PL214911B1 - Sposób wytwarzania 3p,7a-dihydroksy-5a-androst-17-onu - Google Patents

Sposób wytwarzania 3p,7a-dihydroksy-5a-androst-17-onu

Info

Publication number
PL214911B1
PL214911B1 PL392489A PL39248910A PL214911B1 PL 214911 B1 PL214911 B1 PL 214911B1 PL 392489 A PL392489 A PL 392489A PL 39248910 A PL39248910 A PL 39248910A PL 214911 B1 PL214911 B1 PL 214911B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
androst
hydroxy
dihydroxy
epia
substrate
Prior art date
Application number
PL392489A
Other languages
English (en)
Other versions
PL392489A1 (pl
Inventor
Teresa Kolek
Alina Świzdor
Natalia Milecka
Anna Panek
Original Assignee
Univ Przyrodniczy We Wroclawiu
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Univ Przyrodniczy We Wroclawiu filed Critical Univ Przyrodniczy We Wroclawiu
Priority to PL392489A priority Critical patent/PL214911B1/pl
Publication of PL392489A1 publication Critical patent/PL392489A1/pl
Publication of PL214911B1 publication Critical patent/PL214911B1/pl

Links

Landscapes

  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Description

Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania 33,7a-dihydroksy-5a-androst-17-onu (7a-hydroksy-EpiA), o wzorze 2 przedstawionym na rysunku.
Związek ten może znaleźć zastosowanie w przemyśle farmaceutycznym.
Dehydroepiandrosteron (DHEA), syntetyzowany w tkankach mózgu gryzoni i człowieka, zaliczany jest do neurosteroidów (R. C. Bron, C. Jasio, V. Papadopoulos, J. Neurochem. 2000, 74, ss. 847-59). Wyniki wielu badań wskazują, że neuroprotektorowe działanie wykazuje nie DHEA, a jego metabolity, głównie hydroksypochodne przy C-7 (A. Pringle, W. Schmidt, J. Deans, E. Wulfert, K. Reymann, L. Sundstrom, Eur. J. Neurosci, 2003, 18, ss. 117-24).
Badania in vivo wykazały neuroprotektorowe działanie 7α-hydroksy-DHEA oraz obu 7-hydroksypochodnych 3β-hydroksy-5α-androstan-17-onu (epiandrosteronu, EpiA): 3β,7α-dihydroksy-5α-androst-17-onu ^-hydroksy-EpiA) i 3β,7β-dihydroksy-5α-androst-17-onu (7p-hydroksy-EpiA) (B. Dudas, M. Rose, E. Wulfert, Neurobiol. Dis. 2004, 15, ss. 262-268).
Znane mikrobiologiczne hydroksylacje, które najczęściej prowadzono przy użyciu kultur grzybów strzępkowych, są efektywną metodą wprowadzania grupy hydroksylowej w nieaktywną pozycję substratu (P. Fernandes, A. Gruz, B. Angelova, H. M. Pinheiro, J. M. S. Carbal, Enzyme Microbial Technology, 2003, 32, ss. 688-705).
W znanych z literatury przykładach mikrobiologicznej hydroksylacji epiandrosteronu otrzymywano niewielkie wydajności 7α-hydroksyepiandrosteronu. Udział 7α-hydroksy-EpiA w mieszanie, po 8 dniowej transformacji EpiA przez szczep Cephalosporium aphidicola, wynosił 4% (C. A. Bensasson, J. R. Hanson, A. C. Hunter, Phytochemistry, 1998, 40, ss. 2355-58). Natomiast zawartość 7α-hydroksy-EpiA, po inkubacji tego substratu w kulturze Rhizopus nigricans, nie przekraczała 20% (V. E. M. Chambers, W. A. Denny, J. M. Evans, E. R. H. Jones, A. Kasal, G. D. Meakins, J. Pargnell, J. Chem. Soc., Perkin Trans I, 1973, ss. 1500-11; S. Chalbot, C. Trap, J-P. Monin, R. Morfin, Steroids, 2002, 67, ss. 1121-27).
Wynalazek dotyczy sposobu wytwarzania 3β,7α-dihydroksy-5α-androst-17-onu, o wzorze 2, na drodze mikrobiologicznej hydroksylacji 3β-hydroksy-5α-androst-17-onu (epiandrosteron, EpiA).
Istota wynalazku polega na tym, że epiandrosteron (EpiA), przekształca się do 3β,7α-dihydroksy^-andrest-K-onu ^-hydroksy-EpiA) za pomocą kultury szczepu Mortierella isabellina AM212.
Korzystne jest, gdy proces transformacji prowadzi się wodną kulturą szczepu, przy ciągłym wstrząsaniu reagentów, w temperaturze 293-300K.
Postępując zgodnie z wynalazkiem, w wyniku działania układu enzymatycznego zawartego w komórkach grzyba Mortierella isabellina AM212 3β-hydroksy-5α-androst-17-on przekształcany jest do 3β,7α-dihydroksy-5α-androst-17-onu. Uzyskany w ten sposób produkt wydziela się z wodnej kultury mikroorganizmu, znanym sposobem przez ekstrakcję chloroformem.
Zasadniczą zaletą wynalazku jest otrzymanie 3β,7α-dihydroksy-5α-androst-17-onu z wydajnością 73%, w temperaturze pokojowej i pH bliskim obojętnemu.
Wynalazek jest bliżej objaśniony na przykładzie wykonania.
P r z y k ł a d
Do kolby Erlenmajera o pojemności 300 cm3, w której znajduje się 100 cm3 sterylnej pożywki 3 zawierającej 3 g glukozy i 1 g aminobaku, wprowadza się 1 cm3 zawiesiny komórek Mortierella isabellina AM212, które wzrastają, przez trzy dni na tym podłożu, przy stałym wstrząsaniu w temperaturze 295K. Po trzech dniach wzrostu dodaje się 20 mg 3β-hydroksy-5α-androst-17-on, o wzorze 1, rozpuszczonego w 1 cm3 acetonu. Transformację prowadzi się przy ciągłym wstrząsaniu przez kolejne 21 godzin w warunkach, w których prowadzi się hodowlę mikroorganizmu. Następnie, uzyskane roztwory transformacyjne ekstrahuje się trzykrotnie chloroformem, osusza bezwodnym siarczanem magnezu i odparowuje rozpuszczalnik. Otrzymuje się 26 mg surowego produktu, który oczyszcza się chromatograficznie, używając jako eluentu mieszaniny heksan:aceton:chloroform (1:1,5:1,25).
Na tej drodze otrzymuje się 15,4 mg 3β,7α-dihydroksy-5α-androst-17-onu (wydajność 73%).
Uzyskany produkt charakteryzuje się następującymi danymi spektralnymi:
1H NMR: δ (ppm): 0,81 (s, 3H, 19-CH3); 0,83 (s, 3H, 18-CH3); 3,61 (m, 1H, Wh= 31,2 Hz 3αΉ); 3,95 (m, 1H, Wh= 2,4 Hz, 7β-Η).
13C NMR: δ (ppm): 221,1 (C-17), 70,9 (C-3), 66,7 (C-7), 47,5 (C-13), 46,1 (C-9), 45,8 (C-14), 37,5 (C-4), 39,1 (C-8), 37,0 (C-5), 36,6 (C-1), 36,6 (C-16), 36,0 (C-10), 35,7 (C-6), 31,4 (C-2), 31,3 (C-12), 21,3 (C-15), 20,3 (C-11), 13,5 (C-18), 11,2 (C-19).
IR umax (cm-1) (CHCl3) 3625: 1743.

Claims (3)

1. Sposób wytwarzania 33,7a-dihydroksy-5a-androst-17-onu (7a-hydroksy-EpiA), o wzorze 2, na drodze transformacji mikrobiologicznej, w którym jako substrat stosuje się 33-hydroksy-5a-androst-17-on (epiandrosteron, EpiA), o wzorze 1, znamienny tym, że substrat przekształca się za pomocą systemu enzymatycznego szczepu grzyba strzępkowego z gatunku Mortierella isabellina AM212.
2. Sposób, według zastrz. 1, znamienny tym, że proces biotransformacji substratu prowadzi się wodną kulturą szczepu przy ciągłym wstrząsaniu reagentów.
3. Sposób, według zastrz. 1, znamienny tym, że proces biotransformacji substratu prowadzi się w temperaturze 293-300K.
PL392489A 2010-09-23 2010-09-23 Sposób wytwarzania 3p,7a-dihydroksy-5a-androst-17-onu PL214911B1 (pl)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL392489A PL214911B1 (pl) 2010-09-23 2010-09-23 Sposób wytwarzania 3p,7a-dihydroksy-5a-androst-17-onu

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL392489A PL214911B1 (pl) 2010-09-23 2010-09-23 Sposób wytwarzania 3p,7a-dihydroksy-5a-androst-17-onu

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL392489A1 PL392489A1 (pl) 2011-02-14
PL214911B1 true PL214911B1 (pl) 2013-09-30

Family

ID=43798188

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL392489A PL214911B1 (pl) 2010-09-23 2010-09-23 Sposób wytwarzania 3p,7a-dihydroksy-5a-androst-17-onu

Country Status (1)

Country Link
PL (1) PL214911B1 (pl)

Also Published As

Publication number Publication date
PL392489A1 (pl) 2011-02-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Yaoita et al. Sterol constituents from seven mushrooms
Andryushina et al. 14α-Hydroxylation of steroids by mycelium of the mold fungus Curvularia lunata (VKPM F-981) to produce precursors for synthesizing new steroidal drugs
AU771214B2 (en) Process for the isolation of pseudomonic acid a from pseudomonic acid complex-containing culture broth
CN102978272A (zh) 一种新型植物甾醇或/和植物甾烷醇衍生物的制备方法
Ismaili et al. Brassinosteroids and analogs as neuroprotectors: Synthesis and structure–activity relationships
CN103694247A (zh) 化合物Chaetomugilide A及其制备方法和应用
PL214911B1 (pl) Sposób wytwarzania 3p,7a-dihydroksy-5a-androst-17-onu
DE60308388T2 (de) 5-Androsten-3beta-ol-Steroide und Verfahren für ihre Herstellung
Lobastova et al. Synthesis of 3β-hydroxy-androsta-5, 7-dien-17-one from 3β-hydroxyandrost-5-en-17-one via microbial 7α-hydroxylation
Hunter et al. Fate of novel Quasi reverse steroidal substrates by Aspergillus tamarii KITA: Bypass of lactonisation and an exclusive role for the minor hydroxylation pathway
JP2018196327A (ja) ステロールの製造法
DE69427634T2 (de) Delta - 5 - Androstene, die das Halten des Gewichts oder den Gewichtsverlust fördern und Behandlungsverfahren
Cravotto et al. Regio-and stereoselective reductions of dehydrocholic acid
HU227367B1 (en) Method for producing 6-hydroxymethyl-1,4-androstadiene-3,17-dion
Xiong et al. Seven new dammarane triterpenes from the floral spikes of Betula platyphylla var. japonica
PL214910B1 (pl) Sposób jednoczesnego wytwarzania 3p,7a-dihydroksyandrost-5-en-17-onu i 3p,7p-dihydroksyandrost-5-en-17-onu
Atif et al. Solid phase microbial fermentation of anabolic steroid, dihydrotestosterone with ascomycete fungus fusarium oxysporum
PL219992B1 (pl) Sposób wytwarzania 3ß,7ß-dihydroksy-5α-androst-17-onu
PL214913B1 (pl) Nowy 3p,11a-dihydroksy-17a-oxa-D-homo-androst-5-en-17-on oraz sposób jego wytwarzania
Kiran et al. The microbiological hydroxylation of some methoxysteroids by Cephalosporium aphidicola
PL241537B1 (pl) 15α-Hydroksyoksandrolon i sposób wytwarzania 15α-hydroksyoksandrolonu
PL237127B1 (pl) Sposób wytwarzania 6β, 11α-dihydroksyprogesteronu
PL238973B1 (pl) Sposób wytwarzania 12β-hydroksyoksandrolonu
PL215785B1 (pl) Sposób wytwarzania 3p,15a-dihydroksy-5a-androst-17-onu
WO2017150723A1 (ja) ステロールの製造法

Legal Events

Date Code Title Description
LICE Declarations of willingness to grant licence

Effective date: 20130325

LAPS Decisions on the lapse of the protection rights

Effective date: 20130923