PL219071B1 - Pochodne N-acetylo-S-(N-1-(diarylofosforylo)alkilo-tiokarbamoilo)cysteiny, sposób ich wytwarzania i zastosowanie - Google Patents

Pochodne N-acetylo-S-(N-1-(diarylofosforylo)alkilo-tiokarbamoilo)cysteiny, sposób ich wytwarzania i zastosowanie

Info

Publication number
PL219071B1
PL219071B1 PL403138A PL40313813A PL219071B1 PL 219071 B1 PL219071 B1 PL 219071B1 PL 403138 A PL403138 A PL 403138A PL 40313813 A PL40313813 A PL 40313813A PL 219071 B1 PL219071 B1 PL 219071B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
solution
iso
acetyl
thiocarbamoyl
mol
Prior art date
Application number
PL403138A
Other languages
English (en)
Other versions
PL403138A1 (pl
Inventor
Mateusz Psurski
Józef Oleksyszyn
Joanna Wietrzyk
Original Assignee
Politechnika Wroclawska
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Politechnika Wroclawska filed Critical Politechnika Wroclawska
Priority to PL403138A priority Critical patent/PL219071B1/pl
Publication of PL403138A1 publication Critical patent/PL403138A1/pl
Publication of PL219071B1 publication Critical patent/PL219071B1/pl

Links

Description

Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku są pochodne N-acetylo-S-(N-1-(diarylofosforylo)alkilo-tiokarbamoilo)cysteiny znajdujące zastosowanie w medycynie.
Przedmiotem wynalazku jest również sposób wytwarzania pochodnych N-acetylo-S-(N-1-(diarylofosforylo)alkilo-tiokarbamoilo)cysteiny.
Wynalazek dotyczy także zastosowania pochodnych N-acetylo-S-(N-1-(diarylofosforylo)alkilo-tiokarbamoilo)cysteiny.
W literaturze przedmiotu, m.in. w Psurski i współ. „Synthesis and antiproliferative activity of novel a- and P-dialkoxyphosphonylated isothiocyanates” Bioorg. and Medicinal Chemistry Letters 21 (2011) 4572-4576, opisane zostały estry dialkilowe kwasów 1-izotiocyjano-metanofosfonowych, które ze względu na wysoką reaktywność grupy izotiocyjanianowej znalazły zastosowanie w szeregu transformacji syntetycznych. Dla przykładu znalazły zastosowanie w reakcjach prowadzących do uzyskania tiomocznikowych pochodnych peptydów (m.in. Jing-Zi i współ. „Synthesis and in vitro study of pseudo-peptide thioureas containing a-aminophosphonate moiety as potential antitumor agents” Eur. Journal of Med. Chemistry 45 (2010) 5108-5112), które mogą być wartościowymi związkami wykazującymi aktywność biologiczną, w szczególności przeciwnowotworową. W literaturze przedmiotu opisano również syntezę estrów diarylowych, pochodnych kwasu 1-izotiocyjaniano-alkilofosfonowego wykazując jednocześnie ich potencjalna aktywność biologiczną, w szczególności antyproliferacyjna i przeciwnowotworową (Psurski i współ. „Convenient syntheses of novel 1-isothiocyano-alkylphosphonate diphenyl ester derivatives with potential biological activity” Tetrahedron Letters 53 (2012) 5845-5847).
Ze stanu techniki wiadomo jest, iż estry difenylowe fosfonianów odpowiedzialne są za aktywność inhibitorową przeciwko proteazom serynowym (opisane m.in. w Sieńczyk i współ. „Simple phosphonic inhibitors of human neutrophil elastase” Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 21 (2011) 1310-1314).
Z szeregu publikacji m.in. Vermeulen i współ. „Synthesis of isothiocyanate-derived mercapturic acids” European Journal of Medicinal Chemistry 38 (2003) 729-737 znany jest sposób otrzymywania N-acetylocysteinowych pochodnych naturalnych izotiocyjanianów jak na przykład izotiocyjaniany allilowy, benzylowy i fenyletylowy, w którym to sposobie izotiocyjanian miesza się z roztworem N-acetylocysteiny w obecności wodorowęglanu sodu w mieszaninie wody i rozpuszczalnika wybranego z grupy: izo-propanol, etanol lub metanol, po czym uzyskany produkt wytrąca się z użyciem kwasu solnego i ekstrahuje do octanu etylu.
W literaturze naukowej i patentowej nie są znane pochodne N-acetylo-S-(N-1-(diarylofosforylo)alkilo-tiokarbamoilo)cysteiny, jak również sposób ich wytwarzania oraz zastosowanie.
Wynalazek dotyczy pochodnych N-acetylo-S-(N-1-(diarylofosforylo)alkilo-tiokarbamoilo)cysteiny o wzorze ogólnym 1, w którym R1 oznacza podstawniki: metylowy, izo-propylowy, sec-butylowy, izo-butylowy, benzylowy, 2-fenetylowy lub 3,5-dimetoksyfenylowy, natomiast R2 oznacza wodór lub podstawniki: 4-metoksy lub 4-metylotio.
Wynalazek dotyczy również sposobu wytwarzania pochodnych N-acetylo-S-(N-1-(diarylofosforylo)alkilo-tiokarbamoilo)cysteiny o wzorze ogólnym 1, w którym R1 oznacza podstawniki: metylowy, izo-propylowy, sec-butylowy, izo-butylowy, benzylowy, 2-fenetylowy lub 3,5-dimetoksyfenylowy, natomiast R2 oznacza wodór lub podstawniki: 4-metoksy lub 4-metylotio, polegający na tym, że estry diarylowe pochodne kwasów izotiocyjano-metanofosfonowych poddaje się reakcji z N-acetylocysteiną w obecności wodorowęglanu sodu w mieszaninie wody i rozpuszczalnika wybranego z grupy: izo-propanol, etanol lub metanol, a następnie reakcję zakwasza się kwasem solnym i ekstrahuje octanem etylu, z którego po osuszeniu i odparowaniu na wyparce rotacyjnej wydziela się produkt reakcji.
Wynalazek zapewnia również preparat farmaceutyczny zawierający pochodne N-acetylo-S-N-1-(diarylofosforylo)alkilo-tiokarbamoilo)cysteiny o wzorze ogólnym 1, w którym R1 oznacza podstawniki: metylowy, izo-propylowy, sec-butylowy, izo-butylowy, benzylowy, 2-fenetylowy lub 3,5-dimetoksyfenylowy, natomiast R2 oznacza wodór lub podstawniki: 4-metoksy lub 4-metylotio do zastosowania w leczeniu nowotworów.
Opisywane związku cechują się połączeniem dwóch aktywności biologicznych w jednej cząsteczce: ugrupowanie ditiokarbaminianowe jest biologicznie aktywnym prekursorem grupy izotiocyjanianowej zdolnej do wykazywania aktywności biologicznej na szereg różnych sposobów; estry diarylowe fosfonianów są natomiast odpowiedzialne za aktywność związków jako inhibitory proteaz
PL 219 071 B1 serynowych uczestniczących w procesach nowotworowych m.in. wzroście, proliferacji i podziałach komórkowych.
Wynalazek został bliżej przedstawiony we wzorach strukturalnych oraz w przykładach jego realizacji.
P r z y k ł a d 1
Sposób otrzymywania N-acetylo-S-(N-1-(difenoxyfosforylo)etylo-tiokarbamoilo)cysteiny (wzór II) 3
Do kolby gruszkowej o pojemności 50 cm3 odważa się 120 mg estru difenylowego kwasu 1-izotiocyjano-(metylo)metanofosfonowego (0,38 milimola, M = 319,32 g/mol) i rozpuszcza się w 3 cm3 izo-propanolu. Następnie w probówce eppendorfa odważa się 68 mg (0,41 milimola, 1,1 eq,
M = 163,19 g/mol) N-acetylocysteiny i 35 mg (0,41 milimola, 1,1 eq, M = 84 g/mol) wodorowęglanu 3 sodu, a następnie rozpuszcza się w 10 cm3 wody destylowanej. Mieszaninę wkrapla się powoli do roztworu izotiocyjanianu umieszczonego na mieszadle magnetycznym. Reakcję prowadzi się przez minut w temperaturze pokojowej, po czym mieszaninę reakcyjną zakwasza się do pH-2 z użyciem
M roztworu kwasu solnego w wodzie. Zakwaszony roztwór poddaje się ekstrakcji z użyciem octanu 3 etylu (3 x 50 cm3), warstwę organiczną przemywa się nasyconym roztworem chlorku sodu i suszy nad bezwodnym siarczanem magnezu. Po odsączeniu środku suszącego roztwór odparowuje się na wyparce rotacyjnej uzyskując w efekcie 159 mg (0,33 milimola) N-acetylo-S-(N-1-(difenoxyfosforylo)etylo-tiokarbamoilo)cysteiny z wydajnością 87% w postaci białego, krystalicznego osadu .
Wzór sumaryczny C20H23N2O6PS2 Masa cząsteczkowa 482,07 g/mol
Widmo 31P NMR (roztwór w DMSO-d6, δ [ppm]): 17,48 (s, 50%), 17,49 (s, 50%)
Widmo 1H NMR (roztwór w DMSO-d6, δ [ppm], J [Hz]): 12,51 (s, 1H, COOH), 10,68 (d, J = 7.3
Hz, 1H, NHCS), 8,37 (d, J = 8,07 Hz, 1H, NHCO), 7,44-7,09 (m, 10H, Ar-H), 5,79-5,61 (m, 1H, CHP), 4,51-4,33 (m, 1H, CHNH), 3,83 (dd, J = 3,3, 4,92 Hz, 1H, CHA), 3,30-3,12 (m, 1H, CHB), 1,84 (s, 3H, COCH3), 1,56 (dd, J = 2,81, 7,3 Hz, 3H, CHCH3).
Widmo masowe (ESI, m/z): teoretyczna/znaleziona 483,0813/483,0803 [M+H]+
P r z y k ł a d 2
Sposób otrzymywania N-acetylo-S-(N-1-(difenoxyfosforylo)-2-metylopropylo-tiokarbamoilo)cysteiny (wzór III) 3
Do kolby gruszkowej o pojemności 50 cm3 odważa się 90 mg estru difenylowego kwasu 1-izo3 tiocyjano-(izo-propylo)metanofosfonowego (0,26 milimola, M = 347,37 g/mol) i rozpuszcza się w 10 cm3 izo-propanolu. Następnie w probówce eppendorfa odważa się 50 mg (0,31 milimola, 1,2 eq, M =
163,19 g/mol) N-acetylocysteiny i 26 mg (0,31 milimola, 1,2 eq, M = 84 g/mol) wodorowęglanu sodu, 3 a następnie rozpuszcza się w 10 cm3 wody destylowanej. Mieszaninę wkrapla się powoli do roztworu izotiocyjanianu umieszczonego na mieszadle magnetycznym. Reakcję prowadzi się przez 20 minut w temperaturze pokojowej, po czym mieszaninę reakcyjną zakwasza się do pH = 2 z użyciem 1 M roztworu kwasu solnego w wodzie. Zakwaszony roztwór poddaje się ekstrakcji z użyciem octanu etylu 3 (3 x 50 cm3), warstwę organiczną przemywa się nasyconym roztworem chlorku sodu i suszy nad bezwodnym siarczanem magnezu. Po odsączeniu środku suszącego roztwór odparowuje się na wyparce rotacyjnej uzyskując w efekcie 121 mg (0,24 milimola) N-acetylo-S-(N-1-(difenoxyfosforylo)-2-metylopropylo-tiokarbamoilo)cysteiny z wydajnością 91% w postaci bezbarwnego, gęstego oleju.
Wzór sumaryczny C22H27N2O6PS2 Masa cząsteczkowa 510,10 g/mol
Widmo 31P NMR (roztwór w DMSO-d6, δ [ppm]): 16,29 (s, 50%), 16,32 (s, 50%)
Widmo 1H NMR (roztwór w DMSO-d6, δ [ppm], J [Hz]): 12,78 (s, 1H, COOH), 10,61 (d, J = 9,58
Hz, 1H, NHCS), 8,35 (t, J = 7,87 Hz, 1H, NHCO), 7,42-7,05 (m, 10H, Ar-H), 5,70-5,54 (m, 1H, CHP), 4,50-4,36 (m, 1H, CHNH), 3,81 (dd, J = 4,86, 9,96 Hz, 1H, CHA), 3,32-3,10 (m, 1H, CHB), 2,48-2,32 (m, 1H, CHCH3), 1,82 (s, 3H, COCH3), 1,10 (d,J = 6,74 Hz, 3H, CHCH3), 1,03 (d, J = 6,72 Hz, 3H, CHCH3).
Widmo masowe (ESI, m/z): teoretyczna/znaleziona 511,1126/511,1111 [M+H]+
P r z y k ł a d 3
Sposób otrzymywania N-acetylo-S-(N-1-(difenoxyfosforylo)-3-metylobutylo-tiokarbamoilo)cysteiny (wzór IV) 3
Do kolby gruszkowej o pojemności 50 cm3 odważa się 100 mg estru difenylowego kwasu 1-izo3 tiocyjano-(izo-butylo)metanofosfonowego (0,28 milimola, M = 361,39 g/mol) i rozpuszcza się w 15 cm3 izo-propanolu. Następnie w probówce eppendorfa odważa się 55 mg (0,34 milimola, 1,2 eq,
PL 219 071 B1
M = 163,19 g/mol) N-acetylocysteiny i 30 mg (0,34 milimola, 1,2 eq, M = 84 g/mol) wodorowęglanu 3 sodu, a następnie rozpuszcza się w 15 cm3 wody destylowanej. Mieszaninę wkrapla się powoli do roztworu izotiocyjanianu umieszczonego na mieszadle magnetycznym. Reakcję prowadzi się przez 20 minut w temperaturze pokojowej, po czym mieszaninę reakcyjną zakwasza się do pH=2 z użyciem
M roztworu kwasu solnego w wodzie. Zakwaszony roztwór poddaje się ekstrakcji z użyciem octanu 3 etylu (3 x 50 cm3), warstwę organiczną przemywa się nasyconym roztworem chlorku sodu i suszy nad bezwodnym siarczanem magnezu. Po odsączeniu środku suszącego roztwór odparowuje się na wyparce rotacyjnej uzyskując w efekcie 130 mg (0,25 milimola) N-acetylo-S-(N-1-(difenoxyfosforylo)-3-metylobutylo-tiokarbamoilo)cysteiny z wydajnością 89% w postaci białego, krystalicznego osadu.
Wzór sumaryczny C23H29N2O6PS2
Masa cząsteczkowa 524,12 g/mol
Widmo 31P NMR (roztwór w DMSO-d6, δ [ppm]): 17,02 (s, 50%), 17,04 (s, 50%)
Widmo 1H NMR (roztwór w DMSO-d6, δ [ppm], J [Hz]): 12,57 (s, 1H, COOH), 10,58 (d, J = 7,25 Hz, 1H, NHCS), 8,35 (t, J = 7,77 Hz, 1H, NHCO), 7,44-7,04 (m, 10H, Ar-H), 5,79-5,62 (m, 1H, CHP), 4,47-4,32 (m, 1H, CHNH), 4,40-4,32 (m, 1H, CHCH3), 3,85-3,73 (m, 1H, CHA), 3,40-3,31 (m, 1H, CHB), 2,89-2,65 (m, 2H, CHPCHA, CHPCHB), 1,81 (s, 3H, COCH3), 0,92 (d, J = 6,31 Hz, 3H, CHCH3), 0,88 (d, J = 6,15 Hz, 3H, CHCH3).
Widmo masowe (ESI, m/z): teoretyczna/znaleziona 525,1283/525,1277 [M+H]+
P r z y k ł a d 4
Sposób otrzymywania N-acetylo-S-(N-1-(difenoxyfosforylo)-2-metylobutylo-tiokarbamoilo)cysteiny (wzór V) 3
Do kolby gruszkowej o pojemności 50 cm3 odważa się 120 mg estru difenylowego kwasu 1-izo3 tiocyjano-(sec-butylo)metanofosfonowego (0,33 milimola, M = 361,39 g/mol) i rozpuszcza się w 15 cm3 izo-propanolu. Następnie w probówce eppendorfa odważa się 65 mg (0,40 milimola, 1,2 eq, M =
163,19 g/mol) N-acetylocysteiny i 35 mg (0,40 milimola, 1,2 eq, M = 84 g/mol) wodorowęglanu sodu, 3 a następnie rozpuszcza się w 15 cm3 wody destylowanej. Mieszaninę wkrapla się powoli do roztworu izotiocyjanianu umieszczonego na mieszadle magnetycznym. Reakcję prowadzi się przez 30 minut w temperaturze pokojowej, po czym mieszaninę reakcyjną zakwasza się do pH = 2 z użyciem 1 M roztworu kwasu solnego w wodzie. Zakwaszony roztwór poddaje się ekstrakcji z użyciem octanu etylu 3 (3 x 50 cm3), warstwę organiczną przemywa się nasyconym roztworem chlorku sodu i suszy nad bezwodnym siarczanem magnezu. Po odsączeniu środku suszącego roztwór odparowuje się na wyparce rotacyjnej uzyskując w efekcie 160 mg (0,30 milimola) N-acetylo-S-(N-1-(difenoxyfosforylo)-2-metylobutylo-tiokarbamoilo)cysteiny z wydajnością 92% w postaci klarownego, gęstego oleju.
Wzór sumaryczny C23H29N2O6PS2
Masa cząsteczkowa 524,12 g/mol
Widmo 31P NMR (roztwór w DMSO-d6, δ [ppm]): 16,07 (s, 30%), 16,03 (s, 49%), 16,00 (s,18%), 15,94 (s, 3%)
Widmo 1H NMR (roztwór w DMSO-d6, δ [ppm], J [Hz]): 12,84 (s, 1H, COOH), 10,59 (m, 1H, NHCS), 8,35 (t, J = 7,8 Hz, 1H, NHCO), 7,44-7,04 (m, 10H, Ar-H), 5,90-5,53 (m, 1H, CHP), 4,50-4,38 (m, 1H, CHNH), 3,85-3,73 (m, 1H, CHA), 3,40-3,31 (m, 1H, CHB), 2,85-2,65 (m, 1H, CHPCH), 2,23 -2,11 (m, 1H, CH3CHA), 1,82 (s, 3H, COCH3), 1,65-1,49 (m, 1H, CH3CHB), 1,07 (d, J = 6,89 Hz, 3H, CHCH3), 0,89 (t, J = 7,32 Hz, 3H, CH2CH3).
Widmo masowe (ESI, m/z): teoretyczna/znaleziona 525,1283/525,1282 [M+H]+
P r z y k ł a d 5
Sposób otrzymywania N-acetylo-S-(N-1-(difenoxyfosforylo)-2-fenetylo-tiokarbamoilo)cysteiny (wzór VI) 3
Do kolby gruszkowej o pojemności 50 cm3 odważa się 83 mg estru difenylowego kwasu 3
1-izotiocyjano-(benzylo)metanofosfonowego (0,21 milimola, M = 395,45 g/mol) i rozpuszcza się w 10 cm3 izo-propanolu. Następnie w probówce eppendorfa odważa się 40 mg (0,25 milimola, 1,2 eq, M =
163,19 g/mol) N-acetylocysteiny i 21 mg (0,25 milimola, 1,2 eq, M = 84 g/mol) wodorowęglanu sodu, 3 a następnie rozpuszcza się w 10 cm3 wody destylowanej. Mieszaninę wkrapla się powoli do roztworu izotiocyjanianu umieszczonego na mieszadle magnetycznym. Reakcję prowadzi się przez 35 minut w temperaturze pokojowej, po czym mieszaninę reakcyjną zakwasza się do pH = 2 z użyciem 1 M roztworu kwasu solnego w wodzie. Zakwaszony roztwór poddaje się ekstrakcji z użyciem octanu etylu 3 (3 x 50 cm3), warstwę organiczną przemywa się nasyconym roztworem chlorku sodu i suszy nad bezwodnym siarczanem magnezu. Po odsączeniu środku suszącego roztwór odparowuje się na wyparce
PL 219 071 B1 rotacyjnej uzyskując w efekcie 95 mg (0,17 milimola) N-acetylo-S-(N-1-(difenoxyfosforylo)-2-fenetylo-tiokarbamoilo)cysteiny z wydajnością 82% w postaci żółtego, klarownego oleju.
Wzór sumaryczny C26H27N2O6PS2
Masa cząsteczkowa 558,61 g/mol
Widmo 31P NMR (roztwór w DMSO-d6, δ [ppm]): 15,40 (s, 100%)
Widmo 1H NMR (roztwór w DMSO-d6, δ [ppm], J [Hz]): 12,51 (s, 1H, COOH), 10,73 (d, J = 7,82 Hz, 1H, NHCS), 8,18 (d, J = 7,67, 1H, NHCO), 7,45-7,05 (m, 15H, Ar-H), 5,98-5,83 (m, 1H, CHP), 4,42-4,28 (m, 1H, CHNH), 4,28-4,20 (m, 1H, CHPCHA), 3,75-3,65 (m, 1H, CHA), 3,65-3,55 (m, 1H, CHB), 3,45-3,35 (m, 1H, CHPCHB), 1,81 (s, 3H, COCH3)
Widmo masowe (ESI, m/z): teoretyczna/znaleziona 559,1126/559,1061 [M+H]+
P r z y k ł a d 6
Sposób otrzymywania N-acetylo-S-(N-1-(difenoxyfosforylo)-3-fenylopropylo-tiokarbamoilo)-cysteiny (wzór VII) 3
Do kolby gruszkowej o pojemności 50 cm3 odważa się 90 mg estru difenylowego kwasu 1-izotiocyjano-(2-fenyloetylo)metanofosfonowego (0,22 milimola, M = 409,44 g/mol) i rozpuszcza się 3 w 10 cm3 izo-propanolu. Następnie w probówce eppendorfa odważa się 47 mg (0,29 milimola, 1,3 eq,
M = 163,19 g/mol) N-acetylocysteiny i 25 mg (0,29 milimola, 1,3 eq, M = 84 g/mol) wodorowęglanu 3 sodu, a następnie rozpuszcza się w 10 cm3 wody destylowanej. Mieszaninę wkrapla się powoli do roztworu izotiocyjanianu umieszczonego na mieszadle magnetycznym. Reakcję prowadzi się przez minut w temperaturze pokojowej, po czym mieszaninę reakcyjną zakwasza się do pH=2 z użyciem
M roztworu kwasu solnego w wodzie. Zakwaszony roztwór poddaje się ekstrakcji z użyciem octanu 3 etylu (3 x 50 cm3), warstwę organiczną przemywa się nasyconym roztworem chlorku sodu i suszy nad bezwodnym siarczanem magnezu. Po odsączeniu środku suszącego roztwór odparowuje się na wyparce rotacyjnej uzyskując w efekcie 105 mg (0,18 milimola) N-acetylo-S-(N-1-(difenoxyfosforylo)-3-fenylopropylo-tiokarbamoilo)cysteiny z wydajnością 84% w postaci żółtego oleju.
Wzór sumaryczny C27H29N2O6PS2
Masa cząsteczkowa 572,63 g/mol
Widmo 31P NMR (roztwór w DMSO-d6, δ [ppm]): 15,93 (s, 50%), 15,89 (s, 50%).
Widmo 1H NMR (roztwór w DMSO-d6, δ [ppm], J [Hz]): 12,69 (s, 1H, COOH), 10,64 (d, J = 8,67 Hz, 1H, NHCS), 8,40-8,34 (m, 1H, NHCO), 7,43-7,02 (m, 15H, Ar-H), 5,71-5,53 (m, 1H, CHP), 4,54 -4,41 (m, 1H, CHNH), 4,40-4,30 (m, 1H, CHPCHA), 3,90-3,75 (m, 1H, CHPCHB), 3,85-3,73 (m, 1H,
CHA) , 3,40-3,31 (m, 1H, CHB), 2,35-2,15 (m, 2H, CH2), 1,81 (s, 3H, COCH3),
Widmo masowe (ESI, m/z): teoretyczna/znaleziona 573,1283/573,1281 [M+H]+
P r z y k ł a d 7
Sposób otrzymywania N-acetylo-S-(N-1-(3,5-dimetoksyfenylo)(difenoxyfosforylo)-metylo-tiokarbamoilo)cysteiny (wzór VIII) 3
Do kolby gruszkowej o pojemności 50 cm3 odważa się 97 mg estru difenylowego kwasu 1-izotiocyjano-(3,5-dimetoksyfenylo)metanofosfonowego (0,21 milimola, M = 441,44 g/mol) i rozpuszcza 3 się w 15 cm3 izo-propanolu. Następnie w probówce eppendorfa odważa się 38 mg (0,23 milimola,
1,1 eq, M = 163,19 g/mol) N-acetylocysteiny i 20 mg (0,23 milimola, 1,1 eq, M = 84 g/mol) wodorowę3 glanu sodu, a następnie rozpuszcza się w 15 cm3 wody destylowanej. Mieszaninę wkrapla się powoli do roztworu izotiocyjanianu umieszczonego na mieszadle magnetycznym. Reakcję prowadzi się przez 35 minut w temperaturze pokojowej, po czym mieszaninę reakcyjną zakwasza się do pH = 2 z użyciem 1 M roztworu kwasu solnego w wodzie. Zakwaszony roztwór poddaje się ekstrakcji z użyciem 3 octanu etylu (3 x 50 cm3), warstwę organiczną przemywa się nasyconym roztworem chlorku sodu i suszy nad bezwodnym siarczanem magnezu. Po odsączeniu środku suszącego roztwór odparowuje się na wyparce rotacyjnej uzyskując w efekcie 90 mg (0,16 milimola) N-acetylo-S-(N-1-(3,5-dimetoksyfenylo)(difenoxyfosforylo)-metylo-tiokarbamoilo)cysteiny z wydajnością 75% w postaci klarownego, gęstego oleju.
Wzór sumaryczny C27H29N2O8PS2
Masa cząsteczkowa 604,11 g/mol
Widmo 31P NMR (roztwór w DMSO-d6, δ [ppm]): 12,42 (s, 50%), 12,45 (s, 50%)
Widmo 1H NMR (roztwór w DMSO-d6, δ [ppm], J [Hz]): 12,39 (s, 1H, COOH), 11,28 (d, J = 9,16 Hz, 1H, NHCS), 8,38 (dd, J = 4,29, 8,08, 1H, NHCO), 7,4-6,48 (m, 13H, Ar-H), 6,51-6,47 (m, 1H, CHP), 4,51-4,31 (m, 1H, CHNH), 3,71 (s, 6H, 2xOCH3), 3,85-3,73 (m, 1H, CHA), 3,42-3,31 (m, 1H,
CHB) , 1,89 (s, 3H, COCH3)
PL 219 071 B1
Widmo masowe (ESI, m/z): teoretyczna/znaleziona 605,1181/605,1121 [M+H]+
P r z y k ł a d 8
Sposób otrzymywania N-acetylo-S-(N-1-(bis(4-metoksy)fenoxyfosforylo)-2-metylopropylo-tiokarbamoilo)cysteiny (wzór IX) 3
Do kolby gruszkowej o pojemności 50 cm3 odważa się 94 mg estru di-(4-metoksy)fenylowego kwasu 1-izotiocyjano-(izo-propylo)metanofosfonowego (0,23 milimola, M = 407,42 g/mol) i rozpuszcza 3 się w 10 cm3 etanolu. Następnie w probówce eppendorfa odważa się 41 mg (0,25 milimola, 1,1 eq,
M = 163,19 g/mol) N-acetylocysteiny i 20 mg (0,25 milimola, 1,1 eq, M = 84 g/mol) wodorowęglanu 3 sodu, a następnie rozpuszcza się w 10 cm3 wody destylowanej. Mieszaninę wkrapla się powoli do roztworu izotiocyjanianu umieszczonego na mieszadle magnetycznym. Reakcję prowadzi się przez 35 minut w temperaturze pokojowej, po czym mieszaninę reakcyjną zakwasza się do pH = 2 z użyciem
M roztworu kwasu solnego w wodzie. Zakwaszony roztwór poddaje się ekstrakcji z użyciem octanu 3 etylu (3 x 50 cm3), warstwę organiczną przemywa się nasyconym roztworem chlorku sodu i suszy nad bezwodnym siarczanem magnezu. Po odsączeniu środku suszącego roztwór odparowuje się na wyparce rotacyjnej uzyskując w efekcie 110 mg (0,19 milimola) N-acetylo-S-(N-1-(bis(4-metoksy)fenoxyfosforylo)-2-metylopropylo-tiokarbamoilo)cysteiny z wydajnością 85% w postaci klarownego oleju.
Wzór sumaryczny C24H31N2O8PS2 Masa cząsteczkowa 570,61 g/mol
Widmo 31P NMR (roztwór w DMSO-d6, δ [ppm]): 16,77 (s, 50%), 16,74 (s, 50%).
Widmo 1H NMR (roztwór w DMSO-d6, δ [ppm], J [Hz]): 12,07 (s, 1H, COOH), 10,58 (d, J = 8,88
Hz, 1H, NHCS), 8,35 (d, J = 7,68 Hz, 1H, NHCO), 7,10-6,85 (m, 8H, Ar-H), 5,65-5,50 (m, 1H, CHP), 4,49-4,39 (m, 1H, CHNH), 3,90-3,72 (m, 1H, CHA), 3,45-3,3 (m, 1H, CHB), 3,70 (s, 6H, 2xArOCH3), 2,46-2,30 (m, 1H, CHCH3), 1,02 (d, J = 7,88 Hz, 6H, 2xCHCH3), 1,81 (s, 3H, COCH3),
Widmo masowe (ESI, m/z): teoretyczna/znaleziona 571,1338/571,1323 [M+H]+
P r z y k ł a d 9
Sposób otrzymywania N-acetylo-S-(N-1-(bis(4-metylotio)fenoxyfosforylo)-2-metylopropylo-tiokarbamoilo)cysteiny (wzór X) 3
Do kolby gruszkowej o pojemności 50 cm3 odważa się 110 mg estru di-(4-metylotio)fenylowego kwasu 1-izotiocyjano-(izo-propylo)metanofosfonowego (0,25 milimola, M = 439,05 g/mol) i rozpuszcza 3 się w 20 cm3 metanolu. Następnie w probówce eppendorfa odważa się 40 mg (0,25 milimola, 1 eq,
M = 163,19 g/mol) N-acetylocysteiny i 25 mg (0,27 milimola, 1,1 eq, M = 84 g/mol) wodorowęglanu 3 sodu, a następnie rozpuszcza się w 20 cm3 wody destylowanej. Mieszaninę wkrapla się powoli do roztworu izotiocyjanianu umieszczonego na mieszadle magnetycznym. Reakcję prowadzi się przez 15 minut w temperaturze pokojowej, po czym mieszaninę reakcyjną zakwasza się do pH = 2 z użyciem 1 M roztworu kwasu solnego w wodzie. Zakwaszony roztwór poddaje się ekstrakcji z użyciem 3 octanu etylu (3 x 50 cm3), warstwę organiczną przemywa się nasyconym roztworem chlorku sodu i suszy nad bezwodnym siarczanem magnezu. Po odsączeniu środku suszącego roztwór odparowuje się na wyparce rotacyjnej uzyskując w efekcie 125 mg (0,21 milimola) N-acetylo-S-(N-1-(bis(4-metylotio)fenoxyfosforylo)-2-metylopropylo-tiokarbamoilo)cysteiny z wydajnością 86% w postaci klarownego oleju.
Wzór sumaryczny C24H31N2O8PS4
Masa cząsteczkowa 602,75 g/mol
Widmo 31P NMR (roztwór w DMSO-d6, δ [ppm]): 16,79 (s, 50%), 16,74 (s, 50%)
Widmo 1H NMR (roztwór w DMSO-d6, δ [ppm], J [Hz]): 12,10 (s, 1H, COOH), 10,62 (d, J = 9,2
Hz, 1H, NHCS), 8,38 (dd, J = 4,6, 7,68 Hz, 1H, NHCO), 7,32-7,05 (m, 8H, Ar-H), 5,67-5,52 (m, 1H, CHP), 4,51-4,41 (m, 1H, CHNH), 4,40-4,33 (m, 1H, CHPCH), 3,89-3,75 (m, 1H, CHA), 3,45-3,3 (m, 1H, CHB), 2,45 (s, 6H, 2xArSCH3), 1,81 (s, 3H, COCH3), 1,02 (d, J = 7,88 Hz, 6H, 2xCHCH3)
Widmo masowe (ESI, m/z): teoretyczna/znaleziona 603,0881/603,0830 [M+H]+
P r z y k ł a d 10
Sposób otrzymywania N-acetylo-S-(N-1-(bis(4-metoksy)fenoxyfosforylo)-2-metylobutylo-tiokarbamoilo)cysteiny (wzór XI) 3
Do kolby gruszkowej o pojemności 50 cm3 odważa się 105 mg estru di-(4-metoksy)fenylowego kwasu 1-izotiocyjano-(sec-butylo)metanofosfonowego (0,25 milimola, M = 421,45 g/mol) i rozpuszcza 3 się w 10 cm3 izo-propanolu. Następnie w probówce eppendorfa odważa się 55 mg (0,32 milimola,
1,3 eq, M = 163,19 g/mol) N-acetylocysteiny i 27 mg (0,32 milimola, 1,3 eq, M = 84 g/mol) wodorowę3 glanu sodu, a następnie rozpuszcza się w 10 cm3 wody destylowanej. Mieszaninę wkrapla się powoli
PL 219 071 B1 do roztworu izotiocyjanianu umieszczonego na mieszadle magnetycznym. Reakcję prowadzi się przez 20 minut w temperaturze pokojowej, po czym mieszaninę reakcyjną zakwasza się do pH = 2 z użyciem 1 M roztworu kwasu solnego w wodzie. Zakwaszony roztwór poddaje się ekstrakcji z użyciem 3 octanu etylu (3 x 50 cm3), warstwę organiczną przemywa się nasyconym roztworem chlorku sodu i suszy nad bezwodnym siarczanem magnezu. Po odsączeniu środku suszącego roztwór odparowuje się na wyparce rotacyjnej uzyskując w efekcie 130 mg (0,22 milimola) N-acetylo-S-(N-1-(bis(4-metoksy)fenoxyfosforylo)-2-metylobutylo-tiokarbamoilo)cysteiny z wydajnością 88% w postaci klarownego, gęstego oleju.
Wzór sumaryczny C25H33N2O8PS2
Masa cząsteczkowa 584,64 g/mol
Widmo 31P NMR (roztwór w DMSO-d6, δ [ppm]): 15,94 (s)
Widmo 1H NMR (roztwór w DMSO-d6, δ [ppm], J [Hz]): 12,03 (s, 1H, COOH), 10,59-10,50 (m, 1H, NHCS), 8,40-8,35 (m, 1H, NHCO), 7,15-6,85 (m, 8H, Ar-H), 5,84-5,73 (m, 1H, CHP), 4,49-4,39 (m, 1H, CHNH), 3,85-3,73 (m, 1H, CHA), 3,40-3,31 (m, 1H, CHB), 3,74 (s, 6H, 2xArOCH3), 2,85-2,65 (m, 1H, CHPCH), 2,23-2,11 (m, 1H, CH3CHA), 1,65-1,49 (m, 1H, CH3CHB), 1,81 (s, 3H, COCH3), 1,07 (d, J= 6,89 Hz, 3H, CHCH3), 0,89 (t, J= 7,32 Hz, 3H, CH2CH3)
Widmo masowe (ESI, m/z): teoretyczna/znaleziona 585,1494/585,1451 [M+H]+
P r z y k ł a d 11
Sposób otrzymywania N-acetylo-S-(N-1-(bis(4-metylotio)fenoxyfosforylo)-2-metylobutylo-tiokarbamoilo)cysteiny (wzór XII) 3
Do kolby gruszkowej o pojemności 50 cm3 odważa się 135 mg estru di-(4-metylotio)fenylowego kwasu 1-izotiocyjano-(sec-butylo)metanofosfonowego (0,30 milimola, M = 453,06 g/mol) i rozpuszcza 3 się w 15 cm3 metanolu. Następnie w probówce eppendorfa odważa się 55 mg (0,32 milimola, 1,1 eq,
M = 163,19 g/mol) N-acetylocysteiny i 27 mg (0,32 milimola, 1,1 eq, M = 84 g/mol) wodorowęglanu 3 sodu, a następnie rozpuszcza się w 10 cm3 wody destylowanej. Mieszaninę wkrapla się powoli do roztworu izotiocyjanianu umieszczonego na mieszadle magnetycznym. Reakcję prowadzi się przez 30 minut w temperaturze pokojowej, po czym mieszaninę reakcyjną zakwasza się do pH = 2 z użyciem 1 M roztworu kwasu solnego w wodzie. Zakwaszony roztwór poddaje się ekstrakcji z użyciem 3 octanu etylu (3 x 50 cm3), warstwę organiczną przemywa się nasyconym roztworem chlorku sodu i suszy nad bezwodnym siarczanem magnezu. Po odsączeniu środku suszącego roztwór odparowuje się na wyparce rotacyjnej uzyskując w efekcie 150 mg (0,22 milimola) N-acetylo-S-(N-1-(bis(4-metylotio)fenoxyfosforylo)-2-metylobutylo-tiokarbamoilo)cysteiny z wydajnością 80% w postaci żółtawego, gęstego oleju.
Wzór sumaryczny C25H33N2O6PS4
Masa cząsteczkowa 616,77 g/mol
Widmo 31P NMR (roztwór w DMSO-d6, δ [ppm]): 16,55 (s, 31%), 16,51 (s, 17%), 16,49 (s, 31%), 16,45 (s, 21%)
Widmo 1H NMR (roztwór w DMSO-d6, δ [ppm], J [Hz]): 12,17 (s, 1H, COOH), 10,58 (d, J = 9,6 Hz, 1H, NHCS), 8,30-8,18 (m, 1H, NHCO), 7,34-7,02 (m, 8H, Ar-H), 5,88-5,74 (m, 1H, CHP), 4,49 -4,39 (m, 1H, CHNH), 3,85-3,73 (m, 1H, CHA), 3,40-3,31 (m, 1H, CHB), 2,85-2,65 (m, 1H, CHPCH), 2,48 (s, 6H, 2xSCH3), 2,23-2,11 (m, 1H, CH3CHA), 1,65-1,49 (m, 1H, CH3CHB), 1,81 (s, 3H, COCH3), 1,07 (d, J = 6,89 Hz, 3H, CHCH3), 0,89 (t, J = 7,32 Hz, 3H, CH2CH3)
Widmo masowe (ESI, m/z): teoretyczna/znaleziona 617,1037/617,1002 [M+H]+
P r z y k ł a d 12
Sposób otrzymywania N-acetylo-S-(N-1-(bis(4-metoksy)fenoxyfosforylo)-2-fenetylo-tiokarbamoilo)cysteiny (wzór XIII) 3
Do kolby gruszkowej o pojemności 50 cm3 odważa się 110 mg estru di-(4-metoksy)fenylowego kwasu 1-izotiocyjano-(benzylo)metanofosfonowego (0,24 milimola, M = 455,09 g/mol) i rozpuszcza się 3 w 15 cm3 izo-propanolu. Następnie w probówce eppendorfa odważa się 50 mg (0,29 milimola, 1,2 eq,
M = 163,19 g/mol) N-acetylocysteiny i 25 mg (0,29 milimola, 1,2 eq, M = 84 g/mol) wodorowęglanu 3 sodu, a następnie rozpuszcza się w 15 cm3 wody destylowanej. Mieszaninę wkrapla się powoli do roztworu izotiocyjanianu umieszczonego na mieszadle magnetycznym. Reakcję prowadzi się przez 35 minut w temperaturze pokojowej, po czym mieszaninę reakcyjną zakwasza się do pH = 2 z użyciem 1 M roztworu kwasu solnego w wodzie. Zakwaszony roztwór poddaje się ekstrakcji z użyciem 3 octanu etylu (3 x 50 cm3), warstwę organiczną przemywa się nasyconym roztworem chlorku sodu i suszy nad bezwodnym siarczanem magnezu. Po odsączeniu środku suszącego roztwór odparowuje
PL 219 071 B1 się na wyparce rotacyjnej uzyskując w efekcie 120 mg (0,19 milimola) N-acetylo-S-(N-1-(bis(4-metoksy)fenoxyfosforylo)-2-fenetylo-tiokarbamoilo)cysteiny z wydajnością 80% w postaci żółtego, gęstego oleju.
Wzór sumaryczny C28H31N2O8PS2
Masa cząsteczkowa 618,66 g/mol
Widmo 31P NMR (roztwór w DMSO-d6, δ [ppm]): 16,40 (s)
Widmo 1H NMR (roztwór w DMSO-d6, δ [ppm], J [Hz]): 12,29 (s, 1H, COOH), 10,69 (d, J = 8,48 Hz, 1H, NHCS), 8,29 (d, J = 7,84 Hz, 1H, NHCO), 7,42-6,67 (m, 13H, Ar-H), 5,94-5,74 (m, 1H, CHP), 4,42-4,28 (m, 1H, CHNH), 4,28-4,20 (m, 1H, CHPCHA), 3,85-3,75 (m, 1H, CHA), 3,73 (s, 6H, 2xArOCH3), 3,65-3,55 (m, 1H, CHB), 3,45-3,35 (m, 1H, CHPCHB), 1,81 (s, 3H, COCH3)
Widmo masowe (ESI, m/z): teoretyczna/znaleziona 619,1338/619,1308 [M+H]+
P r z y k ł a d 13
Sposób otrzymywania N-acetylo-S-(N-1-(bis(4-metylotio)fenoxyfosforylo)-2-fenetylo-tiokarbamoilo)cysteiny (wzór XIV) 3
Do kolby gruszkowej o pojemności 50 cm3 odważa się 145 mg estru di-(4-metylotio)fenylowego kwasu 1-izotiocyjano-(benzylo)metanofosfonowego (0,30 milimola, M = 487,59 g/mol) i rozpuszcza się 3 w 15 cm3 izo-propanolu. Następnie w probówce eppendorfa odważa się 54 mg (0,33 milimola, 1,1 eq,
M = 163,19 g/mol) N-acetylocysteiny i 27 mg (0,33 milimola, 1,1 eq, M = 84 g/mol) wodorowęglanu 3 sodu, a następnie rozpuszcza się w 15 cm3 wody destylowanej. Mieszaninę wkrapla się powoli do roztworu izotiocyjanianu umieszczonego na mieszadle magnetycznym. Reakcję prowadzi się przez 15 minut w temperaturze pokojowej, po czym mieszaninę reakcyjną zakwasza się do pH = 2 z użyciem 1 M roztworu kwasu solnego w wodzie. Zakwaszony roztwór poddaje się ekstrakcji z użyciem 3 octanu etylu (3 x 50 cm3), warstwę organiczną przemywa się nasyconym roztworem chlorku sodu i suszy nad bezwodnym siarczanem magnezu. Po odsączeniu środku suszącego roztwór odparowuje się na wyparce rotacyjnej uzyskując w efekcie 150 mg (0,23 milimola) N-acetylo-S-(N-1-(bis(4-metylotio)fenoxyfosforylo)-2-fenetylo-tiokarbamoilo)cysteiny z wydajnością 75% w postaci żółtego, gęstego oleju.
Wzór sumaryczny C28H31N2O6PS4
Masa cząsteczkowa 650,79 g/mol
Widmo 31P NMR (roztwór w DMSO-d6, δ [ppm]): 16,41 (s, 50%), 16,40 (s, 50%)
Widmo 1H NMR (roztwór w DMSO-d6, δ [ppm], J [Hz]): 12,35 (s, 1H, COOH), 10,83-10,70 (m, 1H, NHCS), 8,32-8,28 (m, 1H, NHCO), 7,32-7,02 (m, 13H, Ar-H), 5,94-5,80 (m, 1H, CHP), 4,42-4,28 (m, 1H, CHNH), 4,12-4,02 (m, 1H, CHPCHA), 3,78-3,70 (m, 1H, CHA), 3,65-3,55 (m, 1H, CHB), 3,45 -3,35 (m, 1H, CHPCHB), 2,46 (s, 6H, 2xArSCH3), 1,84 (s, 3H, COCH3)
Widmo masowe (ESI, m/z): teoretyczna/znaleziona 651,0881/651,0877 [M+H]+
P r z y k ł a d 14
Oznaczanie aktywności antyproliferacyjnej in vitro z użyciem testu SRB
Roztwory wyjściowe testowanych związków przygotowane zostały, jako 50 mM roztwory w dimetylosulfotlenku (DMSO). Linie komórkowe hodowane były w warunkach in vitro w odpowiednich dla danej linii medium hodowlanym: LoVo i LoVo/DX - Opti-MEM + RPMI 1640 suplementowane 2 mM roztworem L-glutaminy, 1,5 g/L roztworem wodorowęglanu sodu, 4,5 g/L glukozy, 1,0 mM pirogronianu sodu oraz 5% surowicą wołową i 100 ąg/L doxorubicyny (tylko w medium dla linii LoVoDX). Ponadto wszystkie media hodowlane zawierały 100 jednostek/ml penicyliny i 100 ąg/ml streptomycyny. Do odklejenia komórek od płytek hodowlanych używano 0,25% roztworu Trypsyna-EDTA. Następnie policzone komórki posiano na płytki 96-dołkowe w ilości 104 komórek/dołek (100 ąL zawiesiny komórkowej 105 komórek/mL na dołek). Po 24 godzinnej inkubacji na płytki nanoszono roztwory testowanych związków przygotowywane poprzez rozcieńczanie wyjściowego roztworu w medium hodowlanym. Robocze stężenia wynosiły 50 ąM, 25 ąM, 12,5 ąM, 6,25 ąM dając ostatecznie stężenia 25 ąM, 12,5 ąM, 6,25 ąM i 3,125 ąM w dołkach testowych. Każde stężenie naniesiono w trzech powtórzeniach. Płytki były następnie inkubowane przez kolejne 72 godziny w inkubatorze (wilgotność >90%, temperatura 37°C, 5% stężenie, CO2). Po tym czasie wykonano test SRB: do każdego z dołków dodano po 50 ąL 50% roztworu kwasu trichlorooctowego i płytki inkubowano przez 1 godzinę w temperaturze 4°C. Następnie płytki wypłukano pod bieżącą wodą, osuszono i do każdego z dołków dodano po 50 ąL 0,4% roztworu sulforodaminy B w 1% kwasie octowym i inkubowano w ciemności przez 30 minut. Po tym czasie płytki wypłukano w 1% kwasie octowym, osuszono i do każdego z dołków dodano po 150 ąL 10 mM roztworu Tris w wodzie dejonizowanej. Po 30 minutowej inkubacji w temperaturze
PL 219 071 B1 pokojowej odczytano absorbancję przy długości fali 540 nm. Analizę wyników wykonano poprzez porównanie absorbancji dołków traktowanych związkami w odpowiednich stężenia do dołków kontrolnych (nietraktowanych związkami). Następnie określono krzywą zależności procenta zahamowania proliferacji od stężenia i na jego podstawie określono wartość IC50 (stężenie powodujące zahamowanie wzrostu komórek w 50%). Test dla każdego ze związków powtórzony został, co najmniej trzykrotnie. Odchylenie standardowe dla uzyskanych wyników nie przekraczało 5%.
Wyniki przedstawiono w Tabeli 1.
T a b e l a 1
IC50 (ąM)
Związek Linia komórkowa
LoVo LoVoDX
Wzór II 8,9 11,9
Wzór III 9,6 12,8
Wzór IV 9,3 14,5
Wzór IX 23,5 34,9
Wzór V 9,3 11,8
Wzór VI 14,8 17,4
Wzór VII 9,7 12,8
Wzór VIII 11,0 14,8
Wzór X 20,8 23,9
Wzór XI 18,1 28,7
Wzór XII 6,4 7,6
Wzór XIII 17,6 22,1
Wzór XIV 16,6 16,8
P r z y k ł a d 15
Oznaczanie zdolności opisywanych związków do hamowania chymotrypsyno-podobnej aktywności proteolitycznej w lizatach komórek nowotworowych.
Roztwory wyjściowe testowanych związków przygotowane zostały, jako 50 mM roztwory w dimetylosulfotlenku (DMSO). Jako źródło aktywności enzymatycznej wykorzystano linię nowotworową Lovo hodowaną w warunkach podanych w przykładzie 14. Zebrane komórki nowotworowe zostały zlizowane z użyciem buforu A (50 mM HEPES, 5 mM EDTA, 150 mM NaCl, pH 7,5) dodanego w ilości 100 ąL na każdy milion komórek. Po 10 minutach w temperaturze 4°C 50 ąL lizatu komórkowego zostało dodane do 50 ąL roztworu badanych związków w różnych stężeniach przygotowanych na białej płytce 96-dołkowej, a następnie płytkę inkubowano w temperaturze 37°C przez 30 minut. Następnie do każdego dołka dodano po 100 ąL 10 ąM roztworu substratu fluorogenicznego Suc-AAPF-AMC w buforze B (25 mM HEPES, 0,5 mM EDTA, pH 7,5) i przeprowadzono pomiar kinetyczny przez 90 minut w temperaturze 37°C. Wyniki przedstawiono w Tabeli 2 jako % zahamowanie aktywności enzymatycznej przez testowany związek w danych stężeniu
T a b e l a 2
Związek Stężenie związku (ąM)
400 200 100 50 25
% zahamowania aktywności enzymatycznej
1 2 3 4 5 6
Wzór II 76 63 55 34 31
Wzór III 43 36 28 25 20
PL 219 071 B1 ciąg dalszy Tabeli 2
1 2 3 4 5 6
Wzór IV 38 33 31 27 23
Wzór IX 27 24 18 16 11
Wzór V 29 22 20 17 7
Wzór VI 15 14 12 12 9
Wzór VII 37 29 25 20 17
Wzór VIII 32 20 10 5 3
Wzór X 5 4 3 0 0
Wzór XI 27 25 23 18 15
Wzór XII 27 15 11 2 0
Wzór XIII 18 17 16 13 11
Wzór XIV 27 27 27 22 17
Zastrzeżenia patentowe

Claims (3)

1. Pochodne N-acetylo-S-(N-1-(diarylofosforylo)alkilo-tiokarbamoilo)cysteiny o wzorze ogólnym 1, w którym R1 oznacza podstawniki: metylowy, izo-propylowy, sec-butylowy, izo-butylowy, benzylowy, 2-fenetylowy lub 3,5-dimetoksyfenylowy, natomiast R2 oznacza wodór lub podstawniki: 4-metoksy lub 4-metylotio.
2. Sposób wytwarzania pochodnych N-acetylo-S-N-1-(diarylofosforylo)alkilo-tiokarbamoilo)cysteiny o wzorze ogólnym 1, w którym R1 oznacza podstawniki: metylowy, izo-propylowy, sec-butylowy, izo-butylowy, benzylowy, 2-fenetylowy lub 3,5-dimetoksyfenylowy, natomiast R2 oznacza wodór lub podstawniki: 4-metoksy lub 4-metylotio, znamienny tym, że estry diarylowe pochodne kwasów izotiocyjano-metanofosfonowych poddaje się reakcji z N-acetylocysteiną w obecności wodorowęglanu sodu w mieszaninie wody i rozpuszczalnika wybranego z grupy: izo-propanol, etanol lub metanol, a następnie reakcję zakwasza się kwasem solnym i ekstrahuje octanem etylu, z którego po osuszeniu i odparowaniu na wyparce rotacyjnej wydziela się produkt reakcji.
3. Preparat farmaceutyczny zawierający pochodne N-acetylo-S-(N-1-(diarylofosforylo)alkilo-tiokarbamoilo)cysteiny o wzorze ogólnym 1, w którym R1 oznacza podstawniki: metylowy, izo-propylowy, sec-butylowy, izo-butylowy, benzylowy, 2-fenetylowy lub 3,5-dimetoksyfenylowy, natomiast R2 oznacza wodór lub podstawniki: 4-metoksy lub 4-metylotio do zastosowania w leczeniu nowotworów.
PL403138A 2013-03-13 2013-03-13 Pochodne N-acetylo-S-(N-1-(diarylofosforylo)alkilo-tiokarbamoilo)cysteiny, sposób ich wytwarzania i zastosowanie PL219071B1 (pl)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL403138A PL219071B1 (pl) 2013-03-13 2013-03-13 Pochodne N-acetylo-S-(N-1-(diarylofosforylo)alkilo-tiokarbamoilo)cysteiny, sposób ich wytwarzania i zastosowanie

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL403138A PL219071B1 (pl) 2013-03-13 2013-03-13 Pochodne N-acetylo-S-(N-1-(diarylofosforylo)alkilo-tiokarbamoilo)cysteiny, sposób ich wytwarzania i zastosowanie

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL403138A1 PL403138A1 (pl) 2013-11-25
PL219071B1 true PL219071B1 (pl) 2015-03-31

Family

ID=49626527

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL403138A PL219071B1 (pl) 2013-03-13 2013-03-13 Pochodne N-acetylo-S-(N-1-(diarylofosforylo)alkilo-tiokarbamoilo)cysteiny, sposób ich wytwarzania i zastosowanie

Country Status (1)

Country Link
PL (1) PL219071B1 (pl)

Also Published As

Publication number Publication date
PL403138A1 (pl) 2013-11-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2513965T3 (es) Compuestos pirroles como inhibidores de proteínas cinasas ERK y composiciones farmacéuticas que contienen esos compuestos
US3074992A (en) Novel cyclic phosphoric acid ester amides, and the production thereof
RU2515983C2 (ru) Новые соединения миметиков обратного действия, способ их получения и применения
EP3214090B1 (en) Thionucleoside derivative or salt thereof, and pharmaceutical composition
Liu et al. Synthesis and in vitro study of pseudo-peptide thioureas containing α-aminophosphonate moiety as potential antitumor agents
ES2893803T3 (es) Compuestos quelantes de zinc para su utilización en el tratamiento de una infección bacteriana
SK541288A3 (en) Phosphate of 4'-demethylepipodophyllotoxinglucosides, method of preparation thereof, required intermediates, use of the said compounds and pharmaceutical composition them containing
WO2003055489A1 (en) 2,4-diamino-pyrimidine derivative compounds as inhibitors of prolylpeptidase, inducers of apoptosis and cancer treatment agents
CA3007063A1 (en) Cyclic phosphates and cyclic phosphoramidates for the treatment of neurologic disorders
IE883261L (en) Disulfur analogs of ll-e33288 antitumor agents
KR19980086989A (ko) 치환된 6- 및 7- 아미노-테트라하이드로이소퀴놀린 카복실산
US6107284A (en) Water-soluble derivatives of epipodophyllotoxin, process for their preparation, their use as medicinal products and their intended use in anti-cancer treatments
Scozzafava et al. Protease inhibitors. Part 8: Synthesis of potent Clostridium histolyticum collagenase inhibitors incorporating sulfonylated L-alanine hydroxamate moieties
PL219071B1 (pl) Pochodne N-acetylo-S-(N-1-(diarylofosforylo)alkilo-tiokarbamoilo)cysteiny, sposób ich wytwarzania i zastosowanie
US7214794B2 (en) Ceramide analogs, process for their preparation and their use as antitumor agents
IE57835B1 (en) 7-acylamino mitosanes
EP2527351B1 (en) Lipophosphonoxins, method of their preparation and use
US8673969B2 (en) Substituted 4-β-acrylamidopodophyllotoxin congeners as antitumour antibiotics and the process for preparation thereof
DE102005044319A1 (de) 2-(Aminomethyl)-5-Chlor-Benzylamid-Derivate und ihre Verwendung als Hemmstoffe des Gerinnungsfaktors Xa
CN115304502B (zh) Foxm1抑制剂及其制备方法和应用
Babu et al. Synthesis and antimicrobial activity of 5, 5′‐dimethyl‐2‐oxido‐[1, 3, 2]‐dioxaphos‐phorinane‐2‐yl‐amino carboxylates
PL215528B1 (pl) Estry di-(4-metoksy)fenylowe pochodne kwasów 1-izotiocyjano-metanofosfonowych, sposób ich wytwarzania i zastosowanie
Merino-Montiel et al. Unprecedented spiro-annelated sugar isoureas, guanidines and amidines as new families of glycosidase inhibitors
HU207734B (en) Process for producing phosphates and sulfates of 4'-demethyl-epipodophyl-lotoxin-glycozides and pharmaceutical compositions containing them
PL216473B1 (pl) Estry difenylowe pochodne kwasów 1-izotiocyjano-metanofosfonowych, sposób ich wytwarzania oraz zastosowanie