PL221959B1 - Lactobacillus plantarum lactic bacteria strain - Google Patents

Lactobacillus plantarum lactic bacteria strain

Info

Publication number
PL221959B1
PL221959B1 PL401554A PL40155412A PL221959B1 PL 221959 B1 PL221959 B1 PL 221959B1 PL 401554 A PL401554 A PL 401554A PL 40155412 A PL40155412 A PL 40155412A PL 221959 B1 PL221959 B1 PL 221959B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
plantarum
strain
nbrc101977
lactobacillus plantarum
cfu
Prior art date
Application number
PL401554A
Other languages
Polish (pl)
Other versions
PL401554A1 (en
Inventor
Katarzyna Śliżewska
Ilona Motyl
Zdzisława Libudzisz
Anna Otlewska
Hieronim Burchardt
Józef Klecha
Jan Henzler
Original Assignee
Jhj Spółka Z Ograniczoną Odpowiedzialnością
Politechnika Łódzka
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Jhj Spółka Z Ograniczoną Odpowiedzialnością, Politechnika Łódzka filed Critical Jhj Spółka Z Ograniczoną Odpowiedzialnością
Priority to PL401554A priority Critical patent/PL221959B1/en
Publication of PL401554A1 publication Critical patent/PL401554A1/en
Publication of PL221959B1 publication Critical patent/PL221959B1/en

Links

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Description

Opis wynalazkuDescription of the invention

Przedmiotem wynalazku jest szczep bakterii mlekowych Lactobacillus plantarum o właściwościach probiotycznych.The subject of the invention is a strain of lactic bacteria Lactobacillus plantarum with probiotic properties.

Specyficzna i kontrolowana pozytywna regulacja składu mikroflory jelitowej ludzi i zwierząt może być osiągnięta na drodze probiozy czyli spożywania preparatów lub produktów żywnościowych (lub paszowych dla zwierząt) zawierających żywe bakterie, głównie z rodzaju Lactobacillus. Dlatego też producenci żywności i pasz, a także przemysł farmaceutyczny zainteresowani są pozyskiwaniem nowych szczepów tych bakterii o udokumentowanych właściwościach probiotycznych.Specific and controlled positive regulation of the composition of the intestinal microflora of humans and animals can be achieved by probiosis, i.e. consumption of food (or animal feed) preparations or products containing live bacteria, mainly of the Lactobacillus genus. Therefore, food and feed producers as well as the pharmaceutical industry are interested in acquiring new strains of these bacteria with documented probiotic properties.

Dotychczas znane są szczepy bakterii Lactobacillus o właściwościach probiotycznych jak L. acidophilus NCFM, L. acidophilus DDS-1, L. acidophilus SBT-2062, L. acidophilus R0011, L. rhamnosus R0052, L. acidophilus LA-1, L. paracasei CRL-431, L. casei Shirota, L. casei DN-114001, L fermentum RC-14, L. rhamnosus GR-1, L. johnsonii La-1, L. plantarum 299V, L. rhamnosus 271, L. reuteri SD2112, L. rhamnosus GG, L. rhamnosus LB21, L. salivarius UCC118, L. acidophilus LB, L. paracasei F19, L. casei ŁOCK 0900, L. casei ŁOCK 0908, Ł. paracasei ŁOCK 0919, L. brevis ŁOCK 0944, L. paracesei ŁOCK 0920.So far, strains of Lactobacillus bacteria with probiotic properties are known, such as L. acidophilus NCFM, L. acidophilus DDS-1, L. acidophilus SBT-2062, L. acidophilus R0011, L. rhamnosus R0052, L. acidophilus LA-1, L. paracasei CRL -431, L. casei Shirota, L. casei DN-114001, L fermentum RC-14, L. rhamnosus GR-1, L. johnsonii La-1, L. plantarum 299V, L. rhamnosus 271, L. reuteri SD2112, L. rhamnosus GG, L. rhamnosus LB21, L. salivarius UCC118, L. acidophilus LB, L. paracasei F19, L. casei ŁOCK 0900, L. casei ŁOCK 0908, Ł. Paracasei ŁOCK 0919, L. brevis LOCK 0944, L . paracesei LOCK 0920.

Wynalazek dotyczy nowego szczepu bakterii mlekowych z rodzaju Lactobacillus o właściwościach probiotycznych, który oznaczono symbolem ŁOCK 0860 i który zdeponowano pod nr 11/04/2012 w Zakładzie Mikrobiologii Molekularnej Narodowego Instytutu Leków z siedzibą w Warszawie. Szczep stanowi Gram-dodatnia pałeczka, nieruchliwa, nie przetrwalnikująca. Szczep ten wykazuje 99,9% homologii do gatunku Lactobacillus plantarum, co stwierdzono na podstawie wyników testów fermentacyjnych API 50CHL. Sekwencję nukleotydową regionu DNA kodującego gen 16S rRNA nowego szczepu, która określa przynależność gatunkową szczepu, przedstawiono na końcu opisu.The invention concerns a new strain of lactic acid bacteria of the genus Lactobacillus with probiotic properties, marked with the symbol ŁOCK 0860 and deposited under No. 11/04/2012 at the Department of Molecular Microbiology of the National Medicines Institute with its seat in Warsaw. The strain is a gram-positive rod, immobile, non-sporulating. This strain shows 99.9% homology to the species Lactobacillus plantarum, which was found on the basis of the results of API 50CHL fermentation tests. The nucleotide sequence of the DNA region encoding the 16S rRNA gene of the new strain, which defines the species affiliation of the strain, is provided at the end of the description.

W celu określenia przynależności gatunkowej nowego szczepu Lactobacillus plantarum ŁOCK 0860 zsekwencjonowano region DNA kodujący gen 16S rRNA o długości 1339 pz. Otrzymaną sekwencję nukleotydową genu 16S rRNA porównano za pomocą programu BLASTN 2.2.27+ z sekwencjami dostępnymi w bazie National Center of Biotechnology Information (NCBI). Porównanie sekwencji nukleotydowej genu 16S rRNA nowego szczepu Lactobacillus plantarum 0860 z sekwencją szczepu referencyjnego Lactobacillus plantarum NBRC101977 przedstawiono na końcu opisu. Na podstawie tego porównania stwierdzono podobieństwo nowego szczepu bakterii do gatunku Lactobacillus plantarum z prawdopodobieństwem 99,3%.In order to determine the species affiliation of the new Lactobacillus plantarum LOCK 0860 strain, the DNA region encoding the 1339 bp 16S rRNA gene was sequenced. The obtained nucleotide sequence of the 16S rRNA gene was compared using the BLASTN 2.2.27+ program with the sequences available in the National Center of Biotechnology Information (NCBI) database. The comparison of the nucleotide sequence of the 16S rRNA gene of the new Lactobacillus plantarum 0860 strain with the sequence of the Lactobacillus plantarum NBRC101977 reference strain is presented at the end of the description. Based on this comparison, the similarity of the new bacterial strain to the species Lactobacillus plantarum was found with a probability of 99.3%.

Szczep ten wykazuje 99,9% homologii do gatunku Lactobacillus plantarum, co stwierdzono na podstawie wyników testów fermentacyjnych API 50CHL.This strain shows 99.9% homology to the species Lactobacillus plantarum, which was found on the basis of the results of API 50CHL fermentation tests.

Nowy szczep otrzymuje się w wyniku hodowli na podłożu Rogosa (Difco) o składzie w g/l: pepton kazeinowy - 10,0, ekstrakt drożdżowy - 5,0, D(+)glukoza -20,0, fosforan potasu - 6,0, cytrynian amonu - 2,0, Tween 80 - 1,0, octan sodu - 15,0 siarczan magnezu - 0,575, siarczan żelaza II - 0,034, siarczan manganu - 0,12, agar - 15,0, o pH = 5,5 w postaci kremowych, owalnych kolonii, o gładkiej powierzchni i regularnych brzegach, o średnicy około 1 mm. Natomiast w podłożu płynnym MRS (Merck) o składzie w g/l: ekstrakt drożdżowy - 4,0, ekstrakt mięsny 10,0 - pepton z kazeiny 10,0, D(+)glukoza - 20,0, Tween 80-1,0, wodorocytrynian amonu - 2,0, fosforan dwupotasowy - 2,0, octan sodu - 5,0, siarczan magnezu 7-wodny - 0,20, siarczan magnezu 4-wodny - 0,05, nowy szczep bakterii rośnie tworząc jednorodne zmętnienie pożywki. W obrazie mikroskopowym bakterie mają kształt krótkich, prostych, zgrubiałych pałeczek. Pałeczki nie wytwarzają przetrwalników. Szczep rośnie w temperaturach 15 - 45°C, natomiast optymalna temperatura wzrostu szczepu wynosi 37°C. Do wzrostu preferuje środowisko wzbogacone w 5% (v/v) CO2. Szczep nie wytwarza katalazy. Wybarwia się na Gram (+).The new strain is obtained by culturing in Rogosa (Difco) medium with the composition in g / l: casein peptone - 10.0, yeast extract - 5.0, D (+) glucose -20.0, potassium phosphate - 6.0, ammonium citrate - 2.0, Tween 80 - 1.0, sodium acetate - 15.0, magnesium sulfate - 0.575, iron II sulfate - 0.034, manganese sulfate - 0.12, agar - 15.0, pH = 5.5 in the form of cream, oval colonies, with a smooth surface and regular edges, approximately 1 mm in diameter. However, in the liquid medium MRS (Merck) with the composition in g / l: yeast extract - 4.0, meat extract 10.0 - peptone from casein 10.0, D (+) glucose - 20.0, Tween 80-1.0 , ammonium hydrogen citrate - 2.0, dipotassium phosphate - 2.0, sodium acetate - 5.0, magnesium sulphate 7-water - 0.20, magnesium sulphate 4-water - 0.05, a new strain of bacteria grows forming a homogeneous turbidity of the medium . In the microscopic image, the bacteria appear in the shape of short, straight, thickened sticks. The sticks do not produce spores. The strain grows at temperatures of 15 - 45 ° C, while the optimal growth temperature for the strain is 37 ° C. It prefers an environment enriched in 5% (v / v) CO2 for growth. The strain does not produce catalase. It stains Gram (+).

Cechy fizjologiczne i biochemiczne szczepu ŁOCK 0860Physiological and biochemical characteristics of the ŁOCK 0860 strain

Test API 50 CHL wykazał, że szczep jest zdolny do fermentacji następujących sacharydów i ich pochodnych: rybozy, galaktozy, glukozy, fruktozy, mannozy, ramnozy, mannitolu, N-acetyloglukozoaminy, amygdaliny, arbutyny, esculiny, salicyny, celobiozy, maltozy, laktozy, melibiozy, sacharozy, trehalozy, melecytozy, skrobi, gencjobiozy, D-tagatozy, glukonianu.The API 50 CHL test showed that the strain is capable of fermenting the following saccharides and their derivatives: ribose, galactose, glucose, fructose, mannose, rhamnose, mannitol, N-acetylglucosamine, amygdalin, arbutin, esculin, salicin, cellobiose, maltose, lactose, melibiosis, sucrose, trehalose, melecytose, starch, gentiobiose, D-tagatose, gluconate.

Wyniki testu API ZYM wskazują, że szczep wykazuje aktywność następujących enzymów: esterazy, β-galaktozydazy, a-glukozydazy, β-glukozydazy, N-acetylo^-glukozaminidazy, kwaśnej fosfatazy, fosfohydrolazy naftylo-AS-BI, arylamidazy leucyny, arylamidazy waliny, arylamidazy cystyny.The results of the ZYM API test indicate that the strain exhibits the activity of the following enzymes: esterase, β-galactosidase, α-glucosidase, β-glucosidase, N-acetylβ-glucosaminidase, acid phosphatase, naphthyl-AS-BI phosphohydrolase, leucine arylamidase, valine arylamidase, cystine arylamidase.

Ponadto stwierdzono, że szczep nie wytwarza siarkowodoru, ani amoniaku z argininy, nie wykazuje zdolności rozkładu H2O2.Moreover, it was found that the strain does not produce hydrogen sulphide or ammonia from arginine, does not show the ability to decompose H2O2.

PL 221 959 B1PL 221 959 B1

Cechy probiotyczne szczepu ŁOCK 0860Probiotic characteristics of the ŁOCK 0860 strain

Szczep spełnia kryteria stawiane bakteriom probiotycznym, co stwierdzono wyniku badań in vitro wykonanych według procedur zalecanych przez FAO/WHO. Nowy szczep wykazuje odporność na niskie pH (kwasowość soku żołądkowego) w zakresie pH od 2,5 do 3,5. W pH 3,5 przeżywalność po 60 minutach wynosi 2,0, x 108 jtk/ml, a po 180 minutach 1,0 x 108 jtk/ml, przy poziomie wyjściowyThe strain meets the criteria for probiotic bacteria, which was confirmed by in vitro tests carried out according to the procedures recommended by the FAO / WHO. The new strain is resistant to low pH (gastric acidity) in the pH range from 2.5 to 3.5. At pH 3.5, the survival after 60 minutes is 2.0 x 10 8 cfu / ml, and after 180 minutes, 1.0 x 10 8 cfu / ml, at the baseline

3,7 x 109 jtk/ml. Natomiast w pH 2,5 po 60 minutach przeżywa 7,2 x 107 jtk/ml, a po 180 minutach3.7 x 10 9 CFU / ml. However, at pH 2.5, after 60 minutes, it survives 7.2 x 10 7 cfu / ml, and after 180 minutes

1,1 x 104 jtk/ml, przy poziomie wyjściowym 3,7 x 109 jtk/ml.1.1 x 10 4 cfu / ml and the output level of 3.7 x 10 9 cfu / ml.

Wykazuje odporność na sole żółci w stężeniach 2%, 4%, 6% w czasie do 48 godzin. Po 48 go5 dzinach inkubacji w obecności 2% żółci przeżywalność szczepu wynosi 5,5 x 105 jtk/ml, przy stężeniu 53 żółci 4% wynosi 5,0 x 105 jtk/ml, natomiast przy stężeniu 6% przeżywa 3,9 x 103 jtk/ml, przy wyjściowym poziomie bakterii rzędu 3,7 x 109 jtk/ml.It shows resistance to bile salts in concentrations of 2%, 4%, 6% for up to 48 hours. 48 a 5 djinns incubated in the presence of 2% bile survival rate of the strain is 5.5 x 10 5 cfu / ml, at a concentration of 53% bile 4 is 5.0 x 10 5 cfu / ml, whereas at a concentration of 6% survival 3.9 x 10 3 cfu / ml, with the initial bacterial level of 3.7 x 10 9 cfu / ml.

Wykazuje oporność w stosunku do następujących antybiotyków i chemioterapeutyków o działaniu przeciwbakteryjnym: penicyliny, amoksycyliny, doksycykliny, oksytetracykliny, tetracykliny, erytromycyny.It is resistant to the following antibiotics and chemotherapeutic agents with antibacterial activity: penicillin, amoxicillin, doxycycline, oxytetracycline, tetracycline, erythromycin.

Charakteryzuję się słabym przyleganiem do linii komórkowych Caco-2 oznaczoną jako (+). Adherencję określano półilościowo przyjmując następujące kryteria (-) brak przylegania, (+) pojedyncze komórki bakterii w całym preparacie, (++) pojedyncze komórki bakterii w poszczególnych polach widzenia, liczne w preparacie, (+++) liczne bakterie w poszczególnych polach widzenia.It is characterized by poor adherence to Caco-2 cell lines marked as (+). Adherence was semi-quantified using the following criteria (-) no adherence, (+) single bacterial cells throughout the slide, (++) single bacterial cells in each visual field, numerous in the slide, (+++) numerous bacteria in each visual field.

Wykazuje aktywność antagonistyczną w stosunku do bakterii patogennych przenoszonych drogą pokarmową, jak Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Enterococcus faecalis, Salmonella Enteritidis, Salmonella Typhimurium, Listeria monocytogenes, Campylobacter jejuni, Campylobacter coli.It shows antagonistic activity against pathogenic bacteria transmitted via the food route, such as Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Enterococcus faecalis, Salmonella Enteritidis, Salmonella Typhimurium, Listeria monocytogenes, Campylobacter jejuni, Campylobacter coli.

Posiada niewielką aktywność fekalną. Spośród trzech enzymów: β-glukozydazy, β-glukuronidazy i ureazy aktywna jest tylko β-glukozydaza.Has little fecal activity. Of the three enzymes β-glucosidase, β-glucuronidase and urease, only β-glucosidase is active.

Cechy biotechnologiczne szczepu ŁOCK 0860Biotechnological features of the ŁOCK 0860 strain

Cechy biotechnologiczne szczepu określono w mleku. Szczep osiągnął fazę stacjonarną po 25 godzinach hodowli w mleku, a plon komórek wynosił 7,2 x 108 jtk/ml. Czas trwania fazy adaptacyjnej wynosił 2 godziny.The biotechnological characteristics of the strain were determined in milk. The strain reached stationary phase after 25 hours of culturing in milk, and the cell yield was 7.2 x 10 8 cfu / ml. The duration of the adaptation phase was 2 hours.

Maksymalna wartość właściwej szybkości wzrostu szczepu wynosiła 0,55 h-1, a produktywność hodowli 0,3 x 108.The maximum value of the specific growth rate of the strain was 0.55 h -1 , and the productivity of the culture was 0.3 x 10 8 .

Szczep w początkowym etapie fazy stacjonarnej osiągnął kwasowość wynoszącą 40° SH, gwarantującą czysto kwaśny smak produktu. Specyficzna aktywność kwasząca wyrażona w °SH na jednostkę tworzącą kolonie w fazie stacjonarnej wzrostu wynosiła dla szczepu 4,4° SH/108 jtk.The strain in the initial stage of the stationary phase reached an acidity of 40 ° SH, which guarantees a purely acidic taste of the product. The specific acidifying activity expressed in ° SH per colony forming unit in the stationary phase of growth for the strain was 4.4 ° SH / 10 8 cfu.

Szczep charakteryzuje się aktywnością β-galaktozydazy na poziomie 0,35 J, przy czym jednostka aktywności J jest definiowana jako ilość ąmoli ONP uwolnionych w czasie 1 minuty przez 1 mg suchej masy bakterii.The strain is characterized by a β-galactosidase activity of 0.35 J, the unit of J activity being defined as the number of µmoles of ONP released in 1 minute per 1 mg of bacteria dry weight.

Przedmiot wynalazku ilustrują poniższe przykłady.The following examples illustrate the subject matter of the invention.

P r z y k ł a d I.P r z x l a d I.

Szczep hodowano na podłożu płynnym MRS o składzie w g/l: ekstrakt drożdżowy - 4,0, ekstrakt mięsny - 10,0, pepton z kazeiny - 10,0, D(+)glukoza - 20,0, Tween 80 - 1,0, wodorocytrynian amonu - 2,0, fosforan dwupotasowy - 2,0, octan sodu - siarczan magnezu 7-wodny - 0,20, siarczan magnezu 4-wodny - 0,05, w temperaturze 37°C, w środowisku wzbogaconym w CO2 (5% v/v). Po 24 godzinach hodowli wyhodowane komórki oddzielono od podłoża na wstrząsarce uzyskując gęstość 8,5 x 108 komórek/ml. Tak otrzymaną zawiesinę bakterii umieszczono w środowisku o pH 3.0 i w temperaturze 37°C. Po 180 minutach przeżyło 93,1 komórek.The strain was grown on MRS liquid medium with the composition in g / l: yeast extract - 4.0, meat extract - 10.0, casein peptone - 10.0, D (+) glucose - 20.0, Tween 80 - 1.0 , ammonium hydrogen citrate - 2.0, dipotassium phosphate - 2.0, sodium acetate - magnesium sulphate 7-water - 0.20, magnesium sulphate 4-water - 0.05, at 37 ° C, in a CO2 enriched environment ( 5% v / v). After 24 hours of cultivation, the cultured cells were separated from the medium on a shaker to obtain a density of 8.5 x 10 8 cells / ml. The thus obtained bacterial suspension was placed in an environment with a pH of 3.0 and a temperature of 37 ° C. After 180 minutes, 93.1 cells had survived.

P r z y k ł a d II.P r z x l a d II.

Przygotowano liofilizowane mieszanki szczepu zawierające 10% mleko odtłuszczone, na nośniku węglowodanowym o składzie: hydrolizat skrobiowy MD 12,5 g/l, hydrolizat kazeiny 20 g/l, laktitol 0,4 g/l, sacharoza 2 g/l. Trwałość liofilizowanych preparatów oceniano w warunkach chłodniczych (4-5°C) oraz w temperaturze pokojowej (25°C) w trakcie 4 miesięcy przechowywania. Temperatura chłodnicza zapewnia większą stabilność i trwałość liofilizowanych preparatów niezależnie od czynnika ochronnego. Przechowywanie preparatu bakterii suszonego sublimacyjnie z mlekiem jako medium ochronnym przez 4 miesiące 5 spowodowało obniżenie liczby żywych komórek o 6,2% dla temperatury chłodniczej i o 13,0% dla temperatury pokojowej.Freeze-dried mixtures of the strain were prepared, containing 10% skim milk, on a carbohydrate carrier with the following composition: MD starch hydrolyzate 12.5 g / l, casein hydrolyzate 20 g / l, lactitol 0.4 g / l, sucrose 2 g / l. The stability of the freeze-dried preparations was assessed under refrigeration conditions (4-5 ° C) and at room temperature (25 ° C) during 4 months of storage. The cooling temperature ensures greater stability and durability of the freeze-dried preparations regardless of the protective factor. The storage of the freeze-dried bacterial preparation with milk as a protective medium for 4 months 5 resulted in a reduction of the number of viable cells by 6.2% for the cooling temperature and by 13.0% for the room temperature.

Wykaz sekwencji nukleotydowej regionu DNA kodującego gen 16S rRNA nowego szczepu Lactobacillus plantarum ŁOCK 0860, która określa przynależność gatunkową szczepu:List of the nucleotide sequence of the DNA region encoding the 16S rRNA gene of the new Lactobacillus plantarum ŁOCK 0860 strain, which defines the species affiliation of the strain:

PL 221 959 B1PL 221 959 B1

GCGGCGTGCC TAATACATGC AAGTCGAACG AACTCTGGTA TTGATTGGTG CTTGCATCAT GATTTACATT TGAGTGAGTG GGGAACTGGT GAGTAACACGGCGGCGTGCC TAATACATGC AAGTCGAACG AACTCTGGTA TTGATTGGTG CTTGCATCAT GATTTACATT TGAGTGAGTG GGGAACTGGT GAGTAACACG

101 TGGGAAACCT GCCCAGAAGC GGGGGATAAC ACCTGGAAAC AGATGCTAAT101 TGGGAAACCT GCCCAGAAGC GGGGGATAAC ACCTGGAAAC AGATGCTAAT

ACCGCATAAC AACTTGGACC GCATGGTCCG AGTTTGAAAG ATGGCTTCGGACCGCATAAC AACTTGGACC GCATGGTCCG AGTTTGAAAG ATGGCTTCGG

201 CTATCACTTT TGGATGGTCC CGCGGCGTAT TAGCTAGATG GTGGGGTAAC201 CTATCACTTT TGGATGGTCC CGCGGCGTAT TAGCTAGATG GTGGGGTAAC

GGCTCACCAT GGCAATGATA CGTAGCCGAC CTGAGAGGGT AATCGGCCACGGCTCACCAT GGCAATGATA CGTAGCCGAC CTGAGAGGGT AATCGGCCAC

301 ATTGGGACTG AGACACGGCC CAAACTCCTA CGGGAGGCAG CAGTAGGGAA301 ATTGGGACTG AGACACGGCC CAAACTCCTA CGGGAGGCAG CAGTAGGGAA

TCTTCCACAA TGGACGAAAG TCTGATGGAG CAACGCCGCG TGAGTGAAGATCTTCCACAA TGGACGAAAG TCTGATGGAG CAACGCCGCG TGAGTGAAGA

401 AGGGTTTCGG CTCGTAAAAC TCTGTTGTTA AAGAAGAACA TATCTGAAAA401 AGGGTTTCGG CTCGTAAAAC TCTGTTGTTA AAGAAGAACA TATCTGAAAA

TAACTGTTCA GGTATTGACG GTATTTAACC AGAAAGCCAC GGCTAACTACTAACTGTTCA GGTATTGACG GTATTTAACC AGAAAGCCAC GGCTAACTAC

501 GTGCCAGCAG CCGCGGTAAT ACGTAGGTGG CAAGCGTTGT CCGGATTTAT501 GTGCCAGCAG CCGCGGTAAT ACGTAGGTGG CAAGCGTTGT CCGGATTTAT

TGGGCGTAAA GCGAGCGCAG GCGGTTTTTT AAGTCTGATG TGAAAGCCTTTGGGCGTAAA GCGAGCGCAG GCGGTTTTTT AAGTCTGATG TGAAAGCCTT

601 CGGCTCAACC GAAGAAGTGC ATCGGAAACT GGGAAACTTG AGTGCAGAAG601 CGGCTCAACC GAAGAAGTGC ATCGGAAACT GGGAAACTTG AGTGCAGAAG

AGGACAGTGG AACTCCATGT GTTAGCGGTG AAATGCGTAG ATATATGGAAAGGACAGTGG AACTCCATGT GTTAGCGGTG AAATGCGTAG ATATATGGAA

701 GAACACCAGT GGCGAAGGCG GCTGTCTGGT CTGTAACTGA CGCTGAGGCT701 GAACACCAGT GGCGAAGGCG GCTGTCTGGT CTGTAACTGA CGCTGAGGCT

CGAAAGTATG GGTAGCAAAC AGGATTAGAT ACCCTGGTAG TCCATACCGTCGAAAGTATG GGTAGCAAAC AGGATTAGAT ACCCTGGTAG TCCATACCGT

801 AAACGATGAA TGCTAAGTGT TGGAGGGTTT CCGCCCTTCA GTGGCAGCTA801 AAACGATGAA TGCTAAGTGT TGGAGGGTTT CCGCCCTTCA GTGGCAGCTA

ACGCATTAAG CATTCCGCCT GGGGAGTACG GCCGCAAGGC TGAAACTCAAACGCATTAAG CATTCCGCCT GGGGAGTACG GCCGCAAGGC TGAAACTCAA

901 AGGAATTGAC GGGGGCCCGC ACAAGCGGTG GAGCATGTGG TTTAATTCGA901 AGGAATTGAC GGGGGCCCGC ACAAGCGGTG GAGCATGTGG TTTAATTCGA

AGCTACGCGA AGAACCTTAC CAGGTCTTGA CATACTATGC AAATCTAAGAAGCTACGCGA AGAACCTTAC CAGGTCTTGA CATACTATGC AAATCTAAGA

1001 GATTAGACGT TCCCTTCGGG GACATGGATA CAGGTGGTGC ATGGTTGTCG1001 GATTAGACGT TCCCTTCGGG GACATGGATA CAGGTGGTGC ATGGTTGTCG

TCAGCTCGTG TCGTGAGATG TTGGGTTAAG TCCCGCAAAG AGCGCACCCCTCAGCTCGTG TCGTGAGATG TTGGGTTAAG TCCCGCAAAG AGCGCACCCC

1101 TTATTATCAG TTGCCAGCAT TAAGTTGGGC ACTCTGGTGA GACTGCCGGT1101 TTATTATCAG TTGCCAGCAT TAAGTTGGGC ACTCTGGTGA GACTGCCGGT

GACAAACCGG AGGAAGGTGG GGATGACGTC AAATCATCAT GCCCCTTATGGACAAACCGG AGGAAGGTGG GGATGACGTC AAATCATCAT GCCCCTTATG

1201 ACCTGGGCTA CACACGTGCT ACAATGGATG GTACAACGAG TTGCGAACTC1201 ACCTGGGCTA CACACGTGCT ACAATGGATG GTACAACGAG TTGCGAACTC

GCGAGAGTAA GCTAATCTCT TAAAGCCATT CTCAGTTCGG ATTGTAGGCTGCGAGAGTAA GCTAATCTCT TAAAGCCATT CTCAGTTCGG ATTGTAGGCT

1301 GCAACTCGCC TACATGAAGT CGGAATCGCT AG7AATCGC1301 GCAACTCGCC TACATGAAGT CGGAATCGCT AG7AATCGC

W której: a - oznacza adeninę, g - guaninę, c - cytozynę, t -tyminę.In which: a - is adenine, g - guanine, c - cytosine, t-thymine.

Porównanie sekwencji nukleotydowej genu 16S rRNA nowego szczepu Lactobacillus plantarum NBRC101977:Comparison of the nucleotide sequence of the 16S rRNA gene of the new Lactobacillus plantarum NBRC101977 strain:

PL 221 959 B1PL 221 959 B1

Lb. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860No. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860

Lb. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860No. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860

Lb. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860No. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860

Lb. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860No. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860

Lb. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860No. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860

Lb. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860No. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860

Lb. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860No. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860

Lb. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860No. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860

Lb. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860No. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860

Lb. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860No. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860

Lb. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860No. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860

Lb. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860No. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860

Lb. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860No. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860

Lb. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860No. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860

Lb. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860No. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860

Lb. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860No. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860

Lb. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860No. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860

Lb. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860No. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860

Lb. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860No. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860

Lb. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860No. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860

Lb. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860No. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860

Lb. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860No. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860

Lb. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860 (1) (1) (51) (40) (101) (90)No. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860 (1) (1) (51) (40) (101) (90)

1151) (140) (201) (190) (251) (240) (301) (290) (351) (340) (401) (390) (451) (440) (501) (490) (551) (540) (601) (590) (651) (640) (700) (690) (750) (740) (800) (790) (850) (840) (900) (888) (950) (938) (1000) (988) (1050) (1038) (1100) (1088)1151) (140) (201) (190) (251) (240) (301) (290) (351) (340) (401) (390) (451) (440) (501) (490) (551) (540) (601) (590) (651) (640) (700) (690) (750) (740) (800) (790) (850) (840) (900) (888) (950) (938 ) (1000) (988) (1050) (1038) (1100) (1088)

5050

GACGAACGCTGGCGGCGTGCCTAATACATGCAAGTCGAACGAACTCTGGTGACGAACGCTGGCGGCGTGCCTAATACATGCAAGTCGAACGAACTCTGGT

-----------GCGGCGTGCCTAATACATGCAAGTCGAACGAACTCTGGT----------- GCGGCGTGCCTAATACATGCAAGTCGAACGAACTCTGGT

100 attgattggtgcttgcatcatgatttacatttgagtgagtggIgaactgg attgattggtgcttgcatcatgatttacatttgagtgagtgg|gaactgg 101 150100 attgattggtgcttgcatcatgatttacatttgagtgagtggIgaactgg attgattggtgcttgcatcatgatttacatttgagtgagtgg | gaactgg 101 150

TGAGTAACACGTGGGAAACCTGCCCAGAAGCGGGGGATAACACCTGGAAA TGAGTAACACGTGGGAAACCTGCCCAGAAGCGGGGGATAACACCTGGAAA 151 200 cagatgctaataccgcataacaacttggaccgcatggtccgagtttgaaa CAGATGCTAATACCGCATAACAACTTGGACCGCATGGTCCGAGTTTGAAA 201 250TGAGTAACACGTGGGAAACCTGCCCAGAAGCGGGGGATAACACCTGGAAA TGAGTAACACGTGGGAAACCTGCCCAGAAGCGGGGGATAACACCTGGAAA 151 200 cagatgctaataccgcataacaacttggaccgACATTGGACGATAGTGGCTAATAGATTGGACGACAGATTGGACGATAGATTGCTACGACAGATTGGACGATAGATTGGACGATAGATTGCTACGATAGATTGGACGA

GATGGCTTCGGCTATCACTTTTGGATGGTCCCGCGGCGTATTAGCTAGAT GATGGCTTCGGCTATCACTTTTGGATGGTCCCGCGGCGTATTAGCTAGAT 251 300GATGGCTTCGGCTATCACTTTTGGATGGTCCCGCGGCGTATTAGCTAGAT GATGGCTTCGGCTATCACTTTTGGATGGTCCCGCGGCGTATTAGCTAGAT 251 300

GGTGGGGTAACGGCTCACCATGGCAATGATACGTAGCCGACCTGAGAGGG GGTGGGGTAACGGCTCACCATGGCAATGATACGTAGCCGACCTGAGAGGG 301 350GGTGGGGTAACGGCTCACCATGGCAATGATACGTAGCCGACCTGAGAGGG GGTGGGGTAACGGCTCACCATGGCAATGATACGTAGCCGACCTGAGAGGG 301 350

TAATCGGCCACATTGGGACTGAGACACGGCCCAAACTCCTACGGGAGGCA TAATCGGCCACATTGGGACTGAGACACGGCCCAAACTCCTACGGGAGGCA 351 400TAATCGGCCACATTGGGACTGAGACACGGCCCAAACTCCTACGGGAGGCA TAATCGGCCACATTGGGACTGAGACACGGCCCAAACTCCTACGGGAGGCA 351 400

GCAGTAGGGAATCTTCCACAATGGACGAAAGTCTGATGGAGCAACGCCGC GCAGTAGGGAATCTTCCACAATGGACGAAAGTCTGATGGAGCAACGCCGC 401 450GCAGTAGGGAATCTTCCACAATGGACGAAAGTCTGATGGAGCAACGCCGC GCAGTAGGGAATCTTCCACAATGGACGAAAGTCTGATGGAGCAACGCCGC 401 450

GTGAGTGAAGAAGGGTTTCGGCTCGTAAAACTCTGTTGTTAAAGAAGAAC GTGAGTGAAGAAGGGTTTCGGCTCGTAAAACTCTGTTGTTAAAGAAGAAC 451 500GTGAGTGAAGAAGGGTTTCGGCTCGTAAAACTCTGTTGTTAAAGAAGAAC GTGAGTGAAGAAGGGTTTCGGCTCGTAAAACTCTGTTGTTAAAGAAGAAC 451 500

ATArCTGA|A|TAACTGTTCAGGTATTGACGGTATTTAACCAGAAAGCCA ATArCTGA|A|TAACTGTTCAGGTATTGACGGTATTTAACCAGAAAGCCA 501 550ATArCTGA | A | TAACTGTTCAGGTATTGACGGTATTTAACCAGAAAGCCA ATArCTGA | A | TAACTGTTCAGGTATTGACGGTATTTAACCAGAAAGCCA 501 550

CGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTGGCAAGCGTTG CGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTGGCAAGCGTTG 551 600CGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTGGCAAGCGTTG CGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTGGCAAGCGTTG 551 600

TCCGGATTTATTGGGCGTAAAGCGAGCGCAGGCGGTTTTTTAAGTCTGAT TCCGGATTTATTGGGCGTAAAGCGAGCGCAGGCGGTTTTTTAAGTCTGAT 601 650TCCGGATTTATTGGGCGTAAAGCGAGCGCAGGCGGTTTTTTAAGTCTGAT TCCGGATTTATTGGGCGTAAAGCGAGCGCAGGCGGTTTTTTAAGTCTGAT 601 650

GTGAAAGCCTTCGGCTCAACCGAAGAAGTGCATCGGAAACTGGGAAACTT GTGAAAGCCTTCGGCTCAACCGAAGAAGTGCATCGGAAACTGGGAAACTT 651 700GTGAAAGCCTTCGGCTCAACCGAAGAAGTGCATCGGAAACTGGGAAACTT GTGAAAGCCTTCGGCTCAACCGAAGAAGTGCATCGGAAACTGGGAAACTT 651 700

GAGTGCAGAAGAGGACAGTGGAACTCCATGTGT|AGCGGTGAAATGCGTA gagtgcagaagaggacagtggaactccatgtgt|agcggtgaaatgcgta 701 750 gatatatggaagaacaccagtggcgaaggcggctgtctggtctgtaactg gatatatggaagaacaccagtggcgaaggcggctgtctggtctgtaactg 751 800GAGTGCAGAAGAGGACAGTGGAACTCCATGTGT | AGCGGTGAAATGCGTA gagtgcagaagaggacagtggaactccatgtgt | agcggtgaaatgcgta 701 750 gatatatggaagaacacTCCATGTGTgactaggtctggacgataggtctgacgactaggtctgactgactaggtgactgacgatggtgactgacgatgcgaaggagaacgactaggtctgactgactaggtgactgacgatgcgaaggagaacgactaggtctgactgacagtaggtctgagact

ACGCTGAGGCTCGAAAGTATGGGTAGCAAACAGGATTAGATACCCTGGTA acgctgaggctcgaaagtatgggtagcaaacaggattagataccctggta 801 850ACGCTGAGGCTCGAAAGTATGGGTAGCAAACAGGATTAGATACCCTGGTA acgctgaggctcgaaagtatgggtagcaaacaggattagataccctggta 801 850

GTCCATACCGTAAACGATGAATGCTAAGTGTTGGAGGGTTTCCGCCCTTC GTCCATACCGTAAACGATGAATGCTAAGTGTTGGAGGGTTTCCGCCCTTC 851 900 agti^Bgcagctaacgcattaagcattccgcctggggagtacggccgcaa agtgBgcagctaacgcattaagcattccgcctggggagtacggccgcaa 901 950 ggctgaaactcaaaggaattgacgggggcccgcacaagcggtggagcatg ggctgaaactcaaaggaattgacgggggcccgcacaagcggtggagcatg 951 1000GTCCATACCGTAAACGATGAATGCTAAGTGTTGGAGGGTTTCCGCCCTTC GTCCATACCGTAAACGATGAATGCTAAGTGTTGGAGGGTTTCCGCCCTTC 851 900 agti ^ Bgcagctaacgcattaagcattccgcctggggagtacggccgcaa agtgBgcagctaacgcattaagcattccgcctggggagtacggccgcaa ggctgaaactcaaaggaattgacgggggcccgcacaagcggtggagcatg ggctgaaactcaaaggaattgacgggggcccgcacaagcggtggagcatg 901 950 951 1000

TGGTTrAATTCGAAGCTACGCGAAGAACCTTACCAGGTCTTGACATACTA TGGTTTAATTCGAAGCTACGCGAAGAACCTTACCAGGTCTTGACATACTA 1001 1050TGGTTrAATTCGAAGCTACGCGAAGAACCTTACCAGGTCTTGACATACTA TGGTTTAATTCGAAGCTACGCGAAGAACCTTACCAGGTCTTGACATACTA 1001 1050

TGCAAATCTAAGAGATTAGACGTTCCCTTCGGGGACATGGATACAGGTGG TGCAAATCTAAGAGATTAGACGTTCCCTTCGGGGACATGGATACAGGTGG 1051 1100TGCAAATCTAAGAGATTAGACGTTCCCTTCGGGGACATGGATACAGGTGG TGCAAATCTAAGAGATTAGACGTTCCCTTCGGGGACATGGATACAGGTGG 1051 1100

TGCATGGTTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCA TGCATGGTTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCA 1101 1150 aBgagcgcaWcccttattatcagttgccagcattaagttgggcactctgg a|gagcgca|cccttattatcagttgccagcattaagttgggcactctggTGCATGGTTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCA TGCATGGTTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCA 1101 1150 aBgagcgcaWcccttattatcagttgggagcctccctcattatcagttggggcagttactcagggagcctcagttgggagcctcctca

PL 221 959 B1PL 221 959 B1

11511151

12001200

Lb. No. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860 plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860 (1150) (1138) (1150) (1138) Lb. No. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860 plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860 (1200) (1188) (1200) (1188) Lb. No. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860 plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860 (1250) (1238) (1250) (1238) Lb. No. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860 plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860 (1300) (1288) (1300) (1288) Lb. No. plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860 plantarum NBRC101977 Lb. plantarum 0860 (1350) (1338) (1350) (1338)

TGAGACTGCCGGTGACAAACCGGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAAATCAT tgagactgccggtgacaaaccggaggaaggtggggatgacgtcaaatcat 1201 1250TGAGACTGCCGGTGACAAACCGGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAAATCAT tgagactgccggtgacaaaccggaggaaggtggggatgacgtcaaatcat 1201 1250

CATGCCCCTTATGACCTGGGCTACACACGTGCTACAATGGATGGTACAAC CATGCCCCTTATGACCTGGGCTACACACGTGCTACAATGGATGGTACAAC 1251 1300CATGCCCCTTATGACCTGGGCTACACACGTGCTACAATGGATGGTACAAC CATGCCCCTTATGACCTGGGCTACACACGTGCTACAATGGATGGTACAAC 1251 1300

GAGTTGCGAACTCGCGAGAGTAAGCTAATCTCTTAAAGCCATTCTCAGTT GAGTTGCGAACTCGCGAGAGTAAGCTAATCTCTTAAAGCCATTCTCAGTT 1301 1350GAGTTGCGAACTCGCGAGAGTAAGCTAATCTCTTAAAGCCATTCTCAGTT GAGTTGCGAACTCGCGAGAGTAAGCTAATCTCTTAAAGCCATTCTCAGTT 1301 1350

CGGATTGTAGGCTGCAACTCGCCTACATGAAGrCGGAATCGCTAGTAATC CGGATTGTAGGCTGCAACTCGCCTACATGAAGTCGGAATCGCTAGTAATC 1351CGGATTGTAGGCTGCAACTCGCCTACATGAAGrCGGAATCGCTAGTAATC CGGATTGTAGGCTGCAACTCGCCTACATGAAGTCGGAATCGCTAGTAATC 1351

GCGC

GCGC

Zastrzeżenie patentowePatent claim

Claims (1)

Szczep bakterii mlekowych Lactobacillus plantarum ŁOCK 0860 o właściwościach probiotycz-Lactobacillus plantarum LOCK 0860 strain of lactic bacteria with probiotic properties
PL401554A 2012-11-12 2012-11-12 Lactobacillus plantarum lactic bacteria strain PL221959B1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL401554A PL221959B1 (en) 2012-11-12 2012-11-12 Lactobacillus plantarum lactic bacteria strain

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL401554A PL221959B1 (en) 2012-11-12 2012-11-12 Lactobacillus plantarum lactic bacteria strain

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL401554A1 PL401554A1 (en) 2014-05-26
PL221959B1 true PL221959B1 (en) 2016-06-30

Family

ID=50771767

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL401554A PL221959B1 (en) 2012-11-12 2012-11-12 Lactobacillus plantarum lactic bacteria strain

Country Status (1)

Country Link
PL (1) PL221959B1 (en)

Also Published As

Publication number Publication date
PL401554A1 (en) 2014-05-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Wu et al. Isolation and preliminary probiotic selection of lactobacilli from koumiss in Inner Mongolia
Cebeci et al. Properties of potential probiotic Lactobacillus plantarum strains
US20110059058A1 (en) Strain of Lactobacillus Rhamnosus
Kask et al. Physiological properties of Lactobacillus paracasei, L. danicus and L. curvatus strains isolated from Estonian semi-hard cheese
Grosu-Tudor et al. PROBIOTIC POTENTIAL OF SOME LACTIC ACID BACTERIA ISOLATED FROM ROMANIAN FERMENTED VEGETABLES.
Aslam et al. Isolation of acidophilic lactic acid bacteria antagonistic to microbial contaminants
KR101349692B1 (en) The Alcohol resistant strain of lactic acid bacteria, Pediococcus acidilactici and its use
KR101636014B1 (en) Lactobacillus sp. having anti-viral and anti-bacterial activity and use thereof
EP1743042B1 (en) Lactic acid bacteria strains exhibiting probiotic properties and compositions comprising the same
Teanpaisan et al. Survival rates of human-derived probiotic Lactobacillus paracasei SD1 in milk powder using spray drying
Barakat et al. Identification and probiotic characteristics of Lactobacillus strains isolated from traditional Domiati cheese
Tambekar et al. Acid and bile tolerance, antibacterial activity, antibiotic resistance and bacteriocins activity of probiotic Lactobacillus species
Cho et al. Characterization of Lactobacillus spp. isolated from the feces of breast-feeding piglets
Arıcı et al. Some technological and functional properties of lactic acid bacteria isolated from hardaliye
Alikhani et al. Isolation, identification and analysis of probiotic properties of Lactobacillus spp from traditional yoghurts in North of Iran
Kim et al. Characterization of Bacillus polyfermenticus KJS-2 as a probiotic
Uymaz et al. In vitro characterization of probiotic properties of Pediococcus pentosaceus BH105 isolated from human faeces
EP2548945A2 (en) Lactic acid bacterium with increased acid tolerance
PL221959B1 (en) Lactobacillus plantarum lactic bacteria strain
PL221958B1 (en) Lactobacillus plantarum lactic bacteria strain
PL221961B1 (en) Lactobacillus paracasei lactic bacteria strain
PL221957B1 (en) Lactobacillus casei lactic bacteria strain
PL248110B1 (en) Lacticaseibacillus rhamnosus strain of lactic acid bacteria
Nnawuihe et al. Characterization and probiotic potentials of lactic acid bacteria isolated from ingesta of selected ruminants
Kim et al. Isolation, identification, and probiotic properties of Lactobacillus reuteri HY701 from human feces