PL223225B1 - Halogenopochodne benzo[b]furanów, ewentualnie w postaci farmaceutycznie dopuszczalnej soli oraz zastosowanie halogenopochodnych benzo[b]furanów - Google Patents

Halogenopochodne benzo[b]furanów, ewentualnie w postaci farmaceutycznie dopuszczalnej soli oraz zastosowanie halogenopochodnych benzo[b]furanów

Info

Publication number
PL223225B1
PL223225B1 PL398193A PL39819312A PL223225B1 PL 223225 B1 PL223225 B1 PL 223225B1 PL 398193 A PL398193 A PL 398193A PL 39819312 A PL39819312 A PL 39819312A PL 223225 B1 PL223225 B1 PL 223225B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
substituent
type
nch3
cells
halogen atom
Prior art date
Application number
PL398193A
Other languages
English (en)
Other versions
PL398193A1 (pl
Inventor
Mariola Krawiecka
Bożena Kuran
Jerzy Kossakowski
Marcin Cieślak
Julia Kaźmierczak-Barańska
Karolina Królewska
Barbara Nawrot
Original Assignee
Centrum Badań Molekularnych i Makromolekularnych Polskiej Akademii Nauk
Univ Warszawski Medyczny
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Centrum Badań Molekularnych i Makromolekularnych Polskiej Akademii Nauk, Univ Warszawski Medyczny filed Critical Centrum Badań Molekularnych i Makromolekularnych Polskiej Akademii Nauk
Priority to PL398193A priority Critical patent/PL223225B1/pl
Priority to EP13150611.5A priority patent/EP2631232B1/en
Publication of PL398193A1 publication Critical patent/PL398193A1/pl
Publication of PL223225B1 publication Critical patent/PL223225B1/pl

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D307/77—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D307/78—Benzo [b] furans; Hydrogenated benzo [b] furans
    • C07D307/79—Benzo [b] furans; Hydrogenated benzo [b] furans with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C07D307/80—Radicals substituted by oxygen atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D307/77—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D307/78—Benzo [b] furans; Hydrogenated benzo [b] furans
    • C07D307/82—Benzo [b] furans; Hydrogenated benzo [b] furans with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C07D307/84—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen
    • C07D307/85—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen attached in position 2

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

Przedmiotem zgłoszenia są halogenopochodne benzo[b]furanów przedstawione wzorem (1a) i (1d) oraz zastosowanie halogenopochodnych bezo[b]furanów objętych wspólnym wzorem (1), ewentualnie w postaci farmaceutycznie dopuszczalnych soli, do wytwarzania leków przeciwnowotworowych i/lub leków antyproliferacyjnych, działających selektywnie na nowotwory typu białaczek i komórki zawiesinowe.

Description

Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku są halogenopochodne benzo[b]furanów przedstawione wzorem 1a i 1d,
nie zbadane i nie opisane dotychczas w literaturze, a także zastosowanie całej grupy halogenopochodnych benzo[b]furanów objętych wspólnym wzorem 1,
w którym:
R-ι - stanowi niezależnie podstawnik wybrany z grupy obejmującej podstawnik alkilowy typu -(CH2)nCH3 gdzie n = 0-6, lub podstawnik typu: -COOH, -CO(CH2)nCH3, -COO(CH2)nCH3 gdzie n = 0-6 oraz opcjonalnie grupa alkilowa jest podstawiona co najmniej jednym atomem halogenu,
R2 - stanowi niezależnie podstawnik wybrany z grupy obejmującej podstawnik alkilowy typu -(CH2)nCH3 gdzie n = 0-6, lub podstawnik typu: -COOH, -CO(CH2)nCH3, -COO(CH2)nCH3 gdzie n = 0-6, oraz opcjonalnie grupa alkilowa jest podstawiona co najmniej jednym atomem halogenu,
R3 - stanowi podstawnik typu -H, -OH, -OCH3, lub pojedynczy atom halogenu,
R4 - stanowi niezależnie podstawnik wybrany z grupy obejmującej -OH, podstawnik O-alkilowy typu -O-(CH2)nCH3 gdzie n = 0-6,
R5 - stanowi podstawnik typu -OH, podstawnik O-alkilowy typu -O-(CH2)nCH3 gdzie n = 0-6 oraz opcjonalnie grupa alkilowa jest podstawiona co najmniej jednym atomem halogenu, lub podstawnik typu: -CO(CH2)nCH3 gdzie n = 0-6 oraz opcjonalnie grupa alkilowa jest podstawiona co najmniej jednym atomem halogenu,
R6 - stanowi podstawnik typu -H lub podstawnik typu: -CO(CH2)nCH3 gdzie n = 0-6 oraz opcjonalnie grupa alkilowa jest podstawiona co najmniej jednym atomem halogenu, przy czym
Ri, R2, R3, R4, R5, R6 stanowią kombinację podstawników taką, że w budowie związku występuje co najmniej jeden atom halogenu, ewentualnie w postaci farmaceutycznie dopuszczalnych soli, do wytwarzania leków przeciwnowotworowych i/lub leków antyproliferacyjnych, działających selektywnie na nowotwory typu białaczek i komórki zawiesinowe.
Istniejący stan wiedzy.
Szereg związków chemicznych zawierających układ benzo[b]furanu, izolowanych z naturalnych składników roślin jak i syntetyzowanych w laboratoriach wykazuje cytotoksyczną i/lub cytostatyczną aktywność. Należą tutaj pochodne cyklopenta[b]benzo[b]furanu, arylobenzo[b]furany, benzylobenzofurany, pochodne dihydrobenzofuranu.
PL 223 225 B1
Pochodne cyklopenta[b]benzo[b]furanu wyizolowane z układu Aglaia powodują znaczne zmniejszenie aktywności szeregu różnych komórek rakowych. Jako przykład można podać Silvestrol, który wykazuje aktywność przeciwrakową in vitro i in vivo przeciwko komórkom raka piersi i raka prostaty [1].
Arylobenzo[b]furany dają szeroki wachlarz aktywności biologicznej w kierunku antybakteryjnym, cytotoksycznym, antyprofileracyjnym i są potencjalnymi związkami immunosupresyjnymi. Wśród arylobenzofuranów należy wymienić neoligandy wyizolowane z Persea, które są cytotoksyczne dla komórek rakowych linii komórkowych takich jak rak skóry i rak okrężnicy in vitro [2]. Wyizolowany z Onobrychis ebenoides ebenfuran III [2-(2,4-dihydroksyfenyl)-3-formyl-4-hydroksy-6-metoksy-5-(3-metyl-buten-2-yl)-benzofuran] wykazuje aktywność przeciwko komórkom: gruczolakoraka pęcherzykowego płuc (A549) i gruczolakoraka gruczołu krokowego (PC3), embrionalnym komórkom nerki transform owanych adenowirusem 5 (HEK-293), komórkom kostniakomięsaka (KHOS), raka szyjki macicy (HeLa), ostrej białaczki limfoblastycznej (CEM i CEM/LB100) i gruczolakoraka jelita grubego (HT29) [3].
Hayakawa i współpr. wykazali, że niektóre z pochodnych 6-fenylo-2-arylobenzofuranu wykazują selektywną cytotoksyczność przeciwko komórkom nowotworowym VA13 [4-6].
Również Xian i współpr. opisali badania wstępne na serii pochodnych zawierających szkielet 2-arylobenzo[b]furanu. Spośród nich 2-(3-formyl-2-(4-hydroksy-3-metoksyfenyl)-benzofuran-5-yl)-etylo acetale wykazywały aktywność cytotoksyczną wobec różnych linii komórek rakowych [7].
Z kolei pochodne oparte o szkielet 2-benzoyl-4-fenyl-5-hydroksybenzofuranu posiadają wysoką aktywność cytotoksyczną wobec komórek: mysiej białaczki limfocytarnej (L1210), mysiego raka sutka (FM3A), ludzkich białaczek limfoblastycznych (Molt/4 i CEM), ludzkiego raka szyjki macicy (HeLa) i białaczki szpikowej K562 [8].
Pochodne dihydrobenzofuranu opisano jako inhibitory polimeryzacji tubulin i związki o aktywn ości przeciwrakowej [9]. Najbardziej wrażliwe na badane związki były komórki białaczki i raka piersi.
Wśród pochodnych benzofuranów odnajdujemy również związki zawierające w swej budowie halogeny. W związkach tych halogeny podstawione są w pierścieniu benzenowym lub w podstawniku benzylowym. Pochodne tego typu wykazują przede wszystkim aktywność biobójczą, przeciwarytmiczną, spazmolityczną, przeciwgrzybiczną [10-20]. Niewiele jest doniesień o aktywności przeciwrakowej tego typu pochodnych. Przykładem mogą być pochodne 2-(3’,4’,5’-trimetoksybenzoyl)-benzo[b]furanu. Opisane zostały one jako inhibitory polimeryzacji tubulin [21]. Związki te zawierały zarówno podstawniki elektronodonorowe jak -CH3, -OCH3, -OH jak również elektrono akceptorowe jak -F, -Br, Cl podstawione do pierścienia benzenowego. Niektóre z opisanych pochodnych były cytotoksyczne dla komórek rakowych linii komórkowych takich jak mysiej białaczki limfocytarnej (L1210), mysiego raka sutka (FM3A), ludzkich białaczek limfoblastycznych (Molt/4 i CEM), ludzkiego raka szyjki macicy (HeLa).
Zgłaszający od wielu lat prowadzi badania w obszarze pochodnych benzo[b]furanów o potencjalnej aktywności farmakologicznej [22-24]. Opisane zostały przez niego niektóre pochodne kwasów 2- i 3-benzo[b]furanokarboksylowych jak również pochodne benzo[b]furanolu. Wielokierunkowe badania dla tych związków wskazywały przede wszystkim na ich aktywność mikrobiologiczną i przeciwwirusową oraz słabą aktywność przeciwnowotworową [22-24], nie kwalifikującą ich do zastosowania do produkcji leków o właściwościach antyrakowych. Zgłaszający otrzymał i opisał także niektóre, wybrane halogenopochodne [25]. Wykonane dla tych związków badania mikrobiologiczne wskazywały na ich słabą aktywność mikrobiologiczną.
W trakcie dalszych badań nad grupą benzo[b]furanów opisanych wzorem 1, nieoczekiwanie stwierdzono ich wysoką aktywność przeciwnowotworową, pozwalającą na zastosowanie pochodnych benzo[b]furanu zawierających atomy halogenów w obszarze benzenowym i/lub w grupach alkilowych lub acetylowych, o ogólnym wzorze 1, ewentualnie w postaci farmaceutycznie dopuszczalnych soli, do wytwarzania leków przeciwnowotworowych i/lub leków antyproliferacyjnych, działających selektywnie na nowotwory typu białaczek i komórki zawiesinowe.
Opisane związki zostały otrzymane według metod raportowanych przez Zgłaszającego wcześniej [25]. W strukturze swojej zawierają one halogeny Br i Cl podstawione do pierścienia benzenowego i/lub do grup alkilowych i acetylowych. Takie położenie podstawników może w znaczący sposób modyfikować aktywność przeciwnowotworową otrzymanych pochodnych. Otrzymane pochodne to związki krystaliczne o wysokich temperaturach topnienia i dobrej rozpuszczalności w rozpuszczalnikach organicznych.
PL 223 225 B1
Halogenopochodne benzo[b]furanów przedstawione wzorem 1a i 1d,
Zastosowanie halogenopochodnych benzo[b]furanów objętych wspólnym wzorem 1,
w którym:
R-ι - stanowi niezależnie podstawnik wybrany z grupy obejmującej podstawnik alkilowy typu -(CH2)nCH3 gdzie n = 0-6, lub podstawnik typu: -COOH, -CO(CH2)nCH3, -COO(CH2)nCH3 gdzie n = 0-6 oraz opcjonalnie grupa alkilowa jest podstawiona co najmniej jednym atomem halogenu,
R2 - stanowi niezależnie podstawnik wybrany z grupy obejmującej podstawnik alkilowy typu -(CH2)nCH3 gdzie n = 0-6, lub podstawnik typu: -COOH, -CO(CH2)nCH3, -COO(CH2)nCH3 gdzie n = 0-6, oraz opcjonalnie grupa alkilowa jest podstawiona co najmniej jednym atomem halogenu,
R3 - stanowi podstawnik typu -H, -OH, -OCH3, lub pojedynczy atom halogenu,
R4 - stanowi niezależnie podstawnik wybrany z grupy obejmującej -OH, podstawnik O-alkilowy typu -O-(CH2)nCH3 gdzie n = 0-6,
R5 - stanowi podstawnik typu -OH, podstawnik O-alkilowy typu-O-(CH2)nCH3 gdzie n = 0-6 oraz opcjonalnie grupa alkilowa jest podstawiona co najmniej jednym atomem halogenu, lub podstawnik typu: -CO(CH2)nCH3 gdzie n = 0-6 oraz opcjonalnie grupa alkilowa jest podstawiona co najmniej jednym atomem halogenu,
R6 - stanowi podstawnik typu -H lub podstawnik typu: -CO(CH2)nCH3 gdzie n = 0-6 oraz opcjonalnie grupa alkilowa jest podstawiona co najmniej jednym atomem halogenu, przy czym
Ri, R2, R3, R4, R5, R6 stanowią kombinacje podstawników taką, że w budowie związku występuje co najmniej jeden atom halogenu, ewentualnie w postaci farmaceutycznie dopuszczalnych soli, do wytwarzania leków przeciwnowotworowych i/lub leków antyproliferacyjnych, działających selektywnie na nowotwory typu białaczek i komórki zawiesinowe.
Zastosowanie związków o wzorze 1, ewentualnie w postaci farmaceutycznie dopuszczalnych soli, do wytwarzania leków przeciwnowotworowych, zwłaszcza jako leków silnie toksycznych wobec komórek nowotworowych przewlekłej białaczki szpikowej K562 i HL60.
PL 223 225 B1
Korzystny, przykładowy związek o wzorze ogólnym 1, według wynalazku przedstawiony jest wzorem 1a.
Związek 1a (1: Rf = -COCH3, R2 = -CH2Br, R3 = -H, R4 = -OCH3, R5 = -OCH3, R6 = -COCH3 jest silnie toksyczny wobec komórek nowotworowych przewlekłej białaczki szpikowej K562 i HL60. Wyk orzystując test MTT wyznaczono parametr IC50 (stężenie związku powodujące 50% śmiertelność k omórek), który po 48 godzinach inkubacji komórek K562 i HL60 ze związkiem wynosi odpowiednio 5 μM i 0,1 μM. W tych samych warunkach doświadczalnych związek 1a praktycznie nie jest toksyczny dla komórek prawidłowych HUVEC (IC50 >1 μM) oraz dla komórek raka szyjki macicy HeLa (IC50 >1 mM). Dla porównania, wartość IC50 cis-platyny (związek stosowany w terapii chorób nowotworowych) wobec komórek K562 mieści się w zakresie kilku - kilkudziesięciu μM. Ponadto, w kolejnych eksperymentach wykazano, że inkubacja związku 1a z komórkami K562 (stężenie 1a 25 μM, czas inkubacji 24 h) podwyższa aktywność kaspazy 3 i 7 - enzymów proteolitycznych będących markerami apoptozy. Wskazuje to, że cytotoksyczność związku 1a wynika z indukcji apoptozy w komórkach nowotworowych. Selektywna toksyczność związku 1a w stosunku do komórek przewlekłej białaczki szpikowej, brak toksyczności wobec komórek prawidłowych oraz indukcja apoptozy w komórkach nowotworowych wskazują, że związek ten może być wykorzystany do wytwarzania leków przeciwnowotworowych lub dla chorób o podłożu proliferacyjnym.
Warunki syntezy 1,1,-[3-(bromometylo)-5,6-dimetoksy-1-benzofuran-2,7-diyl]dietanon (Przykład I)
1,1'-(5,6-dimetoksy-3-metylo-1-benzofuran-2,7-diyl)dietanon (0.01 mol) został rozpuszczony w CCI4 (100 mL). Następnie dodano katalityczne ilości nadtlenku benzoilu (0.001 mola) i N-bromosukcynoimid (0.01 mola). Mieszaninę reakcyjną ogrzewano w temperaturze wrzenia rozpuszczalnika przez 70 h. Reakcja kontrolowana była metodą chromatografii cienkowarstwowej TLC (układ rozwijający chloroform:metanol 9.9:0.1). Po zakończonej reakcji, całość odsączono, przesącz odparowano do sucha. Surowy produkt oczyszczono za pomocą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym (eluent: chloroform lub chloroform/metanol 50:0.2).
P r z y k ł a d I. (związek 1a)
R! = -COCH3, R2 = -CH2Br, R3 = -H, R4 = -OCH3, R5 = -OCH3, R6 = -COCH3
Wydajność: 40%; żółty proszek, t.top. 104-106°C; 1H-NMR (300 MHz, CDCI3, ó(ppm): 2.66 (3H, s, -COCH3), 2.73 (3H, s, -COCH3), 4.01 (3H, s, -OCH3), 4.25 (3H, s, -OCH3), 5.33 (2H, s, -CH2-Br), 7.36 (1H, s, Ar-H); MS (m/z): 100% = 376.9, 90% = 378.9 [L+Na+]
Ogólne warunki syntezy bromopochodnych benzo[b]furanów (Przykład II -IV)
Odpowiedni benzofuran (ester metylowy kwasu 6-acetylo-5-hydroksy-2-metylo-1-benzofuran-3-karboksylowego lub ester metylowy kwasu 6-acetylo-5-metoksy-2-metylo-1-benzofuran-3-karboksylowego lub 1,1'-(5,6-dimetoksy-3-metylo-1-benzofuran-2,7-diyl)dietanon) (0.02 mol) został rozpuszczony w CHCI3 (20 ml). Następnie mieszając, dodawano kroplami przez 0,5 h roztwór bromu Br2 (0.04 mole) w CHCI3 (10 mL). Mieszanie kontynuowano w temperaturze pokojowej przez 8 h. Reakcja kontrolowana była metodą chromatografii cienkowarstwowej TLC (układ rozwijający chloroform: metanol 9.9:0.1). Po zakończonej reakcji, rozpuszczalnik odparowano do sucha. Surowy produkt oczyszczono za pomocą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym (eluent: chloroform).
PL 223 225 B1
P r z y k ł a d II (związek 1b)
R1 = -CH3, R2 = -COOCH3, R3 = -Br, R4 = -OH, R5 = -COCHBr2, R6 = -H
Wydajność: 77%; żółte kryształy, t.top. 149-150°C; 1H-NMR (300 MHz, CDCI3, ó(ppm): 2.63 (3H, s, -CH3), 3.95 (3H, s, -COOCH3), 6.72 (1H, s, -COCHBr2), 8.00 (1H, s, C7-H), 11.98 (1H, s, -OH); MS (m/z): 100% = 506.8 [L+Na+]
Analiza spaleniowa dla C13H9O5Br3: obliczone: %C = 32.20; %H = 1.87 otrzymane: %C = 32.38; %H = 2.09
P r z y k ł a d III (związek 1c)
R1 = -CH3, R2 = -COOCH3, R3 = -H, R4 = -OCH3, R5 = -COCHBr2, R6 = -H
Wydajność: 78%; żółte kryształy, t.top. 135-138°C; 1H-NMR (300 MHz, CDCI3, 8(ppm): 2.80 (3H, s, -CH3), 3.98 (3H, s, -OCH3), 4.05 (3H, s, -COOCH3), 7.22 (1H, s, -COCHBr2), 7.54 (1H, s, C4-H), 7.95 (1H, s, C7-H); MS (m/z): 100% = 443.2 [L+Na+]
Analiza spaleniowa dla C14H12O5Br2: obliczone: %C = 40.03; %H = 2.88 otrzymane: %C = 39.94; %H = 2.77 P r z y k ł a d IV (związek 1d)
R1 = -COCH2Br, R2 = -CH3, R3 = -H, R4 = -OCH3, R5 = -OCH3, R6 = -COC^Br
Wydajność: 34%; żółte kryształy, t.top. 148-150°C; 1H-NMR (300 MHz, CDCI3+ TMS, 8(ppm): 2.63 (3H, s, -CH3), 4.01 (3H, s, -OCH3), 4.30 (3H, s, -OCH3), 4.44 (2H, s, -COCH2Br), 4.46 (2H, s, -COCH2Br), 7.30 (1H, s, Ar-H); MS (m/z): 100% = 457.1,20% = 459.1 [L+Na+]
Ogólne warunki syntezy chloropochodnych benzo[b]furanów (Przykład V—VII)
Odpowiedni benzofuran (ester metylowy kwasu 6-acetylo-5-hydroksy-2-metylo-1-benzofuran-3-karboksylowego lub ester metylowy kwasu 6-acetylo-5-metoksy-2-metylo-1-benzofuran-3-karboksylowego) (0.02 mol) został rozpuszczony w CHCI3 (20 mL). Następnie chlor cząsteczkowy otrzymany w reakcji KMnO4 ze stężonym HCI był przepuszczany przez kolbę reakcyjną. Reakcja kontrolowana była metodą chromatografii cienkowarstwowej TLC (układ rozwijający chloroform:metanol 9.9:0.1). Po zakończonej reakcji, rozpuszczalnik odparowano do sucha. Surowy produkt oczyszczono za pomocą chromatografii kolumnowej na żelu krzemionkowym (eluent: chloroform i chloroform:metanol 100:0.5).
P r z y k ł a d V (związek 1e)
R1 = -CH3, R2 = -COOCH3, R3 = -Cl, R4 = -OH, R5 = -COCHCI2, R6 = -H
Wydajność: 36%; żółte kryształy, t.top. 171-172°C; 1H-NMR (300 MHz, CDCI3, ó(ppm): 2.68 (3H, s, -CH3), 3.96 (3H, s, -COOCH3), 6.73 (1H, s, -COCHCI2), 7.98 (1H, s, C7-H), 11.70 (1H, s, -OH); MS (m/z): 100% = 350.8 [L+H+]
Analiza spaleniowa dla C13H9O5CI3: obliczone: %C = 44.41; %H = 2.58 otrzymane: %C = 44.60; %H = 2.71
P r z y k ł a d VI
R1 = -CH3, R2 = -COOCH3, R3 = -Cl, R4 = -OH, R5 = -COCH2Cl, R6 = -H
Wydajność: 23%; t.top. 187-188°C; 1H-NMR ó(ppm): 12.11 (s, 1H, OH), 7.74 (s, 1H, C7-H),
4.74 (s, 2H, COCH2CI), 3.96 (s, 3H, COOCH3), 2.68 (s, 3H, CH3); ESI MS m/z: 339.6:341 [M+Na]+ (100%).
Analiza spaleniowa dla C13H10O5CI2: obliczone: %C = 49.24; %H = 3.18 otrzymane: %C = 49.14; %H = 3.24
P r z y k ł a d VII
R1 = -CH3, R2 = -COOCH3, R3 = -Cl, R4 = -OCH3, R5 = -COCH2Cl, R6 = -H
Wydajność: 54%; t.top. 130-131 °C; 1H-NMR ó(ppm): 7.69 (s, 1H, C7-H), 7.19 (s, 1H, C4-H),
4.75 (s, 2H, COCH2CI), 3.88 (m, 6H, COOCH3, OCH3), 2.60 (s, 3H, CH3);
Analiza spaleniowa dla C14H13O5CI*2H2O: obliczone: %C = 50.53; %H = 3.90 otrzymane: %C = 50.60; %H = 3.90
P r z y k ł a d VIII. Właściwości cytotoksyczne halogenopochodnych benzo[b]furanów
Przebadano szereg związków halogenopochodnych benzo[b]furanów pod względem właściwości cytotoksycznych wobec czterech linii komórkowych. Badania przeprowadzono za pomocą testu
PL 223 225 B1
MTT, w którym żółta sól tetrazolowa przetwarzana jest przez dehydrogenazy w mitochondriach żywych komórek w fioletowy formazan, w następujących liniach komórkowych:
- komórki HeLa (rak szyjki macicy, ludzkie)
- komórki HL60 (przewlekła białaczka szpikowa, ludzkie)
- komórki K562 (przewlekła białaczka szpikowa, ludzkie)
- komórki HUVEC (prawidłowe komórki śródbłonka, ludzkie)
1. Komórki HeLa, K562, HL 60, HUVEC w ilości 7 tyś. komórek/ dołek (w 200 ąl medium) wysiano na płytki 96-dołkowe. Komórki inkubowano przez noc w inkubatorze (37°C, 5% CO2).
2. Badane związki rozpuszczono w DMSO i dodawano w ilości 2 ąL do podłoża nad komórkami uzyskując następujące stężenia końcowe w hodowli (1 mM, 10 ąM, 100 nM, 1 nM). Kontrolę stanowiły komórki z DMSO, którego stężenie końcowe w hodowli wynosiło 1%.
3. Wykonanie testu na cytotoksyczność (testu MTT) badanych związków po 48 h inkubacji. W tym celu po 48 h inkubacji komórek HeLa, K562, HL60 lub HUVEC z badanymi związkami dodano MTT (stężenie wyjściowe 5 mg/ml) w ilości 25 ąl/dołek. MTT, żółta sól tetrazolowa jest redukowana do fioletowego formazanu przez dehydrogenazy mitochondrialne żywych komórek, którego ilość można oznaczyć spektrofotometrycznie. Inkubacja komórek z MTT 2 h w inkubatorze (37°C, 5% CO2). Po 2 h inkubacji dodano bufor lizujący zawierający SDS i DMF (95 ąl/dołek). Lizowano przez noc w 37°C, 5% CO2.
4. Odczytanie wyników testu MTT na czytniku FLUOstar Omega (długości fali: 570 i 650 nm). Mierzona absorbancja przy 570 nm jest proporcjonalna do liczby żywych komórek. Płytki analizowano odczytując absorbancję przy długości fali 570 nm i 650 nm. Wartości IC50 (stężenie związku powod ujące 50% śmiertelność komórek) odczytywano z wykresów poprzez interpolację dla 50% przeżywalności komórek.
Uzyskano wyniki (przedstawione w poniższej tabeli), które wskazują na wysoką i selektywną toksyczność związku 1a wobec komórek przewlekłej białaczki szpikowej K562 i HL60.
Związek HeLa K562 HL60 HUVEC
IC50 48 h IC50 48 h IC50 48 h IC5048 h
1a > 1 mM 5 ąM 0,1 ąM > 1 mM
1b 9 ąM 1 ąM 4 ąM > 1 mM
1c 1 ąM 1 ąM 4 ąM > 1 mM
1e 10 ąM > 1 mM 3 ąM > 1 mM
Po 48 godzinach inkubacji ze związkiem 1a obserwowano silną toksyczność wobec komórek przewlekłej białaczki szpikowej K562 i HL60. Badany związek nie jest toksyczny dla komórek raka szyjki macicy (HeLa) oraz nie jest toksyczny dla komórek prawidłowych HUVEC (śródbłonek żyły pępowinowej). Wyniki te sugerują, że związek 1a jest selektywnie toksyczny wobec nowotworów typu białaczek i nie jest toksyczny dla komórek prawidłowych. Związki 1b i 1c są toksyczne zarówno dla komórek HeLa, jak i K562 i HL60, natomiast nie są toksyczne wobec komórek prawidłowych (HUVEC). Związek 1e jest z kolei specyficznie toksyczny dla komórek nowotworowych raka szyjki macicy (HeLa) i białaczki szpikowej HL60, nie jest toksyczny dla komórek białaczki szpikowej K562 oraz k omórek prawidłowych.
P r z y k ł a d IX - Mechanizm toksyczności związków halogenopochodnych benzo[b]furanów.
Sprawdzono czy obserwowana toksyczność związku 1a wynika z indukcji nekrozy lub apoptozy w komórkach przewlekłej białaczki szpikowej K562. W tym celu:
• Komórki K562 w podłożu RPMI 1640 zawierającym 10% płodową surowicę cielęcą oraz anty3 biotyki wysiano na płytkę 96-dołkową w ilości 20x10 komórek/dołek. Komórki hodowano przez godziny w inkubatorze (5% CO2, 37°C).
• Związek 1a rozpuszczono w DMSO i dodano do podłoża nad komórkami uzyskując stężenie końcowe w hodowli wynoszące 25 ąM (5xlC50). Kontrolę negatywną stanowiły komórki hodowane w obecności DMSO o stężeniu końcowym 1%. Kontrolę pozytywną stanowiły komórki hodowane w obecności 1 ąM staurosporyny - silnego induktora apoptozy. Komórki inkubowano ze związkami przez 18 godzin w inkubatorze (5% CO2, 37°C).
PL 223 225 B1 • Wykonano test określający aktywność kaspazy 3 i 7 za pomocą zestawu Apo-ONE® Homogeneous Caspase-3/7 Assay (Promega, Madison, Wl, USA), zgodnie z zaleceniami producenta. Komórki lizowano i inkubowano z profluorescencyjnym substratem dla kaspaz przez 1,5 godziny w temperaturze pokojowej. W wyniku aktywności proteolitycznej kaspaz, profluorescencyjny substrat jest przekształcany do fluorescencyjnego produktu, którego ilość można oznaczyć poprzez pomiar natężenia fluorescencji.
• Odczytano na fig. 1 natężenie fluorescencji każdej studzienki na płytce za pomocą czytnika do płytek FLUOStar Omega (BMG-Labtech, Germany), przy długości fali światła wzbudzającego 485 nm i emisji 520 nm. Natężenie fluorescencji jest proporcjonalne do aktywności kaspazy 3 i 7 w próbce.
WYNIKI
Zaobserwowano (fig. 1), że w komórkach przewlekłej białaczki szpikowej K562 inkubowanej ze związkiem 1a w stężeniu 25 μΜ aktywność kaspazy 3 i 7 jest wyższa w porównaniu do komórek kontrolnych (K562 i K562+DMSO). Wskazuje to, że cytotoksyczność związku 1a wynika z indukcji apoptozy w komórkach przewlekłej białaczki szpikowej (K562).
Literatura
1. Regina Cencie, Marilyn Carrier, Gabriela Galicia-Va'zquez, Marie-Eve Bordeleau, Rami Sukarieh, Annie Bourdeau, Brigitte Brem, Jose G. Teodoro, Harald Greger, Michel L. Tremblay, John A. Porco, Jr., Jerry Pelletier: Antitumor Activity and Mechanism of Action of The Cyclopenta[b]benzofuran, Silvestrol; PLoS ONE, April 2009, Vol. 4, Issue 4, e5223.
2. lan-Lih Tsai, Chih-Feng Hsieh And Chang-Yih Duht; Additional Cytotoxic Neolignans From Persea Obvatifolia; Phytochemistry, 1998, Vol. 48, No. 8, pp. 1371-1375.
3. Efrosini S. Katsanou, Maria Halabalaki, Nektarios Aligiannis, Sofia Mitakou, AlexiosLeandros Skaltsounis, Xanthippi Alexi, Harris Pratsinis, Michael N. Alexis; Cytotoxic effects of 2-arylbenzofuran phytoestrogens on human cancer cells: Modulation by adrenal and gonadal steroids; Journal of Steroid Biochemistry & Molecular Biology, 104, 2007, 228-236.
4. Hayakawa I, Shiota R, Agatsuma T, Furukawa H, Naruto S, Sugano Y. Bioorg Med Chem Left 2004; 14:455. [PubMed: 14698180].
5. Hayakawa I, Shiota R, Agatsuma T, Furukawa H, Naruto S, Sugano Y. Bioorg Med Chem Lett 2004; 14:4383. [PubMed: 15357958].
6. Hayakawa I, Shiota R, Agatsuma T, Furukawa S, Sugano Y. Bioorg Med Chem Lett 200414:3411. [PubMed: 15177443].
7. Yang H, Pang JY, Cai YC, Xu ZL, Xian LJJ. Pharm Pharmacol 2006; 58:1281.
8. Romeo Romagnoli, Pier Giovanni Baraldi, Taradas Sarkar, Carlota Lopez Cara, OlgaCruz Lopez, Maria Dora Carrion, Delia Preti, Manlio Tolomeo, Jan Balzarini, and Ernest Hamel Synthesis and Biological Evaluation of 2-aroyl-4-phenyl-5-hydroxybenzofurans as a New Class of Antitubulin Agents; Med Chem. 2008 November; 4(6): 558-564.
9. Luc Pieters, Stefaan Van Dyck, Mei Gao, Ruoli Bai, Ernest Hamel, Arnold Vlietinck and Guy Lemiere; Synthesis and Biological Evaluation of Dihydrobenzofuran Lignans and Related Compounds as Potential Antitumor Agents that Inhibit Tubulin Polymerization; J. Med. Chem., 1999, 42 (26), pp 5475-5481.
10. Kodama, I.; Kamiya, K.; Toyama, J. Amiodarone: lonic and cellular mechanisms of action of the most promising class III agent. Am. J. Cardiol. 1999, 84, 20R-28R.
11. Courchesne, W.E. Characterization of novel, broad-based fungicidal activity for antiarrhythmic drug amiodarone. J. Pharmacol. Exp. Ther. 2002, 300, 195-199.
12. Courchesne, W.E.; Ozturk, S. Amiodarone induces a caffeine-inhibited, MID1-dependent rise in free cytoplasmic calcium in Saccharomyces cerevisiae. Mol. Microbiol. 2003, 47, 223-234.
13. Nattel, S.; Singh, B.N.; Evolution, mechanisms, and classifications of antiarrhythmic drugs: Focus on class III actions. Am. J. Cardiol. 1999, 84, 11R-19R.
14. Gill, J.; Heel, R.C.; Fitton, A. Amiodarone. An overview of its pharmacological properties, and review of its therapeutic use in cardiac arrhythmias. Drugs 1992, 43, 69-110.
15. Pizzichini, M.; Aleo, M.F.; Marcolongo, R.; Marinello, E. The mechanism of benziodarone activity. Quad Sclavo Diagn 1982, 18, 203-208.
16. Heel, R.C.; Brogden, R.N.; Speight, T.M.; Avery, G.S. Benzbromarone: A review of its pharmacological properties and therapeutic use in gout and hyperuricaemia. Drugs 1977, 14, 349-366.
PL 223 225 B1
17. Masbernard, A.; Giudicelli, C.P. ‘Ten years'experience with benzbromarone in the management of gout and hyperuricaemia. S. Afr. Med. J. 1981,59, 701-706.
18. Repolies, M.J.; Pubill, C.F.; Cabeza, L.L.; Carbo, B.M.; Cerda, R.J.A.; Negrie, R.C. Benzofuran, dihydrobenzofuran, dihydrobenzopyran and benzopyran derivatives as antidepressant agents. Spanish Patent ES2131020 A1, 1999.
19. Graves, A.P.; Brenk, R.; Shoichet, B.K. Decoys for docking. J. Med. Chem. 2005, 48, 3714-3728.
20. Matsuda, S.; Ishii, M.; Kitajiri, N.; Yahara, I.; Harada, H.; Yonetani, Y. Antihypertensive property of a novel uricosuric diuretic, S-8666, in rats. Drug Dev. Res. 1989, 17, 207-217.
21. Romeo Romagnoli, Pier Giovanni Baraldi, Maria Dora Carrion, Carlota Lopez Cara, Olga Cruz-Lopez, Manlio Tolomeo, Stefania Grimaudo, Antonietta Di Cristina, Maria Rosaria Pipitone, Jan Balzarini, Nicola Zonta d, Andrea Brancale d, Ernest Hamel.
Design, synthesis and structure-activity relationship of 2-(3’,4',5’-trimethoxybenzoyl)-benzo[b]furan derivatives as a novel class of inhibitors of tubulin polymerization; Bioorganic & Medicinal Chemistry 17 2009, 6862-6871.
22. Kossakowski, J.; Ostrowska, K.; Hejchman, E.; Wolska, I. Synthesis and structural characterization of derivatives of 2- and 3-benzo[b]furan carboxylic acids with potential cytotoxic activity. II Farmaco 2005, 60, 519-527.
23. Kossakowski, J.; Ostrowska, K. Synthesis of new derivatives of 2,3-dihydro-7-benzo[b]furanol with potential pharmacological activity. Acta Pol. Pharm. 2006, 63, 271-275.
24. Kossakowski, J.; Ostrowska, K.; Struga M.; Stefańska J. Synthesis of new derivatives of 2,2-dimethyl-2,3-dihydro-7-benzo[b]furanol with potential antimicrobial activity. Med. Chem. Res. 2009, 18, 555-565.
25. Jerzy Kossakowski, Mariola Krawiecka, Bożena Kuran, Joanna Stefańska and Irena Wolska; Synthesis and Preliminary Evaluation of the Antimicrobial Activity of Selected 3-Benzofurancarboxylic Acid Derivatives; Molecules 2010, 15, 4737-4749; doi: 10.3390/molecules15074737.

Claims (3)

  1. Zastrzeżenia patentowe
    1. Halogenopochodne benzo[b]furanów przedstawione wzorem 1a i 1d,
  2. 2. Zastosowanie halogenopochodnych benzo[b]furanów objętych wspólnym wzorem 1, w którym:
    R1 - stanowi niezależnie podstawnik wybrany z grupy obejmującej podstawnik alkilowy typu
    -(CH2)nCH3 gdzie n = 0-6, lub podstawnik typu: -COOH, -CO(CH2)nCH3, -COO(CH2)nCH3 gdzie n = 0-6 oraz opcjonalnie grupa alkilowa jest podstawiona co najmniej jednym atomem halogenu,
    PL 223 225 B1
    R2 - stanowi niezależnie podstawnik wybrany z grupy obejmującej podstawnik alkilowy typu -(CH2)nCH3 gdzie n = 0-6, lub podstawnik typu: -COOH, -CO(CH2)nCH3, -COO(CH2)nCH3 gdzie n = 0-6, oraz opcjonalnie grupa alkilowa jest podstawiona co najmniej jednym atomem halogenu,
    R3 - stanowi podstawnik typu -H, -OH, -OCH3 lub pojedynczy atom halogenu,
    R4 - stanowi niezależnie podstawnik wybrany z grupy obejmującej -OH, podstawnik O-alkilowy typu -O-(CH2)nCH3 gdzie n = 0-6,
    R5 - stanowi podstawnik typu -OH, podstawnik O-alkilowy typu -O-(CH2)nCH3 gdzie n = 0-6 oraz opcjonalnie grupa alkilowa jest podstawiona co najmniej jednym atomem halogenu, lub podstawnik typu: -CO(CH2)nCH3 gdzie n = 0-6 oraz opcjonalnie grupa alkilowa jest podstawiona co najmniej jednym atomem halogenu,
    R6 - stanowi podstawnik typu -H lub podstawnik typu: -CO(CH2)nCH3 gdzie n = 0-6 oraz opcjonalnie grupa alkilowa jest podstawiona co najmniej jednym atomem halogenu, przy czym
    R1, R2, R3, R4, R5, R6 stanowią kombinacje podstawników taką, że w budowie związku występuje co najmniej jeden atom halogenu, ewentualnie w postaci farmaceutycznie dopuszczalnych soli, do wytwarzania leków przeciwnowotworowych i/lub leków antyproliferacyjnych, działających selektywnie na nowotwory typu białaczek i komórki zawiesinowe.
  3. 3. Zastosowanie według zastrz. 1, do wytwarzania leków stosowanych w terapiach o charakterze antyproliferacyjnym wobec komórek prawidłowych i nowotworowych, zwłaszcza przewlekłej białaczki szpikowej (K562) i komórek raka szyjki macicy (HeLa), oddzielnie lub w kombinacji z już istni ejącymi lekami.
PL398193A 2012-02-21 2012-02-21 Halogenopochodne benzo[b]furanów, ewentualnie w postaci farmaceutycznie dopuszczalnej soli oraz zastosowanie halogenopochodnych benzo[b]furanów PL223225B1 (pl)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL398193A PL223225B1 (pl) 2012-02-21 2012-02-21 Halogenopochodne benzo[b]furanów, ewentualnie w postaci farmaceutycznie dopuszczalnej soli oraz zastosowanie halogenopochodnych benzo[b]furanów
EP13150611.5A EP2631232B1 (en) 2012-02-21 2013-01-09 Halogen derivatives of benzo[b]furans useful as anti-neoplastic or anti-proliferative drugs

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL398193A PL223225B1 (pl) 2012-02-21 2012-02-21 Halogenopochodne benzo[b]furanów, ewentualnie w postaci farmaceutycznie dopuszczalnej soli oraz zastosowanie halogenopochodnych benzo[b]furanów

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL398193A1 PL398193A1 (pl) 2013-09-02
PL223225B1 true PL223225B1 (pl) 2016-10-31

Family

ID=47501024

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL398193A PL223225B1 (pl) 2012-02-21 2012-02-21 Halogenopochodne benzo[b]furanów, ewentualnie w postaci farmaceutycznie dopuszczalnej soli oraz zastosowanie halogenopochodnych benzo[b]furanów

Country Status (2)

Country Link
EP (1) EP2631232B1 (pl)
PL (1) PL223225B1 (pl)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111423374B (zh) * 2020-05-18 2023-03-21 合肥工业大学 一种二氢吡唑磺酰胺类化合物及其制备方法和用途

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2131020B1 (es) 1997-10-13 2000-03-01 Lacer Sa Derivados de benzofurano, dihidrobenzofunaro, dihidrobenzopirano y benzopirano como agentes antidepresivos.
CA2527934A1 (en) * 2003-06-05 2004-12-16 Warner-Lambert Company Llc Tetrazol benzofurancarboxamides with p13k activity as therapeutic agents
GB0907551D0 (en) * 2009-05-01 2009-06-10 Univ Dundee Treatment or prophylaxis of proliferative conditions

Also Published As

Publication number Publication date
EP2631232B1 (en) 2015-09-16
PL398193A1 (pl) 2013-09-02
EP2631232A1 (en) 2013-08-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Zhu et al. Synthesis and optimization of novel allylated mono-carbonyl analogs of curcumin (MACs) act as potent anti-inflammatory agents against LPS-induced acute lung injury (ALI) in rats
Chowrasia et al. Synthesis, characterization and anti cancer activity of some fluorinated 3, 6-diaryl-[1, 2, 4] triazolo [3, 4-b][1, 3, 4] thiadiazoles
Luo et al. Synthesis and anticancer activity evaluation of naphthalene-substituted triazole spirodienones
Romagnoli et al. Design, synthesis and structure–activity relationship of 2-(3′, 4′, 5′-trimethoxybenzoyl)-benzo [b] furan derivatives as a novel class of inhibitors of tubulin polymerization
Shaikh et al. Design and synthesis of novel carbazolo–thiazoles as potential anti-mycobacterial agents using a molecular hybridization approach
Li et al. Synthesis, molecular properties prediction and biological evaluation of indole-vinyl sulfone derivatives as novel tubulin polymerization inhibitors targeting the colchicine binding site
Starčević et al. Synthesis, photochemical synthesis, DNA binding and antitumor evaluation of novel cyano-and amidino-substituted derivatives of naphtho-furans, naphtho-thiophenes, thieno-benzofurans, benzo-dithiophenes and their acyclic precursors
Hassan et al. Design, synthesis and anticancer evaluation of novel 1, 3-benzodioxoles and 1, 4-benzodioxines
Li et al. Design, synthesis, biological evaluation and structure-activity relationship of sophoridine derivatives bearing pyrrole or indole scaffold as potential antitumor agents
CN104109115A (zh) 一种含氮杂环链接的苯丙酸类化合物、其药物组合物、制备方法和用途
Zhang et al. Discovery of novel aminophosphonate derivatives containing pyrazole moiety as potential selective COX-2 inhibitors
Magar et al. Synthesis and SAR study of new hydroxy and chloro-substituted 2, 4-diphenyl 5H-chromeno [4, 3-b] pyridines as selective topoisomerase IIα-targeting anticancer agents
CN107163011B (zh) 3-(3,4,5-三甲氧基苯甲酰)-苯并呋喃类微管蛋白抑制剂及其制备方法和用途
Zhang et al. Synthesis and cytotoxic activity of novel tetrahydrobenzodifuran–imidazolium salt derivatives
De la Torre et al. [60] Fullerene–flavonoid dyads
Kwiecień et al. Synthesis and biological evaluation of 3-functionalized 2-phenyl-and 2-alkylbenzo [b] furans as antiproliferative agents against human melanoma cell line
Hao et al. Design and synthesis of 2-phenylnaphthalenoids and 2-phenylbenzofuranoids as DNA topoisomerase inhibitors and antitumor agents
Wang et al. Anti-Cancer Activity of Synthesized 5-Benzyl juglone on Selected Human Cancer Cell Lines
Rodrigues et al. Synthesis of novel 8-(het) aryl-6H-pyrano [4′, 3′: 4, 5] thieno [3, 2-b] pyridines by 6-endo-dig cyclization of Sonogashira products and halolactonizations with Cu salts/NXS. Preliminary antitumor evaluation
JP4709757B2 (ja) 過剰増殖性障害の処置に有用なベンゾフラン誘導体
Li et al. Orobanone analogues from acid-promoted aromatization rearrangement of curcumol inhibit hypoxia-inducible factor-1 (HIF-1) in cell-based reporter assays
PL223225B1 (pl) Halogenopochodne benzo[b]furanów, ewentualnie w postaci farmaceutycznie dopuszczalnej soli oraz zastosowanie halogenopochodnych benzo[b]furanów
CN111303026A (zh) 一种恩诺沙星的丙烯酮衍生物及其制备方法和应用
CN115181112A (zh) 6-溴代环淫羊藿素色满3,4-二酮类衍生物的合成及其抗肿瘤应用
CN112824391B (zh) 一种加替沙星的丙烯酮衍生物及其制备方法和应用