PL227843B1 - Zastosowanie Ligustrum vulgare L. do wytwarzania preparatu zawierającego oleaceinę - Google Patents
Zastosowanie Ligustrum vulgare L. do wytwarzania preparatu zawierającego oleaceinę Download PDFInfo
- Publication number
- PL227843B1 PL227843B1 PL399962A PL39996212A PL227843B1 PL 227843 B1 PL227843 B1 PL 227843B1 PL 399962 A PL399962 A PL 399962A PL 39996212 A PL39996212 A PL 39996212A PL 227843 B1 PL227843 B1 PL 227843B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- oleacein
- minutes
- atherosclerotic plaque
- extract
- chloroform
- Prior art date
Links
- XLPXUPOZUYGVPD-XNJYKOPJSA-N Oleacein Chemical compound C\C=C(/C=O)C(CC=O)CC(=O)OCCC1=CC=C(O)C(O)=C1 XLPXUPOZUYGVPD-XNJYKOPJSA-N 0.000 title claims abstract description 26
- XLPXUPOZUYGVPD-UHFFFAOYSA-N dialdehydic form of decarboxymethyl oleuropein aglycone Natural products CC=C(C=O)C(CC=O)CC(=O)OCCC1=CC=C(O)C(O)=C1 XLPXUPOZUYGVPD-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 26
- 241000735235 Ligustrum vulgare Species 0.000 title claims abstract description 9
- 208000037260 Atherosclerotic Plaque Diseases 0.000 claims abstract description 24
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 claims abstract description 13
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 11
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 claims abstract description 8
- 208000032382 Ischaemic stroke Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 claims abstract description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 6
- 208000031225 myocardial ischemia Diseases 0.000 claims abstract description 5
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 23
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 17
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 13
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims description 10
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims description 10
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 108010015302 Matrix metalloproteinase-9 Proteins 0.000 claims description 8
- 102100030412 Matrix metalloproteinase-9 Human genes 0.000 claims description 8
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 8
- 239000006286 aqueous extract Substances 0.000 claims description 6
- 239000012259 ether extract Substances 0.000 claims description 6
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 claims description 5
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 claims description 5
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 5
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 4
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 claims description 4
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 4
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims description 4
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M Propionate Chemical compound CCC([O-])=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 3
- KXKVLQRXCPHEJC-UHFFFAOYSA-N acetic acid trimethyl ester Natural products COC(C)=O KXKVLQRXCPHEJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims description 3
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 claims description 3
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 claims description 3
- 208000026106 cerebrovascular disease Diseases 0.000 claims description 2
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 claims description 2
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims description 2
- 238000003809 water extraction Methods 0.000 claims description 2
- 206010008118 cerebral infarction Diseases 0.000 claims 1
- JUUBCHWRXWPFFH-UHFFFAOYSA-N Hydroxytyrosol Chemical compound OCCC1=CC=C(O)C(O)=C1 JUUBCHWRXWPFFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 6
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 5
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 3
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 3
- 238000003818 flash chromatography Methods 0.000 description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 3
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 2
- 108010000684 Matrix Metalloproteinases Proteins 0.000 description 2
- 102000002274 Matrix Metalloproteinases Human genes 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 2
- 210000001627 cerebral artery Anatomy 0.000 description 2
- WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N chloroform;methanol Chemical compound OC.ClC(Cl)Cl WORJEOGGNQDSOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000004351 coronary vessel Anatomy 0.000 description 2
- 239000002024 ethyl acetate extract Substances 0.000 description 2
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 229940095066 hydroxytyrosol Drugs 0.000 description 2
- 235000003248 hydroxytyrosol Nutrition 0.000 description 2
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 2
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010002329 Aneurysm Diseases 0.000 description 1
- 102000015081 Blood Coagulation Factors Human genes 0.000 description 1
- 108010039209 Blood Coagulation Factors Proteins 0.000 description 1
- 102000004266 Collagen Type IV Human genes 0.000 description 1
- 108010042086 Collagen Type IV Proteins 0.000 description 1
- 102000012432 Collagen Type V Human genes 0.000 description 1
- 108010022514 Collagen Type V Proteins 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- ZNZYKNKBJPZETN-WELNAUFTSA-N Dialdehyde 11678 Chemical class N1C2=CC=CC=C2C2=C1[C@H](C[C@H](/C(=C/O)C(=O)OC)[C@@H](C=C)C=O)NCC2 ZNZYKNKBJPZETN-WELNAUFTSA-N 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 102000009123 Fibrin Human genes 0.000 description 1
- 108010073385 Fibrin Proteins 0.000 description 1
- BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N Fibrin monomer Chemical compound CNC(=O)CNC(=O)CN BWGVNKXGVNDBDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 1
- 241000735234 Ligustrum Species 0.000 description 1
- 208000001145 Metabolic Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 108010006035 Metalloproteases Proteins 0.000 description 1
- 102000005741 Metalloproteases Human genes 0.000 description 1
- 102000003896 Myeloperoxidases Human genes 0.000 description 1
- 108090000235 Myeloperoxidases Proteins 0.000 description 1
- 108090000899 Serralysin Proteins 0.000 description 1
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 description 1
- 201000000690 abdominal obesity-metabolic syndrome Diseases 0.000 description 1
- GGISZLOBBISXOZ-UHFFFAOYSA-N acetic acid;chloroform Chemical compound CC(O)=O.ClC(Cl)Cl GGISZLOBBISXOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 210000000709 aorta Anatomy 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 239000003114 blood coagulation factor Substances 0.000 description 1
- 210000001715 carotid artery Anatomy 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- SKCNIGRBPJIUBQ-UHFFFAOYSA-N chloroform;ethyl acetate Chemical compound ClC(Cl)Cl.CCOC(C)=O SKCNIGRBPJIUBQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 238000013171 endarterectomy Methods 0.000 description 1
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 1
- UREBWPXBXRYXRJ-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;methanol Chemical compound OC.CCOC(C)=O UREBWPXBXRYXRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OJCSPXHYDFONPU-UHFFFAOYSA-N etoac etoac Chemical compound CCOC(C)=O.CCOC(C)=O OJCSPXHYDFONPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 229950003499 fibrin Drugs 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 230000000984 immunochemical effect Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 1
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 description 1
- 201000002818 limb ischemia Diseases 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000000116 mitigating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000004792 oxidative damage Effects 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 238000009160 phytotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 230000003313 weakening effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
- A61K31/215—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids
- A61K31/22—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acyclic acids, e.g. pravastatin
- A61K31/222—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acyclic acids, e.g. pravastatin with compounds having aromatic groups, e.g. dipivefrine, ibopamine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
- A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/63—Oleaceae (Olive family), e.g. jasmine, lilac or ash tree
- A61K36/638—Ligustrum, e.g. Chinese privet
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Hospice & Palliative Care (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Ujawniono zastosowanie oleaceiny, zwłaszcza z Ligustrum vulgare L., do wytwarzania preparatu do leczenia i zapobiegania chorób będących następstwem rozpadu blaszki miażdżycowej, w szczególności wybranych z grupy obejmującej: niedokrwienny udar mózgu, zawal serca oraz chorobę niedokrwienną serca.
Description
Przedmiotem wynalazku jest zastosowanie Ligustrum vulgare L. do wytwarzania preparatu zawierającego oleaceinę do hamowania produkcji MMP-9 przez komórki zawarte w blaszce miażdżycowej i stabilizowania blaszki miażdżycowej, zwłaszcza do leczenia i zapobiegania chorób będących następstwem rozpadu blaszki miażdżycowej, w szczególności wybranych z grupy obejmującej: niedokrwienny udar mózgu, zawał serca oraz chorobę niedokrwienną serca.
Oleaceina jest związkiem o wzorze 1, określanym w piśmiennictwie również jako 3,4-DHPEA-EDA, stanowiący 3,4-dihydroksyfenyloetanol (hydroksytyrozol) zestryfikowany dialdehydową pochodną kwasu enolowego.
wzór 1
Blaszka miażdżycowa jest zmianą występującą w ścianie tętnic (błona wewnętrzna) powstającą w przebiegu miażdżycy. Blaszka składa się z masy lipidowej (głównie LDL), komórek oraz włóknika. Uwypukla się do światła naczynia i zmniejsza jego średnicę. Może to powodować niedokrwienie narządów zaopatrywanych przez daną tętnicę.
Niekontrolowany rozpad blaszki miażdżycowej gromadzącej się wraz z postępem miażdżycy w tętnicach, głównie w aorcie, tętnicach wieńcowych i mózgowych, rzadziej w tętnicach kończyn, może być bezpośrednią przyczyną poważnych następstw, takich jak niedokrwienny udar mózgu lub zawał serca. Blaszka miażdżycowa może pękać, aktywując osoczowe czynniki krzepnięcia, co z kolei prowadzi do wytworzenia skrzepu. Może to zmniejszyć przepustowość naczynia, a w skrajnym przypadku spowodować całkowite zamknięcie światła tętnicy. W ten sposób dochodzi najczęściej do zamknięcia tętnicy wieńcowej i w konsekwencji zawału serca. W podobny sposób, zamknięcie tętnicy mózgowej, w następstwie rozpadu blaszki miażdżycowej, prowadzi do niedokrwiennego udaru mózgu. W podobny sposób może dojść do niedokrwiennej choroby kończyn.
Blaszka miażdżycowa uszkadza również głębsze warstwy ściany tętnicy, przyczyniając się w ten sposób do rozwoju tętniaków.
Dlatego u pacjentów cierpiących na miażdżycę pożądane jest stabilizowanie blaszki miażdżycowej. Pożądane jest również stabilizowanie uszkodzonej blaszki miażdżycowej w celu obniżenia szybkości jej rozpadu, a w następstwie złagodzenie przebiegu zawału serca lub udaru mózgu.
Przyjmuje się, że kluczową rolę w rozpadzie blaszki miażdżycowej odgrywają zewnątrzkomórkowe metaloproteinazy uwalniane przez makrofagi. Wśród nich, metaloproteinaza 9 (MMP 9) odpowiada za degradację żelatyny, kolagenu typu IV i V, co prowadzi do osłabienia osłony włóknistej blaszki miażdżycowej i przyczynia się do jej rozpadu (Fatar M, Stroick M, Griebe M, Hennerici M. Matrixmetalloproteinases in cerebrovascular diseases. Cerebrovasc Dis 2005:20:141-51).
Zgłoszenie patentowe WO 2009/013596 ujawnia możliwość zastosowania produktów odżywczych bogatych w hydroksytyrozol do celów medycznych, takich jak prewencja i leczenie chorób sercowo-naczyniowych (CVD), budowanie blaszki miażdżycowej w naczyniach, nadciśnienie tętnicze i zespół metaboliczny.
W publikacji Czerwińska M. et al. EAS 2012, abstract book 2012-05-29, str. 1108 ujawniono wyniki badania dotyczącego wpływu oleaceiny na uwalnianie mieloperoksydazy, w skrócie MPO, przeprowadzonego na wyselekcjonowanej grupie komórek, tzn. neutrofili wyizolowanych z krwi
PL 227 843 B1 obwodowej zdrowych ochotników w warunkach in vitro. Ponadto, z publikacji Czerwińska M. et al. Food Chemistry, vol. 131, no. 3. 2011-09-20, str. 940-947 znany jest również wpływ oleaceiny na uwalnianie MPO z komórek neutrofili wyizolowanych z krwi. Wyniki wskazują na efekt ochronny oleaceiny przeciwko uszkodzeniom oksydacyjnym.
W publikacji Kiss i wsp., Journal of Ethnopharmacology, vol. 120, 2008, str. 220-225 ujawniono zastosowanie gradientu chloroformu w octanie etylu (100-0%) i octanu etylu w metanolu (100-0%) do oczyszczania wyciągu octanu etylu zawierającego oleaceinę. Opisana metoda pozwoliła na wyizolowanie 250 mg oleaceiny (z 200 g wysuszonego materiału roślinnego).
Celem wynalazku jest dostarczenie preparatu, który mógłby być wykorzystany do stabilizacji blaszki miażdżycowej poprzez skuteczne hamowanie procesu jej rozpadu następującego z udziałem metaloproteinazy-9. Preparat taki mógłby być wykorzystany do leczenia i zapobiegania chorób powstających w wyniku rozpadu blaszki miażdżycowej, w szczególności zawału serca, choroby niedokrwiennej serca, niedokrwiennego udaru mózgu oraz niedokrwienia kończyn.
Nieoczekiwanie tak określony cel udało się zrealizować w przedmiotowym wynalazku.
Przedmiotem wynalazku jest zastosowanie Ligustrum vulgare L. do wytwarzania preparatu zawierającego oleaceinę do hamowania produkcji MMP-9 przez komórki zawarte w blaszce miażdżycowej i stabilizowania blaszki miażdżycowej, zwłaszcza do leczenia i zapobiegania chorób będących następstwem rozpadu blaszki miażdżycowej, w szczególności wybranych z grupy obejmującej: niedokrwienny udar mózgu, zawał serca oraz chorobę niedokrwienną serca, przy czym oleaceinę otrzymuje się z tkanki roślinnej w procesie obejmującym czterokrotną ekstrakcję wodną rozdrobnionych liści ligustra w temperaturze 30°C w płuczce ultradźwiękowej każdorazowo przez 30 minut w stosunku 1:10 surowca do rozpuszczalnika, poddawanie liofilizacji uzyskanego wyciągu wodnego w celu zatężenia, a następnie pięciokrotną ekstrakcję eterem dietylowym uzyskanego ekstraktu wodnego w stosunku 1:1 rozpuszczalnika do ekstraktu, zagęszczanie wyciągu eterowego na wyparce rotacyjnej pod zmniejszonym ciśnieniem w temperaturze 35°C oraz rozdział chromatograficzny ekstraktu eterowego na żelu krzemionkowym w układzie izokratycznym chloroformu i octanu etylu (85:15) przez 60 minut (20 ml/min), następnie dalszy rozdział chromatograficzny uzyskanych frakcji zawierających o leaceinę na żelu krzemionkowym w układzie izokratycznym toluenu, octanu metylu i metanolu (85:11:5) przez 60 minut (20 ml/min) oraz doczyszczanie uzyskanych frakcji zawierających oleaceinę na kolumnie chromatograficznej wypełnionej sephadexem przy użyciu mieszaniny chloroformu i metanolu (9:1).
P r z y k ł a d 1. Uzyskiwanie oleaceiny z liści ligustra pospolitego (Ligustrum vulgare L.) Ligustr pospolity (Ligustrum vulgare L.) jest rośliną ozdobną powszechnie występującą w Europie, wykorzystywaną często do sadzenia żywopłotów. Izolacji oleaceiny zawartej w liściach ligustra pospolitego dokonano sposobem uzyskanym poprzez zmodyfikowanie metody opracowanej przez Kiss i wsp. (Journal of Ethnopharmacology 120 (2008) 220-225) w Katedrze Farmakognozji i Molekularnych Podstaw Fitoterapii Warszawskiego Uniwersytetu Medycznego.
Do izolacji użyto 400 g rozdrobnionego surowca. W pierwszym etapie liście ligustra czterokrotnie ekstrahowano wodą destylowaną w temperaturze 30°C w płuczce ultradźwiękowej każdorazowo przez 30 minut. Ekstrakcje przeprowadzono w stosunku 1:10 surowca do rozpuszczalnika. Wyciągi wodne przesączono przez watę i połączono. Uzyskany wyciąg wodny zatężono na drodze liofilizacji do objętości ok. 1 I. W celu uzyskania mniej zanieczyszczonego wyciągu oraz zwiększenia wydajności procesu izolacji pożądanego związku użyto eteru dietylowego zamiast octanu etylu. Wcześniejsze analizy wykazały bowiem, że wyciąg octanu etylu zawiera więcej związków chemicznych, co tym samym utrudnia proces izolacji oleaceiny. W związku z tym zagęszczony wyciąg wodny poddano następnie 5-krotnej ekstrakcji eterem dietylowym w stosunku 1:1 rozpuszczalnika do ekstraktu. Wyciąg eterowy zagęszczono na wyparce rotacyjnej pod zmniejszonym ciśnieniem w temperaturze 35°C. Uzyskano ok. 5 g wyciągu eterowego. Kolejna modyfikacja polegała na użyciu aparatury oraz rozpuszczalników w układzie izokratycznym. Wg publikacji Kiss i wsp. (2008) oczyszczanie wyciągu octanu etylu polegało na zastosowaniu kolumny wypełnionej żelem krzemionkowym (0.125-0.25 mm; 5.5 cm*10 cm) przy użyciu gradientu rozpuszczalników chloroform-octan etylu (100-0%) oraz octan etylu-metanol (100-0%). W zmodyfikowanej metodzie wyciąg eterowy poddawano rozdziałowi przy użyciu chromatografii typu Flash na kolumnie wypełnionej żelem krzemionkowym (PF-30 SIHP/80G PuriFlash) przy użyciu mieszaniny chloroformu i octanu etylu (85:15) w układzie izokratycznym przez 60 minut (20 ml/min). Uzyskano 9 frakcji, z których do dalszego rozdziału wybrano frakcje 3 i 4. Frakcje te poddano dalszemu rozdziałowi na kolumnie wypełnionej żelem krzemionkowym (PF-30 SIHP/80G PuriFlash) przy użyciu mieszaniny toluenu, octanu metylu i metanolu (84:11:5)
PL 227 843 Β1 w układzie izokratycznym przez 60 minut (20 ml/min). Uzyskano 5 frakcji. Z frakcji 3 naniesionej na kolumnę wypełnioną sephadexem wyizolowano oleaceinę przy użyciu mieszaniny chloroformu i metanolu (9:1). podobnie jak w pierwotnej metodzie. Uzyskano 1,289 g związku. Tożsamość związku potwierdzono metodami NMR oraz HPLC-DAD-MS/MS.
Tabela
| Etap izolacji | Metoda pierwotna | Metoda zmodyfikowana |
| I ekstrakcja | 4xwoda; łaźnia ultradźwiękowa: 30 min | 4xwoda; łaźnia ultradźwiękowa; 30 min |
| 11 ekstrakcja | 5x octan etylu (1:1) | 5x eter dietylowy (1:1) |
| I rozdział | Żel krzemionkowy; kolumna szklana (0.125-O,25mm; 5.5cin*10 cm); gradient chloroform-octan etylu (100-0%) i octan etylu- metanol (100-0%) | Żel krzemionkowy (PF- 30 SIHP/80G PuriFlash); chromatografia typu Flash; układ izokratyczny chloroformu i octanu etylu (85:15) |
| II rozdział | Żel krzemionkowy (PF- 30 SIHP/80G PuriFlash); chromatografia typu Flash; układ izokratyczny chloroformu i octanu etylu (85:15) | |
| doczyszczanie | | Sephadex; kolumna szklana (2x25 cm); układ izokratyczny chloroform- metanol (9:1) | Sephadex; kolumna szklana (2x45 cm); układ izokratyczny chloroform- metanol (9:1) |
Przykład 2. Stabilizacja blaszki miażdżycowej izolowanej z tętnicy szyjnej.
Blaszki miażdżycowe (n=15) były uzyskiwane od pacjentów poddawanych zabiegowi wycięcia błony wewnętrznej tętnicy szyjnej (endarterektomia). Uzyskane blaszki dzielono na dwie części, które inkubowano w zbuforowanym roztworze soli fizjologicznej (kontrola) lub w zbuforowanym roztworze soli fizjologicznej w obecności oleaceiny w stężeniach 5, 10 i 20 μΜ przez 24 godziny w temperaturze 37°C po uprzedniej stymulacji roztworem lipopolisacharydu o stężeniu 1 μg/ml. Kontrolę niestymulowaną stanowił roztwór soli fizjologicznej, w której blaszkę inkubowano 2 godziny. Wpływ oleaceiny na produkcję metaloproteinazy-9 (MMP-9) został określony przy użyciu metody immunochemicznej ELISA (R&D System). Ilość MMP-9 (ng/ml) przeliczano na masę blaszki miażdżycowej, a następnie określono w % w porównaniu do kontroli stymulowanej. Wartość IC50, czyli stężenie związku, przy którym reakcja zostaje zahamowana w 50%, określono na poziomie 9.07±1.2 μΜ (średnia ± błąd standardowy).
Zaprezentowany na fig. 1 wykres przedstawia zależność produkcja MMP-9 [%] od stężenia oleaceiny (5, 10, 20 μΜ).
Wyniki eksperymentu wykazują na zdolność oleaceiny do hamowania produkcji MMP-9 przez komórki zawarte w blaszce miażdżycowej. Obniżenie produkcji MMP-9 stabilizuje blaszkę miażdżycową i hamuje jej rozpad. W związku z uzyskanym efektem oleaceina nadaje się do stosowania w leczeniu i profilaktyce chorób będących następstwem rozpadu blaszki miażdżycowej.
Claims (1)
1. Zastosowanie Ligustrum vulgare L. do wytwarzania preparatu zawierającego oleaceinę do hamowania produkcji MMP-9 przez komórki zawarte w blaszce miażdżycowej i stabilizowania blaszki miażdżycowej, zwłaszcza do leczenia i zapobiegania chorób będących następstwem rozpadu blaszki miażdżycowej, w szczególności wybranych z grupy obejmującej: niedokrwienny udar mózgu, zawał serca oraz chorobę niedokrwienną serca, przy czym oleaceinę otrzymuje się z tkanki roślinnej w procesie obejmującym czterokrotną ekstrakcję wodną rozdrobnionych liści ligustra w temperaturze 30°C w płuczce ultradźwiękowej każdorazowo przez 30 minut w stosunku 1:10 surowca do rozpuszczalnika, poddawanie liofilizacji uzyskanego wyciągu wodnego w celu zatężenia, a następnie pięciokrotną ekstrakcję eterem dietylowym uzyskanego ekstraktu wodnego w stosunku 1:1 rozpuszczalnika do ekstraktu, zagęszczanie wyciągu eterowego na wyparce rotacyjnej pod zmniejszonym ciśnieniem w temperaturze 35°C oraz rozdział chromatograficzny ekstraktu eterowego na żelu krzemionkowym w układzie izokratycznym chloroformu i octanu etylu (85:15) przez 60 minut (20 ml/min), następnie dalszy rozdział chromatograficzny uzyskanych frakcji zawierających oleaceinę na żelu krzemionkowym w układzie izokratycznym toluenu, octanu metylu i metanolu (85:11:5) przez 60 minut (20 ml/min) oraz doczyszczanie uzyskanych frakcji zawierających oleaceinę na kolumnie chromatograficznej wypełnionej sephadexem przy użyciu mieszaniny chloroformu i metanolu (9:1).
Priority Applications (8)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL399962A PL227843B1 (pl) | 2012-07-14 | 2012-07-14 | Zastosowanie Ligustrum vulgare L. do wytwarzania preparatu zawierającego oleaceinę |
| DK13742600.3T DK2872131T3 (en) | 2012-07-14 | 2013-07-13 | Oleacein for the treatment or prevention of diseases due to atherosclerotic plaque |
| PT13742600T PT2872131T (pt) | 2012-07-14 | 2013-07-13 | Oleaceína para tratamento ou prevenção de doenças resultantes de placas ateroscleróticas |
| ES13742600T ES2711560T3 (es) | 2012-07-14 | 2013-07-13 | Oleaceína para tratar o prevenir enfermedades resultantes de placas ateroescleróticas |
| PL13742600T PL2872131T3 (pl) | 2012-07-14 | 2013-07-13 | Oleaceina do leczenia lub zapobiegania chorobom będących następstwem blaszki miażdżycowej |
| PCT/EP2013/064869 WO2014012871A1 (en) | 2012-07-14 | 2013-07-13 | Oleacein for treating or preventing diseases resulting from atherosclerotic plaques |
| US14/356,172 US9682056B2 (en) | 2012-07-14 | 2013-07-13 | Oleacein for treating or preventing diseases resulting from atherosclerotic plaques |
| EP13742600.3A EP2872131B1 (en) | 2012-07-14 | 2013-07-13 | Oleacein for treating or preventing diseases resulting from atherosclerotic plaques |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL399962A PL227843B1 (pl) | 2012-07-14 | 2012-07-14 | Zastosowanie Ligustrum vulgare L. do wytwarzania preparatu zawierającego oleaceinę |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL399962A1 PL399962A1 (pl) | 2014-01-20 |
| PL227843B1 true PL227843B1 (pl) | 2018-01-31 |
Family
ID=48906224
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL399962A PL227843B1 (pl) | 2012-07-14 | 2012-07-14 | Zastosowanie Ligustrum vulgare L. do wytwarzania preparatu zawierającego oleaceinę |
| PL13742600T PL2872131T3 (pl) | 2012-07-14 | 2013-07-13 | Oleaceina do leczenia lub zapobiegania chorobom będących następstwem blaszki miażdżycowej |
Family Applications After (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL13742600T PL2872131T3 (pl) | 2012-07-14 | 2013-07-13 | Oleaceina do leczenia lub zapobiegania chorobom będących następstwem blaszki miażdżycowej |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US9682056B2 (pl) |
| EP (1) | EP2872131B1 (pl) |
| DK (1) | DK2872131T3 (pl) |
| ES (1) | ES2711560T3 (pl) |
| PL (2) | PL227843B1 (pl) |
| PT (1) | PT2872131T (pl) |
| WO (1) | WO2014012871A1 (pl) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ES2690412B1 (es) | 2017-03-10 | 2019-11-13 | Univ Sevilla | Procedimiento para la obtención de secoiridoides dialdehídicos |
| PL423146A1 (pl) * | 2017-10-12 | 2019-04-23 | Warszawski Univ Medyczny | Oleaceina do zastosowanie w prewencji miażdżycy |
| GR20190100075A (el) * | 2019-02-13 | 2020-09-16 | Προκοπιος Παναγιωτη Μαγιατης | Μεθοδος παραλαβης σεκοϊριδοειδων τυπου ελαιασινης και ελαιομισσιοναλης και παραγωγης των αντιστοιχων φαρμακευτικων παρασκευασματων τους |
| FR3147802B1 (fr) | 2023-04-11 | 2025-11-28 | Univ Montpellier | Margines d’huile d’olive |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| BRPI0814726B1 (pt) * | 2007-07-23 | 2020-04-14 | Euromed, S.A | processo para preparar um produto nutricional e produto nutricional |
-
2012
- 2012-07-14 PL PL399962A patent/PL227843B1/pl unknown
-
2013
- 2013-07-13 US US14/356,172 patent/US9682056B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2013-07-13 WO PCT/EP2013/064869 patent/WO2014012871A1/en not_active Ceased
- 2013-07-13 PL PL13742600T patent/PL2872131T3/pl unknown
- 2013-07-13 PT PT13742600T patent/PT2872131T/pt unknown
- 2013-07-13 DK DK13742600.3T patent/DK2872131T3/en active
- 2013-07-13 EP EP13742600.3A patent/EP2872131B1/en not_active Not-in-force
- 2013-07-13 ES ES13742600T patent/ES2711560T3/es active Active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP2872131A1 (en) | 2015-05-20 |
| DK2872131T3 (en) | 2019-03-11 |
| PL2872131T3 (pl) | 2019-05-31 |
| PT2872131T (pt) | 2019-02-26 |
| EP2872131B1 (en) | 2018-11-21 |
| ES2711560T3 (es) | 2019-05-06 |
| WO2014012871A1 (en) | 2014-01-23 |
| US9682056B2 (en) | 2017-06-20 |
| US20160008311A1 (en) | 2016-01-14 |
| PL399962A1 (pl) | 2014-01-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Zhou et al. | Anti-atherosclerosis of oligomeric proanthocyanidins from Rhodiola rosea on rat model via hypolipemic, antioxidant, anti-inflammatory activities together with regulation of endothelial function | |
| Zhang et al. | Z-ligustilide extracted from Radix Angelica Sinensis decreased platelet aggregation induced by ADP ex vivo and arterio-venous shunt thrombosis in vivo in rats | |
| PL227843B1 (pl) | Zastosowanie Ligustrum vulgare L. do wytwarzania preparatu zawierającego oleaceinę | |
| EP1453528A2 (en) | Compositions containing curcuma extracts for the treatment of neurocerebrovascular disorders | |
| JP2019513763A (ja) | 抗炎症抽出物 | |
| KR101811588B1 (ko) | 벼메뚜기로부터 분리된 화합물을 함유하는 항혈전용 조성물 | |
| Moschona et al. | Comparative study of natural phenolic acids and flavonols as antiplatelet and anti-inflammatory agents | |
| Napoleone et al. | Both red and blond orange juice intake decreases the procoagulant activity of whole blood in healthy volunteers | |
| KR102521352B1 (ko) | 조성물 | |
| CN102727536B (zh) | 一种水杉皮提取物及其制备方法和用途 | |
| KR20170005609A (ko) | 시나픽산을 유효성분으로 함유하는 혈전증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품 | |
| Guedes et al. | Anti-hemostatic, antithrombotic, and chemical profiles of a curly-leaf variety of Petroselinum crispum (Apiaceae), a food and medicinal aromatic herb | |
| EP3345910A1 (en) | Compound having effect of inhibiting platelet aggregation and salt thereof, and composition for preventing or treating thrombotic diseases, containing same | |
| Yang et al. | Effectiveness of osthole on uric acid crystal-induced acute gouty arthritis through the inhibition of NLRP3 inflammasome | |
| WO2011144639A1 (en) | Extract of parts of sambucus for use in the treatment of inflammatory processes, intimal hyperplasia and vein graft disease | |
| Nguyen et al. | Antithrombotic phenolics from the stems of Parthenocissus tricuspidata possess anti-inflammatory effect | |
| CA3078910A1 (en) | Oleacein for use in atherosclerosis prevention | |
| KR101461591B1 (ko) | 혈전증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강기능식품 조성물 | |
| CN114907432A (zh) | 达玛烷型三萜及其制备方法与用途 | |
| KR20190065029A (ko) | 쇼레아 록스부르그히이 추출물을 이용한 항염증용 조성물 | |
| JP2019525958A (ja) | Ｕｌｄａｖｉｏｓｉｄｅ Ａの化合物を含有する傷治療用の組成物 | |
| CN111265507A (zh) | 阿魏酸甲酯用于制备治疗/预防血栓药物中的应用 | |
| JP7339698B2 (ja) | 野せり抽出物および抗血栓剤を含む抗血栓用組成物 | |
| US5853731A (en) | Thromboxane A2 Receptor antagonism and antioxidant action of cinnamophilin and its derivatives, their pharmaceutical compositions and uses | |
| CN107007643A (zh) | 两色金鸡菊提取物在制备治疗血栓形成性疾病药物中的应用 |