PL228077B1 - 3-dodecylsulfanyl-butyric acid to be used as a medicine, preferably to prevent development of insulin immunity and the composition containing 3-dodecylsulfanyl-butyric acid as active substance - Google Patents
3-dodecylsulfanyl-butyric acid to be used as a medicine, preferably to prevent development of insulin immunity and the composition containing 3-dodecylsulfanyl-butyric acid as active substanceInfo
- Publication number
- PL228077B1 PL228077B1 PL414785A PL41478515A PL228077B1 PL 228077 B1 PL228077 B1 PL 228077B1 PL 414785 A PL414785 A PL 414785A PL 41478515 A PL41478515 A PL 41478515A PL 228077 B1 PL228077 B1 PL 228077B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- dodecylsulfanylbutyric
- acid
- medicament
- treatment
- tor
- Prior art date
Links
- JKQDAUBTRADMCZ-UHFFFAOYSA-N 3-dodecylsulfanylbutanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCSC(C)CC(O)=O JKQDAUBTRADMCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 21
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 18
- 238000011161 development Methods 0.000 title claims abstract description 12
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims description 8
- 239000013543 active substance Substances 0.000 title abstract 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 title description 30
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 title description 15
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 title description 15
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 title description 15
- 230000036039 immunity Effects 0.000 title 1
- 206010022489 Insulin Resistance Diseases 0.000 claims abstract description 36
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims abstract description 36
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 17
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 5
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 4
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 claims description 13
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 claims description 13
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 claims description 11
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 11
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims description 9
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 7
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 claims description 7
- 208000001145 Metabolic Syndrome Diseases 0.000 claims description 6
- 201000000690 abdominal obesity-metabolic syndrome Diseases 0.000 claims description 6
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 claims description 6
- 201000008980 hyperinsulinism Diseases 0.000 claims description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 6
- 201000010065 polycystic ovary syndrome Diseases 0.000 claims description 6
- -1 elixir Substances 0.000 claims description 5
- 239000002775 capsule Substances 0.000 claims description 4
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 claims description 4
- 239000008187 granular material Substances 0.000 claims description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 4
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 4
- 239000008174 sterile solution Substances 0.000 claims description 4
- 239000006188 syrup Substances 0.000 claims description 4
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 claims description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 claims description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 claims description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 abstract description 8
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 27
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 16
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 13
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-M hexadecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 11
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 8
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 8
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 8
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 8
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 8
- 102000003728 Peroxisome Proliferator-Activated Receptors Human genes 0.000 description 7
- 108090000029 Peroxisome Proliferator-Activated Receptors Proteins 0.000 description 7
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 7
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- YASAKCUCGLMORW-UHFFFAOYSA-N Rosiglitazone Chemical compound C=1C=CC=NC=1N(C)CCOC(C=C1)=CC=C1CC1SC(=O)NC1=O YASAKCUCGLMORW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 6
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 5
- 150000001982 diacylglycerols Chemical class 0.000 description 5
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 5
- 230000009822 protein phosphorylation Effects 0.000 description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 5
- VRYALKFFQXWPIH-PBXRRBTRSA-N (3r,4s,5r)-3,4,5,6-tetrahydroxyhexanal Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CC=O VRYALKFFQXWPIH-PBXRRBTRSA-N 0.000 description 4
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000012839 Krebs-Henseleit buffer Substances 0.000 description 4
- 108090000315 Protein Kinase C Proteins 0.000 description 4
- 102000003923 Protein Kinase C Human genes 0.000 description 4
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 4
- 206010073071 hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 description 4
- 230000000984 immunochemical effect Effects 0.000 description 4
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 description 4
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 4
- 210000000663 muscle cell Anatomy 0.000 description 4
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 4
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 4
- 210000003556 vascular endothelial cell Anatomy 0.000 description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 238000011533 pre-incubation Methods 0.000 description 3
- 238000002331 protein detection Methods 0.000 description 3
- 229960004586 rosiglitazone Drugs 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 3
- QAPSNMNOIOSXSQ-YNEHKIRRSA-N 1-[(2r,4s,5r)-4-[tert-butyl(dimethyl)silyl]oxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-5-methylpyrimidine-2,4-dione Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O[Si](C)(C)C(C)(C)C)C1 QAPSNMNOIOSXSQ-YNEHKIRRSA-N 0.000 description 2
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 2
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 2
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 2
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N Trichloro(2H)methane Chemical compound [2H]C(Cl)(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N 0.000 description 2
- GBOGMAARMMDZGR-UHFFFAOYSA-N UNPD149280 Natural products N1C(=O)C23OC(=O)C=CC(O)CCCC(C)CC=CC3C(O)C(=C)C(C)C2C1CC1=CC=CC=C1 GBOGMAARMMDZGR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 2
- 239000013553 cell monolayer Substances 0.000 description 2
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 2
- GBOGMAARMMDZGR-JREHFAHYSA-N cytochalasin B Natural products C[C@H]1CCC[C@@H](O)C=CC(=O)O[C@@]23[C@H](C=CC1)[C@H](O)C(=C)[C@@H](C)[C@@H]2[C@H](Cc4ccccc4)NC3=O GBOGMAARMMDZGR-JREHFAHYSA-N 0.000 description 2
- GBOGMAARMMDZGR-TYHYBEHESA-N cytochalasin B Chemical compound C([C@H]1[C@@H]2[C@@H](C([C@@H](O)[C@@H]3/C=C/C[C@H](C)CCC[C@@H](O)/C=C/C(=O)O[C@@]23C(=O)N1)=C)C)C1=CC=CC=C1 GBOGMAARMMDZGR-TYHYBEHESA-N 0.000 description 2
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- WNAHIZMDSQCWRP-UHFFFAOYSA-N dodecane-1-thiol Chemical compound CCCCCCCCCCCCS WNAHIZMDSQCWRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 2
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 2
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 2
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 2
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N hexadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 2
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 2
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 2
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 2
- 210000001087 myotubule Anatomy 0.000 description 2
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 2
- YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N phenylmethanesulfonyl fluoride Chemical compound FS(=O)(=O)CC1=CC=CC=C1 YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- LDHQCZJRKDOVOX-UHFFFAOYSA-N trans-crotonic acid Natural products CC=CC(O)=O LDHQCZJRKDOVOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001493 tyrosinyl group Chemical group [H]OC1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- SHPXSZHBKACKSN-FCQUAONHSA-N 1-[(z)-4-chloro-1,2-diphenylbut-1-enyl]-4-methylbenzene Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1C(\C=1C=CC=CC=1)=C(\CCCl)C1=CC=CC=C1 SHPXSZHBKACKSN-FCQUAONHSA-N 0.000 description 1
- IPBCWPPBAWQYOO-UHFFFAOYSA-N 2-(tetradecylthio)acetic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCSCC(O)=O IPBCWPPBAWQYOO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen sulfide Chemical class S RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000003746 Insulin Receptor Human genes 0.000 description 1
- 108010001127 Insulin Receptor Proteins 0.000 description 1
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000006845 Michael addition reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 1
- 235000021314 Palmitic acid Nutrition 0.000 description 1
- 206010036049 Polycystic ovaries Diseases 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 101150057615 Syn gene Proteins 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 235000010724 Wisteria floribunda Nutrition 0.000 description 1
- 210000001789 adipocyte Anatomy 0.000 description 1
- PMMURAAUARKVCB-UHFFFAOYSA-N alpha-D-ara-dHexp Natural products OCC1OC(O)CC(O)C1O PMMURAAUARKVCB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- UDSAIICHUKSCKT-UHFFFAOYSA-N bromophenol blue Chemical compound C1=C(Br)C(O)=C(Br)C=C1C1(C=2C=C(Br)C(O)=C(Br)C=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 UDSAIICHUKSCKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000005754 cellular signaling Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 1
- LDHQCZJRKDOVOX-NSCUHMNNSA-N crotonic acid Chemical compound C\C=C\C(O)=O LDHQCZJRKDOVOX-NSCUHMNNSA-N 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 238000000326 densiometry Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 229940042399 direct acting antivirals protease inhibitors Drugs 0.000 description 1
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 1
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- NNYBQONXHNTVIJ-UHFFFAOYSA-N etodolac Chemical compound C1COC(CC)(CC(O)=O)C2=C1C(C=CC=C1CC)=C1N2 NNYBQONXHNTVIJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 208000004104 gestational diabetes Diseases 0.000 description 1
- 230000014101 glucose homeostasis Effects 0.000 description 1
- 230000004190 glucose uptake Effects 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000006362 insulin response pathway Effects 0.000 description 1
- 230000031146 intracellular signal transduction Effects 0.000 description 1
- 210000005228 liver tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 229940063718 lodine Drugs 0.000 description 1
- 239000007937 lozenge Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 description 1
- WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N n-Pentadecanoic acid Natural products CCCCCCCCCCCCCCC(O)=O WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 238000002731 protein assay Methods 0.000 description 1
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 125000003607 serino group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(O[H])([H])[H] 0.000 description 1
- 230000008054 signal transmission Effects 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L sodium thiosulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=S AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000019345 sodium thiosulphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000007863 steatosis Effects 0.000 description 1
- 231100000240 steatosis hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 150000003463 sulfur Chemical class 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008719 thickening Effects 0.000 description 1
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 125000003203 triacylglycerol group Chemical group 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000007934 α,β-unsaturated carboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
Landscapes
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
Przedmiotem zgłoszenia jest kwas 3-dodecylosulfanylomasłowy do zastosowania jako lek, zwłaszcza do stosowania w leczeniu i profilaktyce rozwoju insulinooporności. Zgłoszenie dotyczy także kompozycji farmaceutycznej, charakteryzującej się tym, że jako substancję czynną zawiera kwas 3-dodecylosulfanylomasłowy oraz zastosowania kwasu 3-dodecylosulfanylomasłowego do wytwarzania leku do zapobiegania insulinooporności.The subject of the application is 3-dodecylsulfanylbutyric acid for use as a medicine, especially for use in the treatment and prevention of the development of insulin resistance. The application also concerns a pharmaceutical composition characterized by the fact that it contains 3-dodecylsulfanylbutyric acid as an active substance and the use of 3-dodecylsulfanylbutyric acid for the production of a drug for the prevention of insulin resistance.
Description
Przedmiotem wynalazku jest kwas 3-dodecylosulfanylomasłowy do zastosowania jako lek, zwłaszcza do zapobiegania rozwojowi insulinooporności oraz kompozycja farmaceutyczna zawierająca kwas 3-dodecylosulfanylomasłowy jako substancję czynną.The present invention relates to 3-dodecylsulfanylbutyric acid for use as a medicament, especially for preventing the development of insulin resistance, and a pharmaceutical composition containing 3-dodecylsulfanylbutyric acid as an active ingredient.
Insulinooporność stanowi zaburzenie homeostazy glukozy, polegające na zmniejszeniu wrażliwości mięśni, tkanki tłuszczowej, wątroby oraz innych tkanek organizmu na insulinę. Insulinooporność jest jedną z przyczyn cukrzycy ciążowej, zwykle pojawia się też w przebiegu cukrzycy typu 1, a także jest stanem poprzedzającym rozwój cukrzycy typu 2 oraz towarzyszącym tej chorobie. Jej zapobieganie, czyli zwiększanie wrażliwości komórek mięśni, wątroby i tkanki tłuszczowej jest ważnym elementem w terapii cukrzycy. Jednym z mechanizmów leżących u podstaw insulinooporności i często wiążącym się z otyłością, jest nadmierna akumulacja lipidów (tri- i diacylogliceroli) w komórkach innych niż komórki tłuszczowe. W efekcie dochodzi do aktywacji enzymów, które uniemożliwiają przekazywanie sygnału od receptora insulinowego do miejsc docelowych w komórce. Dlatego wydaje się, że jedną ze strategii terapeutycznych jest zapobieganie stłuszczaniu komórek poprzez zwiększanie szybkości utleniania kwasów tłuszczowych w mitochondriach. Taki mechanizm działania przypisywano siarkowej pochodnej kwasu tłuszczowego (TTA, kwas tetradecylotiooctowy). Związek ten jest mało specyficznym aktywatorem receptorów PPAR. Ubocznym skutkiem podawania TTA jest jego wbudowywanie do fosfolipidów. W celu uniknięcia tego efektu poszukiwano związków pokrewnych.Insulin resistance is a disorder of glucose homeostasis that reduces the sensitivity of muscles, adipose tissue, liver, and other body tissues to insulin. Insulin resistance is one of the causes of gestational diabetes, usually occurs in type 1 diabetes, and is a condition preceding and accompanying the development of type 2 diabetes. Its prevention, i.e. increasing the sensitivity of muscle cells, liver and adipose tissue, is an important element in the treatment of diabetes. One of the mechanisms underlying insulin resistance, and often associated with obesity, is the excessive accumulation of lipids (tri- and diacylglycerols) in cells other than fat cells. As a result, enzymes are activated that prevent signal transmission from the insulin receptor to cellular targets. Therefore, it appears that one of the therapeutic strategies is to prevent the fatty cells from becoming fatty by increasing the rate of fatty acid oxidation in the mitochondria. This mechanism of action has been attributed to the sulfur derivative of the fatty acid (TTA, tetradecylthioacetic acid). This compound is a slightly specific activator of PPAR receptors. A side effect of TTA administration is its incorporation into phospholipids. In order to avoid this effect, related compounds were sought.
Dlatego też, celem niniejszego wynalazku było znalezienie innego związku, który zapobiegałby insulinooporności poprzez zwiększenie wrażliwości na insulinę komórek wątroby i miotub, form tubularnych różnicujących się na włókna mięśniowe, a także komórek śródbłonka naczyniowego, a także mógłby być stosowany do profilaktyki i/lub leczenia cukrzycy, zwłaszcza cukrzycy typu 2.Therefore, it was an object of the present invention to find another compound that would prevent insulin resistance by increasing insulin sensitivity of liver cells and myotubes, tubular forms that differentiate into muscle fibers, and vascular endothelial cells, and that could also be used for the prevention and / or treatment of diabetes mellitus. especially type 2 diabetes.
Twórcy niniejszego wynalazku przeprowadzili wyczerpujące badania, poszukując związków zapobiegających insulinooporności. Jednym z badanych związków był kwas 3-dodecylosulfanylomasłowy [3-(dodecylsulfanyl)-butanoic acid] (oznaczony poniżej jako TOR-16)The present inventors have conducted exhaustive research to find compounds that prevent insulin resistance. One of the tested compounds was 3-dodecylsulfanylbutyric acid [3- (dodecylsulfanyl) -butanoic acid] (designated below as TOR-16)
o ch3 który poddano badaniom jako substancję chroniącą miotuby C2C12, komórki hepatoma AS-30D oraz komórki śródbłonka naczyniowego przed rozwojem insulinooporności indukowanej palmitynianem, nieoczekiwanie uzyskując wyniki potwierdzające jego aktywność.o ch 3 which was tested as a substance protecting C2C12 myotubes, AS-30D hepatoma cells and vascular endothelial cells against the development of palmitate-induced insulin resistance, unexpectedly obtaining results confirming its activity.
A zatem, przedmiotem niniejszego wynalazku jest substancja zapobiegająca rozwojowi insulinooporności indukowanej palmitynianem w komórkach mięśni, wątroby i śródbłonka w warunkach in vitro, tj. kwas 3-dodecylosulfanylomasłowy (wzór 1) do zastosowania jako lek.Thus, the present invention relates to a substance which prevents the development of palmitate induced insulin resistance in muscle, liver and endothelial cells in vitro, i.e. 3-dodecylsulfanylbutyric acid (formula 1) for use as a medicament.
HOHO
CH3 o ch3 CH 3 o ch 3
Wzór 1Formula 1
Wynalazek dotyczy kwasu 3-dodecylosulfanylomasłowego do stosowania w leczeniu i/lub profilaktyce rozwoju insulinooporności, a także do zastosowania jako lek do profilaktyki i/lub leczenia cukrzycy, zwłaszcza cukrzycy typu 2, zespołu metabolicznego, otyłości, otyłości związanej z zaburzeniami hormonalnymi, zespołu policystycznych jajników i hiperinsulinizmu.The invention relates to 3-dodecylsulfanylbutyric acid for use in the treatment and / or prophylaxis of the development of insulin resistance, and also for use as a drug for the prevention and / or treatment of diabetes mellitus, especially type 2 diabetes, metabolic syndrome, obesity, obesity associated with hormonal disorders, polycystic ovary syndrome. and hyperinsulinism.
Przedmiotem wynalazku jest także kompozycja farmaceutyczna, która jako substancję czynną zawiera kwas 3-dodecylosulfanylomasłowy.The invention also relates to a pharmaceutical composition which comprises 3-dodecylsulfanylbutyric acid as an active ingredient.
Korzystnie, kompozycja według wynalazku jest do zastosowania jako lek, do stosowania w leczeniu i profilaktyce rozwoju insulinooporności, zwłaszcza do zastosowania jako lek do profilaktyki i/lub leczenia cukrzycy, szczególnie cukrzycy typu 2, zespołu metabolicznego, otyłości, otyłości związanej z zaburzeniami hormonalnymi, zespołu policystycznych jajników i hiperinsulinizmu.Preferably, the composition according to the invention is for use as a medicament, for use in the treatment and prophylaxis of the development of insulin resistance, especially for use as a medicament for the prophylaxis and / or treatment of diabetes mellitus, especially type 2 diabetes, metabolic syndrome, obesity, obesity associated with hormonal disorders, polycystic ovaries and hyperinsulinism.
PL 228 077 B1PL 228 077 B1
Korzystnie, kompozycja według wynalazku ma postać płynną na przykład do podawania doustnego, donosowego, doodbytniczego, dopochwowego, dożołądkowego jako roztwór, syrop albo eliksir; oraz do podawania pozajelitowego, podskórnego, doskórnego, domięśniowego lub dożylnego (jak przez wstrzykiwanie) jako sterylny roztwór lub emulsja, a także postać stałą, taką jak tabletka, pastylka, kapsułka, granulki, tabletka powlekana i proszek.Preferably, the composition of the invention is in liquid form, for example for oral, nasal, rectal, vaginal, intragastric administration as a solution, syrup or elixir; and for parenteral, subcutaneous, intradermal, intramuscular or intravenous administration (such as by injection) as a sterile solution or emulsion, and also in solid form such as tablet, trocycle, capsule, granule, coated tablet, and powder.
Przedmiotem wynalazku jest także zastosowanie kwasu 3-dodecylosulfanylomasłowego do wytwarzania leku do stosowania w leczeniu i/lub profilaktyce rozwoju insulinooporności, również do w ytwarzania leku do profilaktyki i/lub leczenia cukrzycy, zwłaszcza cukrzycy typu 2, zespołu metabolicznego, otyłości, otyłości związanej z zaburzeniami hormonalnymi, zespołu policystycznych jajników i hiperinsulinizmu.The invention also relates to the use of 3-dodecylsulfanylbutyric acid for the manufacture of a medicament for use in the treatment and / or prophylaxis of the development of insulin resistance, also for the manufacture of a medicament for the prophylaxis and / or treatment of diabetes mellitus, especially type 2 diabetes, metabolic syndrome, obesity, obesity associated with hormonal disorders, polycystic ovary syndrome and hyperinsulinism.
Korzystnie, kwas 3-dodecylosulfanylomasłowy stosuje się do wytwarzania leku w postaci płynnej, takiej jak roztwór, syrop, eliksir, sterylny roztwór lub emulsja, albo w postaci stałej, takiej jak tabletka, pastylka, kapsułka, granulki, tabletka powlekana i proszek.Preferably, the 3-dodecylsulfanylbutyric acid is used to prepare the medicament in a liquid form such as a solution, syrup, elixir, sterile solution or emulsion, or in a solid form such as a tablet, lozenge, capsule, granules, coated tablet and powder.
Wyniki badań biologicznych kwasu 3-dodecylosulfanylomasłowego (TOR-16) przedstawiono na figurach rysunku, gdzie:The results of biological tests of 3-dodecylsulfanylbutyric acid (TOR-16) are presented in the figures, where:
na fig. 1 zilustrowano aktywację różnych receptorów PPAR przez TOR-16;Figure 1 illustrates activation of various PPAR receptors by TOR-16;
na fig. 2 zilustrowano wpływ TOR-16 na insulinowrażliwość komórek AS-30D ocenianą na podstawie fosforylacji białka Akt;Figure 2 shows the effect of TOR-16 on insulin sensitivity of AS-30D cells as assessed by Akt protein phosphorylation;
na fig. 3 zilustrowano wpływ TOR-16 i rozyglitazonu na insulinowrażliwość miotub C2C12 ocenianą na podstawie fosforylacji białka Akt;Figure 3 shows the effect of TOR-16 and rosiglitazone on C2C12 myotubic insulin sensitivity as assessed by Akt protein phosphorylation;
na fig. 4 zilustrowano wpływ TOR-16 na insulinowrażliwość miotub C2C12 ocenianą na podstawie szybkości pobierania [H3]-deoksyglukozy;Fig. 4 shows the effect of TOR-16 on insulin sensitivity of C2C12 myotubes assessed by the uptake rate of [H3] -deoxyglucose;
na fig. 5 zilustrowano wpływ preinkubacji miotub C2C12 z TOR-16 na stopień stłuszczenia indukowanego palmitynianem i wyrażonego poprzez ocenę akumulacji di- i triacylogliceroli; na fig. 6 zilustrowano wpływ TOR-16 na insulinowrażliwość komórek śródbłonka linii EA.hy926 ocenianą na podstawie fosforylacji białka Akt.Figure 5 shows the effect of preincubation of C2C12 myotubes with TOR-16 on the degree of palmitate-induced steatosis and expressed by assessing accumulation of di- and triacylglycerols; Figure 6 shows the effect of TOR-16 on endothelial cell line EA.hy926 insulin sensitivity as assessed by Akt protein phosphorylation.
Otrzymywanie związku TOR-16Preparation of TOR-16 compound
Żądany produkt otrzymano w wyniku katalizowanej jodem, addycji Michaela dodekanotiolu do podwójnego wiązania kwasu krotonowego, wg procedury opisanej w literaturze [S. Gao, T. Tzeng, M. N. Sastry, C.-M. Chu, J.-T. Liu, C. Lin, C.-F. Yao, lodine catalyzed conjugate addition of mercaptans to α,β-unsaturated carboxylic acids under solvent-free condition, Tetrahedron Lett., 47, 1889-1893 (2006)]. Wydajność reakcji nie była optymalizowana. Celem syntezy było otrzymanie próbki związku o jak najwyższej czystości, odpowiedniej do badań biologicznych. Struktura i jednorodność TOR-16 zostały potwierdzone z wykorzystaniem TLC, widm H-NMR, C-NMR, MS, IR oraz analizy elementarnej.The desired product was obtained by iodine-catalyzed Michael addition of dodecanethiol to the crotonic acid double bond according to the procedure described in the literature [S. Gao, T. Tzeng, M. N. Sastry, C.-M. Chu, J.-T. Liu, C. Lin, C.-F. Yao, lodine catalyzed conjugate addition of mercaptans to α, β-unsaturated carboxylic acids under solvent-free condition, Tetrahedron Lett., 47, 1889-1893 (2006)]. The yield of the reaction was not optimized. The aim of the synthesis was to obtain a sample of the compound of the highest purity, suitable for biological research. The structure and homogeneity of TOR-16 were confirmed by TLC, H-NMR, C-NMR, MS, IR spectra and elemental analysis.
Mieszaninę 8,61 g (0,1 mola) kwasu krotonowego, 30,36 g (0,15 mola) dodekanotiolu i 5,08 g (20% molowych) jodu mieszano mechanicznie w atmosferze azotu przez 2 godziny, w temperaturze 3 A mixture of 8.61 g (0.1 mol) of crotonic acid, 30.36 g (0.15 mol) of dodecanethiol and 5.08 g (20 mol%) of iodine was mechanically stirred under nitrogen for 2 hours at a temperature of 3
50°C. Całość ochłodzono do temperatury pokojowej i rozpuszczono w 200 cm chloroformu. Ślady jodu usunięto poprzez wytrząsanie chloroformowego roztworu z nasyconym wodnym roztworem tiosiarczanu sodu. Warstwę organiczną osuszono za pomocą bezwodnego siarczanu magnezu. Rozpuszczalnik usunięto z wykorzystaniem destylacji pod zmniejszonym ciśnieniem. Oleistą pozostałość rozpuszczono w małej ilości acetonu i pozostawiono na noc w lodówce. Wytrąconą białą masę odsączono, przemyto zimnym acetonem i wysuszono na powietrzu. Otrzymano 15,58 g (54,0%) surowego TOR-16. Do analitycznych i biologicznym badań produkt był dodatkowo trzykrotnie krystalizowany z n-heksanu i suszony w próżni, w temperaturze pokojowej, przez 3 godziny.50 ° C. It was cooled to room temperature and dissolved in 200 ml of chloroform. Traces of iodine were removed by shaking the chloroform solution with a saturated aqueous sodium thiosulfate solution. The organic layer was dried with anhydrous magnesium sulfate. The solvent was removed by distillation under reduced pressure. The oily residue was dissolved in a little acetone and left in the refrigerator overnight. The precipitated white mass was filtered off, washed with cold acetone and air dried. 15.58 g (54.0%) of crude TOR-16 was obtained. For analytical and biological tests, the product was recrystallized three times from n-hexane and dried under vacuum at room temperature for 3 hours.
Charakterystyka fizykochemiczna:Physicochemical characteristics:
Temperatura topnienia: 36-38°C.Melting point: 36-38 ° C.
1H-NMR (500 MHz, CDCI3, δ): 10,08 (s szeroki, 1H, -COOH), 3,14-3,23 [m, 1H, -CH?CH(CH3)S-], 2,45-2,72 [m, 4H, SCH7CH7-; HOOCCH?-], 1,54-1,62 (m, 2H, -SCH?CHr), 1,21-1,42 [m, 21H, -(CH2)9-; -CH(CH3)S-], 0,88 (t, 3H, -CH2CH3). 1 H-NMR (500 MHz, CDCl3, δ): 10.08 (broad s, 1H, -COOH), 3.14-3.23 [m, 1H, -CH? CH (CH3) S-], 2.45-2.72 [m, 4H, SCH7CH7-; HOOCCH? -], 1.54-1.62 (m, 2H, -SCH? CH r), 1.21-1.42 [m, 21H, - (CH2) 9-; -CH (CH 3 ) S-]. 0.88 (t, 3H, -CH 2 CH 3).
13C-NMR (125 MHz, CDCI3, δ): 177,36 (-COOH), 42,01; 35,78; 31,90; 30,70; 29,63; 29,61; 29,58; 29,50; 29,33; 29,21; 28,96; 22,67; 21,40; 14,10. 13 C-NMR (125 MHz, CDCl 3, δ): 177.36 (-COOH), 42.01; 35.78; 31.90; 30.70; 29.63; 29.61; 29.58; 29.50; 29.33; 29.21; 28.96; 22.67; 21.40; 14.10.
IR: 1691 cm-1 (C=O).IR: 1691 cm -1 (C = O).
ESI-MS (m/z [M-H]-): obliczono: 287,2045, znaleziono: 287,2052.ESI-MS (m / z [MH] - ): calcd: 287.2045, found: 287.2052.
Analiza elementarna: obliczono dla C16H32O2S: C-66,61%; H-11,18%; O-11,09%; S-11,11%, znaleziono: C-66,21%; H-10,86%; S-10,95%.Elemental analysis: Calculated for C 16 H 32 O 2 S: C, 66.61%; H 11.18%; O-11.09%; S, 11.11%. Found: C, 66.21%; H: 10.86%; S, 10.95%.
PL 228 077 B1PL 228 077 B1
Traktowanie komórekTreatment of cells
Miotuby C2C12 utrzymywane w pożywce DMEM o wysokiej zawartości glukozy wzbogaconej 10% BFS oraz z dodatkiem antybiotyków (penicylina + streptomycyna) inkubowano przez 72 godziny w obecności TOR-16 w odpowiednim stężeniu lub DMSO (rozpuszczalnik dla TOR-16 podawany w próbie kontrolnej). 24 godziny przed upływem tego czasu do odpowiednich szalek dodawano palm itynian skompleksowany z albuminą w stężeniu 750 μΜ (w celu indukcji insulinooporności), a do drugiej odpowiednią ilość albuminy (kontrola). Po zakończeniu inkubacji usuwano pożywkę i zastępowano ją świeżą. Do części szalek dodawano na 20 minut insulinę w stężeniu 10 nM, a do drugiej odpowie dnią ilość PBS, w jakim była rozpuszczona insulina. Następnie pożywkę usuwano, monowarstwę komórek dwukrotnie przemywano PBS o temp. 4°C i lizowano według standardowej procedury przygotowywania prób do elektroforezy PAGE i immunochemicznej detekcji białek.C2C12 myotubes maintained in DMEM medium with high glucose content enriched with 10% BFS and with the addition of antibiotics (penicillin + streptomycin) were incubated for 72 hours in the presence of the appropriate concentration of TOR-16 or DMSO (solvent for TOR-16 administered in the control sample). 24 hours before the end of this time, palmitate complexed with albumin at a concentration of 750 μΜ was added to the appropriate plates (to induce insulin resistance), and to the other the appropriate amount of albumin (control). After incubation was complete, the medium was removed and replaced with fresh. Insulin at a concentration of 10 nM was added to a portion of the dishes for 20 minutes, and the amount of PBS in which the insulin was dissolved in the second one was added. The medium was then removed, the cell monolayer was washed twice with PBS at 4 ° C and lysed according to standard sample preparation procedures for PAGE electrophoresis and immunochemical protein detection.
Komórki AS-30D (zawiesina o gęstości 500000 komórek/ml) hodowano przez 72 godziny w standardowej pożywce RPMI 1640 w obecności TOR-16 w odpowiednim stężeniu lub DMSO (rozpuszczalnik dla TOR-1 6 podawany w próbie kontrolnej), codziennie zmieniając pożywkę i utrzymując odpowiednią gęstość zawiesiny. 18 godzin przed upływem tego czasu każdą porcje komórek dzielono na dwie. Do jednej dodawano palmitynian skompleksowany z albuminą w stężeniu 75 μΜ (10-krotnie niższe niż w przypadku miotub C2C12) w celu indukcji insulinooporności, a do drugiej odpowiednią ilość albuminy (kontrola). Po zakończeniu inkubacji każdą porcję komórek dzielono ponownie na dwie. Do jednej dodawano na 20 minut insulinę w stężeniu 10 nM, a do drugiej odpowiednią ilość PBS, w jakim była rozpuszczona insulina. Następnie komórki (ok. 5x106 mln w każdej próbie) odwirowywano, przemywano dwukrotnie PBS o temp. 4°C i lizowano według standardowej procedury przygotowywania prób do elektroforezy PAGE i immunochemicznej detekcji białek.AS-30D cells (suspension at 500,000 cells / ml) were cultured for 72 hours in RPMI 1640 standard medium in the presence of TOR-16 at the appropriate concentration or DMSO (solvent for TOR-1 6 administered in the control), changing the medium daily and maintaining appropriate density of the suspension. Eighteen hours before the end of this time, each aliquot of cells was divided into two. To one was added palmitate complexed with albumin at a concentration of 75 μΜ (10 times lower than in the C2C12 litter) to induce insulin resistance, and to the other the appropriate amount of albumin (control). At the end of incubation, each aliquot of cells was again divided into two. To one was added insulin at a concentration of 10 nM for 20 minutes, and to the other the appropriate amount of PBS in which the insulin was dissolved. The cells (approx. 5x10 6 million in each sample) were then centrifuged, washed twice with PBS at 4 ° C, and lysed according to standard sample preparation procedures for PAGE electrophoresis and immunochemical protein detection.
Komórki linii śródbłonkowej EA-hy926 utrzymywane w pożywce DMEM o wysokiej zawartości glukozy wzbogaconej 10% BFS oraz z dodatkiem antybiotyków (penicylina + streptomycyna) inkub owano przez 72 godziny w obecności TOR-16 w odpowiednim stężeniu lub DMSO (rozpuszczalnik, kontrola dla badanego związku). 24 godziny przed upływem tego czasu do odpowiednich szalek dodawano palmitynian skompleksowany z albuminą w stężeniu 750 μΜ (w celu indukcji insulinooporności), a do drugiej odpowiednią ilość albuminy (kontrola). Po zakończeniu inkubacji usuwano pożywkę i zastępowano ją świeżą. Do części szalek dodawano na 20 minut insulinę w stężeniu 10 nM, a do drugiej odpowiednią ilość PBS, w jakim była rozpuszczona insulina. Następnie pożywkę usuwano, monowarstwę komórek dwukrotnie przemywano PBS o temp. 4°C i lizowano według standardowej procedury przygotowywania prób do elektroforezy PAGE i immunochemicznej detekcji białek. Przygotowanie lizatu komórek, elektroforeza białek i oznaczenie immunochemiczne (Western blot)EA-hy926 endothelial line cells maintained in DMEM medium with high glucose content enriched with 10% BFS and with the addition of antibiotics (penicillin + streptomycin) were incubated for 72 hours in the presence of the appropriate concentration of TOR-16 or DMSO (solvent, test compound control) . 24 hours before the end of this time, palmitate complexed with albumin at a concentration of 750 μΜ was added to the appropriate plates (to induce insulin resistance), and to the other the appropriate amount of albumin (control). After incubation was complete, the medium was removed and replaced with fresh. Insulin at a concentration of 10 nM was added to some of the dishes for 20 minutes, and to the other the appropriate amount of PBS in which the insulin was dissolved. The medium was then removed, the cell monolayer was washed twice with PBS at 4 ° C and lysed according to standard sample preparation procedures for PAGE electrophoresis and immunochemical protein detection. Cell lysate preparation, protein electrophoresis and immunochemical assay (Western blot)
W tym celu osad komórek (po dwukrotnym opłukaniu PBS) zawieszano w 0,4 ml roztworu do lizy firmy Cell Signalling z dodatkiem 10 mM NaF, koktajlu inhibitorów proteaz (Complete mini, Roche CH) i 1 mM PMSF (dodanego tuż przez użyciem) i homogenizowano wciągając 15-krotnie do strzykawki przez igłę o średnicy 0,45 mm. Zawiesinę wirowano i zbierano supernatant, z którego pobierano małą próbkę w celu oznaczenia stężenia białka. Do pozostałego supernatantu dodawano buforowany roztwór do nakładania prób na żel do elektroforezy o składzie 210 mM Tris-HCI pH 6,8, 40% glicerol (objętość/objętość), 8% SDS (masa/objętość), 0,01% błękit bromofenolowy (masa/objętość), w proporcji 3:1. Próby mieszano i ogrzewano przez 5 minut w temperaturze 96°C. Przechowywano w temperaturze -20°C. Elektroforezę przeprowadzano w 10% żelu poliakrylamidowym. W studzienkach umieszczano taką objętość próby, która zawierała 20 μg białka. Elektroforezę prowadzono, stosując aparat Tetra-cell firmy Bio-Rad przez 30 minut przy 80 V (żel zagęszczający), a następnie przez 90 minut przy 130 V.For this purpose, the cell pellet (after washing twice with PBS) was resuspended in 0.4 ml of lysis solution from Cell Signaling with the addition of 10 mM NaF, a cocktail of protease inhibitors (Complete mini, Roche CH) and 1 mM PMSF (added just before use) and homogenized by drawing 15 times into the syringe through a needle with a diameter of 0.45 mm. The suspension was centrifuged and the supernatant was collected and a small sample was removed for protein concentration determination. To the remaining supernatant was added a buffered loading solution for a gel electrophoresis 210 mM Tris-HCl pH 6.8, 40% glycerol (v / v), 8% SDS (w / v), 0.01% bromophenol blue ( weight / volume), in a ratio of 3: 1. The samples were stirred and heated for 5 minutes at 96 ° C. Stored at -20 ° C. The electrophoresis was performed on a 10% polyacrylamide gel. A sample volume containing 20 µg of protein was placed in the wells. The electrophoresis was performed using a Bio-Rad Tetra-cell apparatus for 30 minutes at 80V (thickening gel) and then for 90 minutes at 130V.
Po zakończeniu rozdziału elektroforetycznego, białka znajdujące się w żelu przenoszono na membranę nitrocelulozową (Bio-Rad) w aparacie firmy Bio-Rad, przy natężeniu prądu 400 mA przez 60 minut w temperaturze 4°C. Membranę blokowano przez 60 minut w 5% roztworze odtłuszczonego mleka lub 5% albuminy rozpuszczonych w roztworze 100 mM NaCI, 0,1% Tween 20 buforowanych 25 mM Tris (TBS-T). Następnie prowadzono inkubację z przeciwciałem pierwszorzędowym (anty fosfo-Akt i anty Akt, Cel Signalling USA rozpuszczone w 5% albuminie z surowicy bydlęcej przez noc; anty β-aktyna, Sigma, USA w 5% albuminie z krwi bydlęcej przez 60 minut). Po tym czasie membrany płukano TBS-T (3x15 minut) i nakładano przeciwciało ll-rzędowe. Po 60 minutach membrany płukano jak wyżej. Detekcji dokonywano przy użyciu odczynnika Luminata classico Western HRP (Millipore, DE), a klisze wywoływano w aparacie Fuji. Intensywność prążków oceniano przy użyciu densytometru Ingenius (Syngene, UK).After the electrophoretic separation was completed, the proteins in the gel were transferred to a nitrocellulose membrane (Bio-Rad) in a Bio-Rad apparatus at a current of 400 mA for 60 minutes at 4 ° C. The membrane was blocked for 60 minutes in 5% skim milk or 5% albumin dissolved in 100 mM NaCl, 0.1% Tween 20 buffered with 25 mM Tris (TBS-T). This was followed by incubation with the primary antibody (anti phospho-Akt and anti Akt, Cel Signaling USA dissolved in 5% bovine serum albumin overnight; anti β-actin, Sigma, USA in 5% bovine blood albumin for 60 minutes). After this time, the membranes were washed with TBS-T (3 x 15 minutes) and the secondary antibody was applied. After 60 minutes, the membranes were rinsed as above. Detection was made using the Luminata classico Western HRP reagent (Millipore, DE) and the films were developed on a Fuji machine. The intensity of the bands was assessed using an Ingenius densitometer (Syngene, UK).
PL 228 077 B1PL 228 077 B1
Pobieranie [H31-deoksvglukozyRetrieval [H31-deoksvglucose
Po przepłukaniu komórek buforem Krebsa-Henseleita (KH), komórki inkubowano 30 minut bez dodatku substratów. Następnie komórki stymulowano 10 nM insuliną w buforze KH bez dodatku glukozy przez 20 minut Po inkubacji z insuliną do komórek dodawano bufor KH zawierający radioaktywną 2-deoksyglukozę ([3H] 2-DOG, 2 pCi/ml w 1 pM 2-DOG, Moravek Biochemicals, CA USA) i inkubowano przez 5 minut.After washing the cells with Krebs-Henseleit buffer (KH), the cells were incubated 30 minutes without the addition of substrates. The cells were then stimulated with 10 nM insulin in KH buffer without added glucose for 20 minutes. After incubation with insulin, the cells were added with KH buffer containing radioactive 2-deoxyglucose ([ 3 H] 2-DOG, 2 pCi / ml in 1 pM 2-DOG, Moravek Biochemicals, CA USA) and incubated for 5 minutes.
Pobieranie DOG było hamowane przez dodanie 10 μΜ cytochalazyny B (Sigma). Komórki inkubowano jeszcze przez 1 minutę, a następnie trzykrotnie płukano zimnym (4°C) 0,9% roztworem NaCI. Komórki dokładnie osuszano i rozpuszczano w 0,5 M roztworze NaOH. Radioaktywność każdej próby mierzono dwukrotnie, wykorzystując komercyjny roztwór scyntylatora (BCS, Amersham). Pomiar prowadzono za pomocą licznika scyntylacyjnego. Stężenie białka oznaczano wykorzystując zmodyfikowaną metodę Lowry'ego (Modified Lowry Protein Assay, Thermoscientific). Od uzyskanych wyników odejmowano wartość niespecyficznego pobierania radioaktywnej DOG, którą oznaczano w próbie inku3 bowanej z 10 μΜ cytochalazyną B przed dodaniem [ H] 2-DOG. Wartości te nie przekraczały 10%.DOG uptake was inhibited by the addition of 10 µM cytochalasin B (Sigma). The cells were incubated for an additional 1 minute and then washed three times with cold (4 ° C) 0.9% NaCl solution. The cells were thoroughly dried and dissolved in 0.5 M NaOH solution. The radioactivity of each sample was measured in duplicate using a commercial scintillator solution (BCS, Amersham). The measurement was carried out using a scintillation counter. Protein concentration was determined using a modified Lowry method (Modified Lowry Protein Assay, Thermoscientific). From the results obtained values subtracted the nonspecific collection radioactive DOG, which was determined in Test 3 INKU Bowan of 10 μΜ cytochalasin B before the addition of [H] 2-DOG. These values did not exceed 10%.
WynikiResults
Na fig. 1 zilustrowano aktywację różnych receptorów PPAR przez TOR-16. Zdolność do aktywacji receptora określano względem aktywatora referencyjnego (granatowy, trzeci słupek od lewej strony). Granatowe słupki odpowiadają odpowiedzi na właściwy związek referencyjny przyjętej za 100%. Żółty słupek na panelu 1 i niebieskie (panel 2 i 3) oznaczają względną aktywność PPAR w komórkach niestymulowanych. Niebieski słupek na panelu 1 oraz żółte słupki na panelach 2 i 3 oznaczają aktywność PPAR po podaniu samego DMSO (rozpuszczalnik TOR-16 oraz związków referencyjnych). Słupki zielone oznaczają względną aktywację PPAR po podaniu TOR-16 w różnych stężeniach.Figure 1 illustrates activation of various PPAR receptors by TOR-16. The ability to activate the receptor was determined against a reference activator (dark blue, third bar from the left). The navy blue bars correspond to the response to the appropriate reference compound assumed to be 100%. The yellow bar in panel 1 and the blue bar (panels 2 and 3) represent the relative PPAR activity in unstimulated cells. The blue bar on panel 1 and the yellow bar on panels 2 and 3 indicate PPAR activity after administration of DMSO alone (TOR-16 solvent and reference compounds). Green bars indicate the relative activation of PPAR following administration of TOR-16 at various concentrations.
Miarą insulinooporności jest zmniejszone stopnia fosforylacji kinazy Akt w reszcie tyrozynowej w pozycji Ser473 pod wpływem tego hormonu. Może to być następstwem fosforylacji reszt seryny (np. katalizowanej przez kinazę białkową C, PKC). Kinaza Akt jest enzymem w szlaku przekazywania sygnału wewnątrzkomórkowego, który rozpoczyna się przyłączeniem insuliny do receptora znajdującego się w błonie komórkowej. Jeżeli indukcja tego sygnału lub jego przekazywanie są zaburzone, nie dochodzi do fosforylacji kinazy Akt. Ten etap jest wspólny dla wielu rodzajów komórek i może mieć różne następstwa.A measure of insulin resistance is the decreased degree of Akt kinase phosphorylation at the tyrosine residue at Ser473 under the influence of this hormone. This may be the consequence of phosphorylation of serine residues (e.g. catalyzed by protein kinase C, PKC). The Akt kinase is an enzyme in the intracellular signaling pathway that begins with the attachment of insulin to a receptor located in the cell membrane. If the induction of this signal or its transmission is disturbed, the Akt kinase is not phosphorylated. This step is common to many cell types and can have different ramifications.
W mięśniach (ale nie w wątrobie) następstwem aktywacji Akt pod wpływem insuliny jest zwiększenie pobierania glukozy (lub w warunkach doświadczalnych deoksyglukozy znakowanej radionuklidem w celu identyfikacji). A zatem, insulinooporność komórek mięśniowych objawia się także brakiem stymulacji pobierania tych związków pod wpływem insuliny.In muscle (but not in the liver), insulin activation results in an increase in glucose uptake (or experimentally with radionuclide-labeled deoxyglucose for identification). Thus, muscle cell insulin resistance is also manifested by a failure to stimulate uptake of these compounds by insulin.
Na fig. 2 przedstawiono wyniki obu testów tj. fosforylacji Akt w reszcie tyrozyny (komórki hepatoma, miotuby oraz komórki śródbłonka naczyniowego) oraz pobierania deoksyglukozy przez miotuby C2C12. Stężenia TOR-16 podano u góry zdjęcia. Najsilniejsze działanie protekcyjne TOR-16 zaobserwowano dla stężenia 25 μM tego związku (porównaj ścieżka 4 kontrola i 6 + TOR). Przedstawiony obraz Western blot pochodzi z jednego spośród 3 niezależnych doświadczeń.Figure 2 shows the results of both tests, i.e., Akt phosphorylation in a tyrosine residue (hepatoma cells, myotubes and vascular endothelial cells) and deoxyglucose uptake by C2C12 myotubes. TOR-16 concentrations are given at the top of the photo. The strongest protective effect of TOR-16 was observed at a concentration of 25 μM of this compound (compare lane 4 control and 6 + TOR). The presented Western blot image is from one of 3 independent experiments.
W przypadku komórek hepatoma AS-30D najwłaściwszym spośród testowanych stężeniem TOR-16 wydaje się 25 μM.In the case of AS-30D hepatoma cells, 25 μM seems to be the most appropriate TOR-16 concentration tested.
Miotuby C2C12C2C12 litters
Na fig. 3 zilustrowano wpływ TOR-16 i rozyglitazonu na insulinowrażliwość miotub C2C12 ocenianą na podstawie fosforylacji białka Akt.Figure 3 shows the effect of TOR-16 and rosiglitazone on C2C12 myotubic insulin sensitivity as assessed by Akt protein phosphorylation.
Stężenia TOR-16 podano u góry zdjęcia. Najsilniejsze działanie protekcyjne TOR-16 zaobserwowano dla stężenia 50 μM tego związku (porównaj ścieżka 4 kontrola i 8 + TOR-16). Przedstawiony obraz Western blot pochodzi z jednego spośród 3 niezależnych doświadczeń. Na dolnym panelu przedstawiono podobne działanie substancji referencyjnej - rozyglitazonu (1 μM). Puste pole w środku zdjęcia jest spowodowane usunięciem wyników dotyczących innej substancji jednocześnie testowanej w tym doświadczeniu, a nie objętej niniejszym zgłoszeniem.TOR-16 concentrations are given at the top of the photo. The strongest protective effect of TOR-16 was observed for a concentration of 50 μM of this compound (compare Lane 4 control and 8 + TOR-16). The presented Western blot image is from one of 3 independent experiments. The lower panel shows the similar effect of the reference substance rosiglitazone (1 μM). The blank box in the middle of the photo is due to the deletion of the results for another substance simultaneously tested in this experiment and not covered by this notification.
Na fig. 4 zilustrowano wpływ TOR-16 na insulinowrażliwość miotub C2C12 ocenianą na pod3 stawie szybkości pobierania [H ]-deoksyglukozy. Wyniki przedstawiają wartość średnią z 3 doświadczeń ±S.D.Fig. 4 shows the influence of TOR-16 C2C12 myotubes insulin sensitivity as assessed at three joint uptake rate [H] -deoksyglukozy. Results represent the mean value of 3 experiments ± SD
Oba testy - fosforylacja Akt oraz pomiar szybkości pobierania deoksyglukozy po stymulacji komórek insuliną wykazały, że preinkubacja miotub C2C12 z TOR-16 w stężeniu 50 μM zapobiega insulinooporności indukowanej przez kwas palmitynowy.Both tests - Akt phosphorylation and measurement of deoxyglucose uptake rate after stimulation of cells with insulin showed that preincubation of C2C12 myotubes with 50 μM TOR-16 prevents insulin resistance induced by palmitic acid.
PL 228 077 Β1PL 228 077 Β1
Uważa się, że insulinooporność komórek wątroby i mięśni indukowana przez podanie palmitynianu jest następstwem nadmiernej akumulacji lipidów, w tym acylogliceroli, w tych narządach. Szczególnie istotne wydaje się nagromadzanie diacylogliceroli (DAG), które są silnymi aktywatorami kinazy białkowej C (PKC). Aktywacja tego enzymu powoduje niewłaściwą fosforylację i przez to inaktywację białka Akt. Dlatego zapobieganie nadmiernej akumulacji acylogliceroli jest korelowane z zapobieganiem insulinooporności.The insulin resistance of liver and muscle cells induced by palmitate administration is believed to be a consequence of excessive accumulation of lipids, including acylglycerols, in these organs. The accumulation of diacylglycerols (DAG), which are potent activators of protein kinase C (PKC), seems to be of particular importance. Activation of this enzyme causes inappropriate phosphorylation and hence inactivation of the Akt protein. Therefore, the prevention of excessive accumulation of acylglycerols is correlated with the prevention of insulin resistance.
Na fig. 5 zilustrowano wpływ preinkubacji miotub C2C12 z TOR-16 na akumulację di- i triacylogliceroli w obecności palmitynianu. Przedstawione wyniki pochodzą z trzech niezależnych doświadczeń ±S.D.Figure 5 shows the effect of preincubation of C2C12 myotubes with TOR-16 on the accumulation of di- and triacylglycerols in the presence of palmitate. The results shown are from three independent ± S.D. experiments.
Wykazano, że TOR-16 podany na 72 godziny i na 48 godzin przed podaniem palmitynianu istotnie zmniejsza nagromadzanie się diacylogliceroli (DAG), natomiast jego wpływ na akumulację triacylogliceroli (TAG) jest co najwyżej nieznaczny.It has been shown that TOR-16 administered 72 hours and 48 hours before palmitate administration significantly reduces the accumulation of diacylglycerols (DAG), while its effect on the accumulation of triacylglycerols (TAG) is at most insignificant.
Komórki śródbłonka EA.hy926EA.hy926 endothelial cells
Na fig. 6 zilustrowano wpływ TOR-16 na insulinowrażliwość komórek śródbłonka linii EA.hy926 ocenianą na podstawie fosforylacji białka Akt. Komórki były traktowane 100 μΜ palmitynianem przez 48 godzin oraz TOR-16 (w dwóch stężeniach) przez 72 godziny. Odpowiedź na insulinę oznacza stopień stymulacji fosforylacji Akt (wyliczony jako stosunek wartości Akt-P/Akt znormalizowanych wcześniej względem aktyny) w komórkach traktowanych insuliną w stosunku do komórek nietraktowanych tym hormonem. Wyniki są średnią z densytometrycznych pomiarów intensywności chemiluminescencji dla 7-9 niezależnych doświadczeń.Figure 6 shows the effect of TOR-16 on endothelial cell line EA.hy926 insulin sensitivity as assessed by Akt protein phosphorylation. Cells were treated with 100 µL palmitate for 48 hours and TOR-16 (two concentrations) for 72 hours. Insulin response is the degree of stimulation of Akt phosphorylation (calculated as the ratio of Akt-P / Akt values previously normalized to actin) in insulin-treated cells versus untreated cells. The results are the mean of the densitometric measurements of chemiluminescence intensity for 7-9 independent experiments.
Ponadto stwierdzono, że TOR-16 stymuluje wydzielanie NO przez komórki śródbłonka, a efekt ten jest skorelowany ze zwiększoną fosforylacją eNOS. Chociaż zjawisko to nie jest bezpośrednio związane z opornością na insulinę, może sugerować dodatkowe, korzystne śródbłonkowe działanie testowanej substancji.Furthermore, TOR-16 was found to stimulate NO secretion by endothelial cells, an effect correlated with increased eNOS phosphorylation. Although this phenomenon is not directly related to insulin resistance, it may suggest an additional beneficial endothelial effect of the test substance.
Podsumowanie i wnioskiSummary and Conclusions
TOR-16 w sposób istotny zapobiega insulinooporności indukowanej palmitynianem w trzech typach badanych komórek: hepatoma AS-30D; miotuby C2C12 oraz komórki pochodzenia śródbłonkowego EA.hy926. Mechanizm biochemiczny działania TOR-16 (w aspektach objętych niniejszym zgłoszeniem) nie jest ostatecznie potwierdzony, ale fakt, że jest on aktywatorem receptorów PPAR musi być brany pod uwagę.TOR-16 significantly prevents palmitate-induced insulin resistance in three types of cells tested: hepatoma AS-30D; C2C12 myotubes and EA.hy926 endothelial cells. The biochemical mechanism of action of TOR-16 (in the aspects covered by this application) is not definitively confirmed, but the fact that it is an activator of PPAR receptors must be taken into account.
A zatem dzięki zdolności do zapobiegania insulinooporności poprzez zwiększenie wrażliwości na insulinę komórek wątroby i miotub, form tubularnych różnicujących się na włókna mięśniowe, a także komórek śródbłonka naczyniowego, kwas 3-dodecylosulfanylomasłowy (TOR-16) mógłby być stosowany do profilaktyki i/lub leczenia cukrzycy, zwłaszcza cukrzycy typu 2.Thus, thanks to its ability to prevent insulin resistance by increasing insulin sensitivity of liver cells and myotubes, tubular forms that differentiate into muscle fibers, and vascular endothelial cells, 3-dodecylsulfanylbutyric acid (TOR-16) could be used for the prevention and / or treatment of diabetes mellitus especially type 2 diabetes.
Claims (11)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL414785A PL228077B1 (en) | 2015-11-13 | 2015-11-13 | 3-dodecylsulfanyl-butyric acid to be used as a medicine, preferably to prevent development of insulin immunity and the composition containing 3-dodecylsulfanyl-butyric acid as active substance |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL414785A PL228077B1 (en) | 2015-11-13 | 2015-11-13 | 3-dodecylsulfanyl-butyric acid to be used as a medicine, preferably to prevent development of insulin immunity and the composition containing 3-dodecylsulfanyl-butyric acid as active substance |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL414785A1 PL414785A1 (en) | 2017-05-22 |
| PL228077B1 true PL228077B1 (en) | 2018-02-28 |
Family
ID=58709075
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL414785A PL228077B1 (en) | 2015-11-13 | 2015-11-13 | 3-dodecylsulfanyl-butyric acid to be used as a medicine, preferably to prevent development of insulin immunity and the composition containing 3-dodecylsulfanyl-butyric acid as active substance |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL228077B1 (en) |
-
2015
- 2015-11-13 PL PL414785A patent/PL228077B1/en unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL414785A1 (en) | 2017-05-22 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US10576091B2 (en) | Tomatidine, analogs thereof, compositions comprising same, and uses for same | |
| TW202321218A (en) | Shp2 inhibitor, pharmaceutical composition containing same and application thereof | |
| KR101383228B1 (en) | A3 adenosine receptor allosteric modulators | |
| Zhong et al. | Role of CaMKII in free fatty acid/hyperlipidemia-induced cardiac remodeling both in vitro and in vivo | |
| JP7053478B2 (en) | Methods for using FXR agonists | |
| WO2008091863A1 (en) | Sulfonyl-substituted bicyclic compounds as ppar modulators for the treatment of non-alcoholic steatohepatitis | |
| WO2025011568A1 (en) | Heterocyclic compounds used as shp2 inhibitors, pharmaceutical composition comprising same, preparation method therefor and use thereof | |
| CN106536539B (en) | Compounds for improving muscle mass and their uses | |
| JP2017510561A (en) | Heterocyclic compounds | |
| JP2012504617A (en) | Compounds, compositions, and methods for treating β-amyloid disease and synucleinopathies | |
| AU2014319990A1 (en) | Use of acetyl-CoA carboxylase inhibitors for treating acne vulgaris | |
| JP2022527025A (en) | Compositions for the treatment of neurodegenerative diseases and mitochondrial diseases and their usage | |
| US10829453B2 (en) | Antagonists of the kappa opioid receptor | |
| EP2809648B1 (en) | Oxygenated amino- or ammonium-containing sulfonic acid derivatives and their medical use | |
| KR20190021369A (en) | (Anti-PCSK9) compounds and methods of using them for the treatment and / or prevention of cardiovascular diseases | |
| PL228077B1 (en) | 3-dodecylsulfanyl-butyric acid to be used as a medicine, preferably to prevent development of insulin immunity and the composition containing 3-dodecylsulfanyl-butyric acid as active substance | |
| TWI588128B (en) | 5-methoxytryptophan and its derivatives and uses thereof | |
| WO2014125121A1 (en) | Compounds and compositions for treating neurodegenerative diseases | |
| US20240216354A1 (en) | Immunomodulatory imide drugs as zeta-chain-associated protein kinase 70 (zap70) agonists and uses thereof | |
| WO2020168068A1 (en) | Small molecule antagonist to pacap receptor and uses thereof | |
| KR20200023236A (en) | Benzoic acid derivatives and composition for preventing or treating autoimmune diseases comprising the same | |
| JP2020128343A (en) | Nutrient complex | |
| CN106214678A (en) | The new application of benzophenone class medicine | |
| TW201930309A (en) | ASK1 inhibitor compounds and uses thereof | |
| HK1207299A1 (en) | Methods for inhibiting muscle atrophy |