PL229597B1 - Zastosowanie naryngeniny i preparatu zawierającego naryngeninę oraz sposób spowalniania, przeciwdziałania i zapobiegania procesowi powstawania plam bielaczych skóry - Google Patents
Zastosowanie naryngeniny i preparatu zawierającego naryngeninę oraz sposób spowalniania, przeciwdziałania i zapobiegania procesowi powstawania plam bielaczych skóryInfo
- Publication number
- PL229597B1 PL229597B1 PL416041A PL41604116A PL229597B1 PL 229597 B1 PL229597 B1 PL 229597B1 PL 416041 A PL416041 A PL 416041A PL 41604116 A PL41604116 A PL 41604116A PL 229597 B1 PL229597 B1 PL 229597B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- naringenin
- skin
- vitiligo
- cells
- counteracting
- Prior art date
Links
- FTVWIRXFELQLPI-ZDUSSCGKSA-N (S)-naringenin Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1[C@H]1OC2=CC(O)=CC(O)=C2C(=O)C1 FTVWIRXFELQLPI-ZDUSSCGKSA-N 0.000 title claims abstract description 64
- WGEYAGZBLYNDFV-UHFFFAOYSA-N naringenin Natural products C1(=O)C2=C(O)C=C(O)C=C2OC(C1)C1=CC=C(CC1)O WGEYAGZBLYNDFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 60
- 235000007625 naringenin Nutrition 0.000 title claims abstract description 59
- 229940117954 naringenin Drugs 0.000 title claims abstract description 59
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 27
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 title claims abstract description 9
- 230000008569 process Effects 0.000 title claims abstract description 9
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 11
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 20
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims abstract description 15
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims abstract description 7
- 239000000969 carrier Substances 0.000 claims abstract description 6
- 230000002087 whitening effect Effects 0.000 claims abstract description 5
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims abstract description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims abstract description 3
- 239000006071 cream Substances 0.000 claims description 16
- 239000000499 gel Substances 0.000 claims description 7
- 239000006210 lotion Substances 0.000 claims description 7
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 claims description 3
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 claims description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims description 2
- 239000006260 foam Substances 0.000 claims description 2
- 235000015110 jellies Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 claims description 2
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 claims description 2
- 239000002674 ointment Substances 0.000 claims description 2
- 239000002453 shampoo Substances 0.000 claims description 2
- 230000001256 tonic effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 2
- 239000007844 bleaching agent Substances 0.000 abstract description 6
- 206010047642 Vitiligo Diseases 0.000 description 33
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 28
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 23
- 108091006146 Channels Proteins 0.000 description 22
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 17
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 description 16
- 210000002752 melanocyte Anatomy 0.000 description 15
- 208000012641 Pigmentation disease Diseases 0.000 description 12
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 12
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 12
- 206010015150 Erythema Diseases 0.000 description 11
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 11
- 231100000321 erythema Toxicity 0.000 description 11
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 10
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 230000002438 mitochondrial effect Effects 0.000 description 9
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 8
- 239000000047 product Substances 0.000 description 8
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 7
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 7
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 7
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 7
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- GWEVSGVZZGPLCZ-UHFFFAOYSA-N Titan oxide Chemical compound O=[Ti]=O GWEVSGVZZGPLCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 6
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 6
- 210000001700 mitochondrial membrane Anatomy 0.000 description 6
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 6
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N Acrylic acid Chemical group OC(=O)C=C NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 102000019197 Superoxide Dismutase Human genes 0.000 description 5
- 108010012715 Superoxide dismutase Proteins 0.000 description 5
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 description 5
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 5
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 description 5
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 description 5
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 description 5
- 210000004694 pigment cell Anatomy 0.000 description 5
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 5
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 4
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 4
- 102100028054 Mitochondrial potassium channel Human genes 0.000 description 4
- 101710154679 Mitochondrial potassium channel Proteins 0.000 description 4
- REFJWTPEDVJJIY-UHFFFAOYSA-N Quercetin Chemical compound C=1C(O)=CC(O)=C(C(C=2O)=O)C=1OC=2C1=CC=C(O)C(O)=C1 REFJWTPEDVJJIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 4
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 4
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 4
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 4
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 4
- 229940008099 dimethicone Drugs 0.000 description 4
- 239000004205 dimethyl polysiloxane Substances 0.000 description 4
- 235000013870 dimethyl polysiloxane Nutrition 0.000 description 4
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 4
- 239000003974 emollient agent Substances 0.000 description 4
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 4
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 4
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 4
- 210000002510 keratinocyte Anatomy 0.000 description 4
- 230000003061 melanogenesis Effects 0.000 description 4
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 4
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 4
- 229920000435 poly(dimethylsiloxane) Polymers 0.000 description 4
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 4
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 4
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 4
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 4
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WSMYVTOQOOLQHP-UHFFFAOYSA-N Malondialdehyde Chemical compound O=CCC=O WSMYVTOQOOLQHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 3
- 239000004904 UV filter Substances 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 3
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 3
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- -1 fatty acid polyol esters Chemical class 0.000 description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 3
- 210000003780 hair follicle Anatomy 0.000 description 3
- 239000003906 humectant Substances 0.000 description 3
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 3
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 3
- 229940118019 malondialdehyde Drugs 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 3
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 3
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 3
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 3
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 3
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 230000008719 thickening Effects 0.000 description 3
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 3
- 239000004408 titanium dioxide Substances 0.000 description 3
- PUPZLCDOIYMWBV-UHFFFAOYSA-N (+/-)-1,3-Butanediol Chemical compound CC(O)CCO PUPZLCDOIYMWBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 1-monostearoylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)CO VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SMZOUWXMTYCWNB-UHFFFAOYSA-N 2-(2-methoxy-5-methylphenyl)ethanamine Chemical compound COC1=CC=C(C)C=C1CCN SMZOUWXMTYCWNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OSCJHTSDLYVCQC-UHFFFAOYSA-N 2-ethylhexyl 4-[[4-[4-(tert-butylcarbamoyl)anilino]-6-[4-(2-ethylhexoxycarbonyl)anilino]-1,3,5-triazin-2-yl]amino]benzoate Chemical group C1=CC(C(=O)OCC(CC)CCCC)=CC=C1NC1=NC(NC=2C=CC(=CC=2)C(=O)NC(C)(C)C)=NC(NC=2C=CC(=CC=2)C(=O)OCC(CC)CCCC)=N1 OSCJHTSDLYVCQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N Calcium cation Chemical compound [Ca+2] BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100035882 Catalase Human genes 0.000 description 2
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 2
- 241001672694 Citrus reticulata Species 0.000 description 2
- 240000000560 Citrus x paradisi Species 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 2
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 2
- 102000004257 Potassium Channel Human genes 0.000 description 2
- ZVOLCUVKHLEPEV-UHFFFAOYSA-N Quercetagetin Natural products C1=C(O)C(O)=CC=C1C1=C(O)C(=O)C2=C(O)C(O)=C(O)C=C2O1 ZVOLCUVKHLEPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HWTZYBCRDDUBJY-UHFFFAOYSA-N Rhynchosin Natural products C1=C(O)C(O)=CC=C1C1=C(O)C(=O)C2=CC(O)=C(O)C=C2O1 HWTZYBCRDDUBJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 description 2
- 239000006180 TBST buffer Substances 0.000 description 2
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 2
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 2
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 description 2
- 229960001631 carbomer Drugs 0.000 description 2
- 229920003086 cellulose ether Polymers 0.000 description 2
- 235000020971 citrus fruits Nutrition 0.000 description 2
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 2
- 230000001076 estrogenic effect Effects 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 2
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 2
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 2
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 2
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 2
- 229930003949 flavanone Natural products 0.000 description 2
- 235000011981 flavanones Nutrition 0.000 description 2
- 230000006870 function Effects 0.000 description 2
- 239000003349 gelling agent Substances 0.000 description 2
- BXWNKGSJHAJOGX-UHFFFAOYSA-N hexadecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCO BXWNKGSJHAJOGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 229940100601 interleukin-6 Drugs 0.000 description 2
- 239000000644 isotonic solution Substances 0.000 description 2
- MWDZOUNAPSSOEL-UHFFFAOYSA-N kaempferol Natural products OC1=C(C(=O)c2cc(O)cc(O)c2O1)c3ccc(O)cc3 MWDZOUNAPSSOEL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 2
- FMJSMJQBSVNSBF-UHFFFAOYSA-N octocrylene Chemical group C=1C=CC=CC=1C(=C(C#N)C(=O)OCC(CC)CCCC)C1=CC=CC=C1 FMJSMJQBSVNSBF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000601 octocrylene Drugs 0.000 description 2
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 2
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 2
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 2
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 description 2
- 108020001213 potassium channel Proteins 0.000 description 2
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 2
- 229960001285 quercetin Drugs 0.000 description 2
- 235000005875 quercetin Nutrition 0.000 description 2
- 239000003642 reactive oxygen metabolite Substances 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 229920002545 silicone oil Polymers 0.000 description 2
- 210000004927 skin cell Anatomy 0.000 description 2
- DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M sodium pyruvate Chemical compound [Na+].CC(=O)C([O-])=O DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 2
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 2
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 2
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 2
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 2
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 2
- FTVWIRXFELQLPI-CYBMUJFWSA-N (+)-Naringenin Natural products C1=CC(O)=CC=C1[C@@H]1OC2=CC(O)=CC(O)=C2C(=O)C1 FTVWIRXFELQLPI-CYBMUJFWSA-N 0.000 description 1
- 239000001100 (2S)-5,7-dihydroxy-2-(3-hydroxy-4-methoxyphenyl)chroman-4-one Substances 0.000 description 1
- ALSTYHKOOCGGFT-KTKRTIGZSA-N (9Z)-octadecen-1-ol Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCCO ALSTYHKOOCGGFT-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 1
- 229940015975 1,2-hexanediol Drugs 0.000 description 1
- IYAZLDLPUNDVAG-UHFFFAOYSA-N 2-(benzotriazol-2-yl)-4-(2,4,4-trimethylpentan-2-yl)phenol Chemical compound CC(C)(C)CC(C)(C)C1=CC=C(O)C(N2N=C3C=CC=CC3=N2)=C1 IYAZLDLPUNDVAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QCDWFXQBSFUVSP-UHFFFAOYSA-N 2-phenoxyethanol Chemical compound OCCOC1=CC=CC=C1 QCDWFXQBSFUVSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TXFPEBPIARQUIG-UHFFFAOYSA-N 4'-hydroxyacetophenone Chemical compound CC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 TXFPEBPIARQUIG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- TWCMVXMQHSVIOJ-UHFFFAOYSA-N Aglycone of yadanzioside D Natural products COC(=O)C12OCC34C(CC5C(=CC(O)C(O)C5(C)C3C(O)C1O)C)OC(=O)C(OC(=O)C)C24 TWCMVXMQHSVIOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010001557 Albinism Diseases 0.000 description 1
- 101150102415 Apob gene Proteins 0.000 description 1
- 102000014654 Aromatase Human genes 0.000 description 1
- 108010078554 Aromatase Proteins 0.000 description 1
- PLMKQQMDOMTZGG-UHFFFAOYSA-N Astrantiagenin E-methylester Natural products CC12CCC(O)C(C)(CO)C1CCC1(C)C2CC=C2C3CC(C)(C)CCC3(C(=O)OC)CCC21C PLMKQQMDOMTZGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000008025 CLOCK Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010075228 CLOCK Proteins Proteins 0.000 description 1
- 101150071146 COX2 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100114534 Caenorhabditis elegans ctc-2 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100029968 Calreticulin Human genes 0.000 description 1
- 108090000549 Calreticulin Proteins 0.000 description 1
- 102100025064 Cellular tumor antigen p53 Human genes 0.000 description 1
- DQFBYFPFKXHELB-UHFFFAOYSA-N Chalcone Natural products C=1C=CC=CC=1C(=O)C=CC1=CC=CC=C1 DQFBYFPFKXHELB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000034573 Channels Human genes 0.000 description 1
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 1
- 241000207199 Citrus Species 0.000 description 1
- 235000005976 Citrus sinensis Nutrition 0.000 description 1
- 240000002319 Citrus sinensis Species 0.000 description 1
- 235000000882 Citrus x paradisi Nutrition 0.000 description 1
- 101000573882 Coccidioides posadasii (strain C735) Neutral protease 2 homolog MEP3 Proteins 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 206010010356 Congenital anomaly Diseases 0.000 description 1
- 108010037462 Cyclooxygenase 2 Proteins 0.000 description 1
- 101710088194 Dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 206010013786 Dry skin Diseases 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 208000001382 Experimental Melanoma Diseases 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 101710088172 HTH-type transcriptional regulator RipA Proteins 0.000 description 1
- 101000990915 Homo sapiens Stromelysin-1 Proteins 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004310 Ion Channels Human genes 0.000 description 1
- 108090000862 Ion Channels Proteins 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 235000007688 Lycopersicon esculentum Nutrition 0.000 description 1
- 102000043136 MAP kinase family Human genes 0.000 description 1
- 108091054455 MAP kinase family Proteins 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 101150000187 PTGS2 gene Proteins 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 208000031845 Pernicious anaemia Diseases 0.000 description 1
- 102000004160 Phosphoric Monoester Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090000608 Phosphoric Monoester Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- 102100038280 Prostaglandin G/H synthase 2 Human genes 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- ZONYXWQDUYMKFB-UHFFFAOYSA-N SJ000286395 Natural products O1C2=CC=CC=C2C(=O)CC1C1=CC=CC=C1 ZONYXWQDUYMKFB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010039710 Scleroderma Diseases 0.000 description 1
- 240000003768 Solanum lycopersicum Species 0.000 description 1
- 102100030416 Stromelysin-1 Human genes 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M Superoxide Chemical compound [O-][O] OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 101710119418 Superoxide dismutase [Mn] Proteins 0.000 description 1
- 101710202572 Superoxide dismutase [Mn], mitochondrial Proteins 0.000 description 1
- 102100032891 Superoxide dismutase [Mn], mitochondrial Human genes 0.000 description 1
- GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N Thermopsosid Natural products O(C)c1c(O)ccc(C=2Oc3c(c(O)cc(O[C@H]4[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O4)c3)C(=O)C=2)c1 GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N 0.000 description 1
- 208000024799 Thyroid disease Diseases 0.000 description 1
- 102000003425 Tyrosinase Human genes 0.000 description 1
- 108060008724 Tyrosinase Proteins 0.000 description 1
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 1
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011360 adjunctive therapy Methods 0.000 description 1
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 description 1
- 208000004631 alopecia areata Diseases 0.000 description 1
- CEGOLXSVJUTHNZ-UHFFFAOYSA-K aluminium tristearate Chemical compound [Al+3].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O CEGOLXSVJUTHNZ-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940063655 aluminum stearate Drugs 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000002225 anti-radical effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 230000000767 anti-ulcer Effects 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 235000013871 bee wax Nutrition 0.000 description 1
- 239000012166 beeswax Substances 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000002715 bioenergetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- FQUNFJULCYSSOP-UHFFFAOYSA-N bisoctrizole Chemical compound N1=C2C=CC=CC2=NN1C1=CC(C(C)(C)CC(C)(C)C)=CC(CC=2C(=C(C=C(C=2)C(C)(C)CC(C)(C)C)N2N=C3C=CC=CC3=N2)O)=C1O FQUNFJULCYSSOP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019658 bitter taste Nutrition 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 239000005388 borosilicate glass Substances 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- 235000014121 butter Nutrition 0.000 description 1
- 229940046731 calcineurin inhibitors Drugs 0.000 description 1
- 230000003913 calcium metabolism Effects 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 229940096529 carboxypolymethylene Drugs 0.000 description 1
- 150000003943 catecholamines Chemical class 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000005754 cellular signaling Effects 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 229940082500 cetostearyl alcohol Drugs 0.000 description 1
- 229960000541 cetyl alcohol Drugs 0.000 description 1
- 150000001789 chalcones Chemical class 0.000 description 1
- 235000005513 chalcones Nutrition 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol group Chemical group [C@@H]1(CC[C@H]2[C@@H]3CC=C4C[C@@H](O)CC[C@]4(C)[C@H]3CC[C@]12C)[C@H](C)CCCC(C)C HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 1
- 230000003280 chronobiological effect Effects 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 1
- 229960001334 corticosteroids Drugs 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 230000003205 diastolic effect Effects 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000000378 dietary effect Effects 0.000 description 1
- 238000001085 differential centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 230000037336 dry skin Effects 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 description 1
- 230000037149 energy metabolism Effects 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 102000015694 estrogen receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010038795 estrogen receptors Proteins 0.000 description 1
- DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N ethyl mercaptane Natural products CCS DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004090 etiopathogenesis Effects 0.000 description 1
- 150000002207 flavanone derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 150000002208 flavanones Chemical class 0.000 description 1
- 229930003944 flavone Natural products 0.000 description 1
- 150000002212 flavone derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 235000011949 flavones Nutrition 0.000 description 1
- 230000004907 flux Effects 0.000 description 1
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 230000030279 gene silencing Effects 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 229940075507 glyceryl monostearate Drugs 0.000 description 1
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 1
- AIONOLUJZLIMTK-AWEZNQCLSA-N hesperetin Chemical compound C1=C(O)C(OC)=CC=C1[C@H]1OC2=CC(O)=CC(O)=C2C(=O)C1 AIONOLUJZLIMTK-AWEZNQCLSA-N 0.000 description 1
- AIONOLUJZLIMTK-UHFFFAOYSA-N hesperetin Natural products C1=C(O)C(OC)=CC=C1C1OC2=CC(O)=CC(O)=C2C(=O)C1 AIONOLUJZLIMTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000010209 hesperetin Nutrition 0.000 description 1
- 229960001587 hesperetin Drugs 0.000 description 1
- FHKSXSQHXQEMOK-UHFFFAOYSA-N hexane-1,2-diol Chemical compound CCCCC(O)CO FHKSXSQHXQEMOK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PFOARMALXZGCHY-UHFFFAOYSA-N homoegonol Natural products C1=C(OC)C(OC)=CC=C1C1=CC2=CC(CCCO)=CC(OC)=C2O1 PFOARMALXZGCHY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FTODBIPDTXRIGS-UHFFFAOYSA-N homoeriodictyol Natural products C1=C(O)C(OC)=CC(C2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C(=O)C2)=C1 FTODBIPDTXRIGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 239000000819 hypertonic solution Substances 0.000 description 1
- 229940021223 hypertonic solution Drugs 0.000 description 1
- 239000000815 hypotonic solution Substances 0.000 description 1
- 230000008088 immune pathway Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 238000003331 infrared imaging Methods 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 229910001867 inorganic solvent Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003049 inorganic solvent Substances 0.000 description 1
- 230000010039 intracellular degradation Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000019948 ion homeostasis Effects 0.000 description 1
- 230000029411 keratinocyte apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 235000019388 lanolin Nutrition 0.000 description 1
- 238000002647 laser therapy Methods 0.000 description 1
- 230000037356 lipid metabolism Effects 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 description 1
- 239000012160 loading buffer Substances 0.000 description 1
- 206010025135 lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 1
- 230000000873 masking effect Effects 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000008099 melanin synthesis Effects 0.000 description 1
- 235000010270 methyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004292 methyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 229960002216 methylparaben Drugs 0.000 description 1
- 230000003228 microsomal effect Effects 0.000 description 1
- 108010007855 mitochondrial K(ATP) channel Proteins 0.000 description 1
- 230000007631 mitochondrial deficit Effects 0.000 description 1
- 230000004065 mitochondrial dysfunction Effects 0.000 description 1
- 230000004898 mitochondrial function Effects 0.000 description 1
- 239000001788 mono and diglycerides of fatty acids Substances 0.000 description 1
- FTVWIRXFELQLPI-UHFFFAOYSA-N naringenin Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1OC2=CC(O)=CC(O)=C2C(=O)C1 FTVWIRXFELQLPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000007764 o/w emulsion Substances 0.000 description 1
- GLDOVTGHNKAZLK-UHFFFAOYSA-N octadecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCO GLDOVTGHNKAZLK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940055577 oleyl alcohol Drugs 0.000 description 1
- XMLQWXUVTXCDDL-UHFFFAOYSA-N oleyl alcohol Natural products CCCCCCC=CCCCCCCCCCCO XMLQWXUVTXCDDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BARWIPMJPCRCTP-CLFAGFIQSA-N oleyl oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCCOC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC BARWIPMJPCRCTP-CLFAGFIQSA-N 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940056211 paraffin Drugs 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 238000012402 patch clamp technique Methods 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 229960005323 phenoxyethanol Drugs 0.000 description 1
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 description 1
- 230000003711 photoprotective effect Effects 0.000 description 1
- 238000001126 phototherapy Methods 0.000 description 1
- 230000019612 pigmentation Effects 0.000 description 1
- 239000000419 plant extract Substances 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 229920001495 poly(sodium acrylate) polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 229940068917 polyethylene glycols Drugs 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000004224 protection Effects 0.000 description 1
- 239000003223 protective agent Substances 0.000 description 1
- 238000010814 radioimmunoprecipitation assay Methods 0.000 description 1
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 230000009758 senescence Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 238000007390 skin biopsy Methods 0.000 description 1
- 230000037380 skin damage Effects 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- NNMHYFLPFNGQFZ-UHFFFAOYSA-M sodium polyacrylate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)C=C NNMHYFLPFNGQFZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229940054269 sodium pyruvate Drugs 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 230000000475 sunscreen effect Effects 0.000 description 1
- 239000000516 sunscreening agent Substances 0.000 description 1
- 230000009469 supplementation Effects 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- OULAJFUGPPVRBK-UHFFFAOYSA-N tetratriacontyl alcohol Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCO OULAJFUGPPVRBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000021510 thyroid gland disease Diseases 0.000 description 1
- 239000006208 topical dosage form Substances 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000005945 translocation Effects 0.000 description 1
- PHYFQTYBJUILEZ-IUPFWZBJSA-N triolein Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC)COC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC PHYFQTYBJUILEZ-IUPFWZBJSA-N 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 231100000397 ulcer Toxicity 0.000 description 1
- 229940099259 vaseline Drugs 0.000 description 1
- 125000000391 vinyl group Chemical group [H]C([*])=C([H])[H] 0.000 description 1
- 229920002554 vinyl polymer Polymers 0.000 description 1
- VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N vitamin p Natural products O1C2=CC=CC=C2C(=O)C=C1C1=CC=CC=C1 VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007762 w/o emulsion Substances 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Zgłoszenie dotyczy zastosowania naryngeniny w skutecznej ilości do spowalniania, przeciwdziałania i zapobiegania procesowi powstawania plam bielaczych skóry. Zgłoszenie dotyczy także preparatu zawierającego jako substancję czynną naryngeninę w skutecznej ilości oraz kosmetycznie dopuszczalne zaróbki, nośniki i substancje dodatkowe, do stosowania do spowalniania, przeciwdziałania i zapobiegania procesowi powstawania plam bielaczych skóry a także dotyczy sposobu spowalniania, przeciwdziałania i zapobiegania procesowi powstawania plam bielaczych skóry.
Description
Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest zastosowanie naryngeniny i preparatu zawierającego naryngeninę oraz sposób spowalniania, przeciwdziałania i zapobiegania procesowi powstawania plam bielaczych skóry.
Bielactwo jest przewlekłą chorobą polegającą na zniszczeniu, bądź uszkodzeniu naskórkowych komórek barwnikowych - melanocytów, w skórze i mieszkach włosowych. Znane są dwa główne typy schorzenia: bielactwo nabyte (vitiligo) i wrodzone (albinizm). Ocenia się, że na bielactwo zapada 1-4% populacji. Objawem choroby jest pojawienie się plam bielaczych rozmieszczonych w obrębie skóry kończyn, tułowia i twarzy. Dokładne przyczyny powstawania bielactwa nie są do końca poznane. Istnieje kilka teorii dotyczących etiologii bielactwa. Przypuszcza się, że może być ono efektem zespołu czynników genetycznych, środowiskowych i reakcji autoimmunologicznych.
Teoria autoimmunologiczna jest najpowszechniejszą i najlepiej udokumentowaną (ok. 30% wszystkich przypadków) tezą dotyczącą etiopatogenezy bielactwa. Teoria ta zakłada, że do uszkodzenia melanocytów dochodzi na drodze immunologicznej, za czym przemawia częste współistnienie bielactwa z innymi chorobami autoimmunologicznymi np. chorobami tarczycy, niedokrwistością złośliwą, toczniem rumieniowatym, twardziną, cukrzycą, czy łysieniem plackowatym.
Wiele badań naukowych, wskazuje, że jednym z mechanizmów patogenezy bielactwa na poziomie komórkowym jest zaburzona równowaga stanu redoks komórek i tkanek. Niemniej jednak pomimo wielu prac na temat roli stresu oksydacyjnego, brakuje informacji na temat zależnego od stresu oksydacyjnego zaniku lub uszkodzenia melanocytów w warstwie naskórka (Zhang Y, Liu L, Jin L, Yi X, Dang E, Yang Y, Li C, Gao T. Oxidative stress-induced calreticulin expression and translocation: new insights into the destruction of melanocytes. J. Invest Dermatol. 2014 Jan; 134 (1): 183-91; Bellei B, Pitisci A, Ottaviani M, Ludovici M, Cota C, Luzi F, Dell'Anna ML, Picardo M. Vitiligo: a possible model of degenerative diseases. PLoS One. 2013; 8 (3): e59782).
Istnieją badania, które dowodzą, że melanocyty izolowane od osób chorych na bielactwo nabyte wykazują zmiany w przekazywaniu sygnałów komórkowych, charakterystyczne dla niektórych chorób neurodegradacyjnych: zaburzenia w metabolizmie lipidów, nadaktywację kinaz MAP, czy zależną od białka p53 kaskadę sygnałową, mogącą prowadzić do programowanej śmierci komórki. Dodatkowo melanocyty pobrane od pacjentów produkują wiele białek pre-apoptotycznych (senescence-associated secretory phenotype SAPS), takich jak interleukina-6 (IL-6), metaloproteinaza-3 (MMP3), cyklooksygenaza-2 (Cox-2) czy TNFa (tumor necrosis factor) (Bellei B, Pitisci A, Ottaviani M, Ludovici M, Cota C, Luzi F, Dell'Anna ML, Picardo M. Vitiligo: a possible model of degenerative diseases. PLoS One. 2013; 8 (3): e59782).
Innym czynnikiem mającym wpływ na dysfunkcje melanocytów są zaburzenia w obrębie komórek naskórka, które wpływają negatywnie na funkcjonowanie komórek barwnikowych (Moretti S, Fabbri P, Baroni G, Berti S, Bani D, Berti E, Nassini R, Lotti T, Massi D. Keratinocyte dysfunction in vitiligo epidermis: cytokine microenvironment and correlation to keratinocyte apoptosis. Histol. Histopathol. 2009 Jul; 24 (7): 849-57; Moretti S, Spallanzani A, Amato L, Hautmann G, Gallerani I, Fabiani M, Fabbri P. New insights into the pathogenesis of vitiligo: imbalance of epidermal cytokines at sites of lesions. Pigment Cell. Res. 2002 Apr; 15 (2): 87-92; Moretti S, Spallanzani A, Amato L, Hautmann G, Gallerani I, Fabbri P. Vitiligo and Epidermal Microenvironment: Possible Involvement of Keratinocyte-Derived Cytokines. Arch. Dermatol. 2002; 138 (2): 273-274).
W przyczynach degradacji melanocytów i rozwoju bielactwa nabytego upatruje się zaburzenia w funkcjonowaniu mitochondriów. Zaburzoną równowagę w ilości antyoksydantów (np. katalazy czy dysmutazy ponadtlenkowej) związaną z nadmierną produkcją reaktywnych form tlenu, zaburzenia w potencjale transbłonowym oraz wzrost ilości komórek apoptycznych zaobserwowano u pacjentów z bielactwem. Sugeruje się, że mitochondria mogą być celem dla ROS, cytokin, katecholaminy, zaburzeń w metabolizmie Ca2+, które to czynniki są zdolne do zaindukowania degradacji melanocytów (Dell'Anna MLI, Maresca V, Briganti S, Camera E, Falchi M, Picardo M. Mitochondrial impairment in peripheral blood mononuclear cells during the active phase of vitiligo. J Invest Dermatol. 2001 Oct; 117 (4): 908-13).
Istnieje wiele metod leczenia lub łagodzenia objawów bielactwa, jednak żadna nie daje pełnej gwarancji powodzenia. Wybór najefektywniejszej terapii zależy od wielu czynników, w tym od wieku pacjenta, typu klinicznego bielactwa, rozległości zmian i dynamiki procesu chorobowego. W leczeniu
PL 229 597 B1 miejscowym stosuje się: kortykosteroidy, inhibitory kalcyneuryny, filtry słoneczne, maskowanie, tj. kosmetyki do makijażu korygującego. Stosuje się także fototerapię, bądź laseroterapię. W leczeniu ogólnym stosowana bywa, jako terapia wspomagająca, suplementacja antyoksydantami.
Jakkolwiek znanych jest kilka środków przeznaczonych do profilaktyki, leczenia i łagodzenia objawów bielactwa, to nadal istniała potrzeba opracowania skutecznych środków mogących poprawiać kondycję skóry pacjentów.
Naryngenina (5,7,4'-trihydroksyflawanon) jest aglikonem - pochodną uwodornionego flawonu, nie zawierającego podwójnego wiązania między atomami węgli C-2 i C-3 (flawanon). W przyrodzie bogatym źródłem flawanonów są owoce cytrusowe, przede wszystkim pomarańcze (Citrus sinensis) i mandarynki (Citrusreticulata). Naryngenina, nadająca gorzki smak owocom, jest obecna w grejpfrutach (Citrus paradisi) w 70%. Niewielkie jej stężenia wykryto także w pomidorach i ich przetworach.
Do kierunków aktywności farmakologicznej naryngeniny i jej pochodnych należą: działanie estrogenne (Le Bail J. C. i in.: Chalcones are potent inhibitors of aromatase and 17b-hydroxysteroid dehydrogenase activities. Life Sci. 2001,68, 751; Miksicek R. J.: Commonly occuring plant flavonoids have estrogenic activity. Mol. Pharmacol. 1993, 44, 37), obniżające poziom cholesterolu (Borradaile N. M. i in.: Inhibition of hepatocyte apoB secretion by naringenin: Enhanced rapid intracellular degradation independent of reduced microsomal cholesteryl esters. J. Lipid Res. 2002, 43, 1544), przeciwzapalne (Erlund I.: Review of the flavonoids quercetin, hesperetin, and naringenin. Dietary sources, bioactivities, bioavailability and epidemiology. Nutr. Res. 2004, 24, 851), przeciwwrzodowe (Martin M. J., Motilva V., De la Lastra A.: Quercetin and naringenin: effects on ulcer formation and gastric secretion in rats. Phytother. Res. 1993, 7, 150), rozkurczowe (18, 19), ochronne na skórę (Bonina F. i in.: Flavonoids as potential protective agents against photo-oxidative skin damage. Int. J. Pharm. 1996, 145, 87; Saija A. i in.: Influence of different penetration enhancers on in vitro skin permeation and in vivo photoprotective effect of flavonoids. Int. J. Pharm. 1998, 175, 85) i przeciwnowotoworowe (Totta P. i in.: Mechanisms of naringenin-induced apoptotic cascade in cancer cells: Involvement of estrogen receptor a and b signailing. IUBMB Life 2004, 56, 491).
Bonina i in. udowodnili w warunkach in vitro ochronne działanie na skórę naryngeniny przed promieniowaniem UV. Mechanizm procesu obejmuje hamowanie utleniania fosfatydylocholiny w błonach liposomów i zmniejszenie produkcji dialdehydu malonowego (MDA). Naryngenina obniżała ilość MDA w zależności od zastosowanego stężenia. Naryngenina wykazuje słabsze działanie antyrodnikowe, lecz ze względu na lepszą absorpcję i właściwość penetracji do głębszych warstw skóry stanowi bardziej korzystny składnik preparatów ochronnych.
Istnieje doniesienie mówiące o tym, że naryngenina wspomaga proces melanogenezy w modelu doświadczalnym tego procesu w komórkach nowotworowych mysich B16 poprzez stymulację aktywności enzymu tyrozynazy, głównego enzymu w szlaku powstawania pigmentu (Ohguchi i. in. Stimulation of Melanogenesis by the Citrus Flavonoid Naringenin in Mouse B16 Melanoma Cells. Biosci. Biotechnol. Biochem., 70 (6), 1499-1501,2006).
Jednak nie jest oczywiste, że to działanie może mieć miejsce w przypadku bielactwa, gdyż komórki barwnikowe są albo dysfunkcyjne, albo ich nie ma w tkance.
Istniała zatem potrzeba opracowania skutecznych środków mogących poprawiać kondycję skóry pacjentów cierpiących na bielactwo.
Nieoczekiwanie stwierdzono, że naryngenina znacząco poprawia wygląd i kondycję skóry osób cierpiących na bielactwo.
Wynalazek dotyczy zastosowania naryngeniny w skutecznej ilości do spowalniania, przeciwdziałania i zapobiegania procesowi powstawania plam bielaczych skóry.
Korzystne jest zastosowanie, w którym stosuje się naryngeninę w ilości od 0,0001% do 1%, korzystnie od 0,001% do 0,01%, najkorzystniej od 0,01% do 0,1%.
Wynalazek dotyczy także preparatu zawierającego jako substancję czynną naryngeninę w skutecznej ilości oraz kosmetycznie dopuszczalne zarobki, nośniki i substancje dodatkowe, do stosowania do spowalniania, przeciwdziałania i zapobiegania procesowi powstawania plam bielaczych skóry.
Korzystne jest stosowanie preparatu, który zawiera naryngeninę w ilości od 0,0001% do 1% wagowych, korzystnie od 0,001% do 0,01% wagowych, najkorzystniej od 0,01% do 0,1% wagowych w przeliczeniu na całość preparatu.
Korzystne jest stosowanie preparatu w postaci kremu, balsamu, lotionu, aerozolu, żelu, fluidu, korektora, emulsji O/W i W/O, toniku, żeli myjących, szamponów, pianek, a także mleczek, galaretek, past, maści, plastrów i systemów transdermalnych.
PL 229 597 Β1
Wynalazek dotyczy również sposobu spowalniania, przeciwdziałania i zapobiegania procesowi powstawania plam bielaczych skóry polegającego na tym, że skórę traktuje się skuteczną ilością naryngeniny zdefiniowanej powyżej i/lub preparatu zdefiniowanego powyżej.
Kompozycja zawierająca naryngeninę znajduje zastosowanie w pielęgnacji skóry z bielactwem, w przypadku której pod wpływem różnych czynników stresogennych zewnątrz- bądź wewnątrzkomórkowych, dochodzi do dysfunkcji komórek barwnikowych - melanocytów, co w konsekwencji prowadzi do zahamowania produkcji barwnika i powstania plam bielaczych.
Kompozycję naryngeniny można podawać w połączeniu z kosmetycznie dopuszczalnymi nośnikami lub rozcieńczalnikami w wielu różnych postaciach dawkowanych dostosowania miejscowo. Można je łączyć z wieloma różnymi kosmetycznie dopuszczalnymi, chemicznie obojętnymi nośnikami, w postać kremu, balsamu, lotionu, żelu, emulsji O/W i W/O, żeli myjących, itp., zgodnie ze standardową praktyką kosmetyczną.
Kremy i żele można np. formułować z wodnym lub oleistym podłożem, z dodatkiem odpowiednich środków zagęszczających i/lub żelujących i/lub rozpuszczalników. Takie podłoża mogą zawierać np. wodę i/lub olej, taki jak ciekła parafina lub dowolny olej roślinny, albo rozpuszczalnik, taki jak glikol polietylenowy. Do środków zagęszczających i środków żelujących, które można stosować w zależności od charakteru podłoża, należą miękka parafina, stearynian glinu, alkohol cetostearylowy, glikole polietylenowe, tłuszcz z wełny, wosk pszczeli, karboksypolimetylen i pochodne celulozy i/lub monostearynian glicerylu i/lub niejonowe środki emulgujące.
Emulsje W/O i O/W zawierają fazę wodną, fazę tłuszczową i środek powierzchniowo czynny lub mieszaninę środków powierzchniowo czynnych (emulgatorów), które umożliwiają powstanie emulsji. Stosunek ilościowy zależy od wymaganej konsystencji, od właściwości składników fazy tłuszczowej i właściwości emulgatora. Można je formułować poprzez połączenie fazy wodnej z fazą olejową z odpowiednimi emulgatorami. Faza wodna może zawierać ekstrakty roślinne wodne lub/i alkoholowe, faza olejowa - oleje roślinne naturalne (oleinowy, linolowy, linolenowy), parafinowe (wazelinowe, białe, mineralne, płynne parafiny), masła, oleje syntetyczne.
Lotiony można formułować z użyciem wodnego lub olejowego podłoża, np. etanolu lub alkoholu oleilowego.
W razie potrzeby środki kosmetyczne do stosowania zgodnie z wynalazkiem można buforować przez dodanie odpowiednich środków buforujących.
Zazwyczaj preparaty zawierają również jeden lub większą liczbę środków emulgujących, stabilizatorów, środków dyspergujących, środków zagęszczających, środków barwiących, substancji zapachowych, środków konserwujących środków nawilżających, itp.
Nośniki odpowiednie do stosowania zgodnie z wynalazkiem obejmują stałe rozcieńczalniki lub wypełniacze, ośrodki wodne i różne nietoksyczne rozpuszczalniki organiczne i nieorganiczne.
Poniżej przedstawiono przykładowe ramowe receptury środków kosmetycznych oraz preparatów do stosowania zgodnie z wynalazkiem.
Receptura ramowa kremu na noc do twarzy i ciała
| Nazwa składnika | Maksymalnie % |
| emolienty (oleje roślinne, mineralne, silikonowe), woski | 20 |
| środki emulgujące | 10 |
| środki wiążące wilgoć (np, gliceryna, glikol propylenowy, glikol butylenowy) | 30 |
| składniki zagęszczające (np. karbomer, eter celulozy, estry poliolo kwasu tłuszczowego, kopolimery kwasu akrylowego i alkilometakrylanu, galactoarabinian, polyacrylamid) | 5 |
| środki konserwujące | 2 |
| naryngenina (składnik czynny) | 1 |
| woda | do 100 |
PL 229 597 Β1
Receptura ramowa kremu na dzień do twarzy i ciała
| Nazwa składnika | Maksymalnie % |
| emolienty (oleje roślinne, mineralne, silikonowe), woski | 10 |
| środki emulgujące | 5 |
| środki wiążące wilgoć (np. gliceryna, glikol propylenowy) | 7 |
| składniki zagęszczające (np. karbomer, eter celulozy, estry poliolo kwasu tłuszczowego, kopolimery kwasu akrylowego i alkilometakrylanu ) | 12 |
| środki konserwujące | 1,6 |
| filtry UV (oktokrylen, 2,2'-metyleno-bis(6(2H-benzotriazol-2-ilo)-4(l,l,3,3-tetrametylo-butylo)fenol (nano), 2,4,6 trianilino-(p-karbo2’etyloheksylo-l'oksy)-l,3,5-triazyna, dwutlenek tytanu, dwutlenek tytanu(nano)) | 25 |
| naryngenina (składnik czynny) | 1 |
| woda | do 100 |
Poniżej przedstawiono przykłady ilustrujące przedmiot wynalazku. W tabelach podano składy preparatów do stosowania zgodnie z wynalazkiem zawierających naryngeninę.
Przykłady
Przykład 1 - Receptura szczegółowa kremu na dzień do twarzy i ciała:
| Nazwa Składnika (INCI) | Funkcja | Ilość [%] |
| Dimetikon/dimetikon winylowy | absorbent | 0,925 |
| krzemionka | wypełniacz | 0,075 |
| cyklopentas iloks an | emolient | 1,63 |
| PEG/PPG-18/18 Dimetikon | środek emulgujący | 0,07 |
| Poliakrylan sodu | środek zapewniający konsystencję | 1,82 |
| Tridecet-6 | środek powierzchniowo czynny | 0,42 |
| gliceryna | środek wiążący wilgoć | 23,4 |
| Naryngenina | składnik czynny | 0,098 |
| Glikol butylenowy | środek wiążący wilgoć | 0,18 |
| Metylparaben, fenoksyetanol | środek konserwujący | 0,46 |
| woda | rozpuszczalnik | do 100 |
Przykład 2 - Receptura szczegółowa kremu na dzień do twarzy i ciała:
| Nazwa Składnika (INCI) | Funkcja | Ilość [%] |
| Hydrogen dimetikonu | środek przeciwzbrylający | 0,072 |
| naryngenina | składnik czynny | 0,098 |
| Lauret-7 | środek powierzchniowo czynny | 0,31 |
| hydroksy aceto fenon | środek konserwujący | 0,5 |
| 1,2-Hexanediol | rozpuszczalnik | 1,5 |
| Dwutlenek tytanu (nano) | filtr UV | 1,512 |
| Cetyl potasowo-fosforowy | środek emulgujący | 2 |
| Alkohol cetylowy | środek zapewniający konsystencję | 2,5 |
| Cetiol CC | emolient | 4 |
| Oktokrylen | filtr UV | 5 |
| woda | rozpuszczalnik | do 100 |
PL 229 597 B1
Produkty zgodne z niniejszym wynalazkiem zawierające naryngeninę działają ochronnie, spowalniając i przeciwdziałając pojawianiu się plam bielaczych.
Nie wiążąc się z żadną teorią wydaje się, że zaburzenia w funkcjonowaniu mitochondriów mogą powodować dysfunkcje i uszkodzenia melanocytów i w konsekwencji prowadzić do zahamowania produkcji barwnika.
Wyniki badań dokumentujących działanie naryngeniny przedstawiono na załączonych figurach, przy czym:
na fig. 1 przedstawiono wpływ naryngeniny na aktywność kanału mitoBKCa obecnego w mitochondriach ludzkich fibroblastów. Rejestracje zmian przepływu prądu jonowego w czasie przez kanał mitoBKCa przy różnych potencjałach w układzie symetrycznego roztworu (150 mM KCl) w warunkach kontrolnych (200 pM Ca2+), po obniżeniu poziomu wapnia (1 pM Ca2+) oraz po dodaniu naryngeniny (10 pM). Sygnał filtrowano z częstotliwością 1 kHz;
na fig 2 przedstawiono wyniki analizy prądowo-napięciowej wykonanej na podstawie rejestracji zmian przepływu jonów przez kanał mitoBKca w warunkach kontrolnych (200 pM Ca2+) („”) oraz po podaniu 10 μΜ naryngeniny („▼”);
na fig. 3 przedstawiono wyniki analizy prawdopodobieństwa otwarć kanału mitoBKCa przy różnych potencjałach w układzie symetrycznego roztworu (150 mM KCl) w warunkach kontrolnych (200 μM Ca2+) („”), po obniżeniu poziomu wapnia (1 μM Ca2+) („▼”) oraz po dodaniu naryngeniny (10 μΜ) („▼”);
na fig 4 przedstawiono wpływ naryngeniny na aktywność kanału mitoKATP obecnego w wewnętrznej błonie mitochondrialnej ludzkich fibroblastów. Rejestracje zmian przepływu prądu jonowego w czasie przez kanał przy potencjale -60 mV w symetrycznym układzie stężeń (150 mM KCl) w warunkach kontrolnych oraz po dodaniu 30 μM naryngeniny. Sygnał filtrowano z częstotliwością 1 kHz;
na fig. 5 przedstawiono prawdopodobieństwa otwarć kanału mitoKATPa przy stałym napięciu wynoszącym -60 mV w warunkach kontrolnych oraz po podaniu 30 μM naryngeniny;
na fig. 6 przedstawiono wpływ naryngeniny na poziom mitochondrialnej dysmutazy ponadtlenkowej -SOD2 w komórkach nie naświetlanych i po naświetlaniu UVA. Wykonano 3 niezależne doświadczenia;
na fig 7. przedstawiono przykładowy obraz rozdziału elektroforetycznego SOD2 i aktyny (wewnętrzna kontrola - ilościowe nałożenie prób);
na fig. 8 podano sekwencje starterów, a także wykazano na wykresach, że oba geny Perl i Bmall w obu powtórzeniach doświadczenia mają obniżoną ekspresję po naryngeninie względem kontroli.
Badania biologiczne
Przygotowanie komórek do doświadczeń
W niniejszym badaniu wykorzystano linię komórkową fibroblastów pierwotnych (ATCC, PCS-201012, USA). Model doświadczalny wybrano na podstawie wiedzy, że komórki skóry jak fibroblasty, melanocyty i keratynocyty wpływają na swoje wzajemne funkcjonowanie (Gasque P, Jaffar-Bandjee M. C. The immunology and inflammatory responses of human melanocytes in infectious diseases. J. Infect. 2015 Oct; 71 (4): 413-21). Również mitochondria w różnych typach komórek skóry funkcjonują w ten sam sposób. Wysokocukrowa pożywka hodowlana DMEM (Lonza, Szwajcaria) zawierała dodatkowo: 10% FBS ( . fetal bovine serum, Lonza), 100 j/ml penicyliny i streptomycyny (Lonza), 1 g/l pirogronianu sodu (Lonza) oraz 2 mM/ml L-glutaminy (Lonza). Komórki po 24 h inkubacji z 0,01% naryngeniną (DKSH, Szwajcaria), naświetlano w PBS promieniami UVA 8 J/cm2 (komórki kontrolne bez naświetlania były w tym czasie inkubowane także w PBS), usuwano PBS i inkubowano 15 minut we właściwym medium. Następnie komórki były poddawane testom.
Protokół izolacji mitochondriów z fibroblastów
Zebrane komórki odwirowano w 800 g/10 min, po czym przeprowadzono w zawiesinę w 2 ml roztworu do izolacji mitochondriów (250 mM sacharoza, 5 mM HEPES, pH = 7,2) i homogenizowano używając szklanego homogenizatora. Homogenat następnie odwirowano w 9200 g przez 10 min. Zdekantowano supernatant, a grudkę przeprowadzono w zawiesinę w 1 ml roztworu do izolacji mitochondriów. Zawiesinę wirowano ponownie w 770 g przez 10 min. Supernatant umieszczono w nowej probówce i wirowano w 9200 g przez 10 min. Odwirowane mitochondria przeprowadzono w zawiesinę w buforze 150 mM KCl, 10 mM HEPES, p = 7,2 i wirowano w 9200 g przez 10 min. Po końcowym wirowaniu mitochondria przeprowadzono w zawiesinę w 0,3 ml 150 mM KCl, 10 mM HEPES, p = 7,2 i stosowano w dalszych doświadczeniach.
PL 229 597 B1
Eksperymenty patch-clamp i analiza danych
Mitoplasty (pęcherzyki wewnętrznej błony mitochondrialnej) przygotowano z uprzednio wyizolowanych mitochondriów przez dodanie do mitochondriów roztwory hypotonicznego (5 mM HEPES, 100 mM CaCl2, pH = 7,2) przez 45 sek. w celu rozbicia zewnętrznej błony mitochondrialnej. Następnie, dodano roztwór hypertoniczny (750 mM KCl, 30 mM HEPES, 100 mM CaCl2, p = 7,2), w celu utrzymania środowiska izotonicznego. Do testów patch-clamp używa się pipety ze szkła borosilikonowego połączonego z pullerem Flaming/Brown. Pipetę wypełniono roztworem izotonicznym (150 mM KCl, 10 mM HEPES, 100 mM CaCl2, p = 7,2). Roztwór ten też użyto jako kontrolę do wszystkich prezentowanych wyników. Modulatory kanałów dodano jako rozcieńczenia od roztworu izotonicznego. Roztwór gradientowy składa się z 450 mM KCl, 10 mM HEPES i 100 mM CaCl2, pH = 7,2. Obieg był monitorowany przy użyciu wzmacniacza (Axopatch 200B, Molecular Devices Corporation, Sunnyvale, CA). Badanie aktywności kanałów mitochondrialnych zgodnie z metodą Toczyłowska-Mamińska i in. 2014 (ToczyłowskaMamińska R, Olszewska A, Laskowski M, Bednarczyk P, Skowronek K, Szewczyk A.: Potassium channel in the mitochondria of human keratinocytes. J. Invest. Dermatol. 2014 Mar; 134 (3): 764-72).
Metodyka badawcza
Technika Western Blot
Komórki wysiano na szalki o średnicy 150 mm. W części szalek komórki traktowano przez 24 h naryngeniną (0,01%), pozostałe hodowano w warunkach kontrolnych. Po 24 h medium hodowlane zastąpiono roztworem PBS (37°C). Następnie, szalki podzielono na dwie grupy, z których jedną poddano naświetlaniu promieniami UV A (8 J/cm2). W tym samym czasie komórki na szalkach z grupy kontrolnej inkubowano w roztworze PBS z jonami Ca2+, Mg2+ w temperaturze pokojowej przez czas naświetlania. Następnie, we wszystkich szalkach wymieniono roztwór PBS na medium hodowlane i odstawiano do inkubatora na 15 minut. Po tym czasie komórki poddano trypsynizacji, przepłukano zimnym roztworem PBS, a następnie poddano wirowaniu (250 x g/3 min). Po usunięciu supernatantu, osad komórek przeprowadzono w zawiesinę w buforze lizującym RIPA zawierającym inhibitory proteaz i fosfataz (Sigma Aldrich, St. Louis, MO, USA) w temperaturze 4°C i inkubowano przez 20 min. Następnie, komórki poddano wirowaniu (8600 x g/30 min/ 4°C) i w supernatancie oznaczono stężenie białka metodą Bradford (Bradford MM (1976) Anal. Biochem. 72: 248-54). Do lizatów dodano buforu obciążającego (Tris-HCl (0,5 M), SDS (2,3%), merkaptoetanol (5%) (obj.), glicerol (12,5%) (obj.); pH 6,8).
Do badania poziomu dysmutazy ponadtlenkowej SOD2 w mitochondriach wykorzystano metodę Western Blot. Odpowiednie objętości próbek zawierające określoną ilość białka poddano elektroforezie SDS-PAGE, a następnie przeprowadzono transfer na błonę nitrocelulozową. Błonę tę inkubowano w buforze blokującym (Li-Cor Biosciences, Lincoln, Ne, USA). Następnie, błonę nitrocelulozową poddano inkubacji z przeciwciałami pierwszorzędowymi w w/w roztworze z dodatkiem 0,01% Tween 20, przepłukano trzykrotnie roztworem TBST i inkubowano z przeciwciałami drugorzędowymi sprzężonymi z barwnikiem IRDye. Po ponownym przepłukaniu błony nitrocelulozowej roztworem TBST dokonano wizualizacji sygnału za pomocą Odyssey Infrared Imaging System (Li-Cor Biosciences, Lincoln, NE, USA).
Badanie ekspresji genów hPerl i hBmall
Zbadano również ekspresję dwóch genów, tzw. genów zegara Perl i Bmall i genu referencyjnego EF2 w fibroblastach S38 (linia pierwotna ze skórnej biopsji od osoby w wieku lat 38). Udokumentowano, że wyciszenie ekspresji obu tych genów wpływa na rozpoczęcie produkcji barwnika w mieszkach włosowych i keratynocytach (J. A. Hardman, D. J. Tobin, I. S. Haslam, Y. Al-Nuaimi, B. Grimaldi, Ralf Paus: A novel chronobiological control of pigmentation: Molecular clock proteins regulate melanogenesis and melanocyte functions in human hair follicles and epidermis. ESDR, wrzesień 2014, Kopenhaga).
Fibroblasty wysiewano na 6-studzienkowe płytki, po uzyskaniu kofluencji traktowano komórki 0,001% naryngeniną przez 24 godziny. Po tym czasie komórki zbierano w celu wyizolowania RNA. RNA izolowano przy użyciu Trizol Reagent (Ambion - cat nb: 15596-018) metodą Chomczyskiego (Masuda N., Ohnishi T., Kawamoto S., Monden M., Okubo K., 1999. Analysis of chemical modification of RNA from formalin-fixed samples and optimization of molecular biology applications for such samples. Nucleic Acids Research, 1999. Vol. 27, No. 22, 4436-4443). Do zbadania aktywności genów posłużył model urządzenia do qPCR - CFX96 Touch C1000 Real Time PCR Detection System, Biorad.
Na fig. 8 podano sekwencje starterów. Ponadto, przedstawiono wykresy, z których wynika, że oba geny Perl i Bmall w obu powtórzeniach doświadczenia mają obniżoną ekspresję po naryngeninie względem kontroli (K - komórki w samym medium, K-N - komórki w rozpuszczalniku służącym do rozpuszczania naryngeniny).
PL 229 597 Β1
Badania z udziałem ludzi
Do badania zakwalifikowano 38 osób chorujących na bielactwo w wieku od 10 do 72 lat (średnia wieku 39 lata), 34 kobiety i 4 mężczyzn. Badanie ukończyło 28 osób. Próbki produktu według wynalazku do badań (krem na noc z przykładu 2) dostarczono w opakowaniach z tworzywa sztucznego (typu tuba z kaniulą) opatrzonych etykietami informacyjnymi zawierającymi nazwę i numer wyrobu.
Przed nałożeniem testowanego produktu (badanie wstępne) wyznaczono 3 obszary badawcze, tj. 3 plamy bielacze. Testy prowadzono z wypełnieniem następujących warunków:
• naświetlanie NB-UVB - wykonane u 31 pacjentów;
• badany preparat - wykorzystany w przypadku 38 pacjentów;
• badany preparat + naświetlanie NB-UVB - wykonane u 36 pacjentów.
W dniu badania wstępnego oraz po 84 dniach (wizyta IV kończąca 3-miesięczną sesję stosowania badanego preparatu i naświetlania) dokonano oceny klinicznej stanu skóry pacjentów na obszarze badanym ze szczególnym uwzględnieniem: tolerancji stosowania produktu i stopnia repigmentacji wg. skali VASI (Vitiligo Area Scoring lndex) zamieszczonej w karcie pacjenta, stopnia suchości i elastyczności skóry w 10-punktowej skali analogowej oraz wykonano dokumentację fotograficzną wyznaczonych obszarów.
Procedura naświetlania
Naświetlanie wykonywane było lampą NB-UVB 311 nm (prototyp wykonany w firmie InPhoTech) zgodnie ze schematem:
| Dawka początkowa | Kontynuacja leczenia | Uwagi |
| 70% MED (minimalna dawka rumienia) | Zwiększana o 100 mJ/cm2 (lub o 20-30%) co dwa tygodnie | Zalecana częstość naświetlań 3 razy na tydzień (dopuszczalne: 2-4 razy na tydzień) |
| 200 mJ/cm2 (I-II fototyp) 300 mJ/cm (III-IV fototyp) | (przy pojawieniu się niebolesnego rumienia dawki nie należy zwiększać, bolesny rumień powoduje konieczność przerwania terapii do czasu ustąpienia dolegliwości, ponowne leczenie należy rozpocząć od maks. 50% ostatniej dawki) | w przypadku naświetlań konieczność 3 wizyt w tygodniu, co oznacza do 36 naświetlań w ciągu 3 miesięcy badania. |
Wyniki badań
Badanie aktywacji kanałów mitochondrialnych
Mitochondrialny kanał potasowy o dużym przewodnictwie regulowany przez Ca2+ (kanał mitoBKca).
W badaniach wykorzystywano technikę patch-clamp. Przedstawione poniżej wyniki zostały otrzymane z wykorzystaniem techniki elektrofizjologicznej, pozwalającej na rejestrację prądów jonowych płynących przez pojedyncze białka kanałowe obecne w wewnętrznej błonie mitochondrialnej - metodę patch-clamp w konfiguracji oderwanej łatki. Mitoplasty (pęcherzyki wewnętrznej błony mitochondrialnej) otrzymywane były z wyizolowanych, aktywnych biologicznie, mitochondriów ludzkich fibroblastów. Mitochondria uzyskiwane były na podstawie opracowanego protokołu wykorzystującego wirowania różnicowe. Na schemacie 1 poniżej przedstawiono uproszczoną procedurę postępowania.
komórki ludzkich
Fibroblastów preparatyka szok mitochondriów osmotyczny
O mitoptest
Schemat 1. Uproszczony schemat metodyki stosowanej w badaniach kanałów jonowych obecnych w wewnętrznej błonie mitochondrialnej fibroblastów.
PL 229 597 Β1
W wyniku przeprowadzonych badań określających wpływ naryngeniny (NAR) na aktywność mitochondrialnego kanału potasowego o dużym przewodnictwie regulowanego przez wapń (kanał mitoBKca) stwierdzono, że naryngenina jest aktywatorem kanału mitoBKca w warunkach niskiego stężenia jonów wapnia (fig. 1).
Aktywność kanału mitoBKca po stronie napięć dodatnich wzrasta po podaniu 10 μΜ naryngeniny. Prawdopodobieństwo otwarć kanału mitoBKca w warunkach niskiego stężenia jonów wapnia (1 μΜ Ca2+) wzrasta z poziomu około 10% do około 75% (fig. 3).
Dodatkowo, przewodnictwo kanału zmienia się z wartości 280 pS do 255 pS (fig. 2).
Mitochondrialny kanał potasowy o dużym przewodnictwie regulowany przez ATP (kanał mitoBKatp). W wyniku przeprowadzonych badań określających wpływ naryngeniny na aktywność mitochondrialnego kanału potasowego regulowanego przez ATP (kanał mitoKATp) stwierdzono, że naryngenina jest aktywatorem kanału mitoKATp (fig. 4).
Aktywność kanału mitoKATp wzrasta po podaniu 30 μΜ naryngeniny. Prawdopodobieństwo otwarć kanału wzrasta z poziomu około 25% do około 75% (fig. 5).
Pomiary bioenergetycznych parametrów komórki
Poziom SOD2
Zarówno w warunkach kontrolnych, jak i po naświetlaniu promieniowaniem UVA poziom SOD2 w komórkach taktowanych naryngeniną wzrasta odpowiednio o 99% (± 36%, P < 0,001) i 127% (± 47%, P < 0,01) odpowiednio w odniesieniu do komórek kontrolnych (fig. 6 i fig. 7).
Badania z udziałem ludzi
Ocena kliniczna stanu skóry pacjenta
Klinicznej oceny stanu skóry pacjenta dokonano w dniu rozpoczęcia badania (DO) dla 38 pacjentów i w dniu 84 badania (D84) dla 28 pacjentów. Poniżej przedstawiono wyniki badania:
| Kliniczna ocena stanu skóry pacjenta (tylko w obrębie stosowania produktu, bez naświetlania) | DO (n=38) | D84 (n=28) | Różnica (% zmiany) |
| Suchość skóry | 7,13 | 5,57 | -1,56 (redukcja suchości o 22%) |
| Elastyczność skóry | 6,29 | 7,18 | 0,9 (wzrost elastyczności o 14%) |
Stopień repigmentacji
Oznaczenia dotyczące stopnia repigmentacji skóry pacjenta od 0 do 100 (%) według skali VASI (Vitiligo Area Scoring lndex):
• Całkowita repigmentacja (100%), • Bardzo duży stopień repigmentacji (76%-99%), • Duży stopień repigmentacji (51%—75%), • Średni stopień repigmentacji (26%-50%), • Minimalny stopień repigmentacji (1 %—25%), • Brak repigmentacji (0%), • (-) brak oceny w danym obszarze, • „rumień” - stadium poprzedzające repigmentację.
PL 229 597 Β1
| Oznaczenie | NB-UVB | Krem na noc | Krem na noc + NB-UVB |
| pacjenta | Dzień 84 | ||
| V-21 | 0% | 0% | rumień |
| V-22 | 0% | 0% | rumień |
| V-27 | 0% | rumień | rumień |
| V-30 | - | 0% | 10% |
| V-31 | 0% | 0% | rumień |
| V-32 | 0% | 0% | rumień |
| V-36 | 0% | 0% | rumień |
| V-02 | 0% | 0% | 30% |
| V-04 | 0% | 0% | 10% |
| V-05 | 10% | 0% | 30% |
| V-07 | 15% | 0% | 60% |
| V-10 | 0% | 0% | 50% |
| V-12 | 10% | 20% | 40% |
| V-13 | 10% | 5% | 10% |
| V-18 | 10% | 0% | 30% |
| Podsumowanie | 5 pacjentów na 18 pacjentów stosujących naświetlanie (28% badanych) Średnia repig. 11 % | 3 pacjentów na 28 pacjentów stosujących krem (11% badanych) Średnia repig. 12,5% | 15 pacjentów na 28 pacjentów stosujących krem w połączniu z naświetlaniem (53% badanych) Średnia repig. 30% |
Podsumowanie i wnioski
W badaniach biologicznych wykazano, że naryngenina wpływa na poprawę kondycji skóry osób cierpiących na bielactwo.
Nie wiążąc się z żadną teorią, w przyczynach degradacji melanocytów i rozwoju bielactwa nabytego upatruje się zaburzenia w funkcjonowaniu mitochondriów. U pacjentów z bielactwem zaobserwowano zaburzoną równowagę w ilości antyoksydantów (np. katalazy, czy dysmutazy ponadtlenkowej) związaną z nadmierną produkcją reaktywnych form tlenu, zaburzenia w potencjale transbłonowym oraz wzrost ilości komórek apoptycznych. Dysfunkcje wskazują na zaburzenia w funkcjonowaniu energetycznego metabolizmu mitochondrialnego, co wywołuje preapoptotyczny profil komórek.
Protekcyjne działanie naryngeniny wydaje się polegać na obniżeniu poziomu RTF, prawdopodobnie przez wzrost poziomu mitochondrialnego enzymu antyoksydacyjnego - dysmutazy ponadtlenkowej - MnSOD (SOD2). Enzym ten jest jednym z enzymów tzw. „pierwszej linii obrony” i przekształca anionorodnik ponadtlenkowy do nadtlenku wodoru. Naryngenina aktywuje także kanały potasowe w mitochondriach mitoBKca oraz πίΚοΚατρ. Kanały te utrzymują homeostazę jonową w mitochondriach, odpowiedzialne są za zmiany objętości mitochondriów, a także biorą udział w regulacji potencjału błonowego oraz gradientu pH między macierzą mitochondrialną a cytoplazmą komórki.
Naryngenina hamuje również ekspresję genów zegara Bmall i Perl, których aktywacja związana jest z obniżeniem produkcji melaniny.
W badaniach z udziałem ludzi, stosujących krem według receptury kremu na noc, również wykazano repigmentację u 50% badanych w ciągu 84 dni, w miejscu stosowania kremu w połączeniu z naświetlaniem NB-UVB. Wykazano, że naryngenina znacząco poprawia wygląd i kondycję skóry osób cierpiących na bielactwo.
Claims (6)
1. Zastosowanie naryngeniny w skutecznej ilości do spowalniania, przeciwdziałania i zapobiegania procesowi powstawania plam bielaczych skóry.
2. Zastosowanie według zastrz. 1, w którym stosuje się naryngeninę w ilości od 0,0001 % do 1 %, korzystnie od 0,001% do 0,01%, najkorzystniej od 0,01% do 0,1%.
PL 229 597 B1
3. Preparat zawierający jako substancję czynną naryngeninę w skutecznej ilości oraz kosmetycznie dopuszczalne zarobki, nośniki i substancje dodatkowe, do stosowania do spowalniania, przeciwdziałania i zapobiegania procesowi powstawania plam bielaczych skóry.
4. Preparat według zastrz. 3, przy czym preparat zawiera naryngeninę w ilości od 0,0001% do 1% wagowych, korzystnie od 0,001% do 0,01% wagowych, najkorzystniej od 0,01% do 0,1% wagowych w przeliczeniu na całość preparatu.
5. Preparat według zastrz. 3, przy czym stosuje się ten preparat w postaci kremu, balsamu, lotionu, aerozolu, żelu, fluidu, korektora, emulsji O/W i W/O, toniku, żeli myjących, szamponów, pianek, a także mleczek, galaretek, past, maści, plastrów i systemów transdermalnych.
6. Sposób spowalniania, przeciwdziałania i zapobiegania procesowi powstawania plam bielaczych skóry, znamienny tym, że skórę traktuje się skuteczną ilością naryngeniny zdefiniowanej w zastrz. 1 i/lub preparatu zdefiniowanego w zastrz. 3.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL416041A PL229597B1 (pl) | 2016-02-04 | 2016-02-04 | Zastosowanie naryngeniny i preparatu zawierającego naryngeninę oraz sposób spowalniania, przeciwdziałania i zapobiegania procesowi powstawania plam bielaczych skóry |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL416041A PL229597B1 (pl) | 2016-02-04 | 2016-02-04 | Zastosowanie naryngeniny i preparatu zawierającego naryngeninę oraz sposób spowalniania, przeciwdziałania i zapobiegania procesowi powstawania plam bielaczych skóry |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL416041A1 PL416041A1 (pl) | 2017-08-16 |
| PL229597B1 true PL229597B1 (pl) | 2018-08-31 |
Family
ID=59579251
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL416041A PL229597B1 (pl) | 2016-02-04 | 2016-02-04 | Zastosowanie naryngeniny i preparatu zawierającego naryngeninę oraz sposób spowalniania, przeciwdziałania i zapobiegania procesowi powstawania plam bielaczych skóry |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL229597B1 (pl) |
-
2016
- 2016-02-04 PL PL416041A patent/PL229597B1/pl unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL416041A1 (pl) | 2017-08-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Mir-Palomo et al. | Inhibition of skin inflammation by baicalin ultradeformable vesicles | |
| KR101928797B1 (ko) | 컴파운드 ｋ를 함유하는 피부 외용제 조성물 | |
| US20220323532A1 (en) | Compositions comprising plant-derived exosome-like nanovesicles or exosomes and methods of use thereof | |
| KR101858095B1 (ko) | 커큐민을 포함하는 강황 추출물을 유효 성분으로 포함하는 피부 미백, 주름 형성 억제, 및 소양증 완화용 화장품 조성물 | |
| BRPI1000320B1 (pt) | Compositions and methods for treating skin aging signs | |
| KR20130088912A (ko) | 텐저레틴 및 ｅｇｃｇ를 함유하는 피부 외용제 조성물 | |
| KR20120003178A (ko) | 봉독 추출물을 함유하는 피부 미백 및 보습용 조성물 | |
| JP7583777B2 (ja) | 色素沈着過剰障害の処置方法 | |
| CN1984637A (zh) | 包含芍药甙的皮肤老化护理品 | |
| Musnaini et al. | Effectiveness of cream formulation of carrot seed oil as anti-aging | |
| Combes et al. | 166 Helichrysum italicum essential oil prevents skin lipids peroxidation caused by pollution and UV | |
| KR20180100093A (ko) | 진세노사이드 ｆ１을 함유하는 피부 외용제 조성물 | |
| Gerber et al. | Stability, clinical efficacy, and antioxidant properties of Honeybush extracts in semi-solid formulations | |
| KR101909533B1 (ko) | 진세노사이드 ｆ１을 함유하는 피부 외용제 조성물 | |
| KR102333132B1 (ko) | 프랜지패니 오일 또는 프랜지패니 오일의 발효물을 포함하는 화장료 조성물 | |
| KR20130125878A (ko) | 하이드록삼산 유도체를 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물 | |
| KR101954632B1 (ko) | 발아 인삼씨 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물 | |
| KR100431503B1 (ko) | 자외선에 의한 피부세포 손상을 억제하는 프럭토스1,6-디포스페이트 및 그의 염을 함유한 화장료 조성물 | |
| JP2007230976A (ja) | 顆粒球・マクロファージコロニー刺激因子（ｇｍ−ｃｓｆ）産生抑制剤ｉ | |
| JPH09263526A (ja) | イヌカタヒバ有機溶媒抽出物を含有する化粧料組成物および医薬組成物 | |
| KR101910865B1 (ko) | 발아 인삼씨 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물 | |
| Albayrak et al. | In Silico, In Vitro Studies on Liposomal Cosmetic Formulations Used to Prevent the Development of Atopic Dermatitis in Children | |
| JPH0840866A (ja) | ラブドシンまたはその塩を含有する化粧料 | |
| KR101945204B1 (ko) | 발아 인삼씨 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물 | |
| KR100437223B1 (ko) | 멜라닌 생성 조절제로서 디리놀릴시스타민을 함유하는피부 미백용 조성물 |