PL232975B1 - Sposób otrzymywania ekstraktu z nasion orzecha włoskiego, kompozycja zawierająca ekstrakt oraz zastosowanie ekstraktu - Google Patents
Sposób otrzymywania ekstraktu z nasion orzecha włoskiego, kompozycja zawierająca ekstrakt oraz zastosowanie ekstraktuInfo
- Publication number
- PL232975B1 PL232975B1 PL417505A PL41750516A PL232975B1 PL 232975 B1 PL232975 B1 PL 232975B1 PL 417505 A PL417505 A PL 417505A PL 41750516 A PL41750516 A PL 41750516A PL 232975 B1 PL232975 B1 PL 232975B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- extract
- walnut
- weight
- hours
- water
- Prior art date
Links
- 239000000284 extract Substances 0.000 title claims description 105
- 235000009496 Juglans regia Nutrition 0.000 title claims description 94
- 240000007049 Juglans regia Species 0.000 title claims description 89
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 26
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims description 14
- 235000006667 Aleurites moluccana Nutrition 0.000 title 1
- 235000020234 walnut Nutrition 0.000 claims description 71
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 17
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 claims description 11
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 claims description 9
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 9
- 239000012223 aqueous fraction Substances 0.000 claims description 8
- 238000002803 maceration Methods 0.000 claims description 8
- 230000001153 anti-wrinkle effect Effects 0.000 claims description 6
- 239000006286 aqueous extract Substances 0.000 claims description 5
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 5
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 claims description 3
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 claims description 3
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 claims description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 2
- 241000758789 Juglans Species 0.000 claims 6
- 238000013019 agitation Methods 0.000 claims 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 43
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 description 32
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 description 32
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 description 32
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 32
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 25
- 210000002510 keratinocyte Anatomy 0.000 description 19
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 18
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 16
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 14
- 235000014571 nuts Nutrition 0.000 description 12
- 230000003712 anti-aging effect Effects 0.000 description 11
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 11
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 11
- 235000013824 polyphenols Nutrition 0.000 description 11
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 11
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 10
- 102000016387 Pancreatic elastase Human genes 0.000 description 9
- 108010067372 Pancreatic elastase Proteins 0.000 description 9
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 9
- 210000001626 skin fibroblast Anatomy 0.000 description 9
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 8
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 8
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 8
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 8
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 8
- KQPYUDDGWXQXHS-UHFFFAOYSA-N juglone Chemical compound O=C1C=CC(=O)C2=C1C=CC=C2O KQPYUDDGWXQXHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 8
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 7
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 7
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 7
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 7
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 7
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 7
- 150000008442 polyphenolic compounds Chemical class 0.000 description 7
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 7
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 6
- 241000193403 Clostridium Species 0.000 description 6
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 6
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 6
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 6
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 6
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 6
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 6
- AFSDNFLWKVMVRB-UHFFFAOYSA-N Ellagic acid Chemical compound OC1=C(O)C(OC2=O)=C3C4=C2C=C(O)C(O)=C4OC(=O)C3=C1 AFSDNFLWKVMVRB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- ATJXMQHAMYVHRX-CPCISQLKSA-N Ellagic acid Natural products OC1=C(O)[C@H]2OC(=O)c3cc(O)c(O)c4OC(=O)C(=C1)[C@H]2c34 ATJXMQHAMYVHRX-CPCISQLKSA-N 0.000 description 5
- 229920002079 Ellagic acid Polymers 0.000 description 5
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 5
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 5
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 5
- 235000004132 ellagic acid Nutrition 0.000 description 5
- 229960002852 ellagic acid Drugs 0.000 description 5
- FAARLWTXUUQFSN-UHFFFAOYSA-N methylellagic acid Natural products O1C(=O)C2=CC(O)=C(O)C3=C2C2=C1C(OC)=C(O)C=C2C(=O)O3 FAARLWTXUUQFSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000003642 reactive oxygen metabolite Substances 0.000 description 5
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 5
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 4
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 4
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 4
- 230000002424 anti-apoptotic effect Effects 0.000 description 4
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 description 4
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- LNTHITQWFMADLM-UHFFFAOYSA-N gallic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 LNTHITQWFMADLM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 4
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 4
- 230000001603 reducing effect Effects 0.000 description 4
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- IOOMXAQUNPWDLL-UHFFFAOYSA-N 2-[6-(diethylamino)-3-(diethyliminiumyl)-3h-xanthen-9-yl]-5-sulfobenzene-1-sulfonate Chemical compound C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1S([O-])(=O)=O IOOMXAQUNPWDLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- VYTBDSUNRJYVHL-UHFFFAOYSA-N beta-Hydrojuglone Natural products O=C1CCC(=O)C2=C1C=CC=C2O VYTBDSUNRJYVHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 3
- 229940081733 cetearyl alcohol Drugs 0.000 description 3
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 3
- 229940124600 folk medicine Drugs 0.000 description 3
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 3
- 231100000028 nontoxic concentration Toxicity 0.000 description 3
- GLDOVTGHNKAZLK-UHFFFAOYSA-N octadecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCO GLDOVTGHNKAZLK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000002989 phenols Chemical class 0.000 description 3
- 239000000419 plant extract Substances 0.000 description 3
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 3
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 3
- 210000004927 skin cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 3
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 3
- VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 1-monostearoylglycerol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(O)CO VBICKXHEKHSIBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FKMHSNTVILORFA-UHFFFAOYSA-N 2-[2-(2-dodecoxyethoxy)ethoxy]ethanol Chemical compound CCCCCCCCCCCCOCCOCCOCCO FKMHSNTVILORFA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZAKOWWREFLAJOT-CEFNRUSXSA-N D-alpha-tocopherylacetate Chemical compound CC(=O)OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C ZAKOWWREFLAJOT-CEFNRUSXSA-N 0.000 description 2
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- -1 Glyceryl citrate stearate ester Chemical class 0.000 description 2
- 241000193159 Hathewaya histolytica Species 0.000 description 2
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 2
- 241000758791 Juglandaceae Species 0.000 description 2
- 244000184861 Juglans nigra Species 0.000 description 2
- 235000013740 Juglans nigra Nutrition 0.000 description 2
- 235000011669 Juglans sp Nutrition 0.000 description 2
- WIQMWNKYSYJIQG-UHFFFAOYSA-N Juglon Natural products C1=CC(O)=C2C(=O)C(OC)=C(C)C(=O)C2=C1 WIQMWNKYSYJIQG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QAQJMLQRFWZOBN-LAUBAEHRSA-N L-ascorbyl-6-palmitate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O QAQJMLQRFWZOBN-LAUBAEHRSA-N 0.000 description 2
- 239000011786 L-ascorbyl-6-palmitate Substances 0.000 description 2
- 108010078689 Mca-Lys-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa-Ala-Arg-NH2 Proteins 0.000 description 2
- XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N Melanin Chemical compound O=C1C(=O)C(C2=CNC3=C(C(C(=O)C4=C32)=O)C)=C2C4=CNC2=C1C XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 2
- 230000018199 S phase Effects 0.000 description 2
- 241000723873 Tobacco mosaic virus Species 0.000 description 2
- 102000003425 Tyrosinase Human genes 0.000 description 2
- 108060008724 Tyrosinase Proteins 0.000 description 2
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 2
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 2
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 2
- 239000010478 argan oil Substances 0.000 description 2
- 235000010385 ascorbyl palmitate Nutrition 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 2
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 2
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 2
- 235000004515 gallic acid Nutrition 0.000 description 2
- 229940074391 gallic acid Drugs 0.000 description 2
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 2
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 2
- 230000037311 normal skin Effects 0.000 description 2
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 2
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 2
- VCMMXZQDRFWYSE-UHFFFAOYSA-N plumbagin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(C)=CC(=O)C2=C1O VCMMXZQDRFWYSE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 210000000582 semen Anatomy 0.000 description 2
- VSIVTUIKYVGDCX-UHFFFAOYSA-M sodium;4-[2-(2-methoxy-4-nitrophenyl)-3-(4-nitrophenyl)tetrazol-2-ium-5-yl]benzene-1,3-disulfonate Chemical compound [Na+].COC1=CC([N+]([O-])=O)=CC=C1[N+]1=NC(C=2C(=CC(=CC=2)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)=NN1C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 VSIVTUIKYVGDCX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- CRPCXAMJWCDHFM-UHFFFAOYSA-M sodium;5-oxopyrrolidine-2-carboxylate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)C1CCC(=O)N1 CRPCXAMJWCDHFM-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- 229930003799 tocopherol Natural products 0.000 description 2
- 239000011732 tocopherol Substances 0.000 description 2
- 235000019149 tocopherols Nutrition 0.000 description 2
- QUEDXNHFTDJVIY-UHFFFAOYSA-N γ-tocopherol Chemical class OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1 QUEDXNHFTDJVIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZLFQNOJSYZSINX-PVJKAEHXSA-N (2s)-2-[[(2s)-1-[2-[[(2s)-2-[[(e)-3-(furan-2-yl)prop-2-enoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]acetyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]propanoic acid Chemical compound N([C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)C(=O)\C=C\C1=CC=CO1 ZLFQNOJSYZSINX-PVJKAEHXSA-N 0.000 description 1
- VFNKZQNIXUFLBC-UHFFFAOYSA-N 2',7'-dichlorofluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC(Cl)=C(O)C=C1OC1=C2C=C(Cl)C(O)=C1 VFNKZQNIXUFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010089930 2-furanacryloyl-leucyl-glycyl-prolyl-alanine Proteins 0.000 description 1
- QCDWFXQBSFUVSP-UHFFFAOYSA-N 2-phenoxyethanol Chemical compound OCCOC1=CC=CC=C1 QCDWFXQBSFUVSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150067539 AMBP gene Proteins 0.000 description 1
- 206010000087 Abdominal pain upper Diseases 0.000 description 1
- 208000002874 Acne Vulgaris Diseases 0.000 description 1
- 102100022712 Alpha-1-antitrypsin Human genes 0.000 description 1
- 244000144725 Amygdalus communis Species 0.000 description 1
- 235000011437 Amygdalus communis Nutrition 0.000 description 1
- 244000226021 Anacardium occidentale Species 0.000 description 1
- 102000000412 Annexin Human genes 0.000 description 1
- 108050008874 Annexin Proteins 0.000 description 1
- 235000017060 Arachis glabrata Nutrition 0.000 description 1
- 244000105624 Arachis hypogaea Species 0.000 description 1
- 235000010777 Arachis hypogaea Nutrition 0.000 description 1
- 235000018262 Arachis monticola Nutrition 0.000 description 1
- 241001480043 Arthrodermataceae Species 0.000 description 1
- DGAKHGXRMXWHBX-ONEGZZNKSA-N Azoxymethane Chemical compound C\N=[N+](/C)[O-] DGAKHGXRMXWHBX-ONEGZZNKSA-N 0.000 description 1
- 241000193755 Bacillus cereus Species 0.000 description 1
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 description 1
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 241001247801 Bocconia frutescens Species 0.000 description 1
- 241000321538 Candidia Species 0.000 description 1
- 208000005623 Carcinogenesis Diseases 0.000 description 1
- 235000009025 Carya illinoensis Nutrition 0.000 description 1
- 244000068645 Carya illinoensis Species 0.000 description 1
- 241001340526 Chrysoclista linneella Species 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- 240000009226 Corylus americana Species 0.000 description 1
- 235000001543 Corylus americana Nutrition 0.000 description 1
- 235000007466 Corylus avellana Nutrition 0.000 description 1
- 208000001840 Dandruff Diseases 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide Chemical compound C1CO1 IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000823116 Homo sapiens Alpha-1-antitrypsin Proteins 0.000 description 1
- 101001010513 Homo sapiens Leukocyte elastase inhibitor Proteins 0.000 description 1
- 108010003272 Hyaluronate lyase Proteins 0.000 description 1
- 102000001974 Hyaluronidases Human genes 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 description 1
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 1
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 1
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 1
- ZMOIGGHUSNHCAB-UHFFFAOYSA-N Isoplumbagin Natural products C1=CC(O)=C2C(=O)C(C)=CC(=O)C2=C1 ZMOIGGHUSNHCAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010023232 Joint swelling Diseases 0.000 description 1
- 240000004929 Juglans cinerea Species 0.000 description 1
- 235000014056 Juglans cinerea Nutrition 0.000 description 1
- 241001002197 Juglans mollis Species 0.000 description 1
- 235000016488 Juglans mollis Nutrition 0.000 description 1
- 229940124091 Keratolytic Drugs 0.000 description 1
- 241000588747 Klebsiella pneumoniae Species 0.000 description 1
- 102000002274 Matrix Metalloproteinases Human genes 0.000 description 1
- 108010000684 Matrix Metalloproteinases Proteins 0.000 description 1
- 102000005741 Metalloproteases Human genes 0.000 description 1
- 108010006035 Metalloproteases Proteins 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 208000031888 Mycoses Diseases 0.000 description 1
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 1
- 241000305549 Platycarya strobilacea Species 0.000 description 1
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 1
- 102000004005 Prostaglandin-endoperoxide synthases Human genes 0.000 description 1
- 108090000459 Prostaglandin-endoperoxide synthases Proteins 0.000 description 1
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 208000003251 Pruritus Diseases 0.000 description 1
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 description 1
- 208000025747 Rheumatic disease Diseases 0.000 description 1
- 244000297627 Senna alata Species 0.000 description 1
- 206010040829 Skin discolouration Diseases 0.000 description 1
- 239000004902 Softening Agent Substances 0.000 description 1
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 1
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 1
- 102000019259 Succinate Dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 108010012901 Succinate Dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 206010042496 Sunburn Diseases 0.000 description 1
- 206010000496 acne Diseases 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 235000020224 almond Nutrition 0.000 description 1
- 230000000507 anthelmentic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000001142 anti-diarrhea Effects 0.000 description 1
- 230000001355 anti-mycobacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000001028 anti-proliverative effect Effects 0.000 description 1
- 230000001754 anti-pyretic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 239000002221 antipyretic Substances 0.000 description 1
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- ALPCEXCHMFUSAN-UHFFFAOYSA-N beta-Dihydroplumbagin Natural products C1=CC=C2C(=O)C(C)CC(=O)C2=C1O ALPCEXCHMFUSAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 230000036952 cancer formation Effects 0.000 description 1
- 231100000504 carcinogenesis Toxicity 0.000 description 1
- 235000020226 cashew nut Nutrition 0.000 description 1
- 239000004359 castor oil Substances 0.000 description 1
- 235000019438 castor oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000037304 dermatophytes Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 229940008099 dimethicone Drugs 0.000 description 1
- 239000004205 dimethyl polysiloxane Substances 0.000 description 1
- 235000013870 dimethyl polysiloxane Nutrition 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 description 1
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 description 1
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 description 1
- 238000012757 fluorescence staining Methods 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 210000001061 forehead Anatomy 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N glycerol triricinoleate Natural products CCCCCC[C@@H](O)CC=CCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCC=CC[C@@H](O)CCCCCC)OC(=O)CCCCCCCC=CC[C@H](O)CCCCCC ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 230000009931 harmful effect Effects 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 241000411851 herbal medicine Species 0.000 description 1
- 235000008216 herbs Nutrition 0.000 description 1
- 239000002035 hexane extract Substances 0.000 description 1
- 229960002773 hyaluronidase Drugs 0.000 description 1
- 230000002218 hypoglycaemic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000007803 itching Effects 0.000 description 1
- 230000001530 keratinolytic effect Effects 0.000 description 1
- 229940057905 laureth-3 Drugs 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 235000020094 liqueur Nutrition 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N methanol;hydrate Chemical compound O.OC GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000401 methanolic extract Substances 0.000 description 1
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 1
- 230000002438 mitochondrial effect Effects 0.000 description 1
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N n'-amino-n-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 230000018791 negative regulation of catalytic activity Effects 0.000 description 1
- 230000017095 negative regulation of cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000001613 neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 230000036542 oxidative stress Effects 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000036407 pain Effects 0.000 description 1
- 235000020232 peanut Nutrition 0.000 description 1
- 229940094332 peg-8 dimethicone Drugs 0.000 description 1
- 238000005325 percolation Methods 0.000 description 1
- 235000009048 phenolic acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000007965 phenolic acids Chemical class 0.000 description 1
- 229960005323 phenoxyethanol Drugs 0.000 description 1
- 229920000435 poly(dimethylsiloxane) Polymers 0.000 description 1
- 229920001495 poly(sodium acrylate) polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 238000003825 pressing Methods 0.000 description 1
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 1
- 230000037209 prostate health Effects 0.000 description 1
- 239000002510 pyrogen Substances 0.000 description 1
- 150000004053 quinones Chemical class 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000003716 rejuvenation Effects 0.000 description 1
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 1
- 230000000552 rheumatic effect Effects 0.000 description 1
- 210000004761 scalp Anatomy 0.000 description 1
- 230000001624 sedative effect Effects 0.000 description 1
- 230000037370 skin discoloration Effects 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- NNMHYFLPFNGQFZ-UHFFFAOYSA-M sodium polyacrylate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)C=C NNMHYFLPFNGQFZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229940045635 sodium pyroglutamate Drugs 0.000 description 1
- CRPCXAMJWCDHFM-DFWYDOINSA-M sodium;(2s)-5-oxopyrrolidine-2-carboxylate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)[C@@H]1CCC(=O)N1 CRPCXAMJWCDHFM-DFWYDOINSA-M 0.000 description 1
- JWZSXZWCWMCYPE-RSAXXLAASA-M sodium;(4s)-4-amino-5-dodecoxy-5-oxopentanoate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOC(=O)[C@@H](N)CCC([O-])=O JWZSXZWCWMCYPE-RSAXXLAASA-M 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 231100000338 sulforhodamine B assay Toxicity 0.000 description 1
- 238000003210 sulforhodamine B staining Methods 0.000 description 1
- 230000035900 sweating Effects 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 125000003831 tetrazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 229940042585 tocopherol acetate Drugs 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- 208000019553 vascular disease Diseases 0.000 description 1
- 230000006438 vascular health Effects 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 235000020334 white tea Nutrition 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Cosmetics (AREA)
Description
Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest sposób otrzymywania suchego ekstraktu z nasion orzecha włoskiego (Juglans regia L), kompozycja zawierająca ekstrakt oraz zastosowanie w tworzeniu kompozycji kosmetycznych.
Orzech włoski (Juglans regia L.) jest rośliną szeroko rozpowszechnioną na całym świecie. Wyróżnia się 15 gatunków należących do rodziny Juglandaceae, przy czym najpopularniejsze są: Juglans regia (orzech włoski), Juglans nigra (orzech czarny), Juglans cinerea (orzech szary). Orzech włoski znany był już w starożytności - pierwsze wzmianki o nim pochodzą z 2000 lat p.n.e [Milind P., Deepa K.: Walnut: Not a hard nut to crack, IRJP, 2, 8-17, 2011].
Obecnie orzech włoski uznawany jest za roślinę o ogromnym potencjale leczniczym i kosmetycznym. Surowcem leczniczym i kosmetycznym mogą być: kora pnia, liście, kwiatostany, niedojrzałe owoce, naowocnia, nasienie, olej, skórka otaczająca nasienie i twarda łupina nasienna.
W medycynie ludowej ekstrakty z liści orzecha włoskiego używane były jako środek przeciwbakteryjny, przeciwrobaczy, ściągający, keratolityczny, przeciwbiegunkowy, hipoglikemiczny, zmniejszający stan zapalny zatok, łagodzący przeziębienie i ból żołądka [Girzu et al.: Sedative effect of walnut leaf extract an juglone an isolated constituents, Pharm. Biol., 36, 280-286, 1998, Mouhajir F. et al.: Multiple antiviral activities of endemic medicinal plant used by Berber people of Marocco, Pharm. Biol., 39, 364-374, 2001, Vaidyaratman PSV.: Indian medicinal plants a kompendium of500 species, Orient Longman Private Limited, Chennei 3, 264-365, 2005]. W medycynie Wschodu okłady ze świeżych liści przykładano na czoło i ciało w celach przeciwgorączkowych oraz w leczeniu opuchniętych stawów i bólów reumatycznych [Fujita et al.: Tradicional medicine In Turkey VII. Folk medicine In Middle and Wes t Black Sea regions, Econ. Bot, 49, 406-422, 1995, Yesidala E., Biodiversity In Turkish folk medicine. In: Sener, B.(Ed.), Biodiversity: Biomolecular aspects of biodiversity and innovative utilization. Kluwer Academic/Plenum Publishers, London, 119-135, 2002]. Nasiona orzecha wykorzystywano do leczenia chorób zapalnych jelit, łagodzenia objawów cukrzycy i astmy, a także do leczenia raka prostaty i zaburzeń naczyniowych [Spaccarotella et al.: The effect of walnut intake of factors related to prostate and vascular health in older Man, Nutr. J., 7, 2008]. Wyciągi z różnych elementów morfotycznych tej rośliny używane są jako środek łagodzący stany zapalne skóry takie jak egzema, zmniejszający nadmierną potliwość rąk i stóp, zmniejszający nadmierne swędzenie skóry głowy wywołane łupieżem, łagodzący poparzenia słoneczne, a także działający jako środek zmiękczający skórę [Gruenwald J., Brendler T., Jaenjke C.: PDR for herbal medicines, Medicinal Economic, 2001, Robberts JE., Tyler VE.: Tyler's herbs of choice: The therapeutic use of phytomedicinals, The havvorth herbal Press, New York 1999, Ali Shtayeh MS., Abn Ghdeib SI.: Antifungial activity of plant extracts against dermatophytes, Mycoses, 42, 665-772, 1999, Baytop T.: Therapy with Medicinal plants In Turkey (Past and Preasent) 2 nd ed. Nobel Medicine Publisher 1999] oraz jako środek skuteczny przeciwko bakteriom gram dodatnim (Bacillus cereus, Bacillus subtilis, Staphylococus aureus), gram ujemnym (Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae), grzybom (Candidia albicans, Cryptococus neoformans [Deshpande RR. et al.: Antimicrobial Activity of different extracts of Juglans regia L. against oral microflora, Int. J. Pharm. Sci., 3, 200-201,2011, Pereira JA. et al.: Bioactive properties and chemical composition of six walnut (Juglans regia L.) cultivars, Food Chem. Toxicol., 46, 2103-2111,2008, Qa'dan F. et al.: The antimicrobial activities of Psidum guajava and Juglansregia leaf extracts to acne-developing organisms, Am. J. Chin. Med., 33,197-204,2005]. Mei - Zhi i wsp. udowodnili skuteczność ekstraktu z liści (etanol/octan etylu) przeciwko wirusowi mozaiki tytoniowej (TMV) [Mei-zhi Z. et al.: Study on extraction conditions of active antiviral substance from Walnut leaves. Chemistry and Industry of Forest Products, 02, 2007]. Niewielką aktywność przeciw M. tuberculosis wykazywał heksanowy ekstrakt z liści i kory orzecha Juglans sp. [Cruz - Vega DE. et al.: Antimycobacterial activity of Juglans regia, Juglans mollis, Carya illinoensis and Bocconia frutescens, Phytother Res., 22, 557-559, 2008].
Ekstrakty różnych części orzecha Juglans sp., a zwłaszcza niedojrzałych owoców, zielonej naowocni i liści są bardzo bogatym źródłem polifenoli, którym przypisuje się działanie przeciwzapalne [Jerneja J. et al.: How much do cultivar and preparation time influence on phenolics content in walnut liqueur? Food Chem., 104, 100-105, 2007, Jakopic J., Veberic R., Stampar F.: Extraction of phenolic compounds from Green walnut fruits in different solvents, Acta Agr. Slow., 93, 11-15, 2009, Fukuda T., Ito H., Yoshi T.: Antioxidative polyphenols from walnut (Juglans regia L.), Phytochem., 63, 795-801, 2003, Colaric M. et al.: Phenol acids, siringaldehyde, and juglon in fruits of different cultivars of (Juglans regia L.), J. Agric. Food Chem., 53, 6390-6396, 2005, Stampar F. et al.: Traditional walnut liqueur
PL 232 975 B1 cocktail of phenolics, Food Chem., 95, 627-631, 2006]. Jednym z bogatszych źródeł kwasów fenolowych, głównie kwasu elagowego i kwasu gallusowego, jest skórka otaczająca nasiona orzecha włoskiego tzw. „pelikula”, stanowiąca ok. 5% masy nasienia. [Jurd L. The poliphenolic constituens of the pellicle of the walnut (J.regia L.), 1956, Samaranayaka A.G.P., John J.A., Shahidi F., Antioxidant activity of English walnut (Juglans regia L.), J. Food Lipids, 15, 384-397, 2008]. Nasiona orzecha włoskiego posiadają najwyższą spośród orzechów zawartość polifenoli. Zawartość całkowita polifenoli oznaczona w miligramach ekwiwalentów kwasu galusowego (mg of GAE/100 g) wynosiła dla orzecha włoskiego 1625, w porównaniu z migdałem 239, orzechem nerkowca 137, orzechem laskowym 290, orzechem ziemnym 420. [Kornsteiner M., Wagner H., Elmadfa I.: Tocopherols and total phenolics in 10 different nut types, Food Chemistry, 98, 381 -387, 2006]. Udowodniono, że jeden ze związków z grupy polifenoli (juglon) hamuje jelitową karcenogenezę u szczurów, dlatego też wydaje się być obiecującym czynnikiem chroniącym człowieka przed chorobami nowotworowymi przewodu pokarmowego [Sugie S. et al.: Inhibitory effects of plumbagin and juglone on azoxymethane - induced intestinal carcinogenesis in rats. Cancer Lett., 127,177-183, 1998]. Juglon okazał się być również cytotoksyczny w stosunku do wielu ludzkich nowotworowych linii komórkowych [Kamei H. et al.: Inhibition of cell growth in culture by quinones, Cancer Biother. Radiopharm., 13,185-188, 1998].
Stres oksydacyjny jest jednym z głównych mechanizmów powodujących starzenie się skóry, dlatego lokalnie stosowane antyoksydanty pozwalają zniwelować szkodliwe działanie wolnych rodników tlenowych [Kornsteiner M., Wagner H., Elmadfa I.: Tocopherols and total phenolics in 10 different nut types, Food Chem., 98, 381-387, 2006]. Pozyskane z nasion orzecha włoskiego (a także z łupiny i liści) ekstrakty eterowe, butanolowe, metanolowe oraz wodno-metanolowe wykazywały silną aktywność anty oksydacyjną [Carvalho M. et al.: Human cancer cell antiproliferative and antioxidant activities of Juglans regia L., Food Chem. Toxicol., 48, 441-447, 2010, Fukuda T., Ito H., Yoshi T.: Antioxidative polyphenols from walnut (Juglans regia L.), Phytochem., 63, 795-801, 2003, Zhang Z. et al.: Antioxidant phenolic compounds from walnut kernels (Juglans regia L.), Food Chem. 113, 160-165, 2009, Arraz S., Perez Jimenez J., Saura - Calixto F.: Antioxidant capacity of walnut (Juglans regia L.): contribution of oil and defatted matter, Eur. Food Res. Technol. 227, 425-431,2008]. Ponadto, dzięki aktywności antyoksydacyjnej, kwas elagowy wykazuje aktywność hamującą tyrozynazę, przez co zapobiega nadmiernemu tworzeniu się melaniny i przebarwieniom skóry. Ozer B i wsp. (2007) zaproponował aplikowanie na powierzchnię ciała żelu zawierającego ekstrakt z liści orzecha celem wyrównania kolorytu skóry [Ozer B., Kivc MB.: Antityrosinase activity of some plant extracts and formulations containing ellagic acid, Pharm. Biol., 45, 519-524, 2007].
We współczesnej kosmetologii coraz większym zainteresowaniem cieszą się preparaty o działaniu odmładzającym, których składniki aktywne pozyskiwane są z natury. Zawarte w nich związki aktywne, głównie polifenole i flawonoidy, hamują aktywność wielu enzymów np.: kolagenazy, elastazy, hialuronidazy, tyrozynazy, cyklooksygenazy i opóźniają tym samym procesy starzenia. Porównanie wodnych ekstraktów 21 roślin przeprowadzone przez Thringa i wsp. [Thring T.S.S., Hili P., Naughton D.P.: Anticollagenase, anti-elastase and anti-oxidant activities of extracts from 21 plants, BMC Complementary and Alternative Medicine 9, 27-37, 2009] wykazało silne działanie hamujące aktywność kolagenazy i elastazy, zwłaszcza w przypadku ekstraktu z białej herbaty. Ustalono, że za działanie przeciwzmarszczkowe tych ekstraktów odpowiedzialny jest głównie kwas elagowy, który chroni kolagen przed rozpadem poprzez blokowanie MMP (metaloproteinazy) w fibroblastach skóry wystawionej na działanie promieni UVB. Przeciwzmarszczkowe działanie kwasu elagowego zostało potwierdzone w badaniach in vivo u bezwłosych myszy napromieniowywanych przez 8 tyg. promieniami UVB [Kim et al.: Antiwrinkle activity of Platycarya strobilacea extract and its application as a cosmeceutical ingredient,
J. Cosmet. Sci., 61,211-213, 2010]. Istnieje wiele doniesień naukowych i patentów dotyczących wykorzystania naturalnych ekstraktów roślinnych w kosmetyce przeciwstarzeniowej [EP, 2335685 A1; 2011., 1819356 A1; 2007., EP 2394635 A1; 2011., EP 1699475 B1; 2012., US 20110117227 A1; 2011., EP8206721 B2; 2012., US 20100028376 A1; 2010, PL 383017, 2010]. Patent USA [US 6395261 B1, 2002] określa sposób pozyskania ekstraktu wodnego z orzecha włoskiego o właściwościach antyoksydacyjnych, przeciwzapalnych, hamujących aktywność kolagenazy i elastazy, przy czym materiałem do pozyskiwania ekstraktu są wytłoczyny po produkcji oleju z nasion orzecha włoskiego. Według wyżej opisanego patentu, ekstrakt z orzecha może być składnikiem preparatów kosmetycznych o działaniu ochronnym, przeciwzmarszczkowym i przeciwdziałającym efektom starzenia. Jednakże aktywność
PL 232 975 Β1 anty-kolagenazowa wyżej wymienionego wodnego ekstraktu z wytłoczyn orzecha włoskiego jest stosunkowo niewielka: dla stężenia ekstraktu równego 10 mg suchej masy/ml zanotowano inhibicję kolagenazy in vitro na poziomie 17,2%.
Wynalazek rozwiązuje zagadnienie otrzymywania ekstraktu wodnego z jąder nasienia (z nieoddzielonymi skórkami) orzecha włoskiego (Juglans regia) o bardzo wysokiej aktywności hamującej aktywność kolagenazy.
Do otrzymania ekstraktu można zastosować większość typowych technik ekstrakcyjnych, włączając w to macerację, perkolację czy też użycie źródła mikrofal.
Sposób otrzymywania ekstraktu według wynalazku polega na zastosowaniu jako materiału jąder, nieoddzielonych od skórek, nasienia orzecha włoskiego (Juglans regia) o rozdrobnieniu nie większym niż frakcja 4 mm i ich maceracji w środowisku wodnym w proporcji 1 część wagowa jąder i 2,5-10 części Wagowych wody, korzystnie 2,5-6,5 części wagowych wody, w temperaturze 4-75°C, korzystnie do 40°C, przezokres od 1 do 12godzin, korzystnie 6-12godzin, mieszając całość przy użyciu jakiejkolwiek znanej techniki mieszania. Następnie frakcję wodną oddziela się od frakcji stałej, w razie konieczności filtruje, a na koniec zebrany ekstrakt zagęszcza i przechowuje w temperaturze poniżej temperatury pokojowej. Korzystnie, gdy ekstrakcji dokonuje się stosując nasiona całkowicie nierozdrobnione i nieuszkodzone, w okresie do 6 miesięcy od ich zebrania. Korzystnie, gdy oddzielona frakcja płynna jest zagęszczona przez liofilizację, a liofilizat jest przechowywany w temperaturze poniżej 10°C.
Przedmiotem wynalazku jest także kompozycja zawierająca ekstrakt wodny z jąder, nieoddzielonych od skórek, nasienia orzecha włoskiego (Juglans regia) o rozdrobnieniu nie większym niż frakcja 4 mm, otrzymany w wyniku maceracji składników w proporcji 1 część wagowa jąder i 2,5-10 części wagowych wody korzystnie 2,5-6,5 części wagowych wody, w temperaturze 4-75°C, korzystnie do 40°C i przez okres od 1 do 12 godzin, korzystnie 6-12 godzin, o działaniu przeciwstarzeniowym.
Przedmiotem wynalazku jest ponadto zastosowanie ekstraktu z jąder, nieoddzielonych od skórek, nasienia orzecha włoskiego (Juglans regia) o rozdrobnieniu nie większym niż frakcja 4 mm, otrzymanego w wyniku maceracji składników w proporcji 1 część wagowa jąder i 2,5-10 części wagowych wody, korzystnie 2,5-6,5 części wagowych wody, w temperaturze 4-75°C, korzystnie do 40°C, przez okres od 1 godziny do 12 godzin, korzystnie 6-12 godzin, do otrzymywania preparatów kosmetycznych, zwłaszcza przeciwzmarszczkowych.
Ekstrakt według wynalazku wykazuje wiele korzystnych cech, istotnych dla działania przeciwstarzeniowego. Udowodniono dla niego następujące właściwości:
1. Hamowanie aktywności kolagenazy:
a. izolowanej z Clostridium heamolyticunr.
Do badania użyto metody z użyciem FALGPA jako substratu dla kolagenazy, inkubując roztwór enzymu z odpowiednio rozcieńczonym liofilizowanym ekstraktem przez 10 minut przed dodaniem substratu do mieszaniny reakcyjnej. Rezultaty zaprezentowano w poniższej tabeli:
| Stężenie liofilizatu | Inhibicja kolagenazy (%) | |
| w μμ/πι! | Po 1 miesiącu przechowywania | Po 12 miesiącach przechowywania |
| 1 | 61 | 6 |
| 2,5 | 86 | 20 |
| 5 | 100 | 47 |
| 10 | 100 | 80 |
Wyniki świadczą o bardzo wysokiej zdolności hamującej aktywność kolagenazy z Clostridium heamolyticum przez ekstrakt z nasion orzecha.
b. rekombinowanej kolagenazy ludzkiej:
Do badania użyto metody z użyciem rekombinowanej ludzkiej kolagenazy oraz MCA-Lys-Pro-Leu-Gly-Leu-DPA-Ala-Arg-NH2 jako substratu, inkubując roztwór enzymu z odpowiednio rozcieńczonym liofilizowanym ekstraktem, z nasion orzecha przez 10 minut przed dodaniem substratu do mieszaniny reakcyjnej. Rezultaty zaprezentowano w poniższej tabeli:
PL 232 975 Β1
Stężenie liofilizatu w pg/ml
Inhibicja kolagenazy (%)
100
200
Wyniki świadczą o wysokiej zdolności hamującej aktywność kolagenazy ludzkiej przez ekstrakt z nasion orzecha.
2. Hamowanie aktywności elastazy ludzkiej:
Do badania użyto metody z użyciem rekombinowanej ludzkiej elastazy oraz MCA-Lys-Pro-Leu-Gly-Leu-DPA-Ala-Arg-NH2 jako substratu, inkubując roztwór enzymu z odpowiednio rozcieńczonym liofilizowanym ekstraktem z nasion orzecha przez 10 minut przed dodaniem substratu do mieszaniny reakcyjnej. Rezultaty zaprezentowano w poniższej tabeli:
Stężenie liofilizatu w pg/ml
100
200
Inhibicja elastazy (%)
47,8
58,6
87.1
99.1
100
Wyniki świadczą o wysokiej zdolności hamującej aktywność kolagenazy ludzkiej przez ekstrakt z nasion orzecha.
3. Brak cytotoksyczności ekstraktu
Oceny cytotoksyczności ekstraktu z nasion orzecha włoskiego wykonano z zastosowaniem linii komórkowej ludzkich prawidłowych fibroblastów skóry (BJ) pozyskanej z Amerykańskiej Kolekcji Hodowli Komórkowych (ATCC). W celu wyznaczenia najwyższej dawki nietoksycznej ekstraktu, przygotowano 10 różnych rozcieńczeń ekstraktu z nasion orzecha włoskiego pomiędzy 2,5 μg/ml a 1,28 mg/ml. Komórki BJ wystawiono na działanie ekstraktów przez 24 i 48 godz. po czym dokonano oceny ich żywotności za pomocą bardzo czułego testu WST-8. Komórki kontrolne były inkubowane w pełnym podłożu hodowlanym zamiast ekstraktu. Zasada testu WST-8 opiera się na reakcji, która zachodzi w żywych, metabolicznie czynnych komórkach przy udziale mitochondrialnej dehydrogenazy bursztynianowej i polega na redukcji soli tetrazoliowej do rozpuszczalnego w wodzie pomarańczowego formazanu. Intensywność barwy (gęstość optyczna) powstałego roztworu jest wprost proporcjonalna do ilości żywych komórek. Żywotność była wyrażona jako procent komórek kontrolnych hodowanych w pełnym podłożu bez dodatku ekstraktu. Rezultaty zaprezentowano w poniższej tabeli:
Żywotność [%J Stężenie [gg/mlj
2,5 5 10 20 40 80 160 320 640 1280 (24 godz.) (48 godz.)
93,6 95,7 92,9 89,1 79,3 73,4 70,1 19,8 10,4 11,6
90,0 89,6 85,2 79,3 76,7 70,7 54,7 24,2 6,7 3,8
Ekstrakt z nasion orzecha włoskiego w stężeniach 2,5 i 5 μg/ml był nietoksyczny, natomiast ekstrakt w stężeniach 10 i 20 μg/ml wykazywał jedynie niewielki efekt toksyczny w stosunku do fibroblastów skóry BJ.
4. Stymulowanie syntezy białka przez keratynocyty
Oceny zawartości białka komórkowego w hodowli keratynocytów po 72 godz. inkubacji w obecności wybranych nietoksycznych stężeń (2,5; 5 i 10 pLg/ml) ekstraktu z nasion orzecha włoskiego, dokonano z zastosowaniem linii komórkowej ludzkich keratynocytów skóry (HEK001) pozyskanej z ATCC za pomocą testu z sulforodaminą B (SRB). Komórki kontrolne były inkubowane w pełnym podłożu hodowlanym bez dodatku ekstraktu. Sulforodamina B jest barwnikiem, który selektywnie wiąże się z cząsteczkami białka w hodowli komórek, a więc test SRB pozwala na ocenę całkowitej puli białka komórkowego zarówno budulcowego, jak i syntetyzowanego przez komórki. Rezultaty zaprezentowano w poniższej tabeli:
PL 232 975 Β1
| Stężenie ekstraktu | Zawartość białka komórkowego po 72 godz. [% kontroli] |
| 2,5 pg/ml | 107,9 |
| 5 pg/ml | 107,5 |
| 10 pg/ml | 101,7 |
Ekstrakt z nasion orzecha włoskiego w stężeniach 2,5 i 5 μg/ml powodował nieznaczny wzrost zawartości białka w hodowli komórek HEK001 w porównaniu do hodowli kontrolnej. Ekstrakt w stężeniu 10 μg/ml nie wpływał na zawartość całkowitego białka w hodowli keratynocytów. Zatem ekstrakt z nasion orzecha włoskiego jedynie w niskich stężeniach w niewielkim stopniu stymulował syntezę białek przez keratynocyty HEK001.
5. Właściwości antyoksydacyjne
Aktywność antyoksydacyjną ekstraktu z nasion orzecha włoskiego oznaczono z wykorzystaniem hodowli pierwotnej ludzkich fibroblastów skóry (HSF) wyizolowanej ze skóry zdrowego wolontariusza, linii komórkowej ludzkich prawidłowych fibroblastów skóry (BJ) oraz linii komórkowej ludzkich keratynocytów skóry (HEK001). Komórki były inkubowane przez 24 godz. w podłożu hodowlanym zawierającym wyselekcjonowane nietoksyczne stężenia (2,5; 5 i 10 μg/ml) ekstraktu z nasion orzecha włoskiego oraz dla porównania w pełnym podłożu hodowlanym bez dodatku ekstraktu (0 μg/ml). Następnie komórki poddano ekspozycji na promieniowanie UVB (315 nm-290 nm) o gęstości energii 35 i 80 mJ/cm2. Promieniowanie w dawce 35 mJ/cm2 jest równoważne 2-3 godz. ekspozycji skóry na słońce w słoneczny dzień, natomiast promieniowanie w dawce 80 mJ/cm2 jest równoważne całodniowemu opalaniu się na plaży w słoneczny dzień. Komórki kontrolne nie były naświetlane promieniowaniem UVB. Aktywność antyoksydacyjną ekstraktu oznaczono 2 godz. po naświetlaniu komórek poprzez pomiar powstających wewnątrzkomórkowe reaktywnych form tlenu (ROS) za pomocą barwnika fluorescencyjnego dioctanu 2',7'-dichlorofluoresceiny (DCF-DA). Barwnik DCF-DA jest wewnątrzkomórkowe utleniany przez powstające ROS do DCF wykazującego silną zieloną fluorescencję, która może być mierzona za pomocą fluorescencyjnego czytnika mikropłytek. Rezultaty uzyskane z zastosowaniem linii komórkowej prawidłowych ludzkich fibroblastów skóry (BJ) zaprezentowano w poniższej tabeli:
| Rodzaj próbki | Intensywność fluorescencji 485 nm/528 nm [% komórek nienaświetlanych] | |
| 35 mJ/cm1 | 80 mJ/cm2 | |
| UVB - 0 pg/ml | 503 | 2263 |
| UVB - 2,5 pg/itil | 359 | 2586 |
| UVB - 5 pg/ml | 318 | 1853 |
| UVB-10pg/ml | 307 | 1750 |
Rezultaty uzyskane z zastosowaniem hodowli pierwotnej ludzkich fibroblastów skóry (HSF) zaprezentowano w poniższej tabeli:
| Rodzaj próbki | Intensywność fluorescencji 485 nm/528 nm [% komórek nienaświetlanych] |
| 35 mJ/cm2 | 80 mj/ertr | |
| UVB - 0 pg/ml | 345 | 724 |
| UVB - 2,5 μ§/ιη1 | 267 | 686 |
| UVB - 5 pg/ml | 176 | 857 |
| UVB- 10pg/nil | 170 | 574 |
Rezultaty uzyskane z zastosowaniem linii komórkowej ludzkich keratynowców skóry (HEK001) zaprezentowano w poniższej tabeli:
PL 232 975 Β1
| Rodzaj próbki | Intensywność fluorescencji 485 nm/528 nm [% komórek nienaświetlanych] | |
| 35 mJ/cm2 | 80 mJ/cnr | |
| UVB - 0 μβ/πιΐ | 151 | 235 |
| UVB - 2,5 pg/ml | 120 | 245 |
| UVB - 5 pg/ml | 108 | 243 |
| UVB - 10 pg/ml | 97 | 244 |
Po ekspozycji na dawkę promieniowania UVB równą 35 mJ/cm2, fibroblasty i keratynocyty preinkubowane w obecności ekstraktu przez 24 godz. wykazywały w sposób proporcjonalny do wielkości zastosowanej dawki, zmniejszoną produkcję ROS w porównaniu do komórek inkubowanych w samym podłożu bez ekstraktu (UVB - 0 μg/ml). Ekstrakt w stężeniach 5 i 10 μg/ml obniżał produkcję ROS w keratynocytach skóry do poziomu komórek kontrolnych, które nie były naświetlane promieniowaniem UVB. W przypadku fibroblastów (BJ i HSF) były tylko nieznaczne różnice w aktywności anty oksydacyjnej pomiędzy poszczególnymi stężeniami ekstraktu. Po ekspozycji na dawkę promieniowania UVB równą 80 mJ/cm2, wyłącznie wyższe stężenia ekstraktu wykazywały niewielką aktywność ochronną tylko w stosunku do fibroblastów skóry (zarówno linii komórkowej BJ, jak i hodowli pierwotnej HSF).
6. Właściwości antyapoptotyczne
Ludzkie keratynocyty skóry (linia komórkowa HEK001) były inkubowane przez 24 godz. w podłożu hodowlanym zawierającym wyselekcjonowane nietoksyczne stężenia (2,5; 5 i 10 μg/ml) ekstraktu z nasion orzecha włoskiego oraz dla porównania w pełnym podłożu hodowlanym bez dodatku ekstraktu (0 μg/ml). Następnie komórki poddano ekspozycji na promieniowanie UVB o gęstości energii 35 mJ/cm2. Komórki kontrolne nie były naświetlane promieniowaniem UVB. Aktywność antyapoptotyczną ekstraktu oznaczono 2 godz. po naświetlaniu komórek stosując różnicowe barwienie fluorescencyjne (nekroza/apoptoza) za pomocą zestawu do detekcji apoptozy „Annexin V-Cy3”. Wybarwione komórki były obserwowane z użyciem laserowego fluorescencyjnego mikroskopu skaningowego. Komórki apoptotyczne były zliczane z kilku przypadkowych pól widzenia i wyrażone jako procent wszystkich komórek. Dla każdej badanej próby zliczono minimum 1500 komórek. Rezultaty zaprezentowano w poniższej tabeli:
| Rodzaj próbki | Procent apoptotycznych komórek [%] |
| Komórki nienaświetlane | 5,1 |
| UVB - 0 pg/ml | 15,9 |
| UVB-2,5 pg/ml | 14,5 |
| U VB — 5 pg/ml | 7,8 |
| UVB-10 pg/ml | 25,9 |
Po ekspozycji na dawkę promieniowania UVB równą 35 mJ/cm2, wyłącznie stężenie ekstraktu równe 5 μg/ml wykazywało ochronną aktywność antyapoptotyczną w stosunku do keratynocytów skóry.
7. Właściwości przeciwzapalne
W celu indukcji stanu zapalnego, ludzkie keratynocyty skóry (linia komórkowa HEK001) były stymulowane przez 24 godz. mieszaniną lipopolisacharydu (LPS, 10 μg/ml) i interferonu gamma (IFN-γ, 1 μg/ml) w obecności wyselekcjonowanych nietoksycznych dawek (2,5; 5 i 10 μg/ml) ekstraktu z nasion orzecha włoskiego oraz dla porównania w pełnym podłożu hodowlanym niezawierającym ekstraktu (0 μg/ml). Kontrolę negatywną stanu zapalnego stanowiły komórki niestymulowane za pomocą mieszaniny LPS/INF-γ. Ilość wytwarzanych przez keratynocyty cytokin prozapalnych (IL-6 i TNF-α) została oznaczona za pomocą komercyjnych testów ELISA. Rezultaty zaprezentowano w poniższej tabeli:
| Rodzaj próbki | Stężenie IL-6 [pg/ml] | Stężenie TNF-α [ pg/ml) |
| Komórki niestymulowane | 120,0 | 41,8 |
| LPS/INF - 0 pg/ml | 167,6 | 158,9 |
| LPS/INF - 2,5 pg/ml | 174,0 | 44,4 |
| LPS/INF - 5 pg/ml | 267,5 | 62,6 |
| LPS/INF - 10 pg/ml | 367,6 | 242,8 |
PL 232 975 B1
Ekstrakt z nasion orzecha włoskiego powodował w sposób proporcjonalny do wielkości zastosowanej dawki wzrost produkcji IL-6 w porównaniu do keratynocytów hodowanych w podłożu niezawierającym ekstraktu (LPS/INF - 0 pg/ml). Ekstrakt w stężeniach 2,5 i 5 pg/ml znacząco obniżał produkcję TNF-α w porównaniu do komórek hodowanych w podłożu niezawierającym ekstraktu, natomiast ekstrakt w stężeniu 10 pg/ml powodował wzrost produkcji TNF-α przez keratynocyty. IL-6 jest zarówno cytokiną prozapalną, jak i przeciwzapalną kontrolującą wydzielanie innych cytokin prozapalnych takich jak IL-1 i TNF -α. Zatem, ekstrakt z nasion orzecha włoskiego w stężeniach 2,5 i 5 pg/ml nieznacznie zwiększa produkcję cytokiny IL-6, która w tym zwiększonym stężeniu zachowuje się jak cytokina przeciwzapalna hamująca wydzielanie TNF-α.
P r z y k ł a d 1 g całych nasion orzecha włoskiego umieszczono w szklanej butelce i zalano 100 ml wody destylowanej w temperaturze pokojowej, a następnie inkubowano w temperaturze 25°C, przez 12 godzin, mieszając na mieszadle obrotowym z prędkością 5 rpm (obrotów na minutę). Następnie oddzielono frakcję stałą poprzez podwójną filtrację przy użyciu membrany Whatman, frakcję wodną zwirowano przy 8000 rpm, a następnie poddano liofilizacji. Uzyskano 860 mg liofilizatu (wydajność procesu 2,1%). Liofilizowany ekstrakt charakteryzował się 88,5%-owym zahamowaniem aktywności kolagenazy z Clostridium heamolyticum (11,5% aktywności początkowej kolagenazy) przy stężeniu ekstraktu w mieszaninie reakcyjnej równym 2,5 pg/ml, zaś 96,3%-owym zahamowaniem (3,7% aktywności początkowej kolagenazy) przy stężeniu ekstraktu w mieszaninie reakcyjnej równym 5 pg/ml. Liofilizowany ekstrakt w stężeniu 5 pg/ml był nietoksyczny w stosunku do ludzkich fibroblastów skóry, stymulował syntezę białka przez keratynocyty, posiadał właściwości ochronne (antyoksydacyjne i antyapoptotyczne) przed promieniowaniem UVB oraz właściwości przeciwzapalne.
P r z y k ł a d 2 g nasion orzecha włoskiego, rozdrobnionych do uzyskania frakcji 4,0-7,0 mm, umieszczono w szklanej butelce i zalano 100 ml wody destylowanej w temperaturze pokojowej, a następnie inkubowano w temperaturze 25°C, przez 12 godzin, mieszając na mieszadle obrotowym z prędkością 5 rpm (obrotów na minutę). Następnie oddzielono frakcję stałą poprzez podwójną filtrację przy użyciu membrany Whatman, frakcję wodną zwirowano przy 8000 rpm, a następnie poddano liofilizacji. Uzyskano 1620 mg liofilizatu (wydajność procesu 4,05%). Liofilizowany ekstrakt charakteryzował się 77,7%-owym zahamowaniem aktywności kolagenazy z Clostridium heamolyticum (22,3% aktywności początkowej kolagenazy) przy stężeniu ekstraktu w mieszaninie reakcyjnej równym 2,5 pg/ml.
P r z y k ł a d 3 g całych nasion orzecha włoskiego umieszczono w szklanej butelce i zalano 200 ml wody destylowanej w temperaturze pokojowej, a następnie inkubowano w temperaturze 50°C, przez 12 godzin, wytrząsając na wstrząsarce obrotowej z prędkością 30 rpm (obrotów na minutę). Następnie oddzielono frakcję stałą poprzez podwójną filtrację przy użyciu membrany Whatman, frakcję wodną zwirowano przy 8000 rpm, a następnie poddano liofilizacji. Uzyskano 8240 mg liofilizatu (wydajność procesu 10,3%). Liofilizowany ekstrakt charakteryzował się 10%-owym zahamowaniem aktywności kolagenazy z Clostridium heamolyticum (90% aktywności początkowej kolagenazy) przy stężeniu ekstraktu w mieszaninie reakcyjnej równym 2,5 pg/ml, zaś 58,6%-owym zahamowaniem (41,4% aktywności początkowej kolagenazy) przy stężeniu ekstraktu w mieszaninie reakcyjnej równym 5 pg/ml.
P r z y k ł a d 4 g całych nasion orzecha włoskiego umieszczono w szklanej butelce i zalano 100 ml wody destylowanej w temperaturze pokojowej, a następnie inkubowano w temperaturze 4°C, przez 12 godziny, mieszając na wytrząsarce laboratoryjnej z prędkością 60 rpm (obrotów na minutę). Następnie oddzielono frakcję stałą poprzez podwójną filtrację przy użyciu membrany Whatman, frakcję wodną zaś poddano liofilizacji.
P r z y k ł a d 5 g całych nasion orzecha włoskiego umieszczono w szklanej butelce i zalano 50 ml wody destylowanej w temperaturze pokojowej, a następnie inkubowano w temperaturze 37°C, przez 12 godzin, wytrząsając na wstrząsarce obrotowej z prędkością 30 rpm (obrotów na minutę). Następnie oddzielono frakcję stałą poprzez podwójną filtrację przy użyciu membrany Whatman, frakcję wodną zwirowano przy 8000 rpm, a następnie poddano liofilizacji. Uzyskano 795 mg liofilizatu (wydajność procesu 3,97%). Liofilizowany ekstrakt charakteryzował się 50%-owym zahamowaniem aktywności kolagenazy z Clostridium heamolyticum (50% aktywności początkowej kolagenazy) przy stężeniu ekstraktu w mieszaninie
PL 232 975 Β1 reakcyjnej równym 2,5 pg/ml, zaś 77%-owym zahamowaniem (23% aktywności początkowej kolagenazy) przy stężeniu ekstraktu w mieszaninie reakcyjnej równym 5 μg/ml.
W poniższej tabeli porównano właściwości przeciwstarzeniowe ekstraktów uzyskanych z orzecha włoskiego według wynalazku oraz według patentu US 6395261.
| Działanie przeciwstarzeniowe | Ekstrakt z wytłoczyn nasion orzecha włoskiego po produkcji oleju według patentu US 6395261 | Ekstrakt z jądra nasion orzecha włoskiego według wynalazku (procedura przedstawiona odpowiednio w Przykładzie 1 i Przykładzie 4) |
| Efektywne stężenie ekstraktu hamujące aktywność kolagenazy | 5000 pg/ml (19,5% inhibicji aktywności enzymu - źródła enzymu nie podano) | 1 gg/nil (84% inhibicji aktywności enzymu kolagenaza z Clostridium histolyticum) (procedura przygotowania ekstraktu według Przykładu 1) 10 pg/ml (34,2% inhibicji aktywności enzymu kolagenaza ludzka rekombinowana) (procedura przygotowania ekstraktu według Przykładu 4) |
| Efektywne stężenie ekstraktu hamujące aktywność elastazy ludzkiej | 5000 pg/ml (51,4% inhibicji aktywności enzymu — elastaza ludzka z fibroblastów skóry) | 10 pg/ml (47,8 % inhibicji aktywności enzymu elastaza ludzka rekombinowana) (procedura przygotowania ekstraktu według Przykładu 4) |
W poniższej tabeli porównano właściwości protekcyjne ekstraktów uzyskanych z orzecha włoskiego według wynalazku oraz według patentu US 6395261 w stosunek do komórek skóry.
| Działanie protekcyjne w stosunku do komórek skory | Ekstrakt z wytłoczyn nasion orzecha włoskiego po produkcji oleju wg patentu US 6395261 | Ekstrakt z jądra nasion orzecha włoskiego według wynalazku (procedura przedstawiona w Przykładzie 1) |
| Działanie antyoksydacyjne | 250 pg/ml (stopień oksydacji keratynocytów równy 98 UVB 25 mJ/cm2) | 10 pg/ml (stopień oksydacji keratynocytów równy 97 UVB 35 mJ/cm2) |
| Działanie antyapoptotyczne | 100 pg/tnl (1,4-krotne obniżenie ilości komórek apoptotycznych po ekspozycji naUVB) | 5 pg/ml (2-krotne obniżenie ilości komórek apoptotycznych po ekspozycji na UVB) |
| Działanie przeciwzapalne | 1/100 V/V (2,6-krotne obniżenie produkcji TNF-ct przez keratynocyty) | 2,5 pg/ml (3,6-krotne obniżenie produkcji TNF-a przez keratynocyty) |
Jak wykazano w obu powyższych tabelach, ekstrakt z nasion orzecha włoskiego otrzymywany sposobem według wynalazku wykazuje wyraźnie korzystniejsze działanie przeciwstarzeniowe oraz protekcyjne w stosunku do komórek skóry niż ekstrakt otrzymany sposobem znanym w stanie techniki i ujawnionym w patencie US 6395261. To korzystniejsze działanie możliwe jest dzięki zastosowaniu jako materiału wyjściowego nasion orzecha nieoddzielonych od skórek o stopniu rozdrobnienia nie większym niż 4 mm. Ponadto zastosowane w wynalazku proporcje składników maceracji (woda - nasiona orzecha włoskiego) w zakresie 2,5-10 części wagowych wody, korzystnie 2,5-6,5 zapewniają uzyskanie preparatu cechującego się zaskakująco wydajnym działaniem przeciwstarzeniowym w porównaniu z preparatem znanym ze stanu techniki.
PL 232 975 Β1
W zamieszczonej poniżej tabeli zaprezentowano wyniki zachowania aktywności kolagenazy z Clostridium histolyticum w obecności ekstraktu z nasion orzecha nieoddzielonych od skórek w zależności od stopnia rozdrobnienia materiału wyjściowego:
| Rozdrobnienie nasion orzecha włoskiego | Inhibicja kolagenazy (%) przez ekstrakty z |
| nieoddzielonych od skórek (rozmiar frakcji) | nasion orzecha’ w stężeniu 2,5 pg/ml |
| Nasiona nierozdrobnione | 90,1 |
| 4,0-7,0 mm | 77,7 |
| 2,5-4,0 mm | 22,7 |
| < 2,5 mm | 6,5 |
* - ekstrakty pozyskano w następujących warunkach: 40 g nasion orzecha włoskiego o stopniu rozdrobnienia jak w tabeli powyżej umieszczono w szklanej butelce, zalano 100 ml wody destylowanej, inkubowano w temperaturze 25°C przez 12 godzin, mieszając na mieszadle obrotowym z prędkością 5 rpm, następnie oddzielono frakcję stałą poprzez podwójną filtrację przy użyciu membrany Whatman, frakcję wodną żwirowano przy 8000 rpm, a następnie poddano liofilizacji.
Z wyników przedstawionych w powyższej tabeli wynika, że rozdrobnienie materiału wyjściowego do frakcji poniżej 4 mm znacząco zmniejsza korzystny efekt przeciwstarzeniowy otrzymanego ekstraktu (tj. zdolność do hamowania aktywności kolagenazy). Wynika z niej również, że dla uzyskania wysoce aktywnego ekstraktu przeciwstarzeniowego z nasion orzecha włoskiego nie oddzielonych od skórek należy stosować materiał wyjściowy w postaci nasion nieoddzielonych od skórek i zawierający frakcję oleistą, optymalnie nierozdrobniony tj. o rozdrobnieniu nie większym niż frakcja 4 mm. Tak otrzymany ekstrakt różni się znacząco pod względem aktywności hamującej działanie kolagenazy od ekstraktu otrzymanego sposobem według wynalazku US 395261, dla którego materiałem wyjściowym są nasiona orzecha poddane zmiażdżeniu i odciśnięciu frakcji oleistej.
Przykładowe receptury preparatów:
1. Krem po oczy
| Faza A | ||
| Baza emulgatorowa | stearynian glicerolu, alkohol cetearylowy, kwas stearynowy, lauryloglutaminian sodu | 5,0% |
| Laureth -3 | 2-[2-[2-(dodecyloksy)etoksy]etoksy]etanol | 1,0% |
| Alkohol cetearylowy | 4,0% | |
| Masło Shea | 2,0% | |
| Olej arganowy | 2,5% | |
| Olej joj oba | 2,5% | |
| Palmitynian askorbylu | 1,0% | |
| Faza B | ||
| Sodium PCA | Piroglutaminian sodu | 2,0% |
| Gliceryna | 3,0% | |
| Poliakrylan sodu | 2,0% | |
| Wcda | q.s | |
| FazaC | ||
| Ekstrakt z orzecha (0,8 mg/ml) | 10% | |
| Octan tokoferolu | 1.0% | |
| Fenoksvetanol | 1,2% | |
| Zapach | q-s |
PL 232 975 Β1
Wykonanie:
Składniki fazy A podgrzać na łaźni wodnej do momentu ich rozpuszczenia się, składniki fazy B wymieszać i ogrzać do temperatury fazy A. Ciepłą fazę A dodać do ciepłej fazy B i mieszać do uzyskania kremowej konsystencji. Do wystudzonego preparatu dodać składniki fazy C.
2. Krem do twarzy (anty aging)
| Faza A | ||
| Masło Shea | 5.0% 5.0% | |
| GSC | Cytrynianowo-stearynianowy ester glicerylu | |
| Alkohol cetearylowy | 4.0% | |
| Olej arganowy | 5.0% | |
| PEG -40 hydrogenated Castro! oil | Polioksyetylenowany uwodorniony olej rycynowy | l .0% |
| Palmitynian askorbylu | l .0% | |
| Faza B | ||
| Sodium PCA | Pirogi utaminian sodu | 3,0% |
| Gliceryna | 2,0% | |
| PEG 8 dimetikon | Kopolimer tlenku etylenu i dimetikonu | 2,0% |
| Woda | q-s | |
| Faza C | ||
| Ekstrakt z orzecha (0,8 mg/ml) | 10% | |
| Fenoksyetanol | 1,2% | |
| Zapach | q§ |
Wykonanie:
Składniki fazy A podgrzać na łaźni wodnej do momentu ich rozpuszczenia się, składniki fazy B wymieszać i ogrzać do temperatury fazy A. Ciepłą fazę A dodać do ciepłej fazy B i mieszać do uzyskania kremowej konsystencji. Do wystudzonego preparatu dodać składniki fazy C.
Claims (5)
1. Sposób otrzymywania ekstraktu z orzecha włoskiego polegający na inkubacji w środowisku wodnym nasion z orzecha włoskiego i oddzieleniu frakcji stałej, znamienny tym, że jądra nasienia orzecha włoskiego (Juglans regia) nieoddzielone od skórek (pelikul), o rozdrobnieniu w stopniu nie większym niż frakcja o wielkości 4 mm, poddaje się maceracji w proporcji 1 część wagowa jąder i 2,5-10 części wagowych wody, korzystnie 2,5-6,5 części wagowych wody, w temperaturze 4-75°C, przez okres od 1 godziny do 12 godzin, korzystnie 6-12 godzin, mieszając całość, następnie frakcję wodną oddziela się od frakcji stałej, ewentualnie filtruje, a na koniec zebrany ekstrakt zagęszcza się i przechowuje w temperaturze poniżej temperatury pokojowej.
2. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że ekstrakcji dokonuje się stosując nasiona całkowicie nierozdrobnione i nieuszkodzone, w okresie do 6 miesięcy od ich zebrania.
3. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że maceracji dokonuje się w temperaturze do 25°C, gdy oddzielona frakcja płynna jest zagęszczona przez liofilizację, a liofilizat jest przechowywany w temperaturze poniżej 10°C.
4. Kompozycja kosmetyczna, znamienna tym, że zawiera ekstrakt wodny z jąder orzecha włoskiego (Juglans regia), nieoddzielonych od skórek, o rozdrobnieniu nie większym niż frakcja 4 mm, otrzymany w wyniku maceracji składników w proporcji 1 część wagowa jąder i 2,5-10 części wagowych wody, korzystnie 2,5-6,5 części wagowych wody, w temperaturze 4-75°C, korzystnie 25°C, przez okres od 1 godziny do 12 godzin, korzystnie 6-12 godzin.
PL 232 975 B1
5. Zastosowanie ekstraktu z jąder orzecha włoskiego (Juglans regia), nieoddzielonych od skórek, orzecha włoskiego (Juglans regia) o rozdrobnieniu nie większym niż frakcja 4 mm, otrzymanego w wyniku maceracji składników w proporcji 1 część wagowa jąder i 2,5-10 części wagowych wody, korzystnie 2,5-6,5 części wagowych wody, w temperaturze 4-75°C, korzystnie 25°C, przez okres od 1 godziny do 12 godzin, korzystnie 6-12 godzin, do otrzymywania preparatów kosmetycznych, zwłaszcza przeciwzmarszczkowych.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL417505A PL232975B1 (pl) | 2016-06-09 | 2016-06-09 | Sposób otrzymywania ekstraktu z nasion orzecha włoskiego, kompozycja zawierająca ekstrakt oraz zastosowanie ekstraktu |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL417505A PL232975B1 (pl) | 2016-06-09 | 2016-06-09 | Sposób otrzymywania ekstraktu z nasion orzecha włoskiego, kompozycja zawierająca ekstrakt oraz zastosowanie ekstraktu |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL417505A1 PL417505A1 (pl) | 2017-12-18 |
| PL232975B1 true PL232975B1 (pl) | 2019-08-30 |
Family
ID=60655732
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL417505A PL232975B1 (pl) | 2016-06-09 | 2016-06-09 | Sposób otrzymywania ekstraktu z nasion orzecha włoskiego, kompozycja zawierająca ekstrakt oraz zastosowanie ekstraktu |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL232975B1 (pl) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| PL240152B1 (pl) * | 2018-11-16 | 2022-02-21 | Univ Rolniczy Im Hugona Kollataja W Krakowie | Sposób otrzymywania liofilizowanego ekstraktu roślinnego do produktów, zwłaszcza kosmetycznych |
-
2016
- 2016-06-09 PL PL417505A patent/PL232975B1/pl unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL417505A1 (pl) | 2017-12-18 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US12053439B2 (en) | Edible, single-extraction curcuma extracts | |
| Jain et al. | Traditional Indian herb Emblica officinalis and its medicinal importance | |
| KR101059471B1 (ko) | 피부 노화 방지용 화장료 조성물 | |
| TWI381834B (zh) | Abnormal protein removal composition | |
| CA2520057A1 (en) | Composition for promoting production of type i collagen and/or elastin | |
| MX2007005886A (es) | Composiciones farmaceuticas y terapeuticas derivadas de la planta garcinia mangostana l. | |
| KR102083294B1 (ko) | 피부재생 효과를 갖는 미선나무 추출물 및 그 추출물을 함유하는 피부재생용 조성물 | |
| KR102227874B1 (ko) | 아토피와 각종 피부염증을 개선할 수 있는 화장품조성물 | |
| US11717476B2 (en) | Moringa peregrina seed extract rich in 2,5-diformylfuran, process for obtaining same and use thereof in cosmetic compositions | |
| US20130012577A1 (en) | Process to obtain a standardized extract of quercetin and 3-o-methylquercetin from inflorescences of macela-do-campo, a cosmetic, pharmaceutical and veterinary composition containing extract of macela-do-campo, the use of this extract and the method of application of the aforesaid extract | |
| JP2007230977A (ja) | 顆粒球・マクロファージコロニー刺激因子（ｇｍ−ｃｓｆ）産生抑制剤ｉｉ | |
| PL232975B1 (pl) | Sposób otrzymywania ekstraktu z nasion orzecha włoskiego, kompozycja zawierająca ekstrakt oraz zastosowanie ekstraktu | |
| KR102801893B1 (ko) | 나노화된 벌화분 추출물을 유효성분으로 포함하는 여드름 치료용 조성물 | |
| JP5047511B2 (ja) | 顆粒球・マクロファージコロニー刺激因子（ｇｍ−ｃｓｆ）産生抑制剤ｉ | |
| ES2890232T3 (es) | Producción de extractos estandarizados de la planta conocida como cuachalalate (Amphipterygium adstringens) y usos de los mismos como agentes de protección solar | |
| KR100644086B1 (ko) | 피부자극이 없는 한방입욕제의 제조방법 | |
| Köroğlu | Rosa canina L. | |
| Ramesh et al. | A REVIEW ON FORMULATION DEVELOPMENT AND EVALUATION OF ANTIOXIDANT ACTIVITY OF PEEL-OFF FACIAL MASK BY DYNAMIC DUO OF FLAXSEED AND ALOE VERA | |
| HK40090580A (en) | Novel formulations and uses for curcuma extracts | |
| KR101773051B1 (ko) | 반변련 추출물을 함유하는 화장료 조성물 | |
| HK40072572B (en) | Novel formulations and uses for curcuma extracts | |
| KR20050037876A (ko) | 한약재 추출물을 포함하는 항염증 조성물 | |
| CN120919012A (zh) | 一种祛痘霜及其制备方法和应用 | |
| KR20110037461A (ko) | 하고초 추출물 및 노루풀 추출물을 함유하는 주름개선용 화장료 조성물 | |
| Dahale et al. | Formulation and Evaluation of Anti-oxidant Herbal Cream Using Pomegranate Leaves Extract |