PL244020B1 - Sposób jednoczesnego otrzymywania 3β,7α,17β-trihydroksyandrost- 5-enu i 3β,7β,17β-trihydroksy-androst-5-enu - Google Patents
Sposób jednoczesnego otrzymywania 3β,7α,17β-trihydroksyandrost- 5-enu i 3β,7β,17β-trihydroksy-androst-5-enu Download PDFInfo
- Publication number
- PL244020B1 PL244020B1 PL438511A PL43851121A PL244020B1 PL 244020 B1 PL244020 B1 PL 244020B1 PL 438511 A PL438511 A PL 438511A PL 43851121 A PL43851121 A PL 43851121A PL 244020 B1 PL244020 B1 PL 244020B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- ene
- androst
- trihydroxy
- carried out
- transformation
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 13
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 4
- OEVZKEVBDIDVOI-YSZCXEEOSA-N (3s,7r,8r,9s,10r,13s,14s,17s)-10,13-dimethyl-2,3,4,7,8,9,11,12,14,15,16,17-dodecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthrene-3,7,17-triol Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3[C@@H](O)C=C21 OEVZKEVBDIDVOI-YSZCXEEOSA-N 0.000 title abstract description 3
- OEVZKEVBDIDVOI-FMKNUBLKSA-N androst-5-ene-3beta,7alpha,17beta-triol Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3[C@H](O)C=C21 OEVZKEVBDIDVOI-FMKNUBLKSA-N 0.000 title abstract 2
- KPRGOTLNGIBVFL-UHFFFAOYSA-N 7-Oxodehydroepiandrosterone Natural products C1C(O)CCC2(C)C3CCC(C)(C(CC4)=O)C4C3C(=O)C=C21 KPRGOTLNGIBVFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- KPRGOTLNGIBVFL-GINZOMEDSA-N 7-ketodehydroepiandrosterone Chemical group C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3C(=O)C=C21 KPRGOTLNGIBVFL-GINZOMEDSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 241000123196 Piptoporus betulinus Species 0.000 claims abstract description 5
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims abstract description 5
- 230000009466 transformation Effects 0.000 claims description 10
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 6
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000003480 eluent Substances 0.000 claims description 3
- 241000233866 Fungi Species 0.000 claims description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 abstract description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 abstract description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 abstract 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 abstract 1
- OKKJLVBELUTLKV-MZCSYVLQSA-N Deuterated methanol Chemical compound [2H]OC([2H])([2H])[2H] OKKJLVBELUTLKV-MZCSYVLQSA-N 0.000 description 8
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 8
- FMGSKLZLMKYGDP-USOAJAOKSA-N dehydroepiandrosterone Chemical class C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CC=C21 FMGSKLZLMKYGDP-USOAJAOKSA-N 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- FMGSKLZLMKYGDP-UHFFFAOYSA-N Dehydroepiandrosterone Natural products C1C(O)CCC2(C)C3CCC(C)(C(CC4)=O)C4C3CC=C21 FMGSKLZLMKYGDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 3
- 229960002847 prasterone Drugs 0.000 description 3
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QADHLRWLCPCEKT-UHFFFAOYSA-N Androstenediol Natural products C1C(O)CCC2(C)C3CCC(C)(C(CC4)O)C4C3CC=C21 QADHLRWLCPCEKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000010214 Mucor hiemalis f. silvaticus Species 0.000 description 2
- 241000306282 Umbelopsis isabellina Species 0.000 description 2
- QADHLRWLCPCEKT-LOVVWNRFSA-N androst-5-ene-3beta,17beta-diol Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CC=C21 QADHLRWLCPCEKT-LOVVWNRFSA-N 0.000 description 2
- 229950009148 androstenediol Drugs 0.000 description 2
- 230000036983 biotransformation Effects 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 230000002124 endocrine Effects 0.000 description 2
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 241000235389 Absidia Species 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 208000002705 Glucose Intolerance Diseases 0.000 description 1
- 206010018429 Glucose tolerance impaired Diseases 0.000 description 1
- 208000012659 Joint disease Diseases 0.000 description 1
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 206010027940 Mood altered Diseases 0.000 description 1
- 208000019022 Mood disease Diseases 0.000 description 1
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 208000027626 Neurocognitive disease Diseases 0.000 description 1
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000011208 chromatographic data Methods 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 229930182851 human metabolite Natural products 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 230000033444 hydroxylation Effects 0.000 description 1
- 238000005805 hydroxylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000029849 luteinization Effects 0.000 description 1
- 230000007510 mood change Effects 0.000 description 1
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 description 1
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 1
- 230000000324 neuroprotective effect Effects 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 1
- 230000027758 ovulation cycle Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- -1 steroid triols Chemical class 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- RINCXYDBBGOEEQ-UHFFFAOYSA-N succinic anhydride Chemical class O=C1CCC(=O)O1 RINCXYDBBGOEEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000844 transformation Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P33/00—Preparation of steroids
- C12P33/06—Hydroxylating
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J1/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen, not substituted in position 17 beta by a carbon atom, e.g. estrane, androstane
- C07J1/0003—Androstane derivatives
- C07J1/0018—Androstane derivatives substituted in position 17 beta, not substituted in position 17 alfa
- C07J1/0022—Androstane derivatives substituted in position 17 beta, not substituted in position 17 alfa the substituent being an OH group free esterified or etherified
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P33/00—Preparation of steroids
- C12P33/12—Acting on D ring
- C12P33/16—Acting at 17 position
- C12P33/18—Hydroxylating at 17 position
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/645—Fungi ; Processes using fungi
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Wynalazek dotyczy jednoczesnego sposobu otrzymywania 3β,7α, 17β-trihydroksy-androst-5-enu i 3β,7β,17β-trihydroksy-androst-5-enu, o wzorach 2 i 3, na drodze mikrobiologicznej redukcji, w której jako substrat stosuje się 7-okso-DHEA, o wzorze 1, przy użyciu systemu enzymatycznego grzyba strzępkowego Piptoporus betulinus AM39.
Description
Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest sposób jednoczesnego otrzymywania 3β,7α, 17e-trihydroksy-androst-5-enu i 3e,7e,17e-trihydroksy-androst-5-enu, o wzorach 2 i 3, przedstawionych na rysunku.
Wynalazek może znaleźć zastosowanie do otrzymywania trójwodorotlenowych naturalnych metabolitów dehydroepiandrosteronu (DHEA) o wysokim potencjale terapeutycznym.
Wprowadzenie grupy hydroksylowej do cząsteczki steroidowej może skutkować wzmocnieniem lub zmianą aktywności biologicznej związku (Donova M.V., Egorova O.V., App. Microbiol. Biotechnol., 2012, 94, 1423-1447; El Kihel L, Steroids, 2012, 77, 10-26). Hydroksylowane metabolity DHEA wykazują szereg różnorodnych właściwości biologicznych, wcześniej częściowo błędnie przypisywanych samemu DHEA. 7α- i 7e-hydroksy-DHEA mają działanie neuroprotekcyjne, przeciwutleniające, przeciwnowotworowe, immunomodulacyjne i przeciwzapalne. Z powodu tych aktywności związki te mogą być użyteczne w terapiach wielu schorzeń, m. in. chorób autoimmunologicznych, neurodegeneracyjnych czy zaburzeń metabolizmu (El Kihel L, Steroids, 2012, 77, 10-26; Kancheva R. et al., Neuroscience, 2011,191,22-27;Pellissier M. et al., Steroids, 2011,69,137-144; Starka L, Physiol. Res., 2011, 66, 285-294).
3e,7e,17e-trihydroksy-androst-5-en jest występującym u ludzi metabolitem DHEA o aktywności przeciwzapalnej wielokrotnie silniejszej od działania dehydroepiandrosteronu (Morfin R., Starka, L, Int. Rev. Neurobiol., 2001, 46, 79-95; Loria R. M., Steroids, 2002, 67, 953-966). Wykazuje on również aktywność antyglukokortykoidową, dzięki czemu może być wykorzystywany do łagodzenia zaburzeń nastroju (Loria R. M., 1997, Psychoneuroendocrinology 22, 103-108; Duskova M. et al., 2011, Endocrine Regulations 45, 131-137). Ze względu na właściwości immunomodulacyjne rozważane jest jego stosowanie w terapii schorzeń stawów oraz zaburzeń metabolizmu, m. in. otyłości i nietolerancji glukozy (Ahlem C. N. et al., J. Steroid Biochem. Mol. Biol., 2011, 126, 87-94). W badaniach klinicznych wykazano, że 3e,7e,17e-trihydroksy-androst-5-en wpływa na obniżenie poziomu cholesterolu u zdrowych mężczyzn (stickney D. M. et al., Am. J. Transl. Res., 2011,3, 275-283).
Podobnie jak jego 7β izomer, 3e,7a,17e-trihydroksy-androst-5-en jest immunomodulacyjnym związkiem o silnym działaniu przeciwzapalnym (Loria R. M.,1997, Psychoneuroendocrinology 22, 103-108). Obniżony poziom tego steroidu skorelowany został ze zmianami nastroju i zaburzeniami neurokognitywnymi występującymi u kobiet w fazie lutealnej cyklu menstruacyjnego (Duskova M. et al., 2011, Endocrine Regulations 45, 131-137).
Chemiczna synteza leków steroidowych wymaga zwykle przeprowadzania licznych operacji technologicznych, związanych m. in. z koniecznością osłaniania niektórych grup funkcyjnych przed niespecyficznymi co do miejsca i konformacji reakcjami chemicznymi. W przeciwieństwie do metod chemicznych, transformacje mikrobiologiczne pozwalają modyfikować strukturę cząsteczek jednoetapowo, umożliwiając wysoką regio- oraz stereoselektywność reakcji przy zachowaniu łagodnych warunków procesu.
Znany jest sposób otrzymywania mieszaniny 3e,7a,17e-trihydroksy-androst-5-enu i 3β,7β,17βtrihydroksy-androst-5-enu jako produktu biotransformacji androstendiolu lub DHEA przeprowadzanych w kulturach grzybów strzępkowych Mortierella isabellina AM212 (Kołek T. et al., Org. Biomol. Chem., 2011, 9, 5414-5422), Absidia coreulea AM93 (Milecka-Tronina N. et al., Bioorg. Med. Chem., 2013, 22, 883-891) i Mucor silvaticus (Wang Y. et al., Biocatal. Biotransformation, 2013, 31, 168-174). W transformacji androstendiolu przez A. coreulea AM93 otrzymano odpowiednio 9,5% i 19% 3e,7a,17e-trihydroksy-androst-5-enu i 3e,7e,17e-trihydroksy-androst-5-enu. W reakcji z udziałem M. isabellina AM212 a także M. silvaticus mieszanina produktów zawierała kilkukrotnie więcej 3e,7a,17e-trihydroksy-androst-5-enu w porównaniu do izomeru 7β.
Szczep Piptoporus betulinus AM39 był wcześniej ujawniony w literaturze jako mikroorganizm zdolny do mikrobiologicznej hydoksylacji pochodnej bezwodnika kwasu bursztynowego (Olejniczak T., World J. Bicrob. Biot., 2010, 26, 2053-2060).
Istota wynalazku polega na tym, że do podłoża odpowiedniego dla wzrostu grzybów strzępkowych wprowadza się zawiesinę komórek Piptoporus betulinus AM39. Hodowlę prowadzi się przy ciągłym wstrząsaniu w temperaturze 22-26°C. Po upływie co najmniej 4 dni do hodowli dodaje się substrat, którym jest 7-okso-DHEA, rozpuszczony w rozpuszczalniku organicznym mieszającym się z wodą. Transformację prowadzi się w temperaturze od 22°C do 26°C, przy ciągłym wstrząsaniu, co najmniej 24 godziny. Produkty ekstrahuje się rozpuszczalnikiem organicznym niemieszającym się z wodą i oczyszcza chromatograficznie, w wyniku czego otrzymuje się 3e,7a,17e-trihydroksy-androst-5-en oraz 3 β ,7β ,17e-tri hyd roksy-androst-5-en.
Korzystnie jest, gdy stosunek masy dodawanego substratu do objętości hodowli wynosi 0,3 g : 1 L.
Korzystnie także jest, gdy transformację prowadzi się w temperaturze 25°C.
Korzystnie jest, gdy transformację prowadzi się przez 24 godziny.
Korzystne jest, gdy jako ekstrahent stosuje się chloroform.
Korzystne jest także, gdy jako eluent stosuje się mieszaninę octan etylu : chlorek metylenu : metanol w proporcji objętościowej składników 3 : 2 : 0,2.
Sposobem według wynalazku, w wyniku redukcji 7-okso-DHEA (7-okso-dehydroepiandrosteronu) można otrzymać steroidowe triole, które ze względu na swoją aktywność biologiczną mają wysoki potencjał terapeutyczny.
Zasadniczą zaletą wynalazku jest otrzymanie mieszaniny 3e,7a,17e-trihydroksy-androst-5-enu i 3e,7e,17e-trihydroksy-androst-5-enu z wydajnością 27% i 47% w łagodnych warunkach reakcji i w pH bliskim obojętnemu.
Wynalazek jest bliżej objaśniony na przykładzie wykonania.
Do kolby Erlenmeyera o pojemności 300 mL, w której znajduje się 100 mL sterylnej pożywki zawierającej 3 g glukozy i 1 g aminobaku, wprowadza się 2 cm3 zawiesiny komórek Piptoporus betulinus AM39. Hodowlę prowadzi się przez kolejne cztery dni przy stałym wstrząsaniu w temperaturze 25°C. Następnie do hodowli mikroorganizmu dodaje się 30 mg 7-okso-DHEA, o wzorze 1, w postaci zawiesiny w 0,6 cm3 acetonu. Transformację prowadzi się przy ciągłym wstrząsaniu przez 24 godziny w warunkach, w których prowadzona była hodowla mikroorganizmu. Następnie uzyskany roztwór transformacyjny ekstrahuje się trzykrotnie chloroformem, osusza bezwodnym siarczanem magnezu i odparowuje rozpuszczalnik. Wydajność otrzymania produktów według danych chromatograficznych (GC) wynosi odpowiednio 30% i 49%. Po oczyszczeniu surowego produktu za pomocą chromatografii kolumnowej, z zastosowaniem jako eluentu mieszaniny octan etylu : chlorek metylenu : metanol w proporcji objętościowej składników 3 : 2 : 0,2 otrzymuje się 8 mg 3e,7a,17e-trihydroksy-androst-5-enu oraz 14 mg 3e,7e,17e-trihydroksy-androst-5-enu (łączna wydajność izolowana 74% mol.).
Uzyskane produkty charakteryzują się następującymi danymi spektralnymi:
3e,7a,17e-trihydroksy-androst-5-en:
1H NMR (CD3OD) δ (ppm): 0.75 (3H, s, 18-Me); 1.02 (3H, s, 19-Me); 3.44-3.55 (1H, m, 3a-H); 3.61 (1H, t, J = 8.5 Hz, 17a-H); 3.76 (1H, t, J = 3.6 Hz, 7p-H); 5.54 (1H, d, J = 5.0 Hz, 6-H) 13C-NMR (CD3OD): 11.4 (18-C), 18.7 (19-C), 21.5 (11-C), 24.2 (15-C), 30.7 (16-C), 32.2 (2-C), 37.5 (12-C), 38.2 (C-1), 38.5 (10-C), 39.1 (8-C), 42.9 (4-C), 43.6 (13-C), 43.7 (9-C), 45.4 (14-C), 65.5 (7-C), 72.0 (3-C), 82.5 (17-C), 125.0 (6-C), 146.7 (5-C)
3e,7e,17e-trihydroksy-androst-5-en:
1H NMR (CD3OD) δ (ppm): 0.76 (3H, s, 18-Me); 1.09 (3H, s, 19-Me); 3.37-3.48 (1H, m, 3a-H); 3.56 (1H, t, J = 8.5 Hz, 17a-H); 3.72 (1H, dt, J = 2.1 Hz, J = 7.8 Hz, 7a-H); 5.25 (1H, t, J = 1.8 Hz, 6-H).
13C NMR (CD3OD): 11.6 (18-C), 19.6 (19-C), 21.9 (11-C), 26.6 (15-C), 30.9 (16-C), 32.3 (2-C), 37.7 (10-C), 37.8 (12-C), 38.3 (1-C), 41.3 (8-C), 42.6 (4-C), 44.3 (13-C), 50.1 (9-C), 52.3 (14-C), 72.2 (3-C), 74.0 (7-C), 82.3 (17-C), 127.4 (6-C), 144.1 (5-C).
Claims (6)
1. Sposób jednoczesnego otrzymywania 3e,7a, 17e-trihydroksy-androst-5-enu i 3e,7e,17e-trihydroksy-androst-5-enu, znamienny tym, że do podłoża odpowiedniego dla grzybów strzępkowych wprowadza się szczep Piptoporus betulinus AM39, przy czym hodowlę prowadzi się przy ciągłym wstrząsaniu w temperaturze od 22°C do 26°C, następnie po upływie co najmniej 4 dni do hodowli dodaje się substrat, którym jest 7-okso-DHEA, o wzorze 1, rozpuszczony w rozpuszczalniku organicznym mieszającym się z wodą, transformację prowadzi się w temperaturze od 22°C do 26°C przy ciągłym wstrząsaniu co najmniej 24 godziny, po czym produkty ekstrahuje się rozpuszczalnikiem organicznym niemieszającym się z wodą i oczyszcza chromatograficznie, w wyniku czego otrzymuje się 3e,7a,17e-trihydroksy-androst-5-en o wzorze 2 oraz 3e,7e,17e-trihydroksy-androst-5-en o wzorze 3.
2. Sposób według zastrz. 1., znamienny tym, że stosunek masy dodawanego substratu do objętości hodowli wynosi 0,3 g : 1 L.
PL 244020 Β1
3. Sposób według zastrz. 1., znamienny tym, że transformację prowadzi się w temperaturze 25°C.
4. Sposób według zastrz. 1., znamienny tym, że transformację prowadzi się przez 24 godziny.
5. Sposób według zastrz. 1., znamienny tym, że ekstrakcję wykonuje się chloroformem.
6. Sposób według zastrz. 1., znamienny tym, że jako eluent stosuje się mieszaninę octanu etylu : chlorku metylenu : metanolu w proporcji objętościowej składników 3:2:0,2.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL438511A PL244020B1 (pl) | 2021-07-16 | 2021-07-16 | Sposób jednoczesnego otrzymywania 3β,7α,17β-trihydroksyandrost- 5-enu i 3β,7β,17β-trihydroksy-androst-5-enu |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL438511A PL244020B1 (pl) | 2021-07-16 | 2021-07-16 | Sposób jednoczesnego otrzymywania 3β,7α,17β-trihydroksyandrost- 5-enu i 3β,7β,17β-trihydroksy-androst-5-enu |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL438511A1 PL438511A1 (pl) | 2023-01-23 |
| PL244020B1 true PL244020B1 (pl) | 2023-11-20 |
Family
ID=84982724
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL438511A PL244020B1 (pl) | 2021-07-16 | 2021-07-16 | Sposób jednoczesnego otrzymywania 3β,7α,17β-trihydroksyandrost- 5-enu i 3β,7β,17β-trihydroksy-androst-5-enu |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL244020B1 (pl) |
-
2021
- 2021-07-16 PL PL438511A patent/PL244020B1/pl unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL438511A1 (pl) | 2023-01-23 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Ekiz et al. | Biotransformation of cyclocanthogenol by the endophytic fungus Alternaria eureka 1E1BL1 | |
| Choudhary et al. | Biotransformation of adrenosterone by filamentous fungus, Cunninghamella elegans | |
| Shaw et al. | Bile acids. OV. 2, 2-Dimethoxypropane: an esterifying agent preferred to diazomethane for chenodeoxycholic acid. | |
| Bedane et al. | Cytotoxic bufadienolides from the leaves of a medicinal plant Melianthus comosus collected in South Africa | |
| Özçinar et al. | Biotransformation of ruscogenins by Cunninghamella blakesleeana NRRL 1369 and neoruscogenin by endophytic fungus Neosartorya hiratsukae | |
| Xu et al. | Site-selective oxidation of unactivated C–H sp3 bonds of oleanane triterpenes by Streptomyces griseus ATCC 13273 | |
| Ahmed et al. | 1α, 3β, 5β-Trihydroxy-24-methylenecholestan-6-one: a novel steroid from a soft coral Sinularia gibberosa | |
| Yazdi et al. | Biotransformation of hydrocortisone by a natural isolate of Nostoc muscorum | |
| Hussain et al. | Aspergillus niger-mediated biotransformation of methenolone enanthate, and immunomodulatory activity of its transformed products | |
| Zafar et al. | New metabolites from fungal biotransformation of an oral contraceptive agent: methyloestrenolone | |
| Farooq et al. | Microbial transformation of mestanolone by Macrophomina phaseolina and Cunninghamella blakesleeana and anticancer activities of the transformed products | |
| Tapolcsányi et al. | Synthesis and receptor-binding examination of 16-hydroxymethyl-3, 17-estradiol stereoisomers | |
| PL244020B1 (pl) | Sposób jednoczesnego otrzymywania 3β,7α,17β-trihydroksyandrost- 5-enu i 3β,7β,17β-trihydroksy-androst-5-enu | |
| Korda et al. | Sugar migration induced by the Wagner-Meerwein rearrangement of 28-O-glycosyl-betulin derivatives | |
| Al-Awadi et al. | Studies on Bacillus stearothermophilus. Part 1. Transformation of progesterone to a new metabolite 9, 10-seco-4-pregnene-3, 9, 20-trione | |
| Li et al. | Biotransformation of 20 (S)-protopanaxadiol by Mucor spinosus | |
| EP0300062B1 (en) | Novel androst-4-ene-3,17-dione derivatives and process for their preparation | |
| Chou et al. | Fungal transformation of isosteviol lactone and its biological evaluation for inhibiting the AP-1 transcription factor | |
| Bokkenheuser et al. | Dehydroxylation of 16 alpha-hydroxyprogesterone by fecal flora of man and rat | |
| Aamer et al. | New anti-inflammatory and non-cytotoxic metabolites of methylstenbolone obtained by microbial transformation | |
| JP2010531660A (ja) | ９α−ヒドロキシ−ステロイドの合成方法 | |
| Baydoun et al. | Fungal transformation and T-cell proliferation inhibitory activity of melengestrol acetate and its metabolite | |
| Baranovsky et al. | 14β-(Isoxazol-3-yl) methylestrane steroids: chemoselective synthesis and transformations with heterocyclic ring opening | |
| Atif et al. | Solid phase microbial fermentation of anabolic steroid, dihydrotestosterone with ascomycete fungus fusarium oxysporum | |
| PL246071B1 (pl) | Sposób wytwarzania 11α-hydroksy-19-nortestosteronu |