PL81722B1 - - Google Patents

Download PDF

Info

Publication number
PL81722B1
PL81722B1 PL15081271A PL15081271A PL81722B1 PL 81722 B1 PL81722 B1 PL 81722B1 PL 15081271 A PL15081271 A PL 15081271A PL 15081271 A PL15081271 A PL 15081271A PL 81722 B1 PL81722 B1 PL 81722B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
vinblastine
vincristine
alkaloids
vinleurosine
mixture
Prior art date
Application number
PL15081271A
Other languages
English (en)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed filed Critical
Priority to PL15081271A priority Critical patent/PL81722B1/pl
Publication of PL81722B1 publication Critical patent/PL81722B1/pl

Links

Landscapes

  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Description

Sposób selektywnego odzyskiwania trzech dimerycznych alkaloidów z Yinca rosea L. lub ich soli Przedmiotem wynalazku jest sposób selektywne¬ go odzyskiwania nastepujacych trzech dimerycz¬ nych alkaloidów z Vinca rosea L. (Catharanthus roseus G. Don) w postaci zasad lub sold: Vinkaleu- koblastin (VLB; ogólnie znana nazwa: vinblastine, w dalszym ciagu nazywamy winblastyna), Leurosin (VLR; ogólnie znana nazwa: vinleurosine; w dal¬ szym ciagu nazywany winleurozyna) i Leurocristin (VCR; ogólnie znana nazwa: vinoristine; w dalszym ciagu nazywany winkrystyna).W ostatnim czasie farmakolodzy na calym swie¬ cie piracówali z wielka intensywnoscia nad wytwa¬ rzaniem zwiazków o dzialaniu cytostatycznym, na¬ dajacych sie do leczenia chorych na raka. Do naj¬ wazniejszych wyników tych badan nalezy wykry¬ cie dimerycznych alkaloidów otrzymywanych z yin¬ ca rosea L. i wprowadzenie ich do lecznictwa. Pre¬ paraty te, prawie juz od 10 lat okazaly sie stosuii^ kowo najskuteczndejszynl srodkiem stosowanym w klinicznej praktyce w dziedzinie onkologii: Alkaloid winblastyna jest znanym lekiem onko¬ logicznym, który w stosowaniu klinicznym powo¬ duje znaczne zmniejszenie ilosci bialych krwinek.Okazal sie on skuteczny w leczeniu choroby Hod- gkina, ostrej leukemii a takze odpornego Chorio- carcinom [np. Johnson, I. S., Weright, H. P., Svo- boda G.H. i Vlantis, J. Gancer Res. 20, (1960) 10101.Dzialanie alkaloidu winleurozyny jest jeszcze malo znane. Jej zakres dzialania wydaje sie byc taki sam jak u alkaloidu winblastyny [Johnson 10 15 20 25 30 i wspólpracownicy: Cancer Res. 23 (1963) 1390; Antitumoral effects on Vinca rosea alkaloids. Pro- ceeding first symposium of the G.E.A. Excerpta Medica Foundation Amsterdam 1966].Alkaloid winkrystyna zostal opisany wzglednie wyosobniony po raz pierwszy przez G. H. Svobode [Svoboda, G. H.: Alkaloids of Vinca rosea (Catha- ranthus roseus) IX. Extraction and Charactenisation of Leurosidine and Leurocristine, Lloydia 24 (1961) 173—187]. Wkrótce okazalo sie, ze ten nowy alka¬ loid, chociaz pod wzgledem dzialania podobny do wczesniej wykrytej winblastyny, z punktu widze¬ nia farmakologicznego jest znacznie korzystniejszy.W badaniach in vitro alkaloid winkrystyna hamuje mitoze nowych plastycznych komórek w metafazie [np. Cardinali, G., Aboul Enein, M. I. M.: Studies on the Antimitotic Aation of Leuroaristine cristine). Blood 21 (1963) 102]. W stosowaniu kli¬ nicznym alkaloid winkrystyna okazal sie bardziej korzystny w przypadkach ostrej leukemii u dzieci, w porównaniu z dotad znanymi chemoterapeutyka- mi. Podczas gdy przedtem, w wiekszosci przypad¬ ków tej choroby nie mozna bylo uzyskac zadnych wyników leczniczych, to obecnie przy stosowaniu alkaloidu winkrystyny prawie w polowie przypad¬ ków uzyskuje sie pelna remisje [np. Haggard, M. E.: Vinarisrtiine (NSC-67574) therapy for Acute Leuke¬ mie in Children. Canc. Chemother. Rep. 52 (1968) 477] a wiec alkaloid ten ma takze znaczenie w ra¬ towaniu zycia. W chorobach na zlosliwe twarde 8172281722 3 nowotwory u dzieci mozna bylo takze uzyskac w 65 przypadkach na 94 znaczny regres [SeLavry, O, Holland, J. F. i Wolman, I. J.: Canc. Chemother.Rep., 52 (1968) 497].Z punktu widzenia farmakologicznego, z dime- rycznych alkaloidów otrzymywanych z Vinca rosea, winblastyna, winleurozyna i wdnkrystyna sa drugo¬ rzednymi alkaloidami rosliny, to jest sa tymi alka¬ loidami sposród ponad szescdziesieciu obecnych w roslinie, które wystepuja w bardzo malych ilo¬ sciach. Winblastyna i winleurozyna stanowia ra¬ zem tylko 1—2% calosci alkaloidów w roslinie, zas winkrystyna wystepuje zaledwie w stezeniu mniej¬ szym o dwa rzedy wielkosci. Zrozumialym jest wiec, ze oddzialeiHe*4clr ogi innych alkaloidów, odzyska¬ nie^i otrzymanie w ptopniu czystosci odpowiednim dla leku wymaga spqsobu, który jest bardziej skom¬ plikowany niz znanL metody oddzielania alkaloi- dówr .+****. i Znana fia-tóczne^posoby odzyskiwania alkaloidów winblastyny i winkleurozyny a takze winkrystyny [Nobel, R. L. i wspólpracownicy: Ann. N. Y. Acad.Sci. 76, (1958) 882; brytyjski opis patentowy nr. 870 723; opisy patentowe St. Zjedn. Am. nr 3 097131 i 3 205 220; Svoboda, G. H. i wspólpracow¬ nicy: J. Am. Assoc. Sci. ed. 48 (1959) 659; wegier¬ skie opisy patentowe nr 153 200 i 154 715; belgijski opds patentowy nr 624 046], a wszystkie one polega¬ ja na kwasnym lub zasadowym roztwarzaniu su¬ rowca, wzglednie na wstepnej obróbce kwasnej lub zasadowej, na ekstrakcji rozpuszczalnikiem or¬ ganicznym, nie mieszajacym sie z woda, na prze¬ prowadzeniu alkaloidów przy jednej lub dwóch róznych wartosciach pH z wodnego roztwoiru do organicznego rozpuszczalnika i na koniec na chro¬ matograficznym. frakcjonowaniu mieszaniny alka¬ loidów, przeprowadzonej do organicznego rozpusz¬ czalnika.Aczkolwiek w toku dalszej ewolucji te trzy na¬ dajace sie do farmakologicznego stosowania, dime¬ ryczne alkaloidy mozna bylo wydzielic z surowca wymienionymi metodami w lepszej jakosci i z lep¬ sza wydajnoscia, to wielokrotna przemiana fazowa, a glównie skomplikowane rozdzielanie za pomoca chromatografii sprawialy wciaz jeszcze trudnosci przy technicznym stosowaniu tych sposobów. Za¬ sadniczo latwo jest zrozumiec zlozonosc rozdzie¬ lania za pomoca chromatografii poniewaz te trzy dimeryczne alkaloidy winblastyne, winleurozyna i winkrystyne, których ilosc wynosi 1—2% calko¬ witej ilosci ponad 60 alkaloidów obecnych w ro¬ slinie, trzeba zatezyc, potem wydzielic, a w koncu doprowadzic do stopnia czystosci odpowiedniego do stosowania ich jako leku.Rozdzielanie calosci alkaloidów za pomoca chro¬ matografii jest operacja uciazliwa, dlugotrwala i wymagajaca duzej dokladnosci oraz rozdzielczych kolumn chromatograficznych o bardzo duzych wy¬ miarach. Wielkosc urzadzenia chromatograficznego poza duzymi rozmiarami kolumny rozdzielczej cha¬ rakteryzuje sie takze duza iloscia stosowanego do rozdzielania AlaOj. Wedlug wegierskiego opisu pa¬ tentowego nr 154 715 do odzyskania 150 g alkaloidu winblastyny zawartej w jednej tonie surowca po¬ trzeba 240 kg Al^Os. 4 Wynalazek w porównaniu ze znanymi sposobami umozliwia znaczne uproszczenie sposobu wzglednie wykluczenia niedogodnosci polegajacych na wielo¬ krotnej przemianie fazowej i na skomplikowanym 5 rozdzielaniu za pomoca chromatografii, poza tym pozwala na znaczne zmniejszenie wymiarów urza¬ dzenia chromatograficznego i nadto na jednoczesne odzyskiwanie trzech dimerycznych alkaloidów z lepsza niz dotychczas wydajnoscia i o odpowied- 10 niej jakosci. Istota wynalazku polega na tym, ze z mieszaniny surowych alkaloidów, wytworzonej z surowca, oddziela sie bezposrednio sól alkaloidu, skladajaca sie w wiekszej czesci z winblastyny, winleurozyny i winkrystyny, z której w stosunko- 15 wo prosty sposób odzyskuje sie powyzsze sklad¬ niki.W toku badan stwierdzono mianowicie, ze te trzy dimeryczne alkaloidy odzyskac mozna odmien¬ nie od dotychczasowych sposobów, znacznie prost¬ sza metoda jezeli zatezy sie je przed rozdzieleniem chromatograficznym i koncentrat alkaloidowy za¬ wierajacy pozadane dimeryczne alkaloidy w steze¬ niu do okolo 70% podda sie nastepnie chromato¬ grafid. Nalezy wyekstrahowac obojetnym, wodnym roztworem metanolu surowiec bez poddawania go uprzednio lub w czasie ekstrakcji dzialaniu zasad lub kwasów, dzieki czemu z tej delikatnej, latwo rozkladajacej sie masy alkaloidowej otrzymanej so przy przeróbce ekstraktu oddziela sie od przewaza¬ jacej czesci alkaloidów towarzyszacych te trzy di¬ meryczne alkaloidy w postaci soli addycyjnych z kwasami, korzystnie w postaci siarczanów. W ten sposób stezenie tych zwiazków staje sie 30—40 razy wieksze niz w mieszaninach alkaloidowych pod¬ dawanych chromatograficznemu frakcjonowaniu w znanych sposobach. Tym samym rozdzielanie za pomoca chromatografii staje sie o wiele prostsze d mozna je prowadzic przy uzyciu kolumn o wy¬ miarach znacznie mniejszych, poniewaz pozadane dimeryczne alkaloidy oddziela sie od substancji to¬ warzyszacych, wystepujacych tylko w malej ilosci.Korzystne uproszczenie i zmniejszenie wymiarów kolumn przy rozdzielaniu chromatograficznym spo¬ sobem wedlug wynalazku mozna znów najprosciej scharakteryzowac iloscia Al^Oj potrzebna do wy¬ dzielenia mieszaniny alkaloidów otrzymanej z 1 tony surowca, która wynosi w nowym sposobie okolo 20 kg, podczas gdy dotad potrzeba bylo 240 kg. 50 Przedmiotem wynalazku jest wiec sposób selek¬ tywnego odzyskiwania trzech dimerycznych alkaloi¬ dów z Vinca rosea L., mianowicie, winblastyny, winleurozyny i winkrystyny lub ich soli addycyj¬ nych z kwasami, przez wyekstrahowanie surowca 58 wodnym roztworem metanolu, zageszczenie ekstrak¬ tu praktycznie do usuniecia metanolu, zakwaszenie odparowanego roztworu, przesaczenie, wyekstra¬ howanie przy uzyciu rozpuszczalników nie miesza¬ jacych sie z woda, zalkalizowanie fazy wodnej, po- 60 wtórne rozpuszczenie alkaloidów w rozpuszczalni¬ kach organicznych nie mieszajacych sie z woda, odparowanie bezwodnego roztworu do sucha i od¬ zyskanie calosci alkaloidów za pomoca chromato¬ grafii przy uzyciu czesciowo zdezaktywowanego 65 Al2Os.81 5 Sposób, który polega na tym, ze surowiec wyeks- trahowuje sie obojetnym metanolem, po czym uzy¬ skana w znany sposób mieszanine alkaloidów roz¬ puszcza sie w etanolu lub w etanolu zawierajacym maksimum 10% kwasu, nastepnie w przypadku roz¬ tworu etanolowego wykrystalizowuja alkaloidy win¬ blastyne, winleurozyne i winkrystyne w postaci soli addycyjnych z kwasami i po przesaczeniu, zatezona mieszanina soli, zawierajaca jeszcze male ilosci sub¬ stancji towarzyszacych chromatografuje sie przy uzyciu AljO, czesciowo zdezaktywowanego woda, albo w postaci soli addycyjnych z kwasami, albo w postaci uwolnionych zasad, po zalkalizowaniu soli addycyjnych z kwasami, po czym frakcjonuje sie, eluuje, z frakcji eluatu odzyskuje sie alkaloidy win- blastyne, winleurozyne, winkrystyne lub ich sole addycyjne z kwasami, w razie potrzeby oczyszcza i nastepnie ewentualnie poszczególne zasady alka¬ loidów dimerycznych przeprowadza sie w sole ad¬ dycyjne z kwasami, wzglednie z poszczególnych soli dimerycznych alkaloidów wydziela sie alkaloidy.Sposób wedlug wynalazku przeprowadza sie ko¬ rzystnie w nastepujacy sposób: Zmielony surowiec (Vinca rosea L.) ekstrahuje siie kilakrotnoe metanolem zawierajacym 5—20%, a korzystnie 10% wody i przesaczone, polaczone wy¬ ciagi zageszcza sie pod zmniejszonym cisnieniem do usuniecia praktycznie calego metanolu. Nastepnie wodna pozostalosc zakwasza-sie rozcienczonym kwa¬ sem siarkowym w celu usuniecia skladników towa¬ rzyszacych, nie nalezacych do alkaloidów i odsacza sie powstaly osad. Kwasny wodny roztwór ekstra¬ huje sie kilkakrotnie benzenem, po czym oddzie¬ lona kwasna faze wodna alkalizuje sie, alkaliczny wodny roztwór ekstrahuje sie ponownie kilkakrot¬ nie benzenem az do wydzielenia alkaloidów. Pola¬ czone roztwory benzenowe otrzymane przy ekstrak¬ cji alkalicznych roztworów wodnych odparowuje sie do sucha pod zmniepszonym cisnieniem. W ten sposób otrzymuje sie brazowa, bezpostaciowa mie¬ szanine alkaloidów. Mieszanine te rozpuszcza sie w etanolowym roztworze zawierajacym najwyzej 10% kwasu siarkowego, przy czym jednoczesnie ustala sie wartosc pH roztworu na 4,0—5,0. Roz¬ twór zaszczepia sie krysztalami siarczanów alka¬ loidów dimerycznych i wzbudza sie krystalizacje przez pocieranie Scianek naczynia, po czym pozosta¬ wia sie do wykrystalizowania w temperaturze po¬ kojowej przez okres 2 dni. Wydzielona i odsaczona mieszanine 'krystaliczna skladajaca sie z siarczanów winblaistyny, winleurozyny, winkrystyny i towarzy¬ szacych alkaloidów rozpuszcza sie i bezposrednio chromatografuje. Do rozpuszczenia i eluowania uzy¬ wa sie chlorku metylenu i chloroformu w stosun¬ ku 2:1, a do chromatografowania — kolumny roz¬ dzielcze napelnione AljOj czesciowo zdezaktywowa- nym woda. Frakcje 1—3 zawieraja wieksza czesc obecnych alkaloidów towarzyszacych, a frakcje 2—9 — winblastyne i winleurozyne. Winkrystyna zawar¬ ta jest w miinimalnych ilosciach we frakcji 9, a eluowanie jej konczy sie na frakcji 18. Frakcje zawierajace winblastyne i winleurozyne odparowuje sie do sucha, nastepnie pozostalosc rozpuszcza sie w etanolu i po wykrystalizowaniu winleurozyny z lugu pokrystalizacyjnego wytraca sie etanolowym 722 e roztworem zawierajacym najwyzej 10% kwasu siar¬ kowego winblastyne w postaci siarczanu, odsacza sie ja i nastepnie przekrystalizowuje w celu dalsze¬ go oczyszczania. 5 Frakcje zawierajace winkrystyne odparowuje sie do sucha, rozpuszcza sucha pozostalosc w etanolu i wykrystalizowuje winkrystyne, która w podobny sposób jak wyzej, rozpuszcza sie w rozcienczonym etanolowym roztworze kwasu siarkowego i oczy- 10 szcza przez wytracenie krystalicznego siarczanu.Mozna tez postepowac w ten sposób, ze chroma¬ tografuje sie zasady alkaloidów. W tym przypadku mieszanine krystaliczna skladajaca sie z siarczanów winblastyny, winleurozyny, winkrystyny i towarzy- 13 szacych alkaloidów rozpuszcza sie w wodzie d do¬ prowadza sie wartosc pH roztworu amoniakiem do 8,0—9,0. Z alkalicznego roztworu za pomoca chloro¬ formu ekstrahuje sie .zasady alkaloidów, polaczone roztwory chloroformowe suszy sie nad bezwodnym 20 siarczanem sodowym, przesacza, po czym odparo¬ wuje do sucha pod zmniejszonym cisnieniem. Mie¬ szanine zasad alkaloidów zawierajaca glównie te trzy alkaloidy dimeryczne rozpuszcza sie w miesza¬ ninie benzenu i chloroformu w stosunku 1 :1 chro- 25 matografirje na kolumnie rozdzielczej na A1208 cze¬ sciowo zdezaktywowanym woda. Do eluowania sto¬ suje sie mieszanine rozpuszczalników o tym samym skladzie. Frakcje 1—10 zawieraja winblastyne i win¬ leurozyne, a frakcje 13—17 zawieraja winkrystyne. so Przeróbke frakcji zawierajacych winblastyne i win¬ leurozyne wzglednie winkrystyne, zidentyfikowa¬ nych na drodze chromatografii bibulowej wzglednie cienko warstwowej prowadzi sie w sposób powy¬ zej opisany. 35 Szczególy sposobu wedlug wynalazku podano w przytoczonych przykladach.Przyklad I. 100 g wysuszonej zmielonej rosli¬ ny Yiinca rosea L. (Catharanthus roseus G. Don) skladajacej sie glównie z lisci wyekstrahowuje 40 sie jeden raz 600 litrami i dwukrotnie stosujac po 400 litrów 90% wodnego metanolu. Przesaczone i polaczone metanolowe wyciagi zageszcza sie pod zmniejszonym cisnieniem, praktycznie do usuniecia metanolu, do objetosci 140—150 litrów. 45 Nastepnie zakwasza sie w celu usuniecia róznych wyekstrahowanych zwiazków nie nalezacych do al¬ kaloidów, taka sama objetoscia 5% wodnego kwasu siarkowego do uzyskiwania pH«=2 i powstaly ciemno zabarwiony osad odsacza sie. Przesaczony, 50 kwasny wodny roztwór ekstrahuje sie trzykrotnie stosujac po 500 litrów benzenu, po czym doprowa¬ dza sie wartosc pH oddzielonej kwasnej fazy wod¬ nej zawierajacej alkaloidy do 8,5—9,0 za pomoca stezonego wodnego roztworu wodorotlenku amono- 55 wego. Nastepnie alkaliczny wodny roztwór ekstra¬ huje sie trzy- do czterokrotnie stosujac po 600 li¬ trów benzenu do wyekstrahowania alkaloidów. Pola¬ czone roztwory benzenowe suszy sie bezwodnym siarczanem sodowym lub weglanem potasowym 60 i nastepnie przesaczony roztwór benzenowy odpa¬ rowuje sie pod zmniejszonym , cisnieniem. Otrzy¬ muje sie okolo 700 g brazowej mieszaniny alka¬ loidów.Mieszanine te rozpuszcza sie w etanolu zawiera- 65 jacym najwyzej 10% kwasu siarkowego, przy czym81722 7 nalezy zwrócic uwage, aby wartosc pH roztworu wynosila 4,0—5,0. Roztwór z krysztalami siarczanu winblastyny odparowuje sie, wytracanie sie kry¬ sztalów rozpoczyna sie wkrótce po poskrobaniu scia¬ nek naczynia. Calosc odstawia sie na 2 dni w tem¬ peraturze pokojowej do wykrystalizowania, po czym wytracone krysztaly odsacza sie.Wydajnosc, zaleznie od jakosci surowca wynosi 20—100 g mieszaniny krystalicznej, skladajacej sie z siarczanów winblastyny, winleurozyny i winkry¬ styny oraz z siarczanów alkaloidowych towarzy¬ szacych. Te krystaliczna mieszanine surowych siar¬ czanów alkaloidowych rozpuszcza sie w mieszaninie chlorku metylenu i chloroformu o stosunku 2:1, stosujac 7 ml tej mieszaniny na 1 kg mieszaniny siarczanów alkaloidów. Otrzymany roztwór chroma- tografuje sie na kolumnie wypelnionej stokrotna iloscia AlgOs czesciowo zdezaktywowanego woda, po czym eluuje sie mieszanina chlorku metylenu i chloroformu w stosunku 2 :1. Odbiera sie frakcje po 30—50 ml. Trzy pierwsze frakcje zawieraja przewazajaca czesc alkaloidów towarzyszacych.Winblastyne i winleurozyne otrzymuje sie we frak¬ cjach 2h-9. Winkrystyna znajduje sie w minimal¬ nych ilosciach we frakcji 9 i eluuje sie ja do frakcji 18. Frakcje zawierajace winblastyne i win¬ leurozyne wzglednie winkrystyne, zidentyfikowane na drodze chromatografii bibulowej lub cienko¬ warstwowej rozdziela sie i odparowuje do sucha.Wydajnosc: 15—75 g bezpostaciowej suchej pozo¬ stalosci zawierajacej winblastyne i winleurozyne, wzglednie 0,6—3,0 g suchej pozostalosci zawiera¬ jacej winkrystyne.Sucha pozostalosc zawierajaca winblastyne i win¬ leurozyne rozpuszcza sie w 15-krotnej ilosci wod¬ nego etanolu. Wykrystalizowuje winleurozyna, po czym odsacza sie ja, przemywa i suszy. Wydajnosc: zaleznie od jakosci produktu surowego 5—17 g winleurozyny. Temperatura topnienia 202—205°C.M^^+720 (CHCls).Lugi pokrystaliczne winleurozyny, zawierajace winblastyne rozciencza sie bezwodnym etanolem do podwójnej objetosci i wartosc pH roztworu do¬ prowadza sie etajnolowym roztworem kwasu siar¬ kowego do 4,0. Krystalizacja siarczanu winblastyny rozpoczyna sie juz w czasie dodawania etanolowego roztworu kwasu siarkowego. Krystalizacje prowa¬ dzi sie nastepnie w ciagu 16 godzin w lodówce.Wydajnosc: zaleznie od jakosci produktu surowego 15—70 g surow|ego siarczanu winblastyny.Wysuszony i sproszkowany surowy siarczan win¬ blastyny rozpuszcza sie w temperaturze pokojowej w 20-krotnej ilosci bezwodnego metanolu i do prze¬ saczonego roztworu dodaje sie czterokrotna obje¬ tosc bezwodnego etanolu. W celu calkowitego wy¬ krystalizowania winblastyny pozostawia sie roz¬ twór w ciagu 16 godzin w lodówce. Po przekrysta- Mzowaniu uzyskuje sie 90-procentowa wydajnosc.Wydajnosc: zaleznie od jakosci produktu suro¬ wego 13—63 g siarczanu winblastyny [«]D28 = —28° (CHClg).W celu zidentyfikowania przeprowadza sie win¬ blastyne w zasade i z niej wytwarza eterowy zwia¬ zek winblastyny przez przekrystalizowanie z eteru. 8 Temperatura topnienia 201—211°C; [«] *• = +42° (CHC13).Bezpostaciowa, sucha pozostalosc w ilosci 0,6— 3,0 g, oddzielona na drodze chromatograficznej 5 i zawierajaca winkrystyne rozpuszcza sie w 10- krotnej ilosci bezwodnego etanolu i wartosc pH roztworu doprowadza sie do 4,0 za pomoca meta¬ nolowego roztworu kwasu siarkowego. W celu cal¬ kowitego wykrystalizowania siarczanu winkrystyny 10 pozostawia sie roztwór na okres 16 godzin w lo¬ dówce. Ilosc odsaczonego surowego siarczanu win¬ krystyny stanowi 60—70% rozpuszczonej bezposta¬ ciowej suchej pozostalosci zawierajacej winkry¬ styne. 15 W celu przekrystalizowania rozpuszcza sie suro¬ wy siarczan winkrystyny w malej ilosci etanolu, po czym dodaje sie czterokrotna ilosc etanolu, po¬ zostawia sie roztwór do wykrystalizowania w lo¬ dówce na 16 godzin i odsacza. Wydajnosc: 0,3—1,5 g siarczanu winkrystyny. Temperatura topnienia 218^220°C.Mozna tez postepowac w ten sposób, ze 0,6—3,0 g bezpostaciowej suchej pozostalosci, oddzielonej na 29 drodze chromatograficznej a zawierajacej winkry¬ styne rozpuszcza sie w dziesieciokrotnej ilosci bez¬ wodnego metanolu i doprowadza do wykrystalizo¬ wania zasady winkrystyny, która oczyszcza sie w taki sam sposób, jak wyzej opisano przez roz- 30 puszczenie w bezwodnym etanolu i wydzielenie w postaci krystalicznego siarczanu.Przyklad II. Surowa mieszanine krystalicz¬ na, otrzymana wedlug przykladu I, skladajaca sie zaleznie od jakosci surowca z 20—100 g siarcza- 35 nów winleurozyny, winblastyny, winkrystyny i al¬ kaloidów towarzyszacych rozpuszcza sie w wodzie i wartosc pH roztworu doprowadza sie amonia¬ kiem do 8,0—9,0. Z roztworu ekstrahuje sie alka¬ loidy czterokrotnie, stosujac po 1 litrze chlorofor¬ mu, polaczone roztwory chloroformowe suszy sie bezwodnym siarczanem sodowym i przesacza, po czym odparowuje sie je do sucha pod zmniejszo¬ nym cisnieniem. Wydajnosc: 16—80 g mieszaniny : zasad alkaloidów. Mase te rozpuszcza sie w trzy- do czterokrotnej ilosci mieszaniny skladajacej sie z benzenu i chloroformu w stosunku 1 :1, po czym chromatografuje na kolumnie wypelnionej okolo czterdziestokrotna iloscia A1^03, czesciowo zdezak¬ tywowanego woda. Jako mieszanine wymywajaca 50 stosuje sie mieszanine benzenu i chloroformu w stosunku 1:1.Po splynieciu pierwszych 2—10 litrów eluatu za¬ wierajacych jedynie male ilosci alkaloidów towa- 55 rzyszacych, odbiera sie frakcje 0,6—3,0 litrowe.Frakcje 1—10 zawieraja winblastyne i winleuro¬ zyne, frakcje 11 i 12 sa juz wolne od winblastyny i winleurozyny. Nastepnie zaleznie od ilosci poda¬ nej mieszaniny krystalicznej, eluuje sie dalej 3—18 60 litrami mieszaniny skladajacej sie z benzenu i chlo¬ roformu w stosunku 1:1, przy czym odbiera sie frakcje po 0,6—3,6 litra. Frakcje 13—17 zawieraja winkrystyne.Przeróbke frakcji zawierajacych winblastyne 65 i winleurozyne wzglednie winkrystyne, zidentyfi-81 722 9 10 kowanych za pomoca chromatografii bibulowej wzglednie cienkowarstwowej przeprowadza sie w sposób podany w przykladzie I. PL PL

Claims (17)

1. Zastrzezenia patentowe 1. Sposób selektywnego odzyskiwania trzech alka¬ loidów dimerycznych z Vinca rosea L.,' lub ich soli addycyjnych z kwasami przez ekstrahowanie surowca wodnym metanolem, zageszczenie ekstrak¬ tu praktycznie do usuniecia metanolu, zakwasze¬ nie odparowanego roztworu, przesaczenie, wyeks¬ trahowanie przy uzyciu rozpuszczalników nie mie¬ szajacych sie z woda, zalkalizowanie fazy wodnej, powtórne rozpuszczenie alkaloidów w rozpuszczal¬ nikach organicznych nie mieszajacych sie z woda, odparowanie bezwodnego roztworu do sucha i od¬ zyskanie calosci alkaloidów za pomoca chromato¬ grafii przy uzyciu czesciowo zdezaktywowanego Al^Og, znamienny tym, ze surowiec wyekstrahuje sie obojetnym metanolem, uzyskana w znany spo¬ sób mieszanine alkaloidów rozpuszcza sie w etanolu lub w etanolu zawierajacym najwyzej 10% kwasu, po czym w przypadku roztworu etanolowego wy- krystalizowuje winblastyna, winleurozyna i win- krystyna w postaci soli addycyjnych z kwasami i po przesaczeniu zatezona mieszanine soli, zawie¬ rajaca jeszcze male ilosci substancji towarzysza¬ cych, w postaci soli addycyjnych lub w postaci uwolnionych zasad po zalkalizowaniu sold addycyj¬ nych z kwasami, chromatografuje sie przy uzyciu Al2Oa zdezaktywowanego czesciowo woda, po czym eluuje sie, z frakcji eluatu odzyskuje sie winblasty- ne, winleurozyne i winkrystyne albo ich sole ad¬ dycyjne z kwasami, w razie potrzeby oczyszcza sie i nastepnie ewentualnie poszczególne zasady dimerycznych alkaloidów przeprowadza sie w sole addycyjne z kwasami, wzglednie z poszczególnych soli dimerycznych alkaloidów wydziela sie alka¬ loidy.
2. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze zateza sie winblastyny, winleurozyny i winkrysty- ny w postaci ich soli siarczanowych.
3. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze wydzielanie siarczanów winblastyny, winleurozyny i winkrystyny przeprowadza sie za pomoca etano¬ lowego roztworu kwasu siarkowego.
4. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze chromatografuje sie winblastyne, winleurozyne i winkrystyne w postaci soli, korzystnie w postaci siarczanów.
5. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze chromatografuje sie winblastyne, winleurozyne i winkrystyne w postaci zasad.
6. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze 5 zatezona mieszanine soli winblastyny, winleurozy¬ ny i winkrystyny rozpuszcza sie w mieszaninie chlorku metylenu i chloroformu w stosunku 2 :1 i chromatografuje.
7. Sposób wedlug zastrz. 6, znamienny tym, ze eluowanie przeprowadza sie mieszanina chlorku metylenu i chloroformu w stosunku 2:1.
8. Sposób wedlug zastrz. 5, znamienny tym, ze zatezona mieszanine zasad winblastyny, winleu¬ rozyny i winkrystyny rozpuszcza sie w mieszaninie benzenu i chloroformu o stosunku 1 :1, po czym chromatografuje.
9. Sposób wedlug zastrz. 5 i 8, znamienny tym, ze eluowanie prowadzi sie mieszanina benzenu i chloroformu w stosunku 1:1.
10. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze frakcje zawierajace winblastyne i winleurozyne lub ich sole eluuje sie razem i nastepnie rozdziela sie te dwa dimeryczne alkaloidy.
11. Sposób wedlug zastrz. 10, znamienny tym, ze z mieszaniny winblastyny i winleurozyny otrzyma¬ nej metoda rozdzielania chromatograficznego, od¬ dziela sie winleurozyne przez rozpuszczenie w bez¬ wodnym etanolu i nastepna krystalizacje.
12. Sposób wedlug zastrz. 11, znamienny tym, ze winblastyne odzyskuje sie z lugu pokrystalicznego winleurozyny w postaci soli addycyjnych z kwa¬ sem, celowo w postaci siarczanu.
13. Sposób wedlug zastrz. 12, znamienny tym, ze siarczan winblastyny wytraca sie za pomoca etano¬ lowego roztworu kwasu siarkowego i ewentualnie oczyszcza sie przez przekrystalizowanie.
14. Sposób wedlug zastrz. 11, znamienny tym, ze z soli winblastyny wydziela sie zasade alkaloidu i ewentualnie oczyszcza sie.
15. Sposób wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze winkrystyne uzyskana z frakcji zawierajacych ja, ewentualnie przez odparowanie ich do sucha, roz¬ puszcza sie w bezwodnym etanolu i wytraca siar¬ czan winkrystyny etanolowym kwasem siarkowym.
16. Sposób wedlug zastrz. 15, znamienny tym, ze siarczan winkrystyny oczyszcza sie przez przekry¬ stalizowanie.
17. Sposób wedlug zastrz. 15, znamienny tym, ze z siarczanu winkrystyny ewentualnie uwalnia sie zasade alkaloidu i w razie potrzeby przeprowadza ja w sól addycyjna z kwasem. 15 20 25 30 35 40 45 PL PL
PL15081271A 1971-09-30 1971-09-30 PL81722B1 (pl)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL15081271A PL81722B1 (pl) 1971-09-30 1971-09-30

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL15081271A PL81722B1 (pl) 1971-09-30 1971-09-30

Publications (1)

Publication Number Publication Date
PL81722B1 true PL81722B1 (pl) 1975-08-30

Family

ID=19955794

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL15081271A PL81722B1 (pl) 1971-09-30 1971-09-30

Country Status (1)

Country Link
PL (1) PL81722B1 (pl)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CA2215351C (en) Process for isolating galanthamine
EP0379623A1 (en) Production of high purity alkaloids
Zehnder et al. The metabolism of thioridazine (Mellaril®) and one of its pyrrolidine analogues in the rat
Phillipson et al. N-oxides of hyoscyamine and hyoscine in the Solanaceae
SU495310A1 (ru) Хинуклидил-3-диарал(гетерил) карбинолы, про вл ющие антигистаминную, антисеротониновую и антиаллергическую активность и способ их получени
US4172077A (en) Process for the isolation of alkaloid components from the plant Vinca Rosea L.
US6218541B1 (en) Method for extracting bisbenzylisoquinolines
PL81722B1 (pl)
DE2124023C3 (de) Verfahren zur selektiven Gewinnung von Vinblastin, Vinleurosin und Vincristin oder von deren Sulfaten
FI91639B (fi) Alkaloidien uutto
PL95570B1 (pl) Sposob oczyszczania dimerycznych alkaloidow indolu
US4070358A (en) Process for the preparation of diindole alkaloids or of the acid addition salts thereof
King 305. Curare alkaloids. Part III. Pot-curare
SU448649A3 (ru) Способ получени винбластина, винлейрозина и винкристина
SU495311A1 (ru) Способ выделени алкалоидов из чистотела большого
Tani et al. Alkaloids of papaveraceous plants
Dwuma-Badu et al. Constituents of West African medicinal plants XXV. Isolation of oblongine from Tiliacora dinklagei and the synthesis of oblongine and related benzylisoquinoline alkaloids
Palit et al. Quaternary alkaloids from the root bark of tiliacora racemosa
IL37809A (en) A process for the selective separation of vinblastine,vinleurosine and vincristine or the salts thereof
US2948729A (en) Purification of weakly basic alkaloids by the use of naphthoate salts
US2833771A (en) Process for the preparation of
SU667140A3 (ru) Способ получени 4-дезацетоксивинбластина или его солей
US4209443A (en) Process for separating pharmaceutically active diindole alkaloids
DE1186076B (de) Verfahren zur Gewinnung komplexmetallfreier Ferrioxamine
US2938906A (en) Certificate of correction