SU667140A3 - Способ получени 4-дезацетоксивинбластина или его солей - Google Patents

Description

тельно сульфатой дииндоалкалоидов, в органическом растворителе, желател йо в ацетбне или С, -С -алифатическом спирте, лучше в метаноле. Растворение провод т при , предпочтительно при комнатной температуре . Дл  получени  оснований дииндоалкаЛоидов к раствору дрбавл ют основа ние, например моноэтиламин, диэтиламин или пиридин; Образующеес  основание лейрозина при выпадает в осадок. Дй  более полного отделени лейрозииа смесь можно охладить до . Лейрозин отфильтровывают, пройавают тем же растворителем, который был использован дл  растворени  солей алкалоидов, и высушивают. Сырой Лейрозин может быть очищен известным способом, например перекристаллизацией , и/или переведён в соль, предпочтительно та сульфат. Полученный после отделени  основани  лейрозина маточный раствор упа ривают при пониженном давлении, остаток раствор ют в органическом растворителе , желательно в углеводороде бензольного р да, например в бензоле , толуоле или ксилоле, но лучше всего в бензоле, причем сульфат примёй емого дл  получени  оснований дииндоалкалоидов основани  (монозтип амина, диэтйламина или пиридина) выпадает в осадок. Сульфат о.тфильт| овывают , экстрагируют воДнЫ фосфатным буфером с рН 3,7-4,3. ОбъеДиненйые кислые водные фазы  одкисГ1 ют кислотой, желательно фосфорной до рН 3,5-4,1, экстрагируют дихлорйетаном , объединенные органй чёскйе фазы высушивают над безводньм сульфа том натри . Остаток после упариваний содержит винбластин, который може быть  ерёведё1Н в соль, жел тельно в сульфат. . К водной фазе добавл абт основание преимущественно хлорид аммони , до рН 7,5-10, полученный водный щелочной раствор экстрагируют несмешиваю вдамсй с водой органическим растворри телем, желательно дихлормётаном или хл дооформом, и объединений о| ганические фазы упаривают. Остаток посл упаривани , содержащий вийкристин. N-ДезМетилвинбластин, небольшое количество винбластйна и 4-деэаС(ё оксивинбластина форкиилирую емёсЬю |4урав| инрй кислоты и уксусного анг гидри}х а. При этом содержащийс  в см си алкалоидов Н-Дёзметилвинбластин количественно переходит в винкристи Затем реакционнуй смесь разбавл ют 5-15-кратным, лучше. 10-кра ным, кол чеством вода и довод т рН до 7,5-10 с помощью щелочи. . . .111влочной раствор экстрагируют не смешивающймс  с водой растворителем предпочтительно углеводородом бензольного р да или хлорированным углеводородом , например ..енз&лрм,тоуолом , ксилолом, дихлорметаном или хлороформом, желательно бензолом. Объединенные экстракты упаривают при пониженном давлении, остаток, содержащий винкристин, винбластин и 4-дезацетоксивинбластин , раствор ют в органическом растворителе, например в смеси углеводорода бензольного р да и хлорированного углеводорода, желательно в смеси бензола и хлороформа , и дииНдоалкалоиды раздел ют с помощью хроматографии на частично дезактивированной окиси алюмини . В качестве элемента обычно Используют смесь бензола и хлороформа в ступенчато измен емых колйчест вах. Полученные фракции могут быть идентифицированы с помощью тонкослойной хроматографии . Фракции, содержащие одинаковые алкалоиды, объедин ют. Переработку фракций, содержащих винКристин и винбластин, осуществл ют известным способом. Фракции, содержащие 4-дёзацетоксивинбластин, объедин ют и упаривают при пониженном давлении, остающийс  сырой 4-деэацетоксивинбластин очищают перекристаллизацией или перевод т в соль. Пример 1. Получение сырого 4-дёзацетоксивинбластина. 50 г неочищенной смеси сульфатов Дииндоалкалоидов раствор ют при комнатной температуре в 300 мл метанола и при перемешивании добавл ют 13 мл диэтйламина, охлаждают до и выдерживают 1 ч при этой температуре. Кристаллы отфильтровывают, промывают небольшим количеством метанола и 1аысушйвают в вакууме. Получают 6,4 г сырого основани  лейрозина, что составл ет около 90-95% от общего содержани  лейрозина в исходной смеси сульфатов дииндоалкалоидов. Сырой лейрозин может быть очищен пере;кристаллизацией или переведен известным способом в сульфат. Фильтрат упариваюТ при пониженном давлении досуха и остаток раствор ют в 2500 мл бензола-, наблюда  выпадение в осадок сульфа адиэтйламина, который отфильтровывают, промывают небольшим количеством бензола и используют дл  регенерации хшэтиламина. Бензольный фильтрат экстрагируют мл водного фосфатного буфера jc рН 4,0 t 0,1 (10%-ный водный раствор первичного кислого фосфорнокислого натри , к которому добавл ют 1 н.фосфорную кислоту до рН 4,0±0,1). Полученные при экстракции водные фазы объедин ют, подкисл ют 1 н.фосфорной кислотой до рН 4,OtO,l и экстрагируют 4 X 2500 мл дихлорметана. Органические фазы объедин ют, высушивают над безводным сульфатом натри  W упаривают досуха при пониженном давлении. Получают 25 г винбластйна, который может быть без дальнейшей 5 очистки использован дл  получени  винкристина полусинтетическим спосо бом . 25 г винбластина раствор ют в 80 мл метанола и прибавл ют 0,3 об, ный раствор серной кислоты в гтанол до рН.5,0. При сто нии из раствора выпадает кристаллический осадок сул фата винбластина, К водной фазе после экстракции дихлорметаном добавл ют концентриро ванный раствор aivBvmaKа до рН 8,5-9, и экстрагируют 4 х 800 мл хлороформ Экстракты объедин ют, высушивают над безводным сульфатом натри  и фильтруют. Фильтрат упаривают при пониженном давлении и аморфный остаток смеси алкашоидов (В г) раствор ют в смеси 45 мл муравьиной кислоты и 11 мл ук сусного ангидрида, выдерживают 515 мин при комнатной температуре, разбавл ют 10-кратным количеством охлажденной до 5°С дистиллированной воды, добавл ют концентрированный раствор аммиака до рН 8,5-9,0 и экст рагируют 4 X 800 мл бензола. Бензойьные фазы объедин ют, упари вают, аморфный остаток смеси алкалои дов (6,9 г) раствор ют в 42 мл смеси бензола и хлороформа (1:1) ипропускают через колонку (диаметр 4 см) с суспензией окиси алюмини  (активность (у - Y , 345 г) в смеси бензола и хлороформа (9:1) . Вначале через колонку пропускают смесь бензола и хлороформа (9:1) и отбирают фракци  по 100 мл Отдельные фракции исследуют методом тонкослойной хроматографии (окис алюмини  на алюминиевой фольге, элюент - смесь 100 мл бензола, 50 мл хлороформа и 7,5 мл диэтиламина). Фракции 3-10, содержащие 4-дезацетоксивинбластин , объедин ют и упсфивают при пониженном давлении, получа  1 ,7 г неочищенного 4-дезацет оксивйнбластина. . Фракции 11-36 элюируют смесью бен зола и хлороформ а (4:1) и идентифицируют компоненты фракций методом тонкослойной зфоматографии (см.выше) Фракции 11-19 объедин ют и упаривают при пониженном давлении, получа  0,6 г смеси винбластина и 4-дезацетоксивинбластина (1:1), которую можно разделить на отдельные компоненты . Дл  этого раствор вот остаток посг ле упаривани ,в смеси бензола и хлороформа (9:1) и гфопускают через колонку , заполненную суспензией окиси а мини  (активностьW-V) в смеси бензола и хлороформа (9:1). Получают 0,18 г винблаотина и 0,20 г 4-деэаце оксивинбластйна. Фракции 20-24 объедин ют и упаривают при пониженном давлении. Остато содержит 0,9 г винбластина. 40 В фракци х 25-36 содержитс  небольшое количество (0,3 г) 4-дезацетоксивинбластина . Остальные фракции (25-36) элюируют смесью бензола и хлороформа (1:1 Упариванием объединенного элюата при пониженном давлении получают1,7 г винкрис- йнй. Пример 2. Очистка 4-дезацетоксивинбластина . 1,7 г неочищенного 4-дезацетоксивинбластина раствор ют в 25 мл смеси метанола и вОды (З) охлаждают до и выдерживают при этой температуре в течение 16 ч. Кристаллы tтфильтровывают , промывcUOT 3-4 мл вьаиеуказанной смеси метанола и воды, охлаждённой до 5 С,к высушивают. Получают 1,3 г 4-дезацет.оксивинбластина, 1- птт ап - . г 1 эти,-, , т.пл. 90-193С; (Л (с 1, хлороформ). Вычислено,: С 70,19; Н 7,50; N 7,44; О 14,97. СддНзбМ О,. Найдено,%j С 69,85; л 7,52; N 7,23; О 14,97. Массовое число 4-дезацетоксивинбластина (), измеренное по величине пика ионизированных молекуЛ, на 58 массовых единиц меньше,чёМ массовое число винбластина (т/е - 810). Разница соответствует массе ацетоксигруппы. . Оба дииндоалкалоида состо т и велбаминовой и индолиновой частей. Так как массовые числа, характерные дл  велбакв новой части и дл  пика основайи  йелбаминоврй части, имеютс  ив масс-спектре деэацетоксивинбластина (.5, соответственно т/е 1;э4), то отдйда следует, что в индолиновой части упом нута  ацетрксигруппа отсутствует. На основании характера расщеплени  линий массспектра ,l35,224) можно предположить , эта ацетоксигруппа при образовании 4-Дезацетоксивинбластйна отщепл етс  от четвертого атома углерода винбластина. В ЯМР-спектре 4-дезацетоксивинбластина Отсутствует гшк 8- 2,09 м.д., характерный дл  4-ацетоксигруппы, ко -ррый присутствует в ЯМР-спектре вин.бластина.. ЯМР-спектр 4-деэацетоксивинбластина (& }, м.д. J 2,73 (N-метил), 3,60 (харбйметокси), 3,81 (ОСН., св занна  с ароматической группойГ, 3,85 (карбойетркси). Приме р 3. Получение сульфата 4-дёзацетокск1эинбластина. 1,1 г неочищеннОРб 4-дезацетаксивйнбластина разбавл ют 1,25%-ным сггартрйам раствором серной кислоты о рН ,5 и В ьшерживают 2 ч при 5 С. Криста рты отфильтровывают и промыват 2-3 мл охлажденного до этаноа . ,Получают О,95г сырого сульфата -ДёзацбтрксиВ1ИНбластина, который

раствор ют в 25 мл метанола, разбавл ют 1т iauiefpFaiV прбмывают 2-Т Ш рзслажденного до ацетона и высу« ивают , получа  0,83 г очищенного сульфата 4-деэацвтоксивинбластина,

toL ° 29,0 (с 1, метанол).

- - - .

Claims (1)

1. Vinca a katoicls XXXY Desaceto xyvinbtastine - a new Minor Alkaloid from Vinca rosea. L. N. Neiiss, A,J. Barhess, Huckstep, Experientia. 31/1, 18-19 (1975) .