PT1476192E - Métodos e composições para tratar condições hierproliferativas - Google Patents

Description

ΡΕ1476192 1 DESCRIÇÃO ""MÉTODOS E COMPOSIÇÕES PARA TRATAR CONDIÇÕES HIPERPROLIFERATIVAS"" A presente invenção descreve o uso de combinações de inibidores da transdução de sinal que interagem de maneira sinérgica para que a resposta antiproliferativa à combinação exceda a resposta aos inibidores aplicados individualmente para o tratamento do glioblastoma. A proliferação de células humanas e animais é regulada por pequenas hormonas de péptido conhecidas como factores de crescimento, quimiocinas, citocinas ou interleucinas. Seguidamente, estas proteínas serão colectivamente designadas por "factores de crescimento". Já há muito que foi reconhecido que a proliferação de células humanas e animais in vitro é promovida por combinações de factores de crescimento. Tipicamente, a combinação inclui um factor de crescimento que seja relativamente específico de tecido em acção e outro factor de crescimento que actue sobre uma vasta gama de tecidos.

Exemplos específicos de factores de crescimento específicos de tecido incluem o factor de crescimento derivado das plaquetas (PDGF), o factor de crescimento de nervos (NGF), o factor estimulador de colónias 1 (CSFl) e a 2 ΡΕ1476192 eritropoietina (EPO). Estes factores de crescimento têm uma acção selectiva de tecido porque as correspondentes proteínas receptoras que são necessárias para o seu funcionamento são apenas expressas num estreito subconjunto de tecidos humanos e animais. Por exemplo, os receptores de PDGF são expressos em células de fibroblasto, músculo liso e alguns outros elementos de tecido conjuntivo mas não em células epiteliais. Os receptores de NGF são expressos em células originárias da cristã neural mas não em fibroblastos, músculo liso ou tecido conjuntivo.

Um exemplo específico de um factor de crescimento que actua sobre uma vasta gama de tecidos é o factor de crescimento insulino-símile 1 (IGF1) [o IGFl também é conhecido como actividade insulino-símile não suprimível 1 (NSILAl) e também como "somatomedina c". 0 termo IGFl é actualmente preferido e é usado aqui. Contudo, em certa literatura anterior aqui citada, é usado o termo "somatomedina c".]. A proteína receptora específica do IGFl está expressa em virtualmente todas as células humanas e animais e virtualmente todas as células exigem a activação dos receptores de IGF para proliferarem in vitro. Por esta razão, o IGFl ou a insulina (que, a concentrações elevadas, pode substituir o IGFl para activar o receptor de IGFl) é um componente central de meios de cultura disponíveis no comércio que podem ser usados para suportar o crescimento de células na ausência de soro.

Sob condições patológicas, ambos os factores de 3 ΡΕ1476192 crescimento específicos de tecido e os factores de crescimento como o IGF1 foram ligados a estados de doença hiperproliferativa. Por exemplo, o PDGF está ligado a certos cancros e à proliferação de células do músculo liso dentro de placas ateroscleróticas das artérias coronárias. A sobre-expressão do IGFl está ligada à acromegalia e ao cancro da próstata.

Como consequência da maneira como normalmente funcionam os factores de crescimento para modular a proliferação de células podem ser usados compostos que inibam a activação de receptores do factor de crescimento sobre a superfície exterior da célula, ou inibam a função das proteínas geradoras de sinal dentro da célula, para inibirem o crescimento celular. A inibição dos receptores de PDGF tem sido conseguida com sucesso pelo uso de um composto identificado como STI-571 tendo o nome químico 4-(4-metilpiperazin-l-ilme-til)-N-[4-metil-3(4-piridin-3-il)-pirimidin-2-ilamino)-fenil]-benzamida. 0 STI-571 está descrito em EP 0 564 409 e, na forma de sal de sulfonato de metano, especialmente na forma preferida de cristal β em WO 99/03854, e também é conhecido como Imatinib, Glivec ou Gleevec. O Gleevec também inibe a activação de um receptor do factor de crescimento específico de linhagem que está estreitamente relacionado com o receptor de PDGF - nomeadamente o receptor kit. O Gleevec também inibe ainda a actividade de uma proteína geradora de sinal citoplásmico conhecida como 4 ΡΕ1476192 abl. A proteína abl está intimamente envolvida na patologia da leucemia mielógena crónica em seres humanos. Tal como os receptores de PDGF e kit, a abl é uma proteína com activi-dade cinase da proteína específica de tirosina. 0 Gleevec é uma nova terapêutica para, pelo menos temporariamente, tratar o cancro. 0 Gleevec, que foi aprovado pela FDA em Maio de 2001, demonstrou ser eficaz no tratamento da leucemia mielógena crónica e dos tumores do estroma gastrintestinal em seres humanos. O Gleevec (seguidamente designado por "STI-571") constitui um inibidor do receptor do factor de crescimento específico de tecido especialmente útil no contexto da presente invenção. O pedido WO 02/092599 descreve compostos que são potentes inibidores do receptor de IGF1, entre os quais a trans-5-(3-benziloxi-fenil)-7-(3-pirrolidin-l-ilmetil-ci-clobutil)-7H-pirrolo[2,3—d]pirimidin-4-ilamina (seguidamente designada por "ADW"). Estes inibidores do receptor de IGFl são inibidores do receptor do factor de crescimento não específico de tecido particularmente úteis no contexto da presente invenção.

Sumário da Invenção A presente invenção refere-se a uma combinação que compreende (a) um inibidor de um receptor do factor de crescimento não específico de tecido e (b) um inibidor de um receptor do factor de crescimento especifico de tecido para uso simultâneo, paralelo, separado ou sequencial, 5 ΡΕ1476192 especialmente para uso no tratamento de condições hiperproliferativas, tais como, em particular, o cancro, num mamífero, particularmente um ser humano. A invenção também se refere a composições farmacêuticas compreendendo uma combinação desse tipo e a um método de tratar condições hiperproliferativas, tais como especialmente o cancro, com uma combinação desse tipo. A presente invenção também se refere a uma embalagem comercial ou produto compreendendo uma combinação desse tipo.

Breve Descrição dos Desenhos

Os precedentes aspectos da invenção serão mais facilmente entendidos por referência à descrição pormenorizada que se segue, feita em referência aos desenhos em anexo, nos quais: A Fig. 1 é uma fotografia de uma placa de 12 cavidades contendo células de fibroblasto NIH/3T3 transformado por virus de sarcoma de simio (sis 3T3; para a sua preparação, ver Shamah et al., Mol. Cell. Biol. 1_3, 7203-7212, 1993; as células NIH/3T3 estão disponíveis na ATCC sob o Número ATCC CRL-1658) expostas a várias quantidades de ADW e STl-571 e o efeito sinérgico destes compostos em efectuar a inibição do crescimento. A Fig. 2 é um gráfico que mostra a sobrevivência das células fraccionais determinada pela contagem das células 5 dias a seguir ao tratamento combinado da linha de 6 ΡΕ1476192 células de glioma humano U343 (Fig. 2) (para a linha de células U343 ver Senger et al, Câncer Research 6_2, 2131-2140, 2002 e Shamah et al., Mol. Cell. Biol. 13, 7203-7212, 1992) . A linha de células exibe maior destruição com o tratamento combinado. A Fig. 3 mostra a sobrevivência das células fraccionais a seguir ao tratamento combinado com ADW/STI-571. A sobrevivência das células foi determinada pelo uso de um ensaio à base de MTS para determinar a viabilidade das células. O tratamento combinado em fibroblastos sis 3T3 resulta em maior destruição de células (Fig. 3A). Os fibroblastos transformados por ras de controlo (células ras 3T3; para a sua preparação ver Feig L.A. e Cooper G.M., Mol. Cell. Biol. 8_, 2472-2478, 1988) mostram menor sobrevivência a seguir ao tratamento com ADW mas não mostram nenhum efeito sobre a sobrevivência com STI-571 administrada pura ou em combinação com ADW sobre a gama de doses examinadas (Fig. 3B). A Fig. 4 mostra sinergismo entre STI-571 e ADW para a inibição do crescimento de células sis 3T3: (dados quantitativos mais escala alargada para STI-571).

Descrição Pormenorizada de Modelos de Realização

Específicos

Definições: tal como são usados nesta descrição e nas reivindicações em anexo, os seguintes termos terão os significados indicados, salvo se o contexto exigir outro: 7 ΡΕ1476192

Os termos "inibidor de um receptor do factor de crescimento não específico de tecido" e "inibidor de um receptor do factor de crescimento específico de tecido" referem-se a qualquer molécula que reduza a actividade de um receptor do factor de crescimento não específico ou específico de tecido, respectivamente. Esses inibidores podem incluir, por exemplo, antagonistas que se liguem ao receptor do factor de crescimento ou a moléculas que se liguem ao próprio factor de crescimento para evitar a sua ligação ao receptor da superfície da célula e, assim, actuarem como inibidores do receptor do factor de crescimento. Também inclui ainda inibidores da actividade da tirosina cinase dos receptores do factor de crescimento bem como compostos que, por exemplo, diminuem o nível de expressão dos factores de crescimento ou dos seus receptores ou inibem a sinalização "a jusante" da activação do receptor do factor de crescimento. Os inibidores podem ser pequenas moléculas sintéticas, ácido nucleicos anti-sentido ou macromoléculas que podem ser polipéptidos, lípidos e/ou polissacarídeos. "Receptor do factor de crescimento não específico de tecido" refere-se mas não se limita ao receptor IGF-1, ao receptor do factor de crescimento epidérmico e ao receptor do factor de crescimento de transformação. "Receptor do factor de crescimento específico de tecido" refere-se mas não se limita ao receptor do NGF, ao ΡΕ1476192 receptor do factor de crescimento de fibroblasto, ao receptor do factor de crescimento endotelial vascular, ao receptor do factor de crescimento derivado do cérebro e ao receptor do PDGF. A presente invenção refere-se a combinações compreendendo (a) um inibidor de um receptor do factor de crescimento não especifico de tecido, tal como em particular um inibidor do receptor do IGFl, e (b) um inibidor de um receptor do factor de crescimento especifico de tecido, tal como em particular um inibidor do receptor do PDGF.

Os inibidores do receptor do IGF-1 incluem, por exemplo: anticorpos específicos, ácido nucleico anti- sentido conhecido na técnica anterior (por exemplo, inibidores incluindo tirfostina, descritos por Blum et al., Biochemistry 2000, Vol. 39, pp. 15705-15712, aqui incorporados como referência).

Os inibidores do receptor do IGF 1 a utilizar de acordo com a presente invenção são os que estão descritos no pedido WO 02/092599 e incluem, em particular, os seguintes compostos ou sais dos mesmos: cis-7-(3-aminometil-ciclobutil)-5-(3-benziloxi-fenil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ilamina; trans-7-(3-aminometil-ciclobutil)5-(3-benziloxi-fenil)7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ilamina; 9 ΡΕ1476192 dimetilamida do ácido cis-3-[4-amino-5-(3-ben-ziloxi-fenil)-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutano-carboxílico; dimetilamida do ácido trans-3-[4-amino-5-(3-ben-ziloxi-fenil)-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutano-carboxilico; metilamida do ácido cis-3-[4-amino-5-(3-ben-ziloxi-fenil)-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutano-carboxilico; metilamida do ácido trans-3-[4-amino-5-(3-ben-ziloxi-fenil)-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutano-carboxilico; cis-5-(3-benziloxi-fenil)-7-(3-dimetilaminometil-ciclobutil) -7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ilamina; trans-5-(3-benziloxi-fenil)-7-(3-dimetilamino-metil-ciclobutil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ilamina; cis-5-(3-benziloxi-fenil)-7-(3-dimetilaminometil-ciclobutil) -7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ilamina; trans-5-(3-benziloxi-fenil)-7-(3-metilaminometil-ciclobutil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ilamina; 10 ΡΕ1476192 trans-N-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirro-lo[2, 3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-guanidina; cis—N—{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirro-lo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-guanidina; trans-N-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirro-lo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-metanossulfona-mida; cis —N—{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirro-lo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-metanossulfo-namida; trans-N-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirro-lo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-4-metoxibenze-nossulfonamida; trans-N-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirro-lo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-4-metilbenzeno-sulfonamida; trans-N-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirro-lo[2, 3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-4-nitrobenzeno-sulfonamida; trans-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirro-lo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-amida do ácido propano-2-sulfónico; 11 ΡΕ1476192 trans-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirro-lo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-amida do ácido etanossulfónico; trans-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirro-lo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-amida de N-dimetil-sulfamida; cis-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirrolo-[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-amida de N-dimetil-sulfamida; éster metilico do ácido trans-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil }-carbâmico; éster metilico do ácido cis-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil }-carbâmico; éster 2-metoxi-etilico do ácido trans-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclo-butilmetil}-carbâmico; éster 2-metoxi-etilico do ácido cis-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutil-metil}-carbâmico; 12 ΡΕ1476192 trans-l-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirro lo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-3-etil-ureia; cis-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirrolo [2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-3-etil-ureia; trans-l-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirro lo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-3-propil-ureia; cis-l-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirrolo [2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-3-propil-ureia; trans-l-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirro lo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-3-isopropil-ureia; cis-l-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirro-lo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-3-isopropil-ureia; trans-l-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirro lo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-3-butil-ureia; cis-l-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirro-lo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-3-butil-ureia; trans-l-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirro lo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-3-terc-butil-ureia; 13 ΡΕ1476192 cis-l-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirrolo [2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-3-terc-butil-ureia; trans-l-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirro lo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-3-benzil-ureia; trans-l-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirro lo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-3-(3-metil-ben-zil)-ureia; cis-l-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirro-lo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-3-(3-metil-ben-zil)-ureia; cis-l-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirro-lo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-3-(4-metoxi-benzil)-ureia; trans-l-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirro lo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-3-(2-morfolin-4 il-etil)-ureia; cis-l-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirro-lo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-3-(2-morfolin-4 il-etil)-ureia; 14 ΡΕ1476192 trans-l-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirro-lo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-3-(2-dimetil-ami no-etil)-ureia; cis-l-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirrolo-[2, 3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-3-(2-dimetil-amino etil)-ureia; trans-l-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirro-lo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-3-(3-morfolin-4-il-propil)-ureia; cis-l-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirrolo-[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-3-(3-morfolin-4-il propil)-ureia; trans-l-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirro-lo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-3-(3-dimetil-ami no-propil)-ureia; cis-l-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirrolo-[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-3-(3-dimetil-amino propil)-ureia; trans-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirrolo-[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-ureia; cis-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirrolo-[2, 3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-ureia; 15 ΡΕ1476192 trans-N-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirro-lo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-acetamida; cis-N-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirrolo-[2, 3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-acetamida; trans-N-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirrolo [ 2, 3-d] pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-isobutiramida; cis-N-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirrolo-[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-isobutiramida; trans-N-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirrolo [ 2, 3-d] pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-2,2-dimetil-propionamida; cis-N-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirrolo-[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-2,2-dimetil-propionamida; trans-N-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirrolo [ 2, 3-d] pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-2-piperidin-l-il-acetamida; cis-N-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirrolo-[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-2-piperidin-l-il-acetamida; 16 ΡΕ1476192 trans-N-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirro-lo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-2-morfolin-4-il-acetamida; cis-N-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirrolo-[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-2-morfolin-4-il-acetamida; trans-N-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirro-lo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-2-(4-metil-pipe-razin-l-il)-acetamida; cis-N-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirrolo-[2, 3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-2-(4-metil-piperazin-l-il)-acetamida; trans-5-(3-benziloxi-fenil)-7-(3-morfolin-4-il-metil-ciclobutil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ilamina; trans-5-(3-benziloxi-fenil)-7-(3-piperidin-l-il-metil-ciclobutil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ilamina; trans-5-(3-benziloxi-fenil)-7-(3-pirrolidin-l-il-metil-ciclobutil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ilamina (ADW); trans-5-(3-benziloxi-fenil)-7-[3-(4-metil-pipe-razin-l-ilmetil)-ciclobutil]-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ilamina; 17 ΡΕ1476192 trans-7-[3-(adamantan-l-ilaminometil)-ciclobu-til]-5-(3-benziloxi-fenil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ilamina; trans-l-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirro-lo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-piperidin-4-ol; trans-7-(3-azepan-l-ilmetil-ciclobutil-5-(3-ben-ziloxi-fenil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ilamina; trans-5-(3-benziloxi-fenil)-7-[3-(2, 5-dimetil-pirrolidin-l-ilmetil)-ciclobutil]-7H-pirrolo[2, 3-d]piri-midin-4-ilamina; trans-7-(3-azetidin-l-ilmetil-ciclobutil] -5-(3-benziloxi-fenil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ilamina; amida do ácido trans-l-{3-[4-amino-5-(3-benzi loxi-fenil)-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil} piperidino-3-carboxílico; trans-5-(3-benziloxi-fenil)-7[3-(4-piridin-2-il-piperazin-l-ilmetil)-ciclobutil]-7H-pirrolo[2,3-d]pirimi-din-4-ilamina; trans-5-(3-benziloxi-fenil)-7(3-tiomorfolin-4-ilmetil-ciclobutil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ilamina; 18 ΡΕ1476192 trans-5-(3-benziloxi-fenil)-7[3-(2,6-dimetil-morfolin-4-ilmetil)-ciclobutil]-7H-pirrolo[2,3-d]pirimi-din-4-ilamina; amida do ácido trans-(S)—1 — {3 —[4-amino-5-(3 benziloxi-fenil)-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutil-metil}-pirrolidino-2-carboxílico; cis-7-(3-azepan-l-ilmetil-ciclobutil)-5-(3-benzi loxi-fenil)-7H-pirrolo[2, 3-d]pirimidin-4-ilamina; cis-l-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)pirrolo [2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-piperidin-4-ol; éster etilico do ácido cis-4-{3-[4-amino-5-(3 benziloxi-fenil)pirrolo [2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutil metil}-piperazino-l-carboxilico; cis-5-(3-benziloxi-fenil)-7[3-(4-fenil-piperazin 1-ilmetil)-ciclobutil]-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il-amina; cis-5-(3-benziloxi-fenil)-7[3-(4-metil-piperazin 1-ilmetil)-ciclobutil]-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il-amina; cis-5-(3-benziloxi-fenil)-7-(3-tiomorfolin-4-ilmetil)-ciclobutil]-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ilamina; 19 ΡΕ1476192 cis-5-(3-benziloxi-fenil)-7[3-(2,6-dimetil-mor folin-4-ilme til )-ciclobutil]-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin 4-ilamina; amida do ácido cis-(R)—1—{3—[4-amino-5-(3-benzi loxi-fenil)-pirrolo[2,3—d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil} pirrolidino-2-carboxilico; amida do ácido cis-l-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi fenil)-pirrolo[2, 3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-piperidino-3-carboxílico; trans-N-l-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-2-etoxi-acetamida; trans-N-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil) -pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-2-(2-metoxi etoxi)-acetamida; trans-l-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirrolo [2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-3-metil-ureia; cis-l-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirrolo [2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-3-metil-ureia; ácido trans-pirrolidino-l-carboxilico{3-[4-amino 5-(3-benziloxi-fenil)-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil }-amida; 20 ΡΕ1476192 ácido trans-piperidino-l-carboxílico{3-[4-amino 5-(3-benziloxi-fenil)-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclo-butilmetil}-amida; ácido trans-morfolino-4-carboxílico{3-[4-amino-5 (3-benziloxi-fenil)-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclo-butilmetil}-amida; trans-3-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirrolo [2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-l,1-dimetil-ureia; ácido trans-4-metil-piperazino-l-carboxilico{3 [4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclo-butilmetil}-amida; trans-3-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirrolo [2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-1,1-dietil-ureia; éster 2-dietilamino-etilico do ácido trans-{3-[4 ami-no-5-(3-benziloxi-fenil)-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il] ci-clobutilmetil}-carbâmico; éster 2-morfolin-4-il-etilico do ácido trans-{3 [4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil]-carbâmico; 21 ΡΕ1476192 éster 2-(4-metil-piperazin-l-il)-etílico do ácido trans-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirrolo[2,3-d]pi-rimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-carbâmico; éster 2-dimetilamino-etílico do ácido trans-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-carbâmico; éster etilico do ácido trans-{3-[4-amino-5-(3-benzi-loxi-fenil)-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il] -ciclobutilmetil}-carbâmico; éster etílico do ácido trans-4-{3-[4-amino-5-(3-benziloxi-fenil)-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil }-piperazino-l-carboxílico; cis-5-(3-benziloxi-fenil)-7-(3-pirrolidin-l-ilme-til-ciclobutil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ilamina; cis-7-(3-azetidin-l-ilmetil-ciclobutil)-5-(3-benziloxi-fenil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ilamina; éster metilico do ácido trans-3-[4-Amino-5-(3-benziloxi-fenil)-6-bromo-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ci-clobutanocarboxílico; éster metilico do ácido trans-3-[4-Amino-5-(3-benziloxi-fenil)-6-metil-pirrolo[2,3-d]pirimidin-T-il] -ci-clobutanocarboxílico; 22 ΡΕ1476192 trans-{3-[4-Amino-5-(3-benziloxi-fenil)-6-meti1-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutil}-metanol; éster metílico do ácido cis-3-[4-Amino-5-(3 benzi-loxi-fenil)-6-bromo-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il] -ciclo-butanocarboxilico; éster metilico do ácido cis-3-[4-Amino-5-(3 benziloxi-fenil)-6-metil-pirrolo[2, 3-d]pirimidin-7-il]-ciclo-butanocarboxilico; cis-{3-[4-Amino-5-(3-benziloxi-fenil)-6-metil-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutil}-metanol; éster metilico do ácido cis-3-[4-Amino-5-(3 benziloxi-fenil)-6-etil-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il] -ciclobutanocarboxilico; éster metilico do ácido trans-3-[4-Amino-5-(3 benzi-loxi-fenil)-6-etil-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il] -ciclo-butanocarboxilico; cis-{3-[4-Amino-5-(3-benziloxi-fenil)-6-etil-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutil}-metanol; trans-{3-[4-Amino-5-(3-benziloxi-fenil)-6-etil-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutil}-metanol; 23 ΡΕ1476192 trans-5-(3-Benziloxi-fenil)-6-metil-7-(3-pirro-lidin-l-ilmetil-ciclobutil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ilamina; trans-5-(3-Benziloxi-fenil)-6-metil-7-[3-(4-metil-piperazin-l-ilmetil)-ciclobutil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ilamina; trans-l-{3-[4-Amino-5-(3-benziloxi-fenil)-6-metil-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}- piperidin-4-ol; trans-7-(3-Azetidin-l-ilmetil-ciclobutil)-5-(3-benziloxi-fenil)-6-metil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ilamina; trans-5-(3-Benziloxi-fenil)-6-metil-7-{3-[(tetra hidro-piran-4-ilamino)-metil-ciclobutil}-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ilamina; trans-((R)—1—{3—[4-Amino-5-(3-benziloxi-fenil)-6 metil-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-pirro lidin-2-il)-metanol; cis-5-(3-Benziloxi-fenil)-6-metil-7-(3-pirroli-din-l-ilmetil-ciclobutil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ilamina; 24 ΡΕ1476192 cis-5- (3-Benziloxi-fenil)-6-metil-7-[3-(4-metil-piperazin-l-ilmetil)-ciclobutil]-7H-pirrolo[2,3-d]pirimi-din-4-ilamina; cis-7-(3-Azetidin-l-ilmetil-ciclobutil)-5-(3-benziloxi-fenil)-6-metil-7H-pirrolo[2,3—d]pirimidin-4-ilamina; cis-l-{3-[4-Amino-5-(3-benziloxi-fenil)-6-meti1-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-piperidin-4 ol; cis-((R)—1—{3—[4-Amino-5-(3-benziloxi-fenil)-6-metil-pirrolo [2,3—d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-pirro lidin-2-il)-metanol; cis-5-(3-Benziloxi-fenil)-6-etil-7-(3-pirrolidin l-ilmetil-ciclobutil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ilamina; cis-5- (3-Benziloxi-fenil)-6-etil-7[3-(4-metil-piperazin-l-ilmetil)-ciclobutil]-7H-pirrolo[2,3-d]pirimi-din-4-ilamina; cis-7-(3-Azetidin-l-ilmetil-ciclobutil)-6-etil-5 {3- [ (Z)-2-et-(E)-ilideno-hexa-3,5-dieniloxi]-fenil}-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ilamina; cis-l-{3-[4-Amino-5-(3-benziloxi-fenil)-6-etil-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-piperidin-4 ol; 25 ΡΕ1476192 ci s —((R)—1 — {3—[4-Amino-5-(3-benziloxi-fenil)-6-etil-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il]-ciclobutilmetil}-pirro-lidin-2-il)-metanol; e cis-5-(3-Benziloxi-fenil)-6-etil-7-{3-[(tetra-hidro-piran-4-ilamino-metil]-ciclobutil}-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ilamina.

Entre estes compostos, a trans-5-(3-benziloxi-fenil)-7-(3-pirrolidin-l-ilmetil-ciclobutil)-7H-pirrolo-[2, 3 —d]pirimidin-4-ilamina (ADW) é a mais especialmente preferida. A preparação destes compostos está descrita em WO 02/092599.

Os inibidores do receptor do PDGF preferidos a serem usados de acordo com a presente invenção são aqueles que estão descritos no pedido EP 0564 409 e, o mais preferivelmente, a 4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-[4-metil-3-(4-piridin-3-il)-pirimidin-2-ilamino)fenil]-benza-mida (STl-571) ou um sal da mesma, especialmente o sal de metanossulfonato na forma cristalina β, tal como está descrito em WO 99/03854.

As combinações da presente invenção podem ser usadas para tratar uma gama de doenças caracterizadas por hiperproliferação. Essas doenças incluem cancro, por exemplo, tumores sólidos como os tumores do cancro do pulmão, especialmente o cancro do pulmão que não seja de 26 ΡΕ1476192 pequenas células, cancro da próstata, tumores do estroma gastrintestinal, e glioblastoma, bem como leucemias, incluindo a leucemia mielógena crónica (CML) e a leucemia linfocitica aguda (ALL). Outras doenças proliferativas podem não ser malignas, tais como a aterosclerose, trombose, psoriase, esclerodermite e fibrose.

Além disso, o efeito sinérgico das combinações da presente invenção, tal como aqui estão exemplificadas por STI-571 e ADW, podem mostrar efeitos úteis no tratamento de transtornos que surjam como resultado de transplantes, por exemplo, transplante alogénico, especialmente a rejeição de tecidos, tais como especialmente a bronquiolite oblitera-tiva (BO), isto é, uma rejeição crónica de transplantes alogénicos do pulmão. Em contraste com pacientes sem BO, os que têm BO mostram muitas vezes uma elevada concentração do PDGF em fluidos de lavagem bronquioalveolar. A combinação de compostos pode também ser eficaz no tratamento de doenças associadas à migração e proliferação de células do músculo liso vascular tais como restenose e ateroesclerose. Também podem ser capazes de inibir a angiogénese. Todas estas condições hiperproliferativas estão descritas em pormenor em EP 0 564 409, WO 97/02266, WO 99/03854 e WO 98/35958, ou nas outras referências atrás referidas.

Embora não pretendamos ficar limitados pela teoria, um aspecto da actividade sinérgica observada, quando são combinados os inibidores dos receptores dos factores de crescimento especifico de tecido e não 27 ΡΕ1476192 específico de tecido, pode incluir a inibição do crescimento da célula com um primeiro inibidor até uma fase particular do ciclo da célula e, depois, privar de alimento essas células cujo crescimento foi inibido com um segundo inibidor. 0 STI-571 é um reconhecido inibidor de crescimento que impede o crescimento das células tumorais. Em certos casos, o tumor pode adaptar-se e ultrapassar a inibição de crescimento. Adicionando um agente citotóxico com especificidade para células cujo crescimento foi travado é impedida a capacidade do tumor em ultrapassar a inibição de crescimento. Propomos um papel para os inibidores de activação do receptor do factor de crescimento não específico de tecido como agentes citotóxicos para atingir as células-alvo em que o ciclo de replicação celular tenha sido parado.

Por exemplo, o STI-571 é um exemplo de uma activação do inibidor do receptor do factor de crescimento específico de tecido que é um potente inibidor de bcr/abl, uma proteína de fusão oncogénica que provoca CML. Contudo, observou-se num ensaio clínico em estudo que os pacientes de CML numa crise aguda e os pacientes com recaída de Leucemia Linfocítica Aguda Positiva do Cromossoma de Filadélfia (Ph+ALL) apenas mostram respostas temporárias ao STI-571, às quais se segue, num curto espaço de tempo, o desenvolvimento de resistência. Espera-se que venha a ser possível evitar a resistência quando o STI-571 for co-administrado com um inibidor do receptor do factor de crescimento não específico de tecido tal como o inibidor do receptor do IGF1, o ADW. 28 ΡΕ1476192 A inibição sinérgica do crescimento celular por inibição combinada da sinalização do receptor do factor de crescimento derivado das plaquetas e da sinalização do factor de crescimento insulino-simile foi demonstrada in vitro pela observação do efeito dos inibidores de transdução de sinal de pequenas moléculas, STI-571 e ADW, em células sis 3T3, células 3T3 e células do glioma U343.

As células de fibroblasto do sarcoma de símios transformadas pelo vírus NIH/3T3 (sis 3T3) segregam uma potente actividade promotora de crescimento idêntica ao factor de crescimento derivado das plaquetas em ensaios mitogénicos. A p28v-sis segregada parece estimular o crescimento celular autócrino das células transformadas por sis via activação do receptor do PDGF.

Em contraste com as células sis 3T3 em que uma proteína segregada actua através de uma cinase no receptor da célula, mostrámos que o ADW e o STI-571, quer simples quer em conjunto, têm pouco efeito no crescimento celular das células 3T3. Isto não é surpreendente porque embora as proteínas ras sejam necessárias e suficientes para a activação de cinases citosólicas induzida por insulina (Raf-1, MAPK e RSK), não interagem com e não são inibidas por nenhum destes medicamentos. 0 principal determinante da actividade de Ras ligadas por membrana é a sua capacidade de ligar nucleótidos de guanina GDP e GTP. http://ethesis.helsinki.fi/julkaisut/laa/haart/vk/kivinen/ review,htm#l 29 ΡΕ1476192

Num primeiro aspecto, a presente invenção refere-se a uma combinação, tal como uma preparação combinada ou uma composição farmacêutica, que compreende (a) um inibidor de um receptor do factor de crescimento não especifico de tecido, especialmente os que foram atrás referidos, em particular os que foram mencionados como sendo preferidos, nos quais os ingredientes activos (a) e (b) estão presentes em cada caso em forma livre ou na forma de um sal farmaceuticamente aceitável, para uso simultâneo, paralelo, separado ou sequencial. 0 termo "uma preparação combinada" define especialmente um "kit de partes" no sentido em que os parceiros de combinação (a) e (b), tal como estão atrás definidos, podem ser doseados independentemente ou pelo uso de diferentes combinações fixas com quantidades distintas dos parceiros de combinação (a) e (b), isto é, simultaneamente, paralelamente, separadamente ou sequencialmente. As partes do kit de partes podem então, por exemplo, ser administradas simultaneamente ou ser faseadas cronologicamente, ou seja, em alturas diferentes e com intervalos de tempo iguais ou diferentes para qualquer parte do kit de partes. A proporção das quantidades totais de parceiro de combinação (a) para parceiro de combinação (b) a serem administradas na preparação combinada pode variar, por exemplo, para atender às necessidades de uma sub-população de pacientes a serem tratados ou às necessidades do pacien- 30 ΡΕ1476192 te único cujas diferentes necessidades podem ser devidas à doença particular, à gravidade da doença, à idade, ao sexo, ao peso corporal, etc. dos pacientes.

Num aspecto preferido, a presente invenção refere-se a uma combinação que compreende (a) um inibidor de um receptor do factor de crescimento não específico de tecido, especialmente dos que foram atrás referidos, em particular dos que foram referidos como sendo preferidos, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e (b) um inibidor de um receptor do factor de crescimento específico de tecido, especialmente dos que foram atrás referidos, em particular dos que foram referidos como sendo preferidos, ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, para uso no tratamento do glioblastoma. No contexto da presente invenção, os termos "tratamento" ou "tratar" referem-se tanto ao tratamento profilático como preventivo assim como ao tratamento curativo ou modificador da doença, incluindo o tratamento de pacientes em risco de contraírem a doença, ou que se suspeite terem contraído a doença, bem como pacientes que estejam doentes ou a quem tenha sido diagnosticado um sofrimento derivado de uma doença ou condição medicinal.

No contexto desta divulgação, entenda-se que qualquer referência a um inibidor de um receptor do factor de crescimento não específico de tecido ou a um inibidor de um receptor do factor de crescimento específico de tecido 31 ΡΕ1476192 inclui os referidos compostos na sua forma livre ou como sais, especialmente sais farmaceuticamente aceitáveis, ou quaisquer formas de cristal dos mesmos, incluindo hidratos ou solvatos, salvo indicação em contrário e sempre que seja apropriado e conveniente.

Noutro aspecto, a presente invenção refere-se ao uso de um inibidor de um receptor do factor de crescimento não especifico de tecido, especialmente dos que foram atrás referidos, em particular dos que foram referidos como sendo preferidos, ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, para a preparação de um medicamento, para uso em combinação com um inibidor de um receptor do factor de crescimento específico de tecido, especialmente dos que foram atrás referidos, em particular dos que foram referidos como sendo preferidos, ou um sal farmaceuti-camente aceitável dos mesmos, para o tratamento do glio-blastoma. A presente invenção também se refere ao uso de um inibidor de um receptor do factor de crescimento especifico de tecido, especialmente dos que foram atrás referidos, em particular dos que foram referidos como sendo preferidos, ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, para a preparação de um medicamento, para uso em combinação com um inibidor de um receptor do factor de crescimento não específico de tecido, especialmente dos que foram atrás referidos, em particular dos que foram referidos como sendo preferidos, ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, para o tratamento do glioblastoma. 32 ΡΕ1476192

Ainda noutro aspecto, a presente invenção refere-se a composições farmacêuticas compreendendo (a) uma ou mais formas posológicas unitárias de um inibidor de um receptor do factor de crescimento não especifico de tecido, especialmente dos que foram atrás referidos, em particular dos que foram mencionados como sendo preferidos, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo e (b) uma ou mais formas posológicas unitárias de um inibidor de um receptor do factor de crescimento especifico de tecido, especialmente dos que foram atrás referidos, em particular dos que foram referidos como sendo preferidos, ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, em conjunto com pelo menos um suporte farmaceuticamente aceitável. A invenção também se refere ao uso de uma combinação da presente invenção para a preparação de uma composição farmacêutica para o tratamento do glioblastoma. A presente invenção ainda se refere a uma embalagem comercial ou produto compreendendo (a) um inibidor de um receptor do factor de crescimento não especifico de tecido, especialmente dos que foram atrás referidos, em particular dos que foram referidos como sendo preferidos, ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, e (b) um inibidor de um receptor do factor de crescimento especifico de tecido, especialmente dos que foram atrás referidos, em particular dos que foram referidos como sendo preferidos, ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, junta- 33 ΡΕ1476192 mente com instruções para o seu uso simultâneo, paralelo, separado ou sequencial no tratamento do glioblastoma. A presente invenção também se refere a uma embalagem ou produto comercial compreendendo um inibidor de um receptor do factor de crescimento não especifico de tecido, especialmente dos que foram atrás referidos, em particular dos que foram referidos como sendo preferidos, ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, juntamente com instruções para uso em combinação com um inibidor de um receptor do factor de crescimento específico de tecido, especialmente dos que foram atrás referidos, em particular dos que foram referidos como sendo preferidos, ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, para o tratamento de gliobastoma, ou uma embalagem ou produto comercial compreendendo um inibidor de um receptor do factor de crescimento específico de tecido, especialmente dos que foram atrás referidos, em particular dos que foram referidos como sendo preferidos, ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, juntamente com instruções para uso em combinação com um inibidor de um receptor do factor de crescimento não específico de tecido, especialmente dos que foram atrás referidos, em particular dos que foram referidos como sendo preferidos, ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, para o tratamento de gliobastoma. 34 ΡΕ1476192

De acordo com a presente invenção, um paciente é tratado com quantidades terapeuticamente eficazes de um inibidor de um receptor do factor de crescimento não específico de tecido e de um inibidor de um receptor do factor de crescimento especifico de tecido para tratar o gliobastoma, cada um de acordo com um regime posológico que seja apropriado para o agente individual. 0 especialista na técnica é capaz de determinar as quantidades apropriadas e farmaceuticamente eficazes dos compostos de combinação.

Os inibidores dos receptores do factor de crescimento específico e não específico de tecido podem ser preparados e administrados como se descreve na técnica, tal como nos documentos atrás citados. Se estiverem disponíveis no comércio, podem ser administrados, por exemplo, na forma como são comercializados. A administração de uma formulação farmacêutica da presente invenção pode ser conseguida como segue:

Posologia: As composições farmacêuticas compreendem desde aproximadamente 0,0001% até aproximadamente 95% dos componentes activos na formulação, sendo que as formas posológicas que estão em forma de toma única incluem, preferivelmente, desde aproximadamente 10% até aproximadamente 90% da formulação e as formas posológicas que não estão em forma de toma única compreendem, preferivelmente, desde aproximadamente 10% até aproximadamente 60% de cada 35 ΡΕ1476192 componente. As formas posológicas unitárias, tais como drageias, comprimidos, ampolas ou cápsulas, compreendem desde aproximadamente 5 mg até aproximadamente 1,5 g de agentes activos, preferivelmente desde 5 mg até aproximadamente 1 g. A dose de agente activo depende da espécie do animal de sangue quente a ser tratado, do seu peso corporal, da sua idade e do seu estado individual, das circunstâncias farmacocinéticas individuais, da doença a ser tratada e da via de administração. Preferivelmente, para um peso corporal de aproximadamente 70 kg, é administrada uma dose diária desde 10 mg até 2500 mg, mais preferivelmente desde aproximadamente 50 mg até aproximadamente 2000 mg, o mais preferivelmente desde aproximadamente 100 mg até aproximadamente 1500 mg, de qualquer um dos componentes (a) e/ou (b) . As crianças recebem uma dose inferior correspondente baseada na área superficial da sua pele (como referência, a área superficial da pele de um adulto de 70 kg é de 1,73 m2) .

Via de entrega: A formulação pode ser administrada oralmente, transdermicamente, incluindo a administração submucosal, ou parentericamente.

Formulação: As composições farmacêuticas são preparadas de maneira conhecida per se, por exemplo, por meio de processos de mistura convencional, granulação, confecção, dissolução ou liofilização. Por exemplo, as 36 ΡΕ1476192 composições farmacêuticas para administração oral podem ser obtidas combinando os componentes activos com um ou mais suportes sólidos ou liquidos, se necessário granulando uma mistura resultante e processando a mistura ou os grânulos, se assim for pretendido, ou apropriado, com adição de outros excipientes, para formar comprimidos ou núcleos de drageias ou soluções, respectivamente.

Suportes adequados são especialmente enchimentos, tais como açúcares, por exemplo, lactose, sacarose, manitol ou sorbitol, preparações de celulose e/ou fosfatos de cálcio, por exemplo, fosfato tricálcico ou hidrogeno-fosfato de cálcio, e ligantes tais como amidos, por exemplo amido de milho, trigo, arroz ou batata, metilcelulose, hidroxipropilmetilcelulose, carboximetil-celulose sódica e/ou polivinilpirrolidona e/ou, se assim se desejar, desintegradores, tais como os amidos atrás referidos, e também amido de carboximetilo, polivinilpirrolidona de ligação cruzada ou ácido alginico ou um sal do mesmo, tal como alginato de sódio. Excipientes adicionais são especialmente condicionadores de fluxo e lubrificantes, por exemplo, ácido silicico, talco, ácido esteárico ou sais dos mesmos, tais como estearato de magnésio ou de cálcio, e/ou polietileno-glicol ou seus derivados.

Os núcleos de drageia podem ser fornecidos com revestimentos adequados, eventualmente entéricos, sendo usadas, inter alia, soluções de açúcar concentradas que podem compreender goma-arábica, talco, polivinilpirro- 37 ΡΕ1476192 lidona, polietileno-glicol e/ou dióxido de titânio, ou soluções de revestimento em solventes orgânicos adequados, ou misturas de solvente, ou, para a preparação de revestimentos entéricos, soluções de preparações de celulose adequadas, tais como ftalato de acetilcelulose ou ftalato de hidroxipropilmetilcelulose. Podem ser adicionados corantes ou pigmentos aos revestimentos dos comprimidos ou drageias, por exemplo, para efeitos de identificação ou para indicar doses diferentes de ingrediente activo.

As composições farmacêuticas administráveis oralmente também são cápsulas de enchimento seco, consistindo em gelatina e também cápsulas moles seladas consistindo em gelatina e um plastificante, tal como glicerol ou sorbitol. As cápsulas de enchimento seco podem conter o componente (a) e/ou (b) na forma de grânulos, por exemplo misturados com enchimentos, tais como amido de milho, ligantes e/ou deslizantes, tais como talco ou estearato de magnésio e, quando apropriado, estabilizadores (ver, acima, "suportes adequados"). Em cápsulas moles, o ingrediente activo é preferivelmente dissolvido ou suspenso em excipientes líquidos adequados - por exemplo, óleos gordos, 'Lauro-glicol (Gattefoss6 S.A., Saint-Priest, França), egelucire (Gattefoss6 S.A., Saint-Priest, França) ou óleo de sésamo, óleo de parafina ou polietileno-glicóis líquidos, tais como PEG 300 ou 400 (Fluka, Suíça), ou polipropileno-glicóis, a cada um dos quais também podem ser adicionados estabilizadores ou detergentes - ou em água compreendendo outros suportes solúveis como atrás mencionados, tais como metil-celulose ou manitol. 38 ΡΕ1476192

Outras formas orais de administração são, por exemplo, soluções ou xaropes preparados de maneira habitual que compreendam as composições activas, por exemplo, em forma suspensa e numa concentração de aproximadamente entre 0,001% até 20%, preferivelmente aproximadamente 0,001% até cerca de 2%, ou numa concentração similar que forneça uma única dose adequada quando administrada, por exemplo, em medidas de 0,5 até 10 ml. Também adequados, por exemplo, são os concentrados em pó ou líquidos para preparar batidos, por exemplo, em leite. Esses concentrados também podem ser embalados em quantidades de toma única. São possíveis Sistemas de Entrega Transdérmica, especialmente com ingredientes activos neutros. Formulações adequadas incluem, por exemplo, cerca de 0,0001% até cerca de 2% em peso dos ingredientes activos. Por exemplo, são fornecidas formulações que incluam cerca de 2% até 99,9999% (ou o resto para 100%) de um álcool alifático de cadeia curta. Álcoois adequados incluem etanol, isopropanol, propileno-glicol e glicerol. Estas formulações podem, adicionalmente, incluir um potenciador de fluxo. Potenciadores de fluxo adequados incluem, por exemplo, decilmetilsul-fóxido, dimetilsulfóxido bem como cetonas cíclicas, lactonas, anidridos e ésteres. Alguns destes potenciadores de fluxo também aumentam a retenção dos agentes activos e, assim, actuam para aumentar a sua concentração na própria pele. Para formulações destinadas a tratamento directo (local), tais como aplicação tópica na pele, é preferido 39 ΡΕ1476192 usar um potenciador de fluxo que não só maximize o fluxo transdérmico mas também aumente a retenção de componente (a) e/ou (b) na pele. Certos potenciadores de cetona e lactona ciclicas foram referidos como capazes de também aumentar a retenção local e, assim, compreendem uma classe preferida de potenciadores para a administração tópica dos agentes activos. Em formulações para tratamento sistémico é preferível usar um potenciador de fluxo que maximize o fluxo com uma retenção local mínima do ingrediente activo.

Composições farmacêuticas adequadas para administração rectal são, por exemplo, supositórios que consistam numa combinação do ingrediente activo com uma base de supositório. Bases de supositório adequadas são, por exemplo, triglicéridos naturais ou sintéticos, hidrocarbo-netos de parafina, polietileno-glicóis ou alcanóis superiores.

Para administração parentérica há, especialmente, soluções aquosas de um ingrediente activo em forma solúvel em água, por exemplo, na forma de um sal solúvel em água, na presença ou ausência de sais, tais como cloreto de sódio e/ou álcoois de açúcar, tais como manitol ou suspensões de injecção aquosa que compreendam substâncias que aumentem a viscosidade, por exemplo, carboximetil-celulose sódica, sorbitol e/ou dextrano e, quando apropriado, estabilizadores. Os agentes activos, quando apropriados, juntamente com excipientes, também podem estar na forma de um liofilizado e podem ser transformados em 40 ΡΕ1476192 solução, antes da administração parentérica, pela adição de solventes adequados. Soluções, como as que são usadas, por exemplo, para administração parentérica, também podem ser usadas como soluções de infusão.

As formulações incluem qualquer agente activo que seja habitual para o respectivo uso clinico de quaisquer, um ou mais, agentes que pertençam a esse grupo de compostos que sejam conhecidos na técnica. As condições patológicas aqui descritas podem ser tratadas com uma combinação de agentes activos ou com os seus sais farmacêuticos aceitáveis. As formulações podem ser administradas profilacti-camente ou podem ser terapêuticas, numa quantidade eficaz para um animal de sangue quente, por exemplo, um homem, que necessite desse tratamento, preferivelmente na forma de uma composição farmacêutica.

Exemplos: Efeito sinérgico da inibição combinada dos sinais do receptor do factor de crescimento derivado das plaquetas e dos sinais do factor de crescimento insulino- símile usando os inibidores da transdução do sinal de pequenas moléculas, STI-571 e ADW, sobre o crescimento das células

Ensaio de Escrutínio: Foi efectuado um ensaio para verificar a eficácia de várias combinações de doses de STi-571 e adw usando pratos de cultura de tecido de 12 cavidades com 5 x 103 células colocadas em cada cavidade. As células foram colocadas nos pratos e ligadas durante a 41 ΡΕ1476192 noite em meio de crescimento consistindo em DMEM com 10% de soro bovino fetal (FBS) . O meio foi substituído com várias combinações de doses de STI-571 (0 μΜ, 1 μΜ, 3 μΜ), e de ADW (0 μΜ, 0,1 μΜ, 0,3 μΜ, 1 μΜ) em DMEM + 5% de plasma com reduzido teor em plaquetas (PPP) . O meio com agentes foi substituído de 48 em 48 horas. Nos dias 5 e 8, o meio foi retirado e as células foram fixadas e manchadas com 0,5% de violeta cristal em 70% de metanol. Os resultados estão apresentados na Figura 1. As células manchadas com violeta cristal revelaram uma densa monocamada intacta em qualquer dos agentes ausentes do meio. Na presença de maiores quantidades de STI-571, a densidade das células na monocamada está visivelmente empobrecida. Um efeito similar é observado no que respeita a ADW puro. Contudo, o empobrecimento do crescimento das células é dramaticamente potenciado a níveis intermédios de STI-571 (1,0 μΜ) quando mesmo pequenas quantidades de ADW são adicionalmente fornecidas às células. Quase nenhumas células foram observadas a 1 μΜ de STI-571 e 0,3 μΜ de ADW. Este efeito sinérgico observado é uma descoberta importante no tratamento de doenças caracterizadas pela hiperproliferação de células.

Ensaio de Inibição de Crescimento Quantitativo: Para a avaliação quantitativa da inibição do crescimento das células, o efeito do tratamento combinado com STI-571 e ADW foi medido quer por meio da contagem directa do número de células remanescentes (Figura 2), quer com um ensaio de viabilidade celular baseado na redução de um composto de 42 ΡΕ1476192 tetrazólio de MTS resultando numa luz de absorção de formazan solúvel em água a 490 nM (Ensaio de Proliferação de Células Numa Solução Aquosa em Promega CellTiter) (Figuras 3 e 4) . Para os ensaios de contagem de células, colocaram-se no prato 5 x 103 células em triplicado em pratos de cultura de células de 100 mm e deixou-se que se ligassem durante a noite, como atrás referido, em DMEM + 10% de FBS e foram tratadas com agentes em dmem + 5% de PPP. O meio e os agentes foram substituídos de 48 em 48 horas. No dia 5 as células foram tripsinizadas e contadas com um hemacitómetro. A Figura 2 mostra o número dramaticamente diminuído de células sobreviventes quando se usou ADW em conjunto com STI-571 em células de glioma humano U343 (Fig. 2).

Para o ensaio de viabilidade celular à base de MTS, colocaram-se 5 x 103 células em pratos de 24 cavidades durante a noite em DMEM + 10% de FBS. O meio foi então substituído com DMEM + 5% de PPP contendo concentrações apropriadas de STI-571 e/ou ADW. Cada condição foi ensaiada em triplicado. O meio e os agentes foram substituídos de 48 em 48 horas e a fracção de sobreviventes viáveis foi estimada usando-se o ensaio de MTS no dia 5 a seguir ao tratamento. A Figura 3 mostra que o tratamento combinado com ADW e STI-571 em fibroblastos sis 3T3 resulta em maior ligação celular (Fig. 3A) . O controlo de fibroblastos transformados por ras (células ras 3T3) mostra menor sobrevivência a seguir ao tratamento com ADW mas não mostra nenhum efeito sobre a sobrevivência com o STI-571 43 ΡΕ1476192 administrado puro ou em combinação com o ADW na gama posológica examinada (Fig. 3B).

Na Figura 4, a concentração de STI-571 varia e a concentração de ADW é constante a 1 μΜ (linha inferior) ou zero μΜ (linha superior). Observa-se um efeito sinérgico dramático.

Lisboa, 16 de Julho de 2007

Claims (6)

1. ΡΕ1476192 1 REIVINDICAÇÕES 1. Uso de um inibidor de receptor do factor de crescimento insulino-símile 1, ou de um sal farmaceu-ticamente aceitável do mesmo, para a preparação de um medicamento para uso simultâneo, paralelo, separado ou sequencial em combinação com um inibidor de receptor do factor de crescimento derivado das plaquetas, ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para o tratamento do glioblastoma.
2. 2. Uso de um inibidor de receptor do factor de crescimento derivado das plaquetas, ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para a preparação de um medicamento para uso simultâneo, paralelo, separado ou sequencial, em combinação com um inibidor de receptor do factor de crescimento insulino-símile 1, ou com um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para o tratamento do glioblastoma. 3. 0 uso, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, onde o inibidor de receptor do factor de crescimento insulino-símile 1 é trans-5-(3-benziloxi-fenil)-7-(3-pirro-lidin-l-ilmetil-ciclobutil)-7H-pirrolo[2,3 —d]pirimidin-4-ilamina ou um sal da mesma. 4. 0 uso, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, onde o inibidor de receptor do factor de crescimento insulino-símile 1 é a tirfostina ou um sal da mesma. 2 ΡΕ1476192 5. 0 uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, onde o inibidor de receptor do factor de crescimento derivado das plaquetas é 4-(4-metilpi-perazin-l-ilmetil)-N-[4-metil-3-(4-piridin-3-il)-pirimidin-3-ilamino)-fenil]benzamida ou um sal da mesma. 6. 0 uso, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, onde o inibidor de receptor do factor de crescimento insulino-simile 1 é trans-5-(3-benziloxi-fenil)-7-(3-pirro-lidin-l-ilmetil-ciclobutil)-7H-pirrolo[2,3 —d]pirimidin-4-ilamina, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma, e o inibidor de receptor do factor de crescimento derivado das plaquetas é 4-(4-metilpiperazin-l-ilmetil)-N-[4-metil-3-(4-piridin-3-il)-pirimidin-2-ilamino)-fenil]-benzamida, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma.
3. 7. Uma composição farmacêutica para o tratamento do glioblastoma que compreenda (a) uma ou mais formas posológicas unitárias de um inibidor de receptor do factor de crescimento insulino-simile 1, ou de um sal farma-ceuticamente aceitável do mesmo, e (b) uma ou mais formas posológicas unitárias de um inibidor de receptor do factor de crescimento derivado das plaquetas, ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, juntamente com pelo menos um suporte farmaceuticamente aceitável.
4. 8. A composição farmacêutica da reivindicação 7 que compreenda (a) uma ou mais formas posológicas unitárias 3 ΡΕ1476192 de um inibidor de receptor do factor de crescimento insulino-símile 1 das reivindicações 3 ou 4, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e (b) uma ou mais formas posológicas unitárias do inibidor de receptor do factor de crescimento derivado das plaquetas da reivindicação 5, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
5. 9. Uma embalagem ou produto comercial compreendendo (a) um inibidor de receptor do factor de crescimento insulino-simile 1, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e (b) um inibidor de receptor do factor de crescimento derivado das plaquetas, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, juntamente com instruções para o seu uso simultâneo, paralelo, separado ou sequencial no tratamento do glioblastoma.
6. 10. A embalagem ou produto comercial da reivindicação 9, compreendendo (a) um inibidor de receptor do factor de crescimento insulino-simile 1 das reivindicações 3 ou 4, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e (b) o inibidor de receptor do factor de crescimento derivado das plaquetas da reivindicação 5, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Lisboa, 16 de Julho de 2007