PT1553985E

PT1553985E - Bifenilos como agentes de imagiologia na doença de alzheimer

Info

Publication number: PT1553985E
Application number: PT03808140T
Authority: PT
Inventors: Hank F Kung; Mei Ping Kung; Zhi-Ping Zhang
Original assignee: Univ Pennsylvania
Priority date: 2002-10-04
Filing date: 2003-10-06
Publication date: 2011-11-30
Also published as: ES2370818T3; US20050271584A1; WO2004032975A2; AU2003277280A8; AU2003277280A1; JP2006502220A; DK1553985T3; EP1553985A2; WO2004032975A3; ATE522230T1; TW200413009A; EP1553985B1; SI1553985T1

Description

1

DESCRIÇÃO

"BIFENILOS COMO AGENTES DE IMAGIOLOGIA NA DOENÇA DE ALZHEIMER" ANTECEDENTES DA INVENÇÃO Campo da Invenção A presente invenção refere-se a novos compostos bioactivos, a uma composição farmacêutica e de diagnóstico para criação e visualização de imagens (imagiologia) de depósitos amilóides e ao uso de novos compostos.

Arte Antecedente A doença de Alzheimer [(AD) Alzheimer's disease] é um distúrbio neurodegenerativo progressivo caracterizado por declínio cognitivo, perda de memória irreversível, desorientação e deficiência de linguagem. 0 exame post mortem de cortes de cérebro com AD revela abundantes placas senis (SPs) compostas por péptidos β-amilóides (Αβ) e numerosos emaranhados neurofibrilares (NFTs) formados por filamentos de proteínas tau altamente fosforiladas (em revisões recentes e citações adicionais ver Ginsberg, S.D., et ai., "Molecular Pathology of Alzheimer's Disease and Related Disorders", em Cerebral Córtex: Neurodegenerative and Age-related Changes in Structure and Function of Cerebral Córtex, Kluwer Academic/Plenum, NY (1999), pág. 603-654; Vogelsberg--Ragaglia, V., et ai., "Cell Biology of Tau and Cytoskeletal Pathology in Alzheimer's Disease", Alzheimer's Disease, Lippincot, Williams & Wilkins, Philadelphia, PA(1999), pág. 359-372) . A AD familiar [ (FAD) familial AD] é causada por múltiplas mutações nos genes que codificam para a proteína 2 precursora A [ (APP) Amyloid protein precursor], presenilina 1 (PS1) e presenilina 2 (PS2) (Ginsberg, S.D., et al., "Molecular Pathology of Alzheimer's Disease and Related Disorders", em Cerebral Córtex: Neurodegenerative and Age--related Changes in Structure and Function of Cerebral Córtex, Kluwer Academic/Plenum, NY (1999), pág. 603-654; Vogelsberg-Ragaglia, V., et al., "Cell Biology of Tau and Cytoskeletal Pathology in Alzheimer's Disease", Alzheimer's Disease, Lippincot, Williams & Wilkins, Philadelphia, PA (1999) , pág. 359-372) .

Embora os mecanismos exactos subjacentes à AD não sejam totalmente compreendidos, todas as mutações patogénicas associadas à FAD estudadas até agora aumentam a produção da mais amiloidogénica longa forma de 42 a 43 aminoácidos do péptido Αβ. Assim, pelo menos na FAD, a desregulação da produção do Αβ parece ser suficiente para induzir uma cascata de eventos que levam à neurodegeneração. Na verdade, a hipótese da cascata amilóide sugere que a formação de agregados fibrilares extracelulares de Αβ no cérebro pode ser um evento fundamental na patogénese da AD (Selkoe, D.J., "Biology of B-amyloid precursor protein and the Mechanism of Alzheimer's Disease, "Alzheimer's Disease, Lippincot Williams & Wilkins, Philadelphia, PA (1999), pág. 293-310; Selkoe, D.J., J. Am. Med. Assoe. 283:1615-1617 (2000); Naslund, J., et al., J. Am. Med. Assoe. 283:1571-1577 (2000); Golde, T.E., et al., Biochimica et Biophysica Acta 1502:172-187 (2000)).

Diversas abordagens da tentativa para inibir a produção e reduzir o acúmulo de Αβ fibrilar no cérebro estão sendo presentemente avaliadas como terapias potenciais para a AD (Skovronsky, D.M. e Lee, V.M. , Trends Pharmacol. Sei. 21:161- -163 ( 2000); Vassar, R., et al ., Science 286:735-741 (1999); Wolfe, M.S. , et al., J Med. Chem. 41:6-9 (1998); Moore, 3 C.L., et al., J. Med. Chem. 43:3434-3442 (2000); Findeis, M.A., Biochimica et Biophysica Acta 1502:76-84 (2000); Kuner, P., Bohrmann, et al., J. Biol. Chem. 275:1673-1678 (2000)). É, portanto, de grande interesse desenvolver ligantes que ligam especificamente agregados fibrilares de péptidos Αβ. Tendo em vista que as SPs extracelulares são alvos acessíveis, esses novos ligantes poderão utilizar-se como ferramentas de diagnóstico in vivo e como sondas para visualizar a deposição progressiva de Αβ em estudos de amiloidogénese da AD em pacientes vivos.

Para este efeito, relataram-se várias abordagens interessantes para o desenvolvimento de ligantes específicos dos agregados fibrilares de péptidos Αβ (Ashburn, TT, et al.,

Chem. Biol. 3:351-358 (1996) ; Han, G., et al. , J. Am Chem. Soc. 118:4506-4507 ( 1996); Klunk, W. E. , et al. Biol.

Psychiatry 35:627 (1994); Klunk, W.E., et ai., Neurobiol.

Aging 16:541-548 (1995); Klunk, W.E., et ai., Society for

Neuroscience Abstract 23:1638 (1997); Mathis, C.A., et ai.,

Proc. Xllth Intl. Symp. Radiopharm. Chem., Uppsala, Suécia:94-95 (1997);. Lorenzo, A. and Yankner, B.A., Proc.

Natl. Acad. Sei. U.S.A. 91:12243-12247 (1994); Zhen, W., et ai., J. Med. Chem. 42:2805-2815 (1999)). Uma abordagem baseia-se em crisamina-G (CG) e vermelho do Congo (CR) altamente conjugados, tendo-se utilizado este último na coloração ("staining") fluorescente das SPs e dos NFTS nos cortes post mortem de cérebros com AD (Ashburn, T.T., et ai., Chem; Biol 3:351-358 (1996); Klunk, W.E., et ai., J. Histochem. Cytochem. 37:1273-1281 (1989)). As constantes de inibição (Ki) relativas à ligação aos agregados fibrilares de péptidos Αβ de CR, CG, e derivados 3'-bromo- e 3'-iodo de CG são relatadas serem 2800, 370, 300 e 250 nM, respectivamente (Mathis, CA, et ai., Proc. Xllth Intl. Symp. Radiopharm. Chem., Uppsala, Suécia:94-95 (1997)). Demonstrou-se que esses 4 compostos se ligam selectivamente a agregados de péptidos Αβ (1-40) in vitro bem como a depósitos fibrilares Αβ em cortes de cérebros com AD (Mathis, C.A., et al., Proc. Xllth Intl. Symp. Radiopharm. Chem., Uppsala, Suécia:94-95 (1997)). A amiloidose é uma afecção caracterizada pela acumulação de diversas proteínas fibrilares, insolúveis nos tecidos de um paciente. Um depósito de amilóide forma-se pela agregação de proteínas amilóides, seguida pela associação de mais agregados e/ou de proteínas amilóides. A formação e a acumulação de agregados de péptidos β-amilóides (Αβ) no cérebro são factores críticos para o desenvolvimento e a progressão da AD. Os agregados fibrilares de péptidos amilóides, Αβι-40 e Αβι-42, são os principais péptidos metabólicos derivados da proteína precursora amilóide encontrada em placas senis e depósitos amilóides cerebrovasculares em pacientes com AD (Xia, W., et al., J. Proc. Natl. Acad. Sei. U.S.A. 97:9299-9304 (2000)). A prevenção e a inversão da formação de placas Αβ estão a ser alvo de um tratamento para essa doença (Selkoe, D., J. JAMA 283:1615-1617 (2000); Wolfe, M.S., et al., J. Med.. Chem. 41:6-9 (1998); Skovronsky, D.M., e Lee, V.M., Trends Pharmacol. Sei. 21:161-163 (2000)).

Além do papel dos depósitos amilóides na doença de Alzheimer, a presença desses depósitos amilóides têm-se manifestado em doenças como febre do Mediterrâneo, síndrome de Muckle-Wells, mieloma idiopático, polineuropatia amilóide, cardiomiopatia amilóide, amiloidose senil sistémica, polineuropatia amilóide, hemorragia cerebral hereditária com amiloidose, síndrome de Down, scrapie, doença de Creutzfeldt--Jakob, Kuru, síndrome de Gerstamnn-Straussler-Scheinker, carcinoma medular da tiróide, amilóide atrial isolada, substância amilóide composta por β2-ιηίοηορ1οόυ1ίη3 em 5 pacientes que realizam hemodiálise, miosite de corpos de inclusão, depósitos de β2-3πιί1όίάθ na doença de perda de massa muscular, e insulinoma dos ilhéus de Langerhans em um paciente com diabetes do tipo II.

Assim, tem-se procurado ansiosamente um método simples, não invasivo para detecção e quantificação de depósitos de amilóide em um paciente. Actualmente, a detecção de depósitos de amilóide envolve a análise histológica da biopsia ou dos materiais da autópsia. Ambos os métodos apresentam desvantagens. Por exemplo, uma autópsia só pode utilizar-se em um diagnóstico post mortem.

Os agentes utilizados em imagiologia podem basear-se em dois tipos de isótopos. 99mTc (Ti/2, 6 h; 140 KeV) e 123I (Ti/2, 13 h; 159 KeV) utilizam-se rotineiramente em tomografia Computorizada de Emissão de Fotão Único [(SPECT) Single Photon Emission Computed Tomography] , enquanto nC (T1/5, 20 minutos; 511 KeV) e 18F (T i/2, 110 minutos; 511 KeV) são comummente utilizados em tomografia de emissão de positrões [ (PET) Positron Emission Tomography] . A imagiologia directa de depósitos amilóides in vivo é difícil, já que os depósitos apresentam muitas das mesmas propriedades físicas (por exemplo, densidade e teor em água) dos tecidos normais. Tentativas para criar e visualizar imagens (to image) de depósitos amilóides utilizando Técnicas de Imagens por Ressonância Magnética [(MRI) Magnetic resonance imaging] e tomografia axial computorizada [(CAT) Computer-assisted tomography] têm sido decepcionantes e têm detectado depósitos amilóides somente sob algumas condições favoráveis. Além disso, os esforços para marcar depósitos de amilóide com anticorpos, proteína P amilóide sérica, ou outras moléculas sonda apresentaram alguma selectividade na 6 periferia dos tecidos, mas proporcionaram imagens deficientes nos interiores dos tecidos.

Os potenciais ligantes para detectar agregados de péptidos Αβ em cérebros vivos devem atravessar a barreira hemato-encefálica intacta. Assim a captação ("uptake") pelo cérebro pode melhorar utilizando ligantes com um tamanho molecular relativamente menor (em comparação com o Vermelho do Congo) e aumentar a lipofilicidade. Tioflavinas (S e T) altamente conjugadas são comummente utilizadas como corantes para a coloração dos agregados de péptidos Αβ nos cérebros de pessoas que sofrem de AD (Elhaddaoui, A., et al., Biospectroscopy 1:351-356 (1995)). Esses compostos têm por base benzotiazole, que é relativamente pequeno em tamanho molecular.

Seria útil possuir uma técnica não invasiva de criação e de visualização de imagens ("imaging") e de quantificação de depósitos de amilóide em um paciente. Além disso, seria útil possuir compostos que inibissem a agregação de proteínas amilóides para formarem depósitos de amilóide e um método para determinar a capacidade dos compostos para inibir a agregação das proteínas amilóides.

BREVE RESUMO DA INVENÇÃO A presente invenção permite a obtenção de novos compostos da Fórmula geral I. A presente invenção apresenta também uma composição farmacêutica que compreende um composto de Fórmula geral I. A presente invenção permite ainda a obtenção de composições de diagnóstico que compreendem um composto 7 radiomarcado de Fórmula geral I e um veículo ou diluente aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.

Um outro aspecto da presente invenção é indicado para a utilização de compostos de Fórmula geral I na fabricação de uma composição de diagnóstico para criação e visualização de imagens ("imaging") dos depósitos de amilóide.

BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS A Figura 1 mostra as estruturas de potenciais agentes capazes de criarem e de visualizarem imagens ("agentes de imagiologia") de placas de péptidos Αβ. A Figura 2 mostra os dados das ligações de alguns dos compostos bifenílicos e pirazólicos da presente invenção.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

Um primeiro aspecto da presente invenção conduz a compostos de Fórmula geral I:

X

ou um seu sal aceitável sob o ponto de vista farmacêutico, na qual 0 símbolo R1 representa um grupo dimetilamino, o símbolo R2 representa um átomo de hidrogénio, o símbolo R3 representa um grupo 18fluoro-alquilo (Ci_5) , o símbolo R4 representa um grupo hidroxi e o símbolo X representa um átomo de hidrogénio. Nessas formas de realização, é preferível que os símbolos R1 e R4 se encontrem em posição para em relação à 8 ponte, e o símbolo R3 se encontre em posição orto em relação ao símbolo R4. Mais preferivelmente, o símbolo R3 representa um grupo 18fluorometilo ou 18fluoroetilo.

Alguns compostos preferidos abrangidos pela fórmula geral I apresentam as seguintes estruturas i-iii:

i

Na qual, o símbolo n representa um número inteiro de 1 a 5 e o símbolo R' representa 18F.

Na qual, o símbolo n representa um número inteiro de 1 a 5.

No que diz respeito às posições relativas de todo e qualquer substituinte em um anel aromático, é previsível que os símbolos R1, R2, R3, R4 e X possam ocorrer nas posições orto, meta, ou para em relação à ponte de ligação ("linkage bond") entre os anéis aromáticos. É igualmente previsível que em formas de realização preferidas em que cada anel aromático apresenta um substituinte, a posição orto, meta ou para de cada um dos substituintes é independente do substituinte no anel oposto. Em compostos que contêm um substituinte em cada anel é preferível que cada substituinte ocorra de um modo independente ou em uma posição meta ou em uma posição para em relação à referida ponte de ligação. Mais preferivelmente, ambos os substituintes se apresentam em posição para. 9

Deve entender-se também que se considera que a presente invenção inclui estereoisómeros bem como isómeros ópticos, por exemplo misturas de enantiómeros assim como enantiómeros e diastereoisómeros individuais, que surgem como consequência de uma assimetria estrutural dos compostos escolhidos nas presentes séries.

Os compostos de Fórmula geral I podem também ser solvatados, especialmente hidratados. A hidratação pode ocorrer durante a fabricação dos compostos ou das composições que compreendem os compostos, ou a hidratação pode ocorrer ao longo do tempo devido à natureza higroscópica dos compostos. Além disso, os compostos da presente invenção podem existir quer sob formas solvatadas quer sob formas não solvatadas com solventes aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico tais como água, etanol, e similares. Em geral, para efeitos da presente invenção as formas solvatadas consideram-se equivalentes às formas não solvatadas.

Quando qualquer variável ocorre mais do que uma vez em um qualquer componente ou na Fórmula geral I a sua definição em cada ocorrência é independente da sua definição em cada outra ocorrência. Também associações de substituintes e/ou de variáveis são permitidas somente se tais associações resultarem em compostos estáveis. 0 termo "alquilo" quando utilizado na presente invenção por si só ou como parte de um outro grupo refere-se a radicais de até 8 átomos de carbono de cadeias lineares e de cadeias ramificadas. 0 termo "alcoxi" é utilizado na presente invenção para significar um radical alquilo de cadeia linear ou ramificada, como definido antes, a menos que o comprimento da cadeia 10 também esteja limitado, ligado a um átomo de oxigénio, incluindo, mas não limitado a, metoxi, etoxi, n-propoxi, isopropoxi, e assim por diante. De preferência a cadeia alcoxi apresenta 1 a 6 átomos de carbono de comprimento, mais preferivelmente 1 a 4 átomos de carbono de comprimento. 0 termo "monoalquilamina" quando utilizado na presente invenção por si só ou como parte de outro grupo refere-se a um grupo amino que tem como substituinte um grupo alquilo como definido antes. Assim, o termo "metilamina" refere-se a um grupo neutro ou a um substituinte no anel, em que N se liga a um composto de uma das fórmulas gerais referidas na presente invenção através do anel ou de uma cadeia do composto, em que N se liga ainda a um grupo metilo e a um átomo de hidrogénio. Além disso, o N pode ser carregado e pode formar sais. 0 termo "dialquilamina" quando utilizado na presente invenção por si só ou como parte de um outro grupo refere-se a um grupo amino que comporta como substituintes dois grupos alquilo como definidos antes. Assim, o termo "dimetilamina" refere-se a um grupo neutro ou a um substituinte no anel, em que o N se liga a um composto de uma das fórmulas gerais referidas na presente invenção através do anel ou de uma cadeia do composto, em que o N se liga ainda a dois grupos metilo. Além disso, o N pode ser carregado e pode formar sais. O termo "hidroxi-alquilo (C1-5) " quando utilizado na presente invenção refere-se a uma cadeia alquilica ligada a um composto de uma das fórmulas gerais referidas na presente invenção através do anel ou de uma cadeia do composto, em que a porção distai da cadeia alquilica do grupo contém um radical hidroxi. A cadeia alquilica pode conter qualquer 11 número de carbonos, mas de preferência o número de carbonos na cadeia alquilica é entre 1 e 5. 0 termo "halo" utilizado na presente invenção por si próprio ou como parte de um outro grupo refere-se a átomos de cloro, bromo, flúor ou iodo. 0 termo "haloalquilo" quando utilizado na presente invenção refere-se a um qualquer dos grupos alquilo anteriores comportando como substituintes um ou mais átomos de cloro, bromo, flúor ou iodo preferindo-se o flúor e o cloro, tal como clorometilo, iodometilo, trifluorometilo, 2,2,2-trifluoroetilo, e 2-cloroetilo. 0 termo "alquiltio" quando utilizado na presente invenção por si só ou como parte de um outro grupo refere-se a um tioéter com a estrutura: R-S, na qual o símbolo R representa um grupo alquilo C1-4 como definido antes. 0 termo "alquilsulfonilo" quando utilizado na presente invenção por si só ou como parte de um outro grupo refere-se a uma sulfona com a estrutura: R-SO2, na qual o símbolo R representa um grupo alquilo C1-4 como definido antes. 0 termo "arilo" quando utilizado na presente invenção por si só ou como parte de um outro grupo refere-se a grupos monocíclicos ou bicíclicos aromáticos contendo entre 6 e 12 átomos de carbono na porção do anel, de preferência 6 a 10 átomos de carbono na porção do anel, como fenilo, naftilo ou tetra-hidronaftilo. O termo "heterociclo" ou "anel heterocíclico", quando utilizado na presente invenção excepto se mencionado, representa um sistema de anéis mono-heterocíclico estável com 12 5 a 7 membros que podem ser saturados ou insaturados, e que consistem em átomos de carbono e desde 1 a 3 heteroátomos escolhidos no qrupo constituído por átomos de N, 0 e S, e em que os heteroátomos de azoto e de enxofre podem eventualmente oxidar-se. Especialmente úteis são os anéis que contêm um átomo de azoto associado a um átomo de oxiqénio ou de enxofre, ou dois heteroátomos de azoto. Exemplos de tais grupos heterocíclicos incluem grupos piperidinilo, pirrolilo, pirrolidinilo, imidazolilo, imidazinilo, imidazolidinilo, piridilo, pirazinilo, pirimidinilo, oxazolilo, oxazolidinilo, isoxazolilo, isoxazolidinilo, tiazolilo, tiazolidinilo, isotiazolilo, homopiperidinilo, homopiperazinilo, piridazinilo, pirazolilo, e pirazolidinilo, mais preferivelmente tiamorfolinilo, piperazinilo, e morfolinilo. 0 termo "heteroátomo" utiliza-se na presente invenção para significar um átomo de oxigénio ("0"), um átomo de enxofre ("S") ou um átomo de azoto ("N"). Reconhecer-se-á que quando o heteroátomo é azoto, pode formar um radical NRaRb, em que os símbolos Ra e Rb representam, independentemente um do outro, um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo Ci_4, aminoalquilo C2-4, halo-alquilo Ci_4, halo-benzilo, ou os símbolos R1 e R2 consideram-se conjuntamente para formar um anel heterocíclico com 5 a 7-membros que possui eventualmente 0, S ou NRC no mencionado anel, em que Rc representa um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo Ci_4. piranilo, furilo, 0 termo "heteroarilo" quando utilizado na presente invenção refere-se a grupos que possuem 5 a 14 átomos no anel; 6, 10 ou 14 electrões π compartilhados em um arranjo cíclico; e que contém átomos de carbono e 1, 2 ou 3 heteroátomos de oxigénio, azoto ou enxofre (em que exemplos de grupos heteroarilo são: grupos tienilo, benzo[b]tienilo, nafto[2,3-b]tienilo, tiantrenilo, 13 isobenzofuranilo, benzoxazolilo, cromenilo, xantenilo, fenoxatiinilo, 2H-pirrolilo, pirrolilo, imidazolilo, pirazolilo, piridilo, pirazinilo, pirimidinilo, piridazinilo, indolizinilo, isoindolilo, 3H-indolilo, indolilo, indazolilo, purinilo, 4H-quinolizinilo, isoquinolilo, quinolilo, ftalazinilo, naftiridinilo, quinazolinilo, cinolinilo, pteridinilo, 4aH-carbazolilo, carbazolilo, β-carbolinilo, fenantridinilo, acridinilo, perimidinilo, fenantrolinilo, fenazinilo, isotiazolilo, fenotiazinilo, isoxazolilo, furazanilo e fenoxazinilo) 0 termo "aralquilo" ou "arilalquilo", quando utilizado na presente invenção por si só ou como parte de um outro grupo, refere-se a grupos alquilo Ci-6 como examinado antes que possuem um substituinte arilo, como benzilo, feniletilo ou 2-naftilmetilo.

Um outro aspecto da presente invenção está relacionado com métodos de preparação de compostos de Fórmula geral I. A presente invenção diz ainda respeito a métodos de preparação de compostos da Fórmula geral I anterior. Todos os reagentes utilizados na síntese foram produtos comerciais e utilizaram-se sem qualquer purificação salvo indicação em contrário. Como agente secante utilizou-se Na2S04 anidro. A cromatografia em coluna rápida realizou-se sobre gele de sílica de 230 a 400 malhas.

Os compostos da presente invenção podem preparar-se através das reacções descritas nos Esquemas 1 a 6. A síntese de derivados N,N-dimetilamínicos de fluoreno foi alcançada com êxito utilizando uma reacção de metilação redutora apresentada no Esquema 1. Começando com 2 ou 3-aminofluorenos, la-lf, converteu-se o grupo amino no grupo 14 N,N-dimetilamino (2a-2f) com elevado rendimento (> 90%) utilizando aldeído fórmico na presença de cianoboro-hidreto de sódio como agente redutor (4). A mesma reacção foi aplicada na metilação das 9-fluorenonas (Esquema 2) pelo qual se converteram as amino-9-fluorenonas em N,N-dimetilamino-9--hidroxifluorenos (3a-3d) com bom rendimento (> 80%). Sob uma condição de metilação redutora, o grupo ceto da fluorenona foi reduzido até à obtenção do grupo 9-hidroxi. Para preservar o grupo ceto da 9-fluorenona, utilizou-se um método alternativo para a reacção de metilação. Utilizando iodeto de metilo/K2C03 em acetonitrilo à temperatura de refluxo, o grupo amino da 9-fluorenona foi metilado até à obtenção das N,N-dimetilamino-9-fluorenonas (4a-4d) (Esquema 3). Os rendimentos desta reacção de metilação foram menos previsíveis (variando entre 18 e 70%) .

Os Esquemas 5 e 6 descrevem uma via de sintese para a preparação de compostos bifenílicos de Fórmula geral I. 15 {*} Esquema 1 6 5^3 _2/^\ NaCNBHj \J~\J2 - [HCHO)n, AcOH 9

R, (¾ KLrM

R> Ki, nM 1a H 2-NHj >1,000 1b H 3-NHz >1,000 1c H. 4-NHj >1,000 1d Bf 2-WHj 5612 1e 2-NHj >1,000 1f I 2-Wj - {*) Esquema 2

2a H 2-Nítei >1000 2b H 3-NMej 23.51&0 2c H 4-NHaj >1,000 2d 3r 2-NMej 08S±ai 2e ΝΜθ2 2-NMej 15.415.0 2f 1 2-NMe2 0,9210,10

NaCNBHj (HCHCtAcOH

O CH

Ri . A- . Λ M,nM H 2-NBj 3a H 2-NMej >1,000 H 4-NHj 3b H 4-MMej > 1,000 Br H 2-NH2 2-NHj and 3*& 3c Er 3d H 2-NMe? 2-NMe2and 3Br 6814 >1,000 {*) Esquema 3

H Bf 4-NHj 2-NHj

M, nM 2-NMe} 4a H 4b H 4c H 4d Br 4-M^j 2-ΝΜθϊ >1)000 >1000 >1)000 165 i 4 {*) Esquema 4

{*) não de acordo com a presente invenção 16 Esquema 5 a 3,- [CUfi\ MH NaaHi 2 4: ÍCHjOJb A£ÚH. NêCNÉH3

3. R-NHMe 4. R=NMs7

W{0}, SíjCOj MeOH \\ /

-OH 6 7

X:0íOrl 13

SnCljCtOH

NaChlBHj (HCIIOV AcOl! X;eran 20

Pd(PPh3)4l <SnBu3)2 ΝΛ/νX; Brorl 21 dsoxano"^^ 22 {*} Esquema 7 HCI =v l-Q-NH; MeOH »“0"NH·

>-0 HO

>-o lH> MeO Λ=ν MriO^ v=\KZ^NHj ---

-OH V-0

H

Cl SCH2Ph-p-0Me

όϊ~λ l-O-NH $CH2Ph-p-OMe NH _L H,N SCHjPhi^OMe /=\ * L 7 l-O-NH SCHjFh-p-OMe

IH ^CHjPh-p-OrJe BtoHu/MeOH f~\ H SCH3f»h-|>OMe

BHg/THF

- NH SCH2F*h-p-CMe A

SCHjPh-p-OMe O

NH ^SCHjPh-p-OMS 17 ΝΗ SCHjPh*p-OMe SCHjPh-p-OMô V r / & r~t NH SCHjPh-p-OMe -NH SCHjFh-p-ΟΜβ

D (*) não de acordo com a presente invenção {*) Esquema 8

y=\ / \

A

1-0-NH SCHjPh-p-OMe ^^NHSCH2Ph-p-OMB 18 l"0-NH SCHjPh-p-OWe •—NH SCHaPb-p-OMe D l~0~NH SCHáPh-p-OMa ^~NH SCHjPh-p-OMe ?—\ SCH2Ph-p-Ofvte ^-NHSCHaPh-p-OMe

V"A E Í—^VWh 3CH2Ph*p-OMe ^-NH SCHePft*p*OMe ^7\

M

Reacção de Heck Ρά{0^ψψ s

V\ tèf SCHáPn^Ote ΝΗ^βΟΗ*ΡΙν|>ΌΜ» o*. SCHzPhi>OMe '—NH SCHaPh-p-OMe

V"^^C^N^*^CH2Ph*P'OR''5S ^>V......^ SCHjPh-p-OMe ^-~NH .SC H3Ph-p»0 Me

'"A SCHjPh-p-OMe NH SCHjPh-p-OMe 'λ 1. TFA/MeSOjH; 2, Na9BmTc04/Sf){!tpi2 fõ\ -M χ^β

>-0"Q~W /õf' #s NT "S w Γ0Λ voq^» Νχ~? (*) não de acordo com a presente invenção 19 (*) Esquema 10

SnO.. EIQH j ΙίϋΔΰΜΟ MtóH (PW. JIUpEH. t

AtCH <PV»n M»c:aibha

Bi^SbCI BULI THF

“XMX

"XXH

$ A ΙΥΠΡΑ β!

BttSO, l-BuOK “XK>-

SnCÍ* BOH

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(*) não de acordo com a presente invenção. Quando os compostos da presente invenção se utilizam como agentes de imagiologia devem ser marcados com adequados isótopos radioactivos de halogéneo.

Os compostos halogenados radioactivos de acordo com a presente invenção proporcionam eles próprios facilmente a formação de materiais que poderão dispensar-se aos utilizadores em kits. Os kits para constituírem os agentes de imagem podem conter, por exemplo, um frasco-ampola contendo uma solução adequada sob o ponto de vista fisiológico de um composto intermédio de Fórmula geral I em uma concentração e a um pH adequado para as melhores condições complexantes. 0 20 utilizador deve adicionar ao frasco-ampola uma quantidade adequada do radioisótopo, por exemplo, Na123I, e um oxidante, como peróxido de hidrogénio. 0 ligante radiomarcado resultante pode então administrar-se por via intravenosa a um paciente, e criar-se e visualizar-se a imagem dos receptores no cérebro mediante a avaliação das emissões de raios gama ou de electrões dele provenientes.

Uma vez que a composição farmacêutica radioactiva de acordo com a presente invenção se pode preparar com facilidade e de um modo simples, o utilizador pode preparar facilmente essa preparação. Portanto, a presente invenção refere-se igualmente a um kit, que compreende: (1) um composto não-radiomarcado de acordo com a presente invenção, apresentando-se esse composto facultativamente no estado anidro; e incluindo também facultativamente um veiculo inerte, aceitável sob o ponto de vista farmacêutico e/ou também substâncias auxiliares adicionadas; e (2) um agente redutor e facultativamente um quelante; em que os componentes (1) e (2) podem eventualmente associar-se; e ainda em que se podem incluir facultativamente instruções para utilização com uma receita médica para a realização do método descrito antes fazendo reagir os componentes (1) e (2) com tecnécio-99m sob a forma de uma solução de pertecnetato.

Exemplos de adequados agentes redutores e quelantes para o kit acima exposto especificaram-se antes. 0 utilizador pode obter a solução de pertecnetato a partir de um gerador de moblibdénio/tecnécio. Tais geradores podem adquirir-se em uma série de instituições que realizam procedimentos de radiodiagnóstico. Como mencionado antes os componentes (1) e 21 (2) pode associar-se, desde que sejam compatíveis. Um tal kit com um só componente ("monocomponente") , em que os componentes associados se apresentam de preferência liofilizados, é altamente adequado para o utilizador fazer reagir com a solução de pertecnetato de um modo simples.

Quando pretendido, o agente de diagnóstico radioactivo pode conter um qualquer aditivo como agentes de controlo de pH (por exemplo, ácidos, bases, tampões), estabilizadores (por exemplo, ácido ascórbico) ou agentes de isotonização (por exemplo, cloreto de sódio). A expressão "sal aceitável sob o ponto de vista farmacêutico" quando utilizada na presente invenção refere-se a sais carboxilatos ou sais de adição de ácido dos compostos da presente invenção que são, no âmbito de uma decisão profissional racional, adequados para utilização em contacto com os tecidos dos pacientes sem excesso de toxicidade, irritação, resposta alérgica, e similares, proporcional a uma razoável relação benefício/risco, e eficaz para o uso pretendido, bem como as formas zwitteriónicas, sempre que possível, dos compostos da presente invenção. 0 termo "sais" refere-se a sais de adição de ácidos inorgânicos e orgânicos relativamente não tóxicos de compostos da presente invenção. Também estão incluídos os sais provenientes de ácidos orgânicos não tóxicos tais como ácidos alifáticos mono e dicarboxílicos, por exemplo, ácido acético, ácidos alcanóicos comportando como substituintes grupos fenilo, ácidos hidroxi-alcanóicos e alcanodióicos, ácidos aromáticos, e ácidos sulfónicos alifáticos e aromáticos. Esses sais podem preparar-se in situ durante o isolamento e a purificação finais dos compostos ou fazendo reagir separadamente o composto purificado na sua forma de base livre com um ácido orgânico ou inorgânico adequado e isolando o sal assim 22 formado. Os sais mais representativos incluem bromidratos, cloridratos, sulfatos, bissulfatos, nitratos, acetatos, oxalatos, valeratos, oleatos, palmitatos, estearatos, lauratos, boratos, benzoatos, lactatos, fosfatos, tosilatos, citratos, maleatos, fumaratos, succinatos, tartaratos, mesilatos, naftalatos, sais de gluco-heptonato, lactiobionato e sulfonato de laurilo, propionatos, pivalatos, ciclamatos, isetionatos, e assim por diante. Esses podem incluir catiões com base em metais alcalinos e alcalino terrosos, como sódio, litio, potássio, cálcio, magnésio, e similares, bem como, catiões de amónio, amónio quaternário e amina não tóxicos incluindo, embora sem carácter limitativo amónio, tetrametilamónio, tetraetilamónio, metilamina, dimetilamina, trimetilamina, trietilamina, etilamina, e assim por diante. (Ver, por exemplo, Berge S.M., et al., Pharmaceutical Salts, J. Pharm. Sei. 66; 1-19 (1977).

Na primeira fase do presente método de imagiologia, introduz-se um composto marcado de Fórmula geral I em um tecido ou em um paciente em quantidade detectável. 0 composto faz geralmente parte de uma composição farmacêutica e administra-se ao tecido ou ao paciente por meio de métodos que os peritos na especialidade bem conhecem.

Por exemplo, o composto pode administrar-se quer por via oral, rectal, parentérica (intravenosa, intramuscular ou subcutânea), intracisternal, intravaginal, intraperitoneal, intravesical, localmente (pós, pomadas ou gotas), ou sob a forma de spray bucal ou nasal.

[0049] No âmbito da presente invenção, insere-se o composto marcado em um paciente em uma quantidade detectável e depois de ter passado o tempo suficiente para esse composto se associar aos depósitos de amilóide, detecta-se o mesmo 23 composto marcado de forma não invasiva no interior do paciente. Alternativamente, insere-se um composto marcado de Fórmula geral I no interior de um paciente, dá-se o tempo suficiente para o composto se associar aos depósitos de amilóide, e em seguida remove-se uma amostra de tecido do paciente e detecta-se o composto marcado nesse tecido para além do paciente. Também alternativamente, remove-se uma amostra de tecido de um paciente e introduz-se um composto de Fórmula geral I na amostra desse tecido. Após a quantidade de tempo suficiente para o composto se ligar aos depósitos de amilóide, detecta-se o mesmo composto. A administração a um paciente do composto marcado pode realizar-se através de uma via de administração geral ou local. Por exemplo, o composto marcado pode administrar-se ao paciente de modo a ser distribuído por todo o corpo. Alternativamente, o composto marcado pode administrar-se a um órgão ou tecido de interesse específico. Por exemplo, é desejável localizar e quantificar os depósitos de amilóide no cérebro a fim de diagnosticar ou acompanhar a evolução da doença de Alzheimer em um paciente. 0 termo "tecido" significa uma parte do organismo de um paciente. Exemplos de tecidos incluem o cérebro, o coração, o fígado, os vasos sanguíneos, e as artérias. Uma quantidade detectável é uma quantidade de composto marcado necessária para ser detectada pelo método de detecção escolhido. Os peritos na especialidade podem determinar facilmente a quantidade de um composto marcado a introduzir em um paciente de modo a conseguir a sua detecção. Por exemplo, podem administrar-se a um doente quantidades crescentes do composto marcado até que o mesmo seja detectado pelo método de escolha para detectar. Para permitir a detecção dos compostos introduz-se um marcador nos mesmos. 24 0 termo "paciente" refere-se ao homem e outros animais. Os peritos na especialidade estão também familiarizados com a determinação da quantidade de tempo suficiente para um composto se associar aos depósitos de amilóide. A quantidade de tempo necessária pode determinar-se facilmente inserindo uma quantidade detectável de um composto marcado de Fórmula I, II, III, IV, V ou VI em um paciente e detectando em seguida o composto marcado em diversos períodos de tempo após a administração. 0 termo "associado" significa uma interacção química entre o composto marcado e o depósito amilóide. Exemplos de associações incluem ligações covalentes, ligações iónicas, interacções hidrofílicas entre si, interacções hidrofóbicas entre si, e complexos.

Os peritos na arte estão familiarizados com as diversas maneiras de detectar compostos marcados. Por exemplo, para detectar compostos radioactivos pode utilizar-se imagem por ressonância magnética [magnetic resonance image (MRI)], tomografia por emissão de positrões (PET), ou tomografia computorizada de emissão de fotão único (SPECT). 0 marcador que é inserido no composto dependerá do método de detecção desejado. Por exemplo, se escolhermos a PET como um método de detecção, o composto deve possuir um átomo de emissão de 11 i p positrões, como o C ou F. 0 agente de diagnóstico radioactivo deve ter radioactividade suficiente e concentração de radioactividade que possa assegurar um diagnóstico de confiança. Por exemplo, no caso do metal radioactivo ser tecnécio-99m, o mesmo pode incluir-se normalmente em uma quantidade de 0,1 a 50 mCi em aproximadamente 0,5 a 5,0 ml no momento da administração. A quantidade de um composto de Fórmula I pode ser por exemplo 25 suficiente para formar um composto quelato estável com o metal radioactivo. 0 composto quelato assim formado na qualidade de agente de diagnóstico radioactivo é suficientemente estável, e portanto pode administrar-se imediatamente como tal ou armazenar-se até à sua utilização. Quando desejado, o agente de diagnóstico radioactivo pode conter qualquer aditivo como agentes de controlo de pH (por exemplo, ácidos, bases, tampões), agentes estabilizantes (por exemplo, o ácido ascórbico) ou agentes de isotonização (por exemplo, cloreto de sódio). A obtenção de imagens médicas de depósitos de amilóide pode também realizar-se quantitativamente de forma que se pode determinar a quantidade de depósitos de amilóide.

Os compostos preferidos para imagiologia incluem o 18 radioisotopo F. A presente invenção está também direccionada para a utilização de um composto de fórmula Geral I no fabrico de uma composição de diagnóstico destinada à obtenção de imagens médicas de depósitos de amilóide. Um dos pré-requisitos fundamentais para um agente de imagiologia in vivo no cérebro é a capacidade de atravessar a barreira hemato-encefálica intacta após uma injecção intravenosa sob a forma de bolus.

Lisboa, 14 de Novembro de 2011.

Claims

1 REIVINDICAÇÕES 1. Composto de Fórmula geral I:

ou um seu sal aceitável sob o ponto de vista farmacêutico, em que o símbolo R1 representa um grupo dimetilamino, o símbolo R2 representa um átomo de hidrogénio, o símbolo R3 representa um grupo 18fluoroalquilo C1-5, o símbolo R4 representa um grupo hidroxilo, e o símbolo X representa um átomo de hidrogénio.

2. Composto de acordo com a reivindicação 1., em que o símbolo R3 representa um grupo 18fluorometilo ou 18f luoroetilo.

3. Composto de acordo com a reivindicação 2., em que o 10 o símbolo R representa um grupo fluoroetilo.

4. Composição farmacêutica que compreende um composto de acordo com uma qualquer das reivindicações 1. a 3..

5. Composição de diagnóstico para utilização na criação e visualização de imagens (imagiologia) de depósitos amilóides que compreende um composto radiomarcado de acordo com uma qualquer das reivindicações 1. a 3.; e um excipiente ou diluente aceitável sob o ponto de vista farmacêutico.

6. Utilização de compostos de acordo com a reivindicação 1. no fabrico de uma composição diagnóstico para imagiologia de depósitos amilóides. Lisboa, 14 de Novembro de 2011.