PT646578E

PT646578E - Fenil carboxamidas isoxazolos e seus sais processo para a sua preparacao sua aplicacao como medicamentos e as composicoes farmaceuticas que os contem

Info

Publication number: PT646578E
Application number: PT94402183T
Authority: PT
Inventors: Elizabeth Anne Kuo; Robert Westwood
Original assignee: Hoechst Marion Roussel Inc
Priority date: 1993-10-01
Filing date: 1994-09-29
Publication date: 2000-09-29
Also published as: US5506249A; DK0646578T3; JPH07149743A; DE69424734T2; US5476866A; CA2133140A1; EP0646578A1; CA2133140C; EP0646578B1; GB9320299D0; ES2146643T3; GR3034023T3; ATE193531T1; JP3723589B2; DE69424734D1

Description

6 tté

DESCRIÇÃO "FENIL CARBOXAMIDAS ISOXAZOLOS E SEUS SAIS, PROCESSO PARA A SUA PREPARAÇÃO, SUA APLICAÇÃO COMO MEDICAMENTOS E AS COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS QUE OS CONTÊM" A invenção refere-se aos novos fenilcarboxamidaisoxazolos e seus sais, ao processo para a sua preparação, às composições frmacêuticas que os contêm e à sua utilização como medicamentos. A WO 91/17 748 descreve determinados derivados do isoxazolo e a sua utilização como medicamentos. A EP-A-326 107 divulga os beta-cicloalquil-beta-oxopro- pionitrilos anti-artriticos e o processo para a sua preparação. A EP-A-326 108 e a FR-A-2 313 031 divulgam determinados derivados do isoxazolo substituídos por alquilo. A EP-A-440 503 descreve os derivados do isoxazolo substituídos por três radicais diferentes e podendo ser utilizados para o tratamento das doenças inflamatórias. A invenção tem por objectivo os compostos com a fórmula

(I) na qual

Ri representa um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo contendo 1 a 3 átomos de carbono; 1

R2 representa um grupo cicloalquilo contendo 3 a 6 átomos de carbono; R4 representa um átomo de halogéneo, um grupo nitrilo, um grupo nitro, um grupo -SCH3, um grupo alquilcarbonilo em C1-6, um grupo cicloalquilcarbonilo em C3-6, um grupo -CX3, um grupo -WCX3 um grupo -(CX2)nCX3, um grupo -(CX2)nCX3, um grupo -W(CX2)nCX3 ou um grupo -W(CH2)nCX3, nos quais X representa um átomo de halogéneo, W representa um átomo de oxigénio ou de enxofre, e n representa 1, 2 ou 3; e R5 representa um grupo metilo; as suas formas tautómeras assim como os seus sais. 0 termo grupo cicloalquilo contendo 3 a 6 átomos de carbono designa um grupo ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo ou ciclohexilo. 0 termo grupo alquilo contendo 1 a 3 átomos de carbono designa um grupo metilo, etilo, propilo ou isopropilo. 0 termo átomo de halogéneo designa um átomo de flúor, de cloro, de bromo ou de iodo.

Os compostos preferidos de acordo com a invenção são aqueles nos quais:

Ri representa um átomo de hidrogénio; R2 representa um grupo ciclopropilo; R4 representa um átomo de halogéneo, um grupo nitrilo, um grupo nitro, um grupo -CF3, um grupo -C2F5, um grupo -OCF3 ou um grupo -SCF3; e R5 representa um grupo metilo;

Os compostos particularmente preferidos de acordo com a invenção são aqueles nos quais 2

R4 representa um átomo de halogéneo ou um grupo nitrilo, um grupo nitro ou um grupo -CF3; e

Rs representa um grupo metilo.

Os compostos mais particularmente preferidos de acordo com a invenção são aqueles nos quais R4 representa um átomo de bromo ou de cloro ou um grupo nitrilo ou -CF3; e

Rs representa um grupo metilo.

Entre os compostos preferidos de acordo com a invenção, pode citar-se: a 5-ciclopropil-N-(4-bromo-3-metilfenil)-isoxazolo-4-car-boxamida; a 5-ciclopropil-N-(4-cloro-3-metilfenil)-isoxazolo-4-car- boxamida; a 5-ciclopropil-N-(4-ciano-3~metilfenii)-isoxazolo-4-car-boxamida; a 5-ciclopropil-N-(4-trifluorometil-3-fenilmetil)-isoxa-zolo-4-carboxamida; e os seus sais. A invenção tem igualmente por objectivo um processo para a preparação de novos fenil carboxamidas isoxazolos tal como definidos pela fórmula (I) acima assim como os seus sais, compreendendo a reacção de um composto com a fórmula (II)

(II) (na qual Ri, R4 e R5 são tais como definido acima) com um composto com. a fórmula (III) 3

(na qual R2 é tal como definido acima) ou um derivado funcional apropriado deste. A reacção entre o composto com a fórmula (II) e o composto com a fórmula (III) é de preferência feita na presença de um solvente orgânico anidro, tal como o diclorometano ou o tetrahidrofurano, e na presença de um agente de ligação, tal como a diciclohexilcarbodiimida ou a diisopropilcarbodiimida, à temperatura ambiente. A reacção entre o composto com a fórmula (II) e um derivado funcional do composto com. a fórmula (III) é de preferência feita na presença de um solvente orgânico anidro, tal como o diclorometano ou o éter dietílico, na presença de uma base orgânica, tal como a piridina ou a t rietilamina, e a baixa temperatura.

No caso de se utilizar um derivado funcional de um composto com a fórmula (III), trata-se de preferência de um halogeneto de ácido, especialmente de um cloreto de ácido. Este cloreto de ácido pode ser por exemplo preparado in situ, por reacção de um composto com a fórmula (III) com cloreto de tionilo ou pentacloreto de fósforo.

Os compostos cora a fórmula (II) utilizados no processo acima são geralmente produtos conhecidos ou podem ser preparados por diazotação e redução dos nitrobenzenos correspondentes de acordo com os processos conhecidos. As nitroanilinas utilizadas 4

podem ser preparadas como indicado por exemplo na T.P. Sura et al., Synthetic Communications (1988), 18, (16-17) 2161-5. Determinadas anilinas com a fórmula (II) podem ser preparadas de acordo com os processos descritos na patente europeia EP-A-206 951 ou por redução dos nitrobenzenos correspondentes.

Os compostos com a fórmula (III) utilizados no processo acima são igualrnente, em geral, produtos conhecidos ou podem ser preparados pelos processos descritos na literatura, por exemplo na EP-A-326 107.

Os compostos de acordo com a invenção apresentam propriedades farmacológicas interessantes, e em particular uma marcada actividade anti-proliferativa, anti-inflamatória e anti--tumoral. Inibem por um lado os fenómenos inflamatórios provocados por agentes irritantes e, por outro lado as reacções de hipersensibilização retardada, impedindo a activação de células imunitárias por um antigénio específico.

Estas propriedades são ilustradas mais tarde na parte experimental.

Estas propriedades justificam a utilização de novos fenil carboxamida isoxazolos com a fórmula (I) assim como os seus sais farmaceuticamente aceitáveis a título de medicamentos. A invenção tem igualmente por objectivo a aplicação a título de medicamentos dos novos compostos com a fórmula (I) tais como definido acima e dos seus sais farmaceuticamente aceitáveis.

Entre os medicamentos, objecto da invenção, retém-se em especial os medicamentos caracterizados por serem constituídos 5

pelos novos fenil carboxamida isoxazolos com a fórmula (I) acima nos quais R5 representa um grupo metilo. Mostrou-se que a presença de um substituinte metilo se traduz pelo facto destes compostos apresentarem uma meia-vida metabólica mais curta que os compostos correspondentes sem substituto metilo; isto é ilustrado mais amplamente na parte experimental. Por consequência, estes compostos nos quais R5 representa um grupo metilo representam os exemplos suplementares dos compostos particularmente preferidos de acordo com a invenção para uma utilização como medicamentos.

Estes medicamentos são úteis por exemplo no tratamento de tumores, da poliartrite reumatóide e das doenças inflamatórias crónicas de origem imunitária ou não imunitária (por ex. a doença homoloque, as reacções de transplantação, a uveite, a psoríase, o cancro), a diabetes, a prevenção da rejeição aguda e crónica a seguir às transplantações de orgãos e a restenose pós--angioplastia. A dose habitual varia de acordo com o composto utilizado, o doente tratado e a doença em questão e pode ser por exemplo 0,1 mg a 200 mg por dia por via oral. A invenção tem igualmente por objectivo as composições farmacêuticas que contêm a titulo de principio activo pelo menos um composto com a fórmula (I) tal como definido acima ou um sal farmaceuticamente aceitável em associação com um ou mais suportes e/ou excipientes farmacêuticos.

Para uma utilização a titulo de medicamentos, os compostos com a fórmula (I) e os seus sais podem ser incorporados nas composições farmacêuticas destinadas à administração por via oral, rectal ou parenteral. 6

Estas composições farmacêuticas podem ser por exemplo sólidos ou líquidos e podem estar sob as formas utilizadas habitualmente em medicina humana tais como: comprimidos simples ou com película, cápsulas (como as geleias), grânulos, supositórios, soluções por exemplo injectáveis; podem ser preparadas de acordo com os processos clássicos. 0(s) princípío(s) activo(s) podem ser incorporados com os excipientes utilizados de forma, clássica nas composições farmacêuticas tal corno o talco, a goma arábica, o amido, a lactose, o estearato de magnésio, a manteiga de cacau, os veículos- aquosos ou não aquosos, os corpos gordos de origem animal ou vegetal, os derivados da parafina, os glicóis, os diversos agentes molhantes, os dispersantes ou emulsionantes e os conservantes. A invenção tem ainda por objectivo um processo para o tratamento de tumores, da poliartrite reumatóide e das doenças inflamatórias crónicas de origem imunitária ou não imunitária num sujeito humano ou animal compreendendo a administração ao sujeito de uma quantidade eficaz de um composto com a fórmula (I) tal como definido acima ou de um sal farmacêuticamente aceitável. A invenção é ainda ilustrada pelos exemplos não limitativos seguintes:

Exemplo 1: O 5-ciclopropil-N-(4-bromo-3-metilfenil)isoxazo-1o-4-carboxamida 7

Aqueceu-se em refluxo durante 90 minutos ácido 5-ciclo-propilisoxazolo-4-carboxílico (3,33 g, 21,7 mmoles) e cloreto de tionilo (25 ml). Evaporou-se o cloreto de tionilo sob pressão reduzida e tratou-se o resíduo azeotropicamente duas vezes com tolueno. Dissolveu-se 4-bromo-3-metil-anilina (4,0 g, 21,7 mmoles) em diclorometano seco (125 ml) e arrefeceu-se a 0°C. Juntou-se gota-a-gota simultaneamente o cloreto de ácido preparado acima e piridina (2,4 g, 30 mmoles), dissolvido cada em diclorometano (10 ml). Após agitação durante 30 minutos a 0°C, lavou-se a mistura reaccional com água salgada (3 x 75 ml), secou-se (MgS04) e eliminou-se o diclorometano sob pressão reduzida para dar um óleo castanho. A cromatografia "flash" sobre coluna (MeOH 2%, CH2C12 98%) deu um óleo castanho claro que cristaliza em repouso. Após cristalização em etanol/água, obtém--se o produto em agulhas creme, F = 133-135°C.

De forma similar ao exemplo 1, prepararam-se os compostos seguintes, utilizando anilina substituída apropriada como produto de partida.

Exemplo 2: A 5-ciclopropil-N-(4-nitrofenil)-isoxazolo-4- -carboxamida

Exemplo 3: A 5-ciclopropil-N-(4-cianofenil)-isoxazolo-4--carboxamida 8

Exemplo 4 : A 5-ciclopropí 1-N- (4-cloro-3-metilfertil) -isoxa-zolo-4-carboxamida

Exemplo 5: A 5-ciclopropil-N-(4-ciano-3-metilfenil·)-isoxa-zolo-4-carboxaraida

Exemplo 6 : A 5-ciclopropil-N-(3-metil-4-trifluorometil- fenil)-isoxazolo-4-carboxamida

Os dados espectrais, os rendimentos, os pontos de fusão, e os dados analíticos para os exemplos 1 a 6 são dados na tabela I. 9

TABELA

10

Exemplo 7 :

Prepararam-se comprimidos de acordo com a fórmula seguinte:

Composto do exemplo 1........................................................................................ 20 mg

Excipiente para um comprimido até...................................................... 150 mg (pormenores em relação ao excipiente: lactose, amido, talco, estearato de magnésio).

ACTIVIDADE FARMACOLÓGICA Métodos de ensaios bioquímicos

Edema das patas de rato induzido pela carragenina (PO-R) (Ensaio 1)

Uma hora após administração por via oral dos compostos a ensaiar ou do veiculo testemunha aos grupos de ratos (n=6-12, macho CFHB, gama de pesos 0,2. ml de solução salina na almofadinha da pata traseira direita. As patas contra-laterais levaram injecções testemunhas de solução salina. As respostas do edema das patas foram avaliadas três horas depois.

Edema de hipersensibilidade do tipo atraso da patas de ratos (DTH-M) (Ensaio 2)

Grupos de murganhos (n=8-10, macho CD-I, gama de peso 25--30 g) são sensibilizados por uma injecção sub-cutânea de 1 mg de soro de albumina de bovino metilado (MBSA) em volumes de 0,2 ml de emulsão de solução salina/emulsão de adjuvante completa de Freund (FCA). Os grupos de testemunhas negativos levaram injecções de emulsão de solução salina/FCA. As respostas do edema DHT das patas são avaliadas vinte e quatro horas após a prova da almofadinha da pata traseira por 0,1 mg de MBSA em volumes de 0,05 ml de solução salina ao sétimo dia após a 11

levam injecções a ensaiar ou os sensibilização. As patas contra-laterais testemunha de solução salina. Os compostos veículos testemunha são administrados por via oral uma vez por dia aos quarto, quinto, sexto dias e duas vezes ao sétimo dia, uma hora antes e seis horas após a prova por MBSA.

Edema de hipersensibilização do tipo atraso das patas de rato (DTH-R) (Ensaio 3)

Os grupos de ratos (n=8-12, macho CFHB, gama de peso 160--180 g) são sensibilizados por injecção sub-cutânea na base da cauda com volumes de 0,1 ml de FCA. Os grupos de testemunhas negativos levaram uma injecção de adjuvante incompleto de Freund. As respostas do edema DHT das patas são avaliadas vinte e quatro horas após a prova da almofadinha da pata traseira direita por 0,4 mg de antigénio extraído do Mycobacterium turbercolosis em 0,2 volumes de solução salina no sétimo dia após a sensibilização. As patas contra-laterais levaram injecções testemunha de solução salina.

Os compostos a ensaiar são administrados por via oral uma vez por dia aos quarto, quinto, e sexto dia e duas vezes no sétimo dia, uma hora antes e seis horas após a prova antigénica.

Os resultados destes ensaios são dados na tabela II.

As doses são dadas em mg/kg p.o. 12

Tabela II

Ensaio 1 Ensaio 2 Ensaio 3 Exemplo % de inibição Dose % de inibição Dose % de inibição Dose 1 12 50 41 100 > 24 50 2 0 50 19 100 52 50 3 43 50 43 30 60 10 4 11 50 64 100 32 50 5 18 50 41 30 62 10 6 12 50 34 100 57 50

Artrite adjuvante (Ensaio 4)

As investigações foram feitas pelo método de Pearson (Arthrit. Rheum. 2, (1959) p. 44). Os animais experimentais utilizados são os ratos masculinos da linhagem Wistar-Lewis tendo um peso corporal compreendido entre 130 e 200 g. Os compostos a ensaiar são administrados por via oral (p.o.) uma vez por dia durante 12 dias, começando no dia da imunização. Os animais de um grupo testemunha receberam apenas o veículo. Cada grupo de preparação e de testemunhas compreende 6 animais. O critério utilizado para determinar a actividade é a percentagem de redução no aumento de volume das patas comparativamente à do grupo testemunha não tratado.

Reacção de Arthus passiva inversa (Ensaio 5)

Uma hora antes da prova, os compostos a ensaiar são administrados por via oral a ratos Wistar (masculinos ou femininos, 120-200 g) . Após este período de pré-tratamento, a reacção é induzida por uma injecção sub-plantar de soro de cabra anti-rato na pata traseira direita. A pata traseira esquerda, 13 que serve de testemunha, é tratada por apenas uma injecção de solução salina.

Os volumes das patas são medidos imediatamente e quatro horas após a prova, por anti-corpos.

Os resultados destes ensaios são dados na tabela III. As doses são dadas em mg/kg p.o.

Tabela III

Exemplo Ensaio 4 Ensaio 5 Dose % de inibição Dose % de inibição 1 25 -16 50 42 100 26 2 25 92 50 -9 100 27 3 25 90 50 41 100 36 4 25 22 50 17 100 28 5 25 88 50 23 100 34 6 25 42 50 24 100 38

DADOS CINÉTICOS

Fez-se uma comparação entre um composto conhecido, o 5-ci-clopropil-N- (4-trifluoromet.ilfenil) -isoxazolo-4-carboxamida e os compostos da presente invenção, os compostos dos exemplos 5 e 6 acima. 14

Os compostos foram administrados por via oral a ratos em doses de 30 mg/kg e seguiram-se as concentrações plasmáticas durante 72 horas.

Os resultados mostram que a meia-vida metabólica apropriada para o composto conhecido é aproximadamente 21,4 horas enquanto para os dois compostos dos exemplos 5 e 6 da presente invenção seja aproximadamente um terço deste valor, isto é 7,1 horas (ex. 5) e 8,2 horas (ex. 6).

Estes resultados demonstram a vantagem cinética conferida pela presença do grupo metilo representando o substituinte R5 nos compostos da presente invenção.

Lisboa, 30 de Junho de 2000

15

Claims

(I) REIVINDICAÇÕES 1. Compostos com a fórmula (I):

na qual Ri representa um átomo de hidrogénio ou um grupo alquilo contendo 1 a 3 átomos de carbono; R2 representa um grupo cicloalquilo contendo 3 a 6 átomos de carbono; R4 representa um átomo de halogéneo, um grupo nitrilo, um grupo nitro, um grupo- -SCH3, um grupo alquilcarbonilo em C1-6, um grupo cicloalquilcarbonilo em C3_6, um grupo -CX3, um grupo -WCX3, um grupo -(CX2)nCX3, um grupo -(CX2)nCX3, um grupo -W(CX2)nCX3 ou um grupo -W (CH2) nCX3, nos quais X representa um átomo de halogéneo, W representa um átomo de oxigénio ou de enxofre, e n representa 1, 2 ou 3; e Rs representa um grupo metilo; e seus sais.
2. Compostos de acordo com a reivindicação 1, nos quais R-ι representa um átomo de hidrogénio; R2 representa um grupo ciclopropilo; R4 representa um átomo de halogéneo, um grupo nitrilo, um grupo nitro, um grupo -CF3, um grupo -C2F5, um grupo -OCF3 ou um grupo -SCF3; e R5 representa um grupo metilo; 1
3. Compostos de acordo com qualquer das reivindicações 1 ou 2, nos quais R4 representa um átomo de halogéneo ou um grupo nitrilo,. um grupo nitro ou um grupo -CF3; e R5 representa um grupo metilo.
4. Compostos de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 3, nos quais R4 representa um átomo de bromo ou de cloro ou um grupo nitrilo ou -CF3; e R5 representa um grupo metilo.
5. Compostos de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 5, seleccionados entre: 5-ciclopropil-N-(4-bromo-3-metilfenil)-isoxazolo-4-car- boxamida; 5-ciclopropil-N-(4-cloro-3-metilfenil)-isoxazolo-4-car- boxamida; 5-ciclopropil-N-(4-ciano-3-metilfenil)-isoxazolo-4-car- boxamida; 5-ciclopropil-N-(4-trifluorometil-3-metilfenil)-isoxazo- lo-4-carboxamida; e seus sais.
6. Processo para a preparação de um composto com a fórmula (I) de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 5, compreendendo a reacção de um composto com a fórmula (II)

(II) (na qual Ri, R4 e R5 são tal como definido na reivindicação 1) com um composto com a fórmula (III) 2

I i (na qual R2 é tal como definido na reivindicação 1) ou um derivado funcional conveniente deste.
7. Medicamento constituído pelos novos compostos com a fórmula (I) de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 5 assim como pelos seus sais farmaceuticamente aceitáveis.
8. Medicamento constituído pelos novos compostos com a fórmula (I) de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 4, na qual Rs representa um grupo metilo assim como pelos seus sais farmaceuticamente aceitáveis.
9. Composições farmacêuticas compreendendo como princípio activo pelo menos um composto com a fórmula (I) de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 5 ou por um sal farmaceuticamente aceitável em associação com um ou mais suportes e/ou excipientes farmacêuticos. Lisboa, 30 de JJunho de 2000

3