PT94278A - Processo para a preparacao de peptidos inibidores de renina e sua utilizacao em medicamentos - Google Patents

Description

0 presente invento diz respeito a novos pépiidos inibi dores da renina, a processos para a soa preparação s â sua utilização em medicamentos, em particular em medicamentos que influenciam a circulação sanguínea. A renina e uma enzima proteolática que é produzioa prsdominantemente pelos rins e secrstada no plasma. Sabe-se que a renina elimina o decapéptido angioiensina Σ de ang i o tens i noge..... ruo in vivo. A angiotensina I é por sua vez decomposta nos pui meies, nos rins ou noutros tecidos para dar origem ao octapépti-do angioiensina 11, que tem efeito sobre a tensão arterial. Os diferentes efeitos da angiotensina II tais como vasoconsirição, retenção de Na* nos rins, libertação de aidosierona na glândula adrenal e aumento de iónus do sistema nervoso simpático actuam de forma sinsrgística para provocar um aumento da tensão arterial. A aciividade do sistema renina-angiotensina poos ser manipulada farmacoiogicamente mediante inibição da aciividade da renina ou da enzima de conversão da ang i o tens i na (. ECA > e tamoem por meio do bloqueamento dos rsceptorss de angioiensina II. 0 desenvolvimento de agentes inibidores de ECA administráveis oraimenie conduziu assim a novos agentes anti~hipsrtensão (cf. patente alemã 3,628,650, Am. -J. iled. 77, 630, 13841.

Uma forma relatívamente nova oe encarar a questão consiste numa. intervenção precoce na cascata renína-angiotensina, nomeadamente inibindo a peptidase altamente especifica renina.

Foram desenvolvidos até agora diferentes tipos de agentes inibidores da renina; anticorpos específicos para a renina, fosfolápidos, pépiidos possuindo a sequência N-terminai da pró--renina, pépiidos sintéticos como análogos do substrato e pépiidos modificados.

Mas patentes europeias EP--A2 ú,273,S3S; EF-A2 0;27S;i58 e n® PCI yo 86/04901 descrevem-se péptidos inibidores tia renina em que o s ignificado ds R (ver compostos de acordo com o inven- to) abrange também radicais heierocíclicos, mas «em que seja indicado o grupo 1,3-di tialsno ou í,3-ditiona específico ou dado um exemplo concreto de um representante desta ciasse de substâncias. Foram agora descobertos páptidos em que o radical aminoá-··· eido usual -His Chistidina) foi substituído por um raoicai 1;3--di tioiano ou í;3-di tiona e que surpreendentemente possuem uma ooa aceso de inifoiçSo da renins. 0 invento diz respeito a péptidos de fórmula geral (11

0-D-E-X (I) OH em que κΛ -· representa hidrogénio ou - representa aicoxicarbonilo com o máximo ds 8 átomos de carbono ou benziloxicsrboni2o ou q -· representa um grupo de fórmula R".....Cu- R''"' - representa morfoiino ou os radicais (CH..,) ,C-S0o-CHo-CH-

ου (CR.,) .-.,C-"CO-CH,.,.....CH- C* ·Ζ* «£. ÒH^r-C, “H,

ou 4:..,5 ~ representa um grupo de fórmula ~NR''ft em que Δ 5 K e K' sâo idênticos ou diferentes a representam hidrogénio; alquilo de cadeia linear ou ramificada com o máximo de 8 átomos de carbono ou íenilG; ou - representam o radical

(CH2) L - representa o número 0, i ou 2 B - representa uma ligaçáo dirscta ou ·"· representa um agrupamento de aminoácidos de fórmula

-NH R6

CO- ou

h3 h2-co- 0IÍÍ C?y*r r'"' - representa alquilo de cadeia linear ou ramificada com o máximo de 8 átomos de carbono, que é íaculiativamenie substituído com hidroxi, carboxl, alcoxi ou alcoxicarboniIo com o máximo de 6 átomos de carbonoou benziloxi - representa prolina nas suas forma-Lj forma-Q ou como mistura de isomeros D;L, R“"“ - representa ariio com 6 a :i0 átomos de csrbonoj que é facultativamente mono-substituído a tri-substituído com substituintes iguais ou diferentes da série compreendendo halogénso* nitro; dano; hidroxi; alcoxi de cadeia linear ou ramificada com o máximo de 8 átomos de carbono, acsioxi ou benziloxi, ou com um grupo os fórmula 0-C0--R' em que R' ·"· representa alquilo de cadeia linear ou ranufíeso com o máximo de 8 átomos de carbono u - representa um número 0 ou i A - representa um grupo ou , j-‘. .;L d. D e E sáo idênticos ou diferentes e ~ representam uma ligação diracia ou • -· representam um agrupamento aminoãcido de fórmula

X X R6 ' -NH

Ci

em que £·, ** E",

R~ tem o significado atrás indicado para R" s é idêntico a oy diferente deste, na sua forma-L, forma-.....D ou mistura de isõmsros D,L X “· representa hidroxi, benzi 2o;d ou alcoxi com o máximo ae S átomos os carbono ou morfoiino ou ..... representa um grupo de fórmula -uhit'" em que -R*“* - representa hidrogénio ou 1 í nsa v'· ou r as i f i c ada carbono, que s com hidroxi, fenílo, fórmula .... representa alquilo de cadeia com o máximo de 10 átomos os facultativamente substituído piridilo ou com o radicai de

nh2 ou representa um radicai de fórmula - Ν n-ch2-c6h5 a os seus sais fisiologicamente aceitáveis.

Os composto de fórmula gerai (ϊ> cie acordo com o invento possuem vários átomos de carbono assimétricos. Podam por isso apresentar......se nas formas-D e -L, independeniemente uns dos outros. 0 invento inclui os antípodas ópiicos, bem como as misturas isoméricas e os racemaios. Os radicais arninoàc idos est-ao presentes» de preferência, i ndependen temen ie uns dos outros, na forma opiicamente pura, de preferência na íorma-L.

Os compostos de fórmula geral (!) de acordo com o invento pode aprsseniar-se sob a forma dos seus sais. Estes podem ser sais dos compostos de acordo com o invento com ácidos ou bases inorgânicos ou orgânicos. Os produtos de adição de ácido incluem, de preferencia, sais com ácido clorídrico, ácido bromidrico, acido iodidrico, acido suifúrico, ácido fosfórico ou com ácidos carboxílicos tais como ácido acético, ácido propióm·-co, ácido oxálíco, ácido giicôííco, ácido succínlco, ácido maieíco, ácido hidroximaleico, ácido meti imaleice·, acido fumâri·-co, ácido adípico, ácido máiico, ácido iartárieo, ácido cítrico, acido benzôico, acido cinâmico» ácido láctico, ácido ascóroico, ácido salicilico, ácido 2-acaioxibenzóico, ácido nicoiinico, ácido isonicotínico ou ácidos sulfónicos tais como ácido metanos·-sul fónico, ácido e ianossu i f óni c o, ácido fcenzenossuifónico, ácido toluenossulfónico, ácido naftaleno-2-su!fónico ou ácido nafialeno..... dissul?ónico.

Constituem compostos preferidos de fórmula geral (II aquexes em que ι

R 1 representa hidrogénio ou representa alcoxicarbonilo com um máximo de S átomos de carbono ou benziloxicarboniIo ou -Í - representa um grupo de fórmula R^-CO·™ em que R" - representa morfolino ou os radicais ou (CH3)3C-S02-CH2-ÇH- ch2-c6h5 (ch3)3c-co-ch2-j:h- ch2c6h5 ou , ã £·. ··"· representa um grupo de tõrmuia -NH í:i" em que á q ti' e R são sguajs ou diferentes e representam hidrogénio, alquilo de cad&ia linear ou ramificada com um máximo de 6 átomos de carbono ou fenilo

representa o radical em que L ~ representa o número 0, 1 ou 2 & - representa uma ligação directa ou "· representa um agrupamento de aminoácidos de fórmula

em que R6 de cadeia li 6 átomos de substi tuído 4 átomos de representa a1qui1o com um máximo de f acultativamente i com um máximo d© benz i1ox i near ou ramificada carbono, com hidroxi, alcoxi carbono ou ou .·- representa prol i na . na sua forma-L, --D ou sob a forma da mistura isoméríca D,L, R':" ~ representa fenilo ou naft-ilo, facui tatiyamente monossubstituido a trissubstituído com substituintes iguais ou diferentesdo conjunto que inclui flúor, cloro, bromo, iodo, hidroxi, nitro, ciano, alcoxi de cadeia linear ou ramificada com um máximo de 6 átomos

de carbono, acetoxi ou benziloxi, π - representa um número, 0 ou I fi ..... representa um grupo -CH,., ou um grupo -Cí-L,-ChL~, D e E sao iguais ou diferentes e • - representam uma ligação dárecta ou "· representam um agrupamento de aminoácídos de fórmula R6 ‘

em que R'“ tem o significado atrás referido para R'~' & é íguai ou diferente deste, na sua forma-L, -0, ou sob a forma da mistura isomérica D,L, X -- representa hidroxi, benzi loxi ou alcoxi com um máximo de 6 átomos de carbono ou morfoiino ou q - representa um grupo de fórmula -Nhii~ em que R~ ..... representa hidrogénio ou alquilo de cadeia imear ou ramificadacom um máximo de S átomos de carbono, facultativamente substituído com hidroxi, feniio, piridilo ou com o radical de

ou - representa um radical ds fórmula

- N

M-CH2*c6^5 e os seus saís fisíologicamente aceitáveis.

Constituem compostos de fórmula geral <I> particular-mente preferidos aqueles em que / 1 H~ - representa hidrogénio ou "· representa alcoxicarboni lo com um máximo de 4 átomos de carbono ou benziloxícarbonilo - representa um grupo de fórmula fr-CO- em que ;7.f

R" - representa morroiíno ou o radicai (ch3)3c-so2-ch2-ÇH- CH2C6H5

4 .H ou um grupo de fórmula

R** e R'"’ são i sua is ou diferentes e representam hidrogénio ou alquilo de cadeia 1 irisar ou ramificada com um máximo de 4 átomos de carbono, ou íenilo, ou -- representa o radical

em que L - representa o número 0, 1 ou 2 B -· representa uma ligação directa ou -· representa um agrupamento de aminoácidos de fórmula

em que ° R’”' - representa alquilo de cadeia linear ou rsoiif ic&da com um máximo de 4 átomos de earOono; facult-ativamente substituído com hidroxi. oy

-X representa prolina, nas suas formas-L, -D, ou sob a forma da mistura isomériea D,L, R~" - representa fenilo ou naítilo, faeultativamente monossusbtituído a trissubstituido com flúor, cloro; iodo, hidroxi, metoxi, atoxi, propoxi, t-butoxi, benziioxi ou acetoxi, ui -· representa um número, 0 ou 1, A - representa um grupo -CH0- ou -CH,..= D s E são iguais ou diferentes e - representam uma ligaçlo directa ou " representam um agrupamento de aminoácidos de formula R6'

0- em que ç. 1 ' i~, R"' tem o significado atrás referido para R~ e á igual ou diferente deste, na sua forma-L, -D, ou sob a forma da mistura isomérica D,L, X - representa hidroxi, benzi loxi ou alcoxí com um máximo de 4 átomos de carbono ou morfolino ou _ f;

·-· representa um grupo de formula "-WHH 25 que R . K~ ··· representa hidrogénio ou - representa alquilo de cadeia linear ou ramificada com um máximo de 6 átomos de carbono, facultativamente substituído com hidroxi, fenilo, pírídilo ou pelo radical de fórmula •nh2 - representa um radical de fórmula

- N N-CH2-C6H5 e os seus saís fisioiogicsmente aceitáveis.

Os sais dos compostos de acordo com o invento com grupos de formação de sal podem ser preparados de um modo em si mesmo conhecido, por exemplo fazendo reagir os compostos de acordo com o invento, que contêm grupos ácidos, com bases corres..... pendentes, ou fazendo reagir os compostos de acordo com o invento que contêm grupos básicos com ácidos correspondentes, em cada caso de preferência com os ácidos e as bases atrás referidos.

As misturas estereoméricas, em particular as misturas diastereoméricas, podem ser resolvidas nos seus isdmeros 16 individuais tis ura modo em s:l. mesmo conhecido, por exemplo meclían..... is cristal iz&ç&o fraccionada ou cromaiografia.

Os racsmaios podem ser resolvidos de um modo em si mesmo conhecido, por exemplo convertendo os antípodas ópticos em díastsreômeros. 0 grupo de fórmula

tem três átomos de carbono assimétricos que podem apresentar-se, independentemente uns dos outros, na configuração-R ou -8. Este agrupamento apresenta-se, de preferência, na coníiguraçao-SR, 38, 48» na c onf i guração-SR, 3R, 48, na configuraçáo-SS, 38, 48 ou na configuraçSo-58, 3R,'48, e de modo particularmente pref©rido na confáguraçâo-SR, 38, 48 ou na configuraçáo-SS, 38, 48. 0 agrupa mento á também utilizsdo sob a forma de mistura isomérica.

Os compostos de acordo com o invento de fórmula geral

O-D-E-X (I) ι ;· B= D, b, A; R“; H""; \4 e a têm os signafscatios atrás reter idos; sáo obtidos por um processo em que lAj compostos de fórmula geral (II)

O-D-E-X (II) em que D, E e X têm os significados atrás referidos 1 Z - representa um g.rupo protector de aminoj por com sso primeiro convertidos em aminas por remoção do grupo Z métodos usuais e estas sminas são depois feitas reagir compostos de fórmula geral (III)

(III), 18

A tem o significado atrás referido 2'ísffi o significado atrás referido para d e é igual ou diferente deste; com activaçáo do ácido csrboxálico por métodos usuais em solventes inertes para dar origem a compostos de fórmula, geral (la)

OH (la) em que Z! , Pis D, E e X têm os significados atrás referidos, o grupo proiecior 2' é removido por métodos usuais e numa etapa suòsequente os compostos sáo condensados com compostos de formula gerai CIV) R1 -B- (NH· r 2 00H) (IV) '1 ·* R'!‘, 8, y e R"'" têm os significados atrás referidos, caso seja apropriado com a referida, activaçáo de ácido carboxilico atrás

St caso seja apropriado, os ésteres correspondentes sao hidroli·™ zados por métodos usuais, ou os compostos de formulas gerais <IϊI> e (IV) são primeiro feitos reagir pelos métodos atrás referidos e uma ligação peptidica adicional é depois estabeleci..... da usando os compostos de fórmula geral (11) ou por um processo em que >

Ccompostos de fórmula geral <Ib)

(Ib) A, s

R2, w, D e E têm os significados atrás referidos. 8 ~ representa alcoxicarbonilo com um máximo de 8 átomos de carbono, sáo primeiro hidrolizados por métodos usuais para dar origem aos ácidos correspondentes e numa etapa subsequente sMo condensados em presença de agentes auxiliares com aminas de fórmula geral ív>, ou morfolína de fórmula (VI) ou N-benzíipiperazina de fórmula (vil) h2n-r8 (V), ni f

NH (VI) or hn "Λ n-ch2c6h5 (VII)

S 1'^C Ζ· -ΝΗ· Ο-ΝΗ

ΟΧ' ΟΗ (Id) Σ', As Xftém os significados atrás referidos, <* são primeiro hidroiizados por métodos usuais para dar origem aos ácidos correspondentes, e depois feitos reagir com o fragmento de fórmula geral ÍVIII) CVIII) em que D, E e X têm os significados atrás referidos, em solventes inertes, caso seja adequado em presença de agentes auxiliares, e, no caso dos compostos de fórmula geral (Id), sáo feitos reagir numa etapa subsequente por um método descrito para o processo i"Aj; com remoção em etapas do grupo protector Z! respsciívo, com compostos de fórmula geral (IV) ou (IVa)

(IV) ou

(IVa) ;·*ί ΪΊ Í Cíí !ί <ã ή y

«Jj ,

OH

EtOC-NH·

θ + Η20/ΟΗ

+ οηθ/η2ο

+ η2ν. ·νη2 -η2ο

CC3

ΟΗ

A preparação dos compostos de acordo com o invento tem também sido levada a cabo utilizando ouiras variantes usuais do processo descrito ícf. por exemplo "nethoden der organisehen Cnsmie" (métodos de Química Orgânica) de Houben-Wey 1, XV/í e 2 = n. Sodanszky, A. Bodanszky em ” The Practice of Peptids Synthesis" (Prática de Síntese de Péptidos), Sprínger Veriag, Berlim, 1384; Qeorge R. Pettit em "Syniheiic Peptides" (Péptidos Sintéticos), Volume 4, Elsevier Scientific Publisning Company, Amsterdão····· --Oxford-Mova lorgue, 1976; E. 6ross e J. Meisnhofer (Eds.) em "The Peptides" (Os Péptidos), Voi . 1~3, Academic Press, Nova lorque-Londres-íoronio-8ydney-8So Francisco, 1981; H. Bodanszky em "Principies of Pepiide Synihesis" (Princípios de Síntese de Péptidos), Springer Verlag, BerIim-Hsidelòerg-uova Iorque--Tóquio, 1934; R. Uhmann e K. Radschsit, Patente Alemã DE 3,411,244 AI) ou também pelo "Sol id Phase Method" (riéiodo de Fase Sólida), tal como é descrito por n. Bodanszky, A. £«odanszky sm "The Practice of Pept-de Synthesis" (Prática ds Síntese de Péptidos), Sprin*?er verias, Berlim, 1384, ou õ. Barany, R.8. herrlfisid sm "Solid Phase Pepiide Synihesis" (Síntese de Péptidos em Fase Sólida) em "The Peptides" (Os Péptidos), Voi · 2, págs. 3-254, edícfo cíirigi-oa po £. 6ross, J. Heienhofsr, Acaoemic Press, Nova íorque-Lon-d^es-Toronio-Syàney-Sáao Francisco (ÍS&O).

Constituem solventes adequados nas variantes LAi, lB3 e iCJ cio processo os solventes inertes usuais que não se alteram soo as condiçoes de reacção seieccionadas em cada caso. Estes incluem agua ou solventes orgânicos tal como éter dieiílico, éter glicol monometálico ou éter giieol dimeiílico, dioxano ou tetra-hidrofurano, ou hidrocarbonetos tal como benzsno, toiueno, xileno, ciclohexano ou rracções de óleo mineral ou hidrocarbonetos halogenados tal como cloreto de meti leno, clorofórmio, tetracloreto de carbono ou acetona, sulfóxido de dimetiio,

d imeti1formam ida, hexametiIfosforamida, acetato de eiilo, piridi..... na. trietilamina ou picolina. s igualmente possível utilizar misturas dos solventes

Pref sreDi-se teirah i drof urano, cloreto de dimeti1formamida e acetato de etilo.

As variantes IIA3, EB3 s LC1 do processo sáo geral mente levadas a cabo em presença de solventes ou díluentes adequados, caso seja apropriado na presença de um agente auxiliar ou catalisador; a uma temperatura na gama de valores que vai os •“80°€ a 30dcC; de preferência de ~"30eC a *30°C, â pressáo normal, i: igual mente possível trabalhar a pressão elevada ou reduzida.

Constituem grupos carboxi aciivados adequados nas variantes CA3, £B3 e CC3 do processo, por exemplo, azidas de ácido carboxi!ico (que podem ser obtidas, por exemplo, por reacçáo de hidrazidas de ácido carboxi1ico protegidas ou náo protegidas com ácido niiroso, seus saís ou nitritos de alquilo (por exemplo, nitri to de isoamilo). ou esteres insaturados, em particular ésteres de vinilo Cgue podem ser obtidos, por exemplo,, por raacção de um éster correspondente com acetato de vinilo), ésteres de carfcsmoiIvínilo (que podam ser obtidos, por exemplo, por reacção de um ácido correspondente com um reagente cie ísoxazoi ínio), ésteres de alcoxivini-lo (que pooss ser obtidos, por exemplo, por raacçáo dos ácidos correspondentes com slcoxiaeetílenos, de preferência stoxiaceti™ j. ar \ΎΟ ; ou ésteres de amidino, por exemplo ésteres de amidino ΙΜ,Ν'“ ou M,N-d i ssuos i i iu £ dos (que podem ser 00tidos, por exemplo, por reacçâo do ácido correspondente com um® carbodiimída 25 -- Η , Ν' -díssubsiiluida (de preferência dieiclohaxiicâpbodiímida, di isopropi lesrbodi imida ou hidrocloreío de N-(3-dimsiilamlnopro-" pi 1?-N'-etiIcarbodiimida? ou com uma c lanam ida N,N-dissuostiiuída, ou ésteres de arilo, em particular ésteres de íeniio suosiiiuídos com subsiituintes que retiram eiectrões, por exemplo ésteres ds 4-ni trofenilo, 4~~meiiIsulfoni1fenilo; 2,4,5-tri clorofeni1os 2;3i45S,6-paniaciorofeniIo ou 4-feniIdíaxofenilo (que podem ssr obtidos, por exemplo, por reacçSo do ácido corrsspondsnts com um fenol adsquadamente substituído, caso seja apropriado em presença de um agente de condensado tal como, por exemplo, Nitr-díciclo-hexi Icarbodi imida; di isopropi Icsrfaodi imida, cloridrato de N~(3·-· -dimeiílaminopropi1?~N;~eiiIcarbodiimida, cloroformato de iso&u-tilo, arntírido propanofosfónico ou hexafluorofosfato de hensoirlaxo I i 1 ox i t r i s (d i me t i 1 am i no ? f osf ón i o?, ou ésteres de cianomeiilo (que podem ser obtidos, por exemplo, por reacçlío do acido correspondente com cioroacatoniiri lo em presença de uma base?, ou iíoÉsieres, em particular nitrofeni1tioésteres (que podem ser ootidos, por exemplo, por rsacçSo do ácido correspondente com nitrotiofenóis, caso seja apropriado em presença de agentes de condensação tal como Μ,Mf-diciclohsxiIcarbodiimioa, diisopropii-carfoodximida, hidrocloreio de N-(3~dimetilaminopropi1>-N'-eti1-caroodiimida, cloroformato de ísobulilo, anidrído propanovosíôni-co ou hexafluorofosfato de benzoiriasoi1loxi-tris(dxmetilamino?-fosfónio?, ou esteres de amino ou amido Cque podem ser obtidos, por exemplo, por rsacçáo do ácido correspondente com um composto M-hidroxlamino ou IM-h i dr oxiami do, em particular N-hidroxisuccinimida, N-hidro-xiΡiperidina, N~hidroxifiaiimida, hi-hidroxi-S~norcorneno-2,3-dí-ra}‘boximida ou i-hidroxibenzoiriazole, caso seja adequado em presença de agentes de condensação tal como Μ,Ν’-diciclohexilcar~ bodiimida, dlisopropiIcarbodximida ou hidrocloreto ds

hi~ç3”tii.meti Isminopropi i )~N' -sii Icarbodi imida, c loroformaio ds iscbuiilo ou anidrido ds ácido n-propanofosfónico), ou anidridos de ácidos, de preferência anidridos simétricos ou assimétricos dos ácidos correspondentes, em particular anidridos com ácidos inorgânicos (que podem ser obtidos, por exemplo, por reacçao do ácido correspondente com cloreto de tionilo, pantóxido de fósforo ou cloreto de oxalilo), ou anidridos com msxo-derivs-dos ds ácido carbónico, por exemplo meio-ésteres de alquilo inferior ds ácido carbónico (que podem ser obtidos, por exemplo, por rsacçáo do ácido correspondente com esteres de alquilo inferior de ácido halogsnofórmico, por exemplo cloroformato ds meti lo, cloroformato de etilo, cloroformato de propilo, clopofor-maio de xsopropiio, cloroformato de butilo ou cloroformato ds isoóutí2o ou com i-alcoxi inferio;......carboni1-2-&1coxi inferior- ,2-di-hidro-quinolina, por exemplo í-metoxicarbonii-2-etoxi..... - í 12~"d i ™h i dr oqu í no i i na >, ou anidridos com ácidos dx-nalogenofosfórícos (que podem ser ootidos, por exemplo, por reacçlo do ácido correspondente com oxícloreto de fósforo), ou anidridos com derivados de ácido fosfórico ou derivados de ácxdo fosforoso (por exemplo, snidrido propanofosíõnico, H. Wissmarm e H.J. Klsiner, Angeu*. Chem. Jni. Ed. 19, 133 (1930)), ou anidridos com ácidos carboxilicos orgânicos (que podem ser obtidos, por exemplo, por rsacçáo dos ácidos correspondentes com um haleto cie alcano inferior- ou f eni laleanocarhoxi lo facultativamente substituído, em particular cloreto de feniiacetilo, pivaloilo ou trifluoroacetilo), ou anxdridoscom ácidos sulfónicos orgânicos (que podem ser obtidos, por exemplo, por reacçSo de um sal de metal alcalino de um ácido correspondente com um haleto ds sulfonilo, em particular cloreto de metano-, e tarso-, banzeno- ou toluenossul f oni lo) , ou anidridos simétricos (que podem ser obtidos, por exemplo, por condensação de ácidos correspondentes, caso seja apropriado em presença de agentes de condensação tal como 14, NJ-di c ic lohexi 1 ca;....... bodiimida, diisopropi1 carbodiimida, cIoritirato de W (3 dimeti 1 aminopropiI>-N'-etiIcarbotiiimitia, cloroformato de isobuiilo, snitirido propanofosfónico ou hexarluorofosfato ds benzotriazoi1-loxi-irisídimatllaminolfosfônio).

As anu cias cíclicas rsaciivas sso, em particular , amidas com heierociclos ds cinco membros possuindo 2 átomos ds azoto s facul taii vamente carácter aromático, de preferência amitias com imidazoles ou pirazoles (que podem ser obtidas, por exemplo, por reacçio dos ácidos cor respondentes com N,N!-carboniIdi imidazole ou - caso seja apropriado em presença de agentes de condensação tal como, por exemplo, Ν,Ν'-diciclohexiicarbodiimida, Ν,Ν'-diiso..... propi Icarbodi imida, hitirocloreto de N-<3“tiimeii laminopropi 1 l-tr -eiiIcaroodíimitia, cloroformaio de isobuiiio, anidrido propsnoíos-fónico, hexafluorofosfato de benzoiriazoiiioxi-irisCtiimetilaminoi íosfónio - com, por exemplo, 3,S-dimeiiIpirazoie, 1,2,4-triazols ou tetrazole.

Constituem grupos proieciores de snuno adequados os grupos protectores de amino que são usuais na química dos peptidos .

Estes incluem de preferência! benziIoxicarbonilo, 4.....bromoosnziioxicarbonilo, 2-clorobenzíloxícarbonilo, 3-clorooen- si 1oxicarbonilo, diclorob&nziloxicarbonilo, 3,4~dimetoxíbenziloxí carooni lo, 3, S-dimetoxibenzi Ioxicarboni lo, 2,4-tíimeioxibenzi Io·- xicarboni lo, 4-ma toxi benzi loxi carboni Io, 4--ni trobenzi loxi carboni.....

Io, 2~-ni trobenzi Ioxicarboni lo, 2-ni iro-4,S-dimetoxibenzi loxi ca r™ bonilo, 3,4,5-trimetoxibenziIoxicarbonilo, mstoxicarbonilo, etoxicarbonílo, propoxicarbonilo, isopropoxicarbonilo, butoxicarboni lo, ásobutoxicarboni1o, t-butoxicarbonilo, pentoxicarbonilo, ísopentoxicarbonilo, hexoxicarbonilo, c iclonsxoxicarbonilo. 32 oc toxi c arbonilo, 2-eiiIhsxoxicsrboniIo, 2-iodohexoxicarboni iC; 2™bremo®tox i c a rbon i1o, 2-c ioro®toxi carboni 1 o, 2,2,2-i r i c1o r oeto xicar boni Io, 2,2,2-ir ic loro~i-foutoxicarboni Io, benzhidríloxicar™ Donl lo, bis-<4-meioxi f eni I Imeioxi cas^boni lo, fenac i loxi carbon.1 lo, 2-trimeti Isi I í Isioxicarboni lo, 2~<di--n-fouti 1-meti isi 1 í 1 )©toxicar™ bom lo, 2™iri feni Isi 1 i leioxi carboni 1, 2.....edimeií 1-i-buii Isilil leio xicarbonilo, mentiloxicarbonilo, viniloxicarboni1, aiiloxicaròo-n ilo) f enox i c a r bon ilo, to 1 i loxi car bon ilo, 2,4-d i n i i yo f enox í c a r- bo-nilo, 4-ni troíenoxicarbonilo, 2,4,S-triclorofenoxícarbonilo, naftiloxi carbonilo, fluoreniI-S-meioxicarbonilo, eii11iocarbonilo meti 11iocartooni lo, buli 1 tiocarboni Io, t-buti 1 iiocarboni Io, feni1tiocarbonilo, benzi Itiocarbonilo, metilaminocarbonilo, eiilaminocarbonilo, meti 1tiocarbonilo, butiItiocarbonilo, t-butii tiocarbonilo, feni2tiocarbonilo, benzi 1tiocarbonilo, metilamino-carbonilo, etilaminocarbonilo, propílaminocarbonilo, iso-propiI-aminocarboni 1 o, formilo, aeetilo, propionilo, pivalolio, 2-cioro-acetilo, 2~bromoacetilo, 2-iodoacetiIo, 2,2,2-trifluoroacetilo, 2.2.2- tricloroacslilo, benzoílo, 4-clorobenzoálo, 4-metoxibenzoí-

Io, 4-nitrobenzilo, 4-nítrob&nzoí2o, naftilcarbonilo, fenoxiace..... tilo, adaman t i i c a rbon ilo, diciclobexiIfosforilo, difeniifosforilo dibenziIfosforilo, di-(4-nítrobenzi1Ifosforilo, fenoxifeni1fosfo-ri lo, tííeííIfosfinilo, difenilfosf irtilo, ftaloíio ou ftalimido.

Constituem grupos protectores de amino particularmente preferidos benziloxicarbonilo, 3,4-dimetoxifoenziloxicarbonilo, 3,5-dimeioxibenzi loxicarboni lo, 4 metoxibenzi loxicarboni lo, 4~nitrooenziloxi carboni 2o, 2-nitrobenziloxicarbonilo, 3,4,5-tr ims toxibenzi loxicarboni lo, metoxicarboniio, etoxicarboni lo, propoxí-carbonilo, isopropoxicarbonilo, fouloxícarbonilo, isobutoxicarboni lo, l-butoxícarboniIo, ciclohexoxicarboniIo, bsxoxicarbonilo, ocioxicarbonilo, 2-bromoetoxi carbonilo, 2-cloroetoxicaroonilo, fenoxiacetiIo, naf t i1carbonilo, adaman tile a rbon ilo, íialoiio, 2.2.2- ir i cloroetoxi carbonilo, 2,2,2-tr icloro-t-buioxi carboniIo,

mentiloxicarbonilo, viniioxicarfoonilo, aliloxicarbonilo, fenox1~ s::as‘boni 1 o, 4.....ní irof enoxi carboni lo, íluoreni carboni lo; íormíio, aeetilo, propionilo, pivaioilo, 2-cloroacalilo, 2-bromo·--aeetilo, 2; 2; 2-iri f luoroaceii lo, 2, 2, 2-ir i c Ioíoscsí i lo, benzoílo, 4.....clorobenzoílo, 4-b r omofoer.zo£ 1o, 4--ni trobenzoi lo, fialimido ou isovalsroílo tcf. Th. W. 6reane, Proieciive 6roups in Drganic Synthesis CQrupos Protectores em Sínteses Orgânicas), John Wllev ê Sons, Mova Iorque, 1SSÍI.

Os agentes auxiliares utilizados sao, de preferencia, agentes de condensação, que podem também ser bases, em particular no caso cie o grupo carboxi ser actívado sob a forma do anidrido. Utilizam-se aqui, de preferencia, os agentes os condensação usuais tais como csrbodi ímiclas, por exemplo N, -dietí 1-·, N,tr..... .....dipropil-, N,N!-diisopropi1- ou N,W'-dicic1ohexi1carbodiimida, cioridrato de M~<3-dimetiiaminoisopropi1).....N!-eíi1csrbodiímida, ou compostos carboniio tal como carboniIdiimidazole, ou compostos 1; 2 oxasô lio tal c orno 2~e til --5-- f en i 1 -1,2-oxszó 1 i ο-3-su iíato ou 2-1-butil-S-meti1-oxazólio-perciorato, ou compostos acilamino tal como ú-eioxi-í-eioxicarboni1-1,2-di-hídroquinolina, ou anidrido propanofosíónieo, ou cioroformaio de isobutilo, ou hexaí luorofos-faio de benzotriszoliloxi-tris-(dimetilaminolfosfdnio e, como bases, carbonatos de metais alcalinos, por exemplo carbonato de sódio ou carbonato de potássio ou hidrogenocarbonato de sódio ou hidrogenocarbonato de potássio, ou bases orgânicas tais como trialquilaminas, por exemplo irietilamina, N-stiImorfoiina, M-meiiIpiperidina ou diisopropiletilamina. A remoção de um grupo protector de smino é realizada de um modo em si mesmo conhecido sob condiçdes ácidas ou básicas, ou de modo redutivo por hidrogenaçá© catalítica, por exemplo, com rd/C em solventes orgânicos tais como éteres, por exemplo tetrahidroíurano ou dioxa.no, ou alcoóis, por exemplo metanol, etanol ou isopropanol. A hidrólise dos ésteres de ácidos carboxíiicos é realizada recorrendo a métodos usuais num dos solventes atrás reter idos; por tratamento dos ésteres com bases usuais, sendo possível converter os sais inicialmente formados nos ácidos carboxilicos livres por tratamento com um ácido.

Constituem bases adequadas para a hidrólise as bases inorgânicas usuais. Estas incluem, de preferência, hidróxidos de metais alcalinos ou hidróxidos de metais alcalino-terrosos tal como, por exemplo, hidróxido de sódio, hidróxido de potássio ou hidróxido de bário, ou carbonatos de matais alcalinos tal como carbonato de sódio ou carbonato de potássio ou hitírogenocarbonaio de sódio, ou aicóxidoe de metais alcalinos tal como eióxido de sódio, metóxido de sódio, eióxido de potássio, metóxido de potássio ou t-butóxitio de potássio. Utilizam-se de modo particuia rmen te preferido hidróxido de sódio ou hidróxido de potássio. A hidrólise é, de um modo geral, realizada a uma temperatura no intervalo de valores de 0°C a +10O°C, de preferên-cia de +20 °C a +80°C.

De um modo geral, a hidrólise é realizada á pressão normal. fodavia, é também possível trabalhar soo pressão reduzida ou e pressão elevada (por exemplo de 0,5 a 5 bar).

Ao realizar a hidrólise, a base é usada, de um modo geral, numa quantidade entre 1 e 3 moles, de preferência 1 e 1,5 moles, relativamente a 1 mole do éster. Utilizam-se de modo particularmenie preferido quantidades molares dos reagentes.

A remocSo dos ésteres pode, aryalogamenle, ser realizada recorrendo a métodos «suais que utilizam ácidos, tal como, por exemplo, ácido clorídrico ou ácido ir 1fluoroacético no caso dos ésteres de t-butilo ou a hidrogenólise, no caso de ésteres os òenz iIo.

Os compostos das fórmulas gerais <111, (IV), (Iva) s (VIII) sSo em si sr-esmo conhecidos ou podem ser sintetizados por métodos usuais da química dos péptidos, fazendo reagir um fragmento correspondent© que consiste em um ou maís agrupamentos de aminoáeádos, contendo um grupo carfooxilo livre, case seja apropriado presente numa forma activada, com um fragmento complementar que consiste em um ou mais agrupamentos de aminoácidos, contendo um grupo amino, case seja apropriado numa forma activada, e repetindo facultativamente este procedimento com fragmentos apropriados até terem sido preparados os péptidos de fórmulas gerais (II), (IV) e (IVa) desejados, e removendo subsequente s facultativamente os grupos protectores ou suosti tuindo-os por outros grupos protsciores.

Neste contexto, podem ser facultativamente protegidos por grupos protectores usuais Ccf. Houbsn-Wey1, Eugen nueller, Methodsn der organisthen Chemie (Métodos de Química Qrgânics); volume Xv/Í e Volume XV/2, 8eorg íhieme verlag, Esiugarda, ÍS743 grupos reacti vos adicionais, tais como, por exemplo, grupos amino ou hidroxi. A rsacçáío com morfoi ina em (VII e N-benziIpiperazina em (VII) ou com aminas de fórmula (v> é realizada, de um modo geral, num dos solventes inertes atrás referidos, em presença de uma das bases atrás referidas, de preferência trietilamina e cloreto oe meti leno, a uma temperatura entre -40°C e 0SC, de preferência a -20°C e â pressáo normal. τ 36 τ 36

Os um modo gerai, utilizam-se í a S, de pr&f&rêncía. 1 ,S a 2 mole de amina, relativamenie a 1 mole do parceiro de reacçáo.

Os compostos de fórmula geral (III) sys Ζ’-ΝΗ'^ΟΟΟΗ (III), A e 2'têm os significados atrás referidos, slío novos s podem ser preparados por um processo em que compostos de fórmula geral (IX) h2n>^:ooh (ix)* A tem o significado atrás referido, são feitos reagir com um reagente, tal como, por exemplo, (2f-0..... .....C0)o0, 2'-0-00-01 ou (2'-O-CCO-O-N-succinimída, sendo o grupo proiecíop de amino 2'introduzido pelo método CA3 atrás descrito em solventes inertes na presença de uma base, de preferência com hidróxido de sódio numa mistura de díoxano/água ou com tráetil amina em dioxano, a uma temperatura entre Q°C e *.50 SC, de preferencia á temperatura ambiente e pressão atmosférica.

Os compostos das fórmulas gerais Cia) s Clb) são novos e são preparados pelos métodos descritos sob os processos £Aj e ÍÒJ .

Os compostos de fórmula geral CId) sáo também novos s podem ser preparados por um processo sm qus compostos de fórmula geral (111) I 1 sys Ζ'-NH^COOH (III)# em que Z*e A têm os significados atrás referidos. sáo feitos reagir com compostos de fórmula geral <X)

em que Z & a! tém os significados atrás referidos, com remoção do grupo protector Z.

Os compostos de fórmula geral CX) são conhecidos ici. Boger et al . , J. rled. Chem. 28, 1779--Í790 (1385)3.

Os compostos de fórmula geral (IX) são conhecidos ou podem ser preparados por métodos conhecidos íil.P. Msries, A.A. Eamsey, J. flad. Chem. .1.25 342 <l9S9>j.

Os compostos de fórmula geral (lc) são tamhám novos s são preparados por reacção dos-compostos de fórmulas <Iíí>, íl'V> © OO pelos métodos métodos usuais de acoplamento de pépiidos descritos sob o processo [33.

As aminas de fórmulas gerais <v>, (VIU) e <1X1 são conhecidos <ef. G.C. Barreli, Chemistry of tns Amíno hcícís (Química dos Aminoácídos>, Chapman and Hall, Mova Iorque, Londres, 1383 s patente europeia EP-A2 0,278,15811. A morfoiina e N-benziIpiperazins sâo conhecidas.

Os compostos de acordo com o invento possuem um efeito influenciador da circulação sanguínea, podendo por conseguinte ser usados em medicamentos para o tratamento da pressão arterial s da insuficiência cardíaca. fest-e in.vitro A potência de inibição dos pépiidos de acordo com o invento rslaiivamente a renina endógena de palsma humano é determinada in vi iro. Plasma humano reunido e obtido com a adição de ácido stiienodiaminatstraacético CEO TA) como aniieoagu-lanie s armazenado a -"200C. A activicíade da renina do plasma <ARP> é determinada por incubação a 37°C como a taxa de formação de sngiotensins ϊ a partir de angiotensin® s renina endógenas. A solução de reacção contém ISO jul de plasma, 3 .ul de solução os sulfato de hidroxiquinoi ina a 6,6%, 3 }.ú. de solução de dimerca·- prol a 10% s 144 .ui de tampão de fosfato de sódio <0,2 ri; EOíA a

0,1%; plí 5,6) com ou sem as substâncias de acordo com o invento em várias concentrações. A angiotensina í formada por unidade de tempo é determinada por ensaio de radioimunidade CSorin Biomsdica,

Itália). A inibição em percentagem da aciividsde da rsnina do plasma á calculada por comparação das substâncias aqui reivindi..... cadas. A gama de valores de concentração em que as substância* aqui reivindicadas revelam uma inibição a S0% da aciividsde da

-7 — i O rsnina do plasma situa-se entre 10 ' e 10 n.

Exemplo N2 Κ:ςο ENJ 1 v 1,1 » 10_/ V 7,0 · i0_iU Xí I 7,4 · 10_tí X Σ 11 1,4 » Í0“'1U XVI 2,4 · 10~® Xvl I 1,9 - ur10 XXXII 1,5 10““fci xxxm 2,2 »

Os novos compostos activos podem ser convertidos oa maneira convencional em formulações usuais, tais como comprimidos, comprimidos revestidos, pílulas, grânulos, aerossóis, xaropes, emulsões, suspensões e soluções, usando excípienies ou solventes íarmscauticamsnis aceitáveis, não-tóxicos e inertes. Neste sentido, o composto terapeutícamente activo deve, em caoa caso, estar presente numa concentração de cerca de 0,5 a 90¾ em peso oa mistura total, isto é, em quantidades que sejam suficientes para se atingir a gama de dosagem indicada.

As formulações são preparadas, por exemplo, diluindo os compostos activos com solventes e/ou excipíentes, usando 40 facultativamente emulsificantes e/ou dispers&ntes. sendo possível, por exemplo, no caso de ss usar água como diluente, utilizar, caso seja apropriado, solventes orgânicos como solventes auxiliares .

Podem ser mencionados como exemplos de solventes auxiliares; água, solventes orgânicos não tóxicos, lais como parafinas (por exemplo, íracçSes de óleos minerais!, óleos vegetais (por exemplo, óleo de amendoim/sésamo), alcoóis (por exemplo, álcool etílico, glicerol), excipienies tais como, por exemplo, minerais naturais moídos (por exemplo, caulinos, a1uminas, talco, giz), minerais sintéticos moídos (por exemplo, sílica for temente dispersa, sílicaíos), açúcarss (por exemplo, sucrose, lactose e cisxtrose), emulsificantes (por exemplo, ésteres de ácidos gordos de poiioxietileno), ésteres de alcoóis gordos de polioxistileno), licores residuais de sulfito de linhina, msiil celulose, amido a poiivinilpirrolidona) e lubrif icanias (por exemplo, estearato de magnésio, talco, ácido esteárico e sulfato de sódio). A administrado efectua-se da maneira usual, de preferência por via oral ou parentériea, am particular por via per língua I ou intravenosa. No caso de administração oral, para além dos excipienies mencionados, os comprimidos podem, evidentemente, também conter adições, tais como citrato de sódio, carbonato de cálcio e fosfato dicálcico, juntamente com vários aditivos, tais como, amido, de preferência, amido de batata, gelatina e outros. Além disso, podem usar-se adieionalmente para faoricar comprimidos, lubrificantes, tais como estearato de magnésio, sulfato de sódio e laurilo e talco. No caso de suspensões aquosas, podem ser adicionados aos compostos activos vários produtos para realçar o sabor ou corantes para além dos auxiliares atrás menc ionatios.

No caso de administração par&ntérica* podem empregar-se soluçoes dos compostos activos usando materiais excipi entes 1iqu x dos adequados.

De um modo gerai j provou ser vantajosa na administração intravenosa administrar quantidades de cerca de 0,00i a 1 mg/kg, de preferência de cerca de 0,01 a 0,5 mg/kg de peso corporal para se atingir resultados eficazes e, no caso de administração oral, a dosagem á de cerca de 0,01 a 30 mg/kg, de preferência de 0,1 a 10 mg/kg de peso corporal.

Hesmo assim, pode ser por vezes necessário desviarmo-nos das quantidades mencionadas, em particular em função do peso corporal do animal da experiência ou do tipo de administração, mas também com base na espécie de animai e do seu comporismenio individual reiativamente ao medicamarsrto ou á natureza da sua formulação a do momento ou do intervalo em que se efeciua a sua administração. Assim, em certos casos, pode ser suficiente uíiilizar menos do que a quantidade mínima previamante mencionada, enquanto noutros casos os limites máximos mencionados têm de ser ultrapassados. No caso da administração de quantidades relativa-mente grandes, pode ser aconselhável dividir estas num certo número de doses individuais tomadas durante o dia. Mo caso da administração em medicina humana, prevê-se a mesma gama de dosagens. Por consequência, as apXicaçSes atrás mencionadas também se aplicam neste caso.

Compostos......de partida

Exemplo i Fórmula VIII, função amino protegida pelo grupo proteetor Boc> M-t-hutoxicarboni1-L-isoleucina-(2-picoli1iamida

r'

B o c - NH^C ONH^ví^N u

Adicionam-se 413,13 ml <3,024 mo1) de irietilamina a 0°C a uma solução de 100 g <0,432 mol) de N-t-hutoxicarboni1-L--isoleucina e 46,72 g <0,432 mol) de 2-picolilamina em í 1 de cloreto de meti leno. A mistura é agitada durante 10 minutos e arrefecida para —20°C <gelo seco/acetona), adieionando—se a esta temperatura 365 ml <0,561 mol) de uma solução de anidrido de ácido propanorosfáníco em cloreto de meti leno CHoechst ftõ). Continua a agita.)—se a mistura a -20 eC durante 1 hora e faz-se chegar à temperatura, ambiente durante a noite. A mistura da reacçáo é extraída agitando sucessivamente 3 vezes com 300 ml de uma solução de hidrogeno carbonato de sódio de cada vez, 3 vezes com 300 ml de uma solução tampão de pH 4 (Merck, AriS N2 3435) de cada vez e, finalmente, duas vezes com uma solução saturada de cloreto de sódio de cada vez. A fase orgânica é seca sobre sulfato de sódio e concentrada no vácuo. 0 produto bruto é cristalizado agitando-se com éter dietilico, separado por filtração com sucção e em seguida recristalizado com éter diisopropi1i-co/n-hexano.

Rendimento .,3 g (61,Q% do va 1 or ieórico> CCF sistema II ; R , f = 0,3-5 CCF sistema ui; Rf = 0,49 CCF sistema iv ; Rf f = 0,-57

Exemplo 2

Di-hidrocloreto de L-isoieucina-(2-pxcoli1lamida HC1 x X Η,Ν-^NCO] “Ί3 X HC1 44 Adicionam-se 250 ml de ácido clorídrico 4N (gasoso) em dioxano a 40 g (0,124 mol) do composto do Exemplo 1 e agita—se a mistura com arrefecimento no gelo. Faz-se dissolver a suspensão adicionando 10 ml de metanol. Depois de completada a reac çâo (testada por CCF), a mistura é concentrada num evaporador rotativo. Depois de co—evaporação repetioa com éter dietilico, o produto bruto é agitado com éter dietílico, separado por filtração com sucção e seco num exsicador sobre hidróxido de potássio.

Rendimento I 85,9 g (61,8% do valor teórico)

Sistema CCF ; R, = 0,30

Exemplo 3 (Fórmula II) N- t-fou tox i c a r bon i 1 -48-am i no-: i so1euc i na-(2-p i c o1i1)am i da -hidroxi· c i c 1 ohex i 1 -pen tano i 1 -L-

OH

Adiciona^-ss 420 ml de cloreto de meti leno a 13,2 g (41,8 mmol) de ácido N-t-butoxicarboni i-48~amino-38-hidroxi-<: i-clohexi I-penianoi co ÍJ. Boger ei ai. , J. iied. Chem. 28, 1778 (1385)1 e 13,5 g (48 mmol) do composto do Exemplo 2. Faz-ss dissolver a suspensão adicionando 31 ml (230 mmol) de tríetiiami-na a arrefece-se para -20^0 (acetona/gelo seco). Adicionam-se gota s gota 33 ml de uma solução a 50¾ de anidrido de ácido propanofosfónico em cloreto de meti leno, agitando a esta temperatura s deixa-se a mistura chegar durante a noite á temperatura ambiente. 0 cloreto de meti leno é eliminado num evaporadon rotativo s o resíduo é tomado em 400 ml de acetato de etílo. A fase orgânica é lavada sucessivamenie com 200 mi de uma solução de hídrogeno carbonato de sódio saturado, duas vezes com 200 ml de uma solução tampão de pH 7 (liarck, Ari2 N2 3433) de cada vez e 4 vezes com 200 mi de água desminersl izada de cada vez. As soiuçoes tampao são extraídas de novo usando 100 ml de acetato de etilo cada. As fases orgânicas combinadas são lavadas duas vezes usando SOO ml de uma solução saturada de cloreto de sódio de cada vez, secas sobre sulfato de sódio e concentradas num evaporador rotativo para um volume de cerca de 125 ml. Adicionam-se à solução 125 ml de n-haxano, que é colocada num frigoríf :íco C5°C> durante a noite. 0 produto que cristaliza é separado por filtração com sucção, lavado com um pouco de acetati de etilo/n-hexano frio 1 ; 1 e seco no vácuo.

Rendimento ; 86,9 g (/31 do valor EM-ICO ; m/e 513 (Η + H) CCF sistema III! R. = 0,48 CCF sistema IV ; R, - 0,63 CCF sistema V ; Rf * 0,48 CLAP sistema II; R., = 6,02 mín

Exemplo 4 í Fó rmula II)

Di-hídroc loreto de 4S-amino-"3S“hidroxi-5“€ 1 c lohexi 2-pentsnoi 1--1.-isoIeucina--(2-“picoli1)smida

•N. x HC1

Adicionam-se 160 ml de ácido ciorídrldo 4N (gasoso) em dioxano com arrefecimento em gelo, a 16 g (30,8 mmol3) do composto de Exemplo 3. Faz-se dissolver a suspensão, adicionando 6 ml de metanol. Depois de se ter completado a reacçáo (testada por CGF), a mistura é concentrada num evaporatíor rotativo. Apôs co-evaporaçSo repetida com éter díetllico o produto bruto é agitado, separado por filtração com sucção e seco sobre hidróxido de sódio num exsicador. /

Rendimento 16,66 g (35% do valor teórico)

En-ICD ,* m/e 413 (II + H)

CCF sistema III; E. = 0,3S

Exemplo 5 (Fórmula III) Ácido M-t-butoxicarboni1-2-E,S-amino-2“C2-(1,3-di tioiano)scèi:ico

Boc-NH-

S*Y^S

R,S o2h D issol vem-se 193 g (0,11 moí) ds ácido 2-amino""2-"R, 8™ .....2-12-(1,3~ditioIano)3acé?tico ΪΝ.Ρ. flertes. A. A. Eamsey, J-- fíod.

Chem. 12; 342 (1963)3 em 100 ml ds dioxano s 6;6 9 (0,16 moi) ds hidróxido ds sódio s adicionam-se 29 g (0,13 moi) ds carbonato ds di-i-buti lo. Agiia-ss a mistura à temperatura ambiente durar;ts a noite s elimina-se o dioxano num evaporado?· rotativo, à mistura são adicionados 200 ml ds água, ssndo a referida mistura extraída várias vezes com éter. A fase aquosa básica ê ajustada para um pH 3 com ácido clorídrico s extraída várias vezes com cloreto de msiiier-o. As fases orgânicas combinadas sáo lavadas com uma solução de cloreto de sódio saturado, secas sobre sulfato oe sódio e concentradas.

Rendimento 18,1- g (60,6% do valor teórico)

En-ICD ; m/s 419 <h’ -·- H), m/e 237 (Μ *· NH,) CCF sistema IV ; R^. = 0,6S Exemplo 6 (Fórmula II) Éster etílico de N-t-hutox i c a r bon i 1 -4-S-am 1 no.....3S-h 1 d r ox i -S- c i c 1 o- hsxi l-pentanoí 1 -L-1 suc i r?a

Η Boc-NH

0-NH- ooc2h5 0 composto em epígrafe é obtido de modo análogo ao que foi descrito no Exemplo 3 por ligação por meio ds anidrido de ácido propanofosfónico de 4,8 g Ci5s2 mmol} ds ácido N-i-butoxi*·· carbonil-4S-amino-3S-hidroxi"5-cíclQheKilpsntanóico 13* Boger et aL, 3- Med» Cheui» 28, Í779 (1985)3 s 3,3 g (16,7 mmal) de hidrocloreto de éster etílico de L-leucina*

Rendimento z 6,4 g (92% do valor teórico) CCF sistema VI i Rf = ®,85 CCF sistema VIIs Rf = 0,13 CCF sistema VIII s R.f = ®,55 CCF sistema IX s = 0,24 iiismala„2

Hidrocloreto de éster etílico de 48“-amino-3S~hidroxi-5-ciclohs-x i 1 psn t ano i 1 -L-1 suc i n -a

0 composto em epígrafe é obtido analogamente ao Exemplo 4 removendo o grupo protestar N-t-butoxicarboniio de 6,1 g CÍ353 fomol) do composto do Exemplo 6 =

Rendimento 3 S, 1 g <38% do valor teórico) < * > BAR-EM ? m/e 367 <M -2- H); m/e 37S <H ·*· Na) CCF sistema ui: Rf * 0,37 CCF sistema IV : Rf * 0,23 CCF sistema vi : Rf = 0,85 CCF sistema vil: Rf = 0, 13 CCF sisisma VIII Rf = 0,66 CCF sistema IX : R, ~ 0,24 * iNi-t-butoxicarboni l-4S-ami no~3S--h i dr οχ i--6--c i c lohexi i-pentanoi 1--- < 2S-me t i 1> bu i i l aní i da

0 composto em epígrafe é obtido analogamente ao Exemplo 3 acoplando 4,8 g <15,2 mmoi > de ácido N---i--butoxicarbonií"-4S""ami""· no~38-hidroxi“S~c ic lohexi Ipentanoico CJ. Boger et al . , J-~ Nsd. Chem. 28, 1773 <1 385>j e 1,3 ml <16,7 mmoi) de (2--3--meti 1 )buti l™ amina com anidrido do ácido propanovosfõnico.

Rendimento S,4 g <92,4% do valor teórico) CCF sistema IV ; R.f ~ 0,72 CL AP sistema II; R... = 13,51 min ("i·) 3AR--£n ; m/e 385 (H + H); m/e 3Sí CH ·*· Li)

Hidroo ioreio de 4S-amino-38-S"udroxi~S--c i c lohexi 2-penisnoi 1-.....(28-mstí 1 )bulilamida HC1 x

0 composto em ap£gí'afs é obtido analogamente ao Exemplo 3 através da remoçlo do'grtípo protector Boc ae 5,4 g (14 mmol) do composto do Exemplo 8.

Rendimento ; 5 g (> 100% do valor teórico, contendo HCl) CCF sistema 111; R,;: = 0,26 (-}·> BAR-ΕΜ ; m/e 285 (Η + H) gõ:::smPiO.....Í.0· M~f taloi 1-2-R, s-amino”2-C2--( 1,3™di ti ano) lacetato de eti lo

ο Ο composto em epígrafe é preparado do modo descrito na literatura para o composto ditiolano correspondente EM.P. Hertes, A. A. Ramsey, J. Med. Chem. 12, 342 <1969)3 a partir de 77; 8 g <0;3 moi ) de éster etílico de «-ftalidomidomalonaideido e SO mi (0;S moi) de 1,3-dimercaptopropano. 0 produto em bruto ê purifi cado por meio de cromaiografia sobre gel de sílica usando dicior-ometano como eluente.

Rendimento ; /4 g (70% do valor teórico) CCF sistema 11 ; Rf = 0; 83 CCF sistema XI ί = 0, 44 CLAP sistema II! * '6, 63 EM : 1 H-RriN <250 MHz, m/e 3S2 <M + H); m/e 204; m/e 113 DIÍS0) l S ! 7;92 < m .· 4H>; 5;2S <d; 1H); 4,6. <d; 1H); 4,15 (q; 2H); 3; 03 <m, 1H); 2;72 <m, 2H); 2 ; 57 < -Τι ; 1H>; 1,35 (®, 1H); 1,78 <m, i H)i 1,14 <t, 3H);

Esamallg......11 2-R;S-amino-2™II2-< i ,3-di tlano)3acetato de etilo

* R,S

0 composto em epígrafe é preparado do modo descrito na literatura para o composto diiioiano correspondente CM. P. neriss, ft.fi. ftamsey', J. Hed. Chem. 1_2, 342 (1363)3 partindo de 74 g (0*21 moí) oo composto do Exemplo 10 e 17 mi <0,35 moí) de hidrato de hldrazina.

Rendimento l 30 g (64¾ do valor teórico) CCF sistema II R.f “0,90 (ai BfiR—EM ; m/e 222 <H H)^ m/e 22S (li -*· Li), m/e 244 <11 + Na) . £H~Rf1N (250 HHz, DI1S0) 5 ,* 4,10 (m, 3H); 3,65 (d, 1H); 2,80 <m. 4H); 1,92 Cm, 3H); (m. ih> ; i , 18 <i, 3H) .

Exemplo... 12 Ácido 2-R,S”amino-2“L2-< 1,3-d:j.tisno>jacético

*

R,S 0 composto em epígrafe é preparado do modo descrito na literatura para o composto diiioiano correspondente Π1.Ρ. neriss. A. A. Ramas”, J. iled. Chem. 12. 342 <1963)3 fazendo- ferver sm etanoI/KOH o composto do Exemplo lí. CCF sistema III ; E.? =0,05 CCF sistema V ; E;. = 0,35 ϊ Ι:2·ξΒΙεΙ.2........11 ác ício A--t--butoxicav’boni 1-2--R, S~amino-2-C2-·< 1,3~di tisno>3aeêtico

0 composto em epígrafe é obtido de modo análogo ao gue foi descrito no Exemplo 5 fazendo reagir o composto do Exemplo 12 com carbonato de dí-t-bmtilo. CCF sistema í 5 Rf = 0, 13 CCF sistema II ‘ Rf '0, 12 CCF sistema IV ; : E, V = 0, 55 CCF sistema V > «f m,: 0, 86

Err- í CD m/e 294 CM ·*· H): m/e 311 <14 ·*· m/s 265 12,88 < amp.1o, 1H); 7,0 <d, 1H); 4,44 < m, iH3; 4,11 (d, 2,30 Cm, 2 h> ; 2, 70 < m, 2H3 ; 1,86 (m, 2H); 1,38 <s, SH) . “ H--EnM ( 250 HHs, DiiSO 3

E^lPio.......M M-axeti 1-2-R,S~amino“2~C2"< 1,3-~ditíano)3acetato de stilo ο η ch3-c-nh^m:ooc2H5 *

R,S 20 g ¢90,-5 mmol) do composto do Exemplo íl são dissolvidos sfií 400 ml de dioxano e adielonam-se 10 ml (69 mmol) do trietilamina e por fim 7,7 ml (81,3 mmol) de anitírido acético. A mistura é agitada â temperatura ambiente de um dia para o outro, extrai.....se o dioxano e o resíduo é triturado com solução ds bicartoonato/êter, retirado por meio ds filtrado com sucção s seco.

Rendimento 20,9 g (87,8¾ do valor teórico?

Cõf sistema IV CCF sistema V CLAP sistema II

Rf = 0,76 Rf = 0,89 R., - 1,73 min m/e 264 (Μ + H)

Í2ÊÊSiEl2_lS N-aceti1-2-R,8~amino-2-C2-(í,3-ditio1ano)3acetato de etilo ch3-c ooc2h5

*R,S 0 composto em epígrafe é obtido de modo análogo ao que descrito no Exemplo 14 partindo as 2~R, 8-amino~2-C2-í 1,3~di tiolano)lacetato de etiio Π1.Ρ. A.A. Ramsey, J. Med. Chem. 12, 342 (1SS3)3. CCF sistema I ; Rf = 0,75 CCF sistema 11 ; R.? = 0,67 ·: R{ =1,73 ntin CLAP sistema 11 Ei-i-1 CD ÍMM:d.£.„.lâ ; m/e = 250 (Μ + H) N-eioxicarboni 1 -L-fen ilalan i1-£ 2-R,8- es tato de etílo amino-2-£2-(1f3-ditisno)3} at

0 composto em epígrafe é obtido de modo análogo ao qoe loi descrito no Exemplo '1 por ligação por ácido propanofosfónico do composto do Exemplo 11 (3 g; 13 mmoi) e M~etoxicarboní i-L-f e·-·· n i1a1aní na. -__x

Rendimento ; 5 g (8/,4% do valor teórico) CCF sistema I ; Rf = 0,87 amoos os CLÃP sistema 11: R, =4,58 mín estereoisómsros ("j" 1 sAR-Eri í m/e = 441 (ri + H>; m/e = 463 (ri -i- Na)

Exsmplo 17

Acido N-stoxicarboni l-L-íeni ialani 1 ·····i2-R, S-amino 2-L2~< i, 3~úi tisno)jlscético

0 composto em epígrafe é obtido de modo análogo ao gue foi descrito no Exemplo X ou no Exemplo XI por hidrólise básica do composto do Exemplo 16 (4 gj 9,1 mmol) e processamento do modo habitual.

Rendimento CCF sistema IV ¢ + ) BAR-EH 3,7 g (.37% do valor teórico)

Rf 0 ; 63 (isõmero A) h = 0,54 (isómero B) m/e 413 (M M); m/e 419 (H ·*· Li).

Exemplos de Preparação (fórmula geral I, Ia, Ib, Ic ® :cd>

Í2^SEÍíL_1S

He ti X-N-t.....butoxicarboni 1-1..-( 3, S-di iodo-4-msioxi )f eni la lan inato

J

Soc-L-3,S-diiodo-tirosina (1,0 g, Í,S7 mmol; Sissendorf Biochemicals) foi agitada com iodeto de meti lo <352 ul, 5,61 mmol) s carbonato de potássio (0,78 g, 5,61 mmol) em dimsti1 for-mamida (10 mi DMF durante 3 dias, protegida da humidade com um

tubo de secagem. Após evaporação a mistura de reacção foi diluída com água (.ISO mi) e extraída por três vezes com éter (50 mi de cada vez). As fases orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de sódio e evaporadas.

Rendimento = í;!2 g O 100¾ do valor teórico, contém DfíF) CCF sistema IV ; Rf = 0,89 (250 MHz, DilSO) , ! 8 - 7,7 (s, 2H>; 7,28 (d, ÍH)J 4, 15 Cm, iH); 3,71 (5; 3H); 3,62 (s, 3H); 2,95 (dd, 1H); 2,74 (dd, 1H)J 1,33 ís, 9H>. £2£!»EÍo_jjjl N-i-butoxicarboni 1-1.-(3,5-di-iodo-4~metoxi >f eni lalsnina

0 composto em epígrafe é obtido de modo análogo ao gus foi descrito no Exemplo X ou no Exemplo XI por hidrólise básica do composto do Exemplo 18 (0,45 g, 0,80 mmol) e processamento do modo hao i tua1.

Rendimento 0,33 ¢75¾ do valor teórico) CCF sistema IV ; R,. - 0,56 ! 1 H-RMN ¢250 flHz, DMSO) I * = 12,65 Campio, 1H>; 7,7í Cs, 2H>; 7,09 Cd; ÍH)j 4,03 Cm, ÍH); 3,70 <s, 3H); 2,96 Cdd, ÍH)j 2,69 Cdd, ÍH); 1,32 Cs, 9h).

M~t.-towt.oxicartooni 1-2--R, 8-amino-~2-L2-C 1, S-ditiolano/J-acetí i-4S-a- míno-SS.....hidroxi-S-c i c iohexi 1-penianoi 1-L.....isoieuc ir· a.....(2.....pico), i 1 )a- m 1 da

20 mi de cloreto de meti leno e 18,3 mi C105 mmoii de di-isopropileiilamina sao adicionados a 4,4 g (15,7 mmo:) ao composto do Exemplo 5 e a 7,3 g ¢15 mmoil do composto do Exemplo 4. A solução # agi tacis © arrefecida para -20 eC (gelo seco/acs tonai . 11,7 mi de orna solução a 50% de anidrido de acido propano-fosfónico em cloreto de meti leno (Hoechst Ad) sáo adicionados gota a sota a esta temperatura s deixa.....se a mistura aquecer a té s temperatura ambiev-ite de um dia para o outro. 0 cloreto os meti leno é extraído num evaporador rotativo e o resíduo é reco-Inido em acetato de etilo. A fase orgânica é extraída agitsndo-a por três vezes sucessivamente com solução saturada de hídrogeno-carbonsto de sódio, solução tampão pH 4 CMerck, Artigo n2 3435) s solução saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de sódio, concentrada e seca em alto vácuo.

Rendimento S '3 <79; 8% do valor teórico) m/e 680 <11 ·*· H)J m/e 686 <li Li)

CCF sistema III CCF sistema IV CLAP sistema II

Rf = 0,59 Rf = 0,67 Rj = 6,16 min

ÊSêSíElaULI

Di-hidroc loreto de 2-R, S”-amino""2""C2-< 1,3-ditiolano)3~acetil”48·-" ”smino™3S”hidroxi-S“C i c 1 ohexi l-pentanoi I--1.-1 sol euc i ns-C2--pi coi, 11 )-.....amida

ISO mi de ácido clorídrico 4h em dsoxano sáo adiciona.” dos com arrefecimento' por meio cie gelo a 9 s <Í3;24 mmol > do composto oo Exemplo 1 e a mistura è agitada durante 4 horas. A mistura de dioxano/ácido clorídrico é removida por destilação num evaporador rotativo. 0 produto que se obtém por co-evaporação repetida com éter dietOico é separado por meio de filtração com sucção, lavado com éter dietilico e seco sobre hidróxido de potássio num exsicador.

Rendimento C + ) BAR-Eil 8,6 g (100¾ do valor teórico) m/e 580 (M -s- H),“ m/e 602 (li -?· lia) OOP sistema III 1 Rf = 0,88 (isómero A) L- «f = 0,33 (isómero B) CCF sistema IV i 5 = 0,21

&xtSíeJjâ_JII j\Ht-buioxicarboni 1-L-ísni laiani 1-Í2-R, S™aminO“2"“L2-í í , 3-di tioian- o) "i }-sceli i-4S-amino-3S-hidroxi-S""C iclohexi Ipentanoí i-L.....isoieuc i- na-(2-p i c o1o1)-amida

50 ml de ciov‘eto de metileno e 11 ml (68 mmoi) de di-isopropi leti lamina são adicionados s 5,7 g (9 mmoi) do composto do Exemplo II a 3,1 g (11,7 mmoi) de N-i-butoxicarboni1.....L-fe- nílalanina. A solução é agitada e arrefecida para .....20°C (gelo seco/acsiona). 8;2 ml (12,6 mmoi) de solução de anidrido de ácido propanofosfónico em cloreto de metileno a 50¾ ÍHoechst ΑΘ) são adicionados gota a gota a esta temperatura e deixa-se que a temperatura da mistura atinja o valor ambiente de um dia para o outro. 100 mi de cloreto de metileno são adicionados e a mistura é extraída agitando-® por três vezes com solução saturada de hídrogenocarbonato de sódio, 3 vezes com solução tampão pH 7 (Merck, Artigo N2 8433) e uma vez com solução samí-saiurads de cloreto ae sódio. A fase orgânica é seca sobre sulfato de sódio, concentrada e seca sob alto vácuo.

Rend i msn fco /,2 g (95¾ do valor teórico) (*) BARBEM m/e 827 (M + H) CCF sistema I ; A = 0,42 (isõmsro A) Rf 0,38 (isómero B) CCF sistema 111; «f = 0,60 (isómero A) h 0,5 b (isòmsro B) CLAP sistema II; h = 14,34 min (isómero A) Rt " 12,S3 min (isómero 8) ........I v......e.._.Exemp 1 o.......v N-t-butoxi carboni I.....L-f eni lalani I-(2--3.....amino-2.....í2-(i, 3-di i lo lano)·- j }--&ceii 1 -4S-amino-3S--hidroxiS~c ic lohexi Ipsnianoi l-L-isoieuc ina..... -"(2.....picoh I )amída (Exemplo IV) N™ t-buiox i c arbon i 1 ~L- f en i 1 a ian i 1 ~{2-R-am i no-~2~ l 2~ (í, 3-d i t í ο I ano >..... 1 }-aceti 1.....4S~amino~38-hidroxi-S-c iclohexi ipent-anoi l-L-isoleuc i na- .....(2.....picolil>amida (Exemplo V)

$ S = Exemplo 9 (isómero A) a R = Exemplo 10 (isâmero B> 7,2 g do composto do Exemplo III slo separados sobre gel de sílica 60 (Merck, Ari. N2 9385) 0,040 - 0,063 mm (malha 230 - 400) usando um gradiente em degraus de cloreto de msiiie·-no/mstanol (100/0; 93/1; 98/2; 37/3; 36/S; 3/1). A detecç“?o é realizada a 214 mm e a análise das fracçôes é feita por

cromatografia de camada fina e cromatograíia líquida de alta pressão. Depois de combinar e remover o solvente num evaporado" rotativo, obtém-se o seguinte!

3,1 g do composto do Exemplo ϊν íisómero A - SI 0,6 g do composto do Exemplo Iv s Exemplo V (fracçao mista de A e S) 2,31 g do composto do Exemplo V íisómero B ··- R>

Sad^amlijicM Para o isômero.....â.......(Exemplo........|V> CCF sistema 111 ! R., =0 = 60 r CLAP sis tema II ! R, -- 14,34 min c· «.·<) EmíR—ΞΗ ! m/e 827 ífl + H)

Dados__amllMçm_Ea^^.....V.2. CCF sistema II1 ! R, = 0,56 CLAP sistema II ! R, = 12,53 min t <+> BAR-EM ; m/e 827 <π + H> ÈSemPio„.vl Éster etí lico de M-t-butoxicarboni 1-2-R, S-amino.....2~-ϋ2···< 1 ,3-ditiola·-· no) j-aceti l-“4S--amino-3S-hidroxi"”S""C ic lohexi 1 psn tano i 1-1--1 euc i na

0 composto em epígrafe é obtido de modo análogo ao que foi descrita para o Exemplo I mediante ligaçio por anidrido d® ácido propanofosfóníco de 4 g (14,3 mmol) do composto do Exemplo 5 e 4,6 g (13 mmol) do composto do Exemplo 7. 0 produto em bruto

(8,6 g) é filtrado através de 400 g de gel de sílica 60 (Herck, Artigo Mi> 9385; 0,040 - 0,063 mm) usando um gradiente em degraus ds cloreto de metileno/metanol (100/0; 98/2 j 95/61. As írac..... côes contendo o produto são combinadas s concentradas.

Rendimento ' ; 5,7 g (66% do valor teórico) m/s 640 (M ·*· Ma) CGF sistema IV ; CLAP sistema II; (*·) BAR—Eii ; R, = 0,85 r R.j. = 17,91 min m/e 618 (M * H);

Emmpdo VU

Hidrocioreto do éster etílico de 2-R,S-amino™2~C2-”( 1,3™d.ítiols..... no) j-acet i i ~4S--amino”38“-hidroxi~5"”C i c lohexi 1 pentanoí l-L-lsuc na

0 composto em spígrafs é obtido de modo análogo ao que foi descrito para o Exemplo II por remoção do grupo protector ds M--t-outoxicaròonilo de 5,3 g (3,6 mmoi) do composto do Exemplo VI.

Rendimento ,* 4,7 g (85% do valor teórico) CGF sistema III; R,. = 0,71 íisómsro A) r R, == 0,64 (isómero 8) ΐ

(-;· > BAH--EM m/e 518 (H -f- H); m/e 540 (π *· Ma)

EmíúRlo.......vi Ια Éster etílico de W-t-butoxicarbonil-L-fenilalsní 2-C2-R,S-amir:0-2~ £2.....(1,8™di tioíano) ϊ}-acsti l-4S“-£nuno"3S""hidv'oxi""õ-c iclohexilpen-·· tsnoiI-L.....leucIna

0 composto em epígrafe ê obtido de modo análogo ao que foi descrito no Exemplo III mediante ligação por anidrido de ácido propanofosíõnico de 1,7 g (6,6 mmol) de M-t-butoxicarbonil--L-f eni laianina e 2,8 g (S mmol) do composto do Exemplo vil.

Rendimento ; 3 g CCP sistema I l Rf v CL.A8 sistema III R. ' £- R. > t (?&% do valor teórico) 0;65 íisõmero h) 0,57 (isómero B) 35,58 min (isómero A) 3it64 min (isómero B)

í + ) £íAk„£M m/e 765 <M + H); m/e 787 <M + Na) £2£êE!»EÍa_il Éster etílico de th-etoxicarboni 1-L-f eni lalavii 1--Í2-R, 8-am i no-2“ E 2~ •••Cl,3-dítiolano)jI-acetí I~"4S""-5mino""-3S“hidroxi”"S“"CíclohexiIpenta-noi I-'L~leuc ina

0 composto em epígrafe é obtido de modo análogo ao que foi descrito no Exemplo III a partir de IjS g (6,6 mmoi) de N-etoxicarbonil-L-fsnílalanina e 2,8 g (5 mmoi) do composto do Exemplo VIII.

Rendimento ; 2,3 g (62¾ do valor teórico) CGF sistema I ; R,? = 0,60 (ambos os isómeros A ·*· B) CLAP sistema II! R, = 18,66 (isómero ft) t. R., = 15,31 (isómero 8) (*·) BAR-EM ! m/e 737 CM + H),‘ m/s 759 (17 -f· ma) £.;ÍgÍJlEi..O„I. M""t™bwtox:i carboni l-L--f sni lalani 1-C2-R, 8-amino--2.....112--( 1,3-di tiolan-· o)33aceti I--48--amino“-3S-"hidroxi~"5~-c ic lohexi Ipentanoi 1--L.....leucir;-®

4,3 ml de uma solução aquosa de hidróxido de sódio íN são adicionados à temperatura ambiente a 3 s (3,3 mmoi) do composto do Exemplo VIII dissolvido em 30 mi oe dioxano. A mistura é agitada á temperatura ambiente durante 2 dias e depois

tornada ácida com ácido clorídrico IN. 0 solvente orgânico é retirado num evaporador rotativo, o resíduo é separado por meio de filtração e suspenso outra vez em âgua/acetonitrilo 3S/S, e a suspensão é congelada e lioíilizada.

Rendimento ; 2,3 g (30% do valor teórico) C + > BAR-EM : m/e 803 CM + 2Na - H),‘ m/e 813 CM * Ma + K ···· H)

SaMMBlfl......x.1. N-etoxi carfooni I-L-f sni lalani I-C2-R, 8-amino-2-íI2-( i, 3-di tioiano) 3..... iacetí l--48-amino"3S-hidroxi-S"C ic iohexi 1 psntanoi 1-L-leuc ina

OH o2h 0 composto em epígrafe é obtido de modo análogo ao que foi descrito no Exemplo X por hidrólise básica de 2,3 (3,1 mmol) do composto do Exemplo IX.

Rendimento 2,5 g (87¾ do valor teórico) < + > BAR-EM ,* m/e 775 CM + 3Ma - 2H); m/e 731 CM + 2Na + K - - 2H)

Exemplo......X í I e......Exemplo......XIXI. M-etoxicarboni 1-L-f eni laiani i-í2.....S.....ami no-···2.....12-·(1,3-di tioiano) 3 3 a- ceti I-4S-amino-3S-hidroxi-5-c ic Iohexi Ipentanoi 1--L- i sol euc ina- (2---pícoli1)amida (Exemplo XII) hl-atoxi carboni i-L-feni ialani l-£2~R-ami-10-2-12-( í s 3™di t ioiano) j 3 a- ceti 1-43·-ami no.....SS-hidroxi-S-c iclohexiIpentanoiI-L-isoieuc ína-(2— picoiiIlamida (Exemplo XIII)

0 ^ II h3C^^0-C-N H

& S ™ Exemplo XII (isómero A) # R = Exemplo XIII (Isómero'B)

Os compostos em epígrafe foram obtidos por separacáo cromatográfica (de modo análogo ao que foi descrito no Exemplo IV s no Exemplo V) da mistura de isómeros sintetizada a partir de N-etoxicarooni1-L-íenilalanina e do composto ao Exemplo 11 ae modo análogo ao que foi descrito no Exemplo XII. Dá-se primeiro a eluícão do Exemplo XII (isómero Af isómero S); depois da tio Exemplo XIII (isómero B, isómero R>. t ...... CCF' sistema III ! R* « 0,51 CL AP sistema II í R,. = 7,35 mi π ( + 3 SAR-EM ί m/e = 799 (M ·*· H>; m/e = 821 CM ·*· Na)

Dados analíticos......para.....q„ Exemelfl_Xlll Cisómar 0.....51 CCF sistema III -l R^ = 0,47 CLAP sistema II R.,. = 5,81 min C-M BAR.....EH ! m/e = 793 CM ·*· H),* m/e = 821 (M + Na) \

ExMiElo.....>íl.v.....e......Exemplo XV M-t-butoxicarboni 2HL.-( l~naf til)a1ani 1 {2 3-smino 2-·2-(1} 3~d:i tio lano)2j&cetii-4S-amino-38~hiàroxi-5-ciclohexiIpentanoi1-L-isoIeu-£:ina--(2-picoiiliamida (Exemplo XIV) IM-t-outoxi carboni 1.....1.--( i-«afti 1 >slani i-C2“R“amino---2-L2-( 1 ? 3~di tio-· lano >j}aceti l-48-amino~38~hidroxi~5-c i c lohexi Ipentanoi I-L-isoleu·"" c ina-(2-~picoi í 1 lamida (Exemplo XV)

x R = Exemplo XV (isómero 8)

Os compostos em ' epígrafe foram obtidos por separação cromatogrâíica (de modo análogo ao que foi descrito no Exemplo IV & no Exemplo V) da mistura de Isómeros síntetizacia a partir oe íd-i-buioxicarboniI-L-Ci-naítillalanina e do composto do Exemplo 11 de modo análogo ao que foi descrito no Exemplo ΙΙΪ. Dá-se primeiro a eluiçáo do Exemplo XIV (isómero A; isómero 3), e depois a do Exemplo XV (isómero B, isómero R). ......o,.,ExempI.o......XlV...i„isó.mero.....A)

CCF sistema I l R,- CLAP sistema II; h (-*·) BAR—EH ; m/e 0;S3 24;34 m i n = S77 Cft' + H)J m/e 833 (ri -* Ma) LMdQM......arAll-lÍ.^QS_.gg.I^_P..-£^j^XQ_X^ÍLXÍ-l6i^gro_^2 m/e = 899 (M ·?· Ma)

CCf sistema I CLAP sistema II í *·) FA8-MS

Rf = 0.,55 R, =20,49 min t· m/e = 877 (M + H) ãaê£aEia-JÇMjL-S.....Ixg.mp.lo.......xvn N" t-butoxi c a rbon i 1 -L- (4-metox 1) f en i I a i an i 1 - £ 2--8--3¾ I no-2-12--(1,3.......... ditioiano>3 laceii 1 -4S"-am 1 no-38.....hidvioxi- A-·c i c ionexí 1penianoi 1- L-i..... soleuc ins-(2-picol i 1 )amida (Exemplo 'XVI)

m 8 = Exemplo XVI (isómero A) ;« fi = Exemplo XVII (ísómero B)

Os compostos em epígrafe foram obtidos por separado cromatográfica (de modo análogo ao que foi descrito no Exemplo VI s no Exemplo V) da mistura de isómeros sintetizada a partir de H-i-buioxic&rboml-L~(4-metoxi)fenilalanina e do composto do Exemplo II de modo análogo ao que foi descrito no Exemplo III. Dá-se primeiro a eiuiçSo do Exemplo XVI (isómero A, ísómero S), e depois a do Exemplo XVII (isómero 3, isómero R). R, = 0,89 R.j. = 11,77 min CCP sistema I CLAP sistema 11 (-Ϊ-) BAR—EH ; m/e = 8S7 (H ·* H),’ m/e = 879 (H ·*· Ma) asãaa....ijnâliM£os„.mr.s......ο.....g&smeio........XV.......Uiámerp 8> CCF sistema I ; R„ » 0.56 r CLAP sistema II: RA = 10,43 min

(.,.J BhH-EM m/s 357 (ri -f- H)1 m/e = 879 UI ·*· Na) N""t~butoxicarboní 1-2-R, S“'amino-2“C2~( í, 3-di iiolano)3-aceii I-4S-~a-mino-SS-hidroxi-5-c ic lohexi i-pentsnoato de meti Io

B o c - NH-^-vC ONH^v^C OOCH , 4 I J *R,S OH 0 composto em epígrafe é obtido puro, de modo análogo ao que foi descrito para o Exemplo I, ívsedianie ligação por anidrido d® ácido propanofosfônico de 2,2 g (7,8 mmol) do compos™·· to do Exemplo V e de 2,4 g (6,5 mmol) do hidrocloreio de 43-amino·-·· ”3-S”hidroxi-5-c ic lohexi 1-pentanoaio de meti lo [que se pode obter por esisr i?icaçSo do ácido 4S~amino“3S.-mdroxi”5-c ic Iohsxi Ipenia-· t-qíco íJ. Boger et al. , J. Med. Cheem. 28, 1779 (1985) ou P.F. Schuda st al., J. Org. Chsm. 1338, 53, 873-375) coa^ diazomstano a precipitação sob a forma de hidrocioreioj s subsequente cromato-grafia com gel ds sílica. 3,5 g (88¾ do valor teórico) CCF sistema IV; R, = 0,88 (os isõmeros não se podem γ CLAP sistema II; R. =7,06 diferenciar) t m/s 497 UI -?· Li); m/e 4411 m/s 397

£S®Í2EÍS-JÍII

Hidroc loreio de pentanoato de 2-R, S--sm i no“2-£2·~·< I.· 3~di ixoiano) ]- -aeetí i“4S"-amino“”3S"-hidroxi-5·- c ic lohexi lo

0 composto em epígrafe é obtido d© modo análogo ao qu© foi descrito no Exemplo II por remoção do grupo proiector de 3;5 <7;i mmol > do composto do Exemplo XVIII.

Rendimento l 3,0 g (100% do valor teórico) CCF sistema III; R„ = 0;40 Cisdmero A)

T 0;34 (ísómero d) <·*> SAR-En ; m/©' 3S.1 (ri ->· H)J m/s 337 Ui ?· Li) sM-etoxicarboni 1 -L-f©nilalani1~C2-R-®mino-L2·-( 1,3-di tio 1 ar;o> i )-ac- ©ti 1-43.....amino-3S--hidroxi'-S-c ic lohsxi Ipsnianosto eis meti Io CExem..... pio XXI)

I S = Exemplo XX íisómero A) # R = Exemplo XXI (isomero B>

Os compostos em epígrafe foram obtidos por separação cromaiográíica (de modo análogo ao que foi descrito no Exemplo Iv s no Exemplo V) da mistura de isómeros sintetizada a partir de 1,3 g (5,5 mmol) de N-etoxicarboni l-L-íeni lalanina s cie 1,8 g (4,6 mmol> do composto do Exemplo XIX de modo análogo ao que foi descrito no Exemplo III. Dâ~se primeiro a eluição do Exemplo XX (isomero A, isômero 8), e depois a do Exemplo XXI (isdmero 8, isomero FO .

Dados......analíticos......para o.Exemplo XX (isômero.....A) CCF sistema Ϊ : R, = 0,90 i CLAP sistema II; FL = 7,S4 isin (·*·) BAhP-Eli ; m/e = 616 (M ·* Li ),’ m/e — 63/; (ΓI * Nsj Èâdos......anaili-lcos.....gara.......Q.....Exemelo,.....m_£iaõmftEa._fi2· CCF sistema I ; = 0,86 CL AP sistema 11; E,' = 6,63 min x- (*) BAR-EA ; m/e 616 í H + Li); m/e - 616 (ri * Na) issêsaEls......áM.L..Ê.....fcxgffigjo......xxill. M-t-outoxíc&rboni 1 -L™(4-metoxi )feni 1 a 1 ani 1 - í2.....8~amino~2-··l2.....(1,3— d.i tiolano) 3 5-aceti l-4S-am.ino-3S-hidroxi~.5-c i c lohexi Ipentanoato de meti lo (Exemplo XXII)

# S = Exemplo XXII (isómero A) I R = Exemplo XXIII (isômero B)

Gs compostos em epígrafe foram obtidos de modo análogo ao qys foi descrito no Exemplo XX s no Exemplo XXI a partir de 1.3 g (6,3 mmol) Ν-ϊ-butoxicarhoni I-~L"-(4~-metoxi )feni lalanina s de 2.4 g (5,7 mmol) do composto do Exemplo XIX. ú.mdo@ analíUcqs ...Para......g_£x§í5Ela-XXII.......li.sômsro,,M. CCF sistema I !· 1“L- = 0,83 CLAP sistema II; RA = 12,33 min ( + > BAR-EM : m/s = SSS (11 + H); CCF sistema I ; R. = 0,56 CLAP sistema II; FL = 11,25 min 0“j·> BAR-EM ; m/e 668 (íi + B);

EmSiPls......I11.V Ácido N-stoxi carboni I~L~f eni iaisni I-C2-E, 8~amí no-2~-i2-( I,3-ditio-lano) ]laceti I“4S--amino"3S"-hidroxi“S“C íc lohexi ipentanoico

Dissolvem-se 460 g (0,754 mmol) de uma mistura dos compostos do Exemplo XX e do Exemplo XXI sm 20 ml de dioxano/âqua 111, adícionam-se ISO μϊ (1,4 eq) de NaGH 6N e a mistura é agitada â temperatura ambiente durante a noite. A mistura é

ajustada para um pH 3 cora HC1 IN e o dioxanc é removido num svaporador rotativo.. 0 precipitado é separado por filtraçSo cd® sucção» lavado cora um pouco de água e seco sobre KOH num sxsíca-dor =

Rendimento r 33© mg <73?5% do valor teórico) CCF sistema I s R_? = ©?34 CCF sistema IV s = 0,74 < + ) BAR-EM § m/e 634 <11 + K) p m/e 672 (M 4 2K - H).

XXV ácido N-t-butoxicarhoni1-L-(4-snetoKÍ)fenilalanil—C 2-R s S-amina-2-—-C2--< i 53~ditiolano) 3 }aceiiI-”4S~amina-3S~hitíroxi~5~cic:iohsxij.pan--· tanoico

0 composto em epígrafe foi obtido de modo análogo ao que foi descrito no Exempla XXIV a partir de 79Θ mg (1518 ramal) t de uma mistura d© compostos do Exemplo XXII e do Exemplo XXIII»

Rsndirasnta § 56© mg (73% da vaiar teórica) CCF sistema Ί s Rf = &s18 CCf sistema ϊ 11 s R„ := 0n©5 T CCF sistema IV 5 Rf = €· 3 82 <+) BAR-EM 5 m/e 66© (H + Li)% m/e 676 <n + Na)

Exemple XXVI N”t-buto?£icarbonil-2-R5S~amino~2-I2-< 1 s3-di tio lano) 3-aceti 1--48-amino-3S-hidroxi-5-ciclohexi1pentanoi1-<2S-metiI)foutilaraida

SV^S

Η

OH

Βο c-NH-^CONH-^vX^ONH

R, S

0 composto em epígrafe á obtido de modo análogo ao que foi descrito no Exemplo I mediante ligação por anidrido de ácido propanofosfónico de 3,8 g (12 mrnol) do composto do Exemplo IX s 4 g (14,4 mrnol) do composto do Exemplo V.

Rendimento ·: 5,5 g (82,5¾ do valor teórico) CCF sistema Ϊ ; CLftP sistema II; (·*) 8Ακ·"··Εί1 !

Rf =0,5 (os isõmsros não podem ser R, = 13,38 min diferenciados) x· m/e = 545 (H + H); m/e 552 (íl * Li); m/e = 564 (Μ * Na) êMmÃQjowilHidrocloreto do 2--R, Ssmino-~2~ΐ2-(1,3-dií-iolano) 3-ac et i1 -&S- sms ηο-38-hidroxi-5~c i c lohexi Ipentanoi l-~(23-~met i 1 )-~buii lamida

H

HC1 x JL J | ^ NH ONH^v^^C ONH^ *R.S 4 |

OH 0 composto em epígrafe é obtido de modo análogo ao que foi descrito no Exemplo II mediante a remoção do grupo poríecior Boc de 5,4 g (9,9 mrnol) do composto do Exemplo XXVI.

Rendimento 4;2 g (35% do valor teórico) CCF sistema III ; R, = 0,4Í (isómero A) R# = 0,35 (isômsro B> N-e tox i -c s rbon i 1 -L- f en i 1 a 1 ar! i 1 - C 2-8-am i no-2- l 2- (1,3·- d i t i o lano )jj -acsti I-48-amino~3S-hidroxi-5-c ic lohexi Ipsntanoi 1--(28.....meti 1)-buiilamida (Exemplo XXVIII) N-aioxi-carboni I.....L-fsni i aIo n i1-í2-E-amino.....2-·I2-( Ϊ , 3-· di tioiano) 3 -acetil-48-amino“3S~hidroxi-S~c iclohexi Ipentanoi 1--(2S-msti 1 >-butilamida (Exemplo XXIX)

® S = Exemplo XXVIII (isómsro A) t R = Exemplo XXIX (isómero B)

Os compostos em epígrafe foram obtidos por separação cromatográfica (de modo análogo ao que foi descrito no Exemplo IV e no Exemplo V) a partir da mistura de isòmeros obtida de 2,1 g (4,7 mmol) do composto do Exemplo XXVII e de 1,3 g (5,6 mmoi) de M-etoxícarboni 1-L-feni lalanina de forma análoga á do composto do Exemplo ΪΙΪ. Dá-se primeiro a eluiçao do Exemplo XXV1I1 (isómsro A, isómero S), e depois a do Exemplo XXIX (isómero S, isdmero R). Obtém-se adieionaimenie uma fracçlo misturada do Exemplo XXVIII e do Exemplo XXIX.

Dados anal íilcog...pam,..c?.....Exi^lo.......Ml......LisÊmi.o^È.1 CCF sistema I i R, - 0,68 r

ClAR sistema III R. ~ 13,27 min x- <-í·? 8AR-EM ! m/e 671 <11 ·*· Li); m/e = 687 <M + Ma).

Dados.......a nal.1 tj. cos......Eira......o.....£xemg.lo_.....XXl.X^...y^sn.sro.„.B.I CCF sistema I ! R^ = 0,65

ClAP sistema II! R. = 11,61 min x· <·!·) 8AR-6I1 í m/e 671 CH + Li)} m/e = 687 » CM * Ma). fiteaatElaJ?X,llK......§,.....feaaaelfl......KM1 M-i-buioxicarboni l-L~(4-maioxi )feni ialanl i-£2~S~amino~2-I2-< 1,3-d* tiolano)3 )-acetil-48-amino-3S-hidroxi~5-c i c iohexi Ipen ta no i 1--< 23-meti I >-buti Iam ida (Exemplo XXX) N“i--"bL4i.oxicarboni I-L.....<4.....meioxi )feni lalani 1 -í2-R-amino-2-i2.....i 1,3- di tiolsvio) 3 )-aceti I-4S-amino”38-rndroxí-5-e í clohexílpsntanoii--< 28-m©t i1)~bu t i1am ída (Exemplo XXXI)

J

4 S = Exemplo XXX Cisómero A) $ R = Exemplo XXXI Cisômero B)

Os compostos em epígrafe foram obtidos oe modo análogo ao qye foi descrito no Exemplo XXVII e no Exemplo XXIX a partir cio composto do Exemplo XXVII e de N-t-bytoxicarooni 1-2-(4--meioxi )— fenilalanina. Obtém-se também uma considerável íracçáo misturada.

aiãQS-^nallMcos^m^.....Exemplο XXX CCF sistema 11 ; = 0S 38 CLAP sistema II í RL = 22; 80 nun í+) BAR-EM ; m/e = 723 ui ·*· Li) Dados analíticos para o Exemplo XXXI CCF sistema II l Rf = Os 34 CLAP sistema II 1 R 4. - 22; 80 m i n (: > BAR-£11 ; m/e 723 <11 + Lí) S^mElp.....MMl sl.

th-etoxicarboni 1-1.--( 4-meioxi ) f eni Ialarii I--12-S-amino-2·-·(2·- ( í f3~ ai t i o 2ano>3 }-aceti I-4S-amino™3S-hidroxí'"''5-c i cíohsxilpentanoil-“•L-xsoleuc .ina-(2-picol i 1 )amida (Exemplo XXXIII iM-stoxicarboni l-L-(4-m£toxi )fsni lalani 1 - {2“-R-amino~2-£2-( 1s 3-di iioiano) j j~~b.cs·ti i-4S-amino-3S-hidroxi-S-c ic lohexi Ipenianoi 1-L-iso1eucina-<2-picolil)amida (Exemplo XXXIII)

£ S = Exemplo XXX IIíisõmero A> x R = Exemplo XXXIII (isómero Θ)

Os compostos em epígrafe foram obtidos por separacao rromatográfica (de modo análogo ao qwe foi descrito no Exemplo IV e no Exemplo V) a partir da mistura os isõmeros sintetizada a partir de N.....eioxicarbonil-L-C4-meioxi>-fenilalanina e do composto do Exemplo II de forma análoga ao Exemplo III. Dá-se primeiro a

e depois s oo eluição do Exemplo XXXII Cisómero A, isómero 8), Exemplo XXXIII (isómero B; isómero R). CCF sistema III ! Rf “ 0,72 - CCF sistema IV I Rf = 0,79 CLAP sistema II ! Rf = 7,62 min ( + 3 BAR.....Eli ; m/e = 829 CR + H); m/e = &Sí CM Dados analíticos para o Exemplo XXXIII Cisómero 8) CCF sistema III ; R... ™ 0,69 CCF sistema IV ί Rf = 0,73 CLAP sistema II ! R. =6,10 min ΐ·

O) BAR-EH m/e 829 CR 4· H)j m/e = 851 CR + Na)

Exemplo XXXIV Dí~hidrocloreto d© L-fenilalanil-í2-R,8-amino-2-1.2-(1,3~ditiola- no)3}-aceti 1-48- amino-38-hidroxi-5-c í c I ohex i I pen ia no i 1~L.....isoleu- cina-C2-pi c o1iI)am i da

0 composto em epígrafe é obtido ds modo análogo ao =ue foi descrito no Exemplo II mediante a remoção do grupo portector Soc do composto do Exemplo III ou de uma mistura de compostos do Exemplo IV e do Exemplo V.

CCF sistema IV R^. = 0,43 Cisómero A, isómero-S) R..v = 0,40 (isómero 8, isómero-R)

liSâMEliL ÂãM LHt-ouioxicarboni i-L-seri 1.....L-íeni laiani I.....{2.....R; S-amino-2-L2·-(í, 3.........

di iioisno) j }-aceii I-4S o.mi no 3S hidroxi 5 c i c lohexi Ipentanoi I-L isoIewc ins-(2-pi c οIiI)am ida

0 composto em epígrafe é obtido de modo análogo ao qus foi descrito no Exemplo III a partir de N-t-butoxicarboní1-L-se-rina e do composto do Exemplo XXXIV.

Dados, anal áticos CGF sistema II ; Rf = 0,16 (. isómero Ai i : = 0;14 ( isómero B) CLAP sistema II ; RL = S; 04 < isómero &} R; = 5,70 (isómero Ai (o> BAK-EH : m/e = 314 <M + H),‘ m/

gxen^lQ-JLXXVI x.....L3--(3.....pí r idi 1 ipropioni 13-1.-f sni laianiI-£2-E-amino-2.....í2-(í, 3----cU. tiolsnoi 3 3-sceti 2-4S-amino-3S-~hidroxi-~S-~c i c lohexi ipsntanoi I--1.--i so1euci na-(2-p í c o1iI)am í da

Dados analíticos CCF sistema III CLAP sistema II í ·*·) BftR"'£rl

Rf 0 5 47 Rt.= 6,36 min m/e 860 (íl + H); m/e = (M -í- Na). £>m!ElO-MWl és te r meti I i c o de M- t-buiox i c a r bon i I -L- f en ilal sn il-i 2-R, S-am í no-~2~ -£2~< í .·.3™di tiolano) j}™ac:eti I""4S""amino“"3S"-hidroxi-"5-’C iclonexí ipen™ tanoiI-L“isoleuc i na

0 composto em epígrafe á obtido de modo análogo ao que foi descrito no Exemplo VIII sendo usado o éster metiiieo de L-Ieucina em lugar do éster etílico para a síntese dos compostos correspondentes dos Exemplos 6, 7, VI e VII. 0ste_a]3âiáÍi£2S. CCF sistema I : R,, = 0,88 (isómsro A, ísómero-S) R.s = 0,78 (isómero B; isomero-R) (-:·> BAR-Efl ; m/e = 7&1 (M + H>; m/e = 773 íil * tía); m/e 6SÍ

J

IxiffiEio......fflVIii Éster metálico de N-etoxicarboni 1-L-feniiaiani 1-C2-R.-8.....smino-2-L'2" .....C 1,· 3-di tiolano) 3 3-aceti l-4S--amino~3S-hídroxi"5-”í: ic lohexi ipenta·- no i1-L.....isoleuc1 na

0 composto em epígrafe é obtido de modo análogo ao que foi descrito no Exemplo XXXI sendo usado o éster meti isco de .....leucína em lugar do éster etílico para s síntese dos compostos correspondentes dos Exemplos 6, 7, VI e VII.

Pados jniiiticos CCF sistema I ·: Rf = 0,81 CLAP sistema 11 -; Rt - 11,66 \ = 14,08 (·*·) BhR-£M 1 m/s = 723

Cisómaro A, isómero-R) min Cisómaro B) min Cisómaro A) CM + H) ,* m/e = 745 <M + Na); ixgielQ......tUM^MÊÊ.EÍQ.,J.ir. M-t-butoxicarboni 1-L-feni lalani 1"·{2·"··3·"·5η·ίηο·"·2·“ί2··"·( í3- diiiola- no)3 3.....scsti l""4S“amino-"3S"hitíroxi-5-"C iclohexi Ipentanoi !-· -L-lsuc ina-C3"'”aminometi 1 )benzi iam ida (Exemplo XXXIX) M-t-butoxicarboni Í-~L-~í eni iaiani l-C2-R-amino-"2“{r2“C 1, 3“· di tiola no) j 3-acst i 1 -48-am i no“3S~h iúroxi~-5~c icl oh&xi 1 pentano i 1 -L.....leucina-"C3~aminometi 1 )besi2i iamida (Exemplo XL)

$ S = Exemplo XXXJX (isómero A) I S = Exemplo XL Císómero B) 4

Dissolvem-se O, 35 g <1,23 mmoi> do composto do Exemplo/ e 2,50 ml (13,35 mmoi) de 1,3-bisaminometiIbenzeno em 30 ml de ΟΗ,ΧΙ.-,. A mistura ê arrefecida paea -20°C e adiclona-se 1,1 mi ui. de uma soiucfao a 50% de anidrido de ácido n-propi1fosfónico em CH^,ClCHoechst Atí). A mistura e agitada durante a noite á Λ» Ui. temperatura ambiente, adicionam-se 300 ml de éter díetíiico er o precipitado á separado por ííliraçáo com sucçáo. 0 resíduo à agitado maís uma vez com 300 ml de éter dietilico e o precipitado è separado por f i1 tração com sucção e seco. 0 proouto bruto <1,86 g) é separado sobre 300 g de gel de sílica 60 (Merck; Ari. nz 9385) 0,040-0,063 mm (malha 230-400) usando um gradisnte escalonado de cloreto de metiieno/metanol/solução aquosa de Nrt. (25%); 100/0/0; 39/1/0,2; 38/2/0,2; 37/3/0,2 e 35/5/0,2 <0,5 1 c ada).

Faz-ss primeiro a eluiçâo do Exemplo XXXIX (isómero A, isómero-S) e depois do Exemplo XL (isómero B, isómero-R).

Mlãljjy£Q^egllSL_o_^x^Elo__MÃIÂ-iJs^^£^--â2· CCF sistema III ; R.f = 0,32 (-}) BAR—EM ; m/e “ 855 (M + H); m/e — /bo CLAP sistema II ·: sem eluição ou com um pico muito largo

Qagtaa-.SBaliMcaa-EftEa............Lisàmm^-Bl

CCF sistema ΙΠ \ R, = Uf2S (.-?') BAE—Eii ; m/e = 8SS (li + H)· m/e :™ 7S5 CLftr sistema II ; sem eiui cio ou com um pico muito largo

......fikl.......t......S^I»EM.JkLI M-sioxicsrboni 1-1.--/eni lalani 1-f 2~8“Smino-2~ÍI2--í í , 3- di tiolano) „1 }..... -aceti 1 -4S~am i no-3S-h i drox i -5--c i c 1 ohsx i Ipsnianoi i~ .....L-ieucina~C3™aminometi 1 Ibenzi lamida (Exemplo XLI) λΙ·“® tox i ε a r bon i l-L~-feni lalani 1 ~ C 2-R-am i no-2- C 2~ (1,3- di tio lano 1 ΐ}- .....aceti i-4S"-amino“3S--hidroxi"~5-c i c lohexi Ipentanoi 1- L.....1sucina™ C 3™am i nome til)benz ilamida < Exemplo XL Π 1

•t S = Exemplo XXXIX (isómero A) x R = Exemplo XL (isómero 81

Os compostos em epígrafe sáo obtidos de forma análoga I do Exemplo XXXIX e do Exemplo XL a partir do composto do Exemplo XI.

Pados...... CCF sistema ΙΪΙ ; R, = 052β Cl„.AP sistema II I R, = 12S sin :>> BAR--EM ; m/e = S27 <H + H>; 843 (f! + lia)

Dados analíticos para o Exemplo XL1I Clsómero......8>. CCF sistema 111 ! R^ = 0,29 Cl..AP sistema II ; R.s. = ÍOS min < + ) BAR--EH I m/e = 827 (M + H); 849 (M ·* Na)

cxmplo......Xtlll e Exemplo X.LIV N-etoxicarbon 11 -L-fenilalanil-C2-S-*amino-2-i2-11,3- dit-iolano') J')- .....aceii Ι-48-ami no-38.....hidroxi-S-c i c iohsxi Ipsntanoí 1- .....L-iso1eucinoI (Exemplo XLIII) N-eioxi carboni i~L-f eni laiani l-í2-R-amíno-2-f2-< í , 3- di tiolano) 1j···--aceti ].-4S~-ami.no”3S”hzdroxi“5“C i c lohexí Ipentanoí I-L-isoleuanol (Exemplo KLIV)

x S = Exemplo XL111 Cisômero A) £ R = Exemplo XL Cisómsro B)

Os compostos em epígrafe obtêm-se de forma análoga â do Exemplo 3 ou â do Exemplo 1 por ligaçso do smdrido do ácido n-propsnofosfônico do composto do Exemplo XXIV com hicP-ocloreto de L.....isoleucána como componente amina. A preparação dos estereo- isómeros puros efectua-se por cromatografia sobre gel de sílica (oe forma análoga â do Exemplo IV e ao Exemplo V) ou, alternativamente; também por CLAP de fase invertida em fases C0 ícoluna, por exemplo, Merck Hibar, Cat. N2 51441, LiChrosorb, RP-8 (7 ;.;m) s dimensão 250-2S) usando misturas de aceioniiríio/água. £”í *:;.v

íraccSes contendo o produto da cromaiografia sobre gel de sílica sSo combinadas e concentradas num evaporador rotativo, ou por cromaiografia de fase invertida, o acetonitrilo é removido num evaporador rotativo e o produto é liofilizado.

fisdoi.....-ãmil.M.cos.....P.a.ra.. o itg&mero â..Lisóme.ro-S> Exemplo XUII CCF sis tema I ! R “-· 0,54 CCF sistema II d = 0,44 CCF sistema IV * 0, S4 CLAP sistema II ‘ Rt = 7,10 min BAR--EM ! m/e = 5SS (11 m/e = 717 (M Na) UMdos anâllMcas. ...gara... o iMÔmsro S_..,(j sòmgr o.r R, Exemplo XLIv 1

Rf 88 0, S4 Rf = 0,42 Rí = 0,54 R, = 5,71 m i π m/e = SSS CM ip XLVI.

CCF sistema I CCf sistema II CCF sistema IV CLAP sistema II C ) E>AR™EM dster isopropí 1 ico de W-etoxicarboní 1--L.....fenilalani 2“£2~S~amino-~2- -(72-( l, 3“ di tiolano) Jl-acsti l“-4S-amino“-3S-hidroxi-™S“-c ic lohexi 1- psnianoil™ -L-isoleucin* (Exemplo XLV? dsier isopropálico de N-etoxicarboni1-L-fenilalanil-t'2-R-amino--2~ .....l2-< í , 3™ di tiolano) 3}-acstí15.no--3S--hidroxi-5-c ic lohexí Ipente vio i I- L-isoieucína (Exemplo XLVI)

OH ONH-^^ONH^^^CONH^v^O—< ·?·' S ·“ Exemplo XLV (isómero A) 4; R = Exemplo XLVI (isómero 8)

Os compostos em epígrafe obtêm-se de forma análoga á do Exemplo 3 ou á do Exemplo I por ligação do anldrido do ácido n-propanofosfónico do composto do Exemplo XXIV com hidroclorsto do éster L™1so1euc1 na isopropílico como componente amina. A preparação dos estereolsómeros puros efecius-se por cromatografla (tal como foi descrito no Exemplo XLIII e XL.IV).

Dados analíticos para o isómero A (isómero-S, Exemplo XlV) CCF sistema I * = 0,68 CCF sistema II ; ~ 0,57 CLAR sistema 11 27,6 í m i π ( + ? BAK-EM í m/e * 751 (11 + H); m/e = 7 73 (M ·* Ma ) Qãdos_analíticos ..esra o isómero. 8 i isómero-iR., JSiã-Eio ILMIi

CGF sistema 1 CCF sistema II CLAP sistema II C + > SAR-EM *1 *1R, 0 ; t/B 0,57 22,51 m i n m/e = 75 í CM + H>; m/e 773 CM + Ma)

EjcamBlQ-XL-VIl m.....Exemplo. XLViil

M-etoxicarfooni I-L-f sni lalani 1.....£2.....S.....amino-~2.....(2--( í , 3- di tiolano)J -aceii I-4S"-amino-~3S--hidroxi"'-S“C ic lohexí Ipsntanoi i--L-isoisuc 1 ns-L-val ina-(2-pi col i 1 lamida (Exemplo XLOII) N~®toxi c arfooni 1 ~L-fsn 11 a 1 ani 1 -£2-R-amino.....2-·£2-(1,3-- úiííoiano 15}·- -aceti 1 “4S~sm 1 no-3S-h i d roxi-5-c ic lohexi Ipsvrtanoi .ΙΕ-ísiols-yc ina-L-val ina-(2"-picoll 1 >amida (Exemplo ΧΙ,νϊΠ )

3 S = Exemplo XLvII (isômero A) $ R = Exemplo XLVIII (isômero 8)

Os compostos em epígrafe obtêm.....se de forma análoga à do

Exemplo 3 ou è do Exemplo I por ligação ao snidrido do ácido n-propanofosfónico do composto do Exemplo XX JU com di-hidroclore..... to do éster L-isoleuci1-L-v®1ina-(2-picoli1)amida como componente ar-una. A preparação dos esiereoisdmeros puros siscius-sa por cromatografia (tal como foi descrito no Exemplo XLIII e XLlv). y.ádos........a 01.1111 c OS.......pa ra.......o.......i&gmiouÊ_LÍfiáBHEEg=£>........ExjgjjlPj. O.......x L 11111. C· l.·'··' sistema I Rf = 0,52 CGF sistema ΪΙ Ef = 0,40 CL Aí-' sistema ΪΙ Rt = 3,43 min ("i-) BAH”Erl m/e = 333 (li

\

.........iiMmerodi,.........&<sael^J.LMLIÍ2. CCF sis tema I ; R ss * í 0,52 CCF sistema II 0,40 CLAr sistema 11 ; Rt= 8,05 (*·> BAE-En : m/e = 838

Í^IíSEÍJ2......AL.1.X........e.......Exemplo L N-etoxi carboni I-L-ísni laiani l~C2-S-amino-"2-"t2-( 1,3-· di iiolano) 3 }..... --aceli 1--43-¾¾ ino-SS-hi d roxi-S-c ic lohexi Xpanianoi l~ .....(2-~meti 1 )propi iamida (Exemplo XL.IX> N--sioxi carboni I-L-íeni iaiani i-£2-R“amino''"2“C2“( 1, 3- di tiolano > 5 }·· -•••acet i i-"43"-amino'"3S“-hidí‘oxi""S'"”C i c lohexi Ipantanol I-~"(2~-meti 1 jpropi Iamida (Exemplo XL)

$ S = Isómsro A (Exemplo XLIX) $ R = ísómero B (Exemplo L>

Os compostos em epígrafe slo preparados de modo análogo ao gue foi descrito no Exemplo 3 ou I mediante ligaçdo por anidrido de ácido n-propanofosfônico do composto do Exemplo XXIV usando (2-meti1Ipropilamina como componente amina. A preparação dos esisreoisómeros puros é levada a caoo por cromatografia (tal como se descreve nos Exemplos XLIÍí e XLIv).

Dados anal í ticos.......para.......o......isáiMro.....A__( i$ó®miQ-S,........Exemplo JCL1.X1 CCF sistema I ! R¢-0,66 CLAP sistema ΪΙ i R.,. = 8,84 min (*> BAR-EH ! m/e = 657 (11 ·'· Li) QM2S„ãnillAÍ£aà_ei.r..§......o......isámero,.....,8_ CCF sistema I I R.f = 0,66 CLAP sistema II ! R.,. = 7,74 min (·ί·) BAR-Erl l m/e = 657 í!1 + Li)

s&êmLaJJL N-et-oxicaròoni I-L-fsnx lalani 1-(12-8, S-amino-2-L2-( 1,3- di tiano)J 5·· -aceti 2-4S“amino~3S-”hidroxí--5“”C ic lohexi Ipentsnoi 1~ .....L-isoieuc ins-~(2-~picoÍ 11 )smida

0 composto em epígrafe é preparado de modo análogo ao gue foi descrito no Exemplo 3 ou I mediante ligação por anicirxdo de ácido rr-propanoíosfónico do composto do Exemplo 17 com o composto do Exemplo 3 como componente amina.

Dados analíticos CCF sistema 1 i «f = 0 3 32 (os dois isómeros nao CLAP sistema II 8; 34 mi vi podem ser difsrencxsdos> <··:··> BAR-Έίΐ : m/e 813 (π -í- H) m/e 836 (ri ·* Na)

Exemplo......LII e Exemplo LI II N.....t.....butoxi carboni lH.-(4“meioxi )íeni lalani 1.....C2-S.....am:j.no-~2~I2.....< 1,3- tíi iiolano) 3 }'“aceii !”4S"-amino""3S"-hidroxi“-S“”C ic lobexi ipsnianoi l---ímorfol ina)amida (Exemplo LII) N.....t--b;,r!:-oxicarboni l~-L“(4~meioxi ) f eni lalani 1 -{2“E-amioo-2-C2·-( í , 3-· di tioiano) 3 }~aceii l-~-4S~amino~-3S-hidroxi-~5-~c í c lohexilpentanoil--(morfoiinalamida (Exemplo LIII)

ON 0 # S = Isómero ft (Exemplo LII) $ R = ísómero 8 (Exemplo LUI)

Os compostos em epígrafe são preparados de modo análogo so do composto do Exemplo XXV usando morfoiina como componente amíns. A preparação dos diastereómeros puros é levada a cabo por cromatografia (tal como se descreve nos Exemplos XLI11 e XLlV).

Dados analíticos para o CCF sistema I l R,. r CL AP sistema 1.1 : > (Ό BAR™£M ! m/e

IsónígrcL-â_____(Αμ2ΠΜΕΩ::§.,.......E£&ssrÍ£__L112 0; 39 7,7S πϊίπ = 723 (íi + H) J m/e = 723 (M + Li); m/e = 74S (n * Na)

Qfldgl.....i«lfiili££§,......gaga.....o......isómero......B_____(Isómoro-R, Exwaplo LI1J? CCF sistema I = 0;36 · CLftP sistema II ; r_. = 7,07 min (·*·) SAE--EH ' ; m/e = 723 <M + Η) ΐ m/e = 723' (li '«· Li) ί m/e = '/4 b (íi -s- Na) s-agasB-i Q-LIV.....o iJ<sap 1 o.......LV. N-t-bwtojíicarboni l-L-(4~mei.oxi )feni lalani 1-(2-8.....amino.....2.....112--( I;3- di tiolano) 3l-acstí I.....iS.....amino.....38-hidroxi--S-e i c lohexi Ipenianoi 1- - C4'-meii I )buti Iam ida (Exemplo LIV) N-t-butoxicarboni I--L“(4--meíoxi )feni lalani l-Í2-R~amírio-2~£2-C 1; 3-di tiolano) 3 l-aceii l~4S-amino~3S-hidroxi-S-c i c lohexi Ipentanoi ].- -(4-meti1)buiilamida (Exemplo LV)

$ 8 - Isómero A (Exemplo LIV) $ R = isómero B (Exemplo LV)

Os compostos em epígrafe são preparados de modo análogo so do Exemplo 3 ou I mediante ligação por anídrido ds ácido yp-propsnofosfônico do composto do Exemplo XXV usando 3-metiIbutii~ amina como componente amina. A preparação dos estereómeros puros é ievaaa a cabo por crornatografia (tal como se descreve no Exemplo XLIII e XLIV).

BaStel..........e.ã£g.„„o isómero 3___<Xs,êmem-Sj.....,£xeme.lo......LiV>. CCf sistema Π ; R, = 0,38 τ CLAP sistema 11 ; R.t = 21,14 min (*·) SAR-EH ; m/e = 729 (n + Li > j Qãg£*JàBãLi3fl£m......RM^.-SlA£ÚM!ííX£-.&____(.Isâmero-e.·,·.. Exemgl o......t V.)

CCF sistema ϊΐ l Rs = 0,3S CLAP sistema II ; R.,. = 21,14 min (<·) BAR.....EH ; m/e s~ 723 (A -;·· Li); £,2<^ΜΞ2^ίΜ^^Ε2^Βΐο.....LMil ia-t-butoxicavboni I-L-í4~meioxi >íeni ialani 1.....í2-8-smno-2.....?..2.....(i, 3·- di tiolano) j }-acsiii“4S“^mIno-38-hidroxi~-5-c ic lohexi 1 per. t ano i 1~ "n-hsxilamida (Exemplo Lvl) W-~i.....buiox i ca rboni 1-1.-( 4-msioxi )feni Ialani I-· i 2-fi-sm i no-2-L 2-( 1,3- di tiolano) 2 }™&ceti l-4S-amino-3S-hidroxi-S-c ic lobsxi Ipenianoi I™ -n-hexi iam ida (Exemplo LvII)

í S = Isómero A (Exemplo LV11 t R := Isómero B (Exemplo LVíI >

Os compostos em epígrafe seo preparados de modo análogo ao do Exemplo 3 ou I mediante ligação por anitiriao de ácioo n-propanofosfónico do composto do Exemplo XXV usando hidrocloreto de n-nexilamina como componente amina. A preparacao dos 34 estereómaros puros á levada a ca do por cromatosraf ia (tal como se descreve no Exemplo XLIII e XLIV) ,

fóasfeffi.....arfoU-Uias.....Eã.r_ã......SLlaflitEa.....B__Us&ngrozS*.....-Bsgmgia.......LVII CCF sistema ΙΣ ; R^ » 0,45 CLAP sistema II ; R, = 34jii min Ϊ- <·*·) .....EM ; m/e = 737 <M H); m/e = 743 (M Li); m/e -· 7SS (1-1 -s- Na)

Dados analíticos para o.......isómero. B_<.is6me.ro~B‘..*-......ΕμηβεΙα.....LM111 CCF sistema II ,· R « 0,41 CLAP sistema II ; R± - 34,li min

í + > &AR-EM ϊ m/e = 737 <11 + H)j m/e = 743 <M + Li > J m/e ;= 759 <11 * Na)

Emm&M...LVin.......e Exemplo......LiX N--i-buLoxi c&rboni l™L~(4~meioxi )f eni lalani 2--£2-5:-amino-2--L“2--< 1,3™ di tio lano > 3 }-acetí l-~48-~amí no~~3S~hidroxi~S-~c ic iohexi Ipentanoi I™ I“’(W.....DsnzíIpipsrazina)amida (Exemplo LVIíí) N” t-buioxicarfooni l~L~(4-m©toxi ) f eni lalani l"~C2-"R™amino™2--L2-"< I; 3™ di iiolano)3 }-aceti 1 -4S-amino-3S-hidroxi-S-c i clohexi Ipsnianoil--(tHix-nzi ípiparazinalamida <Exemplo LÍX)

OH % S = Jsòmero A (Exemplo LVIII) $ R = Isámero B <Exemplo LIX)

Os compostos em epígrafe sêo preparados de modo análogo ao do Exemplo 3 ου 1 mediante ligação por anidrido de ácido n-propanofosíônico do composto do Exemplo XXV usando N-benzilpí..... perazina como componente amina. A preparação dos sstereâmeros puros s levada a cabo por cromaíografia (tal como se descreve no Exemplo XLÍí! e XLlv). ftrao*.....analíticas......g.a.ra.......p_i«Simar.Q. A__(jjBómsr.o-S^^ CGF sistema II 1 R.í; 0,44 CLAP sistema II I Rf= 31,46 min C + ) BAR-EH ! m/e = 818 (11 + l:i>; .....B............C ÍS.óme r o-R,.....JCxemplo. _JJL X). CCF sistema II ' R,r = 0,44

Cl.AP sistema II ; R4. = 29,97 min (·*·) EiAR—Eíl l m/e ~ 8Í8 ÍM + Li)·

&2£®SEÍ2_LÍL lleti I-2-R-®mino-2-£2-( 1,3-di tiolano) 3-aceti I-~4S“amino~3S-hidroxi“·· -5~c i c. iohexi Ipentanoato

0 composto em epígrafe é obtido por separação crornato-gráfica da mistura de isémeros (base livre) do Exemplo XIX sobre gei de sílica usando um gradiente em degraus de cloreto os meti leno/meíanoi/solução aquosa de NR.., (25¾) tal como se oescrsve no Exemplo XXXIX e XL. Dá-se primeiro a sluiçáo do isómero-S, ospois a do Exemplo LX íisbmero-R).

Dados ana l £ fc i e os CCF sistema III R^ = 0,34 (·*·> BAR-EM i m/e = 39i (M + H>,‘ m/e = 337 (11 -?· Li).

Meti i-M~-i--butoxi carfooni l-2”R-amino.....2--(2--( i, 3-di ti o lano) 3.....acet í I — 43-am i no~3S-h i drox i--5--c i c1ohex1ipenlanoato *——

0 composto em epígrafe é obtido de modo enólogo ao do Exemplo 5 fazendo reagir o composto do Exemplo L.X com carbonato de di-i-butilo usando triet-ilamina como base e dioxano como solvente (de modo anôiogo ao do Exemplo 14). A mistura de rescção é diluída com água e ácido clorídrico IH e extraída com cloreto de meti leno. A fase orgânica é separada, seca soera sulfato de sódio e concentrada. ΰ produto em bruto assim obtido ê purificado por croma togra.f ia “flash" (sílica, cloreto os meti leno). R... = 0,83 R, = 7,06 m i n t m/e = 437 (n * Li);

Dados analíticosl CCF sistema II CLAP sistema II O) BAR-EM

Exemplo L.XII

Acido N- t-bu tox i c a r fcon i 1 -"2B™am 1 πο-·2~· í 2- (1,3~d itiolano)jacetii ~4£>· -amino-SS-hidroxi-S-ciclohsxi1-psntanóico Η

ΓΊ 's

*R Βο c -ΝΗAcoNHA^c00h

4 I OH 0 composto em spígrare é obtido de modo análogo ao do Exemplo X ou Exemplo XI por hidrólise básica do composto do Exemplo LXI <2;:L gj 4f2S mmol) e processamento do modo usual .

Rendimento l 1,SS g (9S;6% do valor teórico) CCF sistema IV ; R. = 0,57 (·;) BAR-EH m/e =- 477 (M + H),‘ m/s 421 j m/e 377.

Exemplo.....LXIII nr-t-butoxi carboni l-2R"amino-2"-C2“( 1,3-di tioiano) .1-®csti 1.....4S~smino·- ~3S“hidroxi~S--c ic lohsxi Ipentanoato

0 composto sm epígrafe é obtido de modo análogo ao do Exemplo 3 ou do Exemplo 9 mediante ligaçSo por anidrido de ácido n-propanoíosfónico do composto do Exemplo LXII com hidroclorsto de L-ieucinol como componente amina. 0 produto em bruto e purificado por cromatografia (cie modo análogo ao do Exemplo IV e Exsmplo V).

Dada»......anali ticos: CCf sistema III ‘ Rf = 0 ; 65 CLAP sistema I í : R, = T. 6,58 min < + ) BAR-EH ; m/e = 582 Cn

ImiísííiJJIíí N.....t.....butoxi carboni 1.....L.....(4-mstoxi >f sni lalani i“t2~R-amino~-2"-;.2-íL 1; 3— dl ídoiano)3lacetil-4S-amino-88"hidroxí-o-c 1 clohexá ipenlanoi1.....L- I euc i no i

OCH

0 composto sní epígrafe é preparado partindo do composto do Exemplo LXIII por a) remoção do grupo proiector de Boc (de modo análogo ao do Exemplo 4) e b) rsacçêo do hidroclorsio assim obtido com Boc-L-"C4-metoxi >f eni lalanina (de modo análogo ao do Exemplo XVI a XVII). 0 produto em bruto é purificado por croma-iograí ia.

Rf = 0;58 R., " 12,8S min m/e = 759 CM + Li)]

Pados jsn®micosl CCf sistema IV CLAP sistema II (··;· > baív-eh

Exefflglo......LXV 2-R-amino-2-í í; 3-d.i tio lano) li-aceti i-4S"amino”3S“hidroxi”~5-c i cio h· exi 1 -pentanoi 1 -L-iso 1 eucina-(2-picol i l )a?úida

0 composto em epígrafe é obtido de modo análogo ao do Exemplo LX por cromaíografia partindo da mistura RsS do composto do Exemplo II. Dá-se primeiro a eluição do isômsro S, depois a do isôssro R (Exemplo LXV? . gados.....analit-icos; CCF sistema 111 =' = 0;33 <"í·) EiftR-En ; m/s = 753 <!H -s- H)j m/e 602 íM Na) Ê2SiíaElfiJJívi

Di-hidroc ioreio de L-C4-meioxi )f eni lalani 1 -C2~R~amino-2-C2.....< l 3- -di tioianol3 íacetil-4S-amino-3S-hidroxí-5.....c i clohexiIpentanoi1-L- -iso 1 suc iria-(2~picoli1)amida

OCH

0 composto em epígrafe ê obtido de modo análogo ao do

Exemplo XXXIV por remoção do grupo protsctor de Soc do composto cio Exemplo XVÍI.

Dados......Mia.ll.il.co5 í

Rf = 0,38

CCF sistema III £>:;§mElo.....lxvií

Di-hidroc ioreto de L- í 4-metoxi Ifeni lalani S-asnirto-"2-Z2~( 1,3- "••di 11 ol ano) 3 laceti l“4S"-ami no-3S-h idr oxi-S-c i cl ohexi Ipentanoí 1-1.-····· 1 so I eoc i na- (2-p i c o 1 i 1) am i da OCH HCl*

0 composto em epígrafe é obtido de modo análogo ao do Exemplo XXXIV por remoção do grupo proisctor de Soc da mistura dos compostos do Exemplo XVI s XVII. BâáSS.....MffillMSfig ί CCF sistema III ' ; =0,42 R.,. = 0,38 £l<gMPl.os_lJVl..II........a.......LX1VI (Quadro 1)

Os Exemplos do Quadro 1 são preparados oe modo análogo ao do Exemplo 3 ou I mediante ligação por anidrido de ácido vr-propanoíosfónico do composto do Exemplo XXV com os compostos smina correspondentes (de modo análogo aos Exemplos LI! a LIX). A purificação s/ou separação dos sstsreõmeros à levada a cabo por cromatograíia (tal como se descreve nos Exemplos XL1II e XLIV).

{

Quadro

V)

*** fl) X X 2 + + + 2 2 2 cn tr> N N in n N N N Q) Q) 0) — — E E E

c c c •H •H •H E E E* 'T O o o o o ·. ·> ·* n in •X/ N 2

I

QQ < U. Η Η td e

<U +5 m •η κ CO I u cw o «I h ►4 td u >

h-4 ] | O u 1 π o Jr N o o «S «0 ttí g °?| O O O OJ £h +j °l > f-< *—í CQ •H 00 gl >| l-H cn . < 2 α o o ** ^ υ “ < 2 Γ O 2 2 I 2

3 1 to • fafl 1 ·% -P •H oj 2 2 G <h «d| O C O) o o td| »_" O u\ 1 <- 1 ° 1 o '-f 1 í, a 1 *-< Ό B I > > cd ω I X X 3 K I X X θ' « 1 u J (Quadro 2>

Exemplos LXXyil.......a LXXXi

Os exemplos do Quadro 2 s«ío obtidos ds modo análogo ao do Exemplo XXXVI fazendo reagir os di-hidrocloreios do Exemplo LXVI s/ou Exemplo LXvII com os ácidos correspondenies usando anidrido de ácido rr-prcjpanofosfôníco como reagente de ligação. A purificação ofeciua-se por cromaíograf ia. % 2

Quadro

(Quadro 3)

Exg^eloi......LXXXH-.......a_......L1X..XVJ

Os exemplos do Quadro 2 são obtidos por ligação do anidrido de ácido n-propanofosfónico dos aminoácldos Boc••"•protegi dos correspondsnies (BISSEMDORF BlOCHEHlCALS embH) como composto do Exemplo LXV (analogamente ao Exemplo XVI e ΧνϊΙ) e purificação cromaiogrãíica.

Quadro

CQuadro 4) ......xc

Os (Exemplos do Quadro 4 sSo quer preparados por ligação dos ácidos correspondentes (Exemplo LXXXVII a 1XC) com o composto do Exemplo L.XV usando anidrido de ácido n-propanofosfánico quer por reacção do composto do Exemplo LXV com "Z-OSu" na presença de trietilamina (Exemplo XO. Esiativamente ao processamento usual, todos os compostos são purificados por cromatograíia.

Os ácidos são preparados por métodos de síntese conhecidos. A síntese do ácido usado para a preparação do Exemplo LXXXVII é descrita no Exemplo 19. A síntese dos ácidos para o Exemplo LXXXVII e IXC está publicada (LXXXVII; J.J. Plattner et ai., J. nsd. Chem. 1988, 31., 2277-2288^ IXCl P. Buelmayer si al . , J. Hed. Chem. ÍS88, 31., 1839-18--6), "Z-OSO" LM-(8enxi loxi-carboníloxii-succinimidal pode ser obtida comercialmente (Aldrích Chem icals).

Quadro

Explicações para a secção experimenta!.' EâSP estacionária Placas CCF preparadas Merck gel de sílica 60 F-254, 5 x 10 espessura da camada 0,25 mm, Art. 5719 tlsús£3à móveis <no teste como "sistema CCF") I 1 CH.-.CI.~,/MeuH 911 11 1 CH.-Cl,../Me 0H £. 9515 III 1 MH..,/CH,.,Cl,../ne 0H £ 0,21911 IV 1 HOAc /CH,.,C 1 .-,/MeOH .A. 0,21911 V 1 Acido acético glacial/n--butanol/H.-,0 'í s O * .í. ! ·».* : 1 VI l EtOAc/n-hexano 211 VII 1 EtOAc/n-hexano 1 13 VIII 1 EiOAe/n-hexano 1 1 1 IX 1 CH.^C 2 .-,/MeOH 9812 X 1 CH.~,Cl.»./rleOH 713 XI 1 CH..Sl,? âiJitSiBsS.. kLAP.· CLAP sistema I 1 Coluna Merck Lichrosorb’'Í'' RP--8, 250-4, 10

Cm : CR) N2 Cat. 50318 CLAP sísiema II ί Coluna Merck Lichrosorb’'1''' RP-18, 250~4, 10 .um Hã Cat. 50334

Fluente para os sistema I e II A! tampão fosfato pH 7, Merck Art. N2 S439/H.-.0 1150 B; acetonitrilo A/B 1/1j taxa de fluxo; 2 isocráiica

Detecçãol 254 nm ' indica......dj^mmtyrM......usadas métodos analíticos gerais CCF Cromatografia de camada fina CCET Cromatografia de camada espessa preparativa C6 Cromatografia gasosa CLftP cc Cromatografia liquida de alta pressão Cromatografia ds coluna Em™ iZ,' ív.f Espectroscopia de resonância magnética nuclear (protões) Espec troscopia ds massa < ionização por impado ds slec troas > <:·:·? BAR-EH EH···-ICO Bombardeamento atómico rápido - espec troscopia de massa, ides positivos, susbiância da mairizl álcool m-niirobenzí1ico Espectroscopia de massa, ionização química

Crupos proteciores

Boc ..... ri.'. f-buioxicarbonilo Benziloxi carbonilo Ddr Oinitrofenilo Fmoc 3--Fluoreni Imetoxicarboni lo 0£t éster etílico Orne éster meti 1ico EtOC EtoxicarboniIo

Deve ser tomado em consideração o facto de a memória descritiva s os exemplos constituírem ilustrações mas nao limitações do presente invento s que outras realizações no âmbito s no espirito do presente invento se tornarão evidentes para os especialistas da técnica.

Claims (4)

1. F?eívind,i c5çSes 1§ "· Processo para a preparação de péptidos de fórniuia geral <1>,

   em qys !::Γ - representa hidrogénio ou -· represerita aicoxícarbonilo com o méximo de S átomos de carbono ou benziioxicarboni Io ou - represerita um grupo de rdrmuxa fi~-CÚ- t em que H~ -· representa morioixno ou os radicais CCH,..)..,C--SO..,.....CH^-CH- ·;:* £' ri. ri*. ou ( Cru>C”C0-~ Cru- CH- èH2f-C6-Hs -f ou  R "·· representa um grupo de tór mu ia .....hH Ή"

   Ff1' s R‘"‘ sáo hidrogénio, o máximo de idênticos ou diferentes e representam alquilo de cadeia linear ou ramificada com 8 átomos de carbono ou íenilo; ou - representam o radical N— em que L - representa o número 0, 1 ou
2. 2 B -·· representa uma ligacso direcia ou ... representa um agrupamento de aminoácidos de fórmula

   OU

   -CO- em que R" - representa alquilo de cadeia linear ou ramificada com o máximo de 8 átomos de carbono, que é faojltstivamente substituído com hidroxi, carboxi, alcoxi ou alcoxicarbonilo com o máximo de 6 átomos de carbono, ou benziloxi representa prolina nas suas forma L, forma D ou como mistura eis isómeros 0,L, R” - rsprssenia arilo com 6 a 10 átomos da carbono, qua é facuitativamenta mono-substituido a tri-substituido com substituintes iguais ou diferentes da série compreendendo halogéneo, nitro, ciano, hidroxi, aicoxi de cadeia linear ou ramificada com o máximo de 8 átomos de carbono, acetoxi ou benziloxi, ou com um grupo 7 de formula 0-C0-R’ * 7 H - representa alquilo de cadeia linear ou ramificada com o máximo de 8 átomos de carbono w - representa um número 0 ou 1 ft - representa um grupo ”CH,,~ ou , ,:γΓΓ 0 e E sSo idênticos ou diferentes e - representam uma ligaçáo directa ou ... representam um agrupamento aminoácido de fórmula R6

   0 -NH em que R’"'' tem o significado atrás indicado para R’"* e é idêntico a ou diferente deste, na sua forma-L, forma--D ou mistura de isómeros D,L - representa hidroxi, benziioxi ou aicoxi com o máximo de & átomos de carbono ou morfolino ou X ρ, representa um grupo de fòrmuia "-NHR" em que p. κ representa hidrogénio ou - representa alquilo de cadeia linear ou ramificada com o máximo de 10 átomos de carbono, que è facultativamente substituído com hidroxi, íanilo, piridilo ou com o radical de fórmula

   representa um radical de fórmula N

   e os seus sais f isiologicasnenie aceitáveis, caracterizado por EA3 se converter compostos de fórmula geral CII> Z-NH

   0-D-E-X OH

   em gue D, E e a têm os significados atrás mencionados e 2 - representa uai grupo protector de amino primeiro sai aminas por remoção do grupo 2 por métodos usuais s ss fazer depois reagir estas aminas com compostos cie fórmula geral <1II >

   era que h tem o significado atrás mencionado, e ZHem o significado atrás mencionado para 2 e é idêntico a ou diferente deste, com activaçáo do ácido csrboxí Hco por métodos usuais em solventes inertes para se obter compostos de fórmula gerai (Ia>

   O-D-E-X OH (la) A; D, £ e X t-êm os significados atrás mencionados, por o grupo proiector 2' ser removido por métodos usuais s num passo subsequente por os compostos serem condensados com compostos de fórmula geral (lv)

   (IV) sm que ftA, B, w e FC têm os significados atrás mencionado. caso seja apropriado com a sciiv&ção do ácido car&oxíIico atrás mencionada, e, caso seja apropriado, por os ésteres corresponoenies seres? hidroiisados por métodos usuais, ou por os compostos de fórmulas gerais <III) e (IV) reagirem primeiro pelos métodos atrás mencionados e por uma ligação pepiícfica adicional ser depois liga ca usando compostos de fórmula geral (II) lBJ se hidrolisar compostos ds formula geral (Ib)

   OH U7

   S " representa alcoxicsrboniIo com o máximo de Θ átomos oe carbono primairo ai© se obter os ácidos corr©spondentes por métodos usuais a, num passo subsequente, estas serem condensaoos na presença de auxiliaras com aminas de fórmula geral (V), ou mor foi ma de fórmula gerai (VI) ou N-benziipiperasina de fórmula parai (Vil) H2N-R8 (V), 0χNH (VI) VwHN N-CH2C6H5 (VII) em que tem o significado atrás indicado, ou por ·.ό 1, ambos os compostos' cie fórmuia gerai <Ic)

   CH (Ic) H s S i H Ϊ y u e ΒΓ' têmos signifiçados atrás indicados, © X' "· representa alcoxi com o máximo do 6 átomos do carbono ou oensd ioxi, ou os compostos do fórmula gorai <Id)

   (Idj em que
3. 3 Z‘, As X' têm os significados atrás indicados, ssrsfi! É^rímsuro hidroiisados para se obter os ácidos corresponoen™ tes por métodos usuais e depois reagidos com o fragmento de fórmula geral (VIII) (VIII) ú, £ e X têm os significados atrás indicados, em solventes inertes, caso seja apropriado na presença cie auxi-1iares, e, no caso dos compostos de fórmula geral (Jdi serem feitos reagir no passo seguinte pelo método descrito no processo ifú, com a remoção por passos do respectívo grupo protector Z!, com compostos de fórmula geral <IV) ou (Iva) 2 r R1 - NhK^COCH (IV) or w (IVa) RAf S, w e R" têm os significados atrás indicados. 21 Processo para a preparação de compostos de fórmula geral O! > de acordo com a Reivindicsçgo' 1, caracterizado por R" - representar hidrogénio ou - representar alcoxicarbonilo com o máximo de S átomos de carbono ou benziloxicarbonilo ou ···· representar um grupo de fórmula R^-CO- R-”' - representa morfolino ou os radicais < CH^>^C-SO^-CH^-CH-Íh2-c6-h ou C CH,,) ^C-CO-CH^-CH-íh2-vh S b ou 4,,S -· representa um grupo de fórmula -hR''R em que ã F R' e R" séo idênticos ou diferentes e representam hidrogénio; alquilo de cadeia linear ou ramificada com o máximo de 8 átomos de carbono ou fenilo, ou representam o radical

   (CH2)l- em que e L ~ representa o número 0; 1 ou 2 8 - representar uma ligação directa ou ·“· representar um agrupamento de aminoâeidos de formula

   -NH 6

   Ci em que R‘" - representa alquilo de cadeia linear ou ramificada com o máximo de 8 átomos de carbono, que é facultativamenie substituído com hídroxí, cãírboxi, alcoxi ou alcoxí carboni lo com o máximo de 6 átomos oe carbono, ou benziloxi - representa prolína nas suas forma.....L, forma-0 ou como mistura de isómeros D,L.

   R'1"' - representar fenilo ou naftilo, que é facuitativamente mono-substiiuido a tr i-substi tuído com subst i tuintes idênticos ou diferentes da série compreendendo flúor, cloro, bromo, iodo, hidroxi, nitro, ciano, aicoxi do cadeia linear ou ramificada com o máximo de 6 átomos de carbono, acetoxi ou bsnziloxi, w -- representar um número 0 ou 1 A - representar um grupo -CH.-S- ou -CH.-.-CH.-,....., S,. j£. -d*. D e E serem idênticos ou diferentes e - representarem uma ligação directa ou - representarem um agrupamento aminoácido de fórmula R6

   0 -NH em que ,,65 , ..... , ,..... ...6 h: oem o sigmíicsoo ac-rãs maicsao pars R e ê íoêntico a ou diferente deste, na sua forma-L, íorma- .....D ou mistura de isómeros D,L X "· representar hidroxi, benzi loxi ou aicoxi com o máximo os 6 átomos de carbono ou morfoiíno ou P. representar um grupo de r drmeu a --ΝΗΚ em que R” ..... representa hidrogénio ou - representa alquilo de cadeia linear ou ramificada com o máximo de 8 átomos de carbono, que é facultativamente substituído com hitiroxi; feniIo; piridilo ou com o rsdicsl de fórmula

   representa um radical de fórmula N ,n-ch2-c6h5 e os seus sais fisiologicamente aceitáveis. 3ã ~ Processo para a preparação de compostos de fórmula gerai (I) de acordo com a Reivindicaçáo 1;. caractsrizado por

   - representar aicoxicarbonilo com o máx:imo de 4 átomos de carbono ou benziioxicarbonilo ou ”·· representar um grupo de fórmula R"'-CO- em que R’-' - representa morfoiino ou o radical C CH„, > ._,C-S0.-,-CH.-t.....CH-

   ·-* λ.
4. £. 4 I

   OU 4,...5 - representa um grupo de formula -NR7? R*’’ s R'~' são idênticos ou diferentes e representam hidrogénio, alquilo de cadeia linear ou ramificada com o máximo de 4 átomos de carbono ou ísnilo, ou ~ representam o radical (3-<ch2>l- em que L - representa o número 0* 1 ou 2 8 - representar uma ligação directa ou - representar um agrupamento de anu noâeidos os fórmula

   OJ -ãCH><CH32-CO- em que R'"’ - representa alquilo de cadeia Hnsar ou r&mií icaoa com o méiximo de 4 átomos de carbono., que S faeultativamente substituído com nidroxi, representa prolins nas suas forma-L, íorma-~D ou como mistura de isómeros D,L, ί::Γ' - representar fenilo ou nafiilo, que é ísculisiivamenie mono-~subsii iuido a iri-suhsiituido com flúor, cloro, iodo, hidroxi, meioxi, etoxi, propoxi, t-butoxi, ben:£iioxi ou acetoxi, * ω - representar um número 0 ou í A ·" representar um grupo -CH ou -CH.-,-Cí"L-, έΐ Λ*:. D e Ξ serem idênticos ou diferentes e -· representarem uma ligação directa ou - representarem um agrupamento aminoâcido de fórmula

   em que

   idêntico a ou diferente deste, na sua forma-L, forma-™D ou mistura de isómeros 0,L X -· representar hidroxi ou alcoxí com o máximo de 4 átomos de carbono ou morfolino ou

   em que R" -· representa hidrogénio ou - representa alquilo de cadeia linear ou ramificada com o máximo de 6 átomos de carbono, que é facultativamente substituído com hidroxi, fenilo, piridilo ou com o radical de fórmula

   ‘NH2 ou representa um radical de fórmula N-CH2-C6H5 s os seus sais farmaceuiicamente aceitáveis. 4sí ·· Método para a produção de medicamentos; caractsr!· zado por se converter compostos de fórmula de acordo com a Reivindxcação 1 em formas adequadas de administração; caso seja apropriado usando os auxiliares e excipienies usuais. 5ã - Método para a utilização de compostos com a fórmula geral <I>, de acordo com a Reivindicação i, no tratamento de doenças da circulação, caractsrizado por se administrar a um paciente os referidos compostos, numa gama de dosagem de cerca as 0,001 a cerca de 30 mg por quilograma de peso corporal, de preferência de cerca de 0,01 a cerca de 19 mg por quilograma de peso corporal. 126 8§ Processo para a preparacao de compostos de fórmula geral C11I) í I ' SN^s Z' “NH^VCOOH caracterizado por se fazer reagir compostos de fórmula geral (!X>

   A tem o significsGo atrás indicado, com reagentes que introduzem grupos protectorss de amino por métodos usuais, em solventes inertes, na presença de uma base e a temperaturas compreendidas entre 0°C e 50°C. Lisboa, 6 de Junho de ISSO

   *UA VICTOH CORDON. 10-A, t* 1200 LI6B0A