PT97601A

PT97601A - Processo de preparacao de intermediarios dos oligossacaridos da caliqueamicina e da esperamicina

Info

Publication number: PT97601A
Application number: PT9760191A
Authority: PT
Inventors: Kyriacos C Nicolaou; Robert D Gronebeg; Erwin P Schreiner; Wilhelm Stahl
Original assignee: Scripps Clinic Res
Priority date: 1990-05-07
Filing date: 1991-05-07
Publication date: 1992-03-31

Description

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MEMÓRIA DESCRITIVA

Referência cruzada a pedidos relacionados O presente pedido é uma continuação, em parte, do Pedido na. de série 07/520245, depositado em 7 de Maio de 1990, cujas revelações são aqui incorporadas como referência.

Apoio governamental O presente invento teve o apoio do Governo dos Estados Unidos da América e o Governo dos Estados Unidos da América tem certos direitos sobre a invenção.

Campo técnico O presente invento refere-se, de um modo geral, aos antibióticos caliqueamicina e esperamicina e, mais particularmente, ao processo de preparação de intermediários úteis na preparação das porções oligossacárido da caliqueamicina e da esperamicina.

Arte anterior

As famílias de antibióticos caliqueamicina [Lee et al., J. Am. Chem. Soc.. 109:3466 (1987)] e esperamicina [Golik et al., J. Am. Chem. Soc.. 109:3462 (1987)] contêm uma estrutura de núcleos trissulfureto, alílica, de enodi-ino, bicíclica, complexa, ligada, através de ligações glicosilo, a uma cadeia de oligossacárido. As porções oligossacárido de cada uma destas moléculas contêm um certo número de derivados de açúcar substituídos e, cada um dessas porções oligossacárido, contém um anel tetra-hidropirano que está substituído no anel com um átomo de enxofre e com o átomo de oxigénio de um grupo hidroxilamina. A estrutura química da caliqueamicina Í1I, que contém um grupo oligossacárido mais complexo do que uma esperamicina, é aqui ilustrada na Figura 1. A unidade sacárido designado pela letra "B" é o derivado de tetra-hidropirano, substituído por enxofre e por 0-hidroxilamina, anteriormente referido.

Os anéis de sacárido de uma esperamicina correspondentes aos anéis "A" e "E" da Figura 1 estão substituídos de um modo similar 72 593 SCRF Case 202.1(POR) -3-

aos ilustrados, com a excepção de o anel de esperamicina correspondente ao anel E incluir um grupo N-isopropilo em vez de um grupo N-etilo. 0 anel "B" correspondente de uma esperamicina contém um grupo S-metilo em vez do grupo S-benzoilo derivado-(substituído com sacárido) (anéis C e D) que se mostra na Figura 1. Na Patente dos E.U.A. na. 4 837 206, cujas revelações são aqui incorporadas para referência, ilustram-se as estruturas da esperamicina e de alguns dos seus derivados.

As porções contendo enodi-ino (aglicon ou núcleo) e hidrato de carbono da caliqueamicina e da esperamicina parecem desempenhar diferentes papéis na actividade biológica dessas moléculas. Assim a porção de núcleo parece clivar o ADN [Zein et al., Science . 24011198 (1988)], enquanto que a porção oligossacárido da caliqueamicina parece guiar a droga para uma ranhura (Hgroove") menor no ADN de cadeia dupla no qual a droga se fixa, ela própria, no lado 5' de uma sequência TCCT e o núcleo cliva o ADN. As esperamicina são menos específicas para sequências. [Zein et al., Science. 244:697 (1989)].

Estudos do efeito na clivagem do ADN da derivação ou remoção de um ou mais dos anéis D e E da caliqueamicina (Figura 1) indicam o seguinte: a remoção do anel E (amino-açúcar) proporcionou uma droga com a mesma especificidade de clivagem de ADN do que o composto original, mas possuindo uma eficiência na clivagem de ADN menor em 2 a 3 ordens de grandeza; a acilação da amina do anel E manteve a especificidade mas diminuiu a eficiência; a remoção do anel D (ramnose terminal) manteve a especificidade mas diminuiu eficiência em 50-100 vezes; e a remoção dos anéis D e E (ramnose terminal e amino-açúcar) resultou na inibição do corte. [Zein et al., Science. 244:697 (1989)]. A esperamicina não possui os anéis C e D e inclui uma estrutura de sacárido complexa adicional, ligada a um grupo hidroxilo do núcleo adicional. 0 pedido de patente da G.B. n°. 2 179 649A refere que a hidrólise ácida das esperamicina conduziu à clivagem dessa segunda estrutura de sacárido complexa e a um derivado da esperamicina resultante, designado por BBM-1675C que era aproxi- SCRF Case 202.1(POR)

madamente tão eficaz como a esperamicina de partida BBM-1675Ai (esperamicina A^) e mais do que a esperamicina BBM-1675A2 (esperamicina A2)/ como agente anti-tumoral e anti-microbiano. Da descrição neste pedido da G.B., a porção oligossacárido da BBM-1675C contém anéis análogos aos anéis A, B e E da caliqueamicina que se mostram na Figura 1. O pedido de patente da G.B. na. 2 179 649A refere também que a hidrólise adicional da esperamicina BBM-1675C conduziu também a outro derivado da esperamicina designado por BBM-1675D que também se indicou ser quase tão eficaz como a esperamicina BBM-1675A-L, como agente anti-tumoral e anti-microbiano. Os resultados apresentados indicam que a esperamicina BBM-1675D possuia apenas dois anéis de sacárido; i.e., os que correspondem aos anéis A e E da Figura 1.

Assim, a arte tem reconhecido a importância das porções oligossacárido dos antibióticos caliqueamicina e esperamicina, e tem reconhecido que os anéis de sacárido no grupo caliqueamicina podem afectar a actividade da droga. Os resultados descritos em Zein et al., Science. 244:697 (1989) e no pedido de patente da G.B. na. 2 179 649A indicam um possível conflito relativo ao efeito das porções sacárido individuais na eficácia, embora se tivessem usado métodos de ensaio diferentes.

Seria pois importante poder preparar uma porção oligossacárido de uma caliqueamicina ou a porção correspondente de uma esperamicina e seus derivados, de modo a poderem estudar-se melhor e afinarem-se as especificidades desses materiais. Seria também importante ligar um oligossacárido de caliqueamicina ou de esperamicina, ou um seu derivado ou análogo, a outro produto químico para clivagem de ADN, conhecido para criar um antibiótico quimérico sintético. 0 presente invento descreve a síntese de intermediários chave úteis na preparação de uma porção oligossacárido de caliqueamicina ou de esperamicina, de um derivado ou análogo da porção de oligossacárido, bem como a síntese de antibióticos quiméricos

72 593 SCRF Case 202.1(POR) -5 contendo um tal oligossacárido.

Breve sumário da invenção O presente invento contempla compostos intermediários úteis na preparação das porções oligossacárido da caliqueamicina e da esperamicina, bem como dos seus análogos e derivados, e a um processo para a preparação destes compostos.

Um composto intermediário contemplado tem uma estrutura que corresponde à da fórmula seguinte

onde R é um radical seleccionado de entre o grupo consistindo de hidrogénio, alquilo C^-Cg, fenilo e fenilo substituído; e R2 é um radical seleccionado de entre o grupo consistindo de tri-alquil C^Cg-sililo, di-alquil C^Cg-fenilsililo e alquil Ci-C6 difenilsililo.

Numa prática preferida, R é um radical fenilo substituído tal como m-clorofenilo e R2 é um grupo trialquil C-L-Cg-sililo tal como t-butildimetilsililo ou trietilsililo. Esta preferência para R2 é válida para todos os compostos nos quais está presente um destes grupos.

Outro composto contemplado tem uma estrutura que corresponde à da fórmula seguinte

onde R1 é hidrogénio ou COR e R é um radical seleccionado de entre o grupo consistindo de hidrogénio, alquilo C^-Cg, fenilo e

72 593 SCRF Case 202.1(POR) fenilo substituído; R2 é um radical seleccionado de entre o grupo consistindo de trialquil C-L-Cg-sililo, dialquil Cj^-Cg-fenilsililo e alquil C-L-Cg-difenilsililo; e -W é o resíduo de (i) um grupo imido cíclico de N-hidroxilo, -0N=R4, onde R4 contém 4 a cerca de 8 átomos de carbono ou (ii) um grupo oxima 0,N-di-substituídof -ON=R^, cuja porção contendo carbono R5 é derivada de um grupo consistindo em alquil C^Cç--cetona ou -aldeído, e num derivado substituído de tetra-hidropi-ranona, com a condição de R1 ser COR quando -W é -0N=R4.

Numa concretização preferida, -W é -0N=R4 e -0N=R4, em conjunto constitui o resíduo de um grupo imido cíclico de N-hidroxi-lo contendo 4 a cerca de 8 átomos de carbono, tal como os que estão presentes num radical N-hidroxissuccinimido ou N-hidroxi-ftalimido, e R1 é COR.

Noutra concretização preferida, -W é -0N=R5 e -0N=R5, em conjunto, constitui o resíduo de uma oxima Ο,Ν-di-substituída cuja porção R5 contendo carbono é derivada de um grupo consistindo em alquil C-^-Cg-cetona ou -aldeído e numa tetra-hidropiranona substituída. Muito preferivelmente, R5 é derivado de uma tetra--hidropiran-4-ona que pode também conter um substituinte de te-tra-hidropirano substituído.

Um composto cuja estrutura corresponde à da fórmula que a seguir se apresenta constitui ainda outro composto contemplado da invenção.

onde R2 é um radical seleccionado de entre o grupo consistindo de tri-alquil C-L-Cg-sililo, dialquil-C-L-Cg-fenilsililo e alquil C-L-Cg-difenilsililo; -0N=R5 é o resíduo de um grupo oxima 0,N-di-substituído, on-

72 593 SCRF case 202.1(POR) -7- de R5 é derivado de um grupo consistindo em alquil C^-Cg-cetona ou -aldeído e num derivado substituído de tetra-hidropiranona? e R6 é seleccionado de entre o grupo consistindo de hidrogénio, alquilo benzoilo, benzoilo substituído, alquil C^-Cg- -oxicarbonilo e N-carbonilimidazilo.

Muito preferivelmente, R6 é hidrogénio ou benzoilo substituído e R2 e R5 são, preferivelmente, como anteriormente se descreveu. É também contemplado um composto cuja estrutura corresponde à que a seguir se apresenta.

onde R8 é hidrogénio ou um grupo protector do átomo de azoto, removível selectivamente, tal como FMOC, t-BOC, CBZ ou NVOC, tal como é usado para a protecção de grupos α-amino durante as reacções de síntese de péptido; R^ é alquilo Cj-Cg, sendo o metilo e o etilo particularmente preferidos; R10 é hidrogénio ou um grupo R2 definido anteriormente; Z é 0 ou um grupo oximino que é o produto de reacção do composto onde Z=0 com hidroxilamina ou com uma hidroxilamina 0-subs-tituída contendo até 7 átomos de carbono, tal como O-benzil-hi-droxilamina ou O-metil-hidroxilamina; e X é seleccionado de entre o grupo consistindo de o-nitro-benzoxilo, benzoxilo, halogéneo, tal como cloro, bromo ou, preferivelmente, fluoro, hidroxilo e tricloroacetimidato [0C(NH)CC13].

Um composto dissacárido de fórmula VII é útil como intermediário na formação de um antibiótico quimérico com um aglicon tal como se mostra nas Figuras 10, 13 e 14. Exemplos de compostos cujas estruturas correspondem à Fórmula VII incluem os compostos 148 e 160-167. 72 593

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Um processo para a formação (preparação) de um composto cuja estrutura corresponde à da fórmula A é também contemplado.

onde R2 é um radical seleccionado de entre o grupo consistindo de trialquil C^^-Cg-sililo, dialquil-C-L-Cg-fenilsililo e al-quil Cj-Cg-difenilsililo; e -0N=R5 é o resíduo de um grupo oxima 0,N-di-substituído onde R5 é derivado de um grupo consistindo em alquil C^^-Cg-cetona ou -aldeído e num derivado substituído de tetra-hidropiranona; compreendendo os passos de

a) aquecimento do composto cuja estrutura corresponde à da fórmula B

onde R2 e R5 são definidos como anteriormente, num meio líquido, durante um período de tempo e a uma temperatura suficiente para esse composto se rearranjar para formar um composto cuja estrutura corresponde à da fórmula A. 0 grupo N-carbonilimidazolilo de um composto cuja estrutura corresponde à da fórmula A é substituído, preferivelmente, por hidrogénio. Prefere-se também que o composto de fórmula A e que o composto possuindo hidrogénio em vez de N-carbonilimidazolilo sejam recuperados.

Breve descrição dos desenhos

Nos desenhos que constituem uma porção da presente descrição: a Figura 1 ilustra a fórmula estrutural da caliqueamicina 72 593 SCRF Case 202.1(POR)

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•L1/ em que Me é metilo. A ligação da junção entre as porções oligossacárido e aglicon é ilustrada pela letra β. Não se mostram os átomos de hidrogénio ligados a outros átomos de carbono de anel que não na ligação glicosídica. As letras A-E designam anéis no oligossacárido. A Figura 2 ilustra a estrutura química do oligossacárido, Composto 1. As posições das ligações de glicosido nas duas unidades sacárido são indicadas pelos números "1" e As ligações chave que ligam os três anéis são indicados com linhas a tracejado através das ligações e pelas letras gregas α-e. As letras A, B e C indicam anéis análogos aos presentes na caliqueamicina.

Nesta figura e nas que se seguem, a configuração estereoquí-mica dos substituintes do anel sacárido é apresentada como linhas na forma de cunha, a cheio, para as ligações que se projectam no sentido ascendente a partir de um anel (ligação β) enquanto que se utilizam linhas a tracejado para as ligações que se projectam no sentido descendente a partir de um anel (ligações a). Não se mostram os hidrogénios ligados ao anel nem os átomos de hidrogénio sem significado estereoquímico. Me é metilo e Ph é fenilo, nesta figura e em todas as outras em que se utilizam estes símbolos. Em cada uma das descrições que se que adicionar-se-ão abreviaturas para os grupos não definidos anteriormente, enquanto que as abreviaturas anteriormente definidas não serão re-defini-das. A Figura 3 ilustra o Esquema reaccional 1 e mostra a síntese geral aqui utilizada para a preparação do anel B, contendo enxofre e hidroxilamina 0,N-di-substituída, de um oligossacárido de caliqueamicina. As setas curvas indicam a direcção da formação e da ruptura das ligações. Utiliza-se uma chaveta para indicar que outro grupo está ligado através de uma ligação dupla ou simples ao átomo de azoto. HO-NPhth é N-hidroxilftalimida, R é um grupo bloqueante geral, Ar é um grupo aromático tal como m-clorofenilo e Im é imidazilo. A Figura 4, apresentada em três folhas, Figuras 4-A, 4-B e 72 593 SCRF Case 202.1(POR)

10- 4-C, ilustra o Esquema reaccional 2 utilizado para a preparação do Composto 1 da Figura 2. Os passos da reacção a-r são descritos nos resultados e nos exemplos. Neste esquema, Ac é acetilo, Ar é m-clorofenilo, 3^Β\ιΜθ2 é t-butildimetilsililo, Phth é ftalilo, PPh3 e trifenilfosfeno e Bn é benzilo. Para cada composto enumerado dá-se a identificação de cada grupo R, R^, R2 e X. A Figura 5 ilustra as fórmulas estruturais dos Compostos 21, 22, 23 e 24, nos quais a identidade de cada grupo R, X e Y é a que se indica. As letras C, D e E indicam a correspondência de um anel apresentado com os anéis C, D e E da caliqueamicina, tal como se mostra na Figura 1. A Figura 6, apresentada em duas folhas, Figuras 6-A e 6-B, ilustra o Esquema reaccional 3 para a síntese dos compostos 21 e 22 cujas estruturas se mostram na Figura 5. Neste esquema, as letras C e D são usadas como anteriormente para designar a correspondência de um anel com um anel de oligossacárido de caliqueamicina, e SiEt3 é trietilsililo. Os passos de reacção a-j são descritos para cada composto enumerado nos exemplos. Cada grupo R, R1, R2 e X é definido como se mostra para cada composto enumerado A Figura 7 ilustra o Esquema reaccional 4 para a síntese dos Compostos 23 e 24 cujas estruturas se mostram na Figura 5. Os passos de reacção a-j são descritos, para cada composto numerado, nos exemplos. A linha ondulada é utilizada para ilustrar a presença de ambos os anómeros. A Figura 8, apresentada em duas partes, Figuras 8-A e 8-B, ilustra o Esquema reaccional 5 para a preparação do Composto 54, um precursor de 3 anéis do oligossacáido da caliqueamicina de 5 anéis, sendo também um análogo do oligossacárido da esperamicina. FMOC é 9-fluorenilmetiloxicarbonilo. Os passos de reacção a-k são descritos, para cada composto enumerado, nos exemplos. Cada grupo R, R1, R2 e X é definido como se indica para cada composto enumerado. -11- 72 593 SCRF Case 202.1(POR) A Figura 9, apresentada em duas folhas, Figuras 9-A e 9-B, ilustra o Esquema reaccional 6 para a preparação do oligossacárido de caliqueamicina, Composto 100, a partir do Composto 55 (forma de cloreto de ácido do Composto 33 que se mostra na Figura 6) e do Composto 54, que se apresenta na Figura 8. Cada grupo R, R1, R2 e X é definido como se indica para cada composto enumerado. Os passos de reacção a-g são descritos para cada composto enumerado, nos exemplos. A Figura 10, apresentada em duas partes, Figuras 10-A e 10-B, ilustra o Esquema reaccional 7 para a preparação de um análogo do Composto 54 que contém um grupo o-nitrobenzilo (ONBn) foto-lábil no átomo de carbono anomérico a partir do qual se pode formar uma ligação glicosídica com uma aglicon, após fotólise e activação adequada. Esta síntese é paralela com a síntese do Composto 54 que se mostra na Figura 8, possuindo, os compostos enumerados análogos os mesmos dois últimos dígitos que os seus análogos na Figura 8, e sendo os passos de reacção análogos designados pelas letras a-k. Cada grupo R, R1 e R2 é definido como se apresenta para cada composto enumerado. A Figura 11, ilustra o Esquema reaccional 8 para a preparação de um antibiótico quimérico usando o Composto 200, um análogo de oligossacárido de 5 anéis do Composto 100 que se mostra na Figura 9 e uma aglicon HZ de clivagem d ADN. Nesta figura h é usado para indicar um passo de irradiação com ultra-violeta, DAST é trifluoreto de dietilaminoenxofre, THF é tetra-hidrofurano e TBAF é fluoreto de tetrabutilamónio. Cada grupo R1, R2, R3, Z±, li2 e Z3 é definido como se indica para cada composto enumerado, enquanto que HZ é usado para representar a forma de álcool da porção aglicon ZZ2 e Z3. A Figura 12, apresentada em três partes, Figuras 12-A, 12-B e 12-C, ilustra o Esquema de reacção 9 para a formação de um antibiótico quimérico, Composto 226. Os Compostos 211 a 222 são análogos dos Compostos 11 a 22 da Figura 4, sendo os dois últimos dígitos de um número nesta figura, os mesmos que os números de dois dígitos na Figura 4, excepto para o Composto 218 que é

72 593 SCRF case 202.1(POR) -12-análogo do Composto 1. Os Compostos 211 a 222 são também preparados de uma forma análoga à dos Compostos 11 a 22. Nesta figura, PPTS é p-toluenossulfonato de piridínio, ^BuMeSiOTf é trifluoro-metanossulfonato (triflato) de t-butildimetilsililo, DIBAL é hi-dreto de di-isobutilalumínio, eq. é equivalente e Et3SiOTf é triflato de trietilsililo. Os grupos R, R^, R^, γ, z^, Z2 e Z3 são como se indicam para cada composto enumerado, HZ representando a forma de álcool generalizada das porções aglicon Z·^, Z2 e Z3. A Figura 13, apresentada em duas folhas, Figuras 13-A e 13-B, ilustra o Esquema reaccional 10 contendo reacções posteriores do Composto 148 para formar o Composto 167, um derivado dos anéis de oligossacárido A e E da caliqueamicina. Os substituintes R, R1# R2/ Z e X estão identificados para cada composto. As outras abreviaturas são definidas como anteriormente. A Figura 14, que se apresenta em duas folhas, Figuras 14-A e 14-B, ilustra o Esquema reaccional 11, no qual se fez reagir um material de clivagem de ADN, análogo da dinemicina A, Composto 300, com o Composto 163 para formar o antibiótico quimérico, di-astereoisomérico, Composto 307a e 307b. Os substituintes R, R^ e R2 estão identificados para cada Composto. A abreviatura Ph representa fenilo e PhCH2 benzilo. 0 presente invento apresenta vários benefícios e vantagens.

Um benefício evidente é o de se ter conseguido preparar o anel B sacárido, tio- e O-hidroxilamina-substituído, presente na caliqueamicina e esperamicina, usando uma síntese com um rendimento elevado.

Outro benefício da invenção é o de se preparar esse anel B ligado apropriadamente ao dissacárido ou análogo, de anéis A e E da caliqueamicina ou da esperamicina.

Ainda um outro benefício da invenção é o de se ter ligado um análogo de dinemicina A ao dissacárido de anéis A e E da caliqueamicina para formar um antibiótico quimérico. -13- 72 593 SCRF Case 202.1(POR)

Uma vantagem particular da invenção é a de se poder efectuar a síntese da porção oligossacárido da caliqueamicina completa, via as sínteses descritas dos anéis A, C, D, E e, particularmente, B.

Ainda uma outra vantagem da invenção é a de se poderem usar os intermediários e os processos descritos para preparar antibióticos quiméricos.

Outros benefícios e vantagens da invenção serão evidentes para os peritos na arte a partir da descrição que se segue.

Descrição detalhada da invenção

Como já anteriormente se referiu, o presente invento refere-se ao processo de preparação da porção oligossacárido de uma caliqueamicina ou esperamicina, bem como de seus análogos e derivados. Mais particularmente, o presente invento refere-se a compostos intermediários específicos, seus análogos e derivados, úteis na preparação destes oligossacáridos e a processos para a sua preparação.

Os compostos que têm aqui um interesse particular são aqueles que são utilizados na preparação do anel B contendo enxofre e oxigénio, bem como do dissacárido de anéis A e E do oligossacárido da caliqueamicina que se ilustra na Figura 1. A esperamicina contém um anel similarmente estruturado e substituído.

As fórmulas químicas que aqui se apresentam são utilizadas para mostrar compostos específicos e, quando apropriado, classes genéricas de compostos. Os compostos definidos por essas classes genéricas são aqui referidos como análogos uns dos outros ou de um composto particularmente enumerado ou nomeado.

Assim, por exemplo, quando R2 é um grupo trialquil C-^-Cg-sililo, dois compostos são análogos um do outro, tendo, por outro lado, a mesma estrutura e configuração, e um contém um grupo trietilsililo e o outro contém um grupo t-butildimetilsililo na mesma posição. Num exemplo mais concreto, o Composto 1 da Figura

72 593 SCRF Case 202.1(POR) -14- 2 e o Composto 216 da Figura 12 são análogos.

Alguns dos compostos aqui descritos contêm uma estrutura e substituintes particulares e outros contêm, substancialmente, a mesma estrutura e os mesmos substituintes ou substituintes análogos, mais, pelo menos um grupo substituinte adicional. Um composto que contém esse, pelo menos um, grupo adicional é considerado um derivado do primeiro composto possuindo menos grupos. Por exemplo, o Composto 16 da Figura 4 contém duas unidades de anel sacárido, enquanto que o Composto 54 contém duas unidades de anel sacárido similares, mais uma outra unidade de anel sacárido como substituinte de um destes dois anéis sacárido. 0 Composto 54 é assim um derivado do Composto 16. Um derivado que contém um ou mais substituintes análogos é considerado um derivado, em vez de um análogo.

Em cada uma das fórmulas químicas que aqui se apresentam não se mostram os átomos de hidrogénio, ligados aos átomos de carbono de anel, nem os hidrogénios ligados a átomos de carbono que não são importantes estereoquimicamente, com o propósito de tornar mais claras as figuras. As ligações que se estendem para cima do plano do papel (ligações β) são ilustradas por linhas a cheio na forma de cunha enquanto que as ligações que se estendem para baixo do plano do papel são apresentadas como linhas a tracejado. Os grupos metilo, etilo e butilo são frequentemente indicados pelas designações abreviadas Me, Et e Bu, respectivamente, enquanto que um grupo benzilo é indicado por Bn, fenilo por Ph e um grupo fta-loilo é indicado por PhTh. As abreviaturas usadas são as que normalmente se encontram na literatura química.

Um Composto de particular interesse é aquele cuja estrutura corresponde à Fórmula I seguinte

0R2 i 72 593 SCRF Case 202.1(POR) /-J -........... -15- €..... na qual R é um radical seleccionado de entre o grupo consistindo de hidrogénio, alquilo C^Cg, fenilo e fenilo substituído; e é ui radical seleccionado de entre o grupo consistindo de trialquil C^Cg-sililo, dialquil Cj-Cg-fenilsililo e alquil C^Cg-dif enilsililo.

Um composto particularmente preferido com a fórmula anterior é o Composto 10, que se mostra nas Figuras 4, 8, 10 e 12. Nesse composto, R é um grupo fenilo substituído, mais especificamente, m-clorofenilo, e R2 é um grupo trialquil C^Cg-sililo, mais espe-cificamente, t-butildimetilsililo (tBuMe2Si). Um trietilsililo (Et3Si) é também um substituinte R2 particularmente preferido.

No Esquema reaccional 2 que se mostra na Figura 4, o glical, Composto 3, é oxidado com ácido m-cloroperbenzóico (MCPBA), e o resíduo desse perácido permanece na forma de um composto éster (indicado por OCOAr), que se rearranja para formar o 3-a-éster do Composto 7, que é, finalmente, transformado na O-hidroxilamina, Composto 10. É de notar que, nessa sequência de passos, se pode usar qualquer ácido per-carboxílico, ainda que o MCPBA seja preferido, na medida em que proporciona um rendimento superior, é estável nos passos subsequentes, e pode ser facilmente substituído em passos adicionais.

Num procedimento alternativo, faz-se reagir a 1,2-anidro--4,6-0-benzilideno-3-0-(t-butildimetilsilil)-0-D-altropiranose [Halcomb et al., J. Am. Chem. soc.. 111:6661 (1989)] com um ácido carboxílico para abrir o 1,2-epóxido e formar o éster de 2-jS--hidroxi-l-a-altropiranose correspondente, no qual a porção ácido do éster é um grupo COR, definido como para a fórmula I. Depois, faz-se reagir este éster (1) com NBS e AIBN; e (2) com Bu3SnH e AIBN (como se descreve na preparação do Composto 2) para formar uma a-l-0-acil-3-tri-alquilsililado-4-benzoil-fucose. Após oxidação de Swern [(C0C1)2, DMSO, , Et3N)] seguida por um rearranjo in situ (tal como também se descreve para a preparação do Composto 2) obtém-se um composto com a fórmula anterior, na qual R é definido como anteriormente. -16- 72 593 SCRF Case 202.1(POR)

Exemplos de grupos R incluem formilo, acetilo, propionilo, butiroilo, hexanoilo, benzoílo, m-clorobenzoilo e similar.

Os substituintes R2 preferidos são os radicais trialquil C^^-Cg-sililo nos quais os grupos alquilo podem ser iguais ou diferentes. Radicais trialquil C-L-Cg-sililo preferidos são o tri-etilsililo (SiEt3) e o t-butildimetilsililo ^ΒιαΜβ23ΐ). Outros radicais sililo úteis incluem trimetilsililo, tri-isopropilsili-lo, t-butildifenilsililo, iso-propildimetilsililo, 2-butildime-tilsililo, t-hexildimetilsililo, fenildimetilsililo e difenilme-tilsililo. Ainda outros grupos sililo R2 úteis, tal como anteri-ormente se descreveu, são bem conhecidos dos peritos na arte. Agentes sililantes úteis para a preparação de radicais sililo R2, estão disponíveis nos Petrarch Systems of Bristol, PA. E.U.A., bem como em outros fornecedores.

Tal como se pode observar nos esquemas das Figuras 4, 8, 10, 12, 13 e 14, utiliza-se um composto, cuja estrutura corresponde à da Fórmula I, para formar uma oxima O,N-di-substituída que liga os precursores dos anéis A e B. Subsequentemente, reduz-se essa oxima di-substituída para formar o grupo hidroxilamino 0,N-di--súbstituído que pode ligar os anéis A e B ao oligossacárido.

Outro composto particularmente preferido da invenção tem a estrutura que se mostra na Fórmula II seguinte

na qual R2 é definido como anteriormente; R1 é hidrogénio ou COR, onde R é descrito como anteriormente; i.e., hidrogénio, alquilo C-^Cg. fenilo ou fenilo substituído; e -W é o resíduo (produto de reacção) de (i) um grupo N-hidroxi-imido cíclico ou de (ii) um grupo oxima 0,N-di-substituí-do. Na fórmula anterior, -W é -ON=R4 ou -0N=R5 tal que N=R4 e -17- 72 593 SCRF Case 202.1(POR) N=R5 representam duas ligações entre um átomo de azoto e R4 ou R5, respectivamente.

Quando -W forma o resíduo de um grupo N-hidroxi-imido cíclico, -0N=R4, R4 contém 4 a cerca de 8 átomos de carbono. Assim, -0N=R4 forma o resíduo de um grupo N-hidroxi-succinimido, N--hidroxi (metilsuccinimido) ou N-hidroxiftalimido. Adicionalmente, guando -W é -0N=R4, R1 é COR.

Um composto particularmente preferido cuja estrutura corresponde à da Fórmula II, é o Composto 9, que se mostra na Figura 4, no qual -ON=R4 forma o resíduo de um grupo N-hidroxiftalimidoílo, R1 é m-clorobenzoilo e R2 é Si'*:BuMe2. Como se pode ver na Figura 4, o Composto 9 e os outros compostos com a fórmula anterior, são precursores do Composto 10 e dos outros compostos cujas estruturas são abrangidas pela Fórmula I.

Quando -W forma o resíduo de um grupo oxima 0,N-di-substituído, é uma porção contendo carbono derivada de uma al-qui 1 -C«l-C6-cetona ou -aldeído; i.e., um derivado de um alquilide-no C-j^-Cg ou um derivado substituído de tetra-hidropiranona. Exemplos de derivados de tetra-hidropiranona incluem um anel A de ca-liqueamicina ou de esperamicina ou um dissacárido de anel A e E, tal como um dos que aqui se ilustram. Neste caso, R1 é definido como anteriormente.

Compostos preferidos de Fórmula II onde R3 é R5 são os compostos 11-12 da Figura 4, os Compostos 49-51 da Figura 8, os Compostos 149-151, da Figura 10 e os Compostos 211-213 da Figura 12. Cada um desses compostos inclui um grupo R5 derivado de um derivado substituído de tetra-hidropiranona e, particularmente, um derivado substituído de tetra-hidropiran-4-ona.

Tal como se pode ver nos compostos acima enumerados das Figuras 4, 8, 10 e 12, a tetra-hidropiranona pode possuir substitu-intes alquilo C^Cg, p.e., metilo, etilo ou hexilo, bem como hi-droxilo, 0-benzilo e 0-sililo; i.e., um grupo R2, um o-nitroben-zoxi (ONBn) e outros derivados de tetra-hidropiranose como grupos -18- 72 593 SCRF Case 202.1(POR) substituintes. Preferivelmente, o derivado substituído de tetra--hidropiranose está, ele próprio, substituído com apenas um subs-tituinte de tetra-hidropiranose. Os compostos oligossacáridos ilustrados são precursores de oligossacáridos maiores, tais como os que podem ser utilizados na preparação de antibióticos quiméricos tal como aqui depois se descreve. Um composto cuja estrutura corresponde à de Fórmula II onde R5 é um derivado de tetra-hi-dropiran-4-ona que está, ele próprio, substituído na posição 2 com um tetra-hidropirano substituído, é um precursor do trissacárido esperamicina. R5 pode também ser derivado de um alquil C^Cg-cetona ou -aldeído; i.e., alquilideno C-j^-Cg. Exemplos destes materiais são formaldeído, acetaldeído, butiraldeído, hexilaldeído, acetona, 2--butanona, 3-hexanona e ciclopentanona. Já foi preparado o derivado de isopropilideno, preparado a partir de acetona, e um outro derivado similar, de outro modo, em estrutura, do Composto 14 da Figura 14, foi usado como composto modelo no rearranjo do derivado de tiocarbonilimidazilo para formar um composto com uma estrutura análoga à do Composto 15.

Ainda outro composto de interesse tem uma estrutura que corresponde à Fórmula III seguinte

III na qual R2 e R5 são definidos como anteriormente e R6 é se-leccionado de entre o grupo consistindo de hidrogénio, alquilo Ci-C6, benzoilo, benzoilo substituído, alquil C-^-Cg-oxicarbonilo e N-carbonilimidazilo. Aqui, R5 é, preferivelmente, um derivado substituído de tetra-hidropiranona tal como anteriormente se descreveu.

Compostos particularmente preferidos cujas estruturas correspondem à Fórmula III incluem os Compostos 15-17 da Figura 4,

72 593 SCRF Case 202.1(POR) -19- os Compostos 53 e 54 da Figura 8, o —.mevSÇjpÊ

Composto 56 da Tigurà 9, os

Compostos 153 e 154 da Figura 10 e os compostos 215, 216 e 217 da Figura 12. Esses Compostos ilustram grupos R6 que incluem hidrogénio, tiocarbonilimidazilo e benzoílo substituído.

Como se pode observar dos exemplos anteriores de grupos benzoílo Rg substituídos, os substituintes no grupo benzoílo podem incluir alcoxilo C^-Cg tal como metoxilo, etoxilo, isopropo-xilo e ciclo-hexiloxilo, alquilo C-^-Cg tal como metilo, etilo, isopropilo, sec-butilo e 2-hexilo, halogéneo tal como iodo, bromo, cloro ou fluoro, e um derivado de tetra-hidropiranose substituído, ligado a glicosilo, tal como o anel D da caliqueami-cina. R6 pode também ser um grupo alquilo C^-Cg, caso este em que o oligossacárido finalmente preparado corresponde ao oligossacá-rido da esperamicina, ou a um seu derivado ou análogo. Exemplos de grupos alquilo C^^-Cg são o metilo (tal como está presente no oligossacárido da esperamicina), etilo, iso-propilo, butilo, sec--butilo, ciclo-hexilo e 2-hexilo. Estes grupos alquilo C^-Cg exemplificam também a porção do grupo alquilo C^-Cg de um grupo alquil C-L-Cg-oxicarbonilo de modo a que SR6 seja um alquil C^^-Cg--tiocarbonato.

Pode-se preparar um grupo alquilo C^-Cg R6 a partir do composto correspondente de Fórmula III onde R6é hidrogénio, o mer-captano, por alquilação com um iodeto ou trifluorosulfonato (tri-flato, Tf) do alquilo C1-c6 anterior, na presença de uma base relativamente moderada, não nucleofílica, tal como K2co3.

É também contemplado um processo para a preparação de um composto cuja estrutura corresponde à Fórmula IV

0R2

IV 72 593 SCRF Case 202.1(POR)

preferivelmente, um derivado substituído da tetra-hidropiranona.

De acordo com este processo, aquece-se um composto cuja estrutura corresponde à da Fórmula V

OR2 v ma qual R2 e R5 são definidos como anteriormente, numa composição líquida durante um período de tempo e a uma temperatura suficientes para se formar um composto cuja estrutura corresponde à da Fórmula IV. 0 grupo imidazilo que se mostra nas Fórmulas IV e V pode ser também tua grupo alcoxilo C-j^-Cg. A composição de líquido é, tipicamente, um solvente apróti-co. Exemplos destes solventes incluem tolueno, xileno, acetoni-trilo e dietil éter de etilenoglicol. A temperatura máxima à qual a composição de líquido é aquecida é, à pressão atmosférica, limitada pelo ponto de ebulição da composição. Contudo, uma composição de líquido não necessita dé ser utilizada à sua temperatura de refluxo. Geralmente, pode-se usar uma temperatura desde a temperatura ambiente (18-25°C) até cerca de 140°C, preferindo-se uma temperatura de cerca de 100 a cerca de 120°C, tal como a que se obtém com tolueno ao refluxo.

Tal como com a maior parte das reacções o rearranjo anterior prossegue mais rapidamente a temperaturas mais elevadas do que a temperaturas mais baixas. Para reacções de laboratório à escala de 0,1-0,5 gramas, o rearranjo fica substancialmente completo quando se realiza a cerca de 110°C durante 0,5-1 hora.

Na prática preferida, o produto do rearranjo é recuperado no final da reacção.

Prefere-se também que o grupo N-carbonilimidazilo ou alcoxi

72 593 SCRF Case 202.1(POR)

-21- cl"C6_carto0nil0 de um composto, cuja estrutura corresponde à da Fórmula IV, possa ser substituído por hidrogénio. Este passo é realizado fazendo reagir o grupo rearranjado tio-N-carbonilimida-zilo ou tiocarbonato com NaSMe à temperatura ambiente, ou com um reagente similar para proporcionar o mercaptano correspondente. Preferivelmente, o mercaptano assim produzido é também isolado e, geralmente, faz-se reagir rapidamente com um agente alquilante ou acilante.

Numa concretização particularmente preferida do processo anterior, prepara-se um composto cuja estrutura corresponde à da fórmula V fazendo reagir um composto cuja estrutura corresponde à da Fórmula VI, onde R2 e R5 são definidos como anteriormente,

OR* vi com tiocarbonildi-imidazole, numa composição de líquido, tal como uma mistura reaccional, usando um solvente aprótico, tal como acetonitrilo. Quando se forma um tiocarbonato, tal como na Fórmula IV, faz-se reagir um tiocloroformato de alquil C^-Cg na presença de uma base, tal como piridina. Mantém-se a mistura reaccional durante um período de tempo suficiente para que se forme um composto com uma estrutura que corresponde à da Fórmula V e, preferivelmente, esse composto é recuperado.

Tipicamente, a reacção realiza-se a uma temperatura compreendida entre cerca de 0 e cerca de 30°C, e, preferivelmente a uma temperatura próxima da temperatura ambiente, a cerca de 18-25°C. Quando a reacção se realiza à temperatura ambiente, mantém-se a reacção durante cerca de 18 a cerca de 24 horas para maximizar o rendimento. A temperaturas mais baixas a reacção prossegue mais lentamente enquanto que, para temperaturas mais elevadas, verifica-se a competição de um rearranjo para formar um composto com uma estrutura correspondente à da Fórmula IV e o rendimento diminui.

J 72 593 SCRF Case 202.1(POR)

-22-

Um composto com uma estrutura correspondente à da Fórmula IV pode também ser preparado, directamente, fazendo reagir uma composição líquida, contendo um Composto de Fórmula VI, com tio-carbonildi-imidazole, a uma temperatura compreendida entre cerca de 30°C e cerca de 140eC, e mantendo a mistura reaccional assim formada durante um período de tempo suficiente para se formar o material desejado. A formação directa de um tiocarbonato é realizada de um modo similar, usando tiocloroformato de alquilo C1-C6 e uma base tal como piridina.

Outro grupo de compostos particularmente preferidos tem uma estrutura que corresponde à da Fórmula VII

J OMe Rã

OR10

VII na qual R8 é hidrogénio ou um grupo protector do átomo de azoto, removível selectivamente, tal como FMOC (9-fluorenilmetil-oxicarbonilo), t-BOC (t-butiloxicarbonilo), CBZ (carbobenziloxi-lo) ou NVOC (nitroveratriloxicarbonilo) tal como é usado para a protecção de grupos α-amino durante reacções de síntese de pépti-dos; R9 é alquilo C-^-Cg, sendo o metilo e o etilo particularmente preferidos; R10 é hidrogénio ou um grupo R2, anteriormente definido; Z é O ou um grupo oximino, que é o produto da reacção do composto onde Z=0 com hidroxilamina ou uma hidroxilamina 0--substituída, tal como O-benzil-hidroxilamina ou O-metil-hidro-xilamina; e X é seleccionado de entre o grupo consistindo de o-nitroben-zoxilo, benzoxilo, halogéneo tal como cloro, bromo ou, preferivelmente fluoro, hidroxilo e tricloroacetamidato [0C(NH)CC13].

Um composto dissacárido de Fórmula VII é útil como intermediário na formação de um antibiótico quimérico com um aglicon, tal como se mostra nas Figuras 10, 13 e 14. Pode-se usar também

*

72 593 SCRF Case 202.1(POR) -23-um composto de Fórmula VII com um aglicon ilustrado nas Figuras 11 e 12 para formar um quimero. Exemplos de compostos cujas estruturas correspondem à Fórmula VII incluem os Compostos 148 e 160-167.

Os compostos análogos e derivados que aqui se descrevem são particularmente úteis na preparação de porções oligossacárido de um antibiótico quimérico, ou quimero, por reacção com um aglicon e, preferivelmente, com um aglicon que clive o ADN. O quimero produzido tem uma actividade de clivagem de ADN in vitro. bem como actividade contra microrganismos, tais como Escherichia coli. Klebsiella pneumoniae. Staphvloccus aureus. e Saccharomyces cerevisiae. e é também um agente útil no tratamento de certos cancros, tais como a leucémia P-388 e o melanoma B16 em ratinhos. Estes químeros possuem assim actividades biológicas similares às exibidas pela caliqueamicina e a esperamicina. Descrevem-se aqui depois exemplos de sínteses de químeros.

Um antibiótico quimérico é utilizado como agente activo numa composição farmacêutica aquosa na qual está dissolvido ou disperso. Assim, dissolve-se ou dispersa-se o quimero num diluente far-maceuticamente tolerável tal como água, água/etanol, solução salina normal ou numa solução aquosa tamponada, tal como uma solução salina tamponada com fosfato, ou dentro de veículos tal como é bem conhecido. Em Remmincrton7 s Pharmaceutical Sciences. Mack Publishing Co., Easton, PA (1980) podem-se encontrar exemplos de outros diluentes. 0 antibiótico quimérico está presente numa tal composição farmacêutica numa quantidade eficaz para se obter o resultado desejado. Por exemplo, quando a clivagem do ADN/ in vitro. é o resultado desejado, pode-se usar um composto da invenção numa quantidade suficiente para proporcionar uma concentração de cerca de 1,0 a cerca de 500 micromolar (μΜ) com uma concentração de ADN de cerca de 0,02 jug/μΐ. Como agente citotóxico (anti-tumoral), uma quantidade eficaz de um quimero é de cerca de 0,2 a cerca de 15 jug por quilograma de peso de corpo. Para uso como agente anti--microbiano, um quimero é utilizado numa concentração de cerca de

J 72 593 SCRF Case 202.1(P0R) -24-

0,01 a cerca de 50 jug/ml. A concentração ou a dosagem particular pode variar com o químero particular (e com o oligossacárido e com o aglicon) utilizado, bem como com o alvo particular; i.e., ADN, tumor ou micróbio, como é bem conhecido.

Os ensaios anti-microbianos e antitumorais, particulares, podem ser realizados como se descreve na Patente dos E.U.A. nfi. 4 837 206, cujas descrições são aqui incorporadas como referência, e no Pedido de Patente da G.B. na. G.B. 2 179 649A. A clivagem do ADN pode ser avaliada como se descreve em Nicolaou et al., J. Am. Chem. Soc. . 110.:7247 j(1988) ou Zein et al., Science. 240:1198 (1988).

Resultados

As estruturas altamente invulgares das esperamicinas e das caliqueamicinas, das quais a caliqueamicina laI é o membro mais proeminente [Lee et al., J. Am. Chem. Soc.. 109:3464 (1987)], associadas à sua actividade biológica fenomenal, têm estimulado o incremento súbito das investigações. Enquanto que a maioria dos esforços de síntese nesta área têm sido dirigidos a mímicos biológicos [Nicolaou et al., J. Am. CHem. Soc.. 110:4866 (1988)] e ao esqueleto de enodi-inobíciclo, [Haseltine et al., J. Am. Chem. Soc.. 110:7638 (1989); Danishefsky et al., J. Am. Chem. Soc. . 110:6890 (1988); Danishefsky et al., Tetrahedron Lett.. .29.:4681 (1988); Screiber et al., Tetrahedron Lett. . 30:433

(1989); Screiber et al., J. Am. Chem. Soc.. 110:631 (1988); Mag-nus et al., Tetrahedron Lett.. .30.:1905 (1989); Magnus et al., J. Chem. Soc. Commun.. 916 (1989); Magnus et al., J. Am. Chem. Soc.. 110:6921 (1988); Magnus et al., J. Am. Chem. Soc.. 110:1626 (1988); Tomioka et al., Tetrahedron Lett.. 30.:851 (1989)] os relatos referentes ao fragmento oligossacárido têm sido poucos [(a) para a a síntese do sistema aromático da caliqueamicina laI ver: Nicolaou et al., Anaew. Che. Int. Ed. Enal. . 27.:1097 (1988); (b) para a síntese de um metil-a-glicosido do tio-açúcar ver: Van La-ak et al., Tetrahedron Lett. . 30.:4505 (1988); (c) para a síntese do açúcar de isopropilamino da esperamicina ver: Golik et al., Tetrahedron Lett. 30:2497 (1989); para uma síntese do açúcar de etilamino da caliqueamicina laI ver: Kahne et al., Tetrahedron -25- 72 593 SCRF Case 202.1(POR)

Lett.. 31:21 (1990)].

A. O oliaossacárido ABC

Os resultados seguintes descrevem o primeiro estudo de síntese que proporciona soluções para a construção estereo-selec-tiva das ligações cruciais α-e, que se mostram na Figura 2, que estão presentes no oligossacárido da caliqueamicina lae síntese esta que permite obter o esqueleto do oligossacárido ABC numa forma opticamente activa.

Por inspecção atenta do fragmento de oligossacárido da caliqueamicina ia1/ podem-se identificar os aspectos intrigantes da síntese, seguintes (que se mostram na Figura 2): (a) a ligação β de alcoxilamina invulgar, ligando as unidades hidrato de carbono A e B através de ligações a e ; (b) a estereoquímica β da ligação de glicósido, o que, em combinação com a natureza 2-desoxilo do sacárido B, oferece um desafio único à construção sintética; (c) uma ponte de enxofre, ligando a unidade hidrato de carbono B com um sistema aromático, pesadamente substituído, através de ligações δ e e; e (d) a estereoquímica a dos centros estereogénicos contendo N e S das unidades sacárido A e B, respectivamente.

Os resultados aqui obtidos proporcionam soluções limpas e novas para todos os desafios anteriores. A concepção de síntese foi baseada nas desconexões retro-sintéticas indicadas na Figura 2 que conduzem ao tiocarbonildi-imidazole (Im2C=S) como fonte de enxofre, à N-hidroxiftalimida (HO-NPhth) como origem do grupo al-coxiamino e a precursores dos anéis A, B e C como pontos de partida potenciais.

No Esquema 1 (Figura 3) ilustrou-se a estratégia de síntese, tal como foi concebida a partir da análise anterior, e que, para além de resolver os problemas acima referidos, evita um passo de desoxigenação potencialmente difícil para gerar o grupo metileno do anel B. Assim, o intermediário I (Esquema 1 da Figura 3) foi concebido com um grupo éster na posição 2, para assegurar o resultado estereoquímico desejado da reacção de glicosidação

72 593 SCRF Case 202.1(POR) -26- (I-+II, estereoquímica β) bem como um meio para colocar, estereo-selectivamente, o átomo de enxofre na posição 4, através e um rearranjo sigmatrópico (II->-III-»-IV). Esperou-se então que o intermediário IV pudesse servir como precursor de V.

No Esquema 2 (Figura 4) ilustra-se a sequência reaccional que conduz ao composto alvo, Composto 1, que se mostra na Figura 2. Assim, após desprotecção selectiva, (DIBAL, 72 por cento) do composto diéster, Composto 2, epoxidação do composto 3 com ácido m-cloroperoxibenzóico (MCPBA), seguida da abertura regio- e estereo-selectiva do epóxido pelo ácido m-clorobenzóico, obteve-se o Composto 4 com um rendimento de 55 por cento. A sililação selectiva [3ί^ΒηΜε2, 67 por cento] do grupo 3-hidroxilo do Composto 4, seguida da exposição a condições de Swern, resultou na formação da enona, Composto 6, via uma sequência de oxidação-eliminação (88 por cento). A redução 1,2 da enona, Composto 6, usando ZnBH^-NH^Cl em éter [na ausência de NH4C1, a migração do grupo sililo de 0-3 para 0-2 era um processo competitivo após a redução 1,2 inicial da enona] prosseguiu suavemente a partir da face β e foi seguida pela esperada migração do éster, in situ. obtendo-e o α-lactol desejado, Composto 7, com um bom rendimento (razão α:β de cerca de 8:1, conforme determinado por RMN-H1). [Como exemplo da migração do éster 1,2 num cis-l-0-acil-2-hidroxi-açúcar ver: Pederson et al., J. Am. Chem. Soc. . 82.:3215 (1960)]. 0 processamento rápido do Composto 7 seguido da adição imediata de HO-NPhth, Ph3P e azodicarboxilato de di-isopropilo [Grochowski et al., J. Carbohvdr. Res.. 50.:C15 (1976)] resultou na formação do jS-glicósido, Composto 9, presumivelmente, através de um intermediário, Composto 8 (rendimento global, 53 por cento). Ainda que o mecanismo desta glicosidação não sej a totalmente compreendido, pode estar a ocorrer um processo SN2, uma vez que a proporção α/β do glicósido resultante, Composto 9, é dependente da proporção dos anómeros de lactol de partida. [Para uma observação similar, incluindo a formação de éster de glicosilo, ver Smith et al., Tetrahedron Lett.. 27:5813 (1986)]. SCRF Case 202.1(POR)

A libertação (usando NH2NH2 do grupo amino conduziu ao derivado de hidroxilamina, Composto 10, que foi condensado com cetona A sob condições ácidas para se obter o Composto 11 (92 por cento de rendimento global, a partir do Composto 9; obtendo-se um único isómero geométrico cuja estereoquímica não foi determina- da).

Por sililação [-Si^BuMe2, 99 por cento] do Composto 11 obte-ve-se o Composto 12, que por exposição ao DIBAL conduziu ao composto de hidroxilo, Composto 12 (91 por cento). Da reacção do Composto 13 com tiocarbonildi-imidazole, durante 20 horas a 25°C, obteve-se uma mistura do tio-imidazoleto, Compostos 14 e 15, este último resultando de um rearranjo [3,3]-sigmatrópico, estereoes-pecífico, do Composto 14. [Para um rearranjo de um xantato alílico em (a) um derivado hidrato de carbono, ver Ferrier et al., Chem. Commun.. 1385 (1970); (b) um derivado de ciclo-hexeno 2-substituído, ver: Trost et al., J. Am. Chem. Soc.. 194:886 (1982)]. O aquecimento da mistura reaccional ao refluxo, durante uma hora, em tolueno, completou o rearranjo no Composto 15, com um rendimento global de 85 por cento a partir do Composto 13. A geração do grupo tiol livre no Composto 15 usando NaSMe resultou na formação do Composto 16, que se fez reagir, imediatamente com cloreto de 2,4,6-trimetilbenzoilo, sob condições básicas, obtendo-se o tioéster desejado, Composto 17. Conseguiu-se a des--sililação selectiva com uma quantidade estequiométrica de nBu4NF, obtendo-se a cetona, Composto 18, com um bom rendimento. A redução estereo-selectiva do grupo carbonilo do anel B com um agente volumoso (K-Selectride) conduziu ao Composto 19 (74 por cento de rendimento global a partir do Composto 17). A des--sililação do Composto 19 conduziu ao di-hidroxilo, Composto 20, com um rendimento quantitativo. Finalmente, a redução estereo--selectiva da oxima no Composto 20 foi assegurada com BH3-NH3/p-toluenossulfonato de piridínio (PPTS), obtendo-se o sistema ABC desejado, Composto 1, com um rendimento de 85 por cento. A estereoquímica dos centros estereogénicos gerados nesta sequência (C-4, C-l', C-3' e C-4') era evidente a partir dos -28- -28- ,í*«: 72 593 SCRF Case 202.1(POR) dados de RMN. A química descrita proporciona soluções estereoquimicamente controladas para as construções das ligações cruciais do fragmento de oligossacárido da caliqueamicina ^ e permite obter o sub-fragmento interessante, Composto 1, para estudos de ligação a ADN e para outras investigações nesta área. Além disso, a sequência descrita facilita a síntese do fragmento de oligossacárido completo destes antibióticos, tal como aqui depois se descreve.

B. 0 dissacárido CD e o anel E

Os resultados que a seguir se discutem, descrevem a síntese dos sistemas de anel CD e E da caliqueamicina ^ 001110 Compostos 21 e 22 (Figura 5; para CD) e 23 e 24 (Figura 5? para E) nas suas formas de ocorrência natural.

No Esquema 3 (Figura 6) ilustra-se a construção estereo-selectiva dos sistemas CD, Compostos 21 e 22, a partir de fragmentos facilmente disponíveis, Compostos 25 e 29 [Nicolaou et al., Anqew. Chem. Inst. Ed. Enal.. 27:1097 (1988)]. Assim, o Composto 25 foi metilado, selectivamente, no grupo 3-hidroxilo, com nBu2SnO-CsF-MeI [Nogashima et al., Chem. Lett.. 141 (1987)] ob-tendo-se o Composto 26 (65 por cento de rendimento, mais 30 por cento de material de partida recuperado).

Por acetilação do Composto 26 obteve-se o Composto 27 (95 por cento de rendimento), um derivado concebido para sofrer a β--glicosidação selectiva devida à participação do grupo vizinho, tal como se deseja na presente sequência de síntese. 0 fluoreto, Composto 28, foi gerado a partir do Composto 27 após exposição a N-bromossuccinimida (NBS) e a trifluoreto de dietilaminoenxofre (DAST) [Nicolaou et al., J. Am. Chem. Soc.. 106:4159 (1984)] (85 por cento de rendimento). 0 acoplamento do Composto 28 com o Composto 29, sob a influência de AgCl04-SnCl2 [Nicolaou et al., J. Am. Chem. Soc.. 106:4159 (1984); Mukaiyama et al., Chem. Lett.. 431 (1981)] prosseguiu de um modo suave, obtendo-se, estereo-es-pecificamente, o glicósido, Composto 30, com um rendimento de 80 por cento. A desacetilação do Composto 30 sob condições convenci-

72 593 SCRF Case 202.1(POR) -29-onais forneceu o sistema CD requerido, na forma do di-hidroxime-tiléster, Composto 21, com um rendimento quantitativo.

Por bis(sililação) do Composto 21 (92 por cento), seguida da redução com DIBAL (90 por cento), obteve-se o álcool, Composto 32, via a formação de um derivado, Composto 31. Finalmente, da oxidação com cloreto de ruténio/periodato de sódio, do Composto 32, a -20°C, obteve-se o ácido carboxílico, Composto 33 (75 por cento) que foi acoplado com sucesso ao tiofenol sob a influência do diclorofosfato de fenilo [Ph0P(0)Cl2] [Liu et al., Con. J. Chem., 58:2695 (1980)], obtendo-se o feniltioéster, Composto 34, com um rendimento de 90 por cento. Finalmente, pela des-sililação do Composto 34 obteve-se o sistema de anel CD desejado, Composto 22 (90 por cento de rendimento). A síntese dos dois isómeros da unidade hidrato de carbono E, Compostos 23(IR) e 24(IS) prosseguiu a partir do hidrocloreto do éster de metilo da serina, Composto 35, como se mostra no Esquema 4 da Figura 7. Deste modo, aqueceu-se o Composto 35, em acetonitrilo ao refluxo, com carbonildi-imidazolo, na presença de 4-dimetilaminopiridina (DMAP) obtendo-se a oxazolidinona, Composto 36, com um rendimento de 95 por cento. Da N-alquilação do Composto 36 com um excesso de iodeto de etilo sob condições básicas, obteve-se o Composto 37 (75 por cento de rendimento) que foi reduzido com DIBAL obtendo-se o aldeído, Composto 38, com um bom rendimento. Está pressuposto que estão contemplados outros análogos de alquilo C^Cg do Composto 37 que podem ser similarmente preparados usando o iodeto de alquilo C^Cg ou o triflato de alquilo C^^-Cg, respectivos, em vez de iodeto de etilo. Por exemplo, usando o iodeto de isopropilo em vez do iodeto de etilo obtém-se o análogo de N-isopropilo dos Compostos 23 e 24, tal como está presente no anel E da esperamicina. A adição estereo-selectiva de um grupo alilo à função aldeído do Composto 38 foi conseguida através da acção de (-)-)3--metoxidi-isopinocanfeilborano e de brometo de alilmagnésio, obtendo-se o composto 39 (43 por cento de rendimento global a partir do Composto 37). Por metilação do Composto 39 (Ag20-Mel, 92 72 593 SCRF Case 202.1(POR)

-30- 4

por cento de rendimento) seguida por ozonólise (91 por cento de rendimento) obteve-se o metoxialdeído, Composto 41, via Composto 40. j A acetilação do Composto 41 prosseguiu suavemente em MeOH sob catálise de ácido, obtendo-se o Composto 42 (85 por cento de rendimento). Depois, expôs-se o Composto 42 a condições básicas para produzir o amino-álcool, Composto 43, com um rendimento de 96 por cento. Finalmente, por ciclização do Composto 43 em metanol com cloreto de hidrogénio anidro, obteve-se uma mistura dos isómeros de metoxilo, Compostos 23(IR) e 24(IS) que foram separados por recristalização em acetato de etilo, obtendo-se os Compostos puros 23 e 24. A química anteriormente descrita demonstra a tecnologia eficiente para a construção das ligações cruciais a (glicosídicas) e β (tioéster) ligando as unidades hidrato de carbono, D e 6, à porção aromática, anel C, do oligossacárido da caliqueamicina ^ que se mostra na Figura 1. Além disso, as sequências descritas tornam facilmente disponíveis derivados dos sistemas de anel CD e E das caliqueamicinas para estudos de ligação de ADN e para outras investigações de síntese bio-orgânica. C. Síntese total do oligossacárido da caliqueamicina ^

Os resultados que a seguir se descrevem utilizam a química, os compostos, os seus derivados e análogos, anteriormente descritos, para a preparação da porção oligossacárido da caliqueamicina •L1, Composto 100 (Figura 9). NO Esquema IV (Figura 8) resume-se a construção de intermediário chave, Composto 54, a partir de blocos de construção, Compostos 44, 45a e 10, utilizando glicosidações [Nicolaou et al., Anaew. Chem. Int. Ed. Encrl.f 27.:1097 (1988)] e o processo Mitsunobu [Mitsunobu, 0., Synthesisf 1 (1981)] bem como a reacção de formação de oxima, anteriormente descrita, para a reunião dos fragmentos requeridos.

Assim, por conversão do metilglicosido, Composto 45, no flu-oreto, Composto 45b, seguida do acoplamento com o Composto 44, obteve-se o dissacárido 46 com um rendimento de 51 por cento, ô

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-31- conjuntamente com o seu anómero (12 por cento). Por separação cromatográfica, seguida por desprotecção selectiva do Composto 46, obteve-se o Composto 47, que foi oxidado selectivamente com nBu2SnO-Br2 [David et al., J. Am. Chem. Soc. Perkin Trans. I. 1568 (1979)] em C-4 obtendo-se a cetona, Composto 48.

Depois, acoplou-se o Composto 48 com o derivado de hidroxi-lamina, Composto 10, anteriormente preparado, via a formação de oxima, obtendo-se o trissacárido, Composto 49 (83 por cento de rendimento). [Embora, nesta reacção se tenha obtido um único isómero geométrico, relativamente à ligação oxima, a sua estereo-química não foi estabelecida. Este composto, e todos os outros derivados de FMOC, descritos neste trabalho, exibiram sinais duplos no espectro de RMN devido aos rotómeros resultantes da rotação condicionada em torno da ligação C-N. O aquecimento da amostra de RMN a 60“C (C6D6) aumenta, frequentemente, a resolução do espectro obtendo-se os picos simples]. A elaboração do Composto 49, tal como se descreve para o Composto 11, conduziu, via Compostos 49-51, ao tionomidazoleto, Composto 52, com um rendimento global elevado (79 por cento). A termólise do Composto 52 prosseguiu suavemente obtendo-se o tio-éster, Composto 53 (98 por cento de rendimento) através do rear-ranjo sigmatrópico 3,3 esperado, do Esquema 1 (Figura 3). Finalmente, da clivagem induzida por NaSMe, da ligação CO-S do Composto 53 resultou o tiol requerido, Composto 54, com um rendimento elevado.

No Esquema 6 da Figura 9 apresentam-se as etapas finais da síntese do oligossacárido da caliqueamicina, Composto 100. Por acoplamento do cloreto de ácido, Composto 55, preparado a partir do Composto 33, com o tiol, Composto 54, na presença de DMAP, obteve-se o produto, Composto 56 (88 por cento com base no tiol). Por des-sililação controlada do Composto 56, obteve-se selectivamente a cetona, Composto 57, que foi reduzido com K-Selectride, como anteriormente se descreveu para o Composto 19, obtendo-se o hidroxilo, Composto 58, com um rendimento global de 75 por cento a partir do Composto 56.

72 593 SCRF Case 202.1(POR) -32

Da des-sililação completa do Composto 58, obteve-se o tetra-ol, Composto 59, que sofreu uma redução estereo-selectiva no sítio oxima, com BH3-NH3/p-toluenossulfonato de piridinio (PPTS), obtendo-se o Composto 60. Finalmente, por remoção do grupo FMOC do Composto 60 obteve-se o oligossacárido da caliqueamicina laI desejado, Composto 100, possuindo um metoxilo em vez de um grupo caliqueamicinona no átomo de carbono anomérico. A estrutura e as atribuições estereoquímicas do Composto 100 foram baseadas nos seus resultados de KMN e nos resultados do seu derivado de hexa-cetato, Composto 61. D. Aaentes quiméricos biologicamente activos

As sínteses anteriormente descritas de intermediários e do oligossacárido da caliqueamicina, Composto 100, ilustram a preparação de materiais que podem ser utilizados para preparar agentes quiméricos biologicamente activos. Exemplos destas acti-vidades biológicas incluem as actividades anti-microbiana, anti--cancerosa e de clivagem de ADN.

Nos Esquemas 7 e 8 que se mostram nas Figuras 10 e 11, res-pectivamente, ilustram-se exemplos de preparações de três oligos-sacáridos úteis para químeros. No Esquema 7 da Figura 10 ilustra-se a preparação de um análogo de dissacárido do dissacárido intermediário de anéis A e E, Composto 148 e também de um análogo de trissacárido do sistema de anel trissacárido ABE da caliqueamicina. Pode-se fazer reagir este trissacárido, Composto 154, com um ácido aromático, tal como se ilustra no Esquema 5, para formar um análogo de 4 anéis do oligossacárido da caliqueamicina. O Composto 154 contém também um grupo bloqueante foto-lábil, um grupo o-nitrobenzoxilo (ONBn), no átomo de carbono anomérico do anel A para ligação a uma molécula de aglicon.

Analisando mais especificamente o Esquema 7, fazem-se reagir os Compostos 62 e 45b, como se ilustra no Esquema 5, Passo (c), para formar o Composto 146 e, depois, o Composto 147 pelo passo (d). Faz-se reagir o Composto 147 como no passo (e) do Esquema 5, para formar o Composto 148. Faz-se reagir o Composto 148 com o Composto 10, como no passo (f) do Esquema 5, para formar o Com- 72 593 SCRF Case 202.1(POR)

-33- posto 149. Esse Composto é depois transformado nos 151 e 152 seguindo os passos (g), (h) e (j) do Esquema 5. o Composto 152 é depois rearranjado para formar o Composto 153 seguindo os procedimentos do passo (i) do Esquema 5 e é, depois, transformado no mercaptano, Composto 154, usando as condições do passo (k) do Esquema 5. A reacção do Composto 154 com o cloreto de ácido, preparado a partir do Composto 33, forma um oligossacárido de 5 anéis, enquanto que a reacção com cloreto de benzoilo ou com cloreto de 2,4,6—trimetilbenzoilo produz um oligossacárido de 4 anéis. A redução da ligação dupla de oxima com NH3-BH3 e PPTS em dicloro-metano, como se mostra no passo (e) do Esquema 6, proporciona a hidroxilamina substituída.

No Esquema 8 da Figura 11 ilustra-se um exemplo de um oligossacárido de 5 anéis, tal como o Composto 200. 0 Composto 200 é similar ao Composto 60, excepto quanto à presença do grupo ONBn foto-lábil, como R^, e quanto à presença de grupos trietil-sililo (SiEt3), R1, nos grupos hidroxilo do sacárido.

Como se pode ver na reacção do Esquema 8, o Composto 200 é irradiado (h ) para remover o grupo ONBn e substituí-lo por um grupo hidroxilo na posição 1, para formar o Composto 201. Depois, faz-se reagir o hidroxilo na posição 1 com DAST, como se descreveu na preparação do Composto 45a, para preparar o derivado de l-fluoro, Composto 202.

Depois, faz-se reagir o fluoro-derivado, Composto 202, com um aglicon, HZ, tal como se ilustra na Figura 11, para formar o antibiótico quimérico completo. Assim, faz-se reagir o Composto 202 com um aglicon, HZ, na presença de perclorato de prata (Ag-CIO4) e de cloreto estanoso (SnC^) para formar o químero bloqueado, Composto 203. O químero bloqueado é depois desbloqueado com morfolina em THF para remover o grupo FMOC e formar o químero de etilamina livre, Composto 204. Depois, removem-se os grupos trialquilsililo 72 593

SCRF Case 202.1(POR) com TBAF para formar o antibiótico quimérico completamente desbloqueado, Composto 205. A capacidade de clivagem do ADN, in vitro. do enodi-ino, HZ. é referida em Nicolaou et al., J. Am. Chem. Soc. . 110:7247 (1988) . Em Nicolaou et al.f Anqew. Chem. Int. Ed. Enal. . 28.:1272 (1989) descrevem-se as propriedades de clivagem de ADN de compostos tais como o HZ2. Pode-se também usar o análogo da dinemicina A, Composto 300, descrito em Nicolaou et al., J. Am. Chem. Soc. f 112:7416 (1990). 0 enodi-ino-diceto-diol, descrito em Mantlo et al., J. Orq. Chem.. 54:2781 (1989) como Composto 4 desses autores, é também referido como clivando ADN in vitro e é, deste modo, útil. Do mesmo modo, são úteis as porções aglicon da daunro-bicina e da doxorubicina.

No Esquema 9 que se mostra na Figura 12 ilustra-se a síntese de um outro químero biologicamente activo, na qual os Compostos 211-220 e 222 são análogos dos Compostos 10-20 e 22, respectiva-mente, e o Composto 221 é um análogo do Composto 1. Este químero utiliza uma porção de oligossacárido contendo três anéis que são análogos aos anéis A, B e C da caliqueamicina.

Aqui, fazem-se reagir o Composto 10 e o Composto 63 (um análogo dos Compostos A e 148), no passo (a), na presença de PPTS (p-toluenossulfonato de piridinio) para formar o Composto 211. Por bloqueamento do hidroxilo livre com ^BuMe2SiOTF forma-se o Composto 212. 0 tratamento do Composto 212 com DIBAL remove o éster aromático, tal como no caso do passo (j) do Esquema 2, para formar o Composto 213.

Faz-se reagir o Composto 213 com tiocarbonildi-imidazole para formar o éster de tio-imidazilo, Composto 214, que é rearran-jado por aquecimento em tolueno a 110°C, para formar o tioéster, Composto 215. 0 tratamento do Composto 215 com NaSMe, remove esse grupo éster para formar o mercaptano, Composto 216, que se faz reagir rapidamente com um cloreto de ácido carboxílico aromático, tal como cloreto de 2,4,6-trimetilbenzoilo, para formar o éster aromático, Composto 217. />»

72 593 SCEF Case 202.1(POR) -35-

Depois, trata-se o Composto 217 com um equivalente de TBAF para remover o grupo bloqueador de enol-éter e formar a cetona, Composto 218, de um modo análogo ao passo (o) do Esquema 2. De novo, seguindo os precedentes do Esquema 2, o grupo ceto do Composto 218 é reduzido com K-Selectride para formar o grupo hidroxilo correspondente do Composto 219, e os grupos trialquilsililo, bloqueadores de hidroxilo, restantes, são removidos para formar o Composto 220. O grupo oxima substituído do Composto 220 é reduzido com NH3-BH3/PPTS, tal como anteriormente se descreveu, para formar a hidroxilamina Ο,Ν-di-substituída, Composto 221, um análogo do Composto 1. Os hidrogénios dos grupos hidroxilo do Composto 221 são, depois, substituído com grupos siEt3 para formar o Composto 222. O Composto 222 é depois irradiado para remover o grupo ONBn de glicosilo no átomo de carbono anomérico para formar o Composto 223. Depois, faz-se reagir esse composto com DAST para formar o derivado de 1-fluoro, Composto 224.

Depois, faz-se reagir o Composto 224 com aglicon de clivagem de ADN, HZ, como anteriormente se descreveu, para formar o químero de hidroxilo bloqueado, Composto 225. A remoção dos trialquilsililo com TBAF forma o agente biologicamente activo, Composto 226.

No Esquema 10 da Figura 13, ilustra-se a síntese de um derivado de dissacárido de anéis A e E, Composto 167. Assim a partir do Composto 148, pela formação da oxima com o-benzil-hidroxilami-na, sob condições ácidas, obtém-se o Composto 160 (passo a, 90 por cento, único isómero geométrico de estereoquímica não definida), que foi sililado sob condições padrão para se obter o Composto 161 (passo b, 90 por cento). Por clivagem fotolítica [Ze-nhavi et al., J. Oro. Chem.. 37:2281 (1972); Zenhavi et al., ibid 37.:2285 (1972); Ohtsuka et al., J. Am. Chem. Soc. . 100:8210 (1978); Pillai, Synthesis, 1 (1980)] do grupo o-nitrobenzilo do Composto 161 (THF-H20, 15 minutos passo c) obteve-se o lactol,

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Composto 162, com um rendimento de 95 por cento. 0 tratamento do Composto 162 com NaH-Cl3CC=N [Grandler et al., Carbohydr. Res.. 135:203 (1985); Schmidt, Ancew Chem. Int. Ed. . Enal.. 25:212 (1986)] em CH2CI2 durante duas horas a 25°C (passo d) resultou na formação do α-tricloroacetimidato, Composto 163, com 98 por cento de rendimento. A reacção de álcool benzilico (2,0 equivalentes) com triclo-roacetimidato, Composto 163, sob condições de Schmidt [Grander et al., Carbohydr. Res.. 135:203 (1985); Schmidt, Anqew Chem. Int. Ed.. Enal.. 25:212 (1986) (BF3.Et20, CH2C12, -60-> -30eC, passo e)] resultou na formação estereo-selectiva do /3-glicósido, Composto 164 (79 por cento de rendimento) conjuntamente com o seu anómero (16 por cento), separado cromatograficamente [RMN-H1, 500 MHz, C6D6, Composto 164: ^^2=6'5 Hz, epi-Composto 164; J1/2=2/4 Hz]. Por outro lado, por tratamento do lactol, Composto 162, com DAST, obteve-se o fluoreto de glicosilo, Composto 163a com um rendimento de 90 por cento (mistura anomérica de cerca de 1:1, passo d). A reacção do Composto 163a com álcool benzílico na presença de silicato de prata-SnCl2 [Paulsen et al., Chem. Ber.. 114:3102 (1981)] resultou na formação do jS-glicósido, Composto 164, e do seu anómero, com 85 por cento de rendimento (mistura anomérica de cerca de 1:1). A produção do intermediário, Composto 166, via Composto 165, prosseguiu suavemente, sob condições de desprotecção convencionais, passos f e g. Finalmente, a exposição do Composto 166 a Ph2SiH2, na presença de Ti(01Pr)4 resultou na formação do Composto 167 desejado como único produto detectável (92 por cento de rendimento, passo h). O que é interessante, é que a redução do Composto 166 com NaCNBH3-H + conduziu, predominantemente, ao epímero 4 do Composto 167 (90 por cento de rendimento). As determinações estereoquimicas do Composto 167 e do epi-167 em C-4 foram baseadas nas constantes de acoplamento de RMN-H·*· [RMN-H1, 500 MHz, CgDg, Composto 167:J3^4=9,5 Hz; epi-Composto 167:J3^4=1,9 Hz, J4 5=1,5 Hz].

Como aplicação desta tecnologia, prepararam-os análogos híbridos da caliqueamicina-dinemicina A, Compostos 307a e 307b (Esquema 11 da Figura 14), a partir do modelo descrito recentemente, Composto 300 [Nicolaou et al., J. Am. Chem. Soc.f 112:7416 72 593 SCRF Case 202.1(POR)

-37-(1990); para outra aproximação a um modelo de dinemicina A, ver: Porco, Jr., et al.f ibid 112:7410 (1990)]. Assim, por acoplamento do Composto 300 com bromoacetato de etilo, sob condições básicas, obteve-se o Composto 301 (60 por cento de rendimento, passo a) que foi convertido no álcool primário, Composto 303 (80 por cento de rendimento global) por: (i) hidrólise de éster; (ii) formação do tioléster de 2-piridilo (passo b), e (iii) redução (passo c). 0 acoplamento do Composto 303 (1,2 equivalentes) com tricloroace-timidato, Composto 163 no passo d, sob a influência de BF3.Et20 resultou na formação de dois produtos principais (70 por cento, proporção de cerca de 1:1) e de dois produtos em menor quantidade (14 por cento, proporção de cerca de 1:1) que foram separados cromatograficamente.

Verificou-se que os isómeros principais eram os jS-glicósidos diastereoméricos, Composto 304a (Rf=0,12, sílica, 20 por cento de acetato de etilo em éter de petróleo) e o Composto 304b (Rf=0,10, sílica, 20 por cento de acetato de etilo em éter de petróleo) [RMN-H1, 500 MHz, CgDg, Composto 304a:Jif2=6'5 Hz; Composto 304b:Ji/2=6'5 Hz] enquanto que se mostrou que os isómeros em menor quantidade eram os anómeros dos Compostos 304a e 304b em C-l [RMN-H1, 500 MHz, CgDg, epi-Composto 304a, J1^2=2,4 Hz: epi-Composto 304b, 2=2,4 Hz]. Por desprotecção sequencial dos Compostos 304a e 304b, como se descreveu anteriormente para o Composto 164, obtiveram-se as oximas, Compostos 306a e 306b via Compostos intermediários, Compostos 305a e 305b, respectivamente, passos e e f.

Finalmente, por redução dos Compostos 306a e 306b, nas condições com Ph2SiH2-Ti(01Pr)4 (passo g) obtiveram-se exclusivamente os Compostos pretendidos, Compostos 307a e 307b, respectivamente, (90 por cento de rendimento). A estereoquímica em C-4 dos Compostos 307a e 307b foi de novo baseada na constante de acoplamento J4^3=9,5e J4^5=9,5 Hz para o H-4 recentemente instalado. As estruturas dos Compostos 304a-307a e 304b-307b são intermutáveis, uma vez que a estereoquímica absoluta dos aglicons não foi determinada.

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Deve-se entender que se pode preparar um químero útil usando um aglicon (HZ) que se mostra nas Figuras 11 e 12 e o dissacá-rido (Composto 163 que se mostra na Figura 13). Inversamente, pode-se usar um análogo de dinemicina A, tal como o Composto 300, em vez de uma das moléculas HZ das Figuras 11 e 12, na preparação de um químero, tal como se mostra nessas figuras.

Melhor forma de realizar a invenção Preparação A: Composto 2 0 Composto 2 foi preparado a partir do derivado de 1,2,3--triacetoxi-4,6-benzilidenogalactose, descrito em J. Orq. Chem.. 27.:3647 (1964) por reacção desse composto com 1,2 equivalentes de N-bromossuccinimida (NBS), 0,03 equivalentes de azo-bis-iso-buti-ronitrilo (AIBN) e de 0,6 equivalentes de BaC03 em benzeno a 80°C durante uma hora, obtendo-se a l,2,3-triacetoxi-4-benzoiloxi-ga-lactose. Depois, fez-se reagir esse composto de tri-acetoxilo com 1,2 equivalentes de tributilestanano (Bu3SnH) e 0,05 equivalentes de AIBN em benzeno, a 80°C durante 0,75 horas, para formar a l,2,3-triacetoxi-4-benzilfucose, com um rendimento global de 76 por cento.

Depois, fez-se reagir esse derivado da fucose, numa mistura de 30 por cento de HBr em ácido acético (HOAc) que foi, ele próprio, misturado com CH2C12 (1:1; v/v), na forma de uma solução 1M a 0°C durante 20 minutos. Depois, fez-se reagir o produto da reacção com 4 equivalentes de Mg e com 0,1 equivalente de I2 em THF a 67°c durante 5 horas obtendo-se o fucal, Composto 2, desejado com um rendimento de 64 por cento. Rf=0,29 (sílica, 25 por cento de éter em éter de petróleo); [a]23D +6,7°C (c-2,2, CHC13); IV (CHC13) nmax, 3029 (m), 2991 (w), 1732 (s), 1650 (m), 1602 (w), 1402 (m), 1372 (m), 1277 (s), 1233 (s), cm-1; RMN-H1 (300 MHz, CDC13) δ 8,09 (d, J=7,3 Hz, 2 H, aromático), 7,59 (t, J=7,4 Hz, 1 H aromático), 6,56 (dd, J=6,3, 1,8 Hz, 1 Η, H-l), 5,67 (m, 1 H, CHO), 5,53 (bd, J=4,3 Hz, 1 H, CHO), 4,70 (ddd, J=6,3, 1,8, 1,8 HZ, 1 Η, H-2), 4,33 (q, J=6,6 Hz, 1 Η, H-5), 1,95 (s, 3 H, acetato), 1,33 (d, J=6,6 Hz, 3 H, H-6); HMRS (FAB) Calculado para C15H1705 (M+H): 277,1076; encontrado: 277,1079. jf 72 593 SCRF Case 202.1(POR) -39-

Exemplo 1: Composto 3 (Passo a. Ficrura 4)

Fez-se reagir o glical conhecido, Composto 2, com 1,0 equivalente de hidreto de di-isobutilalumínio (DIBAL) em CH2C12 a -78°C durante 2,5 horas, obtendo-se o Composto 3 com um rendimento de 72 por cento e 15 por cento de Composto 2 recuperado.

Exemplo 2: Composto 4 (Passo b. Ficrura 4^

Fez-se reagir o Composto 3 com 2,5 equivalentes de ácido m--cloroperbenzóico (MCPBA) a 55 por cento, na presença de MgS04 a 0°C durante 0,5 horas, obtendo-se o Composto 4 com um rendimento de 55 por cento. Rf=0,26 (sílica, 2 por cento de metanol em di-clorometano); [a]23D +63,4°C (c=l,5, CHC13); IV (CHC13) nmax, 3567 (m), 3029 (m), 1730 (s), 1601 (mw), 1577 (m), 1452 (m), 1426 (m), 1388 (m), 1332 (m), 1315 (m), 1273 (s), 1250 (s) cm-1; RMN--H1 (300 MHz, CDC13) δ 8,07-7,92 (m, 4 H, aromático), 7,65-7,41 (m, 5 H, aromático), 6,52 (d, J=l,l Hz, 1 Η, H-l), 5,56 (d, J=3,4 Hz, 1 Η, H-4), 4,35-4,26 (m, 2 Η, H-5, CHO), 3,97 (ddd, J=9,7, 1,7, 1,7 Hz, 1 H, CHO), 2,98 (d, J=8,4 Hz, 1 H, OH), 2,76 (d, J=9,7 Hz, 1 H, OH), 1,26 (d, J=6,5 Hz, 3 Η, H-6).

Exemplo 3: Composto 5 (Passo c, Ficrura 4Ϊ

Fez-se reagir o Composto 4 com 1,5 equivalentes de cloreto de t-butildimetilsililo (^BuMe2SiCl) e 2,0 equivalentes de imida-zole em CH2C12, a 25 °C durante um período de tempo de 30 horas obtendo-se o Composto 5 com um rendimento de 67 por cento.

Exemplo 4: Composto 6 (Passo d, Ficrura 4Ϊ

Agitaram-se cloreto de oxalilo (1,5 equivalentes) e DMS0 (2,0 equivalentes) em CH2C12, a uma temperatura de -78°C durante 20 minutos. A essa solução adicionou-se uma solução de Composto 5 (1,0 equivalente), em diclorometano, e agitou-se a solução resultante durante 1 hora a -78°C. Depois, adicionou-se trietilamina (5,0 equivalentes) e aqueceu-se a mistura reaccional resultante à temperatura ambiente, durante um período de tempo de 1 hora, ob-tendo-se o Composto 6 com um rendimento de 88 por cento. Rf=0,47 (sílica, 15 por cento de éter em éter de petróleo); [a]23D -17,8°C (c=0,54, CHC13); IV (CHC13) nmax, 2956 (s), 2932 (s), 2860 (s), 1739 (s), 1711 (s), 1633 (s), 1364 (s), 1250 (s) cm"1;

72 593 SCRF Case 202.1(POR) -40- RMN-H1 (300 MHz, CDCI3) S 7,95 (bs, 1 H, aromático), 7,89 (dd, J=7,7, 0,8 Hz, 1 H, aromático), 7,54 (dd, J=7,7, 0,9 Hz, 1 H, aromático), 7,37 (dd, J=7,9, 7,9 Hz, 1 H, aromático), 6,40 (s, 1 H, H-l), 6,17 (d, J=l,6, Hz, 1 Η, H-4), 4,92 (dq, J=6,7, 1,7 Hz, 1 Η, H-5), 1,38 (d, J=6,8 Hz, 3 Η, H-6), 0,96 (S, 9 H, t-Bu), 0,19 (S, 3 H, CH3); HMRS (FAB) Calculado para CigH2605ClSi (M+H): 397,1238; encontrado: 397,1256.

Exemplo 5: Composto 7 (Passo e. Figura 4^

Fez-se reagir o Composto 6 com 1,2 equivalentes de Zn(BH4)2 e com 0,5 equivalentes de NH4C1 em éter, a 0°c durante um período de tempo de 20 minutos, obtendo-se o Composto 7.

Exemplo 6: β-Hidroxiftalimida-qlicose. Composto 9 (Passos e e f. Ficrura 4)

Noutra preparação, a uma solução da enona, Composto 6 (0,850 g, 2,13 mmole) em éter (5 ml) a 0°C, adicionou-se cloreto de amónio (55 mg, 1,0 mmole) seguido de boro-hidreto de zinco (16 ml, 2,6 mmole, 0,16 M em éter) e agitou-se a solução resultante durante 20 minutos. Depois diluiu-se a solução com éter frio (250 ml), lavou-se com solução saturada fria de NH4C1 (2 x 100 ml) e com solução saturada fria de NaHC03 (1 x 100 ml). Secou-se a solução (MgS04) e concentrou-se, obtendo-se o lactol, Composto 7. Dissolveu-se o lactol em bruto em THF (11 ml) e, a esta solução, adicionou-se N-hidroxiftalimida (0,38 g, 2,3 mmole) e trifenil-fosfeno (PPh3; 0,67 g, 2,6 mmole). A essa solução adicionou-se azodicarboxilato de di-isopropilo (0,51 ml, 2,6 mmole), gota a gota e agitou-se a solução cor-de-laranja durante 30 minutos. Diluiu-se a solução com CH2Cl2 (300 ml) e lavou-se com solução saturada de NaHC03 (2 x 150 ml) e com H20 (2 x 150 ml). Secou-se a solução (MgS04) e removeu-se o solvente sob vácuo. Crornatografouse o material em bruto (sílica, CH2C12) obtendo-se o jS-glicósido puro, Composto 9 (0,617 g, 53 por cento), Rf=0,36 (sílica, 50 por cento de éter em éter de petróleo); [a]23D -75,20°C (c=l,0, CHCI3); IV (CHC13) nmax, 3030 (mw), 2958 (m), 2933 (m), 2897 (rnw), 2887 (mw), 2860 (m), 1795 (m) , 1741 (vs), 1666 (m), 1577 (w), 1470 (m), 1427 (w), 1390 (m), 1371 (m), 1341 (m), 1316 (m), 1306 (m), 1284 (m), 1278 (m), 1251 (s) cm-1; RMN-H1 (300 MHz,

SCRF Case 202.1(POR) CDCI3) s 8,09 (dd, J=l,7, 1,7 Hz, 1 H, aromático), 8,00 (bd, J=7,7 Hz, 1 H, aromático), 7,83-7,69 (m, 4 H, ftalimida), 7,54-7,50 (m, 1 H, aromático), 7,39 (dd, J=7,9, 7,9 Hz, 1 H, aromático), 5,87 (ddd, J=5,8, 2,2, 1,5 Hz, 1 Η, H-2), 5,42 (d, J=6,0 Hz, 1 H, H-l), 5,01 (bs, 1 Η, H-4), 4,50 (m, 1 Η, H-5), 1,37 (d, J=6,7 HZ, 3 Η, H-6), 0,79 (s, 9 H, t-Bu), 0,16 (s, 3 H, CH3), 0,10 (s, 3 H, CH3). HMRS (FAB) Calculado para C27H3^OyNClSi (M+H): 544,1558; encontrado: 544,1530.

Exemplo 7: Composto 10 (Passo q. Figura 4)

Fez-se reagir o Composto 9 com 1,0 equivalente de hidrazina (NH2NH2) em metanol (MeOH) a 25 °C durante um período de tempo de 10 minutos obtendo-se o Composto 10.

Exemplo 8: Composto A

Fez-se reagir a D-fucose na forma de uma solução 1,0 M em álcool benzílico contendo também 0,1 equivalentes de ácido toluenossulfónico (TSA) a uma temperatura de 65 “C durante um período de tempo de 3 horas. Removeram-se os voláteis e cristalizou-se o α-benzilglicósido em éter. Por concentração das águas--mães de éter obteve-se mais material, com um rendimento total de 83 por cento.

Fez-se reagir o α-benzilglicósido com 3 equivalentes de (CH3)2C(OCH3)2 e 0,1 equivalentes de TSA em acetona a 25"C durante 1,5 horas obtendo-se o 3,4-diacetonido correspondente com um rendimento de 92 por cento.

Fez-se reagir o produto anterior com 1,5 equivalentes de NaH, 1,5 equivalentes de brometo de benzilo, 0,1 equivalentes de iodeto de tetra-butilamónio em tetra-hidrofurano (THF) a uma temperatura de 0 a 25°C durante um período de tempo de 5 horas. Tratou-se o produto da reacção com ácido acético 0,6 M/HC1 2N (3:1 v:v) a 25°C durante um período de tempo de 2 horas obtendo-se a l,2-di-0-benzil-3,4-di-hidroxi-fucose com um rendimento de 85 por cento.

Fez-se reagir esse derivado da fucose com 1,0 equivalentes •T-siEsa*

72 593 SCRF Case 202.1(POR) -42-de óxido dibutilestânico (Bu2SnO) em metanol (MeOH) a 80°C durante um período de tempo de 1 hora. Tratou-se o produto de reacção com 1,0 equivalentes de bromo (Br2) em benzeno, a 25eC durante um período de tempo de 0,5 horas, obtendo-se o Composto A com um rendimento de 76 por cento. Rf=0,27 (sílica, 70 por cento de éter em éter de petróleo; [a]23D +127eC (0=1,8, CHC13); IV (CDC13) nrnax, 3510 (m), 3068 (m), 3066 (m), 3031 (s), 3013 (s), 2941 (m), 2877 (m), 1729 (s), 1497 (m), 1455 (s), 1368 (m), 1351 (m) cm-1; RMN-H1 (300 MHz, CDC13) δ 7,44-7,29 (m, 10 H, aromático), 4,94 (d, 3==3,5 Hz, 1 H, H-l), 4,86-4,61 (m, 5 Η, H-3, 4 x benzílico), 4,31 (q, J=6,6 Hz, 1 Η, H-5), 3,58 (dd, J=9,9, 3,6 Hz, 1 Η, H-2), 3,44 (bs, 1 H, OH), 1,25 (d, J=6,5 Hz, 3 Η, H-6).

Exemplo 9; Composto 11 (nasso h. Figura 4) A uma mistura exaustivamente seca de hidroxilamina, Composto IO, (0,526 g, 1,27 mmole) e da cetona A (0,521 g, 1,52 mmole), adicionou-se benzeno (2,5 ml) seguido de ρ,-toluenossulfonato de piridínio (PPTS) (32 mg, 0,13 mmole). Agitou-se a solução durante 3 horas. Depois, diluiu-se a solução com acetato de etilo (EtOAc) (100 ml), lavou-se com solução saturada de NaHC03 (2 x 75 ml) e secou-se (MgS04). Após concentração da solução, por cromatografia (sílica, 50 por cento de éter em éter de petróleo) obteve-se a oxima, Composto 11 (0,863 g, 92 por cento a partir do Composto 9). Rf=0,39 (sílica, 50 por cento de éter em éter de petróleo); [a]23d -31,5°C (c=l,l, CHC13); IV (CHC13) nmax, 3744 (w), 2935 (m), 2863 (rn), 1729 (s), 1671 (m), 1461 (m), 1371 (m), 1310 (m) cm-1; RMN-H1 (300 MHz, CDC13) δ 8,01 (bs, 1 H, aromático), 7,92 (d, J=7,8 Hz, 1 H, aromático), 7,52 (d, J=7,5 Hz, 1 H, aromático), 7,39-7,28 (m, 11 H, aromático), 5,64 (dd, J=5,5, 1,7 HZ, 1 Η, H-2')/ 5,42 (d, J=5,5 Hz, 1 H, H-l'), 5,05 (d, J=l,4 HZ, 1 H, H~4'), 4,91 (d, J=3,2 Hz, 1 H, H-l), 4,76 (q, J=6,8 Hz, 1 H, H-5), 4,73 (d, J=12,3 Hz, 2 H, 2x benzílico), 4,62 (m, 2 Η, H-3, benzílico), 4,57 (ddq, J=6,6, 2,0, 2,0 Hz, 1 H, H-5'), 4,52 (d, J=12,4 Hz, 1 H, benzílico), 3,67 (dd, J=6,2, 3,3 Hz, 1 Η, H-2), 2,61 (bs, 1 H, OH), 1,39 (d, J=6,8 Hz, 3 Η, H-6), 1,28 (d, J=6,5 Hz, 3 H, H-6'), 0,79 (s, 9 H, t-Bu), 0,17 (s, 3 H, CH3-Si), 0,12 (s, 3 H, CH3-SÍ). HMRS (FAB calculado para C39H4909NClSi (M+H): 738,2865; encontrado: 738,2844.

J 72 593 SCRF Case 202.1(POR)

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-43-

Exemplo 10: Composto 12 (Passo i. Ficmra 4)

Fez-se reagir o Composto 11 com 1,5 equivalentes de triflato de t-butildimetilsililo (^-BuMeSiOTf) e com 2,5 equivalentes de 2,6-lutidina a -25°C durante um período de tempo de 0,5 horas, obtendo-se o Composto 12 com um rendimento de 99 por cento.

Exemplo 11: Composto 13 (Passo i. Ficmra 4^

Fez-se reagir o Composto 12 com 2,5 equivalentes de DIBAL em CH2Cl2 a -78°C durante 1 hora obtendo-se o Composto 13 com um rendimento de 91 por cento. Rf=0,26 (sílica, 30 por cento de éter em éter de petróleo); [a]23D +12,6°C (c=0,7, CHC13); IV (CHC13) nmax, 3581 (w), 3033 (w), 3011 (m), 2957 (s), 2932 (m), 2897 (m), 2887 (m), 2859 (s), 1727 (w), 1672 (m), 1497 (w), 1471 (m), 1463 (rn), 1455 (m), 1363 (m), 1259 (s) cm-1? RMN-H1 (300 MHz, CDC13) δ 7,35-7,25 (m, 10 H, aromático), 5,24 (d, J=4,9 Hz, 1 Η, H-l'), 5,12 (q, J=6,9 HZ, 1 Η, H-5), 5,07 (d, J=2,0 Hz, 1 Η, H-l), 4,86 (bs, 1 Η, H-4'), 4,85 (d, J=ll,8 Hz, 1 H, benzílico), 4,69 (d, J=12,4 Hz, benzílico), 4,63 (d, J=12,3 Hz, 1 H, benzílico), 4,54 (q, J=12,4 Hz, 1 H, benzílico), 4,45 (dq, J=6,7, 1,6 Hz, 1 Η, H-5'), 4,41 (d, J=3,5 Hz, 1 Η, H-3), 3,99 (bm, 1 Η, H-2'), 3,57 (dd, J=3,1, 2,4 HZ, 1 Η, H-2), 2,13 (d, J=4,8 Hz, 1 H, OH), 1,43 (d, J=7,0 Hz, 3 Η, H-6), 1,21 (d, J=6,6 Hz, 3 H, H-6'), 0,94 (S, 9 H, t-Bu), 0,77 (S, 9 H, t-Bu), 0,19 (S, 6 H, 2 x CH3-Si), -0,01 (s, 6 H, 2 x CH3- Si); HMRS (FAB) calculado para C38Hg()08^^2 (M+H): 714,3856; encontrado: 714,3842.

Exemplo 12: Composto 14 (Passo k. Ficrura 4)

Fez-se reagir o Composto 13 com 1 equivalente de tiocarbo-nildi-imidazole em acetonitrilo a 25 °C durante 20 horas obtendo--se uma mistura dos Compostos 14 e 15.

Exemplo 13: Composto 15 fPasso 1. Ficmra 4)

Aqueceu-se uma solução do tio-imidazoleto, Composto 14, (0,120 g, 0,146 mmole) em tolueno (7 ml) ao refluxo durante 40 minutos. Concentrou-se a solução e cromatografou-se (sílica, 50 por cento de éter em éter de petróleo), obtendo-se o tiono-imida-zoleto, Composto 15 (0,118 g, 98 por cento: e 85 por cento de rendimento global a partir do Composto 13). R£=0,30 (sílica, 50 -44- 72 593 SCRF Case 202.1(POR) por cento de éter em éter de petróleo); [a]23D +87,7QC (0=1,5, CHCI3); IV (CHCI3) nmax, 2957 (s) 2932 (s), 2860 (s), 1697 (s), 1672 (s), 1472 (s), 1364 (s), cm-1; RMN-H1 (500 MHz, CDCI3) S 8,18 (d, J=0,9 Hz, 1 H, imidazole)), 7,45 (dd, J=l,5, 1,4 Hz, 1 H, imidazole), 7,36-7,25 (m, 10 H, aromático), 7,10 (dd, J=l,7, 0,6 Hz, 1 H, imidazole), 5,83 (d, J=2,8 Hz, 1 Η, H-l'), 5,10-5,07 (m, 3 H, H-l, H-5, H-2'), 4,87 (d, J=12,3 Hz, 1 H, benzílico), 4,70 (d, J=12,3 Hz, 1 H, benzílico), 4,67 (d, J=12,3 Hz, 1 H, benzílico), 4,56 (d, J=12,3 Hz, 1 H, benzílico), 4,42 (d, J=3,3 Hz, 1 Η, H-3), 4,28 (dq, J=6,8, 1,9 Hz, 1 Η, H-5'), 4,05 (d, J=l,8 Hz, 1 Η, H—4' ) , 3,60 (dd, J=3,4, 2,3 Hz, 1 Η, H-2), 1,46 (d, J=6,7 Hz, 3 Η, H-6'), 1,42 (d, J=7,l Hz, 3 Η, H-6), 0,91, 0,79 (singuletos, 9 H cada, 2 x tBu), 0,25, 0,21, 0,01, 0,00, (singuletos, 3 H cada, 4 x CH3-S1). HMRS (FAB) calculado para c42H62°8N3SSl2 (M+H): 824,3796; encontrado: 824,3836.

Exemplo 14: Composto 16 (Passo m. Ficrura 4)

Tratou-se o Composto 15 com uma quantidade catalítica de NaSMe, em etilmercaptano, à temperatura ambiente, durante um período de tempo de 6 horas obtendo-se o mercaptano livre, Composto 16.

Composto 15: Composto 17 (Passo n. Ficrura 4Ϊ

Fez-se reagir o Composto 16, rapidamente, com 2m0 equivalentes de cloreto de 2,4,6-trimetilbenzoilo, 10 equivalentes de Et3N e 0,35 equivalentes de 4-(dimetilamino)piridina (DMAP), em CH2C12 a 25eC, durante 8 horas obtendo-se o tioéster, Composto 17, com um rendimento global de 91 por cento a partir do Composto 15. Rf=0,24 (sílica, 15 por cento de éter em éter de petróleo); [a]23d +110°C (c-1,1, CHCI3); IV (CHCI3) nmax, 3011 (m), 2957 (s), 2931 (s), 2898 (m), 2886 (m), 2859 (s), 1669 (s), 1655 (w), 1472 (m), 1463 (m), 1455 (m), 1362 (m), 1305 (m), 1259 (s), 1239 (m) cm-1; RMN-H1 (500 MHz, CDCI3) S 7,35-7,24 (m, 10H, aromático), 6,82 (s, 2 H, aromático), 5,79 (d, J=2,8 Hz, 1 Η, H--1'), 5,12-5,08 (m, 2 Η, H-5, H-l), 5,01 (d, J=2,8 Hz, 1 Η, H--2'), 4,86 (d, J=12,4 Hz. 1 H. benzílico), 4,67 (S, 2 H, 2 X benzílico), 4,54 (d, J=12,4 Hz, 1 H, benzílico), 4,41 (d, J=3,3 Hz, 1 Η, H-3), 4,23 (q, J=6,7 Hz, 1 H, H-5'), 4,01 (s, 1 Η, H-

-'jr* 72 593 SCRF Case 202.1(POR) -45--4 '), 3,56 (dd, J=3,1, 2,3 Hz, 1 Η, H-2), 2,26 (S, 9 H, 3 X CH3--aromático), 1,47 (d, J=6,81 Hz, 3 Η, H-6'), 1,40 (d, J=6,8 Hz, 3 Η, H-6), 0,93, 0,76 (singuletos, 9 H cada, 2 x t-Bu), 0,23, 0,18, -0,03, -0,04 (singuletos, 3 H cada, 4 x CH3-SÍ). HMRS (FAB) calculado para C48HyQ08NSSi2 (M+H): 876,4360; encontrado; 876,4396.

Exemplo 16; Composto 18 (Passo o; Figura 4)

Fez-se reagir o Composto 17 com 1,0 equivalente de fluoreto de tetra-butilamónio (TBAF) em THF/H20/HOAc (100;25;1; v;v;v) a 0°C durante 20 minutos obtendo-se a ceto-oxima. Composto 18.

Exemplo 17; Composto 19 (Passo p. Figura 4)

Fez-se reagir o Composto 18 com 2,5 equivalentes de K-Selec-tride (tri-sec-butilboro-hidreto de potássio, 1M em THF) em dime-toxietano a -78°C, durante 1,5 horas obtendo-se a a-hidroxi--oxima, Composto 19, com um rendimento global de 74 por cento a partir do Composto 17. Rf=0,45 (sílica, 50 por cento de éter em éter de petróleo); [a]23D + 56,6°C (c=0,8, CHC13); IV (CHC13) nmax, 3610 (w), 3032 (w), 3012 (m), 2956 (m), 2931 (s), 2859 (m), 1674 (m), 1610 (w), 1471 (m), 1462 (m), 1455 (m), 1370 (m), 1259 (m) cm-1; RMN-H1 (500 MHz, CDCl3) S 7,35-7,25 (m, 10 H, aromático), 6,83 (s, 2 H, aromático), 5,48 (dd, J=9,2, 2,3 Hz, 1 Η, H-l'), 5,12 (q, J=7,0 Hz, H-5), 5,05 (d, J=2,2 Hz, 1 Η, H-l), 4,84 (d, J=12,3 Hz, 1 H, benzílico), 4,69 (d, J=12,4 Hz, 1 H, benzílico), 4,63 (*, J=12,3 HZ, 1 H, benzílico), 4,55 (d, J=12,3 Hz, 1 H, benzílico), 4,38 (d, J=3,4 Hz, 1 Η, H-3), 4,34 (bs, 1 H, H-3'), 4,10 (dq, J=10,2, 6,3 Hz, 1 Η, H-5')# 3,77 (dd, J-10,1, 2,6 Hz, 1 Η, H-4'), 3,57 (dd, J=3,6, 2,3 Hz, 1 Η, H-2), 2,26 (s, 9 H, CH3-aromático), 2,14 (ddd, J=13,3, 3,2, 3,2 Hz, 1 Η, H-2'-eq.), 2,02 (m, 2 H, 0-H, H-2'-ax.), 1,40 (d, J=6,8 Hz, 3 Η, H-6), 1,38 (d, J=6,2 Hz, 3 H, H-6#), 0,77 (s, 9 H, t-Bu), -0,02 (s, 3 H, CH3- Si). HMRS (FAB) calculado para C42H5808NSSi (M+H): 764,3652; encontrado: 764,3637.

Exemplo 18: Composto 20 (Passo q. Ficrura 4)

Fez-se reagir o Composto 19 com 1,2 equivalentes de TBAF em THF, a uma temperatura de 0 a 25°C, durante 0,75 horas, obtendo--se a oxima não protegida, Composto 20, com um rendimento de 100 72 593 SCRF Case 202.1(POR) j- ‘ j

-46- por cento, Rf=0,40 (sílica, 80 por cento de éter em éter de petróleo); [a]23D + 70°C (c=0,6, CHC13); IV (CHC13) nmax, 3687 (W), 3601 (V), 3018 (m), 2928 (s), 2856 (m), 1674 (s), 1609 (m), 1455 (m), 1373 (m) cm”1; RMN-H1 (300 MHz, CDCI3) δ 7,34-7,26 (m, 10 H, aromático), 6,83 (s, 2 H, aromático), 5,48 (dd, J=9,7, 2,3 Hz, 1 Η, H-l'), 4,91 (d, J=3,3 Hz, 1 Η, H-l), 4,77-4,69 (m, 2 H, H-5, benzílico), 4,65 (s, 2 H, 2 x benzílico), 4,61 (d, J=5,4 Hz, 1 Η, H-3), 4,53 (d, J=12,3 Hz, 1 H, benzílico), 4,32 (bd, J=2,6 Hz, 1 Η, H-3')/ 4,10 (m, 1 Η, H-5'), 3,76 (dd, J=10,5, 2,6 Hz, 1 Η, H-4'), 3,66 (dd, J=9,9, 3,3 Hz, 1 Η, H-2), 2,70 (bs, 1 H, OH), 2,26 (s, 9 H, 3x CH3- aromático), 2,13 (ddd, J=13,8, 2,9, 2,9 Hz, 1 H, H-2'-eq.), 2,05 bs, 1 H, OH), 1,98 (ddd, J=ll,8, 11,8, 2,8, HZ, 1 H, H-2'-ax.), 1,48 (d, J=6,8 Hz, 3 Η, H-6), 1,40 (d, J=6,4 Hz, 1 H, H-6'). HMRS (FAB) calculado para C36H440gNS (M+H): 650,2787; encontrado: 650,2750.

Exemplo 19: Composto 1 (Passo r. Ficrura 4)

Fez-se reagir o Composto 20 com 6 equivalentes de BH3-NH3 e com 6 equivalentes de PPTS, a 25"C durante um período de tempo de 4 horas, obtendo-se o Composto 1 com um rendimento de 85 por cento. Rf=0,30 (sílica, 80 por cento de éter em éter de petróleo); [a]23d + 46,4°C (C=0,4, CHC13); IV (CHC13) nmax, 3604 (W), 3494 (W), 3031 (m), 3011 (s), 2958 (s), 2928 (s), 2874 (m), 2858 (m), 1726 (w), 1675 (s), 1610 (m), 1497 (w), 1455 (s), 1434 (sh), 1380 (m), 1356 (w), 1335 (w), 1299 (w), 1282 (w), 1263 (w), 1231 (m) cm-1; RMN-H1 (500 MHz, CDC13) δ 7,39-7,21 (m, 10 H, aromático), 6,82 (s, 2 H, aromático), 6,53 (bs, l H, NH), 5,01 (dd, J=10,0, 1,8 Hz, 1 H, H-l'), 4| 00 0 (d, J= =3,5 Hz, 1 H :, H-l), 4,70 (d, J 11 H to ·* Hz, 1 H, benzílico) / 4, 64 (d, J=12, 0 HZ, 1 H, benzílico), 4,56 (d, J=ll /9 HZ , 1 H, benzi1 ico) , 4 ,50 (d, J=12,4 HZ, 1 H, benzílico )/ 4,38 (dd, J= 9,7, 9 ,7 Hz, 1 H, H-3), 4,25 (bs, 1 Η, H- -3'), 4,05-3 ,96 (m, 2 H, H-5, H-5'), 3 ,69 (dd, J=10,7, 2,5 HZ, 1 Η, H-4'), 3/ 38 (dd, J= =9, 6, 3,6 Hz, 1 H, r H- 2), 2,97 (bs, 1 H, OH), 2,35 (dd, J= 9,9 Hz, 1 H, H-4), 2,26 (S, , 3 H, CH3-aromático), 2,25 (s, 6 H, 2 x CH3-aromático), 1,97-1,94 (m, 2 H, OH, H-2'- eq.), 1,77 (m, 1 H, H-2'-ax.), 1,38 (d, J=6,2 Hz, 1 H, CH3), 1,27 (d, J=6,2 Hz, CH3). HMRS (FAB) calculado para C36H4608NS (M+H): 652,2944; encontrado: 652,2936.

<3* 72 593 SCRF Case 202.1(POR) -47-

Exemplo 20: Composto 25 (Ficnira 6)

Fez-se reagir a L-ramnose com anidrido acético [(Ac)2)0], com uma quantidade catalítica de DMAP, em CH2C12 a 25 °C, para formar o tetra-acetato. Por reacção com tiofenol (PhSH) e SnCl4, em CH2C12 a 0°C/ obteve-se o tiofenilglicósido. A desacetilação foi realizada usando carbonato de potássio em MeOH a 25 °C, obtendo-se o Composto 25 com um rendimento global de cerca de 60 por cento.

Exemplo 21: Composto 26 (Passo a, Ficrura 6)

Tratou-se o Composto 25 com lml equivalentes de Bu2SnO em MeOH a 65°C durante duas horas, seguido de 4 equivalentes de Mel e 1,1 equivalentes de CsF em dimetilformamida (DMF) a 25°C, durante 12 horas, obtendo-se o Composto 26 com um rendimento de 65 por cento mais 30 por cento do Composto 25 de partida.

Exemplo 22: Composto 27 (Passo b. Ficrura 6)

Fez-se reagir o Composto 26 com 3,0 equivalentes de Ac20, 3,5 equivalentes de Et3N e com uma quantidade catalítica de DMAP, em CH2C12 a uma temperatura de 0 a 25°C durante um período de tempo de 2 horas obtendo-se o Composto 27 com um rendimento de 95 por cento.

Exemplo 23: Composto 28 (Passo c. Ficrura 6)

Fez-se reagir o Composto 27 com 2 equivalentes de trifluore-to de dietilaminoenxofre (DAST) e com 1,4 equivalentes de NBS em CH2C12 a uma temperatura de -78 a 0°C, durante 3 horas obtendo-se o Composto 28 com um rendimento de 85 por cento.

Composto 24; Composto 30 (Passo d. Ficrura 6^

Fizeram-se reagir 1 equivalente do Composto 29, 2,0 equivalentes do Composto 28, 4,0 equivalentes de SnCl2 e 4,0 equivalentes de AgC104, em CH2C12, na presença de peneiros moleculares de 4 A, a uma temperatura de -20 a 0°C, durante iam período de tempo de 12 horas, obtendo-se o Composto 30 com um rendimento de 80 por cento. 72 593 SCRF Case 202.1(POR)

Obteve-se um melhor rendimento como se segue: a um balão de 500 ml de fundo redondo, embrulhado em folha de alumínio, adicionaram-se 6,7 g (3,4 eq.) de AgC104 e 6,1 g (3,4 eq.) de SnCl2. Secou-se azeotropicamente esta mistura de catalisadores, três vezes, com benzeno recentemente destilado. Ao balão adicionaram-se 4 gramas de peneiros moleculares de 4 8, em pó, activados. Secou-se esta mistura, de catalisadores e de peneiros moleculares, azeotropicamente, ima vez mais, com benzeno.

Secaram-se 3,34 gramas (9,5 mmole, 1,0 eq.) do fenol, Composto 29, azeotropicamente, três vezes, com benzeno, num balão de 100 ml e, depois, dissolveram-se em 47 ml de CH2C12 seco (0,2M).

Transferiu-se a quantidade anterior de Composto 29 para o balão de 500 ml de fundo redondo. Arrefeceu-se a mistura reaccio-nal até -20°C e, à mistura reaccional, adicionaram-se lentamente, 3,0 gramas (1,2 eq.) do composto de fluoreto (Composto 28), seco azeotropicamente (três vezes com benzeno) dissolvidos em 57 ml de CH2C12 (0,2M). Deixou-se a mistura reaccional aquecer, lentamente, até à temperatura ambiente e agitou-se a esta temperatura durante 2 horas.

Depois, arrefeceu-se de novo a mistura reaccional até -20°C e adicionaram-se, lentamente, mais 1,25 g (4,7 mmole; 0,5 eq.) do composto de fluoreto, Composto 28, dissolvidas em 24 ml de CH2C12 (0,2M). Deixou-se a mistura reaccional atingir a temperatura ambiente e agitou-se a esta temperatura durante 2 horas. Repetiu-se o procedimento anterior, uma vez mais, usando 0,5 g (0,19 mmole; 0,2 eq.) do composto de fluoreto, Composto 28.

Quando todo o fenol foi consumido, filtrou-se a mistura reaccional através de um leito de celite e diluiu-se com EtOAc e éter (1:1; v:v, total de 500 ml) esmagados com 100 ml de solução aquosa saturada de NHC03, 100 ml de água e 20 ml de salmoura. Depois, secou-se a fase orgânica com MgS04, concentrou-se e purificam-se, usando sílica gel, com 10 por cento de benzeno-acetato de etilo, como eluente, obtendo-se 5,0 gramas (8,5 mmole) de material acoplado, Composto 30 (90 por cento de rendimento com base no 72 593 SCRF Case 202.1(POR)

-49-

Composto 29).

Exemplo 25: Composto 21 (Passo e. Ficrura 6)

Tratou-se o Composto 30 com 0,5 equivalentes de K2CO3 em MeOH a 25°C, durante um período de tempo de 2 horas, obtendo-se o Composto 21 com um rendimento quantitativo. Rf=0,20 (sílica, 70 por cento de EtOAc em éter de petróleo; p.f. 137°C; [a]23D -47,4°C (C=0,5, CHCI3), IV (CHCI3) nmax, 3600 (m), 2950 (rn), 1750 (S), 1450 (S), 1400 (S), 1380 (s), 1280 (s) cm"1; RMN-H1 (300 MHz, CDCI3) δ 5,72 (S, 1 H, H-l), 4,45 (s, 1 Η, H-2), 4,18-4,15 (m, 1 Η, H-5), 3,90 (S, 3 H, H3CO), 3,85 (s, 3 H, H3CO), 3,82--3,80 (m, 4 H, H3CO, H-3), 3,61 (dd, J=9,5, 9,4 Hz, H-4), 3,54 (s, 3 H, H3CO), 2,44 (s, 1 H, HO), 2,34 (s, 3H, H3C-aromático), 1,27 (d, J=6,2 HZ, H-6).

Exemplo 26: Composto 31 (Passo f. Figura 6)

Tratou-se o Composto 21 com 2,5 equivalentes de Et3SiOTf e com 3,0 equivalentes de 2,6-lutidina em CH2C12 a uma temperatura de -20 a 0°C, durante 1 hora, obtendo-se o Composto 31 com um rendimento de 92 por cento.

Exemplo 27: Composto 32 (Passo q. Figura 6)

Tratou-se o Composto 31 com 2,5 equivalentes de DIBAL em CH2C12 a uma temperatura de -78 a 0°C durante 2 horas, obtendo-se o Composto 32 com um rendimento de 90 por cento.

Exemplo 28: Composto 33 (Passo h. Ficrura 6)

Fez-se reagir o Composto 32 com 0,02 equivalentes de hidrato de RuC13 e com 4,0 equivalentes de NaI04 num solvente de CC14/CH3CN/H20 (2:2:3; v:v:v) a uma temperatura de 0 a 25°C, durante 3 horas, obtendo-se o Composto 33 com um rendimento de 75 por cento.

Exemplo 29: Composto 34 (Passo i. Ficrura 6)

Fez-se reagir o Composto 33 com 1,5 equivalentes de dicloro-fosfato de fenilo [Ph0P(0)Cl2], 4,0 equivalentes de piridina e 2,0 equivalentes de tiofenol (PhSH) em dimetoxietano, a uma temperatura entre 0 e 25°C durante 1 hora, obtendo-se o Composto 34

72 593 SCRF Case 202.1(POR) -50- com um rendimento de 90 por cento.

Exemplo 30: Composto 22 fPasso i. Figura 6Ί

Fez-se reagir o Composto 34 com 2,2 equivalentes de TBAF em THFF, a 0°C durante 0,5 horas, obtendo-se o Composto 22 com um rendimento de 90 por cento. Rf=0,23 (sílica, 70 por cento de EtOAc em éter de petróleo); p.f. 140°C; [a]23D -36,2°C (c=0,35, CHCI3); IV (CHCI3) nmax, 3600 (m), 3026 (m), 3010 (m), 2939 (m), 1685 (s), 1478 (s), 1458 (m) cm-1; RMN-H1 (300 MHz, CDCI3) S 7,48-7,45 (m, 2 H, aromático), 7,40-7,37 (m, 3 H, aromático), 5,67 (d, J=1,4 Hz, 1 H, H-l), 4,41 (dd, J=2,8, 1,6 Hz, 1 Η, H-2), 4,20-4,13 (m, 1 Η, H-5), 3,89 (s, 3 H, H3CO), 3,80-3,76 (m, 4 H, H3CO, H-4), 3,58 (dd, J=9,4, 9,4 Hz, H-4), 3,51 (S, 3 H, H3CO), 2,38 (s, 3 H, H3C-aromático), 1,24 (d, J=6,3 Hz, H-6).

Exemplo 31: Composto 36 (Passo a. Ficrura 7^

Tratou-se o hidrocloreto de metil-serina (Composto 35) com 1,1 equivalentes de carbonildi-imidazole e com 1,0 equivalente de DMAP, em ch3CN, a 80°C durante 2 horas, obtendo-se o Composto 36 com um rendimento de 95 por cento.

Exemplo 32: Composto 37 (Passo b. Ficrura 7)

Tratou-se o Composto 36 com 1,0 equivalente de NaH e com 4 equivalentes de iodeto de etilo (EtI) em DMF, a 0°C durante 0,5 horas obtendo-se o Composto 37 com um rendimento de 75 por cento.

Exemplo 33: Composto 38 (Passo c. Ficrura 7)

Tratou-se o Composto 37 com 1,5 equivalentes de DIBAL em to-lueno, a -78°C durante 1,5 horas, obtendo-se o Composto 38.

Exemplo 34: Composto 39 (Passo d. Ficrura 7)

Tratou-se o Composto 38 com 1,2 equivalentes de (-)-jS-meto-xidi-isopinocamfeilborano e 1,2 equivalentes de brometo de alil-magnésio em éter a uma temperatura de -78 a 25°C, durante um período de tempo de 4 horas. Depois, adicionaram-se NaOH 3N e H202 a 30 por cento e manteve-se a mistura reaccional a 40°C durante 1 hora obtendo-se o Composto 39 com um rendimento global de 43 por cento a partir do Composto 37. 72 593 SCRF Case 202.1(POR)

-51- r-

Exemplo 35: Composto 40 (Passo e. Ficnira 7)

Fez-se reagir o Composto 39 com 1,2 equivalentes de Ag20 e 5 equivalentes de Mel em DMF, a 40"C durante 12 horas, obtendo-se o Composto 40 com um rendimento de 92 por cento.

Exemplo 36: Composto 41 (Passo f. Fiaura 7)

Tratou-se o Composto 40 com ozono em CH2Cl2/MeOH (1:1; v:v) a -78°C, seguido de 2,0 equivalentes de fosfito de trimetilo [P(0Me)3] a uma temperatura de -78 a 25°C durante 14 horas, obtendo-se o Composto 41 com um rendimento de 91 por cento.

Exemplo 37: Composto 42 (Passo a. Ficrura 7)

Dissolveu-se o Composto 41 em MeOH, na presença de resina Amberlyst-15, a 25°C durante 17 horas, obtendo-se o acetal, Composto 42, com um rendimento de 85 por cento.

Exemplo 38: Composto 43 (Passo h. Fiaura 7^

Tratou-se o Composto 42 com 1,5 equivalentes de NaOH em Me0H/H20 (2:1; v:v), a 90°C durante 1 hora, obtendo-se o Composto 43 com um rendimento de 95 por cento.

Exemplo 39: Compostos 23 e 24 (Passo i. Figura 7)

Tratou-se o Composto 43 com 1,5 equivalentes de HC1 em MeOH, a 25°c durante 3 horas, obtendo-se os Composto 23 e 24, na forma de uma mistura, com um rendimento de 88 por cento. Os compostos 23 e 24 foram obtidos, separadamente, por recristalização em acetato de etilo (EtOAc).

Composto 23: Rf=0,27 (sílica, 10 por cento de MeOH em EtOAc); [a]23D -56,7°C (c=l,0, CHCl3); IV (CHCI3) nmax 3012 (m), 2969 (s), 2937 (s), 2911 (s), 2834 (m), 1466 (m), 1446 (m), 1376 (m), 1358 (w), 1248 (m), 1202 (m), 1154 (m), 1127 (s) cm-1; RMN- -H1 (300 MHZ, C6D6) S 4,66 (dd, J=3,5, 2,3 Hz, 1 Η, H-l), 3,79 (dd, J=11,0, 4,7 Hz, 1 Η, H-5 eq), 3,61-3,51 (m, 2 Η, H-5 ax, H- -3), 3,15 (s, 3 H, H3C0), 3,03 (s, 3 H, H3CO), 2,74 (ddd, J=9,7, 9,0, 4,6 Hz, 1 Η, H-4), 2,52-2,38 (m, 2 H, H2CN), 2,11 (ddd, J= =12,7, 4,5, 2,2 Hz, 1 Η, H-2 eq), 1,47 (ddd, J=12,7, 10,5, 3,6 Hz, 1 H, H-2 ax), 1,30 (bs, 1 Η, HN), 0,91 (t, J=7,l Hz, 3 H, 72 593 SCRF Case 202.1(POR)

-52- H3C).

Composto 24: Rf=0,18 (sílica, 10 por cento de meOH em EtOAc); [a]D25 +99f7°C (c=l,0, CHC13); IV (CHC13) nmax 2971 (s), 2836 (s), 2700 (s), 2457 (m), 1584 (m), 1449 (m) , 1392 (m), 1239 (m), 1191 (m) cm"1; RMN-H1 (300 MHz, C6D6) S 4,14-4,07 (m, 2 H, H-5 eq, H-l), 3,37 (S, 3 H, H3CO), 3,07 (dd, J=9,6, 9,1 Hz, 1 H, H-5 ax), 3,07-3,00 (m, 2 Η, H-3, H3CO), 2,65 (ddd, J=9,0, 9,0, 4,5 HZ, 1 Η, H-4), 2,46-2,33 (m, 2 H, H2C-N), 2,13 (ddd, J=12,5, 4.5, 2,4 Hz, 1 Η, H-2 eq), 1,96 (bs, 1 Η, HN), 1,59 (ddd, J=12,4, 10.5, 8,9 Hz, 1 H, H-2 ax), 0,89 (t, J=7,l Hz, 3 H, H3C).

Exemplo 40: Composto 44 (Ficrura 8)

Fez-se reagir a D-fucose com um excesso de Ac2o para formar o derivado de tetra-acetato. Depois, faz-se reagir o tetra-acetato de fucose com 30 por cento de HBr em HOAc, para preparar o derivado de l-bromo-2,3,4-tri-acetato. Faz-se reagir esse composto com MeOH na presença de Ag2C03 para formar o metil-glicosido. Removem-se os grupos acetato e faz-se reagir o triol resultante com carbonildi-imidazole e, depois, com HC1 2N em THF, para formar o derivado de 3,4-carbonato, Composto 42.

Exemplo 41: Composto 45 (Passo a da Ficrura 8)

Agitou-se uma mistura dos Compostos 23 e 24, K2C03 (1,5 equivalentes) e cloroformato de 9-fluorenilmetilo (1,5 equivalentes) e, THF/H20 (7:3, v:v), a 0°C durante 30 minutos, obtendo-se os derivados de FMOC, correspondentes, com um rendimento de 93 por cento. Agitaram-se esses derivados numa solução de H0Ac/H20 (3:1, v:v) a 90°C, obtendo-se uma mistura dos compostos de 1--hidroxilo correspondentes, incluindo o Composto 45a, com um rendimento de 95 por cento.

Exemplo 42: Composto 45b (Passo b. Ficmra 8)

Fez-se reagir o Composto 45a com 5,0 equivalentes de DAST em THF, e na presença de peneiros moleculares de 4 A, a uma temperatura de -78°C a 0°C, durante um período de tempo de 1 hora, ob-tendo-se o fluoreto, Composto 45b, com um rendimento de 92 por cento. 72 593

SCRF Case 202.1(POR) -53-

Exemplo 43: Composto 46 f Passo e. Ficmra 8^ ·< . <sr"'

Agitou-se uma suspensão de perclorato de prata anidro (0,97 g, 4,7 mmole) e de cloreto estanoso (0,88 g, 4,7 mmole), secos por remoção azeotrópica de benzeno, e de peneiros moleculares de 4 8, em pó, activados (1 g), em éter (20 ml), a 25eC durante 15 minutos e, depois, arrefeceu-se até -50°C. A esta mistura adicio-nou-se uma solução do fluoreto, Composto 45a (0,936 g, 2,34 mmole) e do álcool, Composto 44 (0,720 g, 3,53 mmole), duas vezes seca por remoção azeotrópica de benzeno, em acetonitrilo (20 ml), lentamente, (durante 5 minutos) e deixou-se aquecer gradualmente até 0eC (durante 2 horas. Diluiu-se a mistura com éter (150 ml) e filtrou-se através de celite, e lavou-se o resíduo com éter (3x75 ml). Filtraram-se de novo os filtrados combinados para remover o álcool insolúvel, Composto 44. Lavou-se a solução resultante com solução saturada de NaHC03 (7 x 200 ml) e com salmoura (1 x 200 ml). Depois, secou-se a solução (MgS04) e concentrou-se. Por cro-matografia, com uma eluição em gradiente, do produto em bruto (sílica, de 50 por cento de acetato de etilo em éter de petróleo, até acetato de etilo puro), obteve-se o α-glicósido, Composto 46, puro (0,701 g, 51 por cento) e o anómero β (0,164 g, 12 por cento) .

Exemplo 44: Composto 47 (Passo d. Fiaura 8)

Fez-se reagir o Composto 46 com 0,5 equivalente, de K2C03 em etilenoglicol/THF (1:20, v:v) a 25°C durante 0,25 horas obtendo--se o Composto 47 com um rendimento de 93 por cento.

Exemplo 45: Composto 48 (Passo e. Ficmra 8)

Fez-se reagir o Composto 47 com 1,0 equivalentes de Bu2SnO em MeOH, a 65°C durante 0,75 horas, e, depois com 1,0 equivalentes de bromo (Br2) em benzeno, na presença de peneiros moleculares de 4 8, durante 0,5 horas obtendo-se o Composto 48 com um rendimento de 70 por cento e 18 por cento do Composto 47.

Exemplo 46: Composto 49 (Passo f. Ficmra 8)

Fez-se reagir o Composto 48 com 1,2 equivalentes do Composto 10 e com 0,05 equivalentes de PPTS em benzeno, a 25°C durante 2 horas, obtendo-se o Composto 49 com um rendimento de 83 por cen- -54- 72 593 /Ψ

SCRF Case 202.1(POR) to.

Exemplo 47: Composto 50 (Passo q. Ficrura 8)

Fez-se reagir o Composto 49 com 1,3 equivalentes de tBuMe2SiOTf e com 1,7 equivalentes de 2,6-lutidina, em CH2C12, a uma temperatura de 0 a 25°C durante 2 horas, obtendo-se o Composto 50 com um rendimento quantitativo.

Exemplo 48: Composto 51 (Passo h, Ficrura 8)

Fez-se reagir o composto 50 com 3,0 equivalentes de DIBAL em CH2Cl2 a -78°C durante 0,5 horas, obtendo-se o Composto 51 com um rendimento de 91 por cento.

Exemplo 49: Composto 52 (Passo i. Figura 8)

Fez-se reagir o Composto 51 com 3,0 equivalente de tiocarbo-nildi-imidazole em acetonitrilo, a 25eC durante 4 horas, obtendo--se o Composto 52 com um rendimento de 87 por cento.

Exemplo 50: Composto 53 (Passo i. Ficrura 8)

Aqueceu-se o Composto 52, em tolueno, a 110°C durante 0,5 horas para formar o Composto 53 rearranjado com um rendimento de 98 por cento.

Exemplo 51: Composto 54 (Passo k, Ficrura 8)

Fez-se reagir o Composto 53 com uma quantidade catalítica de NaSMe em etil-mercaptano, durante 6 horas à temperatura ambiente, obtendo-se o Composto 54 com um rendimento de 88 por cento.

Exemplo 52: Composto 55 O Composto 55, o cloreto de ácido do Composto 33, foi preparado fazendo reagir o Composto 33 com (C0C1)2, a 25°C, durante 1 hora, obtendo-se o composto 55 com um rendimento de 95 por cento.

Exemplo 53: Composto 56 (Passo a. Figura 9)

A uma solução do cloreto de ácido, Composto 55, (0,168 g, 0,217 mmole) em diclorometano (1,0 ml), adicionou-se o tiol, Composto 54 (0,145 g, 0,154 mmole) seguido de 3 equivalentes de DMAP 72 593

SCRF Case 202.1(POR) (56 mgf 0f56 mmole). Agitou-se a solução durante 6 horas e, depois, diluiu-se com acetato de etilo (60 ml), lavou-se com solução saturada de NH4C1 (2 x 40 ml), solução saturada de NaHC03 (2 x 40 ml) e secou-se (MgS04). Concentrou-se a solução e croma -tografou-se (sílica, 30 por cento de éter em éter de petróleo) obtendo-se o tioéster, Composto 56 (0,132 g, 52 por cento) e o tiol de partida, Composto 54 (59 mg, 41 por cento).

Exemplo 54: Composto 57 (Passo b. Figura 9)

Fez-se reagir o Composto 56 com 1,0 equivalente de TBAF e 3,5 equivalentes de HOAc em THF, a -23"C durante 0,25 horas obtendo-se o Composto 57.

Exemplo 55: Composto 58 (Passo e. Figura 9)

Fez-se reagir o Composto 57 com 3 equivalentes de K-Selec-tride em dimetoxietano/THF (9:1, v:v), a -78°C durante 1,5 horas obtendo-se o Composto 58 com um rendimento global de 75 por cento a partir do Composto 56.

Exemplo 56: Composto 59 (Passo d. Ficnira 9)

Faz-se reagir o Composto 58 com 3 equivalentes de TBAF em THF obtendo-se o Composto 59.

Exemplo 57: Composto 60 (Passo e. Ficnira 9)

Faz-se reagir o Composto 59 com NH3-BH3 e PPTS em CH2C12, como anteriormente se descreveu, obtendo-se o Composto 60.

Exemplo 58: Composto 100 (Passo f. Ficnira 9)

Faz-se reagir o Composto 60 com morfolina/THF (1:1, v:v) para remover o grupo FMOC e proporcionar o oligossacárido da cali-queamicina í χαΙ, Composto 100.

Exemplo 59: Composto 61 (Passo a. Ficnira 9)

Acetilou-se o Composto 100 com Ac20 na presença de Et3N e de DMAP em CH2C12, como anteriormente se descreveu, para formar o acetoxilo, Composto 61. 72 593 SCRF Case 202.1(POR)

Exemplo 60: Composto 62 (Figura 101 O Composto 62 é o análogo de o-nitrobenzilo de Composto 44 e é preparado de um modo análogo. Assim, acetila-se a D-fucose com Ac20 para formar o tetra-acetato e depois faz-se reagir com HBr/HOAc para formar o l-bromo-2,3,4-triacetoxifucose. Depois faz-se reagir esse material com álcool o-nitrobenzílico na presença de Ag2C03 para formar o triacetato de o-nitrobenzilgli-cosilo. Por desacetilação, seguida da reacção com carbonildi-imi-dazole e HC1 2N em THF, obtém-se o Composto 62.

Exemplo 61: Composto 63 (Ficnira 12) o Composto 63 é preparado a partir do Composto 62 de um modo similar à preparação da porção ceto do Composto 48. Assim, faz-se reagir o Composto 62 com ^uMeSiCl para bloquear o hidroxilo na posição 2. 0 grupo bloqueador 3,4-carbonato é removido com NaOMe em THF/MeOH (pode-se usar também K2C03 em etilenoglicol/THF). Depois, oxida-se o hidroxilo na posição 4 usando 1,0 equivalente de Bu2SnO em MeOH a 65°C, seguido de 1,0 equivalente de Br2 em ben-zeno, na presença de peneiros moleculares de 4 8, a 25eC.

Exemplo 62: Composto 167 fFioura 13)

Esta síntese começa com o Composto 148, que foi preparado de uma forma análoga à usada para o Composto 48. Assim, fez.se reagir o Composto 148 no passo (a) com 1,1 equivalentes de 0--benzil-hidroxilamina e uma quantidade catalítica de PPTS em ben-zeno, a 25°C durante 0,5 horas, obtendo-se o Composto 160 com um rendimento de 90 por cento. Depois fez-se reagir o Composto 160, no passo (b), com 1 equivalente de Et3SiOTf e com 1,2 equivalentes de 2,6-lutidina em diclorometano, a 0°C durante 0,5 horas obtendo-se o Composto 161 com um rendimento de 98 por cento. Por irradiação do Composto 161 com ultra-violetas (passo c) em THF-H20 (9:1; v:v), a 0°C durante 15 minutos, obteve-se o Composto 162 com um rendimento de 95 por cento. A reacção do Composto 162 com uma quantidade catalítica de hidreto de sódio em tricloroacetonitrilo-diclorometano (1:12, v:v) a 25°C durante 2 horas, produziu o Composto 163 com um rendimento de 98 por cento, no passo (d), enquanto que a reacção com 72 593 SCRF Case 202.1(POR) -57-3 equivalentes de DAS em THF a uma temperatura de -78°C a 0°C durante 1 hora no passo d', produziu o Composto 163a, com um rendimento de 90 por cento. Por reacção do Composto 163 com 2 equivalentes de álcool benzílico e com 1 equivalente de eterato de BF3 em diclorometano a uma temperatura de -60°C (a -30°C obteve-se o Composto 164 com um rendimento de 95 por cento, com uma proporção a;j0 de cerca de 1:5 (passo e). Por reacção do Composto 163a com 1,2 equivalentes de álcool benzílico, 1,2 equivalentes de silica-to de prata, com uma quantidade catalítica de SnCl2, em diclorometano, a 25°C, durante 3 horas, obteve-se também o Composto 164, com um rendimento de 85 por cento, com quantidades aproximadamen-te iguais dos anómeros a e β (passo e').

Por reacção do Composto 164 com um excesso de hidrofluoreto de piridínio em CH2C12-THF (7:1; v:v), a 0°C durante 20 minutos, obteve-se o Composto 165 com um rendimento de 98 por cento (passo f). Por reacção do Composto 165 em dietilamina-THF (1:1; v:v), a 25°C durante 2 horas, obteve-se o Composto 166 com um rendimento de 98 por cento (passo g). Finalmente, por reacção do Composto 166 com um excesso de tetra-isopropóxido de titânio e com um excesso de difenilsilano em diclorometano, a 25°C durante 1 hora, obteve-se o Composto 167 com um rendimento de 92 por cento.

Composto 167; óleo amarelo claro Rf=0,31 (sílica, 10 por cento de metanol em diclorometano), [a]D25= -49,2° (c=0,66, CHCI3); RMN-H1 (500MHz, CgDg): 6=7,56 (d, 2H, J=7,6 Hz, Ar), 7,32-7,13 (m, 8H, Ar), 5,88 (bs, 2 H, 0 H), 5,86 (s, 1 Η, E-l), 5,75 (bs, 1 H, 0-N-H), 4,99 (d, 1 H, J=ll,7 Hz, CH2-Ph), 4,67 (d, 1 H, J=ll,7 Hz, CH2-Ph), 4,54-4,47 (m, 3 Η, A-l, CH2-Ph-hÍdroxíl-amina), 4,32 (dd, 1 H, J=10,8, 9,2 Hz, E-5ax), 4,04 (dd, 1 H, J=9,5, 0,5 Hz, A-3), 4,02-3,94 (m, 1 Η, E-3), 3,90 (dd, 1 H, J=10,8, 4,7 Hz, E-5eq), 3,88 (dd, 1 H, J=9,5, 7,6 Hz, A-2), 3,57 (dq, 1 H, J=9,5, 6,0 Hz, A-5), 3,23 (s, 3 H, OCH3), 2,82 (ddd, 1 H, J=9,2, 9,2, 4,7 Hz, E-4), 2,57-2,42 (m, 3 H, E-2eq, N-CH2), 2,34 (dd, 1 H, J=9,5, 9,5 Hz, A-4), 1,54 (dd, 1 H, J=10,2, 10,2 HZ, E-2ax), 1,36 (d, 3 H, J=6,0 Hz, A-6), 0,99 (t, 3 H, J=6,5 Hz, N-CH2-CH3); IV (CHCI3): V max=2964' 2932> 1456, 1095, 1071 cm-1; HRMS calculado para c28**40^2°7 (M+Cs ® ) 649,1890; encontrado

72 593 SCRF Case 202.1(POR) -58- 649,1900.

A

Exemplo 63: Compostos 307a e 307b fFioura 141

Fez-se reagir o Composto 300 (Nicolaou et al., J. Am. chem. Soc.. 112:7416 (1990)] com 3,0 equivalentes de bromoacetato de etilo, 2,0 equivalentes de CsC03 com um equivalente de 18-coroa-6 em acetonitrilo, a 50eC durante 5 horas, obtendo-se o Composto 301 com um rendimento de 60 por cento (passo a), Por reacção do Composto 301 com 2,0 equivalentes de LiOH em THF-H20 (1:1; v:v) durante 0,5 horas, seguida de 1,1 equivalentes de ditiodipiridi-na, 1,1 equivalentes de trifenilfosfina em diclorometano, a 25°C durante 0,5 horas, obteve-se o Composto 302 com um rendimento de 92 por cento (passo b). Fez-se reagir o Composto 302 com 5,0 equivalentes de NaBH4 em OE^-C^-^-PrOH (1:1; v:v), a 25°C durante 20 minutos, obtendo-se o álcool primário, Composto 303, com um rendimento de 92 por cento.

Fizeram-se reagir 1 equivalente de cada um dos Compostos 303 e 163 com uma quantidade catalítica de eterato de BF3 em diclorometano, a uma temperatura de -60°C a -40°C, durante 1 hora, ob-tendo-se os compostos 304a e 304b, com um rendimento de 84 por cento, numa proporção de α:β de cerca de 5:1 (passo d). Removeram-se os grupos protectores do dissacárido, como no Exemplo 62, de novo com rendimentos de 98 por cento, obtendo-se os Compostos 306a e 306b (passos e e f). Reduziram-se os Compostos 306 e 306b misturados com um excesso de tetra-isopropóxido de titânio e di-fenilsilano, em diclorometano, a 25°C durante 1 hora, obtendo-se os Compostos diasterioméricos 307a e 307b com um rendimento de 90 por cento.

Composto 307a; óleo amarelo pálido; Rf=0,39 (sílica, 10 por cento de metanol em diclorometano), [a]D25= -87,3° (c=0,48, CHCI3), RMN-H1 (500MHz, CgDg): 5:8,97 (dd, 1 H, J=4,2, 0,7 Hz, Din-Ar), 7,52 (m, 1 H, Din-Ar), 7,41-6,98 (m, 12 H, 11 Ar, H pro-pargilico), 6,98 (dd, 1 H, J=7,l, 7,1 Hz, Din-Ar), 5,89 (bs, 1 H, OH), 5,83 (bs, 1 H, 0-N-H), 5,78 (s, 1 Η, E-l), 5,28 (d, 1 H, 3=10,0 Hz, H vinilico), 5,10 (dd, 1 H, J=10,0, 1,7 Hz, H vinili-CO), 4,58-4,51 (m, 2 H, CH2-Ph), 4,50 (d, 1 H, J=7,4, A-l), 4,48-

72 593 SCRF case 202.1(POR) -59--4,40 (m, 1 H, E-5ax), 4,25-4,17 (m, 1 H, E-5eq), 4,13-4,02 (m, 3 Η, A-3, OCH2CH20), 4,01-3,94 (m, 1 H, 0CH2CH20), 3,93-3,90 (m, 1 Η, E-3), 3,77 (dd, 1 H, J=9,5, 7,3 Hz, A-2), 3,69-3,52 (m, 1 H, A-5), 3,26 (S, 3 H, OCH3), 2,78-2,66 (m, 2 Η, E-4, N-CH2), 2,65--2,57 (m, 1 H, N-CH2), 2,47 (dd, 1 H, J=12,0, 2,2 Hz, E-2eq), 2,44 (dd, 1 H, J=9,5, 9,5 Hz, A-4), 2,31 (dd, 1 H, J=14,5, 6,5 Hz, Din-CH2), 2,04 (d, 1 H, J=6,7 Hz, Din-CH2), 1,95-1,83 (m, 4 H, CH2), 1,43 (dd, 1 H, J=14,5, 9,3 Hz, E-2ax), 1,33 (d, 3H, J=6,l HZ, A-6), 1,04 (t, 3 H, J=6,5 Hz, N-CH2-CH3); IV (CHCI3) £>max = 2965, 2931, 1733, 1380, 1323, 1146, 1098, 1071 cm"1; HRMS calculado para C49H55N3Oi:l (M+Cs ® ) 994,2891; encontrado 994,2904.

Composto 307b; óleo amarelo claro; RF=0,38 /sílica, 10 por cento de metanol em diclorometano), [a]D25=+125,70 (c=0,68, CHCI3), RMN-H1 (500 MHZ, CgDg): δ = 8,93 (dd, 1 H, J=4,2, 0,7 Hz, Din-Ar), 7,56 (dd, J=7,4, 1,4 Hz, Din-Ar), 7,32-7,02 (m, 12 H, 11 Ar, H propagilico), 6,90 (dd, 1 H, J=7,l, 7,1 Hz, Din-Ar), 5,90 (bs, 1 Η, O-N-H), 5,88 (bs, 1 H, OH), 5,82 (s, 1 Η, E-l), 5,29 (d. 1 H, J=10,2 Hz, H vinilico), 5,11 (dd, 1 H, J=10,2, 1,7 Hz, H vinilico), 4,56-4,51 (m, 2 H, CH2Ph), 4,49 (dd, 1 H, J=ll,l, 9,0 Hz, E-5ax), 4,48 (d, 1 H, J=7,4 HZ, A-l), 4,22-4,17 (m, 2 H, 0CH2CH20), 4,14 (dd, 1 H, J=ll,l, 4,7 Hz, E-5eq), 4,09 (dd, 1 H, J=9,5, 9,5 Hz, A-3), 4,06-4,01 (m, 1 H, OCH2CH20), 3,93-3,88 (m, 1 H, OCH2CH20), 3,87-3,81 (m, 1 Η, E-3), 3, 3,78 (dd, 1 H, J=9,5, 7,1 HZ, A-2), 3,58 (dq, 1 H, J=9,5, 6,1 Hz, A-5), 3,27 (s, 3 H, OCH3), 2,84 (ddd, 1 H, J=9,0, 9,0, 4,7 Hz, E-4), 2,77 (m, 2 Η, N--CH2), 2,54 (dd, 1 H, J=12,2, 2,5 Hz, E-2eq), 2,42 (dd, 1 H, J=9,5, 9,5 HZ, A-4), 2,30 (dd, 1H, J=14,6, 10,5 Hz, Din-CH2), 2,06 (dd, 1 H, J=14,6, 7,1 Hz, Din-CH2), 1,97-1,83 (m, 4 H, Din--CH2), 1,51 (dd, 1 H, J=12,2, 9,2 Hz, E-2ax), 1,33 (d, 3 H, J=6,l Hz, A-6), 1,10 (t, 3 H, J=6,5 Hz, N-CH2CH3); IV (CHCI3): ^max= =2962, 2957, 2929, 1733, 1386, 1323, 1146, 1097, 1070 cm"1; HRMS calculado para C^jgHgg^O·^ (M+Cs ^ ) 994,2891; encontrado 994,2904.

Exemplo 64: Agente biologicamente activo

Agita-se uma suspensão de perclorato de prata anidro (1,0 -60- & 72 593 scrf case 202.1(por) mmole) e de cloreto estanoso (1,0 mmole), secos por remoção azeotrópica de benzeno, e de peneiros moleculares de 4 8, em pó, activados (0,3 g), em diclorometano (2 ml), a 25°C durante 15 minutos e, depois, arrefece-se até -78"C. A esta mistura adiciona-se uma solução do fluoreto, Composto 202 ou Composto 224 (0,5 mmole) e do álcool de aglicon HZ (1,0 mmole), secos duas vezes por remoção azeotrópica de benzeno, em diclorometano (3 ml), lentamente, (durante 1 minuto) e deixa-se a solução resultante aquecer, gradualmente, até 0°C (durante 2 horas). Dilui-se a mistura com o éter (50 ml) e filtra-se através de celite e lava-se o resíduo com éter (3 x 30 ml). Lavam-se os filtrados combinados com solução saturada de Na2co3 (7 x 200 ml) e com salmoura (1 x 200 ml). Depois seca-se a solução (MgS04) e concentra-se. Por cromatografia do produto em bruto (sílica) obtêm-se o a-glicósido e o anómero β, Composto 205 ou Composto 226 puros.

Pretende-se que a descrição anterior seja, ilustrativa e não limitativa do presente invento. Podem-se efectuar numerosas variações e modificações sem sair do verdadeiro espírito e âmbito da invenção.

Claims

72 593 SCRF Case 202.1(POR) -61- REIVINDICACÕES 1 - Processo de preparação de iam composto de fórmula estrutural

na qual R é um radical seleccionado de entre o grupo consistindo em hidrogénio, alquilo fenilo e fenilo substituído; e R2 é ui radical seleccionado de entre o grupo consistindo em triíalquiK^-CgJsililo, difalquilC-L-Cg )fenilsililo e alquilC^^-Cg-difenilsililo; caracterizado por compreender a reacção de hidra-zina com um composto de fórmula

na qual W é um resíduo de um grupo N-hidroxi-imido cíclico.
2 - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por R ser um radical fenilo substituído.
3 - Processo de acordo com a reivindicação 2, caracterizado por o referido radical fenilo substituído ser um radical m-clorofenilo.
4 - Processo de acordo com a reivindicação 2, caracterizado por R2 ser um radical triíalquilC-^-CgJsililo.
5 - Processo de acordo com a reivindicação 3, caracterizado por o referido radical tri(alquilC^-C6)sililo ser um radical t--butildimetilsililo.

72 593 SCRF Case 202.1(POR) -62-
6 - Processo de preparação de um composto de fórmula estrutural

na qual R1 é hidrogénio ou COR e Ré um radical seleccionado de entre o grupo consistindo em hidrogénio, alquilo C^^-Cg, fenilo e fenilo substituído; R2 é um radical seleccionado de entre o grupo consistindo em tri(alquilC1-C6)sililo, diíalquilCj^-CgJfenilsililo e alquilC1-Cg-difenilsililo; e -W é um resíduo de (i) um grupo N-hidroxi-imido cíclico, -0N=R4, onde R4 contém 4 a cerca de 8 átomos de carbono ou (ii) um grupo oxima Ο,Ν-di-substituído, -0N=R5 em que a porção contendo carbono R5 é derivada de um grupo consistindo numa alquilCiL-Cg-cetona ou aldeído e um derivado substituído de tetra-hidropiranona com a condição de R1 ser COR quando -W é 0N=R4, caracterizado por compreender a reacção de (i) um composto de fórmula

com N-hidroxiimida cíclica, trifenilfosfeno e azodicarboxilato de diisopropilo ou de (ii) um composto de fórmula

com um aldeído ou cetona C^-Cg ou com um derivado de tetra-hidropiranona . 72 593 SCRF Case 202.1(POR)

-63-
7 - Processo de acordo com a reivindicação 6, caracterizado por R ser um radical fenilo substituído.
8 - Processo de acordo com a reivindicação 7, caracterizado por R2 ser um radical trifalquilCj-CgJsililo.
9 - Processo de acordo com a reivindicação 8, caracterizado por -W ser o resíduo de um grupo N-hidroxi-imido cíclico contendo 4 a cerca de 8 átomos de carbono.
10 - Processo de acordo com a reivindicação 9, caracterizado por o grupo N-hidroxi-imino cíclico ser um grupo N-hidroxiftalimido ou N-hidroxi-succinimido.
11 - Processo de acordo com a reivindicação 8, caracterizado por -W ser o resíduo de um grupo oxima 0,N-di-substituído, -0N=R5, em que a porção contendo carbono R5 é derivada do grupo consistindo em alquilC^-Cg-cetona ou aldeído e um derivado substituído de tetra-hidropiranona.
12 - Processo de acordo com a reivindicação 11, caracterizado por R5 ser seleccionado de entre o grupo consistindo num isopropilideno e o resíduo de um derivado substituído de tetra-hidropiranona.
13 - Processo de preparação de um composto de fórmula estrutural

0R* na qual R2 é um radical seleccionado de entre o grupo consistindo em tri(alquilC-L-C6)sililo, diíalquilC^^-CgJfenilsililo e alquilCj^-Cg-dif enilsililo; -0N=R5 é o resíduo de um grupo oxima Ο,Ν-di-substituído, em que r5 é derivado de um grupo consistindo em alquilC^-Cg-cetona ou aldeído e um derivado substituído de tetra-hidropiranona; e 72 593 SCRF case 202.1(POR)

-64- R6 é seleccionado de entre o grupo consistindo em hidrogénio, alquilo benzoilo, benzoílo substituído, alquile^-Cgoxicarbonilo e N-carbonil-imidazilo caracterizado por compreender os passos de reagir (i) um composto de fórmula

W com NaSMe, ou (ii) um composto de fórmula

com um agente de alquilação C^-Cg, um agente de benzoílação, um agente de benzoílação substituído ou um agente de alquile^--Cgoxicarbonilação.
14 - Processo de acordo com a reivindicação 13, caracterizado por R6 ser hidrogénio.
15 - Processo de acordo com a reivindicação 13, caracteri zado por R6 ser benzoílo substituído.
16 - Processo de acordo com a reivindicação 13, caracteri zado por R5 ser um derivado substituído de tetra-hidropiranona.
17 - Processo de acordo com a reivindicação 16, caracterizado por o referido derivado substituído de tetra-hidropiranona ser um derivado substituído de tetra-hidropiran-4-ona.
18 - Processo de preparação de ma composto de fórmula estrutural A (segue fórmula) 72 593 SCRF Case 202.1(POR) -65- í •,yá

na qual R2 é um radical seleccionado de entre o grupo consistindo em triíalquilC-j-CgJsililo, diíalquilC^CgJfenilsililo e alquilC^-Cg-difenilsililo; e -0N=R5 é o resíduo de um grupo oxima 0,N-di-substituído, em que R5 é derivado de um grupo consistindo numa alquilC^-Cg-cetona ou aldeído e um derivado substituído de tetra-hidropiranona; caracterizado por compreender os passos de a) aquecer o composto cuja estrutura corresponde à fórmula B

na qual R2 e R5 são como acima definidos, numa composição líquida a uma temperatura e durante um período de tempo suficientes para que esse composto seja rearranjado de modo a formar um composto cuja estrutura corresponde à fórmula A.
19 - Processo de acordo com a reivindicação 18, caracterizado por incluir o passo adicional de substituição do grupo N-carbonilimidazilo do composto de fórmula estrutural A, com hidrogénio, de modo a formar um mercaptano correspondente.
20 - Processo de acordo com a reivindicação 19, caracterizado por compreender os passos adicionais de recuperação dos compostos correspondentes em estrutura à fórmula A, antes de substituir o grupo N-carbonilimidazilo e recuperar o mercaptano correspondente.
21 - Processo de preparação de um composto com a fórmula estrutural 72 593 SCRF Case 202.1(POR)

OR10 em que R8 é hidrogénio ou um grupo protector do átomo de azoto selectivamente removível; R9 é alquilo^-Cg; R10 é hidrogénio ou um radical seleccionado de entre o grupo consistindo em triíalquilC-L-CgJsililo, ditalquil^-CgJfenilsililo e alquilC-L-Cg-difenilsililo; Z é 0 ou um grupo oximino que é o produto da reacção do composto em que Z é 0 e a hidroxilamina ou uma hidroxilamina 0--substituída contendo até 7 átomos de carbono; e X é seleccionado de entre o grupo consistindo em o-nitroben-zoxi, halo, hidroxilo, benzoxi e tricloroacetamidato, caracteri-zado por compreender (i) a oxidação de um composto de fórmula

ou (ii) a realização da referida oxidação seguida por reacção com hidroxilamina ou uma hidroxilamina o-substituída.
22 - Processo de acordo com a reivindicação 21, caracteriza-do por R8 ser seleccionado de entre o grupo consistindo em FMOC, t-BOC, CBZ e NVOC.
23 - Processo de acordo com a reivindicação 21, caracteriza-do por R9 ser metilo ou etilo.
24 - Processo de acordo com a reivindicação 21, caracteri-zado por R8 ser FMOC, R9 ser metilo ou etilo, R10 ser hidrogénio, Z ser 0 e X ser o-nitrobenzoxi. -67- -67-

72 593 SCRF Case 202.1(POR) Lisboa, MAí 1991

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