RS20080257A - Jedinjenja indolona korisna u lečenju kognitivnih poremećaja - Google Patents

Abstract

Predmetni pronalazak obezbeđuje postupak lečenja pacijenta koji pati od kognitivnog oštećenja ili kognitivnog poremećaja, koji podrazumeva primenu jedinjenja indolona u količini koja je delotvorna za lečenje kognitivnog oštećenja ili kognitivnog poremećaja tog pacijenta.

Description

Jedinjenja indolona korisna u lečenju kognitivnih poremećaja

Srodne prijave

Ova prijava, zavedena pod brojem 37 CFR 1.53(b), prema USC Odeljak 119 (e) ima prioritet nad privremenom prijavom br. 60/748,851, zavedenom 09. 12. 2005, koja je ovde inkorporirana u potpunosti po referenci.

Pozadina pronalaska

Procenjuje se da od četiri do pet miliona Amerikanaca (oko 2 % iz svih starosnih grupa i 15% starijih od 65 godina) imaju neki oblik i stepen oštećenja kognitivne funkcije. Poremećaji ili oštećenja kognitivnih funkcija načešće su povezani sa poremećajima ili stanjima centralnog nervnog sistema (CNS).

Kognitivni proces je pojam koji se, uopšteno posmatrano, odnosi na proces kojim se znanje stiče, zadržava i koristi. I pamćenje i razmišljanje uključeni su u skladištenje, ponovno pristupanje i upotrebu informacija. Kognitivni poremećaji su abnormalnosti u razmišljanju i pamćenju, koje su povezane sa privremenom ili trajnom disfunkcijom mozga. Glavni simptomi obuhvataju probleme sa pamćenjem, orijentacijom, izražavanjem, obradom informacija i sposobnošću koncentracije i održavanja pažnje na konkretnom zadatku. Primeri poremećaja ili stanja CNS koji su obuhvaćeni obimom zaštite predmetnog pronalaska obuhvataju, ali nisu ograničeni na, gubitak pamćenja povezan sa starenjem (AAMI, Age-Associated Memorv Impairment). blago kognitivno oštećenje (MCI. K4ild Cognitive Impairment), delirijum (tj. stanje akutne konfuzije): demenciju (ponekad dalje klasifikovanu kao demencija tipa Alchajmerove ili ne-Alchajmerove); Alchajmerovu bolest: Parkinsonovu bolest; Hantingtonovu bolest (ili horeju): mentalnu retardaciju (npr. sindrom Rubenštajn-Tajbi ili Daunov sindrom); cerebrovaskularne bolesti (npr. vaskularnu demenciju, koja prati operativne zahteve srca); afektivne poremećaje; psihotičke poremećaje; autizam (tj. Kanerov sindrom); neurotičke poremećaje; poremećaj nedostatka pažnje (ADD, Attention Deficit Disorder); subduralni hematom; hidrocefalus normalnog pritiska; tumor mozga; traume glave (poremećaj nakon potresa mozga) i traume mozga (videti DSM-IV, APA 1994). Amnezijski i kognitivni poremećaji, sa ili bez ustanovljenog uzroka, opisani su u DSM-IV. Drugi kognitivni poremećaji navedeni u DSM-IV, obuhvataju poremećaje učenja, motoričkih veština i veština komunikacije (DSM-IV 315.00-315.39). Kada se odnose na predmetni pronalazak, smatra se da pojmovi kognitivno oštećenje i kognitivni poremećaj pokrivaju iste terapijske indikacije. Shodno tome, pojmovi kognitivno oštećenje i kognitivni poremećaj koriste se kao sinonimi u predmetnoj prijavi.

Kognitivno otećenje obično se ispoljava kao jedan ili veći brok kognitivnih nedostataka. Gubitak pamćenja je kognitivni nedostatak koji se odlikuje nesposobnošću usvajanja novih informacija ili prizivanja prethodno usvojenih informacija. Afazija je kognitivni nedostatak koji se odlikuje poremećajima u govoru i/ili jeziku (izražavanju). Apraksija je kognitivni nedostatak koji se odlikuje poremećenom sposobnošću izvršavanja motornih aktivnosti uprkos činjenici da je motorna funkcija netaknuta (prema DSM-IV). Agnozija je kognitivni nedostatak koji se odlikuje nemogućnošću prepoznavanja ili identifikacije predmeta, uprkos netaknutoj senzornoj funkciji (kao što je opisano u DSM-IV). Kognitivno oštećenje može da se ispoljava i kroz poremećaje u izvršnim funkcijama (npr. planiranje, organizovanje, razmišljanje o sledu događaja ili apstraktno razmišljanje). Predmetni pronalazak odnosi se na postupak lečenja pacijenta koji pati od kognitivnog oštećenja ili kognitivnog poremećaja, gde se to kognitivno oštećenje ili kognitivni poremećaj ispoljava preko jednog ili većeg broja kognitivnih nedostataka koji su ovde opisani.

Kognitivno oštećenje, ili smanjenje kognitivnih funkcija, prouzrokuje značajne probleme u društvenim i/ili profesionalnim aktivnostima, što može da utiče na sposobnost pacijenta da izvršava svakodnevne životne obaveze i da time uveliko umanji njegovu autonomiju i kvalitet života.

Shodno tome, postoji potreba za tretmanom kognitivnih poremećaja i kognitivnih oštećenja. Otkriveno je da jedinjenja indolona prema predmetnom pronalasku pokazuju snažno dejstvo u modelima kognitivnih oštećenja i time popunjavaju prazninu koja postoji u struci. Podnosioci prijave dalje ističu da su jedinjenja indolona koja su ovde opisana prethodno opisana kao antagonisti GALR3 receptora (videti WO 02/060392), što govori u prilog široj teoriji da su antagonisti GALR3 receptora korisni u lečenju kognitivnih poremećaja.

Kratak opis pronalaska

Predmetni pronalazak obezbeđuje postupak lečenja pacijenta koji pati od kognitivnog poremećaja, koji podrazumeva primenu one količine jedinjenja koja je delotvorna u lečenju kognitivnog poremećaja kod datog pacijenta, gde to jedinjenje ima sledeću strukturu:

gde je svaki od Y\, Y2, Y3i Y4, nezavisno jedan od drugog, -H; neračvasta ili račvasta C1-C7alkil, monofluoralkil ili polifluoralkil grupa; neračvasta ili račvasta C2-C7alkenil ili alkinil grupa; C3-C7cikloalkil, ili C5-C7cikloalkenil grupa; -F, -Cl, -Br ili -I; -NO2; -N3; -CN; -OR4, -SR4, -OCOR4, -COR4, -NCOR4, -N(R4)2, -CON(R4)2ili -COOR4; aril ili heteroaril grupa; ili bilo koja dva od Yj, Y2, Y3i Y,4, koja se nalaze na susednim ugljenikovim atomima, mogu da grade metilendioksi grupu;

gde je svaki R4, nezavisno jedan od drugog. -H; neračvasta ili račvasta C1-C7alkil, monofluoralkil ili polifluoralkil grupa; neračvasta ili račvasta C2-C7alkenil ili alkinil grupa; C3-C7cikloalkil, ili C5-C7cikloalkenil grupa, aril ili aril(C 1 -C6)alkil grupa;

gde je A A', neračvasta ili račvasta C1-C7alkil, aril, heteroaril, aril(C 1 -C6)alkil ili heteroraril(C[-C6)alkil grupa;

gdeje A'

gde su Rji R2, svaki nezavisno, -H; neračvasta ili račvasta C1-C7alkil, - -F, -Cl, -Br, -I, -N02ili -CN; gde je R3-H; neračvasta ili račvasta C1-C7alkil, -F, -Cl, -Br, -I, -NO2, -CN, -ORć, aril ili heteroaril grupa; gde je R5neračvasta ili račvasta C1-C7alkil, -N(R4)2, -ORćili aril grupa; gde je Rćneračvasta ili račvasta C1-C7alkil ili aril grupa; gde je B aril ili heteroaril grupa; uz uslov da, ukoliko je B aril ili heteroaril grupa, ugljenikov atom ili ugljenikovi atomi u orto položaju u odnosu na atom azota u imino vezi mogu da budu supstitisani samo sa jednim ili većim brojem sledećih supstituenata: -H, -F, -Cl, -Br, -I, -CN; metil, etil ili metoksi grupom;

gde je svako n, nezavisno jedno od drugog, ceo broj od 1 do 4, uključujući i 1 i 4;

gde je jedinjenje čist Z izomer imina, čist E izomer imina ili smeša Z i E izomera imina;

ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

Jedinjenja indolona prema predmetnom pronalasku mogu da se koriste za lečenje bilo kog od kognitivnih oštećenja i/ili kognitivnih poremećaja koji su ovde opisani.

Kratak opis slika

Slika 1: Dejstvo jedinjenja 2 na kontekstualno pamćenje kod miševa. 5 mg/kg, 10 mg/kg i 30 mg/kg jedinjenja 2 značajno je olakšavalo učvršćivanje konteksta 24 časa nakon obuke. Sve doze nosioca i jedinjenja 2 primenjene su intraperitonealno (i.p.).

Slika 2: Dejstvo jedinjenja 2 na kontekstualno pamćenje kod miševa. Jedna doza od 1 mg/kg ili 30 mg/kg jedinjenja 2 značajno je pojačala 24-časovno kontekstualno pamćenje kod miševa. Sve doze nosioca i jedinjenja 2 primenjene su oralno.

Slika 3: Dejstvo jedinjenja 2 na kontekstualno pamćenje kod miševa. Injekcije 1 mg/kg i 5 mg/kg jedinjenja 2, dvadeset (20) minuta pre obuke poboljšavalo je nedostatak dugoročnog pamćenja kod C57BL/6 miševa. Sve doze jedinjenja 2 primenjene su intraperitonealno (i.p.).

Detaljanopispronalaska

Predmetni pronalazak obezbeđuje postupak lečenja pacijenta koji pati od kognitivnog oštećenja koji podrazumeva primenu, kod datog pacijenta, one količine jedinjenja koja je delotvotna u lečenju kognitivnog oštećenja od kog pacijent pati, gde navedeno jedinjenje ima sledeću strukturu:

gde je svaki od Yi, Y2, Y3i Y4, nezavisno jedan od drugog, -H; neračvasta ili račvasta C1-C7alkil, monofluoralkil ili polifluoralkil grupa; neračvasta ili račvasta C2-C7alkenil ili alkinil grupa; C3-C7cikloalkil, ili C5-C7cikloalkenil grupa; -F, -Cl, -Br ili -I; -NO2; -N3; -CN; -OR4, -SR4, -OCOR4, -COR4, -NCOR4, -N(R4)2, -CON(R4)2ili -COOR4; aril ili heteroaril grupa; ili bilo koja dva odY\,Y2, Y3i Y4, koja se nalaze na susednim ugljenikovim atomima, mogu da grade metilendioksi grupu;

gde je svaki Pm, nezavisno jedan od drugog, -H; neračvasta ili račvasta C1-C7alkil, monofluoralkil ili polifluoralkil grupa; neračvasta ili račvasta C2-C7alkenil ili alkinil grupa; C3-C7cikloalkil, ili C5-C7cikloalkenil grupa, aril ili aril(Ci-C6)alkil grupa;

gde je A A', neračvasta ili račvasta C1-C7alkil, aril, heteroaril, aril(Ci-C6)alkil ili heteroraril(Ci-C6)alkil grupa;

gdeje A'

gde su Rii R2, svaki nezavisno, -H; neračvasta ili račvasta C1-C7alkil grupa, -F, -Cl, - Br, -I, -N02 ili -CN; gde je R3-H; neračvasta ili račvasta C1-C7alkil, -F, -Cl, -Br, -I, -N02, -CN, -OR6, aril ili heteroaril grupa; gde je R5neračvasta ili račvasta C1-C7alkil, -N(R4)2, -OR6ili aril grupa; gde je Rćneračvasta ili račvasta C1-C7alkil ili aril grupa; gde je B aril ili heteroaril grupa; uz uslov da, ukoliko je B aril ili heteroaril grupa, ugljenikov atom ili ugljenikovi atomi u orto položaju u odnosu na atom azota u imino vezi mogu da budu supstitisani samo sa jednim ili većim brojem sledećih supstituenata: -H, -F, -Cl, -Br, -I, -CN; metil, etil ili metoksi;

gde je svako n, nezavisno jedno od drugog, ceo broj od 1 do 4, uključujući i 1 i 4;

gde je jedinjenje čist Z izomer imina, čist E izomer imina ili smeša Z i E izomera imina;

ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

U predmetnom pronalasku, pojam "neračvasta ili račvasta CpC? alkil grupa" se odnosi na zasićeni ugljovodonični ostatak koji ima od jedan do sedam ugljenikovih atoma. Primeri takvih supstituenata obuhvataju. ali nisu ograničeni na, metil. etil. 1-propil. 2-propil, 1-butik 2-butil, 2-metil-2-propil i 2-mctil- 1-propil grupe. Pojam "C2-C7 alkenil" se odnosi na mononezasićeni ugljovodonični ostatak koji ima od dva do sedam ugljenikovih atoma. Primeri takvih supstituenata obuhvataju, ali nisu ograničeni na, etinil, prop-l-en-l-il, prop-2-en-l-il, but-3-en-2-il i hept-2-en-l-il grupe. Pojam "C3-C7alkinil" se odnosi na ugljovodonični ostatak koji ima od tri do sedam ugljenikovih atoma i koji sadrži jednu trogubu vezu ugjenik-ugljenik. Primeri takvih supstituenata obuhvataju, ali nisu ograničeni na, prop-l-inil, prop-2-inil, pent-2-inil, 4,4-dimetilpent-2-inil, 5-metilheks-3-in-2-il i hept-3-inil grupe.

Kada se koristi u predmetnom pronalasku, pojam "cikloalkil" obuhvata C3-C7cikloalkil ostatke koji mogu da budu supstituisani sa jednim ili većim brojem sledećih supstituenata: -F, -NO2, -CN, neračvasta ili račvasta C1-C7alkil grupa, neračvasta iii račvasta C1-C7monofluoralkil grupa, neračvasta ili račvasta C1-C7polifluoralkil grupa, neračvasta ili račvasta C2-C7alkenil grupa, neračvasta ili račvasta C2-C7alkinil grupa, C3-C7cikloalkil grupa, C3-C7monofluorcikloalkil grupa, C3-C7polifluorcikloalkil grupa, C5-C7cikloalkenil grupa, -N(R4)2, -OR4, -COR4, -NCOR4, -C02R4,-CON(R4)2ili (CH2)n-0-(CII2)m-CH3, gde je svako m, nezavisno, ceo broj od 0 do 2, uključujući i 0 i 2.

Kada se koristi u predmetnom pronalasku, pojam "cikloalkenil" obuhvata C3-C7cikloalkenil ostatke koji mogu da budu supstituisani sa jednim ili većim brojem sledećih supstituenata: -F, -Cl, -Br, -I, -N02, -CN, neračvasta ili račvasta C1-C7alkil grupa, neračvasta ili račvasta C1-C7monofluoralkil grupa, neračvasta ili račvasta C1-C7polifluoralkil grupa, neračvasta ili račvasta C2-C7alkenil grupa, neračvasta ili račvasta C2-C7alkinil grupa, C3-C7cikloalkil grupa, C3-C7monofluorcikloalkil grupa, C3-C7polifluorcikloalkil grupa, C5-C7cikloalkenil grupa, -N(Pv4)2, -OR4, -COR4, -NCOR4, -C02R4,-CON(R4)2ili (CH2)n-0-(CH2)m-CH3. gde je svako m, nezavisno, ceo broj od 0 do 2, uključujući i 0 i 2.

U predmetnom pronalasku, pojam "heteroaril" se koristi tako da obuhvata petočlane i šestočlane nezasićene prstenove koji mogu da sadrže jedan ili više atoma kiseonika, sumpora ili azota. Primeri heteroaril grupa obuhvataju, ali nisu ograničeni na, furanil, tienil, pirolil, oksazolil, tiazolil, imidazolil, pirazolil, izoksazolil, izotiazolil, oksadiazolil, triazolil, tiadiazolil, piridil, piridazinil, pirimidinil, pirazinil i triazinil.

Uz to, pojam "heteroaril" se koristi i da označi fuzionisane biciklične sisteme prstenova koji mogu da sadrže jedan ili više heteroatoma kao što su kiseonik, sumpor i azot. Primeri takvih grupa obuhvataju, ali nisu ograničeni na, indolizinil, indolil, izoindolil, benzo[b]furanil, benzo[b]tiofenil, indazolil, benzimidazolil, purinih benzoksazolil, benzizoksazolil, benzo[b]tiazolil, imidazo[2,l-b]tiazolil, cinolinil, kvinazolinil, kvinoksalinil, 1,8-naftiridinil, pteridinil, kvinolinil, izokvinolinil, ftalimidil i 2,1,3-benzotiazolil.

Pojam "heteroaril" takođe obuhvata i gorenavedene hemijske ostatke koji mogu da budu supstituisani jednim ili većim brojem sledećih supstituenata: -F, -Cl, -Br, -I, -NO2, -CN, neračvasta ili račvasta C1-C7alkil, neračvasta ili račvasta C1-C7monofluoralkil, neračvasta ili račvasta C1-C7polifluoralkil, neračvasta ili račvasta C2-C7alkenil, neračvasta ili račvasta C2-C7alkinil, C3-C7cikloalkil, C3-C7monofluorcikloalkil, C3-C7polifluorcikloalkil, C5-C7cikloalkenil grupa, -N(R4)2, -OR4, -COR4, -NCOR4, -C02R4,-CON(R4)2ili (CH2)n-0-(CH2)m-CH3:gde je svako m, nezavisno, ceo broj od 0 do 2, uključujući i 0 i 2.

Pojam "heteroaril" dalje obuhvata N-okside gorenavedenih hemijskih ostataka koji obuhvataju najmanje jedan azotov atom.

U predmetnom pronalasku, pojam "aril" obuhvata fenil ili naftil. Pojam "aril" takođe obuhvata fenil i naftil ostatke koji mogu da budu supstituisani jednim ili većim brojem sledećih supstituenata: -F, -Cl, -Br, -I, -NO2, -CN. neračvasta ili račvasta C1-C7alkil, neračvasta ili račvasta C1-C7monofluoralkil, neračvasta ili račvasta C1-C7polifluoralkil, neračvasta ili račvasta C2-C7alkenil, neračvasta ili račvasta C2-C7alkinil, C3-C7cikloalkil, C3-C7monofluorcikloalkil, C3-C7polifluorcikloalkil, C5-C7cikloalkenil grupa, -N(Pm)2, -OR4, - SR4, -OCOFU -COR4, -NCOR4, -C02R4,-CON(R4)2ili (CH2)n-0-(CH2)m-CH3, gde je svako m, nezavisno, ceo broj od 0 do 2, uključujući i 0 i 2.

Predmetni pronalazak takođe obuhvata postupak lečenja pacijenta koji pati od kognitivnog oštećenja, a koji podrazumeva primenu, kod datog pacijenta, one količine jedinjenja koja je delotvorna u lečenju kognitivnog oštećenja od kojeg dati pacijent pati, a gde jedinjenje ima sledeću strukturu:

gde je svako R24, nezavisno, jedan ili veći broj sledećih supstituenata: H. F. CL Br. 1. CF3 ili OCH3: gde je R25metil, etil, alil ili fenil, a gde je fenil opciono supstitisan sa F, Cl, Br ili OR4; i

gde je svako Pm, nezavisno, -H; neračvasta ili račvasta C1-C7alkil, monofluoralkil ili polifluoralkil grupa; neračvasta ili račvasta C2-C7alkenil ili alkinil grupa; C3-C7cikloalkil, C5-C7cikloalkenil, aril ili aril(Ci-C6)alkil grupa.

U postupcima koji su ovde opisani, jedinjenje sadrži imino vezu, koja može da ima Z ili E stereokonfiguraciju. U jednom rešenju bilo kog od postupaka koji su ovde opisani, jedinjenje je čist Z izomer imina. U jednom rešenju bilo kog od postupaka koji su ovde opisani, jedinjenje je čist E izomer imina. U jednom rešenju bilo kog od postupaka koji su ovde opisani, jedinjenje je smeša Z i E izomera imina.

U postupcima koji su ovde opisani, jedinjenje može da sadrži alkensku vezu, koja može da ima Z ili E stereokonfiguraciju. Na primer, jedinjenje može da sadrži grupu Y2vezanu u položaju 5 u indolonovom sistemu prstenova, gde je Y2but-2-en-l-il. Takva butenil grupa može da ima Z ili E stereokonfiguraciju. U jednom rešenju bilo kog od postupaka koji su ovde opisani, jedinjenje je čist Z izomer alkena. U jednom rešenju bilo kog od postupaka koji su ovde opisani, jedinjenje je čist E izomer alkena U jednom rešenju bilo kog od postupaka koji su ovde opisani, jedinjenje je smeša Z i E izomera alkena.

U postupcima koji su ovde opisani, jedinjenje može da sadrži jedan ili više ostataka koji mogu da budu hiralni. Ovakvi ostaci mogu da obuhvataju, ali nisu ograničeni na, kvadri valentne hiralne atome ili sistme prstenova sa ograničenom rotacijom, što dovodi do nastanka upravnih asimetričnih ravni. U jednom rešenju bilo kog od postupaka koji su ovde opisani, jedinjenje je enantiomerno ili diastereomerno čisto. U jednom rešenju bilo kog od postupaka koji su ovde opisani, jedinjenje je enantiomerno i diastereomerno čisto. U jednom rešenju bilo kog od postupaka koji su ovde opisani, jedinjenje je smeša enantiomera. U jednom rešenju bilo kog od postupaka koji su ovde opisani, jedinjenje je smeša diastereomera.

U jednom rešenju, jedinjenje se primenjuje oralno.

U jednom rešenju, jedinjenje ima sledeću strukturu:

gde je svaki od Yi, Y2, Y3i Y4, nezavisno, -H; neračvasta ili račvasta C1-C7alkil grupa, -CF3, -F, -Cl, -Br, -I, -OR4, -N(R4)2ili -CON(R4)2; gde je svaki R4, nezavisno jedan od drugog, -H, neračvasta ili račvasta C1-C7alkil, - CF3ili fenil grupa; gde je A A', neračvasta ili račvasta C1-C7alkil, aril, heteroaril, aril(C 1 -C6)alkil ili heteroraril(Ci-C6)alkil grupa; gde je A'

U jednom rešenju, Bje heteroaril grupa. U još jednom rešenju, Bje aril grupa.

U jednom rešenju, Bje fenil, a fenil grupa je opciono supstituisana sa jednim ili većim brojem sledećih supstituenata: -H, -F, -Cl, -Br, -CF3, neračvasta ili račvasta C1-C7alkil, - N(Pm)2, -OR4, -COR4, -NCOR4, -C02R4, ili -CON(R4)2.

U jednom rešenju, Aje ari! grupa. U još jednom rešenju, Aje heteroaril grupa. U jednom rešenju, jedinjenje je odabrano iz grupe koja se sastoji od:

U jednom rešenju, jedinjenje je odabrano iz grupe koja se sastoji od:

U jednom rešenju, A je A' a A'je

U jednom rešenju, jedinjenje je:

U jednom rešenju, Aje aril grupa. U još jednom rešenju, Bje aril grupa. U jednom rešenju, Aje heteroaril(Ci-C6)alkil grupa.

U jednom rešenju, jedinjenje je:

Predmetni pronalazak obezbeđuje postupak lečenja pacijenta koji pati od kognitivnog oštećenja, koji podrazumeva primenu, kod tog pacijenta, one količine bilo kog od jedinjenja koja su ovde opisana koja je delotvorna u lečenju kognitivnog oštećenja od kog dati pacijent pati.

Kao što je prethodno razmatrano, kognitivni poremećaji su poremećaji razmišljanja i pamćenja koji su u vezi sa trajnom ili privremenom disfunkcijom mozga. Predmetni pronalazak usmeren je ka postupcima lečenja kognitivnih poremećaja i kognitivnih oštećenja, koji podrazumevaju primenu terapeutski delotvornih količina jedinjenja indolona koja su ovde opisana.

Primeri poremećaja ili stanja centralnog nervnog sistema koji potpadaju u opseg predmetnog pronalaska obuhvataju, ali nisu ograničeni na, gubitak pamćenja povezan sa starenjem (AAMI, Age-Associated Memorv Impairment), blago kognitivno oštećenje (MCI, Mild Cognitive Impairment), delirijum (tj. stanje akutne konfuzije); demenciju (ponekad dalje klasifikovanu kao demencija tipa Alchajmerove ili ne-Alchajmerove); Alchajmerovu bolest; Parkinsonovu bolest; Hantingtonovu bolest (ili horeju); mentalnu retardaciju (npr. sindrom Rubenštajn-Tajbi ili Daunov sindrom); cerebrovaskularne bolesti (npr. vaskularna demencija, koja prati operativne zahteve srca); afektivne poremećaje; psihotičke poremećaje; autizam (tj. Kanerov sindrom); neurotičke poremećaje; poremećaj nedostatka pažnje (ADD, Attention Deficit Disorder); subduralni hematom; hidrocefalus normalnog pritiska; tumor mozga; traume glave (poremećaj nakon potresa mozga) i traume mozga (videti DSM-IV, APA 1994). Glavni simptomi kognitivnih poremećaja i kognitivnih oštećenja obuhvataju probleme sa pamćenjem, orijentacijom, izražavanjem, obradom informacija i sposobnošću koncentracije i održavanja pažnje na konkretnom zadatku. Samim tim, svaka bolest, poremećaj ili stanje, čiji simptomi obuhvataju probleme sa pamćenjem, orijentacijom, izražavanjem, obradom informacija i sposobnošću koncentracije i održavanja pažnje na konkretnom zadatku, može da bude lečena primenom terapeutski delotvorne količine ovde opisanih jedinjenja indolona.

U jednom rešenju predmetnog pronalaska, kognitivno oštećenje je u vezi sa psihijatrijskim poremećajem, psihotičkim poremećajem, neurološkim poremećajem ili neurotičkim poremećajem. U posebnom rešenju predmetnog pronalaska, pshiotički poremećaj je šizofrenija. U daljem rešenju, kognitivni poremećaj je povezan sa poremećajem centralnog nervnog sistema. U još jednom rešenju, poremećaj centralnog nervnog sistema je gubitak pamćenja povezan sa starenjem, blago kognitivno oštećenje, Alchajmerova bolest ili Parkinsonova bolest. Predmetni pronalazak takođe obuhvata postupak lečenja kognitivnih oštećenja u slučajevima u kojima je to kognitivno oštećenje u vezi sa traumama glave, traumama mozga ili cerebrovaskularnim bolestima. U konkretnom rešenju, cerebrovaskularna bolest je vaskularna demencija. Predmetni pronalazak takođe obuhvata postupke lečenja kognitivnih oštećenja, tamo gde su ta kognitivna oštećenja u vezi sa nekim afektivnim poremećajem.

Sintezahemijskih jedinjenja

Opis koji sledi prikazuje postupke koji mogu da se koriste za sintezu jedinjenja indolona prema predmetnom pronalasku.

Opštipostupci

Sve reakcije se odigravaju u atmosferi argona a reagensi, čisti ili u odgovarajućim rastvaračima, se prebacuju u reakcioni sud pomoću šprica i kanile. Anhidrovani rastvarači nabavljeni su preko Aldrich Chemical Companv i korišćeni u fabričkom stanju. Jedinjenja koja su opisana u daljem tekstu imenovana su pomoću ACD/Name Program (verzija 4.01, Advanced Chemistrv Development Inc., Toronto, Ontario, M5H2L3, Kanada). 'H NMR i<l3>C NMR spektri snimljeni su bilo na 300 MHz (GEQE Plus), bilo na 400 MHz (Bruker Avance) u CDCL3kao rasvaraču i uz tetrametilsilan kao interni standard, osim .ukoliko je drugačije naznačeno. Hemijska pomeranja (5) data su u ppm, konstante kuplovanja (J) su date u Hz a oblici razdvajanja su opisani na sledeći način: s = singlet, d = dublet. t = triplet, q = kvartet, kvintet, sekstet, septet, br = široki, m = multiplet, dd = dublet dubleta, dt = dublet triplela. Elementalna analiza izvršena je u Robertson Microlit Laboratories, ine. Osim ukoliko je drugačije naznačeno, maseni spektri dobijeni su korišćenjem jonizacije elektrosprejem (ESI, Micromass Platform II) te je objavljen MH<+.>Tankoslojna hromatografija (TLC) se vrši na staklenim pločama, koje su unapred impregnirane silika gelom 60 F254(0,25 mm, EM Separations Tech.). Preparativna TLC je izvršena na staklenim pločama koje su unapred impregnirane GF silika gelom (2 mm, Analtech). Hromatografija u koloni pod pritiskom gasa izvršena je na Merck silika gelu 60 (veličina pora od 230 do 400). Tačke topljenja su određene u kapilarama sa otvorenim krajem u Mel-Tamp aparatu i date su bez korekcije.

Koriste se i sledeće dodatne skraćenice: HOAc, sirćetna kiselina; DIPEA, diizopropiletilenamin; DMF, A^N-dimetilformamid; EtOAc, etilacetat; MeOH, metanol; TEA, trietilamin; THF, tetrahidrofuran. Svi odnosi rastvarača su zapremina/zapremina, osim ukoliko je drugačije naznačeno.

I Opšta procedura za dobijanje indolona

Postupci koji slede opisuju procedure koje su korisne za sintezu jedinjenja prema predmetnom pronalasku (ilustrovane u šemama 1 do 5). Supstituisani izatini, korisni u sintezi jedinjenja prema predmetnom pronalasku, alternativno mogu da se dobiju prema procedurama koje su opisane u sledećim referencama: Garden, S.J.; Da Silva, L.E.; Pinto, A.C.;Synthetic Communications,1998, 28, 1679 - 1689.

Coppola, G.M.;Journal of Heterocyclic Chemistry,1987, 24, 1249.

Hess, B.A. Jr.; Corbino, S.;Journal of Heterocyclic Chemistry,1971, 8, 161.

Brvant, W. M. II; Huhn, G.F.; Jensen, J. H.; Pierce, M. E.; Stammbach, C;Synthetic Communications,1993,23, 1617 - 1625.

Opšta procedura za sintezu iminoizatina

Odgovarajuće supstituisani izatin (10 mg - 10 g) stavljen je u sud, dodat je odgovarajući anilin (1,0 do 1,1 ekvivalenata), te je smeša mešana do homogenosti. Smeša je potom zagrejana do 110°C u toku 2 do 7 časova, a zatim ohlađena. Čvrsta supstanca je kristalizovana iz toplog metanola i proceđena, dajući željene proizvode (često u obliku nerazdvojive smeše E i Z izomera koji se pretvaraju jedan u drugi).

Procedura A:

l-( 3- Tienil)- l#- indol- 2, 3- dion: trietilamin (56,9 ml, 0,408 mol) je dodat u smešu\ H-indol-2,3-diona (15,0 g, 0,102 mol), bakar (II) acetata (46,0 g, 0,255 mol) i 3-tienilborne kiseline (19,6 g, 0,153 mol) u CH2C12(500 ml). Reakciona smeša koncentrovana je u vakuumu. Sirovi proizvod je prešišćen hromatografijom na koloni silika gela uz upotrebu heksana/EtOAc (1:1), čime se dobija željeni proizvod (l,lg, 50%).

Procedura B:

( 3£)- 3- r( 4- Metilfenil) imino1- l-( 3- tienil)- 1. 3- dihidro- 2//- indol- 2- on: rastvor l-(3-tienil)-l//-indol-2,3-diona (20 mg, 0,087 mmol) u 1% HOAc/MeOH (8 ml) dodat je u rastvor/?-toluidina (9 mg, 0,18 mmol) u 1% HOAc/MeOH (8 ml). Reakciona smeša je mešana 12 časova na sobnoj temperaturi; zagrejana je na 50°C u toku 1 časa, a potom koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen preparativnom TLC na silika gelu, uz upotrebu EtOAc/heksana (3:7, 0,1% TEA), čime se dobija željeni proizvod (14 mg, 50%).

Procedura C: (3Z)-5-Brom-3-{[3-(trifluormetil)fenil]imino}-1.3-dihidro-2//-indol-2-on: Smeša 5-broin-l//-indol-2,3-diona (1,0 g, 0,442 mmol) i 3-trifluormetilanilina (0,993 g, 6,2 mmol) u rastvoru 1% sirćetne kiseline u metanom, mešana je na 50°C 12 časova. Sirovi proizvod je koncentrovan u vakuumu, čime se dobija željeni proizvod (640 mg, 40%).

Procedura D: ( 3Z)- 5- Brom- l- fenil- 3-{( 3- trilfuormetil) fenil) imino)- l, 3- dihidro- 2//- indol- 2- on: smeša (3Z)-5-brom-3-{[3-(trifluormetil)fenil]imino}-l,3-dihidro-2H-indol-2-ona (100 mg, 0,272 mmol), bakar (II) acetata (54 mg, 0,33 mmol), trietilamina (82,8 mg, 0,817 mmol) i benzen boronske kiseline (40 mg. 0,325 mmol) u 5 ml CFLCb mešana je na sobnoj temperaturi 12 časova. Sirova smeša je koncentrovana u vakuumu i prečišćena preparativnom TLC upotrebom EtOAc:heksana (3:7. 1% trietilamina), čime se dobija željeni proizvod (22 mg. 20%).

Procedura E:( 3 Z )- 1, 5- Difenil- 3 - 1 \ 3 -( trifluormetil) fenilliminol - 1. 3- dihidro- 2fl- indol- 2- on: Smeša

(3Z)-5 -brom-1 -fenil-3 - {[3-(trifluormetil)fenil]imino }-1,3 -dihidro-2H-indol-2-ona (22 mg, 0,05 mmol), tetrakis(trifenilofsfin)paladijuma(0) (12,0 mg, 0,01 mmol), benzen boronske kiseline (10 mg, 0,08 mmol) u THF (5 ml) i vodenog Na2C03(2M, 100 ul) zagrejana je na 67°C u toku 24 časa. Sirovi proizvod koncentrovan je u vakuumu, te je ostatak estrahovan pomoću CH2CI2(3 x 1 ml), koncentrovan i prečišćen preparativnom TLC, uz upotrebu 10% metanola u CHCI3, čime se dobija željeni proizvod (4 mg, 18%).

Procedura F:

l- r( 5- Hlor- l- benzotien- 3- il) metill- 2//- indol- 2, 3- dion: Rastvor izatina (125 mg, 0,85 mmol) u anhidrovanom dioksanu (10 ml) dodat je u kapima u rastvor natrijum hidrida (60 % disperzija u mineralnom ulju, 25 mg, 0,62 mmol) u anhidrovanom dioksanu (10 ml) na 0°C u atmosferi argona. Smeša je ostavljena da se meša 5 minuta, nakon čega je reakcionoj smeši u kapima dodat rastvor 3-(brommetil)-5-hlorbenzo[b]tiofena (267 mg, 1,02 mmol) u dioksanu (10 ml). Reakciona smeša se zagreva i refluktuje u atmosferi argona tokom 16 časova a potom koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se prečišćava preparativnom TLC uz upotrebu 1:24 metanola u hloroformu kao clucnta, čime se dobija željeno jedinjenje u obliku čvrste žute supstance (125 mg, 0,38 mmol, 45%>).

Procedura G: l- l( 5- Hlor- l- benzotien- 3- il) metil1- 3-{[ 3-( trifluormetil) fenil1imino}- 1. 3- dihidro- 2/ 7-

indol- 2- on: Smeša l-[(5-Hlor-l-benzotien-3-il)metil]-2H-indol-2,3-diona (50 mg, 0,15 mmol) i 3-trifluormetilanilina (0,020 ml, 0,15 mmol) zagrejana je na 140°C u toku 2 časa. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom TLC, uz upotrebu smeše etilacetata i heksana (1:3) kao eluenta, čime je dobijen željeni proizvod u vidu žute čvrste supstance (13 mg, 0,030 mmol, 18%).

Procedura H:

6- Metoksi- 1 - fenil- 1 7/- indol- 2, 3- dion: Rastvor N-(3-metoksifenil)-//-fenilamina (1,17 g, 5,72) u etru (3 ml) dodat je rastvoru oksalil hlorida (728 g. 5,75 mmol) i smeša je zagrevana uz refluktovanje u toku 1 časa. Dobijena smeša je ohlađena do sobne temperature.

koncentrovana do suva, a potom rastvorena u nitrobenzenu (35 ml). Rastvor je dodat rastvoru AICI3u nitrobenzenu (0,762 g, 5,72 mml), te je dobijena smeša zagrejana do 70 °C u toku 16 časova. Sirovi proizvod je kocnentrovan u vakuumu i prečišćen hromatografijom u koloni uz upotrebu EtOAc/heksana (1:1) kao eluenta, čime se dobija željeni proizvod (60 mg, 50%).

Jedinjenja od 2 do 17, uključujući i 2 i 17, nabavljena su preko Bionet Research Ltd., Highfield Industrial Estate 3, Camelford, Cormvall PL32 9QZ, Ujedinjeno Kraljevstvo. Ova jedinjenja mogu i da se sintetišu, upotrebom procedura koje su prethodno objašnjene.

Jedinjenje 1: 3-[(2-metoksifenil)imino]-l-fenil-l,3-dihidro-2//-indol-2-on

Jedinjenje 2: l-fenil-3-[[3-(trifluormetil)fenil]imino]-l,3-dihidro-2//-indol-2-on Jedinjenje 3: 3-[(3-metilfenil)imino]-l-fenil-l,3-dihidro-2//-indol-2-on

Jedinjenje 4: 3-[(3-hlorfenil)imino]-l-fenil-l,3-dihidro-2//-indol-2-on

Jedinjenje 5: l-fenil-3-[[4-(trifluormetil)fenil]imino]-l,3-dihidro-2i/-indol-2-on Jedinjenje 6: 3-[(4-metilfenil)imino]-l-fenil-l,3-dihidro-2//-indol-2-on

Jedinjenje 7: 3-[(4-hlorfenil)imino]-l-fenil-l,3-dihidro-2//-indol-2-on

Jedinjenje 8: 3-[(4-bromfenil)imino]-l-fenil-l,3-dihidro-2//-indol-2-on

Jedinjenje 9: 3-[(4-fluorfenil)imino]-l-fenil-l,3-dihidro-2//-indol-2-on

Jedinjenje 10: 3-[(4-fenoksifenil)imino]-l-fenil-l,3-dihidro-2//-indol-2-on

Jedinjenje 11: 3-[(4-etoksifenil)imino]-l-fenil-l,3-dihidro-2/7-indol-2-on

Jedinjenje 12: 3-[(4-metoksifenil)imino]-l-fenil-l,3-dihidro-27//-indol-2-on Jedinjenje 13: 3-[(3,5-dihlorfenil)imino]-l-fenil-l,3-dihidro-27/-indol-2-on Jedinjenje 14: 3-[(3,5-dimetilfenil)imino]-l-fenil-l,3-dihidro-2//-indol-2-on Jedinjenje 15: l-alil-3-[(3,4-dihlorfenil)imino]-l,3-dihidro-2//-indol-2-on

Jedinjenje 16: l-alil-3-[(3,5-dihlorfenil)imino]-l,3-dihidro-2//-indol-2-on

Jedinjenje 17: 3-[(4-bromfenil)imino]-l-izopropil-l,3-dihidro-2//-indol-2-on

Jedinjenje 18: l- r( 5- hlor- 2- tienil) metill- 3- U3-( trifluormetil) fenillimino)- L3- dihidro-2/ 7- indol- 2- on: Smeša l-[(5-hlor-2-tienil)metil]-2/7-indol-2,3-diona (25 mg, 0,09 mmol)

(dobijenog kao stoje kasnije opisano) i 3-trifluormetilanilina (11,3 ul. 0,09 mmol) zagrejana je na 140°C u toku 2 časa. Sirovi materijal je prečišćen preparativnom TLC, uz upotrebu smeše etilacetata u heksanu (3:7), čime se dobija željeni proizvod (23 mg, 0,05 mmol. 61 %).

'H NMR (400 MHz): 5 (glavni izomer) 7.57 (t. J= 7.7, III), 7,53 (t..1= 7,8, IH), 7.33 (t..U 7.8. IH), 7.28 (s. 1 H), 7,19 (d, J = 7.6, 2H). 6,94 - 6,72 (m, 4H). 6.56 (d. J - 7.7. IH). 5.02 (s. 211): ESI-MS/;//.-pronađeno 421 (MH<+>).

H( 5- Hlor- 24ienii) metii1- 2/ jr- indol- 2, 3- dion: rastvor izatina (25 mg, 0,85 mmol) u anhidrovanom dioksanu (10 ml) dodat je u kapima rastvoru natrijum hidrida (60% disperzija u mineralnom ulju, 24 mg, 0,62 mmol) u anhidrovanom dioksanu (10 ml) na 0°C u atmosferi argona. Smeša je ostavljena da se meša 5 minuta, nakon čega je reakcionoj smeši u kapima dodat rastvor 2-hlor-5-(hlormetil)tiofena (0,12 ml, 1,02 mmol) u dioksanu (10 ml). Reakciona smeša se zagreva i refluktuje u atmosferi argona tokom 16 časova a potom koncentruje u vakuumu. Sirovi materijal se prečišćava preparativnom TLC uz upotrebu 1:24 metanola u hloroformu kao eluenta, čime se dobija željeno jedinjenje u obliku čvrste žute supstance (53 mg, 0,19 mmol, 22%).<*>H NMR (400 MHz): 5 7,62 (d, J = 7,4, IH), 7,56 (t, J = 7,8, IH), 7,14 (t, J = 7,7, IH), 6,94 (d, J = 8,0, IH), 6,90 (d, J = 3,2, IH), 6,78 (d, J = 3,7, IH), 4,90 (s, 2H).

Jedinjenje 19: l-( 3- tienil)- 3-{[ 3-( trifluormetil) fenil1imino}- l, 3- dihidro- 2//- indol- 2- on: Smeša l-(3-tieml)-2//-indol-2,3-diona (25 mg, 0,11 mmol) (dobijenog kao što je kasnije opisano) i 3-trifluormetilanilina (14 ud, 0,11 mmol) zagrejana je na 140°C u toku 2 časa. Sirovi materijal je prečišćen preparativnom TLC, uz upotrebu smeše etilacetata u heksanu (3:7), čime se dobija željeni proizvod u obliku žute čvrste supstance (7,3 mg, 0,02 mmol, 22 %). 'H NMR (400 MHz) 5 7,62 - 7,19 (m, 9H), 6,94 (d, J = 8,0, IH), 6,76 (t, J- 7,6. IH); ESI-MSm/ zpronađeno 373 (MH<+>). l-( 3- tienil)- 2//- indol- 2, 3- dion: Bakar (II) acetat monohidrat (4,25 g, 23,4 mmol) zagrevan je uz refluktovanje u acetanhidridu (30 ml) tokom 2 časa. Smeša je proceđena i isprana anhidrovanim etrom (500 ml). Dobijena čvrsta suptanca je osušena u vakuumu na 55°C u toku 16 časova. Dihlormetan (1 ml) je dodat smeši bakar (II) acetata (62 mg, 0,34 mmol), izatina (50 mg, 0,34 mmol) i tiofen-3-boronske kiseline (87 mg, 0,68 mmol), nakon čega je dodat i trietilamin (0,10 ml, 0,68 mmol) u atmosferi argona. Dobijeni rastvor je mešan 16 časova na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je potom dopunjena sa 0,10 mmol bakar (II) acetata, 0,10 mmol tiofen boronske kiseline i jednom kapi trietilamina, nakon čega je smeša zagrejana na 50 °C u toku 6 časova. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom TLC, uz upotrebu metanola u hloroformu (3:97) kao eluenta, čime se željeni proizvod dobija u obliku žute čvrste supstance (25 mg, 0,11 mmol, 33%). 'H NMR (400 MHz): 5 7,70 (d, J = 7,5, IH), 7,58 (t, J = 7,8, IH), 7,50 (d, J = 5,1, IH), 7,48 (s, IH), 7,24 (d, J - 5,1, IH), 7,18 (t, J = 7,51, IH), 7,05 (d, J = 8,0, IH). Jedinjenje 20: 2- metil- 5- l( 2- okso- l- fenil- 1. 2- dimdro- 3/ f- indol- 3- i^^ izonidol- L3( 2/ f)- dion: smeša 1-fenilizatina (50 mg, 0,22 mmol) i 4-amino-N-metilftalimid (40 mg, 0,22 mmol) zagrejana je na 215 °C u toku 2 časa. Sirovi materijal je prečišćen preparativnom TLC, upotrebom smeše etilacetata i heksana (3:7) kao eluenta, čime je željeni proizvod dobijen u vidu žute čvrste supstance (8 mg, 0,02 mmol, 10%). 'H NMR (400 MHz): 5 7,88 (d, J = 7,8, IH), 7,83 - 7,80 (m, IH), 7,51 (t, J = 7,5, IH), 7,47 - 7,18 (m, 6H), 7,02 (t, J - 8,0, IH), 6,91 - 6,79 (m, 2H), 6,58 (d, J = 7,5, IH), 3,22 (s, 3H); ESI-MSm/ zpronađeno 382 (MH<+>). Jedinjenje 21: l- r( 5- hlor- l- benzotien- 3- il) metill- 3-( r3-( trilfuormetil) fenill imino}- l, 3- dihidro- 27/- indol- 2- on: l-[(5-hlor-l-benzotien-3-il)metil]-27/-indol-2,3-dion je dobijen pomoću procedure F. 'H NMR (400 MHz): 5 7,89 (s, IH), 7,79 (d, J = 8,5, IH), 7,65 (d, J = 7,5, III), 7,54 (t, J = 8,0, IH), 7,42 (s, IH), 7,38 (d, J = 8,5, IH), 7,14 (t, J = 7,5, IH), 6,88 (d, J = 7,8, IH), 5,13 (s, 2H). Iz ovog meduproizvoda, l-[(5-hlor-l-benzotien-3-il)metil]-3-{[3-(trifluormetil)fenil]imino}-l,3-dihidro-2H-indol-2-on je dobijen procedurom G. 'H NMR (400 MHz): 8 7,98 (d, J = 2,0, IH), 7,80 (d, J = 8,6, IH), 7,58 (t, J = 7,7, IH), 7,52 (d, J - 8,1, IH), 7,43 (s, IH), 7,38 (dd, J = 8,6, 1,9, IH), 7,31 (preklapajući singlet i dt, J = 1,2, 7,8, 2H), 7,24 (d, J = 7,8, III), 6,87 (d, J = 7,9, IH), 6,77 (t, J = 7,7, IH), 6,59 (d, J = 7,7, IH), 5,20 (s, 2H). ESI-MSm/ zpronađeno 471 (MH<+>sa<35>C1), 473 (MH<+>sa<37>C1).

Jedinjenje 22: 3-( T//- indol- 5- ilimino)- l- fenil- l, 3- dihidro- 2//- indol- 2- on: 1-fenilizatin (51,8 mg, 0,23 mmol) i 5-aminoindol (31 mg, 0,23 mmol) su pomešani i zagrevani na 140 °C u toku 2 časa. Dobijeni sirovi proizvod prečišćen je preparativnom TLC uz upotrebu etilacetata/heksana (6:4) kao eluenta, čime se željeni proizvod dobija u obliku čvrste žute supstance (10,8 mg, 14%). 'H NMR 8 8,28 (s, IH), 7,57 (t, J = 7,7, 2H), 7,49 -7,40 (m, 6H), 7,29 - 7,23 (m, III), 7,03 (dd, J = 8,5, 1,7, IH), 6,98 (d, J = 7,6, IH), 6,83 (d, J = 8,0, IH), 6,74, (J - 7,6. IH). 6.59 (s, IH); ESI-MSm/ z pronađeno338 (MH<+>).

Jedinjenje 23: 3-[( 6- hlor- 3- piridinil) imino]- l- fenil- L3- dihidro- 2//- indol- 2- on: 1-fenilizatin (23,0 mg. 0.10 mmol) i 5-amino-2-hlorpiridin (12,8 mg, 0,10 mmol) su pomešani i zagrevani na 140 °C u toku 7 časova. Dobijeni sirovi proizvod prečišćen je preparativnom TLC uz upotrebu heksana/etilacetata (8:2) kao eluenta, čime se željeni proizvod dobija u obliku čvrste žute supstance (19,7 mg, 59%).<l>ENMR (400 MHz) 5 8,15 (d, J = 8, IH), 7,6 - 7,2 (m, 9H), 6,85 - 6,75 (m, 2H); ESI-MSm/ zpronađeno 334 (MH<+>).

Jedinjenje 24: 3- r( 2- metil- l, 3- benzotiazol- 5- il) imino1- l- fenil- l, 3- dihidro- 2i:/- indol- 2-

on: 5-amino-2-metilbenzotiazol (52,2 mg, 0,31 mmol) je pomešan sa 1-fenilizatinom (69,7 mg, 0,31 mmol) i zagrevan na 140 °C u toku 3 časa. Dobijeni sirovi proizvod prečišćen je preparativnom TLC uz upotrebu etilacetata/heksana (6:4) kao eluenta, čime se željeni proizvod dobija u obliku čvrste žute supstance (36,9 mg, 32,3%).<l>H NMR 5 7,9 - 6,7 (m, 12H), 2,9 (s, 3H). ESI-MSm/ zpronađeno 370 (MH<+>).

Jedinjenje 25: ( 3Z)- 3- I( 3, 4- dihlorfenil) iminol- l-( 2- piridinilmetil)- l , 3- dihidro- 277-

indol- 2- on: dobijen prema proceduri F (za supstituciju 2-pikolil hlorida) i G. 'HNMR (400 MHz, CDC13) 5 8,51 - 8,46 (m, IH), 7,87 - 7,78 (m, IH), 7,64 (d, IH, J = 7,1), 7,53 - 7,31 (m, 5H), 7,28 (d, IH, J = 4,1), 7,12 (d, IH, J = 8,1), 6,58 - 6,53 (m, IH), 5,51(s, 2H); ESI-MS m/ z381 (MH<+>).

Jedinjenje 26: ( 3Z)- 3- r( 3, 4- dihlorfenil) imino1- l- r( 3, 5- dimetil- 4- izoksazolil) metill- L3-

dihidro- 2//- indol- 2- on: dobijen prema procedurama F (za supstituciju 4-hlormetil-3,5-dimetilizoksazola) i B (zagrevanje u mikrotalasnoj pećnici). 'HNMR (400 MHz, CDC13) 8 7,63 (d, IH, J = 9,1), 7,46 (dt, IH, J = 8,1, 2,0), 7,28 (d, IH, J = 2,1), 7,02 (d, IH, J = 2,0), 6,88 (dt, IH, J = 8,0, 2,1), 6,74 - 6,72 (m, IH), 6,72 - 6,70 (m, IH), 5,53 (s, 2H), 2,50 (s, 3H), 2,24 (s, 3H); ESI-MSm/ z399 (MH<+>).

Jedinjenje 27: ( 3Z)- 3-[( 3, 4- dihlorfenil) imino1- l- r( 3-( trifluormetil) fenin- 1. 3- dihidro-2/ i- indol- 2- on: dobijen prema procedurama A i B. 'HNMR (400 MHz, CDC13) 5 7,90 - 7,87 (m, IH), 7,83 - 7,79 (m, IH), 7,67 (d, IH, J = 8), 7,46 - 7,40 (m, IH), 7,33 (d, IH, J = 2), 7,08

- 7,05 (m, IH), 6,96 - 6,80 (m, 5H); ESI-MSm/ z435 (MH<+>).

Jedinjenje 28: ( 3Z)- l-( 3. 5- dihlorfenil)- 3-[( 3, 4-( dihlorfenil) imino1- l, 3- dihidro- 2//indol- 2- on: dobijen prema procedurama A i B. 'HNMR (400 MHz, CDCI3) 5 7,93 (d, IH, J = 8,1), 7.79 (d, IH, J = 6,0), 7,72 - 7,68 (m, IH), 7,59 - 7.45 (m, IH), 7,46 (d, IH, J = 8,1), 7.32 (dt, IH, J - 8,0, 2,1), 7,23 (d, IH, J = 2,5), 6,97 (dd. IH. J = 8,0, 2,1). 6,92 - 6,87 (m, 1II), 6,85 - 6,81 (m. IH); ESI-MSm/ z435 (MH<+>).

Jedinjenje 29: ( 3ZV3- r( 3, 4- dihlorfenil) imino1- 6- metoksi- l- fenol- l, 3- dihidro- 2//indol- 2- on: dobijen prema procedurama H i B. 'HNMR (400 MHz, CDC13) 5 7,69 - 7,54 (m, IH), 7,53 - 7,38 (m, 3H), 7,29 (d, IH, J = 2,0), 7,17 (d, IH, J = 8,1), 7,12 (d, IH, J = 8,0), 6,84 (d, IH, J = 2,5), 6,78 (d, IH, J = 8), 6,6 (dd, 2H, J = 8,0, 2,0), 6,55 (dd, 2H, J = 8,1, 2,5); ESI-MSm/ z(398 MH<+>).

Jedinienje 30: ( 3Z)- 3- K4- hlor- 3- metilfeniniminol- 1 -( 3- tienil)- 1, 3- dihidro- 2ff- indol- 2-

<p>n: dobijen prema procedurama A i B (80°C). 'H NMR (400 MHz, CDC13) 5 7,69 - 7,62 (m, 2H), 7,49 (s, IH), 7,47 (s, IH), 7,41 (dt, IH, J = 7,1, 1,6), 7,3 (dd, IH, J = 5,0, 1,6), 7,05 - 6,97 (m, IH), 6,93 - 6,86 (m, IH), 6,77 (m, IH), 6,56 (m, IH), 2,53 (s, 3H); ESI-MSm/ z353

(MH<+>).

Jedinjenje 31: ( 3Z)- 3-( 2- naftilimino)- l-( 3- tienil)- l, 3- dihidro- 2//- indol- 2- on: dobijen prema procedurama A i B (80°C). 'H NMR (400 MHz, CDC13) 5 8,15 (d, IH, J = 9,1), 8,06 - 7,99 (m, IH), 7,89 - 7,80 (m, IH), 7,78 - 7,71 (m, IH), 7,71 - 7,47 (m, 4H), 7,41 - 7,35 (m, IH), 7,33 (d, IH, J = 5,2), 7,28 (d, IH, J = 6,8,1), 7,00 (d, IH, J = 8,0), 6,76 (t, IH, J = 7,8), 6,67 (d, IH, J = 7,9); ESI-MSm/ z355 (MH<+>).

Jedinjenje 32: ( 3Z)- 3- I( 4- hlorfenil) iminol- l-( 3- tienil)- 1. 3- dihidro- 2//- indol- 2- on: dobijen prema procedurama A i B (80°C). 'H NMR (400 MHz, CDC13) 5 7,69 - 7,56 (m, 2H), 7,54 - 7,48 (m, IH), 7,41 (dt, IH, J = 8,2), 7,32 - 7,28 (m, IH), 7,11 - 6,99 (m, 3H), 6,89 (dt, IH, J = 8), 6,77 - 6,73 (m, IH), 6,66 - 6,33 (m, IH); ESI-MSm/ z339 (MH<+>).

Jedinjenje 33: ( 3Z)- 3- r( 4- iodfenil) imino1- l-( 3- tienil)- 1. 3- dihidro- 277- indol- 2- on: dobijen prema procedurama A i B (1% HOAc u MeOH).<*>H NMR (400 MHz, CDC13) 8 7,79 - 7.74 (m, 2H), 7,53 - 7,48 (m, 2H), 7,35 (dt, IH, J = 8,0, 1,2), 7,29 - 7,24 (m, IH), 6,98 (d, 1H, J = 8,0), 6,89 - 6,75 (m, 4H); ESI-MSm/ z431 (MH<+>).

Jedinjenje 34: ( 3Z)- 3- r( 4- metilfenil) iminoI- l-( 3- tienil)- 1. 3- dihidro- 2/ Tr- indol- 2- on: dobijen prema procedurama A i B (1% HOAc u MeOH). 'kl NMR (400 MHz. CDC13) 8 7.52 - 7.44 (ni, 2H), 7,35 - 7.22 (m, 4H), 6,99 - 6,93 (m, 3H), 6,87 - 6.78 (m, 211). 2,42 (s. 311):

ESI-MS m/ z 319 (MH").

Jedinjenje 35: ( 3Z)- 3- r( 3. 5- dilfuorfeniniminoT^

dobijen prema procedurama A i B (1% HOAc u MeOH).<*>H NMR (400 MHz, CDC13) 8 7,54 - 7,16 (m, 4H), 6,99 (dt, IH, J = 8,2, 0,8), 6,89 (dt, IH, J = 7,7, 1,1), 6,76 (d, IH, J = 7,5), 6,71 (tt, IH, J = 9,3, 2,3), 6,64 - 6,57 (m, 2H); ESI-MSm/ z341 (MH<+>).

Jedinjenje 36: Etil 3-( r( 3Z)- 2- okso- l-( 3- tienil)- 1. 2- dihidro- 3/ f- indol- 3-

ilidenlaminojbenzoat: dobijen prema procedurama A i B (1% HOAc u MeOH).<*>H NMR (400 MHz, CDC13) 8 7,96 (d, IH, J = 7,4), 7,75 - 7,17 (m, 6H), 6,98 (d, IH, J = 8,0), 6,87 - 6,78 (m, 2H), 6,63 (d, IH, J = 7,8), 4,45 - 4,32 (m, 2H), 1,43 - 1,33 (m, 3H); ESI-MSm/ z 377

(MH<+>).

Jedinjenje 37: ( 3Z)- 3-[( 6- hlor- 3- piridinil) iminol- 1 -( 3- tienil)- 1, 3- dihidro- 2//- indol- 2-

<p>n: dobijen prema procedurama A i B (1% HOAc u MeOH). 'H NMR (400 MHz, CDC13) 8 8,21 - 6,81 (m, 10H); ESI-MSm/ z340 (MH<+>).

Jedinjenje 38: ( 3Z)- 3-[( 4- fenoksifenil) imino1- l-( 3- tienil)- 1. 3- dihidro- 2//- indol- 2- on: dobijen prema procedurama A i B (1% HOAc u MeOH).<*>H NMR (400 MHz, CDC13) 8 7,85

- 6,70 (m, 16H); ESI-MSm/ z397 (MH<+>).

Jedinjenje 39: ( 3Z)- 3- r( 4- bromfenil) imino1- l-( 3- tienil)- l, 3- dihidro- 27/- indol- 2- on: dobijen prema procedurama A i G. 'H NMR (400 MHz, CDC13) 8 7,82 - 6,55 (m, 1 IH); ESI-MSm/ z383 (MH<+>).

Jedinjenje 40: ( 3Z)- 3- I( hlorfenil) imino1- l-( 3- tienil)- 1. 3- dihidro- 277- indol- 2- on: dobijen prema procedurama A i G. 'H NMR (400 MHz, CDC13) 8 7,55 - 6,50 (m, 1 IH); ESI-MSm/ z339 (MH<+>).

Jedinjenje 41: ( 3Z)- 3-[( 3- metilfenil) iminol- l-( 3- tienil)- 1. 3- dihidro- 2//- indol- 2- on: dobijen prema procedurama A i B (1% HOAc u MeOH). 'H NMR (400 MHz, CDC13) 5 7,67

- 6,78 (m, 1 IH), 2,39 (s, 3H); ESI-MS m/z 319 (MH<+>).

Jedinienje 42: ( 3Z)- 3- \( 3. 4- dihlorfenil) iminol- 1 - f3- tienilV1. 3 - dihidro- 2//- indol- 2- on: dobijen prema procedurama A i B (1% HOAc i MeOH).<!>H NMR (400 MHz, CDC13) 5 7,82 - 6,80 (m, 10H); ESI-MSm/ z373 (MH<+>).

Jedini enj e 43: ( 3 Z)- 3 -( 2- piridinilmetil)- 3 - {\ 3 -( trifluormetil) fenill imino} - 1, 3 - dihidro-2/ f- indol- 2- on: dobijen prema proceduri B. ESI-MSm/ z382 (MH<+>).

Jedinjenje 44: ( 3Z)- 3-[( 3, 5- dihlorfenil) imino1- l-( 2- piridinilmetil)- l, 3- dihidro- 27f-indol- 2- on: dobijen prema proceduri B. ESI-MSm/ z382 (MH<+>).

Jedinjenje 45: ( 3Z)- l- r( 3. 5- dimetil- 4- izoksazoli0metill- 3-{ f3-( trifluormetil)

fenillimino}- 1, 3- dihidro- 2//- indol- 2- on: dobijen prema proceduri B. ESI-MSm/ z400 (MH<+>).

Jedinjenje 46: ( 3Z)- 3- r( 3, 4- difluorfenil) iminol- l-( 3- piridinilmetil)- l, 3- dihidro- 2/ 7-

indol- 2- on: dobijen prema procedurama F (za supstituciju 3-pikolilhlorida) i B. ESI-MSm/ z350 (MH+).

Jedinjenje 47: ( 3Z)- l-( 3- piridinilmetil)- 3-{ r3-( trifluormetil) feninimino}- 1. 3- dihidro-2//- indol- 2- on: dobijen prema proceduri B. ESI-MSm/ z382 (MH<+>).

Jedinjenje 48: ( 3Z)- 3- l( 3, 4- difluorfenil) imino1- l-( 2- piridinilmetil)- l , 3- dihidro- 2//indol- 2- on: dobijen prema proceduri B. ESI-MSm/ z350 (MH<+>).

Jedinjenje 49: ( 3Z)- 3-[( 3, 5- dihlorfenil) imino1- l-( 3- piridinilmetil)- l, 3- dihidro- 2//indol- 2- on: dobijen prema proceduri B. ESI-MSm/ z384 (MH<+>).

Jedinjenje 50: ( 3Z)- 3- r( 3. 5- dihlorfenil) imino1- l- r( 3. 5- dimetil- 4- izoksazolil)

metil 1- 1, 3- dihidro- 2//- indol- 2- on: dobijen prema proceduri B. ESI-MSm/ z402 (MH<+>).

Jedinjenje 51: ( 3Z)- 1 - fenil- 3-( 5- kvinolinilimino)- 1. 3- dihidro- 2/-/- indol- 2- on: dobijen prema proceduri G. 'H NMR (400 MHz. CDC13) 8 9,38 - 9,32 (m, IH), 8.55 - 8,50 (m. IH), 8.01 - 6.62 (m, 12H), 6.43 - 6,35 (m. IH); ESI-MSm/ z350 (MH<+>).

Jedini enj e 52:( 3Z)- 3 -\( 4 -\ odfenil) imino1 - 1 - fenil- 1, 3 - dihidro- 2#- indol- 2- on:dobijen prema proceduri B (0,1% HOAc, 80 °C, 92 časova, 4 ekv RNH2, 3 molekularna sita). ESI-MSm/ z425 (MH<+>).

Jedinjenje 53: ( 3Z)- 3-[( 3, 4- difluorfenil) iminol- l- fenil- 1. 3- dihidro- 2//- indol- 2- on: dobijen prema proceduri B (0,1% HOAc, 80 °C, 92 časova, 4 ekv RNH2, 3 molekularna sita). ESI-MSm/ z335 (MH<+>).

Jedinjenje 54: ( 3Z)- 3- r( 2- hlor- 4- metilfenil) iminol- l- fenil- l, 3- dihidro- 2//- indol- 2- on: dobijen prema proceduri B (0,1 % HOAc, 80 °C, 92 časova, 4 ekv RNH2, 3 molekularna sita). ESI-MSm/ z347 (MH<+>sa<35>C1), 349 (MH<+>sa 37C1).

Jedinjenje 55: ( 3Z)- 3-[( 2, 4- dimetoksifenil) iminol- l- fenil- l, 3- dihidro- 2//- indol- 2- on: dobijen prema proceduri B (0,1% HOAc, 80 °C, 92 časova, 4 ekv RNH2, 3 molekularna sita). ESI-MSm/ z359 (MH<+>).

Jedinjenje 56: 3-{ IT3Z)- 2- okso- 1 - fenil- 1, 2- dihidro- 3- ilidenjamino} benzonitril: dobijen prema proceduri B (0,1% HOAc, 80 °C, 92 časova, 4 ekv RNH2, 3 molekularna sita). ESI-MSm/ z324 (MH<+>).

Jedinjenje 57: ( 3Z)- 3-{ r2- metil- 5-( trifluormetil) fenil1imino}- l- fenil- l, 3- dihidro- 2/ 7-

indol- 2- on: dobijen prema proceduri B (0,1% HOAc, 80 °C, 92 časova, 4 ekv RNH2, 3 molekularna sita). ESI-MSm/ z381 (MH<+>).

Jedinjenje 58: ( 3Z)- 3- r( 4- hlor- 3- metilfenil) iminol- l-( 3- tienil)- E3- dihidro- 2//- indol- 2-

on: dobijen prema procedurama A i B (80 °C). ESI-MSm/ z353 (MH<+>).

Jedinjenje 59: ( 3Z)- 3-( 6- kvinolinilimino)- l-( 3- tienil)- l13- dihidro- 2//- indol- 2- on:

dobijen prema procedurama A i B (80 °C). ESI-MSm/ z356 (MH<+>).

Jedinjenje 60: ( 3Z)- 3-[( 4- hlorfenil) imino1- l-( 3- tienil)- 1. 3- dihidro- 27/- indol- 2- on:

dobijen prema procedurama A i B (80 °C). ESI-MSm/ z339 (MH<+>).

Jedinjenje 61: ( 3Z)- 3- r( 3- izopropilfenil) imino1- l-( 3- tieniD^^

dobijen prema procedurama A i B (80 °C). ESI-MSm/ z347 (MH<+>).

Jedini enj e 62: ( 3Z)- 3 - r( 3- cikloheksilfenil) iminol- 1 -( 3 - tienilV 1, 3 - dihidro- 2if- indol- 2-

on: dobijen prema procedurama A i B (80 °C). ESI-MSm/ z387 (MH<+>).

Jedinjenje 63: ( 3Z)- 3-( 1, 3- benzotiazol- 6- ilimino1 - 1 - fenil- 1, 3- dihidro- 2/ f- indol- 2- on:

dobijen prema proceduri G. ESI-MSm/ z356 (MH<+>).

Jedinjenje 64: ( 3Z)- 3-( l//- indazol- 6- ilimino1- l- fenil- E3- dihidro- 2//- indol- 2- on:

dobijen prema proceduri G. ESI-MSm/ z339 (MH<+>).

Jedinjenje 65: ( 3Z)- 3- r( 3- hlorfenil') iminol- 6- metoksi- l- fenil- l, 3- dihidro- 2//- indol- 2-

on: dobijen prema procedurama H i G. ESI-MSm/ z363 (MH<+>).

Jedinjenje 66: ( 3Z)- 6- metoksi- l- fenil- 3-{ r3-( trifluormetil) fenil1imino}- l, 3- dihidro-2//- indol- 2- on: dobijen prema procedurama H i G. ESI-MSm/ z397 (MH<+>).

Jedinjenje 67: ( 3Z)- 3- l( 3- bromfenil) imino1- l- fenil- l, 3- dihidro- 2//- indol- 2- on: dobijen prema proceduri B. ESI-MSm/ z378 (MH<+>).

Jedinjenje 68: ( 3Z)- l, 5- difenil- 3-{ 13-( trifluormetil) fenillimino)- E3- dihidro- 2//- indol-2- on: dobijen prema procedurama C, D i E. ESI-MSm/ z443 (MH<+>).

Jedinjenje 69: ( 3Z)- l-( 4- hidroksifenil)- 3-{ r3-( trifluormetil) fenil1imino|- 1. 3- dihidro-2/ 7- indol- 2- on: dobijen prema proceduri G (6 ekv. anilina). ESI-MSm/ z383 (MH<+>).

Jedinjenje 70: ( 3Z)- 3-[( 3. 4- dihlorfenil) imino1- l-( 3- piridinilmetil)- l, 3- dihidro- 2//indol- 2- on: dobijen prema proceduri G (75 °C, 2 časa). ESI-MSm/ z383 (MH<+>).

Jedinjenja 1 do 70, koja su prethodno opisana, samo su ilustracija jedinjenja indolona koja mogu da se koriste u postupcima prema predmetnom pronalasku. Dalja jedinjenja mogu da se dobiju prema postupcima prikazanim u šemama 1 do 5 i prema procedurama koje su poznate u struci.

Moguće je da će biti neophodno uvrstiti strategije za postavljanje i uklanjanje zaštitnih grupa za supstituente kao što su amino, amido, karboksilna kiselina i hidroksilne grupe, u sintetskim postupcima koji su prethodno opisani, kako bi se dobili derivati indolona. Postupci za postavljanje i uklanjanje takvih grupa dobro su poznati u struci i mogu da se nađu, na primer, u Green, T. W. & Wuts, P. G. M. (1991) Protection Groups in Organic Svnthesis, 2. izdanje, John Wiley & Sons, New York.

Strukture jedinjenja 1-70 ilustrovane su u tabelama 1 i la.

<a>Yi, Y?, Y3, Y4, A i B su definisani kao što je opisano u specifikaciji. X je odlazeća grupa kao što je Cl, Br, I ili OTs. R je borna kiselina ili dialkilboratna grupa. <a>Yi, Y2, Y3, Y4i A su definisani kao što je opisano u specifikaciji. <a>Yi, Y2, Y3, Y4, A i B su definisani kao što je opisano u specifikaciji. X je odlazeća grupa kao što je Cl, Br, I ili OTs. R je borna kiselina ili dialkilboratna grupa. Šema 5<a>Sinteza aril ili heteroaril- supstituisanih iminoindolona

<a>A i B su definisani kao stoje opisano u specifikaciji.

Farmaceutski preparati

Kao konkretno rešenje oralnog preparata jedinjenja prema predmetnom pronalasku, 100 mg jednog od jedinjenja koja su ovde opisana formulisano je sa dovoljno fino sprašene laktoze kako bi se dobila ukupna količina od 580 do 590 mg kojom se ispunjava kapsula od čvrstog gela veličine O.

Jedinjenja indolona mogu da se primenjuju na bilo koji od poznatih načina. Na primer, jedinjenja mogu da budu formulisana kao kapsule, supozitorije, kremovi, inhalanti ili transdermalni flasteri. Preparati koji su pogodni za oralnu primenu obuhvataju čvrste oblike, kao što su pilule, kapsule, granule, tablete i praškovi, kao i tečne oblike, kao što su rastvori, sirupi, eliksiri i suspenzije. Oblici koji mogu da se primenjuju parenteralno obuhvataju sterilne rastvore, emulzije i suspenzije.

Optimalne doze koje će biti primenjene mogu da odrede stručnjaci u ovoj oblasti, a razlikovaće se u zavisnosti od konkretnog jedinjenja koje se koristi, snage preparata, načina primene i stadijuma bolesti ili stanja. Usled dodatnih faktora, koji zavise od konkretnog pacijenta koji se leči, a koji obuhvataju starost pacijenta, telesnu masu, pol, način ishrane i vreme primene, biće neophodno prilagoditi dozu. Kod primene preparata kod pacijenta, "terapijski delotvorna količina" je bilo koja količina jedinjenja koja, kada se primeni kod pacijenta koji pati od neke od bolesti prema kojima su jedinjenja delotvorna, dovodi do smanjenja, remisije ili regresije bolesti. U predmetnoj prijavi, "pacijent" je kičmenjak, sisar ili čovek.

Detalji o eksperimentima

II Modelin vivo

A Materijali i postupci

Uticaj jedinjenja 2 na kognitivni proces

Ova studija je sprovedena da bi se pokazalo da se kognitivni procesi, kao što je kontekstualno pamćenje i pamćenje prepoznatih objekata, pojačavaju kod miševa kod kojih je primenjeno jedinjenje 2.

Kontekstualno pamćenje.Kontekstualno pamćenje je oblik Pavlovljevog uslovljavanja strahom, kod koga se neiskusni ("naivni") miš stavlja u novu komoru (kontekst) koja sadrži jedinstvene vizuelne, olfaktorne i taktilne stimuluse. Nakon nekoliko sekundi aklimatizacije, miš dobija kratak, blag električni šok u šapama. Zbog ovog negativnog iskustva, miš će se mesecima sećati da je ta komora opasna. Kada se, u nekom kasnijem trenutku, miš ponovo stavi u isti kontekst, prirodni odgovor miša na opasnost je da se "zamrzne", pri čemu više sekundi stoji potpuno miran. Ova reakcija slična je ljudskoj reakciji na strah. Procenat vremena u toku perioda posmatranja, koji miš provede ovako "zamrznut" predstavlja kvantitativnu meru (uspeh pamćenja) sećanja koje taj miš ima za dati kontekst.

Kontekstualno uslovljavanje je često korišćeno da bi se istražili neuralni medijatori učenja uslovljenog strahom (Phillips, R.G., & LeDoux, J. E. 1992; Kimet al.1993; Bourtchouladzeet al.1994; 1998). Kontekstualno uslovljavanje je takođe korišćeno u studiji uticaja različitih mutacija na pamćenje zavisno od hipokampusa (Bourtchouladzeet al.1994; 1998; Silva A. J.et al.1996; Kogan J. L.et al.1996; Abel, T.et al.1997; Giese K.P.,et al1998), kao i soja miševa i pozadinskih genetskih razlika kod miševa (Logueet al.1996; Chenet al1996; Nguven, P. V. 2000). Obzirom da trajno pamćenje može da se pokrene na osnovu samo nekoliko minuta obuke, kontekstualno uslovljavanje je bilo veoma korisno u proučavanju biološke osnove vremenski jasno razgraničenih procesa kratkotrajnog i dugotrajnog pamćenja (Kimet al.1993; Bourtchouladzeet al.1994; 1998; Abel, T.et al.1997). Kao takvo, kontekstualno uslovljavanje je odličan model za procenu uloge različitih novih lekova i jedinjenja u pamćenju zavisnom od hipokampusa.

Prepoznavanje objekata.Prepoznavanje objekata je etološki važan zadatak za glodare, koji nije posledica negativnog potkrepljivanja (šok na šapama). Ovaj zadatak se oslanja na prirodnu radoznalost glodara, koja ih motiviše da više istražuju nove objekte u svom okruženju, od onih koji su im poznati. Naravno, da bi neki objekat bio "poznat", neophodno je da gaje životinja prethodno istražila i daje zapamtila to iskustvo. Stoga će životinje sa boljim pamćenjem više istraživati nove objekte nego poznate.

U toku obuke, mišu se predstave dva identična, nova objekta. Miševi istražuju ova dva objekta podjednako, približavajući im se, njušeći ih i penjući se na njih. U toku testiranja, životinji se predstavlja objekat sa obuke, i još jedan, novi objekat. Sećanje na objekat sa obuke čini taj objekat poznatim životinji, koja stoga provodi više vremena istražujući novi objekat, umesto da istražuje poznati objekat (Bourtchouladzeel al,2003). Novije studije sa neurološkim snimanjima kod ljudi pokazale su da pamćenje, u slučaju prepoznavanja objekata, zavisi od prefrontalnog korteksa (PFC) (Smith, 1999; Deibert, 1999). Potvrđujući ove rezultate, pacovi sa povredama PFC pokazuju slabo radno pamćenje, kada se od njih zahteva da naprave razliku između poznatih i novih objekata (Mitchell, 1998). Druge studije na majmunima i glodarima ukazuju na to da je hipokampus važan za prepoznavanje novih objekata (Teng, 2000; Mumby, 2001). Prepoznavanje objekata obezbeđuje odličan bihevioralni model za procenu uticaja Jekova i jedinjenja na kognitivne procese koji su u vezi sa funkcijom hipokampusa i korteksa.

Postupci

Subjekti. Korišćeni su mladi odrasli mužjaci C57B1/6 miševa (stari 10 đo 12 nedelja)

(Taconic, NY). Miševi su čuvani (5 miševa) u standardnim laboratorijskim kavezima, sa ciklusom svetlosti i tame 12:12. Eksperimenti su uvek vršeni tokom svetle faze ciklusa. Od dana pre početka eksperimenta pa do kraja eksperimenta, miševi su čuvani sami u pojedinačnim kavezima. Osim u vreme testiranja, miševi su imali slobodan pristup hrani i vodi. Eksperimenti su vođeni u skladu sa Propisima o dobrobiti životinja (Animal Welfare Assurance) # A3280-01. Životinje su gajene u skladu sa Zakonom o zaštiti životinja i Vodičem odeljenja za zdravlje i usluge ljudi.

Obuka i testiranje kontekstualnog uslovljavanja. Za procenu kontekstualnog pamćenja, korišćen je standardizovani postupak uslovljavanja kontekstualnog straha, koji je prvobitno razvijen za procenu pamćenja miševa sa nedostatkom gena za vezujući protein za element odgovora na ciklični AMP ("CERB" miševi) (Bourtchouladzeet al,1994). Na dan obuke, mišje postavljan u komoru za uslovljavanje (Med Associates, Inc., VA), 2 minuta pre puštanja neuslovljenog stimulusa (US), šoka od 0,5 mA na šapama koji traje 2 sekunde. US je ponavljan dva puta, sa pauzom od 1 minut između šokova. Obuku je vršio automatizovani paket programa (Med Associates, Inc., VA). Nakon poslednjeg perioda obuke, miševi su ostavljeni u komori za uslovljavanje još 30 sekundi, nakon čega su vraćani u svoje kaveze. 24 časa nakon obuke, miševi su stavljani u istu komoru za obuku, a kontekstualno pamćenje procenjivano je bodovanjem "zamrzavanja" ("zamrzavanje" služi kao pokazatelj pamćenja). "Zamrzavanje" je definisano kao potpuno odsustvo pokreta u periodima od po 5 sekundi (Kimet al.,1993; Phillips & LeDoux. 1992; Bourtchouladzeet al.,1994; 1998; Abelet al.,1997). Ukupno vreme testiranja bilo je 3 minuta. Nakon svakog eksperimentalnog subjekta, eksperimentalna aparatura dobro je očišćena pomoću 75% etanola, vode, osušena i provetrena nekoliko minuta.

Analiza podataka dobijenih kontekstualnim uslovljavanjem. Svi eksperimenti su zamišljeni i izvršeni na uravnotežen način, što znači (i) da je za svaku eksperimentalnu postavku (npr. za svaki konkretan eksperiment kojim se proučava odnos doze i efekta) korišćen jednak broj eksperimentalnih i kontrolnih miševa; (ii) svi eksperimentalni uslovi ponovljeni su 2 do 3 puta, nezavisno jedan od drugog, a dani u kojima su eksperimenti ponavljani su sabrani tako da se dobije ukupan broj subjekata. Tok svakog eksperimenta je sniman kamerom. U svakom eksperimentu, eksperimentator nije imao uvid ("slepo testiranje") u tretman subjekata tokom obuke i testiranja. Podaci su analizirani Studentovim neparnimttestom, uz pomoć paketa programa (Statwiew 5.0.1; SAS Institute, Ine). Sve vrednosti u tekstu i na slikama, izražene su kao srednja vrednost ± srednja vrednost standardne greške (SEM).

Obuka i testiranje prepoznavanja objekta. Životinje su uzimane u ruke 3 do 5 minuta, u toku 5 dana. Dan pre obuke, svaka pojedinačna životinja stavljana je u eksperimentalnu aparaturu (kutija od pleksiglasa sa dimenzijama L=48 cm; W=38cm i H=20 cm) koja se nalazila u slabo osvetljenoj prostoriji, gde je ostavljana 15 minuta da se navikne na okruženje (Bourtchouladzeet al.2003). Obuka je započeta 24 časa nakon navikavanja. Svaki pojedinačni miš je stavljan u kutiju za obuku, koja je sadržavala dva identična objekta (t.j. dva mala objekta kupastog oblika), te mu je omogućeno da istražuje ove objekte. Objekti su postavljeni u centralni deo kutije, a njihov položaj u prostoru (leva i desna strana) bile su iste za sve subjekte. Životinje su obučavane po 15 minuta.

Kako bi se ispitalo zadržavanje pamćenja, miševi su posmatrani po 10 minuta, 24 časa nakon obuke. Mišu bi bila predstavljana dva objekta, jedan koji je korišćen tokom obuke, koji je, stoga, bio "poznat" i drugi koji je bio nov (t.j. mali objekat u obliku piramide). Kako bi se obezbedilo da nema razlike u mirisu, nakon svakog eksperimentalnog subjekta aparatura i objekti su temeljno čišćeni 90% etanolom, sušeni i provetravani nekoliko minuta.

Analiza podataka dobijenih prepoznavanjem objekata. Eksperimenti su snimani pomoću sistema kamera koje su postavljene iznad aparature. Snimke je pregledao posmatrač koji nije bio svestan postavke eksperimenta ("slepi posmatrač"). Sledeći obrasci ponašanja su određivani: vreme istraživanja oba objekta, ukupno vreme istraživanja oba objekta, broj prilazaka objektima i vreme (latencija) koje protekne do prvog prilaska objektu. Indeks diskriminacije - uspeh pamćenja- određena je kao što je prethodno opisano (Ennaceuret al,1997, Bourtchouladzeet al,,2003). Podaci su analizirani Studentovim neparnimttestom, uz pomoć paketa programa (Statvvievv 5.0.1; SAS Institute, Ine). Sve vrednosti u tekstu i na slikama, izražene su kao srednja vrednost ± srednja vrednost standardne greške (SEM).

Primena jedinjenja/lekova. Jedinjenje 2 je napravljeno sveže iz koncentrovanog rastvora (10 mg/ml DMSO), koji je održavan na 4°C. Jedinjenje 2 je rastvoreno u suspenziji 5% DMSO i 95% 2% vodenog rastvora CMC, a potom primenjeno intraperitonealno (I.P.) pri dozama od 5 mg/kg, 10 mg/kg i 30 mg/kg 20 minuta pre obuke, ili 1 mg/kg i 30 mg/kg oralno, 60 minuta pre obuke. Kontrolne životinje su primile samo nosilac (5% DMSO i 95% CMC koncentracije 2% u vodi). Za svaku obuku i svaku proceduru davanja injekcija lekova, korišćena je grupa "neiskusnih" ("naivnih") životinja.

Rezultati

Kontekstualno pamćenje. Kako bi se procenilo dejstvo jedinjenja 2 na kontekstualno pamćenje, miševima su date injekcije sa jedinjenjem 2 ili nosiocem, 20 minuta pre obuke, nakon čega su životinje obučavane u dva perioda obuke (US). Miševi su potom testirani u istom kontekstu, 24 časa nakon obuke (videti sliku 1). Intraperitonealna primena 5 mg/kg, 10 mg/kg i 30 mg/kg jedinjenja 2 značajno je poboljšavala ponašanje "zamrzavanja" 24 časa nakon obuke (40,3 ± 4,7 % naspram 24,5 ± 3,2 % za 5 mg/kg jedinjenja 2 (n=6) naspram kontrole (n=6), p<0,05; 51,4 ± 9,1 % naspram 24,5 ± 3,2 % za 10 mg/kg jedinjenja 2 (n=6) naspram kontrole (n=6), p<0,01; i 49,1 ± 3,7%) naspram 24,5 ± 3,2% za 30 mg/kg jedinjenja 2 (n=6) naspram kontrola (n=5), p<0,001; Studentov neparni / test).

Slično tome, oralno dopremanje 1 mg/kg i 30 mg/kg jedinjenja 2 šezdeset (60) minuta pre obuke značajno je poboljšala 24-časovno kontekstualno pamćenje (36,4 ±3,9 % naspram 22,3 ± 3,2 %, za 1 mg/kg jedinjenja 2 (n=20) naspram kontrola (n=20), p<0,01; i 34,1 ± 4,3 % naspram 22,3 ± 3,2 % za 30 mg/kg jedinjenja 2 (n=19) naspram kontrola (n=20), p<0,05; Studentov neparnittest; (videti sliku 2).

Prepoznavanje objekta Kako bi se odredili uticaji jedinjenja 2 na prepoznavanje objekta, jedinjenje, ili samo nosilac, dati su intraperitonealno C57BL/6 miševima 20 minuta pre 15-minutne obuke. C57BL/6 miševi kojima je dat nosilac pokazali su slabo prepoznavanje objekta nakon 24 časa. Međutim, samo jedna primena 1 mg/kg jedinjenja 2 (n=14) ili 5 mg/kg jedinjenja 2 (n=12) značajno je pojačavala pamćenje i prepoznavanje (indeks diskriminacije (DI)=-10,2 ± 4 naspram 5,1 ± 6 za miševe koji su primili nosilac naspram onih kojima je injekcijom dato 1 mg/kg jedinjenja 2, p<0,05; i DI=-10,2 ± 4 naspram 18,8 ± 6,6 za miševe koji su primili nosilac naspram onih kojima je injekcijom dato 5 mg/kg jedinjenja 2, p<0,0005). (Videti sliku 3).

Rezultati prethodno navedenih eksperimenata pokazuju da je terapeutski delotvorna količina jedinjenja indolona koja su ovde opisana korisna u lečenju pacijenata koji pate od kognitivnog oštećenja ili kognitivnog poremećaja.

Reference

Abel, T.,et al.,(1997). Genetic demonstration of a role for PKA in the late phase of LTP and in hippocampus-based long-term memory.Cell 88:615-626.

American Psvchiatric Association.Diagnostic and statistical manual of mentol disorders(DSM-IV), APA, Washington, D.C., 1994.

Asymmetric Synthesis(1983) Tom: 2-5, Academic Press, Editor Morrison, J.

Bourtchouladze, R.,et al.,(1998). Different training procedures recruit either one or two critical periods for contextual memory consolidation, each of which requires protein svnthesis and PKA.Learn Mem 5:365-374.

Bourtchouladze, R., et al., (2003). A mouse model of Rubinstein-Taybi syndrome: defective long-term memory is ameliorated by inhibitors of phosphodiesterase 4.Proc Natl Acad Sci USA100: 10518-10522.

Bourtchouladze, R., et al., (1994). Deficient long-term memory in mice vvith a targeted mutation of the cAMP-responsive element-binding protein.Cell 79:59-68.

Bryant, W.M. III,et al.,(1993)Synthetic Communications,23: 1617-1625.

Coppola, G.M. (1987)Journal of Heterocyclic Chemistry,24: 1249.

Deibert, E.,et al.,(1999). Neural pathways in tactile object recognition.Neurolog}'52: 1413-1417.

Ennaccur, A., & Aggleton, J. P. (1997). The effects of neurotoxic lesions of the perirhinal cortex combined to fornix transaction on object recognition memory in therat. Behav Brain Res88: 181-193.

Garden, S.J.,et al.,(1998).Synthetic Communications,28: 1679-1689.

Giese, K. P.,et al.,(1998). Autophosphorylation at Thr286 of the alpha calcium-calmodulin kinase II in LTP and learning.Science279: 870-873.

Green, T.W., & Wuts, P.G.M. (1991)Protection Groups in Organic Synthesis,drugo izdanje, John Wiley & Sons, Nevv York.

Hess, B.A. Jr. & Corbino, S. (1971) Journal of Heterocyclic Chemistry, 8: 161.

Jaques, J.,etal.,(1981) Enantiomers, Racemates and Resolutions. John Wiley & Sons. Kim, J. J.,et al.,(1995). Hippocampectomy impairs the memory of recently, but not remotely, acquired trače eyeblink conditioned responses.Behav Neurosci109: 195-203. Kim, J. J.,et al.,(1993). Effects of amygdala, hippocampus, and periaqueductal gray lesions on short- and long-term contextual fear.Behav NeurosciJ_07: 1093-1098.

Kogan, J. H.,et al.,(1997). Spaced training induces normal long-term memorv in CREB mutant mice.Curr Biol 7:1-11.

Logue, S. F., Paylor, R., & Wefaner, J. M. (1997). Hippocampal lesions cause learning deficits in inbred mice in the Morris vvater maze and conditioned-fear task.Behav Neurosci

111: 104-113.

Mitchell, J. B., & Laiacona, J. (1998). The medial frontal cortex and temporal memory: tests using spontaneous exploratory behaviour in the rat.Behav Brain Res97: 107-113.

Mumby, D. G. (2001). Perspectives on object-recognition memory follovving hippocampal damage: lessons from studies in rats.Behav Brain Res127: 159-181.

Nguyen, P. V.,et al.,(2000). Strain-dependent differences in LTP and hippocampus-dependent memory in inbred mice.Learn Mem7: 170-179.

Nogradi, M. (1987)Stereoselective Synthesis,VCH, Urednik Ebel, H.

Otsuka, S. & Kobayashi, Y. (1964) A radioisotopic assay for monoamine oxidase determinationsin human plasma. Biochem. Pharmacol.,13: 995-1006.

Phillips, R. G. & LeDoux, J. E. (1992). Differential contribution of amvgdala and hippocampus to cued and contextual fearconditioning. Behav Neurosci106: 274-285. Pittenger, C., Huang,et al.,(2002). Reversible inhibition of CREB/ATF transcription factors in region CA1 of the dorsal hippocampus disrupts hippocampus-dependent spatial memory.Neuron34: 447-462.

Silva, A. J.,et al.,.(1996). Impaired learning in mice vvith abnormal short-lived plasticity;Curr Biol 6:1509-1518.

Tcng, E.,et al.,(2000). Contrasting effects on discrimination learning after hippocampal lesions and conjoint hippocampal-caudate lesions in monkevs.JNeurosci20: 3853-3863. Weiss, J.M.,et al.,(1998)Annals ofthe N. Y. Acad. Sci.,(Urednik. T. Hokfelt, Tamas Bartfai & J. Crawley) str. 364-382.

Claims (20)

1. Postupak lečenja pacijenta koji pati od kognitivnog oštećenja, koji podrazumeva primenu, kod tog pacijenta, one količine jedinjenja koja je delotvorna u lečenju kognitivnog oštećenja od kog taj pacijent pati, naznačen time što dato jedinjenje ima strukturu: gde je svaki od Yi, Yj, Y3i Y4, nezavisno, -H; neračvasta ili račvasta C1-C7alkil, monofluoralkil ili polifluoralkil grupa; neračvasta ili račvasta C2-C7alkenil ili alkinil grupa; C3-C7cikloalkil, ili C5-C7cikloalkenil grupa; -F, -Cl, -Br ili -I; -NO2; -N3; -CN; -OR4, -SR4, -OCOFU, -COR4, -NCOFU, -N(R4)2;-CON(R4)2ili -COOR4; aril ili heteroaril grupa; ili bilo koja dva od Yi, Y2, Y3i Y4, koja se nalaze na susednim ugljenikovim atomima, mogu da grade metilendioksi grupu; gde je svaki R4, nezavisno, -H; neračvasta ili račvasta C1-C7alkil, monofluoralkil ili polifluoralkil grupa; neračvasta ili račvasta C2-C7alkenil ili alkinil grupa; C3-C7cikloalkil, C5-C7cikloalkenil, aril ili aril(Cj-C6)alkil grupa; gde je A A', neračvasta ili račvasta C1-C7alkil, aril, heteroaril,'aril(C 1 -C6)alkil ili heteroraril(Ci-Cć)alkil grupa; gdeje A' gde su Rii R2, svaki nezavisno, -H; neračvasta ili račvasta C1-C7alkil, -F, -Cl, -Br, -I, -NO2ili -CN; gde je R3-H; neračvasta ili račvasta C1-C7alkil, -F, -Cl, -Br, -I, -N02, -CN, -ORć, aril ili heteroaril grupa; gde je R5neračvasta ili račvasta C1-C7alkil, -N(R4)2, -ORćili aril grupa; gde je Rćneračvasta ili račvasta C1-C7alkil ili aril grupa; gde je B aril ili heteroaril grupa; uz uslov da, ukoliko je B aril ili heteroaril grupa, ugljenikov atom ili ugljenikovi atomi u orto položaju u odnosu na atom azota u imino vezi mogu da budu supstitisani samo sa jednim ili većim brojem sledećih supstituenata: -H, -F, -Cl, -Br, -I, -CN, metil, etil ili metoksi grupom; gde je svako n, nezavisno, ceo broj od 1 do 4, uključujući i 1 i 4; gde je jedinjenje čist Z izomer imina, čist E izomer imina ili smeša Z i E izomera imina; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

2. Postupak prema zahtevu 1, naznačen time što je jedinjenje enantiomerno i dijastereomerno čisto.

3. Postupak prema zahtevu 1. naznačen time što je jedinjenje enantiomerno ili dijastereomerno čisto.

4. Postupak prema zahtevu 1. naznačen time što je jedinjenje čist Z izomer imina.

5. Postupak prema zahtevu 1, naznačen time što je jedinjenje čist E izomer imina.

6. Postupak prema zahtevu 1, naznačen time što je jedinjenje smeša Z i E izomera imina.

7. Postupak prema zahtevu 1, naznačen time što jedinjenje ima strukturu: gde je svaki od Yi, Y2, Y3i Y4, nezavisno, -H; neračvasta ili račvasta C1-C7alkil grupa, -CF3, -F, -Cl, -Br, -I, -OR4, -N(R4)2ili -CONfP^; gde je svaki R4, nezavisno jedan od drugog, H, neračvasta ili račvasta C1-C7alkil, - CF3ili fenil grupa; gde je A A', neračvasta ili račvasta C1-C7alkil, aril, heteroaril, aril(Ci-C6)alkil ili heteroraril(Ci-C6)alkil grupa; i gdeje A'

8. Postupak prema zahtevu 7, naznačen time što je B aril grupa.

9. Postupak prema zahtevu 8, naznačen time stoje B fenil grupa, a fenil grupa je opciono supstituisana sa sa jednim ili većim brojem sledećih supstituenata: -H, -F, -Cl, -Br, - CF3, neračvasta ili račvasta C1-C7alkil grupa, -N(R4)2, -OR4, -COR4, -NCOR4, - CO2R4, ili -CON(R4)2.

10. Postupak prema zahtevu 9, naznačen time što je A aril grupa.

11. Postupak prema zahtevu 9, naznačen time što je A heteroaril grupa.

12. Postupak lečenja pacijenta koji pati od kognitivnog oštećenja, koji podrazumeva primenu, kod tog pacijenta, one količine jedinjenja koja je delotvorna u lečenju kognitivnog oštećenja od kog taj pacijent pati, naznačen time što dato jedinjenje ima strukturu: gde je svako R24, nezavisno, jedan ili veći broj sledećih supstituenata: H, F, Cl, Br, I, CF3ili OCH3; gde je R2jmetil, etil, alil ili fenil grupa, a gde je fenil grupa opciono supstitisana sa F, Cl, Br ili OR4; i gde je svako R4, nezavisno, -H; neračvasta ili račvasta C1-C7alkil, monofluoralkil ili polifluoralkil grupa; neračvasta ili račvasta C2-C7alkenil ili alkinil grupa; C3-C7cikloalkil. C5-C7cikloalkenil, aril ili aril(Ci-C6)alkil grupa.

13. Postupak prema zahtevu 1. naznačen time što je dato kognitivno oštećenje povezano sa psihijatrijskim poremećajem, psihotičkim poremećajem, neurološkim poremećajem ili neurotičkim poremećajem.

14. Postupak prema zahtevu 1, naznačen time što je dato kognitivno oštećenje povezano sa poremećajem centralnog nervnog sistema.

15. Postupak prema zahtevu 14, naznačen time što je dati poremećaj centralnog nervnog sistema gubitak pamćenja povezan sa starenjem, blago kognitivno oštećenje, Alchajmerova bolest ili Parkinsonova bolest.

16. Postupak prema zahtevu 1, naznačen time što je dato kognitivno oštećenje povezano sa traumom glave, traumom mozga ili cerebrovaskularnom bolešću.

17. Postupak prema zahtevu 1, naznačen time što je dato kognitivno oštećenje povezano sa poremećajem nedostatka pažnje.

18. Postupak prema zahtevu 13, naznačen time što je dati psihotički poremećaj šizofrenija.

19. Postupak prema zahtevu 1, naznačen time što je dato kognitivno oštećenje povezano sa afcktivnim poremećajem.

20. Postupak prema zahtevu 16, naznačen time što je data cerebrovaskularna bolest vaskularna demencija.