RS20090388A

RS20090388A - So 3 - benzil - 2 - metil - 2,3,3a,4,5,6,7,7a - oktahidrobenzo(d)izoksazol-4-ona

Info

Publication number: RS20090388A
Application number: RSP-2009/0388A
Authority: RS
Inventors: Fabio Neggiani; Laura Dini
Original assignee: Abiogen Pharma S.P.A.
Priority date: 2006-11-02
Filing date: 2007-10-31
Publication date: 2010-12-31
Also published as: NO20092114L; CN101535282A; US20100069451A1; HRP20090477A2; DE602007013801D1; MX2009004293A; CN101535281A; EP2094674B1; WO2008053326A1; NO20092115L; WO2008053325A1; ITMI20062102A1; JP2010509310A; KR20090082452A; IL198443A0; ZA200903618B; BRPI0718391A2; AU2007315832A1; ATE504578T1; NZ577311A

Abstract

Predstavljeni pronalazak se odnosi na oksalat so jedinjenja formule (I) u svim njenimstereohemijskim konfiguracijama, na postupak za njenu pripremu i na njenu primenu ulečenju poremećaja raspoloženja, anksioznosti, depresije i konvulzivnih stanja, u poboljšanjusposobnosti učenja, za lečenje amnezije, u rešavanju apstinencijalnog sindroma od droga izloupotrebe lekova. Poželjno, pronalazak se odnosi na oksalat so rel-(3R,3aS,7aS)-3-benzil-2-metil-2,3,3a,4,5, 6,7,7a- oktahidrobenzo[d]izoksazol-4-ona.

Description

So3-benzil-2-metil-2,3,3a,4,5,6,7,7a-oktahidrobenzo[d]izoksazol-4-ona

Predstavljeni pronalazak se odnosi na oksalat so jedinjenja formule:

u svim njegovim stereohemijskim konfiguracijama, postupak za njegovu pripremu i na njegovu primenu za lečenje poremećaja raspoloženja, anksioznosti, depresije i konvulzivnih stanja, u poboljšanju sposobnosti učenja, za lečenje amnezije, u rešavanju apstinencijalnog sindroma kod droga i zloupotrebe lekova.

Naročito, pronalazak se odnosi na oksalat so rel-(3R,3aS,7aS)-3-benzil-2-metil-2,3,3a,4,5,6,7,7a-oktahidrobenzo[d]izoksazol-4-ona.

Jedinjenje rel-(3R,3aS,7aS)-3-benzil-2-metil-2,3,3a,4,5,6,7,7a-oktahidrobenzo[d] izoksazol-4-on, takođe poznato kao BTG 1640, opisano je u međunarodnoj prijavi sa brojem objave WO93/17004 i pripada familiji novih psihoaktivnih jedinjenja.

Naročito, u patentnoj prijavi sa brojem objave WO93/17004 predloženo je umirujuće delovanje cele familije jedinjenja i naročito, testirano je delovanje jedinjenja BTG 1640 i njegovi efekti na sposobnost učenja i za lečenje amnezije.

Prema takvom dokumentu, jedinjenje BTG 1640 je pripremljeno kao žuto ulje i, u testovima koji pokazuju predloženo delovanje, ono se koristi posle razblaženja u PEG i destilovanoj vodi.

U farmaceutskoj praksi, poznato je da uljane supstance imaju mnoge nedostatke koji su većinom povezani sa teškoćama pri rukovanju i formulisanju. Ustvari, teško je izmeriti težinu ulja, uglavnom su manje stabilna na promene temperature, manje su rastvorljiva u uobičajenim rastvaračima i prema tome, tehnički se teže doziraju za pripremu farmaceutskih formulacija.

Generalno je preporučljivo da je oblik aktivnog sastojka - čvrst, koji normalno pokazuje bolje karakteristike, naročito u pogledu rukovanja za delovanja farmaceutske formulacije.

U vezi sa ovim, patentna prijava WO93/17004 navodi mogućnost pripreme soli od novih psihoaktivnih jedinjenja opšte formule (I), tretmanom slobodne baze jedinjenja formule (I) sa pogodnom slobodnom kiselinom. Naročito, dokument WO93/17004 opisuje hidrohlorid BTG 1640 dobijen u obliku belog kristalnog praška.

Uzimajući ovakvu so kao standard i uz potrebu da se prema tome, izbegne primena slobodne baze BTG 1640 u uljanom obliku, u koraku formulacije leka, vršena je procena stabilnosti takve hidrohloridne soli kao aktivnog elementa, u cilju određivanja uslova za skladištenje i očuvanje leka. Poznato je da se farmaceutska supstanca smatra stabilnom ako održava iste karakteristike koje je imala na početku kada se podvrgava različitim uslovima temperature i vlažnosti tokom vremena. Kao što će biti pokazano u primerima, analiza stabilnosti je pokazala da je hidrohloridna so jedinjenja BTG 1640 nestabilna na temperaturama višim od 30°C, usled toga se preporučuje čuvanje u frižideru na temperaturama od 2-8°C, radi predostrožnosti, ne samo za pojedinačnu so kao aktivnu supstancu, već takođe za različite farmaceutske formulacije, koje se danas razvijaju i zasnovane su na takvom aktivnom elementu. Takvi uslovi čuvanja u frižideru, iako neophodni, ipak imaju nepovoljne rezultate. Ustvari, pridržavanje takvih predostrožnosti kod čuvanja pacijenti teško prihvataju, jer pacijenti očigledno nisu prilagodili svoje dnevne aktivnosti tome da moraju lek držati u frižideru, van neposrednog domašaja.

I dalje je postojala potreba da se obezbedi jedinjenje 3-benzil-2-metil-2,3,3a,4,5,6,7,7a-oktahidrobenzo[d]izoksazol-4-on u obliku koji ne zahteva posebne uslove čuvanj<a.>

Cilj predstavljenog pronalaska je prema tome obezbediti oblik 3-benzil-2-metil-2,3,3a,4,5,6,7,7a-oktahidrobenzo[d]izoksazol-4-ona koji ne zahteva posebne uslove skladištenja i čuvanja.

Sledeći cilj je obezbediti so jedinjenja BTG 1640 koja pokazuje karakteristike biodostupnosti koje su u najmanjem slučaju slične sa onima kod hidrohloridne soli poznatog BTG 1640.

Pronalazači predstavljenog pronalaska izveli su ispitivanja i istraživanja i kao rezultat, neočekivano su našli da oksalat so sledećeg jedinjenja:

pokazuje visoko poboljšanu stabilnost tako da ne zahteva posebne uslove čuvanja, čak posle šest meseci čuvanja na 40°C/75% relativne vlažnosti.

Prema tome, pronalazak se odnosi na oksalat so kao što je navedeno u patentnom zahtevu 1, na novi postupak pripreme i na njegovu primenu kao lek, naročito u lečenju poremećaja raspoloženja, anksioznosti, depresije i konvulzivnih stanja, u poboljšanju sposobnosti učenja, za lečenje amnezije, u rešavanju apstinencijalnog sindroma od droga i zloupotrebe lekova.

Poželjno, prema pronalasku obezbeđen je oksalat jedinjenja rel-(3R,3aS,7aS)-3-benzil-2-metil-2,3,3a,4,5,6,7,7a-oktahidrobenzo[d]izoksazol-4-ona, koji sadrži molekul u dva enantiomerna oblika i kao racemsku smešu.

Prednosti i dalje karakteristike naznačeni su u zavisnim patentnim zahtevima.

U predstavljenom pronalasku, molekul 3-benzil-2-metil-2,3,3a,4,5,6,7,7a-oktahidrobenzo[d]izoksazol-4-ona kao što je predstavljen u formuli I:

sadrži u svojoj definiciji bilo koju stereohemijsku konfiguraciju povezanu sa hiralnim centrima, kao i racemske smeše i enantiomere koji se mogu dobiti pomoću tehnika odvajanja koje su poznate stručnjacima iz date oblasti tehnike i bilo koju smešu od dva ili više stereohemij skih j edinj enj a.

Pronalazak će sada biti opisan detaljnije, naročito u vezi sa priloženim slikama gde: Slika 1 je grafikon rezultata dobijenih u testovima stabilnosti izvedenim na BTG 1640 hidrohloridu na uslovima temperature i vlažnosti od 5°C, 25°C/60% relativne vlažnosti, 30°C/65% relativne vlažnosti i 40°C/75% relativne vlažnosti u vezi sa čistoćom ispitivane supstance.

Slika 2 je grafikon rezultata dobijenih u testovima stabilnosti izvedenim na BTG 1640 hidrohloridu pri uslovima temperature i vlažnosti od 5°C, 25°C/60% relativne vlažnosti, 30°C/65% relativne vlažnosti i 40°C/75% relativne vlažnosti u vezi sa procenom ukupnih nečistoća.

Slika 3 je grafikon rezultata dobijenih u testovima stabilnosti izvedenim na BTG 1640 oksalatu pri uslovima temperature i vlažnosti od 5°C, 25°C/60% relativne vlažnosti, 30°C/65% relativne vlažnosti i 40°C/75% relativne vlažnosti u vezi sa čistoćom ispitivane supstance.

Slika 4 je grafikon rezultata dobijenih u testovima stabilnosti izvedenim na BTG 1640 oksalatu pri uslovima temperature i vlažnosti od 5°C, 25°C/60% relativne vlažnosti, 30°C/65% relativne vlažnosti i 40°C/75% relativne vlažnosti u vezi sa procenom ukupnih nečistoća.

Slika 5 je grafikon rezultata dobijenih u testovima stabilnosti izvedenim na temperaturama od 5°C na BTG 1640 metansulfonatu, maleatu, sukcinatu, hidrohloridu i oksalatu u vezi sa čistoćom ispitivane supstance.

Slika 6 je grafikon rezultata dobijenih u testovima stabilnosti izvedenim na BTG 1640 metanesulfonatu, maleatu, sukcinatu, hidrohloridu i oksalatu na temperaturi od 25°C i vlažnosti od 60% relativne vlažnosti, u vezi sa čistoćom ispitivane supstance.

Slika 7 je grafikon rezultata dobijenih u testovima stabilnosti izvedenim na BTG 1640 metansulfonatu, maleatu, sukcinatu, hidrohloridu i oksalatu na temperaturi od 30°C i vlažnosti od 65% relativne vlažnosti, u vezi sa čistoćom ispitivane supstance .

Slika 8 je grafikon rezultata dobijenih u testovima stabilnosti izvedenim na BTG 1640 metansulfonatu, maleatu, sukcinatu, hidrohloridu i oksalatu na temperaturi od 40°C i vlažnosti od 75% relativne vlažnosti, u vezi sa čistoćom ispitivane supstance.

Slika 9 je grafikon rezultata dobijenih u testovima stabilnosti izvedenim na temperaturi od 5°C na BTG 1640 metansulfonatu, maleatu, sukcinatu, hidrohloridu i oksalatu, u vezi sa procenom ukupnih nečistoća.

Slika 10 je grafikon rezultata dobijenih u testovima stabilnosti izvedenim na temperaturi od 25°C i vlažnosti od 60% relativne vlažnosti na BTG 1640 metansulfonatu, maleatu, sukcinatu, hidrohloridu i oksalatu u vezi sa procenom ukupnih nečistoća.

Slika 11 je grafikon rezultata dobijenih u testovima stabilnosti izvedenim na temperaturi od 30°C i vlažnosti od 65% relativne vlažnosti, na BTG 1640 metansulfonatu, maleatu, sukcinatu, hidrohloridu i oksalatu, u vezi sa procenom ukupnih nečistoća.

Slika 12 je grafikon rezultata dobijenih u testovima stabilnosti izvedenim na temperaturi od 40°C i vlažnosti od 75% relativne vlažnosti, na BTG 1640 metansulfonatu, maleatu, sukcinatu, hidrohloridu i oksalatu, u vezi sa procenom ukupnih nečistoća.

Slika 13 je grafikon rezultata apsorpcione kinetike kod Sprague Dawley pacova podvrgnutih oralnoj primeni u dozama od 10 mg/kg (kao što je izraženo kao slobodna baza jedinjenja BTG 1640) formulacije koja sadrži ili hidrohloridnu so ili oksalat so jedinjenja BTG 1640 raspršenu u vodenoj suspenziji gume arabike u količini od 5%.

Pronalazak se prema tome odnosi na oksalat so molekula 3-benzil-2-metil-2,3,3 a,4,5,6,7,7a-oktahidrobenzo [d] izoksazol-4-ona.

Prema pronalasku, takva so se može dobiti tretmanom slobodne baze 3-benzil-2-metil-2,3,3a,4,5,6,7,7a-oktahidrobenzo[d]izoksazol-4-ona oksalnom kiselinom, ili alternativno, od hidrohloridne soli 3-benzil-2-metil-2,3,3a,4,5,6,7,7a-oktahidrobenzo[d]izoksazol-4-ona preko tretmana koji je usmeren ka tome da oslobodi molekul 3-benzil-2-metil-2,3,3a,4,5,6,7,7a-oktahidrobenzo[d]izoksazol-4-on kao slobodnu bazu i zatim reakcijom sa oksalnom kiselinom.

U sledećem aspektu, pronalazak se odnosi na postupak za pripremu oksalat soli 3-benzil-2-metil-2,353a,4,5,6,7,7a-oktahidrobenzo[d]izoksazol-4-ona prema patentnom zahtevu 5, koji sadrži sledeće korake: i) reakciju slobodne baze 3-benzil-2-metil-2,3,3a,4,5,6,7,7a-oktahidrobenzo

[d]izoksazol-4-ona sa oksalnom kiselinom;

ii) ii) podvrgavanje reakcione smcše jednom ili više ciklusa hlađenja ispod 10°C.

Alternativno, slobodna baza 3-benzil-2-metil-2,3,3a,4,5,6,7,7a- oktahidrobenzo[d] izoksazol-4-on iz koraka i) može se dobiti u koraku koji prethodi koraku i) koji obezbeđuje oslobađanje navedene baze od odgovarajućeg hidrohlorida.

Naročito, hidrohloridna so 3-benzil-2-metil-2,3,3a,4,5,6,7,7a- oktahidrobenzo [d] izoksazol-4-ona može se podvrgnuti kasnijim ekstrakcijama u dihlorometanu da bi se dobio molekul 3-benzil-2-metil-2,3,3a,4,5,6,7,7a-oktahidrobenzo[d]izoksazol-4-ona kao slobodna baza u obliku providnog ulja bledo braon boje. Takvom rastvoru se može dodati oksalna kiselina, poželjno u dihidratnom obliku i u prisustvu ledenog kupatila u cilju odvajanja oksalatne soli, posle ciklusa hlađenja na oko 2-8°C, u obliku kristala. Dodatne postupke pripreme soli može obezbediti tehničar za organsku sintezu. Tako dobijena so može se dalje izborno podvrgnuti postupcima prečišćavanja, ako je neophodno.

Tako dobij ena oksalat so proizašla je kao stabilna u različitim uslovima čuvanja, kao što će biti pokazano u primerima, na taj način pokazujući se kao stabilnija od hidrohloridne soli.

Oksalat so 3-benzil-2-metil-2,3,3a,4,5,6,7,7a-oktahidrobenzo[d]izoksazol-4-ona se pokazala, iznenađujuće, ne samo stabilnija od poznatog hidrohlorida, već, kao što će biti prikazano u sledećem, pokazala se i kao biodostupnija, to jest ona je pokazala bolji kinetički apsorpcioni profilin vivood hidrohloridne soli.

Pored toga, oksalat so 3-benzil-2-metil-2,3,3a,4,5,6,7,7a-oktahidrobenzo[d]izoksazol-4-ona se iznenađujuće pokazala kao manje toksična od hidrohloridne soli kao što će to biti prikazano u daljem tekstu.

Oksalat jedinjenja formule I koji ima poboljšanu stabilnost može se kombinovati sa pogodnim inertnim puniocima za formulisanje farmaceutskih kompozicija prema pronalasku i sposoban je da deluje kao farmaceutski aktivna supstanca u lečenju poremećaja raspoloženja, anksioznosti, depresije i konvulzivnih stanja, u poboljšanju sposobnosti učenja, za lečenje amnezije koja je nastala kao posledica na primer Alzheimer-ove bolesti ili vaskularne demencije, u rešavanju apstinencijalnog sindroma kod upotrebe droga i zloupotrebe lekova.

Dnevna doza koja je potrebna da dostigne efekat u lečenju naznačene patologije varira sa subjektom, u zavisnosti od starosti, telesne težine i opšteg zdravstvenog stanja, ali ona može biti obezbeđena za dozu pogodnu za oralnu ili topikalnu primenu u opsegu od 1 do 100 mg, jednom ili više puta na dan, i dozu pogodnu za parenteralnu primenu u opsegu od 0.1 do 100 mg, jednom ili više puta na dan.

Oksalat so jedinjenja formule I dodaće se farmaceutski prihvatljivom nosaču i, izborno, drugim inertnim puniocima u cilju dobijanja farmaceutskih kompozicija koje će se primenjivati parenteralno, oralno ili topikalno. Termin "farmaceutski prihvatljiv nosač" obuhvata rastvarače, potporna sredstva, razblaživače i slično, koji se koriste kao aditivi u cilju obezbeđivanja nosača koji je pogodan za primenu soli prema pronalasku. Kompozicije prema predstavljenom pronalasku koje su pogodne za oralnu primenu biće pogodno u obliku odvojenih jedinica kao što su tablete, kapsule, škrobne kapsule, praško vi ili granule, ili kao suspenzije u tečnosti.

Poželjnije, kompozicija prema pronalasku za oralnu primenu biće u obliku tableta.

Tableta prema pronalasku sadrži poželjno količinu od 1 do 100 mg, poželjno od 1 do 50 mg, oksalat soli jedinjenja formule I po jedinici tablete. Povoljno, tableta sadrži takođe pogodne inertne punioce, kao što su pre-želatinizirani škrob, mikrokristalna celuloza, natrijum škrob glikolat, talk, laktoza, magnezijum stearat, saharoza, stearinska kiselina i manitol.

Poželjno, tableta sadrži od 1.7% do 40 težinskih % oksalata jedinjenja 3-benzil-2-metil-2,3,3a,4,5,6,7,7a-oktahidrobenzo[d]izoksazol-4-ona, poželjnije od 2.1% do 34.7 težinskih % u odnosu na ukupnu težinu tablete.

Kompozicija za oralnu primenu poželjno će sadržati od 1 do 100 mg oksalat soli jedinjenja 3-benzil-2-metil-2,3,3a,4,5,6,7,7a- oktahidrobenzo[d]izoksazol-4-ona.

Kompozicije za parenteralnu primenu sadržaće povoljno sterilne vodene preparate.

Kompozicije za parenteralnu primenu poželjno će sadržati 0.1 do 100 mg oksalat soli jedinjenja 3-benzil-2-metil-2,3,3a,4,5,6,7,7a- oktahidrobenzo[d]izoksazol-4-ona.

Kompozicije za topikalnu primenu povoljno će biti u obliku krema, ulja, masti, emulzija, gelova, vodenih rastvora, sprej rastvora i flastera.

Kompozicije za topikalnu primenu poželjno će sadržati od 1 do 100 mg oksalata jedinjenja 3-benzil-2-metil-2,3,3a,4,5,6,7,7a-oktahidrobenzo[d]izoksazol-4-ona.

Pronalazak će sada biti opisan detaljnije u sledećim primerima, putem ne-ograničavajućeg primera pronalaska i u vezi sa pripremom oksalata jedinjenja BTG 1640 i sa procenom stabilnosti, efikasnosti apsorpcije i toksičnosti hidrohloridne soli iz ranije tehnike i oksalat soli prema pronalasku.

Primer 1. Pripremaoksalatajedinjenja BTG 1640

A. Priprema slobodne baze

10 g BTG 1640 hidrohlorida je rastvoreno u 70 ml 5% natrijum bikarbonata. Dobijeni rastvor je prebačen u levak za odvajanje od 250 ml i dodato je 50 ml dihlorometana. Posle snažnog mešanja od 30 sekundi, rastvor je ostavljen da odstoji dok se nisu odvojila dva sloja. Faza koja sadrži dihlorometan zatim je prebačena u Erlenmajer posudu i u levak za odvajanje je dodato još 20 ml dihlorometana. Zatim je ponovo izvedeno snažno mešanje rastvora sadržanog u levku za odvajanje u trajanju od 30 sekundi i rastvor je ostavljen da odstoji sve do novog odvajanja dva sloja. Pošto je dihlorometanska faza odvojena, koja je dodata u Erlenmajer posudu, ponovljena je ekstrakcija sa dodatnih 20 ml dihlorometana. Tri alikvote dihlorometana zatim su anhidrovane sa natrijum sulfatom, filtrirane na filter papiru i isparavane na rotacionom isparivaču na temperaturi ispod 35°C. Dobijeni ostatak kao bledo braon obojeno ulje odgovara slobodnoj bazi jedinjenja BTG 1640.

B. Priprema oksalat soli

1 g slobodne baze jedinjenja BTG 1640 dobijene kao što je naznačeno u delu A zatim je rastvoreno u 20 ml metanola. Zatim je ukapavanjem dodavano 10 ml metanolskog rastvora koji sadrži 514 mg dihidrat oksalne kiseline (PM= 126.07), rastvor jedinjenja BTG 1640 održavanje potopljen u ledenom kupatilu.

Zatim je dodato 5 ml heksana (alternativno se može koristiti 5ml etra) i rastvor je prebačen u frižider na oko 2-8°C u trajanju od najmanje 48 časova. Na kraju perioda od 48 časova, formirani kristali su izolovani filtracijom i konačno sušeni u peći pod vakuumom na 35°C. Matični rastvor je zatim koncentrovan do ostatka i tokom takvog postupka formirani su i drugi kristali. Ovaj rastvor je ostavljen 48 časova u frižideru na temperaturi od 2-8°C i zatim su formirani kristali izolovani filtracijom i konačno osušeni u peći pod vakuumom na 35°C. Matični rastvor je ponovo koncentrovan do ostatka i takav ostatak je zatim ponovo sipan u 55 ml diizopropil etra i 30 ml etil acetata. Dobijeni rastvor je ponovo ostavljen u frižider na 2-8°C u trajanju od 48 časova. Na kraju perioda od 48 časova, formirani kristali su izolovani filtracijom i konačno sušeni u peći pod vakuumom na 35°C. Ukupni prinos postupka je bio 68%.

Tako dobijeni kristali su podvrgnuti karakterizaciji da bi se pokazalo da odgovaraju oksalatu jedinjenja BTG 1640.

Uzorak kristala je zatim podvrgnut elemantarnoj analizi i dobijeni rezultati su odgovarali vrednostima izračunatim na osnovu predložene hemijske formule.

Oksalat jedinjenja BTG 1640: C16H2oN04

Zatim je dobijen spektar 1H-NMR, koji je potvrdio formiranje oksalata jedinjenja BTG 1640.

'H-NMR (200 MHz5DMSO-d6) 8: 1.63-2.60 (m, 6H) za H5 H6 i H7; 2.41 (s, 3H) za N-CH3; 2.75-2.82 (m, 2H) za benzil CH2; 2.85-2.95 (m, IH) za H3a; 3.38 (br, IH) H3; 4.30 (br, IH) za H7a; 7.15-7.40 (m, 5H) za aromatičnu strukturu.

Primer 2

Analiza stabilnosti hidrohlorida jedinjenja BTG 1640

Uzorci BTG 1640 hidrohlorida od po 100 mg svaki podvrgnuti su sledećim uslovima čuvanja: a) 5°C; b) 25°C i 60% relativne vlažnosti; c) 30°C i 65% relativne vlažnosti;

d) 40°C i 70% relativne vlažnosti.

Čistoća je zatim analizirana periodično, na početku svakih tri meseca, da bi se naglasile moguće varijacije.

Dobijeni su rezultati prikazani u sledećoj Tabeli 1:

Dobijeni rezultati prikazani su na slici 1. Kao što se vidi na slici 1, BTG 1640 hidrohlorid je pokazao dobru stabilnost za uslove temperature/relativne vlažnosti naznačene na tačkama a)-c) za vremenski period od 12 meseci, dok je pokazao snažnu nestabilnost od prvih meseci, kada je podvrgavan temperaturi od 40°C i 75% relativne vlažnosti, na taj način pokazujući da su uslovi d) odredili razlaganje soli, već na šest meseci. Na kraju testa, na osnovu rezultata, naznačeno je da lek ima rok trajanja od 12 meseci i, iz predostrožnosti se poželjno čuva na temperaturama između 2 i 8°C, zbog snažnog razlaganja koje se javlja pri uslovima od 40°C/75% relativne vlažnosti.

Istovremeno, izvršena je analiza nečistoća pri uslovima a)-d) od T/% relativne vlažnosti.

Dobijeni su rezultati koji su prikazani u sledećoj Tabeli 2:

Rezultati su zatim predstavljeni na slici 2, sa koje se vidi daje BTG 1640 hidrohlorid pri uslovima d) pokazao, već posle tri meseca stabilnosti na 40°C/75% relativne vlažnosti, neprihvatljiv procenat nečistoća.

Primer 3

Analiza stabilnosti oksalata iedinjenja BTG 1640

Uzorci od po 100 mg BTG 1640 oksalata pripremljeni prema primeru 1B podvrgnuti su sledećim uslovima čuvanja: a) 5°C; b) 25°C i 60% relativne vlažnosti; c) 30°C i 65%> relativne vlažnosti;

d) 40°C i 75% relativne vlažnosti.

Na tri meseca i u ukupnom periodu od devet meseci njegova nečistoća je zatim

analizirana u cilju naglašavanja mogućih varijacija.

Dobijeni su rezultati koji su prikazani u sledećoj Tabeli 3:

Rezultati su prikazani na slici 3. Kao što se vidi sa slike 3, BTG 1640 oksalat, slično BTG 1640 hidrohloridu, pokazao je dobru stabilnost pri uslovima T/RH naznačenim pod tačkama a)-c) za ukupan period, i takva stabilnost, nasuprot soli BTG 1640 hidrohloridu, održavana je nepromenjenom tokom celokupnog perioda posmatranja, takođe i pod strožijim uslovima pod tačkom d), na taj način pokazujući veću stabilnost oksalat soli u poređenju sa hidrohloridnom soli.

Kao potvrda ovoga, paralelno je izveden test za procenu procenta nečistoća uzorka podvrgnutog istim uslovima a)-d) T/% relativne vlažnosti. Dobij ene su eksperimentalne vrednosti koje su prikazane u Tabeli 4.

Dobijeni rezultati su zatim prikazani na slici 4.

Kao što se može videti sa slike 4, BTG 1640 oksalat, takođe pod uslovima d) i do isteka šest meseci posmatranja, održavao je nepromenjeni profil nečistoće u odnosu na vreme nula, i na taj načinje optimalan i prema tome, nasuprot hidrohloridu, sasvim prihvatljiv.

Prema tome, iz izvedenih testova je očigledna veća stabilnost oksalat soli u poređenju sa hidrohloridnom soli jedinjenja BTG 1640.

Primer 4

Analiza stabilnosti različitih soli jedinjenja BTG 1640

Zapoređenje, pripremljene su druge soli jedinjenja BTG 1640, i to:

• BTG 1640 metansulfonat

• BTG 1640 maleat

•BTG 1640 sukcinat

praćenjem postupka naznačenog u primeru 1 i supstitucijom metansulfonske, maleinske i ćilibarne kiseline za oksalnu kiselinu.

Stabilnosti su zatim procenjivane podvrgavanjem uzoraka od po 100 mg svake soli sledećim analognim uslovima čuvanja: a) 5°C; b) 25 °C i 60% relativne vlažnosti; c) 30°C i 65% relativne vlažnosti;

d) 40°C i 70% relativne vlažnosti.

Na svaka tri meseca i tokom celokupnog perioda od devet meseci analizirana je

njihova čistoća u cilju naglašavanja mogućih varijacija.

Dobijeni rezultati, zajedno sa onim dobijenim u Primeru 2 za hidrohlorid i u Primeru 3 za oksalat u cilju njihovog lakšeg poređenja, prikazani su u Tabeli 5 i na slikama 5-8.

Kao što se može videti na slikama 5-8, profili stabilnosti soli metansulfonata, maleata i sukcinata jedinjenja BTG 1640 izgleda da su još lošiji od profila stabilnosti BTG 1640 hidrohlorida.

Metansulfonat so počinje da se razlaže već posle tri meseca stabilnosti pri navedenim uslovima b)-d), u sve većoj količini kako uslovi postaju lošiji, tj. od a) do d). Maleat so pokazuje prihvatljiv profil pri uslovima a) i b), dok pokazuje značajno razlaganje ako se podvrgava uslovima c) već posle šest meseci i razlaže se na neprihvatljiv način pri uslovima d). Sukcinat so, na kraju, pokazuje razlaganje pri svim uslovima a)-d), već od trećeg meseca i značajno veće razlaganje što su lošiji uslovi čuvanja, tj. od a) do d).

U skladu sa ovim rezultatima, profil nečistoće uzoraka soli podvrgnutih ovakvim uslovima čuvanja pokazao je neprihvatljivo povećanje istog kako se sama so razlaže, kao što je prikazano preko obrazaca predstavljenih na slikama 9-12, dobijenih na osnovu rezultata nečistoće prikazanih u Tabeli 6.

Iznenađujuće, prema tome, oksalat je pokazao različitu i poboljšanu stabilnost u odnosu na poznati hidrohlorid i druge pripremljene kisele adicione soli, i na taj način predstavlja najbolji sastojak za formulaciju farmaceutskih kompozicija, koje ne zahtevaju naročite uslove čuvanja.

Predstavljeni pronalazak je uspešno rešio tehnički problem dobijanja oblika stabilnog BTG 1640 preko identifikacije oksalat soli.

Primer 5

Analiza apsorpcione kinetike oksalata i hidrohlorida jedinjenja BTG 1640

Vršena je procena količine i stope apsorpcije molekula BTG 1640 u njegovim oblicima oksalat i hidrohlorid soli.

Sa ovom namerom, dve soli su raspršene u vodenoj suspenziji gume arabike na 5% čime se dobijaju dve formulacije, pri čemu se svaka od njih primenjuje oralno preko gavaže jednjaka u dozi od 10 mg/kg (izraženo kao slobodna baza jedinjenja BTG 1640) na pet Sprague Dawley pacova.

Koncentracija molekula BTG 1640 u plazmi određivana je u različitim vremenskim tačkama (videti Tabelu 7).

Dobijeni rezultati su prikazani u Tabeli 7 i na slici 13.

Iz obrasca profila koncentracije u vremenu molekula BTG 1640 u plazmi pacova, očigledno je kako oksalat so obezbeđuje višu koncentraciju slobodnog i nemodifikovanog aktivnog elementa BTG 1640 u odnosu na hidrohlorid, posle samo dva minuta od njegove primene.

Ovo, prema tome, ističe veću apsorpciju oksalat soli i prema koncentraciji i prema vremenu.

Oksalat so jedinjenja BTG 1640 imala je prema tome bolje rezultate od hidrohloridne soli, ne samo prema profilu njegove hemijske stabilnosti, već, za oralnu primenu, takođe prema profilu njegove apsorpcione kinetikein vivo.

Primer 6

Procena akutne oralne toksičnosti

Vršena je procena akutne i oralne toksičnosti soli hidrohlorida i oksalata jedinjenja BTG 1640.

Dve soli su raspršene u vodenoj suspenziji, čime se dobijaju dve formulacije, pri čemu se svaka od njih oralno primenjuje preko gavaže jednjaka u dozi od 2000 mg/kg telesne težine (izraženo kao slobodna baza jedinjenja BTG 1640) na jednu od dve grupe koje sadrže tri ženke CD-1 miševa po grupi.

Posmatranje je trajalo 14 dana.

Kod svih životinja svake grupe, smanjenje spontane lokomotorne aktivnosti zabeleženo je u prvim minutima posle tretmana i brzo je nestalo. Letargija, ataksija, agresivnost i vokalizacija zabeleženi su kod miševa tretiranih hidrohloridom BTG 1640 i dva od tih miševa su uginula prvog dana posle primene cele doze. Telesna težina je ostala prilično stabilna tokom celokupnog perioda posmatranja u svim eksperimentalnim grupama. Autopsija je otkrila odsustvo promena, bubrezi su uzorkovani iz svake životinje, u cilju procene moguće bubrežne toksičnosti soli. Histopatološko ispitivanje grupe koja je primala hidrohlorid pokazala je mala žarišta akutne tubularne nekroze u korteksu, balon degeneraciju epitelijuma i dilataciju savijenih tubula. U grupi koja je primala oksalat zabeležena je fokusna i umerena balon degeneracija epitelijuma u savijenim tubulama. Na osnovu razmatranih rezultata, primena 2000 mg/kg telesne težine, kod ženki miševa, oksalata BTG 1640 bila je manje toksična, praćena brzo povratnim neurološkim simptomima, dok je ista doza hidrohlorida BTG 1640 bila letalna kod dve životinje od ukupno tri.

Dalje slede izvesni primeri formulacije za pripremu tableta koje imaju težinu od oko 120 mg farmaceutske kompozicije prema pronalasku koja sadrži oksalat so jedinjenja BTG 1640 i usmerena je na oralnu primenu.

Primer 7

Primer 8

Primer 9 Primer 10 Primer 11

Primer 12

Primer 13 Primer 14 Primer 15

Primer 16

Primer 17 Primer 18 Primer 19

Primer 20

Primer 21 Primer 22 Primer 23

Primer 24 Primer 25

Primer 26

Claims

1. Oksalat so jedinjenja formule I

2. Oksalat so prema patentnom zahtevu 1 naznačena time sto je to oksalat so jedinjenja formule I u obliku jednog ili više stereohemijskih jedinjenja i njihovih smeša.

3. Oksalat so prema patentnom zahtevu 2, naznačena time što je to oksalat so jedinjenja formule I u obliku diastereoizomera ili racemske smeše.

4. Oksalat so prema bilo kom od patentnih zahteva 1-3, naznačena time što je to oksalat jedinjenja rel-(3R,3aS,7aS)-3-benzil-2-metil-2,3,3a,4,5,6,7,7a-oktahidrobenzo[d] izoksazol-4-ona.

5. Postupak za pripremu oksalat soli 3-benzil-2-metil-2,3,3a,4,5,6,7,7a-oktahidrobenzo[d]izoksazol-4-ona, prema bilo kom od patentnih zahteva 1-4, naznačen time što sadrži sledeće korake: i) reakciju slobodne baze 3-benzil-2-metil-2,3,3a,4,5,6,7,7a-oktahidrobenzo[d] izoksazol-4-ona sa oksalnom kiselinom; ii) podvrgavanje reakcione smeše jednom ili više cilklusa hlađenja od manje od 10°C.

6. Postupak prema patentnom zahtevu 5, naznačen time što je slobodna baza 3-benzil-2-metil-2,3,3a,4,5,6,7,7a-oktahidrobenzo[d]izoksazol-4-on iz koraka i) dobijena u koraku koji prethodi koraku i), koji obezbeđuje oslobađanje navedene baze od odgovarajuće hidrohloridne soli.

7. Postupak prema patentnom zahtevu 6, naznačen time što se oslobađanje slobodne baze od hidrohloridne soli izvodi pomoću dihlorometana.

8. Postupak prema bilo kom od patentnih zahteva 5-7, naznačen time što je oksalna kiselina iz koraka i) u dihidratnom obliku.

9. Postupak prema bilo kom od patentnih zahteva 5-8, naznačen time što se korak i) izvodi u ledenom kupatilu.

10. Postupak prema bilo kom od patentnih zahteva 5-9, naznačen time što se hlađenje iz koraka ii) odvija na temperaturama od 2 do 8°C.

11. Oksalat so jedinjenja formule I za primenu kao lek.

12. Oksalat so prema patentnom zahtevu 11, naznačena time što je to oksalat so jedinjenja formule I u obliku jednog ili više stereohemijskih jedinjenja i njihovih smeša za primenu kao lek.

13. Oksalat so prema patentnom zahtevu 12, naznačena time što je to oksalat so jedinjenja formule I u obliku diastereoizomera ili racemske smeše za primenu kao lek.

14. Oksalat so prema bilo kom od patentnih zahteva 11-13, naznačena time što je to oksalat jedinjenja rel-(3R,3aS,7aS)-3-benzil-2-metil-2,3,3a,4,5,6,7,7a-oktahidrobenzo[d] izoksazol-4-ona za primenu kao lek.

15. Farmaceutska kompozicija naznačena time što sadrži oksalat so prema bilo kom od patentnih zahteva 1-4 i farmaceutski prihvatljiv nosač.

16. Kompozicija prema patentnom zahtevu 15, naznačena time što je oksalat so prisutna u količini od 0.1 do 100 mg.

17. Tableta naznačena time što sadrži oksalat so prema bilo kom od patentnih zahteva 1-4 i pogodne inertne punioce.

18. Tableta prema patentnom zahtevu 17, naznačena time što su pogodni inertni punioci izabrani iz grupe koju čine preželatinizirani škrob, mikrokristalna celuloza, natrijum škrob glikolat, talk, laktoza, magnezij um stearat, saharoza, stearinska kiselina i manitol.

19. Tableta prema patentnom zahtevu 17 ili 18, naznačena time što je oksalat so prisutna u količini od 1 do 100 mg po jedinici tablete.

20. Tableta prema patentnom zahtevu 19, naznačena time što je oksalat so prisutna u količini od 1 do 50 mg po jedinici tablete.

21. Primena oksalat soli jedinjenja formule I za proizvodnju leka za lečenje poremećaja raspoloženja, poremaćaja anksioznosti, depresije i konvulzivnih stanja, u poboljšanju sposobnosti učenja, za lečenje amnezije, u rešavanju apstinencijalnog sindroma od droga i zloupotrebe lekova.

22. Primena prema patentnom zahtevu 21, naznačena time što je oksalat so - oksalat jedinjenja formule I u obliku jednog ili više stereohemijskih jedinjenja i njihovih smeša za proizvodnju leka za lečenje poremećaja raspoloženja, anksioznosti, depresije i konvulzivnih stanja, u poboljšanju sposobnosti učenja, za lečenje amnezije, u rešavanju apstinencijalnog sindroma od droga i zloupotrebe lekova.

23. Primena prema patentnom zahtevu 22, naznačena time što je oksalat so - oksalat jedinjenja formule I u obliku diastereoizomera ili racemske smeše za proizvodnju leka za lečenje poremećaja raspoloženja, anksioznosti, depresije i konvulzivnih stanja, u poboljšanju sposobnosti učenja, za lečenje amnezije, u rešavanju apstinencijalnog sindroma od droga i zloupotrebe lekova.

24. Primena prema bilo kom od patentnih zahteva 21-23, naznačena time što je oksalat so - oksalat jedinjenja rel-(3R,3aS,7aS)-3-benzil-2-metil-2,3,3a,4,5,6,7,7a-oktahidrobenzo[d] izoksazol-4-ona za proizvodnju leka za lečenje poremaćaja raspoloženja, anksioznosti, depresije i konvulzivnih stanja, u poboljšanju sposobnosti učenja, za lečenje amnezije, u rešavanju apstinencijalnog sindroma od droga i zloupotrebe lekova.

25. Primena prema bilo kom od patentnih zahteva 21-24, naznačena time što je lek za oralnu primenu.

26. Primena prema patentnom zahtevu 25, naznačena time što je lek za oralnu primenu izabran iz grupe koju čine tablete, kapsule, škrobne kapsule, praško vi, granule ili suspenzije u tečnosti.

27. Primena prema patentnom zahtevu 25 ili 26, naznačena time što je oksalat so jedinjenja formule I u količini od 1 do 100 mg po jedinici leka.

28. Primena prema patentnom zahtevu 27, naznačena time što je lek tableta, gde je oksalat so jedinjenja formule I u količini od 1 do 100 mg po jedinici tablete.

29. Primena prema bilo kom od patentnih zahteva 21-24, naznačena time što je lek za topikalnu primenu.

30. Primena prema patentnom zahtevu 29, naznačena time što je lek za topikalnu primenu izabran iz grupe koju čine kreme, ulja, masti, emulzije, gelovi, vodeni rastvori, sprej rastvori i flasteri.

31. Primena prema patentnom zahtevu 29 ili 30, naznačena time što je oksalat so jedinjenja formule I u količini od 1 do 100 mg po jedinici leka.

32. Primena prema bilo kom od patentnih zahteva 21-24, naznačena time što je lek za parenteralnu primenu.

33. Primena kisele adicione soli prema patentnom zahtevu 32, naznačena time što je lek za parenteralnu primenu sterilni vodeni preparat.

34. Primena kisele adicione soli prema patentnom zahtevu 32 ili 33, naznačena time što je oksalat so jedinjenja formule I u količini od 0.1 do 100 mg po jedinici leka.

35. Oksalat so jedinjenja formule I za primenu u lečenju poremaćaja raspoloženja, anksioznosti, depresije i konvulzivnih stanja, u poboljšanju sposobnosti učenja, za lečenje amnezije, u rešavanju apstinencijalnog sindroma od droga i zloupotrebe lekova.