RS54768B1 - Morfolinilbenzotriazini za primenu u terapiji kancera - Google Patents

Morfolinilbenzotriazini za primenu u terapiji kancera

Info

Publication number
RS54768B1
RS54768B1 RS20160351A RSP20160351A RS54768B1 RS 54768 B1 RS54768 B1 RS 54768B1 RS 20160351 A RS20160351 A RS 20160351A RS P20160351 A RSP20160351 A RS P20160351A RS 54768 B1 RS54768 B1 RS 54768B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
atoms
compounds
formula
salts
stereoisomers
Prior art date
Application number
RS20160351A
Other languages
English (en)
Inventor
Werner Mederski
Thomas Fuchss
Ulrich Emde
Hans-Peter Buchstaller
Original Assignee
Merck Patent Gmbh
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Merck Patent Gmbh filed Critical Merck Patent Gmbh
Publication of RS54768B1 publication Critical patent/RS54768B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61N—ELECTROTHERAPY; MAGNETOTHERAPY; RADIATION THERAPY; ULTRASOUND THERAPY
    • A61N5/00—Radiation therapy
    • A61N5/10—X-ray therapy; Gamma-ray therapy; Particle-irradiation therapy
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D253/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D251/00
    • C07D253/08—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D251/00 condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D513/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00
    • C07D513/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D513/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F7/00—Compounds containing elements of Groups 4 or 14 of the Periodic Table
    • C07F7/02—Silicon compounds
    • C07F7/08—Compounds having one or more C—Si linkages
    • C07F7/0803—Compounds with Si-C or Si-Si linkages
    • C07F7/081—Compounds with Si-C or Si-Si linkages comprising at least one atom selected from the elements N, O, halogen, S, Se or Te
    • C07F7/0812—Compounds with Si-C or Si-Si linkages comprising at least one atom selected from the elements N, O, halogen, S, Se or Te comprising a heterocyclic ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F7/00—Compounds containing elements of Groups 4 or 14 of the Periodic Table
    • C07F7/02—Silicon compounds
    • C07F7/08—Compounds having one or more C—Si linkages
    • C07F7/10—Compounds having one or more C—Si linkages containing nitrogen having a Si-N linkage
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F7/00—Compounds containing elements of Groups 4 or 14 of the Periodic Table
    • C07F7/02—Silicon compounds
    • C07F7/08—Compounds having one or more C—Si linkages
    • C07F7/18—Compounds having one or more C—Si linkages as well as one or more C—O—Si linkages
    • C07F7/1804—Compounds having Si-O-C linkages

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Radiology & Medical Imaging (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

Jedinjenja formule (I)naznačena time, što (I)R1 Hetl ili ArR2 R3 međusobno nezavisno Y ili OY, ili zajedno takođe -O-(CH2)n ;R4 A ili (CH2)nOAL -CR2R3-, jedna prosta veza, -(CH2)n-, CH(Hal)-, -CH(Hal)2,-(CH2)nCH(OY)-, -(CH2)nCO-, -(CH2)nNH-,-(CH2)nCONY2, -NYCO-,-NHCO-NH-, -NR4CO-, -NYS02-, -C(=NR4)-, -C(=NCN)-, - CY(NY2), -CY(CN)-, -CY(0-(CH2)nCN)-, -CY(Het2)-, ili -CY(0-(CH2)nHet2)-;Y H ili AA ravnolančasti ili račvasti alkil sa 1-10 C-atoma, pri čemu međusobnonezavisno, 1-7 H atoma mogu da budu zamenjeni halogenom;Cyc ciklični alkil sa 3-7 C-atoma, pri čemu međusobno nezavisno, 1-4 H-atoma može da bude zamenjeno halogenomAr nesupstituisani ili jednom ili dva puta supstituisani fenil sa (CH2)pOY, R4, (CH2)pOR4, COOY, NY2, NYCOY i/ili CN;Het1 Heteroaril sa jednim ili dva jezgra sa 2-9 C-atoma i 1-4 N-, O-,i/ili S-atomom, koji može da bude nesupstituisan ili može jednom ili dva puta da bude supstituisan sa halogenom, CH2)pOY, R4, (CH2)pOR4, O= COOY, NY2, NYCOY2, CONY2, Cyc, Het2 i/ili CN;Het2 heterocikl sa jednim jezgrom sa 2-7 C-atoma i 1-4 N-, O- i/ili £ atomom koji može da bude nesupstituisan ili jednom supstituisan sa A;Hal F, Cl, Br,ili I;m 0, 1 ili 2; in,p znači međusobno nezavisno 0, 1, 2, 3, 4 ili 5i/ili njene fiziološki nesporne soli, tautomere i/ili stereoizomere, uključujući njihove smeše u svim odnosima.Prijava sadrži još 13 patentnih zahteva.

Description

Opis pronalaska
Pronalazak se odnosi na jedinjenja formule (I)
gđe R<1>, L i m imaju ona u zahtevima navedena značenja, i/ili njihove nesumnjive soli, tautomere i stereoizomere, uključujući njihove smeše u svim odnosima. Jedinjenja formule (I) mogu da se primene za suzbijanje serin-treonin-proteinkinaza kao i senzibilisanje ćelija kancera prema sredstvima protiv kancera i/ili jonizirajućeg zračenja. Takođe je opisana primena jedinjenja formule (I) u
profilaksi, terapiji ili kontroli toka kancera, tumora metastaza ili smetnji angiogeneze u kombinaciji sa radioterapijom i/ili drugim sredstvima protiv kancera. Pronalazak se odnosi dalje na postupak za dobijanje formule (I)reakcijom jedinjenja (II) i (III) i u datom slučaju pretvaranjem baze ili kiseline jedinjenja formule (I) u neku od njenih soli.
DNK-zavisna proteinkinaza (DNK-PK) je serin/treonin-proteinkinaza koja se aktivira u spoju sa DNK. Biohemijski i genetički podaci pokazuju da se DNK-PK (a) sastoji iz katalitičke podjedinice, koja se naziva DNK-PKcs i (b) dve regulatome komponente (Ku70 i Ku80). Funkcionalno je DNK-PK odlučujući sastavni deo sa jedne strane popravke dvostranog loma DNK-lanca a sa druge strane somatske ili V(D)J rekombinacije. Osim toga DNK-PK i njene komponente se dovode u vezu sa mnoštvom daljih psiholoških procesa, između ostalog sa modulacijom hromatinske strukture kao održavanja telomera (Smith & Jackson
(1999) Genes and Devi3: 916; Govtisolo et al. (2001) Mol. Cell. Biol. 21; 3642; NVilliams et ali. (2009) Cancer Res. 69: 2100).
Čovekovo nasleđe u obliku DNK je permanentno izloženo napadima reaktivnih kiseoničnih vrsta (ROS), koje nastaju prvenstveno kao sporedni proizvodi oksidativnog metabolizma. ROS su u stanju da izazovu oštećenja DNK u obliku pojedinačnih kidanja lanca. Dvostruka kidanja lanca mogu da nastanu kada se pojedinačno kidanje dogodi u bliskom susedstvu. Osim toga pojedinačna i dvostruka kidanja lanca mogu biti uzrokovana kada DNK-replikaciona viljuška naiđe na oštećenu baznu mustru. Nadalje su telu strani uticaji, kao jonizirajuće zračenje (na primer gama zračenje ili zračenje teških jona) i određeni antikancer-medikamenti (na primer bleomicin)u stanju da izazovu dvostruko pucanje lanca DNK. DSB mogu dalje da nastanu kao međuproizvodi somatske rekombinacije, procesa koji je značajan za stvaranje funkcionalnog imuno sistema svih ki-čmenjaka. Ako se DNK-dvostruka kidanja lanca, ne ili manjkavo saniraju, mogu da nastupe mutacije i/ili hromozomske aberacije koje za posledicu mogu da dovedu do ćelijske smrti. Kako bi se delovalo nasuprot ugrožavanju sa teškim posledicama koje proističu od dvostrukog kidanja lanca, eukariotiČne ćelije su razvile više mehanizama da bi ovo uklonile. Više eukariote se poslužuju pri tome prevashodno takozvanom ne-homologom krajnjem povezivanju( non- homologous end- joining,NHNJ) pri kome DNK-zavisna proteinkinaza preuzima ključnu ulogu. Biohemijska ispitivanja su pokazala da se DNK-PK najdelotvornije aktivira
nastupom DNK-DSBs. Ćelijske linije, čije su DNK-PK komponente mutirale i nisu funkcionalne, su se pokazale osetljivim na zračenje (Smith und Jackson, 1999).
DNK-PK pripada zbog svojih katalitičkih domena, koji leži u oko 500 aminokiselina brojećoj C-terminalnoj katalitičkoj podjedinici (DNK-PKcs), familijiPhosphatidylinositol- 3- kinaserelated kinases( PIKK),pri Čemu DNK-PK ne predstavlja lipid-kinaze (Hartley et all.(1995) Cell 82: 849; Smith & Jackson
(1999) Genes and Dev 13:916; Lempiainen (2009) EMBO J. 28; 3067).
Proteinkinaza ATM (Ataxia-TeIangiectasia-mutirana kinaza) pripada takođe PIKK- familiji. Ona takođe poseduje centralni značaj pri prepoznavanju DNK-oštećenja. Pacijenti koji boluju od ataxia-telagiectasia, pokazuju pored ostalog povišenu osetljivost prema jonizujućenm zraČenju.(Lavin & Shiloh (1997) Annu. Rev. Immunol. 15: 177; Rotman & Shiloh (1998) Hum. Mol.Genet. 7: 1555)
Od Izzard et al. (1999) Cancer Res. 59: 2581 opisano je da inhibitori PI3-kinaze LY294002 u eksperimentima in-vitro inhibiraju funkciju DNK-PK. Vrednost IC50(koncentracija kod koje je 50%aktiviteta enzima suzbijeno, leži kod malo delotvorne 1,25 uJVI (5,0 mM ATP). I ako dokaz, da inhibitor LY294002 ćelije sisara čini osetljivijim, što znaci da se pojačava ciototoksičnost jonizujućeg zračenja,implicira principijelno primenu kod terapije zračenjem čvrstih tumora kancera, za LY294002 moglo je celularno da se dokaže samo slabo povećanje osetljivosti prema jonizujućem zračenju (Rosenzweig et al. (1999) Clin. Cancer Res. 3:1149). KuDOS Pharmaceuticals Ltd. optimizovao je osnovnu strukturu LY294002 i predstavio različite DNK-PK-inhibitore. Uvođenje dibenzotiofenil-grupe dovelo je do inhibitora Nu-7441, ATP-kompetitivnog jedinjenjasa vrednošću za IC50od 20,0 nM (Hardcastle et al. (2005) J. Med. Chem. 48: 7829). KU-0060648 spaja inhibitorske osobine prema DNK-PK sa poboljšanim profilom rastvorljivosti u vodenim medijima, međutim kinaze PI3K-izoenzim familije se takođe potentno suzbijaju sa KU-006648. Potreba koja postoji već duže za jednim potentnimi selektivnim DNK-PK-inhibitorom sledstveno tome do sada nije bila zadovoljena.
WO2011113512 objavljuje morfolinilhinazoline za suzbijanje proteinkinaze. Pronalasku leži u osnovi zadatak da prevaziđe one, u stanju tehnike navedene nedostatke i da razvije đelotvorne inhibitore DNK-PK, koji su selektivni prema srodnim kinazama PIKK familije kao i da su niskomolekularne veličine i da naročito omogućavaju efektivnu primenu u terapiji kancera kao radio- i hemosenzibilizatori sa ciljem da poboljšaju terapeutsku delotvornost pri istovremenom smanjenju sporednih efekata.
Zadatak pronalaska se rešava prema nezavisnim zahtevima. Podzahtevi sadrže podesne oblike izvođenja. Prema pronalasku pripremaju se jedinjenja formule (I)
u kojoj
R<1>het<1>ili Ar
R 2. R 3 međusobno nezavisno Y ili OY, ili zajedno takođe -0-(CH2)n ;
R<4>A ili (CH2)nO<A>
L -CR<2>R<3->, jedna prosta veza, -(CH2)n-, CH(Hal)-, -CH(Hal)2. -(CH2)nCH(OY)-, -(CH2)nCO-, -(CH2)nNH-,-(CH2)nCONY2, -NYCO-, -NHCO-NH-, -NR<4>CO-, -NYS02-, C(=NR<4>)-, -C(=NCN)-, CY(NY2)--CY(CN)-, CY(0-(CH2)nCN)-, -CY(Het2)-, ili -CY(0-(CH2)nhet<2>)-;
Y H ili A
A ravnolančasti ili račvasti alkil sa 1-10 C-atoma, pri čemu međusobno
nezavisno 1-7 H atoma mogu da budu zamenjeni halogenom;
CyC ciklični alkil sa 3-7 C-atoma, pri čemu međusobno nezavisno, 1-4 H-atoma može da bude zamenjeno halogenom
Ar nesupstituisani ili jednom ili dva puta supstituisani fenil sa halogenom (CH2)pOY, R<4>, (CH2)pOR4, COOY, NY2, NYCOY i/ili CN
supstituisani fenil;
Het<1>heteroaril sa jednim ili dva jezgra sa 2-9 C-atoma i 1-4 N-, O-,i/ili S-atomom, koji može da bude nesupstituisan ili može jednom ili dva puta da bude supstituisan sa halogenom, CH2)pOY, R<4>, (CH2)pOR<4>, 0=, COOY, NY2, NYCOY, CONY2, Cyc, Het<2>i/ili CN;
Het<2>heterocikl sa jednim jezgrom sa 2-7 C-atoma i 1-4 N-, O- i/ili S
atomom koji može da bude nesupstituisan ili jednom supstituisan sa
A;
Hal F, Cl, Br,ili I;
m 0, 1 ili 2; i
n, p znači međusobno nezavisno 0, 1, 2, 3, 4 ili 5
i/ili njene fiziološki nesporne soli, tautomere i/ili stereoizomere, uključujući njihove smeše u svim odnosima.
Iznenađujuće se pokazalo da su jedinjenja prema pronalasku opremljena inhibirajućim osobinama na serin-treonin proteinkinaze. Jedinjenja formule (I) su svojom strukturom jezgra morfolinilbenzotriazina kojoj prevashodno prianja piperidin-supstitucija, koja opet može da bude supstituisana heteroarilom ili arilom, napravljena tako da se odvija potentno i selektivno suzbijanje DNK-PK. Jedinjenja prema pronalasku otvaraju time sasvim nove mogućnosti što se tičr antikancerogenog dejstva sredstava protiv raka. Na način vredan pomenajedinjenja formule (I) igraju terapeutsku ulogu kao radio- i hemosenzibilizatori u tretiranju raka.
Do sada je bilo poznato samo iz WO 1992/07844 da su 2,4-diaminohinazolin-derivati pojačivači hemoterapeutskih sredstava u lečenju raka. Derivati adresiraju višestruku rezistenciju ćelija tumora usled nadekspresije mdrl-gena, čiji genski proizvod Efluks-P-glikoproteinska pumpa drži nisko intracelularnu koncentraciju aktivne materije. Niti su objavljeni psihohemijski i farmakološki podatci, niti je poznat medikament u prodaji. Suprotno tome predloženi pronalazak otkriva da su upravo jedinjenja formule (I) osposobljena za specifično suzbijanje serin-treonin-proteinkinaze kao DNK-PK. Jedinjenja prema pronalasku i njihove soli poseduju vredne farmakološke osobine pri istovremeno dobroj podnošljivosti.
U okviru pronalaska jedinjenja formule (I) su tako definisana da se pod njima podrazumevaju i farmaceutski primenljive soli, hidrati, solvati, tautomerne ili optički aktivne forme (kao na primer stereoizomeri, diastereomeri, enantiomeri, racemati). Pod solvatima jedinjenja podrazumevaju se prianjanja inertnih molekula rastvarača na jedinjenje koja se stvaraju na osnovu njihove međusobne privlačne sile. Solvati su na primer mono- ili dihidrati ili alkoholati. Pod farmaceutski primenljivim derivatima podrazumevaju se na primer soli jedinjenja prema pronalasku kao i takozvane predfaze jedinjenja. Pod predfazama podrazumevaju se na primer sa alkil- ili acilgrupama, šećerima ili oligopeptidima izmenjena jedinjenja formule (I), koja se u organizmu brzo razlažu na delotvorna jedinjenja prema pronalasku. Tome pripadaju! biorazgradljivi polimerni derivati jedinjenja prema pronalasku, kako je to na primer opisano u Int. J. Pharm. 115, 61-67 (1995).
Svako jedinjenje koje in-vivo može da se prevede u bioaktivno sredstvo, što znači u jedinjenja formule (I) je predfaza u smislu ovog pronalaska. Svako biološki aktivno jedinjenje koje rezultuje in-vivo razmenom materije jedinjenja prema pronalasku je metabolit u smislu predloženog pronalaska. Jedinjenja formule (I) mogu da poseduju jedan ili više hiralnih centara i zato da se nalaze u različitim stereoizomernim oblicima. Formula (I) uključuje sve ove oblike.
Predmet pronalaska je takođe i primena smeša jedinjenja formule (I), na primer smeše dva diastereomera, na primer u odnosu 1:1, 1:2, 1:3, 1:4, 1:5, 1:10, 1:100 ili 1:1000. Naročito povoljno se pri tome radi o smešama stereoizomernih jedinjenja. Prethodno i naknadno imaju radikali R<1>, R<2>, R\ R<4>, L, Y, A, Cic, Ar, Het', Het<2>, i hal kao i m, n i pona kod formule (I) navedena značenja, u koliko nije izričito drugačije navedeno. Kod višestrukog pojavljivanja pojedinih ostataka unutar jedinjenja ili nekog radikala ostaci nezavisno međusobno uzimaju navedeno značenje u koliko nije izričito navedeno nešto drugo. Na primer, ostatci YY su u radikalu L u kome se pojavljuju više puta, identični ili različiti, ali prvenstveno u svakom slučaju nezavisno međusobno izabrani od prethodno i/ili naknadno navedenih značenja (na primer metil i/ili etil) u koliko nije izričito drugačije navedeno. Predložene primenjene oznake za defmisanje jedinjenja nalaze se u osnovi opštih pravila IUPAC- organizacije za hemijska jedinjenja naročito za organska jedinjenja. Oznake za objašnjenje gore navedenih jedinjenja pronalaska imaju uvek značenja koja slede, u koliko opis ili zahtevi ne pokazuju nešto drugo. Pojam "nesupstituisan" znači da radikal, grupa ili ostatak ne nosi nikakve supstituente. Pojam"supstituisan" znači da radikal, grupa ili ostatak nosi jedan ili više supstituenata.
"Alkil" ili "A"označava u smislu pronalaska zasićeni ugljovodonični radikal koji je ravnolančast (linearan), račvast ili cikličan i prvenstveno ima 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ili 10 C- atoma što znači C^oalkanil. Primeri za alkilradikale su metil, etil, propil, izopropil, 1,1-, 1,2- ili 2,2-dimetilpropil, 1-etilpropil, 1-etil-l-metilpropil, l-etil-2-metilpropil, 1,1,2- ilil,2,2-trimetilpropil, butil, izobutil, sek-butil, tert-butil l-,2- ili 3-metilbutil, 1,1-, 1,2-, 1,3-, 2,2-, 2,3- ili3,3-dimetilbutil, 1- ili 2-etilbutil, pentil, izopentil, neopentil, tert-pentil, 1-, 2-, 3- ili 4-metilpentil, heksil.
U poljnom obliku izvođenja pronalaska, "A" je ravnolančasti ili račvasti alkil sa 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ili 10 C-atoma pri čemu međusobno nezavisno 1, 2, 3, 4, 5 ili 6 C-atoma mogu da budu zamenjeni halogenom. Kao "A" je naročito povoljan ravnolančasti ili račvasti alkil sa 1, 2, 3, 4, ili 5 C-atoma, pri čemu međusobno nezavisno 1, 2, 3, 4, ili 5 H-atoma mogu biti zamenjeni halogenom. Naročito povoljan je Ci.4-alkil, pri čemu međusobno nezavisno, 1-3 H-atoma mogu sa budu zamenjeni halogenom. Jedan takav C|.4-alkil je na primer,metil, etil, propil, izopropil, butil, izobutil, sec.-butil, tert.-butil, fluormetil, difluormetil, trifluormetil, pentafluormetil, 1,1,1 -trifluoretil Hi brommetil, najpovoljnije metil, etil ili trifluormetil. Podrazumeva se da su sva značenja "A" međusobno nezavisno u radikalima formule prema pronalasku.
"Cikloalkil" ili "cyc" označava u smislu pronalaska zasićene ili delimično nezasićene nearomatične ciklične ugljovodonične grupe sa 1 do 3 prstena koji obuhvataju 3 do 20, prvenstveno 3 do 12, naročito povoljno 3 do 9 C-atoma. Vezivanje na osnovni skelet formule (I) može da bude preko svakog člana prstena cikloalkil grupe. Primeri podesnog cikloalkila su ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, cikloheptil, ciklooktil, ciklodecil, ciklopentenil, cikloheksenil i ciklooktadienil.
U povoljnom obliku izvođenja pronalaska "Cyc" je ciklični alkil sa 3-7 C-atoma, pri čemu međusobno nezavisno 1-4 C-atoma mogu da budu zamenjeni halogenom. Naročito podesan je ciklični alkil sa 3-5 C-atoma.
Osnovni skelet formule (I) je svaka generična ili negenerična struktura, na kojumože da se veže bilo koji radikal u smislu pronalaska, kao na primer Het<1>ili Het<2>da bi se došlo do formule (I) prema pronalasku.
Pojam „Aril", „ Carboaril" ili ,,Ar" označava u smislu pronalaska mono, ili policiklični aromatični ugljovodonični aromatični ugljovođonični sistem sa 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 ili 14, prvenstveno 4-10, naročito pvoljno 5-8 C-atoma koji u datom slučaju mogu da budu supstituisani. Pojam „Aril" uključuje takve sisteme u kojima je aromatični prsten deo jednog bi- ili policikliČnog zasićenogdelimično nezasićenog i/ili aromatičnog sistema, na primer kada je aromatični prsten vezan na „aril", „heteroaril" ili „heterocikl" preko proizvoljnog člana prstena alkil radikala. Primeri za pogodan „aril" su fenil, bifenil, naftil, 1-naftil, 2-naftil, antracenil, in-danil, in-denil, 1,2,3,4-tetrahidronaftil, naročito fenil, o- m- ilip-tolil, o-, m- ilip-etilfenil, o-, m- Hi p-propilfenil, o-,m-, ili p-izopropilfenil, o-, m- ilip-tert.butilfenil, o-, m- ilip-trifluormetilfenil, o-, m- ilip-fluorfenil, o-, m-ili p-bromfenil, o-, m- ili p-hlorfenil, o-, m- ili p-hidroksifenil. o-m- ili p-metoksifenil, o-, m- ili p-metilsulfonilfenil, o-, m- ili p-dimetilam ino fenil. o-, m- ili p-aminosulfonilfenil, o-, m- ili p-metilaminosulfonilfenil, o-, m- ili p-aminokarbonilfenil, o-, m- ili p- karboksifenil, o-, m- ili p-metoksikarbonilfenil, o-, m- ili p-etoksikarbonilfenil, o-, m- ili p -acetilfenil, o- m - ili p - formilfenil, o-, m-ili p-cijanfenil, 2,3-, 2,4-, 2,5-, 2,6-, 3,4- ili 3,5-difluorfenil, 2,3-, 2,4-, 2,5-, 2,6-, 3,4- ili 3,5-dihlorfenil, 2,3-, 2,4-, 2,5-, 2,6-, 3,4- ili 3,5-dibromfenil, 2,3,4-, 2,3,5-, 2,3,6-, 2,4,6-, ili 3,4,5-trihlorfenil, p-jodfenil, 4- fluor-3-hlorfenil, 2-fluor- 4-bromfenil, 2.5-difluor-4-bromfenil ili 2,5-dimetil-4-hlorfenil.
U povoljnom obliku izvođenja pronalaska ,,Ar" je nesupstituisani ili jednom ili dva puta halogenom, (CH2)pOY, R<4>, (CH2)pOR<4>, COOY, NY2, NYCOY ili sa CN supstituisani fenil naftil ili bifenil. Posebno je povoljno da ,,Ar" znači nesupstituisani ili jednom ili dva puta halogenom, (CH2)pOY, R<4>, (CH2)pOR<4>, COOY, NY2, NYCOY ili sa CN supstituisani fenil. Naročito je povoljno da ,,Ar" znači nesupstituisani ili jednom ili dvaput halogenom i/ili (CH2)pOY supstituisani fenil, posebno povoljno jednom ili dva puta halogenom i/ili OA supstituisani fenil.
Pojam „heteroaril" označava u smislu pronalaska jedan 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 ili 15, prvenstveno 2-9, naročito povoljno 5-, 6- ili 7-člani mono ili policiklični aromatični ugljovodonični radikal, koji obuhvata najmanje 1, i ako je odgovarajuće takođe i 2, 3, 4 ili 5 heteroatoma, naročito azot, kiseonik i/ili sumporpri čemu suheteroatomi identični ili različiti. Broj atoma azote je prvenstveno 0, 1, 2, 3 ili 4, a onaj kiseonika i sumpora nezavisno jedan od drugog 0 ili 1. Pojam „heteroaril" uključuje takve sisteme u kojima je heteroaromatični prsten deo jednog bi- ili policikličnog zasićenog delimiČno nezasićenog i/ili aromatičnog sistema, na primerkada je heteroaromatični prsten vezan preko bilo koga člana prstena heteroaril-radikala na „aril" ili „heterocikl". Veza na osnovni skelet formule (I) može da se ostvari preko svakog člana prstena heteroaril grupe, u koliko se ispostavi hemijski smisleno, pri čemu je povoljna veza preko C-atoma.
„Heteroaril" znači bez obzira na druge supstituente, na primer2- ili 3-furil, 2- ili 3-tienil, l-,2- ili3-pirolil, 1-, 2-, 4- ili5-imidazolil, 1-, 3-, 4- ili 5-pirazolil, 2-. 4- ili 5-oksazolil, 3-, 4- ili 5- izoksazolil, 2-, 4- ili 5-tiazolil, 3-,4- ili 5-izotiazolil, 2-, 3- ili 4- piridil, 2-, 4-, 5- ili 6-pirimidinil, 1,2,3-triazol-l-, 4- ili -5-il, 1-, 2-, 4-triazol-l-,3- ili 5-il, 1- ili 5- triazolil, 1, 2, 3-oksadiazol-4- ili—5-il, 1, 2, 4-oksadiazol-3- ili - 5- il, 1, 3 4-tiadiazol-2-ili-5-il, 1, 2, 4-tiadiazol-3- ili -5-il, 1, 2, 3-tiadiazol-4- ili-5-il, 3- ili-piridazinil, pirazinil, 1-, 2-, 3-, 4-, 5-, 6- ili 7-indolil, 4- ili 5- izoindolil, 1-, 2-, 4- ili 5-benzimidazolil, 1-, 2-, 3-, 4-, 5-, 6- ili 7-indazolil, 1-, 3-,4-, 5-, 6- ili 7-benzopirazolil, 2-, 4-, 5-, 6- ili 7- benzoksazolil, 3-, 4-, 5-, 6-, ili 7-benzizotiazolil, 4- , 5-, 6-, ili 7-benz- 2, 1, 3-oksadiazolil, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- ili 8-hinolil, 1-, 3-, 4-, 5- , 6-, 7- ili 8-izohinolil, 3-, 4-, 5-, 6-, 7-ili 8-hinolil, 2-, 4-, 5-, 6-, 7- ili 8-hinazolinil, 5- ili 6- hinoksalinil, 2-, 3-, 5-, 6-, 7- ili 8-2H-benzo-[l,4]-oksazinil, l,3-benzodioksol-5-il, l,4-benzodioksan-6-iI, 2,l,3-benzotiadiazol-4- ili 5-il, 2,1,3-benzoksadiazol-5-il, imidazolil, triazinil, ftalazinil, indolizinil, pteridinil, karbazolil, fenazinil, fenoksazinil, fenotiazinil ili akridinil.
Heterociklični ostaci mogu da budu i delimično ili potpuno hidrogenovani. Nesupstituisani heteroaril može na primer da znači i 2,3-dihidro-2-,-3,-4- ili -5-furil, 2,5-dihidro-2, -3, -4 ili -5 furil, tetrahidro-2-iii-3-furil, l,3-dioksolan-4-il, tetrahidro-2 ili -3-tienil, 2,3-dihidro-l, -2, -3, -4- ili-5-pirolil, 2,5-dihidro-l-, 2-, - 3,-4-ili-5-pirolil, 1-, 2- ili 3-piroIidinil, tetrahidro-1-, 2- ili-4-imidazolil, 2,3-dihidro-l-, -2, -3, -4 ili -5-pirazolil, tetrahidro-1-, -3- ili -4-pirazolil, 1,4-dihidrol-, -2-, -3- ili-4- piridil, 1,2,3,4-tetrahidro-l-, -2-, -3-, -4-, -5- ili 6-piridil, 1-, 2-, 3- ili 4- piperidinil, 2-, 3- ili 4-morfolinil, tetrahidro-2-,-3- ili 4-piranil, 1,4-dioksanil, 1.3- dioksan-2-, 4- ili-5-il, heksahidro-1-, -3- ili -4-piridazinil, heksahidro-1 -,-2-, - 4- ili 5-pirimidinil, 1-, 2- ili 3-piperazinil, 1,2,3,4-tetrahidro-l. -2-, -3-, -4-, -5-, -6-, -7- ili -8-hinolil, 1,2,3,4-tetrahidro-l, -2-, -3-, -4-, -5-, -6-, -7- ili -8-izohinolil, 2 -3-, -4-, -5-, -6-, -7- ili -8-3,4-dihidro-2H-benzo[l,4]oksazinil, 2,3-metilendioksifenil, 3.4- metilendioksifenil, 2,3-etilendioksifenil, 3,4-etilendioksifeniI, 3,4-(difluormetilendioksi)fenil, 2,3-dihidrobenzofuran-5-iIi 6-il, 2,3-(2-okso-metilendioksi)fenil, ili takođe 3,4-dihidro-2H-l,5-benzodioksepin-6- ili -7-il, 2,3-dihidro benzofurani 1 ili2,3 -dihidro-2-okso-furaniI.
Povoljno je da „heteroaril" u okviru „het1" znači jedan aromatični heterocikl sa jednim ili dva jezgrasa 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 ili 9 C-atomai 1, 2, 3 ili 4N-, O- i/ili S-atoma, koji može da bude nesupstituisan ili supstituisan jednom ili dva puta halogenom, (CH2)pOY, R<4>, (CH2)pOR<4>, =0, COOY, NY2, NYCOYI i/ili sa CN. Naročito je povoljno da „het<1>" znači heteroaril sa jednim ili dva jezgra sa 2, 3, 4, 5, 6, 7 ili 8 C-atoma i sa 1, 2 ili 3 N-, O- ili S- atoma, koji može da bude nesupstituisan ili jednom ili dva puta supstituisan halogenom, (CH2)pOY, A i/ili =0, najpovoljnije nesupstituisani hetetroaril ili jednom ili dva puta halogenom, (CH2)pOY, A i/ili =0, izabran iz grupe:
Najpovoljniji je nesupstituisani ili jednom ili dva puta sa (CH2)pOY ili A supstituisani tiazol. Nadalje su jako povoljni jednom ili dvostruko sa (CH2)pOY ili A supstituisani piridin, piridazin ili pirazol.
Pojam „heterocikl" označava u smislu pronalaska jedan mono ili policiklični sistem koji obuhvata 3, 4 ,5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, ili 20 atoma prstena, prvenstveno 3-14 atoma prstena, naročito povoljno 3-10 C-atoma prstena i 1, 2, 3, 4 ili 5 heteroatoma naročito azot, kiseonik i/ili sumpor, pri čemu su heteroatomi identični ili različiti. Ciklični sistem može da bude zasićen ili jednom ili višestruko nezasićen. Primeri podesnih heterocikla su pirolidinil, tiapirolidinil, piperidinil, piperazinil, oksapiperazinil, oksapiperidinil, oksadiazolil, tetrahidrofuril, imidazolidinil, tiazolidinil, tetrahidropiranil, morfolinil, tetrahidrotiofenil, dihidropiranil.
U jednoj izradi pronalaska „het2" je zasićeni heterocikl sa jednim jezgrom sa 2, 3, 4, 5, 6 ili 7 C-atoma i 1, 2, 3 ili 4 N-, O- ili S-atoma koji može da bude nesupstituisan ili samo sa A supstituisan. Povoljno je da „het " znači zasićeni heterocikl sa jednim prstenom sa 2, 3, 4 ili 5 C-atoma i 1 ili 2 N- i/ili O-atoma, koji može da bude nesupstituisan ili jednostavno supstituisan sa A, najpovoljnije jedan nesupstituisani ili sa A supstituisani heterocikl izabran iz grupe:
Pojam„halogen", „atom halogena", „halogenisupstituent" ili ,,hal" označavaju u smislu pronalaska jedan ili više atoma fluora (F), broma (Br), hlora (Cl) ili joda(J). Nazivi „dihalogen", „trihalogen" i „perhalogen" odnose se na dva, tri ili četiri supstituenta, pri čemu se svaki supstituent međusobno nezavisno može izabrati iz grupe F, Cl, Br ili J. „Halogen" prvenstveno podrazumeva F, Cl ili Br. F i Cl su naročito povoljni, naročito onda kada suhalogeni supstituisani na alkil-(haloalkil) ili alkoksi grupi (na primer CF3i CF30).
Radikal R<1>znači prvenstveno hetl ili Ar naročito povoljno het<1>.
Radikali R<2>, R<3>znače naročito međusobno nezavisno Y ili OY ili zajedno i -O-(CH2)n-
Radikal R2 znači prvenstveno Y ili OY, naročito povoljno Y ili OH, najpovoljnije Y, takođe veoma povoljno OH, najpovoljnije H.
Radikal R<3>znači prvenstveno Y ili OY, naročito povoljno OY ili A jako povoljno OY, najpovoljnije OH.
Radikal R<4>znači povoljno A ili (CH2)nOA.
Radikal L znači prevashodno -CR<2>R<J->, jednostruku vezu, -(CH2)n-, -CH(hal)-, C(hal<2>)-, -(CH2)nCH(OY)-, -(CH2)nCO-, -(CH2)nNH-, -(CH2)nC0NY2-,-NYC0-, NHCO-NH-, -NR<4>CO-, -C(=NR<4>), -NYS02-, -C(=NCN>, -CY(NY2)-, CY(CN)-, - CY(0-(CH2)nCN)-, CY(het<2>)- ili -CY(0(CH2)nhet<2>)- naročito povoljno -CR<2>R<3->najpovoljnije -CR<2>R<3>u kombinaciji sa prethodno navedenim povoljnim oblicima izvođenja R i/ili R .
Grupa L-Rl se prvenstveno nalazi u meta položaju na piroliđinu, piperidinu ili azepanu.
Indeks m znači prvenstveno 0, 1 ili 2, naročito povoljno 0 ilil, najpovoljnije I.
Indeks n znači prvenstveno 0,1, 2,3 ili 4naroČito povoljno 1, 2 ili 3. Podrazumeva se da su dotična značenja za ,,n" nezavisno međusobno u radikalimaformule prema pronalasku.
Indeks p znači prvenstveno 0, 1, 2, 3, 4 ili 5 naročito povoljno 0, 1, 2 ili 3, savim povoljno 0, 1 ili 2, najpovoljnije 0 ili 1. Podrazumeva se da su dotična značenja za ,,p" nezavisno međusobno u radikalima formule prema pronalasku.
Odgovarajuće tome predmet pronalaska su ona jedinjenja formule (I) u kojima najmanje jedan od navedenih radikala ima u prethodnom navedena značenja. Radikali koji nisu bliže označeni u kontekstu nekog oblika izvođenja formule (I), njenog dela formule ili bilo koga ostatka od toga treba da imaju ona kod formule (I) navedena značenja, kako su ovde objavljena, da bi resila zadatak pronalaska. To znači da navedeni radikali mogu da preuzmu sva njima dodeljena značenja, kako su prethodno ili naknadno opisana, uključujući sve povoljne oblike izvođenja, bez da se na njih ograničavaju i nezavisno od njihovog pojavljivanja u nekom drugom kontekstu. Podrazumeva se naročito, da se svaki oblik izvođenja nekog određenog radikala može kombinovati sa svakim oblikom izvođenja jednog ili više drugih radikala.
U pogodnom izvođenju predloženog pronalaska pripremaju se derivati morfolinbenzotriazina delimične formule (IA)
u kojoj znače
R<1>het<1>ili Ar;
R<2>Y ili OY;
R<3>0Y ili A;
R<2>R<3>zajedno i -0-(CH2)n-;
L -CR<2>R<3->;
Y HiliA;
A ravnolančasti ili račvasti alkil sa 1-6 C-atoma, pri čemu međusobno
nezavisno 1-5 H-atoma mogu da budu zamenjeni halogenom;
Ar nesupstituisani ili jednom ili dva puta halogenom ili (CH2)pOY
supstituisani fenil;
Het<1>heteroaril sa jednim ili dva jezgra sa 2-8 C-atoma i 1-3 N-, O i/ili S
atoma, koji može da bude nesupstituisan ili supstituisan jednom ili dva puta halogenom, (CH2)pOY, A i/ili 0= ;
Hal F, Cl, Br ili J; i
n, p nezavisno jedan od drugog 0, 1, 2, 3 ili 4
i/ili njene fiziološki nesumnjive soli, tautomere i/ili stereoizomere uključujući njihove smeše u svim odnosima.
U naročito povoljnom izvođenju predloženog pronalaska pripremaju se derivati morfolinnilbenzotriazina delimične formule (IB)
u kojoj znače
Y H ili A;
A ravnolančasti ili račvasti alkil sa 1-6 C- atoma, pri čemu nezavisno međusobno 1-3 H-atoma mogu da budu zamenjeni halogenom;
Het<1>nesupstituisani ili jednom ili dva puta supstituisani halogenom
(CH2)OY, A i/Hi=Oheteroaril, izabran iz grupe:
Hal F, Cl, Br ili J; i
p 0, 1 ili 2,
i/ili njene fiziološki nesumnjive soli, tautomere i/i U stereoizomere uključujući njihove smeše u svim odnosima.
Najpovoljnija su takva jedinjenja formula (I), (IA) i (IB) koja su složena na tabeli 1.
Dalja vrlo povoljna jedinjenja formula (I), (IA) i (IB) su složena na tabelama 2-4
Jedinjenja formule (I) kao i polazne materija za njihovo dobijanje, dobijaju se po po sebi poznatim metodama kako su u literaturi (na primer standardna izdanja kao Houben - Weyl, Methoden der organi schen Chemie, Georg Thieme -Verlag Stuttgart) opisane i/ili srtučnjaku poznate, kao i pod reakcionim uslovima koji su za navedene reakcije poznate i podesne. Pri tome se mogu koristiti po sebi poznate, ovde ne bliže spomenute varijante.
Reakciono vreme, u zavisnosti od primenjenih uslova, leži između nekoliko minuta i 14 dana, reakciona temperatura između -70°C i 150°C normalno između -50°C i 100°C, naročito povoljno između -10°C i 70°C.
Reakcija se odvija u inertnom rastvaraču i po pravilu u prisustvu sredstva koje vezuje kiselinu, prvenstveno neke organske baze, kao DIEPA, trietilamina, dimetilanilina, piridina, hinolina, piperidina ili dietanolamina. Takođe može da bude povoljan dodatak hidroksida alkalnih i zemnoalkalnih metala, karbonata ili bikarbonata ili neke druge soli slabe kiseline alkalnih ili zemnoalkalnih metala, prvenstveno kalij uma, natrij uma, kalcij uma ili cezijuma. Kao baze pogodni su oksidi metala, kao na primer aluminij umoksid, hidroksidi alkalnih metala (između ostalog kalij umhidroksid, natrijumhidroksid i litijumhidroksid), hidropksidi zemnoalkalnih metala (na primer barijumhidroksid ikalcijumhidroksid) i alkoholati alkalnih metala (na primer kalij umetano lat i natrij umpropanolat).
Kao inertni rastvarači podesni su između ostalog ugljovodonici kaoheksan, petroletar, benzol, toluol ili ksilol; hlorovani ugljovodonici kao trihloretilen, 1,2-dihloretan, tetrahlorugljenik, hloroform, ili dihlormetan; alkoholi kao metanol, etanol, izopropanol, n-propanol, n-butanol ili tert.butanol; etri kao dietiletar, diizopropiletar, tetrahidrofuran (THF) ili dioksan; glikoletri kao etilenglikolmonometil-, ili monoetiletar (metilglikol ili etilglikol), etilenglikoldimetiletar (điglvme); ketoni kao aceton ili butanon; amidi kao acetamid, dimetilacetamid,ili dimetilformamid (DMF); nitrili kao acetonitril; Sulfoksidi kao dimetilsulfiksid (DMSO); ugljendisulfid; karbonske kiseline kao mravlja kiselina ili sirćetna kiselina; nitrojedinjenja kao nitrometan ili nitrobenzol; estri kaoetilacetat ili smeše navedenih rastvarača. Naročito povoljni su DMF, metanol, dihlormetan, THF, sirćetna kiselina i acetonitril.
Postupak i obrada reakcione smeše nakon toga može suštinski da se izvede kao bač-reakcija ili na način kontinualne reakcije. Način kontinualne reakcije obuhvata na primer reakciju u kontinualnom reaktoru sa mešalicom, kaskadnim reaktorima sa mešalicom, prstenastom reaktoru ili reaktoru porečnog strujanja,u strujnoj cevi ili u mikroreaktoru. Obrada reakcionih smeša sledi po izboru, filtriranjem, preko čvrstih faza, hromatografijom, separacijom između faza koje se ne mešaju (na primer ekstrakcijom), adsorpcijom na čvrstim nosačima, destilacijom rastvarača i/ili azeotropnim smešama, frakcionim destilacijama, sublimacijom, kristalizacijom, ko-kristalizacijom ili nanofiltracijom na membranama.
Jedinjenja formule (I) mogu prvenstveno da se dobiju tako što reaguju jedinjenja formule (II) i (III). Predmet predloženog pronalaska je time i postupak za dobijanje jedinjenja formule (I), njihovih delova formula i/ili njihovih fiziološki nesumnjivih soli, tautomera i/ili stereoizomera uključujući njihove smeše u svim odnosima, u sledećim koracima:
a) reakcija jedinjenja formule (II)
sa jedinjenjem formule (III) ili (V)
u kojima R<1>i L i m imaju gore navedeno značenje,
uz dobijanje jedinjenja formule (I)
gde R<1>i L i m imaju gore navedeno značenje,
i u datom slučaju
(b) prevođenje baze ili kiseline jedinjenja (I) u neku od njenih soli.
Pri tome se podrazumeva u smislu pronalaska, da radikal preko upućivanja na „gore navedeno značenje" bez bliže specifikacije istog može da preuzme svako, u dosadašnjem toku opisa navedeno značenje za odgovarajući radikal.
Opisuju se
takođe međujedinjenja formula (II), (III), (III A), (IIIB), (IV), (IVA), (IVB), (V), (VA), (VIA), (VIB), (VIC) i/ili (VID)
u kojima R<1>i L i m imaju gore navedeno značenje,
i/ili njihove fiziološki nesumnjive soli, tautomeri i/ili stereoizomeri uključujući njihove smeše u svim odnosima.
Povoljna COOA-grupa jedinjenja formula (IV), (IVA) i (IVB) je i boc-zaštitana grupa (tert.-butiloksikabonilni ostatak).
Opisan je takođe i postupak za dobijanje međujedinjenja formule (II) i/ili njihovih fiziološki nesumnjivih soli, tautomera i/ili stereoizomera uključujući njihove smeše u svim odnosima, koji se odvija prema jednom, više ili svim koracima generičke reakcione šeme koja sledi:
u kojima hal ima gore navedeno značenje
Opisuje se postupak za dobijanje međujedinjenja Formule (II) i/ili njihovih fiziološki nesumnjivih soli, tautomera i/ili stereoizomera, uključujući njihove smeše u svim odnosima, koji se odvija prema jednom, više ili svim koracima generičke reakcione šeme koja sledi:
Opisuje se takođe postupak za dobijanje međujedinjenja Formule (III) i/ili (IV) i/ili njihovih fiziološki nesumnjivih soli, tautomera i/ili stereoizomera, uključujući njihove smeše u svim odnosima, koji se odvija prema jednom, više ili svim koracima generičke reakcione Šeme koja sledi:
u kojima R<1>i L i m imaju gore navedeno značenje.
Opisuje se takođe postupak za dobijanje međujedinjenja Formule (IIIA) i/ili (IVA) i/ili njihovih fiziološki nesumnjivih soli, tautomera i/ili stereoizomera, uključujući njihove smeše u svim odnosima, koji se odvija prema jednom, više ili svim koracima generičke reakcione šeme koja sledi:
u kojima R<l>ima gore navedeno značenje.
Po analognom postupku mogu da se dobiju međujedinjenja Formule (JIIB) i/ili (IVB) i/ili njihovih fiziološki nesumnjivih soli, tautomera i/ili stereoizomera, uključujući njihove smeše u svim odnosima.
Opisuje se postupak za dobijanje hiralnih piperidinskih komponenti Formule (V) i/ili njihovih fiziološki nesumnjivih soli, tautomera i/ili stereoizomera, uključujući njihove smeše u svim odnosima, koji se odvija prema jednom, više ili svim koracima generičke reakcione šeme koja sledi:
u kojima R<1>ima gore navedeno značenje.
Polazna jedinjenja su po pravilu poznata. Ako su nova, to mogu takođe da se dobiju na po sebi poznat način. Jedinjenja formula (II), (III), (IIIA), (IIIB), (IV), (IVA), (IVB) i (V) mogu da se dobiju prema poznatim metodama. Ukoliko je poželjno, polazne materije mogu da se naprave in situ, tako da se ne izoluju iz reakcione smeše, već odmah da se dalje prevode u jedinjenja prema pronalasku. Takođe je moguće reakciju izvoditi fazno.
Navedena jedinjenja prema pronalasku mogu se primenjivati u njihovoj krajnoj formi koja nije forma soli. Sa druge strane predloženi pronalazak obuhvata takođe i primenu ovih jedinjenja u obliku farmaceutski nesumnjivih soli, koje mogu da se izvedu prema u struci poznatim postupcima, od različitih organskih i neorganskih kiselina i baza. Farmaceutski nesumnjivi oblici soli jedinjenja formule (I) kao i njenih delova formule najvećim delom se konvencionalno proizvode. Ukoliko jedinjenja sadrže grupe karbonskih kiselina, neke njihove pogodne soli se mogu tako napraviti, što se jedinjenje prevodi sa podesnom bazom u odgovarajuću adicionu so baze. Takve baze su na primer hidroksidi alkalnih metala (na primer kalij umhidroksid, natrij umhidroksid i litijumhidroksid), hidroksidi zemnoalkalnih metala (na primer barijumhidroksid i kalcij umhidroksid), alkoholati alkalnih metala (na primer kalijummetanolat, i natrijumpropanolat) kao i različite organske baze kao piperidin, dietanolamin i N-metilglutamin. Baza formule (I) kao i njeni delovi formule može se kiselinom prevesti u pripadajuću kiselu adicionu so, na primer reakcijom ekvivalentne količine baze i kiseline u nekom inertnom rastvaraču kao na primer etanolu, i potom upariti. Za ovu reakciju u obzir dolaze naročito kiseline koje daju fiziološki nesumnjive soli, kao na primer halogenovodonici (na primer hlorovodonik, bromovodonik ili jodovodonik), druge mineralne kiseline i njihove odgovarajuće soli (na primer sulfat, nitrat ili fosfat ili slični), alkil- i monoarilsulfonati (na primer etansulfonat, toluolsulfonat i benzolsulfonat) kao i druge organske kiseline i njihove odgovarajuće soli (na primer acetat, trifluoracetat, tartarat, maleat, sukcinat, citrat, benzoat, salicilat, askorbat i slični). Soli sa fiziološki sumnjivim kiselinama, naprimer pikrati mogu da se primene za izolovanje i/ili prečišćavanje jedinjenja formule (I).
Obzirom na gore rečeno vidi se, da se pod izrazom „farmaceutski nesumnjiva so" u predloženoj vezi podrazumeva aktivna materija koja sadrži jedno jedinjenje formule (I) u obliku neke njene soli, naročito onda kada forma soli daje aktivnoj materiji, u poređenju sa slobodnim oblikom aktivne materije, poboljšane farmakokinetičke osobine.Tek farmaceutski nesumnjiv oblik soli aktivne materije može aktivnoj materiji da da i željene farmakokinetičke osobine i Čak može pozitivno da utiče na farmakodinamiku aktivne materije što se tiče njenog terapeutskog dejstva u telu.
Jedinjenja prema pronalasku mogu na osnovu svoje molekulske strukture da budu hiralna i odgovarajući tome da se nalaze u različitim enantiomernim oblicima. Zbog toga mogu da se nalaze u racemskim ili optički aktivnim oblicima. Pošto se farmaceutska đelotvornost racemata odnosno stereoizomera jedinjenja formule (I) može razlikovati, bilo bi poželjno primenjivati enantiomere. U tim slučajevima se može krajnji proizvod ili već međuproizvod razdvojiti na enantiomerna jedinjenja stručnjaku poznatim hemijskim i fizičkim metodama, ili da se već kao takva upotrebe u sintezi.
Iznenađujuće je nađeno da jedinjenja prema pronalasku izazivaju specifično suzbijanjeserin-treonin-proteinkinaza. Zbog toga se dalji predmet pronalaska odnosi na jedinjenja formule i/ili njene fiziološki nesumnjive soli, tautomere i/ili stereoizomere, uključujući njene smeše u svin odnosima, za suzbijanje serin-treonin- proteinkinaza, prvenstveno PIKK i/ili ATM, naročito povoljno DNK-PK, najpovoljnije za suzbijanje napred navedenih serin-treonin-proteinkinaza in-vitro. Pojam „suzbijanje" se odnosi na svako smanjenje aktivnosti, koje se zasniva na delovanju specifičnih jedinjenja prema pronalasku, gde su poslednja u stanju da se tako integrišu sa ciljnim molekulom da se omogućava prepoznavanje, vezivanje i blokiranje. Jedinjenja se odlikuju visokim afinitetom prema najmanje jednoj serin-treonin-proteinkinazi, čime se uspostavlja sigurna veza i prvenstveno potpuna blokada aktiviteta kinaze. Jedinjenja su naročito povoljna monospecifično, jer garantuju isključivo i neposredno prepoznavanje izabranih kinaza. Pojam „prepoznavanje" odnosi se pri tome na svaku vrstu međusobnog delovanja između jedinjenja i naznačenog ciljnog molekula, naročito ne-kovalentne ikovalentne veze, naprimer kovalentna veza hidrofobno/hidrofilno međusobna delovanja, van de Waals-ove sile, jonske veze, vodonične mostove, ligand-receptor-međusobno dejstvo, bazna uparivanja nukleotida ili međusobna delovanja između epitop i antitelo-vezivnog mesta.
Jedinjenja prema pronalasku pokazuju povoljnu biološku aktivnost, koja se može dokazati u ovde opisanim testovima, kao na primer na enzimima baziranom testu. Merenje aktivnosti kinaze je stručnjaku dobro poznata tehnika. Generički test-sistemi za određivanje aktivnosti kinaze supstratima, na primer histon (Alessi et al.
(1996) FEBS Lett. 399(3): 333) ili baznim mielinproteinom, opisani su u literaturi (Campos-Gonzalez & Glenney (1992) JBC 267: 14535). Za identifikaciju inhibitora kinaze na raspolagaju stoje različiti test-sistemi. Kod Scintillation Proximity Assay (Sorg et al. (2002) J Biomolecular Skreening 7: 11) i FlashPlate Assay meri se radioaktivna fosforilacijanekog proteinaili peptidakao supstrata sa ATP. U prisustvu inhibirajućeg jedinjenja ne može se utvrditi, ili veoma smanjeni, radioaktivni signal. Daljesu Homogeneous time-resolvede Fluorescence Resonance Energy Transfer-(HTR-FRET-) i fluorescentno-polarizacione (FP-) tehnologije korisne kao test postupci (Sills et al. (2002) J Biomolecular Skreening 191). Drugi neradioaktivni ELISA postupci primenjuju specifična fosfo-antitela (fosfo-AT). Fosfo-AT vezuje samo fosforilovani supstrat. Ova veza je dokaziva sa drugim peroksidazom konjugovanim Anti-Schaf-antitelom hemiluminescencijom.
Prethodno navedena primena jedinjenja može da se dogodi u in-vitro modelima. Susceptibilitet neke određene ćelije prema tretmanu sa jedinjenjima prema pronalasku može da se odredi testiranjem in-vitro. Tipično se ćelijska kultura neko vreme inkubira sa nekim jedinjenjem prema pronalasku pri različitim koncentracijama, koja je dovoljna da aktivnim sredstvima omogući indukciju ćelijske smrti ili ćelijsku proliferaciju, inhibiranje ćelijske vitalnosti ili migracije, uobičajeno između otprilike jednog sata i jedne nedelje. Za testiranje in-vitro, kultivisane ćelije mogu da se primene iz nekog biopsijskog uzorka. Onda se određuje količina zaostalih ćelija posle tretmana. Primena in-vitro odvija se naročito na uzorcima vrste si sara koje pate od raka, tumora, metastaza, angiogenetskih poremećaja, retroviralnih oboljenja, imunoloških oboljenja i/ili patogenih procesa starenja. Domaćin ili pacijent može da pripada svakoj vrsti sisara, na primer vrsti primata, naročito ljudi, ali takođe i glodarima (uključujući miševe, pacove i hrčke), zečevima, konjima, govedima, psima, mačkama i tako dalje. Životinjski modeli su interesantni za eksperimentalna ispitivanja, pri čemu oni predstavljaju model za tretiranje bolesti kod ljudi.
Testiranje više specifičnih jedinjenja omogućava izbor aktivne materije koja se čini najboljom za lečenje pacijenta. Doza in-vivo izabranog jedinjenja se podešava pogodno na susceptibilitet kinaze i/ili prema težini bolesti pacijenta u odnosu na in-vitro podatke, čime se terapeutska delotvornost primetno povećava. Doza varira u zavisnosti od primenjenog specifičnog jedinjenja, specifičnog oboljenja, statusa pacijenta i tako dalje. Terapeutska doza je tipično dovoljna da bi smanjila neželjenu ćelijsku populaciju u ćelijskom tkivu, dok se životna sposobnost pacijenta održava. Pouka pronalaska koja sledi i njegovi oblici izvođenja koji se tiču primene jedinjenja firmule (I) za dobijanje leka za profilaksu, terapiju i/ili kontrolu toka je važeća i primenljiva bez ograničenja na primenu jedinjenjaza suzbijanje aktivnosti kinaze, u koliko je to smisleno.
Tretman se u opštem nastavlja, sve dok se ne ostvari značajna redukcija, na primer ca. 50% umanjenja ćelijskog tereta i može da se nastavi sve dok se u glavnom više ne mogu dokazati neželjene ćelije u telu. U testovima ove vrste jedinjenja prema pronalasku pokazuju i izazivaju inhibirajući efekat, koji se dokumentu)e uobičajeno IC50-vrednostima u podesnom području, povoljno u mikromolarnom području a još povoljnije u nanomolarnom području. Kinaza se naročito suzbija do 50% kada je koncentracija jedinjenja manja od 1 uM, prvenstveno jednaka ili manja od 0,5 uM, naročito povoljno manje od 0,1 uM. Ova koncentracija se označava kao ICso-vrednost.
Predmet pronalaska je takođe lek koji obuhvata najmanje jedno jedinjenje formule (I) odnosno njene delove i/ili njene fiziološki nesumnjive soli, tautomere i/ili stereoizomere uključujući njihove smeše u svim odnosima. Još jedan predmet pronalaska je farmaceutski sastav koji kao aktivnu materiju obuhvata delotvornu količinu najmanje jednog jedinjenja formule (I) odnosno njenih delova i/ili njene fiziološki nesumnjive soli tautomere i/ili stereoizomere uključujući njihove smeše u svim odnosima, zajedno sa farmaceutski podnošljivim pomoćnim materijama.
„Lek", „medikament", kao i „farmaceutski sastav" ili „farmaceutska formulacija" je pri tome svako sredstvo koje može da se upotrebi u profilaksi, terapiji, kontroli toka ili naknadnom leČenju pacijenata, koji najmanje povremeno pokazuju patogene modifikacije ukupnog stanja, odnosno stanja pojedinih delova organizma pacijenta, prvenstveno usled, raka, tumora, metastaza, smetnji angiogeneze,
retroviralnih oboljenja, oboljenja imunog sistema i/ili procesa starenja, naročito povoljno usled raka, tumora, metastaza i/ili smetnji angiogeneze.
Da bi se povećala protektivna ili terapeutska delotvornost jedinjenja prema pronalasku, mogu biti dodati farmaceutski podnošljivi adjuvanti. U smislu pronalaska svaka supstanca koja sa jedinjenjima prema pronalasku omogućava delovanje, pojačava ili modifikuje je „adjuvans". Poznati adjuvanti su jedinjenja aluminijuma, na primer aluminijumoksid ili aluminijumfosfat, saponini, kao na primer QS 21, muramvldipeptiđ ili muramvltripeptid, proteini, kao na primer gamainterferon ili TNF, MF 59, fosfatđibvlcholin, skvalen ili polioli. Takođe, koaplikacija albumina iz jajeta u kompletnom Freund-ovom adjuvansu može da izazove pojačani ćelijski posredovani imunitet, i tako da podupre delovanje stvorenih neutraliziraj ućih antitela. Nadalje može DNK, koja ima imunostimulatorne osobine ili koja kodira neki protein sa efektom adjuvansa kao na primer citokin, da bude aplicirana paralelno ili u nekom konstruktu.
Unošenje farmaceutskog sredstva u neku ćeliju dotičnog organizma može da se dešava prema pronalasku na svaki način, koji omogućava da se kinaze dovedu u kontakt sa u sastavu sadržanim jedinjenjima, usled čega biva indukovan odgovor. Farmaceutsko sredstvo predloženog pronalaska može da se primeni oralno, transdermalno, transmuskularno, transuretalno, vaginalno, rektalno, pulmonalno, enteralno i/ili parenteralno. Izabrani način davanja upravlja se prema indikacijama, dozi koja se daje, parametara specifičnih individui etc. Naročito, različiti načini davanja omogućavaju terapiju specifičnu mestu, minimizuju sporedna dejstva i smanjuju dozu aktivne supstance. Naročito sasvim pogodne injekcije su one intradermalne, subkutane, intramuskularne ili intravenozne injekcije. Aplikacija može da se dogodi na primer uz pomoć takozvanih pištolja za pelcovanje ili uz pomoć špriceva. Takođe je moguće supstancu pripremiti kao aerosol, koja bude od organizma, prvenstveno humanog pacijenta, inhalirana.
Oblici davanja farmaceutskog sredstva proizvode se na po sebi poznati način u podesnom doziranju sa uobičajenim čvrstim ili tečnim materijama nosačima i/ili sredstvima za razređivanje i na uobičajeni način upotrebljenim pomoćnim materijama, odgovarajuće željenom načinu aplikacije. Znači, suštinski mogu farmaceutski prihvatljivi i stručnjaku poznati ekscipijenti da čine jedan deo farmaceutskog sredstva prema pronalasku, pri čemu količina materijala ekscipijenta, koja se kombinuje sa aktivnom materijom, da bi se proizvela pojedinačna doza, varira u zavisnosti od tretirane individue i načina davanja. Ovi farmaceutski podnošljivi dodaci obuhvataju soli, pufere, punioce, stabilitatore, kompleksirajuće materije, antioksidanse, rastvarače, vezivna sredstva, klizna sredstva, prevlake tableta, materije ukusa, boje, konzervanse, posrednička sredstva i tome slično. Primeri ovih ekscipijenata su voda, biljna ulja, benzilalkoholi, alkilenglikol, polietilenglikol, glicerintriacetat, želatin, ugljeni hidrati kao na primerlaktoza ili štirak, magnezijumstearat, talk i vazelin.
Farmaceutska formulacija može da se pripremi kao tableta, filmtableta, dražeja,
tableta za sisanje, kapsula, pilula, prašak, granulat, sirup, sok, kapi, rastvor, disperzija, suspenzija, supozitorij, emulzija, implantat, krema, gel, salba, pasta, losion, serum, ulje, sprej, aerosol, lepak, flaster ili zavoj. Kao oralno sredstvo davanja pripremaju se prvenstveno tablete, filmtablete, dražeje, tablete za sisanje, kapsule, pilule, praškovi, granulati, sirupi, sokovi, kapi, rastvori disperzije ili suspenzije, takođe i kao depo-oblici. Nadalje se u razmatranje uzimaju parenteralni oblici leka, kao na primer supozitorije, suspenzije, emulzije, implanti ili rastvori, prvenstveno uljani ili vođeni rastvori. Za topičnu aplikaciju se aktivna materija leka formuliše na uobičajeni način sa najmanje jednom farmaceutski prihvatljivom nosećom materijom kao na primer, mikrokristalna celuloza, i u datom slučaju dalje pomoćne materije, kao na primer ovlaživač za čvrste formulacije koje mogu da se nanose na kožu, kao na primer kreme gelovi, salbe, paste, praškovi ili emulzije, odnosno formulacije koje se tečne mogu nanositi na kožu, kao rastvori, suspenzije, losioni, seren, ulja, sprejevi ili aerosolovi. Farmaceutsko sredstvo se prvenstveno nalazi kao injekcioni rastvor. Za dobijanje injekcionog rastvora mogu da se primene prvenstveno vodeni mediji, kao na primer destilovana voda ili fiziološki rastvori soli, pri čemu poslednji uključuju kisele i bazne adicione soli. Farmaceutsko sredstvo može da se nađe i kao čvrst sastav, primerice u liofilizovanom stanju, pa onda dodatkom sredstva za rastvaranje, kao na primer destilovane vode, da se pripremi pre upotrebe. Osnovi dobijanja liofilizata su poznati stručnjaku.
Koncentracija aktivnog jedinjenja u formulaciji može da iznosi 0,1 do 100 težinskih procenata. Odlučujuće je da farmaceutski sastav obuhvata kao aktivnu materiju efektivnu količinu jedinjenja zajedno sa farmaceutski podnošljivim pomoćnim materijama. Pojmovi „efektivna količina" ili „delotvorna doza" primenjuju se ovde promenljivo i označavaju količinu farmaceutske aktivne materije koja ima profilaktičko ili terapeutski relevantno dejstvo na bolest ili patološke promene u ćelijama, tkivu, organima sisara. „Profilaktičko dejstvo" sprečava pojavu bolesti ili čak infekciju patogenom posle prodora pojedinih zastupnika vrste na taj način, što se njihovo potonje širenje jako smanjuje ili čak potpuno inaktivira. „Profilaktičko dejstvo" obuhvata takođe i povećanje normalnih fizioloških funkcija. Profilaksa se naročito savetuje kada individua ima predispozicije za izbijanje prethodno navedenih bolesti, kao na primer porodično nasleđe, genski defekt ili pre kratkog vremena preležana bolest. „Terapeutski relevantno dejstvo" oslobađa delimično ili potpuno od jednog, više ili svih simptoma bolesti ili dovodi do delimičnog ili potpunog povratka u normalno stanje više ili svih fizioloških ili biohemijskih parametara koji stoje sa bolešću ili patološkim promenama u vezi ili su njihovi uzročnici. Kontrola toka se razume takođe kao način terapeutskog tretmana, ako se jedinjenja daju u određenim intervalima, na primer da se simptomi neke bolesti potpuno uklone. Dotična doza, odnosno područje doze za davanje jedinjenja prema pronalasku je dovoljno veliko da bi se dosegao željeni profolaktički ili terapeutski efekat indukcije biološkog ili medicinskog odgovora. U opštem doza varira sa starošću, konstrukcijom i polom pacijenta kao i što uzima u obzir težinu oboljenja. Podrazumeva se da specifična doza, učestalost i trajanje uzimanja osim toga zavisi od mnoštva faktora, kao naprimer sposobnost ciljnog upravljanja i sposobnost vezivanja jedinjenja, običaja ishrane tretirane individue, način davanja, rata izlučivanja i kombinacija sa drugim medikamentima. Individualna doza može da se postavi kako u odnosu na primarno oboljenje tako i u donosu na nastup eventualnih komplikacija. Tačnu dozu ustanovljava stručnjak poznatim sredstvima i metodama. Pouka pronalaska je važeća i bez ograničenjana farmaceutski sastav koji obuhvata jedinjenja formule (I) primenljiva, u koliko se čini smisleno.
U obliku izvođenja pronalaska daju se jedinjenja u dozi od 0,01 mg do 1 g po jedinici doze, prvenstveno 1 do 700 mg naročito povoljno 5 do 100 mg. Dnevno doziranje leži naročito između 0,02 i 100 mg/kg telesne težine.
Radi podupiranja medicinckog dejstva farmaceutski sastav u jednom obliku pronalaska može da obuhvati jednu ili više aktivnih materija, pri čemu je zamislivo davanje istovremeno ili jedno za drugim. Terapeutsko dejstvo farmaceutskog sastava prema pronalasku može na primer da se sastoji u tome, da suzbijanjem DNK-PK kao poželjni sporedni efekat određena sredstva protiv raka bolje deluju ili da se smanjvanjem doze redukuje broj sporednih dej stava ovih medikamenata.
U povoljnom obliku izvođenja pronalaska kombinuje se farmaceutski sastav prema pronalasku sa nekim sredstvom protiv raka. Kako je ovde upotrebljeno pojam „sredstvo protiv raka" se odnosi na svako sredstvo koje se daje pacijentu sa rakom, tumorima, metastazama i/ili smetnjama angiogenezeu svrhu tretiranja raka. Sredstvoprotiv raka je naročito povoljno izabrano iz grupe koja obuhvata citokine, hemokine, pro-apoptotična sredstva, interferone, radioaktivna jedinjenja, modulatore estrogenog receptora, modulatore androgenog receptora, modulatore retinoidnih receptora, citotoksike, citostatike, suzbijače fenil-proteintransferaze i suzbijače angiogeneze ili kombinacije toga. Povoljno je da sredstva protiv raka menjaju, a naročito slabe metabolizam nukleinske kiseline i/ili metabolizam proteina, ćelijsku deobu, DNK-replikaciju, purin-, pirimidin- i/ili biosintezu aminokiseline, ekspresiju gena, mRNK-procesiranje, sintezu proteina , apoptozu ili kombinacije toga.
Pronalazak može da se praktikuje i kao kit koji sadrži jedinjenja prema pronalasku. Kit se sastoji od odvojenih pakovanja (a) delotvorne količine jedinjenja formule (I) i/ili njenih fiziološki nesumnjivih soli, tautomera i/ili stereoizomera, uključujućinjihove smeše u svim odnosima i (b) delotvornu količinu jedne dalje materije. Kit sadrži podesne sudove kao na primer kutije ili kartone, individualne flaše, kese ili ampule. Kit može na primer da sadrži odvojene ampule u kojima se u svakoj nalazi delotvorna količina nekog jedinjenja formule (I) i/ili njenih farmaceutski primenljivih soli tautomera i/ili stereoizomera, uključujući njihove smeše u svim odnosima, i delotvornu količinu aktivne materije nekog leka, rastvorenog ili u liofilizovanom obliku. Kit pronalaska može da sadrži takođe artikal koji ima pismena uputstva ili upućuje korisnika na pismena uputstva koja objašnjavaju ophođenje sa jedinjenjima prema pronalasku.
Jedinjenja formule (I) prema pronalasku i/ili njene fiziološki nesumnjive soli, tautomeri i/ili stereoizomeri, uključujući njihove smeše u u svim odnosima, primenjuju se za profilaksu terapiju i/ili kontrolu toka oboljenja koja su izazvana aktivnošću serin-treonin-proteinkinaze, posredovana i/ili raširena. Predmet predloženog pronalaskaje stoga i primena jedinjenja formule i/ili njihovih fiziološki nesumnjivih soli, tautomera i/ili stereoizomera, uključujući njihove smeše u svim odnosima, za proizvodnju leka za profilaksu terapiju i/ili kontrolu toka bolesti koja se aktivnošću serin-treonin-proteinkinaze izaziva, posreduje i/ili širi. Jedinjenja formule (I) prema pronalasku i/ili njihove fiziološki nesumnjive soli, tautomeri i/ili stereoizomeri, uključujući njihove smešeu svim odnosima su podesna za primenu u profilaksi, terapiji i/ili kontroli toka bolesti, koje se izazvivaju, posreduju i/ili šire aktivnošću serin-treonin-proteinkinaza. Za identifikaciju odgovarajućeg puta prenosa signala i za potvrdu uzajamnog delovanja među različitim trasama prenosa signala razvijeni su različiti modeli ili sistemi modela, na primer modeli ćelijskih kultura (Khvvaja et al.(1997) EMBO 16: 2783) i modeli transgenih životinja (White et al.(200T) Onkogene 20: 7064). Za određivanje određenih stupnjeva u kaskadi prenosa signala mogu da se upotrebe uzalamno delujuća jedinjenja da bi se modulirao signal (Stephens et al. (2000) Biochemical J 351: 95). Osim toga jedinjenja prema pronalasku mogu da se upotrebe takođe kao reagensi i za testiranje prenosnih trasa signala u životinjama i/ili kulturama ćelijskih modela ili kod onih, uovoj prijavi, navedenih kliničkih oboljenja. Kako je ovde rečeno, ovi signalni putevi su relevantni za različita oboljenja. Odgovarajuće tome jedinjenja prema pronalasku su korisna kod profilakse, terapije i/ili kontrole toka oboljenja koja su zavisna od trasa signala sa učešćem serin-treponin-proteinkinaza.
Jedinjenja formule (I) prema pronalasku i/ili njenih fiziološki nesumnjivih soli, tautomera i/ili stereoizomera, uključujući njihove smeše u svim odnosima su pogodna za primenu u profilaksi, terapiji i/ili kontroli toka raka, tumora, metastaza, smetnji angiogeneze, retroviralnih oboljenja i/ili imunooboljenja, naročito raka, tumora, metastaza i/ili smetnji angiogeneze. Jedinjenja formule (I) prema pronalasku i/ili njihove fiziološki nesumnjive soli, tautomeri i/ili stereoizomeri, uključujući njihove smeše u svim odnosima, podesna su za primenu takođe i za usporavanje procesa starenja, pri čemu usporavanje sledi na osnovu poređenja životnog raspona tretiranog domaćina ili njegovih ćelija, ćelijskih kultura, tkiva ili organa sa odgovarajuće pozitivnim i/ili negativnim kontrolama i/ili statistikama.
Tumor je posebno izabran iz grupe oboljenja pločastih epitela, bešike, stomaka, bubrega, ezofagusa, grličća materice, Štitaste žlezđe, creva, jetre, mozga, prostate, urogenitalnog trakta, limfatičnog sistema, jabučice, pluća, kože, krvi i imunog sistema, i/ili je rak izabran iz grupe leukemije monocita, plućnog endokarcinoma, plućnog karcinoma malih ćelija, raka dvanestopalačnog creva, glioblastoma, raka debelog creva, raka dojke, akutne mielotične leukemije, hronične mielotične leukemije, akutne limfatične leukemije, hronične limfatične leukemije, očkinovog limfoma i non-Hočkinovog limfoma.
Drugi oblik predloženog pronalaska se odnosi na jedinjenja prema pronalasku u kombinaciji sa radioterapijom i/ili sa najmanje jednom drugom aktivnom materijom, prvenstveno u kombinaciji sa radioterapijom i/ili sredstvom protiv raka. Tehničke metode zračenja, koje nalaze kliničku primenu obuhvataju prvenstveno fotonsko zračenje (klasično, elektromagnetno rendgen-/gama zračenje), fotonsko zračenje, zračenje jonima teških metala (jonizovani ugljenik) kao i neutronsko zračenje, bez da na to budu ograničene. Stručnjaku su ove radioterapije poznate kao i druge pogodne terapije zračenjem u smislu pronalaska, kao na primer iz Herrmann etal. (2006) Klinische Strahlenbiologie, Elsefir Munchen), 4. Auflage, 67-68; Bhide & Nutting (2010)BMC Medicine 8: 25; Choi & Hung (2010) Current Urologv Reports 11(3): 172). Kao najčešća primena fotonsko zračenje je tehničkim postupkom IMRT (Radioterapija moduliranog intenziteta) kao i postupkom koji daje sliku (konformna trodimenzionalna radioterapija) pri planiranju i izvođenju zračenja za što je moguće egzaktnijem fokusiranju usavršeno. Jedinjenja prema pronalasku postižu kod postojećih hemoterapija kancera i zračenja sinergične efekte i/ili ponovo uspostavljaju delotvornost postojećih hemoterapija kancera i zračenja. Sinergično dejstvo suzbijanja VEGF u kombinaciji sa radioterapijom opisano je u stanju tehnike (WO 2000/61186). Kao druge aktivne materije leka pogodni su naročito takvi hemoterapeutici koji suzbijaju angiogenezu i tako inhibiraju rast i širenje ćelija tumora. Primeri za ovo su VEGF-inhibitori receptora koju sadrže ribozima i antisens, koji su upravljeni na VEGF-receptore, kao i angiostatin i endostatin. Drugi primeri antiplastičnih agenasa koji u kombinaciji sa jedinjenjima prema pronalasku mogu da se primene, sadeže u opštem alkilujuće agense, antimetabolite, epidofilotoksin, jedan antineoplastični enzim, inhibitor topoizomeraze, prokarbazin, mitoksanton ili koordinacione komplekse platine. U drugom obliku izvođenja sredstvo protiv raka je izabrano naročito iz grupe modulatora estrogenog receptora, modulatora androgenog receptora, modulatora retinoidnog receptpora, citotoksika, cito statika, suzbijača prenil-proteintransferaze i suzbijača angiogeneze. U ostalom je prethodno učenje pronalaska i njegovih oblika izvođenja što se tiče farmaceutskog sastava važeće i bez ograničenja primenljivo na drugu medicinsku indikaciju, u koliko se čini smislenim. Naročito pogodan oblik izvođenja obuhvata jedinjenja prema pronalasku u kombinaciji sa radioterapijom i/ili nekim citostatikom.
Još jedan dalji oblik pronalaska se odnosi na primenu najmanje jednog jedinjenja formule (I) i/ili njenih farmaceutski primenljivih soli, tautomera i/ili stereoizomera, uključujući njihove smeše u svim odnosima, za senzibilisanje ćelija raka prema nekom sredstvu protiv raka i/ili jonizujućem zračenju uz napomenu da se senzibilisanje in-vivo ne radi na telu ljudi ili životinja. Senzibilisanje se odvija ex-vivo ili in-vitro tako što se ćelijama, kulturama ćelija, tkivima ili organima aplikuju jedinjenja, koja obuhvataju serin-treonin-proteinkinaze. Primena ex-vivo primenjuje se naročito kod životinjskih ćelija, koj potiču iz životinjskog organizma, koji je pogođen bolešću koja je izabrana iz grupe raka, tumora, metastaza i/ili smetnji angiogeneze. Ex-vivo tretirane ćelije mogu da se drže dalje u kulturi radi ispitivanja koje sledi ili da se prevedu u životinju, pri čemu može da se radi o životinji domaćinu ili nekoj drugoj životinji. Ex-vivo senzibilizacija preme pronalasku ima naročito prednost, zbog testiranja specifičnog dejstva jedinjenja, tako da korišćenjem ovih ex-vivo podataka, in-vivo doza može dase odgovarajuće odredi. Rezultat ovoga je signifikantno povećanje terapeutskog efekta.
Predložena objava opisuje dalje postupak za profilaksu, terapiju i/ili kontrolu toka raka, tumora, metastaza, smetnji angiogeneze, retroviraljnih oboljenja, imunoloških oboljenja i/ili procesa starenja, pri čemu se delotvorna količina najmanje jednog jedinjenja prema pronalasku i/ili njenih fiziološki nesumnjivih soli, tautomera i/ili stereoizomera, uključujući njihove smeše u svim odnosima daje probandu koji se tretira. Podesni probandi u smislu pronalaska su ljudi ili životinje, naročito pogodni su ljudi. Pri tome je stručnjaku poznato da on može da aplicira jedinjenja prema pronalasku, koja po sebi razumljivo mogu da se primene i kao farmaceutska sredstva prema pronalasku u različitim doziranjima, naročito humanom pacijentu. Delotvorna količina i način aplikacije mogu biti od stručnjaka određeni rutinskim ispitivanjem. Prethodna pouka pronalaska i njegovi oblici izvođenja su važeći i primenljivi bez ograničenja na postupak tretiranja u koliko je to smisleno. Sve navedeni kao i drugi sastavni delovi odnosno komponente su poznate stručnjaku i mogu u rutinskim ogledima da dobiju specijalan oblik za pouku prema pronalasku. Svi u opisu citirani dokumenti treba da se ovim u svojoj ukupnosti integrišu u objavi predloženog pronalaska kao reference.
U okviru ovde predstavljenog pronalaska po prvi put su pripremljena jedinjenja nove vrste morfolinilbenzotriazina formule (I). Jedinjenja prema pronalasku stižu afinitivno i/ili selektivno naserin-treonin-proteinkinase, naročito DNK-PK. Jedinjenja iz formule (I) i njeni derivati odlikuju se visokom speciflčnošću i stabilnošću, niskom cenom proizvodnje i jednostavnim rukovanjem. Na ovim osobinama bazira način delovanja koji može da se reprodukuje, uključujući izostanak ukrštenih reaktivnosti, i sigurno međusobno delovanje na koje se može osloniti sa odgovarajućim strukturama ćelije. Pronalazak sadrži i predložena jedinjenja (I) za suzbijanje, regulaciju i/ili modulaciju signalnih kaskada serin-treonin-proteinkinaza, naročito DNK-PK i time nudi alate nove vrste za istraživanje i/ili dijagnostiku.
Lekovi i farmaceutski sastavi koji sadrže navedena jedinjenja, i upotreba ovih jedinjenja za tretiranje kinazom posredovanih smetnji su osim toga mnogo obećavajući nastavak za široki spektar terapija, kojima se kod ljudi i životinja može postići neposredno ublažavanje simptoma. Ovo je naročito podesno za delotvorno suzbijanje teških bolesti kao rak, ili kao monoterapija ili u kombinaciji sa drugim anti-neoplastičnim terapijama. Ključno učešće DNK-PK u DNK reparacionim procesima i potvrda da DNK-PK inhibitori ćelije sisara čine osetljivijim na zračenje, omogućava terapeutsku primenu DNK-PK ili DNK-PK/ATM ili ATM specifičnih inhibitora u okviru tretmana na primer čvrstih tumora raka zračenjem i/ili na DNK-DSBs usmerenoj hemoterapiji. Jedinjenja formule (I), njene soli, izomeri, tautomeri, enantiomeri, diastereomeri, racemati nisu delotvorni samo kod kliničkih slika bolesti, već takođe i u dijagnozi i terapiji svih oboljenja u vezi sa signalnom kaskadom DNK-PK, pre svega u pogledu na suzbijanje čelijske proliferacije i migracije. Osim toga su inhibitori prema pronalasku korisni u tretiranju retroviralnih oboljenja zbog potiskivanja retroviralne integracije (R. Daniel (1999) Science 284: 644). Na kraju materije suzbijači prema pronalasku mogu da se upotrebe kao imunomodulatori kao i modulatori telomernog održavanja. Niskomolekularni inhibitiri primenjuju se pojedinačno i/ili u kombinaciji sa drugim merama tretiranja, kao na primer hirurškim zahvatima, imuno-, zračnom-, i/ili hemoterapijom. Poslednje se odnosi na ciljno usmerenu terapiju sa proizvoljnim NME (što znači NCE i/ili NBE) kao mono i/ili on-Target-/of-Target- kombinovane terapije.
Na osnovu svojeg iznenađujuće snažnog i/ili selektivnog suzbijajućeg delovanja takvih enzima, koji regulišu preko repariranja dsDNK celularne procese, jedinjenja pronalaska mogu pri povoljno niskom doziranju da se daju, dok u poređenju sa manje potentnim odnosno manje selektivnim inhibitorima stanja tehnike ostvaruju slično ili Čak nadmoćnije delovanje. Redukovana doza ide zajedno takođe i sa smanjenim ili nikakvim sporednim dejstvima. Osim toga se visokoselektivno suzbijanje jedinjenjima prema pronalasku reflektuje kroz smanjenje nepoželjnih sporednih efekata, koje je nezavisno od doziranja. Jedinjenja prema pronalasku naročito nemaju hERG-aktivnost. Ova nedostajuća aktivnost pripisuje se skeletu benzotriazina.
Podrazumeva se da ovaj pronalazak nije ograničen samo na farmaceutske sastave, primene i postupke, kako su ovde opisani pošto takve stvari mogu da variraju. Nadalje se podrazumeva, da prethodno primenjena terminologija služi isključivo u svrhu opisivanja naročitih oblika izvođenja, i ne treba da ograniči obim zaštite pronalaska. Kako se prethodno u specifikacijama uključujući pridodate zahteve primenjuje, oblisi reči u singularu uključuju, kao na primer,, jedan", ,jednom",„taj" ili „to" odgovor u pluralu, u koliko kontekst ne zadaje jasno nešto drugo. Na primer sadrži odnos„na jedno jedinjenje" jedno jedino jedinjenje ili više jedinjenja ili odnos na ,jedan postupak" uključuje ekvivalentne korake i postupke, koji su obuhvaćeni obimom zahteva.
U sledećem se pronalazak bliže objašnjava na osnovu nelimitiranih primera za konkretne oblike izvođenja. Primere treba naročito interpretirati u tom pravcu, da nisu ograničeni na konkretno predstavljene kombinacije svojstava, nego se svojstva primera opet slobodno mogu kombinovati, sve dok zadatak pronalaska ne bude rešen.
Prethodno i naknadno su sve temperature navedene u °C. U primerima koji slede „uobičajna obrada" znači: dodaje se , u koliko je potrebno, u to voda, postave, u koliko je potrebno, već prema konstituciji krajnjeg proizvoda, pH- vrednosti između 2 i 10, ekstrahuje sa etilacetatom ili dihlormetan om, odvaja, suši organska faza preko natrijumsulfata, upari i prečišćava hromatografijom na silikagelu i/ili kristalizacijom. Rrvrednosti na silikagelu; eluentetilacetat/metanol 9:1.
NMR (]H) izveden je sa sledećim parametrima.
Uređaji:Bruker Avance DRX 500, Bruker Avance 400, Bruker Avance DPX 300
Referenca: TMS
TD (Time Domaine = broj tačaka podataka ili digitalno razlaganje):65536
Rastvarač: DMSO d6
NS (Number of Scans = Učestalost opipavanja): 32
SF (Spectrometer Frequence = frekvenca odašiljača) 500 MHz
TE (Temperatura): 303 K
HPLC-MS izveden je sa sledećim parametrima
Uređaj: Agilent Technologies 1200 Series
Metode: ESI1ROD.M i POLAR.M (3,8 min., rastvaiač-gradijent)
Kolona: ChromolithSpeed ROD RP18e50-4,6
Rastvarač: acetonitril + 0,05 % HCOOFI / VE-voda + 0.04 HCOOH
Talasna dužina detekcije: 220 nm
MS-tip: API-ES
PRIMER 1: Sinteza 7-Morfolin-4-il-3H-benzo[d][l,2,3]-triazin-4-ona
Rastvoru od 50,0 g. (0.322mol) 2-Amino-4-fluoro-benzoeve kiseline u 600 ml. dimetilformamida se jedno za drugim na sobnoj temperaturi doda 59,23 g. (0.387 mol) Benzotriazol-l-ola, (65,776 ml. 0.387 mol.) N-etildiizopropilamina i 74,15 g.
(0.387 mol.) N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilkarbodiimidhidrohlorida. Uz mešanje ukapa se 64,46 ml. (0,451 mol.) amonijaka u metanolu i meša 18 sati. Sastavui se dodaje voda (2 L) i koncentrovan rastvor natrijumhlorida (0,5 L). Smeša se ekstrahuje tri puta sa etilacetatom (po 0,75 L)i medicinskim benzinom (0,1 L). Organske faze se suše preko natrijumsulfata, filtriraju pa se rastvarač odstrani na rotavaporu. Ostatak se utrlja sa 2-Metoksi-2-metil-propanom (0.2 L) i medicinskim benzinom ( 0,1 L). Kristalasti talog se odfiltruje i suši u sušnici. Tako se dobije 44,5 g. 2-Amino-4-fluoro-benzamida kao čvrsta materija.
Suspenziji od 44,5 g. 2-Amino-4-fluoro-benzamida u 1,4 L sone kiseline (25 %-tne) ukapa se 35,85 g. (0,520 mol.) natrijumnitrita u 75 ml. vode na sobnoj temperaturi. Uz hlađenje ledom meša se 2 sata. Istaloženi talog se odfiltruje, ispere vodom i suši na 60°C u vakuum sušnici. Tako se dobija 32,58 g. 7-fluoro-3H-benzo[d][l,2,3]-triazin-4-ona kao čvrsta materija.
HPLC/MS (M+H)<+>=166; 'H NMR (300 MHz, DMSO) 5,8.32 (dd,J -8.8,5.7, IH), 7.87 (dd, .7=9.0, 2,5 IH), 7.64(td, J-8.7,2,5 IH).
32,5 g. (0196 mol.) 7-fluoro-3H-benzo[d][l,2,3]-triazin-4-ona u 300 ml morfolina zagreva se uz mešanje 5 sati na 120°C. Istaloženi proizvod se odfiltruje na 50°C, talog ispira vodom, odfiltruje i 48 sati suši u vakuum sušnici, tako se dobije 30,7 g. Morfolin-4-il-3H-benzo[d][l,2,3]-triazin-4-ona kao Čvrsta materija. 'H NMR (500 MHz, DMSO) 8, 8.00 (d, .7=9.0, IH), 7.52 (dd,.7=9.0,2,6 IH), 7.39 (dd,7=22.8,2.6, IH), 3.78 (dd, 7 = 17.1, 12.3 4H), 3.45 (dd, 7=17.1, 12.3, 4H).
PRIMER 2: Sinteza tiazolpiperidina
U rastvor od 500 g. (2,18 mol) tert-butilestra (S)-piperidin-l,3-dikarbonske kiseline-1 u 2,5 L đihlormetana dodaje se na sobnoj temperaturi uz mešanje 310 ml ml.(2,24 mol) trietilamina. Posle 15 min reakciona smeša se ohladi na -1°C ijedno za drugim ukapa 1135 g. (2,18 mol.) bezotriazol-l-il-oksipirolidino-fosfonijum-heksafluorofosfata, 234 g. (2,4 mol.) N,0-dimetilaminhidrohlorida i 320 g.
(2,31 mol.) trietilamina. Posle 15 minuta reakciona se sezagreje na sobnu temperaturu i meša 18 sati. Reakciona smeša se razblaži sa 3 L đihlormetana,
ispere vodom, suši preko natrijumsulfata i upari do ulja. Rezultujuće ulje se hromatografiše preko silicijumdioksida. Tako se dobija 489 g. tert-butilestar (S)-3-(metoksi-metil-karbamoil)-piperidin-l-karbonske kiseline kao ulje. Indeks prelamanja u metanolu [a]20D=+19,3°; 'H NMR (400 MHz, DMSO) 6, 3.94 (d,7=10.1 IH), 3.86 (d,7=12.3, IH), 3.72 (s,3H), 3.10 (s, 3H), 2.74 (d,7=9.8, 3H),1.81(d, 7=12.8, IH), 1.71-1.61 (m, 1H),1.60-1.48(m, 2H), 139(d,7=8.2, 9H).
Na -68°C u rastvor od 25 g. (0,291 mol) tiazola u 1 L tetrahidrofurana ukapa se 136,6 (0,32mol.) n-butillitijuma (15%-tni u n-heksanu). Smeša se zagreje na 0°C a zatim ohladi na -40°C. Ova smeša se ukapa na -50°C rastvoru od 79,2 g, (0, 291 mol.) tert-butilestra (S)-3-(metoksi-metil-karbamoil)-piperidin-l-karbonske kiseline u 1,4 L tetrahidrofurana. Potom se reakciona smeša lagano zagreje do 0°C i pomeša sa 2 L ledene vode. Posle dodavanja 2 L vode i 2 L zasićenog rastvora natrijumhlorida sirova smeša se ekstrahuje sa ukupno 4 L etilacetata. Organska faza se ispira zasićenim rastvorom natrijumhlorida, suši preko natrijumsulfata i upari. Sirovi proizvod (87 g.) hromatografiše se preko kolone silikagela. Tako se dobija 76,4 g.tert-butilestra (S)-3-(tiazol-2-karbonil)-piperidin-l-karbonske kiseline kao braon smola; Indeks rotacije u metanolu [a]20D=+27,4c'; "H NMR (500 MHz, DMSO) 5, 8.22 (d,7=3.0IH), 8.17 (d, 7=3.0, 1H),4.22- 3.86 (m, IH), 3,84-3.69 (m, 2H), 3.60-3.52 (m, IH), 3.20-3.05(m, IH), 2.08-1.92 (m, 2H),1.89-1.60 (m, 2H), 1.35 (s, 9H).
Pod atmosferom azota rastvori se 0,5 g (1,69 mol.) tert-butilestra (S)-3-(tiazol-2-karbonil)-piperidin-l-karbonske kiseline u 20ml tetrahidrofurana a zatim na sobnoj temperaturi ukapa 3,374 ml (3,374 mol) litijum-tri-sec-butilborhidrida (0,1 M rastvor u tetrahidrofuranu. Posle 60 minuta doda se 20 ml sirćetne kiseline (10%-tna). Potom se jedno za drugim dodaje voda, zasićeni rastvor natrijumhlorida i etilacetat. Organska faza se odvoji, vodena faza još ekstrahuje sa etilacetatom a potom spojene organske faze, suše preko natrijumsulfata, odfiltruju i upare. Tako se dobije 0,5 g. tert-butilestra (S)-3-(hidroksi-tiazol-2-il-metil)-piperidin-l-karbonske kiseline kao diastereomerna smeša S-piperidina u odnosu 70 : 30 (polarno : nepolarno) HPLC/MS (M+H)<+=>299.
Pod atmosferom azota rastvori se 0,5 g (1,69 mol.) tert-butilestra (S)-3-(tiazol-2-karbonil)-piperidin-l-karbonske kiseline u 200 ml tetrahidrofurana a zatim ukapa između -4 i +2°C 121,8 ml (0,122mol) Htijum-tri-tert-butoksi-aluminijumhidrida (1.0 M rastvor u tetrahidrofuranu). Reakciona smeša se30 minuta mešana 0° apotom još jedan sat na sobnoj temperaturi. Zatim se dodaje ledena voda, pri Čemu se temperatura penje na 1°C . Po dodatku zasićenog rastvora natrijumhlorida i etilacetata odfiltruje se od neorganskog ostatka. Filtrat se pomeša sa vodom i zasićenim rastvorom natrijumhlorida, ekstrahuje etilacetatom pa se organska faza upari. Tako se dobije 19,0 g. tert-butilestra (S)-3-(hidroksi-tiazol-2-il-metil)-piperidin-1-karbonske kiseline kao smeša diastereomera S-piperidina u odnosu 30 : 70 (polarno : nepolarno) HPLC/MS (M+H)^ =299 ; Indeks rotacije u metanolu [ a] 20v=+ 4,& o;lK NMR (300 MHz, DMSO) 5 7.72 (dd, 7=14.9, 3.3, IH), 7.62 (dd,7=3.2, 0.8, IH), 6.22 (dd,7=11.4,5.3, IH), 4.66 (dd,7=9.8,4.6, IH), 3.82 (t, 7=11.8,2H), 2.71-2.54 (m, 2H), 1.88-1.72 (m, IH), 1.73-1.57 (m, 2H), 1.40-1.30(m, 11H).
Rastvoru od 19 g.(0.058 mol) tert-butilestra (S)-3-(hidroksi-tiazol-2-il-metil)-piperidin-1-karbonske kiseline [smeša diastereomera] u 250 ml.đihlormetana se jedno za drugim se dodaje na 22°C 6,91, g. (0.102 mol) imidazola i 26.435 ml (0,201 mol.) tert-butildifenilhlorsilana. Reakciona smeša se pomeša sa 250 ml.ledene vode. Organska faza se suši preko natrijumsulfata, filtrira i upari. Sirovi proizvod sa hromatografiše preko silikagela. Tako se dobija 3,44 g. tert-butilestra (S)-3-[(R)-(tert-butil-difenil-silaniloksi)-tiazol-2-il-metil]-piperidin-l-karbonske kiseline. (Indeks prelamanja u metanolu [a]<20>D=+28.0°;)), i 1,19 g. tert-butilestra(S)-3-[(S)-(tert-butil-difenil-silaniloksi)-tiazol-2-il-metil]-piperidin-l-karbonske kiseline(indeks prelamanja[a]2(]D=-1.3°;). HPLC/MS (M+H)<+>= 537.
Rastvoru od 1,08 g. (2, 0 mol.) tert-butilestra(S)-3-[(S)-(tert-butil-difenil-silaniloksi)-tiazol-2-il-metil]-piperidin-l-karbonske kiseline u 30 ml. đihlormetana ukapa se na +5°C 30 ml hlorovodonika (4 M u 1,4-dioksanu). Reakciona smeša se dva sata meša na sobnoj temperaturi. Posle uparavanja dobija se 1,03 g. (S)-3-[(S)-
(tert-butil-difenil-silaniloksi)-tiazol-2-il-metil]-piperidinijum-hidroph HPLC/MS (M+H)<+>- 437; Indeks prelamanja u metanolu [a]<20>D=-18,l°;). Hidrohlorid se rastvori u 10 ml vode, ohladi u ledenom kupatilu, pa mu se ukapa 1 ml natrijumhidroksida (2 M). Precipitat se podigne u etilacetat, ispira zasićenim rastvorom natrijumhlorida, suši preko natrijumsulfata, filtrira i upari. Tako se dobije 0.8 g. (S)-3-[(S)-(tert-butil-difenil-silaniloksi)-tiazol-2-il-metil]-piperidina kao amorfne smole. HPLC/MS (M+H)<+>=437 ; Indeks prelamanja u metanolu [afV^lVH NMR (400 MHz, DMSO) 6 7.67-7.56(m, 4H), 7.52-7.38 (m, 6H), 7.38-7.26 (m, 2H), 4.84 (d,J =6.6,1H),4.03 (q,J,=7.1,IH), 2.94 (d, 4=11.2, IH), 2.73 (d,J= 11.8, IH), 2.25-2.10 (m, 2H), 1.78(dtd5l/= 10.5,6.9,3.3, IH), 1,49-1.30 (m, 2H), 1.19 - 1.10 (m, 2H), 1.04 - 0.93 (m, 9H).
PRIMER 3A: Sinteza (S)-[(S)-l-(7-morfolin-4-il-benzo[d][l,2,3]-tiazin-4-il)-piperidin-3-il-]-tiazol-2-il-metanola
Suspenziji od 87 mg. (0,375 mmol) 7-morfolin-4-il-3H-benzo[d][l,2,3]-triazin-4-ona u 40 ml. acetona ukapa se na sobnoj temperaturi rastvor od 258, 6 mg. (0,487 mmol) benzotriazol-l-il-oksipirolidino-fosfonijum-heksafluoro fosfata u 10 ml.acetonitrila. Zatim se doda 83,87 uL (0,562 mmol) 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-ena i meša 45 minuta. Tome se ukapa rastvor od 220,15 mg (0,487 mmol) (S)-3-[(S)-(tert-butil-difenil-silaniloksi)-tiazol-2-il-metilj-piperidina u 8 mL acetona i meša 3 sata na sobnoj temperaturi. Sirova smeša se upari, rastvori u etilacetatu, ispira sa natrijumbikarbonatom i zasićenim rastvorom nartijumhlorida pa se organska faza posle sušenja preko natrijumsulfata i filtriranja upari. Sirovi proizvod se hromatografiše preko silikagela. Tako se dobije 156 mg 4-{(S)-3-[(S)-(tert-butil-difenil-silaniloksi)-tiazol-2-il-metil]-piperidin-l-il}-7-morfolin-4-il-benzo[d][l,2,3]-tiazina; HPLC/MS (M+H)<+>= 651.
Rastvoru od 156 mg (0,222mmol) 4-{(S)-3-[(S)-(tert-butil-difenil-silaniloksi)-tiazol-2-il-metil]-piperidin-l-il}-7-morfolin-4-il-benzo[d][l,2,3]-tiazina u 7,5 mL tetrahidrofurana ukapa se rastvor od 491,2 mg (1,557 mmol) tetra-butilamonijum-fluoridtrihidrata u 7,5 ml tetrahidrofurana i zatim meša 2,5 sata na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša se pomeša sa vodom i ekstrahuje dihlormetanom. Organska faza se suši preko natrijumsulfata filtrira i upari. Sirovi proizvod se hromatografiše na silikagelu. Tako se dobija 55,3 mg (S)-[(S)-l-(7-morfolin-4-il-benzo[d][l,2,3]-tiazin-4-il)-piperidin-3-il-]-tiazol-2-il-metanola;HPLC/MS M+H)<+>=413;'H NMR (500 MHz, DMSO) 5 7.85 (U =5.0, IH), 7.77-7.72 (m, IH), 7.70-7.64 (m, IH), 7.58-748 (m, IH), 7.29 (t,4=4.1,IH), 6.39 (d,J=5.4, IH), 4.84-4.76 (m, IH), 4.34 (d,J,=13.0, IH), 4.23 (d,J=13.0, IH), 4.23(<U= 13.0,IH), 3.82-3.72 (m, 4H), 3.40 (dd,J=15.0, 10.1, 4H), 3.13(dtd,J=22.9, 12.8, 10.3, 2H), 2.30-2.20 (m, IH), 1.89-1.82 (m, IH), 1.82- 1.74 (m, IH), 1.72-1.61 (m, IH), 1.61 (s, IH).
Biohemijska aktivnost(S)-[(S)-l-(7-morfolin-4-il-benzo[d][l,2,3]-tiazin-4-il)-piperidin-3-il-]-tiazol-2-iI-metanola bila je lnM (test iz primera 4), dok je celularna aktivnost u submolekularnom području bila (test iz primera 5).
Jedinjenja koja su bila dobijena odgovarajuće primeru 3A, nalaze se u tabelama 1 (bez analoga piridazina br.14 - 15) i 2.
PRIMER 3B: Sinteza (6-metoksi-piridazin-3-il)-[(S)-l-t7-morfolin-4-il-benzo [d][
Faza 1: Piridin-3-il- acetonitril (14,3 g, 0,119 mol) se rastvori u dimetilformamidu (300 mL) u atmosferi azota na 21°C. Rastvor se ohladi na -4°C i u porcijama doda natrijumhidrid (60%-tna suspenzija u parafinskom ulju, 9,96 g, 0.249 mol). Rezultujuća braon suspenzija meša se 45 minuta na 0°C pa se u to potom doda 3-hlor-6-metoksi-piriđazin (34,47 g, 0,231 mol). Smeša se zagreje na 70°C i meša 3 sata. Posle hlađenja obrađuje se kako je uobičajeno i tako dobije 18,6 g (prinos 68%) (6-metoksi-piridazin-3-il)-piridin-3-il-acetonitrila;<!>H NMR (400 MHz, DMSO) 6 8.71 (d,J,=2.3, IH), 8.61- 8.59 (m, IH), 7.92-7.85 (m, IH), 7.72(d, J,= 9.2, IH), 7.53-7.44 (m, IH), 7.30 (d,J=8.7, IH), 6.20 (s, IH), 4.07 (d,J, =11.8, 3H).
Faza 2: (6-metoksi-piridazin-3-il)-piridin-3-il-acetonitril (7,7 g 0,034 mol) rastvori se u atmosferi azota na 23°C u acetonitrilu (200 mL) i tome doda kalijum-tert-butilat (4,16 g, 0,037 mol). Suspenzija se mesa 30 minuta na 23°C, ohladi na -4°C pa se lagano ukapa vodonikperoksid (30%-tni rastvor, 11,34 mL, 0,11 mol). Reakciona smeša se meša još 30 minuta na 0°C, a zatim 2 sata na sobnoj temperaturi. Posle uobičajene obrade dobije se 3,46 g (48% prinos) (6-metoksi-piridazin-3-il)-piridin-3-il-metanon;
'H NMR (400 MHz, DMSO) 8 9.16 (dd,J,=2. 2, 0.7, IH), 8.83 (dd,J=4.8, 1.7, IH), 8.45-8.36 (m, IH), 8.21 (d, J, = 9.2, IH), 7.61. (ddd,J = 7.9, 4.8, 0.8, IH), 7.47 (d,J=9.2, IH), 4.17 (s, 3H).
Faza 3: (6-metoksi-piridazin-3-il)-piridin-3-il-metanon (1,31 g, 6,1 mmol) se rastvori u etanolu (100 mL) doda platina (IV)oksid hidrat (80% Pt, 0,5 g, 2,2 mmol) i meša uz uvođenje vodonika. Posle uobičajene obrade dobije se 1,26 g (93% prinosa) (6-metoksi-piridazin-3-il)-piperidin-3-il-metanola, kao sirovog proizvoda koji se direktno koristi u sledećoj fazi; MS(M+H)<+>= 224;
Faza 4: (6-metoksi-piridazin-3-il)-piperidin-3-il-metanol (1,26 g, 5,64 mmol) rastvori se u dioksanu (10 mL) i doda natrijumbikarbonat (0,95 g, 11,29 mmol) u vodi (10 mL). Meša se 10 minuta na sobnoj temperaturi a potom doda di-tert-butilkarbonat (1,23 g, 6,64 mmol). Meša se još jedan sat a onda obrađuje na uobičajeni način. Tako se dobije 1,09 g (60% prinos) tert-butilestra 3-[hidroksi-6-metoksi-piridazin-3-il)-metil]-piperidin-l-karbonske kiseline;MS(M+H)<+>= 324;
Faza 5: Tert-butilestar 3-[hidroksi-6-metoksi-piridazin-3-il)-metil]-piperidin-l-karbonske kiseline (1,46 g, 4,52 mmol) rastvori se u dihlormetanu (5 mL) i pomeša sa hlorovodonikom u dioksanu (4N, 45 mmol). Reakciona smeša se meša na sobnoj temperaturi a zatim obrađuje na uobičajeni način. Tako se dobija 1,2 g (100% prinos) (6-metoksi-piridazin-3-il)-pipendin-3-il-metanol-hidrohlorida; MS(M+H)<+>= 224;
Faza 6: 7-morfolin-4-il-benzo[d][l,2,3]-tiazin-4-ol (325 mg, 1,4 mmol) suspenduje se u dimetilformamid (10 mL) na sobnoj temperaturi. Potom se doda benzotriazol-l-iloksitris(pirolidino)fosfonijumheksafluorofosfat (960mg, l,8mmol) i 1,8-dazabiciklo[5.4.0]undek-7-ena (320 g, 2,1 mol) i meša 30 minuta Nakon toga se ukapava u kapima rastvor (6-metoksi-piriđazin-3-il)-piperidin-3-il-metanol-hidrohlorida (400 mg, 1,54 mmol) u dimetilformamidu (5mL) i meša 18 sati na sobnoj temperaturi. Posle uobičajene obrade i hromatografije dobija se (S)-(6-metoksi-piridazin-3-il)-[(S)-l-(7-morfolin-4-il-benzo[d][l,2,3]-tiazin-4-il)-piperidin-3-il]-metanol (26mg) i (R)-(6-metoksi-piridazin-3-il)-[(S)-l-(7-morfolin-4-il-benzo[d][l,2,3]-tiazin-4-il)-piperidin-3-il]-metanol (40 mg); Analitika: vidi tabelu 1.
Analozi piridazina koji se dobijaju odgovarajuće primeru 3B nalaze se u tabelama i i 4.
PRIMER 4: DNK-PK / biohemijski test
Kinaza test se odvija na sa streptavidinom obloženim 348-Well-Mikrotiter-Flash-ploČama. Za to se inkubira l,5ug DNK-PK proteinskog kompleksa i 100 ng biotinilizovanog supstrta, kao na primer PESQEAFADLWKK-Biotin-NH2(„Biotin-DNK-PK-peptid"), u ukupnoj zapremini od 36ul (34,25mM HEPES/KOH; 7,85 nM tris-HCl; 68,5 nM KC1; 5ul ATP; 6,85 mM MgCl2; 0,5mM EDTA; 0,14 mMEGTA; 0,69 mMDTT; pH 7,4) sa 500 ng DNK iz telećeg timusa, 0,1 u€i<33>P-ATP i 1,8% DMSO po Well sa odnosno bez test jedinjenja 90 minuta na sobnoj temperaturi. Reakcija je zaustavljena sa 50ul/Well 200 mMEDTA. Svaki Well je tri puta ispiran sa 100 uL 0,9%-tnog rastvora kuhinjske soli. Nespecifična reakcija (prazna vrednost) određena je sa lOuM sopstvenog inhibitora kinaze. Merenje radioaktivnosti urađeno je sa TopCount. IC50-vrednosti obračunate su u RS1 (Kashishain et al. (2003) Molecular Cancer Therapeutics 1257) i sastavljene su u tabeli 1. Ova jedinjenja imaju prvenstveno IC50-vrednost manju od 0,1 uM, naročito povoljno manju od 0,02uM.Sva jedinjenja iz tabela 2, 3 i 4 pokazuju aktivnost sa IC5o-vrednošću manjom od 1 uM, prvenstveno manju od0,lu,M, naročito povoljno manju od 0.02pM, najpovoljnije manju od 0,0 lpM.
PRIMER 5: Celularna DNK-PK fosforilacijana serinu 2056
HCT116 ćelije kultivišu se sa 10% fetalnog telećeg seruma, 1 mM natrij umpiru vata i 2 mM glutamina na 37°C i 10% C02u MEM alfa medij umu. Ćelije se uz pomoć tripsin/EDTA odvajaju od dna posude kulture, centrifugiraju u epruvetama za centrifugiranje i podignu u sveži medijum. Potom se utvrđuje gustina ćelija. 200.000 ćelija se raseje u 1 ml medijuma kulture po kavitetu 12 Well-ploče ćelijske kulture i kultiviše preko noći. Sledećeg dana ćelijama je dodato lOuM bleomicina i test-supstance u svežem medijumu kulture pa se ovokultiviše daljih šest sati. Potom sledi razlaganje čelija. Produkti ćelijskog razlaganja se ispituju SDS-poliakrilamid-gel-elektroforezom uz pomoć DNK-PK specifičnih antitela (Abcam abl3852: ukupna DNK-PK; abl8192: fosfo-serin 2056 DNK-PK) i Western Blotting. Praćenje enzimske reakcije sledi uz pomoć reagesa hemijske luminescencije. Hemijska luminescencija zabeležena je uz pomoć dokumentacionog sistema (VersaDoc™, Bio-Rad, USA) i pomoću za uređaj specifičnog softvera denzitometrijski obrađena. Signali sa fosfo-DNK-PK-specifičnim antitelima se normalizuju na signal antitela prema ukupnom proteinu DNK-PK. Utvrđivanje IC50-Vrednosti kao i procentualnih podataka inhibicije sledi referenciranjem na nivo signala bleomicinom tretirane kontrolne grupe.
PRIMER 6: Celularni test rasta kolonije
Kolorektalna linija ćelija karcinoma HCT116 se kultivira u MEM alfa medijumu sa 10% fetalnog telećeg seruma, lmM natrijumpiruvata i 2 mM glutamina na 37°C i 10%CC>2. Ćelije se podignu pomoću tripsin/EDTA sa dna suda kulture, ođcentrifugiraju u epruvetama za centrifugiranje i podignu u svež medijum. zatim se utvrdi gustina ćelija. 300 ćelija se raseje u 2 ml medijuma kulture u 6-Well-ploči kulture i kultiviše preko noći. Sledećeg dana se ćelije tretirajujedan sat test-supstancama pre nego što se ploča sa kulturom ćelija tretira definisanim dozama rentgenskog zračenja (po pravilu 0, 2, 4, 4.8, 12 Gray; Uređaj za zračenje: Faxitron RX-650; Faxitron X-Ray LLC, USA). Radi određivanja odnosa delovanja doze ćelije se tretiraju različitim koncentracijama neke test-supstance. Posle ozračivanja sledi dalja kultivacija 24 sata u prisustvu test-supstanci, medijum kulture je onda zamenjen medijumom kulture bez test-supstanci, pa su ćelije kultivisane daljih 6 - 8 dana. Zatim su u nastavku stvorene kolonije ćelija obojene pomoću kristalvioleta i izbrojane u uređaju za brojanje kolonija (Gelcount, Oxford Optonics, UK). Određivanje krive delovanja doze, naročito IC50-vrednosti sledi preko primene usklađujuće funkcije krive za nelinearne odnose delovanja doze. Jedinjenje primera 12 je pokazalo ICg0-vrednosti od manje 0,4 uM pri 4,8 Gray.
PRIMER 7: Celularno CHK2" fosforilovanje na treoninu 68
HTC116 ćelije se kultiviraju u MEM alfa medijumu sa 10% fetalnog telećeg seruma, lmM natrijumpiruvata i 2 mM glutamina na 37°C i 10%CO2. Ćelije se podignu pomoću tripsin/EDTA sa dna suda kulture, odcentrifugiraju u epruvetama za centrifugiranje i podignu u svež medijum. Zatim se utvrdi gustina ćelija. 50.000 ćelija se raseje u 0,1 ml medijuma kulture po kavitetu 96-Well-ploče ćelijske kulture i kultivira preko noći. Sledećeg dana se ćelijama doda lOuM bleomicina i test-supstanci u svežem medijumu kulture pa se ovo kultivira daljih 6 sati. Posle razlaganja ćelija sledi detekcija fosfo-treonin 68 CHK2 kinaze u lizatima pomoću fosfo-CHK2 (thr68) Specifičnih ELISA detekcionih sistwma (kataloški br. 7037, Cell Signaling Technologies, USA). ELISA bojena reakcija se meri spektrofotometrijski na 450nm. Ekstinkcija nestimulisane kontrole (kontrole bez bleomicina) oduzeta je od ekstinkcionih vrednosti tretiranih grupa. Kontrole, koje su tretirane bleomicinom izjednačene su sa 100% a sve druge vrednosti ekstinkcije su stavljene u odnos prema tome. Određivanje- IC50-vrednosti urađeno je prema Statistikprograme GraphPad Prism(Graphpad , Software USA) ili Assay Explorer (Symyx Technologies Inc., USA).
PRIMER 8 : Farmaceutske Pripreme
Primer A: Injekciona stakla
Rastvor od 100 g aktivne materije prema pronalasku i 5 g dinatrijumhidrogenfosfata se postavi na pH 6,8 u 3 1 dvostruko destilovane vode sa 2 N sonom kiselinom, filtrira sterilno, puni u injekciona stakla, pod sterilnim uslovima liofllizuje i sterilno zatvori. Svako injekciono staklo sadrži 5 mg aktivne materije prema pronalasku.
Primer B: Supozitorij e
Stopi se smeša od 20 gaktivne materije prema pronalasku sa 100 g sojalecitina i 1400 kakaobutera, izliva u kalupe pa se ohladi. Svaka supozitorija sadrži 20 mg aktivne materije prema pronalasku.
Primer C: Rastvor
Priprema se rastvor od 1 aktivne materije prema pronalasku, 9,38 g NaH2P04-2H20, 28, 48 g Na2HP0412 H20 i 0,1 g benzalkonijumhlorida u 940 mi dvostruko destilovane vode. pH se postavi na 6,8, dopuni do 1 1 i steriliše zračenjem. Rasvor može da se koristi u obliku kapi za oči.
Primer D: Mast
Pomeša se 500 mg aktivne materije prema pronalasku sa 99,5 g vazelina pod asptičnim uslovima.
Primer E: Tablete
Smeša od 1 kg aktivne materije prema pronalasku, 4 kg laktoze 1,2 kg krompirovog škroba 0,2 kg talka i 0,1 kg magnezijumstearata se na uobičajeni način presuje u tablete, tako da svaka tableta sadrži 10 mg aktivne materije prema pronalasku.
PRIMER F: Dražeie
Analogno primeru E presuju se tablete koje se potom na uobičajeni način presvlače prevlakom od saharoze, krompirovog škroba, talka, tragantima i bojama.
PRIMER G: Kapsule
2 kg aktivne materije prema pronalasku se na uobičajeni način pune u kapsule od tvrde želatine tako da svaka kapsula sadrži 20 mg aktivne materije prema pronalasku.
PRIMER H: Ampule
Rastvor od 1 kg aktivne materije prema pronalasku u 60 1 dvostruko destilovane vode sterilno se filtrira, puni u ampule, pod sterilnim uslovima liofilizuje i sterilno zatvara. Svaka ampula sadrži 10 mg aktivne materije prema pronalasku.
PRIMER I: Sprei za inhalaciju
Rastvori se 14 g aktivne materije prema pronalasku u 10 1 izotoničnog rastvora NaCl pa se rastvor puni u uobičajene trgovačke sprej-flaše sa mehanizmom za pumpanje. Rastvor može da se pumpa u usta ili nos. Jedan mlaz (ca 0.1 ml) odgovara dozi od ca. 0,14 mg.

Claims (14)

1. Jedinjenja formule (I) naznačena time, što(I) R<1>Hetl ili Ar R<2>R<3>međusobno nezavisno Y ili OY, ili zajedno takođe -0-(CH2)n ; R<4>A ili (CH2)nOA L -CR<2>R<3->, jedna prosta veza, -(CH2)n-, CH(Hal)-, -CH(Hal)2. -(CH2)nCH(OY)-, -(CH2)nCO-, -(CH2)nNH-,-(CH2)nCONY2, -NYCO-,-NHCO-NH-, -NR<4>CO-, -NYS02-, -C(=NR<4>)-, -C(=NCN)-, - CY(NY2), -CY(CN)-, -CY(0-(CH2)„CN)-, -CY(Het<2>)-, ili -CY(0-(CH2)nHet<2>)-; Y H ili A A ravnolančasti ili račvasti alkil sa 1-10 C-atoma, pri Čemu međusobnonezavisno, 1-7 H atoma mogu da budu zamenjeni halogenom; CyC ciklični alkil sa 3-7 C-atoma, pri čemu međusobno nezavisno, 1-4 H-atoma može da bude zamenjeno halogenom Ar nesupstituisani ili jednom ili dva puta supstituisani fenil sa (CH2)pOY, R<4>, (CH2)pOR<4>, COOY, NY2, NYCOY i/ili CN; Het<1>Heteroaril sa jednim ili dva jezgra sa 2-9 C-atoma i 1-4 N-, O- ,i/ili S-atomom, koji može da bude nesupstituisan ili može jednom ili dva puta da bude supstituisan sa halogenom, CH2)pOY, R<4>, (CH2)pOR<4>, 0= COOY, NY2, NYCOY2, CONY2, Cyc, Het<2>i/ili CN; Het heterocikl sa jednim jezgrom sa 2-7 C-atoma i 1-4 N-, O- i/ili S atomom koji može da bude nesupstituisan ili jednom supstituisan sa A; Hal F, Cl, Br,ili I; m 0, 1 ili 2; i n, p znači međusobno nezavisno 0, 1, 2, 3, 4 ili 5 i/ili njene fiziološki nesporne soli, tautomere i/ili stereoizomere, uključujući njihove smeše u svim odnosima.
2. Jedinjenja prema zahtevu 1,naznačena time, što R<1>znači het<1>
3. Jedinjenja prema zahtevu 1 ili 2,naznačena time, štoR , R nezavisno jedno od drugog znače Y ili OY.
4. Jedinjenja prema jednom od zahteva 1 do 3,naznačena time, štoL znači -CR<2>R<3-.>
5. Jedinjenja prema jednom od zahteva 1-4,naznačena time, što het<1>znači heteroaril sa jednim ili dva jezgra sa 2 - 8 C-atoma 1-3 N- , O-,i/ili S-atomom, koji može da bude nesupstituisan ili može jednom ili dva puta da bude supstituisan sa halogenom, CH2)pOY, A i/ili =0.
6. Jedinjenja prema zahtevu 1 sa delom formule (IA) naznačena time, Štooznačava: R<1>het' ili Ar; R<2>Y ili OY; R<3>OY ili A; R<2>R<3>zajedno i -0-(CH2)n-; L -CR<2>R<3->; Y H ili A; A ravnolančasti ili račvasti alkil sa 1-6 C-atoma, pri čemu međusobno nezavisno 1-5 H-atoma mogu da budu zamenjeni halogenom; Ar nesupstituisani ili jednom ili dva puta halogenom ili (CH2)pOY supstituisani fenil; Het<1>heteroaril sa jednim ili dva jezgra sa 2-8 C-atoma i 1-3 N-, O i/ili S atoma, koji može da bude nesupstituisan ili supstituisan , jednom ili dva puta halogenom, (CH2)pOY, A i/ili 0= ; Hal F, Cl, Br ili J; i n, p nezavisno jedan od drugog 0, 1, 2, 3 ili 4 i/ili njene fiziološki nesporne soli tautomere i/ili stereoizomere, uključujući njihove smeše u svim odnosima.
7. Jedinjenja prema zahtevu 1 sa delom formule (IB) naznačena time, štoY H ili A A ravnolančasti ili račvasti alkil sa 1 -6 C- atoma, pri čemu nezavisno međusobno 1-3 H-atoma mogu da budu zamenjeni halogenom; Het<1>nesupstituisani ili jednom ili dva puta supstituisani halogenom (CH2)OY, A i/ili =0 heteroaril, izabran iz grupe: Hal F, Cl, Br ili J; i p 0, 1 ili 2, i/ili njihove fiziološki nesumnjive soli, tautomere i/ili stereoizomere uključujući njihove smeše u svim odnosima.
8. Jedinjenja prema jednom od zahteva 1 do7, naznačena time, štosu izabrana iz grupe: i/ili njihove fiziološki nesumnjive soli, tautomere i/ili stereoizomere uključujući njihove smeše u svim odnosima.
9. Postupak za dobijanje jedinjenja formule (I) prema zahtevu 1 i/ili njihove fiziološki nesumnjive soli, tautomere i/ili stereoizomere sa sledećim fazamanaznačen time, što:a) reakcija jedinjenja formule (II) sa jedinjenjem formule (III) ili (V) u kojima R ,L i imaju ona u zahtevu 1 navedena značenja, uz dobijanje jedinjenja formule (I) u kome R ,L i mimaju ona u zahtevu 1 navedena značenja, i u datom slučaju (b) pretvaranje neke baze ili kiseline jedinjenja formule (I) u neku od njihovih soli.
10. Primena jedinjenja prema jednom od zahteva 1 do 8 i/ili njihovih fiziološki nesumnjivih soli, tautomerae i/ili stereoizomera uključujući njihove smeše u svim odnosima,naznačena time,što služe za suzbijanje serin-treonin-proteinkinaze in-vitro, prvenstveno PIKK, naročito povoljno DNK-PK.
11. Primena jedinjenja prema jednom od zahteva 1 do 8 i/ili njihovih fiziološki nesumnjivih soli, tautomera i/ili stereoizomera, uključujući njihove smeše u svim odnosimanaznačena time,što služe za primenu senzibilizacije ćelija raka prema nekom sredstvu protiv raka i/ili jonizujućem zračenju.
12. Lekovinaznačeni time,što obuhvataju najmanje jedno jedinjenje prema jednom od zahteva 1 do 8 i/ili njegove fiziološki nesumnjive soli, tautomere i/ili stereoizomere, uključujući njihove smeše u svim odnosima.
13. Farmaceutski sastavnaznačen time,Što obuhvata kao aktivnu materiju delotvornu količinu najmanje jednog jedinjenja prema jednom od zahteva 1 do 8 i/ili njegove fiziološki nesumnjive soli, tautomere i/ili stereoizomere, uključujući njihove smeše u svim odnosima, zajedno sa farmaceutski podnošljivim pomoćnim materijama u kombinaciji sa najmanje jednim sredstvom protiv raka.
14. Jedinjenja prema jednom od zahteva 1 do 8 i/ili njihovih fiziološki nesumnjivih soli, tautomera i/ili stereoizomera, uključujući njihove smeše u svim odnosima,naznačena time,što služe za primenu u profilaksi, terapiji i/ili kontroli toka raka, tumora, metastaza, i/ili smetnji angiogeneze, u kombinaciji sa radioterapijom i/ili sa najmanje jednim sredstvom protiv raka.
RS20160351A 2011-11-18 2012-10-30 Morfolinilbenzotriazini za primenu u terapiji kancera RS54768B1 (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE102011118830A DE102011118830A1 (de) 2011-11-18 2011-11-18 Morpholinylbenzotriazine
EP12783121.2A EP2780332B1 (de) 2011-11-18 2012-10-30 Morpholinylbenzotriazine zur anwendung in der krebstherapie
PCT/EP2012/004542 WO2013072015A1 (de) 2011-11-18 2012-10-30 Morpholinylbenzotriazine zur anwendung in der krebstherapie

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS54768B1 true RS54768B1 (sr) 2016-10-31

Family

ID=47143824

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20160351A RS54768B1 (sr) 2011-11-18 2012-10-30 Morfolinilbenzotriazini za primenu u terapiji kancera

Country Status (24)

Country Link
US (1) US9187469B2 (sr)
EP (1) EP2780332B1 (sr)
JP (1) JP6096792B2 (sr)
KR (1) KR20140097391A (sr)
CN (1) CN103930408B (sr)
AU (1) AU2012339196B2 (sr)
BR (1) BR112014011805A2 (sr)
CA (1) CA2856103C (sr)
DE (1) DE102011118830A1 (sr)
DK (1) DK2780332T3 (sr)
EA (1) EA201400595A1 (sr)
ES (1) ES2572605T3 (sr)
HK (1) HK1199875A1 (sr)
HR (1) HRP20160495T1 (sr)
HU (1) HUE027577T2 (sr)
IL (1) IL232577A (sr)
IN (1) IN2014KN01287A (sr)
MX (1) MX2014005838A (sr)
PL (1) PL2780332T3 (sr)
RS (1) RS54768B1 (sr)
SG (1) SG11201402206YA (sr)
SI (1) SI2780332T1 (sr)
WO (1) WO2013072015A1 (sr)
ZA (1) ZA201404438B (sr)

Families Citing this family (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SG11201406584TA (en) 2012-04-24 2014-11-27 Vertex Pharma Dna-pk inhibitors
RS62649B1 (sr) 2013-03-12 2021-12-31 Vertex Pharma Inhibitori dnk-pk
DE102013008118A1 (de) 2013-05-11 2014-11-13 Merck Patent Gmbh Arylchinazoline
KR102411227B1 (ko) 2013-10-17 2022-06-21 버텍스 파마슈티칼스 인코포레이티드 Dna-pk 억제제로서 (s)-n-메틸-8-(1-((2'-메틸-[4,5'-비피리미딘]-6-일)아미노)프로판-2-일)퀴놀린-4-카복스아미드 및 이의 듀테로화된 유도체의 공결정
MX394860B (es) 2016-09-27 2025-03-24 Vertex Pharma Metodo para tratar cancer usando una combinacion de agentes que dañan adn e inhibidores de proteina cinasa dependiente de adn (adn-pk).
CN107793373B (zh) * 2017-10-31 2019-09-17 广西师范大学 2-取代苯并三嗪酮衍生物及其制备方法
BR112020014140A2 (pt) 2018-01-17 2020-12-01 Vertex Pharmaceuticals Incorporated inibidores de dna-pk
US12269804B2 (en) 2018-01-17 2025-04-08 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Quinoxalinone compounds, compositions, methods, and kits for increasing genome editing efficiency
WO2019143678A1 (en) * 2018-01-17 2019-07-25 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Dna-pk inhibitors
ES3055187T3 (en) 2019-11-01 2026-02-10 Syngenta Crop Protection Ag Pesticidally active fused bicyclic heteroaromatic compounds
KR20240024926A (ko) 2021-06-24 2024-02-26 신젠타 크롭 프로텍션 아게 살충제로서의 2-[3-[1[(퀴나졸린-4-일)아미노]에틸]피라진-2-일]티아졸-5-카르보니트릴 유도체 및 유사한 화합물
EP4543873A1 (en) 2022-06-21 2025-04-30 Syngenta Crop Protection AG Pesticidally active fused bicyclic heteroaromatic compounds

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
BR9107070A (pt) 1990-11-06 1994-05-31 Pfizer Processo para a preparação de derivados de quinazolina uteis para melhorar a atividade antitumoral.
EP1187633A4 (en) 1999-04-08 2005-05-11 Arch Dev Corp USE OF ANTI-VEGF ANTIBODIES TO ENHANCE RADIATION IN ANTICANCER THERAPY
WO2002020500A2 (en) * 2000-09-01 2002-03-14 Icos Corporation Materials and methods to potentiate cancer treatment
US7291733B2 (en) * 2003-10-10 2007-11-06 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Substituted tricyclic heterocycles and their uses
CN101230045B (zh) * 2008-02-14 2013-04-10 沈阳药科大学 芳环并三嗪类衍生物及其应用
EP2547664B1 (de) 2010-03-16 2016-05-04 Merck Patent GmbH Morpholinylchinazoline

Also Published As

Publication number Publication date
JP6096792B2 (ja) 2017-03-15
EP2780332B1 (de) 2016-02-24
ES2572605T3 (es) 2016-06-01
EP2780332A1 (de) 2014-09-24
US20140275072A1 (en) 2014-09-18
EA201400595A1 (ru) 2014-11-28
DE102011118830A1 (de) 2013-05-23
SG11201402206YA (en) 2014-11-27
HRP20160495T1 (hr) 2016-06-03
IN2014KN01287A (sr) 2015-10-16
AU2012339196A1 (en) 2014-07-03
JP2015502926A (ja) 2015-01-29
ZA201404438B (en) 2015-12-23
AU2012339196B2 (en) 2017-04-27
US9187469B2 (en) 2015-11-17
CN103930408B (zh) 2016-09-07
HUE027577T2 (en) 2016-10-28
CN103930408A (zh) 2014-07-16
CA2856103C (en) 2020-08-25
PL2780332T3 (pl) 2016-07-29
MX2014005838A (es) 2014-07-30
HK1199875A1 (en) 2015-07-24
DK2780332T3 (en) 2016-05-30
WO2013072015A1 (de) 2013-05-23
IL232577A (en) 2017-05-29
IL232577A0 (en) 2014-06-30
BR112014011805A2 (pt) 2017-05-16
KR20140097391A (ko) 2014-08-06
SI2780332T1 (sl) 2016-06-30
CA2856103A1 (en) 2013-05-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN103068803B (zh) 作为DNA-PK抑制剂的咪唑并[4,5-c]喹啉类化合物
DK2780332T3 (en) Morpholinylbenzotriaziner for use in cancer therapy
DK2588457T3 (en) PYRAZOLOQUINOLINDERIVATER as DNA-PK inhibitors
MX2012010557A (es) Morfolinilquinazolinas.
MX2012010555A (es) Ingrediente activo cristalino secado por rociado.
HK1184154B (en) Imidazo[4,5-c]quinolines as dna-pk inhibitors
HK1184782B (zh) 吡唑并喹啉类化合物