RS54990B1 - Natrijumove i kalcijumove soli derivata dihidrokinazolina i njihova upotreba kao antivirusnih agenasa - Google Patents

Description

NATRIJUMOVE IKALCIJUMOVE

SOLI DERIVATA DIHIDROKINAZOLINA

I NJIHOVA UPOTREBA KAO

ANTIVIRUSNIH AGENASA

[00011Ovaj pronalazak se odnosi na soli [8-nuoro-2-[4-(3-metoksifenil)piperazin-l-il]-3-[2-rnetoksi-5-(trifluorometil)fenil]-3,4-dihidrokinazolin-4-il}sirćetne kiseline i njihove solvate.

[0002|Pronalazak se dalje odnosi na metode za njihovu proizvodnju, na njihovu upotrebu u melodima lečenja i/ili sprečavanja oboljenja, naročito virusnih infekcija, kao i na njihovu upotrebu u proizvodnji lekova za upotrebu u Icčenju i/ili sprečavanju virusnih infekcija, naročito za upotrebu u tečenju i/i i i sprečavanju citomegalovirusnih infekcija ili infekcija nekim drugim predstavnikom grupe Herpesa viridae. (8-f1uoro-2-[4-(3-metoksifenir)piperazin-l-ilj-3-|2-metoksi-5-(trinuorometil)fenil]-3.4-dihidrokinazolin-4-iljsirćetna kiselina je poznata, na primer. iz WO 2004/096778i razvili su je autori ove prijave kao obećavajućeg kandidata za antivirusno aktivnu supstancu, naročito za borbu protiv infekcija izazvanih humanim citomegalovirusom (HCMV). U postupku razvijanja, međutim, pokazalo se da je krajnje komplikovano dobiti ovo jedinjenje u kristalnom obliku, bilo kao cviter jon ili u obliku soli, i do sada se razvoj odvijao korišćenjem cviter jona u amorfnom obliku. Naročito za prečišćavanje aktivnog sastojka, ali i za njegovu upotrebu u lekovima, bilo bi poželjno dobiti kristalne soli j8-nuoro-2-|4-(3-nietoksifenil)piperazin-l-il]-3-[2-metoksi-5-(tritluorometil)fenirj-3,4-dihidrokinazolin-4-iljsirćetne kiseline koje bi se mogle proizvoditi lako i sa velikim prinosom. Međutim, upotreba amorfnih supstanci za proizvodnju lekova je nepoželjna jer, s jedne strane, često je teško garantovati uniformnu čistoću amorfnih supstanci, a sa druge strane, sa amorfnim supstancama je teško garantovati i uniformne farmakološke parametre, kao što je uniformna biodostupnost.

[0003]Jedan predmet ovog pronalaska je. dakle, da se opišu soli (8-fluoro-2-[4-(3-metoksifenil)piperazin-l-il]-3-[2-metoksi-5-(trifluorometil)fenil]-3,4-dihidrokinazolin-4-il Jsirćetne kiseline sa kojima se mogu dobiti kristalni proizvodi. Da bi bilo iole moguće koristiti soli za razvijanje lekova, one moraju i da ostanu stabilne u skladištu tokom dugog vremenskog perioda. Konačno, kristalna jedinjenja moraju da budu lako rastvorljiva u vodenom medijumu, a pogotovo na fiziološkom pl l.

[0004|Pored toga. soli prema pronalasku imaju visok stepen čistoće.

[0005)U kontekstu ovog pronalaska, termin "kristalni proizvod" označava natrij umove soli S(+)-{8-nuoro-2-[4-(3-metoksifenil)piperazin-l-il]-3-[2-metoksi-5-(trifluorometi!)fenil]-3,4-dihidrokinazolin-4-il} sirćetne kiseline i kalcijumove soii S(+)-{8-fluoro-2-[4-(3-metoksifenil)piperazin-l-il]-3-[2-metoksi-5-(trifluorometil)fenil]-3,4-dihidrokinazolin-4-il] sirćetne kiseline koje, u difrakcionoj analizi X-zracima, poseduju karakteristične pikove, kao što je prikazano na Slikama 1 -3 ili slične pikove.

[0006|U kontekstu ovog pronalaska, termin "stabilne u skladištu" znači, u slučaju soli prema pronalasku, da na 25 °C sadrže minimalan udeo od>90%. poželjno>95%, a najpoželjnije 99% {8-fluoro-2-f4-(3-metoksilaiil)<p>i<p>erazin-l-il]0-f2-metoksi-5-(trilfuorometil)tenil]-3.4-dihidrokinazolin-4-il J sirćetne kiseline za period skladištenja od bar dve. poželjno bar tri, čak poželjnije bar šest nedelja. a najpoželjnije 12 meseci. kad se navedene soli mere pomoću jednog od HPLC metoda 1-3. Navedena stabilnost soli u skladištu se smatra adekvatnom u okviru opsega pronalaska.

[0007] Iznenađujuće, upravo je otkriveno da [8-fluoro-2-f4-(3-metoksifenil)piperazin-l-il]-3-[2-metoksi-5-(trilfuorometil)fenil]-3.4-dihidrokinazolin-4-il Jsirćetna kiselina formira dobro dellnisane kristalne soli sa katjonima natrij uma i kalcijuma. Još je otkriveno da su ove soli lako rastvorljive. a i da ispoljavaju dobru stabilnost u skladištu u vodenom medijumu, konkretno, na fiziološkom pH.

[0008)Pored toga. kristalna natrijumova i kalcijumova so [8-fluoro-2-|4-{3-metoksifenil)piperazin-l-il]-3-[2-metoksi-5-(triJ1uorometil)fenil)-3,4-dihidrokinazolin-4-il J sirćetne kiseline, koje se dobijaju prema pronalasku, ispoljavaju visok stepen čistoće.

|0009)Termini "visoka čistoća, čistoća i čist'*, kad se koriste u vezi sa natrijumovom solju S(+)-{8-fluoro-2-[4-(3-metoksifenil)piperazin-l-il]-3-[2Hiietoksi-5-(trifluorometil)fenil]-3.4-dihidrokinazolin-4-ilJ sirćetne kiseline i kalcijumovom solju S(+)-{8-fluoro-2-[4-(3-metoksifenil)piperazin-l-il]-3-[2-metoksi-5-{trinuorometil}fenil]-3,4-dihidrokinazolin-4-il Jsirćetne kiseline prema pronalasku, označavaju njihovo prisustvo kao supstance u smesi supstanci sa <0,1%. poželjno <0.08%. poželjnije <0.()5%. a naj poželjnije<<>0.01% ukupnog udela poznatih nečistoća u njima. di-p-toluoil-D-vinske kiseline i/ili S-kinazolil piperazina. i/ili kinazolin etil estra i/ili kinazolin kinazolil-dipiperazina i/ili nespecifičnih nečistoća u njima kad se meri pomoću HPLC prema primernom obliku F).

[0010]Predmet ovog pronalaska su. dakle, kristalne natrij umove soli i kristalne kalcijumove soli J841uoro-2-[4-(3-metoksifenil)piperazin-l-il)-3-|2-metoksi-5-(trifluorometil)fenil]o.4-dihidrokinazolin-4-il | sirćetne kiseline, kao i njihovi solvati.

(0011 ]U okviru ovog pronalaska, natrij umove i kalcijumove soli {8-fluoro-2-[4-(3-metoksifenil)piperazin-]-il]-3-[2-metoksi-5^trif1uorometil}fenil]-3.4-dihidrokinazolin-4-il Jsirćetne kiseline su adukti reakcije ;8-tluoro-2-[4-(3-metoksifenil)piperazin-l-il]-3-(2-metoksi-5-(trinuorometil)fenil]-3,4-dihidrokinazolin-4-il J sirćetne kiseline sa jakom natrijumovom ili kalcijumovom bazom, naročito sa natrij um hidroksidom ili kalcij um hidroksidom. J8-f1uoro-2-[4-{3-metoksifenil)piperazin-l-il]-3-[2-metoksi-5-(trifluorometil)fenil]-3,4-dihidrokinazolin-4-ilJsirćetna kiselina i nalrijumovi ili kalcijumovi joni suprotnog naelektrisanja suprotnog naelektrisanja mogu da budu prisutni u bilo kom

odnosu. Poželjan je odnos celih brojeva (npr. 1:1. 1:2. 1:3. 3:1. 2:1). Soli se mogu proizvodili direktnom reakcijom {8-fiuoro-2-[4-(3-metoksilenil)piperazin-l -il|-3-l2-metoksi-5-(trifluorometil)fenil]-3.4-dihidrokinazolin-4-il) sirćetne kiseline sa nalrijumovim ili kalcij umovim bazama ili proizvodnjom neke druge bazne soli {8-tluoro-2-f4-(3-nietoksifcnil)piptMazin-l-il]-3-j2-metoksi-5-(trifliu)n>metil)fenil]-3.4-dihidrokinazolin-4-il)sirćetne kiseline, kojoj se zatim zameni katjon.

|0012|U okviru ovog pronalaska, termin solvati se odnosi na one oblike soli {8-fluoro-2-[4-(3-metoksifenil)piperazin-l-il]-3-[2-metoksi-5-ftrifluorometil)fenilj-3,4-dihidrokinazolin-4-il}sirćetne kiseline koje formiraju kompleks koordinacijom sa molekulima rastvarača. Hidrati su poseban vid sol vata u kojima se koordinacija vrši sa vodom.

[0013]U okviru ovog pronalaska, prednost se daje monokalcijumovoj soli {8-fluoro-2-[4-(3-metoksifenil)piperazin-l-il]-3-[2-metoksi-5^ il j sirćetne kiseline, naročito 2.5-hidratu i 3,5-hidratu monokalcijumove soli {8-lluoro-2-l4-(3-metoksifenil)piperazin-l-il]-3-[2-metoksi-5-{trifluorometil)lenilj-3.4-dihidrokinazolin-4-il Jsirćetne kiseline. Pored toga, u okviru ovog pronalaska, prednost se daje i mononatrijumovoj soli {8-fluoro-2-[4-(3-metoksilenil)piperazin-l-il]-3-[2-metoksi-5-(trifluorometil)fenil|-3,4-dihidrokinazolin-4-il Jsirćetne kiseline, a naročito 3.5-hidratu mononatrij umove soli [8-fluoro-2-[4-(3-metoksifenil)piperazin-l-il |-3-|2-metoksi-5-(trifluorometil)fenil]-3,4-dihidrokinazolin-4-il J sirćetne kiseline.

[0014]Pored toga. u okviru ovog pronalaska, prednost se daje 2.5-hidratu monokalcijumove soli [8-rluoro-2-|4-(3-metoksifeml)piperazin-! -il |-3-l2-metoksi-5-(trilfuoromctil)fenil]-3.4-dihidrokinazolin-4-il J sirćetne kiseline, koji pokazuje karakteristične pikove na oko 6,1. 9.2 i 1 5.5 stepeni 2teta u rendgenskom difraktogramu praha (XRD).

[0015]Pored toga. u okviru ovog pronalaska, prednost se daje i 3.5-hidratu monokalcijumove soli {8-nuoro-2-[4-(3-metoksifenil)piperazin-l-il]-3-[2-metoksi-5-(trif1uorometil)fenil]-3.4-dihidrokinazolin-4-ilJsirćetne kiseline koji pokazuje karakteristične pikove na oko 6.2. 12.4 i 22,4 stepena 2teta u rendgenskom difraktogramu praha (XRD).

|0016]Takođe je poželjan u okviru ovog pronalaska 3.5-hidrat mononatrijumove soli [8-nuoro-2-f4-(3-metoksifenil)piperazin-l-ill-3-[2-metoksi-5-ftrifluoromeli])fenil]-3.4-dihidrokinazolin-4-ilJsirćetne kiseline koji pokazuje karakteristične pikove na oko 6,2. 20.9 i 22,4 stepena 2teta u rendgenskom difraktogramu praha (XRD).

[0017JKao što stručnjak odmah može da vidi. !8-tluoro-2-[4-(3-metoksifenil)piperazin-l-il]-3-[2-metoksi-5-(trifluorometil)fenil]-3.4-dihidrokinazolin-4-ilJ sirćetna kiselina ima

stereocentar na ugljcniku na 4. položaju u dihidrokinazolinskom prsienu. Unutar opsega ovog

pronalaska, naročito je požel jno da ovaj ugljenik ima S-konfiguraciju.

10018)Soli prema pronalasku se u opštem slučaju proizvode reagovanjem {8-fluoro-2-[4-(3-

metoksifenil)piperazin-l-il]-3-[2-metoksi-5-(trifluoromctil)fcnil]-3.4-dihidrokinazolin-4-

il Jsirćetne kiseline ili njene kisele soli sa bazom natrijuma ili kalcijuma. naročito natrijum

hidroksidom ili kalcijum hidroksidom u rastvaraču.

[0019]Moguća je i reakcija bazne soli (8-fluoro-2-[4-(3-metoksifenil)piperazin-l-ilj-3-[2-

metoksi-5-(trifluorometil)fenil]-3.4-dihidrokinazolin-4-il Jsirćetne kiseline. koja nije

natrijumova ili kalcijumova so, sa izvorom nalrijumovih ili kalcijumovih kaljona u rastvaraču.

|0020|Za ranije pomenute reakcije, naročito smesa bar jednog di-(C|-CY)-alkil etra i bar

jednog (C|-C'4)-alkohola se koristi kao rastvarač.

(0021)Prema lome, predmet ovog pronalaska je i metod za proizvodnju natrijumove soli ili

kalcijumove soli (8-fluoro-2-f4-(3-metoksifenil)piperazin- l-il]-3-[2-metoksi-5-

(trifluorometil)feni]]-3.4-dihidrokinazoIin-4-il Jsirćetne kiseline, koji ima sledeće korake:

a. ) rastvaranje {8-tluoro-2-[4-(3-metoksifenil)piperazin-l-il]-3-[2-metoksi-5-(tri-fluorometil)efnil]-3,4-dihidrokinazolin-4-ilJ sirćetne kiseline ili njenog solvata u smesi

bar jednog di-(C|-C4)-alkil etra i bar jednog (C1-C4) alkohola, ako je potrebno, uz

zagrevanje:

b. ) dodavanje NaOll ili Ca(OH)2u rastvor dobijen u koraku a.):

c. ) uklanjanje dela rastvarača iz rastvora dobijenog u koraku b.) i inokulacija. ako je

potrebno, pogodnim semenom kristala, da bi se inicirala kristalizacija soli ili solvata

soli:

d. ) izdvajanje iskristalisane soli ili njenog solvata dobijenog u koraku c);

e. ) ako je potrebno, mešanje soli ili solvata dobijenog u koraku d.) u pogodnom

rastvaraču, poželjno u smesi vode i bar jednog (C1-C4) alkohola da bi se dobio željeni

sol vat i

f. ) sušenje soli ili solvata dobijenog u koraku d.) ili e.).

|0022|Soli prema pronalasku dobtjene na ovaj način mogu. po potrebi, dalje da se obraduju,

npr. da se rekristališu ili mikronizuju. da bi se njihove fizičke osobine dalje prilagodile

namenjenoj upotrebi.

[0023J(8-iluoro-2-[4-(3-metoksifenil)piperazin- l-ilj-3-|2-metoksi-5-(trit1uorometil)fenil]-

3,4-dihidrokinazolin-4-il Jsirćetna kiselina, koja se koristi za dobijanje soli prema pronalasku,

je poznata i može se dobiti, na primer. metodom opisanim u WO 2006/133822.

[0024|Dobijanje se konkretno odvija saponifikacijom estra jedinjenja koje ima formulu (II)

sa bazom.

[0025] Jedinjenje koje ima formulu (II) se može proizvesti reagovanjem jedinjenja koje ima formulu (III)

sa jedinjenjem koje ima formulu (IV) u prisustvu baze [0026|Jedinjenje koje ima formulu (III) se može dobiti reagovanjem jedinjenja koje ima formulu (V)

sa fosfor oksihloridom, fosfor trihloridom ili fosfor pentahloridom u prisustvu baze.

[0027] Jedinjenje koje ima formulu (V) se može dobiti reagovanjem jedinjenja koje ima formulu (VI)

u prvom koraku sa metil estrom akriine kiseline u prisustvu paladijumskog katalizatora i ulja, a u drugom koraku sa bazom.

[0028]Jedinjenja koja imaju formule (IV) i (VI) su u principu poznala stručnjaku ili se mogu dobiti uobičajenim metodima poznatim iz literature.

[0029]Saponifikacija estra jedinjenja koje ima formulu (II) da bi se formirala (8-fluoro-2-[4-(3-metoksifenil)piperazin-I-il]-3-[2-metoksi-5-(trifluorometil)fenil]-3,4-dihidrokinazolin-4-il J sirćetna kiselina se postiže reagovanjem jedinjenja koje ima formulu (II) sa bazom u inertnom rastvaraču, u opsegu temperature od I 8°C sve do refluksa rastvarača. poželjno na 18 do 50°C. poželjnije na 20 do 30°C. na normalnom pritisku, u okviru perioda od. na primer, 0,5 do 10 sati. poželjno u okviru 1 do 5 sati.

[0030]Baze su. na primer. hidroksidi alkalnih metala, kao što je natrij um. litijum ili kalijum hidroksid. ili karbonati alkalnih memla, kao što je cezijum karbonat, natrijum ili kalijum karbonat, ili alkoholati kao Što je natrijum ili kalijum metanolat, ili natrijum ili kalijum etanolat. gde baza može biti prisutna u vodenom rastvoru.

[0031] Inertni rastvaran su, na primer, etri. kao što je 1,2-climetoksietan. metil/tj/r-bulil etar (MTBI j. dioksan.letrahiđrofuran. glikol dimetil etar ili đietilen glikol dimetil etar. alkoholi kao što je metanol. etanol, n-propanoL izo-propanol, n-butanol ili terc-butanol. ili voda, ili smese rastvarača.

[0032|Natrijum hidroksid u vodi i MTBE su poželjni.

[0033)Sinteza jedinjenja koje ima formulu (II) iz jedinjenja koje ima formulu (HI) I jedinjenja koje ima formulu (IV). u prisustvu baze. se odvija u inertnom rastvaraču, u opsegu temperature od 40°C sve do refiuksa rastvarača. poželjno na refiuksu rastvarača. na normalnom pritisku, u okviru, na primer. 2 do 48 sati. poželjno u okviru 4 do 12 sali.

[00341Baze su. na primer. aminske baze kao Što je 1.8-diazabiciklo(5.4.0]undek-7-en (DBU). l-(3-meloksifenil)piperazin iliIrietilamin. ili druge baze kao što je kalijum terc-butilat.

[0035| Inertni rastvarači su. na primer, hlorobenzen ili etri ao što je 1.2 dimetoksietan, dioksan, glikol dimetil etar ili đietilen glikol dimetil etar.

[0036|DBU udioksanu je poželjan.

[0037]Konverzija jedinjenja koje ima formulu ( V) u jedinjenje koje ima formulu (III) se odvija reagovanjem jedinjenja koje ima formulu (V) sa fosfor oksihloridom, fosfor trihloridom ili fosfor pcntahloridom: sa fosfor oksihloridom je poželjno, u prisustvu baze u inertnom rastvaraču. u opsegu temperature od 4()°C pa sve do refiuksa rastvarača, poželjno na refiuksu rastvarača. na normalnom pritisku, u okviru, na primer I do 48 sati. poželjno u okviru 2 do 12 sali.

[0038]Baze su, na primer. amini, kao što je 1.8-điazabicik!o[5.4.()]undek-7-en (DBU), piridin ili trietilamin. ili druge baze kao što je kalijum terc-butilat.

Inertni rastvarači su, na primer. ugljovodonici kao što je benzen. ksilen, toluen ili hlorobenzen.

[0039]DBU u hlorobenzenu je poželjan.

|0040| Konverzija jedinjenja koje ima formulu (VI) u jedinjenje koje ima formulu (V) se odvija, u prvom koraku, reagovanjem jedinjenja koje ima formulu (VI) sa metil estrom akrilne kiseline u prisustvu paladijumskog katalizatora i ulja u rastvaraču, u temperaturnom opsegu od 0°C do 40°C, poželjno na sobnoj temperaturi, a u drugom koraku, reagovanjem sa bazom u inertnom rastvaraču. u opsegu temperature od 40°C pa sve do refiuksa rastvarača. poželjno na

refiuksu rastvarača. na normalnom pritisku, u okviru, na primer. 1 do 48 sati. poželjno u okviru 2 do 12 sati.

[00411Paladijumski katalizatori u prvom koraku su. na primer, paladijum(H) acetat, bis(trifenilfosfin)paladijum(II)hlorid. tctrakis{trifcnilfosiln)paladijuin(0). bis(tris(o-tolil)fosfin)<p>aladijum-(II)-hlorid, ili paladijumski katalizator napravljen iz bis(acetonitril)dihloropaladijum ili paladijum(II) aeetata i liganda. na primer, tris(o-tolil)fosfina, trifenilfosfina ili difenilfosfino lerocena.

(0042)Rastvarači u prvom koraku su. na primer. organske kiseline kao što je sirćetna kiselina ili propionska kiselina.

[0043]Paladijum(II) acetat u sirćetnoj kiselini je poželjan.

[0044|Baze u drugom koraku su. na primer. DBU. trietilamin ili diizopropiletilamin.

[0045]Inertni rastvarači u drugom koraku su. na primer, etri kao što je 1.2-dimetoksietan, dioksan, glikol dimetil etar ili đietilen glikol dimetil etar. ugljovodonici kao što je benzen. ksilen ili toluen, ili drugi rastvarači kao što je izobutironitril, acetonitril. aceton, nitrobenzen, dimetilformamid. dimetilacetamid. dimetilsulf'oksid ili N-metilpirolidon.

[0046JDBU u acetonu je poželjan.

[0047]Dobijanje {8-tluoro-2-[4-(3-metoksifenil)piperazin-l-il]-3-[2-metoksi-5-(trifiuorometil)fenil]-3,4-dihidrokinazolin-4-il j sirćetne kiseline koja se koristi za dobijanje soli prema pronalasku je opisano detaljnije kroz primere, na sledećem dijagramu sinteze 1. Ovaj dijagram sinteze nije ništa drugo nego primer i ni na koji način ga ne treba razumeti kao ograničavajući.

Dijagram sinteze 1

Kao što već pomenuto gore, {8-fluoro-2-[4-(3-metoksifenil)piperazin-l-il]-3-[2-metoksi-5-(trifluorornetil)fenil]-3,4-dihidrokinazolin-4-ilJsirćetna kiselina se poželjno koristi u vidu S-enantiomera. Ovaj S-enantiomer se može dobiti kao što je pokazano, na primer, na sledećem dijagramu sinteze 2.

Dijagram sinteze 2

Soli prema pronalasku ispoljavaju antivirusno dejstvo na predstavnike grupe Herpes viridae (virusi herpesa), iznad svih, na citomegaloviruse (CMV). naročito na humani citomegalovirus (HCMV). Zato su pogodne za upotrebu u metodima lečenja i sprečavanja oboljenja, naročito infekcija virusima, pogotovo virusima o kojima se ovde govori i infektivnih oboljenja koja oni izazivaju. Pod terminom "virusna infekcija" se ovde podrazumeva ne samo infekcija virusom, nego i oboljenje prouzrokovano infekcijom virusom.

[0048|Zbog svojih svojstava i karakteristika, soli prema pronalasku se mogu koristiti za proizvodnju lekova koji su pogodni za upotrebu u metodima lečenja i/ili sprečavanja oboljenja, naročito virusnih infekcija.

[0049)Mogu se pomenuti sledeće oblasti indikacija, u svojstvu primera:

1) lečenje i sprečavanje HCMV infekcija kod pacijenata sa AIDS-om (retinitis.

pneumonitis. gastrointestinalne infekcije);

2) lečenje i sprečavanje citomegalovirusnih infekcija kod pacijenata sa transplantatima

kostne srži i organa koji su često u kontaktu sa životno ugrožavajućim HCMV pneumonitisom ili encefalitisom. kao i gastrointestinalnim i sistemskim HCMV infekcijama:

3) lečenje i sprečavanje HCMV infekcija kod novorođenčadi i dece:

4) lečenje akutne HCMV infekcije kod trudnih žena; 5) lečenje HCMV infekcija kod pacijenata sa imunosupresijom koji pate od kancera i

koji su na terapiji kancera:

6) lečenje HCMV-pozitivnih pacijenata sa kancerom sa ciljem smanjenja

napredovanja tumora u kojima posreduje HCMV (cf. J. Cinatl. et al.. FEMS Microbiology Revievvs 2004. 28, 59-77).

[0050]Soli prema pronalasku se poželjno koriste za pravljenje lekova koji su pogodni za upotrebu u metodima sprečavanja i/ili lečenja infekcija predstavnikom grupe Herpes viridae. naročito citomegalovirusom. još pre humanim citomegalovirusom.

[0051]Zbog svojih farmakoloških svojstava i karakteristika, soli prema pronalasku se mogu koristiti same i. po potrebi, i u kombinaciji sa drugim aktivnim supstancama. naročito antivirusnim supstancama, kao što su, na primer, valganciklovir. ganciklovir. valaciklovir. aciklovir. foskarnet, cidofovir i srodni derivati, za upotrebu u metodima lečenja i/ili sprečavanja virusnih infekcija, pogotovo infekcija HCMV-om.

[0052]Još jedan predmet ovo pronalaska se odnosi na soli prema pronalasku u metodu lečenja i/ili sprečavanja oboljenja, poželjno virusnih infekcija, naročito infekcija humanim citomegalovirusom (HCMV) ili nekim drugim predstavnikom grupe Herpes viridae.

|0053]Upotreba soli prema pronalasku za upotrebu u metodima lečenja i/ili sprečavanja oboljenja, naročito ranije pomenutih oboljenja.

[0054)Još jedan predmet ovo pronalaska je upotreba soli prema pronalasku za proizvodnju leka za upotrebu u metodima lečenja i/ili sprečavanja oboljenja, naročito ranije pomenutih oboljenja.

J0055]Opisan je metod lečenja i/ili sprečavanja oboljenja, naročito ranije pomenutih oboljenja, korišćenjem antivirusno efektivne količine soli prema pronalasku.

[0056]Soli prema pronalasku mogu biti efektivne sistematski i/ili lokalno. Li tu svrhu one se mogu davati na pogodan način, npr. oralnim, parenteralnim. pulmonalnim. nazalnim, sublingvalnim, lingvalnim. bukalnim. rektalnim, dermalnim. transdermalnim. konjunktivnim ili otičkim putem, ili kao implant ili stent.

[0057] Soli prema pronalasku se mogu davati u pogodnim oblicima za ove puteve administracije leka.

|0058| Sredstva administracije koja funkcionišu u skladu sa stanjem u struci i koja oslobađaju soli prema pronalasku brzo i/ili u modifikovanom obliku su pogodna za oralnu administraciju; navedena sredstva administracije sadrže jedinjenja prema pronalasku u kristalnoj i/ili amorfizovanoj i/ili rastvorenoj formi. npr.. tablete (neobložene ili obložene tablete, na primer. sa oblogom koja je otporna na gaslrične tečnosti ili sa oblogama koje se sporo rastvaraju ili su nerastvorljive i koje kontrolišu oslobađanje jedinjenja prema pronalasku), tablete ili oblici prevučeni filmom/slični vaflu koji se brzo rastvaraju u ustima, oblici prevučeni filmom/liofilizati, kapsule fna primer, tvrde ili meke želatinske kapsule), tablete obložene šećerom, granulati. peleti, prah, emulzije, suspenzije, aerosoli ili rastvori.

Parenteralna administracija se može raditi izbegavanjem koraka resorpcije {npr.. intravenoznom, intraarterijalnom, intrakardijalnom. intraspinalnom ili intralumbalnom administracijom) ili iskorišćavanjem resorpcije (npr.. intramuskularnom, subkutanom, intrakutanom, perkutanom ili intraperitonealnom administracijom). Za parenteralno davanje, pogodne forme uključuju preparate za injekcije i infuzije u vidu rastvora, suspenzija, emulzija, liofilizata ili sterilnih prahova.

[0059] Sledeća sredstva su pogodna za ostale puteve administracije, na primer, lekovi za inhalaciju (npr. prahovi za inhaliranje, nebulizeri). kapi za nos. rastvori za nos. sprejevi za nos; tablete, lekovi prevučeni filmom/slični vaflu ili kapsule za lingvalno, sublingvalno ili bukalno administriranje. supozitorije, preparati za uho ili oko. vaginalne kapsule, vodene suspenzije (losioni, smesc koje se promućkaju), lipofilne suspenzije, pomade. kremovi. transdermalni terapijski sistemi, mleko, paste. pene. puder, implanti ili stentovi.

[0060JSoli prema pronalasku se mogu pretvoriti u gore pomenute oblike administracije. To se može uraditi na poznat način mešanjem sa inertnim, netoksičnim, farmaceutski pogodnim ekscipijenlima. Oni uključuju nosače (npr. mikrokristalnu celulozu, laktozu. manitol). rastvarače (npr. tečne polietilen glikole). emulzifikatore i disperzante ili agense za kvašenje (na primer, natrijum dodecil sulfat, polioksisorbitan oleat). vezivna sredstva (npr. polivinilpirolidon), sintetičke i prirodne polimere (npr. albumin). stabilizatore (npr. antioksidanse kao što je askorbinska kiselina), boje (npr. neorganske pigmente kao što su oksidi gvožđa) i popravljače ukusa i/ih mirisa.

(0061 ]Još jedan predmet ovo pronalaska uključuje lekove koji sadrže bar jednu so prema pronalasku, obično sa jednim ili više inertnih, netoksičnih, farmaceutski pogodnih ekscipijenata, kao i njihovu upotrebu u ranije pomenute svrhe.

|0062|U opštem slučaju, da bi se postigli efektivni rezultati u intravenoznoj administraciji, povoljno je da se daju količine, u smislu čiste supstance, između 0.001 i 10 mg/kg. poželjno oko 0.01 do 5 mg/kg telesne težine. U slučaju oralne administracije, doza je obično oko 0.01 do 25 mg/kg, poželjno oko 0.1 do 10 mg/kg telesne težine.

[00631Međutim, nekad može biti neophodno da se odstupi od navedenih količina, naime, u zavisnosti od telesne težine, puta administracije, individualnog odgovora na aktivnu supstancu. prirode preparata i vremena ili intervala u kom se vrši administracija. Prema tome. u određenim slučajevima može biti dovoljno i manje od ranije pomenute minimalne količine, dok u drugim slučajevima navedena gornja granica mora da se pređe. Kad se daju velike količine, može biti preporučljivo da se one raspodele na nekoliko individualnih doza tokom dana.

[0064|Podrazumeva se da oblici pomenuti gore i oni koji će tek biti objašnjeni mogu da se koriste ne samo u kombinaciji datoj na odgovarajući način, nego i u drugim kombinacijama ili sami, bez odstupanja od opsega ovog pronalaska.

[0065JPronalazak će sada biti opisan detaljnije na osnovu primera, kao i sa pozivanjem na priložene crteže, koji pokazuju: SI. 1 rendgenski difraktogram praha (XRD) 3-hidrata natrijumove soli [8-fluoro-2-[4-(3-metoksifeniljpiperazin-l -ilj-3-[2-metoksi-5-(trifluorometil)fenil]-3.4-dihidrokinazolin-4-il J sirćetne kiseline koji je napravljen prema Primeru 2 i

SI. 2 rendgenski difraktogram praha (XRD) 2.5-hidrata kalcijumove soli J8-11uoro-2-[4-(3-metoksifenil)piperazin-l-i!]-3-[2-metoksi-5-ftrifluorometil)fenil]-3.4-dihidrokinazolin-4-iI ] sirćetne kiseline koji je napravljen prema Primeru 3 i

SI. 3 rendgenski difraktogram praha (XRD) 3.5-hiđrata kalcijumove soli (8-fluoro-2-[4-(3-metoksifenil)piperazin-l -il]-3-[2-metoksi-5-(trinuorometil)fenil]-3.4-dihiclrokinazolin-4-il J sirćetne kiseline koji je napravljen prema Primeru 4.

SI. 4 HPLC hromatogram natrijumove soli S(+)-{8-tluoro-2-[4-(3-metoksifenil)piperazin-I-il]-3-[2-metoksi-5-(trilluorometil)feni]|-3.4-dihidrokinazolin-4-ilJsirćetne kiseline. Si. 5 Analiza HPLC hromatograma prema SI. 4 u tabelarnom vidu.

[0066]Ako nije naznačeno drukčije, procenti dati u sledećim testovima i primer i ma su težinski procenti, delovi su težinske proporcije. Odnosi rastvarača. odnosi razblaženja i koncentracije tečnih rastvora se u svim slučajevima odnose na zapreminu.

Lista skraćenica:

/0067|

ACN acetonitril

API aktivni farmaceutski sastojak

APl-ES-pos. ionizacija pod atmosferskim pritiskom, elektrosprej, pozitivna (u MS) API-ES-neg. ionizacija pod atmosferskim pritiskom, elektrosprej. negativna (u MS)

pri bi. približno

CI, NHi hemijska jonizacija (amonijakom)

DBU i ,8-diazabiciklo|5.4.0|undek-7-en

DMAP 4-(dimetilamino)piridin

DMSO dimetil sulfoksid

ESTD eksterna standardizacija

h sat(i)

HPLC tečna hromatografija visokih performansi

conc. koncentrovan

min. minut

MS masena spektrometrija

MTBE metil /crc-butiletar

NMR spektroskopija nuklearnom magnetnom rezonancom

RTretenciono vreme (u HPLC)

VTS vakuumska sušnica

Opšti metodi HPLC:

10068] Metod 1 (HPLC): instrument: HP 1050 sa detekcijom na različitim talasnim dužinama: kolona: Phenomenex Prodigy ODS (3) 100 A. 150 mm x 3 mm. 3 pm: eluent A: (1.0 g KH2P04+ 1,0 ml H.iPOj)/l vode. eluent B: acetonitril; gradijent: 0 min 10% B. 25 min 80% B. 35 min 80% B; protok: 0.5 ml/min; temp.: 45°C: UV detekcija: 210 nm.

[0069] Metod 2 (HPLC): instrument: HP 1050 sa detekcijom na različitim talasnim dužinama: kolona: hiralni AD-H, 250 mm x 4.6 mm. 5 pm; eluent A: «-heptan + 0.2% dietilamin. eluent B: izopropanol + 0.2% dietilamin; gradijent: 0 min 12,5% B. 30 min 12,5% B: protok: I ml/min; temp.: 25°C; UV detekcija: 250 nm. (0070] Metod 3 (HPLC): instrument: 1IP 1050 sa detekcijom na različitim talasnim dužinama; kolona: hiralni AD-IL 250 mm x 4.6 mm. 5 um: eluent A: n-heptan t- 0.2% dietilamin. eluent B: izopropanol + 0.2% dietilamin; gradijent: 0 min 25% B, 15 min 25% B: protok: 1 ml/min; temp.: 30°C; UV detekcija: 250 nm.

Primeri

A) Pobijanje [ 8- fluoro- 244-( 3- metoksifenil) piperazin- l- il] 0-[ 2- metoksj- 5-( trif1uorometil) fenir|- 3. 4- dihidrokinazolin- 4- il i sirćetne kiseline

Primer 1A

[0071] N-(2-fluorofenil)-N'-[2-metoksi-5-(trifluorometil)fenil]urea

2-metoksi-5-trifluorometiIfenil izocijanat (78 kg) je istopljen na pribl. 35°C i rastvoren u acetonitrilu (ukupno pribl. 270 I), a zatim je dodat 2-Iluoroanilin (39,9 kg) i ispran je acetonitrilom (pribl. 25 I). Dobijeni bistar rastvor je mućkan 4 h na refiuksu. a zatim ohlađen do pribl. 75°C. Kad je ova temperatura dostignuta, rastvor je inokulisan semenom kristala željenog krajnjeg proizvoda (200 g), mešan je dodatnih 15 min., a zatim ohlađen do 0°C tokom 3 h. Dobijeni kristalni proizvod je izolovan centrifugiranjem, opran hladnim acetonitrilom (dvaput, korišćenjem pribl. 13 I), i osušen na 45°C u VTS pod strujom azota (pribl. 3.5 h). Ukupno 101.5kg N-( 2- JhH) rofenil)- N'-[ 2- mefofai- 5-( trijhu) rom^dobijeno ovako u čvrstom stanju, što je 85.9% teorijskog prinosa.

[0072] 'M NMR (300 MHz, d6-DMSO): 6 = 8.93 (s, 111). 8.84 (s. IH). 8.52 (d.V=2.3. 211). 7.55(d.2J=7,7. IH). 7.38-7.26 (m. 311). 7.22 (d.<2>J =8.5, IH), 4.00 (s, 3H) ppm;

MS (API-ES-pos.): m/z = 409 [{XI II)'. 100%)]

HPLC (Metod 1): R, = 22.4 i 30.6 min.

Primer 2A

[0073|Metil-(2Z)-3-[3-fluoro-2-(!|2-metaLsi-5-{trinuorometil)fenil |karbamoil)amino)-f enil jakri kit

A?-(2-fluorofenil)-A!'-[2-metoksi-5-(trifluorometil)fenil]urea (51 kg) je rastvoren u sirćetnoj kiselini (pribl. 430 1) u reaktoru u atmosferi azota. Metil akrilat (20.1 kg) je dodat u dobijeni rastvor i dobijena suspenzija je mućkana do dalje upotrebe. Sirćetna kiselina (950 1) je stavljena u drugi reaktor, pažljivo je dodat oleum (pirosumporna kiselina) (57 kg) i paladijum (U) acetat (7 kg) je rastvoren u smesi. Suspenzija obrazovana u prvom reaktoru je zatim dodavana smesi iz drugog reaktora tokom pribl. 2 h; reakciona smesa je produvana smesom 96% azota i 4% kiseonika i dobijena reakciona smesa je mućkana pribl. 18 h na sobnoj temperaturi. Deo sirćetne kiseline (pribl. 900 1) je zatim izbačen destilacijom; dodavana je voda (pribl. 500 I) preostaloj reakcionoj smesi tokom pribl. 1 h i dobijena suspenzija je mućkana 1 h. Dobijena materija sa krupnim česticama je odfiltrirana. oprana jedanput smesom sirćetne kiseline i vode (1:1) i dvaput vodom, i konačno osušena na pribl. 30 mbara i 50°C. Ukupno 44.8 kg) m>til-( 2Z)- 3-[ 3- jhioro- 2-(![ 2- metoksi- 5-( trijhtoromeli/ jjeniljkarhamoiljaminojfenilj akriluluje ovako dobijeno u vidu čvrste supslance, što je 65.0% teorijskog prinosa.

[0074|'H NMR (300 MHz, dfi-DMSO): 5 = 9.16 (s. 1I I). 8.84 (s. 1II). 8.45 (d. 1.7 Hz. 111). 7.73 (m. 211), 7.33 (m, 311). 7.22 (d. 8.6 Hz. IH). 6.70 (d. 16 Hz. IH). 3.99 (s. 3H). 3,71 (s, 3H) ppm;

MS (API-ES-pos.): m/z = 429.9 [(M+NH,)<+>|: 412.9 |(MHI)'|

HPLC: RT = 46.4 min.

[0075]Instrument: HP 1100 sa detekcijom na različitim talasnim dužinama; kolona: Phenomenex Prodigv ODS (3) 100 A. 150 mm x 3 mm. 3 pm; eluent A: (1,36 g KH2PO4+0,7 ml H3P04)/l vode. eluent B: acetonitril; gradijent: 0 min 20% B. 40 min 45% B. 50 min 80% B. 65 min 80% B: protok: 0.5 ml/min; temp.: 55°C: UV detekcija: 210 nm.

Primer 3 A

{0076| [8-fluoro-3-[2-n-ietoksi-5-(trinuorometil)feni] j-2-okso-1.2.3.4-tetrahidrokiniizolin-4-il j metil acetat

Jedinjenje iz Primera 2A (75 kg) je suspendovano u acetonu (1600 L) i dodat je DBU (5,7 kg). Dobijena suspenzija je zagrevana do refiuksa i mućkana 4 h na refiuksu. Dobijeni rastvor je ohlađen do temperature obloge od 55°C i pro filtri ran kroz diatomil. Deo rastvarača (pribl. 1125 1) je uklonjen destilacijom i ostatak je ohlađen do 0°C tokom 2 h. Dobijena čvrsta supstanca je odvojena centrifugiranjem. oprana dvaput hladnim acetonom (pribl. 15 1) i osušena preko noći na 45°C pod sniženim pritiskom u struji azota do konstantne mase. Ukupno 58.3 kg{ 8- flm) ro- 3-[ 2- metoksi- 5-{ trijhfor<mietil) femlJ- 2- ok. so- l , 2, 3, 4-tL'( rahiclrokinctzo! in- 4- illmetil acetataje ovako dobijeno u vidu čvrste supstance, što je 84,1% teorijskog prinosa.

HPLC (Metod 1): RT= 19.4 min.

Primer 4A

[0077] (2S.3S)-2.3-bisf(4-metirbenzoil)oksi| ćilibarna kiselina- {(4S)-8-fiuoro-2-[4-(3-metoksifenil)piperazin-l-iI|-3-[2-metoksi-5-(trifluorometil)fenil|-3.4-dihidrokinazolin-4-il)metil acetat (1:1 so) hlorinacija/aminacija/kristalizacija

Rastvor j8-fluoro-3-[2-metoksi-5-(trifiuorometil)fenil]-2-okso-l .2.3.4-tetrahidrokinazolin-4-il}metil acetata (Primer 3A. 129.2 kg) u hlorobenzenu (800 1) je zagrevan do refiuksa i azeotropno osušen. Fosforni oksihlorid (144 kg) je dodat i reakciona smesa je mućkana 3 h na refiuksu. Zatim su dodati DBU (95 kg) i hlorobenzen (45 I) i mućkano je dodatnih 9 h na refiuksu. Reakciona smesa je ohlađena do sobne temperature, hidrolizovana dodavanjem vode, razblažena hlorobenzenom (80 I) i neutralisana vodenim rastvorom amonijaka (25%). Faze su razdvojene, organska faza je oprana vodom i rastvarač je uklonjen destilacijom. Ostatak je rastvoren u dioksanu (170 I). 3-metoksifenilpiperazin (66 kg). DBU (52 kg) i dodatnih 90 I dioksana je dodato i reakciona smesa je zagrevana 4 h na refiuksu. Reakciona smesa je ohlađena do sobne temperature, dodat je etil acetat (1300 I). smesa je oprana jedanput vodom. 3 puta 0.2 N-nom HC1 i jedanput vodenim rastvorom NaCl i rastvarač je uklonjen destilacijom. Dobijeni ostatak je rastvoren u etil acetatu (800 1) i dodat u rastvor (2S,3.S>2.3-bis|(4-metilbenzoir)oksilćilibarne kiseline (121 kg) u etil acetatu (600 L). Dobijena smesa je mućkana pribl. 60 min. na sobnoj temperaturi, a zatim inokulisana (2S.3.S')-2.3-bis[(4-metilbenzoil)oksi]-ćilibarna kiselina- {(4S)-8-fluoro-2-[4-(3-metoksifenil)piperazin-l-ilj-3-|2-metoksi-5-(trifluorometil)-<f>enir|-3.4-dihidrokinazolin-4-il j metil acetatom kao seme kristala i mućkana je 3 dana na sobnoj temperaturi. Zatim je ohlađena do 0-5°C i mešana dodatna 3 h. Suspenzija je profiltrirana i preostala čvrsta supstanca je ponovo oprana u serijama etil acetatom. Ukupno oko 141 kg soli (izračunato kao težina suve) je ovako dobij eno u vidu čvrste supstance. što je oko 46.2% teorijskog prinosa, u tri stupnja (hlorinacija. aminacija i kristalizacija) u poredenju sa racematom.

[0078J 'H NMR (300 MI Iz, d(,-DMSO): 6 = 7.90 (d.:./ 7.8. 4H). 7.56(d. 2./=8.3. 111). 7.40 (d. V= 7.8. 4H), 7,28-7.05 (m. 4H). 6.91-6.86 (m, 2H), 6,45 (d. 2./ = 8,3, IH), 6.39-6,36 (m, 2H), 5,82 (s. 211). 4.94 (m, IH). 4,03 (q,2J=7.1. 2H). 3.83 (brs. 3H). 3.69 (s, 3H), 3.64 (s, 3H). 3.47-3.36 (m. 8H i voda. 211), 2.98-2.81 (m. 5H), 2.58-2,52 (m. IH). 2.41 (s. 6H). 1.99 (s.3H), 1,18 (t,2./= 7.2. 3H)ppm;

HPLC (Metod I): Rr=16.6 i 18.5 min.

Primer 5A

[0079|(2S,3,V)-2.3-bis[(4-metiIbenzoil)oksijćilibarna kiselina-{(4S)-8-fluoro-2-[4-{3-metoksifenil)piperazin-l-il]-3-[2-metoksi-5-(trifluorometil)fenil]-3.4-dihidrokinazolin-4-il] metil acetat (1:1 so) / rekristalizacija

(2S.3S)-2.3-bis|(4-metilbenzoil)oksi|ćilibarna kiselina - (S) !(4S)-8-tluoro-2-[4-(3-metoksifenil)piperazin-l -iI]-3-[2-metoksi-5-(trifluorometil)fenir)-3.4-dihidrokinazolin-4-il5

metil estar sirćetne kiseline (1:1 so) (141 kg. izračunato kao težina suvog) je suspendovana u etil acetatu (1400 1) i rastvorena zagrevanjem do refiuksa (77°C). Rastvor je profiltriran i polako ohlađen do sobne temperature, što je dovelo do spontane kristalizacije. Suspenzija je mućkana 16 h na sobnoj temperaturi, a zatim ohlađena do 0-5°C i mućkana dodatna 3 h. Suspenzija je profiltrirana i preostala čvrsta supstanca je ponovo oprana hladnim etil acetatom. Kristali su sušeni 16 h na vakuumu na oko 40°C. Ukupno 131.2 kg soli je dobijeno u vidu čvrste supstance, što je 93.0% teorijskog prinosa.

HPLC (Metod i): R, = 16.9 i 18.8 min.;

HPLC (Metod 3): 99.9% e.e.

Primer 6A

|0080|(S)-|8-nuoro-2-[4-(3-nKnoksifenil)piperazin-l-il]-3-(2-metoksi-54ritliHirometilfenil)-3.4-dihidrokinazolin-4-il Jsirćetna kiselina

Smesa (2S.3S)-2.3-bis[(4-metilbenzoil)oksi]ćilibarna kiselina-! (4S)-8-nuoro-2-[4-(3-metoksifenil)piperazin-l-il|-3-|2-metoksi-5-(triflii(Kometil)fenil]-3.4-dihidrokinazolin-4-ir} metil estra sirćetne kiseline (1:1 so) (30.8 kg), natrijum bikarbonata (16,4 kg) i vode (315 1) je pomešana sa MTBE (160 i). Faze su razdvojene i organska faza je tretirana sa 35 1 približno sedmoprocentnim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata. Faze su razdvojene i 125 1 približno četvoroprocentnog vodenog rastvora natrijum hidroksida je dodato u organsku fazu. Reakciona smesa je zagrevana do refiuksa, rastvor je destilovan do suva i sadržaj reaktora je zatim mućkan dodatnih 5 h na 55 - 60 °C. MTBF. (160 1) i voda (65 I) su zatim dodati reakcionoj smesi na pribl. 22°C i mešani. Faze su razdvojene i organska faza je ekstrahovana približno šestoprocentnim vodenim rastvorom natrijum hlorida (30 1). Kombinovane vodene faze su mešane sa vodom (25 1) i MTBE (160 I ) i pFl vrednost je podešena na pribl. 6.5 pribl.

1 N hlorovodoničnom kiselinom. Organska faza je odvojena, rastvarač je polako destilovan do suva i ostatak je rastvoren u acetonu (pribl. 75 1). Rastvarač je zamenjen acetonom (6 destilacija, svaka sa pribl. 130 1). Konačan proizvod je zatim precipitiran dodavanjem vode, izolovan centrifugiranjem i osušen u sušaču u vakuumu. Ukupno 16.5 kg( S)-{ 8- fluoro- 2-[ 4-( 3- mek) ksiJeiul) piperazin- l- i!/- 3-( 2- mel( iksi- 5- triflu() nwiL'! i! fe

U jsirćetne kiselineje dobijeno na ovaj način u vidu amorfne čvrste supstance. što je 96.4% teorijskog prinosa.

|00811'H NMR (300 MFIz. d6-DMSO): 5 = 7.53 (d. \/= 8.4. IH). 7.41 (brs, 111). 7.22(d. 2J =8.5, IH). 7.09-7.01 (m. 2H), 6.86 (m. 211). 6.45 (dd,2J =8.2.\ J =1.8, IH). 6.39-6.34 (m, 211). 4.87 (t. 2J= 7.3, 111). 3.79 (brs. 311). 3.68 (s. 3H). 3,50-3.38 (m. 4H). 2.96-2,75 (m, 5H), 2,45-2,40 (m, 1H) ppm;

MS(API-ES-neg.):m// = 571 [(M-H). 100%]:

HPLC (Metod I): R] = 15.1 min;

HPLC (Metod 2): 99,8% e.e.; Pd (ICP): <1 ppm.

B) Primerni oblici

Eksperimenti sa kristalizacijom

|0082| Izvedeni su eksperimenti sa kristalizacijom da bi se otkrila pogodna kristalna so [8-nuoro-2-[4-(3-nietoksifenil)pipera7jn-l-il]-3-[2-metoksi-5-(trilfuorometil)fenil]-3.4-dihidrokinazolin-4-il! sirćetne kiseline, za kosele soli, kao i za bazne. Eksperimenti sa kristalizacijom su rađeni počevši od (lS>J8-fluoro-2-[4-(3-metoksifenil)piperazin-l-il]-3-f2-metoksi-5-(trifluorometil)fenil]-3.4-dihidrokinazolin-4-il) sirćetne kiseline i odgovarajuće kiseline ili baze. bilo suspendovanjem u odgovarajućem datom rastvaraču nedelju dana na 20°C, bilo kristalizacijom hlađenjem/uparavanjem rastvora koji je 4 sata držan na 50°C. a zatim sporim hlađenjem do 20°C brzinom od 3°C/sat.

[0083] Rezultati eksperimenata sa kristalizacijom sa kiselinama ili bazama su dati u Tabelama 1 i 2 niže, gde skraćenica AP1 stoji za (.S>{8-fluoro-2-[4-(3-metoksifenil)piperazin-l-il]-3-[2-metoksi-5-(lrifluorometil)fenil]-3.4-dihidrokinazolin-4-il j sirćetnu kiselinu.

[0084]"API" je akronim za "aktivan farmaceutski sastojak" (od engl. active farmaceutski ingredient).

[0085]Ono što je važno u ovim eksperimentima je da je. u opšlem slučaju, bilo izuzetno teško napraviti kristalne kisele soli (S)-{841uoro-2-[4-(3-meloksifenil)pipcrazin4-il |-3-|2-metoksi-5-(lrinuorometil)feniI]-3.4-dihidrokinazolin-4-il ] sirćetne kiseline, naročito je važno da je kristalizacija uz upotrebu kiselih jona suprotnog naelektrisanja potpun promašaj.

(0086]Zahvaljujući činjenici da on kristališe samo u organskim rastvaračima kao što su tetrahidrofuran i acetonitril. koji mogu da budu izvor neželjenih nečistoća. 2-amino-2-metil-1.3-propandiol so (S)- [8-fluoro-2-[4-(3-metoksifenil)piperazin-l -i I |-3-|2-metoksi-5-(trifluorometil)fenir]-3.4-dihidrokinazolin-4-il! sirćetne kiseline nije pogodna za dalje farmaceutsko razvi janje.

[0087|S obzirom na pozitivne rezultate dobijene sa natrijum hidroksidom. sledeći eksperimenti sa kristalizacijom su vršeni uz korišcenje hidroksida alkalnih metala i/ili zemnoalkalnih metala u uslovima kristalizacije sličnim onima primenjenim na natrijumovu so. Nađeno je da još kristalnih soli može da se dobije samo kad se koristi kalcijum hidroksid.

Primer 1

|0088|Mononatrijumova so (S)-{8-fluoro-2-[4-(3-metoksifenil)piperazin-l-il|-3-[2-metoksi-5-(trifluorometil)feniI]-3,4-dihidrokinazolin-4-i 1) sirćetne kiseline: 333,1 g (S)-{8-fluoro-2-[4-(3-metoksifenil)piperazin-l-il]-3-[2-metoksi-5-(trinuorometil)fenil]-3,4-dihidrokinazolin-4-il | sirćetne kiseline (Primer 6A) je rastvoreno u 1300 ml smese ctanola i diizopropil etra (1:1) u erlenmajeru sa tri grla od 2000 ml. 21.9 g (546.84 mmol) NaOH u čvrstom stanju je dođato u rastvor. Smesa je zagrevana 25 min. do unutrašnje temperature od 50 °C i to je dalo bistar rastvor narandžaste boje. Ovako dobijen rastvor je mešan 3 sata na ovoj temperaturi i retka suspenzija se formirala već posle 1 sat. Reakciona smesa je zatim hlađena 10 sati pri brzini hlađenja od 3 °C/sat do unutrašnje temperature od 20 °C, a zatim mešana još 5 sati na ovoj temperaturi. Ukupna zapremina reakcione smese je smanjena na vakuumu do približno 750 ml i ovako dobijena suspenzija je mešana na 20 °C 2 sata. Dalje, 250 ml diizopropil etra je dodavano u dobijenu reakcionu smesti tokom perioda od 10 min. i smesa je mešana dodatna 2 sata. Kristalni proizvod koji je dobijen je uklonjen isisavanjem na vakuumu, opran 2 x. svaki put sa po 250 ml diizopropil etra i osušen u vakuumskoj sušnici 20 sati na 20 °C i 160 mbar. Kristalna čvrsta supstanca dobijena na ovaj način je zatim sušena 10 min. na 90 °C u 1R sušnici, a zatim ponovo još 16 sati na 60 °C u vakuumskoj sušnici. Na ovaj način je dobijeno ukupno 274.4 g (86% teorijskog prinosa) željene kristalne soli natrijuma.

Primer 2

10089)Proizvodnja 3-hidrata mononatrij umove soli (S)-!<S-l1uoro-2-|4-(3-metoksifenil)piperazin-l -il]-3-[2-metoksi-5-(lrifluorometil)fcnil }-3.4-dihidrokinazolin-4-ilJsirćetne kiseline: Oko 300 mg natrijumove soli iz Primera l je suspendovano u 1 ml etanola (koji sadrži 4% vode) i mućkan nedelju dana na 25 °C. Dobijena čvrsta supstanca je odfiltrirana i ostatak je osušen na sobnoj temperaturi i sobnoj vlažnosti. Dobijeni ostatak odgovara naslovnom jedinjenju dobijen u vidu trihidrata.[0090)Dobijeni ostatak je ispitan rendgenskom difraktometrijom. Dobijeni difraktogram je prikazan na SI. I.|0091|Rendgenski difraktogram je snimljen pomoću XRD transmisionog/refleksionog difraktometra X'Pert PRO (PANalvticai) na sobnoj temperaturi (radijacija: bakar. Kal. talasna dužina: 1.5406 A). Nije bilo pripreme uzorka.|0092)Liste pikova soli iz Primera 2. kao i soli iz Primera 3 i 4 su prikazane u sledećoj Tabeli ->

Primer 3

[0093]Proizvodnja 2.5 hidrata kalcijumove soli f8-fluoro-2-[4-(3-metoksifenil)piperazin-l-il]-3-[2-metoksi-5-(trifluorometil)fenil]-3,4-dihidrokinazolin-4-il jsirćetne kiseline: 10 g (S)-[8-fluoro-2-[4-{3-metoksifenil)piperazin-l-il]-3-[2-metoksi-5-(trif1uorometil)fenil]-3,4-dihidrokinazolin-4-iljsirćetne kiseline (Primer 6A) je rastvoreno u 45 ml etanola u erlenmajeru sa tri grla od 50 ml i u dobijeni rastvor je dodato 1.294 g Ca(OH)?u čvrstom stanju u vidu praha. Dobijena suspenzija je zagrevana 25 min. do 50 °C. a zatim je mešana 3 sata na ovoj temperaturi. 62,6 g vode je dodato u suspenziju dobijenu na ovaj način i dobijeni rastvor je ohlađen do 0 °C. Prethodno napravljena semena kristala su dodata u ovako dobijen rastvor i suspenzija, koja sadrži delimično uljni proizvod, je zagrevana do sobne temperature i ostavljena da stoji na sobnoj temperaturi 72 sata. Ovako dobijena suspenzija je ponovo ohlađena do 0 °C, a zatim mešana 2 h na ovoj temperaturi. Kristalni proizvod koji je dobijen je odfiltriran i opran 2x. svaki put sa po 15 ml 1:1 smese etanola i vode. a zatim osušen na 50 °C i 160 mbar u vakuumskoj sušnici. Ukupno 7,4 g (68,5% teorijskog prinosa) soli je dobijeno kao kristalna čvrsta supstanca.

[0094]Koristeći kristalinu čvrstu supstancu dobijenu u Primeru 3, snimljen je rendgenski difraktogram praha (XRD). koji je prikazan na Si. 2, pod istim uslovima kao oni pomenuti u Primeru 2.

Primer 4

[0095]3,5-hidrat kalcijumove soli (S)-[8-tluoro-2-[4-(3-metoksifenil)piperazin-l-il|-3-[2-metoksi-5-(trifluorometil)feniI]-3,4-dihidrokinazolin-4-ilJsirćetne kiseline

[0096]Oko 100 mg soli dobijene u Primeru 3 je suspendovano u 1 ml etanola i vode (1:1) i dobijena suspenzija je mućkana 1 nedelju na 25 °C. Dobijena kristalna čvrsta supstanca je odfiltrirana i dobijeni ostatak je osušen na sobnoj temperaturi i sobnoj vlažnosti. Dobijeni ostatak odgovara 3.5-hidratu kalcijumove soli (S)-[8-tluoro-2-f4-(3-metoksifenil)piperazin-l-il]-3-f2-metoksi-5-(trifluorometil)fenill-3.4-dihidrokinazolin-4-ilJsirćetne kiseline.

[0097]Koristeći kristalinu čvrstu supstancu dobijenu u Primeru 4. snimljen je rendgenski difraktogram praha (XRD). koji je prikazan na SI. 3. pod istimlistovima kao oni pomenuti u Primeru 2.

C) Merenja rastvorljivosti

[0098JDa bi se odredila rastvorijivost. zasićen rastvor soli iz Primera 2 je pripremljen u fosfatnom puferu na pII 7.0 i mućkan na sobnoj temperaturi 2 sata. Dobijene suspenzije su profiltrirane pomoću špric-filtera (prečnik pora 0.45 pm) i posle razblaživanja. bistri rastvori su mereni pomoću HPLC. Čist fosfatni pufer je korišćen kao prazan uzorak. Rastvorljivost je izračunata u odnosu na apsorpciju referentnog rastvora amorfnog cviterjona u fosfatnom puferu. Rezultati merenja su prikazani niže u Tabeli 4.

D) praćena fiziiološke efikasnosti

[0099JIn vi tro efekti sastava prema pronalasku na replikaciju HCMV (humani citomegalovirus) cse mogu videti u sledećem antivirusnom eseju: test na smanjenje fluorescencije HCMV.

[0100]Testirani sastavi su korišćeni kao 50-millimolarni (mM) rastvori u dimetil sulfoksidu (DMSO). Ganciclovir®. Foscarnet® ili Ciđofbvir® se mogu koristiti kao referentni sastavi. Jedan dan pre početka testa. 1.5 x 104 humanih fibroblasta sa prepucijuma (NHDF ćelijeVležišle su zasejane u 200 ul medijuma za ćelijske kulture u ležišta B2 — Gl 1 ploče sa

96 ležišta (crna sa providnim dnom). Ležišta duž ivica svake ploče sa 96 ležišta su napunjena sa 200 ul medijuma samo da bi se sprečili efekti ivica. Na dan testiranja, medijum za ćelijske kulture u ležištima B2 - Gl 1 svake ploče sa 96 ležišta je isisan i zamenje sa 100 ul vi rosne suspenzije (multiplicitet infekcije (MOI): 0.1 - 0.2). Virus koji je korišćen je rekombinantni HCMV. koji ima ugrađenu ekspresionu kasetu za zeleni fluorescentni protein (GFP) u virusni genom (HCMV AD 169 RV-HG [E. M. Borst. K. Vv'agner. A. Binz. B. Sodeik. and M. Messerle, 2008. J.Virol. 82:2065-2078.]). Posle inkubacionog vremena od 2 h na 37 °C i 5% COi. virusni inokulat je uklonjen vakuumom sukcionim uređajem i sva ležišta, sa izuzetkom ležišta u koloni 3. su napunjena sa 200 pl medijuma za ćelijske kulture. Kolona 2 nije dalje tretirana i služi kao virusna kontrola. Ležišta u koloni 3 su napunjena sa po 300 pl testirane supstance (razblažene u medij umu za ćelijske kulture) za duplikate analiza. Koncentracija odgovarajuće antivirusne supstance u koloni 3 je bila - 27 puta veća od koncentracije odgovarajuće očekivane vrednosti EC50. Testirana supstanca u koloni 3 je razblažena u 8 koraka do koncentracije od 1:3 preko ploče sa 96 ležišta tako što je po 100 pL iz svake kolone prebačeno u kolonu desno od nje. gde je pomešano sa po 200 pl medijuma za ćelijske kulture koji je već bio tamo. Na ovaj način, tri antivirusne supstance su testirane u duplikatu. Ploče su inkubirane 7 dana na 37 °C i 5% C(X Posle toga. sva ležišta na ploči su oprana 3 puta PBS-om (fosfatno puferisan slani rastvor) i napunjena sa 50 pl PBS. Intenzitet GFP svakog ležišta u ploči sa 96 ležišta je zatim određeno pomoću skenera fluorescencije (FluoBox; Bayer Technologv Services GmbH; za filtriranje: GFP. Ex 480 nm. Em 520 nm). Ovako dobijene merene vrednosti se mogu koristiti za određivanje EC50 anti-HCMV supstance: F(\; (GFP-RA) = koncentracija supstance u uM koja smanjuje GFP fluorescenciju za 50% u poređenju sa netretiranom virusnom kontrolom.|01011Reprezentativni podaci o in vitro efikasnosti sastava prema ovom pronalasku are reprodukovani u Tabeli 5:

E) Farmaceutski sastavi

[0102]Jedinjenje prema pronalasku se može pretvoriti u farmaceutske sastave na sledeći način:

Intravenozni rastvor:

[0103]Da bi se proizveo prvi matični rastvor. 1.0 g soli iz Primera 2 je rastvoren u 10 ml vode u svrhu injektiranja i so je mućkana dok nije dobijen bistar rastvor. Ovaj rastvor je polako dodat u 20 mM rastvor fosfatnog pufera da bi se dobili rastvori za intravenoznu administraciju sa koncentracijama od 5 mg/ml ili l() mg/ml. pH vrednosti odgovarajućih rastvora su podešeni na pribl. pH 7.6 (5 mg/ml) i pribl. pl l 7.7 (10 mg/ml). Konačno, dobijeni rastvori su sterilno profiltrirani i sipani u odgovarajuće sterilisane posude. Posude su zapečaćene zatvaračima za infuziju i čvrstim zatvaračima.

|0104|Po potrebi, rastvori napravljeni na ovaj način se mogu liotllizovati za skladištenje pre nego što se posude zapečate i mogu se rekonstituisati kasnije da bi se upotrebili.

Tableta:

101051Da bi se napravila čvrsta formulacija za oralno davanje, so (50%) iz Primera 2 se proseje i pomeša sa kalcijum hidrogen fosfatom dihidratom (48%), kroskarmelozom- natrijum (5%). polivinilpirolidonom (5%) i koloidnim silica gelom (1%). Dalje se dodaje prosejan magnezijum stearat (1%). Ova smesa za presovanje se zatim direktno koristi za pravljenje

tableta.

F) Čistoća

[0106]Natrijumova so S(+)-{8-flLioro-2-[4-(3-metoksifeniI)piperazin-l-il]-3-]2-inetoksi-5-(trifluoromelil)fenil]-3,4-dihidrokinazolin-4-ilJ sirćetne kiseline:

Procedura

[0107]313.1 g S(+)-{84luoro-2-[4-(3-metoksifenil)piperazin-l-ill-3-[2-metoksi-5-(trifluorometil)fenil]-3,4-dihidrokinazolin-4-ilJsirćetne kiseline je stavljeno u erlenmajer sa šlifom od 2000 ml. Zatim je dodato 1300 ml smese EtOFl (denaturisan) / diizopropil etar (1:1), kao i 21.9 g peleta NaOI l. Kontrolisanjem unutrašnje temperature, smesa je zagrevana 25 minuta do unutrašnje temperature od 50 °C (Trn = 51<3>C). Pelete NaOFl se rastvore dajući bistar rastvor narandžaste boje. Smesa je zatim mešana tri sata i dobijena je suspenzija. Tokom sledećih 10 sati. smesa je hlađena pri brzini hlađenja od 3 °C na sat do unutrašnje temperature od pribl. 20 °C, a zatim mešana još 5 sati na ovoj temperaturi. Ovo je dalo gušću suspenziju ukupne zapremine od 1500 ml u erlenmajer sa šlifom. a 400 ml od navedene ukupne zapremine je zapremina kristala. Ukupna zapremina je smanjena na vakuumu do pribl. 750 ml na 110 do 90 mbar; unutrašnja temperatura 17-25 °C, temperatura obloge 35-50 °C. destilat 273 g. Ovo je zatim mešano oko dva sata. 250 ml diizopropil etra je dodavano tokom perioda od 10 minuta, a zatim je mešano dva sata. Proizvod dobijen na ovaj način je izolovan i opran dva puta. svaki put sa po 250 ml diizopropil etra: mokar prinos: 284.8 g; M/W:805.4 g. Dobijeni proizvod je osušen u vakuumskoj sušnici 20 sati na 50 °C sa dodalim azotom na pribl. 160 mbar; konačna težina 279.4 g. Ovaj proizvod je podvrgnut siedećoj analizi:

Analiza

Određivanje sadržaja natrij uma

[0108]Obično se HNO3doda u višku u 200 mg testirane supstance (natrijumova so S(+)-{8-fluoro-2-[4-(3-metoksifenil)piperazin-l-il]-3-[2-metoksi-5-(trilfuorometil)fenil]-3.4-dihidrokinazolin-4-il]sirćetne kiseline) i radi se mikrotalasno potpomognuta digestija pod pritiskom (prema metodu 2011-0606601 Currenta. Leverkusen). Rastvor se ispituje na sadržaj natrijuma primenom plamene atomske apsorpcione spektroskopije (prema metodu 2011-0267201 Currenta. Leverkusen).

Rezultat: natrijumova so S(+)-{8-fTuoro-2-[4-(3-metoksifenil)piperazin-l-il]-3-[2-meioksi-5-(trifluorometil)fenil]-3.4-dihidrokinazolin-4-il}sirćetne kiseline: 3,5 t.% natrijuma

Modifikacija X zraka: kristal

Određivanje rezidualnog rastvarača: 0.03 t.% diizopropil etra

HPLC analiza

|0109J Ispitivanje sledećih specifičnih i nespecifičnih kontaminacija natrijumove soli S(+)- j8-fiuoro-2-[4-(3-metoksifenil)piperazin-l-il]-3-[2-nietoksi-5-(trifluorometiI)fenil]-3.4-dihidrokinazolin-4-il Jsirćetne kiseline:

• kinazolil piperazin

• Di-p-toluoil vinska kiselina

• kinazolil dipiperazin

• kinazolin etil estar

• pojedinačni nespecifični kontaminanti

pomoću tečne luomalografije pod visokim pritiskom (HPLC);

metod reverzne faze:

Detekcija: UV-opseg;

Analiza: metod površina u procentima sa faktorima korekcije površina

Oprema

[0110] 1. Tečni hromatograf pod visokim pritiskom sa termostatski kontrolisanom pećnicom-kolonom. UV detektorom i sistemom za procenti podataka

2. metalna kolona od nerđajućeg čelika

Reaaensi

[0111]

1. acetonitril. za HPLC

2. kalijum dihidrogen fosfat, p.a.

3. o-fosfoma kiselina jačine 85%. p.a.

testirani rastvor

[0112JUzorak od pribl. 22 mg natrijumove soli S(+)-{8-fluoro-2-[4-(3-metoksifenil)piperazin-l -il]-3-f2-metoksi-5-(trifluoroinetil)fenil]-3,4-dihidrokinazolin-4-il}sirćetne kiseline; precizno izmeren. rastvoren u acetonitrilu, napravljen do 50.0 ml.

Kalibracioni rastvor

J0113]Referentni standard od pribl. 22 mg (S(+)-[8-nuoro-2-[4-f3-metoksifenil)piperazin-l-il]-3-[2-metoksi-5-(tritluorometil)fenil]-3.4-dihidrokinazolin-4-il jsirćetne kiseline, precizno izmeren. rastvoren u acetonitrilu. napravljen do 50.0 ml.

Rastvor za poredenje

(0114]Pripremljen je rastvor za poredenje. sličan kalibracionom rastvoru. On sadrži, kao dodatak, malu količinu organskih kontaminanala (kinazolil piperazin. di-p-toluoil vinska kiselina, kinazolil dipiperazin. kinazolin etil estar).

Uslovi HPLC

[0115]Navedeni uslovi su predviđeni kao smcrnice za vrednosti i, ako je potrebno, da bi se postigla optimalna razdvajanja, oni mogu biti prilagođeni tehničkim mogućnostima hromatografa i osobinama odgovarajuće kolone.

Eluenti

[0116)

A. Rastvaranje 1.36 g kalijum dihidrogen fosfata i 0.7 ml 85%-ne o-fosforne u vodi i podešavanje do 1000.0 ml B. Acetonitril

Brzina protoka

[0U7| 0.5 ml/min

Temperatura pećnice- kolone

[0118)55 °C

Detekcija

[0119]

Zapremina ubrizgavanja

[0120]3 ul

V reme ura vnotežavan i a

101211 10 min (pod početnim uslovima)

Gradijent

10122]

vreme trajanja hromatografske analize

65 min

Preciznost

[0123)Relativna standardna devijacija površina dobijenih iz 6 ubrizgavanja referentnog standarda mora da bude <L5 %.

Procedura

[0124]I Iromatografisati testirani rastvor, kalibracioni rastvor i rastvor za poredenje pod datim uslovima.

Procena

[0125]Elektronsko integraljenje površine pikova

Izračunavanje sadržaja organskih nečistoća (I IPLC)

[0126]Metod površina u procentima sa faktorima korekcije površina (RF). ako ih ima. Rezultat

|0127|Natrijumova so S(+)- (8-nuoro-2-[4-(3-metoksifenil)piperazin-l -il|-3-[2-metoksi-5-(trinuorometil)fenir|-3.4-dihidrokinazolin-4-il } sirćetne kiseline:

• 99,9 površinskih procenata

• 0.0 površinskih procenata za poznate organske kontaminante (nečistoće)

• 0,07 površinskih procenata za najveće nespecifične kontaminante

• 0,0907 površinskih procenata za najveće pojedinačne nespecifične sekundarne komponente

• 88.0 t.%

[0128)Za HPLC hromatogram i njegovu analizu videti Slike 4 i 5.

Claims (16)

1. So |8-fluoro-2-[4-{3MrietoksifeniI)piperazii>l-il|-3-[2-nKnoksi-5-(tnnuoromctil) fcnil]-3,4-dihidrokinazolin-4-il]sirćctnc kiseline ili njen solvat. odabrana iz grupe koja sadrži kristalne natrijumove soli {8-fluoro-2-[4-(3-metoksirenil)piperazin-l -il]-3-[2-metoksi-5-(trifluorometil)feni]]-3.4-dihidrokinazolin-4-il J sirćetne kiseline, kristalne kalcijumove soli {8-fluoro-2-[4-(3-metoksifenil)piperazin4-il]-342-metoksi-5-(triftuorometil)fenill-3,4-dihidrokinazolin-4-il jsirćetne kiseline i njihove solvate.

2. So prema Zahtevu l. koja je monokalcijumova so [ 8 - ti uoro-2 - f 4-( 3 - metoksifenil)piperazin-l-il]-3-[2-mekiksi-5-(lrinuoronKtil)fenil|-3.4-dihidrokinazolin-4-il}sirćetne kiseline ili njen solvat.

3. So prema Zahtevu 2. koja je 2.5-hidrat monokalcijumove soli !8-nuoro-2-[4-{3-metoksifenil)piperazin-l-il]-3-f2-metoksi-5--(tnfluorometil)fenil|-3.4-dihidrokinazolin-4-iI Jsirćetne kiseline.

4. So prema Zahtevu 3. koja se odlikuje time što pokazuje karakteristične pikove na oko 6.1, 9,2 i 15,5 stepeni 2teta u rendgenskom difraktogramu praha (XRD).

5. So prema Zahtevu 2, koja je 3.5-hidrat monokalcijumove soli {8-fluoro-2-[4-(3-metoksifenil)pipeiazin-l-il]-3-[2-metoksi-5-(trifluorometil)fenil]-3.4-dihidrokinazolin-4-ilJsirćetne kiseline.

6. So prema Zahtevu 5. koja se odlikuje time što pokazuje karakteristične pikove na oko 6.2, 12,4 and 22,4 stepeni 2teta u rendgenskom difraktogramu praha (XRD).

7. So prema Zahtevu 1. koja je mononatrijumova so !8-fluoro-2-|4-{3-metoksifenil)piperazin-l-il]-3-[2-metoksi-5-(trifluorometil)fetiilJ-3.4-dihidrokinazolin-4-il J sirćetne kiseline ili njen solvat.

8. So prema Zahtevu 7. koja je 3-hidrat mononatrijumove soli (8-fluoro-2-|4-(3-metoksifenil)piperazin-l-il]-3-[2-meloksi-5-(trifluorometil)fenil j-3.4-dihidrokinazolin-4-ilJsirćetne kiseline.

9. So prema Zahtevu 8, koja se odlikuje time što pokazuje karakteristične pikove na oko 6.2, 20,9 i 22,4 stepeni 2teta u rendgenskom difraktogramu praha (XRD).

10. Metod za proizvodnju soli prema bilo kom od Zahteva 1 do 7. koji ima sledeće korake: a. ) rastvaranje (8 - H Lioro-2-[4-( 3-me tti k s i Ibn i I )p i pe raži n -1 - i 11 - 3 -12 - m el oks i - 5-( t ii - nuorometir)ieiiil]-3.4-dihidrokinazoiin-4-il | sirćetne kiseline ili njenog solvata u smesi vode i bar jednog (C1-C4) dialkil etra i bar jednog (C1-C4) alkohola, ako je potrebno, uz zagrevanje. b. ) dodavanje NaOH ili Ca(OH)2u rastvor dobijen u koraku a.). c. ) uklanjanje dela rastvarača iz rastvora dobijenog u koraku b.) i inokulacija. ako je potrebno, pogodnim semenom kristala, da bi se inicirala kristalizacija soli ili solvata soli:d. ) odvajanje iskristalisane soli ili njenog solvata dobijenog u koraku c.): e. ) ako je potrebno, mešanje soli ili solvata dobijenog u koraku d.) u pogodnom rastvaraču, poželjno u smesi vode i bar jednog (C'i-O) alkohola da bi se dobio željeni solvat i f) sušenje soli ili solvata dobijenog u koraku d.) ili e.).

11. So prema bilo kom od Zahteva 1 do 9 za upotrebu u metodu lečenja i/ili profilakse oboljenja, naročito virusnih infekcija, poželjno humanih citomegalovirusnih (HCMV) infekcija ili infekcija izazvanih nekim drugim predstavnikom grupeherpes viridae.

12. Lek koji sadrži so prema bilo kom od Zahteva 1 do 9 u kombinaciji sa bar jednim farmaceutski prihvatljivim ekscipijenlom.

13. Lek prema Zahtevu 12 za upotrebu u metodu lečenja i/i I i profilakse virusnih infekcija, poželjno humanih citomegalovirusnih (HCMV) infekcija ili infekcija izazvanih nekim drugim predstavnikom grupeherpes viridae.

14. So prema bilo kom od Zahteva I do 9 za upotrebu kao lek. u metodu lečenja i/ili profilakse oboljenja, naročito virusnih infekcija, poželjno humanih citomegalovirusnih (HCMV) infekcija ili infekcija izazvanih nekim drugim predstavnikom grupeherpes viridae.

15. Upotreba soli prema bilo kom od Zahteva I do 9 za proizvodnju leka za lečenje i/ili profilaksu virusnih infekcija, poželjno humanih citomegalovirusnih (11CMV) infekcija ili infekcija izazvanih nekim drugim članom grupeherpes viridae.

16. So prema Zahtevima I do 9 ili lek prema Zahtevu 12 ili 13 za upotrebu u borbi protiv virusnih infekcija, poželjno humanih citomegalovirusnih (HCMV) infekcija ili infekcija izazvanih nekim drugim predstavnikom grupeherpes viridae,u čoveku i životinji kome ili kojoj je potrebno takvo lečenje.