RS55061B1

RS55061B1 - Novi derivati amino-pirolina i njihova upotreba u prevenciji i/ili lečenju metaboličkog sindroma

Info

Publication number: RS55061B1
Application number: RS20160689A
Authority: RS
Inventors: Pascal Bousquet; Jean Daniel Ehrhardt; Lyne Fellmann; Vincent Gasparik; Hugues Greney; Mohamed Hadjeri; André Mann; Nathalie Niederhoffer; Stephan Schann
Original assignee: Univ Strasbourg
Priority date: 2011-04-19
Filing date: 2012-04-17
Publication date: 2016-12-30
Also published as: CN103619814B; JP5986625B2; SI2699545T1; ES2588059T3; PT2699545T; HUE030432T2; EP2699545B1; DK2699545T3; CY1118117T1; US20140045910A1; LT2699545T; US9303019B2; CA2833339C; JP2014514316A; SMT201600284B; CA2833339A1; HRP20161024T1; PL2699545T3; CN103619814A; WO2012143660A1

Description

[0001]Ovaj pronalazak odnosi se na nove derivate amino-pirolina i njihovu upotrebu u prevenciji i/ili lečenju metaboličkog sindroma.

[0002]Metabolički sindrom, koji se takođe naziva sindrom X ili dismetabolički sindrom, sastoji se od niza kardiovaskularnih simptoma, koji uključuju visok arterijski pritisak i metaboličke simptome (hiperholesterolemija, insulinska rezistencija, glukozna intolerancija, abdominalna gojaznost) (Reaven, G,M. 1988. Banting lecture 1988; Role of insulin resistance in human disease. Diabetes 37:1595-1607). Jednoglasno je prepoznato da kombinacija svih ovih simptoma čini glavni kardiovaskularni i metabolički faktor rizika. Komplikacije ovog metaboličkog sindroma uključuju aterosklerozu, koronarnu arterijsku bolest, bubrežnu insuficijenciju, srčanu insuficijenciju, dijabetes, gojaznost. Rasprostranjenost ovog faktora rizika i dalje varira u zemljama. Ipak, postoji tendencija da se pojavi bilo gde u svetu kod oko 30% od ukupne populacije. Njegov ubrzani razvoj je veoma važan i predstavlja glavne javne zdravstvene probleme.

[0003]Sadašnja terapija metaboličkog sindroma sastoji se od medicinskih kombinacija sastavljenih od lekova tako da svaki deluje na komponentu metaboličkog sindroma koji obuhvata između 3 i 6 elemenata uključenih u njemu: antihipertenzivnih lekova (ponekad nekoliko povezanih) u kombinaciji sa hipoglikemijskim lekovima (ponekad nekoliko povezanih) u kombinaciji sa lekovima za snižavanje lipida (ponekad više učesnika).

[0004]Ove kombinacije stvaraju mnoge neželjene efekte a neki, kao što su statini, su veoma skupi.

[0005]lako je nekoliko ispitivanja pokazalo daje metabolički sindrom povezan sa simpatičkom hiperaktivnošću merenoj povećanjem Mišićne Simpatičke Nervne Aktivnosti (ANSM), čak i u odsustvu visokog arterijskog pritiska (Huggett R. J.; Burns J.; Mackintosh A.F.; Mary D.A.S.G. Svmpathetic Neural Activation in nondiabetic Metabolic Svndrome and Its Further Augmentation by Hvpertension Hvpertension, 2004, 44: 847-852), trenutno nijedan dostupan lek, koji može da inhibira simpatički sistem, se ne predlaže za lečenje metaboličkog sindroma i njegovih posledica.

[0006]Imidazolinski receptori (IR) uključeni su u nekoliko bioloških regulatornih sistema. Glavna je regulacija, simpatičkim nervnim sistemom, arterijskog pritiska (Bousquet, P,; Feldman, J. Drugs Acting on Imidazolin Receptors: a Revievv of Their Pharmacologv, their Use in Blood Preassure Control and their Potential Interest in cardioprotection. Drugs 1999, 58, 799-812; Head, G. A,; Mavorov, D. N. Imidazoline Receptors, Novel Agents and Therapeutic Potential. Cardiovasc. Hematol. Agents Med. Chem. 2006,4, 17-32).

[0007]Oni su takođe uključeni u druge patofiziološke funkcije kao što je sekrecija insulina (Chan, L. F. S. Clonidine-displacing Substance and Its Putative Role in Control of Insulin Secretion: A Minirevievv. Gen. Pharmacol. 1998,31, 525-529), regulacija očnog pritiska (Chu, T. C,; S. R„ R,; Ogidigben, Mr. J,; Potter, D. E. Potential Mechanisms of Moxonidine-induced Ocular Hvpotension: Role of Norepinephrine. J. Ocul. Pharmaco /. Ther. 1997,13, 489-496) i kontrola srčanog pulsa (Roegel, J. C,; de Jong, W,; Monassier, L,; Feldman, J,; Bousquet, P. Comparative Effects of ldazoxan, Prazocine and Yohimbine is Coronarv Ligation-induced Arrhvthmias in Spontaneouslv Hvpertensive Rats. J. Cardiovasc. Pharmaco /. 1996, 27, 226-234).

[0008]IR su klasifikovani u tri glavna podtipa IRi, IR2i IR3. Prvi podtip \ R1 nalazi se u rostralnom ventrolateralnom delu (RVLM) moždanog stabla i uključen je u centralnu regulaciju kardiovaskularne funkcije

[0009]IRiosetljiv je na klonidin i druga jedinjenja imidazolina, ali ne na kateholamin i stoga se razlikuje od a2-adrenergičkih receptora (ot2AR).

[0010]Agmatin, "supstance koje pomeraju klonidin" i harman su endogeni ligandi IRi.

[0011]IR2osetljiv je na klonidin, ali osetljiv je i na idazoksan. IR2su podeljeni u dva podtipa prema njihovom afinitetu za amilorid (Tesson, F,; Prib-Buus, C,; Lemoine, A,; Pegorier, J. P,; Parini, A. A Subcellular Distribution of Imidazoline-Guanidinium Receptive Sites in Human and Rabbit Liver. Major Localization to the Outer Mitochondrial Membrane. J. Biol. Chem. 1991, 266,155-160).

[0012]Treći podtip, IR3 dodat je klasifikaciji i uključenje u regulaciji insulina (Englen, R. M,; Hudson, A. L,; Kendall, D. A,; Nutt, D. J,; Morgan, N. G,; Wilson, V. G,; Dillon, Mr P. 'Seeing Through a Glass Darklv': Casting Lighton Imidazoline 'I' sites. Trends Pharmaco/. Sci. 1998,19, 381-390).

[0013]Klonidin je vodeće jedinjenje prve generacije antihipertenzivnih lekova koji centralno deluju. On se vezuje za oba IRii a2AR. Njegovi neželjeni efekti, naročito uspavljivanje, su jasni usled aktivacije a2AR (De Sarro, G. B,; Ascioti, C,; Froio, F,; Libri, V,; Ništico, G. Evidence that Locus Coeruleus is the Site where Klonidin and Drugs Acting at cti- and a2-Adrenoceptors Affect Sleep and Arousal Mechanisms. Br. J.

Pharmacol. 1987, 90, 675-685).

[0014]Lekovi kao što su moksonidin i rilmenidin selektivni su za IRiu odnosu na a2AR zato što imaju manji afinitet za a2AR i stoga što uzrokuju manje neželjene efekte kod hipertenzivnih pacijenata.

[0015]Do skoro, nedostatak hipertenzivnih lekova selektivnih za IR značajno je usporio istraživanje na ovim receptorima.

[0016]Sjedne strane, imidazolinski hipertenzivni lekovi kao što su klonidin i njegovi analozi su svi "hibrid" kao lekovi vezuju se za oba IRii a2AR.

[0017]S druge strane, nekoliko dostupnih jedinjenja koji su visoko selektivni za IRikao što su AGN192403 (Munk, S. A,; Lai, R. K,; Burke, J. E,; Arasasingham, P. N,; Kharlamb, A. B,; Manlapaz, C. A,; Padillo, E. U,; Wijono, Mr. K,; Hasson, D. W,; Wheeler, L. A,; Garst, M.E. Svnthesis and Pharmacologic Evaluation of 2-endo-Amino-3-exo-isopropylbicyklo[2,2,l] heptane: A Potent Imidazoline 1 Receptor Specific Agent. J. Med. Chem 1996, 39,1193-1195), tracizolin i benazolin (Pigini, M,; Bousquet P,; Carotti, A,; Dontenwill, M,; Giannella, M,; Moriconi, R,; Piergentili, A,; Quaglia, W,; Tayebati, S. K,; Brasili, L. Imidazoline Receptors: Qualitative Structure-Activity Relationships and Discovery of Tracizoline and Benazoline. Two Ligands with High Afinitet and Unprecedented Selectivity. Bioorg. Med. Chem. 1997, 5, 833-841) ne menjaju arterijski pritisak ili ga menjaju malo.

[0018]Dodatno, postoji nekoliko jedinjenja selektivnih za IRiu odnosu na ot2AR, ali ne u odnosu na IR2kao što su S23757 (Anastasiadou, M,; Danoun, S,; Crane, L,; Baziard-Mouysset, G,; Payard, M,; Caignard, D, H,; Rettori, M, C,; Renard, P. Synthesis and Pharmacological Evaluation of Imidazoline Sites II and 12 Selective Ligands. Bioorg. Med. Chem. 2001, 9, 585-592) i PMS 952 (Ye, H. F,; Dive, G,; Dehareng, D,; Heymans, F,; Godfroid, J. J. Structure-Activity Relationship on Adrenoreceptors and Imidazoline-Preferring Binding Sites (11,2-PBS). Part 1: Weak Intramolecular H-bond and Conformational Flexibility in a New PBS-Selective ll-lmidazoline Analogue, transl-(4'-5'-Dihydro-l'H-imidazol-2'-yl)methyl-2-hydroxyindane (PMS 952). Bioorg. Med. Chem. 2000, 8,1861-1869).

[0019]Nedavno, jedinjenja selektivna za IRi, LNP 911 i LNP 906, koja su aminopirolini, suprotno drugim jedinjenjima opisanim gore koji imaju nanomolarne afinitete za IRireceptor, razvijani su respektivno kao radioligand i fotoafinitetni radioligand (Greney, H,; Urosevic, D,; Schann, S,; Dupuy, L,; Bruban, V,; Ehrhardt, J, D,; Bousquet, P,; Dontenvvill, M. [125]2-(2-Chloro-4-iodo-phenylamino)-5-methyl-piroline (LNP911), a High-Affinity for Radioligand Selective for II Imidazoline Receptors. Mol. Pharmaco/. 2002, 62,181-191), ali nemaju hipotenzivni efekat. LNP 911 ponaša se više kao antagonist dok je LNP 906 fotoaktivirajući ligand koji ne može da se koristi u in vivo eksperimentima.

[0020]Stoga, postoji potreba za razvojem jedinjenja koja su selektivna za IRi, kako bi se izbegli neželjeni efekti, koji uvek imaju hipotenzivnu aktivnost i koji se mogu koristiti kao monoterapija za metabolički sindrom.

[0021]Jedan od ciljeva ovog pronalaska je da obezbedi selektivna jedinjenja za IRitako da ne dolaze ili jedva dolaze u interakciju sa a2AR i IR2. Dodatno, jedinjenja su agonisti od IRi.

[0022]Drugi cilj ovog pronalaska je da obezbedi aktivne lekokve u metaboličkom sindromu, koji mogu da se koriste u monoterapiji i nemaju neželjene efekte postojećih lekova.

[0023]Drugi cilj ovog pronalaska je da obezbedi farmaceutske kompozicije koje obuhvataju pomenute aktivne lekove.

[0024]Prema tome, ovaj pronalazak se naročito odnosi na jedinjenja opšte formule (I)

u kojoj:

a) ili R12 predstavlja H, a

- Rl i R2 svako nezavisno su:

halogen, ravnolančani ili razgranati Cl do C8 alkil, C2-C8 alken, ravnolančani ili razgranati Cl do C8 alkoksi, C3-C6 cikloalkil, C5-C6 bicikloalkil, polietarski lanac, C1-C5 perfluoroalkil, C1-C8 acil,

OH, SH, primarni, sekundarni ili tercijarni amin, CN, C02H, C02R' u kome je R' ravnolančani ili razgranati C1-C8 alkil ili C3-C6 cikloalkil, ili

- Rl i R2 zajedno formiraju C5 prsten,

- R3, R4 i R5 svako nezavisno predstavljaju:

vodonik, halogen, ravnolančani ili razgranati Cl do C8 alkil, C2-C8 alken, ravnolančani ili razgranati Cl do C8 alkoksi, C3-C6 cikloalkil, C5-C6 bicikloalkil, polietarski lanac, C1-C5

perfluoroalkil, C1-C8 acil, OH, SH, primarni, sekundarni ili tercijarni amin, CN, C02H, C02R' u kome je R' ravnolančani ili razgranati C1-C8 alkil ili C3-C6 cikloalkil,

- R6, R7, R9 i Rll predstavljaju vodonik,

- R8 i RIO odabrani su iz grupe koju čine vodonik i ravnolančani ili razgranati Cl do C5 alkil, pri čemu je najmanje jedan od ova dva ravnolančani ili razgranati Cl do C5 alkil; b) ili R12 predstavlja CH(R13)(CH2) i obrazuje C5 prsten sa R5, R13 koji predstavljaju H ili CH3,

- Rl, R2, R3 i R4 odabrani su iz grupe koju čine vodonik, halogen, ravnolančani ili razgranati Cl do

C8 alkil, C2-C8 alken, ravnolančani ili razgranati Cl do C8 alkoksi, C3-C6 cikloalkil, C5-C6

bicikloalkil, polietarski lanac, C1-C5 perfluoroalkil, C1-C8 acil, -OH, -SH, primarni, sekundarni ili tercijarni amin, -CN, -C02H, -C02R' u kome je R' ravnolančani ili razgranati C1-C8 alkil i C3-C6

cikloalkil;

- R6, R7, R9 i Rll predstavljaju vodonik,

- R8 i RIO odabrani su iz grupe koju čine vodonik i ravnolančani ili razgranati Cl do C5 alkil, pri čemu je najmanje jedan od ova dva ravnolančani ili razgranati Cl do C5 alkil,

pod uslovom da najmanje jedan od između Rl i R13 nije vodonik,

i njihove farmaceutski prihvatljive soli.

[0025]R13 koji nosi ugljenik kada se razlikuje od H, ili R6 i R7 kada se međusobno razlikuju, ili R8 ukoliko je različito od R9 i RIO ukoliko je različito od Rll, su asimetrični i svaki od pomenutih atoma ugljenika stoga može biti apsolutne konfiguracije (R) ili (S) ili (R, S).

[0026]U celokupnom opisu sledeći izrazi uvek imaju isto značenje: " ravnolančani ili razgranati Cl do C8 alkil" označava metil, etil, n-propil, n-butil, n-pentil, n-heksil,

n-heptil ili n-oktil i sve njihove izomere, naime izopropil, izobutil, sec-butil i tert-butil, izopentan (ili 2- metilbutil) ili neopentan (ili 2,2-dimetilpropil), 2,2-dimetilbutan, 2,3-dimetilbutan, 2-metilpentan, 3- metilpentan, 2-metilheksan, 3-metilheksan, 2,2-dimetilpentan, 2,3-dimetilpentan, 2,4-dimetilpentan, 3,3-dimetilpentan, 3-etilpentan, 2, 2,3-trimetilbutan, 2-metilheptan, 3-metilheptan, 4- metilheptan, 2,2-dimetilheksan, 2,3-dimetilheksan, 2,4-dimetilheksan, 2,5-dimetilheksan, 3,3-dimetilheksan, 3,4-dimetilheksan, 3-etilheksan, 2,2,3-trimetilpentan, 2,2,4-trimetilpentan, 2,3,3-trimetilpentan, 2,3, 4-trimetilpentan, 2-metil-3-etilpentan, 3-metil-3-etilpentan, tetrametilbutan. Pomenuti alkil može takođe da se supstituiše, naročito sa alkoholom, tiolom, etrom, halogenom, nitrilom, primarnim, sekundarnim ili tercijarnim aminom;

"C2-C8 alken" označava etilen, propen, buten, penten, heksen, hepten ili okten i sve njihove izomere.

Pomenuti alken može takođe da se supstituiše, naročito sa alkoholom, tiolom, etrom, halogenom, nitrilom, primarnim, sekundarnim ili tercijarnim aminom;

"C1-C8 acil" označava C 1-C 8-C (0)- alkil grupu čiji alkil je kao što je određeno gore;

" C1-C8 sulfonilalkil" označava S(0)20-alkil grupu pri čemu je C1-C8 alkil određen gore;

halogen određuje brom, hlor, fluor ili jod;

"ravnolančani ili razgranati C1-C8 alkoksi" određuje O-alkil tj ravnolančani ili razgranati C1-C8 alkil određen isto kao gore, koji je vezan kiseonikom za molekul formule (I).

Pomenuti alkoksi može takođe da se supstituiše, naročito sa alkoholom, tiolom, etrom, halogenom, nitrilom, primarnim, sekundarnim ili tercijarnim aminom;

"C3-C6 cikloalkil" odnosi se na ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil ili cikloheksil;

"C5-C6 bicikloalkil" odnosi se na dva C5 i/ili C6 fuzirana cikloalkilna prstena;

Pomenuti cikloalkili ili bicikloalkili mogu takođe da se supstituišu, naročito sa alkoholom, tiolom, etrom, halogenom, nitrilom, primarnim, sekundarnim ili tercijarnim aminom;

polietarski lanac određuje 0- (CH2CH2-0)nCH2CH2-OR " lanac, u kome n varira od 0 do 9, a R"

predstavlja alkil ili alken ili cikloalkil kao što je određeno gore;

"C1-C5 perfluoroalkil" odnosi se na C1-C5 alkil, kao što je određeno gore, u kome je svaki vodonik

potpuno supstituisan fluorom; na primer CF3, C2F5, C3F7, C4F9, C5Fn,

primarni, sekundarni ili tercijarni amin određuje -NRaRbgrupu u kojoj Rai Rbnezavisno jedan od drugog određuju H, ravnolančani ili razgranati C1-C6 alkil, C3-C6 cikloalkil, C1-C6 acil.

[0027]Kada R12 predstavlja CH (R13)(CH2) i formira 5C prsten sa R5 koji predstavlja CH2,a R13 predstavlja H ili CH3, dobija se sledeća formula 1-1:

n = 0, ring 5C:

[0028]U poželjnom ostvarenju, jedinjenja imaju formulu 1-1.

[0029]Izraz "farmaceutski prihvatljive soli" znači da jedinjenja formule I, definisana gore, kada sadrže radikal koji predstavlja amin, mogu da postoje u obliku amonijuma iz reakcije neorganske kiseline ili organske kiseline sa aminom.

[0030]Primeri neorganskih kiselina za dobijanje farmaceutski prihvatljivih soli uključuju, ali se ne ograničavaju na, hlorovodoničnu kiselinu, bromovodoničnu kiselinu, azotnu kiseninu, ugljenu kiselinu, mravlju kiselinu, monohidroksilnu ugljenu kiselinu, fosfornu kiselinu, monohidroksilnu fosfornu kiselinu, dihidroksilnu fosfornu kiselinu, perhlornu kiselinu, sumpornu kiselinu, monohidroksilnu sumpornu kiselinu, jodovodoničnu kiselinu.

[0031]Primeri organskih kiselina za dobijanje farmaceutski prihvatljivih soli uključuju, ali se ne ograničavaju na, sirćetnu kiselinu, mlečnu kiselinu, propionsku kiselinu, buternu kiselinu, izobuternu kiselinu, palmitinsku kiselinu, maleinsku kiselinu, glutaminsku kiselinu, hidroksimaleinsku kiselinu, malonsku kiselinu, benzojevu kiselinu, sukcinsku kiselinu, glikolnu kiselinu, suberinsku kiselinu, fumarnu kiselinu, mandelinsku kiselinu, ftalnu kiselinu, salicilnu kiselinu, benzensulfonsku kiselinu, p-toluensulfonsku kiselinu, limunsku kiselinu, vinsku kiselinu, metansulfonsku kiselinu, hidroksinaftalinkarbonsku kiselinu.

[0032]Soli amino kiselina kao što su arginati i njihovi ekvivalenti takođe su uključene kao i soli organskih kiselina kao što su glukuronska kiselina ili galakturonska kiselina i njihovi ekvivalenti (videti na primer, Berge et al, "Pharmaceutical Salts", Journal of Pharmaceutical Science, 1977, 66,1-19).

[0033]Alkil halidi koji omogućavaju dobijanje farmaceutski prihvatljivih soli uključuju, ali se ne ograničavaju na, alkil bromide, jodide, fluoride ili hloride u kojima je pomenuti alkil ostatak zasićen ili nezasićen, ravnolančani ili razgranati sa 1 do 20 atoma ugljenika, ili O-cikloalkil grupa od 3 do 8 atoma ugljenika.

[0034]Kada jedinjenja formule I prema ovom pronalasku imaju radikal koji predstavlja kiselinu ili OH, naročito fenol, onda ona mogu da postoje u obliku karboksilata, alkoksida ili fenoksida, na primer, natrijuma, kalijuma, litijuma ili amonijuma iz reakcije kiseline, alkohola ili fenola sa bazom kao što su na primer natrijum hidroksid, kalijum hidroksid, litijum hidroksid, amonijak ...

[0035]Neočekivano, pronalazači su opazili da su jedinjenja prema ovom pronalasku sa svojom originalnom strukturom pirolina selektivna za imidazolinski IRi receptor u odnosu na a2-adrenergički receptor, pri čemu je odnos Ki(a2AR) /Ki(lRx) varira od 100 do preko 10000.

[0036]Jedinjenja prema ovom pronalasku takođe su selektivna za imidazolinski IRi receptor u odnosu na imidazolinski IR2 receptor, pri čemu je odnos Ki(IR2)/Ki (IR^ oko 1000.

[0037]Dodatno, jedinjenja prema ovom pronalasku takođe su selektivna za imidazolinski IRireceptor u odnosu na više od pedeset drugih potencijalnih ciljeva, receptora ili enzima, a naročito onih datih u tabeli sa FIGURE 3.

[0038]Konačno, da bi se ispoljio željeni terapeutski efekat, jedinjenja prema ovom pronalasku su agonisti imidazolinskog IRireceptora. Ovaj agonistički efekat može da se izmeri korišćenjem bilo kog postupka koji je dostupan stručnjacima iz ove oblasti. Naročito, može da se ispituje merenjem hipotenzivne sposobnosti jedinjenja.

[0039]U jednom poželjnom ostvarenju, ovaj pronalazak odnosi se na jedinjenja kao što su prethodno određena, opšte formule (I) u kojoj:

Rl, R2, R3, R4 i R5 nezavisno jedan od drugog predstavljaju:

H, halogen, ravnolančani ili razgranati Cl- C8 alkil, C2-C8 alken, ravnolančani ili razgranati Cl do C8 alkoksi, C3-C6 cikloalkil, C5-C6 bicikloalkil, polietarski lanac, C1-C5 perfluoroalkil, C1-C8 acil, OH, SH, primarni, sekundarni ili tercijarni amin, CN, C02H, C02R' u kome je R' ravnolančani ili razgranati Cl-C8 alkil ili C3-C6 cikloalkil,

Rl i R2 i/ili R2 i R3 i/ili R3 i R4 i/ili R4 i R5 mogu takođe zajedno da formiraju C4-C6 prsten,

R6, R7, R8, R9, RIO i Rll nezavisno jedan od drugog predstavljaju:

H, ravnolančani ili razgranati C1-C8 alkil, C2-C8 alken, C3-C6 cikloalkil,

R12 je H, ravnolančani ili razgranati C1-C8 alkil, C2-C8 alken, C1-C8 acil, C1-C8 sulfonilalkil.

[0040]U jednom poželjnom ostvarenju, ovaj pronalazak odnosi se na jedinjenja kao što su prethodno određena, sledeće opšte formule (la): u kojoj R8 i RIO nezavisno jedan od drugog predstavljaju H ili ravnolančani ili razgranati Cl do C5 alkil, naročito CH3, a R3 do R5 su kao što su prethodno definisani i R12 je H, ravnolančani ili razgranati Cl do C6 alkil, C2-C8 alken, C1-C8 acil, C1-C8 sulfonilalkil.

[0041]Poželjno, R12 je vodonik, a R8 i RIO odabrani su iz grupe koju čine vodonik i ravnolančani ili razgranati Cl do C5 alkil, pri čemu je najmanje jedan od ova dva ravnolančani ili razgranati Cl do C5 alkil. Određenije, R8 i RIO odabrani su iz grupe koju čine vodonik i metil ili izobutil tako što je jedan od njih vodonik a drugi metil ili izobutil, poželjno metil. U jednom poželjnom ostvarenju, R3 je vodonik. U još jednom poželjnijem ostvarenju, R3, R4 i R5 su vodonik.

[0042]U drugom poželjnom ostvarenju, ovaj pronalazak odnosi se na jedinjenja kao što su prethodno određena, sledeće opšte formule (la):

u kojoj

R3 i R12 su vodonik,

R8 i RIO odabrani su iz grupe koju čine vodonik i ravnolančani ili razgranati Cl do C5 alkil, pri čemu je najmanje jedan od ova dva ravnolančani ili razgranati Cl do C5 alkil, i R4 i R5 su nezavisno odabrani iz grupe koju čine vodonik, halogen, ravnolančani ili razgranati Cl do C3 alkil, ravnolančani ili razgranati Cl do C3 alkoksi, C1-C3 perfluoroalkil, C1-C3 acil, OH, SH, primarni, sekundarni ili tercijarni amin, CN, C02H i C02R' u kome je R' ravnolančani ili razgranati C1-C3 alkil, poželjno iz grupe koju čine halogen, ravnolančani ili razgranati Cl do C3 alkil,

ravnolančani ili razgranati Cl do C3 alkoksi, C1-C3 perfluoroalkil i C1-C3 acil.

[0043]Poželjno, R4 i R5 su vodonik.

[0044]U drugom poželjnom ostvarenju, ovaj pronalazak odnosi se na jedinjenja kao što su prethodno određena, sledeće opšte formule (lb): u kojoj R8 i RIO nezavisno jedan od drugog predstavljaju H ili ravnolančani ili razgranati Cl do C5 alkil, naročito CH3, Rl i R2 nezavisno jedan od drugog predstavljaju H, CH3ili Cl, a R3 do R5 su kao što su definisani gore i R12 predstavlja H, ravnolančani ili razgranati C1-C8 alkil, C2-C8 alken, C1-C8 acil, C1-C8 sulfonilalkil.

[0045]Poželjno, R12 je vodonik. Poželjno, R8 i RIO odabrani su iz grupe koju čine vodonik i ravnolančani ili razgranati Cl do C5 alkil, pri čemu je najmanje jedan od ova dva ravnolančani ili razgranati Cl do C5 alkil. Određenije, R8 i RIO odabrani su iz grupe koju čine vodonik i metil ili izobutil tako da je jedan od njih vodonik a drugi je metil ili izobutil, poželjno metil. Poželjno, Rl i R2 nezavisno jedan od drugog predstavljaju CH3ili Cl. Naročito, Rije metil a R2 je metil ili hlorid. U još poželjnijem ostvarenju, R3, R4 i R5 su vodonik.

[0046]U drugom poželjnom ostvarenju, ovaj pronalazak odnosi se na jedinjenja kao što su prethodno određena, sledeće opšte formule (lb):

u kojoj

R12 je vodonik,

R8 i RIO odabrani su iz grupe koju čine vodonik i ravnolančani ili razgranati Cl do C5 alkil, pri čemu je najmanje jedan od ova dva ravnolančani ili razgranati Cl do C5 alkil,

Rl i R2 su nezavisno odabrani iz grupe koju čine halogen, ravnolančani ili razgranati Cl do C3 alkil, ravnolančani ili razgranati Cl do C3 alkoksi, C1-C3 perfluoroalkil i C1-C3 acil, i R3, R4 i R5 su nezavisno odabrani iz grupe koju čine vodonik, halogen, ravnolančani ili razgranati Cl do C3 alkil, ravnolančani ili razgranati Cl do C3 alkoksi, C1-C3 perfluoroalkil, C1-C3 acil, OH, SH, primarni, sekundarni ili tercijarni amin, CN, C02H i C02R' u kome je R' ravnolančani ili razgranati C1-C3 alkil, poželjno iz grupe koju čine halogen, ravnolančani ili razgranati Cl do C3 alkil, ravnolančani ili razgranati Cl do C3 alkoksi, C1-C3 perfluoroalkil i C1-C3 acil.

[0047]Poželjno, Rl i R2 su nezavisno odabrani iz grupe koju čine halogen i ravnolančani ili razgranati Cl do C3 alkil. Još poželjnije, Rl i R2 nezavisno jedan od drugog predstavljaju CH3ili Cl.

[0048]Poželjno, R3, R4 i R5 su vodonik.

[0049]U drugom poželjnom ostvarenju, ovaj pronalazak odnosi se na jedinjenja kao što su prethodno određena, sledeće formule (la-1): u kojoj R3 i R8 su kao što su određena gore. Poželjno R8 je ravnolančani ili razgranati Cl do C5 alkil, naročito metil ili izobutil, poželjno metil. Poželjno R3 je vodonik.

[0050]U drugom poželjnom ostvarenju, ovaj pronalazak odnosi se na jedinjenja kao što su prethodno određena, sledeće formule (lb-1):

u kojoj Rl, R2, R8 i RIO su kao što su prethodno određena. Poželjno, R8 i RIO odabrani su iz grupe koju čine vodonik i ravnolančani ili razgranati Cl do C5 alkil, pri čemu je najmanje jedan od ova dva ravnolančani ili razgranati Cl do C5 alkil. Poželjnije, R8 i RIO odabrani su iz grupe koju čine vodonik i metil ili izobutil tako da je jedan od njih vodonik a drugi je metil ili izobutil, poželjno metil. Poželjno, Rl i R2 su odabrani iz grupe koju čine halogen, ravnolančani ili razgranati Cl do C8 alkil, ravnolančani ili razgranati Cl do C8 alkoksi, C1-C5 perfluoroalkil, C1-C8 acil, OH, SH, primarni, sekundarni ili tercijarni amin, CN, C02H i C02R' u kome je R' ravnolančani ili razgranati C1-C8 alkil, ili zajedno formiraju C5 prsten. Određenije, Rl i R2 su nezavisno odabrani iz grupe koju čine halogen, ravnolančani ili razgranati Cl do C3 alkil, ravnolančani ili razgranati Cl do C3 alkoksi, C1-C3 perfluoroalkil i C1-C3 acil ili zajedno formiraju C5 prsten. Poželjno, Rl i R2 nezavisno jedan od drugog predstavljaju CH3ili Cl. Naročito, Rije metil a R2 je metil ili hlorid.

[0051]U drugom poželjnom ostvarenju, ovaj pronalazak odnosi se na jedinjenja kao što su prethodno određena, odabrana od između jedne od sledećih formula:

[0052]Poželjno, jedinjenja su odabrana iz grupe koju čine

[0053]U drugom poželjnom ostvarenju, ovaj pronalazak odnosi se na jedinjenja kao što su prethodno određena, sledeće opšte formule (Ic):

u kojoj, Rl do R4 i R6 do Rll su kao što su prethodno određena i R13 predstavlja H ili CH3.

[0054]U određenom ostvarenju jedinjenja opšte formule (Ic), u kojoj R 13 predstavlja metil.

[0055]U određenom ostvarenju jedinjenja opšte formule (Ic), u kojoj Rl nije vodonik.

[0056]U poželjnom ostvarenju jedinjenja opšte formule (Ic), u kojoj R 13 je metil i/ili Rl nije vodonik. Stoga, kada je R13 vodonik onda Rl nije vodonik. Slično, najmanje jedan između Rl i R13 nije vodonik,

[0057]Rl je odabrano iz grupe koju čine vodonik, halogen, ravnolančani ili razgranati Cl do C8 alkil, C2-C8 alken, ravnolančani ili razgranati Cl do C8 alkoksi, C3-C6 cikloalkil, C5-C6 bicikloalkil, polietarski lanac, C1-C5 perfluoroalkil, C1-C8 acil, OH, SH, primarni, sekundarni ili tercijarni amin, CN, C02H, C02R' u kome je R' ravnolančani ili razgranati C1-C8 alkil i C3-C6 cikloalkil, poželjno iz grupe koju čine vodonik, halogen, ravnolančani ili razgranati Cl do C8 alkil, C2-C8 alken, ravnolančani ili razgranati Cl do C8 alkoksi, polietarski lanac, C1-C5 perfluoroalkil, C1-C8 acil, OH, SH, primarni, sekundarni ili tercijarni amin, CN, C02H i C02R' u kome je R' ravnolančani ili razgranati C1-C8 alkil, a još poželjnije iz grupe koju čine vodonik, halogen, ravnolančani ili razgranati Cl do C3 alkil, ravnolančani ili razgranati Cl do C3 alkoksi, C1-C3 perfluoroalkil i C1-C3 acil. U poželjnom ostvarenju, Rije vodonik ili ravnolančani ili razgranati Cl do C3 alkil, poželjno metil. Poželjno, R2, R3 i R4 su vodonik.

[0058]U jednom određenom ostvarenju jedinjenja opšte formule (Ic), u kojoj između Rl, R2, R3 i R4, tri od njih su vodonik a jedan je odabran iz grupe koju čine H, halogen, ravnolančani ili razgranati Cl do C8 alkil, C2-C8 alken, ravnolančani ili razgranati Cl do C8 alkoksi, C3-C6 cikloalkil, C5-C6 bicikloalkil, polietarski lanac, C1-C5 perfluoroalkil, C1-C8 acil, OH, SH, primarni, sekundarni ili tercijarni amin, CN, C02H, C02R' u kome je R' ravnolančani ili razgranati C1-C8 alkil i C3-C6 cikloalkil, poželjno iz grupe koju čine vodonik, halogen, ravnolančani ili razgranati Cl do C8 alkil, C2-C8 alken, ravnolančani ili razgranati Cl do C8 alkoksi, polietarski lanac, C1-C5 perfluoroalkil, C1-C8 acil, OH, SH, primarni, sekundarni ili tercijarni amin, CN, C02H i C02R' u kome je R' ravnolančani ili razgranati C1-C8 alkil, a još poželjnije iz grupe koju čine vodonik, halogen, ravnolančani ili razgranati Cl do C3 alkil, ravnolančani ili razgranati Cl do C3 alkoksi, C1-C3 perfluoroalkil i C1-C3 acil. U poželjnom ostvarenju, između Rl, R2, R3 i R4, tri od njih su vodonik a jedan je vodonik ili ravnolančani ili razgranati Cl do C3 alkil, poželjno vodonik ili metil. Poželjno, R2, R3 i R4 su vodonik.

[0059]U jednom poželjnom ostvarenju jedinjenja opšte formule (Ic), u kojoj R6, R7, R9 i Rll su vodonik, a R8 i RIO su nezavisno odabrani iz grupe koju čine H, ravnolančani ili razgranati Cl do C8 alkil, C2-C8 alken, C3-C6 cikloalkil, C1-C5 perfluoroalkil, poželjno iz grupe koju čine H i ravnolančani ili razgranati Cl do C8 alkil, a još poželjnije iz grupe koju čine H i ravnolančani ili razgranati Cl do C3 alkil. Poželjno, najmanje jedan između R8 i RIO je vodonik. U poželjnom ostvarenju, R6, R7, R9 i Rll su vodonik, a R8 i RIO su nezavisno odabrani iz grupe koju čine H i ravnolančani ili razgranati Cl do C3 alkil, poželjno od između H i metila, pri čemu je najmanje jedan od ova dva vodonik.

[0060]Ovaj pronalazak naročito se odnosi na jedinjenja kao što su prethodno određena, opšte formule (Ic) u kojoj,

Rl, R2, R3 i R4 su odabrani iz grupe koju čine vodonik, halogen, ravnolančani ili razgranati Cl do C3

alkil, ravnolančani ili razgranati Cl do C3 alkoksi, C1-C3 perfluoroalkil, C1-C3 acil, OH, SH, primarni, sekundarni ili tercijarni amin, -CN, -C02H i -C02R' u kome je R' ravnolančani ili razgranati C1-C3 alkil;

R8 i RIO su odabrani iz grupe koju čine vodonik i ravnolančani ili razgranati Cl do C5 alkil, pri čemu je najmanje jedan od ova dva vodonik,

Pod uslovom da najmanje jedan između Rl i R13 nije vodonik.

[0061]U jednom određenom ostvarenju jedinjenja opšte formule (Ic), - R2, R3, R4, R6, R7, R9, RIO i Rll su vodonik;

R13 je H, a Rl je halogen i ravnolančani ili razgranati Cl do C3 alkil; ili

R13 je metil, a Rl je odabrano iz grupe koju čine vodonik, halogen i ravnolančani ili razgranati Cl do C3 alkil; i

R8 i RIO su odabrani iz grupe koju čine vodonik i ravnolančani ili razgranati Cl do C5 alkil, pri čemu je najmanje jedan od ova dva vodonik.

[0062]U jednom određenijem ostvarenju jedinjenja opšte formule (Ic), - R2, R3, R4, R6, R7, R9, RIO i Rll su vodonik;

R13 je H, a Rije metil; ili

R13 je metil, a Rl je odabrano iz grupe koju čine vodonik i metil; i

R8 i RIO su odabrani iz grupe koju čine vodonik i metil, pri čemu je najmanje jedan od ova dva vodonik.

[0063]U drugom poželjnom ostvarenju, ovaj pronalazak odnosi se na jedinjenja kao što su prethodno određena, sledeće formule (lc-1):

u kojoj, Rl, R8 i R9 su kao što su prethodno određena, a R13 predstavlja H ili CH3.

[0064]Poželjno, R9 je vodonik, a najmanje jedan od između Rl, R8 i R13 nije vodonik. U jednom ostvarenju, dve grupe od između Rl, R8 i R13 nisu vodonik.

[0065]Poželjno, Rije odabrano iz grupe koju čine H, halogen, ravnolančani ili razgranati Cl do C8 alkil, C2-C8 alken, ravnolančani ili razgranati Cl do C8 alkoksi, polietarski lanac, C1-C5 perfluoroalkil, C1-C8 acil, OH, SH, primarni, sekundarni ili tercijarni amin, CN, C02H i C02R' u kome je R' ravnolančani ili razgranati Cl do C8 alkil, još poželjnije iz grupe koju čine H, halogen, ravnolančani ili razgranati Cl do C3 alkil, ravnolančani ili razgranati Cl do C3 alkoksi, C1-C3 perfluoroalkil, C1-C3 acil. Određenije, Rl je odabrano iz grupe koju čine H, halogen, ravnolančani ili razgranati Cl do C3 alkil. Određenije, Rije H ili metil.

[0066]Poželjno, R8 je odabrano iz grupe koju čine H i ravnolančani ili razgranati Cl do C8 alkil, još poželjnije iz grupe koju čine H i ravnolančani ili razgranati Cl do C3 alkil. Određenije, R8 je H ili metil.

[0067]U određenom ostvarenju jedinjenja opšte formule (lc-1),

R9 je vodonik;

R13 je H, a Rl je halogen i ravnolančani ili razgranati Cl do C3 alkil; ili

[0068]U dalje određenom ostvarenju jedinjenja opšte formule (lc-1),

R9 je vodonik;

- R13 je H, a Rije metil; ili

R13 je metil, a Rl je odabrano iz grupe koju čine vodonik i metil; i

[0069]U drugom poželjnom ostvarenju, ovaj pronalazak odnosi se na jedinjenja kao što su prethodno određena, odabrana od između jedne od sledećih formula:

[0070]Jedinjenja prema ovom pronalasku mogu biti sintetisana u postupcima poznatim stručnjacima koji su opisani u literaturi od jedinjenja koja su komercijalno dostupna ili dobijena u postupcima poznatim stručnjacima iz ove oblasti.

[0071]Prema drugom aspektu, ovaj pronalazak odnosi se na jedinjenja kao što su prethodno određena, za njihovu upotrebu u prevenciji i/ili lečenju metaboličkog sindroma.

[0072]Jedinjenja prema ovom pronalasku, koja su selektivna za imidazolinski IRireceptor, ne omogućavaju samo jedinjenja koja obezbeđuju izbegavanje neželjenih efekata koji se naročito odnose na interakciju sa a2-adrenergičkim receptorom kao što su sedacija i održavanje hipotenzivnog efekata, već i ona koja takođe mogu da se koriste u monoterapiji za tretiranje svih komponenti metaboličkog sindroma, naime visokog krvnog pritiska, visokog holesterola, insulinske rezistencije, glukozne intolerancije i abdominalne gojaznosti, tako da se na ovaj način izbegava upotreba kombinacije 3 do 6 vrsti leka kojom se stvaraju višestruki neželjeni efekti i dodatni troškovi za sisteme zdravstvenog osiguranja.

[0073]Monoterapija i odsustvo neželjenih efekata kao što je sedacija primećenih u ispitivanjima sa životinjama trebalo bi da omoguće upotrebu jedinjenja prema ovom pronalasku u prevenciji metaboličkog sindroma, ili jedne ili više komponenata metaboličkog sindroma, kod pacijenata koji su rizični za jednu ili drugu pomenutu komponentu.

[0074]Prema drugom aspektu, ovaj pronalazak odnosi se na farmaceutsku kompoziciju koja obuhvata kao aktivni sastojak najmanje jedno jedinjenje prethodno određeno, u kombinaciji sa farmaceutski prihvatljivim nosačem.

[0075]Pod farmaceutski prihvatljivim nosačem podrazumeva se bilo koja supstanca drugačija od aktivnog sastojka u leku. Njegovo dodavanje daje fizičko-hemijske i/ili biohemijske karakteristike tako da promoviše davanje oralnim, sublingvalnim, respiratornim, rektalnim, nazalnim, intestinalnim, parenteralnim putem, intravenoznom, intraperitonealnom, intramuskularnom, subkutanom injekcijom, ili druge karakterisktike određene konzistencije ili ukusa krajnjeg proizvoda, poželjno izbegavanjem kovalentnih hemijskih interakcija sa aktivnim sastojcima.

[0076]Farmaceutske kompozicije prema ovom pronalasku mogu biti u obliku običnih tableta ili obloženih šećerom, sublingvalnih tableta, gelova, mekih kapsula, tvrdih kapsula, tableta, preparata za injekciju, sprejeva, kapi za nos, supozitorija, krema, masti ili gelova za kožu.

[0077]Prema drugom aspektu, ovaj pronalazak odnosi se na postupak lečenja metaboličkog sindroma davanjem, naročito oralno, farmaceutske kompozicije pacijentu koja obuhvata kao aktivni sastojak najmanje jedno jedinjenje određeno gore, zajedno sa farmaceutski prihvatljivim nosačem, u efektivnoj dozi.

[0078]U jednom poželjnom ostvarenju, ovaj pronalazak odnosi se na farmaceutsku kompoziciju kao što je prethodno određena, koja se može primeniti oralnim putem.

[0079]U jednom poželjnom ostvarenju, aktivni sastojak farmaceutske kompozicije koja se može dati oralnim putem kao što je određeno gore, daje se osobi u dozi od između 1 mg/kg do 100 mg/kg.

[0080]Ispod 1 mg/kg doza je suviše mala da bi bila aktivna u lečenju metaboličkog sindroma, a iznad 100 mg/kg postoji rizik od pojave neželjenih efekata.

[0081]Sledeći primeri A i 1 do 5 i FIGURE 1 do 8 prikazuju pronalazak.

HEMIJSKI DEO

[0082]Korišćene skraćenice:

CDCI3: Deuterisani hloroform

iPrOH: Izopropanol

Et20: Dietil etar

POCI3: Fosfor trihlorid

TEA: Trietilamin

TMG: Tetrametilgvanidin

[0083]Svi rastvarači su prečišćeni standardnim postupcima pre upotrebe. Tankoslojne hromatografije izvode se na 60F254 silika ploči (Merck) i tačke su vizualizovane UV lampom. "Flash" hromatografije izvode se na SI 60 silika gelu (40-63u.m) kao stacionarnoj fazi. Tačke topljena (p, f,) određene su u otvorenim kapilarima korišćenjem Gallenkamp uređaja i nisu korigovane. NMR spektri su beleženi u CDCI3ili D20 na Bruker AV300 spektrometru. Hemijska pomeranja (6) izražena su u delovima miliona (ppm), a konstante vezivanja izražene su u Hercima (Hz). Skrćenice koje su korišćene za umnožavanje su sledeće: m: neodređen multiplet, s: singlet, d: dublet, t: triplet, q: kvartet, qn: kvintet, hex: heksaplet, h: heptet. Elementarne analize izvedene su na odeljenju za mikroanalizu Univerziteta Louis Pasteur, Strasbourg, France. Dobijeni analitički podaci za C, H i N dati su sa ± 0,4% od izračunatih teorijskih vrednosti. Sva ciljana jedinjenja ispitivana su u obliku hidrohlorida. Hidrohloridi dobijeni su dodavanjem osnovnog rastvora etanola (1 eq). Hidrohloridi rekristalisani su iz iPrOH-Et20.

Primer A: Opšti postupak pripreme aminopirolina1- 27prema ovom pronalasku

[0084]Jedinjenja su sintetisana u reakcijama odgovarajućeg laktama sa odgovarajućim anilinom u prisustvu POCI3:

A.l: Opšti postupak sinteze laktama L ( 28-33):

[0085]

A.l.l Priprema nitroestara 35-38 : opšti postupak

[0086]a, B-nezasićeni estar(39-41)(1 eq) dodat je u višku nitroalkanu (5 eq) u atmosferi argona. Katalitička količina tetrametilgvanidina (0,1 eq) dodata je mešavini koja je ostavljena da se mućka 12 h na sobnoj temperaturi. Višak nitroalkana destilovan je pod smanjenim pritiskom i ostatak je tretiran sa 2N HCI.

[0087]Mešavina je ekstrahovana sa Et20. Organska faza je ispirana vodom, zatim slanim rastvorom i konačno osušena preko anhidrida Na2S04pre nego što je rastvarač ispario. Proizvod je destilovan pod smanjenim pritiskom da bi se dobio čist nitroestar.

[0088]Metil-4-nitro-butirat (34)komercijalni proizvod

[0089]Metil 3-metil-4-nitro-butirat (35)- Prinos 85%, bezbojno ulje, bp 69-70°C (3 mmHg);<X>H NMR (CDCI3) 54,47 (dd, IH, l/2-CH2, J=6,3, J=12,6); 4,34 (dd, IH, l/2-CH2, J=6,3, J=12,6); 3,69 (s, 3H, CH3); 2,78 (qd, IH, CH, J=6,8, J=13,5); 2,46 (dd, IH, l/2-CH2, J=6,7, J=16,2); 2,35 (dd, IH, l/2-CH2, J=6,8, J=16,2); 1,09 (d,3H, CH3,J=6,8).

[0090]Metil 4-metil-4-nitro pentanoat (36)- Prinos 55%, bezbojno ulje, bp 71-72°C (2,5 mmHg);<*>H NMR (CDCI3) 53,68 (s, 3H, OCH3); 2,37-2,23 (m, 4H, 2xCH2); 1,59 (s, 6H, 2xCH3).

[0091]Metil 3,3-Dimetil-4-nitro-butirat (37). Prinos 48%, bezbojno ulje, bp 70-71°C (1,5 mmHg);<*>H NMR (CDCI3) 64,52 (s, 2H, CH2); 3,67 (s, 3H, CH3); 2,45 (s, 2H, CH2); 1,15 (s, 6H, 2xCH3).

[0092]Metil 4-(2-metil-propil)-4-nitro-pentanoat (38), Prinos 45%, ulje

<*>H NMR (CDCI3) 63,75 (m, 1 H); 3,69 (s, 3 H); 2,39-2,24 (m, 4 H); 1,85 (m, 2 H); 1,60 (m, 1 H); 0,95 (d, J=7Hz, 6 H).

A.1.2 Pripremanje laktama L 30-33:

[0093]Nitroestar34-38(100 mmol) rastvoren je u 250 ml glacijalne sirćetne kiseline i dodato je 500 mg 10% Pd-C . Mešavina je hidrogenizovana na sobnoj temperaturi i atmosferskom pritisku u toku 12h. Mešavina je filtrirana i rasvarač je ispario. Zatim je proizvod rastvoren u 100 ml apsolutnog etanola i alkalovan sa trietilaminom (TEA). Mešavina je zagrevana pod refluksom u toku 12h. Rasrvarači su isparili pod smanjenim pritiskom; a ostatak je rastvoren u Et20 i dodat je IN HCI. Vodena faza ekstrahovana je dva puta sa Et20.

[0094]Organske faze osušene su preko Na2S04i rastvarač je ispario. Proizvod je prečišćen destilacijom pod smanjenim pritiskom kako bi se dobili laktami30-33.

[0095] Pirolidin-2-on ( 28)komercijalni proizvod

[0096] 3-Metil-pirolidin-2-on ( 29)komercijalni proizvod

[0097] 4-Metil-pirolidin-2-on( 30).Prinos 83%, bezbojno ulje, (naknadno kristalizovano), bp 103°C (6 mmHg);<*>H NMR (CDCI3) 6 6,75 (br s, IH, NH); 3,46 (dd, IH, l/2-CH2, J=7,6, J=9,3); 2,93 (dd, IH, l/2-CH2, J=6,0, J=9,5); 2,53-2,44 (m, IH, CH); 2,46 (dd, IH, l/2-CH2, J=6,9, J=16,3); 1,94 (dd, IH, l/2-CH2, J=7,0, J=16,2); 1,10 (d, 3H, CH3, J=6,9).

[0098] 5,5-Dimetil-pirolidin-2-on (31).Prinos 61%, bezbojno ulje, (naknadno kristalizovano), bp 85-88°C (2 mmHg)<*>H NMR (CDCI36 6,52 (br s, IH, NH); 2,42 (t, 2H, CH2, J=8,0); 1,92 (t, 2H, CH2, J=8,0); 1,28 (s, 6H, 2xCH3).

[0099] 4,4-Dimetil-pirolidin-2-on (32).Prinos 73%, bezbojno ulje, (naknadno kristalizovano), bp 94-95°C (2 mmHg)<*>H NMR (CDCI3) 6 6,68 (br s, IH, NH); 3,06 (s, 2H, CH2); 2,11 (s, 2H, CH2); 1,16 (s, 6H, 2xCH3).

[0100] 5-{2-metil-propil)-pirolidin-2-on( 33),Prinos67%, viskozno ulje.

<*>H NMR (CDCI36 6,68 (m, IH); 3,75-3,70 (m, IH); 2,38-2,19 (m, 3H); 1,72-1,60 (m, 2H); 1,68 (m, IH), 1,52-1,42 (m, IH); 1,36-1,26 (m, IH) 0,93 (d, J=8 Hz, 6H).

A.1.3 Pripremanje derivata indana 42-44

[0101]

a) lndan-4-ilamin i indan-5-ilamin

[0102]Nitroindan (komercijalna mešavina izomera 4 i 5) podvrgnuta je hidrogenizaciji u metanolu sa

10% Pd/C na sobnoj temperaturi u toku 12h. Dva izomera indanilamina odvojena su "flash" hromatografijom (AcOEt-heksan, 3-7) da bi se dobio indan-4-ilamin (braon ulje koje kristališe) sa 53% prinosa i indan-5-ilamin (braon ulje koje kristališe) sa 40% prinosa.

[0103]<*>H NMR (CDCI3) (lndan-4-ilamin) 67,69 (d, IH, Har, J=8,l); 7,18 (t, IH, Har, J= 8,1); 7,04 (d, IH, Har, J=8,0); 6,88 (br s, 2H, NH2); 2,93 (t, 2H, CH2, J=7,5); 2,84 (t, 2H, CH2, J=7,4); 2,11 (qn, 2H, CH2, J=7,5)

b) Pripremanje derivata indana42

[0104]lndan-4-ilamin rastvoren je u čistom anhidridu sirčetne kiseline na 0°C. Dobijeni talog, koji se

ubrzo pojavljuje, filtriran je i ispiran vodom. Proizvod je dobijen sa prinosom od 90% (sivo bela čvrsta supstanca) i dovoljno je čist za upotrebu u sledećoj fazi bez dodatnog prečišćavanja.

[0105]<*>H NMR (CDCI3) 67,73 (d, IH, Har, J=8,l); 7,15 (t, IH, Har, J=8,l); 7,02 (d, IH, Har, J=8,0); 6,96 (br s, IH, NH); 2,95 (t, 2H, CH2, J=7,5); 2,81 (t, 2H, CH2, J=7,4); 2,18 (s, 3H, CH3); 2,10 (qn, 2H, CH2, J=7,5).

[0106]Gore dobijeno jedinjenje (lg) rastvoreno je u 20 ml glacijalne sirćetne kiseline i dodat je sveže pripremljen rastvor hlora u glacijalnoj sirćetnoj kiselini (1 eq). Nakon 20 min, dodato je 30 ml vode i mešavina je mućkana 10 min. Talog koji se pojavio filtriran je i ispiran zasićenim vodenim rastvorom natrijum karbonata, sa 20% Na2S205i vodom. Proizvod je osušen u eksikatoru do jedinjenja 7-hloro-4-acetamidoindan sa prinosom od 96% u obliku bele čvrste supstance.

[0107]?H NMR (CDCI3) 67,72 (d, IH, Har, J=8,6); 7,12 (d, IH, Har J=8,6); 7,0 (br s, IH, NH); 2,99 (t, 2H, CH2, J=7,5); 2,87 (t, 2H, CH2, J=7,5); 2,16 (s, 3H, CH3); 2,11 (qn, 2H, CH2, J=7,5).

[0108]7-hloro-4- acetamidoindan (lg) je resuspendovan u 50 ml 4N HCI i mešavina je zagrevana pod refluksom u toku 2h. Nakon hlađenja, mešavina je ispirana sa AcOEt, alkalovana sa NaOH granulama dok pH nije postao slabo bazni. Mešavina je ekstrahovana sa Et20. Organska faza ispirana je vodom, slanim rastvorom i osušena preko anhidrida natrijum sulfata. Rastvarač je ispario ianilin 42 jedobijen sa skoro kvantitativnim prinosom.

[0109]<*>H NMR (CDCI3) 6 7,01 (d, IH, Har, J=8,4); 6,47 (d, IH, Har, J=8,4); 3,55 (br s, 2H, NH2); 2,94 (t, 2H, CH2, J=7,5); 2,83 (t, 2H, CH2, J=7,5); 2,13 (qn, 2H, CH2, J=7,4).

c) Pripremanje derivata indana 43

[0110]Postupak je isti kao i za anilin42 osimšto se koristi brom umesto hlora.

[0111]Jedinjenje 7-bromo-4-acetamidoindan dobijeno je sa prinosom od 92% u obliku bele čvrste supstance.

[0112]<*>H NMR (CDCI3) 67,65 (d, IH, Har, J=8,6); 7,28 (d, IH, Har, J=8,6); 6,89 (br s, IH, NH); 2,97 (t, 2H, CH2, J=7,6); 2,90 (t, 2H, CH2, J=7,5); 2,18 (s, 3H, CH3); 2,13 (qn, 2H, CH2, J=7,6). Jedinjenje 7-bromo-4-acetamidoindan rastvoreno je u dioksanu (10 ml) i mešavina je degazirana i stavljena u atmosferu argona. Dodato je Pd (PPh3)4(10 mol.%) i 5 ml 2 N Na2C03. Zatim je trimetilboroksin (1,5 eq) dodat mešavini preko šprica i sve je zagrevano pod refluksom u toku lOh. Nakon hlađenja, reakciona mešavina razblažena je sa 5 ml vode i filtrirana. Mešavina je ekstrahovana sa dihlorometanom, pri čemu je organska faza osušena preko anhidrida natrijum sulafata, a rastvarač je ispario pod smanjenim pritiskom. Proizvod je prečišćen "flash" hromatografijom (AcOEt-heksan; 3-7) da bi se dobilo jedinjenje 7-metil-4-acetamidoindan sa 80% prinosa u obliku bele čvrste supstance.

[0113]<*>H NMR (CDCI3) 67,57 (d, IH, Har, J=8,2); 6,96 (d, IH, Har, J=8); 6,89 (br s, IH, NH); 2,86 (t, 2H, CH2, J=7,4); 2,82 (t, 2H, CH2, J=7,4); 2,22 (s, 3H, CH3(ar)); 2,17 (s, 3H, CH3); 2,10 (qn, 2H, CH2, J=7,5).

[0114]7-metil-4-acetamidoindan hidralizovan je na isti način kao 7-hloro-4-acetamidoindan gore. Jedinjenje43dobijeno je kao braon ulje sa prinosom od 95%.

[0115]<*>H NMR (CDCI3) 66,81 (d, IH, Har, J=7,7); 6,46 (d, IH, Har, J=7,8); 3,44 (br s, 2H, NH2); 2,84 (t, 2H, CH2, J=7,5); 2,76 (t, 2H, CH2, J=7,4); 2,18 (s, 3H, CH3(ar)); 2,12 (qn, 2H, CH2, J=7,5).

d) Pripremanje derivata 44

[0116]Postupak koji je korišćen je isti kao i za derivat42ali je početno jedinjenje indan-5-ilamin.

[0117]<*>H NMR (CDCI3) 6 7,11 (s, IH, Har); 6,72 (s, IH, Har); 3,92 (br s, 2H, NH2); 2,81 (t, 4H, 2 x CH2, J=7,5); 2,03 (qn, 2H, CH2, J=7,4).

A.1.4 Pripremanje aminopirolina 1-27

[0118]Rastvor odgovarajućeg laktama28-33(5 mmol) i odabranog derivata anilina pripremljeni su u dihloroetanu (10 ml) u atmosferi argona. POCI3(1 eq) dodat je kap po kap mešavini, koja je potom zagrevana do 60°C 6h. Mešavina je ohlađena i hidrolizovana sa 5 ml zasićenog vodenog rastvora Na2C03. Vodena faza je dvaput ekstrahovana sa dihlorometanom. Organska faza je osušena preko anhidrida natrijum slufata a rastvarač je ispario pod smanjenim pritiskom. Proizvod je prečišćen "flash" hromatografijom (3% TEA u AcOEt) da bi se dobio jedan od aminopirolina1-27.

[0119]Dobijeni proizvodi okarakterisani su dole pomoću njihovog NMR spektra.

(3-Hloro-2-metil-fenil)-(4-metil-4,5-dihidro-3Hpirol-2-il) -amin hidrohlorid (1).

[0120]<*>H NMR (D20) 67,45 (d, IH, Har, J=7,9); 7,25 (d, IH, Har, J=7,9); 7,20 (t, IH, Har, J=7,8); 3,73-3,68 (m, IH, 1/2 CH2); 3,22-3,16 (m, 2 H, 1/2 CH2+ CH); 2,77-2,71 (m, 2H, CH2); 2,22 (s, 3H, CH3); 1,10 (d, 3H, CH3, J=6,5).<13>C NMR (D20) 6169,1; 135,5; 133,4; 132,3; 130,1; 128,1; 125,3; 54,2; 37,9; 29,5; 18,1; 14,2. Anal. (Ci2H15CIN2, HCI) C, H, N.

(3-Hloro-2-metil-fenil)-(5- (2-metil-propil) -4,5-dihidro-3Hpirol-2-il) -amin hidrohlorid (2).

[0121]<*>H-NMR (400 MHz, MeOH-d4) 67,54 (d, IH, J=8 Hz), 7,36 (m, 2H), 4,12 (m, IH), 3,18 (m, 2H), 2,36 (s, 3H), 1,95 (s, IH), 1,66 (m, 2H), 1,46 (m, IH), 0,95 (d, 6H, J=8Hz).<13>C-NMR 6 (100 MHz, MeOH-d4) 6 131,2 ,129,4 , 126,5 , 61,6 , 61,4, 31,5 , 31,4, 27,9 , 27,8 , 26,2 , 23,6 , 23,5 , 22,6 , 22,4 , 15,2 MS-ESI (m/z): [M+H]<+>izračunato za C15H22CIN2: 265. Nađeno: 265

(2,6-Dimetil-fenil)-(5-metil-4,5-dihidro-3Hpirol-2-il) -amin hidrohlorid (3). (nije uključeno u pronalazak)

[0122]<*>H NMR (D20)67,24 (d, IH, Har, J=7,6); 7,17 (t, IH, Har, J=7,7); 7,06 (d, IH, Har, J=7,6); 4,02 (h, IH, CH, J=6,4); 3,09-2,97 (m, 2H, CH2); 2,37-2,31 (m, IH, 1/2 CH2); 2,24 (s, 3H, CH3); 2,08 (s, 3H, CH3); 1,86-1,75 (m, IH, 1/2 CH2); 1,13 (d, 3H, CH3, J=6,4).<13>C NMR (D20)6 168,2;139,2; 133,5; 133,1; 131,2; 126,6; 124,0; 56,2; 43,8; 37,0; 28,6; 24,9; 17,2. Anal. (C13H18N2, HCI) C, H, N.

(3-Hloro-2-metil-fenil)-(5-metil-4,5-dihidro-3H-pirol-2-il)-amin hidrohlorid (4).

[0123]<*>H NMR (CDCI3)6 7,41(d, IH, Har, J=7,8); 7,23 (d, IH, Har, J=7,9); 7,18 (t, IH, Har, J=7,8); 4,02 (m, IH, CH, J=6,4); 3,11-3,05 (m, 2H, CH2); 2,38-2,30 (m, IH, 1/2 CH2); 2,25 (s, 3H, CH3); 2,11 (s, 3H, CH3); 1,88-1,78 (m, IH, 1/2 CH2); 1,13 (d, 3H, CH3, J=6,4).<13>C NMR (D20)6 168,7;139,5; 133,4; 132,8; 130,5; 126,8; 123,7; 56,2; 32,3; 30,5; 29,7; 24,9; 20,2. Anal. (C12H15CIN2, HCI) C, H, N.

lndan-4-il-(5-metil-4,5-dihidro-3Hpirol-2-il) -amin hidrohlorid (5).

[0124]<*>H NMR (D20 57,28 (d, IH, Har, J=7,5); 7,21 (t, IH, Har, J=7,6); 7,02 (d, IH, Har, J=7,6); 4,07 (h, IH, CH, J=6,4); 3,04-2,88 (m, 2H, CH2); 2,88 (t, 2H, CH2, J=7,5); 2,74 (t, 2H, CH2, J=7,4); 2,37 (m, IH, 1/2 CH2); 2,00 (qn, 2H, CH2, J=7,3); 1,83-1,75 (m, IH, 1/2 CH2); 1,17 (d, 3H, CH3, J=6,4).<13>C NMR (D20) 6168,0; 147,6; 140,3; 130,7; 127,9; 125,0; 122,6; 56,8; 32,6; 30,1; 29,9; 28,2; 24,8; 19,9. Anal. (C14H18N2,

HCI) C, H, N.

(2,3-Dimetil-fenil)-(5-metil-4,5-dihidro-3Hpirol-2-il) -amin hidrohlorid (6).

[0125]<*>H NMR (D20)67,24 (d, IH, Har, J=7,6); 7,17 (t, IH, Har, J=7,7); 7,06 (d, IH, Har, J=7,6); 4,02 (h, IH, CH, J=6,4); 3,09-3,01 (m, 2H, CH2); 2,39-2,29 (m, IH, 1/2 CH2); 2,24 (s, 3H, CH3); 2,08 (s, 3H, CH3); 1,85-1,78 (m, IH, 1/2 CH2); 1,13 (d, 3H, CH3, J=6,4).<13>C NMR (D20)6 168,2;139,2; 133,5; 133,1; 131,2; 126,6; 124,0; 56,2; 43,8; 37,0; 28,6; 24,9; 17,2. Anal. (Ci3H18N2.HCI) C, H, N.

lndan-4-il- (4-metil-4,5-dihidro-3Hpirol-2-il) -amin hidrohlorid (7).

[0126]<*>H NMR (D20)67,28 (d, IH, Har, J=7,5); 7,21 (t, IH, Har, J=7,6); 7,03 (d, IH, Har, J=7,5); 3,70 (dd, 1 H, 1/2 CH2, J=10,8, J=7,8); 3,19 (dd, 1 H, 1/2 CH2J=11, J=6); 3,17-3,11 (m, IH, 1/2 CH2); 2,89 (t, 2H, CH2, J=7,4); 2,74 (t, 2H, CH2, J=7,4); 2,68-2,61 (m, 2 H, CH + 1/2 CH2); 2,01 (qn, 2H, CH2, J=7,5); 1,10 (d, 3H,

CH3, J=7).<13>C NMR (D20) <5 168,3; 147,6; 140,2; 130,5; 127,9; 124,9; 122,5; 54,1; 37,8; 32,6; 29,9; 29,5; 24,7; 17,6. Anal. (C14H18N2, HCI) C, H, N

(7-Hloro-indan-4-il)-(4-metil-4,5-dihidro-3H-pirol-2-il)-amin hidrohlorid (8).

[0127]<*>H NMR (D20) 6 7,22 (d, IH, Har, J=8,3); 7,01 (d, IH, Har, J=8,4); 3,70 (dd, 1 H, 1/2 CH2, J=10,9, J=7,7); 3,20 (dd, 1 H, 1/2 CH2, J=10,9, J=7,2); 3,15-3,09 (m, IH, 1/2 CH2); 2,93 (t, 2H, CH2, J=7,6); 2,82 (t, 2H, CH2, J=7,5); 2,69-2,61 (m, 2H, CH + 1/2 CH2); 2,04 (qn, 2H, CH2, J=7,6); 1,08 (d, 3H, CH3, J=6,8).<13>C NMR (D20) 6168,5; 145,2; 142,4; 130,4; 129,1; 127,8; 124,5; 54,2; 37,9; 32,2; 30,9; 29,5; 23,8; 17,7. Anal.

(Ci4H17CIN2, HCI)C, H, N.

(7-Metil-indan-4-il)-(4-metil-4,5-dihidro-3H-pirol-2-il)-amin hidrohlorid (9).

[0128]<*>H NMR (D20) 6 7,06 (d, IH, Har, J=8); 6,95 (d, IH, Har, J=8); 3,7 (dd, 1 H, 1/2 CH2, J=10,8, J=7,7); 3,21-3,09 (m, 2H, 1/2 CH2+ CH); 2,82 (t, 2H, CH2, J=7,5); 2,75 (t, 2H, CH2, J=7,5); 2,70-2,64 (m, 2H, CH2); 2,19 (s, 3H, CH3); 2,01 (qn, 2H, CH2, J=7,5); 1,09 (d, 3H, CH3, J=6,7).<13>C NMR (D20) 6168,4; 145,9; 139,8; 135,2; 132,4; 128,5; 128,1; 122,8; 54,0; 37,8; 31,3; 30,1; 29,6; 24,2; 18,1; 17,7. Anal. (C15H20N2, HCI) C, H,

N.

1- (3,4-dihidro-2H-pirol-5-il)-2-metilindolin hidrohlorid( 10).

[0129]<*>H-NMR (400 MHz, MeOH-d4) 6 7,44-7,29 (m, 4H); 4,74 (m, IH); 3,86 (m, 2H); 6,62-3,56 (m, 2H); 3,29-3,23 (1 H); 2,88-2,84 (m, IH); 2,41-2,32 (m, 2H); 1,35 (d, 3H, J=5Hz). C-NMR 6 (100 MHz, MeOH-d4 6 116,7; 140,5; 134,5; 129,3; 128,0; 127,9; 117,0; 61,8;

37,0; 33,1; 22,1; 19,3.

MS-ESI ( m/ i) : [M+H]<+>izračunato za C13H17N2: 201. Nađeno: 201

7-metil-l-(3-metil-3,4-dihidro-2H-pirol-5-il)indolin hidrohlorid ( 11).

[0130]<*>H-NMR (400 MHz, MeOH-d4) 6 7,28-7,20 (m, 3H); 4,282-4,24 (m, 2H); 3,98-3,93 (m, IH); 3,46-3,39 (m, 2H); 3,23-3,20 (m, 2H); 2,95-84 (m, 2H); 2,29 (s, 3H); 1,26 (d, 3H, J=8Hz).<13>C-NMR 6 (100 MHz, MeOH-d4) 6 168,4; 140,1; 137,8; 131,9; 129,5; 128,8; 124,3; 57,0, 56,2; 54,9; 41,2; 31,6; 31,0; 19,4; 18,7. MS-ESI (m/z): [M+H]<+>izračunato za C13H19N2: 215. Nađeno: 215.

2- metil-l-(3-metil-3,4-dihidro-2H-pirol-5-il) indolin hidrohlorid (mešavinadiastereoizomera)( 12 ).

[0131]Ulje, 'H-NMR (400 MHz, aceton-d6) 6 7,43-7,17 (m, 4H); 5,30-5,28 (m, IH); 3,96-3,85 (m, 2H); 3,53-327 (m, 3H); 2,91-2,74 (m, 3H); 1,32-1,04 (m, 6H).

[0132]<13>C-NMR 6 (100 MHz, aceton-d6) 6 164,9 (164,4); 140,7; 134,2; 128,7; 127,4; 116,7 (116,6); 61,2 (61,1); 40,6 (40,4); 31,7; 30,4); 25,7; 19,9 (19,8); 18,0

MS-ESI (m/z): [M+H]<+>izrašunato za Ci3H19N2: 215. Nađeno: 215.

(2-Hlorofenil)-(5-metil-4,5-dihidro-3H-pirol-2-il)-amin hidrohlorid ( 13). (nije uključen u ovaj

pronalazak)

[0133]mp 173-4T.<X>H NMR (D20) 67,67 (M, IH, H ar); 7,50-7,53 (m, 3H, Har); 4,21 (m, IH, CH); 3,18 (m, 2H, CH2); 2,51 (m, IH, 1/2 CH2); 1,94 (m, IH, 1/2 CH2); 1,30 (d, 3H, CH3).<13>C NMR (D20) 6 168,1; 132,5; 131,4; 131,3; 131,0; 129,3; 128,6; 57,9; 30,9; 28,8; 20,5. Anal. (CUH13CIN2, HCI) C, H, N.

(2-Fluoro-5-metil-fenil)-(5-metil-4,5-dihidro-3H-pirol-2-il)-amin hidrohlorid (14). (nije uključen u ovaj

pronalazak

[0134]<*>H NMR (D20) 6 7,20-7,09 (m, 3H, Har); 4,11 (hex, IH, CH, J=6,8); 3,09-2,98 (m, 2H, CH2); 2,42-2-37 (m, IH, 1/2 CH2); 2,25 (s, 3H, CH3); 1,85-1,73 (m, IH, 1/2 CH2); 1,08 (d, 3H, CH3, J=6,5).<13>C NMR (D20) 6168,4; 154,3 (d, jVf= 244,5); 135,7; 130,9; 126,9; 121,6 (d, J<2>C-f= 13,2); 116,4 (d, J<2>C-f= 19,5); 57,2; 30,5; 28,1; 21,3; 19,7.<19>F NMR (D20) 6 -128,3. Anal. (C12H15FN2, HCI) C, H, N.

(2-Hloro-5-metil-fenil)-(5-metil-4,5-dihidro-3Hpirol-2-il)-amin hidrohlorid (15). (nije uključen u ovaj

pronalazak

[0135]<*>H NMR (D20) 67,38 (dd, IH, Har, J=3,l, J=7,8); 7,18 (d, IH, Har, J=2,9); 7,16 (dd, IH, Har, J=3,0, J=7,7); 4,09-3,96 (m, IH, CH); 3,07-2,94 (m, 2H, CH2); 2,41-2,33 (m, IH, 1/2 CH2); 2,24 (s, 3H, CH3); 1,82-1,72 (m, IH, 1/2 CH2); 1,16 (d, 3H, CH3,J=6,3).<13>C NMR (D20)5168,5; 139,4; 131,2,130,2; 128,0; 126,8; 124,4; 57,1; 30,2; 28,1; 19,8; 19,7. Anal. (C12H15CIN2, HCI) C, H, N

(4-Fluoro-2-metil-fenil)-(5-metil-4,5-dihidro-3H-pirol-2-il)-amin hidrohlorid ( 16). (nije uključen u ovaj

pronalazak

[0136]<*>H NMR (D20) 6 7,22 (dd, IH, Har, J=5,4, J=8,7); 7,09 (dd, IH, Har, J=2,9, J=8,7); 7,0 (dt, IH, Har, J=2,9, J=8,8); 4,14 (hex, IH, CH, J=6,7); 3,11-3,03 (m, 2H, CH2); 2,45-2,97 (m, IH, 1/2 CH2); 2,17 (s, 3H, CH3); 1,81-1,74 (m, IH, 1/2 CH2); 1,11 (d, 3H, CH3, J=6,4).<13>C NMR (D20) 6169,8; 161,9 (d, J1^ 248,8); 137,8 (d, J<3>C.F= 9,2); 129,3 (d, J<4>C.F= 2,8); 128,3 (d, J<3>C.F= 9,6); 117,5 (d, J2GF= 22,7); 114,2 (d, J<2>C.F= 23,0); 55,6; 31,5; 28,8; 19,7; 19,5.<19>F NMR (D20) 6 -113,4. Anal. (C12H15FN2, HCI) C, H, N.

(5,6,7,8-tetrahidro-naftalen-l-il)-(5-Metil-4,5-dihidro-3Hpirol-2-il)-amin hidrohlorid (17). (nije

uključen u ovaj pronalazak

[0137]<J>H NMR (D20) 5 7,17 (d, 2H, Har, J=7); 7,03 (t, IH, Har, J=7,l); 4,06-4,00 (m, IH, CH); 3,04-2,97 (m, 2H, CH2); 2,72 (t, 2H, CH2, J=5,7); 2,51 (t, 2H, CH2, J=5,9); 2,40-2,32 (m, IH, 1/2 CH2); 1,81-1,61 (m, 5H, 1/2 CH2+ 2xCH2); 1,15 (d, 3H, CH3, J=6,4).<13>C NMR (D20) 6168,6; 140,1; 133,9; 133,0; 130,2; 126,6; 123,6; 56,6; 29,9; 28,9; 28,2; 24,1; 22,1; 22,0; 19,8. Anal. (C15H20N2.HCI) C, H, N.

lndan-5-il-(5-metil-4,5-dihidro-3Hpirol-2-il) -amin hidrohlorid (18). (nije uključen u ovaj pronalazak

[0138]<*>H NMR (D20) 6 7,26 (d, IH, Har, J=8,0); 7,08 (d, IH, Har, J=l,5); 6,96 (dd, IH, Har, J=l,9, J=7,9); 4,03 (m, IH, CH, J=6,6); 2,99-2,92 (m, 2H, CH2); 2,80 (t, 4H, 2xCH2, J=7,5); 2,35-2,29 (m, IH, 1/2 CH2); 1,97 (qn, 2H, CH2, J=7,5); 1,79-1,71 (m, IH, 1/2 CH2); 1,16 (d, 3H, CH3, J=6,4).<13>C NMR (D20) 6 167,7; 145,7; 145,1; 132,7; 125,5; 121,9; 120,1; 56,9; 32,3; 32,0; 30,4; 28,0; 25,3; 19,8. Anal. (C14H18N2, HCI) C,

H, N.

(6-Hloro-indan-5-il)-(5-metil-4,5-dihidro-3H-pirol-2-il)-amin hidrohlorid (19). (nije uključen u ovaj

pronalazak

[0139]<*>H NMR (D20) 8 7,18 (s, IH, Har); 6,91 (s, IH, Har); 4,07 (m, IH, CH, J=6,6); 2,97-2,90 (m, 2H, CH2); 2,81 (t, 4H, 2xCH2, J=7,5); 2,36-2,28 (m, IH, 1/2 CH2); 1,97 (qn, 2H, CH2, J=7,5); 1,79-1,71 (m, IH, 1/2 CH2); 1,63 (d, 3H, CH3, J=6,4).<13>C NMR (D20) 6 168,5; 145,3; 145,9; 133,4; 127,5; 122,7; 121,6; 57,2; 32,2; 31,8; 30,6; 27,9; 25,5; 21,1. Anal. (C14H17CIN2, HCI) C, H, N.

(7-Hloro-indan-4-il)-(5-metil-4,5-dihidro-3Hpirol-2-il) -amin hidrohlorid (20).

[0140]<*>H NMR (D20) 6 7,22 (d, IH, Har, J=8,3); 7,01 (d, IH, Har, J=8,4); 4,05 (h, IH, CH, J=6,4); 3,05-2,99 (m, 2H, CH2); 2,93 (t, 2H, CH2, J=7,6); 2,81 (t, 2H, CH2, J=7,5); 2,40-2,32 (m, IH, 1/2 CH2); 2,03 (qn, 2H, CH2, J=7,6); 1,82-1,77 (m, IH, 1/2 CH2); 1,17 (d, 3H, CH3, J=6,4).<13>C NMR (D20) 6168,4; 145,1; 142,5; 130,5; 129,2; 127,8; 124,4; 56,8; 32,6; 30,1; 29,9; 28,2; 24,8; 19,9. Anal. (Ci4H18CIN2, HCI) C, H, N.

(2,3-Dimetil-fenil)-(4-metil-4,5-dihidro-3H-pirol-2-il)-amin hidrohlorid( 21).

[0141]<*>H NMR (D20) 6 7,21 (d, IH, Har, J=7,7); 7,16 (t, IH, Har, J=7,7); 7,03 (d, IH, Har, J=7,6); 3,71-3,65 (m, IH, 1/2 CH2); 3,23-3,17 (m, 2H, 1/2 CH2+ CH); 2,74-2,70 (m, 2H, CH2); 2,30 (s, 3H, CH3); 2,11 (s, 3H, CH3); 1,12 (s, 6H, 2xCH3).<13>C NMR (D20) 6168,7; 139,5; 133,4; 132,8; 130,5; 126,8; 123,7; 54,5; 43,7; 37,0; 25,6; 19,4; 12,3. Anal. (C13H18N2, HCI) C, H, N.

lndan-5-il-(4-metil-4,5-dihidro-3H-pirol-2-il)-amin hidrohlorid (22). (nije uključen u ovaj pronalazak

[0142]<*>H NMR(D20) 8 7,26 (d, IH, Har, J=8,0); 7,08 (d, IH, Har, J=l,5); 6,96 (dd,IH,Har, J=l,9, J=7,9);

4,03 (h, IH, CH, J=6,6); 2,97-2,93 (m, 2H, CH2); 2,80 (t, 4H, 2xCH2, J=7,5); 2,35-2,29 (m, IH, 1/2 CH2); 1,97 (qn, 2H, CH2, J=7,5); 1,79-1,71 (m, IH, 1/2 CH2); 1,16 (d, 3H, CH3, J=6,4).<13>C NMR (D20)8 167,7;145,7; 145,1; 132,7; 125,5; 121,9; 120,1; 56,9; 32,3; 32,0; 30,4; 28,0; 25,3; 19,8. Anal. (C14H18N2, HCI) C, H, N.

(5,6,7,8-tetrahidro-naftalen-l-il)-(4-Metil-4,5-dihidro-3H-pirol-2-il)-amin hidrohlorid (23). (nije

uključen u ovaj pronalazak

[0143]<*>H NMR (D20) 57,17 (d, 2H, Har, J=7); 7,03 (t, IH, Har, J=7,l); 4,07-3,99 (m, IH, CH); 3,04-2,96 (m, 2H, CH2); 2,72 (t, 2H, CH2, J=5,7); 2,51 (t, 2H, CH2, J=5,9); 2,39-2,33 (m, IH, 1/2 CH2); 1,81-1,61 (m, 5H, 1/2 CH2+ 2xCH2); 1,15 (d, 3H, CH3, J=6,4).<13>C NMR (D20) 6 168,6; 140,1; 133,9; 133,0; 130,2; 126,6; 123,6; 56,6; 29,9; 28,9; 28,2; 24,1; 22,1; 22,0; 19,8. Anal. (C15H20N2, HCI) C, H, N.

lndan-4-il-(5,5-dimetil-4,5-dihidro-3H-pirol-2-il)-amin hidrohlorid (24). (nije uključen u ovaj pronalazak

[0144]<*>H NMR (D20) 6 7,27 (t, IH, Har, J=8); 7,19 (d, IH, Har, J=7,5); 7,01 (d, IH, Har, J=7,6); 3,08 (t, 2H, CH2, J=7,9); 2,88 (t, 2H, CH2, J=7,5); 2,76 (t, 2H, CH2, J=7,6); 2,13-1,95 (m, 4H, 2xCH2); 1,27 (s, 6H, 2xCH3).<13>C NMR (D20)6166,7; 147,5; 140,3; 130,6; 127,9; 125,0; 122,7; 64,7; 34,3; 32,6; 30,0; 29,7; 26,8; 24,8. Anal. (Ci5H21CIN2, HCI) C, H, N.

(3-Hloro-2-metil-fenil)-(5,5-dimetil-4,5-dihidro-3H-pirol-2-il)-amin hidrohlorid (25). (nije uključen u

ovaj pronalazak

[0145]<*>H NMR (D20)87,40 (d, IH, Har, J=7,9); 7,21 (d, IH, Har, J=7,9); 7,18 (t, IH, Har, J=7,8); 3,08 (t, 2H, CH2, J=7,6); 2,19 (s, 3H, CH3); 1,95 (t, 2H, CH2, J=7,8); 1,26 (s, 6H, 2xCH3).<13>C NMR (D20)6166,7; 135,5; 133,4; 130,1; 128,1; 125,3; 65,0; 37,4; 29,6; 26,8; 24,9. Anal. (Ci3H17CIN2, HCI) C, H, N.

(2,3-Dimetil-fenil)-(4,4-dimetil-4,5-dihidro-3H-pirol-2-il)-amin hidrohlorid ( 26). (nije uključen u ovaj

pronalazak

[0146]<*>H NMR (D20)87,24 (d, IH, Har, J=7,6); 7,17 (t, IH, Har, J=7,7); 7,06 (d, IH, Har, J=7,6); 3,32 (s, 2H, CH2); 2,87 (s, 2H, CH2); 2,25 (s, 3H, CH3); 2,09 (s, 3H, CH3); 1,16 (s, 6H, 2xCH3).<13>C NMR (D20) 5 168,7; 139,5; 133,4; 132,8; 130,5; 126,8; 123,7; 59,2; 43,7; 37,0; 25,6; 19,4; 12,3. Anal. (Ci4H20N2, HCI) C, H, N.

(3-Hloro-2-metil-fenil)-(4,4-dimetil-4,5-dihidro-3Hpirol-2-il)-amin hidrohlorid (27). (nije uključen u

ovaj pronalazak

[0147]<*>H NMR (D2087,45 (d, IH, Har, J=7,9); 7,25 (d, IH, Har, J=7,9); 7,20 (t, IH, Har, J=7,8); 3,70 (m, IH, 1/2 CH2); 3,19 (m, 2H, 1/2 CH2+ CH); 2,74 (m, 2H, CH2); 2,22 (s, 3H, CH3); 1,10 (d, 3H, CH3, J=6,5).<13>C NMR (D20)8 169,1;135,5; 133,4; 130,1; 128,1; 125,3; 54,2; 37,9; 29,5; 18,1; 14,2. Anal. (C13H17CIN2, HCI)

C, H, N.

OPIS CRTEŽA

[0148] Fig. 1Aprikazuje ispitivanja kompetitivnog vezivanja za [<125>I]-PIC u membranama 3T3 ćelija iFig. 1Bprikazuje ispitivanja kompetitivnog vezivanja za [<125>I]-PIC u membranama PC12 ćelija izvedena u skladu sa Primerom 1.3. Svaka tačka je srednja vrednost 2 do 4 eksperimenta, izvedenih u tripletu.Fig.1A : Ordinata predstavlja specifično vezivanje za [<125>l] PIC, a apscisa predstavlja log [M] za klonidin (kvadrat) i za jedinjenje 1 prema pronalasku (trouglovi).Fig. 1B: Ordinata predstavlja specifično vezivanje za [<125>l] PIC, a apscisa predstavlja log [M] jedinjenja 1.FIGURE2 prikazuje efekat jedinjenja 1 prema ovom pronalasku u dozi od 3 u.mol/1 na sekreciju adiponektina mereno u odsustvu ili prisustvu efaroksana u dozi od 100 u.mol/1 prema primeru 1.4.

<***>P <0,001 u poređenju sa kontrolom; ### p <0,001 u poređenju sa jedinjenjem 1.

Ordinata predstavlja sekreciju adiponektina izraženu u ng/ml/mg proteina.

Apscisa sa leva na desno predstavlja: crni histogram: kontrolna grupa, beli histogram: grupu tretiranu Efaroksanom (100 u.mol/ml), sivi histogram: grupu tretiranu jedinjenjem 1 (3 umol/ml) i šrafiran histogram: grupu tretiranu jedinjenjem 1 (3 (imol/ml) + efaroksan (100 (imol/mL).FIGURE 3 predstavlja listu sistema na kojima je pomeraj specifičnog vezivanjaod strane jedinjenja 1 meren prema primeru 3.FIGURE 4A do 4Cprikazuju efekte akutnog tretiranja jedinjenjem 1 u dozi od 10 mg/kg (i.v.) na hemodinamičke parametre i simpatičku aktivnost kod Sprague-Dawley pacova anesteziranih uretanom (1,5 g/kg i.p.) prema primeru 4.

FIGURE 4Aprikazuje promenu renalne simpatičke aktivnosti u funkciji vremena.

Ordinata: merenje renalne simpatičke aktivnosti.

Apscisa: vreme u minutima (strelica pokazuje vreme davanja jedinjenja 1).

FIGURE 4Bprikazuje promenu arterijskog pritiska u mm Hg u funkciji vremena. Crni krugovi predstavljaju srednji arterijski pritisak; crni dijamanti usmereni na gore predstavljaju sistolni arterijski pritisak, a crni dijamanti usmereni na dole predstavljaju dijastolni arterijski pritisak.

Ordinata: merenje srednjeg (PAM), sistolnog (PAS) i dijastolnog (PAD) arterijskog pritiska.

Apscisa: vreme u minutima (strelica pokazuje vreme davanja jedinjenja 1).

FIGURE 4Cprikazuje promenu srčanog pulsa (FC) u bpm u funkciji vremena.

Ordinata: srčani puls (HR) izražen u otkucajima u minuti (bpm)

Apscisa: vreme u minutima (strelica pokazuje vreme davanja jedinjenja 1).

FIGURE 5Ai5Bprikazuju efekte hroničnog tretiranja jedinjenjem 1 (20 mg/kg/d u pijaćoj vodi) na telesnu masu(FIGURE 5A)i unos hrane(FIGURE 5B),kod SHHF pacova{ spontano hipertenzivni, zastoj srca; spontano hipertenzivno, kongestivno srce),tokom 12 nedeljnog perioda tretiranja, merene u skladu sa primerom 5.

FIGURE 5A: ordinata: telesna masa u gramima; apscisa: vreme u nedeljama.

Crni kvadrati predstavljaju kontrole, a crni krugovi predstavljaju grupu tretiranu jedinjenjem 1.<***>: p

<0,001 (ANOVA 2 faktora).

FIGURE 5B:ordinata: unos hrane u gramima/pacov/dan; apscisa: vreme u nedeljama.

<0,001 (ANOVA 2 faktora).

FIGURE 6Ai6Bprikazuju efekte 12-nedeljnog perioda tretiranja jedinjenjem 1 (20 mg/kg /d u pijaćoj vodi) na arterijski pritisak (FIGURE 6A) i srčani puls (FIGURE 6B) kod SHHF pacova, merene u skladu sa primerom 5.

Na kraju tretiranja, SHHF pacovi anestezirani su natrijum pentobarbitalom (50 mg/kg/i, p,), izvedena je traheotomija i ventilirani su okolnim vazduhom.

Arterijski pritisak i srčani puls zabeleženi su pomoću katetra koji je stavljen u levu femoralnu arteriju.FIGURE 6A:ordinata: arterijski pritisak u mm Hg; sa leva na desno: dijastolni arterijski pritisak (PAD), sistolni arterijski pritisak (PAS) i srednji arterijski pritisak (PAM). Crni histogrami predstavljaju kontrolnu grupu, a beli histogrami predstavljaju grupu tretiranu jedinjenjem 1.<*>: p <0,05 (Studentov t-test).FIGURE 6B:ordinata: srčani puls (FC) u otkucajima u minuti (bpm); crni histogram predstavlja kontrolnu grupu, a beli histogram predstavlja grupu tretiranu jedinjenjem 1.FIGURE 7Ado7Cprikazuju efekte 12-nedeljnog perioda tretiranja jedinjenjem 1 (20 mg/kg/d u pijaćoj vodi) na ukupan plazmatični holesterol (FIGURE 7A), trigliceride (FIGURE 7B) i slobodne masne kiseline (FIGURE 7C) u plazmi SHHF pacova, merene u skladu sa primerom 5.

Na kraju tretiranja, SHHF pacovi anestezirani su izofluranom (2,5%) nakon vremena gladovanja od 18h i uzorci krvi uzeti su iz kaudalne vene.FIGURE 7A: ordinata: ukupan holesterol (mmol/l); crni histogram: kontrolna grupa, a beli histogram: grupa tretirana jedinjenjem 1.<****>: p <0,0001 (Studentov t-test).FIGURE 7B:ordinata: trigliceridi (mmol/l); crni histogram: kontrolna grupa, a beli histogram: grupa tretirana jedinjenjem 1.<**>: p <0.01;FIGURE7C : ordinata: slobodne masne kiseline (mmol/l); crni histogram: kontrolna grupa, a beli histogram: grupa tretirana jedinjenjem 1.FIGURE 8A do8G prikazuju efekte 12-nedeljnog perioda tretiranja jedinjenjem 1 (20 mg/kg/d u pijaćoj vodi) na metabolizam glukoze kod SHHF pacova, merene u skladu sa primerom 5.

Na kraju tretiranja, SHHF pacovi anestezirani su natrijum pentobarbitalom (50 mg/kg, i.p.) nakon perioda gladovanja od 18h. U levu femoralnu venu štavljenje kateter radi uzimanja uzoraka krvi za različite doze. Radi izvođenja testa tolerancije na glukozu, dat je rastvor glukoze (0,5 g/kg, i.v.) i koncentracije glukoze u plazmi određivane su nakon 3, 6,10,15, 30 i 45 minuta.FIGURE 8A:ordinata: glukoza (mmol/l); crni histogram: kontrolna grupa, beli histogram: grupa tretirana jedinjenjem 1.FIGURE 8B:ordinata: insulin (ng/ml); crni histogram: kontrolna grupa, beli histogram: grupa tretirana jedinjenjem 1.<****>: p <0,0001 (Studentov t-test).FIGURE 8C:ordinata: (HOMA indeks insulinske rezistencije); crni histogram: kontrolna grupa, beli histogram: grupa tretirana jedinjenjem 1.<****>: p <0,0001 (Studentov t-test).FIGURE 8D:ordinata: glukagon; crni histogram: kontrolna grupa, beli histogram: grupa tretirana jedinjenjem 1.<*>: p <0,05 (Studentov t-test).FIGURE 8E:ordinata: adiponektin (u.g/ml); crni histogram: kontrolna grupa, beli histogram: grupa tretirana jedinjenjem 1.<****>: p <0,0001 (Studentov t-test).FIGURE 8F:ordinata: vreme u minutima (crni kvadrati: kontrolna grupa, beli krugovi: grupa tretirana jedinjenjem 1.FIGURE8G: ordinata: Površina ispod krive (AUC) nakon testa tolerancije na glukozu; crni histogram: kontrolna grupa, beli histogram: grupa tretirana jedinjenjem 1.

<***>: P <0,001 (Studentov t-test).

FIGURE9 daje farmakološke efekte jedinjenja 1-27 prema ovom pronalasku na srednji arterijski pritisak (PAM) i srčani puls (FC) kod anesteziranih normotenzivnih pacova merene u skladu sa primerom 6.

FARMAKOLOŠKI DEO

PRIMER 1:in vitroeksperimenti

1.1 Ćelijskakultura

[0149]3T3-L1 mišji predadipociti kultivisani su do konfluencije na 37°C u DMEM medijumu koji sadrži 4,5 g/litru D-glukozu, 10% FCS i antibiotike. Pri konfluenciji, diferencijacija 3T3-L1 adipocita inicirana je dodavanjem tokom 48 h mešavine koja sadrži 100U.M metil-izobutilksantina, 100 nM deksametazona i 175 nM insulina. Ćelije su potom supkultivisane na svaka 2-3 dana u DMEM, 10% FCS i 175 nM insulinu. Više od 95% ćelija imalo je fenotip zrelih adipocita 10 dana nakon što je postignuta konfluencija.

[0150]PC-12 ćelije kultivisane su u posudama od 75-cm<2>u DMEM (1000 mg/l glukoze) sa dodatkom 10% FBS inaktiviranog tretiranjem na 56°C, 100 U/ml penicillina i 100 u.g/ml streptomicina. Kada su ćelije postigle konfluenciju (3-4 dana nakon starta kulture), one su sakupljene i supkultivisane po akciji 0,25% tripsina za 2 minuta na 37°C. Za ispitivanja specifičnog vezivanja, uklonjen je medijum i ćelije su čuvane zamrzavanjem na -20°C do upotrebe sa membranskim preparatom.

1.2Membranskipreparati i ćelijski ekstrakti

[0151]Adipociti ispirani su dvaput ledeno-hladnim PBS, sakupljeni i homogenizovani u 25 mM Tris-HCI puferu, pH 7,5,1 mM EDTA. Homogenati su centrifugirani na 20,000xg za 15 min na 4°C, a supernatant čuvan je na -80°C do upotrebe. Ostaci su resuspendovani u 25 mM Tris-HCI puferu, pH 7,5,1 mM EDTA i čuvani na -80°C. Alikvoti homogenata i supernatanta korišćeni su za određivanje sadržaja proteina (BC Assay Uptima kit, Interchim, Montlucon, France), korišćenjem BSA proteina kao standard.

[0152]Zamrznute PC12 ćelije, oporavljene su struganjem u ledeno-hladnom Tris-HEPES puferu (5 mM

Tris-HEPES, pH 7,7, 0,5 mM EDTA, 0,5 mM EGTA i 0,5 mM MgCI2) i homogenizovane u Potter homogenizatoru. Nakon centrifugiranja na 75,000g za 20 min, talog je ispiran sa ledeno-hladnim Tris-HEPES puferom a potom ponovo centrifugiran. Ovaj poslednji postupak izveden je dvaput. Ostaci su resuspendovani u istom puferu pri koncentraciji od 1 do 2 mg proteina/ml. Membranski preparati čuvani su na -80°C do upotrebe.

1.3 Ispitivanje vezivanja sa jedinjenjem 1 na membranskim preparatima adipocita i PC12 ćelija

1. 3. 1. Postupak

[0153]Ispitivanja specifičnog kompetitivnog vezivanja izvedena su korišćenjem 0,5 nM [<125>I]-PIC u prisustvu 10 u.M rauvolscina za membrane 3T3 ćelija, ili u odsustvu rauvolscina za membrane PC12 ćelija, sa 6 različitih koncentracija liganda koje se ispituju, od IO"<9>do 10"<4>M.

[0154]Inkubacija je inicirana dodavanjem 3T3 ćelijskih membrana (10-26 ug proteina) ili PC12 ćelijskih membrana (10-25 u.g proteina) u krajnju zapreminu od 250 u.1 Tris-HEPES pufera (50 mM Tris-HEPES, pH 7,7, 0,5 mM EDTA, 0,5 mM EGTA i 0,5 mM MgCI2) i izvedena na 25°C za 45 min.

[0155]Reakcija je zaustavljena brzom vakuum filtracijom kroz GF/B filtere od fiberglasa tretirane sa 0,3% PEI korišćenjem opreme za filtraciju Brandel<®>tipa, praćeno brzim ispiranjem filtera tri puta korišćenjem 3 ml 50mM Tris-HCI pufera, pH 7,4. Radioaktivnost preostala na osušenim filterima određena je korišćenjem Minaxi gama brojača (Packard, Meriden, CT, U,S,A,)- Nespecifično vezivanje određeno je [<125>l] PIC vezivanjem u prisustvu 10 U.M PIC i predstavlja oko 43% od ukupne radioaktivnosti. Izbor 10 u.M PIC koji proizilazi iz pilot eksperimenata pokazuje da je na ovoj koncentraciji zaostalo vezivanje dobijeno sa PIC bilo slično onom dobijenom sa klonidinom.

1. 3. 2. Rezultati

[0156]Rezultati su prikazani na FIGURE 1.

[0157]Mereno je specifično vezivanje 0,5 nM [<125>I]-PIC. Bilo je od 2633 do 6652 cpm u membranskom preparatu 3T3 adipocita i od 2100 do 3400 cpm u membranskom preparatu PC12 ćelija.

[0158]U membranskim preparatima (3T3) adipocita, klonidin, referentni molekul za Rli,može da pomeri specifično vezivanje [<125>I]-PIC u preparatu 3T3 ćelijskih membrana sa dva afiniteta (IC50= 54,9 ± 5.4 nM (57% svih mesta) i 8144 ± 426 nM, n=2) pokazujući prisustvo receptora lireceptora u preparatu 3T3-L1 membrana. Dodatno, selektivno jedinjenje 1 pomera specifično vezivanje [<125>I]-PIC na\ ±receptor na mesto visokog afiniteta (IC50= 104 ± 7 nM (n=4) (Fig. 1A)).

[0159]U membranskim preparatima PC12 ćelija, jedinjenje 1 selektivno za lireceptor pomera specifično vezivanje [<125>I]-PIC sa dva afiniteta (visok afinitet IC50= 3,2 + 0,7 nM (55%) i nizak afinitet 30698 + 5433 nM n=2) kao što je prikazano na Fig.lB.

[0160]Ispitivan je afinitet za a2A-adrenergički receptor (videti Tabelu I u 2.2). Nije primećeno značajano pomeranje na koncentraciji od IO"<5>M.

[0161]Ispitivan je afinitet jedinjenja 1 za više od 50 receptora i transportera. Jedinjenje 1 nije pokazalo nikakav afinitet sličan afinitetu za imidazolinski lireceptor (FIGURE 3).

1.4 Proizvodnja adiponektina

1. 4. 1. Postupak

[0162]Za određivanje sekrecije adiponektina zrelih adipocita,diferencirani 3T3-L1 adipociti (10 dana nakon konfluencije) kultivisani su u 12-bunarnim pločama i ispirani tri puta sa DMEM, a zatim kultivisani 6 sati u samom DMEM, u odsustvu ili u prisustvu 3 U.M jedinjenja 1. U neke bunarčiće antagonist selektivan za imidazolinski lirecptore, efaroksan, je dodat (100 u.M) 30 min pre izlaganja jedinjenju 1.

[0163]Kultivisani medijum je potom oporavljen, centrifugiran 3 min na 10000 g radi uklanjanja ćelijskih kontaminenata, a supernatant je čuvan na -80°C do upotrebe. Nakon dva ispiranja sa hladnim PBS, adipociti su prikupljeni u PBS, homogenizovani i čuvani na -80°C. Alikvot adipocitnog homogenata čuvan je za određivanje proteina. Adiponektin je izmeren korišćenjem ELISA kita prateći uputstva dobavljača. Koncentracija adiponektina je normalizovana sa sadržajem ćelijskog proteina.

1. 4. 2. Rezultati

[0164]Rezultati su prikazani na FIGURE 2.

[0165]Jedinjenje 1 u dozi od 3 u.mol/1 indukovalo je povećanje sekrecije adiponektina iz 3T3-L1

adipocita (378 ± 38 vs 212,6 ± 19,1 ng/ml/mg proteina p <0,001). Predinkubacija sa efaroksanom, koji je antagonist selektivan za U receptore, u dozi od 100 urnol /I, antagonistički deluje na povećanje sekrecije adiponektina (236 ± 19,2 vs 378 ± 38 ng/ml/mg proteina, p <0,001) dok efaroksan sam u istoj dozi nema nikakav značajan efekat u odnosu na kontrolu (175,2 ± 15,5 vs 212,6 ± 19,1 ng/ml/mg proteina, p> 0,05).

PRIMER 2: Ispitivanje specifičnog vezivanja na ljudskim trombocitima.

2.1 Postupak

2. 1. 1. Ispitivanje specifičnog vezivanja U receptora.

[0166]Ispitivanja vezivanja izvedena su na 37°C korišćenjem [<125>I]LNP 911 kao radioliganda prema opisanom opštem postupku, ali adaptiranom radi ispiranja svih trombocita (Grenev, H,; Urosevic, D,; Schann, S,; Dupuy, L,; Bruban, V,; Ehrhardt, J, D,; Bousquet, P,; Dontenvvill, M. [125l]2-(2-Chloro-4-iodo-phenylamino)-5-methyl-pirroline (LNP911), a High-Afinitet Radioligand Selective for II Imidazoline Receptors. Mol. Pharmaco/. 2002, 62,181-191).

[0167]Inkubacija je inicirana dodavanjem od 900 do 950 u.1 suspenzije trombocita u koncentraciji od 500000/u.l u krajnju zapreminu od 1 ml Tirode albumina i izvedena je na 37°C za 5 min (ravnotežni uslovi). Kompetativna ispitivanja izvedena su korišćenjem pojedinačne koncentracije radioliganda (50 pM, 200 000 cpm) u prisustvu rastuće koncentracije odgovarajućeg neoznačenog liganda. Nespecifično vezivanje određeno je vezivanjem [<125>I]LNP 911 u prisustvu 100 nM neoznačenog LNP 911 i predstavljalo je oko 10% od ukupne radioaktivnosti kada se koristilo 50 pM [<125>I]LNP 911.

[0168]Reakcija je zaustavljena brzom vakuum filtracijom kroz GF/C filtere od fiberglasa praćeno sa pet brzih ispiranja filtera sa 3 ml ledeno hladnog Tirode (137 nM NaCI, 2,7 nM KCI, 12 nM NaHC03, 0,36 nM NaH2P04, PH 7,35). Radioaktivnost je merena korišćenjem gama brojača (Wallac 1410).

2. 1. 2 Ispitivanje vezivanja a2adrenergičkih receptora.

[0169]Membranski preparat pripremljen je kao što je opisano u Newman-Tancredi, A,; Nicolas, J, P,; Audinot, V,; Gavaudan, S,; Verriele, L,; Touzard, M,; Chaput, C,; Richard, N,; Millan, N. J. (Action of alpha2 Adrenoreceptor Ligands at alpha2A and 5-HT1A Receptors: the Antagonist, Atipamezole, and the Agonist, Dexmedetomidine, are Highly Selective for alpha2A Adrenorecptors. Naunyn-Schmiedeberg's Arch. Pharmacol. 1998, 358, 197-206).

[0170]Ove membrane (30 u.g proteina/ml za CHO-ha2Ai CHO-ha2B, 100 u.g proteina/ml za CHO-ha2C) inkubirane su 60 min na sobnoj temperaturi u puferu za vezivanje (33 mM Tris HCI, 1 mM EDTA, pH 7,5) u krajnjoj zapremini od 500 u± koja sadrži 0,8 ili 1 ili 2 nM [<3>H]RX821002 respektivno za adrenergičke receptore ha2A, ha2Bi ha2C.

[0171]Inkubacija je zaustavljena brzom vakuum filtracijom kroz GF/C filtere od fiberglasa praćeno sa tri sukcesivna ispiranja sa ledeno hladnim puferom za vezivanje.

[0172]Nespecifično vezivanje određeno je korišćenjem 10U.M fentolamina.

2. 2 Rezultati

[0173]Kompetitivna ispitivanja analizirana su nelinearnom regresijom korišćenjem GraphPad programa.

[0174]/Ci vrednosti određene su koršćenjem postupka koji su opisali Cheng i Prussof (Cheng, Y. C,; Prusoff, W. H. Relationship betvveen the Inhibition Constant (Ki) and the Concentration of Inhibitor wich Causes 50 per Cent Inhibition (150) of an Enzvmatic Reaction. Biochem. Pharmacol. 1973, 22,3099-3108).

Rezultati su prikazani u Tabeli I dole:

[0175]Resultati prikazani gore jasno pokazuju specifičnost jedinjenja prema ovom pronalasku za imidazolinski receptor I tipa u odnosu na a2-adrenergičke receptore.

PRIMER 3: Ispitivanje specifičnog vezivanja jedinjenja 1 na različite receptore, transportere i enzime

3.1. Postupak

[0176]Ispitivano je jedinjenje 1 od dve koncentracije IO"<7>(1.0E-07) M i IO"<5>M (1.0E-05) na različite receptore, transportere i enzime korišćenjem postupaka opisanih u literaturi i prilagođenih za laboratoriju.

3.2. Rezultati

[0177]Oni su dati u tabeli iz FIGURE 3.

[0178]Prikazani rezultati jasno pokazuju da se jedinjenje 1 ne vezuje ni sa jednim od ispitivanih receptora, transportera i enzima sa afininitetom sličnom afinitetu jedinjenja 1 za Rli receptor.

PRIMER 4: Merenje renalne simpatičke nervne aktivnosti (ANSR): Efekat akutnog tretiranja

jedinjenjem 1 sa 10 mg/kg (i.v.) na hemodinamičke parametre i simpatičku aktivnost.

4.1. Postupak

[0179]Muški Sprague-Davvlev pacovi (10 nedelja; Laboratorije Charles River, L'Arbresle, France) anestezirani su uretanom (1,5 g/kg i.p., sa dodatkom 0,1 g/kg i.v. ukoliko je potrebno) i postavljeni na uređaj za zagrevanje da bi se održala rektalna temperatura od 37°C. Katetri su stavljeni u donju abdominalnu aortu i donju šuplju venu radi merenja arterijskog pritiska i davanja jedinjenja respektivno.

[0180]Levi renalni nerv je pažljivo izolovan i glavna grana nerva postavljena je na bipolarnu platina-iridijum elektrodu izolovanu silikon gelom (604A i B; VVacker Chemie, Munich, Germanv). Tokom eksperimenta, pacovi su ventilirani pomoću trahealne kanile (7-8 ml/kg X 72 ciklusa/min) sa mešavinom kiseonika i vazduha (-8% -20% ).

[0181]Arterijski pritisak meren je povezivanjem arterijskog katetra za transdjuser pritiska (TNF-R; Ohmeda, Bilthoven, Netherlands) spojenim sa amplifikatorom (model 13-4615-52; Gould, Cleveland,

OH).

[0182]Renalna simpatička nervna aktivnost (ANSR) je amplifikovana (X50,000), filtrirana prema propusnom opsegu (300-3 000 Hz: Model P-511J, Grass Quincy, MA), i ispravljena pomoću analognog ispravljača kućne izrade uključujući niskofrekventni filtersa cutoff frekvencijom od 150 Hz.

[0183]Dva parametara su neprekidno beležena korišćenjem kompjutera sa analogno-digitalnim konvektorom (model AT-MIO-16, National Instruments, Austin, TX), i LabVIEW 5.1 softverom (National Instruments).

[0184]Arterijski pritisak i ANSR zabeleženi su pre (osnovna linija) i nakon primene jedinjenja 1 (10 mg/kg, i.v.). Na kraju beleženja, hlorisondamin, ganglionski blokator, dat je (2,5 mg/kg i.v.) da bi se procenio nivo pozadinskog šuma koji je potom oduzet od svih podataka ANSR za sledeće analize. Na kraju eksperimenta, pacovi su eutanazirani sa intravenoznom prevelikom dozom natrijum pentobarbitala.

4.2. Rezultati

[0185]Rezultati su prikazani na FIGURE 4A-4C.

[0186]Jedinjenje 1 u dozi od 10 mg/kg, iv, uzrokuje smanjenje 50% renalne simpatičke nervne aktivnosti (FIGURE 4A).

[0187]Paralelno, jedinjenje 1 iste koncentracije uzrokuje jako smanjenje arterijskog pritiska (PAS: 105,3 ± 3 vs 141,7 ± 2,3 mmHg, p <0,001; PAM: 77,4 ± 3,6 vs 108 ± 3,4 mmHg, p <0,0001; PAD: 58,6 ± 3,4 vs. 83,2 ± 4 mmHg, p <0,001) i srčanog pulsa (288,4 ± 10,3 vs 331,4 ± 14 bpm, p <0,01) (FIGURE 4B i 4C). Smanjenje renalne simpatičke nervne aktivnosti, arterijskog pritiska i srčanog pulsa traje više od jednog sata.

PRIMER 5: Merenje arterijskog pritiska, srčanog pulsa, biohemijskih parametara plazme i metabolizma

glukoze: Efekat hroničnog tretiranja jedinjenjem1u dozi od 20 mg/kg/d oralno 12 nedelja

5.1.Postupak

5.1.1 Životinje

[0188]Muški SHHF pacovi( spontano hipertenzivni, zastoj srca; spontano hipertenzivno, kongestivno srce)stari 12 nedelja korišćeni su u ovom ispitivanju (Charles River breeding Centre, L'Arbresle, France).

[0189]Životinje su smeštene u prostoriju sa kontrolisanom temperaturom i osvetljenjem , imale su slobodan pristup tekućoj vodi i standardnu ishranu (A04, SAFE, Augy France). Ovo ispitivanje izvođeno je u skladu sa institucionalnim smernicama i pravilima koje je propisala Evropska Zajednica za upotrebu na eksperimentalnim životinjama (L358-86/609/EEC).

5.1.2 Hroničnotretiranjejedinjenjem 1

[0190]Jedinjenje 1 davano je u pijaćoj vodi 12 nedelja u dozi od 20 mg/kg/d (n=17). Unos vode je redovno meren da bi se podesla koncentracija jedinjenja 1. Netretirani kontrolni SHHF pacovi pili su običnu vodu (n=10).

[0191]Telesna masa, unos vode i hrane mereni su svakog dana. Nakon 12 nedelja tretiranja, uzeti su uzorci krvi. Tri dana kasnije, zabeleženi su arterijski pritisak i srčani puls i izveden je test tolerancije na glukozu.

5.1.3. Beleženje arterijskog pritiska i srčanogpulsa

[0192]Pacovi su anestezirani pentobarbitalom 50 mg/kg, ip (Ceva sante animale, Libourne, France) i izvršena je traheotomija. U femoralnu venu i arteriju stavljeni su katetri radi davanja supstance i radi merenja arterijskog pritiska respektivno. Pacovi su ventilirani okolnim vazduhom i paralizovani davanjem pankuronijum bromida (1,5 mg/kg, iv, Organon SA, France). Arterijski pritisak zabeležen je nakon stabilizcije sa transdjuserom pritiska (Gould P23XL) i rekorderom (Gould electronics BS 272, Longjumeau, France). Srednji arterijski pritisak (MAP) izračunat je kao dijastolni pritisak plus jedna trećina diferencijalnog arterijskog pritiska. Srčani puls je takođe zabeležen od signala pritiska korišćenjem Gould Biotach amplifikatora (model 13-4615-66).

[0193]Rezultati su prikazani na FIGURE 6A i 6B.

[0194]Nakon 12 nedelja tretiranja jedinjenjem u dozi od 20 mg/kg/d u pijaćoj vodi, arterijski pritisak SHHF pacova je znatno smanjen (153±7 vs 176±6 mmHg, p <0,05 ) (FIGURE 6A), ali srčani puls je bio nepromenjen (367 ± 6 vs 361 ± 8 bpm, p> 0,05) (FIGURE 6B).

5.1.4 Merenje biohemijskih parametara plazme

[0195]Nakon 12 nedelja tretiranja, dobijeni su uzorci krvi iz kaudalne vene anesteziranih pacova (2,5% izofluran, Abbott, Rungis, France) nakon perioda gladovanja od 18h.

[0196]Uzorci krvi su centrifugirani 15 minuta na 2000 g i plazma je zamrznuta na -80°C do ispitivanja glukoze, ukopnog holesterola, HDL i LDL holesterola i masnih kiselina. Ova ispitivanja izvedena su na:" Plateau Technique Biologique des H6pitaux Universitaires de Strasbourg " (Advia 2400, Baver HealthCare).

[0197]Insulin, leptin, adiponektin i glukagon određeni su korišćenjem ELISA kitova (insulin: Mercodia, Uppsala, Sweden, leptin: Yanaihara Institute Inc." Shizuoka, Japan adiponektin: B-Bridge International, Mountain View, USA i glukagon: Gentaur, Kampenhout, Belgium) prema preporukama proizvođača.

[0198]Rezultati su prikazani na FIGURE 7A do 7C i FIGURE 8A do 8E.

[0199]Nakon 12 nedelja tretiranja jedinjenjem 1, primećeno je značajno smanjenje ukupnog plazmatičnog holesterola (2,7 ± 0,09 vs 3,8 ± 0,18 mmol/l, P <0,0001) (FIGURE 7A). Jedinjenje 1 takođe je uzrokovalo smanjenje koncentracije plazmatičnih triglicerida (3,8 ± 0,25 vs 4,59 ± 0,23 mmol/l, p <0,01)

(FIGURE 7B); tretiranje nije uticalo na slobodne masne kiseline (FIGURE 7C).

[0200]Tretiranje nije uticalo na glikemiju tokom gladovanja (FIGURE 8A), ali je insulin u plazmi tokom gladovanja značajno smanjen (15,2 ± 2 vs 46,8 ± 3,7 ng/ml, p <0,0001) (FIGURE 8B).

[0201]Izračunavanjem HOMA-IR indeksa potvrđeno je da je kod tretiranih SHHF pacova poboljšana osetljivost na insulin u odnosu na kontrolne SHHF pacove (110 ± 14 vs 534 ± 38, p <0,0001) (FIGURE 8C). Konačno, jedinjenje 1 uzrokovalo je značajno smanjenje glukagona (77,3 ±14 vs 161,3 ± 33 pg/ml, p

<0,05) (FIGURE 6D) i veliko povećanje koncentracije adiponektina u plazmi (10,6 ± 0,52 vs 5,54 + 0,14 u.g/1, p <0,000l) (FIGURE 8E).

5.1.5 Test tolerancije na glukozu (IVGTT)

[0202]Rastvor glukoze od 0,5 g/kg davan je intravenoznim putem. Koncentracija glukoze u plazmi izmerena je korišćenjem glukometra pre ubrizgavanja u životinje koje su gladovale 18 sati, a potom 3, 6, 10,15, 30 i 45 min posle davanja glukoze (Accu Check Go, Roche Diagnostics Mevlan, France). Površine ispod krive (AUC) potom su određene radi upoređivanja grupa.

5.2. Rezultati

5.2.1 Merenje telesne mase i unosa hrane

[0203]Rezultati koji se odnose na telesnu masu i unos hrane dati su u FIGURE 5A i 5B.

[0204]Nakon 9 nedelja tretiranja i do kraja tretiranja, SHHF pacovi tretirani jedinjenjem 1 imali su manju telesnu masu nego kontrolni; njihov unos hrane je već bio niži od unosa hrane kontrolnih nakon jedne nedelje tretiranja (FIGURE 5A i 5B).

5.2.2. Merenje biohemijskih parametara plazme

[0205]Rezultati su prikazani na FIGURE 7A do 7C i FIGURE 8A do 8E.

[0206]Nakon 12 nedelja tretiranja jedinjenjem 1, primećeno je veliko smanjenje ukupnog plazmatičnog holesterola (2,7 ± 0,09 vs 3,8 ± 0,18 mmol/l, P <0,0001) (FIGURE 7A). Jedinjenje 1 je takođe uzrokovalo smanjenje koncentracije plazmatičnih triglicerida (3,8 ± 0,25 vs 4,59 ± 0,23 mmol/l, p <0,01) (FIGURE 7B); tretiranje nije uticalo na slobodne masne kiseline (FIGURE 7C).

[0207]Tretiranje nije uticalo na glikemiju tokom gladovanja (FIGURE 8A), ali je insulin u plazmi tokom gladovanja značajno smanjen (15,2 ± 2 vs 46,8 ± 3,7 ng/ml, p <0,0001) (FIGURE 8B).

[0208]Izračunavanjem HOMA-IR indeksa potvrđeno je da su tretirani SHHF pacovi bili više osetljivi na insulin nego SHHF kontrolni pacovi (110 ± 14 vs 534 ± 38, p <0,0001) (FIGURE 8C). Konačno, jedinjenje 1 uzrokovalo je značajno smanjene glukagona (77,3 ± 14 vs 161,3 ± 33 pg/ml, p <0,05) (FIGURE 6D) i snažno povećanje koncentracije adiponektina u plazmi (10,6 ± 0,52 vs 5,54 ± 0,14 u.g/1, p <0,000l)

(FIGURE 8E).

5.2.3. Test tolerancije na glukozu (IVGTT)

[0209]Rezultati su prikazani na FIGURE 8F i 8G.

[0210]Jedinjenje 1 povećalo je toleranciju na glukozu kod SHHF pacova (AUC: 556 + 20 vs 710 + 37 mmol.min/l, p <0,001) (FIGURE 8F i 8G).

PRIMER 6: Merenje arterijskog pritiska i srčanog pulsa: Efekat akutnog tretiranja intravenoznim ili

intracisternalnim putem

6.1. Postupak

[0211]Odrastao, mužjak VVistar pacova anesteziran je pentobarbitalom 50 mg/kg, i.p. i njihova fiziološka temperatura održavana je konstantnom. Na životinjama izvedena je traheotomija, a u levu karotidu stavljen je kateter da bi se omogućilo i.v. davanje leka. Životinje su paralizovane davanjem pankuronijum bromida (1 mg/kg, i.v., Organon SA, France) i ventilirane okolnim vazduhom (Hugo Sachs Electronic model 7025). Kateter je stavljen u levu femoralnu arteriju i povezan je sa transdjuserom i rekorderom pritiska (Gould electronics BS 272, Longjumeau, France). Srčani puls, sistolni arterijski pritisak, dijastolni arterijski pritisak i srednji arterijski pritisak (PAM) neprekidno su beleženi iz signala pritiska (Gould Biotach amplifier model 13-4615-66); [PAM = PAD +1/3 (PAS-PAD)]. Srednji arterijski pritisak (PAM) i srčani puls (FC) mereni su 90 minuta.

6.2. Rezultati

[0212]Rezultati su izraženi kao maksimalna promena srednjeg arterijskog pritiska u milimetrima živinog stuba (mmHg), a srčani puls je izražen u otkucajima u minuti (bpm) poredeći sa vrednostima osnovne linije pre tretiranja . Takođe su određeni odgovarajući procenti promene. Rezultati su smatrani značajnim ako je promena 10% veća od vrednosti osnovne linije.

[0213]U eksperimentima kod kojih se lek ubrizgava intracisternalnim putem, 0,2 ml rastvora leka ubrizgava se nakon izvlačenja iste zapremine cerebrospinalnog likvora.

[0214]Rezultati su prikazani u Tabeli sa FIGURE 9.

Claims

1. Jedinjenja sledeće opšte formule (I): u kojoj: a) ili R12 predstavlja H, a - Rl i R2 svako nezavisno su: halogen, ravnolančani ili razgranati Cl do C8 alkil, C2-C8 alken, ravnolančani ili razgranati Cl do C8 alkoksi, C3-C6 cikloalkil, C5-C6 bicikloalkil, polietarski lanac, C1-C5 perfluoroalkil, Cl-C8 acil, OH, SH, primarni, sekundarni ili tercijarni amin, CN, C02H, C02R' u kome je R' ravnolančani ili razgranati C1-C8 alkil ili C3-C6 cikloalkil, ili Rl i R2 zajedno formiraju C5 prsten, - R3, R4 i R5 svako nezavisno predstavljaju: vodonik, halogen, ravnolančani ili razgranati Cl do C8 alkil, C2-C8 alken, ravnolančani ili razgranati Cl do C8 alkoksi, C3-C6 cikloalkil, C5-C6 bicikloalkil, polietarski lanac, C1-C5 perfluoroalkil, C1-C8 acil, OH, SH, primarni, sekundarni ili tercijarni amin, CN, C02H, C02R' u kome je R' ravnolančani ili razgranati C1-C8 alkil ili C3-C6 cikloalkil, - R6, R7, R9 i Rll predstavljaju vodonik, - R8 i RIO odabrani su iz grupe koju čine vodonik i ravnolančani ili razgranati Cl do C5 alkil, pri čemu je najmanje jedan od ova dva ravnolančani ili razgranati Cl do C5 alkil; b) ili R12 predstavlja CH(R13)(CH2) i obrazuje C5 prsten sa R5, R13 koji predstavljaju H ili CH3, - Rl, R2, R3 i R4 odabrani su iz grupe koju čine vodonik, halogen, ravnolančani ili razgranati Cl do C8 alkil, C2-C8 alken, ravnolančani ili razgranati Cl do C8 alkoksi, C3-C6 cikloalkil, C5-C6 bicikloalkil, polietarski lanac, C1-C5 perfluoroalkil, C1-C8 acil, -OH, -SH, primarni, sekundarni ili tercijarni amin, -CN, -C02H, -C02R' u kome je R' ravnolančani ili razgranati C1-C8 alkil i C3-C6 cikloalkil; - R6, R7, R9 i Rll predstavljaju vodonik, - R8 i RIO odabrani su iz grupe koju čine vodonik i ravnolančani ili razgranati Cl do C5 alkil, pri čemu je najmanje jedan od ova dva ravnolančani ili razgranati Cl do C5 alkil, pod uslovom da najmanje jedan od između Rl i R13 nije vodonik, i njihove farmaceutski prihvatljive soli.

2. Jedinjenja prema zahtevu 1 sledeće opšte formule (la): u kojoj R3 i R12 su vodonik, R8 i RIO odabrani su iz grupe koju čine vodonik i ravnolančani ili razgranati Cl do C5 alkil, pri čemu je najmanje jedan od ova dva ravnolančani ili razgranati Cl do C5 alkil, i R4 i R5 su nezavisno odabrani iz grupe koju čine vodonik, halogen, ravnolančani ili razgranati Cl do C3 alkil, ravnolančani ili razgranati Cl do C3 alkoksi, C1-C3 perfluoroalkil, C1-C3 acil, OH, SH, primarni, sekundarni ili tercijarni amin, CN, C02H i C02R' u kome je R' ravnolančani ili razgranati C1-C3 alkil, poželjno iz grupe koju čine halogen, ravnolančani ili razgranati Cl do C3 alkil, ravnolančani ili razgranati Cl do C3 alkoksi, C1-C3 perfluoroalkil i C1-C3 acil.

3. Jedinjenja prema zahtevu 2 u kojima su R4 i R5 vodonik.

4.Jedinjenja prema zahtevu 1 sledeće opšte formule (lb): u kojoj R12 je vodonik, R8 i RIO odabrani su iz grupe koju čine vodonik i ravnolančani ili razgranati Cl do C5 alkil, pri čemu je najmanje jedan od ova dva ravnolančani ili razgranati Cl do C5 alkil, Rl i R2 su nezavisno odabrani iz grupe koju čine halogen, ravnolančani ili razgranati Cl do C3 alkil, ravnolančani ili razgranati Cl do C3 alkoksi, C1-C3 perfluoroalkil i C1-C3 acil, i R3, R4 i R5 su nezavisno odabrani iz grupe koju čine vodonik, halogen, ravnolančani ili razgranati Cl do C3 alkil, ravnolančani ili razgranati Cl do C3 alkoksi, C1-C3 perfluoroalkil, C1-C3 acil, OH, SH, primarni, sekundarni ili tercijarni amin, CN, C02H i C02R' u kome je R' ravnolančani ili razgranati C1-C3 alkil, poželjno iz grupe koju čine halogen, ravnolančani ili razgranati Cl do C3 alkil, ravnolančani ili razgranati Cl do C3 alkoksi, C1-C3 perfluoroalkil i C1-C3 acil.

5. Jedinjenja prema zahtevu 4 u kojima su R3, R4 i R5 vodonik.

6. Jedinjenja prema zahtevu 4 ili 5 u kojima su Rl i R2 nezavisno odabrani iz grupe koju čine halogen i ravnolančani ili razgranati Cl do C3 alkil.

7. Jedinjenje prema jednom od zahteva 1 do 6 odabrano od između jedne od sledećih formula:

8.Jedinjenja prema zahtevu 1 sledeće opšte formule (Ic): u kojoj, - Rl, R2, R3 i R4 odabrani su iz grupe koju čine vodonik, halogen, ravnolančani ili razgranati Cl do C3 alkil, ravnolančani ili razgranati Cl do C3 alkoksi, C1-C3 perfluoroalkil, C1-C3 acil, OH, SH, primarni, sekundarni ili tercijarni amin, -CN, -C02H i -C02R' u kome je R' ravnolančani ili razgranati C1-C3 alkil; - R8 i RIO odabrani su iz grupe koju čine vodonik i ravnolančani ili razgranati Cl do C5 alkil, pri čemu je najmanje jedan od ova dva vodonik, pod uslovom da najmanje jedan od između Rl i R13 nije vodonik.

9. Jedinjenja prema zahtevu 8, u kojima - R2, R3, R4 su vodonik, - R13 je H, a Rl je halogen i ravnolančani ili razgranati Cl do C3 alkil; ili R13 je metil, a Rl je odabran iz grupe koju čine vodonik, halogen i ravnolančani ili razgranati Cl do C3 alkil; i - R8 i RIO odabrani su iz grupe koju čine vodonik i ravnolančani ili razgranati Cl do C5 alkil, pri čemu je najmanje jedan od ova dva vodonik.

10. Jedinjenja prema zahtevu 8 ili 9 koja su odabrana od između jedne od sledećih formula:

11.Jedinjenja kao što su određena u jednom od zahteva 1 do 10 za upotrebu u prevenciji i/ili lečenju metaboličkog sindroma.

12. Farmaceutska kompozicija koja kao aktivni sastojak obuhvata najmanje jedno jedinjenje prema jednom od zahteva 1 do 10 zajedno sa farmaceutski prihvatljivim nosačem.

13. Farmaceutska kompozicija prema zahtevu 12 koja može da se primeni oralnim putem.

14.Farmaceutska kompozicija koja može da se primeni oralnim putem prema zahtevu 13 u kojoj je doza aktivnog sastojka kod čoveka između 1 mg/kg do 100 mg/kg.