RS55211B1 - Optimizirana sinteza čistih, nepolimorfnih, kristalnih žučnih kiselina sa određenom veličinom čestica - Google Patents

Description

OPIS PRONALASKA

Prikazani pronalazak se odnosi farmaceutsko sredstvo, sintezu prilagođenu proizvodnji isključivo namenjenoj za lečenje bolesti žuči i jetre, koje obuhvata norursodeoksiholnu kiselinu (nor UDCA --nor ursodcoxycholic acid).

Stanje tehnike

Nor UDCA i Bis-Nor-UDCA su analozi ursodeoksiholne kiseline sa modifikovanim fizičko--hemijskim osobinama, kao što je ratvorljivost, kritična micelarna koncentracija ili hidrofilnost (Roda et al., Dig Dis and Sciences, 1989). Postupak za sinte/u ?.4-nor-5[:i-holan-23-ske kiseline su već opisali Schteingart i Hofmann (Journal of Lipid Research, 1988).In vitroeksperimanti pokazuju njihovu efikasnost na životinjskom modelu holestatičke bolesti jetre (PCT/LP2Q05/0b21/8). Postupak/a dobijanje Nor UDCA je opisan u I P 0624595 lil. Međutim, ovaj dokument ne daje karakteristične hemijski i fizičke osobine, čistoću, stepen kristalizacije i veličinu čestica sintetizovanog Nor UDCA.

Primena žučnih kiselina, naročito ursodeoksiholne kiseline, u holestatičkim bolestima jetre, kao što je primarna bilijarna ciroza, je dobro poznat i već objavljen osamdesetih godina prošlog veka (Poupon et al., Lancet, 1987). Dok sadašnja upotreba dostupnih farmaceutskih preparata dovodi samo da uspešnog lečenja grupe pacijenata, postoji potreba pacijenata koji ne odgovaraju na terapiju ursodeoksiholnom kiselinom ili pate od holestatičkih bolesti jetre ili metaboličkih bolesti koje se ne lece ursodeoksiholnom kiselinom,

U zavisnosti od pH vrednosti rastvarača žučne kiseline su slabo rastvorljive. Adekvatna dobra rastvorljivost žučnih kiselina u intestinalnom traktu je preduslov za uspešan farmaceutski tretman. Rastvorljivost može biti poboljšana obrzovanjem soli Nor UDCA. Drugi cilj je preparat sa dovoljnom oralnom biodostupnošću. Visokain vitro brzinarastvaranje je preduslov za dovoljnu oralnu biodostupnost. Mikronizacija, npr. proizvodnja farmaceutskih preparata sa određenom veoma malom veličinom čestica (> 60% sa prečnikorn manjim od 10 pm) je ustanovljeni postupak/a povećanje brzine rastvaranja. Poznat, ali razrađen postupak za dobijanje mikronizovanih čestica je intenzivno mlevenje.

Dodatni cilj predmetnog pronalaska je obezbeđivanje fizički čistog, npr. kristalnog preparata koji je termodinamički stabilan.

Cilj ovog pronalaska je da sintetiše novi oblik Nor UDCA visokog kvaliteta, koji ima pogodnu čistoću, karakteristike veličine čestica i koji je primenjiv/a lečenje holestatičnih ili metaboličkih bolesti jetre.

Željeni kristalni oblik treba da se dobija na kon/istentan i reproduklibilan način sa prilagodljivim i industrijskim proizvodnim postupkom.

S obzirom da kristalne modifikacije supstance predstavljaju različite kristalne strukture sa potencijalno različitim osobinama, glavni cilj pronalaska je da identifikuje i odabere lermodinamički stabilne polimorfe/jedan kristalni oblik Nor UDCA koji se ne pretvara u drugi polimorfni oblik. Ova određena modifikacija Nor UDCA treba da pokaže/načajene hemijske i fizičke prednosti u odnosu na metastabilne oblike i prema tome treba da bude i/brana supstanca zbog daljih razvijenih hornijskih i farmaceutskih osobina.

Pored toga, poželjno je proizvesti Nor UDCA sa konzislentom veličinom čestica i morfologijom jer kristalni habitusi utiče na važne parametre za obradu kao što su protočnost, nasipna gustina i kompresibilnost. Poželjna je mikronizacija Nor UDCA radi povećanja brzine rastvaranja jedinjenja i njegove oralne biodostupnost.

Uslovi postupka prečišćavanja i kristalizacije treba da proizvedu odgovarajući čvrsti oblik Nor UDCA sa solidnom i reproduktibilnom polimorfnom čistoćom, hemijskom čistoćom, kristalnim habitusom i prinosom. Može se izbeći mikronizacija mlevenjem u cilju kontrole kristalne veličine Nor UDCA. Prema tome, može se sprečiti uobičajena pojava posle mikronizacije, amortizacija.

Objavljeni postupak za sintezu Nor UDCA ne ispunjava zahteve za lekove. Naročito način prečišćavanja nije efikasan za postizanje željenog kvaliteta proizvoda u odnosu na polimorfnu čistoću, hemijsku čistoću, kristalni habitus i prinos. Konvencionalni postupci prečišćavanja ne dozvoljavaju dobijanje polimorfa Nor UDCA koji ima veoma visoku hemijsku čistoću, npr. tako da je ukupna količina nečistoća manja od 0,05%. Pored toga, poznati postupci ne dovode do takve veličine čestica da je D50 vrednost manja od 10 u bez mikronizacije. Pored toga, mikronizacija bi uništila polimorlnu čistoću proizvoda.

Batta et al (1999) Steroids 64, 780-784 opisuje sinteze dinor-žučnih kiselina oksidativnom hidrolizom nitrila nor-žučnih kiselina.

Halilbasic et al (2009) Hepatology 49, 1972 1987 ispituju fiziološke i terapeutske osobine Nor UDCA naMdr2</>miševima.

WO 2009/013334 Al opisje upotrebu nor žučnih kiselina u lečenju a rte ro skleroze.

Suštinapronalaska

Prikazani pronalazak obezbeđuje prilagodljiv i industrijski postupak proizvodnje koji dovodi do dobijanja Nor UDCA sa željenim kvalitativnim karakteristikama koji je farmaceutski primonjiv. Pronalazači su iznenađujuće ustanovi da prečišćavanje i opciono rekristalizacija kalijumove soli Nor UDCA sa naknadnim taloželnjem slobodne kiseline obezbeđuje novi fizički čist i termodinamički stabilan oblik Nor-UDCA ('Oblik A').

U prvom aspektu, prikazani pronalazak se prema tome odnosi na čisti polimorf Nor USCA, definisan u patenlim zahtevima. Polimorf je termodinamički stabilan.

Poželjno, Nor UDCA je anhidrovan obik. To jest, polimorfni kristali su u suštini bez vode. Količina vode u kristalima je generalno manja od 1%, poželjno manja od 0,5%, poželjnije manja od 0,1% na osnovu ukupne mase kristala.

Polimorf je karakterisan sa XRPD signalima na 11,9, 14,4, 15,3, 15,8, i 16,6 ± 0,2, stepena 2leta. Poželjno, polimorf je karakterisan sa XRPD u/orokom kao što je prikazano na slici 4 za 'oblik A'.

Drugi aspekt ovog pronalaska je farmaceutska kompozicija koja ima ovde opisani polimorfni oblik f armaceutska kompozicija pokazuje specifičan raspored veličina čestica gde bar 60% čestica ima veličinu < 10 pm.

treći aspekt pronalaska je upotreba polimorfa prema prikazanom pronalasku ili farmaceutske kompozicije prema prikazanom pronalasku, za lečenje holestatičnih bolesti jetre. Poželjno, holestatićna bolest jetre je izabrana iz grupe koju čine primarna bilijarna ciroza (PBC- primary biliary cirrhosis), primarni sklerozirajući holangitis (PSC -primary sclerosing cholangitis), autoimuni hepatitis (AIH) i sindrom preklapanja, uključujući AIH sindrom preklapanja.

Ovde opisani polimorf ili farmaceutska kompozicija mogu ta kode biti korišćeni za lečenje metaboličkih bolesti jetre. Metaboličke bolesti jetre mogu biti ne-alkoholni steatohepatitis ili alkoholini steatohepatitis.

larmaceutksa kompozicija prema prikazanom pronalasku mora biti formulisana za oralno, parenteralno, subkutanozno, intravensko, intramuskularno, nazalno, inahalativno, lokalno ili rektalno davanje. Uglavnom će sadržati jedan ili više farmaceutski prihavatljivih eksipijenata.

Četvrti aspekt prikazanog pronalaska je postupak dobijanja čistog polimorfa Nor-UDCA, koji obuhvata sledeće korake: kristalizaciju kalijumove soli Nor UDCA; i opciono rastvaranje kalijumove soli u rastvaraču i zakišeljavanje rastvora da bi se dobio čist Nor UDCA.

Hastvarač u kome je rastvorena kalijumova so je poželjno smeša vode i acetona; i taloženje je izvedeno zakišeljavanjem rastvora do pH u opsegu 1 do 2.

Ovde opisani postupak vodi do obrazivanja jednog čvrstog oblika Nor-UDCA, kristalne strukture koja može biti prečišćena kao monoklinička C2, gusto pakovana bez mogućnosti ugradnje rastvarača u praznine. Opisani postupak ne pokazuje obrazovanje polimorfnog Nor-UDCA. Pretvaranje u druge polimorfne oblike takođe ne treba pratiti. Kristalna struktura Nor-UDCA dobijena sintetičkim putem je dokazano termodinamički stabilan oblik.

Dalje, oslovi taloženja Nor-UDCA iz njegove kalijumove soli su takvi da mogu biti dobijeni kristali željene veličine čestica direktno u jednom koraku proizvodnog postupaka. Prema lome, nije potreban dodatni korak mlevenja radi kontrolisanja veličine čestica kristala. Ovo je velika prednost uzimajući u ozbir da visoko energetske operacije kao što su drobljene i mlevenje (mikronizacija) generalno vode amortizaciji Nor-UDCA, na taj način smanjujući polimorfnu čistoću i hemijsku čistoću.

Pored toga, prinos Nor-UDCA sa kvalitetom farmaceutske čistoće ovim postupkom je bar 45% polaznog materijal i prema tome veoma visokog u poređenju sa objavljenim postupcima.

Ukratko, iznenađujuće je ustanovljeno da opisani postupak proizvodnje Nor UDCA vodi do jedne polimorfne, čiste i kristalne supstance koja ne zahteva mikronizaciju, kao što je ustanovljeno u toku proizvodnje UDCA, preparata koji se trenutno koristi u lečenju holestatičkih bolesti jetre. Prema lome, opisani postupak je primenjiv/a dobijanje Bis nor-UDCA.

Prikazani pronalazak je definisan patentnim zahtevima. Prikazani opis se dalje odnosi na sledeće aspekte (1) do (17):

(1) Čist polimorf Nor UDCA ili Bis nor UDCA ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

(2) Polimorf prema tački (1), koji je termodinamički stabilan.

(3) Polimorf prema tački (1) iii (2), gde pomenuti Nor UDCA, Bis nor UDCA ili njegova farmaceutski prihavatljiva so je u njegovom anhidrovanom obliku. (4) Polimorf prema bilo kojoj tački (1) do (3), karakterisan sa XPRD signalima na 11,9, 14,4, 15,3, 15,8, i 16,6 * 0,2.

(5) Polimorf prema tački (4), karakterisan XRPD uzorkom koji je prikazan na slici5.

(6) farmaceutska kompozicija koja sadrži polimorf prema bilo kojoj tački (1) do (5).

(7) farmaceutska kompozicija prema tački (6), gde raspored veličine čestica u farmaceuskoj kompoziciji obuhvata bar 60% čestica veličine < 10 pm. (8) Polimorf ili farmacetuska kompozicija prema bilo kojoj tački (1) do (5), ili farmaceutska kompozicija prema tački (6) ili (7) za lečenje holestatičke bolesti jetre. (9) Polimorf ili farmaceutska kompozicija prema tački (8), gde je holestatička bolest jetre izabrana iz grupe koju čine primarna Dilijarna ciroza (PBC), primarni sklerozirajući holangitis (PSC), autoimuni hepatitis (AIH) i sindromi preklapanja, uključujući AIH sindrom preklapanja. (10) Polimorf prema bio kojoj tački (1) do (5) ili farmaceutska kompozicija prema tačkama (6) ili

(7) za lečenje metaboličkih bolesti jetre i/ili arteroskleroze.

(11) Polimorf ili farmaceutska kompozicija prema tački (10), gde je metabolička bolest jetre nealkoholni steatohepatitis. (12) Polimorf Ili farmaceutska kompozicija prema tački (10), gde je metabolička bolest jetre alkoholni steatohepatitis. (13) l:armaceutska kompozicija prema bilo kojoj tački (6) do (12), koja je formulisana za oralno, parenteralno, subkutanoz.no, intravensko, inlramuskularno, nazalno, topikalno ili rektalno davanje. (14) larmaceutska kompozicija prema bilo kojoj tački (6) do (13), koja obuhvata jedan ili više farmaceutski prihvatljivih ekscipijenata. (15) Postupak za dobijanje preparata čistog polimorfa Nor-UDCA ili Bis-nor-UDCA ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, koji obuhvata sledeće korake:

kristalizaciju kalijumove soli Nor UDCA ili Bis-nor-UDCA; i

opciono rastvaranje kalijumove soli u rastvaraču i zakišeljavanje rastvora da bi se dobio čist Nor UDCA ili Bis-nor-UDCA. (16) Postupak prema tački (15), gde je pomenuti rastvarač smeša vode i acetona, i gde je pomenuto taloženje izvedeno zakišeljavanjom rastvora do pH u opsegu 1 do 2.

(17) Postupak prema tački (15) ili (16). koji dalje obuhvata sledeće korake:

pretvaranje jedinjenja formule (A)

u iedinienie formule (B) (b) pretvaranje jedinjenja formule (B) u jedinjenje formule (C) (c) pretvaranje jedinjenje formule (C) u sirovi oblik jedinjenja formule (D) (d) tretiranje sirovog oblika jedinjenja formule (D) sa KOH u uslovima kristalizacije kalijumove soli Nor-UDCA ili Bis-bor-UDCA;

gde je n 0 ili 1.

Detaljni opis pronalaska

Prikazani pronalazak obezbeđuje čist polimorf Nor UDCA.

Polimorf je termodinamički stabilan.

Polimorfizam je definisan kao sposobnost supstance da kristališe u više od jednog rasporeda kristalne rešetke. Polimorfizam može uticati na mnogo aspekata osobina čvrstog stanja leka. Različite kristalne modifikacije supstance mogu značajno varirati jedna od druge u mnogo pogleda kao što su njihova rastvorljivost, brzina rastvaranja i na kraju biodostupnost. Iscrpna analiza polimorfizma u larmaceutskim i molekularnim kristalima je data npr. kod Bym (Byrn, S. R., Pfeiffer, R. R., Stowell, J. G., "Solid'State Chemistry of Drugs", SSCI Inc., Wesl Lafayetle, Ind., 1999), Brittain, H. G , "Polymorphism in Pharmaceutical Solids", Marcel Dekker, Inc., New York, Basel, 1999) or Bernstein (Bernstein, J., "Polymorphism in Molecular Crystals", Oxford University Press, 2002).

Izrazkristalni se odnosi na bilo koji neamorfni oblik aktivnog farmaceutskog sastojka (API active pharmaceutical ingridient). Izraz 'amorfni oblik' se odnosi na oblik API koji nema pravilnu strukturu kao kristalne strukture. Atomi ili molekuli prisutnog materijala u amorfnom obliku nemaju ujednačeni raspored. Na primer moguće je razlikovati amorfne kristalne oblike jedinjenja pomoću difrakcije X zraka. Izraz 'kristalni polimorf ili 'polimorf kako je ovde opisano odnosi se na specifični kristalni oblik aktivnog farmaceutskog sastojka koji može biti karakterisan pomoću analitičkih postupaka kao što su difrakcija X zraka na prahu ili IR-spektroskopija.

Poželjno, Nor-UDCA je u svom anhidrovanom obliku. To jest, polimorfni kristali u suštini ne sadrže vodu. Količina vode u kristalima je generalno manja od 1%, poželjno manja od 0,5%, čak poželjnije manja od 0,1% na osnovu ukupne mase kristala.

Polimorf je 'čist' u smislu prikazanog pronalaska ukoliko je pogodan za faramaceutski primenu i sadrži manje od 2% nečistoća. Količina nečistoća u polimorfu prema prikazanom pronalasku je generalno manja od 2%, poželjno manja od 1%, poželjnije manja od 0,5% , poželjnije manja od 0,1% na osnovu ukupne zapremine preparata. Količina bilo koje pojedinačne nečistoće u polimorfu prema prikazanom pronalasku je poželjno manja od 0,1%, poželjnije manja od 0,05%, najpoželjnije manja od 0,03% na osnovu ukupne mase preparata. U prvom izvođenju, ukupna količina nečistoća u polimorfu Nor-UDCA je manja od 2%, poželjno manja od 1%, poželjnije manja od 0,5%, poželjnije manja od 0,1% na osnovu ukupne zapremine Nor-UDCA. Količina bilo koje nečistoće u polimorfnom Nor-UDCA je poželjno manja od 0,1%, poželjnije manja od 0,05%, najpoželjnije manja od 0,03% na osnovu ukupne mase Nor-UDCA.

Nečistoće mogu biti određene kao što je opisano u primeru 2. Profil nečistoća Nor-UDCA je određen sa poznatim i nepoznatim nečistoćama. Poznate nečistoće su ursodeoksiholna kiselina (UDCA) i 3a, 7|i dihidroksi 24 nor 5|S holan-23 amid (amid). UDCA, se lakode odnosi na nečistoću A, je polazni materijal u sintezi Nor-UDCA, dok amid, takođe nazvan nečistoćo B, predstavanje intermeđijer nastao u koraku 3 sinteze Nor-UDCA. Nepoznate nečistoće mogu biti iz sintetskog puta, ali takođe i od degradacije Nor-UDCA.

Polimorf prema prikazanom pronalasku je poželjno jedan polimorfni oblik, tj. sušinski se sastoji od jednog polimorfa i/ili ima polimorfnu čistoću. Količina amorfnog Nor-UDCA u polimorfu prema prikazanom pronalasku je tipično zanemarljiva. Amorfna Nor UDCA u polimorfu prema prikazanom pronalasku nije detektovana sa XRPD. Poželjnije, polimorf prema pronalasku ne sadrži u suštini amorfnu Nor-UDCA. Najpoželjnije polimorf prema pronalasku ne sadrži amorfnu Nor-UDCA. Količina polimorfnog oblika A u polimorfu prema prikazanom pronalasku je poželjno bar 99%, poželjnije bar 99,5%, poželjnije bar 99,9%, najpoželjnije u suštini 100%, na osnovu ukupne mase Nor UDCA.

Polimorf prema pronalasku je termodinamički stabilan. Polimorf prema pronalasku je ustanovljeno da se javlja u svim tipovima kristalizacionih modova i takođe obrazuje u različitim čistim rastvaračima i smešama. Čak u kristalizacionim eksperimentima koji polaze od amorfnog oblika Nor UDCA dobijenog drobljenjem (iz difuzije pare na čvrstu supstancu) ili uparavanjem rastvora koji je osušen smrzavanjem (eksperimenti hlađanje/uparavanje) da bi se izbrisali memorijski efekti oblika A, izvedene XRPD analize na izolovanoj čvrstoj supstanci pokazuju da je pretežno dobijen oblik A. Izneneđujuće, pronalazak omogućava rast jednog kristala oblika A.

Raspored veličina čestica polimorfa prema pronalasku je takav da bar 60% kristala ima veličinu čestica manju ođ 10 um.

Polimorf prema prikazanom pronalasku poželjno ima 1)50 manji od 10 nm. Na primer, D50 može biti u opsegu 0,5 pm do 10 pm, poželjnije od 1 pm do 9 um, poželjnije od 2 pm do 8 pm, najpoželjnije od 3 um do 7 pm. Polimorf prema prikazanom pronalasku poželjno ima D90 manji od 30 pm. Na primer, 1)90 može biti u opsegu od 2 pm do 30 pm, poželjnije od 5 pm do 25 pm, poželjnije od 8 pm do 20 pm, najpoželjnije od 10 pm do 18 pm, Polimorf prema prikazanom pronalasku poželjno ima D95 manji od 30 pm. Na primer, D95 može biti u opsegu od 3 pm do 30 pm, poželjnije od 6 pm do 28 pm, poželjnije od 9 pm do 25 pm, najpoželjnije od 10 pm do 20 pm. 1)50, D90 i D95 predstavljaju srednju vrednost ili 50 procenata, 90 procenata i 95 procena rasporeda veličine čestica, respektivno, mereno na osnovu zapremine. To jest D50 (D90; 1)95) je vrednost rasporeda takva da 50% (90%, 95%) čestica ima zapreminu ove vrednosti ili manju.

Raspred veličine čestica može biti određen kako je ovde opisano u Primeru 3 i/ili prema tvropskoj farmakopeji (Ph. Eur.) izdanje 6.6, odeljak 2.9.31, poželjno sa Mastersizer 2000 od Malvern instruments. Procena je tipično izvedena pomoću Fraunhoferovog modela.

Postupak / a dobijanje polimorfa

Postupak za dobijanje polimorfa prema pronalasku poželjno obuhvata sledeće korake:

(a) pretvaranje jedinjenja formule (A)

u jedinjenje formule (B) (b) pretvaranje jedinjenja formule (B) u jedinjenje formule (C) (c) pretvaranje jedinjenja formule (C) u sirovi oblik jedinjenja formule (D)

i

(d) tretiranje sirovog oblika jedinjenja formule (D) sa KOH u uslovima kristalizacije kalijumove soli Nor-UDCA; gde je n 1.

Dobijena kalijumova so u koraku (d) može biti pretvorena u čisti oblik jedinjenja (D) rastvaranjem kalijumove soli u rastvaraču, zakišeljavanjem rastvora tako da se dobiju kristali čistog jedinjenja (D).

Kada je n=l, polazno jedinjenje formule (A) je UDCA i proizvod formule (D) je Nor-UDCA.

Rastvarač je poželjno smeša 2-propanola i vode, gde 2 propanol može biti dodat prvi, a zatim voda do potpunog rastvaranja kalijumove soli.

U siedećim poželjnim izvođenjima postupka prema pronalasku, opisane su i istaknule njegove prednosti. Svaki od sledećih koraka i svaki od njegovih podkoraka, može biti kombinovan sa ostalim izvođenjima prema ovom pronalasku, Naročito, bilo koja od karakteristika sledećih izvođenja može biti Kombinovana sa gore opisanim izvođenjima.

Korak 1: Dobijanje 3u, /{) difonniloksi 5j'> holan 24 ske kiseline (I)

a) Opis postupka (zaštita)

UCDA je dodat u mravlju kiselinu i toluen (>3 sata na 65 do 75°C; smanjivanjem temperature na 18

do 22°C). Toluenska faza je odvojena i ispražnjena je faza mravlja kiselina/voda. Toluenska faza je koncentrovana (< 65°C) i n heptan je brzo dodat na 55 do 65 °C do kristalizacije proizvoda. Reakciona smeša je ohlađena na 10 do 15°C i mešana. Suspenzija je proceđena, isprana sa n-heptanom i osušena na maksimum 50°C (LOD: < 1,0%). Proizvod I je dobijen kao bela čvrsta supstanca.

b) Razlike u poređenju sa objavljenim sintezama

Perhlorna kiselina je izostavljena da bi se pojednostavio postupak, a dodatak anhidrida sirćetne

kiseline je izostavljen da bi se izbeglo jako razvijanje gasa. Da bi se dobio čistiji proizvod i bolji kristalizacioni postupak, reakciona smeša jein situekstrahovana sa toluenom i proizvod je kristalisan iz toluena/n-heptana. Pored toga, može biti korišćena komercijalna vodena mravlja kiselina pa može biti izbegnuta potreba za anhidrovanim reakcionim usiovima. Taloženje iz toluen/heptana pored ostalog služi kao postupak za dalje prečišćavanje proizvoda. Ovaj korak dovodi dodatno do poboljšanog prinosa od približno 85%

Korak 2: Pobijanje 3a, 7[^ dihidrok si- 24- nor-5 P hol an-23 nitrila (II)

a) Opis postupaka (premeŠtanje)

Trifluorosirćetna kiselina, proizvod I i anhidrid trifluorosirćetne kiseline su pomešani (>40 min na 15

do 25°C). Reakciona smeša je veoma blago/agrevana na 35 do 40<U>C i temperatura je održavana konstantom u toku >45 min. Zatim, temperatura je podignuta na 44 do 48°C i održavana konstantom u toku 30 min. Posle hlađenja na<22°Cdodati su toluen i voda. Faze su odvojene i odbačena je faza

voda/kiselina. Dodata je voda u toluensku fazu i odbačena posle odvajanja. Toluen je predestilovan na <50°C da bi se dobilo veoma viskozno ulje. Dodati su ItOH, n heptan i 28% NaOH u ulje,^agrevani do 55-65°C u toku 1,5 h i proizvod II je počeo da kristališe. Voda je dodata i suspenzija je ohlađena na 16 do 22°C. Suspenzija je proceđena, kolač je ispran sa CtOM/vodom, a zatim n-heptanom i osušen

<50°C (LOD: <1,0%). Proizvod II je dobijen kao bela do svetio žuta čvrsta supstanca.

b) Razlike u poredenju sa objavljenim sintezama

/apremina trifluorosirćetne kiseline je smanjena da bi se smanjila upotreba štenih i skupih hemikalija.

Da bi se optimizirala sigurnost i čistoća, temperaturni intervali i vremenski intervali u toku dodavanja natrijum nitrata i zagrevanja su modifikovani. Postupak prečišćavanja je modifikovan u cilju praktičnosti pri prilagodjavanju proizvodnje i da bi se povećala čistoća. Reakciona smeša je ekstrahovana sa toluenom posle čega je potpuno skinuta zaštita sa natrijum hiđroksiđom u QOH/voda/n-heptan. Proizvod je kristalisan iz alkalnog EtOH/voda/n-heptan. Ovo se razlikuje od objavljenih postupka prema Schteingart (1988), postupaka bez kristalizacije proizvoda i premalome bez elemenata prečišćavanja.

Prinosi dobijeni promenjenim postupkom su oko 80%.

K orak 3: Pobijanje 3ct, 7p-dihi droks i-24-nor 5p-holan-23 ske kiseline (III)

a) Opis postupka (hidroliza)

Proizvod II, n-propanol i natrijum hidroksid (pelete) su pomešani u čeličnom reaktoru. Reakciona

smeša je mešana i refluktovana do završene hidrolize (>20 h). Dodata je voda, i n-propanol/voda su predestilovani, održavajući temperaturu iznad 45°C. Dodati su toluen-voda, dok je reakciona smeša efikasno mešana i temperatura je održavana na 55 do 65°C. pH je prilagođen na 1,0 do ?,0 sa 30% HCI. Proizvod III (sirovi nor-UDCA sa nečistoćama do prinosa od pribl. 95% sa UV detektorom na290nm) kristališe iz dvofaznog sistema u toku pH prilagođavanja. Suspenzija je ohlađena na 18 do 22°C. Suspenzija je proceđena i filter kolač je ispran sa vodom i n heptanom i osušen na maksimalno 50°C (LOD. < 1,0%).

b) Razlike u poredenju sa objavljenim sintezama

Reakciono vreme je značajno smanjeno promenom rastvarača od I tOH: voda, 1:1 do čistog n

propanola i promenom od kalijum hidroksida do natrijum hidroksida. Zapremina rastvarača je takođe smanjena. Ispiranje i ekstrakcija su izostavljeni u postupku prečišćavanja i umesto toga je proizvod kristalisao direktno iz dvofaznog sistema voda i toluen. Ovaj postupak je mnogo pojednostavljen; štedi vreme, smanjuje toksične rastvarače, koristi netoksične materijale i prema tome ova

kristalizacija je predmet poboljšanih kontrola. Kristalizacija iz ovih dvofaznih sistema obezbeđuje odličan kvalitet proizvoda sa prinosom od bar 90%.

K or ak 4: Pobij anj e kaliju move sol i 3a, 7[ j dihidroksi-24-nor 5B-holan -23ske kiseline (Nor-UCDA kalij umo va so, IV)

a) Opis postupka (prečišćavanje)

Proizvod III, 2-propanol i jedan ekvivalent kalijum hidroksida su pomešani i zagrejani na 70 do 80°C

Polako je dodavana voda da bi se dobio rastvor. Rastvor je svetio žut do žut i blago zamućen. Aktivni ugljenik i perlit su dodati i rastvor je proceden dok je vruć. Pod sniženim pristiskom predestilovant su 2-propanol/voda na 40 do 80°C. Dodavanjem 2-propanola, destilacija nastavljena do sadržaja vode od<2%. Zatim, suspenzija je ohlađena na 5 do 15°C (>4 sata). Temperatura je snižena na 0 do 5°C i proizvod IV je proceden, ispran sa 2-propanolom i osušen pod sniženim pritiskom <50°C. Proizvod IV je dobijen kao bela čvrsta supstanca. U slučaju da dobijena kalijumova so nije dovoljno čista može biti rekristalizovana: Proizvod IV i 2-propanol su pomešani i zagrevani na 75 do 80°C Dodata je voda da bi se dobio rastvor. Predestilovani su 2-propanol/voda pod sniženim pritiskom na 40 do 80<0>C. U toku destilacije; proizvod IV je počeo da kristališe. Ponovo, destilacija je nastavljena do sadržaja vode < 2%. Dodat je propanol i suspenzija je ohlađena na 5 do 15°C (> 4 sata). Temperatura je smanjena na 0 do 5° i proizvod V je proceden, ispran sa 2-propanolom i osušen pod sniženim prisitkom < 50°C. Rekristalizacija je ponavljana do kompatibilosti tesla čistoće (dobijen je proizvod V farmaceutske čistoće i veoma visokog prinosa od > 98%, kao dokaz veoma efikasnog prečišćavanja).

b) Razlike u poredenju sa objavljenim sintezama

Opisan je novi korak sinteze, prečišćavanje, koji nije opisan u stanju tehnike.

K orak 5: Pobijanje čis te Nor-UDCA (VI)

a) Opis postupka (krajnje taloženje)

Proi/vod V, voda i aceton su mešani na 22 do 28°C da bi se dobio rastvor. Rastvor je proceden. pll

reakcione smeše je podešen na 1,0 do 2,0 u?slabo dodavanja HCI 30%. Proizvod VI je trenutno počeo da kristališe. Suspenzija je ohlađena na 18 do 2<TC, proceđena, isprana sa vodom za injekcije, vodom za injekcije/aceton, i n-heptanom i osušena pod sniženim pritiskom na <50°C (LOD: <0,8%). Prinos je bar 90%.

b) Razlika u poredenju sa objavljenim sintezama

U objavljenom postupku Nor-UDCA je prečišćen jonoizmenjivaćkom hromatografijom na koloni i

rekristalizacijom iz metanol/acetona Identifikovano je da je najefikasniji postupak prečišćavanja obrazovanjem i/ili alternativno rekristalizacojom kalijumove soli Nor-UDCA iz 2-propanol/vođe taloženjem slobodne kiseline iz vode/acetona.Ovaj postupak prečišćavnja je dokazano veoma efikasan u uklanjanju poznatih nečistoća A (amida) i U (UDCA) kao i nepoznatih nečistoća. Na kraju, posle prosejavanja, sintetizovan je nor-UDCA visokog kvaliteta sa definisanim rasporedom veličine čestica (60% < 10 mm) kao što je potrebno za farmaceutske primene.

Farmaceutske kompozicije

Pronalazak se takođe odnosi na farmaceutsku kompoziciju koja sadrži polimorf prema pronalasku.

Tarmaceutska kompozicija može sadržati jedan ili više pogodnih ekscipijcnata koji su farmaceutski prihvatljivi.

Prema specijalnom izvođenju prikazanog pronalaska polimorf može biti formulisan za oralnu ili intravensku primenu, gde ove formulacije dalje sadrže farmaceutski prihvatljive nosače, adjuvante, ekscipijente i/ili sredstva.

Čvrsti dozni oblici za oralno davanje mogu obuhvatiti tablete, poželjno efeverscentne tablete ili

tablete za žvakanje, kapsule, pilule, prahove ili granule. U takvim doznim oblicima, polimorf može biti pomešan sa uobičajeno korišćenim supstancama kao što su saharoza, manitol, sorbitol, škrob i derivati škroba, celuloza i celulozni derivati (npr. mikrokristalna celuloza), di-kalcijum fosfat, laktoza, koloindi anhidrovani silicijum dioksid, talk, lubrikant (npr. magnezijum slearat, makrogol), sredstva za raspadanje i sredstva za puferovanje. Tablete i pilule mogu takođe biti pripremljene sa entero prevlakama u cilju sprečavanja da API bude oštećena stomačnim kiselinama ili enzimima.

I očni do/ni oblici za davanja mogu obuhvatati farmaceutski prihvaljive emulzije, rastvore, suspenzije i sirupe koji sadrže inertne razblaživače koji se uobičajeno koriste u stanju tehnike, kao što je voda ili smeše etanol/voda. Ovi dozni oblici mogu sadržati mikrokristalnu celulozu, alginsku kiselinu ili natrijum alginat, metilcelulozu i slično, da bi se podesile reološke osobine, zaslađivače/koregense ukusa, i/ili koristite sorbinske kiseline ili druga pogodna antimikrobna sredstava za održavanje. Kada se daju kao nazalni aerosoli ili inhalacijom, kompozicije prema prikazanom pronalasku mogu biti pripremljene kao rastvori u rastvoru soli, sa benzil alkoholom ili drugim sredstvima za održavanje, pospešivačima apsorpcije da bi se poboljšala biodostupnost, fluorougljenicima i/ili drugim sredstvima za poboljšavanje rastvaranja ili dispergovanja.

Supozitorije za rektalno davnaje API mogu biti pripremljene mešanjem polimorfa sa pogodnim neiritirajućim ekscipijentima kao što su tvrde masti, kako puler i polietilen glikoli koji su čvrste suptance na sobnoj temperaturi ali tečnosti na rektalnoj temperaturi, tako da se one tope u reklumu i oslobađaju API i opciono druge aktivne supstance prisutne u pomenutim supozitorijama.

Injeklibilni preparati, na primer sterilne injcktibilne vodene ili uljane suspenzije, mogu biti formulisane prema poznatim tehnikama pomoću pogodnih sredstava za dispregovanje, sredstava za kvašenje i/ili sredstava za suspendovanje. Sterilni injektibilni preparat može takođe biti sterilan injektibilni rastvor ili suspenzija u netoksičnom pareneteralno prihvatljivom rablaživaču ili rastvaraču. Medu prihvatljivim nosačima i rastvaračima koji mogu biti korišćeni su voda i izotonični rastvor natrijum hlorida. Sterilna neispraljiva ulja su takođe konvencionalno korišćena kao rastvarač ili medijum za suspendovanje.

Dozni oblici koji sadrže polimorf prema pronalasku mogu dalje sadržati konvencionalne ekscipijente, poželjno farmaceutski prihvatljive organske ili neorganske supstance nosače koji ne raguju sa aktivnim jedinjenjem. Pogodni farmaceutski prihvaljivi nosači obuhvataju na primer vodu, rastvore soli, alkohola, ulja, poželjno biljna ulja, polietilen glikole, želatin, laktozu, amilozu, magnezijum stearat, površinski aktivne supstance, parfimisana ulja, mono-gliceride i digliceride masnih kiselina,, estre petroetarskih masnih kiselina, hidroksimetil celuloza, polivnilpirolidon i slično, farmaceutski preparati mogu bili slerilizovani i ukoliko je poželjno, pomešani sa pomoćnim supstancama, kao što su lubrikanti, sredstva za održavanje, stabilizatori, sredstva za kvašenje, emulgatori. soli koje utiču na osmotski pritisak, puferi, boje, koregensi ukusa i/ili aromatične supstance i slično, koje ne reaguju štetno sa aktivnim jedinjenjima. Za parenteralnu primenu, naročito poželjni nosači obuhvataju rastvore, poželjno uljane ili vodene rastvore, kao i suspenzije, emulzije ili implante.

Različiti sistemi za davanje su poznati i mogu biti korišćeni za davanje API, uključujući, na primer, inkapsulaciju u lipozome, emulzije, mikročestice, mikrokapusle i mikrogranule (videti npr. EP 1 31/ 925). Željena doza može biti davana kao pojedinačna jedinica ili u obliku za odloženo davanje. Željeni dozni oblik može dalje biti davan u višejediničnom obliku, u obliku za trenutno, odloženo, prolongirano ili produženo davanje, pripremljeno oblaganjem, kao matrična formulacija i slično.

ISiodostupnost API može biti poboljšana mikronizacijom formulacije pomoću konvencionalnih tehnika kao što su usitnjavanje, melevenje i sušenje u obliku spreja u prisustvu pogodnih ekscipijenata ili sredstava kao što su fosfolipidi ili površinski aktivna sredstva. Međutim, u posebnom izvođenju nije potrebno usitnjavanje i mlevenje jer polimorf prema pronalasku već ima pogodnu veličinu čestica.

Farmacetska kompozicija sadrži poželjno efikasnu količinu Nor UDCA i farmaceutski prihvatljiv nosač i/ili ekscipijent

Prema poželjnom izvođenju prikazanog pronalaska farmaceutska kompozcija sadrži 10 do 8000 mg, poželjno 25 do 5000 mg, poželjnije 50 do 1500 mg, naročito 250 500 mg Nor-UDCA.

U poseku Nor-UDCA može poželjno biti data pacijentu u količini od 25 mg do 5 g, poželjno 100 mg do 2,5 g , naročito 80,0 mg do 1,5 g po danu. Međutim, 1 g Nor-UDCA je poželjno davan pacijentu. Dalje je primećeno da Nor UDCA može biti davan pojedincu od 1 3000 mg/d, poželjno 10-2000 mg/d, poželjnije 100-1500 mg/d, npr., 100, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 750, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400 ili 1500 mg/d, naročito 500 ili 750 ili 1000 ili 1500 mg/d. Pomenute količine su davane poželjno odjednom ili moguće u više od jedne doze (bar 2, 3, <1, 5 ili 10 doza) po danu. tek ili farmaceutska kompozicija prema prikazanom pronalasku može biti davana više od jedne nedelje, poželjno više od četiri nedelje, poželjno više od šest meseci, poželjnije više od jedne godine, određenije do kraja života.

Nor UDCA može biti davan ne samo u kombinaciji sa farmaceustki prihvatljivim nosačima i u dozniin oblicima kako je ovde opisano, nego takođe i u kombinaciji sa jednim ili više dodatnih aktivnih sastojaka (npr. ursodeoksiholna kiselin3,NSAID, kao sulindak i ibuprofen) za koje je takođe poznato da su efikasni protiv istih ili sličnih bolesti koje se leče (npr. ursodeoksiholna kiselina) ili protiv drugih bolesti, koje mogu poželjno biti rezultat bolesti jetre.

I armaceutkso upotreba polimorfa

Bolest jetre koja se leči prema prikazanom pronalasku može biti holestatička bolest jetre, poželjno primarni sklerozirajući holangitis (PSC), primarna bilijarna ciroza (PBC) ili progresivna familijarna intrahepatička holestaza, naročito progresivna familijarna intrahepatička holestaza tipa 1,2i 3, cistična fibroza, holestaza izazvana lekom ili neholestatička bolest jetre kao što je hronični virusni hepatitis (B, C, D), alkoholni i nealkoholni steatohepatitis, autoimuni hepatitis, hemohromatoza, Vilsonova bolest i deficijencija alfa-l-antitiripsina.

API prema pronalasku može biti korišćena sama ili u kombinaciji sa drugim antiinflamatornim lekovima, kao NSAlDs (npr. ibuprofen, sulindak) i/ili u kombinaciji sa ursodeoksiholnom kiselinom ili 5 aminosalicilnom kiselinom.

Prema još jednom poželjnom izvođenju prikazanog pronalaska bolest jetre je primarni sklerozirajući holangitis (PSC) i/iili primarna bilijarna ciroza (PBC).

Prema još jednom poželjnom izvođenju prikazanog pronalaska bolest koja se leči je metabolička bolest, npr. nealkoholni steato-hepatitis, dijabetes i/ili hiperlipidemija. Prema još jednom poželjnom izvođenju prikazanog pronalaska bolest koja se leči je arteroskleroza.

PRIMERI

Referentni primeri

Ispitivane su različite osobine Nor- UDCA sintetisne prema Schteingart and Hofmann (1988) Journal of Lipid Research Vol. 29(10), 1387-1395.

Hemijska čistoća

Profil hemijske čistoće: sintetizovane Nor-UCDA je procenjen pomoću HPI.C/RI. Dobijeni su sledeći rezultati:

Ukupna količina nečistoća treba da je manja od 0,05% ukoliko se jedinjenje koristi u farmaceutske svrhe. Nor-UDCA sintetizovan prema Schteingart i Hofmann-u ne ispunjava ove uslove. Pokušano je da je dalje prečisti jedinjenje ponovljenom rekristalizacijom. Međutim, nije bilo moguće smanjiti ukupnu količinu nečistoća na manje od 0,05%.

Raspored veličine čestica

Veličina čestica dobijenog kristala je analizirana mikroskopski. Nađeno je da je srednja veličina čestica 13,37 pm, tj. 50% kristala ima veličinu 13,37 pm ili manju, 60% kristala ima veličnu čestica 15,64 pm ili manju. 95% čestica ima veličnu čestica 46,64 pm ili manju. Manje od 30% čestica ima čestico veličine 10 pm ili manju. Ovaj raspored veličine čestica nije pogodan za namenjene farmaceutske preparate Mlevenje/mikronizacija nije poželjena jer bi dovela do smanjenja polimorfne čistoće i/ili termodinamičke stabilnosti Nor UDCA.

Primer 1: Polimorfna čistoća sintetizovane Nor-UDCA

Ispitivanje odabira polimorfna je obavljeno u dve faze. U fazi 1, sintetizovani Nor-UDCA, obeležen kao oblik A, je karakterisan sa XRPD, digitalnim slikanjem, termalnom analizom (DSC i TGMS). Čistoća materijala je bilia proverena sa HPLC/RI. Kratki prikaz analitičkih postupaka je dal u tabeli 1. Određivanje kvalitativne rastvorljivosti sa 20 rastvarača je izvedeno u cilju uklapanja podataka za odabir kristalizacionih rastvarača koji bi se koristili za odabir polimorfa. Dodatno, čvrste supstance; regenerisanje uparavanjem rastvarača koji su korišćene u eksperimentima rastvaranja su analizirane; sa XPRD i digitalnim slikanjem da bi se dobila informacija o potencijalnom obrazovanju novih oblika Nor-UDCA (videti Tabelu 2). Testovi usitnjavanja su izvedeni u cilju podržavanja definicije ekperimentalnog prostora za kristalizacioni mod. Amorfni materijal koji je korišćen kao polazni materijal je namerno dobijen sušenjem smrzavanjem iz rastvora 1,4 dioksan/voda (95/5%) i usitnjavanjem (mlin sa kuglama) za 'hladenje/uparavnje i difuziju pare u eksperimentima sa čvrstom supstancom'. U fazi 2, izvedeno je 217 eksperimenata podeljenih na različite kristalizacione mođove. Primenjeni kristalizacioni modovi su bili: • Kombinovani eksperimenti kristalizacije hlađenje/uparavanje polazeći od amorfnog materijala

• Kristalizacija prethodnim dodavanjem anti-rastvarača

• Fksperimenti sa suspenzijom na dve temperature

• Difuzija pare u rastvore

• Difuzija pare na amorfne čvrste supstance

• Kristalizacija usitnjavanjem sa 24 rastvarača i jedno sušenje.

Pošlo su eksperimenti obavljeni, izvedene su XPRD anali/e i digitalno slikanje na svim kristaii/ovanim čvrstim supstancama. Posle identifikacije stabilnih oblika, procena njihova prirode i reaitivno stabilnosti naspram oblika polaznog materija obezbedena je termalnim analizama i ponovljenim XRPD analizama posle skladištenja.

Rezultati polimorfnog odabira Nor-UDCA pokazuju da je oblik A nađen sa visokom učestalošću javljanja u svim tipovima kristalizacionih modova i takođe je obrazovan u različitim čistim rastvaračima i smešama (videti sliku 1). Čak u kristalizacionim eksperimentima koji polaze od amorfnog oblika Nor-UDCA dobijenog usitnjavanjem ili uparavanjem sušenjem smrzavanjem rastvora da bi se izbrisali efekti memorijo oblika A, izvedene XPRD analizo na čvrstim susptancama pokazuju da je uglavnom dobijen oblik A. Izgleda da je lako gajiti pojedinačne kristale oblika A, jer je primećeno da nastaju u eksperimentima difuzije pare u rastvor, lo sugeriše da postepeni porast superzasičenja sa sporim vremenom difuzije anti-rastvarača igra ulogu u omogućvanju rasta kristalnog oblika A. Generalno, primećeno kristalno stanje je glomazno. Kristalna struktura Nor UDCA je određena iz podataka difrakcije X-zraka na pojedinačnom kristalu sakupljenih na 294K i kristalisanih u monokliničkom sistemu sa C2 prostornom grupom (Z'=2) (videti tabelu 3). Kristalna struktura Nor UDCA je bila uspešno rafinirana sa GOF 1,002 (videti tabelu 3). Pakovanje kristala i šema H-veza za Nor UDCA je prikazana na slici 2. Nor-UDCA prikazuje samo intramolekularne H veze koje obra/uju monomere koji se periodično ponavljaju. 11 veze su obrazovane između različitih hidroksilnih grupa. Nor-UDCA molekuli su blisko spakovani prateći cik cak mod bez šupljina u koje može ući bilo koji rastvarač (videti sliku 3).

Iri dodatna nestabilna oblika (oblik11,oblik Cl i oblik C2) su identifikovani u eksperimentima hladenja/uparavnja. Oblik Cl je takođe dobijen iz anti-rastvarača, a zatim sa kombinovanim eksperimentom hlađenje/uparavanje. XRPD tri oblika su slični, čak veoma slični u slučaju oblika Cl i C2, što ukazuje na mogućnost da su izomorfni tipovi struktura. Oblik Cl je bio dovoljno stabilan da omogući određivanje njihove solvatizovane prirode. Usled njihove nestabilnosti, priroda oblika li i oblika C2 ne može biti određena. Na osnovu sličnosti XRPD uzorka kao i sličnosti molekulske: strukture kristalizacionih rastvarača iz kojih su oblici iskristalisali, može se misliti da su oblici U i CJ takođe solvatizovane strukture.

Identifikovane su tri dodatne nestabilne smeše (oblik A plus 1, oblik A plus2 i oblik A plus3). Smeša oblik A plus 1 je smeša oblika A sa drugim mogućim oblicima dobijenim iz eksperimenata hlađenje/uparavanje. Smeša oblik A plus2 je smeša oblika A sa drugim mogućim oblikom dobijenim iz eksperimenata sa suspenzijom na niskoj temperaturi. Smeša oblik A plus3 je smeša oblika A još nekim mogućim oblikom dobijenim posle desolvalacije ili transformacije oblika Cl (dobijenog iz eksperimenata hlađenje/uparavanje) u toku čuvanja u uslovima okoline. Usled njihovog niskog sadržaja u smešama i nestabilnosti, ne može biti određena priroda tri potencijalna oblika prisutnih u smeši.

Kratak prikaz oblika Nor-UDCA nađenih u toku ispitivanja odabira polimorfa je dat u tabelini na slici 4. Ustanovljeni uslovi za sintezu čistog Nor UDCA (prečišćavanje i rekristalizaciju kalijumove soli Nor UDCA sa naknadnim taloženjem slobodne kiseline), međutim, samo obezbeđuje fizičku čistoću i termodinamičku stabilnost kristalne supstance, tj. oblika A. Slika 1 prikazuje XPRD uzorak polaznog materijala i oblika A dobijenog iz različitih eksperimenata kristalizacije Primedba: Polazni materijal oblika A na slici 1 znači čista, polimorfna, kristalna nor-ursodeoksiholna kiselina sa definisanom veličinom čestica, koriščena u opisanom ispitivanju odabira polimorfa.

Slika 2 pokazuje? kristalno pakovanje i šemu H veza za Nor UDCA oblika A. Primedba: Kvadrat ukazuje na jedinično kristalno pakovanje Nor-UDCA (Oblika A}.

Slika 3 pokazuje molekularnu strukturu i šemu numeracije atoma na dva simetrično nezavisna molekula Nor UDCA kristala.

Slika 4 prikazuje uporedivanje XPRD urzoraka dobijenih novih oblika Nor-UDCA i XPRD uzorka oblika A: Primedba: Polazni materijal oblika A na slici 4 označava čistu, polimorfnu, kristalnu nor ursodeoksiholnu kiselinu sa definisanom veličinom čestica. Objašnjenja XPRD uzoraka prikazanih na slici 4: Pored oblika A, i/olovane su tri potencijalne smeše oblika A sa ostalim oblicima. Na prisustvo novih oblika je ukazivalo postojanje dodatnih signala na XRPO uzorcima čvrstih supstanci, signala koji nisu specifični za XRPD oblika A. Usled činjenice da su XRPD analize pokazivale da je pređom ina nti oblik u smeši oblik A, potencijalne smeše su označene kao: oblik A plusl, oblik A plus2 i oblik A plus ).

Smeša označena kao oblik A plusl je dobijena pošto je završen eksperiment hlađenje/uparavanje sa anizolom i metanolom. Njen XPRD uzorak pokazuje dodatna tri signala (pored onih oblika A) na pribl 8,77°, 14,75° i 20,51° (2teta). Ponovljena XPRD analiza čvrste supstance čuvane u uslovima okoline u bunarčiću i fioli je pokazala da je smeša potpuno pretvorena u oblik A u toku 7 dana.

Smeša označena kao oblik A plus 2 je dobijena posle završetka eskperimenta sa suspenzijom na 5°C sa hloroloromom. XPRD uzorak čvrste supstance je pokazivao pet dodatnih signala na pribl. Ml ", 12,75", 12,89°, 14,72° i 17,06° (2teta) u poredenju sa oblikom A. Ponovljena XPRD analiza čvrste supstance čuvane u uslovima okoline u bunarćiću pokazuje da se smeša potpuno pretvorila u oblik A u toku 11 dana, ali je bila stabilna u eksperimantalnoj fioli (u istom vremenskom intervalu).

Smeša označena kao oblik A plus3 je identifikovana posle pretvaranja oblika Cl (eksperimenata sa antirastvaračem sa 2,2,2 trifluoroctanolom i toluenom) čuvanog u uslovima okoline u toku 7 dana. XPRD uzorak potencijalne smeše A plus 3 pokazuje tri dodatna sinala na 6,74°, 7,15" i 10,25° (2tela) u odnosu na oblik A.

Oblik B je identifikovan posle završetka eksperimenta hlađenje/uparavanje sa 1,4 dioksanom i tetrahidrofuranom. XPRD uzorak oblika B je sličan onome oblika Cl i C2 u smislu du glavni intenzivni signali zajednički za oblike Cl i C2 su isto prisutni u XRPD oblika B. Međutim, uključivanje oblika B u istu izomorfnu klasu oblika (kao oblik Cl i C2) nije odmah bilo moguće usled prisutva efekata preferencijalne orijentacije. Ponovljena XPRD analiza oblika B je pokazala pretvaranje u toku 10 dana u oblik A posle čuvanja u bunarčiću i ekpenmentalnoj fioli u uslovima okoline.

Oblik Cl je dobijen u eksperimentima hlađenjem/uparavanje sa p-ksilenom i metanolom. XPRD alalize pomenute čvrste supstance čuvane u uslovima okoline u bunarčiću za merenje pokazala su da se oblik pretvorio u oblik A u toku 7 dana. Oblik Cl je takođe nađen u eksperimentima sa antirastvaračem sa 2,2,2-trifluoroetanolom i toluenom. Takođe u ovom slučaju, oblik pretvoren u oblik A u toku 7 dana je čuvan u bunarčiću.

Slika 5 odojeno prikazuje XPRD uzorak oblika A, Polimorf je katakterisan sa XPRI) signalima na 11,9, 14,4, 15,3, 15,8, 16,6 1 0,2° 2 teta i ima opšti izgled kako je prikazano na slici 5.

Primer 2: Hemijska čistoća sintetizovane Nor-UDCA

Profil hemijskih nečistoća sintetizovane Nor-UDCA je procenjem pomoću HPLC/R1. Postupak obuhvata instrumetalne uslove ukratko prikazane u tabeli 5. Mogući sporedni proizvodi iz sinteze su nečistoća A, nečistoća B, nečistoća C, nečistoća I), nečistoća I i nečistoća F. Nečistoća A je polazni materijal ursodeoksiholne kiseline (UDCA). Nečistoća B je 3a,7fš dihidroksi-24 nor 5B holan 23-amid, intermedijer nastao nepotpunom hidrolizom nitila. Nečistoća C je Nor henodeoksiholna kiselina (Nor CDCA) koja je glavna nečistoća u polaznom materijalu UDCA. Nečistoća D je holna kiselina (CA), još jedna glavna nečistoća u polaznom materijalu UDCA. Nečistoća i je formi! zaštićena UDCA koja ne pođleže željenoj reakciji. Ona je samo teorijska potencijalna nečistoća kada se formil-zaštitna grupa odcepi alkalnim tretmanom kada se dobija nečistoća A. Nečistoća f je 3ct,7fs-đihiđroksi-24 nor 5fi holan 23 nilril, još jedan intermedijer sinteze. Efikasnost ustanovljenih postupaka prečišćavanja je prikazana kao rezultati analiza HPLC nečistoća tri serije Nor UDCA (videti tabelu 6). Efikasno uklanjanje potencijalno poznatih i nepoznatih nečistoća rekristalizacijom kalijumove soli Nor UDCA i zatim taloženjem slobodne kiseline je vodilo do hemijski čiste Nor UDCA.

Primer 3: Veličinačesticasintetizovane Nor-UDCA

Taloženje slobodnih kiselina je vodilo do Nor UDCA čestica konzistentnog i definisanog rasporeda veličina. Mikronizacija mlevenjem u cilju kontrole velične Nor UDCA može biti izbegnuta. Rezultati merenja veličine čestica tri serije Nor UDCA pokazuju da željeno veličina čestica manja od 10 um može biti dobijena direktno sa ustanovljenim uslovima taloženja (videti tabelu 7).

Rezime:

Ovde je prikazano obrazovanje i rekristalizacija kalijumove soli Nor- UDCA iz smeše 2-propanola i vode a zatim praćeno taloženjem slobodnog oblika kiseline iz smeše vode i acetona. Ovaj postupak prečišćavanja preko kalijumove soli dokazuje da je veoma efikasn u uklanjanju poznatih nečistoća kao i nepoznatih nečistoća. Da zaključimo, opisani postupak je veoma efikasan u obezbedivanja preparata hemijski čistog, jednog polimorfa, kristalnog Nor-UDCA sa definisanom veličinom čestica.

Claims (14)

1. Hemijski čist polimorf Nor-UDCA, u kome; je ukupna količina hemijskih nečistoća manja od 0,5%, u odnosu na ukupnu težinu Nor UDCA, i bar 60% polimorfnih čestica ima veličinu < 10 pm, i pri čemu je pomenuti polimorf, naznačen time, što ima XRPD signale na 11,9, 14,4, 15,3, 15,8, i 16,6 ± 0,2 stepona? tetai što amorfni Nor-UDCA nije detektovan u pomenutom polimorfu pomoću XPPD.

2. Polimorf prema zahtevu 1, u kojem je ukupna količina hemijksih nečistoća manja od 0,1%, poželjno manja od 0,05 %.

3. Polimorf prema/ahlevu 1 ili 2, u kome je pomenuti Nor UDCA u svom anhidorvanom obliku

4. Polimorf prema zahtevu 1,naznačentime, što ima XPRD uzorak prikazan na slici 5.

5. Polimorf prema bilo kom od zahteva 1 do 4, koji ima zapreminski određenu srednji vrednost prečnika čestica D50 manju od 10 pm t/ili zapreminski određenu srednju vrednost prečnika čestica D95 manju od 30 pm.

6. F armaceutska kompozicija koja sadrži polimorf prema bilo kom od zahteva 1 do 5. /.

Farmaceutska kompozicija prema zahtevu 6, gde je raspored veličine čestica u farmaceutskoj kompoziciji bar 60% čestica veličine < 10 pm.

8. Polimorf prema bilo kom od zahteva 1 do 5, ili farmaceutska kompozicija prema zahtevu 6 ili 7, za upotrebu u lečenju holestatičke bolesti jetre, gde je holestatička bolest jetre poželjno izabrana iz grupe koju čine primarna bilijarna ciroza (PBC), primarni sklerozirajući holangitis (PSC), autoimuni hepatitis (AIH) i sindromi preklapanja, uključujući AIH sindrom preklapanja.

9. Polimorf prema bilo kom od zahteva 1 do 5 ili farmaceutska kompozicija prema zahtevu 6 ili 7, za upotrebu u lečenju metaboličke bolesti jetre i/ili arteroskleroze, gde je metabolička bolest jetre poželjno izabrana iz nealkoholnog stearohepatitisa i alkoholnog stearo hepatitisa.

10. Farmaceutska kompozicija prema bilo kom od zahteva 6 do 9, koja je formulisana za oralno, parenteralno, subkutanozno, intravensko, inlramuskularno, nazalno, lokalno ili rektalno davanje , i/ili koja sadrži jedan ili više farmaceutski prihvatljivih ekscipijenata.

11. Postupak za dobijanje čistog polimorfnog Nor UDCA, koji obuhvata sledeće korake: kristalizaciju kalijumove soli Nor UDCA ; i opciono rastvaranje kalijumove soli u rastvaraču i zakišeljavanje rastvora da bi se dobio čist Nor-UDCA.

12. Postupak prema zahtevu 11, gde je pomenuti rastvarač smeša vode i acetona, i gde je pomenuto taloženje izvedeno zakišeljavanjem rastvora do pH u opsegu 1 do 2.

13. Postupak prema zahtevu 11 ili 12, koji dalje obuhvata sledeće korake: (a) pretvaranje jedinjenja formule (A) u jedinjenje formule (B) (b) pretvaranje jedinjenja formule (B) u jedinjenje formule (C) (c) pretvaranje jedinjenja formule (C) u jedinjenje formule (D) u sirovom obliku (d) tretiranje jedinjenja formule (D) u sirovom obliku sa KOH u uslovima kristalizacije kalijumove soli Nor-UDCA; p,de je n 1.

14. Postupak prema bilo kom od zahteva 11 do 13,naznačentime, što ne obuhvata korak mlevenja i/ili korak mikronizacije.