RS55426B1 - Novi biciklični piridinoni - Google Patents

Description

Polje pronalaska

[00011Ovaj pronalazak se odnosi na tretman Alzheimer-ove bolesti i drugih neurodegenerativnih i/ili neuroloških poremećaja kod sisara, uključujući ljude. Ovaj pronalazak se takođe odnosi na modulaciju, kod sisara, uključujući ljude, produkcije A-beta peptida koji mogu da doprinesu formiranju neuroloških naslaga amiloidnih proteina. Još preciznije, ovaj pronalazak se odnosi na nova jedinjenja bicikličnih piridinona koja su korisna za tretman neurodegenerativnih i/ili neuroloških poremećaja, kao što Alzheimer-ova bolest i Daunov sindrom.

POREKLO PRONALASKA

[0002]Demencija nastaje kao posledica velikog broja različitih patoloških procesa. Najčešći patološki procesi koji dovode do demencije su Alzheimer-ova bolest (AB), cerebralna amiloidna angiopatija (CM) i bolesti u kojima je posrednik prion (videti, na primer, Haan i saradnici, Clin. Neurol. Neurosurg. 1990, 92(4):305-310; Glenner i saradnici, J. Neurol. Sci. 1989, 94:1-28). AB se pojavljuje kod skoro polovine svih ljudi koji su stariji od 85 godina, kod dela populacije u Sjedinjenim Državama koja se najbrže povećava. Zbog toga se očekuje da broj AB pacijenata u Sjedinjenim Državama poraste od približno 4 miliona do približno 14 miliona do 2050. godine.

[0003]WO 2011/048525 Al (PFIZER [US] 2011-04-25) i WO 2012/131539 Al (PFIZER [US] 2012-10-04) otkrivaju amiloidni beta protein i modulatore gama sekretaze za tretman neuroloških i psihijatrijskih poremećaja kao što su Alzheimer-ova bolest i Daunov sindrom.

[0004]Ovaj pronalazak se odnosi na grupu modulatora y-sekretaze korisnih za tretman neurodegenerativnih i/ili neuroloških poremećaja, kao što su kao što Alzheimer-ova bolest i Daunov sindrom, (videti Ann. Rep. Med. Chem. 2007, Olsen i saradnici, 42: 27-47).

KRATAK SADRŽAJ PRONALASKA

[0005] Ovaj pronalazak se odnosi na modulatore y-sekretaze Formule I ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, kako je pokazano niže datom formulom:

Pri čemu:

X je 5- do 14-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma; R<1>je vodonik, halogen, Ci-Cćalkil, C3-C6cikloalkil ili C2-C6alkenil grupa; pri čemu je navedena alkil, cikloalkil ili alkenil grupa opciono supstituisana sa jednim do tri supstituenta svaki nezavisno izabran iz grupe koja sadrži fluor, hidroksil i Ci-C6alkoksi grupu; A je C3-C6cikloalkil ili 4- do 10-člani heterocikloalkil; pri čemu je navedeni cikloalkil ili heterocikloalkil opciono supstituisan sa jednim do tri supstituenta svaki nezavisno izabran iz grupe koja sadrži halogen i Ci-Cćalkil grupu; R<2a>i R<2b>su u svakom pojavljivanju nezavisno vodonik, fluor, cijano, -CF3, Ci-Cćalkil, C2-Cćalkenil, C3-C6cikloalkil, C4-C8bicikloalkil, C2-C6alkinil ili fenil grupa; pri čemu je navedena alkil, alkenil, cikloalkil, bicikloalkil, alkinil ili fenil grupa opciono supstituisana sa jednim do tri supstituenta svaki nezavisno izabran iz grupe koja sadrži cijano, C1-C3alkil i fluor; ili R<2a>i R<2b>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju 3- do 5-člani cikloalkil opciono supstituisan sa jednim do tri R<8>; R3 je vodonik, halogen, Ci-Cealkil, C2-C6alkenil, -(C(R<10>)2)t-(C3-C6cikloalkil), -(C(R<10>)2)t(4-do 10-člani heterocikloalkil), -(C(R<10>)2)t-(C6-Cioaril), -(C(R<10>)2>-(5- do 10-člani heteroaril) ili -(C(R'°)2)t-OR<12>; pri čemu je navedeni alkil, alkenil, cikloalkil, heterocikloalkil, aril ili heteroaril opciono supstituisan sa jednim do pet R11; R4aiR4bsu svaki nezavisno vodonik, -CF3ili Ci-Cćalkil grupa, pri čemu je navedena alkil grupa opciono supstituisana sa jednim do tri supstituenta svaki nezavisno izabran iz grupe koja sadrži -CF3, cijano i fluor; iliR4aiR4bnavedeni cikloalkil opciono supstituisan sa jednim do tri supstituenta svaki nezavisno izabran iz grupe koja sadrži -CF3, cijano, fluor i Ci-Cćalkil grupu;

R<5a>i R<5b>su u svakom pojavljivanju svaki nezavisno vodonik, -CF3ili Ci-Cćalkil grupa, pri čemu je navedena alkil grupa opciono supstituisana sa jednim do tri supstituenta svaki nezavisno izabran iz grupe koja sadrži -CF3, cijano i fluor; ili R<5a>i R<5b>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju 3- do 5-člani cikloalkil, pri čemu je navedeni cikloalkil opciono supstituisan sa jednim do tri supstituenta svaki nezavisno izabran iz grupe koja sadrži -CF3, cijano, fluor i Ci-Cćalkil grupu;

R<6>, R<7>i R<8>su svaki nezavisno vodonik, -CF3, cijano, halogen, Ci-Cćalkil ili -OR<9>;poduslovom da R<6>i R<7>ne mogu oba da budu -OH grupa;

R9 je vodonik, Ci-Cćalkil ili -CF3; pri čemu je navedena alkil grupa opciono supstituisana sa jednim do tri supstituenta svaki nezavisno izabran iz grupe koja sadrži cijano grupu i fluor; svaki R10 je nezavisno vodonik, halogen, cijano, -CF3, Ci-Cćalkil ili -SF5; pri čemu je navedena alkil grupa opciono supstituisana sa jednim do tri atoma fluora;

svaki R<11>je nezavisno vodonik, halogen, -CF3, -SF5, -Si(CH3)3, -OR<12>, Ci-Cćalkil, C2-Cealkenil, C2-C6alkinil, -(C(R<10>)2)t-(C3-C6cikloalkil), -(C(R<10>)2)t-( Ce-Cioaril) ili -(C(R<10>)2)t-(5- do 10-člani heteroaril), pri čemu je navedena -Si(CH3)3, alkil, alkenil, alkinil, cikloalkil, aril ili heteroaril grupa opciono supstituisana sa jednim do pet supstituenata svaki nezavisno izabran iz grupe koja sadrži halogen i -CF3grupu;

svaki R12 je vodonik, Ci-C6alkil, -(C(R<13>)2)n-(C3-C6cikloalkil), -(C(R<13>)2)n-(4- do 10-člani heterocikloalkil), -(C(R<13>)2)n-(C6-Cioaril) ili -(C(R<13>)2)n-(5- do 10-člani heteroaril); pri čemu je navedena alkil, cikloalkil, heterocikloalkil, aril ili heteroaril grupa opciono supstituisana sa jednim do pet R<14>;

svaki R13 je nezavisno vodonik, Ci-Cćalkil, C2-C6alkenil, C2-C6alkinil, halogen, cijano, -CF3ili -OCF3grupa;

R14 je nezavisno vodonik, -CF3, cijano, halogen ili Ci-6alkil grupa; pri čemu je navedena alkil grupa opciono supstituisana sa jednim do tri supstituenta svaki nezavisno izabran iz grupe koja sadrži hidroksil, -CF3, cijano i fluor;

i svaki t ili nje ceo broj nezavisno izabran od 0, 1,2 ili 3;

svaki z je ceo broj nezavisno izabran od 1 ili 2;

svaki y je ceo broj nezavisno izabran od 0,1, 2, 3 ili 4.

[0006] Jedinjenja iz pronalaska uključuju Primere 1-73 ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so, kako je ovde opisano.

[0007]Ovde su takođe date kompozicije koje uključuju farmaceutski efektivnu količinu jednog ili više ovde opisanih jedinjenja i farmaceutski prihvatljiv vehikulum, nosač ili ekscipijent.

[0008]Jedinjenj a Formule I su modulatori y-sekretaze. y-Sekretaza igra ulogu u produkciji plakova amiloidnog beta proteina (AP) povezanih sa Alzheimer-ovom bolešću. U skladu sa tim, jedinjenj a Formule I su korisna u lečenju različitih neurodegenerativnih i/ili neuroloških poremećaja povezanih sa produkcijom Ap.

[0009]Ostale karakteristike i prednosti ovog pronalaska će biti očigledne iz ove specifikacije i pripadajućih patentnih zahteva koji opisuju pronalazak.

DETALJAN OPIS PRONALSKA

[0010]Naslovi u ovom dokumentu su dati samo zbog lakšeg pregleda od strane čitaoca. Ne treba smatrati da na bilo koji način ograničavaju pronalazak ili patentne zahteve.

Definicije i primeri

[0011]Kako se koriste kroz celu ovu prijavu, uključujući patentne zahteve, niže dati nazivi imaju značenja koja su definisana u daljem tekstu, ukoliko nije drugačije posebno navedeno. Množina i jednina treba da se tumače kao međusobno zamenljive, za razliku od indikacije brojevima: Naziv "Ci-C6alkil" se odnosi na zasićeni hidrokarbil supstituent ravnog ili račvastog lanca (to jest, supstituent dobijen od ugljovodonika uklanjanjem vodonika) koji sadrži od 1 do 6 atoma ugljenika. U primere ovih supstituenata spadaju metil, etil, propil (uključujući «-propil i izopropil), butil (uključujući «-butil, izobutil, secbutil i terc-butil), pentil i heksil. Naziv "Ci-C3alkil" se odnosi na zasićeni hidrokarbil supstituent ravnog ili račvastog lanca (to jest, supstituent dobijen od ugljovodonika uklanjanjem vodonika) koji sadrži od 1 do 3 atoma ugljenika. U primere ovih supstituenata spadaju metil, etil i propil (uključujući «-propil i izopropil). Naziv "C2-C6alkenil" se odnosi na alifatični ugljovodonikkoji sadrži od 1 do 6 atoma ugljenika i ima najmanje jednu ugljenik-ugljenik dvostruku vezu, uključujući grupe ravnog lanca ili račvastog lanca koje imaju najmanje jednu ugljenik-ugljenik dvostruku vezu. U reprezentativne primere spadaju, ali se ne ograničavaju samo na, etenil, 1-propenil, 2-propenil

(alil), izopropenil, 2-metil-l-propenil, 1-butenil i 2-butenil. Kada jedinjenj a iz ovog pronalaska sadrže C2-C6alkenil grupu, jedinjenje može da egzistira kao čist E (entgegen) oblik i čist Z (zusammen) oblik ili kao bilo koja njihova mešavina.

Naziv "C2-C6alkinil" se odnosi na alifatični ugljovodonik koji sadrži od 2 do 6 atoma ugljenika i ima najmanje jednu ugljenik-ugljenik trostruku vezu, uključujući grupe sa ravnim ili račvastim lancem koje imaju najmanje jednu ugljenik-ugljenik trostruku vezu. U reprezentativne primere alkinila spadaju, ali se ne ograničavaju samo na, acetilenil, 1-propinil, 2-propinil, 3-butinil, 2-pentinil i 1-butinil.

Naziv "C3-C6cikloalkil" se odnosi na karbociklični supstituent dobijen uklanjanjem vodonika iz zasićene karbociklične molekule i ima 3 do 6 atoma ugljenika. Cikloalkil može da bude pojedinačni prsten, koji obično sadrži od 3 do 6 atoma u prstenu. U primere spadju ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil i cikloheksil. Cikloalkil može da sadrži jednu ili više dvostrukih ili trostrukih veza u zavisnosti od broja atoma ugljenika koji sačinjavaju prsten (na primer cikloheksen ima jednu ugljenik-ugljenik dvostruku vezu ili cikloheksin ima jednu ugljenik-ugljenik trostruku vezu). Alternativno, cikloalkil može da bude dvostruki prsten kao što je bicikloalkil, na primer, C/t-Csbicikloalkil. Naziv "C/t-Cshicikloalkil" se odnosi na dvostruki prsten koji ima 4 do 8 atoma ugljenika. Bicikloalkil može da bude međusobno spojen, kao što je biciklo[1.1.0]butan, biciklo[2.1.0]pentan, biciklo[2.2.0]heksan, biciklo[3.1.0]heksan, biciklo[3.2.0]heptani i oktohidropentalen. Naziv "bicikloalkil" takođe obuhvata premoštene bicikloalkil sisteme kao što su, ali bez ograničenja na, biciklo[2.2.1]heptan i biciklo[l.l.l]pentan.

Naziv "C6-Cioaril" se odnosi na aromatični supstituent koji sadrži od 6 do 10 atoma ugljenika, uključujući jedan prsten ili dva spojena prstena. U primere ovakvih aril supstituenata spadaju, ali bez ograničenja na, fenil, naftil i dihidroindenil. Naziv "vodonik" se odnosi na vodonik supstituent i može da bude označen kao -H.

Naziv "hidroksi" ili "hidroksil" se odnosi na -OH. Kada se koristi u kombinaciji sa drugim nazivom(ima), prefiks "hidroksi" pokazuje daje supstituent za koji je prefiks vezan supstituisan sa jednim ili više hidroksi supstituenata. Jedinjenja koja imaju ugljenik za koji je vezan jedan ili više hidroksi supstituenata uključuju, na primer, alkohole, enole i fenil.

Naziv "cijano" (takođe označen kao "nitril") označava -CN, koji takođe može da bude označen kao:

Naziv "halogen" se odnosi na fluor (koji može da bude označen kao -F), hlor (koji može da bude označen kao -Cl), brom (koji može da bude označen kao -Br) ili jod (koji može da bude označen kao -I). U jednom otelotvorenju, halogen je hlor. U narednom otelotvorenju, halogen je fluor. U narednom otelotvorenju, halogen je brom.

Kako se ovde koristi, naziv "(Ci-C6)alkoksi" označava (Ci-C6)alkil grupu, kako je ovde definisano, koja je dodata osnovnom molekulskom ostatku preko atoma kiseonika. U primere spadaju, ali se ne ograničavaju samo na, metoksi, etoksi i n-propoksi.

Naziv "4- do 10-člani heterocikloalkil" se odnosi na supstituent dobijen uklanjanjem vodonika iz zasićene ili delimično zasićene strukture prstena koji sadrži ukupno 4 do 10 atoma u prstenu, pri čemu je najmanje jedan od atoma prstena heteroatom izabran od kiseonika, azota ili sumpora. U primere 4- do 10-članih heterocikloalkila spadaju, ali se ne ograničavaju samo na, dihidrofuranil, tetrahidrofuranil, tetrahidropiranil, dihidrotiofenil i tetrahidrotiofenil. Heterocikloalkil alternativno može da uključi međusobno spojena 2 ili 3 prstena, pri čemu najmanje jedan od tih prstenova sadrži heteroatom kao atom prstena (to jest, azot, kiseonik ili sumpor). U grupi koja ima heterocikloalkil supstituent, atom prstena heterocikloalkil supstituenta koji je vezan za grupu može da bude najmanje jedan heteroatom kada je heteroatom azot ili to može da bude atom ugljenika iz prstena, pri čemu atom ugljenika prstena može da bude u istom prstenu kao i najmanje jedan heteroatom, ili atom ugljenika prstena može da bude u različitom prstenu u odnosu na najmanje jedan heteroatom. Slično tome, ukoliko je nasuprot tome heterocikloalkil supstituent supstituisan sa grupom ili supstituentom, grupa ili supstituent može da bude vezan za najmanje jedan heteroatom kada je heteroatom azot, ili može da bude vezan za atom ugljenika prstena, gde atom ugljenika prstena može da bude u istom prstenu kao najmanje jedan heteroatom, ili gde atom ugljenika prstena može da bude u različitom prstenu od najmanje jednog heteroatoma.

Naziv "5- do 14-člani heteroaril" se odnosi na strukturu aromatičnog prstena koji sadrži od 5 do 14 atoma u prstenu gde je najmanje jedan od atoma prstena heteroatom (to jest, kiseonik, azot ili sumpor), pri čemu su preostali atomi prstena nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži ugljenik, kiseonik, azot i sumpor. Heteroaril može da bude 1 prsten ili 2 ili 3 spojena prstena. U primere heteroaril supstituenata spadaju, ali se ne ograničavaju samo na: supstituenti 6-članog prstena kao što su piridil, pirazil, pirimidinil i piridazinil; supstituenti 5- članog prstena kao što su triazolil, imidazolil, furanil, tiofenil (takođe poznat kao "tiofuranil"), pirazolil, oksazolil, izoksazolil, tiazolil, 1,2,3-, 1,2,4-, 1,2,5- ili 1,3,4-oksadiazolil i izotiazolil; supstituenti 6/5-članih spojenih prstenova kao što su benzotiofuranil, izobenzotiofuranil, benzizoksazolil, benzoksazolil, purinil i antranilil; i supstituenti 6/6-članih spojenih prstenova kao što su hinolinil, izohinolinil, cinolinil, hinazolinil i 1,4-benzoksazinil. U grupi koja ima heteroaril supstituent, atom prstena heteroaril supstituenta koji je vezan za grupu može da bude najmanje jedan heteroatom kada je heteroatom azot, ili može da bude atom ugljenika prstena, gde atom ugljenika prstena može da bude u istom prstenu kao i najmanje jedan heteroatom ili gde atom ugljenika prstena može da bude u različitom prstenu od najmanje jednog heteroatoma. Slično tome, ukoliko je nasuprot tome heteroaril supstituent supstituisan sa grupom ili supstituentom, grupa ili supstituent može da bude vezan za najmanje jedan heteroatom kada je heteroatom azot, ili može da bude vezan za atom ugljenika prstena gde atom ugljenika prstena može da bude u istom prstenu kao i najmanje jedan heteroatom ili gde atom ugljenika prstena može da bude u različitom prstenu od najmanje jednog heteroatoma. Naziv "heteroaril" takođe uključuje piridil 7V-okside i grupe koje sadrže piridin 7V-oksid.

[0012JUkoliko je supstituent opisan kao daje "supstituisan," supstituent koji nije vodonik se nalazi na mestu vodonik supstituenta na ugljeniku ili azotu supstituenta. Prema tome, na primer, supstituisani alkil supstituent je alkil supstituent u kome je najmanje jedan supstituent različit od vodonika na mestu vodonik supstituenta na alkil supstituentu. Kao ilustracija, monofluoroalkil je alkil supstituisan sa fluoro supstituentom a difluoroalkil je alkil supstituisan sa dva fluoro supstituenta. Jasno je da ukoliko postoji više od jednog supstituenta na supstituentu, svaki supstituent koji nije vodonik može da bude identičan ili različit (ukoliko nije drugačije navedeno

[0013]Ukoliko je supstituent opisan kao daje "opciono supstituisan," supstituent može da bude ili (1) nesupstituisan ili (2) supstituisan. Ukoliko je ugljenik supstituenta opisan daje opciono supstituisan sa jednim ili više sa liste supstituenata, jedan ili više vodonika na ugljeniku (može bilo koji u okviru mogućnosti) mogu odvojeno i/ili zajedno da se zamene sa nezavisno izabranim opcionim supstituentom. Ukoliko je azot supstituenta opisan daje opciono supstituisan sa jednim ili više sa liste supstituenata, jedan ili više od vodonika na azotu (može bilo koji u okviru mogućnosti) može svaki da bude zamenjen sa nezavisno izabranim opcionim supstituentom.

[0014]Ova specifikacija koristi nazive "supstituent," "radikal" i "grupa" kao međusobno zamenljive.

[0015]Ukoliko je supstituent opisan daje opciono supstituisan sa do određenim brojem supstituenata različitih od vodonika, taj supstituent može da bude ili (1) nesupstituisan ili (2) supstituisan sa do tog određenog broja supstituenata različitih od vodonika ili na do maksimalnog broja položaja na supstituentu koji mogu da se supstituišu, koji god je manji. Prema tome, na primer, ukoliko je supstituent opisan kao heteroaril opciono supstituisan sa do 3 supstituenta različita od vodonika, tada će bilo koji heteroaril sa manje od 3 položaja koji mogu da se supstituišu opciono da bude supstituisan sa samo onoliko supstituenata različitih od vodonika koliko heteroaril ima položaja koji mogu da se supstituišu. Kao ilustracija, tetrazolil (koji ima samo jedan položaj koji može da se supstituiše) može opciono da se supstituiše sa jednim supstituentom različitim od vodonika. Da ovo dalje ilustrujemo, ukoliko je opisano daje azot amina opciono supstituisan sa do 2 supstituenta različita od vodonika, tada je azot opciono supstituisan sa do 2 supstituenta različita od vodonika ukoliko je azot amina primarni azot, dok će azot amina biti opciono supstituisan sa samo do jednim supstituentom različitim od vodonika ukoliko je azot amina sekundarni azot.

[0016]Ukoliko su supstituenti opisani kao "nezavisno izabrani" iz grupe, svaki supstituent je izabran nezavisno od drugog(ih) Prema tome, svaki supstituent može da bude identičan sa ili različit od drugog supstituenta(anata).

[0017]Jasno je da opisi za bilo koji supstituent, kao što je R<1>, mogu da se kombinuju sa opisima za bilo koji drugi supstituent, kao što je R<2>, tako daje svaki i svaka kombinacija prvog supstituenta i drugog supstituenta ovde data ista kao i ukoliko je svaka kombinacija specifično i pojedinačno navedena. Na primer, u jednoj varijanti, R<1>je uzet zajedno sa R<2>da se obezbedi otelotvorenje u kome je R<1>metil grupa i R<2>je halogen.

[0018] Kako se ovde koriste, nazivi "Formula I", "Formula Ia", "Formula lb" i "Formula Ic" mogu u daljem tekstu da se označe kao "jedinjenje(a) iz pronalaska." Ovi nazivi su takođe definisani da obuhvate sve oblike jedinjenja Formula I, Ia, lb i Ic, uključujući njihove hidrate, solvate, izomere, kristalne i amorfne oblike, izomorfe i polimorfe. Na primer, jedinjenja Formula I, Ia, lb i Ic ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, mogu da egzistiraju u oblicima nesolvata i solvata. Kada su rastvarač ili voda čvrsto vezani, kompleks ima jasno definisanu stehiometriju nezavisnosno od vlažnosti. Međutim, kada su rastvarač ili voda slabo vezani, kao u kanalnim solvatima i higroskopnim jedinjenj ima, sadržaj voda/rastvarač će da zavisi od vlažnosti i uslova sušenja. U ovakvim slučajevima, stehiometrija ne može da bude norma.

[0019]Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu da egzistiraju kao klatrati ili drugi kompleksi. Okvirom ovog pronalaska su obuhvaćeni kompleksi kao što su klatrati, kompleksi inkluzije

lek-domaćin, pri čemu se, za razliku od prethodno pomenutih solvate, lek i domaćin nalaze u stehiometrijskim ili ne-stehiometrijskim količinama. Takođe su uključeni kompleksi Formula I, Ia, lb i Ic koji sadrže dve ili više organskih i/ili neorganskih komponenti koje mogu da budu

u stehiometrijskim ili ne-stehiometrijskim količinama. Nastali kompleksi mogu da budu jonizovani, delimično jonizovani ili ne-jonizovani. Za pregled ovakvih kompleksa, videti J. Pharm. Sci., 64 (8), 1269-1288 by Haleblian (August 1975).

[0020]Jedinjenja iz pronalaska mogu da imaju asimetrične atome ugljenika. Ugljenik-ugljenik veze jedinjenja iz pronalaska mogu ovde da se označe upotrebom pune linije ( ), punog klina(-^^*)ili isprekidanog klina ( mi). Upotreba pune linije za označavanje veza za asimetrične atome ugljenika treba da označi da su na tom atomu ugljenika uključeni svi mogući stereoizomeri (na primer, specifični enantiomeri, racematne smeše itd.). Upotreba ili punog ili isprekidanog klina za opis veza na asimetričnim atomima ugljenika treba da ukaže daje prisutan pokazani stereoizomer. Kada su prisutni u racematnim jedinjenjima, puni i isprekidani klinovi se koriste da definišu relativnu stereohemiju, pre nego apsolutnu stereohemiju. Racematna jedinjenja koja poseduju ovako navedenu relativnu stereohemiju su označena sa (+/-). Na primer, ukoliko nije drugačije naznačeno, smatra se da jedinjenja iz pronalaska mogu da egzistiraju kao stereoizomeri, što uključuje cis i trans izomere, optičke izomere kao što su R i S enantiomeri, diastereomere, geometrijske izomere, rotacione izomere i konformacione izomere. Jedinjenja iz pronalaska mogu da ispoljavaju više od jednog tipa izomerizma i njihovih smeša (kao što su racemati i diastereomerni parovi). Takođe su uključene soli nastale dodatkom kiseline ili dodatkom baze, pri čemu je kaunterjon optički aktivan, na primer, D-laktat ili L-lizin ili racemati, na primer, DL-tartarat ili DL-arginin.

[0021]Kada bilo koji racemat kristališe, moguća su dva različita tipa kristala. Prvi tip je racematno jedinjenje (pravi racemat) koji se odnosi na prethodno, pri čemu se produkuje jedan homogeni oblik kristala koji sadrži oba enantiomera u ekvimolarnim količnama. Drugi tip je racematna smeša ili konglomerat, pri čemu se produkuju dva oblika kristala u ekvimolarnim količnama od kojih svaki sadrži pojedinačni enantiomer.

[0022]Ovaj pronalazak takođe uključuje izotopno-obeležena jedinjenja, koja su identična sa jedinjenjima označenim u Formulama I, Ia, lb i Ic, ali se razlikuju zbog činjenice da je jedan ili više atoma zamenjeno sa atomom koji ima atomsku masu ili maseni broj različit od

atomske mase ili masenog broja koji se uobičajeno nalazi u prirodi. Primeri izotopa koji mogu da budu inkorporirani ujedinjenja iz pronalaska uključuju izotope vodonika, ugljenika, azota, kiseonika, fosfora, fluora i Mora, kao što su, ali bez ograničenja na,<2>H, 3H, 13C, 14C, 15N, 180,<17>0,<3>2P,3<5>S,1<8>F i<36>C1. Neka izotopno-obeležena jedinjenja od jedinjenja iz ovog pronalaska, na primer ona u kojima su inkorporirani radioaktivni izotopi kao što su<3>H i<14>C su korisna u

ispitivanju lekova i/ili distribucije supstrata tkiva. Tricijum, to jest,<3>H i ugljenik-14, to jest,<14>C, izotopi su posebno preferirani zbog svoje lake izrade i detektabilnosti. Osim toga, supstitucija sa težim izotopima kao što je deuterijum, to jest,<2>H, može da obezbedi izvesne terapeutske prednosti koje su rezultat veće metaboličke stabilnosti, na primer, povećanje polu-životain vivoili smanjenje zahtevanih doza i na taj način mogu da budu preferirani u nekim okolnostima. Izotopno-obeležena jedinjenja iz pronalaska mogu generalno da se izrade po procedurama koje su otkrivene u niže datim Šemama i/ili u Primerima i Preparatima, supstitucijom ne-izotopno obeleženog reagensa sa izotopno obeleženim reagensom.

[0023] Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu da se koriste u obliku soli dobijenih od neorganskih ili organskih kiselina. U zavinosti od određenog jedinjenja, so jedinjenja može da ima prednosti zbog jedne ili više fizičkih osobina soli, kao što su povećana farmaceutska stabilnost u uslovima različitih temperatura i vlažnosti, ili poboljšana rastvorljivost u vodi ili ulju. U nekim slučajevima, so jedinjenja takođe može da se koristi kao pomoć u postupku izdvajanja, prečišćavanja i/ili rezolucije jedinjenja.

[0024] Kada je so namenjena za primenu na pacijentu (za razliku, na primer, od upotrebe u in vitro kontekstu) soje preferirano farmaceutski prihvatljiva. Naziv "farmaceutski prihvatljiva so" se odnosi na so izrađenu kombinacijom jedinjenja formule I sa kiselinom čiji se anjon, ili bazom čiji se katjon generalno smatra pogodnim za ljudsku upotrebu. Farmaceutski prihvatljive soli su posebno korisne kao produkti postupaka iz ovog pronalaska zbog svoje veće rastvorljivosti u vodi u odnosu na osnovno jedinjenje.

[0025] Pogodne farmaceutski prihvatljive soli jedinjenja iz ovog pronalaska nastale dodatkom kiseline obuhvataju one soli koje su dobijene od neorganskih kiselina kao što su hlorovodonična, bromovodonična, fluorovodonična, borna, fluoroborna, fosforna, metafosforna, azotna, ugljovodonična, sulfonska i sumporna kiselina i organskih kiselina kao što su sirćetna, benzensulfonska, benzoatna, limunska, etansulfonska, mravlja, glukonska, glikolna, izotionatna, mlečna, laktobionatna, jabučna, malinska, metansulfonska, trifluorometansulfonska, sukcinatna, toluensulfonska, vinska i trifluorosirćetna kiselina. Pogodne organske kiseline generalno uključuju, ali bez ograničenja na, alifatične, cikloalifatične, aromatične, aralifatične, heterociklične, karboksilične i sulfonične grupe organskih kiselina.

[0026] Specifični primeri pogodnih organskih kiselina uključuju ali bez ograničenja na, acetatnu, trifluoroacetatnu, formatnu, propionatnu, sukcinatnu, glukolatnu, glukonatnu, diglukonatnu, laktatnu, malatnu, vinsku kiselinu, citratnu, askorbatnu, glukuronatnu, maleatnu, fumaratnu, piruvatnu, aspartatnu, glutamatnu, benzoatnu, antranilnu kiselinu, stearatnu, salicilatnu, p-hidroksibenzoatnu, fenilacetatnu, mandelatnu embonatnu (pamoatnu), metansulfonatnu, etansulfonatnu, benzensulfonatnu, pantotenatnu, toluensulfonatnu, 2-hidroksietansulfonatnu, sufanilatnu, cikloheksilaminosulfonatnu, algininsku kiselinu, 0-hidroksibutemu kiselinu, galaktaratnu, galakturonatnu, adipatnu, alginatnu, butiratnu, kamforatnu, kamforsulfonatnu, ciklopentanpropionatnu, dodecilsulfatnu, glikoheptanoatnu, glicerofosfatnu, heptanoatnu, heksanoatnu, nikotinatnu, 2-naftalensulfonatnu, oksalatnu, palmoatnu, pektinatnu, 3-fenilpropionatnu, pikratnu, pivalatnu, tiocianatnu i undekanoatnu.

[0027]Isto tako, kada jedinjenja iz pronalaska imaju kiseli ostatak, njihove odgovarajuće farmaceutski prihvatljive soli mogu da uključe soli alkalnih metala, to jest, soli natrijuma ili kalijuma; soli zemno alkalnih metala, na primer, soli kalcijuma ili magnezijuma; i soli formirane sa odgovarajućim organskim ligandima, na primer, kvaternarne amonijumove soli. U narednom otelotvorenju, bazne soli se formiraju od baza koje grade netoksične soli, uključujući soli aluminijuma, arginina, benzatina, holina, dietilamina, diolamina, glicina, lizina, meglumina, olamina, trometamina i cinka.

[0028]Organske soli mogu da se izrade od sekundarnih, tercijernih ili kvaternarnih soli amina, trometamina, dietilamina, A^AT-dibenziletilendiamina, hlorprokaina, holina, dietanolamina, etilendiamina, meglumina (Af-metilglukamina) i prokaina. Bazne grupe koje sadrže azot mogu da se kvaternizuju sa sredstvima kao što su halidi nižeg alkil (Ci-Ce) (na primer, metil, etil, propil i butil hloridi, bromidi i jodidi), dialkil sulfati (to jest, dimetil, dietil, dibutil i diamil sulfati), halidi dugog lanca (to jest, decil, lauril, miristil i stearil hloridi, bromidi i jodidi), arilalkil halidi (to jest, benzil i fenetil bromidi) i drugi.

[0029]U jednom otelotvorenju, mogu takođe da se formiraju hemi soli kiselina i baza, na primer, hemisulfatne i hemikalcijumove soli.

[0030]Uobičajeno, jedinjenja iz pronalaska se primenjuju u količini efikasnoj za lečenje stanja kako je ovde opisano. Jedinjenja iz pronalaska se primenjuju na bilo koji pogodan način u obliku farmaceutske kompozicije prilagođene tom načinu primene i u dozi efikasnoj za namenjeni tretman. Terapeutski efikasne doze jedinjenja potrebne za lečenje uznapredovanog medicinskog stanja će stručnjak sa uobičajenim iskustvom u praksi jednostavno da odredi koristeći prekliničke i kliničke pristupe koji se koriste u medicinskoj praksi. Naziv "terapeutski efektivna količina" kako se ovde koristi, se odnosi na količinu jedinjenja koje se primenjuje a koja će do određenog nivoa da olakšaju jedan ili više simptoma poremećaja koji se tretira.

[0031]Naziv "lečenje", kako se ovde koristi, ukoliko nije drugačije naznačeno, označava poništenje, poboljšanje, inhibiciju progresa ili prevenciju poremećaja ili stanja na koje se ovaj naziv odnosi, ili jedan ili više simptoma takvog poremećaja ili stanja. Naziv "treatman", kako se ovde koristi, ukoliko nije drugačije naznačeno, se odnosi na postupak lečenja, kako je "lečenje" ovde prethodno definisano. Naziv "lečenje" takođe obuhvata adjuvantni i neo-adjuvantni tretman subjekta.

Jedinjenja

[0032]Za dalju ilustraciju jedinjenja iz ovog pronalaska, niže su opisane sledeće podgrupe.

[0033]Niže data Formula laje podgrupa Formule I kako je opisana, pri čemu je z = 1 a svaki R<5>a,R5b, R<6>i R7 je vodonik. U Formuli Ia, X je 5-člani heteroaril izabran od imidazolila, pirazolila, izotiazolila, tiazolila, izoksazolila, oksazolila ili piridila; R<1>je izabran od vodonika, halogena ili Ci-C3alkil grupe; y je 0 ili 1; R<2a>i R<2b>su svaki nezavisno vodonik ili Ci-C3alkil grupa;R4a i R<4b>su svaki nezavisno vodonik ili Ci-C3alkil grupa; A je C3-C6cikloalkil izabran od ciklobutila, ciklopentila ili cikloheksila ili A je 5- do 6-člani heterocikloalkil izabran od tetrahidrofuranila, tetrahidropiranila ili dihidroizoksazolila, pri čemu su ciklobutil, ciklopentil cikloheksil, tetrahidrofuranil, tetrahidropiranil ili dihidroizoksazolil opciono supstituisani sa jedan do tri supstituenta svaki nezavisno izabran od halogena ili Ci-C3alkil grupe; i R<3>je

-(C(R<10>)2)t-(C6-Cioaril), -(C(R<10>)2)t-(5- do 10-člani heteroaril) ili -(C(R<10>)2)t-OR<12>; pri čemu je navedeni aril opciono supstituisan sa jedan do pet supstituenata svaki nezavisno izabran od fluora, hlora, -CF3,-SF5, -OCF3, -OCHF2, -OCH3, -CF2CF3, -CF2CH3grupe; svaki R12 je nezavisno C6-Cioaril ili 5- do 10-člani heteroaril, pri čemuje navedeni aril ili heteroaril opciono supstituisan sa jedan do pet fluora, hlora, CF3, metil ili izopropil grupe; i t je 0 ili 1.

[0034]U nekim otelotvorenjima pronalaska, u Formuli Ia kako je prethodno opisano, x je imidazolil; R<1>je metil grupa; y je 0;R2a i R<2b>su svaki nezavisno vodonik; R<4a>i R<4b>su svaki nezavisno vodonik; A je ciklobutil; i R3 je (6,7-difluoronaftilen-l-il)oksi.

[0035]U nekom narednom otelotvorenju pronalaska, u Formujli Ia kako je prethodno opisano, x je imidazolil; R<1>je metil grupa; y je 1; jedan od R<2a>ili R2b je vodonik a drugi je metil grupa; R<4a>i R<4b>su svaki nezavisno vodonik; A je tetrahidrofuranil; i R<3>je 5-trifluorometiltiofen-2-il.

[0036]Niže opisana Formula lb je podgrupa Formule Ia kako je opisano, pri čemu je x imidazolil, R3 je fenil, z je 1 i svaki R5a,R5b,R<6>i R7 je vodonik. U Formuli lb, kako je niže opisano, R<1>je izabran od vodonika, halogena ili Ci-C3alkil grupe; y je 0 ili 1; R<2a>iR2bsu nezavisno vodonik ili Ci-C3alkil grupa; R<4a>i R<4b>su svaki nezavisno vodonik ili Ci-C3alkil grupa; A je C3-C6cikloalkil izabran od ciklopentila ili cikloheksila ili je A 5- do 6-člani heterocikloalkil izabran od tetrahidrofuranila, tetrahidropiranila ili dihidroizoksazolila, pri čemu su ciklopentil, cikloheksil, tetrahidrofuranil, tetrahidropiranil ili dihidroizoksazolil opciono supstituisani sa jedan do tri supstituenta svaki nezavisno izabran od halogena ili Ci-C3alkil grupe; m je 1, 2 ili 3; i svaki R<11>je nezavisno izabran od vodonika, fluora, hlora, -CF3,

-SF5, -OCF3, -OCHF2, -OCH3, -CF2CF3, -CF2CH3ili ciklopropila.

[0037]U nekim otelotvorenjima pronalaska, u prethodno opisanoj Formuli lb R<1>je metil grupa; y je 1;R2aiR2bsu nezavisno vodonik; R<4a>i R<4b>su svaki nezavisno vodonik; A je tetrahidropiranil; m je 1; i R<11>je CF3grupa. U nekim otelotvorenjima, CF3supstituent je vezan za fenil prsten u para položaju.

[0038]U nekim otelotvorenjima pronalaska, u prethodno opisanoj Formuli lb, R<1>je metil grupa; y je 1;R2aiR2bsu nezavisno vodonik; R<4a>i R<4b>su svaki nezavisno vodonik; A je cikloheksil; m je 1 i R<11>je hlor. U nekim otelotvorenjima hlor supstituent je vezan za fenil prsten u para položaju.

[0039] Niže opisana Formula Ic je podgrupa Formule I kako je prethodno opisano, pri čemu je x imidazolil, R3 je fenil, A je tetrahidrofuranil, z je 1 a svaki R<5a>, R<5b>, R<6>i R7 je nezavisno vodonik. U Formuli Ic, kako je niže opisano, R<1>je izabran od vodonika, halogena ili Ci-Csalkil grupe;R2a i R<2b>su nezavisno vodonik ili metil grupa; R<4a>i R<4b>su svaki nezavisno vodonik ili Ci-C3alkil grupa; tetrahidrofuranil ostatak je opciono supstituisan sa jedan do tri supstituenta svaki nezavisno izabran od halogena ili Ci-C3alkil grupe; i R<11>je izabran od vodonika, fluora, hlora, -CF3, -SF5, -OCF3, -OCHF2, -OCH3, -CF2CF3, -CF2CH3ili ciklopropila.

[0040]U nekim drugim otelotvorenjima pronalaska, u prethodno opisanoj Formuli Ic, R<1>je metil grupa; obaR2a i R<2b>su vodonik; jedanodR4a i R4b je vodonik a drugi je metil grupa; i R<11>je -CF3grupa. U nekim otelotvorenjima -CF3supstituent na fenil prstenuje vezan na para položaju.

[0041]U nekim drugim otelotvorenjima pronalaska, u prethodno opisanoj Formuli Ic, R<1>je metil grupa; obaR2aiR2bsu vodonik; oba R<4a>i R<4b>su vodonik; tetrahidrofuranil ostatak je supstituisan sa jednim fluorom ili metil supstituentom; i R<11>je -CF3grupa. U nekim otelotvorenjima -CF3supstituent na fenil prstenuje vezan u para položaju.

[0042]U nekim drugim otelotvorenjima pronalaska, u prethodno opisanoj Formuli Ic, R<1>je metil grupa; oba R<2a>i R<2b>su vodonik; oba R<4a>i R<4b>su vodonik; i R<11>je fluor, hlor, -CF3, -SF5ili -OCH3grupa.

[0043]U nekim drugim otelotvorenjima pronalaska, u prethodno opisanoj Formuli Ic, R<1>je metil grupa; jedan odR2a i R<2b>je vodonik a drugi je metil grupa; R<2>je vodonik; oba R<4a>i R<4b>su vodonik; i R<11>je fluor, hlor, -CF3, -OCF3, -OCHF2ili -OCH3grupa.

[0044]Niže opisana Formula Id je podgrupa opisane Formule I, pri čemuje x imidazolil, A je tetrahidrofuranil, z je 1 i svaki R<5a>, R<5b>, R<6>i R7 je nezavisno vodonik. U niže opisanoj formuli Id, R2 je vodonik ili metil grupa; R3 je C6-Cioaril ili 5- do 6-člani heteroaril, pri čemuje aril ili heteroaril opciono supstituisan sa jedan do tri R11, pri čemuje svaki R11 nezavisno izabran iz grupe koja sadrži fluor, hlor, -CF3, -SF5, -OCH3, -OCF3i -OCHF2grupu.

[0045]U nekim otelotvorenjima prethodno opisane Formule Id, R<3>je fenil opciono supstituisan sa jedan do tri R11 supstituenta nezavisno izabrana od fluora, hlora, -CF3, -SF5,

-OCH3, -OCF3i -OCHF2grupe.

[0046]U nekim drugim otelotvorenjima prethodno opisane Formule Id, R<3>je tiofenil opciono supstituisan sa jedan do tri R<11>supstituenta nezavisno izabrana od fluora, hlora, -CF3, -SF5,

-OCH3, -OCF3i -OCHF2grupe.

Farmakologija

[0047]Istraživanje Alheimer-ove bolesti (AB) ukazuje daje bolest povezana sa stvaranjem plakova različitih oblika i veličina u mozgu. Primarni plakovi povezani sa AB su amiloidni beta proteini (AP). Ap se stvara kada se prekursor amiloidnog proteina (APP) podvrgne uzastopnim proteolizama sa P- i y-sekretazom (Haas i saradnici, "Trafficking and proteolvtic processing of APP", Cold Spring Harbor Perspect Med., 2011). y-Sekretaza je veliki kompleks četiri različita integralna proteina od kojih je jedan identifikovan kao katalitička komponenta koja uključuje neuobičajenu komponentu ugrađenu u membrani (De Strooper, Bart, i saradnici, "Presenilins and y- Secretase: Structure, Function and Role in Alzheimer's Disease"Cold Spring Harb Perspect Med 2012;2:a006304). Katalitičke komponente poznate kao presenilini su prvo otkrivene kao mesta genetskih mutacija odgovornih za rani početak Alzheimer-ove bolesti (AB). Nađeno je da su proteini enkodirane višepropusne membrane katalitičke komponente y-sekretaza, kompleksi aspartil proteaze ugrađene u membranu odgovorne za generisanje karboksilnog terminusa amiloidnog P proteina (AP) iz prekursora amiloidnog proteina (APP). (De Strooper, Bart, i saradnici, 2012). U skladu sa tim, usmeravanjem na proteine y-sekretaze kao potencijalnog cilja za otkrivanje lekova u tretmanu Azheimer-ove bolesti može da postane glavni fokus u istraživanju Azheimer-ove bolesti.

[0048]Jedinjenja iz ovog pronalaska su modulatori y-sekretaze i mogu da se koriste za lečenje stanja ili bolesti centralnog nervnog sistema za koje je utvrđeno da imaju povećanu aktivnost y-sekretaze kao što je Niemann Pick tip C; neuroloških poremećaja (kao što su migrena); epilepsije; Azheimer-ove bolesti; Parkinsonove bolesti; oštećenja mozga; šloga; cerebrovaskularnih bolesti (uključujući cerebralnu arteriosklerozu, cerebralnu amiloidnu angiopatiju, naslednu cerebralnu hemoragiju i hipoksiju-ishemiju mozga); kognitivnih poremećaja (uključujući amneziju, senilnu demenciju, demenciju povezanu sa HlV-om, Azheimer-ovu bolest, Huntingtonovu bolest, demenciju povezana sa Lewy-jevim telima, vaskularnu demenciju, demenciju uzrokovanu lekovima, tardivnu diskineziju, mioklonuse, distoniju, delirijum, Pikovu bolest, Creutzfeldt-Jacob-sovu bolest, HIV bolest, Gilles de la Tourette-ov sindrom, epilepsiju, mišićne spazme i poremećaje povezane sa mišićnim grčevima ili slabostima uključujući tremore i blage kognitivne poremećaje); mentalnnih oštećenja (uključujući spastičnost, Daunov sindrom i sindrom fragilnog X-hromozoma); poremećaje spavanja (uključujući hipersomniju, poremećaj biološkog ritma spavanja, insomniju, parasomniju i uskraćivanje sna) i psihijatrijskih poremećaja kao što su anksioznost (uključujući poremećaj akutnog stresa, poremećaj opšte anksioznosti, poremećaj socijalne anksioznosti, poremećaj panike, poremećaj post-traumatskog stresa, agorafobiju i opsesivno-kompulsivni poremećaj); izveštačene poremećaje (uključujući akutnu halucinatornu maniju); poremećaja kontrole nagona (uključujući poremećaj kompulsivnog kockanja i poremećaj kontrole impulsa); poremećaje raspoloženja (uključujući bipolarni I poremećaj, bipolarni II poremećaj, maniju, mešovito afektivno stanje, veliku depresiju, hroničnu depresiju, sezonsku depresiju, psihotičnu depresiju, premenstrualni sindrom (PMS), premenstrualni disforični poremećaj (PDD) i postporođaju depresiju); psihomotorne poremećaje; psihotonične poremećaje (uključujući šizofreniju, šizoafektivni poremećaj, šizofreni oblik i poremećaj sumanosti); zavisnosti od lekova (uključujući zavisnost od narkotika, alkoholizam, zavisnost od amfetamina, zavisnost od kokaina, zavisnost od nikotina i sindrom apstinentske krize); poremećaje ishrane (uključujući anaoreksiju, bulimiju,poremećaj nekontrolisanog unosa hrane, hiperfagiju, gojaznost, poremećaj kompulsivnog uzimanja hrane i pagofagiju); poremećaje seksualne disfunkcije, urinarne inkontinencije; neuroloških poremećaja (uključujući oštećenje oka, retinopatiju ili degeneraciju makule oka, tinitus, oštećenje i gubitak sluha i edem mozga) i pedijatrijskih psihijatrijskih poremećaja (uključujući poremećaj deficita pažnje, poremećaj deficita pažnje/hiperaktivnosti, poremećaj ponašanja i autizam) kod sisara, preferirano kod ljudi, uključujući primenu na navedenom sisani terapeutski efektivne količine jedinjenja Formule I, Formule Ia, Formule lb i Formule Ic ili njihove farmaceutski prihvatljive soli.

[0049]U nekim otelotvorenjima, jedinjenja iz ovog pronalaska mogu da se koriste za lečenje neuroloških poremećaja (kao što su migrena; epilepsija; Azheimer-ova bolest; Parkinsonova bolest; Niemann Pick tip C; oštećenje mozga; šlog; cerebrovaskularna bolest; poremećaj ponašanja; poremećaj spavanja) ili psihijatrijskih poremećaja (kao što su anksioznost; izeštačeni poremećaj; poremećaj kontrole nagona; poremećaj raspoloženja; psihomotorni poremećaj; psihotični poremećaj; zavisnost od lekova; poremećaj ishrane; i pedijatrijski psihijatrijski poremećaj) kod sisara, preferirano ljudi,koji uključuje primenu na sisani terapeutski efektivne količine jedinjenja Formule I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli.

[0050]Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu da budu takođe korisna u poboljšanju memorije (i na kratak i na dugi rok) i sposobnosti učenja.

[0051]Izmenjeni tekst četvrtog izdanja Diagnostic and Statistical Manual of Mental Dizorders (DSM-IVTR) (2000, American Psvchiatric Association, Washington D.C.) obezbeđuje dijagnostička sredstva za identifikaciju brojnih poremećaja koji su ovde opisani. Stručnjak sa iskustvom će da prepozna da postoje alternativne nomenklature, nozologije i sistemi klasifikacije za poremećaje koji su ovde opisani, uključujući i one koji su opisani u DMS-IV i da su terminologija i sistemi klasifikacije uznapredovali sa napretkom medicinske nauke.

Formulacije

[0052]Jedinjenja iz pronalaska mogu da se primene oralno. Oralna primena uključuje gutanje tako da jedinjenje ulazi u gastrointestinalni trakt, ili može da se koristi bukalna ili sublingvalna primena kojima jedinjenje ulazi u krvotok direktno iz usta.

[0053] U narednom otelotvorenju, jedinjenja iz pronalaska mogu takođe da se primene direktno u krvotok, u mišić ili u unutrašnji organ. Pogodan način za parenteralnu primenu uključuje intravensku, intraarterijsku, intraperitonealnu, intratekalnu, intraventrikularnu, intrauretralnu, intrasternalnu, intrakranijalnu, intramuskularnu i subkutanu primenu. Pogodni uređaji za parenteralnu primenu uključuju injektore sa iglom (uključujući mikro igle), injektore bez igle i infuzione tehnike.

[0054] U narednom otelotvorenju, jedinjenja iz pronalaska mogu takođe da se primene topično na kožu ili mukozu, to jest, dermalno ili transdermalno. U narednom otelotvorenju, jedinjenja iz pronalaska mogu takođe da se primene intranazalno ili inhalacijom. U narednom otelotvorenju, jedinjenja iz pronalaska mogu da se primene rektalno ili vaginalno. U narednom otelotvorenju, jedinjenja iz pronalaska mogu takođe da se primene direktno u oko ili uho.

[0055] Dozni režim za jedinjenja i/ili kompozicije koje sadrže jedinjenja se zasniva na različitim faktorima, uključujući tip, starost, telesnu težinu, pol i medicinsko stanje pacijenta; ozbiljnost stanja, način primene i aktivnost određenog primenjenog jedinjenja. Prema tome, dozni režim može da varira u velikom opsegu. Vrednosti doze u rasponu od približno 0.01 mg do približno 100 mg po kilogramu telesne težine po danu su korisne u tretmanu prethodno navedenih stanja. U jednom otelotvorenju, ukupna dnevna doza jedinjenja iz pronalaska (primenjena u jednoj ili podeljenim dozama) je obično od približno 0.01 do približno 100 mg/kg. U narednom otelotvorenju, ukupna dnevna doza jedinjenja iz pronalaska je od približno 0.1 do približno 50 mg/kg i u narednom otelotvorenju, od približno 0.5 do približno 30 mg/kg (to jest, mg jedinjenja iz pronalaska po kg telesne težine). U jednom otelotvorenju, doziranje je od 0.01 do 10 mg/kg/dan. U narednom otelotvorenju, doziranje je od 0.1 do 1.0 mg/kg/dan. Dozna jedinica kompozicija može da sadrži ove količine ili njihove manje delove da se dostigne dnevna doza. U brojnim slučajevima, primena jedinjenja se ponavlja više puta u toku dana (obično ne više od 4 puta). Dnevne višestruke doze obično mogu da se koriste za povećanje ukupne dnevne doze, ukoliko je potrebno.

[0056] Za oralnu primenu, kompozicije mogu da budu u obliku tableta koje sadrže 0.01, 0.05, 0.1, 0.5, 1.0, 2.5, 5.0, 10.0, 15.0, 25.0, 50.0, 75.0, 100, 125, 150, 175, 200, 250 i 500 miligrama aktivnog sastojka za simptomatično podešavanje doze za pacijenta. Medikament obično sadrži od približno 0.01 mg do približno 500 mg aktivnog sastojka, ili u narednom otelotvorenju, od približno 1 mg do približno 100 mg aktivnog sastojka. Za intravensku primenu, doze mogu da budu u rasponu od približno 0.1 do približno 10 mg/kg/minut u toku infuzije sa konstantnom brzinom.

[0057]Odgovarajući subjekti u skladu sa ovim pronalaskom su sisari. Sisari u skladu sa ovim pronalaskom obuhvataju, ali se ne ograničavaju samo na, pse, mačke, goveda, koze, konje, ovce, svinje, glodare, dvojezupce, primate i slično i obuhvataju sisare u utrobi. U jednom otelotvorenju, odgovarajući subjekti su ljudi. Humani subjekti mogu da budu oba pola i u bilo kom stadij umu razvitka.

[0058]U narednom otelotvorenju, pronalazak obuhvata jedno ili više jedinjenja iz pronalaska za upotrebu u tretmanu stanja koja su ovde opisana.

[0059]Za tretman prethodno navednih stanja, jedinjenja iz pronalaska mogu da se primene kao jedinjenje kao takvo. Alternativno, farmaceutski prihvatljive soli su pogodne za medicinsku primenu zbog svoje veće rastvorljivosti u vodi u odnosu na osnovno jedinjenje.

[0060]U narednom otelotvorenju, ovaj pronalazak uključuje farmaceutske kompozicije. Ove farmaceutske kompozicije sadrže jedinjenje iz pronalaska uz prisustvo farmaceutski prihvatljivog nosača. Nosač može da bude čvrst, tečan ili oba i može da se formuliše sa jedinjenjem kao jednodozna kompozicija, na primer, tableta, koja može da sadrži od 0.05% do 95% težine aktivna jedinjenja. Jedinjenje iz pronalaska može da se udvoji sa odgovarajućim polimerima kao ciljanim nosačima leka. Takođe mogu da budu prisutne druge farmakološki aktivne supstance.

[0061]Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu da se primene na bilo koji odgovarajući način, preferirano u obliku farmaceutske kompozicije prilagođene za takav način primene i u dozi efikasnoj za namenjeni tretman. Aktivna jedinjenja i kompozicije mogu, na primer, da se primene oralno, rektalno, parenteralno ili topično.

[0062]Oralna primena čvrstog doznog oblika može da bude, na primer, u obliku pojedinačnih jedinica kao što su čvrste ili meke kapsule, pilule, kahete, lozenge ili tablete, od kojih svaka sadrži prethodno odmerenu količinu najmanje jednog jedinjenja iz ovog pronalaska. U narednom otelotvorenju, oralna primena može da bude u obliku praška ili granula. U narednom otelotvorenju, oralni dozni oblik je sub-lingvalan, kao što je, na primer, lozenga. U ovakvim čvrstim doznim oblicima, jedinjenja formule I se obično kombinuju sa jednim ili više adjuvansa. Ovakve kapsule ili tablete mogu da sadrže formulaciju sa kontrolisanim oslobađanjem. U slučaju kapsula, tableta i pilula, dozni oblici mogu takođe da uključe sredstva za puferovanje ili mogu da se izrade sa enteričnim omotačima.

[0063]U narednom otelotvorenju, oralna primena može da bude u tečnom doznom obliku. Tečni dozni oblici za oralnu primenu uključuju, na primer, farmaceutski prihvatljive emulzije, rastvore, suspenzije, sirupe i eliksire koji sadrže inertne razblaživače koji se uobičajeno koriste u tehnici (to jest, vodu). Ovakve kompozicije mogu takođe da uključe adjuvanse kao što su sredstva za vlaženje, emulgovanje, suspendovanje, korigovanje ukusa (na primer, zaslađivači) i/ili za korigovanje mirisa.

[0064] U narednom otelotvorenju, ovaj pronalazak uključuje parenteralni dozni oblik. "Parenteralna primena" obuhvata, na primer, subkutane injekcije, intravenske injekcije, intraperitonealne injekcije, intramuskularne injekcije, intrasternalne injekcije i infuziju. Preparati za injekcije (to jest, sterilne vodene ili uljane suspenzije) mogu da se formulišu u skladu sa poznatom tehnikom koristeći pogodna sredstva za dispergovanje, vlaženje i/ili suspendovanje.

[0065] U narednom otelotvorenju, ovaj pronalazak uključuje dozni oblik za topičnu primenu. "Topična primena" obuhvata, na primer, transdermalu primenu, kao što su transdermalni flasteri ili uređaji za jontoforezu, intraokularna primena ili intranazalna ili inhalaciona primena. Kompozicije za topičnu primenu takođe uključuju, na primer, topične gele, sprejove, masti i kreme. Topična formulacija može da uključi jedinjenje koje pojačava apsorpciju ili penetraciju aktivnog sastojka kroz kožu ili druge obuhvaćene oblasti. Kada se jedinjenja iz ovog pronalaska primenjuju transdermalnim uređajem, primena se postiže koristeći flaster ili tipa rezervoara i porozne membrane ili varijantu sa čvrstim matriksom. U tipične formulacije za ovu svrhu spadju geli, hidrogeli, losioni, rastvori, kreme, masti, praškovi za posipanje, prelivi, pene, filmovi, flasteri za kožu, pločice, implanti, sunđeri, vlakna, zavoji i mikroemulzije. Takođe mogu da se koriste lipozomi. U uobičajene nosače spadaju alkohol, voda, mineralna ulja, tečni parafin, beli vazelin, glicerin, polietilen glikol i propilen glikol. Mogu da budu inkorporirani pojačivači penetracije - videti, na primer, Finnin and Morgan, J. Pharm. Sci., 88 (10), 955-958 (1999).

[0066] Formulacije pogodne za topičnu primenu na oku obuhvataju, na primer, kapi za oči u kojima je jedinjenje iz ovog pronalaska rastvoreno ili suspendovano u pogodnom nosaču.

Uobičajena formulacija pogodna za okularnu ili auralnu primenu može da bude u obliku kapi, mikronizirane suspenzije ili rastvora u izotoničnom, pH-podešenom sterilnom rastvoru soli. U druge formulacije pogodne za okularnu i auralnu primenu spadaju masti, biorazgradivi (to jest absorbilni gel sunđeri, kolagen) i ne-biorazgradivi (to jest, silikon) implanti, pločice, sočiva i partikulatni ili vezikularni sistemi kao što su miozomi ili lipozomi. Polimer, kao što su unakrsno vezana poliakrilna kiselina, polivinil alkohol, hijaluronska kiselina, celulozni polimer, na primer, hidroksipropilmetilceluloza, hidroksietilceluloza ili metilceluloza ili heteropolisaharidni polimer, na primer, gelan guma, može da bude inkorporiran zajedno sa konzervansom kao što je benzalkonijum hlorid. Ovakve formulacije mogu takođe da se oslobode jontoforezom.

[0067]Za intranazalnu primenu ili primenu inhalacijom, aktivna jedinjenja iz pronalaska se uobičajeno oslobađaju u obliku rastvora ili suspenzije iz kontejnera sa sprej pumpom tako što se pritisne ili ispumpa od strane pacijenta ili kao aerosol sprej koji se nalazi u kontejneru pod pritiskom ili nebulizeru, uz upotrebu odgovarajućeg propelanta. Formulacije pogodne za intranazalnu primenu se uobičajeno primenjuju u obliku suvog praška (ili same, kao mešavina, na primer, u suvoj mešavini sa laktozom ili kao smeša čestica komponenti, na primer, smeša sa fosfolipidima kao što je fosfatidilholin) iz inhalera suvog praška ili kao aerosol sprej iz kontejnera pod pritiskom, pumpe, sprej a, atomizera (preferirano atomizera koji koristi elektrohidrodinamiku za produkciju fine magle) ili nebulizera sa ili bez upotrebe odgovarajućeg propelanta kao što su 1,1,1,2-tetrafluoroetan ili 1,1,1,2,3,3,3-heptafluoropropan. Za intranazalnu upotrebu, prašak može da uključi bioadhezivno sredstvo, na primer, hitozan ili ciklodekstrin.

[0068]U narednom otelotvorenju, ovaj pronalazak uključuje dozni oblik za rektalnu primenu. Ovakav rektalni dozni oblik može da bude, na primer, u obliku supozitorija. Kakao buter je tradicionalna podloga za supozitorije, ali kao odgovarajuće mogu da se koriste različite alternative.

[0069]Takođe mogu da se koriste i drugi materijali za nosač kao i drugi načini primene poznati u farmaciji. Farmaceutske kompozicije iz pronalaska mogu da se izrade bilo kojom od dobro poznatih tehnika u farmaciji, kao što su efikasna formulacija i procedure primene. Prethodna razmatranja u vezi sa efikasnim formulacijama i procedurama primene su dobro poznati u tehnici i opisani su u standardnim udžbenicima. Formulacija lekova je diskutovana, na primer, u Hoover, John E., Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, Pennsvlvania, 1975; Liberman i saradnici, Eds., Pharmaceutical Dosage Forms, Marcel Decker, New York, N.Y., 1980; i Kibbe i saradnici, Eds., Handbook of Pharmaceutical Excipients (3rd Ed.), American Pharmaceutical Association, Washington, 1999.

[0070]Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu da se koriste sama, ili u kombinaciji sa drugim terapeutskim sredstvima za tretman različitih stanja ili bolesnih stanja. Jedinjenje(a) iz ovog pronalaska i drugo terapeutsko sredstvo(a) mogu da se primene istovremeno (ili u istom doznom obliku ili u odvojenim doznim oblicima) ili jedno za drugim. Kao primer terapeutskog sredstva može da bude, na primer, agonist metabotropičnog glutamat receptora.

[0071]Primena dva ili više jedinjenja "u kombinaciji" znači da se dva jedinjenja primenjuju vremenski dovoljno blisko da prisustvo jednog menja biološke efekte drugog. Dva ili više jedinjenja mogu da se primene istovremeno, odvojeno ili jedno za drugim. Pored toga, istovremena primena može da se izvede mešanjem jedinjenja pre primene ili primenom jedinjenja u isto vreme ali na različitim anatomskim mestima ili koristeći različite načine primene.

[0072]Izrazi "odvojena primena," "ko-primena," "istovremena primena," i "primena istovremeno" znači da se jedinjenja primenjuju u kombinaciji.

[0073]Ovaj pronalazak uključuje upotrebu kombinacije jedinjenja modulatora y-sekretaze kako je obezbeđeno u Formuli I i jednog ili više dodatnog farmaceutski aktivnog sredstva(ava). Ukoliko se primenjuje kombinacija aktivnih sredstava, tada oni mogu da se primene jedno za drugim ili istovremeno, u odvojenim doznim oblicima ili komb ino vani u pojedinačnom doznom obliku. U skladu sa tim, ovaj pronalazak takođe uključuje farmaceutske kompozicije koje obuhvataju neku količinu: (a) prvog sredstva koje predstavlja jedinjenje Formule I ili farmaceutski prihvatljivu so jedinjenja; (b) drugo farmaceutski aktivno sredstvo; i (c) farmaceutski prihvatljiv nosač, vehikulum ili razblaživač.

[0074]Za upotrebu u konjukciji sa jedinjenjima Formule I, mogu da se izaberu različit farmaceutski aktivna sredstva u zavisnosti od bolesti, poremećaja ili stanja koje se tretira. Farmaceutski aktivna sredstva koja mogu da se koriste u kombinaciji sa kompozicijama iz ovog pronalaska uključuju, bez ograničenja: (i) inhibitore acetilholinsteraze, kao što su donepezil hidrohlorid (ARICEPT, MEMAC), fizostigmin salicilat (ANTTLTRTUM), fizostigmin sulfat (ESERINE), metrifonat, neostigmin, ganstigmin, piridostigmin (MESTINON), ambenonijum (MYTELASE), demarkarijum, Debio 9902 (takođe poznat kao ZT-1; Debiopharm), rivastigmin (EXELON), ladostigil, NP-0361, galantamin hidrobromid (RAZADYNE, RIMINYL, NIVALIN), takrin (COGNEX), tolserin, velnakrin maleat, memokvin, huperzin A (HUP-A; NeuroHitech), fenserin, edrofonijum (ENLON, TENSILON) i INM-176; (ii) amiloid-B (ili njegove fragmente), kao što je Afli-15konjugovan sa pan HLA DR-vezujućim epitopom (PADRE), ACC001 (Elan/Wyeth), ACI-01, ACI-24, AN-1792, Affitope AB-01,CAD106iV-950; (iii) anatitela za amiloid-fl (ili njegove fragmente), kao što su ponezumab, solanezumab, bapineuzumab (takođe poznate kao AAB-001), AAB-002 (Wyeth/Elan), ACI-01-Ab7, BAN-2401, intravenski Ig (GAMMAGARD), LY2062430 (humanizirani m266; Lilly), R'450 (Roche), ACU-5A5, huC091 i one otkrivene u Internacionalnim patentnim publikacijama broj WO04/032868, WO05/025616, WO06/036291, WO06/069081, WO06/l 18959, u US patentnim publikacijama broj US2003/0073655, US2004/0192898, US2005/0048049, US2005/0019328, u Evropskim patentnim publikacijama broj EP0994728 i 1257584 i u US patentu broj 5,750,349; (iv) amiloid-umanjujuća ili inhibirajuća sredstva (uključujući ona koja redukuju produkciju, akumulaciju i fibrilaciju amiloida) kao što su dimebon, davunetid, eprodisat, leuprolid, SK-PC-B70M, celekoksib, lovastatin, anapsos, oksiracetam, pramiracetam, vareniklin, nicergolin, kolostrinin, bisnorcimserin (takođe poznat kao BNC), NIC5-15 (Humanetics), E-2012 (Eisai), pioglitazon, kliokvinol (takođe poznat kao PBT1), PBT2 (Prana Biotechnology), flurbiprofen (ANSAID, FROBEN) i njegov R-enantiomer tarenflurbil (FLURIZAN), nitroflurbiprofen, fenoprofen (FENOPRON, NALFON), ibuprofen (ADVIL, MOTRIN, NUROFEN), ibuprofen lizinat, meklofenaminska kiselina, meklofenamat natrijum (MECLOMEN), indometacin (INDOCIN), diklofenak natrijum (VOLTAREN), diklofenak kalijum, sulindak (CLINORIL), sulindak sulfid, diflunisal (DOLOBID), naproksen (NAPROSYN), naproksen natrijum (ANAPROX, ALEVE), ARC031 (Archer Pharmaceuticals), CAD-106 (Cytos), LY450139 (Lilly), insulin-degradirajući enzim (takođe poznat kao insulizin), gingko biloba ekstrakt EGb-761 (ROKAN, TEBONIN), tramiprosat (CEREBRIL, ALZHEMED), eprodisat (FIBRILLEX, KIACTA), jedinjenje W (3,5-bis(4-nitrofenoksi)benzoeva kiselina), NGX-96992, neprilizin (takođe poznat kao neutrala endopeptidaza (NEP)), scilo-inozitol (takođe poznat kao scilitol), atorvastatin (LIPITOR), simvastatin (ZOCOR), KLVFF-(EEX)3, SKF-74652, ibutamoren mesilat, BACE inhibitori kao što su ASP-1702, SCH-745966, JNJ-715754, AMG-0683, AZ-12304146, BMS-782450, GSK-188909, NB-533, E2609 i TTP-854; Modulatori gama sekretaze kao što su ELND-007; i RAGE (receptor za poboljšane produkte završetka glikacije) inhibitori, kao što su TTP488 (Transtech) i TTP4000 (Transtech) i one otkrivene u US patentu broj 7,285,293, uključujući PTI-777; (v) agonisti alfa-adrenergičnog receptora, kao što su guanfacin (INTUNIV, TENEX), klonidin (CATAPRES), metaraminol (ARAMINE), metildopa (ALDOMET, DOPAMET, NOVOMEDOPA), tizanidin (ZANAFLEX), fenileprin (takođe poznat kao neosineprin). metoksamin, cirazolin, guanfacin (INTUNIV), lofeksidin, ksilazin, modafinil (PROVIGIL), adrafinil i armodafinil (NUVIGIL); (vi) sredstva za blokiranje beta-adrenergičnog receptora (beta blokeri), kao što su karteolol, esmolol (BREVIBLOC), labetalol (NORMODYNE, TRANDATE), oksprenolol (LARACOR, TRASACOR), pindolol (VISKEN), propanolol (INDERAL), sotalol (BETAPACE, SOTALEX, SOTACOR), timolol (BLOCADREN, TIMOPTIC), acebutolol (SECTRAL, PRENT), nadolol (CORGARD), metoprolol tartarat (LOPRESSOR), metoprolol sukcinat (TOPROL-XL), atenolol (TENORMIN), butoksamin i SR 59230A (Sanofi); (vii) antiholinergike, kao što su amitriptilin (ELAVIL, ENDEP), butriptiline, benztropin mesilat (COGENTIN), triheksifenidil (ARTANE), difenhidramin (BENADRYL), orfenadrin (NORFLEX), hiosciamin, atropin (ATROPEN), skopolamin (TRANSDERM-SCOP), skopolamin metilbromid (PARMINE), dicikloverin (BENTYL, BYCLOMINE, DIBENT, D1LOM1NE), tolterodin (DETROL), oksibutinin (D1TROPAN, LYR1NEL XL, OXYTROL), pentienat bromid, propanhelin (PRO-BANTHINE), cikizin, imipramin hidrohlorid (TOFRANIL), imipramin maleat (SURMONTIL), lofepramin, desipramin (NORPRAMIN), doksepin (SINEQUAN, ZONALON), trimipramin (SURMONTIL) i glikopirolat (ROBINUL); (viii) antikonvulzante, kao što su karbamazepin (TEGRETOL, CARBATROL), okskarbazepin (TRILEPTAL), fenitoin natrijum (PHENYTEK), fosfenitoin (CEREBYX, PRODILANTIN), divalproeks natrijum (DEPAKOTE), gabapentin (NEURONTIN), pregabalin (LYRICA), topirimat (TOPAMAX), valproinska kiselina (DEPAKENE), valproat natrijum (DEPACON), l-benzil-5-bromouracil, progabid, beklamid, zonisamid (TRERIEF, EXCEGRAN), CP-465022, retigabin, talampanel i primidon (MYSOLINE); (ix) antipsihotike, kao što su lurasidon (LATUDA, takođe poznat kao SM-13496; Dainippon Sumitomo), aripiprazol (ABTLIFY), hlorpromazin (TTTORAZINE), haloperidol (HALDOL), iloperidon (FANAPTA), flupentiksol dekanoat (DEPIXOL, FLUANXOL), rezerpin (SERPLAN), pimozid (ORAP), flufenazin dekanoat, flufenazin hidrohlorid, prohlorperazin (COMPRO), azenapin (SAPHRIS), loksapin (LOXITANE), molindon (MOBAN), perfenazin, tioridazin, tiotiksin, trifluoperazin (STELAZINE), ramelteon, clozapin (CLOZARIL), norklozapin (ACP-104), risperidon (RISPERDAL), paliperidon (INVEGA), melperon, olanzapin (ZYPREXA), kvetiapin (SEROQUEL), talnetant, amisulprid, ziprasidon (GEODON), blonanserin (LONASEN) i ACP-103 (Acadia Pharmaceuticals); (x) blokere kalcijumovih kanala kao što su lomerizin, ziconotid, nilvadipin (ESCOR, NIVADIL), diperdipin, amlodipin (NORVASC, ISTIN, AMLODIN), felodipin (PLENDIL), nikardipin (CARDENE), nifedipin (ADALAT, PROCARDIA), MEM 1003 i njegovo osnovno jedinjenje nimodipin (NJJVIOTOP), nizoldipin (SULAR), nitrendipin, lacidipin (LACIPIL, MOTENS), lerkanidipin (ZANIDIP), lifarizin, diltiazem (CARDIZEM), verapamil (CALAN, VERELAN), AR-R 18565 (AstraZeneca) i enekadin; (xi) inhibitore katehol O-metiltransferaze (COMT), kao što su nitekapon, tolkapon (TASMAR), entakapon (COMTAN) i tropolon; (xii) stimulanse centralnog nervnog sistema, kao što su atomoksetin, reboksetin, vohimbin, kafein, fenmetrazin, fendimetrazin, pemolin, fenkamfamin (GLUCOENERGAN, REACTIVAN), fenetilin (CAPTAGON), pipradol (MERETRAN), deanol (takođe poznat kao dimetilaminoetanol), metilfenidat (DAYTRANA), metilfenidat hidrohlorid (RITALIN), deksmetilfenidat (FOCALIN), amfetamin (sam ili u kombinaciji sa drugim stimulansima CNS, na primer ADDERALL (amfetamin aspartat, amfetamin sulfat, dekstroamfetamin saharat i dekstroamfetamin sulfat)), dekstroamfetamin sulfat (DEXEDRJNE, DEXTROSTAT), metamfetamin (DESOXYN), lisdeksamfetamin (VYVANSE) i benzfetamin (DIDREX); (xiii) kortikosteroide, kao što su prednizon (STERAPRED, DELTASONE), prednizolon (PRELONE), predizoloneacetat (OMNIPRED, PRED MILD, PRED FORTE), prednizolon natrijum fosfat (ORAPRED ODT), metilprednizolon (MEDROL); metilprednizolon acetat (DEPO-MEDROL) i metilprednizolon natrijum sukcinat (A-METHAPRED, SOLU-MEDROL); (xiv) agoniste dopamin receptora, kao što su apomorfin (APOKYN), bromokriptin (PARLODEL), kabergolin (DOSTINEX), dihidreksidin, dihidroergokriptin, fenoldopam (CORLOPAM), lisurid (DOPERGIN), tergurid spergolid (PERMAX), piribedil (TRIVASTAL, TRASTAL), pramipeksol (MIRAPEX), hinpirol, ropinirol (REQUIP), rotigotin (NEUPRO), SKF-82958 (GlaxoSmithKline), kariprazin, pardoprunoks i sarizotan; (xv) antagoniste dopamin receptora, kao što su hlorpromazine, flufenazin, haloperidol, lokszpin, resperidon, tioridazin, tiotisken, trifluoperazin, tetrabenazin (NITOMAN, XENAZINE), 7-hidroksiamoksapin, droperidol (INAPSINE, DRIDOL, DROPLETAN), domperidon (MOTILIUM), L-741742, L-745870, rakloprid, SB-277011A,

SCH-23390, ekopipam, SKF-83566 i metoklopramid (REGLAN);

(xvi) inhibitore ponovnog preuzimanja dopamina, kao što su bupropion, safinamid, nomifensin maleat (MERITAL), vanokserin (takođe poznat kao GBR-12909) i njegov dekanoatni estar DBL-583 i amineptin;

(xvii) agoniste receptora gama-amino-buterne kiseline (GABA), kao što su baklofen (LIORESAL, KEMSTRO), siklofen, pentobarbital (NEMBUTAL), progabid (GABRENE) i klometiazol;

(xviii) antagoniste histamina 3 (H3) kao što su ciproksifan, tiprolisant, S-38093, irdabisant,

pitolisant, GSK-239512, GSK-207040, JNJ-5207852, JNJ-17216498, HPP-404, SAR-110894, trans-3-fluoro-3-(3-fluoro-4-pirolidin-l-ilmetil-fenil)-ciklobutan karboksilna kiselina etilamid (PF-3654746 i one otkrivene u US patentnim publikacijama broj US2005-0043354, US2005-0267095, US2005-0256135, US2008-0096955, US2007-1079175 i US2008-0176925; Internacionalnim patentnim publikacijama broj WO2006/136924, WO2007/063385, WO2007/069053, WO2007/088450, WO2007/099423, WO2007/105053, WO2007/138431 i WO2007/088462; i US Patentu broj 7,115,600);

(xix) imunomodulatore kao što su glatiramer acetat (takođe poznat kao kopolimer-1; COPAXONE), MBP-8298 (sintetički mielin bazni protein peptid), dimetil fumarat, fingolimod (takođe poznat kao FTY720), rokviinimeks (LINOMIDE), lakvinimod (takođe poznat kao ABR-215062 i SAIK-MS), ABT-874 (humano anti-IL-12 antitelo; Abbott), rituksimab (RITUXAN), alemtuzumab (CAMPATH), daklizumab (ZENAPAX) i natalizumab (TYSABRI);

(xx) imunosupresante kao što su metotreksat (TREXALL, RHEUMATREX), mitoksantron (NOVANTRONE), mikofenolat mofetil (CELLCEPT), mikofenolat natrijum (MYFORTIC), azatioprin (AZASAN, IMURAN), merkaptopurin (PURI-NETHOL), ciklofosfamid (NEOSAR, CYTOXAN), hlorambucil (LEUKERAN), kladribin (LEUSTATIN, MYLINAX), alfa-fetoprotein, etanercept (ENBREL) i 4-benziloksi-5-((5-undecil-2H-pirol-2-iliden)metil)-2,2'-bi-lH-pirol (takođe poznat kao PNU-156804);

(xxi) interferone, uključujući interferon beta-la (AVONEX, REBIF) i interferon beta-lb

(BETASERON, BETAFERON);

(xxii) levodopu (ili njene metili ili etil estre), samu ili u kombinaciji sa inhibitorom DOPA dekarboksilaze (na primer karbidopa (SINEMET, CARBILEV, PARCOPA), benserazid (MADOPAR), a-metildopa, monoflurometildopa, difluorometildopa, brokresin ilim-hidroksibenzilhidrazin);

(xxiii) antagoniste 7V-metil-D-aspartat (NMDA) receptora, kao što su memantin (NAMENDA, AXURA, EBIXA), amantadin (SYMMETREL), akamprozat (CAMPRAL), besonprodil, ketamin (KETALAR), delucemin, deksanabinol, deksefaroksan, dekstrometrofan, dekstrorfan, traksoprodil, CP-283097, himantan, idantadol, ipenoksazon, L701252 (Merck), lancicemin, levorfanol (DROMORAN), LY-233536 i LY-235959 (oba Lilly), metadon, (DOLOPHINE), nerameksan, perzinfotel, fenciklidin, tianeptin (STABLON), dizocilpin (takođe poznat kao MK-801), EAB-318 (Wyeth), ibogain, voakangin, tiletamin, riluzol (RILUTEK), aptiganel (CERESOTAT), gavestinel i remacimid; (xxiv) inhibitore monoamin oksidaze (MAO), kao što su selegilin (EMSAM), selegilin hidrohlorid (I-deprenil, ELDEPRYL, ZELAPAR), dimetilselegilen, brofaromin, fenelzin (NARDIL), tranilcipromin (PARNATE), moklobemid (AURORDC, MANERIX), befloksaton, safinamid, izokarboksazid (MARPLAN), nialamid (NIAMID), rasagilin (AZILECT), iproniazid (MARS1LID, IPROZID, 1PRON1D), CHF-3381 (Chiesi Farmaceutici), iproklozid, toloksaton (HUMORYL, PERENUM), bifemelan, dezoksipeganin, harmin (takođe poznat kao telepatin ili banasterin), harmalin, linezolid (ZYVOX, ZYVOXID) i pargilin (EUDATIN, SUPIRDYL);

(xxv) agoniste muskarinskog receptora (posebno Ml subtipa), kao što su cevimelin, levetiracetam, betanhol hlorid (DUVOID, URECHOLINE), itamelin, pilokarpin (SALAGEN), NGX267, arekolin, L-687306 (Merck), L-689660

(Merck), furtretonijum jodid (FURAMON, FURANOL), furtretonijum benzensulfonat, furtretonijum /»-toluensulfonat, McN-A-343, oksotremorin, sabkomelin, AC-90222 (Acadia Pharmaceuticals) i karbahol (CARBASTAT, MIOSTAT, CARBOPTIC);

(xxvi) neuroprotektivne lekove kao što su bosutinib, kondoliaze, airmoklomol, lamotrigin, perampanel, aniracetam, minaprim, viluzol 2,3,4,9-tetrahidro-l.f/-karbazol-3-on oksim, dezmoteplaza, anatibant, astaksantin, neuropeptid NAP (na primer AL-108 i AL-208; oba Allon Therapeutics), neurostrol, perampenel, isproniklin, bis(4-P-D-glukopiranoziloksibenzil)-2-P-D-glukopiranozil-2-izobutiltartarat (takođe poznat kao daktilorhin B ili DHB), formobaktin, ksaliproden (XAPRILA), laktacistin, dimebolin hidrohlorid (DFMEBON), disufenton (CEROVIVE), arundinska kiselina (ONO-2506, PROGLIA, CEREACT), citikolin (takođe poznat kao citidin 5'-difosfoholin), edaravon (RADICUT), AEOL-10113 i AEOL-10150 (oba Aeolus Pharmaceuticals), AGY-94806 (takođe poznat kao SA-450 i Msc-1), faktor stimulacije kolonije granulocita (takođe poznat kao AX-200), BAY-38-7271 (takođe poznat kao KN-387271; Bayer AG), ankrod

(VIPRJNEX, ARWIN), DP-b99 (D-Pharm Ltd), HF-0220 (17-p-hidroksiepiandrosteron; Newron Pharmaceuticals), HF-0420 (takođe poznat kao oligotropin), piridoksal 5'-fosfat (takođe poznat kao MC-1), mikroplazmin, S-18986, piklozotan, NP031112, takrolimus, L-seril-L-metionil-L-alanil-L-lizil-L-glutamil-glicil-L-valin, AC184897 (Acadia Pharmaceuticals), ADNF-14 (National Institutes of Health), stilbazulenil nitron, SUN-N8075 (Daiichi Suntory Biomedical Research) i zonampanel;

(xxvii) agoniste nikotinskog receptora, kao što su epibatidin, bupropion, CP-601927, vareniklin, ABT-089 (Abbott), ABT594, AZD-0328 (AstraZeneca), EVP-6124, R<3>487 (takođe poznat kao MEM3454; Roche/Memory Pharmaceuticals), R4996 (takođe poznat kao MEM63908; Roche/Memory Pharmaceuticals), TC-4959 i TC-5619 (oba Targacept) i RJR-2403;

(xxviii) inhibitore ponovnog preuzimanja norepinefrina (noradrenalina), kao što su atomoksetin (STRATTERA), doksepin (APONAL, ADAP1N, S1NEQUAN), nortriptilin (AVENTYL, PAMELOR, NORTRILEN), amoksapin (ASENDIN, DEMOLOX, MOXIDIL), reboksetin (EDRONAX, VESTRA), viloksazin (VIVALAN), maprotilin (DEPRILEPT, LUDIOMIL, PSYMION), bupropion (WELLBUTRIN) i radaksafine;

(xxix) inhibitore fosfodiesteraze (PDE), uključujući (a) inhibitore PDE1 (na primer vinpocetine (CAVINTON, CERACTIN, INTELECTOL) i one otkrivene u US patentu broj 6,235,742, (b) inhibitore PDE2 (na primer eritro-9-(2-hidroksi-3-nonil)adenin (EHNA), BAY 60-7550 i one opisane u US patentu broj. 6,174,884), (c) inhibitore PDE3 (na primer anagrelid, cilostazol, milrinon, olprinon, parogrelil i pimobendan), (d) inhibitore PDE4 (na primer apremilast, ibudilastroflumilast, rolipram, Ro 20-1724, ibudilast (KETAS), piklamilast (takođe poznat kao RP73401), CDP840, cilomilast (ARIFLO), roflumilast, tofimilast, oglemilast (takođe poznat kao GRC 3886), tetomilast (takođe poznat kao OPC-6535), lirimifast, teofilin (UNTPHYL, THEOLAIR), arofilin (takođe poznat kao LAS-31025), doksofilin, RPR-122818 ili mesembrin) i (e) inhibitore PDE5 (na primer sildenafil (VIAGRA, REVATIO), tadalafil (CIALIS), vardenafil (LEVITRA, VIVANZA), udenafil, avanafil, dipiridamol (PERSANTINE), E-4010, E-4021, E-8010, zaprinast, jodenafil, mirodenafil, DA-8159 i one otkrivene u Internacionalnim patentnim prijavamaWO2002/020521, WO2005/049616, WO2006/120552, WO2006/126081, WO2006/126082, WO2006/126083 i WO2007/122466), (f) inhibitore PDE9 (na primer BAY 73-6691 (Bayer AG) i one otkrivene u US patentnim publikacijama broj US2003/0195205, US2004/0220186, US2006/0111372, US2006/0106035 i USSN 12/118,062 (zavedenim 9. maja, 2008.)) i (g) inhibitor PDE10 kao

što su 244-(l-Metil-4-piridin-4-il4H-pirazol-3-il)fenoksimetil]hinolin (PF-2545920) i SCH1518291;

(xxx) hinoline, kao što su hinin (uključujući njegov hidrohlorid, dihidrohlorid, sulfat, bisulfat i glukonat soli), hlorohin, sontohin, hidroksihlorohin (PLAQUENIL), meflohin (LARIAM) i amodiahin (CAMOQUIN, FLAVOQUINE);

(xxxi) inhibitore p-sekretaze, kao što su ASP-1702, SCH-745966, JNJ-715754, AMG-0683, AZ-12304146, BMS-782450, GSK-188909, NB-533, LY-2886721, E-2609, HPP-854, (+)-fenserin tartarat (POSIPHEN), LSN-2434074 (takođe poznat kao LY-2434074), KMI-574, SCH-745966, Ac-rER (N2-acetil-D-arginil-L-arginin), loksistatin (takođe poznat kao E64d) i CA074Me;

(xxxii) inhibitore i modulatore y-sekretaze, kao što su BMS-708163 (Avagacest), WO20060430064 (Merck), DSP8658 (Dainippon), ITI-009, L-685458 (Merck), ELAN-G, ELAN-Z, 4-hloro-7V-[2-etil-1 (S)-(hidroksimetil)butil]benzensulfonamid;

(xxxiii) antagoniste serotonin (5-hidroksitriptamin) IA (5-HTia) receptora, kao što su spiperon, /evo-pindolol, BMY 7378, NAD-299, S(-)-UH-301, NAN 190, lekozotan;

(xxxiv) agoniste serotonin (5-hidroksitriptamin) 2C (5-HT2c) receptora, kao što su vabikaserin i zikronapin;

(xxxiv) agoniste serotonin (5-hidroksitriptamin) 4 (5-HT4) receptora, kao što je PRX-03140 (Epix);

(xxxv) antagoniste serotonin (5-hidroksitriptamin) 6 (5-HT6) receptora, kao što su A-964324, AVI-101, AVN-211, mianserin (TORVOL, BOLVIDON, NORVAL), metiotepin (takođe poznat kao metitepin), ritanserin, ALX-1161, ALX1175, MS-245, LY-483518 (takođe poznat kao SGS518; Lilly), MS-245, Ro 04-6790, Ro 43-68544, Ro 63-0563, Ro 65-7199, Ro 65-7674, SB-399885, SB-214111, SB-258510, SB-271046, SB-357134, SB-699929, SB-271046, SB742457 (GlaxoSmithKline), Lu AE58054 (Lundbeck A/S) i PRX-07034 (Epix);

(xxxvii) inhibitore ponovnog preuzimanja serotonina (5-HT) kao što su alaproklat, citalopram (CELEXA, CIPRAMIL), escitalopram (LEXAPRO, CIPRALEX), klomipramin (ANAFRANIL), duloksetin (CYMBALTA), femoksetin (MALEXIL), fenfluramin (PONDEVIIN), norfenfluramin, fluoksetin (PROZAC), fluvoksamin (LUVOX), indalpin, milnacipran (IXEL), paroksetin (PAXIL, SEROXAT), sertralin (ZOLOFT, LUSTRAL), trazodon (DESYREL, MOLIPAXIN), venlafaksine (EFFEXOR), zimelidin (NORMUD, ZELMID), bicifadin, desvenlafaksin (PRISTIOJ, brazofensin, vilazodon, kariprazin, neuralstem i tesofensin;

(xxxviii) trofične faktore, kao što su faktor rasta nerva (NGF), faktor rasta baznog fibroblasta (bFGF; ERSOFERMIN), neurotrofin-3 (NT-3), kardiotrofin-1, neurotrofični faktor dobijen iz mozga (BDNF), neublastin, meteorin i neurotrofični fakto dobijen iz žlezda (GDNF) i sredstva koja stimulišu produkciju trofičnih faktora, kao što su propentofilin, idebenon, PYM50028 (COGANE; Phvtopharm) i AIT-082 (NEOTROFIN);

(xxxix) inhibitore glicin transportera-1, kao što su paliflutin, ORG-25935, JNJ-17305600 i ORG-26041;

(xl) modulatore glutamat receptora tip AMPA, kao što su perampanel, mibampator, selurampanel, GSK-729327 i N-((3S, 4S)-4-(4-(5-cijanotiofen-2-il)fenoksi) tetrahidrofuran-3-il)propan-2-sulfonamid; i slično.

[0075]Ovaj pronalazak dalje uključuje kitove koji su pogodni za upotrebu u sprovođenju prethodno opisanih metoda lečenja. U jednom otelotvorenju, kit sadrži prvi dozni oblik koji uključuje jedno ili više jedinjenja iz ovog pronalaska i kontejner za doze, u dovoljnim količinama da se sprovedu metode iz ovog pronalaska.

[0076]U narednom otelotvorenju, kit iz ovog pronalaska uključuje jedno ili više jedinjenja iz pronalaska.

[0077]Jedinjenja Formule I, Formule la, Formule lb i Formule Ic ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, mogu da se izrade po postupcima koji su niže opisani, zajedno sa postupcima sinteze koji su poznati u organskoj herniji, ili modifikacijama i derivatizacijama koje su bliske stručnjaku sa uobičajenim iskustvom u tehnici. Početni materijali koji su ovde korišćeni su raspoloživi na tržištu ili mogu da se izrade rutinskim postupcima koji su poznati u tehnici (kao što su postupci otkriveni u standardnim referentnim udžbenicima kao što su COMPENDIUM OF ORGANIC SYNTHETIC METHODS, Vol. I-XII (izdavača Wiley-Interscience)). Preferirani postupci uključuju, ali se ne ograničavaju samo na, one koji su niže opisani.

[0078]U toku bilo koje od narednih sekvenci sinteze, može da bude potrebno i/ili poželjno da se zaštite osetljive i reaktivne grupe na bilo kojoj uključenoj molekuli. Ovo može da se postigne pomoću uobičajenih zaštitnih grupa, kao što su one opisane od T. W. Greene, Protective Groups in Organic Chemistry, John Wiley & Sons, 1981; T. W. Greene and P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Chemistry, John Wiley & Sons, 1991; i T. W. Greene and P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Chemistry, John Wiley & Sons, 1999.

[0079]Jedinjenja Formule I, Formule Ia, Formule lb. Formule Ic i Formule Id ili njihove farmaceutski prihvatljiv soli, mogu da se izrade u skladu sa niže datim Šemama reakcije. Ukoliko nije drugačije navedeno, supstituenti u Šemama su definisani kao prethodno. Izdvajanje i prečišćavanje produkata se vrši standardnim procedurama koje su poznate hemičaru sa uobičajenom praksom.

[0080] Stručnjaku sa iskustvom u tehnici će da bude jasno da se različiti simboli, naslovi i podnaslovi korišćeni u šemama, postupcima i primerima koriste za lakšu prezentaciju i/ili da pokažu redosled po kome su uvođeni u šeme, i nije neophodno da odgovaraju simbolima, naslovima ili podnaslovima u pripadajućim patentnim zahtevima. Seme predstavljaju postupke korisne u sintezi jedinjenja iz ovog pronalaska. One ne ogrančavaju okvir pronalaska na bilo koji način.

[0081]Šema 1 ilustruje postupak za izradu jedinjenja označenih kao Formula I. Jedinjenje Formule 1.1 se zagreva u prisustvu razblažene kiseline kao što je hlorovodonična kiselina da se dobije odgovarajući kiseli piridinon Formule 1.2. Međuproizvod Formule 1.2 se podvrgne udvajanju amida iin situreakciji kristalizacije sa amino alkoholom Formule 1.3 koristeći reagens za udvajanje kao što je HATU [0-(7-azabenzotriazol-l-il)-A^A^A^',A^-tetrametiluronijum heksafluorofosfat]. Reakcija se izvodi u prisustvu odgovarajuće baze kao što je diizopropiletilamin i u rastvaraču kao što su dihlormetan ili A^A^'-dimetilformamid.

[0082]Šema 2 ilustruje postupak za izradu jedinjenja FormuleI.Ovaj postupak započinje reakcijom hloraldehida2.1i amina Formule 2.2 koristeći jedan od brojnih protokola reduktivne aminacije poznatih stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Na primer, ova reakcija može da se izvede koristeći redukciono sredstvo kao što je natrijum triacetoksiborhidrid u pogodnom rastvaraču kao što je metanol. Nakon prečišćavanja, nastali hloralkilamin 2.3 može da se izdvoji i čuva u obliku svoje HC1 soli. Finalno jedinjenje Formule I može nakon toga da se izradi tretiranjem smeše hloralkilamina 2.3, kiseline1.2i baze kao što je diizopropiletilamin sa odgovarajućim amid udvajajućim reagensom kao što su BOP-C1 [(bis(2-okso-3-oksazolidinil)fosfonijum hlorid], T3P [propilfosfoijum anhidrid] ili HATU (preferirano HATU) u rastvaraču kao što je dihlormetan.

[0083]Aminoalkohol kao udvajajući partner za Formulu 1.3 može da se izradi preko velikog broja različitih postupaka sinteze, koje stručnjak sa iskustvom u tehnici može jednostavno da predvidi i razvije. Ovim su uključeni, ali se ne ograničavaju samo na, postupci koji su ilustrovani u Šemi 3. Na primer, aminoalkohol Formule 1.3 može da se izradi postupkom reduktivne aminacije ketona Formula 3.1 sa aminom Formule 2.2 koristeći jednu od brojnih procedura koje su dobro poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Naredni postupak uključuje reduktivnu aminaciju aldehida Formule 3.2 sa aminom Formule 2.2 a nakon toga uklanjenjem TBS zaštitne grupe pomoću odgovarajuće procedure, uključujući tretman sa metanolnom HC1 ili tetrabutilamonijum fluoridom. Naredni postupak za sintezu aminoalkohola Formule 1.3 uključuje alkilaciju amina 3.3 sa halidom ili mesilatom Formule 3.4. Još jedan postupak uključuje alkilaciju amina Formule 2.2 sa bromoalkoholom 3.5. Postupci sinteze za različite amine 2.2, kao i alternativni postupci za izradu amino alkohola 1.3, su navedeni u eksperimentalnom delu. Stručnjak sa iskustvom u tehnici, koristeći ova otkrića u kombinaciji sa uobičajenim poznatim postupcima u tehnici, može dalje da izvede ove sinteze da se omogući pristup velikom broju različitih amina 2.2 i amino alkoholima 1.3 uključujući, ali bez ograničenja na, varijacije u R<2a>,R2b, y,alternativne cikloalkile i heterocikloalkile A i različito supstituisane arile i heteroarile R<3>.

[0084]Šema 4 ilustruje postupak za izradu jedinjenja Formule1.1gde je R'-X = 4-metilimidazol-l-il. 3-aminopiridin jedinjenje Formule 4.1 je bromiran koristećiN-bromosukcinimid u rastvaraču kao što je smeša DMSO i vode. Dobijeni međupoizvod Formule 4.2 se nakon toga zagreva sa natrijum metoksidom u odgovarajućem rastvaraču kao što je 1,4-dioksan da se dobije jedinjenje Formule 4.3. Međuproizvod Formule 4.3 se nakon toga tretira sa smešom acetatnog anhidrida i mravlje kiseline da se dobije formamid Formule 4.4, koji se alkiluje sa hloracetonom u prisustvu kalijum jodida i baze kao što je CS2CO3u odgovarajućem rastvaraču kao što je DMF. Dobijeni međuproizvod Formule 4.5 se nakon toga zagreva u prisustvu NFUOAc u sirćetnoj kiselini da se dobije derivat imidazola 4.6. Konačno, jedinjenje Formule1.1može da se izradi podvrgavanjem međuproizvoda Formule 4.6 reakciji karbonilacije. Ova transformacija može da se izvede zagrevanjem rastvora 4.6 i baze kao što je trietilamin u alkoholnom rastvaraču kao što je MeOH, u atmosferi CO, u prisustvu odgovarajućeg paladijum katalizatora kao što je Pd(dppf)2Cl2-DCM [[1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]dihlorpaladijum(II), dihlormetan kompleks].

A) Suzuki udvaianie: R<1>X-B(0H)2, ,,Pd", baza B) CH-aktivacija: ,,Pd", 5-člani heteroaril kao što je C) Chan-Lam udvaianie: CuCte ili Cu(OAc)2, 5-člani heteroarili kao što su D) Suzuki udvajanje: 1X-Br, ,,Pd"

Gde je X = 6-člani heteroaril prsten

Ili 5-člani heteroaril prsten

[0085]Šema 5 opisuje postupak za izradu jedinjenja Formule1.1.Derivat piridila Formule 5.1 se oksiduje sa oksidacionim sredstvom kao što je mCPBA [3-hlorperoksibenzoeva kiselina] u pogodnom rastvaraču kao što je dihloretan, da se dobije odgovarajući A^-oksid Formule 5.2. Međuproizvod Formule 5.2 se nakon toga zagreva u prisustvu TMSCN [trimetilsilil cijanid] i baze kao što je trietilamin, u rastvaraču kao što je acetonitril, da se dobije međuproizvod 5.3. Odgovarajući estar može nakon toga da se izradi od 5.3 u dve faze, podvrgavanjem 5.3 natrijum metoksidu u rastvaraču kao što je THF, a nakon toga tretmanom sa alkoholom i kiselinom kao što je HC1. Estar Formule 5.5 je nepostojan međuproizvod koji dozvoljava uvođenje različitih heterociklusa R'X. Na primer, 5.5 može da se podvrgne Suzuki udvajanju sa heteroarilbornom kiselinom, koristeći postupke koji su dobro poznati stručnjaku sa iskustvom u tehnici [videti Tetrahedron 2002, 58, 9633-9695]. Alternativno, jedinjenje Formule 5.5 može da se udvoji sa heterociklusom X koristeći postupak direktne arilacije [videti D. Lapointe i saradnici, J. Org. Chem. 2011, 76, 749-759 i tamo date reference]. Na primer, 5.5 može da se udvoji sa 2-metil-l,3-oksazolom [Formula 5.7 gde je R<1>= Me] zagrevanjem u prisustvu odgovarajućeg paladijum katalizatora kao što je alilpaladijum hlorid dimer i baze kao što je K2CO3, u rastvaraču kao što je 1,4-dioksan da se dobije međuproizvod Formule1.1gde je R'X = 2-metil-l,3-oksazol-5-il.

[0086]Alternativno, jedinjenje Formule5.5može da se konvertuje u odgovarajući boronat 5.6, koristeći paladijum-katalizovano unakrsno udvajanje sa dibor reagensom kao što je 5,5,5',5'-tetrametil-2,2'-bi-l,3,2-dioksaborinan u prisustvu kalijum acetata i paladijum katalizatora kao što je Pd(dppf)2Cb DCM u rastvaraču kao što je 1,4-dioksan. Dobijeni boronat međuproizvod Formule 5.6 može zatim da se podvrgne Suzuki udvajanju sa heteroaril halidom, da se dobije finalno jedinjenje Formule1.1.Naredni postupak za uvođenje heterociklusa X uključuje upotrebu Chan-Lam udvajanja [videti Tetrahedron Lett. 2003, 44, 3863-3865 i Svnthesis 2008, 5, 795-799]. Na primer, 5.6 može da se udvoji sa supstituisanim imidazolom5.8zagrevanjem sa odgovarajućim izvorom bakra kao što su bakar oksid ili bakar acetat u rastvaraču kao što je metanol, u prisustvu vazduha, da se dobije međuproizvod Formule1.1gde je X = imidazol-l-il. A) Suzuki udvaianie: R<1>X-B(OHb...Pd". baza B) CH-aktivacija: ,,Pd", 5-člani heteroarili kao što su C) Chan-Lam udvajanje. Cu02 ili Cu(OAc)2, 5-člani heteroarili kao što su

D) Suzuki udvajanje: R<1>X-Br, ,,Pd",

E) Baza, i heteroaril kao što je

Gde je X = 6-člani heteroaril prsten Ili 5-člani heteroaril prsten

[0087]Šema 6 ilustruje postupak za sintezu jedinjenja Formule I. Postupak započinje zagrevanjem jedinjenja Formule 6.1 u kiselini kao što je hlorovodonična kiselina da se dobije kiseli piridinon međuproizvod 6.2. Kiselina Formule 6.2 može da se podvrgne reakciji udvajanja / ciklizacije sa aminoalkoholom Formule 1.3 da se dobije međuproizvod Formule 6.3 koristeći reakciju koja je opisana u Šemi 1. Finalno jedinjenje, FormulaI,može nakon toga da se formira direktno od 6.3 ili preko boronata 6.4, koristeći načine koji su objašnjeni u Šemi 5. Alternativno, jedinjenja Formule I, gde je heterociklus X vezan za piridinon prsten preko C-N veze, može da se formira nukleofilnom aromatičnom supstitucijom. Na primer, triazol 6.5 može da se udvoji sa 6.3 zagrevanjem u prisustvu baze kao što je K2CO3i rastvarača kao što je DMSO, da se dobije finalno jedinjenje Formule I gde je X = triazol-l-il.

[0088]Šema 7 ilustruje postupak za sintezu jedinjenja Formule I gde su z = 1 a R4a=R4b=R5a=R5<b>= H. Postupak uključuje zagrevanje smeše jedinjenja Formule 1.2, dibromoetana i baze kao što je CS2CO3u rastvaraču kao što je DMF da se dobije lakton međuproizvod 7.1. Lakton Formule 7.1 može nakon toga da reaguje sa aminom Formule 2.2 u prisustvu reagensa kao što su DIBAL (diizobutilaluminijum hidrid) ili bis(trimetilaluminijum)-! ,4-diazabiciklo[2.2.2]oktan adukt u rastvaraču kao što je THF, da se dobije amid alkohol Formule 7.2. Ovaj međuproizvod, nakon toga, može da reaguje sa metansulfonil hloridom u prisustvu baze kao što je trietilamin u rastvaraču kao što je THF, a nakon toga tretmanom sa bazom kao što je l,3,4,6,7,8-heksahidro-2if-pirimido[l,2-a]pirimidin da se dobije jedinjenje Formule I gde je z = 1 a R<4a>= R<4>b=R5a=R<5b>= H. Alternativno, zatvaranje prstena može da se izvede postupno, prvo konverzijom alkohola 7.2 u odgovarajući hlorid tretmanom sa tionil hloridom, a nakon toga deprotonacijom amida NH sa odgovarajućom bazom kao što je litijum bis(trimetilsilil)amid da se dobije finalno jedinjenje Formule I.

[0089]Šema 8 ilustruje postupak za sintezu amina Formule 8.7, koji predstavljaju podgrupu opšte strukture 2.2. Sinteza započinje deprotonacijom etinil(trimetil)silana, koristeći

odgovarajuću bazu kao što je «-butillitijum u rastvaraču kao što je THF. Ova smeša se nakon toga doda u rastvor epoksida Formule 8.1 (videti J. Barluenga i saradnici, J. Org. Chem. 1995, 60, 6696-6699) u rastvaraču kao što je THF. Dobijeni alkin Formule 8.3 može nakon toga da se podvrgne Sonogashira udvajanju sa aril ili heteroaril halidom Formule 8.4 (gde je hal = brom ili jod) koristeći standardne uslove poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici (videti R. Chinchilla i saradnici, Chem. Soc. Rev. 2011, 40, 5084-5121) da se dobije jedinjenje Formule 8.5. Ovaj međuproizvod se nakon toga podvrgne reakciji ciklizacije uz platina katalizator kao što je di-)j,-hlordihlorbis(etilen)diplatinum(II) i kiseline kao što je trifluorosirćetna kiselina u rastvaraču kao što je CH2CI2, da se dobije dihidrofuran međuproizvod Formule 8.6. Na kraju, transfer hidrogenacijom, koristeći amonijum format i odgovarajući katalizator kao što je paladijum hidroksid na ugljeniku, u rastvaraču kao što je metanol, dobija se amin 8.7, koji je

podgrupa Formule 2.2, gde je y = 1, R<2a>= CH3,R2b=H, A = tetrahidrofuranil i R<3>= aril ili heteroaril.

[0090]Šema 9 ilustruje alternativni postupak za sintezu amina Formule 8.7, podgrupe opšte strukture Formule 2.2. Metil estar Formule 9.1 reaguje sa dianjonom nastalim deprotonacijom hlorsirćetne kiseline (9.2) sa odgovarajućom bazom kao što je LDA, u rastvaraču kao što je THF. Dobijeni a-hlorketon Formule 9.3 se nakon toga tretira sa odgovarajućim redukcionim sredstvom kao što je litijum tri-terc-butoksialuminijum hidrid, u rastvaraču kao što je dietil etar, da se dobije hlorhidrin 9.4, koji nakon toga može da se konvertuje u p-nitrobenzoat 9.6 acilacijom sa p-nitrobenzoil hloridom (9.5) u prisustvu DMAP [4-(dimetilamino)piridin] i baze kao što je trietilamin, u rastvaraču kao što je dihlormetan. Međuproizvod Formule 9.6 se nakon toga tretira sa bazom kao što je kalijum hidroksid, što dovodi do formiranja epoksida Formule 9.7. Analogno sa Šemom 8, epoksid 9.7 može da se podvrgne otvaranju prstena sa acetilidom koji nastaje deprotonacijom 8.2 sa bazom kao što je je n-butillitijum u prisustvu dimetilaluminijum hlorida, u rastvaraču kao što je toluen, da se dobije alkin Formule 9.8. Nakon toga, ovaj međuproizvod se podvrgava uklanjanju trimetilsilil grupe time što se izlaže protičnom rastvaraču kao što je metanol i bazi kao što je kalijum karbonat da se dobije deprotektovani alkin 9.9. Ovaj međuproizvod se nakon toga podvrgava Sonogashira udvajanju sa aril halidom 8.4, kako je opisano u Šemi 8, da se dobije međuproizvod Formule 9.10. Ovaj međuproizvod se nakon toga podvrgava reakciji ciklizacije uz prisustvo platina katalizatora kao što je di-u:-hlordihlorbis(etilen)diplatinum(II), kiseline kao što je p-toluensulfonska kiselina i trimetil ortoformata, u rastvaraču kao što je MeOH, da se dobije jedinjenje Formule 9.11. Tretmanom 9.11 sa bor trifluorid dietil eteratom i redukcionim sredstvom kao što je trietilsilan, u pogodnom rastvaraču kao što je dihlormetan, dobij a se tetrahidrofuran Formule 9.12. Na kraju, uklanjanjem Boe zaštitne grupe izlaganjem kiselini kao što su trifluorosirćetna kiselina ili hlorovodonična kiselina, u rastvaraču kao što su dihlormetan ili 1,4-dioksan, dobija se amin 8.7, koji je podgrupa Formule 2.2, pri čemu su y = 1, R<2a>= CH3, R<2b>= H, A = tetrahidrofuranil i R<3>= aril ili heteroaril.

[0091] Kada se u međuproizvode koji se koriste za sintezu jedinjenja iz ovog pronalaska inkorporira bazni centar, njihove odgovarajuće soli nastale dodatkom kiseline mogu da se koriste u tokovima sinteze. Ove odgovarajuće soli nastale dodatkom kiselina uključuju, ali bez ograničenja, soli dobijene od neorganskih kiselina kao što su hlorovodonična, bromovodonična, fluorovodonična, jodovodonična, borna, fluoroborna, fosforna, azotna, ugljena i sumporna kiselina i organskih kiselina kao što su sirćetna, benzensulfonska, benzoatna, etansulfonska, mravlja, mlečna, jabučna, metansulfonska, trifluorometansulfonska, sukcinatna, toluensulfonska i trifluorosirćetna kiselina. U odgovarajuće organske kiseline generalno spadaju, ali bez ograničenja na, alifatične, cikloalifatične, aromatične, aralifatične, heterociklične, karbociklične i sulfonske grupe organskih kiselina.

[0092] Specifični primeri odgovarajućih organskih kiselina uključuju, ali bez ograničenja na, sirćetnu, trifluorosirćetnu, mravlju, propionsku, sukcinatnu, mlečnu, maleatnu, fumaratnu, benzoatnu, p-hidroksibenzoatnu, fenilsirćetnu, mandelatnu, metansulfonatnu, etansulfonatnu, benzensulfonatnu, toluensulfonatnu, adipatnu, butiratnu, kamforatnu, ciklopentanpropionatnu, dodecilsulfatnu, heptanoatnu, heksanoatnu, nikotinatnu, 2-naftalensulfonatnu, oksalatnu, 3-fenilpropionatnu, pivalatnu i undekanoatnu.

[0093] Osim toga, kada međuproizvodi koji se koriste za izradu jedinjenja iz ovog pronalaska imaju kiseli ostatak, njihove soli mogu da se koriste za sintezu. Ove soli uključuju soli alkalnih metala, to jest, soli litijuma, natrijuma ili kalijuma; soli zemno alkalnih metala, na primer, soli kalcijuma ili magnezijuma; i soli formirane sa odgovarajućim organskim ligandima kao što su amini ili kvaternarni amonijum katjoni. Organske soli ovih kiselih međuproizvoda mogu da se izrade od primarnih,sekundarnih ili tercijernih amina kao što su metilamin, dietilamin, etilendiamin ili trimetilamin. Kvaternarni amini mogu da se izrade reakcijom tercijernih amina sa sredstvima kao što su niži alkil (Ci-Cć) halidi (na primer, metil, etil, propil i butil hloridi, bromidi i jodidi), dialkil sulfati (to jest, dimetil, dietil, dibutil i diamil sulfati), arilalkil halidi (to jest, benzil i fenetil bromidi) i drugi.

Eksperimentalne procedure i radni primeri

[0094] U daljem tekstu su ilustrovane sinteze različitih jedinjenja iz ovog pronalaska. Dodatna jedinjenja u okviru ovog pronalaska mogu da se izrade po postupcima koji su ilustrovani ovim primerima, ili samo po njima ili u kombinaciji sa tehnikama koje su generalno poznate u praksi.

[0095] Jasno je da prethodno opisani međuproizvodi jedinjenja iz pronalaska nisu ograničeni na određeni pokazani enantiomer, već takođe uključuju sve njihove stereoizomere i smeše.

Eksperimentalne procedure

[0096] Eksperimenti se generalno izvode u inertnoj atmosferi (azot ili argon), posebno u slučajevima kada se koriste reagensi ili međuproizvodi osetljivi na kiseonik ili vlagu. Rastvarači i reagensi nabavljeni na tržištu se generalno koriste bez dodatnog prečišćavanja, uključujući anhidrovane rastvarače u slučaju kada je to potrebno (generalno Sure-Seal™ proizvodi dobavljača Aldrich Chemical Companv, Mihvaukee, Wisconsin). Produkti se generalno suše pod vakuumom pre nego što se koriste u daljim reakcijama ili podvrgavaju biološkom ispitivanju. Rezultati masene spektrometrije su dobijeni ili od merenja tečno hromatografskom-masenom spektrometrijom (LCMS), hemijskom jonizacijom pod atmosferskim pritiskom (APCI) ili gasno hromatografskom masenom spektrometrijom

(GCMS). Rezultati hemijskih promena za nuklearnu magnetnu rezonancu (NMR) su izraženi u delovima po milion (ppm, 8) u odnosu na rezidualne pikove iz deuterizovanih rastvarača koji su korišćeni.

[0097]Za navedene procedure sinteze u drugim Primerima ili Postupcima, uslovi reakcije (dužina toka reakcije i temperatura) mogu da variraju. Generalno, reakcije se prate hromatografijom na tankom sloju ili masenom spektrometrijom i podvrgnu procesnoj kontroli kada je to potrebno. Prečišćavanje može da varira u zavisnosti od eksperimenata: generalno, rastvarači i odnosi rastvarača korišćeni u eluentima/gradijentima su izabrani tako da obezbede odgovarajuće RfSili vreme retencije.

Izrade

IzradaPl: 5-( 4- Metil- l//- imidazol- l- il)- 6- okso- l, 6- dihidropiridin- 2- karboksilnakiselina,

hidrobromidna so( Pl)

[00981

[0099]U rastvor poznatog 6-bromo-2-metoksi-3-(4-metil-li:f-imidazol-l-il)piridina (Cl, T. Kimura i saradnici, U.S. Pat. Appl. Publ. 2009, US 20090062529 Al) (44.2 g, 165 mmol) u metanolu (165 mL) se dodaju trietilamin (46 mL, 330 mmol) i [1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]dihlorpaladijum(II), dihlormetan kompleks (6.7 g, 8.2 mmol). Smeša se degasira nekoliko puta sa azotom. Reakcija se zagreje na 70°C u atmosferi CO (3 bara) u Parr aparaturi. Nakon 30 minuta, pritisak opadne za 0.5 bara; doda se nova količina CO sve dok pritisak ne ostane konstantan u periodu od 30 minuta. Smeša se ostavi da se ohladi na sobnu temperaturu i filtrira kroz Celite ploču. Celite ploča se ispere dva puta sa metanolom i kombinovani filtrati se koncentruju pod sniženim pritiskom. Ostatak (88 g) se rastvori u etil acetatu (1 L) i vodi (700 mL); organski sloj se ispere sa vodom (200 mL) i vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (500 mL). Kombinovani organski slojevi se suše preko magnezijum sulfata, filtriraju i koncentruju da se dobije naslovljeno jedinjenje. Prinos: 42.6 g, kvantitativno. Faza 2. Sinteza 5-(4-metil-l//-imidazol-l-il)-6-okso-l,6-dihidropiridin-2-karboksilne kiseline, hidrobromidna so(Pl).

[0100]Rastvor C2 (3.82 g, 15.9 mmol) u sirćetnoj kiselini (30 mL) i razblaženoj bromovodoničnoj kiselini (48%, 30 mL) se zagreva pod refluksom u toku 4 sata. Reakcija se ostavi da se ohladi na sobnu temperaturu i nakon toga ohladi u ledenom kupatilu; dobijeni precipitat se sakupi filtriranjem i ispere sa ledenom vodom (30 mL). Rekristalizacijom iz etanola (20 mL) dobija se naslovljeno jedinjenje kao svetio žuta čvrsta supstanca. Prinos: 3.79 g, 12.6 mmol, 79%. LCMS m/z 220.1 (M+l).<>>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 12.6 (v br s, 1 H), 9.58-9.60 (m, 1 H), 8.07 (d, J=7.6 Hz, 1 H), 7.88-7.91 (m, 1 H), 7.09 (d, J=7.4 Hz, 1 H), 2.34 (br s, 3H).

IzradaP2: 5-( 4- Metil- li:f- imidazol- l- il)- 6- okso- l, 6- dihidropiridin- 2- karboksilnakiselina,

hidrohloridna so( P2)

[0101]

[0102]Smeša C2 (12.8 g, 51.8 mmol) i 37% hlorovodonične kiseline (25 mL) se zagreva pod refluksom u toku 18 sati. Nakon što se reaktivna smeša ohladila na sobnu temperaturu, čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem; meša se sa 1,4-dioksanom (2 x 20 mL) i ponovo filtrira, da se dobije produkt kao žuta čvrsta supstanca. Prinos: 13 g, 51 mmol, 98%. 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 9.52 (br s, 1 H), 8.07 (d, J=7.5 Hz, 1 H), 7.78 (br s, 1 H), 7.21 (d, J=7.5 Hz, 1 H), 2.44 (s, 3H).

Izrada P3: 7-( 4- Metil- l/ f- imidazol- l- il)- 3. 4- dihidropiridor2, l- ciri. 41oksazin- 1. 6- dion ( P3)

[0103]

[0104]Jedinjenje P2 (65 g, 250 mmol), 1,2-dibromoetan (52.5 g, 280 mmol) i cezijum karbonat (124 g, 381 mmol) se kombinuju u A^-dimetilformamidu (850 mL) i 6 sati zagrevaju na 90 °C. Reaktivna smeša se nakon toga ohladi i filtrira kroz Celite. Nakon koncentracijefiltrata pod vakuumom,ostatak se rastvori u dihlormetanu (500 mL), ispere sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida (100 mL), ispere sa vodom (50 mL), suši preko magnezijum sulfata, filtrira i koncentruje pod sniženim pritiskom. Dobij ena čvrsta supstanca se ispere sa acetonitrilom da se dobije produkt. Prinos: 46.5 g, 190 mmol, 76%. 'H NMR (400 MHz, CDC13) 8 8.33 (d, J=1.4 Hz, 1 H), 7.43 (AB kvartet, Jab=7.7 Hz, Avab=33.4 Hz, 2H), 7.15-7.17 (m, 1 H), 4.66-4.70 (m, 2H), 4.38-4.42 (m, 2H), 2.30 (d, J=0.8 Hz, 3H).

Izrada P4: 2-({ c^- 2- r2-( Trifluorometil) fenoksilciklobutil} amino) etanol( P4)

[0105]

Faza 1. Sinteza 2-bromociklobutanona (C3).

[0106]Rastvor ciklobutanona (1.28 mL, 17.1 mmol) u hloroformu (20 mL) se u toku 25 minuta, na 0 °C u kapima tretira sa bromom (0.88 mL, 17 mmol), zagreje na sobnu temperaturu i meša 16 sati. Doda se dihlormetan (100 mL) i rastvor se ispere sa vodenim rastvorom natrijum tiosulfata (50 mL) i zasćenim vodenim rastvorom natrijum hlorida (50 mL). Organski sloj se suši preko magnezijum sulfata i koncentruje podvakuumomda se dobije naslovljeno jedinjenje kao bezbojno ulje. Prinos: 2.45 g, 16.4 mmol, 96%. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 4.97-5.04 (m, 1 H), 3.16-3.24 (m, 2H), 2.69-2.80 (m, 1 H), 2.18-2.30 (m, 1 H).

Faza 2. Sinteza 2-[2-(trifluorometil)fenoksi]ciklobutanona (C4).

[0107]Rastvor 2-(trifluorometil)fenola (2.72 g, 16.8 mmol) u acetonu (147 mL) se na 0 °C tretira sa cezijum karbonatom (5.47 g, 16.8 mmol), a nakon toga se u kapima doda C3 (2.5 g, 16.8 mmol). Smeša se meša 1.5 sat na 0 °C, filtrira kroz Celite i koncentruje podvakuumomda se dobije naslovljeno jedinjenje kao bezbojno ulje. Prinos: 3.5 g, 15 mmol, 89%. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 7.56 (br d,J=7.7Hz, 1 H), 7.45-7.50 (m, 1 H), 7.14 (d, J=8.3 Hz, 1 H), 7.07 (br dd, J=7.6, 7.6 Hz, 1 H), 5.31-5.37 (m, 1 H), 2.92-3.00 (m, 2H), 2.55-2.66 (m, 1 H), 2.19-2.30 (m, 1 H).

Faza 3. Sinteza 2-({cw-2-[2-(trifluorometil)fenoksi]ciklobutil}amino)etanola (P4).

[0108]Rastvor C4 (3.5 g, 15 mmol) i 2-aminoetanola (1.03 g, 16.8 mmol) u 1,2-dihloretanu (100 mL) se tretira sa natrijum triacetoksiborhidridom (5.62 g, 25.2 mmol) i meša na sobnoj temperaturi u toku 2 sata. Reakcija se tretira sa sirćetnom kiselinom (4 mL) i meša na sobnoj temperaturi u toku 16 sati. Doda se vodeni rastvor natrijum hidroksida (1 N, 100 mL) i smeša se ekstrahuje sa dihlormetanom (2 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi se suše preko magnezijum sulfata i koncentruju podvakuumom.Prečišćavanjem hromatografijom na silika gelu (gradijent: 0% do 70% [10% 2 N rastvor amonijaka u metanolu /90% etil acetat] u etil acetatu) dobija se naslovljeno jedinjenje kao ulje boje svetlog ćilibara. Prinos: 2.1 g, 7.6 mmol, 51%. Indikovanacisstereohemija je pažljivo ustanovljena na osnovu NOE (nuklearni Overhauserov efekat) eksperimenata. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 7.57 (br dd,J=7.7,1.3 Hz, 1 H), 7.41-7.47 (m, 1 H), 6.99 (br dd, J=7.6, 7.6 Hz, 1 H), 6.80 (d, J=8.2 Hz, 1 H), 4.88-4.93 (m, 1 H), 3.54-3.66 (m, 3H), 2.81-2.88 (m, 1 H), 2.63-2.70 (m, 1 H), 2.22-2.31 (m, 1 H), 1.97-2.16 (m, 2H), 1.86-1.94 (m, 1 H).

Izrada P5: 2-({[ 3-( 4- hlorfenil) cikloheksillmetil} amino) etanol ( P5)

[0109]

Faza 1. Sinteza l-hloro-4-[3-(metoksimetiliden)cikloheksil]benzena (C5).

[0110]U rastvor (metoksimetil)trimetilsilana (694 mg, 5.75 mmol) u tetrahidrofuranil (6.8 mL) se na -78 °C u kapima doda sec-butillitijum (1.4 M, 4.45 mL, 6.23 mmol). Rastvor se zagreje na -25 °C, drži na toj temperaturi 30 minuta, a nakon toga ohladi na -78 °C. U reakciju se u kapima doda 3-(4-hlorfenil)cikloheksanon (izrađen u skladu sa postupkom koji su dali G. A. Whitlock i saradnici, Bioorg. Med. Chem. Lett. 2009, 19, 3118-3121) (1.0 g, 4.8 mmol). Reakcija se zagreje na -25 °C i meša 30 minuta, nakon toga ostavi da se polako zagreje na sobnu temperaturu i meša u toku 48 sati. Reakcija se razblaži sa tetrahidrofuranom (10 mL), neutrališe sa zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida i ekstrahuje tri puta sa etil acetatom. Kombinovani organski slojevi se suše preko magnezijum sulfata i koncentruju podvakuumomda se dobije sirovo naslovljeno jedinjenje kao bledo žuto ulje. Prinos: 1.25 g. Ovaj materijal se direktno koristi u narednoj fazi. GCMSmlz236 (M<+>).

Faza 2. Sinteza 3-(4-hlorfenil)cikloheksankarbaldehida (C6).

[0111]Sirovi C5 (1.25 g iz prethodne faze, <4.8 mmol) se rastvori u vodenom rastvoru mravlje kiseline (3 M, 2.0 mL) i smeša se refluksuje u toku 2 sata. Rastvor se ohladi na sobnu temperaturu, razblaži sa vodom i ekstrahuje dva puta sa etil acetatom; kombinovani organski slojevi se suše preko natrijum sulfata i koncentruju podvakuumom.Hromatografijom na silika gelu (gradijent: 0% do 100% etil acetat u heptanima) dobija se naslovljeno jedinjenje kao ulje, pomoću 'H NMR se predpostavlja daje to smeša dva stereoizomera u približnom odnosu 4:1. Prinos: 338 mg, 1.52 mmol, 32% kroz dve faze. GCMSmlz222 (M<+>). 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 [9.65 (d,J=l. 4Hz) i 9.79 (br s), ukupno 1 H], 7.25-7.30 (m, 2H), 7.12-7.18 (m, 2H), 1.21-2.66 (m, 10H).

Faza 3. Sinteza 2-({[3-(4-hlorfenil)cikloheksil]metil}amino)etanola(P5).

[0112]U rastvor C6 (338 mg, 1.52 mmol) u metanolu (5 mL) se doda 2-aminoetanol (139 mg, 2.28 mmol) a nakon toga sirćetna kiselina (89 mL, 1.55 mmol). Reakcija se meša pod refluksom u toku 2 sata, a nakon toga ohladi na 0 °C. Doda se natrijum borhidrid (115 mg, 3.04 mmol) i smeša se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu. Reakcija se razblaži sa etil acetatom, neutrališe sa vodom i nakon toga ekstrahuje tri puta sa etil acetatom. Kombinovani organski slojevi se suše preko natrijum sulfata i koncentruju podvakuumomda se dobije sirovo naslovljeno jedinjenje u tečnom stanju. Prinos: 362 mg, 1.35 mmol, 89%. Pretpostavlja se daje to smeša stereoizomera. LCMSmlz268.3 (M+l). 'H NMR (400 MHz, CDCb), karakteristični pikovi: 8 7.22-7.28 (m, 2H), 7.10-7.16 (m, 2H), 3.63 (dd, J=5.3, 5.1 Hz, 2H), 2.75 (dd,J=5.3, 5.1 Hz, 2H).

Primeri

Primer 1

7-( 4- Metil- lif- imidazol- 1 - iD- 2- j/ arTO- 2-[ 2-( trifluorometil) fenoksi] ciklobutil} - 3. 4- dihidro-2if- pirido[ l, 2- a, lpirazin- l, 6- dion, trifluoroacetatna so( 1)

[0113]

Faza 1. Sinteza c«-2-[2-(trifluorometil)fenoksi]ciklobutanola (C7).

[0114]Jedinjenje C4 (3.00 g, 13.0 mmol) se rastvori u metanolu (100 mL) i ohladi na -78 °C. U porcijama se u toku 10 minuta dodaje natrijum borhidrid (1.48 g, 39.1 mmol) i smeša se meša na -78 °C dodatnih 30 minuta a nakon toga ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu i meša 1 sat. Reakcija se neutrališe sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (100 mL) i ekstrahuje sa dihlormetanom (2 x 150 mL). Organski slojevi se kombinuju, isperu sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida (100 mL), suše preko magnezijum sulfata, filtriraju i koncentruju pod sniženim pritiskom. Nakon dva prečišćavanja hromatografijom na silika gelu [gradijenti: 1) 0% do 50% etil acetat u hepatanu; 2) 0% do 50% dihlormetan u hepatanu] dobija se naslovljeno jedinjenje kao bezbojno ulje. Za product je eksperimentalno ustanovljena cis stereohemija na osnovu NOE studija. Prinos: 650 mg, 2.80 mmol, 22%. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 7.60 (br dd, 7=7.8, 1.2 Hz, 1 H), 7.47 (br ddd, 7=8.2, 7.8, 1.2 Hz, 1 H), 7.04 (br dd, 7=7.6, 7.6 Hz, 1 H), 6.87 (br d, J=8.4 Hz, 1 H), 4.86-4.91 (m, 1 H), 4.45-4.53 (m, 1 H), 2.75 (d,7=9.2Hz, 1 H), 2.27-2.36 (m, 1 H), 2.02-2.22 (m, 3H).

Faza 2. Sinteza c7A-2-[2-(trifluorometil)fenoksi]ciklobutil metansulfonata (C8).

[0115]Smeša C7 (484 mg, 2.08 mmol), trietilamina (0.87 mL, 6.3 mmol) i dihlormetana (30 mL) se ohladi do 0 °C i u kapima se u toku 15 minuta dodaje metansulfonil hlorid (0.32 mL, 4.2 mmol). Nakon dodatnih 30 minuta na 0 °C, reakcija se neutrališe sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (50 mL) i smeša se ekstrahuje sa dihlormetanom (2 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida (50 mL), suše preko magnezijum sulfata, filtriraju i koncentruju podvakuumomda se dobije naslovljeno jedinjenje kao bezbojno ulje. Prinos: 640 mg, 2.06 mmol, 99%. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 7.60 (br dd, 7=7.8, 1.2 Hz, 1 H), 7.45-7.51 (m, 1 H), 7.06 (br dd, 7=7.7, 7.6 Hz, 1 H), 6.88 (br d, 7=8.4 Hz, 1 H), 5.26-5.32 (m, 1 H), 5.01-5.06 (m, 1 H), 2.95 (s, 3H), 2.53-2.63 (m, 1 H), 2.37-2.46 (m, 1 H), 2.18-2.30 (m, 2H).

Faza 3. Sinteza 2-({?ra«5-2-[2-(trifluorometil)fenoksi]ciklobutil}amino)etanola (C9).

[0116]Smeša C8 (500 mg, 1.61 mmol) i 2-aminoetanola (5 mL) se 18 sati zagreva na 90 °C, a nakon toga dodatnih 24 sata na 100 °C. Reakcija se ohladi, razblaži sa etil acetatom (100 mL) i ispere sa vodenim rastvorom natrijum hidroksida (1 M, 5 x 50 mL). Organski sloj se suši preko magnezijum sulfata, filtrira i koncentruje podvakuumom.Prečišćavanjem sa HPLC (kolona: Phenomenex Luna C18(2), 5 um; mobilna faza A: 0.1 % mravlja kiselina u vodi; mobilna faza B: 0.1 % mravlja kiselina u metanolu; gradijent: 5% do 100% B) dobija se naslovljeno jedinjenje kao čvrsta supstanca. Prinos; 191 mg, 0.694 mmol, 43%. LCMSmlz276.3 (M+l). 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 8.49 (br s, 1 H), 7.56 (br d, 7=7.6 Hz, 1 H), 7.44-7.50 (m, 1 H), 7.04 (br dd, 7=7.6, 7.6 Hz, 1 H), 6.92 (br d, 7=8.4 Hz, 1 H), 4.90-4.97 (m, 1 H), 3.75-3.90 (m, 3H), 2.99-3.15 (m, 2H), 2.46-2.56 (m, 1 H), 2.21-2.31 (m, 1 H), 1.90-2.02 (m, 1 H), 1.77-1.89 (m, 1 H). Faza 4. Sinteza 7-(4-metil-l/7-imidazol-l-il)-2-{trans-2-[2-(trifluorometil)fenoksi]ciklobutil}-3,4-dihidro-2//-pirido[l,2-a]pirazin-l,6-diona, trifluoroacetatna so(1).

[0117]SmešaPl(35 mg, 0.13 mmol), C9 (39 mg, 0.14 mmol), 0-(7-azabenzotriazol-l-il)-A^A^N'-tetrametiluronijum heksafluorofosfata (HATU, 149 mg, 0.392 mmol) iNJf-diizopropiletilamina (0.89 mL, 0.51 mmol) u dihlormetanu (2.3 mL) se meša 20 sati. Doda se voda (5 mL) i smeša se ekstrahuje sa dihlormetanom (3x5 mL). Kombinovani organski slojevi se suše preko magnezijum sulfata, filtriraju i koncentruju podvakuumom.Prečišćavanje se izvodi pomoću reverzno fazne HPLC (kolona: Waters Sunfire Cl8, 5 um; mobilna faza A: 0.05% trifluorosirćetna kiselina u vodi (v/v); mobilna faza B: 0.05% trifluorosirćetna kiselina u acetonitrilu (v/v); gradijent: 10% do 100% B). Prinos: 50 mg, 0.11 mmol, 85%. LCMSmlz459.1 (M+l). Vreme retencije: 2.53 minuta (kolona: Waters Atlantis dC18, 4.6 x 50 mm, 5 um; mobilna faza A: 0.05% trifluorosirćetna kiselina u vodi (v/v); mobilna faza B: 0.05% trifluorosirćetna kiselina u acetonitrilu (v/v); gradijent: 5% do 95% B u toku 4.0 minuta, linearno; brzina protoka: 2 mL/minut).

Primer 2

7-( 4- Metil- lif-/ ff7idazol- l- il)- 2-{ ?raTO- 2- r2-( trifluorometil) fenoksilciklopentil}- 3, 4- dihidro-2#- pirido[ l, 2- <3lpirazin- l, 6- dion ( 2)

[0118]

Faza 1. Sinteza ?ra«s-2-(dibenzilamino)ciklopentanola (CIO).

[0119]U rastvor rra/7s-2-aminociklopentanol hidrohlorida (385 mg, 2.82 mmol) u 1,2-dihloretanu se dodaju benzaldehid (748 mg, 7.04 mmol) i trietilamin (0.51 mL, 3.7 mmol). Smeša se zagreva 2 sata pod refluksom, ohladi na sobnu temperaturu i doda se natrijum triacetoksiborhidrid. Reaktivna smeša se zagreva pod refluksom u toku dodatnih 18 sati, ohladi na sobnu temperaturu, a nakon toga prenese u dihlormetan. Organski sloj se ispere sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata i vodom, nakon toga suši preko magnezijum sulfata, filtrira i koncentruje podvakuumom.Prečišćavanjem hromatografijom na silika gelu (gradijent: 25% do 50% etil acetat u hepatanu) dobija se naslovljeno jedinjenje kao ulje boje zlata. Prinos: 734 mg, 2.61 mmol, 93%. LCMSmlz282.2 (M+l). 'HNMR (400 MHz, CDCb) 8 7.35-7.39 (m, 4H), 7.32 (br dd, J=7.8, 7.2 Hz, 4H), 7.21-7.26 (m, 2H), 4.05-4.12 (m, 1 H), 3.79 (d, J=13.9 Hz, 2H), 3.52 (d, J=13.9 Hz, 2H), 2.90-2.99 (m, 1 H), 1.74-1.95 (m, 2H), 1.52-1.71 (m, 3H), 1.39-1.49 (m, 1 H).

Faza 2. Sinteza?ra«j,-A7,Ar-dibenzil-2-[2-(trifluorometil)fenoksi]ciklopentanamina(Cll).

[0120]U rastvorCIO(820 mg, 2.91 mmol) u tetrahidrofuranu (20 mL) u kiveti pod visokim pritiskom se doda natrijum hidrid (60% in oil, 175 mg, 4.37 mmol). Nakon 15 minuta, uvede se l-fluoro-2-(trifluorometil)benzen (1.43 g, 8.74 mmol), kiveta se zatvori i smeša se zagreva 18 sati na 70 °C, a nakon toga ohladi na sobnu temperaturu. Smeša se prenese u etil acetat, nakon toga ispere sa vodom i sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida; organski sloj se suši preko magnezijum sulfata, filtrira i koncentruje podvakuumom.Prečišćavanjem hromatografijom na silika gelu (gradijent: 20% do 40% etil acetat u hepatanu) dobija se naslovljeno jedinjenje kao ulje boje zlata. Prinos: 212 mg, 0.498 mmol, 17%. LCMSmlz426.2 (M+l). 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 7.55 (d, J=7.8 Hz, 1 H), 7.41 (dd, J=8.0, 7.8 Hz, 1 H), 7.34-7.39 (m, 4H), 7.24-7.30 (m, 4H), 7.17-7.23 (m, 2H), 7.03 (d, J=8.4 Hz, 1 H), 6.95 (dd, .7=7.6, 7.6 Hz, 1 H), 4.76-4.82 (m, 1 H), 3.68 (AB kvartet, 7ab=14.0 Hz, Avab=41.1 Hz, 4H), 3.50-3.57 (m, 1 H), 1.85-2.00 (m, 2H), 1.62-1.84 (m, 4H).

Faza 3. Sinteza?ra«5-2-[2-(trifluorometil)fenoksi]ciklopentanamina, hidrohloridna so (C12).

[0121]RastvorCll(212 mg, 0.498 mmol), vodonik hlorid (4 N rastvor u 1,4-dioksanu, 2 mL) i 10% Pd/C (100 mg) u metanolu (5 mL) se na 50 °C u Parr šejkeru hidrogenizuje pod pritiskom od 50 psi. Nakon 3 sata, reakcija se filtrira kroz Celite i koncentruje podvakuumomda se dobije naslovljeno jedinjenje kao tamni ostatak. Prinos: 156 mg, kvantitativno. LCMSmlz246.2 (M+l). Faza 4. Sinteza trans-A^-(2-hloretil)-2-[2-(trifluorometil)fenoksi]ciklopentanamina, hidrohloridna so (C13).

[0122]U rastvorC12(130 mg, 0.463 mmol), trietilamina (0.097 mL, 0.695 mmol) i natrijum triacetoksiborhidrida (238 mg, 1.06 mmol) u metanolu (5 mL) se doda hloracetaldehid (55% rastvor u vodi, 0.071 mL, 0.60 mmol). Nakon 3 sata, reaktivna smeša se koncentruje podvakuumom.Ostatak se prenese u dihlormetan i ispere sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata i sa vodom. Organski sloj se suši preko magnezijum sulfata i filtrira. U filtrat se doda vodonik hlorid (2 N rastvor u dietil etru, 2 mL) i smeša se koncentruje podvakuumomda se dobije naslovljeno jedinjenje kao svetio smeđa čvrsta supstanca. Ovaj materijal se prenese u sledeću fazu bez naknadnog prečišćavanja. Prinos: 111 mg, 0.323 mmol, 70%. LCMSmlz308.1 (M+l).

Faza 5. Sinteza 7-(4-metil-l#-imidazol-l-il)-2-{?ar/7s-2-[2^

(trifluorometil)fenoksi]ciklopentil}-3,4-dihidro2i:f-pirido[ 1,2-a]pirazin-1,6-diona (2).

[0123]U rastvor PT (80 mg, 0.27 mmol) iC13(110 mg, 0.32 mmol) u dihlormetanu (5 mL) se dodaju AyV-diizopropiletilamin (0.19 mL, 1.07 mmol) i 0-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,A^,N'-tetrametiluronijum heksafluorofosfat (HATU, 97%, 124 mg, 0.32 mmol). Reakcija se meša 5 dana, a nakon toga prenese u novu količinu dihlormetana i ispere sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata i sa vodom. Organski sloj se suši preko magnezijum sulfata, filtrira i koncentruje podvakuumom.Prečišćavanjem reverzno faznom HPLC (kolona: Waters XBridge Cl8, 5 um; mobilna faza A: 0.03% amonijum hidroksid u vodi (v/v); mobilna faza B: 0.03% amonijum hidroksid u acetonitrilu (v/v); gradijent: 30% do 70% B) dobija se naslovljeno jedinjenje kao ulje. Prinos: 3.6 mg, 7.6 mmol, 3%. LCMSmlz473.3

(M+l). Vreme retencije: 2.62 minuta (kolona: Waters Atlantis dC18, 4.6 x 50 mm, 5 um; mobilna faza A: 0.05% trifluorosirćetna kiselina u vodi (v/v); mobilna faza B: 0.05% trifluorosirćetna kiselina u acetonitrilu (v/v); gradijent: 5% do 95% B u toku 4.0 minuta, linearno; brzina protoka: 2 mL/minut).

Primer 3

2- UraTO- 2-[( 6, 7- Difluoronaftalen- 1 - il) oksi] ciklobutil}- 7-( 4- metil- lif- imidazol- 1 - il)- 3, 4-

dihidro- 2if- piridor 1, 2- a] pirazin- 1, 6- dion ( 3)

[0124]

Faza 1. Sinteza 2-{[c/.s,-2-(benziloksi)ciklobutil]amino}etanola (C14).

[0125]Rastvor 2-(benziloksi)ciklobutanona (izrađen u skladu sa postupkom koji su dali P.

Bisel i saradnici,Eur. J. Org. Chem.1998, 4,729-733; 2.35 g, 13.3 mmol) i 2-aminoetanola (1.63 g, 26.7 mmol) u dihlormetanu (47 mL) se tretira sa sirćetnom kiselinom (0.76 mL, 13.3 mmol) i natrijum triacetoksiborhidridom (5.95 g, 26.7 mmol) i meša na sobnoj temperaturi u toku 16 sati. Doda se vodeni rastvor natrijum hidroksida (1 N, 100 mL) i smeša se ekstrahuje sa dihlormetanom (2 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa vodenim

rastvorom natrijum hidroksida (1 N, 100 mL), suše preko magnezijum sulfata i koncentruju podvakuumomda se dobije produkt kao bezbojno ulje. Prinos: 2.9 g, 13 mmol, 98%. 'H

NMR (400 MHz, CDCb) 8 7.28-7.39 (m, 5H), 4.51 (AB kvartet, Jab=11.7 Hz, Avab=61.1 Hz, 2H), 4.13-4.18 (m, 1 H), 3.54-3.58 (m, 2H), 3.32-3.39 (m, 1 H), 2.72-2.78 (m, 2H), 2.5 (v br s, 2H), 2.05-2.14 (m, 1 H), 1.83-1.98 (m, 3H).

Faza 2: Sinteza 2-[cŽ5-2-(benziloksi)ciklobutil]-7-(4-metil-l^-imidazol-l-il)-3,4-dihidro-2/f-pirido[ 1,2-a]pirazin-1,6-diona (C15).

[0126]Jedinjenje Pl (2.40 g, 8.00 mmol) iC14(2.00 g, 9.04 mmol) se kombinuju u dihlormetanu (160 mL) i tretiraju sa A^,A^-diizopropiletilaminom (6.06 mL, 34.8 mmol) i(9-(7-azabenzo1xiazol-l-il)-A^A^A^',A^'-tetrametiluronijum heksafluorofosfatom (HATU, 97%, 7.84 g, 20.0 mmol). Reakcija se meša 55 sati na sobnoj temperaturi. Doda se voda (200 mL) i smeša se ekstrahuje sa dihlormetanom (3 x 150 mL). Kombinovani organski slojevi se suše preko magnezijum sulfata i koncentruju podvakuumom.Prečišćavanjem hromatografijom na silika gelu (gradijent: 50% do 100% [10% 2 N rastvor amonijaka u metanolu / 90% etil acetat] u etil acetatu) dobija se naslovljeno jedinjenje kao svetio žuta čvrsta supstanca. Prinos: 2.95 g, 7.29 mmol, 91%. 'H NMR (400 MHz, CDCb), karakteristični pikovi: 8 8.35 (d, J=1.4 Hz, 1 H), 7.52 (d, J=7.8 Hz, 1 H), 7.23-7.35 (m, 6H), 7.18-7.20 (m, 1 H), 5.22-5.29 (m, 1 H), 4.45 (AB kvartet, Jab=11.7 Hz, Avab=52.2 Hz, 2H), 4.06-4.18 (m, 2H), 3.68-3.79 (m, 2H), 2.46-2.58 (m, 1 H), 2.31 (d, J=0.8 Hz, 3H). Faza 3: Sinteza 2-[cŽ5,-2-hidroksiciklobutil]-7-(4-metil-l//-imidazol-l-il)-3,4-dihidro-2i<:>/- pirido[l,2-a]pirazin 1,6-diona (C16).

[0127]JedinjenjeC15(2.50 g, 6.18 mmol) se meša sa dihlormetanom (110 mL), tretira sa metansulfonskom kiselinom (27 mL) i meša 1.5 sat na sobnoj temperaturi. Dodaje se vodeni rastvor natrijum hidroksida (6 N) dok pH ne dostivne 12 i nakon toga se smeša ekstrahuje sa dihlormetanom (3 x 150 mL, nakon toga 5 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi se suše preko magnezijum sulfata i koncentruju podvakuumom.Hromatografijom na silika gelu (gradijent: 50% do 100% [20% 2 N rastvor amonijaka u metanolu / 80% etil acetat] u etil acetatu) dobija se naslovljeno jedinjenje kao bela čvrsta supstanca. Prinos: 1.40 g, 4.45 mmol, 72%. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 8.24 (d,J=\ 2Hz, 1 H), 7.36 (d, J=7.6 Hz, 1 H), 7.15 (d, J=7.8 Hz, 1 H), 7.03-7.05 (m, 1 H), 4.70-4.78 (m, 2H), 4.26-4.40 (m, 2H), 3.99 (ddd, J=13.4, 6.9, 4.3 Hz, IH), 3.68 (ddd, J=13.3, 7.8, 4.3 Hz, IH), 2.54-2.65 (m, 1 H), 2.26 (d, J=0.8 Hz, 3H), 2.20-2.34 (m, 2H), 1.89-1.99 (m, 1 H). Faza 4: Sinteza c/5-2-[7-(4-metil-l//-imidazol-l-il)-l,6-diokso-l,3,4,6-tetrahidro-2i<:>f-pirido[l,2-a]pirazin-2-il]ciklobutil metansulfonata (C17).

[0128]Metansulfonil hlorid (148 mL, 1.91 mmol) se u kapima na 0 °C doda u rastvorC16(150 mg, 0.47 mmol) i trietilamina (530 mL, 3.82 mmol) u dihlormetanu (15 mL) i smeša se meša 20 minuta. Doda se voda (50 mL) i smeša se ekstrahuje sa dihlormetanom (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, suše preko magnezijum sulfata i koncentruju podvakuumomda se dobije naslovljeno jedinjenje kao svetio žuta čvrsta supstanca. Prinos: 175 mg, 0.45 mmol, 94%. LCMSmlz

393.4 (M+1).'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 8.24 (d, J=1.2 Hz, 1 H), 7.44 (d, 7=7.8 Hz, 1 H), 7.24 (d, 7=7.6 Hz, IH), 7.13-7.15 (m, 1 H), 5.30-5.35 (m, 1 H), 5.13-5.20 (m, 1 H), 4.47 (ddd, polovina od ABXY uzorka, 7=14.3, 7.6, 4.1 Hz, 1 H), 4.37 (ddd, polovina od ABXY uzorka, 7=14.4, 7.4, 4.0 Hz, 1 H), 3.96 (ddd, 7=13.3, 7.4, 4.1 Hz, 1 H), 3.74 (ddd, 7=13.2, 7.6, 4.0 Hz, 1 H), 2.99 (s, 3H), 2.66-2.77 (m, 1 H), 2.29 (d, 7=1.0 Hz, 3H), 2.24-2.50 (m, 3H).

Faza 5: Sinteza 2-{/rara-2-[(6,7-difluoronaftalen-l-il)oksi]ciklobutil}-7-(4-metil-li:/- imidazol-1 -il)-3,4-dihidro-2/7-pirido[ 1,2-a]pirazin-1,6-diona (3).

[0129]SmešaC17(20 mg, 51 mmol), 6,7-difluoronaftalen-l-ola (9.2 mg, 51 mmol) i kalijum karbonata (35.6 mg, 255 mmol) u dimetil sulfoksidu (1.0 mL) se zagreva 3 sata na 100 °C, filtrira i prečisti reverzno faznom HPLC (kolona: Waters XBridge Cl8, 5 um; mobilna faza A: 0.03% amonijum hidroksid u vodi (v/v); mobilna faza B: 0.03% amonijum hidroksid u acetonitrilu (v/v); gradijent: 20% do 70% B). LCMSmlz Ali.0(M+l). Vreme retencije: 2.58 minuta (kolona: Waters Atlantis dC18, 4.6 x 50 mm, 5 um; mobilna faza A: 0.05% trifluorosirćetna kiselina u vodi (v/v); mobilna faza B: 0.05% trifluorosirćetna kiselina u acetonitrilu (v/v); gradijent: 5% do 95% B u toku 4.0 minuta, linearno; brzina protoka: 2 mL/minut).

Primer 4

2-(| 3- r4- hloro- 3-( trilfuorometil) fenil1- 4. 5- dihidro- 1. 2- oksazol- 5- illmetilV7-( 4- metil- li7

imidazol- 1 - il)- 3, 4- dihidro- 2i:/- pirido[ 1, 2- a] pirazin- 1, 6- dion ( 4)

[0130] Faza 1: Sinteza 7-(4-metil-l^-imidazol-l-il)-2-(prop-2-en-l-il)-3,4-dihidro-2if-pirido[l,2-a]pirazin-l,6-diona (C18).

[0131]Jedinjenje Pl (2.02 g, 6.73 mmol) i 2-(prop-2-en-l-ilamino)etanol (izrađen u skladu sa postupkom koji su dali M. Matteucci i saradnici, U.S. Pat. Appl. Publ. 2007, US 20070060534 Al 20070315) (681 mg, 6.73 mmol) se kombinuju u dihlormetanu (40 mL) i A^A^-diizopropiletilaminu (5.86 mL, 33.7 mmol) i smeša se meša dok ne postane homogena. Doda se 0-(7-azabenzotriazol-l-il)-A^A^A^',Ar'-tetrametiluronijumheksafluorofosfat (HATU, 97%, 7.92 g, 20.2 mmol) i reakcija se meša 48 sati na sobnoj temperaturi. Doda se vodeni rastvor natrijum hidroksida (1 N) i smeša se ekstrahuje tri puta sa 20% izopropanolom u hloroformu. Kombinovani organski slojevi se suše preko natrijum sulfata i koncentruju podvakuumom.Prečišćavanje se izvodi hromatogrfijom na silika gelu (gradijent: 0% do 20% [2 M rastvor NH3u metanolu] u dihlormetanu) a nakon toga trituracijom sa etil acetatom. Prinos: 718 mg, 2.52 mmol, 38%. Druga serija se dobija iz filtrate nakon druge trituracije. Prinos: 221 mg, 0.77 mmol, 11%. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 8.28 (d, 7=1.2 Hz, 1 H), 7.47 (d, 7=7.8 Hz, 1 H), 7.29 (d, 7=7.6 Hz, 1 H), 7.13-7.15 (m, 1 H), 5.83 (ddt, 7=16.8, 10.5, 6.1 Hz, 1 H), 5.28-5.35 (m, 2H), 4.34-4.38 (m, 2H), 4.21 (ddd, 7=6.0, 1.4, 1.2 Hz, 2H), 3.63-3.67 (m, 2H), 2.30 (d, 7=1.0 Hz, 3H).

Faza 2: Sinteza (^-l-^-hloro-S-^rifluorometi^fenilJ-A^-hidroksimetanamina(C19).

[0132]U rastvor 4-hloro-3-(trifluorometil)benzaldehida (93.9 mg, 0.45 mmol) u tetrahidrofuranu (0.9 mL) i etanolu (0.9 mL) se doda hidroksilamin (50% u vodi, 0.20 mL) i reakcija se održava 36 sati na sobnoj temperaturi. Doda se metanol (3.0 mL), rastvarač seukloni pod vakuumoma ostatak se triturira sa toluenom (2x1 mL) da se dobije naslovljeno jedinjenje kao čvrsta supstanca. Prinos: 101 mg, 0.45 mmol, 100%.

Faza 3: Sinteza 4-hloro-A</->hidroksi-3-(trifluorometil)benzenkarboksimidoil hlorida(C20).

[0133]U rastvorC19(101 mg, 0.45 mmol) u A^-dimetilformamidu (1.05 mL) se dodaN-hlorsukcinimid (0.45 M rastvor u A^,A^-dimetilformamidu, 1.05 mL, 0.47 mmol). Reaktivna smeša se zagreva 3 sata na 60 °C, nakon toga ohladi na sobnu temperaturu i direktno koristi u sledećoj fazi. Faza 4: Sinteza2-({3-[4-hloro-3-(trifluorometil)fenil]-4,5-dihidro-l,2-oksazol-5-il}metil)-7-(4-metil- l#-imidazol-l-il)-3,4-dihidro-2/7-pirido[ 1,2-a]pirazin-1,6-diona(4).

[0134]RastvorC18(0.4 M rastvor u dihlormetanu, 0.375 mL, 0.15 mmol) se doda u sirovu reaktivnu smešu iz prethodne faze, a nakon toga se doda N-metilmorfin (1.0 M rastvor uN, N-dimetilformamidu, 0.60 mL, 0.60 mmol) i reaktivna smeša se ostavi 66 sati na sobnoj temperaturi. Nakon uklanjanjarastvarača pod vakuumom,ostatak se rastvori u 1,2-dihloretanu (5.0 mL) i tretira sa 50% zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (4.0 mL). Vodeni sloj se ekstrahuje sa 1,2-dihloretanom (4.0 mL) i kombinovani organski slojevi sekoncentruju pod vakuumom.Prečišćavanjem reverzno faznom visoko efikasnom tečnom hromatografijom (HPLC) (kolona: Phenomenex Gemini C18, 5 um; mobilna faza A: 0.1% amonijum hidroksid u vodi (v/v); mobilna faza B: 0.1% amonijum hidroksid u metanolu (v/v); gradijent: 5% do 100% B) dobija se materijal za koji je, na osnovu 2-dimenzionalnih NMR eksperimenata, utvrđeno da je identičan 3,5-disupstituisanom dihidro-l,2-oksazol izomeru. Ovaj produkt se koncentruje tri puta iz etil acetata da se dobije naslovljeno jedinjenje kao žuta čvrsta supstanca. Prinos: 5.7 mg, 0.011 mmol, 7%. LCMSmlz505.9 (M+l). 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 8.24 (d, J=1.2 Hz, 1 H), 7.87 (d, 7=2.2 Hz, 1 H), 7.54-7.64 (m, 2H), 7.45 (d, 7=7.8 Hz, 1 H), 7.26 (d, 7=8 Hz, 1 H, predpostavljeno; delimično zaklonjeno pikom rastvarača), 7.13-7.16 (m, 1 H), 5.11-5.20 (m, 1 H), 4.45 (ddd, 7=14.3, 7.0, 4.1 Hz, IH), 4.31 (ddd, 7=14.3, 7.6, 4.3 Hz, 1 H), 3.87-4.04 (m, 3H), 3.74 (dd, 7=14.4, 6.7 Hz, 1 H), 3.63 (dd, polovina od ABX uzorka, 7=17.5, 10.7 Hz, 1 H), 3.47 (dd, polovina od ABX uzorka, 7=17.6, 7.2 Hz, 1 H), 2.28 (br s, 3H).

Primer 5

2- { c^- 2-[ 4- Fluoro- 2-( trifluorometil) fenoksilciklopentil} - 7-( 4- metil- lif- imidazol- 1 - if)- 3, 4-

dihidro- 2//- pirido[ 1, 2g] pirazin- 1, 6- dion ( 5)

[0135]

Faza 1. Sinteza trans-2-[(2-hidroksietil)amino]ciklopentanola (C21).

[0136]Smeša 6-oksabiciklo[3.1.0]heksana (3.00 g, 35.7 mmol) i 2-aminoetanola (2.18 g, 35.7 mmol) u etanolu (15 mL) se meša 16 sati na 80 °C u zatvorenoj epruveti. Reaktivna smeša se ohladi na sobnu temperaturu i koncentruje podvakuumom.Prečišćavanjem hromatografijom na siika gelu (eluent: metanol u dihlormetanu) dobija se naslovljeno jedinjenje. Prinos: 1.6 g, 11 mmol, 31%. 'H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 4.43-4.64 (br m, 2H), 3.68-3.75 (m, 1 H), 3.44 (t, J=5.6 Hz, 2H), 2.71-2.77 (m, 1 H), 2.58-2.63 (m, 2H), 1.73-1.89 (m, 2H), 1.47-1.64 (m, 2H), 1.34-1.44 (m, 1 H), 1.17-1.28 (m, 1 H). Faza 2. Sinteza 2-[/ram-2-hidroksiciklopentil]-7-(4-metil-li^-imidazol-l-il)-3,4-dihidro-2i^-pirido[ 1,2-«]pirazin-1,6-diona (C22).

[0137]ReakcijaC21sa Pl se izvodi u skladu sa opštim postupkom za sintezu 1 u Primeru 1. Kada se reakcija završi, što se proceni hromatografijom na tankom sloju, reaktivna smeša se razblaži sa vodom. Vodeni sloj se ekstrahuje tri puta sa 5% metanolom u dihlormetanu i kombinovani organski slojevi se suše preko natrijum sulfata i koncentruju podvakuumom.Hromatografijom na silika gelu (eluent: metanol u dihlormetanu) i trituracijom sa etil acetatom dobija se naslovljeno jedinjenje kao beličasta čvrsta supstanca. Prinos: 340 mg, 1.04 mmol, 22%. LCMSmlz329.0 (M+l). 'H NMR (300 MHz, DMSO-d6) 8 8.27 (s, 1 H), 7.80 (d, J=7.3 Hz, 1 H), 7.42 (s, 1 H), 7.08 (d, 7=7.3 Hz, 1 H), 4.85-4.98 (br m, 1 H), 4.44-4.60 (m, 1 H), 4.03-4.36 (m, 3H), 3.59-3.68 (m, 2H), 2.15 (s, 3H), 1.42-1.96 (m, 6H). Faza 3. Sinteza 2-{c/5-2-[4-fluoro-2-(trifluorometil)fenoksi]ciklopentil}-7-(4-metil-l//- imidazol-1 -il)3,4-dihidro-2/f-pirido[ 1,2-a]pirazin-1,6-diona (5).

[0138]Trifenilfosfin (12.2 mg, 0.046 mmol) se doda u rastvor C22 (11 mg, 0.033 mmol) i 4-fluoro2-(trifluorometil)fenola (7.4 mg, 0.041 mmol) u tetrahidrofuranu (0.5 mL). Reaktivna smeša se tretira sa rastvorom diizopropil azodikarboksilata (94%, 0.015 mL, 0.071 mmol) u tetrahidrofuranu i zagreva 18 sati na 50 °C, nakon toga 4 sata na 90 °C. Iste količine trifenilfosfina i diizopropil azodikarboksilata se ponovo dodaju i zagrevanje se nastavi još 4 dana na 90 °C. Smeša se koncentruje podvakuumom.Prečišćavanjem reverzno faznom HPLC (kolona: Waters XBridge Cl 8, 5 um; mobilna faza A: 0.03% amonijum hidroksid u vodi (v/v); mobilna faza B: 0.03% amonijum hidroksid u acetonitrilu (v/v); gradijent: 40% do 100% B) dobija se naslovljeno jedinjenje. Prinos: 2.8 mg, 5.7 mmol, 17%. LCMSmlz491.1 (M+l). Vreme retencije: 2.32 minuta (kolona: Waters Atlantis dC18, 4.6 x 50 mm, 5 um; mobilna faza A: 0.05% trifluorosirćetna kiselina u vodi (v/v); mobilna faza B: 0.05% trifluorosirćetna kiselina u acetonitrilu (v/v); gradijent: 5% do 95% B u toku 4.0 minuta, linearno; brzina protoka: 2 mL/minut).

Primer 6

7-( 4- Metil- l#- imidazol- 1 - il)- 2-( {( 2^ 3^ 5i?)- 3- metil- 5- r4-( trifluorometil) fenilltetrahidrofuran- 2- il} metil)- 3, 4- dihidro- 2/ f- piridor 1, 2- alpirazin- 1, 6- dion

(6)

[0139]

Faza 1. Sinteza (55)-5-({[ferc-butil(difenil)silil]oksi}metil)furan-2(5//)-ona (C23).

[0140]Imidzol (1.22 g, 17.6 mmol) iferc-butil(difenil)silil hlorid (3.95 mL, 15.4 mmol) se dodaju u rastvor (5<S)-5-(hidroksimetil)furan-2(5H)-ona (1.60 g, 14.0 mmol) uA^V-dimetilformamidu (50 mL) i reaktivna smeša se meša 18 sati na sobnoj temperaturi. Smeša se nakon toga podeli između terc-butil metil etra i vode; organski sloj se ispere dva puta sa vodom, suši preko magnezijum sulfata, filtrira i koncentruje podvakuumom.Hromatografijom na silika gelu (gradijent: 5% do 30% etil acetat u hepatanu) dobija se produkt kao bela čvrsta supstanca. Prinos: 5.20 g, kvantitativno. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 7.63-7.66 (m, 4H), 7.38-7.49 (m, 7H), 6.19 (dd, 7=5.7, 2.0 Hz, 1 H), 5.06-5.10 (m, 1 H), 3.93 (dd, polovina od ABX uzorka, 7=10.9, 4.5 Hz, 1 H), 3.88 (dd, polovina od ABX uzorka, 7=10.8, 5.0 Hz, 1 H), 1.05 (s, 9H). Faza 2. Sinteza (45',55)-5-({[terc-butil(difenil)silil]oksilmetil)-4-metildihidrofuran-2(3H)-ona (C24).

[0141] Bakar(l) bromid-dimetil sulfid kompleks (99%, 3.65 g, 17.6 mmol) se suspenduje u dietil etru (25 mL) i ohladi na 0 °C. Nakon toga se u kapima doda metillitijum (1.6 M rastvor u dietil etru, 22.0 mL, 35.2 mmol) i reaktivna smeša se ohladi na -25 °C. Rastvor C23 (3.10 g, 8.79 mmol) u dietil etru (20 mL) se dodaje takvom brzinom da temperatura reakcije ostane ispod -20 °C. Nakon 30 minuta, reakcija se neutrališe sa zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida (50 mL) i zagreje na sobnu temperaturu. Smeša se ekstrahuje sa dietil etrom i kombinovani organski slojevi se suše preko magnezijum sulfata, filtriraju i koncentruju pod sniženim pritiskom da se dobije produkt kao gusto ulje, koje se koristi u narednoj fazi bez naknadnog prečišćavanja. Prinos: 3.20 g, 8.68 mmol, 99%. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 7.65-7.69 (m, 4H), 7.38-7.48 (m, 6H), 4.09-4.13 (m, 1 H), 3.87 (dd, polovina od ABX uzorka, J=l 1.5, 3.3 Hz, 1 H), 3.73 (dd, polovina od ABX uzorka, J=l 1.5, 3.5 Hz, 1 H), 2.83 (dd, J=17.6, 8.8 Hz, 1 H), 2.53-2.64 (m, 1 H), 2.18 (dd, J=17.4, 7.0 Hz, 1 H), 1.14 (d, J=7.0Hz, 3H), 1.06 (s, 9H). Faza 3. Sinteza(4,S,,5lS)-5-({[etrc-butil(difenil)silil]oksi}metil)-4-metil-2-[4-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-ola (C25).

[0142] Fino usitnjeni cerijum hlorid (95%, 6.98 g, 26.9 mmol) se 2 sata zagreva na 135 °C pod visokim vakukumom i nakon toga ohladi na sobnu temperaturu. U ovaj materijal se doda rastvor C24 (3.20 g, 8.68 mmol) u tetrahidrofuranu (40 mL); dobijena smeša se meša 1 sat i nakon toga ohladi do unutrašnje temperature od -45 °C. Dodaje se [4-(trifluorometil)fenil]magnezijum bromid (0.48 M rastvor u tetrahidrofuranu, 54.3 mL, 26.1 mmol) takvom brzinom da se održi temperatura reakcije ispod -40 °C i mešanje se nastavi 1 sat. Reakcija se neutrališe sa zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida (30 mL) i filtrira kroz Celite. Filtrat se ekstrahuje sa terc-butil metil etrom i kombinovani organski slojevi se isperu sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, suše preko natrijum sulfata, filtriraju i koncentruju podvakuumom.Produkt, dobijen kao ulje, se koristi bez naknadnog prečišćavanja. Prinos: 4.4 g, 8.6 mmol, 99%. Faza 4. Sinteza terc-butil({(25',35,,5i?)-3-metil-5-[4-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-il}metoksi)difenilsilana (C26).

[0143] Jedinjenje C25 (4.4 g, 8.6 mmol) se rastvori u dihlormetanu (50 mL) i ohladi na -78 °C. Doda se trietilsilan (98%, 6.97 mL, 42.8 mmol), a nakon toga se u kapima doda bor trifluorid dietil eterat (98%, 5.50 mL, 42.7 mmol). Nakon 1 sat na -78 °C, reakcija se neutrališe sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata, zagreje na sobnu temperaturu i ekstrahuje saterc-butilmetil etrom. Kombinovani organski slojevi se suše preko magnezijum sulfata, filtriraju, kombinuju sa produktom identične reakcije izvedene sa 2.5 g (4.9 mmol) C25 i koncentruju podvakuumom.Sa dva prečišćavanja hromatografijom na silika gelu [1) gradijent: 0% do 2.5% etil acetat u hepatanu; 2) eluent: 1% etil acetat u hepatanu] dobija se produkt (izomer dobijen drugom eluacijom kolone) kao ulje. Prinos: 1.19 g, 2.39 mmol, 18%. Indikovana relativna stereohemija je ustanovljena na osnovu 'H NMR studija izvedenih na produktu iz naredne faze. Produkti povezanih reakcija (videtiinfra)imaju odgovarajuću stereohemiju. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 7.70-7.75 (m, 4H), 7.51 (s, 4H), 7.36-7.48 (m, 6H), 5.10 (dd, J=7.0, 6.8 Hz, IH), 3.91 (dd, polovina od ABX uzorka, 7=10.9, 4.1 Hz, 1 H), 3.80 (dd, polovina od ABX uzorka,J=10. 9, 4. 3Hz, 1 H), 3.72 (ddd,7=7.1,4.1, 4.0 Hz, 1 H), 2.29-2.41 (m, 1 H), 1.97-2.09 (m, 2H), 1.09 (s, 9H), 1.07 (d, 7=6.8 Hz, 3H). Faza 5. Sinteza {(25',35,5i?)-3-metil-5-[4-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-il}metanola (C27).

[0144]Tetrabutilamonijum fluorid (1.0 M rastvor u tetrahidrofuranu, 2.62 mL, 2.62 mmol) se doda u rastvor C26 (1.19 g, 2.39 mmol) u tetrahidrofuranu (15 mL). Nakon 1 sat na sobnoj temperaturi, doda seferobutilmetil etar i smeša se ispere sa vodom, suši preko natrijum sulfata, filtrira i koncentruje podvakuumom.Hromatografijom na silika gelu (gradijent: 10% do 50% etil acetat u hepatanu) dobija se produkt kao bezbojno ulje. Prinos: 530 mg, 2.04 mmol, 85%. Indikovana relativna stereohemija je podržana NOE studijama na C27 i njegovom aril stereoizomeru, koji je dobijen na isti način iz izomera prve eluacije u prethodnoj fazi. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 7.60 (br d, 7=8.0 Hz, 2H), 7.44-7.49 (m, 2H), 5.09 (dd,7=7.2,7.0 Hz, IH), 3.84-3.91 (m, 1 H), 3.67-3.75 (m, 2H), 2.16-2.27 (m, 1 H), 2.05-2.10 (m, 2H), 1.90 (br s, 1 H), 1.13 (d, J=6.8 Hz, 3H). Faza 6. Sinteza {(25,,35,57^)-3-metil-5-[4-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-il}metil metansulfonata (C28).

[0145]Produkt, dobijen kao ulje, se izrađuje od C27 u skladu sa opštim postupkom za sintezu C8 u Primeru 1. Prinos: 689 mg, 2.04 mmol, 100%. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 7.61 (br d, 7=8.1 Hz, 2H), 7.45-7.49 (m, 2H), 5.13 (br dd, 7=7.1, 6.9 Hz, 1 H), 4.43 (dd, polovina od ABX uzorka,7=11.0,3.4 Hz, IH), 4.37 (dd, polovina od ABX uzorka,7=11.0,5.6 Hz, 1 H), 3.90 (ddd,7=7.2,5.6, 3.3 Hz, IH), 3.07 (s, 3H), 2.18-2.30 (m, 1 H), 2.07-2.12 (m, 2H), 1.17 (d, 7=6.8 Hz, 3H). Faza 7. Sinteza 2-[({(25,,35,5i?)-3-metil-5-[4-(trifiuorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-il}metil)amino]etanola(C29).

[0146]JedinjenjeC28(689 mg, 2.04 mmol) se kombinuje sa 2-aminoetanolom (96%, 2 mL, 30 mmol) i 2 sata zagreva na 85 °C. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, reaktivna smeša se podeli izmeđuterc-butilmetil etra i vode (10 mL). Organski sloj se suši preko natrijum sulfata, filtrira i koncentruje podvakuumomda se dobije produkt kao gusto ulje. Prinos: 618 mg, 2.04 mmol, 100%. LCMSmlz304.2 [M+H<+>]. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 7.59 (br d, 7=8 Hz, 2H), 7.42-7.47 (m, 2H), 5.05 (br dd, 7=6.8, 6.6 Hz, 1 H), 3.69-3.75 (m, 1 H), 3.67 (t, 7=5.3 Hz, 2H), 2.79-2.94 (m, 4H), 2.01-2.12 (m, 3H), 1.11 (d, 7=6.2 Hz, 3H). Faza 8. Sinteza 7-(4-metil-lJr7-imidazol-l-il)-2-({(25,35,5i?)-3-metil-5-[4-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-il} metil)-3,4-dihidro-2//-pirido[ 1,2-a]pirazin-1,6-diona(6).

[0147]U rastvor P2 (514 mg, 2.01 mmol) i C29 (610 mg, 2.01 mmol) u dihlormetanu (20 mL) se dodaju A^A^drizopropiletilamin (1.23 mL, 7.06 mmol) i 0-(7-azabenzotriazol-l-il)-AfA^A^N-tetrametiluronijumheksafluorofosfat (HATU, 99%, 1.78 g, 4.63 mmol). Reaktivna smeša se zagreva 2 sata pod refluksom, nakon toga razblaži sa novom količinom dihlormetana i ispere sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikrbonata, sa vodom i sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida. Organski sloj se suši preko natrijum sulfata, filtrira i koncentruje podvakuumom.Ostatak se prečisti hromatografijom na silika gelu (gradijent: 0% do 5% [~0.7 M rastvor amonijaka u metanolu] u etil acetatu). Beličasta pena dobijena iz kolone se tretira sa etil acetatom; nakon stajanja, formira se precipitat. Precipitat se izdvoji filtriranjem i ispere sa malim količinama etil acetata i terc-butil metil etra da se dobije produkt kao bela čvrsta supstanca. Prinos: 243 mg, 0.499 mmol, 25%. LCMSmlz487.3 [M+H<+>]. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 8.33 (d, 7=1.3 Hz, 1 H), 7.62 (br d, 7=8.1 Hz, 2H), 7.49 (d, 7=7.7 Hz, 1 H), 7.43 (br d, 7=8 Hz, 2H), 7.29 (d, 7=7.7 Hz, 1 H), 7.15-7.17 (m, 1 H), 5.04 (br dd, 7=7, 7 Hz, 1 H), 4.40 (ddd, polovina od ABXY uzorka, 7=14.2, 7.2, 4.2 Hz,

[0148]1 H), 4.30 (ddd, polovina od ABXY uzorka, 7=14.2, 7.7, 4.2 Hz, 1 H), 4.22 (dd, 7=14.0, 2.5 Hz, 1 H), 3.99 (ddd, 7=13.5, 7.9, 4.2 Hz, 1 H), 3.79-3.87 (m, 2H), 3.46 (dd, 7=14.0, 8.0 Hz, 1 H), 2.32 (d, 7=1.0 Hz, 3H), 2.06-2.11 (m, 3H), 1.19-1.22 (m, 3H).

Primer 7 2-({( 2£4fl, 5SV4- Fluoro- 5-( 4-( tri^

imidazol- 1 - il)- 3. 4- dihidro- 2i:f- pirido[ 1, 2- alpirazin- 1. 6- dion ( 7)

[0149]

Faza 1. Sinteza (55)-5-({[terc-butil(difenil)silil]oksi}metil)dihidrofuran-2(3/f)-ona (C30).

[0150](55)-5-(Hidroksimetil)dihidrofuran-2(3i<:>/)-on se konvertuje u produkt u skladu sa opštim postupkom za sintezu C23 u Primeru 6. U ovom slučaju, sirovi produkt se rekristališe iz heksana i dobija se produkt kao bela čvrsta supstanca. Prinos: 10.6 g, 29.9 mmol, 56%. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 7.65-7.69 (m, 4H), 7.38-7.48 (m, 6H), 4.58-4.64 (m, 1 H), 3.89 (dd, polovina od ABX uzorka, 7=11.3, 3.3 Hz, 1 H), 3.70 (dd, polovina od ABX uzorka, 7=11.3, 3.3 Hz, 1 H), 2.69 (ddd, polovinaod ABXY uzorka, 7= i7. 7,10.2, 7.1 Hz, 1 H), 2.52 (ddd, polovina od ABXY uzorka, 7=17.8, 10.0, 6.6 Hz, 1 H), 2.18-2.35 (m, 2H), 1.07 (s, 9H). Faza 2. Sinteza (37^,55)-5-({[terc-butil(difenil)silil]oksi}metil)-3-fluorodihidromran-2(3i/)-ona (C31).

[0151] Rastvor C30 (5.00 g, 14.1 mmol) i A^-fluoro-7V-(fenilsulfonil)benzensulfonamida (4.45 g, 14.1 mmol) u tetrahidrofuranu (50 mL) se ohladi na -78 °C. U kapima se u toku 15 minuta dodaje litijum bis(trimetilsilil)amid (1.0 M rastvor u tetrahidrofuranu, 14.1 mL, 14.1 mmol) i reaktivna smeša se meša 2 sata na -78 °C. Reakcija se neutrališe sa zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida (15 mL), zagreje na sobnu temperaturu i podeli između terc-butil metil etra i zasićenog vodenog rastvora natrijum bikarbonata. Organski sloj se ispere sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata i sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, nakon toga suši preko magnezijum sulfata, filtrira i koncentruje podvakuumom.Nakon prečišćavanja hromatogrfijom na silika gelu (gradijent: 5% do 30% etil acetat u hepatanu), rekristalizacijom iz heksana dobija se produkt kao bela čvrsta supstanca. Prinos: 1.64 g, 4.40 mmol, 31%. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 7.61-7.6 (m, 4H), 7.39-7.50 (m, 6H), 5.50 (ddd, 7=52.7, 8.6, 7.6 Hz, 1 H), 4.69-4.74 (m, 1 H), 3.93 (ddd, 7=11.6, 2.2, 2.2 Hz, IH), 3.62 (dd, 7=11.5, 2.0 Hz, 1 H), 2.71 (dddd, 7=13.6, 9.4, 8.6, 2.4 Hz, 1 H), 2.55 (dddd, 7=27.7, 13.6, 8.8, 7.7 Hz, 1 H), 1.06 (s, 9H). Faza 3. Sinteza (3J?,55)5-({[terc-butil(difenil)silil]oksi}metil)-3-fluoro-2-[4-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-ola (C32).

[0152] Jedinjenje C31 se konvertuje u produkt u skladu sa opštim postupkom za sintezu C25 u Primeru 6. Produkt se dobija kao ulje, koje se direktno prenosi u sledeću fazu. Prinos: 2.20 g, 4.24 mmol, 99%. Faza 4. Sintezaferc-butil({(25',4i?,55)-4-fluoro-5-[4-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-il}metoksi)difenilsilana (C33).

[0153] Produkt se izrađuje od C32 koristeći opšte postupke za sintezu C26 u Primeru 6. U ovom slučaju, prečišćavanje se izvodi hromatografijom na silika gelu (gradijent: 0% do 5% etil acetat u hepatanu). Prinos: 890 mg, 1.77 mmol, 42%. Indikovana relativna stereohemija je potvrđena sa NOE studijama izvršenim na produktu. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 7.69-7.74 (m, 4H), 7.58-7.62 (m, 2H), 7.53 (br d, polovina od ABXY uzorka of br AB kvartet, 7=8 Hz, 2H), 7.37-7.49 (m, 6H), 5.22 (br d, 7=26.6 Hz, 1 H), 4.93-5.11 (m, 1 H), 4.43-4.50 (m, 1 H), 4.10 (dd, 7=11.4, 3.2 Hz, 1 H), 3.84 (dd, 7=11.3, 3.5 Hz, 1 H), 2.08-2.32 (m, 2H), 1.11 (s, 9H).

Faza 5. Sinteza {(25',4i?,55)-4-fluoro-5-[4-(trifluorometil)fenil]tetrahidroruran-2-il}metanola

(C34).

[0154]Produkt, dobijen kao gusto ulje koje polako očvršćava, se izrađuje odC33u skladu sa opštim postupkom za sintezuC27u Primeru 6. Prinos: 392 mg, 1.48 mmol, 84%. Indikovana relativna stereohemija je potvrđena sa NOE studijama izvršenih na ovom primeru. 'H NMR

(400 MHz, CDCb) 8 7.64 (br d, 7=8 Hz, 2H), 7.52 (br d, 7=8 Hz, 2H), 5.19 (br d, 7=26.8 Hz, 1 H), 5.04(dddd, 7=55.0,5.1, 1.8, 1.6 Hz, 1 H), 4.44-4.51 (m, 1 H), 4.03 (dd, 7=12.0, 2.8 Hz, 1 H), 3.77 (dd, 7=12.0, 4.8 Hz, 1 H), 2.00-2.25 (m, 2H), 1.81 (br s, 1 H).

Faza 6. Sinteza {(25,,4i?,55)-4-fluoro-5-[4-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-il}metil metansulfonata (C35).

[0155]Produkt, dobijen kao gusto ulje koje polako očvršćava, se izrađuje odC34koristeći opšte postupke za sintezu C8 u Primeru 1. Prinos: 505 mg, 1.48 mmol, 100%. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 7.65 (br d, 7=8 Hz, 2H), 7.52 (br d, 7=8 Hz, 2H), 5.25 (br d, 7=26.6 Hz, 1 H), 4.98-5.15 (m, 1 H), 4.60-4.67 (m, 1 H), 4.57 (dd, polovina od ABX uzorka, 7=11.3, 2.9 Hz, 1 H), 4.45 (dd, polovina od ABX uzorka, 7=11.3, 4.9 Hz, 1 H), 3.10 (s, 3H), 2.30 (dddd, 7=19.9,14.1, 5.2, 1.2 Hz, 1 H), 2.04 (dddd, 7=36.8, 14.1, 10.7, 5.0 Hz, 1 H). Faza 7. Sinteza 2-[({(25,,4i?,5lS)-4-fluoro-5-[4-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-il}metil)amino]etanola (C36).

[0156]Produkt, dobijen kao ulje, se izrađuje od C35 koristeći opšte postupke za sintezu C29 u Primeru 6. Prinos: 454 mg, 1.48 mmol, 100%. LCMSmlz308.1 [M+H<+>]. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 7.63 (br d, 7=8 Hz, 2H), 7.49 (br d, 7=8 Hz, 2H), 5.16 (br d, 7=27.3 Hz, 1 H), 4.93-5.10 (m, 1 H), 4.44-4.52 (m, 1 H), 3.69 (dd, 7=5.7, 4.9 Hz, 2H), 3.01 (dd, polovina od ABX uzorka, 7=12.5, 3.5 Hz, 1 H), 2.84-2.96 (m, 3H), 2.24 (dddd, 7=21.1, 14.1, 5.0, 1.2 Hz, IH), 1.90 (dddd, 7=37.1, 14.0,10.8, 5.3 Hz, 1 H). Faza 8. Sinteza 2-({(25',4/?,55)-4-fluoro-5-[4-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-il}metil)-7-(4-metil-lif-imidazol-1 -il)-3,4-dihidro-2//-pirido[ 1,2-a]pirazin-1,6-diona (7).

[0157]JedinjenjeC36se konvertuje u produkt u skladu sa opštim postupkom opisanim za

sintezu 6 u Primeru 6. Produkt se dobija kao čvrsta supstanca. Prinos: 50 mg, 0.10 mmol, 7%. LCMSmlz491.3 [M+H<+>]. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 8.39 (br s, 1 H), 7.67 (br d, 7=8 Hz, 2H), 7.51 (d, 7=7.8 Hz, 1 H), 7.48 (br d, 7=8 Hz, 2H), 7.31 (d, 7=7.6 Hz, 1 H), 7.16-7.18 (m, 1 H), 5.17 (br d, 7=27.3 Hz, 1 H), 5.04 (br dd, 7=55, 5 Hz, IH), 4.57-4.65 (m, 1 H), 4.32-4.47

(m, 2H), 4.30 (dd, 7=14.2, 2.7 Hz, 1 H), 4.02 (ddd, 7=13.5, 7.6, 4.1 Hz, 1 H), 3.85 (ddd.

7=13.5, 7.2, 4.1 Hz, IH), 3.53 (dd, 7=14.1, 8.2 Hz, 1 H), 2.33 (d, 7=1.0 Hz, 3H), 2.32-2.43 (m, 1 H), 1.77-1.95 (m, 1 H).

Primer 8

7-(4-Metil-l#-imidazol-l-il)-2-[(lS)-l-{(2^ il}etil]-3,4-dihidro2i7-pirido[l,2-a]pirazin-l,6-dion (8)

[0158]

Faza 1. Sinteza (25,,35)-2-(dibenzilamino)heks-5-in-3-ola (C38).

[0159]«-Butillitijum (2.5 M rastvor u heksanima, 131 mL, 328 mmol) se u kapima, u toku približno 9 minuta, na -70 °C, dodaje u rastvor etinil(trimetil)silana (46.3 mL, 328 mmol) u tetrahidrofuranu (1 L) i reaktivna smeša se meša 30 minuta na -70 °C. Doda se rastvor (15)-A<r>,A<r->dibenzil-l-[(2i?)-oksiran-2-il]etanamina (C37, videti J. Barluenga i saradnici, J. Org. Chem. 1995, 60, 6696-6699) (79.6 g, 298 mmol) u tetrahidrofuranu (250 mL); reaktivna smeša, koja se zagrejala kao rezultat dodavanja, se reohladi na približno -65 °C i doda se bor trifluorid dietil eterat (37.6 mL, 298 mmol). Reaktivna smeša se nakon toga meša 1.5 sat na -70 °C. Doda se zasićeni vodeni rastvor amonijum hlorida (200 mL) i smeša se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu. Organski sloj se ispere sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida i vodeni sloj iz neutralisane reakcije se ekstrahuje sa etil acetatom. Kombinovani organski slojevi se suše preko magnezijum sulfata, filtriraju i koncentruju podvakuumom.Ostatak se rastvori u metanolu (500 mL), tretira sa kalijum karbonatom (206 g, 1.49 mol) i meša 18 sati na sobnoj temperaturi. Nakon filtriranja kroz Celite i ispiranja sa etil acetatom, rastvor sirovog produkta se koncentruje podvakuumom,rastvori u dietil etru (1 L), ispere sa vodom (250 mL) i sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida (75 mL), suši preko magnezijum sulfata, filtrira i koncentruje pod sniženim pritiskom. Nakon zasejavanja sa malom količinom čvrstog produkta, doda se heptan (60 mL) i smeša se energično meša 5 minuta, nakon toga filtrira; izdvojena čvrsta supstanca se ispere sa heptanom (50 mL) da se dobije produkt kao bledo narandžasta čvrsta supstanca. Prinos: 37.3 g, 127 mmol, 43%. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 7.22-7.36 (m, 10H), 4.53 (s, 1 H), 3.84 (d, 7=13.1 Hz, 2H), 3.63 (ddd,7=9.5,5.8, 4.0 Hz, 1 H), 3.34 (d, 7=13.3 Hz, 2H), 2.80 (dq, 7=9.4, 6.6 Hz, 1 H), 2.46 (ddd, polovina od ABXY uzorka, 7=17.0, 4.0, 2.6 Hz, IH), 2.21 (ddd, polovina od ABXY uzorka, 7=17.0, 6.0, 2.6 Hz, IH), 1.86 (dd, 7=2.7, 2.5 Hz, IH), 1.07 (d, 7=6.8 Hz, 3H).

Faza 2. Sinteza (25,35)-2-(dibenzilamino)-6-[4-(trifluorometil)fenil]heks-5-in-3-ola (C39).

[0160]Jedinjenje C38 (25.6 g, 87.2 mmol) se doda u smešu l-bromo-4-(trifluorometil)benzena (12.2 mL, 87.1 mmol), tetrakis(trifenilofsfin)paladijuma(0) (5.04 g, 4.36 mmol) i bakar(l) jodida (997 mg, 5.24 mmol) u trietilaminu (prethodno degasiran sa azotom u disperzionoj kiveti u toku 20 minuta, 250 mL) i reaktivna smeša se meša 1.75 sati na 75 °C. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, reaktivna smeša se filtrira kroz Celite i filter ploča se ispere sa dietil etrom (300 mL). Filtrat se sipa u zasićeni vodeni rastvor amonijum hlorida (250 mL); vodeni sloj se ekstrahuje sa dietil etrom (250 mL) i kombinovani organski slojevi se isperu sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, suše preko magnezijum sulfata, filtriraju i koncentruju podvakuumom.U ostataki se doda heptan (150 mL) i smeša se ponovo koncentruje pod sniženim pritiskom. Ovaj materijal se kombinuje sa odgovarajućim čvrstim supstancama iz slične reakcije izvedene sa C38 (25.0 g, 85.2 mmol) i prečisti hromatografijom na silika gelu (eluent: 25% etil acetat u hepatanu). Izdvojena čvrsta supstanca (~60 g) se rekristališe iz heptana (250 mL) da se dobije produkt kao crvenkasto smeđa čvrsta supstanca. Prinos: 47.2 g, 108 mmol, 63%. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 7.49 (br d, 7=8 Hz, 2H), 7.20-7.33 (m, 12H), 4.55 (br s, 1 H), 3.87 (d, 7=13.1 Hz, 2H), 3.70-3.76 (m, 1 H), 3.36 (d, 7=13.3 Hz, 2H), 2.93 (dq,7=9.4,6.7 Hz, 1 H), 2.76 (dd, polovina od ABX uzorka, 7=17.4, 3.9 Hz, 1 H), 2.48 (dd, polovina od ABX uzorka, 7=17.3, 5.0 Hz, 1 H), 1.12 (d, 7=6.7 Hz, 3H). Faza 3. Sinteza (15)-A^,A^-dibenzil-l-{(25)-5-[4-(trilfuorometil)fenil]-2,3-dihidrofuran-2-il}etanamina (C40).

[0161]Trifluorosirćetna kiselina (18 mL, 230 mmol) i di-^-hlordihlorbis(etilen)diplatinum(II)

(97%, 3.76 g, 6.20 mmol) se dodaju u rastvor C39 (49.4 g, 113 mmol) u dihlormetanu (80 mL). Nakon 1.5 sat na sobnoj temperaturi, reaktivna smeša se sipa u vodeni rastvor natrijum hidroksida (0.5 M, 500 mL) i vodeni sloj se ekstrahuje sa dihlormetanom (250 mL). Kombinovani organski slojevi se suše preko natrijum sulfata, filtriraju i koncentruju podvakuumom.Ostatak se kombinuje sa sirovim produktom iz slične reakcije izvedene sa C39 (10.0 g, 22.9 mmol) i brzo prečisti na kratkoj koloni hromatografijom na silika gelu (eluent: 2% etil acetat u hepatanu), da se dobije produkt kao svetlo-žuta narandžasta čvrsta supstanca. Prinos: 46.5 g, 106 mmol, 78%. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 7.65 (br AB kvartet, 7ab=8.2 Hz, Avab=40.1 Hz, 4H), 7.40 (br d, 7=8 Hz, 4H), 7.23-7.28 (m, 4H), 7.16-7.22 (m, 2H), 5.46 (dd, 7=2.9, 2.7 Hz, 1 H), 4.80 (ddd, 7=9.8, 9.6, 7.2 Hz, 1 H), 3.95 (d, 7=13.8 Hz, 2H), 3.63 (d, 7=13.8 Hz, 2H), 2.96-3.04 (m, 1 H), 2.73 (br dd, 7=9.8, 2.5 Hz, 2H), 1.18 (d,7=6.8Hz, 3H). Faza 4. Sinteza (15)-l-{(25,5^)-5-[4-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-il}etanamina (C41).

[0162]Paladijum hidroksid na ugljeniku (~50% vode, 10 mt% paladijum, 7.1 g, 5 mmol) se doda u suspenziju C40 (22.0 g, 50.3 mmol) i amonijum formata (80.2 g, 1.27 mol) u metanolu (500 mL) i reaktivna smeša se meša 2.5 sata na sobnoj temperaturi, nakon toga kombinuje sa sličnim reakcijama izvršenim saC41(24.5 g, 56.0 mmol) i filtrira kroz Celite uz isperanje sa metanolom (1 L). Filtrat se koncentruje podvakuumomi tretira sa vodenim rastvorom natrijum hidroksida (0.2 M, približno 800 mL), održavajući pH na približno 9. Ovaj fdtrat se ekstrahuje tri puta sa etil acetatom (0.5 L, 1 L i 0.5 L) i kombinovani organski slojevi se isperu sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, suše preko magnezijum sulfata i koncentruju pod sniženim pritiskom da se dobije produkt kao svetio žuto ulje. Izvrši se hidrogenacija da bi došlo do manje ometanja; ustanovljena stereohemija je takođe potvrđena sa IC50koja je dobijena za finalni produkt 8, što ukazuje da tetrahidrofuran ostatak nosi supstituente ucisorijentaciji (videti Tabelu 1). Prinos: 26.3 g, 101 mmol, 95%. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 7.53 (br AB kvartet, 7ab=8 Hz, Avab=50 Hz, 4H), 4.96 (dd,7=7.4,7.0 Hz, IH), 3.70-3.77 (m, 1 H), 2.93-3.01 (m, 1 H), 2.33-2.43 (m, 1 H), 2.00-2.10 (m, 1 H), 1.66-1.85 (m, 2H), 1.12 (d,7=6.4Hz, 3H). Faza 5. Sinteza l-(2-hidroksietil)-5-(4-metil-lJr7-imidazol-l-il)-6-okso-A^-[(15)-l-{(2S,5J?)-5-[4-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-il}etil]-1,6-dihidropiridin-2-karboksamida (C42).

[0163]Bis(trimetilaluminijum)-l,4-diazabiciklo[2.2.2]oktan adukt (97%, 27.8 g, 105 mmol) se doda u rastvorC41(21.0 g, 81.0 mmol) u tetrahidrofuranu (800 mL) i smeša se zagreva 45 minuta na 40 °C. Doda se jedinjenje P3 (28 g, 110 mmol) i reaktivna smeša se zagreva 2 sata pod refluksom, nakon toga ohladi u ledenom kupatilu do približno 5 °C. Uz energično mešanje, polako se u kapima dodaje razblažena hlorovodonična kiselina (1 N, 75 mL)

{ Pažnja: izdvajanje gasa ne počinje odmah!},dovodeći pH do 7-8. Doda se vodeni rastvor natrijum hidroksida (1 M, 75 mL) i smeša se filtrira kroz Celite uz isperanje sa etil acetatom (3 x 500 mL). Organski sloj iz filtrata se ispere sa vodenim rastvorom natrijum hidroksida (1 M, 150 mL), sa vodom (250 mL) i sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida (100 mL), nakon toga suši preko magnezijum sulfata, filtrira i koncentruje podvakuumom.Dobijena bleda čvrsta supstanca se suši pod vakuumom na 50 °C, nakon toga ohladi, meša 20 minuta sa dietil etrom (300 mL) i filtrira da se dobije produkt kao čvrsta supstanca krem boje koja i dalje sadrži približno 13% dietil etra težinski, što se odredi 'H NMR analizom. Korigovani prinos: 31.0 g, 61.4 mmol, 76%. Ovaj materijal se koristi u narednoj fazi. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 8.19 (br d, 7=8.8 Hz, 1 H), 7.99 (d, 7=1.2 Hz, IH), 7.58 (br AB kvartet, 7ab=8.2 Hz, Avab=28.5 Hz, 4H), 7.17 (d, 7=7.6 Hz, IH), 6.98-7.00 (m, 1 H), 6.34 (d, 7=7.6 Hz, 1 H), 5.00 (dd, 7=7.4, 6.6 Hz, 1 H), 4.34-4.41 (m, 1 H), 4.28-4.33 (m, 2H), 4.06-4.14 (m, 1 H), 3.96-4.03 (m, 1 H), 3.71-3.78 (m, 1 H), 2.38-2.47 (m, 1 H), 2.15-2.23 (m, 1 H), 2.12 (d, 7=1.0 Hz, 3H), 1.80-1.95 (m, 2H), 1.35 (d, 7=6.6 Hz, 3H).

Faza 6. Sinteza 7-(4-metil-l/f-imidazol-l-il)-2-[(15)-1-{(25,5/?)-5-[4-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-il}etil]-3,4-dihidro-2if-pirido[l,2-a]pirazin-l,6-diona (8).

[0164]JedinjenjeC42(iz prethodne faze; korigovana težina: 30.9 g, 61.2 mmol) i trietilamin (16 mL, 110 mmol) se kombinuju u tetrahidrofuranu (1 L) i ohlade u ledenom kupatilu. U kapima se u toku 3 do 5 minuta dodaje metansulfonil hlorid (98%, 8.5 mL, 110 mmol), nakon čega se kupatilo za hlađenje ukloni. Reaktivna smeša se meša 40 minuta na sobnoj temperaturi, nakon toga ponovo ohladi u ledenom kupatilu, tretira sa 1,3,4,6,7,8-heksahidro-2//-pirimido[l,2-a]pirimidinom (97%, 30.2 g, 210 mmol) i meša 2.5 sata. U hladnu reaktivnu smešu se doda etil acetat (500 mL), koja se nakon toga ispere sa vodom (2 x 500 mL). Vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (500 mL) i kombinovani organski slojevi se isperu sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida (250 mL), suše preko magnezijum sulfata, filtriraju i koncentruju podvakuumom.Hromatografijom na silika gelu (eluenti: etil acetat, nakon toga 5% metanol u etil acetatu) dobijaju se frakcije koje sadrže produkt; produkt se koncentruje do zapremine od približno 500 mL i dobijena suspenzija se meša 18 sati u atmosferi azota. Nakon hlađenja na 7 °C, suspenzija se filtrira da se dobije bela čvrsta supstanca (22 g). Filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom i dobijena čvrsta supstanca se suspenduje sa dietil etrom (70 mL) i izdvoji filtriranjem; ovaj materijal se rekristališe iz etil acetata (60 mL), ohladi na ledu, filtrira i ispere sa ledeno hladnim etil acetatom da se dobije čvrsta supstanca krem boje (5.5 g). Dva lota se kombinuju i rekristališu iz etil acetata (330 mL) da se dobije produkt kao bela čvrsta supstanca. Prinos: 24.3 g, 49.9 mmol, 82%. LCMSmlz487.3 [M+H<+>]. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 5 8.25 (d, 7=1.2 Hz, 1 H), 7.58 (br d,J=%Hz, 2H), 7.47 (d, 7=7.6 Hz, IH), 7.42 (brd, 7=8 Hz, 2H), 7.30 (d, 7=7.6 Hz, IH), 7.12-7.14 (m, 1 H), 4.92 (dd, 7=7.4, 6.8 Hz, 1 H), 4.82-4.90 (m, 1 H), 4.26-4.39 (m, 2H), 4.09-4.16 (m, 1 H), 3.79 (ddd, polovina od ABXY uzorka, 7=13.3, 7.3, 4.3 Hz, 1 H), 3.67 (ddd, polovina od ABXY uzorka, 7=13.3, 7.2, 4.3 Hz, 1 H), 2.37-2.45 (m, 1 H), 2.30 (d, 7=1.0 Hz, 3H), 2.15-2.24 (m, 1 H), 1.77-1.91 (m, 2H), 1.33 (d, 7=7.0 Hz, 3H).

Primer 9

2- r( 16Vl-{( 2£5fl)- 5- r4- hloro- 2-( trifluoro^^

imidazol- 1 - il)- 3, 4- dmidro- 2#- pirido[ 1, 2- alpirazin- 1, 6- dion ( 9)

[0165]

Faza 1.Sinteza etrc-butil[(25)-4-hloro-3-oksobutan-2-il]karbamata (C43).

[0166]Rastvor hlorsirćetne kiseline (23.2 g, 246 mmol) u tetrahidrofuranu (100 mL) se u toku 35 minuta, na -78 °C, dodaje u rastvor litijum diizopropilamida u tetrahidrofuranu (2.05 M, 240 mL, 492 mmol), brzinom da se unutrašnja temperatura održava ispod -65 °C. Nakon 30 minuta, reaktivna smeša se brzo prenese u levak za dodavanje obložen suvim ledom i u toku 5 minuta dodaje u rastvor metil ^-(ferc-butoksikarboni^-L-alaninata (10.0 g, 49.2 mmol) u tetrahidrofuranu (120 mL). Za ovu reakciju se koristi mehaničko mešanje. Smeša se meša 30 minuta, za koje vreme se reaktivna smeša zagreje na 0 °C. Smeša se ohladi na -78 °C i 10 minuta tretira sa rastvorom sirćetne kiseline (41 mL, 720 mmol) u tetrahidrofuranu (41 mL). Tada se boca uroni u ledeno kupatilo i mešanje se nastavi još 1.5 sat, za koje vreme se reakcija zagreje na 5 °C. Doda se voda (250 mL), a nakon toga dietil etar (400 mL); organski sloj se ispere sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (150 mL) i sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida (50 mL), suši preko magnezijum sulfata, filtrira i koncentruje podvakuumomda se dobije produkt kao voštana, svetio žuta čvrsta supstanca. Prinos: 9.47 g, 42.7 mmol, 87%. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 5.11 (br d, J=6 Hz, 1 H), 4.48-4.58 (m, 1 H), 4.28 (AB kvartet, Jab=15.9 Hz, Avab=8.3 Hz, 2H), 1.44 (s, 9H), 1.38 (d, J=7.1 Hz, 3H).

Faza 2. Sinteza terc-butil [(2S,3R)-4-hloro-3-hidroksibutan-2-il]karbamata (C44).

[0167]Rastvor C43 (16.0 g, 72.2 mmol) u dietil etru (100 mL) se doda u smešu litijum tri-terc-butoksialuminijum hidrida (97%, 28.4 g, 108 mmol) u dietil etru (500 mL). Nakon 3 sata na sobnoj temperaturi, reaktivna smeša se ohladi na 0 °C, neutrališe sa razblaženom hlorovodoničnom kiselinom (1 M, 150 mL) i ekstrahuje sa terobutil metil etrom. Kombinovani organski slojevi se suše preko natrijum sulfata, filtriraju i koncentruju podvakuumomda se dobije gusto ulje, koje se meša sa metilcikloheksanom (45 mL). Dobijena čvrsta supstanca se izdvoji filtriranjem i ispere sa metilcikloheksanom da se dobije produkt (3.1 g). Filtrat se koncentruje, izmeša sa pentanom (25 mL), zagreva pod refluksom, ohladi uz mešanje i zaseje sa čvrstim produktom. Dobijeni materijal se filtrira i ispere sa pentanom da se dobije produkt kao čvrsta supstanca (8.1 g). Ukupan prinos: 11.2 g, 50.1 mmol, 69%. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 4.76 (br s, 1 H), 3.77-3.87 (m, 1 H), 3.69-3.76 (m, 1 H), 3.65 (dd, polovina od ABX uzorka,J=11.3,3.9 Hz, 1 H), 3.53 (dd, polovina od ABX uzorka,J=l 1.3,8.0 Hz, 1 H), 2.95 (br s, 1 H), 1.45 (s, 9H), 1.27 (d, J=6.8 Hz, 3H). Alternativna Faza 2. Sinteza/erc-butil[(25',3i?)-4-hloro-3-hidroksibutan-2-il]karbamata (C44).

[0168]2.0 mM 0.1 M pufera kalijum fosfata u magnezijum hloridu se izrađuje kombinovanjem kalijum dihidrogenfosfata (9.86 g, 72.4 mmol), kalijum hidrogenfosfata (22.2 g, 127 mmol) i magnezijum hlorid heksahidrata (0.812 g, 4.0 mmol) u vodi (2 L); pH dobijenog rastvora je 7.05. U ovaj fosfatni pufer (1.8 L) se dodaju nikotinamid adenin dinukleotid fosfat, dinatrijumova so trihidrat (1.9 g, 2.4 mmol) i enzim ketoreduktaze

(Codeksis, KRED-P1-E05) (8 g) i smeša se meša 45 minuta na 22 °C da se rastvore ketoreduktaze. Doda se rastvorterc-butil[(25)-4-hloro-3-oksobutan-2-il]karbamata (C43)

(50.0 g, 226 mmol) u 2-propanolu (200 mL) i dobijena suspenzija se meša 46 sati na 30 °C, uz protok azota (10 mL/minut) uvođenjem kapi koje sadrže 2-propanol i vodu (1:1, 300 mL). Tada se u reaktivnu smešu dodaterc-butilmetil etar (1 L), koja se meša 20 minuta. Dobijena emulzija se filtrira kroz diatomejsku zemlju (200 g) i filter pogača se polomi i ispere saterc-butil metil etrom (3 x 400 mL). Kombinovani organski slojevi iz filtrata se suše sa natrijum sulfatom (625 g), filtriraju i koncentruju podvakuumomda se dobije sirovi produkt kao crveno ulje (50 g). Ovaj materijal se meša sa etil acetatom (80 mL) i tretira sa obezbojenim ugljenikom (5 g) u toku 10 minuta uz blago zagrevanje. Nakon filtriranja kroz Celite, rastvor se koncentruje podvakuumomi izmeša sa toplim heksanima (40 mL), uz mešanje. Nakon 18 sati, dobijena čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem i ispere sa pentanom da se dobije produkt kao beli prašak (14.14 g). Osnovni rastvor se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije ulje (32 g), koje kristališe na isti način koristeći tople heksane (30 mL) da se dobije dodatna količna produkta kao beli prašak (13.65 g). Ukupan prinos: 27.79 g, 124 mmol, 55%. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 4.77 (br s, IH), 3.77-3.87 (m, 1 H), 3.69-3.76 (m, 1 H), 3.65 (dd, polovina od ABX uzorka, J=l 1.1, 3.9 Hz, 1 H), 3.53 (dd, polovina od ABX uzorka, J=l 1.3, 8.0 Hz, 1 H), 3.00 (br s, 1 H), 1.45 (s, 9H), 1.26 (d, J=6.8 Hz, 3H).

Faza 3. Sinteza (2J?,35)-3-[(terc-butoksikarbonil)amino]-l-hlorbutan-2-il 4-nitrobenzoata (C45).

[0169]RastvorC44(15 g, 67 mmol) u dihlormetanu (400 mL) se ohladi na 0 °C i tretira sa trietilaminom (11.7 mL, 83.9 mmol) i 4-(dimetilamino)piridinom (99%, 827 mg, 6.70 mmol). Nakon toga se doda rastvor 4-nitrobenzoil hlorida (15.6 g, 84.1 mmol) u dihlormetanu (100 mL) i reaktivna smeša se ostavi da se polako zagreje na sobnu temperaturu u toku 18 sati. Doda se dihlormetan (500 mL) i rastvor se ispere sa razblaženom hlorovodoničnom kiselinom (1 M, 250 mL), suši preko natrijum sulfata, filtrira i koncentruje podvakuumom.Prečišćavanjem hromatografijom na silika gelu (gradijent: 0% do 3% etil acetat u dihlormetanu) dobija se produkt kao bledo žuta čvrsta supstanca. Prinos: 23 g, 62 mmol, 92%.

'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 8.24-8.34 (m, 4H), 5.28-5.33 (m, 1 H), 4.55 (br d,J=9Hz, 1 H), 4.19-4.30 (br m, 1 H), 3.71-3.87 (m, 2H), 1.38 (br s, 9H), 1.25 (d, J=6.8 Hz, 3H).

Faza 4. Sintezaterc-butil{(15)-l-[(2#)-oksiran-2-il]etil}karbamata (C46).

[0170]Vodeni rastvor kalijum hidroksida (23.9 g 85% čistoće, 362 mmol, u 160 mL vode) se u kapima na 0 °C doda u rastvorC45(27 g, 72 mmol) u etanolu (1 L) i reaktivna smeša se meša 1 sat na 0 °C. U tom trenutku se smeša razblaži sa vodom (1 L) i ekstrahuje sa terc-butil metil etrom (2 x 500 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa vodenim rastvorom natrijum hidroksida (1 M, 2 x 250 mL), suše preko natrijum sulfata, filtriraju i koncentruju podvakuumom.Hromatografijom na silika gelu (gradijent: 5% do 30% etil acetat u hepatanu) dobija se produkt kao bezbojno ulje. Prinos: 11.9 g, 63.6 mmol, 88%. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 4.41 (br s, 1 H), 3.93-4.06 (br m, 1 H), 2.99 (ddd,J=3.9, 2.5,2.5 Hz, 1 H), 2.74 (dd,J=4. 7, 4.0Hz, 1 H), 2.61 (br dd, J=4.7, 2.7 Hz, 1 H), 1.44 (s, 9H), 1.27 (d,J=6. 9Hz, 3H). Faza 5. Sintezaterc-butil[(25',35)-3-hidroksi-6-(trimetilsilil)heks-5-in-2-il]karbamata (C47).

[0171]77-Butillitijum (2.5 M rastvor u heksanima, 39.7 mL, 99 mmol) se u kapima, na -20 °C, doda u rastvor etinil(trimetil)silana (15 mL, 110 mmol) u toluenu (100 mL), takvom brzinom da se temperatura reakcije održi ispod -15 °C. Reaktivna smeša se meša 15 minuta na ovoj temperaturi. Doda se dimetilaluminijum hlorid (97%, 1.0 M rastvor u heksanima, 96 mL, 96 mmol) i reaktivna boca se 1 sat uroni u ledeno kupatilo, nakon toga zagreva na sobnoj temperaturi u toku 30 minuta. Nakon hlađenja reaktivne smeše na 0 °C, doda se rastvor C46 (6.2 g, 33 mmol) u toluenu (50 mL) i mešanje se nastavi 1 sat na 0 °C, za koje vreme se reaktivna smeša zagreva 1 sat na sobnoj temperaturi a nakon toga ohladi na 0 °C. Doda se smeša zasićenog vodenog rastvora limunske kiseline (100 mL) i vode (100 mL) i ledeno kupatilo se ukloni. Doda seterobutilmetil etar (500 mL) i smeša se meša 15 minuta; organski sloj se nakon toga ispere sa vodom (100 mL), suši preko natrijum sulfata, filtrira i koncentruje podvakuumom,da se dobije produkt kao gusto ulje. Prinos: 7.2 g, 25 mmol, 76%. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 4.79 (br s, 1 H), 3.64-3.74 (m, 2H), 2.48 (dd, polovina od ABX uzorka, J=16.9, 7.4 Hz, 1 H), 2.43 (dd, polovina od ABX uzorka, J=16.9, 5.3 Hz, 1 H), 2.36 (br s, 1 H), 1.45 (s, 9H), 1.24 (d, J=6.6 Hz, 3H), 0.17 (s, 9H).

Faza 6. Sintezaterc-butil[(2S,3S)-3-hidroksiheks-5-in-2-il]karbamata (C48).

[0172]Kalijum karbonat (6.97 g, 50.4 mmol) se doda u rastvor C47 (7.2 g, 25 mmol) u metanolu (50 mL). Nakon mešanja 1.5 sat na sobnoj temperaturi, reaktivna smeša se podeli između vode (50 mL) i terc-butil metil etra (400 mL). Vodeni sloj se ekstrahuje sa /erc-butil metil etrom (100 mL); kombinovani organski slojevi se suše preko natrijum sulfata, filtriraju i koncentruju podvakuumomda se dobije produkt kao gusto ulje. Prinos: 5.0 g, 23 mmol, 92%.

'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 4.76 (br s, 1 H), 3.67-3.80 (m, 2H), 2.74 (br s, 1 H), 2.41-2.44 (m, 2H), 2.06 (dd, J=2.7, 2.6 Hz, 1 H), 1.45 (s, 9H), 1.23 (d, J=6.8 Hz, 3H).

Faza 7. Sinteza terc-butil {(25,,35)-6-[4-hloro-2-(trifluorometil)fenil]-3-hidroksiheks-5-in-2-iljkarbamata (C49).

[0173]Jedinjenje C48 reaguje sa 4-hloro-l-jod-2-(trifluorometil)benzenom koristeći opšte postupke opisane za sintezu C39 u Primeru 8, izuzev što seterc-butilmetil etar koristi umesto dietil etra i u ovom slučaju ne dolazi do kristalizacije. Produkt se dobija kao gusto ulje. Prinos: 19.2 g, 49.0 mmol, 100%. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 7.63 (br d, J=2.0 Hz, 1 H), 7.44-7.52 (m, 2H), 4.80 (br s, 1 H), 3.73-3.84 (m, 2H), 2.63-2.75 (m, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.27 (br d, J=6.6 Hz, 3H). Faza 8.Sinteza etrc-butil[(15)-l-{(25)-5-[4-hloro-2-(trifluorameitl)fenil]-5-metoksitetrahidrofuran-2-il} etiljkarbamata (C50).

[0174]/»-Toluensulfonska kiselina monohidrat (96%, 1.55 g, 7.82 mmol) i di-u-hlordihlorbis(etilen)diplatinum(II) (97%, 545 mg, 0.900 mmol) se dodaju u rastvor C49 (33 g, 84 mmol) i trimetil ortoformata (40 mL, 360 mmol) u metanolu (400 mL) i reaktivna smeša se meša 3 sata na sobnoj temperaturi. Uvede se nova količina di-u-hlordihlorbis(etilen)diplatinum(II) (97%, 500 mg, 0.82 mmol) i mešanje se nastavi 3 sata. Reaktivna smeša se sipa u zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata (400 mL) i ekstrahuje sa terc- butil metil etrom; kombinovani organski slojevi se suše preko magnezijum sulfata, filtriraju i koncentruju podvakuumomda se dobije produkt kao gusto ulje, koje se direktno koristi u narednoj reakciji. Faza 9. Sintezaterc-butil[(15)-l-{(25',5i?)-5-[4-hloro-2-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-il} etiljkarbamata (C51).

[0175] Jedinjenje C50 iz prethodne faze se konvertuje u produkt koristeći opšti postupak za sintezu C26 u Primeru 6. U ovom slučaju, neutralisana reakcija se ekstrahuje sa dihlormetanom; kombinovani organski slojevi se suše preko magnezijum sulfata, filtriraju i koncentruju podvakuumom.Hromatografijom na silika gelu (gradijent: 0% do 10% etil acetat u hepatanu) dobija se čvrsta supstanca (41.8 g), koja se rastvori u metanolu (50 mL) i tretira sa vodom (~7 mL) dok rastvor ne postane mutan. Nakon 2 sata mešanja, smeša se filtrira i izdvojena čvrsta supstanca se ispere sa 3:7 smešom metanola i vode, da se dobije produkt kao čvrsta supstanca (6.9 g). Filtrat se koncentruje dok se ne formira precipitat; precipitat se izdvoji filtriranjem da se dobije 15 g čvrste supstance koja se tretira na isti način da se dobije dodatni produkt kao čvrsta supstanca (9.5 g). Ukupan prinos u toku 2 faze: 16.4 g, 41.6 mmol, 50%. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 7.77 (br d, J=8.4 Hz, 1 H), 7.61 (br d, J=2.2 Hz, 1 H), 7.53 (br dd, J=8.6, 2.2 Hz, IH), 5.13 (br dd,J=S,7 Hz, IH), 4.67 (br s, IH), 3.84-3.94 (m, 2H), 2.32-2.42 (m, 1 H), 2.01-2.11 (m, 1 H), 1.78-1.89 (m, 1 H), 1.58-1.68 (m, 1 H), 1.47 (s, 9H), 1.26 (d, J=6.5Hz, 3H). Faza 10. Sinteza (15)-l-{(25,,5i?)-5-[4-hloro-2-(trilfuorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-il}etanamina (C52).

[0176] Trifluorosirćetna kiselina (25 mL, 340 mmol) se doda u rastvor C51 (16.4 g, 41.6 mmol) u dihlormetanu (250 mL). Reaktivna smeša se meša 18 sati na sobnoj temperature, a nakon toga sipa u vodeni rastvor natrijum hidroksida (1 M, 350 mL). Doda se nova količina dihlormetana (500 mL) i vodeni sloj se ekstrahuje sa dihlormetanom (2 x 200 mL). Kombinovani organski slojevi se suše preko natrijum sulfata, filtriraju i koncentruju podvakuumomda se dobije produkt kao smeđe ulje. Prinos: 12 g, 41 mmol, 98%. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 7.73 (brd, J=8.4 Hz, IH), 7.60 (brd,J=22Hz, IH), 7.50-7.54 (m, 1 H), 5.17-5.23 (m, 1 H), 3.67-3.74 (m, 1 H), 3.01-3.09 (m, 1 H), 2.35-2.46 (m, 1 H), 1.98-2.09 (m, 1 H), 1.59-1.74 (m, 2H), 1.14 (d, .7=6.5 Hz, 3H). Faza 11. Sinteza Af-[(l.S)-l-{(21S,,57?)-5-[4-hloro-2-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-il} etil] -1 -(2-hidroksietil)-5-(4-metil- 1/f-imidazol-1 -il)-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karboksamida (C53).

[0177] Jedinjenje C52 se konvertuje u produkt koristeći opšti postupak za sintezu C42 u Primeru 8, izuzev što se C53 ne meša sa dietil etrom. Produkt se dobija kao beličasta čvrsta supstanca. Prinos: 21 g, 39 mmol, 95%. LCMSmlz539.3 [M+H<+>]. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 8.12 (br d,J=9Hz, 1 H), 8.00-8.02 (m, 1 H), 7.89 (br d, .7=8.5 Hz, 1 H), 7.62 (d,.7=2.2Hz, 1 H), 7.56 (br dd, .7=8.5, 2 Hz, 1 H), 7.22 (d, J=7.5 Hz, 1 H), 7.00-7.02 (m, 1 H), 6.39 (d, .7=7.6 Hz, 1 H), 5.22 (br dd, .7=8, 7 Hz, 1 H), 4.36-4.46 (m, 1 H), 4.27-4.31 (m, 2H), 3.93-4.07 (m, 2H), 3.72-3.78 (m, 1 H), 2.40-2.49 (m, 1 H), 2.16-2.26 (m, 1 H), 2.14 (d, J=0.9 Hz, 3H), 1.7-1.9 (m, 2H), 1.36 (d, .7=6.7 Hz, 3H). Faza 12. Sinteza 2-[(15)-1-{(25',5/?)-5-[4-hloro-2-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-il}etil]-7-(4-metil-lTf-imidazol-1 -il)-3,4-dihidro-27/-pirido[ 1,2-a]pirazin-1,6-diona (9).

[0178] Jedinjenje C53 se konvertuje u produkt koristeći opšte postupke opisane za sintezu 8 u Primeru 8, izuzev za prečišćavanje. U ovom slučaju, nakon hromatogrfije na silika gelu (gradijent: 0% do 5% metanol u dihlormetanu), materijal iz hromatografije se rekristališe iz etil acetata da se dobije produkt. Filtrat iz rekristalizacije se koncentruje, triturira sa dietil etrom i rekristališe iz etil acetata da se dobije dodatni produkt. Ova dva lota se kombinuju (25 g), suspenduju uferc-butilmetil etru (50 mL) i zagrevaju 15 minuta na 50 °C. Hlađenjem i izdvajanjem filtriranjem dobija se produkt kao beličasta čvrsta supstanca. Prinos: 24.7 g, 47.4 mmol, 72%. LCMSmlz521.3 [M+H<+>]. 'HNMR (400 MHz, CDCb) 8 8.30 (br s, 1 H), 7.70 (br d, J=8.4 Hz, 1 H), 7.57 (br d,J=22Hz, 1 H), 7.52 (dd, J=8.3, 2.1 Hz, 1 H), 7.48 (d, J=7.8 Hz, 1 H), 7.30 (d, J=7.8 Hz, IH), 7.12-7.14 (m, 1 H), 5.14-5.20 (m, 1 H), 4.93 (dq, J=9.4, 6.8 Hz, 1 H), 4.43 (ddd, polovina od ABXY uzorka, J=14.1, 7.0, 3.9 Hz, 1 H), 4.26 (ddd, polovina od ABXY uzorka, J=14.1, 8.0, 4.1 Hz, 1 H), 4.06 (ddd, J=9.3, 7.1, 6.6 Hz, 1 H), 3.74 (ddd, polovina od ABXY uzorka, J=13.4, 8.0, 4.0 Hz, 1 H), 3.66 (ddd, polovina od ABX uzorka, J=13.4, 7.1, 4.1 Hz, 1 H), 2.38-2.48 (m, 1 H), 2.31 (d, J=1.0 Hz, 3H), 2.17-2.27 (m, 1 H), 1.70-1.88 (m, 2H), 1.31 (d, J=6.8 Hz, 3H).

Primer 10

2- r( l^- l-{( 2^, 5^)- 5- r3, 5- Difluoro- 4-( trifluorometil) fenilltetrahidrofuran- 2- il} etill- 7-( 4-

metil- li/- imidazol- l- il) 3, 4- dihidro- 2/ y- pirido[ l, 2- alpirazin- l, 6- dion( 10)

[0179] Faza 1. Sinteza (25,,35)-2-(dibenzilamino)-6-[3,5-difluoro-4-(trifluorometil)fenil]heks-5-in-3-ola(C54).

[0180]Jedinjenje C38 se konvertuje u produkt reakcijom sa 5-bromo-l,3-difluoro-2-(trifluorometil)benzenom, koristeći postupak opisan za sintezu C49 u Primeru 9. Produkt se dobija kao čvrsta supstanca. Prinos: 3.10 g, 6.55 mmol, 96%. LCMSmlz474. 2 [M+H<+>]. 'H NMR (400 MHz, CDC13) 8 7.22-7.35 (m, 10H), 6.74 (d, .7=10.2 Hz, 2H), 4.56 (s, 1 H), 3.86 (d, J=13.3 Hz, 2H), 3.68-3.76 (m, 1 H), 3.34 (d, .7=13.3 Hz, 2H), 2.85-2.96 (m, 1 H), 2.79 (dd, .7=17.4, 3.7 Hz, 1 H), 2.47 (dd, .7=17.4, 4.3 Hz, 1 H), 1.11 (d, .7=6.6 Hz, 3H). Faza 2. Sinteza (15)-A^,A<r->dibenzil-l-{(21S)-5-[3,5-difluoro-4-(trifluorometil)fenil]-2,3-dihidrofuran-2-il} etanamina (C55).

[0181] Jedinjenje C54 se konvertuje u produkt koristeći opšte postupke opisane za sintezu C40 u Primeru 8. U ovom slučaju, reakcija se neutrališe sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata umesto sa vodenim rastvorom natrijum hidroksida. Produkt se izdvoji kao gusto ulje. Prinos: 1.96 g, 4.14 mmol, 78%. LCMSmlz474.2 [M+H<+>]. 'HNMR (400 MHz, CDCb) 8 7.38 (br d, polovina od AB kvarteta, .7=7.4 Hz, 4H), 7.25-7.30 (m, 4H), 7.15-7.23 (m, 4H), 5.50-5.53 (m, 1 H), 4.78 (ddd, J=9.8, 9.8, 7.0 Hz, 1 H), 3.91 (d, .7=14.0 Hz, 2H), 3.58 (d, .7=13.7 Hz, 2H), 2.92-3.01 (m, 1 H), 2.68-2.83 (m, 2H), 1.19 (d,J=7.0 Hz, 3H). Faza 3. Sinteza (15)-l-{(2S,57^)-5-[3,5-difluoro-4-(trifluorometil)fenil]tetrahidroruran-2-il} etanamina (C56).

[0182] Produkt se izrađuje od C55 u skladu sa opštim postupkom za sintezu C41 u Primeru 8, izuzev što seferc-butil metil etar koristi u izradi umesto etil acetata. Produkt se dobija kao ulje. Prinos: 629 mg, 2.10 mmol, 90%. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 7.00 (d, J=10.2 Hz, 2H), 4.91 (dd, J=7.2, 6.8 Hz, 1 H), 3.70-3.77 (m, 1 H), 2.93-3.01 (m, 1 H), 2.34-2.44 (m, 1 H), 1.99-2.09 (m, 1 H), 1.73-1.87 (m, 3H), 1.61-1.71 (m, 1 H), 1.11 (d, .7=6.6 Hz, 3H). Faza 4.Sinteza N-[( 15)-1 - {(25,,57^)-5-[3,5-difluoro-4-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-il} etil] -1 -(2-hidroksietil)-5-(4-metil- 17f-imidazol-1 -il)-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karboksamida (C57). [01831 Za konverziju C56 u produkt koristi se opšti postupak opisan za sintezu C42 u Primeru 8. U ovom slučaju, ohlađena reaktivna smeša se neutrališe sa vodenim rastvorom natrijum hidroksida (1 M, 25 mL), a nakon toga ekstrahuje tri puta sa etil acetatom. Kombinovani organski slojevi se suše preko natrijum sulfata, filtriraju i koncentruju podvakuumom.Ostatak se triturira saterc-butilmetil etrom da se dobije produkt kao bela čvrsta supstanca. Prinos: 730 mg, 1.35 mmol, 65%. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 8.61 (br d,J=9Hz, 1 H), 7.96 (br s, 1 H), 7.17 (d, J=7.6 Hz, 1 H), 7.11 (br d, .7=10.3 Hz, 2H), 6.98-7.00 (m, 1 H), 6.41 (d, 7=7.4 Hz, 1 H), 4.95 (dd,7=7.2,6.6 Hz, 1 H), 4.30-4.46 (m, 3H), 4.07-4.18 (m, 2H), 3.94-4.02 (m, 1 H), 2.41-2.50 (m, 1 H), 2.12-2.22 (m, 1 H), 2.08 (br s, 3H), 1.74-1.93 (m, 2H), 1.35 (d, 7=6.6 Hz, 3H). Faza 5. Sinteza l-(2-hloretil)-7V-[(15)-l-{(25,5/f)-5-[3,5-difluoro-4-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-il} etil]-5-(4-metil- l#-imidazol-1 -il)-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karboksamida (C58).

[0184]Tionil hlorid (1.0 mL, 14 mmol) se na 0 °C doda u smešu C57 (1.00 g, 1.85 mmol) u dihlormetanu (20 mL). Ledeno kupatilo se ukloni i reaktivna smeša se meša 2 sata na sobnoj temperaturi, nakon toga ohladi na 0 °C i neutrališe sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikrbonata. Vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom i kombinovani organski slojevi se suše preko natrijum sulfata, filtriraju i koncentruju podvakuumomda se dobije produkt kao lepljiva žuta pena koja se direktno prenosi u sledeću fazu. Prinos: 1.00 g, 1.79 mmol, 97%.LCMS mlz559.1 [M+H<+>]. Faza 6. Sinteza 2-[(15)-l-{(25,,5/^)-5-[3,5-difluoro-4-(trifluorometil)fenil]te1xahidrofuran-2-il}etil]-7-(4-metil-lif-imidazol-1 -il)-3,4-dihidro-2if-pirido[ 1,2-a]pirazin-1,6-diona (10).

[0185]Litijum bis(trimetilsilil)amid (1 M rastvor u THF, 2.24 mL, 2.24 mmol) se u kapima

na 0 °C doda u rastvor C58 (iz prethodne faze, 1.00 g, 1.79 mmol) u tetrahidrofuranu (20 mL) i reaktivna smeša se meša 15 minuta na 0 °C. Ledeno kupatilo se ukloni i mešanje se nastavi 1 sat. Nakon hlađenja na 0 °C, reakcija se neutrališe sa zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida i ekstrahuje sa etil acetatom. Kombinovani organski slojevi se suše preko natrijum

sulfata, filtriraju i koncentruju podvakuumom.Hromatografijom na silika gelu (gradijent: 0% do 20% metanol u etil acetatu) dobija se bledo žuta pena (709 mg), koja se rekristališe iz terc-butil metil etra da se dobije produkt kao bela čvrsta supstanca. Prinos (dva prinosa): 404 mg, 0.773 mmol, 43%. LCMSmlz523.3 [M+H<+>]. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 5 8.30 (br s, 1 H), 7.49 (d, 7=7.8 Hz, 1 H), 7.34 (d, 7=7.8 Hz, 1 H), 7.13-7.15 (m, 1 H), 6.98 (brd, 7=10.3 Hz, 2H), 4.81-4.89 (m, 2H), 4.51 (ddd, 7=14.2, 6.2, 4.1 Hz, 1 H), 4.21 (ddd, 7=14.2, 8.2, 4.1 Hz, 1 H), 4.07-4.14 (m, 1 H), 3.63-3.77 (m, 2H), 2.38-2.47 (m, 1 H), 2.31 (s, 3H), 2.17-2.26 (m, 1 H), 1.76-1.92 (m, 2H), 1.31 (d, 7=6.8 Hz, 3H).

Primeri 11 i 12

7-( 4- Metil- l#- imidazol- l- il)- 2-( j( 2£

il| metil)- 3. 4- dihidro- 2/ 7- piridon. 2- a1pirazin- 1. 6- dion ( 11) i 7- 4- Metil- l/ f- imidazol- l- il)- 2-

((( 2fl, 55V5- metil- 544-( trifluorom

piridori. 2- <3lpirazin- 1. 6- dion( 12)

[0186]

Faza 1.Sinteza 2-[4-(trifluorometil)fenil]heks-5-en-2-ola (C59).

[0187]Rastvor heks-5-en-2-ona (1.00 g, 10.2 mmol) u tetrahidrofuranu (3 mL) se na 0 °C doda u [4-(trifluorometil)fenil]magnezijum bromid (0.26 M rastvor u tetrahidrofuranu, 50 mL, 13 mmol). Nakon 15 minuta na 0 °C, reaktivna smeša se zagreva 18 sati na 70 °C, nakon toga ohladi na sobnu temperaturu, razblaži sa etil acetatom i ispere sa zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida, sa vodom i sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida. Organski sloj se suši preko magnezijum sulfata, filtrira i koncentruje podvakuumom.Prečišćavanjem hromatografijom na silika gelu (gradijent: 10% do 30% etil acetat u hepatanu) dobija se produkt kao ulje tamno zlatne boje. Prinos: 1.86 g, 7.61 mmol, 75%. 'H NMR za sirovi produkt (400 MHz, CDCb), karakteristični pikovi: 8 7.59 (br AB kvartet, Jab=8 Hz, Avab=19 Hz, 4H), 5.74-5.85 (m, 1 H), 4.93-5.01 (m, 2H), 1.59 (s, 3H).

Faza 2. Sinteza {5-metil-5-[4-(trifiuorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-il}metanola (C60).

[0188] 3-Hlorperoksibenzoeva kiselina (70%, 3.73 g, 15.1 mmol) se doda u rastvor C59 (1.85 g, 7.57 mmol) u dihlormetanu (50 mL). Nakon 3 sata, reaktivna smeša se ispere sa 10% vodenim rastvorom natrijum sulfita, sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata i sa vodom. Organski sloj se suši preko magnezijum sulfata, filtrira i koncentruje podvakuumom.Analizom sa 'H NMR se utvrdi da ovaj sirovi produkt sadrži manju količinu međuproizvoda epoksida [karakteristični epoksid pikovi na 400 MHz, u CDCb: 2.87-2.92 (m, 1 H), 2.75 (dd, .7=4.7, 4.1 Hz, 1 H), 2.45 (dd, .7=4.9, 2.7 Hz, 1 H)]. Sirovi produkt se stoga rastvori u dihlormetanu (30 mL), tretira sa p-toluensulfonskom kiselinom monohidratnom (142 mg, 0.746 mmol) i ostavi da se meša 18 sati na sobnoj temperaturi. Reaktivna smeša se nakon toga ispere sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata i sa vodom, suši preko magnezijum sulfata, filtrira i koncentruje pod sniženim pritiskom. Prečišćavanjem hromatografijom na silika gelu (gradijent: 20% do 40% etil acetat u hepatanu) dobija se produkt kao žuto ulje, za koje se 'H NMR analizom utvrdi da se sastoji od približno 1:1 smeše diastereomera. Prinos: 1.65 g, 6.34 mmol, 84%. 'H NMR (400 MHz, CDCb), karakteristični pikovi: 5 7.49-7.61 (m, 4H), [4.29-4.37 (m) i 4.13-4.20 (m), ukupno 1 H], [3.78 (br dd, 7=11.6, 2.4 Hz) i 3.71 (br dd, .7=11.4, 2.8 Hz), ukupno 1 H], 3.54-3.64 (m, 1 H), 2.03-2.28 (m, 3H), 1.55 i 1.53 (2 s, ukupno 3H). Faza 3. Sinteza {cz'5-5-metil-5-[4-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-il}metil 4-metilbenzensulfonata (C61).

[0189] 4-Metilbenzensulfonil hlorid (98%, 1.60 g, 8.22 mmol) se na 0 °C doda u rastvor C60 (1.65 g, 6.34 mmol) i trietilamina (1.32 mL, 9.47 mmol) u dihlormetanu (25 mL) i reaktivna smeša se ostavi da se polako zagreje na sobnu temperaturu kako se led u kupatilu topi. Nakon 18 sati, rastvor se ispere sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata i sa vodom. Organski sloj se koncentruje podvakuumomi prečisti hromatografijom na silika gelu (gradijent: 10% do 40% etil acetat u hepatanu). Produkt, koji je više polarni izomer, se dobija kao bela čvrsta supstanca. Prinos: 830 mg, 2.00 mmol, 32%. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 7.79 (br d, .7=8.4 Hz, 2H), 7.44 (br AB kvartet, Jab=8.2 Hz, Avab=3 1.0 Hz, 4H), 7.34 (br d, J=8 Hz, 2H), 4.37-4.44 (m, 1 H), 4.05 (dd, polovina od ABX uzorka, .7=10.1, 4.4 Hz, 1 H), 4.00 (dd, polovina od ABX uzorka, 7=10.1, 5.8 Hz, 1 H), 2.47 (s, 3H), 2.08-2.22 (m, 3H), 1.62-1.71 (m, 1 H), 1.48 (s, 3H). Takođe je dobijen i manje polarni izomer{/ra«s-5-metil-5-[4-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran2-il}metil 4-metilbenzensulfonat (C62), kao gusta, bezbojna guma (878 mg). 'H NMR (400 MHz, CDCb) S 7.84 (br d, J=8.4 Hz, 2H), 7.56 (br d, 7=8.5 Hz, 2H), 7.44 (br d, 7=8.5 Hz, 2H), 7.35-7.39 (m, 2H), 4.19-4.26 (m, 1 H), 4.06-4.14 (m, 2H), 2.46 (s, 3H), 2.16-2.24 (m, 1 H), 2.04-2.12 (m, 1 H), 1.82-1.89 (m, 2H), 1.47 (s, 3H). Indikovana relativna stereohemija za C61 i C62 je potvrđena na osnovu NOE studija. Faza 4. Sinteza 2-[({cŽ5-5-metil-5-[4-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-il}metil)amino]etanola (C63).

[0190]Smeša 2-aminoetanola (856 mg, 14.0 mmol) i C61 (830 mg, 2.00 mmol) u acetonitrilu (10 mL) se zagreva 18 sati na 90 °C, nakon toga ohladi na sobnu temperaturu, razblaži sa etil acetatom i ispere sa vodom i sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida. Organski sloj se suši preko magnezijum sulfata, filtrira i koncentruje podvakuumomda se dobije produkt kao svetio žuto ulje. Prinos: 559 mg, 1.84 mmol, 92%. LCMSmlz304.1 [M+H+]. 'HNMR (400 MHz, CDCb) 8 7.56 (br AB kvartet, 7ab=8.4 Hz, Avab=15.9 Hz, 4H), 4.29-4.37 (m, 1 H), 3.65 (t, J=5.3 Hz, 2H), 2.79-2.91 (m, 2H), 2.74 (d, J=5.9 Hz, 2H), 2.06-2.25 (m, 3H), 1.54-1.64 (m, 1 H), 1.52 (s, 3H). Faza 5. Sinteza 7-(4-metil-lif-imidazol-l-il)-2-({(2S,5R)-5-metil-5-[4-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-il} metil)-3,4-dihidro-2/f-pirido[ 1,2-a]pirazin-1,6-diona (11) i 7-(4-metil-lif-imidazol-l-il)-2-({(2R,5S)-5-metil-5-[4-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-il} metil)-3,4-dihidro-2/f-pirido[ 1,2-a]pirazin-1,6-diona (12) .

[0191]Jedinjenje C63 se konvertuje u produkte koristeći opšte postupke opisane za sintezu 6 u Primeru 6. U ovom slučaju, hromatogrfija na silika gelu se izvodi koristeći gradijent 0% do 20% metanol u etil acetatu. Racematni produkt se razdvoji na svoje enantiomere superkritičnom hromatografijom fluida (kolona: Chiralcel OJ-H, 5 um; eluent: 4:1 ugljen dioksid metanol koji sadrži 0.2% izopropilamina). Prvi pik eluacije je Primer 11, dobijen kao čvrsta supstanca. Prinos: 47 mg, 97 mmol, 5%. LCMSmlz487.2 [M+H<+>]. 'HNMR (400 MHz, CDCb) 8 8.23 (d,7=1.4Hz, IH), 7.57 (br AB kvartet, Jab=8.2 Hz, Avab=36.4 Hz, 4H), 7.46 (d, 7=7.6 Hz, 1 H), 7.28 (d, 7=7.6 Hz, 1 H, predpostavljeno; delimično zaklonjeno pikom rastvarača), 7.14-7.15 (m, 1 H), 4.39-4.51 (m, 2H), 4.28 (ddd, polovina od ABXY uzorka, 7=14.3, 8.0, 4.1 Hz, IH), 4.10 (dd, 7=13.9, 3.1 Hz, IH), 4.01 (ddd, 7=13.5, 8.0, 4.1 Hz, IH), 3.80 (ddd, 7=13.5, 7.2, 4.1 Hz, IH), 3.34 (dd, 7=14.0, 8.1 Hz, IH), 2.30 (d, 7=1.0 Hz, 3H), 2.17-2.25 (m, 3H), 1.63-1.73 (m, 1 H), 1.50 (s, 3H). Drugi pik eluacije je Primer12,dobijen kao čvrsta supstanca. Prinos: 39 mg, 80 mmol, 4%. LCMSmlz487.2 [M+H<+>]. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 8.22 (d, 7=1.2 Hz, 1 H), 7.59-7.63 (m, 2H), 7.50-7.54 (m, 2H), 7.46 (d,7=7.6Hz, 1 H), 7.28 (d, J=7 Hz, 1 H, predpostavljeno; delimično zaklonjeno pikom rastvarača), 7.13-7.15 (m, 1 H), 4.39-4.50 (m, 2H), 4.28 (ddd, polovina od ABXY uzorka, 7=14.2, 7.9, 4.0 Hz, 1 H), 4.10 (dd, 7=13.9, 3.1 Hz, 1 H), 4.01 (ddd, 7=13.5, 7.9, 4.0 Hz, 1 H), 3.80 (ddd, 7=13.5, 7.2, 4.1 Hz, 1 H), 3.33 (dd, 7=14.0, 8.1 Hz, 1 H), 2.29 (d, 7=1.0 Hz, 3H), 2.17-2.25 (m, 3H), 1.63-1.73 (m, 1 H), 1.50 (s, 3H). Apsolutna stereohemija ovih jedinjenja je potvrđena na bazi razlike u njihovim IC50vrednostima (videti Tabelu 1); jedinjenja sa (2S,5R) konfiguracijom oko tetrahidrofuran prstena su generalno više potentna nego njihovi (2R,5S) enantiomeri.

Primeri 13 i 14

7-( 4- Metil- l//- imidazol- 1 - il)- 2-( { c?, y- 2- metil- 5- r4-( trilfuorometil) fenilltetrahidrofuran- 2-

il} metil)- 3, 4- dihidro2i:f- pirido[ l, 2- alpirazin- l, 6- dion, formatna so ( 13) i 7-( 4- Metil- l//imidazol- l- il)- 2-( Ura/ 7^- 2- methl- 5-[ 4-( trifluorometil) fenil1tetrahidrofuran- 2- il} metil)- 3, 4-

dihidro- 2#- pirido[ l, 2- a] pirazin- l, 6- dion, formatna so( 14)

[0192]

[0193]Metil 5-bromofuran-2-karboksilat (497 mg, 2.42 mmol) i 4-(trifluorometil)fenil]borna kiselina (472 mg, 2.48 mmol) se kombinuju u 1,4-dioksanu (5 mL). Doda se zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata (5.0 mL), a nakon toga tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0) (140 mg, 0.121 mmol) i reaktivna smeša se zagreva 20 minuta u mikrotalasnom reaktoru na 150 °C. Nakon razblaženja sa dihlormetanom (20 mL) i vodom (20 mL), slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ekstrahuje sa dihlormetanom (10 mL). Kombinovani organski slojevi se suše preko magnezijum sulfata, filtriraju i koncentruju podvakuumom.Prečišćavanjem hromatografijom na silika gelu (gradijent: 0% do 50% etil acetat u hepatanu) dobija se produkt kao bledo beličasta čvrsta supstanca. Prinos: 298 mg, 1. 298 mg, 1.10 mmol, 45%. LCMSmlz271.0 [M+H<+>]. 'H NMR (500 MHz, CDCb) 8 7.90 (br d, J=8.3 Hz, 2H), 7.68 (br d, J=8.4 Hz, 2H), 7.28 (d, J=3.7 Hz, 1 H), 6.86 (d,J=3. 7Hz, 1 H), 3.94 (s, 3H).

Faza 2. Sinteza metil 5-[4-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-karboksilata (C65).

[0194]Paladijum hidroksid na ugljeniku (~50% voda, 10 mt% paladijum, 650 mg, 0.46 mmol) se doda u rastvorC64(6.5 g, 32 mmol) u etanolu (170 mL) i reaktivna smeša se hidrogenizuje 3 sata na sobnoj temperaturi. Katalizator se ukloni filtriranjem; filtrat se koncentruje podvakuumomi prečisti superkritičnom tečnom hromatografijom (kolona: Chiralpak AB-H, 5 mm; eluent: 9:1 ugljen dioksid / metanol), da se dobije produkt kao ulje. Početni materijalC64se takođe javlja (2 g). Prinos: 3.0 g, 11 mmol, 34% (44% na osnovu pronađenog početnog materijala). H NMR (400 MHz, CDCb) 8 7.63 (br AB kvartet, Jab=8.5 Hz, Avab=15 Hz, 4H), 5.09 (dd, J=8.9, 5.8 Hz, 1 H), 4.65-4.69 (m, 1 H), 3.81 (s, 3H), 2.33-2.45 (m, 2H), 2.18-2.27 (m, 1 H), 1.84-1.95 (m, 1 H).

Faza 3. Sinteza metil 2-metil-5-[4-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-karboksilata(C66).

[0195]Rastvor kalijum bis(trimetilsilil)amida (1 M rastvor u tetrahidrofuranu, 9.1 mL, 9.1 mmol) ohlađen na -100 °C se doda u rastvor C65 (1.25 g, 4.56 mmol) i jodmetana (98%, 2.90 mL, 45.6 mmol) u dietil etru (5 mL) i reaktivna smeša se ostavi da se postepeno zagreje na sobnu temperaturu. Po završetku reakcije, doda se vodeni rastvor limunske kiseline (1 M, 5 mL). Vodeni sloj se ekstrahuje sa dietil etrom (2x10 mL) i kombinovani organski slojevi se isperu sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, suše preko magnezijum sulfata, filtriraju i koncentruju podvakuumom.Hromatografijom na silika gelu (eluent: 4:1 heptan / etil acetat) dobija se produkt. 'H NMR analizom se utvrdi daje materijal smeša približno 1:1, uz predpostavku da sadržicisitransizomere produkta. Prinos: 560 mg, 1.94 mmol, 42%. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 {7.60 (s) i [7.60 (br d, J=8 Hz) i 7.45-7.49 (m)], ukupno 4H}, [5.20 (dd, J=7.0, 7.0 Hz) i 5.14 (dd, J=9.4, 5.8 Hz), ukupno 1 H], 3.80 i 3.79 (2 s, ukupno 3H), 2.34-2.58 (m, 2H), 1.82-2.07 (m, 2H), 1.65 i 1.60 (2 s, ukupno 3H).

Faza 4. Sinteza {2-metil-5-[4-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-il}metanola (C67).

[0196]Litijum aluminijum hidrid (2 M rastvor u tetrahidrofuranu, 0.26 mL, 0.52 mmol) se doda u rastvor C66 (125 mg, 0.434 mmol) u dietil etru (2 mL) i reaktivna smeša se meša 1 sat na sobnoj temperaturi. Nakon zakišeljavanja sa razblaženom hlorovodoničnom kiselinom, smeša se ekstrahuje sa etil acetatom i kombinovani organski slojevi se suše preko

magnezijum sulfata, filtriraju i koncentruju podvakuumomda se dobije produkt kao ulje,

za koje se predpostavlja da je~1:1 smeša stereoizomera. Prinos: 85 mg, 0.33 mmol, 76%. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 7.59 (br d, J=8.2 Hz, 2H), 7.43-7.49 (m, 2H), 4.97-5.08 (m, 1 H), 3.51-3.63 (m, 2H), 2.32-2.44 (m, 1 H), 2.08-2.19 (m, 1 H), 1.76-1.95 (m, 2H), 1.34 i 1.33 (2 s, ukupno 3H).

Faza 5. Sinteza {2-metil-5-[4-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-il}metil metansulfonata (C68).

[0197] Jedinjenje C67 se konvertuje u produkt koristeći opšte postupke opisane za sintezu C17 u Primeru 3. Produkt, izdvojen približno kao 1:1 smeša stereoizomera, se koristi bez naknadnog prečišćavanja. 'H NMR (400 MHz, CDCb), karakteristični pikovi: 8 7.60 (br d, J=8.6 Hz, 2H), 7.44-7.50 (m, 2H), 5.04-5.10 (m, 1 H), [4.21 (AB kvartet, 7ab=10.4 Hz, Avab=17.5 Hz) i 4.19 (s), ukupno 2H], 3.08 i 3.03 (2 s, ukupno 3H), 1.44 i 1.41 (2 s, ukupno 3H). Faza 6. Sinteza 2-[({2-metil-5-[4-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-il}metil)amino]etanola (C69).

[0198] Produkt se izrađuje od C68 koristeći opšte postupke opisane za sintezu C9 u Primeru 1. U ovom slučaju, produkt se koristi u sledećoj fazi bez HPLC prečišćavanja. Prinos: 295 mg, 0.973 mmol, 94%. Faza 7. Sinteza 7-(4-metil-l//-imidazol-l-il)-2-({c/5-2-metil-5-[4-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-il} metil)-3,4-dihidro-27f-pirido[ 1,2-a]pirazin-1,6-diona, formatna so (13) i 7-(4-metil-l/f-imidazol-l-il)2-({/rara-2-metil-5-[4-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-il} metil)-3,4-dihidro-2/f-pirido[ 1,2-a]pirazin-1,6-diona, formatna so (14). [01991 Jedinjenje C69 reaguje sa P2 u skladu sa postupkom opisanim za sintezu 1 u Primeru 1. U ovom slučaju, sirova reaktivna smeša se jednostavno koncentruje podvakuumomi izomeri se razdvoje pomoću HPLC (kolona: Phenomenex Luna C-18(2), 5 um; mobilna faza A: 0.1 % mravlja kiselina u vodi; mobilna faza B: 0.1% mravlja kiselina u metanolu; gradijent: 5% do 95% B). Primer 13 je prvi izomer eluacije, izolovan kao staklo. Prinos: 38 mg, 71 mmol, 7%. LCMSmlz487.3 [M+H<+>]. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 8.39 (s, 1 H), 8.23 (br s, 1 H), 7.62 (br d,J=SHz, 2H), 7.51 (d, .7=7.8 Hz, 1 H), 7.43 (br d, .7=8 Hz, 2H), 7.29 (d, .7=7.7 Hz, 1 H), 7.14-7.18 (m, 1 H), 5.07 (dd, .7=7.6, 7.2 Hz, 1 H), 4.20-4.35 (m, 2H), 4.11 (d, .7=14.0 Hz, IH), 3.97-4.05 (m, 1 H), 3.78-3.86 (m, 1 H), 3.50 (d, .7=14.0 Hz, IH), 2.44-2.53 (m, 1 H), 2.30 (s, 3H), 2.04-2.13 (m, 1 H), 1.92-2.01 (m, 1 H), 1.80-1.91 (m, 1 H),

1.36 (s, 3H). Drugi izomer eluacije je Primer 14, dobijen kao staklo. Prinos: 26 mg, 49 mmol, 5%. LCMSmlz487.3 [M+H<+>]. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 8.46 (s, 1 H), 8.23 (br s, 1 H), 7.61 (br d, J=8 Hz, 2H), 7.55 (d .7=7.6 Hz, 1 H), 7.44 (br d,J=SHz, 2H), 7.32 (d, J=7.8 Hz, 1 H), 7.16-7.20 (m, 1 H), 5.02 (dd,.7=9.4,5.8 Hz, 1 H), 4.28-4.43 (m, 2H), 4.03 (ddd, polovina od ABXY uzorka, .7=13.7, 7.3, 4.2 Hz, 1 H), 3.94 (d, .7=14.2 Hz, 1 H), 3.85-3.93 (m, 1 H), 3.62 (d, .7=14.1 Hz, 1 H), 2.35-2.44 (m, 1 H), 2.32 (s, 3H), 1.85-2.10 (m, 3H), 1.38 (s, 3H). Indikovane stereohemije su utvrđene na bazi NOE studija izvedenim sa oba izomera.

Primeri 15 i 16

7-( 4- Metil- 17/- imidazol- 1 - il)- 2-( {/ ro»5- 6-[ 4-( trifluorometil) fenilltetrahidro- 2i/- piran- 2-

illmetiD- S^- dihidro^ TZ- piridofl^- alpirazin- Lć- dion, formatna so ( 15) i 7-( 4- Metil- lH-

imidazol- l- il)- 2-( r{ c7' A- 6- r4-( trifluorometil) fenilltetrahidro- 27/- piran- 2- il} metil)- 3, 4- dihidro-2#- pirido[ l, 2- fl] pirazin- l, 6- dion, formatna so ( 16)

[0200]

Faza 1. Sinteza l-[4-(trifluorometil)fenil]heks-5-en-l-ola (C70).

[0201] Smeša 5-bromopent-l-ena (6.0 g, 40 mmol) i magnezijuma (1.44 g, 59.2 mmol) u tetrahidrofuranu (40 mL) se meša 30 minuta na 0 °C. U kapima se doda 4-(trifluorometil)benzaldehid (4.6 g, 26 mmol) i reaktivna smeša se meša 4 sata na sobnoj temperaturi, a nakon toga neutrališe dodavanjem vode (30 mL). Nakon ekstrakcije sa etil acetatom (3x15 mL), kombinovani organski slojevi se isperu sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida (10 mL), suše preko natrijum sulfata, filtriraju i koncentruju podvakuumomda se dobije produkt kao žuto ulje. Ovaj produkt se koristi bez naknadnog prečišćavanja. Prinos: 2.6 g, 11 mmol, 42%. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 7.58-7.64 (m, 2H), 7.44-7.50 (m, 2H), 5.72-5.84 (m, 1 H), 4.93-5.04 (m, 2H), 4.73-4.79 (m, 1 H), 2.05-2.13 (m, 2H), 1.64-1.85 (m, 2H), 1.47-1.60 (m, 1 H), 1.34-1.47 (m, 1 H).

Faza 2. Sinteza 2-(jodmetil)-6-[4-(trifluorometil)fenil]tetrahidro-2H-pirana (C71).

[0202] U rastvor C70 (2.3 g, 9.4 mmol) u acetonitrilu (25 mL) se doda A^-jodsukcinimid (95%, 5.0 g, 21 mmol) i reaktivna smeša se meša 18 sati na sobnoj temperaturi. Nakon neutralisanja sa vodom (15 mL), smeša se ekstrahuje sa etil acetatom (3 x 15 mL) i kombinovani organski slojevi se isperu sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida (15 mL), suše preko natrijum sulfata, filtriraju i koncentruju podvakuumom.Prečišćavanjem hromatografijom na silika gelu (gradijent: 1% do 10% etil acetat u petrol etru) dobija se produkt kao žuto ulje. 'H NMR analiza pokazuje da product sadrži približno 2:1 smešu izomera. Prinos: 1.8 g, 4.9 mmol, 52%. 'H NMR (400 MHz, CDCb), karakteristični pikovi: 8 [7.51 (d, J=8.5 Hz) i 7.56-7.67 (m), ukupno 4H], [4.51 (br d, J=l 1 Hz) i 4.93 (br dd,J=5,5 Hz), ukupno 1 H], [3.48-3.57 (m) i 3.78-3.86 (m), ukupno 1 H], 3.26-2.42 (m, 2H). Faza 3. Sinteza 2-[({6-[4-(trifluorometil)fenil]tetrahidro-2i<:>/-piran-2-il}metil)amino]etanola (C72).

[0203] Jedinjenje C71 se konvertuje u produkt koristeći postupak opisan za sintezu C29 u Primeru 6. Produkt se dobija kao žuto ulje, za koje je 'H NMR analizom procenjeno daje približno 3:1 smeša izomera. Prinos: 1.1 g, 3.6 mmol, 73%. 'H NMR (400 MHz, CDCb), karakteristični pikovi: 8 7.41-7.66 (m, 4H), [4.43 (br d,J=10. 5Hz) i 4.88 (br dd,J=5,5 Hz), ukupno 1 H]. Faza 4. Sinteza 7-(4-metil-l//-imidazol-l-il)-2-( {^rara-6-[4-(trifluorometil)fenil]tetrahidro-2i^-piran-2-il}metil)-3,4-dihidro-2//-pirido[l,2-a]pirazin-l,6-diona, formatna so (15) i 7-(4-metil- IH- imidazol-1 -il)-2-( {c/5-6-[4-(trifluorometil)fenil]tetrahidro-2/^-piran-2-il}rnetil)-3,4-

dihidro-2#-pirido[l,2-a]pirazin-l,6-diona, formatna so(16).

[0204]JedinjenjeC72reaguje sa P2 koristeći postupak opisan za sintezu 1 u Primeru 1. U ovom slučaju, razdvajanje stereoizomera se izvodi reverzno faznom HPLC (kolona: Boston Analvtics, Boston Symmetrix ODS-H, 5 um; mobilna faza A: 0.225% mravlja kiselina u vodi; mobilna faza B: 0.225% mravlja kiselina u aetonitrilu; gradijent: 24% do 44% B). Primer 16 izlazi iz kolone pre Primera 15; oba se dobijaju kao bele čvrste supstance. Indikovana relativna stereohemija je potvrđena na osnovu NOE studija. Primer 15: Prinos, 4.7 mg, 8.8 mmol, 1.3%. LCMSmlz487.0 [M+H<+>]. 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 8.57 (br s, 1 H), 7.82 (d, J=8.0 Hz, 1 H), 7.57 (br AB kvartet, Jab=8 Hz, Avab=21 Hz, 4H), 7.39-7.42 (m, 1 H), 7.23 (d, J=8.0 Hz, 1 H), 5.01-5.06 (m, 1 H), 4.30-4.36 (m, 2H), 4.17-4.27 (m, 2H), 3.83-3.88 (m, 2H), 3.48-3.57 (m, 1 H), 2.28 (br s, 3H), 1.70-2.0 (m, 5H), 1.56-1.66 (m, 1 H). Primer 16: 32.8 mg, 61.6 mmol, 9%. 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 9.05 (br s, 1 H), 7.93 (d, J=7.5 Hz, 1 H), 7.58 (br AB kvartet, Jab=8.5 Hz, Avab=31 Hz, 4H), 7.58 (br s, 1 H), 7.28 (d, J=7.5 Hz, 1 H), 4.52 (br d,J=10. 5Hz, 1 H), 4.30-4.38 (m, 1 H), 4.21-4.29 (m, 1 H), 3.85-3.98 (m, 4H), 3.62 (dd, J=13.8, 8.3 Hz, 1 H), 2.36 (s, 3H), 1.97-2.05 (m, 1 H), 1.72-1.93 (m, 3H), 1.34-1.52 (m, 2H).

Primer 17

7-( 4- Metil- l#- imidazol- 1 - il)- 2-( U2S AS . 5R )- 4 - meti \- 5 -\ 4 -

( trifluorometil) fenil] tetrahidrofuran- 2- il} metil)- 3, 4- dihidro- 2/ f- pirido[ 1, 2- alpirazin- 1, 6- dion,

trifluoroacetatna so ( 17)

[0205]

[0206]RastvorC30(1.02 g, 2.88 mmol) u tetrahidrofuranu (15 mL) se u kapima na -78 °C doda u rastvor litijum bis(trimetilsilil)amida (1.0 M rastvor u hepatanu, 3.45 mL, 3.45 mmol) u tetrahidrofuranu (12 mL); nakon 30 minuta, u hladni rastvor se doda jodmetan (0.215 mL, 3.45 mmol), koji se nakon toga meša 30 minuta na -78 °C, zagreje na -50 °C i meša na toj temperaturi još 3 sata. Nakon neutralisanja sa vodenim rastvorom amonijum hlorida (50% zasićeni, 20 mL), doda se dietil etar (20 mL) i vodeni sloj se ekstrahuje sa dietil etrom (2 x 20 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, suše preko natrijum sulfata, filtriraju i koncentruju podvakuumom.Dobijeno ulje (1.27 g) se rastvori u tetrahidrofuranu (15 mL) i u kapima se, na -78 °C, doda u rastvor litijum bis(trimetilsilil)amida (1.0 M rastvor u hepatanu, 5.0 mL, 5.0 mmol) u tetrahidrofuranu (10 mL). Nakon 1 sat mešanja na -78 °C, reaktivna smeša se brzo zagreje na -50 °C, nakon toga ponovo ohladi na -78 °C. Doda se zasićeni vodeni rastvor natrijum sulfata (10 mL) i smeša se ostavi da se polako otopi. Dodaju se voda (10 mL) i dietil etar (20 mL) i vodeni sloj se ekstrahuje sa dietil etrom (2 x 20 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, suše preko natrijum sulfata, filtriraju i koncentruju pod sniženim pritiskom. Prečišćavanjem hromatografijom na silika gelu (0% do 50% etil acetat u hepatanu) dobija se produkt kao bezbojno ulje, koje nakon toga očvrsne. Indikovana stereohemija je potvrđena u skladu sa radom S. F. Martin i saradnici, J. Org. Chem. 2000, 65, 1305-1318. Prinos: 558 mg, 1.51 mmol, 52%. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 7.66-7.70 (m, 4H), 7.38-7.48 (m, 6H), 4.44-4.51 (m, 1 H), 3.87 (dd, polovina od ABX uzorka,7=1 1.3,3.7 Hz, 1 H), 3.74 (dd, polovina od ABX uzorka,7=1 1.5,4.3 Hz, 1 H), 2.71 (ddq, 7=1 1.6, 9.1,7.1 Hz, 1 H), 2.39 (ddd, 7=12.5, 9.2, 6.2 Hz, 1 H), 1.86 (ddd, 7=12.5,11.7, 10.0 Hz, 1 H), 1.30 (d, 7=7.2 Hz, 3H), 1.07 (s, 9H). Faza 2. Sinteza(3.S,,5lS)-5-({[etrc-butil(difenil)silil]oksi}metil)-3-metil-2-(4-(trifluorometil)fenil)tetrahidrofuran-2-ola (C74).

[0207]Jedinjenje C73 se konvertuje u produkt koristeći postupak za sintezu C25 u Primeru 6. Produkt, dobijen kao narandžasto ulje, se direktno koristi u sledećoj fazi.

Faza 3. Sinteza/erc-butil({(25,,45,,5i?)-4-metil-5-[4-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-il}metoksi)difenilsilana (C75).

[0208]Jedinjenje C74 (<1.51 mmol) se konvertuje u produkt dobijen kao ulje, koristeći postupak opisan za sintezu C26 u Primeru 6. Prinos: 336 mg, 0.674 mmol, 45% u toku 2 faze.

'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 7.73-7.78 (m, 4H), 7.53 (br d, 7=8.2 Hz, 2H), 7.37-7.48 (m, 8H), 5.06 (d, 7=7.4 Hz, 1 H), 4.14-4.21 (m, 1 H), 3.95 (dd, polovina od ABX uzorka, J=10.9, 4.1 Hz, 1 H), 3.86 (dd, polovina od ABX uzorka, 7=10.9, 4.7 Hz, 1 H), 2.59-2.71 (m, 1 H), 2.17 (ddd, 7=12.4, 7, 7 Hz, 1 H), 1.66 (ddd, 7=12.4, 8.8, 7.5 Hz, 1 H), 1.11 (s, 9H), 0.58 (d, 7=7.0 Hz, 3H).

Faza 4. Sinteza {(25',45,5/^)-4-metil-5-[4-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-il}metanola (C76).

[0209]Deprotekcija C75 se izvodi koristeći postupak opisan za sintezu C27 u Primeru 6. Produkt se dobija kao ulje. Indikovana stereohemija za aril grupu je potvrđena na osnovu NOE eksperimenata. Prinos: 139 mg, 0.534 mmol, 81 %. GCMSmlz260 [M<+>]. 'HNMR (400 MHz, CDCb) 8 7.60 (br d, 7=8.2 Hz, 2H), 7.39-7.43 (m, 2H), 5.06 (d, 7=7.0 Hz, 1 H), 4.14-4.21 (m, 1 H), 3.90 (dd, polovina od ABX uzorka, 7=11.7, 3.3 Hz, 1 H), 3.77 (dd, polovina od ABX uzorka, 7=11.7, 6.2 Hz, 1 H), 2.62-2.73 (m, 1 H), 2.24 (ddd, 7=12.5, 7.6, 7.0 Hz, 1 H), 1.49 (ddd,7=12.5,8.6, 6.6 Hz, 1 H), 0.60 (d, 7=7.0 Hz, 3H). Faza 5. Sinteza {(25',45,5/^)-4-metil-5-[4-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-il}metil metansulfonata (C77).

[0210]Jedinjenje C76 se konvertuje u produkt koristeći postupak opisan za sintezu C8 u Primeru 1; dobija se produkt kao ulje. Prinos: 176 mg, 0.520 mmol, 100%. 'HNMR (400 MHz, CDCb) 8 7.61 (br d, 7=8 Hz, 2H), 7.38-7.42 (m, 2H), 5.09 (d,7=7.2Hz, 1 H), 4.41-4.49 (m, 2H), 4.30-4.37 (m, 1 H), 3.11 (s, 3H), 2.63-2.75 (m, 1 H), 2.34 (ddd, 7=12.7, 7.4, 7.4 Hz, 1 H), 1.53 (ddd, 7=12.7, 8.4, 6.6 Hz, 1 H), 0.62 (d, 7=7.0 Hz, 3H). Faza 6. Sinteza 2-[({(2S,4S,5R)-4-metil-5-[4-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-il}metil)amino]etanola (C78).

[0211]Produkt, dobijen kao ulje, se izrađuje od C77 koristeći postupak upotrebljen za sintezu C29 u Primeru 6. Prinos: 132 mg, 0.435 mmol, 86%. LCMSmlz304.4 [M+H<+>]. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 7.59 (br d, 7=8 Hz, 2H), 7.36-7.41 (m, 2H), 5.03 (d, 7=7.4 Hz, 1 H), 4.15-4.23 (m, 1 H), 3.67-3.71 (m, 2H), 2.82-3.00 (m, 4H), 2.59-2.71 (m, 1 H), 2.29 (ddd, J=12.3, 7.6, 6.8 Hz, 1 H), 1.38 (ddd, 7=12.5, 8.6, 7.0 Hz, 1 H), 0.59 (d, 7=7.0 Hz, 3H). Faza 7. Sinteza 7-(4-metil-lif-imidazol-l-il)-2-({(25',45,5JR)-4-metil-5-[4-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-il} metil)-3,4-dihidro-2/f-pirido[ 1,2-a]pirazin-1,6-diona, trifluoroacetatna so (17).

[0212]Konverzija C78 u produkt se izvodi koristeći postupak opisan za sintezu 6 u Primeru 6. Nakon hromatografije na silika gelu, produkt se prečisti reverzno faznom HPLC (kolona: Waters Sunfire Cl8, 5 um; mobilna faza A: 0.05% trifluorosirćetna kiselina u vodi (v/v); mobilna faza B: 0.05% trifluorosirćetna kiselina u acetonitrilu (v/v); gradijent: 5% do 100% B), da se dobije produkt kao čvrsta supstanca. Prinos: 12 mg, 20 mmol, 4%. LCMSmlz487.3 [M+H<+>]. 'H NMR (600 MHz, DMSO-de) 8 9.37 (br s, 1 H), 8.05 (br d,7=7.5Hz, 1 H), 7.81 (br s, 1 H), 7.70 (br d, 7=7.9 Hz, 2H), 7.52 (br d, 7=7.9 Hz, 2H), 7.20 (d, 7=7.5 Hz, 1 H), 5.04 (d, 7=7.0 Hz, 1 H), 4.21-4.31 (m, 3H), 3.83-3.96 (m, 3H), 3.70 (dd, 7=13.8, 8.1 Hz, 1 H), 2.62-2.68 (m, 1 H), 2.31 (s, 3H), 2.28-2.36 (m, 1 H), 1.36-1.42 (m, 1 H), 0.52 (d, 7=7.0 Hz, 3H).

Primer 18

2-({( 25'. 5lf)- 5- r3. 5- Difluoro- 4-( trifluorom

imidazol- 1 - il)- 3, 4- dihidro- 2i:/- pirido[ 1, 2- alpirazin- 1, 6- dion ( 18)

[0213]

[0214]Smeša (25)-l-hloro-5-(trimetilsilil)pent-4-in-2-ola (80 g, 420 mmol) i 2-aminoetanola (110 g, 1.8 mol) se meša 18 sati na 80 °C. Hromatografijom na silika gelu (gradijent: 1% do 10% metanol u dihlormetanu) dobija se produkt kao žuto ulje. Prinos: 30 g, 140 mmol, 33%.

'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 3.80-3.88 (m, 1 H), 3.61-3.72 (m, 2H), 2.84 (dd, J=12.3, 3.3 Hz, 1 H), 2.69-2.81 (m, 2H), 2.64 (dd, 7=12.0, 8.5 Hz, 1 H), 2.45 (dd, polovina od ABX uzorka, 7=16.6, 5.5 Hz, 1 H), 2.37 (dd, polovina od ABX uzorka, 7=16.6, 7.0 Hz, 1 H), 0.12 (s, 9H).

Faza 2. Sinteza A^-(2-hidroksietil)-A^-[(25)-2-hidroksi-5-(trimetilsilil)pent-4-in-l-il]-5-(4-metil-li7-imidazol-l-il)-6-okso-1,6-dihidropiridin-2-karboksamida (C80).

[02151Jedinjenje C79 se konvertuje u produkt koristeći opšti postupak opisan za izradu 1 u Primeru 1. U ovoj sintezi koristi se malo manje od jednog ekvivalenta HATU, reakcija se izvodi u acetonitrilu i ekstrakcije se izvode sa etil acetatom. U ovom slučaju rastvor sirovog produkta se suši preko natrijum sulfata i sirovi produkt se prenese direktno u sledeću fazu. Faza 3. Sinteza 2-[(25)-2-hidroksi-5-(trimetilsilil)pent-4-in-l-il]-7-(4-metil-iy7-imidazol-l-il)-3,4-dihidro-2i7-pirido[ 1,2-a]pirazin-1,6-diona (C81).

[0216]Diizopropil azodikarboksilat (14 g, 69 mmol) se u kapima, na 0 °C, doda u smešu sirovog C80 (<60 mmol) i trifenilfosfina (18.9 g, 72.0 mmol) u tetrahidrofuranu (500 mL). Nakon 2.5 sata mešanja na 0 °C, reaktivna smeša se koncentruje podvakuumom;prečišćavanje hromatografijom na silika gelu (gradijent: 1% do 6% metanol u dihlormetanu) dobija se produkt kao žuta čvrsta supstanca. Prinos: 7.0 g, 18 mmol, 30% kroz dve faze. Faza 4. Sinteza 2-[(2lS)-2-hidroksipent-4-in-l-il]-7-(4-metil-lif-imidazol-l-il)-3,4-dihidro-2i7-pirido[ 1,2-a]pirazin-1,6-diona (C82).

[0217] Smeša C81 (6.5 g, 16 mmol) i kalijum karbonata (2.25 g, 16.3 mmol) u metanolu (150 mL) se meša 5 sati na sobnoj temperaturi. Reaktivna smeša se koncentruje podvakuumomi

prečisti hromatografijom na silika gelu (gradijent: 1% do 2.5% metanol u dihlormetanu) da se dobije produkt kao žuta čvrsta supstanca. Prinos: 2.5 g, 7.7 mmol, 48%. 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 8.31 (d, 7=1.2 Hz, 1 H), 7.78 (d, 7=7.8 Hz, 1 H), 7.31-7.33 (m, 1 H), 7.25 (d, 7=7.8 Hz, 1 H), 4.33-4.39 (m, 2H), 4.04-4.12 (m, 1 H), 3.82-3.96 (m, 3H), 3.50 (dd, 7=13.7, 8.4 Hz, 1 H), 2.41-2.46 (m, 2H), 2.37 (t, 7=2.8 Hz, 1 H), 2.24 (d, 7=1.0 Hz, 3H).

Faza 5. Sinteza 2-{(2S)-5-[3,5-difluoro-4-(trifluorometil)fenil]-2-hidroksipent-4-in-l-il}-7-(4-metil-li/-imidazol-l-il)-3,4-dihidro-2/7-pirido[ 1,2-a]pirazin-1,6-diona (C83).

[0218] Jedinjenje C82 reaguje sa 5-bromo-l,3-difluoro-2-(trifluorometil)benzenom koristeći opšte procedure opisane za sintezu C39 u Primeru 8. U ovom slučaju, rastvarač za reakciju je smeša 1.6:1 A<f->dimetilformamida i trietilamina a kao katalizator se koristi dihlorbis(trifenilfosfin)paladijum(II). Ekstrakcija se izvodi sa etil acetatom i produkt dobijen kao svetio narandžasta čvrsta supstanca se prečisti hromatografijom na silika gelu (gradijent: 0% do 100% [10% (2 M rastvor amonijaka u metanolu) u etil acetat] u etil acetatu). Prinos: 505 mg, 0.997 mmol, 65%. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 8.28 (d, 7=1.2 Hz, 1 H), 7.40 (d, 7=7.8 Hz, 1 H), 7.22 (d, 7=7.6 Hz, 1 H), 7.06-7.08 (m, 1 H), 7.04 (d, 7=9.8 Hz, 2H), 4.41 (ddd, polovina od ABXY uzorka, 7=14.3, 7.2, 4.2 Hz, 1 H), 4.26-4.36 (m, 2H), 3.92-4.00 (m, 2H), 3.83 (ddd, polovina od ABXY uzorka, 7=13.5, 7.3, 4.2 Hz, 1 H), 3.55 (dd, 7=14.0, 8.3 Hz, 1 H), 2.68-2.80 (m, 2H), 2.28 (br s, 3H). Faza 6. Sinteza 2-({(2S,5R)-5-[3,5-difluoro-4-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-il}metil)-7-(4-metil-lif-imidazol-1 -il)-3,4-dihidro-2i7-pirido[ 1,2-a]pirazin-1,6-diona (18).

[0219] Di-u-hlordihlorbis(etilen)diplatina(II) (97%, 60 mg, 99 mmol), trifluorosirćetna kiselina (380 mL, 5.0 mmol) i voda (89 mL, 5.0 mmol) se dodaju u rastvor C83 (250 mg, 0.494 mmol) u dihlormetanu (5 mL) i reaktivna smeša se meša na sobnoj temperaturi sve dok analiza hromatografijom na tankom sloju ne pokaže utrošak početnog materijala. Reaktivna smeša se ohladi na -20 °C i tretira sa trifluorosirćetnom kiselinom (0.958 mL, 12.4 mmol) a nakon toga se u kapima u toku 5 minuta dodaje trietilsilan (99%, 1.19 mL, 7.39 mmol). Nakon sporog zagrevanja na sobnu temperaturu, reakcija se ostavi da stoji 1.5 sat, nakon čega se doda dihlormetan (50 mL) i smeša se ispere sa vodom (25 mL) i sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida (25 mL). Organski sloj se suši preko magnezijum sulfata, filtrira i koncentruje podvakuumom;prečisti se hromatogrfijom na silika gelu (gradijent: 0% do 70%

[10% (2 M rastvor amonijaka u metanolu) u etil acetat] u etil acetatu) a nakon toga sa HPLC (kolona: Phenomenex Lux Cellulose-1,5 mm; gradijent: 70% do 100% etanol u hepatanu) da se dobije produkt kao čvrsta supstanca. Prinos: 40 mg, 79 mmol, 16%. LCMSmlz509.0 [M+H<+>]. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 5 8.35 (br s, 1 H), 7.49 (d,7=7.6Hz, 1 H), 7.29 (d, 7=7.6 Hz, 1 H), 7.16 (br s, 1 H), 6.98 (d, 7=10.4 Hz, 2H), 4.86-4.92 (m, 1 H), 4.31-4.41 (m, 3H), 4.14 (dd, 7=13.9, 2.7 Hz, 1 H), 3.92-4.01 (m, 1 H), 3.78-3.86 (m, 1 H), 3.47 (dd, 7=14.0, 8.5 Hz, 1 H), 2.37-2.48 (m, 1 H), 2.31 (s, 3H), 2.16-2.26 (m, 1 H), 1.69-1.87 (m, 2H).

Postupak A

Izrada 2- supstituisanih 7-( 4- metil- 17/- imidazol- 1 - ilV 3, 4- dihidro- 27/- pirido[ 1. 2- q] pirazin- 1. 6-

diona Ml inicijalnom reduktivnom aminacijom

[0220]

[0221]Rastvor primarnog amina (300 mmol) u metanolu (1 mL) se tretira sa{[ terc-butil(dimetil)silil]oksilacetaldehidom (28 mL, 150 mmol) i mućka 40 minuta na 30 °C. Reaktivna posuda se ohladi na 0 °C, doda se natrijum borhidrid (17 mg, 450 mmol) i reakcija se mućka 100 minuta na 30 °C. Rastvarač seukloni pod vakuumom,doda se voda (1 mL) i smeša se ekstrahuje sa etil acetatom (3x1 mL). Kombinovani organski slojevi se suše preko natrijum sulfata, filtriraju, koncentruju podvakuumomi prečiste preparativnom hromatografijom na tankom sloju.

Faza 2. Sinteza Af-supstituisanog 2-aminoetanola C85.

[0222] Rastvor C84 u metanolu (500 mL) se na 30 °C tretira 16 sati sa rastvorom acetil hlorida (188 mL) u metanolu (312 mL). Rastvarač seukloni pod vakuumom.

Faza 3. Sinteza 2-supstituisanog 7-(4-metil-l//-imidazol-l-il)-3,4-dihidro-2//-pirido[l,2-a]pirazin-l,6-diona Ml.

[0223] Jedinjenje C85 se tretira sa Pl (34.4 mg, 125 mmol), dihlormetanom (2 mL), diizopropiletilaminom (217 mL, 1.25 mmol) i 0-(7-azabenzotriazol-l-il)-A<r>,A<r>,A<r>',A^'-tetrametiluronijum heksafluorofosfatom (HATU, 97%, 122 mg, 320 mmol), a nakon toga mućka 16 sati na 30 °C. Rastvarač seukloni pod vakuumomi ostatak se tretira sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (2 mL) i ekstrahuje sa etil acetatom (3x1 mL). Kombinovani organski slojevi se suše preko natrijum sulfata, filtriraju, koncentruju podvakuumomi prečiste reverzno faznom HPLC. Prečišćavanje se vrši na Phenomenex Gemini Cl 8 koloni (8-10 mm), sa ne-vodenom mobilnom fazom koja sadrži amonijum hidroksid u acetonitrilu (pH 10) i uključuje odgovarajući gradijent.

1. 3,4-difluoro-N-hidroksibenzenkarboksimidoil hlorid (M. R. Barbachvn i saradnici,J. Med. Chem. 2003, 46, 284-302)se podvrgne cikloadiciji sa etilenom i nastali produkt se aciluje u skladu sa postupkom koji su dali A. Corsaro i saradnici,J. Heterocyclic Chem. 1989, 26,

1691-9, da se dobije metil 3-(3,4-difluorofenil)-4,5-dihidro-l,2-oksazol-4-karboksilat. Nakon amonolize, dobijeni primarni amid se konvertuje u terc-butoksikarbonil-zaštićeni amin preko Hofmann pregrupisavanja. Deprotekcijom i rezolucijom sa (-)-anicifos [(45)-2-hidroksi-4-(2-

metoksifenil)-5,5-dimetil-13,2-dioksafosforinan-2-oksidom] dobija se (4R)-3-(3,4-difiuorofenil)-4,5-dihidro-l,2-oksazol-4-amin. Ovaj amin se konvertuje u traženi 2-aminoetanol koristeći opštu proceduru koja je opisana u Postupku A. 2. HPLC uslovi. Kolona: Waters Atlantis dC18, 4.6 x 50 mm, 5 um; mobilna faza A: 0.05% trifluorosirćetna kiselina u vodi (v/v); mobilna faza B: 0.05% trifluorosirćetna kiselina u acetonitrilu (v/v); gradijent: 5% do 95% B u toku 4.0 minuta, linearno; brzina protoka: 2 mL/minut. 3. Reakcijom ferc-butil [cz's-3-hidroksiciklopentil]karbamata (videti M. Pineschi i saradnici, Org. Lett. 2005, 7, 3605-3607) i 3-(trifluorometil)fenila pod Mitsunobu uslovima se dobija terc-butil {/ra«^-3-[3-(trifluorometil)fenoksi]ciklopentil}karbamat. Deprotekcijom pod kiselim uslovima se dobija?ra«^-3-[3-(trifluorometil)fenoksi]ciklopentanamin. Ovaj amin se konvertuje u traženi 2-aminoetanol koristeći opštu proceduru koja je opisana u Postupku A. 4.terc-Butil[(2-hidroksiciklopentil)metil]karbamat se podvrgne Mitsunobu reakciji i deprotekciji, kako je opisano u odeljku, 3 da se dobije l-{2-[3-(trifluorometil)fenoksi]ciklopentil}metanamin. Ovaj metanamin se konvertuje u traženi 2-aminoetanol koristeći opšti postupak opisan u Postupku A. Super osetljiva tečna hromatografija se izvodi na finalnom produktu (kolona: Chiralpak AB-H; eluent: 7:3 ugljen dioksid / propanol) i sakupi se enantiomer druge eluacije. Apsolutna i relativna konfiguracija ovog jedinjenja nije određena. 5.terc-Butil(/ra/7s-3-hidroksiciklobutil)karbamat (P. Liu, PCT Int. Appl. 2007, WO 2007062332 A2) se tretira sa ugljenik tetrabromidom i trifenilfosfinom da se dobijeterc-butil(cz'5-3-bromociklobutil)karbamat, koji se podvrgne reakciji sa 2-(trifluorometil)fenilom, nakon toga deprotekciji sa kiselinom da se dobijetrans- 2>-[ 2-(trifluorometil)fenoksi]ciklobutanamin. Ovaj ciklobutanamin se konvertuje u traženi 2-aminoetanol koristeći opšti postupak opisan u Postupku A. 6. Traženi amin može da se izradi u skladu sa postupkom koji su dali T. A. Shepherd i saradnici, J. Med. Chem. 2002, 45, 2101-2111. 7. HPLC uslovi. Kolona: Waters XBridge Cl8, 2.1 x 50 mm, 5 um; mobilna faza A: 0.0375% trifluorosirćetna kiselina u vodi (v/v); mobilna faza B: 0.01875% trifluorosirćetna kiselina u acetonitrilu (v/v); gradijent: 1% do 5% B u toku 0.6 minuta, nakon toga 5% do 100% B u toku 3.4 minuta; brzina protoka: 0.8 mL/minut. 8. Ciklobutankarbonitril se alkiluje sa l-(bromometil)-4-fluorobenzenom i produkt se redukuje sa litijum aluminijum hidridom da se dobije l-[l-(4-fluorobenzil)ciklobutil]metanamin. 9. Reakcijom Grignardovog reagensa izrađenog od l-(bromometil)-3,5-difluorobenzena sa 6-oksabiciklo[3.1.0]heksanom dobija se rra«s-2-(3,5-difluorobenzil)ciklopentanol. Konverzijom u mesilat, a nakon toga uklanjanjem sa natrijum azidom i redukcijom sa trifenilfosfinom dobija se cz's-2-(3,5-difluorobenzil)ciklopentanamin. 10.ferc-Butil [/ra«s-3-(hidroksimetil)ciklobutil]karbamat i 4-fluoro-2-(trifluorometil)fenol se koriste u izradi, kako je dato u odeljku 3. 11. Ovaj komercijalno raspoloživi amin se konvertuje u traženi 2-aminoetanol koristeći opšti postupak opisan u Postupku A. 12. 2-Hlorcikloheksanon reaguje sa 4-hlorfenolom, a nakon toga se reduktivnom aminacijom sa 2-aminoetanol dobija traženi derivat 2-aminoetanola. 13. Super osetljiva tečna hromatografija se izvodi na finalnom produktu (kolona: Chiralpak OJ-H; eluent: 7:3 ugljen dioksid / metanol) i sakupi se enantiomer prve eluacije. NOE studije pokazujucisstereohemiju. Navedena apsolutna stereohemija je proizvoljno pripisana. 14. Usmerena metilacija 2-hloro-l-fluoro-4-metoksibenzena sa «-butillitijumom i tetrametiletilendiaminom omogućava regiospecifično uvođenje metil grupe. Naknadnim cepanjem metil etra sa bor tribromidom dobija se 3-hloro-4-fluoro-2-metilfenol. 15. 3-(Propan-2-il)fenol se hlorinuje upotrebom oksona i kalijum hlorida da se dobije traženi fenol. 16. Traženi naftalenol se izrađuje na način koji su opisali J. T. Repine i saradnici, Tetrahedron Lett. 2007, 48, 5539-5541. 17. Metil 2-fluoro-6-hidroksibenzoat se tretira sa metilmagnezijum bromidom da se dobije tercijerni alkohol, koji se hidrogenizuje preko paladijuma na ugljeniku da se dobije traženi fenol. 18. 5-(3,4-Dihlorfenil)dihidrofuran-2(3i<:>/)-on (videti G. J. Quallich i saradnici, J. Org. Chem. 1990, 55, 4971-4973) se redukuje sa diizobutilaluminijum hidridom, tretira sa kiselim anhidridom i konvertuje u 5-(3,4-dihlorfenil)tetrahidrofuran-2-karbonitril tretmanom sa trimetilsilil cijanidom i bor trifluorid dietil eteratom. Redukcijom sa diizobutilaluminijum hidridom se dobija l-[5-(3,4-dihlorfenil)tetrahidrofuran-2-il]metanamin, koji se konvertuje u traženi 2-aminoetanol koristeći opšti pristup opisan u Postupku A. 19. Traženi [c/s-5-(4-hlorfenil)tetrahidromran-2-il]metanol se izrađuje hidrogenacijom 5-(4-hlorfenil)furan-2-karbaldehida u prisustvu rutenijum(IV) oksid hidrata. 20. Primer 46 se izdvoji iz racematne smeše super osetljivom tečnom hromatografijom (kolona: Chiralcel OJ-H, 5 mm; eluent: 4:1 ugljen dioksid / metanol koji sadrži 0.2% izopropilamin) i to je drugi od enantiomera koji su eluirani iz kolone. Materijal iz prve eluacije je enantiomer Primera 46 i ima vrednost IC50od 511 nM. Apsolutna stereohemija Primera 46 je pripisana na osnovu njegove niže IC50vrednosti (videti Tabelu 1), analogno sa drugim ovde opisanim jedinjenjima. 21. Traženi {c/5-5-[4-(pentafluoro-^<6->sulfanil)fenil]tetrahidrofuran-2-il}metanol se izrađuje Suzuki reakcijom (5-formilfuran-2-il)borne kiseline sa l-bromo-4-(pentafluoro-X<6->sulfaniljbenzenom, a nakon toga hidrogenacijom u prisustvu rutenijum(IV) oksid hidrata. 22. Primer 47 se izdvoji iz racematne smeše super osetljivom tečnom hromatografijom (kolona: Chiralcel OJ-H, 5 mm; eluent: 65:35 ugljen dioksid / propanol koji sadrži 0.2% izopropilamin) i to je drugi od enantiomera koji su eluirani iz kolone. Materijal iz prve eluacije je enantiomer Primera 47 i ima vrednost IC50od 329 nM. Apsolutna stereohemija Primera 47 je pripisana na osnovu njegove niže IC50vrednosti (videti Tabelu 1), analogno sa drugim ovde opisanim jedinjenjima. 23. {c/5-5-[4-(Trifluorometoksi)fenil]tetrahidrofuran-2-il}metanol se izrađuje od 5-bromofuran-2-karbaldehida i [4-(trifluorometoksi)fenil]borne kiseline koristeći postupak analogan opisanom postupku u odeljku 21. 24. Primer 48 se izdvoji iz racematne smeše super osetljivom tečnom hromatografijom (kolona: Chiralcel OJ-H, 5 mm; eluent: 3:1 ugljen dioksid / metanol koji sadrži 0.2% izopropilamin) i to je drugi od enantiomera koji su eluirani iz kolone. Materijal iz prve eluacije je enantiomer Primera 48 i ima vrednost IC50od 1230 nM. Apsolutna stereohemija Primera 48 je pripisana na osnovu njegove niže IC50vrednosti (videti Tabelu 1), analogno sa drugim ovde opisanim jedinjenjima. 25./'erc-Butil{[(25,5/?)-5-(4-hloro-2-metoksifenil)tetrahidrofuran-2-il]metoksi}difenilsilan se izrađuje od (25)-l-{[/erc-butil(difenil)silil]oksi}-5-(4-hloro-2-metoksifenil)pent-4-in-2-ola koristeći opšti postupak koji su dali T. X. M. Nguyen i saradnici, Letters in Organic Chemistry 2009, 6, 630-636. Ovaj alkin se izrađuje reakcijom terc-butil[(25)-oksiran-2-ilmetoksi]difenilsilana sa 4-hloro-l-etinil-2-metoksibenzenom, koristeći «-butillitijum i bor trifluorid dietil eterat. 26. U ovom slučaju, reakcijom sa di-|ti-hlordihlorbis(etilen)diplatinom(II) se dobija( 4S, 5S)-5-(dibenzilamino)-l-[3fluoro-4-(trifluorometil)fenil]-4-hidroksiheksan-l-on umesto odgovarajućeg 2,3-dihidrofurana. Reakcijom sa/»-toluensulfonskom kiselinom i trimetil ortoformatom, a nakon toga podvrgavanjem trietilsilanu i bor trifluorid dietil eteratu, dobija se (15)-A^ Af-dibenzil-l-{(25)-5-[3-lfuoro-4-(ta^ 27. Finalno zatvaranje prstena se izvodi Mitsunobu reakcijom sa diizopropil azodikarboksilatom. 28. Sonogashira produkt u ovom slučaju se konvertuje u naredni međuproizvod koristeći vodeni rastvor platina(II) hlorida. 29. Finalno zatvaranje prstena se postiže sa cezijum karbonatom u A^A^dimetilformamidu umesto litijum bis(trimetilsilil)amida. 30. Traženi (15)-l-[(25',5i?)-5-ariltetrahidrofuran-2-il]etanamin se izrađuje odC48u skladu sa Primerom 9, izuzev što se Sonogashira produkt u ovom slučaju konvertuje u međuproizvod terc-butil {(15)-l-[(25)-5-hidroksi-5-ariltetrahidrofuran-2-il]etil}karbamat iliferc-butil {(15)-l-[(25)-5-metoksi-5-ariltetrahidrofuran-2-il]etil}karbamat koristeći, po redu, vodeni rastvor platina(ll) hlorida ili platina(II) hlorid i trimetil ortoformat. 31. 2-[({c/5-5-[3-(Trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-il}metil)amino]etanol se izrađuje reakcijom cz52-(bromometil)-5-[3-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofurana (videti H. Ebel i saradnici, PCT Int. Appl., 2010070032, June 24, 2010) sa 2-aminoetanolom. 32. Primer 58 se izdvoji iz racematne smeše super osetljivom tečnom hromatografijom (kolona: Chiralcel OJ-H, 5 mm; eluent: 4:1 ugljen dioksid / metanol koji sadrži 0.2% izopropilamin) i to je drugi od enantiomera koji su eluirani iz kolone. Materijal iz prve eluacije je enantiomer Primera 58 i ima vrednost IC50od 1040 nM. Apsolutna stereohemija Primera 58 je označena na osnovu njegove niže IC50vrednosti (videti Tabelu 1), analogno sa drugim ovde opisanim jedinjenjima. 33. l-hloro-2-fluoro-4-jod-5-metoksibenzen se koristi kao početni materijal; videti J. M. Blaney i saradnici, PCT Int. Appl., 2008150914, Dec 11, 2008. 34. Sandmever reakcijom 4-hloro-2-(trifluorometoksi)anilina dobija se traženi 5-hloro-2-jodfenil trifluorometil etar. 35. Traženi {c/i-5-[4-(pentafluoroetil)fenil]tetrahidrofuran-2-il}metanol se izrađuje Suzuki reakcijom (5-formilfuran-2-il)borne kiseline sa l-bromo-4-(pentafluoroetil)benzenom, a nakon toga hidrogenacijom preko paladijuma na ugljeniku. l-Bromo-4-(pentafluoroetil)benzen se izrađuje u skladu sa postupkom koji su dali W. Lambert i saradnici, PCT Int. Appl., 2011017513, Feb 10, 2011. 36. Traženi {cz'5-5-[4-(l,l-difluoroetil)fenil]tetrahidrofuran-2-il}metanol se izrađuje Suzuki reakcijom 5-bromofuran-2-karbaldehida sa 2-[4-(l,l-dilfuoroetil)fenil]-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolanom, a nakon toga hidrogenacijom u prisustvu rutenijum(IV) oksid hidrata. 37. Primer 62 se izdvoji iz racematne smeše pomoću HPLC (kolona: Phenomenex Lux Cellulose-3, 5 mm; gradijent: 50% do 100% etanol u hepatanu) i to je drugi od enantiomera koji su eluirani iz kolone. Materijal iz prve eluacije je enantiomer Primera 62 i ima vrednost IC50od 723 nM. Apsolutna stereohemija Primera 62 je označena na osnovu njegove niže IC50vrednosti (videti Tabelu 1), analogno sa drugim ovde opisanim jedinjenjima. 38. l-Bromo-4-hloro-2-(difluorometoksi)benzen se izrađuje u skladu sa postupkom koji su dali M. Ge i saradnici, U.S. Pat. Appl. Publ., 20070265332, Nov 15, 2007. 39. U ovom slučaju, reakcija se izvodi sa di-|a-hlordihlorbis(etilen)diplatinom(II) i vodom, da se dobije međuproizvodfcrobutil[(15)-l-{(25)-5-[4-hloro-2-(difluorometoksi)fenil]-5-hidroksitetrahidrofuran-2-il}etil]karbamat. 40.transizomer Primera 64 (2-{[(25,,55)-5-(4-hloro-3,5-difluorofenil)tetrahidrofuran-2-il]metil}-7-(4-metil-li<:>f-imidazol-l-il)-3,4-dihidro-2//-pirido[l,2-a]pirazin-l,6-dion) se takođe izdvaja iz finalne faze. Ovo jedinjenje ima IC50vrednost od 184 nM. 41. (25)-l-{[/lerc-Butil(dimetil)silil]oksi}-5-[2-(trifluorometil)fenil]pent-4-in-2-ol (izrađen analogno kao i alkin opisan u odeljku 26) se konvertuje u{( 2S, 5R)- 5-[ 2-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-il}metanol koristeći bor trifluorid dietil eterat i trietilsilan. 42. Primer 66 je manji diastereomer izdvojen u toku prečišćavanja Primera 17 i predpostavlja se da ima pokazanu stereohemiju. 43. Traženi aril početni materijal se izrađuje od odgovarajuće fluorisanog anilina halogenacijom sa A^-halosukcinimidom, a nakon toga Sandmever reakcijom.

1. Odgovarajući homočiralni 2-aminopropan-1-ol se koristi umesto 2-aminoetanola.

2. HPLC uslovi. Kolona: Waters Atlantis dC18, 4.6 x 50 mm, 5 um; mobilna faza A: 0.05% trifluorosirćetna kiselina u vodi (v/v); mobilna faza B: 0.05% trifluorosirćetna kiselina u acetonitrilu (v/v); gradijent: 5% do 95% B u toku 4.0 minuta, linearno; brzina protoka: 2 mL/minut.

Ispitivanje y- sekretaze na bazi ćelije sa ELISA očitavanjem

[0224]Sposobnost jedinjenja da modulira produkciju amiloidnog beta proteina A0(l-42) se određuje pomoću humanih CHO ćelija uz prekomerno pojavljivanje WT-APP. Ćelije se nanesu u količini od 22,000 ćelija/100 uL po otvoru u providne ploče (Falcon) sa 96 otvora sa kulturom tkiva koja se tretira u medijumu na bazi DMEM/F12 i inkubiraju 24 sata na 37°C. Jedinjenja za testiranje se razblaže u 100% DMSO da se dobije jedanaest tačaka, pola log, za određivanje IC50 odgovora na dozu. Jedinjenja se dodaju u sveže izrađen medijum da se dostigne 1% finalnog DMSO. Odgovarajući vehikulum ili kontrolni inhibitor se dodaju pojedinačno u kontrolne otvore da se dobiju minimalne i maksimalne vrednosti inhibicije, tim redom, za ispitivanje prolaska signala pre nego što se ploče inkubiraju~24 sata na 37°C. Ovim postupkom se dobija kondicioni medijum u svakom otvoru koji se testira na vrednosti AP(l-42) u fazi ELISA testa koji je opisan u daljem tekstu. Preostale ćelijske kulture u svakom otvoru se takođe testiraju na toksičnost ćelija kako je niže opisano.

[0225]Oblaganje ploča za ELISA test se započinje dodavanjem po 50 uL/otvor internog A(3(l-42) specifičnog antitela (3 |ag/mL) u 0.1 M NaHC03(pH 9.0) u crne Maxizorp® ploče

(Nunc) sa 384 otvora i inkubira u toku noći na 4°C. Vezujuće antitelo se nakon toga aspirira iz ploča za ELISA test i ploče se isperu (2 x 100 uL do 4 x 100 uL) sa puferom za ispiranje (Dulbekov PBS, 0.05% Tween 20). U ploče se nakon toga doda po 90 uL/otvor pufera za blokiranje (Dulbekov PBS, 1.0% BSA (Sigma A7030)). Ploče se ostave minimum dva sata na sobnoj temperaturi da se izvrši inkubacija. Nakon toga se pufer za blokiranje ukloni i doda se po 20 uL/otvor pufera za analizu (Dulbekov PBS, 1.0% BSA (Sigma A7030), 0.05% Tvveen 20). U ovoj tački, po 40 uL (u duplikatu) eksperimentalnog kondicionog medijuma (prethodno opisan) se prenese u otvore blokiranih ELISA ploča koje sadrže vezujuće antitelo, nakon čega se podvrgnu inkubaciji na 4°C u toku noći. Toksičnost ćelija se takođe meri u odgovarajućim preostalim ćelijama nakon uklanjanja kondicionog medijuma za analizu AP(1-42) kolorimetrijskim ispitivanjem proliferacije ćelija (CellTiter 96<®>AQueousOne Solution Cell Proliferation Assay, Promega) u skladu sa uputstvima proizvodjača.

[0226JNakon inkubacije ploča za ELISA test u toku noći na 4°C, nevezani A|3 peptidi se uklone ispiranjem (2 x 100 uL do 4 x 100 uL) sa puferom za ispiranje. Doda se europijum (Eu) obeleženo (individualno označen, Perkin Elmer) AP(1-16) 6el0 monoklonalno antitelo (Covance #SIG-39320), (50 uL /otvor Eu-6el0 @ 1:10,000, 20 uM EDTA) u puferu za analizu. Nakon inkubacije mimum 2 sata na temperaturi sredine, ploče se isperu (2 x 100 uL do 4 x 100 uL) sa puferom za ispiranje, a nakon toga se doda po 30 uL/otvor Delfia Enhancement Solution (Perkin Elmer). Nakon inkubacije u toku jedan sat na temperaturi sredine, ploče se očitavaju na EnVision čitaču ploča (Perkin Elmer) koristeći standardne DELFIA TRT postavke. Rezultati analiza koji uključuju određivanje inhibitorne IC50vrednosti se dobijaju analizom dobijene krive regresije (interni softver) i koristeći srednje vrednosti odgovarajućih ploča za maksimalnu i minimalnu vrednost inhibicije.

Claims (27)

1. Jedinjenje koje ima strukturu Formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so naznačeno time što: X je 5- do 14-člani heteroaril koji sadrži 1-3 heteroatoma; R<1>je vodonik, halogen, G-C6alkil, C3-C6cikloalkil ili C2-C6alkenil grupa; pri čemuje navedena alkil, cikloalkil ili alkenil grupa opciono supstituisana sa jednim do tri supstituenta svaki nezavisno izabran iz grupe koja sadrži fluor, hidroksil i Ci-Cćalkoksi grupu; A je C3-C6cikloalkil ili 4- do 10-člani heterocikloalkil; pri čemuje navedeni cikloalkil ili heterocikloalkil opciono supstituisan sa jednim do tri supstituenta svaki nezavisno izabran iz grupe koja sadrži halogen i Ci-Cćalkil grupu; R<2a>i R<2b>su u svakom pojavljivanju nezavisno vodonik, fluor, cijano, -CF3, Ci-Cćalkil, C2-Cćalkenil, C3-C6cikloalkil, C4-C8bicikloalkil, C2-C6alkinil ili fenil grupa; pri čemuje navedena alkil, alkenil, cikloalkil, bicikloalkil, alkinil ili fenil grupa opciono supstituisana sa jednim do tri supstituenta svaki nezavisno izabran iz grupe koja sadrži cijano, Ci-C3alkil i fluor; ili R<2a>i R<2b>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju 3- do 5-člani cikloalkil opciono supstituisan sa jednim do tri R<8>; R3 je vodonik, halogen, Ci-C6alkil, C2-C6alkenil, -(C(R<10>)2)t-(C3-C6cikloalkil), -(C(R10)2)t(4-do 10-člani heterocikloalkil), -(C(R<10>)2)t-(C6-Cioaril), -(C(R<10>)2)t-(5-do 10-člani heteroaril) ili -(C(R<10>)2)t-OR<12>; pri čemuje navedeni alkil, alkenil, cikloalkil, heterocikloalkil, aril ili heteroaril opciono supstituisan sa jednim do pet R11; R<4a>i R<4b>su svaki nezavisno vodonik, -CF3ili G-Cćalkil grupa, pri čemuje navedena alkil grupa opciono supstituisana sa jednim do tri supstituenta svaki nezavisno izabran iz grupe koja sadrži -CF3, cijano i fluor; ili R<4a>i R<4b>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju 3- do 5-člani cikloalkil, pri čemuje navedeni cikloalkil opciono supstituisan sa jednim do tri supstituenta svaki nezavisno izabran iz grupe koja sadrži -CF3, cijano, fluor i Ci-Cćalkil grupu; R<5a>i R<5b>su u svakom pojavljivanju svaki nezavisno vodonik, -CF3ili Ci-Cćalkil grupa, pri čemuje navedena alkil grupa opciono supstituisana sa jednim do tri supstituenta svaki nezavisno izabran iz grupe koja sadrži -CF3, cijano i fluor; ili R<5a>i R<5b>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju 3- do 5-člani cikloalkil, pri čemuje navedeni cikloalkil opciono supstituisan sa jednim do tri supstituenta svaki nezavisno izabran iz grupe koja sadrži -CF3, cijano, fluor i Ci-Cćalkil grupu;R<6>, R<7>i R<8>su svaki nezavisno vodonik, -CF3, cijano, halogen, Ci-Cćalkil ili -OR<9>;poduslovom da R<6>i R<7>ne mogu oba da budu -OH grupa; R9 je vodonik, Ci-Cćalkil ili -CF3; pri čemuje navedena alkil grupa opciono supstituisana sa jednim do tri supstituenta svaki nezavisno izabran iz grupe koja sadrži cijano grupu i fluor; svaki R10 je nezavisno vodonik, halogen, cijano, -CF3, G-C6alkil ili -SF5; pri čemuje navedena alkil grupa opciono supstituisana sa jednim do tri atoma fluora; svaki R<11>je nezavisno vodonik, halogen, -CF3, -SF5, -Si(CH3)3, -OR<12>, G-Cćalkil, C2-Cealkenil, C2-C6alkinil, -(C(R<10>)2)t-(C3-C6cikloalkil), -(C(R<10>)2)t-(C6-Cioaril) ili -(C(R10)2)t-(5-do 10-člani heteroaril), pri čemuje navedena -Si(CH3)3, alkil, alkenil, alkinil, cikloalkil, aril ili heteroaril grupa opciono supstituisana sa jednim do pet supstituenata svaki nezavisno izabran iz grupe koja sadrži halogen i -CF3grupu; svaki R<12>je vodonik, Ci-C6alkil, -(C(R<13>)2)n-( C3-C6cikloalkil), -(C(R<13>)2)n-(4- do 10-člani heterocikloalkil), -(C(R<13>)2)n-(C6-Cioaril) ili -(C(R<13>)2)n-(5- do 10-člani heteroaril); pri čemu je navedena alkil, cikloalkil, heterocikloalkil, aril ili heteroaril grupa opciono supstituisana sa jednim do pet R<14>; svaki R13 je nezavisno vodonik, G-Cćalkil, C2-C6alkenil, C2-C6alkinil, halogen, cijano, -CF3ili -OCF3grupa; R<14>je nezavisno vodonik, -CF3, cijano, halogen ili G-6alkil grupa; pri čemuje navedena alkil grupa opciono supstituisana sa jednim do tri supstituenta svaki nezavisno izabran iz grupe koja sadrži hidroksil, -CF3, cijano i fluor; i svaki t ili nje ceo broj nezavisno izabran od 0, 1, 2 ili 3; svaki z je ceo broj nezavisno izabran od 1 ili 2; svaki y je ceo broj nezavisno izabran od 0, 1, 2, 3 ili 4.

2. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 1, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je X imidazolil, pirazolil, izotiazolil, tiazolil, izoksazolil, oksazolil ili piridil; i R<1>je Ci-Cćalkil grupa.

3. Jedinjenje u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1 ili 2, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je X imidazolil; i R<1>je metil grupa.

4. Jedinjenje u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1 do 3, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je z = 1; a R<4a>i R<4b>su svaki nezavisno vodonik ili metil grupa.

5. Jedinjenje u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1 do 4, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što su R<5a>, R5b,R6i R<7>nezavisno vodonik.

6. Jedinjenje u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1 do 5, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je y = 0 ili 1; a R<2a>i R<2b>su nezavisno vodonik ili metil grupa.

7. Jedinjenje u skladu sa bilo kojim od prethodnih patentnih zahteva, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je A ciklobutil, ciklopentil ili cikloheksil.

8. Jedinjenje u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1 do 6, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je A dihidroizoksazolil, tetrahidrofuranil ili tetrahidropiranil.

9. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 8, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je A tetrahidrofuranil.

10. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 8, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je A tetrahidropiranil.

11. Jedinjenje u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 6 do 10, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je R3 je -(C(R<10>)2)t-(C6-Cioaril) ili -(C(R<10>)2)t-<O>R<12>; i t je 0 ili 1.

12. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 11, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je R<3>-(C(R<10>)2)t-(C6-Cioaril); t je 0; i navedena aril grupa je fenil opciono supstituisana sa jednim do tri R<11>, pri čemuje R<11>izabran iz grupe koja sadrži fluor, hlor, -CF3, -SF5, -OR<12>, Ci-C3alkil i C3-C6cikloalkil grupu; pri čemuje navedena alkil ili navedena cikloalkil grupa opciono i nezavisno supstituisana sa jednim do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen i -CF3.

13. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 11, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je R<3>-(C(R<10>)2)t-(5- do 10-člani heteroaril) a navedeni heteroaril je tiofenil opciono supstituisan sajednim do tri R<11>, pri čemuje R11 izabran iz grupe koja sadrži fluor, hlor i -CF3.

14. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 11, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što jeR3-(C(R<10>)2)t-OR<12>; t je 0; i R12 je izabran od fenila, naftila ili dihidroindenila; pri čemuje navedeni fenil, naftil ili dihidroindenil opciono i nezavisno supstituisan sajednim do tri R<14>izabranih iz grupe koja sadrži fluor, hlor, -CF3i G-C3alkil grupu; pri čemu navedena alkil grupa može da bude nezavisno supstituisana sajednim do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen i -CF3.

15. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 1 koje ima strukturu Formule Id ili njegova farmaceutski prihvatljiva so: naznačeno time što: R2 je vodonik ili metil grupa; R3 je -(C(R<10>)2)t-(C6-Cioaril) ili -(C(R<10>)2)t-(5-do 10-člani heteroaril), pri čemuje navedena arili ili heteroaril grupa opciono supstituisana sajednim do tri R<11>nezavisno izabranim iz grupe koja sadrži fluor, hlor, -CF3, -SF5, -OCH3, -OCF3i -OCHF2; R10 je nezavisno vodonik, halogen, cijano, -CF3, Ci-Cćalkil ili -SF5; pri čemuje navedena alkil grupa opciono supstituisana sa jedan do tri fluora; i t je 0 ili 1.

16. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 15, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je t = 0; a R3 je fenil opciono supstituisan sajednim do tri R11.

17. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 15, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je R<3>tiofenil opciono supstituisan sa jedan do tri R<11>.

18. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 15, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je navedeno jedinjenje 7-(4-metil-lif-imidazol-l-il)-2-[(lS)-l-{(25',5i?)-5-[4-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-il} etil]-3,4-dihidro-2#-pirido[ 1,2-a]pirazin-l ,6-dion.

19. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 15, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je navedeno jedinjenje 2-[(15)-l-{(25',5i?)-5-[4-hloro-2-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-il} etil]-7-(4-metil- 1/f-imidazol-1 -il)-3,4-dihidro-2i:f-pirido[l,2-a]pirazin-l,6-dion.

20. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 15, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je navedeno jedinjenje 2-[(15)-l-{(25',5i?)-5-[3,5-difluoro-4-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-il}etil]-7-(4-metil-l/^-imidazol-l-il)-3,4-dihidro-2/^-pirido[ 1,2-a]pirazin-1,6-dion.

21. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 15, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je navedeno jedinjenje 2-{(15)-l-[(25,5i?)-5-(4-hloro-3,5-difluorofenil)tetrahidrofuran-2-il]etil}-7-(4-metil-lif-imidazol-l-il)-3,4-dihidro-2//- pirido[ 1,2-a]pirazin-1,6-dion.

22. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 15, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je navedeno jedinjenje 2-[(15)-l-{(25,,5i?)-5-[4,5-difluoro-2-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-il}etil]-7-(4-metil-i<y>^-imidazol-l-il)-3,4-dihidro-2//- pirido[ 1,2-a]pirazin-1,6-dion.

23. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 15, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je navedeno jedinjenje 2-[(15)-l-{(25,,5i?)-5-[4-fluoro-2-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-il}etil]-7-(4-metil-l/^-imidazol-l-il)-3,4-dihidro-2H-pirido[ 1,2-a]pirazin-1,6-dion.

24. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 15, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je navedeno jedinjenje 2-[(15)-l-{(25',5i?)-5-[4-hloro-5-fluoro-2-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-il}etil]-7-(4-metil-l/^-imidazol-l-il)-3,4-dihidro-2/f-pirido[ 1,2-a]pirazin-1,6-dion.

25. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 15, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je navedeno jedinjenje 2-[(15)-l-{(25,,5i?)-5-[4-hloro-3-fluoro-2-(trifluorometil)fenil]tetrahidrofuran-2-il} etil]-7-(4-metil- li^-imidazol-1 -il)-3,4-dihidro-2if-pirido[ 1,2-a]pirazin-1,6-dion.

26. Jedinjenje kako je definisano u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1 do 25, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je za upotrebu u tretmanu neurodegenerativnih i psihijatrijskih poremećaja, uključujući Alzheimer-ovu bolest ili Niemann-Pick tip C bolest.

27. Farmaceutska kompozicija, naznačena time što uključuje jedinjenje u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1 do 25 ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i farmaceutski prihvatljiv ekscipijent.