RS55672B1 - Supstance oleuropeina za lečenje rana i čireva kod starijih ljudi i/ili dijabetičara - Google Patents

Description

Oblast tehnike ovog pronalaska

[0001]Ovaj se pronalazak odnosi na novu upotrebu oleuropeina za obradu rana koje zaceljuju i čireva kod lica u poodmaklim godinama ili starih i/ili dijabetičara.

[0002]Preciznije, ovaj se pronalazak specifično odnosi na supstance koje sadrže oleuropein kao jedini aktivni sastojak za upotrebu za lečenje rana koje zaceljuju i čireva kod lica u poodmaklim godinama, starijih ljudi i/ili dijabetičara, izabranih iz grupe koja obuhvata: dijabetesno stopalo, dekubitus i venske čireve.

Prethodno stanje tehnike

[0003]Oleuropein se uglavnom, ali ne isključivo, dobija iz lista drveta maslineO/ea europea,koje potiče iz mediteranske regije gde se ekstrahuju i plod i ulje i predstavljaju glavne sastojke nečega što je poznato kao "Mediteranska dijeta".

[0004]Oleuropein je glavna fenolna komponenta pulpe zelenih maslina (vrsteO/ea europeapo kojoj je glikozid dobio ime) i nalazi se u devičanski ceđenom maslinovom ulju kom daje svoj gorki ukus. Lišće masline takođe sadrži oleuropein kao glavnu komponentu. Ovaj aktivni sastojak (a.i.) koji se koristi u ovom pronalasku, t.j., oleuropein, je dobijen iz ekstrakata lista masline (Farmakopeja Evrope (European Pharmacopoeia) 6.4: minimalni sadržaj oleuropeina od 16%) i naknadne izolacije i prečišćavanja.

[0005]Ekstrakt masline nije samo zdrav već je i baza za izgradnju netoksičnog imunog sistema''. Klinički dokaz je pokazao da ekstrakti lista masline smanjuju krvni pritisak 2,3,4,5 Takođe je objavljeno da tečni ekstrakt napravljen direktno iz svežih listova masline ima antioksidansni kapacitet skoro dvostruko veći od onog što daje ekstrakt zelenog čaja i 400% veći od vitamina C^. Članci iz nepatentne literature opisuju da oleuropein ima razna farmakološka svojstva, kao što je na primer, antioksidansna^, antiinflamatorna^, antikancerogena^.<lO>, antimikrobna^ i antivirusna^ svojstva. Oleuropein se još pokazao korisnim kao zaštita za srce u odnosu na kardiotoksični doksorubicin''^ i vidi se da pokazuje anti-ishemijske i hipolipidemijske aktivnosti<14>.

[0006]U vezi sa patentnim dokumentima, US 2004/0097428 A1 se odnosi na postupke za inhibiranje kancera i drugih bolesti koje vode do formiranja ožiljaka koji obuhvata primenu oleuropeina i proizvoda njegove hidrolize u terapijski delotvornim količinama (patentni zahtev 12 je pomenuo više od stotinu tipova kancera).

[0007]US 2002/0110600 A1 se odnosi na supstancu za ublažavanje simptoma hladnoće i gripa koja sadrži 80-88% ekstrakta lista masline koji sadrži oleuropein. KR 20070065955 se odnosi na zubnu pastu koja obuhvata mikrokapsule koje sadrže funkcionalne sastojke da obezbede direktan kontakt oleuropeina sa usnom dupljom da se suzbiju bakterije, gljive i da se poboljša unutrašnja sluzokoža usta.

[0008]Dokument ES 2 274 721 A1 se odnosi na upotrebu oleuropeina za proizvodnju medicinskog proizvoda za preventivno i/ili terapijsko lečenje stanja koje se povezuje sa perifernom vaskularnom bolešću, posebno insuficijencijom vena pri čemu su taj poremećaj hemoroidi ili proširene vene.

[0009]Dokument US2004/097428 se odnosi na upotrebu oleuropeina za suzbijanje kancera i formiranje ožiljaka.

[0010]Dokument US 2003/0004117 A1 se odnosi na postupke za suzbijanje angiogeneze korišćenjem supstance u obliku ekstrakta biljke koji obuhvata oleuropein.

[0011]Dokument WO2010/070183 A1, istih autora kao i za ovu prijavu patenta, se odnosi na farmaceutske supstance koje obuhvataju oleuropein i ekstrakte lista masline da se indukuje angiogeneza i vaskulogeneza.

[0012]Dokument MX 2007016417 A se odnosi na supstancu koja obuhvata 1-25% soj Lalliumekstrakta kao osnovni sastojak pored mešavine polietilen glikola (PEG) koja obuhvata 15-50% PEG 4000 i 5-30% PEG 300, alkohol (preporučljivo 15-50% etanol ili etanol vodu u odnosu od 50:10%) i biljno ulje (patentni zahtevi 1-2, 4-5) preporučljivo maslinovo ulje na 5-20% (patentni zahtev 3); preparat dobijen iz ove supstance (patentni zahtev 6) i njegova upotreba za sprečavanje ili lečenje dijabetesnog stopala, uglavnom inficiranih rana i spoljnih čireva kože (patentni zahtev 7). Međutim, ovaj dokument ne razmatra maslinovo ulje i/ili nejgove sastavne delove kao osnovne sastojke ovog pronalaska jer se ugrađuje samo da se dobije formulacija u obliku tečne supstance. Druge formulacije opisane u ovom sastojku, kao što je mast, ne obuhvataju pomenutu komponentu, korišćenjem mešavina polietilen glikola visoke i niske molekularne težine da se dobije željena formulacija masti.

[0013]Dakle, moguće je zaključiti da je oleuropein poznat za lečenje različitih bolesti i kao modulator različitih fizioloških procesa. Međutim, pokušaji da se izleče izvesne bolesti koje utiču na specifičnu grupu ljudi, kao što su ljudi u poodmaklim godinama, stari i/ili dijabetičari, i preciznije bolesti pomenutih grupa, kao što je dijabetesno stopalo, dekubitis i venski čirevi, sa oleuropeinom su nepoznati sve do sada.

Cilj pronalaska

[0014]Cilj ovog pronalaska su samim tim farmaceutske supstance koje sadrže oleuropein kao jedini aktivni sastojak za upotrebu za lečenje rana koje zaceljuju i čireva kod lica u poodmaklim godinama ili starih osoba i/ili dijabetičara.

[0015]U određenom izvođenju ovog pronalaska, supstance sadrže oleuropein sa stepenom čistoće od barem 30%, preporučljivo između 41,5% i 100%, specifično 41,5% i 80%, kao jedini aktivan sastojak za upotrebu u lečenju rana koje zaceljuju i čireva kod specifične grupe pacijenata kao što su lica u poodmaklim godinama, i starije osobe i/ili dijabetičari, izabranih iz grupe koja obuhvata: dijabetesno stopalo, dekubitis i venske čireve.

[0016]Supstance iz ovog pronalaska samim tim sadrže oleuropein sa određenim stepenom čistoće kao jedini aktivni sastojak u ovoj formulaciji, kao i odgovarajuće farmaceutski prihvatljive nosače koji se često koriste u farmaceutskoj industriji.

[0017]Za potrebe ovog pronalaska, lica u poodmaklim godinama i/ili stare osobe se smatraju specifičnom grupom pacijenata koju karakteriše predstavljanje određenih simptoma i/ili fizičkog funkcionalnog stanja i starosti.

[0018]Simptomi i/ili fizičko funkcionalno stanje karakteristično za grupu pacijenata izabranih za potrebe ovog pronalaska, lica u poodmaklim godinama, su generalno kombinacija različitih činilaca, između ostalog, hronične bolesti, vaskularne insuficijencije, hronične venske insuficijencije, nedostatka faktora rasta, nedostatka regeneracije tkiva, dijabetesa, anemije, hipoproteinemije, gojaznosti, neuroloških nedostataka, nutritivnih nedostataka, nepokretnosti, itd.

[0019]Najčešća starosna dob terapijske grupe koja se pominje u ovom pronalasku je iznad 55 godina starosti, preporučljivo lica starija od 65 godina, još preporučljivije, lica starija od 70 godina starosti.

[0020]U nastavku su dakle ciljevi ovog pronalaska: Farmaceutska supstanca koja sadrži oleuropein kao jedini aktivni sastojak za upotrebu za lečenje rana koje zaceljuju i čireva kod lica u poodmaklim godinama ili starijih osoba i/ili dijabetičara,

izabrana iz grupe koja se sastoji od: dijabetesno stopalo, dekubitis i venski čir.

[0021]Farmaceutska supstanca koja sadrži oleuropein za upotrebu u postupku iz ovog pronalaska, naznačena time da je oleuropein prisutan u koncentraciji od 10_1m do 10"''^M, preporučljivo u koncentraciji od 10~<2>do 10"^M, još preporučljivije u koncentraciji od 10~<2>.

[0022]Farmaceutska supstanca koja sadrži oleuropein za upotrebu u postupku iz ovog pronalaska, naznačena time da oleuropein prisutan u ovoj supstanci ima stepen čistoće od barem 30%, preporučljivo između 41,5% i 100%, specifično 41,5% i 80%.

[0023]Farmaceutska supstanca koja sadrži oleuropein za upotrebu u postupku iz ovog pronalaska, naznačena time da je u obliku gela, kreme (emulzije u ulju/vodi), ili u obliku vodenog rastvora i dodatno obuhvata odgovarajuće farmaceutski prihvatljive nosače.

[0024]Farmaceutske supstance iz ovog pronalaska za upotrebu u postupku iz ovog pronalaska, u režimu primene od 12 sati, 24 sata i 48 sati.

Opis slika nacrta

[0025]Slika 1: Venski čir. Stadijum I: Procenat dnevnog smanjenja čirom zahvaćenog područja u koncentraciji od 10"<2>m, gela, kreme i vodenog rastvora.

Slika 2: Venski čir. Stadijum II: Procenat napredovanja zalečene površine u koncentraciji od 10"''^M, Slika 3: Venski čir. Stadijum III: Procenat napredovanja zalečene površine u koncentraciji od 10"^M. Slika 4: Venski čir. Stadijum IV: Prosečan procenat napredovanja zalečene površine u koncentracijama od 10"1m -10"''^M.

Slika 5: Venski čir. Stadijum IV: Prosečan procenat dnevnog smanjenja čira pri koncentracijama od 10"10m- 10-11M.

Slika 6: Venski čir. Stadijum V: Procenat dnevnog smanjenja čirom zahvaćenog područja pri

koncentraciji od IO'^m i režimima primene na 12 sati, 24 sata, i 48 sati.

Slika 7: Venski čir. Stadijum VI: Procenat dnevnog smanjenja čirom zahvaćenog područja. Oleuropein sa stepenom čistoće od 41,5% naspram 80%.

Slika 8: Dijabetesno stopalo: Procenat dnevnog smanjenja čirom zahvaćenog područja u koncentraciji od 10_<2>m i 10_<9>m i režimima primene na 12 sati i 24 sata.

Slika 9: Dekubitis: Izlečena površina na kraju studije pri koncentraciji od 10" 2M, 10-<7>M, 10"<9>M i režimima primene na 12 sati, 24 sata i 48 sata.

Detaljan opis pronalaska

[0026]Kao što je gore razmatrano, simptom i/ili fizičko funkcionalno stanje koje određuje bolesti koje treba lečiti u ovom pronalasku kod lica u poodmaklim godnama je generalno kombinacija različitih činilaca, uključujući između ostalih hroničnu bolest, vaskularnu insuficijenciju, hroničnu insuficijenciju vena, manjak faktora rasta, problem sa regeneracijom tkiva, anemija, dijabetes, hipoproteinemija, gojaznost, neurološki nedostaci, deficit hranjivih materija, nepokretljivost, itd.

[0027]Objašnjenje činilaca koji prouzrokuju stvaranje i razvoj svake od specifičnih bolesti koje treba lečiti se razmatraju u tekstu koji sledi.

[0028]Prema "Međunarodnoj radnoj grupi o dijabetesnom stopalu (International VVorking Group on the Diabetic Foot)", dijabetesno stopalo je infekcija, čir ili uništenje dubokih tkiva povezanih sa neurološkim promenama i različitim stepenima bolesti perifernih krvnih sudova u donjim ekstremitetima što pogađa pacijente sa dijabetesom melitusom''5,16 Važno je naglasiti da "dijabetesno stopalo" ne srne da se meša sa stopalom dijabetičara, jer se komplikacije koje uglavnom zavise od kontrole koju dijabetičar ima nad bolešću ne razvijaju kod svih dijabetičara, urođenih činilaca i činilaca sredine povezanih sa pacijentom, i najzad u stadijumu napredovanja osnovne patologije.

[0029]Kada se kaže da dijabetesno stopalo ima "neuropatsku etiopatogenu bazu", znači da primarni uzrok koji prouzrokuje tegobe od dijabetesnog stopala jeste u progresivnom oštećenju koje prouzrokuje dijabetes na nerve, poznatom kao neuropatija. Nervi su odgovorni za prijavljivanje različitih stimulanasa (senzornih nerava) i za kontrolisanje mišića (mišići efektora)<17.>Kod dijabetičara, uključivanje nerava prouzrokuje da pacijent izgubi osetljivost, posebno osetljivost na bol i toplotu, i prouzrokuje atrofiju mišića, uz davanje prednosti pojave deformacija stopala jer se mišići uvlače u kosti, da se mobiliše i stabilizuje struktura kostiju 18.

[0030]Činjenica da osoba gubi osetljivost u stopalu ukazuje da ako dođe do rane, prekomernog č usled svraba, prekomerni pritisak određene tačke ili ako dođe do prekomernog izlaganja izvorima toplote ili hladnoće, to se neće osetiti.<19>S obzirom da je bol mehanizam odbrane organizma koji ohrabruje osobu da preduzme mere da se zaštiti od agresivnih činilaca, dijabetičari mogu da boluju od rana i da to i ne shvate. Pored toga, gubitak kontrole mišića daje kao prednost pojavu deformacija i one mogu, u isto vreme, da pospeše svrab, promene u raspodeli oslonaca na stopalo tokom šetnje i predisponirajuće agresije na određene tačke stopala, koje, ako se ne preduzme briga na vreme, mogu da budu , .. 20,21,22

fatalne.

[0031]Ishemija ili oštećenje tkiva koje nastane iz insuficijencije arterija je često kod dijabetičara kao posledica oštećenja koje pretrpe krvni sudovi kod ovih pacijenata zbog ove bolesti. Funkcija arterija je da obezbede hranljive sastojke i kiseonik za ćelije tako da pravilno mogu da funkcionišu. Stopalo je u području rizika kompromitovano udaljenošću do srca i ako se ovome doda oštećenje koje su pretrpeli krvni sudovi, može se videti da je arterijska cirkulacija stopala u velikoj meri smanjena.

[0032]U vezi sa činiocima koji su okidač za pojavu dijabetesnog stopala<23>, utvrđeno je da počevši od slabe suve kože, insuficijencija protoka krvi dodata na smanjenu osetljivost kod pacijenta, traume (fizičke ili mentalne povrede), kao što je udarac, element koji je oštar ili seče<24>, mali kamen koji ulazi u cipelu ili, da bi se uzeo očigledan primer žuljanje, koje proizvede uska obuća<25>, mogu prouzrokovati početak ove bolesti.

[0033]Rana se dakle formira a da dijabetičar toga nije ni svestan u početku zbog gubitka osetljivosti. Ako se ostavi nelečena, ova rana predstavlja otvorena vrata za infekcije koje prouzrokuju mikroorganizmi. S obzirom da je inflamatorni odgovor smanjen, patogeni ne omogućavaju dovoljnom otpornošću, kolonizuju područje, tkivo se uništava i ima problema sa zaceljivanjem. Samim tim to znači da se stvaraju čirevi. Čirevi su rane koje karakteriše gubitak supstance i posebno nedovoljna sklonost ka zaceljivanju<26.>

[0034]Čirevi zahtevaju svu ortopedsku i medicinsku negu koja je pacijentu dostupna jer ako ne zacele spontano, čirevi teže da se pogoršaju, postanu gangrenozni u brojnim slučajevima, prinudne delimične amputacije ili čak potpunu amputaciju ugroženih područja. Procenjuje se da su komplikacije izvedene iz dijabetesa glavni uzrok netraumatske amputacije širom sveta<27>. Čirevi dijabetesnog stopala zahtevaju višedisciplinarnu dijagnozu i lečenje, koje generalno rade stručnjaci za dijabetes i hirurzi. Lečenje poznato u ovom stanju tehnike se sastoji od pogodnih obloga, antibiotika (protiv stafilokoka, streptokoka i anaerobnih sojeva), čišćenje rane i revaskularizaciju arterije.

[0035]Stručnjaci proučavaju ulogu azot oksida u zaceljivanju rane dijabetesnog stopala 28. Azot oksid, koji se već koristi u stanju tehnike, je snažan vazodilatator koji pomaže u prenosu hranljivih sastojaka do rana kojima je potreban kiseonik. Studija koja je rađena 2004. koja je zaključila da za ljude sa dijabetesnim stopalom, terapija hiperbaričnim kiseonikom (medicinska upotreba kiseonika pod pritiskom većim od atmosferskog pritiska) može poboljšati zaceljivanje posle jedne godine<2930.>Međutim, generalizovano lečenje često nije pogodno za izvesne pacijente i pojedinačna procena mora biti urađena pre nego što se da specifična terapija, čak i davanje kombinacije različitih terapija ako se smatra neophodnim.

[0036]Dekubitus (PU), takođe poznat i kao rana od ležanja u krevetu, dekubitusni čir ili dekubitusne rane, se definiše kao "površina oštećenja koje se nalazi na koži i tkivu ispod koje prouzrokuje pritisak, jak svrab, trenje ili kombinacija navedenih" (EPUAP 2003, Evropski savetodavni panel za dekubitus (European Pressure Ulcer Advisorv Panel)).

[0037]Oni mogu nastati u bilo kom području tela, a češći su u ispupčenjima kostiju (krsna kost, kukovi i pete). Dekubitusi su relativno česti u bolničkom okruženju, posebno pogađaju starije pacijente koji boluju od nepokretnosti, ozbiljne akutne patologije i/ili neuroloških nedostataka.

[0038]Najvažniji činilac u razvoju dekubitusa (PU) je zadržan pritisak. Paralelne i/ili tangencijalne sile trenja, kao i ozbiljni činioci rizika koji fundamentalno zavise od stanja pacijenta u poodmaklim godinama, kao što je gore navedeno, moguće je povezati sa ovim pritiskom.

[0039]Dekubitusi označavaju pojavu poremećaja mikrocirkulacije u nosećim područjima tela smeštenog na tvrdoj površini. Iz tog razloga, područja sa ispupčenjima kosti su najčešća područja za pojavu dekubitusa (PU). Pritisak zadržan na koži i mekim tkivima se povećava intersticijalni pritisak sa začepljenjem limfnih i krvnih sudova (formiranje mikrotromba) što vodi do autolize i nagomilavanja toksičnih metaboličkih preostataka. Produžena lokalna ishemija vodi nekrozi i naknadnom zahvatanju tkiva čirevima i na nivou kože i na nivou dubokog tkiva. Hidrostatički pritisak kapilara kože se kreće u opsegu između 16 i 32 mmHg. Bilo koji pritisak koji premašuje ove brojke smanjuje protok krvi i može prouzrokovati ishemijsko oštećenje za čak manje od dva sata.

[0040]Sile trenja (frikcione sile paralelno sa epidermalnom površinom) i smičnim silama (tangencijalne sile koje povećavaju trenje u područjima pritiska kada se uzglavlje kreveta podigne više od 30°) smajuju pritisak neophodan da prouzrokuje oštećenje tkiva.

[0041]Niz faktora rizika za pojavu dekubitusa (PU) je opisan zavisno od stanja pacijenta u poodmaklim godinama. Od svih je najvažniji činilac nepokretnost.

[0042]Pregled epidemioloških studija sprovedenih u Ujedinjenom Kraljevstvu, Kanadi i SAD, opisuje zapaženu visoku prisutnost dekubitusa u Ujedinjenom Kraljevstvu između 4,4% i 37% zavisno od tipa institucije. Računa se da velika zastupljenosti akutnih slučajeva u bolnicama u Španiji i da iznosti 12%, vodi visokim troškovima za zdravstveni sistem, takođe stvara povećanje radnih opterećenja za profesionalne negovatelje.

[0043]Tradicionalno u Španiji, epidemiologija koja se odnosi na dekubituse se retko sreće i generalno je lokalna. Međutim, poslednjih godina, postoji snažan razvoj svesti o epidemiologiji posebno usled podrške naučnih udruženja, dimenzija da se problem prepoznaje i svest o zdravstvenoj nezi kod donosioca odluka i zdravstvenih radnika.

[0044]Izračunato je da je pojava kod opšte populacije 1,7% između 55 i 69 godina starosti i 3,3% između 70 i 75 godina starosti. Nema pouzdanih podataka o postojanju u oblasti primarne zdravstvene nege. U nekim serijama, procenjuje se da se 60% razvije u bolnici. Više od 70% dekubitusa se javlja kod ljudi starijih od 70 godina.

[0045]Čirevi ovog tipa se klasifikuju kao: * Čirevi 1. grupe: koža izgleda crveno, ovo crvenilo ne nestaje posle uklanjanja pritiska koji se primeni na ovo područje.

Čirevi 2. grupe: koža puca na nivou epidermisa i dermisa prouzrokujući formiranje plihova.

* Čirevi 3. grupe: prouzrokuju gubitak kontinuiteta kože sa pojavom nekroze tkiva potkožne ćelije koja formira crnu krastu ugruška koja se zove eshara. * Čirevi 4. grupe: sveobuhvatan nekrotični čir koji dostiže do mišića, kosti, i čak krvnih sudova i nerava.

[0046]Najzad, venski čirevi su rane koje se generalno pojavljuju na nogama i najčešće se javljaju kod lica u poodmaklim godinama. One su glavni uzrok hroničnih rana, kod između približno 70% i 90%<31>slučajeva. Oni obično nastaju u internom supramaleolarnom regionu iako mogu takođe da nastanu u spoljnjem području ili da se smeste blago iznad sredine lista. Njihova veličina je promenljiva, i njih karakteriše nedostatak bola (izuzev kada su inficirani). Koža oko čira normalno pokazuje sve znake oboljenja kože izazvanog insuficijencijom vene. Ima više teorija o njihovom poreklu mada je moguće zbog različitih uzroka. Trenutno, najprihvaćenije teorije o njihovom poreklu, ih dovode u vezu sa začetkom baze koja prethodi pojavi čira a u čijoj osnovi je ishemijski proces. Tako da bi se sa napredovanjem povišenog krvnog pritiska, eksudacija proteina velike molekularne težine proizvela prema spoljnoj strani krvnih sudova, što je praćeno pucanjem crvenog krvnog zrnca (eritrocita) ili nakandnim malim lokalnim krvarenjima. Ovi proteini će ili biti organizovani, kao u slučaju fibrinogena koji se pretvara u fibrin, ili će biti neutralisani u druge proteine, što se javlja sa alfa-2-makroglobulinom koji inhibira faktor rasta. Venska hipertenzija bi takođe prouzrokovala gomilanje leukocita i fenomena lokalne tromboze venula. Ovi fiziopatološki procesi se ponavljaju sa starenjem.

[0047]Ovo će kao rezultat imati nastanak područja oko krvrnih sudova sa malim sadržajem faktora rasta, čiji nedostatak će prouzrokovati nemogućnost regeneracije tkiva jednom kada se izgubi zaštitni kapacitet epidermisa. Samim time, reepitelizacija i formiranje novog dermisa bi bilo izmenjeno dejstvom takvog stanja kod lica u poodmaklim godinama kada je koža oštećena.

[0048]Venski čirevi su učestaliji kod žena, pri čemu je odnos muškaraca- žena za venske čireve 1-3. Uobičajena pojava je posle 65 godina starosti sa procentom od 5,6 % populacije. Oni su samim tim česti u ambulantnoj ili kućnog medicinskoj nezi. Jednom kada se pojave, postoji tendencija da imaju podmuklo napredovanje sa otežanim zaceljivanjem, značajnim obuhvatanjem okolne kože i čestim ponavljanjima. Starost je fundamentalni činilac rizika, proširene vene se javljaju četiri puta češće i infekcija je sedam puta češća za starosnu dob od 60 godina.

[0049]Uobičajeno napredovanje venskih čireva je sledeće: Edemi (dilatirane (proširene) vene koje generišu insuficijenciju zaliska pri čemu se povratni tok vene usporava i dolazi do hipertenzije kapilara sa povećanom permeabilnošću, stvara se edem), korona flebektatika ili telangiektazija (eritematozna reakcija u zglobu noge) se javlja u prvom stadijumu. Krivudave i dilatirane (proširene) vene, okra ili pigmentni dermatitis (usled ekstravazacije (izlivanje krvi ili druge tečnosti) i taloženja hemosiderina), atrophie blanche (atrofija belog tela) (koja nastaje iz hroničnog kapilaritisa koji dugoročno prouzrokuje nestanak krvnih kapilara, pojavu beličasto obojenih područja kože i dermalne atrofije); "fibrinska manžetna" dermatoskleroza (zbog hroničnih edema i invazije fibroblasta, tkiva se transformišu u tvrd sklerozni prsten koji obavija i iznad i ispod distalni treći deo sa edemom, daje izgled lipodermatosklerozu, tzv. izgled noge kao "obrnuto okrenuta boca šampanjca", limfedem (elefantiazija ekstremiteta), ekcemi staze (što prouzrokuje svrab), infekcije (eksudacije, celulitis), krvarenja, se detektuju u drugoj fazi.

Finalna faza odgovara pojavi aktivnih čireva.

[0050]Kao zaključak, karakteristike tipičnih venskih čireva su generalno sledeće:

1. Prisutno je pulsiranje.

2. Promenljiva veličina, od male do veoma ekstenzivne, često pokriva celu nogu.

3. Oni mogu biti pojedinačni ili višestruki (oni pokazuju tendenciju da se spoje).

4. Oni su generalno okrugli ili ovalno oblikovani iako mogu biti nepravilni.

5. Njihove ivice su glatke, pomalo podignute, imaju modro-crvenu boju i povremno su sjajne, posle toga kako postaju hronični, ivice postaju svetlije i tvrđe. 6. Dno čireva zavisi od stadijuma čira i starosne dobi, generalno je crvene boje zbog

zagušenja,, iako može da bude žućkasto ako postoji Ijušćenje (eksfolijacija) ili nekroza. Može postojati gnojavi sekret koji signalizira sekundarnu infekciju. Kada se poboljšava oporavak, pokazuje se obilje granulacionog tkiva.

7. U smislu bola, oni su umereno bolni, čireve koji ne bole moguće je primetiti u klinici, ali

takođe ima veoma bolnih čireva koji generalno mogu biti inficirani i praćeni brojnim lezijama koje upalom štite ili prikrivaju čir kao što su one koje su opisane.

8. Njihova česta lokacija je u sredini paramaleolarnog (ispupčene kosti) područja, ali njihova

najčešća lokacija je u unutrašnjem bočnog regionu donje trećine koge, t.j., unutrašnje supramaleolarno područje.

9. Jednom kada pokriju celu nogu, redak je slučaj da deluju na stopalo ili bedra, ali nije

neuobičajeno da se pojave između članka i kolena noge.

10. Okolnosti koje okružuju venske čireve odlažu njihovo zaceljivanje, što prouzrokuje trome

rane.

11. Postflebozni (posttrombozni) čirevi sa više iskopanih i nepravilnih ivica, često vode

izlaganju mišića i tetiva, generalno su brojniji, sa značajnim poremećajima kože, imaju goru prognozu usled nepovratnog obuhvatanja nezamenljivog dubokog sistema. Kod nekih slučajeva, lezije se javljaju nekoliko meseci posle epizode sa trombom, iako se najčešće javljaju posle oko dve godine. 12. Pored toga, opšti činioci kao što je anemija, dijabetes, hipoproteinemija, gojaznost, nezdrav stil života i najzad infekcije su pogodne za slabo napredovanje oporavka.

[0051]Za razliku od onoga što se dešava osobama u poodmaklim godinama, normalno zaceljenje ili oporavak rane zahteva pogodnu cirkulaciju, ishranu i imuno stanje, i negativne mehaničke sile moraju biti izbegnute. Normalno, potrebno je manje od 14 dana da se zaokruži postupak i posle tri faze u hemostazi koje mogu da se preklapaju na vreme: hemostaza, upala, proliferacija i transformacije sa stezanjem rane.

a) Faza upale: pločice (trombociti) se nagomilaju i parenhimalne ćelije koje su oštećene na mestu lezije tkiva, faktori rasta sekreta činocii drugi hemijski posrednici za izlečenja rana da se

privuku i aktiviraju inflamatorne ćelije i fibroblaste. Vazodilatacija i povećana permeabilnsot lokalnih kapilara omogućaa transportovanje neutrofilisa sa mesta rane do bakterija fagocita i otpada. b) Proliferativna faza: ponovni postupak reepitelizacije počinje u roku od nekoliko sati posle formiranja tkiva. Epidermalne ćelije se odvajaju od bazalne membrane i migriraju kroz površinu rane.

Aktivirani fagocit makrofaga gubi i otpušta vaskularni endotelni faktor rasta (VEGF) i druge faktore rasta da stimuliše formiranje granulacije tkiva.

c) Transformišući: fibroblasti preoblikuju matricu kolagena da se pojača jačina tkiva i smanji debljina rane. Tokom druge nedelje zaceljenja, fibroblasti usvajaju fenotip miofibroblasta da se olakša

stezanje ožiljka koji se formira.

[0052]Ovo zaceljivanje rane i proces oporavka se očigledno ne odvija kod lica u poodmaklim godinama. U grupi pacijenata izabranih u svrhu ovog pronalaska, rana ne može propisno da zaceli u odgovarajućem vremenskom intervalu. Ovo je zbog rezultata izmene vremenske sekvence i koncentracija biomolekula, kao što su proinflamatorni citokini, faktori rasta, proteaze i inhibitori proteaze, koji su ključni regulatori zaceljivanja rana. Pacijenti u poodmaklim godina samim tim imaju odloženo zaceljivanje i mali odgovor na konvencionalno lečenje.

1, Određivanje aktivnog sastojka i njegove koncentracije u farmaceutskim formulacijama

[0053]Kao što je gore pomenuto, jedini aktivni sastojak (a.i.) farmaceutskih formulacija korišćenih u ovom pronalasku je oleuropein sa stepenom čistoće od barem 30%, preporučljivo između 41,5% i 100%, specifično 41,5% i 80%.

[0054]Pomenuti aktivni sastojak može da se dobije sa poželjnim stepenom čistoće putem konvencionalnih tehnika ekstrakcije i prečišćavanja iz, između ostalih izvora, lista masline i/ili ekstrakta lista masline.

[0055]Međutim, radi ilustracije ovog pronalaska, aktivni sastojak oleuropein sa stepenom čistoće od 41,5% je dobijen od komercijalne kompanije lnterquim, S.A. i aktivni sastojak sa stepenom čistoće od 80% je dobijen od komercijalne kompanije Extrasynthese, S.A (distribuiran u Španiji kroz Cymit Ouimica,

S.L.).

[0056]Količinaaktivnog sastojka (oleuropeina) koju treba koristiti varira zavisno od dva parametra, željene koncentracije (u ovom slučaju proizvedene koncentracije su bile 10"'' M, 10~<2>M, 10~<4>M, 10~<7>M, 10"9 M, 10""IO M i 10"'''' M) i čistoća korišćenog aktivnog sastojka oleuropeina (kao što je pomenuto, samo kao primer, oleuropein sa dve različite čistoće je korišćen u ovoj studiji: 41,5% i 80%).

[0057]Ove koncentracije su zasnovane na molekularnoj težini (MW) oleuropeina, koja je 540,52 g/mol. Samim tim, da bi se pripremio rastvor izmereno je 10"<2>M, 5,4052 g/l, ili drugim rečima 0,54052 g/100 ml.

[0058]Aktivni sastojak iz kompanije lnterquim, S.A. je imao čistoću od 41,5%, samim tim količina oleuropeina neophodna za pripremu farmaceutskih formulacija prema ovom pronalasku je 13,02 g/l, ili drugim rečima 1,302 g/100 ml.

[0059]Aktivni sastojak iz kompanije Extrasynthese je imao stepen čistoće 80%, samim tim za istu koncentraciju oleuropeina u ovoj formuli (10"<2>M), bilo je neophodno 6,7566 g/l, ili drugim rečima 0,6757 g/100 ml.

[0060]Preostali korišćeni rastvori (10"^ M, 10"<9>M, 10"''u M, 10"'''' M) su dobijeni iz ovih serijskih razblaženja.

2. Priprema formulacija galenskog gela, kreme ( emulzije u ulji/ vodi) i vodenog rastvora

[0061]Ilustracije radi, ponovo je proizveden postupak proizvodnje korišćen za koncentraciju 10"<2>M sa čistoćom oleuropeina od 41,5%. Preostale koncentracije su napravljene praćenjem istog standarda sa jedinom varijacijom u količini ugrađenog aktivnog sastojka koja je varirala prema onome što je gore u tekstu opisano (videti Tabelu 1) zavisno od željene koncentracije i čistoće oleuropeina materijala baze.

2J. Gel

[0062]Priprema gela se sastoji od tri faze: Prva, priprema se baza gela; posle toga, priprema se aktivni sastojak; i najzad oba se mešaju.

2. 1. 1. Sastojci

2. 1. 1. 1. Sastojci za pripremu 100 q neutralnog karbomergela

[0063]

Sredstvo za želiranje: Karbopol 940: 1 g

Antimikrobni konzervans: Fenonip 0,5% (između 0,25%-1%)

'Prečišćena voda za laboratorijsku upotrebu qsf: 100 g

• Trietanolamin qsf pH 6,5

Etilendiaminotetrasirćetna kiselina ili EDTA: 0,01%

2. 1. 1. 2 Sastojci za ugradnju ( razblaživanje) aktivnog sastojka

[0064]

Oleuropein: 1,3025 g (0,5405 g od 41,5% čistoće)

* Propilen glikol: 5 g

2. 1. 2 Postupak za pripremu gela

2. 1. 2. 1 Priprema baze gela ( neutralni karbomer gel).

[0065]

1. Prvo, Fenonip i EDTA se rastvore u prečišćenoj vodi.

2. Prethodno razdeljen Karbopol 940 se zatim disperguje i mešavina se ostavi da odstoji na 2-8°C (u frižideru) tokom 24 sata. 3. Posle 24 sata, pH mešavine je 3,5, tako da nema izgled gela već pre viskozne tečnosti.

Samim tim, kako bi se započelo želiranje i da pH bude u optimalnom ospegu od 6-6,5, trietanolamin se dodaje u količini dovoljnoj (oko 0,6%) za dobijanje i završetak procesa želiranja.

2. 1. 2. 2. Preparat od aktivnog sastojka oleuropeoina

[0066]

4. Oleuropein (0,5405 g) u obliku praha se disperguje u 5 g propilen glikola korišćenjem avana

i staklenog tučka. Ugradnja aktivnog sastojka u propilen glikol ne prouzrokuje bilo kakav problem i daje kao rezultat homogenu duboku braon pastu (čiji intenzitet varira zavisno od stepena razblaženja).

2. 1. 2. 3. Ugradnja aktivnog sastojka u bazu gela

[0067]5. Mešavina propilen glikola i aktivnog sastojka se zatim ugrađuje pri energičnom mešanju na sobnoj temperaturi u količini gela dovoljnoj da se dobije 100 g.

[0068]Tako je dobijen gel sledećih proporcija:

2. 1. 3. Opravdanost korišćenih sastojaka i njihovih alternativa

a) Sredstvo za želiranje:

[0069]Pored karbopola ima mnogo sredstava za želiranje (karboksimetil celuloza, hidroksipropil

metilceluloza, ili čak već pripremljene baze (Hispagel®, LiguaGel® i druge)). Prva od njih, hispagel, je

čak korišćena kod prva dva pacijenta u Fazi I za testove venskih čireva, u svakom slučaju, dodata je ista proporcija aktivnog sastojka (a.i.) oleuropeina u bazu kako je opisano u odeljku 3.4.

[0070]Karbopol je izabran zbog svoje dobre stabilnosti tokom vremena, zbog svog neutralnog karaktera, zato što predstavlja savršenu toleranciju za kožu i zbog svoje stabilnosti u odnosu na veliku većinu aktivnih sastojaka. Do njegove promene dolazi samo u prisustvu ultraljubičastog svetla, ali ne postavlja nikakav problem u pogledu očuvanja ili oksidacije kada se paket zatvori.

[0071]Karbopol®: Ovi su visoka molekularna težina, anjonski sintetički akrilni polimeri na bazi kiseline. Postoje različiti tipovi Karbopola® koji su određeni brojevima, ali dva najšire korišćena u današnjoj farmaciji su: Karbopol® 934 i Karbopol® 940. Karbopol® 940 se koristi u ovom pronalasku.

[0072]Opis: gotovo bez mirisa, higroskopski fin beli prah koji formira male grudvice. Rastvorljivost: sporo se rastvara (gelovi) u vodi, teško se rastvara u etanolu i nerastvorljiv u hloroformu i etru. vodena disp. pH: 3,0-4,5 na 1%. Gubitak pri sušenju: < 2,0%. Viskoznost gela pri 0,5%: 40.000-60.000 cPs.

b) Konzervans:

[0073]Fenonip® (mešavina parabena u 2-fenoksietanolu) se bira iz velike količine postojećih

konzervanasa zbog svog širokog spektra protiv mikroorganizama i niske toksičnosti. Postoje drugi veoma moćni konzervansi koji bi se takođe mogli koristiti u formuli (npr. 0,1% katona), ali Fenonip je poželjan jer je taj gel predviđen za upotrebu na koži na otvorenoj rani.

[0074]Drugi konzervansi pogodni u svrhu ovog pronalaska su mešavine parabena (metilparaben i propilparaben), Kvaternijum-15 ili slični.

c) Rastvarač:

[0075]Propilen glikol je korišćen jer pobošljava rezultat Karbopol® gela poboljšavanjem njegove

razmazivosti. Zauzvrat on omogućava boju (homogeniju) ugradnju aktivnog sastojka u gel. Opseg ugradnje je 1%-10%.

[0076]Jošjedan rastvarač pogodan u svrhu ovog pronalaska je glicerin.

d) Alkalizirajući agens (pH regulator):

[0077]Trietanolamin se koristi da bi gel bio odgovarajućeg opsega pH vrednosti.

[0078]Drugamoguća alkalizirajuća sredstva u svrhu ovog pronalaska su, na primer, 10% NaOH ili 10% KOH rastvor.

e) Antioksidans:

[0079JSobzirom da je proizvod predviđen za primenu na otvorenim čirevima, ne dodaje se nikakav

antioksidans.

[0080]Antioksidans bi mogao opciono da se koristi a da ne utiče na aktivnost proizvoda, kao što je urađeno prema opisu datom u odeljku 3.4 kod prva dva pacijenta kojima je oleuropein nanet u ovoj studiji

(pacijenti 5 i 6). Primera radi, treba pomenuti sledeće: natrijum bisulfit (E-223) (0,05%-0,1%) korišćen u gore pomenutim alternativnim formulacijama; askorbinska ksielina (vitamin C natrijum E-301) (0,5%); vitamin E (0,5%); mešavina vitamina C i E (odnos 1:5) (0,5%), butilhidroksitoluen [E-321] (0,1%), itd.

[0081]Ako se uključi antioksidans, on će biti ugrađen u vodu pre dodavanja karbopola®.

2. 2 Krem ( emulzija u ulju/ vodi)

[0082]Priprema gela se sastoji od tri faze: Prvo, mora da se pripremi baza, posle toga, mora da se pripremi aktivni sastojak, i najzad taj aktivni sastojak (a.i.) se ugrađuje u bazu.

2. 2. 1. Sastojci

2. 2. 1. 1. Sastojci za pripremu 100 g baze vodene emulzije

[0083]

Neo PCL (pogodan opseg za kremu bi bio 18% do 25% Neo pcl zavisno od željene konzistencije)

• Prečišćena voda za laboratorijsku upotrebu u qsf 100 g (zavisno od količine NeoPcI, ili antioksidans se ugrađuje, između 82% i 75%)

Konzervans: mešavina 0,2% nipagina i 0,2% nipasola (odnos 1:1)

* Antioksidans: 0,05% natrijum bisulfita

Tragovi metala za izdvajanje: EDTA (0,1%)

2. 2. 1. 2 Sastojci za ugradnju ( razblaživanje) aktivnog sastojka

[0084]

• 41,5% oleuropein: 1,3025 g (0,5405 g oleuropeina)

* Propilen glikol: 5 g

2. 2. 2 Postupak za pripremu emulzije u ulju/ vodi

2. 2. 2. 1 Priprema baze ( vodena emulzija)

[0085]1. Prvo, izmeri se 25% Neo Pcl (optimalni opseg bi bio između 18% i 25% zavisno od željene konzistencije). 2. Konzervans (mešavina 0,2% nipagina i 0,2% nipasola u odnosu 1:1) se ugrađuje u

prečišćenu vodu za laboratorijsku upotrebu, proporcija će biti qsf 100 g (u ovom slučaju 75%).

3. Prečišćena voda sa konzervansom i Neo Pcl se homogenizuju korišćenjem tučka ili mehaničkim mešanjem.

[0086]Tri koraka gore opisana ne bi bila neophodna ako bi bilo koja od emulzifikujućih baza koje se reklamiraju bila korišćena, videti sledeće odeljke "Korišćeni sastojci i alternative za njih". Ugradnja konzervansa u tom slučaju bi bila u tački 4, homogenizovanje zajedno sa oleuropeinom i natrijum bisulfitom u 5 g propilen glikola.

2.2.2.2. Priprema aktivnog sastojka oleuropeoina

[0087]4. Aktivni sastojak (a.i.) oleuropein sa čistoćom od 41,5% (čvrsta supstanca u obliku praha) se raspršuje zajedno sa natrijum bisulfitom (0,05%) u 5 g propilen glikola korišćenjem avana i staklenog tučka u tu svrhu. Ugradnja aktivnog sastojka u propilen glikol ne prouzrokuje bilo kakav problem i daje kao rezultat homogenu duboku braon pastu (čiji intenzitet varira zavisno od stepena razblaženja).

2. 2. 2. 3. Ugradnja aktivnog sastojka u bazu

[0088]5. Mešavina propilen glikola i aktivnog sastojka se zatim ugrađuje uz energično mešanje na sobnoj temperaturi u količinu baze dovoljnu za dobijanje 100 g.

[0089]Tako je dobijena vodena emulzija sledećih proporcija:

2. 2. 3. Korišćeni sastojci i alternative za njih

[0090]

a) Baze:

Za na bazi zasnovane uzorke vodene emulzije, korišćena je emulzija pripremljena sa Neo Pcl u ulju/vodi.

Neo Pcl® ulje/voda ugrađuje cetearet-10, pčelinji vosak, stearil heptanoat, cetil oktanoat, spermacet, miristoil, dimetikon, mineralno ulje i 25% ulja lanolina.

Neo Pcl je korišćen zbog svojih dobrih svojstava i zbog toga što je odličan za ugradnju aktivnih sastojaka pored toga što ne prouzrokuje alergijske reakcije. Međutim, druge samo emulgirajuće baze su mogle biti korišćene pored NeoPcI, kao što je, primera radi, sledeće: baza F 2230 ulja/voda;

ksalifin-15; ili polimerni emulzifikator.

Pored toga, standardne emulzije su mogle biti korišćene, kao što je, na primer, i bez isključivanja:

Beeler baza, Lanette krema ili ketomakrogol krema

b) Konzervansi: Pored izabranog konzervansa, oni koji su opisani za gel (uključujući 0,5% fenonip) bi mogli biti izabrani na neisključujući način. c) Rastvarač: Pored propilen glikola, na neisključujući način mogli bi se na koristiti i oni koji su opisani za gel. d) Antioksidansi: Nisu obuhvaćeni jer je to krema za primenu na otvorenom čiru. Antioksidansi definisani za gel bi mogli opciono biti obuhvaćeni na neisključujući način.

2. 3. Vodeni rastvor

2. 3. 1. Sastojci vodenog rastvora

[0091]

* 1,301 g aktivnog sastojka sa stepenom čistoće od 41,5% (oleuropeina)

• Konzervans: 0,5% fenonip (ili bilo koji od onih koji su korišćeni kao gel).

* Prečišćena voda qsf 100 g

5% propilen glikola (i do 10 g može da se koristi zavisno od željene debljine). To nije ključno.

2. 3. 2. Postupak za pripremu vodenog rastvora za topikalnu upotrebu

[0092]

1. Prvo, konzervans (fenonip) se meša sa prečišćenom vodom za laboratorijsku upotrebu (ako

treba ugraditi antioksidans kao što je metabisulfit, on bi ovde bio ugrađen).

2. Aktivni sastojak se meša sa 5% propilen glikola sa tučkom i zatim se dodaje voda, i sve se meša

sa mehaničkim mešačem ili štapom.

3. Naknadno, aktivni sastojak se ugrađuje u prethodnu mešavinu konzervansa i prečišćene

vode uz energično mešanje sa mehaničkim mešačem ili štapom.

4. EDTA je moguće opciono dodati.

[0093]Tako je dobijen vodeni rastvor sledećih proporcija:

[0094]Antioksidans, primera radi, 0,05 g natrijum metabisulfita, bi opciono mogao biti ugrađen iako bi bio od koristi i antioksidans rastvorljivi u vodi kao što su oni pomenuti za gel.

[0095]Korišćenjem istih standardnih postupaka i sastojaka, supstance u različitim aktivnim koncentracijama sastojka i stepenima čistoće oleuropeina (80%) su formulisane u skladu sa Tabelom 1. Pomenute formulacije su testirane u kliničkim testovima koji će biti opisani u nastavku u svrhu prikaza delotvornosti supstanci iz ovog pronalaska za lečenje specifičnih bolesti kod izabrane grupe pacijenata.

Primeri: Klinički testovi sprovedeni na izabranoj grupi pacijenata

[0096]Pacijenti su izabrani posle sprovedene kontrolne posete u svrhe osiguranja usklađenosti sa dole opisanim kriterijumima uključivanja i isključivanja:

1. Kriterijumi uključivanja

[0097]Uključeni pacijenti su od sledećih kriterijuma uključivanja u studiju odgovarali svim i svakom pojedinačnom kriterijumu:

1. Stariji od 60 godina.

2. Prisustvo čira inframaleolarnog, supramaleolarnog ili čira na nozi (venski čir) ili dekubitus

koj je hroničan (barem 10 nedelja napredovanja) i nije prikazano značajno poboljšanje (smanjenje veličine > 25%) tokom 15 dana pre uključivanja u ove testove.

3. Granulisana površina u rani manjoj od 70%<32.>

4. A/A indeks >0,7

5. Pacijenti kojima je dijagnostikovan tip 1 ili 2 dijabetes melitus (DM) prema kriterijumima

Američkog udruženja za dijabetes (American Diabetes Association (ADA)).

6. Nije utvrđena dijagnoza infekcije u čirom zahvaćenom području na osnovu kliničkih znakova

bilo čira, periulceroznog limfangitisa, modifikovanih karakteristika eksudacije, edema, ili sistemskog područja, groznice.

7. Pacijenti sa venskim čirevima: FEDPALLA Grupa odgovara ll-lll.

8. Pacijenti sa dijabetesnim stopalom: Grupa I ili II na Vagnerovoj skali.

9. Pacijenti sa dekubitusom (PU): Stadijumi 2-3 prema klasifikaciji dekubitusa (PU).

2. Kriterijumi isključivanja

[0098]Pacijenti nisu ispunjavali bilo koji od sledećih kriterijuma isključivanja

1. Klinički znaci ili simptomi lokalne infekcije. Standardne antiseptičke terapije su primenjene

onim pacijentima koji su pokazivali infekciju. Upotreba srebrnih ili kadeksomernih medicinskih zavoja sa jodom smanjuje opterećenje bakterijama i omogućava kontrolisanje infekcije bez značajnih lokalnih i/ili sistemskih reakcija izražene osetljivosti ili lezija u zdravim tkivima. Obe će biti posmatrane kao predviđena primarna terapija<33>.

Upotreba srebrnog sulfadiazina, mupirocina, fuzidične kiseline i metronidazola su jedini antibiotici preporučeni za topikalnu upotrebu za čireve i moraju se posmatrati kao sekundarno predviđeni i moraju se uvek koristiti posle upotrebe gore opisanog antiseptila<33>.

Jednom kada se eliminiše infekcija, pacijenti koji su i dalje odgovarali preostalom uključivanju u studiju su uključeni u pomenutu studiju.

2. Prisustvo izloženosti kosti na dnu čira i/ili dodirivanje kosti pomoću sonde, i/ili prisustva

patoloških fraktura i/ili odvajanja istrulele kosti (sekvestracije).

3. Pacijenti sa HbA1C vrednostima > 9% ili A/A indeksom < 0,7 (su odgovarali).

4. Prisustvo pratećih bolesnih stanja predstavlja povećanje rizika prema mišljenju lekara

istraživača u studiji.

5. Pacijenti sa ozbiljnom bolešću bilo koje etiologije.

6. Pacijenti sa hepatitisnom insuficijencijom (sa AST i/ili ALT vrednostima > 5 puta od normalne vrednosti uspostavljene u referentnim opsezima bolničke lokalne laboratorije).

7. Pacijenti sa ozbiljnom insuficijencijom bubrega (klirens kreatinina <30 ml/min).

8. Pacijenti sa bolestima vezivnog tkiva.

9. Alkoholičari i pušači (da se izbegnu faktori mešanja).

10. Izvesne modifikacije mogu takođe biti mešanje, uključujući neke antibiotike (klaritromicin,

doksiciklin, tetraciklin), nesteroidni antiinflamatorni lekovi (aspirin, ibuprofen), COX-2 inhibitori (celekoksib),diuretici (bumetanid, furosemid), antihipertensivi (kaptopril, enalapril, metoprolol), sistemski kortikosteroidi, imunosupresanti, antiartritici (etanercept, infliksimab), antidiabetici (ppary agonisti: pioglitazon, rosiglitazon), pentoksifilin, bekaplermin (Regranex). Pacijenti koji su koristili ove terapije su isključeni, uz mogućnost uključenja posle odstranjivanja leka iz organizma i to barem 30 dana pre uključivanja u ovu studiju.

11. Trudnice ili žene kod kojih je moguća trudnoća koje ne koriste delotvoran kontraceptivni

postupak, žene koje doje.

12. Poznata izražena osetljivost na bilo koje komponente uključene u terapije korišćene u ovoj

studiji.

13. Imajući u vidu veliki uticaj ishrane na proces<34>oporavka od čira, isključeni su svi koji nisu bili u mogućnosti da drže pogodan uravnotežen način ishrane.

3. Opis lečenja

[0099]Pacijenti su lečeni u skladu sa tipom čira, zavisno od toga da li su kao problem imali venske čireve, čireve od dijabetesnog stopala ili dekubituse.

3. 1. Postupci vezani za oporavak od bolesti

[0100]Plan sprovođenja studije je bio pragmatičan, postupci koji su se odnosili na oporavak tokom perioda studije su bili isti kao oni koje su dobijali pacijenti pr početka kliničkog testiranja, i za takozvane pacijente iz kontrolne grupe i za pacijente koji su lečeni oleuropeinom.

[0101]Razlika između obe grupe je bila primena proizvoda koji sadrže oleuropein na pacijentima koji su obuhvaćeni lečenjem u kliničkom ispitivanju pošto je postupak koji se odnosio na oporavak rane izveden i pre stavljanja zavoja na područje u slučaju venskih čireva.

Učestalost postupaka koji su se odnosili na oporavak:

[0102]Procedure koje su se odnosile na oporavak su izvođene svakih 12, 24 ,48 sati prema planu studije u svakom slučaju. Preporučljivo postupak koji se odnosio na oporavak je korišćen svaka 24 sata. Postupci koji su se odnosili na oporavak su izvođeni bilo od strane medicinske sestre ili članova porodice pacijenta a prema uputstvu medicinske sestre.

Čišćenje rane

[0103]Kadgod se smatra neophodnim, pre primene postupka koji se odnosi na oporavak rane, područje oko rane se čisti (nekrektomija).

Čišćenje rane pranjem:

[0104]Čišćenje rane je bilo identično čišćenju koje su pacijenti koji prate medicinsko lečenje imali pre početka kliničkog ispitivanja: Ivice rane su očišćene korišćenjem gaze natopljene u toploj vodi i sapunu ili fiziološkom rastvoru. Područje je naknadno oprano sa dosta fiziološkog slanog rastvora. Rana je oprana korišćenjem u tu svrhu gaza natopljenih u fiziološkom rastvoru. U slučajevima kada je bio prisutan fibrin izvođeno je pranje zahvatanjem, i područje je oprano sa dosta fiziološkog rastvora. Najzad, ivice su pažljivo isprane sterilnim gazama.

3. 2. Specifične terapije

[0105]Svi pacijenti su lečeni poliuretanskim penama, zavojima sa kalcijum alginatom ili hidrogelovima. Pre početka lečenja i barem 15-20 dana, ovi postupci su standardizovani, čir je kod svih bio zatvoren silikonskim zavojima. Pored toga, kod onih pacijenata sa čirevima venske etiologije, uvek je primenjivano lečenje kompresivnim oblogama.

[0106]Uspostavljene su tri osnovne terapijske grupe: a) Regulacija: gore opisana terapija je nastavljena (postupci koji su se odnosili na oporavak i okluzija čira sa silikonskim zavojima). b) Kontrola plus hijaluronska kiselina: Kod pacijenata sa venskim čirevima. Nastavljeno je gore opisano lečenje (kontrolna grupa), dodavanje 0,2 % hijaluronske kiseline (so natrijuma)

[Jaloplast®], nanošenjem tankog sloja dnevno pre postavljanja silikonskog zavoja.

c) Kontrola plus bekaplermin (iz belih krvnih zrnaca (leukocita) izveden humani rekombinantni faktor rasta BB): Kod pacijenata sa neuropatskim čirevima ili dekubitusima. Gore opisano lečenje je

nastavljeno (kontrolna grupa), dodavanje 0,01% bekaplermina [Regraneks gel®], nanošenjem tankog sloja svakodnevno pre postavljanja silikonskog zavoja. d) Lečenje oleuropeinom: Nastavljeno je gore opisano lečenje (kontrolna grupa), dodavanje oleuropeina u različitim dozama i vremenskim rasporedima kao što je navedeno dole u tektu,

nanošenjem tankog sloja dnevno pre postavljanja silikonskog zavoja.

[0107]U opisanim režimima lečenja nije uvedena nikakva modifikacija.

3. 3. Trajanje studije Grafikon vremena procene

[0108]Periodkontrolnih pregleda: 6 nedelja ili sve do završetka zaceljenja čira.

Broj merenja: Izvedeno je šest merenja raspodeljenih na sledeći način:

Merenje 0: Dan -15 (uključivanje), test za potvrđivanje usklađenosti sa uslovima za uključenje u studiju

• Merenje 1: Početak ispitivanja (dan 0)

• Merenje 2: Dan 14. (+/- 2 dana)

Merenje 3: Dan 28. (+/- 2 dana)

Merenje 4: Dan 35. (+/- 2 dana)

Merenje 5: Dan 42. (+/- 2 dana)

3. 4. Korišćeni eksperimetnalni lek

[0109]Farmaceutska formulacija kako je gore opisano obuhvata oleuropein kao jedini aktivni sastojak sa procentom čistoće aktivnog sastojka (a.i.) od 41,5% ili 80%; nanet u vidu gela, emulzije/kreme u ulju/vodi ili nosača vodenog rastvora, pripremljen za upotrebu u koncentracijama i u režimima primene kako je navedeno u ovom pronalasku.

[0110]Varijanteklinički testiranih formulacija: Kao što je pomenuto gore, aktivni sastojak (a.i.) je nanet na gel nosač kod prvih pacijenata uključenih u Fazu I studije venskih čireva (pacijenti 5 i 6), u tu svhu je korišćena umesto preparata prikazanog u odeljku 2.1, komercijalno već pripremljena baza gela (Hispagel), razblažena na 50% sa vodom da se olakša nanošenje. Za preostale pacijente kojima je nanet gel za lečenje, korišćeni su sastojci i standard proizvodnje opisan u odeljku 2.1.

[0111]Tako je dobijen gel sa sledećim proporcijama:

4. Postupci za procenu reakcije kao odgovora na proizvod

4. 1 Postupak za merenje područja čira i preostalih parametara:

[0112]Za svakog pacijenta, profil čira je izveden na sterilisanom transparentnom papiru za svako od merenja. U tu svrhu su korišćeni STAEDTLER postojani DRY SAFE "F", tzv. acetilenski, markeri.

[0113]Površine čira su izračunate pomoću standardne planimetrije, uvozom obrisa dobijenih u AUTOCAD 2011 programu pri čemu je izračunata površina i dužina spoljnje ivice oboda svakog čira u svakoj od ključnih tačaka merenja. Preostali procenjeni parametri (vlažnost, dermatitis, vaskularizacija, ivice, naslage u čiru) bi mogli direktno da se vide golim okom i njihovo napredovanje je bilo zabeleženo pri svakoj od ključnih tačaka merenja.

4. 2. Glavne promenljive za procenu efikasnosti lečenja

4. 2. 1. Brzina oporavka rane

[0114]Brzina oporavka rane je procenjena pomoću sledeće jednačine35'36:

Skala 1

Procenat varijacije površine čira

[0115]Av = (A0-A1)/A0, pri čemu Av jeste varijacija u području čira, A1 područje u referentnoj kontroli, AO područje u prethodnoj kontroli (početak studije).

[0116]Izražava procenat smanjenja čirom zahvaćenog područja.

Skala 2

Procenat varijacije spoljnje ivice čira:

[0117]Pv = (P0-P1)/P0, pri čemu Pv jeste varijacija spoljne ivice čira, P1 spoljna ivica u

referentnoj kontroli, PO spoljna ivica u prethodnoj kontroli (početak studije).

[0118]Izražava procenat smanjenja spoljne ivice čira.

Skala 3

Jednačina kao funkcija područja: ( dnevno smanjenje čirom zahvaćenog područja)

[0119]Av= (A0-A1)/t, pri čemu Av jeste varijacija u području čira, A1 područje referentne kontrole, A0 područje u prethodnoj kontroli (početak studije) i t vremenska promenljiva između A0 i A1 izražena u danima.

[0120]Izražava dnevno smanjenje čirom zahvaćenog područja.

[0121]Nikakvi proračuni nisu rađeni za napredovanje zapremine čira zato što je uprkos omogućavanju procene napredovanja granulacionog tkiva u čiru, promenljivost u tumačenju rezultata visoka i ne preporučuje se sistematsko izvođenje studije zapremine čira36 37.

4. 2. 2. Generalno prihvaćene dijagnostičke skale procene čira ( FEDPALLA, Vagnerova skala i

Studije dekubitisa ( PU)).

4. 2. 2. 1 Skala 4. 1. Procena kože oko lezije: Skala procene FEDPALLA

[0122]FEDPALLA skala 38 procene se koristi za procenu kože oko lezije. Skala obuhvata 5 promenljivih i ima 5 parametara u svakoj promenljivoj (Tabela 2) sa rezultatom 5 do 1. Zbir svakog parametra daje rezultat koji se odnosi na grupu prognoze za epitalizaciju (Tabela 2).

[0123]Ove grupe idu od niže do više u vezi sa rezultatom dobijenim sa zbirom parametara koje treba uzeti u obzir za kožu oko lezije i koji su im inverzno proporcionalni. Drugim rečima, što je viši rezultat, to je niža grupa i bolja prognoza za epitelizaciju (Tabela 3).

4. 2. 2. 2 Skala 4. 2. Klinička procena dijabetesnog stopala

[0124]U kliničkoj praćeni dijabetesnog stopala, Vagner-Meritova 39 klasifikacija (Tabela 4) koja dozvoljava kategorizaciju lezija zavisno od dubine čira i pokazala je da se normalno koristi visoka međusobna veza sa tendencijom za izlečenje.

4. 2. 2. 3. Skala 4. 3 Klasifikacija dekubitusa ( PU)

[0125]Ova klasifikacija je korišćena zato što je najprihvaćenija klasifikacija na nacionalnim i na međunarodnom nivou i od straneGrupo Nacional para el Estudio y Asesoramiento sobre las Ulceras por Presion(GNEAUPP) (Nacionalne savetodavne i studijske grupe za dekubitus) i od strane Evropskog savetodavnog panela za dekubitus (EPUAP).<40>Tu je klasifikaciju definisala Severnoamerička agencija za istraživanje i kvalitet zdravstvene nege (AHQR) u 1989. i zasnovana je na klasifikaciji grupa (l-IV) stvorenih od stane Šia (Shea) u 1975. i modifikovanih na stadijume (0-IV) od strane Toranca, tokom 1983., uklanjanju stadijuma koje prethodi čiru:

Stadijum I

[0126]Promena vezana za pritisak koju je moguće primetiti na celoj koži koja se manifestuje eritemom kože koji ne bledi posle pritiska, tamna koža, može da ima crvene, plave ili modre nijanse. U poređenju sa područjem koje je susedno ili naspramno telu koje nije izloženo pritisku, može obuhvatiti promene na jednom ili više od sledećih aspekata: temperatura kože (vruća ili hladna), konzistencija tkiva (edem, stvrdnjavanje) i/ili senzacije (bol, vrelina).

STADIJUM II

[0127]Delimičan gubitak debljine kože utiče na epidermis, dermis ili oba. Površinski čir koji ima izgled abrazije, pliha ili površinskog kratera.

STADIJUM III

[0128]Potpungubitak debljine kože obuhvata leziju ili nekrozu potkožnog tkiva koja može da se produži prema dole ali ne kroz fasciju koja je ispod.

STADIJUM IV

[0129]Potpuni gubitak debljine kože sa područjem uništenja koje je prošireno, nekrozom tkiva ili mišića, lezije kosti ili noseće strukture. Može imati šupljine, tunele ili krivudave trajektorije.

4. 3. Sekundarne promenljive

4. 3. 1. Skala 5 Lakoća primene

[0130]Medicinske sestre odgovorne za lečenje moraju uporediti lakoću primene svakog od proizvoda (formulacija galenskog gela, kreme ili rastvora) u odnosu na druge slične proizvode. U tu svrhu, oni moraju klasifikovati proizvod na skali 1 do 10 kao što je gore opisano:

• Veoma praktično u poređenju sa drugim sličnim proizvodima (9 ili 10 od 10)

Veoma praktično u poređenju sa drugim sličnim proizvodima (7 ili 8 od 10)

Nema razlike u poređenju sa drugim sličnim proizvodima (5 ili 6 od 10)

Nepraktično u poređenju sa drugim sličnim proizvodima (3 ili 4 od 10)

• Veoma nepraktično u vezi sa drugim sličnim proizvodima (1 ili 2 od 10).

4. 3. 2. Skala 6 Bezbednost

[0131]Napravljen je plan za registrovanje potencijalnih štetnih ili toksičnih reakcija tokom studije. Nema značajnih podataka koji su prikupljeni u tom smislu.

5. Procena efikasnosti, bezbednosti i primene proizvoda ( ciljevi)

Varijable uspešnosti (efikasnost proizvoda)

Ciljevi

[0132]

a) Prema skali 1. "Akumulirana varijacija površine čira u relativnim vremenskim periodima".

1. Cilj 1: Potpun oporavak rane (100% smanjenje prečnika) ili veće od 70% u okviru

perioda studije (nedelja 6).

2. Cilj 2: Zaceljivanje površine koja premašuje kontrole za 30 procentnih poena (20 poena ako pacijent ima jednu grupu više u FEDPALLA, Vagnerovoj ili Dekubitusnoj (PU) skali). b) Prema skali 2. "Akumulirana varijacija u spoljnjoj ivici čira u relativnim vremenskim periodima".

3. Cilj 3: Potpuno zaceljenje spoljnje ivice čira (100% smanjenje) ili veće od 70% u okviru

perioda studije (nedelja 6).

4. Cilj 4: Kontrole koje premašuju smanjenje spoljnje ivice za 30 procentnih poena (20 tačaka ako pacijent ima jednu grupu više u FEDPALLA, Vagner ili Dekubitusnoj (PU) skali). c) Prema skali 3. "Jednačina kao funkcija područja: (ispoljeno kao procenat dnevnog smanjenja čirom zahvaćenog područja)" 5. Cilj 5: Procenat dnevnog smanjenja područja čira kod pacijenata koji se leče oleuropeinom je 30% veći od procenta dnevnog smanjenja kod kontrolnih pacijenata. d) Prema skali 4 (4.1, 4.2, 4.3). "Smanjenje grupe ili stadijuma u odgovarajućoj generalno prihvaćenoj skali procene za dijagnozu čireva (FEDPALLA -venski čir-, Vagner -neuropatski čirevi- i stadijume Dekubitusa (PU) -PU-)" 6. Cilj 6: Da bi se postiglo smanjenje čireva od grupe III do grupe I ili potpuni opravak. Da bi se postiglo smanjenje čireva od grupe II do potpunog opravka.

e) Prema skali 5. "Lakoća primene"

7. Cilj 7: Da bi se postigao srednji rezultat jednak ili veći od 7 tačaka (jednostavna ili veoma

jednostavna primena).

f) Prema skali 6. "Bezbednost"

8. Cilj 8: Odsustvo neželjenih ili toksičnih reakcija.

6. Razvoj i klinički testovi

[0133]Klinička ispitivanja na ljudima su sprovedena na ukupno 48 pacijenata su izvedena prema dole opisanom redosledu:

1. Venske čireve

2. Dijabetesno stopalo

3. Dekubitis (PU)

[0134]Testovi sprovedeni za svaku terapijsku primenu su opisani dole u tekstu:

6.1 Venski čirevi

[0135]Klinička ispitivanja sprovedena na pacijentima sa venskim čirevima su opsežno izvedena na 36 pacijenata, podeljenih u šest različitih faza sa različitim postupcima i ciljevima: Faza I. Procena nivoa efikasnosti, primenljivosti i bezbednosti oleuropeina proizvedenog u koncentraciji

od 10_<2>pri korišćenju galenskog gela, kreme ( emulzija u ulju/ vodi), oblika vodeno<g>rastvora.

Specifični ciljevi:

[0136]Za proveru efikasnosti različitih galenskih oblika u odnosu na kontrolu kao i za određivanje da li ijedan od njih pokazuje efikasnost koja je niža od ostalih.

Izvršavanje

[0137]Nekoliko šarži je proizvedeno na gelu, kremi i nosačima rastvora sa identičnom koncentracijom aktivnog sastojka (10_<2>M). Ova koncentracija je izabrana za početak kliničkih ispitivanja jer je to najviša prethodno testirana koncentracija na pacovima. Drugim rečima, usvojen je kriterijum opreza.

[0138] Izabrano je deset pacijenata za ovu prvu fazu kliničkog ispitivanja. Svi su odgovarali kriterijumima uključivanja u studiju opisanu gore u tekstu: Pacijenti 1 i 2: Kontrol. Primena standardne terapije za oporavak prema odeljku 3.1 gore u tekstu. Pacijenti 3 i 4(<*>): Kontrola + hijaluronska kiselina. Primena terapije sa hijaluronsom kiselinom opisane gore u odelju 3.2.

Pacijenti 5 i 6: Primena gela u koncentraciji od 10-<2>M svaka 24 sata

Pacijenti 7 i 8: Primena kreme u koncentraciji od 10-<2>M svaka 24 sata

• Pacijenti 9 i 10: Primena rastvora u koncentraciji od 10-<2>M svaka 24 sata

[0139]Kao što je moguće primetiti, proizvod se nanosi na sve pacijente svaka 24 sata da se omogući uspostavljanje poređenja.

[0140](<*>) Ova dva pacijenta su obuhvaćena da bi se pokazalo da su supstance za koje se traži zaštita patentom sa oleuropeinom bolje od trenutnih u stanju tehnike u smislu efikasnosti.

Zaključci:

[0141]

1. Upotreba oleuropeina putem topikalne rute na bilo kom od ova tri korišćena galenska oblika je pokazala visok stepen efikasnosti (ponudila je mnogo bolje rezultate od one dve kontrolne grupe koje predstavljaju trenutno stanje tehnike, i zaceljeni hronični čirevi bez značajnog poboljšanja u prethodne dve nedelje). 2. Sve glavne ciljeve (koji se odnose na područje smanjenja, spoljnje ivice oboda, prema dnevnoj stopi zaceljenja i smanjenje za jednu ili više grupa FEDPALLA skale) je ispunilo šest pacijenata kojima je oleuropein primenjen bez obzira na korišćenu galensku formulu. Treba istaći da prosečna dnevna stopa zaceljenja kod pacijenata kojima je proizvod koji je cilj ovog pronalaska primenjen bio 98,71% viši od (skoro duplo) prosečne brzine zaceljenja četiri kontrolna pacijenta, uključujući dva pacijenta lečena hijaluronskom kiselinom. Videti Sliku 1. 3. Bez obzira na prethodno, rezultati dobijeni od proizvoda u obliku gela su pokazali nešto brži oporavak kao i veću lakoću nanošenja prema onome što su rekle medicinske sestre koje ih nanose, koje su procenile upotrebu gela kao "veoma jednostavnu" (9,5 od 10), i upotrebu krema i vodenog rastvora (7,5 i 7 od 10, prema opisanom redosledu) kao "jednostavnu". Nijedan od tri korišćena galenska oblika nije prouzrokovao neprijatnost ili probleme sa toksičnošću kod pacijenata.

Faza II. Procena nivoa efikasnosti oleuropeina proizvedenog pod galenskim gelom, kremom (emulzijom u ulju/vodi), oblicima vodenog rastvora sa minimalnom koncentracijom oleuropeina sa efikasnošću prethodno testiranom sa uspehom:

1flđP_M

Specifični ciljevi:

[0142]Cilj ovog drugog testa je bio da pokaže efikasnost i superiornost lečenja svim galenskim oblicima prethodno testiranim sa uspehom (gel, krema i rastvor) nanošenjem u stanju tehnike postojećeg aktivnog sastojka u minimalnoj koncentraciji i već korišećnog prethodno sa uspehom u ćelijama (10-<10>M) u kliničkim ispitivanjima. Dodatno, cilj je bio da se uporedi efikasnost ove veoma razblažene koncentracije u vezi sa koncentracijom 10_<2>M kao i da se uporedi efikasnost različitih galenskih formulacija jedne sa drugom.

Izvršavanje:

[0143]Proizvodi su proizvedeni u ovu svrhu u uslovima sličnim onima opisanim u Fazi I sa gore pomenutom varijacijom u njihovim koncentracijama oleuropeina (10_<10>M) (videti odeljak 3.4) jer su korišćeni najniži testirani nivoi koncentracije aktivnog sastojka u prethodnim koracima istraživanja.

[0144]Tri nova pacijenta su izabrana za ovo ispitivanje (pacijenti 5, 6 i 7) zato što su ista četiri pacijenta opisana u Fazi I korišćeni kao kontrole. Svi su odgovarali kriterijumima uključivanja u studiju opisanim gore u tekstu: * Pacijenti 1 i 2: Kontrolno sredstvo. Primena standardne terapije za oporavak prema odeljku 3.1. * Pacijenti 3 i 4: Kontrolno sredstvo + hijaluronska kiselina. Primena terapije sa hijaluronskom kiselinom opisane u odelju 3.2.

* Pacijent 5: Primena gela u koncentraciji od 1(H0 M svaka 24 sata

Pacijent 6: Primena kreme u koncentraciji od 10-<10>M svaka 24 sata

• Pacijent 7: Primena rastvora u koncentraciji od 10-10 M svaka 24 sata

[0145]Kao što je moguće primetiti, proizvod se primenjuje svim pacijentima svaka 24 sata da se omogući uspostavljanje poređenja.

[0146]Različite formulacije sa koncentracijom oleuropeina od 10"<10>M su pokazale nivo efikasnosti sličan jedan drugom, posebno posle 5. nedelje lečenja (videti Sliku 2), ponavljanje obrasca već primećenog u Fazi I pri čemu su nivoi zaceljenja koje je pokazala upotrba gela nešto blago viši (1,72% dnevno zaceljenej naspram 1,68% i 1,65% kreme i rastvora) verovatno usled veće lakoće koju nudi ova podloga za apsorpciju aktivnog sastojka.

[0147]Tri formulacije (gel, krema, rastvor) su pokazale rezultate koji su bili gori od onih koji su pokazani za koncentrovanije formulacije: • 2,58% srednje dnevno smanjenje u Fazi I (koncentracija od 10~<2>M) naspram prosečne 1,68% u Fazi II (koncentracija od 10"<10>M).

* 99,27% srednje zaceljenje na kraju ispitivanja (nedelja 6.) u Fazi I naspram 70,70% u Fazi II.

[0148]U svakom slučaju, efikasnost proizvoda sa ovom koncentracijom aktivnog sastojka i čistoća su bili mnogo viši nego kod kontrolnih. Ponovo, nijedan pacijent nije pokazao neželjena dejstva ili anomalije koje su mogle biti povezane sa nanetim proizodom.

[0149]Zbog toga je veoma opravdano smatrati da su pri identičnim uslovima proizvodnje, galenske formulacije u obliku gela, kreme, obliku rastvora ili slično koje obuhvataju aktivni sastojak iz ovog pronalaska sa stepenom čistoće od barem 30%, preporučljivo između 41,5% i 100%, specifično 41,5% i 80% u koncentracijama sadržali između dve granične vrednosti čija je efikasnost ispitivana sa uspehom (10-2 M i 10-10 M) sa nivoima efikasnosti sličnim efektivno ispitivanim.

[0150]U vezi sa prethodnim i u svrhu provere da li je proizvod bio takođe delotvoran pri višim koncentracijama, izvedena je Faza III kliničkih ispitivanja, uključujući testove sa tri galenske formulacije koncentrovane na 10"<1>M.

Faza III. Procena nivoa efikasnosti oleuropeina proizvedenog pod galenskim gelom, kremom (emulzijom u ulju/vodi), oblicima vodenog rastvora sa maksimalnom koncentracijom oleuropeina (10~1M)

Specifični ciljevi:

[0151]Da bi se proverila efikasnost lečenja sa prethodno uspešno ispitanim galenskim oblicima (gel, krema i mast) nanošenjem visoko aktivnog sastojka koncentracije (10-<1>M), kao i da se proveri njegova efikasnost u vezi sa već ispitanim koncentracijama u Fazama lili.

Izvršavanje:

[0152]U ovu svrhu proizvedeni proizvodi u uslovima sličnim onima koji su opisani u Fazama I i II sa gore pomenutom varijacijom za njihove koncentracije oleuropeina (10-<1>M). Videti odeljke 2 i 3.4.

[0153]Pored četiri gore pomenuta kontrolna pacijenta, tri nova pacijenta, svi su odgovarali uslovma uključivanja u studiju opisanim gore u ovom pronalasku, izabrani su: Pacijenti 1 i 2: Kontrolno sredstvo. Primena standardne terapije za oporavak prema odeljku 3.1. Pacijenti 3 i 4: Kontrolno sredstvo + hijaluronska kiselina. Primena terapije sa hijaluronskom kiselinom opisane u odelju 3.2.

Pacijent 5: Primena gela u koncentraciji od 10"<1>M svaka 24 sata

• Pacijent 6: Primena kreme u koncentraciji od 10"<1>M svaka 24 sata

Pacijent 7: Primena rastvora u koncentraciji od 10"<1>M svaka 24 sata

[0154]Kao što je moguće primetiti, proizvod se primenjuje svim pacijentima svaka 24 sata da se omogući uspostavljanje poređenja.

Zaključci:

[0155]Različite formulacije kod koncentracija oleuropeina od 10"<1>M sa stepenom čistoće od barem 30%, preporučljivo između 41,5% i 100%, specifično 41,5% i 80%, imaju nivo efikasnosti sličan jedan drugom i mnogo veći od kontrola u svim slučajevima, formulacija gela ovog proizvoda je formulacija koja je ponovo minimalno prikazala najviši nivo efikasnosti. Videti Sliku 3.

[0156]Zato, jednom kada se završe Faze I, II i III, sasvim je opravdano smatrati da pri sličnim uslovima proizvodnje, galenske formulacije u obliku gela, obliku kreme, obliku vodenog rastvora ili slično koje obuhvataju oleuropein u koncentracijama sadržanim između dve granične vrednosti čija je efikasnost testirana sa uspehom, 10"<1>M i 10_<10>M (iako se donje granične vrednosti koncentracije zamene pomoću 10_H M posle ispitivanja sa uspehom naknadno u Fazi IV), će imati nivoe efikasnosti slične onima koji su efikasno testirani na pacijentima.

[0157]U svakom slučaju, sledeća faza (Faza IV) kliničkog ispitivanja je dodatno ispitala ovaj problem jer se sastojala od ispitivanja, za oblik gela, širi spektar primene koncentracija aktivnog sastojka obuhvaćenih ovim opsegom. Testovi nisu izvedeni u većem broju galenskih oblika, koncentracije na pacijentima su isključivo zbog teškoća u regrutovanju dovoljnog broja pacijenata koji su usklađeni sa uslovima uključivanja u ispitivanje, posebno imajući u vidu Faze V i VI kliničkih ispitivanja na venskim čirevima za koje bi bio potreban značajan broj pacijenata a koje su i još uvek nezavršene.

[0158]U smislu sekundarnih ciljeva ovog ispitivanja, medicinske sestre su ponovile ista zapažanja: primena gela se pokazala nešto jednostavnijom, iako krema i rastvor nisu predstavljali nikakav problem za upotrebu. Što se tiče bezbednosti, kao što je preostali deo ispitivanja, anomalije nisu predstavljene u smislu neželjenih i toksičnih reakcija.

Faza IV. Procena nivoa efikasnosti formulacije galengskog gela u gotovo svim koncentracijama ovog opsega u kojima aktivni sastojak pokazuje učinak: 10~<1>, 10~2,10~4,10~7,10~9,10~10,10~H.

[0159]Pošto se pokaže efikasnost proizvoda u svojim oblicima u vidu gela, kreme i rastvora u dve granične vrednosti opsega koncentracije u kojoj oleuropein deluje, i imajući u vidu teškoću regrutovanja pacijenata koji su usklađeni sa strogim zahtevima uspostavljenim za formiranje dela ovog ispitivanja, Faza IV kliničkih ispitivanja je samo obuhvatila ispitivanja u obliku galenskog gela.

Specifični ciljevi:

[0160]Da bi se pokazala efikasnost aktivnog sastojka oleuropeina sa stepenom čistoće od barem 30%, preporučljivo između 41,5% i 100%, specifično 41,5% i 80% u različitim koncentracijama, i posebno u koncentraciji od IO-'''' M, što je izvan prethodno ispitanog opsega. U tom cilju, ova Faza IV kliničkog ispitivanja je izvedena samo, a i samo kao primer, u podlozi za gel.

[0161]Rezultate dobijene sa nosačem gela moguće je proširiti na preostale galenske formulacije koje uzimaju u obzir visok stepen sličnosti koja postoji između rezultata različitih testiranih formulacija (gel, krema, rastvor) za tri prethodno testirane koncentracije (10-<1>M, 10~<2>M i 10-<10>M). Samim tim, dobijene rezultate ne treba razumeti tako da se pripisuju isključivo formulaciji u podlozi za gel, već pre da se ova formulacija bira kao primer.

Izvršavanje:

[0162]Proizvodnja jedinjenja je bila slična proizvodnj prikazanoj u prethodnim fazama sa očiglednim izuzetkom u pogledu korišćene koncentracije aktivnog sastojka (videti odeljke 2 i 3.4).

[0163]Cilj je bio obezbediti podatke o dva pacijenta za svaku od različitih koncentracija koje je trebalo testirati. Testirane koncentracije su bile 10"<1>M, 10"<2>M, 10"<4>M, 10"<7>M, 10"9 M, 10"10 M i 10"11 M (10"<2>M su već testirane prethodno u Fazi II, ali su rezultati uključeni ponovo u svrhe poređenja). Samim tm, uzimanje u obzir da se koncentracije od 10"<1>M i 10~<10>M već ispituju tokom FazaIIIi II, prema opisanom redosledu, i da se koncentracija 10~<2>M već testira na dva pacijenta u Fazi I, raspodela pacijenata za ovu fazu je bila sledeća: • Pacijenti 1 i 2: Kontrolno sredstvo. Primena standardne terapije za oporavak prema odeljku 3.1. • Pacijenti 3 i 4: Kontrolno sredstvo + hijaluronska kiselina. Primena terapije sa hijaluronskom kiselinom opisane u odelju 3.2. • Pacijenti 5 i 6: Primena gela u koncentraciji od KH svaka 24 sata (pacijent 5 je prethodno uključen u Fazi III). • Pacijenti 7 i 8: Primena gela u koncentraciji od 10"<2>svaka 24 sata (oba pacijenta su prethodno uključeni u Fazi I).

• Pacijenti 9 i 10: Primena gela u koncentraciji od 10"<4>M svaka 24 sata

• Pacijenti 11 i 12: Primena gela u koncentraciji od 10"<7>M svaka 24 sata

• Pacijenti 13 i 14: Primena gela u koncentraciji od 10"<9>M svaka 24 sata

• Pacijenti 15 i 16: Primena gela u koncentraciji od 10"''0 svaka 24 sata (pacijent 15 je prethodno uključen u Fazu II).

• Pacijenti 17 i 18: Primena gela u koncentraciji od 10"'' 1 svaka 24 sata

[0164]Kao što je moguće primetiti, proizvod se primenjuje svim pacijentima svaka 24 sata da se omogući uspostavljanje poređenja.

Zaključci:

[0165]Faza IV studije je pokazala da je oleuropein delotvoran i bolji od kontrola prema bilo kojoj mernoj skali utvrđenoj u odeljku 4 u ćelom opsegu koncentracije proizvod je sadržao između 10"'' Mi 10"'''' M. Videti Sliku 4. Takođe se vidi da se maksimalna efikasnost aktivnog sastojka postiže pri koncentraciji od 10"<2>M (čak iznad 10"'' M) i veoma progresivno smanjuje sve do 10-<11>M, čija je efikasnost samo nešto bolja od kontrolnih. Videti Sliku 5.

[0166]Kao što je pomenuto u prethodnim fazama, i imajući u vidu postojeću vezu između dobijenih rezultata formula za gel, kremu i rastvor za koncentracije od 10"<1>M, 10"<2>M i 10"<10>M, logično je misliti da dobijeni rezultati u novim koncentracijama testirani samo u obliku gela mogu biti prošireni na preostale formulacije. U smislu sekundarnih promeljivih za procenu proizvoda, aktivni sastojak (a.i.) oleuropeina je ponovo, i ovog puta sa većom populacijom pacijenata, t.j., deset novih pacijenata, je potvrdilo da nema neželjena dejstva, pored činjenice da medicinske sestre odgovorne za terapije upotrebu u obliku gela lako nanose (srednji rezultat od 8,33 od 10).

F aza V. Procena nivoa efikasnosti proizvoda ( u svom obliku gela) pri različitim režimima primene

( svaka 24 sata naspram svakih 12 sati naspram svakih 48 sati). Cilj:

[0167]Da bi se proverila efikasnost aktivnog sastojka oleuropeina pri različitim režimima primene jer je proizvod nanošen svaka 24 sata sve do tada.

Izvršavanje:

[0168]U tom cilju, ova Faza V kliničkog ispitivanja je izvedena, kao primer, u podlozi za gel jer o tome ima više dostupnih podataka i sve do tog trenutka je bila najefikasnija. Priprema proizvoda je bila slična pripremi za Fazu II (videti odeljke 2 i 3.4)

[0169]Četiri nova pacijenta koja su odgovarala gore opisanim zahtevima za uključenje u ovo kliničko ispitivanje su bili izabrani za ovaj deo studije. U tu svrhu uzimanje u obzir da je koncentracija 10"<2>M naneta svaka 24 sata već ispitivana tokom Faze II, raspodela pacijenata za ovu fazu studije je bila sledeća: • Pacijenti 1 i 2: Kontrolno sredstvo. Primena standardne terapije za oporavak prema odeljku 3.1.

Pacijenti 3 i 4: Kontrolno sredstvo + hijaluronska kiselina. Primena terapije sa hijaluronskom kiselinom opisano u odelju 3.2.

Pacijenti 5 i 6: Primena doze gela u koncentraciji od 10~<2>M svakih 12 sati.

• Pacijenti 7 i 8 (iz Faze I): Primena doze gela u koncentraciji od 10~<2>M svaka 24 sata.

• Pacijenti 9 i 10: Primena doze gela u koncentraciji od 10~<2>M svakih 48 sati.

[0170]Postupci koji se odnose na oporavak su uvek izvođeni pre svake primene proizvoda (svakih 12, 24 ili 48 sati).

Zaključci:

[0171]Ova faza studije je služila da se ispita da li je oleuropein sa stepenom čistoće od barem 30%, preporučljivo između 41,5% i 100%, specifično 41,5% i 80%, bolji od kontrola pri bilo kom režimu primene, čak i sa primenama na svakih 48 sati. Videti Sliku 6. Pored toga, potvrđeno je da nije bilo značajnih razlika u efikasnosti aktivnog sastojka među testiranim različitim režimima primene (12 sati, 24 sata, 48 sati).

[0172]Svi ciljevi označeni za procenu efikasnosti, lakoću primene i bezbednost proizvoda su ispunjeni u okviru tri režima primene. Treba napomenuti da nijedan od pacijenata kom je proizvod primenjen svakih 12 sati, sa povećanjem direktnog rukovanja čirom kao posledicom, nije pokazao nikakav znak infekcije ili neželjene reakcije. Ovaj obrazac je ponovljen kod pacijenata sa neuropatijskim čirevima ili dekubitusima kojima je nanet aktivni sastojak (a.i.) na svakih 12 sati.

Faza VI. Procena nivoa efikasnosti galenskih formulacija počevši od dva aktivna sastojka sa različitim

stepenima Specifičnih ciljeva čistoće:

[0173]Za proveru da u rezultatima dejstva nema značajnih varijacija farmaceutskih supstanci u opsegu čistoće aktivnog sastojka ovog pronalaska se koriste u formulaciji farmaceutskih supstanci.

Izvršavanje:

[0174]Dabi se izvelo poređenje ovog učinka, šarža gelova, svih sa koncentracijom od 10~<4>M, je proizvedena (šarža je ponovo proizvedena, kao primer, u podlozi za gel jer o tome ima više podataka i sve do tog trenutka je bila najefikasnija). Priprema se izvodi pomoću sledećih standarda opisanih uz uzimanje u obzir različite koncentracije aktivnog sastojka (a.i.) u ekstraktu (videti odeljke 2 i 3.4).

[0175]Šest novih pacijenata koja su odgovarali gore opisanim zahtevima za uključenje u ovo kliničko ispitivanje su bili izabrani za ovaj deo studije. Rezultati dobijeni za ove pacijente su upoređeni sa onima dobijenim kod dva pacijenta lečena u Fazi IV sa gelom pri 10~<4>M koji su uključili aktivni sastojak sa stepenom čistoće od 41,5%, kao i kod četiri kontrolna pacijenta.

[0176]Pacijenti uključeni u ovu fazu studije su opisani dole u tekstu: * Pacijenti 1 i 2: Kontrolno sredstvo. Primena standardne terapije za oporavak prema odeljku 3.1. Pacijenti 3 i 4: Kontrolno sredstvo + hijaluronska kiselina. Primena terapije sa hijaluronskom kiselinom opisane u odelju 3.2. •, Pacijenti 5 i 6 (iz Faze IV): Primena gela sa aktivnim sastojkom (a.i.) u koncentraciji od 10~<4>M koji sadrži oleuropein sa stepenom čistoće od 41,5% svaka 24 sata. * Pacijenti 7, 8, 9, 10, 11 i 12: Primena gela sa aktivnim sastojkom (a.i.) u koncentraciji od 10"<4>M koji sadrži oleuropein sa stepenom čistoće od 80% svaka 24 sata.

Zaključci:

[0177]Pokazano je da nema veoma značajnih razlika među rezultatima dobijenim sa gelovima koji imaju ugrađen aktivni sastojak sa stepenom čistoće od 41,5% i onima koji imaju ugrađen aktivni sastojak sa stepenom čistoće od 80%, iako je ovaj drugi pokazao brzinu izlečenja koja je veća (prosečno dnevno izlečenje od 2,33% za čireve lečene sa 41,5% oleuropeina naspram 2,69% od 80% oleuropeina). Isceljujuće dejstvo najčistijeg aktivnog sastojka je pored toga mnogo bolje od kontrolnih sredstava (videti Sliku 7). Samim tim, može se zaključiti da isceljujuće dejstvo proizvoda jeste pozitivno i da se povećava kako se povećava čistoća aktivnog sastojka korišćenog u formulaciji farmaceutskih supstanci iz ovog pronalaska.

[0178]Svi ciljevi procene efikasnosti su ispunjeni ovim proizvodom koji je obuhvatio čistiji aktivni sastojak (a.i.). Slično tome, iritacije ili infekcije se nisu javile kod pacijenata lečenih čistim oleuropeinom, što potvrđuje bezbednost ovog aktivnog sastojka sa navedenim stepenom čistoće.

6.2. Neuropatski čirevi ( dijabetesno stopalo)

[0179]Pošto se efikasnost proizvoda iz ovog pronalaska pokazala na venskim čirevima, proizvod je korišćen kod pacijenata koji imaju neuropatske čireve. Specifično, analiza je izvedena na pacijentima sa grupom I ili II čireva na Vagnerovoj skali.

Specifični ciljevi:

[0180]Da se testira efikasnosti istih galenskh formulacija za koje se zaštita patentom traži za lečenje venskih čireva kod pacijenata sa dijabetesnim stopalom. • Za proveru ako postoje značajne razlike u efikasnosti leka kod neuropatskih čireva pod dva različita režima primene doze (svakih 12 sati i svaka 24 sata).

Izvršavanje:

[0181]Imajući u vidu teškoću u pogledu regrutovanja pacijenata koji su usklađeni sa gore opisanim uslovima uključivanja, i kako može da se zaključi iz testova zaključenih kod pacijenata sa venskim čirevima da je nivo efikasnosti galenskog gela, kreme i formulacija vodenog rastvora u njihovim različitim koncentracijama veoma sličan u svim slučajevima, kliničkim testovima na dijabetesnom stopalu koji su izvedeni na samo dve koncentracije; jedna od njih koncentrovana (10~<2>M) i druge su prilično razblažene (10-<9>M), oba na bazi gela. Za svaki od njih, nanosi se formulacija baze u prvim lečenim slučajevima venskih čireva (videti odeljak 2), korišćenjem dva različita režima doze (svakih 12 i 24 sata). Stepen čistoće korišćenog aktivnog sastojka u ovom kliničkom testu je bio 41,5%.

[0182]Međutim, ove formulacije i režimi doze se moraju posmatrati jedino pomoću primera jer je delotvornost preostalih formulacija pokazana na pacijentima sa venskim čirevima.

[0183]Osam pacijenata koji su odgovarali gore opisanim kriterijumima su procenjeni korišćenjem sledećih formulacija: • Kontrolna grupa: Korišćena su dva pacijenta kojima je uspostavljeno lečenje bekaplerminom u odeljku 3.2, gore u tekstu. o Pacijent 1: 5,40 cm<2>čir. Grupa I. Primena doze ovog preparata sa bekaplerminom svaka 24 sata.

o Pacijent 2: 5,86 cm<2>čir. Grupa I. Primena doze ovog preparata sa bekaplerminom svaka

24 sata.

[0184]Kontrolni pacijenti su uvek pokazali dijagnozu oporavka jednaku ili bolju od pacijenata kojima je nanet preparat baze (Vagner grupa I naspram Vagner grupe I ili II).

• 10"2M oleuropeina (tri pacijenta):

o Pacijent 3: 5,58 cm<2>čir. Grupa II. Primena doze osnovnog preparata svakih 24 sati.

o Pacijent 4: 3,45 cm<2>čir. Grupa I. Primena doze osnovnog preparata svaka 24 sata.

o Pacijent 5: 2,64 cm<2>čir. Grupa II. Primena doze osnovnog preparata svakih 12 sati.

• 10"<9>M oleuropeina (tri pacijenta):

o Pacijent 6: 1,62 cm 2 čir. Grupa I. Primena doze osnovnog preparata svaka 24 sata.

o Pacijent 7: 7,70 cm<2>čir. Grupa I. Primena doze osnovnog preparata svaka 24 sata.

o Pacijent 8: 5,56 cm<2>čir. Grupa I. Primena doze osnovnog preparata svakih 12 sati.

Zaključci:

[0185]Svi su pacijenti lečeni preparatima koji sadrže oleuropein, bez obzira na koncentraciju i režim lečenja (broj doza), veoma značajno smanjena je površina čira i smanjena je klasifikacija prema Vagner-Meritovoj klasifikaciji za oko dve grupe, čime su jasno prevaziđene kontrole u smislu efikasnosti i bez pokazivanja veoma značajnih razlika između različitih mezhanizama lečenja (primena svakih 12 ili 24 sata i korišećna je koncentracija gela).

[0186]Kod četiri od šest slučajeva lečenih oleuropeinom problem sa čirom koji nije u praksi pokazao nikakvo značajno poboljšanje (100% izlečenje na kraju lečenja) u roku od dve ili više nedelja je bio u potpunosti rešen. Dva preostala pacijenta (pacijenti 7 i 8) kojima je naneta niža koncentracija gela (10~<9>M) je nanet su postignuti nivoi izlečenja od 86,23% i 99,28%, prema opisanom redosledu, naspram prosečnih 48,95% smanjenja čirom zahvaćene površine kontrolne grupe.

[0187]Treba pomenuti da su testirane niske koncentracije aktivnog sastojka (10~<9>M) imale, u svakom slučaju, nivo efikasnosti mnogo veći od kontrolne supstance. Čir koji je imao brže napredovanje (srednje dnevno zaceljenje od 8,33%) koje je odgovaralo pacijentu 6 lečenom sa oleuropeinom na 10~<9>M u dnevnom režimu primene leka. Međutim, to je bio čir sa malim prečnikom (1,62 cm<2>). Videti Sliku 8.

[0188]Drugi ciljevi (lakoća primene i bezbednost) su takođe zadovoljeni: medicinske sestre koje su nanosile supstancu su potvrdile daje gel bilo najlakše naneti (dobijeni srednji rezultat je bio 8,33 od 10). Pored toga, kod pacijenata nisu detektovani problemi u vidu neugodnosti ili toksičnosti.

[0189]U smislu specifičnijih gore pomenutih ciljeva za testove na dijabetesnom stopalu, moguće je zaključtii kao potvrđeno da galenske formulacije za koje se zaštita patentom traži za lečenje venskih čireva jesu taođe delotvorne kod pacijenata sa dijabetesnim stopalom, i nema značajnih razlika u efikasnosti leka između tih slučajeva u kojima je lek nanet svakih 12 sati i onih u kojima je lek nanet svaka 24 sata.

6.3. Dekubitus ( PU)

[0190]Pošto se uspešno testira upotreba proizvoda iz ovog pronalaska u njegovim različitim galenskim oblicima, koncentracije aktivnog sastojka i režimi doziranja i kod venskih čireva i neuropatskih čireva, logično je bilo smatrati da bi odgovarajuće lečeni dekubitusi mogli takođe da pokažu značajno poboljšanje sa upotrebom ovog proizvoda.

S pecifični ciljevi:

[0191]Da bi se testirala efikasnost istih galenskh formulacija za koje se zaštita patentom traži za oporavak venskih čireva i dijabetesnog stopala kod pacijenata sa dekubitusom. Pored toga, potvrđena je

superiornost proizvoda u pogledu kontrola pod različitim režimima primene (doza).

Izvršavanje:

[0192]Za sprovedene testove izabrani su pacijenti sa dekubitusima prema standardu drugačijem od prethodnih standarda zato što, da bi se izvelo testiranje, izabrani su pacijenata koji imaju više od jednog dekubitusa a kod kojih se ne pokazuje nikakve reakcije na površini tokom barem poslednje dve nedelje. Dakle, kontrola bi bila sam pacijent. Odlučeno je da se čir sa najgorom dijagnozom (s obzirom na skalu dekubitusa) i/ili veća površina leče oleuropeinom, pri čemu drugi čir deluje kao kontrola prema režimima vezanim za oporavak opisanim u odeljku 3. Pored toga, kod jedinog pacijenta koji je imao tri dekubitusa na različitim lokacijama, analizirane razlike u brzini zaceljivanja su izvedene iz upotrebe tri različita režima doze istog proizvoda (12 sati, 24 sata, i 48 sati).

[0193]Klasifikacija dekubitusa (PU) pomenuta u odeljku 4 (skala 4.3) je korišćena da se odredi uključivanje ili isključivanje pacijenata u ovu studiju. Svi proučavani pacijenti su imali čireve stadijuma II ili

III.

[0194]Pacijenti analizirani u ovoj fazi kliničkog ispitivanja su opisani ddole u tekstu:

Pacijent 1:

o Kontrolni: 4,96 cm<2>čir u sedalnoj kosti (Stadijum III).

o 10"<2>M gel svaka 24 sata: 5,32 cm<2>čir u krstačnoj kosti (Stadijum III).

• Pacijent 2:

o Kontrolni: 8,98 cm<2>čir u levoj peti (Stadijum III).

o Gel 10"7 M svaka 24 sata: 18,03 cm<2>čir u krstačnoj kosti (Stadijum III).

Pacijent 3:

o Kontrolni: 8,57 cm<2>čir u levoj peti (Stadijum III).

o Gel 10"9 svaka 24 sata: 11,35 cm<2>čir u desnoj peti (Stadijum III i 13 meseci trajanja).

Pacijent 4 (test dejstva doze):

o Primena svakih 48 sati (10~<4>M gel): 8,37 cm<2><čir>u gluteusu (Faza II).

o Primena svakih 12 sati (10"<4>M gel): 10,56 cm<2>čir u desnoj peti (Stadijum II).

o Primena svakih 24 sata (10~<4>M gel): 1,19 cm<2>čir u krstačnoj kosti (Stadijum II).

r/* Zakliučci:

[0195]Sve korišćene koncentracije i režimi doze imaju efikasnost koja premašuje rezultate koju daju kontrolna sredstva, mnogo veću od kontrolnih sredstava, pri tome nije bilo značajnih razlika između njih. Videti Sliku 9. Obrazac najkoncentrovanijih formulacija koje imaju rezultate koji su nešto bolji od najrazblaženijih formulacija se ponovo ponavlja.

[0196]Kao što se javlja kod čireva dijabetesnog stopala, nisu primećene nikakve značajne razlike između terapija sa primenama svakih 12 sati i onih korišćenih svaka 24 sata. (videti na Slici 9 procenti izlečenja pacijenta 4 pod tri korišćena režima primene: 48 sati, 12 sati, i 24 sata.).

[0197]Opravdano je dakle smatrati da će pored galenskih formulacija i koncentracija testiranih kao primer kod pacijenata koji boluju od dekubitusa (PU), preostale galenske formulacije i koncentracije već testirane u prethodnim fazama ove kliničke studije (venski i neuropatski čirevi) imati kapacitet izlečenja koji je daleko superiorniji u odnosu na dobijene kapacitet izlečenja dobijen pridržavanjem uobičajenih lečenja koje se danas primenjuju, bez obzira na korišćen režim doze.

[0198]U vezi sa glavnim ciljevima ove studije, treba pomenuti da je brzina izlečenja čireva tretiranih oleuropeinom (cilj 5) bila daleko superiornija u svim slučajevima u odnosu na čireve lečene bekaplerminom (pacijent 1: 57% brže; pacijent 2: 34% brže; pacijent 3: 29% brže), uprkos činjenici da je, kao što je gore pomenuto, površina čireva lečenih oleuropeinom bila mnogo veća nego kod kontrolnih čireva. Pored toga, svi čirevi lečeni oleuropinom koji su bili u stadijumu III su pali na stadijum I ili stadijum l-ll (cilj 6).

[0199]U smislu sekundarnih ciljeva ove studije (ciljevi 7 i 8), sve medicinske sestre su potvrdile da je gel bilo lako naneti (srednji rezultat dobijen od 8.5 od 10) i kod pacijenata nisu detektovani problemi u vidu neugodnosti ili toksičnosti.

Claims (10)

1. Farmaceutska supstanca koja sadrži oleuropein kao jedini aktivni sastojak za upotrebu za lečenje rana koje zaceljuju i čireva kod lica u poodmaklim godinama ili dijabetičara izabranih iz grupe koja obuhvata : dijabetesno stopalo, dekubitis i venski čir.

2. Farmaceutska supstanca koja sadrži oleuropein kao jedini aktivan sastojak za upotrebu prema patentnom zahtevu 1, pri čemu farmaceutska supstanca obuhvata pored aktivnog sastojka oleuropeina, sredstvo za želiranje, konzervans, rastvarač, alkilirajući agens i opciono antioksidans.

3. Farmaceutska supstanca koja sadrži oleuropein kao jedini aktivni sastojak za upotrebu prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva, pri čemu je ova farmaceutska supstanca u obliku gela i još obuhvata farmaceutski prihvatljiv nosač.

4. Farmaceutska supstanca koja sadrži oleuropein kao jedini aktivni sastojak za upotrebu prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva 1 do 2, pri čemu je ova farmaceutska supstanca u obliku kreme i još obuhvata farmaceutski prihvatljiv nosač.

5. Farmaceutska supstanca koja sadrži oleuropein kao jedini aktivni sastojak za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 4, pri čemu je oleuropein prisutan u farmaceutskoj supstanci u koncentraciji od 10"'' M do 10"'''' M.

6. Farmaceutska supstanca koja sadrži oleuropein kao jedini aktivni sastojak za upotrebu prema patentnom zahtevu 5, pri čemu je oleuropein prisutan u farmaceutskoj supstanci u koncentraciji od 10~<2>d0 10"9M.

7. Farmaceutska supstanca koja sadrži oleuropein kao jedini aktivni sastojak za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 6, pri čemu se lečenje rana koje zaceljuju i čirevi kod lica u poodmaklim godinama ili starijih ljudi i/ili dijabetičara odnosi na dijabetesno stopalo.

8. Farmaceutska supstanca koja sadrži oleuropein kao jedini aktivni sastojak za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 6, pri čemu se lečenje rana koje zaceljuju i čireva kod lica u poodmaklim godinama ili starijih osoba i/ili dijabetičara odnosi na venske čireve.

9. Farmaceutska supstanca koja sadrži oleuropein kao jedini aktivni sastojak za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 6, pri čemu se lečenje rana koje zaceljuju i čireva kod lica u poodmaklim godinama ili starijih ljudi i/ili dijabetičara odnosi na dekubitise.

10. Farmaceutska supstanca koja sadrži oleuropein kao jedini aktivni sastojak za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 9, pri čemu ovo lečenje obuhvata režim primene na 12 sati, 24 sata ili 48 sati.