RS55910B1 - Višenamenski gel za suvoću vagine sa direktnim i odloženim dejstvom - Google Patents

Description

Opis pronalaska

[0001] Predmetni pronalazak se odnosi na topikalne vaginalne preparate u vidu gela koji sadrže medijatore imunosti, faktore rasta, hemotaksične faktore i antibakterijske/antivirusne faktore ekstrahovane iz goveđeg kolostruma, a opciono i druge sastojke sa komplementarnom aktivnošću.

Stanje tehnike

[0002] U fiziološkim uslovima, vaginalni ekosistem podrazumeva dinamičku ravnotežu mikrobijalne flore koja je pod uticajem balasa hormona, pH i imunog odgovora kao blisko zavisnih faktora. Ćelije vaginalnog zida imaju važnu ulogu u održavanju navedene ravnoteže, posebno na površini i u intermedijernim slojevima epitela, a proliferacija i sazrevanje ovih ćelija je zavisno od hormona.

[0003] Normalno je da je vaginalna sluzokoža navlažena fluidom koji se prilikom pregleda uočava kao bistar sekret sastavljen od transudata plazme, cervikalne sluzi i sekreta vestibularnih žlezdi. Navedeni fluid takođe sadrži antimikrobijalne supstance zahvaljujući kojima sekret ima i protektivnu ulogu. Vaginalni sekret se sastoji od vaginalnog transudata (5%) i cervikalne sluzi i sekreta koji se u ovu sluz sliva (95%). Sluz sprečava kolonizaciju mikroba mehaničkim putem, svojom viskoznošću i eluiranjem sluzi, kao i time što sadrži antitela (IgG i IgA), citokine i antibakterijske faktore.

[0004] "Suvoća vagine" označava stanje koje je često u menopauzalnom dobu; manje je uobičajeno, ali jednako neprijatno kada se javlja kod pacijenata u reproduktivnom dobu.

[0005] Dok su menopauzalni hipoestrogenizam i urinarne navike preovlađujući faktori rizika kod starijih žena, kod žena u reproduktivnom dobu uzroci pojave simptoma mogu biti i upotreba kombinovanih kontraceptivnih sredstava estrogena i progestogena u niskim dozama, tampona, kao i prisustvo stresa itd.

[0006] Simptomi podrazumevaju bol, peckanje i svrab, naročito tokom seksualnog odnosa, sa tendencijom produženog trajanja. Bartolinijeve i Skeneove žlezde bi trebale da proizvode sluz; sluz je od suštinskog značaja kao "tečnost za podmazivanje", odnosno bitna je za normalno odvijanje seksualnog odnosa. Ipak, kada je prisutan poremećaj, proizvodnja sluzi se ne odvija što dalje dovodi do nelagodnosti kod pacijentkinja. Slaba vaginalna i vulvalna lubrikacija često kod žena pouzrokuje niz poremećaja poput peckanja, svraba i bola pri seksualnom odnosu. Prisutna je i veća osetljivost na čak umereno iritirajući situlus, a češće su epizode vaginoze i vaginitisa. Poremećaj je prilično često asociran sa poremećajima uriniranja, npr. sa peckanjem prilikom mokrenja. Čest je i kolposkopski nalaz nepravilnog obrasca preuzimanja joda u Šilerovom testu.

[0007] Za tretman navedenih poremećaja predloženi su brojni lekovi na bazi hormona. Nažalost, postoji sumnja povećane incidence tumora dojke, pre svega komedokarcinoma, prilikom upotrebe svih navedenih proizvoda. Predloženi su i brojni proizvodi na bazi fitoestrogena, ali naučni dokazi o riziku raka dojke postoje i u ovakvim slučajevima: izoflavoni soje indukuju povećanje proliferacije ćelija mišjeg MCF-7 tumora za 97% u odnosu na kontrolu.

[0008] U skladu sa navedenim, postoji potreba za proizvodom na bazi prirodnih supstanci koji:

! ne dovodi do promena u vaginalnom ekosistemu, ali i potpomaže da se vaginalni ekosistem obnovi i održi u ravnoteži, kao i da se pojača njegova odbrambena funkcija;

! predstavlja formulaciji u vidu gela koji je po svojim karakteristikama sličan fiziološkom vaginalnom sekretu i obezbeđuje trenutno olakšanje tegoba, a istovremeno podstiče obnovu i održavanje integriteta sluzokože; ! brzo oslobađa deo aktivnih sastojaka dok se drugi deo polako oslobađa u dužem vremenskom periodu; time se obezbeđuje dugotrajan terapijski efekat i dejstvo tokom celog perioda između uzastopnih administracija.

[0009] Preparati koji sadrže kolostrum ili njegove ekstrakte ili komponente, a za primenu na vaginalnu sluzokožu poznati su iz Međunarodnih patentnih spisa WO 2007/039124, WO 2009/113065 i WO 2004/089278. Mukoadhezivne mikrosfere za isporuku na bukalnu ili vaginalnu sluzokožu su prijavljene Međunarodnim patentnim spisom WO 2010/060886 i radovima:

- CHOWDARY K P R i saradnici: "Mukoadhezivne mikrosfrere za kontrolisanu isporuku lekova", BIOLOGICAL AND PHARMACEUTICAL BULLETIN, vol. 27, br.11, novembar 2004. godine, str.1717-1724;

- PATIL SANJAY B i saradnici: "Mukoadhezivne mikrosfere: sredsvo za isporuku lekova koje obećava" CURRENT DRUG DELIVERY, vol.5, br.4, oktobar 2008. godine, str.312-318;

- ALBERTINI B i saradnici: "Polimer-lipidine mukoadhezivne mikrosfere pripremljeni sprej-liofilizacijom za vaginalnu isporuku ekonazol nitrata", EUROPEAN JOURNAL OF PHARMACEUTICAL SCIENCES, vol. 36, br. 4-5, 2. mart 2009. godine, str, 591-601.

[0010] SAD patetni spis br. 2003/215506 prijavljuje mikroinkapsuliranu frakciju kolosturma obogaćenu imunoglobulinima klase G za isporuku kreatina. Vaginalna isporuka je takođe predviđena, ali je kao osnovna svrha navedena oralna primena, pri čemu je namena inkapsulacije zapravo zaštita od gastrične hidrolize.

Opis pronalaska

[0011] Predmetni pronalazak prijavljuje da su navedeni ciljeni ostvareni predmetnom formulacijom koja sadrži, kao aktivni sastojak, frakciju kolostruma obogaćenu imunoglobulinima, faktorima rasta, hemotaksičnim faktorima i antibakterijskim/antivirusnim faktorima, delom u slobodnom obliku koji je spreman za trenutno oslobađanje, a delom u obliku pogodnom za kontrolisano oslobađanje, prioritetno inkapsuliranom u mukoadhezivne mikročestice.

[0012] Mukoadhezivne mikrosfere su komercijalno dostupne pod imenom SPHERULITE® ili se iste mogu pripremiti u skladu sa Međunarodnim patentnim spisom WO 2010060886.

[0013] Poželjno je da preparati predmetnog pronalaska sadrže druge sastojke, pre svega pantenol, betain, sericin, vitamin E, ektrakte Lepidium mehenii (Make) i Aloe vera.

[0014] Preparati predmetnog pronalaska se prvenstveno upotrebljavaju za tretman premenopauzalnih, menopauzalnih i histerektomisanih žena, tinejdžerki, žena nakon porođaja ili tokom dojenja, žena koje pate od suvoće vagine koja je posledica stresa, kao i žena koje prekomerno upotrebljavaju nebalansirane lokalne tretmane.

[0015] Frakcija kolostruma koja je upotrebljiva kao sastojak gela predmetnog pronalaska se može dobiti iz kravljeg kolostruma, pre svega kolostruma krava rase Holštajn (frizijskih) i Gurnsi. Pokazano je da navedene krave proizvede kolostrum sa najvećom koncentracijom faktora rasta, imunomodulatora, hemotaksičnih faktora i antibakterijskih/antivirusnih faktora. Poželjno je da su se krave otelile po drugi ili treći put. Poželjno je i da se kolostrum prikupi između petog i šestog sata nakon teljenja (ovakav kolostrum se označava kao kolostrum 5H), obzirom da je utvrđeno da je u navedenom periodu u kolostrumu najveća koncentracija aktivnih supstanci. Kolostrum prikupljen u prvom satu sadrži nižu koncentraciju aktivnih supstanci, dok sadržaj aktivnih faktora ubrzano opada od šestog časa nadalje (24 sata nakon teljenja prisutno je samo 15 % aktivnih faktora).

[0016] Prikupljen kolostrum 5H se testira na tuberkulozu, citotoksičnost u ćelijskoj kulturi, mikoplazmu, prione i humane i goveđe viruse.

[0017] Kolostrum u cisterni vimena je praktično sterilan, ali kada se izmuze, uprkos svim merama predostrožnosti, a zbog visoke koncentracije faktora rasta, broj bakterija u kolostrumu raste veoma brzo prilikom zamrzavanja i odmrzavanja što su prilično spori procesi imajući u vidu veliku gustinu kolostruma u prvih nekoliko sati (Slika 1).

[0018] Koncentracija konzervansa koja je dozvoljena za upotrebu u ishrani i koncentracije koje su dozvoljene za parenteralnu i/ili intravensku upotrebu nisu dovoljne da se zaustavi povećanje broja bakterija. Upotreba gama zračenja dovodi do sterilizacije kolostruma samo ukoliko se upotrebi zračenje koje prelazi 10 kGy. Ipak, navedena količina zračenja razara veliki deo aktivnih faktora, a postupak u svakom slučaju ne sprečava obrazovanje pirogena čija je intravenska i/ili topikalna upotreba zabranjena u regionima koji su u kontaktu sa krvlju i limfnim čvorovima. Osmišljen je stoga inovativni sistem prikupljanja,a da bi se dobila sterilna jedinjenja oslobođena od alergena koja su pri tome i bez konzervansa i pirogena.

[0019] U kolostrum prikupljen u sterilnim kontejnerima (sterilisanim dok su bili prazni sa 25 kGy) se zatim dodaju antiseptički agensi i to u količinama dovoljnim da se garantuje sterilnost i odsustvo pirogena (Slika 2). Poželjna je upotreba kalijum sorbata i natrijum benzoata i to tako da koncentracija svakog iznosi 12,5% (znatno veće koncentracije od uobičajenih, odnosno 0,2%), dok se, alternativno, mogu upotrebiti fenoksietanol u koncentraciji od 2,5% ili pak diazolidinil urea u koncentraciji od 1% (Slika 3).

[0020] Ovako tretiran kolostrum nije potrebno čuvati zamrzavanjem pre procesa ekstrakcije aktivnih faktora što dovodi do očigledne uštede industrijskih troškova.

[0021] Kolostrum se dalje razblažuje slanim rastvorom: navedeno razblaživanje ne samo da obezbeđuje bolju filtraciju i smanjenje pojave zapušavanja pora filtera, već pre svega omogućava oslobađanje aktivnih faktora koji su vezani za masti i kazein. Kolostrum razblažen na navedeni način se dalje izlaže tangencijalnoj mikrofiltraciji (keramičke membrane sa maksimalnom veličinom pora između 2 i 6 µm, na temperaturi 5/20°C, transmembranski pritisak izmedju 0,2 i 2 bara), koji je moguće i ponoviti, a da bi se dobio opalescentan rastvor oslobođen od kazeina, masti matriksa i mlečnih proteina. Sve navedene supstance čine preko 90% alergenog sadržaja kolostruma i kravljeg mleka. Rastvor se zatim filtrira kroz membrane, ili alternativno, kroz molekulska sita sa veličinom pora koja propustaju proteine od maksimalno 300.000 daltona, a zarad daljeg prečišćavanje aktivnih faktora koji su svi molkulske težine manje od 200.000 daltona.

[0022] Rastvor se dodatno dijalizira ultrafiltriranjem (filteri sa maksimalnim veličinama pora koje dozvoljavaju prolaz proteina od 1000/2000 daltona) pod visokim pritiskom, a da bi se u potpunosti eliminisali konzervansi (molekulske težine manje od 150 daltona). Odmah potom, rastvor se i liofilizira (Slika 4). Rezultat postupka je dobijanje sterilnog, od pirogena i konzervansa oslobođenog, analergičanog praha (kazein i laktoalbumin su odgovorni za preko 95% alergija na kravlje mleko) vrlo visoke rastvorljivosti, sa maksimalnom mogućom koncentracijom aktivnih faktora.

[0023] Navedena frakcija, u daljem tekstu označena kao LIFEINSIDE™ Mucosa, sadrži sledeće faktore: MEDIJATORI IMUNOSTI

[0024] Imunoglobuline klase IgG2 i IgA (ā/mg), u proporciji od približno 60% Lifeinside™ Mucosa sadržaja (približno 50% IgG2 i približno 10% IgA), sa prirodnom specifičnošću za mnoge bakterije i viruse, pri čemu su pojedini munoglobulini odgovorni za superponiranu NEC (od engl. necrotizing enterocolitis) infekciju.

[0025] KOMPLEMENT C3/C4: Komplement čine cirkulišući proteini sposobni da interaguju sa biološkim membranama i sa specifičnim receptorima koji se nalaze na površini različitih tipova ćelija, a što indukuje inflamatornu reakciju koja pomaže u suzbijanju infekcije.

ANTIBAKTERIJSKI / ANTIVIRUSNI FAKTORI

[0026]

Transferin;

Laktoferin;

Lizozim;

Laktoperoksidaza.

FAKTORI RASTA

[0027] TGF-β1 - TRANSFORMIŠUĆI FAKTOR RASTA: stimuliše proizvodnju klase A imunoglobulina koja je odgovorna za imunsku odbranu u mukozi. Moduliše ćelijsku proliferaciju i podstiče taloženje ekstracelularnog matriksa.

[0028] EGF - EPIDERMALNI FAKTOR RASTA: reguliše razvoj sluzokože. Podstiče stvaranje epitelnih ćelija.

[0029] IGF 1 - INSULINU-SLIČAN FAKTOR RASTA: moduliše ćelijsku proliferaciju, adheziju i migraciju i indukuje proces sazrevanja sluzokože.

[0030] VEGF - VASKULARNI ENDOTELIJALNI FAKTOR RASTA: stimuliše stvaranje krvnih sudova. Ispoljava mitogenu aktivnost i aktivira vaskularnu propustivljost.

[0031] FGF-b – OSNOVNI FAKTOR RASTA FIBROBLASTA: stimuliše proliferaciju ćelija mezenhimskog porekla poput fibroblasta, endotelijalnih ćelija, astrocita i keratinocita. Deluje kao hemotaksični i fitogenetički faktor.

[0032] GH – HORMON RASTA: opšti faktor rasta svih tkiva.

[0033] GHRF – FAKTOR OSLOBAĐANJA HORMONA RASTA.

[0034] NGF – NERVNI FAKTOR RASTA: podstiče aktivnost i reguliše rast i diferencijaciju simpatičkog sistema.

[0035] PRP- Protein bogat prolinom: podstiče sazrevanje T ćelija i ispoljava regenerativni efekat u nervnom sistemu, koštanom sistemu i sluzokoži.

HEMOTAKSIČNI FAKTORI

[0036] EOTAKSIN: vezuje se za receptore hemokina zarad regrutacije eozinofila u tkiva zahvaćena inflamacijom.

[0037] IP-10-hemokinski ligand 10: indukovan je interferonom gama, agregira inflamatorne ćelije.

[0038] MCP-1 monocitni hemotaksični faktor-1: promoviše agregaciju monocita u tkivima zahvaćenim inflamacijom.

CITOKINI

[0039]

IL-2: indukuje proliferaciju T limfocita.

IL-4: ispoljava anti-inflamatornu aktivnost.

IL-6: stimuliše urođeni i adaptivni imunitet.

IL-9: regulator haemopoetskih ćelija, stimuliše proliferaciju ćelija i sprečava apoptozu.

IL-17: reguliše aktivnosti NF-KB i poboljšava proizvodnju azot oksida (NO).

Il-10: ispoljava plejotropne efekte u imunoregulaciji i inflamaciji. Poboljšava preživljavanje B ćelija, a stoga i proizvodnju antitela. Studije sprovedene na miševima kojima je genetičkim inžinjeringom izbačen navedeni gen pokazuju da je protein bitan u imunoregulaciji sluzokože. Interferon-gama: ispoljava poznate antivirusne, antitumorske i imunoregulatorne aktivnosti. Moćan je aktivator makrofaga i aktivira ćelijski-posredovanu imunost prilikom bakterijskih i virusnih infekcija.

[0040] TNF-α - Faktor nekroze tumora: stimuliše migraciju neutrofila i monocita do mesta infekcije.

[0041] Predost upotrebe frakcije koja sadrži prethodno navedene supstance može biti što se ista može upotrebljavati zajedno sa drugim jedinjenjima koja ispoljavaju komplementarnu ili na drugi način korisnu aktivnost. Poželjno je da se upotrebljavaju sledeće supstance:

Betain: Betain (trimetilglicin) - supstanca biljnog porekla koja se ekstrahuje iz šećerne repe. Uključena je u transmetilaciju, biohemijski proces neophodan za ćelijski metabolizam kojim se metil grupa (CH3) prebaciju sa jednog molekula na drugi. U telu, betain gubi metil grupu i konvertuje se u dimetilglicin (vitamin B15); tokom procesa se proizvodi energija i pretpostavlja se da je upravo ovaj efekat odgovoran za povoljno dejstvo jedinjenja a to su povlačenje neobjašnjivog umora i povoljan uticaj na cirkulatorni sistem, srce, alergije i ćelijsko disanje. Betain je idealan sastojak proizvoda dizajniranih za kožu i sluznicu, koje su posebno osetljive i delikatne, imajući u vidu njegove karakteristike hidratacije i vlaženja, a što je od koristi i za poboljšavanje neposrednog vlaženja vaginalne sluzokože.

[0042] Pantenol: Pantotenska kiselina i njen odgovarajući redukovani oblik, pantenol, označavaju vitamine koji se najčešće koriste za topikalnu primenu. Dokazano je da su efikasani u omekšavanju, vlaženju i regeneraciji. Ispoljavaju brojne osnovne funkcije:

! nakon penetracije u sluzokožu, djeluju kao unutrašnje aktivni ovlaživači obzirom da imaju odličnu sposobnost zadržavanja vlažnosti, čime kožu čine mekom i elastičnom;

! stimulišu proliferaciju ćelija i potpomažu obnovu tkiva;

! podstiču normalnu keratinizaciju;

! podstiču zarastanje manjih rana, abrazija i opekotina zahvaljujući svom umirujućem dejstvu.

[0043] Vitamin E ili tokoferol, vitamin rastvorljiv u mastima, ispoljava značajnu antioksidativnu aktivnost i sposoban je da spreči razgradnju vitamina A i masnih kiselina čime posledično deluje i na smanjenje stvaranja toksičnih katabolita i formiranje slobodnih radikala i peroksida. Vitamin E učestvuje u procesima ćelijske respiracije, učvršćuje zidove krvnih sudova i ispoljava značajne povoljne efekte na reproduktivni sistem.

[0044] Sericin (MW 400.000): vlaži, obrazuju film na površini kože i sluzokože i puferiše kiselost. Smanjuje agresivnost surfaktanata. Ispoljava značajan afinitet za hidrofobne proteine, kao i odličnu sposobnost zadržavanja vode, a obe karakteristike su sve izraženije sa povećanjem molekulske težine. Za razliku od hijaluronske kiseline koja se često koristi u vaginalnim hidratantnim proizvodima, efekat stvaranje filma nije okluzivan. U slučaju upotrebe netaknutog sericina, prijatno, terapijsko dejstvo obrazovanja filma ne sprečava apsorpciju ostalih faktora u vaginalnu sluzokožu.

[0045] Maka (ekstrakt Lepidium meyenii): malo poznat lek biljnog porekla i visokoenergetska hrana. Njegova popularnost je u porastu zbog sposobnosti energizacijee, povećanja plodnosti i afrodizijačkog dejstva. Maka ekstrakt sadrži glukozinolate i izotiocijanate sa hemioprotektivnom aktivnošću. Kod žena, ekstrakt Make promoviše plodnost, stimuliše libido, ublažava simptome povezane sa menopauzom, ublažava menstrualne bolove i ispoljava energetsko dejstvo.

[0046] Sastojci ekstrakta Make ne ispoljavaju estrogenu aktivnost, a što je pokazano na ćelijama estrogen-zavisnog kancera dojke (ćelijama MCF-7 tumora).

[0047] Aloe vera ispoljava značajna regenerativna, proteolitička, anti-inflamatorna, antipiretska, analgetska, vlažeća, bakteriostatska, virostatska, fungicidna svojstva, kao i svojsvo brzog zarastanja rasta i smanjenja svraba.

[0048] Formulacije gela predmetnog pronalaska se pripremaju u skladu sa poznatim tehnikama, upotrebom konvencionalnih ekscipijensa. Koncentracija frakcije kolostruma u slobodnom obliku može varira između 1 i 10%, dok koncentracija inkapsulisanog oblika za kontrolisano oslobađanje varira između 0.1 i 5%.

[0049] Približni intervali koncentracija ostalih sastojaka, ukoliko su oni prisutni, naveden je u tekstu koji sledi:

Sericin: 0.5-5%

Pantenol: 0.1-1%

Betain: 1-10%

Ekstrakt Aloe vera: 1-5%

Vitamin E: 0,1-2%

Ekstrakt Lepidium meienii: 1-5%

[0050] Predmetni pronalazak je detaljnije opisan putem eksperimentalnog dela koji sledi, odnosno kroz primere.

Primer 1 - Kvalitativni i kvantitativni sastav vaginalnog gela sa brzim i sporim

oslobađanjem aktivnih faktora

Primer 2 - Klinička ispitivanja

[0051] Vaginalni gel opisan u Primeru 1 je upotrebljen kod 30 polodnih, predmenopauzalnih i menopauzalnih žena koje su patile od suvoće vagine usled hormonskih ili mehaničkih uzroka, stresa, nebalansiranih lokalnih tretmana, dojenja, kontraceptiva itd.

[0052] Tabela 1 prikazuje rezultate dobijene kolposkopijom sa Schiller testom u grupi od 30 tretiranih pacijenata i 28 kontrola. Na kraju studije, razlika između dve grupe je bila statistički značajna (p < 0,05).

Tabela 1

[0053] Tabela 2 prikazuje rezultate prisustva i ozbiljnosti kliničke slike suvoće vagine u istoj grupi. Još jednom, razlika je bila statistički značajna (p <0.05, tretman je podrazumevao pojedinačnu dnevnu pprimenu tokom 20 dana).

Tabela 2

[0054] Upotreba kombinovanog brzo-oslobađajućeg vaginalnog gela i vaginalnog gela sa odloženim otpuštanjem je dovela do definitivnog poboljšanja kliničke slike i povlačenja simptoma povezanih sa vaginalnom suvoćom. U kontrolnoj grupi, kod samo 16,7% slučajeva je došlo do poboljšanja nakon 20 dana, dok je kod 86,7% slučajeva u tretiranoj grupi došlo do poboljšanja/izlečenja.

[0055] Citološki test nakon tretmana (Slike 4-7) pokazuje:

! povećanje celularnosti

! relativni porast zrelih skvamoznih ćelija

! relativno smanjenje bazalnih i para-bazalnih ćelija.

Claims (6)

! prisustvo inflamacije i multinuklearnih histocita što ukazuje na povećan tropizam. Patentni zahtevi

1. Topikalni vaginalni preparati u vidu gela koji sadrže frakciju kolostruma obogaćenu imunoglobulinima, faktorima rasta, hemotaksičnim faktorima i antimikrobnim/antivirusnim faktorima, delimično u slobodnom obliku, a delimično inkapsulirani u mukoadhezivne mikročestice.

2. Preparati prema patentnom zahtevu 1 koji sadrže imunoglobuline klase IgG2 i IgA, komplement c3/c4, transferin, laktoferin, lizozim, laktoperoksidazu, TGF-β1 - transformišući faktor rasta, EGF - epidermalni faktor rasta, IGF 1 – insulinu-sličan faktor rasta, VEGF – vaskularni endotelni faktor rasta, FGF-b – osnovni faktor rasta fibroblasta, GH – hormon rasta, GHRF – faktor oslobađanja hormona rasta, NGF – nervni faktor rasta, prolinom bogate proteine, eotaksin, IP-10-hemokini ligand 10, MCP -1 monocitni hemotaksični faktor-1, IL-2, IL- 4, IL-6, IL-9, IL-17, IL-10, interferon-gama i TNF-α - faktor nekroze tumora.

3. Preparati prema patentnim zahtevima 1 ili 2, naznačeni time, što se frakcija kolosturma dobija iz kravljeg kolostruma izmuženog između petog i šestog sata nakon teljenja, postupkom koji obuhvata:

- dodavanje antiseptičnih agenasa u kolostrum u koncentracijama dovoljnim da se osigura sterilnost i apirogenost;

- razblaživanje rastvorom soli;

- jedan ili više koraka tangencijalne mikrofiltracije kroz keramičke membrane sa porama maksimalne veličine između 2 i 6 µm;

- filtiranje kroz membrane ili molekulska sita sa porama koje propuštaju proteine maksimalne molekulske težine od 300.000 Daltona;

- dijalizu ultrafiltracijom pod visokim pritiskom do potpunog uklanjanja antiseptičkih agenasa i konačnu liofilizaciju.

4. Preparati prema patentnom zahtevu 3, naznačeni time, što je kolostrum dobijen od krava rasa Gernsi ili Holštajn.

5. Preparati prema bilo kojem od patetnih zahteva od 1 do 4 koji sadrže i jedan ili više od sledećih sastojaka:

a) Sericin;

b) Pantenol;

c) Betain;

d) Ekstrakt Aloe vera;

d) vitamin E;

đ) Ekstrakt Lepidium meienii.

6. Preparati prema patentnom zahtevu 1 za upotrebu u tretmanu suvoće vagine.