RS55947B1 - Amidi oksalne kiseline kao inhibitori neprilizina, njihova farmaceutska kompozicija i njihova priprema - Google Patents

Amidi oksalne kiseline kao inhibitori neprilizina, njihova farmaceutska kompozicija i njihova priprema

Info

Publication number
RS55947B1
RS55947B1 RS20170428A RSP20170428A RS55947B1 RS 55947 B1 RS55947 B1 RS 55947B1 RS 20170428 A RS20170428 A RS 20170428A RS P20170428 A RSP20170428 A RS P20170428A RS 55947 B1 RS55947 B1 RS 55947B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
compound
6alkyl
chloro
mmol
compound according
Prior art date
Application number
RS20170428A
Other languages
English (en)
Inventor
Adam Hughes
Erik Fenster
Melissa Fleury
Roland Gendron
Edmund J Moran
Original Assignee
Theravance Biopharma R&D Ip Llc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Theravance Biopharma R&D Ip Llc filed Critical Theravance Biopharma R&D Ip Llc
Publication of RS55947B1 publication Critical patent/RS55947B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
    • A61K31/197—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group the amino and the carboxyl groups being attached to the same acyclic carbon chain, e.g. gamma-aminobutyric acid [GABA], beta-alanine, epsilon-aminocaproic acid or pantothenic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/215—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids
    • A61K31/216—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acids having aromatic rings, e.g. benactizyne, clofibrate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/215—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids
    • A61K31/235—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids having an aromatic ring attached to a carboxyl group
    • A61K31/24—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids having an aromatic ring attached to a carboxyl group having an amino or nitro group
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/27—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carbamic or thiocarbamic acids, meprobamate, carbachol, neostigmine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/365—Lactones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C231/00—Preparation of carboxylic acid amides
    • C07C231/02—Preparation of carboxylic acid amides from carboxylic acids or from esters, anhydrides, or halides thereof by reaction with ammonia or amines
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C233/00—Carboxylic acid amides
    • C07C233/01—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C233/56—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to carbon atoms of carboxyl groups, e.g. oxamides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C241/00—Preparation of compounds containing chains of nitrogen atoms singly-bound to each other, e.g. hydrazines, triazanes
    • C07C241/04—Preparation of hydrazides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C243/00—Compounds containing chains of nitrogen atoms singly-bound to each other, e.g. hydrazines, triazanes
    • C07C243/24—Hydrazines having nitrogen atoms of hydrazine groups acylated by carboxylic acids
    • C07C243/26—Hydrazines having nitrogen atoms of hydrazine groups acylated by carboxylic acids with acylating carboxyl groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C243/00—Compounds containing chains of nitrogen atoms singly-bound to each other, e.g. hydrazines, triazanes
    • C07C243/24—Hydrazines having nitrogen atoms of hydrazine groups acylated by carboxylic acids
    • C07C243/26—Hydrazines having nitrogen atoms of hydrazine groups acylated by carboxylic acids with acylating carboxyl groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C243/28—Hydrazines having nitrogen atoms of hydrazine groups acylated by carboxylic acids with acylating carboxyl groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms to hydrogen atoms or to carbon atoms of a saturated carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C243/00—Compounds containing chains of nitrogen atoms singly-bound to each other, e.g. hydrazines, triazanes
    • C07C243/24—Hydrazines having nitrogen atoms of hydrazine groups acylated by carboxylic acids
    • C07C243/26—Hydrazines having nitrogen atoms of hydrazine groups acylated by carboxylic acids with acylating carboxyl groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C243/30—Hydrazines having nitrogen atoms of hydrazine groups acylated by carboxylic acids with acylating carboxyl groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms to carbon atoms of an unsaturated carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C271/00—Derivatives of carbamic acids, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atom not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C271/06—Esters of carbamic acids
    • C07C271/08—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C271/10—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms with the nitrogen atoms of the carbamate groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C271/22—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms with the nitrogen atoms of the carbamate groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms to carbon atoms of hydrocarbon radicals substituted by carboxyl groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/18—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D207/22—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/24—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D207/26—2-Pyrrolidones
    • C07D207/263—2-Pyrrolidones with only hydrogen atoms or radicals containing only hydrogen and carbon atoms directly attached to other ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D317/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D317/08—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3
    • C07D317/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 not condensed with other rings
    • C07D317/32—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 not condensed with other rings with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D317/34—Oxygen atoms
    • C07D317/40—Vinylene carbonate; Substituted vinylene carbonates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D319/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D319/04—1,3-Dioxanes; Hydrogenated 1,3-dioxanes
    • C07D319/06—1,3-Dioxanes; Hydrogenated 1,3-dioxanes not condensed with other rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
    • A61K31/164—Amides, e.g. hydroxamic acids of a carboxylic acid with an aminoalcohol, e.g. ceramides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
    • A61K31/165—Amides, e.g. hydroxamic acids having aromatic rings, e.g. colchicine, atenolol, progabide
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
    • A61K31/165—Amides, e.g. hydroxamic acids having aromatic rings, e.g. colchicine, atenolol, progabide
    • A61K31/166—Amides, e.g. hydroxamic acids having aromatic rings, e.g. colchicine, atenolol, progabide having the carbon of a carboxamide group directly attached to the aromatic ring, e.g. procainamide, procarbazine, metoclopramide, labetalol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
    • A61K31/165—Amides, e.g. hydroxamic acids having aromatic rings, e.g. colchicine, atenolol, progabide
    • A61K31/167—Amides, e.g. hydroxamic acids having aromatic rings, e.g. colchicine, atenolol, progabide having the nitrogen of a carboxamide group directly attached to the aromatic ring, e.g. lidocaine, paracetamol

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
  • Hydrogenated Pyridines (AREA)

Description

Opis
OSNOVA PRONALASKA
OBLAST PRONALASKA
[0001] Predmetni pronalazak se odnosi na nova jedinjenja koja imaju aktivnost inhibicije neprilizina. Pronalazak se takođe odnosi na farmaceutske kompozicije koje sadrže takva jedinjenja i postupke za pripremu takvih jedinjenja, i nalazi korist u postupcima upotrebe takvih jedinjenja za lečenje bolesti kao što su hipertenzija, srčana insuficijencija, plućna hipertenzija i bolest bubrega.
STANJE TEHNIKE
[0002] Neprilizin (neutralna endopeptidaza, EC 3.4.24.11) (NEP), Zn<2+>metalopeptidaza vezana za endotelijalnu membranu koja se nalazi u mnogim organima i tkivima, uključujući mozak, bubrege, pluća, gastrointestinalni trakt, srce i perifernu vaskulaturu. NEP razlaže i inaktivira određeni broj endogenih peptida, kao što su enkefalini, cirkulišući bradikinin, angiotenzin peptidi i natriuretički peptidi, od kojih poslednji ima nekoliko efekata uključujući, na primer, vazodilataciju i natriurezu/diurezu, kao i inhibiciju kardijačne hipertrofije i ventrikularnu fibrozu. Na taj način, NEP ima važnu ulogu u homeostazi krvnog pritiska i kardiovaskularnom zdravlju.
[0003] Inhibitori NEP, kao što su tiorfan, kandoksatril i kandoksatrilat, studirani su kao potencijalni terapeutici. US 2010/305145 navodi jedinjenja koja su inhibitori NEP. Takođe su poznata jedinjenja koja inhibiraju oba, NEP i angiotenzin-I konvertujući enzim (ACE), i obuhvataju omapatrilat, gempatrilat i sampatrilat. U vezi sa inhibitorima vazopeptidaze, ova poslednja klasa jedinjenja je opisana u Robl et al. (1999) Exp. Opin. Ther. Patents 9(12): 1665-1677.
[0004] Ksander et al. (1995) J. Med. Chem.38:1689-1700 opisuje dikarboksilna kiselina dipeptid inhibitore NEP formule:
[0005] Jedinjenje 21a, koje ima supstituent ćilibarne kiseline, je najaktivnije jedinjenje, sa IC50od 5 nM. Autori su zabeležili da "ćilibarna kiselina u P2’ mestu izgleda da je optimalna s obzirom na to da je produženje lanca karboksilne kiseline za jednu (21e) i dve (2 If) metilenske jedinice smanjilo aktivnost 18- i 65-puta." Autori su dalje zabeležili da je "smanjenje dužine lanca za jedan metilen (21g) takođe pokazalo 18-struko smanjenje u aktivnosti." (stranica 1692, druga kolona).
REZIME PRONALASKA
[0006] Predmetni pronalazak daje nova jedinjenja za koja je nađeno da poseduju aktivnost inhibicije enzima neprilizina (NEP). Prema tome, očekuje se da su jedinjenja prema pronalasku korisna i povoljna kao terapeutska sredstva za lečenje stanja kao što su hipertenzija i srčana insuficijencija.
[0007] Jedan aspekt pronalaska se odnosi na jedinjenje formule I:
gde:
R<1>je izabran od H, -C1-8alkila, -C1-3alkilen-C6-10arila, -C1-3alkilen-C1-9heteroarila, -C3-7cikloalkila, -[(CH2)2O]1-3CH3, -C1-6alkilen-OC(O)R<10>, -C1-6alkilen-NR<11>R<12>, -C1-6alkilen-C(O)R<13>, -C0-
6alkilenmorfolinila, -C1-6alkilen-SO2-C1-6alkila,
R<10>je izabran od -C1-6alkila, -O-C1-6alkila, -C3-7cikloalkila, -O-C3-7cikloalkila, fenila, -O-fenila, -NR<11>R<12>, -CH(R<15>)-NH2, -CH(R<15>)-NHC(O)O-C1-6alkila i -CH(NH2)CH2COOCH3; i R<11>i R<12>su nezavisno izabrani od H, -C1-6alkila i benzila; ili R<11>i R<12>su uzeti zajedno kao -(CH2)3-6-, -C(O)-(CH2)3- ili -(CH2)2O(CH2)2-; R<13>je izabran od -O-C1-6alkila, -O-benzila i -NR<11>R<12>; i R<14>je -C1-6alkil ili -C1-6alkilen-C6-10aril; R<15>je H, -CH3, -CH(CH3)2, fenil ili benzil;
R<2>je -OR<21>ili -CH2OR<21>; i R<3>je H ili -CH3; gde R<21>je H, -C(O)-C1-6alkil, -C(O)-CH(R<22>)-NH2, -C(O)-CH(R<22>)-NHC(O)O-C1-6alkil ili -P(O)(OR<23>)2; R<22>je H, -CH3, -CH(CH3)2, fenil, ili benzil; R<23>je H, -C1-
6alkil ili fenil; ili
R<2>je uzet zajedno sa R<1>tako da formira -OCR<15>R<16>- ili -CH20-CR<15>R<16>-, i R<3>je izabran od H i -CH3, gde
R<15>i R<16>su nezavisno izabrani od H, -C1-6alkila i -O-C3-7cikloalkila, ili R<15>i R<16>are su uzeti zajedno tako da formiraju =O; ili
R<2>je uzet zajedno sa R<3>tako da formira -CH2-O-CH2- ili -CH2-CH2-; ili
R<2>i R<3>su oba -CH3;
Z je izabran od -CH- i -N-;
R<4>je izabran od H, -C1-8alkila, -C1-3alkilen-O-C1-8alkila, -C1-3alkilen-C6-10arila, -C1-3alkilen-O-C6-10arila, -C1-3alkilen-C1-9heteroarila, -C3-7cikloalkila, -[(CH2)2O]1-3CH3, -C1-6alkilen-OC(O)R<40>, -C1-6alkilen-NR<41>R<42>, -C1-6alkilen-C(O)R<43>, -C0-6alkilenmorfolinila, -C1-6alkilen-SO2-C1-6alkila,
R<40>je izabran od -C1-6alkila, -O-C1-6alkila, -C3-7cikloalkila, -O-C3-7cikloalkila, fenila, -O-fenila, -NR<41>R<42>, -CH(R<45>)-NH2, -CH(R<45>)-NHC(O)O-C1-6alkila i -CH(NH2)CH2COOCH3; i R<41>i R<42>su nezavisno izabrani od H, -C1-6alkila i benzila; ili R<41>i R<42>su uzeti zajedno kao -(CH2)3-6-, -C(O)-(CH2)3-, ili -(CH2)2O(CH2)2-; R<43>je izabran od -O-C1-6alkila, -O-benzila i -NR<41>R<42>; i R<44>je -C1-6alkil ili -C0-6alkilen-C6-10aril; R<45>je H, -CH3, -CH(CH3)2, fenil ili benzil;
a je 0 ili 1; R<5>je izabran od halo, -CH3, -CF3i -CN;
b je 0 ili ceo broj od 1 do 3; svaki R<6>je nezavisno izabran od halo, -OH, -CH3, -OCH3, -CN, i -CF3; gde je svaka alkil grupa u R<1>i R<4>izborno supstituisana sa 1 do 8 fluoro atoma; i
gde je metilen linker na bifenilu izborno supstituisan sa jednom ili dve -C1-6alkil grupe ili ciklopropila; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
[0008] Sledeći aspekt pronalaska se odnosi na farmaceutske kompozicije koje sadrže farmaceutski prihvatljiv nosač i jedinjenje prema pronalasku. Takve kompozicije mogu izborno da sadrže druga terapeutska sredstva. Prema tome, u sledećem aspektu pronalaska, farmaceutska kompozicija sadrži jedinjenje prema pronalasku kao prvo terapeutsko sredstvo, jedno ili više sekundarnih terapeutskih sredstava i farmaceutski prihvatljiv nosač. Sledeći aspekt pronalaska se odnosi na kombinaciju aktivnih sredstava, koja sadrži jedinjenje prema pronalasku i drugo terapeutsko sredstvo. Jedinjenje prema pronalasku može biti formulisano zajedno ili posebno od dodatnog sredstva (sredstava). Kada je formulisan posebno, farmaceutski prihvatljiv nosač može biti uključen sa dodatnim sredstvom (sredstvima). Na taj način, sledeći aspekt pronalaska se odnosi na kombinaciju farmaceutskih kompozicija, pri čemu kombinacija sadrži: prvu farmaceutsku kompoziciju koja sadrži jedinjenje prema pronalasku i prvi farmaceutski prihvatljiv nosač; i drugu farmaceutsku kompoziciju koja sadrži drugo terapeutsko sredstvo i drugi farmaceutski prihvatljiv nosač. U sledećem aspektu, pronalazak se odnosi na komplet koji sadrži takve farmaceutske kompozicije, na primer gde su prva i druga farmaceutska kompozicija posebne farmaceutske kompozicije.
[0009] Jedinjenja prema pronalasku poseduju aktivnost inhibicije NEP enzima, i prema tome se očekuje da su korisna kao terapeutska sredstva za lečenje pacijenata koji pate od bolesti ili poremećaja koji se leči putem inhibicije NEP enzima ili povećanjem nivoa njegovih peptidnih supstrata. Na taj način, jedan aspekt pronalaska nalazi korist u postupku za lečenje pacijenata koji pate od bolesti ili poremećaja koji se leči inhibicijom NEP enzima, koji sadrži primenu na pacijenta terapeutski efikasne količine jedinjenja prema pronalasku. Sledeći aspekt pronalaska nalazi upotrebu u postupku za lečenje hipertenzije, srčane insuficijencije ili bolesti bubrega, koji sadrži primenu na pacijenta terapeutski efkasne količine jedinjenja prema pronalasku. Sledeći aspekt pronalaska nalazi upotrebu u postupku za inhibiciju NEP enzima kod sisara koji sadrži primenu na sisara, količine jedinjenja prema pronalasku koja inhibira NEP enzim.
[0010] S obzirom na to da jedinjenja prema pronalasku poseduju aktivnost inhibicije NEP, ona su takođe korisna kao alat za istraživanje. Prema tome, jedan aspekt pronalaska nalazi upotrebu u postupku za upotrebu jedinjenja prema pronalasku kao alat za istraživanje, pri čemu taj postupak sadrži izvođenje biološke analize upotrebom jedinjenja prema pronalasku. Jedinjenja prema pronalasku takođe se mogu koristiti za procenu novih hemijskih jedinjenja. Na taj način sledeći aspekt pronalaska nalazi korist u postupku procene test jedinjenja u biološkoj analizi, koji sadrži: (a) izvođenje biološke analize sa test jedinjenjem da bi se obezbedila prva vrednost analize; (b) izvođenje biološke analize sa jedinjenjem prema pronalasku da bi se obezbedila druga vrednost analize; pri čemu se korak (a) izvodi pre, posle ili istovremeno sa korakom (b); i (c) poređenje prve vrednosti analize iz koraka (a) sa drugom vrednošću analize iz koraka (b). Primeri bioloških analiza obuhvataju analizu inhibicije NEP enzima. Sledeći aspekt pronalaska nalazi upotrebu u postupku studiranja biološkog sistema ili uzorka koji sadrži NEP enzim, pri čemu taj postupak sadrži: (a) dovođenje u kontakt biološkog sistema ili uzorka sa jedinjenjem prema pronalasku; i (b) određivanje efekata uzrokovanih jedinjenjem na biološki sistem ili uzorak.
[0011] Sledeći aspekt pronalaska se odnosi na postupke korisne za pripremu jedinjenja prema pronalasku; takođe su navedeni intermedijeri korisni za pripremu jedinjenja prema predmetnom pronalasku. Prema tome, sledeći aspekt pronalaska se odnosi na postupak za pripremu jedinjenja formule I, koji sadrži korak spajanja jedinjenja formule 1 sa jedinjenjem formule 2:
da bi se proizvelo jedinjenje formule I; gde P je H ili amino-zaštitna grupa izabrana od t-butoksikarbonila, tritila, benziloksikarbonila, 9-fluorenilmetoksikarbonila, formila, trimetilsilila i t-butildimetilsilila; i pri čemu postupak dalje sadrži deportekciju jedinjenja formule 1 kada je P jednak amino zaštitnoj grupi; i gde R<1>-R<6>, a, b i Z su kao što su definisani za formulu I. Sledeći aspekt pronalaska se odnosi na postupak za pripremu farmaceutski prihvatljive soli jedinjenja formule I, koji sadrži dovođenje u kontakt jedinjenja formule I u obliku slobodne kiseline ili baze sa farmaceutski prihvatljivom bazom ili kiselinom. Intermedijeri mogu biti formule 1 ili njihova so, kao što je ovde definisano.
[0012] Pronalazak takođe nalazi korist u upotrebi jedinjenja formule I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, za proizvodnju leka, naročito za proizvodnju leka korisnog za lečenje hipertenzije, srčane insuficijencije ili bolesti bubrega. Pronalazak takođe nalazi korist u upotrebi jedinjenja prema pronalasku za inhibiciju NEP enzima kod sisara i upotrebu jedinjenja prema pronalasku kao alata za istraživanje.
[0013] Posebna grupa jedinjenja formule I su ona navedena u SAD privremenoj prijavi br. 61/554,625, koja je podneta 2.11.2011. Ova grupa obuhvata jedinjenja formule I’; gde:
gde: R<1>je izabran od H, -C1-8alkila, -C1-3alkilen-C6-10arila, -C1-3alkilen-C1-9heteroarila, -C3-7cikloalkila, -[(CH2)2O]1-3CH3, -C1-6alkilen-OC(O)R<10>, -C1-6alkilen-NR<11>R<12>, -C1-6alkilen-C(O)R<13>, -C0-6alkilenmorfolinila, -C1-6alkilen-SO2-C1-6alkila,
R<10>je izabran od -C1-6alkila, -O-C1-6alkila, -C3-7cikloalkila, -O-C3-7cikloalkila, fenila, -O-fenila, -NR<11>R<12>, -CH[CH(CH3)2]-NH2, -CH[CH(CH3)2]-NHC(O)O-C1-6alkila i -CH(NH2)CH2COOCH3; i R<11>i R<12>su nezavisno izabrani od H, -C1-6alkila i benzila; ili R<11>i R<12>su uzeti zajedno kao -(CH2)3-6-, -C(O)-(CH2)3-, ili -(CH2)2O(CH2)2-; R<13>je izabran od -O-C1-6alkila, -O-benzila i -NR<11>R<12>; i R<14>je -C1-6alkil ili -C0-6alkilen-C6-10aril; R<2>je izabran od -OH, -CH2OH, -OP(O)(OH)2, i -CH2OP(O)OH, i R<3>je izabran od H i -CH3; ili
R<2>je uzet zajedno sa R<1>tako da formira -OCR<15>R<16>- ili -CH2O-CR<15>R<16>-, i R<3>je izabran od H i -CH3, gde R<15>i R<16>su nezavisno izabrani od H, -C1-6alkila i -O-C3-7cikloalkila, ili R<15>i R<16>su uzeti zajedno tako da formiraju =O; ili R<2>je uzet zajedno sa R<3>tako da formira -CH2-O-CH2- ili -CH2-CH2-; ili R<2>i R<3>su oba -CH3; Z je izabran od -CH- i -N-; R<4>je izabran od H, -C1-8alkila, -C1-3alkilen-C6-10arila, -C1-3alkilen-C1-9heteroarila, -C3-7cikloalkila, -[(CH2)2O]1-3CH3, -C1-6alkilen-OC(O)R<40>, -C1-6alkilen-NR<41>R<42>, -C1-6alkilen-C(O)R<43>, -C0-6alkilenmorfolinila, -C1-6alkilen-SO2-C1-6alkila,
R<40>je izabran od -C1-6alkila, -O-C1-6alkila, -C3-7cikloalkila, -O-C3-7cikloalkila, fenila, -O-fenila, -NR<41>R<42>, -CH[CH(CH3)2]-NH2, -CH[CH(CH3)2]-NHC(O)O-C1-6alkila i -CH(NH2)CH2COOCH3; i R<41>i R<42>su nezavisno izabrani od H, -C1-6alkila, i benzila; ili R<41>i R<42>su uzeti zajedno kao -(CH2)3-6-, -C(O)-(CH2)3-, ili (CH2)2O(CH2)2-; R<43>je izabran od -O-C1-6alkila, -O-benzila i -NR<41>R<42>; i R<44>je -C1-6alkil ili -C1-6alkilen-C6-10aril; a je 0 ili 1; R<5>je izabran od halo, -CH3, -CF3, i -CN; b je 0 ili ceo broj od 1 do 3; svaki R<6>je nezavisno izabran od halo, -OH, -CH3, -OCH3, i -CF3; i gde je svaka alkil grupa u R<1>i R<4>izborno supstituisana sa 1 do 8 fluoro atoma; i; gde je metilen linker na bifenilu izborno supstituisan sa jednom ili dve -C1-6alkil grupe ili ciklopropilom; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
DEATALJAN OPIS PRONALASKA DEFINICIJE
[0014] Kada se opisuju jedinjenja, kompozicije, metode i postupci prema pronalasku, sledeći termini imaju sledeća značenja osim ukoliko nije drugačije nazančeno. Pored toga, kao što su ovde korišćeni, oblici u jedinini "a," "an," i "the" obuhvataju odgovarajuće oblike u množini osim ukoliko kontekst upotrebe jasno ne ukazuje drugačije. Termini "koji sadrži", "koji uključuje," i "koji ima" su određeni tako da budu uključujući i označavaju da može biti dodatnih elemenata osim navedenih elemenata. Svi brojevi koji izražavaju količine sastojaka, osobine kao što je molekulska težina, reakcione uslove, i tako dalje koji su ovde korišćeni trebalo bi razumeti kao modifikovane u svim slučejvima pomoću termina "oko," osim ukoliko nije drugačije naznačeno. Prema tome, brojevi koji su ovde dalje dati su aproksimacije koje mogu da variraju u zavisnosti od željenih osobina koje se traže da budu dobijene pomoću predmetnog pronalaska. Najmanje, i ne kao pokušaj ograničenja primene doktrine ekvivalenata na obim patentnih zahteva, svaki broj bi najmanje trebalo biti tumačen u svetlu objavljenih značajnih cifara i primenom uobičajenih tehnika zaokruživanja.
[0015] Termin "alkil" označava monovalentnu zasićenu ugljovodoničnu grupu koja može biti linearna ili granata. Osim ukoliko nisu drugačije definisane, takve alkil grupe tipično sadrže od 1 do 10 atoma ugljenika i obuhvataju, na primer, -C1-4alkil, -C1-5alkil, -C2-5alkil, -C1-6alkil, -C1-8alkil i -C1-10alkil. Reprezentativne alkil grupe obuhvataju, na primer, metil, etil, n-propil, izopropil, n-butil, s-butil, izobutil, t-butil, n-pentil, n-heksil, nheptil, n-oktil, n-nonil i n-decil.
[0016] Kada je specifičan broj atoma ugljenika namenjen za određeni termin koji je ovde korišćen, broj atoma ugljenika je prikazan pre termina kao supskript. Na primer, termin "-C1-6alkil" označava alkil grupu koja ima od 1 do 6 atoma ugljenika, i termin "-C3-7cikloalkil" označava cikloalkil grupu koja ima od 3 do 7 atoma ugljenika, respektivno, gde su atomi ugljenika u bilo kojoj prihvatljivoj konfiguraciji.
[0017] Termin "alkilen" označava dvovalentnu zasićenu ugljovodoničnu grupu koja može biti linearna ili granata. Osim ukoliko nije definisano drugačije, takve alkilen grupe tipično sadrže od 0 do 10 atoma ugljenika i obuhvataju, na primer, -C0-1alkilen-, -C0-6alkilen-, -C1-3alkilen-, i -C1-6alkilen-. Reprezentativne alkilen grupe obuhvataju, na primer, metilen, etan-1,2-diil ("etilen"), propan-1,2-diil, propan-1,3-diil, butan-1,4-diil i pentan-1,5-diil. Razume se da kada termin alkilen obuhvata nula ugljenika kao što je -C0-10alkilen-, takvi termini su određeni tako da obuhvataju odsustvo atoma ugljenika, to jest, alkilen grupa nije prisutna osim za vezivanje kovalentnom vezom grupa odvojenih terminom alkilen.
[0018] Termin "aril" označava monovalentni aromatični ugljovodonik koji ima jedan prsten (tj., fenil) ili jedan ili više fuzionisanih prstenova. Fuzionisani sistemi prstenova obuhvataju one koji su potpuno nezasićeni (npr., naftalen) kao i one koji su delimično nezasićeni (npr., 1,2,3,4-tetrahidronaftalen). Osim ukoliko nije drugačije definisano, takve aril grupe tipično sadrže od 6 do 10 atoma ugljenika u prstenu i obuhvataju, na primer, -C6-
10aril. Reprezentativne aril grupe obuhvataju, na primer, fenil, naftalen-1-il i naftalen-2-il.
[0019] Termin "cikloalkil" označava monovalentnu zasićenu karbocikličnu ugljovodoničnu grupu. Osim ukoliko nije definisano drugačije, takve cikloalkil grupe tipično sadrže od 3 do 10 atoma ugljenika i obuhvataju, na primer, -C3-5cikloalkil, -C3-6cikloalkil i -C3-7cikloalkil. Reprezentativne cikloalkil grupe obuhvataju, na primer, ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, i cikloheksil.
[0020] Termin "halo" označava fluoro, hloro, bromo i jodo.
[0021] Termin "heteroaril" je određen tako da obuhvata monovalentni nezasićeni (aromatični) heterociklus koji ima jedan prsten ili dva fuzionisana prstena. Monovalentni nezasićeni heterociklusi su takođe zajednički određeni kao "heteroaril" grupe. Osim ukoliko nije drugačije definisano, heteroaril grupe tipično sadrže ukupno od 5 do 10 atoma u prstenu, od kojih 1 do 9 su atomi ugljenika u prstenu i 1 do 4 su heteroatomi prstena, i obuhvataju, na primer, -C1-9heteroaril i -C5-9heteroaril. Reprezentativne heteroaril grupe obuhvataju, na primer, pirol (npr., 3- pirolil i 2H-pirol-3-il), imidazol (npr., 2-imidazolil), furan (npr., 2-furil i 3-furil), tiofen (npr., 2-tienil), triazol (npr., 1,2,3-triazolil i 1,2,4-triazolil), pirazol (npr., 1H-pirazol-3-il), oksazol (npr., 2-oksazolil), izokazol (npr., 3-izoksazolil), tiazol (npr., 2-tiazolil i 4-tiazolil), i izotiazol (npr., 3-izotiazolil), piridin (npr., 2-piridil, 3-piridil i 4-piridil), piridilimidazol, piridiltriazol, pirazin, piridazin (npr., 3-piridazinil), pirimidin (npr., 2- pirimidinil), tetrazol, triazin (npr., 1,3,5- triazinil), indolil (npr., 1H-indol-2-il, 1H-indol-4-il i 1H-indol-5-il), benzofuran (npr., benzofuran-5-il), benzotiofen (npr., benzo[b]tien-2-il i benzo[b]tien-5-il), benzimidazol, benzoksazol, benzotiazol, benzotriazol, hinolin (npr., 2-hinolil), izohinolin, hinazolin i hinoksalin.
[0022] Termin "izborno supstituisan" označava da dotična grupa može biti nesupstituisana ili može biti supstituisana jednom ili nekoliko puta, kao što je 1 do 3 puta, ili 1 do 5 puta, ili 1 do 8 puta. Na primer, alkil grupa koja je "izborno supstituisana" sa fluoro atomima može biti nesupstituisana, ili može da sadrži 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 ili 8 fluoro atoma. Slično, grupa koja je "izborno supstituisana" sa jednom ili dve -C1-6alkil grupe, može biti nesupstituisana, ili može da sadrži jednu ili dve -C1-6alkil grupe.
[0023] Kao što je ovde korišćen, izraz "koji ima formulu" ili "ima strukturu" nije određen tako da bude ograničavajući i korišćen je na isti način na koji je termin "koji sadrži" uobičajeno korišćen. Na primer, ako je prikazana jedna struktura, razume se da su obuhvaćeni svi stereoizomerni i tautomerni oblici, osim ukoliko nije naznačeno drugačije.
[0024] Termin "farmaceutski prihvatljiv" označava materijal koji nije biološki ili na drugi način neprihvatljiv kada se koristi u pronalasku. Na primer, termin "farmaceutski prihvatljiv nosač" označava materijal koji može biti ugrađen u kompoziciju i primenjen na pacijenta bez uzrokovanja neprihvatljivih bioloških efekata ili interakcije na neprihvatljiv način sa drugim komponentama kompozicije. Takvi farmaceutski prihvatljivi materijali tipično su ispunili tražene standarde toksikološkog i proizvodnog testiranja, i obuhvataju one materijale koji su identifikovani kao pogodni neaktivni sastojci od strane Administracije za hranu i lekove SAD-a.
[0025] Termin "farmaceutski prihvatljiva so" označava so pripremljenu od baze ili kiseline koja je prihvatljiva za primenu na pacijenta, kao što je sisar (na primer, soli koje imaju prihvatljivu bezbednost za sisara za datu režim doziranja). Međutim, razume se da nije potrebno da su soli pokrivene pronalaskom farmaceutski prihvatljive soli, kao što su soli intermedijernih jedinjenja koji nisu namenjeni za primenu na pacijenta. Farmaceutski prihvatljive soli mogu biti poreklom od farmaceutski prihvatljivih neorganskih ili organskih baza i od farmaceutski prihvatljivih neorganskih ili organskih kiselina. Pored toga, kada jedinjenje formule I sadrži oba, bazni deo, kao što je amin, piridin ili imidazol, i kiseli deo kao što je karboksilna kiselina ili tetrazol, mogu biti formirani cviterjoni i obuhvaćeni su unutar termina "so" kao što je ovde korišćen. Soli poreklom od farmaceutski prihvatljivih neorganskih baza obuhvataju soli amonijuma, kalcijuma, bakra, gvožđa (III), gvožđa (II), litijuma, magnezijuma, mangana (III), mangana (II), kalijuma, natrijuma i cinka. Soli poreklom od farmaceutski prihvatljivih organskih baza obuhvataju soli primarnih, sekundarnih i tercijarnih amina, uključujući supstituisane amine, ciklične amine, prirodne amine i slično, kao što su arginin, betain, kafein, holin, N,N’-dibenziletilendiamin, dietilamin, 2-dietilaminoetanol, 2-dimetilaminoetanol, etanolamin, etilendiamin, N-etilmorfolin, N-etilpiperidin, glukamin, glukozamin, histidin, hidrabamin, izopropilamin, lizin, metilglukamin, morfolin, piperazin, piperadin, poliamin smole, prokain, purini, teobromin, trietilamin, trimetilamin, tripropilamin i trometamin. Soli poreklom od farmaceutski prihvatljivih neorganskih kiselina obuhvataju soli borne, ugljene, halogenovodonične (bromovodonične, hlorovodonične, fluorovodonične ili jodovodonične), azotne, fosforne, sulfaminske i sumporne kiseline. Soli poreklom od farmaceutski prihvatljivih organskih kiselina obuhvataju soli alifatičnih hidroksil kiselina (na primer, limunske, glukonske, glikolne, mlečne, laktobionske, jabučne, i vinske kiseline), alifatičnih monokarboksilnih kiselina (na primer, sirćetne, buterne, mravlje, propionske i trifluorosirćetne kiseline), aminokiselina (na primer, asparaginske i glutaminske kiseline), aromatičnih karboksilnih kiselina (na primer, benzoeve, p-hlorobenzoeve, difenilsirćetne, gentizinske, hipurne i trifenilsirćetne kiseline), aromatičnih hidroksil kiselina (na primer, o-hidroksibenzoeve, p-hidroksibenzoeve, 1-hidroksinaftalen-2-karboksilne i 3-hidroksinaftalen-2-karboksilnih kiselina), askorbinske, dikarboksilnih kiselina (na primer, fumarne, maleinske, oksalne i ćilibarne kiseline), glukuronske, bademove, sluzne, nikotinske, orotične, pamoinske, pantotenske, sulfonskih kiselina (na primer, benzensulfonske, kamforsulfonske, edisilne, etansulfonske, izetionske, metansulfonske, naftalensulfonske, naftalen-1,5-disulfonske, naftalen-2,6-disulfonske i p-toluensulfonske kiseline), i 1-hidroksi-2-naftalenske kiseline.
[0026] Kao što je ovde korišćen, termin "prolek" je generalno određen tako da označava neaktivni prekursor leka koji je preveden u njegov aktivan oblik u telu pod fiziološkim uslovima, na primer, pomoću normalnih metaboličkih procesa. Takva jedinjenja ne moraju da poseduju farmakološku aktivnost na NEP, ali se mogu primenjivati oralno ili parenteralno i zatim su metabolizovana u telu tako da formiraju jedinjenja koja su farmakološki aktivna na NEP. Kada su oralno primenjena, takva jedinjenja mogu takođe da obezbede bolju apsorbovanu frakciju (tj., bolje pK osobine) za renalnu primenu, u poređenju sa oralnom primenom aktivnog oblika. Primeri prolekova obuhvataju estre kao što su C1-6alkilestri i aril-C1-6alkilestri. U jednom primeru izvođenja, aktivno jedinjenje ima slobodan karboksil i prolek je njegov estarski derivat, tj., prolek je estar kao što je -C(O)OCH2CH3. Takvi estarski prolekovi su zatim prevedeni pomoću solvolize ili pod fiziološkim uslovima u slobodno karboksil jedinjenje. Termin "prolek" je takođe određen da obuhvata manje aktivan prekursor leka koji je preveden u aktivniji oblik u telu. Na primer, određeni prolekovi mogu da poseduju farmakološku aktivnost na NEP, ali ne neophodno na željenom nivou; takva jedinjenja su prevedena u telu u oblik koji ima željeni nivo aktivnosti. Ovaj termin je takođe određen da obuhvata određene zaštićene derivate jedinjenja formule I koji mogu biti pripremljeni pre krajnjeg stadijuma deprotekcije.
[0027] Termin "terapeutski efikasna količina" označava količinu dovoljnu za postizanje lečenja kada je primenjena na pacijenta kod koga postoji potreba za tim, to jest, količina leka potreba za dobijanje željenog terapeutskog efekta. Na primer, terapeutski efikasna količina za lečenje hipertenzije je količina jedinjenja potrebna za, na primer, smanjenje, suprimiranje, eliminaciju ili prevenciju simptoma hipertenzije ili za lečenje uzroka hipertenzije. U jednom primeru izvođenja, terapeutski efikasna količina je ona količina leka koja je potrebna za smanjenje krvnog pritiska ili količina leka potrebna za održavanje normalnog krvnog pritiska. Sa druge strane, termin "efikasna količina" označava količinu dovoljnu za dobijanje željenog rezultata, koji ne mora neophodno da bude terapeutski rezultat. Na primer, kada se studira sistem koji sadrži NEP enzim, "efikasna količina" može biti količina potrebna za inhibiciju enzima.
[0028] Termin "lečenje" ili "tretman" kao šo je ovde korišćen označava lečenje ili tretman bolesti ili medicinskog stanja (kao što je hipertenzija) kod pacijenta, kao što je sisar (naročito čovek) koje obuhvata jedno ili više od sledećih: (a) prevenciju pojave bolesti ili medicinskog stanja, tj., prevenciju ponovne pojave bolesti ili medicinskog stanja ili profilaktički tretman pacijenta koji je predisponiran bolesti ili medicinskom stanju; (b) ublažavanje bolesti ili medicinskog stanja, tj., eliminaciju ili uzrokovanje regresije bolesti ili medicinskog stanja kod pacijenta; (c) supresiju bolesti ili medicinskog stanja, tj., usporavanje ili zaustavljanje razvoja bolesti ili medicinskog stanja kod pacijenta; ili (d) poboljšanje simptoma bolesti ili medicinskog stanja kod pacijenta. Na primer, termin "lečenje hipertenzije" bi obuhvatao prevenciju pojave hipertenzije, ublažavanje hipertenzije, supresiju hipertenzije i poboljšanje simptoma hipertenzije (na primer, snižavanje krvnog pritiska). Termin "pacijent" je određen tako da obuhvata one sisare, kao što su ljudi, kod kojih postoji potreba za lečenjem ili prevencijom bolesti ili koji su tretnutno tretirani za prevenciju ili lečenje specifične bolesti ili medicinskog stanja, kao i test subjekte kod kojih se jedinjenja prema pronalasku procenjuju ili koriste u analizi, na primer životinjski model.
[0029] Svi drugi termini koji su ovde korišćeni su određeni tako da imaju njihovo uobičajeno značenje kao što razume stručnjak iz date oblasti tehnike.
[0030] U jednom aspektu, pronalazak se odnosi na jedinjenja formule I:
ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so.
[0031] Kao što je ovde korišćen, termin "jedinjenje prema pronalasku" obuhvata sva jedinjenja obuhvaćena formulom I kao što su vrste sadržane u formulama Ia i Ib, kao i jedinjenja obuhvaćena formulama IIa-IIk, IIIa-IIIb i IVa-IVd. Pored toga, jedinjenja prema pronalasku mogu takođe da sadrže nekoliko baznih ili kiselih grupa (na primer, amino ili karboksil grupa) i prema tome, takva jedinjenja mogu da postoje kao slobodna baza, slobodna kiselina ili u različitim oblicima soli. Svi takvi oblici farmaceutski prihvatljivih soli su obuhvaćeni unutar obima pronalaska. Pored toga, jedinjenja koja su ovde navedena takođe mogu da postoje kao prolekovi.
[0032] Prema tome, stručnjaci iz date oblasti tehnike će razumeti da pozivanje na jedinjenje ovde, na primer, pozivanje na "jedinjenje prema pronalasku" ili "jedinjenje formule I" obuhvata jedinjenje formule I kao i farmaceutski prihvatljive soli tog jedinjenja osim ukoliko nije drugačije naznačeno. Pored toga, termin "ili njegova faraceutski prihvatljiva so i/ili prolek’ je određen tako da obuhvata sve permutacije farmaceutski prihvatljivih soli i prolekova, kao što je farmaceutski prihvatljiva so ili prolek. Pored toga, solvati jedinjenja formule I su uključeni unutar obima ovog pronalaska.
[0033] Jedinjenja formule I mogu da sadrže jedan ili više hiralnih centara i prema tome, ova jedinjenja mogu biti pripremljena i korišćena u različitim stereoizomernim oblicima. Prema tome, pronalazak se takođe odnosi na racemske smeše, čiste stereoizomere (npr., enantiomere i diastereoizomere), stereoizomerom-obogaćene smeše, i slično osim ukoliko nije drugačije naznačeno. Kada je hemijska struktura ovde prikazana bez bilo kakve stereohemije, razume se da su svi mogući stereoizomeri obuhvaćeni takvom strukturom. Na taj način, na primer, termini "jedinjenje formule I," "jedinjenja formule II," i tako dalje, su određeni tako da obuhvataju sve moguće stereoizomere jedinjenja. Slično, kada je određeni stereoizomer ovde prikazan ili imenovan, stručnjacima iz date oblasti tehnike će biti jasno da manje količine drugih stereoizomera mogu biti prisutne u kompozicijama prema pronalasku osim ukoliko nije drugačije nazančeno, uz uslov da korist jedinjenja kao celine nije eliminisana prisustvom takvih drugih izomera. Pojedinačni stereoizomeri mogu biti dobijeni pomoću brojnih postupaka koji su dobro poznati u tehnici, uključujući hiralnu hromatografiju upotrebom pogodne hiralne stacionarne faze ili podloge, ili pomoću njihove hemijske konverzije u diastereoizomere, odvajanjem diastereoizomera pomoću uobičajenih sredstava kao što su hromatografija ili rekristalizacija, zatim regeneracijom originalnog stereoizomera.
[0034] Pored toga, gde je primenljivo, svi cis-trans ili E/Z izomeri (geometrijski izomeri), tautomerni oblici i topoizomerni oblici jedinjenja prema pronalasku su obuhvaćeni unutar obima pronalaska osim ukoliko nije naznačeno drugačije.
[0035] Specifičnije, jedinjenja formule I mogu da sadrže najmanje dva hiralna centra kada je "Z" deo jednak -CH-, i mogu da sadrže najmanje jedan hiralni centar kada je "Z" deo jednak -N-. Ovi hiralni centri su naznačeni simbolima * i ** u sledećim formulama Ia i Ib:
[0036] Međutim potrebno je napomenuti, da nema * hiralnog centra kada je R<2>uzet zajedno sa R<3>tako da se formira -CH2-O-CH2- ili -CH2-CH2-, ili R<2>i R<3>su oba -CH3.
[0037] U jednom stereoizomeru jedinjenja formule Ia, oba atoma ugljenika identifikovana sa * i ** simbolima imaju (R) konfiguraciju. U ovom primeru izvođenja, jedinjenja imaju (R,R) konfiguraciju na * i ** atomima ugljenika ili su obogaćena u stereoizomernom obliku koji ima (R,R) konfiguraciju na ovim atomima ugljenika. U drugom stereoizomeru jedinjenja formule Ia, oba atoma ugljenika identifikovana sa * i ** simbolima imaju (S) konfiguraciju. U ovom primeru izvođenja, jedinjenja imaju (S,S) konfiguraciju na * i ** atomima ugljenika ili su obogaćena u stereoizomernom obliku koji ima (S,S) konfiguraciju na ovim atomima ugljenika. U drugom stereoizomeru jedinjenja formule Ia, atom ugljenika identifikovan simbolom * ima (S) konfiguraciju i atom ugljenika identifikovan simbolom ** ima (R) konfiguraciju. U ovom primeru izvođenja, jedinjenja imaju (S,R) konfiguraciju na * i ** atomima ugljenika ili su obogaćena u stereoizomernom obliku koji ima (S,R) konfiguraciju na ovim atomima ugljenika. U drugom stereoizomeru jedinjenja formule Ia, atom ugljenika identifikovan simbolom * ima (R) konfiguraciju i atom ugljenika identifikovan pomoću simbola ** ima (S) konfiguraciju. U ovom primeru izvođenja, jedinjenja imaju (R,S) konfiguraciju na * i ** atomima ugljenika ili su obogaćeni u stereoizomernom obliku koji ima (R,S) konfiguraciju na ovim atomima ugljenika.
[0038] U jednom stereoizomeru jedinjenja formule Ib, atom ugljenika identifikovan sa * simbolom ima (R) konfiguraciju. U ovom primeru izvođenja, jedinjenja imaju (R) konfiguraciju na * atomu ugljenika ili su obogaćeni u stereoizomernom obliku koji ima (R) konfiguraciju na ovom atomu ugljenika. U drugom stereoizomeru jedinjenja formule Ib, atom ugljenika identifikovan sa * simobolom ima (S) konfiguraciju. U ovom primeru izvođenja, jedinjenja imaju (S) konfiguraciju na * atomu ugljenika ili su obogađena u stereoizomernom obliku koji ima (S) konfiguraciju na ovom atomu ugljenika.
[0039] Ovi različiti primeri izvođenja mogu biti prikazani kao formula Ia-1:
formula Ia-2:
formula Ia-3:
formula Ia-4:
formula Ib-1:
[0040] U nekim primerima izvođenja, u cilju optimizacije terapeutske aktivnosti jedinjenja prema pronalasku, npr., za lečenje hipertenzije, može biti poželjno da atomi ugljenika identifikovani sa * i ** simbolima imaju određenu konfiguraciju ili su obogaćeni u stereoizomernom obliku koji ima takvu konfiguraciju. Na taj način, u određenim aspektima, ovaj pronalazak se odnosi na svaki pojedinačni enantiomer ili na enantiomeromobogaćenu smešu enantiomera koja sadrži pretežno jedan enantiomer ili drugi enantiomer. U drugim primerima izvođenja, jedinjenja prema pronalasku su prisutna kao racemske smeše enantiomera.
[0041] Jedinjenja prema pronalasku, kao i ona jedinjenja korišćena u njihovoj sintezi, mogu takođe da obuhvataju izotopski-obeležena jedinjenja, to jest, gde su jedan ili više atoma obogaćeni atomima koji imaju atomsku masu različitu od atomske mase koja se pretežno nalazi u prirodi. Primeri izotopa koji mogu biti ugrađeni u jedinjenja formule I, na primer, obuhvataju, ali bez ograničenja na,<2>H,<3>H,<13>C,<14>C,<15>N,<18>O,<17>O,<35>S,<36>Cl i<18>F. Od naročitog interesa su jedinjenja formule I obogaćena u tricijumu na ugljeniku-14 koji može biti korišćen, na primer, u studijama distribucije tkiva; jedinjenja formule I obogaćena u deuterijumom naročito na mestu metabolizma koji rezultira, na primer, u jedinjenjima koja imaju veću metaboličku stabilnost; i jednjenja formule I obogaćena u pozitron emitujućem izotopu, kao što su<11>C,<18>F,<15>O i<13>N, koja mogu biti korišćena, na primer, u pozitron emitujućim topografskim (PET) studijama.
[0042] Nomenklatura koja je ovde korišćena za imenovanje jedinjenja prema pronalasku je ilustrovana u primerima ovde. Ova nomeklatura je izvedena upotrebom komercijalno dostupnog AutoNom softvera (MDL, San Leandro, California).
REPREZENTATIVNI PRIMERI IZVOĐENJA
[0043] Sledeći supstituenti i vrednosti su određene tako da obezbeđuju reprezentativne primere različitih aspekata i primera izvođenja prema pronalasku. Ove reprezentativne vrednosti su određene tako da dalje definišu i ilustruju takve aspekte i primere izvođenja i nisu određene tako da isključuju druge primere izviđenja ili da ograničavaju obim pronalaska. S tim u vezi, reprezentacija da je određena vrednost ili supstituent poželjan nije određena tako da ni na koji način isključuje druge vrednosti ili supstituente iz pronalaska koji je definisan samo priloženim patentnim zahtevima.
[0044] U jednom aspektu, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja formule I:
[0045] R<1>grupa je izabrana od:
H;
-C1-8alkila, npr., -CH3, -CH2CH3, -(CH2)2CH3, -CH(CH3)2, -C(CH3)3, -CH2CH(CH3)2, -(CH2)3CH3, -(CH2)4CH3, -(CH2)2CH(CH3)2, -(CH2)5CH3, i -(CH2)6CH3; -C1-3alkilen-C6-10arila, npr., benzila;
-C1-3alkilen-C1-9heteroarila, npr., -CH2-piridinila i -(CH2)2- piridinila;
-C3-7cikloalkila, npr., ciklopentila;
-[(CH2)2O]1-3CH3, npr., -(CH2)2OCH3i -[(CH2)2O]2CH3;
-C1-6alkilen-OC(O)R<10>, npr., -CH2OC(O)CH3, -CH2OC(O)CH2CH3, -CH2OC(O)(CH2)2CH3, -CH2CH(CH3)OC(O)CH2CH3, -CH2OC(O)OCH3, -CH2OC(O)OCH2CH3, -CH(CH3)OC(O)OCH2CH3, -CH(CH3)OC(O)O-CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)OC(O)-ciklopentila, -CH2OC(O)O-ciklopropila, -CH(CH3)-OC(O)-O-cikloheksila, -CH2OC(O)O-ciklopentila, -CH2CH(CH3)OC(O)-fenila, -CH2OC(O)O-fenila, -CH2OC(O)-CH[CH(CH3)2]-NH2, -CH2OC(O)-CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3, i -CH(CH3)OC(O)-CH(NH2)CH2COOCH3;
- C1-6alkilen-NR<11>R<12>, npr., -(CH2)2-N(CH3)2,
- C1-6alkilen-C(O)R<13>, npr., -CH2C(O)OCH3, -CH2C(O)O-benzila, -CH2C(O)-N(CH3)2i
- C0-6alkilenmorfolina, npr., -(CH2)2-morfolina i -(CH2)3-morfolina:
- C1-6alkilen-SO2-C1-6alkila, npr., -(CH2)2SO2CH3;
i
[0046] R<10>deo je izabran od:
- C1-6alkila, npr., -CH3i -CH2CH3;
- O-C1-6alkila, npr., -OCH3, -O-CH2CH3i -O-CH(CH3)2;
- C3-7cikloalkila, npr., ciklopentila;
- O-C3-7cikloalkila, npr., -O-ciklopropila, -O-cikloheksila i -O-ciklopentila; fenila; - O-fenila;
- NR<11>R<12>;
- CH(R<15>)-NH2, npr., -CH[CH(CH3)2]-NH2;
- CH(R<15>)-NHC(O)O-C1-6alkila, npr., -CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3; i
- CH(NH2)CH2COOCH3.
[0047] R<11>i R<12>delovi su nezavisno izabrani od H, -C1-6alkila (npr., CH3) i benzila. Alternativno, R<11>i R<12>delovi mogu biti uzeti zajedno kao -(CH2)3-6-, -C(O)-(CH2)3-, ili -(CH2)2O(CH2)2-, na primer tako da se formira grupa kao što je:
[0048] R<13>deo je izabran od -O-C1-6alkila, npr., -OCH3, -O-benzila i -NR<11>R<12>, npr., -N(CH3)2, i
[0049] R<14>deo je -C1-6alkil (npr., -CH3i -C(CH3)3) ili -C0-6alkilen-C6-10aril. R<15>deo je H, -CH3, -CH(CH3)2, fenil ili benzil.
[0050] Pored toga, svaka alkil grupa u R<1>je izborno supstituisana sa 1 do 8 fluoro atoma. Na primer, kada je R<1>jednak -C1-8alkil, R<1>takođe može biti grupa kao što je -CH2CF3, -CH(CH3)CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, -CH(CF3)2, -CH(CH2F)2, -C(CF3)2CH3, i -CH(CH3)CF2CF3.
[0051] U jednom primeru izvođenja, R<1>je izabran od H, -C1-8alkila, -C1-6alkilen-OC(O)R<10>, i
gde R<10>je -C1-6alkil, -O-C1-6alkil ili -CH[R<15>]-NHC(O)O-C1-6alkil; R<14>je -C1-6alkil; R<15>je -CH(CH3)2; i svaka alkil grupa u R<1>je izborno supstituisana sa 1 do 8 fluoro atoma. U jednom specifičnom primeru izvođenja, R<1>je izabran od H, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, -(CH2)3CH3, -(CH2)6CH3,-CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, -CH2OC(O)CH3, -CH2OC(O)CH2CH3, -CH2OC(O)(CH2)2CH3, -CH2OC(O)OCH2CH3, -CH2OC(O)-CH[CH(CH3)2]-NHC(O)O-CH3, i
gde R<14>je -CH3. U drugim primerima izvođenja ova jedinjenja imaju formule IIa-IId, IIi-IIk, IIIa-IIIb, i IVa-IVd.
[0052] U jednom primeru izvođenja, R<1>je H. U drugim primerima izvođenja ova jedinjenja imaju formule IIa-IId, IIi-IIk, IIIa-IIIb, i IVa-IVd.
[0053] U sledećem primeru izvođenja, R<1>je izabran od -C1-8alkila, -C1-3alkilen-C6-10arila, -C1-3alkilen-C1-
9heteroarila, -C3-7cikloalkila, -[(CH2)2O]1-3CH3, -C1-6alkilen-OC(O)R<10>, -C1-6alkilen-NR<11>R<12>, -C1-6alkilen-C(O)R<13>, -C0-6alkilenmorfolinila, -C1-6alkilen-SO2-C1-6alkila,
[0054] U drugim primerima izvođenja ova jedinjenja imaju formule IIa-IId, IIi-IIk, IIIa-IIIb, i IVa-IVd. Ova jedinjenja mogu naći naročitu korist kao lekovi ili kao intermedijeri u sintetičkim postupcima koji su ovde opisani. Specifični primeri takvih delova proleka obuhvataju one gde R<1>je -C1-6alkilen-OC(O)R<10>, kao što je -CH(CH3)OC(O)-O-cikloheksil:
koji gradi jedinjenje cileksetil estar; ili R<1>je -C0-6alkilenmorfolin kao što je -(CH2)2-morfolin:
koji gradi jedinjenje 2-morfolinoetil ili mofetil estar; ili
kao što je -CH2-5-metil-[1,3]dioksol-2-on:
koji gradi jedinjenje medoksomil estar.
[0055] U jednom primeru izvođenja, R<2>je -OR<21>ili -CH2OR<21>, i R<3>je H ili -CH3. Ovi primeri izvođenja mogu biti prikazani kao formule IIa-IId:
[0056] R<21>deo je H, -C(O)-C1-6alkil, -C(O)-CH(R<22>)-NH2, -C(O)-CH(R<22>)-NHC(O)O-C1-6alkil ili -P(O)(OR<23>)2; i u jednom posebnom primeru izvođenja, R<21>deo je H. R<22>deo je H, -CH3, -CH(CH3)2, fenil ili benzil. R<23>deo je H, -C1-6alkil ili fenil.
[0057] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku imaju formulu IIa, i u jednom ilustrativnom primeru izvođenja, R<1>je izabran od H, -C1-8alkila, -C1-6alkilen-OC(O)R<10>, i
gde R<10>je -C1-6alkil, -O-C1-6alkil, ili -CH[R<15>]-NHC(O)O-C1-6alkil; R<14>je -C1-6alkil; R<15>je -CH(CH3)2; i svaka alkil grupa u R<1>je izborno supstituisana sa 1 do 8 fluoro atoma; Z je izabran od -CH- i -N-; R<4>je izabran od H, -C1-8alkila, -C1-3alkilen-O-C1-8alkila, -C1-3alkilen-O-C6-10arila, -[(CH2)2O]1-3CH3, i
gde R<44>je -C1-6alkil; i svaka alkil grupa u R<4>je izborno supstituisana sa 1 do 8 fluoro atoma; a je 0 i b je 0; ili a je 0, b je 1, i R<6>je halo; ili a je 0, b je 2, i jedan R<6>je halo i drugi R<6>je halo ili -CH3; ili a je 1, R<5>je halo, i b je 0; ili a je 1, R<5>je halo, b je 1, i R<6>je halo; ili a je 1, R<5>je halo, b je 2, i svako R<6>je halo; i gde je metilen linker na bifenilu izborno supstituisan sa dve -CH3grupe; i u drugom ilustrativnom primeru izvođenja, R<1>je izabran od H, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, -(CH2)3CH3, -(CH2)6CH3,-CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, -CH2OC(O)CH3, -CH2OC(O)CH2CH3, -CH2OC(O)(CH2)2CH3, -CH2OC(O)OCH2CH3, -CH2OC(O)-CH[CH(CH3)2]-NHC(O)O-CH3, i
gde R<14>je -CH3; R<4>je izabran od H, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, -(CH2)3CH3, -C(CH3)3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -(CH2)3-O-CH2CH3, -(CH2)2-O-fenila, -(CH2)2OCH3, i
gde R<44>je -CH3; i a je 0 i b je 0; ili a je 0, b je 1, i R<6>je 2’-fluoro, 3’-fluoro, 3’-hloro ili 4’-flouro; ili a je 0, b je 2, i R<6>je 2’-fluoro, 5’-hloro ili 2’-metil, 5’-hloro ili 2’,5’-dihloro; ili a je 1, R<5>je 3-hloro, i b je 0; ili a je 1, R<5>je 3-hloro, b je 1, i R<6>je 3’-hloro; ili a je 1, R<5>je 3-hloro, b je 2, i R<6>je 2’-fluoro, 5’-hloro.
[0058] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku imaju formulu IIb, i u jednom ilustrativnom primeru izvođenja, H ili -C1-8alkil; Z je -N-; R<4>je H ili -C1-8alkil; i a i b su 0; i u sledećem ilustrativnom primeru izvođenja, R<1>i R<4>su H.
[0059] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku imaju formulu IIc, i u jednom ilustrativnom primeru izvođenja, R<1>je H ili -C1-8alkil; Z je -CH-; R<4>je H ili -C1-8alkil; a je 0 ili a je 1 i R<5>je halo; b je 0 ili b je 1 ili 2 i R<6>je halo; i gde je metilen linker na bifenilu izborno supstituisan sa dve -CH3grupe; i u sledećem ilustrativnom primeru izvođenja, R<1>je H, -CH2CH3, ili -(CH2)3CH3; R<4>je H; a je 0 ili a je 1 i R<5>je 3-hloro; b je 0 ili b je 1 i R<6>je 2’-fluoro, 3’-fluoro, 3’-hloro ili 4’-flouro.
[0060] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku imaju formulu IId, i u jednom ilustrativnom primeru izvođenja, R<1>je H ili -C1-8alkil; Z je -CH-; R<4>je H ili -C1-8alkil; a je 0; i b je 0, ili b je 1 i R<6>je halo; i u sledećem ilustrativnom primeru izvođenja, R<1>je H ili -CH2CH3; R<4>je H ili -CH2CH(CH3)2; i b je 0, ili b je 1 i R<6>je 2’-fluoro, 3’-fluoro, 3’-hloro, ili 4’-flouro.
[0061] U sledećem primeru izvođenja, R<2>je uzet zajedno sa R<1>da bi se formiralo -OCR<15>R<16>- ili -CH2O-CR<15>R<16>-, i R<3>je izabran od H i -CH3. R<15>i R<16>delovi su nezavisno izabrani od H, -C1-6alkil i -O-C3-7cikloalkil, ili R<15>i R<16>su uzeti zajedno da bi se formiralo =O. Oni se mogu prikazati kao formule IIe-IIh:
[0062] Ova jedinjenja mogu naći naročitu korist kao prolekovi ili kao intermedijeri u sintetičkim postupcima koji su ovde opisani. Jedinjenja gde R<2>je -CH2OP(O)(OH)2mogu takođe da nađu korist kao prolekovi. U jednom primeru izvođenja jedinjenja formula IIe, IIf, IIg, i IIh, Z je -CH-, R<4>je H, a je 0, b je 1, R<6>je 3’Cl, i R<15>i R<16>su H.
[0063] U sledećem primeru izvođenja, R<2>je uzet zajedno sa R<3>da bi se formiralo -CH2-O-CH2- ili -CH2-CH2-, koje može biti prikazano kao formule IIi i IIj, respektivno:
[0064] U sledećem primeu izvođenja, R<2>i R<3>su oba -CH3, koji može biti prikazan kao formula Ilk:
[0065] U jednom primeru izvođenja jedinjenja formula IIi, IIj, i IIk, R<1>je H, Z je -CH-, R<4>je -C1-8alkil (npr., -CH2CH(CH3)2), a je 0, b je 1, i R<6>je 3’Cl.
[0066] Z grupa je izabrana od -CH- i -N-. Ovi primeri izvođenja mogu biti prikazani kao formule IIIa i IIIb:
[0067] R<4>deo je izabran od:
H;
-C1-8alkila, npr., -CH3, -CH2CH3, -(CH2)2CH3, -CH(CH3)2, -C(CH3)3, -CH2CH(CH3)2, -(CH2)3CH3, -(CH2)4CH3, -(CH2)2CH(CH3)2, -(CH2)5CH3, i -(CH2)6CH3;
-C1-3alkilen-O-C1-8alkila npr., -(CH2)3-O-CH2CH3;
-C1-3alkilen-C6-10arila, npr., benzila;
-C1-3alkilen-O-C6-10arila, npr., -(CH2)2-O-fenila;
-C1-3alkilen-C1-9heteroarila, npr., -CH2-piridinila i -(CH2)2-piridinila;
-C3-7cikloalkila, npr., ciklopentila;
-[(CH2)2O]1-3CH3, npr., -(CH2)2OCH3i -[(CH2)2O]2CH3;
-C1-6alkilen-OC(O)R<40>, npr., -CH2OC(O)CH3, -CH2OC(O)CH2CH3, -CH2OC(O)(CH2)2CH3, -CH2CH(CH3)OC(O)CH2CH3, -CH2OC(O)OCH3, -CH2OC(O)OCH2CH3, -CH(CH3)OC(O)OCH2CH3, -CH(CH3)OC(O)O-CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)OC(O)-ciklopentila, -CH2OC(O)O-ciklopropila, -CH(CH3)-OC(O)-O-cikloheksila, -CH2OC(O)O-ciklopentila, -CH2CH(CH3)OC(O)-fenila, -CH2OC(O)O-fenila, -CH2OC(O)-CH[CH(CH3)2]-NH2, -CH2OC(O)-CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3, i
-CH(CH3)OC(O)-CH(NH2)CH2COOCH3;
-C1-6alkilen-NR<41>R<42>, npr., -(CH2)2-N(CH3)2,
-C1-6alkilen-C(O)R<43>, npr., -CH2C(O)OCH3, -CH2C(O)O-benzil, -CH2C(O)-N(CH3)2, i
-C0-6alkilenmorfolina, npr., -(CH2)2-morfolina i -(CH2)3-morfolina:
-C1-6alkilen-SO2-C1-6alkila, npr., -(CH2)2SO2CH3;
[0068] R<40>deo je izabran od:
- C1-6alkila, npr., -CH3i -CH2CH3;
- O-C1-6alkila, npr., -OCH3, -O-CH2CH3, i -O-CH(CH3)2;
- C3-7cikloalkila, npr., ciklopentila;
- O-C3-7cikloalkila, npr., -O-ciklopropila, -O-cikloheksila i -O-ciklopentila; fenila;
- O-fenila;
- NR<41>R<42>;
- CH(R<45>)-NH2, npr., -CH[CH(CH3)2]-NH2;
- CH(R<45>)-NHC(O)O-C1-6alkila, npr., -CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3; i
- CH(NH2)CH2COOCH3.
[0069] R<41>i R<42>delovi su nezavisno izabrani od H, -C1-6alkila (npr., CH3), i benzila. Alternativno, R<41>i R<42>delovi mogu biti uzeti zajedno kao -(CH2)3-6-, -C(O)-(CH2)3-, ili -(CH2)2O(CH2)2-, na primer da bi se formirala grupa kao što je:
[0070] R<43>deo je izabran od -O-C1-6alkila, npr., -OCH3, -O-benzila i -NR<41>R<42>, npr., -N(CH3)2, i
[0071] R<44>deo je -C1-6alkil (npr., -CH3i -C(CH3)3) ili -C0-6alkilen-C6-10aril. R<45>deo je H, -CH3, -CH(CH3)2, fenil ili benzil.
[0072] Pored toga, svaka alkil grupa u R<4>je izborno supstituisana sa 1 do 8 fluoro atoma. Na primer, kada je R<4>jednak -C1-8alkil, R<4>može takođe biti grupa kao što je -CH2CF3, -CH(CH3)CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, -CH(CF3)2, -CH(CH2F)2, -C(CF3)2CH3, i -CH(CH3)CF2CF3.
[0073] U jednom primeru izvođenja, R<4>je izabran od H, -C1-8alkila, -C1-3alkilen-O-C1-8alkila, -C1-3alkilen-O-C6-
10arila, -[(CH2)2O]1-3CH3, i
gde R<44>je -C1-6alkil; i svaka alkil grupa u R<4>je izborno supstituisana sa 1 do 8 fluoro atoma. U jednom specifičnom primeru izvođenja, R<4>je izabran od H, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, -(CH2)3CH3, -C(CH3)3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -(CH2)3-O-CH2CH3, -(CH2)2-O-fenil, -(CH2)2OCH3, i
gde R<44>je -CH3. U drugim primerima izvođenja ova jedinjenja imaju formule IIa-IIk, IIIa-IIIb, i IVa-IVd.
[0074] U jednom primeru izvođenja, R<1>je H. U drugim primerima izvođenja ova jedinjenja imaju formule IIa-IIk, IIIa-IIIb, i IVa-IVd. U sledećem primeru izvođenja, oba R<1>i R<4>su H. U drugim primerima izvođenja ova jedinjenja imaju formule IIa-IIh, IIm-IIo, IIIa-IIIb i IVa-IVd.
[0075] U sledećem primeru izvođenja, R<4>je izabran od -C1-8alkila, -C1-3alkilen-O-C1-8alkila, -C1-3alkilen-C6-
10arila, -C1-3alkilen-O-C6-10arila, -C1-3alkilen-C1-9heteroarila, -C3-7cikloalkila, -[(CH2)2O]1-3CH3, -C1-6alkilen-OC(O)R<40>, -C1-6alkilen-NR<41>R<42>, -C1-6alkilen-C(O)R<43>, -C0-6alkilenmorfolinila, -C1-6alkilen-SO2-C1-6alkila,
[0076] U drugim primerima izvođenja ova jedinjenja imaju formule IIa-IIk, IIIa-IIIb i IVa-IVd. Ova jedinjenja mogu naći naročitu korist kao prolekovi ili kao intermedijeri u sintetičkim postupcima koji su ovde opisani. U jednom primeru izvođenja, oba R<1>i R<4>su takvi delovi proleka. U sledećem primeru izvođenja, jedan od R<1>i R<4>je deo proleka i drugi je H. Specifični primeri takvih delova proleka obuhvataju one gde R<4>je -C1-6alkilen-OC(O)R<10>, kao što je -CH(CH3)OC(O)-O-cikloheksil:
koji gradi jedinjenje cileksetil estar; ili R<4>je -C0-6alkilenmorfolin kao što je -(CH2)2-morfolin:
koji gradi jedinjenje 2-morfolinoetil ili mofetil estar; ili
kao što je -CH2-5-metil-[1,3]dioksol-2-on:
čineći jedinjenje medoksomil estar.
[0077] Numeracija za R<5>i R<6>grupe je kao što sledi:
[0078] Ceo broj "a" je 0 ili 1. R<5>deo, kada je prisutan, je izabran od halo, -CH3, -CF3, i -CN. U jednom primeru izvođenja, a je 0. U sledećem primeru izvođenja, a je 1, i R<5>je halo, kao što je 3-hloro ili 3-fluoro. U sledećem primeru izvođenja a je 0, ili a je 1 i R<5>je halo. U drugim primerima izvođenja ova jedinjenja imaju formule IIa-IIk, IIIa-IIIb i IVa-IVd.
[0079] Ceo broj "b" je 0 ili ceo broj od 1 do 3. R<6>deo, kada je prisutan, je nezavisno izabran od halo, -OH, -CH3, -OCH3, -CN, i -CF3. U jednom primeru izvođenja, b je 0. U sledećem primeru izvođenja, b je 1 i R<6>je izabran od Cl, F, -OH,-CH3, -OCH3, -CN, i -CF3, kao što je 2’-hloro, 3’-hloro, 2’-fluoro, 3’-fluoro, 2’-hidroksi, 3’-hidroksi, 3’-metil, 2’-metoksi, 3’-cijano ili 3’-trifluorometil. U sledećem primeru izvođenja, b je 1 i R<6>je halo, -CH3, ili -OCH3, kao što je 3’-hloro, 3’-metil ili 2’-metoksi. U sledećem primeru izvođenja, b je 2 i R<6>je 2’-fluoro-5’-hloro, 2’,5’-dihloro, 2’,5’-difluoro, 2’-metil-5’-hloro, 3’-fluoro-5’-hloro, 3’-hidroksi -5’-hloro, 3’,5’-dihloro, 3’,5’-difluoro, 2’-metoksi-5’-hloro, 2’-metoksi-5’-fluoro, 2’-hidroksi-5’-fluoro, 2’-fluoro-3’-hloro, 2’-hidroksi-5’-hloro ili 2’-hidroksi-3’-hloro. U sledećem primeru izvođenja, b je 3 i svaki R<6>je nezavisno halo ili -CH3, kao što je 2’-metil-3’, 5’-dihloro ili 2’-fluoro-3’-metil-5’-hloro. U jednom primeru izvođenja, b je 0, ili b je 1 i R<6>je halo, ili b je 2 i svaki R<6>je nezavisno izabran od halo i -CH3. U drugim primerima izvođenja ova jedinjenja imaju formule IIa-IIk, IIIa-IIIb i IVa-IVd.
[0080] U drugim ilustrativnim primerima izvođenja, a je 0 i b je 0; ili a je 0, b je 1, i R<6>je 2’-fluoro, 3’-fluoro, 3’-hloro, ili 4’-flouro; ili a je 0, b je 2, i R<6>je 2’-fluoro, 5’-hloro ili 2’-metil, 5’-hloro ili 2’,5’-dihloro; a je 1, R<5>je 3-hloro, i b je 0; ili a je 1, R<5>je 3-hloro, b je 1, i R<6>je 3’-hloro; ili a je 1, R<5>je 3-hloro, b je 2, i R<6>je 2’-fluoro, 5’-hloro. U drugim primerima izvođenja ova jedinjenja imaju formule IIa-IIk, IIIa-IIIb i IVa-IVd. Od posebnog interesa su jedinjenja formule:
[0081] Metilen linker na bifenilu je izborno supstituisan sa jednom ili dve -C1-6alkil grupe ili ciklopropilom. Na primer, u jednom primeru izvođenja, metilen linker na bifenilu je nesupstituisan; u sledećem primeru izvođenja, metilen linker na bifenilu je supstituisan sa jednom -C1-6alkil grupom (npr., -CH3); i u sledećem primeru izvođenja, metilen linker na bifenilu je supstituisan sa dve -C1-6alkil grupe (npr., dve -CH3grupe); u sledećem primeru izvođenja, metilen linker na bifenilu je supstituisan sa ciklopropil grupom. Ovi primeri izvođenja su prikazani, respektivno, kao formule IVa-IVd:
[0082] U jednom primeru izvođenja jedinjenja formula IVa, IVb, Ivc i IVd, R<1>je H, R<2>je -OR<21>i R<21>je H, R<3>je H, Z je -CH-, R<4>je -C1-8alkil (npr., -CH2CH(CH3)2), a je 0, b je 1 i R<6>je 3’Cl.
[0083] U sledećem primeru izvođenja, R<1>je izabran od H, -C1-8alkila, -C1-6alkilen-OC(O)R<10>, i
gde R<10>je -C1-6alkil, -O-C1-6alkil, ili -CH[R<15>]-NHC(O)O-C1-6alkil; R<14>je -C1-6alkil; R<15>je -CH(CH3)2; i svaka alkil grupa u R<1>je izborno supstituisana sa 1 do 8 fluoro atoma;
[0084] R<4>je izabran od H, -C1-8alkila, -C1-3alkilen-O-C1-8alkila, -C1-3alkilen-O-C6-10arila, -[(CH2)2O]1-3CH3, i
gde R<44>je -C1-6alkil; i svaka alkil grupa u R<4>je izborno supstituisana sa 1 do 8 fluoro atoma;
a je 0 i b je 0; ili a je 0, b je 1, i R<6>je 2’-fluoro, 3’-fluoro, 3’-hloro ili 4’-flouro; ili a je 0, b je 2, i R<6>je 2’-fluoro, 5’-hloro ili 2’-metil, 5’-hloro ili 2’,5’-dihloro; ili a je 1, R<5>je 3-hloro i b je 0; ili a je 1, R<5>je 3-hloro, b je 1, i R<6>je 3’-hloro; ili a je 1, R<5>je 3-hloro, b je 2, i R<6>je 2’-fluoro, 5’-hloro; i gde metilen linker na bifenilu je izborno supstituisan sa dve -CH3grupe. U jednom primeru izvođenja ovih jedinjenja, R<2>je -OR<21>ili -CH2OR<21>; i R<3>je H ili -CH3; gde R<21>je H.
[0085] Pored toga, naročita jedinjenja formule I koja su od interesa obuhvataju ona navedena u Primerima u daljem tekstu, kao i njihove farmaceutski prihvatljive soli.
OPŠTI SINTETIČKI POSTUPCI
[0086] Jedinjenja prema pronalasku mogu biti pripremljena od lako dostupnih početnih materijala upotrebom sledećih opštih postupaka, postupaka navedenih u Primerima, ili upotrebom drugih postupaka, reagenasa i početnih materijala koji su poznati stručnjacima iz date oblasti tehnike. Iako sledeći postupci mogu da ilustruju naročiti primer izvođenja pronalaska, razume se da drugi primeri izvođenja prema pronalasku mogu biti slično pripremljeni upotrebom istih ili sličnih postupaka ili upotrebom drugih postupaka, reagenasa i početnih materijala poznatih stručnjacima iz date oblasti tehnike. Takođe će biti jasno da tamo gde su dati tipični ili poželjni uslovi postupka (na primer, reakcione temperature, vremena, odnosi mola reaktanata, rastvarači, pritisci, itd.), drugi uslovi postupka takođe mogu biti korišćeni osim ukoliko nije drugačije naznačeno. U nekim slučajevima, reakcije su izvedene na sobnoj temperaturi i nije izvršeno stvarno merenje temperature. Razume se da sobna temperatura može da označava temperaturu unutar opsega koji je uobičajeno povezan sa temperaturom sredine u laboratorijskim uslovima, i tipično će biti u opsegu od oko 18°C do oko 30°C. U drugim slučejvima, reakcije su izvedene na sobnoj temperaturi i temperatura je stvarno merena i beležena. Dok će optimalni reakcioni uslovi tipično varirati u zavisnosti od različitih reakcionih parametara kao što su korišćeni određeni reaktanti, rastvarači i količine, stručnjaci iz date oblasti tehnike mogu lako da odrede pogodne reakcione uslove upotrebom rutinskih optimizacionih postupaka.
[0087] Pored toga, kao što će biti jasno stručnjacima iz date oblasti tehnike, uobičajene zaštitne grupe mogu biti neophodne ili poželjne za sprečavanje da određene funkcionalne grupe budu podvrgnute neželjenim reakcijama. Izbor pogodne zaštitne grupe za određenu funkcionalnu grupu kao i pogodni uslovi i reagensi za zaštitu i deprotekciju takvih funkcionalnih grupa su dobro poznati u tehnici. Ako je poželjno, mogu se koristiti zaštitne grupe osim onih koje su ilustrovane u postupcima opisanim ovde. Na primer, brojne zaštitne grupe, i njihovo uvođenje i uklanjanje, su opisani u T. W. Greene and G. M. Wuts, Protecting Groups in Organic Synthesis, Fourth Edition, Wiley, New York, 2006, i referencama koje su u njima citirane.
[0088] Karboksi-zaštitne grupe su pogodne za sprečavanje neželjenih reakcija na karboksi grupi, i primeri obuhvataju, ali bez ograničenja na, metil, etil, t-butil, benzil (Bn), p-metoksibenzil (PMB), 9-fluorenilmetil (Fm), trimetilsilil (TMS), t-butildimetilsilil (TBDMS) i difenilmetil (benzhidril, DPM). Amino-zaštine grupe su pogodne za prevenciju neželjenih reakcija na amino grupi, i primeri obuhvataju, ali bez ograničenja na, tbutoksikarbonil (BOC), tritil (Tr), benziloksikarbonil (Cbz), 9-fluorenilmetoksikarbonil (Fmoc), formil, trimetilsilil (TMS), i t-butildimetilsilil (TBDMS). Hidroksil-zaštitne grupe su pogodne za sprečavanje neželjenih reakcija na hidroksil grupi, i primeri obuhvataju, ali bez ograničenja na C1-6alkile, silil grupe uključujući triC1-
6alkilsilil grupe, kao što su trimetilsilil (TMS), trietilsilil (TES), i t-butildimetilsilil (TBDMS); estre (acil grupe) uključujući C1-6alkanoil grupe, kao što su formil, acetil i pivaloil, i aromatične acil grupe kao što je benzoil; arilmetil grupe kao što je benzil (Bn), p-metoksibenzil (PMB), 9-fluorenilmetil (Fm) i difenilmetil (benzhidril, DPM).
[0089] Standardne tehnike deprotekcije i reagensi su korišćeni da bi se uklonile zaštitne grupe, i mogu da variraju u zavisnosti od toga koja je grupa korišćena. Na primer, natrijum ili litijum hidroksid je uobičajeno korišćen kada je karboksi-zaštitna grupa jednaka metil, kiselina kao što je TFA ili HCl je uobičajeno korišćena kada je karboksi-zatitna grupa jednaka etil ili t-butil, i H2/Pd/C može biti korišćen kada je karboksi-zaštitna grupa jednaka benzil. BOC amino-zaštitna grupa može biti uklonjena upotrebom kiselog reagensa kao što je TFA u DCM ili HCl u 1,4-dioksanu, dok Cbz amino-zaštitna grupa može biti uklonjena upotrebom uslova katalitičke hidrogenizacije kao što je H2(1 atm) i 10% Pd/C u alkoholnom rastvaraču ("H2/Pd/C"). H2/Pd/C je uobičajeno korišćen kada je hidroksil-zaštitna grupa jednaka benzil, dok je NaOH uobičajeno korišćen kada je hidroksil-zaštitna grupa jednaka acil grupi.
[0090] Pogodne baze za upotrebu u ovim šemama obuhvataju, radi ilustracije i ne ograničenja, kalijum karbonat, kalcijum karbonat, natrijum karbonat, trietilamin, piridin, 1,8-diazabiciklo-[5.4.0]undec-7-en (DBU), N,N-diizopropiletilamin (DIPEA), 4-metilmorfolin, natrijum hidroksid, kalijum hidroksid, kalijum t-butoksid i metal hidridi.
[0091] Pogodni inertni razblaživači ili rastvarači za upotrebu u ovim šemama obuhvataju, radi ilustracije i ne ograničenja, tetrahidrofuran (THF), acetonitril (MeCN), N,N-dimetilformamid (DMF), N,N-dimetilacetamid (DMA), dimetil sulfoksid (DMSO), toluen, dihlorometan (DCM), hloroform (CHCl3), ugljen tetrahlorid (CCl4), 1,4-dioksan, metanol, etanol i vodu.
[0092] Pogodni kuplujući reagensi karboksilne kiseline/amina obuhvataju benzotriazol-1-iloksitris(dimetilamino)fosfonijum heksafluorofosfat (BOP), benzotriazol-1-iloksitripirolidinofosfonijum heksafluorofosfat (PyBOP), N,N,N’,N’-tetrametil-O-(7-azabenzotriazol-1-il)uronijum heksafluorofosfat (HATU), (2-(6-hloro-1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametilaminijum heksafluorofosfat) (HCTU), 1,3-dicikloheksilkarbodiimid (DCC), N-(3-dimetilaminopropil)-N’-etilkarbodiimid (EDCI), karbonildiimidazol (CDI) i 1-hidroksibenzotriazol (HOBt). Reakcije kuplovanja su izvedene u inertnom razblaživaču u prirustvu baze kao što je DIPEA, i izvedene su pod uobičajenim uslovima formiranja amidne veze.
[0093] Sve reakcije su tipično izvedene na temperaturi unutar opsega od oko -78 C do 100°C, na primer na sobnoj temperaturi. Reakcije mogu biti praćene upotrebom tankoslojne hromatografije (TLC), tečne hromatografije visokog učinka (HPLC), i/ili LCMS do završetka. Reakcije mogu biti završene u minutima, ili u časovima, tipično od 1-2 časa i do 48 časova. Po završetku, dobijena smeša ili reakcioni proizvod mogu biti dalje tretirani u cilju dobijanja željenog proizvoda. Na primer, dobijena smeša ili reakcioni proizvod mogu biti podvrgnuti jednom ili više od sledećih postupaka: koncentrovanje ili deljenje (na primer, između EtOAc i vode ili između 5% THF u EtOAc i 1M fosforne kiseline); ekstrakcija (na primer, sa EtOAc, CHCl3, DCM, hloroform); ispiranje (na primer, zasićenim vodenim rastvorom NaCl, zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3, Na2CO3(5%), CHCl3ili 1M NaOH); sušenje (na primer, preko MgSO4, preko Na2SO4, ili in vacuo); filtriranje; kristalizacija (na primer, iz EtOAc i heksana); koncentrovanje (na primer, in vacuo); i/ili prečišćavanje (npr., hromatografija na silika gelu, “flash” hromatografija, preparativna HPLC, reverzno-fazna HPLC ili kristalizacija).
[0094] Jedinjenja formule I, kao i njihove soli, mogu biti pripremljeni kao što je prikazano u Šemi I:
Šema I
[0095] Postupak sadrži korak kuplovanja jedinjenja 1 sa jedinjenjem 2, gde R<1>-R<6>, Z, a i b su kao što su definisani za formulu I, i P je izabran od H i pogodne amino-zaštitne grupe, čiji primeri obuhvataju tbutoksikarbonil, tritil, benziloksikarbonil, 9-fluorenilmetoksikarbonil, formil, trimetilsilil i t-butildimetilsilil. Kada je P jednako amino zaštitna grupa, postupak dalje sadrži deprotekciju jedinjenja formule 1, pre ili in situ sa korakom kuplovanja.
[0096] U slučajevima gde R<1>je grupa kao što je -OCH3ili -OCH2CH3, nakon koraka kuplovanja može da usledi korak deprotekcije da bi se dobilo jedinjenje formule I gde R<1>je grupa kao što je -OH. Na taj način, jedan postupak pripreme jedinjenja prema pronalasku obuhvata kuplovanje jedinjenja 1 i 2, sa izbornim korakom deprotekcije da bi se formiralo jedinjenje formule I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
[0097] Postupci pripreme jedinjenja 1 su prikazani u Primerima. Jedinjenje 2 je generalno komercijalno dostupno ili može biti pripremljeno upotrebom postupaka koji su poznati u tehnici.
[0098] Intermedijeri koji su ovde opisani obuhvataju, na primer, jedinjenja formule 1, ili njihovu so:
gde P je H ili pogodna amino-zaštitna grupa, čiji primeri obuhvataju, t-butoksikarbonil, tritil, benziloksikarbonil, 9-fluorenilmetoksikarbonil, formil, trimetilsilil i t-butildimetilsilil; i R<1>, R<2>, R<3>, R<5>, R<6>, Z, a i b su kao što su definisani za formulu I.
[0099] Dodatni detalji u vezi sa specifičnim reakcionim uslovima i drugi postupci za pripremu reprezentativnih jedinjenja prema pronalasku ili njihovi intermedijeri su opisani u Primerima navedenim u daljem tekstu.
KORIST
[0100] Jedinjenja prema pronalasku poseduju aktivnost inhibicije neprilizina (NEP), to jest, jedinjenja su sposobna da inhibiraju katalitičku aktivnost enzima. U drugom primeru izvođenja, jedinjenja ne ispoljavaju značajnu inhibitornu aktivnost na angiotenzin-konvertujućem enzimu. Jedna mera sposobnosti jedinjenja da inhibira aktivnost NEP je konstanta inhibicije (pKi). pKivrednost je negativan logaritam sa osnovom 10 konstante disocijacije (Ki), koja je tipično beležena u molarnim jedinicama. Jedinjenja prema pronalasku od posebnog interesa su ona koja imaju pKina NEP veću od ili jednaku 6.0, naročito ona koja imaju pKiveću od ili jednaku 7.0, i čak naročito ona koja imaju pKiveću od ili jednaku 8.0. U jednom primeru izvođenja, jedinjenja od interesa imaju pKiu opsegu od 6.0-6.9; u sledećem primeru izvođenja, jedinjenja od interesa imaju pKiu opsegu od 7.0-7.9; u sledećem primeru izvođenja, jedinjenja od interesa imaju pKiu opsegu od 8.0-8.9; i u sledećem primeru izvođenja, jedinjenja od interesa imaju pKiu opsegu od više od ili jednako 9.0. Takve vrednosti mogu biti određene pomoću tehnika koje su dobro poznate u tehnici, kao i u analizima koje su ovde opisane.
[0101] Sledeća mera sposobnosti jedinjenja da inhibira aktivnost NEP je vidljiva konstanta inhibicije (IC50), koja je molarna koncentracija jedinjenja koja rezultira u polovini od maksimalne inhibicije konverzije supstrata pomoću NEP enzima. pIC50vrednost je negativan logaritam sa osnovom 10 vrednosti IC50. Jedinjenja prema pronalasku koja su od posebnog interesa, obuhvataju ona koja ispoljavaju pIC50za NEP veću od ili jednaku oko 5.0. Jedinjenja od interesa takođe obuhvataju ona koja imaju pIC50za NEP ≥ oko 6.0 ili pIC50za NEP ≥ oko 7.0. U sledećem primeru izvođenja, jedinjenja od interesa imaju pIC50za NEP unutar opsega od oko 7.0-11.0; i u sledećem primeru izvođenja, unutar opasega od oko 8.0-11.0, kao što je unutar opsega od oko 8.0-10.0.
[0102] Navodi se da u nekim slučajevima, jedinjenja prema pronalasku mogu da poseduju slabu aktivnost inhibicije NEP. U takvim slučajevima, stručnjaci iz date oblasti tehnike će razumeti da će ova jedinjenja još uvek imati korist kao alati za istraživanje.
[0103] Primeri analiza za određivanje osobina jedinjenja prema pronalasku, kao što je aktivnost inhibicije NEP, su opisani u Primerima i obuhvataju radi ilustracije i ne ograničenja, analize koje mere inhibiciju NEP (opisana u Analizi 1). Korisne sekundarne analize obuhvataju analize za merenje inhibicije ACE (takođe opisane u Analizi 1) i inhibicije aminopeptidaze P (APP) (opisana u Sulpizio et al. (2005) JPET 315:1306-1313). Farmakodinamička analiza za procenu in vivo inhibitornih potencija za ACE i NEP kod anesteziranih pacova je opisana u Analizi 2 (videti takođe Seymour et al. (1985) Hypertension 7(Suppl I):I-35-I-42 i Wigle et al. (1992) Can. J. Physiol. Pharmacol. 70:1525-1528), gde je inhibicija ACE merena kao procenat inhibicije odgovora angiotenzin I presora i inhibicija NEP je merena kao povećani izlaz urinarnog cikličnog guanozin 3’,5’-monofosfata (cGMP).
[0104] Postoje mnoge in vivo analize koje se mogu koristiti za utvrđivanje dodatnih koristi jedinjenja prema pronalasku. Model svesnog spontano hipertenzivnog pacova (SHR) je model hipertenzije zavistan od renina, i opisan je u analizi 3. Videti takođe Intengan et al. (1999) Circulation 100(22):2267-2275 i Badyal et al. (2003) Indian Journal of Pharmacology 35:349-362. Model svesnih pacova sa hipertenzijom izazvanom dezoksikotikosteron acetatnom soli (DOCA-soli) je model hipertenzije zavistan od zapremine koji je koristan za merenje aktivnosti NEP, i opisan je u Analizi 4. Videti takođe Trapani et al. (1989) J. Cardiovasc. Pharmacol.
14:419-424, Intengan et al. (1999) Hypertension 34(4):907-913, i Badyal et al. (2003) u prethodnom tekstu). Model sa DOCA-soli je naročito koristan za procenu sposobnosti test jedinjenja da redukuje krvni pritisak kao i za merenje sposobosti test jedinjenja da spreči ili odloži povećanje krvnog pritiska. Model hipertenzivnih pacova osetljivih na Dahl so (DSS) je model hipertenzije koji je osetljiv na so iz hrane (NaCl), i opisan je u Analizi 5. Videti takođe Rapp (1982) Hypertension 4:753-763. Model plućne arterijske hipertenzije sa monokrotalinom opisan, na primer, u Kato et al. (2008) J. Cardiovasc. Pharmacol. 51(1):18-23, pouzdano predskazuje kliničku efikasnost za lečenje plućne arterijske hipertenzije. Životinjski modeli srčane insuficijencije obuhvataju DSS model pasova za srčanu insuficijenciju i model aorto-kavalne fistule (AV šant), poslednji od kojih je opisan, na primer, u Norling et al. (1996) J. Amer. Soc. Nephrol. 7:1038-1044. Drugi životinjski modeli, kao što su testovi sa vrelom pločom, „tail-flick“ i sa formalinom, mogu biti korišćeni za merenje analgetičkih osobina jedinjenja prema pronalasku, kao i model ligacije kičmenog nerva (SNL) neuropatskog bola. Videti, na primer, Malmberg et al. (1999) Current Protocols in Neuroscience 8.9.1-8.9.15.
[0105] Očekuje se da jedinjenja prema pronalasku inhibiraju NEP enzim u bilo kojoj od analiza navedenih u prethodnom tekstu, ili analizama slične prirode. Na taj način, gore navedene analize su korisne u određivanju terapeutske koristi jedinjenja prema pronalasku, na primer, njihove koristi kao antihipertenzivnih sredstava ili sredstava protiv dijareje. Druge osobine i koristi jedinjenja prema pronalasku mogu biti pokazane upotrebom drugih in vitro i in vivo analiza koje su dobro poznate stručnjacima iz date oblasti tehnike. Jedinjenja formule I mogu biti aktivni lekovi kao i prolekovi. Na taj način, kada se diskutuje o aktivnosti jedinjenja iz opisa razume se da bilo koji takvi prolekovi ne moraju da ispoljavaju očekivanu aktivnost u analizi, ali se očekuje da ispoljavaju željenu aktivnost pošto su metabolizovana.
[0106] Očekuje da su jedinjenja prema pronalasku korisna za lečenje i/ili prevenciju medicinskih stanja koja daju odgovor na inhibiciju NEP. Na taj način se očekuje da pacijenti koji pate od bolesti ili poremećaja koji se leči inhibicijom NEP enzima ili povećanjem nivoa njegovih peptidnih supstrata, može biti tretiran primenom terapeutski efikasne količine jedinjenja prema pronalasku. Na primer, putem inhibicije NEP, očekuje se da jedinjenja pojačavaju biološke efekte endogenih peptida koji se metabolizuju pomoću NEP, kao što su natriuretički peptidi, bombesin, bradikinini, kalcitonin, endotelini, enkefalini, neurotenzin, supstranca P i vazoaktivni intestinalni peptid. Na taj način, očekuje se da ova jedinjenja imaju druge fiziološke aktivnosti, na primer, na bubrežni, centralni nervni, reproduktivni i gastrointestinalni sistem.
[0107] U jednom primeru izvođenja prema pronalasku, pacijenti koji pate od bolesti ili poremećaja koji se leči inhibicijom NEP enzima, leče se primenom jedinjenja prema pronalasku koje je u svom aktivnom obliku, tj., jedinjenja formule I gde R<1>i R<4>su H, i R<2>, R<3>, R<5>, R<6>, a, b, i Z su kao što su definisani za formulu I.
[0108] U sledećem primeru izvođenja, pacijenti se leče primenom jedinjenja koje je metabolizovano in vitro tako da formira jedinjenje formule I gde R<1>i R<4>su H, i R<2>, R<3>, R<5>, R<6>, a, b i Z su kao što su definisani za formulu I.
[0109] U sledećem primeru izvođenja, pacijenti se leče primenom jedinjenja prema pronalasku koje je u obliku svog proleka na R<1>grupi, tj., jedinjenja formule I gde R<1>je izabran od -C1-8alkila, -C1-3alkilen-C6-10arila, -C1-
3alkilen-C1-9heteroarila, -C3-7cikloalkila, -[(CH2)2O]1-3CH3, -C1-6alkilen-OC(O)R<10>, -C1-6alkilen-NR<11>R<12>, -C1-
6alkilen-C(O)R<13>, -C0-6alkilenmorfolinila, -C1-6alkilen-SO2-C1-6alkila,
[0110] U sledećem primeru izvođenja, pacijenti se leče primenom jedinjenja prema pronalasku koje je u obliku njegovog proleka na R<4>grupi, tj., jedinjenja formuli I gde R<4>je izabran od -C1-8alkila, -C1-3alkilen-C6-10arila, -C1-
3alkilen-C1-9heteroarila, -C3-7cikloalkila, -[(CH2)2O]1-3CH3, -C1-6alkilen-OC(O)R<40>, -C1-6alkilen-NR<41>R<42>, -C1-
6alkilen-C(O)R<43>, -C0-6alkilenmorfolinila, -C1-6alkilen-SO2-C1-6alkila,
[0111] U sledećem primeru izvođenja, pacijenti su lečeni primenom jedinjenja prema pronalasku koje je u obliku njegovog proleka na R<1>grupi i na R<4>grupi.
Kardiovaskularne bolesti
[0112] Pojačavanjem efekata vazoaktivnih peptida kao što su natriuretički peptidi i bardikinin, očekuje se da jedinjenja prema pronalasku nađu korist u lečenju i/ili prevenciji medicinskih stanja kao što su kardiovaskularne bolesti. Videti, na primer, Roques et al. (1993) Pharmacol. Rev. 45:87-146 i Dempsey et al. (2009) Amer. J. of Pathology 174(3):782-796. Kardiovaskularne bolesti od posebnog interesa obuhvataju hipertenziju i srčanu insuficijenciju. Hipertenzija obuhvata, radi ilustracije i ne ograničenja: primarnu hipertenziju, koja je takođe označena kao esencijalna hipertenzija ili idiopatska hipertenzija; sekundarnu hipertenziju; hipertenziju sa pratećom bolešću bubrega; tešku hipertenziju sa ili bez prateće bolesti bubrega; plućnu hipertenziju, uključujući plućnu arterijsku hipertenziju; i rezistentnu hipertenziju. Srčana insuficijencija obuhvata, radi ilustracije i ne ograničenja: kongestivnu srčanu insuficijenciju; akutnu srčanu insuficijenciju; hroničnu srčanu insuficijenciju, na primer sa smanjenom levom ventrikularnom ejekcionom frakcijom (takođe označena kao sistolna srčana insuficijencija) ili sa očuvanom levom ventrikularnom ejekcionom frakcijom (takođe označena kao dijastolna srčana insuficijencija); i akutnu i hroničnu dekompenzovanu srčanu insuficijenciju, sa ili bez prateće bolesti bubrega. Na taj način, jedan primer izvođenja prema pronalasku se odnosi na postupak za lečenje hipertenzije, naročito primarne hipertenzije ili plućne arterijske hipertenzije, koji sadrži primenu na pacijenta terapeutski efikasne količine jedinjenja prema pronalasku.
[0113] Za lečenje primarne hipertenzije, terapeutski efikasna količina je tipično količina koja je dovoljna da snizi pacijentov krvni pritisak. Ovo bi obuhvatalo obe, blagu-do-umerenu hipertenziju i tešku hipertenziju. Kada je korišćeno za lečenje hipertenzije, jedinjenje može biti primenjivano u kombinaciji sa drugim terapeutskim sredstvima kao što su antagonisti aldosterona, inhibitori aldosteron sintaze, inhibitori angiotenzin-konvertujućeg enzima i dvostruko-delujući inhibitori angiotenzin-konvertujućeg enzima/neprilizina, aktivatori i stimulatori angiotenzin-konvertujućeg enzima 2 (ACE2), vakcine angiotenzina-II, anti-dijabetička sredstva, anti-lipidna sredstva, anti-trombotička sredstva, antagonisti AT1receptora i dvostruko delujući agonist AT1receptora/inhibitori neprilizina, antagonisti β1-adrenergičkih receptora, dvostruko-delujući antagonist βadrenergičkog receptora/antagonisti α1-receptora, blokatori kalcijumovih kanala, diuretici, antagonisti receptora za endotelin, inhibitori endotelin-konvertujućeg enzima, inhibitori neprilizina, natriuretički peptidi i njihovi analozi, antagonisti receptora za klirens natriuretičkog peptida, donori azot oksida, ne-steroidna antiinflamatorna sredstva, inhibitori fosfodiesteraze (specifični inhibitori PDE-V), agonisti receptora za prostaglandin, inhibitori renina, rastvorljivi stimulatori i aktivatori guanilat ciklaze, i njihove kombinacije. U jednom naročitom primeru izvođenja prema pronalasku, jedinjenje prema pronalasku je spojeno sa antagonistom AT1receptora, blokatorom kalcijumovih kanala, diuretikom ili njihovom kombinacijom, i korišćeno za lečenje primarne hipertenzije. U sledećem naročitom primeru izvođenja prema pronalasku, jedinjenje prema pronalasku je spojeno sa antagonistom AT1receptora, i korišćeno za lečenje hipertenzije sa pratećom bolesti bubrega. Kada je korišćeno za lečenje rezistentne hipertenzije, jedinjenje može biti primenjivano u kombinaciji sa drugim terapeutskim sredstvima kao što su inhibitori aldosteron sintaze.
[0114] Za lečenje plućne arterijske hipetenzije, terapeutski efikasna količina je tipično količina koja je dovoljna da snizi plućnu vaskularnu rezistenciju. Drugi ciljevi terapije su poboljšanje kapaciteta za fizičko vežbanje pacijenta. Na primer, u kliničkoj postavci, terapeutski efikasna količina može biti količina koja poboljšava sposobnost pacijenta da hoda udobno tokom perioda od 6 minuta (pokrivajući udaljenost od približno 20-40 metara). Kada je korišćeno za lečenje plućne arterijske hipertenzije jedinjenje može biti primenjivano u kombinaciji sa drugim terapeutskim sredstvima kao što su antagonisti α-adrenergičkog receptora, antagonisti β1-adrenergičkog receptora, agonisti β2-adrenergičkog receptora, inhibitori angiotenzin-konvertujućeg enzima, antikoagulanti, blokatori kalcijumovih kanala, diuretici, antagonisti receptora za endotelin, inhibitori PDE-V, analozi prostaglandina, selektivni inhibitori ponovnog preuizmanja serotonina i njihove kombinacije. U jednom naročitom primeru izvođenja prema pronalasku, jedinjenje prema pronalasku se kombinuje sa inhibitorom PDE-V ili selektivnim inhibitorom ponovnog preuzimanja serotonina i koristi se za lečenje plućne arterijske hipertenzije.
[0115] Pronalazak takođe nalazi korist u postupku za lečenje srčane insuficijencije, naročito kongestivne srčane insuficijencije (uključujući obe, sistolnu i diastolnu kongestivnu srčanu insuficijenciju), koji sadrži primenu na pacijenta terapeutski efikasne količine jedinjenja prema pronalasku. Tipično, terapeutski efikasna količina je količina koja je dovoljna za snižavanje krvnog pritiska i/ili poboljšanje funkcija bubrega. U kliničkoj postavci, terapeutski efikasna količina može biti količina koja je dovoljna za poboljšanje srčane hemodinamike, kao što je na primer smanjenje pritiska plućne arterije, pritiska desne predkomore, pritiska punjenja i vaskularne rezistencije. Jedinjenje može biti primenjivano kao intravenski oblik doze. Kada je korišćeno za lečenje srčane insuficijencije, jedinjenje može biti primenjivano u kombinaciji sa drugim terapeutskim sredstvima kao što su antagonisti receptora za adenozin, sredstva koja razlažu završne proizvode uznapredovale glikozilacije, antagonisti aldosterona, antagonisti AT1receptora, antagonisti β1-adrenergičkog receptora, dvostruko-delujući antagonist β-adrenergičkog receptora/antagonisti α1-receptora, inhibitori himaze, digoksin, diuretici, inhibitori endotelin-konvertujućeg enzima (ECE), antagonisti receptora za endotelin, natriuretički peptidi i njihovi analozi, antagonisti receptora za klirens natriuretičkog peptida, donori azot osida, analozi prostaglandina, inhibitori PDE-V, rastvorljivi aktivatori i stimulatori guanilat ciklaze i antagonisti receptora za vazopresin. U jednom naročitom primeru izvođenja prema pronalasku, jedinjenje prema pronalasku je kombinovano sa antagonistom aldosterona, antagonistom β1-adrenergičkog receptora, antagonistom AT1receptora ili diuretikom, i korišćeno je za lečenje kongestivne srčane insuficijencije.
Dijareja
[0116] Kao inhibitori NEP, očekuje se da jedinjenja prema pronalasku inhibiraju razlaganje endogenih enkefalina i na taj način takva jedinjenja takođe mogu naći korist za lečenje dijareje, uključujući infektivnu i sekretornu/vodenastu dijareju. Videti, na primer, Baumer et al. (1992) Gut 33:753-758; Farthing (2006) Digestive Diseases 24:47-58; i Marçais-Collado (1987) Eur. J. Pharmacol. 144(2): 125-132. Kada su korišćena za lečenje dijareje, jedinjenja prema pronalasku mogu biti kombinovana sa jednim ili više dodatnih sredstava protiv dijareje.
Bolesti bubrega
[0117] Pojačanjem efekata vazoaktivnih peptida kao što su natriuretički peptidi i bradikinin, očekuje se da jedinjenja prema pronalasku pojačavaju funkciju bubrega (videti Chen et al. (1999) Circulation 100:2443-2448; Lipkin et al. (1997) Kidney Int.52:792-801; i Dussaule et al. (1993) Clin. Sci.84:31-39) i nalaze korist u lečenju i/ili prevenciji bolesti bubrega. Bolesti bubrega od naročitog interesa obuhvataju dijabetičku nefropatiju, hroničnu bolest bubrega, proteinuriju i naročito akutnu povredu bubrega ili akutnu insuficijenciju bubrega (videti Sharkovska et al. (2011) Clin. Lab. 57:507-515 i Newaz et al. (2010) Renal Failure 32:384-390). Kada je korišćeno za lečenje bolesti bubrega, jedinjenje može biti primenjivano u kombinaciji sa drugim terapeutskim sredstvima kao što su inhibitori angiotenzin-konvertujućeg enzima, antagonisti AT1receptora i diuretici.
Preventivna terapija
[0118] Pojačavanjem efekata natriuretičkih peptida, takođe se očekuje da jedinjenja prema pronalasku budu korisna u preventivnoj terapiji, zahvaljujući antihipertrofičnim i antifibrotičkim efektima natriuretičkih peptida (videti Potter et al. (2009) Handbook of Experimental Pharmacology 191:341-366), na primer u prevenciji napredovanja srčane insuficijencije posle infarkta miokarda, prevenciji arterijske restenoze posle angioplastike, prevenciji zadebljanja zidova krvnih sudova posle vaskularnih operacija, prevenciji ateroskleroze i prevenciji dijabetičke angiopatije.
Glaukom
[0119] Pojačanjem efekata natriuretičkih peptida, očekuje se da jedinjenja prema pronalasku budu korisna za lečenje glaukoma. Videti, na primer, Diestelhorst et al. (1989) International Ophthalmology 12:99-101. Kada su korišćena za lečenje glaukoma, jedinjenja prema pronalasku mogu biti kombinovana sa jednim ili više dodatnih sredstava protiv glaukoma.
Ublažavanje bola
[0120] Kao inhibitori NEP, očekuje se da jedinjenja prema pronalasku inhibiraju razgradnju endogenih enkefalina i na taj način takva jedinjenja takođe mogu naći korist kao analgetici. Videti, na primer, Roques et al. (1980) Nature 288:286-288 i Thanawala et al. (2008) Current Drug Targets 9:887-894. Kada su korišćena za tretman bola, jedinjenja prema pronalasku se mogu kombinovati sa jednim ili više dodatnih antinociceptivnih lekova kao što su inhibitori aminopeptidaze N ili dipeptidil peptidaze III, ne-steroidna anti-inflamatorna sredstva, inhibitori ponovnog preuzimanja monoamina, mišićni relaksanti, antagonisti NMDA receptora, agonisti opioidnog receptora, agonisti receptora za 5-HT1D serotonin i triciklični antidepresivi.
Druge koristi
[0121] Zahvaljujući njihovim osobinama inhibicije NEP, takođe se očekuje da su jedinjenja prema pronalasku korisna kao antitusivna sredstva, kao i da nalaze korist u lečenju portalne hipertenzije povezane sa cirozom jetre (videti Sansoe et al. (2005) J. Hepatol.43:791-798), kancera (videti Vesely (2005) J. Investigative Med.53:360-365), depresije (videti Noble et al. (2007) Exp. Opin. Ther. Targets 11:145-159), menstrualnih poremećaja, prevremenog porođaja, pre-eklampsije, endometrioze, reproduktivnih poremećaja (na primer, muške i ženske neplodnosti, sindroma policističnih jajnika, neuspešne implantacije), i muške i ženske seksualne disfunkcije, uključujući mušku erektilnu disfunkciju i poremećaj ženskog seksualnog uzbuđenja. Specifičnije, očekuje se da su jedinjenja prema pronalasku korisna u lečenju ženske seksualne disfunkcije (videti Pryde et al. (2006) J. Med. Chem. 49:4409-4424), koja je često definisana kao teškoća ili nesposobnost ženskog pacijenta da nađe zadovoljstvo u seksualnom izražavanju. Ovo pokriva različite ženske seksualne poremećaje uključujući, radi ilustracije i ne ograničenja, poremećaj hipoaktivne seksualne želje, poremećaj seksualnog uzbuđenja, organizmički poremećaj i poremećaj seksualnog bola. Kada se koriste za lečenje takvih poremećaja, naročito ženske seksualne disfunkcije, jedinjenja prema pronalasku mogu biti kombinovana sa jednim ili više od sledećih sekundarnih sredstava: inhibitori PDE-V, agonisti dopamina, agonisti i/ili antagonisti receptora za estrogen, androgeni i estrogeni. Zahvaljujući njihovim osobinama inhibicije NEP, takođe se očekuje da jedinjenja prema pronalasku imaju anti-inflamatorne osobine, i očekuje se da imaju korist kao takva, naročito kada se koriste u kombinaciji sa statinima.
[0122] Nedavne studije sugerišu da NEP ima ulogu u regulaciji nervne funkcije kod insulin-zavisnog dijabetesa i gojaznosti indukovane hranom. Coppey et al. (2011) Neuropharmacology 60:259-266. Prema tome, zahvaljujući njihovim osobinama inhibicije NEP, takođe se očekuje da jedinjenja prema pronalasku budu korisna u obezbeđivanju zaštite od oštećenja nerava uzrokovanih dijabetesom ili gojaznošću indukovanom ishranom.
[0123] Količina jedinjenja prema pronalasku primenjena po dozi ili ukupna količina primenjena na dan može biti unapred određena ili može biti određena na osnovu individualnog pacijenta uzimajući u obzir brojne faktore, uključujući prirodu i težinu pacijentovog stanja, stanje koje se leči, starost, telesnu težinu i opšte zdravstveno stanje pacijenta, toleranciju pacijenta na aktivno sredstvo, put primene, farmakološke faktore kao što su aktivnost, efikasnost, farmakokinetika i toksikološki profili jedinjenja i bilo kojih sekundarnih sredstava koja se primenjuju, i slično. Lečenje pacijenta koji pati od bolesti ili medicinskog stanja (kao što je hipertenzija) može da počne sa unapred određenom dozom ili dozom određenom od strane nadležnog lekara, i nastaviće tokom perioda vremena neophodnog za prevenciju, ublažavanje, supresiju ili poboljšanje simptoma bolesti ili medicinskog stanja. Pacijenti koji se podvrgavaju takvom tretmanu će tipično biti praćeni na rutinskoj bazi da bi se odredila efikasnost terapije. Na primer, u lečenju hipertenzije, merenja krvnog pritiska mogu biti korišćena za određivanje efikasnosti tretmana. Slični indikatori za druge bolesti i stanja opisana ovde, su dobro poznati i lako su dostupni nadležnom lekaru. Kontinuirano praćenje od strane lekara osiguraće da će se optimalna količina jedinjenja prema pronalasku primeniti u bilo koje dato vreme, kao i da će olakšati određivanje trajanja tretmana. Ovo je od naročite vrednosti kada su takođe primenjivana sekundarna sredstva, jer njihov izbor, doza i trajanje terapije takođe mogu zahtevati podešavanje. Na ovaj način, režim lečenja i raspored doziranja mogu biti podešeni tokom terapije tako da je primenjena najniža količina aktivnog sredstva koja ispoljava željenu efikasnost i, pored toga, da se primena nastavlja samo sve dok je neophodna za uspešno lečenje bolesti ili medicinskog stanja.
Alati za istraživanje
[0124] S obzirom da jedinjenja prema pronalasku poseduju aktivnost inhibicije NEP enzima, takva jedinjenja su takođe korisna kao alati za istraživanje za ispitivanje ili studiranje bioloških sistema ili uzoraka koji imaju NEP enzim, na primer za studiranje bolesti kod kojih NEP enzim ili njegovi peptidni supstrati imaju ulogu. Bilo koji pogodan biološki sistem ili uzorak koji ima NEP enzim može biti korišćen u takvim studijama koje mogu biti izvedene in vitro ili in vivo. Reprezentativni biološki sistemi ili uzorci pogodni za takve studije obuhvataju, ali bez ograničenja na, ćelije, ćelijske ekstrakte, plazma membrane, uzorke tkiva, izolovane organe, sisare (kao što su miševi, pacovi, zamorci, zečevi, psi, svinje, ljudi, i tako dalje), i slično, pri čemu su sisari od naročitog interesa. U jednom naročitom primeru izvođenja prema pronalasku, aktivnost NEP enzima kod sisara je inhibirana primenom NEP-inhibitorne količine jedinjenja prema pronalasku. Jedinjenja prema proalasku takođe mogu biti korišćena kao alati za istraživanje za izvođenje bioloških analiza upotrebom takvih jedinjenja.
[0125] Kada je korišćen kao alat za istraživanje, biološki sistem ili uzorak koji sadrži NEP enzim je tipično doveden u kontakt sa količinom jedinjenja prema pronalasku koja inhibira NEP enzim. Pošto je biološki sistem ili uzorak izložen jedinjenju, efekti inhibicije NEP enzima su određeni upotrebom uobičajenih postupaka i opreme, kao što je pomoću merenja vezivanja za receptor u analizi vezivanja ili merenjem ligandomposredovanih promena u funkcionalnoj analizi. Izlaganje obuhvata dovođenje u kontakt ćelija ili tkiva sa jedinjenjem, primenu jedinjenja na sisara, na primer putem i.p., p.o, i.v., s.c., ili inhalirajuće primene, i tako dalje. Ovaj korak određivanja može da obuhvata merenje odgovora (kvantitativna analiza) ili može da obuhvata zapažanje (kvalitativna analiza). Merenje odgovora obuhvata, na primer, određivanje efekata jedinjenja na biološki sistem ili uzorak upotrebom uobičajenih postupaka i opreme, kao što su analize aktivnosti enzima i merenje promena posredovanih preko enzimskog supstrata ili proizvoda u funkcionalnim analizama. Rezultati analize mogu biti korišćeni za određivanje nivoa aktivnosti kao i količine jedinjenja koja je neophodna za postizanje željenog rezultata, to jest, količine koja inhibira NEP enzim. Tipično, korak određivanja će obuhvatati određivanje efekata inhibicije NEP enzima.
[0126] Pored toga, jedinjenja prema pronalasku mogu biti korišćena kao alat za istraživanje za procenu drugih hemijskih jedinjenja, i na taj način su takođe korisna u skrining analizama za otkrivanje, na primer, novih jedinjenja koja imaju aktivnost inhibicije NEP. Na ovaj način, jedinjenje prema pronalasku je korišćeno kao standard u analizi za omogućavanje poređenja rezultata dobijenih sa test jedinjenjem i sa jedinjenjima prema pronalasku za identifikaciju onih test jedinjenja koja imaju oko jednaku ili bolju aktivnost, ukoliko postoje. Na primer, podaci pKiza test jedinjenje ili grupu test jedinjenja su upoređivani sa pKipodacima za jedinjenje prema pronalasku za identifikaciju onih test jedinjenja koja imaju željene osobine, na primer, test jedinjenja koja imaju pKivrednost oko jednaku ili bolju od jedinjenja prema pronalasku, ako postoje. Ovaj aspekt pronalaska obuhvata, kao posebne primere izvođenja, kako generisanje podataka za poređenje (upotrebom odgovarajućih analiza) tako i analizu test podataka za identifikaciju test jedinjenja od interesa. Na taj način, test jedinjenje može biti procenjivano u biološkoj analizi, pomoću postupka koji sadrži korake: (a) izvođenja biološke analize sa test jedinjenjem da bi se obezbedila prva vrednost analize; (b) izvođenje biološke analize sa jedinjenjem prema pronalasku da bi se obezbedila druga vrednost analize; pri čemu se korak (a) izvodi pre, posle ili istovremeno sa korakom (b); i (c) upoređivanje prve vrednosti analize iz koraka (a) sa drugom vrednošću analize iz koraka (b). Primeri bioloških analiza obuhvataju analizu inhibicije NEP enzima.
FARMACEUTSKE KOMPOZICIJE I FORMULACIJE
[0127] Jedinjenja prema pronalasku se tipično primenjuju na pacijenta u obliku farmaceutske kompozicije ili formulacije. Takve farmaceutske kompozicije mogu biti primenjivane na pacijenta preko bilo kog prihvatljivog puta primene uključujući, ali bez ograničenja na, oralni, rektalni, vaginalni, nazalni, inhalacioni, topikalni (uključujući transdermalni), okularni i parenteralni način primene. Pored toga, jedinjenja prema pronalasku mogu biti primenjivana, na primer oralno, u višestrukim dozama na dan (na primer, dva, tri ili četiri puta na dan), u jednoj dnevnoj dozi ili jednoj nedeljnoj dozi. Biće jasno da bilo koji oblik jedinjenja prema pronalasku, (to jest, slobodna baza, slobodna kiselina, farmaceutski prihvatljiva so, solvat, itd.) koji je pogodan za naročiti način primene može biti korišćen u farmaceutskim kompozicijama koje su ovde razmatrane.
[0128] Prema tome, u jednom primeru izvođenja, pronalazak se odnosi na farmaceutsku kompoziciju koja sadrži farmaceutski prihvatljiv nosač i jedinjenje prema pronalasku. Kompozicije mogu da sadrže druga terapeutska i/ili formulaciona sredstva prema želji. Kada se razmatraju kompozicije, "jedinjenje prema pronalasku" može takođe biti označeno ovde kao "aktivno sredstvo," da bi se razlikovalo od drugih komponenti formulacije, kao što je nosač. Na taj način, razume se da termin "aktivno sredstvo" obuhvata jedinjenja formule I kao i farmaceutski prihvatljive soli i solvate tog jedinjenja.
[0129] Farmaceutske kompozicije prema pronalasku tipično sadrže terapeutski efikasnu količinu jedinjenja prema pronalasku. Stručnjacima iz date oblasti tehnike će biti jasno, međutim, da farmaceutska kompozicija može da sadrži više od terapeutski efikasne količine, kao što je u obimnim kompozicijama, ili manje od terapeutski efikasne količine, to jest, pojedinačne jedinične doze dizajnirane za višestruku primenu da bi se postigla terapeutski efikasna količina. Tipično, kompozicija će sadržati od oko 0.01-95 tež.% aktivnog sredstva, uključujući, od oko 0.01-30 tež.%, kao što je od oko 0.01- 10 tež.%, sa tačnom količinom koja zavisi od same formulacije, puta primene, učestalosti doziranja i tako dalje. U jednom primeru izvođenja, kompozicija pogodna za oralni oblik doze, na primer, može da sadrži oko 5-70 tež.%, ili od oko 10-60 tež.% aktivnog sredstva.
[0130] Bilo koji konvencionalni nosač ili ekscipijens može biti korišćen u farmaceutskim kompozicijama prema pronalasku. Izbor određenog nosača ili ekscpijensa, ili kombinacija nosača ili ekscipijenasa, zavisiće od načina primene koji se koristi za lečenje određenog pacijenta ili tipa medicinskog stanja ili stanja bolesti. S tim u vezi, priprema pogodne kompozicije za određeni način primene je unutar obima stručnjaka iz farmaceutske oblasti tehnike. Pored toga, nosači ili ekscipijensi korišćeni u takvim kompozicijama su komercijalno dostupni. Radi dodatne ilustracije, konvencionalne tehnike formulacije su opisane u Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20th Edition, Lippincott Williams & White, Baltimore, Mariland (2000); i H. C. Ansel et al., Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, 7th Edition, Lippincott Williams & White, Baltimore, Mariland (1999).
[0131] Reprezentativni primeri materijala koji mogu da služe kao farmaceutski prihvatljivi nosači obuhvataju, ali bez ograničenja na, sledeće šećere, kao što su laktoza, glukoza i saharoza; skrobovi, kao što je skrob od kukuruza ili skrob od krompira; celuloza, kao što je mikrokristalna celuloza, i njeni derivati, kao što je natrijum karboksimetil celuloza, etil celuloza i celuloza acetat; tragant u prahu; slad; želatin; talk; ekscipijense, kao što je kakao puter i voskovi za supozitorije; ulja, kao što je ulje kikirikija, ulje od semena pamuka, ulje suncokreta, susamovo ulje, maslinovo ulje, kukuruzno ulje i sojino ulje; glikole, kao što je propilen glikol; poliole, kao što je glicerin, sorbitol, manitol i polietilen glikol; estre kao etil oleat i etil laurat; agar; puferujuća sredstva, kao što je magnezijum hidroksid i aluminijum hidroksid; alginsku kiselinu; vodu bez pirogena; izotonični fiziološki rastvor; Ringerov rastvor; etil alkohol; rastvore fosfatnog pufera; komprimovane gasove propelante, kao što su hlorofluorougljenici i hidrofluorougljenici; i druge netoksične kompatibilne supstance korišćene u farmaceutskim kompozicijama.
[0132] Farmaceutske kompozicije se tipično pripremaju temeljnim i intimnim mešanjem ili blendiranjem aktivnog sredstva sa farmaceutski prihvatljivim nosačem i jednim ili više izbornih sastojaka. Dobijena ujednačeno blendirana smeša može zatim biti oblikovana ili sipana u tablete, kapsule, pilule, kanistere, kertridže, dispenzere i slično upotrebom konvencionalnih postupaka i opreme.
[0133] U jednom primeru izvođenja, farmaceutske kompozicije su pogodne za oralnu primenu. Pogodne kompozicije za oralnu primenu mogu biti u obliku kapsula, tableta, pilula, lozengi, skrobnih kapsula, dražeja, praškova, granula; rastvora ili suspenzija u vodenoj ili nevodenoj tečnosti; tečnih emulzija ulje-u-vodi ili voda-uulju; eliksira ili sirupa; i slično; pri čemu svaki od njih sadrži unapred određenu količinu aktivnog sredstva.
[0134] Kada je namenjena za oralnu primenu u čvrstom obliku doze (kapsule, tablete, pilule i slično), kompozicija će tipično sadržati aktivno sredstvo i jedan ili više farmaceutski prihvatljivih nosača, kao što su natrijum citrat ili dikalcijum fosfat. Čvrsti oblici doze takođe mogu da sadrže: punioce ili ekstendere, kao što su skrobovi, mikrokristalna celuloza, laktoza, saharoza, glukoza, manitol, i/ili silicijumska kiselina; vezujuća sredstva, kao što su karboksimetilceluloza, alginati, želatin, polivinil pirolidon, saharoza i/ili akacija; humektante, kao što je glicerol; sredstva za raspadanje, kao što je agaragar, kalcijum karbonat, skrob od krompira ili tapioke, alginska kiselina, određeni silikati, i/ili natrijum karbonat; sredstva za usporavanje rastvaranja, kao što je parafin; ubrzivače apsorpcije, kao što su kvaternarna amonijum jedinjenja; sredstva za vlaženje, kao što je cetil alkohol i/ili glicerol monostearat; apsorbente, kao što je kaolin i/ili bentonit glina; lubrikante, kao što je talk, kalcijum stearat, magnezijum stearat, čvrsti polietilen glikoli, natrijum lauril sulfat, i/ili njihove smeše; sredstva za bojenje; i puferujuća sredstva.
[0135] Sredstva za oslobađanje, sredstva za vlaženje, sredstva za oblaganje, zaslađivači, arome i parfemišuća sredstva, konzervansi i antioksidansi takođe mogu biti prisutni u farmaceutskim kompozicijama. Primeri sredstava za oblaganje za tablete, kapsule, pilule i slično, obuhvataju one korišćene za gastrorezistentne omotače, kao što su celuloza acetat ftalat, polivinil acetat ftalat, hidroksipropil metilceluloza ftalat, kopolimeri metakrilne kiseline-estra metakrilne kiseline, celuloza acetat trimelitat, karboksimetil etil celuloza, hidroksipropil metil celuloza acetat sukcinat, i slično. Primeri farmaceutski prihvatljivih antioksidanata obuhvataju: antioksidante rastvorljive u vodi, kao što su askorbinska kiselina, cistein hidrohlorid, natrijum bisulfat, natrijum metabisulfat natrijum sulfit i slično; antioksidante rastvorljive u ulju, kao što su askorbil palmitat, butilovani hidroksianizol, butilovani hidroksitoluen, lecitin, propil galat, alfa-tokoferol, i slično; i metal-helatirajuća sredstva, kao što su limunska kiselina, etilendiamin tetrasirćetna kiselina, sorbitol, vinska kiselina, fosforna kiselina, i slično.
[0136] Kompozicije mogu takođe biti formulisane za obezbeđivanje sporog ili kontrolisanog oslobađanja aktivnog sredstva upotrebom, na primer, hidroksipropil metil celuloze u različitim proporcijama ili drugim polimernim matricama, lipozoma i/ili mikrosfera. Pored toga, farmaceutske kompozicije prema pronalasku mogu da sadrže sredstva za pokrivanje neprozračnom bojom i mogu biti formulisane tako da oslobađaju samo aktivno sredstvo, ili preferencijalno, u određeni deo gastrointestinalnog trakta, izborno, na odloženi način. Primeri ukalupljenih kompozicija koje mogu biti korišćene obuhvataju polimerne supstance i voskove. Aktivno sredstvo može takođe biti u mikro-inkapsuliranom obliku, izborno sa jednim ili više od gore opisanih ekscpijenasa.
[0137] Pogodni tečni oblici doze za oralnu primenu obuhvataju, radi ilustracije, farmaceutski prihvatljive emulzije, mikroemulzije, rastvore, suspenzije, sirupe i eliksire. Tečni oblici doze tipično sadrže aktivno sredstvo i inertni razblaživač, kao što su, na primer, voda ili drugi rastvarači, solublizujuća sredstva i emulgatori, kao što su etil alkohol, izopropil alkohol, etil karbonat, etil acetat, benzil alkohol, benzil benzoat, propilen glikol, 1,3-butilen glikol, ulja (na primer, ulja od semena pamuka, kikirikija, kukuruza, klica, maslina, ricinusa i susama), glicerol, tetrahidrofuril alkohol, polietilen glikoli i estri masnih kiselina i sorbitana, i njihove smeše. Suspenzije mogu da sadrže suspendujuća sredstva kao što su, na primer, etoksilovani izostearil alkoholi, polioksietilen sorbitol i sorbitan estri, mikrokristalna celuloza, aluminijum metahidroksid, bentonit, agar-agar i tragant, i njihove smeše.
[0138] Kada su namenjene za oralnu primenu, farmaceutske kompozicije prema pronalasku mogu biti pakovane u obliku jedinične doze. Termin "jedinični oblik doze" označava fizički posebnu jedinicu pogodnu za doziranje pacijenta, to jest, svaku jedinicu koja sadrži unapred određenu količinu aktivnog sredstva izračunatu da proizvodi željeni terapeutski efekat pojedinačno ili u kombinaciji sa jednom ili više dodatnih jedinica. Na primer, takvi jedinični oblici doze mogu biti kapsule, tablete, pilule i slično.
[0139] U sledećem primeru izvođenja, kompozicije prema pronalasku su pogodne za inhalacionu primenu, i tipično će biti u obliku aerosola ili praha. Takve kompozicije se generalno primenjuju upotrebom dobro poznatih uređaja za primenu, kao što su raspršivač, inhalator za suvi prah ili za izmerenu dozu. Uređaji raspršivači proizvode struju vazduha visoke brzine koja izaziva da se kompozicija prska kao magla koja se uvodi u respiratorni trakt pacijenta. Primer formulacije za raspršivač sadrži aktivno sredstvo rastvoreno u nosaču da bi se formirao rastvor, ili mikronizovano i spojeno sa nosačem da bi se formirala suspenzija mikronizovanih čestica respirabilne veličine. Inhalatori za suvi prah primenjuju aktivno sredstvo kao slobodni protočni prah koji je dispergovan u vazdušnu struju pacijenta u toku udisaja. Primer formulacije suvog praha sadrži aktivno sredstvo suvo mešano sa ekscipijensom kao što je laktoza, skrob, manitol, dekstroza, polimlečna kiselina, polilaktid-koglikolid, i njihove kombinacije. Inhalatori sa odmerenom dozom ispuštaju izmerenu količinu aktivnog sredstva upotrebom komprimovanog gasa propelanta. Primer formulacije sa izmerenom dozom sadrži rastvor ili suspenziju aktivnog sredstva u tečnom propelantu, kao što je hlorofluorougljenik ili hidrofluoroalkan. Izborne komponente takvih formulacija obuhvataju ko-rastvarače, kao što su etanol ili pentan, i surfaktante, kao što je sorbitan trioleat, oleinska kiselina, lecitin, glicerin i natrijum lauril sulfat. Takve kompozicije su tipično pripremljene dodavanjem ohlađenog ili pod pritiskom hidrofluoroalkana u pogodan kontejner koji sadrži aktivno sredstvo, etanol (ako je prisutan) i surfaktant (ako je prisutan). Za pripremu suspenzije, aktivno sredstvo je mikronizovano i zatim spojeno sa propelantom. Alternativno, formulacija suspenzije može biti pripremljena sušenjem putem raspršivanja omotača od surfaktanta na mikronizovane čestice aktivnog sredstva. Formulacija je zatim sipana u aerosol kanister, koji formira deo inhalatora.
[0140] Jedinjenja prema pronalasku takođe mogu bitio primenjivana parenteralno (na primer, pomoću subkutane, intravenske, intramuskularne ili intraperitonealne injekcije). Za takvu primenu, aktivno sredstvo je obezbeđeno u sterilnom rastvoru, suspenziji ili emulziji. Primeri rastvarača za pripremu takvih formulacija obuhvataju vodu, fiziološki rastvor, alkohole niske molekulske mase kao što su propilen glikol, polietilen glikol, ulja, želatin, estri masnih kiselina kao što je etil oleat, i slično. Parenteralne formulacije takođe mogu da sadrže jedan ili više anti-oksidanasa, solubilizatora, stabilizatora, konzervansa, sredstava za vlaženje, emulgatora i dispergujućih sredstava. Surfaktanti, dodatna stabilizujuća sredstva ili pH-podešavajuća sredstva (kiseline, baze ili puferi) i antioksidanti su naročito korisni za obezbeđivanje stabilnosti za formulaciju, na primer, za minimizaciju ili izbegavanje hidrolize estarskih i amidnih veza mogu biti prisutni u jedinjenju. Ove formulacije mogu biti napravljene sterilnim upotrebom sterilnog injektabilnog medijuma, sterilizacionog sredstva, filtracije, zračenja ili zagrevanja. U jednom posebnom primeru izvođenja, parenteralna formulacija sadrži vodeni rastvor ciklodekstrina kao farmaceutski prihvatljiv nosač. Pogodni ciklodekstrini obuhvataju ciklične molekule koji sadrže šest ili više α-D-glukopiranoznih jedinica vezanih na 1,4 položajima pomoću veza kao u amilazi, βciklodekstrinu ili cikloheptaamilozi. Primeri ciklodekstrina obuhvataju derivate ciklodekstrina kao što su hidroksipropil i sulfobutil etar ciklodekstrini kao što je hidroksipropil-β-ciklodekstrin i sulfobutil etar βciklodekstrin. Primeri pufera za takve formulacije obuhvataju pufere na bazi karboksilne kiseline kao što su rastvori citratnog, laktatnog i maleatnog pufera.
[0141] Jedinjenja prema pronalasku takođe mogu biti primenjivana transdermalno upotrebom poznatih sistema za transdermalnu primenu i ekscipijenasa. Na primer, jedinjenje može biti mešano sa pojačivačima prodiranja, kao što su propilen glikol, polietilen glikol monolaurat, azacikloalkan-2-oni i slično, i ugrađeno u flaster ili sličan sistem za primenu. Ako je poželjno dodatni escipijensi uključujući gelirajuća sredstva, emulgatore i pufere, mogu biti korišćeni u takvim transdermalnim kompozicijama.
Sekundarna sredstva
[0142] Jedinjenja prema pronalasku mogu biti korisna kao jedini tretman bolesti ili mogu biti kombinovana sa jednim ili više dodatnih terapeutskih sredstava u cilju dobijanja željenog terapeutskog efekta. Na taj način, u jednom primeru izvođenja, farmaceutske kompozicije prema pronalasku sadrže druge lekove koji se koprimenjuju sa jedinjenjem prema pronalasku. Na primer, kompozicija može dalje da sadrži jedan ili više lekova (takođe označeni kao "sekundarno sredstvo (sredstva)"). Takva terapeutska sredstva su dobro poznata u tehnici, i obuhvataju antagoniste receptora za adenozin, antagoniste α-adrenergičkog receptora, antagoniste β1-adrenergičkog receptora, agoniste β2-adrenergičkog receptora, dvostruko delujućeiantagonist β-adrenergičkog receptora/antagonist α1-receptora, sredstva koja razlažu završne proizvode uznapredovale glikozilacije, antagoniste aldosterona, inhibitore aldosteron sintaze, inhibitore aminopeptidaze N, androgene, inhibitore angiotenzin-konvertujućeg enzima i dvostruko delujuće inhibitore angiotenzin-konvertujućeg enzima/neprilizina, aktivatore i stimulatore angiotenzin-konvertujućeg enzima 2, vakcine angiotenzina-II, antikoagulante, antidijabetička sredstva, sredstva protiv dijareje, sredstva protiv glaukoma, anti-lipidna sredstva, antinociceptivna sredstva, anti-trombotička sredstva, antagoniste AT1 receptora i dvostruko delujuće antagoniste AT1 receptora/inhibitore neprilizina i multifunkcionalne blokatore receptora za angiotenzin, antagoniste receptora za bradikinin, blokatore kalcijumovih kanala, inhibitore himaze, digoksin, diuretike, agoniste dopamina, inhibitore endotelin-konvertujućeg enzima, antagoniste receptora za endotelin, inhibitore HMG-CoA reduktaze, estrogene, agoniste i/ili antagoniste receptora za estrogen, inhibitore ponovnog preuzimanja monoamina, mišićne relaksante, natriuretičke peptide i njihove analoge, antagoniste receptora za klirens natriuretičkog peptida, inhibitore neprilizina, donore azot oksida, ne-steroidna anti-inflamatorna sredstva, antagoniste receptora za N-metil d-aspartat, agoniste opioidnog receptora, inhibitore fosfodiesteraze, analoge prostaglandina, agoniste receptora za prostaglandin, inhibitore renina, selektivne inhibitore ponovnog preuzimanja serotonina, blokatore natrijumovih kanala, rastvorljive stimulatore i aktivatore guanilat ciklaze, triciklične antidepresive, antagoniste receptora za vazopresin i njihove kombinacije. Specifični primeri ovih sredstava su detaljno ovde navedeni.
[0143] Prema tome, u sledećem aspektu pronalaska, farmaceutska kompozicija sadrži jedinjenje prema pronalasku, drugo aktivno sredstvo, i farmaceutski prihvatljiv nosač. Treće, četvrto itd. aktivno sredstvo takođe mogu biti uključeni u kompoziciju. U kombinovanoj terapiji, količina jedinjenja prema pronalasku koja se primenjuje, kao i količina sekundarnih sredstava, može biti manja od količine koja se tipično primenjuje u monoterapiji.
[0144] Jedinjenja prema pronalasku mogu biti fizički mešana sa drugim aktivnim sredstvom da bi se formirala kompozicija koja sadrži oba sredstva; ili svako sredstvo može biti prisutno u odvojenim i posebnim kompozicijama koje se primenjuju na pacijenta istovremeno ili u posebna vremena. Na primer, jedinjenje prema pronalasku može biti spojeno sa drugim aktivnim sredstvom upotrebom uobičajenih postupaka i opreme da bi se formirala kombinacija aktivnih sredstava koja sadrži jedinjenje prema pronalasku i drugo aktivno sredstvo. Pored toga, aktivna sredstva mogu biti kombinovana sa farmaceutski prihvatljivim nosačem da bi se formirala farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje prema pronalasku, drugo aktivno sredstvo i farmaceutski prihvatljiv nosač. U ovom primeru izvođenja, komponente kompozicije su tipično mešane ili blendirane da bi se stvorila fizička smeša. Fizička smeša je zatim primenjena u terapeutski efikasnoj količini upotrebom bilo kog od puteva koji su ovde opisani.
[0145] Alternativno, aktivna sredstva mogu da ostanu odvojena i posebna pre primene na pacijenta. U ovom primeru izvođenja, sredstva se tipično fizički ne mešaju zajedno pre primene, ali se primenjuju istovremeno ili u posebna vremena kao posebne kompozicije. Takve kompozicije mogu biti pakovane posebno ili mogu biti pakovane zajedno kao komplet. Kada se primenjuju u posebna vremena, sekundarno sredstvo će tipično biti primenjivano manje od 24 časa posle primene jedinjenja prema pronalasku, u opsegu od istovremeno sa primenom jedinjenja prema pronalasku do oko 24 časa posle doze. Ovo je takođe označeno kao uzastopna primena. Na taj način, jedinjenje prema pronalasku može biti oralno primenjivano istovremeno ili uzastopno sa drugim aktivnim sredstvom upotrebom dve tablete, sa jednom tabletom za svako aktivno sredstvo, gde uzastopno može da označava primenu neposredno posle primene jedinjenja prema pronalasku ili u izvesno unapred određeno vreme kasnije (na primer, jedan čas kasnije ili tri časa kasnije). Takođe je razmatrano da sekundarno sredstvo može biti primenjivano više od 24 časa posle primene jedinjenja prema pronalasku. Alternativno, kombinacija može biti primenjivana pomoću različitih puteva primene, to jest, jedna oralno i druga putem inhalacije.
[0146] U jednom primeru izvošenja, komplet sadrži prvi oblik doze koji sadrži jedinjenje prema pronalasku i najmanje jedan dodatni oblik doze koji sadrži jedan ili više sekundarnih sredstava koji su ovde navedeni, u količinama koje su dovoljne za izvođenje postupka prema pronalasku. Prvi oblik doze i drugi (ili treći, itd.) oblik doze zajedno sadrže terapeutski efikasnu količinu aktivnih sredstava za lečenje ili prevenciju bolesti ili medicinskog stanja kod pacijenta.
[0147] Sekundarno sredstvo (sredstva), kada su uključena, prisutna su u terapeutski efikasnoj količini tako da se oni tipično primenjuju u količini koja proizvodi terapeutski koristan efekat kada su ko-primenjivani sa jedinjenjem prema pronalasku. Sekundarno sredstvo može biti u obliku farmaceutski prihvatljive soli, solvata, optički čistog stereoizomera i tako dalje. Sekundarno sredstvo takođe može biti u obliku proleka, na primer, jedinjenja koje ima grupu karboksilne kiseline koja je esterifikovana. Na taj način, sekundarna sredstva navedena ovde su određena tako da obuhvataju sve takve oblike, i komercijalno su dostupna ili mogu biti pripremljena upotrebom uobičajenih postupaka i reagenasa.
[0148] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa antagonistom receptora za adenozin, čiji reprezentativni primeri obuhvataju, ali bez ograničenja na, naksifilin, rolofilin, SLV-320, teofilin i tonapofilin.
[0149] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa antagonistom α-adrenergičkog receptora, čiji reprezentativni primeri obuhvataju, ali bez ograničenja na, dolksazosin, prazosin, tamsulosin i terazosin.
[0150] Jedinjenja prema pronalasku takođe mogu biti primenjivana u kombinaciji sa antagonistom β1-adrenergičkog receptora ("β1-blokatori"). Reprezentativni β1-blokatori obuhvataju, ali bez ograničenja na, acebutolol, alprenolol, amosulalol, arotinolol, atenolol, befunolol, betaksolol, bevantolol, bisoprolol, bopindolol, bucindolol, bukumolol, bufetolol, bufuralol, bunitrolol, bupranolol, bubridin, butofilolol, karazolol, karteolol, karvedilol, celiprolol, cetamolol, kloranolol, dilevalol, epanolol, esmolol, indenolol, labetolol, levobunolol, mepindolol, metipranolol, metoprolol kao što je metoprolol sukcinat i metoprolol tartrat, moprolol, nadolol, nadoksolol, nebivalol, nipradilol, oksprenolol, penbutolol, perbutolol, pindolol, praktolol, pronetalol, propranolol, sotalol, sufinalol, talindol, tertatolol, tilisolol, timolol, toliprolol, ksibenolol i njihove kombinacije. U jednom posebnom primeru izvođenja, β1-antagonist je izabran od atenolola, bisoprolola, metoprolola, propranolola, sotalola i njihovih kombinacija. Tipično, β1-blokator će biti primenjivan u količini koja je dovoljna da obezbedi od oko 2-900 mg po dozi.
[0151] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa agonistom β2-adrenergičkog receptora, čiji reprezentativni primeri obuhvataju, ali bez ograničenja na, albuterol, bitolterol, fenoterol, formoterol, indakaterol, izoetarin, levalbuterol, metaproterenol, pirbuterol, salbutamol, salmefamol, salmeterol, terbutalin, vilanterol, i slično. Tipično, agonist β2-adrenergičkog receptora biće primenjivan u količini koja je dovoljna da obebedi od oko 0.05-500 µg po dozi.
[0152] U jednom primeru izvđenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa sredstvom koje razlaže završne proizvode uznapredovale glikozilacije (AGE), čiji primeri obuhvataju, radi ilustracije, a ne ograničenja, alagebrijum (ili ALT-711), i TRC4149.
[0153] U sledećem primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa antagonistom aldosterona, čiji reprezentativni primeri obuhvataju, ali bez ograničenja na, eplerenon, spironolakton i njihove kombinacije. Tipično, antagonist aldosterona će biti primenjen u količini koja je dovoljna da obezbedi od oko 5-300 mg na dan.
[0154] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa inhibitorom aminopeptidaze N ili dipeptidil peptidaze III, čiji primeri obuhvataju, radi ilustracije, a ne ograničenja, bestatin i PC18 (2-amino-4-metilsulfonil butan tiol, metionin tiol).
[0155] Jedinjenja prema pronalasku takođe mogu biti primenjivana u kombinaciji sa inhibitorom angiotenzinkonvertujućeg enzima (ACE). Reprezentativni inhibitori ACE obuhvataju, ali bez ograničenja na, akupril, alacepril, benazepril, benazeprilat, kaptopril, ceranapril, cilazapril, delapril, enalapril, enalaprilat, fosinopril, fosinoprilat, imidapril, lizinopril, moeksipril, monopril, moveltipril, pentopril, perindopril, hinapril, hinaprilat, ramipril, ramiprilat, saralasin acetat, spirapril, temokapril, trandolapril, zofenopril, i njihove kombinacije. U određenom primeru izvođenja, inhibitor ACE je izabran od: benazeprila, kaptoprila, enalaprila, lizinoprila, ramiprila, i njihovih kombinacija. Tipično, inhibitor ACE će biti primenjivan u količini koja je dovoljna za obezbeđivanje od oko 1-150 mg na dan.
[0156] U sledećem primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku su primenjivana u kombinaciji sa dvostruko delujućim inhibitorom angiotenzin-konverzujućeg enzima/neprilizina (ACE/NEP), čiji primeri obuhvataju, ali bez ograničenja na: AVE-0848 ((4S,7S,12bR)-7-[3-metil-2(S)-sulfanilbutiramido]-6-okso-1,2,3,4,6,7,8,12boktahidropirido[2,1-a][2]-benzazepin-4-karboksilnu kiselinu); AVE-7688 (ilepatril) i njegovo ishodno jedinjenje; BMS-182657 (2-[2-okso-3(S)-[3-fenil-2(S)-sulfanilpropionamido]-2,3,4,5-tetrahidro-1H-1-benzazepin-1-il]sirćetnu kiselinu); CGS-35601 (N-[1-[4-metil-2(S)-sulfanilpentanamido]ciklopentilkarbonil]-L-triptofan); fasidotril; fasidotrilat; enalaprilat; ER-32935 ((3R,6S,9aR)-6-[3(S)-metil-2(S)-sulfanilpentanamido]-5-oksoperhidrotiazolo[3,2-a]azepin-3-karboksilnu kiselinu); gempatrilat; MDL-101264 ((4S,7S,12bR)-7-[2(S)-(2-morfolinoacetiltio)-3-fenilpropionamido]-6-okso-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahidropirido[2,1-a][2]benzazepin-4-karboksilnu kiselinu); MDL-101287 ([4S-[4α,7α(R*),12bβ]]-7-[2-(karboksimetil)-3-fenilpropionamido]-6-okso-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahidropirido[2,1-a][2]benzazepin-4-karboksilnu kiselinu); omapatrilat; RB-105 (N-[2(S)-(merkaptometil)-3(R)-fenilbutil]-L-alanin); sampatrilat; SA-898 ((2R,4R)-N-[2-(2-hidroksifenil)-3-(3-merkaptopropionil)tiazolidin-4-ilkarbonil]-L-fenilalanin); Sch-50690 (N-[1(S)-karboksi-2-[N2-(metansulfonil)-L-lizilamino]etil]-L-valil-L-tirozin); i njihove kombinacije, takođe mogu biti uključeni. U jednom posebnom primeru izvođenja, inhibitor ACE/NEP je izabran od: AVE-7688, enalaprilata, fasidotrila, fasidotrilata, omapatrilata, sampatrilata i njihovih kombinacija.
[0157] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku su primenjivana u kombinaciji sa aktivatorom ili stimulatorom angiotenzin-konvertujućeg enzima 2 (ACE2).
[0158] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa vakcinom angiotenzina-II, čiji primeri oubuhvataju, ali bez ograničenja na ATR12181 i CYT006-AngQb.
[0159] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa antikoagulantom, čiji reprezentativni primeri obuhvataju, ali bez ograničenja na: kumarine kao što su varfarin; heparin; i direktne inhibitore trombina kao što su argatroban, bivalirudin, dabigatran i lepirudin.
[0160] U sledećem primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa antidijabetičkim sredstvom. Reprezentativna anti-dijabetička sredstva obuhvataju injektabilne lekove kao i oralno efikasne lekove, i njihove kombinacije. Primeri injektabilnih lekova obuhvataju, ali bez ograničenja na, insulin i derivate insulina. Primeri oralno efikasnih lekova obuhvataju, ali bez ograničenja na: biguanide kao što je metformin; antagoniste glukagona; inhibitore α-glukozidaze kao što su akarboza i miglitol; inhibitore dipeptidil peptidaze IV (inhibitore DPP-IV) kao što su alogliptin, denagliptin, linagliptin, saksagliptin, sitagliptin i vildagliptin; meglitinide kao što je repaglinid; oksadiazolidindione; sulfoniluree kao što su hlorpropamid, glimepirid, glipizid, gliburid i tolazamid; tiazolidindione kao što su pioglitazon i rosiglitazon; i njihove kombinacije.
[0161] U sledećem primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa tretmanima protiv dijareje. Reprezentativne opcije tretmana obuhvataju, ali bez ograničenja na, oralne rastvore za rehidrataciju (ORS), loperamid, difenoksilat i bizmut subsalicilat.
[0162] U sledećem primeru izvođenja, jedinjenje prema pronalasku je primenjeno u kombinaciji sa sredstvom protiv glaukoma. Reprezentativna sredstva protiv glaukoma obuhvataju, ali bez ograničenja na: α-adrenergičke agoniste kao što je brimonidin; antagoniste β1-adrenergičkog receptora; topikalne β1-blokatore kao što su betaksolol, levobunolol i timolol; inhibitore karbonske anhidraze kao što su acetazolamid, brinzolamid ili dorzolamid; holinergičke agoniste kao što su cevimelin i DMXBanabazein; jedinjenja epinefrina; miotike kao što je pilokarpin; i analoge prostaglandina.
[0163] U sledećem primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa anti-lipidnim sredstvom. Reprezentativna anti-lipidna sredstva obuhvataju, ali bez ograničenja na: inhibitore holesteril estar transfer proteina (CETPs) kao što su anacetrapib, dalcetrapib i torcetrapib; statine kao što su atorvastatin, fluvastatin, lovastatin, pravastatin, rosuvastatin i simvastatin; i njihove kombinacije.
[0164] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa antitrombotičkim sredstvom. Reprezentativna anti-trombotička sredstva obuhvataju, ali bez ograničenja na: aspirin; sredstva protiv trombocita kao što su klopidogrel, prasugrel i tiklopidin; heparin, i njihove kombinacije.
[0165] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa antagonistom AT1 receptora, koji su takođe poznati kao blokatori recepora tipa 1 angiotenzina II (ARBs). Reprezentativni ARBs obuhvataju, ali bez ograničenja na, abitesartan, azilsartan (npr., azilsartan medoksomil), benzilosartan, kandesartan, kandesartan cileksetil, elisartan, embusartan, enoltasosartan, eprosartan, EXP3174, fonsartan, forasartan, glicilosartan, irbesartan, izoteolin, losartan, medoksimil, milfasartan, olmesartan (npr., olmesartan medoksomil), opomisartan, pratosartan, ripisartan, saprisartan, saralasin, sarmesin, TAK-591, tasosartan, telmisartan, valsartan, zolasartan i njihove kombinacije. U određenom primeru izvođenja, ARB je izabran od azilsartan medoksomila, kandesartan cileksetila, eprosartana, irbesartana, losartana, olmesartan medoksomila, saprisartana, tasosartana, telmisartana, valsartana i njihovih kombinacija. Primeri soli i/ili prolekova obuhvataju kandesartan cileksetil, eprosartan mezilat, losartan kalijumovu so i olmesartan medoksomil. Tipično, ARB će biti primenjivan u količini koja je dovoljna da se obezbedi od oko 4-600 mg po dozi, sa primerima dnevnih doza u opsegu od 20-320 mg na dan.
[0166] Jedinjenja prema pronalasku takođe mogu biti primenjivana u kombinaciji sa dvostruko delujućim sredstvom, kao što je antagonist AT1 receptora /inhibitor neprilizina (ARB/NEP), čiji primeri obuhvataju, ali bez ograničenja na, jedinjenja opisana u SAD objavama br. 2008/0269305 i 2009/0023228, oba za Allegretti et al. podneta 23.04.2008., kao što je jedinjenje, 4’-{2-etoksi-4-etil-5-[((S)-2-merkapto-4-metilpentanoilamino)-metil]imidazol-1-ilmetil}-3’-fluorobifenil-2-karboksilna kiselina.
[0167] Jedinjenja prema pronalasku takođe mogu biti primenjivana u kombinaciji sa multifunkcionalnim blokatorima receptora za angiotenzin kao što su opisani u Kurtz & Klein (2009) Hypertension Research 32:826-834.
[0168] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa antagonistom receptora za bradikinin, na primer, icatibantom (HOE-140). Očekuje se da ova kombinovana terapija može da predstavlja prednost prevencije angioedema ili drugih neželjenih posledica povišenih nivoa bradikinina.
[0169] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa blokatorom kalcijumovih kanala. Reprezentativni blokatori kalcijumovih kanala obuhvataju, ali bez ograničenja na, amlodipin, anipamil, aranipin, barnidipin, benciklan, benidipin, bepridil, klentiazem, kilnidipin, cinarizin, diltiazem, efonidipin, elgodipin, etafenon, felodipin, fendilin, flunarizin, galopamil, isradipin, lacidipin, lerkanidipin, lidoflazin, lomerizin, manidipin, mibefradil, nikardipin, nifedipin, niguldipin, niludipin, nilvadipin, nimodipin, nizoldipin, nitrendipin, nivaldipin, perheksilin, prenilamin, riosidin, semotiadil, terodilin, tiapamil, verapamil i njihove kombinacije. U određenom primeru izvođenja, blokator kalcijumovih kanala je izabran od amlodipina, bepridila, diltiazema, felodipina, isradipina, lacidipina, nikardipina, nifedipina, niguldipina, niludipina, nimodipina, nizoldipina, riosidina, verapamila i njihovih kombinacija. Tipično, blokator kalcijumovih kanala će biti primenjivan u količini koja je dovoljna da obezbedi od oko 2-500 mg po dozi.
[0170] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa inhibitorom himaze, kao što je TPC-806 i 2-(5-formilamino-6-okso-2-fenil-1,6-dihidropirimidin-1-il)-N-[{3,4-diokso-1-fenil-7-(2-piridiloksi)}-2-heptil]acetamid (NK3201).
[0171] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa diuretikom. Reprezentativni diuretici obuhvataju, ali nisu ograničeni na: inhibitore karbonske anhidraze kao što su acetazolamid i dihlorfenamid; diuretike Henlejeve petlje, koji obuhvataju derivate sulfonamida kao što su acetazolamid, ambusid, azosemid, bumetanid, butazolamid, hloraminofenamid, klofenamid, klopamid, kloreksolon, disulfamid, etokszolamid, furosemid, mefrusid, metazolamid, piretanid, torsemid, tripamid i ksipamid, kao ne-sulfonamidne diuretike kao što su etakrinska kiselina i druga jedinjenja fenoksisirćetne kiseline kao što su tienilinska kiselina, indakrinon i hinkarbat; osmotske diuretike kao što je manitol; diuretike koji ne izlučuju kalijum, koji obuhvataju antagoniste aldosterona kao što je spironolakton, i inhibitore Na<+>kanala kao što su amilorid i triamteren; tiazide i diuretike slične tiazidu kao što su altiazid, bendroflumetiazid, benzilhidrohlorotiazid, benztiazid, butiazid, hlortalidon, hlorotiazid, ciklopentiazid, ciklotiazid, epitiazid, etiazid, fenhizon, flumetiazid, hidrohlorotiazid, hidroflumetiazid, indapamid, metilklotiazid, metikran, metolazon, paraflutizid, politiazid, hinetazon, teklotiazid i trihlorometiazid; i njihove kombinacije. U posebnom primeru izvođenja, diuretik je izabran od amilorida, bumetanida, hlorotiazida, hlortalidona, dihlorfenamida, etakrinske kiseline, furosemida, hidrohlorotiazida, hidroflumetiazida, indapamida, metilklotiazida, metolazona, torsemida, triamterena i njihovih kombinacija. Diuretik će biti primenjivan u količini koja je dovoljna da obezbedi od oko 5-50 mg na dan, tipičnije 6-25 mg na dan, da uobičajenim dozama 6.25 mg, 12.5 mg ili 25 mg na dan.
[0172] Jedinjenja prema pronalasku takođe mogu biti primenjivana u kombinaciji sa inhibitorom endotelinkonvertujućeg enzima (ECE), čiji primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na, fosforamidon, CGS 26303 i njihove kombinacije.
[0173] U posebnom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa antagonistom receptora za endotelin. Reprezentativni antagonisti receptora za endotelin obuhvataju, ali nisu ograničeni na: selektivne antagoniste receptora za endotelin koji utiču na receptore za endotelin A, kao što su avosentan, ambrisentan, atrasentan, BQ-123, klazosentan, darusentan, sitaksentan i zibotentan; i dvostruke antagoniste receptora za endotelin koji utiču na oba, receptore za endotelin A i B, kao što su bosentan, macitentan, tezosentan).
[0174] U sledećem primeru izvođenja, jedinjenje prema pronalasku se primenjuje u kombinaciji sa jednim ili više inhbitora HMGCoA reduktaze, koji su takođe poznati kao statini. Reprezentativni statini obuhvataju, ali nisu ograničeni na, atorvastatin, fluvastatin, lovastatin, pitavastatin, pravastatin, rosuvastatin i simvastatin.
[0175] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa inhibitorom ponovnog preuzimanja monoamina, čiji primeri obuhvataju, radi ilustracije, a ne ograničenja, inhibitore ponovnog preuzimanja norepinefrina kao što su atomoksetin, buproprion i metabolit bupropriona hidroksibuproprion, maprotilin, reboksetin i viloksazin; selektivne inhibitore ponovnog preuzimanja serotonina (SSRIs) kao što su citalopram i metabolit citaloprama desmetilcitalopram, dapoksetin, escitalopram (npr., escitalopram oksalat), fluoksetin i metabolit fluoksetin desmetila - norfluoksetin, fluvoksamin (npr., fluvoksamin maleat), paroksetin, sertralin i metabolit sertralina - demetilsertralin; dvostruke inhibitore ponovnog preuzimanja serotonina-norepinefrina (SNRIs) kao što su bicifadin, duloksetin, milnacipran, nefazodon i venlafaksin; i njihove kombinacije.
[0176] U sledećem primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa mišićnim relaksantom, čiji primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na: carisoprodol, hlorzoksazon, ciklobenzaprin, diflunizal, metaksalon, metokarbamol i njihove kombinacije.
[0177] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa natriuretičkim peptidom ili analogom, čiji primeri obuhvataju, ali bez ograničenja na: karperitid, CD-NP (Nile Therapeutics), CU-NP, nesiritid, PL-3994 (Palatin Technologies, Inc.), ularitid, cenderitid, i jedinjenja opisana u Ogawa et al (2004) J. Biol. Chem.279:28625-31. Ova jedinjenja su takođe označena kao agonisti receptora-A natriuretičkog peptida (NPR-A). U sledećem primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa antagonistom receptora za klirens natriuretičkog peptida (NPR-C) kao što je SC-46542, cANF (4-23) i AP-811 (Veale (2000) Bioorg Med Chem Lett 10:1949-52). Na primer, AP-811 je pokazao sinergiju kada je kombinovan sa inhibitorom NEP, tiorfanom (Wegner (1995) Clin. Exper. Hypert.17:861-876).
[0178] U sledećem primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa inhibitorom neprilizina (NEP). Reprezentativni inhibitori NEP obuhvataju, ali nisu ograničeni na: AHU-377; kandoksatril; kandoksatrilat; deksekadotril ((+)-N-[2(R)-(acetiltiometil)-3-fenilpropionil]glicin benzil estar); CGS-24128 (3-[3-(bifenil-4-il)-2-(fosfonometilamino)propionamido]propionsku kiselinu); CGS-24592 ((S)-3-[3-(bifenil-4-il)-2-(fosfonometilamino)propionamido]propionsku kiselinu); CGS-25155 (N-[9(R)-(acetiltiometil)-10-okso-1-azaciklodekan-2(S)-ilkarbonil]-4(R)-hidroksi-L-prolin benzil estar); derivate 3-(1-karbamoilcikloheksil)propionske kiseline opisane u WO 2006/027680 za Hepworth et al. (Pfizer Inc.); JMV-390-1 (2(R)-benzil-3-(N-hidroksikarbamoil)propionil-L-izoleucil-L-leucin); ekadotril; fosforamidon; retrotiorfan; RU-42827 (2-(merkaptometil)-N-(4-piridinil)benzenpropionamid); RU-44004 (N-(4-morfolinil)-3-fenil-2-(sulfanilmetil)propionamid); SCH-32615 ((S)-N-[N-(1-karboksi-2-feniletil)-L-fenilalanil]-β-alanin) i njegov prolek SCH-34826 ((S)-N-[N-[1-[[(2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metoksi]karbonil]-2-feniletil]-L-fenilalanil]-β-alanin); sialorfin; SCH-42495 (N-[2(S)-(acetilsulfanilmetil)-3-(2-metilfenil)propionil]-L-metionin etil estar); spinorfin; SQ-28132 (N-[2-(merkaptometil)-1-okso-3-fenilpropil]leucin); SQ-28603 (N-[2-(merkaptometil)-1-okso-3-fenilpropil]-β-alanin); SQ-29072 (7-[[2-(merkaptometil)-1-okso-3-fenilpropil]amino]heptanska kiselina); tiorfan i njegov prolek racekadotril; UK-69578 (cis-4-[[[1-[2-karboksi-3-(2-metoksietoksi)propil]ciklopentil]karbonil]amino] cikloheksankarboksilna kiselina); UK-447,841 (2-{1-[3-(4-hlorofenil)propilkarbamoil]-ciklopentilmetil}-4-metoksibuterna kiselina); UK-505,749 ((R)-2-metil-3-{1-[3-(2-metilbenzotiazol-6-il)propilkarbamoil]ciklopentil}propionska kiselina); 5-bifenil-4-il-4-(3-karboksipropionilamino)-2-metilpentanska kiselina i etil estar 5-bifenil-4-il-4-(3-karboksipropionilamino)-2-metilpentanske kiseline (WO 2007/056546); daglutril [(3S,2’R)-3-{1-[2’-(etoksikarbonil)-4’-fenilbutil]-ciklopentan-1-karbonilamino}-2,3,4,5-tetrahidro-2-okso-1H-1-benzazepin-1-sirćetna kiselina] opisan u WO 2007/106708 za Khder et al. (Novartis AG); i njihove kombinacije. U posebnom primeru izvođenja, inhibitor NEP je izabran od AHU-377, kandoksatrila, kandoksatrilata, CGS-24128, fosforamidona, SCH-32615, SCH-34826, SQ-28603, tiorfana i njihovih kombinacija. U posebnom primeru izvođenja, inhibitor NEP je jedinjenje kao što je daglutril ili CGS-26303 ([N-[2-(bifenil-4-il)-1(S)-(1H-tetrazol-5-il)etil]amino]metilfosfonska kiselina), koji imaju aktivnost kao inhibitori oba, endotelin-konvertujućeg enzima (ECE) i inhibitori NEP. Druga dvostruko delujuća jedinjenja na ECE/NEP takođe se mogu koristiti. Inhibitor NEP će biti primenjivan u količini koja je dovoljna da obezbedi od oko 20-800 mg na dan, sa tipičnim dnevnim dozama u opsegu od 50-700 mg na dan, uobičajenije 100-600 ili 100-300 mg na dan.
[0179] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa donorom azot oksida, čiji primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na nikorandil; organske nitrate kao što je pentaeritritol tetranitrat; i sidnonimine kao što je linzidomin i molsidomin.
[0180] U sledećem primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa nesteroidnim anti-inflamatornim sredstvom (NSAID). Reprezentativna NSAID obuhvataju, ali nisu ograničeni na: acemetacin, acetil salicilnu kiselinu, alklofenak, alminoprofen, amfenak, amipriloz, aloksiprin, anirolak, apazon, azapropazon, benorilat, benoksaprofen, bezpiperilon, broperamol, 3-hloro-4-cikloheksil-α-oksobenzenbuternu kiselinu, karprofen, klidanak, diklofenak, diflunizal, diftalon, enolikam, etodolak, etorikoksib, fenbufen, fenklofenak, fenklozinska kiselina, fenoprofen, fentiazak, feprazon, flufenaminska kiselina, flufenizal, fluprofen, flurbiprofen, furofenak, ibufenak, ibuprofen, indometacin, indoprofen, izoksepak, izoksikam, ketoprofen, ketorolak, lofemizol, lornoksikam, meklofenamat, meklofenaminsku kiselinu, mefenaminsku kiselinu, meloksikam, mezalamin, miroprofen, mofebutazon, nabumeton, naproksen, nifluminsku kiselinu, oksaprozin, okspinak, oksifenbutazon, fenilbutazon, piroksikam, pirprofen, pranoprofen, salsalat, sudoksikam, sulfasalazin, sulindak, suprofen, tenoksikam, tiopinak, tiaprofeninsku kiselinu, tioksaprofen, tolfenaminsku kiselinu, tolmetin, triflumidat, zidometacin, zomepirak i njihove kombinacije. U posebnom primeru izvođenja, NSAID je izabran od etodolaka, flurbiprofena, ibuprofena, indometacina, ketoprofena, ketorolaka, meloksikama, naproksena, oksaprozina, piroksikama i njihovih kombinacija.
[0181] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa antagonistom receptora za N-metil d-aspartat (NMDA), čiji primeri obuhvataju, radi ilustracije, a ne ograničenja, amantadin, dekstrometorfan, dekstropropoksifen, ketamin, ketobemidon, memantin, metadon i tako dalje.
[0182] U sledećem primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa agonistom opioidnog receptora (takođe označeni kao opioidni analgetici). Reprezentativni agonisti opioidnog receptora obuhvataju, ali nisu ograničeni na: buprenorfin, butorfanol, kodein, dihidrokodein, fentanil, hidrokodon, hidromorfon, levalorfan, levorfanol, meperidin, metadon, morfin, nalbufin, nalmefen, nalorfin, nalokson, naltrekson, nalorfin, oksikodon, oksimorfon, pentazocin, propoksifen, tramadol i njihove kombinacije. U određenim primerima izvođenja, agonist opioidnog receptora je izabran od kodeina, dihidrokodeina, hidrokodona, hidromorfona, morfina, oksikodona, oksimorfona, tramadola i njihovih kombinacija.
[0183] U određenom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa inhibitorom fosfodiesteraze (PDE), naročito inhibitorom PDE-V. Reprezentativni inhibitori PDE-V obuhvataju, ali nisu ograničeni na, avanafil, lodenafil, mirodenafil, sildenafil (Revatio®), tadalafil (Adcirca®), vardenafil (Levitra®) i udenafil.
[0184] U sledećem primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa analogom prostaglandina (takođe označeni kao prostanoidi ili analozi prostaciklina). Reprezentativni analozi prostaglandina obuhvataju, ali bez ograničenja na, beraprost natrijum, bimatoprost, epoprostenol, iloprost, latanoprost, tafluprost, travoprost i treprostinil, pri čemu su od posebnog interesa bimatoprost, latanoprost i tafluprost.
[0185] U sledećem primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa agonistom receptora za prostaglandin, čiji primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na, bimatoprost, latanoprost, travoprost i tako dalje.
[0186] Jedinjenja prema pronalasku takođe mogu biti primenjivana u kombinaciji sa inhibitorom renina, čiji primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na, aliskiren, enalkiren, remikiren i njihove kombinacije.
[0187] U sledećem primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa selektivnim inhibitorom ponovnog preuzimanja serotonina (SSRI). Reprezentativni SSRIs obuhvataju, ali nisu ograničeni na: citalopram i metabolit citaloprama - desmetilcitalopram, dapoksetin, escitalopram (npr., escitalopram oksalat), fluoksetin i metabolit fluoksetin desmetila - norfluoksetin, fluvoksamin (npr., fluvoksamin maleat), paroksetin, sertralin i metabolit sertralina - demetilsertralin, i njihove kombinacije.
[0188] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa agonistom receptora za 5-HT1D serotonin, čiji primeri obuhvataju, radi ilustracije, a ne ograničenja, triptane kao što su almotriptan, avitriptan, eletriptan, frovatriptan, naratriptan rizatriptan, sumatriptan i zolmitriptan.
[0189] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa blokatorom natrijumovih kanala, čiji primeri obuhvataju, radi ilustracije, a ne ograničenja, karbamazepin, fosfenitoin, lamotrigin, lidokain, meksiletin, okskarbazepin, fenitoin i njihove kombinacije.
[0190] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa rastvorljivim stimulatorom ili aktivatorom guanilat ciklaze, čiji primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na ataciguat, riociguat i njihove kombinacije.
[0191] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa tricikličnim antidepresivom (TCA), čiji primeri obuhvataju, radi ilustracije, a ne ograničenja, amitriptilin, amitriptilinoksid, butriptilin, klomipramin, demeksiptilin, desipramin, dibenzepin, dimetakrin, dosulepin, doksepin, imipramin, imipraminoksid, lofepramin, melitracen, metapramin, nitroksazepin, nortriptilin, noksiptilin, pipofezin, propizepin, protriptilin, hinupramin i njihove kombinacije.
[0192] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa antagonistom receptora za vazopresin, čiji primeri obuhvataju, radi ilustracije, a ne ograničenja, konivaptan i tolvaptan.
[0193] Kombinovana sekundarna terapeutska sredstva takođe mogu biti korisna u dodatnom kombinovanoj terapiji sa jedinjenjima prema pronalasku. Na primer, jedinjenja prema pronalasku mogu biti kombinovana sa diuretikom i ARB, ili blokatorom kalcijumovih kanala i ARB, ili diuretikom i inhibitorom ACE, ili blokatorom kalcijumovih kanala i statinom. Specifični primeri obuhvataju, kombinaciju inhibitora ACE - enalaprila (u obliku maleatne soli) i diuretika hidrohlorotiazida, koji se prodaje pod žigom Vaseretic®, ili kombinaciju blokatora kalcijumovih kanala amlodipina (u obliku bezilat soli) i ARB olmesartana (u obliku medoksomil proleka), ili kombinaciju blokatora kalcijumovih kanala i statina, svi mogu biti korišćeni sa jedinjenjima prema pronalasku. Druga terapeutska sredstva kao što su agonisti α2-adrenergičkog receptora i antagonisti receptora za vazopresin takođe mogu biti korisna u kombinovanoj terapiji. Primeri agonista α2-adrenergičkih receptora obuhvataju klonidin, deksmedetomidin i guanfacin.
[0194] Sledeće formulacije ilustruju reprezentativne farmaceutske kompozicije prema pronalasku.
Primeri tvrdih želatinskih kapsula za oralnu primenu
[0195] Jedinjenje prema pronalasku (50 g), 440 g raspršivanjem osušene laktoze i 10 g magnezijum stearata temeljno je mešano. Dobijena kompozicija je zatim sipana u tvrde žeatinske kapsule (500 mg kompozicije po kapsuli). Alternativno, jedinjenje prema pronalasku (20 mg) je temeljno mešano sa skrobom (89 mg), mikrokristalnom celulozom (89 mg) i magnezijum stearatom (2 mg). Smeša je zatim propuštana kroz SAD sito veličine okca br.45 i sipana u tvrdu želatinsku kapsulu (200 mg kompozicije po kapsuli).
[0196] Alternativno, jedinjenje prema pronalasku (30 g), sekundarno sredstvo (20 g), 440 g laktoze osušena raspršivanjem i 10 g magnezijum stearata su temeljno mešani, i obrađeni kao što je opisano u prethodnom tekstu.
Primer formulacije želatinske kapsule za oralnu primenu
[0197] Jedinjenje prema pronalasku (100 mg) je temeljno mešano sa polioksietilen sorbitan monooleatom (50 mg) i skrobom u prahu (250 mg). Smeša je zatim sipana u želatinsku kapsulu (400 mg kompozicije po kapsuli). Alternativno, jedinjenje prema pronalasku (70 mg) i sekundarno sredstvo (30 mg) su temeljno mešani sa polioksietilen sorbitan monooleatom (50 mg) i skrobom u prahu (250 mg), i dobijena smeša je sipana u želatinsku kapsulu (400 mg kompozicije po kapsuli).
[0198] Alternativno, jedinjenje prema pronalasku (40 mg) je temeljno mešano sa mikrokristalnom celulozom (Avicel PH 103; 259.2 mg) i magnezijum stearatom (0.8 mg). Smeša je zatim sipana u želatinske kapsule (veličina #1, bele, neprovidne) (300 mg kompozicije po kapsuli).
Primer formulacije tablete za oralnu primenu
[0199] Jedinjenje prema pronalasku (10 mg), skrob (45 mg) i mikrokristalna celuloza (35 mg) su propuštani kroz SAD sito sa veličinom okca br. 20 i temeljno mešani. Tako proizvedene granule su sušene na 50-60°C i propuštane kroz SAD sito sa veličinom okca br. 16. Rastvor polivinilpirolidona (4 mg kao 10 % rastvor u sterilnoj vodi) je mešan sa natrijum karboksimetil skrobom (4.5 mg), magnezijum stearatom (0.5 mg), i talkom (1 mg), i ova smeša je zatim propuštena kroz SAD sito sa veličinom okca br. 16. Natrijum karboksimetil skrob, magnezijum stearat i talk su zatim dodati u granule. Posle mešanja, smeša je presovana na mašini za tablete da bi se dobila tableta težine 100 mg.
[0200] Alternativno, jedinjenje prema pronalasku (250 mg) je temeljno mešano sa mikrokristalnom celulozom (400 mg), stopljenim silicijum dioksidom (10 mg), i stearinskom kiselinom (5 mg). Smeša je zatim presovana da bi se formirale tablete (665 mg kompozicije po tableti).
[0201] Alternativno, jedinjenje prema pronalasku (400 mg) je temeljno mešano sa kukuruznim skrobom (50 mg), kroskarmeloza natrijumom (25 mg), laktozom (120 mg) i magnezijum stearatom (5 mg). Smeša je zatim presovana da bi se formirala tableta sa jednim zarezom (600 mg kompozicije po tableti).
[0202] Alternativno, jedinjenje prema pronalasku (100 mg) je temeljno mešano sa kukuruznim skrobom (100 mg) sa vodenim rastvorom želatina (20 mg). Smeša je sušena i mlevena do finog praha. Mikrokristalna celuloza (50 mg) i magnezijum stearat (5 mg) su zatim mešani sa formulacijom želatina, granulisani i dobijena smeša je presovana da bi se formirale tablete (100 mg jedinjenja prema pronalasku po tableti).
Primer formulacije suspenzije za oralnu primenu
[0203] Sledeći sastojci su mešani da bi se formirala suspenzija koja sadrži 100 mg jedinjenja prema pronalasku na 10 mL suspenzije:
Sastojci Količina
Jedinjenje prema pronalasku 1.0 g
Fumarna kiselina 0.5 g
Natrijum hlorid 2.0 g
Metil paraben 0.15 g
Propil paraben 0.05 g
Granulisani šećer 25.5 g
Sorbitol (70% rastvor) 12.85 g
Veegum® K (magnezijum aluminijum silikat)1.0 g
Aroma 0.035 mL
Boje 0.5 mg
Destilovana voda Do 100 mL
Primer tečne formulacije za oralnu primenu
[0204] Pogodna tečna formulacija je ona sa puferom na bazi karboksilne kiseline kao što su citratni, laktatni i maleatni puferski rastvori. Na primer, jedinjenje prema pronalasku (koje može biti prethodno mešano sa DMSO) je mešano sa 100 mM amonijum citratnim puferom i pH je podešena do pH 5, ili mešano sa 100 mM rastvorom limunske kiseline i pH je podešena do pH 2. Takvi rastvori takođe mogu da obuhvataju solubilizujući ekscipijens kao što je cikldekstrin, na primer rastvor može da obuhvata 10 tež.% hidroksipropil-β-ciklodekstrin.
[0205] Druge pogodne formulacije obuhvataju 5% rastvor NaHCO3, sa ili bez ciklodekstrina.
Primer injektabilne formulacije za primenu pomoću injekcije
[0206] Jedinjenje prema pronalasku (0.2 g) je mešano sa 0.4 M rastvorom natrijum acetatnog pufera (2.0 mL). pH dobijenog rastvora je podešena do pH 4 upotrebom 0.5 N vodenog rastvora hlorovodonične kiseline ili 0.5 N vodenog rastvora natrijum hidroksida, kako je neophodno, i zatim je dodato dovljno vode za injekciju da bi se obezbedila ukupna zapremina od 20 mL. Smeša je zatim filtrirana kroz sterilni filter (0.22 mikrona) da bi se obezbedio sterilni rastvor pogodan za primenu pomoću injekcije.
Primeri kompozicija za primenu pomoću inhalacije
[0207] Jedinjenje prema pronalasku (0.2 mg) je mikronizovano i zatim mešano sa laktozom (25 mg). Ova mešana smeša je zatim sipana u želatinski inhalacioni kertridž. Sadržaj kertridža je primenjen upotrebom inhalatora suvog praha, na primer.
[0208] Alternativno, mikronizovano jedinjenje prema pronalasku (10 g) je dispergovano u rastvoru pripremljenom rastvaranjem lecitina (0.2 g) u demineralizovanoj vodi (200 mL). Dobijena suspenzija je sušena raspršivanjem i zatim mikronizovana da bi se formirala mikronizovana kompozicija koja sadrži čestice koje imaju srednji prečnik manji od oko 1.5 µm. Mikronizovana kompozicija je zatim sipana u kertridže inhalatora sa izmerenom dozom koja sadrži 1,1,1,2-tetrafluoroetan pod pritiskom u količini koja je dovoljna da se obezbedi oko 10 µg do oko 500 µg jedinjenja prema pronalasku po dozi kada je primenjena pomoću inhalatora.
[0209] Alternativno, jedinjenje prema pronalasku (25 mg) je rastvoreno u citratnom puferisanom (pH 5) izotoničnom fiziološkom rastvoru (125 mL). Smeša je mešana i ultrazvučno obrađivana sve dok jednjenje nije rastvoreno. pH rastvora je proverena i podešena, ako je neophodno, do pH 5 laganim dodavanjem vodenog 1 N NaOH. Rastvor je primenjen upotrebom uređaja raspršivača koji obezbeđuje oko 10 µg do oko 500 µg jedinjenja prema pronalasku po dozi.
PRIMERI
[0210] Sledeće Pripreme i Primeri su obezbeđeni radi ilustracije specifičnih primera izvođenja prema pronalasku. Ovi specifični primeri izvođenja, međutim, nisu određeni tako da ograničavaju obim pronalaska, koji je definisan samo priloženim patentnim zahtevima.
[0211] Sledeće skraćenice imaju sledeća značenja osim ukoliko nije drugačije naznačeno i bilo koje druge skraćenice koje su ovde korišćene i nisu definisane imaju svoje standardno, opšte prihvaćeno značenje:
AcOH sirćetna kiselina
BOC t-butoksikarbonil (-C(O)OC(CH3)3)
(BOC)2O di-t-butil dikarbonat
Bn benzil
DCC dicikloheksilkarbodiimid
DCM dihlorometan ili metilen hlorid
DIBAL diizobutilaluminijum hidrid
DIPEA N,N-diizopropiletilamin
DMAP 4-dimetilaminopiridin
DMF N,N-dimetilformamid
DMSO dimetil sulfoksid
Dnp 2,4-dinitrofenil
EDC 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilkarbodiimid
Et3N trietilamin
Et2O dietil etar
EtOAc etil acetat
EtOH etanol
HEPES 4-(2-hidroksietil)-1-piperazinetansulfonska kiselina
HOBt 1-hidroksibenzotriazol
LiHMDS litijum heksametil disilazid
Mca (7-metoksikumarin-4-il)acil
MeCN acetonitril
MeOH metanol
MTBE metil t-butil etar
NaHMDS natrijum heksametildisilazid
Pd(dppf)2Cl21,1-bis(difenilfosfino)ferocen paladijum hlorid
Pd(PPH3)4tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0)
PE petrol etar
SilicaCat®DPP-Pd difenilfosfin paladijumski (II) katalizator na bazi silicijum dioksida
SilicaCat®Pd(0) paladijumski (0) katalizator na bazi silicijum dioksida
TFA trifluorosirćetna kiselina
THF tetrahidrofuran
[0212] Osim ukoliko nije naznačeno drugačije, svi materijali, kao što su reagensi, početni materijali i rastvarači, su kupljeni od komercijalnih nabavljača (kao što su Sigma-Aldrich, Fluka Riedel-de Haën, i slično) i korišćeni su bez dodatnog prečišćavanja.
[0213] Reakcije su izvođene pod atmosferom azota, osim ukoliko nije naznačeno drugačije. Napredovanje reakcija je praćeno pomoću tankoslojne hromatografije (TLC), analitičke tečne hromatografije visokog učinka (anal. HPLC), i masene spektrometrije, čiji detalji su dati u specifičnim primerima. Rastvarači korišćeni u analitičkoj HPLC su bili kao što sledi: rastvarač A je bio 98% H2O/2% MeCN /1.0 mL/L TFA; rastvarač B je bio 90% MeCN/10% H2O/1.0 mL/L TFA.
[0214] Reakcije su obrađene kao što je specifično opisano u svakoj Pripremi na primer; uobičajene reakcione smeše su prečišćene ekstrakcijom i drugim postupcima prečišćavanja kao što su kristalizacija i taloženje zavisni od temperature i rastvarača. Pored toga, reakcione smeše su rutinski prečišćene pomoću preparativne HPLC, tipično upotrebom pakovanja Microsorb C18 i Microsorb BDS kolone i uobičajenih eluenata. Napredovanje reakcija je tipično mereno pomoću tečne hromatografije masene spektrometrije (LCMS). Karakterizacija izomera je izvedena pomoću nuklearne spektroskopije efekta Overhauzera (NOE). Karakterizacija reakcionih proizvoda je rutinski izvedena pomoću masene i<1>H-NMR spektrometrije. Za NMR merenje, uzorci su rastvoreni u deuterisanom rastvaraču (CD3OD, CDCl3, ili DMSO-d6), i<1>H-NMR spektri su dobijeni sa Varian Gemini 2000 instrumentom (400 MHz) pod standardnim uslovima posmatranja. Masena spektrometrijska identifikacija jedinjenja je tipično izvedena upotrebom elektrosprej jonizacionog postupka (ESMS) sa Applied Biosystems (Foster City, CA) model API 150 EX instrumentom ili Agilent (Palo Alto, CA) model 1200 LC/MSD instrumentom.
Priprema 1
Etil estar acetoksi(dietoksifosforil)sirćetne kiseline
[0216] Etil 2-oksoacetat (50%) (74 g, 724.8 mmol) je dodavan ukapavanjem uz mešanje na 0°C u rastvor dietil hidrogen fosfita (50 g, 362.1 mmol) u toluenu (100 mL), pod azotom. Et3N (110 g, 1.1 mol) je dodavan ukapavanjem uz mešanje na 0°C. Dobijeni rastvor je mešan u trajanju od 1 časa na sobnoj temperaturi. U smešu je ukapavanjem dodat anhidrid sirćetne kiseline (37 g, 362.4 mmol) uz mešanje na 0°C. Dobijeni rastvor je mešan preko noći na sobnoj temperaturi. pH vrednost rastvora je podešena do 6 sa 2N HCl. Dobijeni rastvor je ekstrahovan sa DCM (3x150 mL) i organski slojevi su spojeni, sušeni preko Na2SO4, i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je sipan na kolonu silika gela sa EtOAc:heksanima (1:2~1:5) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (52 g) kao svetlo žuta čvrsta supstanca.
Priprema 2
Etil estar (R)-4-amino-5-bifenil-4-il-2-hidroksipentanske kiseline
[0217]
[0218] Rastvor etil estra acetoksi(dietoksifosforil)sirćetne kiseline (15.6 g, 55.3 mmol, 1.2 ekviv.) u THF (osušen) (150 mL), pod azotom, hlađen je do -78°C. LiHMDS (1M u THF) (55.3 mL) je dodat ukapavanjem uz mešanje na -78°C. Posle mešanja od 30 minuta na toj temperaturi, rastvor sirovog t-butil estra ((R)-2-bifenil-4-il-1-formiletil)karbaminske kiseline (15.0 g, 1.0 ekv.) u THF (osušen) (30 mL) je dodavan ukapavanjem tokom 15 minuta. Mešanje je nastavljeno u trajanju od 1.5 čas na -78°C pre nego što je smeša sipana u hladan rastvor sa vodom (200 mL) i EtOAc (200 mL). Organski sloj je više puta razdvajan i vodeni sloj je re-ekstrahovan sa EtOAc (2x100 mL). Spojeni organski slojevi su sušeni preko Na2SO4, filtrirani i isparavani, i ostatak je prečišćen pomoću „flash“ hromatografije (EtOAc/heksani =0~1:10) da bi se dobilo jedinjenje 1 (10.5 g) kao bela čvrsta supstanca.
[0219] Mešani rastvor jedinjenja 1 (10.5 g, 23.2 mmol) u EtOH (anhidrovanom) (100 mL) spojen je sa paladijumom na uglju (1.0 g), pod azotom. Smeša je prečišćena četiri puta sa vodonikom i zatim je vodonik barbotiran tokom 2 časa na sobnoj temperaturi. Paladijum na uglju je otfiltriran, i filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se proizvelo sirovo jedinjenje 2 (10.0 g) kao svetlo žuto ulje, koje je korišćeno bez dodatnog prečišćavanja.
[0220] Jedinjenje 2 (10.0 g, 22.0 mmol) u EtOH (anhidrovanom) (100 mL) je spojeno sa kalijum karbonatom (6.1 g, 44.1 mmol) i dobijeni rastvor je mešan 2 časa na sobnoj temperaturi. Čvrste supstance su otfiltrirane i filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je sipan na kolonu silika gela (EtOAc/heksani =0~1:5) da bi se proizvelo jedinjenje 3 (6.0 g) kao bela čvrsta supstanca.
[0221] Jedinjenje 3 (6.0 g, 14.5 mmol) je rastvoreno u DCM (osušen) (120 mL), i HCl je barbotirana u smešu tokom 5~6 časova na sobnoj temperaturi. Zabeležen je čvrsti talog. Smeša je koncentrovana do polovine zapremine i zatim je filtrirana. Čvrste supstance su sakupljene i isprane hladnim EtOAc, i sušeni pod sniženim pritiskom da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (4.2 g) kao prljavo bela čvrsta HCl so. LC-MS (ES, m/z): 314 [M-HCl+H]<+>.<1>H NMR (300 MHz, DMSO): δ (ppm) =8.07 (s, 1.9H), 7.96 (s, 1.2H), 7.65-7.69 (m, 4.0H), 7.45-7.50 (m, 2.0H), 7.33-7.39 (m, 3.0H), 6.05-6.07 (m, 0.63H), 5.88-5.90 (m, 0.88H), 4.32-4.38 (m, 0.80H), 4.18-4.31 (m, 0.51H), 4.05-4.11 (m, 2H), 3.50 (s, 1H), 2.75-3.05 (m, 2.8H), 1.83-1.94 (m, 1H), 1.71-1.82 (m, 1H), 1.10-1.20 (m, 3.3H).
Priprema 3
t-Butil estar (S)-2-(4-Bromobenzil)-5-oksopirolidin-1-karboksilne kiseline
[0222]
[0223] U rastvor (R)-2-amino-3-(4-bromofenil)propionske kiseline (50 g, 0.2 mol) u MeCN (700 mL) dodat je rastvor NaOH (16.4 g, 0.4 mol) u vodi (700 mL) na -5°C. Posle mešanja u trajanju od 10 minuta, dodat je rastvor (BOC)2O (44.7 g, 0.2 mol) u MeCN (100 mL). Smeša je zagrevana do sobne temperature i mešana preko noći. Posle isparavanja MeCN, ostatak je razblažen sa DCM (800 mL) i zakišeljen sa 1 M HCl do pH 2 na -5°C. Vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (3x200 mL). Spojeni organski slojevi su isrpani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (500 mL), sušeni preko Na2SO4i koncentrovani da bi se proizvelo jedinjenje 1 (66.5 g) kao bela čvrsta supstanca. LC-MS: 366 (M+Na), 709 (2M+Na).
[0224] U rastvor jedinjenja 1 (66.5 g, 193 µmol), Meldrumove kiseline (33.4 g, 232 mmol) i DMAP (37.7 g, 309 mmol) u anhidrovanom DCM (600 mL), ukapavanjem je dodavan rastvor DCC (47.9 g, 232 mmol) u anhidrovanom DCM (200 mL) tokom 1 časa na -5°C pod azotom. Smeša je mešana na -5°C u trajanju od 8 časova, zatim je držana u frižideru preko noći. Zabeleženi su kristali dicikloheksiluree. Smeša je filtrirana, isprana sa 5% KHSO4(5x200 mL) i zasićenim vodenim rastvorom NaCl (200 mL), zatim sušena preko anhidrovanog MgSO4uz držanje u frižideru preko noći. Rastvor je zatim isparavan da bi se proizvelo sirovo jedinjenje 2 (91 g) kao svetlo žuta čvrsta supstanca. LC-MS: 492(M+Na), 961(2M+Na).
[0225] U rastvor sirovog jedinjenja 2 (91 g, 193 mmol) u anhidrovanom DCM (1 L) dodat je AcOH (127.5 g, 2.1 mol) na -5°C pod azotom. Smeša je mešana na -5°C u trajanju od 30 minuta, zatim je NaBH4(18.3 g, 483 mmol) dodavan u malim porcijama tokom 1 časa. Posle mešanja tokom još 1 časa na -5°C, dodat je zasićeni vodeni rastvor NaCl (500 mL). Organski sloj je ispran zasićenim vodenim rastvorom NaCl (2x300 mL) i vodom (2x300 mL), sušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan da bi se proizveo sirovi proizvod, koji je dalje prečišćen ispiranjem sa Et2O da bi se proizvelo jedinjenje 3 (68 g) kao svetlo žuta čvrsta supstanca. LC-MS: 478 (M+Na), 933 (2M+Na).
[0226] Rastvor 3 (68 g, 149 mmol) u anhidrovanom toluenu (500 mL) je refluksovan pod azotom u trajanju od 3 časa. Posle isparavanja rastvarača, ostatak je prečišćen hromatografijom (heksani:EtOAc=10:1) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (38 g) kao svetlo žuto ulje. LC-MS: 376 (M+Na), 729 (2M+Na).
Priprema 4
Etil estar (2R,4R)-4-amino-5-(4-bromofenil)-2-hidroksipentanske kiseline
[0227]
[0228] U rastvor t-butil estra (S)-2-(4-bromobenzil)-5-oksopirolidin-1-karboksilne kiseline (38 g, 107 mmol) u anhidrovanom DCM (250 mL) dodata je TFA (20 mL, 0.27 mol) na -5°C pod azotom. Smeša je zagrevana do sobne temperature i mešana preko noći. Posle ispravanja rastvarača, ostatak je razblažen sa EtOAc (300 mL) i ispran zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(3x200 mL), vodom (200 mL), zasićenim vodenim rastvorom NaCl (250 mL), sušen preko Na2SO4i koncentrovan da bi se proizvelo sirovo jedinjenje 1 (24 g) kao svetlo žuta čvrsta supstanca. LC-MS: 254 [M+H].
[0229] U rastvor NaH (8.6 g, 250 mmol) u anhidrovanom THF (200 mL) ukapavanjem je dodavan rastvor jedinjenja 1 (24 g, 94 mmol) u anhidrovanom THF (200 mL) tokom 30 minuta na 0°C pod azotom. Smeša je zagrevana do sobne temperature i mešana u trajanju od 2 časa. Posle hlađenja do 0°C, ukapavanjem je dodavan pivaloil hlorid (18 g, 150 mmol) tokom 30 minuta. Smeša je zagrevana do sobne temperature i mešana preko noći. Reakcija je ugašena zasićenim vodenim NH4Cl (300 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3x200 mL). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim NaCl (300 mL), sušeni preko MgSO4, filtriran i koncentrovani da bi se proizveo sirovi proizvod, koji je dalje prečišćen hromatografijom (heksani:EtOAc=25:1) da bi se proizvelo jedinjenje 2 (18 g) kao svetlo žuta čvrsta supstanca. LCMS: 360 (M+Na).
[0230] U rastvor jedinjenja 2 (18 g, 53 mmol) u anhidrovanom THF (250 mL) ukapavanjem je dodavan NaHMDS (47.7 mL, 96 mmol) tokom 30 minuta na -78°C pod azotom. Posle mešanja na -78°C u trajanju od 90 minuta, rastvor (+)-(8,8-dihlorokamforilsulfonil)-oksaziridina (31.6 g, 106 mmol) ukapavanjem je dodavan tokom 30 minuta. Posle mešanja na -78°C u trajanju od 2 časa, reakcija je ugašena zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl (400 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3x300 mL). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (300 mL), sušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani da bi se dobio sirovi proizvod koji je dalje prečišćen hromatografijom (heksani:EtOAc=15:1) da bi se proizvelo jedinjenje 3 (8.9 g) kao svetlo žuta čvrsta supstanca. LC-MS: 376 (M+Na).
[0231] Rastvor jedinjenja 3 (8.9 g, 25 mmol) u koncentrovanoj HCl (81 mL, 81 mmol) zagrevan je na 100°C u trajanju od 16 časova. Smeša je zatim koncentrovana da bi se proizveo sirovi proizvod koji je dalje prečišćen ispiranjem sa Et2O da bi se proizvelo jedinjenje 4 (7 g) kao svetlo žuta čvrsta HCl so. LC-MS: 323 (M+ H).
[0232] Rastvor jedinjenja 4 (7 g, 22 mmol) u EtOH (10 mL) je spojen sa 8M HCl u EtOH (120 mL, 960 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je zagrevana na 50°C u trajanju od 16 časova, zatim je koncentrovana. Sirovi proizvod je dalje prečišćen ispiranjem sa Et2O da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (6 g) kao svetlo žuta čvrsta HCl so. LC-MS: 352 (M+ H).
Priprema 5
(3R,5R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-ilmetil)-1-(2,2-dimetilpropionil)-3-hidroksipirolidin-2-on
[0233]
[0234] U rastvor t-butil estra (S)-2-(4-bromobenzil)-5-oksopirolidin-1-karboksilne kiseline (15 g, 43 mmol) u 1,4-dioksanu (600 mL) je dodata 3-hlorofenilborna kiselina (8 g, 51 mmol) i Pd(dppf)2Cl2(3.1 g, 4.2 mmol) na sobnoj temperaturi pod azotom. Posle mešanja u trajanju od 10 minuta, dodat je rastvor K2CO3(11.7 g, 85 mmol) u vodi (60 mL). Smeša je zagrevana do 60°C i mešana preko noći. Posle ispiranja rastvarača, dodata je voda (200 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3x200 mL). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (400 mL), sušeni preko Na2SO4i koncentrovani da bi se proizveo sirovi proizvod koji je dalje prečišćen hromatografijom na koloni (heksani:EtOAc=6:1) da bi se proizvelo jedinjenje 1 (15 g) kao svetlo žuta čvrsta supstanca. LC-MS: 408 (M+Na).
[0235] U rastvor jedinjenja 1 (15 g, 0.039 mol) u anhidrovanom DCM (250 mL) dodata je TFA (20 mL, 270 mmol) na -5°C pod azotom. Smeša je zagrevana do sobne temperature i mešana preko noći. Posle isparavanja rastvarača, ostatak je razblažen sa EtOAc (300 mL), zatim ispran zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(3x200 mL), vodom (200 mL) i zasićenim vodenim rastvorom NaCl (250 mL), zatim sušen preko Na2SO4i koncentrovan da bi se proizvelo sirovo jedinjenje 2 (11 g) kao svetlo žuta čvrsta supstanca. LC-MS: 286 [M+H].
[0236] U rastvor NaH (2.3 g, 98 mmol) u anhidrovanom THF (200 mL) ukapavanjem je dodavan rastvor jedinjenja 2 (11 g, 39 mmol) u anhidrovanom THF (100 mL) tokom 30 minuta na 0°C pod azotom. Smeša je zagrevana do sobne temperature i mešana 2 časa. Posle hlađenja do 0°C, pivaloil hlorid (6 g, 51 mmol) ukapavanjem je dodavan tokom 30 minuta. Smeša je zagrevana do sobne temperature i mešana preko noći. Reakcija je ugašena zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl (200 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3x200 mL). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (300 mL), sušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani da bi se proizveo sirovi proizvod koji je dalje prečišćen hromatografijom (heksani:EtOAc=25:1) da bi se proizvelo jedinjenje 3 (10.5 g) kao svetlo žuta čvrsta supstanca. LC-MS: 391 (M+Na).
[0237] U rastvor jedinjenja 3 (10.5 g, 29 mmol) u anhidrovanom THF (120 mL) ukapavanjem je dodavan NaHMDS (29 mL, 58 mmol) tokom 30 minuta na -78°C pod azotom. Posle mešanja na -78°C u trajanju od 90 minuta, ukapavanjem je dodavan rastvor (+)-(8,8-dihlorokamforilsulfonil)-oksaziridin (15.6 g, 52 mmol) tokom 30 minuta. Posle mešanja na -78°C u trajanju od 2 časa, reakcija je ugašena zasićenim NH4Cl (400 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3x300 mL). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (300 mL), sušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani da bi se dobio sirovi proizvod koji je dalje prečišćen hromatografijom (heksani:EtOAc=15:1) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (9.6 g) kao svetlo žuta čvrsta supstanca. LC-MS: 408 (M+Na).
Priprema 6
Etil estar (2R,4R)-4-amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline
[0239] Rastvor (3R,5R)-5-(3’-hlorobifenil-4-ilmetil)-1-(2,2-dimetilpropionil)-3-hidroksipirolidin-2-ona (9.6 g, 25 mmol) u koncentrovanoj HCl (81 mL, 81 mmol) zagrevan je na 100°C u trajanju od 16 časova. Smeša je zatim koncentrovana da bi se dobio sirovi proizvod koji je dalje prečišćen ispiranjem sa Et2O da bi se proizvelo jedinjenje 1 (5.7 g) kao svetlo žuta čvrsta HCl so. LC-MS: 320 (M+ H).
[0240] U rastvor jedinjenja 1 (5.7 g, 18 mmol) u EtOH (10 mL) dodata je 8M HCl u EtOH (120 mL, 960 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je zagrevana na 50°C u trajanju od 16 časova. Posle koncentrovanja, sirovi proizvod je dalje prečišćen ispiranjem sa Et2O da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (2.1 g) kao svetlo žuta čvrsta HCl so. LC-MS: 348 (M+ H).
Priprema 7
(2R,4R)-4-Amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline
[0241]
[0242] 1 M vodeni rastvor HCl (2.0 mmol) je dodat u etil estar (2R,4R)-4-amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (150.0 mg, 431 µmol) i smeša je mešana na 100°C u trajanju od 2 časa. Smeša je koncentrovana pod vakuumom u trajanju od 3 časa i ostatak je prečišćen pomoću reverzne faze da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (117 mg) kao bela čvrsta supstanca.
Priprema 8
Izopropil estar hloro-okso-sirćetne kiseline
[0243]
[0244] Izopropanol (158 µL, 2.1 mmol, 1.0 ekv.) ukapavanjem je dodavan tokom 5 minuta u oksalil hlorid (350 µL, 4.14 mmol, 2.0 ekv.) na 0°C, i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 2 časa. Višak oksalil hlorida je uklonjen rotacionim isparavanjem (40°C, 50 mmHg) i korišćen bez dodatnog prečišćavanja.
Priprema 9
Izobutil estar hloro-okso-sirćetne kiseline
[0245]
[0246] Izobutanol (191 µL, 2.1 mmol, 1.0 ekv.) ukapavanjem je dodavan tokom 5 minuta u oksalil hlorid (350 µL, 4.14 mmol), 2.0 ekv.) na 0°C, i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 časa. Višak oksalil hlorida je uklonjen rotacionim isparavanjem (40°C, 40 mmHg) i korišćen bez dodatnog prečišćavanja.
Priprema 10
t-Butil oksalil hlorid
[0247]
[0248] Oksalil hlorid (274 µL, 3.2 mmol) je dodat u rastvor t-butil alkohol (289 µL, 3.0 mmol) u etru (2.0 mL, 19.0 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 čas i zatim koncentrovana in vacuo da bi se proizvela bistra bezbojna tečnost. Približno 1M rastvor t-butil oksalil hlorida je pripremljen rastvaranjem dobijene bistre bezbojne tečnosti u DCM (~3.0 mL).
Priprema 11
2-Metoksietil estar hloro-okso-sirćetne kiseline
[0249]
[0250] Rastvor 2-metoksietanola (295 mg, 3.9 mmol) u DCM (ukupna zapremina: 0.5 mL) dodat je u rastvor oksalil hlorida (0.5 mL, 5.8 mmol) u DCM (ukupna zapremina 1.0 mL) na 0°C i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 minuta. Smeša je koncentrovana in vacuo i dobijeni ostatak je rastvoren u DCM (3.9 mL) da bi se proizveo 1.0M rastvor u DCM.
Priprema 12
3-Etoksipropil estar hloro-okso-sirćetne kiseline
[0251]
[0252] Rastvor 3-etoksipropan-1-ola (404 mg, 3.9 mmol) u DCM (ukupna zapremina: 0.5 mL) dodat je u rastvor oksalil hlorida (0.5 mL, 5.8 mmol) u DCM (ukupna zapremina 1.0 mL) na 0°C i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 minuta. Smeša je koncentrovana in vacuo i dobijeni ostatak je rastvoren u DCM (3.9 mL) da bi se proizveo 1.0M rastvor u DCM.
Priprema 13
2-fenoksietil estar hloro-okso-sirćetne kiseline
[0253]
[0254] Rastvor 2-fenoksietanol (536 mg, 3.9 mmol) u DCM (ukupna zapremina: 0.5 mL) dodat je u rastvor oksalil hlorida (0.5 mL, 5.8 mmol) u DCM (ukupna zapremina 1.0 mL) na 0°C i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 minuta. Smeša je koncentrovana in vacuo i dobijeni ostatak je rastvoren u DCM (3.9 mL) da bi se proizveo 1.0M rastvor u DCM.
Priprema 14
(2R,4R)-4-t-Butoksikarbonilamino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanska kiselina
[0255]
[0256] Rastvor (3R,5R)-5-(3’-hlorobifenil-4-ilmetil)-1-(2,2-dimetilpropionil)-3-hidroksipirolidin-2-ona (4.5 g, 11.7 mmol) u koncentrovanoj HCl (30 mL) je mešan na 100°C u trajanju od 16 časova. Smeša je koncentrovana in vacuo da bi se proizvelo jedinjenje 1 (4 g) kao bela čvrsta HCl so. LC-MS: 321 [M+H]<+>.
[0257] U rastvor NaOH (1.8 g, 45.2 mmol) u vodi (100 mL), ukapavanjem je dodato jedinjenje 1 (4 g, 11.3 mmol) u MeCN (100 mL). Smeša je mešana 10 minuta na 0°C. Di-t-butildikarbonat (7.17 g, 33.8 mmol) je dodat i smeša je mešana 15 časova na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana in vacuo da bi se uklonio MeCN, zatim je razblažena sa DCM (300 mL), i pH je podešena do pH=5-6 sa 1N vodenim rastvorom HCl. Zatim je organski sloj sakupljen i ostatak je ekstrahovan sa DCM (3x300 mL). Spojeni organski slojevi su koncentrovani i isprani heksanima (150 mL) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (4 g) kao bela čvrsta supstanca. LC-MS: 442 [M+Na]<+>.
Priprema 15
2,2,3,3,3-pentafluoropropil estar (2R,4R)-4-Amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline
[0258]
[0259] U rastvor (2R,4R)-4-t-Butoksikarbonilamino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (0.9 g, 6 mmol) i 2,2,3,3,3-pentafluoropropan-1-ola (450 mg, 3 mmol) u DCM (30 mL) dodat je DCC (880 mg, 4.3 mmol) i DMAP (260 mg, 2.1 mmol). Dobijena smeša je mešana 15 časova na sobnoj temperaturi, zatim koncentrovana in vacuo. Ostatak je rastvoren u EtOAc (100 mL) i ispran vodom (30 mL) i zasićenim vodenim rastvorom NaCl (30 mL). Organski sloj je sakupljen i koncentrovan i prečišćen hromatografijom na koloni (heksani/EtOAc=5:1) da bi se proizvelo jedinjenje 3 (0.4 g) kao bela čvrsta supstanca. LC-MS: 574 [M+Na]<+>.
[0260] Rastvor jedinjenja 3 (0.4 g, 690 µmol) u 1.4 M HCl u rastvoru 1,4-dioksana (15 mL) je mešan preko noći, i zatim koncentrovan in vacuo. Ostatak je dispergovan u EtOAc (10 mL), i talog je sakupljen filtracijom da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta HCl so (165 mg). LC-MS: 452 [M+H]<+>.<1>H NMR: (DMSO-d6) 1.95-1.82 (m, 2H), 2.99-2.98 (m, 2H), 3.56 (br, 1H), 4.41-4.38 (m, 1H), 4.92-4.82(m, 2H), 6.35(s, 1H), 7.71-7.38 (m, 8H), 8.09 (s, 3H).
Priprema 16
5-Metil-2-okso[1,3]dioksol-4-ilmetil estar (2R,4R)-4-Amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline
[0261]
[0262] Suspenzija (2R,4R)-4-t-butoksikarbonilamino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (740 mg, 1.8 mmol), 4-(bromometil)-5-metil-1,3-dioksol-2-ona (340 mg, 1.8 mmol), kalijum jodida (58 mg, 350 µmol), i K2CO3(486 mg, 3.5 mmol) u DMF (20 mL) mešana je 4 časa na sobnoj temperaturi. Smeša je razblažena sa EtOAc (150 mL) i isprana vodom (30 mL). Organski sloj je sakupljen i koncentrovan i prečišćen hromatografijom na koloni (heksani/EtOAc=1:1) da bi se proizvela bela čvrsta supstanca (490 mg). LC-MS: 554 [M+23]<+>. Rastvor ove čvrste supstance (476 mg, 890 µmol) u 3 N HCl u 1,4-dioksanu (20 mL) je mešan preko noći, i zatim koncentrovan in vacuo. Ostatak je dispergovan u EtOAc (10 mL), i talog je sakupljen filtracijom da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (290 mg). LC-MS: 432 [M+H]<+>.<1>H NMR: (DMSO-d6) 1.92-1.82 (m, 2H), 2.16 (s, 3H), 2.99 (br, 2H), 3.56 (br, 1H), 4.35-4.32 (m, 1H), 5.017 (s, 2H), 6.17 (s, 1H), 7.39-7.36 (m, 4H), 7.71-7.68 (m, 4H), 8.05 (s, 3H).
Priprema 17
Butiriloksimetil estar (2R,4R)-4-Amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline
[0263]
[0264] Rastvor (2R,4R)-4-t-butoksikarbonilamino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (900 mg, 2.1 mmol), hlorometil butirata (350 mg, 2.6 mmol), natrijum jodida (481 mg, 3.21 mmol) i DIPEA (828 mg, 6.42 mmol) u DMF (20 mL) mešan je u trajanju od 16 časova na 30°C. Smeša je razblažena sa EtOAc (150 mL) i isprana vodom (50 mL) i zasićenim vodenim rastvorom NaCl (50 mL). Organski sloj je sakupljen i koncentrovan i prečišćen hromatografijom na koloni (heksani/EtOAc=5:1) da bi se proizvela bela čvrsta supstanca (240 mg). LC-MS: 542 [M+Na]<+>. Rastvor ove čvrste supstance (240 mg, 460 µmol) u 1.4 M HCl u 1,4-dioksanu (15 mL) je mešan preko noći, i zatim koncentrovan in vacuo. Ostatak je dispergovan u EtOAc (10 mL), i talog je sakupljen filtracijom da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta HCl so (140 mg). LC-MS: 420 [M+H]<+>.<1>H NMR: (DMSO) 0.85 (t, J=7.5 Hz, 3H), 1.61-1.52 (m, 2H), 1.89-1.86 (m, 2H), 2.30 (t, J=7.5 Hz, 2H), 2.98 (br, 2H), 3.56 (br, 1H), 4.33-4.30 (m, 1H), 5.74-5.68 (m, 2H), 6.21 (s, 1H), 7.37-7.35 (m, 4H), 7.70-7.767 (m, 4H), 8.01 (brs, 3H).
Priprema 18
Etil estar (2R,4R)-4-Amino-5-(2’,5’-dihlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline
[0265]
[0266] U rastvor t-butil estra (S)-2-(4-bromobenzil)-5-oksopirolidin-1-karboksilne kiseline (33.5 g, 95 mmol) u 1,4-dioksanu (1.2 L) dodata je 2,5-dihlorofenilborna kiselina (21.7 g, 114 mmol) i Pd(dppf)2Cl2(3.5 g, 4.7 mmol) na sobnoj temperaturi pod azotom. Posle mešanja u trajanju od 10 minuta, dodatje rastvor K2CO3(26.1 g, 189 mmol) u vodi (120 mL). Smeša je zagrevana do 60°C i mešana preko noći. Posle isparavanja rastvarača, dodata je voda (400 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3x400 mL). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (500 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4, i koncentrovani da bi se proizveo sirovi proizvod koji je dalje prečišćen hromatografijom na koloni (heksani:EtOAc=6:1) da bi se proizvelo jedinjenje 1 (35.8 g) kao svetlo žuta čvrsta supstanca. LC-MS: 442 [M+Na].
[0267] U rastvor jedinjenja 1 (35.8 g, 85 mmol) u anhidrovanom DCM (300 mL) dodata je TFA (30 mL, 405 mmol) na -5°C pod azotom. Smeša je zagrevana do sobne temperature i mešana preko noći. Posle isparavanja rastvarača, ostatak je razblažen sa EtOAc (500 mL), zatim ispran zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(3x300 mL), vodom (200 mL), i zasićenim vodenim rastvorom NaCl (250 mL), zatim sušen preko Na2SO4i koncentrovan da bi se proizvelo sirovo jedinjenje 2 (26 g) kao svetlo žuta čvrsta supstanca. LC-MS: 320 [M+H].
[0268] U rastvor jedinjenja 2 (26 g, 81 mmol) u anhidrovanom THF (500 mL) ukapavanjem je dodavan n-BuLi u heksanu (39 mL, 97 mmol) tokom 1 časa na -78°C pod azotom. Posle mešanja na -78°C u trajanju od 2 časa, reakcija je ugašena dodavanjem pivaloil hlorida (12.7 g, 105 mmol) putem ukapavanja tokom 30 minuta. Posle mešanja na -78°C u trajanju od 2 časa, reakcija je ugašena zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl (200 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3x200 mL). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (300 mL), sušeni preko anhidrovanog MgSO4, filtrirani i koncentrovani da bi se proizveo sirovi proizvod koji je dalje prečišćen hromatografijom (heksani:EtOAc=25:1) da bi se proizvelo jedinjenje 3 (33 g) kao svetlo žuta čvrsta supstanca. LC-MS: 426 [M+Na].
[0269] U rastvor jedinjenja 3 (10 g, 0.025 mol) u anhidrovanom THF (120 mL) ukapavanjem je dodavan NaHMDS (18.6 mL, 37 mmol) tokom 30 minuta na -78°C pod azotom. Posle mešanja na -78°C u trajanju od 2 časa, rastvor (+)-(8,8-dihlorokamforilsulfonil)-oksaziridin (11.1 g, 37 mmol) u THF (80 mL) ukapavanjem je dodavan tokom 30 minuta. Posle mešanja na -78°C u trajanju od 2 časa, reakcija je ugašena zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl (500 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3x300 mL). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (300 mL), sušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani da bi se proizveo sirovi proizvod koji je dalje prečišćen hromatografijom (heksani:EtOAc=15:1) da bi se proizvelo jedinjenje 4 (4.2 g) kao svetlo žuto ulje. LC-MS: 442 [M+Na].
[0270] Rastvor jedinjenja 4 (4.2 g, 10 mmol) u koncentrovanoj HCl (80 mL, 0.96 mol) zagrevan je na 100°C u trajanju od 16 časova. Smeša je zatim koncentrovana da bi se proizveo sirovi proizvod koji je dalje prečišćen ispiranjem sa Et2O da bi se proizvelo jedinjenje 5 (3.8 g) kao bela čvrsta supstanca. LC-MS: 354 [M+ H].
[0271] U rastvor jedinjenja 5 (3.8 g, 10 mmol) u EtOH (5 mL) dodat je 4M HCl u EtOH (100 mL, 0.4 mol) na sobnoj temperaturi. Smeša je zagrevana na 50°C u trajanju od 16 časova. Posle koncentrovanja, sirovi proizvod koji je dalje prečišćen ispiranjem sa Et2O da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (3.3 g) kao bela čvrsta supstanca. LC-MS: 382 [M+ H].
Priprema 19
(3R,5R)-5-Amino-6-(4-bromo-2-hlorofenil)-2-etoksiheks-1-en-3-ol
[0272]
[0273] U suspenziju 4-bromo-2-hlorobenzaldehida (50 g, 22.8 mmol) u MeOH (500 mL) dodavan je NaBH4(17.3 g, 45.6 mmol) u porcijama na 0°C. Smeša je mešana 30 minuta i zatim je vodeni rastvor NH4Cl dodat da bi se reakcija ugasila. Smeša je koncentrovana in vacuo. Ostatak je ekstrahovan sa EtOAc (2x200 mL) i spojeni organski slojevi su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4, i koncentrovani pod vakuumom da bi se proizvelo jedinjenje 1 (48g) kao bela čvrsta supstanca.
[0274] U rastvor jedinjenja 1 (46.8 g, 21.1 mmol) u suvom DCM (500 mL) dodavan je fosfor tribromid (68.6 g, 25.3 mmol) ukapavanjem na 0°C pod azotom. Smeša je mešana u trajanju od 2 časa i zatim isprana zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(2x200 mL) i zasićenim vodenim rastvorom NaCl (200 mL), sušena preko anhidrovanog Na2SO4, koncentrovana pod vakuumom da bi se proizvelo jedinjenje 2 (36 g) kao bezbojno ulje.
[0275] U mešani rastvor (R)-pirolidin-2-karboksilne kiseline (57.7 g, 0.5 mol) i KOH (84 g, 1.5 mol) u izopropil alkoholu (330 mL) ukapavanjem je dodavan benzil hlorid (70 mL, 0.6 mol) na 0°C tokom 3 časa. Smeša je zatim mešana preko noći na istoj temperaturi. Dobijena smeša je neutralizovana sa koncentrovanom HCl do pH=6, nakon čega je usledilo dodavanje hloroforma (200 mL). Smeša je mešana 30 minuta, zatim filtrirana i talog je ispran hloroformom (3x100 mL). Spojeni hloroformski rastvori su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4, i koncentrovani pod vakuumom da bi se proizvelo jedinjenje 3 (52 g) kao bela čvrsta supstanca. LC-MS: 206 [M+H]<+>.
[0276] U rastvor jedinjenja 3 (10 g, 48.8 mmol) u suvom DCM (50 mL) dodat je SO2Cl2(7.3 g, 61 mmol) na -20°C pod azotom. Smeša je mešana na -20°C u trajanju od 3 časa, nakon čega je usledilo dodavanje rastvora (2-aminofenil)(fenil)metanona (6 g, 30.5 mmol) u suvom DCM (25 mL) i smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvor Na2CO3(10.3 g) u vodi (40 mL) je dodat na 0°C. Organski sloj je razdvojen i vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (50 mLx3). Spojeni organski slojevi su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je ispran sa MTBE (2x50 mL) da bi se proizvelo jedinjenje 4 (8.5 g) kao žuta čvrsta supstanca. LC-MS: 385 [M+H]<+>.
[0277] U rastvor jedinjenja 4 (29.4 g, 76.5 mmol), glicina (28.7 g, 382.4 mmol) i Ni(NO3)2·6H2O (44.5 g, 152.9 mmol) u MeOH (280 mL) dodat je rastvor KOH (30 g, 535.3 mmol) u MeOH (100 mL) na 45°C pod azotom. Smeša je mešana na 60°C jedan čas. Dobijeni rastvor je neutralizovan sa AcOH (31 mL) i sipan u ledenu vodu (380 mL). Dobijena čvrsta supstanca je filtrirana i rastvorena u DCM (450 mL), koji je ispran zasićenim vodenim rastvorom NaCl (150 mL), sušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan. Ostatak je ispran sa EtOAc (2x50 mL) da bi se proizvelo jedinjenje 5 (38 g) kao crvena čvrsta supstanca. LC-MS: 498 [M+H]<+>.
[0278] Jedinjenje 5 (14.3 g, 28.7 mmol) i NaOH (3.4 g, 81.6 mmol) su dodati u bočicu koja je prečišćena azotom dva puta. Dodat je anhidrovani DMF (100 mL) i smeša je mešana 5 minuta na 0°C pre nego što je dodat rastvor jedinjenja 2 (8.6 g, 30.1 mmol) u DMF (20 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 minuta do potpune potrošnje jedinjenja 4 (provereno pomoću TLC). Dobijena smeša je sipana u 5% vodeni rastvor AcOH (120 mL) koji je zatim ekstrahovan sa DCM (3x150 mL) i spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (150 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je rekristalizovan sa DCM/Et2O (1:1) da bi se proizvelo jedinjenje 6 (15.5 g) kao crvena čvrsta supstanca. LC-MS: 702 [M+H]<+>.
[0279] U rastvor jedinjenja 6 (46 g, 65.6 mmol) u MeOH (300 mL) dodat je 3N HCl (200 mL). Smeša je refluksovana sve dok crvena boja nije promenjena u zelenu. Dobijeni rastvor je koncentrovan pod vakuumom i dodat je koncentrovani NH3·H2O (100 mL) i nakon toga je usledila ekstrakcija sa DCM (2x200 mL). Vodena faza je koncentrovana pod vakuumom i podvrgnuta katjonsko izmenjivačkoj smoli (eluirana sa NH3·H2O/EtOH, 1:1) da bi se proizvelo jedinjenje 7 (15 g) kao bela čvrsta supstanca. LC-MS: 280 [M+H]<+>.
[0280] U suspenziju jedinjenja 7 (15 g, 53.9 mmol) u MeCN (150 mL) dodat je rastvor NaOH (4.3 g, 107.7 mmol) u vodi (150 mL) na 0°C, i nakon toga je usledilo dodavanje (BOC)2O (17.6 g, 80.8 mmol). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je koncentrovan pod vakuumom, nakon čega je usledila ekstrakcija sa DCM (2x150 mL). Vodena faza je zakišeljena sa 1N HCl do pH=3 i ekstrahovana sa EtOAc (3x150 mL). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (150 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod vakuumom da bi se proizvelo jedinjenje 8 (12.3 g, 60%) kao bela čvrsta supstanca. LC-MS: 402 [M+Na]<+>.
[0281] U suspenziju jedinjenja 8 (18.4 g, 48.5 mmol) i Meldrumove kiseline (8.4 g, 58.2 mmol) u DCM (400 mL) dodat je DMAP (9.5 g, 77.6 mmol) na -5°C. Posle mešanja u trajanju od 10 minuta, rastvor DCC (12 g, 58.2 mmol) u DCM (100 mL) ukapavanjem je dodavan na -5°C. Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je mešan do 0°C i filtriran. Filtrat je ispran vodenim rastvorom limunske kiseline (3x200 mL) i zasićenim vodenim rastvorom NaCl (200 mL), sušen preko anhidrovanog Na2SO4, i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je ispran sa Et2O (2x50 mL) da bi se proizvelo jedinjenje 9 (22 g) kao svetlo žuta čvrsta supstanca.
[0282] U rastvor jedinjenja 9 (22 g, 43.6 mmol) u DCM (400 mL) dodat je AcOH (28.8 g, 479.4 mmol) na 0°C. Posle mešanja u trajanju od 10 minuta, NaBH4(4.1 g, 109 mmol) je dodavan u porcijama. Smeša je mešana jedan čas na 0°C. Dobijeni rastvor je ispran zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(2x200 mL) i zasićenim vodenim rastvorom NaCl (200 mL), sušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je ispran etrom (2x100 mL) da bi se proizvelo jedinjenje 10 (18.6 g) kao prljavo bela čvrsta supstanca. LC-MS: 514 [M+Na]<+>.
[0283] Rastvor jedinjenja 10 (18.6 g, 37.9 mmol) u toluenu (350 mL) je zagrevan pod refluksom u trajanju od 2 časa. Posle hlađenja, smeša je isparavana do sušenja da bi se proizvelo jedinjenje 11 (14 g) kao žuti sirup. LC-MS: 334 [M-tBu+H]<+>.
[0284] U rastvor jedinjenja 11 (14 g, 36.0 mmol) u DCM (250 mL) dodata je TFA (20 mL). Smeša je mešana u trajanju od 4 časa na 0°C. Dobijeni rastvor je koncentrovan pod vakuumom da bi se uklonila TFA. Ostatak je rastvoren u DCM (400 mL) i ispran zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(2x200 mL), sušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan da bi se proizvelo jedinjenje 12 (10 g) kao žuta čvrsta supstanca. LC-MS: 290 [M+H]<+>.
[0285] U rastvor jedinjenja 12 (10 g, 34.7 mmol) u suvom THF (250 mL) dodat je NaH (2.4 g, 69.3 mmol, 70%) na 0°C. Smeša je mešana u trajanju od jednog časa na 0°C pod azotom. Zatim je dodat pivaloil hlorid (5 g, 41.6 mmol). Posle mešanja još 2 časa, dodat je zasićeni vodeni rastvor NaHCO3(100 mL) da bi se ugasila reakcija. Dobijena smeša je koncentrovana i ekstrahovana sa EtOAc (3x100 mL) i spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (100 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (heksani/EtOAc, 5:1) da bi se proizvelo jedinjenje 13 (11.8 g) kao bela čvrsta supstanca. LC-MS: 374[M+H]<+>.
[0286] U rastvor jedinjenja 13 (11.8 g, 31.8 mmol) u suvom THF (70 mL) ukapavanjem je dodavan NaHMDS (24 mL, 47.7 mmol, 2.0 M u THF) na -78°C pod azotom. Posle mešanja u trajanju od 30 minuta, ukapavanjem je dodavan rastvor (+)-(8,8-dihlorokamforilsulfonil)oksaziridina (15.2 g, 50.8 mmol) u THF (70 mL) na -78 °C. Smeša je mešana još jedan čas na istoj temperaturi pre dodavanja vodenog rastvora NH4Cl (70 mL) da bi se ugasila reakcija. Dobijena smeša je ekstrahovana sa EtOAc (3x150 mL) i spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (150 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4, koncentrovani pod vakuumom i prečišćeni hromatografijom na silika gelu (heksani/EtOAc, 20:1~5:1) da bi se proizveo sirovi proizvod (5 g), koji je dalje prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo jedinjenje 14 (4 g) kao žuta čvrsta supstanca. LC-MS: 390 [M+H]<+>.
[0287] Rastvor jedinjenja 14 (4 g, 10.3 mmol) u koncentrovanoj HCl (50 mL) je zagrevan pod refluksom preko noći. Smeša je koncentrovana pod vakuumom i dobijena čvrsta supstanca je isprana sa Et2O (2x50 mL) da bi se proizvelo jedinjenje 15 (3.1 g) kao bela čvrsta HCl so. LC-MS: 324 [M+H]<+>.
[0288] Rastvor jedinjenja 15 (3.1 g, 8.6 mmol) u HCl/EtOH (6.7M, 40 mL) je mešan preko noći na 50°C. Dobiena smeša je koncentrovana pod vakuumom i ostatak je ispran etrom (2x50 mL) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (2.9 g) kao prljavo bela čvrsta HCl so. LC-MS: 352 [M+H]<+>.<1>H NMR: (CD3OD) 1.268 (t, J = 6.9 Hz, 3H), 1.862-1.946 (m, 1H), 2.068-2.143 (m, 1H), 3.104-3.199 (m, 2H), 3.769-3.809 (m, 1H), 4.162-4.209 (m, 2H), 4.274-4.881 (m, 1H), 7.325 (dd, J = 8.1, 2.1 Hz, 1H), 7.522 (dd, J = 8.3, 3.0 Hz, 1H), 7.696 (d, J = 1.8 Hz, 1H).
Priprema 20
t-Butil estar [(R)-1-Bifenil-4-ilmetil-2-(2,2-dimetil-4,6-diokso-[1,3]dioksan-5-il)-2-oksoetil]karbaminske kiseline
[0289]
[0290] U rastvor (R)-3-bifenil-4-il-2-t-butoksikarbonilamino-propionske kiseline (50 g, 146 mmol), Meldrumove kiseline (23.3 g, 161 mmol) i DMAP (27.8 g, 227 mmol) u anhidrovanom DCM (500 mL) dodavan je rastvor DCC (33.3 g, 161 mmol) u anhidrovanom DCM (200 mL) tokom 1 časa na -5°C pod azotom. Smeša je mešana na -5°C u trajanju od 8 časova, zatim je čuvana u frižideru preko noći, tokom čega su se istaložili sićušni kristali dicikloheksiluree. Posle filtracije, smeša je isprana sa 5% KHSO4(4x200 mL) i zasićenim vodenim rastvorom NaCl (1x200 mL), zatim sušen uz čuvanje u frižideru sa MgSO4preko noći. Rastvor je isparavan da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (68 g, svetlo žuta čvrsta supstanca), koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja. LC-MS: 490 [M+Na], 957 [2M+Na].
Priprema 21
Etil estar (2R,4S)-5-bifenil-4-il-4-t-butoksikarbonilamino-2-hidroksimetilpentanske kiseline (jedinjenje 6) i Etil estar (2S,4S)-5-Bifenil-4-t-butoksikarbonilamino-2-hidroksimetilpentanske kiseline (jedinjenje 7)
[0291]
[0292] U rastvor sirovog t-butil estra [(R)-1-bifenil-4-ilmetil-2-(2,2-dimetil-4,6-diokso-[1,3]dioksan-5-il)-2-oksoetil]karbaminske kiseline (68 g, 147 mmol) u anhidrovanom DCM (1 L) dodat je AcOH (96.7 g, 1.6 mol) na -5°C pod azotom. Smeša je mešana na -5°C u trajanju od 0.5 časova, zatim je NaBH4(13.9 g, 366 mmol) dodavan u malim porcijama tokom 1 časa. Posle mešanja još jedan čas na -5°C, dodat je zasićeni vodeni rastvor NaCl (300 mL). Organski sloj je ispran zasićenim vodenim rastvorom NaCl (2x300 mL) i vodom (2x300 mL), sušen preko MgSO4, filtriran i isparavan da bi se proizveo sirovi proizvod, koji je dalje prečišćen hromatografijom (heksani:EtOAc=5:1) da bi se proizvelo jedinjenje 1 (46 g, svetlo žuta čvrsta supstanca). LC-MS: 476 [M+Na], 929 [2M+Na].
[0293] Rastvor jedinjenja 1 (46 g, 101 mmol) u anhidrovanom toluenu (300 mL) je refluksovan pod azotom u trajanju od 3 časa. Posle isparavanja rastvarača, ostatak je prečišćen hromatografijom (heksani:EtOAc=10:1) da bi se proizvelo jedinjenje 2 (27 g, svetlo žuta čvrsta supstanca). LC-MS: 374 [M+Na], 725 [2M+Na].<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ7.64-7.62 (m, 4H), 7.51-7.46 (m, 2H), 7.42-7.39 (m, 1H), 7.39-7.30 (m, 2H), 4.50-4.43 (m, 1H), 3.27-3.89 (m, 1H), 2.88-2.80 (m, 1H), 2.48-2.42 (m, 2H), 2.09-1.88 (m,2H), 1.66 (s,9H).
[0294] Smeša jedinjenja 2 (27 g, 77 mmol) i t-butoksi-N,N,N’,N’-tetrametilmetandiamina (40.3 g, 231 mmol) je zagrevana do 80°C pod azotom. Posle mešanja u trajanju od 3 časa na 80°C, smeša je razblažena sa EtOAc (300 mL), isprana vodom (2x150 mL) i zasićenim vodenim rastvorom NaCl (2x150 mL), sušena preko MgSO4, filtrirana i isparavana da bi se proizvelo sirovo jedinjenje 3 (29.7 g, svetlo žuto ulje). LC-MS: 425 [M+H], 835 [2M+H].
[0295] U rastvor sirovog jedinjenja 3 (29.7 g, 73 mmol) u THF (200 mL) dodat je 1 M HCl (81 mL) na 0°C pod azotom. Posle mešanja 1 čas na sobnoj temperaturi, smeša je razblažena sa EtOAc (100 mL) i podešena zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3do pH 7. Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (2x150 mL) i spojeni organski slojevi su isprani vodom (2x150 mL) i zasićenim vodenim rastvorom NaCl (1x150 mL), sušeni preko MgSO4, filtrirani, i isparavani da bi se proizvelo sirovo jedinjenje 4 (29.4 g, žuto ulje). LC-MS: 402 [M+Na], 781 [2M+Na].
[0296] U rastvor jedinjenja 4 (29.4 g, 77 mmol) u anhidrovanom THF (300 mL) dodat je anhidrovani EtOH (30 mL) i AcOH (92.5 g, 1.5 mol) na -5°C pod azotom. Smeša je mešana na -5°C u trajanju od 0.5 časova, zatim je NaBH3CN (19.4 g, 308 mmol) dodavan u malim porcijama tokom 1 časa. Posle mešanja još jedan dodatni čas na -5°C, smeša je podešena zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3do pH 7. Vodeni slojevi su ekstrahovani sa EtOAc (2x200 mL) i spojeni organski slojevi su isprani vodom (2x150 mL) i zasićenim vodenim rastvorom NaCl (1x150 mL), sušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani da bi se proizveo sirovi proizvod, koji je dalje prečišćen hromatografijom (heksani:EtOAc=5:1) da bi se proizvelo jedinjenje 5 (11.2 g, svetlo žuta čvrsta supstanca). LC-MS: 404 [M+Na], 785 [2M+Na].
[0297] U rastvor jedinjenja 5 (11.2 g, 29 mmol) u anhidrovanom EtOH (500 mL) dodat je anhidrovani K2CO3(8.0 g, 58 mmol) na 0°C pod azotom. Posle mešanja u trajanju od 1 časa na 0°C, smeša je zagrevana do sobne temperature i mešana u trajanju od 16 časova. Posle filtracije, filtrat je koncentrovan i ostatak je razblažen vodom (150 mL), sa DCM (200 mL) i zasićenim vodenim rastvorom NaCl (50 mL). Posle razdvajanja, vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (2x150 mL). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (2x200 mL), sušeni preko MgSO4, i koncentrovani da bi se proizveo sirovi proizvod koji je dalje prečišćen hromatografijom na koloni (heksani:EtOAc=5:1) da bi se proizvela jedinjenja 6 i 7 (8.3 g, svetlo žuta čvrsta supstanca).
[0298] Jedinjenje 6: LC-MS: 450 [M+Na], 877 [2M+Na].<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ7.58-7.23 (m, 9H), 4.46-4.43 (d, 1H), 4.20-4.13 (m, 2H), 3.94 (s, 1H), 3.82-3.70 (m, 2H), 2.85-2.70 (m, 3H), 2.25-2.22 (d, 1H), 2.01-1.92 (m, 1H), 1.47 (s, 9H), 1.26-1.24 (m, 3H).
[0299] Jedinjenje 7: LC-MS: 450 [M+Na], 877 [2M+Na].<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ7.58-7.55 (m, 4H), 7.50-7.43 (m, 2H), 7.40-7.30 (m, 1H), 7.26-7.23 (m, 1H), 4.46 (m, 1H), 4.21-4.13 (m, 2H), 3.94 (m, 1H), 3.82-3.77 (m, 2H), 2.83-2.81 (d, 2H), 2.66-2.63 (m, 1H), 2.24 (m, 1H), 1.83-1.81 (m, 2H), 1.38 (s, 9H), 1.30-1.25 (m, 3H).
Priprema 22
(2S,4S)-5-Bifenil-4-il-4-t-butoksikarbonilamino-2-hidroksimetilpentanska kiselina (R<7>= H; P<2>=BOC) i Etil estar (2S,4S’)-4-Amino-5-bifenil-4-il-2-hidroksimetilpentanske kiseline (R<7>= -CH2CH3; P<2>uklonjen)
[0300]
[0301] Etil estar (2S,4S)-5-Bifenil-4-il-4-t-butoksikarbonilamino-2-hidroksimetil-pentanske kiseline (210 mg) je saponifikovan sa LiOH da bi se proizvela BOC-zaštićena kiselina (R<7>= H; P<2>=BOC) (120 mg). Etil estar (2S,4S)-5-Bifenil-4-il-4-t-butoksikarbonilamino-2-hidroksimetil-pentanske kiseline (~180 mg) podvrgnut je HCl deprotekciji da bi se proizveo amin estar (R<7>= -CH2CH3; P<2>uklonjen) kao HCl so (120 mg).
Priprema 23
Etil estar (2S,4S)-4-Amino-5-(2’-fluorobifenil-4-il)-2-hidroksimetilpentanske kiseline
[0302]
[0303] U rastvor t-butil estra (S)-2-(4-bromobenzil)-5-oksopirolidin-1-karboksilne kiseline (18.4 g, 52 mmol) u 1,4-dioksanu (500 mL) dodata je 2-fluorofenilborna kiselina (8.7 g, 63 mmol) i Pd(dppf)2Cl2(3.8 g, 5.2 mmol) na sobnoj temperaturi pod azotom. Posle mešanja u trajanju od 10 minuta, dodat je rastvor K2CO3(14.4 g, 104 mmol) u vodi (50 mL). Smeša je zagrevana do 80°C i mešana na ovoj temperaturi u trajanju od 5 časova. Posle isparavanja rastvarača, dodata je voda (300 mL) i smeša je ekstrahovana sa EtOAc (3x200 mL). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (400 mL), sušeni preko Na2SO4i koncentrovani da bi se dobio sirovi proizvod koji je dalje prečišćen hromatografijom na koloni (heksani:EtOAc=8:1) da bi se proizvelo jedinjenje 1 (17.3 g) kao crveno ulje. LCMS: 392 [M+Na].
[0304] Smeša jedinjenja 1 (17.3 g, 46.7 mmol) i t-butoksi-N,N,N’,N’-tetrametilmetandiamina (24.4 g, 140 mmol) je zagrevana do 80°C pod azotom. Posle mešanja u trajanju od 3 časa na 80°C, smeša je razblažena sa EtOAc (300 mL) i isprana vodom (2x150 mL), zasićenim vodenim rastvorom NaCl (150 mL), sušena preko MgSO4, filtrirana i isparavana da bi se proizvelo sirovo jedinjenje 2 (20.6 g) kao crveno ulje. LC-MS: 425 [M+H], 849 (2M+H).
[0305] U rastvor sirovog jedinjenja 2 (20.6 g, 48.6 mmol) u THF (300 mL), dodata je 1 M HCl (58 mL, 58 mmol) na 0°C pod azotom. Posle mešanja 1 čas na sobnoj temperaturi, smeša je razblažena sa EtOAc (100 mL) i podešena zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3do pH od 7. Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (2x150 mL) i spojeni organski slojevi su isprani vodom (2x150 mL) i zasićenim vodenim rastvorom NaCl (150 mL), sušeni preko MgSO4, filtrirani i isparavani da bi se proizvelo sirovo jedinjenje 3 (18.9 g) kao crveno ulje. LC-MS: 420 (M+Na), 817 (2M+Na).
[0306] U rastvor sirovog jedinjenja 3 (18.9 g, 47.6 mmol) u anhidrovanom THF (400 mL) dodat je anhidrovani EtOH (50 mL) i AcOH (57.2 g, 952 mmol) na -5°C pod azotom. Smeša je mešana na -5°C u trajanju od 30 minuta, zatim je NaBH3CN (15 g, 238 mmol) dodavan u malim porcijama tokom 1 časa. Posle mešanja još 1 dodatni čas na -5°C, smeša je podešena zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3do pH od 7. Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (3x200 mL) i spojeni organski slojevi su isprani vodom (2x150 mL) i zasićenim vodenim rastvorom NaCl (150 mL), sušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani da bi se proizveo sirovi proizvod koji je dalje prečišćen hromatografijom (heksani:EtOAc=6:1) da bi se proizvelo jedinjenje 4 (7.1 g) kao svetlo žuta čvrsta supstanca. LC-MS: 422 (M+Na), 821 (2M+Na).
[0307] U rastvor jedinjenja 4 (7.1 g, 17.7 mmol) u anhidrovanom EtOH (500 mL) dodat je anhidrovani K2CO3(9.8 g, 70.8 mmol) na 0°C pod azotom. Posle mešanja 1 čas na 0°C, smeša je zagrevana do sobne temperature i mešana u trajanju od 16 časova. Posle filtracije, filtrat je koncentrovan i ostatak je razblažen vodom (150 mL), sa DCM (200 mL) i zasićenim vodenim rastvorom NaCl (50 mL). Posle razdvajanja, vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (2x150 mL). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (2x200 mL), sušeni preko MgSO4, i koncentrovani da bi se proizveo sirovi proizvod koji je dalje prečišćen hromatografijom na koloni (heksani:EtOAc=5:1) da bi se proizvelo jedinjenje 5 (2 g) kao svetlo žuta čvrsta supstanca. 2.1 g (R,S) izomera je takođe dobijeno kao svetlo žuta čvrsta supstanca.
[0308] Jedinjenje 5 (400 mg, 0.9 mmol) je rastvoreno u MeCN (3 mL) i 4 M HCl u dioksanu (0.5 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 1 časa, zatim koncentrovana da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao HCl so (340 mg), koja je formirana kao ulje i solidifikovana preko noći.
Priprema 24
t-Butil estar [(R)-2-Bifenil-4-il-1-(2,2,5-trimetil-4,6-diokso-1,3-dioksinan-5-ilmetil)etil]karbaminske kiseline
[0309]
[0310] AcOH (8.6 mL) je dodat u rastvor sirovog t-butil estra [(R)-1-bifenil-4-ilmetil-2-(2,2-dimetil-4,6-diokso-[1,3]dioksan-5-il)-2-okso-etil]-karbaminske kiseline (6.4 g, 14 mmol) u anhidrovanom MeCN (90 mL) dodat je AcOH (8.6 mL) na -5°C pod azotom. Smeša je mešana na -5°C u trajanju od 30 minuta, zatim je dodavan natrijum borohidrid (1.3 g, 34.5 mmol) u malim porcijama tokom 2 časa. Posle mešanja još 1 čas na -5°C, dodat je zasićeni vodeni rastvor NaCl i 1.7 M NaCl u vodi (30 mL). Slojevi su razdvojeni i organski sloj je ispran zasićenim vodenim rastvorom NaCl (2x30 mL) i vodom (2x30 mL), sušen pod MgSO4, filtriran i isparavan. Dobijen sirovi proizvod je dalje prečišćen hromatografijom (5:1 heptan:EtOAc) da bi se proizveo t-butil estar [(S)-2-bifenil-4-il-1-(2,2-dimetil-4,6-diokso-[1,3]dioksan-5-ilmetil)etil]karbaminske kiseline (1.1 g, čistoće 98.4%) kao svetlo žuta čvrsta supstanca.
[0311] t-Butil estar [(S)-2-Bifenil-4-il-1-(2,2-dimetil-4,6-diokso-[1,3]dioksan-5-ilmetil)-etil]karbaminske kiseline (5.0 g, 11 mmol) i K2CO3(1.8 g, 13.2 mmol) su rastvoreni u DMF (33.9 mL) i hlađeni do 0°C uz mešanje pod azotom. Metil jodid (892 µL) je dodat i dobijena smeša je mešana na 0°C u trajanju od 1 časa. Smeša je ostavljena da se zagreva do sobne temperature. Dodati su zasićeni vodeni rastvor NaCl (35 mL) i EtOAc (35 mL) i dobijena smeša je mešana u trajanju od 2 minuta. Slojevi su razdvojeni i organski sloj je ispravan. Ostatak je triturisan sa EtOAc (20 mL). Čvrsta supstanca je otfiltrirana i sušena pod vakuumom. Filtrat je koncentrovan i triturisan ponovo sa EtOAc da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (3.9 g).
Priprema 25
(2S,4R)-5-Bifenil-4-il-4-t-butoksikarbonilamino-2-hidroksimetil-2-metilpentanska kiselina (P<2>=BOC) i (2S,4R)-4-Amino-5-bifenil-4-il-2-hidroksimetil-2-metilpentanska kiselina (P<2>uklonjen)
[0312]
[0313] Destilovana voda (140 mL) je prečišćavana 30 minuta pod azotom, zatim kanulirana u posudu koja sadrži 0.1M samarijum dijodida u THF (800 mL), vođenjem računa da se ne omogući da vazduh dođe u kontakt sa rastvorom. Uz održavanje atmosfere azota, dodat je degazirani rastvor t-butil estra [(R)-2-bifenil-4-il-1-(2,2,5-trimetil-4,6-diokso-1,3-dioksinan-5-ilmetil)etil]karbaminske kiseline (3.7 g, 8.0 mmol) i THF (100 mL) dodat preko kanile. Dobijena smeša je mešana u trajanju od 15 minuta, zatim izložena vazduhu. Dodati su zasićeni vodeni rastvor NaCl (12 mL), 10% limunska kiselina (6 mL) i EtOAc (30 mL). Smeša je mešana 5 minuta, zatim su oba sloja ekstrahovana. Organski sloj je sušen preko Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom (330 g zlatne kolone, gradijent 50% EtOAc sa 0.5% AcOH/etra) da bi se proizvela BOC-zaštićena kiselina. (P<2>=BOC) (1.4 g). BOC-zaštićena kiselina je rastvorena u MeCN (10 mL), nakon čega je sledilo dodavanje 4N HCl u dioksanu (10 mL). Rastvarač je isparavan i proizvod je azeotropovan sa toluenom (2x) da bi se proizvela kiselina. (P<2>uklonjen) (1.0 g).
Priprema 26
Etil estar (2S,4R)-4-Amino-5-bifenil-4-il-2-hidroksimetil-2-metilpentanske kiseline
[0314]
[0315] (2S,4R)-4-Amino-5-bifenil-4-il-2-hidroksimetil-2-metilpentanska kiselina (0.3 g, 957 µmol) je spojena sa EtOH (6 mL) i 4 M HCl u 1,4-dioksanu (718 µL), i mešana preko noći. Rastvarači su isparavani i proizvod je azeotropski obrađen sa toluenom (2x) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (295 mg), koje je korišćeno bez dodatnog prečišćavanja.
Priprema 27
t-Butil estar [(R)-1-(3’-Fluorobifenil-4-ilmetil)-2-(2,2,5-trimetil-4,6-diokso-[1,3]dioksan-5-il)-etil]karbaminske kiseline
[0316]
[0317] U rastvor (R)-2-amino-3-(4-bromofenil)propionske kiseline (50 g, 0.2 mol) u MeCN (700 mL) dodat je rastvor NaOH (16.4 g, 0.4 mol) u vodi (700 mL) na -5°C. Posle mešanja u trajanju od 10 minuta, dodat je rastvor (BOC)2O (44.7 g, 0.2 mol) u MeCN (100 mL). Smeša je zagrevana do sobne temperature i mešana preko noći. Posle isparavanja MeCN, ostatak je razblažen sa DCM (800 mL) i zakišeljen sa 1 M HCl do pH 2 na -5°C. Vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (3x200 mL). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (500 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani da bi se proizvelo jedinjenje 1 (64.2 g, bela čvrsta supstanca). LC-MS: 366 [M+Na], 709 [2M+Na].
[0318] U rastvor jedinjenja 1 (64.2 g, 187 mmol) u 1,4-dioksanu (500 mL) dodata je 3-fluorofenilborska kiselina (31.3 g, 224 mmol) i Pd(dppf)2Cl2(13.7 g, 19 mmol) na sobnoj temperaturi pod azotom. Posle mešanja od 10 min, dodat je rastvor K2CO3(51.7 g, 374 mmol) u vodi (250 mL). Smeša je zagrevana do 100°C i mešana preko noći. Posle isparavanja rastvarača, dodata je voda (200 mL). Vodeni sloj je zakišeljen sa 1 M HCl do pH 2 i ekstrahovana sa EtOAc (3x200 mL). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (400 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4, i koncentrovani da bi se proizveo sirovi proizvod koji je dalje prečišćen pomoću hromatografije na koloni (heksani:EtOAc=4:1) da bi se proizvelo jedinjenje 2 (45 g, svetlo žuto ulje). LC-MS: 382 [M+Na], 741 [2M+Na].
[0319] U rastvor jedinjenja 2 (45 g, 125 mmol), Meldrumove kiseline (23.5 g, 163 mmol), i DMAP (26.0 g, 213 mmol) u anhidrovanom DCM (500 mL) dodat je rastvor DCC (33.3 g, 163 mmol) u anhidrovanom DCM (200 mL) tokom 1 časa na -5°C pod azotom. Smeša je mešana na -5°C u trajanju od 8 časova, zatim je držana u frižideru preko noći, tokom čega su istaloženi sitni kristali dicikloheksiluree. Posle filtracije, smeša je isprana sa 5% KHSO4(4x200 mL) i zasićenim vodenim rastvorom NaCl (1x200 mL), zatim sušena uz čuvanje u frižideru sa anhidrovanim MgSO4preko noći. Rastvor je isparavan da bi se proizvelo sirovo jedinjenje 3 (57.7 g, svetlo žuto ulje). LC-MS: 508 [M+Na], 993 [2M+Na].
[0320] U rastvor sirovog jedinjenja 3 (57.7 g, 119 mmol) u anhidrovanom DCM (1 L) dodat je AcOH (78.4 g, 1.3 mol) na -5°C pod azotom. Smeša je mešana na -5°C u trajanju od 0.5 časova, zatim je NaBH4(11.3 g, 0.3 mol) dodavan u malim porcijama tokom 1 časa. Posle mešanja još 1 čas na -5°C, dodat je zasićeni vodeni rastvor NaCl (300 mL). Organski sloj je ispran zasićenim vodenim rastvorom NaCl (2x300 mL) i vodom (2x300 mL), sušen preko anhidrovanog MgSO4, filtriran i koncentrovan da bi se proizveo sirovi proizvod, koji je dalje prečišćen hromatografijom (heksani: EtOAc=6:1) da bi se proizvelo jedinjenje 4 (28 g, svetlo žuto ulje). LC-MS: 494 [M+Na], 965 [2M+Na].
[0321] U rastvor jedinjenja 4 (28 g, 60 mmol) u anhidrovanom DMF (250 mL) dodat je K2CO3(9.9 g, 72 mmol) i CH3I (25.6 g, 180 mmol) na 0°C pod azotom. Posle mešanja 1 čas na 0°C, smeša je zagrevana do sobne temperature i mešana preko noći. Smeša je razblažena vodom (3 L) i ekstrahovana sa EtOAc (3x300 mL). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (500 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4, i koncentrovani da bi se dobio sirovi proizvod koji je dalje prečišćen hromatografijom (heksani:EtOAc=5:1) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (11.7 g, svetlo žuta čvrsta supstanca). LC-MS: 508 [M+Na], 993 [2M+Na].<1>H NMR (300 MHz, CD3OD): δ7.52-7.49 (m, 2H), 7.41-7.39 (m, 2H), 7.32-7.27 (m, 3H), 7.07-7.01 (m, 1H), 6.21-6.18 (d, 1H), 3.79 (m, 1H), 2.78-2.61 (m, 2H), 2.35-2.20 (m, 2H), 1.76 (s, 6H), 1.59 (s, 3H), 2.21 (s, 1H), 1.28(s, 9H).
Priprema 28
(2S,4R)-4-t-Butoksikarbonilamino-5-(3’-fluorobifenil-4-il)-2-hidroksimetil-2-metilpentanska kiselina (P<2>=BOC) i (2S,4R)-4-Amino-5-(3’-fluorobifenil-4-il)-2-hidroksimetil-2-metilpentanska kiselina (P<2>uklonjen)
[0322]
[0323] Destilovana voda (181 mL) je prečišćena 1 čas pod azotom, zatim kanulirana u posudu koja sadrži 0.1 M samarijum dijodida u THF (800 mL). Uz održavanje atmosfere azota, slično degaziran rastvor t-butil estra [(R)-1-(3’-fluorobifenil-4-ilmetil)-2-(2,2,5-trimetil-4,6-diokso-[1,3]dioksan-5-il)-etil]-karbaminske kiseline (4.9 g, 10.0 mmol) i THF (20 mL) je dodat preko kanile. Dobijena smeša je mešana u trajanju od 15 minuta, zatim izložena vazduhu. Rastvarač je isparavan, i dodati su EtOAc (200 mL), zasićeni vodeni rastvor NaCl (50 mL) i 10% limunska kiselina (20 mL). Smeša je mešana 5 minuta, zatim su oba sloja ekstrahovana. Organski sloj je sušen preko Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom (330 g zlatna kolona, 1:1 etar:EtOAc sa 0.5% AcOH) da bi se proizvela BOC-zaštićena kiselina. (P<2>=BOC) (1.5 g). Deo BOC-zaštićene kiseline je rastvoren u 4M HCl u dioksanu (6 mL) i MeCN (10 mL). Rastvarač je isparavan pod vakuumom da bi se proizvela kiselina (P<2>uklonjen).
Priprema 29
Metil estar 3-(N-Bifenil-4-ilmetil-N’-t-butoksikarbonilhidrazino)-2-hidroksi-2-metilpropionske kiseline
[0324]
[0325] 4-(Bromometil)bifenil (2.00 g, 8.09 mmol) i DIPEA (1.4 mL, 8.1 mmol) su rastvoreni u DMF (40.0 mL), zatim je dodat t-butil karbazat (2.1 g, 16.2 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Po završetku reakcije, smeša je delimično koncentrovana, i ostatak je podeljen između EtOAc i zasićenog vodenog rastvora NaHCO3. EtOAc sloj je sušen preko Na2SO4i koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću “flash” hromatografije (0-60% EtOAc/heksani sa 0.5% DIPEA) da bi se proizvelo jedinjenje 1 (1.3 g.)
[0326] Jedinjenje 1 (460 mg, 1.5 mmol) je rastvoreno u izopropil alkoholu (10.0 mL), zatim je dodat metil 2-metilglicidat (180 µL, 1.7 mmol) i smeša je zagrevana do 85°C preko noći. Po šavršetku reakcije, smeša je podeljena između EtOAc i zasićenog vodenog rastvora NaHCO3. EtOAc sloj je zatim sušen preko Na2SO4i koncentrovan da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (0.5 g), koje je korišćeno bez dodatnog prečišćavanja.
Priprema 30
Metil estar (R)-3-[N-(4-Bromobenzil)-N’-t-butoksikarbonilhidrazino]-2-hidroksipropionske kiseline
[0327]
[0328] 4-Bromobenzil bromid (5.0 g, 20 mmol) i DIPEA (3.48 mL, 20.0 mmol) su rastvoreni u DMF (20 mL). Dodat je t-butil karbazat (7.9 g, 60.0 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi sve dok reakcija nije završena. Smeša je delimično koncentrovana, zatim je ostatak podeljen između EtOAc i zasićenog vodenog rastvora NaHCO3. EtOAc sloj je zatim sušen preko Na2SO4i koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću “flash” hromatografije da bi se proizvelo jedinjenje 1 (3.8 g).
[0329] Jedinjenje 1 (1.9 g, 6.3 mmol) je rastvoreno u izopropil alkoholu (26.4 mL). Dodat je metil (2R)-glicidat (1.1 mL, 12.6 mmol) i smeša je zagrevana na 90°C sve dok se reakcija nije završila (~4 dana). Smeša je hlađena do sobne temperature i koncentrovana da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (2.5 g) kao bela čvrsta supstanca.
Priprema 31
Etil estar (R)-3-[N-(3’-Hlorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroksipropionske kiseline
[0330]
[0331] Metil estar (R)-3-[N-(4-Bromobenzil)-N’-t-butoksikarbonilhidrazino]-2-hidroksipropionske kiseline (600 mg, 1 mmol), 3-hlorofenilborna kiselina (419 mg, 2.7 mmol) i K2CO3(617 mg, 4.5 mmol) su spojeni u EtOH (5 mL) i vodi (1 mL), nakon čega sledi dodavanje SilicaCat®Pd(0) (0.09 mmol/g punjenje, 1160 mg, 104 µmol). Smeša je zagrevana u mikrotalasnom reaktoru na 120°C sve dok reakcija nije završena (~30 minuta). Smeša je filtrirana i koncentrovana. Ostatak je rastvoren u MeCN/AcOH i prečišćen pomoću reverzno fazne hromatografije (55 g kolona; gradijent 30-95% MeCN u vodi sa 0.1%TFA). Čiste frakcije su sakupljene, koncentrovane i zatim rastvorene u 4M HCl u dioksanu (6 mL) i EtOH (6 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, zatim je koncentrovana da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (250 mg), koje je korišćeno bez dodatnog prečišćavanja.
Priprema 32
t-Butil estar (S)-2-(1-Bifenil-4-il-1-metiletil)-5-okso-pirolidin-1-karboksilne kiseline
[0332]
[0333] U rastvor 2-(4-bromofenil)acetonitrila (130.0 g, 0.7 mol) i jodometana (103.9 mL, 1.7 mol) u THF (1.0 L) dodavan je NaH (60% disperzija u mineralnom ulju, 66.7 g, 1.7 mol) u malim porcijama na 10°C. Posle završetka dodavanja, smeša je mešana na 10°C još 2 časa. Smeša je sipana u ledenu vodu (2.0 L) i ekstrahovana sa EtOAc (1.5 L). Organski sloj je ispran zasićenim vodenim rastvorom NaCl, sušen preko anhidrovanog MgSO4i koncentrovan da bi se proizvelo jedinjenje 1 (175 g, koje sadrži mineralno ulje) kao žuto ulje, koje je korišćeno direktno bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (CDCl3, 300 MHz) δ 7.52 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.38 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 1.72 (s, 6H).
[0334] U rastvor jedinjenja 1 (175 g, koje sadrži mineralno ulje) u DCM (1.0 L) dodat je DIBAL (1.0 M rastvor u DCM, 700 mL, 0.70 mol) ukapavanjem na -78°C. Reakciona smeša je mešana na -78°C u trajanju od 1.5 čas i zatim pažljivo ugašena sa 3.0 N HCl (1.0 L). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći i organski sloj je ispran zasićenim vodenim rastvorom NaCl, sušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan da bi se proizvelo jedinjenje 2 (180 g) kao žuto ulje, koje je korišćeno direktno bez dodatnog prečišćavanja.<1>H NMR (CDCl3, 300 MHz) δ 9.48 (s, 1H), 7.53 (d, J = 11.0 Hz, 2H), 7.17 (d, J = 11.0 Hz, 2H), 1.46 (s, 6H).
[0335] U vodeni rastvor NaCN (32.7 g u 1.0 L H2O, 0.7 mol) dodati su (NH4)2CO3(380 g, 4.0 mol) i jedinjenje 2 (180 g). Reakciona smeša je refluksovana preko noći i zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom na 75°C. Voda (350 mL) je dodata u ostatak i smeša je ponovo koncentrovana. Ostatak je suspendovan u petrol etru (700 mL) i vodi (250 mL) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 minuta. Talog je sakupljen filtracijom i sušen da bi se proizvelo jedinjenje 3 (150 g) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) δ 10.39 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.48 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.28 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 4.17 (s, 1H), 1.42 (s, 3H), 1.34 (s, 3H).
[0336] Suspenzija jedinjenja 3 (150 g, 0.51 mol) u 6.0 N NaOH (400 mL) i etan-1,2-diola (300 mL) je mešana na 120°C u trajanju od 38 časova. Smeša je hlađena do sobne temperature i neutralizovana sa rastvorom HCl. Talog je sakupljen filtracijom i sušen da bi se proizvelo jedinjenje 4 (250 g, koje sadrži NaCl so) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) δ 7.35 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.17 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 3.22 (s, 1H), 1.16 (s, 3H), 1.15 (s, 3H).
[0337] U suspenziju jedinjenja 4 (250 g, koje sadrži NaCl so) u MeOH (1.0 L) ukapavanjem je dodavan tionil hlorid (72.0 mL, 1.0 mol) na 5°C. Smeša je refluksovana preko noći i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Ostatak je podeljen između DCM (1.0 L) i zasićenog vodenog rastvora NaHCO3(1.5 L). Organski sloj je ispran zasićenim vodenim rastvorom NaCl, sušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan da bi se proizveo odgovarajući metil estar (90.0 g). 2-Fenilacetil hlorid (48.6 g, 0.32 mol) ukapavanjem je dodavan u rastvor estra (90.0 g) i Et3N (56.5 mL, 0.41 mol) u DCM (1.0 L) na 0°C i smeša je mešana na 0°C u trajanju od 30 minuta. Smeša je isprana sa 1.0 N HCl (500 mL) i zasićenim vodenim rastvorom NaCl, respektivno. Organski sloj je sušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan da bi se proizvelo jedinjenje 5 (120 g).<1>H NMR (CDCl3, 300 MHz) δ 7.32 (m, 5H), 7.18 (m, 2H), 6.95 (m, 2H), 5.68 (br s, 1H), 4.76 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 3.57 (s, 3H), 3.53 (d, J = 5.0 Hz, 2H), 1.30 (s, 3H), 1.25 (s, 3H).
[0338] U rastvor jedinjenja 5 (120 g, 0.30 mol) u MeOH (500 mL) dodat je 4.0 N NaOH (200 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 4 časa i zatim je pH podešena do pH=1 sa 3.0 N HCl. Dobijena smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2x300 mL). Spojeni ekstrakti su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl, sušeni preko anhidrovanog Na2SO4, i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je rekristalizovan iz EtOAc/heksana da bi se proizvelo jedinjenje 6 (82.0 g).<1>H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) δ 7.41 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 7.22 (m, 5H), 6.99 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 4.65 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 3.52 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 3.36 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 1.34 (s, 3H), 1.30 (s, 3H).
[0339] Suspenzija jedinjenja 6 (82.0 g, 0.21 mol) u destilovanoj vodi (3.0 L) podešena je do pH=8.5 sa 3.0 N LiOH i formiran je bistar rastvor. Dodata je imobilizovana penicilinaza (20.0 g) i dobijena smeša je mešana na 37°C u trajanu od 60 časova. Smeša je filtrirana i filtrat je podešen do pH=1 sa 3.0 N HCl i ekstrahovan sa EtOAc. Spojeni ektrakti su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl, sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani da bi se proizvelo jedinjenje 7 (59.0 g, 80% ee, koje sadrži 2-fenilsirćetnu kiselinu).
[0340] Suspenzija jedinjenja 7 (59.0 g, koja sadrži 2-fenilsirćetnu kiselinu) u 6.0 N HCl (500 mL) je refluksovana preko noći. Smeša je ispran sa EtOAc (300 mL) i vodena faza je koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se proizvela odgovarajuća aminokiselina kao njena hidrohloridna so. So je rastvorena u vodi (300 mL) i rastvor je podešen do pH=11. Dodat je rastvor (BOC)2O (33.0 g, 0.2 mol) u acetonu (200 mL) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 časa. Smeša je isprana heksanima (200 mL) i vodena faza je podešena do pH=2. Dobijena smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2x300 mL). Spojeni ekstrakti su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl, sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani da bi se proizvelo jedinjenje 8 (37.0 g) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (CDCl3, 300 MHz) δ 9.48 (br s, 1H), 7.46 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 7.26 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 5.02 (br s, 1H), 4.56 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 1.39 (s, 9H).
[0341] Smeša jedinjenja 8 (37.0 g, 0.1 mol) u dioksanu (200 mL) i 1.0 N K2CO3(200 mL) je degazirana u trajanju od 30 minuta sa azotom, nakon čega je usledilo dodavanje fenilborne kiseline (13.4 g, 0.1 mol) i Pd(PPH3)4(1.6 g, 1.4 mmol). Smeša je zagrevana na 75°C u trajanju od 8 časova i zatim hlađena do sobne temperature. Smeša je isprana sa EtOAc/heksanima (150 mL, 1:1) i vodena faza je podešena do pH=2 i ekstrahovana sa EtOAc (2x300 mL). Spojeni ekstrakti su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl, sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani da bi se proizvelo jedinjenje 9 (31.0 g, 84% prinos) kao bela čvrsta supstanca.
[0342] Rastvor jedinjenja 9 (31.0 g, 84 mmol), Meldrumove kiseline (13.3 g, 92 mmol) i DMAP (15.4 g, 0.13 mol) u DCM (400 mL) je hlađen do -5°C i rastvor DCC (19.0 g, 92 mmol) u DCM (200 mL) je dodavan tokom 1 časa. Smeša je mešana na -5°C preko noći. Talog je otfiltrian i filtrat je ispran sa 1.0 N HCl (2x700 mL) i zasićenim vodenim rastvorom NaCl, respektivno. Pošto je organski sloj koji sadrži jedinjenje 10 sušen preko anhidrovanog MgSO4, korišćen je direktno za sledeći korak bez koncentrovanja.
[0343] Rastvor jedinjenja 10 u DCM (600 mL) je hlađen do -5°C i dodat je AcOH (45.0 mL). Zatim je dodavan NaBH4(7.0 g, 0.2 mol) u malim porcijama tokom 30 minuta i smeša je mešana na -5°C u trajanju od 3 časa. Voda (50.0 mL) je ukapavanjem dodavana, nakon čega je usledilo dodavanje zasićenog vodenog rastvora NaCl (450 mL). Organski sloj je ispran vodom (2x300 mL) i zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(2x300 mL), sušen preko anhidrovanog MgSO4i koncentrovan da bi se proizvelo jedinjenje 11 (32.0 g, 75% ee) kao prljavo bela čvrsta supstanca. Posle rekristalizacije iz EtOH, dobijeno je hiralno čisto jedinjenje 11 (13.0 g).<1>H NMR (CDCl3, 300 MHz) δ 7.61 (m, 10H), 4.46 (br s, 1H), 4.26 (m, 1H), 3.72 (br s, 1H), 2.23 (m, 1H), 1.79 (s, 3H), 1.76 (s, 3H), 1.48 (s, 6H), 1.39 (s, 9H).
[0344] Rastvor jedinjenja 11 (13.0 g, 27.0 mmol) u toluenu (100.0 mL) je refluksovan u trajanju od 3 časa. Posle ispravanja rastvarača, ostatak je rekristalizovan iz heksana/EtOAc (3:1) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (8.0 g) kao bela čvrsta supstanca.
Priprema 33
Etil estar (2R,4S)-4-Amino-5-bifenil-4-il-2-hidroksi-5-metilkapronske kiseline
[0345]
[0346] Smeša t-butil estra (S)-2-(1-bifenil-4-il-1-metiletil)-5-okso-pirolidin-1-karboksilne kiseline (14.0 g, 36.9 mmol, racemska) u 3.0 N HCl-EtOAc rastvoru (150 mL) je mešana na sobnoj temperaturi 3 časa. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da bi se proizvelo jedinjenje 1 (10.0 g) kao bela čvrsta supstanca.
[0347] U rastvor jedinjenja 1 (10.0 g, 35.8 mmol) u THF (80.0 mL) ukapavanjem je dodavan BuLi (2.5 M u heksanima, 15.0 mL) na -78°C. Pošto je smeša mešana 30 minuta ukapavanjem je dodavan pivaloil hlorid (4.8 mL, 39.4 mmol). Smeša je mešana na -78°C u trajanju od 1 časa i zatim je ugašena zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl. Dobijena smeša je ekstrahovana sa EtOAc i spojeni ekstrakti su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl, sušeni preko anhidrovanog MgSO4i koncentrovani. Ostatak je prečišćen pomoću “flash” hromatografije na koloni silika gela da bi se proizvelo jedinjenje 2 (9.0 g) kao bela čvrsta supstanca.
[0348] U rastvor jedinjenja 2 (9.0 g, 24.7 mmol) u THF (50.0 mL) ukapavanjem je dodavan natrijum bis(trimetilsilil)amid (2.0 M u THF, 18.5 mL, 37.0 mmol) na -78°C. Smeša je mešana 20 minuta i rastvor derivata oksaziridina (10.8 g, 37.0 mmol) u THF (30.0 mL) je dodavan ukapavanjem. Smeša je mešana na -78°C u trajanju od 30 minuta i zatim ugašena zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl. Dobijena smeša je ekstrahovana sa EtOAc (1.0 L) i ekstrakt je ispran sa 1.0 N HCl i zasićenim vodenim rastvorom NaCl, sušen preko anhidrovanog MgSO4i isparavan da bi se uklonila većina rastvarača. Talog je otfiltriran i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen pomoću “flash” hromatografije na koloni silika gela (DCM:heksani= 1:1 do DCM) da bi se proizvelo jedinjenje 3 (4.3 g, racemsko). Ovaj racemat je podvrgnut hromatografiji na hiralnoj AD-koloni da bi se dobilo hiralno čisto jedinjenje 3 (1.4 g).<1>H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) δ 7.63 (m, 4H), 7.49 (m, 4H), 4.83 (d, 1H), 3.29 (m, 1H), 2.31 (m, 2H), 1.40 (s, 3H), 1.36 (s, 3H), 1.28 (s, 9H). LC-MS (ESI): m/z 380.1 [M+H]<+>.
[0349] Rastvor jedinjenja 3 (1.7 g, 160 mmol) u EtOH (15.0 mL) i 12.0 N HCl (15.0 mL) je zagrevan na 90~95°C u trajanju od 20 časova. Rastvarač je uklonjen i ostatak je tretiran sa 3.0 N HCl-EtOH rastvorom (25.0 mL) pod refluksom još 3 časa. Posle uklanjaja rastvarača, ostatak je prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (0.6 g) kao penasta čvrsta HCl so.<1>H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) δ 7.88 (br s, 3H), 7.68 (m, 4H), 7.49 (m, 4H), 7.35 (m, 1H), 6.11 (br s, 1H), 4.11 (br s, 1H), 4.05 (q, 2H), 3.61 (br s, 1H), 1.67 (m, 2H), 1.40 (s, 3H), 1.36 (s, 3H), 1.09 (t, 3H). LC-MS (ESI): m/z 342.1 [M+H]<+>.
Priprema 34
Etil estar (2S,4S)-4-Amino-5-bifenil-4-il-2-hidroksimetil-5-metilkapronske kiseline
[0350]
[0351] Smeša t-butil estra (S)-2-(1-bifenil-4-il-1-metiletil)-5-okso-pirolidin-1-karbonske kiseline (8.0 g, 21.2 mmol) i t-butoksi-N,N,N’,N’-tetrametilmetandiamina (10.0 g, 63.6 mmol) zagrevana je na 80°C u trajanju od 3 časa. Smeša je hlađena do sobne temperature i razblažena sa EtOAc (200 mL). Dobijeni rastvor je ispran vodom (2x100 mL) i zasićenim vodenim rastvorom NaCl, sušeni preko anhidrovanog MgSO4i koncentrovani da bi se proizvelo jedinjenje 1 (9.2 g, kvantitativno) kao ulje.<1>H NMR (CDCl3, 300 MHz) δ 7.53 (m, 9H), 6.95 (s, 1H), 4.60 (br s, 1H), 2.90 (s, 1H), 2.62 (m, 2H), 1.61 (s, 9H), 1.39 (s, 3H), 1.34 (s, 3H).
[0352] U rastvor jedinjenja 1 (9.2 g, 21.2 mmol) u THF (80.0 mL) dodata je 1.0 N HCl (25.0 mL) na 0°C. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 2 časa i zatim razblažena sa EtOAc (100 mL). Dobijena smeša je neutralizovana zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3i ekstrahovana sa EtOAc (2x100 mL). Spojeni ekstrakti su isprani vodom (2x100 mL) i zasićenim vodenim rastvorom NaCl, sušeni preko anhidrovanog MgSO4i koncentrovani da bi se proizvelo jedinjenje 2 (8.6 g, kvantitativan) kao ulje. LC-MS (ESI): m/z 430.1 [M+Na]<+>.
[0353] U rastvor jedinjenja 2 (8.6 g, 21.2 mmol) u THF (150 mL) i EtOH (15.0 mL) dodat je AcOH (24.3 mL, 0.4 mol) na -5°C. Pošto je smeša mešana na -5°C u trajanju od 30 minuta, NaBH3CN (5.3 g, 84.8 mmol) je dodavan u malim porcijama tokom 1 časa. Smeša je mešana na -5°C u trajanju od 1 časa i neutralizovana zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3. Dobijena smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2x100 mL). Spojeni ekstrakti su isprani vodom (2x100 mL) i zasićenim vodenim rastvorom NaCl, sušeni preko anhidrovanog MgSO4i koncentrovani da bi se proizvelo jedinjenje 3 (8.67 g, kvantitativan) kao penasta čvrsta supstanca.
[0354] U rastvor jedinjenja 3 (3.5 g, 8.6 mmol) u EtOH (30.0 mL) dodat je K2CO3(2.4 g, 17.1 mmol) na 0°C. Smeša je mešana na 0°C u trajanju od 1 časa i zatim ostavljena da se zagreva do sobne temperature i mešana preko noći. Smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan. Ostatak je tretiran vodom (20 mL) i dobijena smeša je ekstrahovana sa DCM (3x25 mL). Spojeni ekstrakti su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl, sušeni preko anhidrovanog MgSO4i koncentrovani. Ostatak je prečišćen pomoću “flash” hromatografije na koloni silika gela (heksani:EtOAc= 6:1) da bi se proizvelo jedinjenje 4 (2.2 g) kao penasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (CDCl3, 300 MHz) δ 7.53 (m, 9H), 4.35 (br s, 1H), 4.15 (m, 2H), 3.95 (br s, 1H), 3.65 (m, 2H), 2.61 (br s, 1H), 1.79 (m, 1H), 1.45 (s, 9H), 1.35 (s, 3H), 1.29 (s, 3H), 1.25 (t, 3H). LC-MS (ESI): m/z 478.2 [M+Na]<+>.
[0355] Smeša jedinjenja 4 (2.2 g, 4.8 mmol) u 2.0 N HCl-EtOH rastvoru (30.0 mL) je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 3 časa. Uklanjanje rastvarača pod sniženim pritiskom proizvelo je jedinjenje iz naslova (1.6 g) kao penasta čvrsta HCl so.<1>H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) δ 8.08 (br s, 3H), 7.55 (m, 9H), 4.95 (br s, 1H), 3.95 (m, 2H), 3.48 (m, 2H), 2.75 (br s, 1H), 1.79 (m, 2H), 1.47 (s, 3H), 1.40 (s, 3H), 1.09 (t, 3H). LC-MS (ESI): m/z 356.1 [M+H]<+>.
Priprema 35
Etil estar 3-[N-(4-Bromobenzil)hidrazinol-2-hidroksipropionske kiseline
[0356]
[0357] Rastvor metil estra (R)-3-[N-(4-bromobenzil)-N’-t-butoksikarbonilhidrazino]-2-hidroksipropionske kiseline (25 g, 62 mmol) u EtOH/HCl (310 mL, 1.0 M, 0.3 mol) je mešan preko noći. Smeša je koncentrovana i ostatak je ispran sa EtOAc (120 mL) i filtriran da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta HCl so (15 g).
Priprema 36
Etil estar (R)-2-[N-(4-bromobenzil)-N’-etoksioksalilhidrazino]-1-etoksikarboniletil estar oksalne kiseline
[0358]
[0359] Etil oksalil hlorid (70 µL, 630 µmol) ukapavanjem je dodavan u rastvor etil estra 3-[N-(4-bromobenzil)hidrazino]-2-hidroksipropionske kiseline (200 mg, 630 µmol) i Et3N (220 µL, 1.6 mmol) u DCM (4.0 mL, 62.2 mmol) na 0°C. Dobijena smeša je mešana u trajanju od 15 minuta na 0°C i u trajanju od 15 minuta na sobnoj temperaturi. Dodata je voda (3 mL), slojevi su razdvojeni, i vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (2x2 mL). DCM slojevi su spojeni, sušeni preko MgSO4, i koncentrovani da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (275 mg).
Priprema 37
t-Butil estar N’-(4-Bromobenzil)hidrazinkarboksilne kiseline
[0360]
[0361] U mešani rastvor t-butil karbazata (50 g, 0.4 mol) u suvom THF (400 mL) ukapavanjem je dodavan rastvor 4-bromobenzaldehida (70 g, 0.4 mol) u suvom THF (200 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 2 časa, i zatim koncentrovana in vacuo da bi se proizvelo jedinjenje 1 kao žuta čvrsta supstanca (113.8 g). LC-MS: 243 [M-tBu+H]<+>.
[0362] U rastvor jedinjenja 1 (113.8 g, 0.4 mol) u suvom THF (1 L) dodat je NaCNBH3(36 g, 0.6 mol) u porcijama na 0°C. Ukapavanjem je dodavan AcOH (180 mL) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Dodati su voda (2 L) i EtOAc (1.5 L) i vodena faza je podešena do pH = 7 sa zasićenim vodenim rastvorom Na2CO3. Organski sloj je razdvojen, ispran zasićenim vodenim rastvorom NaCl i vodom (200 mL), sušen preko anhidrovanog Na2SO4, i koncentrovan in vacuo. Ostatak je tretiran sa MeOH (2 L) i 1N NaOH (1.5 L), i zatim mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 2 časa. Posle uklanjanja MeOH rastvarača, talog je sakupljen filtracijom da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (112 g). LC-MS: 245 [M-tBu+H]<+>.
Priprema 38
Metil estar (R)-3-[N’-t-Butoksikarbonil-N-(5’-hloro-2’-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroksipropionske kiseline
[0363]
[0364] U rastvor t-butil estra N’-(4-bromobenzil)hidrazinkarboksilne kiseline (60 g, 0.2 mol) u 14-dioksanu (1.5 mL) dodata je 5-hloro-2-fluorofenilborna kiselina (38 g, 0.2 mol) i Pd(dppf)Cl2(7.3 g). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod azotom u trajanju od 10 minuta, i zatim, dodat je K2CO3(55.2 g, 0.4 mol) u vodi (240 mL). Dobijena smeša je mešana na 60°C u trajanju od 3 časa, i zatim hlađena do sobne temperature i koncentrovana in vacuo. Ostatak je ekstrahovan sa EtOAc (3x300 mL). Spojeni organski slojevi su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani in vacuo. Proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (PE:EtOAc=10:1~5:1) da bi se proizvelo jedinjenje 1 kao roze čvrsta supstanca (56 g). LC-MS: 701 [2M+H]<+>.
[0365] U rastvor jedinjenja 1 (20 g, 57 mmol) u izopropil alkoholu (250 mL) dodat je metil (2R)-glicidat (8.7 g, 86 mmol) pod azotom. Smeša je mešana na 85°C u trajanju od 3 dana, zatim hlađena do sobne temperature. Istaložena čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (18.5 g). LC-MS: 397 [MtBu+H]<+>.
Priprema 39
Etil estar (R)-3-[N- Hloro-2’-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroksipropionske kiseline
[0366]
[0367] Rastvor metil estra (R)-3-[N’-t-butoksikarbonil-N-(5’-hloro-2’-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroksipropionske kiseline (20 g, 16 mmol) u HCl/EtOH (1.1 M, 200 mL) je mešan preko noći i zatim koncentrovan in vacuo. Ostatak je dispergovan u EtOAc (2 x 40 mL), i talog je sakupljen filtracijom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta HCl so (8.8 g). LC-MS: 367 [M+H]<+>.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1.05 (t, J=7.2 Hz, 3 H), 3.05-3.03 (q, J=7.2 Hz, 2 H), 4.06-3.95 (m, 4 H), 4.42 (br, 1 H), 6.46 (br, 1 H), 7.62-7.40 (m, 7 H), 9.42 (s, 3 H).
Priprema 40
2-okso-2-feniletil estar (R)-3-[N- Hloro-2’-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroksipropionske kiseline
[0368]
[0369] Etil estar 3-[N-(4-Bromobenzil)hidrazino]-2-hidroksipropionske kiseline (3.1 g, 9.6 mmol) je spojen sa di t-butildikarbonatom (4.2 g, 19.2 mmol) i DCM (92.4 mL, 1.4 mol). Dodat je DIPEA (5.0 mL, 28.8 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 24 časa. Smeša je koncentrovana i ostatak je rastvoren u DCM i prečišćen pomoću „flash“ hromatografije (10-95% EtOAc u heksanima). Čiste frakcije su sakupljene i koncentrovane da bi se proizvelo jedinjenje 1 kao beli prah (4.0 g).
[0370] Jedinjenje 1 (3.5 g, 8.4 mmol) je spojeno sa 5-hloro-2-fluorofenilbornom kiselinom (1.8 g, 10.1 mmol) i K2CO3(3.5 g, 25.2 mmol) u EtOH (29.4 mL, 503 mmol) i vodi (7.6 mL, 419 mmol). Dobijena smeša je postavljena pod azot i zatim je dodat SilicaCat DPP-Pd (0.28 mmol/g punjenje; 3.0 g, 839 µmol). Smeša je podvrgnuta mikrotalasima na 120°C u trajanju od 15 minuta. Smeša je zatim filtrirana i isparavana pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen upotrebom „flash“ hromatografije (10-90% EtOAc u heksanima) da bi se proizvelo jedinjenje 2 (2.0 g).
[0371] Jedinjenje 2 (500 mg, 1 mmol) je spojeno sa K2CO3(315 mg, 2.3 mmol) u DMF (5.3 mL, 68.4 mmol). Zatim je dodat 2-bromoacetofenon (249 mg, 1.3 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 15 minuta. Smeša je zatim prečišćena upotrebom „flash“ hromatografije (50-100% EtOAc u heksanima). Ovaj prečišćeni materijal (605 mg) je zatim rastvoren u MeCN (3.6 mL, 68.4 mmol). Zatim je dodat rastvor 4 M HCl u 1,4-dioksanu (1.4 mL, 5.7 mmol), i dobijena smeša je mešana 1 čas da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (245 mg).
Priprema 41
(R)-3-[N’-t-Butoksioksalil-N-(5’-hloro-2’-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroksipropionska kiselina
[0372]
[0373] t-Butil oksalil hlorid je pripremljen dodavanjem oksalil hlorida (102 µL, 1.2 mmol) u rastvor t-butil alkohola (35 µL, 361 µmol) u etru (632 µL, 6.0 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 15 minuta i zatim koncentrovana in vacuo da bi se proizvela bistra bezbojna tečnost.
[0374] 2-Okso-2-feniletil estar (R)-3-[N- Hloro-2’-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroksipropionske kiseline (55.0 mg, 120 µmol) je rastvoren u DCM (463 µL, 7.2 mmol). Dodat je t-butil oksalil hlorid, i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 minuta, i zatim koncentrovana in vacuo. Dobijeni ostatak je rastvoren u AcOH (411 µL, 7.2 mmol). Cink (394 mg, 6.0 mmol) je dodat u smešu, koja je zatim mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 10 minuta. Smeša je filtrirana i prečišćena (Interchim reverzno fazna kolona) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (25.0 mg).
Priprema 42
5-metil-2-okso-[1,3]dioksol-4-ilmetil estar (R)-3-[N- Hloro-2’-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroksipropionske kiseline
[0375]
[0376] LiOH hidrat (3 g, 73 mmol) u vodi (60 mL) dodat je u metil estar (R)-3-[N’-t-butoksikarbonil-N-(5’-hloro-2’-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroksipropionske kiseline (16.5 g, 36.5 mmol) u MeOH (300 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 2 časa, i MeOH je isparavan in vacuo. Smeša je podešena do pH=5 sa 1 M vodenim rastvorom HCl, i ostatak je ekstrahovan sa EtOAc (2x300 mL). Spojeni organski slojevi su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4, i koncentrovani in vacuo da bi se proizvelo jedinjenje 1 kao bela čvrsta supstanca (18 g). LC-MS: 383 [M-tBu+H].
[0377] U rastvor jedinjenja 1 (1.5 g, 3.42 mmol), K2CO3(0.95g, 6.84 mmol) i kalijum jodida (20mg) u DMF (40 mL) dodat je 4-(bromometil)-5-metil-1,3-dioksol-2-on (0.8 g, 4.1 mmol) u DMF (15 mL). Dobijena smeša je mešana u trajanju od 4 časa na sobnoj temperaturi. Dodat je zasićeni vodeni rastvor NaCl (30 mL) i smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2x50 mL). Spojeni organski slojevi su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani in vacuo. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (heksani/EtOAc=1:1) da bi se proizvelo jedinjenje 2 kao žuta čvrsta supstanca (930 mg). LC-MS: 495 [M-tBu+H]<+>.
[0378] Jedinjenje 2 (400 mg, 0.73 mmol) je rastvoreno u MeCN (20 mL), i hlađeno do 0°C. Ukapavanjem je dodavan N-trimetilsililimidazol (290 mg, 1.46mmol) i dobijena smeša je mešana 2 časa. Dodat je MeOH (50 mL) da bi se ugasila reakcija. Smeša je isprana zasićenim vodenim rastvorom NaCl (2x50 mL) i ekstrahovana sa DCM (2x80 mL). Spojeni organski slojevi su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani in vacuo.
Proizvod je sakupljen da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (200 mg). LC-MS: 451 [M+H]<+>.
Priprema 43
(R)-3-[N’-t-Butoksioksalil-N-(5’-hloro-2’-fluorobifenil-4-ilmetil)-hidrazino]-2-hidroksipropionska kiselina
[0379]
[0380] U smešu 2-okso-2-feniletil estra (R)-3-[N-(5’-hloro-2’-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroksipropionske kiseline (2.0 g, 4.4 mmol) u DCM (10 mL) ukapavanjem je dodavan t-butil 2-hloro-2-oksoacetat (1.5 g, 8.8 mmol) na 0°C pod azotom. Zatim je ukapavanjem dodavan DIPEA (1.15 g, 8.8 mmol) i dobijena smeša je mešana 5 minuta na 0°C. Rastvarač je uklonjen isparavanjem i ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (PE:EtOAc=2:1) da bi se proizvelo jedinjenje 1 kao žuta čvrsta supstanca (2.0 g). LC-MS: 585[M+H]<+>.
[0381] Smeša jedinjenja 1 (2.0 g, 3.4 mmol) i Zn (15.5 g, 240 mmol) u AcOH (15 mL) je mešana u trajanju od 1 časa na sobnoj temperaturi, zatim filtrirana. Voda (30 mL) je dodata u filtrat, i smeša je ekstrahovana sa EtOAc (3x40 mL). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (2x50 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4, i koncentrovani in vacuo. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (DCM/MeOH=10:1) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao žuta tečnost (1.4 g). LC-MS: 467 [M+H]<+>.
PRIMER 1
(R)-5-Bifenil-4-il-2-hidroksi-4-(oksalilamino)pentanska kiselina
[0382]
[0383] Etil estar (R)-4-Amino-5-bifenil-4-il-2-hidroksipentanske kiseline (HCl so; 47 mg, 0.2 mmol) i etil oksalil hlorid (18.4 µL, 1.1 ekv.) su spojeni sa DIPEA (52.2 µL, 0.3 mmol) u DMF (0.3 mL)/DCM (0.3 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi sve dok reakcija nije završena. Rastvarač je uklonjen i ostatak je rastvoren u EtOH (750 µL) i 1 M vodenom rastvoru NaOH (750 µL), i mešan na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvarač je uklonjen i ostatak je prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (28.2 mg, čistoće 100%). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C49H19NO6, 358.12; zabeleženo 358.0.
PRIMER 2
A. (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-(oksalilamino)pentanska kiselina
[0384]
[0385] Rastvor etil oksalil hlorida (70.7 µL, 0.6 mmol) u DIPEA (165 µL, 0.9 mmol) dodat je u rastvor etil estra (2R,4R)-4-amino-5-(4-bromofenil)-2-hidroksipentanske kiseline (100 mg, 0.3 mmol) i DCM (0.7 mL), i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 10 minuta, nakon čega je usledilo isparavanje rastvarača pod sniženim pritiskom. Dodati su pinakol estar 3-hlorofenilborne kiseline (112 mg, 468 µmol), K2CO3(97 mg, 702 µmol), EtOH (2 mL) i voda (0.6 mL), a zatim je usledilo dodavanje SilicaCat®Pd(0) (0.09 mmol/g punjenje, 260 mg, 23.4 µmol). Smeša je zagrevana na 120°C u trajanju od 20 minuta. Reakciona smeša je koncentrovana i dodat je 10 M vodeni rastvor NaOH (316 µL) i THF (4.0 mL) sa 1 kapi MeOH. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 čas. Ostatak je rastvoren u AcOH i prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (9 mg, čistoće 95%). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C19H18ClNO6, 392.08; zabeleženo 392.4.
B. Etil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-(oksalilamino)pentanske kiseline
[0386]
[0387] Oksalil hlorid (54.5 µL, 0.6 mmol) je dodat u rastvor t-butil alkohola (56.0 µL) u etru (1.0 mL) i smeša je mešana 1 čas na sobnoj temperaturi. Smeša je koncentrovana pod vakuumom i rastvor etil estra (2R,4R)-4-amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (67.9 mg, 0.2 mmol) i DIPEA (102 µL, 0.6 mmol,) u DCM (1.0 mL) dodat je u dobijeni bistar bezbojni tečni ostatak. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 2 časa i koncentrovana pod vakuumom da bi se proizvela bistra žuta tečnost. 1:1 TFA/DCM (1.6 mL) je dodat u sirovu tečnost i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 2 časa i koncentrovana pod vakuumom da bi se proizvela bistra žuta čvrsta supstanca. Sirova tečnost je prečišćena pomoću reverzno fazne preparativne HPLC (40-90% MeCN/H2O) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (25.0 mg, čistoće 95%) kao bela čvrsta supstanca. MS m/z [M+H]<+>izrač. za C21H22ClNO6, 420.11; zabeleženo 420.1.
C. Etil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-4-(etoksioksalilamino)-2-hidroksipentanske kiseline
[0388]
[0389] Rastvor etil oksalil hlorida (24.6 µL, 0.2 mmol) u DCM (0.4 mL) dodat je u rastvor etil estra (2R,4R)-4-amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (69.6 µg, 0.2 mmol) i Et3N (69.7 mL, 0.5 mmol) u DCM (1.0 mL) na 0°C tokom perioda od 10 minuta. Dobijena smeša je mešana na 0°C u trajanju od 30 minuta, i zatim u trajanju od 15 minuta na sobnoj temperaturi. Dodata je voda (2 mL), slojevi su razdvojeni, i vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (2x2 mL). DCM slojevi su spojeni, sušeni preko Na2SO4, i koncentrovani da bi se proizvela bistra žuta tečnost. Sirova tečnost je prečišćena pomoću „flash“ hromatografije (4 g kolona, 16 mL/min, upotrebom 35% EtOAc/heksana (2 min), 35-50% (1 min), 50% (4 min), 50-70% (1 min) i 70% EtOAc/heksani (3 min)) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (63.9 mg, čistoće 90%) kao bistra bezbojna tečnost koja je solidifikovana posle stajanja do bele čvrste supstance. MS m/z [M+H]<+>izrač. za C23H26ClNO6, 448.14; zabeleženo 448.2.
D. Butil estar (2R,4R)-4-(Butoksioksalilamino)-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline [0390]
[0391] Monohidrat p-toluensulfonske kiseline (849 µg, 4 µmol) dodat je u rastvor etil estra (2R,4R)-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-4-(etoksioksalilamino)-2-hidroksipentanske kiseline (20.0 mg, 45 µmol) u 1-butanolu (0.5 mL). Reakciona smeša je mešana na 80°C u trajanju od 14 časova, na 90°C u trajanju od 4 časa, i zatim je ostavljena da se hladi do sobne temperature. Dodat je zasićeni vodeni rastvor NaHCO3(2 mL) i vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (3x2 mL). DCM slojevi su spojeni, sušeni preko Na2SO4, i koncentrovani pod vakuumom da bi se proizvela bistra bezbojna tečnost. Sirova tečnost je prečišćena pomoću „flash“ hromatografije (4 g kolona, 40% EtOAc/heksani) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (18.1 mg, čistoće 99%) kao bistra bezbojna tečnost. MS m/z [M+H]<+>izrač. za C27H34ClNO6, 504.21; zabeleženo 504.2.
E. 5-metil-2-okso-[1,3]dioksol-4-ilmetil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(5-metil-2-okso-[1,3]dioksol-4-ilmetoksioksalil)amino]pentanske kiseline
[0392]
[0393] Oksalil hlorid (22.4 µL, 264 µmol) je dodat u rastvor 4-hidroksimetil-5-metil-[1,3]dioksol-2-ona (29.1 mg, 224 µmol) u etru (1.5 mL) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 2 časa. Etar je uklonjen pod vakuumom i ostatak je rastvoren u DMF (1.5 mL). Dobijeni rastvor je dodat u rastvor (2R,4R)-4-amino-5-(3’-hloro-bifenil-4-il)-2-hidroksi-pentanske kiseline (65.0 mg, 203 µmol) i NaHCO3(51.2 mg) na 0°C. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 3 časa, zatim koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je zatim prečišćen pomoću reverzno fazne preparative HPLC (30%-90% MeCN/H2O) da bi se proizvelo jedinjenje 1 (19.1 mg) kao bela čvrsta supstanca.
[0394] 1-Hidroksibenzotriazol (7.7 mg, 56.8 µmol) i N-(3-dimetilaminopropil)-N’-etilkarbodiimid hidrohlorid (10.9 mg, 56.8 µmol) dodati su u rastvor jedinjenja 1 (19.1 mg, 37.9 µmol) u DCM (1.0 mL) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 10 minuta. Dodati su 4-Hidroksimetil-5-metil-[1,3]dioksol-2-on (14.8 mg, 114 µmol) i 4-metilmorfolin (7.7 mg, 75.8 µmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 6 časova. Dodata je voda i smeša je ekstrahovana sa DCM (3x1.5 mL). DCM slojevi su spojeni, sušeni preko Na2SO4, i koncentrovani da bi se proizvela žuta tečnost. Sirova tečnost je prečišćena pomoću reverzno fazne preparativne HPLC da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (5.1 mg). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C29H26ClNO12, 616.11; zabeleženo 616.1.
F. (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-4-(etoksioksalilamino)-2-hidroksipentanska kiselina
[0395]
[0396] Etil oksalil hlorid (46.1 µL, 0.4 mmol) dodat je u rastvor (2R,4R)-4-amino-5-(3’-hloro-bifenil-4-il)-2-hidroksi-pentanske kiseline (120 mg, 0.4 mmol) i Et3N (157 µL, 1.1 mmol) u DMF (2.0 mL, 25.8 mmol) na 0°C, i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 20 minuta. Dodata je nova količina etil oksalil hlorida (30 µL) i smeša je mešana dodatnih 10 minuta. Dodata je voda (2 mL) i smeša je ekstrahovana sa DCM (3x2 mL). Ekstrakti su spojeni, sušeni preko Na2SO4i koncentrovani da bi se proizvela žuta tečnost. Sirova tečnost je prečišćena (pomoću hromatografija na C-18 koloni, 20 g; 40-90% MeCN u vodi sa 0.05% TFA) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (28.5 mg) kao bela čvrsta supstanca. MS m/z [M+H]<+>izrač. za C21H22ClNO6, 420.11; zabeleženo 420.2.
G. (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-(izopropoksioksalilamino)pentanska kiselina
[0397]
[0398] Izopropil estar hloro-okso-sirćetne kiseline (62.1 mg, 413 µmol; ~53 µL) ukapavanjem je dodavan u rastvor (2R,4R)-4-amino-5-(3’-hloro-bifenil-4-il)-2-hidroksi-pentanske kiseline (100 mg, 313 µmol) i Et3N (157 µL, 1.1 mmol) u DMF (2.0 mL, 25.8 mmol) na 0°C, i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 10 minuta. Dodata je nova količina etil oksalil hlorida (50 µL) i smeša je mešana dodatnih 10 minuta. Dodat je zasićeni vodeni rastvor NaHCO3(5 mL) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 1 časa. Smeša je ekstrahovana sa DCM (3x3 mL), ekstrakti su spojeni, sušeni preko Na2SO4, i koncentrovani da bi se proizvela žuta tečnost. Sirova tečnost je prečišćena (preparativna HPLC hromatografija na C-18 koloni, mala kolona, upotrebom 40-95% MeCN u vodi sa 0.05% TFA) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (53.0 mg) kao bela čvrsta supstanca. MS m/z [M+H]<+>izrač. za C22H24ClNO6, 434.13; zabeleženo 434.1.
H. (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-(izobutoksioksalilamino)pentanska kiselina
[0399]
[0400] 1.0 M vodeni rastvor HCL (2.5 mL, 2.5 mmol) dodat je u etil estar (2R,4R)-4-amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (100 mg, 287 µmol) i dobijena smeša je mešana na 100°C u trajanju od 1 časa. Smeša je koncentrovana da bi se proizvela (2R,4R)-4-amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-pentanska kiselina.
[0401] Izobutil estar hloro-okso-sirćetne kiseline (99.4 mg, 604 µmol) ukapavanjem je dodavan u rastvor (2R,4R)-4-amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-pentanske kiseline i Et3N (160 µL, 1.2 mmol) u DMF (2.0 mL, 25.8 mmol) na 0°C, i mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 10 minuta. Dodat je zasićeni vodeni rastvor NaHCO3(5 mL) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 2 časa. Smeša je ekstrahovana sa DCM (3x5 mL), DCM ekstrakti su spojeni, isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl, sušeni preko Na2SO4, i koncentrovani da bi se proizveo beli čvrsti ostatak. Sirova čvrsta supstanca je prečišćena pomoću preparativne HPLC hromatografije na C18 koloni (mala kolona; 40-90% MeCN u vodi sa 0.05% TFA) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (40.0 mg) kao bela čvrsta supstanca. MS m/z [M+H]<+>izrač. za C23H26ClNO6, 448.14; zabeleženo 448.1.
I. Izobutil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-(oksalilamino)pentanske kiseline
[0402]
[0403] 4.0 M HCl u 1,4-dioksanu (216 µL, 862 µmol) dodata je u suspenziju etil estra (2R,4R)-4-amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (75.0 mg, 216 µmol) u izobutil alkoholu (0.5 mL, 5.4 mmol), i dobijena smeša je mešana na 60°C u trajanju od 2 časa. Smeša je zatim koncentrovana in vacuo da bi se proizvela bela čvrsta supstanca. Bela čvrsta supstanca je rastvorena u DCM i DIPEA (113 µL, 647 µmol) je zatim dodat u smešu, a nakon toga je ukapavanjem dodato ~0.22 mL 1M rastvora t-butil oksalil hlorida u DCM (0.2 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 minuta i zatim koncentrovana in vacuo da bi se proizvela žuta tečnost. TFA/DCM (1:1, 1.3 mL, 7.7 mmol) rastvor je dodat u žutu tečnost i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 minuta i zatim koncentrovana in vacuo da bi se proizvela bistra žuta tečnost. Sirova tečnost je prečišćena (HPLC hromatografija preparativna skala na C18 koloni, 40-90% MeCN u vodi sa 0.05% TFA) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (70.5 mg, čistoće 99%) kao bela čvrsta supstanca. MS m/z [M+H]<+>izrač. za C23H26ClNO6, 448.14; zabeleženo 448.1.
J. Izopropil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-(oksalilamino)pentanske kiseline
[0404]
[0405] 4.0 M HCl u 1,4-dioksanu (216 µL, 862 µmol) dodata je u suspenziju etil estra (2R,4R)-4-amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (75.0 mg, 216 µmol) u izopropil alkoholu (0.5 mL, 6.5 mmol) i dobijena smeša je mešana na 60°C preko noći. Smeša je zatim koncentrovana in vacuo da bi se proizvela bela čvrsta supstanca. Bela čvrsta supstanca je rastvorena u DCM i DIPEA (113 µL, 647 µmol) je zatim dodata u smešu, a zatim je uakapavnjem dodato ~0.22 mL 1M rastvora t-butil oksalil hlorida u DCM (0.2 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 minuta i zatim koncentrovana in vacuo da bi se proizvela žuta tečnost. TFA/DCM (1:1, 1.3 mL, 7.7 mmol) rastvor je dodat u žutu tečnost i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 minuta i zatim koncentrovana in vacuo da bi se proizvela bistra žuta tečnost. Sirova tečnost je prečišćena (HPLC hromatografija na preparativnoj skali, na C18 koloni, 40-90% MeCN u vodi sa 0.05% TFA) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (62.8 mg, čistoće 98%) kao bela čvrsta supstanca. MS m/z [M+H]<+>izrač. za C22H24ClNO6, 434.13; zabeleženo 434.1.
K. Heptil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-(oksalilamino)pentanske kieline
[0406]
[0407] 4.0 M HCl u 1,4-dioksanu (216 µL, 862 µmol) dodata je u suspenziju etil estra (2R,4R)-4-amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (75.0 mg, 216 µmol) u 1-heptanolu (250 µL, 1.8 mmol) i dobijena smeša je mešana na 60°C u trajanju od 2 časa. Smeša je zatim koncentrovana in vacuo da bi se proizvela bela čvrsta supstanca, koja je prečišćena (Interchim reverzno fazna hromatografija na koloni; gradijent 30-90% MeCN u vodi sa 0.5% TFA). Prečišćena bela čvrsta supstanca je rastvorena u DCM i DIPEA (113 µL, 647 µmol) je zatim dodat u smešu, a nakon toga je ukapavanjem dodato ~0.22 mL 1M rastvora t-butil oksalil hlorida u DCM (0.2 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 minuta i zatim koncentrovana in vacuo da bi se proizvela žuta tečnost. TFA/DCM (1:1, 1.3 mL, 7.7 mmol) rastvor je dodat u žutu tečnost i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 minuta i zatim koncentrovana in vacuo da bi se proizvela bistra žuta tečnost. Sirovo tečnost je prečišćena (HPLC hromatografija na preparativnoj skali, na C18 koloni, 40-90% MeCN u vodi sa 0.05% TFA) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (43.3 mg, čistoće 99%) kao bela čvrsta supstanca. MS m/z [M+H]<+>izrač. za C26H32ClNO6, 490.19; zabeleženo 490.2.
L.3,3,3-Trifluoropropil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-(oksalilamino)pentanske kiseline
[0408]
[0409] 4.0 M HCl u 1,4-dioksanu (287 µL, 1.2 mmol) dodata je u suspenziju etil estra (2R,4R)-4-amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (50.0 mg, 144 µmol) u 3,3,3-trifluoropropan-1-olu (492 mg, 4.3 mmol) i dobijena smeša je mešana na 80°C u trajanju od 12 časova. Smeša je zatim koncentrovana in vacuo da bi se proizvela bela čvrsta supstanca, koja je rastvorena u DCM (1.0 mL) i zatim je ukapavanjem dodato ~0.2 mL 1M rastvora t-butil oksalil hlorida u DCM (0.2 mmol). DIPEA (75.1 µL, 431 µmol) je zatim dodat ukapavanjem i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta i zatim koncentrovana in vacuo da bi se proizvela žuta tečnost. Rastvor TFA/DCM (1:1, 1.3 mL, 7.7 mmol) je dodat u žutu tečnost i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 minuta i zatim koncentrovana in vacuo da bi se proizvela bistra žuta tečnost. Sirova tečnost je prečišćena (HPLC hromatografija na preparativnoj skali, na C18 koloni, 40-90% MeCN u vodi sa 0.05% TFA) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (44.9 mg, čistoće 99%) kao bela čvrsta supstanca. MS m/z [M+H]<+>izrač. za C22H21ClF3NO6, 488.10; zabeleženo 488.1.
M.2.2.2-Trifluoroetil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-(oksalilamino)pentanske kiseline
[0410]
[0411] 4.0 M HCl u 1,4-dioksanu (287 µL, 1.2 mmol) dodata je u suspenziju etil estra (2R,4R)-4-amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (50.0 mg, 144 µmol) u 2,2,2-trifluoroetanolu (0.5 mL, 6.9 mmol) i dobijena smeša je mešana na 110°C u trajanju od 12 časova. Smeša je zatim koncentrovana in vacuo da bi se proizvela bela čvrsta supstanca, koja je rastvorena u DCM (1.0 mL) i ~0.2 mL 1M rastvora t-butil oksalil hlorida u DCM (0.2 mmol). DIPEA (75.1 µL, 431 µmol) je zatim dodat ukapavanjem i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta i zatim koncentrovana in vacuo da bi se proizvela žuta tečnost. Rastvor TFA/DCM (1:1, 1.3 mL, 7.7 mmol) je dodat u žutu tečnost i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta i zatim koncentrovana in vacuo da bi se proizvela bistra žuta tečnost. Sirova tečnost je prečišćena (HPLCV hromatografija na preparativnoj skali, na C18 koloni, 40-90% MeCN u vodi sa 0.05% TFA) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (22.5 mg, čistoće 98%) kao bela čvrsta supstanca. MS m/z [M+H]<+>izrač. za C21H19ClF3NO6, 474.09; zabeleženo 474.1.
N. (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(3,3,3-trifluoropropoksioksalil)-amino]pentanska kiselina
[0412]
[0413] Benzil alkohol (13.0 mL, 126 mmol) je dodat u etil estar (2R,4R)-4-amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (1.9 g, 5.3 mmol), a zatim 4.0 M HCl u 1,4-dioksanu (5.3 mL, 21.3 mmol), i smeša je mešana na 60°C u trajanju od 1 časa. Smeša je prečišćena (Interchim reverzno fazna hromatografija na koloni; 30-90% MeCN u vodi sa 0.05% TFA) da bi se proizveo benzil estar (2R,4R)-4-amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-pentanske kiseline (2.2 g) kao bela čvrsta supstanca. (isparavana in vacuo sa vodom (4 x 300 mL) da bi se uklonio višak benzil alkohola).
[0414] 3,3,3-trifluoropropil oksalil hlorid je pripremljen dodavanjem oksalil hlorida (51.6 µL, 610 µmol) u rastvor 3,3,3-trifluoropropan-1-ola (62.6 mg, 549 µmol) u etru (500 µL, 4.8 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 1 časa i zatim koncentrovana in vacuo da bi se proizvela bistra bezbojna tečnost. ~1M rastvor oksalil hlorida je pripremljen rastvaranjem dobijene tečnosti u ~0.61 mL DCM.
[0415] Rastvor 3,3,3-trifluoropropil oksalil hlorida (~140 µL) dodat je u rastvor benzil estra (2R,4R)-4-amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (50.0 mg, 122 µmol) u DCM (1.0 mL) na 0°C, i smeša je mešana na 0°C u trajanju od 15 minuta. Dodat je zasićeni vodeni rastvor NaHCO3(1 mL) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 1 časa. Slojevi su razdvojeni i vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (2x2 mL). DCM slojevi su spojeni, sušeni preko Na2SO4, i koncentrovani da bi se proizvela bistra žuta tečnost. 10% Pd/C, 50% vlažnosti (0.45 mmol/g punjenje; 13.6 mg, 6.1 µmol) dodat je u rastvor žute tečnosti u DCM i THF (1.0 mL), i smeša je mešana pod vodonikom u trajanju od 30 minuta. Smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan da bi se proizvela bistra žuta tečnost. Sirova tečnost je prečišćena pomoću preparativne HPLC (40-90% MeCN u vodi sa 0.05% TFA) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (16.5mg, čistoće 99%) kao bela čvrsta supstanca. MS m/z [M+H]<+>izrač. za C22H21ClF3NO6, 488.10; zabeleženo 4880.
O. 2,2,3,3,3-Pentafluoropropil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2--hidroksi-4-(oksalilamino)pentanske kiseline
[0416]
[0417] ~1M rastvor t-butil oksalil hlorida (~0.2 mL) dodat je u rastvor 2,2,3,3,3-pentafluoropropil estra (2R,4R)-4-amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (50.0 mg, 111 µmol) u DCM (1.0 mL) na 0°C, a zatim je ukapavanjem tokom 10 minuta dodavan DIPEA (21.2 µL, 122 µmol). Smeša je mešana na 0°C u trajanju od 15 minuta. Dodat je zasićeni vodeni rastvor NaHCO3(5 mL) i smeša je ekstrahovana sa DCM (3x5 mL). DCM ekstrakti su kombinovani, sušeni preko Na2SO4, i koncentrovani da bi se proizvela bistra bezbojna tečnost. Sirova tečnost je prečišćena pomoću „flash“ hromatografije (50 % EtOAc/heksani da bi se proizvela bistra bezbojna tečnost. 1:1 TFA/DCM (1.0 mL) je dodat u rastvor bezbojne tečnosti i mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 minuta. Smeša je koncentrovana in vacuo da bi se proizvela bistra žuta tečnost. Sirova tečnost je prečišćena pomoću preparativne HPLC (40%-90% MeCN u vodi sa 0.05% TFA) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (21.6 mg, čistoće 98%) kao bela čvrsta supstanca. MS m/z [M+H]<+>izrač. za C22H19ClF5NO6, 524.08; zabeleženo 524.0.
P. 5-Metil-2-okso-[1,3]dioksol-4-ilmetil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-(oksalilamino)pentanska kiselina
[0418]
[0419] ~1M rastvor t-butil oksalil hlorida (160 µL) dodat je u rastvor 5-metil-2-okso[1,3]dioksol-4-ilmetil estra (2R,4R)-4-amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (50.0 mg, 116 µmol) u DCM (1.00 mL, 15.6 mmol) na 0°C, nakon čega je usledilo ukapavanjem tokom 10 minuta N,N-diizopropilamina (17.8 µL, 127 µmol). Dobijena smeša je mešana na 0°C u trajanju od 15 minuta, zatim koncentrovana in vacuo.1:1 TFA/DCM (1.0 mL, 6.2 mmol) je dodat u ostatak i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta. Smeša je koncentrovana in vacuo da bi se proizvela bistra žuta tečnost. Sirova tečnost je prečišćena (hromatografija na preparativnoj skali, na C18 koloni, mala kolona, upotrebom 30-90% MeCN u vodi sa 0.05% TFA) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (9.6 mg). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C24H22ClNO9, 504.10; zabeleženo 504.0.
Q. Butiriloksimetil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-(oksalilamino)pentanske kiseline
[0420]
[0421] ~1M rastvor t-butil oksalil hlorida (160 µL) dodat je u rastvor butiriloksimetil estra (2R,4R)-4-amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (48.6 mg, 116 µmol) u DCM (1.00 mL, 15.6 mmol) na 0°C, nakon čega je usledilo ukapavanje tokom 10 minuta N,N-diizopropilamina (17.8 µL, 127 µmol). Dobijena smeša je mešana na 0°C u trajanju od 15 minuta, zatim koncentrovana in vacuo. 1:1 TFA/DCM (1.0 mL, 6.2 mmol) je dodat u ostatak i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta. Smeša je koncentrovana in vacuo da bi se proizvela bistra žuta tečnost. Sirova tečnost je prečišćena (hromatografija na preparativnoj skali na C18 koloni, mala kolona, upotrebom 30-90% MeCN u vodi sa 0.05% TFA) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (10.2 mg). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C24H26ClNO8, 492.13; zabeleženo 492.0.
R. Acetoksimetil estar (2R,4R)-5-(3’-Hloro-bifenil-4-il)-2-hidroksi-4-(oksalilamino)pentanske kiseline
[0422]
[0423] U rastvor (2R,4R)-4-(t-butoksioksalilamino)-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (200 mg, 450 µmol) i bromometil acetata (97 mg, 0.9 mmol) u DMF (2 mL) dodat je 2, 6-lutidin (144 mg, 1.3 mmol) i NaI (67 mg, 450 µmol). Posle mešanja na sobnoj temperaturi u trajanju od 24 časa, smeša je razblažena vodom (20 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2x20 mL). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (2x70 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4, filtrirani i koncentrovani da bi se dobio sirovi proizvod koji je dalje prečišćen pomoću preparativne TLC (PE:EtOAc =2:1) da bi se proizvelo jedinjenje 1 (100 mg) kao žuta čvrsta supstanca. LC-MS: 542[M+Na]<+>.
[0424] U rastvor jedinjenja 1 (100 mg, 0.2 mmol) u DCM (5 mL) dodata je TFA (2 mL) na 0°C. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 2 časa, rastvarač je uklonjen, i ostatak je dalje prečišćen pomoću preparativne TLC (DCM:MeOH = 8:1) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (10 mg). LC-MS: 464 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.61 (s, 1H), 7.55 (d, J=8.0 Hz, 3H), 7.42 (t, J=7.8 Hz, 1H), 7.34 (d, J=8.1 Hz, 3H), 5.78 (s, 2H), 4.40 (s, 1H), 4.31 (t, J=5.9 Hz, 1H), 2.94 (ddd, J=22.0, 13.8, 7.2 Hz, 2H), 2.09 (m, 5H).
S. Etoksikarboniloksimetil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-(oksalilamino)pentanske kiseline
[0425]
[0426] U rastvor (2R,4R)-4-(t-butoksioksalilamino)-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (100 mg, 220 µmol) i hlorometil etil karbonata (61 mg, 440 µmol) u DMF (3 mL) dodat je 2,6-lutidin (72 mg, 660 µmol) i NaI (33 mg, 220 µmol). Posle mešanja na sobnoj temperaturi u trajanju od 24 časa, smeša je razblažena vodom (20 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2x20 mL). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (2x70 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4, filtrirani i koncentrovani da bi se dobio sirovi proizvod koji je dalje prečišćen pomoću preparativne TLC (PE:EtOAc =2:1) da bi se proizvelo jedinjenje 1 (40 mg) kao žuta čvrsta supstanca. LC-MS: 572 [M+Na]<+>.
[0427] U rastvor jedinjenja 1 (40 mg, 70 µmol) u DCM (3 mL) dodata je TFA (1 mL) na 0°C. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 časa, rastvarač je uklonjen i ostatak je dalje prečišćen pomoću preparativne TLC (DCM:MeOH = 8:1) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (18 mg). LC-MS: 494 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.55 (m, 4H), 7.38 (m, 4H), 5.80 (d, J=18.6 Hz, 2H), 4.34 (s, 2H), 4.21 (dd, J=14.3, 7.1 Hz, 2H), 2.95 (m, 2H), 2.07 (d, J=28.0 Hz, 2H), 1.29 (dd, J=12.6, 5.5 Hz, 3H). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C23H24ClNO9, 494.11; zabeležno 494.
T. (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(2-metoksietoksioksalil)amino]-pentanska kiselina
[0428]
[0429] DIPEA (64 µL, 366 µmol) je dodat je u rastvor benzil estra (2R,4R)-4-amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (50.0 mg, 122 µmol) u DCM (3 mL), nakon čega je usledilo ukapavanje rastvora 2-metoksietil estra 1.0M hloro-oksosirćetne kiseline (22 mg, 134 µmol) u DCM. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta, zatim koncentrovana da bi se proizvela bistra žuta tečnost. Sirova tečnost je prečišćena (Interchim hromatografija na C18 koloni, 20g, 340-90% MeCN u vodi sa 0.05% TFA). THF (3 mL) je dodat u prečišćeni materijal, a zatim je usledilo dodavanje paladijuma na uglju (10 tež.% na uglju, vlažnih 50g, 12.9 mg, 12 µmol) i smeša je mešana pod vodonikom u trajanju od 30 minuta. Smeša je filtrirana i koncentrovana in vacuo, i ostatak je rastvoren u AcOH (0.5 mL) i prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (9.8 mg). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C22H24ClNO7, 450.12; zabeleženo 450.2.
U. (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(2-fenoksietoksioksalil)amino]-pentanska kiselina
[0430]
[0431] DIPEA (64 µL, 366 µmol) je dodat je u rastvor benzil estra (2R,4R)-4-amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (50.0 mg, 122 µmol) u DCM (3 mL), a zatim je ukapavanjem dodavan rastvor 2-fenoksietil estar 1.0M hloro-oksosirćetne kiseline (31 mg, 134 µmol) u DCM. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 minuta, zatim koncentrovana da bi se proizvela bistra žuta tečnost. Sirova tečnost je prečišćena (hromatografija na Interchim C18 koloni, 20g, 340-90% MeCN u vodi sa 0.05% TFA). THF (3 mL) je dodat u prečišćeni materijal, a zatim je dodavan paladijum na uglju (10 tež.% na uglju, vlažnih 50g, 12.9 mg, 12 µmol) i smeša je mešana pod vodonikom u trajanju od 30 minuta. Smeša je filtrirana i koncentrovana in vacuo, i ostatak je rastvoren u AcOH (0.5 mL) i prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (3.5 mg). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C27H26ClNO7, 512.14; zabeleženo 512.2.
V. (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-)-4-[(3-etoksipropoksioksalil)amino]-2-hidroksi-pentanska kiselina
[0432]
[0433] DIPEA (64 µL, 366 µmol) je dodat u rastvor benzil estra (2R,4R)-4-amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (50.0 mg, 122 µmol) u DCM (3 mL), nakon čega je usledilo ukapavanje rastvora 3-etoksipropil estra 1.0M hloro-oksosirćetne sirćetne kiseline (26 g, 134 µmol) u DCM. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 minuta, zatim koncentrovana da bi se proizvela bistra žuta tečnost. Sirova tečnost je prečišćena (hromatografija na Interchim C18 koloni, 20g, 340-90% MeCN u vodi sa 0.05% TFA). THF (3 mL) je dodat u prečišćeni materijal, nakon čega je usledilo dodavanje paladijuma na uglju (10 tež.% na uglju, vlažnih 50g, 12.9 mg, 12 µmol) i smeša je mešana pod vodonikom u trajanju od 30 minuta. Smeša je filtrirana i koncentrovana in vacuo, i ostatak je rastvoren u AcOH (0.5 mL) i prečišćena pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (10.5 mg). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C24H28ClNO7, 478.16; zabeleženo 478.2.
W. (S)-2-Metoksikarbonilamino-3-metilbutiriloksimetil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-(oksalilamino)pentanske kiseline
[0434]
[0435] Praćenjem postupaka koji su ovde opisani, takođe je pripremljeno jedinjenje iz naslova (12.6 mg). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C27H31ClN2O10, 579.17; zabeleženo 579.2
PRIMER 3
A. (2R,4R)-5-(2’,5’-Dihlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-(oksalilamino)pentanska kiselina
[0436]
[0437] Rastvor etil oksalil hlorida (42.4 µL, 0.4 mmol) u DCM (0.4 mL, 6 mmol) dodat je u rastvor etil estra (2R,4R)-4-amino-5-(4-bromofenil)-2-hidroksipentanske kiseline (80 mg, 0.2 mmol) i Et3N (0.1 mL, 0.8 mmol) u DCM (1 mL), i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 minuta, zatim isparavana pod sniženim pritiskom. Proizvod je zatim spojen sa 2,5-dihlorofenilbornom kiselinom (72.4 mg, 0.4 mmol), K2CO3(104.9 mg, 759 µmol), EtOH (0.9 mL) i vodom (0.2 mL). Smeša je postavljena pod azot i dodat je SilicaCat®DPP-Pd (0.28 mmol/g punjenje, 90.4 mg, 25.3 µmol). Smeša je obrađena mikrotalasima na 120°C u trajanju od 20 minuta, zatim filtrirana. Dodat je 1M vodeni rastvor LiOH (2.5 mL, 2.5 mmol) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (11.9 mg, čistoće 100%). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C19H17Cl2NO6, 426.04; zabeleženo 426.0.
B. Izobutil estar (2R,4R)-5-(2’,5’-Dihlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-(oksalilamino)pentanske kiseline
[0438]
[0439] 4.0 M HCl u 1,4-dioksanu (196 µL, 785 µmol) dodata je u suspenziju etil estra (2R,4R)-4-amino-5-(2’,5’-dihlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-pentanske kiseline (75.0 mg, 196 µmol) u izobutil alkoholu (0.5 mL, 5.4 mmol), i dobijena smeša je mešana na 60°C u trajanju od 2 časa. Smeša je zatim koncentrovana in vacuo da bi se proizvela bela čvrsta supstanca. Bela čvrsta supstanca je rastvorena u DCM (1 mL) i DIPEA (102 µL, 588 µmol) je zatim dodata u smešu, a zatim je ukapavano ~0.2 mL 1M rastvora t-butil oksalil hlorida u DCM (0.2 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 minuta i zatim koncentrovana in vacuo da bi se proizvela žuta tečnost. Rastvor TFA/DCM (1:1, 1.1 mL, 7.0 mmol) je dodat u žutu tečnost i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta i zatim koncentrovana in vacuo da bi se proizvela bistra žuta tečnost. Sirova tečnost je prečišćena (HPLC hromatografija na preparativnoj skali, na C18 koloni, 40-90% MeCN u vodi sa 0.05% TFA) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (80 mg, čistoće 99%) kao bela čvrsta supstanca. MS m/z [M+H]<+>izrač. za C23H25Cl2NO6, 482.11; zabeleženo 482.1.
C. Izopropil estar (2R,4R)-5-(2’,5’-Dihlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-(oksalilamino)pentanske kiseline
[0441] 4.0 M HCl u 1,4-dioksanu (196 µL, 785 µmol) dodata je u suspenziju etil estra (2R,4R)-4-amino-5-(2’,5’-dihlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-pentanske kiseline (75.0 mg, 196 µmol) u izopropil alkoholu (0.5 mL, 6.5 mmol), i dobijena smeša je mešana na 60°C preko noći. Smeša je zatim koncentrovana in vacuo da bi se proizvela bela čvrsta supstanca. Bela čvrsta supstanca je rastvorena u DCM (1 mL) i zatim je u smešu dodat DIPEA (102 µL, 588 µmol), a nakon toga je ukapavano ~0.2 mL 1M rastvora t-butil oksalil hlorida u DCM (0.2 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 minuta i zatim koncentrovana in vacuo da bi se proizvela žuta tečnost. Rastvor TFA/DCM (1:1, 1.1 mL, 7.0 mmol) je dodat u žutu tečnost i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 minuta i zatim koncentrovana in vacuo da bi se proizvela bistra žuta tečnost. Sirova tečnost je prečišćena (HPLC hromatografija na preparativnoj skali, na C18 koloni, 40-90% MeCN u vodi sa 0.05% TFA) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (60.6 mg, čistoće 98%) kao bela čvrsta supstanca. MS m/z [M+H]<+>izrač. za C22H23Cl2NO6, 468.09; zabeleženo 468.1.
D. (2R,4R)-5-(2’,5’-Dihlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-(izobutoksioksalilamino)-pentanske kiseline
[0442]
[0443] 1.0 M vodeni rastvor HCl (3.5 mL, 3.5 mmol) je dodat u etil estar (2R,4R)-4-amino-5-(2’,5’-dihlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (155 mg, 405 µmol) i smeša je mešana na 100°C u trajanju od 1 časa i zatim koncentrovana. Proizvod je spojen sa Et3N (226 µL, 1.6 mmol) u DMF (2.5 mL, 32.3 mmol). Izobutil estar hloro-okso-sirćetne kiseline (140 mg, 851 µmol) ukapavanjem je dodavan na 0°C i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 10 minuta. Dodat je zasićeni vodeni rastvor NaHCO3(5 mL) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 2 časa. Smeša je ekstrahovana sa DCM (3x5 mL), ekstrakti su spojeni, isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl, sušeni preko Na2SO4i koncentrovani da bi se proizveo beli čvrsti ostatak. Sirova čvrsta supstanca je prečišćena preko preparativne HPLC (C18 kolona; 40-90% MeCN u vodi sa 0.05% TFA) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (98.0 mg, čistoće 99%) kao bela čvrsta supstanca. MS m/z [M+H]<+>izrač. za C23H25Cl2NO6, 482.11; zabeleženo 482.1.
PRIMER 4
(2R,4R)-5-(3-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-(oksalilamino)pentanska kiselina
[0444]
[0445] Rastvor etil oksalil hlorida (41 µL, 0.4 mmol) u DCM (0.5 mL) dodat je u rastvor (3R,5R)-5-amino-6-(4-bromo-2-hloro-fenil)-2-etoksi-heks-1-en-3-ola (96 mg, 0.3 mmol) i Et3N (0.1192 mL, 0.8556 mmol) u DCM (1.4 mL), i mešan u trajanju od 20 minuta na sobnoj temperaturi. Smeša je isparavana pod sniženim pritiskom i spojena sa fenilbornom kiselinom (52.2 mg, 0.4 mmol), K2CO3(100 mg, 0.9 mmol), vodom (0.2 mL) i EtOH (1 mL). Dobijena smeša je postavljena pod azot, i dodat je SilicaCat®DPP-Pd (0.28 mmol/g punjenje; 100 mg, 0.03 mmol). Smeša je zagrevana na 120°C u trajanju od 20 minuta sve dok reakcija nije završena. Smeša je filtrirana i dodat je 1 M vodeni rastvor LiOH (3 mL, 3 mmol). Proizvod je zatim prečišćen (hromatografija na Interchim reverzno faznoj koloni) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (12.6 mg). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C19H18ClNO6, 392.08; zabeleženo 392.2.
PRIMER 5
[0446] Praćenjem postupaka u primerima ovde, i supstitucijom odgovarajućih početnih materijala i reagenasa, pripremljena su sledeća jedinjenja:
R)-5-(5’-Hloro-2’-metilbifenil-4-il)-2-hidroksi-4-(oksalilamino)-pentanska kiselina
opil estar (2R,4R)-5- Hloro-2’-metilbifenil-4-il)-2-hidroksi-4-(oksalilamino)-pentanske kiseline tar (2R,4R)-5- Hloro-2’-metilbifenil-4-il)-2-hidroksi-4-(oksalilamino)pentanske kiseline til estar (2R,4R)-5- Hloro-2’-metilbifenil-4-il)-2-hidroksi-4-(oksalilamino)pentanske kiseline R)-5-(5’-Hloro-2’-fluorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-(oksalilamino)pentanska kiselina
tar (2R,4R)-5- Hloro-2’-fluorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-(oksalilamino)pentanske kiseline til estar (2R,4R)-5- Hloro-2’-fluorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-(oksalilamino)pentanske kiseline opil estar (2R,4R)-5- Hloro-2’-fluorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-(oksalilamino)pentanske kiseline R)-5-(3,3’-Dihlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-(oksalilamino)pentanska kiselina
4R)-5-(3,3’-Dihlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-(izobutoksioksalilamino)-pentanska kiselina butil estar (2R,4R)-5-(3,3’-Dihlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-(oksalilamino)pentanske kiseline butil estar (2R,4R)-5-(3,3’-Dihlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-(oksalilamino)pentanske kiseline 3-[N-(3,5’-Dihloro-2’-fluorobifenil-4-ilmetil)-N’-oksalil-hidrazino]-2-hidroksipropionska kiselina
14. (2R,4R)-5- Hloro-2’-fluorobifenil-4-il)-4-(etoksioksalilamino)-2-hidroksi-pentanska kiselina
15. (2R,4R)-5- Hloro-2’-fluorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-(izopropoksioksalil-amino)-pentanska kiselina 16. (2R,4R)-5- Hloro-2’-fluorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-(izobutoksioksalilamino)-pentanska kiselina 17. etil estar (2R,4R)-5-(3,3’-Dihlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-(oksalilamino)pentanske kiseline
PRIMER 6
A. (2S,4S)-5-Bifenil-4-il-2-hidroksimetil-4-(oksalilamino)pentanska kiselina
[0447]
[0448] Etil oksalil hlorid (27 µL, 0.2 mmol, 1.1 ekv.) je dodat u rastvor etil estra (2S,4S)-4-amino-5-bifenil-4-il-2-hidroksimetil-pentanske kiseline (HCl so; 80 mg, 0.22 mmol) u DMF (0.5 mL)/DCM (0.5 mL), i mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 20 minuta. Rastvarač je uklonjen i ostatak je rastvoren u LiOH (monohidrat; 92.2 mg, 2.2 mmol), vodi (1.0 mL) i EtOH (2.0 mL), i mešan na sobnoj temperaturi 30 minuta. Reakcija je ugašena sa AcOH i rastvarač je uklonjen. Ostatak je rastvoren u AcOH/MeCN i prečišćen pomoću preparativne HPLC. Čiste frakcije su spojene i liofilizovane da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (37 mg, čistoće 95%). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C20H21NO6, 372.14; zabeleženo 372.2.
B. Etil estar (2S,4S)-5-Bifenil-4-il-2-hidroksimetil-4-(oksalilamino)pentanske kiseline
[0449]
[0450] Oksalil hlorid (232 µL, 2.8 mmol) i t-butil alkohol (228 µL) su spojeni u etru (6.7 mL) pod azotom na 0°C. Dobijena smeša je mešana u trajanju od 30 minuta na sobnoj temperaturi. Rastvarač je isparavan pod vakuumom da bi se formirao t-butil estar hloro-okso-sirćetne kiseline, koji je zatim rastvoren u DCM (10 mL) i spojen sa etil estrom (2S,4S)-4-amino-5-bifenil-4-il-2-hidroksimetil-pentanske kiseline (HCl so; 667 mg, 1.8 mmol), koji je rastvoren u DCM sa Et3N (2.6 mL) na 0°C. Dobijena smeša je mešana u trajanju od 5 minuta na sobnoj temperaturi. Sirovi proizvod je koncentrovan, rastvoren u DCM i prečišćen pomoću „flash“ hromatografije (20-80% EtOAc/heksani). Rastvarač je uklonjen i ostatak je rastvoren u DCM (5 mL) i TFA (1 mL), i mešan u trajanju od 1 časa. Proizvod je sušen pod vakuumom i prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (135 mg, čistoće 95%). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C22H25NO6, 400.17; zabeleženo 400.2.
PRIMER 7
A. Butil estar (2S,4S)-5- Fluorobifenil-4-il)-2-hidroksimetil-4-(oksalilamino)pentanske kiseline
[0451]
[0452] Oksalil hlorid (44.1 µL.0.5 mmol) i t-butil alkohol (46.5 µL) su spojeni u etru (1 mL) i mešani u trajanju od 30 minuta na sobnoj temperaturi. Rastvarač je isparavan pod vakuumom da bi se formirao t-butil estar hlorookso-sirćetne kiseline, koji je zatim rastvoren u DCM (2 mL). Etil estar (2S,4S)-4-amino-5- fluorobifenil-4-il)-2-hidroksimetilpentanske kiseline (HCl so; 120 mg, 0.3 mmol) je spojen sa 1-butanolom (3 mL) i 4 M HCl u 1,4-dioksanu (3 mL) i mešan na 60°C u trajanju od 2 časa. Rastvarač je isparavan i azetropski obrađen sa toluenom (2x) i prozvod je rastvoren u Et3N (155 µL) i DCM, zatim spojen sa t-butil estrom hloro-okso-sirćetne kiseline. Dobijena smeša je mešana u trajanju od 20 minuta na sobnoj temperaturi. Rastvarač je isparavan i ostatak je ponovo rastvoren u 1:1 TFA:DCM, i mešan u trajanju od 20 minuta na 40°C. AcOH je dodat i proizvod je prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (30 mg, čistoće 95%). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C24H28FNO6, 446.19; zabeleženo 446.4.
B. (2S,4S)-5- Fluorobifenil-4-il)-2-hidroksimetil-4-(oksalilamino)pentanska kiselina
[0453]
[0454] Etil oksalil hlorid (13.8 µL, 0.1 mmol) i DIPEA (39.2 µL, 0.2 mmol) su spojeni sa etil estrom (2S,4S)-4-amino-5- fluorobifenil-4-il)-2-hidroksimetilpentanske kiseline (HCl so ; 43 mg, 0.1 mmol) rastvorenim u DCM (0.9 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 10 minuta, zatim koncentrovana pod vakuumom. Dodat je 1 M vodeni rastvor LiOH (0.9 mL) i EtOH (0.9 mL) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 čas. Reakciona smeša je ugašena sa AcOH i rastvarača je isparavan. Ostatak je rastvoren u AcOH/MeCN i prečišćen pomoću preparativne HPLC. Čiste frakcije su spojene i liofilizovane da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (32.7 mg, čistoće 95%). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C20H20FNO6, 390.13; zabeleženo 390.2.
PRIMER 8
[0455] Praćenjem postupaka opisanih u primerima ovde, i supstitucijom odgovarajućih početnih materijala i reagenasa, pripremljena su sledeća jedinjenja:
luorobifenil-4-il)-2-hidroksimetil-4-(oksalilamino)pentanske kiseline nil-4-il)-2-hidroksimetil-4-(oksalilamino)pentanska kiselina il-4-il)-2-hidroksimetil-4-(oksalilamino)pentanska kiselina
nil-4-il)-2-hidroksimetil-4-(oksalilamino)pentanska kiselina
il-4-il)-2-hidroksimetil-4-(oksalilamino)pentanska kiselina il-4-il)-2-hidroksimetil-4-(oksalilamino)pentanska kiselina PRIMER 9
A. (2S,4R)-5-Bifenil-4-il-2-hidroksimetil-2-metil-4-(oksalilamino)pentanska kiselina
[0456]
[0457] Etil oksalil hlorid (13.1 µL, 0.1 mmol) je spojen sa etil estrom (2S,4R)-4-amino-5-bifenil-4-il-2-hidroksimetil-2-metilpentanske kiseline (40 mg, 0.1 mmol) rastvorenim u DCM (0.3 mL) i malom količinom DMF. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 20 minuta, zatim koncentrovana pod vakuumom. Dodat je 1 M vodeni rastvor NaOH (117 µL) i THF (1.5 mL) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta. Ostatak je rastvoren u AcOH i prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (8 mg, čistoće 95%). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C21H23NO6, 386.15; zabeleženo 386.0.
B. Etil estar (2S,4R)-5-Bifenil-4-il-2-hidroksimetil-2-metil-4-(oksalilamino)pentanske kiseline
[0458]
[0459] Oksalil hlorid (12.4 µL, 0.1 mmol) i t-butil alkohol (13.1 µL) su spojeni u etru (0.3 mL) pod azotom na 0°C. Dobijena smeša je mešana u trajanju od 30 minuta na sobnoj temperaturi. Rastvarač je isparavan pod vakuumom da bi se formirao t-butil estar hloro-okso-sirćetne kiseline, koji je zatim rastvoren u DCM (0.7 mL) i spojen sa etil estra (2S,4R)-4-amino-5-bifenil-4-il-2-hidroksimetil-2-metilpentanske kiseline (33.4 mg, 98 µmol). Dodat je Et3N (43.6 µL,) na 0°C i dobijena smeša je mešana 30 minuta na sobnoj temperaturi. Rastvarač je isparavan i ostatak je rastvoren u 1:1 TFA:DCM i mešana u trajanju od 1 časa. Dodat je AcOH i proizvod je prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (7 mg, čistoće 95%). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C23H27NO6, 414.18; zabeleženo 414.4.
PRIMER 10
(2S,4R)-5-(3’-Fluorobifenil-4-il)-2-hidroksimetil-2-metil-4-(oksalilamino)pentanska kiselina
[0460]
[0461] Etil oksalil hlorid (9.1 µL, 0.1 mmol) je spojen sa (2S,4R)-4-amino-5-(3’-fluorobifenil-4-il)-2-hidroksimetil-2-metilpentanskom kiselinom (27 mg, 0.1 mmol) rastvorenom u DCM (0.2 mL) i malom količinom DMF. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 20 minuta. Rastvarač je isparavan i dodat je 10 M vodeni rastvor NaOH (81.5 µL), i THF (1.0 mL) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta. Ostatak je rastvoren u AcOH i prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (6 mg, čistoće 95%). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C21H22FNO6, 404.14; zabeleženo 404.4.
PRIMER 11
[0462] Praćenjem postupaka opisanih u primerima ovde, i supstitucijom odgovarajućih početnih materijala i reagenasa, pripremljena su sledeća jedinjenja:
1. (2S,4R)-5- Fluorobifenil-4-il)-2-hidroksimetil-2-metil-4--(oksalilamino)pentanska kiselina
2. (2S,4R)-5- Hloro-2’-fluorobifenil-4-il)-2-hidroksimetil-2-metil-4-(oksalilamino)pentanska kiselina
3. (2S,4R)-5- Fluorobifenil-4-il)-2-hidroksimetil-2-metil-4-(oksalilamino)pentanska kiselina
4. (2S,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksimetil-4-(izobutoksioksalil-amino)-2-metilpentanska kiselina
PRIMER 12
3-(N-Bifenil-4-ilmetil-N’-oksalilhidrazino)-2-hidroksi-2-metilpropionska kiselina
[0463]
[0464] Metil estar 3-(N-Bifenil-4-ilmetil-N’-t-butoksikarbonilhidrazino)-2-hidroksi-2-metilpropionske kiseline (0.1 g, 241 µmol) je rastvoren u DCM (1.0 mL), zatim je dodata TFA (1.0 mL) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 čas. Smeša je koncentrovana i ostatak je rastvoren u DMF (2.00 mL). Dodat je DIPEA (126 µL, 724 µmol), a zatim etil oksalil hlorid (29.6 µL, 265 µmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi sve dok reakcija nije završena (~3 časa). Smeša je koncentrovana i ostatak je rastvoren u THF (1.5 mL), zatim je dodat litijum hidroksid monohidrat (101 mg, 2.4 mmol) u vodi (1.50 mL) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta. Reakcija je ugašena sa AcOH i rastvor je koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću preparativne HPLC (10-70% MeCN/H2O) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (10.9 mg, čistoće 95%). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C19H20N2O6, 373.13; zabeleženo 373.2.
PRIMER 13
(R)-3-[N-(3’-Hlorobifenil-4-ilmetil)-N’-oksalilhidrazino]-2-hidroksipropionska kiselina
[0465]
[0466] Etil estar (R)-3-[N-(3’-Hlorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroksi-propionske kiseline (70 mg, 0.2 mmol) je rastvoren u DCM (1.5 mL), zatim je dodat etil oksalil hlorid (24.7 µL, 221 µmol) i DIPEA (69.9 µL, 401 µmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi sve dok reakcija nije završena (~10 minuta). Smeša je koncentrovana pod vakuumom. Dodat je 1 M vodeni rastvor litijum hidroksida (1.6 mL, 1.6 mmol) i EtOH (1.5 mL) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi sve dok reakcija nije završena (~2 časa). Reakcija je ugašena sa AcOH i rastvarač je isparavan. Ostatak je rastvoren u AcOH/MeCN i prečišćen pomoću preparativne HPLC. Čiste frakcije su spojene i liofilizovane da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (8.3 mg, čistoće 95%). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C18H17ClN2O6, 393.08; zabeleženo 393.2.
PRIMER 14
A. (R)-3-[N- Hloro-2’-fluorobifenil-4-ilmetil)-N’-oksalilhidrazinol-2-hidroksipropionska kiselina
[0467]
[0468] Eil estar (R)-2-[N-(4-bromobenzil)-N’-etoksioksalilhidrazino]-1-etoksikarboniletil estra oksalne kiseline (675 mg, 1.3 mmol) je spojen sa 5-hloro-2-fluorofenilbornom kiselinom (273 mg, 1.6 mmol) i K2CO3(541 mg, 3.9 mmol) u EtOH (4.6 mL, 78.3 mmol) i vodi (1.2 mL, 65.2 mmol). Dobijena smeša je postavljena pod atmosferu azota i zatim je dodat SilicaCat®DPP-Pd (0.28 mmol/g punjenje; 466 mg, 130 µmol). Smeša je mikrotalasno obrađena na 120°C u trajanju od 10 minuta, zatim filtrirana i isparavana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (40 mg). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C18H16ClFN2O6, 411.07; zabeleženo 411.0.
B. Etil estar (R)-3-[N- Hloro-2’-fluorobifenil-4-ilmetil)-N’-oksalilhidrazino]-2-hidroksipropionske kiseline
[0469]
[0470] ~1M rastvor t-butil oksalil hlorida u DCM (136 µL) dodat je u mešani rastvor etil estra
hloro-2’-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroksipropionske kiseline (HCl so; 55.0 mg, 136 µmol) u DCM (1.3 mL, 20 mmol) na 0°C. Posle mešanja na sobnoj temperaturi u trajanju od 2 časa, ukapavanjem je dodat DIPEA (11.9 µL, 68 µmol) u DCM rastvoru (80 µL). Posle jedne minute, dodata je nova količina DIPEA (10 µL) u DCM (80 µL) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Smeša je koncentrovana i dobijeni ostatak je prečišćen pomoću „flash“ hromatografije (4g silika gela, 0-100% EtOAc/heksani). Željene frakcije su spojene i koncentrovane da bi se proizvelo bezbojno ulje (60 mg). Porcija ovog ulja (20 mg) je tretirana sa 1:1 smešom od DCM:TFA (0.2 mL) na sobnoj temperaturi u trajanju od 20 minuta. Smeša je koncentrovana, ostatak je rastvoren u 50% vodi/AcOH (1.5 mL), filtriran i prečišćen pomoću reverzno fazne preparativne da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (10 mg) kao TFA so. MS m/z [M+H]<+>izrač. za C20H20ClFN2O6, 439.10; zabeleženo 439.4.
C. (R)-3-[N- Hloro-2’-fluorobifenil-4-ilmetil)-N’-izobutoksioksalilhidrazinol-2-hidroksipropionska kiselina
[0471]
[0472] Izobutil estar hloro-okso-sirćetne kiseline je pripremljen dodavanjem oksalil hlorida (21 µL, 252 µmol) u rastvor izobutanola (21 µL, 226 µmol) u etru (206 µL, 2.0 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 min i zatim isparavana.
[0473] Izobutil estar hloro-okso-sirćetne kiseline je zatim dodat u rastvor 2-okso-2-feniletil estra (R)-3-[N-
Hloro-2’-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroksipropionske kiseline (23.0 mg, 50 µmol) u DCM (413 µL, 6.4 mmol) na 0°C. Dobijena smeša je mešana na 0°C u trajanju od 15 minuta. Zatim je dodat zasićeni vodeni rastvor NaHCO3i slojevi su razdvojeni. Vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM. DCM slojevi su spojeni, sušeni preko MgSO4i koncentrovani da bi se proizvela bistra žuta tečnost. Cink (164 mg, 2.5 mmol) je dodat u rastvor ove žute tečnosti u AcOH (172 µL, 3.0 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 10 minuta. Smeša je filtrirana upotrebom AcOH i vode, rastvarači su isparavani in vacuo, i ostatak je prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (9.0 mg). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C22H24ClFN2O6, 467.13; zabeleženo 467.1
D. (R)-3-[N- Hloro-2’-fluorobifenil-4-ilmetil)-N’-(2,2-difluoropropoksioksalil)-hidrazino]-2-hidroksipropionska kiselina
[0475] 2,2-Difluoropropil oksalil hlorid je pripremljen dodavanjem oksalil hlorida (21 µL, 252 µmol) u rastvor 2,2-difluoropropanola (21.8 mg, 226 µmol) u etru (206 µL, 2.0 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 15 minuta i zatim isparavana.
[0476] 2,2-Difluoropropil oksalil hlorid je zatim dodat u rastvor 2-okso-2-feniletil estra (R)-3-[N- Hloro-2’-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroksipropionske kiseline (23.0 mg, 50 µmol) u DCM (413 µL, 6.4 mmol) na 0°C. Dobijena smeša je mešana na 0°C u trajanju od 15 minuta. Zatim je dodat zasićeni vodeni rastvor NaHCO3i slojevi su razdvojeni. Vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM. DCM slojevi su spojeni, sušeni preko MgSO4, i koncentrovani da bi se proizvela bistra žuta tečnost. Cink (164 mg, 2.5 mmol) je dodat u rastvor ove žute tečnosti u AcOH (172 µL, 3.0 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 10 minuta. Smeša je filtrirana upotrebom AcOH i vode, rastvarači su isparavani in vacuo, i ostatak je prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (1.1 mg). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C21H20ClF3N2O6, 489.10; zabeleženo 489.0.
E. 5-Metil-2-okso-[1,3]dioksol-4-ilmetil estar (R)-3-[N- Hloro-2’-fluorobifenil-4-ilmetil)-N’-oksalilhidrazino]-2-hidroksipropionske kiseline
[0477]
[0478] U rastvor 5-metil-2-okso-[1,3]dioksol-4-ilmetil estra (R)-3-[N-(5’-hloro-2’-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroksipropionske kiseline (350 mg, 780 µmol) u anhidrovanom DCM (15 mL) dodat je tbutil oksalil hlorid (193 mg, 1.2 mmol) i DIPEA (302 mg, 2.3 mmol) na 0°C. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 5 časova. Smeša je zatim isprana zasićenim vodenim rastvorom NaCl (2x30 mL) i ekstrahovana sa DCM (3x50 mL). Spojeni organski slojevi su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4, i koncentrovani in vacuo da bi se proizvela bela čvrsta supstanca (300 mg). LC-MS: 523 [M-tBu+H]<+>.
[0479] Ova čvrsta supstanca (100 mg, 170 µmol) je rastvorena u TFA (5 mL) i DCM (15 mL). Dobijena smeša je mešana preko noći. Smeša je isparavana in vacuo, i ostatak je prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (20 mg. LC-MS: 523.1 [M+H]<+>.<1>H-NMR: (DMSO-d6): δ 2.14 (s, 3H), 3.17-3.16 (m, 2 H), 4.11-4.08 (m, 2 H), 4.26 (br, 1 H), 4.98 (br, 2 H), 5.50 (br, 1 H), 7.58-7.36 (m, 7 H), 9.94 (s, 1 H), 13.8 (br, 1 H).
F. (R)-3-[N- Hloro-2’-fluorobifenil-4-ilmetil)-N’-etoksioksalilhidrazino]-2-hidroksipropionska kiselina
[0480]
[0481] Etil oksalil hlorid (12.4 µL, 111 µmol) je dodat u rastvor 2-okso-2-feniletil estra (R)-3-[N-(5’-hloro-2’-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroksipropionske kiseline (23.0 mg, 50 µmol) u DCM (413 µL, 6.4 mmol) na 0°C i dobijena smeša je mešana na 0°C u trajanju od 15 minuta. Zatim je dodat zasićeni vodeni rastvor NaHCO3(1 mL) i slojevi su razdvojeni. Vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (2x2 mL). DCM slojevi su spojeni, sušeni preko MgSO4, i koncentrovani. Cink (164 mg, 2.5 mmol) je dodat u rastvor ovog ostatka u AcOH (172 µL, 3.0 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 10 minuta. Smeša je filtrirana i ostatak je prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (10 mg). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C20H20ClFN2O6, 439.10; zabeleženo 439.1.
G.2,2-Difluoropropil estar (R)-3-[N- Hloro-2’-fluoro-ifenil-4-ilmetil)-N’-oksalilhidrazino]-2-hidroksipropionske kiseline
[0482]
[0483](R)-3-[N’-t-Butoksioksalil-N-(5’-hloro-2’-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]2-hidroksi-propionska kiselina (15.0 mg, 32 µmol) je spojena sa HOBt (26.0 mg, 193 µmol) i EDC (34 µL, 0.2 mmol) u DCM (0.2 mL, 4 mmol). Rastvor je mešan u trajanju od 10 minuta i dodat je 2,2-difluoropropanol (24.7 mg, 257 µmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi i praćena je da bi se utvrdilo kada je završena. Posle 2 časa, smeša je koncentrovana rotacionim isparavanjem i rastvarač je uklonjen in vacuo. Dobijeni ostatak je rastvoren u DCM (124 µL, 1.9 mmol). Dodata je TFA (124 µL, 1.6 mmol) i dobijena smeša je mešana u trajanju od 2 časa. Rastvarač je uklonjen in vacuo i ostatak je prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (2.2 mg). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C21H20ClF3N2O6, 489.10; zabeleženo 489.1.
H. Izobutil estar (R)-3-[N- Hloro-2’-fluorobifenil-4-ilmetil)-N’-oksalilhidrazino]-2-hidroksipropionske kiseline
[0484]
[0485] U smeši etil estra (R)-3-[N-(5’-hloro-2’-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroksipropionske kiseline (HCl so; 500.0 mg, 1.3 mmol) u DCM (6.0 mL, 94 mmol) na sobnoj temperaturi dodat je di-t-butildikarbonat (342 µL, 1.5 mmol) i DIPEA (216 µL, 1.3 mmol). Posle mešanja na sobnoj temperaturi preko noći, smeša je koncentrovana i ostatak je prečišćen pomoću „flash“ hromatografije (12g silika gela, 0-50% EtOAc/heksani). Željene frakcije su spojene i koncentrovane da bi se dobilo svetlo žuto ulje. Ovaj uljasti ostatak je rastvoren u MeOH (6.0 mL, 150 mmol) i vodi (1.0 mL, 56 mmol), zatim tretiran sa LiOH monohidratom (104 mg, 2.5 mmol) na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 minuta. Smeša je koncentrovana i ostatak je razblažen vodom (2.0 mL) i sa EtOAc (10.0 mL), zatim zakišeljena sa 1N vodenim rastvorom HCl do pH~2.0 uz snažno mešanje. Organski sloj je ispran zasićenim vodenim rastvorom NaCl (2x2.0 mL), sušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje 1 kao bela čvrsta supstanca (528.6 mg).
[0486] Jedinjenje 1 (65.0 mg, 148 µmol) je rastvoreno u izobutil alkoholu (684 µL, 7.4 mmol). Dodat je rastvor 4.0 M HCl u 1,4-dioksanu (1.2 mL, 4.9 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 2 časa, zatim na 60°C još par sati, sve dok reakcija nije završena. Rastvarač je uklonjen in vacuo da bi se proizvelo jedinjenje 2, koje je korišćeno bez dodatnog prečišćavanja.
[0487] t-Butil oksalil hlorid je pripremljen dodavanjem oksalil hlorida (63 µL, 741 µmol) u rastvor t-butil alkohola (43 µL, 444 µmol) u etru (778 µL, 7.4 µmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 minuta, zatim koncentrovana in vacuo. Jedinjenje 2 (58.5 mg, 148 µmol) je rastvoreno u DCM (570 µL, 8.9 mmol) i dodat je tbutil oksalil hlorid. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 minuta i zatim koncentrovana in vacuo. Ostatak je rastvoren u 1:1 DCM:TFA rastvoru i mešan na sobnoj temperaturi 1 čas.
Rastvarač je uklonjen in vacuo i ostatak je prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (8.5 mg). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C22H24ClFN2O6, 467.13; zabeleženo 467.0.
I. Etil estar (R)-3-[N’-t-Butoksioksalil-N-(5’-hloro-2’-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroksipropionske kiseline
[0488]
[0489] U rastvor etil estra (R)-3-[N-(5’-hloro-2’-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroksipropionske kiseline (200 mg, 0.5 mmol) u DCM (2.0 mL) ukapavanjem je dodavan rastvor t-butil oksalil hlorida (165 mg, 1.0 mmol) na 0°C pod azotom. Dobijena smeša je mešana u trajanju od 5 minuta i zatim je ukapavanjem dodat DIPEA (130 mg, 1.0 mmol). Rastvarač je uklonjen isparavanjem, i ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (petrol etar/EtOAc=4:1) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao žuta tečnost (144 mg). LC-MS: 495 [M+H]<+>.<1>H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ 1.30 (t, J= 7.1 Hz, 3H), 1.56 (s, 9H), 3.37-3.24 (m, 2H), 4.27- 4.16 (m, 4H), 4.38-4.30 (m, 1H), 7.14-7.09 (m, 1H), 7.30-7.28 (m, 1H), 7.48-7.41 (m, 3H), 7.56-7.50 (m, 2H), 8.05 (s, 1H).
J. Etoksikarboniloksimetil estar (R)-3-[N- Hloro-2’-fluorobifenil-4-ilmetil)-N’-oksalilhidrazino]-2-hidroksipropionske kiseline
[0490]
[0491] Smeša (R)-3-[N’-t-butoksioksalil-N-(5’-hloro-2’-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroksipropionske kiseline (270 mg, 580 µmol), hlorometil etil karbonata (160 mg, 1.16 mmol), NaI (174 mg, 1.2 mmol) i 2,6-dimetilpiridina (620 mg, 5.8 mmol) u DMF (10 mL) je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Smeša je sipana u u vodu (30 mL) i smeša je zatim ekstrahovana sa EtOAc (3x30 mL). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (2x30 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4, i koncentrovani in vacuo. Sirovo jedinjenje 1 (300 mg) je korišćeno bez prečišćavanja. LC-MS: 569 [M+H]<+>.
[0492] TFA (1.0 mL) je ukapavanjem dodavana na sobnoj temperaturi u rastvor jedinjenja 1 (300 mg, 530 µmol) u DCM (5 mL). Dobijena smeša je mešana u trajanju od 2 časa na sobnoj temperaturi, i rastvarač je zatim uklonjen. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (DCM/MeOH, 10:1) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao žuta tečnost (10 mg). LC-MS: 512.9 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, MeOD) δ 1.28 (t, J=7.3 Hz, 3H), 3.24-3.28 (m, 2H), 4.18-4.20 (m, 4H), 4.41 (br, 1H), 5.80 (dd, J=11.6, 5.8 Hz, 2H), 7.22 (d, J=10.1 Hz, 1H), 7.34-7.40 (m, 1H), 7.48-7.51 (m, 5H).
K. (R)-3-[N- Hloro-2’-fluorobifenil-4-ilmetil)-N’-oksalilhidrazino]-2-hidroksipropioniloksimetil estar buterne
kiseline
[0493]
[0494] Smeša (R)-3-[N’-t-butoksioksalil-N-(5’-hloro-2’-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroksipropionske kiseline (300 mg, 430 µmol), hlorometil butirata (175 mg, 1.3 mmol), NaI (192 mg, 1.3 mmol) i 2,6-dimetilpiridina (680 mg, 6.4 mmol) u DMF (10 mL) je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Smeša je sipana u vodu (30 mL) i smeša je zatim ekstrahovana sa EtOAc (3x20 mL). Organski sloj je razdvojen, ispran zasićenim vodenim rastvorom NaCl (30 mL), sušen preko anhidrovanog Na2SO4, i koncentrovan in vacuo. Sirovo jedinjenje 1 (300 mg) je korišćeno bez prečišćavanja. LC-MS: 567[M+H]<+>.
[0495] TFA (1.0 mL) ukapavanjem je dodavana na sobnoj temperaturi u rastvor jedinjenja 1 (300 mg, 464 µmol) u DCM (5 mL). Dobijena smeša je mešana u trajanju od 2 časa na sobnoj temperaturi, i rastvarač je zatim uklonjen. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (DCM/MeOH, 10:1) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao žuto ulje (21 mg). LC-MS: 511.1[M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, MeOD) δ 0.94 (t, J=7.4 Hz, 3H), 1.62 (dd, J=14.8, 7.4 Hz, 2H), 2.33 (t, J=7.3 Hz, 2H), 3.28 (d, J=6.1 Hz, 2H), 4.14 (q, J=13.2 Hz, 2H), 4.38 (dd, J=6.0, 4.2 Hz, 1H), 5.80 (br, 2H), 7.16-7.26 (m, 1H), 7.33-7.40 (m, 1H), 7.47-7.52 (m, 5H).
L. Acetoksimetil estar (R)-3-[N- Hloro-2’-fluorobifenil-4-ilmetil)-N’-oksalilhidrazino]-2-hidroksipropionske kiseline
[0496]
[0497] Smeša (R)-3-[N’-t-butoksioksalil-N-(5’-hloro-2’-fluorobifenil-4-ilmetil)hidrazino]-2-hidroksipropionske kiseline (300 mg, 640 µmol), bromometil acetata (196 mg, 1.3 mmol), NaI (192 mg, 1.3 mmol) i 2,6-dimetilpiridina (680 mg, 6.4 mmol) u DMF (10 mL) je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Smeša je sipana u vodu (30 mL) i smeša je zatim ekstrahovana sa EtOAc (3x20 mL). Organski sloj je razdvojen, ispran zasićenim vodenim rastvorom NaCl (30 mL), sušen preko anhidrovanog Na2SO4, i koncentrovan in vacuo. Sirovo jedinjenje 1 (300 mg) je korišćeno bez prečišćavanja. LC-MS: 539 [M+H]<+>.
[0498] TFA (1.0 mL) ukapavanjem je dodavana na sobnoj temperaturi u rastvor jedinjenja 1 (300 mg, 550 µmol) u DCM (5 mL). Dobijena smeša je mešana u trajanju od 2 časa na sobnoj temperaturi, i rastvarač je zatim uklonjen. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (DCM/MeOH, 10:1) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao žuto ulje (15 mg). LC-MS: 482.9 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, MeOD) δ 2.07 (s, 3H), 3.25-3.28 (m, 2H), 4.14 (q, J=13.2 Hz, 2H), 4.38 (t, J=5.9Hz, 1H), 5.88-5.71 (m, 2H), 7.25-7.17 (m, 1H), 7.41-7.31 (m, 1H), 7.70-7.46 (m, 5H).
PRIMER 15
(2R,4S)-5-Bifenil-4-il-2-hidroksi-5-metil-4-(oksalilamino)kapronska kiselina
[0499]
[0500] Etil estar (2R,4S)-4-Amino-5-bifenil-4-il-2-hidroksi-5-metilkapronske kiseline (70 mg, 0.2 mmol) je rastvoren u DCM (5 mL) i mešan u trajanju od 2 minuta, a zatim je dodat etil oksalil hlorid (23 µL, 0.2 mmol) i DIPEA (79 mg, 0.6 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 čas, zatim isparavana pod sniženim pritiskom. Smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u EtOH, i dovoljno ekvivalenata 10N NaOH je dodato da bi se napravio bazni rastvor. Reakcija je praćena tokom 1 časa sve dok nije završena krajnja deprotekcija. Rastvor je zakišeljen sa istom zapreminom AcOH i isparavan pod sniženim pritiskom. Proizvod je zatim prečišćen upotrebom reverzno fazne hromatografije (gradijent od 10-70% MeCN da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (37 mg, čistoće 95%). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C21H23NO6, 386.15; zabeleženo 386.4.
PRIMER 16
(2S,4S)-5-Bifenil-4-il-2-hidroksimetil-5-metil-4-(oksalilamino)kapronska kiselina
[0501]
[0502] Etil estar (2S,4S)-4-Amino-5-bifenil-4-il-2-hidroksimetil-5-metilkapronske kiseline (HCl so; 40 mg, 0.1 mmol) je rastvoren u DCM i DMF (1 mL), a zatim je dodat etil oksalil hlorid (17 µL, 0.2 mmol) i DIPEA (53.3 µL, 0.3 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi sve dok reakcija nije završena (~5 minuta). Reakcija je ugašena vodom. Proizvod je ekstrahovan sa EtOAc i dobijeni organski sloj je koncentrovan. Dodat je 1 M vodeni rastvor litijum hidroksida (1.0 mL, 1.0 mmol) i EtOH (2.0 mL) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi sve dok reakcija nije završena (~2 časa). Reakcija je ugašena sa AcOH i proiozvod je prečišćen pomoću preparativne HPLC. Čiste frakcije su spojene i liofilizovane da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (19 mg, čistoće 95%). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C22H25NO6, 400.17; zabeleženo 400.2.
[0503] Dodatna jedinjenja prema pronalasku mogu biti pripremljena upotrebom sledećih početnih materijala:
Etil estar (R)-4-Amino-5-bifenil-4-il-2-hidroksi-2-metil-pentanske kiseline
[0504]
[0505] U rastvor (R)-3-bifenil-4-il-2-t-butoksikarbonilamino-propionske kiseline (50 g, 0.1 mol), Meldrumove kiseline (23.3 g, 0.2 mol) i DMAP (27.8 g, 0.2 mol) u anhidrovanom DCM (500 mL) dodavan je rastvor DCC (33.3 g, 0.2 mol) u anhidrovanom DCM (200 mL) tokom 1 časa na -5°C pod azotom. Smeša je mešana na -5°C u trajanju od 8 časova, zatim je držana u frižideru preko noći, tokom čega su istaloženi sitni kristali dicikloheksiluree. Posle filtracije, smeša je isprana sa 5% KHSO4(4x200 mL), zasićenim vodenim rastvorom NaCl (200 mL) i sušena uz držanje u frižideru sa MgSO4preko noći. Dobijeni rastvor je isparavan da bi se proizvelo sirovo jedinjenje 1 kao svetlo žuta čvrsta supstanca (68 g). LC-MS: 490 [M+Na], 957 [2M+Na].
[0506] U rastvor sirovog jedinjenja 1 (68 g, 0.1 mol) u anhidrovanom DCM (1 L) dodat je AcOH (96.8 g, 1.6 mol) na -5°C pod azotom. Smeša je mešana na -5°C u trajanju od 0.5 časova, zatim je NaBH4(13.9 g, 0.4 mol) dodavan u malim porcijama tokom 1 časa. Posle mešanja na -5°C još 1 las, dodat je zasićeni vodeni rastvor NaCl (300 mL). Organski sloj je ispran zasićenim vodenim rastvorom NaCl (2x300 mL) i vodom (2x300 mL), sušeni preko MgSO4, filtriran i koncentrovan da bi se dobio sirovi proizvod koji je dalje prečišćen hromatografijom (heksani:EtOAc=5:1) da bi se proizvelo jedinjenje 2 kao svetlo žuta čvrsta supstanca (46 g). LC-MS: 476 [M+Na], 929 [2M+Na].
[0507] U rastvor jedinjenja 2 (46 g, 0.1 mol) u tercijarnom butil alkoholu (100 mL) dodat je dimetilmetilenimonijum jodid (46.3 g, 0.3 mol) na sobnoj temperaturi pod azotom. Smeša je zagrevana do 65°C i mešana na ovoj temperaturi u trajanju od 16 časova. Posle filtracije, filtrat je koncentrovan da bi se dobio sirovi proizvod koji je dalje prečišćen hromatografijom (heksani:EtOAc=20:1~10:1) da bi se proizvelo jedinjenje 3 kao svetlo žuta čvrsta supstanca) (18 g). LC-MS: 460 [M+Na], 897 [2M+Na].
[0508] U rastvor jedinjenja 3 (18 g, 44 mmol) u acetonu (430 mL) i vodi (22 mL) dodata je Sudan crvena kao indikator. Atmosfera ozona je uvedena u smešu na 0°C sve dok nije nestala crvena boja Sudan crvena. Dodat je dimetil sulfid (45 mL) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Smeša je zatim koncentrovana i ostatak je prečišćen hromatografijom (heksani:EtOAc=15:1~7:1) da bi se proizvelo jedinjenje 4 kao svetlo žuta čvrsta supstanca (9.5 g). LC-MS: 434 [M+H], 845 [2M+H].
[0509] U rastvor jedinjenja 4 (9.5 g, 23 mmol) u anhidrovanom THF (120 mL) dodat je rastvor metilmagnezijum bromida u THF (9.2 mL, 28 mmol) na -70°C pod azotom. Smeša je mešana na -60°C u trajanju od 3 časa i reakcija je zatim ugašena zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl (50 mL). Organski sloj je razdvojen i sušen preko MgSO4. Smeša je zatim koncentrovana i ostatak je prečišćen hromatografijom (heksani:EtOAc=10:1~5:1) da bi se proizvelo jedinjenje 5 kao ulje (7.9 g). LC-MS: 450 [M+H], 877 [2M+H].
[0510] U rastvor jedinjenja 5 (7.9 g, 18.4 mmol) u anhidrovanom DCM (300 mL) pumpana je atmosfera HCl na 0°C u trajanju od 6 časova. Smeša je zatim koncentrovana i ostatak je ispran anhidrovanim Et2O da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta HCl so (5.8 g). LC-MS: 364 [M+H], 727 [2M+H].<1>H NMR (300 MHz, DMSO): δ8.00-7.97 (d, 4H), 7.67-7.62 (m, 6H), 7.47-7.28 (m, 8H), 6.32 (s, 1H), 6.09 (s, 1H), 4.13-4.06 (m, 2H), 3.95-3.78 (m, 2H), 3.60 (s, 1H), 3.22-3.08 (m, 3H), 2.95-2.65 (m, 2H), 1.99-1.79 (m, 4H), 1.30-0.87 (m, 9H).
Etil estar (R)-4-Amino-5-bifenil-4-il-2,2-dimetil-pentanske kiseline
[0511]
[0512] Rastvor t-butil estra [(S)-1-bifenil-4-ilmetil-2-(2,2-dimetil-4,6-diokso-[1,3]dioksan-5-il)-etil]-karbaminske kiseline (46 g, 0.1 mol) u anhidrovanom toluenu (300 mL) je refluksovan 3 časa pod azotom. Posle isparavanja rastvarača, ostatak je prečišćen hromatografijom (heksani:EtOAc=10:1) da bi se proizvelo jedinjenje 1 kao svetlo žuta čvrsta supstanca (27 g). LC-MS: 374 [M+Na], 725 [2M+Na].
[0513] U rastvor jedinjenja 1 (6.2 g, 17.6 mmol) u anhidrovanom THF (100 mL) dodat je rastvor LiHMDS u THF (39 mL, 39 mmol) na -78°C pod azotom. Smeša je mešana na -78°C u trajanju od 2 časa, i zatim je dodat metil jodid (7.5 g, 53 mmol). Posle mešanja od 0.5 časova na -78°C, smeša je zagrevana do sobne temperature i mešana na sobnoj temperaturi 3 časa. Pošto je smeša ohlađena do -10°C, reakcija je ugašena zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl (100 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (100 mLx4). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (300 mL), sušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani da bi se proizveo sirovi proizvod koji je dalje prečišćen hromatografijom (heksani:EtOAc=10:1) da bi se proizvelo jedinjenje 2 kao svetlo žuta čvrsta supstanca (5.7 g). LC-MS: 402 [M+Na], 781 [2M+Na].
[0514] U rastvor jedinjenja 2 (5.7 g, 15 mmol) u acetonu (120 mL) dodat je 1 M NaOH (60 mL, 60 mmol) na -5°C pod azotom. Smeša je zagrevana do sobne temperature i mešana na sobnoj temperaturi 20 časova. Smeša je koncentrovana i ostatak je razblažen vodom (250 mL) i ispran sa EtOAc (150 mL). pH vodenog sloja je podešen do 2 sa 6 M HCl na 0°C, i čvrsta supstanca je filtrirana i sušena in vacuo da bi se proizvelo sirovo jedinjenje 3 kao bela čvrsta supstanca (5 g). LC-MS: 420 [M+Na], 817 [2M+Na].
[0515] U rastvor sirovog jedinjenja 3 (5 g, 12.7 mmol) u anhidrovanom EtOH (300 mL) dodat je SOCl2(13.4 mL, 190 mmol) na -30°C pod azotom. Smeša je zagrevana do sobne temperature i mešana u trajanju od 20 časova na sobnoj temperaturi. Smeša je koncentrovana, i ostatak je ispran anhidrovanim Et2O da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta HCl so (3.7 g). LC-MS: 326 [M+H], 651 [2M+H].<1>H NMR (300 MHz, DMSO): δ7.86 (s, 3H), 7.67-7.64 (m, 4H), 7.49-7.33 (m, 5H), 4.09-3.97 (m, 2H), 3.42 (m, 1H), 2.90-2.80 (m, 2H), 1.88-1.84 (m, 2H), 1.17-1.12 (m, 9H).
1-((R)-2-Amino-3-bifenil-4-il-propil)-ciklopropankarboksilna kiselina
[0517] U bočicu koja sadrži BOC-D-4,4’-bifenilalanin (11.3 g, 33.1 mmol, 1.0 ekv.), 4-dimetilaminopiridin (6.5 g, 53.0 mmol, 1.6 ekv.), 2,2-dimetil-1,3-dioksan-4,6-dion (5.3 g, 36.4 mmol, 1.1 ekv.) u DCM (100 mL) dodavan je 1M DCC u DCM (38.1 mL) na 0°C tokom 30 minuta. Smeša je održavana na 0°C u trajanju od 6 časova i dobijeni talog je otfiltriran. Filtrat je ispran 10% vodenim rastvorom KHSO4(2x50 mL), zatim sušen. Rastvor je zakišeljen sa AcOH (20 mL) na 0°C i natrijum borohidrid (3.1 g, 82.7 mmol, 2.5 ekv.) je dodavan tokom 30 minuta u 3 porcije. Smeša je održavana na 0°C u trajanju od 3 časa, isprana vodom i sušena, zatim koncentrovana pod vakuumom. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom (gradijent 0-40% EtOAc/heksana). Dodavana je Eschenmoser-ova so (15.9 g, 86.0 mmol) u t-butil alkoholu (70 mL) i dobijena smeša je mešana na 65°C preko noći. Smeša je koncentrovana i dodat je Et2O (10 mL). Organski rastvor je zatim ispran zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(10 mL) i 10% KHSO4(10 mL). Organski rastvor je sušen preko Na2SO4i koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom (gradijent 0-40% EtOAc/heksana) da bi se proizvelo jedinjenje
[0518] Trimetilsufoksonijum jodid (2.0 g, 9.2 mmol, 1.0 ekv.) u dimetil sulfoksidu (50 mL) je spojen sa NaH (366 mg, 9.2 mmol, 1.1 ekv.) i mešan u trajanju od 15 minuta na sobnoj temperaturi. U ovo je dodato jedinjenje 1 (3.6 g, 8.3 mmol, 1.0 ekv.) rastvoreno u dimetil sulfoksidu (50 mL). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvor je mešan sa zasićenim vodenim rastvorom NaCl (50 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3x10 mL), i organski sloj je ispran zasićenim vodenim rastvorom NaCl (2x50 mL) i sušen preko anhidrovanog Na2SO4. Posle isparavanja rastvarača, sirova reakcija je prečišćena hromatografijom (gradijent 0-40% EtOAc/heksana) da bi se proizvelo jedinjenje 2, t-butil estar 1-((R)-3-bifenil-4-il-2-tbutoksikarbonilaminopropil)-ciklopropankarboksilne kiseline. Dodati su TFA (200 µL) i DCM (500 µL) i dobijena smeša je mešana 30 minuta. Rastvarač je isparavan pod vakuumom i azeotropno obrađen sa toluenom (2x) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova.
ANALIZA 1
In vitro analize za kvantitativno određivanje inhibitornih potencija na humanom i pacovskom NEP, i humanom ACE
[0519] Inhibitorne aktivnosti jedinjenja na humanom i pacovskom neprilizinu (EC 3.4.24.11; NEP) i humanom angiotenzin-konvertujućem enzimu (ACE) određene su upotrebom in vitro analiza kao što su opisane u daljem tekstu.
Ekstrakcija aktivnosti NEP iz bubrega pacova
[0520] Pacovski NEP je pripremljen iz bubrega adultnih Sprague Dawley pacova. Celi bubrezi su isprani u hladnom fosfatno puferisanom fiziološkom rastvoru (PBS) i stavljeni u ledeno hladan pufer za lizu (1% Triton X-114, 150 mM NaCl, 50 mM tris(hidroksimetil)aminometan (Tris) pH 7.5; Bordier (1981) J. Biol. Chem.256: 1604-1607) u odnosu od 5 mL pufera za svaki gram bubrega. Uzorci su homogenizovani na ledu upotrebom polytron ručne drobilice za tkivo. Homogenati su centrifugirani na 1000 x g u „swinging bucket“ rotoru u trajanju od 5 minuta na 3°C. Talog je resuspendovan u 20 mL ledeno hladnog pufera za lizu i inkubiran na ledu u trajanju od 30 minuta. Uzorci (15-20 mL) su zatim postavljeni u slojevima na 25 mL ledeno hladnog amortizujućeg pufera (6% tež./zapr. saharoze, 50 mM pH 7.5 Tris, 150 mM NaCl, 0.06%, Triton X-114), zagrevani do 37°C u trajanju od 3-5 minuta i centrifugirani na 1000 x g u „swinging bucket“ rotoru na sobnoj temperaturi 3 minuta. Dva gornja sloja su aspirirana, ostavljajući viskozni uljasti talog koji sadrži obogaćenu membransku frakciju. Glicerol je dodat u koncentraciji od 50% i uzorci su čuvani na -20°C. Koncentracije proteina su kvantitativno određene upotrebom BCA detekcionog sistema sa goveđim serum albuminom (BSA) kao standardom.
Analize inhibicije enzima
[0521] Rekombinantni humani NEP i rekombinantni humani ACE su dobijeni komercijalno (R&D Systems, Minneapolis, MN, kataloški brojevi 1182-ZN i 929-ZN, respektivno). Fluorogeni peptidni suspstrat Mca-D-Arg-Arg-Leu-Dap-(Dnp)-OH (Medeiros et al. (1997) Braz. J. Med. Biol. Res. 30:1157-62; Anaspec, San Jose, CA) i Abz-Phe-Arg-Lys(Dnp)-Pro-OH (Araujo et al. (2000) Biochemistry 39:8519-8525; Bachem, Torrance, CA) su korišćeni u analizama NEP i ACE respektivno.
[0522] Analize su izvedene u 384-komornim belim providnim pločama na 37°C upotrebom fluorogenih peptidnih supstrata u koncentraciji od 10 µM u puferu za analizu (NEP: 50 mM HEPES, pH 7.5, 100 mM NaCl, 0.01% polietilen glikol sorbitan monolaurat (Tween-20), 10 µM ZnSO4; ACE: 50 mM HEPES, pH 7.5, 100 mM NaCl, 0.01% Tween-20, 1 µM ZnSO4). Odgovarajući enzimi su korišćeni u koncentracijama koje su rezultirale u kvantitativnoj proteolizi 1 µM supstrata posle 20 minuta na 37°C.
[0523] Test jedinjenja su analizirana u opsegu koncentracija od 10 µM do 20 pM. Test jedinjenja su dodata u enzime i inkubirana 30 minuta na 37°C pre početka reakcije dodavanjem supstrata. Reakcije su završene posle 20 minuta inkubacije na 37°C dodavanjem glacijalne sirćetne kiseline do krajnje koncentracije od 3.6% (zapr./zapr.).
[0524] Ploče su očitavane na fluorometru sa talasnim dužinama ekscitacije i emisije podešenim do 320 nm i 405 nm, respektivno. Konstante inhibicije su dobijene pomoću nelinearne regresije rezultata upotrebom jednačine (GraphPad Software, Inc., San Diego, CA):
gde ν je stopa reakcije, ν0je neinhibirana stopa reakcije, I je koncentracija inhibitora i K’ je vidljiva konstanta inhibicije.
[0525] Jedinjenja prema pronalasku su testirana u ovoj analizi i nađeno je da imaju pKivrednosti na humanom NEP kao što sledi.
Uopšteno, ili jedinjenja prolekovi nisu inhibirala enzim u ovoj in vitro analizi, ili prolekovi nisu testirani (n.d.) s obzirom na to da se aktivnost ne bi očekivala.
n.d. = nije određeno ANALIZA 2
Farmakodinamička (PD) analiza za aktivnost ACE i NEP kod anesteziranih pacova
[0526] Mužjaci, Sprague Dawley, normotenzivnih pacova su anestezirani sa 120 mg/kg (i.p.) inaktina. Pošto su anestezirani, jugularna vena, karotidna arterija (PE 50 cevčica) i kateteri bešike (PE 50 cevčica sa osvetljenjem) su kanulirani i izvedena je traheotomija (Teflonska igla, veličine 14 gauge) da bi se olakšala spontana respiracija. Životinjama je zatim obezbeđen 60-minutni period stablizacije i držane su sa konstantnom infuzijom sa 5 mL/kg/h fiziološkog rastvora (0.9%), kao bi ih održavali hidriranim i kako bi se obezbedila proizvodnja urina. Telesna temperatura je održavana tokom eksperimenta upotrebom aparata za zagrevanje. Na kraju 60-minutnog perioda stabilizacije, životinje su dozirane intravenski (i.v.) sa dve doze AngI (1.0 µg/kg, za aktivnost inhibitora ACE) sa razmakom od 15 minuta. Posle 15 minuta od druge doze AngI, životinje su tretirane vehikulumom ili test jedinjenjem. Pet minuta kasnije, životinje su dodatno tretirane bolus i.v. injekcijom atrijalnog natriuretičkog peptida (ANP; 30 µg/kg). Sakupljanje urina (u prethodno izmerenim eppendorf epruvetama) je započeto neposredno posle tretmana sa ANP i nastavljeno 60 minuta. 30 i 60 minuta posle početka sakupljanja urina, životinje su ponovo izložene AngI. Merenja krvnog pritiska su izvedena upotrebom Notocord sistema (Kalamazoo, MI). Uzorci urina su zamrznuti na -20°C do njihove upotrebe za cGMP analizu. Koncentracije cGMP u urinu su određivane pomoću enzimske imunološke analize upotrebom komercijalnog kompleta (Assay Designs, Ann Arbor, Michigan, Cat. No.901-013). Zapremina urina je određivana gravimetrijski. Urinarni izlaz cGMP je izračunavan kao proizvod izlaza urina i koncentracije cGMP u urinu. Inhibicija ACE je procenjivana putem kvantitativnog određivanja % inhibicije odgovora presora na AngI. Inhibicija NEP je procenjivana putem kvantitativnog određivanja pojačanja ANP-indukovanog povećanja urinarnog izlaza cGMP.
ANALIZA 3
In Vivo procena antihipertenzivnih efekata u modelu svesne SHR hipertenzije
[0527] Spontano hipertenzivnim pacovima (SHR, 14-20 nedelja starosti) je obezbeđeno minimalno 48 časova aklimatizacije po dolasku na mesto testiranja sa slobodnim pristupom hrani i vodi. Za beleženje krvog pritiska, ovim životinjama su hirurški implantirani mali glodarski radiopredajnici (telemetrijska jedinica; DSI Modeli TA11PA-C40 ili C50-PXT, Data Science Inc., USA). Vrh katetera povezan za predajnik je umetnut u descendentnu aortu iznad ilijačne bifurkacije i pričvršćen lepkom za tkiva. Predajnik je držan peritonealno i pričvršćen za abdominalni zid prilikom zatvaranja abdominalnog reza sa ne-apsorbujućim šavom. Spoljašnja koža je zatvorena šavom i kopčama. Omogućeno je da životinje oporave sa odgovarajućom post-operativnom negom. Na dan eksperimenta, životinje u njihovim kavezima su postavljene na vrh telemetrijskih prijemnih jedinica za aklimatizaciju na testirajuću sredinu i osnovno merenje rezultata. Posle najmanje 2 časa od početka osnovnog merenja, životinje su zatim dozirane vehikulumom ili test jedinjenjem i praćene do 24 časa posle doze za merenje krvnog pritiska. Rezultati su beleženi kontinuirano tokom trajanja studije upotrebom Notocord softvera (Kalamazoo, MI) i čuvani kao elektronski digitalni signali. Mereni parametri su krvni pritisak (sistolni, dijastolni i srednji arterijski pritisak) i puls.
ANALIZA 4
In Vivo procena antihipertenzivnih efekata u modelu svesnih pacova sa hipertenzijom izazvanom sa DOCA-soli
[0528] CD pacovima (mužjaci, adulti, 200-300 grama, Charles River Laboratory, USA) je omogućeno minimalno 48 časova aklimatizacije posle dolaska na mesto testiranja pre njihovog postavljanja na ishranu sa visokim sadržajem soli. Jednu nedelju posle početka ishrane sa visokim sadržajem soli (8% u hrani ili 1% NaCl u vodi za piće), pelet deoksikortikosteron acetata (DOCA) (100 mg, vreme oslobađanja 90 dana, Innovative Research of America, Sarasota, FL) je implantiran subkutano i izvedena je unilateralna nefrektomija. Sada, životinjama su takođe hirurški implantirani mali glodarski radiopredajnici za merenje krvnog pritiska (videti Analizu 3 za detalje). Životinjama je omogućeno da se oporave sa odgovarajućom post-operativnom negom. Dizajn studije, beleženje rezultata i izmerenih parametara je slično onome opisanom za Analizu 3.
ANALIZA 5
In Vivo procena antihipertenzivnih efekata u modelu hipertenzije kod svesnih pacova sa Dahl/SS
[0529] Mužjacima, pacova osetljivih na Dahl so (Dahl/SS, 6-7 nedelja starosti iz Charles River Laboratory, USA) omogućeno najmanje 48 časova aklimatizacije po dolasku na mesto tetiranja pre njihovog postavljanja na ishranu sa visokim sadržajem soli 8% NaCl (TD.92012, Harlan, USA), zatim su im hirurški implantirani mali glodarski radiopredajnici za merenje krvnog pritiska (videti Analizu 3 za detalje). Životinjama je omogućeno da se oporave sa odgovarajućom post-operativnom negom. Približno 4 do 5 nedelja od početka ishrane sa visokim sadržajem soli, očekivalo sa de ove životinje postanu hipertenzivne. Pošto je nivo hipertenzije potvrđen, ove životinje su korišćene za studiju uz nastavak ishrane sa visokim sadržajem soli da bi se održavao njihov hipertenzivni nivo. Dizajn studije, beleženje rezultata i izmerenih parametara su slični onoma opisanim u Analizi 3.
KOMPARATIVAN PRIMER 1
[0530]
(2R,4S)-5-Bifenil-4-il-2-metil-4-(oksalil-amino)-pentanska kiselina (Komparativno jedinjenje A; R = -C(O)-COOH)
[0531] Etil estar (2R,4S)-4-Amino-5-bifenil-4-il-2-metil-pentanske kiseline (HCl so; 527 mg, 0.2 mmol) i etil oksalil hlorid (18.4 µL, 1.1 ekv.) su spojeni sa DIPEA (52.2 µL, 0.3 mmol) u DMF (0.3 mL)/DCM (0.3 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi sve dok reakcija nije završena. Rastvarač je uklonjen i ostatak je rastvoren u EtOH (750 µL) i 1 M vodenom rastvoru NaOH (750 µL), i mešan na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvarač je uklonjen i ostatak je prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo komparativno jedinjenje A (11.2 mg, 100% čistoće). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C20H21NO5, 356.14; zabeleženo 356.2.
(2R,4S)-5-Bifenil-4-il-4-(3-karboksi-propionilamino)-2-metil-pentanska kiselina (komparativno jedinjenje B; R = -C(O)-(CH2)2-COOH)
[0532] Etil estar (2R,4S)-5-Bifenil-4-il-4-(3-karboksi-propionilamino)-2-metil-pentanske kiseline (Na so; 400 mg, 923 µmol) je mešan sa EtOH (7 mL, 0.1 mol), zatim sa THF (6 mL, 0.1 mol). Zatim je dodat 1 M vodeni rastvor NaOH (2.8 mL, 2.8 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 4 časa i zatim koncentrovana. Proizvod je prečišćen pomoću preparativne HPLC (10-60% MeCN:voda sa/0.5% TFA) da bi se proizvelo komparativno jedinjenje B (150 mg, 97% čistoće). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C22H25NO5, 384.17; zabeleženo 384.6.
[0533] Komparativna jedinjenja A i B su testirana kao što je opisano u Analizi 1 i zabeleženo je da imaju pKivrednosti na humanom NEP kao što sledi:
[0534] Rezultati pokazuju da komparativna jedinjenja A i B imaju iste pKivrednosti za inhibiciju NEP.
KOMPARATIVAN PRIMER 2
[0535]
(R)-5-Bifenil-4-il-4-(2-karboksiacetilamino)-2-hidroksipentanska kiselina (Komparativno jedinjenje C; R = -C(O)-CH2-COOH)
[0536] Etil estar (R)-4-Amino-5-bifenil-4-il-2-hidroksipentanske kiseline (HCl so; 60.3 mg, 0.2 mmol) i metil malonil hlorid (21 µL, 0.2 mmol) su spojeni sa DIPEA (84 µL, 0.5 mmol) u DMF (5 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi sve dok reakcija nije završena (1 čas). Rastvarač je uklonjen i ostatak je rastvoren u MeOH (3 mL) i 10N NaOH (250 µL), i mešan na 60°C sve dok reakcija nije završena (1 čas). Dodata je glacijalna sirćetna kiselina (250 µL) i proizvod je isparavan pod sniženim pritiskom i prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo komparativno jedinjenje C (6.3 mg, 98% čistoće). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C20H21NO6, 372.14; zabeleženo 372.2.
(R)-5-Bifenil-4-il-4-(3-karboksipropionilamino)-2-hidroksipentanska kiselina (komparativno jedinjenje D; R = -C(O)-(CH2)2-COOH)
[0537] Etil estar (R)-4-Amino-5-bifenil-4-il-2-hidroksipentanske kiseline (HCl so; 60.3 mg, 0.2 mmol) i 3-(karbometoksi)propionil hlorid (24 µL, 0.2 mmol) su spojeni sa DIPEA (84 µL, 0.5 mmol) u DMF (5 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi sve dok reakcija nije završena (1 čas). Rastvarač je uklonjen i ostatak je rastvoren u MeOH (3 mL) i 10N NaOH (250 µL), i mešan na 60°C sve dok reakcija nije zvaršena (1 čas). Dodata je glacijalna sirćetna kiselina (250 µL) i proizvod je isparavan pod sniženim pritiskom i prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo komparativno jedinjenje D (8.0 mg, 100% čistoće). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C21H23NO6, 386.15; zabeleženo 386.2.
(R)-5-Bifenil-4-il-4-(4-karboksibutirilamino)-2-hidroksipentanska kiselina (komparativno jedinjenje E; R = -C(OHCH2)3-COOH)
[0538] Etil estar (R)-4-Amino-5-bifenil-4-il-2-hidroksipentanske kiseline (HCl so; 60.3 mg, 0.2 mmol) i metil 5-hloro-5-oksovalerat (31.7 mg, 0.2 mmol) su spojeni sa DIPEA (84 µL, 0.5 mmol) u DMF (5 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi sve dok reakcija nije završena (1 čas). Rastvarač je uklonjen i ostatak je rastvoren u MeOH (3 mL) i 10N NaOH (250 µL), i mešan na 60°C sve dok reakcija nije završena (1 čas). Dodata je glacijalna sirćetna kiselina (250 µL) i proizvod je isparavan pod sniženim pritiskom i prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo komparativno jedinjenje E (8.7 mg, 100% čistoće). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C22H25NO6, 400.17; zabeleženo 400.2.
[0539] Jedinjenje iz Primera 1 i komparativna jedinjenja C, D i E su testirana kao što je opisano u Analizi 1 i nađeno je da imaju pKivredosti na humanom NEP kao što sledi:
[0540] Rezultati pokazuju da je jedinjenje iz Primera 1 imalo veću potenciju na NEP nego komparativna jedinjenja C, D i E.
KOMPARATIVAN PRIMER 3
[0541]
(2S,4S)-5-Bifenil-4-il-4-(2-karboksi-acetilamino)-2-hidroksimetilpentanska kiselina (Komparativno jedinjenje F; R = -C(O)-CH2-COOH)
[0542] (2S,4S)-4-Amino-5-bifenil-4-il-2-hidroksimetil-pentanska kiselina (HCl so; (5 mg, 10 µmol) je rastvorena u 1 M vodenom rastvoru NaOH (119 µL, 119 µmol) i lagano dodata u rastvor metil malonil hlorida (1.9 µL, 18 µmol) i MeCN (0.5 mL, 10 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi sve dok reakcija nije završena (preko noći) i proizvod je prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo komparativno jedinjenje F (1.0 mg, 95% čistoće). MS mlz [M+H]<+>izrač. za C21H23NO6, 386.15; zabeleženo 386.1.
(2S,4S)-5-Bifenil-4-il-4-(3-karboksi-propionilamino)-2-hidroksimetilpentanska kiselina (Komparativno jedinjenje G; R = -C(OHCH2)2-COOH)
[0543] (2S,4S)-4-Amino-5-bifenil-4-il-2-hidroksimetil-pentanska kiselina (HCl so; (5 mg, 10 µmol) je rastvorena u 1 M vodenom rastvoru NaOH (119 µL, 119 µmol) i lagano dodavana u rastvor 3-(karbometoksi)propionil hlorida (2.2 µL, 18 µmol) i MeCN (0.5 mL, 10 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi sve dok reakcija nije završena (preko noći) i proizvod je prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo komparativno jedinjenje G (3.4 mg, 95% čistoće). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C22H25NO6, 400.17; zabeleženo 400.3.
(2S,4S)-5-Bifenil-4-il-4-(4-karboksi-bitirilamino)-2-hidroksimetilpentanska kiselina (Komparativno jedinjenje H; R = -C(O)-(CH2)3-COOH)
[0544] (2S,4S)-4-Amino-5-bifenil-4-il-2-hidroksimetil-pentanska kiselina (HCl so; (5 mg, 10 µmol) je rastvorena u 1 M vodenom rastvoru NaOH (119 µL, 119 µmol) i lagano dodavana u rastvor metil 5-hloro-5-oksovalerata (2.5 µL, 18 µmol) i MeCN (0.5 mL, 10 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi sve dok reakcija nije završena (preko noći) i proizvod je prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo komparativno jedinjenje H (3.0 mg, 95% čistoće). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C2,H27NO6, 414.18; zabeleženo 414.7.
[0545] Jedinjenje iz Primera 5A i komparativna jedinjenja F, G i H su testirana kao što je opisano u Analizi 1 i zabeleženo je da imaju pKivrednosti na humanom NEP kao što sledi:
[0546] Rezultati pokazuju da je jedinjenje iz Primera 5A imalo veću potenciju na NEP nego komparativna jedinjenja F, G i H.
KOMPARATIVAN PRIMER 4
[0547]
(2R,4R)-4-(2-Karboksi-acetilamino)-5-(3’-hloro-bifenil-4-il)-2-hidroksi-pentanske kiseline (Komparativno jedinjenje I; R = -C(O)-CH2-COOH)
[0548] Metil malonil hlorid (18.5 µL, 172 µmol) je dodat u rastvor etil estra (2R,4R)-4-amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (50.0 mg, 144 µmol) i DIPEA (75.1 µL, 431 µmol) u DCM (1.5 mL, 23.4 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 minuta. Smeša je zatim koncentrovana da bi se proizvela žuta tečnost.1 M vodeni rastvor LiOH (719 µL, 719 µmol) ukapavanjem je dodavan u ulje, i smeša je mešana na 60°C u trajanju od 1 časa. Smeša je koncentrovana in vacuo i dobijeni ostatak je rastvoren u AcOH (1.0 mL), prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo komparativno jedinjenje I (2.0 mg, 100% čistoće). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C20H20ClNO6, 406.10; zabeleženo 406.1.
(2R,4R)-4-(3-Karboksi-propionilamino)-5-(3’-hloro-bifenil-4-il)-2-hidroksi-pentanska kiselina (komparativno jedinjenje J; R = -C(O)-(CH2)2-COOH)
[0549] 3-(Karbometoksi)propionil hlorid (21.2 µL, 172 µmol) je dodat u rastvor etil estra (2R,4R)-4-amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (50.0 mg, 144 µmol) i DIPEA (75.1 µL, 431 µmol) u DCM (1.5 mL, 23.4 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta. Smeša je zatim koncentrovana da bi se proizvela žuta tečnost. 1 M vodeni rastvor LiOH (719 µL, 719 µmol) ukapavanjem je dodavan u ulje, i smeša je mešana na 60°C u trajanju od 1 časa. Smeša je koncentrovana in vacuo i dobijeni ostatak je rastvoren u AcOH (1.0 mL), prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo komparativno jedinjenje J (31.1 mg, 100% čistoće). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C21H22ClNO6, 420.11; zabeleženo 420.2.
(2R,4R)-4-(4-Karboksi-butirilamino)-5-(3’-hloro-bifenil-4-il)-2-hidroksi-pentanska kiselina (Komparativno jedinjenje K; R = -C(O)-(CH2)3-COOH)
[0550] Metil 5-hloro-5-oksovalerat (23.8 µL, 172 µmol) dodat je u rastvor etil estra (2R,4R)-4-amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (50.0 mg, 144 µmol) i DIPEA (75.1 µL, 431 µmol) u DCM (1.5 mL, 23.4 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 minuta. Smeša je zatim koncentrovana da bi se proizvela žuta tečnost. 1 M vodeni rastvor LiOH (719 µL, 719 µmol) ukapavanjem je dodavan u ulje, i smeša je mešana na 60°C u trajanju od 1 časa. Smeša je koncentrovana in vacuo i dobijeni ostatak je rastvoren u AcOH (1.0 mL), prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo komparativno jedinjenje K (29.2 mg, 100% čistoće). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C22H24ClNO6, 434.13; zabeleženo 434.2.
[0551] Jedinjenje iz Primera 2A i komparativna jedinjenja I, J i K su testirana kao što je opisano u Analizi 1 i zabeleženo da imaju pKivrednosti na humanom NEP kao što sledi:
[0552] Rezultati pokazuju da je jedinjenje iz Primera 2A imalo veću potenciju na NEP nego komparativna jedinjenja I, J i K.

Claims (35)

  1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje formule I:
    u kome:
    R<10>je izabran od -C1-6alkila, -O-C1-6alkila, -C3-7cikloalkila, -O-C3-7cikloalkila, fenila, -O-fenila, -NR<11>R<12>, -CH(R<15>)-NH2, -CH(R<15>)-NHC(O)O-C1-6alkila i -CH(NH2)CH2COOCH3; i R<11>i R<12>su nezavisno izabrani od H, -C1-6alkila i benzila; ili R<11>i R<12>su uzeti zajedno kao -(CH2)3-6-, -C(O)-(CH2)3-, ili -(CH2)2O(CH2)2-; R<13>je izabran od -O-C1-6alkila, -O-benzila i -NR<11>R<12>; i R<14>je -C1-6alkil ili -C0-6alkilen-C6-10aril; R<15>je H, -CH3, -CH(CH3)2, fenil ili benzil; R<2>je -OR<21>ili -CH2OR<21>, i R<3>je H ili -CH3; gde R<21>je H, -C(O)-C1-6alkil, -C(O)-CH(R<22>)-NH2, -C(O)-CH(R<22>)-NHC(O)O-C1-6alkil ili -P(O)(OR<23>)2; R<22>je H, -CH3, -CH(CH3)2, fenil, ili benzil; R<23>je H, -C1- 6alkil, ili fenil; ili R<2>je uzet zajedno sa R<1>da bi se formirao -OCR<15>R<16>- ili -CH2O-CR<15>R<16>-, i R<3>je izabran od H i -CH3, gde su R<15>i R<16>nezavisno izabrani od H, -C1-6alkila i -O-C3-7cikloalkila, ili R<15>i R<16>su uzeti zajedno tako da formiraju =O; ili R<2>je uzet zajedno sa R<3>tako da se formira -CH2-O-CH2- ili -CH2-CH2-; ili R<2>i R<3>su oba -CH3; Z je izabran od -CH- i -N-; R<4>je izabran od H, -C1-8alkila, -C1-3alkilen-O-C1-8alkila, -C1-3alkilen-C6-10arila, -C1-3alkilen-O-C6-10arila, -C1-3alkilen-C1-9heteroarila, -C3-7cikloalkila, -[(CH2)2O]1-3CH3, -C1-6alkilen-OC(O)R<40>, -C1-6alkilen-NR<41>R<42>, -C1-6alkilen-C(O)R<43>, -C0-6alkilenmorfolinila, -C1-6alkilen-SO2-C1-6alkila,
    R<40>je izabran od -C1-6alkila, -O-C1-6alkila, -C3-7cikloalkila, -O-C3-7cikloalkila, fenila, -O-fenila, -NR<41>R<42>, -CH(R<45>)-NH2, -CH(R<45>)-NHC(O)O-C1-6alkila i -CH(NH2)CH2COOCH3; i R<41>i R<42>su nezavisno izabrani od H, -C1-6alkila i benzila; ili R<41>i R<42>su uzeti zajedno kao -(CH2)3-6-, -C(O)-(CH2)3-, ili -(CH2)2O(CH2)2-; R<43>je izabran od -O-C1-6alkila, -O-benzila i -NR<41>R<42>; i R<44>je -C1-6alkil ili -C0-6alkilen-C6-10aril; R<45>je H, -CH3, -CH(CH3)2, fenil ili benzil; a je 0 ili 1; R<5>je izabran od halo, -CH3, -CF3, i -CN; b je 0 ili ceo broj od 1 do 3; svako R<6>je nezavisno izabrano od halo, -OH, -CH3, -OCH3, -CN, i -CF3; gde je svaka alkil grupa u R<1>i R<4>izborno supstituisana sa 1 do 8 fluoro atoma; i gde je metilen linker na bifenilu izborno supstituisan sa jednom ili dve -C1-6alkil grupe ili ciklopropila; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  2. 2. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time što R<1>je H.
  3. 3. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time što R<1>je izabran od -C1-8alkila, -C1-3alkilen-C6-10arila, -C1-3alkilen-C1-9heteroarila, -C3-7cikloalkila, -[(CH2)2O]1-3CH3, -C1-6alkilen-OC(O)R<10>, -C1-6alkilen-NR<11>R<12>, -C1- 6alkilen-C(O)R<13>, -C0-6alkilenmorfolinila, -C1-6alkilen-SO2-C1-6alkila, ili R<1>je uzet zajedno
  4. 4. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time što R<1>je izabran od H, -C1-8alkila, -C1-6alkilen-OC(O)R<10>, i
    gde R<10>je -C1-6alkil, -O-C1-6alkil ili -CH[R<15>]-NHC(O)O-C1-6alkil; R<14>je -C1-6alkil; R<15>je -CH(CH3)2; i svaka alkil grupa u R<1>je izborno supstituisana sa 1 do 8 fluoro atoma.
  5. 5. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 4, naznačeno time što R<1>je izabran od H, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, -(CH2)3CH3, -(CH2)6CH3,-CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, -CH2OC(O)CH3, -CH2OC(O)CH2CH3, -CH2OC(O)(CH2)2CH3, -CH2OC(O)OCH2CH3, -CH2OC(O)-CH[CH(CH3)2]-NHC(O)O-CH3, i
    gde R<14>je -CH3.
  6. 6. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 5, naznačeno time što R<2>je -OR<21>, R<3>je H, i R<21>je H; ili R<2>je -OR<21>, R<3>je -CH3, i R<21>je H; ili R<2>je -CH2OR<21>, R<3>je H, i R<21>je H; ili R<2>je -CH2OR<21>, R<3>je -CH3, i R<21>je H.
  7. 7. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 6, naznačeno time što R<4>je H.
  8. 8. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 6, naznačeno time što R<4>je izabran od -C1-8alkila, -C1- 3alkilen-OC1-8alkila, -C1-3alkilen-C6-10arila, -C1-3alkilen-O-C6-10arila, -C1-3alkilen-C1-9heteroarila, -C3-7cikloalkila, -[(CH2)2O]1-3CH3, -C1-6alkilen-OC(O)R<40>, -C1-6alkilen-NR<41>R<42>, -C1-6alkilen-C(O)R<43>, -C0-6alkilenmorfolinila, -C1-6alkilen-SO2-C1-6alkila,
  9. 9. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 6, naznačeno time što R<4>je izabran od H, -C1-8alkila, -C1- 3alkilen-OC1-8alkila, -C1-3alkilen-O-C6-10arila, -[(CH2)2O]1-3CH3, i
    gde R<44>je -C1-6alkil; i svaka alkil grupa u R<4>je izborno supstituisana sa 1 do 8 fluoro atoma.
  10. 10. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 9, naznačeno time što R<4>je izabran od H, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, -(CH2)3CH3, -C(CH3)3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -(CH2)3-O-CH2CH3, -(CH2)2-O-fenil, -(CH2)2OCH3, i
    gde R<44>je -CH3.
  11. 11. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 10, naznačeno time što a je 0, ili je 1 i R<5>je halo.
  12. 12. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 11, naznačeno time što b je 0, ili b je 1 i R<6>je halo, ili b je 2 i svaki R<6>je nezavisno izabran od halo i -CH3.
  13. 13. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time što: a je 0 i b je 0; ili a je 0, b je 1, i R<6>je 2’-fluoro, 3’-fluoro, 3’-hloro, ili 4’-flouro; ili a je 0, b je 2, i R<6>je 2’-fluoro, 5’-hloro ili 2’-metil, 5’-hloro ili 2’,5’-dihloro; ili a je 1, R<5>je 3-hloro, i b je 0; ili a je 1, R<5>je 3-hloro, b je 1, i R<6>je 3’-hloro; ili a je 1, R<5>je 3-hloro, b je 2, i R<6>je 2’-fluoro, 5’-hloro.
  14. 14. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 6, naznačeno time što R<2>je -OR<21>, R<3>je H, i R<21>je H; R<1>je izabran od H, -C1-8alkila, -C1-6alkilen-OC(O)R<10>, i
    gde R<10>je -C1-6alkil, -O-C1-6alkil ili -CH[R<15>]-NHC(O)O-C1-6alkil; R<14>je -C1-6alkil; R<15>je -CH(CH3)2; i svaka alkil grupa u R<1>je izborno supstituisana sa 1 do 8 fluoro atoma; Z je izabran od -CH- i -N-; R<4>je izabran od H, -C1-8alkila, -C1-3alkilen-O-C1-8alkila, -C1-3alkilen-O-C6-10arila, -[(CH2)2O]1-3CH3, i
    gde R<44>je -C1-6alkil; i svaka alkil gupa u R<4>je izborno supstituisana sa 1 do 8 fluoro atoma; a je 0 i b je 0; ili a je 0, b je 1, i R<6>je halo; ili a je 0, b je 2, i jedan R<6>je halo i drugi R<6>je halo ili -CH3; ili a je 1, R<5>je halo, i b je 0; ili a je 1, R<5>je halo, b je 1, i R<6>je halo; ili a je 1, R<5>je halo, b je 2, i svaki R<6>je halo; i gde je metilen linker na bifenilu izborno supstituisan sa dve -CH3grupe.
  15. 15. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 14, naznačeno time što R<1>je izabran od H, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, -(CH2)3CH3, -(CH2)6CH3,-CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, -CH2OC(O)CH3, -CH2OC(O)CH2CH3, -CH2OC(O)(CH2)2CH3, -CH2OC(O)OCH2CH3, -CH2OC(O)-CH[CH(CH3)2]-NHC(O)O-CH3, i
    gde R<14>je -CH3; R<4>je izabran od H, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, -(CH2)3CH3, -C(CH3)3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -(CH2)3-O-CH2CH3, -(CH2)2-O-fenil, -(CH2)2OCH3, i
    gde R<44>je -CH3; i a je 0 i b je 0; ili a je 0, b je 1, i R<6>je 2’-fluoro, 3’-fluoro, 3’-hloro, ili 4’-flouro; ili a je 0, b je 2, i R<6>je 2’-fluoro, 5’-hloro ili 2’-metil, 5’-hloro ili 2’,5’-dihloro; ili a je 1, R<5>je 3-hloro i b je 0; ili a je 1, R<5>je 3-hloro, b je 1, i R<6>je 3’-hloro; ili a je 1, R<5>je 3-hloro, b je 2, i R<6>je 2’-fluoro, 5’-hloro.
  16. 16. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 6, naznačeno time što R<2>je -OR<21>, R<3>je -CH3, i R<21>je H; R<1>je H ili -C1- 8alkil; Z je -N-; R<4>je H ili -C1-8alkil; i a i b su 0.
  17. 17. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 16, naznačeno time što R<1>i R<4>su H.
  18. 18. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 6, naznačeno time što R<2>je -CH2OR<21>, R<3>je H, i R<21>je H; R<1>je H ili -C1-8alkil; Z je -CH-; R<4>je H ili -C1-8alkil; a je 0 ili a je 1 i R<5>je halo; b je 0 ili b je 1 ili 2 i R<6>je halo; i gde je metilen linker na bifenilu izborno supstituisan sa dve -CH3grupe.
  19. 19. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 18, naznačeno time što R<1>je H, -CH2CH3, ili -(CH2)3CH3; R<4>je H; a je 0 ili a je 1 i R<5>je 3-hloro; b je 0 ili b je 1 i R<6>je 2’-fluoro, 3’-fluoro, 3’-hloro ili 4’-flouro.
  20. 20. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 6, naznačeno time što R<2>je -CH2OR<21>, R<3>je -CH3, i R<21>je H; R<1>je H ili -C1-8alkil; Z je -CH-; R<4>je H ili -C1-8alkil; a je 0; i b je 0, ili b je 1 i R<6>je halo.
  21. 21. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 20, naznačeno time što R<1>je H ili -CH2CH3; R<4>je H ili -CH2CH(CH3)2; i b je 0, ili b je 1 i R<6>je 2’-fluoro, 3’-fluoro, 3’-hloro ili 4’-flouro.
  22. 22. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time što R<1>je izabran od H, -C1-8alkila, -C1-6alkilen-OC(O)R<10>, i
    gde R<10>je -C1-6alkil, -O-C1-6alkil ili -CH[R<15>]-NHC(O)O-C1-6alkil; R<14>je -C1-6alkil; R<15>je -CH(CH3)2; i svaka alkil grupa u R<1>je izborno supstituisana sa 1 do 8 fluoro atoma; R<4>je izabran
    gde R<44>je -C1-6alkil; i svaka alkil grupa u R<4>je izborno supstituisana sa 1 do 8 fluoro atoma; a je 0 i b je 0; ili a je 0, b je 1, i R<6>je 2’-fluoro, 3’-fluoro, 3’-hloro ili 4’-flouro; ili a je 0, b je 2, i R<6>je 2’-fluoro, 5’-hloro ili 2’-metil, 5’-hloro ili 2’,5’-dihloro; ili a je 1, R<5>je 3-hloro, i b je 0; ili a je 1, R<5>je 3-hloro, b je 1, i R<6>je 3’-hloro; ili a je 1, R<5>je 3-hloro, b je 2, i R<6>je 2’-fluoro, 5’-hloro; i gde je metilen linker na bifenilu izborno supstituisan sa dve -CH3grupe.
  23. 23. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 22, naznačeno time što R<2>je -OR<21>ili -CH2OR<21>; i R<3>je H ili -CH3; gde R<21>je H.
  24. 24. Postupak za pripremu jedinjenja prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 23, koji sadrži korak spajanja jedinjenja formule 1 sa jedinjenjem formule 2:
    da bi se proizvelo jedinjenje formule I; gde R<1>-R<6>, a i b su kao što su definisani u patentnom zahtevu 1, i P je izabran od H i amino-zaštitne grupe izabrane od t-butoksikarbonila, tritila, benziloksikarbonila, 9-fluorenilmetoksikarbonila, formila, trimetilsilila i t-butildimetilsilila; i pri čemu postupak dalje sadrži deprotekciju jedinjenja formule 1 kada je P jednak amino zaštitnoj grupi.
  25. 25. Farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 23 i farmaceutski prihvatljiv nosač; i izborno dalje sadrži terapeutsko sredstvo izabrano od antagonista receptora za adenozin, antagonista α-adrenergičkog receptora, antagonista β1-adrenergičkog receptora, agonista β2-adrenergičkog receptora, dvostruko-delujućih antagonista β-adrenergičkog receptora/antagonista α1-receptora, sredstava koja razlažu završne proizvode uznapredovale glikozilacije, antagonista aldosterona, inhibitora aldosteron sintaze, inhibitora aminopeptidaze N, androgena, inhibitora angiotenzin-konvertujućeg enzima i dvostruko-delujućih inhibitora angiotenzin-konvertujućeg enzima/neprilizina, aktivatora i stimulatora angiotenzin-konvertujućeg enzima 2, vakcine angiotenzina-II, antikoagulanata, anti-dijabetičkih sredstava, sredstava protiv dijareje, sredstava protiv glaukoma, anti-lipidnih sredstava, antinociceptivnih sredstava, anti-trombotičnih sredstava, antagonista AT1 receptora i dvostruko-delujućih antagonista AT1 receptora/inhibitora neprilizina i multifunkcionalnih blokatora receptora za angiotenzin, antagonista receptora za bradikinin, blokatora kalcijumovih kanala, inhibitora himaze, digoksina, diuretika, agonista dopamina, inhibitora endotelinkonvertujućeg enzima, antagonista receptora za endotelin, inhibitora HMG-CoA reduktaze, estrogena, agonista i/ili antagonista receptora za estrogen, inhibitora ponovnog preuzimanja monoamina, mišićnih relaksanata, natriuretičkih peptida i njihovih analoga, antagonista receptora za klirens natriuretičkog peptida, inhibitora neprilizina, donora azot oksida, ne-steroidnih anti-inflamatornih sredstava, antagonista receptora za N-metil daspartat, agonista opioidnog receptora, inhibitora fosfodiesteraze, analoga prostaglandina, agonista receptora za prostaglandin, inhibitora renina, selektivnih inhibitora ponovnog preuzimanja serotonina, blokatora natrijumovih kanala, rastvorljivih stimulatora i aktivatora guanilat ciklaze, tricikličnih antidepresiva, antagonista receptora za vazopresin i njihovih kombinacija.
  26. 26. Farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 25, naznačena time što terapeutsko sredstvo je antagonist AT1 receptora.
  27. 27. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 23, za upotrebu u terapiji.
  28. 28. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 27, za upotrebu u lečenju hipertenzije, srčane insuficijencije ili bolesti bubrega.
  29. 29. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time što jedinjenje ima formulu:
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  30. 30. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 29, naznačeno time što R<1>je H.
  31. 31. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 29, naznačeno time što R<4>je -C1-8alkil.
  32. 32. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 29, naznačeno time što R<21>je H.
  33. 33. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 29, naznačeno time što Z je -CH-.
  34. 34. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 29, naznačeno time što a je 0.
  35. 35. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time što jedinjenje je (2S,4R)-5-(5’-hloro-2’-fluorobifenil-4-il)-2-hidroksimetil-2-metil-4-(oksalilamino)pentanska kiselina ili njegova farmaceutski prihvatljiva so. Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Beograd, Kneginje Ljubice 5
RS20170428A 2011-11-02 2012-11-01 Amidi oksalne kiseline kao inhibitori neprilizina, njihova farmaceutska kompozicija i njihova priprema RS55947B1 (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201161554625P 2011-11-02 2011-11-02
EP12783830.8A EP2773335B1 (en) 2011-11-02 2012-11-01 Oxalic acid amides as neprilysin inhibitors, pharmaceutical composition thereof and preparation thereof
PCT/US2012/063036 WO2013067163A1 (en) 2011-11-02 2012-11-01 Neprilysin inhibitors

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS55947B1 true RS55947B1 (sr) 2017-09-29

Family

ID=47146772

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20170428A RS55947B1 (sr) 2011-11-02 2012-11-01 Amidi oksalne kiseline kao inhibitori neprilizina, njihova farmaceutska kompozicija i njihova priprema

Country Status (31)

Country Link
US (7) US8691868B2 (sr)
EP (1) EP2773335B1 (sr)
JP (1) JP5944010B2 (sr)
KR (1) KR102013200B1 (sr)
CN (1) CN103906509B (sr)
AR (1) AR088618A1 (sr)
AU (1) AU2012332422B2 (sr)
BR (1) BR112014010576B8 (sr)
CA (1) CA2850953C (sr)
CO (1) CO6940421A2 (sr)
CY (1) CY1118909T1 (sr)
DK (1) DK2773335T3 (sr)
ES (1) ES2625628T3 (sr)
HR (1) HRP20170646T1 (sr)
HU (1) HUE034647T2 (sr)
IL (1) IL232038A (sr)
LT (1) LT2773335T (sr)
ME (1) ME02726B (sr)
MX (1) MX343753B (sr)
MY (1) MY165087A (sr)
PH (1) PH12014500987A1 (sr)
PL (1) PL2773335T3 (sr)
PT (1) PT2773335T (sr)
RS (1) RS55947B1 (sr)
RU (1) RU2629930C2 (sr)
SG (2) SG10201509182YA (sr)
SI (1) SI2773335T1 (sr)
SM (1) SMT201700257T1 (sr)
TW (1) TWI560172B (sr)
WO (1) WO2013067163A1 (sr)
ZA (1) ZA201402636B (sr)

Families Citing this family (35)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
HUE028051T2 (hu) 2010-12-15 2016-11-28 Theravance Biopharma R&D Ip Llc Neprilizin inhibitorok
CA2819153A1 (en) 2010-12-15 2012-06-21 Theravance, Inc. Neprilysin inhibitors
JP5959066B2 (ja) 2011-02-17 2016-08-02 セラヴァンス バイオファーマ アール＆ディー アイピー， エルエルシー ネプリライシン阻害剤としての置換アミノ酪酸誘導体
JP5959065B2 (ja) 2011-02-17 2016-08-02 セラヴァンス バイオファーマ アール＆ディー アイピー， エルエルシー ネプリライシン阻害剤としての置換アミノ酪酸誘導体
JP5959074B2 (ja) 2011-05-31 2016-08-02 セラヴァンス バイオファーマ アール＆ディー アイピー， エルエルシー ネプリライシン阻害剤
CN202237001U (zh) * 2011-07-01 2012-05-30 龙泰兴业有限公司 具防护围网的跳床结构
TWI560172B (en) 2011-11-02 2016-12-01 Theravance Biopharma R&D Ip Llc Neprilysin inhibitors
US8905898B2 (en) * 2012-03-09 2014-12-09 Samuel Chen Trampoline enclosure net
CA2871292A1 (en) * 2012-05-31 2013-12-05 Theravance Biopharma R&D Ip, Llc Nitric oxide donor neprilysin inhibitors
WO2013184898A1 (en) 2012-06-08 2013-12-12 Theravance, Inc. Neprilysin inhibitors
SMT201700306T1 (it) 2012-06-08 2017-07-18 Theravance Biopharma R&D Ip Llc Inibitori di neprilisina
MX366149B (es) 2012-08-08 2019-06-28 Theravance Biopharma R&D Ip Llc Inhibidores de neprilisina.
DK2964616T3 (en) 2013-03-05 2017-08-28 Theravance Biopharma R&D Ip Llc Neprilysin inhibitors
CA2934936A1 (en) * 2014-01-30 2015-08-06 Theravance Biopharma R&D Ip, Llc Neprilysin inhibitors
CA2934898A1 (en) * 2014-01-30 2015-08-06 Theravance Biopharma R&D Ip, Llc 5-biphenyl-4-heteroarylcarbonylamino-pentanoic acid derivatives as neprilysin inhibitors
WO2015154673A1 (en) * 2014-04-10 2015-10-15 Zhaoyin Wang Novel prodrugs and combinations for treatment of hypertension and cardiovascular diseases
CN106458857A (zh) * 2014-08-27 2017-02-22 上海翰森生物医药科技有限公司 AHU‑377结晶型游离酸、半钙盐、α﹣苯乙胺盐及其制备方法和应用
WO2016086798A1 (zh) * 2014-12-03 2016-06-09 上海翰森生物医药科技有限公司 Nep抑制剂结晶型游离酸、钙盐多晶型及其制备方法和应用
JP6766055B2 (ja) 2015-02-11 2020-10-07 セラヴァンス バイオファーマ アール＆ディー アイピー， エルエルシー ネプリライシン阻害剤としての（２ｓ，４ｒ）−５−（５’−クロロ−２’−フルオロビフェニル−４−イル）−４−（エトキシオキサリルアミノ）−２−ヒドロキシメチル−２−メチルペンタン酸
LT3259255T (lt) 2015-02-19 2021-04-26 Theravance Biopharma R&D Ip, Llc (2r,4r)-5-(5`-chlor-2`-fluorbifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(5-metiloksazol-2-karbonil)amino]pentano rūgštis
CN105330569A (zh) * 2015-09-11 2016-02-17 天台宜生生化科技有限公司 一种(r)-2-(n-叔丁氧羰基氨基)联苯丙醇的制备方法
CN106310270A (zh) * 2015-12-18 2017-01-11 深圳奥萨制药有限公司 血管紧张素转化酶抑制剂与脑啡肽酶抑制剂的药物组合物
CN106310271A (zh) * 2016-01-27 2017-01-11 深圳奥萨制药有限公司 一种治疗慢性心力衰竭的药物组合物
KR102479822B1 (ko) * 2016-02-05 2022-12-21 인벤티스바이오 엘엘씨 선택적 에스트로겐 수용체 분해제 및 이들의 용도
JP7306828B2 (ja) 2016-03-08 2023-07-11 セラヴァンス バイオファーマ アール＆ディー アイピー， エルエルシー 結晶性（２ｓ，４ｒ）－５－（５’－クロロ－２’－フルオロ－［１，１’－ビフェニル］－４－イル）－２－（エトキシメチル）－４－（３－ヒドロキシイソオキサゾール－５－カルボキサミド）－２－メチルペンタン酸およびその使用
UY38072A (es) 2018-02-07 2019-10-01 Novartis Ag Compuestos derivados de éster butanoico sustituido con bisfenilo como inhibidores de nep, composiciones y combinaciones de los mismos
CN115710266B (zh) * 2018-07-03 2024-09-13 江苏恒瑞医药股份有限公司 吡啶并嘧啶类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用
PY1998404A (es) 2018-11-27 2021-06-17 Novartis Ag Compuestos tetrámeros cíclicos como inhibidores de proproteína convertasa subtilisina/kexina tipo 9 (pcsk9) para el tratamiento de trastornos metabólicos
JP2022507958A (ja) 2018-11-27 2022-01-18 ノバルティス アーゲー 代謝障害の治療用のプロタンパク質転換酵素サブチリシン／ケキシン９型（ｐｃｓｋ９）阻害薬としての環状四量体化合物
JP7657151B2 (ja) 2018-11-27 2025-04-04 ノバルティス アーゲー 代謝性障害の処置のためのプロタンパク質コンバターゼスブチリシン／ケキシン９型（ｐｃｓｋ９）阻害剤としての環状ペプチド
CN112107568B (zh) * 2019-06-19 2022-03-25 北京龙嘉博创医药科技有限公司 二芳基酰胺类化合物及其应用
WO2022123592A1 (en) * 2020-12-08 2022-06-16 Alkem Laboratories Ltd Stable pharmaceutical composition of azilsartan medoxomil or pharmaceutical acceptable salt and processes for preparing thereof
WO2023084449A1 (en) 2021-11-12 2023-05-19 Novartis Ag Diaminocyclopentylpyridine derivatives for the treatment of a disease or disorder
CN115340472B (zh) * 2022-09-19 2024-05-07 合肥工业大学 一种谷氨酸衍生物及其合成方法和应用
CN119306633B (zh) * 2024-09-24 2025-04-25 深圳市第二人民医院(深圳市转化医学研究院) 一种β3-氨基酸衍生物的合成方法

Family Cites Families (46)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4189604A (en) 1975-07-22 1980-02-19 Zaidan Hojin Biseibutsu Kagaku Kenkyu Kai Bestatin
US4206232A (en) 1976-05-10 1980-06-03 E. R. Squibb & Sons, Inc. Relieving hypertension with carboxyalkylacylamino acids
IL58849A (en) 1978-12-11 1983-03-31 Merck & Co Inc Carboxyalkyl dipeptides and derivatives thereof,their preparation and pharmaceutical compositions containing them
FR2480747A1 (fr) 1980-04-17 1981-10-23 Roques Bernard Derives d'acides amines et leur application therapeutique
US4906615A (en) 1980-12-18 1990-03-06 Schering Corporation Substituted dipeptides as inhibitors of enkephalinases
US4722810A (en) 1984-08-16 1988-02-02 E. R. Squibb & Sons, Inc. Enkephalinase inhibitors
US4939261A (en) 1984-06-08 1990-07-03 Ciba-Geigy Corporation N-substituted butyramide derivatives useful for treatment of conditions responsive to inhibition of enkephalinase
EP0225292A3 (en) 1985-12-06 1988-11-30 Ciba-Geigy Ag Certain n-substituted butyramide derivatives
US4929641B1 (en) 1988-05-11 1994-08-30 Schering Corp Mercapto-acylamino acid antihypertensives
KR880007441A (ko) 1986-12-11 1988-08-27 알렌 제이.스피겔 스피로-치환된 글루타르아미드 이뇨제
FR2623498B1 (fr) 1987-11-24 1990-04-06 Bioprojet Soc Civ Nouveaux composes enantiomeres derives d'amino-acides, leur procede de preparation et leurs applications therapeutiques
GB8820844D0 (en) 1988-09-05 1988-10-05 Pfizer Ltd Therapeutic agents
US5599951A (en) 1989-09-15 1997-02-04 Societe Civile Bioprojet Amino acid derivatives, the process for their preparation and their applications to therapy
US5294632A (en) 1991-05-01 1994-03-15 Ciba-Geigy Corporation Phosphono/biaryl substituted dipetide derivatives
US5155100A (en) 1991-05-01 1992-10-13 Ciba-Geigy Corporation Phosphono/biaryl substituted dipeptide derivatives
US5217996A (en) * 1992-01-22 1993-06-08 Ciba-Geigy Corporation Biaryl substituted 4-amino-butyric acid amides
US5508272A (en) 1993-06-15 1996-04-16 Bristol-Myers Squibb Company Compounds containing a fused bicycle ring and processes therefor
DE19510566A1 (de) 1995-03-23 1996-09-26 Kali Chemie Pharma Gmbh Benzazepin-, Benzoxazepin- und Benzothiazepin-N-essigsäurederivate sowie Verfahren zu ihrer Herstellung und diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel
US5977075A (en) 1995-04-21 1999-11-02 Novartis Ag N-aroylamino acid amides as endothelin inhibitors
US6660756B2 (en) 2001-03-28 2003-12-09 Pfizer Inc. N-phenpropylcyclopentyl-substituted glutaramide derivatives as inhibitors of neutral endopeptidase
GB0119305D0 (en) 2001-04-12 2001-10-03 Aventis Pharma Gmbh Mercaptoacetylamide derivatives,a process for their preparation and their use
WO2006027680A1 (en) 2004-09-10 2006-03-16 Pfizer Limited 3-(1-carbamoylcyclohexyl) propionic acid derivatives as inhibitors of neutral endopeptidase enzyme
AR057882A1 (es) 2005-11-09 2007-12-26 Novartis Ag Compuestos de accion doble de bloqueadores del receptor de angiotensina e inhibidores de endopeptidasa neutra
WO2007106708A2 (en) 2006-03-10 2007-09-20 Novartis Ag Combinations of the angiotensin ii antagonist valsartan and the nep inhibitor daglutril
PH12012502091A1 (en) * 2007-01-12 2019-06-14 Novartis Ag Process for preparing 5-biphenyl-4-amino-2-methyl pentanoic acid
TWI448284B (zh) 2007-04-24 2014-08-11 Theravance Inc 雙效抗高血壓劑
AR070176A1 (es) 2008-01-17 2010-03-17 Novartis Ag Procesos de sintesis de inhibidores de nep, compuestos intermediarios y uso de los mismos en la sintesis
US20100247606A1 (en) * 2009-03-25 2010-09-30 Allergan, Inc. Intraocular sustained release drug delivery systems and methods for treating ocular conditions
JP5466759B2 (ja) * 2009-05-28 2014-04-09 ノバルティス アーゲー ネプリライシン阻害剤としての置換アミノ酪酸誘導体
SG176009A1 (en) * 2009-05-28 2011-12-29 Novartis Ag Substituted aminopropionic derivatives as neprilysin inhibitors
JO2967B1 (en) 2009-11-20 2016-03-15 نوفارتس ايه جي Acetic acid derivatives of carbamoyl methyl amino are substituted as new NEP inhibitors
AU2011207020B2 (en) 2010-01-22 2014-04-17 Novartis Ag Intermediates of neutral endopeptidase inhibitors and preparation method thereof
US8993631B2 (en) 2010-11-16 2015-03-31 Novartis Ag Method of treating contrast-induced nephropathy
US8673974B2 (en) 2010-11-16 2014-03-18 Novartis Ag Substituted amino bisphenyl pentanoic acid derivatives as NEP inhibitors
CA2819153A1 (en) 2010-12-15 2012-06-21 Theravance, Inc. Neprilysin inhibitors
HUE028051T2 (hu) * 2010-12-15 2016-11-28 Theravance Biopharma R&D Ip Llc Neprilizin inhibitorok
JP5959066B2 (ja) 2011-02-17 2016-08-02 セラヴァンス バイオファーマ アール＆ディー アイピー， エルエルシー ネプリライシン阻害剤としての置換アミノ酪酸誘導体
JP5959065B2 (ja) * 2011-02-17 2016-08-02 セラヴァンス バイオファーマ アール＆ディー アイピー， エルエルシー ネプリライシン阻害剤としての置換アミノ酪酸誘導体
CN103748070B (zh) 2011-05-31 2015-06-24 施万生物制药研发Ip有限责任公司 脑啡肽酶抑制剂
CN103582630B (zh) 2011-05-31 2016-08-17 施万生物制药研发Ip有限责任公司 脑啡肽酶抑制剂
JP5959074B2 (ja) 2011-05-31 2016-08-02 セラヴァンス バイオファーマ アール＆ディー アイピー， エルエルシー ネプリライシン阻害剤
TWI560172B (en) 2011-11-02 2016-12-01 Theravance Biopharma R&D Ip Llc Neprilysin inhibitors
CA2871292A1 (en) 2012-05-31 2013-12-05 Theravance Biopharma R&D Ip, Llc Nitric oxide donor neprilysin inhibitors
SMT201700306T1 (it) 2012-06-08 2017-07-18 Theravance Biopharma R&D Ip Llc Inibitori di neprilisina
WO2013184898A1 (en) 2012-06-08 2013-12-12 Theravance, Inc. Neprilysin inhibitors
MX366149B (es) 2012-08-08 2019-06-28 Theravance Biopharma R&D Ip Llc Inhibidores de neprilisina.

Also Published As

Publication number Publication date
JP2015505298A (ja) 2015-02-19
US12016835B2 (en) 2024-06-25
KR102013200B1 (ko) 2019-08-22
PH12014500987A1 (en) 2014-06-16
US20170368010A1 (en) 2017-12-28
BR112014010576B1 (pt) 2020-05-26
US20130109639A1 (en) 2013-05-02
CY1118909T1 (el) 2018-01-10
HUE034647T2 (hu) 2018-02-28
JP5944010B2 (ja) 2016-07-05
US20140343138A1 (en) 2014-11-20
ME02726B (me) 2017-10-20
EP2773335B1 (en) 2017-03-08
BR112014010576A8 (pt) 2020-05-19
BR112014010576A2 (pt) 2017-05-02
LT2773335T (lt) 2017-06-12
MY165087A (en) 2018-02-28
IL232038A0 (en) 2014-05-28
SI2773335T1 (sl) 2017-07-31
PL2773335T3 (pl) 2017-08-31
BR112014010576B8 (pt) 2020-12-08
AR088618A1 (es) 2014-06-25
RU2629930C2 (ru) 2017-09-05
US20190262297A1 (en) 2019-08-29
CN103906509B (zh) 2016-11-02
ES2625628T3 (es) 2017-07-20
HK1200371A1 (en) 2015-08-07
IL232038A (en) 2017-07-31
US10744104B2 (en) 2020-08-18
CO6940421A2 (es) 2014-05-09
US9682052B2 (en) 2017-06-20
CN103906509A (zh) 2014-07-02
TW201326096A (zh) 2013-07-01
TWI560172B (en) 2016-12-01
SG11201401894XA (en) 2014-05-29
SMT201700257T1 (it) 2017-07-18
AU2012332422B2 (en) 2017-03-02
EP2773335A1 (en) 2014-09-10
KR20140089565A (ko) 2014-07-15
US11547687B2 (en) 2023-01-10
US20160074352A1 (en) 2016-03-17
US10123984B2 (en) 2018-11-13
CA2850953C (en) 2018-12-04
WO2013067163A1 (en) 2013-05-10
AU2012332422A1 (en) 2014-06-26
MX2014005339A (es) 2014-08-08
MX343753B (es) 2016-11-22
CA2850953A1 (en) 2013-05-10
US9150500B2 (en) 2015-10-06
NZ623841A (en) 2015-05-29
DK2773335T3 (en) 2017-06-06
SG10201509182YA (en) 2015-12-30
PT2773335T (pt) 2017-05-29
ZA201402636B (en) 2015-06-24
US20210059966A1 (en) 2021-03-04
HRP20170646T1 (hr) 2017-06-30
US8691868B2 (en) 2014-04-08
US20230285340A1 (en) 2023-09-14
RU2014122109A (ru) 2015-12-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US12016835B2 (en) Neprilysin inhibitors
US10053417B2 (en) Neprilysin inhibitors
RS54348B1 (sr) Inhibitori neprilizina
SG192815A1 (en) Substituted aminobutyric derivatives as neprilysin inhibitors
RS55967B1 (sr) Inhibitori neprilizina
EP2675792A1 (en) Substituted aminobutyric derivatives as neprilysin inhibitors
HK1200371B (en) Oxalic acid amides as neprilysin inhibitors, pharmaceutical composition thereof and preparation thereof
NZ623841B2 (en) Neprilysin inhibitors
HK1219475B (en) Neprilysin inhibitors