RS55967B1 - Inhibitori neprilizina - Google Patents

Inhibitori neprilizina

Info

Publication number
RS55967B1
RS55967B1 RS20170515A RSP20170515A RS55967B1 RS 55967 B1 RS55967 B1 RS 55967B1 RS 20170515 A RS20170515 A RS 20170515A RS P20170515 A RSP20170515 A RS P20170515A RS 55967 B1 RS55967 B1 RS 55967B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
chr
ch2oc
6alkyl
nhc
mmol
Prior art date
Application number
RS20170515A
Other languages
English (en)
Inventor
Adam Hughes
Melissa Fleury
Original Assignee
Theravance Biopharma R&D Ip Llc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Theravance Biopharma R&D Ip Llc filed Critical Theravance Biopharma R&D Ip Llc
Publication of RS55967B1 publication Critical patent/RS55967B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C229/00—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C229/02—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton
    • C07C229/04—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated
    • C07C229/22—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated the carbon skeleton being further substituted by oxygen atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/415—1,2-Diazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/415—1,2-Diazoles
    • A61K31/4155—1,2-Diazoles non condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4192—1,2,3-Triazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4196—1,2,4-Triazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/42—Oxazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4439—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. omeprazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/66—Phosphorus compounds
    • A61K31/675—Phosphorus compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pyridoxal phosphate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C271/00—Derivatives of carbamic acids, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atom not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C271/06—Esters of carbamic acids
    • C07C271/08—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C271/10—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms with the nitrogen atoms of the carbamate groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C271/22—Esters of carbamic acids having oxygen atoms of carbamate groups bound to acyclic carbon atoms with the nitrogen atoms of the carbamate groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms to carbon atoms of hydrocarbon radicals substituted by carboxyl groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/18—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D207/22—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/24—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D207/26—2-Pyrrolidones
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D231/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings
    • C07D231/02—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings
    • C07D231/10—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D231/14—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D231/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings
    • C07D231/02—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings
    • C07D231/10—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D231/14—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D231/18—One oxygen or sulfur atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D231/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings
    • C07D231/02—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings
    • C07D231/10—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D231/14—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D231/18—One oxygen or sulfur atom
    • C07D231/20—One oxygen atom attached in position 3 or 5
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D249/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D249/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
    • C07D249/04—1,2,3-Triazoles; Hydrogenated 1,2,3-triazoles
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D249/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D249/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
    • C07D249/08—1,2,4-Triazoles; Hydrogenated 1,2,4-triazoles
    • C07D249/10—1,2,4-Triazoles; Hydrogenated 1,2,4-triazoles with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D249/12—Oxygen or sulfur atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D249/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D249/16—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D249/18—Benzotriazoles
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D253/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D251/00
    • C07D253/08—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having three nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D251/00 condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D257/00—Heterocyclic compounds containing rings having four nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D257/02—Heterocyclic compounds containing rings having four nitrogen atoms as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
    • C07D257/04—Five-membered rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D261/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-oxazole or hydrogenated 1,2-oxazole rings
    • C07D261/02—Heterocyclic compounds containing 1,2-oxazole or hydrogenated 1,2-oxazole rings not condensed with other rings
    • C07D261/06—Heterocyclic compounds containing 1,2-oxazole or hydrogenated 1,2-oxazole rings not condensed with other rings having two or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D261/10—Heterocyclic compounds containing 1,2-oxazole or hydrogenated 1,2-oxazole rings not condensed with other rings having two or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D261/18—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms, with at the most one bond to halogen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D263/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings
    • C07D263/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings not condensed with other rings
    • C07D263/30—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D263/34—Heterocyclic compounds containing 1,3-oxazole or hydrogenated 1,3-oxazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D263/36—One oxygen atom
    • C07D263/38—One oxygen atom attached in position 2
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/04—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/645—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having two nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07F9/6503—Five-membered rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/645—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having two nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07F9/6503—Five-membered rings
    • C07F9/65031—Five-membered rings having the nitrogen atoms in the positions 1 and 2

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Low-Molecular Organic Synthesis Reactions Using Catalysts (AREA)

Description

Opis
OSNOVA PRONALASKA
OBLAST PRONALASKA
[0001] Predmetni pronalazak se odnosi na nova jedinjenja koja su metabolizovana in vivo do jedinjenja koja imaju aktivnost kao inhibitori neprilizina. Pronalazak se takođe odnosi na farmaceutske kompozicije koje sadrže ova jedinjenja. Opisani su postupci i intermedijeri za pripremu ovih jedinjenja i postupci upotrebe ovih jedinjenja za lečenje bolesti kao što su hipertenzija, srčana insuficijencija, plućna hipertenzija i bolest bubrega.
STANJE TEHNIKE
[0002] US 2010/305145 opisuje inhibitore neprilizina.
[0003] SAD patentna objava br.2012/0157383, podneta 14.12.2011. uobičajeno preneta na Gendron et al., opisuje nova jedinjenja koja imaju aktivnost kao inhibitori neprilizina. Naročito, opisana su jedinjenja roda:
U zavisnosti od promenljivih, jedinjenja unutar ovog roda mogu biti označena kao da su u aktivnom obliku ili kao prolek, koji je metabolizovan in vivo da bi se generisao aktivni oblik jedinjenja.
[0004] Uprkos ovim jedinjenjima međutim, ostaje potreba za jedinjenjima i prolekovima unutar ovog roda koji imaju različite metaboličke i osobine cepanja. Na primer, ostaje potreba za aktivnim jedinjenjima i/ili jedinjenjima prolekovima koji imaju poboljšanu oralnu apsorpciju i za jedinjenjima prolekovima koji prolaze kroz brzo cepanje tako da formiraju aktivno jedinjenje. Ovaj pronalazak je usmeren na tu potrebu.
REZIME PRONALASKA
[0005] Jedan aspekt pronalaska se odnosi na jedinjenje formule XII:
gde:
(i) R<a>je H; R<b>je Cl; X je
i
R<2>je H, R<4>je -OH, i R<7>je izabran od -CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHR<c>OC(O)-C1-
4alkil, -CHR<c>OC(O)O-C2-4alkil, -CHR<c>OC(O)O-cikloheksil, -C2-4alkilen-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHR<d>-NH2, -CH2OC(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, benzil, i
ili R<2>je H, R<4>je izabran od -O-benzil, -OCHR<c>OC(O)-C1-4alkil, -OCH2OC(O)CHR<d>-NH2, i -OCH2OC(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, i R<7>je izabran od H i -CH2OC(O)CH3; ili R<2>je izabran od -C(O)-C1-6alkil, -C(O)CHR<d>-NH2, -C(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, i -P(O)(OR<e>)2, R<4>je -OH, i R<7>je H; ili
(ii) R<a>je H; R<b>je Cl; X je
i
R<2>je H, R<3>je -OH i R<7>je izabran od -CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHR<c>OC(O)-C1-
4alkil, -CHR<c>OC(O)O-C2-4alkil, -CHR<c>OC(O)O-cikloheksil, -C2-4alkilen-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHR<d>-NH2, -CH2OC(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, benzil, i
ili R<3>je izabran od -OC(O)CH2CH3, -OC(O)CH2CH(CH3)2, -OC(O)-fenil, -OCH2OC(O)CHR<d>-NH2, i -OCH2OC(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, i R<7>je H; ili R<2>je izabran od -C(O)-C1-6alkil, -C(O)CHR<d>-NH2, -C(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, i -P(O)(OR<e>)2, R<3>je -OH, i R<7>je H; ili
(iii) R<a>je H; R<b>je Cl; X je
i
R<2>je H, R<3>je -OH i R<7>je izabran od -CH2CH3, -CH2CH(CH3)2, -CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3,-CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHR<c>OC(O)-C1-4alkil, -CHR<c>OC(O)O-C2-4alkil, -CHR<c>OC(O)O-cikloheksil, -C2-4alkilen-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHR<d>-NH2, -CH2OC(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, benzil i
ili R<2>je H, R<3>je izabran od -OC(O)CH2CH3, -OC(O)CH2CH(CH3)2, -OC(O)-fenil, -OCH2OC(O)CHR<d>-NH2, i -OCH2OC(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, i R<7>je H; ili R<2>je izabran od -C(O)-C1-6alkil, -C(O)CHR<d>-NH2, -C(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil i -P(O)(OR<e>)2, R<3>je -OH, i R<7>je H; ili
(iv) R<a>je F; R<b>je Cl; X je
i
R<2>je H i R<7>je izabran od H, -CH2CH3, -CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHR<c>OC(O)-C1-
4alkil, -CHR<c>OC(O)O-C2-4alkil, -CHR<c>OC(O)O-cikloheksil, -C2-4alkilen-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHR<d>-NH2, -CH2OC(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, benzil, i
ili R<2>je izabran od -C(O)-C1-6alkil, -C(O)CHR<d>-NH2, -C(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, i -P(O)(OR<e>)2, i R<7>je H; ili
(v) R<a>je H; R<b>je Cl; X je
R<2>je H i R<7>je izabran od H, -CH2CH3, -CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHR<c>OC(O)-C1-
4alkil, -CHR<c>OC(O)O-C2-4alkil, -CHR<c>OC(O)O-cikloheksil, -C2-4alkilen-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHR<d>-NH2, -CH2OC(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, benzil, i
ili R<2>je izabran od -C(O)-C1-6alkil, -C(O)CHR<d>-NH2, -C(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil i -P(O)(OR<e>)2, i R<7>je H; ili
(vi) R<a>je H; R<b>je Cl; X je
i
R<2>je H i R<7>je izabran od H, -CH2CH3, -CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH,-CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHR<c>OC(O)-C1-
4alkil, -CHR<c>OC(O)O-C2-4alkil, -CHR<c>OC(O)O-cikloheksil, -C2-4alkilen-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHR<d>-NH2, -CH2OC(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, benzil, i
ili R<2>je izabran od -C(O)-C1-6alkil, -C(O)CHR<d>-NH2, -C(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil i -P(O)(OR<e>)2i R<7>je H; ili
(vii) R<a>je H; R<b>je Cl; X je
R je H ili -CH3; i
R<2>je H i R<7>je izabran od -CH2CH3, -CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHR<c>OC(O)-C1-
4alkil, -CHR<c>OC(O)O-C2-4alkil, -CHR<c>OC(O)O-cikloheksil, -C2-4alkilen-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHR<d>-NH2, -CH2OC(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, benzil, i
ili R<2>je izabran od -C(O)-C1-6alkil, -C(O)CHR<d>-NH2, -C(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil i -P(O)(OR<e>)2, i R<7>je H; ili
(viii) R<a>je F; R<b>je Cl; X je
i
R<2>je H, R<4>je –OH i R<7>je izabran od -CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3,-CH2CF2CF3, -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH,-CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHR<c>OC(O)-C1-
4alkil, -CHR<c>OC(O)O-C2-4alkil,-CHR<c>OC(O)O-cikloheksil, -C2-4alkilen-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHR<d>-NH2,-CH2OC(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, benzil, i
ili R<2>je H, R<4>je izabran od -O-benzil, -OCHR<c>OC(O)-C1-4alkil, -OCH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, -OCH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3i
i R<7>je H; ili R<2>je izabran od -C(O)-C1-6alkil, -C(O)CHR<d>-NH2, -C(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, i -P(O)(OR<e>)2, R<4>je -OH, i R<7>je H; ili
(ix) R<a>je H; R<b>je Cl; X je
i
R<2>je H i R<7>je izabran od -CH2CH3, -CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHR<c>OC(O)-C1-
4alkil, -CHR<c>OC(O)O-C2-4alkil, -CHR<c>OC(O)O-cikloheksil, -C2-4alkilen-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHR<d>-NH2, -CH2OC(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, benzil, i
ili R<2>je izabran od -C(O)-C1-6alkil, -C(O)CHR<d>-NH2, -C(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil i -P(O)(OR<e>)2, i R<7>je H; ili
(x) R<a>je H; R<b>je H; X je
i
R<2>i R<4>su H, i R<7>je izabran od -CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -CHR<c>OC(O)-C1-4alkil, -CHR<c>OC(O)O-C2-4alkil, -CHR<c>OC(O)O-cikloheksil, -C2-4alkilen-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHR<d>-NH2, -CH2OC(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, i benzil; ili R<2>je H, R<4>je izabran od -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3i -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, i R<7>je H; ili R<2>je izabran od -C(O)-C1-6alkil, -C(O)CHR<d>-NH2, -C(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, i -P(O)(OR<e>)2, R<4>je H, i R<7>je H; ili R<2>je H, R<4>je -CH2OP(O)(OR<e>)2ili -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, i R<7>je -CH2CH3; ili R<2>je -C(O)CH[CH(CH3)2]NH2,
R<4>je H, i R<7>je -CH2CH3; ili
(xi) R<a>je H; R<b>je Cl; X je
i
R<2>i R<4>su H, i R<7>je izabran od H, -CH2CH3, -CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, (CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHR<c>OC(O)-C1-
4alkil, -CHR<c>OC(O)O-C2-4alkil, -CHR<c>OC(O)O-cikloheksil, -C2-4alkilen-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHR<d>-NH2, -CH2OC(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil i benzil; ili R<2>je H, R<4>je izabran od -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3i -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, i R<7>je H; ili R<2>je izabran od -C(O)-C1-6alkil, -C(O)CHR<d>-NH2, -C(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil i -P(O)(OR<e>)2, R<4>je H, i R<7>je H; ili R<2>je H, R<4>je -CH2OP(O)(OR<e>)2ili -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, i R<7>je -CH2CH3; ili R<2>je -C(O)CH[CH(CH3)2]NH2, R<4>je H, i R<7>je -CH2CH3; gde svaki R<c>je nezavisno H ili -C1-3alkil; svaki R<d>je nezavisno H, -CH3, -CH(CH3)2, fenil, ili benzil; i svaki R<e>je nezavisno H, -C1-6alkil ili fenil;
ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so.
[0006] Predmetni pronalazak daje jedinjenja koja su metabolizovana in vivo do jedinjenja za koja je nađeno da poseduju aktivnost inhibicije enzima neprilizina (NEP). Prema tome, očekuje se da su jedinjenja prema pronalasku korisna i povoljna kao terapeutska sredstva za lečenje pacijenata koji pate od bolesti ili poremećaja koji je tretiran inhibicijom enzima NEP ili povećanjem nivoa njegovih peptidnih supstrata. Na taj način, jedan aspekt pronalaska nalazi svoju korist u postupku za lečenje hipertenzije, srčane insuficijencije ili bolesti bubrega, koji sadrži primenu na pacijenta terapeutski efikasne količine jedinjenja prema pronalasku.
[0007] Sledećei aspekt pronalaska se odnosi na farmaceutske kompozicije koje sadrže farmaceutski prihvatljiv nosač i jedinjenje prema pronalasku.
[0008] Sledeći aspekt pronalaska se odnosi na postupke korisne za pripremu jedinjenja prema pronalasku. Farmaceutski prihvatljive soli jedinjenja formule I, mogu biti pripremljene pomoću postupka koji sadrži dovođenje u kontakt jedinjenja formule I u obliku slobodne kiseline ili baze sa farmaceutski prihvatljivom bazom ili kiselinom.
[0009] Pronalazak nalazi korist u upotrebi jedinjenja formule I ili nejgove farmaceutski prihvatljive soli, za proizvodnju leka, naročito za proizvodnju leka korisnog za lečenje hipertenzije, srčane insuficijencije ili bolesti bubrega. Pronalazak takođe nalazi korist u upotrebi jedinjenja prema pronalasku za inhibiciju enzima NEP kod sisara; i u upotrebi jedinjenja prema pronalasku kao alata za istraživanje. Drugi aspekti i primeri izvođenja pronalaska su ovde navedeni.
DEATALJAN OPIS PRONALASKA
[0010] Kada se opisuju jedinjenja, kompozicije, metode i postupci prema pronalasku, sledeći termini imaju sledeća značenja osim ukoliko nije drugačije nazančeno. Pored toga, kao što su ovde korišćeni, oblici u jedinini "a," "an," i "the" obuhvataju odgovarajuće oblike u množini osim ukoliko kontekst upotrebe jasno ne ukazuje drugačije. Termini "koji sadrži", "koji uključuje," i "koji ima" su određeni tako da budu uključujući i označavaju da može biti dodatnih elemenata osim navedenih elemenata. Svi brojevi koji izražavaju količine sastojaka, osobine kao što je molekulska težina, reakcione uslove, i tako dalje koji su ovde korišćeni trebalo bi razumeti kao modifikovane u svim slučejvima pomoću termina "oko," osim ukoliko nije drugačije naznačeno. Prema tome, brojevi koji su ovde dalje dati su aproksimacije koje mogu da variraju u zavisnosti od željenih osobina koje se traže da budu dobijene pomoću predmetnog pronalaska. Najmanje, i ne kao pokušaj ograničenja primene doktrine ekvivalenata na obim patentnih zahteva, svaki broj bi najmanje trebalo biti tumačen u svetlu objavljenih značajnih cifara i primenom uobičajenih tehnika zaokruživanja.
[0011] Termin "alkil" označava monovalentnu zasićenu ugljovodoničnu grupu koja može biti linearna ili granata. Osim ukoliko nisu drugačije definisane, takve alkil grupe tipično sadrže od 1 do 10 atoma ugljenika i obuhvataju, na primer, -C1-6alkil, označava alkil grupu koja ima od 1 do 6 atoma ugljenika gde su atomi ugljenika u bilo kojoj prihvatljivoj konfiguraciji. Reprezentativne alkil grupe obuhvataju, na primer, metil, etil, n-propil, izopropil, nbutil, s-butil, izobutil, t-butil, n-pentil i n-heksil.
[0012] Kao što je ovde korišćen, izraz "koji ima formulu" ili "ima strukturu" nije određen tako da bude ograničavajući i korišćen je na isti način na koji je termin "koji sadrži" uobičajeno korišćen. Na primer, ako je prikazana jedna struktura, razume se da su obuhvaćeni svi stereoizomerni i tautomerni oblici, osim ukoliko nije naznačeno drugačije.
[0013] Termin "farmaceutski prihvatljiv" označava materijal koji nije biološki ili na drugi način neprihvatljiv kada se koristi u pronalasku. Na primer, termin "farmaceutski prihvatljiv nosač" označava materijal koji može biti ugrađen u kompoziciju i primenjen na pacijenta bez uzrokovanja neprihvatljivih bioloških efekata ili interakcije na neprihvatljiv način sa drugim komponentama kompozicije. Takvi farmaceutski prihvatljivi materijali tipično su ispunili tražene standarde toksikološkog i proizvodnog testiranja, i obuhvataju one materijale koji su identifikovani kao pogodni neaktivni sastojci od strane Administracije za hranu i lekove SAD-a.
[0014] Termin "farmaceutski prihvatljiva so" označava so pripremljenu od baze ili kiseline koja je prihvatljiva za primenu na pacijenta, kao što je sisar (na primer, soli koje imaju prihvatljivu bezbednost za sisara za datu režim doziranja). Međutim, razume se da nije potrebno da su soli pokrivene pronalaskom farmaceutski prihvatljive soli, kao što su soli intermedijernih jedinjenja koja nisu namenjena za primenu na pacijenta. Farmaceutski prihvatljive soli mogu biti poreklom od farmaceutski prihvatljivih neorganskih ili organskih baza i od farmaceutski prihvatljivih neorganskih ili organskih kiselina. Pored toga, kada jedinjenje formule I sadrži oba, bazni deo, kao što je amin, piridin ili imidazol, i kiseli deo kao što je karboksilna kiselina ili tetrazol, mogu biti formirani cviterjoni i obuhvaćeni su unutar termina "so" kao što je ovde korišćen. Soli poreklom od farmaceutski prihvatljivih neorganskih baza obuhvataju soli amonijuma, kalcijuma, bakra, gvožđa (III), gvožđa (II), litijuma, magnezijuma, mangana (III), mangana (II), kalijuma, natrijuma i cinka. Soli poreklom od farmaceutski prihvatljivih organskih baza obuhvataju soli primarnih, sekundarnih i tercijarnih amina, uključujući supstituisane amine, ciklične amine, prirodne amine i slično, kao što su arginin, betain, kafein, holin, N,N’-dibenziletilendiamin, dietilamin, 2-dietilaminoetanol, 2-dimetilaminoetanol, etanolamin, etilendiamin, N-etilmorfolin, N-etilpiperidin, glukamin, glukozamin, histidin, hidrabamin, izopropilamin, lizin, metilglukamin, morfolin, piperazin, piperadin, poliamin smole, prokain, purini, teobromin, trietilamin, trimetilamin, tripropilamin i trometamin. Soli poreklom od farmaceutski prihvatljivih neorganskih kiselina obuhvataju soli borne, ugljene, halogenovodonične (bromovodonične, hlorovodonične, fluorovodonične ili jodovodonične), azotne, fosforne, sulfaminske i sumporne kiseline. Soli poreklom od farmaceutski prihvatljivih organskih kiselina obuhvataju soli alifatičnih hidroksil kiselina (na primer, limunske, glukonske, glikolne, mlečne, laktobionske, jabučne, i vinske kiseline), alifatičnih monokarboksilnih kiselina (na primer, sirćetne, buterne, mravlje, propionske i trifluorosirćetne kiseline), aminokiselina (na primer, asparaginske i glutaminske kiseline), aromatičnih karboksilnih kiselina (na primer, benzoeve, p-hlorobenzoeve, difenilsirćetne, gentizinske, hipurne i trifenilsirćetne kiseline), aromatičnih hidroksil kiselina (na primer, o-hidroksibenzoeve, p-hidroksibenzoeve, 1-hidroksinaftalen-2-karboksilne i 3-hidroksinaftalen-2-karboksilnih kiselina), askorbinske, dikarboksilnih kiselina (na primer, fumarne, maleinske, oksalne i ćilibarne kiseline), glukuronske, bademove, sluzne, nikotinske, orotične, pamoinske, pantotenske, sulfonskih kiselina (na primer, benzensulfonske, kamforsulfonske, edisilne, etansulfonske, izetionske, metansulfonske, naftalensulfonske, naftalen-1,5-disulfonske, naftalen-2,6-disulfonske i p-toluensulfonske kiseline), i 1-hidroksi-2-naftalenske kiseline.
[0015] Kao što je ovde korišćen, termin "prolek" je generalno određen tako da označava neaktivni (ili značajno manje aktivan) prekursor leka koji je preveden u njegov aktivan oblik u telu pod fiziološkim uslovima, na primer, pomoću normalnih metaboličkih procesa. Takva jedinjenja ne moraju neophodno da poseduju farmakološku aktivnost na NEP, ali se mogu primenjivati oralno ili parenteralno i zatim su metabolizovana u telu tako da formiraju jedinjenje koje je farmakološki aktivno na NEP.
[0016] Termin "terapeutski efikasna količina" označava količinu dovoljnu za postizanje lečenja kada je primenjena na pacijenta kod koga postoji potreba za tim, to jest, količina leka potreba za dobijanje željenog terapeutskog efekta. Na primer, terapeutski efikasna količina za lečenje hipertenzije je količina jedinjenja potrebna za, na primer, smanjenje, suprimiranje, eliminaciju ili prevenciju simptoma hipertenzije ili za lečenje uzroka hipertenzije. U jednom primeru izvođenja, terapeutski efikasna količina je ona količina leka koja je potrebna za smanjenje krvnog pritiska ili količina leka potrebna za održavanje normalnog krvnog pritiska. Sa druge strane, termin "efikasna količina" označava količinu dovoljnu za dobijanje željenog rezultata, koji ne mora neophodno da bude terapeutski rezultat. Na primer, kada se studira sistem koji sadrži NEP enzim, "efikasna količina" može biti količina potrebna za inhibiciju enzima.
[0017] Termin "lečenje" ili "tretman" kao što je ovde korišćen označava lečenje ili tretman bolesti ili medicinskog stanja (kao što je hipertenzija) kod pacijenta, kao što je sisar (naročito čovek) koje obuhvata jedno ili više od sledećih: (a) prevenciju pojave bolesti ili medicinskog stanja, tj., prevenciju ponovne pojave bolesti ili medicinskog stanja ili profilaktički tretman pacijenta koji je predisponiran bolesti ili medicinskom stanju; (b) ublažavanje bolesti ili medicinskog stanja, tj., eliminaciju ili uzrokovanje regresije bolesti ili medicinskog stanja kod pacijenta; (c) supresiju bolesti ili medicinskog stanja, tj., usporavanje ili zaustavljanje razvoja bolesti ili medicinskog stanja kod pacijenta; ili (d) poboljšanje simptoma bolesti ili medicinskog stanja kod pacijenta. Na primer, termin "lečenje hipertenzije" bi obuhvatao prevenciju pojave hipertenzije, ublažavanje hipertenzije, supresiju hipertenzije i poboljšanje simptoma hipertenzije (na primer, snižavanje krvnog pritiska). Termin "pacijent" je određen tako da obuhvata one sisare, kao što su ljudi, kod kojih postoji potreba za lečenjem ili prevencijom bolesti ili koji su tretnutno tretirani za prevenciju ili lečenje specifične bolesti ili medicinskog stanja, kao i test subjekte kod kojih se jedinjenja prema pronalasku procenjuju ili koriste u analizi, na primer životinjski model.
[0018] Svi drugi termini koji su ovde korišćeni su određeni tako da imaju njihovo uobičajeno značenje kao što razume stručnjak iz date oblasti tehnike.
[0019] Jedinjenje formule I može da sadrži jedan ili više hiralnih centara i prema tome, ova jedinjenja mogu biti pripremljena i korišćena u različitim stereoizomernim oblicima. U nekim primerima izvođenja, u cilju optimizacije terapeutske aktivnosti jedinjenja prema pronalasku, npr., za lečenje hipertenzije, može biti poželjno da atomi ugljenika imaju određenu (R,R), (S,S), (S,R) ili (R,S) konfiguraciju ili su obogaćeni u stereoizomernom obliku koji ima takvu konfiguraciju. U drugim primerima izvođenja, jedinjenja prema pronalasku su prisutna kao racemske smeše. Prema tome, pronalazak se takođe odnosi na racemske smeše, čiste stereoizomere (npr., enantiomere i diastereoizomere), stereoizomerom-obogaćene smeše, i slično osim ukoliko nije drugačije naznačeno. Kada je hemijska struktura ovde prikazana bez bilo kakve stereohemije, razume se da su svi mogući stereoizomeri obuhvaćeni takvom strukturom. Slično, kada je određeni stereoizomer ovde prikazan ili imenovan, stručnjacima iz date oblasti tehnike će biti jasno da manje količine drugih stereoizomera mogu biti prisutne u kompozicijama prema pronalasku osim ukoliko nije drugačije naznačeno, uz uslov da korist jedinjenja kao celine nije eliminisana prisustvom takvih drugih izomera. Pojedinačni stereoizomeri mogu biti dobijeni pomoću brojnih postupaka koji su dobro poznati u tehnici, uključujući hiralnu hromatografiju upotrebom pogodne hiralne stacionarne faze ili podloge, ili pomoću njihove hemijske konverzije u diastereoizomere, odvajanjem diastereoizomera pomoću uobičajenih sredstava kao što su hromatografija ili rekristalizacija, zatim regeneracijom originalnog stereoizomera.
[0020] Pored toga, gde je primenljivo, svi cis-trans ili E/Z izomeri (geometrijski izomeri), tautomerni oblici i topoizomerni oblici jedinjenja prema pronalasku su obuhvaćeni unutar obima pronalaska osim ukoliko nije naznačeno drugačije.
[0021] Jedinjenja prema pronalasku, kao i ona jedinjenja korišćena u njihovoj sintezi, mogu takođe da obuhvataju izotopski-obeležena jedinjenja, to jest, gde su jedan ili više atoma obogaćeni atomima koji imaju atomsku masu različitu od atomske mase koja se pretežno nalazi u prirodi. Primeri izotopa koji mogu biti ugrađeni u jedinjenja formule I, na primer, obuhvataju, ali bez ograničenja na,<2>H,<3>H,<13>C,<14>C,<15>N,<18>O,<17>O,<35>S,<36>Cl i<18>F. Od naročitog interesa su jedinjenja formule I obogaćena u tricijumu na ugljeniku-14 koji može biti korišćen, na primer, u studijama distribucije tkiva; jedinjenja prema pronalasku obogaćena deuterijumom naročito na mestu metabolizma koji rezultira, na primer, u jedinjenjima koja imaju veću metaboličku stabilnost; i jednjenja formule I obogaćena u pozitron emitujućem izotopu, kao što su<11>C,<18>F,<15>O i<13>N, koja mogu biti korišćena, na primer, u pozitron emitujućim topografskim (PET) studijama.
[0022] Nomenklatura koja je ovde korišćena za imenovanje jedinjenja prema pronalasku je ilustrovana u primerima ovde. Ova nomeklatura je izvedena upotrebom komercijalno dostupnog AutoNom softvera (MDL, San Leandro, California).
[0023] SAD patentna objava br. 2012/0157383 specifično je otkrila (2R,4R)-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(3-hidroksi-3H-benzotriazol-5-karbonil)amino]pentansku kiselinu, koja je predstavljena formulom I’:
U jednom primeru izvođenja, ovo jedinjenje je označeno kao aktivni oblik i primenjeno je kao prolek, koji je metabolizovan in vivo tako da se formira jedinjenje formule I’. SAD patentna objava br. 2012/0157383 takođe je otkrila etil estarski prolek jedinjenja formule I’.
[0024] Jedan aspekt pronalaska se odnosi na druge prolekove jedinjenja formule I’. Ovi prolekovi su predstavljeni formulom XII, gde R<a>je H, R<b>je Cl, i X je:
U jednom primeru izvođenja, ova jedinjenja su predstavljena formulom I:
gde R<2>je H, R<4>je -OH, i R<7>je izabran od -CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHR<c>OC(O)-C1-
4alkil, -CHR<c>OC(O)O-C2-4alkil, -CHR<c>OC(O)O-cikloheksil, -C2-4alkilen-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHR<d>-NH2, -CH2OC(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, benzil, i
ili R<2>je H, R<4>je izabran od -O-benzil, -OCHR<c>OC(O)-C1-4alkil, -OCH2OC(O)CHR<d>-NH2, i -OCH2OC(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, i R<7>je izabran od H i -CH2OC(O)CH3; ili R<2>je izabran od -C(O)-C1-6alkil, -C(O)CHR<d>-NH2, -C(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil i -P(O)(OR<e>)2, R<4>je –OH i R<7>je H; gde je svaki R<c>nezavisno H ili -C1-3alkil; svaki R<d>je nezavisno H, -CH3, -CH(CH3)2, fenil ili benzil; i svaki R<e>je nezavisno H, -C1-6alkil ili fenil; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
[0025] U jednom određenom primeru izvođenja jedinjenja formule I, R<2>je H, R<4>je -OH i R<7>je izabran od -CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CF3, -CH2OC(O)CH3, -CH2OC(O)(CH2)2CH3, -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3, benzil i
ili R<2>je H, R<4>je -OCH2OC(O)CH3i R<7>je izabran od H i -CH2OC(O)CH3; ili R<2>je H, R<4>je izabran od -OCH2OC(O)(CH2)2CH3, -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, i -OCH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3, i R<7>je H; ili R<2>je H, R<4>je -O-benzil i R<7>je H.
[0026] Jedinjenje (2R,4R)-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(5-hidroksi-1-metil-1H-pirazol-3-karbonil)amino]pentanska kiselina je takođe specifično navedeno u SAD patentnoj objavi br. 2012/0157383, i predstavljeno je formulom II’:
U jednom primeru izvođenja, ovo jedinjenje je označeno kao aktivni oblik i primenjeno je kao prolek, koji je metabolizovan in vivo tako da se formira jedinjenje formule II’. SAD patentna objava br. 2012/0157383 takođe je opisala izobutil estarski prolek jedinjenja formule II’.
[0027] Sledeći aspekt pronalaska se odnosi na druge prolekove jedinjenja formule II’. Ovi prolekovi su predstavljeni formulom XII, gde R<a>je H, R<b>je Cl i X je:
U jednom primeru izvođenja, ova jedinjenja su predstavljena formulom II:
gde R<2>je H, R<3>je -OH i R<7>je izabran od -CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHR<c>OC(O)-C1-
4alkil, -CHR<c>OC(O)O-C2-4alkil, -CHR<c>OC(O)O-cikloheksil, -C2-4alkilen-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHR<d>-NH2, -CH2OC(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, benzil, i
ili R<3>je izabran od -OC(O)CH2CH3, -OC(O)CH2CH(CH3)2, -OC(O)-fenil, -OCH2OC(O)CHR<d>-NH2, i -OCH2OC(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, i R<7>je H; ili R<2>je izabran od -C(O)-C1-6alkil, -C(O)CHR<d>-NH2, -C(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, i -P(O)(OR<e>)2, R<3>je –OH i R<7>je H; gde je svaki R<c>nezavisno H ili -C1-3alkil; svaki R<d>je nezavisno H, -CH3, -CH(CH3)2, fenil ili benzil; i svaki R<e>je nezavisno H, -C1-6alkil ili fenil;
ili njihova farmaceutski prihvatljiva so.
[0028] U jednom određenom primeru izvođenja jedinjenja fformule II, R<2>je H, R<3>je -OH i R<7>je izabran od -CH2CH3, -CH2CF2CF3, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -CH2OC(O)(CH2)2CH3, -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, benzil i
[0029] Jedinjenje (2R,4R)-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(5-hidroksi-1-piridin-2-il-1H-pirazol-3-karbonil)amino]pentanska kiselina je takođe specifično navedena u SAD patentnoj objavi br. 2012/0157383, i predstavljena je formulom III’:
U jednom primeru izvođenja, ovo jedinjenje je označeno kao aktivni oblik i primenjeno je kao prolek, koji je metabolizovan in vivo tako da formira jedinjenje formule III’.
[0030] Sledeći aspekt pronalaska se odnosi na druge prolekove jedinjenja formule III’. Ovi prolekovi su predstavljeni formulom XII, gde R<a>je H, R<b>je Cl, i X je:
U jednom primeru izvođenja, ova jedinjenja su predstavljena formulom III:
gde R<2>je H, R<3>je -OH and R<7>je izabran od -CH2CH3, -CH2CH(CH3)2, -CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHR<c>OC(O)-C1-4alkil, -CHR<c>OC(O)O-C2-4alkil, -CHR<c>OC(O)O-cikloheksil, -C2-4alkilen-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHR<d>-NH2, -CH2OC(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, benzil, i
ili R<2>je H, R<3>je izabran od -OC(O)CH2CH3, -OC(O)CH2CH(CH3)2, -OC(O)-fenil, -OCH2OC(O)CHR<d>-NH2, i -OCH2OC(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, i R<7>je H; ili R<2>je izabran od -C(O)-C1-6alkil, -C(O)CHR<d>-NH2, -C(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, i -P(O)(OR<e>)2, R<3>je -OH, i R<7>je H; gde je svaki R<c>nezavisno H ili -C1-3alkil; svaki R<d>je nezavisno H, -CH3, -CH(CH3)2, fenil ili benzil; i svaki R<e>je nezavisno H, -C1-6alkil ili fenil;
ili njihova farmaceutski prihvatljiva so.
[0031] U jednom određenom primeru izvođenja jedinjenja formule III, R<2>je H, R<3>je -OH i R<7>je izabran od -CH2CH3, -CH2CH(CH3)2, -CH2OC(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, benzil i
gde R<d>je -CH(CH3)2. U sledećem primeru izvođenja jedinjenja formule III, R<2>je H, R<3>je -OCH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, i R<7>je H. U sledećem primeru izvođenja jedinjenja formule III, R<2>je -C(O)CH[CH(CH3)2]NH2, R<3>je –OH i R<7>je H.
[0032] Sledeći aspekt pronalaska se odnosi na jedinjenje formule XII, gde R<a>je F, R<b>je Cl, i X je:
U jednom primeru izvođenja, ova jedinjenja su predstavljena formulom IV:
gde R<2>je H i R<7>je izabran od H, -CH2CH3, -CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHR<c>OC(O)-C1-
4alkil, -CHR<c>OC(O)O-C2-4alkil, -CHR<c>OC(O)O-cikloheksil, -C2-4alkilen-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHR<d>-NH2, -CH2OC(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, benzil, i
ili R<2>je izabran od -C(O)-C1-6alkil, -C(O)CHR<d>-NH2, -C(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, i -P(O)(OR<e>)2, i R<7>je H; gde je svaki R<c>nezavisno H ili -C1-3alkil; svaki R<d>je nezavisno H, -CH3, -CH(CH3)2, fenil ili benzil; i svaki R<e>je nezavisno H, -C1-6alkil ili fenil; ili njihova farmaceutski prihvatljiva so.
[0033] U jednom određenom primeru izvođenja jedinjenja formule IV, R<2>je H i R<7>je izabran od H i -CH2CH3.
[0034] Sledeći aspekt pronalaska se odnosi na jedinjenje formule XII, gde R<a>je H, R<b>je Cl, i X je:
U jednom primeru izvođenja, ova jedinjenja su predstavljena formulom V:
gde R<2>je H i R<7>je izabran od H, -CH2CH3, -CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHR<c>OC(O)-C1-
4alkil, -CHR<c>OC(O)O-C2-4alkil, -CHR<c>OC(O)O-cikloheksil, -C2-4alkilen-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHR<d>-NH2, -CH2OC(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, benzil, i
ili R<2>je izabran od -C(O)-C1-6alkil, -C(O)CHR<d>-NH2, -C(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, i -P(O)(OR<e>)2, i R<7>je H; gde je svaki R<c>nezavisno H ili -C1-3alkil; svaki R<d>je nezavisno H, -CH3, -CH(CH3)2, fenil ili benzil; i svaki R<e>je nezavisno H, -C1-6alkil ili fenil; ili njihova farmaceutski prihvatljiva so.
[0035] U jednom određenom primeru izvođenja jedinjenja formule V, R<2>je H i R<7>je izabran od H i -CH2CH3.
[0036] Sledeći aspekt pronalaska se odnosi na jedinjenje formule XII, gde R<a>je H, R<b>je Cl, i X je:
U jednom primeru izvođenja, ova jedinjenja su predstavljena formulom VI:
gde R<2>je H i R<7>je izabran od H, -CH2CH3, -CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHR<c>OC(O)-C1-
4alkil, -CHR<c>OC(O)O-C2-4alkil, -CHR<c>OC(O)O-cikloheksil, -C2-4alkilen-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHR<d>-NH2, -CH2OC(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, benzil i
ili R<2>je izabran od -C(O)-C1-6alkil, -C(O)CHR<d>-NH2, -C(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil i -P(O)(OR<e>)2, i R<7>je H; gde je svaki R<c>nezavisno H ili -C1-3alkil; svaki R<d>je nezavisno H, -CH3, -CH(CH3)2, fenil ili benzil;
i svaki R<e>je nezavisno H, -C1-6alkil ili fenil; ili njihova farmaceutski prihvatljiva so.
[0037] U jednom određenom primeru izvođenja jedinjenja formule VI, R<2>je H i R<7>je izabran od H, -CH2OC(O)CH3, -CH2OC(O)OCH2CH3, -CH2OC(O)OCH(CH3)2, i -C(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3.
[0038] Jedinjenje (2R,4R)-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(3-metoksi-izoksazol-5-karbonil)amino]pentanska kiselina je takođe specifično navedeno u SAD patentnoj objavi br. 2012/0157383, i predstavljeno je formulom VII’:
U jednom primeru izvođenja, ovo jedinjenje je označeno kao aktivni oblik i primenjeno je kao prolek, koji je metabolizovan in vivo da bi se formiralo jedinjenje formule VII’.
[0039] Sledeći aspekt pronalaska se odnosi na druge prolekove jedinjenja formule VII’. Ovi prolekovi su predstavljeni formulom XII, gde R<a>je H, R<b>je Cl, i X je:
gde R je H ili -CH3. U jednom primeru izvođenja, ova jedinjenja su predstavljena formulom VII:
gde R<2>je H i R<7>je izabran od -CH2CH3, -CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHR<c>OC(O)-C1-
4alkil, -CHR<c>OC(O)O-C2-4alkil, -CHR<c>OC(O)O-cikloheksil, -C2-4alkilen-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHR<d>-NH2, -CH2OC(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, benzil, i
ili R<2>je izabran od -C(O)-C1-6alkil, -C(O)CHR<d>-NH2, -C(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, i -P(O)(OR<e>)2, i R<7>je H; gde je svaki R<c>nezavisno H ili -C1-3alkil; svaki R<d>je nezavisno H, -CH3, -CH(CH3)2, fenil ili benzil; i svaki R<e>je nezavisno H, -C1-6alkil ili fenil; ili njihova farmaceutski prihvatljiva so.
[0040] U jednom određenom primeru izvođenja jedinjenja formule VII, R je -CH3, R<2>je H, i R<7>je izabran od -CH2OC(O)CH3, -CH2OC(O)OCH(CH3)2, -CH2OC(O)OCH2CH3, i -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3.
[0041] Jedinjenje (2R,4R)-5-(5’-hloro-2’-fluorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(1-hidroksi-1H-[1,2,3]triazol-4-karbonil)amino]pentanska kiselina je takođe specifično navedeno u SAD patentnoj objavi br. 2012/0157383, i predstavljeno je formulom VIII’:
U jednom primeru izvođenja, ovo jedinjenje je označeno kao aktivni oblik i primenjeno je kao prolek, koji je metabolizovan in vivo da bi se formiralo jedinjenje formule VIII’. SAD patentna objava br. 2012/0157383 takođe je opisala izopropil estarske, etil estarske, izobutil estarske i heptil estarske prolekove jedinjenja formule VIII’.
[0042] Sledeći aspekt pronalaska se odnosi na prolekove jedinjenja formule VIII’. Ovi prolekovi su predstavljeni formulom XII, gde R<a>je F, R<b>je Cl, i X je:
U jednom primeru izvođenja, ova jedinjenja su predstavljena formulom VIIIa ili VIIIb:
gde R<2>je H, R<4>je -OH, i R<7>je izabran od -CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3,-CH2CF2CF3, -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH,-CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHR<c>OC(O)-C1-
4alkil, -CHR<c>OC(O)O-C2-4alkil,-CHR<c>OC(O)O-cikloheksil, -C2-4alkilen-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHR<d>-NH2,-CH2OC(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, benzil, i
ili R<2>je H, R<4>je izabran od -O-benzil, -OCHR<c>OC(O)-C1-4alkil, -OCH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, -OCH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3i
i R<7>je H; ili R<2>je izabran od -C(O)-C1-6alkil, -C(O)CHR<d>-NH2, -C(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, i -P(O)(OR<e>)2, R<4>je -OH, i R<7>je H; gde je svaki R<c>nezavisno H ili -C1-3alkil; svaki R<d>je nezavisno H, -CH3, -CH(CH3)2, fenil ili benzil; i svaki R<e>je nezavisno H, -C1-6alkil ili fenil; ili njihova farmaceutski prihvatljiva so.
[0043] U jednom određenom primeru izvođenja jedinjenja formule VIIIa i VIIIb, R<2>je H, R<4>je -OH i R<7>je izabran od -CH2CF2CF3, -CH2OC(O)CH3, -CH2OC(O)(CH2)2CH3, -CH2OC(O)OCH2CH3, -CH2OC(O)OCH(CH3)2, -CH(CH3)OC(O)O-cikloheksil, -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3, i
ili R<2>je H, R<4>je izabran od -OCH2OC(O)(CH2)2CH3, -OCH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, -OCH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3, i
i R<7>je H.
[0044] Jedinjenje (2R,4R)-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(5-okso-1-fenil-4,5-dihidro-1H-[1,2,4]triazol-3-karbonil)amino]pentanska kiselina je takođe specifično navedeno u SAD patentnoj objavi br. 2012/0157383, i predstavljeno je formulom IX’:
U jednom primeru izvođenja, ovo jedinjenje je označeno kao aktivni oblik i primenjeno je kao prolek, koji je metabolizovan in vivo tako da formira jedinjenje formule IX’.
[0045] Sledeći aspekt pronalaska se odnosi na druge prolekove jedinjenja formule IX’. Ovi prolekovi su predstabljeni formulom XII, gde R<a>je H, R<b>je Cl, i X je:
U jednom primeru izvođenja, ova jedinjenja su predstavljena formulom IX:
gde R<2>je H i R<7>je izabran od -CH2CH3, -CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHR<c>OC(O)-C1-
4alkil, -CHR<c>OC(O)O-C2-4alkil, -CHR<c>OC(O)O-cikloheksil, -C2-4alkilen-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHR<d>-NH2, -CH2OC(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, benzil, i
ili R<2>je izabran od -C(O)-C1-6alkil, -C(O)CHR<d>-NH2, -C(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, i -P(O)(OR<e>)2, i R<7>je H; gde je svaki R<c>nezavisno H ili -C1-3alkil; svaki R<d>je nezavisno H, -CH3, -CH(CH3)2, fenil ili benzil;
i svaki R<e>je nezavisno H, -C1-6alkil ili fenil; ili njihova farmaceutski prihvatljiva so.
[0046] U jednom određenom primeru izvođenja jedinjenja formule IX, R<2>je H i R<7>je izabran od -CH2OC(O)OCH2CH3i -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3.
[0047] Jedinjenje (2R,4R)-4-[(5-acetil-2H-pirazol-3-karbonil)amino]-5-bifenil-4-il-2-hidroksipentanska kiselina je takođe specifično navedeno u SAD patentnoj objavi br.2012/0157383, i predstavljeno je formulom X’:
U jednom primeru izvođenja, ovo jedinjenje je označeno kao aktivni oblik i primenjeno je kao prolek, koji je metabolizovan in vivo da bi se formiralo jedinjenje formule X’. SAD patentna objava br.2012/0157383 je takođe opisala etil estarske, butil estarske, metoksietil estarske, medoksomil estarske, mofetil estarske i metansulfoniletil estarske prolekove jedinjenja formule X’.
[0048] Sledeći aspekt pronalaska se odnosi na druge prolekove jedinjenja formule X’. Ovi prolekovi su predstavljeni formulom XII, gde R<a>je H, R<b>je H, i X je:
U jednom primeru izvođenja, ova jedinjenja su predstavljena formulom Xa ili Xb:
gde R<2>i R<4>su H, i R<7>je izabran od -CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -CHR<c>OC(O)-C1-4alkil, -CHR<c>OC(O)OC2-4alkil,-CHR<c>OC(O)O-cikloheksil, -C2-4alkilen-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHR<d>-NH2, -CH2OC(O)CHR<d>-NHC(O)OC1-6alkil, i benzil; ili R<2>je H, R<4>je izabran od -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3i -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, i R<7>je H; ili R<2>je izabran od -C(O)-C1-6alkil, -C(O)CHR<d>-NH2, -C(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, i -P(O)(OR<e>)2, R<4>je H, i R<7>je H; ili R<2>je H, R<4>je -CH2OP(O)(OR<e>)2ili -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, i R<7>je -CH2CH3; ili R<2>je -C(O)CH[CH(CH3)2]NH2, R<4>je H, i R<7>je -CH2CH3; i gde je svaki R<c>nezavisno H ili -C1-3alkil; svaki R<d>je nezavisno H, -CH3, -CH(CH3)2, fenil ili benzil; i svaki R<e>je nezavisno H, -C1-6alkil ili fenil; ili njihova farmaceutski prihvatljiva so.
[0049] U jednom određenom primeru izvođenja jedinjenja formule Xa i Xb, R<2>je H, R<4>je -CH2-OP(O)(OH)2ili -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, i R<7>je -CH2CH3. U sledećem primeru izvođenja jedinjenja formule Xa i Xb, R<2>je -C(O)CH[CH(CH3)2]NH2, R<4>je H, i R<7>je -CH2CH3.
[0050] Sledeći aspekt pronalaska se odnosi na jedinjenje formule XII, gde R<a>je H, R<b>je Cl, i X je:
U jednom primeru izvođenja, ova jedinjenja su predstavljena formulom XIa ili XIb:
gde R<2>i R<4>su H, i R<7>je izabran od H, -CH2CH3, -CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, CHR<c>OC(O)-C1-4alkil, -CHR<c>OC(O)O-C2-4alkil, -CHR<c>OC(O)O-cikloheksil, -C2-4alkilen-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHR<d>-NH2, -CH2OC(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil i benzil; ili R<2>je H, R<4>je izabran od -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3i -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, i R<7>je H; ili R<2>je izabran od -C(O)-C1-6alkil, -C(O)CHR<d>-NH2, -C(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil i -P(O)(OR<e>)2, R<4>je H, i R<7>je H; ili R<2>je H, R<4>je -CH2OP(O)(OR<e>)2ili -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, i R<7>je -CH2CH3; ili R<2>je -C(O)CH[CH(CH3)2]NH2, R<4>je H, i R<7>je -CH2CH3; i gde je svaki R<c>nezavisno H ili -C1-3alkil; svaki R<d>je nezavisno H, -CH3, -CH(CH3)2, fenil ili benzil; i svaki R<e>je nezavisno H, -C1-6alkil ili fenil; ili njihova farmaceutski prihvatljiva so.
[0051] U jednom određenom primeru izvođenja jedinjenja formule XIa i XIb, R<2>, R<4>, i R<7>su H. U sledećem primeru izvođenja formule XIa i XIb, R<2>i R<4>su H, i R<7>je -CH2OC(O)OCH2CH3.
OPŠTI SINTETIČKI POSTUPCI
[0052] Jedinjenja prema pronalasku mogu biti pripremljena od lako dostupnih materijala upotrebom sledećih opštih postupaka, postupaka navedenih u Primerima ili upotrebom drugih postupaka, reagenasa i početnih materijala koji su poznati stručnjacima iz date oblasti tehnike. Iako sledeći postupci mogu da ilustruju određeni primer izvođenja prema pronalasku, razume se da drugi primeri izvođenja prema pronalasku mogu biti slično pripremljeni upotrebom istih ili sličnih postupaka ili upotrebom drugih postupaka, reagenasa i početnih materijala poznatih stručnjacima iz date oblasti tehnike. Takođe će biti jasno da tamo gde su dati tipični ili poželjni uslovi postupka (na primer, reakcione temperature, vremena, molarni odnosi reaktanata, rastvarači, pritisci, itd.), mogu se takođe koristiti i drugi uslovi postupka osim ukoliko nije drugačije naznačeno. U nekim slučajevima, reakcije su izvedene na sobnoj temperaturi i nije izvedeno stvarno merenje temperature. Razume se da sobna temperatura može biti shvaćena da označava temperaturu unutar opsega koji je uobičajeno povezan sa temperaturom sredine u laboratorijskim uslovima, i tipično će biti u opsegu be od oko 18°C do oko 30°C. U drugim slučajevima, reakcije su izvedene na sobnoj temperaturi i temperatura je zaista merena i beležena. Dok će optimalni reakcioni uslovi tipično varirati u zavisnosti od različitih reakcionih parametara kao što su određeni reaktanti, rastvarači i korišćene količine, stručnjaci iz date oblasti tehnike će jednostavno odrediti pogodne reakcione uslove upotrebom rutinskih postupaka optimizacije.
[0053] Pored toga, kao što će biti jasno stručnjacima iz date oblasti tehnike, konvencionalne zaštitne grupe mogu biti neophodne ili poželjne da se spreči da određene funkcionalne grupe budu podvrgnute neželjenim reakcijama. Izbor pogodne zaštitne grupe za određenu funkcionalnu grupu kao i pogodni uslovi i reagensi za zaštitu i deprotekciju takvih funkcionalnih grupa su dobro poznati u tehnici. Mogu se koristiti zaštitne grupe osim onih koje su ilustrovane u postupcima opisanim ovde, ako je poželjno. Na primer, brojne zaštitne grupe i njhovo uvođenje i uklanjanje, su opisani u T. W. Greene and G. M. Wuts, Protecting Groups in Organic Synthesis, Fourth Edition, Wiley, New York, 2006, i referencama koje su u njima citirane.
[0054] Karboksi-zaštitne grupe su pogodne za prevenciju neželjenih reakcija na karboksi grupi, i primeri obuhvataju, ali bez ograničenja na, metil, etil, t-butil, benzil (Bn), p-metoksibenzil (PMB), 9-fluorenilmetil (Fm), trimetilsilil (TMS), t-butildimetilsilil (TBDMS), i difenilmetil (benzhidril, DPM). Amino-zaštitne grupe su pogodne za prevenciju neželjenih reakcija na amino grupi, i primeri obuhvataju, ali bez ograničenja na, tbutoksikarbonil (BOC), tritil (Tr), benziloksikarbonil (Cbz), 9-fluorenilmetoksikarbonil (Fmoc), formil, trimetilsilil (TMS) i t-butildimetilsilil (TBDMS).
[0055] Standardne tehnike deprotekcije i reagensi su korišćeni za uklanjanje zaštitnih grupa, i mogu da variraju u zavisnosti od toga koja je grupa korišćena. Na primer, natrijum ili litijum hidroksid je uobičajeno korišćen kada je karboksi-zaštitna grupa metil, kiselina kao što je TFA ili HCl (npr., 4.0 M HCl u 1,4-dioksanu) je uobičajeno korišćena kada je karboksi-zaštitna grupa etil ili t-butil, i H2/Pd/C može biti korišćen kada je karboksi-zaštitna grupa benzil. BOC amino-zaštitna grupa može biti uklonjena upotrebom kiselog reagensa kao što je TFA u DCM ili HCl u 1,4-dioksanu, dok Cbz amino-zaštitna grupa može biti uklonjena upotrebom uslova katalitičke hidrogenizacije kao što je H2(1 atm) i 10% Pd/C u alkoholnom rastvaraču ("H2/Pd/C").
[0056] Odlazeće grupe su funkcionalne grupe ili atomi koji mogu biti zamenjeni drugom funkcionalnom grupom ili atomom u reakciji supstitucije, ko što je reakcija nukleofilne supstitucije. Na primer, reprezentativne odlazeće grupe obuhvataju hloro, bromo i jodo grupe; sulfonske estarske grupe, kao što su mezilat, tozilat, brozilat, nozilat i slično; i aciloksi grupe, kao što su acetoksi i trifluoroacetoksi.
[0057] Pogodne baze za upotrebu u ovim šemama obuhvataju, radi ilustracije i ne ograničenja, kalijum karbonat, kalcijum karbonat, natrijum karbonat, trietilamin (Et3N), piridin, 1,8-diazabiciklo-[5.4.0]undec-7-en (DBU), N,N-diizopropiletilamin (DIPEA), 4-metilmorfolin, natrijum hidroksid, kalijum hidroksid, kalijum t-butoksid i metal hidride.
[0058] Pogodni inertni razblaživači ili rastvarači za upotrebu u ovim šemama obuhvataju, radi ilustracije i ne ograničenja, tetrahidrofuran (THF), acetonitril (MeCN), N,N-dimetilformamid (DMF), N,N-dimetilacetamid (DMA), dimetil sulfoksid (DMSO), toluen, dihlorometan (DCM), hloroform (CHCl3), ugljen tetrahlorid (CCl4), 1,4-dioksan, metanol, etanol, vodu, dietil etar i aceton.
[0059] Pogodni kuplujući reagensi karboksilne kiseline/amina obuhvataju benzotriazol-1-iloksitris(dimetilamino)fosfonijum heksafluorofosfat (BOP), benzotriazol-1-iloksitripirolidinofosfonijum heksafluorofosfat (PyBOP), N,N,N’,N’-tetrametil-O-(7-azabenzotriazol-1-il)uronijum heksafluorofosfat (HATU), 1,3-dicikloheksilkarbodiimid (DCC), N-(3-dimetilaminopropil)-N’-etilkarbodiimid (EDC), karbonildiimidazol (CDI) i 1-hidroksibenzotriazol (HOBt). Kuplujuće reakcije su izvedene u inertnom razblaživaču u prisustvu baze kao što je DIPEA, i izvedene su pod uobičajenim uslovima formiranja amidne veze.
[0060] Sve reakcije su tipično izvedene na temperaturi unutar opsega od oko -78 C do 100°C, na primer na sobnoj temperaturi. Reakcije mogu biti praćene upotrebom tankoslojne hromatografije (TLC), tečne hromatografije visokog učinka (HPLC), i/ili LCMS do završetka. Reakcije mogu biti završene za nekoliko minuta, ili mogu trajati nekoliko časova, tipično od 1-2 časa i do 48 časova. Po završetku, dobijena smeša ili reakcioni proizvod mogu biti dalje tretirani u cilju dobijanja željenog proizvoda. Na primer, dobijena smeša ili reakcioni proizvod mogu biti podvrgnuti jednom ili više sledećih postupaka: koncentrovanje ili deljenje (na primer, između EtOAc i vode ili između 5% THF u EtOAc i 1M fosforne kiseline); ekstrakcija (na primer, sa EtOAc, CHCl3, DCM, hloroformom); ispiranje (na primer, sa zasićenim vodenim rastvorom NaCl, zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3, Na2CO3(5%), CHCl3ili 1M NaOH); sušenje (na primer, preko MgSO4, preko Na2SO4, ili in vacuo); filtriranje; kristalizacija (na primer, iz EtOAc i heksana); koncentrovanje (na primer, in vacuo); i/ili prečišćavanje (npr., hromatografija na silika gelu, „flash“ hromatografija, preparativna HPLC, reverzno fazna-HPLC, ili kristalizacija).
[0061] Radi ilustracije, jedinjenja prema pronalasku, kao i njihove soli, mogu biti pripremljeni kao što je prikazano u Šemama I-IV.
Šema I
Šema I je reakcija transesterifikacije. Generalno, ova reakcija obuhvata reakciju estra sa toplotom, željenim alkoholom (HO-R<7>) i pogodnim kiselim katalizatorom, na primer hlorovodoničnom kiselinom. HO-R<7>alkoholi su ili komercijalno dostupni ili mogu biti pripremljeni pomoću tehnika koje su poznate u stanju tehnike ili ovde opisane. Primeri HO-R<7>jedinejnja obuhvataju HO-CH2CF3, HO-(CH2)2CF3, HO-CH2CF2CH3, HO-CH2CF2CF3, HO-C(CH3)(CF3)2, HO-CH(CH2CH3)CF3, HOCH(CH3)CF2CF3, benzil alkohol, i
Šema II je reakcija nukleofilne supstitucije, gde L je pogodna odlazeća grupa. Generalno, ova reakcija je izvedena u prisustvu pogodne baze kao što je trietilamin u pogodnom inertnom razblaživaču ili rastvaraču kao što je aceton. L-R<7>jedinjenja su ili komercijalno dostupna ili mogu biti pripremljena pomoću tehnika koje su poznate u stanju tehnike ili ovde opisane. Primeri L-R<7>jedinjenja obuhvataju Br-(CH2)2OH, Br-(CH2)3OH, Br-(CH2)2OCH3, Br-CH2OC(O)CH3, Cl-CH2OC(O)(CH2)2CH3, Cl-CH2OC(O)OCH2CH3, Cl-CH2OC(O)OCH(CH3)2, Cl-CH2OC(O)O-cikloheksil, hlormetil estar (S)-2-benziloksikarbonilamino-3-metil-buterne kiseline i hlormetil estar (S)-2-tbutoksikarbonilamino-3-metil-buterne kiseline.
[0062] Alternativno, u Šemi II, alkohol mora biti korišćen umesto L-R<7>, na primer HO-C2-4alkilen-N(CH3)2u reakciji kuplovanja upotrebom HOBt i EDC.
Šema III
Šema III je reakcija nukleofilne supstitucije, gde L je pogodna odlazeća grupa. Generalno, ova reakcija je izvedena u prisustvu pogodne baze kao što je N,N-diizopropiletilamin u pogodnom inertnom razblaživaču ili rastvaraču kao što je dihlorometan. L-R<2>jedinjenje je ili komercijalno dostupno ili može biti pripremljeno pomoću tehnika koje su poznate u stanju tehnike ili su ovde opisane. Primeri L-R<2>jedinjenja obuhvataju Cl-C(O)-CH3, Cl-C(O)-CH(CH3)2, i Cl-C(O)-CH2CH(CH3)2.
Šema IV
Šema IV je reakcija kuplovanja, gde P je H ili pogodna amino-zaštitna grupa. Kada je P amino zaštitna grupa, postupak dalje sadrži deprotekciju jedinjenja pre ili in situ sa korakom kuplovanja. Primeri kuplujućih reagenasa obuhvataju HATU i HOBt sa EDC. Generalno, ove reakcije su izvedene u prisustvu baze kao što je DIPEA ili 4-metilmorfolin, i inertnog razblaživača ili rastvarača kao što su DMF ili DMA. Početni materijali karboksilne kiseline su generalno komercijalno dostupni ili mogu biti pripremljeni upotrebom postupaka koji su poznati u stanju tehnike.
[0063] Dodatni detalji u vezi sa specifičnim reakcionim uslovima i drugi postupci za pripremu reprezentativnih jedinjenja prema pronalasku ili njihovi intermedijeri su opisani u Primerima navedenim u daljem tekstu.
KORIST
[0064] Jedinjenja formule I’-III’ i VII’-X’ imaju aktivnost kao inhibitori neprilizina, i očekuje se da imaju terapeutsku korist kao inhibitori neprilizina. Prolekovi ovih jedinjenja, pošto su metabolizovani in vivo, očelkuje se da imaju istu korist. Na taj način, kada se razmatra aktivnost jedinjenja prema pronalasku, razume se da ovi prolekovi imaju očekivanu aktivnost pošto su metabolizovani.
[0065] Primeri analiza obuhvataju radi ilustracije i ne ograničenja, analize koje mere inhibiciju NEP. Korisne sekundarne analize obuhvataju analize za merenje inhibicije ACE i inhibicije aminopeptidaze P (APP) (npr., kao što je opisano u Sulpizio et al. (2005) JPET 315:1306-1313). Farmakodinamička analiza za procenu in vivo inhibitornih potencija za ACE i NEP kod anesteziranih pacova je opisana u Seymour et al. (1985) Hypertension 7(Suppl I):I-35-I-42 i Wigle et al. (1992) Can. J. Physiol. Pharmacol. 70:1525-1528), gde je inhibicija ACE merena kao procenat inhibicije odgovora angiotenzin I presora i inhibicija NEP je merena kao povećani izlaz urinarnog cikličnog guanozin 3’,5’-monofosfata (cGMP).
[0066] Takođe postoje mnoge in vivo analize koje se mogu koristiti. Model svesnog spontano hipertenzivnog pacova (SHR) je model hipertenzije zavistan od renina. Videti na primer, Intengan et al. (1999) Circulation 100(22):2267-2275 i Badyal et al. (2003) Indian Journal of Pharmacology 35:349-362. Model svesnih pacova sa hipertenzijom izazvanom dezoksikotikosteron acetatnom soli (DOCA-soli) je model hipertenzije zavistan od zapremine koji je koristan za merenje aktivnosti NEP, i opisan je u Analizi 4. Videti takođe Trapani et al. (1989) J. Cardiovasc. Pharmacol. 14:419-424, Intengan et al. (1999) Hypertension 34(4):907-913, i Badyal et al. (2003) u prethodnom tekstu). Model sa DOCA-soli je naročito koristan za procenu sposobnosti test jedinjenja da redukuje krvni pritisak kao i za merenje sposobosti test jedinjenja da spreči ili odloži povećanje krvnog pritiska. Model hipertenzivnih pacova osetljivih na Dahl so (DSS) je model hipertenzije koji je osetljiv na so iz hrane (NaCl), i opisan je, na primer, u Rapp (1982) Hypertension 4:753-763. Model plućne arterijske hipertenzije sa monokrotalinom opisan, na primer, u Kato et al. (2008) J. Cardiovasc. Pharmacol. 51(1):18-23, pouzdano predskazuje kliničku efikasnost za lečenje plućne arterijske hipertenzije. Životinjski modeli srčane insuficijencije obuhvataju DSS model pasova za srčanu insuficijenciju i model aorto-kavalne fistule (AV šant), poslednji od kojih je opisan, na primer, u Norling et al. (1996) J. Amer. Soc. Nephrol. 7:1038-1044. Drugi životinjski modeli, kao što su testovi sa vrelom pločom, „tail-flick“ i sa formalinom, mogu biti korišćeni za merenje analgetičkih osobina jedinjenja prema pronalasku, kao i model ligacije kičmenog nerva (SNL) neuropatskog bola. Videti, na primer, Malmberg et al. (1999) Current Protocols in Neuroscience 8.9.1-8.9.15. Druge osobine i korsti jedinjenja mogu biti demonstrirani upotrebom različitih in vitro i in vivo analiza koje su dobro poznate u stanju tehnike.
[0067] Očekuje da su jedinjenja prema pronalasku korisna za lečenje i/ili prevenciju medicinskih stanja koja daju odgovor na inhibiciju NEP. Na taj način se očekuje da pacijenti koji pate od bolesti ili poremećaja koji se leči inhibicijom NEP enzima ili povećanjem nivoa njegovih peptidnih supstrata, može biti tretiran primenom terapeutski efikasne količine jedinjenja prema pronalasku. Na primer, putem inhibicije NEP, očekuje se da jedinjenja pojačavaju biološke efekte endogenih peptida koji se metabolizuju pomoću NEP, kao što su natriuretički peptidi, bombesin, bradikinini, kalcitonin, endotelini, enkefalini, neurotenzin, supstranca P i vazoaktivni intestinalni peptid. Na taj način, očekuje se da ova jedinjenja imaju druge fiziološke aktivnosti, na primer, na bubrežni, centralni nervni, reproduktivni i gastrointestinalni sistem.
Kardiovaskularne bolesti
[0068] Pojačavanjem efekata vazoaktivnih peptida kao što su natriuretički peptidi i bardikinin, očekuje se da jedinjenja prema pronalasku nađu korist u lečenju i/ili prevenciji medicinskih stanja kao što su kardiovaskularne bolesti. Videti, na primer, Roques et al. (1993) Pharmacol. Rev. 45:87-146 i Dempsey et al. (2009) Amer. J. of Pathology 174(3):782-796. Kardiovaskularne bolesti od posebnog interesa obuhvataju hipertenziju i srčanu insuficijenciju. Hipertenzija obuhvata, radi ilustracije i ne ograničenja: primarnu hipertenziju, koja je takođe označena kao esencijalna hipertenzija ili idiopatska hipertenzija; sekundarnu hipertenziju; hipertenziju sa pratećom bolešću bubrega; tešku hipertenziju sa ili bez prateće bolesti bubrega; plućnu hipertenziju, uključujući plućnu arterijsku hipertenziju; i rezistentnu hipertenziju. Srčana insuficijencija obuhvata, radi ilustracije i ne ograničenja: kongestivnu srčanu insuficijenciju; akutnu srčanu insuficijenciju; hroničnu srčanu insuficijenciju, na primer sa smanjenom levom ventrikularnom ejekcionom frakcijom (takođe označena kao sistolna srčana insuficijencija) ili sa očuvanom levom ventrikularnom ejekcionom frakcijom (takođe označena kao dijastolna srčana insuficijencija); i akutnu i hroničnu dekompenzovanu srčanu insuficijenciju, sa ili bez prateće bolesti bubrega. Na taj način, jedan primer izvođenja prema pronalasku se odnosi na postupak za lečenje hipertenzije, naročito primarne hipertenzije ili plućne arterijske hipertenzije, koji sadrži primenu na pacijenta terapeutski efikasne količine jedinjenja prema pronalasku.
[0069] Za lečenje primarne hipertenzije, terapeutski efikasna količina je tipično količina koja je dovoljna da snizi pacijentov krvni pritisak. Ovo bi obuhvatalo obe, blagu-do-umerenu hipertenziju i tešku hipertenziju. Kada je korišćeno za lečenje hipertenzije, jedinjenje može biti primenjivano u kombinaciji sa drugim terapeutskim sredstvima kao što su antagonisti aldosterona, inhibitori angiotenzin-konvertujućeg enzima i dvostruko-delujući inhibitori angiotenzin-konvertujućeg enzima/neprilizina, aktivatori i stimulatori angiotenzin-konvertujućeg enzima 2 (ACE2), vakcine angiotenzina-II, anti-dijabetička sredstva, anti-lipidna sredstva, anti-trombotička sredstva, antagonisti AT1receptora i dvostruko delujući agonist AT1receptora/inhibitori neprilizina, antagonisti β1-adrenergičkih receptora, dvostruko-delujući antagonist β-adrenergičkog receptora/antagonisti α1-receptora, blokatori kalcijumovih kanala, diuretici, antagonisti receptora za endotelin, inhibitori endotelin-konvertujućeg enzima, inhibitori neprilizina, natriuretički peptidi i njihovi analozi, antagonisti receptora za klirens natriuretičkog peptida, donori azot oksida, ne-steroidna anti-inflamatorna sredstva, inhibitori fosfodiesteraze (specifični inhibitori PDE-V), agonisti receptora za prostaglandin, inhibitori renina, rastvorljivi stimulatori i aktivatori guanilat ciklaze, i njihove kombinacije. Jedinjenje prema pronalasku može biti spojeno sa antagonistom AT1receptora, diuretikom, blokatorom kalcijumovih kanala ili njihovom kombinacijom, i korišćeno za lečenje primarne hipertenzije; ili jedinjenje prema pronalasku može biti spojeno sa antagonistom AT1receptora, i korišćeno za lečenje hipertenzije sa pratećom bolesti bubrega. [0070] Za lečenje plućne arterijske hipetenzije, terapeutski efikasna količina je tipično količina koja je dovoljna da snizi plućnu vaskularnu rezistenciju. Drugi ciljevi terapije su poboljšanje kapaciteta za fizičko vežbanje pacijenta. Na primer, u kliničkoj postavci, terapeutski efikasna količina može biti količina koja poboljšava sposobnost pacijenta da hoda udobno tokom perioda od 6 minuta (pokrivajući udaljenost od približno 20-40 metara). Kada je korišćeno za lečenje plućne arterijske hipertenzije jedinjenje može biti primenjivano u kombinaciji sa drugim terapeutskim sredstvima kao što su antagonisti α-adrenergičkog receptora, antagonisti β1-adrenergičkog receptora, agonisti β2-adrenergičkog receptora, inhibitori angiotenzin-konvertujućeg enzima, antikoagulanti, blokatori kalcijumovih kanala, diuretici, antagonisti receptora za endotelin, inhibitori PDE-V, analozi prostaglandina, selektivni inhibitori ponovnog preuizmanja serotonina i njihove kombinacije. Jedinjenje prema pronalasku može da se kombinuje sa inhibitorom PDE-V ili selektivnim inhibitorom ponovnog preuzimanja serotonina i koristi se za lečenje plućne arterijske hipertenzije.
[0071] Pronalazak dalje nalazi korist u postupku za lečenje srčane insuficijencije, naročito kongestivne srčane insuficijencije (uključujući obe, sistolnu i diastolnu kongestivnu srčanu insuficijenciju), koji sadrži primenu na pacijenta terapeutski efikasne količine jedinjenja prema pronalasku. Tipično, terapeutski efikasna količina je količina koja je dovoljna za snižavanje krvnog pritiska i/ili poboljšanje funkcija bubrega. U kliničkoj postavci, terapeutski efikasna količina može biti količina koja je dovoljna za poboljšanje srčane hemodinamike, kao što je na primer smanjenje pritiska plućne arterije, pritiska desne predkomore, pritiska punjenja i vaskularne rezistencije.
Na primer, jedinjenje može biti primenjivano kao intravenski oblik doze. Kada je korišćeno za lečenje srčane insuficijencije, jedinjenje može biti primenjivano u kombinaciji sa drugim terapeutskim sredstvima kao što su antagonisti receptora za adenozin, sredstva koja razlažu završne proizvode uznapredovale glikozilacije, antagonisti aldosterona, antagonisti AT1receptora, antagonisti β1-adrenergičkog receptora, dvostruko-delujući antagonist β-adrenergičkog receptora/antagonisti α1-receptora, inhibitori himaze, digoksin, diuretici, inhibitori endotelin-konvertujućeg enzima (ECE), antagonisti receptora za endotelin, natriuretički peptidi i njihovi analozi, antagonisti receptora za klirens natriuretičkog peptida, donori azot osida, analozi prostaglandina, inhibitori PDE-V, rastvorljivi aktivatori i stimulatori guanilat ciklaze i antagonisti receptora za vazopresin. Jedinjenje prema pronalasku je kombinovano sa antagonistom aldosterona, antagonistom β1-adrenergičkog receptora, antagonistom AT1receptora ili diuretikom, i korišćeno je za lečenje kongestivne srčane insuficijencije.
Dijareja
[0072] Kao inhibitori NEP, očekuje se da jedinjenja prema pronalasku inhibiraju razlaganje endogenih enkefalina i na taj način takva jedinjenja takođe mogu naći korist za lečenje dijareje, uključujući infektivnu i sekretornu/vodenastu dijareju. Videti, na primer, Baumer et al. (1992) Gut 33:753-758; Farthing (2006) Digestive Diseases 24:47-58; i Marçais-Collado (1987) Eur. J. Pharmacol. 144(2): 125-132. Kada su korišćena za lečenje dijareje, jedinjenja prema pronalasku mogu biti kombinovana sa jednim ili više dodatnih tretmana protiv dijareje.
Bolesti bubrega
[0073] Pojačanjem efekata vazoaktivnih peptida kao što su natriuretički peptidi i bradikinin, očekuje se da jedinjenja prema pronalasku pojačavaju funkciju bubrega (videti Chen et al. (1999) Circulation 100:2443-2448; Lipkin et al. (1997) Kidney Int. 52:792-801; i Dussaule et al. (1993) Clin. Sci. 84:31-39) i nalaze korist u lečenju i/ili prevenciji bolesti bubrega. Bolesti bubrega od naročitog interesa obuhvataju dijabetičku nefropatiju, hroničnu bolest bubrega, proteinuriju i naročito akutnu povredu bubrega ili akutnu insuficijenciju bubrega (videti Sharkovska et al. (2011) Clin. Lab. 57:507-515 i Newaz et al. (2010) Renal Failure 32:384-390). Kada je korišćeno za lečenje bolesti bubrega, jedinjenje može biti primenjivano u kombinaciji sa drugim terapeutskim sredstvima kao što su inhibitori angiotenzin-konvertujućeg enzima, antagonisti AT1receptora i diuretici.
Preventivna terapija
[0074] Pojačavanjem efekata natriuretičkih peptida, takođe se očekuje da jedinjenja prema pronalasku budu korisna u preventivnoj terapiji, zahvaljujući antihipertrofičnim i antifibrotičkim efektima natriuretičkih peptida (videti Potter et al. (2009) Handbook of Experimental Pharmacology 191:341-366), na primer u prevenciji napredovanja srčane insuficijencije posle infarkta miokarda, prevenciji arterijske restenoze posle angioplastike, prevenciji zadebljanja zidova krvnih sudova posle vaskularnih operacija, prevenciji ateroskleroze i prevenciji dijabetičke angiopatije.
Glaukom
[0075] Pojačanjem efekata natriuretičkih peptida, očekuje se da jedinjenja prema pronalasku budu korisna za lečenje glaukoma. Videti, na primer, Diestelhorst et al. (1989) International Ophthalmology 12:99-101. Kada su korišćena za lečenje glaukoma, jedinjenja prema pronalasku mogu biti kombinovana sa jednim ili više dodatnih sredstava protiv glaukoma.
Ublažavanje bola
[0076] Kao inhibitori NEP, očekuje se da jedinjenja prema pronalasku inhibiraju razgradnju endogenih enkefalina i na taj način takva jedinjenja takođe mogu naći korist kao analgetici. Videti, na primer, Roques et al. (1980) Nature 288:286-288 i Thanawala et al. (2008) Current Drug Targets 9:887-894. Kada su korišćena za tretman bola, jedinjenja prema pronalasku se mogu kombinovati sa jednim ili više dodatnih antinociceptivnih lekova kao što su inhibitori aminopeptidaze N ili dipeptidil peptidaze III, ne-steroidna anti-inflamatorna sredstva, inhibitori ponovnog preuzimanja monoamina, mišićni relaksanti, antagonisti NMDA receptora, agonisti opioidnog receptora, agonisti receptora za 5-HT1D serotonin i triciklični antidepresivi.
Druge koristi
[0077] Zahvaljujući njihovim osobinama inhibicije NEP, takođe se očekuje da su jedinjenja prema pronalasku korisna kao antitusivna sredstva, kao i da nalaze korist u lečenju portalne hipertenzije povezane sa cirozom jetre (videti Sansoe et al. (2005) J. Hepatol. 43:791-798), kancera (videti Vesely (2005) J. Investigative Med. 53:360-365), depresije (videti Noble et al. (2007) Exp. Opin. Ther. Targets 11:145-159), menstrualnih poremećaja, prevremenog porođaja, pre-eklampsije, endometrioze, reproduktivnih poremećaja (na primer, muške i ženske neplodnosti, sindroma policističnih jajnika, neuspešne implantacije), i muške i ženske seksualne disfunkcije, uključujući mušku erektilnu disfunkciju i poremećaj ženskog seksualnog uzbuđenja. Specifičnije, očekuje se da su jedinjenja prema pronalasku korisna u lečenju ženske seksualne disfunkcije (videti Pryde et al. (2006) J. Med. Chem. 49:4409-4424), koja je često definisana kao teškoća ili nesposobnost ženskog pacijenta da nađe zadovoljstvo u seksualnom izražavanju. Ovo pokriva različite ženske seksualne poremećaje uključujući, radi ilustracije i ne ograničenja, poremećaj hipoaktivne seksualne želje, poremećaj seksualnog uzbuđenja, organizmički poremećaj i poremećaj seksualnog bola. Kada se koriste za lečenje takvih poremećaja, naročito ženske seksualne disfunkcije, jedinjenja prema pronalasku mogu biti kombinovana sa jednim ili više od sledećih sekundarnih sredstava: inhibitori PDE-V, agonisti dopamina, agonisti i/ili antagonisti receptora za estrogen, androgeni i estrogeni. Zahvaljujući njihovim osobinama inhibicije NEP, takođe se očekuje da jedinjenja prema pronalasku imaju anti-inflamatorne osobine, i očekuje se da imaju korist kao takva, naročito kada se koriste u kombinaciji sa statinima.
[0078] Nedavne studije sugerišu da NEP ima ulogu u regulaciji nervne funkcije kod insulin-zavisnog dijabetesa i gojaznosti indukovane hranom. Coppey et al. (2011) Neuropharmacology 60:259-266. Prema tome, zahvaljujući njihovim osobinama inhibicije NEP, takođe se očekuje da jedinjenja prema pronalasku budu korisna u obezbeđivanju zaštite od oštećenja nerava uzrokovanih dijabetesom ili gojaznošću indukovanom ishranom.
[0079] Količina jedinjenja prema pronalasku primenjena po dozi ili ukupna količina primenjena na dan može biti unapred određena ili može biti određena na osnovu individualnog pacijenta uzimajući u obzir brojne faktore, uključujući prirodu i težinu pacijentovog stanja, stanje koje se leči, starost, telesnu težinu i opšte zdravstveno stanje pacijenta, toleranciju pacijenta na aktivno sredstvo, put primene, farmakološke faktore kao što su aktivnost, efikasnost, farmakokinetika i toksikološki profili jedinjenja i bilo kojih sekundarnih sredstava koja se primenjuju, i slično. Lečenje pacijenta koji pati od bolesti ili medicinskog stanja (kao što je hipertenzija) može da počne sa unapred određenom dozom ili dozom određenom od strane nadležnog lekara, i nastaviće tokom perioda vremena neophodnog za prevenciju, ublažavanje, supresiju ili poboljšanje simptoma bolesti ili medicinskog stanja. Pacijenti koji se podvrgavaju takvom tretmanu će tipično biti praćeni na rutinskoj bazi da bi se odredila efikasnost terapije. Na primer, u lečenju hipertenzije, merenja krvnog pritiska mogu biti korišćena za određivanje efikasnosti tretmana. Slični indikatori za druge bolesti i stanja opisana ovde, su dobro poznati i lako su dostupni nadležnom lekaru. Kontinuirano praćenje od strane lekara osiguraće da će se optimalna količina jedinjenja prema pronalasku primeniti u bilo koje dato vreme, kao i da će olakšati određivanje trajanja tretmana. Ovo je od naročite vrednosti kada su takođe primenjivana sekundarna sredstva, jer njihov izbor, doza i trajanje terapije takođe mogu zahtevati podešavanje. Na ovaj način, režim lečenja i raspored doziranja mogu biti podešeni tokom terapije tako da je primenjena najniža količina aktivnog sredstva koja ispoljava željenu efikasnost i, pored toga, da se primena nastavlja samo sve dok je neophodna za uspešno lečenje bolesti ili medicinskog stanja.
Alati za istraživanje
[0080] S obzirom da se jedinjenja prema pronalasku metabolizuju in vivo do jedinjenja koja imaju aktivnost kao inhibitori neprilizina, ona su takođe korisna kao alati za istraživanje ili studiranje bioloških sistema ili uzoraka koji imaju NEP enzim, na primer za studiranje bolesti kod kojih NEP enzim ili njegovi peptidni supstrati imaju ulogu. Prema tome, pronalazak nalazi korist u postupku upotrebe jedinjenja prema pronalasku kao alata za istraživanje, koji sadrži izvođenje biološke analize upotrebom jedinjenja prema pronalasku. Bilo koji pogodan biološki sistem ili uzorak koji ima NEP enzim može biti korišćen u takvim studijama koje mogu biti izvedene in vitro ili in vivo. Reprezentativni biološki sistemi ili uzorci pogodni za takve studije obuhvataju, ali bez ograničenja na, ćelije, ćelijske ekstrakte, plazma membrane, uzorke tkiva, izolovane organe, sisare (kao što su miševi, pacovi, zamorci, zečevi, psi, svinje, ljudi, i tako dalje), i slično, pri čemu su sisari od naročitog interesa. Na primer, aktivnost NEP enzima kod sisara može biti inhibirana primenom NEP-inhibitorne količine jedinjenja prema pronalasku. Ova jedinjenja takođe mogu biti korišćena kao alati za istraživanje izvođenjem bioloških analiza upotrebom takvih jedinjenja.
[0081] Kada je korišćen kao alat za istraživanje, biološki sistem ili uzorak koji sadrži NEP enzim je tipično doveden u kontakt sa količinom jedinjenja prema pronalasku koja inhibira NEP enzim. Pošto je biološki sistem ili uzorak izložen jedinjenju, efekti inhibicije NEP enzima su određeni upotrebom uobičajenih postupaka i opreme, kao što je pomoću merenja vezivanja za receptor u analizi vezivanja ili merenjem ligandom-posredovanih promena u funkcionalnoj analizi. Izlaganje obuhvata dovođenje u kontakt ćelija ili tkiva sa jedinjenjem, primenu kristalnog jedinjenja na sisara, na primer putem i.p., p.o, i.v., s.c., ili inhalirajuće primene, i tako dalje. Ovaj korak određivanja može da obuhvata merenje odgovora (kvantitativna analiza) ili može da obuhvata zapažanje (kvalitativna analiza). Merenje odgovora obuhvata, na primer, određivanje efekata jedinjenja na biološki sistem ili uzorak upotrebom uobičajenih postupaka i opreme, kao što su analize aktivnosti enzima i merenje promena posredovanih preko enzimskog supstrata ili proizvoda u funkcionalnim analizama. Rezultati analize mogu biti korišćeni za određivanje nivoa aktivnosti kao i količine jedinjenja koja je neophodna za postizanje željenog rezultata, to jest, količine koja inhibira NEP enzim. Tipično, korak određivanja će obuhvatati određivanje efekata inhibicije NEP enzima.
[0082] Pored toga, jedinjenja prema pronalasku mogu biti korišćena kao alat za istraživanje za procenu drugih hemijskih jedinjenja, i na taj način su takođe korisna u skrining analizama za otkrivanje, na primer, novih jedinjenja koja imaju aktivnost inhibicije NEP. Na taj način, pronalazak nalazi korist u postupku procene test jedinjenja u biološkoj analizi, koji sadrži: (a) izvođenje biološke analize sa test jedinjenjem da bi se obezbedila prva vrednost analize; (b) izvođenje biološke analize sa jedinjenjem prema pronalasku da bi se obezbedila druga vrednost analize; pri čemu se korak (a) izvodi pre, posle ili istovremeno sa korakom (b); i (c) upoređivanje prve vrednosti analize iz koraka (a) sa drugom vrednošću analize iz koraka (b). Primeri bioloških analiza obuhvataju analizu inhibicije enzima NEP. Na ovaj način, jedinjenja prema pronalasku su korišćena kao standardi u analizi za omogućavanje poređenja rezultata dobijenih sa test jedinjenjem i sa jedinjenjem prema pronalasku za identifikaciju onih test jedinjenja koja imaju oko jednaku ili bolju aktivnost, ukoliko postoje. Na primer, podaci pKiza test jedinjenje ili grupu test jedinjenja su upoređivani sa pKipodacima za jedinjenje prema pronalasku za identifikaciju onih test jedinjenja koja imaju željene osobine, na primer, test jedinjenja koja imaju pKivrednost oko jednaku ili bolju od jedinjenja prema pronalasku, ako postoje. Mogu biti uključeni i generisanje uporednih podataka (upotrebom odgovarajućih analiza) i analiza test podataka da bi se identifikovala test jedinjenja od interesa.
[0083] Pronalazak dalje nalazi korist u postupku studiranja biološkog sistema ili uzorka koji sadrži enzim NEP, pri čemu taj postupak sadrži: (a) dovođenje u kontakt biološkog sistema ili uzorka sa jedinjenjem prema pronalasku; i (b) određivanje efekata uzrokovanih jedinjenjem na biološki sistem ili uzorak.
FARMACEUTSKE KOMPOZICIJE I FORMULACIJE
[0084] Jedinjenja prema pronalasku se tipično primenjuju na pacijenta u obliku farmaceutske kompozicije ili formulacije. Takve farmaceutske kompozicije mogu biti primenjivane na pacijenta preko bilo kog prihvatljivog puta primene uključujući, ali bez ograničenja na, oralni, rektalni, vaginalni, nazalni, inhalacioni, topikalni (uključujući transdermalni), okularni i parenteralni način primene. Pored toga, jedinjenja prema pronalasku mogu biti primenjivana, na primer oralno, u višestrukim dozama na dan (na primer, dva, tri ili četiri puta na dan), u jednoj dnevnoj dozi ili jednoj nedeljnoj dozi. Biće jasno da bilo koji oblik jedinjenja prema pronalasku, (to jest, slobodna baza, slobodna kiselina, farmaceutski prihvatljiva so, solvat, itd.) koji je pogodan za naročiti način primene može biti korišćen u farmaceutskim kompozicijama koje su ovde razmatrane.
[0085] Prema tome, u jednom primeru izvođenja, pronalazak se odnosi na farmaceutsku kompoziciju koja sadrži farmaceutski prihvatljiv nosač i jedinjenje prema pronalasku. Kompozicije mogu da sadrže druga terapeutska i/ili formulaciona sredstva prema želji. Kada se razmatraju kompozicije, "jedinjenje prema pronalasku" može takođe biti označeno ovde kao "aktivno sredstvo," da bi se razlikovalo od drugih komponenti formulacije, kao što je nosač. Na taj način, razume se da termin "aktivno sredstvo" obuhvata jedinjenja formule I kao i farmaceutski prihvatljive soli i solvate tog jedinjenja.
[0086] Farmaceutske kompozicije prema pronalasku tipično sadrže terapeutski efikasnu količinu jedinjenja prema pronalasku. Stručnjacima iz date oblasti tehnike će biti jasno, međutim, da farmaceutska kompozicija može da sadrži više od terapeutski efikasne količine, kao što je u obimnim kompozicijama, ili manje od terapeutski efikasne količine, to jest, pojedinačne jedinične doze dizajnirane za višestruku primenu da bi se postigla terapeutski efikasna količina. Tipično, kompozicija će sadržati od oko 0.01-95 tež.% aktivnog sredstva, uključujući, od oko 0.01-30 tež.%, kao što je od oko 0.01- 10 tež.%, sa tačnom količinom koja zavisi od same formulacije, puta primene, učestalosti doziranja i tako dalje. U jednom primeru izvođenja, kompozicija pogodna za oralni oblik doze, na primer, može da sadrži oko 5-70 tež.%, ili od oko 10-60 tež.% aktivnog sredstva.
[0087] Bilo koji konvencionalni nosač ili ekscipijens može biti korišćen u farmaceutskim kompozicijama prema pronalasku. Izbor određenog nosača ili ekscipijensa, ili kombinacija nosača ili ekscipijenasa, zavisiće od načina primene koji se koristi za lečenje određenog pacijenta ili tipa medicinskog stanja ili stanja bolesti. S tim u vezi, priprema pogodne kompozicije za određeni način primene je unutar obima stručnjaka iz farmaceutske oblasti tehnike. Pored toga, nosači ili ekscipijensi korišćeni u takvim kompozicijama su komercijalno dostupni. Radi dodatne ilustracije, konvencionalne tehnike formulacije su opisane u Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20th Edition, Lippincott Williams & White, Baltimore, Mariland (2000); i H. C. Ansel et al., Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, 7th Edition, Lippincott Williams & White, Baltimore, Mariland (1999).
[0088] Reprezentativni primeri materijala koji mogu da služe kao farmaceutski prihvatljivi nosači obuhvataju, ali bez ograničenja na, sledeće šećere, kao što su laktoza, glukoza i saharoza; skrobovi, kao što je skrob od kukuruza ili skrob od krompira; celuloza, kao što je mikrokristalna celuloza, i njeni derivati, kao što je natrijum karboksimetil celuloza, etil celuloza i celuloza acetat; tragant u prahu; slad; želatin; talk; ekscipijense, kao što je kakao puter i voskovi za supozitorije; ulja, kao što je ulje kikirikija, ulje od semena pamuka, ulje suncokreta, susamovo ulje, maslinovo ulje, kukuruzno ulje i sojino ulje; glikole, kao što je propilen glikol; poliole, kao što je glicerin, sorbitol, manitol i polietilen glikol; estre kao etil oleat i etil laurat; agar; puferujuća sredstva, kao što je magnezijum hidroksid i aluminijum hidroksid; alginsku kiselinu; vodu bez pirogena; izotonični fiziološki rastvor; Ringerov rastvor; etil alkohol; rastvore fosfatnog pufera; komprimovane gasove propelante, kao što su hlorofluorougljenici i hidrofluorougljenici; i druge netoksične kompatibilne supstance korišćene u farmaceutskim kompozicijama.
[0089] Farmaceutske kompozicije se tipično pripremaju temeljnim i intimnim mešanjem ili blendiranjem aktivnog sredstva sa farmaceutski prihvatljivim nosačem i jednim ili više izbornih sastojaka. Dobijena ujednačeno blendirana smeša može zatim biti oblikovana ili sipana u tablete, kapsule, pilule, kanistere, kertridže, dispenzere i slično upotrebom konvencionalnih postupaka i opreme.
[0090] U jednom primeru izvođenja, farmaceutske kompozicije su pogodne za oralnu primenu. Pogodne kompozicije za oralnu primenu mogu biti u obliku kapsula, tableta, pilula, lozengi, skrobnih kapsula, dražeja, praškova, granula; rastvora ili suspenzija u vodenoj ili nevodenoj tečnosti; tečnih emulzija ulje-u-vodi ili voda-uulju; eliksira ili sirupa; i slično; pri čemu svaki od njih sadrži unapred određenu količinu aktivnog sredstva.
[0091] Kada je namenjena za oralnu primenu u čvrstom obliku doze (kapsule, tablete, pilule i slično), kompozicija će tipično sadržati aktivno sredstvo i jedan ili više farmaceutski prihvatljivih nosača, kao što su natrijum citrat ili dikalcijum fosfat. Čvrsti oblici doze takođe mogu da sadrže: punioce ili ekstendere, kao što su skrobovi, mikrokristalna celuloza, laktoza, saharoza, glukoza, manitol, i/ili silicijumska kiselina; vezujuća sredstva, kao što su karboksimetilceluloza, alginati, želatin, polivinil pirolidon, saharoza i/ili akacija; humektante, kao što je glicerol; sredstva za raspadanje, kao što je agaragar, kalcijum karbonat, skrob od krompira ili tapioke, alginska kiselina, određeni silikati, i/ili natrijum karbonat; sredstva za usporavanje rastvaranja, kao što je parafin; ubrzivače apsorpcije, kao što su kvaternarna amonijum jedinjenja; sredstva za vlaženje, kao što je cetil alkohol i/ili glicerol monostearat; apsorbente, kao što je kaolin i/ili bentonit glina; lubrikante, kao što je talk, kalcijum stearat, magnezijum stearat, čvrsti polietilen glikoli, natrijum lauril sulfat, i/ili njihove smeše; sredstva za bojenje; i puferujuća sredstva.
[0092] Sredstva za oslobađanje, sredstva za vlaženje, sredstva za oblaganje, zaslađivači, arome i parfemišuća sredstva, konzervansi i antioksidansi takođe mogu biti prisutni u farmaceutskim kompozicijama. Primeri sredstava za oblaganje za tablete, kapsule, pilule i slično, obuhvataju one korišćene za gastrorezistentne omotače, kao što su celuloza acetat ftalat, polivinil acetat ftalat, hidroksipropil metilceluloza ftalat, kopolimeri metakrilne kiselineestra metakrilne kiseline, celuloza acetat trimelitat, karboksimetil etil celuloza, hidroksipropil metil celuloza acetat sukcinat, i slično. Primeri farmaceutski prihvatljivih antioksidanata obuhvataju: antioksidante rastvorljive u vodi, kao što su askorbinska kiselina, cistein hidrohlorid, natrijum bisulfat, natrijum metabisulfat natrijum sulfit i slično; antioksidante rastvorljive u ulju, kao što su askorbil palmitat, butilovani hidroksianizol, butilovani hidroksitoluen, lecitin, propil galat, alfa-tokoferol, i slično; i metal-helatirajuća sredstva, kao što su limunska kiselina, etilendiamin tetrasirćetna kiselina, sorbitol, vinska kiselina, fosforna kiselina, i slično.
[0093] Kompozicije mogu takođe biti formulisane za obezbeđivanje sporog ili kontrolisanog oslobađanja aktivnog sredstva upotrebom, na primer, hidroksipropil metil celuloze u različitim proporcijama ili drugim polimernim matricama, lipozoma i/ili mikrosfera. Pored toga, farmaceutske kompozicije prema pronalasku mogu da sadrže sredstva za pokrivanje neprozračnom bojom i mogu biti formulisane tako da oslobađaju samo aktivno sredstvo, ili preferencijalno, u određeni deo gastrointestinalnog trakta, izborno, na odloženi način. Primeri ukalupljenih kompozicija koje mogu biti korišćene obuhvataju polimerne supstance i voskove. Aktivno sredstvo može takođe biti u mikro-inkapsuliranom obliku, izborno sa jednim ili više od gore opisanih ekscpijenasa.
[0094] Pogodni tečni oblici doze za oralnu primenu obuhvataju, radi ilustracije, farmaceutski prihvatljive emulzije, mikroemulzije, rastvore, suspenzije, sirupe i eliksire. Tečni oblici doze tipično sadrže aktivno sredstvo i inertni razblaživač, kao što su, na primer, voda ili drugi rastvarači, solublizujuća sredstva i emulgatori, kao što su etil alkohol, izopropil alkohol, etil karbonat, etil acetat, benzil alkohol, benzil benzoat, propilen glikol, 1,3-butilen glikol, ulja (na primer, ulja od semena pamuka, kikirikija, kukuruza, klica, maslina, ricinusa i susama), glicerol, tetrahidrofuril alkohol, polietilen glikoli i estri masnih kiselina i sorbitana, i njihove smeše. Suspenzije mogu da sadrže suspendujuća sredstva kao što su, na primer, etoksilovani izostearil alkoholi, polioksietilen sorbitol i sorbitan estri, mikrokristalna celuloza, aluminijum metahidroksid, bentonit, agar-agar i tragant, i njihove smeše.
[0095] Kada su namenjene za oralnu primenu, farmaceutske kompozicije prema pronalasku mogu biti pakovane u obliku jedinične doze. Termin "jedinični oblik doze" označava fizički posebnu jedinicu pogodnu za doziranje pacijenta, to jest, svaku jedinicu koja sadrži unapred određenu količinu aktivnog sredstva izračunatu da proizvodi željeni terapeutski efekat pojedinačno ili u kombinaciji sa jednom ili više dodatnih jedinica. Na primer, takvi jedinični oblici doze mogu biti kapsule, tablete, pilule i slično.
[0096] U sledećem primeru izvođenja, kompozicije prema pronalasku su pogodne za inhalacionu primenu, i tipično će biti u obliku aerosola ili praha. Takve kompozicije se generalno primenjuju upotrebom dobro poznatih uređaja za primenu, kao što su raspršivač, inhalator za suvi prah ili za izmerenu dozu. Uređaji raspršivači proizvode struju vazduha visoke brzine koja izaziva da se kompozicija prska kao magla koja se uvodi u respiratorni trakt pacijenta. Primer formulacije za raspršivač sadrži aktivno sredstvo rastvoreno u nosaču da bi se formirao rastvor, ili mikronizovano i spojeno sa nosačem da bi se formirala suspenzija mikronizovanih čestica respirabilne veličine. Inhalatori za suvi prah primenjuju aktivno sredstvo kao slobodni protočni prah koji je dispergovan u vazdušnu struju pacijenta u toku udisaja. Primer formulacije suvog praha sadrži aktivno sredstvo suvo mešano sa ekscipijensom kao što je laktoza, skrob, manitol, dekstroza, polimlečna kiselina, polilaktid-koglikolid, i njihove kombinacije. Inhalatori sa odmerenom dozom ispuštaju izmerenu količinu aktivnog sredstva upotrebom komprimovanog gasa propelanta. Primer formulacije sa izmerenom dozom sadrži rastvor ili suspenziju aktivnog sredstva u tečnom propelantu, kao što je hlorofluorougljenik ili hidrofluoroalkan. Izborne komponente takvih formulacija obuhvataju ko-rastvarače, kao što su etanol ili pentan, i surfaktante, kao što je sorbitan trioleat, oleinska kiselina, lecitin, glicerin i natrijum lauril sulfat. Takve kompozicije su tipično pripremljene dodavanjem ohlađenog ili pod pritiskom hidrofluoroalkana u pogodan kontejner koji sadrži aktivno sredstvo, etanol (ako je prisutan) i surfaktant (ako je prisutan). Za pripremu suspenzije, aktivno sredstvo je mikronizovano i zatim spojeno sa propelantom. Alternativno, formulacija suspenzije može biti pripremljena sušenjem putem raspršivanja omotača od surfaktanta na mikronizovane čestice aktivnog sredstva. Formulacija je zatim sipana u aerosol kanister, koji formira deo inhalatora.
[0097] Jedinjenja prema pronalasku takođe mogu biti primenjivana parenteralno (na primer, pomoću subkutane, intravenske, intramuskularne ili intraperitonealne injekcije). Za takvu primenu, aktivno sredstvo je obezbeđeno u sterilnom rastvoru, suspenziji ili emulziji. Primeri rastvarača za pripremu takvih formulacija obuhvataju vodu, fiziološki rastvor, alkohole niske molekulske mase kao što su propilen glikol, polietilen glikol, ulja, želatin, estri masnih kiselina kao što je etil oleat, i slično. Parenteralne formulacije takođe mogu da sadrže jedan ili više antioksidanasa, solubilizatora, stabilizatora, konzervansa, sredstava za vlaženje, emulgatora i dispergujućih sredstava. Surfaktanti, dodatna stabilizujuća sredstva ili pH-podešavajuća sredstva (kiseline, baze ili puferi) i antioksidanti su naročito korisni za obezbeđivanje stabilnosti za formulaciju, na primer, za minimizaciju ili izbegavanje hidrolize estarskih i amidnih veza, ili dimerizacije tiola koji mogu biti prisutni u jedinjenju. Ove formulacije mogu biti napravljene sterilnim upotrebom sterilnog injektabilnog medijuma, sterilizacionog sredstva, filtracije, zračenja ili zagrevanja. U jednom posebnom primeru izvođenja, parenteralna formulacija sadrži vodeni rastvor ciklodekstrina kao farmaceutski prihvatljiv nosač. Pogodni ciklodekstrini obuhvataju ciklične molekule koji sadrže šest ili više α-D-glukopiranoznih jedinica vezanih na 1,4 položajima pomoću veza kao u amilazi, β-ciklodekstrinu ili cikloheptaamilozi. Primeri ciklodekstrina obuhvataju derivate ciklodekstrina kao što su hidroksipropil i sulfobutil etar ciklodekstrini kao što je hidroksipropil-β-ciklodekstrin i sulfobutil etar β-ciklodekstrin. Primeri pufera za takve formulacije obuhvataju pufere na bazi karboksilne kiseline kao što su rastvori citratnog, laktatnog i maleatnog pufera.
[0098] Jedinjenja prema pronalasku takođe mogu biti primenjivana transdermalno upotrebom poznatih sistema za transdermalnu primenu i ekscipijenasa. Na primer, jedinjenje može biti mešano sa pojačivačima prodiranja, kao što su propilen glikol, polietilen glikol monolaurat, azacikloalkan-2-oni i slično, i ugrađeno u flaster ili sličan sistem za primenu. Ako je poželjno dodatni escipijensi uključujući gelirajuća sredstva, emulgatore i pufere, mogu biti korišćeni u takvim transdermalnim kompozicijama.
Sekundarna sredstva
[0099] Jedinjenja prema pronalasku mogu biti korisna kao jedini tretman bolesti ili mogu biti kombinovana sa jednim ili više dodatnih terapeutskih sredstava u cilju dobijanja željenog terapeutskog efekta. Na taj način, u jednom primeru izvođenja, farmaceutske kompozicije prema pronalasku sadrže druge lekove koji se koprimenjuju sa jedinjenjem prema pronalasku. Na primer, kompozicija može dalje da sadrži jedan ili više lekova (takođe označeni kao "sekundarno sredstvo (sredstva)"). Takva terapeutska sredstva su dobro poznata u tehnici, i obuhvataju antagoniste receptora za adenozin, antagoniste α-adrenergičkog receptora, antagoniste β1-adrenergičkog receptora, agoniste β2-adrenergičkog receptora, dvostruko delujući antagonist β-adrenergičkog receptora/antagonist α1-receptora, sredstva koja razlažu završne proizvode uznapredovale glikozilacije, antagoniste aldosterona, inhibitore aldosteron sintaze, inhibitore aminopeptidaze N, androgene, inhibitore angiotenzin-konvertujućeg enzima i dvostruko delujuće inhibitore angiotenzin-konvertujućeg enzima/neprilizina, aktivatore i stimulatore angiotenzin-konvertujućeg enzima 2, vakcine angiotenzina-II, antikoagulante, antidijabetička sredstva, sredstva protiv dijareje, sredstva protiv glaukoma, anti-lipidna sredstva, antinociceptivna sredstva, anti-trombotička sredstva, antagoniste AT1receptora i dvostruko delujuće antagoniste AT1receptora/inhibitore neprilizina i multifunkcionalne blokatore receptora za angiotenzin, antagoniste receptora za bradikinin, blokatore kalcijumovih kanala, inhibitore himaze, digoksin, diuretike, agoniste dopamina, inhibitore endotelin-konvertujućeg enzima, antagoniste receptora za endotelin, inhibitore HMG-CoA reduktaze, estrogene, agoniste i/ili antagoniste receptora za estrogen, inhibitore ponovnog preuzimanja monoamina, mišićne relaksante, natriuretičke peptide i njihove analoge, antagoniste receptora za klirens natriuretičkog peptida, inhibitore neprilizina, donore azot oksida, ne-steroidna anti-inflamatorna sredstva, antagoniste receptora za N-metil daspartat, agoniste opioidnog receptora, inhibitore fosfodiesteraze, analoge prostaglandina, agoniste receptora za prostaglandin, inhibitore renina, selektivne inhibitore ponovnog preuzimanja serotonina, blokatore natrijumovih kanala, rastvorljive stimulatore i aktivatore guanilat ciklaze, triciklične antidepresive, antagoniste receptora za vazopresin i njihove kombinacije. Specifični primeri ovih sredstava su detaljno ovde navedeni.
[0100] Prema tome, u sledećem aspektu pronalaska, farmaceutska kompozicija sadrži jedinjenje prema pronalasku, drugo aktivno sredstvo, i farmaceutski prihvatljiv nosač. Treće, četvrto itd. aktivno sredstvo takođe mogu biti uključeni u kompoziciju. U kombinovanoj terapiji, količina jedinjenja prema pronalasku koja se primenjuje, kao i količina sekundarnih sredstava, može biti manja od količine koja se tipično primenjuje u monoterapiji.
[0101] Jedinjenja prema pronalasku mogu biti fizički mešana sa drugim aktivnim sredstvom da bi se formirala kompozicija koja sadrži oba sredstva; ili svako sredstvo može biti prisutno u odvojenim i posebnim kompozicijama koje se primenjuju na pacijenta istovremeno ili u posebna vremena. Na primer, jedinjenje prema pronalasku može biti spojeno sa drugim aktivnim sredstvom upotrebom uobičajenih postupaka i opreme da bi se formirala kombinacija aktivnih sredstava koja sadrži jedinjenje prema pronalasku i drugo aktivno sredstvo. Pored toga, aktivna sredstva mogu biti kombinovana sa farmaceutski prihvatljivim nosačem da bi se formirala farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje prema pronalasku, drugo aktivno sredstvo i farmaceutski prihvatljiv nosač. U ovom primeru izvođenja, komponente kompozicije su tipično mešane ili blendirane da bi se stvorila fizička smeša. Fizička smeša je zatim primenjena u terapeutski efikasnoj količini upotrebom bilo kog od puteva koji su ovde opisani.
[0102] Alternativno, aktivna sredstva mogu da ostanu odvojena i posebna pre primene na pacijenta. U ovom primeru izvođenja, sredstva se tipično fizički ne mešaju zajedno pre primene, ali se primenjuju istovremeno ili u posebna vremena kao posebne kompozicije. Takve kompozicije mogu biti pakovane posebno ili mogu biti pakovane zajedno kao komplet. Kada se primenjuju u posebna vremena, sekundarno sredstvo će tipično biti primenjivano manje od 24 časa posle primene jedinjenja prema pronalasku, u opsegu od istovremeno sa primenom jedinjenja prema pronalasku do oko 24 časa posle doze. Ovo je takođe označeno kao uzastopna primena. Na taj način, jedinjenje prema pronalasku može biti oralno primenjivano istovremeno ili uzastopno sa drugim aktivnim sredstvom upotrebom dve tablete, sa jednom tabletom za svako aktivno sredstvo, gde uzastopno može da označava primenu neposredno posle primene jedinjenja prema pronalasku ili u izvesno unapred određeno vreme kasnije (na primer, jedan čas kasnije ili tri časa kasnije). Takođe je razmatrano da sekundarno sredstvo može biti primenjivano više od 24 časa posle primene jedinjenja prema pronalasku. Alternativno, kombinacija može biti primenjivana pomoću različitih puteva primene, to jest, jedna oralno i druga putem inhalacije.
[0103] U jednom primeru izvošenja, komplet sadrži prvi oblik doze koji sadrži jedinjenje prema pronalasku i najmanje jedan dodatni oblik doze koji sadrži jedan ili više sekundarnih sredstava koji su ovde navedeni, u količinama koje su dovoljne za izvođenje postupka prema pronalasku. Prvi oblik doze i drugi (ili treći, itd.) oblik doze zajedno sadrže terapeutski efikasnu količinu aktivnih sredstava za lečenje ili prevenciju bolesti ili medicinskog stanja kod pacijenta.
[0104] Sekundarno sredstvo (sredstva), kada su uključena, prisutna su u terapeutski efikasnoj količini tako da se oni tipično primenjuju u količini koja proizvodi terapeutski koristan efekat kada su ko-primenjivani sa jedinjenjem prema pronalasku. Sekundarno sredstvo može biti u obliku farmaceutski prihvatljive soli, solvata, optički čistog stereoizomera i tako dalje. Sekundarno sredstvo takođe može biti u obliku proleka, na primer, jedinjenja koje ima grupu karboksilne kiseline koja je esterifikovana. Na taj način, sekundarna sredstva navedena ovde su određena tako da obuhvataju sve takve oblike, i komercijalno su dostupna ili mogu biti pripremljena upotrebom uobičajenih postupaka i reagenasa.
[0105] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa antagonistom receptora za adenozin, čiji reprezentativni primeri obuhvataju, ali bez ograničenja na, naksifilin, rolofilin, SLV-320, teofilin i tonapofilin.
[0106] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa antagonistom αadrenergičkog receptora, čiji reprezentativni primeri obuhvataju, ali bez ograničenja na, doksazosin, prazosin, tamsulosin i terazosin.
[0107] Jedinjenja prema pronalasku takođe mogu biti primenjivana u kombinaciji sa antagonistom β1-adrenergičkog receptora ("β1-blokatori"). Reprezentativni β1-blokatori obuhvataju, ali bez ograničenja na, acebutolol, alprenolol, amosulalol, arotinolol, atenolol, befunolol, betaksolol, bevantolol, bisoprolol, bopindolol, bucindolol, bukumolol, bufetolol, bufuralol, bunitrolol, bupranolol, bubridin, butofilolol, karazolol, karteolol, karvedilol, celiprolol, cetamolol, kloranolol, dilevalol, epanolol, esmolol, indenolol, labetolol, levobunolol, mepindolol, metipranolol, metoprolol kao što je metoprolol sukcinat i metoprolol tartrat, moprolol, nadolol, nadoksolol, nebivalol, nipradilol, oksprenolol, penbutolol, perbutolol, pindolol, praktolol, pronetalol, propranolol, sotalol, sufinalol, talindol, tertatolol, tilisolol, timolol, toliprolol, ksibenolol i njihove kombinacije. U jednom posebnom primeru izvođenja, β1-antagonist je izabran od atenolola, bisoprolola, metoprolola, propranolola, sotalola i njihovih kombinacija. Tipično, β1-blokator će biti primenjivan u količini koja je dovoljna da obezbedi od oko 2-900 mg po dozi.
[0108] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa agonistom β2-adrenergičkog receptora, čiji reprezentativni primeri obuhvataju, ali bez ograničenja na, albuterol, bitolterol, fenoterol, formoterol, indakaterol, izoetarin, levalbuterol, metaproterenol, pirbuterol, salbutamol, salmefamol, salmeterol, terbutalin, vilanterol, i slično. Tipično, agonist β2-adrenergičkog receptora biće primenjivan u količini koja je dovoljna da obezbedi od oko 0.05-500 µg po dozi.
[0109] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa sredstvom koje razlaže završne proizvode uznapredovale glikozilacije (AGE), čiji primeri obuhvataju, radi ilustracije, a ne ograničenja, alagebrijum (ili ALT-711), i TRC4149.
[0110] U sledećem primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa antagonistom aldosterona, čiji reprezentativni primeri obuhvataju, ali bez ograničenja na, eplerenon, spironolakton i njihove kombinacije. Tipično, antagonist aldosterona će biti primenjen u količini koja je dovoljna da obezbedi od oko 5-300 mg na dan.
[0111] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa inhibitorom aminopeptidaze N ili dipeptidil peptidaze III, čiji primeri obuhvataju, radi ilustracije, a ne ograničenja, bestatin i PC18 (2-amino-4-metilsulfonil butan tiol, metionin tiol).
[0112] Jedinjenja prema pronalasku takođe mogu biti primenjivana u kombinaciji sa inhibitorom angiotenzinkonvertujućeg enzima (ACE). Reprezentativni inhibitori ACE obuhvataju, ali bez ograničenja na, akupril, alacepril, benazepril, benazeprilat, kaptopril, ceranapril, cilazapril, delapril, enalapril, enalaprilat, fosinopril, fosinoprilat, imidapril, lizinopril, moeksipril, monopril, moveltipril, pentopril, perindopril, hinapril, hinaprilat, ramipril, ramiprilat, saralasin acetat, spirapril, temokapril, trandolapril, zofenopril, i njihove kombinacije.
[0113] U određenom primeru izvođenja, inhibitor ACE je izabran od: benazeprila, kaptoprila, enalaprila, lizinoprila, ramiprila, i njihovih kombinacija. Tipično, inhibitor ACE će biti primenjivan u količini koja je dovoljna za obezbeđivanje od oko 1-150 mg na dan.U sledećem primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku su primenjivana u kombinaciji sa dvostruko delujućim inhibitorom angiotenzin-konverzujućeg enzima/neprilizina (ACE/NEP), čiji primeri obuhvataju, ali bez ograničenja na: AVE-0848 ((4S,7S,12bR)-7-[3-metil-2(S)-sulfanilbutiramido]-6-okso-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahidropirido[2,1-a][2]-benzazepin-4-karboksilnu kiselinu); AVE-7688 (ilepatril) i njegovo ishodno jedinjenje; BMS-182657 (2-[2-okso-3(S)-[3-fenil-2(S)-sulfanilpropionamido]-2,3,4,5-tetrahidro-1H-1-benzazepin-1-il]sirćetnu kiselinu); CGS-35601 (N-[1-[4-metil-2(S)-sulfanilpentanamido]ciklopentilkarbonil]-L-triptofan); fasidotril; fasidotrilat; enalaprilat; ER-32935 ((3R,6S,9aR)-6-[3(S)-metil-2(S)-sulfanilpentanamido]-5-oksoperhidrotiazolo[3,2-a]azepin-3-karboksilnu kiselinu); gempatrilat; MDL-101264 ((4S,7S,12bR)-7-[2(S)-(2-morfolinoacetiltio)-3-fenilpropionamido]-6-okso-1,2,3,4,6,7,8,12boktahidropirido[2,1-a][2]benzazepin-4-karboksilnu kiselinu); MDL-101287 ([4S-[4α,7α(R*),12bβ]]-7-[2-(karboksimetil)-3-fenilpropionamido]-6-okso-1,2,3,4,6,7,8,12b-oktahidropirido[2,1-a][2]benzazepin-4-karboksilnu kiselinu); omapatrilat; RB-105 (N-[2(S)-(merkaptometil)-3(R)-fenilbutil]-L-alanin); sampatrilat; SA-898 ((2R,4R)-N-[2-(2-hidroksifenil)-3-(3-merkaptopropionil)tiazolidin-4-ilkarbonil]-L-fenilalanin); Sch-50690 (N-[1(S)-karboksi-2-[N2-(metansulfonil)-L-lizilamino]etil]-L-valil-L-tirozin); i njihove kombinacije, takođe mogu biti uključeni. U jednom posebnom primeru izvođenja, inhibitor ACE/NEP je izabran od: AVE-7688, enalaprilata, fasidotrila, fasidotrilata, omapatrilata, sampatrilata i njihovih kombinacija.
[0114] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku su primenjivana u kombinaciji sa aktivatorom ili stimulatorom angiotenzin-konvertujućeg enzima 2 (ACE2).
[0115] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa vakcinom angiotenzina-II, čiji primeri oubuhvataju, ali bez ograničenja na ATR12181 i CYT006-AngQb.
[0116] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa antikoagulantom, čiji reprezentativni primeri obuhvataju, ali bez ograničenja na: kumarine kao što su varfarin; heparin; i direktne inhibitore trombina kao što su argatroban, bivalirudin, dabigatran i lepirudin.
[0117] U sledećem primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa antidijabetičkim sredstvom. Reprezentativna anti-dijabetička sredstva obuhvataju injektabilne lekove kao i oralno efikasne lekove, i njihove kombinacije. Primeri injektabilnih lekova obuhvataju, ali bez ograničenja na, insulin i derivate insulina. Primeri oralno efikasnih lekova obuhvataju, ali bez ograničenja na: biguanide kao što je metformin; antagoniste glukagona; inhibitore α-glukozidaze kao što su akarboza i miglitol; inhibitore dipeptidil peptidaze IV (inhibitore DPP-IV) kao što su alogliptin, denagliptin, linagliptin, saksagliptin, sitagliptin i vildagliptin; meglitinide kao što je repaglinid; oksadiazolidindione; sulfoniluree kao što su hlorpropamid, glimepirid, glipizid, gliburid i tolazamid; tiazolidindione kao što su pioglitazon i rosiglitazon; i njihove kombinacije.
[0118] U sledećem primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa tretmanima protiv dijareje. Reprezentativne opcije tretmana obuhvataju, ali bez ograničenja na, oralne rastvore za rehidrataciju (ORS), loperamid, difenoksilat i bizmut subsalicilat.
[0119] U sledećem primeru izvođenja, jedinjenje prema pronalasku je primenjeno u kombinaciji sa sredstvom protiv glaukoma. Reprezentativna sredstva protiv glaukoma obuhvataju, ali bez ograničenja na: α-adrenergičke agoniste kao što je brimonidin; antagoniste β1-adrenergičkog receptora; topikalne β1-blokatore kao što su betaksolol, levobunolol i timolol; inhibitore karbonske anhidraze kao što su acetazolamid, brinzolamid ili dorzolamid; holinergičke agoniste kao što su cevimelin i DMXBanabazein; jedinjenja epinefrina; miotike kao što je pilokarpin; i analoge prostaglandina.
[0120] U sledećem primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa anti-lipidnim sredstvom. Reprezentativna anti-lipidna sredstva obuhvataju, ali bez ograničenja na: inhibitore holesteril estar transfer proteina (CETPs) kao što su anacetrapib, dalcetrapib i torcetrapib; statine kao što su atorvastatin, fluvastatin, lovastatin, pravastatin, rosuvastatin i simvastatin; i njihove kombinacije.
[0121] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa antitrombotičkim sredstvom. Reprezentativna anti-trombotička sredstva obuhvataju, ali bez ograničenja na: aspirin; sredstva protiv trombocita kao što su klopidogrel, prasugrel i tiklopidin; heparin, i njihove kombinacije.
[0122] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa antagonistom AT1 receptora, koji su takođe poznati kao blokatori recepora tipa 1 angiotenzina II (ARBs). Reprezentativni ARBs obuhvataju, ali bez ograničenja na, abitesartan, azilsartan (npr., azilsartan medoksomil), benzilosartan, kandesartan, kandesartan cileksetil, elisartan, embusartan, enoltasosartan, eprosartan, EXP3174, fonsartan, forasartan, glicilosartan, irbesartan, izoteolin, losartan, medoksimil, milfasartan, olmesartan (npr., olmesartan medoksomil), opomisartan, pratosartan, ripisartan, saprisartan, saralasin, sarmesin, TAK-591, tasosartan, telmisartan, valsartan, zolasartan i njihove kombinacije. U određenom primeru izvođenja, ARB je izabran od azilsartan medoksomila, kandesartan cileksetila, eprosartana, irbesartana, losartana, olmesartan medoksomila, saprisartana, tasosartana, telmisartana, valsartana i njihovih kombinacija. Primeri soli i/ili prolekova obuhvataju kandesartan cileksetil, eprosartan mezilat, losartan kalijumovu so i olmesartan medoksomil. Tipično, ARB će biti primenjivan u količini koja je dovoljna da se obezbedi od oko 4-600 mg po dozi, sa primerima dnevnih doza u opsegu od 20-320 mg na dan.
[0123] Jedinjenja prema pronalasku takođe mogu biti primenjivana u kombinaciji sa dvostruko delujućim sredstvom, kao što je antagonist AT1receptora /inhibitor neprilizina (ARB/NEP), čiji primeri obuhvataju, ali bez ograničenja na, jedinjenja opisana u SAD objavama br. 2008/0269305 i 2009/0023228, oba za Allegretti et al. podneta 23.04.2008., kao što je jedinjenje, 4’-{2-etoksi-4-etil-5-[((S)-2-merkapto-4-metilpentanoilamino)-metil]imidazol-1-ilmetil}-3’-fluorobifenil-2-karboksilna kiselina.
[0124] Jedinjenja prema pronalasku takođe mogu biti primenjivana u kombinaciji sa multifunkcionalnim blokatorima receptora za angiotenzin kao što su opisani u Kurtz & Klein (2009) Hypertension Research 32:826-834.
[0125] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa antagonistom receptora za bradikinin, na primer, icatibantom (HOE-140). Očekuje se da ova kombinovana terapija može da predstavlja prednost prevencije angioedema ili drugih neželjenih posledica povišenih nivoa bradikinina.
[0126] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa blokatorom kalcijumovih kanala. Reprezentativni blokatori kalcijumovih kanala obuhvataju, ali bez ograničenja na, amlodipin, anipamil, aranipin, barnidipin, benciklan, benidipin, bepridil, klentiazem, kilnidipin, cinarizin, diltiazem, efonidipin, elgodipin, etafenon, felodipin, fendilin, flunarizin, galopamil, isradipin, lacidipin, lerkanidipin, lidoflazin, lomerizin, manidipin, mibefradil, nikardipin, nifedipin, niguldipin, niludipin, nilvadipin, nimodipin, nizoldipin, nitrendipin, nivaldipin, perheksilin, prenilamin, riosidin, semotiadil, terodilin, tiapamil, verapamil i njihove kombinacije. U određenom primeru izvođenja, blokator kalcijumovih kanala je izabran od amlodipina, bepridila, diltiazema, felodipina, isradipina, lacidipina, nikardipina, nifedipina, niguldipina, niludipina, nimodipina, nizoldipina, riosidina, verapamila i njihovih kombinacija. Tipično, blokator kalcijumovih kanala će biti primenjivan u količini koja je dovoljna da obezbedi od oko 2-500 mg po dozi.
[0127] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa inhibitorom himaze, kao što je TPC-806 i 2-(5-formilamino-6-okso-2-fenil-1,6-dihidropirimidin-1-il)-N-[{3,4-diokso-1-fenil-7-(2-piridiloksi)}-2-heptil]acetamid (NK3201).
[0128] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa diuretikom. Reprezentativni diuretici obuhvataju, ali nisu ograničeni na: inhibitore karbonske anhidraze kao što su acetazolamid i dihlorfenamid; diuretike Henlejeve petlje, koji obuhvataju derivate sulfonamida kao što su acetazolamid, ambusid, azosemid, bumetanid, butazolamid, hloraminofenamid, klofenamid, klopamid, kloreksolon, disulfamid, etokszolamid, furosemid, mefrusid, metazolamid, piretanid, torsemid, tripamid i ksipamid, kao ne-sulfonamidne diuretike kao što su etakrinska kiselina i druga jedinjenja fenoksisirćetne kiseline kao što su tienilinska kiselina, indakrinon i hinkarbat; osmotske diuretike kao što je manitol; diuretike koji ne izlučuju kalijum, koji obuhvataju antagoniste aldosterona kao što je spironolakton, i inhibitore Na<+>kanala kao što su amilorid i triamteren; tiazide i diuretike slične tiazidu kao što su altiazid, bendroflumetiazid, benzilhidrohlorotiazid, benztiazid, butiazid, hlortalidon, hlorotiazid, ciklopentiazid, ciklotiazid, epitiazid, etiazid, fenhizon, flumetiazid, hidrohlorotiazid, hidroflumetiazid, indapamid, metilklotiazid, metikran, metolazon, paraflutizid, politiazid, hinetazon, teklotiazid i trihlorometiazid; i njihove kombinacije. U posebnom primeru izvođenja, diuretik je izabran od amilorida, bumetanida, hlorotiazida, hlortalidona, dihlorfenamida, etakrinske kiseline, furosemida, hidrohlorotiazida, hidroflumetiazida, indapamida, metilklotiazida, metolazona, torsemida, triamterena i njihovih kombinacija. Diuretik će biti primenjivan u količini koja je dovoljna da obezbedi od oko 5-50 mg na dan, tipičnije 6-25 mg na dan, da uobičajenim dozama 6.25 mg, 12.5 mg ili 25 mg na dan.
[0129] Jedinjenja prema pronalasku takođe mogu biti primenjivana u kombinaciji sa inhibitorom endotelinkonvertujućeg enzima (ECE), čiji primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na, fosforamidon, CGS 26303 i njihove kombinacije.
[0130] U posebnom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa antagonistom receptora za endotelin. Reprezentativni antagonisti receptora za endotelin obuhvataju, ali nisu ograničeni na: selektivne antagoniste receptora za endotelin koji utiču na receptore za endotelin A, kao što su avosentan, ambrisentan, atrasentan, BQ-123, klazosentan, darusentan, sitaksentan i zibotentan; i dvostruke antagoniste receptora za endotelin koji utiču na oba, receptore za endotelin A i B, kao što su bosentan, macitentan, tezosentan).
[0131] U sledećem primeru izvođenja, jedinjenje prema pronalasku se primenjuje u kombinaciji sa jednim ili više inhbitora HMGCoA reduktaze, koji su takođe poznati kao statini. Reprezentativni statini obuhvataju, ali nisu ograničeni na, atorvastatin, fluvastatin, lovastatin, pitavastatin, pravastatin, rosuvastatin i simvastatin.
[0132] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa inhibitorom ponovnog preuzimanja monoamina, čiji primeri obuhvataju, radi ilustracije, a ne ograničenja, inhibitore ponovnog preuzimanja norepinefrina kao što su atomoksetin, buproprion i metabolit bupropriona hidroksibuproprion, maprotilin, reboksetin i viloksazin; selektivne inhibitore ponovnog preuzimanja serotonina (SSRIs) kao što su citalopram i metabolit citaloprama desmetilcitalopram, dapoksetin, escitalopram (npr., escitalopram oksalat), fluoksetin i metabolit fluoksetin desmetila - norfluoksetin, fluvoksamin (npr., fluvoksamin maleat), paroksetin, sertralin i metabolit sertralina - demetilsertralin; dvostruke inhibitore ponovnog preuzimanja serotoninanorepinefrina (SNRIs) kao što su bicifadin, duloksetin, milnacipran, nefazodon i venlafaksin; i njihove kombinacije.
[0133] U sledećem primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa mišićnim relaksantom, čiji primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na: carisoprodol, hlorzoksazon, ciklobenzaprin, diflunizal, metaksalon, metokarbamol i njihove kombinacije.
[0134] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa natriuretičkim peptidom ili analogom, čiji primeri obuhvataju, ali bez ograničenja na: karperitid, CD-NP (Nile Therapeutics), CU-NP, nesiritid, PL-3994 (Palatin Technologies, Inc.), ularitid, cenderitid, i jedinjenja opisana u Ogawa et al (2004) J. Biol. Chem. 279:28625-31. Ova jedinjenja su takođe označena kao agonisti receptora-A natriuretičkog peptida (NPR-A). U sledećem primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa antagonistom receptora za klirens natriuretičkog peptida (NPR-C) kao što je SC-46542, cANF (4-23) i AP-811 (Veale (2000) Bioorg Med Chem Lett 10:1949-52). Na primer, AP-811 je pokazao sinergiju kada je kombinovan sa inhibitorom NEP, tiorfanom (Wegner (1995) Clin. Exper. Hypert.17:861-876).
[0135] U sledećem primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa inhibitorom neprilizina (NEP). Reprezentativni inhibitori NEP obuhvataju, ali nisu ograničeni na: AHU-377; kandoksatril; kandoksatrilat; deksekadotril ((+)-N-[2(R)-(acetiltiometil)-3-fenilpropionil]glicin benzil estar); CGS-24128 (3-[3-(bifenil-4-il)-2-(fosfonometilamino)propionamido]propionsku kiselinu); CGS-24592 ((S)-3-[3-(bifenil-4-il)-2-(fosfonometilamino)propionamido]propionsku kiselinu); CGS-25155 (N-[9(R)-(acetiltiometil)-10-okso-1-azaciklodekan-2(S)-ilkarbonil]-4(R)-hidroksi-L-prolin benzil estar); derivate 3-(1-karbamoilcikloheksil)propionske kiseline opisane u WO 2006/027680 za Hepworth et al. (Pfizer Inc.); JMV-390-1 (2(R)-benzil-3-(N-hidroksikarbamoil)propionil-L-izoleucil-L-leucin); ekadotril; fosforamidon; retrotiorfan; RU-42827 (2-(merkaptometil)-N-(4-piridinil)benzenpropionamid); RU-44004 (N-(4-morfolinil)-3-fenil-2-(sulfanilmetil)propionamid); SCH-32615 ((S)-N-[N-(1-karboksi-2-feniletil)-L-fenilalanil]-β-alanin) i njegov prolek SCH-34826 ((S)-N-[N-[1-[[(2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metoksi]karbonil]-2-feniletil]-L-fenilalanil]-βalanin); sialorfin; SCH-42495 (N-[2(S)-(acetilsulfanilmetil)-3-(2-metilfenil)propionil]-L-metionin etil estar); spinorfin; SQ-28132 (N-[2-(merkaptometil)-1-okso-3-fenilpropil]leucin); SQ-28603 (N-[2-(merkaptometil)-1-okso-3-fenilpropil]-β-alanin); SQ-29072 (7-[[2-(merkaptometil)-1-okso-3-fenilpropil]amino]heptanska kiselina); tiorfan i njegov prolek racekadotril; UK-69578 (cis-4-[[[1-[2-karboksi-3-(2-metoksietoksi)propil]ciklopentil]karbonil]amino] cikloheksankarboksilna kiselina); UK-447,841 (2-{1-[3-(4-hlorofenil)propilkarbamoil]-ciklopentilmetil}-4-metoksibuterna kiselina); UK-505,749 ((R)-2-metil-3-{1-[3-(2-metilbenzotiazol-6-il)propilkarbamoil]ciklopentil}propionska kiselina); 5-bifenil-4-il-4-(3-karboksipropionilamino)-2-metilpentanska kiselina i etil estar 5-bifenil-4-il-4-(3-karboksipropionilamino)-2-metilpentanske kiseline (WO 2007/056546); daglutril [(3S,2’R)-3-{1-[2’-(etoksikarbonil)-4’-fenilbutil]-ciklopentan-1-karbonilamino}-2,3,4,5-tetrahidro-2-okso-1H-1-benzazepin-1-sirćetna kiselina] opisan u WO 2007/106708 za Khder et al. (Novartis AG); i njihove kombinacije. U posebnom primeru izvođenja, inhibitor NEP je izabran od AHU-377, kandoksatrila, kandoksatrilata, CGS-24128, fosforamidona, SCH-32615, SCH-34826, SQ-28603, tiorfana i njihovih kombinacija. U posebnom primeru izvođenja, inhibitor NEP je jedinjenje kao što je daglutril ili CGS-26303 ([N-[2-(bifenil-4-il)-1(S)-(1H-tetrazol-5-il)etil]amino]metilfosfonska kiselina), koji imaju aktivnost kao inhibitori oba, endotelin-konvertujućeg enzima (ECE) i inhibitori NEP. Druga dvostruko delujuća jedinjenja na ECE/NEP takođe se mogu koristiti. Inhibitor NEP će biti primenjivan u količini koja je dovoljna da obezbedi od oko 20-800 mg na dan, sa tipičnim dnevnim dozama u opsegu od 50-700 mg na dan, uobičajenije 100-600 ili 100-300 mg na dan.
[0136] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa donorom azot oksida, čiji primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na nikorandil; organske nitrate kao što je pentaeritritol tetranitrat; i sidnonimine kao što je linzidomin i molsidomin.
[0137] U sledećem primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa nesteroidnim anti-inflamatornim sredstvom (NSAID). Reprezentativna NSAID obuhvataju, ali nisu ograničeni na: acemetacin, acetil salicilnu kiselinu, alklofenak, alminoprofen, amfenak, amipriloz, aloksiprin, anirolak, apazon, azapropazon, benorilat, benoksaprofen, bezpiperilon, broperamol, 3-hloro-4-cikloheksil-α-oksobenzenbuternu kiselinu, karprofen, klidanak, diklofenak, diflunizal, diftalon, enolikam, etodolak, etorikoksib, fenbufen, fenklofenak, fenklozinska kiselina, fenoprofen, fentiazak, feprazon, flufenaminska kiselina, flufenizal, fluprofen, flurbiprofen, furofenak, ibufenak, ibuprofen, indometacin, indoprofen, izoksepak, izoksikam, ketoprofen, ketorolak, lofemizol, lornoksikam, meklofenamat, meklofenaminsku kiselinu, mefenaminsku kiselinu, meloksikam, mezalamin, miroprofen, mofebutazon, nabumeton, naproksen, nifluminsku kiselinu, oksaprozin, okspinak, oksifenbutazon, fenilbutazon, piroksikam, pirprofen, pranoprofen, salsalat, sudoksikam, sulfasalazin, sulindak, suprofen, tenoksikam, tiopinak, tiaprofeninsku kiselinu, tioksaprofen, tolfenaminsku kiselinu, tolmetin, triflumidat, zidometacin, zomepirak i njihove kombinacije. U posebnom primeru izvođenja, NSAID je izabran od etodolaka, flurbiprofena, ibuprofena, indometacina, ketoprofena, ketorolaka, meloksikama, naproksena, oksaprozina, piroksikama i njihovih kombinacija.
[0138] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa antagonistom receptora za N-metil d-aspartat (NMDA), čiji primeri obuhvataju, radi ilustracije, a ne ograničenja, amantadin, dekstrometorfan, dekstropropoksifen, ketamin, ketobemidon, memantin, metadon i tako dalje.
[0139] U sledećem primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa agonistom opioidnog receptora (takođe označeni kao opioidni analgetici). Reprezentativni agonisti opioidnog receptora obuhvataju, ali nisu ograničeni na: buprenorfin, butorfanol, kodein, dihidrokodein, fentanil, hidrokodon, hidromorfon, levalorfan, levorfanol, meperidin, metadon, morfin, nalbufin, nalmefen, nalorfin, nalokson, naltrekson, nalorfin, oksikodon, oksimorfon, pentazocin, propoksifen, tramadol i njihove kombinacije. U određenim primerima izvođenja, agonist opioidnog receptora je izabran od kodeina, dihidrokodeina, hidrokodona, hidromorfona, morfina, oksikodona, oksimorfona, tramadola i njihovih kombinacija.
[0140] U određenom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa inhibitorom fosfodiesteraze (PDE), naročito inhibitorom PDE-V. Reprezentativni inhibitori PDE-V obuhvataju, ali nisu ograničeni na, avanafil, lodenafil, mirodenafil, sildenafil (Revatio®), tadalafil (Adcirca®), vardenafil (Levitra®) i udenafil.
[0141] U sledećem primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa analogom prostaglandina (takođe označeni kao prostanoidi ili analozi prostaciklina). Reprezentativni analozi prostaglandina obuhvataju, ali bez ograničenja na, beraprost natrijum, bimatoprost, epoprostenol, iloprost, latanoprost, tafluprost, travoprost i treprostinil, pri čemu su od posebnog interesa bimatoprost, latanoprost i tafluprost.
[0142] U sledećem primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa agonistom receptora za prostaglandin, čiji primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na, bimatoprost, latanoprost, travoprost i tako dalje.
[0143] Jedinjenja prema pronalasku takođe mogu biti primenjivana u kombinaciji sa inhibitorom renina, čiji primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na, aliskiren, enalkiren, remikiren i njihove kombinacije.
[0144] U sledećem primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa selektivnim inhibitorom ponovnog preuzimanja serotonina (SSRI). Reprezentativni SSRIs obuhvataju, ali nisu ograničeni na: citalopram i metabolit citaloprama - desmetilcitalopram, dapoksetin, escitalopram (npr., escitalopram oksalat), fluoksetin i metabolit fluoksetin desmetila - norfluoksetin, fluvoksamin (npr., fluvoksamin maleat), paroksetin, sertralin i metabolit sertralina - demetilsertralin, i njihove kombinacije.
[0145] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa agonistom receptora za 5-HT1D serotonin, čiji primeri obuhvataju, radi ilustracije, a ne ograničenja, triptane kao što su almotriptan, avitriptan, eletriptan, frovatriptan, naratriptan rizatriptan, sumatriptan i zolmitriptan.
[0146] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa blokatorom natrijumovih kanala, čiji primeri obuhvataju, radi ilustracije, a ne ograničenja, karbamazepin, fosfenitoin, lamotrigin, lidokain, meksiletin, okskarbazepin, fenitoin i njihove kombinacije.
[0147] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa rastvorljivim stimulatorom ili aktivatorom guanilat ciklaze, čiji primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na ataciguat, riociguat i njihove kombinacije.
[0148] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa tricikličnim antidepresivom (TCA), čiji primeri obuhvataju, radi ilustracije, a ne ograničenja, amitriptilin, amitriptilinoksid, butriptilin, klomipramin, demeksiptilin, desipramin, dibenzepin, dimetakrin, dosulepin, doksepin, imipramin, imipraminoksid, lofepramin, melitracen, metapramin, nitroksazepin, nortriptilin, noksiptilin, pipofezin, propizepin, protriptilin, hinupramin i njihove kombinacije.
[0149] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku se primenjuju u kombinaciji sa antagonistom receptora za vazopresin, čiji primeri obuhvataju, radi ilustracije, a ne ograničenja, konivaptan i tolvaptan.
[0150] Kombinovana sekundarna terapeutska sredstva takođe mogu biti korisna u dodatnom kombinovanoj terapiji sa jedinjenjima prema pronalasku. Na primer, jedinjenja prema pronalasku mogu biti kombinovana sa diuretikom i ARB, ili blokatorom kalcijumovih kanala i ARB, ili diuretikom i inhibitorom ACE, ili blokatorom kalcijumovih kanala i statinom. Specifični primeri obuhvataju, kombinaciju inhibitora ACE - enalaprila (u obliku maleatne soli) i diuretika hidrohlorotiazida, koji se prodaje pod žigom Vaseretic®, ili kombinaciju blokatora kalcijumovih kanala amlodipina (u obliku bezilat soli) i ARB olmesartana (u obliku medoksomil proleka), ili kombinaciju blokatora kalcijumovih kanala i statina, svi mogu biti korišćeni sa jedinjenjima prema pronalasku. Druga terapeutska sredstva kao što su agonisti α2-adrenergičkog receptora i antagonisti receptora za vazopresin takođe mogu biti korisna u kombinovanoj terapiji. Primeri agonista α2-adrenergičkih receptora obuhvataju klonidin, deksmedetomidin i guanfacin.
[0151] Sledeće formulacije ilustruju reprezentativne farmaceutske kompozicije prema pronalasku.
Primeri tvrdih želatinskih kapsula za oralnu primenu
[0152] Jedinjenje prema pronalasku (50 g), 440 g raspršivanjem osušene laktoze i 10 g magnezijum stearata temeljno je mešano. Dobijena kompozicija je zatim sipana u tvrde žeatinske kapsule (500 mg kompozicije po kapsuli). Alternativno, jedinjenje prema pronalasku (20 mg) je temeljno mešano sa skrobom (89 mg), mikrokristalnom celulozom (89 mg) i magnezijum stearatom (2 mg). Smeša je zatim propuštana kroz SAD sito veličine okca br.45 i sipana u tvrdu želatinsku kapsulu (200 mg kompozicije po kapsuli).
[0153] Alternativno, jedinjenje prema pronalasku (30 g), sekundarno sredstvo (20 g), 440 g laktoze osušena raspršivanjem i 10 g magnezijum stearata su temeljno mešani, i obrađeni kao što je opisano u prethodnom tekstu.
Primer formulacije želatinske kapsule za oralnu primenu
[0154] Jedinjenje prema pronalasku (100 mg) je temeljno mešano sa polioksietilen sorbitan monooleatom (50 mg) i skrobom u prahu (250 mg). Smeša je zatim sipana u želatinsku kapsulu (400 mg kompozicije po kapsuli). Alternativno, jedinjenje prema pronalasku (70 mg) i sekundarno sredstvo (30 mg) su temeljno mešani sa polioksietilen sorbitan monooleatom (50 mg) i skrobom u prahu (250 mg), i dobijena smeša je sipana u želatinsku kapsulu (400 mg kompozicije po kapsuli).
[0155] Alternativno, jedinjenje prema pronalasku (40 mg) je temeljno mešano sa mikrokristalnom celulozom (Avicel PH 103; 259.2 mg) i magnezijum stearatom (0.8 mg). Smeša je zatim sipana u želatinske kapsule (veličina #1, bele, neprovidne) (300 mg kompozicije po kapsuli).
Primer formulacije tablete za oralnu primenu
[0156] Jedinjenje prema pronalasku (10 mg), skrob (45 mg) i mikrokristalna celuloza (35 mg) su propuštani kroz SAD sito sa veličinom okca br. 20 i temeljno mešani. Tako proizvedene granule su sušene na 50-60°C i propuštane kroz SAD sito sa veličinom okca br.16.
[0157] Rastvor polivinilpirolidona (4 mg kao 10 % rastvor u sterilnoj vodi) je mešan sa natrijum karboksimetil skrobom (4.5 mg), magnezijum stearatom (0.5 mg), i talkom (1 mg), i ova smeša je zatim propuštena kroz SAD sito sa veličinom okca br. 16. Natrijum karboksimetil skrob, magnezijum stearat i talk su zatim dodati u granule. Posle mešanja, smeša je presovana na mašini za tablete da bi se dobila tableta težine 100 mg.
[0158] Alternativno, jedinjenje prema pronalasku (250 mg) je temeljno mešano sa mikrokristalnom celulozom (400 mg), stopljenim silicijum dioksidom (10 mg), i stearinskom kiselinom (5 mg). Smeša je zatim presovana da bi se formirale tablete (665 mg kompozicije po tableti).
[0159] Alternativno, jedinjenje prema pronalasku (400 mg) je temeljno mešano sa kukuruznim skrobom (50 mg), kroskarmeloza natrijumom (25 mg), laktozom (120 mg) i magnezijum stearatom (5 mg). Smeša je zatim presovana da bi se formirala tableta sa jednim zarezom (600 mg kompozicije po tableti).
[0160] Alternativno, jedinjenje prema pronalasku (100 mg) je temeljno mešano sa kukuruznim skrobom (100 mg) sa vodenim rastvorom želatina (20 mg). Smeša je sušena i mlevena do finog praha. Mikrokristalna celuloza (50 mg) i magnezijum stearat (5 mg) su zatim mešani sa formulacijom želatina, granulisani i dobijena smeša je presovana da bi se formirale tablete (100 mg jedinjenja prema pronalasku po tableti).
Primer formulacije suspenzije za oralnu primenu
[0161] Sledeći sastojci su mešani da bi se formirala suspenzija koja sadrži 100 mg jedinjenja prema pronalasku na 10 mL suspenzije:
Sastojci Količina
Jedinjenje prema pronalasku 1.0 g
Fumarna kiselina 0.5 g
Natrijum hlorid 2.0 g
Metil paraben 0.15 g
Propil paraben 0.05 g
Granulisani šećer 25.5 g
Sorbitol (70% rastvor) 12.85 g
Veegum® K (magnezijum aluminijum silikat)1.0 g
Aroma 0.035 mL
Boje 0.5 mg
Destilovana voda Do 100 mL
Primer tečne formulacije za oralnu primenu
[0162] Pogodna tečna formulacija je ona sa puferom na bazi karboksilne kiseline kao što su citratni, laktatni i maleatni puferski rastvori. Na primer, jedinjenje prema pronalasku (koje može biti prethodno mešano sa DMSO) je mešano sa 100 mM amonijum citratnim puferom i pH je podešena do pH 5, ili mešano sa 100 mM rastvorom limunske kiseline i pH je podešena do pH 2. Takvi rastvori takođe mogu da obuhvataju solubilizujući ekscipijens kao što je ciklodekstrin, na primer rastvor može da obuhvata 10 tež.% hidroksipropil-β-ciklodekstrin.
[0163] Druge pogodne formulacije obuhvataju 5% rastvor NaHCO3, sa ili bez ciklodekstrina.
Primer injektabilne formulacije za primenu pomoću injekcije
[0164] Jedinjenje prema pronalasku (0.2 g) je mešano sa 0.4 M rastvorom natrijum acetatnog pufera (2.0 mL). pH dobijenog rastvora je podešena do pH 4 upotrebom 0.5 N vodenog rastvora hlorovodonične kiseline ili 0.5 N vodenog rastvora natrijum hidroksida, kako je neophodno, i zatim je dodato dovljno vode za injekciju da bi se obezbedila ukupna zapremina od 20 mL. Smeša je zatim filtrirana kroz sterilni filter (0.22 mikrona) da bi se obezbedio sterilni rastvor pogodan za primenu pomoću injekcije.
Primeri kompozicija za primenu pomoću inhalacije
[0165] Jedinjenje prema pronalasku (0.2 mg) je mikronizovano i zatim mešano sa laktozom (25 mg). Ova mešana smeša je zatim sipana u želatinski inhalacioni kertridž. Sadržaj kertridža je primenjen upotrebom inhalatora suvog praha, na primer.
[0166] Alternativno, mikronizovano jedinjenje prema pronalasku (10 g) je dispergovano u rastvoru pripremljenom rastvaranjem lecitina (0.2 g) u demineralizovanoj vodi (200 mL). Dobijena suspenzija je sušena raspršivanjem i zatim mikronizovana da bi se formirala mikronizovana kompozicija koja sadrži čestice koje imaju srednji prečnik manji od oko 1.5 µm. Mikronizovana kompozicija je zatim sipana u kertridže inhalatora sa izmerenom dozom koja sadrži 1,1,1,2-tetrafluoroetan pod pritiskom u količini koja je dovoljna da se obezbedi oko 10 µg do oko 500 µg jedinjenja prema pronalasku po dozi kada je primenjena pomoću inhalatora.
[0167] Alternativno, jedinjenje prema pronalasku (25 mg) je rastvoreno u citratnom puferisanom (pH 5) izotoničnom fiziološkom rastvoru (125 mL). Smeša je mešana i ultrazvučno obrađivana sve dok jednjenje nije rastvoreno. pH rastvora je proverena i podešena, ako je neophodno, do pH 5 laganim dodavanjem vodenog 1 N NaOH. Rastvor je primenjen upotrebom uređaja raspršivača koji obezbeđuje oko 10 µg do oko 500 µg jedinjenja prema pronalasku po dozi.
PRIMERI
[0168] Sledeće Pripreme i Primeri su obezbeđeni radi ilustracije specifičnih primera izvođenja prema pronalasku. Ovi specifični primeri izvođenja, međutim, nisu određeni tako da ograničavaju obim pronalaska ni na koji način osim ukoliko nije specifično navedeno.
[0169] Sledeće skraćenice imaju sledeća značenja osim ukoliko nije drugačije naznačeno i bilo koje druge skraćenice koje su ovde korišćene i nisu definisane imaju svoje standardno, opšte prihvaćeno značenje:
AcOH sirćetna kiselina
BOC t-butoksikarbonil (-C(O)OC(CH3)3)
(BOC)2O di-t-butil dikarbonat
DCC dicikloheksilkarbodiimid
DCM dihlorometan ili metilen hlorid
DIPEA N,N-diizopropiletilamin
DMA N,N-dimetilacetamid
DMAP 4-dimetilaminopiridin
DMF N,N-dimetilformamid
EDC 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilkarbodiimid
Et3N trietilamin
Et2O dietil etar
Et3SiH trietilsilan
EtOAc etil acetat
EtOH etanol
HATU N,N,N’,N’-tetrametil-O-(7-azabenzotriazol-1-il)uronijum heksafluorofosfat
HCTU 2-(6-hloro-1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametilaminijum heksafluorofosfat
HEPES 4-(2-hidroksietil)-1-piperazinetansulfonska kiselina
HOBt 1-hidroksibenzotriazol
MeCN acetonitril
MeOH metanol
NaHMDS natrijum heksametildisilazid
Pd(dppf)2Cl21,1-bis(difenilfosfino)ferocen paladijum hlorid
Pd(PPH3)4tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0)
PE petrol etar
PMB p-metoksibenzil
PyBOP benzotriazol-1-iloksitris(pirolidino)fosfonijum heksafluorofosfat
SilicaCat®DPP-Pd difenilfosfin paladijumski (II) katalizator na bazi silicijum dioksida
TFA trifluorosirćetna kiselina
THF tetrahidrofuran
TMSCl trimetilsilil hlorid
Tr tritil
[0170] Osim ukoliko nije naznačeno drugačije, svi materijali, kao što su reagensi, početni materijali i rastvarači, su kupljeni od komercijalnih nabavljača (kao što su Sigma-Aldrich, Fluka Riedel-de Haën, i slično) i korišćeni su bez dodatnog prečišćavanja.
[0171] Reakcije su izvođene pod atmosferom azota, osim ukoliko nije naznačeno drugačije. Napredovanje reakcija je praćeno pomoću tankoslojne hromatografije (TLC), analitičke tečne hromatografije visokog učinka (anal. HPLC), i masene spektrometrije, čiji detalji su dati u specifičnim primerima. Rastvarači korišćeni u analitičkoj HPLC su bili kao što sledi: rastvarač A je bio 98% H2O/2% MeCN /1.0 mL/L TFA; rastvarač B je bio 90% MeCN/10% H2O/1.0 mL/L TFA.
[0172] Reakcije su obrađene kao što je specifično opisano u svakoj Pripremi na primer; uobičajene reakcione smeše su prečišćene ekstrakcijom i drugim postupcima prečišćavanja kao što su kristalizacija i taloženje zavisni od temperature i rastvarača. Pored toga, reakcione smeše su rutinski prečišćene pomoću preparativne HPLC, tipično upotrebom pakovanja Microsorb C18 i Microsorb BDS kolone i uobičajenih eluenata. Napredovanje reakcija je tipično mereno pomoću tečne hromatografije masene spektrometrije (LCMS). Karakterizacija izomera je izvedena pomoću nuklearne spektroskopije efekta Overhauzera (NOE). Karakterizacija reakcionih proizvoda je rutinski izvedena pomoću masene i<1>H-NMR spektrometrije. Za NMR merenje, uzorci su rastvoreni u deuterisanom rastvaraču (CD3OD, CDCl3, ili DMSO-d6), i<1>H-NMR spektri su dobijeni sa Varian Gemini 2000 instrumentom (400 MHz) pod standardnim uslovima posmatranja. Masena spektrometrijska identifikacija jedinjenja je tipično izvedena upotrebom elektrosprej jonizacionog postupka (ESMS) sa Applied Biosystems (Foster City, CA) model API 150 EX instrumentom ili Agilent (Palo Alto, CA) model 1200 LC/MSD instrumentom.
Priprema 1: t-Butil estar (S)-2-(4-Bromobenzil)-5-oksopirolidin-1-karboksilne kiseline
[0173]
[0174] U rastvor (R)-2-amino-3-(4-bromofenil)propionske kiseline (50 g, 0.2 mol) u MeCN (700 mL) dodat je rastvor NaOH (16.4 g, 0.4 mol) u vodi (700 mL) na -5°C. Posle mešanja u trajanju od 10 minuta, dodat je rastvor (BOC)2O (44.7 g, 0.2 mol) u MeCN (100 mL). Smeša je zagrevana do sobne temperature i mešana preko noći. Posle isparavanja MeCN, ostatak je razblažen sa DCM (800 mL) i zakišeljen sa 1 M HCl do pH 2 na -5°C. Vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (3x200 mL). Spojeni organski slojevi su isrpani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (500 mL), sušeni preko Na2SO4i koncentrovani da bi se proizvelo jedinjenje 1 (66.5 g) kao bela čvrsta supstanca. LC-MS: 366 (M+Na), 709 (2M+Na).
[0175] U rastvor jedinjenja 1 (66.5 g, 193 µmol), Meldrumove kiseline (33.4 g, 232 mmol) i DMAP (37.7 g, 309 mmol) u anhidrovanom DCM (600 mL), ukapavanjem je dodavan rastvor DCC (47.9 g, 232 mmol) u anhidrovanom DCM (200 mL) tokom 1 časa na -5°C pod azotom. Smeša je mešana na -5°C u trajanju od 8 časova, zatim je držana u frižideru preko noći. Zabeleženi su kristali dicikloheksiluree. Smeša je filtrirana, isprana sa 5% KHSO4(5x200 mL) i zasićenim vodenim rastvorom NaCl (200 mL), zatim sušena preko anhidrovanog MgSO4uz držanje u frižideru preko noći. Rastvor je zatim isparavan da bi se proizvelo sirovo jedinjenje 2 (91 g) kao svetlo žuta čvrsta supstanca. LC-MS: 492(M+Na), 961(2M+Na).
[0176] U rastvor sirovog jedinjenja 2 (91 g, 193 mmol) u anhidrovanom DCM (1 L) dodat je AcOH (127.5 g, 2.1 mol) na -5°C pod azotom. Smeša je mešana na -5°C u trajanju od 30 minuta, zatim je NaBH4(18.3 g, 483 mmol) dodavan u malim porcijama tokom 1 časa. Posle mešanja tokom još 1 časa na -5°C, dodat je zasićeni vodeni rastvor NaCl (500 mL). Organski sloj je ispran zasićenim vodenim rastvorom NaCl (2x300 mL) i vodom (2x300 mL), sušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan da bi se proizveo sirovi proizvod, koji je dalje prečišćen ispiranjem sa Et2O da bi se proizvelo jedinjenje 3 (68 g) kao svetlo žuta čvrsta supstanca. LC-MS: 478 (M+Na), 933 (2M+Na).
[0177] Rastvor 3 (68 g, 149 mmol) u anhidrovanom toluenu (500 mL) je refluksovan pod azotom u trajanju od 3 časa. Posle isparavanja rastvarača, ostatak je prečišćen hromatografijom (heksani:EtOAc=10:1) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (38 g) kao svetlo žuto ulje. LC-MS: 376 (M+Na), 729 (2M+Na).
Priprema 2: (3R,SR)-5-(3’-Hlorobifenil-4-ilmetil)-1-(2,2-dimetilpropionil)-3-hidroksipirolidin-2-on
[0178]
[0179] U rastvor t-butil estra (S)-2-(4-bromobenzil)-5-oksopirolidin-1-karboksilne kiseline (15 g, 43 mmol) u 1,4-dioksanu (600 mL) je dodata 3-hlorofenilborna kiselina (8 g, 51 mmol) i Pd(dppf)2Cl2(3.1 g, 4.2 mmol) na sobnoj temperaturi pod azotom. Posle mešanja u trajanju od 10 minuta, dodat je rastvor K2CO3(11.7 g, 85 mmol) u vodi (60 mL). Smeša je zagrevana do 60°C i mešana preko noći. Posle ispiranja rastvarača, dodata je voda (200 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3x200 mL). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (400 mL), sušeni preko Na2SO4i koncentrovani da bi se proizveo sirovi proizvod koji je dalje prečišćen hromatografijom na koloni (heksani:EtOAc=6:1) da bi se proizvelo jedinjenje 1 (15 g) kao svetlo žuta čvrsta supstanca. LC-MS: 408 (M+Na).
[0180] U rastvor jedinjenja 1 (15 g, 0.039 mol) u anhidrovanom DCM (250 mL) dodata je TFA (20 mL, 270 mmol) na -5°C pod azotom. Smeša je zagrevana do sobne temperature i mešana preko noći. Posle isparavanja rastvarača, ostatak je razblažen sa EtOAc (300 mL), zatim ispran zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(3x200 mL), vodom (200 mL) i zasićenim vodenim rastvorom NaCl (250 mL), zatim sušen preko Na2SO4i koncentrovan da bi se proizvelo sirovo jedinjenje 2 (11 g) kao svetlo žuta čvrsta supstanca. LC-MS: 286 [M+H].
[0181] U rastvor NaH (2.3 g, 98 mmol) u anhidrovanom THF (200 mL) ukapavanjem je dodavan rastvor jedinjenja 2 (11 g, 39 mmol) u anhidrovanom THF (100 mL) tokom 30 minuta na 0°C pod azotom. Smeša je zagrevana do sobne temperature i mešana 2 časa. Posle hlađenja do 0°C, pivaloil hlorid (6 g, 51 mmol) ukapavanjem je dodavan tokom 30 minuta. Smeša je zagrevana do sobne temperature i mešana preko noći. Reakcija je ugašena zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl (200 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3x200 mL). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (300 mL), sušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani da bi se proizveo sirovi proizvod koji je dalje prečišćen hromatografijom (heksani:EtOAc=25:1) da bi se proizvelo jedinjenje 3 (10.5 g) kao svetlo žuta čvrsta supstanca. LC-MS: 391 (M+Na).
[0182] U rastvor jedinjenja 3 (10.5 g, 29 mmol) u anhidrovanom THF (120 mL) ukapavanjem je dodavan NaHMDS (29 mL, 58 mmol) tokom 30 minuta na -78°C pod azotom. Posle mešanja na -78°C u trajanju od 90 minuta, ukapavanjem je dodavan rastvor (+)-(8,8-dihlorokamforilsulfonil)-oksaziridin (15.6 g, 52 mmol) tokom 30 minuta. Posle mešanja na -78°C u trajanju od 2 časa, reakcija je ugašena zasićenim NH4Cl (400 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3x300 mL). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (300 mL), sušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani da bi se dobio sirovi proizvod koji je dalje prečišćen hromatografijom (heksani:EtOAc=15:1) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (9.6 g) kao svetlo žuta čvrsta supstanca. LC-MS: 408 (M+Na).
Priprema 3: Etil estar (2R, 4R)-4-Amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline
[0183]
[0184] Rastvor (3R,5R)-5-(3’-hlorobifenil-4-ilmetil)-1-(2,2-dimetilpropionil)-3-hidroksipirolidin-2-ona (9.6 g, 25 mmol) u koncentrovanoj HCl (81 mL, 81 mmol) zagrevan je na 100°C u trajanju od 16 časova. Smeša je zatim koncentrovana da bi se dobio sirovi proizvod koji je dalje prečišćen ispiranjem sa Et2O da bi se proizvelo jedinjenje 1 (5.7 g) kao svetlo žuta čvrsta HCl so. LC-MS: 320 (M+ H).
[0185] U rastvor jedinjenja 1 (5.7 g, 18 mmol) u EtOH (10 mL) dodata je 8M HCl u EtOH (120 mL, 960 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je zagrevana na 50°C u trajanju od 16 časova. Posle koncentrovanja, sirovi proizvod je dalje prečišćen ispiranjem sa Et2O da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (2.1 g) kao svetlo žuta čvrsta HCl so. LC-MS: 348 (M+ H).
Priprema 4: Etil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(3-hidroksi-3H-benzotriazol-5-karbonil)amino]pentanske kiseline
[0186]
[0187] HATU (328 mg, 862 µmol) je dodat u rastvor 1-hidroksi-1H-1,2,3-benzotriazol-6-karboksilne kiseline (154 mg, 862 µmol) u DMF (1.5 mL, 19.5 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 10 minuta. DIPEA (0.3 mL, 1.7 mmol) je dodat u smešu, a zatim i etil estar (2R, 4R)-4-amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (200 mg, 575 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 1 časa. Smeša je koncetrovana in vacuo i dobijeni ostatak je prečišćen reverzno faznom hromatografijom (35-80% MeCN u vodi sa 0.05% TFA) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (197 mg) kao bela čvrsta supstanca.
Priprema 5: (2R,4R)-4-t-Butoksikarbonilamino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanska kiselina
[0188]
[0189] Rastvor (3R,5R)-5-(3’-hlorobifenil-4-ilmetil)-1-(2,2-dimetilpropionil)-3-hidroksipirolidin-2-ona (4.5 g, 11.7 mmol) u koncentrovanoj HCl (30 mL) je mešan na 100°C u trajanju od 16 časova. Smeša je koncentrovana in vacuo da bi se proizvelo jedinjenje 1 (4 g) kao bela čvrsta HCl so. LC-MS: 321 [M+H]<+>.
[0190] U rastvor NaOH (1.8 g, 45.2 mmol) u vodi (100 mL), ukapavanjem je dodato jedinjenje 1 (4 g, 11.3 mmol) u MeCN (100 mL). Smeša je mešana 10 minuta na 0°C. Di-t-butildikarbonat (7.17 g, 33.8 mmol) je dodat i smeša je mešana 15 časova na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana in vacuo da bi se uklonio MeCN, zatim je razblažena sa DCM (300 mL), i pH je podešena do pH=5-6 sa 1N vodenim rastvorom HCl. Zatim je organski sloj sakupljen i ostatak je ekstrahovan sa DCM (3x300 mL). Spojeni organski slojevi su koncentrovani i isprani heksanima (150 mL) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (4 g) kao bela čvrsta supstanca. LC-MS: 442 [M+Na]<+>.
Priprema 6: 2,2,3,3,3-pentafluoropropil estar (2R,4R)-4-Amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline
[0191]
[0192] U rastvor (2R,4R)-4-t-Butoksikarbonilamino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (0.9 g, 6 mmol) i 2,2,3,3,3-pentafluoropropan-1-ola (450 mg, 3 mmol) u DCM (30 mL) dodat je DCC (880 mg, 4.3 mmol) i DMAP (260 mg, 2.1 mmol). Dobijena smeša je mešana 15 časova na sobnoj temperaturi, zatim koncentrovana in vacuo. Ostatak je rastvoren u EtOAc (100 mL) i ispran vodom (30 mL) i zasićenim vodenim rastvorom NaCl (30 mL). Organski sloj je sakupljen i koncentrovan i prečišćen hromatografijom na koloni (heksani/EtOAc=5:1) da bi se proizvelo jedinjenje 3 (0.4 g) kao bela čvrsta supstanca. LC-MS: 574 [M+Na]<+>.
[0193] Rastvor jedinjenja 1 (0.4 g, 690 µmol) u 1.4 M HCl u rastvoru 1,4-dioksana (15 mL) je mešan preko noći, i zatim koncentrovan in vacuo. Ostatak je dispergovan u EtOAc (10 mL), i talog je sakupljen filtracijom da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta HCl so (165 mg). LC-MS: 452 [M+H]<+>.<1>H NMR: (DMSO-d6) 1.95-1.82 (m, 2H), 2.99-2.98 (m, 2H), 3.56 (br, 1H), 4.41-4.38 (m, 1H), 4.92-4.82(m, 2H), 6.35(s, 1H), 7.71-7.38 (m, 8H), 8.09 (s, 3H).
Priprema 7: 5-Metil-2-okso[1,3]dioksol-4-ilmetil estar (2R,4R)-4-Amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline
[0194]
[0195] Suspenzija (2R,4R)-4-t-butoksikarbonilamino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (740 mg, 1.8 mmol), 4-(bromometil)-5-metil-1,3-dioksol-2-ona (340 mg, 1.8 mmol), kalijum jodida (58 mg, 350 µmol), i K2CO3(486 mg, 3.5 mmol) u DMF (20 mL) mešana je 4 časa na sobnoj temperaturi. Smeša je razblažena sa EtOAc (150 mL) i isprana vodom (30 mL). Organski sloj je sakupljen i koncentrovan i prečišćen hromatografijom na koloni (heksani/EtOAc=1:1) da bi se proizvela bela čvrsta supstanca (490 mg). LC-MS: 554 [M+23]<+>. Rastvor ove čvrste supstance (476 mg, 890 µmol) u 3 N HCl u 1,4-dioksanu (20 mL) je mešan preko noći, i zatim koncentrovan in vacuo. Ostatak je dispergovan u EtOAc (10 mL), i talog je sakupljen filtracijom da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (290 mg). LC-MS: 432 [M+H]<+>.<1>H NMR: (DMSO-d6) 1.92-1.82 (m, 2H), 2.16 (s, 3H), 2.99 (br, 2H), 3.56 (br, 1H), 4.35-4.32 (m, 1H), 5.017 (s, 2H), 6.17 (s, 1H), 7.39-7.36 (m, 4H), 7.71-7.68 (m, 4H), 8.05 (s, 3H).
Priprema 8: Butiriloksimetil estar (2R,4R)-4-Amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline
[0196]
[0197] Rastvor (2R,4R)-4-t-butoksikarbonilamino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (900 mg, 2.1 mmol), hlorometil butirata (350 mg, 2.6 mmol), natrijum jodida (481 mg, 3.21 mmol) i DIPEA (828 mg, 6.42 mmol) u DMF (20 mL) mešan je u trajanju od 16 časova na 30°C. Smeša je razblažena sa EtOAc (150 mL) i isprana vodom (50 mL) i zasićenim vodenim rastvorom NaCl (50 mL). Organski sloj je sakupljen i koncentrovan i prečišćen hromatografijom na koloni (heksani/EtOAc=5:1) da bi se proizvela bela čvrsta supstanca (240 mg). LC-MS: 542 [M+Na]<+>. Rastvor ove čvrste supstance (240 mg, 460 µmol) u 1.4 M HCl u 1,4-dioksanu (15 mL) je mešan preko noći, i zatim koncentrovan in vacuo. Ostatak je dispergovan u EtOAc (10 mL), i talog je sakupljen filtracijom da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta HCl so (140 mg). LC-MS: 420 [M+H]<+>.
<1>H NMR: (DMSO) 0.85 (t, J=7.5 Hz, 3H), 1.61-1.52 (m, 2H), 1.89-1.86 (m, 2H), 2.30 (t, J=7.5 Hz, 2H), 2.98 (br, 2H), 3.56 (br, 1H), 4.33-4.30 (m, 1H), 5.74-5.68 (m, 2H), 6.21 (s, 1H), 7.37-7.35 (m, 4H), 7.70-7.767 (m, 4H), 8.01 (brs, 3H).
Priprema 9: Etil estar (2R,4R)-4-Amino-5-(4-bromofenil)-2-hidroksipentanske kiseline
[0198]
[0199] U rastvor t-butil estra (S)-2-(4-bromobenzil)-5-oksopirolidin-1-karboksilne kiseline (38 g, 107 mmol) u anhidrovanom DCM (250 mL) dodata je TFA (20 mL, 0.27 mol) na -5°C pod azotom. Smeša je zagrevana do sobne temperature i mešana preko noći. Posle ispravanja rastvarača, ostatak je razblažen sa EtOAc (300 mL) i ispran zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(3x200 mL), vodom (200 mL), zasićenim vodenim rastvorom NaCl (250 mL), sušen preko Na2SO4i koncentrovan da bi se proizvelo sirovo jedinjenje 1 (24 g) kao svetlo žuta čvrsta supstanca. LC-MS: 254 [M+H].
[0200] U rastvor NaH (8.6 g, 250 mmol) u anhidrovanom THF (200 mL) ukapavanjem je dodavan rastvor jedinjenja 1 (24 g, 94 mmol) u anhidrovanom THF (200 mL) tokom 30 minuta na 0°C pod azotom. Smeša je zagrevana do sobne temperature i mešana u trajanju od 2 časa. Posle hlađenja do 0°C, ukapavanjem je dodavan pivaloil hlorid (18 g, 150 mmol) tokom 30 minuta. Smeša je zagrevana do sobne temperature i mešana preko noći. Reakcija je ugašena zasićenim vodenim NH4Cl (300 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3x200 mL). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim NaCl (300 mL), sušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani da bi se proizveo sirovi proizvod, koji je dalje prečišćen hromatografijom (heksani:EtOAc=25:1) da bi se proizvelo jedinjenje 2 (18 g) kao svetlo žuta čvrsta supstanca. LCMS: 360 (M+Na).
[0201] U rastvor jedinjenja 2 (18 g, 53 mmol) u anhidrovanom THF (250 mL) ukapavanjem je dodavan NaHMDS (47.7 mL, 96 mmol) tokom 30 minuta na -78°C pod azotom. Posle mešanja na -78°C u trajanju od 90 minuta, rastvor (+)-(8,8-dihlorokamforilsulfonil)-oksaziridina (31.6 g, 106 mmol) ukapavanjem je dodavan tokom 30 minuta. Posle mešanja na -78°C u trajanju od 2 časa, reakcija je ugašena zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl (400 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3x300 mL). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (300 mL), sušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani da bi se dobio sirovi proizvod koji je dalje prečišćen hromatografijom (heksani:EtOAc=15:1) da bi se proizvelo jedinjenje 3 (8.9 g) kao svetlo žuta čvrsta supstanca. LC-MS: 376 (M+Na).
[0202] Rastvor jedinjenja 3 (8.9 g, 25 mmol) u koncentrovanoj HCl (81 mL, 81 mmol) zagrevan je na 100°C u trajanju od 16 časova. Smeša je zatim koncentrovana da bi se proizveo sirovi proizvod koji je dalje prečišćen ispiranjem sa Et2O da bi se proizvelo jedinjenje 4 (7 g) kao svetlo žuta čvrsta HCl so. LC-MS: 323 (M+ H).
[0203] Rastvor jedinjenja 4 (7 g, 22 mmol) u EtOH (10 mL) je spojen sa 8M HCl u EtOH (120 mL, 960 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je zagrevana na 50°C u trajanju od 16 časova, zatim je koncentrovana. Sirovi proizvod je dalje prečišćen ispiranjem sa Et2O da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (6 g) kao svetlo žuta čvrsta HCl so. LC-MS: 352 (M+ H).
Priprema 10: 5-Hidroksi-1-piridin-2-il-1H-pirazol-3-karboksilna kiselina
[0204]
[0205] U suspenziju etil estra 5-hidroksi-1-piridin-2-il-1h-pirazol-3-karboksilne kiseline (351.6 mg, 1.5 mmol) u MeOH (5.0 mL, 120 mmol) na sobnoj temperaturi dodat je LiOH monohidrat (126.5 mg, 3.0 mmol), formirajući bistar rastvor. Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvor je zatim koncentrovan. U dobijeni ostatak dodat je 1N vodeni rastvor HCl da bi se postigla pH~2, formirajući talog. Dodata je voda (4.0 mL) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 1 časa, zatim filtrirana. Čvrste supstance su isprane vodom i sušene pod vakuumom da bi se proizvela jedinjenja iz naslova kao bela čvrsta supstanca (128 mg).
Priprema 11: (2R,4R)-4-Amino-5-(5’-hloro-2’-fluoro-bifenil-4-il)-2-hidroksipentanska kiselina
[0206]
[0207] U rastvor t-butil estra (S)-2-(4-bromobenzil)-5-oksopirolidin-1-karboksilne kiseline (25 g, 70.6 mmol) u 1,4-dioksanu (500 mL) dodata je 5-hloro-2-fluorofenilborna kiselina (24.6 g, 141 mmol), Pd(PPH3)4(4.1 g, 3.5 mmol) i rastvor K2CO3(17.8 g, 141 mmol) u vodi (90 mL), na sobnoj temperaturi pod azotom. Smeša je zagrevana do 60°C i mešana preko noći. Dodata je voda (500 mL) i rastvarač je isparavan. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc (3x200 mL). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (300 mL) i filtrirani. Filtrat je koncentrovan da bi se proizveo sirovi proizvod koji je prečišćen hromatografijom da bi se proizvelo jedinjenje 1 (22.7 g) kao svetlo žuta čvrsta supstanca. LC-MS: 829.2 [2M+Na<+>].
[0208] U rastvor jedinjenja 1 (4.9 g, 12.1 mol) u DCM (100 mL) dodata je TFA (4.5 mL, 60.7 mmol) na 0°C pod azotom, i mešan 1 čas. Smeša je zagrevana do sobne temperature u trajanju od 1.5 časa. Posle isparavanja rastvarača, ostatak je razblažen sa EtOAc (100 mL), zatim ispran zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(3x100 mL), vodom (2x100 mL), zasićenim vodenim rastvorom NaCl (100 mL), zatim sušen preko Na2SO4. Smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan da bi se proizvelo sirovo jedinjenje 2 (spojeno sa posebnom serijom za ukupno od 16.9 g). LC-MS: 304 [M+H].
[0209] U rastvor NaH (2.4 g, 695 mmol) u THF (200 mL) ukapavanjem je dodavan rastvor jedinjenja 2 (8.5 g, 278 mmol) u THF (50 mL) na 0°C pod azotom. Smeša je zagrevana do sobne temperature i mešana 2 časa. Posle hlađenja do 0°C, ukapavanjem je dodavan pivaloil hlorid (5 g, 41.7 mmol) tokom 30 minuta. Smeša je zagrevana do sobne temperature i mešana 9.5 časova. Reakcija je ugašena zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl (250 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3x400 mL). Spojeni organski slojevi su sušeni preko Na2SO4i koncentrovani da bi se proizveo sirovi proizvod koji je prečišćen hromatografijom da bi se proizvelo jedinejnje 3 (18 g) kao žuta čvrsta supstanca. LC-MS: 388 [M+H<+>].
[0210] U rastvor jedinjenja 3 (9 g, 23.2 mmol) u THF (200 mL) ukapavanjem je dodavan NaHMDS (20.9 mL, 41.8 mmol) na -78°C pod azotom. Posle mešanja od 1 časa na -78°C, ukapavanjem je dodavan rastvor (+)-(8,8-dihlorokamforilsulfonil)oksaziridina (10.4 g, 34.8 mmol) u THF (50 mL). Posle mešanja na -78°C u trajanju od 1 časa, reakcija je ugašena zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl (50 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3x400 mL). Spojeni organski slojevi su isprani sa 1M HCl (400 mL), zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(400 mL), i zasićenim vodenim rastvorom NaCl (400 mL), sušeni preko Na2SO4, i koncentrovani da bi se dobio sirovi proizvod koji je prečišćen hromatografijom da bi se proizvelo jedinjenje 4 (8.8 g) kao bela polu-čvrsta supstanca. LC-MS: 426.1 [M+Na<+>].
[0211] Rastvor jedinjenja 4 (8.8 g, 21.8 mmol) u EtOH (12 mL) je dodat u koncentrovanu HCl (200 mL) i zagrevan na 100°C i mešan preko noći. Smeša je zatim koncentrovana da bi se dobio sirovi proizvod koji je prečišćen ispiranjem sa Et2O (100 mL) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao čvrsta HCl so (7.5 g). LC-MS: 338 [M+ H<+>].
Priprema 12: Etil estar (2R,4R)-4-Amino-5-(5’-hloro-2’-fluorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline
[0212]
[0213] Rastvor jedinjenja 5 (7.5 g, 20.1 mmol) u EtOH/HCl (100 mL) je zagrevan na 50°C preko noći. Smeša je koncentrovana i sirovi proizvod je prečišćen ispiranjem sa Et2O (200 mL) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (6.5 g) kao bela čvrsta HCl so. LC-MS: 366.1 [M+ H<+>].
Priprema 13: Etil estar (2R,4R)-5-(4-Bromofenil)-2-hidroksi-4-[(1-hidroksi-1H-1,2,3-triazol-4-karbonil)amino]pentanske kiseline
[0214]
[0215] 1-Hidroksi-1H-1,2,3-triazol-4-karboksilna kiselina je pripremljena spajanjem etil estra 1-hidroksi-1H-[1,2,3]triazol-4-karboksilne kiseline (2.0 g, 13 mmol), EtOH (25 mL, 430 mmol), i prethodno rastvorenog rastvora LiOH monohidrata (1.6 g, 38.2 mmol) i vode (10 mL, 600 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 4 časa, zatim delimično koncentrovana i zakišeljena sa HCl da bi se izazvalo taloženje. Čvrsta supstanca je filtrirana i sušena pod vakuumom da bi se dobilo 1.3 g željene kiseline.
[0216] 1-Hidroksi-1H-1,2,3-triazol-4-karboksilna kiselina (163 mg, 1.3 mmol) je spojena sa HCTU (523 mg, 1.3 mmol) i DMF, i mešana u trajanju od 5 minuta na sobnoj temperaturi. Dodati su DIPEA (661 µL, 3.8 mmol) i etil estar (2R,4R)-4-amino-5-(4-bromofenil)-2-hidroksipentanske kiseline (0.400 g, 1.26 mmol) i dobijena smeša je mešana 10 minuta. Smeša je isparavana pod sniženim pritiskom i prečišćena (C18 kolona; 20-70% MeCN u vodi sa 5% TFA) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (330 mg).
Priprema 14: 5-(4-Metoksibenziloksi)-1-metil-1H-pirazol-3-karboksilna kiselina
[0217]
[0218] U mešani rastvor metil estra 5-hidroksi-1-metil-1H-pirazol-3-karboksilne kiseline (200 mg, 1 mmol) u DMF (992 µL, 12.8 mmol) na 0°C dodat je K2CO3(195 mg, 1.4 mmol). Posle 10 minuta na 0°C dodat je pmetoksibenzil hlorid (208 µL, 1.5 mmol) i dobijena smeša je mešana na 60°C u trajanju od 1 časa, pre omogućavanja da se hladi do sobne temperature. Dodat je MeOH (2.6 mL, 63.2 mmol), a zatim LiOH (61.4 mg, 2.6 mmol) u vodi (2.6 mL, 142 mmol), i reakcija je praćena da se proveri da li je završena. Rastvarač je uklonjen in vacuo. Voda je dodata u bočicu i sirovi proizvod je zakišeljen sa 1N vodenim rastvorom HCl. Čvrste supstance su filtrirane da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (350 mg).
Priprema 15: (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-{[5-(4-metoksibenziloksi)-1-metil-1H-pirazol-3-karbonil]amino}pentanska kiselina
[0220] 5-(4-Metoksi-benziloksi)-1-metil-1H-pirazol-3-karboksilna kiselina (118.8 mg, 453 µmol) je spojena sa HCTU (187.3 mg, 453 µmol) i DMF (2.0 mL, 25.9 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 15 minuta. Dodati su DIPEA (225 µL, 1.3 mmol) i etil estar (2R,4R)-4-amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (150 mg, 430 µmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 15 minuta. Rastvarač je uklonjen in vacuo. Dodat je EtOH (1.5 mL, 25.9 mmol), a zatim i rastvor 1 M LiOH u vodi (4.3 mL, 4.3 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 1 časa. Rastvarač je uklonjen in vacuo i proizvod je prečišćen pomoću reverzno-fazne hromatografije da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (171 mg).
Priprema 16: 3-(2-Fluorofenil)-izoksazol-5-karbonil hlorid
[0221]
[0222] Oksalil hlorid (0.07 mL, 0.74 mmol) je ukapavanjem dodavan u mešani rastvor 3-(2-fluorofenil)izoksazol-5-karboksilne kiseline (77 mg, 370 µmol) u THF (10 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 2 časa, zatim koncentrovana da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (79 mg), koje je korišćeno bez dodatnog prečišćavanja.
Priprema 17: 3-Metoksiizoksazol-5-karbonil hlorid
[0223]
[0224] U rastvor 3-metoksiizoksazol-5-karboksilne kiseline (420 mg, 3 mmol) u THF(15 mL) i DMF (1 kap) ukapavanjem je dodavan oksalil hlorid (650 µL, 7 mmol) na 0°C. Smeša je zatim mešana na sobnoj temperaturi 3 časa. Rastvor je koncentrovan in vacuo da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao svetlo žuto ulje (430 mg).
Priprema 18: Hlormetil estar (S)-2-t-Butoksikarbonilamino-3-metilbuterne kiseline
[0225]
[0226] U smešu (S)-2-(t-butoksikarbonilamino)-3-metilbuterne kiseline (28.6 g, 130 mmol) i NaHCO3(44 g, 520 mmol) i Bu4NHSO4(4.4 g, 13 mmol) u DCM (200 mL) i vodi (200 mL) dodat je hlorometil sulfohloridat (26 g, 158 mmol) na 0°C. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 24 časa, i zatim je ekstrahovana sa DCM (3x150 mL). Spojeni organski slojevi su isprani vodom (2x300 mL), i DCM sloj je prečišćen pomoću „flash“ kolone (petrol etar:EA=15:1) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (35 g). LC-MS: 266 [M+H]<+>.
Priprema 19: Hlorometil estar (S)-2-Metoksikarbonilamino-3-metilbuterne kiseline
[0227]
[0228] Rastvor hlorometil estra (S)-2-t-butoksikarbonilamino-3-metilbuterne kiseline (35 g, 132 mmol) u DCM (200 mL) ukapavanjem je dodavan rastvor TFA (50 mL) u DCM (100 mL) na 0°C. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći i zatim koncentrovana in vacuo da bi se proizvelo sirovo jedinjenje 1 kao žuto ulje (21.8 g.) LCMS: 166 [M+H]<+>.
[0229] U smešu jedinjenja 1 (21.8 g, 139 mmol) i metil hloroformata (12 mL, 157 mmol) u THF (1 L) dodata je TEA (38 mL, 278 mmol) na 0°C. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 12 časova, zatim je koncentrovana in vacuo. Ostatak je prečišćen pomoću „flash“ kolone (petrol etar:EtOAc=6:1) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (20.3 g). LC-MS: 224 [M+H]<+>.<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6): δ 0.97-1.0 (m, 6H), 2.16-2.21 (m, 1H), 3.68 (s, 1H), 4.14 (d, J=4Hz, 1H), 5.76-5.91(m, 2H).
Priprema 20: Etil estar (2R,4R)-4-Amino-5-bifenil-4-il-2-hidroksipentanske kiseline
[0230]
[0231] U mešani rastvor t-butil estra (S)-2-bifenil-4-ilmetil-5-oksopirolidin-1-karboksilne kiseline (4.4 g, 12.4 mmol) u anhidrovanom THF (70 mL) dodat je rastvor 1 M LiHMDS u THF (28 mL) tokom 15 minuta na -65°C pod azotom. Posle mešanja od 3 časa na -65°C, dodat je oksodiperoksimolibden(piridin) (heksametilfosfornitriamid) (9 g, 18.6 mmol). Smeša je mešana još 2 časa na -35°C, zatim je dodat zasićeni vodeni rastvor Na2S2O3(60 mL). Organski sloj je sakupljen i ispran zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl (60 mL x 3) i zasićenim vodenim rastvorom NaCl (60 mL x 2), zatim sušen preko Na2SO4, i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da bi se proizveo sirovi proizvod koji je dalje prečišćen hromatografijom (heksani:EtOAc = 5:1) da bi se proizvelo jedinjenje 1 kao bela čvrsta supstanca (1.8 g). LC-MS: 757 [2M+Na].
[0232] U rastvor jedinjenja 1 (1.8 g, 5.0 mmol) u anhidrovanom DCM (50 mL) dodat je DMAP (122 mg, 1 mmol) i Et3N (1.5 g, 14.9 mmol) na 0°C pod azotom. Posle mešanja u trajanju od 0.5 časa na 0°C, benzil hlorid (1.0 g, 7.4 mmol) je dodavan tokom 15 minuta. Smeša je mešana dodatna 2 časa na 0°C, zatim je dodat zasićeni vodeni rastvor NaHCO3(50 mL). Organski sloj je sakupljen i ispran zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(50 mL x 2) i zasićenim vodenim rastvorom NaCl (50 mL x 1), zatim sušen preko Na2SO4. Čvrste supstance su filtrirane i filtrat je koncentrovan da bi se proizveo sirov proizvod koji je dalje prečišćen hromatografijom (heksani:EtOAc = 4:1) da bi se proizvelo jedinjenje 2A (471 mg) i jedinjenje 2B (883 mg) kao bele čvrste supstance. LC-MS: 494 [M+Na]; 965 [2M+Na].
[0233] Jedinjenje 2A:<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) =8.02 (m,2H), 7.57-7.25 (m,12H), 5.42 (m,1H), 4.50 (m,1H), 3.26-3.21 (m, 1H), 2.90 (m, 1H), 2.58 (m, 1H), 2.15-2.05 (m, 1H), 1.62(m,9H)
[0234] Jedinjenje 2B:<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) =8.06 (m,2H), 7.58-7.18 (m,12H), 5.53-5.41 (m,1H), 4.39 (m,1H), 3.57-3.54 (m, 1H), 2.87-2.80 (m, 1H), 2.48-2.44 (m, 1H),1.98 (m, 1H), 1.63 (m,9H).
[0235] U mešani rastvor jedinjenja 2A (471 mg, 1 mmol) u anhidrovanom EtOH (10 mL) dodat je anhidrovani K2CO3(691 mg, 5 mmol) na sobnoj temperaturi pod azotom. Posle mešanja od 20 časova na sobnoj temperaturi, čvrste supstance su filtrirane. U filtrat je dodata voda (30 mL), DCM (30 mL) i zasićeni vodeni rastvor NaCl (5 mL). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan sa DCM (30 mL x 3). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (50 mL), sušeni preko Na2SO4, i koncentrovani da bi se proizveo sirovi proizvod koji je dalje prečišćen hromatografijom (heksani:EtOAc = 6:1) da bi se proizvelo jedinjenje 3 kao bela čvrsta supstanca (275 mg). LC-MS: 436 [M+Na], 849 [2M+Na].
[0236] U EtOH (5 mL) dodat je acetil hlorid (685 mg) na -30°C. Posle mešanja u trajanju od 1 časa na -30°C, dodat je rastvor jedinjenja 3 (275 mg, 665 µmol) u anhidrovanom EtOH (5 mL). Smeša je zagrevana do 25°C i mešana u trajanju od 3 časa na 25°C. Posle isparavanja rastvarača, ostatak je ispran hladnim anhidrovanim Et2O (10 mL) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta HCl so (207 mg). LC-MS: 314 [M+H], 649 [2M+Na].
[0237]<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ (ppm) =7.99 (m,3H), 7.66-7.64 (m,4H), 7.48-7.35 (m,5H), 6.08 (m,1H), 4.21 (m,1H), 4.09-4.05 (m, 2H), 3.52 (m, 1H), 2.97-2.95 (m, 2H), 1.89-1.87 (m, 2H), 1.19-1.14 (m,3H).
Priprema 21: 5-metil-2-okso-[1,3]dioksol-4-ilmetil estar (2R, 4R)-4-Amino-5-(5’-hloro-2’-fluorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline
[0238]
[0239] U suspenziju (2R, 4R)-4-amino-5-(5’-hloro-2’-fluorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (HCl so; 10.3 g, 27.6 mmol) u THF (45 mL) dodat je vodeni rastvor NaOH (3.3 g, 82.8 mmol). Rastvor (BOC)2O (9.6 g, 44.2 mmol) u THF (25 mL) ukapavanjem na 0°C. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 16 časova. THF je uklonjen i ostatak je rastvoren u vodi (50 mL). Rastvor je zakišeljen do pH=3 sa vodenim rastvorom HCl (2N). Dobijeni talog je otfiltriran, i kolač je ispran vodom (20 mL) i prečišćen hromatografijom (DCM:MeOH=20:1) da bi se proizvelo jedinjenje 1 kao bela čvrsta supstanca (9.0 g). LC-MS: 438 [M+H]<+>,
[0240] U rastvor jedinjenja 1 (2 g, 4.6 mmol) i 4-(bromometil)-5-metil-1,3-dioksol-2-ona (880 mg, 4.6 mmol) u DMF (20 mL) dodat je K2CO3(947 mg, 6.8 mmol) i KI (152 mg, 0.9 mmol). Posle mešanja na sobnoj temperaturi u trajanju od 2 časa, smeša je razblažena vodom (50 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2x100 mL). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (2x100 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4, filtrirani i koncentrovani. Ostatak je prečišćen hromatografijom (DCM:EtOAc=10:1) da bi se proizvelo jedinjenje 2 kao žuta pena (2.3 g). LCMS: 572 [M+Na]<+>.
[0241] Rastvor jedinjenja 2 (2.3 g, 4.2 mmol) u HCl/dioksanu (50 mL, 3.3 M) je mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 2 časa. Rastvarač je uklonjen, i ostatak je ispran sa EtOAc (10 mL) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (1.8 g). LC-MS: 450.0 [M+H].<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ 1.85-1.92 (m, 2H), 2.17 (s, 3H), 2.99 (br, 2H), 3.57 (br, 1H), 4.26-4.42 (m, 1H), 5.02 (s, 2H), 6.19 (d, J=5.0 Hz, 1H), 7.34-7.45 (m, 3H), 7.49-7.51 (m, 1H), 7.53-7.68 (m, 3H), 7.99 (s, 3H).
Priprema 22: 2,2,3,3,3-pentafluoropropil estar (2R,4R)-4-Amino-5-(5’-hloro-2’-fluorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline
[0242]
[0243] Upotrebom postupaka koji su ovde opisani, takođe može biti pripremljeno jedinjenje iz naslova.
Priprema 23: Butiriloksimetil estar (2R,4R)-4-Amino-5-(5’-hloro-2’-fluorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline
[0244]
[0245] Upotrebom postupaka koji su ovde opisani, takođe može biti pripremljeno jedinjenje iz naslova.
PRIMER 1A: (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(3-hidroksi-3H-benzotriazol-5-karbonil)amino]pentanska kiselina
[0246]
[0247] 1-Hidroksi-1H-1,2,3-benzotriazol-6-karboksilna kiselina (56.6 mg, 316 µmol) i HCTU (131 mg, 316 µmol) su spojeni u DMF, i mešani 5 minuta na sobnoj temperaturi. Dodati su DIPEA (83 µL, 474 µmol) i etil estar (2R,4R)-4-amino-5-(4-bromofenil)-2-hidroksipentanske kiseline (50 mg, 0.2 mmol), i dobijena smeša je mešana u trajanju od 10 minuta. Smeša je isparavana pod sniženim pritiskom i prečišćena (C18 kolona. 20-70% MeCN u vodi sa 5% TFA). Čiste frakcije su liofilizovane (40 mg). Ove čvrste supstance su zatim spojene sa 3-hlorofenilbornom kiselinom (44.5 mg, 285 µmol), K2CO3(66 mg, 474 µmol), EtOH (0.8 mL, 10 mmol) i vodom (0.2 mL, 10 mmol). Dodat je Silika-Cat®DPP-Pd (0.28 mmol/g punjenje; 57 mg, 16 µmol) i dobijena smeša je obrađena mikrotalasima na 100°C u trajanju od 10 minuta. Smeša je filtrirana i dodat je 1 M LiOH u vodi (1.3 mL, 1.3 mmol). Smeša je mešana 30 minuta, isparavana pod sniženim pritiskom, i prečišćena pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (20.2 mg, čistoća 95%). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C24H21ClN4O5, 481.12; zabeleženo 481.2.
PRIMER 1B: 3,3,3-Trifluoropropil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifen,4-il)-2-hidroksi-4-[(3-hidroksi-3H-benzotriazol-5-karbonil)amino]pentanske kiseline
[0248]
[0249] 4.0 M HCl u 1,4-dioksanu (196 mL, 786 mmol) dodat je rastvor etil estra (2R,4R)-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(3-hidroksi-3H-benzotriazol-5-karbonil)amino]pentanske kiseline (50.0 mg, 98.2 µmol) u 3,3,3-trifluoropropan-1-olu (336 mg, 3.0 mmol), i dobijena smeša je mešana na 70°C u trajanju od 3 časa. Smeša je koncentrovana in vacuo da bi se proizvela bela čvrsta supstanca, koja je prečišćena pomoću preparativne HPLC (hromatografija na C18 koloni upotrebom 40-90% MeCN u vodi sa 0.05% TFA) da bi se proizvelo jedinjeje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (18 mg, čistoća 100%). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C27H24ClF3N4O5, 577.14; zabeleženo 577.1.
PRIMER 1C: 2,2,2-Trifluoroetil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(3-hidroksi-3H-benzotriazol-5-karbonil)amino]pentanske kiseline
[0250]
[0251] 4.0 M HCl u 1,4-dioksanu (196 µL, 786 µmol) dodat je rastvir etil estra (2R,4R)-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(3-hidroksi-3H-benzotriazol-5-karbonil)amino]pentanske kiseline (50.0 mg, 98.2 µmol) u 2,2,2-trifluoroetanolu (215 µL, 3.0 mmol), i dobijena smeša je mešana na 100°C u trajanju od 3 časa. Smeša j ekoncentrovana in vacuo da bi se proizvela bistra bezbojna tečnost, koja je prečišćena pomoću preparativne HPLC (hromatografijana C18 koloni upotrebom 40-90% MeCN u vodi sa 0.05% TFA) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (15.2 mg, čistoća 99%). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C26H22ClF3N4O5, 563.12; zabeleženo 563.2.
PRIMER 1D: 2,2,3,3,3-Pentafluoropropil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(3-hidroksi-3H-benzotriazol-5-karbonil)amino]pentanske kiseline
[0252]
[0253] HATU (37.9 mg, 99.6 µmol) je dodat u rastvor 1-hidroksi-1H-1,2,3-benzotriazol-6-karboksilne kiseline (14.9 mg, 83 µmol) u DMF (0.5 mL, 6.4 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 5 minuta. 2,2,3,3,3-pentafluoropropil estar (2R,4R)-4-Amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (30.0 mg, 66.4 µmol) je dodavan ukapavanjem u smešu, a zatim i DIPEA (35 µL, 0.2 mmol) u trajanju od 5 minuta, i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta. Smeša je koncentrovana in vacuo da bi se proizvela žuta tečnost, koja je prečišćena pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (2.9 mg, čistoća 100%). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C27H22ClF5N4O5, 613.12; zabeleženo 613.0.
PRIMER 1E: 5-Metil-2-okso-[1,3]dioksol-4-ilmetil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(3-hidroksi-3H-benzotriazol-5-karbonil)amino]pentanske kiseline
[0255] HATU (37.9 mg, 99.6 µmol) je dodat u rastvor 1-hidroksi-1H-1,2,3-benzotriazol-6-karboksilne kiseline (14.9 mg, 83 µmol) u DMF (0.5 mL, 6.4 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 5 minuta. U smešu je ukapavanjem dodavan 5-metil-2-okso[1,3]dioksol-4-ilmetil estar (2R,4R)-4-Amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (28.7 mg, 66.4 µmol), a zatim DIPEA (35 µL, 0.2 mmol) tokom 5 minuta, i smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 minuta. Smeša je koncentrovana in vacuo da bi se proizvela žuta tečnost, koja je prečišćena pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (37.8 mg, čistoća 98.5%). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C29H25ClN4O8, 593.14; zabeleženo 593.0.
PRIMER 1F: Butiriloksimetil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(3-hidroksi-3H-benzotriazol-5-karbonil)amino]pentanske kiseline
[0257] HATU (37.9 mg, 99.6 µmol) je dodat u rastvor 1-hidroksi-1H-1,2,3-benzotriazol-6-karboksilne kiseline (14.9 mg, 83 µmol) u DMF (0.5 mL, 6.4 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 5 minuta. Butiriloksimetil estar (2R,4R)-4-Amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (27.9 mg, 66.4 µmol) je ukapavanjem dodavan u smešu, a zatim DIPEA (35 µL, 0.2 mmol) tokom 5 minuta, i smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 minuta. Smeša je koncentrovana in vacuo da bi se proizvela žuta tečnost, koja je prečišćena pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (5.2 mg, listoća 98.2%). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C29H29ClN4O7, 581.17; zabeleženo 581.2.
PRIMER 1G: (2R,4R)-4-[(3-Acetoksimetoksi-3H-benzotriazol-5-karbonil)amino]-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanska kiselina
[0259] 4.0 M HCl u 1,4-dioksanu (270 mL, 1.1 mmol) dodat je rastvor (2R,4R)-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(3-hidroksi-3H-benzotriazol-5-karbonil)amino]pentanske kiseline (130 mg, 270 µmol) u benzil alkoholu (559 µL, 5.4 mmol), i mešan na 60°C u trajanju od 1.5 časa. Smeša je zatim prečišćena (hromatografija na C18 koloni, 55g kolona, upotrebom 30-90% MeCN u vodi sa 0.05% TFA) da bi se proizvela prljavo bela čvrsta supstanca. Bromometil acetat (45.5 mg, 297 µmol) je dodat u rastvor ove prljavo bele čvrste supstance i K2CO3(82.2 mg, 595 µmol) u DMF (3.1 mL, 40.0 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 1 časa. Smeša je zatim prečišćena (hromatografija na koloni, mala kolona, upotrebom 40-90% MeCN u vodi sa 0.05% TFA) da bi se proizvela bistra bezbojna viskozna tečnost. 10% Pd/C, 50% vlažan (0.45 mmol/g punjenje; 30.0 mg, 13.5 µmol) je dodat u rastvor ove bistre bezbojne viskozne tečnosti u MeOH (4.1 mL, 102 mmol) i dobijena smeša je mešana pod vodonikom u trajanju od 30 minuta. Smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan in vacuo da bi se proizvela bistra bezbojna tečnost. Sirova tečnost je prečišćena (hromatografija na C18 koloni, 55g kolona, upotrebom 30-85% MeCN u vodi sa 0.05% TFA) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (14.0 mg) kao bela čvrsta supstanca. MS m/z [M+H]<+>izrač. za C27H25ClN4O7, 553.14; zabeleženo 553.1.
PRIMER 1H: Acetoksimetil estar (2R,4R)-4-[(3-Acetoksimetoksi-3H-benzotriazol-5-karbonil)amino]-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline
[0260]
[0261] Et3N (7.0 µL, 50 µmol) je dodat u rastvor [(2R,4R)-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(3-hidroksi-3H-benzotriazol-5-karbonil)amino]pentanske kiseline (20.0 mg, 42 µmol) i bromometil acetata (6.52 µL, 67 µmol) u acetonu (1.3 mL, 17.2 mmol), i dobijena smeša je mešana u hermetički zatvorenoj bočici na 65°C u trajanju od 5 časova. Dodat je 1:1 TFA/DCM (0.50 mL, 3.1 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta i koncentrovana da bi se proizvela bistra žuta tečnost. Sirova tečnost je pečišćena pomoću preparativne HPLC (hromatorafija na C18 kolonu, mala kolona, upotreba 30-90% MeCN u vodi sa 0.05% TFA) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (5.2 mg, čistoća 100%). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C30H29ClN4O9, 625.16; zabeleženo 625.1.
PRIMER 1I: (2R,4R)-4-[(3-Benziloksi-3H-benzotriazol-5-karbonil)amino]-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanska kiselina
[0262]
[0263] HATU (246 mg, 647 µmol) je dodat u rastvor 1-hidroksi-1H-1,2,3-benzotriazol-6-karboksilne kiseline (116 mg, 647 µmol) u DMF (2.0 mL, 25.8 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 10 minuta. DIPEA (225 µL, 1.3 mmol) je dodat u smešu, a zatim i etil estar (2R,4R)-4-amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (150 mg, 431 µmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 1 časa.
3.0 M LiOH u vodi (1.7 mL, 5.2 mmol) je dodat u smešu i mešan na sobnoj temperaturi 30 minuta. Smeša je zatim prečišćena (hromatografija na C18 koloni, 55g kolona, upotrebom 40-90% MeCN u vodi sa 0.05% TFA) da bi se proizvela bela čvrsta supstanca. Benzil bromid (41 µL, 345 µmol) je dodat u rastvor ove čvrste supstance u acetonu (3.0 mL, 40.8 mmol). Dodat je Et3N (54 µL, 388 µmol) i dobijena smeša je mešana na 50°C u trajanju od 2 časa. Smeša je koncentrovana in vacuo i dobijena sirova bistra žuta tečnost je prečišćena (hromatografija na C18 koloni, 55g kolona, upotrebom 40-90% MeCN u vodi sa 0.05% TFA) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (201 mg, čistoća 100%) kao bela čvrsta supstanca. MS m/z [M+H]<+>izrač. za C31H27ClN4O5, 571.17; zabeleženo 571.
PRIMER 1J: Benzil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(3-hidroksi-3H-benzotriazol-5-karbonil)amino]pentanske kiseline
[0264]
[0265] 4.0 M HCl u 1,4-dioksanu (270 µL, 1.0 mmol) dodat je u rastvor (2R,4R)-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(3-hidroksi-3H-benzotriazol-5-karbonil)amino]pentanske kiseline (130 mg, 270 µmol) u benzil alkoholu (559 µL, 5.4 mmol), i dobijena smeša je mešana na 60°C u trajanju od 15 minuta. Smeša je prečišćena pomoću preparativne HPLC (hromatografije na C18 koloni upotrebom 30-90% MeCN u vodi sa 0.05% TFA) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (16.0 mg, čistoća 99.2%). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C31H27ClN4O5, 571.17; zabeleženo 571.1.
PRIMER 1K: Acetoksimetil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(3-hidroksi-3H-benzotriazol-5-karbonil)amino]pentanske kiseline
[0266]
[0267] Bromometil acetat (6.7 µL, 68.3 µmol) i Et2O (11.7 µL, 84 µmol) su dodati u rastvor (2R,4R)-4-[(3-benziloksi-3H-benzotriazol-5-karbonil)amino]-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (30.0 mg, 52.5 µmol) u acetonu (1.0 mL, 13.6 mmol) i dobijena smeša je mešana na 45°C u trajanju od 1 časa. Dodata je jedna kap AcOH da bi se reakcija neutralizovala i smeša je koncentrovana da bi se proizvela bistra žuta tečnost. Sirova tečnost je prečišćena (hromatografija na koloni C18, 55g kolona, upotrebom 40-90% MeCN u vodi sa 0.05% TFA) da bi se proizvela bela čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je rastvorena u THF (1.0 mL, 12.3 mmol) i u rastvor je dodat 10% Pd/C, 50% vlažan (0.45 mmol/g punjenje; 5.8 mg, 2.6 µmol), koji je mešan pod vodonikom u trajanju od 1 časa. Smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan da bi se proizvela bistra bezbojna tečnost. Sirova tečnost je prečišćena (hromatografija na C18 koloni u preparativnim razmerama, mala kolona, upotrebom 30-90% MeCN u vodi sa 0.05% TFA) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (10.0 mg, čistoća 99%). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C27H25ClN4O7, 553.14; zabeleženo 553.1.
PRIMER 1L: (2R,4R)-4-{[3-((R)-2-Amino-3-metilbutiriloksimetoksi)-3H-benzotriazol-5-karbonil]amino}-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-pentanska kiselina
[0268]
[0269] Et3N (7.0 µL, 50 µmol) je dodat u rastvor [(2R,4R)-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(3-hidroksi-3H-benzotriazol-5-karbonil)amino]pentanske kiseline (20.0 mg, 42 µmol) i hlorometil estra (S)-2-tbutoksikarbonilamino-3-metilbuterne kiseline (17.7 mg, 67 µmol) u acetonu (1.3 mL, 17.2 mmol), i dobijena smeša je mešana u hermetički zatvorenoj bočici na 65°C u trajanju od 5 časova. Dodat je 1:1 TFA/DCM (0.50 mL, 3.1 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 minuta i koncentrovana da bi se proizvela bistra žuta čvrsta supstanca. Sirova tečnost je prečišćena pomoću preparativne HPLC (hromatografija na C18 koloni, mala kolona, upotrebom 30-90% MeCN u vodi sa 0.05% TFA) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta HCl so (6.2 mg, čistoća 96%). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C30H32ClN5O7, 610.20; zabeleženo 610.1.
PRIMER 1M: (2R,4R)-4-[(3-Butitiloksimetoksi-3H-benzotriazol-5-karbonil)amino]-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanska kiselina
[0270]
[0271] Et3N (7.0 µL, 50 µmol) je dodat u rastvor [(2R,4R)-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(3-hidroksi-3H-benzotriazol-5-karbonil)amino]pentanske kiseline (20.0 mg, 42 µmol i hlorometil butirata (8.3 µL, 67 µmol) u acetonu (1.3 mL, 17.2 mmol), i dobijena smeša je mešana u hermetički zatvorenoj bočici na 65°C u trajanju od 5 časova. Smeša je zatim koncentrovana da bi se proizvela žuta tečnost. Sirova tečnost je prečišćena pomoću preparativne HPLC (hromatografija na C18 koloni, mala kolona, upotreba 30-90% MeCN u vodi sa 0.05% TFA) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (3.3 mg, čistoća 94%). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C29H29ClN4O7, 581.17; zabeleženo 581.1.
PRIMER 1N: (R)-2-Metoksikarbonilamino-3-metilbutiriloksimetil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(3-hidroksi-3H-benzotriazol-5-karbonil)amino]pentanske kiseline
[0272]
[0273] Hlorometil estar (S)-2-t-Butoksikarbonilamino-3-metil-buterne kiseline (18.1 mg, 68.3 µmol) i Et3N (11.7 µL, 84 µmol) su dodati u rastvor (2R,4R)-4-[(3-benziloksi-3H-benzotriazol-5-karbonil)amino]-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (30.0 mg, 52.5 µmol) u acetonu (1.00 mL, 13.6 mmol) i mešani na 60°C u trajanju od 3 časa. Smeša je koncentrovana da bi se proizvela žuta tečnost, koja je spojena sa 1:1 TFA/DCM (1.0 mL, 6.2 mmol) i mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 1 časa. Smeša je koncentrovana in vacuo i dobijena sirova tečnost je prečišćena (hromatografija na C18 koloni, 55g kolona, upotrebom 30-90% MeCN u vodi sa 0.05% TFA) da bi se proizvela bela čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je rastvorena u DCM (0.5 mL, 7.8 mmol) na 0°C. Dodat je metil hloroformat (6.1 µL, 78.8 µmol), a zatim Et3N (18.3 µL, 131 µmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta. Dodata je kap AcOH da bi se reakcija neutralizovala i smeša je koncentrovana da bi se proizvela bistra žuta tečnost. Sirova tečnost je spojena sa 10% Pd/C, 50% vlažnim (0.45 mmol/g punjenje; 5.8 mg, 2.6 µmol) i mešana pod vodonikom u trajanju od 1 časa. Smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan da bi se proizvela bistra žuta tečnost. Sirova tečnost je prečišćena (hromatografija na C18 koloni u preparativnim razmerama, mala kolona, upotrebom 30-90% MeCN u vodi sa 0.05% TFA) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta TFA so (7.5 mg, 99% čistoća,). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C32H34ClN5O9, 668.20; zabeleženo 668.1.
PRIMER 10: (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-{[3-((S)-2-metoksikarbonilamino-3-metilbutiriloksimetoksi)-3H-benzotriazol-5-karbonil]amino}pentanska kiselina
[0274]
[0275] Et3N (7.0 µL, 50 µmol) je dodat u rastvor [(2R,4R)-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(3-hidroksi-3H-benzotriazol-5-karbonil)amino]pentanske kiseline (20.0 mg, 42 µmol) i hlorometil estra (S)-2-tbutoksikarbonilamino-3-metilbuterne kiseline (17.7 mg, 67 µmol) u acetonu (1.3 mL, 17.2 mmol), i dobijena smeša je mešana u hermetički zatvorenoj bočici na 65°C u trajanju od 5 časova. Smeša je zatim koncentrovana da bi se proizvela žuta tečnost. Metil hloroformat (4.8 ML, 62 µmol) je dodat u rastvor žute tečnosti i Et3N (11.6 µL, 83 µmol) u DCM (0.5 mL, 7.8 mmol) na 0°C i smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 15 minuta. Smeša je koncentrovana in vacuo i dobijena bistra bezbojna tečnost je prečišćšena pomoću HPLC u preparativnim razmerama (hromatografija na C18 koloni, mala kolona, upotrebom 30-90% MeCN u vodi sa 0.05% TFA da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta TFA so (5.1 mg, čistoća 99%). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C32H34ClN5O9, 668.20; zabeleženo 668.
PRIMER 1P: (R)-2-amino-3-metilbutiriloksimetil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(3-hidroksi-3H-benzotriazol-5-karbonil)amino]pentanske kiseline
[0276]
[0277] Hlorometil estar (S)-2-t-Butoksikarbonilamino-3-metil-buterne kiseline (18.1 mg, 68.3 µmol) i Et3N (11.7 µL, 84 µmol) su dodati u rastvor (2R,4R)-4-[(3-benziloksi-3H-benzotriazol-5-karbonil)amino]-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (30.0 mg, 52.5 µmol) u acetonu (1.00 mL, 13.6 mmol) i mešan na 60°C u trajanju od 3 časa. Smeša je koncentrovana da bi se proizvela žuta tečnost, koja je spojena sa 1:1 TFA/DCM (1.0 mL, 6.2 mmol) i mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 1 časa. Smeša je koncentrovana in vacuo i dobijena sirova tečnost je prečišćena (hromatografija na C18 koloni, 55g kolona, upotrebom 30-90% MeCN u vodi sa 0.05% TFA) da bi se proizvela bela čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je rastvorena u THF (1.0 mL) i 10% Pd/C, 50% vlažnosti (0.45 mmol/g punjenje; 5.8 mg, 2.6 µmol) je dodat u rastvor, koji je mešan pod vodonikom u trajanju od 1 časa. Smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan da bi se proizvela bistra žuta tečnost. Sirova tečnost je prečišćena (hromatografija na C18 koloni u preparativnim razmerama, mala kolona, upotrebom 30-90% MeCN u vodi sa 0.05% TFA) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta TFA so (6.5 mg, čistoća 98%). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C30H32ClN5O7, 610.20; zabeleženo 610.1.
PRIMER 2A: (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(5-hidroksi-1-metil-1H-pirazol-3-karbonil)amino]pentanska kiselina
[0278]
[0279] 5-Hidroksi-1-metil-1H-pirazol-3-karboksilna kiselina (19.6 mg, 138 µmol) je spojena sa HCTU (56.9 mg, 138 µmol) u DMF. Smeša je mešana 10 minuta na sobnoj temperaturi pre dodavanja DIPEA (72 µL, 413 µmol) i etil estra (2R,4R)-4-amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (50 mg, 0.1 mmol). Dobijena smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Dodati su EtOH (402 µL, 6.9 mmol) i 1 M LiOH u vodi (1.1 mL, 1.1 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 1 časa. Smeša je isparavana pod sniženim pritiskom i prečišćena pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (6.4 mg). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C22H22ClN3O5, 444.12; zabeleženo 444.4.
PRIMER 2B: 5-Metil-2-okso-[1,3]dioksol-4-ilmetil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(5-hidroksi-1-metil-1H-pirazol-3-karbonil)amino]pentanske kiseline
[0280]
[0281] 5-Hidroksi-1-metil-1H-pirazol-3-karboksilne kiseline (5.6 mg, 39 µmol) i HCTU (16.2 mg, 39 µmol) su spojeni u DMF (166 µL, 2.1 mmol) i mešani na sobnoj temperaturi u trajanju od 15 minuta. Dodati su DIPEA (19 µL, 0.1 mmol) i 5-metil-2-okso[1,3]dioksol-4-ilmetil estar (2R,4R)-4-amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (15.4 mg, 36 µmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 minuta. Rastvarač je uklonjen in vacuo i sirovi proizvod je prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (7 mg). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C27H26ClN3O8, 556.14; zabeleženo 556.1.
PRIMER 2C: Etil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(5-hidroksi-1-metil-1H-pirazol-3-karbonil)amino]pentanske kiseline
[0282]
[0283] 5-Hidroksi-1-metil-1h-pirazol-3-karboksilna kiselina (122 mg, 862 µmol) i HATU (361 mg, 949 µmol) su spojeni u DMF (1.0 mL, 13 mmol) i mešani 10 minuta. Dodati su etil estar (2R,4R)-4-amino-5-(3’-hlorobifenil-4il)-2-hidroksipentanske kiseline (30.0 mg, 86 µmol) i DIPEA (165 µL, 949 µmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Smeša je zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom i ostatak je rastvoren u 50% AcOH-vodi (1.5 mL), filtriran, prečišćen pomoću reverzno-fazne preparativne HPLC, i liofilizovan da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (11.1 mg). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C24H26ClN3O5, 472.16; zabeleženo 472.2.
PRIMER 2D: 2,2,3,3,3-Pentafluoropropil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(5-hidroksi-1-metil-1H-pirazol-3-karbonil)amino]pentanske kiseline
[0284]
[0285] (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-{[5-(4-metoksibenziloksi)-1-metil-1H-pirazol-3-karbonil]amino}pentanska kiselina (28.0 mg, 49.6 µmol) je spojena sa HOBt (40.2 mg, 298 µmol) i EDC (53 µL, 0.3 mmol) u DCM (0.4 mL, 6 mmol). Dobijeni rastvor je mešan 15 minuta pre dodavanja 2,2,3,3,3-pentafluoro-1-propanola (39.6 µL, 397 µmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi i reakcija je praćena da bi se utvrdilo da li je završena. Posle 4 časa, smeša je koncentrovana rotacionim isparavanjem i ostatak je prečišćen (reverzno-fazna kolona).
[0286] Ostatak je rastvoren u EtOAc (842 µL, 8.6 mmol) i dodat je 10% Pd/C, 50% vlažan (0.45 mmol/g punjenje; 31.9 mg, 14 µmol). Dobijena smeša je mešana pod vodonikom u trajanju od 1 časa. Rastvarač je uklonjen in vacuo i ostatak je prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (4.9 mg, čistoća 100%). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C25H23ClF5N3O5, 576.12; zabeleženo 576.1
PRIMER 2E: 1-Trifluorometilpropil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(5-hidroksi-1-metil-1H-pirazol-3-karbonil)amino]pentanske kiseline
[0287]
[0288] (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-{[5-(4-metoksibenziloksi)-1-metil-1H-pirazol-3-karbonil]amino}pentanska kiselina (28.0 mg, 49.6 µmol) je spojena sa HOBt (40.2 mg, 298 µmol) i EDC (53 µL, 0.3 mmol) u DCM (0.4 mL, 6 mmol). Dobijeni rastvor je mešan u trajanju od 15 minuta pre dodavanja 1,1,1-trifluoro-2-butanola (50.9 mg, 397 µmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi i reakcija je praćena da bi se proverilo da li je završena. Posle 4 časa, smeša je koncentrovana pomoću rotacionog isparavanja i ostatak je prečišćen (reverzno-fazna kolona).
[0289] Ostatak je rastvoren u EtOAc (842 µL, 8.6 mmol), i dodat je 10% Pd/C, 50% vlažan (0.45 mmol/g punjenje; 31.9 mg, 14 µmol). Dobijena smeša je mešana pod vodonikom u trajanju od 1 časa. Rastvarač je uklonjen in vacuo i ostatak je prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (1.3 mg, čistoća 99%). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C26H27ClF3N3O5, 554.16; zabeleženo 554.1.
PRIMER 2F: 2,2,3,3,3-Pentafluoro-1-Metilpropil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(5-hidroksi-1-metil-1H-pirazol-3-karbonil)amino]pentanske kiseline
[0290]
[0291] (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-{[5-(4-metoksibenziloksi)-1-metil-1H-pirazol-3-karbonil]amino}pentanska kiselina (28.0 mg, 49.6 µmol) je spojena sa HOBt (40.2 mg, 298 µmol) i EDC (53 µL, 0.3 mmol) u DCM (0.4 mL, 6 mmol). Dobijeni rastvor je mešan 15 minuta pre dodavanja 3,3,4,4,4-pentafluoro-2-butanola (65.2 mg, 397 µmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi i reakcija je praćena da bi se utvrdilo da li je završena. Posle 4 časa, smeša je koncentrovana rotacionim isparavanjem i ostatak je prečišćen (reverzno-fazna kolona).
[0292] Ostatak je rastvoren u EtOAc (842 µL, 8.6 mmol), i dodat je 10% Pd/C, 50% vlažan (0.45 mmol/g punjenje; 31.9 mg, 14 µmol). Dobijena smeša je mešana pod vodonikom u trajanju od 1 časa. Rastvarač je uklonjen in vacuo i ostatak je prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (1.8 mg, čistoća 98%). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C26H25ClF5N3O5, 590.14; zabeleženo 590.1.
PRIMER 2G: Benzil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(5-hidroksi-1-metil-1H-pirazol-3-karbonil)amino]pentanske kiseline
[0293]
[0294] Smeša etil estra (2R,4R)-4-amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (150.0 mg, 431 µmol), benzil alkohola (446.2 µL, 4.3 mmol) i 4.0 M HCl u 1,4-dioksanu (431 µL, 1.7 mmol) mešana je na sobnoj temperaturi preko noći, zatim na 50°C u trajanju od 1 časa. Smeša je zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. 5-Hidroksi-1-metil-1H-pirazol-3-karboksilna kiselina (30.6 mg, 216 µmol) i HATU (98.4 mg, 259 µmol) su mešani u DMF (0.5 mL, 5 mmol) u trajanju od 10 minuta, zatim dodati u koncentrovanu smešu, zajedno sa DIPEA (113 µL, 647 µmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 2 časa i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u 50% AcOH-vodi (5 mL), filtriran, i prečišćen pomoću reverzno-fazne preparativne HPLC da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (81.4 mg).
PRIMER 2H: Butiriloksimetil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(5-hidroksi-1-metil-1H-pirazol-3-karbonil)amino]pentanske kiseline
[0295]
[0296] U rastvor metil estra 5-hidroksi-1-metil-1H-pirazol-3-karboksilne kiseline (3 g, 19.2 mmol) u DMF (15 mL) dodat je K2CO3(2.7 g, 19.2 mmol) na sobnoj temperaturi. Posle 10 min, dodat je alil bromid (2.3 g, 19.2 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 časa. Dodata je voda (150 mL), smeša je ekstrahovana sa EtOAc (3x50 mL), i spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (50 mL) i sušeni preko anhidrovanog Na2SO4. Rastvor je zatim isparavan i ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (silika gel: 200-300 mreža, eluiran sa PE:EtOAc = 10:1 do 5:1 do 1:1) da bi se proizvelo jedinjenje 1 kao bela čvrsta supstanca (3 g). LC-MS: 197 [M+H]<+>.
[0297] U rastvor jedinjenja 1 (3 g, 15 mmol) u THF (30 mL) dodat je rastvor LiOH (550 mg, 23 mmol) u vodi (15 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 čas, zati koncentrovana in vacuo. Voda je dodata (20 mL) u ostatak i smeša je isprana sa EtOAc (20 mL). Vodeni sloj je zakišeljen sa 1N vodenim rastvorom HCl do pH=3 i ekstrahovan sa EtOAc (3x30 mL). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (30 mL), i sušeni preko anhidrovanog Na2SO4. Rastvor je zatim isparavan da bi se proizvelo jedinjenje 2 kao bela čvrsta suptsnca (2.3 g). LC-MS: 183 [M+H]<+>.
[0298] U rastvor etil estra (2R,4R)-4-amino-2-hidroksi-5-(3’-metilbifenil-4-il)pentanske kiseline (13 g, 7.1 mmol) i jedinjenja 2 (2.7 g, 7.1 mmol) u DMF (30 mL) dodati su PyBOP (3.7 g, 7.1 mmol) i DIPEA (1.8 g, 14.2 mmol) na 0°C. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 časa. Dodata je voda (200 mL), smeša je ekstrahovana sa EtOAc (3x100 mL), i spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (100 mL) i sušeni preko anhidrovanog Na2SO4. Smeša je koncentrovana i ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (silika gel: 200-300 mreža; eluiran sa PE:EtOAc=10:1 do 5:1 do 1:1) da bi se proizvelo jedinjenje 3 kao svetlo žuta čvrsta supstanca (2.4 g). LC-MS: 512 [M+H]<+>.
[0299] U rastvor jedinjenja 3 (2.4 g, 4.7 mmol) u THF (20 mL) i vode (10 mL) dodat je LiOH (169 mg, 7 mmol) na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 čas. Smeša je koncentrovana, dodata je voda (50 mL) i smeša je isprana sa EtOAc (2x20 mL). Vodeni sloj je zakišeljen sa 1N vodenim rastvorom HCl do pH=3 i ekstrahovan sa EtOAc (3x50 mL). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (50 mL) i sušeni preko anhidrovanog Na2SO4. Rastvor je zatim isparavan da bi se proizvelo jedinjenje 4 kao žuta čvrsta supstanca (2 g). LC-MS: 484 [M+H]<+>.
[0300] Suspenzija jedinjenja 4 (400 mg, 830 µmol), NaI (248 mg, 1.7 mmol) i lutidina (173 mg, 1.7 mmol) u hlorometil butiratu (2 mL) je mešana na 50°C u trajanju od 5 časova. Posle hlađenja do sobne temperature, smeša je razblažena vodom (20 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2x20 mL). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (40 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4, koncentrovani i prečišćeni hromatografijom na silika gelu (silika gel: 200-300 mreža; eluiranje sa PE:EtOAc od 5:1 do 2:1) da bi se proizvelo jedinjenje 5 kao svetlo žuta čvrsta supstanca (200 mg). LC-MS: 584 [M+H]<+>.
[0301] U rastvor jedinjenja 5 (140 mg, 240 µmol) u DCM (5 mL) dodat je Pd(PPH3)4(83 mg, 70 µmol), Et3SiH (83 mg, 720 µmol) i AcOH (43 mg, 720 µmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 4 časa i koncentrovana. Ostatak je prečišćen pomoću preparativne HPLC [Daisogel-C18, 150x21.2 mm, 5µ; MeCN-H2O (0.1% TFA) od 60% do 80%] da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao žuto ulje (20 mg). LC-MS: 544 [M+H]<+>.
<1>H-NMR (CD3OD, 400 Hz): δ 0.93 (t, 3H), 1.62 (q, 2H), 2.06-2.13 (m, 2H), 2.31 (t, 2H), 2.97-2.99 (m, 2H), 3.65 (s, 3H), 4.32 (m, 1H), 4.51 (m, 1H), 5.75 (dd, 2H), 7.35-7.41 (m, 4H), 7.53-7.60 (m, 4H).
PRIMER 2I: (S)-2-Amino-3-metilbutiriloksimetil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(5-hidroksi-1-metil-1H-pirazol-3-karbonil)amino]pentanske kiseline
[0302]
[0303] Suspenzija (2R,4R)-4-[(5-aliloksi-1-metil-1H-pirazol-3-karbonil)amino]-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-pentanske kiseline (400 mg, 830 µmol), NaI (248 mg, 1.7 mmol) i lutidina (173 mg, 1.7 mmol) u hlorometil estru (S)-2-t-butoksikarbonilamino-3-metilbuterne kiseline (2 mL) je mešana na 50°C u trajanju od 2 časa. Posle hlađenja do sobne temperature, smeša je razblažena vodom (20 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2x20 mL). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (40 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4, koncentrovani i prečišćeni hromatografijom na silika gelu (silika gel: 200-300 mreža; eluiranje sa PE:EtOAc od 5:1 do 2:1) da bi se proizvelo jedinjenje 1 kao svetlo žuta čvrsta supstanca (290 mg). LC-MS: 713 [M+H]<+>.
[0304] U rastvor jedinjenja 1 (290 mg, 0.4 mmol) u THF (5 mL) dodat je Pd(PPH3)4(70 mg, 60 µmol) i 1,3-dimetilbarbiturna kiselina (312 mg, 2 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 2 časa i koncentrovana. Ostatak je rastvoren u EtOAc (30 mL), ispran sa 5% NaHCO3(2x15 mL), sušen preko anhidrovanog Na2SO4, i koncentrovan da bi se proizvelo sirovo jedinjenje 2 kao braon čvrsta supstanca (220 mg). LC-MS: 673 [M+H]<+>.
[0305] U 1 M rastvor HCl (g) u dioksanu (5 mL) dodato je jedinjenje 2 (220 mg, 330 µmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 čas i koncentrovana. Ostatak je prečišćen pomoću preparativne HPLC [Daisogel-C18, 150x21.2 mm, 5µ; MeCN-H2O (0.1% TFA) od 35% do 45%] da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (100 mg). LC-MS: 573 [M+H]<+>.<1>H-NMR (DMSO-d6, 400 Hz): δ 0.97 (d, 6H), 1.82-1.85 (m, 1H), 1.98-2.01 (m, 1H), 2.162.19(m, 1H), 2.85-2.88 (m, 2 H), 3.58 (s, 3H), 3.99-4.01 (m, 1H), 4.18-4.20 (m, 1 H), 4.23-4.25 (m, 1 H), 5.84 (dd, 2 H), 7.28-7.47 (m, 4H), 7.60-7.69 (m, 4H), 8.01 (s, 1H), 8.55 (br, 2 H).
PRIMER 3A: (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(5-hidroksi-1-piridin-2-il-1H-pirazol-3-karbonil)amino]pentanska kiselina
[0306]
[0307] 5-Hidroksi-1-piridin-2-il-1H-pirazol-3-karboksilna kiselina (59.0 mg, 287 µmol) i HCTU (131 mg, 316 µmol) su spojeni u DMF (1.3 mL, 17.2 mmol) i mešani na sobnoj temperaturi 15 minuta. Dodati su 5-metil-2-okso[1,3]dioksol-4-ilmetil estar (2R,4R)-4-amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (100 mg, 0.3 mmol) i DIPEA (150 µL, 862 µmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 minuta. Reakcija je isparavana pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u EtOH i dodat je rastvor 1 M LiOH u vodi (1.4 mL, 1.4 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 1 časa, zatim isparavana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (85 mg). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C26H23ClN4O5, 507.14; zabeleženo 507.1.
PRIMER 3B: 5-Metil-2-okso-[1,3]dioksol-4-ilmetil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(5-hidroksi-1-piridin-2-il-1H-pirazol-3-karbonil)amino]pentanske kiseline
[0308]
[0309] 5-Hidroksi-1-piridin-2-il-1H-pirazol-3-karboksilna kiselina (8.1 mg, 39 µmol) i HCTU (16.2 mg, 39 µmol) su spojeni u DMF (166 µL, 2.1 mmol) i mešani na sobnoj temperaturi 15 minuta. Dodati su DIPEA (19 µL, 0.1 mmol) i 5-metil-2-okso[1,3]dioksol-4-ilmetil estar (2R,4R)-4-amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (15.4 mg, 36 µmol), i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta. Rastvarač je uklonjen in vacuo i sirovi proizvod je prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (18 mg). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C31H27ClN4O8, 619.15; zabeleženo 619.1.
PRIMER 3C: Etil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(5-hidroksi-1-piridin-2-il-1H-pirazol-3-karbonil)amino]pentanske kiseline
[0311] 5-Hidroksi-1-piridin-2-il-1H-pirazol-3-karboksilna kiselina (23.6 mg, 115 µmol) i HATU (52.5 mg, 138 µmol) mešani su u N,N-dimetilacetamidu (1.0 mL, 11 mmol) u trajanju od 10 minuta. Dodati su etil estar (2R,4R)-4-Amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (40.0 mg, 115 µmol) i DIPEA (60.1 µL, 345 µmol), i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 2 časa. Smeša je zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom, ostatak je rastvoren u EtOAc (20 mL), i organski sloj je ispran vodom (2x5 mL), sušen preko MgSO4, i koncentrovan. Jedna polovina ostatka je rastvorena u 50% AcOH-vodi (1.5 mL), filtrirana i prečišćena pomoću reverzno fazne preparativne HPLC da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao TFA so (6.1 mg). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C28H27ClN4O5, 535.17; zabeleženo 535.4.
PRIMER 3D: Izobutil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(5-hidroksi-1-piridin-2-il-1H-pirazol-3-karbonil)amino]pentanske kiseline
[0312]
[0313] 5-Hidroksi-1-piridin-2-il-1H-pirazol-3-karboksilna kiselina (23.6 mg, 115 µmol) i HATU (52.5 mg, 138 µmol) su mešani u N,N-dimetilacetamidu (1.0 mL, 11 mmol) u trajanju od 10 minuta. Dodati su etil estar (2R,4R)-4-Amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (40.0 mg, 115 µmol) i DIPEA (60.1 µL, 345 µmol), i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 2 časa. Smeša je zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom, ostatak je rastvoren u EtOAc (20 mL), i organski sloj je ispran vodom (2x5 mL), sušen preko MgSO4, i koncentrovan. Jedna polovina ostatka je spojena sa izobutil alkoholom (0.5 mL, 5 mmol), i 4.0 M HCl u 1,4-dioksanu (115 µL, 460 µmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, koncentrovana pod sniženim pritiskom, ostatak je rastvoren u 50% AcOH-vodi (1.5 ml), filtriran i prečišćen pomoću reverzno fazne preparativne HPLC da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao TFA so (9.1 mg). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C30H31ClN4O5, 563.20; zabeleženo 563.4.
PRIMER 3E: Benzil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(5-hidroksi-1-piridin-2-il-1H-pirazol-3-karbonil)amino]pentanske kiseline
[0314]
[0315] Smeša etil estra (2R,4R)-4-amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (150.0 mg, 431 µmol), benzil alkohola (446.2 µL, 4.3 mmol) i 4.0 M HCl u 1,4-dioksanu (431 µL, 1.7 mmol) mešana je na sobnoj temperaturi preko noći, zatim na 50°C u trajanju od 1 časa. Smeša je zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. 5-Hidroksi-1-piridin-2-il-1H-pirazol-3-karboksilna kiselina (44.2 mg, 216 µmol) i HATU (98.4 mg, 259 µmol) su mešani u DMF (0.5 mL, 5 mmol) u trajanju od 10 minuta, zatim su dodati u koncentrovanu smešu, zajedno sa DIPEA (113 µL, 647 µmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 2 časa i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u 50% AcOH-vodi (5 mL), filtriran i prečišćen pomoću reverzno-fazne preparativne HPLC da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (19.5 mg).
PRIMER 3F: (2R,4R)-2-((S)-2-Amino-3-metilbutiriloksi)-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-4-[(5-hidroksi-1-piridin-2-il-1H-pirazol-3-karbonil)amino]pentanska kiselina
[0316]
[0317] Upotrebom postupaka koji su ovde opisani, takođe može biti pripremljeno jedinjenje iz naslova.
PRIMER 3G: (2R,4R)-4-{(5-((S)-2-Amino-3-metilbutiriloksimetoksi)-1-piridin-2-il-1H-pirazol-3-karbonil]amino}-5-(3’-hloro-bifenil-4-il)-2-hidroksipentanska kiselina
[0318]
[0319] Upotrebom postupaka koji su ovde opisani, takođe može biti pripremljeno jedinjenje iz naslova.
PRIMER 3H: (S)-2-metoksikarbonilamino-3-metilbutiriloksimetil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(5-hidroksi-1-piridin-2-il-1H-pirazol-3-karbonil)amino]pentanske kiseline
[0320]
[0321] U rastvor (2R,4R)-4-[(5-aliloksi-1-piridin-2-il-1H-pirazol-3-karbonil)-amino]-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (220 mg, 0.4 mmol) i hlorometil estra ((S)-2-metoksikarbonilamino-3-metilbuterne kiseline (180 mg, 0.8 mmol) u DMF (2 mL) dodat je 2,6-lutidin (130 mg, 1.2 mmol) i NaI (60 mg, 0.4 mmol). Posle mešanja na sobnoj temperaturi 24 časa, smeša je razblažena vodom (20 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2x20 mL). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (2x70 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4, filtrirani, koncentrovani i prečišćeni pomoću preparativne TLC (PE:EtOAc=1:1) da bi se proizvelo jedinjenje 1 kao žuta čvrsta supstanca (160 mg). LC-MS: 734 [M+H]<+>.
[0322] Smeša jedinjenja 1 (140 mg, 190 µmol), Et3SiH (88 mg, 760 µmol), Pd(PPH3)4(22 mg, 20 µmol), i AcOH (22 mg, 0.38 mmol) u DCM (2 mL) je mešana na sobnoj temperaturi 4 časa. Rastvarač je uklonjen i ostatak je prečišćen pomoću preparativne HPLC (Gemini-C18150x21.2 mm, 5µ; MeCN-H2O (0.1%TFA); od 50% do 70%) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (15 mg). LC-MS: 694 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.47 (d, J=5.0 Hz, 1H), 8.06 (d, J=8.5 Hz, 2H), 7.55 (dd, J=19.3, 11.4 Hz, 4H), 7.37 (dt, J=28.2, 6.2 Hz, 5H), 5.85 (d, J=5.7 Hz, 1H), 5.75 (d, J=5.7 Hz, 1H), 4.58 (m, 1H), 4.36 (t, J=5.8 Hz, 1H), 4.04 (d, J=5.9 Hz, 1H), 3.65 (s, 3H), 3.04 (d, J=6.8 Hz, 2H), 2.20 (dd, J=12.5, 7.1 Hz, 1H), 2.08 (m, 2H), 0.90 (dd, J=10.8, 6.9 Hz, 6H).
PRIMER 4A: Etil estar (2R,4R)-4-[(5-Acetil-1H-pirazol-3-karbonil)amino]-5-(5’-hloro-2’-fluorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline
[0323]
[0324] U mešani rastvor 3-acetil-1H-pirazol-5-karboksilne kiseline (50.9 mg, 330 µmol), HATU (125 mg, 330 µmol), i DIPEA (104 µL, 0.6 mmol) u DMF (0.6 mL, 7.7 mmol), dodat je etil estar (2R,4R)-4-amino-5-(5’-hloro-2’-fluorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (110 mg, 300 µmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi sve dok reakcija nije završena. Smeša je razblažena sa DCM i isprana zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3. Organske materije su sušene preko Na2SO4, i rastvarač je uklonjen. Polovina materijala je zatim prečišćena pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (22 mg) kao TFA so. MS m/z [M+H]<+>izrač. za C25H25ClFN3O5, 502.15; zabeleženo 502.1.
PRIMER 4B: (2R,4R)-4-[(5-Acetil-1H-pirazol-3-karbonil)amino]-5-(5’-hloro-2’-fluorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanska kiselina
[0326] Etil estar (2R,4R)-4-[(5-Acetil-1H-pirazol-3-karbonil)amino]-5-(5’-hloro-2’-fluorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (75 mg, 150 µmol) je mešana na sobnoj temperaturi sa LiOH (10.8 mg, 450 µmol) u vodi (450 µL, 25 mmol) i EtOH (450 µL, 7.7 mmol), preko noći. Rastvarač je uklonjen i preostali materijal je prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (11.6 mg) kao TFA so.
PRIMER 5A: Etil estar (2R,4R)-4-[(5-Acetil-1H-pirazol-3-karbonil)amino]-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline
[0327]
[0328] U mešani rastvor 3-acetil-1H-pirazol-5-karboksilne kiseline (50.9 mg, 330 µmol), HATU (125 mg, 330 µmol), i DIPEA (104 µL, 0.6 mmol) u DMF (0.6 mL, 7.7 mmol), dodat je etil estar (2R,4R)-4-amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (104 mg, 300 µmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi sve dok reakcija nije završena. Smeša je razblažena sa DCM i isprana zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3. Organske materije su sušene preko Na2SO4, i rastvarač je uklonjen. Polovina materijala je zatim prečišćena pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (20 mg) kao TFA so. MS m/z [M+H]<+>izrač. za C25H26ClN3O5, 484.16; zabeleženo 484.1.
PRIMER 5B: (2R,4R)-4-[(5-Acetil-1H-pirazol-3-karbonil)amino]-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanska kiselina
[0329]
[0330] Etil estar (2R,4R)-4-[(5-Acetil-1H-pirazol-3-karbonil)amino]-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-pentanske kiseline (72 mg, 150 µmol) je mešan na sobnoj temperaturi sa LiOH (10.8 mg, 450 µmol) u vodi (450 µL, 25 mmol) i EtOH (450 µL, 7.7 mmol), preko noći. Rastvarač je uklonjen i preostali materijal je prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (11.5 mg) kao TFA so.
PRIMER 6A: (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-4-{[3-(2-fluorofenil)izoksazol-5-karbonil]amino}-2-hidroksipentanska kiselina
[0331]
[0332] U smešu 3-(2-fluorofenil)izoksazol-5-karboksilne kiseline (14.3 mg, 69 µmol) i HATU (26.2 mg, 69 µmol) u DMF (0.5 mL, 6 mmol) na sobnoj temperaturi, dodat je etil estar (2R,4R)-4-amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (20.0 mg, 58 µmol) i DIPEA (20.0 µL, 115 µmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Dodati su MeOH (2.0 mL, 49 mmol), voda (1.0 mL, 56 mmol), i LiOH monohidrat (9.7 mg, 230 µmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 čas. Dobijene čvrste supstance su filtrirane i isprane sa MeCN i vodom da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (17.1 mg). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C27H22ClFN2O5, 509.12; zabeleženo 509.
PRIMER 6B: Etoksikarboniloksimetil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-4-{[3-(2-fluorofenil)izoksazol-5-karbonil]amino}-2-hidroksipentanske kiseline
[0333]
[0334] Rastvor etil estra (2R,4R)-4-amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (HCl so; 1.5 g, 4 mmol), 3-(2-fluorofenil)izoksazol-5-karboksilne kiseline (814 mg, 4 mmol), HOBt (1.1 g, 8 mmol), EDC (1.5 g, 8 mmol) i DIPEA (1.6 g, 12 mmol) u DMF (50 ml) je mešan 15 časova na sobnoj temperaturi. Reakcija je ugašena vodom (50 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3x60 mL), i organski slojevi su sakupljeni i koncentrovani. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (petrol etar/EtOAc =5:1) da bi se proizvelo jedinjenje 1 (1.1 g). LC-MS: 537 [M+H]<+>.
[0335] Suspenzija jedinjenja 1 (200 mg, 0.37 mmol) i LiOH monohidrata (78 mg, 1.9 mmol) u THF/MeOH/H2O (2:2:1 20 mL) je mešana 3 časa na sobnoj temperaturi. Smeša je koncentrovana da bi se uklonili organski rastvarači, i ostatak je podešen do pH 6 sa vodenim rastvorom HCl (1 M). Smeša je filtrirana da bi se proizvelo jedinjenje 2 kao bela čvrsta supstanca (120 mg). LC-MS: 509 [M+H]<+>.
[0336] Suspenzija jedinjenja 2 (150 mg, 0.3 mmol), hlorometil etil karbonata (84 mg, 0.6 mmol), NaI (15 mg, 0.6 mmol) i piridina (96 mg, 1.2 mmol) u DMF (20 mL) je mešana u trajanju od 15 časova na 30°C. Reakcija je ugašena vodom (15 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3x30 mL). Spojeni organski slojevi su koncentrovani in vacuo i prečišćeni hromatografijom na koloni (petrol etar/EtOAc=3:1) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (10 mg). LC-MS: 611 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1.33 (t, J=7.2 Hz, 3H), 2.03-2.08 (m, 1H), 2.30-2.34 (m, 1H), 3.05 (d, J=6.4 Hz 2H), 4.26 (q, J=7.2 Hz, 2H), 4.48 (br, 1H), 4.75 (br, 1H), 5.68-5.70 (m, 1H), 5.81-5.83 (m, 1H), 6.88 (d, J=8.8Hz, 1H), 7.28-7.34 (m, 7H), 7.42-7.53 (m, 4H), 7.96-7.99 (t, J=6.8Hz, 1H).
PRIMER 6C: Izopropoksikarboniloksimetil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-4-{[3-(2-fluorofenil)izoksazol-5-karbonil]amino}-2-hidroksipentanske kiseline
[0337]
[0338] U mešani rastvor (2R,4R)-4-(t-butoksikarbonilamino)-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (2.4 g, 5.7 mmol) u DMF (50 mL) dodat je hlorometil izopropil karbonat (1.3 g, 8.6 mmol). U ovu smešu, dodati su NaI (1.71 g, 11.4 mmol) i DIPEA (2.2 g, 17.1 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Dodata je voda (100 mL) i smeša je ekstrahovana sa EtOAc (3x80 mL). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (2x100 mL) i vodom (2x100 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4, i koncentrovani in vacuo. Proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (petrol etar/EtOAc, 15:1∼6:1) da bi se proizvelo jedinjenje 1 kao bela čvrsta supstanca (574 mg). LC-MS: 558 [M+Na]<+>.
[0339] Jedinjenje 1 (574 mg, 1.1 mmol) je rastvoreno u rastvoru HCl-dioksanu (1.4 M, 50 mL) na 0°C, i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 8 časova. Posle uklanjanja rastvarača, ostatak je dispergovan u EtOAc (10 mL). Talog je sakupljen filtracijom da bi se proizvelo jedinjenje 2 kao bela čvrsta HCl so (300 mg). LC-MS: 436 [M+H]<+>.
[0340] U rastvor jedinjenja 2 (150 mg, 340 µmol) u DMF (10 mL) dodat je 3-(2-fluorofenil)-izoksazol-5-karbonil hlorid (79 mg, 380 µmol) i DIPEA (120 µL, 680 µmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Dodata je voda (50 mL) i smeša je zatim ekstrahovana sa EtOAc (3x30 mL). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (2x50 mL) i vodom (2x50 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4, i koncentrovani in vacuo. Ostatak je zatim prečišćen pomoću preparativne HPLC (CAN-H2O (0.1% TFA), 75-80) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (60 mg). LC-MS: 625 [M+H]<+>.<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1.22-1.23 (m, 6H), 2.01-2.07 (m, 2H), 2.89-2.96 (m, 2H), 4.37-4.38 (m, 2H), 4.80 (br, 1H), 5.67-5.69 (m, 2H), 5.71-5.78 (m,1H), 7.31-7.33 (m, 7H), 7.42-7.43 (m, 5H), 7.61-7.63 (m, 1H), 8.95 (d, J=6.8Hz, 1H).
PRIMER 6D: Acetoksimetil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-4-{[3-(2-fluorofenil)izoksazol-5-karbonil]amino}-2-hidroksipentanske kiseline
[0341]
[0342] U mešani rastvor bromometil acetata (977 mg, 6.4 mmol) u DMF (10 mL) ukapavanjem je dodavan rastvor (2R,4R)-4-(t-butoksikarbonilamino)-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (1.8 g, 4.3 mmol) u DMF (10 mL) na sobnoj temperaturi. Zatim je ukapavanjem dodavan piridin (1.5 g, 19.2 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Dodata je voda (150 mL) i smeša je ekstrahovana sa EtOAc (3x100 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (2x100 mL) i vodom (3x100 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4, i koncentrovani in vacuo. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (petrol etar/EtOAc=6:1) da bi se proizvelo jedinjenje 1 kao bela čvrsta supstanca (570 mg. LC-MS: 436 [M-tBu+H]<+>.
[0343] Jedinjenje 1 (570 mg, 1.2 mmol) je rastvoreno u rastvoru HCl-dioksana (1.4 mol/L, 50 mL) na 0°C. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 8 časova, zatim koncentrovana in vacuo. Ostatak je dispergovan u EtOAc (10 mL). Talog je sakupljen filtracijom da bi se proizvelo jedinjenje 2 kao bela čvrsta HCl so (200 mg). LC-MS: 392 [M+H]<+>.
[0344] U rastvor jedinjenja 2 (150 mg, 380 µmol) u THF (10 mL) dodat je 3-(2-fluorofenil)-izoksazol-5-karbonil hlorid (79 mg, 380 µmol) i DIPEA (120 µL, 680 µmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Dodata je voda (50 mL), i smeša je zatim ekstrahovana sa EtOAc (3x20 mL). Organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (2x30 mL) i vodom (2x30 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4, i koncentrovani in vacuo. Ostatak je zatim prečišćen pomoću preparatuvne HPLC (CAN-H2O (0.1% TFA), 75-80) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (13 mg). LC-MS: 581 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1.90-1.99 (m, 2H), 2.07 (s, 3H), 2.89-2.96 (m, 2H), 4.27-4.38 (m, 2H), 5.67-5.69 (m, 2H), 5.78 (br, 1H), 7.31-7.33 (m, 7H), 7.42-7.43 (m, 5H), 7.61-7.63 (m, 1H), 8.95 (d, J=8.8 Hz, 1H).
PRIMER 6E: (S)-2-Metoksikarbonilamino-3-metilbutiriloksimetil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-4-{[3-(2-fluorofenil)izoksazol-5-karbonil]amino}-2-hidroksipentanske kiseline
[0345]
[0346] 2,6-Lutidin (96 mg, 0.9 mmol) je dodat u rastvor (2R,4R)-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-4-{[3-(2-fluorofenil)izoksazol-5-karbonil]amino}-2-hidroksipentanske kiseline (150 mg, 0.3 mmol), hlorometil estra (S)-2-metoksikarbonilamino-3-metilbuterne kiseline (134 mg, 0.6 mmol) i NaI (135 mg, 0.9 mmol) u DMF (10 mL). Smeša je mešana na 50°C preko noći. Dodata je voda (20 mL) i smeša je ekstrahovana sa etil etrom (2x30mL). Spojeni organski slojevi su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani in vacuo. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (petrol etar/EtOAc=4/1∼1/2) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao prljavo žuta čvrsta supstanca (8 mg). LCMS: 695.9 [M+H]<+>.<1>H-NMR(CD3OD-d4, 400MHz) δ 0.92-0.95 (m, 6H), 2.03-2.08 (m, 3H), 3.00-3.10 (m, 2H), 4.09 (br, 1H), 4.27-4.28 (m, 1H), 4.87 (br, 1H), 5.75-5.85 (m, 2H), 7.26-7.37 (m, 6H), 7.51-7.53 (m, 6H), 7.93-7.95 (m, 1H).
PRIMER 7A: (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(3-metoksiizoksazol-5-karbonil)amino]pentanska kiselina
[0347]
[0348] 3-Metoksiizoksazol-5-karboksilna kiselina (39.4 mg, 275 µmol) i HCTU (128 mg, 310 µmol) su spojeni u DMF, i mešani u trajanju od 10 minuta na sobnoj temperaturi. Dodati su DIPEA (72 µL, 413 µmol) i etil estar (2R,4R)-4-amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (50 mg, 0.1 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Smeša je spojena sa EtOH (402 µL, 6.9 mmol) i 1 M LiOH u vodi (1.1 mL, 1.1 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 čas, isparavana pod sniženim pritiskom i prečišćena pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova. MS m/z [M+H]<+>izrač. za C22H21ClN2O6, 445.11; zabeleženo 445.2.
PRIMER 7B: 2-Metoksikarbonilamino-3-metilbutiriloksimetil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(3-metoksiizoksazol-5-karbonil)amino]pentanske kiseline
[0350] U rastvor etil estra (2R,4R)-4-amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (HCl so, 1 g, 2.6 mmol) u THF (30 mL) dodat je rastvor 3-metoksiizoksazol-5-karbonil hlorida (430 mg, 3mmol) u THF (10 mL) i Et3N (790 mg, 7.8 mmol) na 0°C. Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 6 časova, zatim koncentrovan in vacuo da bi se proizvela žuta čvrsta supstanca koja je prečišćena hromatografijom (PE:EtOAc = 8:1) da bi se proizvelo jedinjenje 1 kao bela čvrsta supstanca (0.9 g). LC-MS: 473 [M+H]<+>.
[0351] U rastvor jedinjenja 1 (0.5 g, 1 mmol) u MeOH/THF/H2O (15 mL/15 mL/3 mL) dodat je LiOH (120 mg, 5 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 5 časova, zatim je koncentrovana. pH smeše je podešena do pH 5 sa HCl (1N, 20 mL). Čvrste supstance su filtrirane da bi se proizvelo jedinjenje 2 kao bela čvrsta supstanca (0.4 g). LCMS: 445 [M+H]<+>,
[0352] DIPEA (250 mg, 2 mmol) je dodat u rastvor jedinjenja 2 (220 mg, 0.5 mmol), hlorometil estra (S)-2-metoksikarbonilamino-3-metilbuterne kiseline (220 mg, 1 mmol) i NaI (300 mg, 2 mmol) u DMF (5 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 12 časova. Smeša je zatim sipana u vodu (20 mL), ekstrahovana sa EtOAc (3x15 mL), isprana zasićenim vodenim rastvorom NaCl (30 mL), sušena preko anhidrovanog Na2SO4, i koncentrovana in vacuo. Ostatak je zatim prečišćen hromatografijom (petrol etar:EtOAc = 6:1) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (10 mg). LC-MS: 632 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 0.86 (d, J=6.8 Hz, 6H), 1.97-2.02 (m, 3H), 2.92-2.94 (m, 2H), 3.92 (s, 3H), 4.36-4.21 (m, 2H), 5.70-5.79 (m, 2H), 6.72 (s, 1H), 7.29 (d, J=8.0 Hz, 2H), 7.46-7.61 (m, 2H), 7.60-7.69 (m, 4H), 8.73 (d, J=8.8 Hz, 1H).
PRIMER 7C: Izopropoksikarboniloksimetil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(3-metoksiizoksazol-5-karbonil)amino]pentanske kiseline
[0353]
[0354] Smeša (2R,4R)-4-(t-butoksikarbonilamino)-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (600 mg, 1.4 mmol), hlorometil izopropil karbonata (426 mg, 2.8 mmol), NaI (420 mg, 2.8 mmol) i DIPEA (546 mg, 4.2 mmol) u DMF (30.0 mL) je mešana na 25°C preko noći. Reakciona smeša je sipana u vodu (60 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3x50 mL). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (2x50 mL) i vodom (2x50 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4, i koncentrovani in vacuo. Proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (petrol etar:EtOAc=2:1) da bi se proizvelo jedinjenje 1 kao bezbojna tečnost (240 mg). LC-MS: 480 [M-tBu+H]<+>.
[0355] Jedinjenje 1 (240 mg, 0.45 mol) je rastvoreno u rastvoru HCl-dioksana (10.0 mL, 3.0 M) na 0°C, i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvarač je uklonjen in vacuo. Ostatak je dispergovan u EtOAc (10 mL). Talog je sakupljen filtracijom da bi se proizvelo jedinjenje 2 kao bela čvrsta HCl so (80mg). LC-MS: 436 [M+H]<+>,
[0356] Smeša jedinjenja 2 (70 mg, 0.15 mmol), 3-metoksiizoksazol-5-karboksilne kiseline (43 mg, 0.3 mmol), HOBT (40 mg, 0.3 mmol), EDCI (57 mg, 0.3 mmol) i DIPEA (78 mg, 0.6 mmol) u DMF (10.0 mL) je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Smeša je sipana u vodu (30 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3x30 mL). Organski sloj je odvojen, ispran zasićenim vodenim rastvorom NaCl (2x30 mL) i vodom (2x30mL), sušen preko anhidrovanog Na2SO4, i koncentrovan in vacuo. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (petrol etar:EtOAc=2:1) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (20 mg). LC-MS: 561 [M+H]<+>.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1.30 (d, J=6.4 Hz, 6H), 2.04-2.05 (m, 1H), 2.25-2.29 (m, 1H), 2.99-3.01 (m, 2H), 3.48 (br, 1H), 4.00 (s, 3H), 4.46-4.48 (m, 1H), 4.50 (br, 1H), 4.92-4.93 (m, 1H), 5.69-5.79 (m, 2H), 6.51 (s, 1H), 6.79-6.70 (m, 1H), 7.28-7.57(m, 8H).
PRIMER 7D: Acetoksimetil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(3-metoksiizoksazol-5-karbonil)amino]pentanske kiseline
[0357]
[0358] Bromometil acetat (977 mg, 6.4 mmol) je dodat u mešani rastvor (2R,4R)-4-(t-butoksikarbonilamino)-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (1.8 g, 4.3 mmol) u DMF (20 mL) na sobnoj temperaturi. Piridin (1.7 g, 21.5 mmol) je dodavan ukapavanjem i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Dodata je voda (50 mL) i smeša je ekstrahovana sa EtOAc (3x50 mL). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (2x60 mL) i vodom (2x60 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4, i koncentrovani in vacuo. Proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (petrol etar:EtOAc, 15:1∼6:1) da bi se proizvelo jedinjenje 1 kao bela čvrsta supstanca (570 mg). LC-MS: 436 [M-tBu+H]<+>.
[0359] Jedinjenje 1 (570 mg, 1.2 mmol) je dodato u rastvor HCl-dioksana (1.4 mol/L, 50 mL) na 0°C, i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 časa i zatim koncentrovana in vacuo. Ostatak je dispergovan u EtOAc (10 mL). Talog je sakupljen filtracijom da bi se proizvelo jedinjenje 2 kao bela čvrsta HCl so (200 mg). LC-MS: 392 [M+H]<+>.
[0360] U rastvor jedinjenja 2 (100 mg, 255 µmol) u DMF (10 mL) dodata je 3-metoksiizoksazol-5-karboksilna kiselina (79 mg, 383 µmol), HOBt (69 mg, 510 µmol), EDCI (98 mg, 510 µmol) i DIPEA (0.2 mL, 1.0 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Dodata je voda (30 mL) i smeša je ekstrahovana sa EtOAc (3x30 mL). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (2x30 mL) i vodom (2x30mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4, i koncentrovani in vacuo. Ostatak je prečišćen pomoću preparativne HPLC (CAN-H2O(0.1% TFA), 60-65) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (15 mg). LC-MS: 517 [M+H]<+>.<1>H-NMR (DMSO-d6, 400 Hz): δ 1.84-1.99 (m, 2H), 2.07 (s, 3H), 2.89-2.96 (m, 2H), 3.92 (s, 3H), 4.21-4.32 (m, 2H), 5.66-5.69 (m, 2H), 5.74 (br, 1H), 6.72 (s, 1H), 7.29 (d, J=8.4 Hz, 2H), 7.28-7.30 (m, 2H), 7.60-7.62 (m, 3H), 7.69 (s, 1H), 8.76 (d, J=8.8 Hz, 1H).
PRIMER 7E: Etoksikarboniloksimetil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(3-metoksiizoksazol-5-karbonil)-amino]pentanske kiseline
[0361]
[0362] U mešani rastvor hlorometil etil karbonata (0.2 mL, 1.1 mmol) u DMF (1 mL) ukapavanjem je dodavan rastvor (2R,4R)-4-(t-butoksikarbonilamino)-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (400 mg, 960 µmol) u DMF (6 mL) na sobnoj temperaturi. Dodati su NaI (432 mg, 2.88 mmol) i DIPEA (0.5 mL, 2.88 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Dodata je voda (50 mL) i smeša je ekstrahovana sa EtOAc (3x30 mL). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (2x50 mL) i vodom (2x50 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4, i koncentrovani in vacuo. Proozvod je prečišćen hromatografijom na koloni (petrol etar:EtOAc, 15:1∼6:1) da bi se proizvelo jedinjenje 1 kao bela čvrsta supstanca (190 mg). LC-MS: 544 [M+Na]<+>.
[0363] Jedinjenje 1 (190 mg, 360 µmol) je dodato u rastvor HCl-dioksana (1.4 mol/L, 50 mL) na 0 °C, i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 časa i zatim koncentrovana in vacuo. Ostatak je diseprgovan u EtOAc (10 mL). Talog je sakupljen filtracijom da bi se proizvelo jedinjenje 2 kao bela čvrsta HCl so (150 mg). LC-MS: 422 [M+H]<+>.
[0364] U mešani rastvor jedinjenja 2 (150 mg, 360 µmol) u THF (20 mL) ukapavanjem je dodavan rastvor 3-metoksiizoksazol-5-karbonil hlorida (73 mg, 530 µmol) u THF (2 mL) na sobnoj temperaturi. Ukapavanjem je dodavan DIPEA (0.2 mL) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Dodata je voda (50 mL) i smeša je ekstrahovana sa Et2O (3x40 mL). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (2x50 mL) i vodom (2x50 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4, i koncentrovani in vacuo. Ostatak je prečišćen pomoću preparativne HPLC (CAN-H2O (0.1%TFA), 60-70) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (25 mg). LC-MS: 546.9 [M+H]<+>.<1>H-NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ 1.22 (t, J=6.8 Hz, 3H), 1.87-1.96 (m, 2H), 2.83-2.89 (m, 2H), 3.92 (s, 3H), 4.16 (q, J=6.8 Hz, 2H), 4.18-4.20 (m,2H), 5.68-5.78 (m,3H), 6.72 (s, 1H), 7.29 (d, J=8.0 Hz 2H), 7.45-7.48 (m, 2H), 7.60-7.62 (m, 3H), 7.69 (m, 1H), 8.76 (d, J=8.8 Hz,1H).
PRIMER 8A: (2R,4R)-5-(5’-Hloro-2’-fluorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(1-hidroksi-1H-[1,2,3]triazol-4-karbonil)amino]pentanska kiselina
[0365]
[0366] Etil estar (2R,4R)-5-(4-Bromofenil)-2-hidroksi-4-[(1-hidroksi-1H-1,2,3-triazol-4-karbonil)amino]pentanske kiseline (30 mg, 70 µmol) je spojen sa 5-hloro-2-fluorofenilbornom kiselinom (22 mg, 126 µmol), K2CO3(29.1 mg, 211 µmol), EtOH (0.8 mL, 10 mmol), i vodom (0.2 mL, 10 mmol). Poslednji je dodat SilicaCat DPP-Pd (0.28 mmol/g punjenje; 25.1 mg, 7.0 µmol). Dobijena smeša je obrađena mikrotalasima na 100°C u trajanju od 10 minuta. Dodat je 1 M LiOH u vodi (281 µL, 281 µmol) i dobijena smeša je mešana u trajanju od 1 časa. Smeša je filtrirana, koncentrovana i prečišćena pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (17 mg). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C20H18ClFN4O5, 449.10; zabeleženo 449.2.
PRIMER 8B: 2,2,3,3,3-pentafluoropropil estar (2R,4R)-5-(5’-Hloro-2’-fluorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(1-hidroksi-1H-[1,2,3]triazol-4-karbonil)amino]pentanske kiseline
[0367]
[0368] 2,2,3,3,3-Pentafluoropropil estar (2R,4R)-4-Amino-5-(5’-hloro-2’-fluorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (32.1 mg, 68.3 µmol), 1-hidroksi-1H-[1,2,3]triazol-4-karboksilna kiselina (10.6 mg, 82 µmol) i HATU (39.0 mg, 102 µmol) su mešani u DMF (1.0 mL, 12.9 mmol) u trajanju od 10 minuta. Ukapavanjem je dodavan DIPEA (35.7 µL, 205 µmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 čas. Smeša je koncentrovana i proizvedena je bistra žuta tečnost, koja je prečišćena upotrebom hromatografije na C18 koloni preparativnih razmera (mala količina; 30-90% MeCN u vodi sa 0.05% TFA) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (4.9 mg). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C23H19ClF6N4O5, 581.09; zabeleženo 581.
PRIMER 8C: 5-Metil-2-okso-[1,3]dioksol-4-ilmetil estar (2R,4R)-5-(5’-Hloro-2’-fluorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(1-hidroksi-1H-[1,2,3]triazol-4-karbonil)amino]pentanske kiseline
[0369]
[0370] 5-metil-2-okso-[1,3]dioksol-4-ilmetil estar (2R,4R)-4-Amino-5-(5’-hloro-2’-fluorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (30.7 mg, 68.3 µmol), 1-hidroksi-1H-[1,2,3]triazol-4-karboksilna kiselina (10.6 mg, 82 µmol) i HATU (39.0 mg, 102 µmol) su mešani u DMF (1.0 mL, 12.9 mmol) u trajanju od 10 minuta. Ukapavanjem je dodavan DIPEA (35.7 µL, 205 µmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 čas. Smeša je koncentrovana da bi se proizvela bistra žuta tečnost, koja je prečišćena upotrebom hromatografije na C18 koloni u preparativnim razmerama (mala kolona; 30-90% MeCN u vodi sa 0.05% TFA) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (27.1 mg). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C25H22ClFN4O8, 561.11; zabeleženo 561.1.
PRIMER 8D: (2R,4R)-5-(5’-Hloro-2’-fluorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-{[1-(5-metil-2-okso-[1,3]dioksol-4-ilmetoksi)-1H-[1,2,3]triazol-4-karbonil]amino}pentanska kiselina
[0371]
[0372] 4-Hlorometil-5-metil-1,3-dioksol-2-on (11.0 µL, 100 µmol) je dodat u rastvor (2R,4R)-5-(5’-hloro-2’-fluorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(1-hidroksi-1H-1,2,3-triazol-4-karbonil)amino]pentanske kiseline (30.0 mg, 66.8 µmol) u acetonu (0.5 mL, 6.8 mmol). Dodat je Et3N (18.6 µL, 134 µmol) i dobijena smeša je mešana na 65°C u trajanju od 2 časa. Smeša je koncentrovana in vacuo da bi se proizvela žuta čvrsta supstanca. Sirova čvrsta supstanca je prečišćena pomoću HPLC u preparativnim razmerama (hromatografija na C18 koloni, mala kolona, upotrebom 30-90% MeCN u vodi sa 0.05% TFA) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (6.5 mg). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C25H22ClFN4O8, 561.11; zabeleženo 561.1.
PRIMER 8E: (2R,4R)-4-[(1-Butiriloksimetoksi-1H-[1,2,3]triazol-4-karbonil)amino]-5-(5’-hloro-2’-fluorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanska kiselina
[0373]
[0374] Hlorometil butirat (13.7 mg, 100 µmol) je dodat u rastvor (2R,4R)-5-(5’-hloro-2’-fluorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(1-hidroksi-1H-1,2,3-triazol-4-karbonil)amino]pentanske kiseline (30.0 mg, 66.8 µmol) u acetonu (0.5 mL, 6.8 mmol). Dodat je Et3N (18.6 µL, 134 µmol) i dobijena smeša je mešana na 65°C u trajanju od 2 časa. Smeša je zatim koncentrovana in vacuo da bi se proizvela žuta tečnost. Sirova tečnost je prečišćena (hromatografija na C18 koloni u preparativnim razmerama, mala kolona, upotrebom 30-90% MeCN u vodi sa 0.05% TFA) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (6.0 mg). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C25H26ClFN4O7, 549.15; zabeleženo 549.1.
PRIMER 8F: (2R,4R)-4-{[1-((S)-2-Amino-3-metilbutiriloksimetoksi)-1H-[1,2,3]triazol-4-karbonil]-amino}-5-(5’-hloro-2’-fluorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanska kiselina
[0375]
[0376] Hlorometil estar (S)-2-t-butoksikarbonilamino-3-metilbuterne kiseline (44.4 mg, 167 µmol) je dodat u rastvor (2R,4R)-5-(5’-hloro-2’-fluorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(1-hidroksi-1H-1,2,3-triazol-4-karbonil)amino]pentanske kiseline (30.0 mg, 66.8 µmol) u acetonu (0.5 mL, 6.8 mmol). Dodat je Et3N (18.6 µL, 134 µmol) i dobijena smeša je mešana na 65°C u trajanju od 2 časa. Dodat je 1:1 TFA/DCM (1.0 mL, 6.2 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta, i zatim koncentrovana in vacuo da bi se proizvela žuta tečnost. Sirova tečnost je prečišćena (hromatografija na C18 koloni u preparativnim razmerama, mala kolona, upotrebom 30-90% MeCN u vodi sa 0.05% TFA) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (10 mg). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C26H29ClFN5O7, 578.17; zabeleženo 578.1.
PRIMER 8G: (2R,4R)-5-(5’-Hloro-2’-fluorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-{[1-((S)-2-metoksikarbonilamino-3-metilbutiriloksimetoksi)-1H-[1,2,3]triazol-4-karbonil]amino}pentanska kiselina
[0377]
[0378] Hlorometil estar (S)-2-metoksikarbonilamino-3-metilbuterne kiseline (37.4 mg, 167 µmol) je dodat u rastvor (2R,4R)-5-(5’-hloro-2’-fluorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(1-hidroksi-1H-1,2,3-triazol-4-karbonil)amino]pentanske kiseline (30.0 mg, 66.8 µmol) u acetonu (0.5 mL, 6.8 mmol). Dodat je Et3N (18.6 µL, 134 µmol) i dobijena smeša je mešana na 65°C u trajanju od 2 časa. Smeša je zatim koncentrovana in vacuo da bi se proizvela žuta tečnost. Sirova tečnost je prečišćena (hromatografija na C18 koloni u preparativnim razmerama, mala kolona, upotrebom 30-90% MeCN u vodi sa 0.05% TFA) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (8.2 mg). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C28H31ClFN5O9, 636.18; zabeleženo 636.1.
PRIMER 8H: Butiriloksimetil estar (2R,4R)-5-(5’-Hloro-2’-fluorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(1-hidroksi-1H-[1,2,3]triazol-4-karbonil)amino]pentanske kiseline
[0379]
[0380] DIPEA (35.8 µL, 206 µmol) je dodat u rastvor butiriloksimetil estra (2R,4R)-4-amino-5-(5’-hloro-2’-fluorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (30.0 mg, 68.5 µmol), 1-hidroksi-1H-1,2,3-triazol-4-karboksilne kiseline (13.3 mg, 103 µmol) i HATU (39.1 mg, 103 µmol) u DMF (500 µL, 6.5 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 minuta, zatim koncentrovana in vacuo da bi se proizvela bistra žuta tečnost. Sirova tečnost je prečišćena pomoću HPLC u preparativnim razmerama (hromatografija na C18 koloni, mala kolona, upotrebom 30-90% MeCN u vodi sa 0.05% TFA) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (9.0 mg). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C25H26ClFN4O7, 549.15; zabeleženo 549.1.
PRIMER 8I: Etoksikarboniloksimetil estar (2R,4R)-5-(5’-hloro-2’-fluorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(1-hidroksi-1H-[1,2,3]triazol-4-karbonil)amino]pentanske kiseline
[0381]
[0382] U rastvor etil estra 1-aliloksi-1H-[1,2,3]triazol-4-karboksilne kiseline (1.7 g, 8.6 mmol) u MeOH (20 mL) dodat je rastvor LiOH (1.1 g, 45.3 mmol) u vodi (4 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi sve dok reakcija nije završena (1 čas). Smeša je koncentrovana, razblažena vodom (10 mL), i ekstrahovana sa EtOAc (2x20 mL). Vodeni sloj je zakišeljen sa 1N HCl do pH=3, ekstrahovan sa EtOAc (3x30 mL), i spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (30 mL) i sušeni preko anhidrovanog Na2SO4. Rastvor je isparavan da bi se proizvelo jedinjenje 1 (1.3 g) kao bela čvrsta supstanca. LC-MS: 170 [M+H]<+>.
[0383] U rastvor etil estra (2R,4R)-4-amino-5-(5’-hloro-2’-fluorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (HCl so) (800 mg, 2.0 mmol) i jedinjenja 1 (337 mg, 2.0 mmol) u DMF (15 mL) dodati su PyBOP (1.0 g, 2.0 mmol) i DIPEA (987 µL, 6.0 mmol) na 0°C. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 4 časa. Dodata je voda (50 mL) i smeša je ekstrahovana sa EtOAc (3x10 mL), i spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl i sušeni preko anhidrovanog Na2SO4. Rastvor je koncentrovan da bi se dobio sirovi proizvod koji je prečišćen hromatografijom na silika gelu (silika gel: 200-300 mreža; eluiran sa PE:EtOAc=10:1 do 5:1 do 1:1) da bi se proizvelo jedinjenje 2 (700 mg) kao svetlo žuta čvrsta supstanca. LC-MS: 517 [M+H]<+>.
[0384] U rastvor jedinjenja 2 (700 mg, 1.4 mmol) u MeOH (15 mL) i vodi (3 mL) dodat je LiOH (171 mg, 4.1 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Smeša je koncentrovana, dodata je voda (20 mL) i smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2x10 mL). Vodeni sloj je zakišeljen sa 1N HCl do pH=3, ekstrahovan sa EtOAc (3x10 mL), i spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (30 mL) i sušeni preko anhidrovanog Na2SO4. Rastvor je isparavan da bi se proizvelo jedinjenje 3 (650 mg) kao žuta čvrsta supstanca. LC-MS: 489 [M+H]<+>.
[0385] U smešu jedinjenja 3 (80 mg, 160 µmol) i hlorometil etil karbonata (1.0 ml) dodati su NaI (48 mg, 0.32 mmol) i lutidin (52 mg, 480 µmol). Smeša je mešana na 50°C u trajanju od 6 časova. Smeša je zatim hlađena do sobne temperature, razblažena vodom (15 ml), i ekstrahovana sa EtOAc (2x15 mL). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (20 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4, koncentrovani i prečišćeni hromatografijom na silika gelu (silika gel: 200-300 mreža; eluiranje sa PE:EtOAc od 4:1 do 1:1) da bi se proizvelo jedinjenje 4 (60 mg) kao svetlo žuta čvrsta supstanca. LC-MS: 591 [M+H]<+>.
[0386] U rastvor jedinjenja 4 (40 mg, 68 µmol) u MeCN (10 mL) dodat je NaI (10 mg, 68 µmol), i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 5 minuta. U ovu mešanu suspenziju, dodat je TMSCl (11 mg, 102 µmol) i mešana je još 10 minuta. Reakcija je ugašena natrijum tiosulfatom i smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2x10 mL). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaCl (20 mL) i sušeni preko anhidrovanog Na2SO4. Ostatak je prečišćen pomoću pre-HPLC [Daisogel-C18, 250 x 50 mm, 10µm; CAN-H2O (0.1% TFA) od 60% do 90%] da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (8 mg) kao bela čvrsta supstanca. LC-MS: 551 [M+H]<+>.<1>H-NMR (CDCl3, 400 Hz): δ 1.27 (t, 3H), 2.06-2.11 (m, 1H), 2.14-2.24 (m, 1H), 2.96-3.01 (m, 2H), 4.18 (q, 2H), 4.42 (m, 1H), 4.71 (m, 1H), 5.57-5.65 (m, 2H), 7.05 (t, 1H), 7.22-7.24 (m, 2H), 7.35-7.40 (m, 4H), 8.04 (s, 1H).
PRIMER 8J: Izopropoksikarboniloksimetil estar (2R,4R)-5-(5’-Hloro-2’-fluorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(1-hidroksi-1H-[1,2,3]triazol-4-karbonil)amino]pentanske kiseline
[0387]
[0388] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno (110 mg) upotrebom postupaka koji su ovde opisani.
PRIMER 8K: 1-Cikloheksiloksikarboniloksietil estar (2R,4R)-5-(5’-Hloro-2’-fluorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(1-hidroksi-1H-[1,2,3]triazol-4-karbonil)amino]pentanske kiseline
[0389]
[0390] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno (16.6 mg) upotrebom postupaka koji su ovde opisani.
PRIMER 8L: (S)-2-metoksikarbonilamino-3-metil-butiriloksimetil estar (2R,4R)-5-(5’-Hloro-2’-fluorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(1-hidroksi-1H-[1,2,3]triazol-4-karbonil)amino]pentanske kiseline
[0391]
[0392] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno (117 mg) upotrebom postupaka koji su ovde opisani.
PRIMER 8M: Acetoksimetil estar (2R,4R)-5-(5’-Hloro-2’-fluorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(1-hidroksi-1H-[1,2,3]triazol-4-karbonil)amino]pentanske kiseline
[0393]
[0394] Upotrebom postupaka koji su ovde opisani, takođe može biti pripremljeno jedinjenje iz naslova.
PRIMER 9A: (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(5-okso-1-fenil-4,5-dihidro-1H-[1,2,4]triazol-3-karbonil)amino]pentanska kiselina
[0395]
[0396] 5-Okso-1-fenil-4,5-dihidro-1H-[1,2,4]triazol-3-karboksilna kiselina (42.3 mg, 206 µmol) i HCTU (128 mg, 310 µmol) su spojeni u DMF, i mešani 10 minuta na sobnoj temperaturi. Dodati su DIPEA (72 µL, 413 µmol) i etil estar (2R,4R)-4-amino-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksipentanske kiseline (50 mg, 0.1 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Smeša je spojena sa EtOH (402 µL, 6.9 mmol) i 1 M LiOH u vodi (1.1 mL, 1.1 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 čas, isparavana pod sniženim pritiskom, i prečišćena pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova (1.8 mg) kao TFA so. MS m/z [M+H]<+>izrač. za C26H23ClN4O5, 507.14; zabeleženo 507.2.
PRIMER 9B: Etoksikarboniloksimetil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(5-okso-1-fenil-4,5-dihidro-1H-[1,2,4]triazol-3-karbonil)amino]pentanske kiseline
[0397]
[0398] Rastvor (2R,4R)-5-(3’-hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(5-okso-1-fenil-4,5-dihidro-1H-[1,2,4]triazol-3-karbonil)amino]pentanske kiseline (253 mg, 0.5 mmol), hlorometil etil karbonata (69 mg, 0.5 mmol), 2,6-lutidina (165 mg, 1.5 mmol) i NaI (150 mg, 1 mmol) u DMF (20 mL) je mešan u trajanju od 15 časova na 50°C. Smeša je ugašena vodom (20 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3x30 mL). Spojeni organski slojevi su sakupljeni i koncentrovani in vacuo. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (petrol etar/EtOAc=3:1) da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (13 mg). LC-MS: 608.8 [M+H]<+>.<1>H NMR: (CDCl3, 400 MHz) δ 1.27 (t, J=8.0 Hz, 3H), 2.03-2.33 (m, 2H), 3.02-3.05 (m, 2H), 4.18 (q, J=8.0 Hz, 2H), 4.49 (br, 1H), 4.85 (br, 1H), 5.57-5.76 (m, 2H), 7.03 (d, J=12 Hz, 1H), 7.25-7.40 (m, 4H), 7.42-7.51 (m, 3H), 7.53-7.61 (m, 3H), 7.93 (d, J=8.0 Hz, 2H).
PRIMER 9C: (S)-2-metoksikarbonilamino-3-metilbutiriloksimetil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(5-okso-1-fenil-4,5-dihidro-1H-[1,2,4]triazol-3-karbonil)amino]pentanske kiseline
[0399]
[0400] Upotrebom postupaka koji su ovde opisani, takođe može biti pripremljeno jedinjenje iz naslova.
PRIMER 10A: Etil estar (2R,4R)-4-[(5-Acetil-2-fosfonooksimetil-2H-pirazol-3-karbonil)amino]-5-bifenil-4-il-2-hidroksipentanske kiseline
[0401]
[0402] Etil estar (2R,4R)-4-Amino-5-bifenil-4-il-2-hidroksipentanske kiseline (HCl so; 500 mg, 1 mmol, 1.0 ekv.), 5-acetil-2H-pirazol-3-karboksilna kiselina (330.4 mg, 2.1 mmol, 1.5 ekv.), i HATU (820 mg, 2.1 mmol, 1.5 ekv.) su spojeni u DMF (5 mL), i dobijena smeša je mešana 2 minuta. Dodat je DIPEA (750 µL) i smeša je mešana 1 čas. Smeša je sušena pod vakuumom, i proizvod je prečišćen upotrebom reverzno-fazne hromatografije (10-70% MeCN/H2O; 0.05% TFA tokom 70 minuta) da bi se proizvelo jedinjenje 1 kao TFA so (300 mg, čistoća 98%). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C25H27N3O5, 450.20; zabeleženo 450.2.
[0403] U rastvor jedinjenja 1 (15.0 mg, 33.4 µmol) u DMF (103 µL, 1.3 mmol) dodat je K2CO3(5.1 mg, 36.7 µmol) i hlorometil estar di-t-butil estra fosforne kiseline (9.50 mg, 36.7 µmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, zatim isparavana pod sniženim pritiskom. Ostatak je razblažen u EtOAc i dodat je rastvor 1M HCl da bi se pH doveo do 4-5. Organski sloj je ekstrahovan dva puta sa EtOAc, ispran vodom, a zatim zasićenim vodenim rastvorom NaCl, sušen preko anhidrovanog MgSO4, filtriran i isparavan. Ostatak je prečišćen pomoću „flash“ hromatografije (30-90% EtOAc u heksanima). Dodat je DCM (64.2 µL, 1.0 mmol), a zatim TFA (40 µL, 0.6 mmol), i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 20 minuta. Smeša je isparavana i prečišćena pomoću preparativne HPLC da bi se proizvelo jedinjenje iz naslova kao TFA so (4 mg). MS m/z [M+H]<+>izrač. za C26H30N3O9P, 560.17; zabeleženo 560.1.
PRIMER 10B: Etil estar (2R,4R)-4-[(5-Acetil-2H-pirazol-3-karbonil)amino]-2-((S)-2-amino-3-metilbutiriloksi)-5-bifenil-4-il-pentanske kiseline
[0404]
[0405] Upotrebom postupaka koji su ovde opisani, takođe može biti pripremljeno jedinjenje iz naslova.
PRIMER 10C: Etil estar (2R,4R)-4-{[5-Acetil-2-((S)-2-amino-3-metilbutiriloksimetil)-2H-pirazol-3-karbonil]amino}-5-bifenil-4-il-2-hidroksipentanske kiseline
[0406]
[0407] Upotrebom postupaka koji su ovde opisani, takođe može biti pripremljeno jedinjenje iz naslova.
PRIMER 11A: Etoksikarboniloksimetil estar (2R,4R)-5-(3’-Hlorobifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(1H-tetrazol-5-karbonil)amino]pentanske kiseline
[0408]
[0409] Upotrebom postupaka koji su ovde opisani, takođe može biti pripremljeno jedinjenje iz naslova.
ANALIZA
In vitro analize za kvantitativno određivanje inhibitornih potencija (IC50) na humanom i pacovskom NEP, i humanom ACE
[0410] Inhibitorne aktivnosti jedinjenja na humanom i pacovskom neprilizinu (EC 3.4.24.11; NEP) i humanom angiotenzin-konvertujućem enzimu (ACE) određene su upotrebom in vitro analiza kao što su opisane u daljem tekstu.
Ekstrakcija aktivnosti NEP iz bubrega pacova
[0411] Pacovski NEP je pripremljen iz bubrega adultnih Sprague Dawley pacova. Celi bubrezi su isprani u hladnom fosfatno puferisanom fiziološkom rastvoru (PBS) i stavljeni u ledeno hladan pufer za lizu (1% Triton X-114, 150 mM NaCl, 50 mM tris(hidroksimetil)aminometan (Tris) pH 7.5; Bordier (1981) J. Biol. Chem. 256: 1604-1607) u odnosu od 5 mL pufera za svaki gram bubrega. Uzorci su homogenizovani na ledu upotrebom polytron ručne drobilice za tkivo. Homogenati su centrifugirani na 1000 x g u „swinging bucket“ rotoru u trajanju od 5 minuta na 3°C. Talog je resuspendovan u 20 mL ledeno hladnog pufera za lizu i inkubiran na ledu u trajanju od 30 minuta. Uzorci (15-20 mL) su zatim postavljeni u slojevima na 25 mL ledeno hladnog amortizujućeg pufera (6% tež./zapr. saharoze, 50 mM pH 7.5 Tris, 150 mM NaCl, 0.06%, Triton X-114), zagrevani do 37°C u trajanju od 3-5 minuta i centrifugirani na 1000 x g u „swinging bucket“ rotoru na sobnoj temperaturi 3 minuta. Dva gornja sloja su aspirirana, ostavljajući viskozni uljasti talog koji sadrži obogaćenu membransku frakciju. Glicerol je dodat u koncentraciji od 50% i uzorci su čuvani na -20°C. Koncentracije proteina su kvantitativno određene upotrebom BCA detekcionog sistema sa goveđim serum albuminom (BSA) kao standardom.
Analize inhibicije enzima
[0412] Rekombinantni humani NEP i rekombinantni humani ACE su dobijeni komercijalno (R&D Systems, Minneapolis, MN, kataloški brojevi 1182-ZN i 929-ZN, respektivno). Fluorogeni peptidni suspstrat Mca-D-Arg-Arg-Leu-Dap-(Dnp)-OH (Medeiros et al. (1997) Braz. J. Med. Biol. Res. 30:1157-62; Anaspec, San Jose, CA) i Abz-Phe-Arg-Lys(Dnp)-Pro-OH (Araujo et al. (2000) Biochemistry 39:8519-8525; Bachem, Torrance, CA) su korišćeni u analizama NEP i ACE respektivno.
[0413] Analize su izvedene u 384-komornim belim providnim pločama na 37°C upotrebom fluorogenih peptidnih supstrata u koncentraciji od 10 µM u puferu za analizu (NEP: 50 mM HEPES, pH 7.5, 100 mM NaCl, 0.01% polietilen glikol sorbitan monolaurat (Tween-20), 10 µM ZnSO4; ACE: 50 mM HEPES, pH 7.5, 100 mM NaCl, 0.01% Tween-20, 1 µM ZnSO4). Odgovarajući enzimi su korišćeni u koncentracijama koje su rezultirale u kvantitativnoj proteolizi 1 µM supstrata posle 20 minuta na 37°C.
[0414] Test jedinjenja su analizirana u opsegu koncentracija od 10 µM do 20 pM. Test jedinjenja su dodata u enzime i inkubirana 30 minuta na 37°C pre početka reakcije dodavanjem supstrata. Reakcije su završene posle 20 minuta inkubacije na 37°C dodavanjem glacijalne sirćetne kiseline do krajnje koncentracije od 3.6% (zapr./zapr.).
[0415] Ploče su očitavane na fluorometru sa talasnim dužinama ekscitacije i emisije podešenim do 320 nm i 405 nm, respektivno. Konstante inhibicije su dobijene pomoću nelinearne regresije rezultata upotrebom jednačine (GraphPad Software, Inc., San Diego, CA):
gde ν je stopa reakcije, ν0je neinhibirana stopa reakcije, I je koncentracija inhibitora i K’ je vidljiva konstanta inhibicije.
[0416] Jedinjenje formule I’ (Primer 1A) je testirano u ovoj analizi i nađeno je da ima pKivrenbost na humanom NEP od ≥9.0, i za sledeće prolekove je takođe nađeno da imaju aktivnost:
Jedinjenja prolekovi iz Primera 1B-F, 1H, 1J-K i 1N-P nisu testirani s obzirom na to da se aktivnost ne bi očekivala u ovoj in vitro analizi; međutim, na bazi aktivnosti aktivnog oblika, očekuje sa prolekovi imaju in vivo NEP aktivnost.
[0417] Jedinjenje formule II’ (Primer 2A) je testirano u ovoj analizi i nađeno je da ima pKivrednost na humanom NEP od ≥9.0. Jedinjenja prolekovi iz Primera 2B-I ili nisu inhibirala enzim u ovoj in vitro analizi, ili nisu testirana s obzirom na to da se aktivnost ne bi očekivala u ovoj analizi; međutim, na bazi aktivnosti aktivnog oblika, očekuje se da prolekovi imaju in vivo NEP aktivnost.
[0418] Jedinjenje formule III’ (Primer 3A) je testirano u ovoj analizi i nađeno je da ima pKivrednost na humanom NEP od ≥9.0. Jedinjenja prolekovi iz Primera 3B-E ili nisu inhibirala enzim u ovoj in vitro analizi, ili nisu testirana s obzirom na to da se aktivnost ne bi očekivala u ovoj analizi; međutim, na bazi aktivnosti aktivnog oblika, očekuje da lekovi imaju in vivo NEP aktivnost.
[0419] Sledeća jedinjenja prema pronalasku su testirana u ovoj analizi i nađeno je da imaju pKivrednosti na humanom NEP kao što sledi. Uopšteno, ili jedinjenja prolekovi nisu inhibirala enzim u ovoj in vitro analizi, ili prolekovi nisu testirani (n.d.) s obzirom na to da se aktivnost ne bi očekivala.
[0420] Jedinjenje formule VII’ (Primer 7A) je testirano u ovoj analizi i nađeno je da ima pKivrednost na humanom NEP od ≥9.0. Jedinjenja prolekovi iz Primera 7B-E ili nisu inhibirala enzim u ovoj in vitro analizi, ili nisu testirana s obziroim na to da se aktivnost ne bi očekivala u ovoj analizi; međutim, na bazi aktivnosti aktivnog oblika, očekuje se da prolekovi imaju in vivo NEP aktivnost.
[0421] Jedinjenje formule VIII’ (Primer 8A) je testirano u ovoj analizi i nađeno je da ima pKivrednost na humanom NEP od ≥9.0. Jedinjenja prolekovi Primera 8B-L ili nisu inhibirala enzim u ovoj in vitro analizi, ili nisu testirana s obzirom na to da se aktivnost ne bi očekivala u ovoj analizi; međutim, na bazi aktivnosti aktivnog oblika, očekuje se da prolekovi imaju in vivo NEP aktivnost. Očekuje se da jedinjenja prolekovi iz Primera 8I imaju in vivo NEP aktivnost.
[0422] Jedinjenje formule IX’ (Primer 9A) je testirano u ovoj analizi i nađeno je da ima pKivrednost na humanom NEP od ≥9.0. Jedinjenja prolekovi iz Primera 9B-C ili nisu inhibirala enzim u ovoj in vitro analizi, ili nisu testirana s obzirom da se aktivnost ne bi očekivala u ovoj analizi; međutim, na bazi aktivnosti aktivnog oblika, očekuje se da prolekovi imaju in vivo NEP aktivnost.
[0423] Jedinjenje formule X’ je testirano u ovoj analizi i nađeno je da ima pKivrednost na humanom NEP od ≥9.0. Jedinjenje prolek iz Primera 10A ili nije inhibiralo enzim u ovoj in vitro analizi ili nije testirano s obzirom na to da se aktivnost ne bi očekivala u ovoj analizi; međutim, na bazi aktivnosti aktivnog oblika, očekuje da ovaj prolek ima in vivo NEP aktivnost.
[0424] Jedinjenje prolek iz Primera 11A ili nije ihibiralo enzim u ovoj in vitro analizi, ili nije testirano s obzirom na to da se aktivnost ne bi očekivala u ovoj analizi; međutim, očekuje se da ovaj prolek ima in vivo NEP aktivnost.

Claims (17)

  1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje formule XII:
    gde: (i) R<a>je H; R<b>je Cl; X je
    i R<2>je H, R<4>je -OH, i R<7>je izabran od -CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHR<c>OC(O)-C1- 4alkil, -CHR<c>OC(O)O-C2-4alkil, -CHR<c>OC(O)O-cikloheksil, -C2-4alkilen-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHR<d>-NH2, -CH2OC(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, benzil, i
    ili R<2>je H, R<4>je izabran od -O-benzil, -OCHR<c>OC(O)-C1-4alkil, -OCH2OC(O)CHR<d>-NH2, i -OCH2OC(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, i R<7>je izabran od H i -CH2OC(O)CH3; ili R<2>je izabran od -C(O)-C1-6alkil, -C(O)CHR<d>-NH2, -C(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, i -P(O)(OR<e>)2, R<4>je -OH, i R<7>je H; ili (ii) R<a>je H; R<b>je Cl; X je
    i R<2>je H, R<3>je -OH i R<7>je izabran od -CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHR<c>OC(O)-C1- 4alkil, -CHR<c>OC(O)O-C2-4alkil, -CHR<c>OC(O)O-cikloheksil, -C2-4alkilen-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHR<d>-NH2, -CH2OC(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, benzil, i
    ili R<3>je izabran od -OC(O)CH2CH3, -OC(O)CH2CH(CH3)2, -OC(O)-fenil, -OCH2OC(O)CHR<d>-NH2, i -OCH2OC(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, i R<7>je H; ili R<2>je izabran od -C(O)-C1-6alkil, -C(O)CHR<d>-NH2, -C(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, i -P(O)(OR<e>)2, R<3>je -OH, i R<7>je H; ili (iii) R<a>je H; R<b>je Cl; X je
    i R<2>je H, R<3>je -OH i R<7>je izabran od -CH2CH3, -CH2CH(CH3)2, -CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3,-CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHR<c>OC(O)-C1-4alkil, -CHR<c>OC(O)O-C2-4alkil, -CHR<c>OC(O)O-cikloheksil, -C2-4alkilen-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHR<d>-NH2, -CH2OC(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, benzil i
    ili R<2>je H, R<3>je izabran od -OC(O)CH2CH3, -OC(O)CH2CH(CH3)2, -OC(O)-fenil, -OCH2OC(O)CHR<d>-NH2, i -OCH2OC(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, i R<7>je H; ili R<2>je izabran od -C(O)-C1-6alkil, -C(O)CHR<d>-NH2, -C(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil i -P(O)(OR<e>)2, R<3>je -OH, i R<7>je H; ili (iv) R<a>je F; R<b>je Cl; X je
    i R<2>je H i R<7>je izabran od H, -CH2CH3, -CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHR<c>OC(O)-C1- 4alkil, -CHR<c>OC(O)O-C2-4alkil, -CHR<c>OC(O)O-cikloheksil, -C2-4alkilen-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHR<d>-NH2, -CH2OC(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, benzil, i
    ili R<2>je izabran od -C(O)-C1-6alkil, -C(O)CHR<d>-NH2, -C(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, i -P(O)(OR<e>)2, i R<7>je H; ili (v) R<a>je H; R<b>je Cl; X je
    i R<2>je H i R<7>je izabran od H, -CH2CH3, -CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHR<c>OC(O)-C1- 4alkil, -CHR<c>OC(O)O-C2-4alkil, -CHR<c>OC(O)O-cikloheksil, -C2-4alkilen-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHR<d>-NH2, -CH2OC(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, benzil, i
    ili R<2>je izabran od -C(O)-C1-6alkil, -C(O)CHR<d>-NH2, -C(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil i -P(O)(OR<e>)2, i R<7>je H; ili (vi) R<a>je H; R<b>je Cl; X je
    i R<2>je H i R<7>je izabran od H, -CH2CH3, -CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH,-CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHR<c>OC(O)-C1- 4alkil, -CHR<c>OC(O)O-C2-4alkil, -CHR<c>OC(O)O-cikloheksil, -C2-4alkilen-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHR<d>-NH2, -CH2OC(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, benzil, i
    ili R<2>je izabran od -C(O)-C1-6alkil, -C(O)CHR<d>-NH2, -C(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil i -P(O)(OR<e>)2i R<7>je H; ili (vii) R<a>je H; R<b>je Cl; X je
    R je H ili -CH3; i R<2>je H i R<7>je izabran od -CH2CH3, -CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHR<c>OC(O)-C1- 4alkil, -CHR<c>OC(O)O-C2-4alkil, -CHR<c>OC(O)O-cikloheksil, -C2-4alkilen-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHR<d>-NH2, -CH2OC(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, benzil, i
    ili R<2>je izabran od -C(O)-C1-6alkil, -C(O)CHR<d>-NH2, -C(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil i -P(O)(OR<e>)2, i R<7>je H; ili (viii) R<a>je F; R<b>je Cl; X je
    i R<2>je H, R<4>je –OH i R<7>je izabran od -CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3,-CH2CF2CF3, -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH,-CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHR<c>OC(O)-C1- 4alkil, -CHR<c>OC(O)O-C2-4alkil,-CHR<c>OC(O)O-cikloheksil, -C2-4alkilen-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHR<d>-NH2,-CH2OC(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, benzil, i
    ili R<2>je H, R<4>je izabran od -O-benzil, -OCHR<c>OC(O)-C1-4alkil, -OCH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, -OCH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3i
    i R<7>je H; ili R<2>je izabran od -C(O)-C1-6alkil, -C(O)CHR<d>-NH2, -C(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, i -P(O)(OR<e>)2, R<4>je -OH, i R<7>je H; ili (ix) R<a>je H; R<b>je Cl; X je
    R<2>je H i R<7>je izabran od -CH2CH3, -CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHR<c>OC(O)-C1- 4alkil, -CHR<c>OC(O)O-C2-4alkil, -CHR<c>OC(O)O-cikloheksil, -C2-4alkilen-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHR<d>-NH2, -CH2OC(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, benzil, i
    ili R<2>je izabran od -C(O)-C1-6alkil, -C(O)CHR<d>-NH2, -C(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil i -P(O)(OR<e>)2, i R<7>je H; ili (x) R<a>je H; R<b>je H; X je
    i R<2>i R<4>su H, i R<7>je izabran od -CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -(CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -CHR<c>OC(O)-C1-4alkil, -CHR<c>OC(O)O-C2-4alkil, -CHR<c>OC(O)O-cikloheksil, -C2-4alkilen-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHR<d>-NH2, -CH2OC(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, i benzil; ili R<2>je H, R<4>je izabran od -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3i -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, i R<7>je H; ili R<2>je izabran od -C(O)-C1-6alkil, -C(O)CHR<d>-NH2, -C(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, i -P(O)(OR<e>)2, R<4>je H, i R<7>je H; ili R<2>je H, R<4>je -CH2OP(O)(OR<e>)2ili -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, i R<7>je -CH2CH3; ili R<2>je -C(O)CH[CH(CH3)2]NH2, R<4>je H, i R<7>je -CH2CH3; ili (xi) R<a>je H; R<b>je Cl; X je
    i R<2>i R<4>su H, i R<7>je izabran od H, -CH2CH3, -CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CH3, -CH2CF2CF3, -C(CH3)(CF3)2, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, (CH2)2-3OH, -CH2CH(NH2)COOCH3, -(CH2)2OCH3, -CHR<c>OC(O)-C1- 4alkil, -CHR<c>OC(O)O-C2-4alkil, -CHR<c>OC(O)O-cikloheksil, -C2-4alkilen-N(CH3)2, -CH2OC(O)CHR<d>-NH2, -CH2OC(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil i benzil; ili R<2>je H, R<4>je izabran od -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NHC(O)OCH3i -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, i R<7>je H; ili R<2>je izabran od -C(O)-C1-6alkil, -C(O)CHR<d>-NH2, -C(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil i -P(O)(OR<e>)2, R<4>je H, i R<7>je H; ili R<2>je H, R<4>je -CH2OP(O)(OR<e>)2ili -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, i R<7>je -CH2CH3; ili R<2>je -C(O)CH[CH(CH3)2]NH2, R<4>je H, i R<7>je -CH2CH3; gde svaki R<c>je nezavisno H ili -C1-3alkil; svaki R<d>je nezavisno H, -CH3, -CH(CH3)2, fenil, ili benzil; i svaki R<e>je nezavisno H, -C1-6alkil ili fenil; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  2. 2. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, formule IV:
    gde R<2>je H i R<7>je izabran od H i -CH2CH3.
  3. 3. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, formule V:
    gde R<2>je H i R<7>je izabran od H i -CH2CH3.
  4. 4. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, formule I:
    gde R<2>je H, R<4>je -OH i R<7>je izabran od -CH2CF3, -(CH2)2CF3, -CH2CF2CF3,-CH2OC(O)CH3, -CH2OC(O)(CH2)2CH3, -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2,-CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3, benzil i
    ili R<2>je H, R<4>je -OCH2OC(O)CH3i R<7>je izabran od H i -CH2OC(O)CH3; ili R<2>je H, R<4>je izabran od -OCH2OC(O)(CH2)2CH3, -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2i -OCH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3, i R<7>je H; ili R<2>je H, R<4>je -O-benzil i R<7>je H.
  5. 5. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, formule II:
    gde R<2>je H, R<3>je -OH i R<7>je izabran od -CH2CH3, -CH2CF2CF3, -CH(CH2CH3)CF3, -CH(CH3)CF2CF3, -CH2OC(O)(CH2)2CH3, -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, benzil i
  6. 6. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, formule III:
    gde R<2>je H, R<3>je -OH i R<7>je izabran od -CH2CH3, -CH2CH(CH3)2,-CH2OC(O)CHR<d>-NHC(O)O-C1-6alkil, benzil i
    gde R<d>je -CH(CH3)2; ili R<2>je H, R<3>je -OCH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2, i R<7>je H; ili R<2>je -C(O)CH[CH(CH3)2]NH2, R<3>je -OH, i R<7>je H.
  7. 7. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, formule VI:
    gde R<2>je H i R<7>je izabran od H, -CH2OC(O)CH3, -CH2OC(O)OCH2CH3,-CH2OC(O)OCH(CH3)2i -C(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3.
  8. 8. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, formule VII:
    gde R je -CH3, R<2>je H, i R<7>je izabran od -CH2OC(O)CH3, -CH2OC(O)OCH(CH3)2,-CH2OC(O)OCH2CH3, i -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3.
  9. 9. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, formule VIIIa ili VIIIb:
    gde R<2>je H, R<4>je -OH i R<7>je izabran od -CH2CF2CF3, -CH2OC(O)CH3,-CH2OC(O)(CH2)2CH3, -CH2OC(O)OCH2CH3, -CH2OC(O)OCH(CH3)2, -CH(CH3)OC(O)O-cikloheksil, -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3, i
    ili R<2>je H, R<4>je izabran od -OCH2OC(O)(CH2)2CH3, -OCH2OC(O)CH[CH(CH3)2]NH2,-OCH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3, i
    i R<7>je H.
  10. 10. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, formule IX:
    gde R<2>je H i R<7>je izabran od -CH2OC(O)OCH2CH3i -CH2OC(O)CH[CH(CH3)2]-NHC(O)OCH3.
  11. 11. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, formule Xa ili Xb: gde R<2>j
    C(O)CH[CH(CH3)2]NH2, R<4>je H, i R<7>je -CH2CH3.
  12. 12. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, formule XIa ili XIb:
    gde R<2>, R<4>, i R<7>su H; ili R<2>i R<4>su H, i R<7>je -CH2OC(O)OCH2CH3.
  13. 13. Postupak za pripremu jedinjenja prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 12, koji sadrži korak: (a) reakcije jedinjenja formule
    sa jedinjenjem formule HO-R<7>u reakciji transesterifikacije; ili (b) reakcije jedinjenja formule
    sa jedinjenjem formule L-R<7>u reakciji nukleofilne supstitucije, gde L je odlazeća grupa; ili (c) reakcije jedinjenja formule
    sa jedinjenjem formule L-R<2>u reakciji nukleofilne supstitucije, gde L je odlazeća grupa; ili (d) reakcije jedinjenja formule
    sa jedinjenjem formule HOOC-X u reakciji kuplovanja, gde P je H ili amino-zaštitna grupa; da bi se proizvelo jedinjenje formule XII.
  14. 14. Farmaceutska kompozicija koja sadrži farmaceutski prihvatljiv nosač i jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 12, izborno zajedno sa sa dodatnim trerapeutskim sredstvom.
  15. 15. Farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 14, naznačena time što dodatno terapeutsko sredstvo je antagonist AT1receptora.
  16. 16. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 12, za upotrebu u terapiji.
  17. 17. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 16, za upotrebu u lečenju hipertenzije, srčane insuficijencije ili bolesti bubrega. Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Beograd, Kneginje Ljubice 5
RS20170515A 2012-06-08 2013-06-06 Inhibitori neprilizina RS55967B1 (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261657229P 2012-06-08 2012-06-08
US201361773969P 2013-03-07 2013-03-07
PCT/US2013/044546 WO2013184934A1 (en) 2012-06-08 2013-06-06 Neprilysin inhibitors

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS55967B1 true RS55967B1 (sr) 2017-09-29

Family

ID=48626696

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20170515A RS55967B1 (sr) 2012-06-08 2013-06-06 Inhibitori neprilizina

Country Status (29)

Country Link
US (6) US9108934B2 (sr)
EP (2) EP3199517B1 (sr)
JP (2) JP6162230B2 (sr)
KR (1) KR102102197B1 (sr)
CN (1) CN104350042B (sr)
AR (1) AR091381A1 (sr)
AU (1) AU2013271537B2 (sr)
BR (1) BR112014030743B1 (sr)
CA (1) CA2876024C (sr)
DK (1) DK2864292T3 (sr)
ES (2) ES2632600T3 (sr)
HR (1) HRP20171037T1 (sr)
HU (1) HUE032802T2 (sr)
IL (1) IL235737B (sr)
LT (1) LT2864292T (sr)
ME (1) ME02698B (sr)
MX (1) MX356260B (sr)
NZ (2) NZ723772A (sr)
PH (1) PH12014502733B1 (sr)
PL (1) PL2864292T3 (sr)
PT (1) PT2864292T (sr)
RS (1) RS55967B1 (sr)
RU (1) RU2663618C2 (sr)
SG (2) SG11201408094YA (sr)
SI (1) SI2864292T1 (sr)
SM (1) SMT201700306T1 (sr)
TW (2) TWI644901B (sr)
WO (1) WO2013184934A1 (sr)
ZA (1) ZA201408634B (sr)

Families Citing this family (27)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2819153A1 (en) 2010-12-15 2012-06-21 Theravance, Inc. Neprilysin inhibitors
HUE028051T2 (hu) 2010-12-15 2016-11-28 Theravance Biopharma R&D Ip Llc Neprilizin inhibitorok
JP5959066B2 (ja) 2011-02-17 2016-08-02 セラヴァンス バイオファーマ アール＆ディー アイピー， エルエルシー ネプリライシン阻害剤としての置換アミノ酪酸誘導体
JP5959065B2 (ja) 2011-02-17 2016-08-02 セラヴァンス バイオファーマ アール＆ディー アイピー， エルエルシー ネプリライシン阻害剤としての置換アミノ酪酸誘導体
JP5959074B2 (ja) 2011-05-31 2016-08-02 セラヴァンス バイオファーマ アール＆ディー アイピー， エルエルシー ネプリライシン阻害剤
TWI560172B (en) 2011-11-02 2016-12-01 Theravance Biopharma R&D Ip Llc Neprilysin inhibitors
SMT201700306T1 (it) 2012-06-08 2017-07-18 Theravance Biopharma R&D Ip Llc Inibitori di neprilisina
WO2013184898A1 (en) 2012-06-08 2013-12-12 Theravance, Inc. Neprilysin inhibitors
MX366149B (es) 2012-08-08 2019-06-28 Theravance Biopharma R&D Ip Llc Inhibidores de neprilisina.
DK2964616T3 (en) 2013-03-05 2017-08-28 Theravance Biopharma R&D Ip Llc Neprilysin inhibitors
CA2934936A1 (en) 2014-01-30 2015-08-06 Theravance Biopharma R&D Ip, Llc Neprilysin inhibitors
CA2934898A1 (en) 2014-01-30 2015-08-06 Theravance Biopharma R&D Ip, Llc 5-biphenyl-4-heteroarylcarbonylamino-pentanoic acid derivatives as neprilysin inhibitors
CN105338467B (zh) * 2014-08-07 2019-04-02 电信科学技术研究院 一种设备到设备通信中数据接收方法、发送方法及设备
CN104592163B (zh) * 2015-01-08 2016-08-24 爱斯特（成都）生物制药有限公司 一种手性2-苯基吡咯烷的合成方法
JP6766055B2 (ja) 2015-02-11 2020-10-07 セラヴァンス バイオファーマ アール＆ディー アイピー， エルエルシー ネプリライシン阻害剤としての（２ｓ，４ｒ）−５−（５’−クロロ−２’−フルオロビフェニル−４−イル）−４−（エトキシオキサリルアミノ）−２−ヒドロキシメチル−２−メチルペンタン酸
LT3259255T (lt) 2015-02-19 2021-04-26 Theravance Biopharma R&D Ip, Llc (2r,4r)-5-(5`-chlor-2`-fluorbifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(5-metiloksazol-2-karbonil)amino]pentano rūgštis
KR102671166B1 (ko) * 2015-12-14 2024-05-31 막스-플랑크-게젤샤프트 츄어 푀르더룽 데어 비쎈샤프텐 에.파우. 3,5-디페닐-디아졸 화합물의 수용성 유도체
JP7306828B2 (ja) 2016-03-08 2023-07-11 セラヴァンス バイオファーマ アール＆ディー アイピー， エルエルシー 結晶性（２ｓ，４ｒ）－５－（５’－クロロ－２’－フルオロ－［１，１’－ビフェニル］－４－イル）－２－（エトキシメチル）－４－（３－ヒドロキシイソオキサゾール－５－カルボキサミド）－２－メチルペンタン酸およびその使用
CN107071636B (zh) * 2016-12-29 2019-12-31 北京小鸟听听科技有限公司 对带麦克风的设备的去混响控制方法和装置
JP6580097B2 (ja) 2017-09-05 2019-09-25 株式会社東芝 面発光量子カスケードレーザ
UY38072A (es) 2018-02-07 2019-10-01 Novartis Ag Compuestos derivados de éster butanoico sustituido con bisfenilo como inhibidores de nep, composiciones y combinaciones de los mismos
PY1998404A (es) 2018-11-27 2021-06-17 Novartis Ag Compuestos tetrámeros cíclicos como inhibidores de proproteína convertasa subtilisina/kexina tipo 9 (pcsk9) para el tratamiento de trastornos metabólicos
JP7657151B2 (ja) 2018-11-27 2025-04-04 ノバルティス アーゲー 代謝性障害の処置のためのプロタンパク質コンバターゼスブチリシン／ケキシン９型（ｐｃｓｋ９）阻害剤としての環状ペプチド
JP2022507958A (ja) 2018-11-27 2022-01-18 ノバルティス アーゲー 代謝障害の治療用のプロタンパク質転換酵素サブチリシン／ケキシン９型（ｐｃｓｋ９）阻害薬としての環状四量体化合物
US11419917B2 (en) * 2020-04-07 2022-08-23 Drora Shevy Treatment for SARS-CoV-2 and other coronaviruses
WO2023084449A1 (en) 2021-11-12 2023-05-19 Novartis Ag Diaminocyclopentylpyridine derivatives for the treatment of a disease or disorder
KR102485499B1 (ko) * 2022-07-15 2023-01-09 오가노이드사이언스 주식회사 신장 질환의 치료 또는 예방용 조성물

Family Cites Families (46)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4189604A (en) 1975-07-22 1980-02-19 Zaidan Hojin Biseibutsu Kagaku Kenkyu Kai Bestatin
US4206232A (en) 1976-05-10 1980-06-03 E. R. Squibb & Sons, Inc. Relieving hypertension with carboxyalkylacylamino acids
IL58849A (en) 1978-12-11 1983-03-31 Merck & Co Inc Carboxyalkyl dipeptides and derivatives thereof,their preparation and pharmaceutical compositions containing them
FR2480747A1 (fr) 1980-04-17 1981-10-23 Roques Bernard Derives d'acides amines et leur application therapeutique
US4906615A (en) 1980-12-18 1990-03-06 Schering Corporation Substituted dipeptides as inhibitors of enkephalinases
US4722810A (en) 1984-08-16 1988-02-02 E. R. Squibb & Sons, Inc. Enkephalinase inhibitors
US4939261A (en) 1984-06-08 1990-07-03 Ciba-Geigy Corporation N-substituted butyramide derivatives useful for treatment of conditions responsive to inhibition of enkephalinase
EP0225292A3 (en) 1985-12-06 1988-11-30 Ciba-Geigy Ag Certain n-substituted butyramide derivatives
US4929641B1 (en) 1988-05-11 1994-08-30 Schering Corp Mercapto-acylamino acid antihypertensives
KR880007441A (ko) 1986-12-11 1988-08-27 알렌 제이.스피겔 스피로-치환된 글루타르아미드 이뇨제
FR2623498B1 (fr) 1987-11-24 1990-04-06 Bioprojet Soc Civ Nouveaux composes enantiomeres derives d'amino-acides, leur procede de preparation et leurs applications therapeutiques
GB8820844D0 (en) 1988-09-05 1988-10-05 Pfizer Ltd Therapeutic agents
US5599951A (en) 1989-09-15 1997-02-04 Societe Civile Bioprojet Amino acid derivatives, the process for their preparation and their applications to therapy
US5155100A (en) 1991-05-01 1992-10-13 Ciba-Geigy Corporation Phosphono/biaryl substituted dipeptide derivatives
US5294632A (en) 1991-05-01 1994-03-15 Ciba-Geigy Corporation Phosphono/biaryl substituted dipetide derivatives
US5217996A (en) 1992-01-22 1993-06-08 Ciba-Geigy Corporation Biaryl substituted 4-amino-butyric acid amides
US5508272A (en) 1993-06-15 1996-04-16 Bristol-Myers Squibb Company Compounds containing a fused bicycle ring and processes therefor
DE19510566A1 (de) 1995-03-23 1996-09-26 Kali Chemie Pharma Gmbh Benzazepin-, Benzoxazepin- und Benzothiazepin-N-essigsäurederivate sowie Verfahren zu ihrer Herstellung und diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel
US5977075A (en) 1995-04-21 1999-11-02 Novartis Ag N-aroylamino acid amides as endothelin inhibitors
US6660756B2 (en) 2001-03-28 2003-12-09 Pfizer Inc. N-phenpropylcyclopentyl-substituted glutaramide derivatives as inhibitors of neutral endopeptidase
GB0119305D0 (en) 2001-04-12 2001-10-03 Aventis Pharma Gmbh Mercaptoacetylamide derivatives,a process for their preparation and their use
AU2003290120A1 (en) * 2002-11-19 2004-06-15 Galderma Research & Development, S.N.C. Biaromatic compounds which activate PPAR-Gama type receptors, and use thereof in cosmetic or pharmaceutical compositions
WO2006027680A1 (en) 2004-09-10 2006-03-16 Pfizer Limited 3-(1-carbamoylcyclohexyl) propionic acid derivatives as inhibitors of neutral endopeptidase enzyme
AR057882A1 (es) 2005-11-09 2007-12-26 Novartis Ag Compuestos de accion doble de bloqueadores del receptor de angiotensina e inhibidores de endopeptidasa neutra
WO2007106708A2 (en) 2006-03-10 2007-09-20 Novartis Ag Combinations of the angiotensin ii antagonist valsartan and the nep inhibitor daglutril
PH12012502091A1 (en) * 2007-01-12 2019-06-14 Novartis Ag Process for preparing 5-biphenyl-4-amino-2-methyl pentanoic acid
TWI448284B (zh) 2007-04-24 2014-08-11 Theravance Inc 雙效抗高血壓劑
AR070176A1 (es) 2008-01-17 2010-03-17 Novartis Ag Procesos de sintesis de inhibidores de nep, compuestos intermediarios y uso de los mismos en la sintesis
US20120150643A1 (en) * 2010-12-14 2012-06-14 Moneyhoney Llc System and method for processing remainder amounts of money from gift cards
SG176009A1 (en) * 2009-05-28 2011-12-29 Novartis Ag Substituted aminopropionic derivatives as neprilysin inhibitors
JP5466759B2 (ja) * 2009-05-28 2014-04-09 ノバルティス アーゲー ネプリライシン阻害剤としての置換アミノ酪酸誘導体
JO2967B1 (en) 2009-11-20 2016-03-15 نوفارتس ايه جي Acetic acid derivatives of carbamoyl methyl amino are substituted as new NEP inhibitors
AU2011207020B2 (en) 2010-01-22 2014-04-17 Novartis Ag Intermediates of neutral endopeptidase inhibitors and preparation method thereof
US8673974B2 (en) 2010-11-16 2014-03-18 Novartis Ag Substituted amino bisphenyl pentanoic acid derivatives as NEP inhibitors
US8993631B2 (en) * 2010-11-16 2015-03-31 Novartis Ag Method of treating contrast-induced nephropathy
CA2819153A1 (en) 2010-12-15 2012-06-21 Theravance, Inc. Neprilysin inhibitors
HUE028051T2 (hu) * 2010-12-15 2016-11-28 Theravance Biopharma R&D Ip Llc Neprilizin inhibitorok
JP5959066B2 (ja) 2011-02-17 2016-08-02 セラヴァンス バイオファーマ アール＆ディー アイピー， エルエルシー ネプリライシン阻害剤としての置換アミノ酪酸誘導体
JP5959065B2 (ja) * 2011-02-17 2016-08-02 セラヴァンス バイオファーマ アール＆ディー アイピー， エルエルシー ネプリライシン阻害剤としての置換アミノ酪酸誘導体
JP5959074B2 (ja) 2011-05-31 2016-08-02 セラヴァンス バイオファーマ アール＆ディー アイピー， エルエルシー ネプリライシン阻害剤
CN103748070B (zh) 2011-05-31 2015-06-24 施万生物制药研发Ip有限责任公司 脑啡肽酶抑制剂
CN103582630B (zh) 2011-05-31 2016-08-17 施万生物制药研发Ip有限责任公司 脑啡肽酶抑制剂
TWI560172B (en) 2011-11-02 2016-12-01 Theravance Biopharma R&D Ip Llc Neprilysin inhibitors
CA2871292A1 (en) 2012-05-31 2013-12-05 Theravance Biopharma R&D Ip, Llc Nitric oxide donor neprilysin inhibitors
SMT201700306T1 (it) 2012-06-08 2017-07-18 Theravance Biopharma R&D Ip Llc Inibitori di neprilisina
LT3259255T (lt) * 2015-02-19 2021-04-26 Theravance Biopharma R&D Ip, Llc (2r,4r)-5-(5`-chlor-2`-fluorbifenil-4-il)-2-hidroksi-4-[(5-metiloksazol-2-karbonil)amino]pentano rūgštis

Also Published As

Publication number Publication date
IL235737B (en) 2019-12-31
CN104350042A (zh) 2015-02-11
US20180327350A1 (en) 2018-11-15
SMT201700306T1 (it) 2017-07-18
JP2017125063A (ja) 2017-07-20
KR20150023686A (ko) 2015-03-05
US10315984B2 (en) 2019-06-11
US20170355664A1 (en) 2017-12-14
BR112014030743B1 (pt) 2022-09-06
RU2663618C2 (ru) 2018-08-07
ES2632600T3 (es) 2017-09-14
IL235737A0 (en) 2015-02-01
PH12014502733A1 (en) 2015-02-02
SG10201703185VA (en) 2017-05-30
US9884807B2 (en) 2018-02-06
CN104350042B (zh) 2017-05-24
TW201726629A (zh) 2017-08-01
CA2876024C (en) 2020-04-07
JP2015525215A (ja) 2015-09-03
LT2864292T (lt) 2017-07-10
US10829438B2 (en) 2020-11-10
CA2876024A1 (en) 2013-12-12
EP2864292B1 (en) 2017-04-12
AU2013271537A1 (en) 2014-12-04
NZ702749A (en) 2017-01-27
HUE032802T2 (hu) 2017-10-30
US20160002148A1 (en) 2016-01-07
AU2013271537B2 (en) 2017-05-11
AR091381A1 (es) 2015-01-28
MX2014014918A (es) 2015-05-11
JP6162230B2 (ja) 2017-07-12
PT2864292T (pt) 2017-07-10
TWI644901B (zh) 2018-12-21
EP3199517A1 (en) 2017-08-02
DK2864292T3 (en) 2017-07-31
US20200017436A1 (en) 2020-01-16
TWI583671B (zh) 2017-05-21
US20210155576A1 (en) 2021-05-27
US11174219B2 (en) 2021-11-16
ME02698B (me) 2017-10-20
BR112014030743A2 (pt) 2017-06-27
WO2013184934A1 (en) 2013-12-12
PH12014502733B1 (en) 2015-02-02
MX356260B (es) 2018-05-21
PL2864292T3 (pl) 2017-10-31
US9108934B2 (en) 2015-08-18
SG11201408094YA (en) 2015-01-29
EP3199517B1 (en) 2018-09-12
TW201402552A (zh) 2014-01-16
US20130330366A1 (en) 2013-12-12
ZA201408634B (en) 2015-12-23
KR102102197B1 (ko) 2020-04-20
NZ723772A (en) 2017-06-30
US9670140B2 (en) 2017-06-06
RU2014153578A (ru) 2016-07-27
SI2864292T1 (sl) 2017-07-31
EP2864292A1 (en) 2015-04-29
HRP20171037T1 (hr) 2017-10-06
ES2700152T3 (es) 2019-02-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11174219B2 (en) Neprilysin inhibitors
KR101892500B1 (ko) 네프릴리신 억제제
EP2858650B1 (en) Neprilysin inhibitors
RS55797B1 (sr) Inhibitori neprilizina
EP3099668B1 (en) 5-biphenyl-4-heteroarylcarbonylamino-pentanoic acid derivatives as neprilysin inhibitors
HK1241357A1 (en) Neprilysin inhibitors