RS55974B1 - Upotreba estetrola kao kontraceptivnog sredstva u hitnim slučajevima - Google Patents

Description

Tehnička oblast pronalaska

Sadašnji pronalazak se odnosi na novu upotrebu tetrahidroksilovanog estrogena predstavljenog formulom (I); poželjno poznatog medicinskog jedinjenja estetrola (1,3,5(10)-estratrien-3,15 α,16 α,17 β-tetrol), naime u postupku hitne kontracepcije.

Stanje tehnike

Uprkos dostupnosti krajnje efektivnih postupaka kontracepcije, veliki broj trudnoća je neplaniran, n.pr. kao rezultat nedostatka pristupu kontraceptivnim sredstvima ili neuspeha kontracepcije (kao što je spadanje kondoma).

Hitna kontracepcija (EC), korišćenjem leka ili uređaja, je važno sredstvo sprečavanja neželjene trudnoće nakon seksualnog odnosa. Opisano je nekoliko postupaka hitne kontracepcije. Iako je uređaj bakar intrauterin najefektivniji EC postupak koji može biti upotrebljen do 5 dana nakon procenjenog vremena ovulacije, njegova široka primena je ograničena zbog logističkih i medicinskih razloga. U kasnim 1970-tim Yuzpe je uveo režim koji je uključivao kombinovanu upotrebu estrogena (0,1 mg etinilestradiol) i progestogena (0,5 mg levonorgestrel) u roku od 72 sata od seksualnog odnosa sa ponavljanjem nakon 12 sati. Yuzpe režim je povezan sa velikom incidencom mučnina i povraćanja zbog visokog sadržaja estrogena. Od 1990-tih prepoznat je potencijal levonorgestrela (LNG), sintetičkog progestogena. Za tretman sa 0,75 mg LNG, ponovljen nakon 12 sati ili kao jedna doza od 1,5 mg, u roku od 72 sata nakon seksualnog odnosa, je pokazano da je povezan sa manjim brojem sporednih efekata i višom efikasnošću od Yuzpe režima. Ipak, ukoliko se da kada je luteinizujući hormon već počeo da raste (LH talas), LNG-u manjka efikasnost. Progesteron receptor modulator mifepriston (10 mg) nudi drugu opciju za EC sa vrlo malo sporednih efekata i većom efikasnošću od Yuzpe režima. Takođe interval između koitusa i tretmana može biti produžen do 120 sati sa mifepristonom. Još jedan režim je tretman sa progesteron receptor modulatorom ulipristal acetatom koji je efektivniji od LNG i koji može biti upotrebljen do 120 sati nakon seksualnog odnosa.

Ostaje potreba u nauci za alternativnim postupcima hitne kontracepcije sa smanjenim sporednim efektima, koji su efektivni u prevenciji neželjene trudnoće nakon seksualnog odnosa, i koji mogu biti dati u jednoj efektivnoj dozi, do 120 sati nakon seksualnog odnosa.

Sadašnji pronalazak obezbeđuje novo kontraceptivno sredstvo u hitnim slučajevima koje prevazilazi bar delimično gore postavljene probleme.

Suština pronalaska

Sadašnji pronalazak obezbeđuje novo kontraceptivno sredstvo u hitnim slučajevima, koje sadrži estetrol, prirodni estrogen, proizveden humanom fetalnom jetrom samo tokom trudnoće. Strukturalno, estetrol se karakteriše prisustvom četiri hidroksilne grupe. U prošlosti, estetrol je smatran slabim estrogenom zbog njegovog relativno niskog afiniteta za estrogen receptore. Ipak, skorašnja proučavanja na pacovima pokazuju visoku oralnu absorbciju i biodostupnost, što je rezultiralo u obnavljanju interesa za estetrol. Skorašnje studije podržavaju potencijalnu upotrebu u primeni kao što terapija zamene hormona, kontracepcija, prevencija osteoporoze i tretman kancera dojke (videti n.pr., Coelingh Bennink et al. u Contraception, 77, 186-190, 2008; Visser and Coelingg Benning u J. Ster. Biochem. & Mol. Biol., 114, 85-89, 2009 i US 2004/0192620), ali nikada njegovu upotrebu u hitnoj kontracepciji.

Tako se u jednom aspektu sadašnjeg pronalaska obezbeđuje postupak hitne kontracepcije kod ženke sisara koji se sastoji od davanja kontraceptivnog sredstva u hitnim slučajevima koje sadrži tetrahidrohilovani estrogen predstavljen opštom formulom (I):

gde su R1, R2, R3, R4 nezavisno atom vodonika, hidroksilna grupa, alkoksi grupa sa 1-5 atoma ugljenika, ili keto grupa, poželjno gde su R1, R2, R3, R4 nezavisno atom vodonika, hidroksilna grupa ili akloksi grupa sa 1-5 atoma ugljenika; gde su svaki od R5, R6, R7 hidroksilna grupa; i gde su ne više od 3 od R1, R2, R3, R4 atomi vodonika, u efektivnoj količini da inhibira trudnoću kod ženke sisara, pri čemu se navedeno davanje obavlja kroz ne-vaginalno davanje.

U poželjnoj realizaciji, tetrahidroksilovani estrogen koji se sadrži u kontraceptivnom sredstvu u hitnim slučajevima kako je to ovde otkriveno je estetrol (1,3,5(10)-estratrien-3,15 α,16 α,17 β-tetrol). U poželjnoj realizaciji, kontraceptivno sredstvo u hitnim slučajevima kako je ovde otkriveno sadrži tetrahidroksilovani estrogen u dozi između 0,5 i 7 mg/kg.

U sledećoj realizaciji kontraceptivno sredstvo u hitnim slučajevima kako je ovde otkriveno dalje sadrži dodatni aktivni sastojak pogodan za sprečavanje trudnoće.

Sledeći aspekt sadašnjeg otkrića obezbeđuje upotrebu kontraceptivnog sredstva u hitnim slučajevima kao što je ovde opisano za sprečavanje ovulacije.

Još jedan aspekt sadašnjeg otkrića obezbeđuje upotrebu kontraceptivnog sredstva u hitnim slučajevima kao što je ovde opisano za sprečavanje trudnoće.

Još jedan aspekt sadašnjeg otkrića obuhvata postupak prevencije ovulacije i/ili trudnoće kod ženke sisara koji se sastoji od davanja kontraceptivnog sredstva u hitnim slučajevima kako je to ovde otkriveno u efektivnoj količini da inhibira ovulaciju i/ili trudnoću. Prema ovom pronalasku, davanje kontraceptivnog sredstva u hitnim slučajevima kako je ovde otkriveno se čini ne-vaginalno. Najpoželjnije, navedeno davanje je putem oralnog, parenteralnog, rektalnog, transkutanog ili mesnog davanja.

U daljoj poželjnoj realizaciji postupka koji je ovde otkriven, davanje kontraceptivnog sredstva u hitnim slučajevima kako je ovde otkriveno se obavlja u jednoj dozi.

U sledećoj poželjnoj realizaciji, davanje kontraceptivnog sredstva u hitnim slučajevima kako je ovde otkriveno se obavlja sa dve doze, n.pr. u intervalu od 6, 12, 18 ili 24 časa.

U daljoj poželjnoj realizaciji, davanje kontraceptivnog sredstva u hitnim slučajevima kako je ovde opisano se obavlja u roku od 120 časova nakon seksualnog odnosa, poželjno u roku od 96, 72, 48, 24, 12 časova ili manje. Još jedan aspekt sadašnjeg pronalaska obezbeđuje postupak hitne kontracepcije kod ženki sisara, postupak koji se sastoji od oralnog, parenteralnog, rektalnog, transkutanog ili mesnog davanja tetrahidroksilovanog estrogena predstavljenog opštom formulom (I):

gde su R1, R2, R3, R4 nezavisno atom vodonika, hidroksilna grupa, alkoksi grupa sa 1-5 atoma ugljenika, ili keto grupa, poželjno gde su R1, R2, R3, R4 nezavisno atom vodonika, hidroksilna grupa ili alkoksi grupa sa 1-5 atoma ugljenika; gde je svaki od R5, R6, R7 hidroksilna grupa; i gde su ne više od 3 od R1, R2, R3, R4 atomi vodonika, ženki koja može da rađa decu u efektivnoj količini da se inhibira trudnoća i pri čemu ovaj metod obuhvata davanje jedne doze navedenog estrogen navedenom subjektu u roku od 120 časova nakon seksualnog odnosa.

Poželjno, navedena farmaceutska kompozicija sadrži estetrol (1,3,5(10)-etratrien-3,15 α,16 α,17 β-tetrol).

U sledećoj realizaciji, navedena farmaceutska kompozicija dalje sadrži dodatni aktivni sastojak.

Još jedan aspekt sadašnjeg otkrića obuhvata pribor koji se sastoji od kontraceptivnog sredstva u hitnim slučajevima kako je ovde otkriven ili farmaceutske kompozicije kako je ovde otkrivena, i instrukcija za upotrebu.

Kratak opis slika

Sadašnji pronalazak je ilustrovan sledećim slikama koje služe samo u ilustrativne svrhe:

Slika 1 daje srednju vrednost nivoa estetrola u plazmi ( ± standardna greška) kod zdravih žena u post-menopauzi kojima je oralno data jedna doza od 1, 10 ili 100 mg estetrola.

Slika 2 daje procenat promene srednje vrednosti nivoa luteinizirajućeg hormona (LH) kod žena u post-menopauzi koje su primile jednu oralnu dozu od 100 mg estetrola. Slika 3 daje procenat promene srednje vrednosti nivoa stimulišućeg hormona folikule (FSH) kod žena u post-menopauzi koje su primile jednu dozu od 100 mg estetrola.

Detaljan opis pronalaska

Tema koja nije obuhvaćena obimom patentnih zahteva ne čini deo sadašnjeg pronalaska za koji se traži zaštita. Kako se to ovde koristi, singularni oblici članova „jedno“, „jedan“ i „taj“ uključuju kako singularna tako i označavanja u pluralu osim ukoliko kontekst jasno ne diktira drugačije.

Pojmovi „obuhvata“, „sastoji“ i „sastoji se od“ kako se to ovde koristi su sinonimi sa „uključujući“, „uključuje“ ili „sadrži se od“, „sadrži“, i inkluzivni su ili otvoreni i ne isključuju dodatne, nenavedene članove, elemente ili korake postupka. Gde se na realizacije upućuje kao one koje „sadrže“ posebna svojstva, elemente ili korake, tu se ima namera da se specifično uključe realizacije koje sadrže navedena svojstva, elemente ili korake.

Navođenje numeričkog raspona krajnjim tačkama uključuje sve brojeve i razlomke koji se nalaze u okviru svakog posebnog raspona, kao i navedene krajnje tačke.

Pojam „oko“ kako se ovde koristi kada se upućuje na merljivu vrednost kao što je parametar, količina, vremensko trajanje i slično, znači da obuhvata varijacije od ±10% ili manje, poželjno ±5% ili manje, poželjnije ±1% ili manje, i još poželjnije ±0,1% ili manje od navedene vrednosti, toliko da su takve varijacije odgovarajuće da se upotrebe kako bi se izveo otkriveni pronalazak. Ima se razumeti da je vrednost na koju modifikator „oko“ upućuje sama takođe specifično, i poželjno, otkrivena.

Osim ukoliko nije drugačije definisano, svi pojmovi koji se koriste u otkrivanju pronalaska, uključujući tehničke i naučne pojmove, imaju značenje koje se uobičajeno podrazumeva od stručnjaka iz oblasti nauke kojoj pronalazak pripada. Putem daljeg uputstva, definicije pojmova su uključene da se bolje razume ono čemu uči sadašnji pronalazak.

Upućivanje kroz ovaj opis na „jednu realizaciju“ ili „realizaciju“ znači da je određeno svojstvo, struktura ili karakteristika opisano u vezi sa realizacijom uključeno u bar jednu realizaciju sadašnjeg pronalaska. Tako, pojavljivanje fraza „u jednoj realizaciji“ ili „u realizaciji“ na različitim mestima kroz ovaj opis ne mora da obavezno sve upućuju na istu realizaciju, ali može. Štaviše, određena svojstva, strukture ili karakteristike mogu biti kombinovane na bilo koji pogodan način, kako bi to bilo očigledno stručnjaku iz ove oblasti iz ovog otkrića, u jednoj ili više realizacija. Štaviše, dok neke realizacije koje su ovde opisane uključuju neka ali ne i druga svojstva uključena u druge realizacije, kombinacije ili svojstva različitih realizacija postoji namera da su u okviru obima ovog pronalaska, i formiraju različite realizacije, kako bi to razumeli stručnjaci iz ove oblasti nauke. Na primer, u priloženim zahtevima, bilo koja od realizacija za koju je zatražena zaštita može biti upotrebljena u bilo kojoj kombinaciji.

Sadašnji pronalazači su pronašli da hitna kontracepcija može biti obezbeđena davanjem jedne doze tetrahidroksilovanog estrogena, poželjno estetrola. Pronašli su da estetrol može da inhibira ovulaciju kod pacova i spreči trudnoću kod zečeva. Šta više, pokazali su da estetrol ima inhibitorno dejstvo na gonadotropine (luteinizirajući hormon i stimulišući hormon folikule) kod žena u ranoj menopauzi kojima je oralno data jedna doza estetrola. Dodatno tome, za estetrol je pokazano da ima visoku oralnu bioabsorbciju i značajno dugačak poluživot eliminacije.

U skladu sa tim, jedan aspekt sadašnjeg pronalaska se odnosi na upotrebu tetrahidroksilovanog estrogena, poželjno estetrola, kao hitnu kontracepciju ili postupak hitne kontracepcije.

„Hitna kontracepcija“ je ovde definisana kao tretman usmeren na prevenciju trudnoće nakon seksualnog odnosa. Za razliku od normalnog kontraceptivnog sredstva, koji se daje dnevno u niskoj dozi tokom ovulacionog ciklusa, kontraceptivno sredstvo u hitnim situacijama se generalno daje u jednoj (ili dve) visokoj dozi. „Trudnoća“ upućuje u ovom kontekstu na stanje ženke nakon što se oplođena jajna ćelija sama implantira u postavu materice.

„Estetrol“, „1,3,5(10)-estratrien-3,15α, 16α, 17β-tetrol“ i „E4“ su sinonimi i upotrebljavaju se ovde naizmenično da upute na prirodni estrogen, proizveden od strane fetalne jetre samo tokom trudnoće. Strukturalno, karakteriše se prisustvo četiri hidroksilne grupe, pa odatle akronim E4. Estetrol je predložen za terapiju zamene izmene hormona, kontracepciju, prevenciju osteoporoze i tretman kancera dojke, ali nikada za upotrebu kao kontraceptivno sredstvo u hitnim slučajevima. Estetrol je takozvani „tetrahidroksilizovani estrogen“ i takođe obuhvata derivate, kao što su oni predstavljeni generalnom formulom (I):

pri čemu su R1, R2, R3, R4 nazavisno atom vodonika, hidroksilna grupa, alkoksi grupa sa 1-5 atoma ugljenika, ili keto grupa;

pri čemu su svaki od R5, R6, R7 hidroksilna grupa; i

pri čemu su ne više od 3 od R1, R2, R3, R4 atomi vodonika.

U poželjnoj realizaciji, navedeni tetrahidroksilizovani estrogen je estetrol koji ma sledeću formulu (II):

Zbog značajno dugog poluživota eliminacije estetrola, kontraceptivno sredstvo u hitnim slučajevima sadašnjeg pronalaska može biti dato u jednoj dozi. Ipak, takođe je ovde obuhvaćeno davanje višestrukih doza, n.pr. dve doze, uzete na primer sa razlikom od 12 sati jedna od druge.

Kada se koristi kod ljudi, dobri rezultati mogu biti dobijeni sa jednom oralnom dozom između 30 mg i 400 mg, kao što je između 40 mg i 250 mg, između 40 mg i 200 mg, između 40 mg i 150 mg, između 40 mg i 100 mg ili između 50 mg i 100 mg tetrahidroksilovanog estrogena, poželjno estetrola.

Alternativno, jedna doza tetrahidroksilovanog estrogena, poželjno estetrola, može biti utvrđena prema telesnoj težini subjekta kome je neophodno dati ga. Tipične doze su one u sledećim rasponima: 0,5 do 7,0 mg/kg, 1,0 do 5,0 mg/kg, 1,5 do 2,5 mg/kg ili 2,0 mg/kg. Doza od 0,5 mg/kg tako korespondira sa dozom od 30 mg za subjekta sa telesnom težinom od 60 kg, dok doza od 4 mg/kg korespondira sa dozom od 240 mg/kg za subjekta sa težinom od 60 kg, itd.

U poželjnoj realizaciji, kontraceptivno sredstvo u hitnim slučajevima sadašnjeg pronalaska može biti dato oralno za upotrebu kao kontraceptivno sredstvo u hitnim slučajevima. Povoljno, pronalazači su pronašli da je nakon oralnog unosa primećen visoki i nivo estetrola koji brzo dostiže vrhunac u plazmi. Tako, trenutni efekti mogu biti dobijeni nakon oralnog davanja estetrola. Oralni oblici doze su dobro poznati stručnjacima iz ove oblasti nauke i mogu biti, na primer, preparati u obliku tablete, tablete obložene filmom, obložene tablete, kapsule, gel kapsule, pilule ili praška. Osim aktivnog sastojka estetrola, oblici doze prema sadašnjem pronalasku dalje sadrže farmaceutski prihvatljivo vezivno sredstvo kao što su, na primer, ali ne i ograničeno na, laktoza, skrob, polivinilpirolidon (PVP), magnezijum stearat, itd.

Alternativno, kontraceptivno sredstvo u hitnim slučajevima sadašnjeg pronalaska može takođe biti dato putem parenteralnog, rektalnog, transkutanog ili mesnog davanja. Prema ovom pronalasku, kontraceptivno sredstvo u hitnim slučajevima sadašnjeg pronalaska se daje ne-vaginalno. U sledećoj realizaciji, kontraceptivno sredstvo u hitnim slučajevima sadašnjeg pronalaska može takođe biti dato putem parenteralnog, transkutanog ili mesnog davanja.

Takođe su ovde otkriveni oblici doze koji dalje sadrže drugi aktivni sastojak ili vezivno sredstvo koje ima određenu aktivnost.

Sledeći aspekt sadašnjeg otkrića se odnosi na farmaceutsku kompoziciju koja sadrži između 0,5 mg/kg i 7 mg/kg estetrola, kao aktivnog sastojka i farmaceutski prihvatljivog vezivnog sredstva.

Kontraceptivno sredstvo u hitnim slučajevima sadašnjeg pronalaska se daje u okviru ograničenog perioda nakon seksualnog odnosa a poželjno što je pre moguće nakon seksualnog odnosa. Uobičajeni vremenski period je u roku od 120 časova (5 dana) od odnosa, kao što je to u roku od 96 (4 dana), 72 (3dana), 48 (2 dana), 24 časa (1 dan) od seksualnog odnosa ili kraće.

Dobijeni rezultati sadašnjim pronalaskom ukazuju da E4 kod zečeva sprečava trudnoće sa visokom efikasnošću. Bez želje da se bude vezano teorijom, E4 može takođe biti upotrebljen do 120 časova nakon odnosa, što pruža prednost u odnosu na poznate pilule u hitnim slučajevima. Za estetrol je ovde pokazano da sprečava ovulaciju i sprečave trudnoće. Estetrol je efektivan čak i kada se daje kratko pre ovulacije kada se LH talas već započeo da se podiže, u vremenskom periodu kada upotreba npr. levonorgestrela vise nije efektivna, ili čak nakon ovulacije, kada nijedna od postojećih pilula u hitnim slučajevima nije efektivna.

Pronalazači su pokazali da je jedna doza do 100 mg tetrahidroksilovanog estrogena, poželjno estetrola, bezbedna i da je dobro tolerišu ljudi, što je prednost u odnosu na sintetičke estrogene kao što je etinil estradiol, koji su povezani sa neželjenim sporednim efektima kao što je tromboembolizam, zadržavanje fluida, mučnina, nadimanje, holelitijaza, glavobolja i bol u grudima.

Sledeći aspekt sadašnjeg pronalaska se odnosi na postupak hitne kontracepcije, postupak koji se sastoji od oralnog davanja jedne doze tetrahidroksilovanog estrogena, poželjno estetrola, između 0,5 i 7 mg/kg ženi u roku od 120 časova od seksualnog odnosa.

Ovde je dalje otkriven dozni režim za hitnu kontracepciju upotrebom tetrahidroksilovanog estrogena, poželjno estetrola, kao aktivnog sastojka. Dozni režim prema sadašnjem pronalasku je da se jedna doza između 0,5 i 7 mg/kg tetrahidroksilovanog estrogena, poželjno estetrola, kao aktivni sastojak da u roku od 120 časova od seksualnog odnosa.

Alternativno, navedeni dozni režim može biti primenjen u dve uzastopne faze, sa npr., intervalom od 6, 12, 18 ili 24 časova.

Ovde je takođe otkriven pribor sa kontraceptivnim sredstvom za hitne slučajeve koji se sastoji od farmaceutske kompozicije koja sadrži tetrahidroksilovani estrogen, poželjno estetrol, kako je ovde definisan. Pribor može dalje da sadrži instrukcije za upotrebu.

Sadašnji pronalazak je dalje ilustrovan sledećim primerima.

Primeri

Primer 1: Anti-ovulatorno dejstvo E4 kod pacova sa četvorodnevnim ciklusom

Sadašnji primer demonstrira antiovulatornu aktivnost estetrola (E4) nakon oralnog davanja pacovima sa četvorodnevnim ciklusom.

Vaginalni brisevi ženki pacova se dobijaju svaki dan dve nedelje pre početka tretmanom da identifikuju pacovi sa četvorodnevnim ciklusom. Svi tretmani se daju oralno dva puta na dan otprilike u 6h 30min i 16h 30 min četiri uzastopna dana (Dani 1-4), počevši od dana estrusa. Jedan dan nakon poslednje doze (Dan 5), pacovi se eutaniziraju sa CO2zagušenjem u otprilike 13h, i izračunava se broj jajašca po jajovodu vizuelizacijom pod mikroskopom za disekciju i rezultati se beleže.

U jednoj studiji, životinje (8 po grupi) se tretiraju sa E4(0,03; 0,1; 0,3; 1,0 ili 3,0 mg/kg) ili etinilestradiolom (EE) (0,0003; 0,001; 0,003, 0,01 ili 0,03 mg/kg). Kontrolnoj grupi se daje samo nosač.

Svi pacovi su ovulirali kada su tretirani p.o. sa nosačem dok su životinje koje su primale E4ili EE pokazale smanjenje ovulatorne aktivnosti. E4tretman sa dozama od 0,03 mg/kg dva puta na dan nije inhibirao ovulaciju. Pri višim dozama, E4je blokirao ovulaciju na način koji je povezan sa dozom. Ovulacija je inhibirana kod 2 od 8 pacova sa dozama E4od 0,1 mg/kg datim dva puta na dan; kod 5 od 8 pacova pri 0,3 mg/kg; kod 7 od 8 pacova pri 1,0 mg/kg i kod 8 od 8 pacova pri 3,0 mg/kg. Izračunati ED50je 0,182 mg/kg. Dnevni tretman sa EE proizvodi sledeće odgovore: 0,0003 mg/kg i 0,001 mg/kg nisu inhibirali ovulaciju; 0,003 mg/kg blokirao je ovulaciju kod 1-og od 8 pacova; 0,01 mg/kg kod 4 od 8 pacova; i 0,03 mg/kg kod 8 od 8 pacova. Izračunati ED50je 0,01 mg/kg.

Rezultati ove studije pokazuju da E4, kao i EE, prikazuju antiovulatornu aktivnost pod ovim eksperimentalnim uslovima.

U sledećoj studiji, antiovulatorna aktivnost E4je procenjivana u odnosu na estradiol (E2). Životinje (8 po grupi) se tretiraju sa E4, E2ili nosačem (kontrolna grupa). Zbog strmosti krive odgovor-na-dozu, antiovulatorni ED50za E2nije mogao biti izračunat, ali je pronađeno da se nalazi u rasponu od 0,03 do 0,1 mg/kg. Antiovulatorni ED50za E4je procenjen da je 0,204 mg/kg.

Rezultati ove studije pokazuje da E4, kao i E2, prikazuje antiovulatornu aktivnost pod ovakvim eksperimentalnim uslovima.

Kao zaključak, studije su demonstrirale da E4potiskuje ovulaciju kada se daje oralno odraslim pacovima sa ciklusom.

Primer 2: Sprečavanje trudnoće kod zečeva

U ovom primeru procenjuje se da li E4može da spreči trudnoću kod zečeva.

Osamnaest dokazano plodnih ženki zečeva, 3 po grupi se daje doza dva puta na dan u otprilike intervalima od 12 časova tokom 14 dana počevši od četvrtog dana nakon parenja:

Grupa 1: kontrola sa nosačem (ASV: 0,9% natrijum hlorid, 0,4% polisorbat 80, 0,5% karboksimetilceluloza i 0,9% benzil alkohol u destilisanoj ili dejoniziranoj vodi, 1 ml/kg),

Grupa 2: 0,01 mg/kg E4u ASV, 1 ml/kg,

Grupa 3: 0,03 mg/kg E4u ASV, 1 ml/kg,

Grupa 4: 0,1 mg/kg E4u ASV, 1 ml/kg,

Grupa 5: 0,3 mg/kg E4u ASV, 1 ml/kg,

Grupa 6: 1,0 mg/kg E4u ASV, 1 ml/kg.

Doze se utvrđuju prema telesnoj težini izmerenoj prvog dana davanja doze i podešene su prema težinama dobijenim nedelju dana kasnije. Svaka ženka zeca se pari sa dva dokazano plodna mužjaka nakon četiri dana davanja doza. Na ženkama se izvrši autopsija deset dana kasnije i utvrđuje se broj trudnoća.

Rezultati sudije su dati u Tabeli 1. U kontrolnoj grupi sa nosačem primećeno je ukupno 25 ovulacija. Inhibicija ovulacije je jasno prisutna u grupi koja prima dozu od 1,0 mg/kg gde je viđeno samo 3 ovulacije. Uvećana materica kod zečeva bez corpora lutea potvrđuje uspešnu kopulaciju. U grupi tretiranoj sa nosačem primećen je ukupan broj od 13 trudnoća koje rezultiraju iz 15 ovulacija (2 životinje). Pri dozi od 0,1 mg/kg nisu primećene trudnoće, iako se desilo 20 ovulacija. Slično, pri dozi od 0,3 mg/kg dogodilo se 20 ovulacija, ali trudnoće nisu viđene.

Tabela 1 Dejstva kontrole sa nosačem i različitih doza E4 na ovulaciju i trudnoću

Zaključeno je da oralne doze E4više od 0,3 mg/kg b.i.d. izazivaju inhibiciju ovulacije. Doze preko 0,03 mg/kg b.i.d. izazivaju potpunu prevenciju od trudnoće.

Primer 3: Dejstva E4 na trudnoću Wistar pacova

Predmet ovih studija je da se procene dejstva E4na trudnoću Wistar pacova kada se daje oralno kljukanjem.

U jednoj studiji, grupi od sedam parenih ženki pacova se da E4oralno, kljukanjem, pri nivoima doze od 30, 60 ili 90 mg/kg/dan od Dana 6 do 17 zaključno sa trudnoćom. Sličnoj grupi od sedam pacova se daje nosač, 0,5% w/v karboksimetilceluloza, tokom istog perioda da se ponašaju kao kontrola. Na dan 20 nakon gestacije, ženke se ispituju.

Nema smrti tokom studije; sve životinje su preživele do planirane autopsije. Nema relevantnih neočekivanih kliničkih obzervacija ili zabeleženih nalaza sa autopsije za koje se smatra da su u vezi sa tretmanom. Srednja vrednost gubitka telesne težine grupe i označeno smanjenje u srednoj vrednosti unosa hrane su primećeni kod svih doziranih grupa tokom perioda tretmana.

U sledećoj studiji, korišćenjem istog protokola kao u gornjoj studiji, grupama od sedam parenih ženki pacova se daje E4pri nivoima doze od 0,1, 0,3, 1, 3 i 10 mg/kg/dan ili nosač (kontrole).

Nema smrti tokom studije. Za tri ženke u grupi koja prima 10 mg/kg/dan i jednu ženku u grupi koja prima 3 mg/kg/dan je primećeno da su se pogrbile pri kraju perioda gestacije. Ne postoje druge zabeležene kliničke obzervacije za koje se smatra da su u vezi sa tretmanom. Pri 10 mg/kg/dan postoji prosečan gubitak u srednjoj vrednosti telesne težine tokom perioda tretmana, sa smanjenom srednjom vrednošću unosa hrane. Pri 0,1, 0,3, 1 i 3 mg/kg/dan, srednja vrednost dobijanja na telesnoj težini je manja nego kod kontrola tokom perioda tretmana, uz smanjenje u srednjoj vrednosti težine gravidne materice u grupama koje primaju 0,3, 1 i 3 mg/kg/dan. Pri 1 i 3 mg/kg/dan, srednja vrednost unosa hrane tokom perioda tretmana je neznatno niži nego kod kontrole.

Pri nivou doze od 3 mg/kg/dan, primećena je samo neznata materinska toksičnost.

Primer 4: Studija toksičnosti estetrola kod majmuna

Studija maksimalne tolerisane doze (MTD) se izvodi na odraslim ženkama makaki majmuna.

Tri kontrolne životinja se tretiraju oralno sa nosačem, a ostale četiri životinje se tretiraju oralno sa E4kao suspenzijom u nosaču pri pojedinačnim dozama od 1, 10, 100 ili 1000 mg/kg na dane 1, 3, 6 i 14 svaki posebno.

Ne postoje nepredviđene smrti tokom obavljanja ove studije.

Nema važnih kliničkih znakova povezanih sa E4tretmanom. Jedini primećeni škodljivi klinički znak je povraćanje kod jedne sa E4tretirane životinje pri dozi od 1000 mg/kg, otprilike 12 časova nakon davanja doze.

Nisu primećeni efekti na telesnu težinu ili hematološke parametre.

Klinička hemija pokazuje smanjene nivoe neorganskog fosfora kod 2 od 3 kontrolne životinje i kod 3 od 4 sa 1 mg/kg E4tretirane životinje dan nakon davanja doze. Nakon toga su primećeni sniženi nivoi kod svih sa E4tretiranih životinja nakon doze od 100 mg/kg date jednoj kontrolnoj životinji i 1000 mg/kg doze date svim sa E4tretiranim životinjama. Ovi nalazi su verovatno od malog značaja.

Primećeni su nalazi od manjeg značaja kod nekih parametara jetre (aspartat aminotransferaza (AST) i alanin aminotransferaza (ALT)) kod jedna kontrolne životinje i kod jedne sa E4tretirane životinje. Ipak, nisu evidentirani očigledni nalazi u vezi sa testiranim subjektom ili datom dozom.

Autopsija na svima nije otkrila nikakve neobične nalaze.

Zaključeno je da se jedan oralni tretman makaki majmuna sa E4 do doza od 1000 mg/kg dobro toleriše i nije se pokazao bilo kakav relevantan toksikološki nalaz.

Primer 5: Bezbednost, tolerantnost, farmakokinetika i farmakodinamika jedne doze E4 kod zdravih žena u postmenopauzi

U ovom primeru bezbednost, tolerantnost, farmakokinetika i farmakodinamika jedne eskalirajuće doze E4(0,1, 1, 10 i 100 mg) se procenjuje kod zdravih žena u postmenopauzi.

Dvostruko-naslepa (studija u kojoj niti subjekti eksperimenta niti osobe koje vode eksperiment znaju kritične aspekte eksperimenta), nasumična, sa placebom kontrolisana, sa podizanjem jedne doze studija (0,1, 1, 10 i 100 mg E4) se obavlja kod zdravih žena u postmenopauzi. Učestvuje 32 zdravih žena u postmenopauzi na dobrovoljnoj osnovi između 53 i 69 godina starosti. Menopauza se definiše kao ≥12 meseci izostajanja menstruacije (amenoreje) ili 6 meseci amenoreje sa nivoom seruma FSH ≥ 40 IU/I i seruma E2<73 pmol/I. Tretman grupe su uporedive u pogledu demografskih parametara i karakteristika. Ukupno 8 subjekata se nalazi u svakoj od doznih grupa; šest subjekata prima aktivni tretman a dva subjekta primaju placebo.

Bezbednost

Nema izveštaja o žestokom ili ozbiljnim škodljivim događajima. Jedan škodljivi događaj je blagog inteziteta (bol u leđima, klasifikovan kao nepovezan), svi ostali su blagi. Izvešteno je o jednom značajnom škodljivom efektu (AE) kod subjekta u grupi sa najvišom dozom (100 mg E4): alergijska reakcija (urtikarija) koja je uzeta kao neozbiljna, blaga i verovatno u vezi sa E4. Subjekt se oporavio u potpunosti u roku od nekoliko časova. Alergijski testovi nakon studije ne potvrđuju direktni alergijski odgovor na E4ili testirani rastvor koji se koristi u studiji. Najčešće primećeni AE-ovi sistemu klasa organa Poremećaji nervnog sistema i Gastrointestinalni poremećaji od subjekata u svim doznim grupama uključujući placebom tretirane subjekte (videti Tabelu 2). Broj i priroda AE-ova su slični kod subjekata sa placebom i kod 0,1, 1,0 i 10 mg E4. Najveći broj AE-ova (svi AE-ovi i povezani AE-ovi) je kod subjekata sa 100 mg E4. Nije primećena kumulacija specifičnih AE-ova u bilo kojoj tretman grupi. Broj subjekata koji izveštavaju o AE-ovima je uporediv između tretman grupa sa sa najnižim brojem u 10 mg grupi, u kojoj se samo jedan AE dogodio. Ne postoje značajne promene u ECG-ovima, bilo kom od laboratorijskih testova ili vitalnim znacima.

Tabela 2 Škodljivi događaji u vezi sa lekom, na koje se žale više od jednog subjekta u bilo kojoj od doznih grupa

Kao zaključak, rezultati ove studije pokazuju da E4nakon jednog davanja doze do 100 mg je bezbedno i dobro se toleriše.

Farmakokinetika

Srednja vrednost koncentracija E4u plazmi spram vremenskih grafičkih podataka za 1 mg, 10 mg i 100 mg grupu je data na Slici 1. Profili plazma koncentracije nisu mogli biti utvrđeni kod subjekata 0,1 mg grupe.

Farmakokinetički podaci E4su vrlo konzistentni u okviru svake dozne grupe i kro dozni raspon koji je proučavan. Varijabilnost među subjektima je vrlo niska.

Apsorbcija E4je ekstremno brza i praćena brzom redistribucijom. Reapsorbcija je očigledna tokom prvih 18 časova nakon oralnog unosa. Jedinjenje se eliminiše sa krajnjim vremenom poluživota od 28 časova (rasponi od 18-60 h).

AUC0-∞vrednosti su proporcionalne oralnoj dozi u rasponu od 10 do 100 mg E4.

Cmaxvrednosti su proporcionalne u rasponu od 1 do 100 mg E4. Na krajnje vreme poluživota i vrednosti frakcionog čišćenja ne utiče nivo doze.

Kao zaključak, rezultati ove studije pokazuju da, u doznom rasponu koji je testiran, E4ima visoku i sa dozom proporcionalnu oralnu bioabsorbciju sa konzistentnim profilom plazme zbog male interindividualne varijacije, i značajno krajnje vreme poluživota od oko 28 časova.

Farmakodinamika

Farmakodinamički podaci pokazuju jasnu od doze zavisnu inhibiciju plazam LH nivoa od strane E4do 48 časova nakon davanja doze. Maksimalna srednja vrednost supresije je 48% 4 časova nakon davanja doze. Drugi LH kroz 45% je viđen 12 sati nakon davanja doze, sinhrono sa srednjom vrednošću E4nivoa. Procenat promene LH nivoa 100 mg grupe je prikazan na Slici 2.

Temeljna i neprekidna inhibicija FSH nivoa, sa maksimalnim potiskivanjem od 41% nakon 48 časova od davanja doze, je takođe mogla biti ustanovljena u 100 mg doznoj grupi (nije mereno u drugim doznim grupama) do 168 časova (1 nedelja) nakon davanja doze. Promena procenta FSH nivoa 100 mg dozne grupe je prezentovana na Slici 3.

Neki brzo reagujući, na estrogen osetljivi parametri u vezi sa hepatičnim i metabolizmom kostiju se utvrđuju samo u 100-mg doznoj grupi. Blago povećanje u trigliceridima i blago smanjenje LDL-holesterola i aplipoprotein-B100 je primećeno. Minimalne promene su primećene u parametrima kostiju osteokalcina i C-telopeptida. Nisu primećene relevantne promene u parametrima zgrušavanja Faktoru XII i plazminogenu. Primećeno je blago povećanje u SHBG i CBG. Sveukupan profil sugeriše minimalni efekat na metabolizam jetre. Interpretacija farmakodinamičkih podataka mora biti učinjeno uz pažljivo uzimanje u obzir malog broja subjekata i davanja jedne doze.

Ne pojavljuje se značajna endometrijska stimulacija kako nijedan od subjekata nije doživeo povlačenje krvarenja nakon diskontinuiteta post tretmanom sa progestogenom.

Kao zaključak, efekti E4na LH i FSH nivoe označava snažnu potenciju jedinjenja da inhibira centralni gonadotropin.

Primer 6: Studija inhibicije ovulacije estetrola kod zdravih žena sa regularnim menstrualnim ciklusom

Ovaj primer pokazuje inhibiciju ovulacije sa jednom dozom estetrola nakon oralnog davanja zdravim ženama sa redovnim menstrualnim ciklusom.

Nasumična, dvostruko-naslepa, placebom kontrolisana unakrsna studija se obavlja kod zdravih žena sa redovnim menstrualnim ciklusom. Žene ne koriste hormonsko kontraceptivno sredstvo a redovan menstrualni ciklus je definisan kao menstrualni ciklus između 24-35 dana. Žene se nasumično stavljaju u jednu od tretman grupa, ukupno 20 žena se dodeljuje svakoj od tretman grupa. U svakoj tretman grupi, svaka žena prima jednu oralnu dozu estetrola (n.pr. 50 mg, 75 mg ili 100 mg estetrola) u jednom ciklusu tretmana i jednu oralnu dozu placeboa u drugom ciklusu tretmana (unakrsno).

Subjekti se prvo proveravaju u ciklusu pred-tretmana (odnosno normalni menstrualni ciklus) da se istraži razvoj folikule i da se potvrdi ovulacija. Folikularni razvoj i endometrijum se mere transvaginalnim ultrazvukom (TVUS) svaka 3 dana počevši od 6-og dana menstrualnog ciklusa sve dok se ne primeti ovulacija. Kada se izmeri prečnik folikule od 13 mm, subjekti se prate svaki sekund ili svaki dan. Smatra se da je ovulacija potvrđena ukoliko se izmeri vrednost seruma progesterona (P) ≥ 16 nmol/L. Lutealna faza treba da bude bar 10 dana.

U ciklusu tretmana, folikularni razvoj i endometrijum se mere sa TVUS svaka 3 dana počevši od 6-og dana menstrualnog ciklusa sve dok vodeća folikula nije ≥ 18 mm. Kada se izmeri prečnik folikule od 13 mm, subjekti se prate svaki sekund ili svaki dan. Subjekti se tretiraju (sa jednom oralnom dozom estetrola ili placeboa) kada je vodeća folikula ≥ 18 mm. Nakon tretmana, subjekti se prate 6 dana putem dnevnih TVUS-a i sakupljanjem uzoraka krvi radi merenja nivoa hormona (FSH, LH, E2, P). U slučaju da je folikula već bila ruptuirana (pukla) subjekti se i dalje tretiraju.

Primer 7: Efikasnost, bezbednost i tolerantnost estetrola u poređenju sa levonorgestrelom za hitnu kontracepciju kod zdravih žena reproduktivne starosti

Ovaj primer pokazuje efikasnost, bezbednost i tolerantnost estetrola u poređenju sa levonorgestrelom (LNG) radi hitne kontracepcije kod zdravih žena u reproduktivnom životnom dobu.

Potencijalna, nasumična, dvostruko-naslepa, milticentralna, aktivno kontrolisana studija se obavlja kod zdravih žena u reproduktivnom životnom dobu sa redovnim menstrualnim ciklusom koje same dolaze radi hitne kontracepcije u roku od 48 do 120 časova nakon nezaštićenog seksualnog odnosa. Žene su bar 18 godina starosti, ne koriste hormonsku kontracepciju a redovan menstrualni ciklus je definisan kao menstrualni ciklus između 24-35 dana. Žene nasumično primaju između 48h i 120h nakon nezaštićenog seksualnog odnosa jednom tretman sa bilo jednom dozom od 50 do 100 mg E4ili jednom dozom od 1,5 mg LNG sa naknadnim vizitama na 5-7 dana nakon očekivanog početka menzisa i sledećom vizitom na 12-14 dana nakn očekivanog početka menzisa (ukoliko je to neophodno). 40-45 žena po kliničkom sajtu (položaju) učestvuje u ovoj studiji, sa ukupno 40-45 kliničkih sajtova.

Stope trudnoća nakon tretmana se upoređuju između tretman grupa. Trudnoća (efikasnost) se utvrđuje detektovanje hormona trudnoće humanog horionskog gonadotropina (hCG) u serumu i povratak menstruacije.

Obrasci menstrualnog krvarenja se procenjuju nakon praćenja oko jedne nedelje nakon sledećeg menzisa.

Bezbednost i tolerantnost se procenju određivanjem laboratorijskih parametara rutinske bezbednosti (hematologija, biohemija i analiza urina), vitalnih znakova, obavljanjem fizičkih, ginekoloških i ispitivanja dojke, krvnog pritiska, srčanog ritma, telesne težine, i praćenjem (ozbiljnih) škodljivih događaja sve do praćenja oko jedne nedelje nakon sledećeg menzisa.

Claims (12)

1. PATENTNI ZAHTEVI 1. Postupak hitne kontracepcije kod ženke sisara, naznačen time, što se sastoji od davanja kontraceptivnog sredstva u hitnom slučaju koje sadrži tetrahidroksilovani estrogen predstavljen generalnom formulom (I):

   gde su R1, R2, R3, R4 nezavisno atom vodonika, hidroksilna grupa, alkoksi grupa sa 1-5 atoma ugljenika, ili keto grupa; poželjno gde su R1, R2, R3, R4 nezavisno atom vodonika, hidroksilna grupa ili akloksi grupa sa 1-5 atoma ugljenika; gde su svaki od R5, R6, R7 hidroksilna grupa; i gde su ne više od 3 od R1, R2, R3, R4 atomi vodonika, u efektivnoj količini da inhibira trudnoću kod ženke sisara, pri čemu se navedeno davanje obavlja kroz ne-vaginalno davanje.
2. 2. Postupak prema bilo kom od zahteva 1, naznačen time, što se navedeno davanje obavlja kroz oralno, parenteralno, rektalno, transkutano ili mesno davanje.
3. 3. Postupak prema bilo kom od zahteva 1 ili 2, naznačen time, što navedeno kontraceptivno sredstvo u hitnom slučaju dodatno sadrži farmaceutski prihvatljivu so ili vezivno sredstvo.
4. 4. Postupak prema bilo kom od zahteva 1 do 3, naznačen time, što navedeno kontraceptivno sredstvo u hitnom slučaju dodatno sadrži dodatni aktivni sastojak pogodan za sprečavanje trudnoće.
5. 5. Postupak prema bilo kom od zahteva 1 do 4, naznačen time, što navedeni tetrahidroksilovani estrogen predstavlja estetrol (1,3,5(10)-estratrien-3,15α, 16α,17β-tetrol).
6. 6. Postupak prema bilo kom od zahteva 1 do 5, naznačen time, što navedeno kontraceptivno sredstvo u hitnom slučaju sadrži tetrahidroksilovani estrogen u dozi od između 0,5 i 7 mg/kg, između 1,0 i 5,0 mg/kg, između 1,5 i 2,5 mg/kg, ili od oko 2,0 mg/kg.
7. 7. Postupak prema bilo kom od zahteva 1 do 5, naznačen time, što navedeno kontraceptivno sredstvo u hitnom slučaju sadrži tetrahidroksilovani estrogen u dozi između 30 mg i 400 mg, između 40 mg i 250 mg, između 40 mg i 200 mg, između 40 mg i 150 mg, između 40 mg i 100 mg, između 50 mg i 100 mg, ili od oko 100 mg estetrola.
8. 8. Postupak prema bilo kom od zahteva 1 do 7, naznačen time, što se davanje obavlja u jednoj dozi.
9. 9. Postupak prema bilo kom od zahteva 1 do 7, naznačen time, što se davanje obavlja iz dve doze, npr. sa intervalom od 6, 12, 18 ili 24 časova.
10. 10. Postupak prema bilo kom od zahteva 1 do 9, naznačen time, što se navedeno davanje obavlja u roku od 120 časova nakon seksualnog odnosa, poželjno u roku od 96 časova, u roku od 72 časa, u roku od 48 časova, u roku od 24 časa, u roku od 12 časova ili manje.
11. 11. Upotreba tetrahidroksilovanog estrogena predstavljenog generalnom formulom (I):

    gde su R1, R2, R3, R4 nezavisno atom vodonika, hidroksilna grupa, alkoksi grupa sa 1-5 atoma ugljenika, ili keto grupa; poželjno gde su R1, R2, R3, R4 nezavisno atom vodonika, hidroksilna grupa ili akloksi grupa sa 1-5 atoma ugljenika; gde su svaki od R5, R6, R7 hidroksilna grupa; i gde su ne više od 3 od R1, R2, R3, R4 atomi vodonika, kao kontraceptivno sredstvo u hitnom slučaju, pri čemu se davanje navedenog tetrahidroksilovanog estrogena obavlja putem ne-vaginalnog davanja.
12. 12. Upotreba prema zahtevu 11, naznačena time, što se davanje navedenog tetrahidroksilovanog estrogena obavlja putem oralnog, parenteralnog, rektalnog, transkutanog ili mesnog davanja.