RS57177B1 - Derivati benzamida za inhibiranje aktivnosti abl1, abl2 i bcr-abl1 - Google Patents

Derivati benzamida za inhibiranje aktivnosti abl1, abl2 i bcr-abl1

Info

Publication number
RS57177B1
RS57177B1 RS20180497A RSP20180497A RS57177B1 RS 57177 B1 RS57177 B1 RS 57177B1 RS 20180497 A RS20180497 A RS 20180497A RS P20180497 A RSP20180497 A RS P20180497A RS 57177 B1 RS57177 B1 RS 57177B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
compound
methyl
mmol
amino
phenyl
Prior art date
Application number
RS20180497A
Other languages
English (en)
Inventor
Stephanie Kay Dodd
Pascal Furet
Robert Martin Grotzfeld
Darryl Brynley Jones
Paul Manley
Andreas Marzinzik
Xavier Francois Andre Pelle
Bahaa Salem
Joseph Schoepfer
Wolfgang Jahnke
Original Assignee
Novartis Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=48670630&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RS57177(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Novartis Ag filed Critical Novartis Ag
Publication of RS57177B1 publication Critical patent/RS57177B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4439—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. omeprazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/78—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms, with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D213/81—Amides; Imides
    • C07D213/82—Amides; Imides in position 3
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/553—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07F9/576—Six-membered rings
    • C07F9/58—Pyridine rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/6558—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing at least two different or differently substituted hetero rings neither condensed among themselves nor condensed with a common carbocyclic ring or ring system
    • C07F9/65583—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing at least two different or differently substituted hetero rings neither condensed among themselves nor condensed with a common carbocyclic ring or ring system each of the hetero rings containing nitrogen as ring hetero atom

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
  • Hydrogenated Pyridines (AREA)

Description

OBLAST PRONALASKA
[0001] Dati pronalazak odnosi se na jedinjenja sposobna za inhibiranje enzimske aktivnosti tirozin kinaze na Abelsonovom proteinu (ABL1), proteina povezanog sa Abelsonom (ABL2) i srodnih himernih proteina, naročito BCR-ABL1. Pronalazak se dalje odnosi na postupak za dobijanje jedinjenja iz pronalaska, farmaceutske preparate koji obuhvataju ta jedinjenja i postupke za korišćenje tih jedinjenja u treatmanu kancera.
OSNOVA PRONALASKA
[0002] Aktivinost tirozin kinaze za ABL1 protein je normalno čvrsto regulisana, sa N-terminalnim (cap) regionom od SH3 domena i igra značajnu ulogu. Jedan regulatorni mehanizam obuhvata glicin-2 na poziciji N terminalnog “cap” ostatka koji je miristilovan i onda interaguje sa vezivnim mestom za miristat u katalitičkom domenu za SH1. Znak za hroničnu mijeloidnu leukemiju (CML) je Filadelfija hromozom (Ph), formiran t(9,22) recipročnom translokacijom na hromozomu u hematopetskoj matičnoj ćeliji. Ovaj hromozom nosi BCR-ABL1 onkogen koji kodira himerni BCR-ABL1 protein, kojem nedostaje N-terminalni “cap” ostatak i koji ima konstitutivno aktivni domen tirozin kinaze.
[0003] [0003] Iako su lekovi koji inhibiraju aktivnost tirozin kinaze BCR-ABL1 putem ATP-kompetitivnog mehanizma, kao što su Gleevec® / Glivec® (imatinib), Tasigna® (nilotinib) i Sprycel® (dasatinib), efikasni u tretmanu CML, neki pacijenti doživljavaju relapse zbog pojave klonova otpornih na ove lekove, kod kojih mutacije u SH1 domenu kompromituju vezivanje inhibitora. Iako Tasigna® i Sprycel® ostaju aktivni kod mnogih mutantnih oblika BCR-ABL1 rezistentnih na Gleevec, mutacija kod koje je treonin-315 zamenjen izoleucinom (T315I) ostaje neosetljiva na sva tri leka i može dovesti do razvoja rezistencije na terapiju kod ovakvih CML pacijenata. Stoga, inhibicija BCR-ABL1 mutacija, kao što je T315I, ostaje medicinska potreba koju treba zadovoljiti. Uz CML, BCR-ABL1 fuzioni proteini su uzročnici kod odredjenog procenta akutnih limfocitnih leukemija, i lekovi koji targetuju aktivnost ABL kinaze su takodje korisni i kod ove indikacije.
[0004] Sredstva koja targetuju miristoil vezujuće mesto (tzv. alosterični inhibitori) imaju potencijal u tretmanu BCR-ABL1 poremećaja (J. Zhang, F. J. Adrian, W. Jahnke, S. W. Cowan-Jacob, A. G. Li, R. E. Iacob4, T. Sim, J. Powers, C. Dierks, F. Sun, G.-R. Guo, Q. Ding, B. Okram, Y. Choi, A. Wojciechowski, X. Deng, G. Liu, G. Fendrich, A. Strauss, N. Vajpai, S. Grzesiek, T. Tuntland, Y. Liu, B. Bursulaya, M. Azam, P. W. Manley, J. R. Engen, G. Q. Daley, M. Warmuth., N. S. Gray. Targeting BCR–ABL by combining allosteric with ATP-binding-site inhibitors. Nature 2010;463:501-6). Da bi se sprečila pojava rezistencije na lekove pri upotrebi ATP inhibitora i/ili alosteričnih inhibitora, moguće je razviti kombinacionu terapiju koja podrazumeva upotrebu oba tipa inhibitora u tretmanu poremećaja povezanih sa BCR-ABL1. Ova potreba posebno postoji kod malih molekula, ili njihovih kombinacija, koji inhibiraju aktivnost BCR-ABL1 i BCR-ABL1 mutacija putem ATP vezivnog mesta, miristoil vezivnog mesta ili kombinacije oba vezujuća mesta.
[0005] Dalje, inhibitori aktivnosti ABL1 kinaze imaju potencijal korišćenja u terapiji metastatičnih invazivnih karcinoma i virusnih infekcija kao što su boginje i Ebola virusi.
[0006] Jedinjenja iz ovog pronalaska takodje imaju potencijal u tretmanu ili prevenciji oboljenja ili poremećaja povezanih sa abnormalnom aktivacijom kinaze prirodne (“wild type”) ABL1, uključujući nemaligna oboljenja ili poremećaje, kao što su oboljenja CNS a posebno odredjena neurodegenerativna oboljenja (na primer Alchajmerovo, Parkinsonovo oboljenje), oboljenja motoneurona (amiotrofična lateralna skleroza), mišićne distrofije, autoimuna i zapaljenska oboljenja (dijabetes i plućna fibroza), virusne infekcije, prionska oboljenja.
[0007] Objavljena prijava broj WO 2004/005281 A1 opisuje supstituisane pirimidinilaminobenzamide kao inhibitore tirozin kinaze.
[0008] Eck M J et al Current Opinion in Call Biology, vol. 21, no. 2, 1 April 2009, strane 288-295 izveštavaju o inhibitorima BCR-Abl, kao što su Imatinib, Nilotinib i Dasatinib.
SUŠTINA PRONALASKA
[0009] U jednom aspektu, datim pronalaskom obezbedjena su jedinjenja formule (I):
u kojoj:
R1predstavlja pirazolil; gde pomenuti pirazolil može da bude nesupstituisan ili supstituisan sa 1 do 2 R6grupe;
R2predstavlja pirolidinil; gde pomenuti pirolidinil može biti supstituisan sa jednom R7grupom; gde je R3odabran od vodonika i halo;
gde je R4odabran od –SF5i –Y2–CF2–Y3;
gde je R6pri svakom javljanju nezavisno odabran iz grupe koju čine vodonik, hidroksi, metil, metoksi, cijano, trifluorometil, hidroksi-metil, halo, amino, fluoro-etil, etil i ciklopropil; gde je R7odabran od hidroksi, metil, halo, metoksi, hidroksi-metil, amino, metil-amino, amino-metil, trifluorometil, 2-hidroksipropan-2-il, metil-karbonil-amino, dimetil-amino, 2-amino-3-metilbutanoil)oksi, karboksi, metoksi-karbonil, fosfonooksi, cijano i amino-karbonil; gde je Y odabran od CH i N;
gde je Y1odabran od CH i N;
gde je Y2odabran od CF2, O i S(O)0-2; i
gde je Y3odabran od vodonika, hloro, fluoro, metila, difluorometila i trifluorometila.
[0010] U drugom aspektu, datim pronalaskom obezbedjena je farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje formule (I) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, u mešavini sa jednim ili više pogodnih ekscipijenasa.
[0011] Jedinjenja formule I se koriste u terapiji kod životinja, u kojoj aktivnost BCR-ABL1 doprinosi patologiji i/ili simptomologiji bolesti.
[0012] Obelodanjen je postupak za dobijanje jedinjenja formule (I), i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli.
KRATAK OPIS CRTEŽA
[0013]
Slika 1: Mapa difrakcije X-zraka (korišćenjem izvora bakra (lambda = 1.54A) za merenja) za formulaciju amorfne čvrste disperzije iz Primera 9 (videti primer 41) sa 25% punjenja iz primera 9 sa PVP VA64 (37.5%) i Pharmacoat 603 (37.5%).
Slika 2: Životinje sa subkutanim KCL-22 ksenograftovima primale su svakog dana tretman iz Primera 9. Pokazana je antitumorska aktivnost zavisna od visine primljene doze.
Slika 3: KCL-22 ćelije su rasle kao subkutani ksenograftovi i četiri životinje su dozirane sa 75mg/kg Nilotiniba BID (dva puta dnevno). Kada su tumori razvili rezistenciju na tretman Nilotinibom doziranje je promenjeno na 30mg/kg Primer 9 BID. Tretman tumora rezistentnih na nilotinib opisan u Primeru 9 je doveo do regresije tumora. Svaka kriva predstavlja pojedinačnu životinju.
Slika 4: Životinje sa subkutanim KCL-22 ksenograftovima su dozirane kombinacijom 30mg/kg Primer 9 BID i 75mg/kg Nilotinib BID. Svaka kriva predstavlja pojedinačnu životinju. Potpuna regresija tumora je detektovana kod svih životinja i održala se do kraja studije.
Definicije
[0014] Opšti pojmovi koji se koriste ovde i u daljem tekstu poželjno imaju u kontekstu ovog izvodjenja sledeća značenja, ukoliko drugačije nije naznačeno, gde se opštiji pojmovi, gde god da se koriste, mogu nezavisno jedan od drugog da budu zamenjeni sa još specifičnijim definicijama ili ostaju, čime se definišu detaljnija izvodjenja pronalaska:
Izraz “Alkil” se odnosi na razgrante ili nerazgranate ugljovodonične grupe sa 1 do 7 atoma ugljenika (C1-7alkil), ili 1 do 4 atoma ugljenika (C1-4alkil). Reprezentativni primeri za alkil uključuju, ali nisu ograničeni na, metil, etil, n-propil, izo-propil, n-butil, sek-butil, izo-butil, terc-butil, n-pentil, izopentil, neopentil, n-heksil, 3-metilheksil, 2,2- dimetilpentil, 2,3-dimetilpentil, n-heptil, n-oktil, n-nonil, n-decil i slično. Supstituisani alkil predstavlja alkil grupu koja sadrži jedan ili više, kao što su jedan, dva ili tri supstituenta koji su odabrani od halogenih, hidroksi ili alkoksi grupa. Halosupstituisani-alkil i halo-supstituisani-alkoksi, mogu biti ili ravni ili razgranati lanci koji obuhvataju, metoksi, etoksi, difluorometil, trifluorometil, pentafluoroetil, difluorometoksi, trifluorometoksi, i slično.
[0015] “Aril” označava monociklični ili spojeni biciklični aromatični prsten koji sadrži od šest do deset atoma ugljenika. Na primer, aril može da bude fenil ili naftil, najbolje fenil. “Arilen” označava dvovalentni radikal izveden iz aril grupe.
[0016] “BCR-ABL1” odnosi se na fuzioni protein kreiran iz N-terminalnih egzona “breakpoint cluster” regiona (BCR) gena i glavnog C-terminalnog dela (egzoni 2–11) Abelsonovog (ABL1) gena. Uobičajeni fuzioni transkripti kodiraju protein od 210-kDa (p210 BCR-ABL1), iako redji transkripti kodiraju protein od 190-kDa (p190 BCR-ABL1) kao i 230-kDa protein (p230 BCR-ABL1). ABL1 sekvence ovih proteina sadrže ABL1 tirozin kinazni domen koji je visoko regulisan kod prirodnog proteina, ali konstitutivno aktiviran kod BCR-ABL1 fuzionog proteina. Ova deregulisana tirozin kinaza interaguje sa mnogim ćelijskim signalnim putevima dovodeći do transformacije i deregulacije proliferacije ćelija.
[0017] Izraz “BCR-ABL1 mutanti” odnosi se na brojne mutacije na jednom mestu u BCR-ABL1 uključujući: Glu255→Lizin, Glu255→Valin, Thr315→Izoleucin, Met244→Val, Phe317→Leu, Leu248→Val, Met343→Thr, Gly250→Ala, Met351→Thr, Gly250→Glu, Glu355→Gly, Gln252→His, Phe358→Ala, Gln252→Arg, Phe359→Val, Tyr253→His, Val379→Ile, Tyr253→Phe, Phe382→Leu, Glu255→Lys, Leu387→Met, Glu255→Val, His396→Pro, Phe311→Ile, His396→Arg, Phe311→Leu, Ser417→Tyr, Thr315→Ile, Glu459→Lys i Phe486→Ser.
[0018] Jedinjenja iz pronalaska osetljiva su na supstituciju na R3/ R4supstituisanom prstenu u položaju koji je orto u odnosu na tačku vezivanja NHC(O) grupe. Uporediti, na primer, sledeća jedinjenja formule (I). IC50iz primera 2 iznosi 1nM u poredjenju sa hloro ili metil supstitucijom sa IC50od 1.6 i 1.8 μM, tim redosledom:
[0019] “Halogen” (ili halo) po mogućstvu predstavlja hloro ili fluoro, ali takodje može da bude i bromo ili jodo.
[0020] GLEEVEC<®>(imatinib mezilati) je indikovan u tretmanu pacijenata sa KIT (CD117)-pozitivnim neresektabilnim i/ili metastatičnim malignim gastrointestinalnim stromalnim tumorima (GIST).
Takodje je indikovan u tretmanu odraslih pacijenata nakon potpune resekcije KIT (CD117)-pozitivnog GIST. Takodje je indikovan u tretmanu novih dijagnostikovanih odraslih i pedijatrijskih pacijenata sa Filadelfija hromozom–pozitivnom hroničnom mijeloidnom leukemijom (Ph+ CML) u hroničnoj fazi i kod pacijenata sa Ph+ CML u blast krizi (BC), ubrzanoj fazi (AP) ili u hroničnoj fazi (CP) nakon neuspešne terapije interferonom-alfa. Može se takodje koristiti kao ciljani medikament za tretman sledećih retkih poremećaja sa ograničenim mogućnostima tretmana: relapsna ili refraktorna Filadelfija hromozom–pozitivna akutna limfoblastna leukemija (Ph+ ALL); mijelodisplastična/mijeloproliferativna oboljenja (MDS/MPD) povezana sa genskim rearanžmanima kod receptora faktora rasta iz krvnih pločica (PDGFR); agresivna sistemska mastocitoza (ASM) bez D816V c-KIT mutacije ili sa nepoznatim c-KIT mutacionim statusom; hipereozinofilni sindrom/hronična eozinofilna leukemija (HES/CEL) sa FIP1L1-PDGFRα fuzionom kinazom (mutaciona analiza ili FISH ukazuju na CHIC2 deleciju alela) i za pacijente sa HES i/ili CEL koji su negativni na FIP1L1-PDGFRα fuzionu kinazu ili imaju nepoznat status; i neresektabilni, rekurentni i/ili metastatički dermatofibrosarkoma protuberans (DFSP).
[0021] TASIGNA<®>(nilotinib) je indikovan u tretmanu odraslih pacijenata sa novodijagnostikovanom Filadelfija hromozom-pozitivnom hroničnom mijeloidnom leukemijom (Ph+ CML) u hroničnoj fazi. Može se koristiti za tretman odraslih kod kojih više nema pozitivnog efekta, ili su netolerantni na ostale tretmane, uključujući imatinib (GLEEVEC<®>), ili su uzimali druge terapeutike, uključujući imatinib (GLEEVEC) ali ih ne podnose.
[0022] SPRYCEL<®>(dasatinib) je lek koji se dobija na recept a koji se koristio za tretman odraslih kod kojih je u skorije vreme dijagnostikovana Filadelfija hromozom-pozitivna (Ph+) hronična mijeloidna leukemija (CML) u hroničnoj fazi i za tretman odraslih kojima stari lek više ne odgovara ili su intolerantni na druge tretmane, kao i kod pacijenata sa ALL.
[0023] BOSULIF® (Bosutinib) je lek koji se izdaje na recept a koji je korišćen u tretmanu odraslih kod kojih je nedavno dijagnostikovana Filadelfija hromozom-pozitivna (Ph+) hronična mijeloidna leukemija (CML) u hroničnoj fazi i za tretman odraslih kojima stari lek više ne odgovara ili su intolerantni na druge tretmane, kao i kod paciejnata sa ALL.
[0024] Jedinjenja formule (I) imaju različite izomerne oblike. Na primer, bilo koji asimetrični atom ugljenika može biti prisutan u (R)-, (S)- ili (R,S)-konfiguraciji, najbolje u (R)- ili (S)-konfiguraciji. Supstituenti u dvostrukoj vezi ili posebno na prstenu mogu biti prisutni u cis- (= Z-) ili trans (= E-) obliku. Jedinjenja na taj način mogu biti prisutna kao smeše izomera ili najbolje kao čisti izomeri, poželjno kao čisti dijastereomeri ili čisti enantiomeri. Sledeća jedinjenja formule (I) postoje u tautomernoj formi:
[0025] Da bi ilustrovali tautomerizam sa sledećim specifičnim primerima, (R)-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1H-pirazol-5-il)nikotinamid (desna strukturna formula, niže) predstavlja tautomer (R)-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1H-pirazol-3-il)nikotinamid (leva strukturna formula, niže) i obrnuto:
[0026] Kada se koristi množinski oblik (na primer, jedinjenja, soli), to obuhvata jedninu (na primer, pojedinačno jedinjenje, jedna so). Izraz “jedinjenje” ne isključuje (na primer, u farmaceutskoj formulaciji) da je prisutno više od jednog formul (I) (ili njegova so), gde “a” samo predstavlja neodredjeni član. Neodredjeni član“A” može se poželjno čitati kao “jedan ili više”, a manje poželjno alternativno kao “jedan”.
[0027] Bilo koja ovde data formula predstavlja kako neobeležene oblike tako i izotopno obeležene oblike jedinjenja. Izotopno obeležena jedinjenja imaju strukture predstavljene formulama koje su date u okviru ovog teksta, kod kojih su jedan ili više atoma zamenjeni atomom odabrane atomske mase ili masenog broja. Primeri izotopa koji mogu biti uključeni u jedinjenja iz ovog pronalaska uključuju izotope vodonika, ugljenika, azota, kiseonika, fosfora, fluora i hlora, kao što su redom<2>H,<3>H,<11>C,<13>C,<14>C,<15>N,<18>F,<31>P,<32>P,<18>F<35>S,<36>Cl,<123>I,<124>I,<125>I. Pronalazak obuhvata različita ovde definisana, izotopno obeležena jedinjenja, na primer ona u koja su uključeni radioaktivni izotopi kao što su<3>H, i<14>C, ili ona u kojima su prisutni neradioaktivni izotopi poput<2>H i<13>C. Ovakva izotopno obeležena jedinjenja su korisna u metaboličkim studijama (najbolje sa<14>C), studijama kinetike reakcija (sa, na primer,<2>H ili<3>H), pri detekciji ili imidžing (“imaging”) tehnikama, kao što su pozitronska emisiona tomografija (PET) ili kompjuterska tomografija zasnovana na emisiji jednog fotona (SPECT) uključujući testove tkivne distribucije lekova ili supstrata, ili kod radioaktivnog tretmana pacijenata. Posebno,<18>F ili obeleženo jedinjenje su naročito poželjni za PET ili SPECT studije. Izotopno obeležena jedinjenja iz pronalaska i njihovi pro-lekovi mogu se generalno dobiti konvencionalnim tehnikama poznatim stručnjacima ili postupcima analognim onima koji opisanim u pratećim primerima korišćenjem odgovarajućih izotopno obeleženih reageasa.
[0028] Pored toga, supstitucija težim izotopima, naročito deuterijumom (tj.,<2>H ili D) može da proizvede odredjene terapijske prednosti koje proizilaze iz veće metaboličke stabilnosti, na primer povećanog in vivo poluživota ili smanjene potrebne doze ili poboljšanog terapijskog indeksa. Jasno je da se deuterijum u ovom konteksu posmatra kao supstituent jedinjenja iz pronalaska. Koncentracija takvog težeg izotopa, naročito deuterijuma, može se definisati faktorom obogaćenja izotopa. Izraz " faktor obogaćenja izotopa " kako se ovde koristi predstavlja odnos izmedju zastupljenosti izotopa i prirodne zastupljenosti odredjenog izotopa. Ako je supstituent u jedinjenju ovog pronalaska označeni deuterijum, takvo jedinjenje ima faktor obogaćenja izotopa za svaki označeni atom deuterijuma od najmanje 3500 (52.5% ugradnje deuterijuma na svaki označeni atom deuterijuma), najmanje 4000 (60% ugradnje deuterijuma), najmanje 4500 (67.5% ugradnje deuterijuma), najmanje 5000 (75% ugradnje deuterijuma), najmanje 5500 (82.5% ugradnje deuterijuma), najmanje 6000 (90% ugradnje deuterijuma), najmanje 6333.3 (95% ugradnje deuterijuma), najmanje 6466.7 (97% ugradnje deuterijuma), najmanje 6600 (99% ugradnje deuterijuma), ili najmanje 6633.3 (99.5% ugradnje deuterijuma).
[0029] Na primer, jedinjenje formule Ib, prikazano ovde gde R3predstavlja vodonik i gde Y može da bude CH, uključuje deuterijum na pirolidinilskom prstenu kao što je prikazano:
[0030] Ovaj deuterizovani oblik je manje sklon metaboličkoj transformaciji (levo, iznad) u poredjenju sa nedeuterizovanim oblikom (desno, gore).
Opis poželjnih izvodjenja
[0031] Dati pronalazak se odnosi na jedinjenja sposobna za inhibiranje aktivnosti za BCR-ABL1 ili mutanata BCR-ABL1 preko alosteričnih vezivnih mesta, vezivnih mesta za miristoil.
[0032] U jednom izvodjenju, u pogledu jedinjenja iz pronalaska, predstavljena su jedinjenja formule (Ib):
u kojoj je: R3odabrana od vodonika i halo; R4je odabrana od –SF5i –Y2–CF2–Y3; gde R6kada je povezana sa azotom na pirazolilskom prstenu odabrana je od vodonika, metila, hidroksi-etila, fluoroetila, etila i ciklopropila; i R6kada je povezan za atom ugljenika na pirazolilskom prstenu je odabran iz grupe koju čine vodonik, hidroksi, metil, metoksi, cijano, trifluorometil, hidroksi-metil, halo, amino, fluoro-etil, etil i ciklopropil; gde je R7odabran iz grupe koju čine hidroksi, metil, halo, metoksi, hidroksi-metil, amino, metil-amino, amino-metil, trifluorometil, 2-hidroksipropan-2-il, metil-karbonilamino, dimetil-amino, 2-amino-3-metilbutanoil)oksi, karboksi, metoksi-karbonil, fosfonooksi, cijano i amino-karbonil; gde je Y1odabran od CH i N; gde je Y2odabran od CF2, O i S(O)0-2; gde je Y3odabran od vodonika, fluoro, hloro, metil, difluorometil i trifluorometila; ili njihovih farmaceutski prihvatljivih soli.
[0033] U daljem izvodjenju, predstavljena su jedinjenja formule (Ic):
u kojoj je: R3odabran od vodonika i halo; gde je R4odabran od –SF5i –Y2–CF2–Y3; gde R6kada je vezan za azot u pirazolilskom prstenu je odabran od vodonika, metila, hidroksi-etila, fluoro-etila, etila i ciklopropila; i gde R6kada je vezan za atom uglljenika iz pirazolilskog prstena je odabran iz grupe koju
1
čine vodonik, hidroksi, metil, metoksi, cijano, trifluorometil, hidroksi-metil, halo, amino, fluoro-etil, etil i ciklopropil; gde je R7odabran iz grupe koju čine hidroksi, metil, halo, metoksi, hidroksi-metil, amino, metil-amino, amino-metil, trifluorometil, 2-hidroksipropan-2-il, metil-karbonil-amino, dimetil-amino, 2-amino-3-metilbutanoil)oksi, karboksi, metoksi-karbonil, fosfonooksi, cijano i amino-karbonil; gde je Y1odabran od CH i N; gde je Y2odabran od CF2, O i S(O)0-2; gde je Y3odaban od vodonika, fluoro, hloro, metil, difluorometil i trifluorometil; ili njihovih farmaceutski prihvatljivih soli.
[0034] U narednom izvodjenju predstavljena su jedinjenja formule (I), ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, u kojoj R1predstavlja pirazolil; u kojoj pomenuti pirazolil može da bude nesupstituisan ili supstituisan sa 1 do 2 R6grupe.
[0035] U daljem izvodjenju, R1predstavlja nesupstituisani pirazolil.
[0036] U daljem izvodjenju, R1predstavlja pirazolil supstituisan sa jednom R6grupom.
[0037] U daljem izvodjenju, R1predstavlja pirazolil supstituisan sa dve R6grupe.
[0038] U daljem izvodjenju, R2predstavlja pirolidin-1-il supstituisan sa jednom R7grupom.
[0039] U daljem izvodjenju, Y je odabran od CH i N.
[0040] U daljem izvodjenju, Y predstavlja N.
[0041] U daljem izvodjenju, Y predstavlja CH.
[0042] U daljem izvodjenju, Y1je odabran od CH i N.
[0043] U daljem izvodjenju, Y1predstavlja N.
[0044] U daljem izvodjenju, Y1predstavlja CH.
[0045] Sledeća dalja izvodjenja primenjuju se na jedinjenja prema bilo kojoj od formula (I), (Ib) ili (Ic), ili na njihove farmaceutski prihvatljive soli.
[0046] U daljem izvodjenju, R3je odabran od vodonika i halo.
[0047] U narednom izvodjenju, R4je odabran od –SF5i –Y2–CF2–Y3.
[0048] U daljem izvodjenju, R4predstavlja hlorodifluorometoksi.
[0049] U daljem izvodjenju, R4predstavlja trifluorometoksi.
[0050] U narednom izvodjenju, R6je pri svakom pojavljivanju nezavisno odabran iz grupe koju čine, vodonik, hidroksi, metil, metoksi, cijano, trifluorometil, hidroksi-metil, halo, amino, fluoro-etil, etil i ciklopropil.
[0051] U daljem izvodjenju, R6, kada je vezan za azot na pirazolilskom prstenu, odabran je od vodonika, metila, hidroksi-etila, fluoro-etila, etila i ciklopropila.
[0052] U daljem izvodjenju, R6,kada je povezan sa ugljenikovim atomom iz pirazolilskog prstena, je odabran od vodonika, hidroksi, metila, metoksi, cijano, trifluorometila, hidroksi-metila, halo, amino, fluoro-etila, etila i ciklopropila.
[0053] U daljem izvodjenju, R7je odabran iz grupe koju čine hidroksi, metil, halo, metoksi, hidroksimetil, amino, metil-amino, amino-metil, trifluorometil, 2-hidroksipropan-2-il, metil-karbonil-amino, dimetil-amino, 2-amino-3-metilbutanoil)oksi, karboksi, metoksi-karbonil, fosfonooksi, cijano i aminokarbonil.
[0054] U daljem izvodjenju, Y2je odabran od CF2, O i S(O)0-2.
[0055] U daljem izvodjenju, Y2predstavlja O.
[0056] U daljem izvodjenju, Y2is CF2.
[0057] U daljem izvodjenju, Y2is S(O)0-2.
[0058] U daljem izvodjenju, Y3je odabran od vodonika, hloro, fluoro, metila, difluorometila i trifluorometila.
[0059] U daljem izvodjenju, Y3predstavlja hloro.
[0060] U daljem izvodjenju, Y3predstavlja fluoro.
[0061] U daljem izvodjenju su jedinjenja, ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, koje su odabrane od:
[0062] U sledećem izvodjenju predstavljena su jedinjenja, ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, koje su odabrane od:
�
[0063] U sledećem izvodjenju predstavljena su jedinjenja, ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, koje su odabrane od:
[0064] U narednom izvodjenju predstavljeno je jedinjenje, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, koja predstavlja:
[0065] U narednom izvodjenju predstavljena su jedinjenja, odabrana od:
1
Farmakologija i upotreba
[0066] Na osnovu studija inhibicije opisanih u sekciji “Eksperimenti” u nastavku teksta, jedinjenje formule (I) prema ovom pronalasku pokazuje terapijsku efikasnost posebno kod poremećaja koji zavise od aktivnosti BCR-ABL1. Konkretno, jedinjenja iz ovog pronalaska inhibiraju alosterično ili miristoilvezujuće mesto kod BCR-ABL1 (uključujući prirodni, “wild-type” BCR-ABL1 i/ili njegove mutacije).
[0067] Kombinacija kompetitivnog inhibitora za ATP kod BCR-ABL1 sa alosteričnim inhibitorom BCR-ABL1 odlaže pojavu stečene rezistencije kod BCR-ABL1+KCL-22 ćelija, in vitro. Iznenadjujuće, BCR-ABL1+KCL-22 ćelije tretirane svaka 3-4 dana jedinjenjem iz pronalaska ispoljile su stečenu rezistenciju nakon oko 28 dana dok su ove iste ćelije tretirane svaka 3-4 dana nilotinibom ili dasatinibom pokazale stečenu rezistenciju nakon samo 18-21 dana. Ono što još više iznenadjuje, kada su BCR-ABL1+KCL-22 ćelije bile tretirane svaka 3-4 dana kombinacijom jedinjenja iz pronalaska i bilo nilotinibom ili dasatinibom, nije primećena pojava stečene rezistencije u barem prvih 60 dana. Stoga je miristoil-vezujuće mesto kod jedinjenja iz ovog pronalaska, u kombinaciji sa BCR-ABL1 inhibitorima koji se vezuju za ATP vezujuće mesto, posebno značajno za tretman proliferativnih oboljenja uključujući upregulaciju aktivnosti ABL1 kinaze, kao u slučaju BCR-ABL1 fuzionih proteina u CML i podvrstama drugih hematoloških maligniteta kao što su ALL i AML.
[0068] Ćelije karcinoma koriste invapodije za degradaciju izvanćelijskog matriksa tokom invazije tumora i metastaze. Aktivna ABL kinaza je neophodna za stvaranje invapodija indukovanih SRC, regulišući različite faze nastajanja invapodija i njihove funkcije. Jedinjenja iz ovog pronalaska, stoga, kao inhibitori ABL1, imaju potencijal kao terapeutici u tretmanu metastatičnih invazivnih karcinoma.
1
[0069] Allosterični inhibitor ABL1 kinaze može biti korišćen za tretman kancera mozga: uključujući glioblastom, koji je najčešći & najagresivniji maligni primarni tumor mozga a kod kojeg se ekspresija ABL1 može imunohistohemijski detektovati kod odredjene podgrupe pacijenata (Haberler C, Gelpi E, Marosi C, Rössler K, Birner P, Budka H, Hainfellner JA. Immunohistochemical analysis of plateletderived growth factor receptor-alpha, -beta, c-KIT, ABL1, and ABL2 proteins in glioblastoma: possible implications for patient selection for imatinib mesylate therapy. J Neurooncol. 2006 Jan;76(2):105-9). Medjutim, kliničke studije sa Gleevec®-om nisu bile uspešne kod pacijenata sa glioblastomom (Reardon DA, Dresemann G, Taillibert S, Campone M, van den Bent M, Clement P, Blomquist E, Gordower L, Schultz H, Raizer J, Hau P, Easaw J, Gil M, Tonn J, Gijtenbeek A, Schlegel U, Bergstrom P, Green S, Weir A, Nikolova Z. Multicentre phase II studies evaluating imatinib plus hydroxyurea in patients with progressive glioblastoma. Br J Cancer. 2009 Dec 15;101(12):1995-2004; Razis E, Selviaridis P, Labropoulos S, Norris JL, Zhu MJ, Song DD, Kalebic T, Torrens M, Kalogera-Fountzila A, Karkavelas G, Karanastasi S, Fletcher JA, Fountzilas G. Phase II study of neoadjuvant imatinib in glioblastoma: evaluation of clinical and molecular effects of the treatment. Clin Cancer Res.2009 Oct 1;15(19):6258-66; Dresemann G. Imatinib and hydroxyurea in pretreated progressive glioblastoma multiforme: a patient series. Ann Oncol. 2005 Oct;16(10):1702-8), najverovatnije zbog slabog stepena izloženosti tumora leku u mozgu kao i odsustvu poremećene krvno-moždane barijere (Holdhoff et al, J Neurooncol. 2010;97(2):241-5). Transport leka Gleevec® kroz krvno-moždanu barijeru je, kako je pokazano u prekliničkim studijama, ograničen dejstvom aktivnih efluks transportera kao što je P-glikoprotein. Ovo je takodje slučaj sa dasatinibom (Chen Y, Agarwal S, Shaik NM, Chen C, Yang Z, Elmquist WF. P-glycoprotein and breast cancer resistance protein influence brain distribution of dasatinib. J Pharmacol Exp Ther. 2009 Sep;330(3):956-63). Poznato je da zračenje utiče na bolje otvaranje krvno-moždane barijere. Kod mišjih modela, odgovor tumora glioblastoma multiforme na Gleevec® je bio u korelaciji sa povećanom stopom odlaganja tumorskog rasta i preživljavanja kada je Gleevec® primenjivan u kombinaciji sa svakodnevnim zračenjem (Geng L, Shinohara ET, Kim D, Tan J, Osusky K, Shyr Y, Hallahan DE. STI571 (Gleevec) improves tumor growth delay and survival in irradiated mouse models of glioblastoma. Int J Radiat Oncol Biol Phys.2006 Jan 1;64(1):263-71). Stoga novi ABL1 inhibitor sa velikom izloženošću u mozgu predstavlja solidan terapijski pristup u tretmanu glioblastoma i drugih kancera mozga.
[0070] CNS-CML: kod nekih CML pacijenata tretiranih lekom Gleevec®, opisani su pojava blast krize CNS i zakazivanje koji se mogu objasniti lošom izloženošću mozga leku Gleevec®. (Kim HJ, Jung CW, Kim K, Ahn JS, Kim WS, Park K, Ko YH, Kang WK, Park K. Isolated blast crisis in CNS in a patient with chronic myelogenous leukemia maintaining major cytogenetic response after imatinib. J Clin Oncol. 2006 Aug 20;24(24):4028-9; Radhika N, Minakshi M, Rajesh M, Manas BR, Deepak Kumar
1
M.Central nervous system blast crisis in chronic myeloid leukemia on imatinib mesylate therapy: report of two cases. Indian J Hematol Blood Transfus.2011 Mar;27(1):51-4). U stvari, kod CML pacijenata, koncentracija leka Gleevec® je u stvarnosti mnogo niža (~100 puta) u CNS-u nego u plazmi (Leis JF, Stepan DE, Curtin PT, Ford JM, Peng B, Schubach S, Druker BJ, Maziarz RT. Central nervous system failure in patients with chronic myelogenous leukemia lymphoid blast crisis and Philadelphia chromosome positive acute lymphoblastic leukemia treated with imatinib (STI-571). Leuk Lymphoma.
2004 Apr;45(4):695-8). Stoga, ABL1 inhibitori iz ovog pronalaska koji pokazuju visoku izloženost u mozgu predstavljaju validan pristup razvoju terapija protiv CML, uključujući CNS-CML.
[0071] Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu biti korisna u tretmanu virusa. Na primer, virusne infekcije mogu biti posredovane aktivnošću ABL1 kinaze, kao što je to u slučaju virusa boginja i Ebola virusa. Za lekove Gleevec® i Tasigna® je pokazano da zaustavljaju oslobadjanje viralnih partikula Ebola virusa iz inficiranih ćelija, in vitro (Kalman, Daniel; Bornmann, William Gerard, Methods of use of non-ATP competitive tyrosine kinase inhibitors to treat pathogenic infection, PCT Int. Appl. 2007, WO 2007002441; Garcia Mayra; Cooper Arik; Shi Wei; Bornmann William; Carrion Ricardo; Kalman Daniel; Nabel Gary J. Productive Replication of Ebola Virus Is Regulated by the ABL1 Tyrosine Kinase. Science translational medicine 2012;4:123ra24). Za jedinjenja iz ovog pronalaska koja inhibiraju ABL1 kinazu, može se stoga očekivati da smanjuju sposobnost patogena za replikaciju.
[0072] Jedinjenja iz pronalaska mogu se takodje pokazati korisnim u tretmanu neuroloških degenerativnih promena. Dok nativna ABL1 tirozin kinaza ostaje relativno neaktivna u zdravom mozgu odraslih osoba, može se aktivirati u mozgu pacijenata sa oboljenjima CNS, uključujući neurodegenerativna oboljenja kao što su Alchajmerova bolest (AD), Parkinsonova bolest (AD), frontotemporalna demencija (FTD), Pikova bolest, Niemann-Pick oboljenje C tipa (NPC) kao i druga degenerativna, zapaljenska i autoimuna oboljenja i starenje.
[0073] Parkinsonova bolest je drugo najzastupljenije hronično neurodegenerativno oboljenje sa najčešćim familijarnim autozomalno-recesivnim oblikom uzrokovanim mutacijama kod E3 ubikvitin ligaze, parkina. Skorašnje studije pokazuju da je aktivirana ABL1/ABL2 pronadjena u strijatumu pacijenata sa sporadičnim parkinsonizmom. Istovremeno, parkin biva fosforilovan na tirozinu, što uzrokuje gubitak njegove aktivnosti kao ubikvitin ligaze i krioprotektora, što se vidi po akumulaciji supstrata parkina (Ko HS, Lee Y, Shin JH, Karuppagounder SS, Gadad BS, Koleske AJ, Pletnikova O, Troncoso JC, Dawson VL, Dawson TM. Phosphorylation by the c-Abl protein tyrosine kinase inhibits parkin's ubiquitination and protective function. Proc Natl Acad Sci U S A.2010 Sep 21;107(38):16691-6; Imam SZ, Zhou Q, Yamamoto A, Valente AJ, Ali SF, Bains M, Roberts JL, Kahle PJ, Clark RA, Li S. Novel regulation of parkin function through c-Abl-mediated tyrosine phosphorylation: implications for Parkinson's disease. J Neurosci.2011 Jan 5;31(1):157-63). Ove dve studije su takodje pokazale da
1
kod ćelijskih ili životinjskih modela Parkinsonove bolesti farmakološka inhibicija ABL1 kinaze ili genetski nokdaun ABL1 sprečavaju fosforilaciju parkina na tirozinskom ostatku i ponovo vraćaju funkciju E3 ligaze i krioprotektivnu funkciju kako in vitro tako in vivo. Ovi rezultati pokazuju da je ABL1-zavisna fosforilacija tirozina kod parkina osnovna post-translaciona modifikacija koja dovodi do gubitka funkcije parkina i napredovanja oboljenja kod sporadične PD. Stoga, sposobnost jedinjenja iz pronalaska da inhibiraju miristat-vezujuće mesto kod ABL1, može otvoriti put novim terapijskim opcijama za zaustavljanje napredovanja parkinsonizma.
[0074] Alchajmerova bolest se karakteriše dvema osnovnim osobinama: izvanćelijskim depozitima neurotoksičnog amiloida- β koji dovode do razvoja amiloidnih plaka, i intraćelijskom akumulacijom hiperfosforilovanog tau proteina koji doprinosi razvoju neurofibrilarnih klupka (NFTs).
[0075] Nivo amiloida- β biva redukovan nakon intratekalnog tertmana lekom Gleevec® u mozgu normalnih morskih prasića, kao i kod ćelijskih modela (Netzer WJ, Dou F, Cai D, Veach D, Jean S, Li Y, Bornmann WG, Clarkson B, Xu H, Greengard P. Gleevec inhibits beta-amyloid production but not Notch cleavage. Proc Natl Acad Sci U S A.2003 Oct 14;100(21):12444-9). Isti tim je postavio hipotezu da Gleevec® postiže efekat na smanjenje koncentracije amiloida- β putem novog mehanizma koji sprečava GSAP interakciju sa supstratom gama-sekretaze, APP-CTF (He G, Luo W, Li P, Remmers C, Netzer WJ, Hendrick J, Bettayeb K, Flajolet M, Gorelick F, Wennogle LP, Greengard P. Gammasecretase activating protein is a therapeutic target for Alzheimer's disease. Nature. 2010 Sep 2;467(7311):95-8). U okviru ove studije, efekat leka Gleevec® na inhibiciju GSAP/APP-CTF bio je primećen jedino pri mikromolarnim koncentracijama. Drugi tim je pokazao da fosforilacija tirozina na intraćelijskom domenu APP (tj. Tyr682) reguliše amiloidogenično procesovanje APP ubrzavajući stvaranje amiloida- β in vivo (Barbagallo AP, Weldon R, Tamayev R, Zhou D, Giliberto L, Foreman O, D'Adamio L. Tyr(682) in the intracellular domain of APP regulates amyloidogenic APP processing in vivo. PLoS One. 2010 Nov 16;5(11):e15503). Druge studije su pokazale da je APP fosforilovan na tirozinu u ćelijama koje eksprimiraju konstitutivno aktivnu formu ABL1 onkogena (Zambrano N, Bruni P, Minopoli G, Mosca R, Molino D, Russo C, Schettini G, Sudol M, Russo T. The beta-amyloid precursor protein APP is tyrosine-phosphorylated in cells expressing a constitutively active form of the Abl protoncogene. J Biol Chem. 2001 Jun 8;276(23):19787-92). Ovi podaci posmatrani zajedno sugerišu amiloidogenično APP procesovanje zavisno od ABL1 za nastanak toksičnog amiloid- β peptida i daljih amiloidnih plaka. Stoga bi trebalo očekivati da jedan ABL1 inhibitor snižava stopu nastajanja amiloidnih plaka kod pacijenata obolelih od Alchajmerove bolesti.
1
[0076] Za Tau protein je pokazano da je fosforilovan od strane ABL1 kinaze na tirozinskim ostacima 18, 197, 310 i 394 kod ćelijskih modela, a za tau pY394 je pokazano prisustvo u lezijama NFT u mozgu AD pacijenata.
[0077] ABL1 je aktivirana u mozgu pacijenata sa sporadičnim oblikom Alchajmerove bolesti kako je pokazano prisustvom fosforilacije bilo na Y412, indikatoru aktivacije, koja ko-lokalizuje sa granulovakuolarnom degeneracijom, ili na T735 koji ko-lokalizuje sa tipičnim lezijama, amiloidnim plakama, neurofibrilarnim klupkom (NFTs) dodatno na GVD. Amiloid-β i oksidativni stress aktiviraju ABL1 kinazu u kulturama nervnih ćelija a intracerebralna injekcija fibrilarnog amiloidnog peptida dovodi do povećane ekspresije ABL1 i nizvodnog efektora p73. Transgeni miševi (APP/Swe mišji model AD), imaju viši nivo ABL1 u mozgu i, nakon tretmana lekom Gleevec® koji je ABL1 inhibitor, detektovano je smanjenje nivoa fosforilacije tau proteina u njihovom mozgu. Model transgenog miša koji eksprimira konstitutivno aktivnu ABL1 u neuronima prednjeg mozga pokazao je gubitak neurona, jaku upalu neurona i fosforilaciju tirozina tau proteina u mozgu (za pregledni članak, videti Schlatterer SD, Acker CM, Davies P. c-Abl in neurodegenerative disease. J Mol Neurosci. 2011 Nov;45(3):445-52).
[0078] Na osnovu svih ovih rezultata, postoje dokazi za ulogu ABL1 kinaze u patogenezi Alchajmerove bolesti kod razvoja obe vrste lezija, amiloidnih plaka i neurofibrilarnih klupka.
[0079] Dalje, aktivirana ABL1 je takodje prisutna kod drugih taupatija pored sporadičnog Alchajmerovog oboljenja, uključujući mozak pacijenata sa frontotemporalnom demencijom sa N279K i P301L mutacijama, Pikovim oboljenjem i Guam Parkinsonovom demencijom (Schlatterer SD, Acker CM, Davies P. c-Abl in neurodegenerative disease. J Mol Neurosci.2011 Nov;45(3):445-52).
[0080] Stoga, jedinjenja iz ovog pronalaska, inhibicijom ABL1 u CNS-u, predstavljaju validan pristup u razvoju terapija protiv Alchajmerove bolesti, kao i drugih β-amiloidoza, kao što su vaskularna demencija i druge taupatije, kao što su frontotemporalna demencija i Pikova bolest.
[0081] Oboljenje Niemann-Pick tipa C (NPC) je fatalni autozomni recesivni poremećaj koji se karakteriše akumulacijom slobodnog holesterola i glikosfingolipida u endozomalnom lizozomalnom sistemu, kao i progresivnim odumiranjem neurona, posebno Purkinje neurona u području malog mozga. U mišjem modelu NPC, proapoptotična ABL1, nizvodni cilji geni kao i p73 ciljni geni su eksprimirani u malom mozgu. Inhibicija ABL1 lekom Gleevec® sprečila je gubitak Purkinjeovih neurona, dovela do poboljšanja neuroloških simptoma i povećala stopu preživljavanja. Pozitivan efekat leka Gleevec® na preživljavanje je bio u sprezi sa redukovanim nivoom mRNK za p73 proapoptotične ciljne gene (Alvarez AR, Klein A, Castro J, Cancino GI, Amigo J, Mosqueira M, Vargas LM, Yévenes LF, Bronfman FC, Zanlungo S. Imatinib therapy blocks cerebellar apoptosis and improves neurological symptoms in a
2
mouse model of Niemann-Pick type C disease. FASEB J.2008 Oct;22(10):3617-27). Stoga, jedinjenja iz ovog pronalaska, inhibicijom ABL1 kinaze, predstavljaju validan pristup u razvoju terapija protiv oboljenja uzrokovanih proapoptotičnim ABL1/p73 signalnim putem, kao što je NPC.
[0082] Kod modela prionske bolesti, Gleevec® je pokazao pozitivne efekte: odloženu prionsku invaziju neurona inhibicijom širenja priona sa periferije u CNS (Yun SW, Ertmer A, Flechsig E, Gilch S, Riederer P, Gerlach M, Schätzl HM, Klein MA. The tyrosine kinase inhibitor imatinib mesylate delays prion neuroinvasion by inhibiting prion propagation in the periphery. J Neurovirol.2007 Aug;13(4):328-37). Gleevec® i deficijencija ABL1 indukovali su oslobadjanje ćelije od PrPSc kod ćelija inficiranih prionima (Ertmer A, Gilch S, Yun SW, Flechsig E, Klebl B, Stein-Gerlach M, Klein MA, Schätzl HM. The tyrosine kinase inhibitor STI571 induces cellular clearance of PrPSc in prion-infected cells. J Biol Chem. 2004 Oct 1;279(40):41918-27). Stoga, novi inhibitori ABL1 iz ovog pronalaska takodje predstavljaju validan terapijski pristup u tretmanu prionskih oboljenja kao što je Krojcfeld-Jakobsovo oboljenje.
[0083] X-vezana recesivna Emeri-Drajfusova mišićna distrofija je uzrokovana mutacijama emerina, nuklearnog membranskog proteina sa ulogama u nuklearnoj arhitekturi, genskoj regulaciji i signalingu. Nedavna studija je pokazala da ABL1 direktno fosforiluje emerin na tirozinskom ostatku u ćelijskim modelima, kao i da status fosforilacije emerina menja njegovo vezivanje za druge proteine kao što je BAF. Ovo pak može objasniti mislokalizaciju mutantnog emerina iz nuklearnog u citosolne kompartmente i posledične promene u nizvodnim efektorskim i signalnim integratorima za signalne puteve na nuklearnom omotaču (Tifft KE, Bradbury KA, Wilson KL. Tyrosine phosphorylation of nuclear-membrane protein emerin by SRC, ABL1 and other kinases. J Cell Sci. 2009 Oct 15;122(Pt 20):3780-90). Promene u interakciji emerin-lamin tokom mitoze i interfaze su relevantne za patologiju mišićne distrofije. Dodatno, rezultati iz druge studije pokazuju da Gleevec® atenuira distrofiju skeletnih mišića kod mdx miševa (Huang P, Zhao XS, Fields M, Ransohoff RM, Zhou L. Imatinib attenuates skeletal muscle dystrophy in mdx mice. FASEB J.2009 Aug;23(8):2539-48).
[0084] Stoga, novi inhibitori ABL1 iz ovog pronalaska takodje predstavljaju terapijske pristupe u tretmanu skeletalnih i mišićnih distrofija.
[0085] Dalje, ABL1 kinaza igra ulogu u zapaljenskim procesima i oksidativnom stresu, dvama mehanizmima koji su uključeni u niz humanih oboljenja počev od akutnih oboljenja CNS, kao što su moždani udar i traumatske moždane ili povrede kičmene moždine, hronična oboljenja CNS, kao što su Alchajmerova, Parkinsonova, Hantingtonova i bolesti motoneurona, sve do ne-CNS zapaljenskih i autoimunih oboljenja, kao što su dijabetes i plućna fibroza.
[0086] Na primer, Gleevec® sprečava fibrozu kod različitih prekliničkih modela sistemske skleroze i indukuje regresiju postojeće fibroze (Akhmetshina A, Venalis P, Dees C, Busch N, Zwerina J, Schett G, Distler O, Distler JH. Treatment with imatinib prevents fibrosis in different preclinical models of systemic sclerosis and induces regression of established fibrosis. Arthritis Rheum.2009 Jan;60(1):219-24) i pokazuje antifibrotične efekte kod plućne fibroze indukovane bleomicinom kod miševa (Aono Y, Nishioka Y, Inayama M, Ugai M, Kishi J, Uehara H, Izumi K, Sone S. Imatinib as a novel antifibrotic agent in bleomycin-induced pulmonary fibrosis in mice. Am J Respir Crit Care Med. 2005 Jun 1;171(11):1279-85). Druga studija je pokazala da i imatinib i nilotinib atenuiraju akutnu povredu pluća indukovanu bleomicinom i plućnu fibrozu kod miševa (Rhee CK, Lee SH, Yoon HK, Kim SC, Lee SY, Kwon SS, Kim YK, Kim KH, Kim TJ, Kim JW. Effect of nilotinib on bleomycin-induced acute lung injury and pulmonary fibrosis in mice. Respiration. 2011;82(3):273-87). Iako su se u ovim studijama autori fokusirali na implikacije na mehanizam povezan sa PDGFRs, od interesa, u studiji od Rhee i sar. (Respiration.2011;82(3):273-87), nilotinib, koji je potentniji inhibitor c-ABL od imatiniba, pokazao je superiorne terapijske antifibrotične efekte, na taj način podržavajući terapijsku primenu inhibitora c-ABL za tretman humanih oboljenja sa upalom pluća. U drugoj studiji, izlaganje miševa hiperoksiji pojačalo je aktivaciju ABL1 neophodnu za fosforilaciju dinamina 2 i za proizvodnju reaktivnih jona kiseonika i plućno curenje (Singleton PA, Pendyala S, Gorshkova IA, Mambetsariev N, Moitra J, Garcia JG, Natarajan V. Dynamin 2 and c-Abl are novel regulators of hyperoxia-mediated NADPH oxidase activation and reactive oxygen species production in caveolin-enriched microdomains of the endothelium. J Biol Chem.2009 Dec 11;284(50):34964-75).
[0087] Stoga, ovi podaci ukazuju da novi inhibitori c-ABL iz ovog pronalaska imaju terapijsku primenu u tretmanu humanih oboljenja sa upalom pluća.
[0088] Aktivacija ABL1 insulinom, putem modifikacije odgovora FAK, može da igra važnu ulogu u usmeravanju prema mitogenom nasuprot metaboličkom signalingu putem insulinskih receptora (Genua M, Pandini G, Cassarino MF, Messina RL, Frasca F. c-Abl and insulin receptor signalling. Vitam Horm.
2009;80:77-105). Pokazano je da inhibitori c-Abl kao što je Gleevec® mogu da preokrenu dijabetes tipa 1 u normalno stanje kod ne-gojaznih miševa (Louvet C, Szot GL, Lang J, Lee MR, Martinier N, Bollag G, Zhu S, Weiss A, Bluestone JA. Tyrosine kinase inhibitors reverse type 1 diabetes in nonobese diabetic mice. Proc Natl Acad Sci U S A. 2008 Dec 2;105(48):18895-900). Ublažavanje dijabetesa lekom Gleevec® je imitirano nokdaunom ABL1 mRNK posredovanim siRNK (Hägerkvist R, Sandler S, Mokhtari D, Welsh N. Amelioration of diabetes by imatinib mesylate (Gleevec): role of beta-cell NF-kappaB activation and anti-apoptotic preconditioning. FASEB J.2007 Feb;21(2):618-28).
[0089] Stoga, novi inhibitori ABL1 iz ovog pronalaska imaju terapijsku primenu u tretmanu humanog dijabetesa.
[0090] Inhibitor ABL1 iz ovog pronalaska može se koristiti u kombinaciji sa jednim ili više postojećih tretmana za gore navedena oboljenja: na primer inhibitor ABL1 iz ovog pronalaska može se koristiti u kombinaciji sa levodopom ili drugim lekovima koji sadrže L-DOPA ili neki dopaminski agonist za tretman Parkinsonove bolesti ili u kombinaciji sa inhibitorom holinesteraze kao što su Exelon kapsule ili transdermalni flasteri za tretman Alchajmerove bolesti.
[0091] Kod hronične mijelogene leukemije (CML), recipročna balansirana hromozomalna transllokacija u hematopojetičnim stem ćelijama (HSCs) daje BCR-ABL1 hibridni gen. Ovaj kodira onkogeni BCR-ABL1 fuzioni protein. Dok ABL1 kodira visokoregulisanu proteinsku tirozin kinazu, koja igra fundamentalnu ulogu u regulaciji ćelijske proliferacije, adherencije i apoptoze, BCR-ABL1 fuzioni gen kodira konstitutivno aktiviranu kinazu. Ovako aktivirana kinaza pretvara HSCs pri čemu se dobija fenotip sa deregulisanom klonalnom proliferacijom, smanjenim kapacitetom za pričvršćivanje za stromu koštane srži i sniženim apoptotskim odgovorom na mutagene stimulus, dajući progresivno više malignih transformacija. Dobijeni granulociti se ne razvijaju u zrele limfocite i oslobadjaju se u cirkulaciju, dovodeći do nedostatka zrelih ćelija i povećane osetljivosti na infekcije. Za ATP-kompetitivne inhibitore BCR-ABL1 je pokazano da sprečavaju kinazu da aktivira mitogene i anti-apoptotične puteve (na primer, PI-3 kinaza i STAT5), dovodeći do smrti ćelija sa BCR-ABL1 fenotipom i tako obezbedjujući efikasnu terapiju protiv CML. KCL-22 ćelijska linija (kupljena od DSMZ, Leibniz institut, Nemačka) je ustanovljena iz pleuralne efuzije 32-godišnje žene sa Filadelfija hromozom-pozitivnom CML u blast krizi 1981. godine, i opisano je da sadrži t(9;22) što daje BCR-ABL1 fuzioni gen i p53 mutaciju. KCL-22 ćelijska linija može se koristiti kod modela ksenografta da bi se pokazala efikasnost in vivo jedinjenja iz ovog pronalaska (videti Eksperimentalni deo, infra). Jedinjenja iz pronalaska, kao inhibitori BCR-ABL1, uključujući njihove mutante, su stoga posebno pogodna za terapiju oboljenja povezanih sa overekspresijom ovog ciljnog molekula, kao što su ALL ili CML leukemije.
[0092] Takodje se pokazalo da jedinjenja iz ovog pronalaska imaju anti-tumorsko dejstvo, in vitro: In vitro antitumorsko dejstvo je testirano, korišćenjem na primer leukemičnih ćelijskih linija kao što su Ba/F3-BCR-ABL1, KCL-22, K-562, MEG-01, KYO-1, LAMA-84, KU812, EM-2, CML-T1, BV-173, ili ALL-SIL.
[0093] Jedinjenje iz pronalaska ili farmaceutska kompozicija može da se koristi u postupku lečenja kancera, što obuhvata davanje ispitaniku efikasne količine jedinjenja iz pronalaska ili farmaceutske kompozicije za potrebe njegovog lečenja.
[0094] Može se davati dodatno terapijsko sredstvo.
[0095] Dodatno terapijsko sredstvo može biti različiti BCR-ABL1 inhibitor koji je odabran od imatiniba, nilotiniba, dasatiniba, dosutiniba, radotiniba, ponatiniba i bafetiniba.
[0096] Postupak lečenja stanja posredovanog BCR-ABL1, obuhvata davanje ispitaniku efikasne količine jedinjenja iz
pronalaska ili farmaceutske kompozicije za potrebe njegovog lečenja.
2
[0097] BCR-ABL1 može da sadrži jednu ili više mutacija. Ove mutacije uključuju V299L, T315I, F317I, F317L, Y253F, Y253H, E255K, E255V, F359C i F359V (UJane F. Apperley. Part 1: Mechanism of resistance to imatinib in chronic myeloid leukaemia. Lancet Oncology 2007;8:1018).
[0098] Mogu da se tretiraju stanja posredovana BCR-ABL1, gde BCR-ABL1 sadrži jednu ili više mutacija koje su odabrane od V299L, T315I, F317I, F317L, Y253F, Y253H, E255K, E255V, F359C i F359V.
[0099] Jedinjenje se može davati parenteralno.
[0100] Jedinjenje se može davati intramuskularlno, intravenozno, subkutano, oralno, pulmonarno, intratekalno, topično ili intranazalno.
[0101] Jedinjenje se može davati sistemski.
[0102] Pacijent može da bude sisar.
[0103] Pacijent može da bude primat.
[0104] Pacijent može da bude čovek.
[0105] Postupak lečenja oboljenja posredovanih ABL1/BCR-ABL1, može da sadrži korak: davanja pacijentu za potrebe njegovog lečenja terapijski efikasne količine hemoterapeutskog sredstva u kombinaciji sa terapijski efikasnom količinom jedinjenja formule (I).
[0106] U narednom aspektu predstavljeno je jedinjenje formule I, ili bilo koje specifično izvodjenje opisano u prethodnom delu teksta, za upotrebu u tretmanu kancera.
[0107] U narednom aspektu, kancer je leukemija odabrana od hronične mijeloidne leukemije (CML) i akutne limfoblastične leukemije (ALL).
[0108] U daljem aspektu predstavljeno je jedinjenje formule I ili njegova bilo koja specifična izvodjenja za upotrebu u lečenju kancera u kombinaciji sa dodatnim jedinjenjem koje je odabrano od imatiniba, nilotiniba, dazatiniba, bosutiniba, ponatiniba i bafetiniba.
[0109] U daljem aspektu, jedinjenje formule I je (R)-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1H-pirazol-5-il)nikotinamid.
[0110] U daljem aspektu jedinjenje formule I je farmaceutski prihvatljiva so (R)-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1H-pirazol-5-il)nikotinamida.
[0111] U daljem aspektu, dodatno jedinjenje se daje sekvencijalno.
[0112] U daljem aspektu, dodatno jedinjenje se daje istovremeno.
[0113] U daljem aspektu, dodatno jedinjenje je nilotinib.
[0114] U daljem aspektu, dodatno jedinjenje je imatinib.
[0115] U daljem aspektu, dodatno jedinjenje je dasatinib.
[0116] U daljem aspektu, dodatno jedinjenje je bosutinib.
[0117] U daljem aspektu, dodatno jedinjenje je ponatinib.
[0118] U daljem aspektu, dodatno jedinjenje je bafetinib.
Farmaceutske kompozicije
[0119] U narednom aspektu, datim pronalaskom obezbedjene su farmaceutski prihvatljive kompozicije koje obuhvataju terapijski-efikasnu količinu jednog ili više gore opisanih jedinjenja, koje su formulisane zajedno sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih nosača (aditivi) i/ili diluenti. Kao što je detaljnije opisano u nastavku, farmaceutske kompozicije iz datog pronalaska mogu biti posebno formulisane za primenu u čvrstom ili tečnom obliku, uključujući one koji su prilagodjene za sledeće: (1) oralna primena, na primer, natapanjem (vodeni ili nevodeni rastvori ili suspenzije), tablete, bolusi, prahovi, granule, paste za nanošenje na jezik; (2) parenteralna primena, na primer, subkutana, intramuskularna ili intravenusna injekcija kao što je, na primer, sterilni rastvor ili suspenzija; (3) topična primena, na primer, u vidu kreme, masti ili spreja koji se primenjuje na kožu, pluća, ili mukozne membrane; ili (4) intravaginalno ili intrarektalno, na primer, kao vaginaleta, krem ili pena; (5) sublingvalno; (6) okularno; (7) transdermalno; (8) nazalno; ili (9) pulmonarno; ili (10) intratekalno.
[0120] U ovom tekstu, izraz „terapeutski efikasna količina” označava da količina jedinjenja, materijala, ili kompozicije koja sadrži jedinjenje prema predmetnom pronalasku, koja je efikasna za stvaranje nekog željenog terapeutskog dejstva bar u subpopulaciji ćelija životinje pri prihvatljivom odnosu korist/rizik primenjivom na bilo koji medicinski tretman.
[0121] Izraz "farmaceutski prihvatljivi nosač", onako kako se ovde koristi, odnosi se na ona jedinjenja, materijale, kompozicije i/ili dozne oblike koji su, u okviru opsega normalnog medicinskog rasudjivanja, pogodni za upotrebu u kontaktu sa tkivima ljudi i životinja bez prekomerne toksičnosti, iritacije, alergijskog odgovora i sličnog, ili drugog problema ili komplikacije srazmernog razumnom odnosu koristi i rizika.
[0122] U ovom tekstu, izraz "farmaceutski-prihvatljivi nosač" označava farmaceutski prihvatljivimaterijal, kompoziciju ili sredstvo, kao što je tečni ili čvrsti punilac, diluent, ekscipijens, pomoćna sredstva za proizvodnju (na primer, lubrikant, talk magnezijum, kalcijum ili cink stearat, ili stearinska kiselina), ili materijal za enkapsulaciju u obliku rastvora, koji je uključen u prenošenje ili transport predmentog jedinjenja iz jednog organa, ili dela tela, u drugi organ, ili deo tela. Svaki nosač mora biti “prihvatljiv” u smislu da je kompatibilan sa drugim sastojcima formulacije i nije štetan za pacijenta. Neki primeri materijala koji mogu da služe kao farmaceutski prihvatljivi nosači uključuju: (1) šećere, kao što je laktoza, glukoza i saharoza; (2) skrobove, kao što je kukuruzni skrob i skrob krompira; (3) celuloza, i njeni derivati, kao što je natrijum karboksimetil celuloza, etil celuloza i acetat celuloze; (4) tragakant u prahu; (5) slad; (6) želatin; (7) talk; (8) ekscipijensi, kao što je kakao buter i voskovi za supozitorije; (9) ulja, kao što je ulje kikirikija, pamukovo ulje, šafranovo ulje, susamovo ulje, maslinovo
2
ulje, kukuruzno ulje i sojino ulje; (10) glikoli, kao što je propilen glikol; (11) polioli, kao što je glicerin, sorbitol, manitol i polietilen glikol; (12) estri, kao što je etil oleat i etil laurat; (13) agar; (14) puferski agensi, kao što je magnezijum hidroksid i aluminijum hidroksid; (15) alginska kiselina; (16) voda bez pirogena; (17) izotonični slani rastvor; (18) Ringerov rastvor; (19) etil alkohol; (20) ph puferski rastvori; (21) poliestri i (22) druge netoksične kompatibilne supstance uključene u farmaceutske formulacije.
[0123] Kao što je gore navedeno, odredjena izvodjenja iz datog pronalaska mogu da sadrže bazne funkcionalne grupe, kao što su amino ili alkilamino, i koje su, stoga, sposobne za formiranje farmaceutski-prihvatljivih soli sa farmaceutski-prihvatljivim kiselinama. U ovom pogledu izraz "farmaceutski-prihvatljive soli", odnosi se na relativno netoksične, neorganske i organske kisele adicione soli jedinjenja iz datog pronalaska. Ove soli se mogu dobiti in situ u vehikulumu za davanje ili u procesu proizvodnje doznih oblika, ili odvojenom reakcijom prečišćenog jedinjenja iz pronalaska u njegov slobodan bazni oblik sa odgovarajućem organskom ili neorganskom kiselinom, i izolovanjem tako dobijene soli tokom naknadnog prečišćavanja. Reprezentativne soli obuhvataju hidrobromidne, hidrohloridne, sulfatne, bisulfatne, fosfatne, nitratne, acetatne, valeratne, oleatne, palmitatne, stearatne, lauratne, benzoatne, laktatne, fosfatne, tozilatne, citratne, maleatne, fumaratne, sukcinatne, tartratne, napfilatne, mezilatne, glukoheptonatne, laktobionatne, i laurilsulfonatne soli i slično. (Videti, na primer, Berge et al. (1977) "Pharmaceutical Salts", J. Pharm. Sci.66:1-19).
[0124] Farmaceutski prihvatljive soli predmetnih jedinjenja uključuju konvencionalne netoksične soli ili kvaternerne amonijumove soli jedinjenja, na primer, iz netoksičnih organskih ili neorganskih kiselina. Na primer, te konvencionalne netoksične soli uključuju one koji su izvedene iz neorganskih kiselina kao što su hidrohloridna, hidrobromidna, sumporna, sulfaminska, fosforna, azotna, i slično; i soli dobijene iz organskih kiselina kao što je sirćetna, propionska, ćilibarna, glikolna, stearinska, mlečna, jabučna, vinska, limunska, askorbinska, palmitinska kiselina, maleinska, hidroksimaleinska, fenilsirćetna, glutaminska, benzoeva, salicilna, sulfanilna, 2-acetoksibenzoeva kiselina, fumarna kiselina, toluensulfonska kiselina, metansulfonska, etan disulfonska kiselina, oksalna, izotionska kiselina, i njima slične kiseline.
[0125] U drugim slučajevima, jedinjenja iz datog pronalaska mogu da sadrže jednu ili više kiselih funkcionalnih grupa i, stoga, su sposobne za formiranje farmaceutski-prihvatljivih soli sa farmaceutskiprihvatljivim bazama. Izraz "farmaceutski-prihvatljive soli" u ovim slučajevima odnosi se na relativno netoksične, neorganske i organske bazne adicione soli jedinjenja iz datog pronalaska. Ove soli se takodje mogu pripremiti in situ u vehikulumu za primenu/davanje ili procesu proizvodnje doznog oblika, ili odvojenom reakcijom prečišćenog jedinjenja u njegovom kiselinskom obliku sa odgovarajućom bazom, kao što je hidroksid, karbonat ili bikarbonat farmaceutski-prihvatljivom metalnom katjonu, sa amonijakom, ili farmaceutski-prihvatljivom organskom primarnom, sekundarnom ili tercijalnom aminu.
2
Reprezentativne soli alkalnih ili zemnoalkalnih metala obuhvataju litijumove, natrijumove, kalijumove, kalcijumove, magnezijumove, i aluminijumove soli i slično. Reprezentativni organski amini korisni su za formiranje baznih adicionih soli koji sadrže etilamin, dietilamin, etilendiamin, etanolamin, dietanolamin, piperazin i slično. (Videti, na primer, Berge et al., gore).
[0126] Ovlaživači (sredstva za kvašenje), emulgatori i lubrikanti, poput natrijum lauril sulfata i magnezijum stearata, kao i boje, sredstva za otpuštanje, sredstva za presvlačenje, sredstva za zasladivanje, aromati isredstva za parfimiranje, konzervansi i antioksidansi takodje mogu biri prisutni u kompozicijama.
[0127] Primeri za farmaceutski-prihvatljive antioksidanse uključuju: (1) antioksidanse koji su rastvorljivi u vodi, kao što su askorbinska kiselina, cistein hidrohlorid, natrijum bisulfat, natrijum metabisulfit, natrijum sulfit i slično; (2) antioksidansi koji su rastvorljivi u ulju, kao što su askorbil palmitat, butilirani hidroksianizol (BHA), butilirani hidroksitoluen (BHT), lecitin, propil galat, alfatokoferol, i slično; i (3) helatni agensi za metal, kao što je limunska kiselina, etilendiamin tetrasirćetna kiselina (EDTA), sorbitol, vinska kiselina, fosforna kiselina, i slično.
[0128] Formulacije prikazanog pronalaska uključuju one pogodne za oralnu, nazalnu, topičnu (uključujući bukalnu i sublingvalnu), rektalnu, vaginalnu i/ili parenteralnu primenu. Pogodno je da formulacije budu predstavljene pojedinačnim doziranim formama i mogu biti pripremljene bilo kojim metodama dobro poznatim u oblasti farmaceutske nauke. Količina aktivnog sastojka koja se može kombinovati sa materijalom nosačem da bi se proizveo jedinični dozni oblik, varirače u zavisnosti od tretmana domaćina, posebnog načina primene (administriranja). Količina aktivnog sastojka koja se može kombinovati sa materijalom nosačem da bi se proizvela pojedinačna dozirana forma će uopšteno biti ona količina jedinjenja koja proizvodi terapijski efekat. Generalno, od sto posto, ova količina će biti u opsegu od oko 0.1 procenta do oko devedeset i devet procenata aktivnog sastojka, poželjno od oko 5 procenta do oko 70 procenta, najpoželjnije od oko 10 procenta do oko 30 procenata.
[0129] U odredjenim izvodjenjima, formulacija iz datog pronalaska obuhvata ekscipijens koji je odabran iz grupe koju čine ciklodekstrini, celuloze, lipozomi, agensi za formiranje micela, na primer, žučne kiseline, i polimerni nosači, na primer, poliestri i polianhidridi; i jedinjenja iz datog pronalaska. U odredjenim izvodjenjima, pomenuta formulacija čini jedinjenje iz ovog pronalaska biološki dostupnim u oralnom obliku.
[0130] Postupci pripreme ovih formulacija ili kompozicija uključuju korak povezivanja jedinjenja iz prikazanog pronalaska sa nosačem i, opciono, jednim ili više pomoćnih sastojaka. Uopšteno, formulacije su pripremljene ravnomernim i čvrstim povezivanjem jedinjenja iz prikazanog pronalaska sa tečnim
2
nosačima, ili fino usitnjenim čvrstim nosačima, ili oba, i zatim, ako je neophodno, oblikovanjem proizvoda.
[0131] Formulacije pronalaska pogodne za oralnu primenu mogu biti u obliku kapsula, skrobnih kapsula, pilula, tableta, pastila (korišćenjem baza sa ukusom, obično saharoze i akacije ili tragakanta), praškova, granula, ili kao rastvor ili suspenzija u vodenoj ili ne-vodenoj tečnosti, ili kao tečna emulzija ulje-u-vodi ili voda-u-ulju, ili kao eliksir ili sirup, ili kao pastile (korišćenjem inertne baze, kao što je želatin i glicerin, ili saharoza i akacija) i/ili kao tečnost za ispiranje usta i slično, pri čemu svaka sadrži unapred odredjenu količinu jedinjenja prikazanog pronalaska kao aktivni sastojak. Jedinjenje prikazanog pronalaska može takodje da se primeni kao bolus pilula, gusti sirup ili pasta.
[0132] Formulacija čvrste disprezije obuhvata, ma primer, amorfnu disperziju jedinjenja iz pronalaska, ekscipijens (kopolimeri, kao što je polivinil pirolidinon (PVP) VA64 (Kollidon® VA64 ili Copovidone), i slično). Čvrsta disperzija se može dalje poboljšati sa malim viskozitetom hidroksil propil metil celuloza (HPMCs) (kao što je Pharmacoat 603, Methocel E3, ili slično). Videti primer 41, niže, za konkretnije detalje za pripremu formulacije čvrste disperzije iz pronalaska.
[0133] Farmaceutska kompozicija sadrži amorfnu disperziju (R)-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1H-pirazol-5-il)nikotinamida (Primer 9) i 1 do 2 ekscipijensa; gde je ekscipijens odabran od HPMC AS, Pharmacoat 603, Eudragit L100, PVP K30, PVP VA64 i Eudragit EPO.
[0134] U izvodjenju, ekscipijensi su PVP VA64 i Pharmacoat 603.
[0135] U daljem izvodjenju, procenat Pharmacoat 603 je u opsegu od 30% do 45%, procenat PVP VA64 je u opsegu od 30% do 45% i procenat (R)-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1H-pirazol-5-il)nikotinamida (Primer 9) je u opsegu od 20% do 30%.
[0136] U daljem izvodjenju, procenat Pharmacoat 603 je 37.5%, procenat PVP VA64 is 37.5% i procenat (R)-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1H-pirazol-5-il)nikotinamida (Primer 9) je 25%.
[0137] U čvrstim oblicima doza pronalaska za oralnu administraciju (kapsule, tablete, pilule, dražeje, praškovi, granule i slično), aktivni sastojak je pomešan sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih nosača, kao što je natrijum citrat ili dikalcijum fosfat, i/ili sa bilo čime od sledećeg: (1) puniocima ili ekstenderima, kao što je skrob, laktoza, saharoza, glukoza, manitol, i/ili silicijumska kiselina; (2) vezujućim sredstvima, kao, na primer, karboksimetil celuloza, alginati, želatin, polivinil pirolidon, saharoza i/ili gumarabika (guma akacije); (3) ovlaživačima, kao što je glicerol; (4) dezintegrišućim agensima, kao što je agar-agar, kalcijum karboksilat, krompirov ili tapioka skrob, alginska kiselina, odredjeni silikati, i natrijum karbonat; (5) agensima za odlaganje rastvaranja, kao što je parafin; (6)
2
agensima koji ubrzavaju apsorpciju, kao što su kvaternerna jedinjenja amonijaka i surfaktanti, kao što su poloksameri i natrijum lauril sulfat; (7) agensima kvašenja, kao, na primer, cetil alkohol, glicerol monostearat i nejonski surfaktanti; (8) apsorbensima, kao što je kaolin i bentonit glina; (9) lubrikantima, kao talk, kalcijum stearat, magnezijum stearat, čvrsti polietilen glikoli, natrijum lauril sulfat, cink stearat, natrijum stearat, stearinska kiselina i njihove mešavine; (10) agensima koji su dali boju i (11) agensi za kontrolisano oslobadjanje kao što je krospovidon ili etil celuloza. U slučaju kapsula, tableta i pilula, farmaceutske kompozicije mogu takođe da sadrže pufere. Čvrste kompozicije sličnog tipa mogu takodje biti korišćene kao punioci u meko i tvrdo-punjenim želatinskim kapsulama korišćenjem takvih ekscipijenasa kao što je laktoza ili mlečni šećeri, kao i polietilen glikoli velike molekulske težine i slično.
[0138] Tableta može biti napravljena sabijanjem ili oblikovanjem, po potrebi sa jednim ili više dodatnih sastojaka. Komprimovane tablete mogu biti pripremljene korišćenjem agenasa za povezivanje (na primer, želatin ili hidroksipropilmetil celuloza), lubrikanata, inertnih rastvarača, konzervansa, dezintegranata (na primer, natrijum skrob glikolat ili unakrsno vezane natrijum karboksimetil celuloze), površinski aktivnog ili disperzivnog agensa. Oblikovane tablete mogu biti napravljene kalupljenjem u odgovarajućoj mašini mešavine sprašenog jedinjenja nakvašenog inertnim tečnim rastvaračem.
[0139] Tablete, i drugi čvrsti dozni oblici farmaceutskih kompozicija prikazanog pronalaska, kao što su dražeje, kapsule, pilule i granule, mogu se opciono pripremiti sa oblažućim slojevima i omotačima, kao što su enterični omotači i drugi omotači dobro poznati u oblasti farmaceutske formulacije. Takodje mogu biti formulisane tako da omoguće sporo ili kontrolisano oslobadjanje aktivnog sastojka korišćenjem, na primer, hidroksipropilmetil celuloze u različitim proporcijama da se dobije željeni profil oslobadjanja, drugih polimernih matrica, lipozoma i/ili mikrosfera. Mogu biti formulisane za brzo oslobadjanje, na primer, za sušenje na temperaturi ispod 0<o>C. One mogu biti sterilisane, na primer, filtracijom kroz filter koji zadržava bakterije, ili sjedinjavanjem sterilinih sastojaka u obliku sterilnih čvrstih kompozicija koje se mogu rastvoriti u sterilnoj vodi, ili nekom drugom sterilnom injektabilnom medijumu neposredno pre upotrebe. Ove kompozicije mogu takodje opciono da sadrže agense za opacifikaciju i mogu biti takvog sastava da oslobadjaju aktivni sastojak(e) isključivo, ili preferencijalno, u odredjenim delovima gastrointestinalnog trakta, po potrebi, na odloženi način. Primeri ustanovljenih kompozicija koje se mogu koristiti uključuju polimerne supstance i voskove. Aktivni sastojak može takodje biti u mikro-enkapsuliranom obliku, ako je odgovarajuće, sa jednim ili više gore opisanih ekscipijenasa.
[0140] Tečne dozni oblici za oralnu primenu jedinjenja iz pronalaska uključuju farmaceutski prihvatljive emulzije, mikroemulzije, rastvore, suspenzije, sirupe i eliksire. Kao dodatak aktivnom sastojku, tečne dozne forme mogu da sadrže inertne rastvarače uobičajeno korišćene u stanju tehnike, kao što su, na primer, voda ili drugi rastvarači, solubilizirajući agensi i emulzifikatori, kao što je etil alkohol, izopropil
2
alkohol, etil karboksilat, etil acetat, benzil alkohol, benzil benzoat, propilen glikol, 1,3-butilen glikol, ulja (konkretno, pamukovo, kikiriki, kukuruzno, klica, maslinovo, ricinusovo i susamovo ulje), glicerol, tetrahidrofuril alkohol, polietilen glikoli i estri masnih kiselina i sorbitana, i njihove mešavine.
[0141] Pored inertnih rastvarača, kompozicije za oralnu upotrebu mogu takodje da uključuju adjuvanse kao što su agensi za kvašenje, agensi za emulgovanje, agensi za suspendovanje, zasladjivači, agensi koji su dali ukus, agensi za bojenje, agensi koji su dali miris i konzervansi.
[0142] Suspenzije, kao dodatak aktivnim jedinjenjima, mogu da sadrže agense za suspendovanje kao, na primer, etoksilovani izostearil alkoholi, polioksietilen sorbitol i estri sorbitana, mikrokristalna celuloza, aluminijum metahidroksid, bentonit, agar-agar i tragakant, i njihove mešavine.
[0143] Formulacije farmaceutskih kompozicija iz pronalaska za rektalnu ili vaginalnu primenu mogu biti prisutne kao supozitorije, koja može biti pripremljena mešanjem jednog ili više jedinjenja pronalaska sa jednim ili više odgovarajućih neiritirajućih ekscipijenasa ili nosača koje čine, na primer, kakao buter, polietilen glikol, vosak za supozitorije ili salicilat, i koji je čvrst na sobnoj temperaturi, a tečan na temperaturi tela pa će se, stoga, otopiti u rektumu ili vagini i osloboditi aktivno jedinjenje.
[0144] Formulacije iz datog pronalaska koje su pogodne za vaginalnu primenu takodje uključuju vagitorije, tampone, kreme, gelove, paste, pene ili formulacije u spreju koje sadrže takve nosače za koje se u stanju tehnike zna da su odgovarajući.
[0145] Dozirane forme za topičku ili transdermalnu primenu jedinjenja ovog pronalaska uključuju praškove, sprejeve, masti, paste, kreme, losione, gelove, rastvore, pečeve i inhalante. Aktivno jedinjenje može biti mešano pod sterilnim uslovima sa farmaceutski prihvatljivim nosačem, i sa bilo kojim konzervansima, puferima, ili potisnim gasovima koji mogu biti potrebni.
[0146] Masti, paste, kreme i gelovi mogu sadržati, kao dodatak aktivnom jedinjenju ovog pronalaska, ekscipiense, kao što su životinjske i biljne masti, ulja, voskovi, parafini, skrob, tragakant, derivati celuloze, polietilen glikoli, silikoni, bentoniti, silicijumska kiselina, talk i cink oksid, ili njihove smeše.
[0147] Praškovi i sprejevi mogu da sadrže, pored jedinjenja ovog pronalaska, ekscipijense kao što je laktoza, talk, silicijumska kiselina, aluminijum hidroksid, kalcijum silikati i poliamid prah, ili mešavine ovih supstanci. Sprejevi mogu dodatno da sadrže uobičajene potisne gasove, kao što su hlorofluorougljovodonici i isparljive nesupstituisane ugljovodonike, kao što su butan i propan.
[0148] Transdermalni flasteri imaju dodatnu prednost jer omogućavaju kontrolisanu isporuku jedinjenja prikazanog pronalaska u organizam. Takve dozne forme se mogu napraviti rastvaranjem ili dispergovanjem jedinjenja u odgovarajućem medijumu. Pojačivači apsorpcije se takodje mogu koristiti da povećaju kretanje jedinjenja kroz kožu. Brzina tog kretanja se može kontrolisati ili korišćenjem membrane koja kontroliše brzinu ili dispergovanjem aktivnog jedinjenja u polimernom matriksu ili gelu.
[0149] Oftalmične formulacije, masti za oči, praškovi, rastvori i slično, su takodje razmatrani budući da spadaju u opseg ovog pronalaska.
[0150] Farmaceutske kompozicije iz ovog pronalaska pogodne za parenteralnu primenu sadrže jedno ili više jedinjenja iz pronalaska u kombinaciji sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih sterilnih izotoničnih vodenih ili nevodenih rastvora, disperzija, suspenzija ili emulzija, ili su to sterilni praškovi koji mogu biti rekonstituisani u sterilnim injektabilnim rastvorima ili disperzijama neposredno pre upotrebe, koji mogu da sadrže antioksidanse, pufere, bakteriostatike, rastvorene supstance koje čine formulaciju izotoničnom sa krvlju primaoca ili agense za suspendovanje ili agense za zgušnjavanje.
[0151] Primeri odgovarajućih vodenih i nevodenih nosača koji mogu biti upotrebljeni u farmaceutskim kompozicijama pronalaska uključuju vodu, etanol, poliole (kao što je glicerol, propilen glikol, polietilen glikol, i slično), i njihove odgovarajuće mešavine, biljna ulja, kao što je maslinovo ulje, i injektabilni organski estri, kao što je etil oleat. Odgovarajuća fluidnost se može održati, na primer, upotrebom materijala za oblaganje, kao što je lecitin, održavanjem potrebne veličine čestica u slučaju disperzija, i upotrebom surfaktanata.
[0152] Ove kompozicije mogu takodje da sadrže adjuvanse kao što su konzervansi, agensi za kvašenje, agensi za emulgovanje i agensi za dispergovanje. Prevencija delovanja mikroorganizama može biti obezbedjena uključivanjem različitih antibakterijskih i fungicidnih agenasa, na primer, parabena, hlorobutanola, fenol sorbinske kiseline, i slično. Takodje može biti poželjno da se uključuju izotonični agensi, kao što su šećeri, natrijum hlorid, i slično u kompozicije. Uz to, produžena apsorpcija injektabilnih farmaceutskih formi može biti dobijena uključivanjem agenasa koji odlažu apsorpciju kao što je aluminijum monostearat i želatin.
[0153] U nekim slučajevima, u cilju produžavanja dejstva leka, poželjno je usporiti apsorpciju leka iz subkutane ili intramuskularne injekcije. Ovo može biti postignuto upotrebom tečne suspenzije kristalnog ili amorfnog materijala koji ima slabu rastvorljivost u vodi. Brzina apsorpcije leka tada zavisi od brzine njegovog razlaganja koja, za uzvrat, može da zavisi od veličine kristala i kristalne forme. Alternativno, odložena apsorpcija parenteralno primenjene forme leka se postiže rastvaranjem ili suspendovanjem leka u uljanom nosaču.
[0154] Injektabilne depo forme su napravljene formiranjem mikroenkapsulirane matrice jedinjenja koje je u pitanju u biorazgradljivim polimerima kao što je polilaktid-poliglikolid. Zavisno od odnosa leka i polimera, i prirode konkretnog polimera koji se koristi, brzina oslobadjanja leka se može kontrolisati. Primeri drugih biodegradabilnih polimera uključuju poli(ortoestre) i poli(anhidride). Depo injektabilne formulacije su takodje pripremljene zatvaranjem leka u lipozome ili u vidu mikroemulzija koje su kompatibilne sa tkivom organizma.
1
[0155] Kada se jedinjenja iz datog pronalaska primenjuju kao farmaceutski preparati, na ljude i životinje, ona se mogu davati per se ili kao farmaceutska kompozicija koja sadrži, na primer, 0.1 do 99% (još poželjnije, od 10 do 30%) aktivnog sastojka u kombinaciji sa farmaceutski prihvatljivim nosačem.
[0156] Preparati iz datog pronalaska mogu da se daju oralnim putem, parenteralno, topikalno, ili rektalno. Oni se naravno daju u oblicima koji su pogodni za svaki način primene. Na primer, oni se primenjuju u obliku tableta ili kapsula, injektiranjem, inhalacijom, u obliku losiona za oči, masti, supozitorija, itd. davanje putem injekcija, infuzija ili inhalacijom; topikalno pomoću losiona ili masti; i rektalno stavljanjem supozitorija. Poželjne su oralne primene.
[0157] Izrazi “parenteralna primena” i “davanje parenteralno” kako se ovde koristi označavaju načine primene koji nisu enteralna i topičku primenu, obično injektiranjem, i uključuju, bez ograničenja, intravensku, intramuskularnu, intraarterijalnu, intratekalnu, intrakapsularnu, intraorbitalnu, intrakardijačnu, intradermalnu, intraperitonealnu, transtrahealnu, subkutanu, subkutikularnu, intraartikularnu, subkapsularnu, subarahnoidalnu, intraspinalnu i intrasternalnu injekciju i infuziju.
[0158] Izrazi “sistemska primena,” “primenjeno sistemski,” “periferna primena” i “primenjeno periferno” kako se ovde koristi označavaju primenu jedinjenja, leka ili drugog materijala koja nije direktno u centralni nervni sistem, tako da ulazi u pacijentov sistem, i stoga je predmet metabolizma i drugih sličnih procesa, na primer, subkutanom primenom.
[0159] Ova jedinjenja mogu biti primenjena kod ljudi i životinja za terapiju bilo kojim odgovarajućim načinom primene, uključujući oralni, nazalni, kao, na primer, sprej, rektalni, intravaginalni, parenteralni, intracisternalni i topički, kao praškovi, masti ili kapi, uključujući bukalni i sublingvalni.
[0160] Bez obzira na to koji je put primene izabran, jedinjenja iz prikazanog pronalaska, koja mogu biti korišćena u odgovarajućoj hidratisanoj formi, i/ili farmaceutske kompozicije prikazanog pronalaska, su formulisane u farmaceutski prihvatljivim doznim oblicima konvencionalnim metodama poznatim onima koji su upućeni u stanje tehnike.
[0161] Konkretni nivoi doza aktivnih sastojaka u farmaceutskoj kompoziciji ovog pronalaska mogu biti varirani tako da se dobije količina aktivnog sastojka koja je efektivna u postizanju željenog terapeutskog odgovora za odredjenog pacijenta, kompoziciju, i načina primene, bez ispoljavanja toksičnosti po pacijenta.
[0162] Izabrani dozirani nivo će zavisiti od različitih faktora uključujući aktivnost odredjenog jedinjenja prikazanog pronalaska koje je u pitanju, ili njegovog estra, soli ili amida, puta primene, vremena primene, brzine ekskrecije odredjenog jedinjenja koje je u pitanju, dužine trajanja tretmana, drugih lekova, jedinjenja i/ili materijala korišćenih u kombinaciji sa odredjenim jedinjenjem koje je u pitanju,
2
godina, pola, težine, stanja, opšteg zdravlja i prethodne medicinske istorije pacijenta koji se leči, i sličnih faktora poznatih u medicinskoj nauci.
[0163] Lekar ili veterinar koji ima uobičajeno iskustvo u ovoj oblasti može lako da odredi i propiše efektivnu količinu farmaceutske kompozicije koja je potrebna. Na primer, lekar ili veterinar mogu da počnu sa dozama jedinjenja pronalaska koje je u pitanju u farmaceutskoj kompoziciji na nivoima nižim od onih potrebnih u cilju postizanja željenog terapeutskog efekta i postepeno povećavaju doziranje dok željeni efekat ne bude postignut.
[0164] Uopšteno, odgovarajuća dnevna doza jedinjenja pronalaska će biti ona količina jedinjenja koja predstavlja najmanju dozu koja je efekasna u postizanju terapijskog efekta. Takva efikasna doza će uglavnom zavisiti od gore opisanih faktora. Uopšteno, intravenske, intercerebralnoventrikularne i subkutane doze jedinjenja iz ovog pronalaska za pacijenta, kada se koristi za indikovane analgezijske efekte, će varirati od oko 0.0001 do oko 100 mg po kilogramu telesne težine dnevno.
[0165] Ako je poželjno, efektivna dnevna doza aktivnog jedinjenja može biti primenjena kao dve, tri, četiri, pet, šest ili više pod-doza primenjenih odvojeno u odgovarajućim intervalima tokom dana, opciono, u obliku doziranih jedinica.
[0166] In vivo PK parametri mogu se koristiti za procenu humanih PK parametara. Primenjujući razne postupke koji su poznati u stanju tehnike za predvidjanje ljudskog PK, procenjuje se predvidjeni humani klirens. Na primer, procenjeno je da je (R)-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1H-pirazol-5-il)nikotinamid (Primer 9) 3 mL/min/kg i procenjeno je da količina raspodele iznosi 1 L/kg. Predvidjena efikasna dnevna doza iz Primera 9 za ljude, iznosi izmedju 90 i 130 mg/day.
[0167] Iako je moguće da se jedinjenje iz prikazanog pronalaska daje pojedinačno, poželjno je da se jedinjenje primenjuje kao farmaceutska formulacija (kompozicija).
[0168] Jedinjenja prema pronalasku mogu biti formulisana za primenu na bilo koji pogodan način za upotrebu u humanoj ili veterinarskoj medicini, po analogiji sa drugim farmaceutskim proizvodima.
[0169] U narednom aspektu, datim pronalaskom obezbedjene su farmaceutski prihvatljive kompozicije koje obuhvataju terapijski-efikasnu količinu jednog ili više predmetnih jedinjenja, kako je opisano ranije u tekstu, koje su formulisane zajedno sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih nosača (aditivi) i/ili diluenti. Kao što je detaljnije opisano u nastavku, farmaceutske kompozicije iz datog pronalaska mogu biti posebno formulisane za primenu u čvrstom ili tečnom obliku, uključujući one koji su prilagodjene za sledeće: (1) oralna primena, na primer, natapanjem (vodeni ili nevodeni rastvori ili suspenzije), tablete, bolusi, prahovi, granule, paste za nanošenje na jezik; (2) parenteralna primena, na primer, subkutana, intramuskularna ili intravenusna injekcija kao što je, na primer, sterilni rastvor ili suspenzija; (3) topična primena, na primer, u vidu kreme, masti ili spreja koji se primenjuje na kožu, pluća, ili mukozne membrane; ili (4) intravaginalno ili intrarektalno, na primer, kao vaginaleta, krem ili pena; (5) sublingvalno ili bukalno; (6) okularno; (7) transdermalno; ili (8) nazalno.
[0170 ] Izraz "lečenje" ima za cilj da obuhvati i profilaksu, terapiju i lek.
[0171] Pacijent koji prima ovaj tretman je bilo koja životinja koja ima potrebu za istim, uključujući primate, naročito ljude, i ostale sisare kao što su konji, stoka, svinja i ovca; i živinu i kućne ljubimce uopšte.
[0172] Tehnologija mikroemulsifikacije može poboljšati bioraspoloživost nekih lipofilnih (u vodi nerastvornih) farmaceutskih agenasa. Primeri uključuju Trimetrin (Dordunoo, S. K., et al., Drug Development and Industrial Pharmacy, 17(12), 1685-1713, 1991 i REV 5901 (Sheen, P. C., et al., J Pharm Sci 80(7), 712-714, 1991). Izmedju ostalog, mikroemulsifikacija obezbedjuje povećanu bioraspoloživost pre svega usmeravajući apsorpciju u limfni sistem umesto u cirkulatorni sistem, tako što obilazi jetru, i sprečava uništavanje jedinjenja u hepatobilijarnoj cirkulaciji.
[0173] Dok se razmatraju svi pogodni amfifilični nosači, trenutno poželjni nosači su oni koji imaju GRAS (Generalno-priznati-kao-bezbedni) status, i koji mogu istovremeno solubilizovati jedinjenja iz ovog pronalaska i pretvarati ih u mikroemulziju u kasnijoj fazi kada rastvor dolazi u kontakt sa kompleksom vodene faze (kao što je onaj pronadjen u ljudskom gastrointestinalnom traktu). Amfifilični sastojci koji zadovoljavaju ove zahteve obično imaju HLB (od hidrofilnog do lipofilnog balansa) vrednosti od 2-20, i njihove strukture sadrže ravnočlani lanac alifatičnih radikala u opsegu od C-6 do C-20. Primeri su polietilen-glikolizovane masni gliceridi i polietilen glikoli.
[0174] Posebno su razmatrani komercijalno dostupni amfifilični nosači, uključujući Gelucire-serije, Labrafil, Labrasol, ili Lauroglikol (svi su proizvedeni i distribuirani od strane Gattefosse Corporation, Saint Priest, France), PEG-mono-oleat, PEG-di-oleat, PEG-mono-laurat i di-laurat, Lecitin, Polisorbat 80, itd. (proizvedeni i distribuirani od strane brojnih kompanija u Sjedinjenim Američkim državama i širom sveta).
[0175] Hidrofilni polimeri pogodni za upotrebu u datom pronalasku su oni koji su lako rastvorljivi u vodi, koji mogu biti vezani kovalentnom vezom za lipid koji formira vezikule, i koji se tolerišu (podnose) in vivo bez toksičnih efekata (tj., koji su biokompatiblni). Pogodni polimeri obuhvataju polietilen glikol (PEG), poliaktičnu kis. (takodje se naziva polilaktid), poliglikolnu kiselinu (takodje se naziva poliglikolid), kopolimer koji čine polilaktična kiselina-poliglikolna kiselina, i polivinil alkohol. Poželjni polimeri su oni koji imaju molekulsku težinu od oko 100 ili 120 daltona do oko 5,000 ili 10,000 daltona, i još poželjnije od oko 300 daltona do oko 5,000 daltona. U posebno poželjnom izvodjenju, polimer je polietilenglikol sa molekulskom težinom od oko 100 do oko 5,000 daltona, i još poželjnije sa molekulskom težinom od oko 300 do oko 5,000 daltona.U posebno poželjnom izvodjenju, polimer je polietileneglikol od 750 daltona (PEG(750)). Polimeri takodje mogu biti definisani brojem monomera
4
u njima; u poželjnom izvodjenju datog pronalaska koriste se polimeri od najmanje tri monomera, kao što su PEG polimeri koji se sastoje od tri monomera (približno 150 daltona).
[0176] Ostali hidrofilni polimeri koji mogu biti pogodni za upotrebu u predmetnom pronalasku uključuju polivinilpirolidon, polimetoksazolin, polietiloksazolin, polihidroksipropil metakrilamid, polimetakrilamid, polidimetilakrilamid, i derivatizovane celuloze kao što su hidroksimetilceluloza ili hidroksietilceluloza.
[0177] Formulacija sadrži biokompatibilni polimer odabran iz grupe koju čine poliamidi, polikarbonati, polialkileni, estri akrilnih i metakrilnih polimera, polivinil polimeri, poliglikolidi, polisiloksani, poliuretani i ko-polimeri, celuloze, polipropilen, polietileni, polistiren, polimeri mlečne i glikolne kiseline, polianhidridi, poli(orto)estri, poli(buterna kiselina), poli(valerijanska kiselina), poli(laktid-kokaprolakton), polisaharidi, proteini, polihijaluronske kiseline, policijanoakrilati, i mešavine, smeše, ili njihovi kopolimeri.
[0178] Ciklodekstrini predstavljaju ciklične oligosaharide, koji se sastoje od 6, 7 ili 8 jedinica glukoze, označenih slovima iz Grčkog pisma alfa, beta ili gama, tim redosledom. Nije poznato da postoje ciklodekstrini sa manje od šest jedinica glukoze. Jedinice glukoze povezane su alfa-1,4-glukozidnim vezama. Kao posledica postojanja konformacije stolice za šećerne jedinice, sve sekundarne hidroksilne grupe (na C-2, C-3) nalaze se na jednoj strani prstena, dok su sve primarne hidroksilne grupe na C-6 nalaze sa druge strane. Kao rezultat, spoljašni delovi su hidrofilni, čineći ciklodekstrine rastvorljivima u vodi. Nasuprot tome, šupljine ciklodekstrina su hidrofobne, s obzirom da su obložene atomima vodonika od C-3 i C-5, i kiseonicima poput etra. Ove matrice dozvoljavaju kompleksaciju sa različitim relativno hidrofobnih jedinjenja, uključujući, na primer, steroidna jedinjenja kao što je 17-beta-estradiol (videti, na primer., van Uden et al. Plant Cell Tiss. Org. Cult. 38:1-3-113 (1994)). Kompleksacija se odvija putem Van der Waalsovih interakcija i formiranjem. Za opšti pregled hemije ciklodekstrina, videti, Wenz, Agnew. Chem. Int. Ed. Engl., 33:803-822 (1994).
[0179] Fizičko-hemijska svojstva derivata ciklodekstrina snažno zavisi od vrste i stepena supstitucije. Na primer, njihova stabilnost u vodi kreće se od nerastvornog (na primer, triacetil-beta-ciklodekstrin) do rastvorljivosti od 147% (w/v) (G-2-beta-ciklodekstrin). Osim toga, oni su rastvorljivi u mnogim organskim rastvaračima. Osobine ciklodekstrina omogućavaju kontrolu rastvorljivosti različitih formulacija komponenata smanjenjem ili povećanjem njegove rastvroljivosti.
[0180] Opisani su brojni ciklodekstrini i postupci za njihovo dobijanje. Na primer, Parmeter (I), i dr. (U.S. Pat. No. 3,453,259) i Gramera, i dr. (U.S. Pat. No. 3,459,731) su opisali elektroneutralne ciklodekstrine. Drugi derivati uključuju ciklodekstrine sa katjonskim svojstvima [Parmeter (II), U.S. Pat. No.3,453,257], nerastvorne ciklodekstrine sa ukrštenim/ unakrsnim vezama (Solms, U.S. Pat. No.
3,420,788), i ciklodekstrine sa anjonskim svojstvima [Parmeter (III), U.S. Pat. No.3,426,011]. Medju derivatima ciklodekstrina sa anjonskim svojstvima, matičnom ciklodekstrinu su dodate karboksilne kiseline, fosforaste kiseline, fosfinaste kiseline, fosfonske kiseline, fosforne kiseline, tiofosfosfonske kiseline, tiosulfinske kiseline, i sulfonske kiseline [videti, Parmeter (III), gore]. Osim toga, ciklodekstrinski derivati sulfoalkil etra su opisani od strane Stella, et al. (U.S. Pat. No.5,134,127).
[0181] Lipozomi se sastoje od najmanje jedne lipidne dvoslojne membrane koja zatvara vodeni unutrašnji odeljak. Lipozomi se mogu karakterisati vrstom membrane i veličinom. Male unilamelarne vezikule (SUVs) imaju jednu membranu i obično se kreću u opsegu izmedju 0.02 i 0.05 μm u prečniku; velike unilamelarne vezikule (LUVS) obično su veće od 0.05 μm. Oligolamelarne velike vezikule i multilamelarne vezikule imaju višestruke, obično koncentrične, slojeve membrana i obično su veće od 0.1 μm. Lipozomi sa nekoliko nekoncentričnih membrana, tj., nekoliko manjih vezikula koje se nalaze unutar veće vezikule, nazivaju se multivezikularnim vezikulama.
[0182] Jedan otkriće ovog pronalaska odnosi se na formulacije koje sadrže lipozome koje sadrži jedinjenje iz datog pronalaska, gde je lipozomska membrana tako formulisana da obezbedjuje lipozom sa povećanim nosećim kapacitetom. Alternativno ili pored toga, jedinjenje iz datog pronalaska može biti sadržano unutar, ili može biti adsorbovano unutar lipozomskog dvosloja lipozoma. Jedinjenja iz datog pronalaska mogu da se združe sa lipidnim surfaktantom i nose unutar unutrašenjeg prostora lipozoma; u ovim slučajevima, lipozomska membrana je otporna na disruptivne efekte agregata aktivnog sredstva i surfaktanta.
[0183] Lipidni dvosloj lipozoma sadrži lipide derivatizovane sa polietilen glikolom (PEG), tako da PEG lanci proširuju sa unutrašnje površine lipidnog dvosloja u unutrašnji prostor koji je enkapsuliran lipozomom, i koji je proširen sa spoljašnje strane lipidnog dvosloja u okolnu sredinu.
[0184] Aktivni agensi sadržani u lipozomima iz datog pronalaska su u rastvorljivom obliku. Agregati surfaktanta i aktivni agens (kao što su emulzije ili micele koje sadrže aktivni agens od značaja) mogu biti upleteni unutar unutrašnjeg prostora lipozoma prema datom pronalasku. Surfaktant deluje kako bi dispergovao i rastvorio aktivni agens, i može da bude odabran od bilo kojeg od odgovarajućeg alifatičnog, cikloalifatičnog ili aromatičnog surfaktanta, uključujući bez ograničenja na biokompatibilne lizofosfatidilholine (LPCs) različitih dužina lanaca (na primer, od oko C.sup.14 do oko C.sup.20). Polimer-derivatizovani lipidi kao što su PEG-lipidi mogu se takodje koristiti za formiranje micela jer će delovati da inhibiraju fuziju micela/membrana, i kao dodatak polimera u molekule surfaktanta smanjuje CMC surfaktanta i pomaže u formiranju micela. Poželjni su surfaktanti sa CMC koji su mikromolarnom opsegu; više CMC surfaktanata mogu da se koriste za pripremu micela zarobljenih u lipozomima iz datog pronalaska, medjutim, micele monomera surfaktanta mogu uticati na stabilnost lipozomskog dvosloja i mogu biti faktor kod dizajniranja lipozoma željene stabilnosti.
[0185] Lipozomi prema predmetnom pronalasku mogu se pripremiti bilo kojoj od različitih tehnika koje su poznate u stanju tehnike. Videti, na primer, Američki Pat. br.4,235,871; objavljene PCT prijave WO 96/14057; Novi RRC, Lipozomi: Praktični pristup, IRL Press, Oxford (1990), strane 33-104; Lasic DD, Liposomes from physics to applications, Elsevier Science Publishers BV, Amsterdam, 1993.
[0186] Na primer, lipozomi mogu da se dobiju difuzijom lipida koji je derivatizovan sa hidrofilnim polimerom u preoblikovanim lipozomima, kao što je izlaganje preoblikovanih lipozoma na micelama sastavljenim od polimera nakalemljenim na lipide (lipid-grafted polymers), u lipidnim koncentracijama koje odgovaraju finalnom molskom procentu derivatizovanog lipida koji je poželjan u lipozomu. Lipozomi koji sadrže hidrofilni polimer mogu takodje da se formiraju homogenizacijom, hidratacijom lipidnih polja, ili ekstruzionim tehnikama, kao što je poznato u stanju tehnike.
[0187] U jednom otkriću pronalaska, lipozomi se dobijaju da bi imali suštinski homogene veličine u odabranom opsegu veličine. Jedan efikasan postupak odredjivanja veličine obuhvata ekstrudiranje vodene suspenzije lipozoma kroz niz polikarbonatnih membrana koji imaju izabranu jedinstvenu veličina pora; veličina pore membrane grubo odgovara najvećim veličinama lipozoma koji su proizvedeni ekstruzijom kroz tu membranu. Videti, na primer američki Pat. br. 4,737,323 (Apr. 12, 1988).
[0188] Karakteristike oslobadjanja formulacije zavise od materijala za inkapsulaciju, koncentracije inkapsuliranog leka, i prisustva sredstava za modifikovanje oslobadjanja leka. Na primer, oslobadjanje može da bude podešeno tako da bude zavisno od pH, na primer, korišćenjem obloge osetljive na pH koja oslobadja lek samo na niskom pH, kao u želucu, ili višem pH, kao u tankom crevu. Enterička obloga može da se koristi za sprečavanje oslobadjanja do posle prolaska kroz želudac. Višestruke obloge ili smeše cijanamida inkapsuliranog u različite materijale može da se koristi za dobijanje početnog oslobadjanja u želucu, praćenog kasnijim oslobadjanjem u tankom crevu. Oslobadjanje može takodje da bude podešeno uključivanjem soli ili sredstava koja obrazuju pore, koja mogu da povećaju preuzimanje vode ili oslobadjanje leka putem difuzije iz kapsule. Pomoćne supstance koje menjaju rastvorljivost leka mogu takodje da se koriste za kontrolisanje brzine oslobadjanja. Sredstva koja poboljšavaju raspadanje matrice ili oslobadjanje iz matrice mogu takodje da budu uključena. Ona mogu da budu dodata leku, dodata kao posebna faza (tj., kao čestice), ili mogu da budu istovremeno rastvorena u fazi polimera u zavisnosti od jedinjenja. U svim slučajevima, količina treba da bude izmedju 0.1 i trideset procenata (tež./tež. polimera). Tipovi sredstava za poboljšanje raspadanja uključuju neorganske soli kao što su amonijum sulfat i amonijum hlorid, organske kiseline kao što su limunska kiselina, benzojeva kiselina i askorbinska kiselina, neorganske baze kao što su natrijum karbonat, kalijum karbonat, kalcijum karbonat, cink karbonat i cink hidroksid i organske baze kao protamin sulfat, spermin, holin, etanolamin, dietanolamin i trietanolamin i površinski aktivne supstance kao Tween® i Pluronic®. Sredstva koja obrazuju pore koja dodaju mikrostrukturu matricama (tj., jedinjenja rastvorljiva u vodi kao što su neorganske soli i šećeri) dodaju se kao čestice. Opseg treba da bude izmedju jednog i trideset procenata (tež./tež. polimera).
[0189] Upotreba takodje može biti prilagodjena izmenom vremena boravka čestica u stomaku. Ovo se ne može postići, na primer, prevlačenjem čestica sa, ili odabirom enkapsuliranog materijala, mukozalnog adhezivnog polimera. Primeri obuhvataju najveći broj polimera sa slobodnim karboksilnim grupama, kao što je hitosan, celuloze, i naročito poliakrilati (u ovom tekstu, poliakrilati se odnose na polimere koji obuhvataju akrilatne grupe i modifikovane akrilatne grupe kao što su cijanoakrilati i metakrilati).
Farmaceutske kombinacije
[0190] Pronalazak se posebno odnosi na jedinjenje formule I (ili farmaceutske kompozicije koja sadrži jedinjenje formule (I)) u lečenju jedne ili više ovde pomenutih bolesti; pri čemu je odgovor na lečenje povoljan kao što je pokazano, na primer, delimičnim ili potpunim uklanjanjem jednog ili više od simptoma bolesti, do potpunog izlečenja ili remisije bolesti.
[0191] Filadelfija hromozom- pozitivna (Ph+) ALL predstavlja 15-30 % ALL kod odraslih i do 5% pedijatrijskih ALL (Faderl S, Garcia-MAnero G, Thomas D, et al. Philadelphia Chromosome Positive Acute Lymphoblastic Leukemia- Current Concepts and Future Perspectives. Rev Clin Exp Hematol 2002;6:142-160). Pedijatrijska Ph+ ALL se karakteriše starijim godištem (prosečno 9-10 godina nasuprot otprilike 4 godine starosti za sve ALL pacijente) i većim brojem WBC ćelija pri dijagnozi. I kod odraslih i kod dece, Ph+ ALL se karakteriše recipročnom translokacijom izmedju hromozoma 9 i 22 (t(9;22)(q34;q11)) dajući fuzionisani BCR gen sa hromozoma 22 sa ABL genskim sekvencama translociranim sa hromozoma 9, što rezultuje ekspresijom BCR-ABL1 proteina. Postoje 2 primarne varijante BCR-ABL1, p190BCR-ABL1, koja se detektuje kod oko 85% Ph+ ALL pacijenata, i p210 BCR-ABL1, tipična za CML, identifikovana kod oko 15% Ph+ ALL pacijenata (Dombret H, Galbert J, Boiron J, et al. Outcome of Treatment in Adults with Philadelphia chromosome-posititve acute lymphoblastic leukemia- Results of the prospective multicenter LALA-94 trial. Blood 2002;100:2357-2366; Faderl S, Garcia-MAnero G, Thomas D, et al. Philadelphia Chromosome Positive Acute Lymphoblastic Leukemia- Current Concepts and Future Perspectives. Rev Clin Exp Hematol 2002;6:142-160).
[0192] Tretman ALL se zasniva na klasifikaciji rizika za svakog pacijenta ponaosob, sa intenzivnijim tretmanom kod pacijenata sa povećanim rizikom od relapse; ova strategija maksimizira stopu remisije i ograničava nepotrebne toksične efekte. Progres je bio postepen, od uvodjenja kombinovane hemioterapije i tretmana za pre-simptomsku leukemiju centralnog nervnog sistema do novijih, intenzivnih režima tretmana za pacijente sa visokim rizikom za relapsu (C. H. Pui i W. E. Evans. Acute Lymphoblastic Leukemia New Engl J Med 1998;339:605-615; ). Pre razvoja imatiniba, Ph+ALL pacijenti su podvrgavani intenzivnoj hemioterapiji praćenoj transplantima hematopojetičkih stem ćelija (HSCT), idealno sa uparenim vezanim donorom, s obzirom da je ovaj pristup imao za rezultat unapredjene EFS nasuprot HSCT sa drugim donorima ili samo hemioterapiju. Generalno, i nasuprot većini pedijatrijskih pacijenata sa ALL, pacijenti sa Ph+ALL imali su lošiju prognozu sa niskom stopom preživljavanja bez pojavljivanja simptoma (EFS) (Arico M, Valsecchi M G, Camitta B, Schrappe M, Chessells J, Baruchel A, Gaynon P, Silverman L, Janka-Schaub G, Kamps W, et al. New Engl J Med 2000;342:998-1006).
[0193] Postojeće terapije (kao što su GLEEVEC<®>, TASIGNA<®>, SPRYCEL<®>, BOSULIF<®>, ICLUSIG<TM>i slične) vezuju se za ATP-vezujuće mesto domena kinaze. Nasuprot tome, jedinjenja iz pronalaska su moćni inhibitori BCR-ABL1, ABL1 i ABL2 koji se vezuju za drugačije mesto na domenu kinaze od ATP-vezujućeg mesta.
[0194] Stoga, jedinjenja iz pronalaska sa njihovim novim, alosteričnim mehanizmom dejstva, mogu se koristit kao samostalna terapija ili pak sekvencijalno ili u kombinaciji sa postojećim terapijama izabranim od sledećih lekova: GLEEVEC<®>, TASIGNA<®>, SPRYCEL<®>, BOSULIF<®>i ICLUSIG<TM>.
[0195] Kao samostalna terapija, jedinjenja iz pronalaska mogu se koristiti za tretman oboljenja i poremećaja povezanih sa BCR-ABL1, ABL1 i ABL2. BCR-ABL1 može biti prirodni ili mutantni BCR-ABL1 izabran od V299L, T315I, F317I/L, Y253F/H, E255K/V i F359C/V. Jedinjenja iz pronalaska mogu se koristiti za tretman pacijenata koji ne reaguju na postojeće terapije kao rezultat mutacija koje se pojavljuju u okviru ATP-vezujućeg mesta. U obliku kombinacione terapije, jedinjenja iz pronalaska predstavljaju jedinstvenu mogućnost za tretman pacijenata sa Ph+ leukemijom kombinacijom dva potentna, mehanistički različita BCR-ABL inhibitora. Kombinovani klinički pristup može obezbediti kod pacijenata značajniju i održiviju redukciju tumora sa smanjenim rizikom od relapse.
[0196] Toplokrvna životinja koja ima leukemiju odabrana je od hronične mijeloidne leukemije (CML) i akutne limfoblastilčne leukemije (ALL) može da bude tretirana što obuhvata sekvencijalno davanje pomenutoj životinji terapijski efikasne količine jedinjenja iz pronalaska ili njegove farmaceutski prihvatljive soli i terapijski efikasne količine jedinjenja koje je odabrano od imatiniba, nilotiniba, dazatiniba, bosutiniba, ponatiniba i bafetiniba.
[0197] Toplokrvna životinja može da bude čovek (pacijent).
[0198] Jedinjenje iz pronalaska može da bude (R)-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1H-pirazol-5-il)nikotinamid (Primer 9) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
[0199] Doza (R)-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1H-pirazol-5-il)nikotinamida (Primer 9) može da bude 90-130 mg.
[0200] Doza nilotinib može da bude od 10-50 mg/kg, Imatinib može da bude 50-200mg/kg, dazatinib može da bude od 5-20 mg/kg ili ponatinib može da bude od 2-10 mg/kg.
[0201] Doza bosutiniba može da bude 500 mg.
[0202] Toplokrvna životinja koja ima leukemiju odabrana je od hronične mijeloidne leukemije (CML) i akutne limfoblastične leukemije (ALL) može da bude tretirana što obuhvata istovremenu primenu pomenutoj terapijski efikasne količine jedinjenja iz pronalaska ili njegove farmaceutski prihvatljive soli i terapijski efikasne količine jedinjenja koje je odabrano od imatiniba, nilotiniba, dazatiniba, bosutiniba, ponatiniba i bafetiniba na životinju.
[0203] Toplokrvna životinja može da bude čovek (pacijent).
[0204] Jedinjenje pronalaska može biti (R)-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1H-pirazol-5-il)nikotinamida (Primer 9) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
[0205] Doza (R)-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1H-pirazol-5-il)nikotinamida (Primer 9) može da bude od 90-130 mg.
[0206] Doza nilotiniba može da bude od 10-50 mg/kg, Imatiniba od 50-200mg/kg, dasatinib od 5-20 mg/kg ili ponatiniba od 2-10 mg/kg.
[0207] Doza bosutiniba može da bude 500 mg.
[0208] Toplokrvne životinje koje imaju leukemiju odabranu od hronične mijeloidne leukemije (CML) i akutne limfoblastične leukemije (ALL) mogu se tretirati što obuhvata simultano davanje životinji terapijski efikasne količine (R)-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1H-pirazol-5-il)nikotinamida (Primer 9) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli i terapijski efikasne količine Nilotinib-a.
[0209] Jedinjenje formule (I) može takodje biti korišćeno u kombinaciji sa drugim antineoplastičnim jedinjenjima. Takva jedinjenja uključuju ali nisu ograničena na, inhibitore ribonukleotid reduktaza; inhibitore topoizomeraze I; inhibitore topoizomeraze II; jedinjenja koja aktiviraju mikrotubule; alkilirajuća jedinjenja; inhibitore histon deacetilaze; inhibitore mTOR, kao što je RAD001; antineoplastične antimetabolite; jedinjenja platine; jedinjenja koja ciljano deluju na smanjenje aktivnosti proteinskih ili lipidnih kinaza, inhibitora metionin aminopeptidaza; modifikatore biološkog odgovora; inhibitore onkogenih izoformi Ras; inhibitore telomeraze; inhibitore proteazoma; jedinjenja koja se koriste u lečenju hematoloških maligniteta, kao što je FLUDARABINE; jedinjenja koja ciljano deluju, smanjuju ili inhibiraju aktivnost PKC, kao što je midostaurin; inhibitore Hsp90 kao što su 17-AAG (17-alilaminogeldanamicin, NSC330507), 17-DMAG (17-dimetilaminoetilamino-17-demetoksi-geldanamicin, NSC707545), IPI-504, CNF1010, CNF2024, CNF1010 od Conforma Therapeutics i AUY922;
4
temozolomid (TEMODAL<®>); inhibitore kinezina koji učestvuje u formiranju deobnog vretena, kao što su SB715992 ili SB743921 od GlaxoSmithKline, ili pentamidin/hlorpromazin od CombinatoRx; inhibitori PI3K, kao što je BEZ235, BKM120 ili BYL719; inhibitore RAF, kao što je RAF265; inhibitore MEK kao što je ARRY142886 od Array PioPharma, AZD6244 od AstraZeneca, PD181461 od Pfizera, leukovorin, EDG vezujuća sredstva, antileukemjska jedinjenja, inhibitore S-adenozilmetionin dekarboksilaze, regulatore apoptoze, antiproliferativna antitela ili druga hemoterapijska jedinjenja. Osim toga, alternativno ili kao dodatak oni mogu biti korišćeni u kombinaciji sa jonizujućim zračenjem. Osim toga, alternativno ili kao dodatak oni mogu biti korišćeni u kombinaciji sa JAK inhibitorima, kao što je ruksolitinib.
[0210] Dalje, alternativno ili kao dodatak mogu da se koriste u kombinaciji sa smoothened inhibitorima, kao što je LDE225.
[0211] Dalje, alternativno ili kao dodatak mogu da se koriste u kombinaciji sa interferonom.
[0212] Pojam “inhibitori ribonukleotid reduktaze” odnosi se na analoge pirimidinskih ili purinskih nukleozida, uključujući, ali ne samo, fludarabin i/ili citozin arabinozide (ara-C), 6-tioguanin, 5-fluorouracil, kladribin, 6-merkaptopurin (naročito u kombinaciji sa ara-C u slučaju lečenja ALL) clofarabin, nelarabin (prolek od 9-β-arabinofuranozilguanina, ara-G), pentostatin, hidroksiureea ili derivati 2-hidroksi-1H-izoindol-1,3-diona, (Nandy i sar., Acta Oncologica, 1994; 33: 953-961.
[0213] Pojam “inhibitor topoizomeraze” kako je ovde korišćen uključuje, ali nije ograničen na topotekan, gimatekan, irinotekan, kamptotekian i njegove analoge, 9-nitrokamptotecin i makromolekularni kamptotecin konjugat PNU-166148 (jedinjenje A1 u objavljenoj prijavi WO99/ 17804). Irinotekan može biti primenjen u obliku u kome se nalazi na tržištu, npr. pod zaštićenim imenom CAMPTOSAR. Topotekan može biti primenjen u obliku u kome se nalazi na tržištu, npr. pod zaštićenim imenom HYCAMTIN.
[0214] U ovom tekstu, pojam “inhibitor topoizomeraze II” uključuje, ali nije ograničen na antracikline kao što su doksorubicin (uključujući lipozomalni oblik, npr. CAELYX), daunorubicin, epirubicin, idarubicin i nemorubicin, antrahinone mitoksantron i losoksantron, i podofilotoksine etoposid i tenipozide. Etoposid može biti primenjen u obliku u kome se nalazi na tržištu, npr. pod zaštićenim imenom ETOPOPHOS. Tenipozid može biti primenjen u obliku u kome se nalazi na tržištu, npr. pod zaštićenim imenom VM 26-BRISTOL. Doksorubicin može biti primenjen u obliku u kome se nalazi na tržištu, npr. pod zaštićenim imenom ADRIBLASTIN ili ADRIAMYCIN. Epirubicin može biti primenjen u obliku u kome se nalazi na tržištu, npr. pod zaštićenim imenom FARMORUBICIN. Idarubicin može biti primenjen u obliku u kome se nalazi na tržištu, npr. pod zaštićenim imenom ZAVEDOS. Mitoksantron može biti primenjen u obliku u kome se nalazi na tržištu, npr. pod zaštićenim imenom NOVANTRON.
[0215] Pojam “aktivno jedinjenje mikrotubula” odnosi se na jedinjenja koja stabilizuju mikrotubule, jedinjenja koja destabilizuju mikrotubule i inhibitore polimerizacije mikrotubulina uključujući, ali ne samo njih, taksane, npr. paklitaksel i doketaksel, vinka alkaloide, npr. vinblastin, naročito vinblastin sulfat, vinkristin naročito vinkristin sulfat, i vinorelbin, diskodermolide, kohicin i epotilone i njihove derivate, npr. epotilon B ili D ili njihovi derivati. Paklitaksel može biti primenjen u obliku u kome se nalazi na tržištu, npr. TAXOL. Doketaksel može biti primenjen u obliku u kome se nalazi na tržištu, npr. pod zaštićenim imenom TAXOTERE. Vinblastin sulfat može biti primenjen u obliku u kome se nalazi na tržištu, npr. pod zaštićenim imenom VINBLASTIN R.P. Vinkristin sulfat može biti primenjen u obliku u kome se nalazi na tržištu, npr. pod zaštićenim imenom FARMISTIN. Diskodermolid može biti dobijen, npr. kako je opisano u Američkom patentu br. US 5,010,099. Takodje su uključeni derivati Epotilona koji su opisani u WO 98/10121, US 6,194,181, WO 98/25929, WO 98/08849, WO 99/43653, WO 98/22461 i WO 00/31247. Naročito poželjni su Epotilon A i/ili B.
[0216] Pojam “alkilirajuće jedinjenje” kako je ovde korišćen uključuje, ali nije ograničen na, ciklofosfamid, ifosfamid, melfalan ili nitrozoureju (BCNU ili Gliadel). Ciklofosfamid može biti primenjen u obliku u kome se nalazi na tržištu, npr. pod zaštićenim imenom CYCLOSTIN. Ifosfamid može biti primenjen u obliku u kome se nalazi na tržištu, npr. pod zaštićenim imenom HOLOXAN.
[0217] Izraz “inhibitori histon deacetilaze” ili “HDAC inhibitori” odnose se na jedinjenja koja inhibiraju histon deacetilazu i koja poseduju antiproliferativno dejstvo. Ovo obuhvata jedinjenja kao što su LDH589 koje je opisano u objavljenoj prijavi WO 02/22577, naročito N-hidroksi-3-[4-[[(2-hidroksietil)[2-(1H-indol-3-il)etil]-amino]metil]fenil]-2E-2-propenamid, N-hidroksi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)-etil]-amino]metil]fenil]-2E-2-propenamid i njihove farmaceutski prihvatljive soli. To dalje posebono uključuje Suberoilanilid hidroksaminsku kiselinu (SAHA).
[0218] Pojam “antineoplastični antimetaboliti” uključuje, ali nije ograničen na, 5-fluorouracil ili 5-FU, kapecitabin, gemcitabin, DNA demetilirajuća jedinjenja, kao što su 5-azacitidin i decitabin, metotreksat i edatreksat, i antagoniste folne kiseline kao što je pemetreksed. Kapecitabin može biti primenjen u obliku u kome se nalazi na tržištu, npr. pod zaštićenim imenom XELODA. Gemcitabin može biti primenjen u obliku u kome se nalazi na tržištu, npr. pod zaštićenim imenom GEMZAR.
[0219] Pojam “jedinjenje platine” kako je ovde korišćen uključuje, ali nije ograničen na, karboplatin, cis-platin, cisplatin i oksaliplatin. Karboplatin može biti primenjen u obliku u kome se nalazi na tržištu, npr. pod zaštićenim imenom CARBOPLAT. Oksaliplatin može biti primenjen u obliku u kome se nalazi na tržištu, npr., pod zaštićenim imenom ELOXATIN.
[0220] U ovom tekstu, izraz "jedinjenja koja targetuju/snižavaju aktivnost proteinske ili lipidne kinaze”; ili “aktivnost proteinske ili lipidne fosfataze”; ili daljih jedinjenja koja imaju anti-angiogenetsko dejstvo”, uključuje ali se ne ograničava na, inhibitore protein tirozin kinaze i/ili inhibitore serinske i/ili treoninske kinase ili pak inhibitore lipidne kinaze, npr. :
a) jedinjenja koja targetuju, smanjuju ili inhibiraju aktivnost članova ABL1 familije, proizvoda njihove genske fuzije (na primer, BCR-ABL1 kinaze) i mutanata, kao što su jedinjenja koja targetuju smanjenje ili inhibiranje aktivnosti članova ABL1 familije i proizvoda njihove genske fuzije, na primer, imatinib, nilotinib, dasatinib, bosutinib, ponatinib, bafetinib, PD180970, AG957, NSC 680410 i PD173955; b) jedinjenja koja targetuju, smanjuju ili inhibiraju aktivnost receptora za protein kinaze C (PKC) i Raf familije serin/treonin kinaza, članova MEK, SRC, JAK, FAK, PDK1, PKB/Akt, i familije članova Ras/MAPK, i/ili članova familije ciklin-zavisnih kinaza (CDK) i posebno predstavljaju one derivate staurosporina opisane u američkom patentu US 5,093,330, na primer, midostaurin; primeri daljih jedinjenja uključuju npr. UCN-01, safingol, BAY 43-9006, Bryostatin 1, Perifozin; Ilmofozin; RO 318220 i RO 320432; GO 6976; Isis 3521; LY333531/LY379196; izohinolinska jedinjenja, kao što su ona opisana u objavljenoj prijavi WO 00/09495; FTIs; BEZ235 (P13K inhibitor) ili AT7519 (CDK inhibitor);
[0221] Termin "inhibitori mTOR " odnosi se na jedinjenja koja inhibiraju sisarsku metu rapamicina (mTOR) i koja poseduju antiproliferativni efekat, kao što su sirolimus (Rapamune<®>), everolimus (Certican™), CCI-779 i ABT578.
[0222] Termin "modifikator biološkog odgovora ", onako kako se ovde koristi, odnosi se na limfokine ili interferone, npr. na interferon γ.
[0223] Termin "inhibitor Ras onkogenih izoformi", npr. H-Ras, K-Ras ili N-Ras, onako kako se ovde koristi, odnosi se na jedinjenja koja targetuju, smanjuju ili inhibiraju onkogenu aktivnost Ras, npr. " inhibitor farnezil transferaze ", npr. L-744832, DK8G557 ili R115777 (Zarnestra).
[0224] Termin " inhibitor telomeraze ", onako kako se ovde koristi, odnosi se na jedinjenja koja targetuju, smanjuju ili inhibiraju aktivnost telomeraze. Jedinjenja koja targetuju, smanjuju ili inhibiraju aktivnost telomeraze su posebno jedinjenja koja inhibiraju receptor za telomerazu, npr. telomestatin.
[0225] U ovom tekstu, izraz "inhibitor metionin-aminopeptidaze", odnosi se na jedinjenja koja targetuju, smanjuju ili inhibiraju aktivnost metionin-aminopeptidaze. Jedinjenja koja targetuju, smanjuju ili inhibiraju aktivnost metionin aminopeptidaze su npr. bengamid ili njegov derivat.
[0226] U ovom tekstu, izraz, " inhibitor proteazoma", odnosi se na jedinjenja koja targetuju, smanjuju ili inhibiraju aktivnost proteazoma. Jedinjenja koja targetuju, smanjuju ili inhibiraju aktivnost proteazoma uključuju npr. Bortezomid (Velcade™)i MLN 341.
4
[0227] U ovom tekstu, izraz, "inhibitori HSP90 ", uključuje, ali se ne ograničava na, jedinjenja koja targetuju, smanjuju ili inhibiraju unutrašnju ATPaznu aktivnost za HSP90; razgradjujući, targetujući, smanjujući ili inhibirajući klijent-proteine HSP90 putem ubikvitinskog proteazomskog puta. Jedinjenja koja targetuju, smanjuju ili inhibiraju inherentnu ATPaznu aktivnost HSP90 su posebno jedinjenja, proteini ili antitela koja inhibiraju ATPaznu aktivnost HSP90, npr. 17-alilamino, 17-demetoksigeldanamicin (17AAG), derivat geldanamicina, druga jedinjenja povezana sa geldanamicinom, radikikol i inhibitori HDAC. Primeri HSP90 inhibitora su HSP990 i AUY922
[0228] Za tretman akutne mijeloidne leukemije (AML), jedinjenja formule (I) mogu se koristiti u kombinaciji sa standardnim terapijama za leukemiju, posebno u kombinaciji sa terapijama koje se koriste u tretmanu AML. Konkretno, jedinjenja formule (I) mogu se primenjivati u kombinaciji sa npr. inhibitorima farnezil-transferaze i/ili drugim lekovima korisnim u tretmanu AML, kao što su Daunorubicin, Adriamicin, Ara-C, VP-16, Tenipozid, Mitoksantron, Idarubicin, Carboplatinum i PKC412.
[0229] Jedinjenja koja ciljano deluju, smanjuju ili inhibiraju aktivnost inhibitora histon deacetilaze (HDAC) kao što su natrijum biturat i suberoilanilid hidroksamska kiselina (SAHA) inhibiraju aktivnost enzima poznatih kao histon deacetilaze. Specifičnim inhibitorima HDAC pripadaju MS275, SAHA, FK228 (raniji naziv FR901228), Trihostatin A i jedinjenja opisana u američkom patentu br. US 6,552,065, naročito, N-hidroksi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)-etil]-amino]metil]fenil]-2E-2-propenamid, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so i N-hidroksi-3-[4-[(2-hidroksietil){2-(1H-indol-3-il)etil]-amino]metil]fenil]-2E-2-propenamid, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naročito laktat.
[0230] Pristupi koji dovode do oštećenja tumorskih ćelija odnose se na pristupe kao što je jonizujuće zračenje. Pojam “jonizujuće zračenje” u ovom tekstu znači jonizujuće zračenje koje se dešava kao posledica delovanja ili elektromagnetnih talasa (kao što su X-zraci i gama zraci) ili čestica (kao što su alfa i beta čestice). Jonizujuće zračenje se sprovodi tokom radijacione terapije i poznato je u struci, ali nije ograničeno samo na radijacionu terapiju. Videti Hellman, Principles of Radiation Therapy, Cancer, u Principles and Practice of Oncology, Devita i sar., Eds., 4<th>Edition, Vol.1, str.248-275 (1993).
[0231] Pojam “inhibitori S-adenosilmetionin dekarboksilaze” kako je ovde korišćen uključuje, ali nije ograničen na jedinjenja opisana u US 5,461,076.
[0232] “Ostala hemoterapeutska jedinjenja” uključuju, ali ne samo njih, alkaloide biljaka, jedinjenja hormona i njihovih antagonista; modifikatore biološkog odgovora, poželjno limfokine ili interferone; antisens oligonukleotide ili derivate oligonukleotida; shRNA ili siRNA; ili mešovita jedinjenja ili jedinjenja sa drugim ili nepoznatim mehanizmom delovanja.
[0233] Struktura aktivnih sastojaka identifikovana pomoću kodnih brojeva, generičkih ili trgovačkih marki može se pronaći u aktuelnom izdanju standardnog kompendijuma " Merck-ov Indeks" ili u bazama podataka npr.kod Patents International, (npr.u IMS World Publications).
[0234] Nijedna od citiranih referenci iz ovog teksta nije navedena da bi pružila mogućnost da se citirane reference smatraju predhodnim stanjem tehnike što bi imalo negativan uticaj na patentabilnost ovog pronalaska.
Postupci za dobijanje jedinjenja iz pronalaska
[0235] Dato otkriće takodje opisuje postupke za dobijanje jedinjenja iz pronalaska. U opisanim reakcijama, može biti neophodno da se zaštite reaktivne funkcionalne grupe, kao što su na primer, hidroksi, amino, imino, tio ili karboksi grupe, gde ove koje su poželjne u finalnom proizvodu, mogu da budu zaštićene da bi se izbegla njihova neželjeno učešće u reakcijama. Uobičajene zaštitne grupe mogu da se koriste u skladu sa standardnom procedurom, videti na primer, T. W. Greene and P. G. M. Wuts in "Protective groups in ogranic chemistry. " John Wiley and sons, 1991.
[0236] Tamo gde su temperature zadate pre ili kasnije u ovom tekstu, potrebno je dodati “oko”, s obzirom da se minorna odstupanja od zadatih vrednosti, npr od ±10 %, mogu tolerisati. Sve reakcije se mogu odvijati u prisustvu jednog ili više razblaživača i/ili rastvarača. Polazni materijali mogu se upotrebiti u ekvimolarnim količinama; alternativno, neko jedinjenje može se upotrebiti u višku, npr. kao rastvarač ili za pomeranje ravnoteže ili za generalno ubrzavanje reakcije. Pomoćna sredstva, kao što su kiseline, baze ili katalizatori , mogu se dodati u pogodnim količinama, poznatim u ovoj oblasti, u količinama u kojima to reakcija zahteva i u skladu za opštepoznatim postupcima.
[0237] Jedinjenja formule (I) mogu se dobiti postupkom kao što je to predstavljeno u sledećoj Reakcionoj Shemi I:
Reakciona Shema I:
4
u kojoj su Y, Y1, R1, R2, R3i R4definisani u formuli (I) u sažetku pronalaska i gde X1i X2predstavljaju atome halogena, gde X1može biti odabran od hloro, bromo, ili jodo i gde X2može biti odabran od hloro ili fluoro.
[0238] Faza a: Jedinjenje formule (4) može da se dobije reakcijom kiselinskog hlorida iz jedinjenja formule (2) sa jedinjenjem formule (3) u prisustvu odgovarajućeg rastvarača (na primer, tetrahidrofurana, ili slično), i organske baze (na primer, diizopropiletilamina, ili slično). Reakcija se odvija na temperaturi od oko 0<o>C do oko sobne temperature i može trajati oko 2 h da se završi.
[0239] Kiselinski hlorid jedinjenja formule (2) može da se dobije sa agensom za hlorinaciju (na primer tionil hlorid, ili oksalil hlorid, ili slično) u prisustvu katalizatora (na primer, dimetilformamida, ili slično) i odgovarajućeg rastvarača (na primer, toluena, ili slično). Reakcija se odvija na sobnoj temperature ili zagrevanjem do temperature od oko 85<o>C i može trajati oko 2 dok se ne završi.
[0240] Faza b: Jedinjenje formule (5) može se dobiti reakcijom jedinjenja formule (4) sa R2-H gde je R2definisan u sažetku pronalaska, u prisustvu odgovarajućeg rastvarača (na primer 2-propanola, ili dimetil sulfoksida, ili slično), i odgovarajuće organske baze (na primer diizopropiletilamina, ili trietilamina, ili slično). Reakcija se odvija na temperaturi od oko 90<o>C do oko 140<o>C i može trajati od oko 30 minuta do oko 72 h da se završi.
[0241] Faza c: Jedinjenje formule (6) može da se dobije reakcijom jedinjenja formule (4), gde X1po mogućstvu može da bude bromo ili jodo, sa R1-Z1, gde je R1definisan u tekstu, gde je Z1poželjno borna kiselina ili estar (Suzukijeva reakcija), u prisustvu odgovarajućeg rastvarača (na primer, dimetoksietana, ili smeše dimetoksietana i vode, ili slično), odgovarajuće neorganske baze (na primer natrijum
4
karbonata, ili slično), i paladijumskog katalizatora (na primer bis(trifenilfosfin)paladijum(II) dihlorida, ili kompleks 1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen-paladijum(II)dihlorida dihlorometana, ili tetrakis(trifenilfosfin)paladijuma(0), ili slično) i opciono korastvarača (na primer, etanola, ili slično. Reakcija se odvija na temperaturi od oko 80<o>C do oko 130<o>C i može trajati od oko 20 minuta do oko 18 h da se završi.
[0242] Alternativno, faza c se može dogoditi reakcijom jedinjenja formule (4), pri čemu je X1poželjno bromo ili jodo, sa R1-Z2, gde je R1definisan u tekstu, gde Z2po mogućstvu predstavlja trialkilstanil reagens (Still-ova reakcija), u prisustvu odgovarajućeg rastvarača (na primer, dimetil sulfoksida, ili slično), i paladijumskog katalizatora (na primer, tetrakis(trifenilfosfin)paladijuma(0). Reakcija se odvija na temperaturi od oko 140<o>C i može trajati oko 18 h da se završi.
[0243] Faza d: Jedinjenje formule (I) može da se dobije reakcijom jedinjenja formule (5), pri čemu je X1poželjno bromo ili jodo, sa R1-Z1, gde je R1definisan u tekstu, gde Z1po mogućstvu predstavlja bornu kiselinu ili estar (Suzukijeva reakcija), u prisustvu odgovarajućeg rastvarača (na primer, dimetoksietana, ili smeše dimetoksietana i vode, ili slično), neorganske baze (na primer, natrijum karbonata, ili slično), i paladijumskog katalizatora (na primer, bis(trifenilfosfin)paladijum(II) dihlorida, ili kompleksa 1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen-paladijum(II)dihlorida i dihlorometana, ili tetrakis(trifenilfosfin)paladijuma(0), ili slično) i po slobodnom izboru korastvarača (na primer, etanola, ili slično). Reakcija se odvija na temperaturi od oko 80-130<o>C i može trajati od oko 20 minuta do oko 2 h dok se ne završi.
[0244] Faza e: Jedinjenje formule (I) može da se dobije reakcijom jedinjenja formule (6) sa R2-H gde je R2definisan u tekstu, u prisustvu odgovarajućeg rastvarača (na primer, 2-propanola, ili dimetil sulfoksida, ili slično), organske baze (na primer, diizopropiletilamina, ili trietilamina, ili slično). Reakcija se odvija na temperaturi od oko 90-140<o>C i može trajati od oko 30 minuta do oko 72 h da se završi.
[0245] Jedinjenja formule (I) mogu se dobiti postupkom navedenim u sledećoj Reakcionoj Shemi II:
Reakciona Shema II:
4
u kojoj su Y, Y1, R1, R2, R3i R4definisani u formuli (I) u sažetku pronalaska i gde X1i X2predstavljaju atome halogena, pri čemu X1može posebno da predstavlja hloro, bromo, ili jodo, gde X2može posebno da predstavlja hloro ili fluoro i gde Alk predstavlja mali alkilni lanac, posebno metil.
[0246] Faza f: Jedinjenje formule (8) može se dobiti reakcijom jedinjenja formule (7) sa R2-H gde je R2definisan u ovom tekstu, u poredjenju sa fazom b
[0247] Faza g: Jedinjenje formule (9) može se dobiti reakcijom jedinjenja formule (8), pri čemu X1može posebno da predstavlja bromo ili jodo, sa R1-Z1, gde je R1definisan u ovom tekstu, gde Z1po mogućstvu predstavlja bornu kiselinu ili estar (Suzukijeva reakcija), u poredjenju sa fazom d.
[0248] Faza h: Jedinjenje formule (10) može da se dobije hidrolizom estra jedinjenja formule (9) u prisustvu odgovarajućeg rastvarača (na primer vode, ili slično), neorganske baze (na primer, natrijum hidroksida, ili slično). Reakcija se odvija na sobnoj temperaturi i može trajati do oko 2 h dok se ne završi.
[0249] Faza i: Jedinjenje formule (I) ) može se dobiti reakcijom jedinjenja formule (10) sa jedinjenjem formule (3) u prisustvu reagensa za kuplovanje (kao što je 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)karbodiimid hidrohlorid i hidroksibenzotriazola, ili slično), odgovarajuće baze (kao što je N-metilmorfolin, diizopropiletilamin, ili slično) i odgovarajućeg rastvarača (kao što je dihlorometan, dimetilformamid, ili slično). Reakcija se odvija na sobnoj temperaturi i može trajati do oko 12 h da se završi.
[0250] Jedinjenja formule (I) mogu da se dobiju postupkom koji je opisan u sledećoj Reakcionoj Shemi III:
Reakciona Shema III:
u kojoj su Y, Y1, R1, R2, R3i R4definisani u formuli (I) u sažetku pronalaska i gde X1i X2predstavljaju atome halogena, pri čemu X1posebno predstavlja hloro, bromo, ili jodo, gde X2posebno predstavlja
4
hloro ili fluoro, gde Prot predstavlja zaštitnu grupu, posebno tetrahidro-2H-piran-2-il (THP) ili 2-(trimetilsilil)etoksi]metil (SEM) gde R1predstavlja pirazol sa slobodnim NH.
[0251] Faza l: Jedinjenje formule (12) može da se dobije reakcijom jedinjenja formule (4) sa Prot-R1-Z1gde je R1kao što je definisano u tekstu, pri čemu Z1po mogućstvu predstavlja bornu kiselinu ili estar (Suzukijeva reakcija), Prot posebono predstavlja THP ili SEM, u poredjenju sa Fazom c.
[0252] Faza m: Jedinjenje formule (13) može da se dobije reakcijom jedinjenja formule (12) sa R2-H gde je R2kao što je ovde definisano, analogno fazi e.
[0253] Faza n: Jedinjenje formule (13) može da se dobije reakcijom jedinjenja formule (5) sa Prot-R1-Z1gde je R1kao što je ovde definisano, gde Z1poželjno predstavlja bornu kiselinu ili estar (Suzukijeva reakcija), pri čemu Prot posebno predstavlja THP ili SEM, u poredjenju sa fazom d.
[0254] Faza o: Jedinjenje formule (I) može da se dobije reakcijom jedinjenja formule (13) sa sredstvom za deprotekciju (na primer, tetra-n-butilamonijum fluoridom, ili trifluoro sirćetna kiselina, ili hlorovodonična kiselina, ili slično) u prisustvu odgovarajućeg rastvarača (na primer, tetrahidrofurana, ili dihlorometana, ili slično). Reakcija se odvija na sobnoj temperaturi ili na temperaturi do oko 80°C i može trajati od oko 2 do 24 h da se završi.
[0255] Jedinjenja formule (I), gde R1predstavlja pirazol koji je supstituisan sa R6grupom, može da se dobije postupkom kao što je prikazano u sledećoj Reakcionoj Shemi IV:
Reakciona Shema IV:
u kojoj Y, Y1, R2, R3, R4i R6imaju značenje kao što je definisano za jedinjenje formule (I) u Sažetku pronalaska i gde X1predstavlja atom halogena, naročito bromo, ili jodo, i gde R6predstavlja niži alkil, posebno metil.
[0256] Faza p: Jedinjenje formule (14) može da se dobije reakcijom jedinjenja formule (5) sa alkilvinilketonom (na primer, metilvinilketonom, ili slično) u prisustvu odgovarajućeg rastvarača (na primer dimetilformamida, ili slično), organske baze (na primer, trietilamina, ili slično), i paladijumskog katalizatora (na primer tri-o-tolilfosfin-paladijum diacetata, ili slično). Reakcija se odvija na temperaturi od oko 130<o>C i može trajati do oko 16 h da se završi.
[0257] Faza q: Jedinjenje formule (Id) može da se dobije reakcijom jedinjenja formule (14) reakcijom sa zaštićenim hidrazidom (na primer hidrazid toluen-4-sulfonske kiseline, ili slično) u prisustvu odgovarajućeg rastvarača (na primer, etanol, ili slično). Reakcija se odvija na temperaturi od oko 80<o>C i može trajati do oko 2 h da se završi. Tada se zaštitna grupa uklanja in situ sa alkoholatom (na primer,
4
natrijummetoksidom, ili slično). Deprotekcija se odvija na temperaturi od oko 80<o>C i može trajati do oko 48 h.
[0258] Jedinjenja formule (I) mogu se dobiti postupkom kao što je to prokazano u sledećoj Reakcionoj Shemi V:
Reakciona Shema V:
u kojoj, Y1, R1, R2, R3i R4imaju značenje kako je definisano za jedinjenje formule (I) u sažetku pronalaska, gde X1i X2predstavljaju atome halogena, pri čemu X1posebno predstavlja hloro, bromo, ili jodo, gde X2posebno može da predstavlja hloro ili fluoro i gde Alk predstavlja niži lanac alkila posebno metil, gde Prot predstavlja zaštićenu grupu, naročito tetrahidro-2H-piran-2-il (THP) kada R1predstavlja pirazol sa slobodnim NH.
[0259] Faza r: Jedinjenje formule (15) može da se dobije reakcijom jedinjenja formule (8), pri čemu X1poželjno predstavlja bromo ili jodo, sa Prot-R1-Z1, gde je R1ovde definisan, Prot naročito predstavlja tetrahidro-2H-piran-2-il (THP) gde R1predstavlja pirazol sa slobodnim NH, gde Z1poželjno predstavlja bornu kiselinu ili estar (Suzukijeva reakcija), analogno jedinjenju iz faze d.
[0260] Faza s: Jedinjenje formule (16) dobija se hidrolizom estra jedinjenja formule (15) u prisustvu odgovarajućeg rastvarača (na primer vode i metanola, ili slično), neorganske baze (na primer, natrijum hidroksida, ili slično). Reakcija se odvija na sobnoj temperaturi i može trajati do oko 14 h dok se ne završi.
[0261] Faza t: Jedinjenje formula (17) može da se dobije reakcijom jedinjenja formule (16) sa jedinjenjem formule (3) u prisustvu reagensa za kuplovanje (kao što je 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)karbodiimid hidrohlorid i hidroksibenzotriazol, ili slično), odgovarajuće baze (kao što je N-metilmorfolin, ili slično) i odgovarajućeg rastvarača (kao što je tetrahidrofuran, ili slično). Reakcija se odvija na temperaturi od oko 25°-65°C i može trajati do oko 2 dana.
[0262] Faza u: Jedinjenje formule (I) može da se dobije reakcijom jedinjenja formule (17) sa agensom za deprotekciju (na primer hlorovodonična kiselina, ili slično) u prisustvu odgovarajućeg rastvarača (na primer tetrahidrofurana i metanola, ili slično). Reakcija se odigrava na sobnoj tempraturi i može da traje oko 2 h (do završetka).
[0263] Detaljni primeri sinteze jedinjenja Formule (I) mogu se pronaći u gornjim primerima.
Dodatni postupci za dobijanje jedinjenja iz pronalaska
[0264] Jedinjenje iz pronalaska može se dobiti kao farmaceutski prihvatljiva kisela adiciona so reakcijom slobodne baze jedinjenja sa farmaceutski prihvatljivom neorganskom ili organskom kiselinom. Alternativno, farmaceutski prihvatljiva bazna adiciona so jedinjenja iz pronalaska može se dobiti reakcijom slobodne kiseline jedinjenja sa farmaceutski prihvatljivom neorganskom ili organskom bazom.
[0265] Jedinjenja formule (I) mogu se takodje izmeniti dodavanjem odgovarajućih funkcionalnih grupa radi poboljšanja selektivnih bioloških osobina. Modifikacije (izmene) ove vrste poznate su u stanju tehnike i uključuju one koje povećavaju penetraciju u datom biološkom sistemu (na primer krv, limfni sistem, centralni nervni sistem, testis), povećanu bioraspoloživost, povećanu rastvorljivost da bi se dozvolila parenteralna primena (na primer, injekcije, infuzija), menjanje metabolizam i/ili menjanje brzine sekrecije. Primeri za ovu vrstu modifikacija obuhvataju ali nisu ograničeni na esterifikaciju, na primer, sa polietilen glikolima, derivatizaciju sa pivaloiloksi ili supstituentima masnih kiselina, konverzija u karbamate, hidroksilaciju aromatičnih prstenova i supstituciju heteroatoma u aromatičnim prstenovima. Gde god se pominju jedinjenja formule (I), i/ili N-oksidi, tautomeri i/ili njihove (poželjno farmaceutski prihvatljiv) soli, ovo obuhvata tako modifikovane formule, a poželjni su molekuli formule (I), njihovi N-oksidi, njihovi tautomeri i/ili njihove soli.
[0266] Alternativno, oblici soli jedinjenja iz pronalaska mogu da se dobiju korišćenjem soli polaznih materijala ili intermedijera. U svetlu uske povezanosti izmedju novih jedinjenja formule (I) u slobodnom obliku i onih u obliku njihovih soli, uključujući one soli koji se mogu koristiti kao intermedijeri, na primer u prečišćavanju ili u identifikaciji novih jedinjenja, bilo koje pozivanje na jedinjenja ili jedinjenje formule (I) pre i posle ove napomene se može razumeti i kao pozivanje na jedinjenje u slobodnom obliku i/ili na jedno ili više njenih soli, po potrebi i u smislu celishodnosti, kao i na jedno ili više solvata, na primer, hidrata.
[0267] Soli se formiraju kao kisele adicione soli, po mogućstvu sa organskim ili neorganskim kiselinama, iz jedinjenja formule (I) sa baznim atomom azota, i to su posebno farmaceutski prihvatljive soli. Odgovarajuće neorganske kiseline su na primer, halogene kiseline, kao što su hlorovodonična, sumporna ili fosforna kiselina. Odgovarajuće organske kiseline su na primer, karboksilna, fosfinska,
1
sumporna ili sulfamino kiselina, na primer, sirćetna kiselina, propionska kiselina, oktanska kiselina, dekanska kiselina, dodekanska kiselina, glikolna kiselina, mlečna kiselina, fumarna kiselina, ćilibarna kiselina, malonska kiselina, adipinska kiselina, pimelinska kiselina, suberinska kiselina, azelainska kiselina, jabučna kiselina, vinska kiselina, limunska kiselina, aminokiseline, kao što su glutaminska kiselina ili asparaginska kiselina, maleinska kiselina, hidroksi-maleinska, metilmaleinska kiselina, cikloheksankarboksilna kiselina, adamantankarboksilna kiselina, benzoeva kiselina, salicilna kiselina, 4-aminosalicilna kiselina, ftalna kiselina, fenilsirćetna kiselina, mandelinska kiselina, cimetna kiselina, metan- ili etan- sulfonska kiselina, 2-hidroksietansulfonska kiselina, etan-1,2-disulfonska kiselina, benzensulfonska kiselina, 2-naftalensulfonska kiselina, 1,5,-naftalen-disulfonska, 2-, ili 3-metilbenzensulfonska kiselina, metilsumporna kiselina, etilsumporna kiselina, dodecilsumporna kiselina, N-cikloheksilsulfaminokiselina kiselina, N-metil, N-etil ili N-propil-sulfaminokiselina, ili ostale organske protonske kiseline, kao što je askorbinska kiselina. Soli se obično mogu prevesti u slobodna jedinjenja, na primer, tretmanom sa odgovarajućim baznim jedinjenjima, na primer sa alkalnim metalnim karbonatima, alkalinim metalnim hidrogenkarbonatima, ili alkalinim metalnim hidroksidima, obično kalijum karbonatom ili natrijum hidroksidom.
[0268] U svrhu izolovanja i prečišćavanja, moguće je da koriste i farmaceutski neprihvatljive soli, kao što su na primer pikrati ili perhlorati. Za terapijsku upotrebu, samo se upotrebljavaju farmaceutski prihvatljive soli ili slobodna jedinjenja (gde su primenjivi u obliku farmaceutskih preparata), i stoga su poželjni.
[0269] Oblici slobodne kiseline ili slobodne baze jedinjenja iz pronalaska mogu redom da se dobiju redom iz odgovarajućih baznih adicionih soli ili kiselih adicionih soli. Na primer, jedinjenje iz pronalaska u obliku kisele adicione soli može da se prevede u odgovarajuću slobodnu bazu tretmanom sa odgovarajućom bazom (na primer, rastvorom amonijum hidroksida, natrijum hidroksida, i slično). Jedinjenje iz pronalaska u obliku bazne adicione soli može da se prevede u odgovarajuću slobodnu kiselinu tretmanom sa odgovarajućom kiselinom (na primer, hlorovodoničnom kiselinom, itd.).
[0270] Jedinjenja iz pronalaska u neoksidovanom obliku može da se dobije iz N-oksida jedinjenja iz pronalaska tretmanom sa redukcionim sredstvom (na primer, sumpor, sumpor dioksid, trifenil fosfin, litijum borohidrid, natrijum borohidrid, fosfor trihlorid, tribromid, ili slično) u odgovarajućem inertnom organskom rastvaraču (kao što je na primer, acetonitril, etanol, vodeni dioksan, ili slično) na temperaturi od 0 do 80°C.
[0271] Derivati prolekova za jedinjenja iz pronalaska mogu da se dobiju postupcima koji su poznati stručnjacima upućenim u stanje tehnike (za detalje videti, na primer, Saulnier MG, Langley DR, Kadow JF, Senter PD, Knipe JO, Tun MM, Vyas DM and Doyle TW (1994) Synthesis of etoposide phosphate,
2
BMY-40481: a watersoluble clinically active prodrug of etoposide. Bioorg Med Chem Lett 4:2567-2572; and Rautio J, Kumpulainen H, Heimbach T, Oliyai R, Oh D, Järvinen T and Savolainen J (2008)); Prodrugs: design and clinical applications. Nat Rev Drug Discov. 7:255-70). Na primer, jedinjenje iz pronalaska može da formira fosfatni estar hidroksilne grupe. Još odredjenije, jedinjenja iz pronalska mogu da formiraju prolekova kao što je prikazano:
[0272] Dalje, jedinjenje iz pronalaska može da bude prolek drugog jedinjenja iz pronalaska.
Da bi ovo ilustrovali, primer 36 predstavlja prolek jedinjenja iz primera 37 i jedinjenje iz primera 37 predstavlja potencijalni metabolit iz primera 36.
[0273] Zaštićeni derivati jedinjenja iz pronalaska mogu da se dobiju pomoću sredstava koja su poznata stručnjacima upućenim u stanje tehnike. Ako ima potrebe da jedna ili više drugih funkcionalnih grupa, npr. karboksi, hidroksi, amino, sulfhidril ili slične budu zaštićene u početnom materijalu kako je ovde opisano ili bilo koji prekursor, jer ne bi trebalo da učestvuju u reakciji ili da ometaju reakciju, upotrebiće se grupe koje se obično koriste u sintezi peptidnih jedinjenja, kao i cefalosporina i penicilina, derivate nukleinskih kiselina i šećera. Zaštitne grupe su grupe koje nisu prisutne u finalnom jedinjenju nakon uklanjanja, dok grupe koje su prisutne kao supstituenti nisu zaštitne grupe u smislu koji se ovde koristi, to su grupe koje su dodate na početku ili u središnjoj fazi i uklonjene da bi se dobilo finalno jedinjenje. Takodje, u slučaju konverzije jedinjenja formule (I) u različito jedinjenje formule (I), zaštitne grupe mogu biti uvedene i uklonjene, ako su korisne ili potrebne. Zaštitne grupe mogu već biti prisutne u prekursorima i trebalo bi da zaštite potrebne funkcionalne grupe od neželjenih sekundarnih reakcija, kao što su alkilacije, eterifikacije, estarifikacije, oksidacije, solvoliza i slične reakcije. Karakteristika zaštitnih grupa je da se lako uklanjaju, tj. bez neželjenih sekundarnih reakcija, putem acetolize, protonolize, solvolize, redukcije, fotolize ili takodje enzimskom aktivnošću, na primer pod uslovima analognim fiziološkim, i da nisu prisutne u krajnjem proizvodu. Specijalista za ovu oblast zna, ili može lako da ustanovi, koje zaštitne grupe su pogodne za reakcije pomenute u prethodnom i u daljem delu teksta.
[0274] Zaštita tih funkcionalnih grupa takvim zaštitinim grupama, samim zaštitnim grupama, i reakcije njihovog uklanjanja opisane su na primer u standardnim referentnim radovima kao što su J. F. W. McOmie, "Protective Groups in Organic Chemistry", Plenum Press, London and New York 1973, in T. W. Greene, "Protective Groups in Organic Synthesis", Third edition, Wiley, New York 1999, in "The Peptides"; Volume 3 (editors: E. Gross and J. Meienhofer), Academic Press, London and New York 1981, in "Methoden der organischen Chemie" (Methods of organic chemistry), Houben Weyl, 4th edition, Volume 15/I, Georg Thieme Verlag, Stuttgart 1974, in H.-D. Jakubke and H. Jescheit, "Aminosäuren, Peptide, Proteine" (Amino acids, peptides, proteins), Verlag Chemie, Weinheim, Deerfield Beach, and Basel 1982, and in Jochen Lehmann, "Chemie der Kohlenhydrate: Monosaccharide und Derivate" (Chemistry of carbohydrates: monosaccharides and derivatives), Georg Thieme Verlag, Stuttgart 1974.
[0275] Jedinjenja iz pronalaska mogu se lako pripremiti, ili formirati tokom postupka iz pronalaska, kao solvati (na primer, hidrati). Hidrati jedinjenja iz datog pronalaska mogu se pogodno pripremiti rekristalizacijom iz vodena/organska smeša rastvarača, korišćenjem organskih rastvarača kao što je dioksin, tetrahidrofuran ili metanol.
[0276] Jedinjenja iz pronalaska mogu da se dobiju u obliku njihovih pojedinačnih stereoizomera reakcijom racemskih smeša jedinjenja sa optički aktivnim sredstvom za razdvajanje koje gradi par dijastereomernih jedinjenja, pri čemu na taj način dolazi do razdvajanja dijastereomera, i regenerisanja optički čistog enantiomera. Dok je razdvajanje enantiomera moguće uraditi korišćenjem kovalentnih dijastereomernih derivata jedinjenja iz pronalaska, poželjno je korišćenje kompleksa koji mogu da disosuju (npr., kristalnih dijastereomernih soli). Dijastereomeri imaju tačno odredjene fizičke osobine (npr., tačke topljenja, tačka ključanja, rastvorljivost, reaktivnost, itd.) i lako se mogu razdvojiti na osnovu razlika u ovim osobinama. Dijastereomerne smeše se na primer mogu razdvojiti na njihove pojedinačne dijasteromere, pomoću frakcione kristalizacije, hromatografijom, ili tehnikama razdvajanja /rezolucije koje se baziraju na razlikama u rastvorljivosti i sličnim postupcima. Ovo razdvajanje se može izvesti ili na nivou polaznog jedinjenja ili u samom jedinjenju formule (I). Enantiomeri se razdvajaju kroz formiranje dijastereoizomernih soli, na primer formiranjem soli sa enantiomerno-čistom hiralnom kiselinom, ili hromatografijom, na primer, pomoću HPLC, korišćenjem hromatografskih supstrata sa hiralnim ligandima. Zatim se ponovo dobija optički čisti enantiomer, zajedno sa sredstvom za razdvajanje, pomoću bilo kojeg prakitičnog postupka koji ne dovodi do racemizacije. Detaljniji opis tehnika za razdvajanje stereoizomernih oblika jedinjenja iz racemskih smeša se može pronaći u knjizi
4
autora Jean Jacques, Andre Collet, Samuel H. Wilen, “Enantiomers, Racemates and Resolutions,” John Wiley And Sons, Inc., 1981.
[0277] Ukratko, jedinjenja Formule (I) mogu se dobiti postupkom, koji uključuje:
(a) ona jedinjenja u opštim reakcionim shemama I-V; i
(b) po slobodnom izboru prevodjenje jedinjenja iz pronalaska u farmaceutski prihvatljivu so;
(c) po slobodnom izboru prevodjenje soli jedinjenja iz pronalaska u oblik bez soli;
(d) po slobodnom izboru prevodjenje neoksidovanog oblika jedinjenja iz pronalaska u farmaceutski prihvatljivi N-oksid;
(e) po slobodnom izboru prevodjenje oblika N-oksida jedinjenja iz pronalaska u njegov neoksidovan oblik;
(f) po slobodnom izboru razlaganje pojedinačnog izomera jedinjenja iz pronalaska iz smeše izomera;
(g) po slobodnom izboru prevodjenje nederivatizovanog jedinjenja iz pronalaska u farmaceutski prihvatljivi derivat proleka; i
(h) po slobodnom izboru prevodjenje derivata proleka jedinjenja iz pronalaska u njegov nederivatizovani oblik.
[0278] Ukoliko proizvodnja polaznih materijala nije posebno opisana, jedinjenja su poznata ili se mogu pripremiti na analogan način sa postupcima poznatim u stanju tehnike ili kao što je opisano u primerima u daljem tekstu.
[0279] Jedan od stručnjaka će ceniti da gornje transformacije predstavljaju samo postupke za dobijanje jedinjenja iz datog pronalaska, i da se slično mogu koristiti i drugi poznati postupci.
Primeri
[0280] Sledeći primeri služe da ilustruju pronalazak bez ograničavanja njegovog opsega. U navedenim primerima, temperature su date u stepenima Celzijusa. Ukoliko drugačije nije naznačeno, reakcije se vrše na sobnoj temperaturi. Dalje, ukoliko drugačije nije naznačeno, uslovi za analitičku HPLC su sledeći:
Uslov 1: UPLC-MS, kolona Acquity BEH C18, 1.7 μm, 2.1 x 50 mm, peć na temperaturi od 40°C, eluenti: A = voda 0.1% mravlja kiselina i B = MeCN 0.1% mravlja kiselina, gradijent od 20% do 100% B u 4.3 min, protok 0.7 mL/min, detekcija pomoću UV/VIS (DAD), ESI (+/-).
Uslov 2: LC-MS, kolona Ascentis® Express C182.7 µm 2.1 x 30 mm, 50°C, eluenti: A = voda 0.05 % mravlja kiselina 3.75 mM amonijum acetat i B = MeCN 0.04% mravlja kiselina, gradijent 5% do 95% B tokom 3.7 min, protok 1.2 mL/min do 1.4 mL/min u 3.7 min, detekcij UV/VIS (DAD), ESI (+/-).
Uslov 3: UPLC-MS, kolona Acquity HSS T3, 1.8 μm, 2.1 x 50 mm, pećnica na temperaturi od 50°C, eluentsi A = voda 0.05% mravlja kiselina+ 3.75 mM amonijum acetat i B = MeCN 0.04% mravlja kiselina, gradijent od 2% do 98% B za 1.40 min, zatim 98% B za 0.75 min, protok 1.2 mL/min, detekcija UV/VIS (DAD), ESI (+/-).
R. uslov 4: HPLC, kolona Chromolith® Performance, RP-18e, 100 x 4.6 mm prekolona 5 x 4.6 mm na sobnoj temperaturi, eluenti: A = voda 0.1% mravlja kiselina i B = MeCN 0.1% mravlja kiselina, gradijent od 2% do 100% B u 8 min, zatim 100 % B tokom 2 min, protok 2.0 mL/min, detekcija UV/VIS (DAD).
Uslov 5: HPLC, kolona CC125/4 Nucleosil® 100-3 C18HD, 4.0 x 125 mm, eluenti: A = voda 0.1% TFA i B = MeCN 0.1% TFA, gradijent od 2% do 100% B tokom 7 min, zatim 100% B tokom 2 min i na kraju 100% do 2% B tokom 1 min, protok 1.0 mL/min, detekcij UV 215 nm.
Uslov 6: potrebni su slični uslovi kao i za reakcoini uslov 3, koristi se pećnica na 60°C umesto na 50°C. Uslov 7: : HPLC, kolona Eclipse XDB C18, 5 μm, 4.6 x 150 mm, pećnica na temperaturi od 25°C, eluenti: A = voda 0.1% H3PO4i B = MeCN, gradijent od 10% do 95% B za 17 min, protok 1.0 mL/min, detekcija UV/VIS (DAD) 210 nm.
Uslov 8: LC-MS, kolona Poroshell® 120 SB-C18, 3.0 x 50 mm, 2.7 µm, eluenti: A = voda 0.1% TFA i B = MeCN 0.1% TFA, gradijent od 5% B za 0.5 min, 5% do 95% B za 6.5 min, 95% B za 3 min, 95% do 5% B za 0.1 min, 5% B za 2 min, protok 0.8 mL/min, UV/VIS (DAD), ESI (+).
Dalje, ukoliko drugačije nije naznačeno, uslovi za preparativnu HPLC su sledeći:
Uslov 9: Preparativna HPLC, kolona: XBridge C1830 x 100 mm, 5 µm; protok 30 mL/min; mobilna faza: A = voda 0.1% mravlja kiselina; B = MeCN; varijabilni gradijent, od početnog % B do konačnog % B, i vreme rada kako je odredjeno u primerima.
R. uslov 10: Preparativna HPLC Gilson system, kolona SunFire™ prep C18 OBD, 5 µm 30 x 100 mm, eluenti: A = voda 0.1 % TFA i B = MeCN, gradijent 5% B za 2 min, zatim 5% do 100% B u 20 min i konačno 100% B u 3 min, protok 30 mL/min, detekcija pomoću UV/VIS.
[0281] Preparativna ahiralna SFC se vrši korišćenjem sledećeg sistema: Waters SFC THAR100; protok 100 mL / min; mobilna faza: A = superkritični CO2; B = MeOH; varijabilni gradijent, od početnog % B do finalnog % B vreme rada i kolone su odredjene u Primerima. Detalji za kolonu:
Kolona DEAP: kolona Dietil amino (250 x 30 mm, 5 μm, 60 Å), Princeton
Kolona Diol: kolona Diol (250 x 30 mm, 5 μm, 60 Å), Princeton
<1>H-NMR spektri su snimani na 300 MHz, ili kako je naznačeno, NMR spektrometrom na 400 MHz. Značajni pikovi su tabelirani prema redosledu: multiplicitet (s, singlet; d, dublet; t, triplet; q, kvartet; m, multiplet; br. s, široki singlet) i broj protona.
[0282] U sledećim primerima, koriste se skraćenice navedene u nastavku: aq. (vodeni); DAD (detektor sa nizom dioda); DCM (dihlorometan); DIPEA (diizopropil-etilamin); DMF (N,N-dimetilformamid); DME (dimetoksietan); DMSO (dimetil sulfoksid); dppf (1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen); eq. (ekvivalenti); ESI (jonizacija elektrosprejom); EtOAc (etil acetat); EtOH (etanol); Et2O (dietil etar); h (čas); HPLC (tečna hromatografija visokih performansi); HV (visoki vakuum); iPrOH (izopropanol); iPr2O (diizopropil etar); LC (tečna hromatografija); M (molarni); MeCN (acetonitril); MeOH (metanol); MeTHF (2-metiltetrahidrofuran); min (minuti); mL (millilitri); MP (makroporozni); MPLC (tečna hromatografija pri srednjim pritiscima); MS (masena spektrometrija); MW (mikrotalasi); n-BuLi (nbutilitijum); NMM (N-metilmorfolin); NMP (N-metilpirolidinon); NMR (nuklearna magnetna rezonanca); PL (polistiren); PPh3(trifenilfosfin); PTFE (politetrafluoretilen); RM (reakciona smeša); RT (sobna temperatura); sat. (zasićen); sec (sekundi); SFC (superkritična fluidna hromatografija); Si-Thiol (silika gel koji je modifikovan 3-merkaptopropilom); SPE (ekstrakcija čvrste faze); TBAF (tetran-butilamonijum fluorid); TBME (metil terc-butil etar); TFA (trifluorosirćetna kiselina); THF (tetrahidrofuran); tR(retenciono time); UPLC (tečna hromatografija ultra performansi) i UV (Ultraljubičasto).
Primer 1
(R)-4-(3-Hidroksipirolidin-1-il)-3-(1H-pirazol-5-il)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)benzamid [0283]
[0284] (R)-4-(3-Hidroksipirolidin-1-il)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)-3-(1-((2-(trimetilsilil)etoksi) metil)-1H-pirazol-5-il)benzamid (Faza 1.1, 149 mg, 0.2 mmol) se dodaje u fiolu za mikrotalasno zračenje, koja se zatvara i ispire sa argonom. Rastvor 1 M TBAF u THF-u (2.98 mL, 2.98 mmol) se zatim dodaje i reakciona smeša se meša na temperaturi od 80°C tokom 3 dana. Reakciona smeša se razblažuje sa EtOAc (40 mL), ispire sa zasić. NaHCO3i koncentrovanim rastvorom soli, suši na Na2SO4i rastvarač se upari pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečišćava preparativnom SFC (Kolona DEAP, od 25% do 30% tokom 6 min) dajući jedinjenje iz naslova u obliku čvrstog proizvoda bele boje.
UPLC-MS (Uslov 3) tR= 0.98 min, m/z = 433.3 [M+H]<+>, m/z = 431.3 [M-H]-;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.75 (br. s, 1 H) 1.86 (br. s, 1 H) 2.70 - 2.79 (m, 1 H) 3.03 - 3.19 (m, 2 H) 3.19 - 3.28 (m, 1 H) 4.20 (br. s, 1 H) 4.73 - 4.92 (m, 1 H) 6.34 (d, J = 11.00 Hz, 1 H) 6.73 - 6.94 (m, 1 H) 7.32 (d, J = 8.80 Hz, 2 H) 7.65 (d, J = 104.42 Hz, 1 H) 7.81 - 7.96 (m, 4 H) 10.10 (s, 1 H) 12.88 (d, J = 81.67 Hz, 1 H).
Faza 1.1: (R)-4-(3-Hidroksipirolidin-1-il)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)-3-(1-((2-(trimetilsilil)etoksi) metil)-1H-pirazol-5-il)benzamid
[0285]
[0286] Suspenzija (R)-3-bromo-4-(3-hidroksipirolidin-1-il)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)benzamida (Faza 1.2, 100 mg, 0.225 mmol), 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazola (146 mg, 0.45 mmol), Pd(PPh3)2Cl2(17.34 mg, 0.025 mmol) i Na2CO3(119 mg, 1.123 mmol) u smeši vode (272 µL), DME (953 µL) i EtOH (136 µL) podvrava se mikrotalasnom zračenju na temperaturi od 125°C tokom 20 min. Reakciona smeša se razblažuje sa THF-om (3 mL), obradjuje sa Si-Tiol (Silicycle, 1.44 mmol/g, 94 mg, 0.135 mmol), filtrira i filtrat se uparava na sniženom pritisku dajući ostatak koji se prečišćava fleš hromatografijom (RediSep® Silica gel kolona, 4 g, cikloheksan / EtOAc od 40% do 100% EtOAc) dajući jedinjenje iz naslova u obliku ulja žute boje. UPLC-MS (Uslov 1) tR= 3.28 min, m/z = 563.2 [M+H]<+>, m/z = 561.2 [M-H]-.
Faza 1.2: (R)-3-Bromo-4-(3-hidroksipirolidin-1-il)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)benzamid [0287]
[0288] Smeša 3-bromo-4-fluoro-N-(4-(trifluoromethoxy)phenyl)benzamida (Faza 1.3, 100 mg, 0.264 mmol), (R)-pirolidin-3-ol-a (46.1 mg, 0.529 mmol) i TEA (147 µL, 1.058 mmol) u DMSO (199 µL) se meša na temperaturi od 90°C tokom 16 h. Reakciona smeša se razblažuje sa smešom rastvarača TBME/EtOAc (1:1) (30 mL), ispire sa 0.5 M HCl (3 x 5 mL) i koncentrovanim rastvorom soli (5 mL) i rastvarač se uparava na sniženom pritisku dajući sirovi proizvod koji se prečišćava fleš hromatografijom (RediSep® Silica gel kolona, 4 g, cikloheksan / EtOAc-EtOH 0.1% NH4OH (8:2), od 30% do 80% EtOAc-EtOH 0.1% NH4OH (8:2)) dajući jedinjenje iz naslova u obliku beličastog proizvoda bele boje. UPLC-MS (R. uslov 1) tR= 2.83 min, m/z = 444.9/446.9 [M+H]<+>, m/z = 443.0/445.0 [M-H]-;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.80 - 1.92 (m, 1 H) 1.92 - 2.04 (m, 1 H) 3.24 - 3.30 (m, 1 H). 3.36 - 3.46 (m, 1 H) 3.60 - 3.72 (m, 1 H) 3.81 (dd, J = 10.51, 4.65 Hz, 1 H) 4.36 (d, J = 2.69 Hz, 1 H) 4.97 (d, J = 3.42 Hz, 1 H) 6.93 (d, J = 8.80 Hz, 1 H) 7.34 (d, J = 8.56 Hz, 2 H) 7.80 - 7.90 (m, 3 H) 8.14 (d, J = 1.96 Hz, 1 H) 10.19 (s, 1 H).
Stage 1.3: 3-Bromo-4-fluoro-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)benzamid
[0289]
[0290] SOCl2(2.92 mL, 40.0 mmol) i DMF (0.5 mL) dodaju se u kapima u suspenziju koju čine 3-bromo-4-fluorobenzoeva kiselina (1.752 g, 8 mmol) u toluenu (20 mL) i reakciona smeša se meša na temperaturi od 80°C tokom 1 h. Rastvarač se uparava na sniženom pritisku i ostatak se razblažuje sa THF (15 mL). Dodaje se DIPEA (2.79 mL, 16.00 mmol) i smeša se hladi do temperature od 0°C, obradjuje sa rastvorom 4-trifluorometoksianilina (1.181 mL, 8.80 mmol) u THF-u (5 mL) i meša tokom 1 h. Reakciona smeša se obradjuje sa vod. 1 M HCl (50 mL), i ekstrahuje sa TBME. Kombinovani ekstrakti se ispiraju sa vod.1 M HCl, vod.1 M NaOH i koncentrovanim rastvorom soli, suši na MgSO4i rastvarač se uparava na sniženom pritisku dajući ostatak koji kristališe iz smeše rastvarača koju čine n-heptan / DCM dajući jedinjenje iz naslova u obliku čvrstog proizvoda bele boje. UPLC-MS (R. uslov 1) tR= 3.18 min, m/z = 377.9/379.9 [M+H]<+>, m/z = 375.9/377.9 [M-H]-;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.38 (d, J = 8.6 Hz, 2 H) 7.56 (t, J = 8.7 Hz, 1 H) 7.87 (d, J = 9.0 Hz, 2 H) 8.00 - 8.06 (m, 1 H) 8.32 (dd, J = 6.6, 2.2 Hz, 1 H) 10.50 (s, 1 H).
Primer 2
(R)-6-(3-Hidroksipirolidin-1-il)-5-(1H-pirazol-3-il)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)nikotinamid [0291]
[0292] Smeša DME (570 µL), vode (163 µL) i EtOH (81 µL) se dodaje u smešu (R)-5-bromo-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)nikotinamida (Faza 2.2, 60 mg, 0.134 mmol), (1H-pirazol-3-il)borne kiseline (45.1 mg, 0.403 mmol) Pd(PPh3)2Cl2(9.44 mg, 0.013 mmol), Na2CO3(42.8 mg, 0.403 mmol) u foli za mikrotalasno zračenje. Fiola se zatvara, prazni / ispire 3 puta sa argonom i reakciona smeša se izlaže mikrotalasnom zračenju na temperaturi od 120°C u vremenu od 10 min. Dodaje se dodatna količina (1H-pirazol-3-il)borne kiseline (45.1 mg, 0.403 mmol) i reakciona smeša se izlaže mikrotalasnom zračenju na temperaturi od 120°C u vremenu od 30 min, razblažuje sa THF (1 mL) i obradjuje sa Si-Tiol (Silicycle 1.27 mmol/g, 52.9 mg, 0.067 mmol), filtrira i filtrat se uparava na sniženom pritisku dajući ostatak koji se prečišćava preparativnom HPLC (R. uslov 9, 15% tokom 0.2 min zatim 15% do 45% tokom 14 min) dajući jedinjenje iz naslova u oblikučvrstog proizvoda bele boje.
[0293] Alternativno, jedinjenje iz primera 2 se dobija obradjivanjem suspenzije 6-((R)-3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil) nikotinamida (Faza 2.1, 68.3 g, 132 mmol) u DCM (1 L) sa TFA (305 mL, 3959 mmol) na sobnoj temperaturi u vremenu od 5.5 h. Rastvarač se uparava na sniženom pritisku i ostatak se rastvara u EtOAc (2 L), ispire sa zasić. rastvorom NaHCO3(3 x 500 mL) i koncentrovanim rastvorom soli (2 x 500 mL), i suši na Na2SO4. Rastvarač se uparava na sniženom pritisku i ostatak se suspenduje u DCM-u (300 mL) i meša na sobnoj temperaturi u vremenu od 15 min. Kristalni materijal se filtrira, ispre sa DCM (200 mL), suši na sniženom pritisku, rastvara u MeOH (500mL) i obradjuje sa Si-Tiolom (Biotage, 10.0 g, 13 mmol) tokom 15 h na temperaturi od 30°C. Smeša se filtrira i rastvarač se uparava na sniženom pritisku dajući sirovi proizvod koji se prečišćava fleš hromatografijom (Silika gel, 2 kg, DCM / MeOH 95:5) i koji kristališe iz MeCN dajući jedinjenje iz naslova u obliku čvrstog kristalnog proizvoda bele boje.
[0294] Analitički podaci za jedinjenje iz Primera 2: HPLC (Condition 5) tR= 5.37 min, HPLC Chiral (CHIRALPAK® AD-H, 250 x 4.6 mm, eluent : EtOH/MeCN (98:2), 0.5 mL/min, UV 210 nm) tR= 9.62 min, UPLC-MS (uslov 1) tR= 1.79 min, m/z = 434.1/435.1 [M+H]<+>, m/z = 432.1/433.1 [M-H]-;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.65 - 1.76 (m, 1 H) 1.76 - 1.87 (m, 1 H) 2.97 (d, J=11.37 Hz, 1 H) 3.19 - 3.29 (m, 2 H) 3.34 - 3.48 (m, 1 H) 4.10 - 4.23 (m, 1 H) 4.89 (br. s, 1 H) 6.40 (s, 1 H) 7.33 (d, J=8.70 Hz, 2 H) 7.58/7.82 (br. s, 1 H) 7.89 (d, J=8.70 Hz, 2 H) 8.06 (s, 1 H) 8.77 (s, 1 H) 10.21 (s, 1 H) 12.88/13.07 (br. s, 1 H).
Faza 2.1: 6-((R)-3-Hidroksipirolidin-1-il)-5-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)nikotinamid
[0295]
[0296] Pinakol estar 1-(Tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-borne kiseline (59.9 g, 214.4 mmol), K3PO4(105.7 g, 498.1 mmol) i Pd(PPh3)4(9.6 g, 8.30 mmol) se dodaju u suspenziju (R)-5-bromo-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)nikotinamida (Faza 2.2, 74 g, 165.8 mmol) u toluenu (740 mL) i mešaju na temperaturi od 110°C tokom 2.5 h u struji argona. Smeša se zatim razblažuje sa EtOAc (2 L), ispire sa vodom (2 x 1 L) i suši na Na2SO4. Rastvarač se upari na sniženom pritisku i sirovi ostatak se prečišćava fleš hromatografijom (Silica gel, 2 kg, DCM / MeOH 95:5). Rezultujući materijal se rastvara u smeši MeOH (500 mL) i THF (800 mL) i obradjuje sa Si-Tiol (Biotage, 15 g, 19.5 mmol) na sobnoj temperaturi tokom 17 h. Smeša se filtrira i rastvarač se uparava na sniženom pritisku dajući ostatak koji kristalizuje iz MeOH dajući jedinjenje iz naslova u obliku čvrstog kristalnog proizvoda bele boje. HPLC (Uslov 5) tR= 5.99 min, UPLC-MS (Uslov 6) m/z = 518.2 [M+H]<+>;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.42 (br. s, 3 H) 1.63 - 1.98 (m, 4 H) 2.20 - 2.37 (m, 1 H) 2.71 - 2.94 (m, 1 H) 3.21 (d, J=6.65 Hz, 3 H) 3.32 - 3.51 (m, 1 H) 3.69 - 3.92 (m, 1 H) 4.08 - 4.24 (m, 1 H) 4.75 - 4.88 (m, 1 H) 4.89 - 5.17 (m, 1 H) 6.29 - 6.49 (m, 1 H) 7.32 (d, J=8.99 Hz, 2 H) 7.59 (s, 1 H) 7.78 - 8.10 (m, 3 H) 8.80 (t, J=2.54 Hz, 1 H) 10.05 - 10.28 (m, 1 H).
Faza 2.2: (R)-5-Bromo-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)nikotinamid [0297]
[0298] (R)-Pirolidin-3-ol (17.1 ml, 211.2 mmol) i DIPEA (67.6 ml, 387.6 mmol) se dodaju u suspenziju 5-bromo-6-hloro-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)nikotinamida (Faza 2.3, 69.6 g, 175.9 mmol) u iPrOH (120 mL) i meša na temperaturi od 140 °C tokom 1 h. Smeša se razblažuje sa EtOAc (1 L), ispire sa 1N HCl (2 x 200 mL), zasić. rastvorom NaHCO3(200 mL) i koncentrovanim rastvorom soli (2 x 200 mL) i suši na Na2SO4. Rastvarač se uparava na sniženom pritisku i proizvod kristalizuje iz smeše rastvarača koju čine EtOAc / iPr2O dajući jedinjenje iz naslova u obliku čvrstog kristalnog proizvoda bele boje. HPLC (Uslov 5) tR= 6.58 min, UPLC-MS (Uslov 6) m/z = 446.0/448.0 [M+H]<+>;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.78 - 2.01 (m, 2 H) 3.55 (d, J=11.34 Hz, 1 H) 3.64 - 3.76 (m, 1 H) 3.79 - 3.91 (m, 2
1
H) 4.33 (br. s, 1 H) 4.97 (d, J=3.13 Hz, 1 H) 7.33 (d, J=9.38 Hz, 2 H) 7.83 (d, J=8.99 Hz, 2 H) 8.30 -8.36 (m, 1 H) 8.66 (d, J=2.35 Hz, 1 H) 10.20 (s, 1 H).
Faza 2.3: 5-Bromo-6-hloro-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)nikotinamid
[0299]
[0300] Mešani rastvor 5-bromo-6-hloro-nikotinske kiseline (375 g, 1.586 mol) i DMF-a (37 mL) u toluenu (3.1 L) obradjuje se u kapima sa SOCl2(347 mL, 4.758 mol) na sobnoj temperaturi i onda meša na temperaturi na 85°C tokom 2.5 h. Rastvarač se uparava na sniženom pritisku i ostatak se rastvara u THF-u (3.1 L), hladi do temperature od -25°C, prvo se obradjuje sa DIPEA (543 mL, 3.172 mol) i zatim dodavanjem rastvora 4-(trifluorometoksi)anilina (295 g, 1.665 mol) u THF (3.1 L) u kapima. Nakon 30 min na temperaturi od 10°C rastvarač se uparava na sniženom pritisku i ostatak se rastvara u TBME (4 L), ispire sa 1N HCl (2 x 1 L), zasić. rastvorom NaHCO3(1 L) i koncentrovanim rastvorom soli (2 x 200 mL) i suši na Na2SO4. Rastvarač se ušarava na sniženom pritisku i proizvod se kristalizuje iz smeše rastvarača EtOAc / n-heptan dajući jedinjenje iz naslova u obliku čvrstog kristalnog proizvoda bež boje. UPLC-MS (Uslov 3) tR= 1.25 min, m/z = 393/395/397 [M-H]-;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.40 (d, J=8.60 Hz, 2 H) 7.86 (d, J=8.60 Hz, 2 H) 8.73 (d, J=2.20 Hz, 1 H) 8.92 (d, J=2.20 Hz, 1 H) 10.69 (s, 1 H).
Primer 3
(R)-6-(3-Hidroksipirolidin-1-il)-5-(3-metil-1H-pirazol-5-il)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil) nikotinamid
[0301]
[0302] (R,E)-6-(3-Hidroksipirolidin-1-il)-5-(3-oksobut-1-en-1-il)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil) nikotinamid (Faza 3.1, 50 mg, 0.091 mmol) i hidrazid toluen-4-sulfonska kiselina (34.5 mg, 0.181 mmol) i EtOH (302 µL) se dodaju u fiolu za mikrotalasno zračenje, koja se zatvori i meša na temperaturi od 80°C tokom 1.5 h. Smeša se hladi do sobne temperature, dodaje se NaOMe (17.15 mg, 0.318 mmol) i reakciona smeša se meša na temperaturi od 80°C tokom 48 h. Reakciona smeša se zakišeljava sa
2
mravljom kiselinom, filtrira kroz PTFE filter membranu debljine 0.2 µM i prečišćava preparativnom HPLC (Uslov 9, od 20% do 50% za 18 min) dajući jedinjenje iz naslova u obliku čvrstog proizvoda bele boje. UPLC-MS (Uslov 1) tR= 2.08 min, m/z = 448.0 [M+H]<+>, m/z = 446.0 [M-H]-;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.68 - 1.79 (m, 1 H) 1.78 - 1.90 (m, 1 H) 2.29 (br. s, 3 H) 2.98 (d, J=11.74 Hz, 1 H) 3.25 - 3.37 (m, 2 H) 3.40 - 3.53 (m, 1 H) 4.21 (br. s, 1 H) 4.83 (br. s, 1 H) 6.13 (s, 1 H) 7.33 (d, J=8.31 Hz, 2 H) 7.86 (d, 2 H) 8.01 (br. s, 1 H) 8.71 (br. s, 1 H) 10.15 (s, 1 H) 12.57 (br. s, 1 H).
Faza 3.1: (R,E)-6-(3-Hidrokipirolidin-1-il)-5-(3-oksobut-1-en-1-il)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil) nikotinamid
[0303]
[0304] (R)-5-Bromo-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)nikotinamid (Faza 2.2, 250 mg, 0.560 mmol), Pd(OAc)2(3.77 mg, 0.017 mmol), tri-o-tolilfosfin (20.46 mg, 0.067 mmol), but-3-en-2-on (55.1 µL, 0.672 mmol) i TEA (102 µL, 0.728 mmol) se dodaju u fiolu za mikrotalasno zračenje, koja se zatvara i pročisti sa argonom. Dodaje se DMF (1.87 mL) i reakciona smeša se meša na temperaturi od 130°C tokom 6 h. Tada se dodaje dodatna količina but-3-en-2-on (22.96 µL, 0.280 mmol) i smeša se meša na temperaturi od 130°C tokom 16 h. Reakciona smeša se sipa u vodu (25 mL) i ekstrahuje sa DCM-om (3 x 20 mL). Kombinovani ekstrakti se suše na MgSO4i rastvarač se upari na sniženom pritisku dajući sirovi proizvod koji se prečišćava fleš hromatografijom (RediSep® Silica gel kolona, 12 g, cikloheksan / EtOAc-EtOH 0.1% NH4OH (9:1) od 40% do 75% EtOAc-EtOH 0.1% NH4OH (9:1)). Frakcije koje sadrže čisti proizvod se sakupljaju i rastvarač se uparava na sniženom pritisku dajući ostatak koji se azeotropira sa ksilenom i trituriše u cikloheksanu dajući jedinjenje iz naslova u obliku čvrstog proizvoda žute boje. UPLC-MS (Uslov 1) tR= 2.39 min, m/z = 436.0 [M+H]<+>, m/z = 434.0 [M-H]-;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.82 - 1.91 (m, 1 H) 1.91 - 2.00 (m, 1 H) 2.35 (s, 3 H) 3.43 (d, J = 11.25 Hz, 1 H) 3.59 - 3.67 (m, 1 H) 3.78 - 3.88 (m, 2 H) 4.34 (br. s, 1 H) 4.99 (d, J = 3.18 Hz, 1 H) 6.61 (d, J = 15.89 Hz, 1 H) 7.36 (d, J = 8.31 Hz, 2 H) 7.81 - 7.93 (m, J = 16.14, 9.29 Hz, 3 H) 8.29 (d, J = 2.20 Hz, 1 H) 8.71 (d, J = 2.45 Hz, 1 H) 10.21 (s, 1 H).
Primer 4
(R)-6-(3-Hidroksipirolidin-1-il)-5-(4-metil-1H-pirazol-5-il)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)nikotinamid [0305]
[0306] U rastvor 6-hloro-5-(4-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)nikotinamida (Faza 4.1, 55 mg, 0114 mmol) i (R)-pirolidin-3-ol-a (11.96 mg, 0.137 mmol) u iPrOH (114 µL) u fioli, dodaje se DIPEA (43.9 µL, 0.252 mmol), i fiola se zatvara i zagreje do temperature od 140°C tokom 18 h. Nakon hladjenja do sobne temperature, reakciona smeša se rastvara u EtOAc, ispire sa koncentrovanim rastvorom soli, suši na Na2SO4i rastvarač se upari na sniženom pritisku i sirovi proizvod se prečišćava fleš hromatografijom (RediSep® Silica gel kolona, EtOAc / MeOH 98:2) dajući 6-((R)-3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(4-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)nikotinamid u obliku beličaste pene. Ovaj intermedijer (39 mg, 0.073 mmol) se rastvara u DCM-u (0.8 mL), obradjuje sa TFA (0.262 mL, 3.4 mmol) i meša na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Reakciona smeša se sipa u 25 mL 10% Na2CO3i ekstrahuje sa EtOAc. Kombinovani ekstrakti se suše na Na2SO4I rastvarač se upari na sniženom pritisku i sirovi proizvod se prečišćava fleš hromatografijom (RediSep® Silica gel kolona, DCM / MeOH od 2% do 10% MeOH) dajući jedinjenje iz naslova u obliku beličastog praha. HPLC (Uslov 4) tR= 4.46 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 0.92 min, m/z = 448.4 [M+H]<+>;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.64 - 1.81 (m, 2 H) 1.86 (s, 3 H) 2.78 - 2.97 (m, 1 H) 3.07 - 3.41 (m, 3 H) 4.18 (br. s, 1 H) 4.81 (br. s, 1 H) 7.32 (d, J = 8.60 Hz, 2 H) 7.58 (br. s, 1 H) 7.85 (d, J = 9.38 Hz, 2 H) 7.93 (br. s, 1 H) 8.73 (br. s, 1 H) 10.14 (s, 1 H) 12.63 (br. s, 1 H).
Faza 4.1: 6-hloro-5-(4-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)nikotinamid
[0307]
[0308] U rastvor 6-hloro-5-jodo-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)nikotinamida (Faza 4.2, 89 mg, 0.2 mmol) i 4-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazola (58.4 mg, 0.2 mmol) u dioksanu (1 mL) u fioli koja je isprana argonom i zagrevana na temperaturi od 110°C, dodaje se K3PO4(127 mg, 0.6 mmol), i onda se dodaje PdCl2(dppf) (7.32 mg, 0.01 mmol). Fiola je zapečaćena i reakciona smeša se meša u struji argona na temperaturi od 110°C u vremenu od 18 h.
4
Reakciona smeša se hladi do sobne temperature, rastvara u EtOAc i ispire sa koncentrovanim rastvorom soli. Organska faza se sušu preko Na2SO4i rastvarač se uparava na sniženom pritisku i ostatak se prečišćava fleš hromatografijom (RediSep® Silica gel kolona, n-heptan / EtOAc od 50% do 100% EtOAc) dajući jedinjenje iz naslova u obliku bele pene. HPLC (Uslov 4) tR= 6.24 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 1.22 min, m/z = 481.2 [M+H]<+>.
Faza 4.2: 6-hloro-5-jodo-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)nikotinamid
[0309]
[0310] U smešu 6-hloro-5-jodonikotinske kiseline (1.00 g, 3.35 mmol) i 4-(trifluorometoksi)anilina (0.623 mg, 3.52 mmol) u toluenu (7 mL) dodaju se DMF (0.13 mL) i SOCl2(0.734 mL, 10.05 mmol) i reakciona smeša se meša na temperaturi od 80°C u vremenu od 1 h. Rastvarač se uparava na sniženom pritisku u struji argona i ostatak se rastvara u THF-u (7.00 mL) i DIPEA (1.17 mL, 6.7 mmol), hladi do temperature od -15°C i obradjuje u kapima sa rastvorom 4-(trifluorometoksi)anilina (0.476 mL, 3.52 mmol) u THF-u (7.00 mL) i meša na sobnoj temperaturi u vremenu od 1 h. Rastvarač se uparava na sniženom pritisku i ostatak se obradjuje sa vod. 1N HCl (30 mL) i ekstrahuje sa TBME (100 mL). Kombinovani ekstrakti se ispiru sa zasić. vod. Na2CO3(30 mL) i koncentrovanim rastorom soli (30 mL), suše na Na2SO4i rasatvarač se uparava na sniženom pritisku sve do pojave kristalizacije. Proizvod se trituriše sa n-heptanom, filtrira i suši dajući jedinjenje iz naslova u obliku beličastog čvrstog proizvoda. HPLC (Uslov 4) tR= 6.36 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 1.23 min, m/z = 441.1 [M-H]-.
Primer 5
(R)-5-(4-Fluoro-1H-pirazol-5-il)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil) nikotinamid
[0311]
[0312] U rastvor 6-hloro-5-(4-fluoro-1H-pirazol-5-il)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)nikotinamida (Faza 5.1, 75 mg, 0.187 mmol) i (R)-pirolidin-3-ol (19.97 mg, 0.225 mmol) u iPrOH (187 µL) u fioli koja je bila zapečaćena i zagrevana na temperaturi od 140°C tokom 1 h dodaje se DIPEA (71.9 µL, 0.412 mmol). Nakon hladjenja na sobnoj temperaturi, reakciona smeša se rastvara u EtOAc i ispire sa koncentrovanim rastvorom soli, suši na Na2SO4i rastvarač se uparava na sniženom pritisku dajući sirovi proizvod koji se prečišćava fleš hromatografijom (RediSep® Silica gel kolona, DCM / MeOH od 2% do 10% MeOH) dajući jedinjenje iz naslova u obliku pene bele boje. HPLC (Uslov 4) tR= 4.73 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 0.93 min, m/z = 452.4 [M+H]<+>;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.64 - 1.95 (m, 2 H) 3.00 (d, J = 11.34 Hz, 1 H) 3.18 - 3.51 (m, 3 H) 4.22 (br. s, 1 H) 4.86 (br. s, 1 H) 7.32 (d, J = 8.60 Hz, 2 H) 7.77 - 8.11 (m, 4 H) 8.76 (br. s, 1 H) 10.17 (s, 1 H) 12.90 (br. s, 1 H).
Faza 5.1: 6-hloro-5-(4-fluoro-1H-pirazol-5-il)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)nikotinamid
[0313]
[0314] U rastvor 6-hloro-5-jodo-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)nikotinamida (Faza 4.2, 133 mg, 0.3 mmol) i 4-fluoro-5-(tributilstanil)-1H-pirazola (101 mg, 0.270 mmol) u DMSO (1 mL) u fioli u atmosferi argona, dodaje se Pd(Ph3P)4(17.33 mg, 0.015 mmol). Fiola je bila zapečaćena i reakciona smeša se zagreje do temperature od 100°C tokom 18 h. Nakon hladjenja do sobne temperature, reakciona smeša se rastvara u EtOAc, ispire sa koncentrovanim rastvorom soli, suši na Na2SO4i rastvarač se uparava na sniženom pritisku dajući sirovi proizvod koji se prečišćava fleš hromatografijom (RediSep® Silica gel kolona, n-heptan /EtOAc od 10% do 50% EtOAc) dajući jedinjenje iz naslova u obliku beličastog praha. HPLC (Uslov 4) tR= 5.5 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 1.05 min, m/z =399.2 [M-H]-.
Primer 6
(R)-6-(3-Hidroksipirolidin-1-il)-5-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)nikotinamid [0315]
[0316] Smeša (R)-5-bromo-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)nikotinamida (Faza 2.2, 60 mg, 0.134 mmol), 1-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazola (42 mg, 0.202 mmol), Pd(PPh3)2Cl2(9.44 mg, 0.013 mmol), Na2CO3(42.8 mg, 0.403 mmol), DME (570 µL), vode (163 µL) i EtOH (81 µL) u fioli za mikrotalasno zračenje je bila zapečaćena, ispražnjena/ zatim je ispirana sa argonom i bila je izložena mikrotalasnom zračenju na temperaturi od 120°C u vremenu od 10 min. Reakciona smeša se razblažuje sa THF (1 mL), obradjuje sa Si-Tiol (Silicycle, 1.44 mmol/g, 46.7 mg, 0.067 mmol), filtrira i filtrat se upari na sniženom pritisku dajući ostatak koji se prećišćava preparativnom HPLC (Uslov 9, 25% za 0.2 min zatim 15% do 45% za 14 min) dajući jedinjenje iz naslova u obliku čvrstog proizvoda bele boje. LC-MS (Uslov 2) tR= 1.61 min, m/z = 448.2/449.2 [M+H]<+>, m/z = 446.1 [M-H]-;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.71 - 1.80 (m, 1 H) 1.81 - 1.91 (m, 1 H) 2.98 (d, J = 11.25 Hz, 1 H) 3.25 - 3.39 (m, .2 H) 3.44 - 3.53 (m, 1 H) 3.89 (s, 3 H) 4.22 (s, 1 H) 4.84 (s, 1 H) 7.34 (d, J = 8.56 Hz, 2 H) 7.53 (s, 1 H) 7.84 (d, J = 5.38 Hz, 2 H) 7.86 - 7.88 (m, 1 H) 7.94 (d, J = 2.45 Hz, 1 H) 8.67 (d, J = 2.45 Hz, 1 H) 10.14 (s, 1 H).
Primer 7
(S)-6-(3-(Hidroksimetil)pirolidin-1-il)-5-(1H-pirazol-5-il)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)nikotinamid [0317]
[0318] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na sličan način kao i primeru 2 korišćenjem (S)-5-bromo-6-(3-(hidroksimetil)pirolidin-1-il)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)nikotinamida (Faza 7.1) i (1H-pirazol-3-il)borne kiseline dajući čvrstu supstancu bele boje. UPLC-MS (Uslov 1) tR= 1.89 min, m/z = 448.0 [M+H]<+>, m/z = 446.1 [M-H]-;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.48 - 1.64 (m, 1 H) 1.77 - 1.90 (m, 1 H) 2.15 - 2.28 (m, 1 H) 3.03 (dd, J = 11.25, 6.85 Hz, 1 H) 3.22 (br. s, 2 H) 3.25 - 3.31 (m, 2 H) 3.34 - 3.39 (m, 1 H) 4.62 (br. s, 1 H) 6.39 (br. s, 1 H) 7.34 (d, J = 8.56 Hz, 2 H) 7.51 - 7.84 (m, 1 H) 7.83 - 7.90 (m, 2 H) 8.03 (s, 1 H) 8.68 - 8.79 (m, 1 H) 10.19 (s, 1 H) 12.87 - 13.12 (m, 1 H).
Faza 7.1: (S)-5-Bromo-6-(3-(hidroksimetil)pirolidin-1-il)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)nikotinamid [0319]
[0320] Smeša 5-bromo-6-hloro-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)nikotinamida (Faza 2.3, 500 mg, 1.264 mmol), (S)-beta-prolinol hidrohlorida (226 mg, 1.643 mmol), DIPEA (662 µL, 3.79 mmol) i iPrOH (1.945 mL) u zatvorenoj fioli je podvrgnuta mikrotalasnom zračenju na temperaturi od 140°C u vremenu od 60 min. Rastvarač se uparava na sniženom pritisku i ostatak se obradjuje sa vod.0.5 M HCl (20 mL) i ekstrahuje sa EtOAc. Kombinovani ekstrakti se ispiru sa 0.5 M HCl (10 ml) i vodom, suše na MgSO4i rastvarač se upari na sniženom pritisku dajući proizvod koji se trituriše sa cikloheksanom, filtrira i suši dajući jedinjenje iz naslova u obliku čvrstog proizvoda bele boje. UPLC-MS (Uslov 1) tR= 2.76 min, m/z = 460.0/462.0 [M+H]<+>, m/z = 458.0/460.0 [M-H]-;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.59 -1.76 (m, 1 H) 1.92 - 2.04 (m, 1 H) 2.26 - 2.44 (m, 1 H) 3.37 - 3.50 (m, 2 H) 3.56 (dd, J = 11.00, 7.34 Hz, 1 H) 3.67 - 3.85 (m, 3 H) 4.71 (br. s, 1 H) 7.35 (d, J = 8.56 Hz, 2 H) 7.85 (d, 1 H) 8.34 (d, J = 1.96 Hz, 1 H) 8.68 (d, J = 1.96 Hz, 1 H) 10.21 (s, 1 H).
Primer 8
(S)-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1H-pirazol-5-il)nikotinamid [0321]
[0322] K3PO4(41.3 mg, 0.195 mmol) se dodaje u rastvor (S)-5-bromo-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)nikotinamida (Faza 8.1, 30 mg, 0.067 mmol) i 1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazola (36.2 mg, 0.13 mmol) u toluenu (0.32 mL) u fioli koja je isprana sa argonom. Dodaje se Pd(PPh3)4(3.75 mg, 0.032 mmol). Fiola je bila zapečaćena i zagrevana na temperaturi od 110°C u vremenu od 18 h. Nakon hladjenja na sobnoj temperaturi, reakciona smeša se rastvara u EtOAc, ispire sa koncentrovanim rastvorom soli, suši na Na2SO4i rastvarač se upari na sniženom pritisku dajući sirovi proizvod koji se prečišćava fleš hromatografijom (RediSep® Silica gel kolona, DCM / MeOH od 2% do 5% MeOH) što za rezultat ima dobijanje N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-((S)-3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il)nikotinamida, gde se deo toga ( 21 mg, 0.039 mmol) rastvara u DCM-u (0.5 mL), obradjuje sa TFA (0.141 mL, 1.82 mmol) i mešaju na sobnoj temperaturi u vremenu od 3 h. Reakciona smeša se sipa u 10 % vod. Na2CO3(10 mL) i ekstrahuje sa EtOAc. Kombinovani ekstrakti se suše na Na2SO4i rastvarač se uparava na sniženom pritisku dajući sirovi proizvod koji se prečišćava fleš hromatografijom (RediSep® Silica gel kolona, DCM / MeOH od 2% do 5% MeOH) dajući jedinjenje iz naslova. HPLC (Uslov 4) tR= 4.49 min, HPLC Chiral (CHIRALCEL® OD-H, 250 x 4.6 mm, eluent : n-heptan/EtOH/MeOH (85:10:5), 1 mL/min, UV DAD, tR= 13.32 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 0.92 min, m/z = 450.3 [M+H]<+>;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.65 - 1.76 (m, 1 H) 1.77 - 1.92 (m, 1 H) 2.86 - 2.97 (m, 1 H) 3.18 - 3.35 (m, 2 H) 3.34 - 3.47 (m, 1 H) 4.10 - 4.24 (m, 1 H) 4.66 - 4.93 (m, 1 H) 6.28 - 6.42 (m, 1 H) 7.31 (d, J = 8.99 Hz, 2 H) 7.85 (d, J = 8.99 Hz, 3 H) 7.96 -8.05 (m, 1 H) 8.64 - 8.81 (m, 1 H) 10.17 (s, 1 H) 12.80 - 13.14 (m, 1 H).
Faza 8.1: (S)-5-Bromo-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)nikotinamid [0323]
[0324] U rastvor 5-bromo-6-hloro-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)nikotinamida (Faza 9.3, 206 mg, 0.5 mmol) i (S)-pirolidin-3-ol-a (52.3 mg, 0.6 mmol) u iPrOH (500 µL) u fioli, koja je bila zapečaćena i zagrevana na temperaturi od 140°C tokom 1 h, dodaje se DIPEA (190 µL, 1.1 mmol). Nakon hladjenja na sobnoj temperaturi, reakciona smeša je rastvarana u EtOAc, ispirana je sa 0.5 M vod. HCl i koncentrovanim rastvorom soli, sušena na Na2SO4i rastvarač se uparava na sniženom pritisku dajući sirovi proizvod koji se prečišćava fleš hromatografijom (RediSep® Silica gel kolona, n-heptan / EtOAc od 20 do 100% EtOAc) dajući jedinjenje iz naslova u obliku belog kristalnog praha. HPLC (Uslov 4) tR= 5.59 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 1.17 min, m/z = 462.0/464.1 [M+H]<+>.
Primer 9
(R)-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1H-pirazol-5-il)nikotinamid [0325]
[0326] Smeša (R)-5-Bromo-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)nikotinamida (Faza 9.2, 100 mg, 0.216 mmol) i 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazola (215 mg, 0.663 mmol), Pd(PPh3)2Cl2(17 mg, 0.024 mmol), Na2CO3(115 mg, 1.081 mmol), DME (917 µL), vode (262 µL) i EtOH (131 µL) u fioli za mikrotalasno zračenje je bila zapečaćena, zatim je ista ispražnjena / pročišćena 3 puta sa argonom i podvrgnuta mikrotalasnom zračenju na temperaturi od 125°C tokom 20 min. Reakciona smeša se razblažuje sa 2 mL DME, meša sa Si-Thiol (Silicycle 1.44 mmol/g, 90 mg, 0.130 mmol) tokom 3 h. Smeša se centrifugira i supernatant se filtrira kroz PTFE filter debljine 0.45 μm i rastvarač se uparava na sniženom pritisku. Sirovi proizvod se prečišćava fleš hromatografijom (RediSep® Silica gel kolona, 12 g, cikloheksan / EtOAc od 40% do 100% EtOAc) dajući zaštićeni intermedijer u obliku bezbojnog ulja. Zatim su dodavani etilen diamin (96 µL, 1.428 mmol) i TBAF 1 M u THF-u (1.428 mL, 1.428 mmol) i reakciona smeša se meša na temperaturi od 80-85°C tokom 5 dana. Rastvarač se upari na sniženom pritisku i ostatak je rastvoren u EtOAc (40 mL), ispran 3 puta sa zasić. vod. NaHCO3i koncentrovanim rastvorom soli, sušen na Na2SO4i rastvarač se upari na sniženom pritisku dajući ostatak koji je prečišćen preparativnom SFC (Column DEAP, od 25% do 30% za 6 min) dajući jedinjenje iz naslova u obliku čvrstog proizvoda bele boje.
[0327] Alternativno, jedinjenje iz Primera 9 dobija se dodatkom TFA (168 mL, 2182 mmol) u rastvor N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-((R)-3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il)nikotinamida (Faza 9.1, 31.3 g, 54.6 mmol) u DCM-u (600 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2.5 h. Rastvarač je uparen na sniženom pritisku i ostatak je rastvoren u EtOAc (1.5 L), zatim ispiran sa zasić. rastvorom NaHCO3(3 x 500 mL) i koncentrovanim rastvorom soli (500 mL), suši na Na2SO4i rastvarač se upari na sniženom pritisku dajući ostatak koji se suspenduje u DCM-u (300 mL), nakon toga meša na sobnoj temperaturi tokom 15 min, filtrira, ispire sa DCM-om (200 mL), suši i prečišćava hromatografijom (Silika gel, 1 kg, DCM / MeOH 95:5). Ostatak se rastvara u MeOH (500 mL) i obradjuje sa Si-Tiol (Biotage, 5.0 g , 6.5 mmol) tokom 16 h na temperaturi od 25°C. Smola se otfiltira, rastvarač se uparava pod sniženim pritiskom i ostatak kristalizuje iz MeCN dajući jedinjenje iz naslova u obliku bele kristalne supstance.
[0328] Alternativno, jedinjenje iz primera 9 se dobija dodatkom vodenog HCl u kapima (7.7 mL 6M) u rastvor N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-((R)-3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il)nikotinamida (Faza 9.1, 3.8 g, 7.12 mmol) u MeOH (20 mL) i THF (10 mL) uz hladjenje (na temperaturi ispod 35°C). Smeša je mešana na temperaturi od 22°C tokom 2 h i nakon toga je dodavana u ohladjenu (10°C) 1.2 M NaOH (22 mL). Tokom dodavanja temperatura je održavana ispod 30°C i pH smeše je održavan u opsegu od 9-10. Reakciona smeša je nakon toga mešana 30 min na temperaturi od 30°C. Rastvarač je uparavan na sniženom pritisku, dok se željeno jedinjenje nije istaložilo. Precipitat (talog) se filtrira i suši dajući jedinjenje iz naslova u obliku čvrstog proizvoda žute boje.
[0329] Analitički podaci za jedinjenje iz Primera 9: HPLC (Uslov 5) tR= 5.54 min, HPLC Chiral (CHIRALCEL® OD-H, 250 x 4.6 mm, eluent : n-heptan /EtOH/MeOH (85:10:5), 1 mL/min, UV 210 nm) tR= 10.17 min, UPLC-MS (uslov 3) tR= 0.93 min, m/z = 450.3 [M+H]<+>, m/z = 494.1 [M+ mravlja kiselin-H]-;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.65 - 1.76 (m, 1 H) 1.76 - 1.87 (m, 1 H) 2.93 (d, J=11.73 Hz, 1 H) 3.19 - 3.29 (m, 2 H) 3.35 - 3.51 (m, 1 H) 4.10 - 4.25 (m, 1 H) 4.89 (br. s, 1 H) 6.41 (br. s, 1 H) 7.33 (d, J=8.50 Hz, 2 H) 7.57/7.83 (br. s, 1 H) 7.90 (d, J=8.50 Hz, 2 H) 8.07 (br. s, 1 H) 8.77 (br. s, 1 H) 10.23 (s, 1 H) 12.97/13.15 (br. s, 1 H).
Faza 9.1: N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-((R)-3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il)nikotinamid
[0330]
[0331] 1-(Tetrahidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol (29.6 g, 102 mmol), K3PO4(51.6 g, 236 mmol) i Pd(PPh3)4(4.55 g, 3.93 mmol) su dodavani u suspenziju (R)-5-bromo-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)nikotinamida (Faza 9.2, 36.4 g, 79 mmol) u toluenu (360 mL) u atmosferi argona i smeša je mešana na temperaturi od 110°C tokom 4 h. Reakciona smeša je sipana u koncentrovani rastvor soli (500 mL) i ekstrahovana je sa EtOAc (2 x 1 L). Sakupljeni ekstrakti se ispiraju sa koncentrovanim rastvorom soli (500 mL), suše na Na2SO4, i rastvarač se uparava na sniženom pritisku dajući ostatak koji se prečišćava hromatografijom (kolona sa silika gelom, 1.5 kg, DCM / MeOH 95:5) što za rezultat ima dobijanje pene tamnožute boje, koja se rastvara u smeši rastvarača MeOH / DCM (1 L of 3:1) i obradjuje sa Si-Tiol (Biotage, 35 g , 45.5 mmol) tokom 17 h na temp. od 30°C. Smola se otfiltira, i rastvarač se uparava na sniženom pritisku dok željeno jedinjenje kristališe. Proizvod se filtrira i ispire sa MeOH i suši dajući jedinjenje iz naslova.
[0332] Alternativno, faza 9.1 se dobija dodatkom 4-(hlorodifluorometoksi)anilina (16.6 g, 84.9 mmol), NMM (21.7 g, 212.1 mmol), hidroksibenzotriazol hidrata (HOBt H2O, 11.9 g, 77.77 mmol) i 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)karbodiimid hidrohlorida (EDCI HCl, 20.9 g, 109.0 mmol) u rastvor 6-((R)-3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il)nikotinske kiseline (Faza 9.4, 29.83 g, 70.7 mmol) u THF-u (271 mL). Smeša se meša 1.5 h na temperaturi od 25°C i nakon toga na temp. od 65°C tokom 16 h. Nakon hladjenja reakcione smeše do temp. od 35 °C, dodaje se dodatna količina EDCI HCl (13.3 g, 69.4 mmol) i reakciona smeša se meša 1.5 h na temperaturi od 35°C zatim ponovo na temperaturi od 65°C tokom 16 h. Nakon hladjenja reakcione smeše do temperature od 35°C, dodaje se voda (150 mL), THF se uklanja na sniženom pritisku, dodaje se EtOAc (180 mL) i smeša se meša na temperaturi od 35 °C tokom 1 h. Dva sloja se razdvajaju i vod. faza se zatim ekstrahuje sa EtOAc (60 mL). Sakupljeni organski slojevi se ispiraju sa vodom (90 mL), koncentrovanim rastvorom soli (90 mL). Rastvarač se uparava na sniženom pritisku dajući čvrsti proizvod braon boje koji se prečišćava hromatografijom na koloni (Silica gel, DCM / MeOH 40:1 to 20:1) dajući jedinjenje iz naslova u obliku čvrstog proizvoda žute boje.
1
[0333] Analitički podaci za fazu 9.1: HPLC (Uslov 5) tR= 6.12 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 1.06 min, m/z = 533.2 [M+H]<+>;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.36 - 2.02 (m, 7 H) 2.23 - 2.38 (m, 1 H) 3.08 - 3.29 (m, 2 H) 3.32 - 3.52 (m, 2 H) 3.73 - 3.93 (m, 1 H) 4.13 - 4.25 (m, 1 H) 4.80 - 4.90 (m, 1 H) 4.95 - 5.17 (m, 1 H) 6.33 - 6.50 (m, 1 H) 7.33 (d, J=8.99 Hz, 2 H) 7.61 (d, J=1.56 Hz, 1 H) 7.86 (d, J=8.99 Hz, 2 H) 7.97 - 8.11 (m, 1 H) 8.82 (s, 1 H) 10.13 - 10.25 (m, 1 H).
Faza 9.2: (R)-5-Bromo-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)nikotinamid [0334]
[0335] (R)-Pirolidin-3-ol (9.55 g, 109.6 mmol) i DIPEA (35.1 ml, 201.3 mmol) se dodaju u suspenziju 5-bromo-6-hloro-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)nikotinamida (Faza 9.3, 37.7 g, 91.5 mmol) u iPrOH (65 mL) i mešaju na temperaturi od 140°C tokom 1 h. Nakon toga se dodaje EtOAc (700 mL) i rastvor se ispire sa 1N HCl (2 x 200 mL), zasić. NaHCO3(200 mL) i koncentrovanim rastvorom soli (2 x 200 mL), suši na Na2SO4, i rastvor se koncentruje na sniženom pritisku dok ne počne kristalizacija. Dodaje se n-Heptan (1 L) i smeša se meša na sobnoj temperaturi tokom 30 min, filtrira i ispire sa iPr2O (500 mL) dajući jedinjenje iz naslova u obliku bele kristalne supstance. HPLC (Uslov 5) tR= 6.68 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 1.10 min, m/z = 462.2/464.2 [M+H]<+>;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.78 - 2.01 (m, 2 H) 3.55 (d, J=11.34 Hz, 1 H) 3.66 - 3.75 (m, 1 H) 3.79 - 3.93 (m, 2 H) 4.34 (br. s, 1 H) 4.98 (d, =3.13 Hz, 1 H) 7.32 (d, J=8.99 Hz, 2 H) 7.84 (d, J=8.99 Hz, 2 H) 8.33 (d, J=1.96 Hz, 1 H) 8.66 (d, J=1.96 Hz, 1 H) 10.21 (s, 1 H).
Faza 9.3: 5-Bromo-6-hloro-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)nikotinamid
[0336]
[0337] U suspenziju 5-bromo-6-hloro-nikotinske kiseline (26 g, 110 mmol) u toluenu (220 mL) dodaju se DMF (2.55 mL, 33.0 mmol) i SOCl2(24.08 ml, 330 mmol) i reakciona smeša se meša na temperaturi od 80°C u vremenu od 1 h. Rastvarač se uparava na sniženom pritisku i ostatak se rastvara u THF-u (220 mL) i hladi do temperature od -16°C. Dodaje se DIPEA (38.4 mL, 220 mmol), nakon čega sledi dodavanje rastvora 4-(hlorodifluorometoksi)anilina u kapima (22.35 g, 115 mmol) u THF (220 mL) u vremenu od 15 min. Suspenzija se meša tokom 1 h na sobnoj temperaturi. Rastvarač se uparava na
2
sniženom pritisku i ostatak se rastvara u TBME (700 mL), ispire sa 1N HCl (2 x 200 mL), zasić. NaHCO3(200 mL) i koncentrovanim rastvorom soli (2 x 200 mL), suši na Na2SO4, i rastvarač se uparava na sniženom pritisku dajući proizvod koji je kristalizovao iz smeše rastvarača EtOAc - n-heptan dajući jedinjenje iz naslova u obliku bele kristalne supstance. HPLC (Uslov 5) tR= 7.77 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 1.24 min, m/z = 409.1/411.1/413.1 [M+H]<+>;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.38 (d, =8.99 Hz, 2 H) 7.85 (d, =8.99 Hz, 2 H) 8.72 (br. s, 1 H) 8.92 (br. s, 1 H) 10.68 (s, 1 H).
Faza 9.4: 6-((R)-3-Hidroksipirolidin-1-il)-5-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il)nikotinska kiselina
[0338]
[0339] U rastvor metil 6-((R)-3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il)nikotinata (Faza 9.5, 111g, 299 mmol) u MeOH (270 mL) dodaje se vod. NaOH (180 mL 2.6 M) i reakciona smeša se meša na sobnoj temperaturi u vremenu od 14 h. MeOH se upari na sniženom pritisku i vod. ostatak se obradjuje sa koncentrovanim rastvorom soli (90 mL), ekstrahuje sa MeTHF dva puta (540 mL 360 mL) i kombinovani organski slojevi se ispiraju sa vodom (90 mL). U spojene vodene slojeve se dodaje MeTHF, dvofazna smeša se hladi do temperature od 0 °C i zakiseli (pH = 4-4.5) sa vod. rastvorom HCl (18%) i ekstrahuje sa MeTHF. Spojeni organski ekstrakti se ispiraju sa koncentrovanim rastvorom soli i rastvarač se uparava na sniženom pritisku dajući ostatak koji se rekristalizuje iz smeše rastvarača EtOAc / TBME (1:1) dajući jedinjenje iz naslova u obliku čvrstog proizvoda bele boje. HPLC (Uslov 7) tR= 4.74 min, LC-MS (Uslov 8) tR= 3.37 rmin, m/z = 359.0 [M+H]<+>;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.44 (br. s, 2 H), 1.51 (d, J=11.54 Hz, 2 H), 1.64 - 1.86 (m, 4 H), 1.90 (br. s, 1 H), 2.31 (d, J=9.29 Hz, 1 H), 2.77 (br. s, 1 H), 3.10 (br. s, 1 H), 3.21 (d, J=8.78 Hz, 2 H), 3.27 - 3.51 (m, 4 H), 3.87 (d, J=11.54 Hz, 1 H), 4.16 (br. s, 1 H), 4.75 - 4.93 (m, 1 H), 5.04 (br. s, 1 H), 6.35 (d, J=17.32 Hz, 1 H), 7.51 - 7.64 (m, 1 H), 7.64 - 7.82 (m, 1 H), 8.67 (d, J=2.26 Hz, 1 H), 12.58 (br. s, 1 H).
Faza 9.5: Metil 6-((R)-3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il)nikotinat
[0340]
[0341] Smeša (R)-metil 5-bromo-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)nikotinata (Faza 9.6, 90 g, 299 mmol), pinakol estra 1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-borne kiseline (103.9 g, 373.6 mmol), K3PO4(126.9 g, 597.7 mmol), Pd(PPh3)2Cl2(6.29 g, 8.97 mmol) u toluenu (900 mL) se meša na temperaturi od 92°C u vremenu od 16 h. Nakon hladjenja smeše do sobne temperature, rastvor se ispire sa vodom (450 mL), 5 %-tnim rastvorom NaHCO3(430 mL) i rastvarač se uparava na sniženom pritisku dajući ostatak koji se koristi bez daljih prečišćavanja u sledećoj fazi. HPLC (Uslov 7) tR= 6.929 min, LC-MS (Uslov 8) tR= 4.30 min, m/z = 373.0 [M+H]<+>;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.19 - 1.28 (m, 1 H), 1.35 - 1.63 (m, 4 H), 1.63 - 1.86 (m, 3 H), 1.89 (br. s, 1 H), 2.12 - 2.39 (m, 1 H), 3.11 (br. s, 1 H), 3.18 - 3.48 (m, 4 H), 3.78 (s, 4 H), 3.88 (d, J=11.54 Hz, 1 H), 4.08 - 4.24 (m, 1 H), 4.86 (dd, J=18.20, 2.89 Hz, 1 H), 5.02 (d, J=8.28 Hz, 1 H), 6.39 (br. s, 1 H), 7.58 (d, J=1.25 Hz, 1 H), 7.78 (br. s, 1 H), 8.69 (t, J=2.01 Hz, 1 H).
Faza 9.6: (R)-metil 5-bromo-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)nikotinat
[0342]
[0343] U rastvor metil-5-bromo-6-hroronikotinata (85 g, 339.5 mmol) i (R)-pirolidin-3-ol (54.2 g, 441.2 mmol) u izopropil acetatu dodaje se DIPEA (105.3 g, 142.2 mL, 814.4 mmol) i reakciona smeša se meša na temperaturi od 70°C tokom 14 h . Rastvarač se uparava na sniženom pritisku dajući ostatak koji se rastvara u toluenu (850 mL), koji se zatim ispire sa vodom (127 mL) i koncentrovanim rastvorom soli (127 mL) i koncentruje na sniženom pritisku dok ne počne taloženje. n-Heptan (340 mL) se lagano dodaje u mešanu smešu na temperaturi od 22 °C, koja je zatim hladjena do temperature od 0 °C i proizvod se filtrira, ispire sa smešom rastvarača toluen / n-heptan (1:1.5) i suši dajući jedinjenje iz naslova u obliku čvrstog proizvoda žute boje. HPLC (Uslov 7) tR= 8.54 min, LC-MS (Uslov 8) tR= 4.62 min, m/z = 300.9/302.9 [M+H]<+>;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.77 - 1.99 (m, 2 H), 3.57 (d, J=11.54 Hz, 1 H), 3.72 (ddd, J=11.11, 7.97, 3.26 Hz, 1 H), 3.78 (s, 3 H), 3.81 -3.90 (m, 2 H), 4.26 -4.39 (m, 1 H), 4.99 (br. s, 1 H), 8.11 (d, J=2.01 Hz, 1 H), 8.56 (d, J=1.76 Hz, 1 H).
4
Primer 10
(S)-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-(hidroksimetil)pirolidin-1-il)-5-(1H-pirazol-5-il)nikotinamid
[0344]
[0345] Smeša (S)-5-bromo-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-(hidroksimetil)pirolidin-1-il)nikotinamida (Faza 10.1, 119 mg, 0.25 mmol), 1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazola (139 mg, 0.5 mmol), Pd(PPh3)2Cl2(0.018 g, 0.025 mmol), Na2CO3(0.106 g, 1.000 mmol), DME (1.061 mL), vode (0.303 mL) i EtOH (0.152 mL) je dodavana u fiolu za mikrotalasno zračenje koja je bila zapečaćena, zatim je bila ispražnjena/ pročišćena 3 puta sa argonom i podvrgnuta mikrotalasnom zračenju na temperaturi od 125°C tokom 20 min. Reakciona smeša je razblažena sa DME (2 mL) i mešana tokom noći sa Si-Tiol (Silicycle 1.43 mmol/g, 0.105 g, 0.150 mmol). Smeša se centrifugira i supernatant se filtrira kroz PTFE filter debljine 0.45 μm i rastvarač se uparava na sniženom pritisku. Sirovi proizvod se prečišćava fleš hromatografijom (RediSep® Silica gel kolona, 12 g, cikloheksan / EtOAc od 20% do 90% EtOAc) dajući zaštićeni intermedijer koji se obradjuje sa smešom DCM (2.5 mL) i TFA (0.963 mL, 12.50 mmol) i meša na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Rastvarač se upari na sniženom pritisku i ostatak se obradjuje sa rastvorom 7 N NH3u MeOH (2 mL, 14 mmol). Rastvarač se uparava na sniženom pritisku i ostatak se prečišćava preparativnom SFC (Kolona DEAP, izokratsko eluiranje 28% za 9 min) dajući jedinjenje iz naslova u obliku ulja žutog boje. UPLC-MS (Uslov 1) tR=1.87 min, m/z = 464.1 [M+H]<+>, m/z = 462.1 [M-H]-;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.49 - 1.65 (m, 1 H) 1.75 - 1.97 (m, 1 H) 2.14 - 2.30 (m, 1 H) 3.04 (dd, J = 11.37, 6.97 Hz, 1 H) 3.14 - 3.26 (m, 2 H) 3.26 - 3.29 (m, 1 H) 3.35 - 3.46 (m, 2 H) 4.60 (t, J = 5.14 Hz, 1 H) 6.39 (d, J = 1.96 Hz, 1 H) 7.33 (d, J = 9.05 Hz, 2 H) 7.76 (br. s, 1 H) 7.84 - 7.94 (m, 2 H) 8.04 (d, J = 2.45 Hz, 1 H) 8.74 (s, 1 H) 10.18 (s, 1 H) 12.87 (br. s, 1 H).
Faza 10.1: (S)-5-Bromo-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-(hidroksimetil)pirolidin-1-il)nikotinamid
[0346]
[0347] Jedinjenje iz naslova se priprema na sličan način kao što je opisano u Fazi 9.2 korišćenjem 5-bromo-6-hloro-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)nikotinamida (Faza 9.3) i (S)-1-pirolidin-3-ilmetanola da bi se dobio beličasti kristalni proizvod. HPLC (Stanje 4) tR= 5.82 min, UPLC-MS (Stanje 3) tR= 1.14 min, m/z = 476.2/478.3 [M+H]<+>.
Primer 11
(R)-6-(3-Hidroksipirolidin-1-il)-5-(1H-pirazol-5-il)-N-(4-((trifluorometil)tio)fenil)nikotinamid [0348]
[0349] Jedinjenje iz pronalaska se dobija na sličan način kao što je opisano u Primeru 9 korišćenjem (R)-5-bromo-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-N-(4-((trifluorometil)tio)fenil)nikotinamida (Faza 11.1) i 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazola dajući čvrsti proizvod bele boje. UPLC-MS (R. uslov 3) tR= 0.97 min, m/z = 450.2 [M+H]<+>, m/z = 448.1 [M-H]-;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.67 - 1.78 (m, 1 H) 1.78 - 1.88 (m, 1 H) 2.94 (d, J = 11.92 Hz, 1 H) 3.19 - 3.34 (m, 2 H) 3.38 - 3.50 (m, 1 H) 4.20 (br. s, 1 H) 4.81 - 4.93 (m, 1 H) 6.33 - 6.45 (m, 1 H) 7.83 (m, J = 113.40, 8.20 Hz, 3 H) 7.93 (d, J = 8.66 Hz, 2 H) 7.99 - 8.08 (m, 1 H) 8.70 - 8.81 (m, 1 H) 10.30 (s, 1 H) 12.90 - 13.16 (m, 1 H).
Faza 11.1: (R)-5-Bromo-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-N-(4-((trifluorometil)tio)fenil)nikotinamid [0350]
[0351] U rastvor 5-bromo-6-hloro-N-(4-((trifluorometil)tio)fenil)nikotinamida (Faza 11.2, 123 mg, 0.3 mmol) i (R)-pirolidin-3-ol-a (31.4 mg, 0.36 mmol) u iPrOH (300 µL) u fioli, koja je bila zapečaćena i zagrevana na temperaturi od 140°C tokom 1 h dodaje se DIPEA (73 µL, 0.42 mmol).
Nakon hladjenja na sobnoj temperaturi, reakciona smeša se razblažuje sa EtOAc, ispire sa koncentrovanim rastvorom soli, suši na Na2SO4i rastvarač se uparava na sniženom pritisku dajući ostatak koji se trituriše sa iPr2O, filtrira i suši dajući jedinjenje iz naslova u obliku belog kristalnog praha. HPLC (Uslov 4) tR= 5.9 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 1.21 min, m/z = 464.1 [M+H]<+>.
Faza 11.2 : 5-Bromo-6-hloro-N-(4-((trifluorometil)tio)fenil)nikotinamid
[0352]
[0353] Dodaje se DMF (0.12 mL) uz lagani dodatak SOCl2(0.73 mL, 10 mmol) u smešu 5-bromo-6-hloro-nikotinske kiseline (473 mg, 2 mmol) u toluenu (5 mL), i reakciona smeša se zatim meša na temperaturi od 80°C tokom 1 h. Nakon hladjenja do sobne temperature, toluen se upari na sniženom pritisku i ostatak se rastvara u THF (0.4 mL). Dodaje se DIPEA (0.7 mL, 4 mmol) i rastvor se hladi do temperature od 0°C u struji azota. Tada se dodaje 4-trifluorometilsulfanil-anilin u kapima u (438 mg, 2.2 mmol) u THF (1 mL) i reakciona smeša se meša na temperaturi od 0°C tokom 2 h. Reakciona smeša se razblažuje sa TBME (50 mL), obradjuje sa 1 M HCl i ekstrahuje sa TBME. Spojeni ekstrakti se ispiraju sa 1 M vod. NaOH i koncentrovanim rastvorom soli, suše na Na2SO4i rastvarač se upari na sniženom pritisku i proizvod kristalzuje iz smeše rastvarača TBME / n-heksan dajući jedinjenje iz naslova u obliku beličastog kristalnog praha. HPLC (Uslov 4) tR= 6.63 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 1.33 min, m/z = 411.1 [M+H]<+>.
Primer 12
(S)-6-(3-(Hidroksimetil)pirolidin-1-il)-5-(1H-pirazol-5-il)-N-(4-((trifluorometil)tio)fenil)nikotinamid [0354]
[0355] Jedinjenje iz naslova se dobija na sličan način kao što je opisano u Primeru 10 korišćenjem (S)-5-bromo-6-(3-(hidroksimetil)pirolidin-1-il)-N-(4-((trifluorometil)tio)fenil)nikotinamida (Faza 12.1) i 1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazola što za rezultat ima dobijanje bledo žutog praha. UPLC-MS (Uslov 3) tR= 0.99 min, m/z = 464.2 [M+H]<+>, m/z = 462.2 [M-H]-;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 1.48 - 1.64 (m, 1 H) 1.76 - 1.93 (m, 1 H) 2.15 - 2.27 (m, 1 H) 3.04 (dd, J = 11.49, 7.09 Hz, 1 H) 3.18 - 3.26 (m, 2 H) 3.27 - 3.29 (m, 1 H) 3.32 - 3.41 (m, 2 H) 4.60 (br. s, 1 H) 6.39 (d, J = 1.71 Hz, 1 H) 7.67 (d, J = 8.56 Hz, 2 H) 7.80 (br. s, 1 H) 7.87 - 7.99 (m, 2 H) 8.04 (d, J = 2.45 Hz, 1 H) 8.74 (br. s, 1 H) 10.28 (s, 1 H) 12.76 - 13.20 (m, 1 H).
Faza 12.1: (S)-5-Bromo-6-(3-(hidroksimetil)pirolidin-1-il)-N-(4-((trifluorometil)tio)fenil)nikotinamid [0356]
[0357] U rastvor 5-bromo-6-hloro-N-(4-((trifluorometil)tio)fenil)nikotinamida (Faza 11.2, 2.88 g, 7.0 mmol) i (S)-1-pirolidin-3-il-metanola (1.156, 8.40 mmol) u iPrOH (7.0 mL) u fioli, koja je bila zapečaćena i zatim zagrejana do 140°C tokom 1 h, dodavan je DIPEA (4.89 mL, 28.0 mmol). Nakon hladjenja na sobnoj temperaturi, reakciona smeša se rastvara u EtOAc, ispire sa vod. 0.5 M HCl i koncentrovanim rastvorom soli, suši na Na2SO4i rastvarač se uparava na sniženom pritisku dajući ostatak koji se trituriše sa iPr2O, filtrira i suši dajući jedinjenje iz naslova u obliku kristalnog praha bež boje. HPLC (Uslov 4) tR= 6.17 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 1.20 min, m/z = 476.2/478.2 [M+H]<+>.
Primer 13
(R)-N-(3-Fluoro-4-(trifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1H-pirazol-5-il)nikotinamid [0358]
[0359] Smeša (R)-N-(3-fluoro-4-(trifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-5-il)nikotinamida (Faza 13.1, 64 mg, 0.11 mmol), etilen diamina (37.2 µL, 0.55 mmol) i 1 M TBAF u THF-u (1.651 mL, 1.651 mmol) u fioli za mikrotalasno zračenje je bila zapečaćena i mešana na temperaturi od 80-85°C tokom 20 h. Rastvarač se uparava na sniženom pritisku i ostatak se rastvara u EtOAc (40 mL), ispire 3 puta sa zasić. vod. NaHCO3i koncentrovanim rastvorom soli, suši na Na2SO4i rastvarač se uparava na sniženom pritisku dajući sirovi proizvod koji se prečišćava preparativnom SFC (Kolona Diol, izokratsko eluiranje 27%) dajući jedinjenje iz naslova u obliku čvrstog proizvoda bele boje. UPLC-MS (Uslov 3) tR= 0.95 min, m/z = 452.3 [M+H]<+>, m/z = 450.3 [M-H]-;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.64 - 1.78 (m, 1 H) 1.78 1.89 (m, 1 H) 2.95 (d, J = 11.74 Hz, 1 H) 3.29 (br. s, 2 H) 3.37 - 3.49 (m, 1 H) 4.20 (br. s, 1 H) 4.83 (br. s, 1 H) 6.35 - 6.42 (m, 1 H) 7.52 (t, J = 9.05 Hz, 1 H) 7.62 (d, J = 9.29 Hz, 1 H) 7.74 (br. s, 1 H) 7.98 (dd, J = 13.20, 2.20 Hz, 1 H) 8.02 (d, J = 2.20 Hz, 1 H) 8.74 (d, J = 1.71 Hz, 1 H) 10.31 (br. s, 1 H) 12.95 (br. s, 1 H).
Faza 13.1: (R)-N-(3-Fluoro-4-(trifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-5-il)nikotinamid
[0360 ]
[0361] Smeša (R)-5-bromo-N-(3-fluoro-4-(trifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)nikotinamida (Faza 13.2, 100 mg, 0.215 mmol), 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazola (104 mg, 0.321 mmol), Pd(PPh3)2Cl2(15.2 mg, 0.022 mmol), Na2CO3(91 mg, 0.862 mmol), DME (914 µL), vode (261 µL) i EtOH (131 µL) u fioli za mikrotalasno zračenje je bila zapečaćena, zatim je bila ispražnjena/ pročišćena 3 puta sa argonom i podvrgnuta mikrotalasnom zračenju na temperaturi od 125°C tokom 20 min. Reakciona smeša se razblažuje sa DME (3 mL), zatim se meša tokom noći sa Si-Tiol (Silicycle 1.44 mmol/g, 90 mg, 0.129 mmol). Smeša se centrifugira i supernatant se filtrira kroz PTFE filter debljine 0.45 μm i rastvarač se uparava na sniženom pritisku dajući ostatak koji se prečišćava preparativnom SFC (Kolon DEAP, od 15% do 20% tokom 6 min) dajući jedinjenje iz naslova u obliku providnog ulja žute boje. UPLC-MS (Uslo3) tR= 1.28 min, m/z = 581.2 [M+H]<+>, m/z = 580.4 [M-H]-.
Faza 13.2 : (R)-5-Bromo-N-(3-fluoro-4-(trifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)nikotinamid
[0362]
[0363] Jedinjenje iz naslova se dobija na sličan način koji je opisan u fazi 9.2 korišćenjem 5-bromo-6-hloro-N-(3-fluoro-4-(trifluorometoksi)fenil)nikotinamida (Faza 13.3) i (R)-pirolidin-3-ol dajući beličastu kristalnu supstancu. HPLC (Uslov 4) tR= 5.82 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 1.17 min, m/z = 464.1 [M+H]<+>.
Faza 13.3: 5-Bromo-6-hloro-N-(3-fluoro-4-(trifluorometoksi)fenil)nikotinamid
[0364]
[0365] Jedinjenje iz naslova se dobija na sličan način kako je opisano u Fazi 11.2 korišćenjem 5-bromo-6-hloro-nikotinske kiseline i 3-fluoro-4-trifluorometoksi-anilina dajući beličastu kristalnu supstancu. HPLC (Uslov 4) tR= 6.43 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 1.29 min, m/z = 413 [M-H]-.
Primer 14
(S)-N-(3-Fluoro-4-(trifluorometoksi)fenil)-6-(3-(hidroksimetil)pirolidin-1-il)-5-(1H-pirazol-5-il)nikotinamid
[0366]
[0367] Jedinjenje iz naslova se dobija na sličan način kao i u Primeru 10 korišćenjem (S)-5-bromo-N-(3-fluoro-4-(trifluorometoksi)fenil)-6-(3-(hidroksimetil)pirolidin-1-il)nikotinamida (Faza 14.1) i 1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazola dajući prah bledo žute boje. UPLC-MS (Uslov 3) tR= 0.96 min, m/z = 466.2 [M+H]<+>, m/z = 464.2 [M-H]-.<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 2.77 (s, 3 H) 3.38 - 3.61 (m, 4 H) 4.61 (br. s, 1 H) 6.47 (s, 1 H) 7.68 (d, J = 8.56 Hz, 2 H) 7.83 (br. s, 1 H) 7.93 (d, J = 8.80 Hz, 2 H) 8.15 (br. s, 1 H) 8.71 (br. s, 1 H) 10.36 (s, 1 H) 12.83 - 13.15 (m, 1 H).
Faza 14.1: (S)-5-Bromo-N-(3-fluoro-4-(trifluorometoksi)fenil)-6-(3-(hidroksimetil)pirolidin-1-il)nikotinamid
[0368]
[0369] Jedinjenje iz naslova se dobija na sličan način kao što je opisano u Fazi 9.2 korišćenjem 5-bromo-6-hloro-N-(3-fluoro-4-(trifluorometoksi)fenil)nikotinamida (Faza 13.3) i (S)-1-pirolidin-3-il-metanola dajući beličasti kristalni proizvod. HPLC (Uslov 4) tR= 5.99 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 1.18 min, m/z = 478.1/480.1 [M+H]<+>.
Primer 15
(R)-N-(3-Fluoro-4-((trifluorometil)tio)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1H-pirazol-5-il)nikotinamid
[0370]
[0371] Jedinjenje iz naslova se dobija na način analogan onom opisanom u Primeru 13 korišćenjem (R)-N-(3-fluoro-4-((trifluorometil)tio)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1-((2-(trimetilsilil)etoksi) metil)-1H-pirazol-5-il)nikotinamida (Faza 15.1) dajući beličasti proizvod. UPLC-MS (Uslov 3) tR= 1.00 min, m/z = 468.3 [M+H]<+>, m/z = 466.1 [M-H]-;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.68 -1.78 (m, 1 H) 1.79 - 1.89 (m, 1 H) 2.96 (d, J = 11.74 Hz, 1 H) 3.24 - 3.30 (m, 2 H) 3.40 - 3.49 (m, 1 H) 4.20 (d, J = 2.20 Hz, 1 H) 4.84 (br. s, 1 H) 6.38 (d, J = 1.96 Hz, 1 H) 7.66 - 7.78 (m, 3 H) 7.98 (dd, J = 11.98, 1.96 Hz, 1 H) 8.03 (d, J = 2.45 Hz, 1 H) 8.75 (d, J = 2.45 Hz, 1 H) 10.24 - 10.72 (m, 1 H) 12.59 - 13.22 (m, 1 H).
Faza 15.1: (R)-N-(3-Fluoro-4-((trifluorometil)tio)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazol-5-il)nikotinamid
[0372]
[0373] Jedinjenje iz naslova se dobija na način analogan sa onim koji je opisan u Fazi 13.1 korišćenjem (R)-5-bromo-N-(3-fluoro-4-((trifluorometil)tio)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)nikotinamida (Faza 15.2) i 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-1H-pirazola dajući žutu smolu. UPLC-MS (Uslov 3) tR= 1.33 min, m/z = 598.4 [M+H]<+>, m/z = 596.5 [M-H]-.
1
Faza 15.2: (R)-5-Bromo-N-(3-fluoro-4-((trifluorometil)tio)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)nikotinamid
[0374]
[0375] Jedinjenje iz naslova se dobija na način analogan sa onim koji je opisan u Fazi 9.2 korišćenjem 5-bromo-6-hloro-N-(3-fluoro-4-((trifluorometil)tio)fenil)nikotinamida (Faza 15.3) i (R)-pirolidin-3-ol dajući beličasti kristalni proizvod. HPLC (Uslov 4) tR= 6.11 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 1.23 min, m/z = 480.1 [M+H]<+>.
Faza 15.3: 5-Bromo-6-hloro-N-(3-fluoro-4-((trifluorometil)tio)fenil)nikotinamid
[0376]
[0377] Jedinjenje iz naslova se dobija na način analogan sa onim koji je opisan u Fazi 11.2 korišćenjem 5-bromo-6-hloro-nikotinske kiseline i 3-fluoro-4-trifluorometilsulfanil-anilina dajući belu kristalnu supstancu . HPLC (Uslov 4) tR= 6.71 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 1.34 min, m/z = 429 [M-H]-.
Primer 16
(R)-6-(3-Hidroksipirolidin-1-il)-N-(4-(perfluoroetil)fenil)-5-(1H-pirazol-5-il)nikotinamid
[0378]
[0379] Smeša (R)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-N-(4-(perfluoroetil)fenil)-5-(1-((2-(trimetilsilil) etoksi)metil)-1H-pirazol-5-il)nikotinamida (Faza 16.1, 68 mg, 0.114 mmol) i etilen diamina (38.4 µL, 0.569 mmol) u fioli za mikrotalasno zračenje je bila zapečaćena u atmosferi argona. Nakon toga se dodaje 1 M TBAF u THF (1.707 mL, 1.707 mmol) i reakciona smeša se meša na temperaturi od 80°C
2
tokom 20 h. Rastvarač se upari na sniženom pritisku i ostatak se rastvara u EtOAc (40 mL), ispire 3 puta sa zasić. vod. NaHCO3i koncentrovanim rastvorom soli, suši na Na2SO4i rastvarač se upari na sniženom pritisku dajući ostatak koji se prečišćava preparativnom SFC (Kolona Diol, izokratski 27% za 9 min) dajući jedinjenje iz naslova u obliku beličastog proizvoda. UPLC-MS (Uslov 3) tR= 0.98 min, m/z = 468.2 [M+H]<+>, m/z = 466.2 [M-H]-;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.68 - 1.78 (m, 1 H) 1.83 (dd, J = 8.80, 4.40 Hz, 1 H) 2.96 (d, J = 11.74 Hz, 1 H) 3.19 - 3.29 (m, 2 H) 3.40 - 3.50 (m, 1 H) 4.20 (br. s, 1 H) 4.83 (br. s, 1 H) 6.39 (d, J = 1.96 Hz, 1 H) 7.65 (d, J = 8.80 Hz, 2 H) 7.77 (br. s, 1 H) 8.02 (d, J = 9.05 Hz, 2 H) 8.05 (d, J = 2.45 Hz, 1 H) 8.76 (d, J = 2.20 Hz, 1 H) 10.33 (s, 1 H) 12.91 (br. s, 1 H).
Faza 16.1: (R)-6-(3-Hidroksipirolidin-1-il)-N-(4-(perfluoroetil)fenil)-5-(1-((2-(trimetilsilil) etoksi)metil)-1H-pirazol-5-il)nikotinamid
[0380]
[0381] Smeša (R)-5-bromo-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-N-(4-(perfluoroetil)fenil)nikotinamida (Faza 16.2, 100 mg, 0.208 mmol), 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1-((2-(trimetilsilil)etoksi) metil)-1H-pirazola (135 mg, 0.416 mmol), Pd(PPh3)2Cl2(14.62 mg, 0.021 mmol), Na2CO3(88 mg, 0.833 mmol), DME (883 µL), vode (252 µL) i EtOH (126 µL) je stavljena u fiolu za mikrotalasno zračenje, koja je bila zapečaćena, pa ispražnjena/ pročišćena 3 puta sa argonom i podvrgnuta mikrotalasnom zračenju na temperaturi od 125°C tokom 20 min. Reakciona smeša se razblažuje sa 3 mL DME, a nakon toga se tokom noći meša sa Si-Tiol (Silicycle 1.44 mmol/g, 87 mg, 0.125 mmol). Smeša je bila centrifugirana i supernatant se filtrira kroz PTFE filter debljine 0.45 μm i rastvarač je uparavan na sniženom pritisku dajući ostatak koji se prečišćava preparativnom SFC (Kolona Diol, od 15% do 20% za 6 min) dajući jedinjenje iz naslova u obliku bezbojne prozirne smole. UPLC-MS (Uslov 3) tR= 1.31 min, m/z = 598.4 [M+H]<+>, m/z = 596.3 [M-H]-.
Faza 16.2 : (R)-5-Bromo-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-N-(4-(perfluoroetil)fenil)nikotinamid
[0382]
[0383] Jedinjenje iz naslova se dobija na način analogan sa onim koji je opisan u Fazi 9.2 korišćenjem 5-bromo-6-hloro-N-(4-(perfluoroetil)fenil)nikotinamida (Faza 16.3) i (R)-pirolidin-3-ol dajući beličasti kristalni proizvod. HPLC (Uslov 4) tR= 5.96 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 1.20 min, m/z = 480.2 [M+H]<+>.
Faza 16.3: 5-Bromo-6-hloro-N-(4-(perfluoroetil)fenil)nikotinamid
[0384]
[0385] Jedinjenje iz naslova se dobija na način analogan sa onim koji je opisan u fazi 11.2 korišćenjem 5-bromo-6-hloro-nikotinske kiseline i 4-pentafluoroetil-anilina dajući beli kristalni proizvod. HPLC (Uslov 4) tR= 6.61 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 1.32 min, m/z = 429 [M-H]-.
Primer 17
(R)-6-(3-Hidroksipirolidin-1-il)-N-(4-(pentafluorosulfanil)fenil)-5-(1H-pirazol-5-il)nikotinamid [0386]
[0387] Jedinjenje iz naslova se dobija na način analogan sa onim koji je opisan u Primeru 8 korišćenjem (R)-5-bromo-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-N-(4-(pentafluorosulfanil)fenil)nikotinamida (Faza 17.1) i 1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazola dajući čvrsti proizvod bež boje. HPLC (Uslov 4) tR= 4.68 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 0.92 min, m/z = 476.3 [M+H]<+>;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.64 - 1.91 (m, 2 H) 2.93 (d, J = 11.73 Hz, 1 H) 3.19 -3.34 (m, 2 H) 3.36 - 3.49 (m, 1 H) 4.12 - 4.24 (m, 1 H) 4.81 (d, J = 3.13 Hz, 1 H) 6.38 (s, 1 H) 7.73 -7.89 (m, 3 H) 7.92 - 8.09 (m, 3 H) 8.73 (d, J = 1.96 Hz, 1 H) 10.37 (s, 1 H) 12.82 - 13.17 (m, 1 H).
4
Faza 17.1: (R)-5-Bromo-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-N-(4-(pentafluorosulfanil)fenil)nikotinamid [0388]
[0389] Jedinjenje iz naslova se dobija na način analogan sa onim koji je opisan u Fazi 9.2 korišćenjem 5-bromo-6-hloro-N-(4-(pentafluorosulfanil)fenil)nikotinamida (Faza 17.2) i (R)-pirolidin-3-ol-a dajući čvrsti proizvod. UPLC-MS (Uslov 3) tR= 1.16 min, m/z = 490.1 [M+H]<+>.
Faza 17.2: 5-Bromo-6-hloro-N-(4-(pentafluorosulfanil)fenil)nikotinamid
[0390]
[0391] Jedinjenje iz naslova se dobija na način analogan sa onim koji je opisan u fazi 11.2 korišćenjem 5-bromo-6-hloro-nikotinske kiseline i 4-aminofenilsumpor pentafluorida dajući čvrsti proizvod narandžaste boje. HPLC (Uslov 4), tR= 6.43 min, UPLC-MS (Uslov 3), tR= 1.27 min, m/z = 435.3/437.2 [M+H]<+>.
Primer 18
(R)-N-(4-((hlorodifluorometil)tio)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1H-pirazol-5-il)nikotinamid [0392]
[0393 ] Jedinjenje iz naslova se dobija na način analogan sa onim koji je opisan u Primeru 8 korišćenjem (R)-5-bromo-N-(4-((hlorodifluorometil)tio)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)nikotinamida (Faza 18.1) i 1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazola dajući beličasti čvrsti proizvod. HPLC (Uslov 4) tR= 4.94 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 0.99 min, m/z = 466.3 [M+H]<+>;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.65 - 1.88 (m, 2 H) 2.86 - 2.99 (m, 1 H) 3.19 - 3.33 (m, 2 H) 3.36 - 3.51 (m, 1 H) 4.13 - 4.23 (m, 1 H) 4.76 - 4.90 (m, 1 H) 6.31 - 6.42 (m, 1 H) 7.65 (d, J = 8.21 Hz, 2 H) 7.76 - 7.84 (m, 1 H) 7.92 (d, J = 8.60 Hz, 2 H) 7.98 - 8.08 (m, 1 H) 8.66 -8.82 (m, 1 H) 10.28 (s, 1 H) 12.82 - 13.14 (m, 1 H).
Faza 18.1: (R)-5-Bromo-N-(4-((hlorodifluorometil)tio)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)nikotinamid [0394]
[0395] Jedinjenje iz naslova se dobija se dobija na način analogan sa onim koji je opisan u Fazi 9.2 korišćenjem 5-bromo-6-hloro-N-(4-((hlorodifluorometil)tio)fenil)nikotinamida (Faza 18.2) i (R)-pirolidin-3-ol-a dajući beličasti kristalni proizvod. HPLC (Uslov 4) tR= 5.97 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 1.19 min, m/z = 478.2/480.1 [M+H]<+>.
Faza 18.2 : 5-Bromo-6-hloro-N-(4-((hlorodifluorometil)tio)fenil)nikotinamid
[0396]
[0397] Jedinjenje iz naslova se dobija na način analogan sa onim koji je opisan u Fazi 11.2 korišćenjem 5-bromo-6-hloro-nikotinske kiseline i 4-((hloro-difluorometil)tio)anilina (Faza 18.3) dajući beličasti kristalni proizvod. HPLC (Uslov 4) tR= 6.78 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 1.32 min, m/z = 425 [M-H]-.
Stage 18.3 : 4-((hlorodifluorometil)tio)anilin
[0398]
[0399] U rastvor 4-nitrofenilhlorodifluorometil sulfida (dobijenog kao što je opisano u nemačkom patentu br. DE2845997, 627, 67.5 g, 0.28 mol) u etanolu (270 mL) i vodi (68 mL) koji se meša na temperaturi od 72 °C dodaje se koncentrovana HCl (3.4 mL, 41.5 mmol) i gvozdeni prah (203 g, 3.63 mol) u tri dela u periodu od 10 min. Reakciona smeša se meša na temperaturi od 82 °C tokom 30 min, filtrira kroz sloj Celite® (EtOH), rastvarač se uparava na sniženom pritisku dajući ulje žute boje koje se rastvara u DCM-u i ispire sa zasić. NaHCO3i koncentrovanim rastvorom soli. Organska faza se suši na MgSO4, filtrira i filtrat se upari na sniženom pritisku dajući sirovi proizvod u obliku ulja žute boje koji se destiluje (tačka klučanja.88-92°C, 0.9 mmHg) i filtrira kroz sloj Celite® dajući jedinjenje iz naslova u obliku ulja bledo žute boje.<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ ppm 3.98 (br. s, 2 H) 6.67 (dd, 2 H) 7.43 (dd, 2 H).
Primer 19
(R)-6-(3-Hidroksipirolidin-1-il)-N-(4-(perfluoroetoksi)fenil)-5-(1H-pirazol-5-il)nikotinamid [0400]
[0401] Jedinjenje iz naslova se dobija na način analogan sa onim koji je opisan u Primeru 8 korišćenjem (R)-5-bromo-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-N-(4-(perfluoroetoksi)fenil)nikotinamida (Faza 19.1) i 1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazola dajući beličasti čvrsti proizvod. HPLC (Uslov 4) tR= 4.86 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 0.97 min, m/z = 484.4 [M+H]<+>;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.62 - 1.92 (m, 2 H) 2.94 (d, J = 1.00 Hz, 1 H) 3.18 - 3.34 (m, 2 H) 3.37 - 3.51 (m, 1 H) 4.13 - 4.22 (m, 1 H) 4.70 - 4.91 (m, 1 H) 6.37 (br. s, 1 H) 7.31 (d, J = 8.99 Hz, 2 H) 7.86 (m, J = 9.00 Hz, 3 H) 8.01 (br. s, 1 H) 8.65 - 8.83 (m, 1 H) 10.17 (s, 1 H) 12.84 - 13.11 (m, 1 H).
Faza 19.1: (R)-5-Bromo-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-N-(4-(perfluoroetoksi)fenil)nikotinamid [0402]
[0403] Jedinjenje iz naslova se dobija na način analogan sa onim koji je opisan u fazi 9.2 korišćenjem 5-bromo-6-hloro-N-(4-(perfluoroetoksi)fenil)nikotinamida (Faza 19.2) i (R)-pirolidin-3-ol-a dajući beličasti kristalni proizvod. HPLC (Uslov 4) tR= 6.01 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 1.17 min, m/z = 496.2 [M+H]<+>.
Faza 19.2: 5-Bromo-6-hloro-N-(4-(perfluoroetoksi)fenil)nikotinamid
[0404]
[0405] Jedinjenje iz naslova se dobija na način analogan sa onim koji je opisan u Fazi 9.3 korišćenjem 5-bromo-6-hloro-nikotininske kiseline i 4-(perfluoroetoksi)anilina dajući beličasti kristalni proizvod. HPLC (Uslov 4) tR= 6.73 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 1.30 min, m/z = 443.1 [M-H]-.
Primer 20
(R)-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-4-(3-hidroksipirolidin-1-il)-3-(1H-pirazol-5-il)benzamid [0406]
[0407] Jedinjenje iz naslova se dobija na način analogan sa onim koji je opisan u Primeru 8 korišćenjem (R)-3-bromo-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-4-(3-hidroksipirolidin-1-il)benzamida (Faza 20.1) i pinakol estra 1-(Tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-borne kiseline dajući beličasti čvrsti proizvod. UPLC-MS (Uslov 3) tR= 0.99 min, m/z = 449.0 [M+H]<+>, m/z = 493.0 [M+mravlja kiselina-H]-; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.67 - 1.79 (m, 1 H) 1.80 -1.92 (m, 1 H) 2.72 (d, J=10.88 Hz, 1 H) 3.03 - 3.18 (m, 2 H) 3.19 - 3.30 (m, 1 H) 4.19 (br. s, 1 H) 4.77 - 4.92 (m, 1 H) 6.22 - 6.42 (m, 1 H) 6.76 - 6.93 (m, 1 H) 7.31 (d, J=8.56 Hz, 2 H) 7.45 - 7.81 (m, 1 H) 7.83 - 7.95 (m, 4 H) 10.12 (s, 1 H) 12.71 - 13.12 (m, 1 H).
Faza 20.1: (R)-3-Bromo-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-4-(3-hidroksipirolidin-1-il)benzamid [0408]
[0409] Smeša 3-bromo-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-4-fluorobenzamida (1 g, 2.53 mmol), (R)-pirolidin-3-ol-a (0.331 g, 3.80 mmol), TEA (0.706 mL, 5.07 mmol) i DMSO (2.53 mL) se meša na temperaturi od 90°C tokom 20 h. Reakciona smeša se obradjuje sa 0.5 M HCl (50 mL) i ekstrahuje sa EtOAc. Spojeni ekstrakti se ispiraju sa 0.5 M HCl, zasić. vod. NaHCO3i koncentrovanim rastvorom soli, suši na Na2SO4i rastvarač se upari na sniženom pritisku dajući sirovi proizvod koji se prečišćava fleš hromatografijom (RediSep® Silica gel kolona, 40 g, cikloheksan / EtOAc, od 1% do 4.5% EtOAc). Frakcije koje sadrže sirovi proizvod se sakupljaju i rastvarač se uparava na sniženom pritisku dajući ostatak koji se trituriše iz cikloheksana dajući proizvod iz naslova u obliku belog amorfnog proizvoda. UPLC-MS (Uslov 3) tR= 1.15 min, m/z = 462.9 [M+H]<+>, m/z = 460.9 [M-H]-; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.81 - 1.90 (m, 1 H) 1.92 - 2.03 (m, 1 H) 3.27 (dd, J=10.39, 1.10 Hz, 1 H) 3.36 - 3.44 (m, 1 H) 3.62 - 3.71 (m, 1 H) 3.81 (dd, J=10.45, 4.71 Hz, 1 H) 4.32 - 4.40 (m, 1 H) 4.99 (d, J=3.42 Hz, 1 H) 6.93 (d, J=8.80 Hz, 1 H) 7.33 (d, J=9.05 Hz, 2 H) 7.82 - 7.91 (m, 3 H) 8.14 (d, J=2.20 Hz, 1 H) 10.21 (s, 1 H).
Faza 20.2: 3-Bromo-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-4-fluorobenzamid
[0410]
[0411] Jedinjenje iz naslova se dobija na način analogan sa onim koji je opisan u Fazi 1.3 korišćenjem 3-bromo-4-fluorobenzoeve kiseline i 4-(hlorodifluorometoksi)anilina dajući beličasti čvrsti proizvod. UPLC-MS (Uslov 3) tR= 1.25 min, m/z = 394.0 [M+H]<+>, m/z = 391.9 [M-H]-; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.37 (d, J=9.17 Hz, 2 H) 7.57 (t, J=8.68 Hz, 1 H) 7.84 - 7.91 (m, 2 H) 8.03 (ddd, J=8.62, 4.83, 2.32 Hz, 1 H) 8.32 (dd, J=6.60, 2.20 Hz, 1 H) 10.52 (s, 1 H).
Primer 21
(S)-6-(3-(Aminometil)pirolidin-1-il)-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-5-(1H-pirazol-5-il)nikotinamid
[0412]
[0413] Jedinjenje iz naslova se dobija na način analogan sa onim koji je opisan u Primeru 8 korišćenjem (S)-terc-butil ((1-(3-bromo-5-((4-(hlorodifluorometoksi)fenil)karbamoil)-piridin-2-il)pirolidin-3-il)metil)karbamata (Faza 21.1) i 1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazola dajući beličasti prah. HPLC (Uslov 4) tR= 4.15 min, UPLC-MS (Condition 3) tR= 0.78 min, m/z = 463.1 [M+H]<+>;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.50 - 1.62 (m, 1 H) 1.91 (d, J=6.26 Hz, 1 H) 2.27 (s, 1 H) 2.72 (d, J=7.04 Hz, 2 H) 3.04 - 3.16 (m, 3 H) 3.30 (br. s, 2 H) 3.47 (dd, J=11.34, 7.04 Hz, 1 H) 6.38 (d, J=1.96 Hz, 2 H) 7.31 (d, J=8.60 Hz, 2 H) 7.64 - 7.91 (m, 2 H) 8.05 (d, J=2.35 Hz, 1 H) 8.72 (d, J=1.95 Hz, 1 H) 10.19 (s, 1 H) 12.86 - 13.01 (m, 1 H).
Faza 21.1: (S)-terc-Butil ((1-(3-bromo-5-((4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-karbamoil)piridin-2-il)pirolidin-3-il)metil)karbamat
[0414]
[0415] Jedinjenje iz naslova se dobija na način analogan sa onim koji je opisan u fazi 8.1 korišćenjem 5-bromo-6-hloro-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)nikotinamida (Faza 9.3) i terc-butil estra (R)-1-pirolidin-3-ilmetil-karbaminske kiseline dajući kristalni čvrsti proizvod. HPLC (Uslov 4) tR= 6.09 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 1.36 min, m/z = 577.2 [M+H]<+>.
Primer 22
(R)-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-4-(3-hidroksipirolidin-1-il)-3-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzamid
[0416]
[0417] 3-Metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol (Faza 23.1, 128 mg, 0.329 mmol), K3PO4(140 mg, 0.658 mmol) i Pd(PPh3)4(15.22 mg, 0.013 mmol) se dodaju u rastvor (R)-3-bromo-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-4-(3-hidroksipirolidin-1-il)benzamida (Faza 20.1, 80 mg, 0.165 mmol) u toluenu (1.5 mL) u atmosferi argona i reakciona smeša se zagreje na temperaturi od 110°C tokom 2 h. Rastvarač se uparava na sniženom pritisku i ostatak se rastvara u DCM-u (4 mL) i obradjuje sa TFA (0.507 mL, 6.58 mmol) i meša na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Reakciona smeša se obradjuje sa zasić. vod. Na2CO3(20 mL) i ekstrahuje sa EtOAc. Spojeni ekstrakti se ispiraju sa koncentrovanim rastvorom soli (20 mL), suši na Na2SO4, i rastvarač se uparava na sniženom pritisku dajući sirovi proizvod koji se prečišćava preparativom HPLC (Uslov 10 – 20% do 80% B za 20 min). Frakcije koje sadrže čisti proizvod se sakupjaju, obradjuju sa zasić. vod. Na2CO3i MeCN se upari na sniženom pritisku. Vod. ostatak se ekstrahuje sa DCM-om i spojeni ekstrakti se suše na Na2SO4, filtriraju i filtrate se upari na sniženom pritisku dajući ostatak koji kristališe iz smeše rastvarača DCM / n-heksan dajući proizvod iz naslova u obliku čvrstog proizvoda bele boje. HPLC (Uslov 5) tR= 6.41 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 1.03 min, m/z = 463 [M+H]<+>;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.67 - 1.78 (m, 1 H) 1.84 (s, 1 H) 2.16 - 2.30 (m, 3 H) 2.74 (d, J=10.56 Hz, 1 H) 3.04 - 3.33 (m, 3 H) 4.14 - 4.23 (m, 1 H) 4.76 - 4.87 (m, 1 H) 6.07 (s, 1 H) 6.73 - 6.86 (m, 1 H) 7.29 (d, J=8.21 Hz, 2 H) 7.78 - 7.90 (m, J=8.99 Hz, 4 H) 10.07 (s, 1 H) 12.34 - 12.56 (m, 1 H).
Primer 23
(R)-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(3-metil-1H-pirazol-5-il)nikotinamid
[0418]
[0419] 3-Metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol (Faza 23.1, 150 mg, 0.359 mmol), K3PO4(147 mg, 0.692 mmol) i Pd(PPh3)4(15.98 mg, 0.014 mmol) se dodaju u rastvor (R)-5-Bromo-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)nikotinamida (Faza 9.2, 80 mg, 0.173 mmol) u toluenu (1.5 mL) u atmosferi argona i reakciona smeša se meša na temperaturi od 110°C u vremenu od 2 h. Rastvarač se uparava na sniženom pritisku i ostatak se rastvara u DCM-u (1.5 mL), obradjuje sa TFA (0.533 mL, 6.92 mmol) i meša na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Reakciona smeša se obradjuje sa zasić. vod. Na2CO3(20 mL) i ekstrahuje sa EtOAc. Spojeni ekstrakti se ispiraju sa koncentrovanim rastvorom soli (20 mL), suše na Na2SO4, i eastvarač se uparava
1
na sniženom pritisku dajući sirovi proizvod koji se prečišćava fleš hromatografijom (kolona sa Silika gelom, 12 g, smeša rastvarača DCM / MeOH od 99:1 do 92:8) i kristališe iz smeše rastvarača DCM / nheksan dajući proizvod iz naslova u obliku čvrstog proizvoda bele boje. HPLC (Uslov 5) tR= 5.92 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 0.94 min, m/z = 464.1 [M+H]<+>;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.67 - 1.89 (m, 2 H) 2.19 - 2.31 (m, 3 H) 2.98 (d, J=10.95 Hz, 1 H) 3.24 - 3.35 (m, 2 H) 3.39 - 3.52 (m, 1 H) 4.16 - 4.25 (m, 1 H) 4.80 - 4.90 (m, 1 H) 6.11 - 6.17 (m, 1 H) 7.32 (d, J=8.60 Hz, 2 H) 7.87 (d, J=8.99 Hz, 2 H) 7.97 - 8.06 (m, 1 H) 8.66 - 8.78 (m, 1 H) 10.16 (s, 1 H) 12.51 - 12.70 (m, 1 H).
Faza 23.1: 3-Metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol
[0420 ]
[0421] Smeša 3-metilpirazola (3.0 g, 35.4 mmol), 3,4-dihidro-2H-pirana (4.97 mL, 53.2 mmol) i TFA (0.02 mL, 0.260 mmol) se meša na temperaturi od 85°C tokom 6 h u atmosferi argona. Reakciona smeša se hladi do sobne temperature i dodaje se 60% NaH u mineralnom ulju (0.061 g, 1.524 mmol) i reakciona smeša se meša tokom 10 min. Reakciona smeša se prečišćava tzv. bulb-to-bulb destilacijom (postupak razdvajanja smeša zasnovan na razlikama u njihovoj isparljivosti u ključaloj tečnoj smeši na sniženom pritisku) dajući 3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol (tačka. ključanja.150-170°C/ 12 mbar). Rastvor n-BuLi u n-heksanu (3.38 mL 1.6 M, 5.41 mmol) dodaje se u kapima tokom 10 min u rastvor 3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazola (1.0 g, 5.41 mmol) u THF-u (12 mL) na temperaturi od -70°C u atmosferi azota i reakciona smeša se meša 10 min i potom se obradjuje u kapima sa 2-metoksi-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan (0.898 g, 5.69 mmol) i meša na temperaturi od -70°C tokom 1 h. Reakciona smeša se ostavlja da se zagreje do sobne temperature, obradjuje sa n-heksanom i proizvod se filtrira, rastvara u vodi (10 mL) i zakišeljava do pH 6 sa vodenim rastvorom limunske kiseline (10%). Voda se upari na sniženom pritisku i vodeni ostatak se ekstrahuje sa EtOAc, suši na Na2SO4i rastvarač se uparava na sniženom pritisku dajući proizvod iz naslova u obliku smole žute boje. UPLC-MS (Uslov 3) tR= 0.56 min, m/z = 211.2 [M+H]<+>.
Primer 24
(R)-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-3-(4-fluoro-1H-pirazol-5-il)-4-(3-hidroksipirolidin-1-il)benzamid
2
[0423] Smeša N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-4-fluoro-3-(4-fluoro-1H-pirazol-5-il)benzamida (Faza 24.1, 62 mg, 0.147 mmol), R-3-hidroksipirolidina (0.031 mL, 0.206 mmol) i TEA (0.062 mL, 0.442 mmol) u DMSO (0.5 mL) se obradjuje na temperaturi od 100°C tokom 16 h. Reakciona smeša se razblažuje sa EtOAc (30 mL), obradjuje sa zasić. vod. Na2CO3(20 mL) i ekstrahuje sa EtOAc. Sakupljeni ekstrakti se ispiraju sa vodom (20 mL) i koncentrovanim rastvorom soli (20 mL), suše na Na2SO4i rastvarač se uparava na sniženom pritisku dajući sirovi proizvod koji se prečišćava preparativnom HPLC (Uslov 10). Frakcije koje sadrže čisti proizvod se sakupljaju, obradjuju sa zasić. vod. Na2CO3i MeCN se uklanja na sniženom pritisku. Vodeni ostatak se ekstrahuje sa DCM-om i spojeni ekstrakti se suše preko Na2SO4i rastvarač se upari na sniženom pritisku. Ostatak se rastvara u DCM i obradjuje sa n-heksanom dajući proizvod iz naslova u obliku čvrstog proizvoda bele boje. HPLC (Uslov 5) tR= 6.61 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 1.01 min, m/z = 467.3 [M+H]<+>;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.69 - 1.95 (m, 2 H) 2.79 (d, J=10.56 Hz, 1 H) 3.06 - 3.20 (m, 2 H) 3.22 - 3.35 (m, 1 H) 4.13 - 4.30 (m, 1 H) 4.79 - 4.96 (m, 1 H) 6.75 - 6.92 (m, 1 H) 7.31 (d, J=8.60 Hz, 2 H) 7.86 (m, J=9.38 Hz, 5 H) 10.11 (s, 1 H) 12.67 - 13.12 (m, 1 H).
Faza 24.1: N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-4-fluoro-3-(4-fluoro-1H-pirazol-5-il)benzamid [0424]
[0425] Smeša 3-bromo-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-4-fluorobenzamida (Faza 20.2, 200 mg, 0.497 mmol), 4-fluoro-5-(tributilstanil)-1H-pirazola (211 mg, 0.472 mmol) i Pd(PPh3)4 (28,7 mg, 0.025 mmol) u DMSO (1.5 mL) koja je bila u zapečaćenoj posudi se meša na temperaturi od 100°C tokom 20 h u atmosferi argona. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc (30 mL), obradjivana sa zasić. vod. Na2CO3(20 mL) i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani ekstrakti se ispiraju sa vodom (20 mL) i koncentrovanim rastvorom soli (20 mL), suši na Na2SO4i rastvarač se uparava na sniženom pritisku dajući sirovi proizvod koji se prečišćava fleš hromatografijom (kolona napunjena sa silika gelom, 12 g, n-heksan / EtOAc 95:5 do 6:4) dajući proizvod iz naslova u obliku čvrstog proizvoda bele boje. HPLC (Uslov 5) tR= 7.20 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 1.12 min, m/z = 400.1 [M+H]<+>.
Primer 25
(R)-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-5-(4-fluoro-1H-pirazol-5-il)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)nikotinamid
[0426]
[0427] Jedinjenje iz naslova se dobija na način analogan sa onim koji je opisan u primeru 5 korišćenjem 6-hloro-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-5-(4-fluoro-1H-pirazol-5-il)nikotinamida (Faza 25.1) i (R)-pirolidin-3-ol dajući prah bele boje. HPLC (Uslov 4) tR= 4.89 min, HPLC Chiral (CHIRALCEL® OD-H, 250 x 4.6 mm, eluent : n-heptan/EtOH/MeOH (85:10:5), 1 mL/min, UV 210 nm) tR= 9.34 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 0.96 min, m/z = 468.1 [M+H]<+>;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.67 - 1.92 (m, 2 H) 3.00 (d, J=11.73 Hz, 1 H) 3.19 - 3.33 (m, 2 H) 3.43 (m, J=7.00 Hz, 1 H) 4.22 (br. s, 1 H) 4.87 (br. s, 1 H) 7.31 (d, J=8.60 Hz, 2 H) 7.85 (d, J=8.99 Hz, 2 H) 7.90 - 8.10 (m, 2 H) 8.77 (br. s, 1 H) 10.18 (s, 1 H) 12.83 - 13.19 (m, 1 H).
Faza 25.1: 6-hloro-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-5-(4-fluoro-1H-pirazol-5-il)nikotinamid [0428]
[0429] Jedinjenje iz naslova se dobija na način analogan sa onim koji je opisan u Fazi 13.1 korišćenjem 6-hloro-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-5-jodonikotinamida (Faza 25.2) i 4-fluoro-5-(tributilstanil)-1H-pirazola dajući beličasti prah. HPLC (Uslov 4) tR= 5.69 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 1.09 min, m/z = 415 [M-H]-;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm .
Faza 25.2: 6-hloro-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-5-jodonikotinamid
[0430]
4
[0431] Jedinjenje iz naslova se dobija na način analogan sa onim koji je opisan u Fazi 11.2 korišćenjem 6-hloro-5-jodonikotinske kiseline i 4-(hlorodifluorometoksi)aniline dajući beličasti prah. HPLC (Uslov 4) tR= 6.47 min, UPLC-MS (Uslov3) tR= 1.26 min, m/z = 456.8 [M-H]-.
Primer 26
(R)-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(3-(trifluorometil)-1H-pirazol-5-il)nikotinamid
[0432]
[0433] K3PO4(135 mg, 0.635 mmol), 1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-3-(trifluorometil)-1H-pirazol-5-ilborna kiselina (112 mg, 0.424 mmol) i Pd(PPh3)4(12.24 mg, 10.59 µmol) se dodaju u rastvor (R)-5-bromo-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)nikotinamida (Faza 9.2, 100 mg, 0.212 mmol) u toluenu (2 mL) i reakciona smeša se meša na temperaturi od 110°C tokom 2 h u atmosferi argona. Reakciona smeša se filtrira kroz Hyflo®, ispire sa vodom i rastvarač se upari na sniženom pritisku dajući sirovi proizvod koji se prečišćava fleš hromatografijom (kolona sa Silika gelom, 12g, DCM / EtOH od 99:1 do 94:6). Rezultujući intermedijer se rastvara u DCM-u (2 mL), obradjuje sa TFA (0.462 mL, 5.99 mmol) i meša 1 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša se razblažuje sa EtOAc (20 mL), obradjuje sa zasić. vod. Na2CO3(20 mL) i ekstrahuje sa EtOAc. Sakupljeni ekstrakti se ispiraju sa koncentrovanim rastvorom soli (20 mL), suši na Na2SO4I rastvarač se uparava na sniženom pritisku dajući sirovi proizvod koji se prečišćava fleš hromatografijom (kolona sa silika gelom, 4 g, DCM / EtOH from 99:1 to 9:1). Frakcije koje sadrže čisti proizvod se sakupljaju i rastvarač se upari na sniženom pritisku dajuči ostatak koji se tritururiše u smeši rastvarača DCM/ nheksan, filtrira i suši dajući proizvod iz naslova u obliku čvrstog proizvoda bele boje. HPLC (Uslov 5) tR= 6.545 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 1.10 min, m/z = 518.1 [M+H]<+>;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.71 - 1.95 (m, 2 H) 2.94 (d, J=11.34 Hz, 1 H) 3.24 (m, 2 H) 3.44 (m, 1 H) 4.17 - 4.32 (m, 1 H) 4.91 (br. s, 1 H) 6.88 (s, 1 H) 7.34 (d, J=8.21 Hz, 2 H) 7.86 (d, J=9.38 Hz, 2 H) 8.12 (s, 1 H) 8.81 (s, 1 H) 10.17 (s, 1 H) 13.94 (s, 1 H).
Primer 27
(R)-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1-metil-1H-pirazol-5-il)nikotinamid
[0434]
[0435] Jedinjenje iz naslova se dobija na način analogan sa onim koji je opisan u Fazi 2.1 korišćenjem (R)-5-bromo-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)nikotinamida (Faza 9.2) i 1-metil-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazola dajući prah bele boje. HPLC (Uslov 4) tR= 5.25 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 0.98 min, m/z = 464.1 [M+H]<+>;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.65 - 1.89 (m, 2 H) 2.87 - 3.00 (m, 1 H) 3.09 - 3.29 (m, 3 H) 3.59 (s, 3 H) 4.19 (br. s, 1 H) 4.87 (d, J=3.13 Hz, 1 H) 6.39 (s, 1 H) 7.27 - 7.36 (m, 2 H) 7.50 (dd, J=1.76, 0.98 Hz, 1 H) 7.78 - 7.88 (m, 2 H) 8.00 (d, J=2.35 Hz, 1 H) 8.78 (dd, J=2.35, 1.17 Hz, 1 H) 10.15 (s, 1 H).
Primer 28
(R)-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1-metil-1H-pirazol-3-il)nikotinamid
[0436]
[0437] Jedinjenje iz naslova se dobija na način analogan sa onim koji je opisan u fazi 2.1 korišćenjem (R)-5-bromo-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)nikotinamida (Faza 9.2) i 1-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazola dajući prah bele boje. HPLC (Uslov 4) tR= 5.16 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 0.98 min, m/z = 464 [M+H]<+>;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.64 - 1.90 (m, 2 H) 2.85 - 3.00 (m, 1 H) 3.06 - 3.26 (m, 3 H) 3.59 (s, 3 H) 4.19 (br. s, 1 H) 4.87 (d, J=2.74 Hz, 1 H) 6.39 (s, 1 H) 7.31 (d, J=8.60 Hz, 2 H) 7.50 (dd, J=1.76, 0.98 Hz, 1 H) 7.84 (d, J=8.60 Hz, 2 H) 8.01 (d, J=2.74 Hz, 1 H) 8.78 (dd, J=2.54, 0.98 Hz, 1 H) 10.15 (s, 1 H).
Primer 29
(R)-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-5-(1-(2-hidroksietil)-1H-pirazol-4-il)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)nikotinamid
[0438]
[0439] U rastvor (R)-5-bromo-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)nikotinamida (Faza 9.2, 116 mg, 0.25 mmol) i 1-(2-(tetrahidro-2H-piran-2-iloksi)etil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazola (161 mg, 0.5 mmol ) u DME (1.0 mL) u atmosferi argona, dodaje se 2M Na2CO3(0.375 mL, 0.75 mmol). Tada se dodaje PdCl2(dppf) (9.15 mg, 0.013 mmol) i reakciona smeša se meša na temperaturi od 100°C tokom 2 h. Nakon hladjenja na sobnoj temperaturi, reakciona smeša se rastvara u EtOAc i ispire sa koncentrovanim rastvorom soli, suši na Na2SO4i rastvarač se upari na sniženom pritisku. Sirovi proizvod se rastvara u DCM-u (1.4 mL) hladi do temperature od 0°C, zatim obradjuje sa TFA (0.77 mL, 10 mmol) i meša na sobnoj temperaturi u vremenu od 3 h. Reakciona smeša se sipa u vod. Na2CO310% (15 mL) i ekstrahuje sa EtOAc. Spojeni ekstrakti se suše na Na2SO4i rastvarač se uparava na sniženom pritisku dajući sirovi proizvod koji se prečišćava fleš hromatografijom (kolona RediSep® sa silika gelom, DCM / MeOH, od 2% do 10% MeOH) dajući beličasti prah. HPLC (Uslov 4) tR= 4.33 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 0.88 min, m/z = 494 [M+H]<+>;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.67 - 1.88 (m, 2 H) 2.96 (d, J=11.73 Hz, 0 H) 3.24 - 3.37 (m, 2 H) 3.41 - 3.53 (m, 1 H) 3.75 (q, J=5.73 Hz, 2 H) 4.04 - 4.25 (m, 4 H) 4.81 (d, J=3.52 Hz, 1 H) 4.86 - 4.94 (m, 1 H) 7.31 (d, J=8.21 Hz, 2 H) 7.53 - 7.59 (m, 1 H) 7.79 - 7.89 (m, 3 H) 7.93 (d, J=2.35 Hz, 1 H) 8.65 (dd, J=2.35, 0.78 Hz, 1 H) 10.15 (s, 1 H).
Primer 30
(R)-N-(4-(1,1-Difluoroetoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1H-pirazol-5-il)nikotinamid [0440]
[0441] K3PO4(113 mg, 0.532 mmol), 1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol (99 mg, 0.355 mmol) i Pd(PPh3)4(10.24 mg, 8.86 µmol) se dodaju u rastvor (R)-5-bromo-N-(4-(1,1-difluoroetoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)nikotinamida (Faza 30.1, 80 mg, 0.177 mmol) u toluenu (1.5 mL) u atmosferi argona i reakciona smeša se meša na temperaturi od 110°C tokom 1 h. Reakciona smeša se razblažuje sa EtOAc (20 mL) obradjuje sa zasić. rastvorom NaHCO3(20 mL) i ekstrahuje sa EtOAc. Sakupljeni ekstrakti se ispiraju sa koncentrovanim rastvorom soli (20 mL), suše na Na2SO4i rastvarač se upari na sniženom pritisku dajući sirovi proizvod koji se prečišćava fleš hromatografijom (kolona sa silika gelom, 12 g DCM / EtOH od 97:3 do 95:5) dajući N-(4-(1,1-difluoroetoksi)fenil)-6-((R)-3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il)nikotinamid koji se (66 mg, 0.129 mmol) rastvara u DCM-u (1.5 mL) i obradjuje sa TFA (0.546 mL, 7.09 mmol) i meša 2 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša se rablažuje sa EtOAc (20 mL), obradjuje sa zasić. rastvorom NaHCO3(25 mL) i ekstrahuje sa EtOAc (20 mL). Spojeni ekstrakti se ispiraju sa koncentrovanim rastvorom soli (20 mL), suše na Na2SO4i rastvarač se upari na sniženom pritisku dajući sirovi proizvod koji se prečišćava preparativnom HPLC (Uslov 10). Frakcije koje sadrže čisti proizvod se sakupljaju, obradjuju sa 0.5g NaHCO3i MeCN se upari na sniženom pritisku. Vod. ostatak se ekstrahuje sa DCM dajući proizvod iz naslova u obliku čvrstog proizvoda bele boje. HPLC (Uslov 5) tR= 5.42 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 0.82 min, m/z = 430.1 [M+H]<+>;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.68 - 1.87 (m, 2 H) 1.93 (t, J=13.67 Hz, 3 H) 2.94 (d, J=11.71 Hz, 1 H) 3.15 - 3.33 (m, 2 H) 3.38 - 3.48 (m, 1 H) 4.19 (br. s, 1 H) 6.37 (s, 1 H) 7.15 (d, J=9.37 Hz, 2 H) 7.65 - 7.83 (m, J=9.37 Hz, 3 H) 8.03 (d, J=2.34 Hz, 1 H) 8.73 (d, J=2.34 Hz, 1 H).
Faza 30.1: (R)-5-Bromo-N-(4-(1,1-difluoroetoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)nikotinamid [0442]
[0443] Smeša 5-bromo-6-hloro-N-(4-(1,1-difluoroetoksi)fenil)nikotinamida (Faza 30.2, 700 mg, 1.752 mmol), (R)-pirolidin-3-ol-a (0.170 mL, 2.102 mmol) i DIPEA (0.673 mL, 3.85 mmol) i iPrOH (2 mL) u zapečaćenoj fioli se zagreva na temperaturi od 120°C tokom 1 h. Reakciona smeša se razblažuje sa EtOAc (80 mL), obradjuje sa 10% limunskom kiselinom (40 mL; ~pH4) i ekstrahuje sa EtOAc. Spojeni ekstrakti se ispiru sa koncentrovanim rastvorom soli (2 x 40 mL), suše na Na2SO4i rastvarač se upari na sniženom pritisku dajući ostatak koji se ispire sa Et2O i n-heksanom i kristali se suše dajući proizvod iz naslova u obliku čvrstog proizvoda bež boje. HPLC (Uslov 5) tR= 6.4 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 1.02 min, m/z = 442.1/ 444.0 [M+H]<+>.
Faza 30.2: 5-Bromo-6-hloro-N-(4-(1,1-difluoroetoksi)fenil)nikotinamid
[0444]
[0445] U smešu 5-bromo-6-hloronikotinske kiseline (1.2 g, 4.97 mmol) i DMF-a (20 µL, 0.258 mmol) u DCM-u (40 mL) u atmosferi azota, dodaje se oksalil hlorid (653 µL, 7.46 mmol) i reakciona smeša se meša 2 h na sobnoj temperaturi. Rastvarač se upari, ostatak se rastvori u DCM (10 mL) i ponovo upari do suva. Ostatak se rastvara u THF-u (30 mL), dodaje se DIPEA (1.737 mL, 9.95 mmol) i reakciona smeša se ohladi do temperature od -15°C. Dodaje se 4-(1,1-difluoroetoksi)anilin (Faza 30.3, 0.932 g, 5.22 mmol) u kapima u THF (10 mL) u vremenu od 15 min i reakciona smeša se meša 1 h na sobnoj temperaturi. Rastvarač se upari na sniženom pritisku i ostatak se razblažuje sa EtOAc (100 mL), obradjuje sa limunskom kiselinom 10% (60 mL) i ekstrahuje sa EtOAc. Spojeni ekstrakti se ispiraju sa zasić. vod. Na2CO3(50 mL) i koncentrovanim rastvorom soli (2 x 50 mL), suše na Na2SO4i rastvarač se upari na sniženom pritisku dajući sirovi proizvod koji se suspenduje u n-heksanu, filtrira i suši dajući proizvod iz naslova u obliku čvrstog proizvoda bež boje. HPLC (Uslov 5) tR= 7.3 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 1.16 min, m/z = 391/393 [M+H]<+>.
Faza 30.3: 4-(1,1-Difluoroetoksi)anilin
[0446]
[0447] Rastvor 1-(1,1-difluoroetoksi)-4-nitrobenzena (Faza 30.4, 2.95 g, 13.94 mmol) u EtOH (100 mL) se hidrogenizuje (Reni Ni 1.0 g; 26.5 h na sobnoj temperaturi). Reakciona smeša se filtrira kroz sloj Hyflo® i rastvarač se uparava na sniženom pritisku dajući sirovi proizvod iz naslova u obliku ulja braon bolje. HPLC (Uslov 5) tR= 4.5 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 0.74 min, m/z = 174.1 [M+H]<+>.
Faza 30.4: 1-(1,1-Difluoroetoksi)-4-nitrobenzen
[0448]
[0449 ] U smešu XeF2 (4.92 g, 29.1 mmol) i DCM (50 mL) u plastičnoj fioli dodaju se 4-Nitroacetofenon (2.45 g, 14.54 mmol) i HF-piridin (10.11 mL, 116 mmol) i reakciona smeša se meša na sobnoj temperaturi u vremenu od 20 h. Reakciona smeša se pažljivo dodaje u mešanu smešu EtOAc (150 mL) i zasić. NaHCO3(250 mL) i ekstrahuje sa EtOAc. Spojeni ekstrakti se ispiraju sa koncentrovanim rastvorom soli (2 x 100 mL), suše na Na2SO4i rastvarač se upari na sniženom pritisku dajući sirovi proizvod koji se prečišćava fleš hromatografijom (kolona na silika gelu, 40 g, n-heksan / EtOAc (95:5)) dajući proizvod iz naslova u obliku ulja žute boje. HPLC (Uslov 5) tR= 6.9 min, UPLC-MS (Uslov3) tR= 1.05 min.
Primer 31
(R)-N-(4-(2-hloro-1,1,2,2-tetrafluoroetil)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1H-pirazol-5-il)nikotinamid
[0450]
[0451] Jedinjenje iz naslova se dobija na način analogan sa onim koji je opisan u primeru 8 korišćenjem (R)-5-bromo-N-(4-(2-hloro-1,1,2,2-tetrafluoroetil)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)nikotinamida (Faza 31.1) i 1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazola dajući prah bele boje. HPLC (Uslov 4) tR= 4.89 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 0.98 min, m/z = 484.1 [M+H]<+>;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.65 - 1.89 (m, 2 H) 2.83 - 2.98 (m, 1 H) 3.18 - 3.33 (m, 2 H) 3.36 - 3.49 (m, 1 H) 4.13 - 4.24 (m, 1 H) 4.77 - 4.93 (m, 1 H) 6.31 - 6.43 (m, 1 H) 7.62 (d, J=8.59 Hz, 2 H) 7.77 - 7.84 (m, 1 H) 7.91 - 8.09 (m, 3 H) 8.64 - 8.81 (m, 1 H) 10.31 (s, 1 H) 12.83 -12.96 (m, 1 H).
Faza 31.1: (R)-5-Bromo-N-(4-(2-hloro-1,1,2,2-tetrafluoroetil)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)nikotinamid
[0452]
1
[0453] Jedinjenje iz naslova se dobija na način analogan sa onim koji je opisan u fazi 8.1 korišćenjem 5-bromo-6-hloro-N-(4-(2-hloro-1,1,2,2-tetrafluoroetil)fenil)nikotinamida (Faza 31.2) i (R)-pirolidin-3-ol dajući prah bele boje. HPLC (Uslov 4) tR= 6.05 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 1.18 min, m/z = 498 [M+H]<+>.
Faza 31.2: 5-Bromo-6-hloro-N-(4-(2-hloro-1,1,2,2-tetrafluoroetil)fenil)nikotinamid
[0454]
[0455] Jedinjenje iz naslova se dobija na način analogan sa onim koji je opisan u Fazi 9.3 uz korišćenje 5-bromo-6-hloronikotinske kiseline i 4-(2-hloro-1,1,2,2-tetrafluoroetil)anilina (faza 31.3) čime se dobija kristalni prah bež boje. HPLC (Uslov 4) tR= 6.77 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 1.31 min, m/z = 444.8 [M+H]<+>.
Faza 31.3: 4-(2-hloro-1,1,2,2-tetrafluoroetil)anilin
[0456]
[0457] U smešu anilina (745 mg, 8 mmol) i 1-hloro-1,1,2,2-tetrafluoro-2-jodoetana (1049 mg, 4 mmol) u DMF-u (10 mL) u fioli za mikrotalasno zračenje u atmosferi argona, dodaje se Ni(PPh3)4( 222 mg, 0.2 mmol ). Fiola je bila zapečaćena i reakciona smeša se meša dva dana na temperaturi od 80°C. Nakon hladjenja na sobnoj temperaturi, reakciona smeša se rastvara u Et2O, ispire sa 10% NaHCO3i koncentrovanim rastvorom soli, suši na MgSO4i rastvarač se upari na sniženom pritisku dajući ostatak koji se prečišćava fleš hromatografijom (kolona sa silika gelom RediSep®, n-heptan / EtOAc, od 0 do 25% EtOAc) i dalje hromatografijom reverzne faze (MPLC, Lichroprep® 15-25 μm kolona, eluenti: voda 0.1% mravlja kiselina / MeCN 0.1% mravlja kiselina, gradijent 10 do 50% MeCN 0.1% mravlja kiselina). Frakcije koje sadrže čisti proizvod se sakupljaju i MeCN se upari na sniženom pritisku dajući vod. fazu koja je neutralizovana sa NaHCO3i ekstrahovana sa Et2O. Vod. ostatak se ekstrahuje sa DCM dajući proizvod iz naslova u obliku čvrstog proizvoda. Spojeni ekstrakti se suše na MgSO4i rastvarač se upari na sniženom pritisku dajući jedinjenje iz naslova u obliku ulja crvene boje. HPLC (Uslov 4) tR= 5.48 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 1.04 min, m/z = 269 [M+H]<+>.
1 1
Primer 32
(R)-6-(3-Hidroksipirolidin-1-il)-5-(1H-pirazol-5-il)-N-(6-((trifluorometil)tio)piridin-3-il)nikotinamid [0458]
[0459] Jedinjenje iz pronalaska se dobija na sličan način kao što je opisano u Primeru 8 uz korišćenje (R)-5-bromo-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-N-(6-((trifluorometil)tio)piridin-3-il)nikotinamida (Faza 32.1) i 1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazola dajući beličasti prah. HPLC (Uslov 4) tR= 4.18 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 0.82 min, m/z = 451.3 [M+H]<+>;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.64 - 1.89 (m, 2 H) 2.94 (d, J=11.73 Hz, 1 H) 3.18 - 3.33 (m, 2 H) 3.36 - 3.49 (m, 1 H) 4.18 (br. s, 1 H) 4.81 (d, J=3.13 Hz, 1 H) 6.38 (s, 1 H) 7.68 - 7.85 (m, 2 H) 8.02 (d, J=1.95 Hz, 1 H) 8.32 (dd, J=8.60, 2.35 Hz, 1 H) 8.73 (d, J=2.35 Hz, 1 H) 8.98 (d, J=2.35 Hz, 1 H) 10.42 (s, 1 H) 12.89 - 13.12 (m, 1 H).
Faza 32.1: (R)-5-Bromo-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-N-(6-((trifluorometil)tio)piridin-3-il)nikotinamid [0460]
[0461] Jedinjenje iz pronalaska se dobija na sličan način kao što je opisano u fazi 8.1 uz korišćenje 5-bromo-6-hloro-N-(6-((trifluorometil)tio)piridin-3-il)nikotinamida (Faza 32.2) i (R)-pirolidin-3-ol dajući beličast prah. HPLC (Uslov 4) tR= 5.53 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 1.01 min, m/z = 463.1 [M+H]<+>.
Faza 32.2: 5-Bromo-6-hloro-N-(6-((trifluorometil)tio)piridin-3-il)nikotinamid
[0462]
1 2
[0463] Jedinjenje iz pronalaska se dobija na sličan način kao što je opisano u Fazi 9.3 uz korišćenje 5-bromo-6-hloronikotinske kiseline i 6-(trifluorometiltio)piridin-3-amina dajući beličasti prah. HPLC (Uslov 4) tR= 6.43 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 1.15 min, m/z = 411.9 [M-H]-.
Primer 33
(R)-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(4-metil-1H-pirazol-5-il)nikotinamid
[0464]
[0465] U rastvor 6-hloro-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-5-(4-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il)nikotinamida (Faza 33.1, 99 mg, 0.2 mmol) i (R)-pirolidin-3-ol, 20.9 mg, 0.24 mmol) u iPrOH (200 µL) u fioli koja je zapečaćena, dodavan je DIPEA ( 77 µL, 0.44 mmol) i reakciona smeša se meša na temperaturi od 140°C tokom 1.5 h. Nakon hladjenja na sobnoj temperaturi, reakciona smeša se razblažuje u EtOAc, ispire sa koncentrovanim rastvorom soli, suši na Na2SO4i rastvarač se upari na sniženom pritisku. Ostatak se rastvara u DCM (1.1 mL ), hladi do temperature od 0°C, obradjuje sa TFA ( 0.616 mL, 8 mmol ) i meša na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Reakciona smeša se sipa u 10% vod. Na2CO3(10 mL) i ekstrahuje sa EtOAc. Spojeni ekstrakti se suše na Na2SO4i rastvarač se upari na sniženom pritisku dajući ostatak koji se prečišćava fleš hromatografijom (RediSep® kolona sa silika gelom, DCM / MeOH od 2% do 10% MeOH) dajući jedinjenje iz naslova u obliku praha bež boje. HPLC (Uslov 4) tR= 4.79 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 0.95 min, m/z = 464 [M+H]<+>;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.63 - 1.92 (m, 5 H) 2.81 - 2.96 (m, 1 H) 3.05 - 3.41 (m, 3 H) 4.17 (br. s, 1 H) 4.81 (br. s, 1 H) 7.30 (d, J=8.60 Hz, 2 H) 7.58 (s, 1 H) 7.79 - 8.02 (m, 3 H) 8.73 (s, 1 H) 10.15 (s, 1 H) 12.58 - 12.85 (m, 1 H).
Faza 33.1: 6-hloro-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-5-(4-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il)nikotinamid
[0466]
1
[0467] K3PO4(191 mg, 0.9 mmol) i Pd(PPh3)4(17.33 mg, 0.015 mmol) se dodaju u rastvor 6-hloro-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-5-jodonikotinamida (Faza 25.2, 138 mg, 0.3 mmol) i 4-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazola (131 mg, 0.45 mmol) u toluenu (1.5 mL) u atmosferi argona u fioli, koja je bila zapečaćena i zagrevana na temperaturi od 110°C tokom 18 h. Reakciona smeša se sipa u 20 mL vode i ekstrahuje sa EtOAc. Spojeni ekstrakti se suše preko Na2SO4i rastvarač se upari na sniženom pritisku dajući ostatak koji se prečišćava fleš hromatografijom (RediSep® kolona sa silika gelom, n-heptan / EtOAc, od 5 do 50% EtOAc) i kristalizuje iz n-heptana što za rezultat ima dobijanje jedinjenja iz naslova u obliku beličastog praha. HPLC (Uslov 4) tR= 6.8 min, UPLC-MS (Uslov3) tR= 1.26 min, m/z = 495 [M-H]-.
Primer 34
(S)-6-(3-Hidroksipirolidin-1-il)-5-(1H-pirazol-5-il)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)nikotinamid [0468]
[0469] Jedinjenje iz naslova se dobija na način analogan sa onim koji je opisan u Primeru 8 uz korišćenje (S)-5-bromo-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)nikotinamida (Faza 34.1) i 1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazola dajući beličasti prah. HPLC (Uslov 4) tR= 4.42 min, HPLC Chiral (CHIRALPAK® AD-H, 250 x 4.6 mm, eluent : EtOH / MeCN (98:2), 0.5 mL/min, UV 210 nm) tR= 28.27 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 0.91 min, m/z = 434.2 [M+H]<+>;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.63 - 1.88 (m, 2 H) 2.92 (d, J=11.73 Hz, 1 H) 3.19 - 3.29 (m, 2 H) 3.34 - 3.47 (m, 1 H) 4.18 (br. s, 1 H) 4.80 (d, J=3.13 Hz, 1 H) 6.37 (s, 1 H) 7.31 (d, J=8.99 Hz, 2 H) 7.75 - 7.89 (m, 3 H) 8.00 (d, J=2.35 Hz, 1 H) 8.71 (d, J=2.35 Hz, 1 H) 10.16 (s, 1 H) 12.85 - 13.12 (m, 1 H).
Faza 34.1: (S)-5-Bromo-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)nikotinamid [0470]
1 4
[0471] Jedinjenje iz naslova se dobija na način analogan sa onim koji je opisan u Fazi 8.1 uz korišćenje 5-bromo-6-hloro-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)nikotinamida (Faza 2.3) i (S)-pirolidin-3-ol dajući beličasti kristalni prah. HPLC (Uslov 4) tR= 5.83 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 1.06 min, m/z = 446.1 [M+H]<+>.
Primer 35
(S)-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-5-(4-fluoro-1H-pirazol-5-il)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)nikotinamid
[0472]
[0473] Jedinjenje iz naslova se dobija na način analogan sa onim koji je opisan u primeru 5 uz korišćenje 6-hloro-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-5-(4-fluoro-1H-pirazol-5-il)nikotinamida (Faza 25.1) i (S)-3-pirolidinola da bi se dobio čvrsti proizvod bele boje. HPLC (Uslov 5) tR= 5.69 min, HPLC Chiral (CHIRALCEL® OD-H, 250 x 4.6 mm, eluent : n-heptan/EtOH/MeOH (85:10:5), 1 mL/min, UV 210 nm) tR= 12.62 min, UPLC-MS (Uslov 6) tR= 0.97 min, m/z = 468.2 [M+H]<+>;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.71 - 1.81 (m, 1 H) 1.81 - 1.92 (m, 1 H) 3.02 (d, J=11.34 Hz, 1 H) 3.24 - 3.37 (m, 2 H) 3.40 - 3.49 (m, 1 H) 4.23 (br. s, 1 H) 4.89 (br. s, 1 H) 7.32 (d, J=9.4 Hz, 2 H) 7.76 - 7.98 (m, J=9.00 Hz, 3 H) 8.03 (d, J=2.35 Hz, 1 H) 8.79 (d, J=2.35 Hz, 1 H) 10.20 (br. s, 1 H) 12.99 (br. s, 1 H).
Primer 36
Metil 1-(5-((4-(hlorodifluorometoksi)fenil)karbamoil)-3-(1H-pirazol-5-il)piridin-2-il)pirolidin-3-karboksilat
[0474]
1
[0475] DIPEA (181 µL, 1.035 mmol) se dodaje u smešu 6-hloro-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-5-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il)nikotinamida (Faza 36.1, 100 mg, 0.207 mmol), hidrohlorida metil-3-pirolidin karboksilata (44.5 mg, 0.269 mmol) i iPrOH (414 µL) u fioli za mikrotalasno zračenje, koja je bila isprana sa argonom, pa zapečaćena i mešana na temperaturi od 130°C tokom 24 h. Reakciona smeša se razblažuje sa EtOAc, obradjuje sa koncentrovanim rastvorom soli i ekstrahuje sa EtOAc. Spojeni ekstrakti se suše preko Na2SO4i rastvarač se upari na sniženom pritisku dajući sirovi proizvod koji se prečišćava fleš hromatografijom (kolona na silika gelu, n-heptan / EtOAc od 40% do 100% EtOAc) a ondai i preparativnom TLC (Silika gel, eluent EtOAc). Dodatnom liofilizacijom iz 1,4-dioksana dobija se jedinjenje iz naslova u obliku jedinjenja iz naslova u obliku čvrstog proizvoda svetlo bele boje. UPLC-MS (Uslov 6) tR= 1.09 min, m/z = 492.1 [M+H]<+>;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.90 - 2.02 (m, 1 H) 2.02 - 2.14 (m, 1 H) 3.06 - 3.20 (m, 1 H) 3.23 - 3.48 (m, 4 H) 3.61 (s, 3 H) 6.35 - 6.48 (m, 1 H) 7.34 (d, J=8.78 Hz, 2 H) 7.79 - 7.90 (m, 1 H) 7.89 (d, J=8.80 Hz, 2 H) 8.03 - 8.13 (m, 1 H) 8.70 - 8.83 (m, 1 H) 10.26 (s, 1 H).
Faza 36.1: 6-hloro-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-5-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il)nikotinamid
[0476]
[0477] U 6-hloro-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-5-jodonikotinamid (Faza 25.2, 12 g, 26.1 mmol) u DME (160 mL) dodaju se pinakol estar 1-(Tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-borne kiseline (9.45 g, 34.0 mmol), Na2CO3(39.2 mL, 78 mmol) i PdCl2(dppf) (0.956 g, 1.307 mmol). Smeša se prazni/ ispire 3 puta sa argonom, i meša na temperaturi od 80°C tokom 22 h. Reakciona smeša se razblažuje sa EtOAc (350 mL), ispire sa vodom (4 x 150 mL) i ekstrahuje sa EtOAc. Spojeni ekstrakti se suše na Na2SO4i rastvarač se upari na sniženom pritisku dajući sirovi proizvod koji se prečišćava fleš hromatografijom (kolona sa silika gelom, 850 g, EtOAc / n-heksan (1:2)) i kristalizuje iz smeše rastvarača iPr2O / EtOAc dajući proizvod iz naslova u obliku čvrstog proizvoda bele boje. HPLC (Uslov 5) tR= 7.52 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 1.22 min, m/z = 483/485 [M+H]<+>.
1
Primer 37
1-(5-((4-(hlorodifluorometoksi)fenil)karbamoil)-3-(1H-pirazol-5-il)piridin-2-il)pirolidin-3-karboksilna kiselina
[0478]
[0479] U rastvor metil 1-(5-((4-(hlorodifluorometoksi)fenil)karbamoil)-3-(1H-pirazol-5-il)piridin-2-il)pirolidin-3-karboksilata (Primer 36, 24.5 mg, 0.05 mmol) u smeši rastvarača MeOH (0.5 mL) / THF (1 mL) dodaje se vod. 1 M LiOH (0.199 mL, 0.199 mmol) i reakciona smeša se meša na sobnoj temperaturi 1 h 20. Reakciona smeša se obradjuje sa 1 M HCl (4 ekviv.) i organski rastvarači se upare na sniženom pritisku. Vod. faza se ekstrahuje dva puta sa EtOAc i spojeni ekstrakti se ispiraju sa koncentrovanim rastvorom soli, suše preko Na2SO4i rastvarač se koncentruje na sniženom pritisku do zapremine od 0.5 mL. Dodaje se n-Heptan i proizvod se filtrira, ispire sa n-heptanom i suši dajući jedinjenje iz naslova u obliku čvrstog proizvoda bež boje. UPLC-MS (Uslov 6) tR= 0.96 min, m/z = 478.3 [M+H]<+>;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.86 - 2.12 (m, 2 H) 2.90 - 3.09 (m, 1 H) 3.17 -3.54 (m, 4 H) 6.41 (d, J=2.08 Hz, 1 H) 7.34 (d, J=9.05 Hz, 2 H) 7.66 - 7.83 (m, 1 H) 7.88 (d, J=9.17 Hz, 2 H) 8.06 (d, J=2.44 Hz, 1 H) 8.70 - 8.84 (m, 1 H) 10.23 (s, 1 H) 12.90 (br. s, 1 H).
Primer 38
(S)-(R)-1-(5-((4-(hlorodifluorometoksi)fenil)karbamoil)-3-(1H-pirazol-5-il)piridin-2-il)pirolidin-3-il 2-amino-3-metilbutanoat
[0480]
[0481] U smešu (R)-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1H-pirazol-5-il)nikotinamida (Primer 9, 800 mg, 1.672 mmol) u DCM-u (20 mL) dodaju se Boc-L-Valin (726 mg, 3.34 mmol) i DMAP (102 mg, 0.836 mmol) i suspenzija se meša na sobnoj temperaturi tokom 30 min. Zatim se dodaje N,N'-Diizopropil karbodiimid (0.521 mL, 3.34 mmol) i rezultujući rastvor se meša na
1
sobnoj temperaturi tokom 19 h. Reakciona smeša se razblažuje sa EtOAc (150 mL), ispire sa vod. zasić. rastvorom NaHCO3(50 mL) i koncentrovanim rastvorom soli (2 x 50 mL) i ekstrahuje sa EtOAc. Spojeni ekstrakti se suše preko Na2SO4i rastvarač se upari na sniženom pritisku dajući ostatak koji se suspenduje u EtOAc (5 mL), meša na sobnoj temperaturi, filtrira i ispire sa 10 mL EtOAc. Filtrat se upari do suva na sniženom pritisku i rezultujući intermedijer se rastvara u DCM (15 mL), obradjuje sa TFA (4.09 mL, 53.0 mmol) i meša na sobnoj temperaturi tokom 92 h. Rastvarač se upari na sniženom pritisku i ostatak se rastvara u EtOAc (150 mL), ispire sa vod. zasić. rastvorom NaHCO3(50 mL) i sa vodom (2 x 50 mL), suši na Na2SO4i rastvarač se upari na sniženom pritisku dajuči ostatak koji se rastvara u MeOH (20 mL), i obradjuje sa Si-Tiol (Biotage 1.3 mmol/g, 1 g). U smeši se dodaje silika gel (5 g), rastvarač se upari na sniženom pritisku, i ostatak se prečišćava fleš hromatografijom (RediSep® kolona napunjena sa silika gelom, 120 g, DCM / MeOH 95:5) a zatim i preparativnom SFC (Kolona DEAP; izokratsko eluiranje 25% za 15 min). Frakcije koje sadrže čisti proizvod se sakupljaju i rastvarač se upari na sniženom pritisku dajući ostatak koji se rastvara u toplom MeOH (4 mL) i filtrira kroz PTFE filter debljine 0.45 µm. Filtrat se sonifikuje tokom 5 min i rezultujuća bela suspenzija se meša 2 h na sobnoj temperaturi, filtrira, ispire sa MeOH (1 mL) i suši dajući proizvod iz naslova u obliku čvrstog proizvoda bele boje. HPLC (Uslov 5) tR= 5.41 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 0.86 min, m/z = 549.2 [M+H]<+>;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.77 (d, J=6.65 Hz, 3 H) 0.81 (d, J=6.65 Hz, 3 H) 1.51 - 1.64 (m, 2 H) 1.69 - 1.81 (m, 1 H) 1.84 - 1.94 (m, 1 H) 1.98 - 2.12 (m, 1 H) 3.02 (d, J=5.08 Hz, 1 H) 3.15 (d, J=12.90 Hz, 1 H) 3.30 - 3.43 (m, 2 H) 3.46 - 3.57 (m, 1 H) 5.13 - 5.25 (m, 1 H) 6.39 (br. s, 1 H) 7.31 (d, J=8.21 Hz, 2 H) 7.76 - 7.91 (m, 3 H) 8.05 (s, 1 H) 8.73 (br. s, 1 H) 10.21 (s, 1 H) 12.94 (br. s, 1 H).
Primer 39
(R)-1-(5-((4-(hlorodifluorometoksi)fenil)karbamoil)-3-(1H-pirazol-5-il)piridin-2-il)pirolidin-3-il dihidrogen fosfat
[0482]
[0483] U rastvor N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-((R)-3-((3-oksido-1,5-dihidrobenzo[e][1,3,2] dioksafosfepin-3-il)oksi)pirolidin-1-il)-5-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il)nikotinamida (Faza 39.1, 620 mg, 0.797 mmol) u DCM-u (10 mL) dodaje se TFA (1.227 mL, 15.93 mmol) i
1
reakciona smeša se meša 20 h na sobnoj temperaturi. Dodaje se dodatna količina TFA (500µL) i reakciona smeša se meša naredna 4 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša se razblažuje sa EtOAc (100 mL), obradjuje sa zasić. vod. Na2CO3(70 mL) i ekatrahuje sa EtOAc (50 mL). Spojeni ekstrakti se ispiraju sa koncentrovanim rastvorom soli (50 mL), suše preko Na2SO4i rastvarač se upari na sniženom pritisku dajući ostatak koji se prečišćava fleš hromatografijom (kolona sa silika gelom, 12 g DCM /EtOH od 9:1 do 4:6). Intermedijer se rastvara u smeši rastvarača MeOH / THF (10 mL u odnosu 1:1) i hidrogenizuje (60 mg Pd/C 5%, 0.1 bar, 22-25°C, 6.5 h). Reakciona smeša se filtrira kroz Hyflo® i rastvarač se upari na sniženom pritisku. Ostatak se rastvara u smeši rastvarača MeOH / THF i obradjuje sa PL-Tiol na MP SPE kartridžu (StratoSpheres™). Smola se otfiltrira i rastvarač se upari na sniženom pritisku dajući proizvod iz naslova. HPLC (Uslov5) tR= 5.50 min, UPLC-MS (Uslov 6) tR= 0.76 min, m/z = 530.2 [M+H]<+>;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.88 - 2.08 (m, 2 H) 3.12 - 3.48 (m, 4 H) 4.73 (br. s, 1 H) 6.37 - 6.44 (m, 1 H) 7.33 (d, J=8.99 Hz, 2 H) 7.76 (s, 1 H) 7.87 (d, J=8.99 Hz, 2 H) 8.04 - 8.08 (m, 1 H) 8.73 - 8.78 (m, 1 H) 10.21 (s, 1 H).
Faza 39.1: N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-((R)-3-((3-oksido-1,5-dihidrobenzo[e][1,3,2] dioksafosfepin-3-il)oksi)pirolidin-1-il)-5-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il)nikotinamid [0484]
[0485] U smešu N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-((R)-3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il)nikotinamida (Faza 9.1, 200 mg, 0.371 mmol) i tetrazola u MeCN (8.240 mL, 3.71 mmol) u fioli, dodaje se N,N-dietil-1,5-dihidrobenzo[e][1,3,2]dioksafosfepin-3-amin (355 mg, 1.483 mmol) i reakciona smeša se meša na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Reakciona smeša se ohladi do temperature od 5°C, obradjuje sa TEA (0.775 mL, 5.56 mmol) i vod. H2O2(0.379 mL, 3.71 mmol) i meša se na temperaturi od 0°C tokom 30 min, a nakon toga 3 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša se kvenčuje sa rastvorom 10% Na2S2O3(20 mL) i ekstrahuje sa EtOAc. Spojeni ekstrakti se ispiraju sa vodom (20 mL) i koncentrovanim rastvorom soli (15 mL), suši preko Na2SO4i rastvarač se upari na sniženom pritisku dajući sirovi proizvod koji se prečišćava fleš hromatografijom (kolona sa silika gelom, 12 g DCM / MeOH od 98:2 do 9:1) dajući proizvod iz naslova u bolku pene bele boje. HPLC (Uslov 5) tR= 7.3 min, UPLC-MS (Uslov 3) tR= 1.18 min, m/z = 716.3 [M+H]<+>.
1
Primer 40
(R)-1-(3-(1H-Pirazol-5-il)-5-((4-(trifluorometoksi)fenil)karbamoil)piridin-2-il)pirolidin-3-il dihidrogen fosfat
[0486]
[0487] Jedinjenje iz naslova se dobija na način analogan sa onim koji je opisan u primeru 39 uz korišćenje (R)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1H-pirazol-3-il)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil) nikotinamida (Faza 2.1) i N,N-dietil-1,5-dihidrobenzo[e][1,3,2]dioksafosfepin-3-amin dajući čvrst proizvod bež boje. HPLC (Uslov 5) tR= 5.3 min, UPLC-MS (Uslov 6) tR= 0.75 min - m/z = 514.4 [M+H]<+>;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.88 - 2.07 (m, 2 H) 3.21 - 3.49 (m, 4 H) 4.66 - 4.76 (m, 1 H) 6.41 (d, J=1.96 Hz, 1 H) 7.02 - 7.15 (m, 1 H) 7.34 (d, J=8.68 Hz, 2 H) 7.77 (s, 1 H) 7.87 (d, J=9.05 Hz, 2 H) 8.06 (d, J=2.32 Hz, 1 H) 8.75 (d, J=2.32 Hz, 1 H) 10.21 (s, 1 H).
Primer 41
Čvrsta disperzna formulacija
[0488] Čvrsta disperzna formulacija može se pripremiti za jedinjenja pronalaska kada je povećanje njihove rastvorljivosti korisno za biodostupnost i/ili permeabilnost.
[0489] Čvrsta disperzna formulacija je dobijena korišćenjem amorfne disperzije (R)-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1H-pirazol-5-il)nikotinamida (Primer 9, videti Sliku 1) sa ekscipijensima odabranim od PVP VA64 i Pharmacoat 603. Najpre, rastvor za sprej sušenje je dobijen mešanjem (R)-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1H-pirazol-5-il)nikotinamida (Primer 9, 2.5 grama) sa PVP VA 64 (3.75 grama) i Pharmacoat-om 603 (3.75 grama). Smeša od 50/50 metilenhlorid/etanola je dodavana do rastvaranja svih komponenti što se videlo na osnovu bistrog rastvora bez čestica i zamućenja (~200 mL). Alternativno, smeša od 50/50 metilenhlorida/etanola može biti zamenjena sa smešom aceton/etanol/voda (5:4:1). Sprej sušenje je izvedeno na Büchi B290 Mini-sprej sušilu ulazne temperature od 70<o>C, aspiriranjem na 85%, strujom azota od 50mm Hg stuba, pumpanjem na 15% i čistačem mlaznice na nulu dajući 5.5 grama (55%). Dobijena sprej osušena čvrsta disperzija sadržavala je 23.6% leka, (R)-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1H-pirazol-5-il)nikotinamida (Primer 9), 37.5% PVP VA64 i 37.5% Pharmacoat-a 603. Disperzija je bila amorfna sa temperaturom stakljenja
11
(Tg) od 117<o>C i sadržavala je približno 1.4% vode kako je odredjeno termogravimetrijskom analizom (TGA). Rastvaranje čvrste disperzije na pH 1 praćeno pH promenom do 6.8 nakon 30 minuta pokazalo je potpuno rastvaranje pri kiselom pH. Disperzija je ostala potpuno stabilna nakon promene do neutralnog pH.
[0490] Disperzija je suspendovana u rastvoru fosfatnog pufera (PBS) pri koncentraciji od 3 mg/mL (leka) tokom 12 časova na sobnoj temperaturi. Nije primećena kristalizacija, veličina čestica D (0.9; prečnik čestice kada je 90% čestica ispod navedenog broja) je bila 14.134 sa veoma homogenom i uskom distribucijom veličine čestica. Lek nije kristalisao iz suspenzije i nije primećena hemijska degradacija (utvrdjeno UPLC). Suspenzija je bila 99.4% hemijski čista, što odgovara T0 čistoći suspenzije i samog leka.
[0491] Poboljšane osobine čvrste disperzne formulacije (R)-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1H-pirazol-5-il)nikotinamida (Primer 9) na psu se mogu pokazati tablicom farmakokinetičkih parametara, ispod.
[0492] Formulacija čvrste disperzije (R)-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1H-pirazol-5-il)nikotinamida (Primer 9) u dozi od 60 mpk daje 6.5 puta veće izloženost nego što je to slučaj sa kristalnom suspenzijom (671.9 μM prema 102.9 μm).
Ogledi
[0493] Delotvornost opisanih jedinjenja iz ovog pronalaska može se pokazati testovima prikazanim u daljem tekstu. Jedinjenja iz ovog pronalaska su testirana na sposobnost inhibicije aktivnosti ABL1 u biohemijskim testovima, kao i BCR-ABL1 u ćelijskim testovima opisanim u daljem tekstu. Jedinjenja iz ovog pronalaska su zatim testirana i njihova efikasnost in vivo dokazana na KCL-22 modelu ksenografta.
Biohemijski testovi
[0494] Ekspresija i prečišćavanje proteinske kinaze - ekspresija i prečišćavanje humane ABL su izvodjeni
standardnim metodama za ekspresiju i prečišćavanje. Dobijeni protein ABL64-515 je upotrebljen u in vitro
testovima za kinaze. Protein je dobijen pomoću vektora za ko-ekspresiju sa DNK fragmentom za ABL1 (1a
izoforma, sa N-terminalnim His6-tagom na koji se nastavlja PreScission mesto sečenja za proteaze) i humanom
proteinskom tirozin fosfatazom-1B (ostaci 1-283, bez tagova), sa dualnim ekspresionim vektorom pCDF Duet-1
(Novagen). His-ABL je eksprimirana u E.coli BL21 (DE3) i ABL proteini izolovani na osnovu Ni-afiniteta na Ni-
NTA koloni (Qiagen). His-tag je uklonjen pomoću PreScission proteaze (GE Healthcare) i nefosforilovana ABL
dalje prečišćavana na Mono Q HR 10/10 (GE Healthcare, mono-fosforilovana ABL čini oko 10-20 % ukupnog
ABL proteina) i HiLoad 16/60 Superdex 200 koloni kao molekulskom situ (GE Healthcare). Nefosforilovani
ABL64-515 proteini su analizirani masenom spektroskopijom i brzo smrznuti u alikvotima a zatim čuvani na –
80°C. SRC (aminokiseline 83-535 ili Src83-535) je eksprimiran i prečišćen kako je opisano (S.W. Cowan-Jacob,
G. Fendrich, P.W. Manley, W. Jahnke, D. Fabbro, J. Liebetanz, T. Meyer, c-Src crystal structure provides insights
into c-Src activation. Structure 13 (2005) 861-871).
Radioaktivni ABL1 (64-515) test
[0495] Za odredjivanje aktiviteta ABL kinaze korišćen je test radiometrijskog vezivanja za filter. Test je izvodjen mešanjem 10 µL jedinjenja prethodno razblaženog sa 10 µL ATP (20 μM ATP sa 0,1 μCi [γ-33P]-ATP) sa fosfo-akceptorskim peptidom poli[Ala6Glu2LysHBr5Tyr1] = poliAEKY) u 20 mM Tris/HCl pH 7,5, 1 mM DTT, 10 mM MgCl2, 0,01 mM Na3VO4, 50 mM NaCl.10 µL enzima (u opsegu koncentracija od 5 nM do 20 nM) je dodavano da bi se započela reakcija. Prethodna inkubacija enzima sa jedinjenjima (gde je naznačeno) izvodjena je izlaganjem enzima jedinjenjima pre dodavanja supstratne smese (ATP i/ili peptidnog supstrata). Nakon 15 min na sobnoj temperaturi, reakcija je zaustavljena dodatkom 50 µL 125 mM EDTA, a 33P vezan za peptid je odvojen na pločama sa filterom (PVDF ili MAIP; Millipore, Volketswil, Švajcarska) pripremljenim prema uputstvu proizvodjača. Ploče sa filterima su ispirane 3x sa 0,5% H3PO4, a zatim je dodavano po 30 µL scintilacionog koktela (Microscint, Perkin Elmer) u svaki bunarčić i mereno u TopCount NXT scintilacionom brojaču (Perkin Elmer). Rezultati su izražavani kao vrednosti IC50. Vrednosti Kmza ATP su odredjivane testiranjem ABL kinaze sa rastućim koncentracijama ATP i održavanjem egzogenog akceptorskog proteinskog supstrata (poli-AEKY) na konstantnoj koncentraciji (oko 2 puta većoj od Km) i obrnuto. Kmi Vmaxsu računate prema Eadie-Hofstee kako je opisano (D. Fabbro, G. Fendrich, V. Guez, T. Meyer, P. Furet, J. Mestan, J.D. Griffin, P.W. Manley, S.W. Cowan-Jacob, Targeted therapy with imatinib: An exception or a rule? Handbook of Experimental Pharmacology 167, Inhibitors of Protein Kinases and Protein Phosphates (2005) 361-389). Rezultati su grafički prikazani kao V nasuprot V/S, gde je V brzina reakcije pri odredjenoj datoj koncentraciji supstrata (S), i fitovani u pravu liniju pomoću linearne regresione analize, gde nagib krive odgovara -Kma odsečak na Y-osi predstavlja Vmax.
Kaliper ABL1 (64-515) test
[0496] Svi eksperimenti su izvodjeni na mikrotitar pločama sa 384 bunarčića. Svaka ploča je sadržala serijska razblaženja sa 8 tačaka za svako od 40 testiranih jedinjenja, kao i četiri serijska razblaženja sa 8 tačaka za staurosporin kao referentno jedinjenje, plus 16 visokih (“high”) i 16 niskih (“low”) kontrola. Upravljanje rastvorima i inkubacija su izvodjeni na Thermo CatX radnoj stanici opremljenoj Innovadyne Nanodrop Express. Izmedju pipetiranja, vrhovi su čišćeni u ciklusima pranja sa puferom za ispiranje.
[0497] Test ploče su pripremljene dodavanjem 50 nL rastvora jedinjenja u 90% DMSO u svaki bunarčić. Reakcije sa kinazama su započinjane postepenim dodavanjem 4,5 µL rastvora peptid/ATP u svaki bunarčić (50 mM HEPES, pH 7,5, 1 mM DTT, 0,02% BSA, 0,6% DMSO, 10 mM beta-glicerofosfat i 10 µM natrijum ortovanadat, 20 mM MgCl2, 2 mM MnCl2, 4 µM ATP, 4 µM peptida (FITC-Ahx-EAIYAAPFAKKK-NH2)) i 4,5 µL rastvora enzima (50 mM HEPES, pH 7,5, 1 mM DTT, 0,02% BSA, 0,6% DMSO, 10 mM beta-glicerofosfat i 10 µM natrijum ortovanadat, 20 mM MgCl2, 2mM MnCl2, 3,5 nM ABL (ABL(64-515), interno proizvedeno iz E. coli)) u svaki bunarčić. Reakcije sa kinazama su inkubirane na 30°C tokom 60 minuta a zatim zaustavljane dodavanjem 16 µL stop rastvora (100 mM HEPES pH 7,5, 5% DMSO, 0,1% Kaliper reagens za oblaganje, 10 mM EDTA i 0,015% Brij35) u svaki bunarčić. Ploče sa zaustavljenim kinaznim reakcijama su prenesene u Caliper LC3000 radne stanice za očitavanje. Fosforilovani i nefosforilovani peptidi su odvojeni Kaliper “microfluidic mobility shift” tehnologijom. Ukratko, uzorci iz zaustavljenih reakcija sa kinazama su nanošeni na čip. Supstance za analizu se transportuju kroz čip konstantnim protokom pufera i migracija supstratnog peptida je praćena pomoću fluorescentnog signala kojim je obeležen. Fosforilovani peptid (proizvod) i nefosforilovani peptid (supstrat) se odvajaju u električnom polju na osnovu odnosa naelektrisanja i mase. Aktivnosti kinaza su izračunavane iz količina nastalih fosfo-peptida. Vrednosti IC50 su odredjivane iz procenata inhibicije pri različitim koncentracijama jedinjenja, nelinearnom regresivnom analizom.
[0498] Dobijanje razblaženja jedinjenja: Testirana jedinjenja su rastvarana u DMSO-u (10 mM) i prebacivana u Matrix epruvete od 1,4mL sa ravnim dnom ili V-oblika, sa jedinstvenim 2D matrikskodom. Stok rastvori su čuvani na 2°C ukoliko nisu odmah korišćeni. Za eksperimente fiole su
11
odmrzavane i identifikovane skenerom, pri čemu se generiše radni list sa uputstvima za sledeće korake u procesu.
[0499] Razblaženja jedinjenja su radjena na mikrotitar pločama sa 96 bunarčića. Ovaj format omogućio je testiranje maksimalno 40 individualnih test jedinjenja na 8 concentrations (pojedinačne tačke) uključujući 4 referentna jedinjenja. Protokol razblaženja uključivao je proizvodnju “ploča za prerazblaženja”, “master ploče” i “test ploče”.
[0500] Ploče za pre-razblaženja: polipropilenske ploče sa 96 bunarčića. Ukupno 4 ploče za prerazblaženja su pripremljena, uključujući 10 test jedinjenja, svako na poziciji A1-A10, jedno standardno jedinjenje A11 i jedna DMSO kontrola na A12. Sva razblaženja su izvodjena pomoću HamiltonSTAR robota.
[0501] Master ploče: 30 µL razblaženja pojedinačnih jedinjenja uključujući standardno jedinjenje i kontrole za 4 ploče za “pre-razblaženje” su prebačeni na “master ploču” sa 384 bunarčića, uključujući sledeće koncentracije: 1’810, 362, 72,5, 54,6, 14,5, 2,9, 0,58 i 0,12µM, redosledom, u 90% DMSO.
[0502] Test ploče: identične “test ploče” su zatim pripremljene pipetiranjem 50nL svakog od razblaženja jedinjenja sa “master ploča” na “test ploče” sa 384 bunarčića pomoću HummingBird 384-kanalnog dispenzera. Ploče su korišćene direktno za eksperiment koji je izvodjen u ukupnoj zapremini od 9,05 µL. Time su dobijene finalne koncentracije jedinjenja od 10, 2,0, 0,4, 0,08, 0,016, 0,0032, 0,00064 i 0,000128 µM i konačna koncentracija DMSO od 0,5 % u eksperimentu.
Ćelijski testovi
[0503] Da bi se odredila sposobnost jedinjenja iz ovog pronalaska da inhibiraju aktivnost BCR-ABL1 u ćelijskim testovima, jedinjenja su testirana na sposobnost da selektivno inhibiraju proliferaciju ćelija zavisnih od ekspresije BCR-ABL1 u odnosu na ćelije koje ne zavise od ekspresije BCR-ABL1.
[0504] Ćelijska linija Ba/F3 izvedena iz mišje koštane srži je korišćena za dobijanje odgovarajućih modela ćelijskih linija. Ba/F3 ćelije su dobijene iz Nemačke kolekcije mikroorganizama i ćelijskih kultura (DSMZ, Braunschweig i DSMZ br. ACC 300). Roditeljske Ba/F3 ćelije zavise od IL3 za rast i preživljavanje i korišćene su kao referentna ćelijska linija koja ne zavisi od aktivnosti BCR-ABL1 za rast i preživljavanje. Ove ćelije su označene kao Ba/F3-WT.
[0505] Da bi se dobile Ba/F3 ćelije koje zavise od ekspresije BCR-ABL1 za rast i preživljavanje, Ba/F3 ćelije su izmenjene tako da eksprimiraju BCR-ABL1, pomoću retroviralne transdukcije sa retroviralnim vektorom baziranim na MSCV koji sadrži p210 BCR-ABL1 ekspresionu kasetu. Ukoliko se gaje u odsustvu IL-3, proliferacija ćelija je zavisna od ekspresije BCR-ABL1. (Daley, G.Q. i Baltimore, D. Transformation of an interleukin 3-dependent hematopoietic cell line by the chronic myeloid leukemiaspecific p210 BCR-ABL1 protein. PNAS 1988;85:9312-9316). Ove ćelije se označavaju kao Ba/F3BCR-ABL-WT. Sličan pristup je korišćen za dobijanje Ba/F3 ćelija koje zavise od BCR-ABL1 varijante u kojoj je treonin 315 zamenjen izoleucinom. Ove ćelije se označavaju kao Ba/F3-BCR-ABL-T315I.
[0506] Ba/F3-WT ćelije su gajene u RPMI1640 medijumu sa L-glutaminom, HEPES (Lonza), 10% FBS (Gibco) i 5ng/ml IL-3 (Calbiochem). Ba/F3-BCR-ABL1-WT ćelije i Ba/F3-BCR-ABL1-T315I ćelije su gajene u RPMI1640 medijumu sa L-glutaminom, HEPES (Lonza) i 10% FBS (Gibco).
Test proliferacije
[0507] Za svaku ćelijsku liniju, gustina ćelija je podešena na 50000 ćelija/mL i 50 μL (2500 ćelija) je dodato u svaki bunarčić na test ploči sa 384 bunarčića.
[0508] Test jedinjenja su resuspendovana u DMSO-u u koncentraciji od 10 mM. Serijska trostruka razblaženja svakog jedinjenja u DMSO-u su pravljena na pločama sa 384 bunarčića pomoću Janus tečnog dispenzera (PerkinElmer). Jedinjenje je dodavano na test ploče koje sadrže 2500 ćelija u 50 μL zapremine putem “Acoustic delivery” iz ATS-100 (EDC). Za Ba/F3-BCR-ABL1-WT ćelijske testove, 2 nL svakog razblaženja pojedinačnog jedinjenja je preneseno na test ploču da bi se dobile finalne test koncentracije od 0,4 µM, 0,13 µM, 0,044 µM, 0,015 µM, 0,005 µM, 0,001 µM, 0,00033 µM, 0,00011 µM, 0,000037 µM, 0,000012 µM. Za Ba/F3-WT i Ba/F3-BCR-ABL1-T315I ćelijske testove, 50 nL svakog razblaženja pojedinačnog jedinjenja je preneseno na test ploču da bi se dobile finalne test koncentracije od 10 µM, 3,33 µM, 1,11 µM, 0,37 µM, 0,12 µM, 0,041 µM, 0,014 µM, 0,0046 µM, 0,0015 µM, 0,00051 µM.
[0509] Ćelije su inkubirane na 37°C u atmosferi sa odgovarajućom vlažnošću i 5% ugljen-dioksida tokom 48 časova. Britelite plus rastvor (Perkin Elmer) je pripremljen prema uputstvu proizvodjača i po 25 μL je dodato u svaki bunarčić test ploče. Ploče su inkubirane 3-5 minuta i luminescencija je merena u EnVision Multimode čitaču za ploče (Perkin Elmer). Nivo luminescencije korelira sa brojem ćelija u svakom bunarčiću. Na taj način se može izračunati efekat svake koncentracije inhibitora i dobiti odgovarajuće IC50vrednosti.
[0510] Jedinjenja iz ovog pronalaska pokazuju IC50vrednosti u opsegu od 0,1 nM do 12 nM za inhibiciju aktivnosti Abl kinaze u radiometrijskom vezivanju za filtere (Radio). U “microfluidic mobility shift” testu (Kaliper test), IC50vrednosti se kreću u opsegu od 0,1 nM do 10 nM. Kod Ba/F3-BCR-ABL-WT i T315I testa ćelijske proliferacije, GI50vrednosti se kreću u opsegu od 0,8 nM do 110 nM i 13 nM do 4,2μM, redosledom.
11
Tabela sa Biohemijskim podacima
11
Tabela podataka za ćelijsku Proliferaciju Ba/F3-BCR-ABL1-WT i T315I
In vivo efikasnost kod KCL-22 modela ksenografta – tretman jednim sredstvom
[0511] Jedinjenja iz ovog pronalaska su dozirana oralno kod modela mišjeg KCL-22 ksenografta tokom 7 dana. Kod 6-8 nedelja starih ženki miša, kupljenih kod Harlan-a (Indianapolis IN), subkutano je implantirano 5x10<6>KCL-22 ćelija u 50% matrigelu (BD Biosciences, #354234) u desni dorzalni aksilarni region. Tretman lekom je iniciran kada je tumor dostigao prosečnu zapreminu od 238 mm<3>(10 dana nakon implantacije tumora). Jedinjenja iz ovog pronalaska u slanom rastvoru sa fosfatnim puferom su pripremana nedeljno i dozirana oralnom sondom oko 3-30mg/kg dva puta dnevno (n=6 miševa po pojedinačnom doznom nivou). Zapremina tumora je odredjivana digitalnim kaliperom dvaput nedeljno i izračunavana kao dužina x širina<2>/2.
11
[0512] Jedinjenja iz pronalaska pokazala su statistički značajnu regresiju. Na primer, doza od 3mg/kg (R)-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1H-pirazol-5-il)nikotinamida dvaput dnevno (Primer 9) je dovela do inhibicije rasta tumora od 45% u poredjenju sa miševima tretiranim samo nosačem, dok su regresije od 56%, 88% i 92% detektovane pri dozama od redosledom 7,5, 15 i 30 mg/kg, davanim dvaput dnevno. Kao pozitivna kontrola davan je nilotinib 75mg/kg dva puta dnevno, što je izazvalo regresiju tumora od 82% (Slika 2).
In vivo efikasnost kod KCL-22 modela ksenografta – tretman sa dva sredstva
[0513] Kod 6-8 nedelja starih ženki miša, kupljenih kod Harlan-a (Indianapolis IN), subkutano je implantirano 2x10<6>KCL-22 ćelija u 50% matrigelu (BD Biosciences, #354234) u desni dorzalni aksilarni region. Tretman lekom je iniciran kada je tumor dostigao prosečnu zapreminu od 189 mm<3>(9 dana nakon implantacije tumora). Jedinjenja iz ovog pronalaska u slanom rastvoru sa fosfatnim puferom su pripremana nedeljno i dozirana oralnom sondom 30mg/kg dva puta dnevno, a rastvor Nilotiniba je doziran 75mg/kg dva puta dnevno. Životinje su primale bilo pojedinačno sredstvo ili pak kombinaciju oba istovremeno. Zapremina tumora je odredjivana digitalnim kaliperom dvaput nedeljno i izračunavana kao dužina x širina<2>/2.
[0514] Životinje tretirane samo sa nilotinibom pokazale su >84% regresije tumora nakon 4 nedelje svakodnevnog tretmana, ali je većina tumora relapsirala na >500mm<3>nakon tog vremena. Životinje sa tumorima rezistentnim na nilotinib su zatim primale svakodnevni tretman iz Primera 9, i monitoring tumorskog odgovora je nastavljen (Slika 3).
[0515] Životinje tretirane nilotinibom i Primer 9 istovremeno su pokazali kompletnu regresiju tumora kod svih životinja do kraja eksperimenta (Slika 4).
11

Claims (18)

  1. PATENTNI ZAHTEVI: 1. Jedinjenje formule (I):
  2. u kojoj: R1predstavlja pirazolil; gde pomenuti pirazolil može da bude nesupstituisan ili supstituisan sa 1 do 2 R6grupe; R2predstavlja pirolidinil; gde pomenuti pirolidinil može biti supstituisan sa jednom R7grupom; gde je R3odabran od vodonika i halo; gde je R4odabran od –SF5i –Y2–CF2–Y3; gde je R6pri svakom javljanju nezavisno odabran iz grupe koju čine vodonik, hidroksi, metil, metoksi, cijano, trifluorometil, hidroksi-metil, halo, amino, fluoro-etil, etil i ciklopropil; gde je R7odabran od hidroksi, metil, halo, metoksi, hidroksi-metil, amino, metil-amino, amino-metil, trifluorometil, 2-hidroksipropan-2-il, metil-karbonil-amino, dimetil-amino, 2-amino-3-metilbutanoil)oksi, karboksi, metoksi-karbonil, fosfonooksi, cijano i amino-karbonil; gde je Y odabran od CH i N; gde je Y1odabran od CH i N; gde je Y2odabran od CF2, O i S(O)0-2; i gde je Y3odabran od vodonika, hloro, fluoro, metil, difluorometil i trifluorometil, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli. 2. Jedinjenje formule (Ib) iz patentnog zahteva 1:
  3. u kojoj je: gde je R3odabran od vodonika i halo; gde je R4odabran od –SF5i –Y2–CF2–Y3; gde R6kada je vezan za azot u pirazoliskom prstenu je odabran iz grupe koju čine vodonik, metil, fluoroetil, etil i ciklopropil; i R6kada je vezan za atom ugljenika iz pirazolilskog prstena je odabran od vodonika, hidroksi, metila, metoksi, cijano, trifluorometila, hidroksi-metila, halo, amino, fluoro-etila, etila i ciklopropila; gde je R7odabran od hidroksi, metil, halo, metoksi, hidroksi-metil, amino, metil-amino, amino-metil, trifluorometil, 2-hidroksipropan-2-il, metil-karbonil-amino, dimetil-amino, 2-amino-3-metilbutanoil)oksi, karboksi, metoksi-karbonil, fosfonooksi, cijano i amino-karbonil; gde je Y1odabran od CH i N; gde je Y2odabran od CF2, O i S(O)0-2; i gde je Y3odabran od vodonika, fluoro, hloro, metil, difluorometil i trifluorometila, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli. 3. Jedinjenje iz formule (Ic) prema patentnom zahtevu 2:
  4. u kojoj je: R3odabran od vodonika i halo; gde je R4odabran od –SF5i –Y2–CF2–Y3; gde R6kada je vezan za azot iz pirazolilskog prstena je odabran iz grupe koju čine vodonik, metil, fluoro-etil, etil i ciklopropil; i gde R6kada je vezan za atom ugljenika iz pirazolilskog prstena je odabran iz vodonika, hidroksi, metil, metoksi, cijano, trifluorometil, hidroksi-metil, halo, amino, fluoro-etil, etil i ciklopropil; gde je R7odabran iz grupe koju čine hidroksi, metil, halo, metoksi, hidroksi-metil, amino, metil-amino, amino-metil, trifluorometil, 2-hidroksipropan-2-il, metil-karbonil-amino, dimetil-amino, 2-amino-3-metilbutanoil)oksi, karboksi, metoksi-karbonil, fosfonooksi, cijano i amino-karbonil; gde je Y1odabran od CH i N; gde je Y2odabran od CF2, O i S(O)0-2; i gde je Y3odabran iz grupe koju čine vodonik, fluoro, hloro, metil, difluorometil i trifluorometil, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli. 4. Jedinjenje iz patentnog zahteva 3, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, koja je odabrana od:
  5. 5. Jedinjenje iz patentnog zahteva 3, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, koja je odabrana od:
  6. 6. Jedinjenje iz patentnog zahteva 3, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, koja je odabrana od:
    12
  7. 7. Jedinjenje iz patentnog zahteva 1, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, koja je odabrana od:
  8. 8. Jedinjenje koje je odabrano iz grupe koju čine:
  9. 9. Jedinjenje iz patentnog zahteva 1 koje je (R)-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1H-pirazol-5-il)nikotinamid ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  10. 10. Farmaceutska kompozicija koja obuhvata amorfnu disperziju (R)-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1H-pirazol-5-il)nikotinamida i 1 do 2 ekscipijenta koji su odabrani od PVP VA64 i Pharmacoat 603.
  11. 11. Kompozicija prema patentnom zahtevu 10, naznačen time, što je procenat Pharmacoat 603 u opsegu od 30% do 45%, a procenat PVP VA64 u opsegu od 30% do 45% i gde je percenat (R)-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1H-pirazol-5-il)nikotinamida u opsegu od 20% do 30%.
  12. 12. Kompozicija prema patentnom zahtevu 11, naznačen time, što je procenat Pharmacoat 603 iznosi 37.5%, procenat PVP VA64 iznosi 37.5% i gde percenat (R)-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1H-pirazol-5-il)nikotinamida iznosi 25%.
  13. 13. Jedinjenje formule (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, prema bilo kojem od patentnih zahteva od 1 do 9 za upotrebu u lečenju kancera.
  14. 14. Jedinjenje formule (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu prema patentnom zahtevu 13, gde kancer predstavlja leukemiju odabranu od hronične mijeloidne leukemije i akutne limfoblastične leukemije. 12
  15. 15. Jedinjenje formule (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu prema patentnom zahtevu 13 ili 14, zajedno sa dodatnim jedinjenjem koje je odabrano iz grupe koju čine imatinib, nilotinib, dasatinib, bosutinib, ponatinib i bafetinib.
  16. 16. Jedinjenje formule (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu prema patentnom zahtevu 15 u sekvencijalnoj ili simultanoj primeni sa pomenutim dodatnim jedinjenjem gde je pomenuto dodatno jedinjenje nilotinib.
  17. 17. Jedinjenje formule (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu prema bilo kojem od patentnih zahteva od 13 do 16, naznačen time, što je jedinjenje (R)-N-(4-(hlorodifluorometoksi)fenil)-6-(3-hidroksipirolidin-1-il)-5-(1H-pirazol-5-il)nikotinamid ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  18. 18. Farmaceutska kompozicija koja obuhvata jedinjenje, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, prema bilo kojem od patentnih zahteva od 1 do 9 zajedno sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih nosača. Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Beograd, Kneginje Ljubice 5 12
RS20180497A 2012-05-15 2013-05-09 Derivati benzamida za inhibiranje aktivnosti abl1, abl2 i bcr-abl1 RS57177B1 (sr)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261647174P 2012-05-15 2012-05-15
US201361790967P 2013-03-15 2013-03-15
EP13730652.8A EP2861579B9 (en) 2012-05-15 2013-05-09 Benzamide derivatives for inhibiting the activity of abl1, abl2 and bcr-abl1
PCT/IB2013/053768 WO2013171639A1 (en) 2012-05-15 2013-05-09 Benzamide derivatives for inhibiting the activity of abl1, abl2 and bcr-abl1

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS57177B1 true RS57177B1 (sr) 2018-07-31

Family

ID=48670630

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20180497A RS57177B1 (sr) 2012-05-15 2013-05-09 Derivati benzamida za inhibiranje aktivnosti abl1, abl2 i bcr-abl1

Country Status (50)

Country Link
US (2) US8829195B2 (sr)
EP (1) EP2861579B9 (sr)
JP (1) JP6078639B2 (sr)
KR (1) KR102091893B1 (sr)
CN (1) CN104302638B (sr)
AP (1) AP3613A (sr)
AR (1) AR091063A1 (sr)
AU (1) AU2013261127B2 (sr)
BR (1) BR112014026383B1 (sr)
CA (1) CA2868958C (sr)
CL (1) CL2014002757A1 (sr)
CO (1) CO7131380A2 (sr)
CR (1) CR20140519A (sr)
CU (1) CU24265B1 (sr)
CY (2) CY1120235T1 (sr)
DK (1) DK2861579T5 (sr)
DO (1) DOP2014000256A (sr)
EA (1) EA024391B1 (sr)
ES (1) ES2670601T3 (sr)
FR (1) FR22C1053I2 (sr)
GE (1) GEP201606532B (sr)
GT (1) GT201400253A (sr)
HR (1) HRP20180695T1 (sr)
HU (2) HUE039138T2 (sr)
IL (1) IL235566A (sr)
JO (1) JO3453B1 (sr)
LT (2) LT2861579T (sr)
LU (1) LUC00287I2 (sr)
MA (1) MA37519B1 (sr)
ME (1) ME03095B (sr)
MX (1) MX359014B (sr)
MY (1) MY169377A (sr)
NL (1) NL301201I2 (sr)
NO (1) NO2022043I1 (sr)
NZ (1) NZ701626A (sr)
PE (3) PE20161416A1 (sr)
PH (1) PH12014502531A1 (sr)
PL (1) PL2861579T3 (sr)
PT (1) PT2861579T (sr)
RS (1) RS57177B1 (sr)
SG (1) SG11201407152XA (sr)
SI (1) SI2861579T1 (sr)
SV (1) SV2014004850A (sr)
TN (1) TN2014000427A1 (sr)
TR (1) TR201807023T4 (sr)
TW (1) TWI560183B (sr)
UA (1) UA113208C2 (sr)
UY (1) UY34811A (sr)
WO (1) WO2013171639A1 (sr)
ZA (1) ZA201407065B (sr)

Families Citing this family (68)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SMT201700457T1 (it) 2012-04-26 2017-11-15 Bristol Myers Squibb Co DERlVATI IMIDAZOTIADIAZOLICI E IMIDAZOPIRAZINICI COME INIBITORI DEL RECETTORE ATTIVATO DA PROTEASI 4 (PAR4) PER IL TRATTAMENTO DELL'AGGREGAZIONE PIASTRINICA
US9278981B2 (en) 2012-05-15 2016-03-08 Novartis Ag Compounds and compositions for inhibiting the activity of ABL1, ABL2 and BCR-ABL1
JP6080947B2 (ja) 2012-05-15 2017-02-15 ノバルティス アーゲー Ａｂｌ１、ａｂｌ２およびｂｃｒ−ａｂｌ１の活性を阻害するための化合物および組成物
US9340537B2 (en) 2012-05-15 2016-05-17 Novatis Ag Benzamide derivatives for inhibiting the activity of ABL1, ABL2 and BCR-ABL1
PT2861579T (pt) * 2012-05-15 2018-04-27 Novartis Ag Derivados de benzamida para inibir a atividade de abl1, abl2 e bcr-abl
TWI568722B (zh) 2012-06-15 2017-02-01 葛蘭馬克製藥公司 作爲ｍＰＧＥＳ－１抑制劑之三唑酮化合物
EP2943485B1 (en) 2013-01-14 2017-09-20 Incyte Holdings Corporation Bicyclic aromatic carboxamide compounds useful as pim kinase inhibitors
ME03780B (me) 2013-01-15 2021-04-20 Incyte Holdings Corp Jedinjenja tiazolkarboksamida i piridinkarboksamida korisna kao inhibitori pim kinaze
TW201605866A (zh) 2013-08-23 2016-02-16 英塞特公司 可用作ｐｉｍ激酶抑制劑之呋喃并－及噻吩并－吡啶甲醯胺化合物
US9682931B2 (en) * 2013-11-01 2017-06-20 Ube Industries, Ltd. Aryloyl(oxy or amino)pentafluorosulfanylbenzene compound, pharmaceutically acceptable salt thereof, and prodrugs thereof
CA2935423C (en) 2014-01-24 2023-11-07 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Antibody molecules to pd-1 and uses thereof
AU2015210750B2 (en) 2014-01-31 2020-08-20 Children's Medical Center Corporation Antibody molecules to TIM-3 and uses thereof
US10449210B2 (en) * 2014-02-13 2019-10-22 Ligand Pharmaceuticals Inc. Prodrug compounds and their uses
WO2015138920A1 (en) 2014-03-14 2015-09-17 Novartis Ag Antibody molecules to lag-3 and uses thereof
CN106687118A (zh) 2014-07-02 2017-05-17 配体药物公司 前药化合物及其用途
US9580418B2 (en) 2014-07-14 2017-02-28 Incyte Corporation Bicyclic aromatic carboxamide compounds useful as Pim kinase inhibitors
WO2016010897A1 (en) 2014-07-14 2016-01-21 Incyte Corporation Bicyclic heteroaromatic carboxamide compounds useful as pim kinase inhibitors
MA41044A (fr) 2014-10-08 2017-08-15 Novartis Ag Compositions et procédés d'utilisation pour une réponse immunitaire accrue et traitement contre le cancer
WO2016061142A1 (en) 2014-10-14 2016-04-21 Novartis Ag Antibody molecules to pd-l1 and uses thereof
EP3233918A1 (en) 2014-12-19 2017-10-25 Novartis AG Combination therapies
CN104478911A (zh) * 2014-12-19 2015-04-01 成都安斯利生物医药有限公司 一种制备3-三氟甲基吡咯硼酸的方法
EP3246046A4 (en) * 2015-01-13 2018-12-05 Kyoto University Agent for preventing and/or treating amyotrophic lateral sclerosis
JO3746B1 (ar) 2015-03-10 2021-01-31 Aduro Biotech Inc تركيبات وطرق لتنشيط الإشارات المعتمدة على "منبه أو تحفيز جين انترفيرون"
WO2016196244A1 (en) 2015-05-29 2016-12-08 Incyte Corporation Pyridineamine compounds useful as pim kinase inhibitors
WO2017019897A1 (en) 2015-07-29 2017-02-02 Novartis Ag Combination therapies comprising antibody molecules to tim-3
ES2878188T3 (es) 2015-07-29 2021-11-18 Novartis Ag Terapias de combinación que comprenden moléculas de anticuerpos contra LAG-3
EP4378957A3 (en) 2015-07-29 2024-08-07 Novartis AG Combination therapies comprising antibody molecules to pd-1
AR105967A1 (es) 2015-09-09 2017-11-29 Incyte Corp Sales de un inhibidor de pim quinasa
WO2017059251A1 (en) 2015-10-02 2017-04-06 Incyte Corporation Heterocyclic compounds useful as pim kinase inhibitors
KR20250099459A (ko) 2015-11-03 2025-07-01 얀센 바이오테크 인코포레이티드 Pd-1과 특이적으로 결합하는 항체 및 그의 용도
EP3389712B1 (en) 2015-12-17 2024-04-10 Novartis AG Antibody molecules to pd-1 and uses thereof
US9931342B2 (en) 2016-02-02 2018-04-03 Duke University Compositions and methods for the treatment of cancer
JP2019515932A (ja) * 2016-04-29 2019-06-13 アスター バイオテック リミテッド ライアビリティ カンパニー チロシンキナーゼｂｃｒ−ａｂｌ阻害剤としての新規複素環化合物
EP3507367A4 (en) 2016-07-05 2020-03-25 Aduro BioTech, Inc. CYCLIC DINUCLEOTID COMPOUNDS WITH INCLUDED NUCLEIC ACIDS AND USES THEREOF
CN109715616A (zh) * 2016-09-27 2019-05-03 诺华股份有限公司 用于结晶有机化合物的表面活性剂体系
US20190240176A1 (en) * 2016-10-26 2019-08-08 The University Of Georgia Research Foundation, Inc. Methods of treatment for myeloid leukemia
MA47798A (fr) * 2017-03-15 2020-01-22 Sun Pharma Advanced Res Co Ltd Nouvelle dispersion amorphe d'acide cyclopropanecarboxylique (5-{5-[ n'-(2-chloro-6-méthylbenzoyl) hydrazinocarbonyl] -2-méthyl-phényléthynyl}-pyridin-2-yl) amide
UY37695A (es) 2017-04-28 2018-11-30 Novartis Ag Compuesto dinucleótido cíclico bis 2’-5’-rr-(3’f-a)(3’f-a) y usos del mismo
WO2018216705A1 (ja) * 2017-05-23 2018-11-29 国立大学法人京都大学 神経変性疾患の予防及び／又は治療剤
WO2018237173A1 (en) 2017-06-22 2018-12-27 Novartis Ag ANTIBODY MOLECULES DIRECTED AGAINST CD73 AND CORRESPONDING USES
US10596161B2 (en) 2017-12-08 2020-03-24 Incyte Corporation Low dose combination therapy for treatment of myeloproliferative neoplasms
CN111788196A (zh) 2018-01-09 2020-10-16 配体药物公司 缩醛化合物及其治疗用途
US12398209B2 (en) 2018-01-22 2025-08-26 Janssen Biotech, Inc. Methods of treating cancers with antagonistic anti-PD-1 antibodies
WO2019204354A1 (en) 2018-04-16 2019-10-24 C4 Therapeutics, Inc. Spirocyclic compounds
UY38247A (es) 2018-05-30 2019-12-31 Novartis Ag Anticuerpos frente a entpd2, terapias de combinación y métodos de uso de los anticuerpos y las terapias de combinación
KR102618168B1 (ko) * 2018-07-06 2023-12-27 일양약품주식회사 프리온 질환의 예방 또는 치료를 위한 약제학적 조성물
CN115215838B (zh) 2018-09-18 2025-04-04 拓臻股份有限公司 用于治疗特定白血病的化合物
KR102119150B1 (ko) 2018-10-23 2020-06-04 한국원자력의학원 N-1h-벤지미다졸-2-일-3-(1h-피롤-1-일) 벤자미드를 유효성분으로 함유하는 암 예방 또는 치료용 약학적 조성물
TW202444706A (zh) * 2019-05-16 2024-11-16 瑞士商諾華公司 N-[4-(氯二氟甲氧基)苯基]-6-[(3r)-3-羥基吡咯啶-1-基]-5-(1h-吡唑-5-基)吡啶-3-甲醯胺之結晶形狀
US11236070B2 (en) 2019-05-16 2022-02-01 Novartis Ag Chemical process
GB201913110D0 (en) * 2019-09-11 2019-10-23 Benevolentai Bio Ltd New compounds and methods
JP2022548881A (ja) 2019-09-18 2022-11-22 ノバルティス アーゲー Ｅｎｔｐｄ２抗体、組合せ療法並びに抗体及び組合せ療法を使用する方法
WO2021143927A1 (zh) * 2020-01-19 2021-07-22 正大天晴药业集团股份有限公司 作为bcr-abl抑制剂的化合物
ES3057399T3 (en) * 2020-01-28 2026-03-02 Tapi Czech Ind S R O Solid state forms of asciminib and processes for the preparation thereof
WO2021156360A1 (en) 2020-02-05 2021-08-12 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods for discontinuing a treatment with a tyrosine kinase inhibitor (tki)
CN111321200A (zh) * 2020-02-28 2020-06-23 广州安镝声生物医药科技有限公司 一种细胞外abl1激酶活性检测试剂盒及其应用
CN115124551B (zh) * 2021-03-24 2024-04-30 奥锐特药业(天津)有限公司 一种高纯度米哚妥林的制备方法
WO2022206937A1 (zh) * 2021-04-01 2022-10-06 苏州晶云药物科技股份有限公司 一种吡唑取代的烟酰胺类化合物的盐酸盐新晶型及其制备方法
CA3218550A1 (en) 2021-05-11 2022-11-17 Novartis Ag Dosing regimens
BR112023024085A2 (pt) 2021-05-28 2024-02-06 Chia Tai Tianqing Pharmaceutical Group Co Ltd Composto usado como inibidor de bcr-abl
CN114149409B (zh) * 2021-11-16 2024-03-22 中国药科大学 一种具有蛋白激酶抑制活性的（杂）芳基酰胺类化合物
CN116135851B (zh) * 2021-11-17 2025-09-23 武汉众诚康健生物医药科技有限公司 一种芳香胺化合物及其应用
US20250144224A1 (en) * 2021-12-13 2025-05-08 The Regents Of The University Of California Abl inhibitors and uses thereof
CN115109048B (zh) * 2022-08-10 2023-12-08 中国药科大学 一种(杂)芳基酰胺类化合物
KR20250102064A (ko) 2022-11-10 2025-07-04 신톤 비.브이. 애시미닙 염산염의 결정형
WO2024257116A1 (en) * 2023-06-13 2024-12-19 Natco Pharma Limited Novel polymorphic forms of asciminib and its pharmaceutical salts thereof
WO2025146653A1 (en) * 2024-01-04 2025-07-10 Biophore India Pharmaceuticals Pvt. Ltd Process for the preparation of n- [4(chlorodifluoromethoxy)phenyl]-6-[(3r)-3-hydroxy pyrrolidin-l-yl]-5-(lh-pyrazol-3-yl) pyridine-3- carboxamide and pharmaceutically acceptable salts thereof
WO2025151311A1 (en) * 2024-01-10 2025-07-17 Board Of Regents, The University Of Texas System Nicotinamide derivatives

Family Cites Families (60)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CH445129A (fr) 1964-04-29 1967-10-15 Nestle Sa Procédé pour la préparation de composés d'inclusion à poids moléculaire élevé
US3459731A (en) 1966-12-16 1969-08-05 Corn Products Co Cyclodextrin polyethers and their production
US3453257A (en) 1967-02-13 1969-07-01 Corn Products Co Cyclodextrin with cationic properties
US3426011A (en) 1967-02-13 1969-02-04 Corn Products Co Cyclodextrins with anionic properties
US3453259A (en) 1967-03-22 1969-07-01 Corn Products Co Cyclodextrin polyol ethers and their oxidation products
US4235871A (en) 1978-02-24 1980-11-25 Papahadjopoulos Demetrios P Method of encapsulating biologically active materials in lipid vesicles
DE2845997A1 (de) 1978-10-23 1980-04-30 Bayer Ag Pflanzenwachstumsregulierende mittel, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung zur regulierung des pflanzenwachstums
US4737323A (en) 1986-02-13 1988-04-12 Liposome Technology, Inc. Liposome extrusion method
US5093330A (en) 1987-06-15 1992-03-03 Ciba-Geigy Corporation Staurosporine derivatives substituted at methylamino nitrogen
AU2328188A (en) 1987-09-23 1989-04-18 Ciba-Geigy Ag Heterocyclic compounds
US5010099A (en) 1989-08-11 1991-04-23 Harbor Branch Oceanographic Institution, Inc. Discodermolide compounds, compositions containing same and method of preparation and use
KR0166088B1 (ko) 1990-01-23 1999-01-15 . 수용해도가 증가된 시클로덱스트린 유도체 및 이의 용도
US5395855A (en) 1990-05-07 1995-03-07 Ciba-Geigy Corporation Hydrazones
IL115849A0 (en) 1994-11-03 1996-01-31 Merz & Co Gmbh & Co Tangential filtration preparation of liposomal drugs and liposome product thereof
AU716610B2 (en) 1996-08-30 2000-03-02 Novartis Ag Method for producing epothilones, and intermediate products obtained during the production process
DE938597T1 (de) 1996-09-06 2000-03-09 Obducat Ab Verfahren für das anisotrope ätzen von strukturen in leitende materialien
JP4274583B2 (ja) 1996-11-18 2009-06-10 ゲゼルシャフト・フュア・ビオテクノロギッシェ・フォルシュンク・ミット・ベシュレンクテル・ハフツング（ゲー・ベー・エフ） エポチロンｃ，ｄ，ｅ及びｆ、製造と薬剤
US6441186B1 (en) 1996-12-13 2002-08-27 The Scripps Research Institute Epothilone analogs
GB9721069D0 (en) 1997-10-03 1997-12-03 Pharmacia & Upjohn Spa Polymeric derivatives of camptothecin
US6194181B1 (en) 1998-02-19 2001-02-27 Novartis Ag Fermentative preparation process for and crystal forms of cytostatics
JP2002504540A (ja) 1998-02-25 2002-02-12 スローン−ケッタリング インスティトゥート フォア キャンサー リサーチ エポチロンの合成、その中間体およびそのアナログ
EP1107964B8 (en) 1998-08-11 2010-04-07 Novartis AG Isoquinoline derivatives with angiogenesis inhibiting activity
KR100851418B1 (ko) 1998-11-20 2008-08-08 코산 바이오사이언시즈, 인코포레이티드 에포틸론 및 에포틸론 유도체의 생산을 위한 재조합 방법 및 물질
AU2001231143A1 (en) 2000-01-27 2001-08-07 Cytovia, Inc. Substituted nicotinamides and analogs as activators of caspases and inducers of apoptosis and the use thereof
PE20020354A1 (es) 2000-09-01 2002-06-12 Novartis Ag Compuestos de hidroxamato como inhibidores de histona-desacetilasa (hda)
WO2003039529A1 (en) 2001-11-07 2003-05-15 4Sc A.G. Selective antibacterial agents
WO2003055477A1 (en) 2001-12-21 2003-07-10 7Tm Pharma A/S Method for the treatment of mc receptor related disorders with a chelate and/or a chelator
GB0215676D0 (en) * 2002-07-05 2002-08-14 Novartis Ag Organic compounds
JP4896518B2 (ja) 2002-12-13 2012-03-14 ワイエム・バイオサイエンシズ・オーストラリア・ピーティーワイ・リミテッド ニコチンアミド系キナーゼ阻害薬
TW200505902A (en) 2003-03-20 2005-02-16 Schering Corp Cannabinoid receptor ligands
US20070054916A1 (en) 2004-10-01 2007-03-08 Amgen Inc. Aryl nitrogen-containing bicyclic compounds and methods of use
US20080167347A1 (en) 2005-01-20 2008-07-10 Shiongi & Co., Ltd. Ctgf Expression Inhibitor
WO2006120178A1 (en) 2005-05-11 2006-11-16 Novo Nordisk A/S New haloalkylsulfone substituted compounds useful for treating obesity and diabetes
WO2007002441A1 (en) 2005-06-24 2007-01-04 Emory University Methods of use for non-atp competitive tyrosine kinase inhibitors to treat pathogenic infection
PT1746097E (pt) 2005-07-20 2010-04-15 Aventis Pharma Sa Heterociclos fundidos de 1,4-di-hidropiridina, processo para a sua preparação, utilização e composições que os contêm
CN102861338A (zh) * 2006-04-05 2013-01-09 诺瓦提斯公司 用于治疗癌症、包含bcr-abl/c-kit/pdgf-r tk抑制剂的组合
WO2008021725A2 (en) 2006-08-11 2008-02-21 Smithkline Beecham Corporation Chemical compounds
CN101528744A (zh) 2006-10-20 2009-09-09 Irm责任有限公司 用于调节c-kit和pdgfr受体的组合物和方法
US7939690B2 (en) * 2006-11-15 2011-05-10 High Point Pharmaceuticals, Llc Haloalkylsulfone substituted compounds useful for treating obesity and diabetes
CN101627027B (zh) * 2007-01-05 2013-06-19 百时美施贵宝公司 氨基吡唑激酶抑制剂
WO2008112695A2 (en) 2007-03-12 2008-09-18 Irm Llc Pyrazolo [3,4-d] pyrimidines and 1, 2, 5, 6-tetraaza- as- indacenes as protein kinase inhibitors for cancer treatment
WO2008124393A1 (en) 2007-04-04 2008-10-16 Irm Llc Benzothiazole derivatives and their use as protein kinase inhibitors
WO2008144253A1 (en) 2007-05-14 2008-11-27 Irm Llc Protein kinase inhibitors and methods for using thereof
AU2008281877A1 (en) 2007-08-02 2009-02-05 F. Hoffmann-La Roche Ag The use of benzamide derivatives for the treatment of CNS disorders
TWI534137B (zh) 2007-09-17 2016-05-21 艾伯維巴哈馬有限公司 抗感染劑及其用途
EP2297097A2 (en) 2008-06-11 2011-03-23 Irm Llc Compounds and compositions useful for the treatment of malaria
JP5603869B2 (ja) 2008-09-29 2014-10-08 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング 新規化合物
CN102548987B (zh) 2009-07-14 2014-04-16 江苏迈度药物研发有限公司 作为激酶抑制剂的氟取代化合物及其使用方法
JP2011057661A (ja) 2009-08-14 2011-03-24 Bayer Cropscience Ag 殺虫性カルボキサミド類
US8629132B2 (en) 2009-11-13 2014-01-14 Genosco Kinase inhibitors
JO3634B1 (ar) * 2009-11-17 2020-08-27 Novartis Ag طريقة لعلاج اضطرابات تكاثرية وحالات مرضية أخرى متوسطة بنشاط كيناز bcr-abl، c-kit، ddr1، ddr2، أو pdgf-r
WO2011082400A2 (en) 2010-01-04 2011-07-07 President And Fellows Of Harvard College Modulators of immunoinhibitory receptor pd-1, and methods of use thereof
KR101347303B1 (ko) 2010-01-29 2014-01-06 한미사이언스 주식회사 단백질 키나아제 저해활성을 갖는 티에노[3,2-ｄ]피리미딘 유도체
WO2012129562A2 (en) 2011-03-24 2012-09-27 The Scripps Research Institute Compounds and methods for inducing chondrogenesis
CN102276500A (zh) * 2011-05-05 2011-12-14 西安交通大学 水杨酰胺类抗肿瘤化合物及其合成方法和用途
EP2713722B1 (en) 2011-05-31 2017-03-15 Receptos, LLC Novel glp-1 receptor stabilizers and modulators
US9340537B2 (en) 2012-05-15 2016-05-17 Novatis Ag Benzamide derivatives for inhibiting the activity of ABL1, ABL2 and BCR-ABL1
PT2861579T (pt) * 2012-05-15 2018-04-27 Novartis Ag Derivados de benzamida para inibir a atividade de abl1, abl2 e bcr-abl
JP6080947B2 (ja) 2012-05-15 2017-02-15 ノバルティス アーゲー Ａｂｌ１、ａｂｌ２およびｂｃｒ−ａｂｌ１の活性を阻害するための化合物および組成物
US9278981B2 (en) * 2012-05-15 2016-03-08 Novartis Ag Compounds and compositions for inhibiting the activity of ABL1, ABL2 and BCR-ABL1

Also Published As

Publication number Publication date
US20140343086A1 (en) 2014-11-20
SG11201407152XA (en) 2014-11-27
CN104302638B (zh) 2016-08-24
PH12014502531B1 (en) 2015-01-12
LTPA2022523I1 (sr) 2022-12-12
CN104302638A (zh) 2015-01-21
ES2670601T9 (es) 2022-11-30
CY2022033I1 (el) 2023-01-05
EP2861579B1 (en) 2018-02-21
LUC00287I2 (sr) 2025-05-12
LTC2861579I2 (sr) 2024-08-26
FR22C1053I1 (fr) 2022-12-16
DK2861579T5 (da) 2022-10-24
HUS2200046I1 (hu) 2022-11-28
AR091063A1 (es) 2014-12-30
SV2014004850A (es) 2018-04-04
WO2013171639A1 (en) 2013-11-21
IL235566A (en) 2016-09-29
PT2861579T (pt) 2018-04-27
NL301201I2 (nl) 2022-12-07
CY1120235T1 (el) 2019-07-10
PE20161416A1 (es) 2017-01-08
GEP201606532B (en) 2016-08-25
IL235566A0 (en) 2015-02-01
CU24265B1 (es) 2017-07-04
ES2670601T3 (es) 2018-05-31
LT2861579T (lt) 2018-05-10
DOP2014000256A (es) 2015-02-27
KR20150020170A (ko) 2015-02-25
EP2861579B9 (en) 2018-08-29
AU2013261127B2 (en) 2015-03-12
MX2014013374A (es) 2015-01-16
SI2861579T1 (en) 2018-05-31
CY2022033I2 (el) 2023-01-05
CA2868958A1 (en) 2013-11-21
PH12014502531A1 (en) 2015-01-12
EA024391B1 (ru) 2016-09-30
MA37519B1 (fr) 2017-03-31
EA201491824A1 (ru) 2015-02-27
JP6078639B2 (ja) 2017-02-08
JO3453B1 (ar) 2020-07-05
CA2868958C (en) 2020-09-01
CU20140131A7 (es) 2015-04-29
AU2013261127A1 (en) 2014-11-20
AP3613A (en) 2016-02-29
MX359014B (es) 2018-09-12
CL2014002757A1 (es) 2015-01-23
NO2022043I1 (en) 2022-10-25
MA37519A1 (fr) 2016-06-30
CO7131380A2 (es) 2014-12-01
BR112014026383A2 (pt) 2017-06-27
ME03095B (me) 2019-01-20
UY34811A (es) 2013-12-31
HUE039138T2 (hu) 2018-12-28
EP2861579A1 (en) 2015-04-22
US8829195B2 (en) 2014-09-09
PL2861579T3 (pl) 2018-07-31
UA113208C2 (xx) 2016-12-26
ZA201407065B (en) 2016-08-31
CR20140519A (es) 2015-03-26
HK1203495A1 (en) 2015-10-30
AP2014007992A0 (en) 2014-10-31
NZ701626A (en) 2016-02-26
TWI560183B (en) 2016-12-01
KR102091893B1 (ko) 2020-03-23
PE20150669A1 (es) 2015-05-17
MY169377A (en) 2019-03-26
TW201400471A (zh) 2014-01-01
DK2861579T3 (en) 2018-05-28
TR201807023T4 (tr) 2018-06-21
JP2015521185A (ja) 2015-07-27
FR22C1053I2 (fr) 2023-11-10
PE20210667A1 (es) 2021-04-05
BR112014026383B1 (pt) 2020-11-17
US20130310395A1 (en) 2013-11-21
GT201400253A (es) 2017-09-28
TN2014000427A1 (en) 2016-03-30
HRP20180695T1 (hr) 2018-06-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP2861579B1 (en) Benzamide derivatives for inhibiting the activity of abl1, abl2 and bcr-abl1
EP2861576B1 (en) Benzamide derivatives for inhibiting the activity of abl1, abl2 and bcr-abl1
EP2858988B1 (en) Benzamide derivatives for inhibiting the activity of abl1, abl2 and bcr-abl1
EP2900637B1 (en) Thiazole or imidazole substituted pyrimidine, pyridine and pyrazine amide derivatives and related compounds as abl1, abl2 and bcr-abl1 inhibitors for the treatment of cancer, specific viral infections and specific cns disorders
HK1203495B (en) Benzamide derivatives for inhibiting the activity of abl1, abl2 and bcr-abl1