RS57199B1 - Ekstrakti kakaa, proizvodi od kakaa i postupci za njihovu proizvodnju - Google Patents

Description

ROMARK LABORATORIES L.C.

FARMACEUTSKE KOMPOZICIJE TIZOKSANIDA I NITAZOKSANIDA

Osnova pronalaska

Dati pronalazak se odnosi na farmaceutske kompozicije koje sadrže kao aktivno sredstvo najmanje jedno jedinjenje koje je izabrano izmedju grupa koje se sastoje od formule (I)

Aktivno sredstvo je po mogucstvu u obliku čestica koje imaju veličinu manju od 200 u.m i glavnu veličinu čestice veću od 10 u.m. Pronalazak se odnosi i na farmaceutske kompozicije koje su stabilizovane sa barem jednom farmaceutski prihvatljivom kiselinom. Farmaceutske kompozicije su naročito korisne u lečenju oportunističkih infekcija (koje su prouzrokovane od strane nekog mikroorganizma) kod osoba sa komprimovanim i supresivinim imunim sistemima, u lečenju infekcija (pljosnatih glista) trematoda.

Opis tehnike

Postoji hitna potreba za razvojem postupka u lečenju brojnih parazitskih i bakterijskih infekcija kod ljudi sa imunokomprimovanim imunim sistemima (AIDS, oboleli od raka, stariji ljudi, pacijenti kojima su transplantirani organi i koji su na lekovima za slabljenje imunog sistema). Druga oblast od značaja su infekcije trematoda, naročito u tropskim klimatskim uslovima.Tako postoji potreba za farmaceutskom kompozicijom koja mogu da podnesu čak i imunokomprimovani ljudi, a čije je čuvanje stabilno čak i u tropskim sredinama. Još odredjenije,Toxoplasma gondiije portozoa i ona je medju najmoćnijim uzročnicima latentnih infekcija centralnog nervnog sistema po ćelom svetu.Mnogi zdravi ljudi su zaraženi sa parazitima, ali obično imuni sitem čuva organizam podkontrolom. T. gondiije najobičniji patogen (prouzrokovan od strane drugog mikroorganizma) i u mozgu pacijenata koji boluju od AIDS-a. Sada toksoplazmoza postaje sve već problem ne samo zbog AIDS-a, već i zbog širokog spektra korišćenja imunosupresivnih lekova (na primer, kod davanja pacijentima sa presadjenim organima). Toksoplazmoza se obično leči u kombinaciji pirimetamina i sulfadiazina. Dok su lekovi efikasni, oni ne ubijaju ciste parazita, tako da lečenje mora biti nastavljeno davanjem leka u dozama da bi se održala efikasnost. Otrovnost često ubrzava prestanak dejstva leka, naročito kod imunosupresivnih, i vraća rezultat delovanja na početak. Statistike nisu dobre, sa izveštajima o stopama smrtnosti od oko 70 procenata kod pacijenata sa imunodeficijencijom i prosečnim vremenom preživljavanja od četiri meseca. Kriptosporidioza je uzrokovana mikroskopskom parazitskom protozoomCryptosporidium parvum.Kod osoba sa normalnom imunom funkcijom, diareja izazvana odstrane C. parvum,može da se intezivira i produži ali je samoograničavajuća Kod pacijenata obolelih od AIDS-a, kriptosporodialna diareja često ugrožava život. Utvrdjeno je da 15-20 procenata obolelih od AIDS-a pati od ovih stanja. Do danas,nije bilo konzistentne i efikasne terapije za kriptosporidiozu. Najćešće identifikovani patogen kod pacijenata obolelih od AIDS-a jeEnterocytozoon bieneusi,mikrosporodijalni parazit, koji je pronadjen kod približno jedne četvrtine pacijenata. Sada izgleda da ovaj sićušni parazit može u velikim količinama da bude uzročnik velikih razmera za mnoge neobjašnjene slučajeve malabsorpcije (nedovoljna absorpcija hranjivih materijala u crevima), diareje i slabljenja koja se javljaju kod pacijenata bolesnih od HlV-a. Do sada nije poznato efikasno lečenje. Nekoliko drugih vrsta mikrosporidija inficiraju HlV-pozitivne pacijente, uključujućiEncephalitozoon hellemicuniculi,i nove vrste označene kaoSeptata intestinalis.Skoriji izveštaj sugeriše da je rasprostiranje infekcija mikrosporidija u značajnom porastu. Infekcije sa parazitomIsospora belli\ eklinički nemoguće razlikovati od kriptosporidioze. Još rasprostranjenije u tropskim klimatskim uslovima,l. bellije bila prijavljena u manje od 1% pacijenata u Sjedinjenim Državama, mada je stvarni opseg nalaženja verovatnov\ š\. Pneumocystis cariniije uopšteno klasifikovan kao protozojski parazit; neke studije ukazuju da su to možda gljive, sa kojima dele izvesne genetičke sekvence.P. cariniiobično inficiraju pluća (Pneumocvstis Carnii Pneumonia (PCP)). Objavljeno je da je terapija uspešna kod 40-60 % pacijenata, sa problemima koji uključuju toksičnost leka naročito kod pacijenata sa ugroženim imunim sistemom. Medju mnogim ozbiljnim manifestacijama infekcije virusom humane imunodeficijencije (HIV) kod dece, PCP odudara zbog visokog opsega nalaženja ravnomerne raspodele po godištima,i učestanoj smrtnosti.PCP je najozbiljnija rasprostranjena infekcija kod dece sa infekcijom virusa HIV; opseg nalaženja PCP medju decom zaraženom HlV-om koje ne prihvataju profilaksu se procenjuje na barem 12 % u prvoj godini života. Mnoga deca umiru kratko nakon pogoršanja razvoja PCP. Mvcobacterium Avium kompleks (MAC) upućuje na infekcije od familije vrlo sličnih mikobakterijskih organizama,Mycobacteruim aviumiM. intracellulare Kadase MAC javlja kod ljudi koji nemaju ugrožen imuni sistem, to je obično u obliku infekcije respiratornog trakta. U pacientima sa AIDS-om, MAC je učestano rasprostranjen ( rasprostranjeni MAC il DMAC), i skoro bilo koji organski sistem može biti obuhvaćen. U skorijoj studiji, bakterijski MAC je nadjen kod 43% pacijenata koji su preživeli 2 godine po dijagnozi AIDS.Nije ustanovljena standardna terapija za rasprostranjeni MAC. Kombinacijalekova se obično prepisuje, a ukoliko je uspešna, potrebno je da se lečenje nastavi za života. Urgentno je potrebno još efikasnijie lečenje. Zaraženi HlV-om su naročito osetljivi na infekcijeMycobacterium tuberculosis,i tok bolesti je ubrzan. Dok je ekstrapulmonalna tuberkuloza neuobičajena kod pacijenata koji nisu zaraženi virusom HIV, ona se učestano javlja kod HlV-pozitivnih ljudi. CDC označava smernice budućeg toka lečenja TB koji prima rastuću raširenost TB višestruko otpornog na lekove (MDR-TB). Smrtnost medju pacijentima koji boluju od AIDS-a sa MDR-TB je veoma visoka (približno 80%) i širenje bolesti je ekstremno brzo. Prema tome, postoji hitna potreba za razvijanjem postupka za lečenje ovih tako rasprostranjenih infekcija, koje nagoveštavaju neprijatnosti za ljude i životinje. Takodje postoji potreba za lekom sa širokim spektrom dejstva radi pojednostavljenja u lečenju infekcija tremaodama. Danas je neophodno utvrditi dijagnozu za specifični patogen (u ovom slučaju trematodu), i onda prepisati terapiju sa lekom koja je specifična za datu trematodu. Mnoge manje razvijene zemlje nisu obučene da postave dijagnozu za specifičnu trematodu. Razvoj širokog spektra lekova koji delujuće eliminisati zahtev za dijagnozom.Schistosoma mansoni,krvni parazit (trematoda iz roda Schistosoma), je sredstvo koje prouzrokuje šistozomiazu, drugu najznačajniju tropsku parazitsku bolest kod ljudi (posle malarije), i najznačajniju infekciju trematoda kod čoveka.Schistosoma haematobiumjejoš jedna značajna vrsta koja inficira čoveka. Preko 200 miliona individua pati od šistosomiazije širom sveta, uključujući nekoliko stotina hiljada ljudi u Sjedinjenim Državama.Fasciola hepatica,uobičajeni parazit jetre, je prvenstveno bolest ovaca, ali su ljudi slučajni domaćini. Parazit uspeva da opstane u prisustvu snažnog imunog odgovora domaćina. Bitionol je predložen za lečenje, ali nije ustanovljen za upotrebu u Sjedinjenim Državama.

Tako postoji potreba za farmaceutskom kompozicijom čije je skladištenje stabilno čak i u tropskim sredinama, i koji ima širok spektar dejstva protiv trematoda.

Suština Pronalaska

Pokazano je u studijama sa životinjama i u humanim kliničkim studijama da je efikasnost lečenja, upotreba jedinjenja sa formulama (I) i (II) zavisna od veličine čestice aktivne supstance u leku i stabilnosti jedinjenja. Opisani farmaceutski sastavi su pogodni za lečenje ljudi i životinjskih infekcija trematoda koje su uzrokovane sa Schistosoma kao što suSchistosoma mansoni, Schistosoma

haematobium, Schistosomamekongi, Schistosomajaponicum, Schistosoma

intercalatum;Fasciolakao što jeFasciola gigantica, Fasciolopsis biskr,i

Dicrocoelium dentriticum, Heterophyes heterophyes,iMetagonimus yokogawa.

Farmaceutske kompozicije su isto efikasne za lečenje imunokompromisnih i oportunističkih infekcija odCryptosporidium parvum, Isospora beili, Enterocytzoon

bieneusi, Encephalittozoon intestinaiis, Mycobacterium tuberculosis,

Mycobacterium avium intacellulare, Pneumocystis carinii] Toxoplasma gondii.

Farmaceutska kompozicija može biti u obliku pogodnom za oralnu primenu, kao što je davanje leka u dozama ( u čvrstom obliku), tečne suspenzije, ili paste.

KRATAK OPIS CRTEŽA

Za potpunije razumevanje prirode i predmeta datog pronalaska treba da bude načinjena referenca pomoću sledećeg detaljnog opisa koji je uradjen sa pratećim crtežima u kojima: Slik. 1 pokazuje inhibiciju u procentima i sposobnost rastenja ćelije domaćina od nitazoksamida nasuprotE. intestinaiis.

Sli. 2. pokazuje inhibiciju u procentima i sposobnost rasta ćelije domaćina za nitazoksanid nasuprotV. corneae.

SI. 3 pokazuje inhibiciju u procentima i sposobnost rasta ćelije domaćina od albendazola naspramE. intestinaiis.

Sli. 4 pokazuje procenat inhibicije i sposobnost za život ćelije domaćina albendazola naspram V.corneae.

SI. 5 pokazuje mapu vrednosti za OD dobijenu za svaki bunarčić sa kulturomT. gondii,protiv koncentracije leka u kulturi.

Sli. 7 je tabela koja se zasniva na ogledu za efikasnost nitazoksanida naspram mikobakterija koje rastu u tečnoj sredini koja sadrži odgovarajuće hranjive sastojke za uzgajanje mikroorganizama. Sli. 8 pokazuje procenat aktivnih

čestica koje imaju veličinu manju od 0u.m.

Detaljan opis pronalaska

Postupak za lečenje infekcija iz datog pronalaska obuhvata primenu farmaceutske kompozicije koja se sastoji od aktivnog sredstva, barem jednog jedinjenja izabranog iz grupe koja se sastoji od desacetil-nitazoksanida sa formulom (I) : i nitazoksanida sa formulom (II) :

Nitazoksanid (NTZ), jedinjenje sa formulom (II), je generičko (opšte) ime za 2-(acetiloksi)-N-(5-nitro 2-tiazoli) benzamid, jedinjenje koje je prvi put sintetizovano od strane Rossignol i Cavier 1975 godine. 2 mg nitazoksanida se može. rastvoriti u 1 ml DMSO. Nitazoksanid se lako absorbuje oralnim putem. Sve do sada nije bilo dokaza da jedinjenja sa formulama (I) i/ili (II) mogu da budu široko efikasna protiv infekcija trematodama, ili da mogu da budu dovoljno ne toksična da bi bila podneta čak i od ljudi sa ugroženim imunim sistemom. Dobijanje i odredjena upotreba nitazoksanida je obelodanjena u US patent 3,950,351, kao i u publikacijama datog pronalazača. Desacetil-nitazoksanid, jedinjenje sa formulom (I), se ponekad ukazuje kao tizoksanid ili d-NTZ, i metabolit je nitazoksanida. U VV095/28393, dati pronalazač opisuje postupak za proizvodnju čistog jedinjenja sa formulom (II), kao i upotrebu jedinjenja koje sadrži smešu jedinjenja (I) i (II). Uočeno je da čvrste čestice jedinjenja sa formulom (I), jedinjenja sa formulom (II) ili njihove smeše imaju čestice veličine izmedju 170 i 520 u.m (prosečna vrednost veličine cestice =352mm) i veoma ograničenu efikasnost kada se primenjuju oralno na životinje i ljude. Efikasnost takvih čestica je manja od postojećih farmaceutskih proizvoda i stoga je neprihvatljiva za podešavanje ili komercijalne svrhe. Takodje je uočeno kod pasa da oralna primena jedinične doze od 50 mg po kilogramu čvrstih čestica jedinjenja sa formulom (I) i jedinjenja sa formulom (II) sa veličinom čestice manjom od 5u.m, prouzrokuje snažnu, reakciju kod životinja. Sada je otkriveno da u cilju efikasanijeg i sigurnijeg lečenja infekcija uzrokovanih parazitima, bakterijama, gljivama i virusima kod ljudi i životinja, farmaceutski sastav, ili u čvrstom obliku ili u obliku vodene suspenzije, mora da sadrži efikasnu dozu aktivnog sredstva u obliku čestica u čvrstom stanju koje imaju veličinu manju od 200u,m i jedinjenje sa formulom (I) i / ili jedinjenja sa formulom (II), srednja veličina akivnih čvrstih čestica je veća od 10 u,m. Prisustvo velikog broja čestica aktivnog sredstva koje imaju veličinu veću od 200u.m u pogledu sadržaja čestica koje imaju veličinu izmedju 5 i 200u.m značajno smanjuje hemoterapeutsku aktvinost jedinjenja. Po mogućstvu, farmaceutski sastavi iz pronalaska ne obuhvataju više od 5% težine aktivnih čestica u čvrstom stanju koje imaju veličinu veću od 200 u,m. Najpoželjnije, je da farmaceutski sastavi iz pronalaska ne sadrže aktivne čvrste čestice u čvrstom stanju koje imaju veličinu veću od 200 u.m. Prisustvo visokog sadržaja čestica sa aktivnim sredstvom koje imaju veličinu manju od 5u.m u pogledu sadržaja čestica koje imaju veličinu izmedju 5 i 200u.m može da proizvesti suprotan efekat kod životinja ili ljudi. Osim toga,sada je uočeno da se čestice koje imaju veličinu manju od 5u.m brže apsorbuju iz gastro-intestinalnog trakta u krv koja prolazi kroz sistem za cirkulaciju, i stoga nisu tako efikasni kao protiv parazita, bakterija, gljiva i virusa koji obično žive unutar gastro-intestinalnog trakta od životinja ili ljudi. Upućeni naučnik ne može predvideti da veličina čestice jedinjenja sa formulom (I) i jedinjenja sa formulom (II) može imati tako značajan efekat na njegovu mikrobiološku aktivnost kod životinja i ljudi. Na primer, u studijama koje su sprovedene od strane pronalazača, antiparazitska jedinjenja takva kao što su albendazol, mebendazol, niklozamid, prazikvantel i metronidazol ne pokazuju tako primetnu razliku u antiparazitskoj aktivnosti kod životinja i ljudi, što zavisi od njihove veličine čestice. Osim toga, upućeni naučnik ne može da predvidi da veličina čestice od jedinjenja sa formulom (I) i jedinjenja sa formulom (II) može da ima tako suprotan efekat na sposobnost životinja ili ljudi da podnesu primenu pomenutog aktivnog sredstva. Jedinjenje (a) sa formulama (I) i (II) mogu se primeniti davanjem leka u dozama (u čvrstom obliku) ili u vidu vodene suspenzije, i poželjno je da farmaceutski sastav sadrži efikasnu dozu aktivnog sredsva u obliku čestica u čvrstom stanju sa formulom (I) i / ili (II) sa veličinom čestice manjom od 200u.m, srednja vrednost veličine čestice za pomenute aktivne čestice u čvrstom stanju je veća od 10 u.m kao što je odredjeno od strane Coulter Counter LS100. Ova oprema koristi lasersko svetio na 750 nm za čestice veličina od 0.4 do 900 u.m u prečniku svetlosnom difrakcijom. Uzorci su mereni u vodi sa malim količinama TritonX-100 da bi se povećala kvašljivost i deflokulacija (smanjenjem stanja flokulencije dispergovanjem flokulovanih čestica) praha. Od koristi je da je srednja vrednost veličine čestice za pomenute aktivne čestice u čvrstom stanju izmedju 10 i 100 um, po mogućstvu izmedju 20 i 50 um. Primeri za poželjna jedinjenja su: kompozicija za koju manje od 10% od težine pomenutih čvrstih ćestica ima veličinu veću od 100 (im; kompozicija gde najmanje 50 % težine od pomenute aktivne čvrste supstance ima veličinu čestica manju od

50 u.m. Od koristi je da je srednja vrednost veličine čestice za pomenute aktivne čestice (u čvrstom stanju) izmedju 10 i 100 (im, po mogućstvu izmedju 20 i 50 um. U saglasnosti sa poželjnim izvodjenjem kompozicije, manje od 10 % pomenutih aktivnih čestica u čvrstom stanju ima veličinu manju od 5 u.m. Aktivno sredstvo ili sredstva koja su korišćena prilikom davanja leka u dozama (u čvrstom obliku) ili u vidu suspenzija je pogodna smeša čestica u čvrstom stanju od jedinjenja sa formulom (I) i formulom (II) sa veličinom čestice manjom od 200u.m, težinski sadržaj jedinjenja sa fromulom (I) u pogledu težine jedinjenja sa formulom (I) i sa formulom (II) od pomenute smeše je obuhvaćeno izmedju 0.5 i 20% po mogućstvu izmedju 0.5 i 10 %. Pronalazak se takodje odnosi i na ranije opisane farmaceutske sastave koji sadrže barem jednu farmaceutski prihvatljivu kiselinu. Primeri takvih kiselina su : limunska kiselina, glutaminska kiselina, ćilibarna kiselina, etansulfonska kiselina, sirćetna. kiselina, vinska kiselina, askorbinska kiselina, metansulfonska kiselina, fumarna kiselina, adipinska kiselina, jabučna kiselina i njihove smeše. Limunska kiselina je veoma odgovarajuća. Prisustvo pomenute kiseline poboljšava stabilnost aktivnog sredstva i sredstava. Odnos težina farmaceutski prihvatljive kiseline/ težina pomenutih aktivnih čvrstih čestica je pogodno izmedju 0.01 i 0.5, po mogućstvu izmedju 0.03 i 0.2. Količina kiseline je dovoljna za regulisanje pH suspenzije izmedju 2 i 6, po mogućstvu izmedju 3 i 5, najpoželjnije izmedju 3.5 i 4.5. Tehnike za dobijanje, i poželjni primeri za to, davanje farmaceutske kompozicije u dozama u čvrstom i tečnom obliku su obelodanjeni u WO/ 95/ 28393, čiji sadržaj je ovde uključen kao referenca. Kompozicije sadrže sredstvo za kvašenje i ako je moguće derivat škroba kao što je onaj opisan u US Patent 5,578,621, čiji sadržaj je ovde uključen kao referenca za otkrivanje mogućih sredstava za kvašenje i derivata škroba. Kao što je opisano u US 5,578,621, sredstvo za kvašenje služi kao disperziono sredstvo.Takve farmaceutske kompozicije, ili davanjem u dozama u čvrstom ili u tečnom stanju ili kao paste ili masti, mogu po slobodnom izboru da sadrže dodatna aktivna sredstva kao što su antibiotici, anti-virusna sredstva ili inhibitori protonskih pumpi. Dok to nije korisno (pogodno), moguće je i da takve farmaceutske formulacije sadrže aktivne čvrste čestice od jedinjenja sa formulom (I) i / ili jedinjenje sa formulom (II) koje su veće od 200u.m. Kompozicije mogu da sadrže ekscipijente koji su kao takvi poznati za potrebe dobijanja oblika pogodnih za oralnu primenu. Da bi imali odličnu efikasnost protiv širokog spektra parazita, bakerija i virusa, korisno je da je faktor.raspodele za pomenute aktivne čvrste čestice izmedju 0.8 i 2, po mogućstvu izmedju 1.1 i 1.9, a najpoželjnije je daje veći od 1.5, pomenuti faktor raspodele je računat pomoću sledeće formule, : F9O%=(09O%-01O%) 1 (09O%+01O%)12)

u kojoj je<F>90o/ofaktor raspodele na 9O%;09Oo/oje maksimalna veličina čestica od frakcija za čestice koje odgovaraju 90% od pomenutih aktivnih čvrstih čestica, i 01Oo/oje maksimalna veličina čestica od frakcija čestica koje odgovaraju 10% od pomenutih aktivnih čvrstih supstanci. Prema specifičnom izvodjenju pronalaska, čestice od jedinjenja sa formulom (I) i / ili (II) se dobijaju pomoću postupaka koji su ovde ranije opisani i onda se samelju tako da je manje od 10 % aktivnih čestica veće od 100 u.m, manje od 50% od rečenih čestica je veće od 50u.m i manje od 10

% od pomenutih aktivnih čestica je manje od 5|im u veličini, srednja vrednost veličine čestica je izmedju 20 i. 50 u.m. Pomenute aktivne čestice su onda granulisane korišćenjem smeše koja sadrži aktivne čvrste čestice i barem jedno sredstvo za granulaciju. Primeri sredstva za granulaciju su: polivinilpirolidon, voda

.alkohol, saharoza hidroksil celuloza i njihova smeša. Korisno je da se barem jedna farmaceutski prihvatljiva kiselina dodaje za vreme procesa granulacije. Pronalazak se odnosi na davanje doza u čvrstom stanju koje obuhvata kompoziciju pronalaska kao štosu tablete, disperzibilne tablete, tabete sa presvlakom, matriksi itd. Oblik davanja doze iz pronalaska sadrži, na primer: Aktivne ćestice u čvrstom stanju sa veličinom čestice manjom od 200u.m, manjom od 10% pomenutih čestica ima veličinu manju od 100 u,m, manju od 50 % od pomenutih čestica ima veličinu

manju od 50 |im i manje od 10% pomenutih čestica ima veličinu manju od 5 u,m,

srednja veličina čestice je izmedju 20 i 50 u.m.barem jedno sredstvo za granulaciju; barem jedno sredstvo za kvašenje; i barem jedan derivat škroba, i barem jednu farmaceutski prihvatljivu kiselinu koja se po mogućstvu dobija za vreme procesa granulacije. Davanje doza u tečnom obliku kao što su vodene suspenzije iz pronalaska obuhvata, na primer :kao aktivno sredstvo, čvrste čestice koje sadrže u sebi jedinjenje sa formulom (I) i / ili jedinjenja sa formulom (II) imaju veličinu čestica manju od 200mm, manje od 10 % od pomenutih čestica ima veličinu veču od 100 mm, manje od 50 % pomenutih čestica ima veličinu veću od 50 mm i manje od 10% pomenutih čestica ima veličinu manju od 5 mm, i barem jedno sredstvo za granulaciju; barem jedno sredstvo za kvašenje; i barem jednu farmaceutski prihvatljivu so, pH suspenzije treba da je izmedju 2 i 6, po mogućstvu izmedju 3 i 5, najpoželjnije izmedju 3.5 i 4.5; barem jedno sredstvo za zgušnjavanje, na primer ksantan guma, aguar guma, cristalna celuloza, karuba guma, karboksimetilceluloza ili njihove smeše. Pasta ili mast iz pronalaska koji su pogodni za oralnu primenu sadrže, na primer: kao aktivno sredstvo, čvrste čestice koje sadrže u sebi jedinjenje sa formulom (I) i / ili jedinjenje sa fromulom (II) imaju veličinu čestica manju od 200 (im, manju od 10 % od pomenutih čestica ima veličinu veću od 100 (im, manju od 50% od pomenutih čestica imaju veličinu veću od 50 u.m i manje od 10% od pomenutih čestica imaju veličinu manju od 5 (im, i barem jedno sredstvo za kvašenje; barem jednu farmaceutski prihvatljivu so, pH suspenzije treba da je izmedju 2 i 6, po mogućstvu izmedju 3 i 5, najpoželjnije izmedju 3.5 i 4.5; barem jedno sredstvo za zgušnjavanje, na primer ksantan guma, aguar guma, cristalna celuloza, karuba guma, karboksimetilceluloza ili njihove smeše. Pasta i mast za topičnu ili intravaginalnu primenu sadrži, na primer: kao aktivno sredstvo, čvrste čestice koje sadrže u sebi jedinjenje sa formulom (I) i / ili jedinjenje sa fromulom (II) imaju veličinu čestica manju od 200 (im, manju od 10 %od pomenutih čestica ima veličinu veću od 100 u.m, manju od 50% od pomenutih čestica imaju veličinu veću od 50 (im i manje od 10% od pomenutih čestica imaju veličinu manju od 5 (im, i barem jedno sredstvo za kvašenje; barem jednu farmaceutski prihvatljivu so, pH suspenzije treba da je izmedju 2 i 6, po mogućstvu izmedju 3 i 5, najpoželjnije izmedju 3.5 i 4.5; barem jedno sredstvo za zgušnjavanje, na primer ksantan guma, aguar guma, cristalna celuloza, karuba guma, karboksimetilceluloza ili njihove smeše.

Opis dobijanja farmaceutskih kompozicija

Sušeno prečišćeno jedinjenje sa formulom (I) i sušeno prečišćeno jedinjenje sa formulom (II) su podvrgnute mlevenju i razvrstane po veličini pomoću mrežastog rešeta. Posle mlevenja, čestice od jedinjenja sa fromulom (I), ili formulom (II) i njihove smeše imaju raspodelu veličine čestice kao što je dato na si. 8. Slika 8 pokazuje procenat čestica koje imaju veličinu manju od 0 u.m.Sa pomenute slike, se vidi da :manje od 10% od ukupne težine čestica ima veličinu manju od približno 5 u.m; manje od 10 % od težine čestica ima veličinu veću od približno 70 u.m; srednja veličina čestice je približno 40 mm;

faktor raspodele za čestice je oko 1.73, pomenuti faktor raspodele je ukalkulisan u sledeću formulu: F9O%=(09O%-01O%) / (09O%+010%) / 2)

u kojoj je F90% faktor raspodele na 90%; 090% je maksimalna veličina čestica frakcija za čestice koji odgovaraju 90% od pomenutih aktivnih čvrstih čestica, i 010% je maksimalna veličina čestica za frakcije za čestice koje odgovaraju 10 % od pomenutih aktivnih čvrstih čestica. Specifični primeri za takve kompozicije su obelodanjeni u sledećim tabelama.

Topli šećerni rastvor ili presvlaka sloja supstance koji je raspršen preko površine

tableta ili granula koje sadrže 500 mg aktivnog sredstva.

Farmaceutske kompozicije u pronalasku su kompozicije sa širokim spektrom dejstava na parazite, bakterije, gljive i viruse, naročito kada se daju oralnim putem. Efikasnost i sigurnost farmaceutskih kompozicija su izvanredne kod životinja i ljudi koje su ovde ranije obelodanjene. Naročito u humanim kliničkim studijama, bila je posmatrana efikasnost farmacetskih kompozicija koje su ovde ranije opisane su značajno efikasnija u lečenju parazitskih infekcija neko iste formulacije koje koriste aktivna jedinjenja koja imaju veličinu čestica izmedju 170 i 520 mm (srednja vrednost veličine čestice=352mm), čak i kada se cestice većih dimenzija daju pacijentima u dozama do tri puta više iza duži periode vremena. Dobijeni primeri izlečenja su pokazani u tabeli 6

Tabela 6. Poredjenje rezultata humanih kliničkih studija korišćenjem jedinjenja sa

formulom (I) i formulom (II) koje imaju veličinu čestica u osegu od 170 um do 520 um(

srednja=352 mm) sa koji su dobijeni korišćenjem formule (I) i formule (II) koje imaju

veličinu čestice u opsegu od 5 mm do 200 (im (sredina =34 mm).

Jedinjenje sa formulom ( I) ( 98 %) +jedinjenjesaformulom( II) ( 2%)

Za svaki od parazita iz table 6, proporcionalno izlečenje je značajno bolje za pacijente koji su lečeni sa aktivnim česticama izmedju 5 i 200 mm nego za one koje su lečeni sa aktivnim česticama u opsegu od 170 mm do 520 mm u veličini, sa statističkim značajem za svaki slučaj gde je p<0.02 (korišćenjem standardnog X^ testa). Ovo je slučaj čak iako doze aktivnih sredstva sa velikim česticama je obično viša i trajanje lečenja je često duže neko da je davano pacijentima koji primaju farmaceutske kompozicije od aktivnih sredstava koji imaju veličine čestica koje su manje od 200 mm. Nema ozbiljnih suprotnih efekata koji se javljaju za ne razgradjuju i da kompozicije zadržavaju svoju efikasnost za period vremena posle njihovog dobijanja koje je pogodno za medicinske i komercijalne svrhe.

U onome što sledi, biće predstavljena efikasnost farmaceutskih kompozicija.

PRIMER I

CRVPTOSPORIDIUM PARVUM

U preliminarnom kliničkom ispitivanju, 30 pacijenata obolelih od AIDS-a sa hroničnom kriptosporodijalnom dijarejom je lečeno sa oralnim nitazoksanidom od 500 do 2000 mg dnevno. Ukoliko se dijareja nastavlja, pacijenti primaju dodatne četiri nedelje nitazoksanid, do 2000 mg na dan. Dvadeset osmoro ljudi dovršava terapiju za dve ili više nedelja i šesnaestoro njih je po vrednosti odredjeno za terapeutski odgovor osme nedelje lečenja. U ovoj kasnijoj grupi , 12 osoba ima 50 %-tno ili veće smanjenje u frekvenciji pomeranja creva u toku dana i 10 individua ima znatno smanjenje ili potpuno odsustvo parazita u izmetu, sa organizmom koji ostaje neotkriven kod četvoro ljudi. Šestoro pacijenata dostižu kriterijum i za klinički i za parazitološki odgovor za njihovu korist. Više je verovatno da će pacijenti koji dobijaju višu dnevne doze leka za duži period da pozitivnije reaguju na lek. Otvorena studija o nitazoksanidu za kriptosporidialnu diareju koja se odnosi na AIDS dokumentuje (navodi pismene dokaze) o smanjenju crevnih pokreta medju pacijentima koji uzimaju dnevno 500, 1000, 1500 ili 2000 mg leka. Učesnici u ogledu imaju srednju vrednost rezultata CD4+ od 42 ćelije / mm<3>(opseg 0-303

ćelije / mm3)srednju vrednost od 6.7 crevnih pomeranja dnevno za prošek od 15 meseci, jaja cisti Crvptosporidium parvum u stolici, i bez prisustva ostalih patogena iz trbuha. Skoro svi učesnici nemaju uspeha u terapiji sa azitromicinom ili paromomicinon. Posle 23 nedelje, 9 od 13 ima kompletan klinički odgovor (preovladjujuće jedan do tri pokreta creva dnevno) i 4 od 13 ima delimični klinički odgovor(najmanje 50 procentno smanjenje u pokretima creva dnevno ili promena u sastavu stolice tako da se barem dobija 75 procenata). Sa završetkom studije, kod 8 od 11 pac. parazit je kompletno iskorenjen i ostala tri imaju značajno smanjenje nivoa oocisti. Postojao je trend ka boljem odgovoru sa dozama od 100 mg dnevno ili više i sa dužom terapijom. Dva učesnika ogleda imaju osip po koži; više od 90 procenata se pridezlavalo režima studije za više od četiri nedelje.

PRIMER II

CRYPTOSPORIDIUM PARVUM

In Vitro Informacija o davanju leka Nitazoksanid se rastvara u sterilnom dimetilsulfoksidu (DMS0) i proba protiv nedirnutih jaja cisti C.parvum sa zaraženim jednoslojnim ćelijama u koncentracij. od 100 ng/ml, 10 u.g/ml/1 u.g/ml i 0.1 u,g /1. Druga proba (test) je izveden sa testiranim nitazoksanidom u dodatnim koncentracijama od 20, 2, 0.2 i 0.02 mg /1. Ove koncentracije se postižu serijskim rastvaranjem sa komletnim DMEM medijumom da bi se dobila krajnja DMSO koncentracija od 0.5 %, Kontrolni medijum isto dolazi u dodir sa 0.5 %. Eksperiment koristi kulturu ćelije od MDBKF5D2. Ćelije rastu u komori od 7 mm, i kao Crvptosporidium parvum: GCH1 oociste (umehureno zigotno stanje u životu nekih sporozoa), 5 x 104 po posudi, je praćeno da bi se uporedio paromomicin ( pozitivna kontrola) prema nitazoksanidu (eksperimentalni lek). Materijali uključuju imuni anti-Cryptosporidium parvum sporozoit (jedan od sićušnih tela u kojima se dele spore od izvesnih sporozoa, od kojih se svaka razvija u odraslu individuu) od zečijeg seruma (0.1%) i antitela koze koje je obeleženo fluorosceinom i vezano za antitelo zeca (1%)

Ogled provere toksičnosti

200 u.l medijuma koji sadrži nitazoksanid na koncentracijama od 100, 10, 1 ili 0.1

u.g / ml i odgovarajuće kontrole su uvedene u dva"bunarčica" od posude sa 96 primarnih zasada koji sadrže MDBKF5D2 jednoslojnih ćelija i dve posude bez .

Lek se inkubira na sloju ćelija na 37 °C i 8% CO2. Na 24 h (proba 1) i 48 h (proba 2), MTS (Ovvensov rastvor) PMS se dodaje u svaku od posuda u koncentracijama od 333 u.g / ml i 25 u.M za svakog posebno u vezi sa drugim. Posuda je vraćena u inkubator u mrak da bi se razvijao dva sata. Na dva sata, 100 ml od svakog supernatanta se prenese u novu posudu za mikrotitraciju i očitava se na ELISA čitaču na 490 nm. Rezultati su snimljeni i analizirani. Procenat toksičnosti je izračunat oduzimanjem srednje vrednosti optičke gustine (OD) za supernatante leka od srednje vrednosti optičke gusine (OD) supernatanata iz kontrolnog medijuma (nema leka), deljenjem sa OD kontrolnog medijuma i množenjem sa 100.

Ogled sa netaknutim C. parvum oocistama 5 x 104 C.parvum oocista po "bunarčiću" se inkubira u nitazoksanidu ( 100, 20 ,10, 2, 1,0.2, 0.1 i 0.02 u.g / ml) na 37°C (8% CO2) na konfluentnom ćelijskom sloju MDBKF5D2.Nivo infekcije za svaku ćeliju je odredjen i analiziran imunofluoroscentnim ogledom na 24 do 48 h. Procenat inhibicije je uračunat oduzimanjem srednje vrednosti broja parazita/ 10 polja u posudama za testiranje leka od srednje vrednosti broja parazita/ 10 polja u kontrolnom medijmu (nema leka), deljenjem broja za kontrolni medijum , i zatim množenjem sa 100.

Ukupni Broj za kontrolni medijum

Rezultati :

Proba 1 : 24 h

Proba 2 : 48 sati

Utiskivanje nitazoksanida na nedodirnutim ocistama C. parvum

U probi 1, nitazoksanid na koncentracijama od 10, 1 ili 0.1 rezultuje u nivoima parazitske inhibicije od 94.4, 77.2 i 51.8 %, svaki za sebe u vezi sa drugim, i nivoima celijske toksičnosti iz 65.1, 8.3 i 19.3 % za svakog posebno u vezi sa drugim. Mada se gotovo kompletna inhibicija parazitskih infekcija javlja u 10 u.g/ I, visoka toksičnost je očigledna. Na 1u.g/l nitazoksanida, parazitska inhibicija i ćelijska toksičnost je uporedjena sa paromomicinom na koncentraciji od 2 mg / ml , u korist prvog (77.2 % parazitske inhibicije i 8.3 % toksičnosti za nitazoksanid na 1 mg/ ml je poredjeno sa 51 % parazitskom inhibicijom i 23.8% ćelijske toksičnosti za paramomicin na 2 mg/ ml).U ogledu 2, lek je promenjen da bi se dobila bolja raspodela doze sa minimalnom toksičnošću. Stoga, kulture postaju sposobne za razvoj za 48 h umesto 24 h kao i u probi 1. Inkubacija za 48 h jasno rezultuje u višoj relativnoj celijskoj toksičnosti kao što je očigledno sa ispitivanjem paromomicina u oba ogleda. Koncentracija nitazoksanida od 20 mg / ml je i dalje suviše toksična na 48 h inkubacije mada jednoćelijski sloj ostaje i dalje netaknut. Moguće je da visoka toksičnost koja mora da utiče na ćelijsku funkciju takodje ubija infekciju parazita/ razvoj. Na 2 mg / I nitazoksanida, . postojala je značajna inhibicija parazitske infekcije sa relativno niskom ćelijskom toksičnošću. Dalja razblaživanja takodje rezultuju značajnom inhibicijom i niskom toksičnošću.Pri koncenraciji leka od 2 mg / ml ublažena ćelijska toksičnost i inhibitorska aktivnost od 94.90 % pokazuju da je nitazoksanid na 2 mg/ ml superiorniji od paromomicina za infekciju in vitro C.parum na 2 mg/ Im (na primer 1000 puta viša koncentracija).

PRIMER IIICRVPTOSPORIDIUM PARVUM

In vitro doza i informacija o informacija o skladištenju

Zalihe nitazoksanida i dezacetil-nitazoksanida (NTZ i.NTZdes) su testirane protiv neokrnjenih ooocista C.parvum i isečenih jednoslojnih ćelija zaraženih sporozoitama na koncentracijama od 10,1 ,0.1 i 0.01 mg / ml. Svako jedinjenje se rastvara u 100 % dimetil sulfoksidu (DMSO) i razblažuje do željenih koncentracija sa sterilnim DMEM. Svaka koncentracija nitazoksanida i kontrolora medijuma sadrži 0.025 % DMSO kao stalnu količinu. Eksperiment koristi celijsku kulturu od MDBKF5D2. Ćelije rastu u komori od 7 mm, i kao Crvptosporidium parvum ; GCH1 ooociste (umehureno zigotno stanje u životu nekih sporozoa), 5 x 104 po posudi, je praćeno da bi se uporedio paromomicin ( pozitivna kontrola) prema nitazoksanidu (eksperimentalni lek). Materijali uključuju imuni anti-Crvptosporidium parvum sporozoit ( jedan od sićušnih tela u kojima se dele spore od izvesnih sporozoa, od kojih se svaka razvija u odraslu individuu) seruma zeca (0.1%) i antitela koze koje je obeleženo fluorescentnom bojom i povezano sa antitelom zeca (1%).

p gled provere toksičnosti

200 u.1 medijuma sadrži rastvor nitazoksanida u predhodno pomenutim koncentracijama i odgovarajuće kontrole su uvedene u dva "bunarčića" u posudi od 96 primarnih zasada koji sadrže MDBKF5D2 jednoslojne ćelije i dve posude bez jednoslojnih ćelija. Lek se inkubira na 37 °C i 8% C02- Na 48 h, MTS

(Ovvensov rastvor) i PMS su dodati u svaku od posuda u koncentracijama od 333 u.g / ml i 25 u.M za svakog posebno u vezi sa drugim. Tanjir je vraćen u inkubator u mrak da bi se razvijao dva sata. Na dva sata, 100 ml od svakog supernatanta se prenese u novu posudu za mikrotitraciju i očitava se na ELISA čitaču na 490 nm. Rezultati su snimljeni i analizirani. Procenat toksičnosti je izračunat oduzimanjem srednje vrednosti optičke gustine (OD) za supernatante leka od srednje vrednosti optičke gusine (OD) supernatanata iz kontrolnog medijuma (nema leka), deljenjem sa OD kontrolnog medijuma i množenjem sa 100.

OD mediiuma - OD leka x 100

OD medijuma

Rezultati0citotoksičnosti su označeni kao što sledi: 0.5 % toksičnosti = 0,6-25 % toksičnosti=1, 26-50% toksičnosti=2, 51-75 % toksičnosti=3 i 76-100% toksičnosti = -4. Kao standard, skor od 0 ili 1 treba da se smatra prihvatljivim nivoom toksičnosti. Rezultati za toksičnost od 2, 3 ili 4 uzimaju u obzir visok nivo toksičnosti za jednoslojne ćelije.

Ogled sa netaknutim C. parvum oocistama

5 x 104 C.parvum oocista se inkubira po posudi na predhodno pomenutim nitazoksanida na 37°C (8% CO2) na konfluentnom sloju ćelija MDBKF5D2.Nivo infekcije za svaku ćeliju je odredjen i analiziran imunofluoroscentnim ogledom na 48h. Procenat inhibicije je uračunat oduzimanjem srednje vrednosti broja parazita/ 10 polja u posudama za testiranje leka od srednje vrednosti broja parazita/ 10 polja u kontrolnom medijumu (nema leka), deljenjem broja za kontrolni medijum , i množenjem sa 100.

Rezultati :

Ogled sa C. parvum oocistama ( 48 h )

Konc. -mg/ ml; Parazit/ Srednja vrednost br. parazita/ polje ( analizirano 12 polja);

% Inhibicije-procenat inhibicije parazitskih infekcija; % Toks-Procenat toksičnosti ćelija od lekova Može se videti iz gornje tabele da inhibitorska aktivnost NTZida je ista kao i za NTZ u primeru II. I nitazoksanid i dezacetil nitazoksanid su jednako

efikasni in vitro naspramCryptosporidium parvumkada su isprobavani uporedno sa98<i>94 % inhibicijama koje su dobijene sa 10 i 1 u,g/ ml za svako jedinjenje posebno u vezi sa drugim. Za nitazoksanid 1 mg/ml je najniža koncentracija dajući više od 90 % inhibicije dok se 50% inhibicija može dobiti sa nižim koncentracijama nitazoksanida kao što su 0.2, 0.1 i 0.02 u.g / ml. Sa istim eksperimentalnim uslovima paromomicin koji se koristi kao kontrolno sredstvo je 2,000 puta manje efikasan sa inhibitorskim koncentracijama koje su unutar opsega od 51 % do 83 % na koncentraciji od 2,000 u.g/ ml.

PRIMER IV

E.INTESTINALIS i V.CORNEA

2RK-13 ćelije (ćelijska linija zečiji bubreg) se dodaju u posude sa 24 primarna zasada sa koncentracijama od 2.6 x 105 ćelija po posudi (1.o ml medijuma; RPMI 1640 sa 2mM L-glutamina i 5% seruma fetusa govečeta koji se inaktivira toplotom).

Sudovi se inkubiraju na 37°C u CO2inkubatoru preko noći za koje vreme se bunarčici prelivaju jedan u drugi ( sa udvostručavanjem, 5 x 10<$>ćelija po . bunarčiću).Septata intestinaiis(kultura izvedena iz tkiva) organizmi se dodaju u ćeliju domaćina u odnosu 3 :1 i porede se sa procenjenim ćelijama ili 15 x 10<6>organizama po bunarčiću. Ovaj odnos rezultuje u približno 50 % zaraženih ćelija domaćina.Lekovi su rastvoreni u DMSO, vodi i metanolu ( zavisno od rastvorljivosti) da bi se stvorile zalihe od 1.0 mg/ ml. Zalihe su čuvane na -70°C. Razblaženi rastvori iz eksperimenata su potpuno napravljeni u sredini kulture tkiva. Svi su oni testirani u trostrukom bunarčiću.Medijum se zamenjuje svaka tri do četiri dana (sadrži sveže rastvorene lekove).Šestoga dana(posle dodavanja parazita i lekova), ćelije su ispitivane na toksičnost. Kontrolne ćelije daju lekove ali paraziti nisu ispitivani na konfluentnost, morfologiju ćelije, i prisustvo mrtvih ili plutajućih ćelija. Samo su ćelije koje su inkubirane sa parazitima ispitivane da bi se potvrdilo da su paraziti zarazni ( tj. prisustvo parazitofosfornih vakuola). Ćelije koje inkubiraju parazite i lekove su procenjene za toksičnost ćelija domaćina i relativan broj parazitofosfornih vakuola (tj. viši, medijum, ili niže).Desetog dana, 100 mg od 10% SDS (0.5 % krajnja koncentracija) se dodaje u bunarčiće za kulture da discrupt membrane ćelija domaćina i uzrokuju oslobadjanje mikrosporidija. Ukupan broj parazita koji su prisutni u svakom bunarčiću je odredjen brojanjem alikvota na hemacitometra. Rezultati su izraženi kao procenat inhibicije ( koji se odnosi na inficirane ćelije koje ne daju lek). Rezultati su pokazani na crtežima 1-4.

PRIMER V TOXOPLASMA GONDII

Nitazoksanid i dezacetil nitazoksanid su testirani protiv parazita, i još odredjenije, RH sojevi od Toxoplasma gondii, su održavani pomoću niznih kanalima u mišu. Kulture ćelija od MRC5 fibroplasta (Bio-Merieux, France) koje su uzgajane u mikroposudi sa 96 bunarčica su nakalemljene sa T.gondii. 200 sveže uzgajenih takizoita se dodaje u svaki od bunarčića sa kulturom, izuzev u 8 kontrolnih bunarčica ( negativni kontrolori). Posle 4 sata inkubacije , razblaženi lekovi se dodaju u kulture. Nitazoksanid (NTZ) i dezacetil nitazoksanid (dNTZ) su probani u koncentracijama u opsegu izmedju 8. 10"<4>i 40 mg / /L. Lekovi na početku rastvoreni u DMSO, u koncentraciji od 2 mg/ mL, zatim su razblaženi rastvo. po redu dobijani u kulturnoj sredini. Nije dobijen precipitiat. Razblaženi lekovi su dodavani u kulture ( 8 bunarčića za svaki razblaženi) zatim su tanjiri sa kulturama inkubirani 72 h. Kulture su onda fiksirane sa hladnim metanolom. Procena rasta za T. gondii je izvršena pomoću ELISA korišćenjem peroksidaze koja obeležava anti tela T. gondii kod zeca. Vrednosti optičke gustine su zabeležene za svaki bunarčić. Rezultati su predstavljeni pomoću dobijenih OD vrednosti koje su podeljene za svaki bunarčić sa kulturom, naspram koncentracije leka u kulturi. Statističke analize koje su sadržane u regresionoj analizi sa 95 % intervala koji su pouzdani i odredjivanja krivih za dozni odgovor, od OD vrednosti koje su proizvedene za svaki lek. Jedan tanjir je obojen sa Giemsa za ispitivanje citopatičkog efekta u kulturama.Tri odvojena eksperimenta su ostvarena. U svakom eksperimentu, dva tanjira sa kulturama se koriste za svako jedinjenje; u svakom tanjiru sa kulturom, 8 repliciranih bunarčića se koristi za svaku koncentraciju leka.

Rezultati :

Slični rezultati su dobijeni u tri niza eksperimenata. Grafičko predstavljanje rezultata za.jedan reprezentativan, eksperiment za svaki lek je pokazano na slik.

5 a, b, c i 6 a, b, c.

Nitazoksanid ( slik. 5 a. b. c) :

Nije uoče inhibitorski efekat za koncentracije u opsegu izmedju 10-4 mg / I i 0.3 mg / I. Značajan efekat je uočen za koncetracije >0.6 mg / L, sa kompletnom inhibicijom rasta Toxoplasme za koncetracije > 2.5 mg / L. Kako bilo, uočena je znatna toksičnost ćelijskog monosloja za koncentracije >2.5 mg/ L. Mikroskopska ispitivanja monosloja pokazuje da NTZ, u koncentraciji od 1.25 mg /L izaziva citopatički efekat na ćelijama koje žive kao paraziti na telu domaćina, sa (fižičkim povećanjem parazitofosforskih vakuola i smanjenje broja intra-celularnih parazita. Od regresione analize, može da se proceni oko 50% inhibiranih koncentracija na 1.2 mg/L

Deacetil nitazoksanid ( slik. 7 a. b. c) :

Slični rezultati su dobijeni sa deacetil nitazoksanidom : nema efekta za koncentracije koje su u opsegu izmedj 10"<4>i 0,3 mg./ L, inhibicije koncentracij

>0.6 mg/ L, i značajna toksičnost za koncentracije > 2.5 mg / L. 50% inhibirane koncentracije može se proceniti na 1.2 mgVL Dobijeni rezultati su reproduktibilni za tri odvojena eksperimenta, sa procenom inhibitorskog efekta leka na ponovoljenim kulturama za svaku koncenraciju leka. I za NTZ i deacetil NTZ, značajna inhibicija rasta Toxoplasma se može dobiti na na koncentracijama od približno 1.2 mg/L, sa promenom parazitofosforaste vakuole ali ne i značajnijih promena samog parazita. Ovi rezultati pokazuju da ovi lekovi imaju dobru aktivnost protiv T. gondii, i da se može očekivati in vivo terapeutski efekat na osnovu dobijanja koncentracija od približno 1 mg/1 u serumu ili tkivima.

PRIMER VI

MYCOBACTERIA

Nadjeno je da Nitazoksanid ima antimikrobsku aktivnost naspram TB organizama. Sledeća tabela pokazuje ogled za MIC od nitazoksanid i tizoksanid naspram Mvcobacterium intracellular tehnikom sa razblaženim agarom. Ovi rezultati su zasnovani na nekoliko eksperimenata , od kojih svaki traaje 3 nedelje za postupak razblaživanja agarom sa Middlebrook agarom. Rezultati koji su dobijeni pokazuju da nitazoksanid ima MIC naspram Micobacteria od 2 u,g/ ml i tiazoksanid ima MIC od 4 u.g/ ml, korišćenjem soja standardnih Mvzobacterium intracellular iz ATCC, korišćenjem standardnog ogleda razblaženog agara. MIC za Nitazoksanid i tizoksanid za Mvcobacteria intracellulare

7H11 agara za tri nedelje. Za ovaj eksperiment je korišćen, stanardni soj, M. intracellular ATCC 13950. Slik. 7 je grafikon zasnovan na ogledu za efikasnost naspram mvcobacteria koje rastu na tečnom medijumu koji sadrži hranljive sastojke pogodne za uzgajanje mikoroorganizama. Koristi se MTS kolorimetrijski ogled koji dozvoljava da se odredi rast za 4 dana pre nego za 3 nedelje kao i sa postupkom brojanja na agaru. Kao što se može videti iz rezultata na slic. 7, kada se 72 h pošto je kultura začeta dodaje nitazoksanid, odmah se javlja efekat na produženi rast poredjenjem sa rastom u jedinstvenom kontrolnom medijumu. Doza od 3 u.g / ml nitazoksanida zaustavlja rast u naredna 24 h a onda se naknadno u naredna 2 dana, javlja slab rast . Doza od 50 mg/ ml je kompletno bakteriostatska za sve vreme od 144 h m, za kulturu.

PRIMER VII CRVPTOSPORIDIUM PARVUM

Efekat od nitazoksanida se proba protiv Crvptosporidium parvum kod miša koji je zaražen za potrebe eksperimenta.Nitazoksanid je zastupljen od Romark Laboratories, L.C., Tampa, Florida. Puna doza za čoveka (1 g/ na dan za t dana tj. 7

g) je modifikovan za upotrebu kod miševa prema Padžetu i Barnsu. Covečija doza je pomnožena sa 0.0026 za miša (težina približno 20 g) da bi se dobila ukupna

količina leka potrebna za svakog domaćina ujutro i uveče za 7 narednih dan .

Svaki miš prima 2.6 mg/ dan (7000 mg x 0.0026/7). Doze su davane preko usta plastičnom brizgalicom sa okruglim vrhom. Dvadesetoro odojčadi miševa starih dva dana su zaraženi davanjem oralnim putem 100, OOo oocista od Crvptosporidium parvum koji su dobijeni od zaraženog mladog govečeta. Pre nego što su davani mišu, oocisti su sakupljani korišćenjem šećernog rastvora prema tehnici opisanoj od strane Fayer-a & Ellisa. Uzet je Analni bris od svakog miša i ispitivano je dnevno korišćenje modifikovane Niehl-Neelsen tehnike bojenja opisane od Graczvk et al. Košuljica od oocista postaje vidljiva u fekalijama posle 2 dana po inficiranju oralnim putem životinje. Trećeg dana prateći infekciju životinja , 10 miševa prima 1.3 mg nitazoksanida, od jutra do mraka, u sedam narednih dana dok su preostalih 10 miševa čuvani kao nelečeni kontrolni primerci. Analni bris se dnevno dobija za svaki od 7 dana od lečenja i svaki od 7 dana dovodi do kraja eksperimenta. Oocisti su suspendovani u ulju i prebrojavani na po 100 polja pod mikroskopom. Rezultati : Rezultati prikazani u tabeli koja sledi jasno pokazuju da nitazoksanid koji je davan u vidu dnevne doze od 2.6 mg / dan za sedam uzastopnih dana efikasan protiv Criptosporidium parvum u smanjenju broja oocista u fekalijama zaraženog miša kada se uporedi sa kontrolnim životinjama. Probni lek snižava broj košuljica oocista u 6 od 10 miševa koji su podvrgnuti tretmanu na kraju trećeg dana lečenja. Na kraju tretmana 7 dana, postoji potpun smanjenje košuljica oocista, sve životinje koje su podvrgnute tretmanu imaju negativno prisustvo oocista u stolici kada se uporede sa kontrolnim miševima koji nisu podvrgnuti tretmanu. Ovaj efekat traje najmanje 7 dana po tretmanu kao što je pokazano ispitivanja o negativnom prisustvu oocista posmatranim 3 i 7 dana po završetku tretmana.

BR. DETEKTOVANIH OOCISTA PO POLJU POTOPLJENOM U ULJU

PRIMER VIII

MYCOBACTERIUM

Nitazoksanid je uporedjen naspram joniazidnih antibiotika. Protokol koji koristi BCG (Bacille de Calmette et Guerin) kao soj mikobakterija. Osetljivost ovog sloja je ista kao i od M. tuberculosis, ali je ovaj soj neškodljiv i tako ne zahteva viši nivo sadržaja sredstva za tuberkulozu. 4mg/ na dan po mišu u 0.2 ml suncokretovog ulja je davano mišu. Rezultati kod miševa tretiranih nitazoksanidom su uporedivi sa grupom primljenih joniazida.

PRIMER IX

FASCIOLA HEPATICA

Dejstvenost In vitro za nitazoksanid i dezacetil-nitazoksanid je testirana protivFasciola Hepatica.Odrasla F. hepatica je dobijena iz žučnih kanala jetre od tri govečeta koja su proglašena neizlečivim naspram fasciolosis (genom trematode koja živi u jetri) u laboratoriji za medicinsku dijagnostiku u veterini, u Lujzijani kod Hardv's Meat Packers, Bunkie, LA. Trematode su ispirane u sterilnom sonom rastvoru 1h i prenesene u sterilan rastvor od RPMI (pH 7.4) dodatna 3 h. Trematode su držane u sterilnom RPMI-zečijem serumu (50 :50 v/v) ili sterilnom RPMI (pH 7.4)

preko noći na 37 °C sa 5 % C02- Kultura in vitro (37 °C C02) su napredovale prema modifikaciji postupka od.lbarra i Dženkinsa (Z. Parasitenkd. 70 :655-661, 1984). Koristeći tehniku u sterilnim uslovima, trematode su ispirane dva puta 2-3 minuta u Hanksovom uravnoteženom rastvoru soli (pH 7.2) i stavljane su pojedinačno u "bunarčice" od posude sa šest primarnih zasada Linbro kulture koji sadrži 10 ml alikvota od označenih razblaženih -rastvora lekova u sredini kulture. Potonji se sastoji od sterilnog RPMI-zečijeg seruma (50 : 50 v/v) sa

sa 2% zečijim serumom plus 100 ppm penicilina i 100 ppm streptomicina. Korišćene su samo one trematode koje su imale normalnu aktivnost i morfologiju. Zalihe rastvora NTZ ili njegovog D-NTZ metabolita obezbedjene od strane Romark, su rastvorene u DMSO (2000 u.g/ ml) i razblažene u kulturnoj sredini, korišćenjem volumetrijskih balona od 100 ml, da bi se dobile specifične koncentracije leka ( 100, 50, 25, 10, 5, 3, 1 u.g / ml). Dve trematode koje su služile za kontrolu (proba eksperimenta pomoću paralelnog eksperimenta) su bile uključene u svaki replikat, jedna u sredinu kulture sa RBC koja nije bila isposredovana i jedna u sredinu kulture sa RBC koja nije bila natopljena lekovima.Trematode su ispitivane na efikasnost lečenja lekom što se manifestuje smrću, narušenom pokretljivošću ili morfološkim promenama ako se uporedi sa kontrolnim trematodama koje nisu tretirane, korišćenjem panela osvetljenog odpozadi i osvetljenih 3X uvećanih sočiva.

Rezultati: Eksperiment1: Za D-NTZ, trematode u tretmanima od 50 i 100 u.g su na umoru ili su mrtve untar jednog sata. 4 od 7 parazita iz roda trematoda sa tretmanom od 25 u.g su na umoru, dva su aktivna, i jedan tromi parazit ostaje živ posle četiri sata. Na 10 u,g, uočena je smanjena aktivnost na 1,3 ili 4 časa i svi su na umoru ili mrtvi za 7 h. Smanjena aktivnost kod nekih individua se vidi za 24 h u grupama od 5 mg i 3 u.g sa nešto sporijim početkom na 3 u.g ; za 50h sve su mrtve u posudama za tretman od 3 u.g i 5u.g, izuzev jednog usporenog parazita u svakoj grupi. Nešto usporenija aktivnost je uočena u grupi od 1u.g na 42-74 h i samo 3 aktivna i jedan parazit koji je na umoru ostaju živi posle 91 h; za 115 sati preostaje samo jedan usporeni parazit u grupi od 1 / g. Posmatrana je smrtnost u kontrolnim uzorcima sa RBC grupom za 66 h (jedan parazit), 91 h (jedan parazit) i 115 h ( četiri parazita). Kod onih kontro. uzoraka bez RBC grupe, svi su živi za 91 hi jedan je umro posle 115 h.Eksperiment2: Za NTZ, uočena je nešto veća aktivnost sa ranijim efektima na ukupan rezultat pokretljivosti i smrtnosti u osam replikata kada se poredi sa rezultatima za D-NTZ. U grupama od 100, 50 i 25 u.g svi paraziti su mrtvi ili skoro mrtvi za 1h, izuzev jednog parazita iz grupe od 25 u.g koji je uginuo za tri sata. Smanjenje pokretljivosti koje je izazvano davanjem leka u dozama, moze se videti u svakoj od ostalih grupa koje su lečene lekovima sa početkom posle sat vremena. Na 10 u,g, samo je jedan parazit opstao 16 h. U grupi od 5 u.g, samo su tri parazita aktivna posle šest sati i nijedan nije aktivan za 16 h. Po isteku

23 h, samo 2 usporena parazita u grupi od 3 u.g ostaju živa, oni umiru po isteku 41

h. Za grupu od 1 mg/ I, jedan parazit umire posle 16 h, tri posle 41 h i pet posle

74 h ; 3 parazita ostaju aktivna posle 91 h i jedan parazit ima aktivnost posle 115

h. Smrt parazita u grupama sa visokim dozama (25, 50, 100 mg) je bila brza i praćena je sa kontrakcijama i "uvijanjem trbuha". Pri nižim nivoima davanja leka, većina parazita je usporena za neko vreme i postaje mlitavija kada su mrtve ili skoro mrtve. Kontaminacija postaje ograničena eksperimentalnim rezultatima kod nekih replikata počev od 91 h. Za eksperiment sa D-NTZ, glavni bakterijski i fungicidalni prekomerni rast koji ide zajedno sa smrtnošću se javlja posle 115 h, u dva "replika plejta" (sekundarni zasadima). Za eksperiment sa NTZ, prekomerna smrtnost parazita u svim sekundarnim zasadima(replika plejt) se javlja posle 91 ( dva replikata) i 115 h (5 replikati). 139 sati posmatranja se ne smatraju validnim zbog generalne kontaminacije najvećeg broja tanjira.

Zaključci:

. Snažna efikasnost nitazoksanida kod parazita je utvrdjena eksperimentima sa obadva testirana leka. Nešto veća aktivnost u uništavanju parazita je posmatrana protivF. hepatica,za nitazoksanid a zatim za dezacetil-nitazoksanid, glavni metabolit, koji treba da je aktivan na nivou jetre. Brza smrt parazita se javlja za 1h u in vitro D-NTZ opsegu davanja leka > 50 u,g, za 4 sata na 25 jig i 6-7 sata na 10

u.g. Deset u.g, može da bude obim isporuke ciljnog leka kroz odgovarajući jednokratni tretman ukoliko farmakokinetički rezultat pokazuje da je nivo tkiva održavan > 6-8 sati po pojedinačnom tretmanu. Snažna aktivnost usmrćivanja parazita od 74 h ( tri dana ) je posmatrana za oba jedinjenja u opsegu davanja leka u dozama od 3 i 5 mg. Pristup produženog opstanka, koji nije isti za kontrolne parazite koji nisu lečeni lekovima je posmatran na nivou davanja leka u dozama od 1 mg ; isporuka ovih nivoa leka parazitima u tkivima jetre u 3 do 4 dana može zato imati neodgovarajući terapeutski efekat na parazite.

P RIMER X

FASCIOLA GIGANTICA

Nitazoksanid je proban protiv nesazrelih i odraslih Fasciola gigantica u zečevima koji su zaraženi u eksperimentu. Učaurene larveFasciola gigantica(EMC) su sakupljane na listu celofana 28-35 dana posle infekcije od pužaL. calludiod stranelarve Fasciola giganticakoja se izleže iz jaja parazita korišćenjem tehnike opisane od Abdel-Gani kada su larve dnevno izložene veštačkom svetlu, 30 minuta u čistoj dehlorizovanoj vodi. Rezultujuće učaurene larve (EMC) su zaštićene na 4 °C u frižideru 5 do 8 dana ispod površine vode sve dok su korišćene za inficiranje eksperimentalnih životinja. Četrdeset (40) Boscat zečeva, svaki težine od 1.5 do 2 kg, su uključeni u studiju i dodeljeni dvema tretiranim grupama od 20 životinja. Životinje iz grupe 1 su zaražene oralnim putem sa 35-40 učaurenih larvi zamotanih u list loćike i gurnutih na koren jezika životinja. Usta od životinje su rukom držana zatvorenim sve dok nisu progutale učaurene larve. Ova grupa 1 životinja je korišćena da testira efikasnost nitazoksanida protiv (larvi)u nezrelom stadijumu ( starih 4-5 nedelja)Fasciola gagantica.Životinje iz grupe 2 su zaražene oralnim putem sa 10-15 učaurenih larvi, kao što je ranije naznačeno, i korišćene su za testiranje efikasnosti nitazoksanida protiv rano sazrelih parazita (> starih 10 nedelja). Deset životinja iz grupe 1 prima 35 mg nitazoksanida, ujutro i uveče, u 7 uzastopnih dana 4 nedelje po njihovom inficiranju u nezreloj fazi ciklusa parazita. Deset preostalih životnja iz grupe 1 su čuvani kao kontrolni uzorci koji nisu podvrgnuti tretmanu. Deset životinja iz grupe 2 primaju 35 mg nitazoksanida, ujutro i uveče, u sedam narednih dana 10 nedelja po njihovom inficiranju u zreloj (razvijenoj) fazi parazita. 10 preostalih životinja iz grupe 2 su sačuvane kao kontrolni uzorci koji nisu podvrgnuti tretmanu. Sve životinje su hranjene sa suvim obrocima do kraja eksperimenta. Sedam dana po davanju zadnje doze nitazoksanida, svi zečevi iz svake od grupa su žrtvovani. Površina jetre ispitivana je na prisustvo nekrotičnih migrirajućih brazdi koji se premeštaju naročito u nezreloj fazi ciklusa parazita. Ove nekrotične oblasti su isptivane korišćenjem dve hirurške igle da bi se izvukli premešteni juvenilni paraziti prema tehnici opisanoj od El-Bahy. Jetre su isečene u male komade naračito oko migrirajućih brazdi i potopljene pod mikroskopom da bi se izvukli postojeći paraziti. Abdomalna šupljina i crevne površine su ispirane sa toplom vodom. Voda se onda sakuplja, prosejava i ispituje radi identifikacije juvenilnih parazita. Svi sakupljeni paraziti, kao i njihovi delovi su sakupljeni i kod tretitanih i netretiranih životinja u obadve grupe 1 i 2. Zivi paraziti se pojavljuju kao obojene glave čiode, jasno pokazujući netaknute delove opne, koji se lako izvlače iz tkiva jetre korišćenjem tople vode, dok su mrtvi paraziti prilikom gubitka boje sivkasti i pokazuju slomljenu nekrotičnu površinu. Efikasnost nitazoksanida se izračunava korišćenjem fomule koja je pokazana ispod :

% efikasnosti

Gde je : a = broj parazita dobijenih iz fekalija kontrolnih životinja

b= broj parazita dobijenih iz fekalija tretiranih životinja

Rezultati

Rezultati studije kao što je naznačeno u tabeli 7 pokazuju značajan pad u broju nezrelih parazita dobijenih iz jetre zeca u obradjenoj grupi kada se uporede sa kontrolnom grupom. Srednja vrednost procenta redukcije je izračunata kao 46.77 % ( opseg : 40-60 %).

Na početku potpuno razvijenog stadijuma infekcije, nitazoksanid pokazuje kompletan efekat (100 % smanjenje ) i posle ispitivanja jetre tretiranog zeca se ne mogu videti crvi uporedjenjem sa kontrolnim životinjama koje nisu lečene kao što je pokazano u tabeli 8.

Nitazoksanid koji je davan u dozama od 70 mg/ dan za 7 uzastopnih dana umereno je efikasan protiv nezrelog stadijuma Fasciola gigantica i potpuno efikasan protiv potpuno zrelog stanja parazita.

PRIMER XIII

SCHISTOSOMA

Nitazoksanid je testiran protivSchistosoma mansoniiSchistosoma hematobiumna eksperimentalno zaraženom mišu. Četrdeset (40) belih miševa, teških 30 do 50 grama su odredjeni za dve grupe za tretman od 20 životinja po grupi. Prva grupa je inficirana sa 300-500 oslobodjenih aktivnih larvi Schistosoma mansoni koje su suspendovane u 0.25 ml destilovane vode i davane svakom mišu intraperitonealnim ubrizgavanjem. Druga grupa je zaražena na isti način ali sa larvamaSchistosoma hemotobium.Ove dve grupe su onda čuvane ukupno 70 dana u laboratoriji. Sedamdeset dana po inficiranju životinja, deset miševa iz svake grupe je tretirano sa 1.3 mg nitazoksanida koji je davan oralnim putem, ujutro i uveče, za sedam uzastopnih dana. Sedam dana po završetku tretmana veliki miševi su žrtvovani i gliste su izvadjene iz jetre svake od životinja polivanjem korišćenjem mlake vode (37°C). Brojane su ekstrahovane šistozome za sve tretmane i kontolne životinje. Efikasnost nitazoksanida je izračunata primenom formule koja je pokazana niže:

Rezultati

Rezultati pokazani u tabeli 9 i 10 jasno pokazuju da nitazoksanid koji je davan u dnevnim dozama od 2.6 mg / dan za sedam uzastopnih dana efikasniji protivSchistosoma hematobiumgde je posmatrano smanjenje (broja) glista od 82.85 % kada se uporedi sa kontolnim životinjama dok protivSchistostoma mansoni,smanjenje broja glista dostiže samo 59.91 % protiv kontrolnih miševa. Ovi rezultati su saglasni sa izveštajem Abaza et al., kod pacijenata gde nitazoksanid nije bio efikasan protivS. mansonikao što je pokazano pozitivnim računom za broj jaja posle tretmana nitazoksanidom.

Claims (64)

1. Oralna farmaceutska kompozicija obuhvata kao aktivno sredstvo barem jedno jedinjenje koje je izabrano iz grupe koja se sastoji od: jedinjenja sa formulom (I) jedinjenja sa formulom (II) gde je pomenuto aktivno, sredstvo u obliku aktivnih čestica sa veličinom čestica manjom od 200 (im i srednjom veličinom čestice većom od 5 u.m.

2. Kompozicija prema patentnom zahtevu 1, gde je srednja veličina pomenutih aktivnih čestica u čvrstom stanju izmedju 10 i 100 u,m.

3. Kompozicija prema patentnom zahtevu 1, gde je srednja veličina pomenutih aktivnih čestica u čvrstom stanju izmedju 20 i 50 u.m.

4. Kompozicija prema patentnom zahtevu 1, gde manje od 10% težine pomenutih aktivnih čestica u čvrstom stanju ima srednja vrednost veličine čestice veću od 100 [im.

5. Kompozicija prema patentnom zahtevu 1, gde najmanje 50% težine pomenutih aktivnih čestica u čvrstom stanju ima srednja vrednost veličine čestica koja je manja od 50 um.

6. Kompozicija prema patentnom zahtevu 1, gde manje od 10% težine pomenutih aktivnih čestica u čvrstom stanju ima srednju vrednost veličine čestice manju od 5 um

7. Sastav prema patentnom zahtevu 1, u kojem je faktor raspodele za pomenute aktivne čestice u čvrstom stanju izmedju 0.8 i 2, pomenuti faktor raspodele je izračunat pomoću sledece formule: u kojoj je Fgo%faktor raspodele na 90%;

3*90% je maksimalna veličina čestice za frakcije čestica koje odgovaraju 90% pomenutih aktivnih čestica u čvrstom stanju, i

^10% je maksimalna veličina čestice za frakcije čestica koje odgovaraju 10% pomenutih aktivnih čestica u čvrstom stanju.

8. Kompozicija prema patentnom zahtevu 1, u kojem je faktor raspodele za pomenute aktivne čestice u čvrstom stanju izmedju 1.1 i 1.9, pomenuti faktor raspodele je izračunat pomoću sledeće formule: u kojoj je F90%faktor raspodele na 90%;

^90% je maksimalna veličina čestice za frakcije čestica koje odgovaraju 90% pomenutih aktivnih čestica u čvrstom stanju, i

^10% je maksimalna veličina čestice za frakcije čestica koje odgovaraju 10% pomenutih aktivnih čestica u čvrstom stanju.

9. Oralna farmaceutska kompozicija obuhvata kao aktivno sredstvo barem jedno jedinjenje koje je izabrano iz grupe koja se sastoji od: jedinjenja sa formulom (I) jedinjenja sa formulom (II) i poboljšanje stabilnosti količine farmaceutski prihvatljive kiseline.

10. Kompozicija prema patentnom zahtevu 9, gde je farmaceutski prihvatljiva kiselina odabrana iz grupe koja se sastoji od limunske kiseline, glutaminske kiseline, cilibarne kiseline, etansulfonske kiseline, sircetne kiseline, vinske kiseline, askorbinske kiseline, metansulfonske kiseline, fumarne kiseline, adipinske kiseline, jabučne kiseline i njihove smeše.

11. Kompozicija prema patentnom zahtevu 9, u kojem je odnos težine za farmaceutski prihvatljivu kiselinu/ težine za pomenute aktivne čestice u čvrstom stanju, izmedju 0.01 i 0.5.

12. Kompozicija prema patentnom zahtevu 9, u kojoj je odnos težine za farmaceutski prihvatljivu kiselinu/ težine za pomenute aktivne čestice u čvrstom stanju, izmedju 0.03 i 0.2.

13. Upotreba barem jednog jedinjenja odabranog iz grupe koja se sastoji od jedinjenja sa formulom (I) i jedinjenja sa fromulom (II): kao aktivnog sredstva za proizvodnju farmaceutskih kompozicija za lečenje infekcije kod imunokomprimovanih sisara od strane mikoorganizama koji su odabrani iz grupe koja se sastoji odCryptosporidium parvum, Isospora belli, Enterocytzoon bieneusi, Encephalitozoon intestinaiis, Mycobacterium tubercu/ osis, Mycobacterium avium intracef/ ulare, Pneumocystis carniiiToxoplasma gondii.

14. Upotreba kao prema patentnom zahtevu 13, gde je pomenuto aktivno sredstvo u obliku aktivnih čestica sa veličinom koja je manja od 200 u.m i srednjom veličinom čestice koja je veća od 5 u.m.

15. Upotreba kao prema patentnom zahtevu 13, gde je pomenuto aktivno sredstvo u obliku čestica sa srednjom vrednosti veličine čestice izmedju 20 i 50 u.m.

16. Upotreba kao i u patentnom zahtevu 13, gde pomenuta farmaceutska kompozicija dalje obuhvata najmanje jednu farmaceutski prihvatljivu so.

17. Upotreba kao prema patentnom zahtevu 16, gde je pomenuta farmaceutski prihvatljiva kiselina odabrana od grupe koja se sastoji od limunske kiseline, glutaminske kiseline, cilibarne kiseline, etansulfonske kiseline, sirćetne kiseline, vinske kiseline, askorbinske kiseline, metansulfonske kiseline, fumarne kiseline, adipinske kiseline, jabučne kiseline i njihove smeše.

18. Upotreba kao prema patentnom zahtevu 13, gde je pomenuto aktivno sredstvo jedinjenje sa formulom (I).

19. Upotreba farmaceutske kompozicije kao prema patentnom zahtevu 13, gde je pomenuto aktivno sredstvo jedinjenje sa formulom (II).

20. Upotreba barem jednog jedinjenja odabranog iz grupe koja se sastoji od jedinjenja sa formulom (I), i jedinjenja sa formulom (II): kao aktivnog sredstva za proizvodnju farmaceutske kompozicije za lečenje parazitske infekcije trematoda.

21. Upotreba kao prema patentnom zahtevu 20, gde je trematoda odabrana iz grupe koja se sastoji odSchistosoma Fasciola, Fasciolopsis, Dicrocoelium, Heterophyes, i Metagonimus.

22. Upotreba kao prema patentnom zahtevu 20, u kojem je trematoda odabrana iz grupe koja se sastoji odSchistosoma mansoni, Schistosoma haematobium, Schistosoma mekongi, Schistosoma japonicum, Schistosoma intercalatum;Fasciola hepatica, Fasciola gigantica, Fasciolopsis biski;iDicrocoelium dentriticum, Heterophyes heterophyes,iMetagonimus yokogawa.

23. Upotreba kao prema patentnom zahtevu 22, gde je pomenuto aktivno sredstvo u obliku aktivnih čestica sa srednjom vrednošcu veličine čestica manjom od 200 u.m i srednjom vrednošcu veličine čestica većom od 5u.m.

24. Upotreba kao prema patentnom zahtevu 23, gde je pomenuto aktivno sredstvo u obliku čestica sa srednjom vrednošću čestica izmedju 20 i 50 u.m.

25. Upotreba kao prema patentnom zahtevu 22, gde pomenuta farmaceutska kompozicija dalje obuhvata barem jednu farmaceutski prihvatljivu kiselinu.

26. Upotreba kao prema patentnom zahtevu 25, gde je pomenuta farmaceutski aktivna kiselina odabrana iz grupe koja se sastoji od limunske kiseline, glutaminske kiseline, cilibane kiseline, etansulfonske kiseline, sircetne kiseline, vinske kiseline, askorbinske kiseline, metansulfonska kiselina, fumarna kiselina, adipinska kiselina, jabučne kiseline i njihove smeše.

27. Upotreba kao prema patentnom zahtevu 25, gde je odnos težine farmaceutski prihvatljive kiseline/ težine pomenutih aktivnih čestica izmedju 0.01 i 0.5.

28. Upotreba kao prema patentnom zahtevu 22, gde je pomenuto aktivno sredstvo jedinjenje sa formulom (I).

29. Upotreba kao prema patentnom zahtevu 22, gde je pomenuto aktivno sredstvo jedinjenje sa formulom (II).

30. Farmaceutska pasta za mesnu primenu, pomenuta pasta obuhvata : kao aktivno sredstvo, čvrste čestice od najmanje jednog jedinjenja odabranog iz grupe koja se sastoji od: jedinjenja sa formulom (I) jedinjenja sa formulom (II) pomenute čestice imaju veličinu čestica manju od 200u.m i srednju vrednost veličine čestica manju od 5 u.m; barem jedno sredstvo za zgušnjavanje (tečnosti); barem jedno sredstvo za kvašenje; i barem jednu farmaceutski prihvatljivu kiselinu, pH paste izmedju 2 i 6.

31. Farmaceutska pasta kao prema patentnom zahtevu 30, gde pomenuta pasta dalje obuhvata barem jedan aditiv koji je odabran iz grupe koja se sastoji iz cetil alkohola, derivata glicerida, propilen glikola, i njihove smeše.

32. Farmaceutska kompozicija za oralnu primenu sadrži aktivno sredstvo koje je postalo zrnasto u prisustvu sredstva za granulaciju, u kojem je; pomenuto aktivno sredstvo u obliku čvrstih aktivnih čestica od najmanje jednog jedinjenja koje je odabrano iz grupe koja se sastoji od : jedinjenja sa formulom (I) jedinjenja sa formulom (II) i u kojem pomenute aktivne čestice imaju veličinu koja je manja od 200 um i srednju vrednost veličine čestice koja je veća od 5 um.

33. Kompozicija prema patentnom zahtevu 32, u kojem je pomenuto aktivno sredstvo izabrano iz grupe koja se sastoji od polivinilpirolidona, vode, alkohola, saharoze, hidroksil celuloze i njihove smeše.

34. Kompozicija prema patentnom zahtevu 32, u kojem pomenute granulirane aktivne čvrste čestice sadrže barem jednu farmaceutski prihvatljivu kiselinu.

35. Kompozicija prema patentnom zahtevu 34, gde je pomenuta farmaceutski prihvatljiva kiselina odabrana iz grupe koja se sastoji od limunske kiseline, glutaminske kiseline, cilibarne kiseline, etansulfonske kiseline, sircetne kiseline, vinske kiseline, askorbinske, metansulfonska kiselina, fumarna kiselina, adipinska kiselina, jabučna kiselina i njihove smeše.

36. Kompozicija prema patentnom zahtevu 34, gde je odnos težine farmaceutski prihvatljive kiseline/ težine pomenutog aktivnog sredstva izmedju 0.01 i 0.5.

37. Farmaceutska kompozicija za oralnu primenu koja sadrži aktivno sredstvo, sredstvo za kvašenje i derivat škroba, u kojoj je : pomenuto aktivno sredstvo u obliku čvrstih aktivnih čestica od barem jednog jedinjenja koje je izabrano od grupe koja se sastoji od : jedinjenja sa formulom (I) jedinjenja sa formulom (II) i u kojem pomenute čestice imaju veličinu manju od 200 um i srednju vrednost veličine čestice koja je veća od 5 um.

38. Farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 37, dalje obuhvata barem jednu farmaceutski prihvatljivu kiselinu.

39. Farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 37, u kojoj su aktivne čestice granulirane u prisustvu sredstva za granuliranje da bi se formiralo sredstvo za granuliranje koje sadrži od 2 do 99.97% od težine pomenutog aktivnog jedinjenja i od 0.03 do 10% težine granuliranog sredstva.

40. Farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 39, gde je pomenuto granulirano sredstvo izabrano izmedju grupa koje se sastoje od polivinilpiroiidona, vode, alkohola, saharoze, hidroksil celuloze i njihove smeše.

41. Tečna suspenzija od aktivnog sredstva za oralnu primenu, pomenuta suspenzija sadrži : aktivno sredstvo, čvrste čestice od barem jednog jedinjenja koje je izabrano iz grupe koja se sastoji od : jedinjenja sa formulom (I) jedinjenja sa formulom (II) gde je pomenuto aktivno sredstvo u obliku aktivnih čestica koje imaju veličinu manju od 200 um i srednju vrednost veličine čestice veću od 5 um ; i barem jedno farmaceutski prihvatljivu kiselinu, pH suspenzije izmedju 2 i 6.

42. Suspenzija prema patentnom zahtevu 41, u kojoj je pH suspenzije izmedju 3 i 5.

43. Suspenzija prema patentnom zahtevu 41, dalje obuhvata sredstvo za granulaciju.

44. Farmaceutska kompozicija koja sadrži aktivno sredstvo, na barem jednom od jedinjenja koje je izabrano od grupe koja se sastoji od : jedinjenja sa formulom (I) jedinjenja sa formulom (II) i obuhvata dalje poboljšanje stabilnosti količine farmaceutski prihvatljive kiseline.

45. Kompozicija prema patentnom zahtevu 44, gde je farmaceutski prihvatljiva kiselina odabrana iz grupe koja se sastoji od limunske kiseline, glutaminske kiseline, ćilibarne kiseline, etansulfonske kiseline, sirćetne kiseline, vinske kiseline, askorbinske kiseline, metansulfonske kiseline, fumarne kiseline, adipinske kiseline, jabučne kiseline i njihove smeše.

46. Kompozicija prema patentnom zahtevu 45, gde je pomenuta farmaceutski prihvatljiva kiselina limunska kiselina.

47. Kompozicija prema patentnom zahtevu 45, gde je pomenuta farmaceutski prihvatljiva kiselina askorbinska kiselina.

48. Farmaceutska kompozicija koja sadrži aktivno sredstvo, na barem jednom od jedinjenja odabranom iz grupe koja se sastoji od: jedinjenja sa formulom II i farmaceutski prihvatljive kiseline u količini koja je dovoljna da obezbedi pH pomenute farmaceutske kompozicije izmedju 2 i 6 kada je pomenuta farmaceutska kompozicija u kontaktu sa vodom, kada je težinski odnos farmaceutski prihvatljive kiseline prema farmaceutski prihvatljivoj kompoziciji izmedju 0.01 i 0.5.

49. Kompozicija prema patentnom zahtevu 48, gde je težinski odnos farmaceutski prihvatljive kiseline prema farmaceutski prihvatljivoj kompoziciji izmedju 0.03 i 0.2.

50. Kompozicija prema patentnom zahtevu 48, gde je pomenuta kompozicija u čvrstom obliku za doziranje, i gde su pomenute čestice granulirane u prisustvu barem jednog sredstva za granuliranje da bi se formirale granulirane aktivne čestice u čvrstom stanju.

51. Kompozicija prema patentnom zahtevu 48, gde pomenute aktivne čestice pre granuliranja imaju veličinu manju od 200 u.m i srednju vrednost veličine čestice veću od 5 p.m.

52. Kompozicija prema patentnom zahtevu 51, gde je srednja vrednost veličine za pomenute aktivne čestice izmedju 10 i 100 (im.

53. Kompozicija prema patentnom zahtevu 50, gde pomenute granulirane aktivne čestice u čvrstom stanju obuhvataju od 2 do 99.97% od težine pomenutog aktivnog jedinjenja i od 0.03 do 10% težine granuliranog sredstva.

54. Kompozicija prema patentnom zahtevu 50, gde je pomenuto granulirano sredstvo izabrano izmedju grupa koje se sastoje od polivinilpirolidona, vode, alkohola, saharoze, hidroksil celuloze i njihove smeše.

55. Kompozicija prema patentnom zahtevu 50, gde je u granuliranim aktivnim česiticama u čvrstom stanju odnos težina farmaceutski prihvatljive kiseline prema farmaceutski prihvatljivoj kompoziciji izmedju 0.01 i 0.5.

56. Kompozicija prema patentnom zahtevu 50 , gde je pomenuta je farmaceutski prihvatljiva so odabrana iz grupe koja se sastoji od limunske kiseline, glutaminske kiseline, cilibarne kiseline, etansulfonske kiseline, sircetne kiseline, vinske kiseline, askorbinske kiseline, metansulfonske kiseline, fumarne kiseline, adipinske kiseline, jabučne kiseline i njihove smeše.

57. Kompozicija prema patentnom zahtevu 45, gde je pomenuta kompozicija u obliku suspenzije čvrstih čestica za barem jedno jedinjenje sa formulom I i formulom II u tečnosti.

58. Kompozicija prema patentnom zahtevu 57, gde su pomenute aktivne čestice pre formiranja pomenute suspenzije granulirane u prisustvu barem jednog sredstva za granuliranje da bi se formirale granulisane aktivne čestice u čvrstom stanju.

59. Kompozicija prema patentnom zahtevu 57, gde je pomenuta tečnost voda.

60. Kompozicija prema patentnom zahtevu 57, gde je pH za pomenutu suspenziju izmedju 2 i 6.

61. Kompozicija prema patentnom zahtevu 57, gde je pH za pomenutu suspenziju izmedju 3 i 5.

62. Kompozicija prema patentnom zahtevu 45, gde je pomenuta kompozicija u obliku paste koja sadrži aktivne čestice od barem jednog jedinjenja sa formulama I i II, sredstvo za kvašenje, i barem jedno sredstvo za zgušnjavanje (tečnosti).

63. Kompozicija prema patentnom zahtevu 62, gde je farmaceutski prihvatljiva so odabrana iz grupe koja se sastoji od limunske kiseline, glutaminske kiseline, ćilibarne kiseline, etansulfonske kiseline, sirćetne kiseline, vinske kiseline, askorbinske kiseline, metansulfonske kiseline, fumarne kiseline, adipinske kiseline, jabučne kiseline i njihove smeše.

64. Kompozicija prema patentnom zahtevu 62, gde pomenute aktivne čestice imaju veličinu manju od 200 um, manje od 10 % težine pomenutih čestica ima veličinu veću od 100 um, manje od 50 % pomenutih čestica ima veličinu veću od 50 um, i manju od 10 % težine pomenutih čestica sa veličinom manjom od 5 mm.