RS57250B1 - Jedinjenje benzotiofena - Google Patents

Description

Opis

OBLAST TEHNIKE

[0001] Predmetni pronalazak se odnosi na jedinjenje benzotiofena koje je korisno kao aktivni sastojak farmaceutske kompozicije, posebno, farmaceutske kompozicije za lečenje visceralnog bola, inflamatornog bola, bola usled osteoartritisa, neuropatskog bola, ili fibromijalgije. Pored toga, pronalazak se odnosi na agens za sprečavanje i/ili lečenje inflamatornog bola, bola usred osteoartritisa, neuropatskog bola, ili fibromijalgije koji sadrži aktivator srednje provodljivosti za kalijumov kanal koji je aktiviran kalcijumom (u daljem tekstu naznačen kao aktivator IK1 kanala).

STANJE TEHNIKE

[0002] Kalijumov kanal aktiviran kalcijumom je eksprimiran u različitim životinjskim ćelijama, i igra važnu ulogu u regulisanju ćelijskih funkcija. To jest, kalijumov kanal aktiviran kalcijumom vrši izlučivanje kalijuma otvaranjem kanala kao odgovor na povećanje unutarćelijskog kalcijuma u ekscitabilnim i neekscitabilnim ćelijama, i reguliše membranske potencijale izazivanjem naknadne hiperpolarizacije. Kalijumov kanal aktiviran kalcijumom je klasifikovan kao kanal velike provodjivosti (BK), kanal male provodljivosti (SK), i kanal srednje provodljivosti (IK). U ovim kanalima, potvrđeno je da je IK kanal eksprimiran u limfocitima, crvenim krvnim zrncima, fibroblastima, vaskularnim endotelijalnim ćelijama, epitelijumu disajnih puteva, gastrointestinalnom traktu, perifernim nervima, dorzalnim ganglijama, i slično i nagovešteno je da je IK kanal uključen u bolesti koje njih ciljaju (Current Medicinal Chemistry, 2007, tom 14, str. 1437-1457). Dodatno, iz činjenice da je otkriveno da IK1/SK dvostruki otvarač poboljšava visceralnu preosetljivost i abnormalno kretanje creva (Gastroenterology, 2008, tom 134, izdanje 4, dodatak 1, str. A-544, T1386), predložena je mogućnost lečenja sindroma iritabilnog creva (irritabile bowel syndrome -IBS).

[0003] Sa druge strane, pokazano je da je IK1 kanal eksprimiran u senzornom nervnom sistemu, ali nema promene u nivou ekspresije kod modela sa neuropatskim bolom i modela sa inflamatornim bolom (Neuroscience, 2005, tom131, str. 161-175) i pokazano je da je IK1 uključen u analgetsko delovanje PPAR agoniste (The Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics, 2006. tom 319, str. 1051-1061). Međutim, određeno mišljenje nije dobijeno za vezu između IK1 kanala i poremećaja bola. Osim toga, bilo je malo izveštaja koji pokazuju da je aktivator IK1 kanala efikasan kod inflamatornog bola, bola usred osteoartritisa, neuropatskog bola, ili fibromijalgije, koristeći modele bolesti kod životinja. U ovom pogledu, WO2008/054435 i WO02/062745 odnose se na modulaciju provodljivosti kalijumskih kanala aktiviranih kalcijumom za lečenje bola, između ostalog.

OBJAVA PREDMETNOG PRONALASKA PROBLEMI KOJI ĆE BITI REŠENI PRONALASKOM

[0004] Predmetni pronalazak obezbeđuje novo jedinjenje koje je korisno kao aktivni sastojak leka, posebno, farmaceutske kompozicije za sprečavanje i/ili lečenje visceralnog bola, inflamatornog bola, bola usred osteoartritisa, neuropatskog bola, ili fibromijalgije.

[0005] Pored toga, pronalazak se odnosi na agens za sprečavanje ili lečenje inflamatornog bola, bola usred osteoartritisa, neuropatskog bola, ili fibromijalgije koji sadrži aktivator IK1 kanala.

SREDSTVA ZA REŠAVANJE PROBLEMA

[0006] Predmetni pronalazači sproveli su intenzivna ispitivanja o aktivatorima IK1 kanala, i kao rezultat, pronašli su da jedinjenje benzotiofena predmetnog pronalaska ima odlična dejstva, čime se završava pronalazak.

[0007] To jest, predmetni pronalazak se odnosi na jedinjenje formule (I) ili njegovu so, i farmaceutsku kompoziciju koja sadrži jedinjenje formule (I) ili njegovu so i farmaceutski prihvatljiv ekscipijens.

(U formuli,

X je -O-, -CH2-, -NH-, ili -N(niži alkil)-,

n je ceo broj od 1 do 3,

R<1>je -H, halogen, ili niži alkil,

R<2>i R<3>su svaki isti ili različiti jedan od drugog, i oni su -H, halogen, niži alkil, ili halo-niži alkil,

R<4>je -H ili -Lk-NH-R<0>,

Lk je niži alkilen ili veza,

R<0>je niži alkil, -niži alkilen -OH, ili cikloalkil,

pod uslovom da u slučaju gde R<4>je -H, X je -N(niži alkil)-, i

R<5>je -H ili niži alkil.)

[0008] Pored toga, ukoliko nije drugačije naznačeno, kada su simboli u određenoj hemijskoj formuli u predmetnoj specifikaciji korišćeni takođe u drugoj hemijskoj formuli, isti simbol ima isto značenje.

[0009] Osim toga, potvrđeno je farmakološkim testovima koji koriste modele bolesti životinja da je aktivator IK1 kanala efikasan kod inflamatornog bola, bola usred osteoartritisa, neuropatskog bola, ili fibromijalgije, čime se završava pronalazak.

[0010] To jest, predmetni pronalazak se odnosi na agens za sprečavanje i/ili lečenje inflamatornog bola, bola usred osteoartritisa, neuropatskog bola, ili fibromijalgije koji sadrži aktivator IK1 kanala kao aktivni sastojak.

[0011] Osim toga, predmetni pronalazak se odnosi na farmaceutsku kompoziciju za lečenje visceralnog bola, inflamatornog bola, bola usred osteoartritisa, neuropatskog bola, ili fibromijalgije koja sadrži jedinjenje formule (I) ili njegovu so.

[0012] U međuvremenu, farmaceutska kompozicija uključuje agens za lečenje visceralnog bola, inflamatornog bola, bola usred osteoartritisa, neuropatskog bola, ili fibromijalgije koji sadrži jedinje formule (I) ili njegovu so.

[0013] Osim toga, predmetna objava se odnosi na:

(1) primenu jedinjenja formule (I) ili njegove soli za proizvodnju farmaceutske kompozicije za lečenje visceralnog bola, inflamatornog bola, bola usred osteoartritisa, neuropatskog bola, ili fibromijalgije;

(2) primenu jedinjenja formule (I) ili njegove soli za lečenje visceralnog bola, inflamatornog bola, bola usred osteoartritisa, neuropatskog bola, ili fibromijalgije;

(3) jedinjenje formule (I) ili njegovu so za lečenje visceralnog bola, inflamatornog bola, bola usred osteoartritisa, neuropatskog bola, ili fibromijalgije; i

(4) metodu za lečenje visceralnog bola, inflamatornog bola, bola usred osteoartritisa, neuropatskog bola, ili fibromijalgije koja obuhvata administriranje efikasne količine jedinjenja formule (I) ili njegove soli subjektu.

[0014] U međuvremenu, termin "subjekat" je ljudsko biće ili druga životinja kod kojih postoji potreba za sprečavanjem ili lečenjem, i u skladu sa određenim tehničkim rešenjem, ljudsko biće kojem je potrebno sprečavanje ili lečenje.

EFEKTI PRONALASKA

[0015] Jedinjenje formule (I) ili njegova so ima efekat aktivacije IK1 kanala, i može da bude primenjeno kao agens za sprečavanje i/ili lečenje visceralnog bola, inflamatornog bola, bola usred osteoartritisa, neuropatskog bola, ili fibromijalgije.

[0016] Pored toga, aktivator IK1 kanala može takođe da bude primenjen kao agens za sprečavanje i/ili lečenje inflamatornog bola, bola usred osteoartritisa, neuropatskog bola, ili fibromijalgije.

TEHNIČKA REŠENJA ZA IZVOĐENJE PRONALASKA

[0017] U daljem tekstu, pronalazak će biti opisan detaljno.

U predmetnoj specifikaciji, "niži alkil" je linearni ili razgranati alkil koji ima 1 do 6 ugljenikovih atoma (takođe pod nazivom kao C1-6alkil; broj ugljenika je u daljem tekstu označen na isti način.), i njegovi primeri uključuju metil, etil, n-propil, izopropil, n-butil, izobutil, sek-butil, terc-butil, n-pentil, n-heksil, i slično. U drugom tehničkom rešenju, niži alkil je C1-4alkil, u dodatnom tehničkom rešenju, niži alkil je metil, etil, n-propil, ili tercbutil, u još daljem tehničkom rešenju, niži alkil je metil, u još daljem tehničkom rešenju, niži alkil je linearni ili razgranati alkil koji ima 4 ugljenikova atoma (C4alkil), i u još daljem tehničkom rešenju, niži alkil je terc-butil.

[0018] U specifikaciji, "halo-niži alkil" je niži alkil supstituisan sa 1 do 5 halogenih atoma. U drugom rešenju, halo-niži alkil je niži alkil substituisan sa 1 do 3 halogenih atoma, i u daljem rešenju, halo-niži alkil je -CF3.

[0019] U specifikaciji, "niži alkilen" je linearni ili razgranati C1-6alkilen, i njegovi primeri uključuju metilen, etilen, trimetilen, tetrametilen, pentametilen, heksametilen, propilen, metil metilen, etil etilen, 1,2-dimetil etilen, 1,1,2,2-tetrametil etilen, i slično. U drugom rešenju, niži alkilen je C1-4alkilen, u daljem rešenju, niži alkilen je C4alkilen, i u još daljem rešenju, niži alkilen je metilen.

[0020] U specifikaciji, "halogen" znači F, Cl, Br, ili I.

[0021] U specifikaciji, "cikloalkil" je zasićena ugljovodonična prstenasta grupa koja ima 3 do 10 ugljenikovih atoma (C3-10), i može da ima most. Njeni primeri uključuju ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, cikloheptil, ciklooktil, adamantil, i slično. U drugom tehničkom rešenju, cikloalkil je cikloalkil koji ima 3 do 8 ugljenikovih atoma (C3-8cikloalkil), i u dodatnom tehničkom rešenju, cikloalkil je ciklobutil.

[0022] Tehnička rešenja pronalaska su prikazana ispod.

(1) Jedinjenje formule (I) i njegova so, u kojem R<1>je -H, -F, ili -CH3, u drugom rešenju, R<1>je -H ili niži alkil, u daljem rešenju, R<1>je -H ili -CH3, u još daljem rešenju, R<1>je -H, u još daljem rešenju, R<1>je halogen, u još daljem rešenju, R<1>je -F, u još daljem rešenju, R<1>je niži alkil, i u još daljem rešenju, R<1>je -CH3.

(2) Jedinjenje formule (I) i njegova so, u kome R<2>je -H ili halogen, u drugom tehničkom rešenju, R<2>je -H, -F, ili -Cl, u dodatnom tehničkom rešenju, R<2>je -H, u još daljem tehničkom rešenju, R<2>je halogen, i u još daljem tehničkom rešenju, R<2>je -F ili -Cl.

(3) Jedinjenje formule (I) i njegova so, u kome je R<3>halogen ili halo-niži alkil, u drugom tehničkom rešenju, R<3>je -F, -Cl, ili -CF3, u daljem tehničkom rešenju, R<3>je halogen, u još daljem tehničkom rešenju, R<3>je -F ili -Cl, u još daljem tehničkom rešenju, R<3>je - Cl, u još daljem tehničkom rešenju, R<3>je halo-niži alkil, i u još daljem tehničkom rešenju, R<3>je -CF3.

(4) Jedinjenje formule (I) i njegova so, u kome R<4>je -Lk-NH-R<0>.

(5) Jedinjenje formule (I) i njegova so, u kome Lk je niži alkilen, u drugom tahničkom rešenju, Lk je C1-4alkilen, i u dodatnom tehničkom rešenju, Lk je -CH2-.

(6) Jedinjenje formule (I) i njegova so, u kome R<0>je C4alkil, -C4alkilen -OH ili C3-8cikloalkil, u drugom tehničkom rešenju, R<0>je C3-8cikloalkil, u dodatnom tehničkom rešenju, R<0>je ciklobutil, u još daljem tehničkom rešenju, R<0>je C4alkil, i u još daljem tehničkom rešenju, R<0>je terc-butil.

(7) Jedinjenje formule (I) i njegova so, u kome R<5>je -H ili -CH3, i u drugom tehničkom rešenju, R<5>je -H.

(8) Jedinjenje formule (I) i njegova so, u kome X je -O- ili -CH2-, u drugom tehničkom rešenju, X je -O-, i u dodatnom tehničkom rešenju, X je -CH2-.

(9) Jedinjenje formule (I) i njegova so, u kome n je 2.

(10) Jedinjenje formule (I) i njegova so, koje je kombinacija dva ili više tehničkih rešenja kao što je opisano u (1) do (9).

[0023] Pored toga, specifični primeri kombinacije u (10) uključuju sledeća rešenja.

(11) Jedinjenje formule (I) i njegova so, u kome R<1>je niži alkil, R<2>je -H, R<3>je halogen, R<4>je -Lk-NH-R<0>, Lk je -CH2-, R<0>je C3-8cikloalkil, R<5>je -H, X je -O-, i n je 2.

(12) Jedinjenje formule (I) i njegova so, u kome R<1>je -H, R<2>je halogen, R<3>je haloniži alkil, R<4>je -Lk-NH-R<0>, Lk je -CH2-, R<0>je C3-8cikloalkil, R<5>je -H, X je -O-, i n je 2.

(13) Jedinjenje formule (I) i njegova so, u kome R<1>je niži alkil, R<2>je halogen, R<3>je halogen, R<4>je -Lk-NH-R<0>, Lk je -CH2-, R<0>je C3-8cikloalkil, R<5>je -H, X je -O-, i n je 2.

[0024] Pored toga, primeri drugih specifičnih tehničkih rešenja kombinacije u (10) uključuju sledeće (a) do (f).

(a) Jedinjenje formule (I) i njegova so, u kome R<4>je -Lk-NH-R<0>.

(b) Jedinjenje (a) i njegova so, u kome X je -O- ili -CH2-.

(c) Jedinjenje (b) i njegova so, u kome n je 2.

(d) Jedinjenje (c) i njegova so, u kome Lk je -CH2-.

(e) Jedinjenje (d) i njegova so, u kome R<5>je -H.

(f) Jedinjenje (e) i njegova so, u kome R<0>je C4alkil, -C4alkilen -OH, ili C3-8cikloalkil.

[0025] Primeri tehničkih rešenja specifičnih jedinjenja koja su uključena u pronalazak uključuju sledeća jedinjenja i njihove soli:

5-(6-hloro-2-metil-1-benzotiofen-3-il)-2-{(2R)-2-[(ciklobutilamino)metil]morfolin-4-il}benzoeva kiselina,

5-(6-hloro-2-fluoro-1-benzotiofen-3-il)-2-{(2R)-2-[(ciklobutilamino)metil]morfolin-4-il}benzoeva kiselina,

2-{(3R)-3-[(terc-butilamino)metil)piperidin-1-il}-5-[6-(trifluorometil)-1-benzotiofen-3-il]benzoeva kiselina,

5-[5-hloro-6-(trifluorometil)-1-benzotiofen-3-il]-2-{(2R)-2-[(ciklobutilamino)metil]morfolin-4-il}benzoeva kiselina, ili

5-(6-hloro-5-(fluoro-2-metil-1-benzotiofen-3-il)-2-{(2R)-2-[(ciklobutilamino)metil]morfolin-4-il}benzoeva kiselina.

[0026] Primeri drugih tehničkih rešenja specifičnih jedinjenja uključenih u pronalazak uključuju sledeća jedinjenja i njihove soli:

Hidrobromid 5-(6-hloro-2-metil-1-benzotiofen-3-il)-2-{(2R)-2-[(ciklobutilamino)metil]morfolin-4-il}benzoeve kiseline,

hidrohlorid 5-(6-hloro-2-fluoro-1-benzotiofen-3-il)-2-{(2R)-2-[(ciklobutilamino)metil]morfolin-4-il}benzoeve kiseline,

hidrohlorid 2-{(3R)-3-(terc-butilamino)metil]piperidin-1-il}-5-[6-(trifluorometil)-1-benzotiofen-3-il]benzoeve kiseline,

hidrohlorid 5-[5-hloro-6-(trifluorometil)-1-benzotiofen-3-il]-2-{(2R)-2-[(ciklobutilamino)metil]morfolin-4-il}benzoeve kiseline, ili

hidrohlorid 5-(6-hloro-5-fluoro-2-metil-1-benzotiofen-3-il)-2-{(2R)-2-[(ciklobutilamino)metil]morfolin-4-il}benzoeve kiseline.

[0027] Jedinjenja formule (I) mogu da budu prisutna kao geometriijski izomeri u zavisnosti od tipova njihovih supstituenata. U predmetnoj specifikaciji, čak u slučajevima kada se jedinjenja formule (I) pojavljuju samo u jednom izomernom obliku, pronalazak obuhvata druge izomere i takođe obuhvata izdvojene izomere ili njihove smeše.

[0028] Pored toga, jedinjenje formule (I) može da ima asimetrične ugljenikove atome ili aksijalnu asimetriju, i optički izomeri koji se baziraju na njima mogu biti prisutni. Pronalazak takođe uključuje izdvojen optički izomer jedinjenja sa formulom (I) ili njegovu smešu.

[0029] Osim toga, opisan je takođe farmaceutski prihvatljiv prolek jedinjenja predstavljenog formulom (I). Farmaceutski prihvatljiv prolek je jedinjenje koje ima grupu koja može da bude pretvorena u amino grupu, hidroksilnu grupu, karboksilnu grupu, ili slično solvolizom ili pod fiziološkim uslovima. Kao grupa koja formira prolek, grupe opisane u Prog. Med., 1985, tom 5, str. 2157-2161, i "Pharmaceutical Research and Development, Drug Design" (Hirokawa Publishing Company), 1990, tom 7, str. 163-198 mogu biti uzete za primer.

[0030] Pored toga, soli jedinjenja formule (I) je farmaceutski prihvatljiva so jedinjenja formule (I), i jedinjenje formule (I) može da formira kiselu adicionu so ili so sa bazom u zavisnosti od tipova njihovih supstituenata. Specifični primeri soli uključuju kisele adicione soli neorganskih kiselina kao što su hlorovodonična kiselina, bromovodonična kiselina, jodovodonična kiselina, sumporna kiselina, azotna kiselina, fosforna kiselina, i slično, i organskih kiselina kao što su mravlja kiselina, sirćetna kiselina, propionska kiselina, oksalna kiselina, malonska kiselina, ćilibarna kiselina, fumarna kiselina, maleinska kiselina, mlečna kiselina, jabučna kiselina, mandelinska kiselina, vinska kiselina, dibenzoil vinska kiselina, ditoluoil vinska kiselina, limunska kiselina, metan sulfonska kiselina, etan sulfonska kiselina, benzen sulfonska kiselina, p-toluensulfonska kiselina, asparaginska kiselina, glutaminska kiselina, i slično, soli neorganskih baza kao što su natrijum, kalijum, magnezijum, kalcijum, aluminijum, i slično, i organskih baza kao što su metilamin, etilamin, etanolamin, lizin, ornitin, i slično, soli različitih amino kiselina kao što su acetilleucin, i slično i derivati amino kiselina, amonijumova so, i slično.

[0031] Osim toga, pronalazak takođe obuhvata različite hidrate ili solvate jedinjenja formule (I) ili njihovu so, i kristalne polimorfne supstance. Pored toga, pronalazak takođe obuhvata jedinjenja označena sa različitim radioaktivnim ili ne-radioaktivnim izotopima.

METODA PRIPREMANJA

[0032] Jedinjenje formule (I) i njegova so mogu da budu pripremljeni primenjivanjem različitih poznatih sintetskih metoda, korišćenjem karakteristika baziranih na njihovoj osnovnoj strukturi ili tipovima supstituenata. Potom, može biti efikasno u tehnologiji pripreme da je funkcionalna grupa supstituisana sa odgovarajućom zaštitnom grupom (grupa koja lako može da bude pretvorena u funkcionalnu grupu) u fazi od polaznog materijala do intermedijera u zavisnosti od tipova funkcionalnih grupa. Kao takva zaštitna grupa, zaštitne grupe opisane u "Greene's Protective Groups in Organic Synthesis (4. izdanje, 2006)" napisane od strane P. G. M. Wuts i T. W. Greene mogu da posluže kao primer, i one mogu biti pogodno odabrane i primenjene u zavisnosti od uslova reakcije. Takvom metodom, prvo, zaštitna grupa je uvedena, reakcija je izvedena, i zaštitna grupa je uklonjena, ako je potrebno. Ovakvim postupanjem, moguće je dobiti željeno jedinjenje.

[0033] Pored toga, prolek jedinjenja formule (I) može da bude pripremljen daljim izvođenjem reakcije uvođenjem specifične grupe u fazi od polaznog materijala do intermedijera na isti način kao što je onaj za iznad opisanu zaštitnu grupu, ili korišćenjem dobijenog jedinjenja formule (I). Reakcija može da bude izvedena primenjivanjem metoda koje su poznate poznavaocima oblasti kao što su uopštena esterifikacija, amidacija, dehidratacija, ili slično.

[0034] U daljem tekstu biće opisane reprezentativne metode pripremanja jedinjenja formule (I). Svaka od metoda pripremanja takođe može biti izvedena sa pozivanjem na reference opisane u opisu. Takođe, metod pripremanja pronalaska nije ograničen na primere koji su opisani ispod.

[Hem. 2]

(U formuli, Hal predstavlja Cl, Br, ili I.)

[0035] Jedinjenje formule (I) uključuje (i) jedinjenje formule (I), u kome R<5>je niži alkil (u daljem tekstu naznačen kao jedinjenje formule (I-1)), i (ii) jedinjenje formule (I), u kome R<5>je -H (u daljem tekstu naznačen kao jedinjenje formule (I-2)). Svaki uopšteni metod pripremanja biće opisan ispod.

(i) Jedinjenje formule (I-1) može da bude pripremljeno od jedinjenja (A) i (B). Reakcija je takozvano Suzuki kuplovanje, u kome je jedinjenje (I) pripremljeno reagovanjem jedinjenja boronske kiseline (A) i jedinjenja (B). Reakcija može da bude izvedena u odsustvu rastvarača, ili rastvarača koji je inertan u odnosu na reakciju, kao što su aromatični ugljovodonici uključujući toluen, ksilen i slično, etri uključujući Et2O, THF, DME, dioksan, i slično, halogenovane ugljovodoonike uključujući DCM, DCE, hloroform, i slično, i aprotične rastvarači uključujući DMF, DMSO, EtOAc, CH3CN, i slično, i pod zagrevanjem do refluksa od sobne temperature. Reakcija se izvodi u prisustvu paladijuma, fosfin liganda, i metalne baze. Kao paladijum, Pd(PPh3)4, Pd(OAc)2, Pd2dba3, i slično može da bude korišćen. Kao fosfin ligand, BINAP, DPPF, PPh3, P(Bu<t>)3i slično može da bude korišćen. Kao metalna baza, Na2CO3, K2CO3, Cs2CO3, NaOBu<t>, K3PO4i slično može da bude korišćen.

(ii) Jedinjenje formule (I-2) može da bude pripremljeno dealkilovanjem R<5>jedinjenja formule (I-1). Na primer, dealkilacija je hidroliza i slično. U slučaju alkalne hidrolize, baze metala kao što su NaOH, KOH, Na2CO3, Cs2CO3, i slično mogu da budu korišćene. U slučaju kisele hidrolize, hlorovodonična kiselina i slično može da bude korišćena. U oba slučaja, temperatura reakcije je od pod hlađenjem ledom do pod uslovom refluksa, i moguće je izvesti reakciju pod uslovima u kojima se substrat ne razgrađuje. Kao rastvarač, alkoholi kao što su MeOH, EtOH, i slično, aprotični rastvarači kao što su DMF, DMSO, i slično, voda ili od njih pomešani rastvarači mogu biti primenjeni.

1

POLAZNI MATERIJAL SINTEZE 1

[0036]

[0037] Polazno jedinjenje (A) može da bude dobijeno reakcijom jedinjenja (1) i jedinjenja borne kiseline kao što je triizopropilborat i slično.

[0038] U reakciji, jedinjenje (1) i jedinjenje borne kiseline kao što je triizopropilborat i slično su pomešani u jednakim količinama, ili bilo koji od njih u većoj količini, smeši je dodat organolitijumski reagens kao što je nBuLi i slično pod hlađenjem poželjno u opsegu od -78°C do 0°C, i dobijeni proizvod je mešan u rastvaraču koji je inertan u odnosu na reakciju ili u odsustvu rastvarača obično na teperaturi od niske do sobne temperature, poželjno 0°C do 30°C, tokom 0.1 sata do 5 dana. Primeri rastvarača primenjenog ovde ukjučuju, ali nisu ograničeni na, ugljovodonike kao što je heksan i slično, i etre kao što je Et2O, THF, i slično sve dok rastvarač ne ometa reakciju.

POLAZNI MATERIJAL SINTEZE 2

[0039]

[0040] Polazno jedinjenje (B) može da bude dobijeno reakcijom jedinjenja (2) i jedinjenja (3).

[0041] U reakciji, jedinjenje (2) i jedinjenje (3) pomešani su u jednakim količinama, ili bilo koji od njih u većoj količini, i smeša je mešana u rastavraču koji je inertan u odnosu na reakciju ili u odsustvu rastvarača, obično tokom 0.1 sata do 5 dana od hlađenja do zagrevanja do refluksa, poželjno 0°C do 80°C. Primeri rastvarača korišćenog ovde uključuju, ali nisu ograničeni na, aromatične ugljovodonike, etre, halogenovane ugljovodonike, DMF, DMSO, EtOAc, CH3CN, i od njih pomešane rastvarače. Kada je reakcija izvedena u prisustvu organske baze ka što je TEA, DIPEA, i slično, ili u prisitvu neorganske baze kao što je K2CO3, Na2CO3, KOH, i slično, ovaj slučaj može biti povoljan u pogledu nesmetanog napretka reakcije.

REFERENCE

[0042]

S. R. Sandler i W. Karo, "Organic Functional Group Preparations", 2. izdanje, tom 1, Academic Press Inc., 1991

"Courses in Experimental Chemistry" (5. izdanje) izdato od strane Hemijskog društva Japana, tom 14 (2005) (Maruzen Co., Ltd.)

POLAZNI MATERIJAL SINTEZE 3

[0043]

(U formuli, Lv predstavlja halogen, -OMs, -OTs ili slično.)

[0044] Jedinjenje (B-1) koje je tehničko rešenje polaznog jedinjenja (B) je dobijeno pretvaranjem jedinjenja (4), koje je dobijeno pomoću reakcije jedinjenja (2) i jedinjenja (3-1), u jedinjenje (5) i nakon toga reakcijom sa jedinjenjem (6). Jedinjenje (4) je dobijeno iz jedinjenja (2) i jedinjenja (3-1) na isti način kao što je opisano u iznad opisanom Polaznom materijalu sinteze 2. Jedinjenje (5) je dobijeno pretvaranjem OH grupe jedinjenja (4) u odlazeću grupu kao što je halogen, -OMs, -OTs, ili slično primenom uobičajenih metoda ("Courses in Experimental Chemistry" (5. izdanje) izdato od strane Hemijskog društva Japana, tom 14 (2005) (Maruzen Co., Ltd.)). U poslednjem koraku, jedinjenje (B-1) dobijeno je reagovanjem jedinjenja (5) i jedinjenja (6) korišćenjem istih uslova kao što je iznad opisano u Polaznom materijalu sinteze 2.

[0045] Jedinjenje formule (I) je izolovano i prečišćeno kao slobodno jedinjenje, njegova so, hidrat, solvat, ili kristalna polimorfna supstanca. So jedinjenja formule (I) može da bude pripremljena uobičajenom reakcijom formiranja soli.

[0046] Izolacija i prečišćavanje su izvedeni primenom uobičajenih hemijskih postupaka kao što su ekstrakcija, frakciona kristalizacija, različiti tipovi frakcione hromatografije, i slično.

[0047] Različiti izomeri mogu da budu pripremljeni odabiranjem pogodnog polaznog jedinjenja, ili mogu da budu razdvojeni korišćenjem razlike u fizičkohemijskim svojstvima između izomera. Na primer, optički izomeri su dobijeni opštim metodama optičke rezolucije (na primer, frakcionom kristalizacijom koja vodi do diastereomerne soli sa optički aktivnom bazom ili kiselinom, ili hromatografijom korišćenjem hiralne kolone ili slično) racemske smeše, i mogu takođe da budu pripremljeni od pogodnog optički aktivnog polaznog jedinjenja.

[0048] Farmakološka aktivnost jedinjenja formule (I) je potvrđena sledećim testovima.

[0049] Takođe, u Test Primerima 2 do 6, 0.5% suspenzija metil celuloze je korišćena kao lek za testiranje.

TEST PRIMER 1: TEST MERENJA AKTIVNOSTI OTVARANJA IK1 KANALA [0050] Ćelije su ((1) T84 ćelije (koje su poznate kao ćelije koje eksprimiraju IK1 kanal) ili (2) humane ćelije koje eksprimiraju IK1 kanal (transgen: NM_002250.2, koristi ćelije: CHO dhfr-)) zasejane u mikroploči sa 384 bunarića tako da bude 12000 ćelija po bunariću. Posle inkubacije preko noći, medijum je isušen, i medijumu je dodato 20 µL FLIPR test reagensa membranskog potencijala (FLIPR test kit membranskog potencijala, proizveden od strane Molecular Devices LLC), što je praćeno inkubacijom na sobnoj temperaturi tokom 1 sata. Intenzitet fluorescencije je izmeren na 530 nm/590 nm, koji je postavljen kao pred-vrednost.

20 µL rastvora za puferovanje koji sadrži lek koji se ispituje (koji sadrži 0.01% pluronsku kiselinu i 20 mM Hepes-NaOH (pH7.4); 0.2% CHAPS u HBSS-u) je dodato, što je praćeno inkubiranjem na sobnoj temperaturi tokom 1 sata, i naknadna vrednost je izmerena. Aktivnost leka koji se ispituje je određena od relativnih vrednosti gde je NS-309 (6,7-dihloro-1H-indol-2,3-dion 3-oksim, proizveden od strane Sigma-Aldrich Co., LLC; 0.2 µM; DMSO rastvor) lečenje postavljeno kao 100%, i DMSO lečenje je postavljeno kao 0%. Vrednost aktivnosti

1

(%) u svakoj koncentraciji je grafički prikazana naspram koncentracije leka za testiranje, i EC50vrednost je izračunata metodom logističke regresije.

[0051] EC50vrednosti otvaranja IK1 kanala nekoliko reprezentativnih Primera jedinjenja u pronalasku prikazane su u sledećoj Tabeli (u Tabeli, Br. znači broj, i Pr znači broj primera jedinjenja. Isto važi i u daljem tekstu.). Tabela 1 prikazuje rezultate kada se primenjuju T84 ćelije, i Tabela 2 prikazuje rezultate kada se primenjuju humane ćelije koje eksprimiraju IK1 kanal (transgen: NM_002250.2, koristi ćelije: CHO dhfr-). Sa P<0.05 u svakom testu, utvrđeno je da postoji značajna razlika.

Tabela 1

Tabela 2

TEST PRIMER 2: EFEKAT NA ABDOMINALNI BOL PUTEM KOLOREKTALNE DISTENZIJE PACOVA

[0052] Nakon što su mužjaci Wistar pacova (CLEA Japan, Inc.) anestezirani sa izofluranom, balon je insertovan u debelo crevo. Nakon buđenja, lek koji se ispituje je oralno administriran, i posle 1 sata, bol u abdomenu koji je izazvan širenjem balona je izmeren kao indikator abdominalnog fleksionog ponašanja. Svaki stimulus (15,30,45, 60 mmHg) ponavlja se tokom 5 minuta u intevalima od 5 minuta. Test značajnih razlika grupe rastvarača i grupe leka koji se ispituje je izveden u vidu poređenja između grupa korišćenjem Student-ovog ttesta ili Dunnett‑ovog testa za višestruku komparaciju. Sa P<0.05 u svakom testu, utvrđeno je da postoji značajna razlika.

[0053] U testu abdominalnog bola putem kolorektalne distenzije pacova efektivnost nekoliko reprezentativnih primera jedinjenja iz pronalaska je prikazana u sledećoj Tabeli (U Tabeli, MED znači minimalna efikasna doza. Isto važi i u daljem tekstu.). Svako jedinjenje iz primera Pr10 ili Pr18 ispoljava značajnu aktivnost u svakoj dozi prikazanoj u sledećoj Tabeli.

Tabela 3

TEST PRIMER 3: INHIBITORNI EFEKAT NA RASPODELU MASE IZMEĐU ZADNJIH UDOVA KOD PACOVA SA OSTEOARTRITISOM INDUKOVANIM ADJUVANSOM

[0054] Ovo je model za ispitivanje inflamatornog bola. 50 µL ubijenih Mycobacterium tuberculosis H37Ra (koje proizvodi DIFCO Laboratories) suspendovanih u tečnom parafinu je supkutano administrirano u stopalo desnog zadnjeg uda ženke Lewis pacova (obezbeđene od strane Charles River Laboratories, Japan) tako da bude 10 mg/mL. Sledećeg dana, rastvarač ili lek koji se ispituje je oralno administriran. Nakon 1 ili 2 sata, raspodela mase između levog i desnog zadnjeg uda je merena primenom Incapacitance Tester-a (proizveden od strane Linton Instrumentation). Test značajne razlike grupe rastvarača i grupe leka koji se ispituje je izveden u vidu poređenja između grupa primenom Student-ovog t-testa ili Dunnettovog testa za višestruku komparaciju. Sa P<0.05 u svakom testu, određeno je da postoji značajna razlika.

[0055] U testu pacova sa artritisom izazvanim adjuvansom efektivnost nekoliko reprezentativnih primera jedinjenja iz pronalaska je prikazana u sledećoj Tabeli. Svako jedinjenje iz primera Pr10, Pr11, Pr14 ili Pr18 je ispoljilo značajnu aktivnost u svakoj dozi prikazanoj u sledećoj Tabeli.

Tabela 4

1

TEST PRIMER 4: INHIBITORNI EFEKAT NA RASPODELU MASE IZMEĐU ZADNJIH UDOVA U MODELU OSTEOARTRITISA KOJI JE INDUKOVAN MONOJODOACETATOM

[0056] Ovaj model je model osteoartritisa, i dejstvo na bol usled osteoartritisa, može da bude procenjeno primenom modela. Ovaj test je izveden na osnovu The Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics, 2010, tom 334, str.955-963. Pod anestezijom izofluranom, 1 mg/mesto rastvora monojodoacetata (u daljem tekstu označen kao MIA) (proizveden od strane Sigma-Aldrich Co., LLC) je pojedinačno administrirano u zglobnu šupljinu desnog kolena mužjaka SD pacova (obezbeđeni od strane Charles River Laboratories, Japan). MIA je rastvoren u fiziološkom rastvoru, i njegovih 50 µL je administrirano korišćenjem igle od 27 gejdža x 0.5 inča. 3 nedelje posle MIA administracije, rastvarač ili lek koji se ispituje je oralno adminitriran. Posle 1 ili 2 sata, raspodela mase između levog i desnog zadnjeg uda je merena primenom Incapacitance Tester-a (izrađen od strane Linton Instrumentation). Test značajne razlike grupe rastvarača i grupe leka koji se ispituje je izveden u vidu poređenja između grupa primenom Student-ovog t-testa ili Dunnett-ovog testa za višestruku komparaciju. Sa P<0.05 u svakom testu, određeno je da postoji značajna razlika.

[0057] Efektivnost u odnosu na model osteoartritisa koji je indukovan monojodoacetatom nekoliko reprezentativnih primera jedinjenja iz pronalaska je prikazana u sledećoj Tabeli. Svako jedinjenje iz primera Pr10, Pr11, Pr14 ili Pr18 je ispoljilo značajnu aktivnost u svakoj dozi prikazanoj u sledećoj Tabeli.

Tabela 5

TEST PRIMER 5: EFEKAT NA VREDNOST PRAGA BOLA U MODELU MIJALGIJE KOJA JE IZAZVANA REZERPINOM

[0058] Ovaj model je model koji imitira bolest fibromijalgiju. Ovaj test je izveden na osnovu Pain, 2009, tom 146, str 26-33. Rezerpin (1 mg/kg) je subkutano administriran mužjacima SD pacova (obezbeđeni od strane Japan SLC,Inc, Japan) jednom dnevno tokom 3 dana. Posle 5 dana, rastvarač ili lek koji se ispituje je oralno administriran. Posle 2 sata, vrednost praga bola izmerena je korišćenjem Randall-Selitto opreme (proizvedena od strane Muromachi Kikai

1

Co., Ltd.) na trbušasti mišić lista. Test značajne razlike grupe rastvarača i grupe kojoj je administriran lek koji se testira izvršen je u poređenju između grupa primenom Student-ovog t-testa ili Dunnett-ovog testa za višestruku komparaciju. Ovde, vrednost dobijena administriranjem rastvarača normalnom pacovu kome nije administriran rezerpin je postavljena kao 100%, i vrednost rezerpin grupe u kojoj je rastvarač administriran je postavljena kao 0%. Sa P<0.05 u svakom testu, određeno je da postoji značajna razlika.

[0059] Kao rezultat, reprezentativno jedinjenje iz primera 10 (Pr10) iz pronalaska prikazalo je stopu poboljšanja veću od 50% pri dozi od 1 mg/kg. Ovaj rezultat je bio značajna aktivnost.

TEST PRIMER 6: DEJSTVO NA VREDNOST PRAGA BOLA KOD VAGOTOMISANIH PACOVA

[0060] Pokazano je da ovaj model je model koji prikazuje simptome kao što je fibromijalgija. Model je napravljen na osnovu Neuroscience, 2009, tom 164, str. 1252-1262. Mužjaci SD pacova (obezbeđeni od strane Japan SLC, Inc, Japan) su anestezirani sa somnopentilom, što je praćeno brijanjem u blizini ksifisternuma. Rez je učinjen duž središnje linije od ksifisternuma do repne strane. Stmak i ezofagus ispod dijafragme su bili izloženi, i vagus nervi na obe strane ezofagusa su presečeni. Mišić i koža su zašiveni po redosledu. 1 do 3 nedelje nakon operacije, potvrđeno je smanjenje vrednosti praga bola. Rastvarač ili lek koji se ispituje je oralno administriran, i posle 2 sata, vrednost praga bola je merena primenom Randall-Selitto opreme (proizvedena od strane Muromachi Kikai Co., Ltd.) u trbušasti mišić lista. Test značajne razlike grupe rastvarača i grupe leka koji se ispituje je izveden u poređenju između grupa primenom Student-ovog t-testa ili Dunnett-ovog testa za višestruku komparaciju. Sa P<0.05 u svakom testu, određena je da postoji značajna razlika.

[0061] Efektivnost nekoliko reprezentativnih primera jedinjenja iz pronalaska je prikazana u sledećoj Tabeli kao stopa poboljšanja kada je vrednost grupe u kojoj je rastvarač administriran u grupu koja je lažno operisana bila postavljena kao 100%, i vrednost grupe u kojoj je rastvarač administriran u grupu koja je operisana bila postavljena kao 0%. Svako jedinjenje iz primera Pr10, Pr14, Pr15 ili Pr18 prikazuje značajnu aktivnost u svakoj dozi prikazanoj u sledećoj Tabeli.

1

Tabela 6

[0062] Iz rezultata gornjih testova, potvrđeno je da različita jedinjenja reprezentativne formule (I) ili njihove soli pokazuju aktivnost otvaranja IK1 kanala. Stoga, pokazano je da jedinjenja pronalaska imaju aktivnost otvaranja IK1 kanala, to jest, efekat aktivacije IK1 kanala.

[0063] Pored toga, iz rezultata iz gornjih testova, pronađeno je da jedinjenje sa formulom (I) ili njegova so pokazuje efektivnost u pogledu uticaja na bol u abdomenu kod pacova usled kolorektalne distenzije, inhibitornog efekta na raspodelu mase između zadnjih udova kod pacova sa artritisom koji je indukovan adjuvansom, inhibitornog efekta na distribuciju mase između zadnjih udova u modelu osteoartritisa koji je indukovan monojodoacetatom, efekta na vrednost praga bola u modelu mijalgije koja je indukovana rezerpinom, i vrednosti praga bola kod vagotomisanog pacova. U skladu sa tim, jedinjenje sa formulom (I) ili njegova so može da bude korišćeno u sprečavanju i/ili lečenju visceralnog bola, inflamatornog bola, bola usred osteoartritisa, neuropatskog bola, ili fibromijalgije. Ovde, visceralni bol, kao određena tehnička rešenja, je IBS simptom (abdominalni bol). Pored toga, bol usred osteoartritisa, je bol usled osteoartritisa.

[0064] Osim toga, iz rezultata iz gornjih testova, utvrđeno je da aktivator IK1 kanala može takođe da bude korišćen za sprečavanje i/ili lečenje inflamatornog bola, bola usred osteoartritisa, neuropatskog bola, ili fibromijalgije.

[0065] Farmaceutska kompozicija koja sadrži jednu ili više vrsta jedinjenja sa formulom (I) ili njegovu so kao aktivni sastojak može da bude pripremljena korišćenjem ekscipijenasa koji su obično korišćeni u oblasti, to jest, ekscipijensi za farmaceutsku izradu, nosači za farmaceutsku izradu, i slično u skladu sa metodama koje se obično koriste. Administriranje može da bude postignuto ili oralnom administracijom pomoću tableta, pilula, kapsula, granula, praškova, rastvora, i slično, ili parenteralnim administriranjem ubrizgavanjem, kao što su intraartikularna, intravenska, ili intramišićna ubrizgavanja, i slično, supozitorijama, oftamološkim rastvorima, mastima za oči, transdermalnim tečnim preparatima, mastima,

1

transdermalnim flasterima, transmukoznim tečnim preparatima, transmukoznim flasterima, inhalatorima, i slično.

[0066] Čvrsta kompozicija za primenu u oralnoj administraciji u skladu sa predmetnim pronalaskom korišćena je u obliku tableta, praškova, granula, ili slično. U takvoj čvrstoj kompoziciji, jedan ili više aktivnih sastojaka pomešani su sa najmanje jednim neaktivnim ekscipijensom. U konvencionalnoj metodi, kompozicija može da sadrži neaktivne aditive, kao što je lubrikant, agens za raspadanje, stabilizator, ili pomoćni agens za rastvaranje. Ako je potrebno, tablete ili pilule mogu da budu obložene sa šećerom ili filmom supstance za gastrično ili enteričko oblaganje.

[0067] Tečna kompozicija za oralnu administraciju sadrži farmaceutski prihvatljive emulzije, rastvore, suspenzije, sirupe, eliksire, ili slično, i takođe sadrži uopšteno primenjivane inertne rastvarače, na primer, prečišćenu vodu ili EtOH. Pored inertnog rastvarača, tečna kompozicija može takođe da sadrži pomoćne agense, kao što je pomoćni agens za rastvaranje, agens za vlaženje, i agens za suspendovanje, zaslađivače, agens za ukus, aromate, i antiseptike.

[0068] Injekcije za parenteralnu administraciju uključuju sterilne vodene ili ne-vodene rastvorne preparate, suspenzije i emulzije. Vodeni rastvarač uključuje, na primer, destilovanu vodu za injekciju i fiziološki rastvor. Primeri nevodenog rastvarača uključuju alkohole kao što je EtOH. Takva kompozicija može dalje da sadrži agens za toničnost, antiseptik, agens za vlaženje, emulgator, agens za dispergovanje, agens za stabilizaciju, ili pomoćni agens za rastvaranje. Oni se sterilišu, na primer, filtracijom kroz filter za zadržavanje bakterija, mešanjem baktericida, ili zračenjem. Pored toga, oni takođe mogu da budu korišćeni pripremanjem sterilne čvrste kompozicije, i rastvaranjem ili suspendovanjem u sterilnoj vodi ili sterilnom rastvaraču za injektiranje pre njihove upotrebe.

[0069] Agens za spoljašnju primenu uključuje masti, gips, kreme, žele, flastere, sprejeve, losione, kapi za oči, masti za oči, i slično. Agensi sadrže opšte primenjivane baze masti, baze losiona, vodene ili nevodene tečne preparate, suspenzije, emulzije, i slično.

[0070] Kao transmukozni agensi kao što su inhaler, transnazalni agens, i slično, primenjeni su oni u obliku čvrste supstance, tečnosti, ili polu-čvrstog stanja, i mogu da budu pripremljeni u skladu sa konvencionalno poznatom metodom. Na primer, poznati ekscipijens, i takođe agens sa podešavanje pH, antiseptik, surfaktant, lubrikant, agens za stabilizaciju, agens za zgušnjavanje, ili slično mogu biti adekvatno dodati tome. Za njihovu administraciju, prigodan uređaj za inhalaciju ili duvanje može da bude korišćen. Na primer, jedinjenje može da bude

1

administrirano samo ili kao prah formulisane smeše, ili kao rastvor ili suspenzija u kombinaciji sa farmaceutski prihvatljivim nosačem, korišćenjem konvencionalno poznatog uređaja ili spreja, kao što je uređaj za inhalaciju izmerene administracije, i slično. Inhalator suvog praha ili slično može da bude za pojedinačnu ili višestruku primenu u administriranju, i suvi prah ili kapsula koja sadrži prah mogu da budu korišćeni. Alternativno, ovo može da bude u obliku kao što je aerosolni sprej pod pritiskom koji koristi odgovarajući agens za izbacivanje, na primer, pogodan gas kao što je hlorofluoroalkan, ugljen dioksid, i slično, ili drugim oblicima.

[0071] U oralnoj administraciji, dnevna doza je generalno od oko 0.001 do 100 mg/kg, poželjno od 0.01 do 30 mg/kg, i poželjnije od 0.01 do 10 mg/kg, po telesnoj masi, administrirana u jednom delu ili u 2 do 4 podeljena dela. U slučaju intravenske administracije, dnevna doza je pogodno administrirana od oko 0.0001 do 10 mg/kg po telesnoj masi, jednom dnevno ili dva ili više puta dnevno. Pored toga, transmukozni agens je administriran u dozi od oko 0.001 do 100 mg/kg po telosnoj masi, jednom dnevo ili dva ili više puta dnevno. Doza se određuje na odgovarajući način u zavisnosti od individualnog slučaja uzimajući u obzir simptome, starost, pol, i slično.

[0072] Iako varira u zavisnosti od puteva administracije, doznih oblika, mesta administriranja, ili tipova ekscipijensa i aditiva, farmaceutska kompozicija predmetnog pronalaska sadrži 0.01 do 100% po masi, i u određenom tehničkom rešenju, 0.01 do 50% po masi jedno ili više vrsta jedinjenja sa formulom (I) ili njegovu so, koja je aktivni sastojak.

[0073] Jedinjenje formule (I) može da bude korišćeno u kombinaciji sa različitim agensima za lečenje ili sprečavanje bolesti za koje se jedinjenje sa formulom (I) smatra efikasnim. U kombinovanoj primeni, ko-administracija ili odvojena administracija jedna za drugom mogu da budu izvedene, ili administracija može da bude izvedena u željenom vremenskom intervalu. Preparati koji bi trebalo da budu ko-administrirani mogu da budu pomešani ili mogu da budu pripremljeni individualno.

PRIMERI

[0074] U nastavku, metode pripremanja za jedinjenje formule (I) biće opisane u više detalja sa osvrtom na Primere. Dalje, predmetni pronalazak nije ograničen na jedinjenja opisana u Primerima kao što je ispod opisano. Pored toga, metode pripremanja polaznih jedinjenja su prikazana u Primerima za pripremanje, i metode pripremanja jedinjenja formule (I) prikazane su u Primerima. Pored toga, metode pripremanja za jedinjenje sa formulom (I) nisu ograničene na metode pripremanja specifičnih Primera kao ispod, ali jedinjenje sa formulom

2

(I) može da bude pripremljeno bilo kojom kombinacijom metoda pripremanja ili metoda koje su poznate obučenom poznavaocu oblasti.

[0075] Pored toga, sledeće skraćenice su korišćene u Primerima, Primerima pripremanja, Tabelama ispod, i specifikaciji. AIBN: 2,2'-azobisizobutironitril, slani rastvor: zasićeni slani rastvor, BINAP: 2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1'-binaftil, CHAPS: 3-[(3-holamidopropil)dimetilamonio]-1-propansulfonat, DCE: dihloroetan, DCM: dihlorometan, DIPEA: diizopropiletilamin, DME: 1,2-dimetoksietan, DMF: N,N-dimetilformamid, DMSO: dimetil sulfoksid, DPPF: 1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen, Et2O: dietil etar, EtOAc: etil acetat, EtOH: etanol, HBSS: Hanksov balansirani slani rastvor, Hepes: 4-(2-hidroksietil)-1-piperazin etansulfonska kiselina, Hepes-NaOH (pH 7.4): vodeni Hepes rastvor čija je pH prilagođena na pH 7.4 sa NaOH, KOBu<t>: kalijum terc-butoksid, MED:minimalna efikasna doza, MeOH: metanol, MgSO4: anhidrovani magnezijum sulfat, Na2SO4: anhidrovani natrijum sulfat, NaOBu<t>: natrijum terc-butoksid, Pd(OAc)2: paladijum (II) acetat, Pd2dba3: tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum(0), Pd(PPh3)4: tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0), P(Bu<t>)3: tri-terc-butilfosfin, PPh3: trifenilfosfin, nBuLi: n-butil litijum, TEA: trietilamin, THF: tetrahidrofuran, i silika gel kolona:hromatografija na koloni sa silika gelom.

-OMs: metansulfoniloksi, i -OTs: p-toluensulfoniloksi.

[0076] Br.: Broj, Prip: Broj primera pripreme jedinjenja, Pr: Broj primera jedinjenja, Ref: Primeri ili Primeri pripremanja na koje se odnose (Na primer, u slučaju gde je Pr10 naveden u koloni Ref za Pr15 u Tabeli koja sledi, prikazuje da jedinjenje primera 15 (Pr15) može da bude pripremljeno na isti način kao što je opisano u tekstu primera od jedinjenja primera 10 (Pr10)), Pod: fizičkohemijski podaci, Str: struktura hemijske formule, i Inf: informacije o optičkoj aktivnosti i soli jedinjenja. (Hiralni predstavlja optički aktivnu supstancu. U slučaju da nije posebno opisana u odnosu na so, predstavlja slobodnu formu. Pored toga, na primer, u slučaju gde HCl je opisan u Tabelama, predstavlja monohidrohlorid.)

[0077] NMR (CDCl3): vrednost hemijskog pomeranja δ<1>H-NMR izmerena u CDCl3rastvaraču, NMR (DMSO-d6): vrednost hemijskog pomeranja δ<1>H-NMR izmerena u DMSO-d6rastvaraču, i NMR (DMSO-d6+ D2O): vrednost hemijskog pomeranja δ<1>H-NMR izmerena dodavanjem D2O u DMSO-d6.

[0078] EI: m/z vrednosti izmerene pomoću EI-MS, ESI: m/z vrednosti izmerene pomoću ESI-MS, APCI: m/z vrednosti izmerene pomoću APCI-MS, i APCI/ESI: m/z vrednosti izmerene pomoću APCI i ESI u isto vreme. Takođe, u slučaju gde postoji ili – na sufiksu za ESI, označava MS vrednost izmerenu u pozitivnom jonskom modu, i - označava MS vrednost izmerenu u negativnom jonskom modu.

[0079] Pored toga, radi pogodnosti, koncentracija mol/L je izražena kao M. Na primer, 1 M vodeni rastvor NaOH znači 1 mol/L vodenog rastvora NaOH.

[0080] Difrakcija X zraka na prahu je izmerena korišćenjem RINT-TTR II proizvedenog od strane Rigaku Corporation pri sledećim uslovima, to jest, cev: Cu, struja u cevi: 300 mA, napon u cevi: 50 kV, širina uzorkovanja: 0.020°, brzina skeniranja: 4°/min, talasna dužina: 1.54056 angstroma, i merenje opsega ugla difrakcije (20): 2.5° do 40°.

[0081] Svaki kristal je redom okarakterisan rendgenskim difraktogramom praha i u difrakciji X zraka na prahu, rastojanje kristalne rešetke ili celokupni šablon važni su u identifikaciji kristala zbog svojstva podataka. Pošto relativni intenzitet može da varira neznatno u zavisnosti od pravca rasta kristala, veličine čestice, ili uslova merenja, nije potrebno striktno tumačiti.

PRIMER 1 PRIPREMANJA

[0082] Rastvor nBuLi u heksanu (1.59 M, 33.6 mL) je dodavan u kapima smeši 6-hloro-1-benzotiofena (6.00 g) i THF-a (180 mL) na -78°C, što je praćeno mešanjem na -78°C tokom 30 minuta. Temperatura reakcione smeše je povećana do -40°C, što je praćeno mešanjem tokom 5 minuta, i zatim je jodometan (10.1 g) dodat tome na -40°C. Temperatura reakcione smeše je povećana do sobne temperature, što je praćeno mešanjem tokom 12 sati. Voda je dodata reakcionoj smeši na sobnoj temperaturi, što je praćeno ekstrakcijom sa EtOAc-om. Organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen preko MgSO4, i zatim koncentrovan pod sniženim pritiskom, čime se dobija 6-hloro-2-metil-1-benzotiofen (6.41 g).

PRIMER 2 PRIPREMANJA

[0083] Smeša 6-hloro-2-metil-1-benzotiofena (6.40 g), hloroforma (100 mL), i bromina (5.88 g) je mešana na sobnoj temperaturi tokom 18 sati, i zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u EtOAc-u, i organski sloj je ispran sa vodom, 10% vodenim Na2S2O3rastvorom, i slanim rastvorom ovim redosledom. Organski sloj je osušen preko Na2SO4i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen na silika gel koloni (sredstvo za rastvaranje: heksan), čime se dobija 3-bromo-6-hloro-2-metil-1-benzotiofen (8.50 g).

PRIMER 3 PRIPREMANJA

[0084] Smeša 6-(trifluorometil)-1-benzotiofena (1.57 g), sirćetne kiseline (8 mL), i N-bromosukcinimida (1.58 g) je mešana na 60°C tokom 18 sati. Reakciona smeša ohlađena do sobne temperature je razblažena sa hloroformom. Organski sloj je ispran sa zasićenim vodenim Na2S2O3rastvorom, zasićenim vodenim Na2CO3rastvorom, vodom, i slanim rastvorom ovim redosledom, osušen preko MgSO4, i zatim koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen na silika gel koloni (sredstvo za rastvaranje: heksan), čime se dobija 3-bromo-6-(trifluorometil)-1-benzotiofen (1.94 g).

PRIMER 4 PRIPREMANJA

[0085] Boran-dimetil sulfidni kompleks (12.4 mL) je dodat smeši 6-hloro-5-fluoro-1-benzotiofen-2-karboksilne kiseline (10.0 g) i THF-a (100 mL) uz hlađenje ledom, što je praćeno mešanjem na sobnoj temperaturi tokom 30 minuta. Dalje, reakciona smeša je mešana na 50°C tokom 4 sata, i dioksan (50 mL) je dodat tome, što je praćeno mešanjem na 80°C tokom 2 sata. Voda je dodata reakcionoj smeši koja je ohlađena ledom, što je praćeno ekstrakcijom sa EtOAc-om. Organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen preko MgSO4, i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen na silika gel koloni (sredstvo za rastvaranje: heksan/EtOAc), čime se dobija (6-hloro-5-fluoro-1-benzotiofen-2-il)metanol (3.83 g).

PRIMER 5 PRIPREMANJA

[0086] (6-Hloro-5-fluoro-1-benzotiofen-2-il)metanol (5.94 g) je rastvoren u DCM-u (59 mL), i tionil hlorid (4.89 g) je dodat tome uz hlađenje ledom, što je praćeno mešanjem na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Tionil hlorid (1.63 g) je dalje dodavan reakcionoj smeši, što je praćeno mešanjem na sobnoj temperaturi tokom 30 minuta. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. EtOAc je dodat ostatku, i organski sloj je ispran sa zasićenim vodenim natrijum bikarbonatom i slanim rastvorom ovim redosledom, osušen preko MgSO4, i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen na silika gel koloni (sredstvo za rastvaranje: heksan), čime se dobija 6-hloro-2-(hlorometil)-5-fluoro-1-benzotiofen (4.93 g).

PRIMER 6 PRIPREMANJA

[0087] Smeša 6-hloro-2-(hlorometil)-5-fluoro-1-benzotiofena (4.93 g) i THF-a (47 mL) je dodata smeši litijum aluminijum hidrida (1.19 g) i THF-a (30 mL) uz hlađenje ledom, što je praćeno mešanjem tokom 30 minuta uz hlađenje ledom. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata, i voda (1.2 mL), 15% vodeni NaOH rastvor (1.2 mL), i

2

voda (3.6 mL) su dodati tome uz hlađenje ledom ovim redosledom, što je praćeno mešanjem na sobnoj temperaturi tokom 30 minuta. Nerastvorljivi materijal je odvojen filtracijom korišćenjem celita, i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen na silika gel koloni (sredstvo za rastvaranje: heksan), čime se dobija 6-hloro-5-fluoro-2-metil-1-benzotiofen (4.02 g).

PRIMER 7 PRIPREMANJA

[0088] Smeša 4-hloro-2,5-difluorobenzaldehida (21.1 g), rodanina (16.7 g), natrijum acetata (39.2 g), i sirćetne kiseline (68 mL) je zagrevana do refluksa tokom 4 sata. Voda (300 mL) je dodata reakcionoj smeši ohlađenoj do sobne temperature, što je praćeno mešanjem tokom 3 sata. Talog je sakupljen filtracijom, ispran sa vodom i osušen pod sniženim pritiskom (34.1 g). Rastvor NaOH (31.7 g) u vodi (284 mL) je dodat dobijenom proizvodu (34.1 g), što je praćeno mešanjem na 80°C tokom 3 sata. Koncentrovana hlorovodonična kiselina (66 mL) je dodata reakcionoj smeši ohlađenoj do sobne temperature, što je praćeno mešanjem na sobnoj temperaturi tokom 30 minuta. Talog je sakupljen filtracijom (29.3 g). Smeša dobijenog proizvoda (29.3 g), DMSO (293 mL), i KOBu<t>(26.2 g) je mešana na 80°C preko noći. Zasićena voda limunske kiseline (450 mL) je dodata reakcionoj smeši ohlađenoj do sobne temperature, što je praćeno mešanjem na sobnoj temperaturi tokom 30 minuta. Talog je sakupljen filtracijom, ispran sa vodom, i osušen pod sniženim pritiskom, čime se dobija 6-hloro-5-fluoro-1-benzotiofen-2-karboksilna kiselina (21.9 g).

PRIMER 8 PRIPREMANJA

[0089] Smeša 6-(trifluorometil)-1-benzotiofen-2-karboksilne kiseline (2.17 g), bakra (0.25 g), i hinolina (8 mL) je mešana na 200°C tokom 5 sati. Reakciona smeša ohlađena do sobne temperature je razblažena sa EtOAc-om. Organski sloj je ispran sa 1 M hlorovodoničnom kiselinom i slanim rastvorom ovim redosledom, osušen preko Na2SO4, i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen na silika gel koloni (sredstvo za rastvaranje: heksan), čime se dobija 6-(trifluorometil)-1-benzotiofen (1.62 g).

PRIMER 9 PRIPREMANJA

[0090] Rastvor nBuLi u heksanu (2.76 M; 18.6 mL) je dodavan u kapima smeši 6-hloro-1-benzotiofena (7.20 g) i THF-a (216 mL) na -78°C, što je praćeno mešanjem na -78°C tokom 30 minuta. Temperatura reakcione smeše je povećana do -40°C, što je praćeno mešanjem tokom 5 minuta, i zatim je N-fluorobenzensulfonimid (21.5 g) dodat tome na -40°C. Temperatura reakcione smeše je povećana do sobne temperature, što je praćeno mešanjem tokom 12 sati. Voda je dodata reakcionoj smeši na sobnoj temperaturi, što je praćeno ekstrakcijom sa EtOAc-om. Organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen na silika gel koloni (sredstvo za rastvaranje: heksan), čime se dobija 6-hloro-2-fluoro-1-benzotiofen (3.12 g).

PRIMER 10 PRIPREMANJA

[0091] Rastvor nBuLi u heksanu (1.59 M; 36.7 mL) je dodavan u kapima smeši 3-bromo-6-hloro-2-metil-1-benzotiofena (8.48 g), triizopropilborata (11.0 g), i THF-a (148 mL) na -78°C pod atmosferom argona, što je praćeno mešanjem na -78°C tokom 30 minuta. Nakon što je temperatura reakcione smeše povećana do sobne temperature, reakciona smeša je mešana tokom 1 sata. 1 M hlorovodonična kiselina je dodata tome, što je praćeno mešanjem na sobnoj temperaturi tokom 30 minuta i ekstrahovanjem sa EtOAc-om. Organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Heksan je dodat ostatku, i talog je prikupljen filtracijom. Filtrirani proizvod je osušen pod sniženim pritiskom, čime se dobija (6-hloro-2-metil-1-benzotiofen-3-il)boronska kiselina (1.47 g). PRIMER 11 PRIPREMANJA

[0092] Rastvor nBuLi u heksanu (2.76 M; 9.1 mL) je dodavan u kapima smeši 6-hloro-2-fluoro-1-benzotiofena (3.11 g) i THF-a (62 mL) na -78°C pod atmosferom argona. Nakon što je temperatura reakcione smeše povećana do -50°C tokom 40 minuta, triizopropilborat (6.27 g) je dodat tome, i temperatura je povećana do sobne temperature, što je praćeno mešanjem tokom 12 sati.1 M hlorovodonična kiselina je dodata reakcionoj smeši na sobnoj temperaturi, što je praćeno mešanjem tokom 15 minuta i ekstrahovanjem sa EtOAc-om. Organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Mešani rastvarač EtOAc i heksana je dodat ostatku, i proizvedeni talog je sakupljen filtracijom. Proizvod sakupljen filtracijom je osušen pod sniženim pritiskom, čime se dobija (6-hloro-2-fluoro-1-benzotiofen-3-il)boronska kiselina (2.81 g).

PRIMER 12 PRIPREMANJA

[0093] Rastvor izopropil magnezijum hlorida u THF-u (2.0 M; 27.2 mL) je dodavan u kapima smeši 1-bromo-2-hloro-5-fluoro-4-metilbenzena (8.10 g) i THF (55 mL) na -10°C pod atmosferom argona, što je praćeno mešanjem na -10°C tokom 45 minuta. Smeša joda (18.4 g) i THF (26 mL) je dodavana u kapima reakcionoj smeši na -75°C, što je praćeno mešanjem na -75°C tokom 3 sata. Zasićeni vodeni Na2S2O3rastvor je dodat reakcionoj smeši na -75°C, što je praćeno mešanjem na sobnoj temperaturi tokom 15 minuta. Zasićeni vodeni

2

natrijum bikarbonat je dodat reakcionoj smeši na sobnoj temperaturi, što je praćeno ekstrakcijom sa EtOAc-om. Organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, i zatim koncentrovan pod sniženim pritiskom, čime se dobija 1-hloro-4-fluoro-2-jodo-5-metilbenzen (9.71 g).

PRIMER 13 PRIPREMANJA

[0094] Metil difluoro(fluorosulfonil)acetat (18.2 mL) i bakar jodid (2.74 g) dodati su smeši 1-hloro-4-fluoro-2-jodo-5-metilbenzena (9.71 g) i DMF (120 mL) na sobnoj temperaturi, što je praćeno mešanjem na 95°C tokom 3.5 sata pod atmosferom argona. EtOAc je dodat reakcionoj smeši ohlađenoj do sobne temperature, što je praćeno mešanjem, i nerastvorljivi materijal je odvojen filtracijom primenom filtracije kroz Celit. Voda je dodata filtratu, što je praćeno ekstrakcijom sa EtOAc-om. Organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen na silika gel koloni (sredstvo za rastvaranje: heksan), čime se dobija 1-hloro-4-fluoro-5-metil-2-(trifluorometil)benzen (5.64 g).

PRIMER 14 PRIPREMANJA

[0095] N-bromosukcinimid (5.19 g) i AIBN (218 mg) su dodati smeši 1-hloro-4-fluoro-5-metil-2-(trifluorometil)benzena (5.64 g) i ugljenik tetrahlorida (85 mL) na sobnoj temperaturi, što je praćeno mešanjem na 80°C tokom 12 sati. Nakon što je reakciona smeša ohlađena do sobne temperature, N-bromosukcinimid (5.19 g) i AIBN (218 mg) su dalje dodati tome, što je praćeno mešanjem tokom 1 dana na 80°C. Zasićeni vodeni natrijum bikarbonat i zasićeni vodeni Na2S2O3rastvor su dodati reakcionoj smeši ohlađenoj do sobne temperature, i praćeno je ekstrakcijom sa hloroform. Organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen na silika gel koloni (sredstvo za rastvaranje: heksan), čime se dobija 1-(bromometil)-5-hloro-2-fluoro-4-(trifluorometil)benzen (3.08 g).

PRIMER 15 PRIPREMANJA

[0096] 4-Metilmorfolin 4-oksid (2.47 g) je dodat smeši 1-(bromometil)-5-hloro-2-fluoro-4-(trifluorometil)benzena (3.08 g) i acetonitrila (31 mL), što je praćeno mešanjem tokom 1 sata u vodenom kupatilu i dodatno na sobnoj temperaturi tokom 1 sata. Zasićeni vodeni amonijum hlorid je dodat reakcionoj smeši uz hlađenje ledom, što je praćeno ekstrakcijom sa EtOAcom. Organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, i koncentrovan pod

2

sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen na silika gel koloni (sredstvo za rastvaranje: heksan/EtOAc), čime se dobija 5-hloro-2-fluoro-4-(trifluorometil)benzaldehid (1.32 g).

PRIMER 16 PRIPREMANJA

[0097] Smeša metil 5-bromo-2-fluorobenzoata (5.00 g), (2S)-morfolin-2-il metanola (3.39 g), DIPEA (4.16 g), i DMSO (25 mL) je mešana na 80°C tokom 36 sati. Voda je dodata reakcionoj smeši ohlađenoj do sobne temperature, što je praćeno ekstrakcijom sa mešanim rastvaračem EtOAc i Et2O. Organski sloj je ispran sa vodom i slanim rastvorom ovim redosledom, osušen preko Na2SO4, i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen na silika gel koloni (sredstvo za rastvaranje: heksan/EtOAc), čime se dobija metil 5-bromo-2-[(2S)-2-(hidroksimetil)morfolin-4-il]benzoat (4.69 g).

PRIMER 17 PRIPREMANJA

[0098] Metansulfonil hlorid (2.35 g) je dodat smeši metil 5-bromo-2-[(2S)-2-(hidroksimetil)morfolin-4-il]benzoata (3.08 g), DCM (46 mL) i TEA (2.83 g) na sobnoj temperaturi, što je praćeno mešanjem na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Zasićeni vodeni natrijum bikarbonat je dodat reakcionoj smeši na sobnoj temperaturi, što je praćeno ekstrakcijom sa hloroform. Organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Smeša ostatka, DMSO (15 mL), i ciklobutilamina (6.63 g) je mešana na 60°C tokom 18 sati. Voda je dodata reakcionoj smeši ohlađenoj do sobne temperature, što je praćeno ekstrakcijom sa mešanim rastvaračem EtOAc i Et2O. Organski sloj je ispran sa vodom i slanim rastvorom ovim redosledom, osušen preko Na2SO4, i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen osnovnom silika gel kolonom (sredstvo za rastvaranje: heksan/EtOAc), čime se dobija metil 5-bromo-2-{(2R)-2-[(ciklobutilamino)metil]morfolin-4-il}benzoat (1.96 g).

PRIMER 18 PRIPREMANJA

[0099] Smeša terc-butil (4-[4-bromo-2-(metoksikarbonil)fenil]-1,4-diazepan-1-karboksilata) (3.00 g), MeOH (10 mL), i rastvora vodonik hlorida u dioksanu (4 M; 10 mL) je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 sata, i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Zasićeni vodeni natrijum bikarbonat je dodat ostatku, što je praćeno ekstrakcijom sa EtOAc-om. Organski sloj je osušen preko Na2SO4, i zatim je koncentrovan pod sniženim pritiskom, čime se dobija metil 5-bromo-2-(1,4-diazepan-1-il)benzoat (1.96g).

PRIMER 19 PRIPREMANJA

2

[0100] DCE (19 mL), sirćetna kiselina (364 mg), i natrijum triacetoksiborohidrid (1.93 g) su mešani sa metil 5-bromo-2-(1,4-diazepan-1-il)benzoatom (950 mg) po ovom redu, acetaldehid (401 mg) je dodat, i zatim je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Zasićeni vodeni natrijum bikarbonat je dodat reakcionoj smeši, što je praćeno snažnim mešanjem tokom 10 minuta i ekstrahovanjem sa hloroformom. Organski sloj je osušen preko Na2SO4i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen osnovnom silika gel kolonom (sredstvo za rastvaranje: heksan/EtOAc), čime se dobija metil 5-bromo-2-(4-etil-1,4-diazepan-1-il)benzoat (624 mg).

PRIMER 21 PRIPREMANJA

[0101] Smeša (6-hloro-5-fluoro-2-metil-1-benzotiofen-3-il)boronske kiseline (598 mg), metil 5-bromo-2-[(2S)-2-(hidroksimetil)morfolin-4-il]benzoata (577 mg), Pd (PPh3)4(202 mg), DME (11.5 mL), i 2 M vodenog Na2CO3rastvora (2.6 mL) je mešana na 80°C tokom 5 sati pod atmosferom argona. Reakciona smeša ohlađena do sobne temperature je ekstrahovana sa mešanim rastvaračem EtOAc i Et2O. Organski sloj je ispran slanim rastvorom, i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen na silika gel koloni (sredstvo za rastvaranje: heksan/EtOAc), čime se dobija metil 5-(6-hloro-5-fluoro-2-metil-1-benzotiofen-3-il)-2-[(2S)-2-(hidroksimetil)morfolin-4-il]benzoat (750 mg).

PRIMER 21-1 PRIPREMANJA

[0102] Smeša (6-hloro-2-metil-1-benzotiofen-3-il)borne kiseline (2.40 g), metil 5-bromo-2-[(2S)-2-(hidroksimetil)morfolin-4-il]benzoata (2.50 g), Pd (PPh3)4(875 mg), DME (50 mL), i 2 M vodenog Na2CO3rastvora (11.4 mL) je mešana na 80°C preko noći pod atmosferom argona. Nakon što je reakciona smeša ohlađena do sobne temperature razblažena sa EtOAcom, nerastvorljivi materijal je uklonjen filtracijom kroz Celit, i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Dobijeni ostatak je prečišćen na silika gel koloni (sredstvo za rastvaranje: heksan/EtOAc), čime se dobija metil 5-(6-hloro-2-metil-1-benzotiofen-3-il)-2-[(2S)-2-(hidroksimetil)morfolin-4-il]benzoat (3.18 g).

PRIMER 22 PRIPREMANJA

[0103] Metansulfonil hlorid (0.28 mL) je dodat smeši metil 5-(6-hloro-5-fluoro-2-metil-1-benzotiofen-3-il)-2-[(2S)-2-(hidroksimetil)morfolin-4-il]benzoata (740 mg), DCM (14.8 mL), i TEA (0.69 mL) uz hlađenje ledom i pod atmosferom argona, i temperatura je povećana do sobne temperature, što je praćeno mešanjem tokom 2 sata. Zasićeni vodeni natrijum bikarbonat je dodat reakcionoj smeši, što je praćeno ekstrakcijom sa hloroform. Organski sloj

2

je ispran slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, i zatim koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen na silika gel koloni (sredstvo za rastvaranje: heksan/EtOAc), čime se dobija metil 5-(6-hloro-5-fluoro-2-metil-1-benzotiofen-3-il)-2-[(2S)-2-{[(metilsulfonil)oksi]metil}morfolin-4-il]benzoat (791 mg).

PRIMER 22-1 PRIPREMANJA

[0104] Metansulfonil hlorid (1.86 g) je dodat smeši metil 5-(6-hloro-2-metil-1-benzotiofen-3-il)-2-[(2S)-2-(hidroksimetil)morfolin-4-il]benzoata (3.18 g), DCM (32 mL), i TEA(2.24 g) uz hlađenje ledom, što je praćeno mešanjem na istoj temperaturi tokom 1.5 sata. Zasićeni vodeni natrijum bikarbonat je dodat reakcionoj smeši uz hlađenje ledom, što je praćeno ekstrakcijom sa hloroform. Organski sloj je osušen preko Na2SO4, i zatim koncentrovan pod sniženim pritiskom, čime se dobija metil 5-(6-hloro-2-metil-1-benzotiofen-3-il)-2-[(2S)-2-{[(metilsulfonil)oksi]metil}morfolin-4-il]benzoat (3.58 g).

PRIMER 1

[0105] Smeša (6-hloro-2-metil-1-benzotiofen-3-il)boronske kiseline (1.02 g), metil 5-bromo-2-{(2R)-2-[(ciklobutilamino)metil]morfolin-4-il}benzoata (898 mg), Pd(PPh3)4(271 mg), DME (29 mL) i 2 M vodenog Na2CO3rastvora (4.7 mL) je mešana na 100°C tokom 18 sati pod atmosferom argona. Voda je dodata reakcionoj smeši ohlađenoj do sobne temperature, što je praćeno ekstrakcijom sa EtOAc-om. Organski sloj je osušen preko MgSO4, i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen osnovnom silika gel kolonom (sredstvo za rastvaranje: heksan/EtOAc), čime se dobija metil 5-(6-hloro-2-metil-1-benzotiofen-3-il)-2-{(2R)-2-[(ciklobutilamino)metil]morfolin-4-il}benzoat (970 mg).

PRIMER 10

[0106] Smeša metil 5-(6-hloro-2-metil-1-benzotiofen-3-il)-2-{(2R)-2-[(ciklobutilamino)metil]morfolin-4-il}benzoata (950 mg), 1 M vodenog NaOH rastvora (9.5 mL), i EtOH (10 mL) je mešana na 50°C tokom 12 sati. Reakciona smeša ohlađena do sobne temperature neutralizovana je sa 1 M hlorovodoničnom kiselinom, i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen na koloni oktadecil silika gela (sredstvo za rastvaranje: 0.001 M hlorovodonična kiselina/dioksan). Eluirana frakcija je koncentrovana pod sniženim pritiskom i pomešana sa EtOH-om. 1 M hlorovodonična kiselina (1.8 mL) je dodata, i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen sa EtOH-om, čime se dobija monohidrohlorid 5-(6-hloro-2-metil-1-benzotiofen-3-il)-2-{(2R)-2-[(ciklobutilamino)metil]morfolin-4-il]benzoeve kiseline (830 mg).

2

PRIMER 25

[0107] Smeša metil 5-(6-hloro-5-fluoro-2-metil-1-benzotiofen-3-il)-2-[(2S)-2-{[(metilsulfonil)oksi]metil}morfolin-4-il]benzoata (1.00 g), DMSO (10 mL), i ciklobutilamina (1.35 g) je mešana na 60°C tokom 12 sati, i dodatno mešana na 80°C tokom 12 sati. Voda je dodata reakcionoj smeši ohlađenoj do sobne temperature, što je praćeno ekstrakcijom sa EtOAc-om. Organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen osnovnom silika gel kolonom (sredstvo za rastvaranje: heksan/EtOAc), čime se dobija metil 5-(6-hloro-5-fluoro-2-metil-1-benzotiofen-3-il)-2-{(2R)-2-[(ciklobutilamino)metil]morfolin-4-il}benzoat (845 mg).

PRIMER 30

[0108] Metansulfonil hlorid (178 mg) je dodat smeši metil 5-(6-hloro-2-metil-1-benzotiofen-3-il)-2-[(3S)-3-(hidroksimetil)piperidin-1-il]benzoata (293 mg), DCM (5 mL), i TEA (207 mg) na sobnoj temperaturi, što je praćeno mešanjem na sobnoj temperaturi tokom 1.5 sata. Zasićeni vodeni natrijum bikarbonat je dodat reakcionoj smeši na sobnoj temperaturi, što je praćeno ekstrakcijom sa hloroformom. Organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Smeša ostatka i DMSO (4 mL), i 1-amino-2-metil-2-propanola (610 mg) je mešana na 60°C tokom 18 sati, i dalje mešana na 80°C tokom 6 sati. Voda je dodata reakcionoj smeši ohlađenoj do sobne temperature, što je praćeno ekstrakcijom sa EtOAc-om. Organski sloj je ispran sa vodom, i slanim rastvorom ovim redolsedom, osušen preko Na2SO4, i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen osnovnom silika gel kolonom (sredstvo za rastvaranje: heksan/EtOAc), čime se dobija metil 5-(6-hloro-2-metil-1-benzotiofen-3-il)-2-[(3R)-3-{[(2-hidroksi-2-metilpropil)amino]metil}piperidin-1-il]benzoat (114 mg).

PRIMER 31

[0109] Smeša metil 5-(6-hloro-2-metil-1-benzotiofen-3-il)-2-{(2R)-2-[(ciklobutilamino)metil]morfolin-4-il}benzoata (2.05 g), 1 M vodenog NaOH rastvora (6.0 mL), i MeOH (15 mL) je mešana na 50°C tokom 19 sati pod atmosferom argona. 1 M hlorovodonična kiselina (6.0 mL) je dodata reakcionoj smeši ohlađenoj do sobne temperature, i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen na silika gel koloni (sredstvo za rastvaranje: hloroform/MeOH). Prečišćeni proizvod je je pomešan sa smešom dioksan/H2O (40 mL/2 mL), i 47% vodeni rastvor bromovodonične kiseline (0.70 mL) je dodat, što je praćeno mešanjem na 60°C tokom 13 sati. Dobijeni proizvod je ohlađen do sobne temperature, i talog je prikupljen filtracijom, čime se dobija monohidrobromid 5-(6hloro-2-metil-1-benzotiofen-3-il)-2-{(2R)-2-[(ciklobutilamino)metil]morfolin-4-il}benzoeva kiselina (1.65 g).

[0110] Na isti način kao metode iznad opisanih Primera pripremanja ili Primera, pripremljena su jedinjenja iz Primera pripremanja i Primera prikazanih u tabelama koje slede.

Tabela 7

1

Tabela 8

2 Tabela 9

Tabela 10

4 Tabela 11

Tabela 12

Tabela 13

Tabela 14

Tabela 15

Tabela 16

Tabela 17

Tabela 18

4

Tabela 19

Tabela 20

Tabela 21

4

Tabela 22

4

Tabela 23

4

Tabela 24

4

Tabela 25

4

Tabela 26

4

INDUSTRIJSKA PRIMENLJIVOST

[0111] Jedinjenje predmetnog pronalaska ima efekat aktivacije IK1 kanala, i može da bude primenjeno kao agens za sprečavanje i/ili lečenje visceralnog bola, inflamatornog bola, bola usred osteoartritisa, neuropatskog bola, ili fibromijalgije.

[0112] Pored toga, prema saznanjima dobijenim u predmetnom pronalasku, aktivator IK1 kanala može takođe da bude primenjen kao agens za sprečavanje i/ili lečenje inflamatornog bola, bola usred osteoartritisa, neuropatskog bola, ili fibromijalgije.

Claims (1)

1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje sa sledećom formulom (I) ili njegova so.

   (U formuli, X je -O-, -CH2-, -NH-, ili -N(C1-6alkil)-, n je ceo broj 1 do 3, R<1>je -H, halogen, ili C1-6alkil, R<2>i R<3>su svaki isti ili različiti jedan od drugog, i oni su -H, halogen, C1-6alkil, ili halo-C1-6alkil, R<4>je -H ili -Lk-NH-R<0>, Lk je C1-6alkilen ili veza, R<0>je C1-6alkil, -C1-6alkilen-OH, ili cikloalkil, pod uslovom da u slučaju gde R<4>je -H, X je -N(C1-6alkil)-, i R<5>je -H ili C1-6alkil.) 2. Jedinjenje ili njegova so u skladu sa patentnim zahtevom 1, gde R<4>je -Lk-NH-R<0>. 3. Jedinjenje ili njegova so u skladu sa patentnim zahtevom 2, gde X je -O- ili -CH2-. 4. Jedinjenje ili njegova so u skladu sa patentnim zahtevom 3, gde n je 2. 5. Jedinjenje ili njegova so u skladu sa patentnim zahtevom 4, gde Lk je -CH2-. 6. Jedinjenje ili njegova so u skladu sa patentnim zahtevom 5, gde R<5>je -H. 7. Jedinjenje ili njegova so u skladu sa patentnim zahtevom 6, gde R<0>je C4alkil, -C4alkilen-OH, ili C3-8cikloalkil. 8. Jedinjenje ili njegova so u skladu sa patentnim zahtevom 1, gde R<1>je C1-6alkil, R<2>je -H, R<3>je halogen, R<4>je -Lk-NH-R<0>, Lk je -CH2-, R<0>je C3-8cikloalkil, R<5>je -H, X je -O-, i n je 2. 9. Jedinjenje ili njegova so u skladu sa patentnim zahtevom 1, gde R<1>je C1-6alkil, R<2>je halogen, R<3>je halogen, R<4>je -Lk-NH-R<0>, Lk je -CH2-, R<0>je C3-8cikloalkil, R<5>je -H, X je -O-, i n je 2. 10. Jedinjenje ili njegova so u skladu sa patentnim zahtevom 7, koje je odabrano od sledeće grupe koja se sastoji od: 5-(6-hloro-2-metil-1-benzotiofen-3-il)-2-{(2R)-2-[(ciklobutilamino)metil]morfolin-4-il}benzoeva kiselina, 5-(6-hloro-2-fluoro-1-benzotiofen-3-il)-2-{(2R)-2-[(ciklobutilamino)metil]morfolin-4-il}benzoeva kiselina, 2-{(3R)-3-[(terc-butilamino)metil)piperidin-1-il}-5-[6-(trifluorometil)-1-benzotiofen-3-il]benzoeva kiselina, 5-[5-hloro-6-(trifluorometil)-1-benzotiofen-3-il]-2-{(2R)-2-[(ciklobutilamino)metil]morfolin-4-il}benzoeva kiselina, i 5-(6-hloro-5-(fluoro-2-metil-1-benzotiofen-3-il)-2-{(2R)-2-[(ciklobutilamino)metil]morfolin-4-il}benzoeva kiselina. 11. Jedinjenje ili njegova so u skladu sa patentnim zahtevom 10, koje je 5-(6-hloro-2-metil-1-benzotiofen-3-il)-2-{(2R)-2-[(ciklobutilamino)metil]morfolin-4-il}benzoeva kiselina ili njena so. 12. Jedinjenje ili njegova so u skladu sa patentnim zahtevom 10, koje je 5-(6-hloro-5-fluoro-2-metil-1-benzotiofen-3-il)-2-{(2R)-2-[(ciklobutilamino)metil]morfolin-4-il}benzoeva kiselina ili njena so. 13. Farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje ili njegovu so u skladu sa patentnim zahtevom 1 i farmaceutski prihvatljiv ekscipijens. 14. Farmaceutska kompozicija u skladu sa patentnim zahtevom 13 za primenu u prevenciji ili lečenju bolesti odabrane iz grupe koja se sastoji od visceralnog bola, inflamatornog bola, bola usled osteoartritisa, neuropatskog bola, i fibromijalgije. 15. Jedinjenje ili njegova so u skladu sa patentnim zahtevom 1 za primenu u prevenciji ili lečenju bolesti odabrane iz grupe koja se sastoji od visceralnog bola, inflamatornog bola, bola usled osteoartritisa, neuropatskog bola, i fibromijalgije. Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Beograd, Kneginje Ljubice 5