RS57757B1 - Jedinjenja n-heteroarila substituisana n-azaspirocikloalkanom i kompozicije za inhibiranje aktivnosti shp2 - Google Patents

Jedinjenja n-heteroarila substituisana n-azaspirocikloalkanom i kompozicije za inhibiranje aktivnosti shp2

Info

Publication number
RS57757B1
RS57757B1 RS20181174A RSP20181174A RS57757B1 RS 57757 B1 RS57757 B1 RS 57757B1 RS 20181174 A RS20181174 A RS 20181174A RS P20181174 A RSP20181174 A RS P20181174A RS 57757 B1 RS57757 B1 RS 57757B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
amino
mmol
substituted
azaspiro
halo
Prior art date
Application number
RS20181174A
Other languages
English (en)
Inventor
Christine Hiu-Tung Chen
Zhuoliang Chen
Michael Dore
Jorge Garcia Fortanet
Rajesh Karki
Mitsunori Kato
Matthew J Lamarche
Lawrence Blas Perez
Troy Douglas Smith
Sarah Williams
John William Giraldes
Bakary-Barry Toure
Martin Sendzik
Original Assignee
Novartis Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Novartis Ag filed Critical Novartis Ag
Publication of RS57757B1 publication Critical patent/RS57757B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D498/10—Spiro-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/4965—Non-condensed pyrazines
    • A61K31/497—Non-condensed pyrazines containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D241/00—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings
    • C07D241/02—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D241/10—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D241/14—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D241/18—Oxygen or sulfur atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D241/00—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings
    • C07D241/02—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D241/10—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D241/14—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D241/20—Nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/10—Spiro-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D491/10—Spiro-condensed systems
    • C07D491/107—Spiro-condensed systems with only one oxygen atom as ring hetero atom in the oxygen-containing ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D495/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D495/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D495/10—Spiro-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
    • C07B2200/07—Optical isomers

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)

Description

Opis
OBLAST PRONALASKA
[0001] Dati pronalazak odnosi se na jedinjenja koja su sposobna za inhibiranje aktivnosti SHP2. Pronalaskom je dalje predstavljen postupak za dobijanje jedinjenja iz pronalaska, farmaceutskih preparata koji sadrže ta jedinjenja i za korišćenje tih jedinjenja i kompozicija u upravljanju bolestima ili poremećajima u vezi sa aberantnom aktivnošću SHP2.
OSNOVA PRONALASKA
[0002] Src Homology-2 fosfataza (engl. Src Homolgy-2 phosphatase - SHP2) je nereceptorska protein tirozin fosfataza koju kodira gen PTPN11, a koja je uključena u mnogobrojne ćelijske funkcije uključujući proliferaciju, diferencijaciju, održavanje ćelijskog ciklusa i migraciju. SHP2 je uključen u prenos signala preko Ras-mitogenom aktivisane protein-kinaze, zatim u signalne puteve JAK-STAT ili fosfoinozitol 3-kinaza-AKT.
[0003] SHP2 poseduje dva N-terminalna Src homology 2 domena (N-SH2 i C-SH2), katalitički domen (PTP) i C-terminalni rep. Dva SH2 domena kontrolišu unutarćelijsku lokalizaciju i funkcionalnu regulaciju SHP2. Molekul se nalazi u neaktivnom obliku, u konformaciji u kojoj je samim sobom inhibisan, koja je dodatno stabilizovana mrežom interakcija koje su uključene u vezivanje, i koja obuhvata ostatke iz N-SH2 i PTP domena. Stimulacija, na primer, citokinima ili faktorima rasta dovodi do promene konformacije i izlaganja katalitičkog mesta, što dovodi do enzimske aktivacije SHP2.
[0004] Mutacije u genu PTPN11, odnosno u proteinu koji on kodira, SHP2, su identifikovane u više bolesti kod ljudi, kao što su Noonan-ov sindrom, Leopard-sindrom, juvenilne mijelomonocitne leukemije, neuroblastom, melanom, akutna mijeloidna leukemija i kanceri dojke, pluća i kolona. Stoga, SHP2 predstavlja veoma privlačan ciljni molekul u razvijanju novih terapija koje bi se koristile u lečenju različitih bolesti. Jedinjenja iz ovog pronalaska zadovoljavaju potrebu za malim molekulima koji inhibišu aktivnost SHP2.
SUŠTINA PRONALASKA
[0005] U jednom aspektu, datim pronalaskom predstavljena su jedinjenja Formule I:
u kojoj je: p odabran od 0 i 1; gde je q odabran od 0 i 1; gde je Y1odabran od CH i N; gde je Y2odabran od CR6i N; gde R1predstavlja –XR1a; u kojoj je R1aodabran iz gurpe koju čine C6-10aril, C3-8cikloalkil, C3-8cikloalkenil i 5-9-očlana heteroarilna grupa koja sadrži od 1 do 4 heteroatoma ili grupe koje su nezavisno odabrane od N, C(O), O i S; gde je pomenuti aril ili heteroaril iz R1asupstituisan sa 1 do 5 R9grupa nezavisno odabranih iz grupe koju čine halo, amino, hidroksi, N3, C1-4alkil, dimetil-amino, hidroksi-supstituisani-C1-4alkil, halo-supstituisani-C1-4alkil, i amino-supstituisani-C1-4alkil; i gde je X odabran uz grupe koju čine veza, S(O)m, O, C(O), COR11, CR10aR10b, NR11; u kojoj je m odabran od 0, 1 i 2; gde je svaka R10ai R10bnezavisno odabrana od halo i C1-4alkil; i gde je R11odabran od vodonika i C1-4alkil; gde su R2ai R2bnezavisno odabrani od vodonika, C1-4alkil, C1-4alkoksi, amino, hidroksi, C3-
8cikloalkil i C1-4alkil-amino; i gde su R3ai R3bnezavisno odabrani od halo, karbonil, C1-4alkil, C1-
4alkoksi, amino, hidroksi, C3-8cikloalkil i C1-4alkil-amino; gde su R4ai R4bnezavisno odabrani iz grupe koju čine vodonik, halo, karbonil, C1-4alkil, C1-4alkoksi, amino, hidroksi, C3-8cikloalkil i C1-4alkil-amino; gde su R5ai R5bnezavisno odabrani iz grupe koju čine vodonik, karbonil, C1-4alkil, C1-4alkoksi, amino, hidroksi, C3-8cikloalkil i C1-4alkil-amino; gde su bilo koje dve grupe odabrane od R2a, R2b, R3a, R3b, R4a, R4b, R5a, R5bi gde R7može da formira 5 do 6-očlani nezasičeni ili delimično zasićeni prsten; gde je R6odabran iz grupe koju čine vodonik, halo, cijano, C1-4alkil, C1-4alkoksi, amino-karbonil, halosupstituisani C1-4alkil, halo-supstituisani C1-4alkoksi, hidroksi-supstituisani C1-4alkil, aminosupstituisani C1-4alkil, -S(O)1-2R6a, -C(S)R6a, -C(O)NR6aR6b, -C(NH)NR6aR6bi –NR6aC(O)R6b; gde su R6ai R6bnezavisno odabrani izmedju vodonika i C1-4alkila; gde R7i R8zajedno sa atomom ugljenika za kojeg su oba vezana grade 3-očlani do 7-očlani zasičeni ili delimično nezasićeni prsten koji po slobodnom izboru sadrži 1 do 3 heteroatoma ili grupa nezavisno odabranih od N, C(O), O i S(O)m; gde je m odabran od 0, 1 i 2; gde pomenuti zasićeni prsten formiran od strane R7i R8može biri nesupstituisan ili supstituisan sa 1 do 3 grupe koje su nezavisno odabrane od amino, hidroksi, metoksi, halo, metil, metil-amino i izobutiriloksi, ili njena farmaceutski prihvatljiva so.
[0006] U drugom aspektu, datim pronalaskom predstavljena je farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje Formule I, ili njena farmaceutski prihvatljiva so, u mešavini sa jednim ili više odgovarajućih ekscipijenasa.
[0007] U trećem aspektu, datim pronalaskom predstavljeno je jedinjenje Formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu u lečenju oboljenja kod životinje kod koje modulacija SHP2 aktivnosti može sprečiti, inhibirati ili poboljšati patologiju i/ili simptomologiju oboljenja, gde se jedinjenje Formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so daje životinji u terapijski efikasnoj količini.
[0008] U četvrtom aspektu, datim pronalaskom je obezbedjeno jedinjenje Formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu u lečenju oboljenja kod životinje kod koje se modulacija SHP2 aktivnosti može sprečiti, inhibirati ili se može poboljšati patologija i/ili simptomologija oboljenja, gde se jedinjenje Formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so daje životinji u terapijski efekasnoj količini, i u istovremenoj ili sekvencijalnoj kombinaciji sa terapeutskim sredstvom protiv kancera.
Definicije
[0009] Ukoliko drugačije nije naznačeno, opšti uslovi koji su korišćeni u prethodnom delu teksta i u nastavku prvenstveno imaju u kontekstu ovog pronalaska sledeća značenja, gde opštiji pojmovi gde god da se koriste mogu, nezavisno jedan od drugog, da budu zamenjeni odredjenim definicijama ili ostaju, definišući na taj način detaljnije izvodjenja iz pronalaska:
[0010] “Alkil” se odnosi na potpuno zasićeni razgranati ili nerazgranatu ugljovodoničnu grupu sa do 20 atoma ugljenika. Ukoliko drugačije nije odredjeno, alkil se odnosi na ugljovodonične grupe sa 1 do 7 atoma uglenika (C1-7alkil), ili 1 do 4 atoma ugljenika (C1-4alkil). Reprezentativni primeri za alkil obuhvataju, ali nisu ograničeni na, metil, etil, n-propil, izo-propil, n-butil, sek-butil, izo-butil, terc-butil, n-pentil, izopentil, neopentil, n-heksil, 3-metilheksil, 2,2- dimetilpentil, 2,3-dimetilpentil, n-heptil, noktil, n-nonil, n-decil i slično. Substituisani alkil predstavlja alkil grupu sa jednim ii više, kao što je taj, dva ili tri supstituenta koji su odabrani od halogena, hidroksi ili alkoksi grupa. Halo-supstituisani-alkil i halo-supstituisani-alkoksi, može biti ili ravnočlani ili razgranati lanac grupe i uključuje, metoksi, etoksi, difluorometil, trifluorometil, pentafluoroetil, difluorometoksi, trifluorometoksi, i slično.
[0011] “Aril” označava monociklični ili kondenzovani biciklični aromatični prsten sa šest do deset atoma ugljenika u prstenu. Aril na primer, može da bude fenil ili naftil, najbolje fenil. “Arilen” označava dvovalentni radikal koji je izveden iz aril grupe.
[0012] “Heteroaril” ima značenje kao što je definisano za aril gde je jedan ili više članova prstena heteroatom. Na primer, C5-10heteroaril je najmanje 5 članova kao što je naznačeno da su to atomi ugljenika, ali ovi atomi ugljenika mogu biti zamenjeni sa heteroatomom. Shodno tome, C5-10heteroaril obuhvata piridil, indolil, indazolil, hinoksalinil, hinolinil, benzofuranil, benzopiranil, benzotiopiranil, benzo[1,3]dioksol, imidazolil, benzo-imidazolil, pirimidinil, furanil, oksazolil, izoksazolil, triazolil, tetrazolil, pirazolil, tienil, itd.
[0013] Pojam “Cikloalkil” označava zasićeni ili delimično nezasićeni, monociklični, kondenzovani biciklični ili premošćeni policiklični prstenasti sistem koji sadrži naznačene atome ugljenika. Na primer, C3-10cikloalkil uključuje ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, cikloheksenil, itd.
[0014] “Heterocikloalkil” označava cikloalkil, kako je definisano u ovoj prijavi, pod uslovom da je jedan ili više ovde naznačenih atoma ugljenika u prstenu, zamenjeno grupom koja je odabrana od -O-, -N=, -NR-, -C(O)-, -S-, -S(O) – ili -S(O)2-, gde R predstavlja vodonik, C1-4alkil ili zaštitnu grupu za azot. Na primer, C3-8heterocikloalkil kako se koristi u ovoj prijavi za opisivanje jedinjenja iz pronalaska obuhvata morfolino, pirolidinil, pirolidinil-2-on, piperazinil, piperidinil, piperidinilon, 1,4-dioksa-8-aza-spiro[4.5]dek-8-il, tiomorfolino, sulfanomorfolino, sulfonomorfolino, itd.
[0015] “Halogen” (ili halo) po mogućstvu predstavlja hloro ili fluoro, ali takodje može da bude i bromo ili jodo.
[0016] “SHP2” označava“Src Homolgu-2 fosfatazu” a takodje je poznata i kao SH-PTP2, SH-PTP3, Syp, PTP1D, PTP2C, SAP-2 ili PTPN11.
[0017] Medju kancere kod kojih su nadjene mutacije “PTPN11” se pored ostalog ubrajaju: N58Y; D61Y, V; E69K; A72V, T, D; E76G, Q, K (ALL); G60A; D61Y; E69V; F71K; A72V; T73I; E76G, K; R289G; G503V (AML); G60R, D61Y, V, N; Y62D; E69K; A72T, V; T73I; E76K, V, G, A, Q; E139D; G503A, R; Q506P (JMML); G60V; D61V; E69K; F71L; A72V; E76A (MDS); Y63C (CMML); Y62C; E69K; T507K (neuroblastom); V46L; N58S; E76V (kancer pluća); R138Q (melanom); E76G (kancer debelog creva).
[0018] Jedinjenja formula I mogu da imaju različite izomerne oblike. Na primer, bilo koji asimetrični atom ugljenika može biti prisutan u (R)-, (S)- ili (R,S)-konfiguraciji, po mogućstvu u (R)- ili (S)-konfiguraciji. Supstituenti na dvostrukoj vezi ili naročito prsten mogu biti prisutni u cis- (= Z-) ili trans (= E-) obliku. Jedinjenja mogu dakle biti prisutni kao smeše izomera ili po mogućstvu u obliku čistih izomera, najbolje u obliku čistih dijastereomera ili čistih enantiomera.
[0019] Gde se koristi množinski oblik (na primer, jedinjenja, soli), to obuhvata i jedninu (na primer, pojedinačno jedinjenje, pojedinačna so). Izraz “jedinjenje” ne isključuje mogućnost (na primer, u farmaceutskoj formulaciji) da bude prisutno više od jednog jedinjenja formule I (ili njegova so), gde “a” samo predstavlja neodredjeni član.
[0020] Gde god se pominju jedinjenje ili jedinjenja formule I, ovo takodje dalje obuhvata N-okside tih jedinjenja i/ili tautomere.
[0021] Izraz ”njenih i/ili N-oksida, tautomera i/ili (najbolje farmaceutiski prihvatljivu) so” naro;ito znači da jedinjenje formule I može biti prisutno kao takvo u smeši sa njegovim N-oksidom, kao tautomer (na primer, usled keto-enolne, laktam-laktimske, amid-imidinska kiselina ili enamin-imin tautomerije) ili u (na primer, ekvivalencija izazvana reakcijom) smeše sa njegovim tautomerom, ili u obliku soli jedinjenja formule I i/ili bilo kojeg od tih oblika ili smeša dva ili više tih oblika.
[0022] Za sledeća jedinjenja, NH2 grupa vezana za pirazinski prsten je kritična za snagu prstena. Analiza kristalografske strukture pokazuje NH2 grupu u intramolekulskoj interakciji sa glavnom karbonil grupom od SHP2 ostatka E250:
[0023] Dati pronalazak takodje obuhvata sve pogodne izotopske varijacije jedinjenja iz pronalaska, ili njihovih farmaceutski prihvatljivih soli. Izotopska varijacija jedinjenja iz pronalaska ili njegova farmaceutski prihvatljiva so definisana je kao jedno u kojem je najmanje jedan atom zamenjen atomom sa istim atomskim brojem ali je atomska masa različita od atomske mase koja se uobičajeno nalazi u prirodi. Primeri izotopa koji mogu biti inkorporirani u jedinjenja iz ovog pronalaska i farmaceutski prihvatljive soli, uključuju bez ograničenja izotope vodonika, ugljenika, azota i kiseonika, kao što su<2>H,<3>H,<11>C,<13>C,<14>C,<15>N,<17>O,<18>O,<35>S,<18>F,<36>Cl i<123>I. Odredjene izotopske varijacije jedinjenja iz pronalaska i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, na primer, one u kojima je radioaktivni izotop poput<3>H ili<14>C inkorporiran, korisni su u testovima tkivne distribucije lekova i/ili supstrata. U odredjenim primerima,<3>H i<14>C izotopi mogu da se koriste, zbog jednostavnosti pripreme i načina detektovanja. U ostalim primerima, supstitucija sa izotopima kao što je<2>H, može doneti odredjene terapijske prednosti koje su posledica veće metaboličke stabilnosti, kao što su na primer povećan in vivo poluživot ili smanjenje neophodne doze. Izotopske varijacije jedinjenja iz pronalaska, ili njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, dobijaju se pomoću uobičajenih procedura korišćenjem odgovarajuće izotopske varijacije pogodnog reagensa. Na primer, jedinjenje iz pronalaska može da postoji u deuterisanom obliku kao što je prikazano u nastavku:
Opis poželjnih izvodjenja
[0024] Dati pronalazak odnosi se na jedinjenja koja su sposobna za inhibiranje aktivnosti SHP2. U jednom aspektu pronalaska, u odnosu na jedinjenja formule I, –XR1apredstavlja –SR1ai koji je odabran od:
[0025] U narednom aspektu pronalaska, –XR1apredstavlja –SR1ai odabran je od:
u jednom aspektu pronalaska, predstavljeno je jedinjenje, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, koja je odabrana od:
[0026] U narednom aspektu, u odnosu na jedinjenja Formule I, predstavljena su jedinjenja Formule Ia:
u kojoj je: n odabran od 1, 2, 3 i 4; gde je p odabran od 0 i 1; gde je q odabran od 0 i 1; gde je Y1odabran od CH i N; gde je Y2odabran od CR6i N; gde je Y4nezavisno odabran od N, C(O) i CR9; gde samo jedan od Y4predstavlja C(O); gde je R6odabran od vodonika, halo, metil i amino-karbonila; gde R7i R8zajedno sa atomom ugljenika za koji su oba vezani grade 3 do 7-očlani zasićeni ili delimično nezasićeni prsten koji po slobodnom izboru sadrži heteroatom koji je odabran od N, O i S(O)m; gde je m odabran od 0, 1 i 2; gde pomenuti zasićeni prsten formiran od R7i R8može biti nesupstituisan ili supstituisan sa 1 do 3 grupe koje su nezavisno odabrane od od amino, halo, hidroksi, amino-metil i metil-amino, ili R7i R8zajedno sa atomom ugljenika za koji su spojeni grade 5-očlani zasićeni ili delimično nezasićeni prsten koji po slobodnom izboru sadrži 1 do 2 heteroatoma ili grupe koje su nezavisno odabrane od N, O, C(O) i S(O)m; gde je m odabran od 0, 1 i 2; pri čemu pomenuti zasićeni prsten formiran od R7i R8može biti supstituisan sa 1 do 3 grupe koje su nezavisno odabrane od amino, hidroksi, metoksi, halo, metil, metil-amino i izobutiriloksi, ili R7i R8zajedno sa atomom ugljenika za koji su spojeni grade 6-očlani zasićeni ili delimično nezasićeni prsten koji po slobodnom izboru sadrži heteroatom koji je odabran od N, O i S(O)m; gde je m odabran od 0, 1 i 2; pri čemu pomenuti zasićeni prsten formiran od R7i R8može biti supstituisan grupom odabranom od amino, amino-metil and metil-amino, ili R7i R8zajedno sa atomom ugljenika za koji su spojeni grade 4-očlani zasićeni ili delimično nezasićeni prsten koji po slobodnom izboru sadrži heteroatom odabran od N, O i S(O)m; gde je m odabran od 0, 1 i 2; pri čemu pomenuti zasićeni prsten formiran od R7i R8može biti supstituisan grupom odabranom od amino, amino-metil i metil-amino;
gde je R9odabran od halo, amino, dimetil-amino, hidroksi, N3, C1-4alkil, halo-supstituisani-C1-4alkil, C1-
4alkoksi, -C(O)OR10i -NHC(O)R10; gde je R10odabran od vodonika, fenila i naftila; gde pomenuti fenil iz R10može biti nesupstituisan ili supstituisan sa metoksi; ili njegova farmaceutski prihvaljiva so.
1
[0027] U daljem aspektu pronalaska predstavljena su jedinjenja, ili njihova farmaceutski prihvatljiva so, koja su odabrana od:
�
[0028] U drugom aspektu pronalaska predstavljena su jedinjenja formule II:
u kojoj je: p odabran od 0 i 1; q odabran od 0 i 1; Y1odabran od CH i N; Y2odabran od CR6i N; R1odabran od C6-10aril, C3-8cikloalkil, C3-8cikloalkenil i 5-9-očlane heteroaril grupe koja sadrži od 1 do 4 heteroatoma odabranih od N, O i S; gde su pomenuti aril ili heteroaril iz R1asupstituisani sa 1 do 5 R9grupa koje su nezavisno odabrane od halo, amino, hidroksi, N3, C1-4alkil, hidroksi-supstituisanog-C1-
1
4alkila, halo-supstituisanog-C1-4alkila i amino-supstituisanog-C1-4alkila; gde su R2ai R2bnezavisno odabrani od vodonika, C1-4alkila, C1-4alkoksi, amino, hidroksi, C3-8cikloalkila i C1-4alkil-amino; gde su R3ai R3bnezavisno odabrani od halo, karbonil, C1-4alkila, C1-4alkoksi, amino, hidroksi, C3-8cikloalkila i C1-4alkil-amino; gde su R4ai R4bnezavisno odabrani iz grupe koju čine vodonik, halo, karbonil, C1-4alkil, C1-4alkoksi, amino, hidroksi, C3-8cikloalkil i C1-4alkil-amino; gde su R5ai R5bnezavisno odabrani iz grupe koju čine vodonik, karbonil, C1-4alkil, C1-4alkoksi, amino, hidroksi, C3-8cikloalkil i C1-4alkil-amino; gde bilo koje dve grupe koje su odabrane od R2a, R3a, R4, R5, R6ai R7amogu da grade 5-očlani do 6-očlani nezasićeni ili delimično nezasasićeni prsten; gde je R6odabran iz grupe koju čine vodonik, halo, cijano, C1-4alkil, C1-4alkoksi, amino-karbonil, halo-supstituisani C1-4alkil, halo-supstituisani C1-4alkoksi, hidroksi-supstituisani C1-4alkil i amino-supstituisani C1-4alkil; gde R7i R8zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani grade 3 do 7-očlani zasićeni ili delimično nezasićeni prsten, koji po slobodnom izboru može da sadrži heteroatom odabran od N, O i S(O)m; gde je m odabran od 0, 1 i 2; pri čemu pomenuti zasićeni prsten formiran od R7i R8može biti nesupstituisan ili supstituisan sa 1 do 3 grupe koje su nezavisno odabrane od amino, halo, hidroksi, amino-metil i metil-amino; ili njihova farmaceutski prihvatljiva so.
[0029] U drugom aspektu pronalaska predstavljena su jedinjenja formule IIa:
u kojoj je: n odabran od 1, 2, 3 i 4; p odabran od 0 i 1; q odabran od 0 i 1; Y1odabran od CH i N; Y2odabran od CR6i N; Y4odabran od N i CR9; R6odabran iz grupe koju čine vodonik, halo, metil i aminokarbonil;
gde R7i R8zajedno sa atomom ugljenika za koji su spojeni grade 3-očlani do 7-očlani zasićeni ili delimično nezasićeni prsten koji po slobodnom izboru sadrži heteroatom odabran od N, O, i S(O)m; gde je m odabran od 0, 1 i 2; pri čemu pomenuti zasićeni prsten formiran od R7i R8može biti nesupstituisan ili supstituisan sa grupom koje je odabrana od amino, amino-metil i metil-amino, ili
1
gde R7i R8zajedno sa atomom ugljenika za koji su spojeni grade 5-očlani zasićeni prsten koji po slobodnom izboru sadrži heteroatom odabran od N, O i S(O)m; gde je m odabran od 0, 1 i 2; pri čemu pomenuti zasićeni prsten formiran od R7i R8može biti nesupstituisan ili supstituisan sa grupom koje je odabrana od amino, amino-metil and metil-amino, ili
R7i R8zajedno sa atomom ugljenika za koji su spojeni grade 6-očlani zasićeni prsten koji po slobodnom izboru sadrži heteroatom koji je odabran od N, O i S(O)m; gde je m odabran od 0, 1 i 2; pri čemu pomenuti zasićeni prsten formiran od R7i R8može biti supstituisan grupom koje je odabrana od amino, amino-metil i metil-amino, ili
R7i R8zajedno sa atomom ugljenika za koji su spojeni grade 4-očlani zasićeni prsten koji po slobodnom izboru sadrži heteroatom koji je odabran od N, O i S(O)m; gde je m odabran od 0, 1 i 2; pri čemu pomenuti zasićeni prsten formiran od R7i R8može biti supstituisan amino;
gde je R9odabran od halo, amino, hidroksi, N3, C1-4alkil, halo-supstituisanog-C1-4alkila, C1-4alkoksi, -C(O)OR10i -NHC(O)R10; gde je R10odabran od vodonika, fenila i naftila; gde pomenuti fenil iz R10može biti nesupstituisan ili supstituisan sa metoksi; ili njena farmaceutski prihvatljiva so.
[0030] U drugom aspektu pronalaska predstavljeno je jedinjenje, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, koje je odabrano od:
1
[0031] U drugom aspektu pronalaska predstavljene je jedinjenje, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, koje je odabrano od
1
�
�
�
[0032] U drugom aspektu pronalaska predstavljeno je jedinjenje, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, koja je odabrana od:
[0033] U drugom aspektu pronalaska predstavljeno je jedinjenje:
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so,
ili jedinjenje:
2
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili jedinjenje koje predstavlja:
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili jedinjenje koje predstavlja:
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili jedinjenje koje predstavlja:
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
2 Farmakologija i korišćenje
[0034] Src Homology-2 fosfataza (SHP2) je protein tirozin fosfataza koju kodira gen PTPN11, i ona učestvuje u mnogobrojnim ćelijskim procesima uključujući proliferaciju, diferencijaciju, održavanje ćelijskog ciklusa i migraciju. SHP2 je uključen u prenos signala preko Ras-mitogenom aktivisane protein-kinaze, zatim u signalne puteve JAK-STAT ili fosfoinozitol 3-kinaza-AKT. SHP2 aktivira Erk1 i Erk2 (Erk1/2, Erk) MAP-kinaze, prenoseći aktivaciju indukovanu receptorskim tirozin kinazama kao što su ErbB1, ErbB2 i c-Met.
[0035] SHP2 poseduje dva N-terminalna Src homology 2 domena (N-SH2 i C-SH2), katalitički domen (PTP) i C-terminalni rep. Dva SH2 domena kontrolišu unutarćelijsku lokalizaciju i funkcionalnu regulaciju SHP2. Molekul se nalazi u neaktivnom obliku, u konformaciji u kojoj je samim sobom inhibisan, koja je dodatno stabilizovana mrežom interakcija koje su uključene u vezivanje koja obuhvata ostatke iz N-SH2 i PTP domena. Nakon stimulacije faktorom rasta, SHP2 se vezuje za specifična mesta sa fosforilovanim tirozinima na docking-proteinima kao što su Gab1 i Gab2, preko svojih SH2 domena. Stimulacija faktorima rasta indukuje promenu konformacije, koja dovodi do aktivacije SHP2.
[0036] Mutacije u genu PTPN11 su identifikovane u više bolesti kod ljudi, kao što su Noonan-ov sindrom, Leopard-sindrom, juvenilne mijelomonocitne leukemije, neuroblastom, melanom, akutna mijeloidna leukemija i kanceri dojke, pluća i kolona. SHP2 predstavlja značajan nishodni signalni molekul za različite receptorske tirozin kinaze, uključujući receptore za faktor rasta poreklom iz trombocita (PDGF-R), faktor rasta fibroblasta (FGF-R) i epidermalni faktor rasta (EGF-R). SHP2 je takođe značajan nishodni signalni molekul za aktivaciju mitogenom aktiviranog protein (MAP) kinaznog signalnog puta koji može da dovede do transformacije ćelije, što je preduslov za nastanak kancera. Isključenje ili „knockdown“ gena za SHP2 značajno inhibiše rast ćelijskih linija kancera pluća sa mutacijama u SHP2 ili EML4/ALK translokacijama, kao i amplifikovani EGFR kanceri dojke i ezofagusa. SHP2 je takođe aktivisan nishodno od onkogena u karcinomu želuca, anaplastičnom krupnoćelijskom limfomu i glioblastomu.
[0037] Noonan-ov sindrom (NS) i Leopard-sindrom (LS) - mutacije u PTPN11 su uzrok LS-a (višestruke pege, atipična elektrokardiografska provodljivost, okularni hiperteloziam, pulmonalna stenoza, nenormalnosti genitalija, zaostajanje u rastu, senzoneuralna gluvoća) i NS-a (urođene anomalije uključujući srčane defekte, kraniofacijalne abnormalnosti i nizak rast). Oba poremećaja su deo familije autozomalnih dominantnih sindroma koji su posledica mutacija u germinativnim ćelijama i to u komponentama RAS/RAF/MEK/ERK mitogenom aktivisane protein kinaze signalnog puta, koje su potrebne za normalni ćelijski rast i diferencijaciju. Aberantna regulacija ovog puta ima dalekosežne efekte, pogotovo na razvoj srca, pa dovodi do različitih abnormalnosti, uključujući valvuloseptalne defekte i/ili hipertrofičnu kardiomiopatiju (engl. hypertrophic cardiomyopathy - HCM). Za ometajuće
2
promene u MAPK signalnom putu je ustanovljeno da su one centralne u ovim poremećajima i više različitih gena su identifikovani kao geni-kandidati duž ovog puta kod ljudi, uključujući mutacije u KRAS, NRAS, SOS1, RAF1, BRAF, MEK1, MEK2, SHOC2 i CBL. Gen koji je najčešće mutiran u NS i LS je PTPN11.Mutacije u germinativnim ćelijama u genu PTPN11 (SHP2) su nađene u ~50% slučajeva sa NS i kod skoro svih pacijenata sa LS koji dele određena svojstva sa NS. Za NS, supstitucije Y62D i Y63C u proteinu su većinom invarijantne i one su među najčešće prisutnim mutacijama. Obe ove mutacije utiču na katalitički neaktivnu konformaciju SHP2 bez ometanja vezivanja fosfataze za svoje fosforilovane patnere u signalnom putu.
[0038] Juvenilne mijelomonocitne leukemije (JMML) - Somatske mutacije u PTPN11 (SHP2) su nađene u 35% pacijenata sa JMML, mijeloproliferativna bolest dece (MPD). Ove mutacije koje dodeljuju funkciju (engl. gain-of-function mutations) su tipično tačkaste mutacije u N-SH2 domenu ili u fosfataznom domenu, koje sprečavaju inhibiciju samim sobom intramolekulskom interakcijom izmedju katalitičkog domena i N-SH2 domena, što ima za posledicu stalnu aktiviranost SHP2.
[0039] Akutna mijeloidna leukemija - mutacije u PTPN11 su identifikovane u: ~10% pedijatrijskih akutnih leukemija, kao što su mijelodisplatični sindrom (MDS); ~7% B-ćelijskih limfoblastnih leukemija (B-ALL); i ~4% akutnih mijeloidnih leukemija (AML).
[0040] Mutacije koje dovode do NS i leukemija uzrokuju promene u aminokiselinama koje su smeštene u dodirnoj površini između N-SH2 i PTP domena u konformaciji SHP2 gde je ovaj molekul sobom inhibisan, na taj način ometaju inhibišuće intramolekulske interakcije, dovodeći do hiperaktivnosti katalitičkog domena.
[0041] SHP2 deluje kao pozitivni regulator u receptor-tirozin-kinaznom (RTK) signalnom putu. Među kancere kod kojih postoji alteracija u RTK (EGFR<amp>, Her2<amp>, FGFR<amp>, Met<amp>, translocirana/aktivisana RTK, tj. ALK, BCR/ABL) ubrajajau se kanceri jednjaka, dojke, pluća, debelog creva, želuca, gliomi, kanceri glave i vrata.
[0042] Ezofagealni kancer je maligna bolest ezofagusa. Postoje različiti podtipovi, primarno su to: kancer skvamoznih ćelija (<50%) i adenokarcinom. Procenat ekspresije RTK je veoma visok u ezofagealnom adenokarcinomu i kanceru skvamoznih ćelija. Inhibitor SHP2, stoga može da se koristi u razvijanju novih strategija u lečenju.
[0043] Kancer dojke je glavni tip kancera i najčešći uzrok smrti kod žena, gde pacijenti razvijaju rezistenciju na postojeće lekove. Kancer dojke se javlja u 4 osnovna podtipa: luminalni A, luminalni B, sličan Her2 i trostruko neghativni/sličan bazalnom. Trostruko negativni kancer dojke (engl. triple negative breast cancer - TNBC) je agresivni kancer dojke za koji ne postoji specifična usmerena terapija. Receptor za epidermalni faktor rasta I (EGFR) se pojavio kao ciljni molekul za specifičnu teapiju TNBC koji obećava. Inhibicija Her2 kao i EGFR preko SHP2 je moguća terapija kancera dojke koja obećava.
2
[0044] Kancer pluća - NSCLC je trenutno glavni uzrok smrtnosti povezane sa kancerom, što se odnosi na oko 85% kancera pluća (predominantno adenokarcinoma i karcinoma skvamoznih ćelija). Iako citotoksična hemoterapija ostaje jedan značajan deo lečenja, specifične terapije koje su zasnovane na genskim izmenamakao što je EGFR i ALK u tumoru, imaju veću šansu da budu uspešne ako se zasnivaju na ciljanoj terapiji.
[0045] Kancer debelog creva - Približno 30% do 50% kolorektalnih tumora imaju mutaciju u KRAS i 10 do 15% mutacije u BRAF genima. Kod subpopulacije pacijenata čiji tumori pojačano ispoljavaju EGFR, pokazano je da imaju povoljan klinički odgovor na anti-EGFR terapiju.
[0046] Kancer želuca je jedan od najzastupljenijih tipova kancera. Aberantna ekspresija tirozin kinaza, što se odražava na aberantnu fosforilaciju tirozina u kancerskim ćelijama želuca, je poznata u ovoj oblasti medicine. Ove receptorske tirozin-kinaze, c-met (HGF receptor), FGF receptor 2, i erbB2/neu su često amplifikovane u različitim tipovima karcinoma želuca. Znači, da greške u različitim signalnim putevima mogu da doprinesu progresiji različitih tipova kancera želuca.
[0047] Neuroblastom je tumor koji se javlja kod dece, i to je tumor simpatičkog nervnog sistema koji se razvija, što čini oko 8% kacera u dečijem uzrastu.Uloga genomskih izmena u genu za anaplastični limfom-kinazu (ALK) je postulirana u patogenezi neuroblastoma.
[0048] Karcinom skvamoznih ćelija glave i vrata (engl. squamous-cell carcinoma of the head and neck - SCCHN). Za veliki broj kancera visok nivoi ekspresije EGFR su u korelaciji sa lošom prognozom i rezistencijom na terapiju zračenjem, većinom za karcinom skvamoznih ćelija glave i vrata (SCCHN). Blokiranje signala preko EGFR dovodi do inhibicije stimulacije receptora, ćelijske proliferacije i redukovane invazivnosti metastaza. Zbog toga je, EGFR glavna meta za nove specifične antikancerske terapije SCCHN.
[0049] Ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja koja mogu da inhibišu aktivnost SHP2. U pronalasku je dalje opisan proces za dobijanje jedinjenja iz pronalaska i pripremu farmaceutskih preparata koji sadrže ova jedinejnja. Još jedan aspekt ovog pronalaska se odnosi na jedinjenje sa formulom I za upotrebu u lečenju bolesti povezanih sa SHP2, a koji obuhvata korak primene, kod pacijenta kojem je lečenje potrebno, u količini koja je terapijski efikasna, jedinjenja sa formulom I, kao što je to izneto u Sažetku pronalaska.
[0050] U odredjenim izvodjenjima, ovaj pronalazak se odnosi na ranije pomenuto jedinjenje za upotrebu, gde su navedene bolesti povezane sa SHP2, kanceri iz grupe koju izmedju ostalog čine: JMML; AML; MDS; B-ALL; neuroblastom; ezofagealni; kancer dojke; kancer pluća; kancer debelog creva; kancer želuca; kancer glave i vrata, ili gde je bolest ili poremećaj posredovana aktivnosšću SHP2 odabrana među sledećim: Noonan-ov sindrom, Leopard-sindrom, juvenilne mijelomonocitne leukemije, neuroblastom, melanom, akutna mijeloidna leukemija, kancer dojke, kancer jednjaka, kancer pluća,
2
kancer debelog creva, kancer glave, neuroblastom, karcinom skvamoznih ćelija glave i vrata, karcinom želuca, anaplastični krupnoćelijski limfom i glioblastom.
[0051] Jedinjenja opisana u ovom pronalasku takođe mogu da se koriste u lečenju drugih bolesti ili stanja koja su povezana sa aberantnom aktivnošću SHP2. Dakle, dodatni aspekt, pronalaska je upotreba jedinjenja iz ovog pronalaska u lečenju poremećaja kao što su: NS; LS; JMML; AML; MDS; B-ALL; neuroblastom; ezofagealni; kancer dojke; kancer pluća; kancer debelog creva; kancer želuca; kancer glave i vrata.
[0052] Moguće je inhibitor SHP2 iz ovog pronalaska, uspešno kombinovati sa drugim farmakološki aktivnim jedinjenjem, ili sa dva ili više dodatna farmakološki aktivna jedinjenja, pogotovo u lečenju kancera. Na primer, jedinjenje sa formulom (I), ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, kao što je to ranije definisano, moguće je davati istovremeno, sekvencijalno ili zasebno, u kombinaciji sa jednim ili više sredstava kao što su hemoterapijska sredstva, na primer, mitotski inhibitori kao što su taksan, vinka alkaloid, paklitaksel, docetaksel, vinkristin, vinblastin, vinorelbin ili vinflunin, i druga antitumorska sredstva, npr. cisplatin, 5-fluorouracil ili 5-fluoro-2-4(1 H,3H)-pirimidindion (5FU), flutamid ili gemcitabin. Stoga, u pronalasku je opisana kombinacija inhibitora SHP2 iz ovog pronalaska, i jednog ili više farmaceutski aktivnog jedinjenja, naročito gde je drugo farmaceutski aktivno jedinjenje ili jedinjenja namenjeno lečenju kancera, i još specifičnije gde je drugo farmaceutski aktivno jedinjenje ili jedinjenja odabrano iz grupe vinka alkaloid, paklitaksel, docetaksel, vinkristin, vinblastin, vinorelbin, vinflunin, cisplatin, 5-fluorouracil, 5-fluoro-2-4(1 H,3H)-pirimidindion (5FU), flutamid ili gemcitabin.
[0053] Primena ovakvih kombinacija može da ima značajne prednosti, uključujući sinergističko delovanje, u terapiji.
[0054] U odredjenim izvodjenjima, ovaj pronalazak se odnosi na ranije pomenuto jedinjenje za upotrebu, gde je pomenuto jedinjenje primenjeno parenteralnim putem.
[0055] U odredjenim izvodjenjima, ovaj pronalazak označava ranije pomenuto jedinjenje za upotrebu, gde je pomenuto jedinjnje primenjeno intramuskularno, intravenski, subkutano, oralno, pulmonalno, intratekalno, topikalno ili intranazalno.
[0056] U odredjenim izvodjenjima, ovaj pronalazak označava ranije pomenuto jedinjenje za upotrebu, gde je pomenuto jedinjnje primenjeno sistemski.
[0057] U odredjenim izvodjenjima, ovaj pronalazak označava ranije pomenuto jedinjenje za upotrebu, gde je pomenuti pacijent sisar.
[0058] U odredjenim izvodjenjima, ovaj pronalazak označava ranije pomenuto jedinjenje za upotrebu, gde je pomenuti pacijent primat.
[0059] U odredjenim izvodjenjima, ovaj pronalazak označava ranije pomenuto jedinjenje za upotrebu, gde je pomenuti pacijent čovek.
[0060] U jednom drugom aspektu, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenje sa formulom I za upotrebu u lečenju poremećaja posredovanih SHP2, i obuhvata korak: primena kod pacijenta kojem je potrebna terapijski efikasna količina hemoterapijskog sredstva u kombinacji sa terapijski efikasnom količinom jedinjenja sa formulom I kao što je to definisano u Sažetku pronalaska.
Farmaceutske kompozicije
[0061] U narednom aspektu, datim pronalaskom obezbedjene su farmaceutski prihvatljive kompozicije koje obuhvataju terapijski-efikasnu količinu jednog ili više gore opisanih jedinjenja, koje su formulisane zajedno sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih nosača (aditivi) i/ili diluenti. Kao što je detaljnije opisano u nastavku, farmaceutske kompozicije iz datog pronalaska mogu biti posebno formulisane za primenu u čvrstom ili tečnom obliku, uključujući one koji su prilagodjene za sledeće: (1) oralna primena, na primer, natapanjem (vodeni ili nevodeni rastvori ili suspenzije), tablete, bolusi, prahovi, granule, paste za nanošenje na jezik; (2) parenteralna primena, na primer, subkutana, intramuskularna ili intravenusna injekcija kao što je, na primer, sterilni rastvor ili suspenzija; (3) topična primena, na primer, u vidu kreme, masti ili spreja koji se primenjuje na kožu, pluća, ili mukozne membrane; ili (4) intravaginalno ili intrarektalno, na primer, kao vaginaleta, krem ili pena; (5) sublingvalno; (6) okularno; (7) transdermalno; (8) nazalno; ili (9) pulmonarno; ili (10) intratekalno.
[0062] U ovom tekstu, izraz „terapeutski efikasna količina” označava da količina jedinjenja, materijala, ili kompozicije koja sadrži jedinjenje prema predmetnom pronalasku, koja je efikasna za stvaranje nekog željenog terapeutskog dejstva bar u subpopulaciji ćelija životinje pri prihvatljivom odnosu korist/rizik primenjivom na bilo koji medicinski tretman.
[0063] Izraz "farmaceutski prihvatljivi", onako kako se ovde koristi, odnosi se na ona jedinjenja, materijale, kompozicije i/ili dozne oblike koji su, u okviru opsega normalnog medicinskog rasudjivanja, pogodni za upotrebu u kontaktu sa tkivima ljudi i životinja bez prekomerne toksičnosti, iritacije, alergijskog odgovora i sličnog, ili drugog problema ili komplikacije srazmernog razumnom odnosu koristi i rizika.
[0064] U ovom tekstu, izraz "farmaceutski-prihvatljivi nosač" označava farmaceutski prihvatljivimaterijal, kompoziciju ili sredstvo, kao što je tečni ili čvrsti punilac, diluent, ekscipijens, pomoćna sredstva za proizvodnju (na primer, lubrikant, talk magnezijum, kalcijum ili cink stearat, ili stearinska kiselina), ili materijal za enkapsulaciju u obliku rastvora, koji je uključen u prenošenje ili transport predmentog jedinjenja iz jednog organa, ili dela tela, u drugi organ, ili deo tela. Svaki nosač mora biti “prihvatljiv” u smislu da je kompatibilan sa drugim sastojcima formulacije i nije štetan za pacijenta. Neki primeri materijala koji mogu da služe kao farmaceutski prihvatljivi nosači uključuju: (1) šećere, kao što je laktoza, glukoza i saharoza; (2) skrobove, kao što je kukuruzni skrob i skrob krompira; (3)
1
celuloza, i njeni derivati, kao što je natrijum karboksimetil celuloza, etil celuloza i acetat celuloze; (4) tragakant u prahu; (5) slad; (6) želatin; (7) talk; (8) ekscipijensi, kao što je kakao buter i voskovi za supozitorije; (9) ulja, kao što je ulje kikirikija, pamukovo ulje, šafranovo ulje, susamovo ulje, maslinovo ulje, kukuruzno ulje i sojino ulje; (10) glikoli, kao što je propilen glikol; (11) polioli, kao što je glicerin, sorbitol, manitol i polietilen glikol; (12) estri, kao što je etil oleat i etil laurat; (13) agar; (14) puferski agensi, kao što je magnezijum hidroksid i aluminijum hidroksid; (15) alginska kiselina; (16) voda bez pirogena; (17) izotonični slani rastvor; (18) Ringerov rastvor; (19) etil alkohol; (20) pH puferski rastvori; (21) poliestri i (22) druge netoksične kompatibilne supstance uključene u farmaceutske formulacije.
[0065] Kao što je gore navedeno, odredjena izvodjenja iz datog pronalaska mogu da sadrže bazne funkcionalne grupe, kao što su amino ili alkilamino, i koje su, stoga, sposobne za formiranje farmaceutski-prihvatljivih soli sa farmaceutski-prihvatljivim kiselinama. U ovom pogledu izraz "farmaceutski-prihvatljive soli", odnosi se na relativno netoksične, neorganske i organske kisele adicione soli jedinjenja iz datog pronalaska. Ove soli se mogu dobiti in situ u vehikulumu za davanje ili u procesu proizvodnje doznih oblika, ili odvojenom reakcijom prečišćenog jedinjenja iz pronalaska u njegov slobodan bazni oblik sa odgovarajućem organskom ili neorganskom kiselinom, i izolovanjem tako dobijene soli tokom naknadnog prečišćavanja. Reprezentativne soli obuhvataju hidrobromidne, hidrohloridne, sulfatne, bisulfatne, fosfatne, nitratne, acetatne, valeratne, oleatne, palmitatne, stearatne, lauratne, benzoatne, laktatne, fosfatne, tozilatne, citratne, maleatne, fumaratne, sukcinatne, tartratne, napfilatne, mezilatne, glukoheptonatne, laktobionatne, i laurilsulfonatne soli i slično. (Videti, na primer, Berge et al. (1977) "Pharmaceutical Salts", J. Pharm. Sci.66:1-19)..
[0066]] Farmaceutski prihvatljive soli predmetnih jedinjenja uključuju konvencionalne netoksične soli ili kvaternerne amonijumove soli jedinjenja, na primer, iz netoksičnih organskih ili neorganskih kiselina. Na primer, te konvencionalne netoksične soli uključuju one koji su izvedene iz neorganskih kiselina kao što su hidrohloridna, hidrobromidna, sumporna, sulfaminska, fosforna, azotna, i slično; i soli dobijene iz organskih kiselina kao što je sirćetna, propionska, ćilibarna, glikolna, stearinska, mlečna, jabučna, vinska, limunska, askorbinska, palmitinska kiselina, maleinska, hidroksimaleinska, fenilsirćetna, glutaminska, benzoeva, salicilna, sulfanilna, 2-acetoksibenzoeva kiselina, fumarna kiselina, toluensulfonska kiselina, metansulfonska, etan disulfonska kiselina, oksalna, izotionska kiselina, i njima slične kiseline.
[0067] U drugim slučajevima, jedinjenja iz datog pronalaska mogu da sadrže jednu ili više kiselih funkcionalnih grupa i, stoga, su sposobne za formiranje farmaceutski-prihvatljivih soli sa farmaceutskiprihvatljivim bazama. Izraz "farmaceutski-prihvatljive soli" u ovim slučajevima odnosi se na relativno netoksične, neorganske i organske bazne adicione soli jedinjenja iz datog pronalaska. Ove soli se
2
takodje mogu pripremiti in situ u vehikulumu za primenu/davanje ili procesu proizvodnje doznog oblika, ili odvojenom reakcijom prečišćenog jedinjenja u njegovom kiselinskom obliku sa odgovarajućom bazom, kao što je hidroksid, karbonat ili bikarbonat farmaceutski-prihvatljivom metalnom katjonu, sa amonijakom, ili farmaceutski-prihvatljivom organskom primarnom, sekundarnom ili tercijalnom aminu. Reprezentativne soli alkalnih ili zemnoalkalnih metala obuhvataju litijumove, natrijumove, kalijumove, kalcijumove, magnezijumove, i aluminijumove soli i slično. Reprezentativni organski amini korisni su za formiranje baznih adicionih soli koji sadrže etilamin, dietilamin, etilendiamin, etanolamin, dietanolamin, piperazin i slično. (Videti, na primer, Berge et al., gore).
[0068] Ovlaživači (sredstva za kvašenje), emulgatori i lubrikanti, poput natrijum lauril sulfata i magnezijum stearata, kao i boje, sredstva za otpuštanje, sredstva za presvlačenje, sredstva za zasladivanje, aromati isredstva za parfimiranje, konzervansi i antioksidansi takodje mogu biri prisutni u kompozicijama.
[0069] Primeri za farmaceutski-prihvatljive antioksidanse uključuju: (1) antioksidanse koji su rastvorljivi u vodi, kao što su askorbinska kiselina, cistein hidrohlorid, natrijum bisulfat, natrijum metabisulfit, natrijum sulfit i slično; (2) antioksidansi koji su rastvorljivi u ulju, kao što su askorbil palmitat, butilirani hidroksianizol (BHA), butilirani hidroksitoluen (BHT), lecitin, propil galat, alfatokoferol, i slično; i (3) helatni agensi za metal, kao što je limunska kiselina, etilendiamin tetrasirćetna kiselina (EDTA), sorbitol, vinska kiselina, fosforna kiselina, i slično.
[0070] Formulacije prikazanog pronalaska uključuju one pogodne za oralnu, nazalnu, topičnu (uključujući bukalnu i sublingvalnu), rektalnu, vaginalnu i/ili parenteralnu primenu. Pogodno je da formulacije budu predstavljene pojedinačnim doziranim formama i mogu biti pripremljene bilo kojim postupcima koji su dobro poznati u oblasti farmaceutske nauke. Količina aktivnog sastojka koja se može kombinovati sa materijalom nosačem da bi se proizveo jedinični dozni oblik, variraće u zavisnosti od tretmana domaćina, posebnog načina primene (administriranja). Količina aktivnog sastojka koja se može kombinovati sa materijalom nosačem da bi se proizvela pojedinačna dozirana forma će uopšteno biti ona količina jedinjenja koja proizvodi terapijski efekat. Generalno, od sto posto, ova količina će biti u opsegu od oko 0.1 procenta do oko devedeset i devet procenata aktivnog sastojka, poželjno od oko 5 procenta do oko 70 procenta, najpoželjnije od oko 10 procenta do oko 30 procenata.
[0071] U odredjenim izvodjenjima, formulacija iz datog pronalaska obuhvata ekscipijens koji je odabran iz grupe koju čine ciklodekstrini, celuloze, lipozomi, agensi za formiranje micela, na primer, žučne kiseline, i polimerni nosači, na primer, poliestri i polianhidridi; i jedinjenja iz datog pronalaska. U odredjenim izvodjenjima, pomenuta formulacija čini jedinjenje iz ovog pronalaska biološki dostupnim u oralnom obliku.
[0072] Postupci pripreme ovih formulacija ili kompozicija uključuju korak povezivanja jedinjenja iz prikazanog pronalaska sa nosačem i, opciono, jednim ili više pomoćnih sastojaka. Uopšteno, formulacije su pripremljene ravnomernim i čvrstim povezivanjem jedinjenja iz prikazanog pronalaska sa tečnim nosačima, ili fino usitnjenim čvrstim nosačima, ili oba, i zatim, ako je neophodno, oblikovanjem proizvoda.
[0073] Formulacije pronalaska pogodne za oralnu primenu mogu biti u obliku kapsula, skrobnih kapsula, pilula, tableta, pastila (korišćenjem baza sa ukusom, obično saharoze i akacije ili tragakanta), praškova, granula, ili kao rastvor ili suspenzija u vodenoj ili ne-vodenoj tečnosti, ili kao tečna emulzija ulje-u-vodi ili voda-u-ulju, ili kao eliksir ili sirup, ili kao pastile (korišćenjem inertne baze, kao što je želatin i glicerin, ili saharoza i akacija) i/ili kao tečnost za ispiranje usta i slično, pri čemu svaka sadrži unapred odredjenu količinu jedinjenja prikazanog pronalaska kao aktivni sastojak. Jedinjenje prikazanog pronalaska može takodje da se primeni kao bolus pilula, gusti sirup ili pasta.
[0074] U čvrstim oblicima doza pronalaska za oralnu administraciju (kapsule, tablete, pilule, dražeje, praškovi, granule i slično), aktivni sastojak je pomešan sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih nosača, kao što je natrijum citrat ili dikalcijum fosfat, i/ili sa bilo čime od sledećeg: (1) puniocima ili ekstenderima, kao što je skrob, laktoza, saharoza, glukoza, manitol, i/ili silicijumska kiselina; (2) vezujućim sredstvima, kao, na primer, karboksimetil celuloza, alginati, želatin, polivinil pirolidon, saharoza i/ili gumarabika (guma akacije); (3) ovlaživačima, kao što je glicerol; (4) dezintegrišućim agensima, kao što je agar-agar, kalcijum karboksilat, krompirov ili tapioka skrob, alginska kiselina, odredjeni silikati, i natrijum karbonat; (5) agensima za odlaganje rastvaranja, kao što je parafin; (6) agensima koji ubrzavaju apsorpciju, kao što su kvaternerna jedinjenja amonijaka i surfaktanti, kao što su poloksameri i natrijum lauril sulfat; (7) agensima kvašenja, kao, na primer, cetil alkohol, glicerol monostearat i nejonski surfaktanti; (8) apsorbensima, kao što je kaolin i bentonit glina; (9) lubrikantima, kao talk, kalcijum stearat, magnezijum stearat, čvrsti polietilen glikoli, natrijum lauril sulfat, cink stearat, natrijum stearat, stearinska kiselina i njihove mešavine; (10) agensima koji su dali boju i (11) agensi za kontrolisano oslobadjanje kao što je krospovidon ili etil celuloza. U slučaju kapsula, tableta i pilula, farmaceutske kompozicije mogu takođe da sadrže pufere. Čvrste kompozicije sličnog tipa mogu takodje biti korišćene kao punioci u meko i tvrdo-punjenim želatinskim kapsulama korišćenjem takvih ekscipijenasa kao što je laktoza ili mlečni šećeri, kao i polietilen glikoli velike molekulske težine i slično.
[0075] Tableta može biti napravljena sabijanjem ili oblikovanjem, po potrebi sa jednim ili više dodatnih sastojaka. Komprimovane tablete mogu biti pripremljene korišćenjem agenasa za povezivanje (na primer, želatin ili hidroksipropilmetil celuloza), lubrikanata, inertnih rastvarača, konzervansa, dezintegranata (na primer, natrijum skrob glikolat ili unakrsno vezane natrijum karboksimetil celuloze),
4
površinski aktivnog ili disperzivnog agensa. Oblikovane tablete mogu biti napravljene kalupljenjem u odgovarajućoj mašini mešavine sprašenog jedinjenja nakvašenog inertnim tečnim rastvaračem.
[0076] Tablete, i drugi čvrsti dozni oblici farmaceutskih kompozicija prikazanog pronalaska, kao što su dražeje, kapsule, pilule i granule, mogu se opciono pripremiti sa oblažućim slojevima i omotačima, kao što su enterični omotači i drugi omotači dobro poznati u oblasti farmaceutske formulacije. Takodje mogu biti formulisane tako da omoguće sporo ili kontrolisano oslobadjanje aktivnog sastojka korišćenjem, na primer, hidroksipropilmetil celuloze u različitim proporcijama da se dobije željeni profil oslobadjanja, drugih polimernih matrica, lipozoma i/ili mikrosfera. Mogu biti formulisane za brzo oslobadjanje, na primer, za sušenje na temperaturi ispod 0<o>C. One mogu biti sterilisane, na primer, filtracijom kroz filter koji zadržava bakterije, ili sjedinjavanjem sterilinih sastojaka u obliku sterilnih čvrstih kompozicija koje se mogu rastvoriti u sterilnoj vodi, ili nekom drugom sterilnom injektabilnom medijumu neposredno pre upotrebe. Ove kompozicije mogu takodje opciono da sadrže agense za opacifikaciju i mogu biti takvog sastava da oslobadjaju aktivni sastojak(e) isključivo, ili preferencijalno, u odredjenim delovima gastrointestinalnog trakta, po potrebi, na odloženi način. Primeri ustanovljenih kompozicija koje se mogu koristiti uključuju polimerne supstance i voskove. Aktivni sastojak može takodje biti u mikro-enkapsuliranom obliku, ako je odgovarajuće, sa jednim ili više gore opisanih ekscipijenasa.
[0077] Tečni dozni oblici za oralnu primenu jedinjenja iz pronalaska uključuju farmaceutski prihvatljive emulzije, mikroemulzije, rastvore, suspenzije, sirupe i eliksire. Kao dodatak aktivnom sastojku, tečne dozne forme mogu da sadrže inertne rastvarače uobičajeno korišćene u stanju tehnike, kao što su, na primer, voda ili drugi rastvarači, solubilizirajući agensi i emulzifikatori, kao što je etil alkohol, izopropil alkohol, etil karboksilat, etil acetat, benzil alkohol, benzil benzoat, propilen glikol, 1,3-butilen glikol, ulja (konkretno, pamukovo, kikiriki, kukuruzno, klica, maslinovo, ricinusovo i susamovo ulje), glicerol, tetrahidrofuril alkohol, polietilen glikoli i estri masnih kiselina i sorbitana, i njihove mešavine.
[0078] Pored inertnih rastvarača, kompozicije za oralnu upotrebu mogu takodje da uključuju adjuvanse kao što su agensi za kvašenje, agensi za emulgovanje, agensi za suspendovanje, zasladjivači, agensi koji su dali ukus, agensi za bojenje, agensi koji su dali miris i konzervansi.
[0079] Suspenzije, kao dodatak aktivnim jedinjenjima, mogu da sadrže agense za suspendovanje kao što su, na primer, etoksilovani izostearil alkoholi, polioksietilen sorbitol i estri sorbitana, mikrokristalna celuloza, aluminijum metahidroksid, bentonit, agar-agar i tragakant, i njihove mešavine.
[0080] Formulacije farmaceutskih kompozicija iz pronalaska za rektalnu ili vaginalnu primenu mogu biti prisutne kao supozitorije, koja može biti pripremljena mešanjem jednog ili više jedinjenja pronalaska sa jednim ili više odgovarajućih neiritirajućih ekscipijenasa ili nosača koje čine, na primer, kakao buter, polietilen glikol, vosak za supozitorije ili salicilat, i koji je čvrst na sobnoj temperaturi, a tečan na temperaturi tela pa će se, stoga, otopiti u rektumu ili vagini i osloboditi aktivno jedinjenje.
[0081] Formulacije iz datog pronalaska koje su pogodne za vaginalnu primenu takodje uključuju vagitorije, tampone, kreme, gelove, paste, pene ili formulacije u spreju koje sadrže takve nosače za koje se u stanju tehnike zna da su odgovarajući.
[0082] Dozni oblici za topičku ili transdermalnu primenu jedinjenja ovog pronalaska uključuju praškove, sprejeve, masti, paste, kreme, losione, gelove, rastvore, pečeve i inhalante. Aktivno jedinjenje može biti mešano pod sterilnim uslovima sa farmaceutski prihvatljivim nosačem, i sa bilo kojim konzervansima, puferima, ili potisnim gasovima koji mogu biti potrebni.
[0083] Masti, paste, kreme i gelovi mogu sadržati, kao dodatak aktivnom jedinjenju ovog pronalaska, ekscipiense, kao što su životinjske i biljne masti, ulja, voskovi, parafini, skrob, tragakant, derivati celuloze, polietilen glikoli, silikoni, bentoniti, silicijumska kiselina, talk i cink oksid, ili njihove smeše.
[0084] Praškovi i sprejevi mogu da sadrže, pored jedinjenja ovog pronalaska, ekscipijense kao što je laktoza, talk, silicijumska kiselina, aluminijum hidroksid, kalcijum silikati i poliamid prah, ili mešavine ovih supstanci. Sprejevi mogu dodatno da sadrže uobičajene potisne gasove, kao što su hlorofluorougljovodonici i isparljive nesupstituisane ugljovodonike, kao što su butan i propan.
[0085] Transdermalni flasteri imaju dodatnu prednost jer omogućavaju kontrolisanu isporuku jedinjenja prikazanog pronalaska u organizam. Takve dozne forme se mogu napraviti rastvaranjem ili dispergovanjem jedinjenja u odgovarajućem medijumu. Pojačivači apsorpcije se takodje mogu koristiti da povećaju kretanje jedinjenja kroz kožu. Brzina tog kretanja se može kontrolisati ili korišćenjem membrane koja kontroliše brzinu ili dispergovanjem aktivnog jedinjenja u polimernom matriksu ili gelu.
[0086] Oftalmične formulacije, masti za oči, praškovi, rastvori i slično, su takodje razmatrani budući da spadaju u opseg ovog pronalaska.
[0087] Farmaceutske kompozicije iz ovog pronalaska pogodne za parenteralnu primenu sadrže jedno ili više jedinjenja iz pronalaska u kombinaciji sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih sterilnih izotoničnih vodenih ili nevodenih rastvora, disperzija, suspenzija ili emulzija, ili su to sterilni praškovi koji mogu biti rekonstituisani u sterilnim injektabilnim rastvorima ili disperzijama neposredno pre upotrebe, koji mogu da sadrže antioksidanse, pufere, bakteriostatike, rastvorene supstance koje čine formulaciju izotoničnom sa krvlju primaoca ili agense za suspendovanje ili agense za zgušnjavanje.
[0088] Primeri odgovarajućih vodenih i nevodenih nosača koji mogu biti upotrebljeni u farmaceutskim kompozicijama pronalaska uključuju vodu, etanol, poliole (kao što je glicerol, propilen glikol, polietilen glikol, i slično), i njihove odgovarajuće mešavine, biljna ulja, kao što je maslinovo ulje, i injektabilni organski estri, kao što je etil oleat. Odgovarajuća fluidnost se može održati, na primer, upotrebom materijala za oblaganje, kao što je lecitin, održavanjem potrebne veličine čestica u slučaju disperzija, i upotrebom surfaktanata.
[0089] Ove kompozicije mogu takodje da sadrže adjuvanse kao što su konzervansi, agensi za kvašenje, agensi za emulgovanje i agensi za dispergovanje. Prevencija delovanja mikroorganizama može biti obezbedjena uključivanjem različitih antibakterijskih i fungicidnih agenasa, na primer, parabena, hlorobutanola, fenol sorbinske kiseline, i slično. Takodje može biti poželjno da se uključuju izotonični agensi, kao što su šećeri, natrijum hlorid, i slično u kompozicije. Uz to, produžena apsorpcija injektabilnih farmaceutskih formi može biti dobijena uključivanjem agenasa koji odlažu apsorpciju kao što je aluminijum monostearat i želatin.
[0090] U nekim slučajevima, u cilju produžavanja dejstva leka, poželjno je usporiti apsorpciju leka iz subkutane ili intramuskularne injekcije. Ovo može biti postignuto upotrebom tečne suspenzije kristalnog ili amorfnog materijala koji ima slabu rastvorljivost u vodi. Brzina apsorpcije leka tada zavisi od brzine njegovog razlaganja koja, za uzvrat, može da zavisi od veličine kristala i kristalne forme. Alternativno, odložena apsorpcija parenteralno primenjene forme leka se postiže rastvaranjem ili suspendovanjem leka u uljanom nosaču.
[0091] Injektabilne depo forme su napravljene formiranjem mikroenkapsulirane matrice jedinjenja koje je u pitanju u biorazgradljivim polimerima kao što je polilaktid-poliglikolid. Zavisno od odnosa leka i polimera, i prirode konkretnog polimera koji se koristi, brzina oslobadjanja leka se može kontrolisati. Primeri drugih biodegradabilnih polimera uključuju poli(ortoestre) i poli(anhidride). Depo injektabilne formulacije su takodje pripremljene zatvaranjem leka u lipozome ili u vidu mikroemulzija koje su kompatibilne sa tkivom organizma.
[0092] Kada se jedinjenja iz datog pronalaska primenjuju kao farmaceutski preparati, na ljude i životinje, ona se mogu davati per se ili kao farmaceutska kompozicija koja sadrži, na primer, 0.1 do 99% (još poželjnije, od 10 do 30%) aktivnog sastojka u kombinaciji sa farmaceutski prihvatljivim nosačem.
[0093] Preparati iz datog pronalaska mogu da se daju oralnim putem, parenteralno, topikalno, ili rektalno. Oni se naravno daju u oblicima koji su pogodni za svaki način primene. Na primer, oni se primenjuju u obliku tableta ili kapsula, injektiranjem, inhalacijom, u obliku losiona za oči, masti, supozitorija, itd. davanje putem injekcija, infuzija ili inhalacijom; topikalno pomoću losiona ili masti; i rektalno stavljanjem supozitorija. Poželjne su oralne primene.
[0094] Izrazi “parenteralna primena” i “davanje parenteralno” kako se ovde koristi označavaju načine primene koji nisu enteralna i topičku primenu, obično injektiranjem, i uključuju, bez ograničenja, intravensku, intramuskularnu, intraarterijalnu, intratekalnu, intrakapsularnu, intraorbitalnu, intrakardijačnu, intradermalnu, intraperitonealnu, transtrahealnu, subkutanu, subkutikularnu, intraartikularnu, subkapsularnu, subarahnoidalnu, intraspinalnu i intrasternalnu injekciju i infuziju.
[0095] Izrazi “sistemska primena,” “primenjeno sistemski,” “periferna primena” i “primenjeno periferno” kako se ovde koristi podrazumeva primenu jedinjenja, leka ili drugog materijala osim direktnog davanja u centralni nervni sistem, tako da ulazi u pacijentov sistem, i stoga je predmet metabolizma i drugih sličnih procesa, na primer, subkutanom primenom.
[0096] Ova jedinjenja mogu biti primenjena kod ljudi i životinja za terapiju bilo kojim odgovarajućim načinom primene, uključujući oralni, nazalni, na primer, u formi spreja, rektalni, intravaginalni, parenteralni, intracisternalni i topički, kao praškovi, masti ili kapi, uključujući bukalni i sublingvalni.
[0097] Bez obzira na to koji je put primene izabran, jedinjenja iz prikazanog pronalaska, koja mogu biti korišćena u odgovarajućoj hidratisanoj formi, i/ili farmaceutske kompozicije prikazanog pronalaska, su formulisane u farmaceutski prihvatljivim doznim oblicima uobičajenim postupcima poznatim onima koji su upućeni u stanje tehnike.
[0098] Konkretni nivoi doza aktivnih sastojaka u farmaceutskoj kompoziciji ovog pronalaska mogu da variraju tako da se dobije količina aktivnog sastojka koja je efikasna u postizanju željenog terapeutskog odgovora za odredjenog pacijenta, kompoziciju, i načina primene, bez ispoljavanja toksičnosti po pacijenta.
[0099] Izabrani dozirani nivo će zavisiti od različitih faktora uključujući aktivnost odredjenog jedinjenja prikazanog pronalaska koje je u pitanju, ili njegovog estra, soli ili amida, puta primene, vremena primene, brzine ekskrecije odredjenog jedinjenja koje je u pitanju, dužine trajanja tretmana, drugih lekova, jedinjenja i/ili materijala korišćenih u kombinaciji sa odredjenim jedinjenjem koje je u pitanju, godina, pola, težine, stanja, opšteg zdravlja i prethodne medicinske istorije pacijenta koji se leči, i sličnih faktora poznatih u medicinskoj nauci.
[0100] Lekar ili veterinar koji ima uobičajeno iskustvo u ovoj oblasti može lako da odredi i propiše efikasnu količinu farmaceutske kompozicije koja je potrebna. Na primer, lekar ili veterinar mogu da počnu sa dozama jedinjenja pronalaska koje je u pitanju u farmaceutskoj kompoziciji na nivoima nižim od onih potrebnih u cilju postizanja željenog terapeutskog efekta i postepeno povećavaju doziranje dok željeni efekat ne bude postignut.
[0101] Uopšteno, odgovarajuća dnevna doza jedinjenja pronalaska će biti ona količina jedinjenja koja predstavlja najmanju dozu koja je efekasna u postizanju terapijskog efekta. Takva efikasna doza će uglavnom zavisiti od gore opisanih faktora. Uopšteno, intravenske, intercerebralnoventrikularne i subkutane doze jedinjenja iz ovog pronalaska za pacijenta, kada se koristi za indikovane analgezijske efekte, će varirati od oko 0.0001 do oko 100 mg po kilogramu telesne težine dnevno.
[0102] Ako je poželjno, efikasna dnevna doza aktivnog jedinjenja može biti primenjena kao dve, tri, četiri, pet, šest ili više pod-doza primenjenih odvojeno u odgovarajućim intervalima tokom dana, opciono, u obliku doziranih jedinica.
[0103] Iako je moguće da se jedinjenje iz prikazanog pronalaska daje pojedinačno, poželjno je da se jedinjenje primenjuje kao farmaceutska formulacija (kompozicija).
[0104] Jedinjenja prema pronalasku mogu biti formulisana za primenu na bilo koji pogodan način za upotrebu u humanoj ili veterinarskoj medicini, po analogiji sa drugim farmaceutskim proizvodima.
[0105] U narednom aspektu, datim pronalaskom obezbedjene su farmaceutski prihvatljive kompozicije koje obuhvataju terapijski-efikasnu količinu jednog ili više predmetnih jedinjenja, kako je opisano ranije u tekstu, koje su formulisane zajedno sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih nosača (aditivi) i/ili diluenata. Kao što je detaljnije opisano u nastavku, farmaceutske kompozicije iz datog pronalaska mogu biti posebno formulisane za primenu u čvrstom ili tečnom obliku, uključujući one koji su prilagodjene za sledeće: (1) oralna primena, na primer, natapanjem (vodeni ili nevodeni rastvori ili suspenzije), tablete, bolusi, prahovi, granule, paste za nanošenje na jezik; (2) parenteralna primena, na primer, subkutana, intramuskularna ili intravenusna injekcija kao što je, na primer, sterilni rastvor ili suspenzija; (3) topična primena, na primer, u vidu kreme, masti ili spreja koji se primenjuje na kožu, pluća, ili mukozne membrane; ili (4) intravaginalno ili intrarektalno, na primer, kao vaginaleta, krem ili pena; (5) sublingvalno ili bukalno; (6) okularno; (7) transdermalno; ili (8) nazalno.
[0106] Izraz "lečenje" ima za cilj da obuhvati i profilaksu, terapiju i lek.
[0107] Pacijent koji prima ovaj tretman je bilo koja životinja koja ima potrebu za istim, uključujući primate, naročito ljude, i ostale sisare kao što su konji, stoka, svinja i ovca; i živinu i kućne ljubimce uopšte.
[0108] Jedinjenje iz ovog pronalaska može se davati kao takvo ili u obliku smeša sa farmaceutski prihvatljivim nosačima i može se primenjivati zajedno sa antimikrobnim sredstvima kao što su penicilini, cefalosporini, aminoglikozidi i glikopeptidi. Konjuktivna (vezivna) terapija, tako obuhvata i sekvencijalnu, istovremenu i odvojenu primenu aktivnog jedinjenja na način da terapijski efekti prvog primenjenog nisu potpuno nestali kada se kasnije primenjuju.
[0109] Tehnologija mikroemulsifikacije može poboljšati bioraspoloživost nekih lipofilnih (u vodi nerastvornih) farmaceutskih agenasa. Primeri uključuju Trimetrin (Dordunoo, S. K., et al., Drug Development and Industrial Pharmacy, 17(12), 1685-1713, 1991 i REV 5901 (Sheen, P. C., et al., J Pharm Sci 80(7), 712-714, 1991). Izmedju ostalog, mikroemulsifikacija obezbedjuje povećanu bioraspoloživost pre svega usmeravajući apsorpciju u limfni sistem umesto u cirkulatorni sistem, tako što obilazi jetru, i sprečava uništavanje jedinjenja u hepatobilijarnoj cirkulaciji.
[0110] Dok se razmatraju svi pogodni amfifilični nosači, trenutno poželjni nosači su oni koji imaju GRAS (Generalno-priznati-kao-bezbedni) status, i koji mogu istovremeno solubilizovati jedinjenja iz ovog pronalaska i pretvarati ih u mikroemulziju u kasnijoj fazi kada rastvor dolazi u kontakt sa kompleksom vodene faze (kao što je onaj pronadjen u ljudskom gastrointestinalnom traktu). Amfifilični sastojci koji zadovoljavaju ove zahteve obično imaju HLB (od hidrofilnog do lipofilnog balansa) vrednosti od 2-20, i njihove strukture sadrže ravnočlani lanac alifatičnih radikala u opsegu od C-6 do C-20. Primeri su polietilen-glikolizovani masni gliceridi i polietilen glikoli.
[0111] Posebno su razmatrani komercijalno dostupni amfifilični nosači, uključujući Gelucire-serije, Labrafil, Labrasol, ili Lauroglikol (svi su proizvedeni i distribuirani od strane Gattefosse Corporation, Saint Priest, France), PEG-mono-oleat, PEG-di-oleat, PEG-mono-laurat i di-laurat, Lecitin, Polisorbat 80, itd. (proizvedeni i distribuirani od strane brojnih kompanija u Sjedinjenim Američkim državama i širom sveta).
[0112] Hidrofilni polimeri pogodni za upotrebu u datom pronalasku su oni koji su lako rastvorljivi u vodi, koji mogu biti vezani kovalentnom vezom za lipid koji formira vezikule, i koji se tolerišu (podnose) in vivo bez toksičnih efekata (tj., koji su biokompatiblni). Pogodni polimeri obuhvataju polietilen glikol (PEG), poliaktičnu kis. (takodje se naziva polilaktid), poliglikolnu kiselinu (takodje se naziva poliglikolid), kopolimer koji čine polilaktična kiselina-poliglikolna kiselina, i polivinil alkohol. Poželjni polimeri su oni koji imaju molekulsku težinu od oko 100 ili 120 daltona do oko 5,000 ili 10,000 daltona, i još poželjnije od oko 300 daltona do oko 5,000 daltona. U posebno poželjnom izvodjenju, polimer je polietilenglikol sa molekulskom težinom od oko 100 do oko 5,000 daltona, i još poželjnije sa molekulskom težinom od oko 300 do oko 5,000 daltona. U posebno poželjnom izvodjenju, polimer je polietileneglikol od 750 daltona (PEG(750)). Polimeri takodje mogu biti definisani brojem monomera u njima; u poželjnom izvodjenju datog pronalaska koriste se polimeri od najmanje tri monomera, kao što su PEG polimeri koji se sastoje od tri monomera (približno 150 daltona).
[0113] Ostali hidrofilni polimeri koji mogu biti pogodni za upotrebu u predmetnom pronalasku uključuju polivinilpirolidon, polimetoksazolin, polietiloksazolin, polihidroksipropil metakrilamid, polimetakrilamid, polidimetilakrilamid, i derivatizovane celuloze kao što su hidroksimetilceluloza ili hidroksietilceluloza.
[0114] U odredjenim izvodjenjima, formulacija datog pronalaska sadrži biokompatibilni polimer odabran iz grupe koju čine poliamidi, polikarbonati, polialkileni, estri akrilnih i metakrilnih polimera, polivinil polimeri, poliglikolidi, polisiloksani, poliuretani i ko-polimeri, celuloze, polipropilen, polietileni, polistiren, polimeri mlečne i glikolne kiseline, polianhidridi, poli(orto)estri, poli(buterna kiselina), poli(valerijanska kiselina), poli(laktid-ko-kaprolakton), polisaharidi, proteini, polihijaluronske kiseline, policijanoakrilati, i mešavine, smeše, ili njihovi kopolimeri.
[0115] Ciklodekstrini predstavljaju ciklične oligosaharide, koji se sastoje od 6, 7 ili 8 jedinica glukoze, označenih slovima iz Grčkog pisma alfa, beta ili gama, tim redosledom. Nije poznato da postoje ciklodekstrini sa manje od šest jedinica glukoze. Jedinice glukoze povezane su alfa-1,4-glukozidnim vezama. Kao posledica postojanja konformacije stolice za šećerne jedinice, sve sekundarne hidroksilne
4
grupe (na C-2, C-3) nalaze se na jednoj strani prstena, dok su sve primarne hidroksilne grupe na C-6 nalaze sa druge strane. Kao rezultat, spoljašni delovi su hidrofilni, čineći ciklodekstrine rastvorljivima u vodi. Nasuprot tome, šupljine ciklodekstrina su hidrofobne, s obzirom da su obložene atomima vodonika od C-3 i C-5, i kiseonicima poput etra. Ove matrice dozvoljavaju kompleksaciju sa različitim relativno hidrofobnih jedinjenja, uključujući, na primer, steroidna jedinjenja kao što je 17-beta-estradiol (videti, na primer., van Uden et al. Plant Cell Tiss. Org. Cult. 38:1-3-113 (1994)). Kompleksacija se odvija putem Van der Waalsovih interakcija i formiranjem. Za opšti pregled hemije ciklodekstrina, videti, Wenz, Agnew. Chem. Int. Ed. Engl., 33:803-822 (1994).
[0116] Fizičko-hemijska svojstva derivata ciklodekstrina snažno zavisi od vrste i stepena supstitucije. Na primer, njihova stabilnost u vodi kreće se od nerastvornog (na primer, triacetil-beta-ciklodekstrin) do rastvorljivosti od 147% (w/v) (G-2-beta-ciklodekstrin). Osim toga, oni su rastvorljivi u mnogim organskim rastvaračima. Osobine ciklodekstrina omogućavaju kontrolu rastvorljivosti različitih formulacija komponenata smanjenjem ili povećanjem njegove rastvorljivosti.
[0117] Opisani su brojni ciklodekstrini i postupci za njihovo dobijanje. Na primer, Parmeter (I), i dr. (U.S. Pat. No. 3,453,259) i Gramera, i dr. (U.S. Pat. No. 3,459,731) su opisali elektroneutralne ciklodekstrine. Drugi derivati uključuju ciklodekstrine sa katjonskim svojstvima [Parmeter (II), U.S. Pat. No.3,453,257], nerastvorne ciklodekstrine sa ukrštenim/ unakrsnim vezama (Solms, U.S. Pat. No.
3,420,788), i ciklodekstrine sa anjonskim svojstvima [Parmeter (III), U.S. Pat. No. 3,426,011]. Medju derivatima ciklodekstrina sa anjonskim svojstvima, matičnom ciklodekstrinu su dodate karboksilne kiseline, fosforaste kiseline, fosfinaste kiseline, fosfonske kiseline, fosforne kiseline, tiofosfosfonske kiseline, tiosulfinske kiseline, i sulfonske kiseline [videti, Parmeter (III), gore]. Osim toga, ciklodekstrinski derivati sulfoalkil etra su opisani od strane Stella, et al. (U.S. Pat. No.5,134,127).
[0118] Lipozomi se sastoje od najmanje jedne lipidne dvoslojne membrane koja zatvara vodeni unutrašnji odeljak. Lipozomi se mogu karakterisati vrstom membrane i veličinom. Male unilamelarne vezikule (SUVs) imaju jednu membranu i obično se kreću u opsegu izmedju 0.02 i 0.05 μm u prečniku; velike unilamelarne vezikule (LUVS) obično su veće od 0.05 μm. Oligolamelarne velike vezikule i multilamelarne vezikule imaju višestruke, obično koncentrične, slojeve membrana i obično su veće od 0.1 μm. Lipozomi sa nekoliko nekoncentričnih membrana, tj., nekoliko manjih vezikula koje se nalaze unutar veće vezikule, nazivaju se multivezikularnim vezikulama.
[0119] Jedan aspekt ovog pronalaska odnosi se na formulacije sa lipozomima koje sadrži jedinjenje iz datog pronalaska, gde je lipozomska membrana tako formulisana da obezbedjuje lipozom sa povećanim nosećim kapacitetom. Alternativno ili pored toga, jedinjenje iz datog pronalaska može biti sadržano unutar, ili može biti adsorbovano unutar lipozomskog dvosloja lipozoma. Jedinjenja iz datog pronalaska mogu da se združe sa lipidnim surfaktantom i nose unutar unutrašenjeg prostora lipozoma; u ovim slučajevima, lipozomska membrana je otporna na disruptivne efekte agregata aktivnog sredstva i surfaktanta.
[0120] Prema jednom izvodjenju datog pronalaska, lipidni dvosloj lipozoma sadrži lipide derivatizovane sa polietilen glikolom (PEG), tako da PEG lanci proširuju sa unutrašnje površine lipidnog dvosloja u unutrašnji prostor koji je enkapsuliran lipozomom, i koji je proširen sa spoljašnje strane lipidnog dvosloja u okolnu sredinu.
[0121] Aktivni agensi sadržani u lipozomima iz datog pronalaska su u rastvorljivom obliku. Agregati surfaktanta i aktivni agens (kao što su emulzije ili micele koje sadrže aktivni agens od značaja) mogu biti upleteni unutar unutrašnjeg prostora lipozoma prema datom pronalasku. Surfaktant deluje kako bi dispergovao i rastvorio aktivni agens, i može da bude odabran od bilo kojeg od odgovarajućeg alifatičnog, cikloalifatičnog ili aromatičnog surfaktanta, uključujući bez ograničenja na biokompatibilne lizofosfatidilholine (LPCs) različitih dužina lanaca (na primer, od oko C.sup.14 do oko C.sup.20). Polimer-derivatizovani lipidi kao što su PEG-lipidi mogu se takodje koristiti za formiranje micela jer će delovati da inhibiraju fuziju micela/membrana, i kao dodatak polimera u molekule surfaktanta smanjuje CMC surfaktanta i pomaže u formiranju micela. Poželjni su surfaktanti sa CMC koji su mikromolarnom opsegu; više CMC surfaktanata mogu da se koriste za pripremu micela zarobljenih u lipozomima iz datog pronalaska, medjutim, micele monomera surfaktanta mogu uticati na stabilnost lipozomskog dvosloja i mogu biti faktor kod dizajniranja lipozoma željene stabilnosti.
[0122] Lipozomi prema predmetnom pronalasku mogu se pripremiti bilo kojoj od različitih tehnika koje su poznate u stanju tehnike. Videti, na primer, Američki Pat. br.4,235,871; objavljene PCT prijave WO 96/14057; Novi RRC, Lipozomi: A practical approach, IRL Press, Oxford (1990), strane 33-104; Lasic DD, Liposomes from physics to applications, Elsevier Science Publishers BV, Amsterdam, 1993.
[0123] Na primer, lipozomi mogu da se dobiju difuzijom lipida koji je derivatizovan sa hidrofilnim polimerom u preoblikovanim lipozomima, kao što je izlaganje preoblikovanih lipozoma na micelama sastavljenim od polimera nakalemljenim na lipide (lipid-grafted polymers), u lipidnim koncentracijama koje odgovaraju finalnom molskom procentu derivatizovanog lipida koji je poželjan u lipozomu. Lipozomi koji sadrže hidrofilni polimer mogu takodje da se formiraju homogenizacijom, hidratacijom lipidnih polja, ili ekstruzionim tehnikama, kao što je poznato u stanju tehnike.
[0124] U jednom aspektu datog pronalaska, lipozomi se dobijaju da bi imali suštinski homogene veličine u odabranom opsegu veličine. Jedan efikasan postupak odredjivanja veličine obuhvata ekstrudiranje vodene suspenzije lipozoma kroz niz polikarbonatnih membrana koji imaju izabranu jedinstvenu veličina pora; veličina pore membrane grubo odgovara najvećim veličinama lipozoma koji su proizvedeni ekstruzijom kroz tu membranu. Videti, na primer američki Pat. br. 4,737,323 (Apr. 12, 1988).
[0125] Karakteristike oslobadjanja formulacije zavise od materijala za inkapsulaciju, koncentracije inkapsuliranog leka, i prisustva sredstava za modifikovanje oslobadjanja leka. Na primer, oslobadjanje može da bude podešeno tako da bude zavisno od pH, na primer, korišćenjem obloge osetljive na pH koja oslobadja lek samo na niskom pH, kao u želucu, ili višem pH, kao u tankom crevu. Enterička obloga može da se koristi za sprečavanje oslobadjanja do posle prolaska kroz želudac. Višestruke obloge ili smeše cijanamida inkapsuliranog u različite materijale može da se koristi za dobijanje početnog oslobadjanja formulacije u želucu, praćenog kasnijim oslobadjanjem u tankom crevu. Oslobadjanje može takodje da bude podešeno uključivanjem soli ili sredstava koja obrazuju pore, koja mogu da povećaju preuzimanje vode ili oslobadjanje leka putem difuzije iz kapsule. Pomoćne supstance (ekscipijensi) koje menjaju rastvorljivost leka mogu takodje da se koriste za kontrolisanje brzine oslobadjanja. Sredstva koja poboljšavaju raspadanje matrice ili oslobadjanje iz matrice mogu takodje da budu uključena. Ona mogu da budu dodata leku, dodata kao posebna faza (tj., kao čestice), ili mogu da budu istovremeno rastvorena u fazi polimera u zavisnosti od jedinjenja. U svim slučajevima, količina treba da bude izmedju 0.1 i trideset procenata (tež./tež. polimera). Tipovi sredstava za poboljšanje raspadanja uključuju neorganske soli kao što su amonijum sulfat i amonijum hlorid, organske kiseline kao što su limunska kiselina, benzojeva kiselina i askorbinska kiselina, neorganske baze kao što su natrijum karbonat, kalijum karbonat, kalcijum karbonat, cink karbonat i cink hidroksid i organske baze kao protamin sulfat, spermin, holin, etanolamin, dietanolamin i trietanolamin i površinski aktivne supstance kao Tween® i Pluronic®. Sredstva koja obrazuju pore koja dodaju mikrostrukturu matricama (tj., jedinjenja rastvorljiva u vodi kao što su neorganske soli i šećeri) dodaju se kao čestice. Opseg treba da bude izmedju jednog i trideset procenata (tež./tež. polimera).
[0126] Upotreba takodje može biti prilagodjena izmenom vremena boravka čestica u stomaku. Ovo se ne može postići, na primer, prevlačenjem čestica sa, ili odabirom enkapsuliranog materijala, mukozalnog adhezivnog polimera. Primeri obuhvataju najveći broj polimera sa slobodnim karboksilnim grupama, kao što je hitosan, celuloze, i naročito poliakrilati (u ovom tekstu, poliakrilati se odnose na polimere koji obuhvataju akrilatne grupe i modifikovane akrilatne grupe kao što su cijanoakrilati i metakrilati).
4
Farmaceutske kombinacije
[0127] Pronalazak se posebno odnosi na upotrebu jedinjenja formule I (ili farmaceutske kompozicije koja sadrži jedinjenje formule I) u lečenju jedne ili više ovde pomenutih bolesti; pri čemu je odgovor na lečenje povoljan kao što je pokazano, na primer, delimičnim ili potpunim uklanjanjem jednog ili više od simptoma bolesti, do potpunog izlečenja ili remisije bolesti.
[0128] Jedinjenje formule (I) može se takodje koristiti u kombinaciji sa sledećim jedinjenjima i konjugatima antitelo-lek:
Inhibitori BCR-ABL: Imatinib (Gleevec®); Inilotinib hidrohlorid; Nilotinib (Tasigna®); Dasatinib (BMS-345825); Bosutinib (SKI-606); Ponatinib (AP24534); Bafetinib (INNO406); Danusertib (PHA-739358), AT9283 (CAS 1133385-83-7); Saracatinib (AZD0530); i N-[2-[(1S,4R)-6-[[4-(Ciklobutilamino)-5-(trifluorometil)-2-pirimidinil]amino]-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1,4-imin-9-il]-2-oksoetil]-acetamid (PF-03814735, CAS 942487-16-3); i LGX818.
[0129] ALK inhibitori: PF-2341066 (XALKORI<®>; crizotinib); 5-hloro-N4-(2-(izopropilsulfonil)fenil)-N2-(2-metoksi-4-(4-(4-metilpiperazin-1-il)piperidin-1-il)fenil)pirimidin-2,4-diamin; GSK1838705A; i CH5424802.
[0130] BRAF inhibitori: Vemurafanib (PLX4032); i Dabrafenib.
[0131] FLT3 inhibitori – sunitinib malat (prodaje se pod trgovačkim imenom Sutent® od strane Pfizera); PKC412 (midostaurin); tanutinib, sorafenib, sunitinib, midostaurin, lestaurtinib, KW-2449, hizartinib (AC220) i krenolanib.
MEK Inhibitori – trametinib.
Inhibitori receptora vaskularnog Endotelijalnog faktora rasta (VEGF): Bevacizumab (prodaje se pod trgovačkim imenom Avastin® od strane Genentech/Roche), aksitinib, (N-metil-2-[[3-[(E)-2-piridin-2-iletenil]-1H-indazol-6-il]sulfanil]benzamid, koji je poznat i kao AG013736, i opisan u objavljenoj PCT prijavi br. WO 01/002369), Brivanib Alaninat ((S)-((R)-1-(4-(4-Fluoro-2-metil-1H-indol-5-iloksi)-5-metilpirolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-iloksi)propan-2-il)2-aminopropanoat, koji je poznat i kao BMS-582664), motesanib (N-(2,3-dihidro-3,3-dimetil-1H-indol-6-il)-2-[(4-piridinilmetil)amino]-3-piridinkarboksamid, i opisan u objavljenoj PCT prijavi br. WO 02/066470), pazireotid (takodje poznat i kao SOM230, i opisan u objavljenoj PCT prijavi br. WO 02/010192), sorafenib (prodaje se pod trgovačkim imenom Nexavar®);
Inhibitorima receptora HER2: Trastuzumab (prodaje se pod zaštićenim znakom Herceptin® proizvodjača Genentech/Roche), neratinib (takodje poznat kao HKI-272, (2E)-N-[4-[[3-hloro-4-[(piridin-2-il)metoksi]fenil]amino]-3-cijano-7-etoksihinolin-6-il]-4-(dimetilamino)but-2-enamid, i opisan u PCT objavi br. WO 05/028443), lapatinib ili lapatinib ditozilat (prodaje se pod zaštićenim znakom Tykerb® proizvodjača GlaxoSmithKline); Trastuzumab emtanzin (u Sjedinjenim Američkim državama, ado-trastuzumab emtanzin, trgovačko ime Kadcyla)- konjugat antitela sa lekom koji se sastoji od monoklonskog antitela trastuzumab (Herceptin) koji je povezan sa citotoksičnim sredstvom mertanzine (DM1);
Antitelima CD20: Rituksimab (prodaje se pod zaštićenim znacima Riuxan® i MabThera® proizvodjača Genentech/Roche), tositumomab (prodaje se pod zaštićenim znakom Bexxar® proizvodjača GlaxoSmithKline), ofatumumab (prodaje se pod zaštićenim znakom Arzerra® proizvodjača GlaxoSmithKline)
Inhibitorima tirozin kinaze: Erlotinib hidrohlorid (prodaje se pod zaštićenim znakom Tarceva® proizvodjača Genentech/Roche), Linifanib (N-[4-(3-amino-1H-indazol-4-il)fenil]-N'-(2-fluoro-5-metilfenil)urea, takodje poznat kao ABT 869, dostupan kod Genentech), sunitinib malat (prodaje se pod zaštićenim imenom Sutent® proizvodjača Pfizer), bosutinib (4-[(2,4-dihloro-5-metoksifenil)amino]-6-metoksi-7-[3-(4-metilpiperazin-1-il)propoksi]hinolin-3-karbonitril, takodje poznat kao SKI-606, i opisan u SAD patentu br. 6,780,996), dasatinib (prodaje se pod zaštićenim imenom Sprycel® proizvodjača Bristol-Myers Squibb), armala (takodje poznat kao pazopanib, prodaje se pod zaštićenim imenom Votrient® proizvodjača GlaxoSmithKline), imatinib i imatinib mezilat (prodaje se pod zaštićenim imenima Gilvec® i Gleevec® proizvodjača Novartis);
Inhibitorima sinteze DNK: Kapecitabin (prodaje se pod zaštićenim znakom Xeloda® proizvodjača Roche), gemcitabin hidrohlorid (prodaje se pod zaštićenim znakom Gemzar® proizvodjača Eli Lilly and Company), nelarabin ((2R,3S,4R,5R)-2-(2-amino-6-metoksi-purin-9-il)-5-(hidroksimetil)oksolan-3,4-diol, prodaje se pod zaštićenim imenima Arranon® i Atriance® proizvodjača GlaxoSmithKline); Antineoplastičnim sredstvima: oksaliplatin (prodaje se pod zaštićenim imenom Eloxatin® proizvodjača Sanofi-Aventis i opisan je u američkom patentu br.4,169,846);
Inhibitorima receptora epidermalnog faktora rasta (EGFR): Gefitnib (prodaje se pod zaštićenim imenom Iressa®), N-[4-[(3-Hloro-4-fluorofenil)amino]-7-[[(3''S'')-tetrahidro-3-furanil]oksi]-6-hinazolinil]-4(dimetilamino)-2-butenamid, prodaje se pod zaštićenim imenom Tovok® proizvodjača Boehringer Ingelheim), cetuksimab (prodaje se pod zaštićenim imenom Erbitux® proizvodjača Bristol-Myers Squibb), panitumumab (prodaje se pod zaštićenim imenom Vectibix® proizvodjača Amgen); Inhibitorima dimerizacije HER: Pertuzumab (prodaje se pod zaštićenim znakom Omnitarg®, proizvodjača Genentech);
Human Granulocyte colony-stimulating factor (G-CSF) modulators: Filgrastim (sold under the tradename Neupogen® by Amgen)
4
Modulatorima humanog granulocitnog faktora stimulacije kolonija (G-CSF): Filgrastim (prodaje se pod zaštićenim imenom Neupogen® proizvodjača Amgen);
Imunomodulatorima: Afutuzumab (dostupan kod Roche®), pegfilgrastim (prodaje se pod zaštićenim imenom Neulasta® proizvodjača Amgen), lenalidomid (takodje poznat kao CC-5013, prodaje se pod zaštićenim imenom Revlimid®), talidomid (prodaje se pod zaštićenim imenom Thalomid®);
CD40 inhibitori: Dacetuzumab (takodje poznat i kao SGN-40 ili huS2C6, dostupan kod Seattle Genetics, Inc) Inhibitorima CD40: Dacetuzumab (takodje poznat kao SGN-40 ili huS2C6, dostupan kod Seattle Genetics, Inc);
Agonistima pro-apoptotskog receptora (PARA): Dulanermin (takodje poznat kao AMG-951, dostupan kod Amgen/Genentech);
Hedgehog antagonistima: 2-hloro-N-[4-hloro-3-(2-piridinil)fenil]-4-(metilsulfonil)- benzamid (takodje poznat kao GDC-0449, i opisan u objavljenoj PCT prijavi br. WO 06/028958);
Inhibitorima PI3K: 4-[2-(1H-Indazol-4-il)-6-[[4-(metilsulfonil)piperazin-1-il]metil]tieno[3,2-d]pirimidin-4-il]morfolin (takođe poznat kao GDC 0941 i opisan u objavljenoj PCT br. WO 09/036082 i WO 09/055730), 2-Metil-2-[4-[3-metil-2-okso-8-(hinolin-3-il)-2,3-dihidroimidazo[4,5-c]hinolin-1-il]fenil]propionitril (takodje poznat kao BEZ 235 ili NVP-BEZ 235, i opisan u u objavljenoj PCT prijavi br. WO 06/122806);
Inhibitorima fosfolipaze A2: Anagrelid (prodaje se pod zaštićenim imenom Agrylin®) ;
Inhibitorima BCL-2: 4-[4-[[2-(4-hlorofenil)-5,5-dimetil-1-cikloheksen-1-il]metil]-1-piperazinil]-N-[[4-[[(1R)-3-(4-morfolinil)-1-[(feniltio)metil]propil]amino]-3-[(trifluorometil)sulfonil]fenil]
sulfonil]benzamid (takodje poznat kao ABT-263 i opisan u PCT objavi br. WO 09/155386); ;
Inhibitorima kinaze mitogenom aktivirane protein kinaze (MEK): XL-518 (Cas No. 1029872-29-4, dostupan kod ACC Corp.);
Inhibitorima aromataze: Egzemestan (prodaje se pod zaštićenim znakom Aromasin® proizvodjača Pfizer), letrozol (prodaje se pod zaštićenim imenom Femara® proizvodjača Novartis), anastrozol (prodaje se pod zaštićenim imenom Arimidex®);
Inhibitorima topoizomeraze I: Irinotekan (prodaje se pod zaštićenim znakom Camptosar®
proizvodjača Pfizer), topotekan hidrohlorid (prodaje se pod zaštićenim imenom Hycamtin®
proizvodjača GlaxoSmithKline) ;
Inhibitorima topoizomeraze II: Etopozid (takodje poznat kao VP-16 i Etopozid fosfat, prodaje se pod zaštićenim imenima Toposar®, VePesid® i Etopophos®), tenipozid (takodje poznat kao VM-26, prodaje se pod zaštićenim imenom Vumon®);
Inhibitorima mTOR: Temsirolimus (prodaje se pod zaštićenim imenom Torisel® proizvodjača Pfizer), ridaforolimus (formalno poznat kao deferolimus, (1R,2R,4S)-4-[(2R)-2
4
[(1R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21R,23S,24E,26E,28Z,30S,32S,35R)-1,18-dihidroksi-19,30-dimetoksi-15,17,21,23,29,35-heksametil-2,3,10,14,20-pentaokso-11,36-dioksa-4-azatriciklo[30.3.1.0<4,9>]heksatri akonta-16,24,26,28-tetraen-12-il]propil]-2-metoksicikloheksil dimetilfosfinat, takodje poznat kao AP23573 i MK8669, i opisan u PCT objavi br. WO 03/064383), everolimus (prodaje se pod zaštićenim imenom Afinitor® proizvodjača Novartis);
Inhibitorima osteoklastične resorpcije kostiju: Monohidrat 1-hidroksi-2-imidazol-1-il-fosfonoetil) fosfonske kiseline (prodaje se pod zaštićenim imenom Zometa® proizvođača Novartis);
Konjugatima CD33 antitela sa lekom: Gemtuzumab ozogamicin (prodaje se pod zaštićenim imenom Mylotarg® proizvodjača Pfizer/Wyeth);
Konjugatima CD22 antitela sa lekom: Inotuzumab ozogamicin (takodje označen kao CMC-544 i WAY-207294, dostupan kod Hangzhou Sage Chemical Co., Ltd.) ;
Konjugatima CD20 antitela sa lekom: Ibritumomab tiuksetan (prodaje se pod zaštićenim imenom Zevalin®); Analozi somatostatina: oktreotid (takođe poznat kao oktreotid acetat, prodaje se pod zaštićenim imenima Sandostatin® i Sandostatin LAR®);
Receptor Activator for Nuclear Factor κ B (RANK) inhibitors: Denosumab (sold under the tradename Prolia® by Amgen)
Sintetičkim interleukinom-11 (IL-11): oprelvekin (prodaje se pod zaštićenim imenom Neumega® proizvodjača Pfizer/Wyeth);
Sintetičkim eritropoetinom: Darbepoetin alfa (prodaje se pod zaštićenim imenom Aranesp® proizvođača Amgen) ;
Inhibitorima receptorskog aktivatora za nukleani faktor κ B (RANK): Denosumab (prodaje se pod zaštićenim imenom Prolia® proizvođača Amgen);
Peptidnim antitelima mimeticima trombopoetina: Romiplostim (prodaje se pod zaštićenim imenom Nplate® proizvođača Amgen;
Stimulatorima ćelijskog rasta: Palifermin (prodaje se pod zaštićenim imenom Kepivance® proizvođača Amgen) ;
Antitelima protiv receptora insulinu sličnog faktora rasta 1 (IGF-1R): Figitumumab (takođe poznat kao CP-751,871, dostupan kod ACC Corp), robatumumab (CAS No.934235-44-6);
Anti-CS1 antitelima: Elotuzumab (HuLuc63, CAS No.915296-00-3);
CD52 antitelima: Alemtuzumab (prodaje se pod zaštićenim imenom Campath®);
Inhibitorima CTLA-4: Tremelimumab (IgG2 monoklonsko antitelo dostupno kod Pfizer, ranije poznato kao ticilimumab, CP-675,206), ipilimumab (CTLA-4 antitelo, takodje poznato kao MDX-010, CAS No.
477202-00-9);
4
Inhibitori PD1: Nivolumab (na koji se u ovom tekstu poziva i kao MDX-1106, MDX-1106-04, ONO-4538, BMS0936558, CAS Registry No: 946414-94-4) opisan u, na primer, američkoj prijavi broj 8,008,449, i čija je sekvenca tamo opisana (ili sekvenca koja je u značajnoj meri identična ili slična njoj, na primer, sekvenca koja ima najmanje 85%, 90%, 95% identičnosti ili više, sa sekvencom koja je definisana u američkojj prijavi broj 8,008,449). Pembrolizumab (koji se u ovom tekstu pominje kao Lambrolizumab, MK-3475, MK03475, SCH-900475 ili KEYTRUDA), opisan u, na primer, američkoj prijavi broj 8,354,509 i u objavljenoj patentnoj prijavi br.2009/114335, i čija je sekvenca tamo navedena (ili sekvenca koja je u značajnoj meri identična ili slična njoj, na primer, sekvenca koja ima najmanje 85%, 90%, 95% identičnosti ili više, sa sekvencom koja je definisana u američkoj prijavi broj 8,354,509 i u objavljenoj patentnoj prijavi br. 2009/114335); imunoadhezin (na primer, imunoadhezin koji se sastoji od ekstracelularnog ili dela kojim se vezuje za PD-1 na PD-L1 ili PD-L2 fuzionisan za konstantni region (npr., Fc region imunoglobulinske sekvence); Pidilizumab (CT-011; Cure Tech) je humanizovano IgG1k monoklonsko antitelo koje se vezuje za PD1 (Pidilizumab i druga humanizovana anti-PD-1 monoklonska antitelam su opisana u objavljenoj patentnoj prijavi br.2009/101611); i AMP-224 (B7-DCIg; „Amplimmune“), opisan u objavljenoj patentnoj prijavi br.2010/027827 i u objavljenoj patentnoj prijavi br. 2011/066342), je PD-L2 Fc fuzionisani solubilni receptor koji blokira interakciju izmedju PD1 i B7-H1; drugi inhibitori PD-1, na primer, anti-PD1 antitela opisana u u američkoj prijavi broj 8,609,089, američkoj prijavi broj 2010028330, i/ili u američkoj prijavi broj 20120114649.
[0133] inhibitori PDL1: MSB0010718C (takodje se nazivaju i A09-246-2; Merck Serono) je monoklonsko antitelo koji se vezuje za PD-L1 i otkriveno je na primer, u objavljenoj prijavi WO 2013/0179174, (i ma sekvencu koja je u suštini identična ili slična, na primer, sekvenci koja ima barem 85%, 90%, 95% identičnosti ili više u odnosu na sekvencu koja je naznačena u objavljenoj prijavi WO 2013/0179174); i anti-PD-Ll vezujući antagonista koji je odabran od YW243.55.S70, MPDL3280A (Genetech/Roche) predstavlja humano Fc optimizovano IgG1 monoklonsko antitelo koje se vezuje za PD-L1 (MDPL3280A i druga humana monoklonska antitela koja se vezuju za PD-L1 i koja su opisana u američkom Patentu br.: 7,943,743 i objavljena američka prijava br.: 20120039906); MEDI-4736, MSB-0010718C, ili MDX-1105 (MDX-1105, poznat i kao BMS-936559, koji predstavlja anti-PD-Ll antitelo koje je opisano u objavljenoj prijavi WO2007/005874; antitelo YW243.55.S70 predstavlja anti-PD-Ll koji je opisan u objavljenoj prijavi WO 2010/077634); .
inhibitori LAG-3: BMS-986016 (takodje se nazivaju i BMS986016; Bristol-Myers Squibb) predstavlja monoklonsko antitelo koje se vezuje za LAG-3. BMS-986016 i druga humanizovana anti-LAG-3 antitela opisana su u US 2011/0150892, WO2010/019570, i WO2014/008218.
[0134] agonisti GITR: primeri za agoniste GITR obuhvataju, na primer, GITR fuzione proteine i anti-GITR antitela (na primer, dvovalentna anti-GITR antitela), kao što su, GITR fuzioni protein opisan u
4
američkom Patentu br.: 6,111,090, Evropskom Patentu br.: 090505B1, američkom Patentu br.: 8,586,023, objavljenim PCT prijavama br.: WO 2010/003118 i 2011/090754, ili anti-GITR antitela opisanim na primer, u američkom Patentu br.: 7,025,962, Evropskom Patentu br.: 1947183B1, američkom Patentu br.: 7,812,135, američkom Patentu br.: 8,388,967, američkom Patentu br.: 8,591,886, Evropskom Patentu br.: EP 1866339, objavljenoj PCT prijavi br.: WO 2011/028683, objavljenoj PCT prijavi br.:WO 2013/039954, PCT prijavi br.: WO2005/007190, PCT prijavi br.: WO 2007/133822, PCT prijavi br.: WO2005/055808, PCT prijavi br.: WO 99/40196, PCT prijavi br.: WO 2001/03720, PCT prijavi br.: WO99/20758, objavljenoj PCT prijavi br.: WO2006/083289, PCT prijavi br.: WO 2005/115451, američkom Patentu br.: 7,618,632, i PCT prijavi br.: WO 2011/051726.
[0135] Inhibitorima histon deacetilaze (HDI): Voninostat (prodaje se pod zaštićenim imenom Zolinza® proizvodjača Merck);
[0136] anti-CTLA4 antitela obuhvataju Tremelimumab (IgG2 monoklonsko antitelo dostupno od Pfizer, ranije poznat kao tikilimumab, CP-675,206); i Ipilimumab (CTLA-4 antitelo, takodje poznato i kao MDX-010, CAS br.477202-00-9).
[0137] anti-TIM-3 antitela ili njihov fragment za vezivanje antigena.
[0138] Alkilirajućim sredstvima: Temozolomid (prodaje se pod zaštićenim imenima Temodar® i Temodal® proizvođača Schering-Plough/Merck), daktinomicin (takođe poznat kao aktinomicin-D i prodaje se pod zaštićenim imenom Cosmegen®), melfalan (takođe poznat kao L-PAM, L-sarkolizin i fenilalanin iperit, prodaje se pod zaštićenim imenom Alkeran®), altretamin (takođe poznat kao heksametilmelamin (HMM), prodaje se pod zaštićenim imenom Hexalen®), karmustin (prodaje se pod zaštićenim imenom BiCNU®), bendamustin (prodaje se pod zaštićenim imenom Treanda®), busulfan (prodaje se pod zaštićenim imenima Busulfex® i Myleran®), karboplatin (prodaje se pod zaštićenim imenom Paraplatin®), lomustin (takođe poznat kao CCNU, prodaje se pod zaštićenim imenom CeeNU®), cisplatin (takođe poznat kao CDDP, prodaje se pod zaštićenim imenima Platinol® i Platinol®-AQ), hlorambucil (prodaje se pod zaštićenim imenom Leukeran®), ciklofosfamid (prodaje se pod zaštićenim imenima Cytoxan® i Neosar®), dakarbazin (takođe poznat kao DTIC, DIC i imidazol karboksamid, prodaje se pod zaštićenim imenom DTIC-Dome®), altretamin (takođe poznat kao heksametilmelamin (HMM) prodaje se pod zaštićenim imenom Hexalen®), ifosfamid (prodaje se pod zaštićenim imenom Ifex®), prokarbazin (prodaje se pod zaštićenim imenom Matulane®), mehloretamin (takođe poznat kao azotni iperit, mustin i mehloroetamin hidrohlorid, prodaje se pod zaštićenim imenom Mustargen®), streptozocin (prodaje se pod zaštićenim imenom Zanosar®), tiotepa (takodje poznat kao tiofosfoamid, TESPA i TSPA, prodaje se pod zaštićenim imenom Thioplex®;
4
Modifikatorima biološkog odgovora: bacil Kalmet-Gerin (prodaje se pod zaštićenim imenima theraCys® i TICE® BCG), denileukin diftitoks (prodaje se pod zaštićenim imenom Ontak®);
Anti-tumorskim antibioticima: doksorubicin (prodaje se pod zaštićenim imenima Adriamycin® i Rubex®), bleomicin (prodaje se pod zaštićenim imenom lenoxane®), daunorubicin (takođe poznat kao dauorubicin hidrohlorid, daunomicin i rubidomicin hidrohlorid, prodaje se pod zaštićenim imenom Cerubidine®), lipozomalni daunorubicin (daunorubicin citrat lipozom, prodaje se pod zaštićenim imenom DaunoXome®), mitoksantron (takođe poznat kao DHAD, prodaje se pod zaštićenim imenom Novantrone®), epirubicin (prodaje se pod zaštićenim imenom Ellence™), idarubicin (prodaje se pod zaštićenim imenima Idamycin®, Idamycin PFS®), mitomicin C (prodaje se pod zaštićenim imenom Mutamycin®);
Anti-mikrotubularnim sredstvima: Estramustin (prodaje se pod zaštićenim imenom Emcyl®);
Inhibitorima katepsina K: Odanacatib (takođe poznat kao MK-0822, N-(1-cijanociklopropil)-4-fluoro-N<2>-{(1S)-2,2,2-trifluoro-1-[4'-(metilsulfonil)bifenil-4-il]etil}-L-leucinamid, dostupan kod Lanzhou Chon Chemicals, ACC Corp., and ChemieTek, i opisan u PCT objavi br. WO 03/075836) ;
Analozima epotilona B: Iksabepilon (prodaje se pod zaštićenim imenom Lxempra® proizvođača Bristol-Myers Squibb);
Inhibitorima proteina toplotnog šoka (HSP): Tanespimicin (17-alilamino-17-demetoksigeldanamicin, takođe poznat kao KOS-953 i 17-AAG, dostupan kod SIGMA, i opisan u SAD patent br.4,261,989); Agonistima TpoR: Eltrombopag (prodaje se pod zaštićenim imenima Promacta® i Revolade® proizvođača GlaxoSmithKline);
Anti-mitotskim sredstvima: Docetaksel (prodaje se pod zaštićenim imenom Taxotere® proizvođača Sanofi-Aventis);
Inhibitorima adrenalnih steroida: aminoglutetimid (prodaje se pod zaštićenim imenom Cytadren®); Androgenima: Fluoksimesteron (prodaje se pod zaštićenim imenom Halotestin®)
Anti-androgenima: Nilutamid (prodaje se pod zaštićenim imenima Nilandron® i Anandron®), bikalutamid (prodaje se pod zaštićenim imenom Casodex®), flutamid (prodaje se pod zaštićenim imenom Fulexin™);
Inhibitorima proteazoma: Bortezomib (prodaje se pod zaštićenim imenom Velcade®);
Inhibitorima CDK1: Alvocidib (takodje poznat kao flovopirdol ili HMR-1275, 2-(2-hlorofenil)-5,7-dihidroksi-8-[(3S,4R)-3-hidroksi-1-metil-4-piperidinil]-4-hromenon, i opisan u SAD patentu br.
5,621,002);
Agonistima receptora gonadotropin-oslobađajućeg hormona (GnRH): Leuprolid ili leuprolid acetat (prodaje se pod zaštićenim imenima Viadure® proizvodjača Bayer AG, Eligard® proizvođača Sanofi-Aventis i Lupron® proizvođača Abbott Lab);
Taksan anti-neoplastičnim sredstvima: Kabazitaksel (1-hidroksi-7β,10β-dimetoksi-9-okso-5β,20-epoksitaks-11-en-2α,4,13α-triil-4-acetat-2-benzoat-13-[(2R,3S)-3-{[(terc-butoksi)karbonil]amino}-2-hidroksi-3-fenilpropanoat), larotaksel ((2α,3ξ,4α,5β,7α,10β,13α)-4,10-bis(acetiloksi)-13-({(2R,3S)-3-[(terc-butoksikarbonil) amino]-2-hidroksi-3-fenilpropanoil}oksi)-1- hidroksi-9-okso-5,20-epoksi-7,19-ciklotaks-11-en-2-il benzoat);
Agonistima receptora 5HT1a: Ksaliproden (takođe poznat kao SR57746, 1-[2-(2-naftil)etil]-4-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2,3,6-tetrahidropiridin, i opisan u SAD patentu br.5,266,573);
HPC vakcinama: Cervarix® koju prodaje GlaxoSmithKline, Gardasil® koju prodaje Merck;
Sredstvima za heliranje gvožđa: Deferasinoks (prodaje se pod zaštićenim imenom Exjade® proizvodjača Novartis);
Anti-metabolitima: Klaribin (2-hlorodeoksiadenozin, prodaje se pod zaštićenim imenom Leustatin®), 5-fluorouracil (prodaje se pod zaštićenim imenom Adrucil®), 6-tioguanin (prodaje se pod zaštićenim imenom Purinethol®), pemetreksed (prodaje se pod zaštićenim imenom Alimta®), citarabin (takodje poznat kao arabinozilcitozin (Ara-C), prodaje se pod zaštićenim imenom Cytosar-U®), lipozomalni citarabin (takodje poznat kao Lipozomalni Ara-C, prodaje se pod zaštićenim imenom DepoCyt™), decitabin (prodaje se pod zaštićenim imenom Dacogen®), hidroksiurea (prodaje se pod zaštićenim imenima Hydrea®, Droxia™ i Mylocel™), fludarabin (prodaje se pod zaštićenim imenom Fludara®), floksuridin (prodaje se pod zaštićenim imenom FUDR®), kladribin (takodje poznat kao 2-hlorodeoksiadenozin (2-CdA) prodaje se pod zaštićenim imenom Leustatin™), metotreksat (takodje poznat kao ametopterin, metotreksat natrijum (MTX), prodaje se pod zaštićenim imenima Rheumatrex® i Trexall™), pentostatin (prodaje se pod zaštićenim imenom Nipent®);
Bisfosfonatima: Pamidronat (prodaje se pod zaštićenim imenom Aredia®), zoledronska kiselina (prodaje se pod zaštićenim imenom Zometa®);
Demetilirajućim sredstvima: 5-azacitidin (prodaje se pod zaštićenim imenom Vidaza®), decitabin (prodaje se pod zaštićenim imenom Dacogen®);
Biljnim alkaloidima: Paklitaksel vezan za protein (prodaje se pod zaštićenim imenom Abraxane®), vinblastin (takodje poznat kao vinblastin sulfat, vinkaleukoblastin i VLB, prodaje se pod zaštićenim imenima Alkaban-AQ® i Velban®), vinkristin (takodje poznat kao vinkristin sulfat, LCR i VCR, prodaje se pod zaštićenim imenima Oncovin® i Vincasar Pfs®), vinorelbin (prodaje se pod zaštićenim imenom Navelbine®), paklitaksel (prodaje se pod zaštićenim imenima Taxol i Onxal™);
1
Retinoidima: Alitretinoin (prodaje se pod zaštićenim imenom Panretin®), tretinoin (sve-trans retinoinska kiselina, takođe poznat kao ATRA, prodaje se pod zaštićenim imenom Vesanoid®), Izotretinoin (13-cis-retinoinska kiselina, prodaje se pod zaštićenim imenima Accutane®, Amnesteem®, Claravis®, Clarus®, Decutan®, Isotane®, Izotech®, Oratane®, Isotret® i Sotret®), beksaroten (prodaje se pod zaštićenim imenom Targretin®);
Glukokortikosteroidima: Hidrokortizon (takodje poznat kao kortizon, hidrokortizon natrijum sukcinat, hidrokortizon natrijum fosfat i prodaje se pod zaštićenim imenima Ala-Cort®, Hydrocortisone Phosphate, Solu-Cortef®, Hydrocort Acetate® i Lanacort®), deksametazon ((8S,9R,10S,11S,13S,14S,16R,17R)-9-fluoro-11,17-dihidroksi-17-(2-hidroksiacetil)-10,13,16-trimetil-6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17-dodekahidro-3H-ciklopenta[a]fenantren-3-on), prednizolon (prodaje se pod zaštićenim imenima Delta-Cortel®, Orapred®, Pediapred® i Prelone®), prednizon (prodaje se pod zaštićenim imenima Deltasone®, Liquid Red®, Meticorten® i Orasone®), metilprednizolon (takodje poznat kao 6-Metilprednizolon, Metilprednizolon acetat, Metilprednizolon natrijum sukcinat, prodaje se pod zaštićenim imenima Duralone®, Medralone®, Medrol®, M-Prednisol® i Solu-Medrol®);
Citokinima: Interleukin-2 (takodje poznat kao aldesleukin i IL-2, prodaje se pod zaštićenim imenom Proleukin®), interleukin-11 (takođe poznat kao oprevelkin, prodaje se pod zaštićenim imenom Neumega®), alfa interferon alfa (takodje poznat kao IFN-alfa, prodaje se pod zaštićenim imenima Intron® A i Roferon-A®);
Nishodna regulacija estrogenskog receptora: Fulvestrant (prodaje se pod zaštićenim imenom Faslodex®);
Anti-estrogeni: tamoksifen (prodaje se pod zaštićenim imenom Novaldex®);
Toremifen (prodaje se pod zaštićenim imenom Fareston®);
Selektivni modulatori estrogenskog receptora (SERMs): Raloxifen (prodaje se pod zaštićenim imenom Evista®);
Agonistima oslobadjajućeg hormona lutinizirajućeg hormona (LHRH): Goserelin (prodaje se pod zaštićenim imenom Zoladex®);
Progesteronima: megestrol (takođe poznat kao megestrol acetat, prodaje se pod zaštićenim imenom Megace®) ;
Raznim citotoksičnim sredstvima: Arsenik trioksid (prodaje se pod zaštićenim imenom Trisenox®), asparaginaza (takodje poznata kao L-asparaginaza, Erwinia L-asparaginaza, prodaje se pod zaštićenim imenima Elspar® i Kidrolase®);
Jedinjenje formule (I) takodje može da se koristi u kombinaciji sa sledećim dopunskim terapijama:
2
Lekovima protiv mučnine: Antagonistima NK-1 receptora: Kasopitant (prodaje se pod zaštićenim imenima Rezonic® i Zunrisa® proizvodjača GlaxoSmithKline); i
Citoprotektivnim sredstvima: Amifostin (prodaje se pod zaštićenim imenom Ethyol®), leukovorin (takodje poznat kao kalcijum leukovorin, citrovorum faktor i folinska kiselina);.
[0139] Imunski „checkpoint“ inhibitori: U jednom izvodjenju, kombinacione terapije koje su ovde opisane obuhvataju inhibitor inhibitornog molekula imunskog „checkpoint“-molekula. Izraz „imunski checkpoint molekuli“ se odnosi na grupu membranskih molekula koji su prisutni na površini CD4 i CD8 T-ćelija. Ovi molekuli mogu efikasno da posluže kao kočnice kako bi nishodno modulisali ili inhibisali anti-tumorski odgovor. Među imunske „checkpoint“ molekule se pored ostalih ubrajaju tzv. Programmed Death 1 (PD-1), citotoksični T-limfocitni antigen 4 (engl. Cytotoxic T-Lymphocyte Antigen 4 - CTLA-4), B7H1, B7H4, OX-40, CD137, CD40, i LAG3, koji direktno inhibišu imunske ćelije, imunoterapijska sredstva koja mogu da deluju kao imunski „checkpoint“ inhibitori koje je moguće koristiti u metodama iz ovog pronalaska, obuhvataju pored ostalog, inhibitore PD-L1, PD-L2, CTLA4, TIM3, LAG3, VISTA, BTLA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2B4 i/ili TGFR beta. Inhibiciju inhibitornog molekula moguće je ostvariti inhibisanjem DNK, RNK ili na proteinskom nivou. U izvodjenjima, inhibitorna nukleinska kiselina (npr., dsRNA, siRNA ili shRNA), može da se koristi za inhibisanje ekspresije inhibitornog molekula. U drugim izvođenjima inhibitor inhibitornog signala je, polipeptid npr., solubilni ligand, ili antitelo ili njegov antigen-vezujući fragment, koji se vezuje za inhibitorni molekul.
[0140] U odredjenim izvodjenjima, anti-PD-1 molekuli opisani u ovom tekstu, primenjeni su u kombinaciji sa jednim ili više drugih inhibitora PD-1, PD-L1 i/ili PD-L2 sa kojima je struka upoznata. Antagonista može da bude antitelo, njegov fragment koji ima antigen-vezujuće svojstvo, imunoadhezin, fuzionisani protein ili oligopeptid.
[0141] U odredjenim izvodjenjima, kombinacione terapije ovde opisane, obuhvataju modulator kostimulatornog molekula ili inhibitorni molekul, npr., koinhibitorni ligand ili receptor.
[0142] U jednom izvođenju, kostimulatorni modulator, npr., agonista kostimulatornog molekula je odabran da bude agonista (npr., antitelo sa agonističkim delovanjem ili njegov antigen-vezujući fragment, ili solubilni fuzionisani molekul) OX40, CD2, CD27, CDS, ICAM-1, LFA-1 (CD11a/CD18), ICOS (CD278), 4-1BB (CD137), GITR, CD30, CD40, BAFFR, HVEM, CD7, LIGHT, NKG2C, SLAMF7, NKp80, CD160, B7-H3 ili CD83 ligand.
[0143] U drugom izvođenju, kombinacione terapije ovde opisane uključuju jedan kostimulatorni molekul, npr., agonistu koji je povezan sa pozitivnim signalom koji sadrži kostimulatorni domen CD28, CD27, ICOS i GITR.
[0144] U jednom izvodjenju, molekul anti-PD-1 antitelo je primenjen nakon tretmana, npr., nakon lečenja melanoma sa anti-CTLA4 antitelom (npr., ipilimumab) sa ili bez inhibitora BRAF-a (npr., vemurafenib ili dabrafenib). Kao primer doze za korišćenje moguće je navesti dozu molekula anti-PD-1 antitelo od oko 1 do 10 mg/kg, npr., 3mg/kg i dozu anti-CTLA4 antitela, npr., ipilimumab, od oko 3mg/kg.
[0145] U drugom izvođenju, molekul anti-PD-1 ili anti-PD-L1 antitelo se primenjuje u kombinaciji sa anti-LAG-3 antitelom ili njegovim antigen-vezujućim fragmentom. U drugom izvođenju, molekul anti-PD-1 ili anti-PD-L1 antitelo se primenjuje u kombinaciji sa anti-TIM-3 antitelom ili njegovim antigenvezujućim fragmentom. U pak, nekim drugim izvođenjima, molekul anti-PD-1 ili anti-PD-L1 antitelo se primenjuje u kombinaciji sa anti-LAG-3 antitelom i anti-TIM-3 antitelom ili njihovim fragmentima koji imaju antigen-vezujuće svojstvo. Kombinaciju antiela, navedenu ovde, moguće je primeniti odvojeno, npr. kao zasebna antiela ili kao povezana antitela, npr., kao molekul bispecifičnog ili trispecifičnog antitela. U jednom izvođenju, primenjeno je bispecifično antitelo koje objedinjuje molekul anti-PD-1 ili anti-PD-L1 antiela i anti-TIM-3 ili anti-LAG-3 antitelo, ili njihov antigen vezujući fragment. U određenim izvođenjima, kombinacija antitela izneta ovde, koristi se u lečenju kancera, npr., kancera kao što je ovde opisano (npr., čvrsti tumori). Efikasnost ranije navedenih kombinacije moguće je testirati na životinjskim modelima koji su poznati u ovoj oblasti. Na primer, animalni modeli za ispitivanje sinergističkog delovanja anti-PD-1 i anti-LAG-3 su opisani, npr., kod Woo i sar. (2012) Cancer Res. 72(4):917-27.
[0146] U nekim izvođenjima, ovde opisana kombinaciona terapija (npr., molekul anti-PD-1 ili PD-L1 antitela, sam ili u kombinaciji sa drugim imunomodulatorom (npr., molekulom anti-LAG-3 ili anti-TIM-3 antitela). U jednom izvođenju, molekul anti-PD-1 ili anti-PD-L1 antitela je primenjen u kombinaciji sa anti-LAG-3 antitelom ili njegovim antigen-vezujućim fragmentom. U drugom izvođenju, molekul anti-PD-1 ili anti-PD-L1 antitela je primenjen u kombinaciji sa anti-TIM-3 antitelom, ili njegovim antigen-vezujućim fragmentom. U pak drugim izvođenjima, molekul anti-PD-1 ili anti-PD-L1 antitela je primenjen u kombinaciji sa anti-LAG-3 antitelom i anti-TIM-3 antitelom, ili sa njihovim antigenvezujućim fragmentima. Kombinaciju antitela koja je ovde navedena moguće primenjivati odvojeno, npr., kao zasebna antitela, ili kao povezane, npr., molekule bispecifičnih ili trispecifičnih antitela. U jednom izvođenu, primenjeno je bispecifično antitelo koje obuhvata, molekul anti-PD-1 ili anti-PD-L1 antitela i jedno anti-TIM-3 ili anti-LAG-3 antitelo, ili njegov antigen-vezujući fragment. U određenim izvođenjima, kombinacija antitela navedena u ovoj prijavi, koristi se za lečenje kancera, npr., kancer u značenju koje ima u ovom tekstu (npr., čvrsti tumor). Efikasnost ranije pomenutih kombinacija moguće je isptivati na animalnim modelima, koji su opisani u ovoj oblasti. Na primer, opisani su animalni modeli za ispitivanje sinergističkog delovanja anti-PD-1 i anti-LAG-3, npr., Woo et al. (2012) Cancer Res.
4
72(4):917-27).24
[0147] U odredjenim izvodjenjima, molekul antitela je u obliku molekula bispecifičnog ili multispecifičnog antitela. U jednom izvodjenju, molekul bispecifičnog antitela poseduje jednu specifičnost za vezivanje PD-1 ili PD-L1 i drugu specifičnost za vezivanje, npr., druga specifičnost prema TIM-3, LAG-3 ili PD-L2. U jednom izvodjenju, molekul bispecifičnog antitela se vezuje za PD-1 ili PD-L1 i TIM-3. U drugom izvodjenju, moelkul bispecifičnog antitela se vezuje za PD-1 ili pd-L1 i LAG-3. U drugom izvodjenju, molekul bispecifičnog antitela se vezuje za PD-1 ili za PD-L1. U pak drugom izvodjenju, molekul bispecifičnog antitela se vezuje za PD-1 i za PD-L2. U drugom izvođenju, molekul bispecifičnog antitela se vezuje za TIM-3 i LAG-3. Od bilo koje kombinacije ranije pomenutih molekula moguće je napraviti molekul multispecifičnog antitela, npr., trispecifično antitelo koje obuhvata prvu specifičnost za vezivanje PD-1 ili PD-L1, zatim drugu i treću specifičnost za vezivanje dva ili više medju sledećim: TIM-3, LAG-3 ili PD-L2.
POSTUPCI ZA DOBIJANJE JEDINJENJA IZ PRONALASKA
[0148] Dati pronalazak takodje opisuje postupke za dobijanje jedinjenja iz pronalaska. U opisanim reakcijama, može biti neophodno da se zaštite reaktivne funkcionalne grupe, kao što su na primer, hidroksi, amino, imino, tio ili karboksi grupe, gde ove koje su poželjne u finalnom proizvodu, mogu da budu zaštićene da bi se izbegla njihova neželjeno učešće u reakcijama. Uobičajene zaštitne grupe mogu da se koriste u skladu sa standardnom procedurom, videti na primer, T. W. Greene and P. G. M. Wuts in "Protective groups in ogranic chemistry. " John Wiley and sons, 1991.
[0149] Jedinjenja Formule I mogu da se dobiju prema postupku koji je opisan u sledećoj Reakcionoj Shemi I:
Reakciona Shema I:
u kojoj su p, q, Y1, Y2, R2a, R2b, R3a, R3b, R4a, R4b, R5a, R5b, R7i R8kao što je definisano za Formulu I u sažetku pronalaska, gde Q predstavlja halogen (poput broma) ili tiol, boronat ili stanat koji reaguje sa halogenom na jedinjenju 5, i gde X predstavlja reaktivnu grupu koja reaguje sa Q (kao što je boronat, stanan, alkohol, tiol, halogen, i slično ). Jedinjenje 4 može da se dobije reakcijom jedinjenja 2 sa jedinjenjem 3 pod odgovarajućim uslovima u prisustvu ili u odsustvu prelaznog metala u uslovima sobne temperature, ili prema toplotnim ili u uslovima mikrotalasnog zračenja. Alternativno, halogen iz jedinjenja 2 može biti zamenjen drugim halogenima ili odgovarajućim grupama za aktivaciju kao što su triflati, mezilati, tozilati, nonaflati, boronati, organostanani, organosilil, organocink, litijum, magnezijum, i slično.
[0150] Jedinjenje formule I može da se dobije reakcijom jedinjenja 4 sa odgovarajućim partnerom za kuplovanje (kao što je na primer jedinjenje 5) u zavisnosti od X. Na primer, jedinjenje 5 je prikazano u reakcionoj shemi I kao supstituisana fenil grupa koja je vezana preko X. Alternativno, jedinjenje 5 može da bude aril-alkohol, aril-tio, aril-boronat, aril-stanat, heteroaril-alkohol, aril-tiol, heteroaril-tiol, arilboronat, aril-stanan, olefin, ili drugi aril-metali ili heteroaril-metali, i slično. Partneri za kuplovanje mogu takodje da budu supstituisani. Ova reakcija može da se odigrava u odgovarajućim kiselim ili baznim uslovima, u prisustvu ili u odsustvu prelaznog metala kao što je paladijum, na sobnoj temperaturi, ili u toplotnim ili u uslovima mikrotalasnog zračenja. Ostali halogeni ili odgovarajuće grupe za aktiviranje (na primer, triflati, mezilati, tozilati, i nonaflati) mogu da se koriste umesto Br za ove transformacije.
[0151] Alternativno, partneri za kuplovanje (sprezanje) mogu biti promenjeni i jedinjenje 2 može biti derivatizovani u stanan, boronat, organo-cink, organo-litijum, organo-magnezijum, organo-silikon, organo-kuprat i kupluju se sa odgovarajućim aril-halidom, heteroaril-halidom, olefinom ili sa odgovarajućom reaktivnom funkcionalnom grupom (na primer, triflati, mezilati, tozilati i nonaflati), i njima slične grupe.
[0152] Ove reakcije mogu da se izvode prema opisanom ili obrnutom redosledu, sa raznim rastvaračima, temperaturama, pritiscima, i drugim pogodnim atmosferama. Reakcije mogu da se vode u kiselim, baznim uslovima i/ ili u uslovima primene prelaznog metala.
[0153] Detaljni primeri sinteze jedinjenja iz Formule I mogu se naći u primerima, niže.
Dodatni postupci za dobijanje jedinjenja iz pronalaska
[0154] Jedinjenje iz pronalaska može se dobiti kao farmaceutski prihvatljiva kisela adiciona so reakcijom slobodne baze jedinjenja sa farmaceutski prihvatljivom neorganskom ili organskom kiselinom. Alternativno, farmaceutski prihvatljiva bazna adiciona so jedinjenja iz pronalaska može se dobiti reakcijom slobodne kiseline jedinjenja sa farmaceutski prihvatljivom neorganskom ili organskom bazom.
[0155] Jedinjenja formule (I) mogu se takodje izmeniti dodavanjem odgovarajućih funkcionalnih grupa radi poboljšanja selektivnih bioloških osobina. Modifikacije (izmene) ove vrste poznate su u stanju tehnike i uključuju one koje povećavaju penetraciju u datom biološkom sistemu (na primer krv, limfni sistem, centralni nervni sistem, testis), povećanu bioraspoloživost, povećanu rastvorljivost da bi se dozvolila parenteralna primena (na primer, injekcije, infuzija), menjanje metabolizam i/ili menjanje brzine sekrecije. Primeri za ovu vrstu modifikacija obuhvataju ali nisu ograničeni na esterifikaciju, na primer, sa polietilen glikolima, derivatizaciju sa pivaloiloksi ili supstituentima masnih kiselina, konverzija u karbamate, hidroksilaciju aromatičnih prstenova i supstituciju heteroatoma u aromatičnim prstenovima. Gde god se pominju jedinjenja formule I, i/ili njihovi N-oksidi, tautomeri i/ili (poželjno farmaceutski prihvatljiv) soli, ovo obuhvata tako modifikovane formule, a poželjni su molekuli formule I, njihovi N-oksidi, njihovi tautomeri i/ili njihove soli.
[0156] Alternativno, oblici soli jedinjenja iz pronalaska mogu da se dobiju korišćenjem soli polaznih materijala ili intermedijera. U svetlu uske povezanosti izmedju novih jedinjenja formule I u slobodnom obliku i onih u obliku njihovih soli, uključujući one soli koji se mogu koristiti kao intermedijeri, na primer u prečišćavanju ili u identifikaciji novih jedinjenja, bilo koje pozivanje na jedinjenja ili jedinjenje formule (I) pre i posle ove napomene se može razumeti i kao pozivanje na jedinjenje u slobodnom obliku i/ili na jedno ili više njenih soli, po potrebi i u smislu celishodnosti, kao i na jedno ili više solvata, na primer, hidrata.
[0157] Soli se formiraju kao kisele adicione soli, po mogućstvu sa organskim ili neorganskim kiselinama, iz jedinjenja formule I sa baznim atomom azota, i to su posebno farmaceutski prihvatljive soli. Odgovarajuće neorganske kiseline su na primer, halogene kiseline, kao što su hlorovodonična, sumporna ili fosforna kiselina. Odgovarajuće organske kiseline su na primer, karboksilna, fosfinska, sumporna ili sulfamino kiselina, na primer, sirćetna kiselina, propionska kiselina, oktanska kiselina, dekanska kiselina, dodekanska kiselina, glikolna kiselina, mlečna kiselina, fumarna kiselina, ćilibarna kiselina, malonska kiselina, adipinska kiselina, pimelinska kiselina, suberinska kiselina, azelainska kiselina, jabučna kiselina, vinska kiselina, limunska kiselina, aminokiseline, kao što su glutaminska kiselina ili asparaginska kiselina, maleinska kiselina, hidroksi-maleinska, metilmaleinska kiselina, cikloheksankarboksilna kiselina, adamantankarboksilna kiselina, benzoeva kiselina, salicilna kiselina, 4-aminosalicilna kiselina, ftalna kiselina, fenilsirćetna kiselina, mandelinska kiselina, cimetna kiselina, metan- ili etan- sulfonska kiselina, 2-hidroksietansulfonska kiselina, etan-1,2-disulfonska kiselina, benzensulfonska kiselina, 2-naftalensulfonska kiselina, 1,5,-naftalen-disulfonska, 2-, ili 3-metilbenzensulfonska kiselina, metilsumporna kiselina, etilsumporna kiselina, dodecilsumporna kiselina, N-cikloheksilsulfaminokiselina kiselina, N-metil, N-etil ili N-propil-sulfaminokiselina, ili ostale organske protonske kiseline, kao što je askorbinska kiselina.
[0158] U svrhu izolovanja i prečišćavanja, moguće je da koriste i farmaceutski neprihvatljive soli, kao što su na primer pikrati ili perhlorati. Za terapijsku upotrebu, samo se upotrebljavaju farmaceutski prihvatljive soli ili slobodna jedinjenja (gde su primenjivi u obliku farmaceutskih preparata), i stoga su poželjni.
[0159] Oblici slobodne kiseline ili slobodne baze jedinjenja iz pronalaska mogu redom da se dobiju iz odgovarajućih baznih adicionih soli ili kiselih adicionih soli. Na primer, jedinjenje iz pronalaska u obliku kisele adicione soli može da se prevede u odgovarajuću slobodnu bazu tretmanom sa odgovarajućom bazom (na primer, rastvorom amonijum hidroksida, natrijum hidroksida, i slično). Jedinjenje iz pronalaska u obliku bazne adicione soli može da se prevede u odgovarajuću slobodnu kiselinu tretmanom sa odgovarajućom kiselinom (na primer, hlorovodoničnom kiselinom, itd.).
[0160] Jedinjenja iz pronalaska u neoksidovanom obliku može da se dobije iz N-oksida jedinjenja iz pronalaska tretmanom sa redukcionim sredstvom (na primer, sumpor, sumpor dioksid, trifenil fosfin, litijum borohidrid, natrijum borohidrid, fosfor trihlorid, tribromid, ili slično) u odgovarajućem inertnom organskom rastvaraču (kao što je na primer, acetonitril, etanol, vodeni dioksan, ili slično) na temperaturi od 0 do 80°C.
[0161] Derivati prolekova za jedinjenja iz pronalaska mogu da se dobiju postupcima koji su poznati stručnjacima upućenim u stanje tehnike (za detalje videti, na primer, Saulnier et al., (1994), Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, Vol.4, p.1985). Na primer, odgovarajući prolekovi mogu da se dobiju reakcijom ne-derivatizovanog jedinjenja iz pronalaska sa pogodnim sredstvom za karbamilaciju (na primer, 1,1-ailoksialkilkarbanohloridat, para-nitrofenil karbonat, ili slično).
[0162] Zaštićeni derivati jedinjenja iz pronalaska dobijaju se postupcima koji su poznati stručnjacima upućenim u stanje tehnike. Detaljniji opis tehnika pogodnih za stvaranje zaštitnih grupa i njihovo uklanjanja može se pronaći u T. W. Greene, “Protecting Groups in Organic Chemistry”, 3<rd>edition, John Wiley and Sons, Inc., 1999.
[0163] Jedinjenja iz pronalaska mogu se lako pripremiti, ili formirati tokom postupka iz pronalaska, kao solvati (na primer, hidrati). Hidrati jedinjenja iz datog pronalaska mogu se pogodno pripremiti rekristalizacijom iz smeše vodeni/organski rastvarač, korišćenjem organskih rastvarača kao što je dioksin, tetrahidrofuran ili metanol.
[0164] Jedinjenja iz pronalaska mogu da se dobiju u obliku njihovih pojedinačnih stereoizomera reakcijom racemskih smeša jedinjenja sa optički aktivnim sredstvom za razdvajanje koje gradi par dijastereomernih jedinjenja, pri čemu na taj način dolazi do razdvajanja dijastereomera, i regenerisanja optički čistog enantiomera. Dok je razdvajanje enantiomera moguće uraditi korišćenjem kovalentnih dijastereomernih derivata jedinjenja iz pronalaska, poželjno je korišćenje kompleksa koji mogu da disosuju (npr., kristalnih dijastereomernih soli). Dijastereomeri imaju tačno odredjene fizičke osobine (npr., tačke topljenja, tačka ključanja, rastvorljivost, reaktivnost, itd.) i lako se mogu razdvojiti na osnovu razlika u ovim osobinama. Dijastereomeri se na primer mogu razdvojiti hromatografijom, ili po mogućstvu, tehnikama razdvajanja /rezolucije koje se baziraju na razlikama u rastvorljivosti i sličnim postupcima. Zatim se ponovo dobija optički čisti enantiomer, zajedno sa sredstvom za razdvajanje, pomoću bilo kojeg praktičnog postupka koji ne dovodi do racemizacije. Detaljniji opis tehnika za razdvajanje stereoizomernih oblika jedinjenja iz racemskih smeša se može pronaći u knjizi autora Jean Jacques, Andre Collet, Samuel H. Wilen, “Enantiomers, Racemates and Resolutions,” John Wiley And Sons, Inc., 1981.
[0165] Ukratko, jedinjenja Formule I mogu se dobiti postupkom, koji uključuje:
(a) onu reakcionu shemu I; i
(b) po slobodnom izboru prevodjenje jedinjenja iz pronalaska u farmaceutski prihvatljivu so;
(c) po slobodnom izboru prevodjenje soli jedinjenja iz pronalaska u oblik bez soli;
(d) po slobodnom izboru prevodjenje neoksidovanog oblika jedinjenja iz pronalaska u farmaceutski prihvatljivi N-oksid;
(e) po slobodnom izboru prevodjenje oblika N-oksida jedinjenja iz pronalaska u njegov neoksidovan oblik;
(f) po slobodnom izboru razlaganje pojedinačnog izomera jedinjenja iz pronalaska iz smeše izomera;
(g) po slobodnom izboru prevodjenje nederivatizovanog jedinjenja iz pronalaska u farmaceutski prihvatljivi derivat proleka; i
(h) po slobodnom izboru prevodjenje derivata proleka jedinjenja iz pronalaska u njegov nederivatizovani oblik.
[0166] Ukoliko proizvodnja polaznih materijala nije posebno opisana, jedinjenja su poznata ili se mogu pripremiti na analogan način sa postupcima poznatim u stanju tehnike ili kao što je opisano u primerima u daljem tekstu.
[0167] Jedan od stručnjaka će ceniti da gornje transformacije predstavljaju samo postupke za dobijanje jedinjenja iz datog pronalaska, i da se slično mogu koristiti i drugi poznati postupci.
Primeri
[0168] Sledeći primeri i intermedieri služe da ilustruju pronalazak bez ograničavanja njegovog opsega. Navedene su neke skraćenice koje se koriste u primerima: sirćetna kiselina (AcOH); trietilamin (TEA); tetrahidrofuran (THF); vodeni (aq.); atmosfera (atm.); 2,2'-bis-difenilfosfanil-[1,1']binaftalenil (BINAP); 4-dimetilaminopiridin (DMAP); terc-butoksikarbonil (Boc); 1,1-karbonildiimidazol (CDI); di-terc-butil dikarbonat (BOC2O); benzotriazol-1-il-oksi-tris-(dimetilamino)-fosfonijum heksafluorofosfat (BOP); dihlorometan (DCM); dietil etar (Et2O); p-toluen sulfonska kiselina (PTSA); etil acetat (EtOAc); etanol (EtOH); litijum bis(trimetilsilil)amid (LHMDS); diizopropil azodikarboksilat (DIAD); N,N-diizopropil-etilamin (DIEA ili DIPEA); N,N-dimetilformamid (DMF); dimetil sulfoksid (DMSO); difenilfosforil azid (DPPA); čas(ovi) (h); 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronijum heksafluorofosfat (HATU); tečna hromatografija visokih Performansi (HPLC); litijum aluminijum hidrid (LAH); tečna hromatografija spojena sa masenom spektrometrijom (LCMS); litijum diizopropilamid (LDA); metanol (MeOH); mililitr(i) (mL); minut(i) (min); mikrotalasno(MW); n-butilitijum (n-BuLi); 1,1-bis(difenilfosfino)-ferocendihloropaladijum (II) (PdCl2(dppf)); tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum (0) (Pd2(dba)3); dihlorobis(trifenilfosfin)paladijum (II) (PdCl2(PPh3)2); sobna temperatura (RT); trifluorosirćetna kiselina (TFA); tetrahidrofuran (THF); tankoslojna hromatografija (TLC); retenciono vreme (tR); & 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilksanten (Xantophos).
Intermedijer 1
6-hloro-3-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-amin
[0169]
[0170] Faza a: U rastvor 3-bromo-2-(trifluorometil)piridina (1.0 g, 4.42 mmol), XantPhos (256 mg, 0.442 mmol), Pd2(dba)3(203 mg, 0.221 mmol) u dioksanu (12 mL) dodaje se (na sobnoj temperaturi i u atmosferi N2) 2-etilheksil-3-merkaptopropanoat (1.1 mL, 4.87 mmol) a nakon toga i DIPEA (1.55 mL, 8.85 mmol). Dobijeni rastvor se meša u mikrotalasnom reaktoru tokom 1 h na temperaturi od 110 °C . Posle hladjenja na sobnoj temperaturi, reakciona smeša se filtrira kroz sloj Celita a zatim se ispire sa EtOAc (25 mL). Spojeni filtrati se koncentruju i dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 30% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući 2-etilheksil 3-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)propanoat (1.41 g, 3.88 mmol). MS m/z 364.0 (M+H)<+>.
[0171] Faza b: U rastvor 2-etilheksil 3-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)propanoata (1.0 g, 2.75 mmol) u THF-u (8 mL) dodaje se na temperaturi od -78 °C i u atmosferi N2kalijum terc-butoksid (1 M u THF, 8.25 mL, 8.25 mmol). Nakon snažnog mešanja na temperaturi od -78 °C tokom 20 min, reakciona smeša se kvenčuje sa vod. K2CO3(2 M, 500 μL) i isparljivi ostaci se uklanjaju na sniženom pritisku. Dobijeni ostatak se sipa u levak za razdvajanje koji sadrži K2CO3aq (2 M, 30 mL) i ekstrahuje se sa Et2O (2 x 20 mL). Vodena faza se zakišeljava sa 6 M HCl do pH 4 i dobijena zamućena suspenzija se ekstrahuje sa smešom rastvarača CHCl3:IPA (9:1; 3 x 20 mL) dajući 2-(trifluorometil)piridin-3-tiol (380 mg, 2.12 mmol). MS m/z 180.0 (M+H)<+>.
[0172] Faza c: U rastvor 2-(trifluorometil)piridin-3-tiola (285 mg, 1.591 mmol), 3-bromo-6-hloropirazin-2-amina (414 mg, 1.988 mmol), XantPhos (101 mg, 0.175 mmol), i Pd2(dba)3(72.8 mg, 0.08 mmol) u dioksanu (2 mL) dodaje se (na sobnoj temperaturi i u atmosferi N2) DIPEA (556 μL, 3.18 mmol). Dobijeni rastvor se meša u mikrotalasnom reaktoru tokom 1.5 h na temperaturi od 130 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, reakciona smeša se razblažuje sa EtOAc i filtrira se kroz sloj Celita a zatim i ispire sa EtOAc (25 mL). Spojeni filtrati se koncentruju i dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 30% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući 6-hloro-3-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-amin (1.41 g, 3.88 mmol).<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 8.64 (dd, J=4.55, 1.26 Hz, 1 H), 7.90 (s, 1 H), 7.82 (dd, J=8.08, 0.76 Hz, 1 H), 7.46 (dd, J=8.08, 4.80 Hz, 1 H);<19>F NMR (376 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm -64.34 (s, 1 F). MS m/z 307.1 (M+H)<+>.
Intermedijer 2
6-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)-3-(2,3-dihlorofenil)pirazin-2-amin
[0173]
[0174] Suspenzija 3-bromo-6-hloropirazin-2-amina (1.2 g, 5.76 mmol), (2,3-dihlofenil)borne kiseline (1.1 g, 5.76 mmol), kalijum fosfata (3.67 g, 17.27 mmol), i PdCl2(dppf)·DCM adukta (235 mg, 0.288
1
mmol) u smeši rastvarača MeCN:H2O (9:1, 15 mL, degazairan) se meša u mikrotalasnom reaktoru tokom 4 h na temperaturi od 120 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, reakciona smeša se filtrira kroz sloj Celita i ispire sa EtOAc (25 mL). Spojeni filtrati se koncentruju i rezultujući ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 30% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući 6-(4-amino-4-metilpiperidin-1-il)-3-(2,3-dihlorofenil)pirazin-2-amin (633 mg, 2.306 mmol). MS m/z 276.4 (M+H)<+>.
Intermedijer 3
6-hloro-3-((2,3-dihlorofenil)tio)pirazin-2-amin
[0175]
[0176] Smeša 3-bromo-6-hloropirazin-2-amina (5.0 g, 23.99 mmol), 2,3-dihlorobenzentiola (6.44 g, 36.0 mmol), bakar(I)jodida (914 mg, 4.80 mmol), kalijum fosfata (10.18 g, 48.0 mmol), i 1,10-fenantrolina (1.73 mg, 9.59 mmol) u dioksanu (50 mL, degazirani) se meša 16 h na temperaturi od 85 °C. Nakon hladjenja na sobnoj temperaturi, reakciona smeša se razblažuje sa EtOAc, i filtrira kroz sloj Celita i ispire sa pranjem od EtOAc dobijenim nakon razblaživanja smeše (50 mL). Isparljivi ostaci se uklanjaju na sniženom pritisku i dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 25% gradijent smeše rastvarača DCM/toluen) dajući 6-hloro-3-((2,3-dihlorofenil)tio)pirazin-2-amin (3.7 g, 12.07 mmol). MS m/z 306.0 (M+H)<+>.
Intermedijer 4
(R) i (S)-2-(7-azaspiro[3.5]nonan-1-il)izoindolin-1,3-dion
[0177]
[0178] Faza a: Suspenzija terc-butil 1-amino-7-azaspiro[3.5]nonan-7-karboksilata (250 mg, 1.04 mmol), anhidrida ftalne kiseline (193 mg, 1.3 mmol), aktiviranih molekulskih sita (3 angstrema, 250
2
mg), i DIPEA (545 µL, 3.12 mmol) u toluenu (4 mL) se meša tokom 16 h na temperaturi od 105 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, smeša se filtrira kroz sloj Celita i ispire sa pranjem od EtOAc dobijenim nakon razblaživanja smeše (10 mL). Isparljive supstance se uklanjanju na sniženom pritisku i rezultujući ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (5 do 40% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući terc-butil 1-(1,3-dioksoizoindolin-2-il)-7-azaspiro[3.5]nonan-7-karboksilat (233 mg, 0.629 mmol). MS m/z 370.4 (M+H)<+>.
[0179] Faza b: Rastvor terc-butil 1-(1,3-dioksoizoindolin-2-il)-7-azaspiro[3.5]nonan-7-karboksilata (233 mg, 0.629 mmol) i HCl (4 M u dioksanu, 800 µL, 3.21 mmol) u dioksanu (5 mL) se meša 16 h na sobnoj temperaturi. Isparljivi ostaci se uklanjaju na rotacionom uparivaču dajući HCl so jedinjenja iz naslova (195 mg, 0.636 mmol). MS m/z 270.3 (M+H)<+>.
[0180] Faza c: Prečišćavanje hiralnom SFC se vrši prema sledećim uslovima; kolona: Cellulose LUX-2 21x250 mm, protok: 75 g po minutu, mobilna faza: 50%-tni MeOH i 10 mM NH4OH u CO2, detekcija: 220 nm UV pri čemu se dobijaju dva pika Rt(P1)= 3.6 min (enantiomer R); Rt(P2)= 7.4 min (enantiomer S).
Intermedijer 5
2-(1,1-dioksido-1-tia-8-azaspiro[4.5]dekan-4-il)izoindolin-1,3-dion
[0181]
[0182] Faza a: Rastvor 1,1-dioksida 8-(terc-butoksikarbonil)-1-tia-8-azaspiro[4.5]dekan-4-karboksilne kiseline (dobijen od terc-butil 4-oksopiperidin-1-karboksilata u 4 koraka dobijen je kako je opisano u Carreira et al., Org Lett., 2011, 13, 6134-6136; 2.00 g, 6.00 mmol), difenil fosforazidata (2.0 g, 7.26 mmol), i Et3N (1.0 mL, 7.26 mmol) u toluenu (37 mL) se meša 1.5 h na temperaturi od 115 °C. Dodaje se benzil alkohol (1.50 mL, 14.52 mmol) i rezultujuća smeša se meša 16 h na temperaturi od 100 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, reakciona smeša se sipa u levak za odvajanje koji sadrži zasić. vod. NaHCO3(30 mL) i ekstrahuje EtOAc (3 x 20 mL). Spojene organske faze se suše preko MgSO4, filtriraju i isparljivi ostaci se uklanjanju na sniženom pritisku. Dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (10 do 90% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući 1,1-dioksid terc-butil 4-(((benziloksi)karbonil)amino)-1-tia-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (1.57 g. 3.58 mmol) u obliku čvrstog proizvoda bele boje. MS m/z 339.4 (M+H)<+>.
[0183] Faza b: Suspenzija 1,1-dioksid terc-butil 4-(((benziloksi)karbonil)amino)-1-tia-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (570 mg.1.30 mmol) i Pd/C (10% na uglju, 138 mg) u THF-u (8 mL) se snažno meša u atmosferi H2tokom 16 h. Reakciona smeša se filtrira kroz sloj Celita i ispire sa pranjem od EtOAc dobijenim nakon razblaživanja smeše (20 mL). Isparljive supstance se uklanjaju na sniženom pritisku dajući 1,1-dioksid terc-butil 4-amino-1-tia-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata koji se koristi u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
[0184] Faza c: Suspenzija 1,1-dioksid terc-butil 4-amino-1-tia-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (415 mg, 1.363 mmol), anhidrida ftalne kiseline (252 mg, 1.704 mmol), i aktiviranih molekulskih sita (3 angstrema, 500 mg) u toluenu (7 mL) se snažno meša tokom 16 h na temperaturi od 115 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, smeša se filtrira kroz sloj Celita i ispire EtOAc (10 mL), i isparljive supstance se uklanjaju na sniženom pritisku. Dobijeni ostatak se prečišćava pomoću hromatografije na silika gelu (0 do 10% gradijent smeše rastvarača MeOH/DCM) dajući 1,1-dioksid terc-butil 4-(1,3-dioksoizoindolin-2-il)-1-tia-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (385 mg, 0.886 mmol) u obliku pene bele boje. MS m/z 433.1 (M-H)-.
[0185] Faza d: Rastvor 1,1-dioksid terc-butil 4-(1,3-dioksoizoindolin-2-il)-1-tia-8-azaspiro[4.5] dekan-8-karboksilata (385 mg, 0.886 mmol) i HCl (4 M u dioksanu, 2.22 mL, 8.86 mmol) u dioksanu (4 mL) meša se 16 h na sobnoj temperaturi. Smeša se razblažuje sa dioksanom (20 mL) i filtrira dajući 2-(1,1-dioksido-1-tia-8-azaspiro[4.5]dekan-4-il)izoindolin-1,3-dion (HCl so, 328 mg, 0.884 mmol) u obliku pene bele boje. MS m/z 335.4 (M+H)<+>.
Intermedijer 6
(R)-2-metil-N-((S)-7-azaspiro[3.5]nonan-1-il)propan-2-sulfinamid
[0186]
[0187] Faza a: Rastvor terc-butil 1-okso-7-azaspiro[3.5]nonan-7-karboksilata (5.24 g, 21.9 mmol), titanijum(IV) izopropoksida (16.2 mL, 54.7 mmol), i (R)-2-metilpropan-2-sulfinamida (3.45 g, 28.5 mmol) u THF-u (99 mL) se meša 12 h na temperaturi od 65 °C. Nakon hladjenja do temperature od -78 °C, dodaje se MeOH (9.9 mL) a zatim i litijum borohidrid (1.43 g, 65.7 mmol). Dobijena smeša se meša na temperaturi od -78 °C tokom 3 h i na sobnoj temperaturi 1 h. MeOH se lagano dodaje da bi se kvenčovao višak borohidrida, nakon čega se dodaje koncentrovani rastvor soli. Dobijena smeša se meša 15 min i nakon toga se filtrira kroz Celit. Vodena smeša se ekstrahuje sa EtOAc (3 x 20 mL). Organske
4
faze se suše na MgSO4, filtriraju, i isparljivi ostaci se uklanjaju na sniženom pritisku. Dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 50% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan dajući (S)-terc-butil 1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-7-azaspiro[3.5]nonan-7-karboksilat (4.79 g. 13.90 mmol) u obliku čvrstog proizvoda bele boje. MS m/z 345.3 (M+H)<+>.
[0188] Faza b: Rastvor (S)-terc-butil 1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-7-azaspiro[3.5]nonan-7-karboksilata (0.4 g, 1.16 mmol) i TFA (450 mL, 5.81 mmol) u DCM-u (3.5 mL) se meša 30 min na temperaturi od 40 °C. Zasić. Na2CO3se dodaje do pH 11 i vodena smeša se ekstrahuje sa DCM-om (3 x 15 mL). Spojene organske faze se ispiraju sa koncentrovanim rastvorom soli, suše preko Na2SO4, filtriraju, i isparljive supstance se uklanjanju na sniženom pritisku dajući (R)-2-metil-N-((S)-7-azaspiro[3.5]nonan-1-il)propan-2-sulfinamid (237 mg, 0.97 mmol) u obliku čvrstog proizvoda bele boje. MS m/z 245.5 (M+H)<+>.
Intermedijer 7
N-(4-metoksibenzil)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amin
[0189]
[0190] Faza a: U rastvor terc-butil 1-okso-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (1.8 g, 7.11 mmol), i (4-metoksifenil)metanamina (1.07 g, 7.82 mmol) u DCE (7 mL) dodaje se natrijum cijanoborohidrid (2.23 g, 35.5 mmol) iz delova i smeša se meša na sobnoj temperaturi tokom 65 h. Smeša se razblažuje sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (10 mL) i ekstrahuje sa EtOAc (3 x 20 mL). Spojene organske faze se ispiraju sa koncentrovanim rastvorom soli i koncentruju. Dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 2% gradijent smeše rastvarača MeOH/DCM, 0.25% izmenjeni Et3N, zatim sa 0 do 50% gradijentom smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući terc-butil 1-((4-metoksibenzil)amino)-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat (1.1 g, 2.94 mmol) u obliku bezbojnog voska. MS m/z 375.3 (M+H)<+>.
[0191] Faza b: Rastvor terc-butil 1-((4-metoksibenzil)amino)-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (1.1 g, 2.94 mmol) i TFA (2 mL) u DCM-u (2 mL) se meša tokom 15 min na temperaturi od 0 °C. Isparljivi ostaci se uklanjaju na sniženom pritisku. Dobijeni ostatak se razblažuje sa vodenim NaHCO3(10 mL) i ekstrahuje sa EtOAc (4 x 10 mL) dajući N-(4-metoksibenzil)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amin (0.8 g, 2.92 mmol) u obliku bezbojnog ulja. MS m/z 275.2 (M+H)<+>.
[0192] N-(4-metoksibenzil)-3-azaspiro[5.5]undekan-7-amin se dobija na osnovu gore navedene procedure polazeći od terc-butil 7-okso-3-azaspiro[5.5]undekan-3-karboksilata.
Intermedijer 8
N-((R)-1-(4-metoksifenil)etil)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amin
[0193]
[0194] Faza a: U rastvor terc-butil 1-okso-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (1.15 g, 4.54 mmol), i (R)-1-(4-metoksifenil)etanamina (961 mg, 6.36 mmol) u DCE (3 mL) dodaje se natrijum cijanoborohidrid u delovima i isti se meša tokom 16 h na sobnoj temperaturi. Smeša se razblažuje sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (5 mL) i ekstrahuje sa EtOAc (3 x 10 mL). Spojene organske faze se ispiraju sa koncentrovanim rastvorom soli i koncentruju. Dobijeni ostatak koji sadrži smešu dijastereomera u odnosu 9:1 se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 20% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući terc-butil 1-(((R)-1-(4-metoksifenil)etil)amino)-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat (glavni dijastereomer; 431 mg, 1.11 mmol) čist.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 7.18-7.24 (m, 2 H), 6.81-6.86 (m, 2 H), 3.76 (d, J=13.64 Hz, 1 H), 3.72 (s, 3 H), 3.64-3.70 (m, 2 H), 2.65-2.92 (m, 2 H), 2.05-2.14 (m, 1 H), 1.80-1.91 (m, 1 H), 1.65-1.75 (m, 1 H), 1.42-1.60 (m, 4 H), 1.40 (s, 9 H), 1.28-1.35 (m, 1 H), 1.20 (d, J=6.57 Hz, 3 H), 1.09-1.17 (m, 2 H), 0.80 (d, J=11.37 Hz, 1 H). MS m/z 389.6 (M+H)<+>.
[0195] Faza b: U rastvor terc-butil 1-(((R)-1-(4-metoksifenil)etil)amino)-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (glavni dijastereomer; 431 mg, 1.11 mmol) u DCM-u (2 mL) dodaje se TFA (2 mL) i isti se meša 10 min na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša se koncentruje uz novi dodatak DCM-a, zatim se razblažuje sa zasićenim vodenim NaHCO3i ekstrahuje DCM-om (3 x 20 mL). Organski ostaci se ispiraju sa koncentrovanim rastvorom soli, suše na Na2SO4, filtriraju i koncentruju dajući N-((R)-1-(4-metoksifenil)etil)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amin.<1>H NMR (400 MHz, METANOL-d4) δ 7.25 (d, J=8.6 Hz, 2 H), 6.87 (d, J=8.7 Hz, 2 H), 3.85-3.78 (m, 1 H), 3.78 (s, 3 H), 3.35 (m, 1 H), 3.28 (m, 1 H), 3.03 (m, 2 H), 2.63 (dd, J=9.6, 7.3 Hz, 1 H), 2.06-1.85 (m, 2 H), 1.83-1.69 (m, 2 H), 1.62 (m, 1 H), 1.54-1.38 (m, 4 H), 1.33 (d, J=6.6 Hz, 3 H), 1.31-1.23 (m, 1 H). MS m/z 289.5 (M+H)<+>.
Intermedijer 9
N-((R)-1-(4-metoksifenil)etil)-1-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-4-amin
[0196]
[0197] Faza a: U rastvor terc-butil 4-okso-1-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (dobijenog iz terc-butil 4-oksopiperidin-1-karboksilata u 3 koraka kako je opisano u Carreira et al., Org Lett., 2013, 15, 4766-4769; 200 mg, 0.78 mmol), i (R)-1-(4-metoksifenil)etanamina (474 mg, 3.13 mmol) u DCE (1 mL) dodaje se natrijum cijanoborohidrid u delovima (393 mg, 3.13 mmol). Dobijena reakciona smeša se meša tokom 16 h na sobnoj temperaturi. Dodaje se litijum borohidrid (34 mg, 1.6 mmol) i smeša se meša 30 min na sobnoj temperaturi. Smeša se razblažuje sa MeOH (2 mL) i ispiraljive supstance se uklanjaju na sniženom pritisku (dva puta). Dodaje se zasić. vod. NaHCO3(5 mL) i smeša se ekstrahuje sa DCM-om (3 x 20 mL). Spojene organske faze se suše preko Na2SO4, filtriraju, i isparljivi ostaci se uklanjaju na sniženom pritisku. Rezultujuća smeša dijastereomera u odnosu 9:1 se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 40% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući terc-butil 4-(((R)-1-(4-metoksifenil)etil)amino)-1-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat (65 mg, 0.17 mmol) u obliku čistog dijastereomera. Glavni dijastereomer:<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.15 (d, J=8.6 Hz, 2 H), 6.79 (d, J=8.6 Hz, 2 H), 3.96-3.76 (m, 2 H), 3.77-3.66 (m, 5 H), 3.60 (t, J=8.1 Hz, 1 H), 2.98 (m, 2 H), 2.76 (t, J=7.8 Hz, 1 H), 1.95 (m, 1 H), 1.67-1.41 (m, 4 H), 1.40 (s, 9 H), 1.33 (d, J=3.1 Hz, 1 H), 1.21 (d, J=6.5 Hz, 3 H), 1.08-0.92 (m, 1 H). MS m/z 391.6 (M+H)<+>.
[0198] Faza b: Rastvor terc-butil 4-(((R)-1-(4-metoksifenil)etil)amino)-1-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (glavni dijastereomer, 65 mg, 0.17 mmol) i TFA (2 mL) u DCM-u (2 mL) meša se 10 min na sobnoj temperaturi. Isprarljivi ostaci se uklanjaju na sniženom pritisku, razblažuju sa zasić. vod.
NaHCO3(5 mL), i ekstrahuju sa DCM-om (3 x 20 mL). Spojene organske faze se ispiraju sa koncentrovanim rastvorom soli, suše na Na2SO4, filtriraju i isparljive supstance su uklanjaju na sniženom pritisku dajući N-((R)-1-(4-metoksifenil)etil)-1-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-4-amin (40 mg, 0.13 mmol) koji se koristi bez daljeg prečišćavanja. MS m/z 291.5 (M+H)<+>.
Intermedijer 10
3-((2-amino-3-hloropiridin-4-il)tio)-6-hloropirazin-2-amin
[0199]
[0200] Faza a: Komercijalno dostupni 2,3-dihloro-4-jodopiridin se prevodi u 3-hloro-4-jodopiridin-2-amin pomoću postupka a, kako je opisano u Marie et al., Molecules, 2012, 17,10683-10707.
[0201] Faza b: U rastvor 3-amino-5-hloropirazin-2-tiola (100 mg, 0.619 mmol), 3-hloro-4-jodopiridin-2-amina (315 mg, 1.238 mmol), XantPhos (35.8 mg, 0.062 mmol), i Pd2(dba)3(28.3 mg, 0.03 mmol) u dioksanu (3 mL) dodaje se (na sobnoj temperaturi i u atmosferi N2) DIPEA (324 mL, 1.856 mmol). Dobijeni rastvor se meša u reaktoru za mikrotalasno zračenje tokom 2.5 h na temperaturi od 100 °C. Nakon mešanja do sobne temperature, reakciona smeša se razblažuje sa EtOAc i nakon toga se filtrira kroz sloj Celita a zatim se ispire sa pranjem od EtOAc dobijenim nakon razblaživanja smeše (10 mL). Spojeni filtrati se koncentruju i dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 5% gradijent smeše rastvarača MeOH/DCM) dajući 3-((2-amino-3-hloropiridin-4-il)tio)-6-hloropirazin-2-amin (1.41 g, 3.88 mmol).<1>H NMR (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 7.88 (s, 1 H), 7.68 (d, J=5.56 Hz, 1 H), 6.06 (d, J=5.56 Hz, 1 H), 1.35-1.43 (m, 2 H). MS m/z 288.2 (M+H)<+>.
Intermedijer 11
3-amino-5-hloropirazin-2-tiol
[0202]
[0203] Faza a: Rastvor 3-bromo-6-hloropirazin-2-amina (4.95 g, 23.74 mmol) u dioksanu (119 mL) se tokom 10 min puni sa azotom. Tada se dodaju 2-etilheksil 3-merkaptopropanoat (3.79 mL, 24.92 mmol), Xantphos (1.37 g, 2.37 mmol), Pd2(dba)3(1.08 g, 1.19 mmol), i DIPEA (8.29 mL, 47.5 mmol). Dobijeni rastvor se meša na temperaturi od 105 °C tokom 24 h i reakciona smeša se filtrira kroz Celit i koncentruje. Sirovi proizvod se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0-40% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući 2-etilheksil 3-((3-amino-5-hloropirazin-2-il)tio)propanoat (6.24 g, 18.04 mmol) u obliku ulja žute boje.<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) d ppm 7.82 (s, 1 H), 4.93 (br. s., 2 H), 4.14-3.96 (m, 2 H), 3.47 (t, J=6.9 Hz, 2 H), 2.78 (t, J=6.9 Hz, 2 H), 1.67-1.51 (m, 1 H), 1.44-1.20 (m, 8 H), 0.90 (t, J=7.4 Hz, 6 H). MS m/z 346.0 (M+H)<+>.
[0204] Faza b: U rastvor 2-etilheksil 3-((3-amino-5-hloropirazin-2-il)tio)propanoata (2.3 g, 6.65 mmol) u THF-u (33 mL) na temperaturi od -78 °C, dodaje se kalijum terc-butoksid (1 M u THF, 19.95 mL, 19.95 mmol) i rezultujuća smeša se meša na temperaturi od -78 °C tokom 1 h. Dodaje se MeOH (20 mL) i rezultujuća smeša se koncentruje. Sirovi proizvod se rastvara u MeOH, filtrira, i prečišćava HPLC-om (gradijent elucije 5-20%, acetonitril u vodi, 0.1% modifikator TFA) dajući 3-amino-5-hloropirazin-2-tiol (TFA so: 1.3 g, 4.72 mmol) u obliku čvrstog proizvoda žute boje. MS m/z 162.0 (M+H)<+>.
Intermedijer 12
6-hloro-3-((3-hloropiridin-4-il)tio)pirazin-2-amin
[0205]
[0206 ] Rastvor 3-amino-5-hloropirazin-2-tiola (TFA so: 0.158 g, 0.978 mmol) u dioksanu (4.9 mL) se puni sa azotom tokom 10 min. Tada, se dodaju 3-hloro-4-jodopiridin (0.468 g, 1.955 mmol), Xantphos (0.057 g, 0.098 mmol), Pd2(dba)3(0.045 g, 0.049 mmol), i DIPEA (0.512 mL, 2.93 mmol). Dobijena smeša se meša na temperaturi od 105 °C tokom 10 h, filtrira kroz Celita i koncentruje. Sirovi proizvod se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0-40% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan; heptan koji sadrži 2% Et3N) dajući 6-hloro-3-((3-hloropiridin-4-il)tio)pirazin-2-amin (75 mg, 0.274 mmol) u obliku čvrstog proizvoda bele boje.<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 8.46 (s, 1 H), 8.22 (d, J=5.3 Hz, 1 H), 7.96 (s, 1 H), 6.68 (d, J=5.3 Hz, 1 H), 5.17 (br. s., 2 H). MS m/z 273.0 (M+H)<+>.
Intermedijer 13
6-hloro-3-((2-hloropiridin-3-il)tio)pirazin-2-amin
[0207]
[0208] Kroz rastvor 3-amino-5-hloropirazin-2-tiola (TFA so: 0.2 g, 1.238 mmol) u dioksanu (6.2 mL) se propušta azot tokom 10 min. Tada se dodaju 2-hloro-3-jodopiridin (0.593 g, 2.475 mmol), Xantphos (0.072 g, 0.124 mmol), Pd2(dba)3(0.057 g, 0.062 mmol), i DIPEA (0.65 mL, 3.71 mmol). Dobijena smeša se meša na temperaturi od 105 °C tokom 10 h, filtrira kroz Celit i koncentruje. Sirovi proizvod se prečišćava hromtografijom na silika gelu (0-40% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan, koji sadrži 2% Et3N) dajući 6-hloro-3-((2-hloropiridin-3-il)tio)pirazin-2-amin (95 mg, 0.348 mmol) u obliku čvrstog proizvoda bele boje.<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 8.28-8.38 (m, 1 H), 7.91 (s, 1 H), 7.51-7.59 (m, 1 H), 7.22 (dd, J=7.9, 4.6 Hz, 1 H), 5.25 (br. s., 2 H). MS m/z 273.0 (M+H)<+>.
Intermedijer 14
6-hloro-3-((2,3-dihloropiridin-4-il)tio)pirazin-2-amin
[0209]
[0210] Rastvor 3-amino-5-hloropirazin-2-tiola (TFA so: 0.50 g, 1.814 mmol) u dioksanu (90 mL) se degazira sa azotom tokom 10 min. Tada se dodaju 2,3-dihloro-4-jodopiridin (0.0.99 g, 3.63 mmol), Xantphos (0.105 g, 0.181 mmol), Pd2(dba)3(0.083 g, 0.091 mmol), i DIPEA (0.95 mL, 5.44 mmol). Dobijena smeša se meša na temperaturi od 105 °C tokom 10 h, filtrira kroz Celit i koncentruje. Sirovi proizvod se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0-10% gradijent smeše rastvarača EtOAc/DCM).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.13 (d, J=5.3 Hz, 1 H), 7.95 (s, 1 H), 7.30 (br. s, 2 H), 6.83 (d, J=5.3 Hz, 1 H). MS m/z 306.9 (M+H)<+>.
Intermedijer 15
6-hloro-3-((3-hloro-2-fluoropiridin-4-il)tio)pirazin-2-amin
[0211]
[0212] Rastvor 3-amino-5-hloropirazine-2-tiola (TFA so: 50 mg, 0.181 mmol) u dioksanu (1.8 mL) se puni sa azotom tokom 10 min. Tada se dodaju 3-hloro-2-fluro-4-jodopiridin (0.140 g, 0.544 mmol), Xantphos (11 mg, 0.018 mmol), Pd2(dba)3(8 mg, 0.009 mmol), i DIPEA (95 µL, 0.544 mmol). Dobijena smeša se meša na temperaturi od 100 °C tokom 10 h, filtrira kroz Celit, i koncentruje. Sirovi ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 40% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan; gde heptan sadrži 2% Et3N) dajući 6-hloro-3-((3-hloro-2-fluoropiridin-4-il)tio)pirazin-2-amin (41 mg, 0.137 mmol) u obliku čvrstog proizvoda bele boje.<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 8.06 (s, 1 H), 7.91 (d, J=5.3 Hz, 1 H), 6.63 (d, J=5.3 Hz, 1 H), 5.30 (br. s, 2 H). MS m/z 291.0 (M+H)<+>.
Intermedijer 17
2-(2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-4-il)izoindolin-1,3-dion
[0213]
[0214] Prema postupcima od Dirat et al., iz medj. PCT prijave, br. 20044078750, od 16 Sept 2004, dobija se terc-butil 4-hidroksi-2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 4.13 (dd, J=10.1, 4.6 Hz, 1 H), 4.03 (dd, J=4.6, 2.0 Hz, 1 H), 3.78–3.71 (m, 2 H), 3.69 (d, J=8.6 Hz, 1 H), 3.67–3.58 (m, 2 H), 3.29 (m, 1 H), 3.16 (m, 1 H), 1.78 (m, 2 H), 1.58 (m, 1 H), 1.50 (m, 2 H), 1.47 (s, 9 H). MS m/z 258.1 (M-H)<+>iz 1-terc-butil 4-etil piperidin-1,4-dikarboksilata u četiri koraka, zatim prevodjenjem u 2-(2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-4-il)izoindolin-1,3-dion u dva koraka kao što sledi.
1
[0215] Faza a: U rastvor terc-butil 4-hidroksi-2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (306 mg, 1.19 mmol), ftalimida (262 mg, 1.78 mmol) i trifenilfosfina (468 mg, 1.78 mmol) u THF-u (10 mL) dodaje se diizopropilazadikarboksilat (0.374 mL, 1.78 mmol) i meša 16 h. Smeša se koncentruje i prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 50% gradijent smeše rastvarača etil acetat/heptan) da bi se dobio racemski terc-butil 4-(1,3-dioksoizoindolin-2-il)-2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat (190 mg, 0.49 mmol).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7.88 (dd, J=5.4, 3.0 Hz, 2 H), 7.77 (dd, J=5.5, 3.0 Hz, 2 H), 4.65 (dd, J=8.7, 5.6 Hz, 1 H), 4.40 (dd, J=9.5, 5.6 Hz, 1 H), 4.26 (t, J=9.0 Hz, 1 H), 4.08 (d, J=8.5 Hz, 1 H), 3.98 (d, J=8.5 Hz, 1 H), 3.84 (m, 1 H), 3.58 (m, 1 H), 3.20 (m, 1 H), 2.94 (m, 1 H), 1.73 (m, 2 H), 1.56 (s, 9 H), 1.42–1.36 (m, 2 H).
[0216] Faza b: U rastvor racemskog terc-butil 4-(1,3-dioksoizoindolin-2-il)-2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (190 mg, 0.49 mmol) u dihlorometanu (3 mL) dodaje se trifluorosirćetna kiselina (1 mL). Smeša se koncentruje sa daljim dodatkom dihlorometana, zatim acetonitrila, što za rezultat ima dobijanje 2-(2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-4-il)izoindolin-1,3-diona u obliku TFA soli (kvantitativni prinos). MS m/z 287.0 (M+H)<+>. Proizvod se koristi bez dalje karakterizacije.
Intermedijer 18
2-hloro-3-merkaptobenzamid
[0217]
[0218] Faza a: Smeša 2-hloro-3-fluorobenzonitrila (3.15 g, 20.25 mmol), 2-metilpropan-2-tiola (2.283 mL, 20.25 mmol) i Cs2CO3(6.598 g, 20.25 mmol) u DMF-u (100 mL) se meša 48 h na temperaturi od 22 °C. Reakciona smeša se razblažuje sa vodom (200 mL) i EtOAc (300 mL). EtOAc sloj se ispire sa vodom (3 x 300 mL), koncentrovanim rastvorom soli (3 x 100 mL), suši na Na2SO4, filtrira i koncentruje. Dobijei ostatak se prečišćava HPLC (gradijent elucije: 45 do 70% acetonitrila u vodi, 5 mM NH4OH u formi modifikatora), dajući 3-(terc-butiltio)-2-hlorobenzonitril (1.33 g, 5.89 mmol). MS m/z 226.1 (M+H)<+>.
2
[0219 ] Faza b: Smeša 3-(terc-butiltio)-2-hlorobenzonitrila (217 mg, 0.961 mmol) i NaOH (1 N, 2.88 mL, 2.88 mmol) u MeOH (11 mL) je ozračena u reaktoru za mikrotalasno zračenje tokom 35 min na temperaturi od 90 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, reakciona smeša se koncentruje i rastvara u MeOH. Čvrsti ostatak se otfiltrira i filtrat se koncencentruje skoro do suva i prečišćava HPLC (gradijent elucije: 25 do 50% acetonitrila u vodi, 5 mM NH4OH koji služi kao modifikator), dajući 3-(terc-butiltio)-2-hlorobenzamid (93.6 mg, 0.384 mmol). MS m/z 244 (M+H)<+>.
[0220] Faza c: Smeša 3-(terc-butiltio)-2-hlorobenzamida (190 mg, 0.779 mmol) i konc. HCl (2.36 mL, 78 mmol) se meša 45 min na temperaturi od 85 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, reakciona smeša se koncentruje do suva dajući sirovi 2-hloro-3-merkaptobenzamid (HCl so: 156 mg, 0.651 mmol). MS m/z 188 (M+H)<+>.
Intermedijer 19
2-(8-(6-amino-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-il)-2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-4-il)izoindolin-1,3-dion
[0221]
[0222] Spajanje TFA soli 2-(2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-4-il)izoindolin-1,3-diona sa 6-hloro-3-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-aminom (151 mg, 0.492 mmol) korišćenjem standardnih procedura opisano je u prethodnom delu teksta. Razblaživanje DCM-om i prečišćavanje hromatografijom na silika gelu (0 do 60% gradijent smeše rastvarača etil acetat/heptan) ima za rezultat dobijanje 2-(8-(6-amino-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-il)-2-oksa-8-azaspiro[4.5] dekan-4-il)izoindolina-1,3-diona (0.140 g, 0.178 mmol). MS m/z 557.1 (M+H)<+>. Prečišćavanje SFC hromatografijom za razdvajenj hiralnih jedinjenja vrši se na sledeći način; kolona: OJ-H 21 x 250 mm, protok: 80 g po minutu, mobilna faza: 45% MeOH i 5 mM NH4OH u CO2, detekcija: okida je signal koji proizvodi masa u cilju dobijanja jednog pika od enantiomera 1 (P1), Rt: 2.77 min. MS m/z 557.1 (M+H)<+>, i pik 2 (P2), Rt: 3.91 min. MS m/z 557.2 (M+H)<+>. Deprotekcija ftalimida vrši se odvojeno na svakom enantiomeru bez dalje karakterizacije.
Intermedijer 20
3-hloro-4-jodo-N,N-dimetilpiridin-2-amin
[0223]
[0224] Rastvor 3-hloro-2-fluoro-4-jodopiridina (0.26 g, 1.01 mmol) i dimetilamina (2 M u THF, 1.5 ml, 3.03 mmol) u DMSO (3.4 mL) se meša 2 h na temperaturi od 70 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, dodaje se voda i vodena smeša se ekstrahuje sa EtOAc. Spojene organske faze se ispiraju sa vodom, koncentrovanim rastvorom soli, suše sa Na2SO4, filtriraju i koncentruju na sniženom pritisku dajući 3-hloro-4-jodo-N,N-dimetilpiridin-2-amin (0.26 g, 0.922 mmol) u obliku bezbojnog ulja.<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 7.75 (d, J=5.3 Hz, 1 H), 7.33 (d, J=5.0 Hz, 1 H), 3.00 (s, 6 H). MS m/z 282.9 (M+H)<+>.
Intermedijer 21
3-hloro-4-jodo-2-metoksipiridin
[0225]
[0226] Rastvor 3-hloro-2-fluoro-4-jodopiridina (150 mg, 0.571 mmol) i NaOMe (0.5 M in MeOH, 3.4 ml, 1.71 mmol) u DMSO (1.9 mL) se meša tokom 1 h na temperaturi od 70 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, dodaje se voda i vodena smeša se ekstrahuje sa EtOAc. Spojene organske faze se ispiraju sa vodom, koncentrovanim rastvorom soli, suše na Na2SO4, filtriraju, i koncentruju na sniženom pritisku dajući 3-hloro-4-jodo-2-metoksipiridin (123 mg, 0.456 mmol)u obliku bezbojnog ulja.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.81 (d, J=5.3 Hz, 1 H), 7.55 (d, J=5.3 Hz, 1 H), 3.92 (s, 3 H). MS m/z 269.9 (M+H)<+>.
4
Intermedijer 22
6-hloro-3-((3-(trifluorometil)piridin-4-il)tio)pirazin-2-amin
[0227]
[0228] Smeša 3-amino-5-hloropirazin-2-tiola (750 mg, 4.09 mmol), 4-bromo-3-(trifluorometil)piridina (1.63 g, 5.31 mmol), Xantphos (236 mg, 0.409 mmol), Pd2(dba)3(187 mg, 0.204 mmol), i DIPEA (2.14 mL, 12.26 mmol) u dioksanu (degaziran, 50 mL) meša se 16 h na temperaturi od 100 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, reakciona smeša se filtrira kroz sloj Celita i ispire EtOAc (25 mL). Spojeni filtrati se koncentruju na sniženom pritisku i dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 40% gradijent smeše rastvarača EtOAc/DCM) dajući 6-hloro-3-((3-(trifluorometil)piridin-4-il)tio)pirazin-2-amin (722 mg, 2.35 mmol) u obliku čvrstog proizvoda svetlo žute boje. MS m/z 307.0 (M+H)<+>.
[0229] Sledeća jedinjenja se mogu sintetizovati korišćenjem gore navedene procedure ili modifikacija gore navedenog postupka korišćenjem jodo- ili bromo-piridila i tiolata.
Tabela 1
Intermedijer 23
6-hloro-3-((3-hloropiridazin-4-il)tio)pirazin-2-amin
[0230]
[0231] Smeša 3-amino-5-hloropirazin-2-tiola (100 mg, 0.545 mmol), 3,4-diholoropiridazina (81 mg, 0.545 mmol), i DIPEA (0.142 mL, 0.817 mmol) u MeCN (5.5 mL) meša se 12 h na temperaturi od 50 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, precipitat se sakuplja vakuum filtracijom da bi se dobio 6-hloro-3-((3-hloropiridazin-4-il)tio)pirazin-2-amin (101 mg, 0.368 mmol) u obliku čvrstog priozvoda braon boje.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.90 (d, J=5.4 Hz, 1 H), 7.95 (s, 1 H), 7.31 (s, 2 H), 7.15 (d, J=5.3 Hz, 1 H). MS m/z 274.1 (M+H)<+>.
Intermedijer 24
terc-butil 1-okso-8-azaspiro[4.5]dec-2-en-8-karboksilat
[0232]
[0233] Faza a: Smeša terc-butil 4-formilpiperidin-1-karboksilata (35.0 g, 164 mmol), litijum tercbutoksida (15.77 g, 197 mmol), i alil bromida (11.54 mL, 189 mmol) u DMF-u (328 mL) se meša 1 h na temperaturi od 0 °C. Smeša se sipa u levak za razdvajanje koji sadrži zasić. vod NH4Cl:H2O (1:1, 500 mL) i ekstrahuje se Et2O (5 x 50 mL). Spojene organske faze se suše preko MgSO4, filtriraju, i isparljivi ostaci se uklanjaju na sniženom pritisku. Dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 25% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući terc-butil 4-alil-4-formilpiperidin-1-karboksilat (24 g, 95 mmol) u obliku bezbojnog ulja.<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 9.52 (s, 1 H), 5.53-5.76 (m, 1 H), 4.96-5.19 (m, 2 H), 3.80 (br. s., 2 H), 2.97 (t, J=11.49 Hz, 2 H), 2.26 (d, J=7.33 Hz, 2 H), 1.95 (dt, J=13.71, 3.13 Hz, 2 H), 1.38-1.58 (m, 11 H).
[0234] Faza b: U rastvor terc-butil 4-alil-4-formilpiperidin-1-karboksilata (24 g, 95 mmol) u THF-u (300 mL) dodaje se (na temperaturi od -78 °C i u atmosferi N2) vinil magnezijum bromid (1 M u THFu, 118 mL, 118 mmol). Dobijeni rastvor se lagano zagreje do sobne temperature tokom 1 h. Smeša se sipa u levak za odvajanje koji sadrži zasić. vod NH4Cl (250 mL) i ekstrahuje se sa EtOAc (4 x 50 mL). Spojene organske faze se suše preko MgSO4, filtriraju i isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku dajući terc-butil 4-alil-4-(1-hidroksialil)piperidin-1-karboksilat (26.7 g, 95 mmol) u obliku bezbojnog ulja.<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 9.52 (s, 1 H), 5.56-5.75 (m, 1 H), 5.05-5.18 (m, 2 H), 3.80 (br. s., 2 H), 2.97 (t, J=11.49 Hz, 2 H), 2.26 (d, J=7.33 Hz, 2 H), 1.96 (dt, J=13.83, 3.06 Hz, 2 H), 1.49-1.60 (m, 2 H), 1.41-1.49 (m, 9 H). Ovo jedinjenje se koristi u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
[0235] Faza c: Smeša terc-butil 4-alil-4-(1-hidroksialil)piperidin-1-karboksilata (26.7 g, 95 mmol) i Des-Martinovog perjodinana (44.3 g, 105 mmol) u DCM-u (380 mL) se meša 1 h na sobnoj temperaturi. Smeša se sipa u levak za odvajanje koji sadrži zasić. vod NaHCO3:Na2SO3 (1:1, 300 mL) i ekstrahuje se sa DCM-om (4 x 50 mL). Spojene organske faze se suše preko MgSO4, filtriraju, i isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku dajući čvrsti proizvod bele boje. Ovaj čvrsti proizvod se suspenduje u heptanu (250 mL) i sonifikuje tokom 5 min. Bela suspenzija se filtrira kroz sloj Celita i isparljivi ostaci se uklanjanju na sniženom pritisku dajući terc-butil 4-akriloil-4-alilpiperidin-1-karboksilat (26.5 g, 95 mmol) u obliku ulja žute boje.<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 6.81 (dd, J=16.93, 10.36 Hz, 1 H), 6.40 (dd, J=16.80, 1.89 Hz, 1 H), 5.71 (dd, J=10.36, 2.02 Hz, 1 H), 5.46-5.66 (m, 1 H), 4.91-5.14 (m, 2 H), 3.78 (br. s., 2 H), 2.96 (br. s., 2 H), 2.25-2.39 (m, 2 H), 1.97-2.15 (m, 2 H), 1.37-1.57 (m, 11 H). Ovo jedinjenje se koristi u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
[0236] Faza d: U rastvor terc-butil 4-akriloil-4-alilpiperidin-1-karboksilata (26.5 g, 95 mmol) u toluenu (degazirani, 850 mL) dodaje se katalizator Grubbs II (2.02 g, 2.38 mmol) u toluenu (degazirani, 100 mL). Dobijena smeša se meša 45 min na temperaturi od 85 °C. Rastvarač se uklanja na sniženom pritisku i dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 40% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući terc-butil 1-okso-8-azaspiro[4.5]dek-2-en-8-karboksilat (20.76 g, 83 mmol) u obliku čvrstog proizvoda braon boje. Rastvor ovog jedinjenja i DDQ (565 mg, 2.49 mmol) u toluenu (540 mL) se meša 15 min na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor svetlo crvene boje se filtrira kroz sloj Celita. Dodaje se ugalj (200 g) i rezultujuća suspenzija se meša 2 h na soboj temperaturi. Smeša se filtrira kroz sloj Celita i isparljivi sastojci se uklanjanjaju na sniženom pritisku. Dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 40% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući terc-butil 1-okso-8-azaspiro[4.5]dek-2-en-8-karboksilat (15.6 g, 62.3 mmol) u obliku čvrstog prozvoda bele boje.<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 7.63-7.74 (m, 1 H), 6.20 (dt, J=5.81, 2.15 Hz, 1 H), 3.99-4.25 (m, 2 H), 2.92 (t, J=11.62 Hz, 2 H), 2.63 (s, 2 H), 1.72-1.86 (m, 2 H), 1.49 (s, 9 H), 1.29 (d, J=12.88 Hz, 2 H).
Intermedijer 25
terc-butil 1-(1,1-dimetiletilsulfinamido)-3-metil-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat
[0237]
[0238] Faza a: U suspenziju terc-butl 1-okso-8-azaspiro[4.5]dek-2-en-8-karboksilata (4.2 g, 16.71 mmol) i CuI (6.37 g, 33.4 mmol) u Et2O (100 mL) dodaje se (na temperaturi od 0 °C i u atmosferi N2) MeLi (1.6 M u THF-u, 31.3 mL, 50.1 mmol). Nakon 90 min mešanja na temperaturi od 0 °C, smeša se sipa u levak za odvajanje koji sadrži zasić. vod NH4Cl i ekstrahuje sa EtOAc (3 x 15 mL). Spojene organske faze se suše preko MgSO4, filtriraju, i isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku. Dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 50% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući terc-butil 3-metil-1-okso-8-azaspiro[4.5]dek-2-en-8-karboksilat (4.23 g, 15.82 mmol) u obliku bezbojnog ulja.<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 3.89-4.00 (m, 1 H), 3.83 (d, J=13.39 Hz, 1 H), 3.11 (ddd, J=13.64, 10.36, 3.28 Hz, 1 H), 2.99 (ddd, J=13.58, 10.42, 3.54 Hz, 1 H), 2.47-2.59 (m, 1 H), 2.19-2.36 (m, 2 H), 1.74-1.97 (m, 2 H), 1.50-1.65 (m, 2 H), 1.48 (s, 9 H), 1.33-1.44 (m, 2 H), 1.17 (d, J=6.32 Hz, 3 H).
[0239] Faza b: Rastvor terc-butil 3-metil-1-okso-8-azaspiro[4.5]dek-2-en-8-karboksilata (502 mg, 1.878 mmol), titanijum(IV) etoksida (1.57 mL, 7.51 mmol), i 2-metilpropan-2-sulfinamida (455 mg, 3.76 mmol) u THF-u (12.5 mL) meša se 16 h na temperaturi od 65 °C. Nakon hladjenja do temperature od 0 °C, dodaje se MeOH (3 mL) a zatim litijum borohidrid (123 mg, 5.63 mmol). Dobijena smeša se meša na temperaturi od 0 °C tokom 1 h. Zasićeni vod. NH4Cl se lagano dodaje da bi se kvenčovao višak borohidrida uz dodatak EtOAc (30 mL). Dobijena smeša se snažno meša 15 min i nakon toga filtrira kroz sloj Celita. Isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku i dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 75% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući terc-butil 1-(1,1-dimetiletilsulfinamido)-3-metil-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat (463 mg, 1.243 mmol) u obliku čvrstog proizvoda bele boje.
Intermedijeri 26a/b
(1R,3S)-benzil 1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-3-metil-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat & (1R,3R)-benzil 1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-3-metil-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat [0240]
[0241] Faza a: Smeša terc-butil 3-metil-1-okso-8-azaspiro[4.5]dek-2-en-8-karboksilata (4.23 g, 15.82 mmol) i TFA (17 mL) u DCM-u (80 mL) se meša 30 min na sobnoj temperaturi. Isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku. Smeša koju čini dobijeni ostatak, DIPEA (13.82 mL, 79 mmol), i benzil hloroformat (3.39 mL, 23.73 mmol) u DCM-u (80 mL) se meša 16 h na sobnoj temperaturi. Smeša se sipa u levak za odvajanje koji sadrži zasić. vod NH4Cl i ekstrahuje se sa DCM-om (3 x 25 mL). Spojene organske faze se suše na MgSO4, filtriraju i isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku. Dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 40% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući benzil 3-metil-1-okso-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat (4.58 g, 15.20 mmol) u obliku ulja svetlo žute boje. MS m/z 302.2 (M+H)<+>.
[0242] Faza b: Benzil 3-metil-1-okso-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat (4.58 g, 15.20 mmol) se dalje prečišćava hiralnom SFC na sledeći način: kolona: IA 21 x 250 mm, protok: 70 g po minutu, mobilna faza: 45% (9:1 EtOH:MeCN) u CO2, detekcija: 220 nm UV dajući (R)-benzil 3-metil-1-okso-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat (2.02 g, 6.70 mmol), Rt: 2.0 min; i (S)-benzil 3-metil-1-okso-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat (2.11 g, 7.0 mmol), Rt: 3.6 min.
[0243] Faza c: Rastvor (R)-benzil 3-metil-1-okso-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (2.02 g, 6.70 mmol), titanijum(IV) etoksida (5.62 mL, 26.8 mmol), i (R)-2-metilpropan-2-sulfinamida (1.625 g, 13.4 mmol) u THF-u (67 mL) se meša 16 h na temperaturi od 65 °C. Nakon hladjenja do temperature od -78 °C, dodaje se MeOH (12 mL) a zatim litijum borohidrid (0.438 g, 20.11 mmol). Dobijena smeša se meša 16 h u temperaturnom intervalu od -78 °C do sobne temperature. Zasić. vod NH4Cl se lagano dodaje da bi se kvenčovao višak borohidrida uz dodatak EtOAc (100 mL). Dobijena smeša se snažno meša u vremenu od 15 min i filtrira kroz sloj Celita. Isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku i dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (5 do 90% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući (1R,3R)-benzil 1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-3-metil-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat (1.94 g, 4.77 mmol) u obliku čvrstog proizvoda bele boje. MS m/z 407.3 (M+H)<+>.
[0244] Faza c (iz enantiomera): Prati se isti postupak počev od (S)-benzil 3-metil-1-okso-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata da bi se dobio (1R,3S)-benzil 1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-3-metil-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat.
Intermedijer 27
(1R,3R)-terc-butil 3-((terc-butildimetilsilil)oksi)-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat)
[0245]
[0246] Faza a: Smeša CuCl (142 mg, 1.432 mmol), (S)-TolBINAP (972 mg, 1.432 mmol), i natrijum terc-butoksida (138 mg, 1.432 mmol) u THF (60 mL) se meša 30 min na sobnoj temperaturi. Dodaje se B2pin2(13.34 g, 52.5 mmol) u THF-u (20 mL) i dobijena smeša se meša 10 min na soboj temperaturi. Dodaje se Terc-butil 1-okso-8-azaspiro[4.5]dek-2-en-8-karboksilat (12.0 g, 47.7 mmol) u THF-u (50 mL) a zatim MeOH (3.9 mL, 95 mmol). Dobijena smeša se meša 16 h na sobnoj temperaturi. Dodaje se H2O (150 mL) a zatim i natrijum perborat (36.7 g, 239 mmol) i dobijena smeša se snažno meša 1 h na sobnoj temperaturi. Dobijena suspenzija zelene boje se filtrira kroz sloj Celita, sipa u levak za odvajanje koji sadrži zasić. vod, NaHCO3: sat. aq Na2SO3(1:1, 300 mL) i ekstrahuje EtOAc (4 x 40 mL). Spojene organske faze se suše na MgSO4, filtriraju, I isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku dajući sirovi (R)-terc-butil 3-hidroksi-1-okso-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat. Odredjivanje enantiomera u ovoj smeši pokazuje 90% ee (Rt(S): 1.59 min, Rt(R): 1.80 min; hiralna SFC; kolona: IA 4.6 x 100 mm, protok: 70 g po minuti, mobilna faza: 5-55% MeOH u CO2, detekcija: 220 nm UV).
[0247] Smeša sirovog (R)-terc-butil 3-hidroksi-1-okso-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata
(teor 47.7 mmol), imidazola (4.87 g, 71.6 mmol), TBSCl (8.99 g, 59.6 mmol) u DMF-u (120 mL) se meša 16 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša se sipa u levak za odvajanje koji sadrži zasić. vod NH4Cl:H2O (1:1, 250 mL) i ekstrahuje sa Et2O (5 x 50 mL). Spojene organske faze se suše preko MgSO4, filtriraju i isparljivi ostaci se uklanjaju na sniženom pritisku. Dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 30% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući (R)-tercbutil 3-((terc-butildimetilsilil)oksi)-1-okso-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat (13.115 g, 34.2 mmol) u obliku bezbojnog ulja koje očvršćava nakon stajanja.
[0248] Faza b: Rastvor (R)-terc-butil 3-((terc-butildimetilsilil)oksi)-1-okso-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (8 g, 20.86 mmol), titanijum(IV) etoksida (17.49 mL, 83.0 mmol), i (R)-2-metilpropan-2-sulfinamida (5.06 g, 41.7 mmol) u THF-u (100 mL) se meša 16 h na temperaturi od 65 °C. Nakon hladjenja do temperature od -78 °C, dodaje se MeOH (15 mL) a zatim i litijum borohidrid (1.363 g, 62.6 mmol). Dobijena smeša se meša 16 h na temperaturi od -78 °C. Zasić. vod NH4Cl se lagano dodaje da bi se kvenčovao višak borohidrida uz dodatak EtOAc (100 mL). Dobijena smeša se snažno meša tokom 15 min i nakon toga filtrira kroz sloj Celita. Isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku i dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 50% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući (1R,3R)-terc-butil 3-((terc-butildimetilsilil)oksi)-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat (5.3 g, 10.84 mmol) u obliku čvrstog proizvoda bele boje. MS m/z 489.3 (M+H)<+>.
Intermedijer 28
(1R,3S)-terc-butil 1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-3-hidroksi-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat) [0249]
[0250] Faza a: Smeša (1R,3R)-terc-butil 3-((terc-butildimetilsilil)oksi)-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (3.84 g, 7.86 mmol) i TBAF (1 M u THF-u; 8.64 mL, 8.64 mmol) u THF-u (40 mL) se meša 30 min na sobnoj temperaturi. Sve isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku i dobijena smeša se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 10% gradijent smeše rastvarača MeOH/DCM) dajući (1R, 3R)-terc-butil 1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-3-hidroksi-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat (2.94 g, 7.86 mmol). MS m/z 375.3 (M+H)<+>.
[0251] Faza b: U rastvor (1R, 3R)-terc-butil 1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-3-hidroksi-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (3.0 g, 8.01 mmol), trifenilfosfina (4.2 g, 16.02 mmol), i izohinolin-1-karboksilne kiseline (4.16 g, 24.03 mmol) u THF-u (80 mL) dodaje se DIAD (3.1 mL, 16.02 mmol).
1
Dobijena smeša se meša 1 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc (50 mL), filtrirana kroz sloj Celita, sipana u levak za odvajanje koji sadrži zasić. vod NaHCO3i ekstrahuje sa EtOAc (3 x 25 mL). Spojene organske faze se suše preko MgSO4, filtriraju i isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku. Dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 4% gradijent smeše rastvarača MeOH/DCM) dajući (2S,4R)-8-(terc-butoksikarbonil)-4-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-8-azaspiro[4.5]dekan-2-il izohinolin-1-karboksilat (3.65 g, 6.89 mmol) u obliku ulja narandžaste boje. MS m/z 530.3 (M+H)<+>.
[0252] Faza c: Smeša (2S,4R)-8-(terc-butoksikarbonil)-4-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-8-azaspiro[4.5]dekan-2-il izohinolin-1-karboksilata (3.65 g, 6.89 mmol) i litijum hidroksida (2.95 g, 68.9 mmol) u smeši rastvarača THF:H2O (1:1, 70 mL) se meša 2 h na sobnoj temperaturi. Smeša se sipa u levak za odvajanje koji sadrži zasić. vod NH4Cl i ekstrahuje sa EtOAc (3 x 15 mL). Spojene organske faze se suše preko MgSO4, filtriraju i isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku. Dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 10% gradijent smeše rastvarača MeOH/DCM) dajući (1S,3S)-terc-butil 1-(R)-1,1-dimetiletilsulfinamido-3-hidroksi-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat MS m/z 275.2 (M+H-Boc)<+>.
Intermedijer 29
(1R,3S)-terc-butil 1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-3-(izobutiriloksi)-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat)
[0253]
[0254] U rastvor (1R,3R)-terc-butil 1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-3-hidroksi-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (200 mg, 0.534 mmol), trifenilfosfina (280 mg, 1.068 mmol), i izobuterne kiseline (146 μL, 1.602 mmol) u THF-u (5 mL) dodaje se DIAD (208 μL, 1.068 mmol). Dobijena smeša se meša 16 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša se razblažuje sa EtOAc (50 mL), filtrira kroz sloj Celita, siša u levak za odvajanje koji sadrži zasić. vod. NaHCO3, i ekstrahuje sa EtOAc (3 x 10 mL). Spojene organske faze se suše preko MgSO4, filtriraju, i isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku. Dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 7% gradijent
2
smeše rastvarača MeOH/DCM) dajući (1R,3S)-terc-butil 1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-3-(izobutiriloksi)-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat) (237 mg, 0.534 mmol). MS m/z 345.3 (M+H-Boc)<+>.
Intermedijeri 30a/b/c
(1R,3R)-terc-butil 1-((R)-N,2-dimetilpropan-2-ilsulfinamido)-3-hidroksi-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat, (1R,3R)-terc-butil 1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-3-metoksi-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat, & (1R,3R)-terc-butil 1-((R)-N,2-dimetilpropan-2-ilsulfinamido)-3-metoksi-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat
[0255]
[0256] Smeša (1R,3R)-terc-butil 1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-3-hidroksi-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (142 mg, 0.378 mmol) i NaH (60 %-tna disperzija u mineralnom ulju, 19 mg, 0.473 mmol) u THF-u se meša 20 min na temperaturi od 0 °C. Dodaje se jodometan (47 μL, 0.756 mmol) i dobijena smeša se meša 4 h na sobnoj temperaturi. Isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku i dobijeni ostatak se prečišćava HPLC (gradijent elucije čini 25-50% acetonitril u vodi, 5 mM NH4OH kao modifikator) dajući (1R,3R)-terc-butil 1-((R)-N,2-dimetilpropan-2-ilsulfinamido)-3-hidroksi-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat (15.0 mg, 0.039 mmol). MS m/z 289.2 (M+H-Boc)<+>; (1R,3R)-tercbutil 1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-3-metoksi-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat. MS m/z 289.2 (M+H-Boc)<+>; i (1R,3R)-terc-butil 1-((R)-N,2-dimetilpropan-2-ilsulfinamido)-3-metoksi-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat. MS m/z 303.2 (M+H-Boc)<+>.
Intermedijer 31
(1R,3S)-terc-butil 1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-3-metoksi-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat [0257]
[0258] Smeša koju čini (1R,3S)-terc-butil 1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-3-hidroksi-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat (500 mg, 1.335 mmol), srebro (I) oksid (340 mg, 1.468 mmol), i jodometan (250 μL, 4.0 mmol) u DCM-u (5 mL) se meša (zaštićena od svetlosti) tokom 24 h na sobnoj temperaturi i 24 h na 45 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, smeša se filtrira kroz sloj Celita, isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku, i dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 5% gradijent smeše rastvarača MeOH/DCM) dajući (1R,3S)-tercbutil 1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-3-metoksi-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat (248 mg, 0.638 mmol). MS m/z 289.2 (M+H-Boc)<+>.
Intermedijer 32
racemski terc-butil 1-((terc-butoksikarbonil)amino)-3,3-difluoro-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat [0259]
[0260] Faza a: Smeša terc-butil 3-((terc-butildimetilsilil)oksi)-1-(1,1-dimetiletilsulfinamido)-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (365 mg, 0.746 mmol) i HCl (4 M u dioksanu, 1.86 mL, 7.46 mmol) u MeOH (4 mL) se meša 1 h na temperaturi od 40 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku dajući čvrsti proizvod bele boje. MS m/z 171.1 (M+H)<+>. Smeša ovog ostatka, DIPEA (2.6 mL, 14.92 mmol), i Boc2O (407 mg, 1.865 mmol) u THF-u (15 mL) se meša 16 h na sobnoj temperaturi. Smeša se sipa u levak za odvajanje koji sadrži zasić. vod NH4Cl i ekstrahuje se Et2O (5 x 10 mL). Spojene organske faze se suše preko MgSO4, filtriraju, i isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku. Dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (10 do 80% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući terc-butil 1-((tercbutoksikarbonil)amino)-3-hidroksi-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat (275 mg, 0.742 mmol). MS m/z 271.3 (M+H-Boc)<+>.
4
[0261] Faza b: Smeša terc-butil 1-((terc-butoksikarbonil)amino)-3-hidroksi-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilate (275 mg, 0.742 mmol) i Des-Martinovog perjodinana (472 mg, 1.113 mmol) u DCM-u (7.5 mL) se meša 2 h na temperaturi od 0 °C. Smeša se sipa u levak za odvajanje koji sadrži zasić. vod NaHCO3i ekstrahuje DCM-om (3 x 10 mL). Spojene organske faze se suše preko MgSO4, filtriraju, i isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku. Dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (5 to 75% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući terc-butil 1-((terc-butoksikarbonil)amino)-3-okso-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat (135 mg, 0.366 mmol).<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 4.57 (d, J=9.09 Hz, 1 H), 4.16 (d, J=8.08 Hz, 1 H), 3.89-4.08 (m, 2 H), 2.77-2.93 (m, 2 H), 2.71 (dd, J=18.95, 8.08 Hz, 1 H), 2.50 (d, J=18.19 Hz, 1 H), 2.07-2.24 (m, 2 H), 1.76 (td, J=12.82, 4.67 Hz, 1 H), 1.58-1.70 (m, 1 H), 1.42-1.53 (m, 18 H), 1.25-1.38 (m, 1 H).
[0262] Faza c: Smeša terc-butil 1-((terc-butoksikarbonil)amino)-3-okso-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (95 mg, 0.258 mmol) i DeoxoFluor (190 mL, 1.031 mmol) u DCM-u (1 mL) se meša 48 h na temperaturi od 50 °C. Smeša se sipa u levak za odvajanje koji sadrži zasić. vod NaHCO3/led i ekstrahuje se EtOAc (3 x 5 mL). Spojene organske faze se suše preko MgSO4, filtriraju, i isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku. Dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 to 30% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući terc-butil 1-((tercbutoksikarbonil)amino)-3,3-difluoro-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat (52 mg, 0.133 mmol).<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 4.55 (d, J=9.35 Hz, 1 H), 3.78-4.02 (m, 3 H), 2.64-2.86 (m, 2 H), 2.38-2.59 (m, 1 H), 2.10-2.32 (m, 1 H), 1.79-2.10 (m, 2 H), 1.58 (qd, J=12.72, 3.79 Hz, 1 H), 1.27-1.52 (m, 21 H).
[0263] Sledeća jedinjenja se sintetizuju korišćenjem gore navedenog postupka ili modifikacija gore navedenog postupka korišćenjem hiralno čistog (1R,3R)-terc-butil 3-((terc-butildimetilsilil)oksi)-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata u obliku polaznog materijala.
Tabela 2
Intermedijer 33
1-amino-2,8-diazaspiro[4.5]dek-1-en-3-on
[0264]
[0265] Faza a: Rastvor diizopropilamina (0.320 mL, 2.245 mmol) u THF-u (4 mL) se hladi do temperature od -78<o>C i obradjuje sa n-butilitijumom (1.3 mL, 2.080 mmol) a nakon toga se meša 5 min na temperaturi od -78<o>C i zagreje se do 0<o>C dajući rastvor LDA da se kasnije koristi. Na temperaturi od -78<o>C u rastvor terc-butil 4-cijanopiperidin-1-karboksilata (153 mg, 0.728 mmol) u THF-u (10 mL) dodaje se pripremljeni rastvor LDA (2.8 mL) u kapima i dobijena smeša se meša 10 min na temperaturi od -78<o>C, a nakon toga 10 min na -10<o>C. Reakciona smeša se ponovo hladi do temperature od -78<o>C i rastvor alil-Br (80 µL, 0.924 mmol) u THF (2 mL) se dodaje u kapima. Dobijena reakciona smeša se meša 1 h na sobnoj temperaturi i isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku. Vodeni sloj se ekstrahuje EtOAc, spojene organske faze se ispiraju vodom, koncentrovanim rastvorom soli, suše na Na2SO4, filtriraju i koncentruju na sniženom pritisku. Ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 50% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući terc-butil 4-alil-4-cijanopiperidin-1-karboksilat (40 mg, 0.16 mmol) u obliku bezbojnog ulja.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 5.99-5.70 (m, 1 H), 5.23 (q, J=1.1 Hz, 1 H), 5.20 (dtd, J=3.3, 2.1, 1.1 Hz, 1 H), 3.96 (d, J=13.7 Hz, 2 H), 2.86 (s, 2 H), 2.36 (dt, J=7.5, 1.3 Hz, 2 H), 1.84 (dq, J=13.7, 2.6 Hz, 2 H), 1.40 (s, 11 H).
[0266] Faza b: Rastvor terc-butil 4-alil-4-cijanopiperidin-1-karboksilata (22 mg, 0.088 mmol) u DCM-u (1.5 mL) i NaOH (2.5 M u MeOH, 0.176 mL, 0.439 mmol) se provetrava ozonom (difuziono provetravanje) na temperaturi od -78<o>C tokom 30 minuta. Reakciona smeša se pročisti kiseonikom i nakon toga razdvaja izmedju vode i DCM-a. Faze se razdvajaju, organska se sakuplja i vodena se ekstrahuje DCM-om (2 x 5 mL). Spojene organske faze se koncentruju na sniženom pritisku. Dobijeni ostatak se sipa u MeOH i meša 24 h na temperaturi od 65<o>C. Nakon hladjenja do sobne temperature, isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku i dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 70% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući terc-butil 4-cijano-4-(2-metoksi-2-oksoetil)piperidin-1-karboksilat (21 mg, 0.074 mmol) u obliku bezbojnog ulja.
<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 4.14 (s, 2 H), 3.75 (s, 3 H), 3.08 (t, J=12.9 Hz, 2 H), 2.62 (s, 2 H), 2.15-2.02 (m, 2 H), 1.59-1.48 (m, 2 H), 1.46 (s, 9 H). TLC (50% EtOAc/heptan (obojeni w/ KMnO4), Rf= 0.5).
[0267] Faza c: Rastvor terc-butil 4-cijano-4-(2-metoksi-2-oksoetil)piperidin-1-karboksilata (287 mg, 1.017 mmol) i NH3(7 N u MeOH, 3.0 mL, 21.00 mmol) u MeOH (5 mL) se meša u zatvorenoj epruveti tokom 48 h na temperaturi od 120<o>C. Nakon hladjenja do sobne temperature, isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku dajući čvrsti proizvod bele boje. Čvrsti proizvod se trituriše sa EtOAc i filtrira dajući terc-butil 1-amino-3-okso-2,8-diazaspiro[4.5]dek-1-en-8-karboksilat (157 mg, 0.587 mmol) u obliku čvrstog proizvoda bele boje.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.44 (s, 1 H), 8.02 (s, 1 H), 3.98 (d, J=13.3 Hz, 2 H), 2.71 (s, 2 H), 2.34 (s, 2 H), 1.81 (td, J=12.9, 4.6 Hz, 2 H), 1.49-1.30 (m, 11 H). MS m/z 268 (M+H)<+>.
Intermedijeri 34a/b
Racemski terc-butil 2-fluoro-1-okso-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat & terc-butil 2,2-difluoro-1-okso-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat
[0268]
[0269] U rastvor NaHMDS (1 M u THF-u, 8.68 mL, 8.68 mmol) na -78 °C dodaje se rastvor terc-butil 1-okso-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (2.0 g, 7.89 mmol) u THF-u (5 mL). Nakon mešanja tokom 30 min na ovoj temperaturi, dodaje se rastvor N-fluorobenzensulfonamida (2.49 g, 7.89 mmol) u THF-u (10 mL). Nakon 3 h mešanja na temperaturi od -78 °C, smeša se ispire sa zasić. vod NaHCO3(100 mL) i ekstrahuje DCM-om (3 x 100 mL). Spojene organske faze se ispiraju sa koncentrovanim rastvorom soli, suše preko Na2SO4, filtriraju, i koncentruju na sniženom pritisku. Dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 25% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući racemski terc-butil 2-fluoro-1-okso-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat (351 mg, 1.29 mmol). MS m/z 272.1 (M+H)<+>i difluoro keton koji se ko-eluira polaznim materijalom. Spojene koeluirane frakcije difluoro keton/polazni materijal se još jednom prečišćavaju hromatografijom na silika gelu (0 do 5% gradijent smeše rastvarača MeOH/DCM) dajući terc-butil 2,2-difluoro-1-okso-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat (573 mg, 1.98 mmol). MS m/z 290.1 (M+H)<+>.
Intermedijer 35
(S)-terc-butil 4-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat [0270]
[0271] Faza a: Rastvor terc-butil 4-hidroksi-2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (544 mg, 2.11 mmol) i Des-Martinovog perjodinana (1.39 g, 3.17 mmol) u DCM-u (10 mL) se meša 2 h na temperaturi od 0 °C. Dodaje se zasićeni vod NaHCO3: zasić. vod Na2S2O3(1:1, 10 mL), organska faza se razdvaja i vodena faza se ekstrahuje DCM-om (3 x 10 mL). Spojene organske faze se suše preko Na2SO4, filtriraju i isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku. Dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 50% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući terc-butil 4-okso-2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat (470 mg, 1.84 mmol) u obliku bezbojnog ulja koje kristalizuje nakon stajanja.<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 4.08 (s, 2 H), 4.05 (s, 2 H), 3.88 (dt, J = 13.7, 4.9 Hz, 2 H), 3.12 (ddd, J = 13.6, 9.8, 3.6 Hz, 2 H), 1.75 (ddd, J = 13.9, 9.7, 4.2 Hz, 2 H), 1.58-1.51 (m, 2 H), 1.48 (s, 9 H). MS m/z 256.2 (M+H)<+>.
[0272] Faza b: Rastvor terc-butil 4-okso-2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (220 mg, 0.86 mmol), titanijum(IV) etoksida (725 µL, 3.45 mmol), i (R)-2-metilpropan-2-sulfinamida (209 mg, 1.72 mmol) u THF-u (4 mL) se meša 1 h na temperaturi od 90 °C. Nakon hladjenja do temperature od 0 °C, dodaje se litijum borohidrid (23 mg, 1.06 mmol). Nakon 30 minuta mešanja, reakciona smeša se kvenčuje dodatkom MeOH. Isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku. Dobijeni ostatak se razblažuje sa koncentrovanim rastvorom soli i ekstrahuje EtOAc (4 x 10 mL). Spojene organske faze se suše preko Na2SO4, filtriraju i isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku, i dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 100% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući (S)-terc-butil 4-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat (170 mg, 0.47 mmol). MS m/z 361.1 (M+H)<+>.
[0273] Sledeća jedinjenja se sintetizuju pomoću gore navedenog postupka ili modifikacija gore navedenog postupka korišćenjem odgovarajućeg ketona i sulfonamida.
Tabela 3
Intermedijer 36
(1R)-terc-butil 1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-2-metil-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat [0274]
[0275] Faza a: U rastvor terc-butil 1-okso-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (2.2 g, 8.68 mmol) u THF-u (24 mL) dodaje se LiHMDS (1 M u THF-u, 8.68 mL, 8.68 mmol) na temperaturi od 0-5 °C. Nakon mešanja smeše tokom 30 min na ovoj temperaturi, dodaje se jodometan (0.543 mL, 8.68 mmol). Dobijena smeša se ostavlja da se zagreje do sobne temperature i meša 2 h. Reakciona smeša se razblažuje EtOAc i kvenčuje zasić. vod NaHCO3. Organska faza se ispire sa koncentrovanim rastvorom soli, suši preko Na2SO4, filtrira i koncentruje na sniženom pritisku. Dobijeno braon ulje se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 25% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući terc-butil 2-metil-1-okso-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat (1.3 g, 4.86 mmol). MS m/z 268.1. (M+H)<+>.
[0276] Faza b: Rastvor terc-butil 2-metil-1-okso-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (267 mg, 0.999 mmol), titanijum(IV) etoksida (837 µL, 3.99 mmol), i (R)-2-metilpropan-2-sulfinamida (242 mg, 1.997 mmol) u THF-u (10 mL) se meša 24 h na temperaturi od 85 °C. Nakon hladjenja do temperature od -78 °C, dodaje se MeOH (12 mL) a zatim i litijum borohidrid (65.3 mg, 3.00 mmol). Dobijena smeša se meša u temperaturnom intevalu od -78 °C do sobne temperature tokom 16 h. Zasić. vod NH4Cl se lagano dodaje da bi se kvenčovao višak borohidrida uz dodatak EtOAc (100 mL). Rezultujuća smeša se snažno meša 15 min i nakon toga se filtrira kroz sloj Celita. Isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku i dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 60% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan (koji sadrži 0.25% Et3N)) dajući (1R)-terc-butil 1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-2-metil-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat (92 mg, 0.247 mmol). MS m/z 373.1 (M+H)<+>.
Intermedijeri 37a/b
(3S,4S)-terc-butil 4-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-3-metil-2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat & (3R,4S)-terc-butil 4-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-3-metil-2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat
[0277]
[0278] Faza a: U rastvor terc-butil 4-okso-2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-8- (2.47 g, 9.67 mmol) u THF/u (24 mL) dodaje se LiHMDS (1 M u THF-u, 9.67 mL, 9.67 mmol) at -78 °C. Nakon mešanja smeše tokom 30 min na toj temperaturi, dodaje se jodometan (0.605 mL, 9.67 mmol) u THF-u (10 mL). Dobijena smeša se ostavlja da se zagreje do sobne temperature i meša 1 h. Reakciona smeša se razblažuje sa EtOAc i kvenčuje sa zasić. vod NaHCO3. Organska faza se ispire sa koncentrovanim rastvorom soli, suši preko Na2SO4, filtrira i koncentruje na sniženom pritisku. Dobijeno braon ulje se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 20% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući terc-butil 3-metil-4-okso-2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat (318 mg, 1.181 mmol). MS m/z 270.2. (M+H)<+>.
[0279] Faza b: Rastvor terc-butil 3-metil-4-okso-2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (318 mg, 1.181 mmol), titanijum(IV) etoksida (990 µL, 4.72 mmol), i (R)-2-metilpropan-2-sulfinamida (286 mg, 2.361 mmol) u THF-u (4 mL) se meša 90 min na temperaturi od 90 °C. Nakon hladjenja do temperature od 0 °C, dodaje se litijum borohidrid (65.3 mg, 3.00 mmol) iz jedne porcije i rezultujuća smeša se meša tokom 16 h na sobnoj temperaturi. Zasić. vod NH4Cl se lagano dodaje da bi se kvenčovao višak borohidrida, nakon čega sledi dodatak EtOAc (25 mL). Dobijena smeša se snažno meša u vremenu od 15 min i nakon toga filtrira kroz sloj Celita. Organska faza se ispire sa zasićenim vod NaHCO3, koncentrovanim rastvorom soli, suši na Na2SO4, filtrira, i isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku. Dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 100% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući (4S)-terc-butil 4-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-3-metil-2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat (88 mg, 0.235 mmol). MS m/z 375.2 (M+H)<+>.
[0280] Faza c: Dijastereomeri se razdvajaju pomoći SFC hromatografije za razdvajanje hiralnih jedinjenja na sledeći način: kolona: LUXC430 x 250 mm, protok: 80 g po minutu, mobilna faza: 20% MeOH u CO2, detekcija: 210 nm dajući (3R,4S)-terc-butil 4-((R)-1,1 dimetiletilsulfinam ido)-3-metil-2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata, Rt= 4.0 min; i (3S,4S)-terc-butil 4-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-3-metil-2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekane-8-karboksilat, Rt= 4.55 min.
Intermedijer 38
(3S,4S)-terc-butil 4-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-3-metil-2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat
[0281]
[0282] Faza a: U rastvor diizopropilamina (23.4 mL, 166 mmol) u THF-u (220 mL) koji je ohladjen na temperaturi -10 °C dodaje se u kapima nBuLi (2.5 M u heksan, 64.1 mL, 160 mmol). Nakon 30 min mešanja na ovoj temperaturi, dodaje se 1-terc-butil 4-etil piperidin-1,4-dikarboksilat (27.5 g, 107 mmol) u THF-u (50 mL) u kapima i dobijena smeša se meša 30 min na temperaturi od 0 °C. Dodaje se (S)-2-((terc-butildimetilsilil)oksi)propanal (20.47 mL, 102 mmol) i smeša se meša 1 h na temperaturi od 0 °C i 1 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša se razblažuje sa zasić. vod NaHCO3:H2O (1:4, 125 mL), dodaje se EtOAc (50 mL), i faze se razdvajaju. Vodena faza se dalje ekstrahuje EtOAc (3 x 100 mL).
1
Spojene organske faze se suše preko Na2SO4, filtriraju i rastvarač se uklanja na sniženom pritisku. Dobijeni ostatak se koristi u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja. MS m/z 346.4 (M+H-Boc)<+>.
[0283] Faza b: U rastvor sirovog 1-terc-butil 4-etil 4-((2S)-2-((terc-butildimetilsilil)oksi)-1-hidroksipropil)piperidin-1,4-dikarboksilata (95 g, 214 mmol) u THF-u (600 mL) dodaje se u porcijama LiBH4(7.0 g, 321 mmol) i dobijena smeša se meša 16 h na sobnoj temperaturi. Nakon hladjenja do temperature od 0 °C, dodaje se zasić. vod NaHCO3:H2O (1:2, 150 mL) i dobijena smeša se snažno meša sve do prestanka izdvajanja mehurića. Dodaje se EtOAc (100 mL), smeša se filtrira, faze se razdvajaju, i vodena faza se dalje ekstrahuje EtOAc (3 x 50 mL). Spojene organske faze se ispiraju sa koncentrovanim rastvorom soli, suše preko Na2SO4, filtriraju i isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku dajući terc-butil 4-((2S)-2-((terc-butildimetilsilil)oksi)-1-hidroksipropil)-4-(2-hidroksietil)piperidin-1-karboksilat (64.8 g, 161 mmol) koji se koristi u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
[0284] Faza c: Rastvor terc-butil 4-((2S)-2-((terc-butildimetilsilil)oksi)-1-hidroksipropil)-4-(2-hidroksietil)piperidin-1-karboksilata (64.8 g, 161 mmol) i TBAF (1 M u THF, 242 mL, 242 mmol) u THF-u (500 mL) se meša 2 h na sobnoj temperaturi. Dodaju se zasić. vod NaHCO3:H2O (1:2, 150 mL), faze se razdvajaju, i vodena faza se dalje ekstrahuje EtOAc (3 x 100 mL). Spojene organske faze se ispiraju sa koncentrovanim rastvorom soli, suše preko Na2SO4, filtriraju i isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku. Dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (20 do 100% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući terc-butil 4-((2S)-1,2-dihidroksipropyl)-4-(2-hidroksietil)piperidin-1-karboksilat (39.25 g, 136 mmol) u obliku polučvrstog bezbojnog ulja.
[0285] Faza d: U suspenziju NaH (10.60 g, 424 mmol) u THF-u (600 mL) na temperaturi od 0 °C, dodaje se u kapima rastvor terc-butil 4-((2S)-1,2-dihidroksipropil)-4-(2-hidroksietil)piperidin-1-karboksilata (35.06 g, 121 mmol) i TsCl (23.10 g, 121 mmol) u THF-u (200 mL). Dobijena smeša se meša 1 h na temperaturi od 0 °C. Dodaje se lagano vod NH4Cl (~5 mL) na temperaturi od -20 °C i reakciona smeša se snažno meša sve do prestanka izdvajanja mehurića. U tom trenutku, zasić. vod NH4Cl (100 mL) se dodaje uz koncentrovani rastvor soli (100 mL) i smeša se ekstrahuje EtOAc (3 x 100 mL). Spojene organske faze se suše preko Na2SO4, filtriraju i rastvarač se uklanja na sniženom pritisku dajući (3S)-terc-butil 4-hidroksi-3-metil-2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat (32.19 g, 119 mmol) koji se koristi u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja. MS m/z 171.1 (M-Boc)-.
[0286] Faza e: Rastvor (3S)-terc-butil 4-hidroksi-3-metil-2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (32.19 g, 119 mmol) i Des-Martinovog perjodinana (67.4 g, 154 mmol) u DCM-u (300 mL) meša se 2 h na temperaturi od 0 °C. Nakon zagrevanja do sobne temperature, isparljive componente se uklanjaju na sniženom pritisku i dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 40% gradijenta smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući (S)-terc-butil 3-metil-4-okso-2-oksa-8-
2
azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat (27.68 g, 92 mmol) u obliku bledo žutog ulja.<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 4.09 (d, J=9.60 Hz, 1 H), 3.66-3.86 (m, 4 H), 3.03 (ddd, J=13.77, 9.73, 3.79 Hz, 1 H), 2.90 (ddd, J=13.64, 10.23, 3.41 Hz, 1 H), 1.68 (ddd, J=13.83, 9.92, 4.29 Hz, 1 H), 1.41-1.59 (m, 2 H), 1.30-1.40 (m, 10 H), 1.20-1.25 (m, 3 H).
[0287] Faza f: Rastvor (3S)-terc-butil 3-metil-4-okso-2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (22.52 g mg, 84 mmol), titanijum(IV) etoksida (70.1 mL, 334 mmol), i (R)-2-metilpropan-2-sulfinamida (21 g, 173 mmol) u THF-u (300 mL) se meša 21 h na temperaturi od 90 °C. Nakon hladjenja do temperature od -4 °C, dodaje se MeOH (30 mL), sledi dodavanje litijum borohidrida u kapima (1.82 g, 84 mmol) (uz održavanje temperature reakcije ispod 2 °C) i dobijena smeša se meša 1 h na temperaturi od -4 °C. Lagano se dodaje zasić. vod NH4Cl da bi se kvenčovao višak borohidrida (formira se želatin) nakon čega sledi dodatak EtOAc (500 mL). Dobijena smeša se snažno meša tokom 15 min na sobnoj temperaturi i nakon toga se filtrira kroz sloj Celita nakon čega se ispire sa pranjem od EtOAc (500 mL) dobijenim nakon razblaživanja smeše. Isprarljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku i dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 100% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući (3S,4S)-terc-butil 4-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-3-metil-2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat u obliku dijastereomerne smeše u odnosu 95:5 (manje važni dijastereomer (3R,4S)-terc-butil 4-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-3-metil-2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat).
[0288] Faza g: Dijiastereomeri se razdvaju pomoću hiralne SFC na sledeći način: kolona: LC-430 x 250 mm, protok: 100 g po minutu, mobilna faza: 30%-tni MeOH u CO2, detekcija: 225 nm, Rt: 0.95 min (sporedni dijastereomer Rt: 0.55 min) dajući (3S,4S)-terc-butil 4-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-3-metil-2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat (19 g, 50.68 mmol). MS m/z 375.2.
Intermedijer 39
(4R)-4-amino-2-metil-8-azaspiro[4.5]dekan-2-ol
[0289]
[0290] Faza a: Smeša dihidrohloridne soli (2R,4R)-4-amino-8-azaspiro[4.5]dekan-2-ol-a (623 mg, 2.56 mmol), Na2CO3(1357 mg, 12.80 mmol), i CbzCl (1048 mg, 6.14 mmol) in H2O (5 mL) se snažno meša tokom 30 min na sobnoj temperaturi. Dodaje se THF (0.5 mL) i dobijena smeša se meša 18 h na sobnoj temperaturi. Smeša se razblažuje sa vodom i DCM-om. Odvojena vodena faza se ekstrahuje DCM-om (2 x 10 mL). Spojene organske faze se suše preko Na2SO4, filtriraju, i koncentruju na sniženom pritisku, i dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 100% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući (1R,3R)-benzil 1-(((benziloksi)karbonil)amino)-3-hidroksi-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat (940 mg, 2.14 mmol) u obliku pene bele boje. MS m/z 439.3 (M+H)<+>.
[0291] Faza b: Smeša (1R,3R)-benzil 1-(((benziloksi)karbonil)amino)-3-hidroksi-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat (440 mg, 1.003 mmol) i Dess-Martinov perjodinan (638 mg, 1.505 mmol) u DCM-u (6 mL) se meša 1 h na temperaturi od 0 °C i 18 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša se razblažuje sa zasić. vod NaHCO3: zaić. vod Na2S2O3(1:1, 25 mL). Odvojena vodena faza se ekstrahuje DCM-om (3 x 15 mL). Spojene organske faze se ispiraju sa koncenrovanim rastvorom soli, suše na MgSO4, i koncentruju na sniženom pritisku. Dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 70% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući (R)-benzil 1-(((benziloksi)karbonil)amino)-3-okso-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat (415 mg, 0.951 mmol) u obliku pene bele boje. MS m/z 437.2 (M+H)<+>.
[0292] Faza c: U rastvor MeLi (1.2 M in THF, 2.61 mL, 3.13 mmol) u THF-u (15 mL) dodaje se u kapima (R)-benzil 1-(((benziloksi)karbonil)amino)-3-okso-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat (415 mg, 0.951 mmol) u THF-u (5 mL) na temperaturama od -30 do -40 °C. Dobijena smeša se meša 20 min na temperaturama od -30 do -40 °C. Smeša se razblažuje NaHSO4(10 %-tni rastvor u H2O), razblažuje
4
EtOAc, i ostavlja da se zagreje do sobne temperature uz snažno mešanje. Smeša se razblažuje sa zasić. vod NaHCO3i odvojena vodena faza se ekstrahuje sa EtOAc (1 x 15 mL). Spojene organske faze se suše na Na2SO4, filtriraju, i koncentruju na sniženom pritisku. Rastvor dobijenog ostatka (313 mg), Na2CO3 (498 mg, 4.70 mmol), i CbzCl (295 mg, 1.729 mmol) u vodi (10 mL) i THF (1 mL) se snažno mešaju tokom 3 dana na sobnoj temperaturi. Smeša se razblažuje EtOAc i odvojena vodena faza se ekstrahuje sa EtOAc (3 x 15 mL). Spojene organske faze se koncentruju na sniženom pritisku. Dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 50% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući dva dijastereomera: dijastereomer A (112 mg, 0.25 mmol) u obliku bezbojnog polučvrstog proizvoda, MS m/z 453.3 (M+H)<+>i dijastereomera B (45 mg, 0.010 mmol) u obliku pene/čvrstog proizvoda bele boje, MS m/z 453.3 (M+H)<+>.
[0293] Faza d: Smeša dijastereomera A (50 mg, 0.11 mmol) i Pd/C (10 wt.%; 12 mg, 0.011 mmol) u MeOH (8 mL) se snažno meša 2 h u atmosferi vodonika. Dodaje se Celit i smeša se filtrira kroz sloj Celita a zatim se ispire DCM-om. Filtrat se koncentruje na sniženom pritisku dajući (4R)-4-amino-2-metil-8-azaspiro[4.5]dekan-2-ol u obliku bezbojnog čvrstog proizvoda koji se koristi bez daljeg prečišćavanja. MS m/z 185.2 (M+H)<+>.
Intermedijer 40
(1R,3S)-terc-butil 1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-3-fluoro-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat [0294]
[0295] Smeša (1R,3R)-terc-butil 1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-3-hidroksi-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (400 mg, 1.068 mmol) i DAST (1 M u DCM, 1.87 mL, 1.87 mmol) u DCM-u (8.5 mL) se meša 90 min na temperaturi od 0 °C. Reakciona smeša se kvenčuje dodatkom zasićenog vod NaHCO3(5 mL). Nakon 10 min mešanja na temperaturi od 0 °C, faze se odvajaju i vodena se ekstrahuje DCM-om (2 x 5 mL). Spojene organske faze se suše na MgSO4, filtriraju, i ispraljivi ostaci se uklanjaju na sniženom pritisku dajući (1R,3S)-terc-butil 1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-3-fluoro-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat koji se koristi u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja. MS m/z 277.2 (M+H-Boc)<+>.
Intermedijer 41
(1R,3R)-terc-butil 1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-3-fluoro-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat [0296]
[0297] Smeša (1R,3S)-terc-butil 1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-3-hidroksi-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (200 mg, 0.534 mmol) i DAST (1 M u DCM, 934 µL, 0.934 mmol) u DCM-u (5 mL) se meša 90 min na temperaturi od 0 °C. Reakciona smeša se kvenčuje dodatkom zasić. vod NaHCO3(5 mL). Nakon 10 min mešanja na sobnoj temperaturi, faze se razdvajaju i vodeni sloj se ekstrahuje sa DCM (2 x 5 mL). Spojene organske faze se suše na MgSO4, filtriraju, i ispirljivi ostaci se uklanjaju na sniženom pritisku dajući (1R,3R)-terc-butil 1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-3-fluoro-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat koji se koristi u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja. MS m/z 277.2 (M+H-Boc)<+>.
Intermedijer 42
3-((6-amino-2,3-dihloropiridin-4-il)tio)-6-hloropirazin-2-amin
[0298]
[0299] Faza a: U rastvor 5,6-dihloropiridin-2-amina (590 mg, 3.62 mmol) u THF-u (5 mL) dodaje se LiHMDS (1 M u THF-u, 7.96 mL, 7.96 mmol) na temperaturi od 0 °C. Reakciona smeša se meša 10 min na temperaturi od 0 °C, nakon toga se rastvor Boc2O (869 mg, 3.98 mmol) u THF-u (5 mL) dodaje u reakcionu smešu. Dobijeni rastvor se meša 15 min na temperaturi od 0 °C zatim se pH podesi do 4 dodatkom 1 M HCl. Rastvor se razblažuje sa EtOAc, ispire sa zasić vod NaHCO3, koncentrovanim rastvorom soli, suši na Na2SO4, filtrira, i koncentruje na sniženom pritisku. Dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 40% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući terc-butil (5,6-dihloropiridin-2-il)karbamat (790 mg, 3.00 mmol).<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 7.86 (d, J=8.7 Hz, 1 H), 7.70 (d, J=8.7 Hz, 1 H), 7.20 (br s, 1 H), 1.51 (s, 9 H). MS m/z 232.9 (M+H-tBu)<+>.
[0300] Faza b: U rastvor diizopropilamina (1 mL, 7.07 mmol) u THF-u (5 mL) dodaje se n-BuLi (2.5 M u heksanima, 2.83 mL, 7.07 mmol) na temperaturi od -78 °C i dobijeni rastvor se meša 1 h na toj temperaturi. Terc-butil (5,6-dihloropiridin-2-il)karbamat (930 mg, 3.53 mmol) u THF-u (5 mL) se dodaje na temperaturi od -78 °C. Nakon mešanja na ovoj temperaturi tokom 2 h, dodaje se jodin (987 mg, 3.89 mmol) u THF-u (5 mL) i dobijena smeša se meša 30 min na temperaturi od -78 °C. Nakon zagrevanja do sobne temperature, reakciona smeša se razblažuje sa vodom i ekstrahuje EtOAc (2 x 50 mL). Spojene organske faze se ispiraju sa zasićenim vod Na2S2O3, koncentrovanim rastvorom soli, suše na Na2SO4, filtriraju, i koncentruju na sniženom pritisku. Dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 40% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući terc-butil (5,6-dihloro-4-jodopiridin-2-il)karbamat ( 813 mg, 2.09 mmol).<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 8.45 (s, 1 H), 7.12 (s, 1 H), 1.52 (s, 9 H). MS m/z 332.9 (M+H-tBu)<+>.
[0301] Faza c: Smeša terc-butil (5,6-dihloro-4-jodopiridin-2-il)karbamata (610 mg, 1.57 mmol), natrijum 3-amino-5-hloropirazin-2-tiolata (302 mg, 1.65 mmol), Pd2(dba)3(72 mg, 0.08 mmol), Xantphos (91 mg, 0.16 mmol), i DIPEA (0.55 mL, 3.14 mmol) u dioksanu (7.8 mL) se meša 8 h na temperaturi od 110 °C. Nakon hladjenja do dobne temperature, reakciona smeša se filtrira kroz sloj Celita i isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku. Dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 40% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući terc-butil (4-((3-amino-5-hloropirazin-2-il)tio)-5,6-dihloropiridin-2-il)karbamat (470 mg, 1.11 mmol).<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ ppm 10.24 (s, 1 H), 7.96 (s, 1 H), 7.31 (br s, 2 H), 7.16 (s, 1 H), 1.38 (s, 9 H). MS m/z 321.9 (M+H-Boc)<+>.
[0302] Faza d: Smeša terc-butil (4-((3-amino-5-hloropirazin-2-il)tio)-5,6-dihloropiridin-2-il)karbamata (470 mg, 1.11 mmol) i HCl (4 M u dioksanu, 5.56 mL, 22.24 mmol) se meša 1 h na sobnoj temperaturi. Isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku dajući 3-((6-amino-2,3-dihloropiridin-4-il)tio)6-hloropirazin-2-amin dihidrohlorid (411 mg, 1.04 mmol) koji se koristi bez daljeg prečišćavanja. MS m/z 324.0 (M+H)<+>.
Primer 1
(S) i (R) 8-(6-amino-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amine [0303]
[0304] Faza a: Rastvor 6-hloro-3-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-amin (200 mg, 0.652 mmol) i N-(4-metoksibenzil)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amina (358 mg, 1.304 mmol) u DIPEA (3 mL) se meša 60 h na temperaturi od 130 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku. Dobijeni ostatak se rastvara u TFA (3 mL) i rastvor se meša u reaktoru za mikrotalasno zračenje tokom 1 h na temperaturi od 160 °C i 15 min na 180 °C. Isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku i dobijeni ostatak se prečišćava HPLC (gradijent elucije 25-50% acetonitrila u vodi, 5 mM NH4OH u obliku modifikatora) dajući 8-(6-amino-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amin (73 mg, 0.482 mmol; 83% čisto na osnovu HRMS).19 mg ovog jedinjenja se dalje prečišćava HPLC-om (gradijent elucije 25-50% acetonitrila u vodi, 0.1% modifikator TFA modifikator) dajući čisto jedinjenje iz naslova (9.5 mg).<1>H NMR (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8.29 (dd, J=4.42, 1.39 Hz, 1 H), 7.48 (s, 1 H), 7.19-7.41 (m, 2 H), 4.06-4.26 (m, 2 H), 2.89-3.14 (m, 2 H), 2.71 (t, J=7.33 Hz, 1 H), 1.86-2.00 (m, 1 H), 1.73-1.84 (m, 1 H), 1.43-1.72 (m, 5 H), 1.27-1.42 (m, 2 H), 1.17-1.27 (m, 1 H).<19>F NMR (376 MHz, METANOL-d4) δ ppm -66.45 (s). HRMS prorač. za C19H24N6F3S (M+H)<+>425.1735, nadjeno 425.1753. IC50iznosi 0.023 μM.
[0305] Faza b: Prečišćavanje SFC (superkritičnom fluidnom hromatografijom) na osnovu hiralnosti gore navedenog jedinjenja iz naslova vrši se na sledeći način; kolona: ID 21x250 mm, protok: 75 g po minuti, mobilna faza: 35% MeOH i 10 mM NH4OH u CO2, detekcija: 270 nm UV da bi se dobio pojedinačni enantiomer Rt(P1)= 4.9 min; IC50is 0.011 μM i Rt(P2)= 6.4 min; IC50is 0.167 μM.
[0306] Sledeća jedinjenja Formula I, kao što je naznačeno u tabeli 4, se dobijaju korišćenjem gore navedenog postupka ili modifikacija gore navedenog postupka korišćenjem odgovarajućeg derivata tiopirazin-2-amina i zaštićenog amina.
Tabela 4
Primer 8
(R) i (S)-2-(6-amino-5-((2,3-dihlorofenil)tio)pirazin-2-il)-2-azaspiro[3.3]heptan-5-amin [0307]
1
[0308] Faza a: Rastvor 6-hloro-3-((2,3-dihlorofenil)tio)pirazin-2-amina (140 mg, 0.457 mmol) i tercbutil 2-azaspiro[3.3]heptan-5-ilkarbamata (HCl so, 125 mg, 0.502 mmol) u DIPEA (1 mL) se meša 24 h na temperaturi od 130 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku. Dobijeni ostatak se rastvara u DCM-u (5 mL), dodaje se TFA (0.5 mL) i dobijena smeša se meša 30 min na sobnoj temperaturi. Isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku i dobijeni ostatak se prečišćava HPLC-om (gradijent elucije 25-50% acetonitril u vodi, 5 mM NH4OH kao modifikator) dajući 2-(6-amino-5-((2,3-dihlorofenil)tio)pirazin-2-il)-2-azaspiro[3.3]heptan-5-amin (75 mg, 0.186 mmol).<1>H NMR (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 7.31 (dd, J=8.03, 1.51 Hz, 1 H), 7.18 (s, 1 H), 7.11 (t, J=8.03 Hz, 1 H), 6.60 (dd, J=8.03, 1.51 Hz, 1 H), 4.45 (d, J=8.78 Hz, 1 H), 4.03 (d, J=9.03 Hz, 1 H), 3.96 (d, J=9.03 Hz, 1 H), 3.90 (d, J=8.78 Hz, 1 H), 3.34-3.39 (delimično preklapanje sa rastvaračem, m, 1 H), 2.12-2.25 (m, 1 H), 1.90-2.11 (m, 2 H), 1.52-1.67 (m, 1 H). HRMS prorač. za C16H18Cl2N5S (M+H)<+>382.0660, nadjeno 382.0585. IC50iznosi 5.36 μM.
[0309] Faza b: 2-(6-amino-5-((2,3-dihlorofenil)tio)pirazin-2-il)-2-azaspiro[3.3]heptan-5-amin (53.9 mg, 0.141 mmol) se dalje prečišćava hiralnom SFC; kolona: OJ-H 21 x 250 mm, protok: 80 g po minuti, mobilna faza: 26% MeOH i 10 mM NH4OH in CO2, detekcija: 269 nm UV da bi se dobio pojedinačni enantiomer Rt(P1)= 3.7 min; IC50iznosi 17.49 μM i Rt(P2)= 4.7 min.; IC50iznosi 3.31 μM.
[0310] Sledeća jedinjenja Formule I, kao što je naznačeno u tabeli 5, dobijaju se upotrebom gore navedenog postupka ili modifikacija gore navedenog postupka korišćenjem odgovarajućeg derivata pirazin-2-amina i zaštićenog amina.
Tabela 5
1 1
12
1
Primer 14
7-(6-amino-5-((2,3-dihlorofenil)tio)pirazin-2-il)-7-azaspiro[3.5]nonan-1-amin
[0311]
[0312] Rastvor 6-hloro-3-((2,3-dihlorofenil)tio)pirazin-2-amina (140 mg, 0.457 mmol) i 2-(7-azaspiro[3.5]nonan-1-il)izoindolin-1,3-diona (HCl so, 154 mg, 0.502 mmol) u DIPEA (1 mL) se meša 16 h na temperaturi od 130 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku. Rastvor dobijenog ostatatka i hidrazin hidrata (29 µL, 0.602 mmol) u
1 4
smeši rastvarača THF:MeOH (1:1, 1 mL) se meša 16 h na temperaturi od 55 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku i dobijeni ostatak se prečišćava HPLC-om (gradijent elucije 35-60% acetonitril u vodi, 5 mM NH4OH kao modifikator) dajući jedinjenje iz naslov (78 mg, 0.502 mmol).<1>H NMR (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 7.59 (s, 1 H), 7.31 (dd, J=8.03, 1.51 Hz, 1 H), 7.12 (t, J=8.03 Hz, 1 H), 6.62 (dd, J=8.03, 1.51 Hz, 1 H), 4.37 (d, J=13.55 Hz, 1 H), 4.26 (d, J=13.55 Hz, 1 H), 3.24-3.30 (delimično preklapanje sa rastvaračem, m, 1 H), 3.07-3.20 (m, 1 H), 2.923.06 (m, 1 H), 2.26-2.39 (m, 1 H), 1.87-2.07 (m, 2 H), 1.57-1.87 (m, 4 H), 1.34-1.42 (m, 1 H). HRMS prorač za C18H22Cl2N5S (M+H)<+>410.0973, nadjeno 410.1018; (racemski). IC50iznosi 0.056 μM.
[0313] Prečišćavanje gorenavedenog jedinjenja SFC hromatografijom za razdvajanje hiralnih jedinjenja vrši se na sledeći način; kolona: AD-H 21x250 mm, protok: 80 g po minuti, mobilna faza: 46% MeOH i 10 mM NH4OH u CO2, detekcija: 274 nm UV da bi se dobio pojedinačni enantiomer Rt(P1)= 4.0 min i Rt(P2)= 5.5 min. (P1 (S-enantiomer (odredjen X-zracima)); IC50iznosi 0.019 μM; (P2 (R-enantiomer)); IC50iznosi 0.414 μM.
[0314] Sledeća jedinjenja Formule I, kao što je identifikovano u tabeli 6, se dobijaju korišćenjem gore navednog postupka ili izmena gore navedenog postupka korišćenjem odgovarajućeg derivata pirazin-2-amina i amina zaštićenog ftalamidom.
Tabela 6
1
Primer 20
(S)-7-(6-amino-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-il)-7-azaspiro[3.5]nonan-1-amin
1
[0316] Faza a: smeša 6-hloro-3-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-amina (230 mg, 0.750 mmol) i (R)-2-metil-N-((S)-7-azaspiro[3.5]nonan-1-il)propan-2-sulfinamida (238 mg, 0.975 mmol) u DIPEA (3.7 mL) se meša 10 h na temperaturi od 105 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku i dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (5 do 70% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući (R)-N-((S)-7-(6-amino-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-il)-7-azaspiro[3.5]nonan-1-il)-2-metilpropan -2-sulfinamid (172 mg, 0.334 mmol) u obliku čvrstog prizovda bele boje. MS m/z 515.2 (M+H)<+>.
[0317] Faza b: Rastvor (R)-N-((S)-7-(6-amino-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-il)-7-azaspiro[3.5]nonan-1-il)-2-metilpropan-2-sulfinamida (142 mg, 0.376 mmol) i HCl (4 M u dioksanu, 414 µL, 1.66 mmol) u DCM-u (1.4 mL) se meša 20 min na temperaturi od 40 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, dodaje se HCl (1 M in H2O) i dobijena vodena smeša se ekstrahuje sa DCM. Vodena faza se zaalkali sa NH4OH (28% u H2O) dok pH iste ne postane 12 i ekstrahuje DCM-om (3 x 20 mL). Spojeni organski slojevi se ispiraju sa koncentrovanim rastvorom soli, suše preko MgSO4, filtriraju i isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku dajući (S)-7-(6-amino-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-il)-7-azaspiro[3.5]nonan-1-amin (93 mg, 0.227 mmol).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.40-8.53 (m, 1 H), 7.61-7.69 (m, 1 H), 7.55 (dd, J=8.0, 4.5 Hz, 1 H), 7.29 (d, J=8.0 Hz, 1 H), 6.19 (s, 2 H), 4.11-4.24 (m, 1 H), 3.99-4.06 (m, 1 H), 3.06-3.20 (m, 2 H), 2.90-3.06 (m, 2 H), 1.50-1.74 (m, 4 H), 1.33-1.49 (m, 2 H). HRMS prorač. za C18H21F3N6S (M+H)+ 411.1566, nadjeno 411.1579. IC50iznosi 0.038 μM.
Primer 21
(S)-5-amino-3-(1-amino-8-azaspiro[4.5]dekan-8-il)-6-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-karboksamid
[0318]
1
[0319] Faza a: U rastvor 6-hloro-3-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-amina (1.2 g, 2.119 mmol) u DCM-u (30 mL) dodaje se na temperaturi od 0 °C NBS (745 mg, 4.19 mmol)iz jedne porcije. Dobijena smeša se snažno meša 30 min na temperaturi od 0 °C i 1 h na sobnoj temperaturi. Bistar rastvor se kvenčuje sa vodom i ekstrahuje DCM-om. Spojeni organski slojevi se ispiru sa vodom, koncentrovanim rastvorom soli, suši na Na2SO4, filtriraju i koncentruje. Dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 50% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući 5-bromo-6-hloro-3-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-amin (938 mg, 2.51 mmol). MS m/z 387.2 (M+H)<+>.
[0320] Faza b: Smeša 5-bromo-6-hloro-3-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-amina (750 mg, 1.945 mmol) i bakar(I) cijanida (348 mg, 3.89 mmol) u DMF-u (7 mL) se meša 14 h na temperaturi od 120 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, reakciona smeša se filtrira kroz sloj Celita a nakon toga i sa MeOH (50 mL). Isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku i dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 100% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući 5-amino-3-hloro-6-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-karbonitril (301 mg, 0.907 mmol). MS m/z 332.3 (M+H)<+>.
[0321] Faza c: Smeša 5-amino-3-hloro-6-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-karbonitrila (52 mg, 0.157 mmol) i (S)-N-((R)-1-(4-metoksifenil)etil)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amina (90 mg, 0.314 mmol) u DIPEA (0.246 mL) se meša 1 h na temperaturi od 135 °C. Nakon hladjenja do sobnoj temperaturi, isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku i dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 100% gradijent smeše EtOAc/heptan) dajući 5-amino-3-((S)-1-(((R)-1-(4-metoksifenil)etil)amino)-8-azaspiro[4.5]dekan-8-il)-6-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-karbonitril (77 mg, 0.132 mmol). MS m/z 584.5 (M+H)<+>.
[0322] Faza d: Smeša 5-amino-3-((S)-1-(((R)-1-(4-metoksifenil)etil)amino)-8-azaspiro[4.5]dekan-8-il)-6-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-karbonitrila (77 mg, 0.132 mmol) i NaOH (1 M in H2O, 1.451 mL, 1.451 mmol) u MeOH (3.5 mL) meša se u reaktoru za mikrotalasno zračenje tokom 35 min na temperaturi od 110 °C. Nakon hladenja do sobne temperature, isparljive komponente se uklanjaju na
1
sniženom pritisku dajući 5-amino-3-((S)-1-(((R)-1-(4-metoksifenil)etil)amino)-8-azaspiro[4.5]dekan-8-il)-6-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-karboksamid (79 mg, 0.132 mmol) koji se koristi u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja. MS m/z 602.5 (M+H)<+>.
[0323] Faza e: Rastvor 5-amino-3-((S)-1-(((R)-1-(4-metoksifenil)etil)amino)-8-azaspiro[4.5]dekan-8-il)-6-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-karboksamida (79 mg, 0.132 mmol) u TFA (1.2 mL, 15.76 mmol) meša se u reaktoru za mikrotalasno zračenje na temperaturi od 100<o>C sve dok se ne utroši početni materijal (3 h, praćeno momoću LCMS). Ispraljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku i dobijeni ostatak se prečišćava pomoću HPLC (gradijent elucije 25-50% acetonitril u vodi, 5 mM NH4OH u obliku modifikatora) dajući (S)-5-amino-3-(1-amino-8-azaspiro[4.5]dekan-8-il)-6-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-karboksamid (18.8 mg, 0.039 mmol).<1>H NMR (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8.43 (dd, J=4.5, 1.4 Hz, 1 H), 7.57 (dd, J=8.1, 1.3 Hz, 1 H), 7.46 (dd, J=8.2, 4.5 Hz, 1 H), 3.92-3.88 (m, 2 H), 3.20-3.08 (m, 2 H), 2.77 (t, J=7.4 Hz, 1 H), 2.04-1.96 (m, 1 H), 1.829-1.82 (m, 1 H), 1.78-1.61 (m, 4 H), 1.53 (ddd, J=12.3, 9.2, 5.7 Hz, 1 H), 1.43 (ddd, J=9.8, 4.9, 2.0 Hz, 1 H), 1.39-1.32 (m, 1 H), 1.30-1.23 (m, 1 H). HRMS prorač. za C20H25F3N7OS (M+H)<+>468.1715, nadjeno 468.1761; IC50iznosi 0.010 μM.
[0324 ] Sledeća jedinjenja Formule I, kao što je identifikovano u tabeli 7, se dobijaju korišćenjem gore navednog postupka ili izmena gore navedenog postupka upotrebom odgovarajućeg amina i postupka deprotekcije amina.
Tabela 7
Primer 23
(S)-8-(5-amino-6-((2-(trifluorometul)piridin-3-il)tio)-1,2,4-triazin-3-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amin [0325]
1
[0326] Faza a: Smeša 3-hloro-1,2,4-triazin-5-amina (70 mg, 0.536 mmol), (S)-N-((R)-1-(4-metoksifenil)etil)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amina (247 mg, 0.644 mmol), i N-metilmorfolina (177 μL, 1.609 mmol) u MeCN (1 mL) i NMP (0.1 mL) se ozračuje u reaktoru za mikrotalasno zračenje tokom 45 min na temperaturi od 90 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, dobijeni ostatak se direktno prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 5% gradijent smeše rastvarača MeOH/DCM) dajući (S)-8-(5-amino-1,2,4-triazin-3-il)-N-((R)-1-(4-metoksifenil)etil)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-aminkoji se koristi u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja. MS m/z 383.5 (M+H)<+>.
[0327] Faza b: U rastvor (S)-8-(5-amino-1,2,4-triazin-3-il)-N-((R)-1-(4-metoksifenil)etil)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amina (194 mg, 0.507 mmol) u DCM-u (8 mL) dodaje se iz jedne porcije NBS (97 mg, 0.543 mmol) na temperaturi od 0 °C. Nakon mešanja tokom 20 min na temperaturi od 0 °C, bistar rastvor se kvenčuje sa nekoliko kapi vod. Na2CO3i ekstrahuje DCM-om. Dobijeni organski slih se suši na MgSO4, filtrira i isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku. Dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 100% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući (S)-8-(5-amino-6-bromo-1,2,4-triazin-3-il)-N-((R)-1-(4-metoksifenil)etil)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amin (77.9 mg, 0.169 mmol). MS m/z 463.4 (M+H)<+>.
[0328] Faza c: Smeša (S)-8-(5-amino-6-bromo-1,2,4-triazin-3-il)-N-((R)-1-(4-metoksifenil)etil)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amina (54.1 mg, 0.117 mmol), 2-(trifluorometil)piridin-3-tiola (21 mg, 0.117 mmol), XantPhos (7.46 mg, 0.013 mmol), Pd2(dba)3(5.37 mg, 0.0058 mmol), i DIPEA (0.041 mL, 0.234 mmol) u dioksanu (1 mL) se meša u reaktoru za mikrotalasno zračenje tokom 1.5 h na temperaturi od 130 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, reakciona smeša se filtrira kroz sloj Celita, a zatim se ispire sa EtOAc (10 mL). Isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku dajući (S)-8-(5-amino-6-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)-1,2,4-triazin-3-il)-N-((R)-1-(4-metoksifenil)etil)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amin (65 mg, 0.116 mmol). MS m/z 560.5 (M+H)<+>.
[0329] Faza d: Rastvor (S)-8-(5-amino-6-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)-1,2,4-triazin-3-il)-N-((R)-1-(4-metoksifenil)etil)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amina (65 mg, 0.116 mmol) u TFA (1.253 mL, 16.26 mmol) se meša na temperaturi od 100<o>C dok se ne utroši sav polazni materijal (1.5 h, što se proverava pomoću LC/MS), isparljive komponente se uklanaju na sniženom pritisku, dobijeni ostatak se razblažuje sa vodom, i ekstrahuje Et2O (3 x 10 mL). Vodeni sloj se zaalkali do pH 12 korišćenjem NH4OH (28%
11
u vodi), i ekstrahuje se DCM-om (3 x 10 mL). Spojeni organski slojevi se ispiraju sa koncentrovanim rastvorom soli, suše na Na2SO4, filtriraju i isparljivi ostaci se uklanjaju na sniženom pritisku. Dobijeni ostatak se prečišćava HPLC (gradijent elucije 25-50% acetonitril u vodi, 5 mM NH4OH kao modifikator) dajući (S)-8-(5-amino-6-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)-1,2,4-triazin-3-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amin (14.5 mg, 0.032 mmol).<1>H NMR (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8.50-8.45 (m, 1 H), 7.60-7.54 (m, 1 H), 7.53-7.46 (m, 1 H), 4.64-4.50 (m, 2 H), 3.22-3.09 (m, 2 H), 2.88 (t, J=7.3 Hz, 1 H), 2.11-2.00 (m, 1 H), 1.94-1.86 (m, 1 H), 1.84-1.74 (m, 1 H), 1.74-1.63 (m, 3 H), 1.59-1.46 (m, 2 H), 1.45-1.39 (m, 1 H), 1.39-1.31 (m, 1 H). HRMS proračun za C18H23F3N7S (M+H)<+>426.1688, nadjeno 426.1667. IC50iznosi 0.290 μM.
Primer 24
(S)-8-(4-amino-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirimidin-2-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amin [0330]
[0331] Faza a: Smeša 2-(trifluorometil)piridin-3-tiola (150 mg, 0.837 mmol), 2-hloro-5-jodopirimidin-4-amina (267 mg, 1.047 mmol), XantPhos (53.3 mg, 0.092 mmol), Pd2(dba)3(38.3 mg, 0.042 mmol), i DIPEA (0.292 mL, 1.674 mmol) u dioksanu (1 mL) se meša u reaktoru za mirkotalazno zračenje tokom 1.5 h na temperaturi od 130 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, reakciona smeša se filtrira kroz sloj Celita, a nakon toga se ispire EtOAc (10 mL). Isparljive komponente se uklanajau na sniženom pritisku dajući 2-hloro-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirimidin-4-amin (141 mg, 0.460 mmol). MS m/z 307.4 (M+H)<+>.
[0332] Faza b: Smeša 2-hloro-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirimidin-4-amina (70 mg, 0.228 mmol) i (S)-N-((R)-1-(4-metoksifenil)etil)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amina (105 mg, 0.274 mmol) u DIPEA (0.359 mL) se meša 1.5 h u reaktoru za mikrotalasno zračenje na temperaturi od 135 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku dajući (S)-8-(4-amino-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirimidin-2-il)-N-((R)-1-(4-metoksifenil)etil)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amin (128 mg, 0.228 mmol). MS m/z 559.5 (M+H)<+>.
[0333] Faza c: Rastvor (S)-8-(4-amino-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirimidin-2-il)-N-((R)-1-(4-metoksifenil)etil)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amin (128 mg, 0.229 mmol) u TFA (2.471 mL, 32.1 mmol) se meša na temperaturi od 100<o>C dok se sav polazni materijal nije utrošio (1.5 h, što se prati LCMS), isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku, dobijeno ostatakse razblažuje sa vodom, i ekstrahuje Et2O (3 x 10 mL). Vodeni sloj se zaalkali do pH 12 korišćenjem NH4OH (28% u vodi), i ekstrahuje se DCM-om (3 x 10 mL). Spojeni organski slojevi se ispiraju sa koncentrovanim rastvorom soli, suše preko Na2SO4, filtriraju i isparljivi ostaci se uklanjaju na sniženom pritisku. Dobijeni ostatak se prečišćava HPLC (gradijent elucije 35-60% acetonitril u vodi, 5 mM NH4OH kao modifikator), dajući (S)-8-(4-amino-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirimidin-2-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amin (32 mg, 0.072 mmol).<1>H NMR (400MHz, METANOL-d4) δ ppm 8.41-8.35 (m, 1 H), 8.00 (s, 1 H), 7.47-7.43 (m, 2 H), 4.66-4.45 (m, 2 H), 3.18-3.06 (m, 2 H), 2.81 (t, J=7.3 Hz, 1 H), 2.09-1.97 (m, 1 H), 1.94-1.86 (m, 1 H), 1.81-1.72 (m, 1 H), 1.69-1.62 (m, 2 H), 1.59-1.53 (m, 2 H), 1.49-1.44 (m, 1 H), 1.40-1.35 (m, 1 H), 1.33-1.25 (m, 1 H). HRMS prorač. za C19H24F3N6S (M+H)<+>425.1735, nadjeno 425.1741; IC50iznosi 2.78 μM.
Primer 25
(R)-5-amino-3-(1-amino-8-azaspiro[4.5]dekan-8-il)-6-((3-hloro-2-(trifluorometil)piridin-4-il)tio)pirazin-2-karboksamid
[0334]
[0335] Faza a: Rastvor 5-amino-3-hloropirazin-2-karbonitrila (1.55 g, 10.0 mmol) i (R)-N-((R)-1-(4-metoksifenil)etil)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amina (2.88 g, 10.0 mmol) u DIPEA (10 μL) i NMP (5 mL) se meša 16 h na temperaturi od 110 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, reakciona smeša se sipa u levak za odvajanje koji sadrži vod. NaHCO3i ekstrahuje EtOAc. Spojene organske faze se suše na MgSO4, filtriraju i isparljivi ostaci se uklanjaju na sniženom pritisku. Dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 5% gradijent smeše rastvarača MeOH/DCM) dajući 5-amino-3((R)-1-(((R)-1-(4-metoksifenil)etil)amino)-8-azaspiro[4.5]dekan-8-il)pirazin-2-karbonitril (2.74 g, 6.74 mmol). MS m/z 407.3 (M+H)<+>.
[0336] Faza b: (Napomena: Ova reakcija se vrši u 4 serije od po 500 mg). Rastvor 5-amino-3-((R)-1-(((R)-1-(4-metoksifenil)etil)amino)-8-azaspiro[4.5]dekan-8-il)pirazin-2-karbonitrila (500 mg, 1.23 mmol) u MeOH (8 mL) i NaOH (2.5 M u H2O, 5 mL, 12.3 mmol) se meša u reaktoru za mikrotalasno zračenje tokom 90 min na temperaturi od 130 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, dobijena smeša se prečišćava pomoću HPLC (35-60% gradijent smeše rastvarača acetonitril/voda, 5 mM NH4OH kao modifikator) dajući 5-amino-3-((R)-1-(((R)-1-(4-metoksifenil)etil)amino)-8-azaspiro[4.5]dekan-8-il)pirazin-2-karboksamid (160 mg/po reakciji, 640 mg ukupno, 1.51 mmol). MS m/z 425.3 (M+H)<+>.
[0337] Faza c: Rastvor 5-amino-3-((R)-1-(((R)-1-(4-metoksifenil)etil)amino)-8-azaspiro[4.5]dekan-8-il)pirazin-2-karboksamida (615 mg, 1.45 mmol) u TFA (11 mL) se meša 1 h na temperaturi od 100 °C. Isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku. Rastvor dobijenog ostatka, DIPEA (1.2 mL, 6.89 mmol), i Boc2O (330 mg, 1.516 mmol) u DCM-u (15 mL) se mešaju tokom 2 h na sobnoj temperaturi. Isparljivi ostaci se uklanjaju na sniženom pritisku i dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (1 do 10% gradijent smeše rastvarača MeOH/DCM) dajući (R)-terc-butil (8-(6-amino-3-karbamoilpirazin-2-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-il)karbamat (538 mg, 1.378 mmol). MS m/z 391.0 (M+H)<+>.
[0338] Faza d: Rastvor (R)-terc-butil (8-(6-amino-3-karbamoilpirazin-2-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-il)karbamata (538 mg, 1.378 mmol), i NBS (270 mg, 1.516 mmol) u DCM-u (5 mL) se meša 20 min na temperaturi od 0 °C. Reakciona smeša se kvenčuje MeOH (2 mL) i meša 20 min na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša se sipa u levak za odvajanje koji sadrži vod. NaHCO3. i ekstrahuje sa DCM-om. Spojene organske faze se suše preko MgSO4, filtriraju i isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku dajući (R)-terc-butil (8-(6-amino-5-bromo-3-karbamoilpirazin-2-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-il)karbamat (627 mg, 1.336 mmol). MS m/z 471.2 (M+H)<+>.
[0339] Faza e: U rastvor (R)-terc-butil (8-(6-amino-5-bromo-3-karbamoilpirazin-2-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-il)karbamata (627 mg, 1.336 mmol), XantPhos (77 mg, 0.134 mmol), i Pd2(dba)3(61.2 mg, 0.067 mmol) u dioksanu (3 mL) dodaje se (na sobnoj temperaturi i u struji N2) 2-etilheksil-3-merkaptopropanoat (334 μL, 1.469 mmol) a zatim i DIPEA (467 μL, 2.67 mmol). Dobijeni rastvor se meša 1 h u reaktoru za mikrotalasno zračenje na temperaturi od 90 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, reakciona smeša se filtrira kroz sloj Celita a zatim se ispire EtOAc (5 mL). Spojeni filtrati se koncentruju i dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 10% gradijent smeše rastvarača MeOH/DCM) dajući 2-etilheksil 3-((3-amino-5-((R)-1-((terc-butoksikarbonil)amino)-8-azaspiro[4.5]dekan-8-il)-6-karbamoilpirazin-2-il)tio)propanoat (574 mg, 0.946 mmol). MS m/z 607.4 (M+H)<+>.
11
[0340] Faza f: U rastvor 2-etilheksil 3-((3-amino-5-((R)-1-((terc-butoksikarbonil)amino)-8-azaspiro[4.5]dekan-8-il)-6-karbamoilpirazin-2-il)tio)propanoata (574 mg, 0.946 mmol) u THF-u (3 mL) dodaje se (na temperaturi od -78 °C i u struji N2) kalijum terc-butoksid (1 M u THF, 2.84 mL, 2.84 mmol). Nakon snažnog mešanja na temperaturi od -78 °C tokom 10 min, reakciona smeša se kvenčuje sa vod. K2CO3(2 M, 500 μL) i isparljivi ostaci se uklanjaju na sniženom pritisku. Dobijeni ostatak se prečišćava HPLC (15 do 40% gradijent smeše rastvarača acetonitril/voda, 5 mM NH4OH u obliku modifikatora) dajući (R)-terc-butil (8-(6-amino-3-karbamoil-5-merkaptopirazin-2-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-il)karbamat (280 mg, 0.663 mmol). MS m/z 423.4 (M+H)<+>.
[0341] Faza g: U rastvor (R)-terc-butil (8-(6-amino-3-karbamoil-5-merkaptopirazin-2-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-il)karbamata (88 mg, 0.208 mmol), 3-hloro-4-jodo-2-(trifluorometil)piridina (80 mg, 0.260 mmol), XantPhos (12.1 mg, 0.021 mmol), i Pd2(dba)3(9.6 mg, 0.01 mmol) u dioksanu (0.5 mL) dodaje se (na sobnoj temperaturi i u struji N2) DIPEA (110 μL, 0.625 mmol). Dobijeni rastvor se meša 1 h u reaktoru za mikrotalasno zračenje na temperaturi od 90 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, reakciona smeša se razblažuje EtOAc i filtrira kroz sloj Celita, a zatim ispire EtOAc (5 mL). Spojeni filtrati se koncentruju i suše na vakuumu. Rastvor dobijenog ostataka u DCM-u (1 mL) i TFA (400 mL) se meša 10 min na sobnoj temperaturi. Isparljivi ostaci se uklanjanju na sniženom pritisku i dobijeni ostatak se prečišćava HPLC-om (gradijent elucije 25-50% acetonitril u vodi, 5 mM NH4OH u obliku modifikatora) dajući (R)-5-amino-3-(1-amino-8-azaspiro[4.5]dekan-8-il)-6-((3-hloro-2-(trifluorometil)piridin-4-il)tio)pirazin-2-karboksamid (60 mg, 0.120 mmol).<1>H NMR (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8.18 (d, J=5.05 Hz, 1 H). 6.85 (d, J=5.31 Hz, 1 H). 3.87 (t, J=13.89 Hz, 2 H).
2.98-3.14 (m, 2 H), 2.72 (t, J=7.33 Hz, 1 H). 1.86-2.02 (m, 1 H). 1.73-1.81 (m, 1 H). 1.43-1.72 (m, 5 H).1.17-1.41 (m, 3 H).<19>F NMR (376 MHz, METANOL-d4) δ ppm -67.22 (s, 1 F). HRMS prorač. za C20H24ClF3N7OS (M+H)<+>502.1404, nadjeno 502.1398. IC50iznosi 0.058 μM
Primer 26
(R)-8-(6-amino-5-((2-amino-3-hloropiridin-4-il)tio)pirazin-2-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amin [0342]
[0343] Smeša 3-((2-amino-3-hloropiridin-4-il)tio)-6-hloropirazin-2-amina (67 mg, 0.233 mmol) i (R)-2-metil-N-((R)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-il)propan-2-sulfinamida (120 mg, 0.465 mmol) u DIPEA (2 mL) se meša 5 h na temperaturi od 130 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, isparljivi ostaci se uklanjaju na sniženom pritisku. Rastvor dobijenog ostatka u dioksanu (5 mL) i HCl (4 M u dioksanu, 1 mL) se meša 1 h na temperaturi od 40 °C. Isparljivi ostavi se uklanjaju na sniženom pritisku i dobijeni ostatak se prečišćava HPLC (gradijent elucije 25-50% acetonitril u vodi, 5 mM NH4OH kao modifikator). Dobijeni ostatak se dalje prečišćava SFC (Princeton DEAP 20x150mm, protok: 80 g po minutu, mobilna faza: 20-40% MeOH u CO2tokom 5.7 min, sakupljanje frakcije odredjenih masa, temperatura peći iznosi 40 °C, povratni pritisak 120 bar) dajući (R)-8-(6-amino-5-((2-amino-3-hloropiridin-4-il)tio)pirazin-2-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amin (23 mg, 0.057 mmol).<1>H NMR (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 7.50-7.64 (m, 2 H), 5.91 (d, J=5.77 Hz, 1 H), 4.26 (t, J=13.18 Hz, 2 H), 3.03-3.20 (m, 2 H), 2.79 (t, J=7.53 Hz, 1 H), 1.95-2.11 (m, 1 H), 1.83-1.95 (m, 1 H), 1.52-1.82 (m, 5 H), 1.37-1.52 (m, 2 H), 1.32 (dd, J=13.30, 2.01 Hz, 1 H). HRMS prorač. za C18H25ClN7S (M+H)+ 406.1581, nadjeno 406.1576. IC50iznosi 0.014 μM.
Sledeća jedinjenja se sintetizuju korišćenjem gore navedene procedure ili modifikacija gore navedene procedure uz upotrebu odgovarajućeg amina i zaštićenog amina.
Tabela 8
Primer 28
(R)-8-(6-amino-5-((3-hloropiridin-4-il)tio)pirazin-2-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amin [0344]
11
[0345 ] Faza a: U suspenziju 6-hloro-3-((3-hloropiridin-4-il)tio)pirazin-2-amina (53 mg, 0.194 mmol) u DIPEA (2 mL) dodaje se (R)-2-metil-N-((R)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-il)propan-2-sulfinamid (65 mg, 0.252 mmol). Dobijena smeša se meša na temperaturi od 90 °C tokom 10 h i nakon toga koncentruje. Sirovi proizvod se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0-50% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan; gde EtOAc sadrži 10% MeOH, a heptan 2% Et3N) dajući (R)-N-((R)-8-(6-amino-5-((3-hloropiridin-4-il)tio)pirazin-2-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-il)-2-metilpropan-2-sulfinamid (40 mg, 0.081 mmol) u obliku belićastog čvrstog proizvoda. MS m/z 495.0 (M+H)<+>.
[0346] Faza b: U rastvor (R)-N-((R)-8-(6-amino-5-((3-hloropiridin-4-il)tio)pirazin-2-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-il)-2-metilpropan-2-sulfinamida (40 mg, 0.081 mmol) u DCM-u (0.8 mL), dodaje se rastvor HCl (4 M u dioksanu, 101 µL, 0.404 mmol) i dobijena smeša se meša na temperaturi od 40 °C tokom 1 h. Dodaje se vodeni rastvor HCl (2 M, 2 mL) i dobijena smeša se ekstrahuje sa DCM-om (2x). Vodena smeša se zaalkali sa amonijum hidroksidom (28% u vodi) sve do pH = 12 i ekstrahuje sa DCM-om (3x). Organski slojevi se sakupe, ispiraju sa koncentrovanim rastvorom soli, suše na Na2SO4, filtriraju i koncentruju dajući (R)-8-(6-amino-5-((3-hloropiridin-4-il)tio)pirazin-2-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amin (24 mg, 0.061 mmol).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 8.49 (s, 1 H), 8.25 (d, J=5.3 Hz, 1 H), 7.66 (s, 1 H), 6.56 (d, J=5.3 Hz, 1 H), 6.24 (s, 2 H), 4.07-4.26 (m, 2 H), 2.98-3.13 (m, 2 H), 2.70 (t, J=7.4 Hz, 1 H), 1.11-1.94 (m, 10 H). HRMS prorač. za C18H24ClN6S (M+H)+ 391.1472, nadjeno 391.1480. IC50iznosi 0.023 μM.
Primer 29
(R)-8-(6-amino-5-((2-hloropiridin-3-il)tio)pirazin-2-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amin [0347]
[0348] Faza a: U suspenziju 6-hloro-3-((2-hloropiridin-3-il)tio)pirazin-2-amina (85 mg, 0.311 mmol) u DIPEA (1.6 mL), ddodaje se (R)-2-metil-N-((R)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-il)propan-2-sulfinamid (105
11
mg, 0.405 mmol). Dobijena smeša se meša na temperaturi od 90 °C tokom 10 h i nakon toga se koncentruje. Surovi proizvod se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0-50% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan; gde EtOAc sadrži 10% MeOH, a heptan sadrži 2% Et3N) dajući (R)-N-((R)-8-(6-amino-5-((2-hloropiridin-3-il)tio)pirazin-2-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-il)-2-metilpropan-2-sulfinamid (40 mg, 0.081 mmol) u obliku beličastog čvrstog proizvoda.<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) d ppm 8.15 (dd, J=4.5, 1.8 Hz, 1 H), 7.64 (s, 1 H), 7.01-7.18 (m, 2 H), 4.87 (br. s, 2 H), 4.24 (s, 2 H), 3.29-3.45 (m, 1 H), 3.20 (d, J=5.8 Hz, 1 H) 2.98-3.13 (m, 2 H), 1.98-2.21 (m, 1 H), 1.36-1.94 (m, 9 H), 1.22 (s, 9 H). MS m/z 495.0 (M+H)<+>.
[0349] Faza b: U rastvor (R)-N-((R)-8-(6-amino-5-((2-hloropiridin-3-il)tio)pirazin-2-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-il)-2-metilpropan-2-sulfinamida (66 mg, 0.133 mmol) u DCM-u (2 mL), dodaje se rastvor HCl (4 M u dioksanu, 167 µL, 0.667 mmol) i dobijena smeša se meša na temperaturi od 40 °C tokom 1 h. Dodaje se vodeni sloj HCl (2 M, 2 mL) i dobijena smeša se ekstrahuje sa DCM (2x). Vodena smeša se zaalkali sa amonijum hidroksidom (28% u vodi) do pH = 12 i ekstrahuje sa DCM-om (3x). Organski slojevi se sakupljaju, ispiraju sa koncentrovanim rastvorom soli, suše na Na2SO4, filtriraju i koncentruju dajući (R)-8-(6-amino-5-((2-hloropiridin-3-il)tio)pirazin-2-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amin (24 mg, 0.062 mmol) u obliku čvrstog proizvoda žutomrke boje.<1>H NMR (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8.01 (dd, J=4.8, 1.8 Hz, 1 H), 7.43-7.52 (m, 1 H), 7.12 (dd, J=7.9, 4.6 Hz, 1 H), 7.00 (dd, J=7.9, 1.6 Hz, 1 H), 4.11-4.26 (m, 2 H), 2.96-3.10 (m, 2 H), 2.67-2.81 (m, 1 H), 1.06-2.05 (m, 10 H). HRMS prorač. za C18H24ClN6S (M+H)<+>391.1472, nadjeno 391.1470. IC50is 0.015 μM.
Primer 30
(R)-8-(6-amino-5-((2,3-dihloropiridin-4-il)tio)pirazin-2-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amin
[0350]
[0351] Faza a: U suspenziju 6-hloro-3-((2,3-dihloropiridin-4-il)tio)pirazin-2-amina (34 mg, 0.111 mmol) u DIPEA (0.55 mL), dodaje se (R)-2-metil-N-((R)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-il)propan-2-sulfinamida (37 mg, 0.144 mmol). Dobijena smeša se meša na temperaturi od 90 °C tokom 10 h i onda se koncentruje. Sirovi proizvod se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0-50% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan; gde EtOAc sadrži 10% MeOH, dok heptan sadrži 2% Et3N) dajući (R)-N-
11
((R)-8-(6-amino-5-((2,3-dihloropiridin-4-il)tio)pirazin-2-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-il)-2-metilpropan-2-sulfinamid (33 mg, 0.062 mmol) u obliku beličastog čvrstog proizvoda.<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ ppm 8.02 (d, J=5.3 Hz, 1 H), 7.66 (s, 1 H), 6.60 (d, J=5.3 Hz, 1 H), 4.82 (s, 2 H), 4.21-4.34 (m, 2 H), 3.34-3.42 (m, 1 H), 3.20 (d, J=5.8 Hz, 1 H), 2.99-3.15 (m, 2 H), 2.08-2.21 (m, 1 H), 1.26-1.97 (m, 9 H), 1.23 (s, 9 H). MS m/z 529.1 (M+H)<+>.
[0352] Faza b: U rastvor dajući (R)-N-((R)-8-(6-amino-5-((2,3-dihloropiridin-4-il)tio)pirazin-2-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-il)-2-metilpropan-2-sulfinamida (20 mg, 0.038 mmol) u DCM-u (0.38 mL), dodaje se rastvor HCl (4 M u dioksanu, 47 µL, 0.189 mmol) i dobijena smeša se meša na temperaturi od 40 °C tokom 1 h. Reakciona smeša se koncentruje i rastvara u MeOH. Sirovi proizvod se prečišćava HPLC-om (gradijent elucije 15-40% acetonitril u vodi, 5 mM NH4OH kao modifikator) dajući (R)-8-(6-amino-5-((2,3-dihloropiridin-4-il)tio)pirazin-2-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amin (7 mg, 0.016 mmol) u obliku čvrstog proizvoda bele boje.<1>H NMR (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 7.91-8.04 (m, 1 H), 7.52-7.65 (m, 1 H), 6.61 (d, J=5.3 Hz, 1 H), 4.29 (t, J=14.2 Hz, 2 H), 3.06-3.22 (m, 2 H), 2.88 (t, J=7.4 Hz, 1 H), 1.21-2.17 (m, 10 H). HRMS prorač. za C18H23Cl2N6S (M+H)<+>425.1082, nadjeno 425.1095. IC50iznosi 0.003 μM.
Primer 31
(S)-7-(6-amino-5-((2,3-dihloropiridin-4-il)tio)pirazin-2-il)-7-azaspiro[3.5]nonan-1-amin
[0353]
[0354] Faza a: U suspenziju 6-hloro-3-((2,3-dihloropiridin-4-il)tio)pirazin-2-amina (54 mg, 0.176 mmol) u DIPEA (1.8 mL), dodaje se (R)-2-metil-N-((R)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-il)propan-2-sulfinamid (86 mg, 0.351 mmol). Dobijena smeša se meša na temperaturi od 90 °C tokom 10 h i zatim koncentruje. Sirovi proizviod se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0-50% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan; gde EtOAc sadrži 10% MeOH, a heptan sadrži 2% Et3N) dajući (R)-N-((S)-7-(6-amino-5-((2,3-dihloropiridin-4-il)tio)pirazin-2-il)-7-azaspiro[3.5]nonan-1-il)-2-metilpropan-2-sulfinamid (52 mg, 0.102 mmol) u obliku beličastog čvrstog proizvoda. MS m/z 514.9 (M+H)<+>.
[0355] Faza b: U rastvor (R)-N-((S)-7-(6-amino-5-((2,3-dihloropiridin-4-il)tio)pirazin-2-il)-7-azaspiro[3.5]nonan-1-il)-2-metilpropan-2-sulfinamida (20 mg, 0.039 mmol) u DCM-u (0.38 mL),
11
dodaje se rastvor HCl (4 M u dioksanu, 47 µL, 0.189 mmol) i dobijena smeša se meša na temperaturi od 40 °C tokom 1 h. Dobijena smeša se koncentruje i rastvara u MeOH. Sirovi proizvod se prečišćava HPLC-om (gradijent elucije 15-40% acetonitril u vodi, 5 mM modifikatora NH4OH) dajući (S)-7-(6-amino-5-((2,3-dihloropiridin-4-il)tio)pirazin-2-il)-7-azaspiro[3.5]nonan-1-amin (7 mg, 0.017 mmol) u obliku čvrstog proizvoda bele boje.<1>H NMR (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 7.89 (d, J=5.5 Hz, 1 H), 7.50 (s, 1 H), 6.51 (d, J=5.5 Hz, 1 H), 3.94-4.31 (m, 2 H), 2.76-3.11 (m, 3 H), 2.06-2.24 (m, 1 H), 1.36-1.82 (m, 7 H). HRMS prorač. za C17H21Cl2N6S (M+H)<+>411.0925, nadjeno 411.0938. IC50iznosi 0.028 μM.
Primer 32
(R)-8-(6-amino-5-((2,3-dihloropiridin-4-il)tio)pirazin-2-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amin [0356]
[0357] Faza a: U suspenziju 3-((3-amino-2-hlorofenil)tio)-6-hloropirazin-2-amina (60 mg, 0.209 mmol) u DIPEA (1.5 mL) dodaje se (R)-2-metil-N-((R)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-il)propan-2-sulfinamid (70 mg, 0.272 mmol). Dobijena smeša se meša na temperaturi od 90 °C tokom 10 h i nakon toga koncentruje. Sirovi poizvod se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0-50% gradijent EtOAc/heptan; gde heptan sadrži 2% Et3N) dajući (R)-N-((R)-8-(6-amino-5-((3-amino-2-hlorofenil)tio)pirazin-2-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-il)-2-metilpropan-2-sulfinamid (31 mg, 0.061 mmol) u obliku beličatog čvrstog proizvoda. MS m/z 509.0 (M+H)<+>.
[0358] Faza b: U rastvor (R)-N-((R)-8-(6-amino-5-((3-amino-2-hlorofenil)tio)pirazin-2-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-il)-2-metilpropan-2-sulfinamid (31 mg, 0.061 mmol) u DCM-u (0.6 mL) dodaje se rastvor HCl (4 M u dioksanu, 76 µL, 0.304 mmol) i dobijena smeša se meša na temperaturi od 40 °C tokom 1 h. Dodaje se vodeni rastvor HCl (2 M, 2 mL) i rezultujuća smeša se ekstrahuje sa DCM (2x). Vodena smeša se zaalkali sa amonijum hidroksidom (28% u vodi) sve do pH = 12 i ekstrahuje DCM (3x). Organski slojevi se sakupljaju, ispiru sa koncentrovanim rastvorom soli, suše preko Na2SO4, filtriraju, i koncentruju dajući (R)-8-(6-amino-5-((3-amino-2-hlorofenil)tio)pirazin-2-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amin (18 mg, 0.042 mmol) u obliku čvrstog proizvoda žute boje.<1>H NMR (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 7.40 (s, 1 H), 6.73 (t, J=8.0 Hz, 1 H), 6.50 (dd, J=8.1, 1.3 Hz, 1 H), 5.90 (dd, J=7.8, 1.3 Hz, 1 H), 4.02-4.18 (m, 2 H), 3.21 (dt, J=3.2, 1.5 Hz, 1 H), 2.98 (d, J=11.4 Hz, 2 H),
11
2.67 (t, J=7.5 Hz, 1 H), 1.04-2.02 (m, 10 H). HRMS prorač. za C19H26ClN6S (M+H)<+>405.1628, nadjeno 405.1639. IC50iznosi 0.011 μM.
Primer 33
(R)-8-(6-amino-5-((3-hloro-2-fluoropiridin-4-il)tio)pirazin-2-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amin [0359]
[0360] U suspenziju 6-hloro-3-((3-hloro-2-fluoropiridin-4-il)tio)pirazin-2-amina (40 mg, 0.137 mmol) u DIPEA (0.7 mL) dodaje se (R)-2-metil-N-((R)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-il)propan-2-sulfinamid (71 mg, 0.0275 mmol). Dobijena smeša se meša na temperaturi od 90 °C tokom 10 h i nakon toga koncentruje. Sirovi ostatak se rastvara u DCM-u (0.7 mL), dodaje se rastvor HCl (4 M u dioksanu, 34 µL, 0.137 mmol) i dobijena smeša se meša na temperaturi od 40 °C tokom 1 h. Reakciona smeša se koncentruje i sirovi proizvod se prečišćava HPLC (gradijent elucije 15 do 40% acetonitrila u vodi, 0.1% modifikator TFA) dajući (R)-8-(6-amino-5-((3-hloro-2-fluoropiridin-4-il)tio)pirazin-2-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amin (TFA so: 17 mg, 0.042 mmol).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.94 (d, J=5.3 Hz, 1 H), 7.79 (br. s., 3 H), 7.69 (br. s., 1 H), 6.51 (d, J=5.5 Hz, 1 H), 6.34 (br. s., 2 H), 4.12-4.32 (m, 2 H), 2.99-3.24 (m, 3 H), 2.00-2.12 (m, 1 H), 1.30-1.90 (m, 9 H). HRMS prorač. za C18H23ClFN6S (M+H)+ 409.1377, nadjeno 409.1385. IC50is 0.005 μM.
Primer 34
[0361]
12
[0362] Faza a: U rastvor terc-butil 2-okso-1,8-diazaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (300 mg, 1.180 mmol) u dihlorometanu (3 mL) na sobnoj temperature dodaje se fosfor pentasulfid (110 mg, 0.495 mmol) a zatim heksametildisiloksan (2.256 mL, 10.62 mmol). Reakciona smeša se meša 3 h na sobnoj temperaturi zatim razblažuje sa EtOAc i filtrira kroz sloj Celita. Filtrat se koncentruje na sniženom pritisku. Sirovi proizvod se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 80% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući terc-butil 1-tiokso-2,8-diazaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat (0.290 g, 1.07 mmol) u obliku čvrstog proizvoda bele boje.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.39 (s, 1 H), 3.66 (dt, J=13.6, 4.9 Hz, 2 H), 3.09 (s, 2 H), 2.78 (t, J=7.8 Hz, 2 H), 1.95 (t, J=7.8 Hz, 2 H), 1.57 (dd, J=6.6, 4.8 Hz, 4 H), 1.39 (s, 9 H). MS m/z 271 (M+H)<+>.
[0363] Faza b: U rastvor 1-tiokso-2,8-diazaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (100 mg, 0.370 mmol) u THF (3 mL) dodaje se u kapima jodometan (0.231 mL, 3.70 mmol). Dobijeni rastvor se meša na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Tokom trajanja reakcije smeša polako postaje više žute boje i nakon mešanja u odredjenom vremenu reakcije postaje talog svetlo žute boje. Reakciona smeša se koncentruje i suši na vakuumu dajući čvrsti proizvod žute boje. Čvrsti proizvod ćute boje se sipa u MeOH (2 mL) i obradjuje 7 M amonijakom u metanolu (3 mL) zatim se zagreva u zatvorenoj epruveti na temperaturi od 100<o>C tokom 8 h. Reakciona smeša se hladi do sobne temperature i koncentruje na sniženom pritisku dajući čvrsti proizvod koji se sonifikuje sa acetonitrilom i filtrira. Filtrat se koncentruje i ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 30% gradijent smeše rastvarača MeOH/DCM) dajući terc-butil 1-amino-2,8-diazaspiro[4.5]dek-1-en-8-karboksilat (87 mg, 0.343 mmol).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.38 (s, 1 H), 8.81 (d, J=25.2 Hz, 2 H), 3.98 (s, 2 H), 3.55 (t, J=7.0 Hz, 2 H), 2.82 (s, 2 H), 2.12 (t, J=7.1 Hz, 2 H), 1.74 (td, J=12.9, 4.7 Hz, 2 H), 1.57 (d, J=12.7 Hz, 2H), 1.41 (s, 9 H). MS m/z 254 (M+H)<+>.
[0364] Faza c: U rastvor terc-butil 1-amino-2,8-diazaspiro[4.5]dek-1-en-8-karboksilata (86 mg, 0.339 mmol) u DCM-u (3 mL) dodaje se HCl u dioksanu (4 M, 0.500 mL, 2.0 mmol) na sobnoj temperaturi i reakciona smeša se meša 16 h. Reakciona smeša se koncentruje i ostatak se trituriše iz acetonitrila i filtrira dajući 2,8-diazaspiro[4.5]dek-1-en-1-amin (57.7 mg, 0.254 mmol) u obliku ćvrstog proizvoda žuto mrke boje.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.64 (s, 1 H), 9.39-9.23 (m, 1 H), 9.15 (s, 1 H), 9.07 (s, 1 H), 8.70 (d, J=12.5 Hz, 1 H), 3.54 (t, J=6.9 Hz, 2 H), 3.32 (d, J=13.3 Hz, 2 H), 3.05-2.88 (m, 2 H), 2.18 (t, J=6.9 Hz, 2 H), 2.01 (td, J=13.7, 4.3 Hz, 2 H), 1.80 (d, J=13.8 Hz, 2 H). MS m/z 154 (M+H)<+>.
[0365 ] Faza d: U suspenziju 6-hloro-3-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-amina (250 mg, 0.815 mmol) i 2,8-diazaspiro[4.5]dek-1-en-1-amina (210 mg, 1.371 mmol) u N-metil-2-pirolidinonu (4 mL) dodaje se DIPEA (1.4 mL, 8.02 mmol) i reakciona smeša se zagreje do temperature od 140<o>C tokom 16 h. Dobijena tamna smeša se hladi do sobne temperature i razblažuje EtOAc i vodom. Slojevi se razdeljuju i organski se odbacuje. Vodeni sloj se ekstrahuje sa smešom rastvarača 20% izopropanol/hloroform (2 x 30 mL), spojeni organski ekstrakti se suše na Na2SO4, filtriraju i koncentruju. Sirovi ostatak se prečišćava preparativnom HPLC (gradijent elucije, 5 do 40% ACN u vodi, 0.1% modifikator TFA) i polovina objedinjenih frakcija se liofilizuje dajući 8-(6-amino-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-il)-2,8-diazaspiro[4.5]dek-1-en-1-amin (TFA so: 61.4 mg, 0.082 mmol). Preostale frakcije se sakupljaju i neutralizuju snažnim mešanjem u vremenu od 10 minuta sa 50 %-tnim zasićenim NaHCO3. Dobijeni rastvor se ekstrahuje sa 20 %-tnom smešom rastvarača izopropanol/hloroform (3 x 30 mL), spojeni organski ekstrakti se suše preko Na2SO4, filtriraju i koncentruju dajući 8-(6-amino-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-il)-2,8-diazaspiro[4.5]dek-1-en-1-amin (22 mg, 0.052 mmol) u obliku slobodne baze.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.46 (d, J=4.4 Hz, 1 H), 7.67 (s, 1 H), 7.55 (dd, J=8.2, 4.5 Hz, 1 H), 7.31 (d, J=8.1 Hz, 1 H), 6.19 (s, 2 H), 5.74 (s, 2 H), 4.40 (d, J=13.4 Hz, 2 H), 3.43 - 3.34 (m, 2 H), 2.90 (t, J=12.2 Hz, 2 H), 1.97-1.89 (m, 2 H), 1.83 (td, J=13.0, 4.1 Hz, 2 H), 1.36 (d, J=12.9 Hz, 2 H). MS m/z 424.1541 (M+H)<+>. IC50iznosi 0.032 μM
[0366] Sledeće jedinjenje se dobija korišćenjem gore navedenog amina i spaja se (kupluje) upotrebom standardnih postupaka koji su opisani u ovom tekstu.
Primer 36
racemski-8-(6-amino-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-il)-2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-4-amin
[0367]
[0368] Rastvoreni racemski-2-(8-(6-amino-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-il)-2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-4-il)izoindolin-1,3-dion (40 mg, 0.072 mmol) u etanolu (1 mL) u konusnoj mikrotalasnoj vajli od 5 mL, dodaje se hidrazin hidrat (0.070 mL, 1.44 mmol), vajla se zatvara i zagreje na temperaturi od 90 °C tokom 2 h na aluminijumskom kupatilu. Suspenzija se filitrira na vakuum pumpi kroz PTFE membranu sa prečnikom pora od 0.45 μm i ispire sa etanolom. Vrši se prečišćavanje HPLC-om (gradijent elucije od 15 do 40% acetonitril u vodi, 0.1% modifikator TFA), zatim se rastvor razblažuje sa EtOAc i ispire zasić. vod. rastv. bikarbonata, zatim koncentrovanim rastvorom soli. Isti se koncentruje, razblažuje sa 1 mL DCM i dodaje se HCl (100 µL, 4 M u dioksanu) da bi se dobio talog. Talog se koncentruje dajući 8-(6-amino-5-((2-(trifluorometil) piridin-3-il)tio)pirazin-2-il)-2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-4-amin (HCl so: 1 mg, 0.002 mmol).<1>H NMR (400 MHz, Metanol-d4) δ 8.43–8.39 (m, 1 H), 7.65 (s, 1 H), 7.46–7.39 (m, 2 H), 4.35–4.14 (m, 2 H), 3.98 (d, J=9.2 Hz, 1 H), 3.90 (d, J=9.2 Hz, 1 H), 3.58 (d, J=5.3 Hz, 1 H), 3.29–3.12 (m, 3 H), 1.76 (m, 4 H). HRMS prorač. Za C18H22F3N6OS (M+H)<+>427.1528, nadjeno 427.1537. IC50iznosi 0.07 μM.
Primer 37
(R) i (S) - 8-(6-amino-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-il)-2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-4-amin
[0369]
12
[0370] Rastvorenom pojedinačnom enantiomeru P1, 2-(8-(6-amino-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-il)-2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-4-il)izoindolin-1,3-dion (49 mg, 0.088 mmol) u etanolu (1 mL) u koničnoj mikrotalasnoj vajli od 5 mL, dodaje se hidrazin hidrat (0.080 mL, 1.65 mmol), vajla se zatvara i zagreje na aluminijumskom kupatilu, na temperaturi od 90 °C tokom 2 h. Suspenzija filtrirana na vakuum pumpi kroz PTFE membranu sa prečnikom pora od 0.45 mm i ispire etanolom. Vrši se prečišćavanje HPLC-om (gradijent elucije od 15 do 40% acetonitril u vodi, 5 mM modifikator NH4OH), dovodi do izolovanja 8-(6-amino-5-((2-(trifluorometil) piridin-3-il)tio)pirazin-2-il)-2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-4-amina (13 mg, 0.029 mmol). Hiralna analitička HPLC: LC-34.6x100mm, 5 mm, mobilna faza: 45% MeOH sa 10 mM amonijakom, 5 mL/min, jedan enantiomerni pik 1 (P1), Rt: 0.88 min, >99% pojedinačni enantiomer.<1>H NMR (400 MHz, Metanol-d4) δ 8.39 (dd, J=4.3, 1.6 Hz, 1 H), 7.60 (s, 1 H), 7.41 (m, 2 H), 4.21–4.07 (m, 3 H), 3.86 (d, J=8.7 Hz, 1 H), 3.79 (d, J=8.7 Hz, 1 H), 3.51 (dd, J=9.0, 5.2 Hz, 1 H), 3.24 (m, 2 H), 3.15 (m, 1 H), 1.73 (m, 2 H), 1.59 (m, 1.8 Hz, 2 H). HRMS prorač. za C18H22F3N6OS (M+H)+ 427.1528, nadjeno 427.1542. IC50iznosi 0.025 μM.
Primer 38
(R) i (S) - 8-(6-amino-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-il)-2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-4-amin
[0371]
[0372] Rastvorenom pojedinačnom enantiomeru P1, 2-(8-(6-amino-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-il)-2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-4-il)izoindolin-1,3-dion (42 mg, 0.075 mmol) u etanolu (1 mL) u koničnoj mikrotalasnoj vajli od 5 mL, dodaje se hidrazin hidrat (0.080 mL, 1.65 mmol), vajla se zatvara i zagreje na aluminijumskom kupatilu, na temperaturi od 90 °C tokom 2 h. Suspenzija filtrirana na vakuum pumpi kroz PTFE membranu sa prečnikom pora od 0.45 μm i ispire etanolom. Prečišćavanje HPLC (gradijent elucije od 15 do 40% acetonitrila u vodi, 5 mM modifikatora NH4OH) dovodi do izolovanja 8-(6-amino-5-((2-(trifluorometil) piridin-3-il)tio)pirazin-2-il)-2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-4-amina (13 mg, 0.029 mmol). Analitička HPLC za razdvajanje hiralnih jedinjenja: LC-3 4.6 x 100mm, 5 μm, mobilna faza: 45% MeOH sa 10 mM amonijaka, 5 mL/min, pojedinačni enantiomer pik 2 (P2), Rt: 1.33 min, >99% pojedinačni enantiomer.<1>H NMR (400 MHz, Metanol-d4) δ 8.39 (dd, J=4.3, 1.6 Hz, 1 H), 7.60 (s, 1 H), 7.41 (m, 2 H), 4.21–4.07 (m, 3 H), 3.86 (d, J=8.6 Hz, 1 H), 3.79 (d, J=8.8 Hz, 1 H), 3.50 (dd, J=9.0, 5.2 Hz, 1 H), 3.24 (m, 2 H), 3.15 (m, 1 H), 1.80–1.67 (m, 2 H), 1.64–1.50 (m, 2 H). HRMS prorač. za C18H22F3N6OS (M+H)<+>427.1528, nadjeno 427.1536. IC50iznosi 0.983 μM.
Primer 39
(R)-6-amino-2-(1-amino-8-azaspiro[4.5]dekan-8-il)-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)nikotinamid
[0373]
12
[0374] Faza a: U rastvor 2,6-dihloropiridin-3-karboksamida (0.728 g, 3.81 mmol) u 1-metil pirolidinonu (7 mL) dodaje se N-metil morfolin (1.14 mL, 10.40 mmol) i (R)-N-((R)-1-(4-metoksifenil)etil)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amin (1 g, 3.47 mmol). Dobijena smeša se zagreje do temperature od 100<o>C u uslovima za refluktovanje tokom 24 h. Reakciona smeša se razblažuje sa etil acetatom, obradjuje sa koncentrovanim natrijum bikarbonatom i filtrira. Organski sloj se odvaja, suši preko natrijum sulfata, filtrira i koncentruje na sniženom pritisku. Dobijeno ulje tamno crvene boje se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 50% gradijent smeše rastvarača etil acetat/heptan koji sadrži 0.25% trietilamin) dajući 6-hloro-2-((R)-1-(((R)-1-(4-metoksifenil)etil)amino)-8-azaspiro[4.5]dekan-8-il)nikotinamid (0.998 g, 2.25 mmol).<1>H NMR (400 MHz, Metanol-d4) δ 7.81 (d, J=7.8 Hz, 1 H), 7.26 (d, J=8.6 Hz, 2 H), 6.86 (m, 3 H), 3.82 (m, 1 H), 3.77 (s, 3 H), 3.75–3.63 (m, 2 H), 3.03 (m, 2 H), 2.59 (m, 1 H), 2.01–1.92 (m, 1 H), 1.88–1.52 (m, 5 H), 1.51–1.36 (m, 3 H), 1.32 (d, J=6.5 Hz, 3 H), 1.25 (m, 2 H). MS m/z 442.9 (M+H)<+>.
[0375] Faza b: U rastvor 6-hloro-2-((R)-1-(((R)-1-(4-metoksifenil)etil)amino)-8-azaspiro[4.5]dekan-8-il)nikotinamida (242 mg, 0.546 mmol), u toluenu (11 mL), dodaju se Pd2(dba)3(97 mg, 0.169 mmol), i (oksibis(2,1-fenilen))bis(difenilfosfin) (103 mg, 0.191 mmol). Reakciona smeša se tretira azotom, i dodaju se benzofenon imin (0.11 mL, 0.656 mmol) i kalijum terc-butoksid (0.710 mL, 1 M u tetrahidrofuranu, 0.710 mmol) u atmosferi azota. Reakciona smeša se zagreje do temperature od 80<o>C tokom 2 h, i smeša se ostavlja da se ohladi do sobne temperature, filtrira kroz sloj Celita, i ispire sa etil acetatom. Filtrat se koncentruje na sniženom pritisku, i ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 50% gradijent smeše rastvarača etil acetat/heptan) dajući 6-((difenilmetilen)amino)-2-((R)-1-(((R)-1-(4-metoksifenil)etil)amino)-8-azaspiro[4.5]dekan-8-il)nikotinamid (250 mg, 0.425 mmol). MS m/z 588.3 (M+H)<+>.
[0376] Faza c: U suspenziju 6-((difenilmetilen)amino)-2-((R)-1-(((R)-1-(4-metoksifenil)etil)amino)-8-azaspiro[4.5]dekan-8-il)nikotinamida (130 mg, 0.221 mmol) u THF-u (6 mL), dodaje se HCl (2 M, 0.1 mL, 0.200 mmol) i dobijeni rastvor se meša na sobnoj temperaturi tokom 30 minuta. Reakciona smeša se koncentruje na sniženom pritisku i ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 50% gradijenta smeše rastvarača etil acetat/heptan, koji sadrži 0.25% trietilamina) da bi se dobio 6-amino-2-((R)-1-(((R)-1-(4-metoksifenil)etil)amino)-8-azaspiro[4.5]dekan-8-il)nikotinamid (43 mg, 0.102 mmol). MS m/z 424.1 (M+H)<+>.
[0377] Faza d: Rastvor 6-amino-2-((R)-1-(((R)-1-(4-metoksifenil)etil)amino)-8-azaspiro[4.5]dekan-8-il)nikotinamida (199 mg, 0.470 mmol) u trifluorosirćetnoj kiselini (3 mL) se zagreje do temperature od 100<o>C tokom 30 min. Smeša se koncentruje na sniženom pritisku i ostatak se koristi u sledećoj fazi bez
12
daljeg prečišćavanja. (R)-6-amino-2-(1-amino-8-azaspiro[4.5]dekan-8-il)nikotinamid. MS m/z 290.2 (M+H)<+>.
[0378] Faza e: U rastvor (R)-6-amino-2-(1-amino-8-azaspiro[4.5]dekan-8-il)nikotinamida u dihlorometanu (2 mL) dodaje se trietilamin (0.196 mL, 1.410 mmol) i di-terc-butil dikarbonat (113 mg, 0.517 mmol) i dobijena smeša se meša 2 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša se koncentruje na sniženom pritisku, i ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 50% gradijent smeše rastvarača etil acetat/heptan, koji sadrži 0.25% trietilamin) dajući (R)-terc-butil(8-(6-amino-3-karbamoilpiridin-2-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-il)karbamat (147 mg, 0.377 mmol).<1>H NMR (400 MHz, Metanol-d4) δ 7.88 (d, J=8.5 Hz, 1 H), 6.19 (d, J=8.5 Hz, 1 H), 3.66 (t, J=7.7 Hz, 1 H), 3.27–3.15 (m, 2 H), 2.98 (t, J=12.4 Hz, 2 H), 2.05–1.94 (m, 1 H), 1.86–1.46 (m, 8 H), 1.45 (s, 9 H), 1.41 (d, J=6.0 Hz, 1 H). MS m/z 390.3 (M+H)<+>.
[0379] Faza f: U rastvor (R)-terc-butil(8-(6-amino-3-karbamoilpiridin-2-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-il)karbamata (136 mg, 0.349 mmol) u dihlorometanu (5 mL), hladjenog na ledenom kupatilu, dodaje se N-jodosukcinimid (86 mg, 0.384 mmol). Dobijena smeša se meša na temperaturi od 5<o>C tokom 2 h. Reakciona smeša se kvenčuje dodatkom 2 mL metanola, i smeša se ostavlja da se zagreje do sobne temperature. Rastvarači se uklanjaju na sniženom pritisku. Sirovi proizvod se ekstrahuje dihlorometanom i ispire koncentrovanim rastvorom soli. Organski sloj se sušu preko natrijum sulfata, filtrira i koncentruje na sniženom pritisku dajući (R)-terc-butil (8-(6-amino-3-karbamoil-5-jodopiridin-2-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-il)karbamat (170 mg, 0.330 mmol) koji se koristi u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja. MS m/z 516.1 (M+H)<+>.
[0380] Faza g: U rastvor (R)-terc-butil (8-(6-amino-3-karbamoil-5-jodopiridin-2-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-il)karbamata (177 mg, 0.343 mmol) u dioksanu (10 mL), dodaje se Pd2(dba)3(31.4 mg, 0.034 mmol), (9,9-dimetil-9H-ksanten-4,5-diil)bis(difenilfosfin) (39.7 mg, 0.069 mmol), 2-(trifluorometil)piridin-3-tiol (67.7 mg, 0.378 mmol), i N,N-diizopropiletilamin (0.120 mL, 0.687 mmol). Dobijena smeša se zagreva do temperature od 120 °C tokom 2 h, nakon toga se ostavlja da se hladi do sobne temperature. Reakciona smeša se razblažuje etil acetatom i filtrira kroz sloj Celita. Filtrat se koncentruje na sniženom pritisku i prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 50% gradijent smeše rastvarača etil acetat/heptan, koji sadrži 0.25% trietilamina) dajući (R)-terc-butil (8-(6-amino-3-karbamoil-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)piridin-2-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-il)karbamat (115 mg, 0.203 mmol). MS m/z 567.2 (M+H)<+>.
[0381] Faza h: U rastvor (R)-terc-butil (8-(6-amino-3-karbamoil-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)piridin-2-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-il)karbamata (110 mL, 0.194 mmol) u dihlorometanu (2 mL) dodaje se trifluorosirćetna kiselina (2 mL, 26 mmol) i dobijena smeša se ostavlja da se meša na sobnoj
12
temperaturi tokom 1 h. Rastvarači se uklanjaju na sniženom pritisku, i ostatak se prečišćava HPLC (gradijent elucije: 35 do 60% acetonitrila u vodi, 5 mM modifikator NH4OH) dajući (R)-6-amino-2-(1-amino-8-azaspiro[4.5]dekan-8-il)-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)thio)nikotinamid (40 mg, 0.084 mmol).<1>H NMR (400 MHz, Metanol-d4) δ 8.38 (dd, J=4.1, 1.9 Hz, 1 H), 7.93 (s, 1 H), 7.56-7.31 (m, 2 H), 3.77-3.55 (m, 2 H), 3.16-2.98 (m, 2 H), 2.82 (t, J=7.4 Hz, 1 H), 2.03 (m, 1 H), 1.94-1.60 (m, 5 H), 1.60-1.20 (m, 4 H).<19>F NMR (376 MHz, Metanol-d4) δ -66.48. HRMS prorač. za C21H26F3N6OS (M+H)<+>467.1841, nadjeno 467.1837. IC50iznosi 0.118 μM.
Primer 40
(R)-3-((3-amino-5-(1-amino-8-azaspiro[4.5]dekan-8-il)pirazin-2-il)tio)-2-hlorobenzamid
[0382]
[0383] Faza a: Smeša 2-hloro-3-merkaptobenzamida (HCl so, 145 mg, 0.647 mmol), 3-bromo-6-hloropirazin-2-amina (299 mg, 1.436 mmol), bakar (I) jodida (49.3 mg, 0.259 mmol), kalijum fosfata (412 mg, 1.941 mmol), i 1,10-fenantrolina (58.3 mg, 0.324 mmol) u dioksanu (5 mL, degaziran) se meša u mikrotalasnom reaktoru tokom 4 h na temperaturi od 130 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, reakciona smeša se filtrira kroz sloj Celita, zatim se ispire EtOAc (50 mL). Spojeni filtrati se koncentruju i dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 100% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući 3-((3-amino-5-hloropirazin-2-il)tio)-2-hlorobenzamid (140 mg, 0.444 mmol). MS m/z 315.0 (M+H)<+>
[0384] Faza b: Smeša 3-((3-amino-5-hloropirazin-2-il)tio)-2-hlorobenzamida (130 mg, 0.412 mmol) i (R)-2-metil-N-((R)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-il)propan-2-sulfinamida (139 mg, 0.536 mmol) u DIPEA (0.648 mL) se meša u mikrotalasnom reaktoru tokom 14 h na temperaturi od 95 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, isparljivi ostaci se uklanjaju na sniženom pritisku i dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 100% gradijent smeše rastvarača MeOH/DCM koji sadrži 0.25%
12
TEA) dajući 3-((3-amino-5-((R)-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-8-azaspiro[4.5]dekan-8-il)pirazin-2-il)tio)-2-hlorobenzamid (65 mg, 0.121 mmol). MS m/z 537.2 (M+H)<+>.
[0385] Faza c: 3-((3-amino-5-((R)-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-8-azaspiro[4.5]dekan-8-il)pirazin-2-il)tio)-2-hlorobenzamid (65 mg, 0.121 mmol) se rastvara u smeši rastvarača HCl/dioksan (4 M, 0.121 mL, 0.484 mmol) i meša na temperaturi od 22<o>C sve dok ne ostane polazni materijal (1 h, što se prati LCMS). Ispraljivi ostaci se uklanjaju na sniženom pritisku i dobijeni ostatak se prečišćava HPLC-om (gradijent elucije: 25 do 50% acetonitrila u vodi, modifikator 5 mM NH4OH), dajući (R)-3-((3-amino-5-(1-amino-8-azaspiro[4.5]dekan-8-il)pirazin-2-il)tio)-2-hlorobenzamid (25.5 mg, 0.058 mmol).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 7.90 (s, 1 H), 7.63 (s, 1 H), 7.62 (br. s., 1 H), 7.28-7.18 (m, 1 H), 7.18-7.09 (m, 1 H), 6.64 (dd, J=1.6, 7.9 Hz, 1 H), 6.08 (s, 2 H), 4.18-4.07 (m, 2 H), 3.12-2.95 (m, 2 H), 2.74-2.64 (m, 1 H), 1.91-1.73 (m, 2 H), 1.66-1.47 (m, 4 H), 1.39-1.14 (m, 4 H). HRMS prorač. za C20H26ClN6OS (M+H)<+>433.1577, nadjeno 433.1598; IC50 iznosi 0.016 μM.
Primer 41
(2R,4R)-4-amino-8-(6-amino-5-((2-amino-3-hloropiridin-4-il)tio)pirazin-2-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-2-ol
[0386]
[0387] Faza a: Smeša (1R,3R)-terc-butil 3-((terc-butildimetilsilil)oksi)-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (100 mg, 0.205 mmol) i HCl (4 M u dioksanu, 510 mL, 2.05 mmol) u MeOH (1 mL) se meša 1 h na temperaturi od 40 °C. Isparljivi ostaci se uklanjaju na sniženom pritisku i dobijeni beli ostatak se suši na vakuumu tokom 1 h. MS m/z 171.1 (M+H)<+>.
[0388] Faza b: Smeša ovog belog ostatka i 3-((2-amino-3-hloropiridin-4-il)tio)-6-hloropirazin-2-amina (65 mg, 0.226 mmol) u smeši rastvarača DIPEA:NMP (2:1; 1.5 mL) se snažno meša 40 h na temperaturi od 100 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, isparljivi ostaci se uklanjaju na sniženom pritisku volatiles i dobijeni sirovi proizvod se prečišćava HPLC-om (gradijent elucije 7.5-20% acetonitril u vodi, 0.1% modifikator TFA). Isparljivi ostaci se uklanjaju na sniženo pritisku i dobijeni ostatak se dalje
12
prečišćava HPLC (gradijent elucije 15-40% acetonitril u vodi, 5 mM modifikatora NH4OH) dajući (2R,4R)-4-amino-8-(6-amino-5-((2-amino-3-hloropiridin-4-il)tio)pirazin-2-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-2-ol (44 mg, 0.102 mmol) u obliku čvrstog proizvoda bele boje.<1>H NMR (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 7.51-7.64 (m, 2 H), 5.92 (d, J=5.56 Hz, 1 H), 4.16-4.39 (m, 3 H), 3.00-3.21 (m, 2 H), 2.80 (dd, J=8.08, 7.07 Hz, 1 H), 2.33 (dt, J=13.45, 6.79 Hz, 1 H), 1.95 (dd, J=13.89, 7.58 Hz, 1 H), 1.83 (dd, J=14.02, 4.17 Hz, 1 H), 1.61-1.74 (m, 3 H), 1.56 (ddd, J=13.39, 8.08, 5.81 Hz, 1 H), 1.30 (d, J=13.14 Hz, 1 H). HRMS prorač. za C18H25ClN7OS (M+H)<+>422.1557, nadjeno 422.1569. IC50iznosi 0.007 μM.
[0389] Sledeća jedinjenja iz tabele 9 se mogu sintetizovati korišćenjem gore navedenog postupka ili izmena gore navednih postupaka upotrebom odgovarajućeg zaštićenog amina i intermedijera hloropirazina.
Tabela 9
1
11
12
1
14
1
1
Primer 68
(3R,4S)-8-(6-amino-5-((2-amino-3-hloropiridin-4-il)tio)pirazin-2-il)-3-metil-2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-4-amin
[0390]
[0391] Faza a: Smeša (3R,4S)-terc-butil 4-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-3-metil-2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (53 mg, 0.142 mmol) i HCl (4 M u dioksanu, 354 mL, 1.415 mmol) u MeOH (5 mL) se meša 1 h na temperaturi od 40 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku dajući (3R,4S)-3-metil-2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-4-amin koji se koristi u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja. MS m/z 171.1 (M+H)<+>.
[0392] Faza b: Smeša sirovog (3R,4S)-3-metil-2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-4-amine, 3-((2-amino-3-hloropiridin-4-il)tio)-6-hloropirazin-2-amina (35.5 mg, 0.123 mmol), i DIPEA (193 μL, 1.11 mmol) u DMSO (600 μL) se meša 16 h na temperaturi od 100 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, isparljivi ostaci se uklanjaju na sniženom pritisku i dobijeni ostatak se prečišćava HPLC-om (gradijent elucije 15-40% acetonitril u vodi, 5 mM modifikatora NH4OH) dajući (3R,4S)-8-(6-amino-5-((2-amino-3-hloropiridin-4-il)tio)pirazin-2-il)-3-metil-2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-4-amin (13 mg, 0.030 mmol).<1>H NMR (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 7.72-7.51 (m, 2 H), 5.92 (d, J=5.5 Hz, 1 H), 4.31 (m, 2 H), 4.01-3.78 (m, 2 H), 3.58 (dq, J=8.1, 6.0 Hz, 1 H), 3.04 (m, 2 H), 2.48 (d, J=8.1 Hz, 1 H),
1
1.75 (m, 2 H), 1.61-1.47 (m, 2 H), 1.31 (d, J=6.1 Hz, 3 H). HRMS prorač. za C18H25ClN7OS (M+H)+ 422.1530, nadjeno 422.1505. IC50iznosi 0.010 μM.
Primer 69
(3S,4S)-8-(6-amino-5-((2-amino-3-hloropiridin-4-il)tio)pirazin-2-il)-3-metil-2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-4-amin
[0393]
[0394] Faza p a: Smeša (3S,4S)-terc-butil 4-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-3-metil-2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (51 mg, 0.136 mmol) i HCl (4 M u dioksanu, 340 μL, 1.362 mmol) u MeOH (5 mL) meša se 1 h na temperaturi od 40 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, ispraljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku dajući (3S,4S)-3-metil-2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-4-amin koji se koristu u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja. MS m/z 171.1 (M+H)<+>.
[0395] Faza b: Smeša sirovog (3S,4S)-3-metil-2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-4-amina, 3-((2-amino-3-hloropiridin-4-il)tio)-6-hloropirazin-2-amina (35.5 mg, 0.123 mmol), i DIPEA (193 μL, 1.11 mmol) u DMSO (600 μL) se meša tokom 16 h na temperaturi od 100 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, isparljive componente se uklanjaju na sniženom pritisku i dobijeni ostatak se prečišćava HPLC (gradijent elucije 15-40% acetonitril u vodi, 5 mM modifikator NH4OH) dajući (3S,4S)-8-(6-amino-5-((2-amino-3-hloropiridin-4-il)tio)pirazin-2-il)-3-metil-2-oksa-8-azaspiro[4.5]dekan-4-amin (11 mg, 0.026 mmol).<1>H NMR (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 7.67-7.47 (m, 2 H), 5.91 (d, J=5.5 Hz, 1 H), 4.22 (qd, J=6.4, 4.8 Hz, 1 H), 4.03 (ddt, J=13.5, 8.9, 4.7 Hz, 2 H), 3.86 (d, J=8.7 Hz, 1 H), 3.71 (d, J=8.7 Hz, 1 H), 3.37 (td, J=9.9, 4.9 Hz, 1 H), 3.29-3.23 (m, 1 H), 3.00 (d, J=5.0 Hz, 1H) 1.91-1.56 (m, 4 H), 1.21 (d, J=6.4 Hz, 3 H). HRMS prorač. za C18H25ClN7OS (M+H)<+>422.1530, nadjeno 422.1514. IC50 iznosi 0.010 μM.
Primer 70
(1R,3R)-8-(6-amino-5-((2-amino-3-hloropiridin-4-il)tio)pirazin-2-il)-3-metil-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amin
1
[0397] Faza a: Smeša (1R,3R)-benzil 1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-3-metil-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (100 mg, 0.246 mmol) i HCl (4 M u dioksanu, 1.5 mL, 6.5 mmol) u MeOH (1.5 mL) se meša u mikrotalasnom reaktoru tokom 14 h na temperaturi od 140 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, ispraljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku dajući (1R,3R)-3-metil-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amin koji se koristi u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja. MS m/z 169.2 (M+H)<+>.
[0398] Faza b: Smeša sirovog (1R,3R)-3-metil-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amina (theor 0.246 mmol) i 3-((2-amino-3-hloropiridin-4-il)tio)-6-hloropirazin-2-amina (70.9 mg, 0.246 mmol) u DIPEA (1 mL) i DMSO (0.5 mL) se meša 2 h na temperaturi od 130 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, isparljive componente se uklanjaju na sniženom pritisku i dobijeni ostatak se prečišćava HPLC-om (gradijent elucije 15-40% acetonitril u vodi, 5 mM modifikator NH4OH) dajući (1R,3R)-8-(6-amino-5-((2-amino-3-hloropiridin-4-il)tio)pirazin-2-il)-3-metil-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amin (23 mg, 0.055 mmol).<1>H NMR (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 7.51-7.64 (m, 2 H), 5.91 (d, J=5.31 Hz, 1 H), 4.18-4.37 (m, 2 H), 3.02-3.18 (m, 2 H), 2.82 (dd, J=9.60, 6.32 Hz, 1 H), 2.09-2.20 (m, 1 H), 2.00-2.09 (m, 1 H), 1.91-2.00 (m, 1 H), 1.58-1.74 (m, 2 H), 1.24-1.48 (m, 3 H), 1.09-1.20 (m, 1 H), 1.01-1.09 (m, 3 H). HRMS prorač. za C19H27ClN7S (M+H)<+>420.1737, nadjeno 420.1719. IC50iznos i 0.005 μM.
Primer 71
(1R,3S)-8-(6-amino-5-((2-amino-3-hloropiridin-4-il)tio)pirazin-2-il)-3-metil-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amin
[0399]
1
[0400] Faza a: Suspenzija (1R,3S)-benzil 1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-3-metil-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (600 mg, 1.476 mmol) i Pd(OH)2(104 mg, 0.148 mmol) u smeši rastvarača EtOAc:THF (1:275 mL) se snažno meša u atmosferi H2tokom 48 h. Reakciona smeša se filtrira kroz sloj Celita a nakon toga ispire MeOH (50 mL). Isparljivi ostaci se uklanjanju na sniženom pritisku. Rastvor dobijenog ostatka i HCl (4 M u dioksanu, 1.0 mL, 4.0 mmol) se meša 2 h na temperaturi od 45 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, isparljivi ostaci se uklanjaju na sniženom pritisku. Suspenzija dobijenog ostatatka i Pd/C (10% u aktiv. ulju, 200 mg) u MeOH (20 mL) se promućka tokom 2 h na 60 psi u atmosferi H2. Reakciona smeša se filtrira kroz sloj Celita, nakon toga ispire MeOH (50 mL). Isparljivi ostaci se uklanjanju na sniženom pritisku dajući (1R,3S)-3-metil-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amin koji se koristi u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja. MS m/z 169.1 (M+H)<+>.
[0401 ] Faza b: Smeša sirovog (1R,3S)-3-metil-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amina (0.729 mmol) i 3-((2-amino-3-hloropiridin-4-il)tio)-6-hloropirazin-2-amina (150 mg, 0.521 mmol) u DIPEA (3.2 mL) i DMA (6 mL) se meša 14 h na temperaturi od 100 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, isparljivi ostaci se uklanjaju na sniženom pritisku i dobijeni ostatak se prečišćava HPLC (gradijent elucije 10-30% acetonitril u vodi, 0.1% modifikator TFA) dajući sirovi čvrsti proizvod. Sirovi čvrsti proizvod se dalje prečišćava HPLC-om (gradijent elucije 15-40% acetonitril u vodi, 5 mM modifikator NH4OH) dajući (1R,3S)-8-(6-amino-5-((2-amino-3-hloropiridin-4-il)tio)pirazin-2-il)-3-metil-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amin (80 mg, 0.189 mmol).<1>H NMR (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 7.65-7.49 (m, 2 H), 5.91 (d, J=5.5 Hz, 1 H), 4.30 (ddt, J=12.4, 9.7, 3.6 Hz, 2 H), 3.34 (s, 1 H), 3.19-2.95 (m, 1 H), 2.92-2.80 (m, 1 H), 2.34-2.16 (m, 2 H), 1.85-1.49 (m, 4 H), 1.41 (dq, J=13.5, 2.7 Hz, 1 H), 1.30 (dq, J=13.5, 2.6 Hz, 1 H), 1.13-0.92 (m, 4 H). HRMS prorač. za C19H27ClN7S (M+H)<+>420.1737, nadjeno 420.1716. IC50 iznosi 0.005 μM.
Primer 72
8-(6-amino-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-il)-1-oksa-3,8-diazaspiro[4.5]dek-2-en-2-amin
[0402]
14
[0403] Faza a: Rastvor 6-hloro-3-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-amina (70 mg, 0.304 mmol), terc-butil ((4-hidroksipiperidin-4-il)metil)karbamata (103 mg, 0.336 mmol), i DIPEA (2.0 mL, 11.45 mmol) u NMP/u (1 mL) se meša 3 h na temperaturi od 120<o>C. Nakon hladjenja do sobne temperature, reakciona smeša se razblažuje sa EtOAc, organska faza se ispire sa vodom, koncentrovanim rastvorom soli, suši na Na2SO4, i isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku dajući uljasti ostatak braon boje. Ovaj ostatak se sipa u DCM (5 mL) i dodaje se HCl (4 M u dioksanu; 760 µL, 3.04 mmol) iz dva dela (polovina na početku reakcije i drugi deo 3 h kasnije). Reakciona smeša se ukupno meša 4 h. Isparljivi ostaci se uklanjaju na sniženom pritisku i dobijeni ostatak se trituriše MeCN dajući čvrsti proizvod braon boje. Dobijeni sirovi proizvod se prevodi u slobodnu bazu suspendovanjem sa 5%-tnom MeOH/DCM i dodaje se zasić. vod NaHCO3. Dobijeni slojevi se razdvajaju i vodeni sloje se ponovo ekstrahuje 5% MeOH/DCM. Spojene organske faze se koncentruju na sniženom pritisku dajući 1-(6-amino-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-il)-4-(aminometil)piperidin-4-ol (65 mg, 0.149 mmol) u obliku čvrstog proizvoda beličasto-žuto mrke boje.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.47 (dd, J=4.6, 1.4 Hz, 1 H), 7.68 (s, 1 H), 7.55 (dd, J=8.3, 4.5 Hz, 1H) 7.32 (dd, J=8.3, 1.4 Hz, 1 H), 4.04 (dt, J=13.8, 4.2 Hz, 2 H), 3.38-3.28 (m, 2 H), 2.83 (s, 2 H), 1.70-1.48 (m, 4 H). MS m/z 401.2 (M+H)<+>
[0404] Faza b: Rastvor 1-(6-amino-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-il)-4-(aminometil)piperidin-4-ol (65 mg, 0.162 mmol) u EtOH (3 mL) se obradjuje uzastopno sa cijanogen bromidom (0.541 mL, 1.623 mmol) a nakon toga sa NaHCO3(68.2 mg, 0.812 mmol) i dobijena smeša se meša 16 h na sobnoj temperaturi. Isparljivi ostaci se uklanjaju na sniženom pritisku i dobijeni ostatak se prečišćava HPLC (gradijent elucije 15-40% acetonitril u vodi, 5 mM modifikator NH4OH) dajući 8-(6-amino-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-il)-1-oksa-3,8-diazaspiro[4.5]dek-2-en-2-amin (12.5 mg, 0.029 mmol).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.46 (dd, J=4.5, 1.4 Hz, 1 H), 7.68 (s, 1 H), 7.55 (dd, J=8.3, 4.6 Hz, 1 H), 7.31 (dd, J=8.2, 1.5 Hz, 1 H), 6.22 (s, 2 H), 5.78 (s, 2 H), 3.94-3.73 (m, 2 H), 3.64-3.45 (m, 2 H), 3.36 (s, 2 H), 1.88-1.56 (m, 4 H). HRMS prorač. za C17H19F3N7OS (M+H)+ 426.1318, nadjeno 426.1296. IC50iznosi 0.193 μM.
[0405] Sledeća jedinjenja iz tabele 10 se mogu sintetizovati korišćenjem gore navedenog postupka ili izmena gore navedenog postupka upotrebom odgovarajućeg zaštićenog amina i intermedijera hloropirazina.
Tabela 10
Primer 75
(R)-8-(6-amino-5-((3-hloro-2-(dimetilamino)piridin-4-il)tio)pirazin-2-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amin
[0406]
[0407] Faza a: Smeša 6-bromo-3-((3-hloro-2-(dimetilamino)piridin-4-il)tio)pirazin-2-amina (124 mg, 0.392 mmol) i (R)-2-metil-N-((R)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-il)propan-2-sulfinamida (111 mg, 0.431 mmol) u DIPEA (2.6 mL) se meša 10 h na temperaturi od 90 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, isparljivi ostavi se uklanjaju na sniženom pritisku i dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 10% gradijent EtOAc (koji sadrži 10% MeOH)/heptan (koji sadrži 25 Et3N)) dajući (R)-N-((R)-8-(6-amino-5-((3-hloro-2-(dimetilamino)piridin-4-il)tio)pirazin-2-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-il)-2-metilpropan-2-sulfinamid (75 mg, 0.139 mmol). MS m/z 538.3 (M+H)<+>.
[0408] Faza b: Smeša (R)-N-((R)-8-(6-amino-5-((3-hloro-2-(dimetilamino)piridin-4-il)tio)pirazin-2-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-il)-2-metilpropan-2-sulfinamida (75 mg, 0.139 mmol) i HCl (4 M u dioksanu, 174 µL, 0.697 mmol) u DCM-u (2 mL) se meša 30 min na sobnoj temperaturi. Isparljivi ostaci se uklanjaju na sniženom pritisku i dobijei ostatak se prečišćava HPLC (gradijent elucije 35-60% acetonitril u vodi, 5 mM modifikatora NH4OH) dajući (R)-8-(6-amino-5-((3-hloro-2-(dimetilamino)piridin-4-il)tio)pirazin-2-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amin (28 mg, 0.064 mmol) as a white solid.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.85-7.92 (m, 1 H), 7.63 (s, 1 H), 6.16 (br. s, 2 H), 6.04-6.10 (m, 1 H), 4.06-4.23 (m, 2 H), 2.97-3.15 (m, 2 H), 2.87 (s, 6 H), 2.64-2.73 (m, 1 H), 1.11-1.97 (m, 10 H). HRMS prorač. za C20H29ClN7S (M+H)<+>434.1894, nadjeno 434.1883. IC50iznosi 0.010 μM.
[0409] Sledeća jedinjenja iz tabele 11 se mogu sintetizovati korišćenjem gore navedenog postupka ili izmena gore navedenog postupka upotrebom odgovarajućeg zaštićenog amina i intermedijera hloropirazina.
Tabela 11
14
Primer 81
(R)-4-((3-amino-5-(1-amino-8-azaspiro[4.5]dekan-8-il)pirazin-2-il)tio)-3-hloropiridin-2(1H)-on [0410]
[0411] Smeša (S)-N-((R)-8-(6-amino-5-((3-hloro-2-fluoropiridin-4-il)tio)pirazin-2-il)-8-azaspiro[4.5]dekan-1-il)-2-metilpropan-2-sulfinamida (17 mg, 0.033 mmol), litijum hidroksida (2 mg, 0.040 mmol), i vode (0.07 mL) u DMSO (0.3 mL) se meša u mikrotalasnom reaktoru tokom 45 min na temperaturi od 90 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, dodaje se MeOH (0.5 mL) a zatim i HCl (4 M u dioksanu, 2.0 mL, 8.0 mmol) i dobijena smeša se meša 1 h na temperaturi od 40 °C. Isparljivi ostaci se uklanjaju na sniženom pritisku i dobijeni ostatak se prečišćava pomoću HPLC (gradijent elucije 15-40% acetonitril u vodi, 5 mM modifikator NH4OH) dajući (R)-4-((3-amino-5-(1-amino-8-azaspiro[4.5]dekan-8-il)pirazin-2-il)tio)-3-hloropiridin-2(1H)on (5 mg, 0.012 mmol) as a white solid.
<1>H NMR (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 7.53-7.61 (m, 1 H), 7.19 (d, J=7.1 Hz, 1 H), 5.72 (d, J=7.1 Hz, 1 H), 4.26 (t, J=13.1 Hz, 2 H), 3.06-3.20 (m, 2 H), 2.81 (t, J=7.5 Hz, 1 H), 1.27-2.11 (m, 10 H). HRMS prorač. za C18H24ClN6OS (M+H)<+>407.1448, nadjeno 407.1433. IC50iznosi 0.020 μM.
Primer 82
racemski-8-(6-amino-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-il)-2,2-difluoro-8-azaspiro[4.5] dekan-1-amin
[0412]
[0413] Faza a: Rastvor terc-butil 2,2-difluoro-1-okso-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (220 mg, 0.76 mmol), racemskog 2-metilpropan-2-sulfinamida (184 mg, 1.52 mmol), i titanijum(IV) etoksida (0.640 mL, 3.0 mmol) u THF-u (4 mL) se meša 30 min na temperaturi od 90 °C. Nakon hladjenja do 0 °C, dodaje se litijum borohidrid (33 mg, 1.5 mmol) iz jednog dela. Nakon 30 min mešanja, reakciona smeša se kvenčuje dodatkom MeOH. Isparljivi ostaci se uklanjaju na sniženom pritisku. Dobijeni ostatak se razblažuje sa koncentrovanim rastvorom soli, i ekstrahuje EtOAc (4 x 10 mL), spojene organske faze se suše preko Na2SO4, filtriraju, i koncentruju na sniženom pritisku. Dobijeni ostatak se prečišćavaju hromatografijom na silika gelu (10 do 50% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući terc-butil 1-(1,1-dimetiletilsulfinamido)-2,2-difluoro-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat u obliku belog praha (190 mg, 0.48 mmol). MS m/z 395.2 (M+H)<+>.
[0414] Faza b: Rastvor terc-butil 1-(1,1-dimetiletilsulfinamido)-2,2-difluoro-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (190 mg, 0.48 mmol) i TFA (1 mL) u DCM-u (4 mL) meša se 20 min na temperaturi od 0 °C. Isparljivi ostaci se uklanjaju na sniženom pritisku dajući N-(2,2-difluoro-8-azaspiro[4.5]dekan-1-il)-2-metilpropan-2-sulfinamid koji se koristi u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
[0415] Faza c: Rastvor N-(2,2-difluoro-8-azaspiro[4.5]dekan-1-il)-2-metilpropan-2-sulfinamida (teor.
0.48 mmol) i 6-hloro-3-((2-(trifluoro metil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-amina (148 mg, 0.480 mmol) u DIPEA (0.8 mL) se meša 1 h na temperaturi od 100 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, isparljivi ostaci se uklanjaju na sniženom pritisku i dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 100% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući N-(8-(6-amino-5-((2-
14
(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-il)-2,2-difluoro-8-azaspiro[4.5]dekan-1-il)-2-metilpropan-2-sulfinamid (174 mg, 0.28 mmol) u obliku narandžastog praha. Deo ovog materijala se prebacuje u fazu d, preostali materijal se razdvaja hiralnom hromatografijom (videti primer 83).
[0416] Faza d: Rastvor N-(8-(6-amino-5-((2-(trifluorometil) piridin-3-il)tio) pirazin-2-il)-2,2-difluoro-8-azaspiro[4.5]dekan-1-il)-2-metilpropan-2-sulfinamida (54 mg, 0.096 mmol) i HCl (4 M u dioksanu, 0.239 mL, 0.96 mmol) u DCM-u (1 mL) meša se 30 min na temperaturi od 40 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, isparljivi ostaci se uklanjanju na sniženom pritisku. Ovaj ostatak se trituriše MeCN dajući racemski-8-(6-amino-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-il)-2,2-difluoro-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amin (HCl so, 38 mg, 0.075 mmol) u obliku praha bledo žuto mrke boje.<1>H NMR (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8.52-8.38 (m, 1 H), 7.71 (s, 1 H), 7.50-7.43 (m, 2 H), 4.44 (dd, J=21.0, 14.2 Hz, 2 H), 3.67 (dd, J=15.1, 11.2 Hz, 1 H), 3.23-3.08 (m, 2 H), 2.47-2.34 (m, 2 H), 2.27 (dt, J=14.6, 7.4 Hz, 1 H), 2.01-1.88 (m, 2 H), 1.75-1.54 (m, 3 H). HRMS prorač. za C19H22F5N6S (M+H)+ 461.1547, nadjeno 461.1540. IC50iznosi 0.380 μM.
Primer 83a/b
(R) i (S)-8-(6-amino-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-il)-2,2-difluoro-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amin
[0417]
[0418] Faza a: N-(8-(6-amino-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-il)-2,2-difluoro-8-azaspiro[4.5]dekan-1-il)-2-metilpropan-2-sulfinamid (100 mg, 0.177 mmol) se dalje prečišćava SFC hromatografijom za razdvajanje hiralnih jedinjenja na sledeći način: kolona: WHO-1 21 x 250 mm, protok: 80 g po minuti, mobilna faza: 45% MeOH i 5 mM NH4OH u CO2, detekcija: okida je signal koji proizvodi masa, u cilju dobijanja pojedinačnih enantiomera Rt(enantiomer R): 2.6 min (44 mg, 0.078 mmol) i Rt(enantiomer S): 5.8 min (41 mg, 0.073 mmol).
14
[0419] Faza b: Smeša čistog enantiomera i HCl (4 M u dioksanu, 200 µL, 0.8 mmol) u DCM-u (2 mL) se meša 1 h na temperaturi od 40 °C. Isparljivi ostaci se uklanjaju na sniženom pritisku i dobijeni ostatak se trituriše MeCN dajući jedinjenja iz naslova u obliku HCl soli:
[0418] (R)-Enantiomer:<1>H NMR (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8.46 (dd, J=3.7, 2.3 Hz, 1 H), 7.73 (s, 1 H), 7.53-7.45 (m, 2 H), 4.52-4.36 (m, 2 H), 3.68 (dd, J=15.0, 11.2 Hz, 1 H), 3.24-3.09 (m, 2 H), 2.47-2.34 (m, 2 H), 2.32-2.21 (m, 1 H), 2.05-1.90 (m, 2 H), 1.74-1.55 (m, 3 H).<19>F NMR (376 MHz, METANOL-d4) δ -66.19, -98.51 (d, J=234.5 Hz), -101.83 (d, J=234.6 Hz). HRMS prorač. za C19H22F5N6S (M+H)<+>461.1547, nadjeno 461.1540. IC50iznosi 0.882 μM.
[0419] (S)-Enantiomer:<1>H NMR (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8.50-8.41 (m, 1 H), 7.70 (s, 1 H), 7.47 (m, 2 H), 4.52-4.35 (m, 2 H), 3.67 (dd, J=15.1, 11.2 Hz, 1 H), 3.24-3.05 (m, 2 H), 2.49-2.32 (m, 2 H), 2.31-2.19 (m, 1 H), 2.02-1.88 (m, 2 H), 1.73-1.51 (m, 3 H).<19>F NMR (376 MHz, METANOL-d4) δ -66.24, -98.47 (d, J=234.4 Hz), -101.77 (d, J=234.6 Hz). HRMS prorač. za C19H22F5N6S (M+H)+ 461.1547, nadjeno 461.1541. IC50iznosi 0.306 μM.
Primer 84
8-(6-amino-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-il)-2-fluoro-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amin [0420]
[0421] Faza a: Rastvor racemskog terc-butil 2-fluoro-1-okso-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (78 mg, 0.28 mmol), titanijum(IV) etoksida (235 µL, 1.1 mmol), i (R)-2-metilpropan-2-sulfinamida (68 mg, 0.56 mmol) u THF-u (1.5 mL) se meša 1 h na temperaturi od 90 °C. Nakon hladjenja do temperature od 0 °C, dodaje se litijum borohidrid (12 mg, 0.56 mmol) iz jednog dela. Nakon 30 min mešanja, reakciona smeša se kvenčuje dodatkom MeOH. Isparljivi ostaci se uklanjaju na sniženom pritisku. Dobijeni ostatak se razblažuje sa koncentrovanim rastvorom soli, i ekstrahuje EtOAc (4 x 10 mL), spojene organske faze se suše preko Na2SO4, filtriraju, i koncentruju na sniženom pritisku. Dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 50% gradijent smeše rastvarača EtOAc/heptan) dajući
14
terc-butil 1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-2-fluoro-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilat (64 mg, 0.17 mmol). MS m/z 377.3 (M+H)<+>.
[0422] Faza b: Smeša terc-butil 1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-2-fluoro-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (64 mg, 0.17 mmol) i TFA (1 mL) u DCM-u (4 mL) se meša 10 min na temperaturi od 0 °C. Isparljivi ostaci se uklanjaju na sniženom pritisku i dobijeni ostatak se koristi u sledećoj fazi reakcije bez daljeg prečišćavanja.
[0423] Faza c: Smeša prethodnog ostataka i 6-hloro-3-((2-(trifluoro metil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-amina (51 mg, 0.17 mmol) u DIPEA (0.3 mL) se meša 2 h na temperaturi od temperaturi od 100 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, isparljivi ostaci se uklanjaju na sniženom pritisku i dobijeni ostatak se prečišćava hromatografijom na silika gelu (0 do 10% gradijent smeše rastvarača MeOH/DCM (koji sadrži 0.25% Et3N)) dajući N-(8-(6-amino-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-il)-2-fluoro-8-azaspiro[4.5]dekan-1-il)-2-metilpropan-2-sulfinamid (41 mg, 0.075 mmol). MS m/z 547.2 (M+H)<+>kao smeša dijastereomera. Dalja prečišćavanja korišćenjem SFC hromatografije za razdvajanje hiralnih jedinjenja se vrše na sledeći način: column: ID 21 x 250 mm, protok: 80 g po minuti, mobilna faza: 45% iPrOH i 10 mM NH4OH u CO2, detekcija: okida je signal koji proizvodi masa u cilju dobijanja pojedinačnih enantiomera Rt(P1)= 2.7 min (17 mg, 0.031 mmol) i Rt(enant-P1)= 4.4 min (17 mg, 0.031 mmol).
[0424] Faza d: Rastvor svakog čistog izomera i HCl (4 M u dioksanu, 100 µL, 0.4 mmol) u DCM (0.1 mL) se meša 1 h na temperaturi od 40 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, isparljivi ostaci se uklanjaju na sniženom pritisku i dobijeni ostatak se trituriše pomoću MeCN dajući jedinjenja iz naslova u obliku HCl soli.
Tabela 12
14
Primer 86a/b
(1R)-8-(6-amino-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-il)-2-metil-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amin
[0425]
[0426] Faza a: Rastvor (1R)-terc-butil 1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-2-metil-8-azaspiro[4.5]dekan-8-karboksilata (32 mg, 0.086 mmol) i TFA (0.2 mL, 2.60 mmol) u DCM-u (2 mL) se meša 30 min na sobnoj temperaturi. Isparljivi ostaci se uklanjaju na sniženom pritisku dajući (R)-2-metil-N-((1R)-2-
14
metil-8-azaspiro[4.5]dekan-1-il)propan-2-sulfinamid. MS m/z 273.0 (M+H)<+>. Sirovi proizvod se koristi u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.
[0427] Faza b: Smeša (R)-2-metil-N-((1R)-2-metil-8-azaspiro[4.5]dekan-1-il)propan-2-sulfinamida (23 mg, 0.084 mmol), 6-hloro-3-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-amina (23 mg, 0.075 mmol), i NMP (0.1 mL) u DIPEA (1 mL) se meša 6 h na temperaturi od 115 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, isparljivi ostaci se uklanjaju na sniženom pritisku dajući (R)-N-((1R)-8-(6-amino-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-il)-2-metil-8-azaspiro[4.5]dekan-1-il)-2-metilpropan-2-sulfinamid u obliku ulja crne boje koje se koristi u sledećoj fazi bez prečišćavanja.
[0428] Faza c: Smeša (R)-N-((1R)-8-(6-amino-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-il)-2-metil-8-azaspiro[4.5]dekan-1-il)-2-metilpropan-2-sulfinamida i HCl (4 M u dioksanu, 84 µL, 0.338 mmol) u DCM-u (2 mL) meša se 1 h na temperaturi od 40 °C. Nakon hladjenja do sobne temperature, isparljive komponente se uklanjaju na sniženom pritisku i dobijeni ostatak se prečišćava HPLC-om (gradijent elucije 35-60% acetonitril u vodi, 0.1% modifikator TFA) dajući TFA so 8-(6-amino-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirazin-2-il)-2-metil-8-azaspiro[4.5]dekan-1-amina. HRMS prorač. za C20H26F3N6S 439.1892 (M+H)<+>, nadjeno 439.1872. IC50iznosi 0.0010 μM.
[0429] Faza d: hiralna separacija (videti tabelu 13 za detalje).
Tabela 13
1
11
[0430] Sledeći primeri jedinjenja iz Tabele 14 mogu da se dobiju korišćenjem gore navedenih postupaka i odgovarajućih polaznih materijala:
Tabela 14
1 2
Testovi
[0431] Ispitivana je sposobnost jedinjenja iz pronalska da selektivno inhibiše aktivnost SHP2. Inhibišuća svojstva jedinjenja iz pronalaska koja su ovde opisana moguće je izmeriti ispitivanjem u ma kom od sledećih testova (eseja).
Test alosterne inhibicije SHP2
1
[0432] SHP2 se alosterno aktiviše vezivanjem bis-tirozil-fosforilovanih peptida za Src homology 2 (SH2) domene SHP2. Poslednji aktivacioni korak dovodi do oslobadjanja auto-inhibitornog interfejsa SHP2, koji sa svoje strane ostavlja protein tirozin fosfatazu (PTP) SHP2 u aktivnom stanju i dostupnu za prepoznavanje supstrata i katalizaciju reakcije. Katalitička aktivnost SHP2 je praćena koristeći surogatni supstrat DiFMUP u brzoj varijanti testa fluorescence.
[0433] Detaljnije, reakcije fosfataze su urađene na sobnoj temperaturi u crnim polistirenskim pločama sa 384 mesta, sa ravnim dnom, niskom ivicom, sa nevezujućom površinom (Corning, Kat# 3575) u finalnoj reakcionoj zapremini od 25 μl i sa esej-puferom sledećeg sastava : 60 mM HEPES, pH 7.2, 75 mM NaCl, 75 mM KCl, 1 mM EDTA, 0.05% P-20, 5 mM DTT.
[0434] Inhibicija SHP2 jedinjenjima iz pronalaska (u koncentracijama od 0,003 - -100 μM) je praćena upotrebom testa u kojem 0,5 nM SHP2 inkubirano sa 0,5 μM rastvorom peptida IRS1_pY1172(dPEG8)pY1222 (sekvenca: H2N-LN(pY)IDLDLV(dPEG8)LST(pY)ASINFQK-amid). Nakon 30-60 minuta inkubacije na 25°C, u reakcionu smešu je dodat surogatni supstrat DiFMUP (Invitrogen, cat# D6567) i inkubiran dalje 30 minuta na 25°C. Reakcija je zatim zaustavljena dodavanjem 5 µl 160 µM rastvora bpV(Phen) (Enzo Life Sciences kat# ALX-270-204). Fluorescentni signal je praćen uz pomoć čitača fluorescence u mikropločama (Envision, Perkin-Elmer) na talasnoj dužini 340 nm za ekscitaciju i 450 nm za emisiju. Krive dozne zavisnosti za inhibitore su obradjene regresionom analizom metodom curve fitting sa podacima normalizovanim za IC50 sa normalizacijom na bazi kontrole. Rezultati IC50 za jedinjenja iz pronalaska su prikazani kroz primere i u tabelama 1-7, gore.
Ćelijski test p-ERK
[0435] Ćelijski test p-ERK korišćenjem AlphaScreen® SureFire™ Phospho-ERK 1/2 Kit (PerkinElmer): Ćelijska linija KYSE-520 (30,000 ćelija/bunaru) je kultivisana u ploči sa 96 mesta preko noći i ćelije su tretirane inhibitorima Shp2 u koncentracijama od 20, 6.6, 2.2, 0.74, 0.24,0.08, 0.027 µM, 2 sata na 37°C. Inkubacije su okončane dodavanjem 30 µl pufera za liziranje (PerkinElmer) koji je praćen sa SureFire fosfoekstraćelijskim signalom regulisana kinaza (pERK) kitom za testiranje. Uzorci su obradjeni prema uputstvu proizvodjača. Fluorescentni signal koji potiče od pERK je izmeren u duplikatu koristeći čitač tipa 2101 multilabel (Perkin Elmer Envision). Procenat inhibicije je normalizovan ukupnim signalom koji je izmeren od ERK i uporedjen sa DMSO kontrolom, koji je bio vehikulum.
Test formiranja kolonija i test proliferacije
[0436] KYSE-520 ćeliije (1500 ćelija/bunaru) su kultivisane u pločama sa 24 mesta u 300 µl medijuma (RPMI-1640 koji sadrži 10% FBS, Lonza). Za sprovodjenje tretmana lekovima, jedinjenja iz pronalaska
1 4
u različitim koncentracijama (20, 10, 5, 2.5, 1.25 µM) su dodata 24 sata i 5 dana nakon zasađivanja ćelija. Jedanaestog dana ćelije su obojene sa 0,2% kristal-violet (MP Biomedicals) i potom rastvorene u 20% sirćetnoj kiselini za kvantifikaciju uz pomoć čitača Spectramax (Thermo Scientific). U testu proliferacije, ćelije su kultivisane (1500 ćelija/bunaru) u pločama sa 96 mesta u 100 µl medijuma (RPMI-1640 koji sadrži 10% FBS, Lonza). Šestog dana, dodato je 50 µl reagensa Celltiter-Glo (Promega) i izmeren je luminiscentni signal prema uputstvima proizvodjača (Promega).
1

Claims (20)

  1. PATENTNI ZAHTEVI: 1. Jedinjenje formule I:
    u kojoj je: p odabran od 0 i 1; q odabran od 0 i 1; Y1 odabran od CH i N; Y2 odabran od CR6 i N; gde R1 predstavlja –XR1a; u kojoj je R1a odabran od C6-10aril, C3-8cikloalkil, C3-8cikloalkenil i gde 5-9-očlana heteroaril grupa sadrži od 1 do 4 heteroatoma ili grupe koje su nezavisno odabrane od N, C(O), O i S; gde pomenuti aril ili heteroaril iz R1a može biti supstituisan sa 1 do 5 R9 grupe koje su nezavisno odabrane od halo, amino, hidroksi, N3, C1-4alkil, dimetil-amino, hidroksisupstituisanog-C1-4alkila, halo-supstituisanog-C1-4alkila i amino-supstituisanog-C1-4alkila; i gde je X odabran od veze, S(O)m, O, C(O), COR11, CR10aR10b, NR11; gde je m odabran od 0, 1 i 2; gde je svaki R10a i R10b nezavisno odabran od halo i C1-4alkila; i gde je R11 odabran od vodonika i C1- 4alkila; gde su R2a i R2b nezavisno odabrani od vodonika, C1-4alkila, C1-4alkoksi, amino, hidroksi, C3- 8cikloalkil i C1-4alkil-amino; gde su R3a i R3b nezavisno odabrani od halo, karbonila, C1-4alkila, C1-4alkoksi, amino, hidroksi, C3- 8cikloalkila i C1-4alkil-amino; gde su R4ai R4bnezavisno odabrani iz grupe koju čine vodonik, halo, karbonil, C1-4alkil, C1-4alkoksi, amino, hidroksi, C3-8cikloalkil i C1-4alkil-amino; gde su R5ai R5bnezavisno odabrani iz grupe koju čine vodonik, karbonil, C1-4alkil, C1-4alkoksi, amino, hidroksi, C3-8cikloalkil i C1-4alkil-amino; gde su bilo koje dve grupe odabrane od R2a, R2b, R3a, R3b, R4a, R4b, R5a, R5bi gde R7može da formira 5 do 6-očlani nezasičeni ili delimično zasićeni prsten; gde je R6odabran iz grupe koju čine vodonik, halo, cijano, C1-4alkil, C1-4alkoksi, amino-karbonil, halosupstituisani C1-4alkil, halo-supstituisani C1-4alkoksi, hidroksi-supstituisani C1-4alkil, aminosupstituisani C1-4alkil, -S(O)1-2R6a, -C(S)R6a, -C(O)NR6aR6b, -C(NH)NR6aR6bi –NR6aC(O)R6b; gde su R6ai R6bnezavisno odabrani izmedju vodonika i C1-4alkila; gde R7i R8zajedno sa atomom ugljenika za koji su spojeni grade 3-očlani do 7-očlani zasićeni ili delimično nezasićeni prsten koji po slobodnom izboru sadrži od 1 do 3 heteroatoma ili grupa odabranih od N, O, i S(O)m; gde je m odabran od 0, 1 i 2; pri čemu pomenuti zasićeni prsten formiran od R7i R8može biti nesupstituisan ili supstituisan sa 1 do 3 grupe koje su nezavisno odabrane od amino, hidroksi, metoksi, halo, metil, metil-amino, ili izobutiriloksi; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  2. 2. Jedinjenje iz formule I kako je traženo u patentnom zahtevu 1, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, koja je odabrana od:
    1
    �
  3. 3. Jedinjenje Formule Ia:
    u kojoj je: n odabran od 1, 2, 3 i 4; p odabran od 0 i 1; q odabran od 0 i 1; Y1 odabran od CH i N; Y2 odabran od CR6 i N; svaki Y4 nezavisno odabran od N, C(O) i CR9; gde samo jedan Y4 predstavlja C(O); gde je R6odabran od vodonika, halo, metila i amino-karbonila; gde R7i R8zajedno sa atomom ugljenika za koji su oba vezani grade 3 do 7-očlani zasićeni ili delimično nezasićeni prsten koji po slobodnom izboru sadrži heteroatom koji je odabran od N, O i S(O)m; gde je m odabran od 0, 1 i 2; gde pomenuti zasićeni prsten formiran od R7i R8može biti nesupstituisan ili supstituisan sa 1 do 3 grupe koje su nezavisno odabrane od od amino, halo, hidroksi, amino-metil i metil-amino, ili R7i R8zajedno sa atomom ugljenika za koji su spojeni grade 5-očlani zasićeni ili delimično nezasićeni prsten koji po slobodnom izboru sadrži 1 do 2 heteroatoma ili grupe koje su neezavisno odabrane od N, O, C(O) i S(O)m; gde je m odabran od 0, 1 i 2; pri čemu pomenuti zasićeni prsten formiran od R7i R8može biti supstituisan sa 1 do 3 grupe koje su nezavisno odabrane od amino, hidroksi, metoksi, halo, metil, metil-amino i izobutiriloksi, ili R7i R8zajedno sa atomom ugljenika za koji su spojeni grade 6-očlani zasićeni ili delimično nezasićeni prsten koji po slobodnom izboru sadrži heteroatom koji je odabran od N, O i S(O)m; gde je m odabran od 0, 1 i 2; pri čemu pomenuti zasićeni prsten formiran od R7i R8može biti supstituisan grupom odabranom od amino, amino-metil and metil-amino, ili R7i R8zajedno sa atomom ugljenika za koji su spojeni grade 4-očlani zasićeni ili delimično nezasićeni prsten koji po slobodnom izboru sadrži heteroatom odabran od N, O i S(O)m; gde je m odabran od 0, 1 1 i 2; pri čemu pomenuti zasićeni prsten formiran od R7i R8može biti supstituisan grupom odabranom od amino, amino-metil i metil-amino; gde je R9 odabran od halo, amino, hidroksi, N3, dimetil-amino, C1-4alkil, halo-supstituisani-C1- 4alkil, C1-4alkoksi, -C(O)OR10 i -NHC(O)R10; gde je R10 odabran od vodonika, fenila i naftila; gde je pomenuti fenil iz R10 može da bude nesupstituisan ili supstituisan metoksi; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  4. 4. Jedinjenje iz patentnog zahteva 3, ili njegova farmaceutski prihvtljiva so, odabrana od:
    1
    11
    ��
    �
  5. 5. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 formule II: 1 4
    u kojoj je: p odabran od 0 i 1; q odabran od 0 i 1; Y1 odabran od CH i N; Y2 odabran od CR6 i N; gde je R1 odabran od C6-10aril, C3-8cikloalkil, C3-8cikloalkenil i 5-9-očlana heteroarilna grupa koja sadrži od 1 do 4 heteroatoma koji su odabrani od N, O i S; gde su pomenuti aril ili heteroaril od R1a substituisani sa 1 do 5 R9 grupa koje su nezavisno odabrane od halo, amino, hidroksi, N3, C1- 4alkil, hidroksi-supstituisanog-C1-4alkila, halo-supstituisanog-C1-4alkila i amino-supstituisanog-C1- 4alkila; gde su R2ai R2bsvaki za sebe odabrani od vodonika, C1-4alkila, C1-4alkoksi, amino, hidroksi, C3- 8cikloalkil i C1-4alkil-amino; gde su R3ai R3bsvaki za sebe odabrani od halo, karbonila, C1-4alkila, C1-4alkoksi, amino, hidroksi, C3- 8cikloalkil i C1-4alkil-amino; gde su R4ai R4bnezavisno odabrani iz grupe koju čine vodonik, halo, karbonil, C1-4alkil, C1-4alkoksi, amino, hidroksi, C3-8cikloalkil i C1-4alkil-amino; gde su R5ai R5bsvaki za sebe odabrani od vodonika, karbonila, C1-4alkila, C1-4alkoksi, amino, hidroksi, C3-8cikloalkil i C1-4alkil-amino; gde bilo koje dve grupe odabrane od R2a, R3a, R4, R5, R6ai R7amogu da grade 5–očlani do 6-očlani nezasićeni ili delimično nezasićeni prsten; gde je R6odabran iz grupe koju čine vodonik, halo, cijano, C1-4alkil, C1-4alkoksi, amino-karbonil, halosupstituisani C1-4alkil, halo-supstituisani C1-4alkoksi, hidroksi-supstituisani C1-4alkil i aminosupstituisani C1-4alkil; 1 gde R7i R8zajedno sa atomom ugljenika za koji su spojeni grade 3-očlani do 7-očlani zasićeni ili delimično nezasićeni prsten koji po slobodnom izboru sadrži heteroatom odabran od N, O, i S(O)m; gde je m odabran od 0, 1 i 2; pri čemu pomenuti zasićeni prsten formiran od R7i R8može biti nesupstituisan ili supstituisan sa 1 to 3 grupe koje su nezavisno odabrano od amino, halo, hidroksi, amino-metil i metilamino, ili njihova farmaceutski prihvatljiva so.
  6. 6. Jedinjenje Formule IIa:
    u kojoj je: n odabran od 1, 2, 3 i 4; p odabran od 0 i 1; q odabran od 0 i 1; Y1odabran od CH i N; Y2odabran od CR6i N; Y4odabran od N i CR9; R6odabran iz grupe koju čine vodonik, halo, metil i amino-karbonil; gde R7i R8zajedno sa atomom ugljenika za koji su obe vezane grade 3-očlani do 7-očlani zasićeni ili delimično nezasičeni prsen koji po slobodnom uzboru sadrži heteroatom odabran od N, O i S(O)m; gde je m odabran od 0, 1 i 2; gde pomenuti zasićeni prsten formiran od strane R7i R8može biti nesupstituisan ili supstituisan grupom koja je odabrana od amino, amino-metil i metil-amino, ili gde R7i R8zajedno sa atomom ugljenika za koji su spojeni grade 5-očlani zasićeni prsten koji po slobodnom izboru sadrži heteroatom odabran od N, O i S(O)m; gde je m odabran od 0, 1 i 2; pri čemu pomenuti zasićeni prsten formiran od R7i R8može biti nesupstituisan ili supstituisan sa grupom koje je odabrana od amino, amino-metil and metil-amino, ili 1 R7i R8zajedno sa atomom ugljenika za koji su spojeni grade 6-očlani zasićeni prsten koji po slobodnom izboru sadrži heteroatom koji je odabran od N, O i S(O)m; gde je m odabran od 0, 1 i 2; pri čemu pomenuti zasićeni prsten formiran od R7i R8može biti supstituisan grupom koje je odabrana od amino, amino-metil i metil-amino, ili R7i R8zajedno sa atomom ugljenika za koji su spojeni grade 4-očlani zasićeni prsten koji po slobodnom izboru sadrži heteroatom koji je odabran od N, O i S(O)m; gde je m odabran od 0, 1 i 2; pri čemu pomenuti zasićeni prsten formiran od R7i R8može biti supstituisan amino; gde je R9odabran od halo, amino, hidroksi, N3, C1-4alkil, halo-supstituisanog-C1-4alkila, C1-4alkoksi, -C(O)OR10i -NHC(O)R10; gde je R10odabran od vodonika, fenila i naftila; gde pomenuti fenil iz R10može biti nesupstituisan ili supstituisan sa metoksi; ili njena farmaceutski prihvatljiva so.
  7. 7. Jedinjenje iz patentnog zahteva 6, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačen time, što je odabrana od:
    1
  8. 8. Jedinjenje odabrano iz grupe koju čine:
    1
    �
    �
    11
    ��
    �
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  9. 9. Jedinjenje odabrano iz grupe koju čine:
    1 4
    Ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  10. 10. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 4, naznačen time, što predstavlja:
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  11. 11. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 4, koje predstavlja: 1
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  12. 12. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 4, koje predstavlja:
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  13. 13. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 4, koje predstavlja:
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  14. 14. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 4, koje predstavlja:
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so. 1
  15. 15. Farmaceutska kompozicija koja obuhvata jedinjenje prema bilo kojem od patentnih zahteva od 1 do 14, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, i najmanje jedan farmaceutski prihvatljivi nosač.
  16. 16. Jedinjenje prema patentnim zahtevima od 1 do 14, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu u lečenju oboljenja ili poremećaja koje je posredovano aktivnošću SHP2.
  17. 17. Jedinjenje prema bilo kojem od patentnih zahteva od 1 do 14, za upotrebu prema patentnom zahtevu 16, naznačen time, što je bolest ili poremećaj posredovana aktivnošću SHP2 odabrana iz grupe koju čine Noonan-ov sindrom, Leopard-sindrom, juvenilna mijelomonocitna leukemija, neuroblastom, melanom, akutna mijeloidna leukemija, kancer dojke, kancer jednjaka, kancer pluća, kancer debelog creva, kancer glave, neuroblastom, karcinom skvamoznih ćelija glave i vrata, karcinom želuca, anaplastični krupnoćelijski limfom i glioblastom.
  18. 18. Kombinacija jedinjenja prema bilo kojem od patentnih zahteva od 1-14, i jedan ili više farmaceutski aktivnih jedinjenja.
  19. 19. Kombinacija iz patentnog zahteva 18, naznačen time, što su drugo farmaceutski aktivno jedinjenje ili jedinjenja za upotrebu u lečenju kancera.
  20. 20. Kombinacija iz patentnog zahteva 18, naznačen time, što su drugo farmaceutski aktivno jedinjenje ili jedinjenja odabrani iz grupe koju čine vinka alkaloid, paklitaksel, docetaksel, vinkristin, vinblastin, vinorelbin, vinflunin, cisplatin, 5-fluorouracil, 5-fluoro-2-4(1 H,3H)-pirimidindion (5FU), flutamid i gemcitabin. Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Beograd, Kneginje Ljubice 5 1
RS20181174A 2014-01-17 2015-01-16 Jedinjenja n-heteroarila substituisana n-azaspirocikloalkanom i kompozicije za inhibiranje aktivnosti shp2 RS57757B1 (sr)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201461928754P 2014-01-17 2014-01-17
US201461991129P 2014-05-09 2014-05-09
EP15703321.8A EP3094628B1 (en) 2014-01-17 2015-01-16 N-azaspirocycloalkane substituted n-heteroaryl compounds and compositions for inhibiting the activity of shp2
PCT/IB2015/050345 WO2015107495A1 (en) 2014-01-17 2015-01-16 N-azaspirocycloalkane substituted n-heteroaryl compounds and compositions for inhibiting the activity of shp2

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS57757B1 true RS57757B1 (sr) 2018-12-31

Family

ID=52462974

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20181174A RS57757B1 (sr) 2014-01-17 2015-01-16 Jedinjenja n-heteroarila substituisana n-azaspirocikloalkanom i kompozicije za inhibiranje aktivnosti shp2

Country Status (42)

Country Link
US (6) US10077276B2 (sr)
EP (1) EP3094628B1 (sr)
JP (1) JP6534389B2 (sr)
KR (2) KR102501558B1 (sr)
CN (1) CN105916845B (sr)
AP (1) AP2016009299A0 (sr)
AR (1) AR100033A1 (sr)
AU (1) AU2015207757B8 (sr)
BR (1) BR112016016432B1 (sr)
CA (1) CA2935695C (sr)
CL (1) CL2016001790A1 (sr)
CR (2) CR20160328A (sr)
CU (1) CU24424B1 (sr)
CY (1) CY1121155T1 (sr)
DK (1) DK3094628T3 (sr)
DO (1) DOP2016000177A (sr)
EA (1) EA031573B1 (sr)
EC (1) ECSP16067692A (sr)
ES (1) ES2695242T3 (sr)
GT (1) GT201600147A (sr)
HR (1) HRP20181832T1 (sr)
HU (1) HUE039869T2 (sr)
IL (1) IL246436B (sr)
JO (1) JO3517B1 (sr)
LT (1) LT3094628T (sr)
MA (1) MA39282B1 (sr)
MX (1) MX356895B (sr)
MY (1) MY176357A (sr)
NI (1) NI201600101A (sr)
NZ (1) NZ721598A (sr)
PE (1) PE20170011A1 (sr)
PH (1) PH12016501336B1 (sr)
PL (1) PL3094628T3 (sr)
PT (1) PT3094628T (sr)
RS (1) RS57757B1 (sr)
SG (1) SG11201605272SA (sr)
SI (1) SI3094628T1 (sr)
SV (1) SV2016005245A (sr)
TN (1) TN2016000268A1 (sr)
TW (1) TWI657083B (sr)
UY (1) UY35957A (sr)
WO (1) WO2015107495A1 (sr)

Families Citing this family (153)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10357184B2 (en) * 2012-06-21 2019-07-23 Globus Medical, Inc. Surgical tool systems and method
US11466017B2 (en) 2011-03-10 2022-10-11 Board Of Regents, The University Of Texas System Heterocyclic inhibitors of PTPN11
LT2951183T (lt) 2013-01-29 2019-05-27 Aptinyx Inc. Spiro-laktamo nmda receptorių moduliatoriai ir jų panaudojimas
JO3517B1 (ar) 2014-01-17 2020-07-05 Novartis Ag ان-ازاسبيرو الكان حلقي كبديل مركبات اريل-ان مغايرة وتركيبات لتثبيط نشاط shp2
EP3094627B1 (en) 2014-01-17 2018-08-22 Novartis AG 1-pyridazin-/triazin-3-yl-piper(-azine)/idine/pyrolidine derivatives and and compositions thereof for inhibiting the activity of shp2
EP3094629B1 (en) 2014-01-17 2018-08-22 Novartis AG 1-(triazin-3-yl/pyridazin-3-yl)-piper(-azine)idine derivatives and compositions thereof for inhibiting the activity of shp2
CN107787226A (zh) * 2015-03-25 2018-03-09 诺华股份有限公司 药物组合
US10287266B2 (en) * 2015-06-19 2019-05-14 Novartis Ag Compounds and compositions for inhibiting the activity of SHP2
JP6878316B2 (ja) * 2015-06-19 2021-05-26 ノバルティス アーゲー Ｓｈｐ２の活性を阻害するための化合物および組成物
CN105503725B (zh) * 2015-12-30 2018-03-27 天津药明康德新药开发有限公司 一种叔丁基1‑羟基‑8‑氮杂螺烷[4,5]葵烷‑8‑羧酸酯的制备方法
JP7044375B2 (ja) * 2016-05-31 2022-03-30 ボード オブ リージェンツ，ザ ユニバーシティ オブ テキサス システム Ｐｔｐｎ１１の複素環式阻害剤
EA202092442A3 (ru) * 2016-06-07 2021-08-31 Джакобио Фармасьютикалс Ко., Лтд. Новые гетероциклические производные, применимые в качестве ингибиторов shp2
AU2017283769B2 (en) 2016-06-14 2019-08-15 Novartis Ag Compounds and compositions for inhibiting the activity of SHP2
PH12019500056B1 (en) * 2016-07-12 2024-01-31 Revolution Medicines Inc 2,5-disubstituted 3-methyl pyrazines and 2,5,6-trisubstituted 3-methyl pyrazines as allosteric shp2 inhibitors
EA201990424A1 (ru) * 2016-08-01 2019-08-30 Аптиникс Инк. Спиролактамовые модуляторы nmda-рецептора и их применение
MX385336B (es) 2016-08-01 2025-03-18 Aptinyx Inc Moduladores del receptor nmda espiro-lactam y uso de los mismos.
ES2974090T3 (es) 2016-08-01 2024-06-25 Tenacia Biotechnology Hong Kong Co Ltd Moduladores de NMDA de espirolactama y métodos de uso de los mismos
WO2018057884A1 (en) 2016-09-22 2018-03-29 Relay Therapeutics, Inc. Shp2 phosphatase inhibitors and methods of use thereof
TW202500565A (zh) 2016-10-24 2025-01-01 美商傳達治療有限公司 Shp2磷酸酶抑制劑及其使用方法
EP3568204B1 (en) 2017-01-10 2023-08-30 Novartis AG Pharmaceutical combination comprising an alk inhibitor and an shp2 inhibitor
BR112019015075A2 (pt) 2017-01-23 2020-03-10 Revolution Medicines, Inc. Compostos bicíclicos como inibidores de shp2 alostéricos
SG11201906412SA (en) 2017-01-23 2019-08-27 Revolution Medicines Inc Pyridine compounds as allosteric shp2 inhibitors
WO2018172984A1 (en) * 2017-03-23 2018-09-27 Jacobio Pharmaceuticals Co., Ltd. Novel heterocyclic derivatives useful as shp2 inhibitors
US11591336B2 (en) 2017-05-26 2023-02-28 D. E. Shaw Research, Llc Substituted pyrazolo[3,4-b]pyrazines as SHP2 phosphatase inhibitors
GB2577436B (en) * 2017-06-20 2024-11-27 Control Components Multi-stage, multi-path rotary disc valve
JP7356414B2 (ja) * 2017-09-07 2023-10-04 レヴォリューション・メディスンズ，インコーポレイテッド がんを治療するためのｓｈｐ２阻害剤組成物および方法
CN118684652A (zh) * 2017-09-11 2024-09-24 克鲁松制药公司 SHP2的八氢环戊二烯并[c]吡咯别构抑制剂
WO2019067843A1 (en) 2017-09-29 2019-04-04 Relay Therapeutics, Inc. PYRAZOLO [3,4-B] PYRAZINE DERIVATIVES AS INHIBITORS OF PHOSPHATASE SHP2
SG11202002941WA (en) 2017-10-12 2020-04-29 Revolution Medicines Inc Pyridine, pyrazine, and triazine compounds as allosteric shp2 inhibitors
TWI697490B (zh) * 2017-12-06 2020-07-01 大陸商北京加科思新藥研發有限公司 用於作為shp2抑制劑之新穎雜環衍生物
CA3084058A1 (en) * 2017-12-15 2019-06-20 Revolution Medicines, Inc. Polycyclic compounds as allosteric shp2 inhibitors
US11426422B2 (en) 2018-01-30 2022-08-30 Research Development Foundation SHP2 inhibitors and methods of use thereof
JP7210599B2 (ja) 2018-01-31 2023-01-23 アプティニックス インコーポレイテッド スピロラクタム系ｎｍｄａ受容体修飾因子およびその使用
CN115448923B (zh) * 2018-02-13 2024-03-22 上海青煜医药科技有限公司 嘧啶并环化合物及其制备方法和应用
MA51845A (fr) * 2018-02-13 2020-12-23 Shanghai Blueray Biopharma Co Ltd Composé cyclique fusionné à une pyrimidine, son procédé de préparation et son application
WO2019165073A1 (en) 2018-02-21 2019-08-29 Relay Therapeutics, Inc. Shp2 phosphatase inhibitors and methods of use thereof
KR102753101B1 (ko) 2018-03-02 2025-01-09 오츠카 세이야쿠 가부시키가이샤 약제학적 화합물
KR102724968B1 (ko) 2018-03-21 2024-10-31 수조우 푸허 바이오파마 컴퍼니 리미티드 Shp2 억제제 및 이의 용도
WO2019183364A1 (en) 2018-03-21 2019-09-26 Relay Therapeutics, Inc. Pyrazolo[3,4-b]pyrazine shp2 phosphatase inhibitors and methods of use thereof
CN117263942A (zh) 2018-03-21 2023-12-22 传达治疗有限公司 Shp2磷酸酶抑制剂及其使用方法
CN112203689A (zh) * 2018-04-10 2021-01-08 锐新医药公司 治疗癌症的shp2抑制剂组合物和方法
CN118978535A (zh) 2018-05-01 2024-11-19 锐新医药公司 作为mTOR抑制剂的C40-、C28-及C-32连接的雷帕霉素类似物
JP7297871B2 (ja) 2018-05-02 2023-06-26 ナビール ファーマ，インコーポレイティド Ｐｔｐｎ１１の置換されたヘテロ環式インヒビター
CN116003321A (zh) * 2018-05-09 2023-04-25 北京加科思新药研发有限公司 可用作shp2抑制剂的新型杂环衍生物
SG11202100719YA (en) 2018-07-24 2021-02-25 Taiho Pharmaceutical Co Ltd Heterobicyclic compounds for inhibiting the activity of shp2
WO2020033828A1 (en) 2018-08-10 2020-02-13 Board Of Regents, The University Of Texas System 6-(4-amino-3-methyl-2-oxa-8-azaspiro[4.5]decan-8-yl)-3-(2,3-dichlorophenyl)-2-methylpyrimidin-4(3h)-one derivatives and related compounds as ptpn11 (shp2) inhibitors for treating cancer
WO2020061103A1 (en) 2018-09-18 2020-03-26 Nikang Therapeutics, Inc. Fused tricyclic ring derivatives as src homology-2 phosphatase inhibitors
CN112839935A (zh) 2018-09-26 2021-05-25 北京加科思新药研发有限公司 可用作shp2抑制剂的新型杂环衍生物
EP3856744A1 (en) * 2018-09-29 2021-08-04 Novartis AG Manufacture of compounds and compositions for inhibiting the activity of shp2
CA3113379A1 (en) * 2018-09-29 2020-04-02 Novartis Ag Process of manufacture of a compound for inhibiting the activity of shp2
EP3860717A1 (en) 2018-10-03 2021-08-11 Gilead Sciences, Inc. Imidozopyrimidine derivatives
TW202028183A (zh) * 2018-10-10 2020-08-01 大陸商江蘇豪森藥業集團有限公司 含氮雜芳類衍生物調節劑、其製備方法和應用
JP7449282B2 (ja) 2018-10-17 2024-03-13 アレイ バイオファーマ インコーポレイテッド タンパク質チロシンホスファターゼ阻害薬
CN117143079A (zh) 2018-11-06 2023-12-01 上海奕拓医药科技有限责任公司 一种螺芳环化合物及其应用
CN111153899B (zh) * 2018-11-08 2023-12-01 四川科伦博泰生物医药股份有限公司 一种取代吡啶化合物、其制备方法和用途
EP3889153A4 (en) 2018-11-30 2022-09-07 Tuojie Biotech (Shanghai) Co., Ltd. PYRIMIDINE AND FIVE-MEMBERED HETEROCYCLIC NITROGEN DERIVATIVE, METHOD OF MANUFACTURE THEREOF AND MEDICAL USES THEREOF
CA3112129A1 (en) 2018-12-05 2020-06-11 Mirati Therapeutics, Inc. Combination therapies
WO2020156242A1 (zh) * 2019-01-31 2020-08-06 贝达药业股份有限公司 Shp2抑制剂及其应用
US20220152026A1 (en) * 2019-02-12 2022-05-19 Novartis Ag Pharmaceutical combination comprising tno155 and a krasg12c inhibitor
CA3129031A1 (en) 2019-02-12 2020-08-20 Novartis Ag Pharmaceutical combination comprising tno155 and a pd-1 inhibitor
IL284835B2 (en) 2019-02-12 2025-08-01 Novartis Ag Pharmaceutical combination comprising tno155 and ribociclib
CN111647000B (zh) 2019-03-04 2021-10-12 勤浩医药（苏州）有限公司 吡嗪类衍生物及其在抑制shp2中的应用
EP3935049A1 (en) 2019-03-07 2022-01-12 Merck Patent GmbH Carboxamide-pyrimidine derivatives as shp2 antagonists
IL320682A (en) * 2019-04-02 2025-07-01 Array Biopharma Inc Protein tyrosine phosphatase inhibitors
US11001561B2 (en) 2019-04-08 2021-05-11 Merck Patent Gmbh Pyrimidinone derivatives as SHP2 antagonists
CN114126620B (zh) 2019-05-13 2024-12-31 传达治疗有限公司 Fgfr抑制剂和其使用方法
CN114190090A (zh) * 2019-06-07 2022-03-15 锐新医药公司 Shp2抑制剂{6-[(2-氨基-3-氯吡啶-4-基)硫烷基]-3-[(3s,4s)-4-氨基-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-8-基]-5-甲基吡嗪-2-基}甲醇的固体形式
TWI817018B (zh) 2019-06-28 2023-10-01 美商艾瑞生藥股份有限公司 用於治療ｂｒａｆ相關的疾病和失調症之化合物
CA3144284A1 (en) 2019-06-28 2020-12-30 Tuojie Biotech (Shanghai) Co., Ltd. Pyrimidine five-membered nitrogen heterocyclic derivative, preparation method thereof and pharmaceutical use thereof
CN111704611B (zh) * 2019-07-25 2022-01-14 上海凌达生物医药有限公司 一类芳基螺环类shp2抑制剂化合物、制备方法和用途
CN112300160A (zh) * 2019-08-01 2021-02-02 上海奕拓医药科技有限责任公司 一种螺芳环化合物、其制备及应用
EP3772513A1 (en) 2019-08-09 2021-02-10 C.N.C.C.S. S.c.a.r.l. Collezione Nazionale Dei Composti Chimici e Centro Screening Shp2 inhibitors
GB201911928D0 (en) 2019-08-20 2019-10-02 Otsuka Pharma Co Ltd Pharmaceutical compounds
US12122787B2 (en) 2019-09-20 2024-10-22 Shanghai Jemincare Pharmaceuticals Co., Ltd Fused pyridone compound, and preparation method therefor and use thereof
WO2021061706A1 (en) 2019-09-24 2021-04-01 Relay Therapeutics, Inc. Shp2 phosphatase inhibitors and methods of making and using the same
PE20230249A1 (es) 2019-11-08 2023-02-07 Revolution Medicines Inc Compuestos de heteroarilo biciclicos y usos de estos
WO2021143823A1 (zh) * 2020-01-16 2021-07-22 浙江海正药业股份有限公司 吡啶或嘧啶类衍生物及其制备方法和用途
CN113135910A (zh) 2020-01-19 2021-07-20 北京诺诚健华医药科技有限公司 嘧啶-4(3h)-酮类杂环化合物、其制备方法及其在医药学上的应用
EP4110338A1 (en) 2020-02-28 2023-01-04 Novartis AG A triple pharmaceutical combination comprising dabrafenib, an erk inhibitor and a shp2 inhibitor
TW202144334A (zh) * 2020-04-03 2021-12-01 大陸商上海翰森生物醫藥科技有限公司 含氮雜芳類衍生物游離鹼的晶型
CN113493440B (zh) * 2020-04-03 2024-08-23 上海翰森生物医药科技有限公司 含氮杂芳类衍生物的盐及其晶型
WO2021218755A1 (zh) * 2020-04-30 2021-11-04 贝达药业股份有限公司 Shp2抑制剂及其组合物和应用
CA3179994A1 (en) 2020-05-08 2021-11-11 Novartis Ag Pharmaceutical combination comprising tno155 and nazartinib
US20230218765A1 (en) * 2020-05-19 2023-07-13 The Regents Of The University Of Michigan Small molecule degraders of shp2 protein
WO2021247836A1 (en) 2020-06-03 2021-12-09 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods for targeting shp-2 to overcome resistance
CN115734966B (zh) * 2020-06-12 2025-07-18 石药集团中奇制药技术（石家庄）有限公司 杂环化合物及其用途
KR20230042600A (ko) 2020-06-18 2023-03-28 레볼루션 메디슨즈, 인크. Ras 억제제에 대한 획득된 저항성을 지연, 예방, 및 치료하는 방법
EP4169913A4 (en) 2020-06-22 2024-10-30 Sichuan Kelun-Biotech Biopharmaceutical Co., Ltd. SUBSTITUTED PYRAZINE COMPOUND, PHARMACEUTICAL COMPOSITION THEREOF AND USE THEREOF
CN115916786B (zh) 2020-07-08 2025-10-17 诺华股份有限公司 用于抑制shp2活性的化合物和组合物的制造
WO2022006780A1 (en) * 2020-07-08 2022-01-13 Novartis Ag Manufacture of compounds and compositions for inhibiting activity of shp2
EP4186896A4 (en) * 2020-07-24 2024-08-07 Betta Pharmaceuticals Co., Ltd SHP2 INHIBITOR AND ASSOCIATED COMPOSITION AND APPLICATION
CA3187757A1 (en) 2020-09-03 2022-03-24 Ethan AHLER Use of sos1 inhibitors to treat malignancies with shp2 mutations
AU2021345111B2 (en) 2020-09-15 2025-11-27 Revolution Medicines, Inc. Indole derivatives as Ras inhibitors in the treatment of cancer
CN116348466B (zh) * 2020-09-23 2025-05-30 上海齐鲁制药研究中心有限公司 吡嗪硫联苯基类化合物及其应用
WO2022109577A1 (en) 2020-11-18 2022-05-27 Relay Therapeutics, Inc. Fgfr inhibitors and methods of making and using the same
EP4039685A1 (en) 2021-02-08 2022-08-10 Irbm S.P.A. Azabicyclic shp2 inhibitors
US20240025924A1 (en) * 2021-03-23 2024-01-25 Shanghai Haiyan Pharmaceutical Technology Co., Ltd. Heterocycle substituted ketone derivative, and composition and medicinal use thereof
CN117083285A (zh) * 2021-03-31 2023-11-17 南京明德新药研发有限公司 一系列含Se的吡嗪类化合物及其应用
TWI825637B (zh) 2021-03-31 2023-12-11 美商輝瑞股份有限公司 啶－１，６（２ｈ，７ｈ）－二酮
EP4067358A1 (en) 2021-04-02 2022-10-05 C.N.C.C.S. S.c.a.r.l. Collezione Nazionale Dei Composti Chimici e Centro Screening (s)-1-(5-((pyridin-3-yl)thio)pyrazin-2-yl)-4'h,6'h-spiro[piperidine-4,5'-pyrrolo[1,2-b]pyrazol]-4'-amine derivatives and similar compounds as shp2 inhibitors for the treatment of e.g. cancer
CR20230558A (es) 2021-05-05 2024-01-24 Revolution Medicines Inc Inhibidores de ras para el tratamiento del cáncer
EP4333847A1 (en) 2021-05-05 2024-03-13 Novartis AG Compounds and compositions for the treatment of mpnst
AR125782A1 (es) 2021-05-05 2023-08-16 Revolution Medicines Inc Inhibidores de ras
EP4334324A1 (en) 2021-05-05 2024-03-13 Revolution Medicines, Inc. Covalent ras inhibitors and uses thereof
US12390469B2 (en) 2021-05-05 2025-08-19 Huyabio International, Llc SHP2 inhibitor monotherapy and uses thereof
AU2022271243A1 (en) 2021-05-05 2023-11-30 Huyabio International, Llc Combination therapies comprising shp2 inhibitors and pd-1 inhibitors
CN117642166A (zh) 2021-06-09 2024-03-01 中外制药株式会社 用于癌症治疗的组合疗法
EP4351582B1 (en) 2021-06-09 2025-10-08 F. Hoffmann-La Roche AG Combination of a particular braf inhibitor (paradox breaker) and a pd-1 axis binding antagonist for use in the treatment of cancer
WO2022259157A1 (en) 2021-06-09 2022-12-15 Novartis Ag A triple pharmaceutical combination comprising dabrafenib, trametinib and a shp2 inhibitor
TW202317100A (zh) 2021-06-23 2023-05-01 瑞士商諾華公司 包含ｋｒａｓ ｇ１２ｃ抑制劑的藥物組合及其用於治療癌症之用途
CA3224155A1 (en) * 2021-07-07 2023-01-12 Lei Fan Synthesis and application of phosphatase degrader
EP4395769A1 (en) 2021-09-01 2024-07-10 Novartis AG Pharmaceutical combinations comprising a tead inhibitor and uses thereof for the treatment of cancers
AR127308A1 (es) 2021-10-08 2024-01-10 Revolution Medicines Inc Inhibidores ras
EP4426305A1 (en) 2021-11-04 2024-09-11 F. Hoffmann-La Roche AG Novel use of quinazolinone compound for the treatment of cancer
TW202342040A (zh) 2022-02-21 2023-11-01 瑞士商諾華公司 藥物配製物
CN114524772B (zh) * 2022-02-28 2023-07-11 中国药科大学 一种含杂环串联类化合物及其制备方法与应用
WO2023172940A1 (en) 2022-03-08 2023-09-14 Revolution Medicines, Inc. Methods for treating immune refractory lung cancer
CN116903581B (zh) * 2022-04-14 2026-04-14 山东大学 Shp2/hdac双靶点抑制剂及其制备方法和应用
AU2023285116A1 (en) 2022-06-10 2024-12-19 Revolution Medicines, Inc. Macrocyclic ras inhibitors
WO2024035830A1 (en) 2022-08-11 2024-02-15 Relay Therapeutics, Inc. Solid forms of a cdk inhibitor
EP4345101A1 (en) 2022-09-29 2024-04-03 Irbm S.P.A. Azole derivatives as shp2 inhibitors
US20240197715A1 (en) 2022-11-18 2024-06-20 Novartis Ag Pharmaceutical combinations and uses thereof
WO2024113194A1 (en) * 2022-11-30 2024-06-06 Canwell Biotech Limited Shp2 inhibitors, compositions and methods thereof
WO2024126660A1 (en) 2022-12-15 2024-06-20 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination therapy for cancer treatment
AU2024241633A1 (en) 2023-03-30 2025-11-06 Revolution Medicines, Inc. Compositions for inducing ras gtp hydrolysis and uses thereof
EP4688790A1 (en) 2023-04-07 2026-02-11 Revolution Medicines, Inc. Macrocyclic ras inhibitors
WO2024211663A1 (en) 2023-04-07 2024-10-10 Revolution Medicines, Inc. Condensed macrocyclic compounds as ras inhibitors
WO2024216016A1 (en) 2023-04-14 2024-10-17 Revolution Medicines, Inc. Crystalline forms of a ras inhibitor
AU2024252105A1 (en) 2023-04-14 2025-10-16 Revolution Medicines, Inc. Crystalline forms of ras inhibitors, compositions containing the same, and methods of use thereof
WO2024218632A1 (en) 2023-04-17 2024-10-24 Array Biopharma Inc. Erk protein kinase inhibitors
CN121712509A (zh) 2023-05-04 2026-03-20 锐新医药公司 用于ras相关疾病或病症的组合疗法
US20250049810A1 (en) 2023-08-07 2025-02-13 Revolution Medicines, Inc. Methods of treating a ras protein-related disease or disorder
AU2024321817A1 (en) 2023-08-08 2026-03-05 Quanta Therapeutics, Inc. Combination therapies with kras modulators
IL327306A (en) 2023-10-12 2026-05-01 Revolution Medicines Inc Macrocyclic RAS inhibitors
WO2025106901A1 (en) 2023-11-17 2025-05-22 Quanta Therapeutics, Inc. Combination cancer therapies with a kras modulator and an rtk-mapk pathway inhibitor
WO2025171296A1 (en) 2024-02-09 2025-08-14 Revolution Medicines, Inc. Ras inhibitors
WO2025215527A2 (en) 2024-04-10 2025-10-16 Novartis Ag Pharmaceutical combinations and uses thereof
WO2025240847A1 (en) 2024-05-17 2025-11-20 Revolution Medicines, Inc. Ras inhibitors
WO2025255438A1 (en) 2024-06-07 2025-12-11 Revolution Medicines, Inc. Methods of treating a ras protein-related disease or disorder
WO2025261943A1 (en) 2024-06-18 2025-12-26 F. Hoffmann-La Roche Ag Anti-cancer combinations comprising mosperafenib and folfox or folfiri
WO2025265060A1 (en) 2024-06-21 2025-12-26 Revolution Medicines, Inc. Therapeutic compositions and methods for managing treatment-related effects
WO2026015825A1 (en) 2024-07-12 2026-01-15 Revolution Medicines, Inc. Use of ras inhibitor for treating pancreatic cancer
WO2026015790A1 (en) 2024-07-12 2026-01-15 Revolution Medicines, Inc. Methods of treating a ras related disease or disorder
WO2026015801A1 (en) 2024-07-12 2026-01-15 Revolution Medicines, Inc. Methods of treating a ras related disease or disorder
WO2026015796A1 (en) 2024-07-12 2026-01-15 Revolution Medicines, Inc. Methods of treating a ras related disease or disorder
WO2026050446A1 (en) 2024-08-29 2026-03-05 Revolution Medicines, Inc. Ras inhibitors
WO2026060400A1 (en) 2024-09-16 2026-03-19 Quanta Therapeutics, Inc. Combination therapies with kras modulators
WO2026072904A2 (en) 2024-09-26 2026-04-02 Revolution Medicines, Inc. Compositions and methods for treating lung cancer
WO2026090116A2 (en) 2024-10-21 2026-04-30 Revolution Medicines, Inc. Ras inhibitors
US20260108528A1 (en) 2024-10-22 2026-04-23 Revolution Medicines, Inc. Methods of treating a ras protein-related disease or disorder
WO2026090245A1 (en) 2024-10-22 2026-04-30 Revolution Medicines, Inc. Use of ras inhibitors for treating cancer
CN119039223B (zh) * 2024-10-31 2025-02-25 江苏豪森药业集团有限公司 一种含氮杂芳类衍生物的制备方法及其中间体
CN119661551B (zh) * 2024-12-16 2025-11-25 重庆大学 一种(3r,4s)-3-甲基-2-氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷-4-胺盐酸盐的制备方法

Family Cites Families (135)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CH445129A (fr) 1964-04-29 1967-10-15 Nestle Sa Procédé pour la préparation de composés d'inclusion à poids moléculaire élevé
US3459731A (en) 1966-12-16 1969-08-05 Corn Products Co Cyclodextrin polyethers and their production
US3426011A (en) 1967-02-13 1969-02-04 Corn Products Co Cyclodextrins with anionic properties
US3453257A (en) 1967-02-13 1969-07-01 Corn Products Co Cyclodextrin with cationic properties
US3453259A (en) 1967-03-22 1969-07-01 Corn Products Co Cyclodextrin polyol ethers and their oxidation products
JPS6041077B2 (ja) 1976-09-06 1985-09-13 喜徳 喜谷 １，２‐ジアミノシクロヘキサン異性体のシス白金（２）錯体
US4235871A (en) 1978-02-24 1980-11-25 Papahadjopoulos Demetrios P Method of encapsulating biologically active materials in lipid vesicles
US4261989A (en) 1979-02-19 1981-04-14 Kaken Chemical Co. Ltd. Geldanamycin derivatives and antitumor drug
DE3381783D1 (de) 1982-03-03 1990-09-13 Genentech Inc Menschliches antithrombin iii, dns sequenzen dafuer, expressions- und klonierungsvektoren die solche sequenzen enthalten und damit transformierte zellkulturen, verfahren zur expression von menschlichem antithrombin iii und diese enthaltende pharmazeutische zusammensetzungen.
US4512991A (en) * 1982-12-27 1985-04-23 Merck & Co., Inc. 3-Acyl-2-amino-5-halo-6-(substituted)pyrazine antimicrobial compounds
FR2567518B1 (fr) 1984-07-11 1987-11-13 Sanofi Sa Nouveaux composes a noyau heterocyclique azote, leur preparation et les medicaments qui en contiennent
US4737323A (en) 1986-02-13 1988-04-12 Liposome Technology, Inc. Liposome extrusion method
EP0799617A3 (en) * 1986-02-24 1997-11-12 Mitsui Petrochemical Industries, Ltd. Therapeutic agent for neurological diseases
US5266573A (en) 1989-08-07 1993-11-30 Elf Sanofi Trifluoromethylphenyltetrahydropyridines for the treatment and/or prophylaxis of intestinal motility disorders
KR0166088B1 (ko) 1990-01-23 1999-01-15 . 수용해도가 증가된 시클로덱스트린 유도체 및 이의 용도
GB9012316D0 (en) 1990-06-01 1990-07-18 Wellcome Found Pharmacologically active cns compounds
DK169008B1 (da) 1990-06-01 1994-07-25 Holec Lk A S Fremgangsmåde og skærm til afskærmning af en strømtransformer samt strømtransformer med en sådan afskærmning
EP0647450A1 (en) 1993-09-09 1995-04-12 BEHRINGWERKE Aktiengesellschaft Improved prodrugs for enzyme mediated activation
IL115849A0 (en) 1994-11-03 1996-01-31 Merz & Co Gmbh & Co Tangential filtration preparation of liposomal drugs and liposome product thereof
US6111090A (en) 1996-08-16 2000-08-29 Schering Corporation Mammalian cell surface antigens; related reagents
DE69738749D1 (de) 1996-08-16 2008-07-17 Schering Corp Zelloberflächen-antigen aus säugetieren und verwandte reagenzien
MA26473A1 (fr) 1997-03-01 2004-12-20 Glaxo Group Ltd Composes pharmacologiquement actifs.
WO1999020758A1 (en) 1997-10-21 1999-04-29 Human Genome Sciences, Inc. Human tumor necrosis factor receptor-like proteins tr11, tr11sv1, and tr11sv2
JP2002502607A (ja) 1998-02-09 2002-01-29 ジェネンテク・インコーポレイテッド 新規な腫瘍壊死因子レセプター相同体及びそれをコードする核酸
WO2000059893A1 (en) 1999-04-06 2000-10-12 Krenitsky Pharmaceuticals Inc. Neurotrophic thio substituted pyrimidines
PE20010306A1 (es) 1999-07-02 2001-03-29 Agouron Pharma Compuestos de indazol y composiciones farmaceuticas que los contienen utiles para la inhibicion de proteina kinasa
PT1196186E (pt) 1999-07-12 2008-02-14 Genentech Inc Promoção ou inibição da angiogénese e da cardiovascularização com homólogos de ligandos/receptores do factor de necrose tumoral.
GB0018891D0 (en) 2000-08-01 2000-09-20 Novartis Ag Organic compounds
JP4272338B2 (ja) 2000-09-22 2009-06-03 バイエル アクチェンゲゼルシャフト ピリジン誘導体
US6995162B2 (en) 2001-01-12 2006-02-07 Amgen Inc. Substituted alkylamine derivatives and methods of use
DK1438053T3 (da) 2001-10-17 2008-12-08 Boehringer Ingelheim Pharma Pyrimidinderivater, lægemiddel indeholdende disse forbindelser, deres anvendelse og fremgangsmåder til deres fremstilling
BR0307544A (pt) 2002-02-01 2004-12-07 Ariad Gene Therapeutics Inc Compostos contendo fósforos, componentes e composição bem como, sua utilização através de métodos de tratamentos
RU2004126671A (ru) 2002-02-06 2005-04-10 Вертекс Фармасьютикалз Инкорпорейтед (Us) Гетероарилсоединения, полезные в качестве ингибиторов gsk-3
JP4201716B2 (ja) 2002-03-05 2008-12-24 メルク フロスト カナダ リミテツド カテプシンシステインプロテアーゼ阻害剤
TWI275390B (en) 2002-04-30 2007-03-11 Wyeth Corp Process for the preparation of 7-substituted-3- quinolinecarbonitriles
WO2004056875A1 (en) 2002-12-23 2004-07-08 Wyeth Antibodies against pd-1 and uses therefor
GB0300783D0 (en) 2003-01-14 2003-02-12 Btg Int Ltd Treatment of neurodegenerative conditions
US7393858B2 (en) 2003-03-07 2008-07-01 Merck Sharp & Dohme Ltd. Tetrahydropyran compounds as tachykinin antagonists
AU2004244626A1 (en) 2003-05-23 2004-12-09 The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services GITR ligand and GITR ligand-related molecules and antibodies and uses thereof
US20050048054A1 (en) 2003-07-11 2005-03-03 Shino Hanabuchi Lymphocytes; methods
US7399865B2 (en) 2003-09-15 2008-07-15 Wyeth Protein tyrosine kinase enzyme inhibitors
WO2005055808A2 (en) 2003-12-02 2005-06-23 Genzyme Corporation Compositions and methods to diagnose and treat lung cancer
KR20070008674A (ko) 2004-04-01 2007-01-17 아스테라스 세이야쿠 가부시키가이샤 피라진 유도체, 및 아데노신 길항제로서의 이의 약학적용도
WO2005117909A2 (en) * 2004-04-23 2005-12-15 Exelixis, Inc. Kinase modulators and methods of use
GB0409799D0 (en) 2004-04-30 2004-06-09 Isis Innovation Method of generating improved immune response
US20060002932A1 (en) 2004-06-04 2006-01-05 Duke University Methods and compositions for enhancement of immunity by in vivo depletion of immunosuppressive cell activity
KR20200019263A (ko) 2004-09-02 2020-02-21 제넨테크, 인크. 헤지호그 신호전달에 대한 피리딜 억제제
AU2005316540A1 (en) 2004-12-16 2006-06-22 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyrid-2-ones useful as inhibitors of Tec family protein kinases for the treatment of inflammatory, proliferative and immunologically-mediated diseases
AU2006230099B2 (en) 2005-03-25 2012-04-19 Gitr, Inc. GITR binding molecules and uses therefor
PL2161336T5 (pl) 2005-05-09 2017-10-31 Ono Pharmaceutical Co Ludzkie przeciwciała monoklonalne przeciwko białku Programmed Death 1 (PD-1) oraz sposoby leczenia raka z zastosowaniem samych przeciwciał anty-PD-1 lub w połączeniu z innymi środkami immunoterapeutycznymi
GB0510390D0 (en) 2005-05-20 2005-06-29 Novartis Ag Organic compounds
CA2612241C (en) 2005-07-01 2018-11-06 Medarex, Inc. Human monoclonal antibodies to programmed death ligand 1 (pd-l1)
BRPI0615880A2 (pt) 2005-09-13 2011-05-31 Palau Pharma Sa compostos derivados de 2-aminopirimidina como moduladores da atividade de receptor da histamina h4, uso dos mesmos e composição farmacêutica
AR057579A1 (es) * 2005-11-23 2007-12-05 Merck & Co Inc Compuestos espirociclicos como inhibidores de histona de acetilasa (hdac)
WO2007133822A1 (en) 2006-01-19 2007-11-22 Genzyme Corporation Gitr antibodies for the treatment of cancer
US20100029941A1 (en) 2006-03-28 2010-02-04 Takeda Pharmaceutical Company Limited Preparation of (r)-3-aminopiperidine dihydrochloride
ES2500165T3 (es) 2006-06-29 2014-09-30 Kinex Pharmaceuticals, Llc Composiciones de biarilo y métodos para modular una cascada de quinasas
US7515405B2 (en) 2006-07-25 2009-04-07 Hewlett-Packard Development Company, L.P. Anti-rotation mechanism for an electronic device
US20090137549A1 (en) 2006-11-09 2009-05-28 Paul John Edward Novel compounds useful for the treatment of degenerative & inflamatory diseases
US8252803B2 (en) 2007-02-12 2012-08-28 Merck Sharp & Dohme Corp. Piperidine derivatives
EP2137162B1 (en) * 2007-03-15 2018-08-01 Novartis AG Organic compounds and their uses
KR101586617B1 (ko) 2007-06-18 2016-01-20 머크 샤프 앤 도메 비.브이. 사람 프로그램된 사멸 수용체 ｐｄ-1에 대한 항체
CN101801413A (zh) 2007-07-12 2010-08-11 托勒克斯股份有限公司 采用gitr结合分子的联合疗法
AU2008298948B2 (en) 2007-09-12 2014-09-04 F. Hoffmann-La Roche Ag Combinations of phosphoinositide 3-kinase inhibitor compounds and chemotherapeutic agents, and methods of use
EP2214675B1 (en) 2007-10-25 2013-11-20 Genentech, Inc. Process for making thienopyrimidine compounds
RU2531758C2 (ru) 2008-02-11 2014-10-27 Куретек Лтд. Моноклональные антитела для лечения опухолей
US8168757B2 (en) 2008-03-12 2012-05-01 Merck Sharp & Dohme Corp. PD-1 binding proteins
JP2011518219A (ja) 2008-04-22 2011-06-23 ポートラ ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド タンパク質キナーゼの阻害剤
EA201100136A1 (ru) 2008-06-13 2011-08-30 Новартис Аг 2,4'-бипиридинилы в качестве ингибиторов протеинкиназы d, применимые для лечения сердечной недостаточности и рака
US8168784B2 (en) 2008-06-20 2012-05-01 Abbott Laboratories Processes to make apoptosis promoters
CN102203074A (zh) 2008-06-20 2011-09-28 麦它波莱克斯股份有限公司 芳基gpr119激动剂及其用途
NZ603525A (en) 2008-06-27 2015-02-27 Celgene Avilomics Res Inc Pyrimidine based compound and uses thereof
GB0812031D0 (en) 2008-07-01 2008-08-06 7Tm Pharma As Thiazole derivatives
KR20110044992A (ko) 2008-07-02 2011-05-03 이머전트 프로덕트 디벨롭먼트 시애틀, 엘엘씨 ＴＧＦ-β 길항제 다중-표적 결합 단백질
WO2010011666A2 (en) 2008-07-21 2010-01-28 University Of South Florida Indoline scaffold shp-2 inhibitors and cancer treatment method
AR072999A1 (es) 2008-08-11 2010-10-06 Medarex Inc Anticuerpos humanos que se unen al gen 3 de activacion linfocitaria (lag-3) y los usos de estos
JP2012500652A (ja) 2008-08-25 2012-01-12 アンプリミューン、インコーポレーテッド 標的化共刺激ポリペプチドおよび癌を処置するための使用方法
ES2545609T3 (es) 2008-08-25 2015-09-14 Amplimmune, Inc. Composiciones de antagonistas de PD-1 y métodos de uso
CN102149820B (zh) 2008-09-12 2014-07-23 国立大学法人三重大学 能够表达外源gitr配体的细胞
WO2010048149A2 (en) 2008-10-20 2010-04-29 Kalypsys, Inc. Heterocyclic modulators of gpr119 for treatment of disease
JP5702293B2 (ja) * 2008-11-10 2015-04-15 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッドＶｅｒｔｅｘ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｅｄ Ａｔｒキナーゼの阻害剤として有用な化合物
EP4209510B1 (en) 2008-12-09 2024-01-31 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-pd-l1 antibodies and their use to enhance t-cell function
KR20100067046A (ko) 2008-12-10 2010-06-18 동화약품주식회사 신규한 ２，６―위치에 치환된 ３―니트로피리딘 유도체, 그의 제조방법 및 이를 포함하는 약학 조성물
FR2941696B1 (fr) 2009-02-05 2011-04-15 Sanofi Aventis Derives d'azaspiranyl-alkylcarbamates d'heterocycles a 5 chainons, leur preparation et leur application en therapeutique
EP3192811A1 (en) 2009-02-09 2017-07-19 Université d'Aix-Marseille Pd-1 antibodies and pd-l1 antibodies and uses thereof
WO2010121212A2 (en) 2009-04-17 2010-10-21 H. Lee Moffit Cancer Center And Research Institute, Inc. Indoline scaffold shp-2 inhibitors and method of treating cancer
NZ598262A (en) 2009-08-17 2014-05-30 Sloan Kettering Inst Cancer Heat shock protein binding compounds, compositions, and methods for making and using same
PT3023438T (pt) 2009-09-03 2020-05-08 Merck Sharp & Dohme Anticorpos anti-gitr
GB0919054D0 (en) 2009-10-30 2009-12-16 Isis Innovation Treatment of obesity
US8673913B2 (en) 2009-11-13 2014-03-18 Case Western Reserve University SHP-2 phosphatase inhibitor
US20130017199A1 (en) 2009-11-24 2013-01-17 AMPLIMMUNE ,Inc. a corporation Simultaneous inhibition of pd-l1/pd-l2
WO2011078143A1 (ja) 2009-12-22 2011-06-30 塩野義製薬株式会社 ピリミジン誘導体およびそれらを含有する医薬組成物
SI2519543T1 (sl) 2009-12-29 2016-08-31 Emergent Product Development Seattle, Llc Beljakovine, ki se vežejo s heterodimeri in njihova uporaba
KR101789129B1 (ko) 2010-06-30 2017-11-20 후지필름 가부시키가이샤 신규 니코틴아미드 유도체 또는 그 염
WO2012009217A1 (en) 2010-07-13 2012-01-19 Merck Sharp & Dohme Corp. Spirocyclic compounds
KR101764952B1 (ko) 2010-07-29 2017-08-03 리겔 파마슈티칼스, 인크. Ａｍｐｋ-활성화 헤테로시클릭 화합물 및 그의 사용 방법
WO2012027495A1 (en) * 2010-08-27 2012-03-01 University Of The Pacific Piperazinylpyrimidine analogues as protein kinase inhibitors
CA2813162C (en) 2010-10-20 2015-06-16 Pfizer Inc. Pyridine-2- derivatives as smoothened receptor modulators
RU2591195C2 (ru) 2010-12-13 2016-07-10 Эррэй Биофарма Инк. Замещенные n-(1h-индазол-4-ил) имидазол [1,2-а]пиридин-3- карбоксамидные соединения в качестве ингибиторов рецепторной тирозинкиназы iii типа
JP5727276B2 (ja) 2011-03-04 2015-06-03 協同油脂株式会社 グリース組成物及びグリース封入転がり軸受
SG2014009260A (en) 2011-09-12 2014-09-26 Merck Patent Gmbh Aminopyrimidine derivatives for use as modulators of kinase activity
WO2013039954A1 (en) 2011-09-14 2013-03-21 Sanofi Anti-gitr antibodies
US9624298B2 (en) 2011-11-28 2017-04-18 Merck Patent Gmbh Anti-PD-L1 antibodies and uses thereof
WO2013096093A1 (en) 2011-12-21 2013-06-27 Merck Sharp & Dohme Corp. Compounds as dgat-1 inhibitors
EP2858994A1 (en) 2012-06-07 2015-04-15 F. Hoffmann-La Roche AG Pyrazolopyrimidone and pyrazolopyridone inhibitors of tankyrase
TWI633087B (zh) 2012-06-13 2018-08-21 赫孚孟拉羅股份公司 新穎二氮雜螺環烷及氮雜螺環烷
UY34887A (es) 2012-07-02 2013-12-31 Bristol Myers Squibb Company Una Corporacion Del Estado De Delaware Optimización de anticuerpos que se fijan al gen de activación de linfocitos 3 (lag-3) y sus usos
JP6099753B2 (ja) 2012-10-03 2017-03-22 アドビナス セラピューティクス リミテッド スピロ環化合物、その組成物及びその医薬応用
WO2014160521A1 (en) * 2013-03-15 2014-10-02 Blueprint Medicines Corporation Piperazine derivatives and their use as kit modulators
WO2015092819A2 (en) 2013-12-21 2015-06-25 Nektar Therapeutics (India) Pvt. Ltd. Derivatives of 6-(2,3-dichlorophenyl)-1,2,4-triazin-5- amine
EP3094627B1 (en) 2014-01-17 2018-08-22 Novartis AG 1-pyridazin-/triazin-3-yl-piper(-azine)/idine/pyrolidine derivatives and and compositions thereof for inhibiting the activity of shp2
JO3517B1 (ar) 2014-01-17 2020-07-05 Novartis Ag ان-ازاسبيرو الكان حلقي كبديل مركبات اريل-ان مغايرة وتركيبات لتثبيط نشاط shp2
EP3094629B1 (en) 2014-01-17 2018-08-22 Novartis AG 1-(triazin-3-yl/pyridazin-3-yl)-piper(-azine)idine derivatives and compositions thereof for inhibiting the activity of shp2
HUE057895T2 (hu) 2014-05-01 2022-06-28 Celgene Quanticel Res Inc Lizinspecifikus demetiláz-1 inhibitorai
US10174032B2 (en) 2014-05-05 2019-01-08 Signalrx Pharmaceuticals, Inc. Heterocyclic compound classes for signaling modulation
ES2741746T3 (es) 2015-06-19 2020-02-12 Novartis Ag Compuestos y composiciones para inhibir la actividad de SHP2
JP6878316B2 (ja) 2015-06-19 2021-05-26 ノバルティス アーゲー Ｓｈｐ２の活性を阻害するための化合物および組成物
US10287266B2 (en) 2015-06-19 2019-05-14 Novartis Ag Compounds and compositions for inhibiting the activity of SHP2
WO2017156397A1 (en) 2016-03-11 2017-09-14 Board Of Regents, The University Of Texas Sysytem Heterocyclic inhibitors of ptpn11
JP7044375B2 (ja) 2016-05-31 2022-03-30 ボード オブ リージェンツ，ザ ユニバーシティ オブ テキサス システム Ｐｔｐｎ１１の複素環式阻害剤
EA202092442A3 (ru) 2016-06-07 2021-08-31 Джакобио Фармасьютикалс Ко., Лтд. Новые гетероциклические производные, применимые в качестве ингибиторов shp2
PH12019500056B1 (en) 2016-07-12 2024-01-31 Revolution Medicines Inc 2,5-disubstituted 3-methyl pyrazines and 2,5,6-trisubstituted 3-methyl pyrazines as allosteric shp2 inhibitors
WO2018057884A1 (en) 2016-09-22 2018-03-29 Relay Therapeutics, Inc. Shp2 phosphatase inhibitors and methods of use thereof
TW202500565A (zh) 2016-10-24 2025-01-01 美商傳達治療有限公司 Shp2磷酸酶抑制劑及其使用方法
EP3568204B1 (en) 2017-01-10 2023-08-30 Novartis AG Pharmaceutical combination comprising an alk inhibitor and an shp2 inhibitor
SG11201906412SA (en) 2017-01-23 2019-08-27 Revolution Medicines Inc Pyridine compounds as allosteric shp2 inhibitors
BR112019015075A2 (pt) 2017-01-23 2020-03-10 Revolution Medicines, Inc. Compostos bicíclicos como inibidores de shp2 alostéricos
WO2018172984A1 (en) 2017-03-23 2018-09-27 Jacobio Pharmaceuticals Co., Ltd. Novel heterocyclic derivatives useful as shp2 inhibitors
JP7356414B2 (ja) 2017-09-07 2023-10-04 レヴォリューション・メディスンズ，インコーポレイテッド がんを治療するためのｓｈｐ２阻害剤組成物および方法
WO2019067843A1 (en) 2017-09-29 2019-04-04 Relay Therapeutics, Inc. PYRAZOLO [3,4-B] PYRAZINE DERIVATIVES AS INHIBITORS OF PHOSPHATASE SHP2
SG11202002941WA (en) 2017-10-12 2020-04-29 Revolution Medicines Inc Pyridine, pyrazine, and triazine compounds as allosteric shp2 inhibitors
CA3084058A1 (en) 2017-12-15 2019-06-20 Revolution Medicines, Inc. Polycyclic compounds as allosteric shp2 inhibitors
WO2019165073A1 (en) 2018-02-21 2019-08-29 Relay Therapeutics, Inc. Shp2 phosphatase inhibitors and methods of use thereof
CN117263942A (zh) 2018-03-21 2023-12-22 传达治疗有限公司 Shp2磷酸酶抑制剂及其使用方法
CN112203689A (zh) 2018-04-10 2021-01-08 锐新医药公司 治疗癌症的shp2抑制剂组合物和方法

Also Published As

Publication number Publication date
LT3094628T (lt) 2018-10-25
PT3094628T (pt) 2018-11-21
ECSP16067692A (es) 2017-10-31
EP3094628A1 (en) 2016-11-23
AU2015207757A1 (en) 2016-07-07
KR20160103137A (ko) 2016-08-31
US20220073537A1 (en) 2022-03-10
ES2695242T3 (es) 2019-01-02
AP2016009299A0 (en) 2016-06-30
UY35957A (es) 2015-08-31
EP3094628B1 (en) 2018-08-08
IL246436A0 (en) 2016-08-31
US20170015680A1 (en) 2017-01-19
US11952386B2 (en) 2024-04-09
JO3517B1 (ar) 2020-07-05
MA39282A1 (fr) 2018-06-29
MA39282B1 (fr) 2018-10-31
CR20160328A (es) 2016-11-10
DOP2016000177A (es) 2016-09-30
US12209098B2 (en) 2025-01-28
PE20170011A1 (es) 2017-03-25
KR102688024B1 (ko) 2024-07-25
DK3094628T3 (en) 2018-12-03
EA031573B1 (ru) 2019-01-31
NZ721598A (en) 2018-08-31
BR112016016432B1 (pt) 2022-11-29
CR20200617A (es) 2021-02-11
JP2017502993A (ja) 2017-01-26
HRP20181832T1 (hr) 2019-01-11
PH12016501336A1 (en) 2016-08-15
KR20230028581A (ko) 2023-02-28
MX356895B (es) 2018-06-19
US10077276B2 (en) 2018-09-18
NI201600101A (es) 2016-09-06
PH12016501336B1 (en) 2019-05-17
MY176357A (en) 2020-08-03
US20220396585A1 (en) 2022-12-15
CA2935695C (en) 2022-08-30
US10968235B2 (en) 2021-04-06
AU2015207757B2 (en) 2017-04-06
US20200181168A1 (en) 2020-06-11
IL246436B (en) 2019-10-31
SV2016005245A (es) 2016-11-21
EA201691442A1 (ru) 2016-12-30
TWI657083B (zh) 2019-04-21
TN2016000268A1 (en) 2017-10-06
AU2015207757B8 (en) 2017-05-11
AR100033A1 (es) 2016-09-07
HUE039869T2 (hu) 2019-02-28
SI3094628T1 (sl) 2018-11-30
CN105916845A (zh) 2016-08-31
US20210371429A1 (en) 2021-12-02
CA2935695A1 (en) 2015-07-23
US10336774B2 (en) 2019-07-02
BR112016016432A2 (sr) 2017-08-08
CN105916845B (zh) 2019-11-12
US20180201623A1 (en) 2018-07-19
WO2015107495A1 (en) 2015-07-23
PL3094628T3 (pl) 2019-01-31
SG11201605272SA (en) 2016-08-30
TW201612170A (en) 2016-04-01
CY1121155T1 (el) 2020-05-29
KR102501558B1 (ko) 2023-02-20
MX2016009223A (es) 2016-10-05
JP6534389B2 (ja) 2019-06-26
AU2015207757A8 (en) 2017-05-11
CU24424B1 (es) 2019-06-04
GT201600147A (es) 2018-11-27
CL2016001790A1 (es) 2016-12-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11952386B2 (en) N-azaspirocycloalkane substituted N-heteroaryl compounds and compositions for inhibiting the activity of SHP2
JP7278359B2 (ja) Ｓｈｐ２の活性を阻害するための化合物および組成物
EP3310779B1 (en) Compounds and compositions for inhibiting the activity of shp2
EP3310774B1 (en) Compounds and compositions for inhibiting the activity of shp2
JP6473457B2 (ja) Ｓｈｐ２の活性を阻害するための１−（トリアジン−３−イル／ピリダジン−３−イル）−ピペリジン／ピペラジン誘導体およびその組成物
EP3094627B1 (en) 1-pyridazin-/triazin-3-yl-piper(-azine)/idine/pyrolidine derivatives and and compositions thereof for inhibiting the activity of shp2
JP2018517746A (ja) Ｓｈｐ２の活性を阻害するための化合物および組成物
HK1228375B (en) N-azaspirocycloalkane substituted n-heteroaryl compounds and compositions for inhibiting the activity of shp2
HK1228375A1 (en) N-azaspirocycloalkane substituted n-heteroaryl compounds and compositions for inhibiting the activity of shp2