RS58014B1

RS58014B1 - Triciklična jedinjenja kao antikancerski agensi

Info

Publication number: RS58014B1
Application number: RS20181319A
Authority: RS
Inventors: Derek J Norris; George V Delucca; Ashvinikumar V Gavai; Claude A Quesnelle; Patrice Gill; Daniel O'malley; Wayne Vaccaro; Francis Y Lee; Mikkel V Debenedetto; Andrew P Degnan; Haiquan Fang; Matthew D Hill; Hong Huang; William D Schmitz; Jr John E Starrett; Wen-Ching Han; John S Tokarski; Sunil Kumar Mandal
Original assignee: Bristol Myers Squibb Co
Priority date: 2013-12-24
Filing date: 2014-12-23
Publication date: 2019-02-28
Also published as: CN108558871A; EP3087071A1; CY1121076T1; DK3466949T3; HUE054183T2; JP6675501B2; AU2014369982A1; ES2857848T3; KR20160095168A; JP6466456B2; PT3087071T; PT3466949T; MY176489A; CN108558871B; SG11201605097SA; EA032469B1; HRP20210212T1; DK3087071T3; EP3466949A1; PL3087071T3

Description

Opis

POLJE NA KOJE SE PRONALAZAK ODNOSI

[0001] Pronalazak obezbeđuje nova triciklična jedinjenja, farmaceutske kompozicije koje sadrže jedinjenja, i njihovu primenu u metodama, na primer, za lečenje ili profilaksu određenih kancera i za njihovu primenu u lečenju.

STANJE TEHNIKE PRONALASKA

[0002] Genomi eukariotskih organizama su visoko organizovani unutar jedra ćelije. Dugi lanci dupleksa DNK su obavijeni oko oktamera histonskih proteina da bi se formirao nukleozom. Ova osnovna jedinica je potom dodatno komprimovana agregacijom i savijanjem nukleozoma da bi se formirala struktura vizoko kondenzovanog hromatina. Niz različitih stanja kondenzacije je moguć, i zbijenost ove strukture varira tokom ćelijskog ciklusa, pri čemu je najkompaktnija tokom procesa ćelijske deobe. Nedavno je zapaženo da hromatinski obrasci formiraju fundamentalno važan set mehanizama kontrole gena naznačen kao epigenetska regulacija. Dodelom širokog opsega specifičnih hemijskih modifikacija histonima i DNK (kao što su acetilacija, metilacija, fosforilacija, ubikvitinacija i SUMOilacija) epigenetski regulatori modulišu strukturu, funkciju i pristupačnost našeg genoma, čime se vrši ogroman uticaj u ekspresiji gena.

[0003] Acetilacija histona je najčešće povezana sa aktivacijom genske transkripcije, pošto modifikacija oslabljuje interakciju DNK i histonskog oktamera izmenom elektrostatike. Dodatno ovoj fizičkoj promeni, specifični proteini se vezuju za acetilovane ostatke lizina unutar histona da bi se pročitao epigenetski kod. Bromodomeni su mali (∼110 amino kiselina) različiti domeni unutar proteina koji se vezuju za acetilovane ostatke lizina uobičajeno ali ne isključivo u sklopu histona. Postoji familija od oko 50 proteina za koju je poznato da sadrži bromodomene, i oni imaju niz funkcija unutar ćelije. BET familija proteina koji sadrže bromodomen obuhvata 4 proteina (BRD2, BRD3, BRD4 i BRD-T) koji sadrže tandemske bromodomene koji su sposobni za vezivanje za dva acetilovana ostatka lizina u neposrednoj blizini, povećavajući specifičnost interakcije.

[0004] Prijavljeno je da se BRD2 i BRD3 vezuju sa histonima duž aktivno transkribovanih gena i mogu biti uključeni u olakšavanje elongacije transkripcije (Leroy et al., Mol. Cell.

2008 30(1):51-60), dok se čini da je BRD4 uključen u angažovanje pTEF-I3 kompleksa do inducibilnih gena, rezultujući fosforilacijom RNK polimeraze i povećanim transkripcionim učinkom (Hargreaves et al., Cell, 2009138(1): 1294145). Svi članovi familije su prijavljeni da imaju neku funkciju u aspektima kontrole ili izvršavanja ćelijskog ciklusa, i pokazano je da ostaju u kompleksu sa hromozomima tokom ćelijske deobe – nagoveštavajući ulogu u održavanju epigenetske memorije. Dodatno neki virusi koriste ove proteine da bi privezali svoje genome za hromatin ćelije domaćina, kao deo procesa virusne replikacije (You et al., Cell, 2004 117(3):349-60). Skorašnji članci koji se odnose na ovaj cilj uključuju Prinjha et al., Trends in Pharmacological Sciences, Mart 2012, tom 33, br. 3, str. 146-153; Conway, ACS Med. Chem. Lett., 2012, 3, 691-694 i Hewings et al., J. Med. Chem., 2012, 55, 9393-9413.

[0005] BET inhibitori malih molekula koji su prijavljeni da su u razvoju uključuju GSK-525762A, OTX-015, TEN-010 kao i druge sa Oksfordskog univerziteta i Constellation Pharmaceuticals Inc.

[0006] WO 2014/164596 se odnosi na fuzionisane triciklične sisteme, koji su opisani da su korisni kao inhibitori BET bromodomena.

[0007] WO 2014/134232 opisuje jedinjenja karbazola, koja se smatraju korisnim kao inhibitori bromodomena.

[0008] WO 2014/086739 se odnosi na derivate benzimidazola, koji su opisani da su korisni kao EP4 antagonisti.

[0009] WO 2014/134267 se odnosi na jedinjenja karbazola, koja su opisana da su korisna kao inhibitori bromodomena.

[0010] WO 2012/145173 se odnosi na materijale za svetleće diode, pri čemu materijali sadrže fuzionisane triciklične sisteme.

[0011] WO 2013/046635 opisuje materijale za organske elektroluminescentne elemente, pri čemu materijali mogu sadržati fuzionisane triciklične sisteme.

[0012] Görlitzer et al., "Reaktionen von 4,5-Dihydro-4-oxo-1H-pyrido[3,2-b]indol-2-carbonsäureestern", Die Pharmazie, Govi Verlag, Pharmazeutischer Verlag GmbH, tom 55, br. 4, strane 273 do 281, opisuju fuzionisane pirido indolske derivate i njihove reakcije.

[0013] Stotine epigenetskih efektora je identifikovano, od kojih su mnogi hromatin-vezujući proteini ili hromatin-modifikujući enzimi. Ovi proteini su povezani sa raznim poremećajima kao što su neurodegenerativni poremećaji, metaboličke bolesti, inflamacija i kancer. Stoga, ova jedinjenja koja inhibiraju vezivanje bromodomena sa njihovim srodnim acetilovanim proteinima, obećavaju nove pristupe u lečenju niza autoimunih i inflamatornih bolesti ili stanja i u lečenju raznih tipova kancera.

REZIME PRONALASKA

[0014] Obezbeđeno je jedinjenje sa formulom (I)

pri čemu

A je

R je nezavisno jedan ili više vodonik, CD3, halogen, haloalkil, hidroksialkil, CN, CF3, CH2F, CHF2, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil, po izboru supstituisan (C1-C6)alkoksi, po izboru supstituisan (C3-C6)cikloalkil, po izboru supstituisan heterociklo,-OR<4>, -CONR<3>R<4>, -NR<3>R<4>, NR<3>R<4>(C1-C6)alkil-, -NR<6>OCOR<3>, -NR<6>COR<3>, NR<6>COR<3>(C1-C6)alkil-, -NR<6>CO2R<3>, NR<6>CO2R<3>(C1-C6)alkil-, -NR<6>CONR<3>R<4>, -SO2NR<3>R<4>, SO2(C1-C6)alkil-, -NR<6>SO2NR<3>R<4>, -NR<6>SO2R<4>ili NR<6>SO2R<4>(C1-C6)alkil-;

X i Y su nezavisno odabrani od vodonika, po izboru supstituisanog (C1-C6)alkila, po izboru supstituisanog (C3-C8)cikloalkila, po izboru supstituisanog arila, po izboru supstituisanog heteroarila ili po izboru supstituisanog heterociklo;

Z je vodonik, halogen, -OH, (C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, -NR<3>R<4>, -CONR<3>R<4>,-OCONR<3>R<4>, -NR<6>OCOR<3>, -NR<6>CONR<3>R<4>, -NR<6>SO2NR<3>R<4>ili -NR<6>SO2R<4>;

R<1>je, nezavisno u svakom slučaju, jedan ili više vodonik, halogen, -CN,-OR<4>, -NR<3>R<4>, -CONR<3>R<4>, -COOH, -OCONR<3>R<4>, -NR<6>OCOR<3>, -NR<6>CONR<3>R<4>,-NR<6>SO2NR<3>R<4>, -NR<6>SO2R<4>, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil, po izboru supstituisan (C2-C6)alkenil, po izboru supstituisan (C2-C6)alkinil, po izboru supstituisan (C1-C6)alkoksi, po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil, po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil (C1-C6)alkil, po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil-CO-, po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil-SO2-, po izboru supstituisan aril (C1-C6)alkoksi, po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil (C1-C6)alkoksi, po izboru supstituisan heterociklil-CO-, po izboru supstituisan heterociklil, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil-SO2-, -NR<6>SO2-po izboru supstituisan (C1-C6)alkil, -NR<6>SO2-po izboru supstituisan heterociklo, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil-NR<6>SO2- ili po izboru supstituisan heterociklo-NR<6>SO2-;

R<2>je vodonik, halogen, -CN, OH, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil, po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil, po izboru supstituisan (C1-C6) alkoksi, po izboru supstituisan aril, po izboru supstituisan heteroaril ili po izboru supstituisan heterociklo;

R<3>je vodonik, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil, po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil, po izboru supstituisan (C2-C6)alkenil, po izboru supstituisan (C2-C6)alkinil, cijano(C1-C6)alkil, hidroksi(C1-C6)alkil, po izboru supstituisan aril, po izboru supstituisan aril(C1-C6)alkil, po izboru supstituisan ariloksi(C1-C6)alkil, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil-SO2-, po izboru supstituisan heterociklil, po izboru supstituisan heterociklil(C1-C6)alkil, po izboru supstituisan heteroaril ili po izboru supstituisan heteroaril(C1-C6)alkil,

R<4>je vodonik, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil ili po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil;

ili R<3>i R<4>mogu biti uzeti zajedno sa atomom azota za koji su vezani da bi formirali po izboru supstituisan (C4-C8) heteroaril ili (C4-C8) heterociklični prsten;

R<6>je vodonik ili po izboru supstituisan (C1-C6)alkil;

i/ili farmaceutski prihvatljiva so, tautomer ili stereoizomer tog jedinjenja;

pri čemu se termin aril, bilo zasebno ili kao deo veće grupe, odnosi na monociklične, biciklične i triciklične prstenaste sisteme koji imaju ukupno pet do 15 članova prstena, pri čemu je najmanje jedan prsten u sistemu aromatičan i pri čemu svaki prsten u sistemu sadrži tri do sedam članova prstena;

i pri čemu se termin heterociklo ili heterociklični odnosi na stabilan 3-, 4-, 5-, 6-, ili 7-očlani monociklični ili biciklični ili 7-, 8-, 9-, 10-, 11-, 12-, 13-, ili 14-očlani policiklični heterociklični prsten koji je zasićen, delimično nezasićen, ili potpuno nezasićen, i koji sadrži atome ugljenika i 1, 2, 3 ili 4 heteroatoma nezavisno odabrana iz grupe koja se sastoji od N, O i S; i uključuje bilo koju policikličnu grupu u kojoj je bilo koji od iznad-definisanih heterocikličnih prstenova fuzionisan za benzenov prsten.

[0015] U sledećem aspektu, obezbeđena je farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje pronalaska, tj. jedinjenje sa formulom (I) i/ili farmaceutski prihvatljivu so, tautomer ili stereoizomer tog jedinjenja, i jedan ili više farmaceutski prihvatljivih nosača, razblaživača ili ekscipijenasa.

[0016] U sledećem aspektu, obezbeđeno je jedinjenje pronalaska za primenu u lečenju. Posebno, za primenu u lečenju bolesti ili stanja za koje je inhibitor bromodomena indikovan.

[0017] U sledećem aspektu, obezbeđeno je jedinjenje pronalaska za primenu u metodi lečenja autoimunih i inflamatornih bolesti ili stanja koja obuhvata administriranje subjektu koji ima potrebu za njim terapijski efikasne količine inhibitora bromodomena.

[0018] U sledećem aspektu, obezbeđeno je jedinjenje pronalaska za primenu u metodi lečenja kancera koja obuhvata administriranje subjektu koji ima potrebu za njim terapijski efikasne količine inhibitora bromodomena.

[0019] U sledećem aspektu predmetnog pronalaska, obezbeđeno je jedinjenje pronalaska za primenu u metodi za lečenje poremećaja posredovanog proteinom koji sadrži bromodomen kod pacijenta koji ima potrebu za njim, koja obuhvata korak administriranja jedinjenja pronalaska pomenutom pacijentu.

DETALJAN OPIS PRONALASKA

[0020] U prvom aspektu predmetnog pronalaska, obezbeđeno je jedinjenje sa formulom (I)

pri čemu

A je

R je nezavisno jedan ili više vodonik, CD3, halogen, haloalkil, hidroksialkil, CN, CF3, CH2F, CHF2, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil, po izboru supstituisan (C1-C6)alkoksi, po izboru supstituisan (C3-C6)cikloalkil, po izboru supstituisan heterociklo,-OR<4>, -CONR<3>R<4>, -NR<3>R<4>, NR<3>R<4>(C1-C6)alkil-, -NR<6>OCOR<3>, -NR<6>COR<3>, NR<6>COR<3>(C1-C6)alkil-, -NR<6>CO2R<3>, NR<6>CO2R<3>(C1-C6)alkil-,-NR<6>CONR<3>R<4>, -SO2NR<3>R<4>, SO2(C1-C6)alkil-, -NR<6>SO2NR<3>R<4>, -NR<6>SO2R<4>ili NR<6>SO2R<4>(C1-C6)alkil-;

ili R<3>i R<4>mogu biti uzeti zajedno sa atomom azota za koji su vezani da bi se formirao po izboru supstituisan (C4-C8) heteroaril ili (C4-C8) heterociklični prsten;

R<6>je vodonik ili po izboru supstituisan (C1-C6)alkil;

i/ili farmaceutski prihvatljiva so, tautomer ili stereoizomer tog jedinjenja;

i pri čemu se termin heterociklo ili heterocikličan odnosi na stabilan 3-, 4-, 5-, 6-, ili 7-očlani monociklični ili biciklični ili 7-, 8-, 9-, 10-, 11-, 12-, 13-, ili 14-očlani policiklični heterociklični prsten koji je zasićen, delimično nezasićen, ili potpuno nezasićen, i koji sadrži atome ugljenika i 1, 2, 3 ili 4 heteroatoma nezavisno odabrana iz grupe koja se sastoji od N, O i S; i uključuje bilo koju policikličnu grupu u kojoj je bilo koji od iznad-definisanih heterocikličnih prstenova fuzionisan za benzenov prsten.

[0021] U 2. aspektu pronalaska unutar obima prethodnog aspekta, obezbeđeno je jedinjenje sa formulom

pri čemu:

A je

R<3>je vodonik, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil, po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil, po izboru supstituisan (C2-C6)alkenil, po izboru supstituisan (C2-C6)alkinil, cijano(C1-C6)alkil, hidroksi(C1-C6)alkil, po izboru supstituisan aril, po izboru supstituisan aril(C1-C6)alkil, po izboru supstituisan ariloksi(C1-C6)alkil, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil-SO2-, po izboru supstituisan heterociklil, po izboru

1

supstituisan heterociklil(C1-C6)alkil, po izboru supstituisan heteroaril ili po izboru supstituisan heteroaril(C1-C6)alkil,

R<6>je vodonik ili po izboru supstituisan (C1-C6)alkil;

i/ili farmaceutski prihvatljiva so, tautomer ili stereoizomer tog jedinjenja.

[0022] U 3. aspektu pronalaska unutar obima prethodnih aspekata, obezbeđeno je jedinjenje sa formulom

pri čemu:

A je

R je nezavisno jedan ili više vodonik, CD3, halogen, haloalkil, hidroksialkil, CN, CF3, CH2F, CHF2, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil, po izboru supstituisan (C1-C6)alkoksi, po izboru supstituisan (C3-C6)cikloalkil, po izboru supstituisan heterociklo,-OR<4>, -CONR<3>R<4>, -NR<3>R<4>, NR<3>R<4>(C1-C6)alkil-, -NR<6>OCOR<3>, -NR<6>COR<3>, NR<6>COR<3>(C1-C6)alkil-, -NR<6>CO2R3, NR<6>CO1R<3>(C1-C6)alkil-,-NR<6>CONR<3>R<4>, -SO2NR<3>R<4>, SO2(C1-C6)alkil-, -NR<6>SO2NR<3>R<4>, -NR<6>SO2R<4>ili NR<6>SO2R<4>(C1-C6)alkil-;

R<6>je vodonik ili po izboru supstituisan (C1-C6)alkil;

i/ili farmaceutski prihvatljiva so, tautomer ili stereoizomer tog jedinjenja.

[0023] U 4. aspektu pronalaska unutar obima prethodnih aspekata, obezbeđeno je jedinjenje sa formulom

pri čemu:

A je

R<1>je, nezavisno u svakom slučaju, jedan ili više vodonik, halogen, -CN,-OR<4>, -NR<3>R<4>, -CONR<3>R<4>, -COOH, -OCONR<3>R<4>, -NR<6>OCOR<3>, -NR<6>CONR<3>R<4>,-NR<6>SO2NR<3>R<4>, -NR<6>SO2R<4>, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil, po izboru supstituisan (C2-C6)alkenil, po izboru supstituisan (C2-C6)alkinil, po izboru supstituisan (C1-C6)alkoksi, po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil, po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil (C1-C6)alkil, po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil-CO-, po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil-SO2-, po izboru supstituisan aril (C1-C6)alkoksi, po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil (C1-C6)alkoksi, po izboru supstituisan heterociklil-CO-, po izboru supstituisan heterociklil, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil-SO2-, -NR<6>SO2-po izboru supstituisan (C1-C6)alkil, -

1

NR<6>SO2-po izboru supstituisan heterociklo, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil-NR<6>SO2- ili po izboru supstituisan heterociklo-NR<6>SO2-;

R<6>je vodonik ili po izboru supstituisan (C1-C6)alkil;

i/ili farmaceutski prihvatljiva so, tautomer ili stereoizomer tog jedinjenja.

[0024] U sledećem aspektu, obezbeđeno je jedinjenje odabrano od tipičnih primera unutar obima prvog aspekta, ili farmaceutski prihvatljiva so, tautomer ili stereoizomer tog jedinjenja.

[0025] U sledećem aspektu, obezbeđeno je jedinjenje odabrano od bilo koje podskup liste jedinjenja unutar obima bilo kog od iznad pomenutih aspekata.

[0026] U sledećem aspektu, obezbeđeno je jedinjenje unutar obima prvog aspekta odabrano od sledećih

2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(1,1,1,7,7,7-heksafluoroheptan-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol,

2-[3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol,

2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(1S)-4,4,4-trifluoro-1-fenilbutil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol,

2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol,

2-[3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido [3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol,

2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol,

2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol,

2-{3-[4-(hidroksimetil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol,

5-{7-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol,

5-{5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-7-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol,

2-(5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol,

(1R)-1-ciklopropil-1-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]etan-1-ol,

2-{3-[5-(<2>H3)metil-3-metil-1,2-oksazol-4-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

2-{3-[4-(<2>H3)metoksi-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol,

2-[3-(4-metoksi-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol,

(1R)-1-ciklopropil-1-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-[(S)-(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]etan-1-ol,

2-{6-fluoro-5-[(S)-(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol,

(1S)-1-ciklopropil-1-{6-fluoro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}etan-1-ol,

(1R)-1-ciklopropil-1-{6-fluoro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}etan-1-ol,

1

2-{5-[(3-fluoropiridin-2-il)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol,

2-{8-fluoro-5-[(S)-(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol,

2-{6-fluoro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol,

2-{5-[(S)-(4,4-difluorocikloheksil)(fenil)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol,

2-{8-fluoro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol,

(1R)-1-ciklopropil-1-{6-fluoro-5-[(S)-(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}etan-1-ol,

2-{6-fluoro-5-[(5-metil-1,2-oksazol-3-il)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol,

2-{6-hloro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol,

2-[(R)-(4,4-difluorocikloheksil)({9-fluoro-7-metansulfonil-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-5-il})metil]-3-fluoropiridin,

(1S)-1-ciklopropil-1-{6-fluoro-5-[(S)-(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-1H-pirido[3,2-b]indol-7-il}etan-1-ol,

2-{8-fluoro-5-[(5-metil-1,2-oksazol-3-il)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol,

2-{5-[(5-hloropiridin-2-il)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol,

2-{5-[(3-hloropiridin-2-il)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol,

2-{5-[(4-hloropiridin-2-il)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol,

2-{5-[(4,4-difluorocikloheksil)(3-fluoropiridin-2-il)metil]-6-fluoro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol,

2-{6-fluoro-5-[(3-fluoropiridin-2-il)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol,

1

2-{8-fluoro-5-[(3-fluoropiridin-2-il)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol,

2-{3-[4-(<2>H3)metoksi-1-(<2>H3)metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol,

2-{3-[4-metoksi-1-(<2>H3)metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol,

5-{7-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-metoksi-1-metil-1H-1,2,3-triazol,

2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-amin,

N-{2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-il}acetamid,

N-{2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-il}metansulfonamid,

metil N-{2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-il}karbamat,

5-{6-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol,

5-{9-fluoro-6-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol,

5-{6-metansulfonil-9-metoksi-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol,

N-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-9-il]ciklopropansulfonamid,

5-{9-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol,

5-{9-metansulfonil-6,7-dimetoksi-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol, i

2-{3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

i/ili farmaceutski prihvatljiva so, tautomer ili stereoizomer tog jedinjenja.

1

[0027] Sledeće tehničko rešenje pronalaska obezbeđuje jedinjenja pri čemu A je

i R je nezavisno jedan ili više vodonik, CD3, OCD3, CF3, CHF2ili (C1-C3)alkil.

[0028] Sledeće tehničko rešenje pronalaska obezbeđuje jedinjenja pri čemu A je

i R je nezavisno jedan ili više vodonik, CD3, OCD3, CF3, CHF2ili (C1-C3)alkil.

[0029] U sledećem tehničkom rešenju, jedinjenja pronalaska ima IC50vrednosti ≤ 250 nM.

[0030] U sledećem tehničkom rešenju, jedinjenja pronalaska ima IC50vrednosti ≤25 nM [0031] U sledećem tehničkom rešenju, jedinjenja pronalaska ima IC50vrednosti ≤ 5 nM. OSTALA TEHNIČKA REŠENJA PRONALASKA

[0032] U sledećem tehničkom rešenju, pronalazak obezbeđuje farmaceutsku kompoziciju, koja sadrži farmaceutski prihvatljiv nosač i terapijski efikasnu količinu najmanje jednog od jedinjenja pronalaska ili stereoizomera, tautomera, farmaceutski prihvatljive soli, ili solvata tog jedinjenja.

[0033] U sledećem tehničkom rešenju, pronalazak obezbeđuje proces za pravljenje jedinjenja pronalaska ili stereoizomera, tautomera, farmaceutski prihvatljive soli, ili solvata tog jedinjenja.

1

[0034] U sledećem tehničkom rešenju, pronalazak obezbeđuje jedinjenje pronalaska za primenu u metodi za inhibiranje aktivnosti proteina koji sadrži bromodomen kojim je posredovan poremećaj kod pacijenta koji ima potrebu za njim koja obuhvata korak administriranja pomenutom pacijentu najmanje jednog jedinjenja pronalaska.

[0035] U sledećem tehničkom rešenju, pronalazak obezbeđuje jedinjenje pronalaska za primenu u metodi za lečenje i/ili profilaksu raznih tipova kancera, koja obuhvata administriranje pacijentu koji ima potrebu za takvim lečenjem i/ili profilaksom terapijski efikasne količine jednog ili više jedinjenja pronalaska, zasebno, ili, po izboru, u kombinaciji sa drugim jedinjenjem pronalaska i/ili najmanje jednim drugačijim tipom terapijskog agensa.

[0036] U sledećem tehničkom rešenju, pronalazak obezbeđuje jedinjenje pronalaska za primenu u metodi za lečenje i/ili profilaksu raznih tipova kancera, uključujući bez ograničenja, sitnoćelijski kancer pluća, ne-sitnoćelijski kancer pluća, kolorektalni kancer, multipli mijelom, akutnu mijeloidnu leukemiju (AML), akutnu limfoblastnu leukemiju (ALL), kancer pankreasa, kancer jetre, hepatoćelijski kancer, neuroblastom, ostale solidne tumore ili ostale hematološke kencere.

[0037] U sledećem tehničkom rešenju, pronalazak obezbeđuje jedinjenje pronalaska za primenu u metodi za lečenje i/ili profilaksu raznih tipova kancera, uključujući bez ograničenja, sitnoćelijski kancer pluća, ne-sitnoćelijski kancer pluća, kolorektalni kancer, multipli mijelom ili AML.

[0038] U sledećem tehničkom rešenju, pronalazak obezbeđuje jedinjenje predmetnog pronalaska za primenu u lečenju.

[0039] U sledećem tehničkom rešenju, pronalazak obezbeđuje kombinovani preparat jedinjenja predmetnog pronalaska i dodatnog terapijskog agensa(agenasa) za istovremenu, odvojenu ili sekvencijalnu primenu u terapiji.

[0040] U sledećem tehničkom rešenju, pronalazak obezbeđuje jedinjenje pronalaska za primenu u metodi inhibiranja proteina koji sadrži bromodomen koja obuhvata stupanje u vezu pomenutog proteina sa bilo kojim jedinjenjem pronalaska koje je uzeto za primer ili njegovom kompozicijom.

TERAPIJSKE PRIMENE

[0041] Jedinjenja sa formulom (I) pronalaska su inhibitori bromodomena i imaju potencijalnu korisnost u lečenju bolesti i stanja za koje je indikovan inhibitor bromodomena.

1

[0042] U jednom tehničkom rešenju obezbeđeno je jedinjenje pronalaska za primenu u metodi za lečenje bolesti ili stanja, za koje je indikovan inhibitor bromodomena, kod subjekta koji ima potrebu za njim koja obuhvata administriranje terapijski efikasne količine jedinjenja pronalaska.

[0043] U sledećem tehničkom rešenju obezbeđeno je jedinjenje pronalaska za primenu u metodi za lečenje hroničnog autoimunog i/ili inflamatornog stanja, kod subjekta koji ima potrebu za njim koja obuhvata administriranje terapijski efikasne količine jednog ili više jedinjenja pronalaska.

[0044] U dodatnom tehničkom rešenju obezbeđeno je jedinjenje pronalaska za primenu u metodi za lečenje kancera kod subjekta koji ima potrebu za njim koja obuhvata administriranje terapijski efikasne količine jednog ili više jedinjenja pronalaska.

[0045] U jednom tehničkom rešenju subjekt koji ima potrebu za njim je sisar, posebno čovek.

[0046] Za inhibitore bromodomena se smatra da su korisni u lečenju raznih bolesti ili stanja koja su povezana sa sistemskom ili tkivnom inflamacijom, inflamatornim odgovorima na infekciju ili hipoksiju, ćelijskom aktivacijom i proliferacijom, metabolizmom lipida, fibrozom i u sprečavanju i lečenju virusnih infekcija.

[0047] Inhibitori bromodomena mogu biti korisni u lečenju širokog spektra hroničnih autoimunih i inflamatornih stanja kao što su reumatoidni artritis, osteoartritis, akutni giht, psorijaza, sistemski lupus eritematozus, multipla skleroza, inflamatorna bolest creva (Kronova bolest i ulcerativni kolitis), astma, hronična opstruktivna bolest disajnih puteva, pneumonitis, miokarditis, perikarditis, miozitis, ekcem, dermatitis, alopecija, vitiligo, bulozne bolesti kože, nefritis, vaskulitis, ateroskleroza, Alchajmerova bolest, depresija, retinitis, uveitis, skleritis, hepatitis, pankreatitis, primarna bilijarna ciroza, sklerozantni holangitis, Adisonova bolest, hipofizitis, tiroiditis, dijabetes tipa I i akutno odbacivanje transplantiranih organa.

[0048] Inhibitori bromodomena mogu biti korisni u lečenju širokog spektra akutnih inflamatornih stanja kao što su akutni giht, arteritis džinovskih ćelija, nefritis uključujući lupus nefritis, vaskulitis sa obuhvatanjem organa kao što su glomerulonefritis, vaskulitis koji uključuje arteritis džinovskih ćelija, Wegener-ov granulomatozis, poliarteritis nodoza, Behcet-ova bolest, Kawasaki bolest, Takajasu arteritis i akutno odbacivanje transplantiranih organa.

2

[0049] Inhibitori bromodomena mogu biti korisni u sprečavanju ili lečenju bolesti ili stanja koja uključuju inflamatorne odgovore na infekcije sa bakterijama, virusima, gljivicama, parazitima ili njihovim toksinima, kao što su sepsa, sindrom sepse, septični šok, endotoksemija, sindrom sistemskog inflamatornog odgovora (systemic inflammatory response sindrom - SIRS), sindrom disfunkcije više organa, sindrom toksičnog šoka, akutna povreda pluća, ARDS (adult respiratory distress sindrom – respiratorni distres sindrom odraslih), akutna bubrežna insuficijencija, fulminantni hepatitis, opekotine, akutni pankreatitis, post-hirurški sindromi, sarkoidoza, Herxheimer-ove reakcije, encefalitis, mijelitis, meningitis, malarija, SIRS povezan sa virusnim infekcijama kao što su influenca, herpes zoster, herpes simpleks i koronavirus.

[0050] Inhibitori bromodomena mogu biti korisni u sprečavanju ili lečenju stanja povezanih sa ishemijsko-reperfuzionom povredom kao što su infarkt miokarda, cerebrovaskularna ishemija (moždani udar), akutni koronarni sindromi, renalna reperfuziona povreda, transplantacija organa, koronarni arterijski bajpas grafting, kardio-pulmonalne bajpas procedure i plućna, bubrežna, hepatična, gastro-intestinalna embolija ili periferna embolija ekstremiteta.

[0051] Inhibitori bromodomena mogu biti korisni u lečenje poremećaja metabolizma lipida putem regulacije APO-A1 kao što su hiperholesterolemija, ateroskleroza i Alchajmerova bolest.

[0052] Inhibitori bromodomena mogu biti korisni u lečenje fibroznih stanja kao što su idiopatska plućna fibroza, bubrežna fibroza, post-operativna stenoza, formiranje keloida, skleroderma i srčana fibroza.

[0053] Inhibitori bromodomena mogu biti korisni u sprečavanju i lečenju virusnih infekcija kao što su herpes virus, humani papiloma virus, adenovirus, poksvirus i ostali DNK virusi.

[0054] Inhibitori bromodomena mogu takođe biti korisni u lečenju kancera, uključujući hematološke, epitelijalne uključujući karcinome pluća, dojke i debelog creva, karcinome srednje linije, mezenhimalne, hepatične, bubrežne i neurološke tumore.

[0055] U jednom tehničkom rešenju bolest ili stanje za koje je indikovan inhibitor bromodomena je odabrano od bolesti koje su povezane sa sindromom sistemskog inflamatornog odgovora, kao što su sepsa, opekotine, pankreatitis, velika trauma, hemoragija i ishemija. U ovom tehničkom rešenju, inhibitor bromodomena bi bio administriran u trenutku dijagnoze da bi se smanjila učestalost za SIRS, početak šoka, sindroma duisfunkcije više organa, koji uključuje početak akutne povrede pluća, ARDS, akutnu bubrežnu, hepatičnu, srčanu i gastro-intestinalnu povredu i mortalitet. U sledećem tehničkom rešenju inhibitor bromodomena bi bio administriran pre hirurških ili ostalih procedura povezanih sa vizokim rizikom za sepsu, hemoragiju, teške tkivne povrede, SIRS ili MODS (sindrom disfunkcije više organa). U posebnom tehničkom rešenju bolest ili stanje za koje je indikovan inhibitor bromodomena je sepsa, sindrom sepse, septički šok i endotoksemija. U sledećem tehničkom rešenju, inhibitor bromodomena je indikovan za lečenje akutnog ili akutnog na hronični pankreatitis. U sledećem tehničkom rešenju inhibitor bromodomena je indikovan za lečenje opekotina.

[0056] U jednom tehničkom rešenju bolest ili stanje za koje je inhibitor bromodomena indikovan je odabrano od herpes simpleks infekcija i reaktivacija, čireva, herpes zoster infekcija i reaktivacija, varičela, osipa kože, humanog papiloma virusa, cervikalnih neoplazija, adenovirusnih infekcija, uključujući akutnu respiratornu bolest, i infekcije poksvirusom kao što su kravlje boginje i variola i virus afričke svinjske groznice.

[0057] Termin "bolesti ili stanja za koje je inhibitor bromodomena indikovan" treba da uključi bilo koje od ili sva od iznad pomenutih stanja bolesti.

[0058] U jednom tehničkom rešenju, obezbeđeno je jedinjenje pronalaska za primenu u metodi za inhibiranje bromodomena koja obuhvata uspostavljanje kontakta bromodomena sa jedinjenjem pronalaska.

[0059] Dok je moguće da se za primenu u lečenju, jedinjenje pronalaska može administrirati kao samo jedinjenje, ono je češće predstavljeno kao farmaceutska kompozicija.

[0060] Farmaceutske kompozicije mogu biti predstavljene u jediničnim doznim oblicima koji sadrže prethodno određenu količinu aktivnog sastojka po jediničnoj dozi. Poželjne jedinično dozne kompozicije su one koje sadrže dnevnu dozu ili sub-dozu, ili prikladnu njihovu frakciju, aktivnog sastojka. Takve jedinične doze mogu stoga biti administrirane više od jednom dnevno. Poželjne jedinično dozne kompozicije su one koje sadrže dnevnu dozu ili sub-dozu (za administraciju više od jednom dnevno), kao što je ovde naznačeno, ili prikladnu njihovu frakciju, aktivnog sastojka.

[0061] Tipovi kancera koji mogu biti tretirani sa jedinjenjima ovog pronalaska uključuju, ali nisu na njih ograničeni, kancere mozga, kancere kože, kancere bešike, kancere jajnika, kancere dojke, kancere želuca, kancere pankreasa, kancere prostate, kancere debelog creva, kancere krvi, kancere pluća i kancere kostiju. Primeri ovakvih tipova kancera uključuju neuroblastom, karcinom creva kao što su karcinom rektuma, karcinom debelog creva, familijarni adenomatozni polipozni karcinom i nasledni ne-polipozni kolorektalni kancer, ezofagealni karcinom, labijalni karcinom, karcinom grkljana, karcinom hipofarinksa, karcinom jezika, karcinom pljuvačne žlezde, karcinom želuca, adenokarcinom, medularni tiroidni karcinom, papilarni tiroidni karcinom, renalni karcinom, karcinom bubrežnog parenhima, karcinom jajnika, karcinom grlića materice, karcinom tela materice, karcinom endometrijuma, horiokarcinom, karcinom pankreasa, karcinom prostate, karcinom testisa, karcinom dojke, urinarni karcinom, melanom, tumore mozga kao što su glioblastom, astrocitom, meningiom, meduloblastom i periferni neuroektodermalni tumori, Hodgkin-ov limfom, ne-Hodgkin-ov limfom, Burkitt-ov limfom, akutnu limfocitnu leukemiju (ALL), hroničnu limfocitnu leukemiju (CLL), akutnu mijeloidnu leukemiju (AML), hroničnu mijeloidnu leukemiju (CML), T-ćelijsku leukemiju limfom kod odraslih, difuzni limfom velikih B-ćelija (diffuse large B-cell lymphoma - DLBCL), hepatoćelijski karcinom, karcinom žučne kese, karcinom bronhija, sitnoćelijski karcinom pluća, ne-sitnoćelijski karcinom pluća, multipli mijelom, bazaliom, teratom, retinoblastom, melanom horoida, seminom, rabdomiosarkom, kraniofaringiom, osteosarkom, hondrosarkom, miosarkom, liposarkom, fibrosarkom, Ewing-ov sarkom i plazmocitom.

[0062] Dodatno nedostacima apoptoze koji su pronađeni u tumorima, smatra se da nedostaci u sposobnosti da se eliminišu samo-reagujuće ćelije imunog sistema usled otpornosti apoptozi igraju ključnu ulogu u patogenezi autoimunih bolesti. Autoimune bolesti su okarakterisane time da ćelije imunog sistema proizvode antitela na svoje sopstvene organe i molekule ili direktno napadaju tkiva dovodeći do uništavanja pomenutih. Neuspeh da ove samo-reagujuće ćelije podlegnu apoptozi vodi do manifestacije bolesti. Nedostaci u regulaciji apoptozom su identifikovani u autoimunim bolestima kao što su sistemski lupus eritematozus ili reumatoidni artritis.

[0063] Stoga, u skladu sa sledećim tehničkim rešenjem, pronalazak obezbeđuje jedinjenje pronalaska za primenu u metodi lečenja autoimune bolesti obezbeđujući pacijentu koji ima potrebu za njim jedinjenje ili kompoziciju predmetnog pronalaska. Primeri takvih autoimunih bolesti uključuju, ali nisu na njih ograničeni, bolesti kolagena kao što su reumatoidni artritis, sistemski lupus eritematozus. Sharp-ov sindrom, CREST sindrom (kalcinoza, Raynaud-ov sindrom, dismotilitet jednjaka, teleangiektazija), dermatomiozitis, vaskulitis (Morbus Wegener) i Sjogren-ov sindrom, bubrežne bolesti kao što su Goodpasture-ov sindrom, rapidno-progresivni glomerulonefritis i membrano-proliferativni glomerulonefritis tipa II,

2

endokrine bolesti kao što su dijabetes tipa-I, autoimuna poliendokrinopatija-kandidijazaektodermalna distrofija (APECED), autoimuni paratiroidizam, perniciozna anemija, gonadna insuficijencija, idiopatska Addison-ova bolest, hipertireoza, Hašimotov tiroiditis i primarni miksedem, bolesti kože kao što su pemphigus vulgaris, bulozni pemfigoid, gestacioni herpes, bulozna epidermoliza i erythema multiforme major, bolesti jetre kao što su primarna bilijarna ciroza, autoimuni holangitis, autoimuni hepatitis tipa-1, autoimuni hepatitis tipa-2, primarni sklerozantni holangitis, neuronske bolesti kao što su multipla skleroza, mijastenija gravis, Lambert-Eaton mijastenijski sindrom, stečena neuromiotomija, Guillain-Barre-ov sindrom (Muller-Fischer-ov sindrom), sindrom ukočene osobe, cerebralna degeneracija, ataksija, opsoklonus, senzorna neuropatija i ahalazija, bolesti krvi kao što su autoimuna hemolitička anemija, idiopatska trombocitopenijska purpura (Morbus Werlhof), infektivne bolesti sa povezanim autoimunim reakcijama kao što su AIDS, malarija i Chagas-ova bolest.

[0064] Jedinjenja pronalaska su korisna za lečenje određenih tipova kancera samostalno ili u kombinaciji ili ko-administraciji sa ostalim terapijskim agensima ili terapijom zračenjem. Tako, u jednom tehničkom rešenju, jedinjenja pronalaska su ko-administrirana sa terapijom zračenjem ili drugim terapijskim agensom sa citostatskom ili antineoplastičnom aktivnošću. Pogodna jedinjenja citostatske hemioterapije uključuju, ali nisu na njih ograničeni (i) antimetabolite; (ii) agense za fragmentiranje DNK, (iii) agense za unakrsno vezivanje DNK, (iv) agense za interkaliranje (v) inhibitore sinteze proteina, (vi) otrove topoizomeraze I, kao što su kamptotecin ili topotekan; (vii) otrove topoizomeraze II, (viii) agense usmerene na mikrotubule, (ix) inhibitore kinaze (x) razne ispitivane agense (xi) hormone i (xii) antagoniste hormona. Smatra se da jedinjenja pronalaska mogu biti korisna u kombinaciji sa bilo kojim poznatim agensima koji spadaju u 12 iznad pomenutih klasa kao i sa bilo kojim budućim agensima koji su trenutno u razvoju. Posebno, smatra se da jedinjenja pronalaska mogu biti korisna u kombinaciji sa važećim Standardima zdravstvene zaštite kao i bilo kojim koji će se razviti u doglednoj budućnosti. Specifične doze i režimi doziranja bi bili bazirani na rastućem znanju lekara i opštoj stručnosti u oblasti.

[0065] Dalje su ovde obezbeđena jedinjenja pronalaska za primenu u metodama lečenja pri čemu su jedinjenja pronalaska administrirana sa jednim ili više imuno-onkoloških agenasa. Imuno-onkološki agensi koji su ovde primenjeni, takođe poznati kao imunoterapije kancera, su efikasni da se poboljšaju, stimulišu, i/ili pozitivno-regulišu imuni odgovori kod subjekta. U jednom aspektu, administracija jedinjenja pronalaska sa imuno-onkološkim agensom ima sinergistički efekat u inhibiranju rasta tumora.

[0066] U jednom aspektu, jedinjenje(a) pronalaska je sekvencijalno administrirano pre administracije imuno-onkološkog agensa. U sledećem aspektu, jedinjenje(a) pronalaska je administrirano istovremeno sa imunološko-onkološkim agensom. U još jednom aspektu, jedinjenje(a) pronalaska je sekvencijalno administrirano nakon administracije imunoonkološkog agensa.

[0067] U sledećem aspektu, jedinjenja pronalaska mogu biti ko-formulisana sa imunoonkološkim agensom.

[0068] Imuno-onkološki agensi uključuju, na primer, lek malog molekula, antitelo, ili drugi biološki ili mali molekul. Primeri bioloških imuno-onkoloških agenasa uključuju, ali nisu na njih ograničeni, vakcine za kancer, antitela, i citokine. U jednom aspektu, antitelo je monoklonsko antitelo. U sledećem aspektu, monoklonsko antitelo je humanizovano ili humano.

[0069] U jednom aspektu, imuno-onkološki agens je (i) agonist stimulacionog (uključujući ko-stimulacioni) receptora ili (ii) antagonist inhibitornog (uključujući ko-inhibitorni) signala na T ćelije, od kojih oba dovode do pojačanja antigen-specifičnih T ćelijskih odgovora (često naznačeni kao regulatori kontrolnih tačaka imunog sistema).

[0070] Određeni stimulatorni i inhibitorni molekuli su članovi imunoglobulinske super familije (IgSF). Jedna važna familija liganada koji su vezani za membranu koji se vezuju za ko-stimulatorne ili ko-inhibitorne receptore je B7 familija, koja uključuje B7-1, B7-2, B7-H1 (PD-L1), B7-DC (PD-L2), B7-H2 (ICOS-L), B7-H3, B7-H4, B7-H5 (VISTA), i B7-H6. Druga familija liganada vezanih za membranu koji se vezuju za ko-stimulatorne ili koinhibitorne receptore je TNF familija molekula koji se vezuju za srodne članove familije TNF receptora, koja uključuje CD40 i CD40L, OX-40, OX-40L, CD70, CD27L, CD30, CD30L, 4-1BBL, CD137 (4-1BB), TRAIL/Apo2-L, TRAILR1/DR4, TRAILR2/DR5, TRAILR3, TRAILR4, OPG, RANK, RANKL, TWEAKR/Fn14, TWEAK, BAFFR, EDAR, XEDAR, TACI, APRIL, BCMA, LTβR, LIGHT, DcR3, HVEM, VEGI/TL1A, TRAMP/DR3, EDAR, EDA1, XEDAR, EDA2, TNFR1, Limfotoksin α/TNFβ, TNFR2, TNFα, LTβR, Limfotoksin α 1β2, FAS, FASL, RELT, DR6, TROY, NGFR.

[0071] U sledećem aspektu, imuno-onkološki agens je citokin koji inhibira aktivaciju T ćelija (npr., IL-6, IL-10, TGF-β, VEGF, i dugi imunosupresivni citokini) ili citokin koji stimuliše aktivaciju T ćelija, radi stimulisanja imunog odgovora.

2

[0072] U jednom aspektu, odgovori T ćelija mogu biti stimulisani kombinacijom jedinjenja pronalaska i jednog ili više od (i) antagonista proteina koji inhibira aktivaciju T ćelija (npr., inhibitori kontrolnih tačaka imunog sistema) kao što su CTLA-4, PD-1, PD-L1, PD-L2, LAG-3, TIM-3, Galectin 9, CEACAM-1, BTLA, CD69, Galectin-1, TIGIT, CD113, GPR56, VISTA, 2B4, CD48, GARP, PD1H, LAIR1, TIM-1, i TIM-4, i (ii) agonista proteina koji stimuliše aktivaciju T ćelija kao što su B7-1, B7-2, CD28, 4-1BB (CD137), 4-1BBL, ICOS, ICOS-L, OX40, OX40L, GITR, GITRL, CD70, CD27, CD40, DR3 i CD28H.

[0073] Ostali agensi koji mogu biti kombinovani sa jedinjenjima pronalaska za lečenje kancera uključuju antagoniste inhibitornih receptora na NK ćelijama ili agoniste aktivirajućih receptora na NK ćelijama. Na primer, jedinjenja pronalaska mogu biti kombinovana sa KIR antagonistima, kao što je lirilumab.

[0074] Drugi agensi za kombinovane terapije uključuju agense koji inhibiraju ili iscrpljuju makrofage ili monocite, uključujući ali nisu ograničeni na CSF-1R antagoniste kao što su CSF-1R antagonistička antitela uključujući RG7155 (WO11/70024, WO11/107553, WO11/131407, WO13/87699, WO13/119716, WO13/132044) ili FPA-008 (WO11/140249; WO13169264; WO14/036357).

[0075] U sledećem aspektu, jedinjenja pronalaska mogu biti primenjena sa jednim ili više agonističkih agenasa koji vezuju pozitivne kostimulatorne receptore, blokirajućih agenasa koji oslabljuju signalizaciju kroz inhibitorne receptore, antagonista, i jednim ili više agenasa koji sistemski povećavaju učestalost anti-tumorskih T ćelija, agenasa koji prevazilaze različite imunološke supresivne puteve unutar tumorske mikrosredine (npr., blokiraju inhibitorno angažovanje receptora (npr., PD-L1/PD-1 interakcije), oslabljuju ili inhibiraju Treg ćelije (npr., primena anti-CD25 monoklonskog antitela (npr., daklizumab) ili pomoću ex vivo potrošnje anti-CD25 mikrogranula), inhibiraju metaboličke enzime kao što su IDO, ili preokreću/sprečavaju T ćelijsku anergiju ili istrošenost) i agenasa koji pokreću urođenu imunološku aktivaciju i/ili inflamaciju na mestima tumora.

[0076] U jednom aspektu, imuno-onkološki agens je CTLA-4 antagonist, kao što je antagonističko CTLA-4 antitelo. Pogodna CTLA-4 antitela uključuju, na primer, YERVOY (ipilimumab) ili tremelimumab.

[0077] U sledećem aspektu, imuno-onkološki agens je PD-1 antagonist, kao što je antagonističko PD-1 antitelo. Pogodna PD-1 antitela uključuju, na primer, OPDIVO (nivolumab), KEYTRUDA (pembrolizumab), ili MEDI-0680 (AMP-514; WO2012/145493). Imuno-onkološki agens može takođe uključiti pidilizumab (CT-011), iako je njegova

2

specifičnost za PD-1 vezivanje sporna. Drugi pristup da se nacilja PD-1 receptor je rekombinantni protein sačinjen od vanćelijskog domena od PD-L2 (B7-DC) koji je fuzionisan za Fc deo od IgG1, zvan AMP-224

[0078] U sledećem aspektu, imuno-onkološki agens je PD-L1 antagonist, kao što je antagonističko PD-L1 antitelo. Pogodna PD-L1 antitela uključuju, na primer, MPDL3280A (RG7446; WO2010/077634), durvalumab (MEDI4736), BMS-936559 (WO2007/005874), i MSB0010718C (WO2013/79174).

[0079] U sledećem aspektu, imuno-onkološki agens je LAG-3 antagonist, kao što je antagonističko LAG-3 antitelo. Pogodna LAG3 antitela uključuju, na primer, BMS-986016 (WO10/19570, WO14/08218), ili IMP-731 ili IMP-321 (WO08/132601, WO09/44273).

[0080] U sledećem aspektu, imuno-onkološki agens je CD137 (4-1BB) agonist, kao što je agonističko CD137 antitelo. Pogodna CD137 antitela uključuju, na primer, urelumab i PF-05082566 (WO12/32433).

[0081] U sledećem aspektu, imuno-onkološki agens je GITR agonist, kao što je agonističko GITR antitelo. Pogodna GITR antitela uključuju, na primer, BMS-986153, BMS-986156, TRX-518 (WO06/105021, WO09/009116) i MK-4166 (WO11/028683).

[0082] U sledećem aspektu, imuno-onkološki agens je IDO antagonist. Pogodni IDO antagonisti uključuju, na primer, INCB-024360 (WO2006/122150, WO07/75598, WO08/36653, WO08/36642), indoksimod, ili NLG-919 (WO09/73620, WO09/1156652, WO11/56652, WO12/142237).

[0083] U sledećem aspektu, imuno-onkološki agens je OX40 agonist, kao što je agonističko OX40 antitelo. Pogodna OX40 antitela uključuju, na primer, MEDI-6383 ili MEDI-6469.

[0084] U sledećem aspektu, imuno-onkološki agens je OX40L antagonist, kao što je antagonističko OX40 antitelo. Pogodni OX40L antagonisti uključuju, na primer, RG-7888 (WO06/029879).

[0085] U sledećem aspektu, imuno-onkološki agens je CD40 agonist, kao što je agonističko CD40 antitelo. U još jednom tehničkom rešenju, imuno-onkološki agens je CD40 antagonist, kao što je antagonističko CD40 antitelo. Pogodna CD40 antitela uključuju, na primer, lukatumumab ili dacetuzumab.

[0086] U sledećem aspektu, imuno-onkološki agens je CD27 agonist, kao što je agonističko CD27 antitelo. Pogodna CD27 antitela uključuju, na primer, varlilumab.

[0087] U sledećem aspektu, imuno-onkološki agens je MGA271 (na B7H3) (WO11/109400).

2

[0088] Kombinovana terapija je predviđeno da obuhvati administraciju ovih terapijskih agenasa na sekvencijalni način, to jest, pri čemu je svaki terapijski agens administriran u različito vreme, kao i administracija ovih terapijskih agenasa, ili najmanje dva od terapijskih agenasa, na suštinski istovremen način. Suštinski istovremena administracija može biti postignuta, na primer, administracijom subjektu pojedinačnog doznog oblika koji ima nepromenljiv odnos svakog terapijskog agensa ili u višestrukim, pojedinačnim doznim oblicima za svaki od terapijskih agenasa. Sekvencijalna ili suštinski istovremena administracija svakog terapijskog agensa može se ostvariti bilo kojim pogodnim putem uključujući, ali nije ograničen na, oralne puteva, intravenske puteve, intramuskularne puteve, i direktnu apsorbciju kroz tkiva sa mukoznim membranama. Terapijski agensi mogu biti administrirani istim putem ili različitim putevima. Na primer, prvi terapijski agens odabrane kombinacije može biti administriran pomoću intravenske injekcije dok drugi terapijski agensi kombinacije mogu biti administrirani oralno. Alternativno, na primer, svi terapijski agensi mogu biti administrirani oralno ili svi terapijski agensi mogu biti administrirani pomoću intravenske injekcije. Kombinovana terapija takođe može obuhvatiti administraciju terapijskih agenasa kao što je iznad opisano u daljoj kombinaciji sa drugim biološki aktivnim sastojcima i terapijama bez lekova (npr., operacijom ili tretmanom zračenjem.) Gde kombinovana terapija dodatno sadrži lečenje bez lekova, lečenje bez lekova može biti sprovedeno u bilo koje pogodno vreme sve dok se koristan efekat iz zajedničkog dejstva kombinacije terapijskih agenasa i lečenja bez lekova ne postigne. Na primer, u odgovarajućim slučajevima, koristan efekat se i dalje postiže kada se lečenje bez lekova privremeno ukloni iz administracije terapijskih agenasa, možda danima ili čak nedeljama. FARMACEUTSKE KOMPOZICIJE I DOZIRANJE

[0089] Pronalazak takođe obezbeđuje farmaceutski prihvatljive kompozicije koje sadrže terapijski efikasne količine jednog ili više jedinjenja pronalaska, koje je formulisano zajedno sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih nosača (aditiva) i/ili razblaživača, i po izboru, jednim ili više dodatnih terapijskih agenasa koji su iznad opisani. Kao što je detaljno ispod opisano, farmaceutske kompozicije predmetnog pronalaska mogu biti specijalno formulisane za administraciju u čvrstom ili tečnom obliku, uključujući one koje su prilagođene za sledeće: (1) oralnu administraciju, na primer, napitci (vodeni ili ne-vodeni rastvori ili suspenzije), tablete, npr., one namenjene za bukalnu, sublingvalnu, i sistemsku apsorbciju, bolusi, praškovi, granule, paste za primenu na jezik; (2) parenteralnu administraciju, na primer, pomoću subkutane, intramuskularne, intravenske ili epiduralne injekcije kao, na primer,

2

sterilni rastvor ili suspenzija, ili formulacija sa kontinuiranim oslobađanjem; (3) topikalnu primenu, na primer, kao krem, mast, ili flaster sa kontrolisanim oslobađanjem ili sprej koji se primenjuje na kožu; (4) intravaginalno ili intrarektalno, na primer, kao pesar, krema ili pena; (5) sublingvalno; (6) okularno; (7) transdermalno; ili (8) nazalno.

[0090] Fraza "farmaceutski prihvatljiv" je ovde upotrebljena da uputi na ona jedinjenja, materijale, kompozicije, i/ili dozne oblike koji su, u okviru zdravorazumne procene lekara, pogodni za primenu u kontaktu sa tkivima ljudskih bića i životinja bez prekomerne toksičnosti, iritacije, alergijskog odgovora, ili drugog problema ili komplikacije, proporcionalno sa razumnim odnosom korist/rizik.

[0091] Fraza "farmaceutski prihvatljiv nosač" kao što je ovde primenjeno označava farmaceutski prihvatljiv materijal, kompoziciju ili transporter, kao što je tečno ili čvrsto sredstvo za punjenje, razblaživač, ekscipijens, pomoćno sredstvo za proizvodnju (npr., lubrikant, talk magnezijum, kalcijum ili cink stearat, ili stearinska kiselina), ili materijal koji inkapsulira rastvarač, uključen u prenošenje ili transportovanje predmetnog jedinjenja iz jednog organa, ili dela tela, u drugi organ, ili deo tela. Svaki nosač mora biti "prihvatljiv" u smislu da je kompatibilan sa ostalim sastojcima formulacije i da nije štetan po pacijenta. Neki primeri materijala koji mogu služiti kao farmaceutski-prihvatljivi nosači uključuju: (1) šećere, kao što su laktoza, glukoza i saharoza; (2) skrobove, kao što su kukuruzni skrob i krompirov skrob; (3) celulozu, i njene derivate, kao što su natrijum karboksimetil celuloza, etil celuloza i celuloza acetat; (4) tragakant u prahu; (5) slad; (6) želatin; (7) talk; (8) ekscipijense, kao što su kakao buter i voskovi za supozitorije; (9) ulja, kao što su ulje od kikirikija, ulje semena pamuka, suncokretovo ulje, susamovo ulje, maslinovo ulje, kukuruzno ulje i sojino ulje; (10) glikole, kao što je propilen glikol; (11) poliole, kao što su glicerin, sorbitol, manitol i polietilen glikol; (12) estre, kao što su etil oleat i etil laurat; (13) agar; (14) agense za puferovanje, kao što su magnezijum hidroksid i aluminijum hidroksid; (15) alginsku kiselinu; (16) vodu bez pirogena; (17) izotoničan fiziološki rastvor; (18) Ringer-ov rastvor; (19) etil alkohol; (20) pH puferovane rastvore; (21) poliestre, polikarbonate i/ili polianhidride; i (22) ostale netoksične kompatibilne supstance koje su upotrebljene u farmaceutskim formulacijama.

[0092] Agensi za kvašenje, emulgatori i lubrikanti, kao što su natrijum lauril sulfat i magnezijum stearat, kao i boje, agensi za oslobađanje, agensi za oblaganje, zaslađivači, agensi za korekciju ukusa i parfemi, konzarvansi i antioksidansi mogu takođe biti prisutni u kompozicijama.

2

[0093] Primeri farmaceutski-prihvatljivih antioksidanasa uključuju: (1) u vodi rastvorne antioksidanse, kao što su askorbinska kiselina, cistein hidrohlorid, natrijum bisulfat, natrijum metabisulfit, natrijum sulfit i slično; (2) u ulju rastvorne antioksidanse, kao što su askorbil palmitat, butilovani hidroksianizol (BHA), butilovani hidroksitoluen (BHT), lecitin, propil galat, alfa-tokoferol, i slično; i (3) agense za heliranje metala, kao što su limunska kiselina, etilendiamin tetrasirćetna kiselina (EDTA), sorbitol, vinska kiselina, fosforna kiselina, i slično.

[0094] Formulacije predmetnog pronalaska uključuju one pogodne za oralnu, nazalnu, topikalnu (uključujući bukalnu i sublingvalnu), rektalnu, vaginalnu i/ili parenteralnu administraciju. Formulacije mogu pogodno biti prisutne u jediničnom doznom obliku i mogu biti pripremljene pomoću bilo kojih metoda koje su dobro poznate u oblasti farmacije. Količina aktivnog sastojka koji se može kombinovati sa materijalom nosača da bi se proizveo pojedinačni dozni oblik će varirati zavisno od pacijenta koji se leči i posebnog načina administracije. Količina aktivnog sastojka koji se može kombinovati sa materijalom nosača da bi se proizveo pojedinačni dozni oblik će uopšteno biti ona količina jedinjenja koja proizvodi terapijski efekat. Uopšteno, od sto posto procenata, ova količina će se kretati u opsegu od oko 0.1 procenat do oko devedeset devet procenata aktivnog sastojka, poželjno od oko 5 procenata do oko 70 procenata, najpoželjnije od oko 10 procenata do oko 30 procenata.

[0095] U određenim tehničkim rešenjima, formulacija predmetnog pronalaska sadrži ekscipijens odabran iz grupe koja se sastoji od ciklodekstrina, celuloza, lipozoma, agenasa koji formiraju micele, npr., žučnih kiselina, i polimernih nosača, npr., poliestara i polianhidrida; i jedinjenja predmetnog pronalaska. U određenim tehničkim rešenjima, iznad pomenuta formulacija obezbeđuje oralno bioraspoloživo jedinjenje predmetnog pronalaska.

[0096] Metode pripremanja ovih formulacija ili kompozicija uključuju korak dovođenja u vezu jedinjenja predmetnog pronalaska sa nosačem i, po izboru, jednim ili više pomoćnih sastojaka. Uopšteno, formulacije su pripremljene ravnomernim i bliskim dovođenjem u vezu jedinjenja predmetnog pronalaska sa tečnim nosačima, ili fino podeljenim čvrstim nosačima, ili oba, i zatim, ako je potrebno, oblikovanjem proizvoda.

[0097] Formulacije pronalaska pogodne za oralnu administraciju mogu biti u obliku kapsula, kesica, pilula, tableta, lozenga (primenom osnove sa korigovanim ukusom, uobičajeno saharoze i akacije ili tragakante), praškova, granula, ili kao rastvor ili suspenzija u vodenoj ili ne-vodenoj tečnosti, ili kao ulje-u-vodi ili voda-u-ulju tečna emulzija, ili kao eliksir ili sirup, ili kao pastile (primenom inertne baze, kao što su želatin i glicerin, ili saharoza i akacija) i/ili kao sredstva za ispiranje usta i slično, pri čemu svaka sadrži prethodno određenu količinu jedinjenja predmetnog pronalaska kao aktivni sastojak. Jedinjenje predmetnog pronalaska može takođe biti administrirano kao bolus, elektuarijum ili pasta.

[0098] U čvrstim doznim oblicima pronalaska za oralnu administraciju (kapsule, tableta, pilule, dražeje, praškovi, granule, pastile i slično), aktivni sastojak je pomešan sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih nosača, kao što su natrijum citrat ili dikalcijum fosfat, i/ili bilo kojim od sledećih: (1) sredstvima za punjenje ili ekstenderima, kao što su skrobovi, laktoza, saharoza, glukoza, manitol, i/ili silicijumska kiselina; (2) sredstvima za vezivanje, kao što su, na primer, karboksimetilceluloza, alginati, želatin, polivinil pirolidon, saharoza i/ili akacija; (3) humektansima, kao što je glicerol; (4) agensima za raspadanje, kao što su agar-agar, kalcijum karbonat, krompirov ili tapioka skrob, alginska kiselina, određeni silikati, i natrijum karbonat; (5) agenasima za usporavanje rastvora, kao što je parafin; (6) sredstvima za ubrzavanje apsorbcije, kao što su kvaternerna amonijum jedinjenja i surfaktanti, kao što su poloksamer i natrijum lauril sulfat; (7) agensima za vlaženje, kao što su, na primer, cetil alkohol, glicerol monostearat, i nejonski surfaktanti; (8) apsorbentima, kao što su kaolin i bentonit glina; (9) lubrikansima, kao što su talk, kalcijum stearat, magnezijum stearat, čvrsti polietilen glikoli, natrijum lauril sulfat, cink stearat, natrijum stearat, stearinska kiselina, i njihove smeše; (10) bojama; i (11) agensima za kontrolu oslobađanja kao što su krospovidon ili etil celuloza. U slučaju kapsula, tableta i pilula, farmaceutske kompozicije mogu takođe sadržati agense za puferovanje. Čvrste kompozicije sličnog tipa mogu takođe biti upotrebljene kao sredstva za punjenje u želatinskim kapsulama sa mekim i tvrdim omotačem primenjujući takve ekscipijense kao što su laktoza ili mlečni šećeri, kao i polietilen glikoli vizoke molekularne mase i slično.

[0099] Tableta može biti napravljena komprimovanjem ili oblikovanjem, po izboru sa jednim ili više pomoćnih sastojaka. Komprimovane tablete mogu biti pripremljene primenom vezujućeg sredstva (na primer, želatina ili hidroksipropilmetil celuloze), lubrikanta, inertnog razblaživača, konzervansa, sredstva za raspadanje (na primer, natrijum skrob glikolata ili unakrsno vezane natrijum karboksimetil celuloze), površinski aktivnog ili dispergujućeg agensa. Oblikovane tablete mogu biti napravljene oblikovanjem u pogodnoj mašini smeše jedinjenja u prahu koje je navlaženo sa inertnim tečnim razblaživačem.

[0100] Tablete, i ostali čvrsti dozni oblici farmaceutske kompozicije predmetnog pronalaska, kao što su dražeje, kapsule, pilule i granule, mogu po izboru biti sa razdelnom linijom ili pripremljene sa premazima i omotačima, kao što su enterički premazi i ostali premazi koji su

1

dobro poznati u oblasti farmaceutskog formulisanja. One mogu takođe biti formulisane tako da obezbede sporo ili kontrolisano oslobađanje aktivnog sastojka u njima primenom, na primer, hidroksipropilmetil celuloze u raličitim razmerama da bi se obezbedio željeni profil oslobađanja, drugih polimernih matrica, lipozoma i/ili mikrosfera. One mogu biti formulisane za brzo oslobađanje, npr., osušene zamrzavanjem. One mogu biti sterilisane pomoću, na primer, filtracije kroz filter za zadržavanje bakterija, ili inkorporiranjem sterilišućih agenasa u obliku sterilnih čvrstih kompozicija koje mogu biti rastvorene u sterilnoj vodi, ili nekom drugom sterilnom injektabilnom medijumu neposredno pre primene. Ove kompozicije mogu takođe po izboru sadržati agense za zamućivanje i mogu biti takve kompozicije da one oslobađaju aktivni sastojak(sastojke) jedino, ili preferencijalno, u određeni deo gastrointestinalnog trakta, po izboru, odloženo. Primeri kompozicija za ugradnju koje mogu biti primenjene uključuju polimerne supstance i voskove. Aktivni sastojak može takođe biti u mikro-inkapsuliranom obliku, po potrebi, sa jednim ili više iznad opisanih ekscipijenasa.

[0101] Tečni dozni oblici za oralnu administraciju jedinjenja pronalaska uključuju farmaceutski prihvatljive emulzije, mikroemulzije, rastvore, suspenzije, sirupe i eliksire. Pored aktivnog sastojka, tečni dozni oblici mogu sadržati inertne razblaživače koji se uobičajeno primenjuju u oblasti, kao što su, na primer, voda ili drugi rastvarači, solubilizujući agensi i emulgatori, kao što su etil alkohol, izopropil alkohol, etil karbonat, etil acetat, benzil alkohol, benzil benzoat, propilen glikol, 1,3-butilen glikol, ulja (posebno, semena pamuka, kikirikija, kukuruza, klice, masline, ricinusa i ulje susama), glicerol, tetrahidrofuril alkohol, polietilen glikoli i estri masnih kiselina i sorbitana, i njihove smeše.

[0102] Pored inertnih razblaživača, oralne kompozicije mogu takođe da uključe adjuvanse kao što su agensi za vlaženje, emulgujući i suspendujući agensi, agensi za zaslađivanje, korekciju ukusa, bojenje, korekciju mirisa i konzerviranje.

[0103] Suspenzije, pored aktivnih jedinjenja, mogu sadržati suspendujuće agense kao, na primer, etoksilovane izostearil alkohole, polioksietilen sorbitol i sorbitan estre, mikrokristalnu celulozu, aluminijum metahidroksid, bentonit, agar-agar i tragakant, i njihove smeše.

[0104] Formulacije farmaceutskih kompozicija pronalaska za rektalnu ili vaginalnu administraciju mogu biti predstavljene kao supozitorija, koja može biti pripremljena mešanjem jednog ili više jedinjenja pronalaska sa jednim ili više pogodnih neiritirajućih ekscipijenasa ili nosača koji sadrže, na primer, kakao buter, polietilen glikol, vosak za supozitorije ili salicilat, i koja je čvrsta na sobnoj temperaturi, ali tečna na temperaturi tela i, stoga, će se otopiti u rektumu ili vaginalnoj šupljini i osloboditi aktivno jedinjenje.

2

[0105] Formulacije predmetnog pronalaska koje su pogodne za vaginalnu administraciju takođe uključuju pesarije, tampone, kreme, gelove, paste, pene ili sprej formulacije koje sadrže takve nosače koji su u oblasti poznati kao pogodni.

[0106] Dozni oblici za topikalnu ili transdermalnu administraciju jedinjenja ovog pronalaska uključuju praškove, sprejeve, masti, paste, kreme, losione, gelove, rastvore, flastere i inhalante. Aktivno jedinjenje može biti pomešano pod sterilnim uslovima sa farmaceutski prihvatljivim nosačem, i sa bilo kojim konzervansima, puferima, ili propelentima koji mogu biti neophodni.

[0107] Masti, paste, kreme i gelovi mogu sadržati, pored aktivnog jedinjenja ovog pronalaska, ekscipijense, kao što su životinjske i biljne masti, ulja, voskovi, parafini, skrob, tragakant, derivate celuloze, polietilen glikole, silikone, bentonite, silicijumsku kiselinu, talk i cink oksid, ili njihove smeše.

[0108] Praškovi i sprejevi mogu sadržati, pored jedinjenja ovog pronalaska, ekscipijense kao što su laktoza, talk, silicijumska kiselina, aluminijum hidroksid, kalcijum silikati i poliamid prašak, ili smeše ovih supstanci. Sprejevi mogu dodatno sadržati uobičajene propelente, kao što su hlorofluorougljovodonici i isparljivi nesupstituisani ugljovodonici, kao što su butan i propan.

[0109] Transdermalni flasteri imaju dodatnu prednost obezbeđivanja kontrolisane isporuke jedinjenja predmetnog pronalaska u telo. Takvi dozni oblici mogu biti napravljeni rastvaranjem ili dispergovanjem jedinjenja u odgovarajućem medijumu. Pojačivači apsorbcije mogu takođe biti primenjeni da povećaju tok jedinjenja preko kože. Brzina ovakvog toka može biti kontrolisana bilo obezbeđivanjem membrane za kontrolu brzine ili dispergovanjem jedinjenja u polimernom matriksu ili gelu.

[0110] Oftalmičke formulacije, očne masti, praškovi, rastvori i slično, su takođe razmatrani kao da su unutar obima ovog pronalaska.

[0111] Farmaceutske kompozicije ovog pronalaska koje su pogodne za parenteralnu administraciju sadrže jedno ili više jedinjenja pronalaska u kombinaciji sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih sterilnih izotoničnih vodenih ili nevodenih rastvora, disperzija, suspenzija ili emulzija, ili sterilnih praškova koji mogu biti rekonstituisani u sterilne injektabilne rastvore ili disperzije neposredno pre nego što će se primeniti, koji mogu sadržati šećere, alkohole, antioksidanse, pufere, bakteriostatike, supstance koje se rastvaraju koje čine formulaciju izotoničnom sa krvlju nameravanog primaoca ili agense za suspendovanje ili zgušnjavanje.

[0112] Primeri pogodnih vodenih i nevodenih nosača koji mogu biti upotrebljeni u farmaceutskim kompozicijama pronalaska uključuju vodu, etanol, poliole (kao što su glicerol, propilen glikol, polietilen glikol, i slično), i njihove pogodne smeše, biljna ulja, kao što je maslinovo ulje, i injektabilne organske estre, kao što je etil oleat. Pogodna fluidnost može biti održana, na primer, primenom materijala za oblaganje, kao što je lecitin, održavanjem zahtevane veličine čestice u slučaju disperzija, i primenom surfaktanata.

[0113] Ove kompozicije mogu takođe sadržati adjuvanse kao što su konzervansi, agensi za vlaženje, emulgatori i agensi za dispergovanje. Sprečavanje dejstva mikroorganizama na predmetna jedinjenja može biti osigurano inkluzijom raznih antibakterijskih i antigljivičnih agenasa, na primer, parabena, hlorobutanola, fenol sorbinske kiseline, i slično. Može biti takođe poželjno da se u kompozicije uključe izotonični agensi, kao što su šećeri, natrijum hlorid, i slično. Dodatno, produžena apsorbcija injektabilnog farmaceutskog oblika može biti ostvarena inkluzijom agenasa koji odlažu apsorpciju kao što su aluminijum monostearat i želatin.

[0114] U nekim slučajevima, da bi se produžio efekat leka, poželjno je da se uspori apsorpcija leka iz subkutane ili intramuskularne injekcije. Ovo može biti postignuto primenom tečne suspenzije kristalnog ili amorfnog materijala koji ima slabu rastvorljivost u vodi. Brzina apsorbcije leka potom zavisi od njegove brzine rastvaranja koja, zatim, može zavisiti od veličine kristala i kristalnog oblika. Alternativno, odložena apsorbcija parenteralno administriranog oblika leka je postignuta rastvaranjem ili suspendovanjem leka u uljanom transporteru.

[0115] Injektabilni depo oblici su napravljeni formiranjem mikroinkapsuliranih matrica predmetnih jedinjenja u biorezgardljivim polimerima kao što je polilaktid-poliglikolid. Zavisno od odnosa leka prema polimeru, i prirode posebnog polimera koji je upotrebljen, brzina oslobađanja leka može biti kontrolisana. Primeri drugih biorazgradljivih polimera uključuju poli(ortoestre) i poli(anhidride). Depo injektabilne formulacije su takođe pripremljene hvatanjem leka u lipozome ili mikroemulzije koje su kompatibilne sa tkivom tela.

[0116] Kada se jedinjenja predmetnog pronalaska administriraju kao farmaceutski proizvodi, ljudima i životinjama, ona mogu biti data kakva jesu ili kao farmaceutska kompozicija koja

4

sadrži, na primer, 0.1 do 99% (poželjnije, 10 do 30%) aktivnog sastojka u kombinaciji sa farmaceutski prihvatljivim nosačem.

[0117] Bez obzira na odabrani put administracije, jedinjenja predmetnog pronalaska, koja mogu biti primenjena u pogodnom hidratisanom obliku, i/ili farmaceutske kompozicije predmetnog pronalaska, su formulisani unutar farmaceutski prihvatljivih doznih oblika pomoću konvencionalnih metoda koje su poznate obučenim poznavaocima oblasti.

[0118] Stvarni dozni nivoi aktivnih sastojaka u farmaceutskim kompozicijama ovog pronalaska mogu se menjati tako da se dobije količina aktivnog sastojka koja je efikasna da se postigne željeni terapijski odgovor za posebnog pacijenta, kompozicija, i način administracije, bez toksičnosti po pacijenta.

[0119] Odabrani dozni nivo će zavisiti od raznolikosti faktora uključujući aktivnost posebnog jedinjenja predmetnog pronalaska koje je upotrebljeno, ili estra, soli ili amida tog jedinjenja, put administracije, vreme administracije, brzinu izlučivanja ili metabolizam posebnog jedinjenja koje je upotrebljeno, brzinu i stepen apsorbcije, trajanje lečenja, ostale lekove, jedinjenja i/ili materijale koji su primenjeni u kombinaciji sa posebnim jedinjenjem koje je upotrebljeno, starost, pol, masu, stanje, opšte zdravlje i prethodnu medicinsku istoriju pacijenta koji se leči, i slične faktore koji su dobro poznati u oblastima medicine.

[0120] Lekar ili veterinar sa prosečnim znanjem iz oblasti može lako da odredi i propiše efikasnu količinu farmaceutske kompozicije koja je potrebna. Na primer, lekar ili veterinar može započeti sa dozama jedinjenja pronalaska koja su upotrebljena u farmaceutskoj kompoziciji na nivoima nižim od onih koji su potrebni da bi se postigao željeni terapijski efekat i postepeno povećavati dozu dok se ne postigne željeni efekat.

[0121] Uopšteno, pogodna dnevna doza jedinjenja pronalaska će biti ona količina jedinjenja koja je najniža doza efikasna da proizvede terapijski efekat. Ovakva efikasna doza će uopšteno zavisiti od faktora koji su opisani iznad. Uopšteno, oralne, intravenske, intracerebroventrikularne i subkutane doze jedinjenja ovog pronalaska za pacijenta će se kretati u opsegu od oko 0.01 do oko 50 mg po kilogramu telesne mase na dan.

[0122] Ukoliko je poželjno, efikasna dnevna doza aktivnog jedinjenja može biti administrirana kao dve, tri, četiri, pet, šest ili više pod-doza administriranih odvojeno u odgovarajućim intervalima tokom dana, po izboru, u jediničnim doznim oblicima. U određenim aspektima pronalaska, doziranje je jedna administracija na dan.

[0123] Dok je moguće da se jedinjenje predmetnog pronalaska administrira zasebno, poželjno je da se jedinjenje administrira kao farmaceutska formulacija (kompozicija).

DEFINICIJE

[0124] Ukoliko nije drugačije naznačeno, pretpostavlja se da bilo koji heteroatom sa nepopunjenim valentnim nivoima ima dovoljno atoma vodonika da se popune valentni nivoi.

[0125] Kroz specifikaciju i pridodate patentne zahteve, data hemijska formula ili naziv će obuhvatiti sve stereo i optičke izomere i njihove racemate gde takvi izomeri postoje. Ukoliko nije drugačije naznačeno, svi hiralni (enantiomerni i dijastereomerni) i racemski oblici su u okviru obima pronalaska. Mnogi geometrijski izomeri C=C dvostrukih veza, C=N dvostrukih veza, prstenastih sistema, i slično mogu takođe biti prisutni u jedinjenjima, i svi tako stabilni izomeri su razmatrani u predmetnom pronalasku. Cis- i trans- (ili E- i Z-) geometrijski izomeri jedinjenja predmetnog pronalaska su opisani i mogu biti izolovani kao smeša izomera ili kao odvojeni izomerni oblici. Predmetna jedinjenja mogu biti izolovana u optički aktivnim ili racemskim oblicima. Optički aktivni oblici mogu biti pripremljeni razdvajanjem racemskih oblika ili sintezom iz optički aktivnih polaznih materijala. Svi procesi koji su primenjeni za pripremanje jedinjenja predmetnog pronalaska i intermedijeri koji su napravljeni u njima se smatraju delom predmetnog pronalaska. Kada su enantiomerni ili dijastereomerni proizvodi pripremljeni, oni mogu biti razdvojeni pomoću konvencionalnih metoda, na primer, pomoću hromatografije ili frakcione kristalizacije. Zavisno od uslova procesa krajnji proizvodi predmetnog pronalaska se dobijaju bilo u slobodnom (neutralnom) ili obliku soli. I slobodan oblik i soli ovih krajnjih proizvoda su u okviru obima pronalaska. Ukoliko je poželjno, jedan oblik jedinjenja može biti konvertovan u drugi oblik. Slobodna baza ili kiselina može biti konvertovana u so; so može biti konvertovana u slobodno jedinjenje ili drugu so; smeša izomernih jedinjenja predmetnog pronalaska može biti razdvojena u pojedinačne izomere. Jedinjenja predmetnog pronalaska, slobodni oblik i njihove soli, mogu postojati u više tautomernih oblika, u kojima su atomi vodonika premešteni na druge delove molekula i hemijske veze između atoma molekula su posledično preuređene. Treba razumeti da su svi tautomerni oblici, u meri u kojoj mogu postojati, uključeni u pronalazak.

[0126] Kada je supstituent naznačen kao "po izboru supstituisan", supstituenti su odabrani od, na primer, supstituenata kao što su alkil, cikloalkil, aril, heterociklo, halo, hidroksi, alkoksi, okso, alkanoil, ariloksi, alkanoiloksi, amino, alkilamino, arilamino, arilalkilamino, disupstituisani amini u kojima su 2 amino supstituenta odabrana od alkil, aril ili arilalkil; alkanoilamino, aroilamino, aralkanoilamino, supstituisani alkanoilamino, supstituisani arilamino, supstituisani aralkanoilamino, tiol, alkiltio, ariltio, arilalkiltio, alkiltiono, ariltiono, arilalkiltiono, alkilsulfonil, arilsulfonil, arilalkilsulfonil, sulfonamido, npr. -SO2NH2, supstituisani sulfonamido, nitro, cijano, karboksi, karbamil, npr. -CONH2, supstituisani karbamil npr. -CONHalkil,-CONHaril, -CONHarilalkil ili slučajevi kada su dva supstituenta na azotu odabrana od alkil, aril ili arilalkil; alkoksikarbonil, aril, supstituisani aril, guanidino, heterociklil, npr., indolil, imidazolil, furil, tienil, tiazolil, pirolidil, piridil, pirimidil, pirolidinil, piperidinil, morfolinil, piperazinil, homopiperazinil i slično, i supstituisani heterociklil, ukoliko nije drugačije definisano.

[0127] Radi jasnoće i u skladu sa standardnom konvencijom u oblasti, simbol

je primenjen u formulama i tabelama da prikaže vezu koja je mesto vezivanja grupe ili supstituenta za središte/jezgro strukture.

[0128] Dodatno, radi jasnoće, gde supstituent ima crticu (-) koja nije između dva slova ili simbola; ovo se primenjuje da se naznači mesto vezivanja za supstituent. Na primer, -CONH2je povezan preko atoma ugljenika.

[0129] Dodatno, radi jasnoće, kada nije prikazan supstituent na kraju pune linije, ovo ukazuje da je tamo metil (CH3) grupa koja je povezana za vezu.

[0130] Kao što je ovde primenjeno, termin "alkil" ili "alkilen" treba da uključi i razgranate i ravno-lančane zasićene alifatične ugljovodonične grupe koje imaju naznačen broj atoma ugljenika. Na primer, "C1-C6alkil" označava alkil koji ima 1 do 6 atoma ugljenika. Alkil grupe uzete kao primer uključuju, ali nisu na njih ograničene, metil (Me), etil (Et), propil (npr., n-propil i izopropil), butil (npr., n-butil, izobutil, t-butil), i pentil (npr., n-pentil, izopentil, neopentil).

[0131] Termin "alkenil" označava ravno- ili razgranato-lančani ugljovodonični radikal koji sadrži jednu ili više dvostrukih veza i tipično od 2 do 20 atoma ugljenika u dužini. Na primer, "C2-C8alkenil" sadrži od dva do osam atoma ugljenika. Alkenil grupe uključuju, ali nisu na njih ograničene, na primer, etenil, propenil, butenil, 1-metil-2-buten-1-il, heptenil, oktenil i slično.

[0132] Termin "alkinil" označava ravno- ili razgranato-lančani ugljovodonični radikal koji sadrži jednu ili više trostrukih veza i tipično od 2 do 20 atoma ugljenika u dužini. Na primer, "C2-C8alkenil" sadrži od dva do osam atoma ugljenika. Reprezentativne alkinil grupe uključuju, ali nisu na njih ograničene, na primer, etinil, 1-propinil, 1-butinil, heptinil, oktinil i slično.

[0133] Termin "alkoksi" ili "alkiloksi" se odnosi na -O-alkil grupu. "C1-6alkoksi" (ili alkiloksi), treba da uključi C1, C2, C3, C4, C5, i C6alkoksi grupe. Alkoksi grupe uzete kao primer uključuju, ali nisu na njih ograničene, metoksi, etoksi, propoksi (npr., n-propoksi i izopropoksi), i t-butoksi. Slično, "alkiltio" ili "tioalkoksi" predstavlja alkil grupu kao što je iznad definisano sa naznačenim brojem atoma ugljenika povezanu preko sumpornog mosta; na primer metil-S- i etil-S-.

[0134] Termin "aril", bilo sam ili kao deo veće grupe kao što su "aralkil", "aralkoksi", ili ariloksialkil", se odnosi na monociklične, biciklične i triciklične prstenaste sisteme koji imaju ukupno pet do 15 članova prstena, pri čemu je najmanje jedan prsten u sistemu aromatičan i pri čemu svaki prsten u sistemu sadrži tri do sedam članova prstena. U određenim tehničkim rešenjima pronalaska, "aril" se odnosi na aromatični prstenasti sistem koji uključuje, ali nije ograničen na fenil, bifenil, indanil, 1-naftil, 2-naftil i terahidronaftil. Termin "aralkil" ili "arilalkil" se odnosi na alkil ostatak koji je povezan za aril prsten. Neograničavajući primeri uključuju benzil, fenetil i slično. Fuzionisani arili mogu biti povezani sa drugom grupom bilo na pogodnoj poziciji na cikloalkil prstenu ili aromatičnom prstenu. Na primer:

[0135] Strelice koje su nacrtane da su usmerene od prstenastog sistema ukazuje da veza može biti povezana za bilo koji od pogodnih atoma prstena.

[0136] Termin "cikloalkil" se odnosi na ciklizovane alkil grupe. C3-6cikloalkil treba da uključi C3, C4, C5, i C6cikloalkil grupe. Cikloalkil grupe koje su uzete kao primer uključuju, ali nisu na njih ograničene, ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, i norbornil. Razgranate cikloalkil grupe kao što su 1-metilciklopropil i 2-metilciklopropil su uključene u definiciju "cikloalkil". Termin "cikloalkenil" se odnosi na ciklizovane alkenil grupe. C4-6cikloalkenil treba da uključi C4, C5, i C6cikloalkenil grupe. Cikloalkenil grupe koje su uzete kao primer uključuju, ali nisu na njih ograničene, ciklobutenil, ciklopentenil, i cikloheksenil.

[0137] Termin "cikloalkilalkil"se odnosi na cikloalkil ili supstituisani cikloalkil vezan za alkil grupu koja je povezana za karbazolsko jezgro jedinjenja.

[0138] "Halo" ili "halogen" uključuje fluoro, hloro, bromo, i jodo. "Haloalkil" treba da uključi i razgranate i ravnolančane zasićene alifatične ugljovodonične grupe koje imaju naznačen broj atoma ugljenika, supstituisanih sa 1 ili više halogena. Primeri haloalkila uključuju, ali nisu na njih ograničeni, fluorometil, difluorometil, trifluorometil, trihlorometil, pentafluoroetil, pentahloroetil, 2,2,2-trifluoroetil, heptafluoropropil, i heptahloropropil. Primeri haloalkila takođe uključuju "fluoroalkil" koji treba da uključi i razgranate i ravnolančane zasićene alifatične ugljovodonične grupe koje imaju naznačen broj atoma ugljenika, supstituisanih sa 1 ili više atoma fluora.

[0139] "Haloalkoksi" ili "haloalkiloksi" predstavlja haloalkil grupu kao što je iznad definisano sa naznačenim brojem atoma ugljenika koja je povezana preko kiseonikovog mosta. Na primer, "C1-6haloalkoksi", treba da uključi C1, C2, C3, C4, C5, i C6haloalkoksi grupe. Primeri haloalkoksi uključuju, ali nisu na njih ograničeni, trifluorometoksi, 2,2,2-trifluoroetoksi, i pentafluorotoksi. Slično, "haloalkiltio" ili "tiohaloalkoksi" predstavlja haloalkil grupu kao što je definisano iznad sa naznačenim brojem atoma ugljenika koja je povezana preko sumpornog mosta; na primer trifluorometil-S-, i pentafluoroetil-S-.

[0140] Termin "benzil," kao što je ovde primenjeno, se odnosi na metil grupu na kojoj je jedan od atoma vodonika zamenje fenil grupom.

[0141] Kao što je ovde primenjeno, termin "heterociklus," "heterociklil," ili "heterociklična grupa" treba da označi stabilan 3-, 4-, 5-, 6-, ili 7-očlani monociklični ili biciklični ili 7-, 8-, 9-, 10-, 11-, 12-, 13-, ili 14-očlani policiklični heterociklični prsten koji je zasićen, delimično nezasićen, ili potpuno nezasićen, i koji sadrži atome ugljenika i 1, 2, 3 ili 4 heteroatoma nezavisno odabrana iz grupe koja se sastoji od N, O i S; i koji uključuje bilo koju policikličnu grupu u kojoj je bilo koji od iznad-definisanih heterocikličnih prstenova fuzionisan za benzenov prsten. Heteroatomi azota i sumpora mogu po izboru biti oksidovani (tj., N→O i S(O)p, pri čemu p je 0, 1 ili 2). Atom azota može biti supstituisan ili nesupstituisan (tj., N ili NR pri čemu R je H ili drugi supstituent, ako je definisano). Heterociklični prsten može biti povezan sa svojom bočnom grupom na bilo kom heteroatomu ili ugljenikovom atomu što rezultuje stabilnom strukturom. Heterociklični prstenovi koji su opisani ovde mogu biti supstituisani na ugljenikovom ili azotovom atomu ukoliko je dobijeno jedinjenje stabilno. Azot u heterociklusu može po izboru biti kvaternizovan. Poželjno je da kada ukupan broj S i O atoma u heterociklusu prelazi 1, tada ovi heteroatomi nisu susedni jedan drugom. Poželjno je da ukupan broj S i O atoma u heterociklusu nije veći od 1. Kada se termin "heterociklus" primenjuje, on treba da uključi heteroaril.

[0142] Primeri heterociklusa uključuju, ali nisu na njih ograničeni, akridinil, azetidinil, azocinil, benzimidazolil, benzofuranil, benzotiofuranil, benzotiofenil, benzoksazolil, benzoksazolinil, benztiazolil, benztriazolil, benztetrazolil, benzizoksazolil, benzizotiazolil, benzimidazolinil, karbazolil, 4aH-karbazolil, karbolinil, hromanil, hromenil, cinolinil, dekahidrohinolinil, 2H,6H-1,5,2-ditiazinil, dihidrofuro[2,3-b]tetrahidrofuran, furanil, furazanil, imidazolidinil, imidazolinil, imidazolil, 1H-indazolil, imidazolopiridinil, indolnil, indolinil, indolizinil, indolil, 3H-indolil, izatinoil, izobenzofuranil, izohromanil, izoindazolil, izoindolinil, izoindolil, izohinolinil, izotiazolil, izotiazolopiridinil, izoksazolil, izoksazolopiridinil, metilendioksifenil, morfolinil, naftiridinil, oktahidroizohinolinil, oksadiazolil, 1,2,3-oksadiazolil, 1,2,4-oksadiazolil, 1,2,5-oksadiazolil, 1,3,4-oksadiazolil, oksazolidinil, oksazolil, oksazolopiridinil, oksazolidinilperimidinil, oksindolil, pirimidinil, fenantridinil, fenantrolinil, fenazinil, fenotiazinil, fenoksatiinil, fenoksazinil, ftalazinil, piperazinil, piperidinil, piperidonil, 4-piperidonil, piperonil, pteridinil, purinil, piranil, pirazinil, pirazolidinil, pirazolinil, pirazolopiridinil, pirazolil, piridazinil, piridooksazolil, piridoimidazolil, piridotiazolil, piridinil, pirimidinil, pirolidinil, pirolinil, 2-pirolidonil, 2H-pirolil, pirolil, hinazolinil, hinolinil, 4H-hinolizinil, hinoksalinil, hinuklidinil, tetrazolil, tetrahidrofuranil, tetrahidroizohinolinil, tetrahidrohinolinil, 6H-1,2,5-tiadiazinil, 1,2,3-tiadiazolil, 1,2,4-tiadiazolil, 1,2,5-tiadiazolil, 1,3,4-tiadiazolil, tiantrenil, tiazolil, tienil, tiazolopiridinil, tienotiazolil, tienooksazolil, tienoimidazolil, tiofenil, triazinil, 1,2,3-triazolil, 1,2,4-triazolil, 1,2,5-triazolil, 1,3,4-triazolil, i ksantenil. Takođe uključeni su fuzionisana prstenasta i spiro jedinjenja koja sadrže, na primer, iznad pomenute heterocikluse.

[0143] Kao što je ovde primenjeno, termin "biciklični heterociklus" ili "biciklična heterociklična grupa" treba da označi stabilni 9- ili 10-očlani heterociklični prstenasti sistem koji sadrži dva fuzionisana prstena i sastoji se od atoma ugljenika i 1, 2, 3, ili 4 heteroatoma nezavisno odabrana iz grupe koja se sastoji od N, O i S. Od dva fuzionisana prstena, jedan prsten je 5- ili 6-očlani monociklični aromatični prsten koji sadrži 5-očlani heteroaril prsten, 6-očlani heteroaril prsten ili benzo prsten, svaki fuzionisan za drugi prsten. Drugi prsten je 5-ili 6-očlani monociklični prsten koji je zasićen, delimično nezasićen, ili nezasićen, i sadrži 5-očlani heterociklus, 6-očlani heterociklus ili karbociklus (pod uslovom da prvi prsten nije benzo kada je drugi prsten karbociklus).

[0144] Biciklična heterociklična grupa može biti povezana za svoju bočnu grupu na bilo kom heteroatomu ili atomu ugljenika što daje stabilnu strukturu. Biciklična heterociklična grupa koja je ovde opisana može biti supstituisana na atomu ugljenika ili azota ukoliko je

4

rezultujuće jedinjenje stabilno. Poželjno je da kada ukupni broj S i O atoma u heterociklucu prelazi 1, tada ovi heteroatomi nisu susedni jedan drugom. Poželjno je da ukupni broj S i O atoma u heterociklusu nije veći od 1.

[0145] Primeri biciklične heterociklične grupe su, ali nisu ograničeni na, hinolinil, izohinolinil, ftalazinil, hinazolinil, indolil, izoindolil, indolinil, 1H-indazolil, benzimidazolil, 1,2,3,4-tetrahidrohinolinil, 1,2,3,4-tetrahidroizohinolinil, 5,6,7,8-tetrahidro-hinolinil, 2,3-dihidro-benzofuranil, hromanil, 1,2,3,4-tetrahidro-hinoksalinil i 1,2,3,4-tetrahidro-hinazolinil.

[0146] Kao što je ovde primenjeno, termin "aromatična heterociklična grupa" ili "heteroaril" treba da označi stabilne monociklične i policiklični aromatične ugljovodonike koji uključuju najmanje jedan heteroatomski član prstena kao što su sumpor, kiseonik, ili azot. Heteroaril grupe uključuju, bez ograničenja, piridil, pirimidinil, pirazinil, piridazinil, triazinil, furil, hinolil, izohinolil, tienil, imidazolil, tiazolil, indolil, piroil, oksazolil, benzofuril, benzotienil, benztiazolil, izoksazolil, pirazolil, triazolil, tetrazolil, indazolil, 1,2,4-tiadiazolil, izotiazolil, purinil, karbazolil, benzimidazolil, indolinil, benzodioksolanil i benzodioksan. Heteroaril grupe su supstituisane ili nesupstituisane. Atom azota je supstituisan ili nesupstituisan (tj., N ili NR pri čemu R je H ili drugi supstituent, ukoliko je definisano). Heteroatomi azota i sumpora mogu po izboru biti oksidovani (tj., N→O i S(O)p, pri čemu p je 0, 1 ili 2).

[0147] Premošćeni prstenovi su takođe uključeni u definiciju heterociklusa. Premošćeni prsten se javlja kada jedan ili više, poželjno jedan do tri, atoma (tj., C, O, N, ili S) povezuju dva nesusedna atoma ugljenika ili azota. Primeri premošćenih prstenova uključuju, ali nisu na njih ograničeni, jedan atom ugljenika, dva atoma ugljenika, jedan atom azota, dva atoma azota, i ugljenik-azot grupu. Zabeleženo je da most uvek konvertuje monociklični prsten u triciklični prsten. Kada je prsten premošćen, supstituenti vezani za prsten mogu takođe biti prisutni na mostu.

[0148] Termin "heterociklilalkil"se odnosi na heterociklil ili supstituisan heterociklil koji je vezan za alkil grupu koja je povezana za karbazolno jezgro jedinjenja.

[0149] Termin "kontra jon" se primenjuje da predstavi negativno naelektrisane vrste kao što su hlorid, bromid, hidroksid, acetat, i sulfat ili pozitivno naelektrisane vrste kao što su natrijum (Na+), kalijum (K+), amonijum (RnNHm+ gde n=0-4 i m=0-4) i slično.

[0150] Termin "elektron privlačna grupa" (electron withdrawing group - EWG) se odnosi na supstituent koji polarizuje vezu, povlačeći elektronsku gustinu prema sebi i od drugih vezanih atoma. Primeri EWG uključuju, ali nisu na njih ograničeni, CF3, CF2CF3, CN, halogen, haloalkil, NO2, sulfon, sulfoksid, estar, sulfonamid, karboksamid, alkoksi, alkoksietar, alkenil, alkinil, OH, C(O)alkil, CO2H, fenil, heteroaril, -O-fenil, i -O-heteroaril. Poželjni primeri EWG-a uključuju, ali nisu na njih ograničeni, CF3, CF2CF3, CN, halogen, SO2(C1-4alkil), CONH(C1-4alkil), CON(C1-4alkil)2, i heteroaril. Poželjniji primeri EWG uključuju, ali nisu na njih ograničeni, CF3i CN.

[0151] Kao što je ovde primenjeno, termin "amin zaštitna grupa" označava bilo koju grupu koja je poznata u oblasti organske sinteze za zaštitu amin grupa koja je stabilna na estar redukujući agens, disupstituisani hidrazin, R4-M i R7-M, nukleofil, hidrazin redukujući agens, aktivator, jaku bazu, zaklonjenu aminsku bazu i agens za ciklizaciju. Takve amin zaštitne grupe koje odgovaraju ovim kriterijumima uključuju one navedene u Wuts, P. G. M. i Greene, T.W. Protecting Groups in Organic Synthesis, 4. izdanje, Wiley (2007) i The Peptides: Analysis, Synthesis, Biology, tom 3, Academic Press, Njujork (1981). Primeri amin zaštitnih grupa uključuju, ali nisu na njih ograničeni, sledeće: (1) acil tipove kao što su formil, trifluoroacetil, ftalil, i p-toluensulfonil; (2) aromatične karbamat tipove kao što su benziloksikarbonil (Cbz) i supstituisani benziloksikarbonili, 1-(p-bifenil)-1-metiletoksikarbonil, i 9-fluorenilmetiloksikarbonil (Fmoc); (3) alifatične karbamat tipove kao što su terc-butiloksikarbonil (Boc), etoksikarbonil, diizopropilmetoksikarbonil, i aliloksikarbonil; (4) ciklične alkil karbamat tipove kao što su ciklopentiloksikarbonil i adamantiloksikarbonil; (5) alkil tipove kao što su trifenilmetil i benzil; (6) trialkilsilan kao što je trimetilsilan; (7) tipove koji sadrže tiol kao što su feniltiokarbonil i ditiasukcinoil; i (8) alkil tipove kao što su trifenilmetil, metil, i benzil; i supstituisane alkil tipove kao što su 2,2,2-trihloroetil, 2-feniletil, i t-butil; i trialkilsilan tipove kao što je trimetilsilan.

[0152] Kao što je ovde pomenuto, termin "supstituisan" znači da je najmanje jedan atom vodonika zamenje sa nevodoničnom grupom, pod uslovom da su održane normalne valence i da supstitucija daje stabilno jedinjenje. Dvostruke veze prstena, kao što je ovde primenjeno, su dvostruke veze koje su formirane između dva susedna atoma u prstenu (npr., C=C, C=N, ili N=N).

[0153] U slučajevima gde postoje atomi azota (npr., amini) na jedinjenjima predmetnog pronalaska, ovi mogu biti konvertovani u N-okside tretmanom sa oksidujućim agensom (npr., mCPBA i/ili hidrogen peroksidima) da bi se dobila druga jedinjenja ovog pronalaska. Stoga, smatra se da prikazani i atomi azota za koje se traži zaštita obuhvataju i prikazan azot i njegov N-oksid (N→O) derivat.

[0154] Kada se bilo koja promenljiva pojavljuje više od jednom u bilo kojoj komponenti ili formuli za jedinjenje, njena definicija pri svakom pojavljivanju je nezavisna od njene definicije pri svakom drugom pojavljivanju. Stoga, na primer, ukoliko je grupa prikazana da je supstituisana sa 0-3 R, tada navedena grupa može po izboru biti supstituisana sa do tri R grupe, i pri svakom pojavljivanju R je odabrano nezavisno od definicije za R. Takođe, kombinacije supstituenata i/ili promenljivih su dozvoljene samo ako takve kombinacije daju stabilna jedinjenja.

[0155] Kada je veza sa supstituentom prikazana da se ukršta sa vezom koja povezuje dva atoma u prstenu, tada takav supstituent može biti vezan za bilo koji atom na prstenu. Kada je supstituent naveden bez ukazivanja atoma kojim je takav supstituent vezan za ostatak jedinjenja date formule, tada takav supstituent može biti vezan preko bilo kog atoma u takvom supstituenta. Kombinacije supstituenata i/ili promenljivih su dozvoljene samo ako takve kombinacije daju stabilna jedinjenja.

[0156] Predmetni pronalazak treba da uključi sve izotope atoma koji se pojavljuju u predmetnom jedinjenju. Izotopi uključuju one atome koji imaju isti atomski broj ali različite masene brojeve. Kao uopšteni primer i bez ograničenja, izotopi vodonika uključuju deuterijum i tricijum. Izotopi vodonika mogu biti označeni kao<1>H (vodonik),<2>H (deuterijum) i<3>H (tricijum). Oni su takođe uobičajeno naznačeni kao D za deuterijum i T za tricijum. U prijavi, CD3označava metil grupu pri čemu svi od atoma vodonika su deuterijum. Izotopi ugljenika uključuju<13>C i<14>C. Izotopski-obeležena jedinjenja pronalaska mogu uopšteno biti pripremljena pomoću konvencionalnih tehnika koje su poznate obučenim poznavaocima oblasti ili pomoću procesa koji su analogni onima koji su ovde opisani, primenom pogodnog izotopski-obeleženog reagensa umesto neobeleženog reagensa koji se inače upotrebljava.

[0157] Kao što je ovde primenjeno, "farmaceutski prihvatljive soli" se odnose na derivate jedinjenja koja su stavljena na uvid javnosti pri čemu je osnovno jedinjenje modifikovano pravljenjem kisele ili bazne soli tog jedinjenja. Primeri farmaceutski prihvatljivih soli uključuju, ali nisu na njih ograničeni, soli mineralnih ili organskih kiselina sa baznim grupama kao što su amini; i alkalne ili organske soli kiselih grupa kao što su karboksilne kiseline. Farmaceutski prihvatljive soli uključuju konvencionalne netoksične soli ili kvaternerne amonijum soli formirane od osnovnog jedinjenja, na primer, od netoksičnih neorganskih ili organskih kiselina. Na primer, takve konvencionalne netoksične soli uključuju one izvedene iz neorganskih kiselina kao što su hlorovodonična, bromovodonična, sumporna, sulfamska, fosforna, i azotna; i soli pripremljene od organskih kiselina kao što su sirćetna,

4

propionska, sukcinična, glikolna, stearinska, mlečna, jabučna, vinska, limunska, askorbinska, pamoinska, maleinska, hidroksimaleinska, fenilsirćetna, glutaminska, benzoeva, salicilna, sulfanilna, 2-acetoksibenzoeva, fumarna, toluensulfonska, metansulfonska, etan disulfonska, oksalna, i izetionska, i slično.

[0158] Farmaceutski prihvatljive soli predmetnog pronalaska mogu biti sintetisane iz osnovnog jedinjenja koje sadrži baznu ili kiselu grupu pomoću konvencionalnih hemijskih metoda. Uopšteno, takve soli mogu biti pripremljene reagovanjem slobodnih kiselih ili baznih oblika ovih jedinjenja sa stehiometrijskom količinom pogodne baze ili kiseline u vodi ili u organskom rastvaraču, ili u smeši ova dva; uopšteno, nevodeni medijum kao etar, etil acetat, etanol, izopropanol, ili acetonitril su poželjni. Liste pogodnih soli su pronađene u Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 22. izdanje, Allen, L. V. Jr., Ed.; Pharmaceutical Press, London, UK (2012).

[0159] Dodatno, jedinjenja sa formulom I mogu imati prolek oblike. Bilo koje jedinjenje koje će biti konvertovano in vivo da bi se obezbedio bioaktivni agens (tj., jedinjenje sa formulom I) je prolek. Razni oblici prolekova su dobro poznati u oblasti. Za primere ovakvih prolek derivata, videti:

a) Bundgaard, H., ed., Design of Prodrugs, Elsevier (1985), i Widder, K. et al., eds., Methods in Enzymology, 112:309-396, Academic Press (1985);

b) Bundgaard, H., poglavlje 5, "Design and Application of Prodrugs," A Textbook of Drug Design and Development, str. 113-191, Krosgaard-Larsen, P. et al., eds., Harwood Academic Publishers (1991);

c) Bundgaard, H., Adv. Drug Deliv. Rev., 8:1-38 (1992);

d) Bundgaard, H. et al., J. Pharm. Sci., 77:285 (1988);

e) Kakeya, N. et al., Chem. Pharm. Bull., 32:692 (1984); i

f) Rautio, J (Editor). Prodrugs and Targeted Delivery (Methods and Principles in Medicinal Chemistry), tom 47, Wiley-VCH, 2011.

[0160] Jedinjenja koja sadrže karboksi grupu mogu da formiraju fiziološki hidrolizujuće estre koji služe kao prolekovi tako što se hidrolizuju u telu da se dobiju jedinjenja sa formulom I sama po sebi. Takvi prolekovi se poželjno administriraju oralno jer se hidroliza u mnogim slučajevima javlja uglavnom pod uticajem digestivnih enzima. Parenteralna administracija može biti primenjena gde je estar sam po sebi aktivan, ili u onim slučajevima gde se hidroliza javlja u krvi. Primeri fiziološki hidrolizujućih estara jedinjenja sa formulom I uključuju C1-6alkil, C1-6alkilbenzil, 4-metoksibenzil, indanil, ftalil, metoksimetil, C1-6alkanoiloksi-C1-6alkil (npr., acetoksimetil, pivaloiloksimetil ili propioniloksimetil), C1-6alkoksikarboniloksi-C1-

6alkil (npr., metoksikarbonil-oksimetil ili etoksikarboniloksimetil, gliciloksimetil, fenilgliciloksimetil, (5-metil-2-okso-1,3-dioksolen-4-il)-metil), i druge dobro poznate fiziološki hidrolizujuće estre koji se primenjuju, na primer, u oblastima penicilina i cefalosporina. Takvi estri mogu biti pripremljeni pomoću konvencionalnih tehnika poznatih u oblasti. Priprema prolekova je dobro poznata u oblasti i opisana je u, na primer, King, F.D., ed., Medicinal Chemistry: Principles and Practice, The Royal Society of Chemistry, Kembridž, UK (2. izdanje, reprodukovano, 2006); Testa, B. et al., Hidrolysis in Drug and Prodrug Metabolism. Chemistry, Biochemistry and Enzymology, VCHA and Wiley-VCH, Cirih, Švajcarska (2003); Wermuth, C.G., ed., The Practice of Medicinal Chemistry, 3. izdanje, Academic Press, San Dijego, KA (2008).

[0161] Termin "solvat" označava fizičku povezanost jedinjenja ovog pronalaska sa jednim ili više molekula rastvarača, bilo organskog ili neorganskog. Ova fizička povezanost uključuje vodonično vezivanje. U određenim slučajevima solvat će biti sposoban za izolaciju, na primer kada je jedan ili više molekula rastvarača ugrađeno u kristalnu rešetku kristalne čvrste supstance. Molekuli rastvarača u solvatu mogu biti prisutni u pravilnom rasporedu i/ili neuređenom rasporedu. Solvat može sadržati bilo stehiometrijsku ili nestehiometrijsku količinu molekula rastvarača. "Solvat" obuhvata i fazu-rastvora i solvate koji se mogu izolovati. Solvati koji su uzeti kao primer uključuju, ali nisu na njih ograničeni, hidrate, etanolate, metanolate, i izopropanolate. Metode solvatacije su uopšteno poznate u oblasti.

[0162] Kao što je ovde primenjeno, termin "pacijent" se odnosi na organizme koji treba da se leče pomoću metoda koje su ovde stavljene na uvid javnosti. Takvi organizmi poželjno uključuju, ali nisu na njih ograničeni, sisare (npr., miševe, majmune, konje, goveda, svinje, pse, mačke, i slično), i najpoželjnije se odnosi na ljude.

[0163] Kao što je ovde primenjeno, termin "efikasna količina" označava količinu leka ili farmaceutskog agensa, tj., jedinjenja pronalaska, koja će izazvati biološki ili medicinski odgovor tkiva, sistema, životinje ili čoveka koji se traži, na primer, od strane istraživača ili kliničara. Pored toga, termin "terapijski efikasna količina" označava bilo koju količinu koja, kada se poredi sa odgovarajućim ispitanikom koji nije primio takvu količinu, dovodi do poboljšanog tretmana, lečenja, sprečavanja, ili ublažavanja bolesti, poremećaja, ili propratnog efekta, ili smanjenja brzine napredovanja bolesti ili poremećaja. Efikasna količina može biti administrirana u jednoj ili više administracija, primena ili doza i ne treba da bude ograničena

4

na posebnu formulaciju ili put administracije. Termin takođe uključuje unutar svog obima količine efikasne za poboljšanje normalne fiziološke funkcije

[0164] Kao što je ovde primenjeno, termin "lečenje" uključuje bilo koji efekat, npr., ublažavanje, smanjenje, modulisanje, poboljšavanje ili uklanjanje, što dovodi do poboljšanja stanja, bolesti, poremećaja, i slično, ili ublažavanja njihovih simptoma.

[0165] Kao što je ovde primenjeno, termin "farmaceutska kompozicija" se odnosi na kombinaciju aktivnog agensa sa nosačem, inertnim ili aktivnim, koja čini kompoziciju posebno pogodnom za dijagnostičku ili terapijsku primenu in vivo ili ex vivo.

[0166] Primeri baza uključuju, ali nisu na njih ograničeni, hidrokside alkalnih metala (npr., natrijuma), zemno-alkalne metale (npr., magnezijum), hidrokside, amonijak, i jedinjenja sa formulom NW4<+>, pri čemu W je C1-4alkil, i slično.

[0167] Za terapijsku primenu, soli jedinjenja predmetnog pronalaska su razmatrane kao da su farmaceutski prihvatljive. Ipak, soli kiselina i baza koje nisu farmaceutski prihvatljive mogu takođe naći primenu, na primer, u pripremi ili prečišćavanju farmaceutski prihvatljivog jedinjenja.

METODE PRIPREME

[0168] Jedinjenja predmetnog pronalaska mogu biti pripremljena na mnogo načina koji su dobro poznati obučenom poznavaocu oblasti organske sinteze. Jedinjenja predmetnog pronalaska mogu biti sintetisana primenom metoda koje su ispod opisane, zajedno sa sintetskim metodama koje su poznate u oblasti sintetske organske hemije, ili njihovim varijacijama kao što razumeju oni koji su obučeni u oblasti. Poželjne metode uključuju, ali nisu na njih ograničene, one koje su ispod opisane.

[0169] Jedinjenja ovog pronalaska mogu biti pripremljena primenom reakcija i tehnika koje su opisane u ovom delu. Reakcije su izvedene u rastvaračima pogodnim za reagense i materijale koji su upotrebljeni i pogodni su za transformacije koje su izvršene. Takođe, u opisu sintetskih metoda koje su ispod definisane, treba shvatiti da svi predloženi reakcioni uslovi, uključujući izbor rastvarača, reakcionu sredini, reakcionu temperaturu, trajanje eksperimenta i procedure obrade, su izabrani da budu standardni uslovi za tu reakciju, što bi trebalo da bude lako prepoznato od strane obučenog poznavaoca oblasti. Obučeni poznavalac oblasti organske sinteze razume da funkcionalnost prisutna na raznim delovima molekula mora biti kompatibilna sa predloženim reagensima i reakcijama. Takve restrikcije za supstituente koji su kompatibilni sa uslovima reakcije će biti lako razumljive obučenom

4

poznavaocu oblasti i alternativne metode moraju onda biti primenjene. Ovo će nekada zahtevati odluku da se modifikuje redosleda koraka sinteze ili da se odabere jedna posebna shema procesa u odnosu na drugu kako bi se dobilo željeno jedinjenje pronalaska. Takođe će biti prepoznato da je druga glavna okolnost u planiranju bilo kog puta sinteze u ovoj oblasti razuman izbor zaštitne grupe koja je primenjena za zaštitu reaktivne funkcionalne grupe prisutne u jedinjenjima koja su opisana u ovom pronalasku. Merodavan prikaz koji opisuje mnoge alternative obučenom stručnjaku je Greene i Wuts (Protective Groups In Organic Synthesis, treće izdanje, Wiley and Sons, 1999).

[0170] Jedinjenja sa formulom (I) mogu biti pripremljena upućivanjem na metode koje su ilustrovane u sledećim Shemama. Kao što je u njima prikazano krajnji proizvod je jedinjenje koje ima istu strukturnu formulu kao Formula (I). Biće razumljivo da bilo koje jedinjenje sa formulom (I) može biti proizvedeno pomoću shema pogodnim odabirom reagenasa sa odgovarajućom supstitucijom. Rastvarači, temperatura, pritisci, i drugi reakcioni uslovi mogu lako biti odabrani od strane obučenog poznavaoca oblasti. Polazni materijali su komercijalno dostupni ili lako pripremljeni od strane obučenog poznavaoca oblasti. Komponente jedinjenja su kao što je ovde definisano ili na drugom mestu u specifikaciji.

Shema 1

[0171] Opšti putevi do jedinjenja koja su opisana u pronalasku su ilustrovani u Shemama 1-13, gde R<1>, R<2>, X, Y, Z i A supstituenti su definisani prethodno u tekstu ili funkcionalna grupa koja može biti konvertovana u željeni finalni supstituent. Supstituent Hal je halid. L je odlazeća grupa kao što je halid ili OH koja može biti lako konvertovana u odlazeću grupu kao što je triflat. Kao što je prikazano u Shemi 1, opšta procedura za pripremanje jedinjenja pronalaska uključuje započinjanje sa supstituisanim aminopiridinom 1. Kuplovanje 1 sa aromatičnim heterociklusom A (2, gde M je pogodan partner za kuplovanje, kao što su

4

boronska kiselina, boronski estar ili stanan) primenom pogodnog katalizatora može dati funkcionalizovane aminopiridine 3. Na primer, 3 može nastati iz reakcije Suzuki kuplovanja između 5-bromo-2-hloropiridin-3-amina i heteroaromatične boronske kiseline primenom Pd(dppf)Cl2kao katalizatora. Naknadno kuplovanje da bi se dobio funkcionalizovan anilin 6 može biti postignuto primenom različitih uslova poznatih u literaturi. Na primer, aminopiridin 3 se može podvrgnuti kuplovanju koje je posredovano bakrom sa pogodnim supstituisanim arenom 4 (gde M je boronska kiselina, boronski estar ili stanan) da bi dao anilin 6. Alternativno, 6 može nastati iz reakcije Buchwald N-arilacije 3 sa aromatičnim halidom 5 (gde Hal je halid). Zatvaranje prstena da bi se stvorio karbolin 7 može biti postignuto primenom Pd katalizatora u prisustvu baze, kao što je natrijum acetat. U finalnom koraku, karbolinski azot može biti supstituisan pod Mitsunobu uslovima primenom trifenilfosfina i diizopropil azodikarboksilata (DIAD) sa alkilirajućim agensom 8 (gde X je OH). Alternativno, funkcionalizovan karbolin 10 može biti stvoren iz reakcije zamene između karbolina 7 i alkilirajućeg agensa 9, gde L je odlazeća grupa kao što su halid, mesilat ili triflat, u prisustvu baze, kao što je kalijum karbonat. U slučajevima gde je 10 racemat, hiralno razdvajanje može obezbediti enantiomerno čiste proizvode. Dalja derivatizacija R<1>može obezbediti dodatna jedinjenja pronalaska. Na primer, kada je R<1>estar, dodatak Grignard-ovog reagensa ili alkil litijuma može stvoriti tercijerne alkohole. Isti R<1>estar može biti umesto toga hidrolizovan primenom, na primer, natrijum hidroksida da bi dao karboksilnu kiselinu (R<1>= CO2H) kao finalni supstituent.

[0172] Alternativna sinteza karbolina 7 i 10 počinje od nitropiridina 11 kao što je prikazano u Shemama 2 do 4. Suzuki reakcija između, na primer, 2,5-dibromo-3-nitropiridina i odgovarajuće supstituisanog arena (12, gde M je pogodan partner za kuplovanje, kao što su boronska kiselina ili boronski estar) može dati funkcionalizovan piridin 13. Reduktivna ciklizacija koja je posredovana fosfin reagensom, kao što je 1,2-bis(difenilfosfino)etan (dppe), može obezbediti karbolin 14. Spajanje 14 sa aromatičnim heterociklusom A (2, gde

4

M je pogodan partner za kuplovanje, kao što su boronska kiselina, boronski estar ili stanan) primenom pogodnog katalizatora potom stvara karbolin 7 kao što je prikazano u Shemi 3.

[0173] Alternativno, karbolinski azot intermedijera 14 može biti prvi supstituisan pod Mitsunobu uslovima sa alkilirajućim agensom 8 (gde X je OH) ili sa alkilirajućim agensom 9, gde L je odlazeća grupa kao što je halid, mesilat ili triflat, u prisustvu baze, kao što je kalijum karbonat kao što je prethodno opisano u Shemi 1 da bi se dobio intermedijer 15. Potom kuplovanje 15 sa aromatičnim heterociklusom A (2, gde M je pogodan partner za kuplovanje, kao što je boronska kiselina, boronski estar ili stanan) primenom pogodnog katalizatora potom stvara finalni karbolin 10 kao što je prikazano u Shemi 4.

[0174] Alternativna sinteza karbolina 10 može biti postignuta kao što je navedeno u Shemi 5. Odlazeća grupa, L, od 15 (pripremljenog kao u Shemi 4) može biti konvertovana u pogodan partner za kuplovanje, M (poželjno boronski estar ili boronsku kiselinu) dejstvom paladijum katalizatora, dajući 16. Spajanje 16 sa aromatičnim heterociklusom A (17, gde L je pogodna odlazeća grupa, kao što su halogen ili triflat) primenom pogodnog katalizatora može dati karboline 10.

[0175] Derivati hidroksimetil pirazola kao što su 20 mogu biti postignuti u skladu sa Shemom 6. Intermedijer 16 (gde je M pogodan partner za kuplovanje kao što su boronska kiselina ili

4

boronski estar; pripremljni kao u Shemi 5) može biti kuplovan za odgovarajući zaštićeni triazol 18 dejstvom pogodnog katalizatora. Triazol 18 je dostupan u jednom koraku iz reakcije cikloadicije-posredovane bakrom, (azidometil)trimetilsilana sa zaštićenim propargil alkoholom. Sa intermedijera 19 može potom biti uklonjena zaštita primenom različitih uslova. Na primer, kad je PG terc-butildimetilsilil, tretiranje sa tetrabutilamonijum fluoridom može dati finalno jedinjenje 20. Dalja derivatizacija hidroksilne grupe (na primer: alkilacija, konverzija u odlazeću grupu i premeštanje, oksidacija u bilo aldehid bilo karboksilnu kiselinu i naknadna obrada) može obezbediti dodatna jedinjenja pronalaska primenom metoda koje će očigledne poznavaocu oblasti.

[0176] Alternativno, intermedijer 15 (pripremlje kao u Shemi 4) može biti direktno kuplovan sa pogodnim aromatičnim heterociklusom, 21, putem paladijumom posredovane C-H aktivacije da bi se dobilo jedinjenje 10. Ovo je ilustrovano u Shemi 7.

[0177] Alternativno, aromatični heterociklus 21 može biti deprotonovan sa jakom bazom kao što je n-BuLi i podvrgnut transmetalaciji u cink, kalaj ili bor da bi se dobila jedinjenja 2.

Jedinjenja 2 mogu potom biti kuplovana u Negishi, Stille, ili Suzuki kuplovanju za intermedijer 15 (pripremlje kao u Shemi 4) dejstvom pogodnog paladijum katalizatora da bi se dobila jedinjenja 10. Ovo je ilustrovano u Shemi 8.

[0178] Alternativna sinteza karbolina 14 može biti postignuta kao što je prikazano u Shemi 9. Anilin 22 može biti kuplovan za piridin 23, gde L i L' su dve odlazeće grupe kao što su halid ili triflat, primenom reakcije Buchwald N-arilacije da bi se dobio intermedijer 24. Na primer, 24 može nastati iz reakcije Buchwald N-arilacije između 3,5-dibromopiridina i pogodnog anilina. Oksidativno zatvaranje prstena, primenom prikladnog katalizatora kao što je Pd(OAc)2u kiselom medijumu kao što je trifluorosirćetna kiselina, može dati karboline 14.

Ovo je ilustrovano u Shemi 9.

[0179] Piridini 23 (gde L i L' su pogodne odlazeće grupe kao što su halidi ili triflati) mogu takođe biti kuplovani za aromatične heterocikluse 2 (gde M je pogodan partner za kuplovanje kao što su boronski estar, boronska kiselina, ili stanan) ili 21 pomoću metoda koje su analogne onima koje su ilustrovane u Shemama 1, 3, 4, 7, i 8. Piridini 25 mogu biti kuplovani za aniline 22, primenom reakcije Buchwald N-arilacije da bi dali intermedijer 26.

Oksidativno zatvaranje prstena, primenom prikladnog katalizatora kao što je Pd(OAc)2u kiselom medijumu kao što je trifluorosirćetna kiselina, može dati karboline 7. Ovo je ilustrovano u Shemi 10.

1

[0180] Alkoksi-supstituisani triazoli 32 mogu biti pripremljeni kao što je ilustrovano u Shemi 11. Aldehid 27 može biti konvertovan u acetal 29 tretiranjem sa alkoholom 28 (gde Alk je C1-C6alkil ili C3-C6cikloalkil po izboru supstituisan sa deuterijumom) u prisustvu kiseline ili dehidratacionog agensa kao što je CaCl2. Acetal 29 može biti konvertovan u alkoksisupstituisane alkine 30 tretiranjem sa jakom bazom kao što su litijum dietilamid ili natrijum amid. Jedinjenja 30 mogu biti konvertovana u triazole 32 preko bakrom-katalizovane 3+2 reakcije cikloadicije sa azidom 31. Triazoli 32 mogu biti direktno kuplovani za karboline kao što je ilustrovano u Shemi 7. U većini slučajeva, navedeno kuplovanje dovodi do gubitka trimetilsilil grupe. U slučajevima gde trimetilsilil grupa nije izgubljena, ona može biti uklonjena tretiranjem sa tetrabutilamonijum fluoridom.

[0181] Alkil-supstituisani triazoli 39 mogu biti pripremljeni kao što je ilustrovano u Shemi 12. Acetilen 33 može biti alkilovan sa 34 (gde Alk je C1-C6alkil ili C3-C6cikloalkil po izboru supstituisan sa deuterijumom i gde L je prikladna odlazeća grupa kao što su jodid, bromid, hlorid, ili sulfonat) dejstvom jake baze kao što je n-BuLi. Alkin 35 može biti konvertovan u triazole 36 preko bakrom-katalizovane 3+2 reakcije cikloadicije sa 31. Triazoli 36 mogu biti direktno kuplovani za karboline kao što je ilustrovano u Shemi 7. Alternativno, trimetilsilil grupa od 36 može biti uklonjena direktno dejstvom tetrabutil amonijum fluorida da bi se dobio N-metil-triazol 37. Deprotonovanje 37 sa jakom bazom kao što je n-BuLi, što je praćeno reakcijom sa prikladnim elektrofilom 38 (gde L je odlazeća grupa kao što je halid ili

2

alkoksid i M je prikladna grupa za olakšavanje metalom-posredovanih kuplovanja kao što je tributilkalaj ili boronski estar; npr. M-L = Bu3SnCl ili B(OMe)3) može dati triazole 39 koji odmah mogu biti kuplovani kao što je ilustrovano u Shemama 1, 3, 4, 8, i 10.

[0182] Mogu se razlikovati supstituenti triazola kao što je prikazano u Shemi 13. Odlazeća grupa od 34 (gde Alk je C1-C6alkil ili C3-C6cikloalkil po izboru supstituisan sa deuterijumom i gde L je prikladna odlazeća grupa kao što su jodid, bromid, hlorid, ili sulfonat) može biti istisnuta tretmanom sa natrijum azidom da bi se dobilo 40. Alkini 41 ili 42 mogu biti kuplovani za azide 40 da bi se dobili triazoli 43 preko bakrom-katalizovane 3+2 reakcije cikloadicije. Triazoli 43 mogu biti direktno kuplovani za karboline kao što je ilustrovano u Shemi 7. Alternativno, deprotonovanje 43 sa jakom bazom kao što je n-BuLi, praćeno reakcijom sa prikladnim elektrofilom 38 (gde L je odlazeća grupa kao što su halid ili alkoksid i M je prikladna grupa za olakšavanje metalom posredovanih kuplovanja kao što je tributiltin ili boronski estar; npr. M-L = Bu3SnCl ili B(OMe)3) može dati triazole 44 koji mogu lako biti kuplovani kao što je ilustrovano u Shemama 1, 3, 4, 8, i 10.

PRIMERI

[0183] Pronalazak je dalje definisan u sledećim Primerima. Treba razumeti da su Primeri dati samo kao ilustracija. Iz diskusije iznad u tekstu i Primera, obučeni poznavalac oblasti može konstatovati suštinske karakteristike pronalaska, i bez udaljavanja od smisla i njegovog obima, može činiti razne promene i modifikacije da bi prilagodio pronalazak raznim primenama i uslovima. Kao rezultat, pronalazak nije ograničen ilustrativnim primerima koji su navedeni ovde ispod, nego se definiše patentnim zahtevima koji su ovome priloženi.

SKRAĆENICE

4

[0184] Sledeći HPLC uslovi mogu biti primenjeni gde je naznačeno:

Analitička HPLC Metoda 1: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7 µm čestice; Mobilna faza A: voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: Acetonitril 0.05% TFA; Gradijent: 2-98% B tokom 1 min, potom 0.5-min zadržavanje na 98% B; Protok: 0.8 mL/min; Detekcija: UV na 254 nm.

Analitička HPLC Metoda 2: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7 µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Gradijent: 0-100% B tokom 3 min, potom 0.7-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1.11 mL/min; Detekcija: UV na 254 nm.

LC/MS Metoda 1: Kolona: Phenomenex-Luna 2.0 X 30 mm, 3 um čestice; Mobilna faza A: 10/90 metanol:voda, 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90/10 metanol:voda, 0.1% TFA; Temperatura 40 °C; Gradijent 0% -100% B tokom 2 min; Protok 1 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm.

LC/MS Metoda 2: Kolona: Waters Acquity SDS; Mobilna faza A: 100% Voda, 0.1% TFA; Mobilna faza B: 100% Acetonitril, 0.1% TFA; Temperatura 50 °C; Gradijent 2% -98 % B tokom 2.2 min; Protok 0.8 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm.

LC/MS Metoda 3: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0%B, 0-100% B tokom 3 min, potom 0.5-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm.

LC/MS Metoda 4: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 metanol:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 metanol:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0%-100% B tokom 3 min, potom 0.5-min zadržavanje na 100% B; Protok: 0.5 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm.

Preparativna HPLC Metoda 1: Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 30-70% B tokom 20 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min.

Preparativna HPLC Metoda 2: Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 metanol: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 metanol: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 35-75% B tokom 20 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min.

Preparativna HPLC Metoda 3: Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; Gradijent: 15-55% B tokom 20 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min.

Primeri 1 & 2

2-[3-(Dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0185]

Korak 1: 2-Hloro-5-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)piridin-3-amin

[0186] U posudu od 500 mL sa okruglim dnom koja sadrži 5-bromo-2-hloropiridin-3-amin (Matrix, 4.0 g, 19.3 mmol) i (3,5-dimetilizoksazol-4-il)boronsku kiselinu (AOBChem, 3.26 g, 23.1 mmol) u THF-u (150 mL) je dodat trikalijum fosfat (2M aq., 28.9 mL, 57.8 mmol) da bi se dobila žuta suspenzija. Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2(1.58 g, 1.93 mmol) je zatim dodat i N2je u mehurićima uvođen u smešu tokom 4 min. Dobijena reakciona smeša je zagrevana na 80 °C tokom 1 h, koncentrovana i potom razblažena sa 10% LiCl rastvorom i ekstrahovana sa CH2Cl2-om. Organski sloj je koncentrovan i filtriran kroz Celite®. Matični rastvor je prečišćen primenom ISCO silika gel hromatografije (kolona od 220 g, gradijent od 0% do 50% EtOAc/CH2Cl2). Trituracija sa hladnim Et2O-om je dala jedinjenje iz naslova (3.14 g, 73%) kao bledo narandžastu čvrstu supstancu.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.71 (d, J=2.1 Hz, 1H), 6.92 (d, J=2.1 Hz, 1H), 4.20 (br. s., 2H), 2.42 (s, 3H), 2.27 (s, 3H); LCMS (M+H) = 224.1. HPLC RT = 1.39 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Korak 2: Metil 3-((2-hloro-5-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)piridin-3-il)amino)benzoat [0187] U posudu od 250 mL sa okruglim dnom koja sadrži 2-hloro-5-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)piridin-3-amin (2.0 g, 8.9 mmol), (3-(metoksikarbonil)fenil)boronsku kiselinu (Aldrich, 3.22 g, 17.9 mmol), Cu(OAc)2(2.43 g, 13.4 mmol) i 4Å molekularna sita (7.0 g) u prahu, je dodat CHCl3(50 mL) i piridin (1.45 mL, 17.9 mL). Vazduh je zamenjen sa O2, i reakcija je mešana pod O2balonom tokom 6 h. Dodatni (3-(metoksikarbonil)fenil)boronska kiselina (3.22 g, 17.9 mmol), piridin (1.45 mL, 17.9 mmol) i 4Å molekularna sita (1.7 g) su dodati. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom noći. Dodatni (3-(metoksikarbonil)fenil)boronska kiselina (3.22 g, 17.9 mmol), piridin (1.45 mL, 17.9 mmol) i Cu(OAc)2(400 mg) su dodati u reakciju. Nakon mešanja na sobnoj temperaturi tokom 7 h, reakciona smeša je filtrirana kroz Celite® ispirajući sa CHCl3-om. Filtrat je razblažen sa vodom i amonijum hidroksid (18.6 mL, 143 mmol) je dodat. Vodeni sloj je ekstrahovan sa CHCl3-om i kombinovani organski slojevi su oprani sa 10% LiCl-om. Organski sloj je koncentrovan i prečišćen pomoću silika gel hromatografije (Kolona od 220 g, gradijent od 0% do 50%EtOAc/CH2Cl2). Frakcije su koncentrovane u vakuumu dok se ne formira beli talog koji je prikupljen putem filtracije i ispran sa EtOAc-om da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.33 g, 57%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.94 (t, J=1.8 Hz, 1H), 7.85 (d, J=2.1 Hz, 1H), 7.82 (dt, J=7.7, 1.3 Hz, 1H), 7.48 (t, J=7.9 Hz, 1H), 7.40 (d, J=2.1 Hz, 1H), 7.36 (ddd, J=8.0, 2.3, 1.0 Hz, 1H), 6.32 (s, 1H), 3.94 (s, 3H), 2.45 (s, 3H), 2.29 (s, 3H); LCMS (M+H) = 358.2; HPLC RT = 2.70 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Korak 3: Metil 3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat [0188] U bočicu od 40 mL koja sadrži metil 3-((2-hloro-5-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)piridin-3-il)amino)benzoat (515 mg, 1.44 mmol) i natrijum acetat trihidrat (480 mg, 3.52 mmol) u DMA-u (5.0 mL) je dodat bis(trifenilfosfin)paladijum(II) hlorid (81 mg, 0.12 mmol). N2je u mehurićima propušten kroz reakcionu smešu tokom 1 min. Bočica je zatvorena i zagrevana na 180 °C tokom 15-30 min. Reakciona smeša je potom koncentrovana i prečišćena direktno primenom ISCO silika gel hromatografije (Kolona od 40 g, gradijent od 0% do 100% EtOAc/CH2Cl2). Dobijeno narandžasto ulje je rastvoreno u EtOAc-u (7 mL) i mešano na sobnoj temperaturi tokom noći. Dobijen žuti talog je prikupljen putem filtracije i opran sa EtOAc-om. Matični rastvor je koncentrovan i ponovo prečišćen primenom ISCO silika gel hromatografije (Kolona od 40 g, gradijent od 0% do 50% EtOAc/CH2Cl2). Nakon trituracije sa hladnim EtOAc-om, čvrste supstance su kombinovane da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (301 mg, 65%). HPLC RT = 2.01 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Korak 4: Metil 3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0189] U bočicu od 5 mL koja sadrži metil 3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (87 mg, 0.27 mmol) i fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol (104 mg, 0.54 mmol) [Orjales, A. et al. J. Med. Chem. 2003, 46, 5512-5532] u THF-u (2.0 mL) je dodat Ph3P (141 mg, 0.54 mmol) i DIAD (0.11 mL, 0.54 mmol). Dobijena suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi tokom noći i zatim koncentrovana. Ostatak je prečišćen primenom ISCO silika gel hromatografije (Kolona od 40 g, Gradijent od 0% do 50% EtOAc/CH2Cl2) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (139 mg) kao nečista smeša koja je preneta u naredni korak bez dodatnog prečišćavanja. LCMS (M+H) = 496.2; HPLC RT = 3.06 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Korak 5: 2-[3-(Dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0190] Posuda od 250 mL sa okruglim dnom koja sadrži metil 3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (1.58 g, 3.19 mmol) u CH2Cl2-u (50 mL) je ohlađena u ledenom/MeOH kupatilu. MeMgBr, (3M u Et2O-u, 17.0 mL, 51.0 mmol) je dodavan polako tokom 2 min. Dobijena suspenzija je mešana tokom 2.5 h i zatim kvenčovana pažljivo sa zas. NH4Cl-om. Led je dodat u reakcionu smešu praćeno 10% LiCl rastvorom. Vodeni sloj je ekstrahovan sa CH2Cl2-om (2x). Organski sloj je osušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan da se dobije racemski 2-[3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol, koji je razdvojen primenom hiralne prep SFC (Kolona: Chiral OD-H 25 x 3 cm, 5 µm; Mobilna faza: 70/30 CO2/MeOH; Protok: 85 mL/min). Pik koji se brže eluira je koncentrovan na malu zapreminu. Voda je dodata da bi se formirao beli talog koji je prikupljen putem filtracije, ispirajući sa vodom, da bi se dobila bela čvrsta supstanca koja je označena kao Enantiomer A (0.59 g, 36%). Pik koji se sporije eluira je tretiran na identični način i naznačen kao Enantiomer B (0.51 g, 31%). Enantiomer A:<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.40 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.33 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.53 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.46 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.42 (dd, J=8.2, 1.4 Hz, 1H), 7.37 - 7.31 (m, 2H), 7.30 - 7.28 (m, 1H), 5.56 (d, J=10.5 Hz, 1H), 4.06 (d, J=8.9 Hz, 1H), 3.89 - 3.83 (m, 1H), 3.55 (td, J=11.9, 2.1 Hz, 1H), 3.35 (td, J=11.9, 2.1 Hz, 1H), 3.10 (q, J=10.8 Hz, 1H), 2.39 (s, 3H), 2.23 (s, 3H), 2.03 (d, J=14.2 Hz, 1H), 1.89 (s, 1H), 1.74 (s, 6H), 1.68 - 1.59 (m, 1H), 1.46 - 1.36 (m, 1H), 1.12 (d, J=12.2 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 496.4; HPLC RT = 2.46 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min); SFC RT = 5.36 min (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 70/30 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min). Enantiomer B:<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.40 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.33 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.53 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.46 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.42 (dd, J=8.2, 1.4 Hz, 1H), 7.36 - 7.31 (m, 2H), 7.30 - 7.28 (m, 1H), 5.56 (d, J=10.7 Hz, 1H), 4.06 (dd, J=11.7, 2.5 Hz, 1H), 3.86 (dd, J=11.5, 2.8 Hz, 1H), 3.55 (td, J=11.9, 2.1 Hz, 1H), 3.35 (td, J=11.9, 2.0 Hz, 1H), 3.15 - 3.05 (m, 1H), 2.39 (s, 3H), 2.23 (s, 3H), 2.03 (d, J=13.6 Hz, 1H), 1.90 (s, 1H), 1.74 (s, 6H), 1.68 - 1.58 (m, 1H), 1.46 - 1.36 (m, 1H), 1.12 (d, J=12.4 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 496.4; HPLC RT = 2.46 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min); SFC RT = 14.95 min (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 70/30 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min).

Primeri 3-24

[0191] Jedinjenja u Tabeli 1 su pripremljena u skladu sa procedurama koje su opisane za Primer 1:

1

2 HPLC uslovi za Tabelu 1:

Metoda A:

Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA;

Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm.

Metoda B:

Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7 µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C;

Gradijent: 0-100% B tokom 3 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1.11 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm.

Metoda C:

Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza: 80/20 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min; Detekcija UV na 220 nm.

Metoda D:

Kolona: Chiralpak IB, 250 x 4.6 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza: 80/20 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min; Detekcija UV na 220 nm.

Metoda E:

Kolona: Phenomenex Lux Cellulose 2, 250 x 4.6 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza: 75/25 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min; Detekcija UV na 220 nm.

Primeri 25 & 26

[0192]

Korak 1: (4-Fluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol

[0193] U bočicu od 40 mL koja sadrži magnezijum (0.39 g, 16.1 mmol) u THF-u (15 mL) je polako dodat 4-bromotetrahidro-2H-piran (PharmaBlock, 1.8 mL, 16.1 mmol) hladeći u vodenom kupatilu ako je potrebno. Dobijena reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1.5 h i zatim ohlađena u vodenom kupatilu. 4-Fluorobenzaldehid (Aldrich, 1.2 mL, 10.7 mmol) je dodat polako. Dobijena narandžasta reakciona smeša je uklonjena iz vodenog kupatila i kvenčovana sa zas. NH4Cl-om nakon 10 min.10% LiCl rastvor je dodat i smeša je ekstrahovana sa Et2O-om (2x). Organski sloj je osušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan. Ostatak je prečišćen primenom ISCO silika gel hromatografije (Kolona od 80 g, Gradijent od 0% do 50% EtOAc/heksani) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.12 g, 33%) kao bezbojno ulje.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.31 - 7.27 (m, 2H), 7.08 - 7.02 (m, 2H), 4.37 (dd, J=7.7, 2.4 Hz, 1H), 4.06 - 3.99 (m, 1H), 3.94 - 3.87 (m, 1H), 3.37 (td, J=11.9, 2.2 Hz, 1H), 3.29 (td, J=11.8, 2.3 Hz, 1H), 1.94 - 1.87 (m, 2H), 1.81 (tdt, J=11.6, 7.7, 3.8 Hz, 1H), 1.45 (qd, J=12.3, 4.7 Hz, 1H), 1.36 - 1.27 (m, 1H), 1.16 (ddq, J=13.2, 3.9, 2.0 Hz, 1H); LCMS (M+H-H2O) = 193.1; HPLC RT = 1.65 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min). Korak 2: 2-[3-(Dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0194] Prateći procedure analogne onima koje su opisane u Koracima 4 i 5 Primera 1, metil 3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (100 mg, 0.31 mmol) i (4-fluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol (131 mg, 0.62 mmol) su konvertovani u racemski 2-[3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol, koji je razdvojen hiralnom prep SFC da se dobiju Enantiomer A (18 mg, 11%) i Enantiomer B (22 mg, 12%). Enantiomer A:<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.41 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.33 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.50 (d, J=1.5 Hz, 1H), 7.46 - 7.37 (m, 3H), 7.06 - 6.99 (m, 2H), 5.53 (d, J=10.5 Hz, 1H), 4.07 (dd, J=11.7, 2.5 Hz, 1H), 3.87 (dd, J=11.8, 3.0 Hz, 1H), 3.54 (td, J=11.9, 2.1 Hz, 1H), 3.34 (td, J=11.9, 2.1 Hz, 1H), 3.11 - 3.01 (m, 1H), 2.41 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 1.98 (d, J=13.4 Hz, 1H), 1.89 (s, 1H), 1.73 (s, 6H), 1.66 - 1.59 (m, 1H), 1.46 - 1.36 (m, 1H), 1.13 (d, J=13.3 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 514.4; HPLC RT = 2.55 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min); SFC RT = 6.56 min (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 75/25 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min). Enantiomer B:<1>H

4

NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.41 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.33 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.50 (d, J=1.5 Hz, 1H), 7.46 - 7.37 (m, 3H), 7.06 - 6.99 (m, 2H), 5.53 (d, J=10.5 Hz, 1H), 4.07 (dd, J=11.7, 2.5 Hz, 1H), 3.87 (dd, J=11.8, 3.0 Hz, 1H), 3.54 (td, J=11.9, 2.1 Hz, 1H), 3.34 (td, J=11.9, 2.1 Hz, 1H), 3.11 - 3.01 (m, 1H), 2.41 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 1.98 (d, J=13.4 Hz, 1H), 1.89 (s, 1H), 1.73 (s, 6H), 1.66 - 1.59 (m, 1H), 1.46 - 1.36 (m, 1H), 1.13 (d, J=13.3 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 514.4; HPLC RT = 2.55 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min); SFC RT = 8.58 min (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 75/25 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min); [α]D<20>= 89.91, (c = 0.14, CHCl3).

Primeri 27 & 28

2-{5-[(4,4-Difluorocikloheksil)(fenil)metil]-3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0195]

Korak 1: (4,4-Difluorocikloheksil)(fenil)metanon

[0196] U posudu od 50 mL sa okruglim dnom koja sadrži 4,4-difluoro-N-metoksi-N-metilcikloheksankarboksamid (500 mg, 2.41 mmol) [Lehmann-Lintz, T. et al. PCT Int. Appl., 2011, WO2011104334] u THF-u (10 mL) na -78°C je polako dodat fenillitijum (1.8M u dibutil etru, 4.69 mL, 8.45 mmol). Nakon 1 h, reakciona smeša je sipana u led i 1M HCl (10.8 mL, 10.8 mmol) uz mešanje. Smeša je razblažena sa zas. NaCl-om i ekstrahovana sa Et2O-om. Organski sloj je osušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (532 mg, 98%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.98 - 7.89 (m, 2H), 7.64 - 7.55 (m, 1H), 7.54 - 7.44 (m, 2H), 3.46 - 3.27 (m, 1H), 2.36 - 2.11 (m, 2H), 2.09 - 1.73 (m, 6H); HPLC RT = 2.39 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Korak 2: (4,4-Difluorocikloheksil)(fenil)metanol

[0197] U posudu od 100 mL sa okruglim dnom koja sadrži (4,4-difluorocikloheksil)(fenil) metanon (532 mg, 2.37 mmol) u MeOH-u (15 mL) u ledenom vodenom kupatilu je dodavan NaBH4(135 mg, 3.56 mmol) u malim delovima tokom 20 sekundi. Nakon mešanja u ledenom vodenom kupatilu tokom 30 min, reakciona smeša je razblažena sa vodom i koncentrovana. Ostatak je zakišeljen do pH 6 sa IN limunskom kiselinom i ekstrahovan sa CH2Cl2-om (2x). Organski sloj je osušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan da se dobije sirovo jedinjenje iz naslova (562 mg) koje je korišćeno u narednom koraku bez dodatnog prečišćavanja. HPLC RT = 2.35 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Korak 3: 2-{5-[(4,4-Difluorocikloheksil)(fenil)metil]-3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0198] Prateći procedure analogne onima koje su opisane u Koracima 4 i 5 Primera 1, metil 3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (80 mg, 0.25 mmol) i (4,4-difluorocikloheksil)(fenil)metanol (141 mg, 0.62 mmol) su konvertovani u racemski 2-{5-[(4,4-difluorocikloheksil)(fenil)metil]-3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, koji je razdvojen hiralnom prep SFC da se dobiju Enantiomer A (23 mg, 30%) i Enantiomer B (23 mg, 30%). Enantiomer A:<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.40 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.33 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.51 (d, J=1.7 Hz, 1H), 7.47 - 7.39 (m, 3H), 7.37 - 7.32 (m, 2H), 7.31 - 7.28 (m, 1H), 5.56 (d, J=10.5 Hz, 1H), 2.94 (d, J=8.1 Hz, 1H), 2.39 (s, 3H), 2.28 - 2.15 (m, 5H), 2.05 - 1.83 (m, 3H), 1.77 - 1.72 (m, 6H), 1.71 - 1.58 (m, 2H), 1.44 - 1.31 (m, 2H); LCMS (M+H) = 530.4; HPLC RT = 2.81 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min); SFC RT = 3.54 min (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 70/30 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min); [α]D<20>= -101.98, (c = 0.07, CHCl3). Enantiomer B:<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.40 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.33 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.51 (d, J=1.7 Hz, 1H), 7.47 - 7.39 (m, 3H), 7.37 - 7.32 (m, 2H), 7.31 -7.28 (m, 1H), 5.56 (d, J=10.5 Hz, 1H), 2.94 (d, J=8.1 Hz, 1H), 2.39 (s, 3H), 2.28 - 2.15 (m, 5H), 2.05 - 1.83 (m, 3H), 1.77 - 1.72 (m, 6H), 1.71 - 1.58 (m, 2H), 1.44 - 1.31 (m, 2H); LCMS (M+H) = 530.4; HPLC RT = 2.81 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min); SFC RT = 7.58 min (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 70/30 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min); [α]D<20>= 104.36, (c = 0.10, CHCl3).

Primeri 29 & 30

2-[3-(Dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[fenil(1,3-tiazol-4-il)metil]-5H-pirido [3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0199]

Korak 1: Fenil(tiazol-4-il)metanol

[0200] Rastvor tiazol-4-karbaldehida (0.32 g, 2.83 mmol) u THF-u (18.9 mL) je ohlađen na 0 °C. Fenilmagnezijum bromid (3M u Et2O-u, 2.83 mL, 8.49 mmol) je dodat. Nakon 1.5 h, reakcija je kvenčovana sa zas. NH4Cl-om, potom razblažena sa vodom. Reakcija je ekstrahovana sa EtOAc-om, i organski sloj je opran sa zas. NaCl-om, osušen sa Na2SO4-om i koncentrovan. Ostatak je prečišćen primenom ISCO silika gel hromatografije (Kolona od 40 g, Gradijent od 0% do 100% EtOAc/heksani) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.45 g, 82 %).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.80 (d, J=2.1 Hz, 1H), 7.49 - 7.44 (m, 2H), 7.42 - 7.36 (m, 2H), 7.35 - 7.29 (m, 1H), 7.13 (dd, J=2.0, 0.9 Hz, 1H), 6.01 (d, J=4.2 Hz, 1H), 2.94 (d, J=4.3 Hz, 1H); LCMS (M+H-H2O) = 174.1.

Korak 2: 2-[3-(Dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[fenil(1,3-tiazol-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0201] Prateći procedure analogne onima koje su opisane u Koracima 4 i 5 Primera 1, metil 3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (80 mg, 0.25 mmol) i fenil(tiazol-4-il)metanol (95 mg, 0.50 mmol) su konvertovani u racemski 2-[3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[fenil(1,3-tiazol-4-il)metil]-5H-pirio[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol, koji je razdvojen hiralnom prep SFC da se dobiju Enantiomer A (10 mg, 8%) i Enantiomer B (10 mg, 8%). Enantiomer A:<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.05 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.35 (d, J=1.5 Hz, 1H), 8.30 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.53 - 7.44 (m, 3H), 7.39 -7.33 (m, 3H), 7.27 - 7.18 (m, 2H), 2.32 (s, 3H), 2.14 (s, 3H), 1.58 (s, 6H); LCMS (M+H) = 495.4; HPLC RT = 7.24 min (Kolona: Sunfire C183.5 µm, 3.0 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 0-100% B tokom 15 min; Protok: 0.5 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm); SFC RT = 8.45 min (Kolona: Chiralpak AD-H, 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 80/20 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min); [α]D<20>= 42.45, (c = 0.06, CHCl3). Enantiomer B:<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.05 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.35 (d, J=1.5 Hz, 1H), 8.30 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.53 - 7.44 (m, 3H), 7.39 - 7.33 (m, 3H), 7.27 - 7.18 (m, 2H), 2.32 (s, 3H), 2.14 (s, 3H), 1.58 (s, 6H); LCMS (M+H) = 495.4; HPLC RT = 7.24 min (Kolona: Sunfire C18 3.5 µm, 3.0 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 0-100% B tokom 15 min; Protok: 0.5 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm); SFC RT = 11.91 min (Kolona: Chiralpak AD-H, 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 80/20 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min); [α]D<20>= -35.86, (c = 0.06, CHCl3).

Primer 31

2-[5-(Diciklobutilmetil)-3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0202]

Korak 1: Diciklobutilmetanol

[0203] U suspenziju magnezijuma (0.58 g, 23.8 mmol) u THF-u (32 mL) je dodato 4 kapi 1,2-dibromoetana. Suspenzija je zagrejana do 50 °C, potom bromociklobutan (3.21 g, 23.8 mmol) je dodat u kapima. Reakcija je ohlađena u ledenom kupatilu, potom je dodat ciklobutanekarbaldehid (1.0 g, 11.9 mmol) u THF-u (7.9 mL). Nakon 1 h, reakcija je kvenčovana sa zas. NH4Cl-om, potom ekstrahovana sa EtOAc-om. Organski sloj je opran sa zas. NaCl-om, osušen sa Na2SO4-om i koncentrovan. Ostatak je prečišćen primenom ISCO silika gel hromatografije (Kolona od 40 g, Gradijent od 0% do 50% EtOAc/heksani) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.04 g, 62%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.40 (td, J=6.9, 4.8 Hz, 1H), 2.38 - 2.23 (m, 2H), 1.98 - 1.68 (m, 12H), 1.30 - 1.27 (m, 1H).

Korak 2: Metil 5-(diciklobutilmetil)-3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-5H-pirido [3,2-b]indol-7-karboksilat

[0204] U suspenziju metil 3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (100 mg, 0.31 mmol) i diciklobutilmetanola (87 mg, 0.62 mmol) u toluenu (3.1 mL) je dodat 2-(trimetilfosforaniliden)acetonitril (0.5M u THF-u, 1.2 mL, 0.62 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 110 °C tokom noći. Dodatni diciklobutilmetanol (87 mg, 0.62 mmol) i 2-(trimetilfosforaniliden)acetonitril (0.5M u THF-u, 1.2 mL, 0.62 mmol) su dodati i mešanje je nastavljeno tokom noći. Reakciona smeša je koncentrovana, i ostatak je prečišćen primenom ISCO silika gel hromatografije (Kolona od 24 g, Gradijent od 0% do 50% EtOAc/heksani) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (57 mg, 41%). LCMS (M+H) = 444.5.

Korak 3: 2-[5-(Diciklobutilmetil)-3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il] propan-2-ol

[0205] Prateći proceduru analognu onoj koja je opisana u Koraku 5 Primera 1, metil 5-(diciklobutilmetil)-3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (80 mg, 0.25 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (19 mg, 30%) kao nerazdvojivu smešu atropizomera nakon prečišćavanja pomoću prep HPLC (Kolona: Phen Luna C18, 30 x 100 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Gradijent: 10-100% B tokom 14 min, potom 2-min zadržavanje na 100% B; Protok: 40 mL/min). LCMS (M+H) = 444.5; HPLC RT = 6.96 min (Kolona: Sunfire C183.5 µm, 3.0 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 0-100% B tokom 15 min; Protok: 0.5 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm).

Primer 32 & 33

2-[3-(Dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[(1-fluorociklobutil)(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0206]

Korak 1: (1-Fluorociklobutil)(fenil)metanon

[0207] Suspenzija Accufluor™ NFTh-a (Aldrich, 50% na alumini, 6.03 g, 9.36 mmol) i ciklobutil(fenil)metanona (0.75 g, 4.68 mmol) [Bauser, M. et al. PCT Int. Appl., 2005, WO2005039569] u MeOH-u (46.8 ml) je podeljena između dve bočice od 40 mL pod pritiskom i mešana tokom noći na 70 °C. Dodatni Accufluor™ NFTh (2.0 g) je dodat i zagrevanje je nastavljeno tokom noći. Reakcija je ohlađena, potom dekantovana i koncentrovana. CH2Cl2je dodat, i nerastvorni materijal je izfiltriran. Organski sloj je opran sekvencijalno sa vodom i zas. NaCl-om, potom osušen sa Na2SO4-om i koncentrovan da se dobije sirovo jedinjenje iz naslova (600 mg, 72%), koje je korišćeno u narednom koraku bez dodatnog prečišćavanja.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.90 - 8.05 (2H, m), 7.52 - 7.63 (1H, m), 7.41 - 7.50 (2H, m), 2.71 - 2.91 (2H, m), 2.42 - 2.64 (2H, m), 2.00 (1H, dd, J=11.1, 3.7 Hz), 1.74 (1H, dtd, J=11.2, 8.9, 8.9, 2.3 Hz)

Korak 2: (1-Fluorociklobutil)(fenil)metanol

[0208] Rastvor (1-fluorociklobutil)(fenil)metanona (0.780 g, 4.38 mmol) u MeOH-u (14.59 ml) je ohlađen na 0 °C i NaBH4(0.248 g, 6.57 mmol) je dodat u delovima. Nakon 1 sata mala količina vode je dodata, zatim je reakcija koncentrovana. Ostatak je suspendovan u CH2Cl2-u, potom zas. NH4Cl rastvor je pažljivo dodat. Slojevi su razdvojeni, i zatim vodeni sloj je ponovo ekstrahovan sa CH2Cl2-om. Organski sloj je opran sa slanim rastvorom, osušen sa natrijum sulfatom i koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem ISCO (Kolona od 40g; Heks/EtOAc; 0 do 30% Gradijent) da se dobije (1-fluorociklobutil)(fenil)metanol (0.651 g, 3.61 mmol, 83 % prinos).1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.48 - 7.43 (m, 2H), 7.41 - 7.31 (m, 3H), 4.77 (dd, J=18.5, 4.7 Hz, 1H), 2.48 - 2.13 (m, 5H), 1.83 - 1.70 (m, 1H), 1.25 - 1.13 (m, 1H). 19F NMR (376MHz, CDCl3) δ -142.70 (s, IF)

Korak 3: 2-[3-(Dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[(1-fluorociklobutil)(fenil)metil] -5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0209] Prateći procedure analogne onima koje su opisane u Koracima 4 i 5 Primera 1, metil 3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (75 mg, 0.23 mmol) i (1-fluorociklobutil)(fenil)metanol (84 mg, 0.47 mmol) su konvertovani u racemski 2-[3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[(1-fluorociklobutil)(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol, koji je razdvojen hiralnom prep SFC da se dobiju Enantiomer A (29 mg, 18%) i Enantiomer B (30 mg, 19%). Enantiomer A:<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.39 - 8.35 (m, 2H), 7.89 (br s, 1H), 7.47 (dd, J=8.2, 1.3 Hz, 1H), 7.31 - 7.28 (m, 6H), 6.27 - 6.10 (m, 1H), 2.92 - 2.65 (m, 2H), 2.40 - 2.26 (m, 2H), 2.25 (s, 3H), 2.06 (s, 3H), 1.95 - 1.83 (m, 2H), 1.74 (s, 6H); LCMS (M+H) = 484.5; HPLC RT = 8.20 min (Kolona: Sunfire C183.5 µm, 3.0 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 0-100% B tokom 15 min; Protok: 0.5 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm). SFC RT = 6.57 (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 80/20 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min); [α]D<20>= -10.66 (c = 0.08, CHCl3). Enantiomer B:<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.39 - 8.35 (m, 2H), 7.89 (br s, 1H), 7.47 (dd, J=8.2, 1.3 Hz, 1H), 7.31 - 7.28 (m, 6H), 6.27 - 6.10 (m, 1H), 2.92 - 2.65 (m, 2H), 2.40 - 2.26 (m, 2H), 2.25 (s, 3H), 2.06 (s, 3H), 1.95 - 1.83 (m, 2H), 1.74 (s, 6H); LCMS (M+H) = 484.5; HPLC RT = 8.20 min (Kolona: Sunfire C183.5 µm, 3.0 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 0-100% B tokom 15 min; Protok: 0.5 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm). SFC RT = 13.73 (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 80/20 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min); [α]D<20>= 15.73 (c = 0.08, CHCl3).

Primer 34 i 35

2-[3-(Dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[4,4,4-trifluoro-1-(1,3-oksazol-4-il)butil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0210]

Korak 1: N-Metoksi-N-metiloksazol-4-karboksamid

[0211] Suspenzija oksazol-4-karboksilne kiseline (0.50 g, 4.42 mmol) i HOBT (0.74 g, 4.86 mmol) je mešana tokom 10 min i zatim N,O-dimetilhidroksilamin, HCl (0.47 g, 4.86 mmol) i DIEA (0.85 mL, 4.86 mmol) su dodati. Nakon 10 min, EDC (0.93 g, 4.86 mmol) je dodat. Dobijena reakciona smeša je mešana tokom noći i potom razblažena sa 1M HCl. Slojevi su razdvojeni, i vodeni sloj je ekstrahovan sa CH2Cl2-om. Organski sloj je opran sekvencijalno sa zas. NaHCO3-om i zas. NaCl-om, osušen preko Na2SO4i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.22 g, 33 %).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.22 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.41 (s, 3H).

Korak 2: 4,4,4-Trifluoro-1-(oksazol-4-il)butan-1-on

[0212] U suspenziju magnezijuma (0.070 g, 2.88 mmol) u THF-u (15 mL) je dodato 2 kapi 1,2-dibromoetana praćeno rastvorom 3-bromo-1,1,1-trifluoropropana (0.51 g, 2.88 mmol) u

1

THF-u (5.0 mL). Dobijena reakciona smeša je ohlađena na 0 °C, i potom suspenzija N-metoksi-N-metiloksazol-4-karboksamida (0.22 g, 1.44 mmol) u THF-u (5.0 mL) je dodata. Nakon 1.5 h, reakcija je kvenčovana sa zas. NH4Cl-om, i zatim ekstrahovana sa EtOAc-om (2x). Kombinovani organski sloj je opran sa zas. NaCl-om, osušen sa Na2SO4-om i koncentrovan do jedinjenje iz naslova (0.25 g, 89 % prinos), koje je primenjeno bez dodatnog prečišćavanja u narednom koraku.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.30 (d, J=1.0 Hz, 1H), 7.94 (d, J=0.7 Hz, 1H), 3.31 - 3.19 (m, 2H), 2.57 (dt, J=10.8, 7.7 Hz, 2H).

Korak 3: 4,4,4-Trifluoro-1-(oksazol-4-il)butan-1-ol

[0213] Rastvor 4,4,4-trifluoro-1-(oksazol-4-il)butan-1-on (0.25 g, 1.28 mmol) u MeOH-u (4.3 mL) je ohlađen na 0 °C i NaBH4(0.073 g, 1.92 mmol) je dodat. Nakon 1.5 h, mala količina vode je dodata i reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je razblažen sa CH2Cl2-om, potom pažljivo kvenčovan sa zas. NH4Cl-om. Slojevi su razdvojeni, i vodeni sloj ekstrahovan sa CH2Cl2-om. Kombinovani organski sloj je osušen sa Na2SO4-om i koncentrovan. Ostatak je prečišćen primenom ISCO silika gel hromatografije (Kolona od 24 g, Gradijent od 0% do 100% EtOAc/heksani) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.16 g, 63%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.88 (s, 1H), 7.62 (t, J=0.9 Hz, 1H), 4.85 - 4.76 (m, 1H), 2.40 (d, J=5.4 Hz, 1H), 2.38 - 2.19 (m, 2H), 2.16 - 2.06 (m, 2H).

Korak 4: 2-[3-(Dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[4,4,4-trifluoro-1-(1,3-oksazol-4-il)butil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0214] Prateći procedure analogne onima koje su opisane u Koracima 4 i 5 Primera 1, metil 3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (100 mg, 0.31 mmol) i 4,4,4-trifluoro-1-(oksazol-4-il)butan-1-ol, (91 mg, 0.47 mmol) su konvertovani u racemski 2-[3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[4,4,4-trifluoro-1-(1,3-oksazol-4-il)butil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol, koji je razdvojen hiralnom prep SFC da se dobiju Enantiomer A (26 mg, 17%) i Enantiomer B (27 mg, 17%). Enantiomer A:<1>H NMR (500 MHz, CD3OD) δ 8.41 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.30 (d, J=8.4 Hz, 1H), 8.17 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 8.04 (d, J=1.6 Hz, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.51 (dd, J=8.4, 1.3 Hz, 1H), 6.16 (dd, J=10.2, 5.4 Hz, 1H), 2.98 - 2.73 (m, 2H), 2.47 (s, 3H), 2.37 (dt, J=14.9, 5.6 Hz, 1H), 2.30 (s, 3H), 1.91 - 1.76 (m, 1H), 1.64 (s, 6H); LCMS (M+H) = 499.5; HPLC RT = 7.19 min (Kolona: Sunfire C18 3.5 µm, 3.0 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 0-100% B tokom 15 min; Protok: 0.5 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm). SFC RT = 4.21 min (Kolona: Phenomenex LUX Cellulose 2 250 x 4.6 mm, 5µm; Mobilna faza: 80/20 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min); [α]D<20>= 16.38 (c = 0.17, CHCl3).

2

Enantiomer B:<1>H NMR (500 MHz, CD3OD) δ 8.41 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.30 (d, J=8.4 Hz, 1H), 8.17 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 8.04 (d, J=1.6 Hz, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.51 (dd, J=8.4, 1.3 Hz, 1H), 6.16 (dd, J=10.2, 5.4 Hz, 1H), 2.98 - 2.73 (m, 2H), 2.47 (s, 3H), 2.37 (dt, J=14.9, 5.6 Hz, 1H), 2.30 (s, 3H), 1.91 - 1.76 (m, 1H), 1.64 (s, 6H); LCMS (M+H) = 499.5; HPLC RT = 7.19 min (Kolona: Sunfire C183.5 µm, 3.0 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 0-100% B tokom 15 min; Protok: 0.5 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm). SFC RT = 5.10 min (Kolona: Phenomenex LUX Cellulose 2250 x 4.6 mm, 5µm; Mobilna faza: 80/20 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min); [α]D<20>= -9.16 (c = 0.08, CHCl3).

Primer 36 & Primer 37

2-[3-(Dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[4,4,4-trifluoro-1-(1,2-oksazol-4-il)butil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0215]

Korak 1: 4,4,4-Trifluoro-1-(izoksazol-4-il)butan-1-ol,

[0216] Smeša 3-bromo-1,1,1-trifluoropropana (1.37 g, 7.73 mmol), magnezijuma (0.19 g, 7.73 mmol) i dibromoetana (2-3 kapi) u THF-u (13 mL) je zagrevana do 50 °C tokom 30 min. Reakciona smeša je potom ohlađena u ledenom kupatilu i izoksazol-4-karbaldehid (0.50 g, 5.15 mmol) u THF-u (5.0 mL) je dodat polako. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h i zatim kvenčovana sa zas. NH4Cl-om (3 mL) i razblažena sa vodom. Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc-om (3x). Organski sloj je izdvojen, koncentrovan i ostatak je prečišćen pomoću ISCO silika gel hromatografije (Kolona od 40 g, Gradijent od 0% do 40% EtOAc/heksani) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (710 mg, 71%) kao bezbojna čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.63 (d, J=0.7 Hz, 1H), 8.45 (s, 1H), 4.77 (dd, J=8.1, 4.9 Hz, 1H), 2.48 - 2.17 (m, 2H), 2.08 - 1.86 (m, 2H).

Korak 2: 2-[3-(Dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[4,4,4-trifluoro-1-(1,2-oksazol-4-il)butil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0217] Prateći procedure analogne onima koje su opisane u Koracima 4 i 5 Primera 1, metil 3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (75 mg, 0.23 mmol) i 4,4,4-trifluoro-1-(izoksazol-4-il)butan-1-ol, (68 mg, 0.35 mmol) su konvertovani u racemski 2-[3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[4,4,4-trifluoro-1-(1,2-oksazol-4-il)butil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol, koji je razdvojen hiralnom prep SFC da se dobiju Enantiomer A (6 mg, 5%) i Enantiomer B (5 mg, 4%). Enantiomer A:<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.89 (d, J=1.1 Hz, 1H), 8.43 (d, J=1.5 Hz, 1H), 8.34 (d, J=8.4 Hz, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.84 (d, J=14.5 Hz, 2H), 7.53 (dd, J=8.3, 1.2 Hz, 1H), 6.21 (dd, J=11.1, 4.5 Hz, 1H), 3.01 - 2.87 (m, 1H), 2.83 - 2.71 (m, 1H), 2.44 (s, 3H), 2.40 - 2.29 (m, 1H), 2.26 (s, 3H), 1.84 - 1.67 (m, 1H), 1.64 (s, 6H); LCMS (M+H) = 499.4; HPLC RT = 9.35 min (Kolona: Sunfire C18 3.5 µm, 3.0 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 0-100% B tokom 15 min; Protok: 0.5 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm). SFC RT = 8.36 min (Kolona: Chiralpak IC, 250 x 4.6 mm, 5µm; Mobilna faza: 75/25 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min). Enantiomer B:<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.89 (d, J=1.1 Hz, 1H), 8.43 (d, J=1.5 Hz, 1H), 8.34 (d, J=8.4 Hz, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.84 (d, J=14.5 Hz, 2H), 7.53 (dd, J=8.4, 1.3 Hz, 1H), 6.21 (dd, J=11.2, 4.4 Hz, 1H), 3.02 - 2.88 (m, 1H), 2.82 - 2.72 (m, 1H), 2.44 (s, 3H), 2.39 - 2.29 (m, 1H), 2.26 (s, 3H), 1.82 - 1.68 (m, 1H), 1.64 (s, 6H); LCMS (M+H) = 499.3; HPLC RT = 9.28 min (Kolona: Sunfire C18 3.5 µm, 3.0 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 0-100% B tokom 15 min; Protok: 0.5 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm); SFC RT = 12.41 min (Kolona: Chiralpak IC, 250 x 4.6 mm, 5µm; Mobilna faza: 75/25 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min).

Primeri 38 & 39

4-[7-Metansulfonil-5-(4,4,4-trifluoro-1-fenilbutil)-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il]-3,5-dimetil-1,2-oksazol

[0218]

[0219] Racemski 4-[7-metansulfonil-5-(4,4,4-trifluoro-1-fenilbutil)-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il]-3,5-dimetil-1,2-oksazol je pripremljen u skladu sa procedurama koje su opisane za Primer

4

1, zamenjujući (3-(metilsulfonil)fenil)boronsku kiselinu (CombiBlocks) za (3-(metoksikarbonil)fenil)boronsku kiselinu u Koraku 2. Razdvajanje primenom hiralne prep SFC je dalo Enantiomere A i B. Enantiomer A:<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.63 (d, J=8.2 Hz, 1H), 8.56 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.95 (dd, J=8.2, 1.4 Hz, 1H), 7.42 - 7.32 (m, 4H), 7.28 (d, J=1.7 Hz, 2H), 6.06 (dd, J=10.9, 5.1 Hz, 1H), 3.17 (s, 3H), 2.98 - 2.89 (m, 1H), 2.81 (ddt, J=19.7, 10.6, 5.2 Hz, 1H), 2.33 (s, 3H), 2.25 - 2.16 (m, 1H), 2.15 (s, 3H), 1.88 -1.76 (m, 1H); LCMS (M+H) = 528.3; HPLC RT = 2.87 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min); SFC RT = 10.03 min (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 75/25 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min); [α]D<20>= -56.9 (c = 0.12, CHCl3). Enantiomer B:<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.63 (d, J=8.2 Hz, 1H), 8.56 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.95 (dd, J=8.2, 1.4 Hz, 1H), 7.42 - 7.32 (m, 4H), 7.28 (d, J=1.7 Hz, 2H), 6.06 (dd, J=10.9, 5.1 Hz, 1H), 3.17 (s, 3H), 2.98 - 2.89 (m, 1H), 2.81 (ddt, J=19.7, 10.6, 5.2 Hz, 1H), 2.33 (s, 3H), 2.25 - 2.16 (m, 1H), 2.15 (s, 3H), 1.88 - 1.76 (m, 1H); LCMS (M+H) = 528.3; HPLC RT = 2.87 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min); SFC RT = 19.50 min (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 75/25 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min);

[α]D<20>= 62.7 (c = 0.14, CHCl3).

Primeri 40 & 41

2-{5-[(4-Fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(5-metil-1,2-oksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0220]

Korak 1: Metil 4-(5-bromo-3-nitropiridin-2-il)benzoat

[0221] U smešu 2,5-dibromo-3-nitropiridina (2.00 g, 7.09 mmol), (4-(metoksikarbonil)fenil)boronske kiseline (1.28 g, 7.09 mmol) Pd(dppf)Cl2(0.36 g, 0.50 mmol) u THF-u (30 mL) je dodat trikalijum fosfat (3M u vodi) (7.09 mL, 21.3 mmol). Reakciona smeša je pročišćena sa N2(3x) i zatim mešana na 80 °C tokom 3 h. Vodeni sloj je izdvojen. Organski sloj osušen sa Na2SO4-om, filtriran kroz mali čep Celite® ispiranjem sa EtOAc-om i koncentrovan. Sirovi ostatak je prečišćen primenom ISCO silika gel hromatografije (Kolona od 120 g, Gradijent od 0% do 50% EtOAc/CH2Cl2) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.64 g, 69%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.15 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.88 (d, J=2.2 Hz, 1H), 8.17 - 8.02 (m, 2H), 7.78 - 7.63 (m, 2H), 3.90 (s, 3H).

Korak 2: Metil 3-bromo-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0222] Smeša metil 4-(5-bromo-3-nitropiridin-2-il)benzoata (1.64 g, 4.86 mmol) i 1,2-bis(difenilfosfino)etana (2.42 g, 6.08 mmol) u 1,2-dihlorobenzenu (30 mL) je pročišćena sa N2(3x) i zatim zagrejana do refluksa. Nakon 4 h, smeša je ohlađena do sobne temperature i koncentrovana. Ostatak je suspendovan u CHCl3-u, sonikovan i zatim filtriran. Čvrsta supstanca je oprana sa CHCl3-om i osušena da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.84 g, 57%) kao bež čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.85 (s, 1H), 8.60 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.29 (dd, J=5.1, 3.1 Hz, 2H), 8.22 (s, 1H), 7.88 (dd, J=8.3, 1.4 Hz, 1H), 3.93 (s, 3H); LCMS (M+H) = 305.1.

Korak 3: Metil 3-bromo-5-((4-fluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0223] Prateći proceduru analognu onoj koja je opisana u Koraku 4 Primer 1, metil 3-bromo-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (840 mg, 2.75 mmol) i (4-fluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol (Korak 1 Primera 25, 868 mg, 4.13 mmol) su konvertovani u jedinjenje iz naslova kao racemat (1.26 g, 92%), koje je primenjeno bez dodatnog prečišćavanja u narednom koraku. LCMS (M+H) = 497.2.

Korak 4: Metil 5-((4-fluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0224] U smešu metil 3-bromo-5-((4-fluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (500 mg, 1.01 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborolana) (306 mg, 1.21 mmol), Pd(dppf)Cl2(37 mg, 0.050 mmol) i KOAc (197 mg, 2.01 mmol) u bočici sa poklopcem na zavrtanje je dodat dioksan (10 mL). Bočica je opremljena sa teflonskim septum poklopcem i pročišćena sa N2(3x). Reakciona smeša je zagrevana na 90 °C tokom 16 h, potom ohlađena na sobnu temperaturu i filtrirana. Filtrat je prečišćen primenom ISCO silika gel hromatografije (Kolona od 40 g, Gradijent od 0% do 90% EtOAc/CH2Cl2) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (254 mg, 46%). LCMS (M+H) = 463.4.

Korak 5: Metil 5-((4-fluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-3-(5-metilizoksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboilat

[0225] U bočicu sa navojem je dodat metil 5-((4-fluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (125 mg, 0.23 mmol), 4-jodo-5-metilizoksazol (48 mg, 0.23 mmol), Pd(dppf)Cl2(8 mg, 0.011 mmol) i fosforna kiselina, kalijum so (0.23 mL, 0.69 mmol) praćeno THF-om (1.5 mL). Dobijena suspenzija je zagrevana na 80 °C tokom 45 min, potom ohlađena na sobnu temperaturu, razblažena sa EtOAc-om i kvenčovana sa vodom. Organski sloj je opran sa vodom, zas. NaCl-om, osušen i koncentrovan u vakuumu. Sirov proizvod je prečišćen primenom ISCO silika gel hromatografije (Kolona od 24 g, Gradijent od 0% do 100% EtOAc/CH2Cl2) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (83 mg, 72%). LCMS (M+H) = 500.1; HPLC RT = 3.68 min (Kolona: Waters Sunfire C18 5 µm, 2.1 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Gradijent 0-100% B tokom 4 min; Protok: 1 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm).

Korak 6: 2-{5-[(4-Fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(5-metil-1,2-oksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0226] Prateći proceduru analognu onoj koja je opisana u Koraku 5 Primer 1, metil 5-((4-fluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-3-(5-metilizoksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (105 mg, 0.21 mmol) je konvertovan u racemski 2-{5-[(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(5-metil-1,2-oksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, (60 mg, 57%) koji je razdvojen pomoću hiralne prep SFC da se dobiju Enantiomeri A i B. Enantiomer A:<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.75 (s, 1H), 8.52 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.34 - 8.13 (m, 2H), 8.05 (s, 1H), 7.79 - 7.62 (m, 2H), 7.46 (dd, J=8.4, 1.3 Hz, 1H), 7.10 (t, J=8.8 Hz, 2H), 5.76 (d, J=11.0 Hz, 1H), 4.19 - 3.75 (m, 3H), 3.68 - 3.54 (m, 1H), 3.50 - 3.35 (m, 2H), 2.64 (s, 2H), 2.08 - 1.86 (m, 1H), 1.86 - 1.74 (m, 1H), 1.74 - 1.53 (m, 6H), 1.53 - 0.99 (m, 4H); LCMS (M+H) = 500.5; SFC RT = 7.68 (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 75/25 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min); [α]D<20>= -79.08 (c = 0.11, MeOH). Enantiomer B:<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.75 (s, 1H), 8.52 (d, J=1.5 Hz, 1H), 8.26 (s, 2H), 8.12 - 7.90 (m, 1H), 7.81 - 7.60 (m, 2H), 7.58 - 7.34 (m, 1H), 7.10 (s, 2H), 5.88 - 5.64 (m, 1H), 4.15 - 3.74 (m, 3H), 3.72 - 3.55 (m, 1H), 3.37 (s, 2H), 2.64 (s, 2H), 2.10 - 1.90 (m, 1H), 1.68 (d, J=3.7 Hz, 6H), 1.51 - 1.26 (m, 2H), 1.25 - 1.01 (m, 2H); LCMS (M+H) = 500.5; SFC RT = 10.51 (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 75/25 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min).

Primeri 42 & 43

2-{5-[(4-Fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(3-metil-1,2-oksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0227]

[0228] Racemski 2- {5-[(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(3-metil-1,2-oksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-6]indol-7-il}propan-2-ol, je pripremljen u skladu sa procedurama koje su opisane za primer 40, zamenjujući 4-bromo-3-metilizoksazol [Gibson, C. et al. J. Med. Chem. 2009, 52, 4370-4279] za 4-jodo-5-metilizoksazol u Koraku 5. Razdvajanje primenom hiralne prep SFC je dalo Enantiomere A i B. Enantiomer A:<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.96 (s, 1H), 8.51 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.40 - 8.16 (m, 2H), 8.05 (s, 1H), 7.68 (dd, J=8.6, 5.3 Hz, 2H), 7.47 (dd, J=8.4, 1.3 Hz, 1H), 7.10 (t, J=8.8 Hz, 2H), 5.76 (d, J=11.0 Hz, 1H), 4.18 - 3.76 (m, 3H), 3.37 (s, 4H), 2.46 (s, 3H), 2.39 - 2.21 (m, 1H), 1.68 (d, J=3.7 Hz, 11H), 1.46 - 0.95 (m, 3H); LCMS (M+H) = 500.5; SFC RT = 7.92 (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 75/25 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min); [α]D<20>= -25.54 (c = 0.35, CHCl3). Enantiomer B:<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.96 (s, 1H), 8.51 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.40 -8.16 (m, 2H), 8.05 (s, 1H), 7.68 (dd, J=8.6, 5.3 Hz, 2H), 7.47 (dd, J=8.4, 1.3 Hz, 1H), 7.10 (t, J=8.8 Hz, 2H), 5.76 (d, J=11.0 Hz, 1H), 4.18 - 3.76 (m, 3H), 3.37 (s, 4H), 2.46 (s, 3H), 2.39 -2.21 (m, 1H), 1.68 (d, J=3.7 Hz, 11H), 1.46 - 0.95 (m, 3H); LCMS (M+H) = 500.5; SFC RT = 10.45 (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 75/25 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min).

Primer 44

3-(Dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilna kiselina

[0229]

[0230] U bočicu od 5 mL koja sadrži metil 3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (Korak 4 Primera 1,54 mg, 0.11 mmol) u MeOH-u (2.0 mL) je dodat IN NaOH (1.10 mL, 1.10 mmol). Dobijena reakciona smeša je zagrevana na 80 °C tokom 30 min i zatim koncentrovana. 1M limunska kiselina (1.10 mL, 1.10 mmol) je dodata, i bela čvrsta supstanca je prikupljena putem filtracije, isprana sa vodom i osušena pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao racemat (17 mg, 31%).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.57 - 8.47 (m, 3H), 8.15 (dd, J=8.3, 1.1 Hz, 1H), 7.63 (d, J=1.4 Hz, 1H), 7.48 (d, J=7.5 Hz, 2H), 7.40 - 7.34 (m, 2H), 7.31 (d, J=7.2 Hz, 1H), 5.62 (d, J=10.5 Hz, 1H), 4.13 - 4.04 (m, 1H), 3.92 - 3.81 (m, 1H), 3.62 - 3.52 (m, 1H), 3.42 - 3.33 (m, 1H), 3.14 (q, J=10.9 Hz, 1H), 2.41 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 2.05 (d, J=13.0 Hz, 1H), 1.69 - 1.63 (m, 1H), 1.48 - 1.40 (m, 1H), 1.12 (d, J=13.3 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 482.1; HPLC RT = 2.74 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Primer 45

3-(Dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-(difenilmetil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilna kiselina [0231]

[0232] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za Primer 44, metil 5-benzhidril-3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (Korak 4 Primera 3, 17 mg, 0.035 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (14 mg, 84%).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.57 - 8.48 (m, 2H), 8.26 (s, 1H), 8.16 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.42 - 7.34 (m, 6H), 7.31 (s, 1H), 7.25 - 7.19 (m, 4H), 6.96 (d, J=1.7 Hz, 1H), 2.25 (s, 3H), 2.07 (s, 3H); LCMS (M+H) = 474.0; HPLC RT = 3.11 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Primer 46

2-[5-Benzil-3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol [0233]

Korak 1: Metil 5-benzil-3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat [0234] U bočicu od 5 mL koja sadrži metil 3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (Korak 3 Primera 1, 39 mg, 0.12 mmol) i K2CO3(50 mg, 0.36 mmol) u DMF-u (0.5 mL) je dodat benzil bromid (0.021 mL, 0.18 mmol). Dobijena reakciona smeša je zagrevana na 70 °C tokom 1 h. Dodatni benzil bromid (0.021 mL, 0.18 mmol) je dodat i zagrevanje je nastavljeno na 70 °C tokom 10 min i potom na 80 °C tokom 1 h. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i prečišćena direktno primenom ISCO silika gel hromatografije (Kolona od 40 g, Gradijent od 0% do 50% EtOAc/CH2Cl2) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (36 mg, 74%) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.52 (d, J=1.9 Hz, 1H), 8.48 (dd, J=8.0, 0.6 Hz, 1H), 8.28 (d, J=0.6 Hz, 1H), 8.08 (dd, J=8.2, 1.2 Hz, 1H), 7.45 (d, J=1.9 Hz, 1H), 7.34 - 7.28 (m, 3H), 7.16 (dd, J=7.6, 1.8 Hz, 2H), 5.61 (s, 2H), 3.99 (s, 3H), 2.39 (s, 3H), 2.22 (s, 3H); LCMS (M+H) = 412.1; HPLC RT = 3.03 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Korak 2: 2-[5-Benzil-3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol [0235] Prateći proceduru analognu onoj koja je opisana u Koraku 5 Primera 1, metil 5-benzil-3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (36 mg, 0.087 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (2 mg, 4%) nakon prečišćavanja pomoću prep HPLC (Kolona: Phen Luna C18, 30 x 100 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Gradijent: 10-100% B tokom 12 min, potom 2-min zadržavanje na 100% B; Protok: 40 mL/min).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.45 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.38 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.45 (dd, J=8.3, 1.4 Hz, 1H), 7.38 (d, J=1.9 Hz, 1H), 7.34 - 7.29 (m, 4H), 7.19 - 7.15 (m, 2H), 5.57 (s, 2H), 2.38 (s, 3H), 2.22 (s, 3H), 1.70 (s, 6H); LCMS (M+H) = 412.1; HPLC RT = 2.42 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Primeri 47-49

[0236] Jedinjenja u Tabeli 2 su pripremljena u skladu sa procedurama koje su opisane za Primer 46:

Tabela 2

HPLC uslovi za Tabelue 2:

Metoda A:

Primer 50

4-[5-Benzil-7-(difluorometil)-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il]-3,5-dimetil-1,2-oksazol

[0237]

1

Korak 1: 3-((2-Hloro-5-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)piridin-3-il)amino)benzaldehid [0238] U posudu od 100 mL sa okruglim dnom koja sadrži 2-hloro-5-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)piridin-3-amin (Korak 1 Primera 1, 1.00 g, 4.47 mmol), hloro(2-dicikloheksilfosfino-2',4',6'-triizopropil-1,1'-bifenil)[2-(2'-amino-1,1'-bifenil)]paladijum(II) (X-phos prekatalizator, 0.21 g, 0.27 mmol) i 3-bromobenzaldehid (1.56 mL, 13.4 mmol) u toluenu (20 mL) je dodat cezijum karbonat (2.91 g, 8.94 mmol). Reakciona smeša je zagrevana na 100 °C tokom 16 h, potom ohlađena na sobnu temperaturu i razblažena sa EtOAc-om (100 mL). Filtracija kroz Celite® i koncentracija su dale sirov ostatak koji je prečišćen primenom ISCO silika gel hromatografije (Kolona od 24 g, Gradijent od 0% do 100% EtOAc/heksani) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (359 mg, 24%). LCMS (M+H) = 328.1; HPLC RT = 1.63 min (Kolona: Waters Acquity BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7 µm čestice; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 1.5 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm)

Korak 2: 3-(3,5-Dimetilizoksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karbaldehid

[0239] U bočicu od 5 mL za mikrotalasnu koja sadrži 3-((2-hloro-5-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)piridin-3-il)amino)benzaldehid (359 mg, 1.10 mmol) i natrijum acetat (225 mg, 2.74 mmol) u DMA-u (5.0 mL) je dodat bis(trifenilfosfin)paladijum(II) hlorid (62mg, 0.088 mmol). Dobijena suspenzija je zagrevana na 170 °C u mikrotalasnom reaktoru tokom 20 min, potom na 180 °C tokom 20 min, potom na 200 °C tokom 40 min. Reakciona smeša je prečišćena direktno primenom ISCO silika gel hromatografije (Kolona od 24 g, Gradijent od 0% do 100% EtOAc/heksani) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (69 mg, 22%). LCMS (M+H) = 292.2; HPLC RT = 0.88 min (Kolona: Waters Acquity BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7 µm čestice; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 1.5 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm) Korak 3: 5-Benzil-3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karbaldehid [0240] U posudu od 25 mL sa okruglim dnom koja sadrži 3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karbaldehid (22 mg, 0.076 mmol) i cezijum karbonat (98 mg, 0.30

2

mmol) u DMF-u (1.0 mL) je dodat benzil bromid (0.018 mL, 0.15 mmol). Dobijena suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h i zatim koncentrovana. Sirov proizvod je prečišćen primenom ISCO silika gel hromatografije (Kolona od 4 g, Gradijent od 0% do 100% EtOAc/heksani) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (9 mg, 31%). LCMS (M+H) = 382.2; HPLC RT = 1.18 min (Kolona: Waters Acquity BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7 µm čestice; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 1.5 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm) Korak 4: 4-[5-Benzil-7-(difluorometil)-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il]-3,5-dimetil-1,2-oksazol

[0241] U posudu od 25 mL sa okruglim dnom koja sadrži 5-benzil-3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karbaldehid (9 mg, 0.024 mmol) u CH2Cl2-u (2.0 mL) je dodat deoksofluor (104 mg, 0.24 mmol). Dobijena reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod azotom tokom noći i zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen putem preparativne LC-MS (Kolona: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 25-100% B tokom 15 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1 mg, 14%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.58 (s, 1H), 8.40 (d, J=8.1 Hz, 1H), 8.21 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.53 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.36 - 7.20 (m, 6H), 5.83 (s, 2H), 2.47 (s, 3H), 2.29 (s, 3H); LCMS (M+H) = 404.3; HPLC RT = 1.98 min (Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7 µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1.11 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm).

Primer 51

4-(5-Benzil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il)-3,5-dimetil-1,2-oksazol

[0242]

Korak 1: 2-Hloro-5-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-N-fenilpiridin-3-amin

[0243] Prateći proceduru analognu onoj koja je opisana u Koraku 1 Primera 50, 2-hloro-5-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)piridin-3-amin (Korak 1 Primera 1, 0.50 g, 2.24 mmol) i bromobenzen (1.05 g, 6.71 mmol) su konvertovani u jedinjenje iz naslova (200 mg, 30%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.98 (s, 1H), 7.92 (d, J=2.2 Hz, 1H), 7.46 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.36 - 7.28 (m, 2H), 7.22 (d, J=7.5 Hz, 2H), 7.02 (t, J=7.3 Hz, 1H), 2.40 (s, 3H), 2.21 (s, 3H); LCMS (M+H) = 300.2; HPLC RT = 1.23 min (Kolona: Waters Acquity BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7 µm čestice; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 1.5 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm).

Korak 2: 3,5-Dimetil-4-(5H-pirido[3,2-b]indol-3-il)izoksazol

[0244] Prateći proceduru analognu onoj koja je opisana u Koraku 2 Primera 50, 2-hloro-5-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-N-fenilpiridin-3-amin (200 mg, 0.67 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (73 mg, 42%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.51 (s, 1H), 8.45 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.21 (d, J=7.9 Hz, 1H), 7.88 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.63 - 7.57 (m, 1H), 7.57 -7.50 (m, 1H), 7.28 (td, J=7.4, 1.1 Hz, 1H), 2.49 (s, 3H), 2.30 (s, 3H); LCMS (M+H) = 264.2; HPLC RT = 0.84 min (Kolona: Waters Acquity BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7 µm čestice; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 1.5 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm).

Korak 3: 4-(5-Benzil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il)-3,5-dimetil-1,2-oksazol

[0245] Prateći proceduru analognu onoj koja je opisana u Koraku 1 Primera 46, 3,5-dimetil-4-(5H-pirido[3,2-b]indol-3-il)izoksazol (73 mg, 0.28 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (51 mg, 52%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.55 (s, 1H), 8.30 (d, J=7.7 Hz, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.80 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.62 (t, J=7.7 Hz, 1H), 7.36 (t, J=7.6 Hz, 1H), 7.31 -7.18 (m, 5H), 5.77 (s, 2H), 2.46 (s, 3H), 2.28 (s, 3H); LCMS (M+H) = 354.2; HPLC RT = 1.98 min (Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7 µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1.11 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm).

Primer 52

4-(5-Benzil-7-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il)-3,5-dimetil-1,2-oksazol

4

Korak 1: 2-Hloro-5-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-N-(3-(metilsulfonil)fenil)piridin-3-amin [0247] Prateći proceduru analognu onoj koja je opisana u Koraku 2 Primera 1, 2-hloro-5-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)piridin-3-amin (Korak 1 Primera 1, 284 mg, 1.27 mmol) i (3-(metilsulfonil)fenil)boronska kiselina (CombiBlocks, 533 mg, 2.67 mmol) su konvertovani u jedinjenje iz naslova (100 mg, 21%). LCMS (M+H) = 378.3; HPLC RT = 2.08 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Korak 2: 4-(5-Benzil-7-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il)-3,5-dimetil-1,2-oksazol [0248] Prateći procedure analogne onima koje su opisane u Koracima 2 i 3 Primera 50, 2-hloro-5-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-N-(3-(metilsulfonil)fenil)piridin-3-amin (99 mg, 0.26 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (23 mg, 20% preko dva koraka).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.61 (d, J=8.2 Hz, 1H), 8.57 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.17 (d, J=1.0 Hz, 1H), 7.93 (dd, J=8.3, 1.4 Hz, 1H), 7.49 (d, J=1.7 Hz, 1H), 7.38 - 7.30 (m, 3H), 7.15 (dd, J=7.2, 2.2 Hz, 2H), 5.63 (s, 2H), 3.16 (s, 3H), 2.40 (s, 3H), 2.23 (s, 3H); LCMS (M+H) = 432.4; HPLC RT = 2.55 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Primer 53

2-[5-Benzil-3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-9-il]propan-2-ol [0249]

Korak 1: 5-(3,5-Dimetilizoksazol-4-il)piridin-3-amin

[0250] U bočicu od 40 mL koja sadrži 5-bromopiridin-3-amin (Aldrich, 200 mg, 1.16 mmol) i 3,5-dimetil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)izoksazol (Aldrich, 516 mg, 2.31 mmol) u THF-u (10 mL) je dodat vod. trikalijum fosfat (2M, 1.7 mL, 3.47 mmol) da bi se dobila žuta suspenzija. Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2(94 mg, 0.12 mmol) je zatim dodat i N2je u mehurićima uvođen u smešu tokom 2 min. Dobijena reakciona smeša je zagrevana na 80 °C tokom 1 h, koncentrovana i prečišćena primenom ISCO silika gel hromatografije (Kolona od 40 g, Gradijent od 0% do 10% MeOH/CH2Cl2) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (213 mg, 97%) kao bledo narandžasta čvrsta supstanca. LCMS (M+H) = 190; HPLC RT = 0.51 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Korak 2: Metil 3-((5-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)piridin-3-il)amino)benzoat

[0251] U bočicu od 40 mL pod pritiskom koja sadrži 5-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)piridin-3-amin (212 mg, 1.12 mmol), metil 3-bromobenzoat (Lancaster, 241 mg, 1.12 mmol) i Cs2CO3(730 mg, 2.24 mmol) u toluenu (10 mL) je dodat hloro(2-dicikloheksilfosfino-2',4',6'-triizopropil-1,1'-bifenil)[2-(2'-amino-1,1'-bifenil)]paladijum(II) (88 mg, 0.11 mmol). N2je u mehurićima propušten kroz reakcionu smešu tokom 1 min. Bočica je zatvorena i zagrevana do 100 °C tokom 16 h. Nakon hlađenja do sobne temperature, smeša je koncentrovana i prečišćena primenom ISCO silika gel hromatografije (Kolona od 80 g, Gradijent od 0% do 100% EtOAc/CH2Cl2) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (130 mg, 36%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.37 (d, J=2.5 Hz, 1H), 8.13 (d, J=1.9 Hz, 1H), 7.89 - 7.79 (m, 1H), 7.70 (dt, J=7.6, 1.2 Hz, 1H), 7.41 (t, J=7.9 Hz, 1H), 7.34 - 7.31 (m, 1H), 7.28 (dd, J=2.4, 1.0 Hz, 1H), 5.90 (s, 1H), 3.92 (s, 3H), 2.46 (s, 3H), 2.32 (s, 3H); LCMS (M+H) = 324; HPLC RT = 1.90 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Korak 3: Metil 3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-9-karboksilat [0252] Bočica od 40 mL pod pritiskom koja sadrži metil 3-((5-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)piridin-3-il)amino)benzoat (130 mg, 0.40 mmol), paladijum (II) acetat (18 mg, 0.08 mmol) i K2CO3(11.1 mg, 0.08 mmol) u pivalinskoj kiselini (2 mL) je zagrevana otvorena na vazduhu na 110 °C tokom 12 h. Nakon hlađenja do sobne temperature, smeša je razblažena sa MTBE (6 mL), i talog je filtriran sa MTBE ispiranjima. U bočici od 40 mL pod pritiskom, čvrsta supstanca je rastvorena u TFA (3 mL) i paladijum (II) acetat (18.1 mg, 0.08 mmol) je dodat. Bočica je zatvorena i zagrevana na 100 °C tokom 15 h. Nakon hlađenja do sobne temperature, dodatni paladijum (II) acetat (18 mg, 0.08 mmol) je dodat. Reakcija je zatvorena i zagrevana tokom dodatnih 24 h. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakcija je koncentrovana i prečišćena primenom preparativne HPLC (Luna C18 30 x 100 kolona, 12 min gradijent od 10%B do 100%B) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (4 mg, 3%) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (500 MHz, CD3OD) δ 8.85 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.78 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.32 (dd, J=7.5, 0.8 Hz, 1H), 8.17 (dd, J=8.5, 0.7 Hz, 1H), 7.98 (dd, J=8.5, 7.6 Hz, 1H), 4.21 (s, 3H), 2.58 (s, 3H), 2.40 (s, 3H); LCMS (M+H) = 322; HPLC RT = 1.78 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Korak 4: Metil 5-benzil-3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-9-karboksilat [0253] Prateći proceduru analognu onoj koja je opisana u Koraku 1 Primera 46, metil 3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-9-karboksilat (4 mg, 0.012 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (4 mg, 76%).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.61 (d, J=1.9 Hz, 1H), 7.75 (dd, J=7.2, 1.1 Hz, 1H), 7.67 - 7.62 (m, 1H), 7.61 - 7.55 (m, 1H), 7.45 (d, J=1.9 Hz, 1H), 7.35 - 7.27 (m, 3H), 7.11 (dd, J=7.4, 2.1 Hz, 2H), 5.59 (s, 2H), 4.15 (s, 3H), 2.38 (s, 3H), 2.21 (s, 3H).

Korak 5: 2-[5-Benzil-3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-9-il]propan-2-ol [0254] Bočica od 5 mL koja sadrži metil 5-benzil-3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-9-karboksilat (4 mg, 9.5 µmol) u THF-u (0.2 mL) je ohlađena na -78 °C i MeLi (1.6M u Et2O, 36 µL, 57 µmol) je dodavan u kapima. Dobijena reakciona smeša je mešana na -78 °C tokom 30 min, potom kvenčovana sa zas. NH4Cl-om i ekstrahovana sa EtOAc-om (2x). Organski sloj je koncentrovan i prečišćen primenom ISCO silika gel hromatografije (Kolona od 12 g, Gradijent od 50% do 100% EtOAc/CH2Cl2) i dodatno prečišćen primenom prep HPLC (Kolona: Phen Luna C18, 30 x 100 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Gradijent: 10-100% B tokom 12 min, potom 2-min zadržavanje na 100% B; Protok: 40 mL/min). Frakcija koja sadrži željeni proizvod je razblažena sa zas. NaHCO3rastvorom i koncentrovana. Ostatak je ponovo razblažen u zas. NaHCO3rastvoru i ekstrahovan sa CHCl3-om (3x). Organski sloj je osušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (2 mg, 43%).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.81 (br s, 1H), 8.42 (d, J=1.9 Hz, 1H), 7.58 - 7.52 (m, 1H), 7.48 (d, J=1.7 Hz, 1H), 7.42 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.36 - 7.28 (m, 4H), 7.18 - 7.12 (m, 2H), 5.57 (s, 2H), 2.39 (s, 3H), 2.23 (s, 3H), 1.85 (s, 6H); LCMS (M+H) = 412.2; HPLC RT = 2.73 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Primeri 54 & 55

2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0255]

Korak 1: 2-Hloro-5-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)piridin-3-amin

[0256] U posudu od 100 mL sa okruglim dnom koja sadrži 5-bromo-2-hloropiridin-3-amin (2.90 g, 14.0 mmol), 1,4-dimetil-5-(tributilstanil)-1H-1,2,3-triazol (2.70 g, 6.99 mmol) [Seefeld, M.A. et al. PCT Int. Appl., 2008, WO2008098104] i Pd(PPh3)4(0.61 g, 0.52 mmol) u DMF-u (20 mL) je dodat bakarni jodid (0.20 g, 1.05 mmol) i Et3N (1.9 mL, 14.0 mmol). Reakciona smeša je pročišćena sa N2tokom 3 min i zatim zagrevana na 100 °C tokom 1 h. Nakon hlađenja do sobne temperature, smeša je razblažena sa 10% LiCl rastvorom i ekstrahovana sa EtOAc-om (2x). Kombinovane organske supstance su oprane sa zas. NaClom, osušene preko MgSO4, filtrirane i koncentrovane. CH2Cl2je dodat, i dobijeni talog je prikupljen filtracijom. Matični rastvor je koncentrovan i prečišćen primenom ISCO silika gel hromatografije (Kolona od 40 g, Gradijent od 0% do 100% EtOAc/CH2Cl2). Dobijena čvrsta supstanca je kombinovana sa talogom i triturisana sa hladnim EtOAc-om da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (740 mg, 47%) kao svetlo smeđa čvrsta supstanca. LCMS (M+H) = 224.1; HPLC RT = 1.03 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Korak 2: Metil 3-((2-hloro-5-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)piridin-3-il)amino)benzoat

[0257] Prateći proceduru analognu onoj koja je opisana u Koraku 2 Primera 1,2-hloro-5-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)piridin-3-amin (740 mg, 3.31 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (644 mg, 54%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.94 (t, J=1.9 Hz, 1H), 7.88 (d, J=2.1 Hz, 1H), 7.83 (dt, J=7.8, 1.3 Hz, 1H), 7.49 (t, J=7.9 Hz, 1H), 7.40 (d, J=2.1 Hz, 1H), 7.36 (ddd, J=8.0, 2.3, 0.9 Hz, 1H), 6.38 (s, 1H), 3.99 (s, 3H), 3.93 (s, 3H), 2.34 (s, 3H); LCMS (M+H) = 358.2; HPLC RT = 2.34 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min). Korak 3: Metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat [0258] Prateći proceduru analognu onoj koja je opisana u Koraku 3 Primera 1, metil 3-((2-hloro-5-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)piridin-3-il)amino)benzoat (2.82 g, 7.88 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (1.58 g, 62%).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 11.93 (s, 1H), 8.62 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.36 (dd, J=8.2, 0.6 Hz, 1H), 8.29 - 8.22 (m, 1H), 8.16 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.91 (dd, J=8.2, 1.4 Hz, 1H), 4.02 (s, 3H), 3.94 (s, 3H), 2.31 (s, 3H); LCMS (M+H) = 322.3; HPLC RT = 1.98 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Alternativna sinteza metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata

[0259] Smeša metil 3-bromo-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (Korak 2 Primera 40, 3.000 g, 9.83 mmol), 1,4-dimetil-5-(tributilstanil)-1H-1,2,3-triazola (4.18 g, 10.82 mmol), bakar (I) jodida (0.281 g, 1.475 mmol), Pd(Ph3P)4(0.738 g, 0.639 mmol) i trietilamina (2.74 mL, 19.66 mmol) u DMF-u (25 mL) je pročišćena pod strujom azota i zatim zagrevana u bloku za zagrevanje na 95 °C tokom 2 sata. Nakon hlađenja do sobne temperature reakciona smeša je razblažena sa vodom i ekstrahovana u etil acetatu. Oprana sa vodom, NH4OH-om, slanim rastvorom i koncentrovana. Ostatak je triturisan sa 100 mL CHCl3, izfiltrirana čvrsta supstanca i isprana sa CHCl3-om da se dobije 1.6 g proizvoda. Filtrat je nanet na ISCO kolonu (Kolona od 330 g, A: DCM; B: 10%MeOH/DCM, 0 do 100% Gradijent) i podvrgnut hromatografiji da se dobije dodatnih 0.7 g. metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (2.30 g ukupno, 7.16 mmol, 72.8 % prinos).

Korak 4: Metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0260] Prateći proceduru analognu onoj koja je opisana u Koraku 4 Primera 1, metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (80 mg, 0.25 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (65 mg, 53%) Nakon prečišćavanja pomoću prep HPLC (Kolona: Phen Luna C18, 30 x 100 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Gradijent: 10-100% B tokom 14 min, potom 2-min zadržavanje na 100% B; Protok: 40 mL/min).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.51 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.47 (d, J=8.1 Hz, 1H), 8.10 (dd, J=8.1, 1.1 Hz, 1H), 7.63 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.46 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.40 - 7.30 (m, 3H), 5.62 (d, J=10.6 Hz, 1H), 4.11 - 4.03 (m, 4H), 3.92 - 3.83 (m, 4H), 3.56 (td, J=11.9, 1.8 Hz, 1H), 3.35 (td, J=11.9, 1.9 Hz, 1H), 3.18 - 3.05 (m, 1H), 2.30 (s, 3H), 2.04 (d, J=13.0 Hz, 1H), 1.71 -1.58 (m, 1H), 1.50 - 1.37 (m, 1H), 1.09 (d, J=12.8 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 496.3; HPLC RT = 2.93 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Korak 5: 2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol,

[0261] Prateći proceduru analognu onoj koja je opisana u Koraku 5 Primera 1, metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (65 mg, 0.13 mmol) je konvertovan u racemski 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-6]indol-7-il]propan-2-ol, koji je razdvojen hiralnom prep SFC (Kolona: Chiralpak IB 25 x 2 cm, 5 µm; Mobilna faza: 70/30 CO2/MeOH; Protok: 50 mL/min);da se dobiju Enantiomer A (24 mg, 36%) i Enantiomer B (26 mg, 38%). Enantiomer A:<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) 68.44 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.36 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.56 (d, J=1.7 Hz, 1H), 7.47 - 7.41 (m, 3H), 7.37 - 7.32 (m, 2H), 7.31 - 7.28 (m, 1H), 5.59 (d, J=10.5 Hz, 1H), 4.06 (dd, J=11.8, 2.8 Hz, 1H), 3.90 - 3.84 (m, 4H), 3.55 (td, J=11.9, 2.0 Hz, 1H), 3.35 (td, J=11.9, 2.0 Hz, 1H), 3.15 - 3.04 (m, 1H), 2.30 (s, 3H), 2.04 (d, J=13.6 Hz, 1H), 1.92 (s, 1H), 1.75 (s, 6H), 1.69 - 1.58 (m, 1H), 1.47 - 1.38 (m, 1H), 1.12 (d, J=13.4 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 496.4; HPLC RT = 2.46 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min). SFC RT = 5.50 min (Kolona: Chiralpak IB 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 70/30 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min); SFC RT = 1.06 min (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 50/50 CO2/(1:1 MeOH/CH3CN); Protok: 2 mL/min); [α]D<20>= -117.23 (c = 0.08, CHCl3). Enantiomer B:<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.44 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.36 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.56 (d, J=1.7 Hz, 1H), 7.47 - 7.41 (m, 3H), 7.37 - 7.32 (m, 2H), 7.31 - 7.28 (m, 1H), 5.59 (d, J=10.5 Hz, 1H), 4.06 (dd, J=11.8, 2.8 Hz, 1H), 3.90 - 3.84 (m, 4H), 3.55 (td, J=11.9, 2.0 Hz, 1H), 3.35 (td, J=11.9, 2.0 Hz, 1H), 3.15 - 3.04 (m, 1H), 2.30 (s, 3H), 2.04 (d, J=13.6 Hz, 1H), 1.92 (s, 1H), 1.75 (s, 6H), 1.69 - 1.58 (m, 1H), 1.47 - 1.38 (m, 1H), 1.12 (d, J=13.4 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 496.4; HPLC RT = 2.46 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min). SFC RT = 8.30 min (Kolona: Chiralpak IB 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 70/30 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min); SFC RT = 2.83 min (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 50/50 CO2/(1:1 MeOH/CH3CN); Protok: 2 mL/min); [α]D<20>= 88.78 (c = 0.10, CHCl3). Alternativna sinteza primera 54

2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol.

[0262]

Korak 1: (S)-metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0263] Enantiomeri fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanola (2.0 g, 10.4 mmol) [Orjales, A. et al. J. Med. Chem. 2003, 46, 5512-5532], su razdvojeni na preparativnoj SFC. (Kolona: Chiralpak AD 5 x 25 cm, 5 µm; Mobilna faza: 74/26 CO2/MeOH; Protok: 270 mL/min; Temperatura 30°C). Razdvojeni pikovi su koncentrovani i osušeni pod vakuumom da se dobiju bele čvrste supstance. Enantiomer A: (S)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol: (0.91 g, 45.5%) SFC RT = 2.32 min (Kolona: Chiralpac AD 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza:

1

70/30 CO2/MeOH; Protok: 3 mL/min); Temperatura 40°C. Enantiomer B: (R)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol. (0.92 g, 46%) SFC RT = 3.09 min (Kolona: Chiralpac AD 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 70/30 CO2/MeOH; Protok: 3 mL/min); Temperatura 40°C.

[0264] Prateći proceduru analognu onoj koja je opisana u Koraku 4 Primera 1 izuzev primene toluena (120mL) kao rastvarača, metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (4 g, 12.45 mmol) i (R)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol (Enantiomer B iznad, 5.86 g, 30.5 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (5.0 g, 81%). HPLC RT = 2.91 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Korak 2. (S)-2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0265] Posuda od 500 mL sa okruglim dnom koja sadrži (S)-metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (5.0 g, 10.09 mmol) u THF-u (150 mL) je ohlađena u led/MeOH kupatilu. MeMgBr, (3M u Et2O-u, 17.0 mL, 51.0 mmol) je dodavan polako tokom 4 min. Dobijeni rastvor je mešan tokom 2 h i zatim kvenčovan pažljivo sa zas. NH4Cl-om. Reakciona smeša je razblažena sa 10% LiCl rastvorom ekstrahovan sa EtOAc-om. Organski sloj je osušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan. Sirov materijal je prečišćen primenom ISCO silika gel hromatografije (Kolona od 120 g, Gradijent od 0% do 6% MeOH/CH2Cl2). Proizvod je prikupljen i koncentrovan zatim rastvoren u vrućem MeOH-u(35mL). U smešu je dodato 15mL vode i smeša je ohlađena na sobnu temperaturu. Dobijen beli talog je prikupljen filtracijom sa ispiranjem smešom 2:1 MeOH/voda potom osušen pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (3.2 g, 62%).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.40 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.33 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.53 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.46 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.42 (dd, J=8.2, 1.4 Hz, 1H), 7.37 - 7.31 (m, 2H), 7.30 - 7.28 (m, 1H), 5.56 (d, J=10.5 Hz, 1H), 4.06 (d, J=8.9 Hz, 1H), 3.89 - 3.83 (m, 1H), 3.55 (td, J=11.9, 2.1 Hz, 1H), 3.35 (td, J=11.9, 2.1 Hz, 1H), 3.10 (q, J=10.8 Hz, 1H), 2.39 (s, 3H), 2.23 (s, 3H), 2.03 (d, J=14.2 Hz, 1H), 1.89 (s, 1H), 1.74 (s, 6H), 1.68 - 1.59 (m, 1H), 1.46 - 1.36 (m, 1H), 1.12 (d, J=12.2 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 496.3; HPLC RT = 2.44 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min); SFC RT = 2.01

2

min (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 60/40 CO2/(1:1 MeOH/CH3CN); Protok: 2 mL/min). SFC RT = 1.06 min (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 50/50 CO2/(1:1 MeOH/CH3CN); Protok: 2 mL/min).

Primeri 56-65

[0266] Jedinjenja u Tabeli 3 su pripremljena u skladu sa procedurama koje su opisane za Primer 54:

Tabela 3

HPLC uslovi za Tabelu 3:

Metoda A:

Metoda B:

Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza: 80/20 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm.

Metoda C:

Chiralpak IC 250 x 4.6 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza: 70/30 CO2/MeOH;

Protok: 2 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm.

Primeri 66 & 67

2-{5-[(4-Fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0267]

Korak 1: Metil 5-((4-fluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-3-(1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0268] Smeša 1-metil-5-(tributilstanil)-1H-1,2,3-triazola (244 mg, 0.66 mmol) [Allgeier, H. et al., PCT Int. Appl., 2006, WO2006108591], metil 3-bromo-5-((4-fluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (Korak 3 Primera 40, 163 mg, 0.33 mmol), bakar (I) jodida (9 mg, 0.05 mmol), Pd(PPh3)4(28 mg, 0.02 mmol) i trietilamina (0.091 mL, 0.65 mmol) u DMF-u (2.0 mL) je pročišćena sa N2(3x) i zatim zagrejana do 100 °C i mešana tokom 2 h. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je filtrirana

4

kroz Celite® pranjem sa EtOAc-om. Filtrat je opran sa 10% LiCl rastvorom i zas. NaCl-om, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan. Ostatak je prečišćen primenom ISCO silika gel hromatografije (Kolona od 24 g, Gradijent od 0% do 100% EtOAc/heksani) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (64 mg, 39%). LCMS (M+H) = 500.2.

Korak 2: 2-{5-[(4-Fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0269] Prateći proceduru analognu onoj koja je opisana u Koraku 5 Primera 1, metil 5-((4-fluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-3-(1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (65 mg, 0.13 mmol) je konvertovan u racemski 2-{5-[(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-6]indol-7-il}propan-2-ol, koji je razdvojen hiralnom prep SFC da se dobiju Enantiomer A (20 mg, 30%) i Enantiomer B (20 mg, 30%). Enantiomer A:<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.59 (s, 1H), 8.56 - 8.47 (bs, 1H), 8.15 (d, J=8.4 Hz, 1H), 8.12-8.03 (m, 2H), 7.73 (dd, J=8.6, 5.5 Hz, 2H), 7.48 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.18 (t, J=8.8 Hz, 2H), 5.83 (d, J=11.2 Hz, 1H), 5.22 (s, 1H), 4.14 (s, 3H), 3.92 (d, J=9.7 Hz, 1H), 3.73 (d, J=8.8 Hz, 1H), 3.56 - 3.35 (m, 2H), 3.27 (d, J=13.6 Hz, 1H), 1.68 (m., 1H), 1.58 (m, 7H), 1.42 - 1.21 (m, 1H), 0.98 (d, J=12.8 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 500.3; HPLC RT = 7.29 min (Kolona: Sunfire C183.5 µm, 3.0 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 0-100% B tokom 15 min; Protok: 0.5 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm). SFC RT = 9.86 min (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza: 75/25 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min); [α]D<20>= -99.55 (c = 0.14, CHCl3). Enantiomer B:<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.59 (s, 1H), 8.56 - 8.46 (bs, 1H), 8.15 (d, J=8.4 Hz, 1H), 8.03-8.11 (m, 2H), 7.73 (dd, J=8.6, 5.5 Hz, 2H), 7.48 (d, J=8.6 Hz, 1H), 7.18 (t, J=8.8 Hz, 2H), 5.83 (d, J=11.2 Hz, 1H), 5.22 (s, 1H), 4.14 (s, 3H), 4.01 - 3.84 (m, 1H), 3.81 - 3.66 (m, 1H), 3.49 (s, 2H), 3.30 - 3.18 (m, 1H), 1.82 - 1.65 (m, 1H), 1.58 (m, 7H, preklapanje 2CH3i 1CH), 1.40 - 1.21 (m, 1H), 1.10 - 0.89 (m, 1H); LCMS (M+H) = 500.3; HPLC RT = 7.28 min (Kolona: Sunfire C183.5 µm, 3.0 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 0-100% B tokom 15 min; Protok: 0.5 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm). SFC RT = 12.09 min (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza: 75/25 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min); [α]D<20>= 98.84 (c = 0.14, CHCl3).

Primer 69

2-[5-Benzil-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indo1-7-il]propan-2-ol

[0271] Prateći procedure analogne onima koje su opisane u Primeru 46, metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-6]indol-7-karboksilat (Korak 3 Primera 54, 58 mg, 0.18 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (57 mg, 78% preko 2 koraka).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.49 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.40 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.78 (d, J=0.9 Hz, 1H), 7.48 (dd, J=8.2, 1.5 Hz, 1H), 7.42 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.35 - 7.29 (m, 3H), 7.16 (dd, J=7.7, 1.8 Hz, 2H), 5.59 (s, 2H), 3.89 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 1.87 (s, 1H), 1.71 (s, 6H); LCMS (M+H) = 412.4; HPLC RT = 2.33 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Primeri 70 & 71

2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-[oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0272]

Korak 1: Metil 3-((2-hloro-5-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)piridin-3-il)amino)-2-fluorobenzoat

[0273] U bočicu od 70 mL pod pritiskom koja sadrži 2-hloro-5-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)piridin-3-amin (Korak 1 Primera 54, 500 mg, 2.24 mmol), metil 3-bromo-2-fluorobenzoat (Oakwood, 781 mg, 3.35 mmol) i Cs2CO3(728 mg, 2.24 mmol) u dioksanu (10 mL) je dodat 1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen (62.0 mg, 0.11 mmol), Pd(OAc)2(85 mg, 0.38 mmol) i Ksantfos (65 mg, 0.11 mmol). N2je u mehurićima propuštan kroz reakcionu smešu tokom 2 min. Bočica je zatvorena i zagrevana do 100 °C tokom 24 h. BrettPhos prekatalizator (100 mg, 0.12 mmol) i dodatni metil 3-bromo-2-fluorobenzoat (781 mg, 3.35 mmol) su dodati. N2je u mehurićima propuštan kroz reakcionu smešu tokom 2 min, i zatim zagrevanje je nastavljeno na 110 °C tokom 24 h. Dodatni BrettPhos prekatalizator (100 mg, 012 mmol) je dodat i mešanje je nastavljeno na 120 °C tokom 5 h. BrettPhos prekatalizator (100 mg, 0.12 mmol) je ponovo dodat i reakciona smeša je zagrevana na 120 °C tokom 5 h. Nakon hlađenja do sobne temperature, smeša je razblažena sa CHCl3-om i filtrirana kroz Celite® ispirajući sa CHCl3-om. Filtrat je koncentrovan i prečišćen primenom ISCO silika gel hromatografije (Kolona od 40 g, Gradijent od 0% do 100% EtOAc/CH2Cl2) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (140 mg, 17%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.90 (d, J=2.1 Hz, 1H), 7.74 (ddd, J=8.0, 6.5, 1.7 Hz, 1H), 7.52 - 7.44 (m, 1H), 7.24 (d, J=0.9 Hz, 1H), 7.17 (t, J=2.0 Hz, 1H), 6.34 (s, 1H), 3.97 (d, J=0.7 Hz, 6H), 2.32 (s, 3H); LCMS (M+H) = 376.3; HPLC RT = 2.23 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min). Korak 2: 2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-[oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0274] Prateći procedure analogne onima koje su opisane u Koracima 3, 4 i 5 Primera 1, metil 3-((2-hloro-5-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)piridin-3-il)amino)-2-fluorobenzoat (139 mg, 0.37 mmol) je konvertovan u racemski 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-[oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol, koji je razdvojen hiralnom prep SFC da se dobiju Enantiomer A (28 mg, 15% over 3 steps) i Enantiomer B (27 mg, 14% over 3 steps). Enantiomer A:<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.44 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.15 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.63 (dd, J=8.2, 6.7 Hz, 1H), 7.54 - 7.47 (m, 3H), 7.40 - 7.34 (m, 2H), 7.31 (d, J=7.3 Hz, 1H), 6.15 (br. s., 1H), 4.06 (dd, J=11.6, 2.3 Hz, 1H), 3.89 (dd, J=11.5, 2.1 Hz, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.56 (td, J=11.9, 2.1 Hz, 1H), 3.39 - 3.28 (m, 1H), 3.03 (d, J=7.0 Hz, 1H), 2.26 (s, 3H), 2.23 (d, J=2.4 Hz, 1H), 2.11 - 2.03 (m, 1H), 1.85 (d, J=2.7 Hz, 6H), 1.68 - 1.60 (m, 1H), 1.53 - 1.47 (m, 1H), 1.02 (d, J=13.3 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 514.4; HPLC RT = 2.84 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min); SFC RT = 9.50 min (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 75/25 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min);

[α]D<20>=-142.33 (c = 0.08, CHCl3). Enantiomer B:<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.44 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.15 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.63 (dd, J=8.2, 6.7 Hz, 1H), 7.54 - 7.47 (m, 3H), 7.40 - 7.34 (m, 2H), 7.31 (d, J=7.3 Hz, 1H), 6.15 (br. s., 1H), 4.06 (dd, J=11.6, 2.3 Hz, 1H), 3.89 (dd, J=11.5, 2.1 Hz, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.56 (td, J=11.9, 2.1 Hz, 1H), 3.39 - 3.28 (m, 1H), 3.03 (d, J=7.0 Hz, 1H), 2.26 (s, 3H), 2.23 (d, J=2.4 Hz, 1H), 2.11 - 2.03 (m, 1H), 1.85 (d, J=2.7 Hz, 6H), 1.68 - 1.60 (m, 1H), 1.53 - 1.47 (m, 1H), 1.02 (d, J=13.3 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 514.4; HPLC RT = 2.84 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min); SFC RT = 11.86 min (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 75/25 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min); [α]D<20>= 92.61 (c = 0.10, CHCl3).

Primeri 72-77

[0275] Jedinjenja u Tabeli 4 su pripremljena u skladu sa procedurama koje su opisane za Primer 70:

Tabela 4

HPLC uslovi za Tabelu 4:

Metoda A:

Metoda B:

Metoda C:

Primer 78 & 79

2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-8-fluoro-5-[(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0276]

Korak 1: Metil 4-(5-bromo-3-nitropiridin-2-il)-2-fluorobenzoat

[0277] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za Korak 1 Primera 40, 2,5-dibromo-3-nitropiridin (2.28 g, 8.08 mmol) i (3-fluoro-4-(metoksikarbonil)fenil)boronska kiselina (1.60 g, 8.08 mmol) su konvertovani u jedinjenje iz naslova (1.8 g, 63%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.97 (d, J=2.1 Hz, 1H), 8.39 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.05 (t, J=7.7 Hz, 1H), 7.73 - 7.71 (m, 1H), 7.40 (dd, J=10.9, 1.7 Hz, 1H), 7.35 (dd, J=8.1, 1.7 Hz, 1H), 3.99 (s, 3H); LCMS (M+H) = 355.2; HPLC RT = 2.58 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min). Korak 2: Metil 3-bromo-6-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat Metil 3-bromo-8-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0278] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za Korak 2 Primera 40, konverzija metil 4-(5-bromo-3-nitropiridin-2-il)-2-fluorobenzoata (1.80 g, 5.07 mmol) je stvorila smešu jedinjenja iz naslova, koja su razdvojena primenom ISCO silika gel hromatografije (Kolona od 120 g, Gradijent od 50% do 70% EtOAc/heksani) da se dobiju metil 3-bromo-6-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (200 mg, 12%) i metil 3-bromo-8-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (240 mg, 15%) kao bele čvrste supstance. Metil 3-bromo-6-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat:<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.43 (br. s., 1H), 8.64 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.18 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.06 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.71 (dd, J=8.3, 6.1 Hz, 1H), 3.92 (s, 3H); LCMS (M+H) = 323.1; HPLC RT = 2.62 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min). Metil 3-bromo-8-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat:<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.81 (s, 1H), 8.59 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.29 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.11 (d, J=5.9 Hz, 1H), 8.02 (d, J=10.6 Hz, 1H), 3.91 (s, 3H); LCMS (M+H) = 323.1; HPLC RT = 2.56 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Korak 3: Metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-8-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0279] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za Korak 1 Primera 66, metil 3-bromo-8-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (240 mg, 0.74 mmol) i 1,4-dimetil-5-(tributilstanil)-1H-1,2,3-triazol (344 mg, 0.89 mmol) [Seefeld, M.A. et al. PCT Int. Appl., 2008, WO2008098104] su konvertovani u jedinjenje iz naslova (115 mg, 46%).<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.58 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.19 (d, J=5.5 Hz, 1H), 8.12 (d, J=10.8 Hz, 1H), 8.09 (d, J=1.8 Hz, 1H), 4.08 (s, 3H), 4.01 (s, 3H), 2.38 (s, 3H); LCMS (M+H) = 340.2; HPLC RT = 2.13 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Korak 4: 2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-8-fluoro-5-[(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0280] Prateći procedure analogne onima koje su opisane u Koracima 4 i 5 Primera 1, metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-8-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (115 mg, 0.34 mmol) i (4-fluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol (Korak 1 Primera 25, 143 mg,

1

0.68 mmol) su konvertovani u racemski 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-8-fluoro-5-[(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol, koji je razdvojen hiralnom prep SFC da se dobiju Enantiomer A (10 mg, 11%) i Enantiomer B (10 mg, 11%). Enantiomer A:<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.46 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.03 (d, J=11.4 Hz, 1H), 7.99 (d, J=6.1 Hz, 1H), 7.58 (d, J=1.6 Hz, 1H), 7.43 (dd, J=8.7, 5.1 Hz, 2H), 7.10 - 7.02 (m, 2H), 5.53 (d, J=10.5 Hz, 1H), 4.07 (dd, J=11.7, 2.7 Hz, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.89 (dd, J=11.7, 2.8 Hz, 1H), 3.60 - 3.49 (m, 1H), 3.36 (td, J=11.9, 1.9 Hz, 1H), 3.12 - 2.98 (m, 1H), 2.32 (s, 3H), 2.26 (d, J=2.0 Hz, 1H), 1.99 (d, J=13.4 Hz, 1H), 1.81 (s, 6H), 1.69 - 1.55 (m, 1H), 1.48 - 1.35 (m, 1H), 1.11 (d, J=12.8 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 532.4; HPLC RT = 10.52 min (Kolona: Sunfire C183.5 µm, 3.0 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 0-100% B tokom 15 min; Protok: 0.5 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm). SFC RT = 6.71 min (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza: 75/25 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min). [α]D<20>= -100.86 (c = 0.68, CHCl3). Enantiomer B:<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.46 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.03 (d, J=11.4 Hz, 1H), 7.99 (d, J=6.1 Hz, 1H), 7.58 (d, J=1.6 Hz, 1H), 7.43 (dd, J=8.7, 5.1 Hz, 2H), 7.11 - 7.02 (m, 2H), 5.53 (d, J=10.5 Hz, 1H), 4.07 (dd, J=11.7, 2.8 Hz, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.89 (dd, J=11.9, 2.8 Hz, 1H), 3.60 - 3.51 (m, 1H), 3.36 (td, J=11.9, 1.9 Hz, 1H), 3.12 - 2.99 (m, 1H), 2.32 (s, 3H), 2.28 (d, J=2.1 Hz, 1H), 1.99 (d, J=13.7 Hz, 1H), 1.81 (s, 6H), 1.68 - 1.55 (m, 1H), 1.49 - 1.36 (m, 1H), 1.11 (d, J=12.6 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 499.3; HPLC RT = 10.54 min (Kolona: Sunfire C183.5 µm, 3.0 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 0-100% B tokom 15 min; Protok: 0.5 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm); SFC RT = 8.09 min (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza: 75/25 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min). [α]D<20>= 91.50 (c = 1.58, CHCl3).

Primer 80 & 81

2-[3-(Dimetil-1,2-oksazol-4-il)-6-fluoro-5-[(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0281]

1 1

[0282] Racemski 2-[3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-6-fluoro-5-[(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol, je pripremljen prateći procedure analogne onima koje su opisane za Primer 70, zamenjujući 2-hloro-5-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)piridin-3-amin (Korak 1 Primera 1) za 2-hloro-5-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)piridin-3-amin u Koraku 1. Razdvajanje hiralnom prep SFC je dalo Enantiomere A i B. Enantiomer A:<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.47 (br s, 1 H), 7.97 (d, J=8.1 Hz, 1 H), 7.53 - 7.81 (m, 3 H), 7.12 - 7.23 (m, 3 H), 5.94 (d, J=11.0 Hz, 1 H), 3.88 (d, J=11.9 Hz, 1 H), 3.75 (dd, J=10.5, 3.2 Hz, 1 H), 3.44 - 3.53 (m, 1 H), 3.26 (dd, J=11.8, 10.0 Hz, 2 H), 2.42 (br s, 3 H), 2.24 (br s, 3 H), 1.78 (d, J=12.1 Hz, 1 H), 1.67 (br s, 6 H), 1.25 - 1.40 (m, 1 H), 0.98 - 1.09 (m, 1 H); LCMS (M+H) = 532.4; HPLC RT = 9.36 min (Kolona: Sunfire C18 3.5 µm, 3.0 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 0-100% B tokom 15 min; Protok: 0.5 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm). SFC RT = 15.16 min (Kolona: Phenomenex Lux Cellulose 4, 250 x 4.6 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza: 75/25 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min). Enantiomer B:<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.47 (br s, 1 H), 7.97 (d, J=8.1 Hz, 1 H), 7.54 - 7.77 (m, 3 H), 7.17 (t, J=7.7 Hz, 2 H), 5.94 (d, J=10.6 Hz, 1 H), 3.88 (d, J=9.2 Hz, 1 H), 3.72 - 3.79 (m, 1 H), 3.49 (dd, J=11.6, 10.0 Hz, 1 H), 3.21 - 3.31 (m, 1 H), 2.42 (br s, 3 H), 2.24 (br s, 3 H), 1.78 (d, J=12.3 Hz, 1 H), 1.67 (br s, 6 H), 1.30 (d, J=9.7 Hz, 1 H), 1.03 (d, J=12.5 Hz, 1 H); LCMS (M+H) = 532.4; HPLC RT = 9.36 min (Kolona: Sunfire C183.5 µm, 3.0 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 0-100% B tokom 15 min; Protok: 0.5 mL/min); SFC RT = 18.88 min (Kolona: Phenomenex Lux Cellulose 4, 250 x 4.6 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza: 75/25 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min).

Primeri 82-87

[0283] Jedinjenja u Tabeli 5 su pripremljena u skladu sa procedurom koja je opisana za Primer 80:

1 2

Tabela 5

N/A: Nije Primenljivo/Dostupno

HPLC uslovi za Tabelu 5:

Metoda A:

Kolona: Sunfire C183.5 µm, 3.0 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 0-100% B tokom 15 min; Protok: 0.5 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm.

Metoda B:

Kolona: Chiralpak IC, 250 x 4.6 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza: 70/30 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min; Detekcija UV na 220 nm.

Primer 88

(S)-2-(3-(4-(Hidroksimetil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il)propan-2-ol

[0284]

1

Korak 1: 4-(((terc-Butildimetilsilil)oksi)metil)-5-jodo-1-((trimetilsilil)metil)-1H-1,2,3-triazol

[0285] Smeša terc-butildimetil(prop-2-in-1-iloksi)silana (Aldrich, 0.85 mL, 4.19 mmol), (azidometil)trimetilsilana (TCI, 0.560 g, 4.61 mmol), bakar (I) jodida (0.88 g, 4.61 mmol), 1-bromopirolidin-2,5-diona (Aldrich, 0.90 g, 5.03 mmol) i DIEA (0.73 mL, 4.19 mmol) u THF-u (35.0 mL) je mešana na sobnoj temperaturi tokom noći i zatim koncentrovana u vakuumu. Ostatak je rastvoreno u EtOAc-u, opran sa 10/90 conc. NH4OH/zas. NH4Cl rastvorom, vodom i zas. NaCl-om i zatim osušena preko Na2SO4. Filtracija i koncentracija su obezbedile sirovo ulje koje je prečišćeno primenom ISCO silika gel hromatografije (Kolona od 80 g, Gradijent od 0% do 50% EtOAc/heksani) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.40 g, 22%) kao žuto-smeđe ulje. LCMS (M+H) = 426.2;<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.77 (s, 2H), 3.84 (s, 2H), 1.00 - 0.86 (m, 9H), 0.25 - 0.19 (m, 9H), 0.16 - 0.11 (m, 6H).

Korak 2: (S)-Metil 3-bromo-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0286] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za Korak 4 Primera 1, metil 3-bromo-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (Korak 2 Primera 40, 1.00 g, 3.28 mmol) i (R)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol (1.26 g, 6.55 mmol) [dobijeni nakon hiralne SFC racemskog fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanola pripremljenog u skladu sa Orjales, A. et al. J. Med. Chem.2003, 46, 5512-5532] su konvertovani u jedinjenje iz naslova (2.06 g) kao nečistu smešu, koja je preneta u neredni korak bez dodatnog prečišćavanja. LCMS (M+H) = 481.2.

Korak 3: (S)-Metil 5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0287] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za Korak 4 Primera 40, (S)-metil 3-bromo-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (800 mg, 1.67 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (365 mg, 42%). LCMS (M+H) = 445.4 (boronska kiselina).

1 4

Korak 4: (S)-Metil 3-(4-(((terc-butildimetilsilil)oksi)metil)-1-((trimetilsilil)metil)-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0288] Bočica koja sadrži smešu (S)-metil 5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (360 mg, 0.68 mmol), 4-(((terc-butildimetilsilil)oksi)metil)-5-jodo-1-((trimetilsilil)metil)-1H-1,2,3-triazola (393 mg, 0.92 mmol) PdCl2dppf (25 mg, 0.034 mmol) i vod. kalijum fosfata tribazičnog (3M, 0.68 mL, 2.05 mmol) u THF-u (5 mL) je vakuumski pročišćena sa N2(3x). Dobijena smeša je zagrejana do 80 °C, mešana tokom 1 h i zatim ohlađena na sobnu temperaturu. Smeša je razblažena sa EtOAc-om, prebačena u levak za odvajanje, oprana sa vodom i zas. NaCl-om, i osušena preko Na2SO4. Filtracija i koncentracija su obezbedile sirovo ulje koje je prečišćeno primenom ISCO silika gel hromatografije (Kolona od 40 g, Gradijent od 0% do 100% EtOAc/heksani) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (277 mg, 58%). LCMS (M+H) = 698.6.

Korak 5: (S)-2-(3-(4-(((terc-Butildimetilsilil)oksi)metil)-1-((trimetilsilil)metil)-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il)propan-2-ol

[0289] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za Korak 5 Primera 1, (S)-metil 3-(4-(((terc-butildimetilsilil)oksi)metil)-1-((trimetilsilil)metil)-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-6]indol-7-karboksilat (270 mg, 0.39 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (212 mg, 79%). LCMS (M+H) = 698.7.

Korak 6: (S)-2-(3-(4-(Hidroksimetil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il)propan-2-ol

[0290] TBAF (1M u THF-u, 0.74 mL, 0.74 mmol) je dodat u rastvor (S)-2-(3-(4-(((tercbutildimetilsilil)oksi)metil)-1-((trimetilsilil)metil)-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il)propan-2-ola, (208 mg, 0.30 mmol) u THF-u (3.0 mL) i vodi (11 µL, 0.60 mmol) na 0 °C. Dobijena reakciona smeša je mešana na 0 °C tokom 30 min. Dodatni TBAF (1M u THF-u, 0.74 mL, 0.74 mmol) je dodat i mešanje je nastavljeno na sobnoj temperaturi tokom 1 h. TBAF (1M u THF-u, 0.74 mL, 0.74 mmol) je ponovo dodat, i nakon mešanja tokom 1 h reakciona smeša je kvenčovana sa zas. NH4Cl-om i prebačena u levak za odvajanje. Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc-om (2x). Kombinovani ekstrakti su oprani sa zas. NH4Cl-om, vodom i zas. NaCl-om, i zatim osušeni preko Na2SO4. Filtracija i koncentracija su dale ostatak koji je prečišćen primenom ISCO silika gel hromatografije (Kolona od 24 g, Gradijent od 0% do 10% MeOH/CH2Cl2) da bi se dobilo

1

jedinjenje iz naslova (128 mg, 78%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.64 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.54 (br s, 1H), 8.15 (d, J=8.4 Hz, 2H), 7.67 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.53 - 7.45 (m, 1H), 7.39 - 7.30 (m, 2H), 7.26 (d, J=7.3 Hz, 1H), 5.79 (d, J=11.2 Hz, 1H), 5.37 (t, J=5.2 Hz, 1H), 5.23 (s, 1H), 4.54 (t, J=4.6 Hz, 2H), 4.07 (s, 3H), 3.89 (br s, 1H), 3.74 (br s, 1H), 3.45 (d, J=13.0 Hz, 2H), 3.29 (br s, 1H), 1.67 (br s, 1H), 1.59 (m, 7H), 1.40 - 1.20 (m, 1H), 1.05 (br s, 1H); LCMS (M+H) = 512.4; HPLC: RT = 6.08 min (Kolona: Sunfire C183.5 µm, 3.0 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 0-100% B tokom 15 min; Protok: 0.5 mL/min).

Primer 89

2-{3-[4-(Metoksimetil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0291]

Korak 1: Metil 3-(4-(hidroksimetil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0292] Tetrabutilamonijum fluorid (1M u THF-u, 16.1 mL, 16.1 mmol) je dodat u rastvor (S)-metil 3-(4-(((terc-butildimetilsilil)oksi)metil)-1-((trimetilsilil)metil)-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata na sobnoj temperaturi, pripremljenog u Primeru 88, Korak 4 (750 mg, 1.07 mmol) u THF-u (10 mL). Dobijena smeša je mešana tokom 15 min. Reakcija je kvenčovana sa zas. vod. NH4Cl rastvorom, prebačena u levak za odvajanje, i ekstrahovana sa etil acetatom. Ekstrakti su kombinovani, oprani sa zas. vod. NH4Cl rastvorom, vodom i slanim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirani, i koncentrovani da se obezbedi bistro-žuto ulje. Sirov proizvod je prečišćen primenom ISCO silika gel hromatografije (Kolona od 40 g, 0% do 100% etil acetat/dihlorometan) da se dobije (S)-metil 3-(4-(hidroksimetil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (500 mg, 0.977 mmol, 91 %). Analitička hiralna SFC je prikazala 93% hiralne čistoće. Jedinjenje je podvrgnuto preparativnom hiralnom SFC razdvajanju da bi se dobio (S)-metil 3-(4-(hidroksimetil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-

1

pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (400 mg, 0.782 mmol, 73 % prinos, >99.% hiralne čistoće kao što je određeno pomoću Analitičke hiralne SFC. LCMS (M+H) = 512.3.

Korak 2 : (S)-Metil 3-(4-(metoksimetil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0293] Natrijum hidrid (60% u ulju, 8.44 mg, 0.211 mmol) je dodat u bočicu koja sadrži rastvor (S)-metil 3-(4-(hidroksimetil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (54.0 mg, 0.106 mmol) u DMF-u (1 mL) na 0 °C. Primećeno je oslobađanje gasa i reakcija je mešana tokom 10 min pre dodavanja jodometana (0.0130 mL, 0.211 mmol). Nakon 10 min, još natrijum hidrida (60% u ulju, 8.44 mg, 0.211 mmol) i jodometana (0.0130 mL, 0.211 mmol) je dodato. Reakcija je kvenčovana sa zas. vod. NH4Cl-om, razblažena sa etil acetatom, prebačena u levak za odvajanje, oprana sa 10% LiCl rastvorom, vodom i slanim rastvorom, osušena preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirana, i koncentrovana da bi se obezbedio sirovi (S)-metil 3-(4-(metoksimetil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (72.0 mg, 0.137 mmol, 130 %) kao žuto ulje. LCMS (M+H) = 525.0. Proizvod je primenjen bez dodatnog prečišćavanja.

Korak 3: (S)-2-(3-(4-(Metoksimetil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il)propan-2-ol

[0294] Metilmagnezijum bromid (3M u Et2O-u, 0.533 mL, 1.60 mmol) je dodat u rastvor (S)-metil 3-(4-(metoksimetil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (56.0 mg, 0.107 mmol) u THF-u (1 mL) na 0 °C. Nakon 15 min, reakcija je kvenčovana pažljivo sa zas. vod. amonijum hlorid rastvorom, prebačena u levak za odvajanje, razblažena sa etil acetatom, oprana sa vodom i slanim rastvorom, osušena preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirana, i koncentrovana da bi se dobilo bistro ulje. Ulje je rastvoreno u minimumu dihlorometana i prečišćeno na ISCO pratećem hromatografskom sistemu (12 g silika kartridža, eluiranje sa 0-10% smešom metanol/dihlorometan, 30 mL/min) da bi se obezbedio onečišćen (S)-2-(3-(4-(metoksimetil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il)propan-2-ol (41.4 mg, 0.0790 mmol, 74 %). LCMS (M+H) = 526.4. HPLC: RT = 3.02 min (Kolona: Sunfire C18 3.5 µm, 3.0 x 150 mm; Mobilna faza A: 10:90 metanol:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 metanol:voda sa 0.1% TFA; Gradijent 0-100% B tokom 5 min; Protok: 1.0 mL/min). Proizvod je dalje prečišćen pomoću preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza

1

A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 17-57% B tokom 25 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da bi se obezbedio (S)-2-(3-(4-(metoksimetil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il)propan-2-ol (32.4 mg, 0.0620 mmol, 58%), i njegova potvrđena čistoća pomoću LCMS analize je bila 100%. Dve analitičke LC/MS injekcije su primenjene da se odredi konačna čistoća. HPLC (Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1.11 mL/min; Detekcija: UV na 220.) RT: 1.59 min. LCMS (M+H) =526.3nm. HPLC (Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95Acetonitril:voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1.11 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm); HPLC RT: 1.39. LCMS (M+H) =526.3.<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.57 (s, 1H), 8.49 (br. s., 1H), 8.16 (m 2H), 7.66 (d, J=7.4 Hz, 2H), 7.49 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.38-7.30 (m, 2H), 7.29-7.20 (m, 1H), 5.80 (d, J=11.1 Hz, 1H), 4.47 (s, 2H), 4.07 (br. s., 3H), 3.91 (d, J=6.1 Hz, 1H), 3.75 (d, J=9.1 Hz, 1H), 3.32-3.21 (m, 4H), 2.51 (br. s., 2H), 1.70 (d, J=12.5 Hz, 1H), 1.59 (m 7H), 1.40-1.25 (m, 1H), 1.11-0.93 (m, 1H).

Primeri 90 & 91

2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)(<2>H)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0295]

Korak 1: N-Metoksi-N-metiloksan-4-karboksamid

1

[0296] U posudu od 1 L sa okruglim dnom, rastvor tetrahidro-2H-piran-4-karboksilne kiseline (46.0 g, 353 mmol) u dihlorometanu (250 mL) je tretiran sa 1,1'-karbonildiimidazolom (63.0 g, 389 mmol) u delovima – oprez stvaranje mehurova. Nakon završetka dodavanja smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h i zatim tretirana u delovima sa N,O-dimetilhidroksilaminom, HCl (37.9 g, 389 mmol) i zatim mešana tokom noći na sobnoj temperaturi. Oprana sa vodom i slanim rastvorom, osušena preko MgSO4, filtrirana, i koncentrovana da se dobije N-metoksi-N-metiloksan-4-karboksamid (55.0 g, 302 mmol, 85 %) kao svetlo žuto-smeđe ulje.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 4.02 (ddd, J=11.4, 4.2, 2.1 Hz, 2H), 3.71 (s, 3H), 3.46 (td, J=11.8, 2.2 Hz, 2H), 3.19 (s, 3H), 1.93-1.80 (m, 2H), 1.69-1.62 (m, 2H).

Korak 2: 4-Benzoiloksan

[0297] Rastvor N-metoksi-N-metiloksan-4-karboksamida (5.00 g, 28.9 mmol) u tetrahidrofuranu (50 mL) u posudi sa okruglim dnom je ohlađen na -78 °C u kupatilu sa suvim ledom/acetonom pod azotom. Rastvor je tretiran pomoću šprica sa fenillitijumom 1.8 M u dibutiletru (24.1 mL, 43.3 mmol) polako tokom 10 min. Dobijena tamna smeša je mešana u kupatilu tokom 2 h pre nego što je sipana u smešu led/zas. vod. amonijum hlorid i ekstrahovana u etil acetat. Organske supstance su oprane sa vodom i slanim rastvorom i koncentrovane. Svetlo žuto ulje je prečišćeno pomoću silika gel kolonske hromatografije na ISCO Companion (kolona sa 120 g silika gela) i eluirano sa EtOAc/heksan gradijentom (10-50%). Frakcije koje sadrže proizvod su prikupljene, i isparljive materije su uklonjene da bi se dobio 4-benzoiloksan (4.30 g, 22.6 mmol, 78 %) kao skoro bezbojno ulje. LCMS: Waters Acquity SDS. Kolona: BEH C182.1x50 mm 1.7u (1.6 min grad) 2-98 % B. Brzina protoka = 0.8 mL/min. Rastvarač A: H2O -0.1 % TFA. Rastvarač B: Acetonitril - 0.1 % TFA. RT = 0.78 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 191.1. HPLC: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm (4 min grad) 0-100% B. Brzina protoka = 4 mL/min. Inj. zap. = 10 uL. Talasna dužina = 220. Temp. peći = 40 °C. Rastvarač A: 10% MeOH - 90% H2O -0.1 % TFA. Rastvarač B: 90% MeOH - 10 % H2O - 0.1 % TFA. HPLC: RT = 1.65 min.

Korak 3: Oksan-4-il(fenil)(<2>H)metanol

[0298] Rastvor 4-benzoiloksana (300 mg, 1.58 mmol) u metanolu (3 mL) u scintilacionoj bočici je tretiran polako u delovima sa natrijum borodeuteridom 98% D (99.0 mg, 2.37 mmol) – trenutno stvaranja mehurića. Nakon završetka dodavanja, smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Smeša je razblažena sa vodom i ekstrahovana u etil acetat. Organske materije su oprane sa vodom i slanim rastvorom i koncentrovane da se dobije

1

oksan-4-il(fenil)(<2>H)metanol (300 mg, 98 %) kao gusto ulje. Ovo je primenjeno bez dodatnog prečišćavanja. HPLC: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm (4 min grad) 0-100% B. Brzina protoka = 4 mL/min. Inj. zap. = 10 uL. Talasna dužina = 220. Temp. peći = 40 °C. Rastvarač A: 10% MeOH - 90% H2O -0.1 % TFA. Rastvarač B: 90% MeOH - 10 % H2O - 0.1 % TFA. HPLC: RT = 1.443 min; LCMS: Waters Acquity SDS. Kolona: BEH C182.1x50 mm 1.7u (1.6 min grad) 2-98 % B. Brzina protoka = 0.8 mL/min.. Rastvarač A: H2O -0.1 % TFA. Rastvarač B: Acetonitril - 0.1 % TFA. LCMS: RT = 0.77 min; (ES): m/z (M+H-H2O)<+>= 176.1.

Korak 4: Metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)(<2>H)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0299] Suspenzija metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (249 mg, 0.776 mmol), fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)(<2>H)metanola (300 mg, 1.55 mmol), i trifenilfosfina (407 mg, 1.55 mmol) u dihlorometanu (5 mL) je mešana u posudi sa okruglim dnom i tretirana u kapima sa DIAD (0.302 mL, 1.55 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Reakciona smeša je dodata direktno na silika gel kolonu i prečišćena je primenom silika gel kolonske hromatografije sa ISCO Companion (kolona sa 40g silika gela) i eluirana sa etil acetatom. Frakcije koje sadrže proizvod su prikupljene, i isparljive materije su uklonjene da bi se dobio metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)(<2>H)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (190 mg, 0.383 mmol, 49 %) kao bela čvrsta supstanca. LCMS: Waters Acquity SDS. Kolona: BEH C182.1x50 mm 1.7u (1.6 min grad) 2-98 % B. Brzina protoka = 0.8 mL/min. Rastvarač A: H2O -0.1 % TFA. Rastvarač B: Acetonitril - 0.1 % TFA. LCMS: RT = 0.89 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 497.2.

Korak 5: 2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[oksan-4-il(fenil)(<2>H)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0300] U posudi sa okruglim dnom, rastvor metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)(<2>H)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (190 mg, 0.383 mmol) u tetrahidrofuranu (10 mL) je ohlađen u ledenom kupatilu pod azotom i tretiran sa metilmagnezijum bromidom (3M u etru, 3.06 mL, 9.20 mmol). Nakon 2 h reakcija je kvenčovana sa zas. vod. amonijum hloridom i ekstrahovana u etil acetat. Organske supstance su oprane sa vodom, i isparljive supstance su koncentrovane da se dobije 120 mg bele čvrste supstance. Materijal je prečišćen primenom silika gel kolonske hromatografije na ISCO Companion (kolona sa 40g silika gela) i eluiran sa (90:9:1 CH2Cl2:MeOH: NH4OH)/CH2Cl2

11

gradijentom (0-100%). Frakcije koje sadrže proizvod su prikupljene, i isparljive supstance su uklonjene da se dobije 150 mg racemata, koji je razdvojen hiralnom prep SFC (Kolona: Chiral OD-H 25 x 3 cm, 5 µm; Mobilna faza: 70/30 CO2/MeOH; Protok: 85 mL/min) da se dobije 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)(<2>H)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol Enantiomer A (50.0 mg, 26%) i 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(R)-oksan-4-il(fenil)(<2>H)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol Enantiomer B (50.0 mg, 26%). Enantiomer A: 1H NMR (400MHz, CDCl3) d 8.42 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.35 (dd, J=8.3, 0.5 Hz, 1H), 7.97 (d, J=0.7 Hz, 1H), 7.55 (d, J=1.7 Hz, 1H), 7.48-7.40 (m, 3H), 7.37-7.27 (m, 3H), 4.05 (dd, J=11.2, 3.3 Hz, 1H), 3.89-3.81 (m, 4H), 3.54 (td, J=11.9, 2.0 Hz, 1H), 3.34 (td, J=11.9, 2.1 Hz, 1H), 3.13-3.03 (m, 1H), 2.29 (s, 3H), 2.06-1.97 (m, 2H), 1.74 (s, 6H), 1.69-1.60 (m, 1H), 1.48-1.35 (m, 1H), 1.11 (d, J=12.2 Hz, 1H). LCMS: RT = 0.76 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 497.3 (Waters Acquity SDS. Kolona: BEH C18 2.1x50 mm 1.7u (1.6 min grad) 2-98 % B. Brzina protoka = 0.8 mL/min. Rastvarač A: H2O -0.1 % TFA. Rastvarač B: Acetonitril - 0.1 % TFA). HPLC: RT= 8.148 min; (Kolona: Sunfire C183.5 µm, 3.0 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 0-100% B tokom 15 min; Protok: 0.5 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm). RT hiralne SFC = 1.06 min (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 50/50 CO2/(1:1 MeOH/CH3CN); Protok: 2 mL/min). Enantiomer B: RT hiralne SFC = 2.83 min (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 50/50 CO2/MeOH Protok: 2 mL/min).

Primeri 92 & 93

2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(2-fluorofenil)(<2>H)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0301]

Korak 1: 4-(2-Fluorobenzoil)oksan

[0302] Rastvor 1-bromo-2-fluorobenzena (10.1 g, 57.7 mmol) u tetrahidrofuranu (50 mL) u posudi sa okruglim dnom je ohlađen na -78 °C u kupatilu sa suvim ledom i acetonom i tretiran polako preko šprica sa nBuLi, 2.5 M u heksanima (23.1 mL, 57.7 mmol), i dobijeni žuto-smeđi rastvor je mešan tokom 35 min u kupatilu. Smeša je tretirana sa rastvorom N-metoksi-N-metiloksan-4-karboksamida (5.00 g, 28.9 mmol) u 10 mL tetrahidrofurana preko šprica da bi se dobio taman rastvor. Nakon 2 h, smeša je kvenčovana sa zas. vod. NH4Cl-om i ekstrahovana u etil acetat. Organske supstance su oprane sa vodom i slanim rastvorom, i isparljive supstance su koncentrovane da bi se dobilo tamno-žuto ulje. Materijal je prečišćen primenom silika gel kolonske hromatografije na ISCO Companion (kolona sa 120 g silika gela) i eluiran sa EtOAc/heksan heksan gradijent (10-40%). Frakcije koje sadrže proizvod su prikupljene, i isparljive supstance su uklonjene su prikupljene, i isparljive supstance su uklonjene da bi se dobio 4-(2-fluorobenzoil)oksan (4.50 g, 21.6 mmol, 75 %) kao svetložuto-smeđe ulje. LCMS: Waters Acquity SDS. Kolona: BEH C182.1x50 mm 1.7u (1.6 min grad) 2-98 % B. Brzina protoka = 0.8 mL/min. Rastvarač A: H2O -0.1 % TFA. Rastvarač B: Acetonitril - 0.1 % TFA. LCMS: RT = 0.81 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 209.1. HPLC: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm (4 min grad) 0-100% B. Brzina protoka = 4 mL/min. Inj. zap. = 10 uL. Talasna dužina = 220. Temp. peći = 40 °C. Rastvarač A: 10% MeOH - 90% H2O -0.1 % TFA. Rastvarač B: 90% MeOH - 10 % H2O - 0.1 % TFA. HPLC: RT = 1.797 min.

Korak 2: 2-Fluorofenil(oksan-4-il)(<2>H)metanol

[0303] Rastvor (2-fluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanona (300 mg, 1.44 mmol) u metanolu (3 mL) u scintilacionoj bočici je tretiran polako u delovima sa natrijum borodeuteridom (90.0 mg, 2.16 mmol) – trenutna pojava mehurića. Nakon završetka dodavanja, smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1.5 h. Smeša je razblažena sa vodom i ekstrahovana u etil acetat. Organske supstance su oprane sa vodom i slanim rastvorom, i isparljive supstance su koncentrovane da se dobije 2-fluorofenil(oksan-4-il)(<2>H)metanol (304 mg, 100%) kao bezbojno ulje. HPLC: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm (4 min grad) 0-100% B. Brzina protoka = 4 mL/min. Inj. zap. = 10 uL. Talasna dužina = 220. Temp. peći = 40 °C. Rastvarač A: 10% MeOH - 90% H2O -0.1 % TFA. Rastvarač B: 90% MeOH - 10 % H2O -0.1 % TFA. HPLC: RT = 1.557 min.

Korak 3: 2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(2-fluorofenil)(<2>H)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol i 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(R)-oksan-4-il(2-fluorofenil)(<2>H)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0304] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za sintezu 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)(<2>H)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ola, metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (228 mg, 0.710 mmol) i (2-fluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)(<2>H)metanol (300 mg, 1.42 mmol) su konvertovani u 150 mg racemskog 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(-oksan-4-il(2-fluorofenil)(<2>H)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ola, koji je razdvojen hiralnom prep SFC (Kolona: Chiral OD-H 25 x 3 cm, 5 µm; Mobilna faza: 70/30 CO2/MeOH; Protok: 85 mL/min) da se dobiju 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(2-fluorofenil)(<2>H)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol Enantiomer A (70.0 mg, 35%) i 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(R)-oksan-4-il(2-fluorofenil)(<2>H)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol Enantiomer B (50.0 mg, 25%). Enantiomer A: 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.46 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.36-8.30 (m, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.82-7.72 (m, 2H), 7.45 (dd, J=8.3, 1.4 Hz, 1H), 7.37-7.28 (m, 1H), 7.25-7.18 (m, 1H), 7.04 (ddd, J=10.5, 8.2, 1.2 Hz, 1H), 4.05 (dd, J=10.6, 3.4 Hz, 1H), 4.00 (s, 3H), 3.87 (dd, J=11.7, 2.4 Hz, 1H), 3.57-3.48 (m, 1H), 3.33 (td, J=11.9, 2.0 Hz, 1H), 3.16 (t, J=11.3 Hz, 1H), 2.37 (s, 3H), 1.95 (s, 1H), 1.88 (d, J=12.3 Hz, 1H), 1.73 (d, J=2.9 Hz, 6H), 1.63 (m, 1H), 1.47-1.34 (m, 1H), 1.12 (d, J=12.6 Hz, 1H). LCMS: RT = 0.78 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 515.3 (Waters Acquity SDS. Kolona: BEH C18 2.1x50 mm 1.7u (1.6 min grad) 2-98 % B. Brzina protoka = 0.8 mL/min. Rastvarač A: H2O -0.1 % TFA. Rastvarač B: Acetonitril - 0.1 % TFA). HPLC: RT= 8.133 min (Kolona: Sunfire C18 3.5 µm, 3.0 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 0-100% B tokom 15 min; Protok: 0.5 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm). RT hiralne SFC = 4.335 min (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 70/30 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min). Enantiomer B: RT hiralne SFC = 7.569 min (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 70/30 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min).

Primeri 94 & 95

2-{5-[(2,3-Difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0305]

11

Korak 1: 4-(2,3-Difluorobenzoil)oksan

[0306] Rastvor 4-bromo-1,2-difluorobenzena (2.40 g, 12.4 mmol) u tetrahidrofuranu (20 mL) u posudi sa okruglim dnom je ohlađen na -78 °C u kupatilu sa suvim ledom i acetonom i tretiran polako u kapima preko šprica sa nBuLi, 2.5 M u heksanima (4.97 mL, 12.4 mmol) i mešan tokom 20 min u kupatilu. Smeša je potom tretirana sa rastvorom N-metoksi-N-metiloksan-4-karboksamida (0.718 g, 4.15 mmol) u 2 mL tetrahidrofurana preko šprica da bi se dobio svetlo-braon rastvor. Nakon 1 h, smeša je kvenčovana sa zas. vod. NH4Cl-om i ekstrahovana u etil acetat. Organske supstance su oprane sa vodom i slanim rastvorom, i isparljive supstance su koncentrovane da se dobije ulje. Analiza pomoću LCMS pokazuje 2 formirana izomerna proizvoda. Materijal je prečišćen pomoću silika gel kolonske hromatografije na ISCO Companion (kolona sa 40 g silika gela) i eluiran sa EtOAc/heksan heksan gradijentom (0-50%). Frakcije koje sadrže glavni izomer su prikupljene, i isparljive supstance su uklonjena da se dobije 4-(2,3-difluorobenzoil)oksan (350 mg, 37%) kao bezbojno ulje.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.54 (ddt, J=7.9, 6.1, 1.7 Hz, 1H), 7.37 (dtd, J=9.5, 8.0, 1.7 Hz, 1H), 7.20 (tdd, J=8.1, 4.6, 1.4 Hz, 1H), 4.05 (dt, J=11.4, 3.5 Hz, 2H), 3.55 (td, J=11.3, 2.9 Hz, 2H), 3.42-3.30 (m, 1H), 1.93-1.74 (m, 4H). Frakcije koje sadrže manjinski izomer su prikupljene, i isparljive supstance su uklonjene da bi se dobio 4-(3,4-difluorobenzoil)oksan (130 mg, 14%) kao bezbojno ulje.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.83-7.70 (m, 2H), 7.33-7.22 (m, 1H), 4.11-4.01 (m, 2H), 3.56 (td, J=11.6, 2.5 Hz, 2H), 3.43 (tt, J=11.0, 4.0 Hz, 1H), 1.95-1.82 (m, 2H), 1.81-1.71 (m, 2H).

Korak 2: (2,3-Difluorofenil)(oksan-4-il)metanol

[0307] Rastvor 4-(2,3-difluorobenzoil)oksana (350 mg, 1.55 mmol) u metanolu (10 mL) je tretiran polako u delovima sa NaBH4 (88.0 mg, 2.32 mmol) – trenutno stvaranje mehura. Nakon završetka dodavanja, smeša je mešana na sobnoj temperaturi. Isparljive supstance su uklonjene, i ostatak je podeljen između zas. vod. NH4Cl i etil acetata. Organske supstance su oprane sa vodom, i isparljive supstance su koncentrovane da se dobije (2,3difluorofenil)(oksan4-il)metanol (350 mg, 99 %) kao bezbojno ulje. LCMS: Waters Acquity SDS. Kolona: BEH C18 2.1x50 mm 1.7u (1.6 min grad) 2-98 % B. Brzina protoka = 0.8 mL/min. Rastvarač A: H2O -0.1 % TFA. Rastvarač B: Acetonitril - 0.1 % TFA. LCMS: RT = 0.74 min; (ES): m/z (M+H-H2O) = 211.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.26-7.17 (m, 1H), 7.14-7.06 (m, 2H), 4.80 (dd, J=7.2, 4.3 Hz, 1H), 4.03 (dd, J=11.4, 3.8 Hz, 1H), 3.95 (dd, J=10.9, 4.1 Hz, 1H), 3.42-3.26 (m, 2H), 2.12 (d, J=4.4 Hz, 1H), 1.97-1.89 (m, 1H), 1.89-1.80 (m, 1H), 1.56-1.39 (m, 2H), 1.31-1.23 (m, 1H).

Korak 3: 2-{5-[(2,3-Difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0308] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za sintezu 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)(<2>H)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ola i 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(R)-oksan-4-il(fenil)(<2>H)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ola, 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (150 mg, 0.467 mmol) i (2,3-difluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol (213 mg, 0.934 mmol) su konvertovani u 140 mg racemskog 2-{5-[(2,3-difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola kao belu čvrstu supstancu, koji je razdvojen hiralnom prep SFC (Kolona: Chiral OD-H 25 x 3 cm, 5 µm; Mobilna faza: 75/25 CO2/MeOH; Protok: 85 mL/min) da se dobiju Enantiomer A (50 mg, 23%) i Enantiomer B (40 mg, 22%). Enantiomer A:<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.49 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.36 (d, J=8.2 Hz, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.58-7.51 (m, 1H), 7.46 (dd, J=8.3, 1.3 Hz, 1H), 7.23-7.11 (m, 2H), 5.77 (d, J=11.6 Hz, 1H), 4.12-4.05 (m, 1H), 4.03 (s, 3H), 3.88 (dd, J=11.9, 2.6 Hz, 1H), 3.59-3.47 (m, 1H), 3.34 (td, J=11.9, 2.1 Hz, 1H), 3.24-3.11 (m, 1H), 2.39 (s, 3H), 2.00 (s, 1H), 1.88 (d, J=12.7 Hz, 1H), 1.74 (d, J=4.9 Hz, 6H), 1.67-1.53 (m, 1H), 1.49-1.33 (m, 1H), 1.14 (d, J=11.7 Hz, 1H). LCMS: RT = 0.78 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 532.4 (Kolona: BEH C182.1x50 mm 1.7u (1.6 min grad) 2-98 % B. Brzina protoka = 0.8 mL/min. Rastvarač A: H2O -0.1 % TFA. Rastvarač B: Acetonitril - 0.1 % TFA). HPLC RT = 9.133 min (Kolona: Sunfire C183.5 µm, 3.0 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 0-100% B tokom 15 min; Protok: 0.5 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm). RT hiralne SFC = 6.660 min (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 75/25 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min). Enantiomer B: RT hiralne SFC = 11.635 min (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 75/25 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min).

Primeri 96 & 97

11

2-{5-[(3,4-Difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0309]

Korak 1: 4-(3,4-Difluorobenzoil)oksan

[0310] U rastvor 4-bromo-1,2-difluorobenzena (1.18 mL, 10.4 mmol) u suvom THF-u (50 mL) je dodat izopropilmagnezijum hlorid (5.21 mL, 10.4 mmol) preko šprica i zatim je mešan na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Etarski rastvor N-metoksi-N-metiloksan-4-karboksamida (1.64 g, 9.47 mmol) je dodat, i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Reakciona smeša je kvenčovana sa vodom (20 mL) i ekstrahovana sa etil acetatom. Kombinovani organski slojevi su oprani sa slanim rastvorom, osušeni preko Na2SO4, i koncentrovani. Sirovi ostatak je takođe prečišćen (24 g „combiflash“ kolona/jedinjenje apsorbovano na silici, eluirano pri 10-15% EA u petroletru) da bi se dobio 4-(3,4-difluorobenzoil)oksan (700 mg, 32 %) kao bezbojno ulje.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.83-7.70 (m, 2H), 7.33-7.22 (m, 1H), 4.11-4.01 (m, 2H), 3.56 (td, J=11.6, 2.5 Hz, 2H), 3.43 (tt, J=11.0, 4.0 Hz, 1H), 1.95-1.82 (m, 2H), 1.81-1.71 (m, 2H).

Korak 2: (3,4-Difluorofenil)(oksan-4-il)metanol

[0311] U promešani rastvor 4-(3,4-difluorobenzoil)oksana (2.80 g, 12.4 mmol) u MeOH-u (60 mL) je dodat NaBH4(0.937 g, 24.8 mmol) u delovima tokom perioda od 2 min i zatim je mešan na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Metanol je uparen, i ostatak je kvenčovan sa ledenom vodom (55 mL) i ekstrahovan sa EtOAc-om(2 x 100 mL). EtOAc-ni ekstakt je osušen preko Na2SO4, filtriran, i koncentrovan da se dobije (3,4-difluorofenil)(oksan-4-il)metanol (2.50 g, 11.0 mmol, 88 %) kao bezbojna tečnost.<1>H NMR (400MHz , CDCl3) δ 7.23-7.10 (m, 2 H), 7.03 (ddd, J = 1.8,4.1, 8.2 Hz, 1 H), 4.38 (dd, J = 2.8, 7.3 Hz, 1 H), 4.08-3.88 (m, 2 H), 3.42-3.23 (m, 2 H), 1.97 (s, 1 H), 1.91-1.72 (m, 2 H), 1.50-1.29 (m, 2 H), 1.24-1.13 (m, 1 H).

11

Korak 3: 2-{5-[(3,4-Difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0312] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za sintezu 2-{5-[(2,3-difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola, (3,4-difluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol (355 mg, 1.56 mmol) je konvertovan u 114 mg racemskog 2-{5-[(3,4-difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola kao belu čvrstu supstancu koji je razdvojen hiralnom prep HPLC (Kolona: Lux Cellulose 4 25 x 2.1 cm, 5 µm; Mobilna faza: 70/30 0.2% DEA u smeši heksan/metanol; Protok: 18 mL/min) da se dobiju Enantiomer A (20.0 mg, 8%) i Enantiomer B (40 mg, 16%). Enantiomer A:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 8.47 (d, J = 2.0 Hz, 1 H), 8.31 (d, J = 8.0 Hz, 2 H), 8.08 (s, 1 H), 7.63 (ddd, J = 2.3, 7.8, 11.5 Hz, 1 H), 7.53-7.49 (m, 1 H), 7.47-7.41 (m, 1 H), 7.24 (td, J = 8.5, 10.5 Hz, 1 H), 5.75 (d, J = 11.0 Hz, 1 H), 4.04 (s, 3 H), 4.00 (dd, J = 2.8, 11.8 Hz, 1 H), 3.82 (dd, J = 2.8, 11.8 Hz, 1 H), 3.60 (dt, J = 2.0, 11.8 Hz, 1 H), 3.45-3.34 (m, 2 H), 2.34 (s, 3 H), 1.89 (d, J = 12.5 Hz, 1 H), 1.68 (d, J = 4.0 Hz, 7 H), 1.65-1.57 (m, 1 H), 1.44-1.38 (m, 1 H), 1.13 (d, J = 12.0 Hz, 1 H). LCMS: RT= 1.852 min ; MS (ES): m/z= 532.5 [M+H]<+>(ACN/H2O sa HCOONH4, Ascentis Express C18 2.7 µm (50 x 2.1)mm, Gradijent = 4 min, Talasna dužina = 220 nm); HPLC RT = 13.127 min (Kolona: Sunfire C18 3.5 µm, 4.6 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 10-100% B tokom 30 min; Protok: 1 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm). Hiralne HPLC RT = 15.105 min (Kolona: Lux Cellulose 4, 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 70/30 0.2% DEA u smeši Heksan/Metanol; Protok: 1 mL/min). Enantiomer B: Hiralne HPLC RT = 18.032 min (Kolona: Lux Cellulose 4, 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 70/300.2% DEA u Heksan/Metanol; Protok: 1 mL/min).

2-{5-[(3,5-Difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0313]

11

[0314] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za sintezu 2-{5-[(3,4-difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola, (3,5-difluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol je konvertovan u 40 mg racemskog 2-{5-[(3,5-difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola kao belu čvrstu supstancu koji je razdvojen hiralnom prep SFC (Kolona: Lux Cellulose - 4, 25 x 2.1 cm, 5 µm; Mobilna faza: 60/40 CO2/(0.25% DEA u metanolu); Protok: 60 mL/min) da se dobiju Enantiomer A (14.0 mg, 8%) i Enantiomer B (14.0 mg, 8%). Enantiomer A:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 8.47 (d, J = 1.5 Hz, 1 H), 8.30 (d, J = 8.0 Hz, 2 H), 8.08 (s, 1 H), 7.51 (dd, J = 1.3, 8.3 Hz, 1 H), 7.36-7.23 (m, 2 H), 6.93-6.84 (m, 1 H), 5.76 (d, J = 11.0 Hz, 1 H), 4.08-3.94 (m, 4 H), 3.86-3.77 (m, 1 H), 3.64-3.54 (m, 1 H), 3.44-3.33 (m, 2 H), 2.33 (s, 3 H), 1.92-1.83 (m, 1 H), 1.73-1.57 (m, 7 H), 1.45-1.36 (m, 1 H), 1.14 (d, J = 13.6 Hz, 1 H). LCMS: RT= 2.423 min; MS (ES): m/z= 532.2, [M+H]<+>(ACN/H2O sa HCOONH4, Ascentis Express C18 2.7 µm (50 x 2.1)mm, Gradijent = 4 min, Talasna dužina = 220 nm); HPLC RT = 8.633 min (Kolona: Sunfire C18 3.5 µm, 4.6 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 10-100% B tokom 15 min; Protok: 1 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm). RT hiralne SFC = 3.58 min (Kolona: Lux Cellulose 4, 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 60/40 CO2/(0.25% DEA u metanolu; Protok: 4 mL/min). Enantiomer B: RT hiralne SFC = 4.69 min (Kolona: Lux Cellulose 4, 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 60/40 CO2/(0.25% DEA u metanolu; Protok: 4 mL/min).

Primeri 100 & 101

2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(3-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0315]

[0316] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za sintezu 2-{5-[(3,5-difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-

11

il}propan-2-ola, (3-fluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol (355 mg, 1.56 mmol) je konvertovan u 120 mg racemskog 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(3-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ola kao belu čvrstu supstancu, koji je razdvojen hiralnom prep SFC (Kolona: Chiral OD-H 25 x 2.1 cm, 5 µm; Mobilna faza: 60/40 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 70 mL/min) da se dobiju Enantiomer A (48.0 mg, 19%) i Enantiomer B (47.0 mg, 18%).Enantiomer A:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 8.46 (d, J = 1.5 Hz, 1 H), 8.32-8.27 (m, 2 H), 8.11 (s, 1 H), 7.53-7.48 (m, 1 H), 7.46-7.40 (m, 2 H), 7.39-7.32 (m, 1 H), 7.06-6.98 (m, 1 H), 5.78 (d, J = 11.5 Hz, 1 H), 4.02 (s, 3 H), 3.98 (d, J = 3.0 Hz, 1 H), 3.82 (dd, J = 2.5, 11.5 Hz, 1 H), 3.60 (dt, J = 2.3, 11.9 Hz, 1 H), 3.43-3.33 (m, 2 H), 2.33 (s, 3 H), 1.92 (d, J = 13.1 Hz, 1 H), 1.71-1.66 (m, 7 H), 1.48-1.33 (m, 1 H), 1.13 (d, J = 12.0 Hz, 1 H). LCMS: RT= 1.822 min; MS (ES): m/z= 514 [M+H]<+>(ACN/H2O sa HCOONH4, Ascentis Express C18 2.7 µm (50 x 2.1)mm, Gradijent = 4 min, Talasna dužina = 220 nm); HPLC RT = 8.155 min (Kolona: Sunfire C18 3.5 µm, 4.6 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 10-100% B tokom 15 min; Protok: 1 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm). RT hiralne SFC = 6.16 min (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 70/30 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 3 mL/min). Enantiomer B: RT hiralne SFC = 3.81 min (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 70/30 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 3 mL/min).

Primeri 102 & 103

2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[oksan-4-il(2,4,6-trifluorofenil)metil]-5H-pirido [3,2-b] indol-7-il] propan-2-ol

[0317]

[0318] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za sintezu 2-{5-[(3,4-difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola, (2,4,6-trifluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol je konvertovan u 40 mg racemskog 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[oksan-4-il(2,4,6-trifluorofenil)metil]-

11

5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ola kao belu čvrstu supstancu, koji je razdvojen hiralnom prep SFC (Kolona: Chiralpak OJ-H 25 x 2.1 cm, 5 µm; Mobilna faza: 80/20 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 60 mL/min) da se dobiju Enantiomer A (12.0 mg, 6%) i Enantiomer B (11.0 mg, 6%). Enantiomer A:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 8.50 (d, J = 2.0 Hz, 1 H), 8.37 (br. s., 1 H), 8.33-8.27 (m, 1 H), 8.10-8.03 (m, 1 H), 7.52 (dd, J = 1.5, 8.5 Hz, 1 H), 7.02-6.92 (m, 2 H), 6.04 (d, J = 12.0 Hz, 1 H), 4.15-4.07 (m, 3 H), 4.06-3.98 (m, 1 H), 3.80 (d, J = 11.5 Hz, 1 H), 3.60-3.51 (m, 1 H), 3.46-3.34 (m, 2 H), 2.42-2.37 (m, 3 H), 1.79 (d, J = 11.5 Hz, 1 H), 1.71-1.55 (m, 7 H), 1.40 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 1.09 (br. s., 1 H). LCMS: RT= 2.394 min; MS (ES): m/z= 550.2 [M+H]<+>(ACN/H2O sa HCOONH4, Ascentis Express C18 2.7 µm (50 x 2.1)mm, Gradijent = 4 min, Talasna dužina = 220 nm);HPLC RT = 8.445 min (Kolona: Sunfire C183.5 µm, 4.6 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 10-100% B tokom 15 min; Protok: 1 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm). RT hiralne SFC = 2.94 min (Kolona: Chiralpak OJ-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 80/20 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 3 mL/min). Enantiomer B: RT hiralne SFC = 4.29 min (Kolona: Chiralpak OJ-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 80/20 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 3 mL/min).

Primeri 104 & 105

2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-fluoro-5-[oksan-4-il(2,4,6-trifluorofenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0319]

[0320] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za sintezu 2-{5-[(3,4-difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola, (2,4,6-trifluorofenil)(oksan-4-il)metanol i metil 3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat su konvertovani u racemski 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-fluoro-5-[oksan-4-il(2,4,6-trifluorofenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol, koji je razdvojen hiralnom prep SFC (Kolona: Lux Cellulose -2, 25

12

x 2.1 cm, 5 µm; Mobilna faza: 60/40 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 60 mL/min) da se dobiju Enantiomer A (17.0 mg, 33%) i Enantiomer B (19.0 mg, 37%). Enantiomer A:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 8.53 (d, J = 1.5 Hz, 1 H), 8.43 (br. s., 1 H), 7.85 (s, 1 H), 7.27-7.21 (m, 1 H), 7.04-6.95 (m, 2 H), 6.07 (d, J = 11.5 Hz, 1 H), 4.11 (s, 3 H), 4.03 (d, J = 14.6 Hz, 1 H), 3.85-3.77 (m, 1 H), 3.59-3.51 (m, 1 H), 3.43-3.35 (m, 2 H), 2.40 (s, 3 H), 1.78 (d, J = 11.5 Hz, 1 H), 1.69-1.61 (m, 7 H), 1.42 (m, 1 H), 1.07 (d, J = 11.5 Hz, 1 H). LCMS: RT= 1.859 min; MS (ES): m/z= 568.2 [M+H]<+>(ACN/H2O sa HCOONH4, Ascentis Express C18 2.7 µm (50 x 2.1)mm, Gradijent = 4 min, Talasna dužina = 220 nm); HPLC RT = 9.155 min (Kolona: Sunfire C183.5 µm, 4.6 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 10-100% B tokom 15 min; Protok: 1 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm). RT hiralne SFC = 8.15 min (Kolona: Lux Cellulose -2, 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 60/40 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 3 mL/min). Enantiomer B: RT hiralne SFC = 9.58 min (Kolona: Lux Cellulose-2, 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 60/40 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 3 mL/min). Primeri 106 & 107

2-{5-[(2,5-Difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0321]

[0322] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za sintezu 2-{5-[(3,4-difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola, (2,5-difluorofenil)(oksan-4-il)metanol i metil 3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat su konvertovani u racemski 2-{5-[(2,5-difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, koji je razdvojen hiralnom prep SFC (Kolona: Chiralcel OD-H, 25 x 2.1 cm, 5 µm; Mobilna faza: 80/20 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 60 mL/min) da se dobiju Enantiomer A (22.0 mg, 44%) i Enantiomer B (25.0 mg, 48%). Enantiomer A:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 8.49 (d, J = 2.0 Hz, 1 H), 8.39 (br. s., 1 H), 7.99-7.90 (m, 1 H), 7.83 (br. s., 1 H), 7.21 (d, J = 12.5 Hz, 1 H), 7.14-7.04 (m, 2 H), 5.99 (d, J = 11.5 Hz, 1 H), 4.05 (s, 3 H), 4.02-3.95 (m, 1 H), 3.81 (dd, J = 2.8, 11.8 Hz, 1 H), 3.65-3.56 (m, 1 H), 3.42-3.34 (m, 2 H), 2.35 (s, 3 H), 1.97-1.86 (m, 1 H), 1.72-1.59 (m, 7 H), 1.45-1.40 (m, 1 H), 0.98 (d, J = 13.1 Hz, 1 H). LCMS: RT= 1.85 min; MS (ES): m/z= 550.2 [M+H]<+>(ACN/H2O sa HCOONH4, Ascentis Express C182.7 µm (50 x 2.1)mm, Gradijent = 4 min, Talasna dužina = 220 nm); HPLC RT = 8.838 min (Kolona: Sunfire C18 3.5 µm, 4.6 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 10-100% B tokom 15 min; Protok: 1 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm). RT hiralne SFC = 8.39 min (Kolona: Chiralcel OD-H, 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 75/25 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 3 mL/min). Enantiomer B: RT hiralne SFC = 10.10 min (Kolona: Chiralcel OD-H, 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 75/25 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 3 mL/min).

Primeri 108 & 109

2-{5-[(2,3-Difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0323]

[0324] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za sintezu 2-{5-[(3,4-difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola, (2,3-difluorofenil)(oksan-4-il)metanol i metil 3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat su konvertovani u racemski 2-{5-[(2,3-difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, koji je razdvojen hiralnom prep SFC (Kolona: Chiralcel OD-H, 25 x 2.1 cm, 5 µm; Mobilna faza: 65/35 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 75 mL/min) da se dobiju Enantiomer A (22.0 mg, 44%) i Enantiomer B (15.0 mg, 30%). Enantiomer A:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 8.52 (d, J = 1.5 Hz, 1 H), 8.39 (br. s., 1 H), 7.97-7.82 (m, 2 H), 7.39-7.19 (m, 3 H), 6.07 (d, J = 11.5 Hz, 1 H), 4.12-3.99 (m, 4 H), 3.83 (dd, J = 3.0, 11.5 Hz, 1 H), 3.67-3.56 (m, 1 H), 3.46-3.37 (m, 2 H), 2.37 (s, 3 H), 1.93 (d, J = 13.6 Hz, 1 H), 1.76-1.61 (m, 7 H), 1.49-1.40 (m, 1 H), 0.99 (d, J = 12.5 Hz, 1 H). LCMS: RT= 1.85 min; MS (ES): m/z= 550.2 [M+H]<+>(ACN/H2O sa HCOONH4, Ascentis Express C18 2.7 µm (50 x 2.1)mm, Gradijent = 4 min, Talasna dužina = 220 nm); HPLC RT = 8.918 min (Kolona: Sunfire C18 3.5 µm, 4.6 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 10-100% B tokom 15 min; Protok: 1 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm). RT hiralne SFC = 2.609 min (Kolona: Chiralcel OD-H, 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 70/30 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 3 mL/min). Enantiomer B: RT hiralne SFC 4.36 min (Kolona: Chiralcel OD-H, 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 70/30 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 3 mL/min).

Primeri 110 & 111

2-{5-[(2,4-Difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0325]

[0326] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za sintezu 2-{5-[(3,4-difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola, (2,4-difluorofenil)(oksan-4-il)metanol i metil 3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat su konvertovani u racemski 2-{5-[(2,4-difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, koji je razdvojen hiralnom prep SFC (Kolona: Chiralpak IC, 25 x 2.1 cm, 5 µm; Mobilna faza: 60/40 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 60 mL/min) da se dobiju Enantiomer A (12.0 mg, 21%) i Enantiomer B (10.0 mg, 17%). Enantiomer A:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 8.50 (d, J = 1.5 Hz, 1 H), 8.37 (br. s., 1 H), 8.19-8.10 (m, 1 H), 7.80 (br. s., 1 H), 7.24-7.07 (m, 2 H), 6.95 (ddd, J = 2.5, 8.7, 10.9 Hz, 1 H), 5.97 (d, J = 11.5

12

Hz, 1 H), 4.09-3.97 (m, 4 H), 3.81 (d, J = 9.0 Hz, 1 H), 3.64-3.55 (m, 1 H), 3.42-3.35 (m, 2 H), 2.36 (s, 3 H), 1.90 (t, J = 5.8 Hz, 2 H), 1.70-1.60 (m, 7 H), 1.45-1.39 (m, 1 H), 0.96 (d, J = 14.6 Hz, 1 H). LCMS: RT= 1.86 min; MS (ES): m/z= 550.2 [M+H]<+>(ACN/H2O sa HCOONH4, Ascentis Express C182.7 µm (50 x 2.1)mm, Gradijent = 4 min, Talasna dužina = 220 nm); HPLC RT = 9.112 min (Kolona: Sunfire C18 3.5 µm, 4.6 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 10-100% B tokom 15 min; Protok: 1 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm). RT hiralne SFC = 10.61 min (Kolona: Chiralpak IC, 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 60/40 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 4 mL/min). Enantiomer B: RT hiralne SFC = 12.94 min (Kolona: Chiralpak IC, 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 60/40 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 4 mL/min).

Primeri 112 & 113

2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-fluoro-5-[(3-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0327]

[0328] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za sintezu 2-{5-[(3,4-difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola, (3-fluorofenil)(oksan-4-il)metanol i metil 3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat su konvertovani u racemski 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-fluoro-5-[(3-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol, koji je razdvojen hiralnom prep SFC (Kolona: Chiralcel OD-H, 25 x 2.1 cm, 5 µm; Mobilna faza: 60/40 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 75 mL/min) da se dobiju Enantiomer A (5.00 mg, 9%) i Enantiomer B (15.0 mg, 29%). Enantiomer A:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 8.40 (d, J = 2.0 Hz, 1 H), 8.2 (br. s., 1 H), 7.81 (s, 1 H), 7.34-7.26 (m, 3 H), 7.18 (m, 1 H), 6.91 (m, 1 H), 5.70 (d, J = 11.5 Hz, 1 H), 3.92 (s, 3 H), 3.90 (d, J = 3.0 Hz, 1 H), 3.72 (d, J = 3.0 Hz, 1 H), 3.51 (m, 1 H), 3.40-3.37 (m, 2 H), 2.23 (s, 3 H), 1.93 (d, J = 13.6 Hz, 1 H), 1.76-1.61 (m, 7 H), 1.49-1.40 (m, 1 H), 0.99 (d, J = 12.5 Hz, 1 H). LCMS: RT= 1.85 min; MS (ES): m/z= 532.2 [M+H]<+>(ACN/H2O sa HCOONH4, Ascentis Express C18 2.7 µm (50 x 2.1)mm, Gradijent = 4 min, Talasna dužina = 220 nm).HPLC RT = 8.907 min (Kolona: Sunfire C183.5 µm, 4.6 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 10-100% B tokom 15 min; Protok: 1 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm). RT hiralne SFC = 2.09 min (Kolona: Chiralcel OD-H, 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 60/40 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 4 mL/min). Enantiomer B: RT hiralne SFC 3.00 min (Kolona: Chiralcel OD-H, 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 60/40 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 4 mL/min).

Primer 114

2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-fluoro-5-[(S)-(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0329]

[0330] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za sintezu 2-{5-[(3,4-difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola, (R)-(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metanol i metil 3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat su konvertovani u 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-fluoro-5-[(S)-(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol. LCMS: RT = 1.617 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 532.2; (Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1.11 mL/min).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.57 (br. s., 1H), 8.23 (br. s., 1H), 7.96 (s, 1H), 7.46-7.26 (m, 3H), 7.22 (d, J=11.4 Hz, 1H), 7.18-7.05 (m, 1H), 6.05 (d, J=11.4 Hz, 1H), 4.01 (br. s., 3H), 3.94-3.86 (m, 1H), 3.73 (d, J=9.4 Hz, 1H), 3.49 (br. s., 1H), 3.22 (t, J=11.4 Hz, 1H), 2.30 (br. s., 3H), 1.75 (d, J=1.1 Hz, 1H), 1.69-1.60 (m, 2H), 1.55 (br. s., 6H), 1.36 (d, J=9.1 Hz, 1H).

Primeri 115 & 116

12

5-{5-[(2-Fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-9-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol

[0331]

[0332] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za sintezu 2-{5-[(3,4-difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola, (2-fluorofenil)(oksan-4-il)metanol i metil 3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat su konvertovani u racemski 5-{5-[(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-9-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol, koji je razdvojen hiralnom prep SFC (Kolona: Chiralcel OD-H, 25 x 2.1 cm, 5 µm; Mobilna faza: 60/40 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 75 mL/min) da se dobiju Enantiomer A (14.0 mg, 9%) i Enantiomer B (15.0 mg, 9%). Enantiomer A:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 8.71 (d, J = 2.0 Hz, 1 H), 8.42 (br. s., 2 H), 8.21-8.14 (m, 1 H), 8.08 (d, J = 7.5 Hz, 1 H), 7.84 (br. s., 1 H), 7.43-7.33 (m, 2 H), 7.12-7.03 (m, 1 H), 6.16 (d, J = 11.5 Hz, 1 H), 4.10-3.98 (m, 4 H), 3.85-3.77 (m, 4 H), 3.63 (dd, J = 10.0, 11.5 Hz, 1 H), 3.49-3.36 (m, 2 H), 2.37 (s, 3 H), 2.03-1.94 (m, 1 H), 1.76-1.62 (m, 1 H), 1.45 (dt, J = 7.8, 12.4 Hz, 1 H), 0.92 (d, J = 14.1 Hz, 1 H). LCMS: RT= 1.863 min; MS (ES): m/z= 534.2 [M+H]<+>(ACN/H2O sa HCOONH4, Ascentis Express C182.7 µm (50 x 2.1)mm, Gradijent = 4 min, Talasna dužina = 220 nm). HPLC RT = 9.004 min (Kolona: Sunfire C18 3.5 µm, 4.6 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 10-100% B tokom 15 min; Protok: 1 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm). RT hiralne SFC = 3.58 min (Kolona: Chiralcel OD-H, 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 60/40 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 4 mL/min). Enantiomer B: RT hiralne SFC 6.18 min (Kolona: Chiralcel OD-H, 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 60/40 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 4 mL/min).

Primeri 117 & 118

5-{9-Metansulfonil-5-[oksan-4-il(2,4,6-trifluorofenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol

12

[0334] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za sintezu 2-{5-[(3,4-difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola, (2,4,6-trifluorofenil)(oksan-4-il)metanol i metil 3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat su konvertovani u racemski 5-{9-metansulfonil-5-[oksan-4-il(2,4,6-trifluorofenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol, koji je razdvojen hiralnom prep SFC (Kolona: Chiralcel OD-H, 25 x 2.1 cm, 5 µm; Mobilna faza: 60/40 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 75 mL/min) da se dobiju Enantiomer A (13.0 mg, 8%) i Enantiomer B (13.0 mg, 8%). Enantiomer A:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 8.76 (d, J = 1.5 Hz, 1 H), 8.47 (br. s., 1 H), 8.34 (br. s., 1 H), 8.11 (d, J = 7.0 Hz, 1 H), 7.93-7.82 (m, 1 H), 7.02 (t, J = 9.0 Hz, 2 H), 6.22 (d, J = 11.5 Hz, 1 H), 4.14 (s, 3 H), 4.05 (d, J = 11.5 Hz, 1 H), 3.86-3.76 (m, 4 H), 3.61-3.52 (m, 1 H), 3.46-3.36 (m, 2 H), 2.42 (s, 3 H), 1.83 (d, J = 12.0 Hz, 1 H), 1.77-1.63 (m, 1 H), 1.50-1.39 (m, 1 H), 1.01 (d, J = 12.5 Hz, 1 H). LCMS: RT= 1.898 min; MS (ES): m/z= 570.2 [M+H]<+>(ACN/H2O sa HCOONH4, Ascentis Express C182.7 µm (50 x 2.1)mm, Gradijent = 4 min, Talasna dužina = 220 nm). HPLC RT = 9.683 min (Kolona: Sunfire C18 3.5 µm, 4.6 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 10-100% B tokom 15 min; Protok: 1 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm). RT hiralne SFC = 3.18 min (Kolona: Chiralcel OD-H, 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 60/40 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 4 mL/min). Enantiomer B: RT hiralne SFC 4.78 min (Kolona: Chiralcel OD-H, 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 60/40 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 4 mL/min).

Primeri 119 & 120

2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(2-fluoro-4-metoksifenil)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

12

[0336] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za sintezu 2-{5-[(3,4-difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola, (2-fluoro-4-metoksifenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol je konvertovan u racemski 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(2-fluoro-4-metoksifenil)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol, koji je razdvojen primenom hiralne prep SFC (Kolona: Chiral OD-H 25 x 2.1 cm, 5 µm; Mobilna faza: 60/40 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 70 mL/min) da se dobiju 2 enantiomera. Enantiomer A:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 8.47 (d, J = 1.5 Hz, 1 H), 8.30 (d, J= 8.0 Hz, 2 H), 8.06 (s, 1 H), 7.98 (t, J = 8.8 Hz, 1 H), 7.53-7.47 (m, 1 H), 6.89 (dd, J = 2.0, 8.5 Hz, 1 H), 6.68 (dd, J = 2.5, 12.5 Hz, 1 H), 5.92 (d, J = 11.5 Hz, 1 H), 4.10-3.97 (m, 4 H), 3.86-3.75 (m, 4 H), 3.66-3.57 (m, 1 H), 3.43-3.36 (m, 2 H), 2.42-2.34 (m, 3 H), 1.95 (d, J = 9.5 Hz, 1 H), 1.72-1.60 (m, 7 H), 1.43 (dq, J = 4.5, 12.4 Hz, 1 H), 0.98 (d, J = 12.0 Hz, 1 H). LCMS: RT= 1.831 min; MS (ES): m/z= 544.4 [M+H]<+>(ACN/H2O sa HCOONH4, Ascentis Express C18 2.7 µm (50 x 2.1)mm, Gradijent = 4 min, Talasna dužina = 220 nm); HPLC RT = 8.114 min (Kolona: Sunfire C183.5 µm, 4.6 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 10-100% B tokom 15 min; Protok: 1 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm). RT hiralne SFC = 2.20 min (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 60/40 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 4 mL/min). Enantiomer B: RT hiralne SFC = 3.40 min (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 60/40 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 4 mL/min).

Primeri 121 & 122

2-{5-[(2,3-Difluoro-4-metoksifenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0337]

12

[0338] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za sintezu 2-{5-[(3,4-difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola, (2,3-difluoro-4-metoksifenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol je konvertovan u racemski 2-{5-[(2,3-difluoro-4-metoksifenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, koji je razdvojen primenom hiralne prep SFC (Kolona: Chiral OD-H 25 x 2.1 cm, 5 µm; Mobilna faza: 60/40 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 70 mL/min) da se dobiju 2 enantiomera. Enantiomer A:<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8.46 (d, J=1.51 Hz, 1 H) 8.29 (d, J=8.53 Hz, 2 H) 8.02 (s, 1 H) 7.78 (t, J=7.28 Hz, 1 H) 7.48 (d, J=8.03 Hz, 1 H) 7.03 (t, J=7.28 Hz, 1 H) 5.92 (d, J=11.04 Hz, 1 H) 4.05 (s, 3 H) 3.99 (d, J=9.04 Hz, 1 H) 3.88 (s, 3 H) 3.79 (d, J=10.04 Hz, 1 H) 3.58 (t, J=11.04 Hz, 1 H) 3.34-3.40 (m, 2 H) 2.35 (s, 3 H) 1.91 (d, J=11.55 Hz, 1 H) 1.57-1.70 (m, 7 H) 1.37-1.46 (m, 1 H) 0.95 (d, J=14.06 Hz, 1 H). LCMS: RT= 2.38 min; MS (ES): m/z= 560 [M-H]-(ACN/H2O sa HCOONH4, Ascentis Express C182.7 µm (50 x 2.1)mm, Gradijent = 4 min, Talasna dužina = 220 nm); HPLC RT = 7.953 min (Kolona: Sunfire C18 3.5 µm, 4.6 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 10-100% B tokom 15 min; Protok: 1 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm). RT hiralne SFC = 2.19 min (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 60/40 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 4 mL/min). Enantiomer B: RT hiralne SFC = 3.27 min (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 60/40 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 4 mL/min).

Primeri 123 & 124

2-{5-[(2,5-Difluoro-4-metoksifenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0339]

12

[0340] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za sintezu 2-{5-[(3,4-difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola, (2,5-difluoro-4-metoksifenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol je konvertovan u racemski 2-{5-[(2,5-difluoro-4-metoksifenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, koji je razdvojen primenom hiralne prep SFC (Kolona: Lux Cellulose -4, 25 x 2.1 cm, 5 µm; Mobilna faza: 60/40 CO2/(0.25% DEA u metanolu); Protok: 75 mL/min) da se dobiju 2 enantiomera. Enantiomer A:<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ ppm 8.46 (d, J=1.51 Hz, 1 H) 8.34 (br. s., 1 H) 8.28 (d, J=8.03 Hz, 1 H) 8.03 (s, 1 H) 7.89 (dd, J=12.05, 7.03 Hz, 1 H) 7.49 (dd, J=8.28, 1.25 Hz, 1 H) 6.89 (dd, J=11.55, 7.03 Hz, 1 H) 5.91 (d, J=11.55 Hz, 1 H) 4.06 (s, 3 H) 4.00 (d, J=7.03 Hz, 1 H) 3.76-3.84 (m, 4 H) 3.60 (t, J=10.79 Hz, 1 H) 3.35-3.41 (m, 2 H) 2.36 (s, 3 H) 1.83-1.93 (m, 1 H) 1.58-1.69 (m, 7 H) 1.43 (br. s., 1 H) 0.99 (d, J=13.05 Hz, 1 H). LCMS: RT= 1.83 min; MS (ES): m/z= 562 [M+H]<+>(ACN/H2O sa HCOONH4, Ascentis Express C18 2.7 µm (50 x 2.1)mm, Gradijent = 4 min, Talasna dužina = 220 nm); HPLC RT = 7.953 min (Kolona: Sunfire C18 3.5 µm, 4.6 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 10-100% B tokom 15 min; Protok: 1 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm). RT hiralne SFC = 6.70 min (Kolona: Lux Cellulose -4, 250 x 21 mm, 5 µm; Mobilna faza: 60/40 CO2/(0.25% DEA u metanolu); Protok: 4 mL/min). Enantiomer B: RT hiralne SFC = 12.06 min (Kolona: Lux Cellulose -4, 250 x 21 mm, 5 µm; Mobilna faza: 60/40 CO2/(0.25% DEA u metanolu); Protok: 4 mL/min).

Primeri 125 & 126

2-{5-[(2,4-Difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0341]

1

[0342] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za sintezu 2-{5-[(3,4-difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola, 3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat i (2,4-difluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol su konvertovani u racemski 2- {5-[(2,4-difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, koji je razdvojen primenom hiralne prep SFC (Kolona: Chiral OD-H 25 x 2.1 cm, 5 µm; Mobilna faza: 75/25 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 70 mL/min) da se dobiju 2 enantiomera. Enantiomer A:<1>H NMR (400 MHz, d4-MeOH) δ 8.39 (m, 1H), 8.28-8.12 (m, 3H), 8.02 (m, 1H), 7.47 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 7.12 (m, 1H), 6.96 (m, 1H), 5.95 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.03 (m, 1H), 3.81 (m, 1H), 3.61 (m, 1H), 3.33 (m, 3H), 2.51 (s, 3H), 2.35 (s, 3H), 1.91 (m, 1H), 1.68 (s, 6H), 1.64 (m, 1H), 1.43 (m, 1 H), 0.99 (m, 1H). LCMS: RT= 2.00 min; MS (ES): m/z= 532.5 [M+H]<+>(ACN/H2O sa HCOONH4, Ascentis Express C182.7 µm (50 x 2.1)mm, Gradijent = 4 min, Talasna dužina = 220 nm); HPLC RT = 8.530 min (Kolona: Sunfire C18 3.5 µm, 4.6 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 10-100% B tokom 15 min; Protok: 1 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm). RT hiralne SFC = 4.06 min (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 75/25 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 3 mL/min). Enantiomer B: RT hiralne SFC = 4.87 min (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 75/25 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 3 mL/min).

Primeri 127 & 128

2-[3-(Dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[oksan-4-il(2,4,6-trifluorofenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0343]

1 1

[0344] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za sintezu 2-{5-[(3,4-difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola, metil 3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat i (2,4,6-trifluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol su konvertovani u racemski 2-[3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[oksan-4-il(2,4,6-trifluorofenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol, koji je razdvojen primenom hiralne prep SFC (Kolona: Lux Cellulose -2, 25 x 2.1 cm, 5 µm; Mobilna faza: 75/25 CO2/(0.25% DEA u metanolu); Protok: 60 mL/min) da se dobiju 2 enantiomera. Enantiomer A:<1>H NMR (400 MHz, d4-MeOH) δ 8.42 (m, 1H), 8.28 (m, 2H), 8.06 (m, 1H), 7.52 (m, 1H), 6.99 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 6.05 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.04 (m, 1H), 3.83 (m, 1H), 3.66 (m, 1H), 3.57 (m, 1H), 2.54 (s, 3H), 2.39 (s, 3H), 1.81 (m, 1H), 1.67 (m, 8H), 1.41 (m, 1H), 1.16 (m, 1H). LCMS: RT= 2.01 min; MS (ES): m/z= 550.5 [M+H]<+>(ACN/H2O sa HCOONH4, Ascentis Express C18 2.7 µm (50 x 2.1)mm, Gradijent = 4 min, Talasna dužina = 220 nm); HPLC RT = 8.529 min (Kolona: Sunfire C183.5 µm, 4.6 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 10-100% B tokom 15 min; Protok: 1 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm). RT hiralne SFC = 7.40 min (Kolona: Lux Cellulose -2, 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 70/30 CO2/(0.25% DEA u metanolu); Protok: 3 mL/min). Enantiomer B: RT hiralne SFC = 8.59 min (Kolona: Lux Cellulose -2, 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 70/30 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 3 mL/min).

Primeri 129 & 130

2-{5-[(3,5-Difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0345]

1 2

[0346] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za sintezu 2-{5-[(3,4-difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola, metil 3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat i (3,5-difluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol su konvertovani u racemski 2-{5-[(3,5-difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, koji je razdvojen primenom hiralne prep SFC (Kolona: Lux Cellulose -2, 25 x 2.1 cm, 5 µm; Mobilna faza: 65/35 CO2/(0.25% DEA u metanolu); Protok: 60 mL/min) da se dobiju 2 enantiomera. Enantiomer A:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 8.43-8.38 (m, 1 H), 8.30 (d, J = 8.5 Hz, 1 H), 8.19 (s, 1 H), 8.09 (s, 1 H), 7.54-7.48 (m, 1 H), 7.30 (d, J = 6.5 Hz, 2 H), 6.96-6.87 (m, 1 H), 5.77 (d, J = 11.0 Hz, 1 H), 4.02 (d, J = 12.0 Hz, 1 H), 3.84 (d, J = 11.5 Hz, 1 H), 3.69-3.58 (m, 1 H), 3.48-3.36 (m, 2 H), 2.49 (s, 3 H), 2.33 (s, 3 H), 1.92 (d, J = 12.5 Hz, 1 H), 1.70 (d, J = 4.0 Hz, 6 H), 1.67 (m, 1H), 1.43 (m, 1 H), 1.16 (d, J = 12.5 Hz, 1 H). LCMS: RT= 2.26 min; MS (ES): m/z= 532.2 [M+H]<+>(ACN/H2O sa HCOONH4, Ascentis Express C18 2.7 µm (50 x 2.1)mm, Gradijent = 4 min, Talasna dužina = 220 nm); HPLC RT = 8.948 min (Kolona: Sunfire C18 3.5 µm, 4.6 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 10-100% B tokom 15 min; Protok: 1 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm). RT hiralne SFC = 3.79 min (Kolona: Lux Cellulose -2, 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 70/30 CO2/(0.25% DEA u metanolu); Protok: 3 mL/min). Enantiomer B: RT hiralne SFC = 4.67 min (Kolona: Lux Cellulose -2, 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 70/30 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 3 mL/min).

Primeri 131 & 132

2-{5-[(2,5-Difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0347]

1

Korak 1: Metil 3-bromo-5-((2,5-difluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido [3,2-b] indol-7-karboksilat

[0348] Smeša metil 3-bromo-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (300 mg, 0.983 mmol) i (2,5-difluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanola (449 mg, 1.97 mmol) u DCM-u (18 mL) je dodavana trifenilfosfinu (516 mg, 1.97 mmol) i DIAD-u (0.382 mL, 1.97 mmol) u kapima tokom perioda od 2 min na 25 °C, i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Smeša je prečišćen primenom silika gel kolonske hromatografije na ISCO Companion (24g silika gel „flash“ kolona) primenom gradijenta od 0 do 1% MeOH/CHCl3tokom 30 min. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i koncentrovane, i dobijena čvrsta supstanca je triturisana sa dietil etrom (10 mL) da se dobije metil 3-bromo-5-((2,5-difluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (200 mg, 37 %) kao bela čvrsta supstanca. LCMS: HPLC: RT=1.21 min, MS (ES): m/z= 515, 517 [M+H]<+>; (ACN/H2O sa NH4OAc, Acquity BEH C181.7 µm (50 x 2.1) mm, gradijent = 3 min, Talasna dužina = 220 nm).

Korak 2: Metil 5-((2,5-difluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0349] Promešani rastvor metil 3-bromo-5-((2,5-difluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (0.400 g, 0.287 mmol) i 1,4-dimetil-5-(tributilstanil)-1H-1,2,3-triazola (0.122 g, 0.316 mmol) u DMF-u (1.5 ml) je pročišćena pod strujom azota tokom nekoliko min. U smešu je dodat tetrakis(trifenilfosfin) paladijum (0.022 g, 0.0190 mmol), bakar(I) jodid (8.20 mg, 0.0430 mmol), i Et3N (0.0800 mL, 0.574 mmol), i smeša je zagrevana do 95 °C tokom 2 h u mikrotalasnoj peći. Smeša je razblažena sa vodom (20 mL) i ekstrahovana sa EtOAc-om (30 mL x 2), i ekstrakti koncentrovani. Ostatak je prečišćen primenom silika gel kolonske hromatografije (ISCO, Silika adsorbovana, „flash“ kolona od 12 g, 0 do 1.5% MeOH/CHCl3tokom 30 min). Frakcije koje sadrže proizvod su koncentrovane da se dobije metil 5-((2,5-difluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-3-

1 4

(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (0.100 g, 0.188 mmol, 66 %) kao bela čvrsta supstanca. LCMS: HPLC: RT=1.04 min, MS (ES): m/z= 532 [M+H]<+>; (ACN/H2O sa NH4OAc, Acquity BEH C18 1.7 µm (50 x 2.1) mm, Gradijent = 3 min, Talasna dužina = 220 nm).

Korak 3: 2-{5-[(2,5-Difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0350] Prateći proceduru analognu onoj koja je opisana u Koraku 2 za sintezu 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)(<2>H)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ola, metil 5-((2,5-difluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat je konvertovan u racemski 2-{5-[(2,5-difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol kao belu čvrstu supstancu, koji je razdvojen hiralnom prep SFC (Kolona: Chiral OD-H 25 x 2.1 cm, 5 µm; Mobilna faza: 80/20 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 70 mL/min) da se dobiju Enantiomer A (20.0 mg, 20%) i Enantiomer B (16.0 mg, 16%). Enantiomer A:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 8.47 (d, J = 2.0 Hz, 1 H), 8.37 (br. s., 1 H), 8.30 (s, 1 H), 8.04 (s, 1 H), 7.98-7.88 (m, 1 H), 7.54-7.46 (m, 1 H), 7.14-7.05 (m, 2 H), 5.98 (d, J = 11.0 Hz, 1 H), 4.06 (s, 3 H), 4.00 (d, J = 8.5 Hz, 1 H), 3.81 (br. s., 1 H), 3.66-3.57 (m, 1 H), 3.43-3.34 (m, 2 H), 2.36 (s, 3 H), 1.90 (d, J = 13.1 Hz, 1 H), 1.70-1.61 (m, 7 H), 1.43 (dt, J= 7.8, 12.4 Hz, 1 H), 1.00 (d, J = 13.6 Hz, 1 H). LCMS: RT= 1.822 min; MS (ES): m/z= 532.5 [M+H]<+>(ACN/H2O sa HCOONH4, Ascentis Express C18 2.7 µm (50 x 2.1)mm, Gradijent = 4 min, Talasna dužina = 220 nm); HPLC RT = 8.178 min (Kolona: Sunfire C18 3.5 µm, 4.6 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 10-100% B tokom 15 min; Protok: 1 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm). RT hiralne SFC = 8.76 min (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 80/20 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 3 mL/min). Enantiomer B: RT hiralne SFC = 8.17 min (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 80/20 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 3 mL/min).

Primeri 133 & 134

2-{5-[(2,6-Difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0351]

1

[0352] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za sintezu 2-{5-[(2,5-difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola, (2,6-difluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol je konvertovan u racemski 2-{5-[(2,6-difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, koji je razdvojen hiralnom prep SFC (Kolona: Chiral OD-H 25 x 2.1 cm, 5 µm; Mobilna faza: 70/30 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 60 mL/min) da se dobiju Enantiomer A (30.0 mg, 22%) i Enantiomer B (30.0 mg, 22%). Enantiomer A:<1>H NMR (400MHz, CD3OD): δ 8.50-8.51 (m, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.32 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 7.54-7.56 (m, 1H), 7.40-7.44 (m, 1H), 7.39-7.43 (m, 1H), 7.05-7.09 (m, 2H), 6.09-6.12 (m, 1H), 4.12 (s, 3H), 4.03-4.06 (m, 1H), 3.81-3.84 (m, 1H), 3.54-3.62 (m, 1H), 3.45-3.51 (m, 1H), 2.41 (s, 3H), 1.82-1.85 (m, 1H), 1.70 (s, 6H), 1.31-1.46 (m, 2H), 1.23-1.31 (m, 1H), 1.08-1.12 (m, 1H). LCMS: RT= 2.43 min; MS (ES): m/z= 532.2 [M+H]<+>(ACN/H2O sa HCOONH4, Ascentis Express C182.7 µm (50 x 2.1)mm, Gradijent = 4 min, Talasna dužina = 220 nm); HPLC RT = 8.053 min (Kolona: Sunfire C18 3.5 µm, 4.6 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 10-100% B tokom 15 min; Protok: 1 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm). RT hiralne SFC = 7.83 min (Kolona: Lux Cellulose 2, 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 60/40 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 4 mL/min). Enantiomer B: RT hiralne SFC = 9.03 min (Kolona: Lux Cellulose 2, 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 60/40 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 4 mL/min).

Primeri 135 & 136

2-{5-[(2,4-Difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0353]

1

[0354] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za sintezu 2-{5-[(2,5-difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola, (2,4-difluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol je konvertovan u racemski 2-{5-[(2,4-difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, koji je razdvojen hiralnom prep SFC (Kolona: Lux Cellulose 4, 250 x 21.5 mm, 5 µm; Mobilna faza: 65/35 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 70 mL/min)) da se dobiju Enantiomer A (26.0 mg, 8%) i Enantiomer B (20.0 mg, 6%). Enantiomer A:<1>H NMR (400MHz, CD3OD): δ 8.46 (m, 1H), 8.32-8.27 (m, 2H), 8.14 (m, 1H), 8.01 (m, 1H), 7.48 (dd, J = 8.0, 0.8 Hz, 1H), 7.10 (m, 1H), 6.93 (m, 1H), 5.95 (d, J 11.2 Hz, 1H), 4.05(s, 3H), 3.99 (m, 1H), 3.79 (m, 1H), 3.58 (m, 1H), 3.36 (m, 2H), 2.35 (s, 3H), 1.89 (m, 1H), 1.66 (s, 3H), 1.64 (s, 3H), 1.61 (m, 1H), 1.41 (m, 1H), 0.95 (m, 1H). LCMS: RT= 1.84 min; MS (ES): m/z= 532.2 [M+H]<+>(ACN/H2O sa HCOONH4, Ascentis Express C18 2.7 µm (50 x 2.1)mm, Gradijent = 4 min, Talasna dužina = 220 nm); HPLC RT = 8.301 min (Kolona: Sunfire C18 3.5 µm, 4.6 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 10-100% B tokom 15 min; Protok: 1 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm). RT hiralne SFC = 4.32 min (Kolona: Lux Cellulose 4, 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 65/35 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 4 mL/min). Enantiomer B: RT hiralne SFC = 9.15 min (Kolona: Lux Cellulose 4, 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 65/35 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 4 mL/min).

Primeri 137 & 138

2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-9-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0355]

1

[0356] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za sintezu 2-{5-[(2,5-difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola, (2-fluorofenil)(oksan-4-il)metanol i metil 3-bromo-9-metoksil-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat su konvertovani u racemski 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-9-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol, koji je razdvojen hiralnom prep SFC (Kolona: Chiral OD-H 25 x 2.1 cm, 5 µm; Mobilna faza: 60/40 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 60 mL/min) da se dobiju Enantiomer A (30.0 mg, 22%) i Enantiomer B (30.0 mg, 22%). Enantiomer A:<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.4 (s, 1 H), 8.3 (br. s., 1 H), 8.1 (td, J=7.5, 2.0 Hz, 1 H), 7.6 (s, 1 H), 7.3-7.4 (m, 2 H), 7.0-7.1 (m, 2 H), 6.0 (d, J=11.5 Hz, 1 H), 4.1 (s, 3 H), 4.0-4.1 (m, 4 H), 3.8 (dd, J=11.5, 3.0 Hz, 1 H), 3.6-3.7 (m, 1 H), 3.4 (d, J=12.0 Hz, 2 H), 2.4 (s, 3 H), 1.9 (d, J=13.1 Hz, 1 H), 1.6-1.7 (m, 7 H), 1.4 (qd, J=12.3, 4.3 Hz, 1 H), 1.0 (d, J=13.1 Hz, 1 H). LCMS: RT= 1.76 min; MS (ES): m/z= 544.4 [M+H]<+>(ACN/H2O sa HCOONH4, Ascentis Express C18 2.7 µm (50 x 2.1)mm, Gradijent = 4 min, Talasna dužina = 220 nm); HPLC RT = 7.960 min (Kolona: Sunfire C18 3.5 µm, 4.6 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 10-100% B tokom 15 min; Protok: 1 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm). RT hiralne SFC = 1.90 min (Kolona: Chiral OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 60/40 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 4 mL/min). Enantiomer B: RT hiralne SFC = 2.90 min (Kolona: Chiral OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 60/40 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 4 mL/min).

Primeri 139 & 140

2-{5-[(2,5-Difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0357]

1

[0358] U smešu metil 3-bromo-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (300 mg, 0.983 mmol) i (2,5-difluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanola (449 mg, 1.97 mmol) u DCM-u (18 mL) je dodavan trifenilfosfin (516 mg, 1.97 mmol) i DIAD (0.382 mL, 1.97 mmol) u kapima tokom perioda od 2 min na 25 °C, i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Smeša je prečišćena primenom silika gel kolonske hromatografije na ISCO Companion (24g silika gel „flash“ kolona, 0 do 1% MeOH/CHCl3tokom 30min). Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i koncentrovane, i dobijena čvrsta supstanca je triturisana sa dietil etrom (10 mL) da se dobije metil 3-bromo-5-((2,5-difluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (250 mg, 49 %) kao bela čvrsta supstanca. LCMS: HPLC: RT=1.19 min, MS (ES): m/z= 515, 517 [M+H]<+>; (ACN/H2O sa NH4OAc, Acquity BEH C181.7 µm (50 x 2.1) mm, gradijent = 3 min, talasna dužina = 220 nm).

Korak 2: Metil 5-((2,5-difluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0359] Smeša metil 3-bromo-5-((2,5-difluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (200 mg, 0.388 mmol), 3,5-dimetil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)izoksazola (130 mg, 0.582 mmol), K2CO3(161 mg, 1.16 mmol), PdCl2(dppf)-CH2Cl2proizvoda (31.7 mg, 0.0390 mmol), 1,4-dioksana (6.5 mL), i vode (1.3 mL) u bočici je pročišćena strujom argona tokom 5 min. Bočica je zatvorena septumom, ispražnjena i napunjena argonom, i zatim je zagrevana do 100 °C tokom 1 h. Smeša je razblažena sa 30 mL vode i ekstrahovana sa EtOAc-om (45 mL x 2), osušena preko Na2SO4, filtrirana, koncentrovana, i sirov proizvod je prečišćen primenom silika gel kolonske hromatografije primenom ISCO (Silika gel, 12 g „flash“ kolona, 0 do 2% MeOH/CHCl3tokom 30 min) da se dobije metil 5-((2,5-difluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (200 mg, 0.376 mmol, 97 %)

1

kao žuta tečnost. LCMS: RT=0.96 min; MS (ES): m/z= 532 [M+1]<+>(ACN/H2O sa NH4OAc, Acquity BEH C181.7 µm (50 x 2.1) mm, gradijent = 3 min, talasna dužina = 220 nm).

Korak 3: 2-{5-[(2,5-Difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0360] Promešani rastvor metil 5-((2,5-difluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (150 mg, 0.282 mmol) u tetrahidrofuranu (1 mL) je ohlađen na -20 °C i tretiran sa metilmagnezijum bromidom (3M u THF-u, 0.470 mL, 1.41 mmol) putem šprica, i nakon završetka dodavanja reakciona smeša je polako zagrevana do sobne temperature tokom perioda od 5 h. Smeša je ohlađena u ledenom kupatilu, kvenčovana sa zas. vod. NH4Cl-om (20 mL), i vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAcom (30 mL x 2). Ekstrakt je osušen preko Na2SO4, filtriran, koncentrovan, i ostatak prečišćen pomoću preparativne HPLC (Kolona: Sunfire C18(250X30* 7u) Mobilna faza A: 10 mm NH4OAc u vodi, Mobilna faza B: ACN rastvorljivost: MEOH+THF, Protok: 30 mL/min) da se dobije racemski 2-{5-((2,5-difluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil]-3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol (100 mg, 0.184 mmol, 65 %) kao bela čvrsta supstanca, koji je razdvojen hiralnom prep SFC (Kolona: Chiral OD-H 25 x 2.1 cm, 5 µm; Mobilna faza: 85/15 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 60 mL/min) da se dobiju Enantiomer A (40 mg, 26%) i Enantiomer B (40 mg, 26%). Enantiomer A:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 8.38 (d, J = 1.8 Hz, 1 H), 8.25 (d, J = 8.3 Hz, 1 H), 8.20 (br. s., 1 H), 8.02 (s, 1 H), 7.93 (d, J = 7.3 Hz, 1 H), 7.47 (dd, J = 1.3, 8.3 Hz, 1 H), 7.13-7.05 (m, 2 H), 5.95 (d, J = 11.5 Hz, 1 H), 4.00 (dd, J = 2.8, 11.5 Hz, 1 H), 3.80 (dd, J = 3.0, 11.8 Hz, 1 H), 3.67-3.56 (m, 1 H), 3.43-3.34 (m, 2 H), 2.49 (s, 3 H), 2.33 (s, 3 H), 1.92 (d, J = 13.3 Hz, 1 H), 1.66 (d, J = 3.8 Hz, 7 H), 1.42 (dd, J = 4.3, 12.5 Hz, 1 H), 0.98 (d, J = 13.3 Hz, 1 H). LCMS: RT= 1.99 min; MS (ES): m/z= 532.4 [M+H]<+>(ACN/H2O sa HCOONH4, Ascentis Express C18 2.7 µm (50 x 2.1)mm, gradijent = 4 min, talasna dužina = 220 nm); HPLC RT = 8.487 min (Kolona: Sunfire C18 3.5 µm, 4.6 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 10-100% B tokom 15 min; Protok: 1 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm). RT hiralne SFC = 3.67 min (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 70/30 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 3 mL/min). Enantiomer B: RT hiralne SFC = 4.38 min (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 70/30 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 3 mL/min).

Primeri 141 & 142

14

2-{5-[(3,4-Difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0361]

[0362] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za sintezu 2-{5-[(2,5-difluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil]-3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola, (3,4-difluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol je konvertovan u racemski 2-{5-[(3,4-difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol (90.0 mg, 49 %), koji je razdvojen hiralnom prep SFC (Kolona: Lux Cellulose 4, 25 x 2.1 cm, 5 µm; Mobilna faza: 65/35 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 60 mL/min) da se dobiju Enantiomer A (25.0 mg, 14%) i Enantiomer B (23.0 mg, 13%). Enantiomer A:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 8.37 (d, J = 2.0 Hz, 1 H), 8.27 (d, J = 8.5 Hz, 1 H), 8.15 (s, 1 H), 8.05 (s, 1 H), 7.68-7.57 (m, 1 H), 7.52-7.39 (m, 2 H), 7.24 (td, J = 8.5, 10.5 Hz, 1 H), 5.75 (s, 1 H), 4.06-3.95 (m, 1 H), 3.89-3.78 (m, 1 H), 3.66-3.55 (m, 1 H), 3.40 (m, 2 H), 2.49 (s, 3 H), 2.33 (s, 3 H), 1.92 (d, J = 13.3 Hz, 1 H), 1.68 (d, J = 3.5 Hz, 6 H), 1.65-1.58 (m, 1 H), 1.45-1.34 (m, 1 H), 1.16-1.07 (d, J = 13.3 Hz, 1 H). LCMS: RT= 2.05 min; MS (ES): m/z= 532.4 [M+H]<+>(ACN/H2O sa HCOONH4, Ascentis Express C18 2.7 µm (50 x 2.1)mm, gradijent = 4 min, talasna dužina = 220 nm); HPLC RT = 8.911 min (Kolona: Sunfire C18 3.5 µm, 4.6 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 10-100% B tokom 15 min; Protok: 1 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm). RT hiralne SFC = 3.36 min (Kolona: Lux Cellulose 4, 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 55/45 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 3 mL/min). Enantiomer B: RT hiralne SFC = 3.89 min (Kolona: Lux Cellulose 4, 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 55/45 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 3 mL/min).

Primeri 143 & 144

2-{5-[(2,6-Difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0363]

[0364] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za sintezu 2-{5-[(2,5-difluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil]-3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola, (2,6-difluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol je konvertovan u racemski 2-{5-[(2,6-difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, koji je razdvojen hiralnom prep SFC (Kolona: Chiralcel OD-H, 25 x 2.1 cm, 5 µm; Mobilna faza: 60/40 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 70 mL/min) da se dobiju Enantiomer A (7.00 mg, 9%) i Enantiomer B (6.00 mg, 7%). Enantiomer A:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 8.40 (d, J = 1.5 Hz, 1 H), 8.29-8.20 (m, 2 H), 8.08 (s, 1 H), 7.55-7.50 (m, 1 H), 7.45-7.35 (m, 1 H), 7.09-7.02 (m, 2 H), 6.07 (d, J = 11.5 Hz, 1 H), 4.03 (d, J = 9.0 Hz, 1 H), 3.81 (d, J = 11.5 Hz, 1 H), 3.61-3.50 (m, 1 H), 3.45-3.35 (m, 2 H), 2.53 (s, 3 H), 2.37 (s, 3 H), 1.83 (d, J = 14.1 Hz, 1 H), 1.66 (s, 6H), 1.72-1.62 (m, 1 H), 1.42 (m, 1 H), 1.06 (d, J = 13.1 Hz, 1 H). LCMS: RT= 1.85 min; MS (ES): m/z= 532.4 [M+H]<+>(ACN/H2O sa HCOONH4, Ascentis Express C18 2.7 µm (50 x 2.1)mm, gradijent = 4 min, talasna dužina = 220 nm); HPLC RT = 8.403 min (Kolona: Sunfire C18 3.5 µm, 4.6 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 10-100% B tokom 15 min; Protok: 1 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm). RT hiralne SFC = 2.62 min (Kolona: Chiralcel OD-H, 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 55/45 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 3 mL/min). Enantiomer B: RT hiralne SFC = 3.66 min (Kolona: Chiralcel OD-H, 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 55/45 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 3 mL/min).

Primeri 145 & 146

2-{5-[(2,3-Difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0366] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za sintezu 2-{5-[(2,5-difluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil]-3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola, (2,3-difluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol je konvertovan u racemski 2-{5-[(2,3-difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, koji je razdvojen hiralnom prep SFC (Kolona: Chiralcel OD-H, 25 x 2.1 cm, 5 µm; Mobilna faza: 60/40 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 70 mL/min) da se dobiju Enantiomer A (52.0 mg, 30%) i Enantiomer B (54.0 mg, 31%). Enantiomer A:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 8.38 (d, J = 1.60 Hz, 1H), 8.26 (d, J = 8.40 Hz, 1H), 8.20 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.89 (t, J = 7.60 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 7.20-7.32 (m, 2H), 6.00 (d, J = 12.00 Hz, 1H), 3.99 (dd, J = 3.20, 11.00 Hz, 1H), 3.80 (dd, J = 2.80, 11.40 Hz, 1H), 3.60 (dt, J = 11.60, Hz, 1H), 3.33-3.40 (m, 2H), 2.48 (s, 3H), 2.32 (s, 3H), 1.89-2.04 (m, 1H), 1.60-1.70 (m, 7H), 1.37-1.47 (m, 1H), 0.97 (d, J = 12.80 Hz, 1H). LCMS: RT= 2.013 min; MS (ES): m/z= 532.5 [M+H]<+>(ACN/H2O sa HCOONH4, Ascentis Express C18 2.7 µm (50 x 2.1)mm, gradijent = 4 min, talasna dužina = 220 nm); HPLC RT = 8.534 min (Kolona: Sunfire C18 3.5 µm, 4.6 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 10-100% B tokom 15 min; Protok: 1 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm). RT hiralne SFC = 2.38 min (Kolona: Chiralcel OD-H, 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 55/45 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 4 mL/min). Enantiomer B: RT hiralne SFC = 2.96 min (Kolona: Chiralcel OD-H, 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 55/45 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 4 mL/min).

Primeri 147 & 148

2-[3-(Dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[(3-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0367]

14

[0368] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za sintezu 2-{5-[(2,5-difluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil]-3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola, (3-fluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol je konvertovan u racemski 2-[3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[(3-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol (110 mg, 48 %), koji je razdvojen hiralnom prep SFC (Kolona: Chiralcel OD-H, 25 x 2.1 cm, 5 µm; Mobilna faza: 65/35 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 60 mL/min) da se dobiju Enantiomer A (30.0 mg, 13%) i Enantiomer B (30.0 mg, 13%). Enantiomer A:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 8.36 (d, J = 1.5 Hz, 1 H), 8.27 (d, J = 8.5 Hz, 1 H), 8.13 (s, 1 H), 8.08 (s, 1 H), 7.51-7.31 (m, 4 H), 7.06-6.98 (m, 1 H), 5.77 (s, 1 H), 4.04-3.97 (m, 1 H), 3.82 (dd, J = 2.5, 11.5 Hz, 1 H), 3.66-3.56 (m, 1 H), 3.47-3.40 (m, 2 H), 2.49 (s, 3 H), 2.33 (s, 3 H), 1.94 (d, J = 13.1 Hz, 1 H), 1.68 (d, J = 3.0 Hz, 6 H), 1.65-1.59 (m, 1 H), 1.46-1.38 (m, 1 H), 1.16-1.08 (m, 1 H). LCMS: RT= 2.02 min; MS (ES): m/z= 514.4 [M+H]<+>(ACN/H2O sa HCOONH4, Ascentis Express C18 2.7 µm (50 x 2.1)mm, Gradijent = 4 min, Talasna dužina = 220 nm); HPLC RT = 8.511 min (Kolona: Sunfire C18 3.5 µm, 4.6 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 10-100% B tokom 15 min; Protok: 1 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm). RT hiralne SFC = 3.28 min (Kolona: Chiralcel OD-H, 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 65/35 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 3 mL/min). Enantiomer B: RT hiralne SFC = 5.06 min (Kolona: Chiralcel OD-H, 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 65/35 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 3 mL/min).

Primeri 149 & 150

2-[3-(Dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0369]

[0370] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za sintezu 2-{5-[(2,5-difluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil]-3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola, (2-fluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol je konvertovan u racemski 2-[3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol (70.0 mg, 70 %), koji je razdvojen hiralnom prep SFC (Kolona: Chiralcel OD-H, 25 x 2.1 cm, 5 µm; Mobilna faza: 60/40 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 70 mL/min) da se dobiju Enantiomer A (35.0 mg, 34%) i Enantiomer B (35.0 mg, 34%). Enantiomer A:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 8.34-8.35 (m, 1H), 8.24 (d, J = 8.00 Hz, 1H), 8.16 (s, 1H), 8.02-8.09 (m, 2H), 7.43-7.46 (m, 1H), 7.28-7.36 (m, 2H), 7.03-7.08 (m, 1H), 5.94-5.97 (m, 1H), 3.97-3.98 (m, 1H), 3.77-3.81 (m, 1H), 3.56-3.62 (m, 1H), 3.30-3.39 (m, 2H), 2.47 (s, 3H), 2.31 (s, 3H), 1.88-1.93 (m, 1H), 1.60-1.68 (m, 7H), 1.39-1.43 (m, 1H), 0.95-0.98 (m, 1H). LCMS: RT= 2.28 min ; MS (ES): m/z= 514.2 [M+H]<+>(ACN/H2O sa HCOONH4, Ascentis Express C182.7 µm (50 x 2.1)mm, Gradijent = 4 min, Talasna dužina = 220 nm); HPLC RT = 8.068 min (Kolona: Sunfire C18 3.5 µm, 4.6 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 10-100% B tokom 15 min; Protok: 1 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm). RT hiralne SFC = 2.25 min (Kolona: Chiralcel OD-H, 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 55/45 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 3 mL/min). Enantiomer B: RT hiralne SFC = 3.59 min (Kolona: Chiralcel OD-H, 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 55/45 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 3 mL/min).

Primer 151

N-Ciklopropil-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-9-karboksamid

[0371]

14

Korak 1: Metil 2-(5-bromo-3-nitropiridin-2-il)benzoat

[0372] U bočicu od 40 mL je dodata smeša 2,5-dibromo-3-nitropiridina (2.00 g, 7.09 mmol), (2-(metoksikarbonil)fenil)boronske kiseline (1.41 g, 7.80 mmol), i 2 M vodenog trikalijum fosfata (7.09 mL, 14.2 mmol) u tetrahidrofuranu (20 mL), i reakciona smeša je pročišćena pod strujom azota tokom nekoliko min. Smeša je potom tretirana sa PdCl2(dppf)-CH2Cl2proizvodom (0.290 g, 0.355 mmol), poklopljena septumom, ispražnjena, i pročišćena sa azotom 3 puta. Reakciona smeša je potom zagrevana u bloku za zagrevanje na 80 °C tokom 3 h. Reakciona smeša je razblažena sa vodom i ekstrahovana u etil acetat. Organske supstance su oprane sa vodom, i isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom da bi se dobio taman ostatak. Materijal je prečišćen primenom silika gel kolonske hromatografije sa ISCO Companion (kolona sa 80 g silika gela) i eluiran sa EtOAc/heksan gradijentom (10-50%) da se dobije metil 2-(5-bromo-3-nitropiridin-2-il)benzoat (1.10 g, 3.26 mmol, 46 %) kao svetlo-žuti ostatak koji polako očvršćava. LCMS: Waters Acquity SDS. Kolona: BEH C18 2.1x50 mm 1.7u (1.6 min grad) 2-98 % B. Brzina protoka = 0.8 mL/min. Rastvarač A: H2O -0.1 % TFA. Rastvarač B: Acetonitril - 0.1 % TFA; LCMS: RT = 0.92 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 337.0, 339.0.

Korak 2: 3-Bromo-5H-pirido[3,2-b]indol-9-karboksilat

[0373] Rastvor metil 2-(5-bromo-3-nitropiridin-2-il)benzoata (1.00 g, 2.97 mmol) i 1,3-bis(difenilfosfino)propana (1.35 g, 3.26 mmol) u 1,2-dihlorobenzenu (10 mL) je zatvoren u veću bočicu od 20 mL i zagrevan u bloku za zagrevanje na 155 °C tokom noći. Rastvarač je uklonjen pod visokim vakuumom da bi se dobio tamni ostatak, koji je prečišćen primenom silika gel kolonske hromatografije sa ISCO Companion (kolona sa 80 g silika gela) i eluiran sa EtOAc/heksan gradijentom (20-50%) da se dobije metil 3-bromo-5H-pirido[3,2-b]indol-9-karboksilat (220 mg, 0.721 mmol, 24 %). LCMS: Waters Acquity SDS. Kolona: BEH C18 2.1x50 mm 1.7u (1.6 min grad) 2-98 % B. Brzina protoka = 0.8 mL/min. Rastvarač A: H2O -0.1 % TFA. Rastvarač B: Acetonitril - 0.1 % TFA. LCMS: RT = 0.60 min; (ES): m/z (M+H)<+>

14

= 305.0, 307.0. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.71 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.40 (br. s., 1H), 7.90 (s, 1H), 7.75 (dd, J=7.2, 1.2 Hz, 1H), 7.66-7.54 (m, 2H), 4.12 (s, 3H).

Korak 3: Metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-9-karboksilat [0374] Rastvor metil 3-bromo-5H-pirido[3,2-b]indol-9-karboksilata (220 mg, 0.721 mmol), 1,4-dimetil-5-(tributilstanil)-1H-1,2,3-triazola (334 mg, 0.865 mmol), bakar(I) jodida (27.5 mg, 0.144 mmol), Pd(Ph3P)4(83.0 mg, 0.0720 mmol), TEA (0.201 mL, 1.44 mmol), i DMF (5 mL) u bočici od 20 mL je zatvoren i zagrevan u bloku za zagrevanje na 95 °C tokom noći. Reakciona smeša je razblažena sa NH4OH-om (vod) i vodom i ekstrahovana u etil acetat. Organske supstance su oprane sa vodom i slanim rastvorom i koncentrovane. Ostatak je prečišćen primenom silika gel kolonske hromatografije sa ISCO Companion (kolona sa 40 g silika gela) i eluiran sa MeOH/CH2Cl2gradijentom (0-10%) da se dobije metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-9-karboksilat (70.0 mg, 0.218 mmol, 30 %). LCMS: Waters Acquity SDS. Kolona: BEH C182.1x50 mm 1.7u (1.6 min grad) 2-98 % B. Brzina protoka = 0.8 mL/min. Rastvarač A: H2O -0.1 % TFA. Rastvarač B: Acetonitril - 0.1 % TFA. LCMS: RT = 0.56 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 322.2.

Korak 4. (S)-Metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-9-karboksilat

[0375] Rastvor metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-9-karboksilata (70.0 mg, 0.218 mmol), (R)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanola (84.0 mg, 0.436 mmol), i trifenilfosfina (114 mg, 0.436 mmol) u dihlorometanu (4 mL) je tretiran u kapima sa DIAD (0.0850 mL, 0.436 mmol), i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom noći. Smeša je direktno naneta na silika gel kolonu. Materijal je prečišćen primenom silika gel kolonske hromatografije primenom ISCO Companion (kolona sa 40 g silika gela) i eluiran sa MeOH/CH2Cl2gradijentom (0-10%). Frakcije koje sadrže proizvod su prikupljene, i isparljive supstance su uklonjene da bi se dobilo žuto ulje, koje je prečišćeno drugi put na ISCO Companion (kolona sa 24 g silika gela) i eluirano sa etil acetatom da se dobije (S)-metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-9-karboksilat (35.0 mg, 35 %). LCMS: Waters Acquity SDS. Kolona: BEH C182.1x50 mm 1.7u (1.6 min grad) 2-98 % B. Brzina protoka = 0.8 mL/min. Rastvarač A: H2O -0.1 % TFA. Rastvarač B: Acetonitril - 0.1 % TFA; LCMS: RT = 0.74 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 496.3.<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.58 (s, 1H), 8.33 (br. s., 1H), 7.96 (s, 1H), 7.67 (d, J=7.4 Hz, 3H), 7.45 (d, J=7.4 Hz, 1H), 7.37-7.30 (m, 2H), 7.28-7.21 (m, 1H), 5.90 (d, J=11.1 Hz, 1H), 4.02 (br. s., 2H), 3.95 (s, 3H), 3.91 (d, J=9.4 Hz, 1H), 3.72 (d, J=9.4

14

Hz, 1H), 3.52-3.38 (m, 2H), 3.27 (t, J=11.3 Hz, 1H), 2.30 (br. s., 3H), 1.73 (d, J=13.1 Hz, 1H), 1.61-1.51 (m, 1H), 1.36-1.25 (m, 1H), 0.97 (d, J=12.5 Hz, 1H).

Korak 5: N-Ciklopropil-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-9-karboksamid

[0376] Rastvor (S)-metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-9-karboksilat (35.0 mg, 0.0710 mmol) u metanolu (2 mL) je tretiran sa 1 N NaOH (0.706 mL, 0.706 mmol), i svetlo-žut rastvor je mešan na sobnoj temperaturi. Smeša je koncentrovana na rotacionom uparivaču da bi se dobio čvrsti ostatak. Ovo je tretirano sa 1 N HCl i rastvoreno u 2 mL metanola, i rastvor je koncentrovan na rotacionom uparivaču da se dobije (S)-3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-9-karboksilna kiselina (34.0 mg, 0.0710 mmol) kao bela čvrsta supstanca, koja je primenjena bez prečišćavanja. LCMS: Waters Acquity SDS. Kolona: BEH C182.1x50 mm 1.7u (1.6 min grad) 2-98 % B. Brzina protoka = 0.8 ml/min. Rastvarač A: H2O -0.1 % TFA. Rastvarač B: Acetonitril - 0.1 % TFA. LCMS: RT = 0.80 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 482.3.

[0377] Rastvor (S)-3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-9-karboksilne kiseline (34.0 mg, 0.0710 mmol) u DMF-u (2 mL) je tretiran sa EDC (27.1 mg, 0.141 mmol), HOBT (21.6 mg, 0.141 mmol), i zatim sa ciklopropilaminom (20.2 mg, 0.353 mmol), i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom noći. Reakciona smeša je razblažena sa vodom i 1 N HCl. Vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom, i organske supstance su oprane sa vodom i koncentrovane. Sirov materijal je prečišćen putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 15-55% B tokom 25 min, potom 5-minutno zadržavanje na 55% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da se dobije N-ciklopropil-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-9-karboksamid (6.00 mg, 16%). LCMS: RT = 1.72 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 521.3 (Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1.11 mL/min).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 12.17 (d, J=3.7 Hz, 1H), 8.68 (br. s., 1H), 8.64-8.36 (m, 1H),

14

8.15 (d, J=6.1 Hz, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.76 (br. s., 1H), 7.67 (d, J=7.7 Hz, 2H), 7.40-7.30 (m, 2H), 7.29-7.21 (m, 1H), 5.99 (d, J=11.1 Hz, 1H), 4.03 (br. s., 3H), 3.90 (d, J=8.8 Hz, 1H), 3.71 (d, J=9.1 Hz, 1H), 3.49 (d, J=11.1 Hz, 1H), 3.42-3.35 (m, 1H), 3.25 (t, J=11.4 Hz, 1H), 3.07 (td, J=7.2, 3.9 Hz, 1H), 2.31 (br. s., 3H), 1.76 (d, J=11.4 Hz, 1H), 1.66-1.52 (m, 1H), 1.36-1.24 (m, 1H), 0.91 (d, J=10.1 Hz, 1H), 0.83 (d, J=7.1 Hz, 2H), 0.73 (br. s., 2H).

Primer 152

[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-6-il]metanol

[0378]

Korak 1: Metil 3-(5-bromo-3-nitropiridin-2-il)-4-fluorobenzoat

[0379] Smeša 2,5-dibromo-3-nitropiridina (705 mg, 2.50 mmol) i (2-fluoro-5-(metoksikarbonil)fenil)boronske kiseline (495 mg, 2.50 mmol) u tetrahidrofuranu (10 mL) u bočici od 20 mL je pročišćena pod strujom azota i zatim tretirana sa 2 M vodenim trikalijum fosfatom (3.75 mL, 7.50 mmol) (formirane čvrste supstance) i zatim sa PdCl2(dppf)-CH2Cl2proizvodom (204 mg, 0.250 mmol). Bočica je zatvorena sa septumom, ispražnjena, i pročišćena sa azotom 3 puta pre nego što je reakciona smeša zagrejana u bloku za zagrevanje na 80 °C. Oprez - čvrste supstance se postepeno rastvaraju zagrevanjem. Nakon 3 h, smeša je ohlađena na sobnu temperaturu, razblažena sa vodom, i ekstrahovana u etil acetat. Organske supstance su oprane sa vodom, i isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom da bi se dobio taman ostatak. Materijal je prečišćen primenom silika gel kolonske hromatografije sa ISCO Companion (kolona sa 80 g silika gela) i eluiran sa EtOAc/heksan gradijentom (10-40%) da se dobije metil 3-(5-bromo-3-nitropiridin-2-il)-4-fluorobenzoat (507 mg, 1.43 mmol, 57 %) kao bela kristalna čvrsta supstanca. LCMS: Waters Acquity SDS. Kolona: BEH C182.1x50 mm 1.7u (1.6 min grad) 2-98 % B. Brzina protoka = 0.8 mL/min. Rastvarač A: H2O -0.1 % TFA. Rastvarač B: Acetonitril - 0.1 % TFA. LCMS: RT = 0.99 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 355.0, 356.9.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.99 (d, J=2.1 Hz, 1H), 8.52 (d, J=2.1 Hz, 1H), 8.39 (dd, J=7.0, 2.2 Hz, 1H), 8.18 (ddd, J=8.7, 5.1, 2.3 Hz, 1H), 7.18 (dd, J=9.7, 8.8 Hz, 1H), 3.94 (s, 3H).

14

Korak 2: Metil 3-bromo-9-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-6-karboksilat

[0380] Smeša metil 3-(5-bromo-3-nitropiridin-2-il)-4-fluorobenzoata (500 mg, 1.41 mmol) i 1,2-bis(difenilfosfino)etana (701 mg, 1.76 mmol) u 1,2-dihlorobenzenu (5 mL) je zatvorena u bočici od 20 mL i zagrevana u bloku za zagrevanje na 170 °C tokom 5 h. Reakciona smeša je uklonjena iz bloka za zagrevanje, i tamna smeša je premeštena u posudu sa okruglim dnom i koncentrovana pod visokim vakuumom. Dobijeni crni ostatak je rastvoren u DCM-u i prečišćen primenom silika gel kolonske hromatografije sa ISCO Companion (kolona sa 40 g silika gela) i eluiran sa EtOAc/heksan gradijentom (15-50%) da se dobije metil 3-bromo-9-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-6-karboksilat (170 mg, 0.526 mmol, 37 %) kao bela čvrsta supstanca. LCMS: Waters Acquity SDS. Kolona: BEH C182.1x50 mm 1.7u (1.6 min grad) 2-98 % B. Brzina protoka = 0.8 mL/min. Rastvarač A: H2O -0.1 % TFA. Rastvarač B: Acetonitril - 0.1 % TFA. LCMS: RT = 0.93 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 323.0, 325.0.

Korak 3: Metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-6-karboksilat

[0381] U bočicu od 20 mL je dodata smeša 1,4-dimetil-5-(tributilstanil)-1H-1,2,3-triazola (264 mg, 0.684 mmol), metil 3-bromo-9-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-6-karboksilata (170 mg, 0.526 mmol), bakar(I) jodida (20.0 mg, 0.105 mmol), i TEA (0.147 mL, 1.05 mmol) u DMF-u (5 mL), i smeša je pročišćena pod strujom azota. Potom je dodat Pd(Ph3P)4(60.8 mg, 0.0530 mmol) i poklopljena sa septumom. Bočica je ispražnjena i pročišćena sa azotom 3 puta i zatim je reakciona smeša zagrevana u bloku za zagrevanje na 95 °C tokom 3 h. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu, razblažena sa vodom i vodenim amonijum hidroksidom, i ekstrahovana u etil acetat. Organske supstance su oprane sa vodom i slanim rastvorom, i isparljive supstance su uklonjene. Dobijeni ostatak je rastvoren u DCM-u i prečišćen primenom silika gel kolonske hromatografije sa ISCO Companion (kolona sa 24 g silika gela) i eluiran sa etil acetatom da se dobije metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-6-karboksilat (160 mg, 0.292 mmol, 56 %) kao prljavo-bela čvrsta supstanca. LCMS: Waters Acquity SDS. Kolona: BEH C182.1x50 mm 1.7u (1.6 min grad) 2-98 % B. Brzina protoka = 0.8 mL/min. Rastvarač A: H2O -0.1 % TFA. Rastvarač B: Acetonitril - 0.1 % TFA. LCMS: RT = 0.75 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 340.1.

Korak 4. (S)-Metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-fluoro-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-6-karboksilat

[0382] U bočicu od 20 mL je dodat metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-6-karboksilat (160 mg, 0.472 mmol), (R)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-

1

il)metanol (181 mg, 0.943 mmol) i dihlorometan (6 mL), i reakciona smeša je potom tretirana sa trifenilfosfinom (247 mg, 0.943 mmol) i tretiran je u kapima sa DIAD (0.183 mL, 0.943 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom noći. Sirova reakciona smeša je direktno naneta na silika gel kolonu i prečišćena je primenom ISCO Companion (kolona sa 40 g silika gela) sa etil acetatom da se dobije (S)-metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-fluoro-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-6-karboksilat (150 mg, 60 %) kao bela čvrsta supstanca. LCMS4: Waters Acquity SDS. Kolona: BEH C182.1x50 mm 1.7u (1.6 min grad) 2-98 % B. Brzina protoka = 0.8 mL/min. Rastvarač A: H2O -0.1 % TFA. Rastvarač B: Acetonitril - 0.1 % TFA. LCMS: RT = 0.92 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 514.2.

Korak 5: [3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-6-il]metanol

[0383] Rastvor (S)-metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-fluoro-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-6-karboksilata (40.0 mg, 0.0780 mmol) u tetrahidrofuranu (5 mL) u bočici od 20 mL je ohlađen u ledenom kupatilu i tretiran sa čvrstim LiAlH4(5.91 mg, 0.156 mmol), i smeša je mešana u kupatilu. Nakon 1 h, još LiAlH4(5.91 mg, 0.156 mmol) je dodato. Nakon 2 h smeša je kvenčovana sa zas. vod. amonijum hloridom i ekstrahovana u etil acetat. Organske supstance su oprane sa vodom, i isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom da bi se dobila bela čvrsta supstanca. Sirov materijal je prečišćen putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 15-55% B tokom 25 min, potom 5-minutno zadržavanje na 55% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da se dobije [3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-6-il]metanol (8.00 mg, 20 %). LCMS: RT 1.39 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 486.2 (Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1.11 mL/min).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.57 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.67 (d, J=7.7 Hz, 2H), 7.64-7.58 (m, 1H), 7.36-7.31 (m, 2H), 7.28-7.22 (m, 1H), 7.11 (t, J=8.8 Hz, 1H), 6.41 (d, J=11.1 Hz, 1H), 5.10-5.04 (m, 2H), 3.92-3.87 (m, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.71 (d, J=8.4 Hz, 1H), 3.55-3.40

1 1

(m, 2H), 3.23 (t, J=11.4 Hz, 1H), 2.16 (s, 3H), 1.92 (m, 1H), 1.60-1.44 (m, 2H), 0.70 (d, J=12.8 Hz, 1H).

Primer 153

4-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-8-il]-2-metilbutan-2-ol

[0384]

Korak 1: Metil 3-(3-(5-bromo-3-nitropiridin-2-il)fenil)propanoat

[0385] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za sintezu metil 3-(5-bromo-3-nitropiridin-2-il)-4-fluorobenzoata, 2,5-dibromo-3-nitropiridin (1084 mg, 3.85 mmol) i (3-(3-metoksi-3-oksopropil)fenil)boronska kiselina (800 mg, 3.85 mmol) su konvertovani u metil 3-(3-(5-bromo-3-nitropiridin-2-il)fenil)propanoat (700 mg, 1.92 mmol, 50 %) kao svetložuto, gusto ulje. LCMS: RT = 1.00 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 365.0, 367.0. (LCMS: Waters Acquity SDS. Kolona: BEH C182.1x50 mm 1.7u (1.6 min grad) 2-98 % B. Brzina protoka = 0.8 mL/min. Rastvarač A: H2O -0.1 % TFA. Rastvarač B: Acetonitril - 0.1 % TFA).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.91 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.28 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.45-7.31 (m, 4H), 3.69 (s, 3H), 3.02 (t, J=7.7 Hz, 2H), 2.67 (t, J=7.8 Hz, 2H).

Korak 2: Metil 3-(3-bromo-5H-pirido[3,2-b]indol-6-il)propanoat

[0386] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za sintezu metil 3-bromo-9-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-6-karboksilata, metil 3-(3-(5-bromo-3-nitropiridin-2-il)fenil)propanoat (700 mg, 1.92 mmol) je konvertovan u metil 3-(3-bromo-5H-pirido[3,2-b]indol-6-il)propanoat (280 mg, 0.840 mmol, 44 %) kao belu čvrstu supstancu. LCMS: RT = 0.83 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 333.0, 335.0 (Waters Acquity SDS. Kolona: BEH C182.1x50 mm 1.7u (1.6 min grad) 2-98 % B. Brzina protoka = 0.8 mL/min. Rastvarač A: H2O -0.1 % TFA. Rastvarač B: Acetonitril - 0.1 % TFA).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 9.21 (br. s., 1H), 8.60 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.22 (d, J=7.5 Hz, 1H), 7.96 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.38-7.34 (m, 1H), 7.30 (d, J=7.6 Hz, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.32-3.22 (m, 2H), 2.88-2.78 (m, 2H). Takođe dobijen iz reakcije je izomerni metil 3-(3-bromo-5H-pirido[3,2-b]indol-8-il)propanoat (210 mg, 0.630

1 2

mmol, 33 %) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.60 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.18-8.16 (m, 1H), 8.06 (br. s., 1H), 7.88 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.44-7.39 (m, 2H), 3.69 (s, 3H), 3.17 (t, J=7.8 Hz, 2H), 2.81-2.71 (m, 2H). LCMS: RT = 0.79 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 333.0, 335.0 (Waters Acquity SDS. Kolona: BEH C182.1x50 mm 1.7u (1.6 min grad) 2-98 % B. Brzina protoka = 0.8 mL/min. Rastvarač A: H2O -0.1 % TFA. Rastvarač B: Acetonitril -0.1 % TFA).

Korak 3: (S)-Metil 3-(3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-8-il)propanoat

[0387] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana u koracima 3 i 4 za sintezu (S)-metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-fluoro-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-6-karboksilata, metil 3-(3-bromo-5H-pirido[3,2-b]indol-8-il)propanoat (210 mg, 0.630 mmol) je konvertovan u (S)-metil 3-(3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-8-il)propanoat (33.0 mg, 18 %). LCMS: RT = 0.86 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 524.3 (Waters Acquity SDS. Kolona: BEH C18 2.1x50 mm 1.7u (1.6 min grad) 2-98 % B. Brzina protoka = 0.8 mL/min. Rastvarač A: H2O -0.1 % TFA. Rastvarač B: Acetonitril - 0.1 % TFA).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.51 (s, 1H), 8.07 (m, 2H), 7.95 (s, 1H), 7.66 (d, J=7.4 Hz, 2H), 7.50 (d, J=7.4 Hz, 1H), 7.37-7.27 (m, 2H), 7.27-7.17 (m, 1H), 5.77 (d, J=11.4 Hz, 1H), 4.01 (br. s., 3H), 3.88 (d, J=13.8 Hz, 1H), 3.72 (d, J=8.8 Hz, 1H), 3.58 (s, 3H), 3.48-3.34 (m, 2H), 3.27 (t, J=11.3 Hz, 1H), 3.05 (t, J=7.4 Hz, 2H), 2.80-2.68 (m, 2H), 2.30 (s, 3H), 1.67 (d, J=12.5 Hz, 1H), 1.60-1.45 (m, 1H), 1.37-1.19 (m, 1H), 1.00 (d, J=12.5 Hz, 1H).

Korak 4: 4-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-8-il]-2-metilbutan-2-ol

[0388] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za sintezu (S)-2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ola, (S)-metil 3-(3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-8-il)propanoat je konvertovan u 4-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-8-il]-2-metilbutan-2-ol.<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.50 (s, 1H), 8.04 (s, 2H), 7.94 (s, 1H), 7.66 (d, J=7.7 Hz, 2H), 7.47 (d, J=7.4 Hz, 1H), 7.37-7.27 (m, 2H), 7.27-7.17 (m, 1H), 5.76 (d, J=11.1 Hz, 1H), 4.01 (br. s., 3H), 3.88 (d, J=13.5 Hz, 1H), 3.72 (d, J=9.4 Hz, 1H), 3.55-3.36 (m, 2H), 3.27 (t, J=11.3 Hz, 1H), 2.85-2.76 (m, 2H), 2.30 (s, 3H), 1.79-1.71 (m, 2H), 1.67 (d, J=12.5 Hz, 1H), 1.58-1.46 (m, 1H), 1.35-1.24 (m, 1H), 1.18 (s, 6H), 1.01 (d, J=12.1 Hz, 1H). LCMS: RT = 1.75 min; (ES):

1

m/z (M+H)<+>= 524.35 (LCMS: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1.11 mL/min). Primeri 154 & 155

4-{5-[(4,4-Difluorocikloheksil)(fenil)metil]-7-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-3,5-dimetil-1,2-oksazol

[0389]

Korak 1: 3-Bromo-5-((4,4-difluorocikloheksil)(fenil)metil)-7-(metilsulfonil)-5H-pirido [3,2-b] indol

[0390] U bočicu od 20 mL je dodata smeša 3-bromo-7-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indola (300 mg, 0.923 mmol), (4,4-difluorocikloheksil)(fenil)metanola (417 mg, 1.85 mmol), i trifenilfosfina (484 mg, 1.85 mmol), i dihlorometan (10 mL), i smeša je mešana na sobnoj temperaturi dok je tretirana u kapima sa DIAD (0.359 mL, 1.85 mmol), i zatim mešana na sobnoj temperaturi. Suspenzija je postepeno postala rastvor tokom dodavanja. Nakon 5 h, smeša je naneta na silika gel kolonu i prečišćena primenom silika gel kolonske hromatografije, primenom ISCO Companion (kolona sa 120 g silika gela) i eluirana sa EtOAc/heksan gradijentom (20-0%) da se dobije 3-bromo-5-((4,4-difluorocikloheksil)(fenil)metil)-7-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indol (492 mg, 0.922 mmol, 100 %). LCMS: RT = 1.06 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 533.0, 535.0. (Waters Acquity SDS. Kolona: BEH C18 2.1x50 mm 1.7u (1.6 min grad) 2-98 % B. Brzina protoka = 0.8 mL/min. Rastvarač A: H2O -0.1 % TFA. Rastvarač B: Acetonitril - 0.1 % TFA).

Korak 2: 4-{5-[(4,4-Difluorocikloheksil)(fenil)metil]-7-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-3,5-dimetil-1,2-oksazol

[0391] U bočicu od 2 drama je dodata smeša 3-bromo-5-((4,4-difluorocikloheksil)(fenil)metil)-7-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indola (150 mg, 0.281

1 4

mmol), 3,5-dimetil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)izoksazola (94.0 mg, 0.422 mmol), PdCl2(dppf)-CH2Cl2proizvoda (34.4 mg, 0.0420 mmol), 2 M vodenog trikalijum fosfata (0.422 mL, 0.844 mmol), i tetrahidrofurana (3 mL). Smeša je pročišćena sa strujom azota. Bočica je zatvorena i zagrevana u bloku za zagrevanje na 90 °C 3 h. Sirov materijal je prečišćen putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 25-100% B tokom 20 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da se dobije racemski 4-{5-[(4,4-difluorocikloheksil)(fenil)metil]-7-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-3,5-dimetil-1,2-oksazol, koji je razdvojen hiralnom prep HPLC (Chiralcel OD 20x250 mm 20 mL/min 15% EtOH/0.5%DEA u Heptanu) da se dobiju Enantiomer A (5.00 mg, 3 %) i Enantiomer B (4.00 mg, 3%). Enantiomer A:<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.76 (br. s., 1H), 8.59 (s, 1H), 8.46 (d, J=8.2 Hz, 1H), 8.38 (br. s., 1H), 7.85 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.66 (d, J=7.7 Hz, 2H), 7.38-7.31 (m, 2H), 7.30-7.22 (m, 1H), 6.05 (d, J=11.3 Hz, 1H), 3.39 (s, 3H), 2.49 (s, 3H), 2.31 (s, 3H), 2.17-1.97 (m, 3H), 1.92 (br. s., 2H), 1.84-1.68 (m, 1H), 1.64 (br. s., 1H), 1.37 (d, J=13.4 Hz, 1H), 1.28-1.13 (m, 1H). LCMS: RT = 1.98 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 550.1. (Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1.11 mL/min). Chiral HPLC: RT = 11.761 min (Kolona: Chiralcel OD 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 20% Etanol (0.1 % DEA) u Heptanu (0.15 DEA); Protok: 1 mL/min). Enantiomer A: Hiralna HPLC: RT = 13.669 min(Kolona: Chiralcel OD 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 20% Etanol (0.1 % DEA) u heptanu (0.1 5 DEA); Protok: 1 mL/min).

Primeri 156 & 157

5-{5-[(4,4-Difluorocikloheksil)(fenil)metil]-7-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol

[0392]

1

[0393] U bočicu od 2 drama je dodata smeša 3-bromo-5-((4,4-difluorocikloheksil)(fenil)metil)-7-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indola (150 mg, 0.281 mmol), 1,4-dimetil-5-(tributilstanil)-1H-1,2,3-triazola (163 mg, 0.422 mmol), bakar(I) jodida (10.7 mg, 0.0560 mmol), Pd(Ph3P)4(32.5 mg, 0.0280 mmol), i DMF (2 mL). Smeša je tretirana sa Et3N (0.118 mL, 0.844 mmol) i pročišćena strujom azota. Bočica je zatvorena i zagrevana u bloku za zagrevanje na 90 °C tokom 4 h i sadržaj je filtriran kroz 0.45 um najlonski membranski filter, i sirov materijal je prečišćen putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 15-70% B tokom 20 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja. Materijal je dalje prečišćen na hiralnoj prep SFC (Kolona: Chiral ID 25 x 3 cm, 5 µm; Mobilna faza: 70/30 CO2/MeOH; Protok: 85 mL/min) da se dobiju 5-{5-[(4,4-difluorocikloheksil)(fenil)metil]-7-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol Enantiomer A (20.0 mg, 13%) i Enantiomer B (20.0 mg 13 %). Enantiomer A:<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.79 (br. s., 1H), 8.67 (s, 1H), 8.58-8.53 (m, 1H), 8.50 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.87 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.67 (d, J=7.6 Hz, 2H), 7.41-7.31 (m, 2H), 7.30-7.22 (m, 1H), 6.06 (d, J=11.0 Hz, 1H), 4.02 (s, 3H), 3.39 (br. s., 3H), 2.30 (s, 3H), 2.16-1.98 (m, 2H), 1.91 (br. s., 2H), 1.83-1.53 (m, 3H), 1.38 (d, J=11.9 Hz, 1H), 1.23 (br. s., 1H). LCMS: RT = 1.742 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 550.15 (Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1.11 mL/min). RT hiralne SFC = 7.50 min (Kolona: Chiralcel ID 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 70/30 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min). Enantiomer B: RT hiralne SFC = 8.50 min (Kolona: Chiralcel ID 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 70/30 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min).

1

Primeri 158 & 159

5-{5-[(4,4-Difluorocikloheksil)(fenil)metil]-7-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol

[0394]

[0395] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za sintezu 5-{5-[(4,4-difluorocikloheksil)(fenil)metil]-7-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazola, 4-(<2>H3)metil-1-metil-5-(tributilstanil)-1H-1,2,3-triazol i 3-bromo-5-((4,4-difluorocikloheksil)(fenil)metil)-7-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indol su konvertovani, nakon hiralne prep SFC (Kolona: Chiral ID 25 x 3 cm, 5 µm; Mobilna faza: 70/30 CO2/MeOH; Protok: 85 mL/min), u 5-{5-[(4,4-difluorocikloheksil)(fenil)metil]-7-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol Enantiomer A (16.0 mg, 10%) i Enantiomer B (17.0 mg 11 %). Enantiomer A:<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.77 (br. s., 1H), 8.67 (s, 1H), 8.59-8.52 (m, 1H), 8.50 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.87 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.66 (d, J=7.6 Hz, 2H), 7.42-7.31 (m, 2H), 7.31-7.22 (m, 1H), 6.06 (d, J=11.3 Hz, 1H), 4.02 (s, 3H), 3.39 (s, 3H), 2.16-1.98 (m, 3H), 1.91 (br. s., 2H), 1.83-1.67 (m, 1H), 1.65-1.52 (m, 1H), 1.38 (d, J=12.0 Hz, 1H), 1.23 (br. s., 1H). LCMS: RT = 1.736 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 553.10 (Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1.11 mL/min). RT hiralne SFC = 7.50 min (Kolona: Chiralcel ID 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 70/30 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min). Enantiomer B: RT hiralne SFC = 8.50 min (Kolona: Chiralcel ID 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 70/30 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min). Primer 160

5-{6,7-Difluoro-9-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol

1

Korak 1: (2-Bromo-4,5-difluorofenil)(metil)sulfan

[0397] U bočici od 40 mL, rastvor 1-bromo-2,4,5-trifluorobenzena (2.00 g, 9.48 mmol) u DMSO-u (15 mL) je tretiran sa NaSMe (3.32 g, 47.4 mmol), i dobijena suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 h. Reakciona smeša je razblažena sa DCM-om, i organske supstance su oprane sa vodom i slanim rastvorom. Isparljive supstance su koncentrovane da se dobije (2-bromo-4,5-difluorofenil)(metil)sulfan (2.20 g, 98 %), koji je primenjen bez dodatnog prečišćavanja u sledećoj reakciji.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.23 (dd, J=8.7, 5.7 Hz, 1H), 6.98 (dd, J=8.5, 6.4 Hz, 1H), 2.46 (s, 3H). HPLC: RT = 2.756 min; (Chromolith ODS S54.6 x 50 mm (4 min grad) 0-100% B. Brzina protoka = 4 ml/min. Inj. zap. = 10 uL. Talasna dužina = 220. Temp. peći = 40 °C. Rastvarač A: 10% MeOH - 90% H2O -0.1 % TFA. Rastvarač B: 90% MeOH - 10 % H2O - 0.1 % TFA).

Korak 2: 1-Bromo-4,5-difluoro-2-(metilsulfonil)benzen

[0398] Rastvor (2-bromo-4,5-difluorofenil)(metil)sulfana (2.20 g, 9.20 mmol) u 2-propanolu (50 mL) u posudi sa okruglim dnom je tretiran sa Oksonom (11.3 g, 18.4 mmol), i suspenzija je energično mešana i razblažena sa malo vode da bi se rastvorilo nešto čvrstog oksona da bi se dobila bela mlečna suspenzija, koja je mešana na sobnoj temperaturi i mešana tokom noći. Smeša je razblažena sa vodom i ekstrahovana u DCM-u, i kombinovane organske supstance su koncentrovane da se dobije 1-bromo-4,5-difluoro-2-(metilsulfonil)benzen (2.40 g, 8.85 mmol, 96 %) kao bela čvrsta supstanca. HPLC: RT = 1.362 min; (Chromolith ODS S54.6 x 50 mm (4 min grad) 0-100% B. Brzina protoka = 4 ml/min. Inj. zap. = 10 uL. Talasna dužina = 220. Temp. peći = 40 °C. Rastvarač A: 10% MeOH - 90% H2O -0.1 % TFA. Rastvarač B: 90% MeOH - 10 % H2O - 0.1 % TFA). LCMS: RT = 0.79 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 270.8, 272.9. (Waters Acquity SDS. Kolona: BEH C182.1x50 mm 1.7u (1.6 min grad) 2-98 % B. Brzina protoka = 0.8 mL/min. Rastvarač A: H2O -0.1 % TFA. Rastvarač B: Acetonitril - 0.1 % TFA).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.76 (dd, J=7.1, 5.7 Hz, 1H), 7.55 (dd, J=8.4, 5.0 Hz, 1H), 3.25 (d, J=0.6 Hz, 3H).

Korak 3: 2-(4,5-Difluoro-2-(metilsulfonil)fenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan

1

[0399] U veliku bočicu od 40 mL je dodata smeša 1-bromo-4,5-difluoro-2-(metilsulfonil)benzena (2.40 g, 8.85 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborolana) (2.70 g, 10.6 mmol), kalijum acetata (2.61 g, 26.6 mmol), i PdCl2(dppf)-CH2Cl2proizvoda (0.362 g, 0.443 mmol) u dioksanu (20 mL). Bočica je zatvorena i zagrevana u bloku za zagrevanje na 90 °C tokom noći. Razblažena sa vodom i ekstrahovana u etil acetat. Organske supstance su oprane sa vodom, i isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom i dobijeni crni ostatak je rastvoren u DCM-u i prečišćen primenom silika gel kolonske hromatografije sa ISCO Companion kolonom sa 40g silika gela i eluiran sa EtOAc/heksan gradijentom (50-100%) da se dobije 2-(4,5-difluoro-2-(metilsulfonil)fenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan (2.1 g, 6.60 mmol, 74.6 %) kao žuti ostatak koji polako očvršćava.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.69-7.58 (m, 2H), 3.25 (d, J=0.6 Hz, 3H), 1.41-1.37 (m, 12H). LCMS: RT = 0.54 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 237.1 (boronska kiselina) (Waters Acquity SDS. Kolona: BEH C182.1x50 mm 1.7u (1.6 min grad) 2-98 % B. Brzina protoka = 0.8 ml/min. Rastvarač A: H2O -0.1 % TFA. Rastvarač B: Acetonitril - 0.1 % TFA).

Korak 4: 5-Bromo-2-(4,5-difluoro-2-(metilsulfonil)fenil)-3-nitropiridin

[0400] U bočicu od 40 ml je dodata smeša 2,5-dibromo-3-nitropiridina (1.861 g, 6.60 mmol), 2-(4,5-difluoro-2-(metilsulfonil)fenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolana (2.1 g, 6.60 mmol), PdCl2(dppf)-CH2Cl2proizvoda (0.404 g, 0.495 mmol), i 2 Molarnog vodenog trikalijum fosfata (9.90 mL, 19.8 mmol), i smeša je pročišćena pod strujom azota. Bočica je zatvorena i zagrevana u bloku za zagrevanje na 80 °C tokom 3 h. Razblažena sa vodom i ekstrahovana u etil acetat. Organske supstance su oprane sa vodom i slanim rastvorom i koncentrovane da bi se dobio crni ostatak koji je prečišćen primenom silika gel kolonske hromatografije sa ISCO Companion kolonom sa 120 g silika gela i eluiran sa CH2Cl2/EtOAc gradijentom (0-50%) da se dobije 5-bromo-2-(4,5-difluoro-2-(metilsulfonil)fenil)-3-nitropiridin (1.2 g, 3.05 mmol, 46.2 %) kao svetlo-žuta čvrsta supstanca. LCMS: RT = 0.90 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 392.7, 394.7. (Waters Acquity SDS. Kolona: BEH C182.1x50 mm 1.7u (1.6 min grad) 2-98 % B. Brzina protoka = 0.8 ml/min. Rastvarač A: H2O -0.1 % TFA. Rastvarač B: Acetonitril - 0.1 % TFA)<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 9.04 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.61 (d, J=2.1 Hz, 1H), 7.76 (dd, J=8.6, 5.3 Hz, 1H), 7.63 (dd, J=9.2, 5.1 Hz, 1H), 3.32 (d, J=0.5 Hz, 3H).

Korak 5: 3-Bromo-6,7-difluoro-9-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indol

[0401] Rastvor 5-bromo-2-(4,5-difluoro-2-(metilsulfonil)fenil)-3-nitropiridina (1.2 g, 3.05 mmol) i 1,2-bis(difenilfosfino)etana (1.459 g, 3.66 mmol) u 1,2-dihlorobenzenu (15 mL) je

1

zatvoren u bočici od 40 mL i zagrevan u bloku za zagrevanje na 170 °C tokom 5 h. Rastvarači su upareni na rotacionom uparivaču sa zagrevanjem pod visokim vakuumom, i ostatak je prečišćen primenom silika gel kolonske hromatografije sa ISCO Companion (kolona sa 120 g silika gela) i eluiran sa CH2Cl2/EtOAc gradijentom (20-70%) da se dobije 3-bromo-6,7-difluoro-9-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indol (230 mg, 0.637 mmol, 21 %) kao svetlo-žuta čvrsta supstanca. LCMS: RT = 0.81 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 360.9, 362.9. (Waters Acquity SDS. Kolona: BEH C182.1x50 mm 1.7u (1.6 min grad) 2-98 % B. Brzina protoka = 0.8 mL/min. Rastvarač A: H2O -0.1 % TFA. Rastvarač B: Acetonitril - 0.1 % TFA).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.70 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.09 (d, J=2.1 Hz, 1H), 7.44 (dd, J=8.8, 4.2 Hz, 1H), 3.33 (s, 3H).

Korak 6: (S)-3-Bromo-6,7-difluoro-9-(metilsulfonil)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol

[0402] U posudu sa okruglim dnom je dodata suspenzija 3-bromo-6,7-difluoro-9-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indola (230 mg, 0.637 mmol) i (R)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanola (245 mg, 1.27 mmol) u dihlorometanu (6 mL), i dobijena reakciona smeša je tretirana sa trifenilfosfinom (334 mg, 1.27 mmol) pre dodatka DIAD (0.248 mL, 1.27 mmol) u kapima na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom noći. Materijal je prečišćen primenom silika gel kolonske hromatografije sa ISCO Companion (kolona sa 80 g silika gela) i eluiran sa CH2Cl2/EtOAc gradijentom (0-100%) da se dobije (S)-3-bromo-6,7-difluoro-9-(metilsulfonil)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol (315 mg, 0.588 mmol, 92 %) kao svetlo-žuta čvrsta supstanca. LCMS: RT = 1.01 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 534.9, 536.9. (Waters Acquity SDS. Kolona: BEH C18 2.1x50 mm 1.7u (1.6 min grad) 2-98 % B. Brzina protoka = 0.8 mL/min. Rastvarač A: H2O -0.1 % TFA. Rastvarač B: Acetonitril - 0.1 % TFA).

Korak 7: 5-{6,7-Difluoro-9-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol

[0403] U bočicu od 2 drama je dodata smeša (S)-3-bromo-6,7-difluoro-9-(metilsulfonil)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indola (30.0 mg, 0.0560 mmol), 1,4-dimetil-5-(tributilstanil)-1H-1,2,3-triazola (32.5 mg, 0.0840 mmol), bakar(I) jodida (2.13 mg, 0.0110 mmol), Pd(Ph3P)4(6.47 mg, 5.60 µmol), i TEA (0.0230 mL, 0.168 mmol) u DMF-u (1 mL). Bočica je zatvorena i zagrevana u bloku za zagrevanje na 80 °C tokom noći. Reakciona smeša je potom razblažena sa amonijum hidroksidom i vodom i ekstrahovana u etil acetat. Organske supstance su oprane sa vodom i slanim rastvorom, i organske supstance

1

su koncentrovane. Materijal je prečišćen primenom silika gel kolonske hromatografije sa ISCO Companion (kolona sa 24 g silika gela) i eluiran sa etil acetatom. Frakcije koje sadrže proizvod su prikupljene, i isparljive supstance su uklonjene da se dobije 15.0 mg bele čvrste supstance. Ovaj materijal je dalje prečišćen preko preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 15-70% B tokom 20 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da se dobije 5-{6,7-difluoro-9-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol (5.10 mg, 16%). LCMS: RT = 1.605 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 552.10; (Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1.11 mL/min)<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.74 (br. s., 1H), 8.34 (br. s., 1H), 7.69 (br. s., 2H), 7.51 (br. s., 1H), 7.38 (br. s., 2H), 7.31 (d, J=6.9 Hz, 1H), 5.97 (br. s., 1H), 3.97-3.86 (m, 4H), 3.76 (d, J=9.6 Hz, 1H), 3.63-3.45 (m, 5H), 3.28 (t, J=10.6 Hz, 1H), 2.22 (br. s., 3H), 1.83 (br. s., 1H), 1.39 (br. s., 2H), 1.04 (d, J=12.2 Hz, 1H).

Primer 161

5-{6,7-Difluoro-9-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol

[0404]

[0405] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za sintezu 5-{6,7-difluoro-9-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazola, (S)-3-bromo-6,7-difluoro-9-(metilsulfonil)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol i 4-(<2>H3)metil-1-metil-5-(tributilstanil)-1H-1,2,3-triazol su konvertovani u 5-{6,7-difluoro-9-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol. LCMS: RT = 1.634 min; (ES): m/z

1 1

(M+H)<+>= 555.10; (Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1,7-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1.11 mL/min).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.76 (br. s., 1H), 8.37 (br. s., 1H), 7.71 (br. s., 2H), 7.52 (br. s., 1H), 7.38 (br. s., 2H), 7.32 (d, J=7.1 Hz, 1H), 5.98 (br. s., 1H), 4.01-3.85 (m, 4H), 3.77 (d, J=10.3 Hz, 1H), 3.60-3.41 (m, 5H), 3.34-3.22 (m, 1H), 1.81 (br. s., 1H), 1.40 (br. s., 2H), 1.05 (d, J=12.3 Hz, 1H).

Primer 162

5-{9-Metansulfonil-6,7-dimetoksi-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol

[0406]

[0407] U bočici od 2 drama, smeša 5-{6,7-difluoro-9-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazola (10.0 mg, 0.0180 mmol) i KOtBu (10.1 mg, 0.0900 mmol) u metanolu (1 mL) je zagrevana u bloku za zagrevanje na 90 °C tokom noći. Sirov materijal je prečišćen putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: Waters XBridge Shield RP18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 15-100% B tokom 20 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da se dobije 5-{9-metansulfonil-6,7-dimetoksi-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol (4.40 mg, 40 %). LCMS: RT = 1.605 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 579.2. (Kolona: Waters Acquity UPLC BEHC18, 2.1 x 50 mm, 1.7-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1.11 mL/min). LCMS: RT = 0.81 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 579.2 (Waters Acquity SDS. Kolona: BEH C182.1x50 mm 1.7u (1.6 min grad) 2-

1 2

98 % B. Brzina protoka = 0.8 mL/min. Rastvarač A: H2O -0.1 % TFA. Rastvarač B: Acetonitril - 0.1 % TFA).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.64 (s, 1H), 8.14 (br. s., 1H), 7.61 (d, J=7.5 Hz, 2H), 7.36-7.29 (m, 2H), 7.26 (d, J=7.6 Hz, 2H), 6.26 (d, J=10.9 Hz, 1H), 4.16 (s, 3H), 4.06 (s, 3H), 3.94-3.84 (m, 4H), 3.77 (d, J=9.3 Hz, 1H), 3.47 (br. s., 5H), 3.34 (t, J=11.3 Hz, 1H), 1.80 (d, J=12.5 Hz, 1H), 1.45 (d, J=12.1 Hz, 2H), 1.11 (d, J=12.1 Hz, 1H).

Primer 163

5-{7-Fluoro-9-metansulfonil-6-metoksi-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol

[0408]

[0409] U bočici od 2 drama, smeša 5-{6,7-difluoro-9-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazola (13.0 mg, 0.0230 mmol) i KOtBu (22.0 mg, 0.200 mmol) u metanolu (2 mL) je mešana na sobnoj temperaturi tokom 11 dana. Dobijena bela suspenzija je razblažena sa vodom i HCl i ekstrahovana u etil acetat. Organske supstance su oprane sa vodom, i isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom da bi se dobila bela čvrsta supstanca. Materijal je prečišćen putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 15-65% B tokom 5 min, potom 20-min zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da se dobije 5-{7-fluoro-9-metansulfonil-6-metoksi-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol (8.50 mg, 44%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.68 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.62 (d, J=7.7 Hz, 2H), 7.53 (d, J=8.9 Hz, 1H), 7.39-7.29 (m, 2H), 7.29-7.19 (m, 1H), 6.24 (d, J=10.9 Hz, 1H), 4.19 (s, 3H), 3.93-3.83 (m, 4H), 3.76 (d, J=9.9 Hz, 1H), 3.66-3.52 (m, 2H), 3.49 (s, 3 H), 3.33 (t, J=11.1 Hz, 1H), 1.80 (d, J=12.4 Hz, 1H), 1.50-1.36 (m, J=12.1, 12.1 Hz, 2H), 1.10 (d, J=12.5 Hz, 1H). LCMS: RT = 1.696 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 567.1 (Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom;

1

Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1.11 mL/min).

Primer 164

5-{5-[(4,4-Difluorocikloheksil)(fenil)metil]-6,7-difluoro-9-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol (Enantiomer A)

[0410]

Korak 1: 3-Bromo-5-((4,4-difluorocikloheksil)(fenil)metil)-6,7,9-trifluoro-5H-pirido[3,2-b]indol

[0411] U bočicu od 20mL je dodata suspenzija 3-bromo-6,7,9-trifluoro-5H-pirido[3,2-b]indola (400 mg, 1.33 mmol), (4,4-difluorocikloheksil)(fenil)metanola (601 mg, 2.66 mmol), i trifenilfosfina (697 mg, 2.66 mmol), i dihlorometan (6 mL). Smeša je mešana tokom dodavanja DIAD (0.517 mL, 2.66 mmol) u kapima, i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom noći. Reakciona smeša je naneta na silika gel kolonu i prečišćena primenom silika gel kolonske hromatografije sa ISCO Companion (kolona sa 80 g silika gela) i eluirana sa EtOAc/heksan gradijentom (10-50%) da se dobije 3-bromo-5-((4,4-difluorocikloheksil)(fenil)metil)-6,7,9-trifluoro-5H-pirido[3,2-b]indol (300 mg, 0.589 mmol, 44 %) kao bela čvrsta supstanca. LCMS: RT = 1.22 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 509.0, 511.0. (Waters Acquity SDS. Kolona: BEH C182.1x50 mm 1.7u (1.6 min grad) 2-98 % B. Brzina protoka = 0.8 mL/min. Rastvarač A: H2O -0.1 % TFA. Rastvarač B: Acetonitril - 0.1 % TFA).

Korak 2: 5-{-[(4,4-Difluorocikloheksil)(fenil)metil]-6,7,9-trifluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol

[0412] U bočicu od 20mL je dodata smeša 3-bromo-5-((4,4-difluorocikloheksil)(fenil)metil)-6,7,9-trifluoro-5H-pirido[3,2-b]indola (300 mg, 0.589 mmol), 4-(<2>H3)metil-1-metil-5-(tributilstanil)-1H-1,2,3-triazola (344 mg, 0.884 mmol), bakar(I) jodida (22.4 mg, 0.118 mmol), i Pd(Ph3P)4(68.1 mg, 0.0590 mmol) u DMF-u (6 mL). Smeša je pročišćena pod

1 4

strujom azota tokom nekoliko min i zatim je dodat Et3N (0.246 mL, 1.767 mmol), i bočica je zatvorena i zagrevana u bloku za zagrevanje na 90 °C tokom 3 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i razblažena sa vod. amonijum hidroksidom i vodom i ekstrahovana u etil acetat. Organske supstance su oprane sa vodom i slanim rastvorom i koncentrovane. Materijal je prečišćen primenom silika gel kolonske hromatografije sa ISCO Companion (kolona sa 40 g silika gela) i eluiran sa EtOAc/heksan gradijentom (50-100%) da se dobije 5-{-[(4,4-difluorocikloheksil)(fenil)metil]-6,7,9-trifluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol (230 mg, 0.435 mmol, 74%) kao bela čvrsta supstanca, koji je razdvojen hiralnom prep SFC (Kolona Whelk-O R,R 25 X 3 cm, 5 µm; Mobilna faza: 85/15 CO2/MeOH; Protok: 85 mL/min) da se dobiju Enantiomer A (110 mg, 34%) i Enantiomer B (106 mg, 33%). Enantiomer A:<1>H NMR (400MHz, CDCl3) d 8.55 (d, J=1.7 Hz, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.50-7.45 (m, 2H), 7.43-7.31 (m, 3H), 6.98 (ddd, J=10.5, 9.0, 5.3 Hz, 1H), 6.02 (br. s., 1H), 3.82 (s, 3H), 2.95-2.82 (m, J=8.4 Hz, 1H), 2.22 (d, J=11.6 Hz, 2H), 2.11-2.01 (m, 1H), 2.00-1.82 (m, 1H), 1.76-1.62 (m, 1H), 1.51 (d, J=12.7 Hz, 1H), 1.27 (br. s., 1H), 0.91-0.84 (m, 1H). LCMS: RT = 1.09 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 529.2; (Waters Acquity SDS. Kolona: BEH C182.1x50 mm 1.7u (1.6 min grad) 2-98 % B. Brzina protoka = 0.8 mL/min. Rastvarač A: H2O -0.1 % TFA. Rastvarač B: Acetonitril - 0.1 % TFA). HPLC: RT = 3.468 min; (Chromolith ODS S54.6 x 50 mm (4 min grad) 0-100% B. Brzina protoka = 4 mL/min. Inj. zap. = 10 uL. Talasna dužina = 220. Temp. peći = 40 °C Rastvarač A: 10% MeOH - 90% H2O -0.1 % TFA. Rastvarač B: 90% MeOH - 10 % H2O - 0.1 % TFA). HPLC: RT = 14.067 min; (Sunfire C183.5um, 3.0x150 mm: 95/5 do 5/95 H2O/CH3CN/0.05% TFA, Protok=5 mL/min, Gradijent= 15 min, na 220 nm). RT hiralne SFC = 12.219 min (Kolona: Whelk-O R,R, 250 x 21 mm, 5 µm; Mobilna faza: 80/20 CO2/ metanol; Protok: 2 mL/min). Enantiomer B: RT hiralne SFC = 14.392 min (Kolona: Whelk-O R,R, 250 x 21 mm, 5 µm; Mobilna faza: 80/20 CO2/ Metanol; Protok: 2 mL/min).

Korak 3: 5-{-[(4,4-Difluorocikloheksil)(fenil)metil]-6,7,-difluoro-9-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol Enantiomer A

[0413] U bočicu od 2 drama je dodata smeša 5-{-[(4,4-difluorocikloheksil)(fenil)metil]-6,7,9-trifluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol Enantiomera A (20.0 mg, 0.0380 mmol) i natrijum metansulfinata (38.0 mg, 0.372 mmol) u DMSO-u (1 mL), i bočica je zatvorena i zagrevana u bloku za zagrevanje na 90 °C tokom noći. Sirov materijal je prečišćen putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM

1

amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 20-100% B tokom 20 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da se dobije 5-{-[(4,4-difluorocikloheksil)(fenil)metil]-6,7,-difluoro-9-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol Enantiomer A. (6.80 mg, 30 %).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) d 8.75 (br. s., 1H), 8.31 (br. s., 1H), 7.67 (br. s., 2H), 7.51 (br. s., 1H), 7.41-7.26 (m, 3H), 5.97 (br. s., 1H), 3.93 (br. s., 3H), 3.56 (br. s., 3H), 2.14-1.89 (m, 5H), 1.87-1.67 (m, 1H), 1.48-1.26 (m, 3H). LCMS: RT = 1.93 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 589.1; (Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1.11 mL/min).

Primeri 165 i 166

2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b] indol-7-il] propan-2-amin

[0414]

Korak 1: 7-(2-Azidopropan-2-il)-3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol

[0415] Smeša 2-(3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3 -triazol-5 -il)-5 -(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il)propan-2-ola (600 mg, 0.847 mmol) i TMS-N3 (0.281 mL, 2.12 mmol) u DCM-u (20 mL) je ohlađena na 0 °C i tretirana sa BF3•OEt2(0.537 mL, 4.24 mmol) u kapima tokom perioda od 2 min. Smeša je polako dovedena do sobne temperature tokom perioda od 2 h i zatim mešana na sobnoj temperaturi tokom noći. Smeša je kvenčovana sa 25 mL vode praćeno sa 25 mL 10% NaHCO3rastvora i ekstrahovana sa DCM-om (50 mL x 2). Organske supstance su osušene preko Na2SO4, filtrirane, i koncentrovane, i ostatak je prečišćen primenom silika gel kolonske hromatografije da se

1

dobije 7-(2-azidopropan-2-il)-3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol (430 mg, 0.826 mmol, 84 %) kao bela čvrsta supstanca. LCMS: HPLC: RT=1.10 min; MS (ES): m/z= 521 [M+1]<+>(ACN/H2O sa NH4OAc, Acquity BEH C181.7 µm (50 x 2.1) mm, Gradijent = 3 min, Talasna dužina = 220 nm).

Korak 2: 2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-amin

[0416] Mešana suspenzija 7-(2-azidopropan-2-il)-3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indola (0.400 g, 0.768 mmol), MeOH (10 mL), i Pd/C (10% na ugljeniku, 0.0400 g, 0.376 mmol) je hidrogenizovana na sobnoj temperaturi pod balonom gasa vodonika tokom 3 h. Smeša je filtrirana kroz Celite i oprana sa metanolom (50 mL), i filtrat je koncentrovan da se dobije racemski 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-amin (0.300 g, 0.607 mmol, 86 %) kao bela čvrsta supstanca, koji je razdvojen hiralnom prep SFC (Kolona: Chiral OD-H 25 x 2.1 cm, 5 µm; Mobilna faza: 70/30 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 75 mL/min) da se dobiju Enantiomer A i Enantiomer B. Enantiomer A:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 8.43 (d, J = 1.5 Hz, 1 H), 8.34-8.29 (m, 1 H), 8.22 (s, 1 H), 8.09 (s, 1 H), 7.64 (d, J = 7.5 Hz, 2 H), 7.54 (dd, J = 1.5, 8.0 Hz, 1 H), 7.39-7.32 (m, 2 H), 7.30-7.22 (m, 1 H), 5.82 (d, J = 10.5 Hz, 1 H), 4.03-3.96 (m, 4 H), 3.82 (dd, J = 3.0, 11.5 Hz, 1 H), 3.66-3.57 (m, 1 H), 3.45-3.35 (m, 2 H), 2.33-2.29 (m, 3 H), 1.98 (d, J = 13.6 Hz, 1 H), 1.69-1.62 (m, 7 H), 1.45 (dd, J = 4.0, 13.1 Hz, 1 H), 1.07 (d, J = 12.0 Hz, 1 H). LCMS: HPLC: RT= 1.73 min MS (ES): m/z= 495.5 [M+H]<+>(ACN/H2O sa HCOONH4, Ascentis Express C18 2.7 µm (5 x 2.1)mm, gradijent = 4 min, talasna dužina = 220 nm). HPLC RT = 5.81 min (Kolona: Sunfire C18 3.5 µm, 4.6 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 10-100% B tokom 15 min; Protok: 1 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm). RT hiralne SFC = 2.41 min (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 70/30 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 4 mL/min). Enantiomer B: RT hiralne SFC = 3.65 min (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 70/30 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 4 mL/min).

Primeri 167 & 168

N-{2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-il}-2-(dimetilamino)acetamid

[0417]

1

[0418] Rastvor 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-amina (50.0 mg, 0.101 mmol) u DMF-u (1 mL) je tretiran sa 2-(dimetilamino)sirćetnom kiselinom (13.6 mg, 0.131 mmol), Et3N (0.0420 mL, 0.303 mmol), i HATU (50.0 mg, 0.131 mmol), i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Smeša je kvenčovana sa 10 mL vode i ekstrahovana sa EtOAc-om (25 mL x 2), osušena preko Na2SO4, filtrirana, i koncentrovana i ostatak prečišćen pomoću preparativne HPLC (Kolona: X bridge C18 (250 X19,5µ), Mobilna faza A= Pufer :10 mm amonijum acetat u H2O, Mobilna faza B= ACN, Protok :17 mL/min, Grad:T %B:0 /30, 10/60) da se dobije racemski N-{2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-il}-2-(dimetilamino)acetamid (35.0 mg, 0.0590 mmol, 49 %) kao čvrsta supstanca bele boje, koji je razdvojen hiralnom prep SFC (Kolona: Chiral OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 60/40 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 4 mL/min) da se dobiju Enantiomer A i Enantiomer B. Enantiomer A:<1>H NMR (400MHz, CD3OD): δ 8.44 (d, J = 1.60 Hz, 1H), 8.30 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.58-7.60 (m, 2H), 7.45 (dd, J = 8.40, Hz, 1H), 7.33-7.37 (m, 2H), 7.25-7.29 (m, 1H), 5.77 (d, J = 10.80 Hz, 1H), 3.90-4.00 (m, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.81 (dd, J = 8.40, Hz, 1H), 3.58-3.61 (m, 1H), 3.39-3.40 (m, 2H), 3.00 (s, 2H), 2.37 (s, 6H), 2.30 (s, 3H), 1.89-1.98 (m, 1H), 1.67-1.82 (m, 6H), 1.58-1.67 (m, 1H), 1.41-1.44 (m, 1H), 1.09 (d, J = 12.00 Hz, 1H). LCMS: RT= 1.98 min, MS (ES): m/z=580.4 [M+H]<+>(ACN/H2O sa HCOONH4, Ascentis Express C18 2.7 µm (50 x 2.1)mm, Gradijent = 4 min, Talasna dužina = 220 nm); HPLC RT= 5.96 min (Sunfire C18 (4.6X150)mm, 3.5 mikrona, Mobilna faza A:0.05% TFA u vodi :Acetonitril (95:5), Mobilna faza B:Acetonitril :0.05% TFA u vodi (95:5), PROTOK:1 mL/min, Talasna dužina = 220 nm); RT hiralne SFC = 2.31 (Chiral OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 60/40 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 4 mL/min). Enantiomer B: RT hiralne SFC = 4.86 (Chiral OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 60/40 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 4 mL/min).

Primeri 169 i 170

1

4-[7-(2-Hidroksipropan-2-il)-5-[oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il]-3,5-dimetil-2,3-dihidro-1,3-tiazol-2-on

[0419]

Korak 1: Metil 3-(5-formil-3-metil-2-okso-2,3-dihidrotiazol-4-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0420] Smeša metil 5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (489 mg, 0.929 mmol), 4-hloro-3-metil-2-okso-2,3-dihidrotiazol-5-karbaldehida (150 mg, 0.845 mmol), i trikalijum fosfata (2M u vodi, 1.27 ml, 2.53 mmol) u THF-u (10 mL) je pročišćena pod strujom argona tokom 5 min. PdCl2(dppf)-CH2Cl2proizvod (69.0 mg, 0.0850 mmol) je dodat, i bočica je zatvorena sa septumom, ispražnjena, pročišćena sa argonom 3 puta, i zatim zagrevana do 80 °C tokom 2 h u mikrotalasnoj. Reakcija je kvenčovana sa vodom (50 mL) i ekstrahovana sa EtOAc-om (75 mL x 2), osušena preko Na2SO4, koncentrovana, i ostatak je prečišćen primenom silika gel kolonske hromatografije (ISCO 40 g „flash“ kolona, 0-2% MeOH/CHCl3tokom 45 min) da se dobije metil 3-(5-formil-3-metil-2-okso-2,3-dihidrotiazol-4-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat. LCMS: RT= 1.17 min MS (ES): m/z= 542 [M+1]<+>(ACN/H2O sa NH4OAc, Acquity BEH C181.7 µm (50 x 2.1) mm, Gradijent = 3 min, Talasna dužina = 220 nm).

Korak 2: Metil 3-(5-(hidroksimetil)-3-metil-2-okso-2,3-dihidrotiazol-4-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0421] Promešani rastvor metil 3-(5-formil-3-metil-2-okso-2,3-dihidrotiazol-4-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (200 mg, 0.369 mmol) u MeOH-u (10 mL) je tretiran sa NaBH4(18.2 mg, 0.480 mmol) i mešan na sobnoj temperaturi tokom 45 min. Smeša je kvenčovana sa zas.vod. NH4Cl-om (30 mL) i ekstrahovana sa DCM-om (50 mL x 2), osušena preko Na2SO4, filtrirana, i koncentrovana da se dobije metil 3-(5-(hidroksimetil)-3-metil-2-okso-2,3-dihidrotiazol-4-il)-5-(fenil(tetrahidro-

1

2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (180 mg, 0.331 mmol, 90 %) kao žuta čvrsta supstanca. LCMS: HPLC: RT=1.03 min; MS (ES): m/z= 544 [M+1]<+>(ACN/H2O sa NH4OAc-om, Acquity BEH C181.7 µm (50 x 2.1) mm, gradijent = 3 min, talasna dužina = 220 nm).

Korak 3: Metil 3-(3,5-dimetil-2-okso-2,3-dihidrotiazol-4-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0422] U promešani rastvor metil 3-(5-(hidroksimetil)-3-metil-2-okso-2,3-dihidrotiazol-4-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (100 mg, 0.184 mmol) u DCM-u (10 mL) pod N2(g) je dodat trietilsilan (0.147 ml, 0.920 mmol) praćeno sa TFA (10.0 mL, 130 mmol), i reakcija je zagrevana do refluksa tokom 16 h. Rastvarači su uklonjeni pod vakuumom, ostatak je kvenčovan sa ledenom vodom, bazifikovan sa vod.NaHCO3-om (15 mL), i ekstrahovan sa DCM-om (30 mL x 2). Ekstrakt je osušen preko Na2SO4, filtriran, koncentrovan, i ostatak je prečišćen primenom silika gel kolonske hromatografije (ISCO silika gel 12 g „flash“ kolona, 0-2% MeOH/CHCl3tokom 45 min) da se dobije metil 3-(3,5-dimetil-2-okso-2,3-dihidrotiazol-4-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (90.0 mg, 0.171 mmol, 93 %) kao žuta čvrsta supstanca. LCMS: HPLC: RT=1.15 min; MS (ES): m/z= 528 [M+1]<+>(ACN/H2O sa NH4OAc, Acquity BEH C18 1.7 µm (50 x 2.1) mm, gradijent = 3 min, talasna dužina = 220 nm).

Korak 4: 4-[7-(2-Hidroksipropan-2-il)-5-[oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il]-3,5-dimetil-2,3-dihidro-1,3-tiazol-2-on

[0423] Promešani rastvor metil 3-(3,5-dimetil-2-okso-2,3-dihidrotiazol-4-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (100 mg, 0.191 mmol) u tetrahidrofuranu (0.7 mL) je ohlađen na -20 °C i tretiran sa metilmagnezijum bromidom (3M u THF-u, 0.316 mL, 0.948 mmol). Reakcionoj smeši je polako dozvoljeno da se zagreje na sobnu temperaturu tokom perioda od 5 h. Reakcija je kvenčovana sa zas. vod. NH4Cl-om (30 mL) i ekstrahovana sa EtOAc-om (50 mL x 2), osušena preko Na2SO4, filtrirana, i koncentrovana. Sirov proizvod je prečišćen pomoću prep. HPLC (Kolona: phenyl X bridge(250 X19,5µ),M. faza A : 10 mm amonijum acetat u vodi, M. faza B: ACN, Protok: 17 mL/min, izokratski 0/30,10/60) da se dobije racemski 4-[7-(2-hidroksipropan-2-il)-5-[oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il]-3,5-dimetil-2,3-dihidro-1,3-tiazol-2-on (45.0 mg, 0.0840 mmol, 37 %) kao bela čvrsta supstanca, koji je razdvojen pomoću preparativne hiralne SFC (Kolona: Chiral OD-H 250 x 30 mm, 5 µm; Mobilna faza: 60/40

1

CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 80 mL/min) da se dobiju Enantiomer A (18.0 mg, 0.0330 mmol, 17 %) i Enantiomer B (17.0 mg, 0.0320 mmol, 16 %). Enantiomer A:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 8.37 (d, J = 1.5 Hz, 1 H), 8.29 (d, J = 8.5 Hz, 1 H), 8.20 (s, 1 H), 8.11 (s, 1 H), 7.62 (d, J = 7.5 Hz, 2 H), 7.48 (dd, J = 1.3, 8.3 Hz, 1 H), 7.38-7.31 (m, 2 H), 7.29-7.23 (m, 1 H), 5.74 (d, J = 11.0 Hz, 1 H), 4.00 (d, J = 11.5 Hz, 1 H), 3.83 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 3.66-3.57 (m, 1 H), 3.50-3.38 (m, 2 H), 3.06 (s, 3 H), 2.09-2.04 (m, 3 H), 1.95 (d, J = 10.0 Hz, 1 H), 1.70-1.60 (m, 7 H), 1.47-1.40 (m, 1 H), 1.13 (d, J = 13.1 Hz, 1 H). LCMS: RT= 2.00 min MS (ES): m/z=528 [M+H]<+>(ACN/H2O sa HCOONH4, Ascentis Express C18 2.7 µm (50 x 2.1)mm, gradijent = 4 min, talasna dužina = 220 nm). HPLC- RT=8.67 min Sunfire C18 (4.6X150)mm, 3.5 mikrona, Mobilna faza A:0.05% TFA u vodi :Acetonitril (95:5), Mobilna faza B:Acetonitril: 0.05% TFA u vodi (95:5), Protok: 1 mL/min, Talasna dužina = 220 nm). RT hiralne SFC = 2.92 (Chiral OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 60/40 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 4 mL/min). Enantiomer B: RT hiralne SFC = 10.04 (Chiral OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 60/40 CO2/(0.25% DEA u MeOH-u); Protok: 4 mL/min).

Primer 171

4-{7-Metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-3,5-dimetil-1,2-oksazol

[0424]

[0425] Prateći procedure analogne onima koje su opisane u (S)-metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilatu, intermedijer 4-(7-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-6]indol-3-il)-3,5-dimetil-1,2-oksazol (30.0 mg, 0.0880 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (18.5 mg, 37%).<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.57 (d, J=8.2 Hz, 1H), 8.53 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.33 (s, 1H), 7.90 (dd, J=8.2, 1.3 Hz, 1H), 7.66 (d, J=1.5 Hz, 1H), 7.45 (d, J=7.5 Hz, 2H), 7.40-7.34 (m, 2H), 7.34-7.29 (m, 1H), 5.58 (d, J=10.5 Hz, 1H), 4.07 (dd, J=11.7, 2.8 Hz, 1H), 3.87 (dd, J=11.7, 2.7 Hz, 1H), 3.55 (td, J=11.9, 1.8 Hz, 1H), 3.36 (td, J=11.9, 1.8 Hz, 1H), 3.19 (s, 3H), 3.17-

1 1

3.04 (m, 1H), 2.41 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 2.03 (d, J=13.7 Hz, 1H), 1.67-1.59 (m, 1H), 1.45-1.34 (m, 1H), 1.07 (d, J=13.1 Hz, 1H); LCMS (M+H)<+>= 516; HPLC RT = 2.593 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Primer 172

4-{5-[(S)-(4-Fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-7-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-3,5-dimetil-1,2-oksazol

[0426]

[0427] Enantiomeri (4-fluorofenil)(oksan-4-il)metanola (1.10 g, 5.23 mmol) su razdvojeni na preparativnoj SFC. (Kolona: Chiralpak AD-H 5 x 25 cm, 5 µm; Mobilna faza: 80/20 CO2/MeOH; Protok: 150 mL/min; Temperatura 40 °C). Frakcije koje sadrže razdvojene pikove su koncentrovane i osušene pod vakuumom da se dobiju bele čvrste supstance. Enantiomer A: (S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metanol (496 mg, 45%) SFC RT = 2.30 min (Kolona: Chiralpac AD 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 80/20 CO2/MeOH; Protok: 3 mL/min); Temperatura 35 °C. Enantiomer B: (R)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metanol (530 mg, 48%) SFC RT = 3.17 min (Kolona: Chiralpac AD 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 80/20 CO2/MeOH; Protok: 3 mL/min); Temperatura 35 °C.

[0428] Prateći procedure analogne onima koje su opisane u 4-{7-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-3,5-dimetil-1,2-oksazolu, intermedijer 4-(7-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il)-3,5-dimetil-1,2-oksazol (30.0 mg, 0.0880 mmol) i (R)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metanol (37 mg, 0.176 mmol) su konvertovani u jedinjenje iz naslova (13.9 mg, 29%).<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.57 (d, J=8.2 Hz, 1H), 8.54 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.91 (dd, J=8.2, 1.3 Hz, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.44 (dd, J=8.6, 5.1 Hz, 2H), 7.10-7.02 (m, 2H), 5.55 (d, J=10.7 Hz, 1H), 4.08 (dd, J=11.6, 2.7 Hz, 1H), 3.87 (dd, J=11.8, 2.7 Hz, 1H), 3.55 (td, J=11.9, 1.8 Hz, 1H), 3.39-3.30 (m, 1H), 3.20 (s, 3H), 3.12-3.02 (m, 1H), 2.44 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 1.99 (d, J=13.6 Hz, 1H), 1.67-1.59 (m, 1H), 1.45-1.34 (m, 1H), 1.08 (d, J=13.1 Hz, 1H); LCMS (M+H)<+>= 534.4; HPLC RT = 2.645 min (Kolona:

1 2

Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Primeri 173-174

[0429] Jedinjenja u Tabeli 6 su pripremljena u skladu sa procedurom koja je opisana za 4-{7-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-3,5-dimetil-1,2-oksazol:

Tabela 6

N/A: Nije primenljivo/Dostupno

HPLC uslovi za Tabelu 6: Metoda A: Kolona: Chiral IB, 250 x 4.6 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza: 80/20 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min; Detekcija UV na 220 nm.

Primer 175

2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-8-il]propan-2-ol

[0430]

Korak 1: Metil 4-((2-hloro-5-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)piridin-3-il)amino)benzoat

1

[0431] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za metil 3-((2-hloro-5-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)piridin-3-il)amino)benzoat, 2-hloro-5-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)piridin-3-amin (200 mg, 0.894 mmol) i 4-(metoksikarbonil)fenil)boronska kiselina (322 mg, 1.79 mmol) su konvertovani u jedinjenje iz naslova (122 mg, 38%). LCMS (M+H) = 358.2; HPLC RT = 2.268 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Korak 2: Metil 4-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat [0432] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za metil 3-(1,4-dimetil 1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat, metil 4-((2-hloro-5-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)piridin-3-il)amino)benzoat (121mg, 0.340 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (96.0 mg, 88%).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 9.24-9.08 (m, 1H), 8.61 (s, 1H), 8.58 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.32 (dd, J=8.6, 1.7 Hz, 1H), 7.73 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.57 (d, J=8.6 Hz, 1H), 4.04 (s, 3H), 4.00 (s, 3H), 2.40 (s, 3H); LCMS (M+H) = 322.3; HPLC RT = 1.895 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Korak 3: (S)-Metil 4-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0433] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za (S)-metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat, metil 4-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (30.0 mg, 0.0930 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (19.6 mg, 42%). LCMS (M+H) = 496; HPLC RT = 2.836 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Korak 4: 2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-8-il]propan-2-ol

[0434] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za (S)-2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol, (S)-metil 4-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (19.6 mg, 0.0400 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (19.6

1 4

mg, 100%).<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.50 (d, J=1.5 Hz, 1H), 8.45 (d, J=1.7 Hz, 1H), 7.90 (dd, J=8.7, 2.0 Hz, 1H), 7.71 (d, J=8.7 Hz, 1H), 7.59 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.45 (d, J=7.2 Hz, 2H), 7.38-7.32 (m, 2H), 7.31-7.28 (m, 1H), 5.50 (d, J=10.7 Hz, 1H), 4.06 (dd, J=11.8, 2.8 Hz, 1H), 3.94-3.84 (m, 4H), 3.54 (td, J=11.9, 2.0 Hz, 1H), 3.36 (td, J=11.9, 2.0 Hz, 1H), 3.10 (qt, J=11.1, 3.5 Hz, 1H), 2.31 (s, 3H), 2.01 (d, J=13.4 Hz, 1H), 1.87 (s, 1H), 1.75 (d, J=1.5 Hz, 6H), 1.65-1.59 (m, 1H), 1.47-1.36 (m, 1H), 1.19-1.11 (m, 1H); LCMS (M+H) = 496.4; HPLC RT = 2.535 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Primer 176

2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-8-il]propan-2-ol

[0435]

Korak 1: (S)-Metil 4-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(4-fluorofenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0436] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za (S)-metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat, metil 4-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (30.0 mg, 0.0930 mmol) i (R)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metanol (36.6 mg, 0.174mmol) su konvertovani u jedinjenje iz naslova (19.6 mg, 42%). LCMS (M+H) = 496; HPLC RT = 2.836 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Korak 2: 2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-8-il]propan-2-ol

[0437] Prateći procedure analogne onima koje su opisane 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-8-il]propan-2-ol, (S)-metil 4-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(4-fluorofenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-

1

b]indol-7-karboksilat (15.3 mg, 0.0300 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (14.8 mg, 95%).<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.50 (d, J=1.4 Hz, 1H), 8.47 (d, J=1.7 Hz, 1H), 7.89 (dd, J=8.7, 2.0 Hz, 1H), 7.67 (d, J=8.9 Hz, 1H), 7.58 (d, J=1.5 Hz, 1H), 7.46-7.39 (m, 2H), 7.07-7.01 (m, 2H), 5.46 (d, J=10.7 Hz, 1H), 4.06 (dd, J=11.6, 2.6 Hz, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.87 (dd, J=11.7, 2.9 Hz, 1H), 3.54 (td, J=11.9, 2.1 Hz, 1H), 3.36 (td, J=11.9, 2.0 Hz, 1H), 3.11-3.01 (m, 1H), 2.33 (s, 3H), 1.96 (d, J=13.0 Hz, 1H), 1.86 (s, 1H), 1.74 (s, 6H), 1.65-1.59 (m, 1H), 1.45-1.36 (m, 1H), 1.20-1.13 (m, 1H); LCMS (M+H) = 514.4; HPLC RT = 2.577 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Primer 177

5-{7-Metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol

[0438]

Korak 1: 2-Hloro-5-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol)-N-(3-(metilsulfonil)fenil)piridin-3-amin

[0439] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za metil 3-((2-hloro-5-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)piridin-3-il)amino)benzoat, 2-hloro-5-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)piridin-3-amin (500 mg, 2.24 mmol) i (3-(metilsulfonil)fenil)boronska kiselina (939 mg, 4.69 mmol) su konvertovani u jedinjenje iz naslova (287 mg, 34%). LCMS (M+H) = 378.2; HPLC RT = 1.700 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Korak 2: 5-(7-(Metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il)-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol [0440] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat, 2-hloro-5-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol)-N-(3-(metilsulfonil)fenil)piridin-3-amin (287 mg, 0.760 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (111 mg, 43%).<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.83 (s, 1H), 8.63 (d, J=1.8 Hz, 1H),

1

8.60 (d, J=8.2 Hz, 1H), 8.22 (d, J=0.9 Hz, 1H), 7.94 (dd, J=8.2, 1.5 Hz, 1H), 7.82 (d, J=1.8 Hz, 1H), 4.06 (s, 3H), 3.19 (s, 3H), 2.41 (s, 3H); LCMS (M+H) = 322.3; HPLC RT = 1.512 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Korak 3: 5-{7-Metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol

[0441] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za 4-{7-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-3,5-dimetil-1,2-oksazol, 5-(7-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il)-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol (30.0 mg, 0.0880 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (18.8 mg, 41%).<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.60 (d, J=8.2 Hz, 1H), 8.57 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.37 (s, 1H), 7.93 (dd, J=8.2, 1.3 Hz, 1H), 7.70 (d, J=1.5 Hz, 1H), 7.47-7.42 (m, 2H), 7.41-7.35 (m, 2H), 7.35-7.31 (m, 1H), 5.61 (d, J=10.5 Hz, 1H), 4.07 (dd, J=11.6, 2.9 Hz, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.88 (dd, J=11.8, 2.8 Hz, 1H), 3.56 (td, J=12.0, 1.8 Hz, 1H), 3.36 (td, J=11.9, 1.8 Hz, 1H), 3.21 (s, 3H), 3.16-3.06 (m, 1H), 2.34-2.29 (m, 3H), 2.04 (d, J=14.5 Hz, 1H), 1.68-1.60 (m, 1H), 1.47-1.36 (m, 1H), 1.07 (d, J=13.0 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 516.4; HPLC RT = 2.362 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Primer 178

5-{5-[(S)-(4-Fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-7-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol

[0442]

[0443] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za 5-{7-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol, 5-(7-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il)-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol (30.0 mg, 0.0880 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (16.4 mg, 34%).<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ

1

8.61 (d, J=8.2 Hz, 1H), 8.58 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.34 (s, 1H), 7.94 (dd, J=8.2, 1.2 Hz, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.43 (dd, J=8.5, 5.0 Hz, 2H), 7.07 (t, J=8.5 Hz, 2H), 5.57 (d, J=10.7 Hz, 1H), 4.08 (dd, J=11.7, 2.9 Hz, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.88 (dd, J=11.7, 2.7 Hz, 1H), 3.55 (td, J=11.9, 1.7 Hz, 1H), 3.39-3.32 (m, 1H), 3.21 (s, 3H), 3.12-3.02 (m, 1H), 2.33 (s, 3H), 1.99 (d, J=13.3 Hz, 1H), 1.67-1.60 (m, 1H), 1.40 (qd, J=12.3, 4.5 Hz, 1H), 1.08 (d, J=13.0 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 534.4; HPLC RT = 2.408 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Primer 179

(5-{7-Metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)metanol

[0444]

Korak 1: 5-Bromo-2-(4-metansulfonilfenil)-3-nitropiridin

[0445] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za metil 4-(5-bromo-3-nitropiridin-2-il)benzoat, (3-(metilsulfonil)fenil)boronska kiselina (114 mg, 0.568 mmol) je konvertovana u jedinjenje iz naslova (185 mg, 91%). LCMS (M+H) = 357; HPLC RT = 1.798 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Korak 2: 3-Bromo-7-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol

[0446] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za metil 3-bromo-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat, 5-bromo-2-(4-metansulfonilfenil)-3-nitropiridin (185 mg, 0.520 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (74.8 mg, 44%).<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.71 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.52 (d, J=8.2 Hz, 1H), 8.48 (br. s., 1H), 8.16-8.13 (m, 1H), 8.02 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.90 (dd, J=8.2, 1.5 Hz, 1H), 3.16 (s, 3H); LCMS (M+H) = 325; HPLC RT = 1.945 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

1

Korak 3: 3-Bromo-7-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol [0447] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za 5-{7-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol, 3-bromo-7-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol (74.0 mg, 0.230 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (57.0 mg, 50%).<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.66 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.51 (d, J=8.1 Hz, 1H), 8.26 (d, J=0.8 Hz, 1H), 8.07 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.86 (dd, J=8.2, 1.4 Hz, 1H), 7.50-7.44 (m, 2H), 7.42-7.35 (m, 2H), 7.34-7.29 (m, 1H), 5.45 (d, J=11.0 Hz, 1H), 4.07 (dd, J=11.8, 3.0 Hz, 1H), 3.87 (dd, J=11.8, 3.0 Hz, 1H), 3.56 (td, J=11.9, 2.1 Hz, 1H), 3.38 (td, J=11.9, 2.1 Hz, 1H), 3.19-3.07 (m, 4H), 1.98 (d, J=13.1 Hz, 1H), 1.65-1.57 (m, 1H), 1.43-1.32 (m, 1H), 1.03 (dd, J=13.4, 1.3 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 499; HPLC RT = 2.828 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Korak 4: (5-{7-Metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)metanol

[0448] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat, 3-bromo-7-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol (57.0 mg, 0.114 mmol) i 4-{[(tercbutildimetilsilil)oksi]metil}-5-(tributilstanil)-1-[(trimetilsilil)metil]-1H-1,2,3-triazol (101 mg, 0.171 mmol) su konvertovani, nakon desililacije sa 1M TBAF u THF-u (1.70 mL, 1.70 mmol), u jedinjenje iz naslova (61.0 mg, 99%).<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.68 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.60 (d, J=8.2 Hz, 1H), 8.39 (s, 1H), 8.25 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.92 (dd, J=8.2, 1.4 Hz, 1H), 7.56-7.50 (m, 2H), 7.40-7.35 (m, 2H), 7.34-7.29 (m, 1H), 5.58 (d, J=10.8 Hz, 1H), 4.80-4.74 (m, 1H), 4.72-4.66 (m, 1H), 4.09 (s, 3H), 4.06 (dd, J=11.8, 2.8 Hz, 1H), 3.87 (dd, J=11.7, 2.9 Hz, 1H), 3.55 (td, J=11.9, 1.9 Hz, 1H), 3.41 (td, J=11.9, 2.0 Hz, 1H), 3.30-3.22 (m, 1H), 3.21 (s, 3H), 2.36 (t, J=6.3 Hz, 1H), 1.97 (d, J=13.4 Hz, 1H), 1.64-1.59 (m, 1H), 1.46-1.36 (m, 1H), 1.10 (d, J=12.5 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 532; HPLC RT = 2.107 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Primer 180

4-(Fluorometil)-5-{7-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1-metil-1H-1,2,3-triazol

1

[0450] U posudu od 20 mL koja sadrži (5-{7-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)metanol (47.0 mg, 0.0880 mmol) ohlađenu u kupatilu sa temperaturom od -78 °C je dodat DAST (53.0 uL, 0.398 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 1 h u kupatilu sa temperaturom od -78 °C potom je dodat zas. vod. NaHCO3, i reakciji je dozvoljeno da se zagreje na sobnu temperaturu. Reakciona smeša je potom razblažena sa 10% vod. LiCl-om i ekstrahovana dva puta sa CHCl3-om. Kombinovani organski slojevi su osušeni preko MgSO4, filtrirani, i koncentrovani. Sirovi ostatak je prečišćena na silika gel koloni (40 g) i eluiran sa gradijentom od 100% CH2Cl2do 4% MeOH/CH2Cl2. Epruvete sa proizvodom su prikupljene i koncentrovane da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (33.7 mg, 71%).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.66 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.61 (d, J=8.4 Hz, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.06 (d, J=1.5 Hz, 1H), 7.94 (dd, J=8.4, 1.3 Hz, 1H), 7.48 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.41-7.34 (m, 2H), 7.34-7.29 (m, 1H), 5.58 (d, J=10.8 Hz, 1H), 5.53-5.45 (m, 1H), 5.40-5.33 (m, 1H), 4.09 (s, 3H), 4.08-4.02 (m, 1H), 3.87 (dd, J=12.0, 2.8 Hz, 1H), 3.60-3.50 (m, 1H), 3.38 (td, J=11.9, 2.0 Hz, 1H), 3.21 (s, 3H), 3.20-3.12 (m, 1H), 1.97 (d, J=12.8 Hz, 1H), 1.65-1.57 (m, 1H), 1.47-1.35 (m, 1H), 1.09 (d, J=12.8 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 534; HPLC RT = 2.375 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Primer 181

5-{9-Fluoro-6-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol

[0451]

Korak 1: 5-Bromo-2-(2-fluoro-5-metansulfonilfenil)-3-nitropiridin

1

[0452] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za metil 4-(5-bromo-3-nitropiridin-2-il)benzoat, 2-(2-fluoro-5-metansulfonilfenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan (500 mg, 1.66 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (325 mg, 52%).<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 9.02 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.58 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.34 (dd, J=6.5, 2.4 Hz, 1H), 8.10 (ddd, J=8.7, 4.7, 2.4 Hz, 1H), 7.34 (dd, J=9.4, 8.8 Hz, 1H), 3.15 (s, 3H); LCMS (M+H) = 375; HPLC RT = 1.977 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Korak 2: 3-Bromo-9-fluoro-6-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol

[0453] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za metil 3-bromo-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat, 5-bromo-2-(2-fluoro-5-metansulfonilfenil)-3-nitropiridin (325 mg, 0.866 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (173 mg, 58%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 11.99 (s, 1H), 8.68 (d, J=2.1 Hz, 1H), 8.30 (d, J=2.1 Hz, 1H), 8.05 (dd, J=8.5, 4.9 Hz, 1H), 7.31 (dd, J=9.8, 8.7 Hz, 1H), 3.38 (s, 3H); LCMS (M+H) = 343; HPLC RT = 1.998 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Korak 3: 3-Bromo-9-fluoro-6-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol

[0454] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za 5-{7-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol, 3-bromo-9-fluoro-6- metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol (100 mg, 0.290 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (121 mg, 81%).<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.71 (d, J=1.5 Hz, 1H), 8.36 (dd, J=8.8, 5.3 Hz, 1H), 7.78 (d, J=1.5 Hz, 1H), 7.51 (d, J=7.6 Hz, 2H), 7.44-7.31 (m, 3H), 7.18 (t, J=8.6 Hz, 1H), 6.96 (d, J=9.8 Hz, 1H), 4.06 (d, J=8.9 Hz, 1H), 3.86-3.70 (m, 1H), 3.53 (t, J=11.2 Hz, 1H), 3.34-3.15 (m, 4H), 2.92 (q, J=11.0 Hz, 1H), 2.11 (d, J=13.4 Hz, 1H), 1.97-1.79 (m, 1H), 1.54-1.44 (m, 1H), 0.37 (d, J=12.4 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 517; HPLC RT = 2.913 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Korak 4: 5-{9-Fluoro-6-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol

1 1

[0455] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat, 3-bromo-9-fluoro-6-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4- il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol (60.0 mg, 0.116 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (21.8 mg, 33%).<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.64 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.40 (dd, J=8.9, 5.3 Hz, 1H), 7.52 (d, J=7.9 Hz, 2H), 7.46 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.43-7.37 (m, 2H), 7.37-7.32 (m, 1H), 7.24 (t, J=8.7 Hz, 1H), 7.00 (d, J=9.8 Hz, 1H), 4.07 (dd, J=11.6, 2.6 Hz, 1H), 3.78 (dd, J=11.7, 3.1 Hz, 1H), 3.72 (s, 3H), 3.57-3.50 (m, 1H), 3.37 (s, 3H), 3.21 (td, J=12.0, 2.0 Hz, 1H), 3.00-2.87 (m, 1H), 2.20 (br. s., 1H), 2.18 (s, 3H), 2.03-1.93 (m, 1H), 1.68-1.58 (m, 1H), 0.38 (d, J=12.7 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 534; HPLC RT = 2.463 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Primer 182

5-{6-Metansulfonil-9-metoksi-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol

[0456]

[0457] U bočicu od 8 mL koja sadrži 5-{9-fluoro-6-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol (50.0 mg, 0.0940 mmol) u DMSO-u (2 mL) je dodat NaOMe (101 mg, 1.87 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 20 min potom razblažena sa vodom, ohlađena sa ledom, i neutralisana sa vod. 1M limunskom kiselinom. Beli talog koji se formirao je prikupljen filtracijom i prečišćen na prep HPLC (Kolona: Phen Luna C18, 30 x 100 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Gradijent: 10-100% B tokom 12 min, potom 3-min zadržavanje na 100% B; Protok: 40 mL/min). Epruvete koje sadrže proizvod su bazifikovane sa zas vod. K2CO3-om i koncentrovane da se ukloni Acetonitril. Beli talog se formirao tokom koncentrovanja i filtriran je sa vodenim ispiranjima i osušen pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (27.1 mg, 52%).<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.63 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.40 (d, J=8.9

1 2

Hz, 1H), 7.51 (d, J=7.9 Hz, 2H), 7.42 (d, J=1.7 Hz, 1H), 7.40-7.35 (m, 2H), 7.35-7.30 (m, 1H), 7.04-6.93 (m, 2H), 4.30 (s, 3H), 4.06 (d, J=9.2 Hz, 1H), 3.75 (dd, J=11.3, 2.9 Hz, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.52 (t, J=11.1 Hz, 1H), 3.32 (s, 3H), 3.23-3.13 (m, 1H), 2.98-2.85 (m, 1H), 2.22-2.14 (m, 4H), 2.03-1.91 (m, 1H), 1.63-1.58 (m, 1H), 0.36 (d, J=12.8 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 546; HPLC RT = 2.325 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Primer 183

5-{6-Metansulfonil-9-metoksi-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol

[0458]

Korak 1: 5-Bromo-2-(5-metansulfonil-2-metoksifenil)-3-nitropiridin

[0459] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za metil 4-(5-bromo-3-nitropiridin-2-il)benzoat, 2-(5-metansulfonil-2-metoksifenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan (1.00 g, 3.20 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (789 mg, 63%).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.96 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.43 (d, J=2.1 Hz, 1H), 8.25 (d, J=2.3 Hz, 1H), 8.05 (dd, J=8.7, 2.4 Hz, 1H), 7.06 (d, J=8.8 Hz, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.12 (s, 3H); LCMS (M+H) = 387; HPLC RT = 1.952 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Korak 2: 3-Bromo-6-metansulfonil-9-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol

[0460] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za metil 3-bromo-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat, 5-bromo-2-(5-metansulfonil-2-metoksifenil)-3-nitropiridin (788 mg, 2.03 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (321 mg, 44%).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 11.65 (s, 1H), 8.60 (d, J=2.2 Hz, 1H), 8.22 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.97 (d, J=8.6 Hz, 1H), 7.04 (d, J=8.8 Hz, 1H), 4.10 (s, 3H), 3.30 (s, 3H); LCMS (M+H) = 355; HPLC RT = 1.635 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa

1

0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Korak 3: 3-Bromo-6-metansulfonil-9-metoksi-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol

[0461] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za 5-{7-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol, 3-bromo-6-metansulfonil-9-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol (166 mg, 0.470 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (172 mg, 69%).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.70 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.36 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.74 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.51 (d, J=7.8 Hz, 2H), 7.44-7.36 (m, 2H), 7.35-7.30 (m, 1H), 6.98-6.91 (m, 2H), 4.25 (s, 3H), 4.05 (d, J=11.2 Hz, 1H), 3.74 (dd, J=11.9, 2.7 Hz, 1H), 3.51 (t, J=10.9 Hz, 1H), 3.27-3.15 (m, 4H), 2.98-2.83 (m, 1H), 2.10 (d, J=13.3 Hz, 1H), 1.97-1.83 (m, 1H), 1.51-1.42 (m, 1H), 0.35 (d, J=12.6 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 529; HPLC RT = 2.766 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Korak 4: 5-{6-Metansulfonil-9-metoksi-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol

[0462] U bočici od 4 mL je kombinovan 3-bromo-6-metansulfonil-9-metoksi-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol (30.0 mg, 0.0570 mmol), 4-(<2>H3)metil-1-[(trimetilsilil)metil]-1H-1,2,3-triazol (19.5 mg, 0.113 mmol), i tetrabutilamonijum acetat (34.2 mg, 0.113 mmol) u NMP-u (0.1 mL). U smešu je dodat tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum-hloroform proizvod (5.80 mg, 0.00500 mmol), bočica je zatvorena pod N2(g) i zagrevana na bloku za zagrevanje sa teperaturom od 100 °C tokom 3 h. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu, i 1M rastvor TBAF u THF-u (0.560 mL, 0.560 mmol) je dodat. Nakon mešanja tokom 10 min, zas. vod. NH4OH je dodat, i zatim je smeša koncentrovana da bi se uklonio THF. Ostatak je razblažen sa 10% vod. LiCl-om, i dobijeni talog je prikupljen filtracijom. Sirova čvrsta supstanca je prečišćena na prep HPLC (Kolona: Phen Luna C18, 30 x 100 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Gradijent: 10-100% B tokom 12 min, potom 3-min zadržavanje na 100% B; Protok: 40 mL/min). Epruvete koje sadrže proizvod su bazifikovane sa zas. vod. K2CO3-om i koncentrovane da se ukloni acetonitril. Beli talog je formiran tokom koncentrovanja i filtriran je sa vodenim ispiranjima i osušen pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (11.7 mg, 37%).<1>H NMR

1 4

(500MHz, CDCl3) δ 8.63 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.41 (d, J=8.9 Hz, 1H), 7.51 (d, J=7.9 Hz, 2H), 7.42 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.40-7.35 (m, 2H), 7.35-7.30 (m, 1H), 7.02-6.95 (m, 2H), 4.30 (s, 3H), 4.06 (dd, J=11.7, 2.7 Hz, 1H), 3.75 (dd, J=11.3, 3.1 Hz, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.52 (t, J=10.8 Hz, 1H), 3.32 (s, 3H), 3.18 (td, J=12.0, 1.8 Hz, 1H), 2.99-2.87 (m, 1H), 2.24-2.14 (m, 1H), 2.04-1.92 (m, 1H), 1.63-1.57 (m, 1H), 0.36 (d, J=13.0 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 549; HPLC RT = 2.292 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Primer 184

5-[6-(<2>H3)Metansulfonil-9-(<2>H3)metoksi-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il]-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol

[0463]

[0464] U bočicu od 4 mL koja sadrži rastvor KOtBu (56.8 mg, 0.510 mmol) u CD3OD-u (0.750 mL) je dodat (5-{9-fluoro-6-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol (27.0 mg, 0.0510 mmol) da bi se dobila bela suspenzija. Reakciona smeša je razblažena sa DMSO (0.4 mL) i čvrsta supstanca rastvorena. Nakon mešanja tokom 30 min na sobnoj temperaturi, reakcija je neutralisana sa 1M vod. limunskom kiselinom i zatim koncentrovana. Smeša je razblažena sa vodom, i dobijeni beli talog je prikupljen filtracijom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (23.3 mg, 83%).<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.63 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.40 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.51 (d, J=7.8 Hz, 2H), 7.42 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.40-7.35 (m, 2H), 7.35-7.30 (m, 1H), 7.02-6.92 (m, 2H), 4.05 (dd, J=11.8, 2.7 Hz, 1H), 3.75 (dd, J=11.6, 3.1 Hz, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.55-3.47 (m, 1H), 3.22-3.13 (m, 1H), 2.98-2.86 (m, 1H), 2.24-2.13 (m, 4H), 2.03-1.92 (m, 1H), 1.57-1.50 (m, 1H), 0.36 (d, J=12.8 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 552; HPLC RT = 2.325 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Primer 185

1

4-{6-Metansulfonil-9-metoksi-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-3,5-dimetil-1,2-oksazol

[0465]

Korak 1: 4-{9-Fluoro-6-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-3,5-dimetil-1,2-oksazol

[0466] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za 2-hloro-5-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)piridin-3-amin, 3-bromo-9-fluoro-6-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol (60.0 mg, 0.116 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (55.0 mg, 88%).<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.60 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.36 (dd, J=8.9, 5.3 Hz, 1H), 7.52 (d, J=8.1 Hz, 2H), 7.43-7.37 (m, 3H), 7.36-7.30 (m, 1H), 7.21 (t, J=8.7 Hz, 1H), 6.99 (d, J=9.8 Hz, 1H), 4.06 (dd, J=11.6, 2.7 Hz, 1H), 3.77 (dd, J=11.7, 3.1 Hz, 1H), 3.52 (td, J=11.9, 1.8 Hz, 1H), 3.34 (s, 3H), 3.21 (td, J=12.0, 2.0 Hz, 1H), 3.01-2.87 (m, 1H), 2.25 (s, 3H), 2.22-2.14 (m, 1H), 2.08 (s, 3H), 2.02-1.90 (m, 1H), 1.63-1.57 (m, 1H), 0.38 (d, J=12.8 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 534; HPLC RT = 2.731 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min). Korak 2: 4-{6-Metansulfonil-9-metoksi-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-3,5-dimetil-1,2-oksazol

[0467] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za 5-{6-metansulfonil-9-metoksi-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol, 4-{9-fluoro-6-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-3,5-dimetil-1,2-oksazol (55.0 mg, 0.100 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (21.7 mg, 38%).

<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.59 (d, J=1.6 Hz, 1H), 8.37 (d, J=8.9 Hz, 1H), 7.52 (d, J=7.6 Hz, 2H), 7.43-7.35 (m, 3H), 7.32 (d, J=7.2 Hz, 1H), 7.02-6.93 (m, 2H), 4.28 (s, 3H), 4.05 (d, J=8.8 Hz, 1H), 3.80-3.68 (m, 1H), 3.50 (t, J=11.2 Hz, 1H), 3.28 (s, 3H), 3.17 (t, J=10.9 Hz, 1H), 2.99-2.85 (m, 1H), 2.24 (s, 3H), 2.17 (d, J=14.1 Hz, 1H), 2.07 (s, 3H), 2.03-1.91 (m, 1H), 1.51 (br. s., 1H), 0.36 (d, J=12.5 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 546; HPLC RT = 2.428 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1%

1

TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Primer 186

4-{5-[(S)-(2-Fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-6-metansulfonil-9-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-3,5-dimetil-1,2-oksazol

[0468]

Korak 1: 3-Bromo-5-[(S)-(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-6-metansulfonil-9-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol

[0469] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za 5-{7-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol, 3-bromo-6-metansulfonil-9-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol (75.0 mg, 0.210 mmol) i (R)-(2-fluorofenil) (oksan-4-il)metanol (89.0 mg, 0.422 mmol) su konvertovani u jedinjenje iz naslova (96.3 mg, 83%). LCMS (M+H) = 547; HPLC RT = 2.668 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min). Korak 2: 4-{5-[(S)-(2-Fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-6-metansulfonil-9-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-3,5-dimetil-1,2-oksazol

[0470] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za 4-{9-fluoro-6-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-3,5-dimetil-1,2-oksazol, 3-bromo-5-[(S)-(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-6-metansulfonil-9-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol (30.0 mg, 0.0550 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (21.7 mg, 66%).<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.56 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.45 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.75 (t, J=7.6 Hz, 1H), 7.46 (d, J=1.7 Hz, 1H), 7.36-7.28 (m, 2H), 7.23 (d, J=9.9 Hz, 1H), 7.01-6.94 (m, 2H), 4.27 (s, 3H), 4.11-4.04 (m, 1H), 3.84 (dd, J=11.5, 3.1 Hz, 1H), 3.58-3.47 (m, 1H), 3.35 (s, 3H), 3.29-3.21 (m, 1H), 3.05 (q, J=11.1 Hz, 1H), 2.27 (s, 3H), 2.15-2.04 (m, 4H), 2.00-1.89 (m, 2H), 0.58 (d, J=12.7 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 564; HPLC RT = 2.280 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B:

1

90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Primer 187

4-{5-[(S)-(4-Fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-6-metansulfonil-9-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-3,5-dimetil-1,2-oksazol

[0471]

[0472] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za 4-{9-fluoro-6-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-3,5-dimetil-1,2-oksazol, 3-bromo-5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-6-metansulfonil-9-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol (32.5 mg, 0.0590 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (28.5 mg, 83%).<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.60 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.32 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.55 (dd, J=8.5, 5.1 Hz, 2H), 7.37 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.11-7.04 (m, 2H), 6.96 (d, J=9.0 Hz, 1H), 6.92 (d, J=9.8 Hz, 1H), 4.28 (s, 3H), 4.05 (d, J=9.2 Hz, 1H), 3.73 (dd, J=11.6, 2.9 Hz, 1H), 3.49 (t, J=11.1 Hz, 1H), 3.31 (s, 3H), 3.20-3.11 (m, 1H), 2.93-2.82 (m, 1H), 2.29 (s, 3H), 2.17-2.08 (m, 4H), 1.97-1.85 (m, 1H), 1.51-1.40 (m, 1H), 0.33 (d, J=13.4 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 564; HPLC RT = 2.473 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Primer 188

5-{5-[(S)-(2-Fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-6-metansulfonil-9-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol

[0473]

1

[0474] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za 5-{9-fluoro-6-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol, 3-bromo-5-[(S)-(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-6-metansulfonil-9-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol (30.0 mg, 0.0550 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (13.5 mg, 43%).<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.59 (br. s., 1H), 8.50 (d, J=8.9 Hz, 1H), 7.75 (t, J=7.7 Hz, 1H), 7.51 (br. s., 1H), 7.39-7.28 (m, 2H), 7.03-6.87 (m, 2H), 4.28 (s, 3H), 4.12-4.02 (m, 1H), 3.85 (d, J=8.5 Hz, 1H), 3.76 (br. s., 3H), 3.53 (t, J=11.1 Hz, 1H), 3.37 (s, 3H), 3.26 (t, J=11.4 Hz, 1H), 3.04 (d, J=10.7 Hz, 1H), 2.24-1.90 (m, 6H), 0.59 (d, J=13.0 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 564; HPLC RT = 2.243 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Primer 189

5-{5-[(S)-(2-Fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-6-metansulfonil-9-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol

[0475]

[0476] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za 5-{6-metansulfonil-9-metoksi-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol, 3-bromo-5-[(S)-(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-6-metansulfonil-9-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol (30.0 mg, 0.0550 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (6.70 mg, 21%).<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.60 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.49 (d, J=8.9 Hz, 1H), 7.75 (t, J=7.6 Hz, 1H), 7.51 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.37-7.31 (m, 1H), 7.31-7.28 (m, 1H), 7.24 (s, 1H), 7.02-6.94 (m, 2H), 4.28 (s, 3H), 4.10-4.06 (m, 1H), 3.85 (dd, J=11.9, 3.1 Hz, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.57-3.49 (m, 1H), 3.37 (s, 3H), 3.26 (td, J=12.0, 1.8 Hz, 1H), 3.10-2.99 (m, 1H), 2.18-1.93 (m, 3H), 0.59 (d, J=12.2 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 567; HPLC RT = 2.237 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Primer 190

1

5-{5-[(S)-(4-Fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-6-metansulfonil-9-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol

[0477]

[0478] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za 5-{9-fluoro-6-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol, 3-bromo-5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-6-metansulfonil-9-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol (32.5 mg, 0.0590 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (26.0 mg, 77%).<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.64 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.36 (d, J=8.9 Hz, 1H), 7.54 (dd, J=8.5, 5.2 Hz, 2H), 7.43 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.12-7.04 (m, 2H), 6.99 (d, J=9.0 Hz, 1H), 6.94 (d, J=9.9 Hz, 1H), 4.29 (s, 3H), 4.05 (dd, J=11.5, 2.8 Hz, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.75 (dd, J=11.7, 3.1 Hz, 1H), 3.54-3.46 (m, 1H), 3.34 (s, 3H), 3.16 (td, J=11.9, 1.8 Hz, 1H), 2.94-2.82 (m, 1H), 2.20 (s, 3H), 2.12 (d, J=13.6 Hz, 1H), 1.99-1.86 (m, 1H), 1.53-1.45 (m, 1H), 0.34 (d, J=12.5 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 564; HPLC RT = 2.405 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min). Primer 191

5-{5-[(S)-(4-Fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-6-metansulfonil-9-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol

[0479]

[0480] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za 5-{6-metansulfonil-9-metoksi-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol, 3-bromo-5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-6-metansulfonil-9-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol (28.5 mg, 0.0520 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (2.80 mg,

1

9.4%).<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.64 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.36 (d, J=8.9 Hz, 1H), 7.54 (dd, J=8.3, 5.1 Hz, 2H), 7.43 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.10-7.05 (m, 2H), 6.99 (d, J=9.0 Hz, 1H), 6.94 (d, J=9.5 Hz, 1H), 4.29 (s, 3H), 4.05 (d, J=9.2 Hz, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.75 (d, J=12.1 Hz, 1H), 3.50 (t, J=11.0 Hz, 1H), 3.34 (s, 3H), 3.21-3.11 (m, 1H), 2.95-2.82 (m, 1H), 2.12 (d, J=13.1 Hz, 1H), 1.98-1.86 (m, 1H), 1.50 (d, J=4.6 Hz, 1H), 0.34 (d, J=12.7 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 567; HPLC RT = 2.392 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Primer 192

[0481]

[0482] U bočicu od 4 mL koja sadrži 2-[3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol (20.0 mg, 0.0400 mmol) u CD3OD-u (1.5 mL) je dodat KOtBu (20.4 mg, 0.182 mmol). Smeša je zagrevana na bloku za zagrevanje sa temperaturom od 80 °C tokom 23 h, potom na sobnoj temperaturi je dodat zas. vod. NaHCO3, i smeša je koncentrovana da bi se uklonio CD3OD. Smeša je razblažena sa vodom, i dobijeni beli talog je prikupljen filtracijom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (18.1 mg, 89%).<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.39 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.33 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.52 (d, J=1.7 Hz, 1H), 7.46 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.42 (dd, J=8.2, 1.4 Hz, 1H), 7.37-7.31 (m, 2H), 7.30-7.28 (m, 1H), 5.56 (d, J=10.7 Hz, 1H), 4.06 (dd, J=11.7, 2.6 Hz, 1H), 3.86 (dd, J=11.7, 2.8 Hz, 1H), 3.55 (td, J=11.9, 1.8 Hz, 1H), 3.35 (td, J=11.9, 2.0 Hz, 1H), 3.16-3.04 (m, 1H), 2.23 (s, 3H), 2.03 (d, J=13.4 Hz, 1H), 1.93 (s, 1H), 1.74 (s, 6H), 1.68-1.59 (m, 1H), 1.47-1.36 (m, 1H), 1.11 (d, J=13.6 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 499; HPLC RT = 2.422 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Primer 193

1 1

4-[6-(<2>H3)Metansulfonil-9-metoksi-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il]-5-(<2>H3)metil-3-metil-1,2-oksazol

[0483]

[0484] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za 2-{3-[5-(<2>H3)metil-3-metil-1,2-oksazol-4-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, 4-{6-metansulfonil-9-metoksi-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-3,5-dimetil-1,2-oksazol (11.0 mg, 0.0200 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (9.00 mg, 80%).<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.59 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.36 (d, J=8.9 Hz, 1H), 7.52 (d, J=8.1 Hz, 2H), 7.41-7.35 (m, 3H), 7.34-7.29 (m, 1H), 6.99-6.93 (m, 2H), 4.28 (s, 3H), 4.05 (dd, J=11.5, 2.7 Hz, 1H), 3.74 (dd, J=11.6, 3.2 Hz, 1H), 3.51 (td, J=11.9, 1.8 Hz, 1H), 3.18 (td, J=11.9, 1.9 Hz, 1H), 3.00-2.87 (m, 1H), 2.17 (d, J=13.7 Hz, 1H), 2.07 (s, 3H), 2.03-1.92 (m, 1H), 1.53 (dd, J=12.8, 4.4 Hz, 1H), 0.35 (d, J=13.0 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 552; HPLC RT = 2.392 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Primer 194

5-{9-Fluoro-7-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol

[0485]

Korak 1: 5-Bromo-2-(2-fluoro-4-metansulfonilfenil)-3-nitropiridin

[0486] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za metil 4-(5-bromo-3-nitropiridin-2-il)benzoat, 2-(2-fluoro-4-metansulfonilfenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan (2.96 g, 9.86 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (469 mg, 13%).<1>H NMR (400MHz,

1 2

CDCl3) δ 9.03 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.59 (d, J=2.1 Hz, 1H), 8.02-7.86 (m, 2H), 7.73 (dd, J=9.2, 1.5 Hz, 1H), 3.14 (s, 3H); HPLC RT = 1.973 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min). Korak 2: 3-Bromo-9-fluoro-7-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol

[0487] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za metil 3-bromo-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat, 5-bromo-2-(2-fluoro-4-metansulfonilfenil)-3-nitropiridin (469 mg, 1.25 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (136 mg, 32%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 12.34 (br. s., 1H), 8.69 (br. s., 1H), 8.39 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.60 (d, J=9.5 Hz, 1H), 3.34 (br. s., 3H); LCMS (M+H) = 343; HPLC RT = 1.940 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Korak 3: 3-Bromo-9-fluoro-7-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol

[0488] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za 5-{7-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol, 3-bromo-9-fluoro- 7-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol (136 mg, 0.400 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (76.0 mg, 37%).<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.75 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.09 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.54 (dd, J=8.9, 0.9 Hz, 1H), 7.45 (d, J=7.5 Hz, 2H), 7.41-7.36 (m, 2H), 7.35-7.31 (m, 1H), 5.46 (d, J=11.0 Hz, 1H), 4.07 (dd, J=11.7, 2.9 Hz, 1H), 3.88 (dd, J=11.8, 3.0 Hz, 1H), 3.57 (td, J=11.9, 2.0 Hz, 1H), 3.38 (td, J=11.9, 2.1 Hz, 1H), 3.15-3.05 (m, 4H), 2.00 (d, J=13.3 Hz, 1H), 1.64-1.57 (m, 1H), 1.42-1.32 (m, 1H), 1.00 (d, J=12.2 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 517; HPLC RT = 2.761 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Korak 4: 5-{9-Fluoro-7-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol

[0489] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat, 3-bromo-9-fluoro-7-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol (38.0 mg, 0.0730 mmol) je konvertovan u

1

jedinjenje iz naslova (28.2 mg, 71%).<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.66 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.71 (d, J=1.5 Hz, 1H), 7.64-7.59 (m, 1H), 7.46-7.42 (m, 2H), 7.41-7.37 (m, 2H), 7.36-7.32 (m, 1H), 5.61 (d, J=10.5 Hz, 1H), 4.08 (dd, J=11.7, 2.8 Hz, 1H), 3.95-3.84 (m, 4H), 3.56 (td, J=11.9, 1.8 Hz, 1H), 3.36 (td, J=11.9, 1.8 Hz, 1H), 3.21 (s, 3H), 3.15-3.04 (m, 1H), 2.31 (s, 3H), 2.06 (d, J=13.3 Hz, 1H), 1.63 (dd, J=13.4, 4.0 Hz, 1H), 1.46-1.34 (m, 1H), 1.04 (d, J=13.0 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 534; HPLC RT = 2.363 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Primer 195

5-{9-Fluoro-7-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol

[0490]

[0491] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za 5-{6-metansulfonil-9-metoksi-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol, 3-bromo-9-fluoro-7-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil) metil]-5H-pirido[3,2-b]indol (38.0 mg, 0.0730 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (18.0 mg, 45%).<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.66 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.71 (d, J=1.7 Hz, 1H), 7.62 (dd, J=8.7, 0.9 Hz, 1H), 7.46-7.42 (m, 2H), 7.41-7.37 (m, 2H), 7.37-7.32 (m, 1H), 5.61 (d, J=10.5 Hz, 1H), 4.08 (dd, J=11.8, 2.8 Hz, 1H), 3.94-3.85 (m, 4H), 3.56 (td, J=11.9, 1.8 Hz, 1H), 3.36 (td, J=11.9, 1.9 Hz, 1H), 3.21 (s, 3H), 3.15-3.05 (m, 1H), 2.06 (d, J=13.3 Hz, 1H), 1.68-1.59 (m, 1H), 1.41 (qd, J=12.4, 4.4 Hz, 1H), 1.04 (d, J=13.0 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 537; HPLC RT = 2.362 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Primer 196

5-{9-Fluoro-5-[(S)-(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-7-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol

1 4

[0493] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za 5-{9-fluoro-6-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol, 3-bromo-9-fluoro-5- [(S)-(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-7-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol (150 mg, 0.280 mmol) i 4-(<2>H3)metil-5-(tributilstanil)-1-[(trimetilsilil)metil]-1H-1,2,3-triazol (194 mg, 0.420 mmol) su konvertovani u jedinjenje iz naslova (68.7 mg, 44%).

<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.68 (d, J=1.5 Hz, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.80 (br t, J=7.2 Hz, 1H), 7.59 (d, J=8.5 Hz, 1H), 7.41-7.34 (m, 1H), 7.33-7.28 (m, 1H), 7.11-7.03 (m, 1H), 5.78 (br d, J=11.4 Hz, 1H), 4.07 (br dd, J=11.8, 2.8 Hz, 1H), 4.01 (s, 3H), 3.88 (br dd, J=11.7, 2.9 Hz, 1H), 3.59-3.51 (m, 1H), 3.38-3.29 (m, 1H), 3.23-3.11 (m, 4H), 1.95 (br d, J=13.3 Hz, 1H), 1.66-1.60 (m, 1H), 1.39 (qd, J=12.3, 4.4 Hz, 1H), 0.99 (br d, J=12.8 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 555; HPLC RT = 2.367 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min). Primer 197

5-{7-Metansulfonil-9-metoksi-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol

[0494]

[0495] U bočicu od 8 mL je dodat 5-{9-fluoro-7-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol (20.0 mg, 0.0370 mmol) u MeOH-u (2 mL). U smešu je dodat KOtBu (20.6 mg, 0.184 mmol), i reakcija je zagrevana na bloku za zagrevanje sa temperaturom od 80 °C. Nakon zagrevanja tokom 17 h, reakcija je ohlađena do sobne temperature i neutralisana sa 1M vod. limunskom kiselinom. Smeša je

1

koncentrovana da se ukloni MeOH i razblažena sa vodom, potom je dodat zas. vod. K2CO3, i beli talog je prikupljen filtracijom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (16.4 mg, 78%).<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.65 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.46-7.40 (m, 2H), 7.40-7.30 (m, 4H), 5.60 (d, J=10.5 Hz, 1H), 4.27 (s, 3H), 4.07 (br dd, J=11.7, 2.8 Hz, 1H), 3.91-3.82 (m, 4H), 3.60-3.51 (m, 1H), 3.39-3.30 (m, 1H), 3.21 (s, 3H), 3.15-3.04 (m, 1H), 2.06 (br d, J=14.2 Hz, 1H), 1.69-1.60 (m, 1H), 1.45-1.33 (m, 1H), 1.01 (br d, J=13.0 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 549; HPLC RT = 2.273 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min). Primer 198

5-{5-[(S)-(2-Fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-7-metansulfonil-9-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol

[0496]

[0497] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za 5-{7-metansulfonil-9-metoksi-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol, 5-{9-fluoro-5-[(S)-(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-7-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol (20.0 mg, 0.0360 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (14.3 mg, 66%).<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.68 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.22-7.98 (m, 1H), 7.93-7.74 (m, 2H), 7.39-7.29 (m, 3H), 7.08-7.00 (m, 1H), 5.76 (br d, J=11.0 Hz, 1H), 4.25 (s, 3H), 4.09-4.04 (m, 1H), 4.03-3.95 (m, 3H), 3.89-3.81 (m, 1H), 3.58-3.51 (m, 1H), 3.37-3.29 (m, 1H), 3.17 (s, 4H), 1.94 (br d, J=13.0 Hz, 1H), 1.43-1.33 (m, 1H), 0.97 (br d, J=14.2 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 567; HPLC RT = 2.297 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Primeri 199 &200

1

5-{5-[(4,4-Difluorocikloheksil)(fenil)metil]-9-fluoro-7-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol

[0498]

Korak 1: 3-Bromo-5-[(4,4-difluorocikloheksil)(fenil)metil]-9-fluoro-7-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol

[0499] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za 3-bromo-5-[(4,4-difluorocikloheksil)(fenil)metil]-7-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol, 3-bromo-9-fluoro-7-metansulfonil-5H- pirido[3,2-b]indol (50.0 mg, 0.148 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (71.0 mg, 88%). LCMS (M+H) = 551; HPLC RT = 3.045 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Korak 2: 5-{5-[(4,4-Difluorocikloheksil)(fenil)metil]-9-fluoro-7-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol

[0500] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za 5-{5-[(4,4-difluorocikloheksil)(fenil)metil]-7-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol, 3-bromo-5-[(4,4-difluorocikloheksil)(fenil)metil]-9-fluoro-7-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol (80.0 mg, 0.145 mmol) je konvertovan u racemski 5-{5-[(4,4-difluorocikloheksil)(fenil)metil]-9-fluoro-7-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol, koji je razdvojen na hiralnoj prep SFC da se dobiju enantiomer A (19.1 mg, 22%) i enantiomer B (20.7 mg, 24%). Enantiomer A:<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.67 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.62 (dd, J=8.7, 0.9 Hz, 1H), 7.45-7.32 (m, 5H), 5.61 (d, J=10.5 Hz, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.21 (s, 3H), 2.95 (q, J=11.2 Hz, 1H), 2.23 (br d, J=12.5 Hz, 2H), 2.08-1.84 (m, 2H), 1.77-1.62 (m, 2H), 1.39 (qd, J=12.9, 3.5 Hz, 1H), 1.27 (br d, J=10.2 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 571; HPLC RT = 2.587

1

min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok:4 mL/min); SFC RT = 15.4 min (Kolona: Chiralpak IC, 250 x 4.6 mm, 5µm; Mobilna faza: 55/45 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min). Enantiomer B:<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.67 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.70 (d, J=1.7 Hz, 1H), 7.62 (dd, J=8.7, 0.9 Hz, 1H), 7.45-7.32 (m, 5H), 5.61 (d, J=10.7 Hz, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.21 (s, 3H), 2.95 (q, J=11.0 Hz, 1H), 2.23 (br d, J=12.7 Hz, 2H), 2.10-1.84 (m, 2H), 1.76-1.59 (m, 2H), 1.44-1.34 (m, 1H), 1.28 (br s, 1H); LCMS (M+H) = 571; HPLC RT = 2.583 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min); SFC RT = 17.5 min (Kolona: Chiralpak IC, 250 x 4.6 mm, 5µm; Mobilna faza: 55/45 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min).

Primer 201

5-{9-Fluoro-5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-7-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol

[0501]

[0502] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za 5-{9-fluoro-6-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol, 3-bromo-9-fluoro-5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-7-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol (72.7 mg, 0.136 mmol) i 4-(<2>H3)metil-5-(tributilstanil)-1-[(trimetilsilil)metil]-1H-1,2,3-triazol (79.0 mg, 0.200 mmol) su konvertovani u jedinjenje iz naslova (40.5 mg, 53%).

<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.68 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.70 (d, J=1.7 Hz, 1H), 7.62 (dd, J=8.7, 1.0 Hz, 1H), 7.43 (dd, J=8.8, 5.0 Hz, 2H), 7.13-7.04 (m, 2H), 5.57 (d, J=10.6 Hz, 1H), 4.08 (br dd, J=12.2, 2.5 Hz, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.89 (br dd, J=11.9, 2.7 Hz, 1H), 3.60-3.50 (m, 1H), 3.41-3.30 (m, 1H), 3.21 (s, 3H), 3.12-3.00 (m, 1H), 2.01 (br d, J=12.3 Hz, 1H), 1.64-1.60 (m, 1H), 1.46-1.34 (m, 1H), 1.05 (br d, J=12.2 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 555; HPLC RT = 2.492 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90

1

MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Primer 202

5-{5-[(S)-(4-Fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-7-metansulfonil-9-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol

[0503]

[0504] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za 5-{7-metansulfonil-9-metoksi-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol, 5-{9-fluoro-5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-7-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol (30.0 mg, 0.0540 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (25.6 mg, 80%).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.67 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.42 (dd, J=8.6, 5.1 Hz, 2H), 7.34 (s, 1H), 7.07 (t, J=8.5 Hz, 2H), 5.56 (br d, J=10.5 Hz, 1H), 4.27 (s, 3H), 4.07 (br dd, J=11.7, 2.6 Hz, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.87 (br dd, J=11.6, 3.4 Hz, 1H), 3.54 (br td, J=11.7, 1.6 Hz, 1H), 3.34 (td, J=11.9, 1.9 Hz, 1H), 3.21 (s, 3H), 3.12-2.99 (m, 1H), 2.01 (br d, J=13.7 Hz, 1H), 1.68-1.60 (m, 1H), 1.38 (qd, J=12.4, 4.7 Hz, 1H), 1.02 (br d, J=12.7 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 567; HPLC RT = 2.443 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Primeri 203 & 204

2-{5-[(4,4-Difluorocikloheksil)(fenil)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0505]

1

Korak 1: Metil 3-bromo-5-[(S)-(4,4-difluorocikloheksil)(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0506] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za 3-bromo-5-[(4,4-difluorocikloheksil)(fenil)metil]-7-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol, metil 3-bromo-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (45.0 mg, 0.147 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova i primenjen je bez prečišćavanja u sledećem koraku bez prečišćavanja. LCMS (M+H) = 513; HPLC RT = 3.520 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Korak 2: Metil 5-[(4,4-Difluorocikloheksil)(fenil)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0507] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za 5-{5-[(4,4-difluorocikloheksil)(fenil)metil]-7-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol, metil 3-bromo-5-[(S)-(4,4-difluorocikloheksil)(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat je konvertovan u jedinjenje iz naslova (25.4 mg, 32%). LCMS (M+H) = 533; HPLC RT = 3.128 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min). Korak 3: 2-{5-[(4,4-Difluorocikloheksil)(fenil)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0508] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za (S)-2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol, metil 5-[(4,4-difluorocikloheksil)(fenil)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (25.4 mg, 0.0480 mmol) je konvertovan u racemski 2-{5-[(4,4-difluorocikloheksil)(fenil)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, koji je razdvojen na hiralnoj prep SFC da se dobiju enantiomer A

2

(11.1 mg, 42%) i enantiomer B (10.7 mg, 41%). Enantiomer A:<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.45 (d, J=1.7 Hz, 2H), 8.00 (s, 1H), 7.60 (br s, 1H), 7.49-7.41 (m, 3H), 7.38-7.34 (m, 2H), 7.33-7.29 (m, 1H), 5.61 (br d, J=10.5 Hz, 1H), 3.88 (s, 3H), 2.99-2.86 (m, 1H), 2.22 (br d, J=10.8 Hz, 2H), 2.06-1.83 (m, 3H), 1.75 (d, J=2.7 Hz, 6H), 1.72-1.69 (m, 1H), 1.45-1.31 (m, 2H); LCMS (M+H) = 533; HPLC RT = 2.783 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min); SFC RT = 7.4 min (Kolona: Chiral IB, 250 x 4.6 mm, 5µm; Mobilna faza: 80/20 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min). Enantiomer B:<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.44 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.35 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.54 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.47-7.41 (m, 3H), 7.37-7.32 (m, 2H), 7.32-7.28 (m, 1H), 5.59 (d, J=10.5 Hz, 1H), 3.88 (s, 3H), 2.99-2.89 (m, 1H), 2.21 (br d, J=12.7 Hz, 2H), 2.05-1.96 (m, 1H), 1.96-1.83 (m, 2H), 1.75 (d, J=2.6 Hz, 6H), 1.62 (br s, 1H), 1.45-1.32 (m, 2H); LCMS (M+H) = 533; HPLC RT = 2.781 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min); SFC RT = 11.0 min (Kolona: Chiral IB, 250 x 4.6 mm, 5µm; Mobilna faza: 80/20 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min).

Primeri 205 & 206

2-{5-[(S)-(4,4-Difluorocikloheksil)(fenil)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0509]

Korak 1: Metil 5-[(4,4-difluorocikloheksil)(fenil)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0510] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat, metil 3-bromo-5-[(S)-(4,4-difluorocikloheksil)(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (38.0 mg, 0.0740 mmol)

2 1

je konvertovan u jedinjenje iz naslova (19.8 mg, 50%). LCMS (M+H) = 530; HPLC RT = 3.128 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Korak 2: 2-{5-[(S)-(4,4-Difluorocikloheksil)(fenil)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0511] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za (S)-2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol, metil 5 -[(4,4-difluorocikloheksil)(fenil)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (19.8 mg, 0.0370 mmol) je konvertovan u racemski 2-{5-[(S)-(4,4-difluorocikloheksil)(fenil)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, koji je razdvojen na hiralnoj prep SFC da se dobiju enantiomer A (7.90 mg, 39%) i enantiomer B (8.20 mg, 40%). Enantiomer A:<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.44 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.36 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.54 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.47-7.41 (m, 3H), 7.37-7.33 (m, 2H), 7.32-7.29 (m, 1H), 5.59 (d, J=10.5 Hz, 1H), 3.88 (s, 3H), 2.99-2.89 (m, 1H), 2.30 (s, 3H), 2.21 (br d, J=12.2 Hz, 2H), 2.06-1.96 (m, 1H), 1.96-1.83 (m, 2H), 1.75 (d, J=2.7 Hz, 6H), 1.62 (br s, 1H), 1.45-1.33 (m, 2H); LCMS (M+H) = 530; HPLC RT = 2.785 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min); SFC RT = 7.4 min (Kolona: Chiral IB, 250 x 4.6 mm, 5µm; Mobilna faza: 80/20 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min). Enantiomer B:<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.44 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.36 (d, J=7.9 Hz, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.54 (d, J=1.7 Hz, 1H), 7.47-7.42 (m, 3H), 7.37-7.33 (m, 2H), 7.32-7.29 (m, 1H), 5.59 (d, J=10.5 Hz, 1H), 3.88 (s, 3H), 2.94 (br q, J=11.0 Hz, 1H), 2.30 (s, 3H), 2.27-2.17 (m, 2H), 2.05-1.96 (m, 1H), 1.96-1.83 (m, 2H), 1.75 (d, J=2.6 Hz, 6H), 1.64-1.59 (m, 1H), 1.44-1.32 (m, 2H); LCMS (M+H) = 530; HPLC RT = 2.786 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min); SFC RT = 11.0 min (Kolona: Chiral IB, 250 x 4.6 mm, 5µm; Mobilna faza: 80/20 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min).

Primeri 207 & 208

3-Fluoro-2-[{7-metansulfonil-9-metoksi-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-5-il}(oksan-4-il)metil]piridin

2 2

[0513] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za 5-{7-metansulfonil-9-metoksi-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol, 3-fluoro-2-({9-fluoro-7-metansulfonil-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-5-il}(oksan-4-il)metil)piridin (53.0 mg, 0.0930 mmol) je konvertovan u racemski 3-fluoro-2-[{7-metansulfonil-9-metoksi-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-5-il}(oksan-4-il)metil]piridin, koji je razdvojen na hiralnoj prep SFC da se dobiju enantiomer A (4.00 mg, 7%) i enantiomer B (4.0mg, 7%). Enantiomer A:<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.68 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.52 (br s, 1H), 8.28-8.04 (m, 1H), 7.45-7.39 (m, 1H), 7.37-7.31 (m, 2H), 5.86 (br d, J=8.7 Hz, 1H), 4.25 (s, 3H), 4.06 (s, 3H), 4.00 (br dd, J=11.7, 2.8 Hz, 1H), 3.83 (br dd, J=11.8, 3.0 Hz, 1H), 3.51 (br t, J=11.1 Hz, 2H), 3.30 (br t, J=11.6 Hz, 1H), 3.21 (br s, 3H), 1.71 (br d, J=10.4 Hz, 1H), 1.49 (qd, J=11.9, 4.0 Hz, 1H), 1.40-1.28 (m, 1H), 0.86 (br d, J=12.1 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 568; HPLC RT = 2.213 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min); SFC RT = 5.1 min (Kolona: Chiral OJ-H, 250 x 4.6 mm, 5µm; Mobilna faza: 80/20 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min). Enantiomer B:<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.68 (d, J=1.5 Hz, 1H), 8.52 (br s, 1H), 8.27-8.06 (m, 1H), 7.45-7.40 (m, 1H), 7.37-7.31 (m, 2H), 5.86 (br d, J=7.5 Hz, 1H), 4.25 (s, 3H), 4.06 (s, 3H), 4.00 (br dd, J=11.7, 3.0 Hz, 1H), 3.83 (br dd, J=11.8, 3.0 Hz, 1H), 3.51 (br t, J=11.4 Hz, 2H), 3.30 (br t, J=11.4 Hz, 1H), 3.21 (br s, 3H), 1.71 (br d, J=11.3 Hz, 1H), 1.53-1.44 (m, 1H), 1.39-1.29 (m, 1H), 0.91-0.82 (m, 1H); LCMS (M+H) = 568; HPLC RT = 2.208 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B

2

tokom 4 min; Protok: 4 mL/min); SFC RT = 6.9 min (Kolona: Chiral OJ-H, 250 x 4.6 mm, 5µm; Mobilna faza: 80/20 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min).

Primeri 209 & 210

5-{5-[(S)-(4,4-Difluorocikloheksil)(fenil)metil]-9-etoksi-7-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol

[0514]

[0515] U bočicu od 20mL koja sadrži KOtBu (72.4 mg, 0.645 mmol) u EtOH-u (3 mL) je dodat racemski 5- {5-[(4,4-difluorocikloheksil)(fenil)metil]-9-fluoro-7-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol (36.6 mg, 0.0640 mmol), i reakciona smeša je zagrevana na bloku za zagrevanje sa temperaturom od 80 °C tokom 2 h. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakcija je neutralisana sa 1M vod. limunskom kiselinom i koncentrovana da se ukloni EtOH. Voda je dodata u smešu, i dobijen beli talog je prikupljen filtracijom da se dobije racemski 5-{5-[(S)-(4,4-difluorocikloheksil)(fenil)metil]-9-etoksi-7-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol, koji je razdvojen na hiralnoj prep SFC da se dobiju enantiomer A (15.9 mg, 41%) i enantiomer B (15.6 mg, 40%). Enantiomer A:<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.64 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.62 (d, J=1.4 Hz, 1H), 7.43-7.39 (m, 2H), 7.38-7.34 (m, 2H), 7.34-7.31 (m, 2H), 5.59 (d, J=10.5 Hz, 1H), 4.55 (q, J=7.0 Hz, 2H), 3.87 (s, 3H), 3.20 (s, 3H), 2.93 (q, J=10.7 Hz, 1H), 2.24 (br d, J=11.0 Hz, 2H), 2.05-1.84 (m, 2H), 1.68 (t, J=7.0 Hz, 4H), 1.62 (br s, 1H), 1.41-1.31 (m, 1H), 1.28-1.20 (m, 1H); LCMS (M+H) = 597; HPLC RT = 2.760 min (Kolona: Chromolith ODS S54.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min); SFC RT = 7.57 min (Kolona: Chiral OD-H, 250 x 4.6 mm, 5µm; Mobilna faza: 80/20 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min).

2 4

Enantiomer B:<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.64 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.62 (d, J=1.4 Hz, 1H), 7.42-7.39 (m, 2H), 7.38-7.34 (m, 2H), 7.34-7.30 (m, 2H), 5.59 (d, J=10.5 Hz, 1H), 4.55 (q, J=7.0 Hz, 2H), 3.87 (s, 3H), 3.20 (s, 3H), 2.93 (q, J=10.8 Hz, 1H), 2.24 (br d, J=11.6 Hz, 2H), 2.05-1.82 (m, 2H), 1.74-1.61 (m, 5H), 1.42-1.31 (m, 1H), 1.28-1.20 (m, 1H); LCMS (M+H) = 597; HPLC RT = 2.765 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min); SFC RT = 8.96 min (Kolona: Chiral OD-H, 250 x 4.6 mm, 5µm; Mobilna faza: 80/20 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min).

Primeri 211 & 212

2-[(4,4-Difluorocikloheksil)({9-fluoro-7-metansulfonil-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-5-il})metil]-3-fluoropiridin

[0516]

Korak 1: 2-({3-Bromo-9-fluoro-7-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-5-il}(4,4-difluorocikloheksil)metil)-3-fluoropiridin

[0517] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za 2-({3-bromo-9-fluoro-6-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-5-il}(4,4-difluorocikloheksil)metil)-3-fluoropiridin, 3-bromo-9-fluoro-7-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol (60.0 mg, 0.175 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova i primenjen je bez prečišćavanja u sledećem koraku. LCMS (M+H) = 570; HPLC RT = 3.011 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min). Korak 2: 2-[(4,4-Difluorocikloheksil)({9-fluoro-7-metansulfonil-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-5-il})metil]-3-fluoropiridin

2

[0518] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za 5-{5-[(4,4-difluorocikloheksil)(fenil)metil]-7-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol, 2-({3-bromo-9-fluoro-7-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-5-il}(4,4-difluorocikloheksil)metil)-3-fluoropiridin je konvertovan u racemski 2-[(4,4-difluorocikloheksil)({9-fluoro-7-metansulfonil-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-5-il})metil]-3-fluoropiridin (75.1 mg, 72% preko 2 koraka). Hiralno razdvajanje je izvedeno na racemskom jedinjenju (37.0 mg, 0.0630 mmol) primenom hiralne prep SFC da se dobiju enantiomer A (17.4 mg, 46%) i enantiomer B (17.4 mg, 46%). Enantiomer A:<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.70 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.59-8.35 (m, 2H), 7.61 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.48-7.41 (m, 1H), 7.39-7.33 (m, 1H), 5.88 (br d, J=10.5 Hz, 1H), 4.08 (s, 3H), 3.38 (br s, 1H), 3.21 (s, 3H), 2.16 (br s, 1H), 1.97 (br d, J=3.9 Hz, 1H), 1.88 (br d, J=14.7 Hz, 2H), 1.72-1.61 (m, 1H), 1.49 (br d, J=11.4 Hz, 1H), 1.42-1.27 (m, 2H), 1.12 (br d, J=13.0 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 590; HPLC RT = 2.608 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min); SFC RT = 7.7 min (Kolona: Chiral AS, 250 x 4.6 mm, 5µm; Mobilna faza: 90/10 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min). Enantiomer B:<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.70 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.60-8.33 (m, 2H), 7.61 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.49-7.41 (m, 1H), 7.40-7.34 (m, 1H), 5.87 (br d, J=10.6 Hz, 1H), 4.08 (s, 3H), 3.38 (br s, 1H), 3.21 (s, 3H), 2.23-2.11 (m, 1H), 2.05-1.80 (m, 3H), 1.72-1.61 (m, 1H), 1.52-1.43 (m, 1H), 1.42-1.24 (m, 2H), 1.12 (br d, J=12.2 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 590; HPLC RT = 2.606 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min); SFC RT = 9.6 min (Kolona: Chiral AS, 250 x 4.6 mm, 5µm; Mobilna faza: 90/10 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min).

Primeri 213 &214

2-[(4,4-Difluorocikloheksil)({7-metansulfonil-9-metoksi-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-5-il})metil]-3-fluoropiridin

[0519]

2

[0520] Prateći procedure analogne onima koje su opisane za 5-{7-metansulfonil-9-metoksi-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol, racemski 2-[(4,4-difluorocikloheksil)({9-fluoro-7-metansulfonil-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-5-il})metil]-3-fluoropiridin (37.0 mg, 0.0630 mmol) je konvertovan u racemski 2-[(4,4-difluorocikloheksil)({7-metansulfonil-9-metoksi-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-5-il})metil]-3-fluoropiridin, koji je razdvojen na hiralnoj prep SFC da se dobiju enantiomer A (15.5 mg, 40%) i enantiomer B (17.0 mg, 44%). Enantiomer A:<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.69 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.53 (br s, 1H), 8.19 (br s, 1H), 7.46-7.39 (m, 1H), 7.38-7.31 (m, 2H), 5.86 (br d, J=9.9 Hz, 1H), 4.25 (s, 3H), 4.05 (s, 3H), 3.37 (br s, 1H), 3.21 (s, 3H), 2.14 (br s, 1H), 2.02-1.79 (m, 3H), 1.70-1.59 (m, 1H), 1.51-1.44 (m, 1H), 1.39-1.25 (m, 2H), 1.07 (br d, J=11.2 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 602; HPLC RT = 2.575 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min); SFC RT = 7.8 min (Kolona: Chiral AS, 250 x 4.6 mm, 5µm; Mobilna faza: 85/15 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min). Enantiomer B:<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.69 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.53 (br s, 1H), 8.19 (br s, 1H), 7.46-7.39 (m, 1H), 7.38-7.32 (m, 2H), 5.86 (br d, J=11.1 Hz, 1H), 4.25 (s, 3H), 4.05 (s, 3H), 3.38 (br s, 1H), 3.25-3.17 (m, 3H), 2.21-2.10 (m, 1H), 2.03-1.80 (m, 3H), 1.71-1.60 (m, 1H), 1.48 (br d, J=14.2 Hz, 1H), 1.39-1.23 (m, 2H), 1.08 (br d, J=11.7 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 602; HPLC RT = 2.582 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min); SFC RT = 10.0 min (Kolona: Chiral AS, 250 x 4.6 mm, 5µm; Mobilna faza: 85/15 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min).

Primer 216

2

N-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-9-il]metansulfonamid

[0521]

[0522] U promešani rastvor 5-{9-fluoro-6-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazola (15.0 mg, 0.0280 mmol) i metansulfonamida (15 mg, 0.158 mmol) u NMP-u (0.15 mL) je dodat t-BuOK (11.0 mg, 0.0980 mmol). Ova smeša je zagrevana na 65 °C tokom 24 h i ohlađena na sobnu temperaturu. Smeša je razblažena sa 10% LiCl rastvorom i ekstrahovana sa EtOAc-om (2X). Organske supstance su osušene preko MgSO4, filtrirane, i koncentrovane. Dobijeni ostatak je prečišćen putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: Waters XBridge Phenyl, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 0-100% B tokom 20 min; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.6 mg, 9%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.58 (br s, 1H), 8.27 (br s, 1H), 7.80 (br s, 1H), 7.55 (br d, J=7.7 Hz, 2H), 7.43 (br d, J=7.4 Hz, 1H), 7.36 - 7.27 (m, 3H), 7.25 - 7.20 (m, 1H), 6.71 (br d, J=10.4 Hz, 1H), 3.84 (br d, J=8.8 Hz, 1H), 3.73 (s, 3H), 3.62 (br s, 1H), 3.58 (br s, 3H), 3.46 (br t, J=11.3 Hz, 1H), 3.27 (br d, J=10.4 Hz, 1H), 3.18 (br t, J=11.8 Hz, 1H), 2.54 (s, 3H), 2.00 (s, 3H), 1.93 (br s, 1H), 1.66 - 1.50 (m, 2H), 0.44 (br d, J=11.8 Hz, 1H). LCMS: RT= 1.64 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 609.4; LCMS: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1.11 mL/min. HPLC čistoća na 220 nm: 100 %. Primeri 217-219

[0523] Jedinjenja u Tabeli 7 su pripremljena u skladu sa procedurom koja je iznad opisana (Primer 216):

2

Tabela 7

HPLC uslovi za Tabelu 7: Metoda B: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7 µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1.11 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm.

Primer 221

5-{9-Fluoro-6-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol

[0524]

[0525] U bočici od 4 mL, (S)-3-bromo-9-fluoro-6-(metilsulfonil)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol (150 mg, 0.290 mmol), 4-(<2>H3)metil-5-(tributilstanil)-1-[(trimetilsilil)metil]-1H-1,2,3-triazol (241 mg, 0.522 mmol), i tetrakis(trifenilfosfin) paladijum (0) (40.2 mg, 0.0350 mmol) su rastvoreni u DMF-u (1.00 mL) da se dobije narandžasta suspenzija. Bakar (I) jodid (8.28 mg, 0.0430 mmol) i Et3N (0.0890 mL, 0.638 mmol) su dodati. Reakciona smeša je pročišćena sa azotom tokom 5 min i zatim zagrevana na

2

95 °C tokom 40 min. Smeša je ohlađena do sobne temperature i kombinovana sa 1M nBu4NF u THF-u (1.16 mL, 1.16 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 min, i razblažena sa EtOAc-om. Smeša je oprana sa 10% vod. LiCl rastvorom i slanim rastvorom. Organski sloj je osušen (MgSO4), filtriran, i koncentrovan da se dobije sirova smeša. Ova smeša je prečišćena pomoću silika gel kolonske hromatografije (Teledyne ISCO CombiFlash 0% do 100% Rastvarač A/B= heksan/EtOAc, RediSep SiO280 g, detektovanje na 254 nM, i praćenje na 220 nM). Koncentrovanje prikladnih frakcija je obezbedilo 5-{9-fluoro-6-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol (156 mg, 65%).1H NMR<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.68 (s, 1H), 8.38 (dd, J=8.8, 5.0 Hz, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.62 (br d, J=7.7 Hz, 2H), 7.41 (t, J=8.9 Hz, 1H), 7.37-7.31 (m, 2H), 7.29-7.23 (m, 1H), 6.79 (br d, J=10.4 Hz, 1H), 3.93-3.82 (m, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.71 (s, 3H), 3.65 (br d, J=8.8 Hz, 1H), 3.54-3.46 (m, 1H), 3.40 (br s, 1H), 3.24-3.13 (m, 1H), 1.96 (br d, J=13.1 Hz, 1H), 1.77-1.56 (m, 2H), 0.46 (br d, J=12.5 Hz, 1H).). LCMS: RT = 1.572 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 537.10 ; LCMS: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1.11 mL/min. HPLC čistoća na 220 nm: 99 %. Primer 222

N-{6-Metansulfonil-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-9-il}ciklopropansulfonamid

[0526]

[0527] U promešani rastvor 5-{9-fluoro-6-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazola (25.0 mg, 0.0500 mmol) i ciklopropansulfonamida (22.6 mg, 0.190 mmol) u NMP-u (0.25 mL) je dodat t-BuOK (18.3 mg, 0.160 mmol). Ova smeša je zagrevana na 65 °C tokom 17 h pre nego što se ohladi na sobnu temperaturu. Smeša je potom razblažena sa 10% vod. LiCl rastvorom i ekstrahovana sa

21

EtOAc-om. Kombinovani EtOAc ekstrakti su osušeni (MgSO4), filtrirani, i koncentrovani da se dobije sirova smeša. Ona je prečišćena putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: Waters XBridge Phenyl, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 15-70% B tokom 20 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da se dobije N-{6-metansulfonil-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-9-il}ciklopropansulfonamid (14.7 mg, 50%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.70 (s, 1H), 8.34 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.95-7.91 (m, 1H), 7.63 (br d, J=7.7 Hz, 2H), 7.53 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.37-7.31 (m, 2H), 7.30-7.22 (m, 1H), 6.76 (s, 1H), 3.88 (br d, J=16.2 Hz, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.68 (br s, 1H), 3.64 (s, 3H), 3.51 (br d, J=12.1 Hz, 1H), 3.43 (br d, J=10.1 Hz, 1H), 3.25-3.20 (m, 1H), 3.15 (br d, J=4.4 Hz, 1H), 2.54 (s, 1H), 1.95 (br d, J=12.5 Hz, 1H), 1.64 (br d, J=8.4 Hz, 2H), 1.21 (br s, 2H), 1.10 (br d, J=8.1 Hz, 2H), 0.51 (br d, J=12.1 Hz, 1H). LCMS: RT = 1.792 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 638.15; LCMS: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1.11 mL/min. HPLC čistoća na 220 nm: 98 %.

Primer 223

[0528] Jedinjenje u Tabeli 8 je pripremljeno u skladu sa procedurom koja je opisana iznad (Primer 222):

Tabela 8

HPLC uslovi za Tabelu 8: Metoda B: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7 µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1.11 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm.

Primer 225

4-({6-Metansulfonil-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-9-il}amino)butanska kiselina

[0529]

[0530] U promešani rastvor 5-{9-fluoro-6-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazola (20.0 mg, 0.0400 mmol) i pirolidin-2-ona (0.100 mL, 0.0400 mmol) u NMP-u (0.10 mL) je dodat t-BuOK (20.0 mg, 0.180 mmol). Ova smeša je zagrevana na 95 °C tokom 2 h i ohlađena na sobnu temperaturu. Smeša je razblažena sa MeOH-om i prečišćena putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: Waters XBridge Phenyl, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 15-70% B tokom 20 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da se dobije 4-({6-metansulfonil-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-9-il}amino)butanska kiselina (5.80 mg, 25%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.55 (s, 1H), 8.20 (br s, 1H), 8.10 (br d, J=8.8 Hz, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.57 (br d, J=7.4 Hz, 2H), 7.37-7.27 (m, 2H), 7.27-7.22 (m, 1H), 6.77-6.69 (m, 2H), 3.87 (br d, J=9.8 Hz, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.67 (br d, J=10.4 Hz, 1H), 3.52 (br s, 1H), 3.46 (s, 1H), 3.36 (br s, 1H), 3.20 (br t, J=11.8 Hz, 1H), 2.54 (s, 5H), 2.40 (br t, J=7.1 Hz, 2H), 1.98-1.88 (m, 3H), 1.72-1.53 (m, 2H), 0.53 (br d, J=11.8 Hz, 1H). LCMS: RT = 1.328 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 620.10. LCMS: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1.11 mL/min. HPLC Čistoća na 220 nm: 98 %.

Primer 226

N-(2-Amino-2-metilpropil)-6-metansulfonil-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-9-amin

[0531]

[0532] U promešani rastvor 5-{9-fluoro-6-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazola (22.0 mg, 0.0410 mmol) i 3,3-dimetil-1,2,5-tiadiazolidin-1,1-diona (44.1 mg, 0.290 mmol) u NMP-u (0.10 mL) je dodat t-BuOK (32.0 mg, 0.280 mmol). Ova smeša je postepeno zagrevana do 95 °C tokom 3 h i ohlađena na sobnu temperaturu. Smeša je razblažena sa MeOH-om i prečišćena putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: Waters XBridge Phenyl, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 15-70% B tokom 20 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da se dobije N-(2-amino-2-metilpropil)-6-metansulfonil-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-9-amin (8.60 mg, 35%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.51 (s, 1H), 8.42 (br t, J=6.1 Hz, 1H), 8.04 (d, J=9.1 Hz, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.54 (br d, J=7.7 Hz, 2H), 7.35-7.29 (m, 2H), 7.26-7.19 (m, 1H), 6.75 (d, J=9.1 Hz,

21

1H), 6.70 (br d, J=10.1 Hz, 1H), 3.85 (br d, J=14.5 Hz, 1H), 3.71 (br s, 2H), 3.65 (br s, 3H), 3.60 (br d, J=6.7 Hz, 1H), 3.51-3.45 (m, 1H), 3.42 (s, 2H), 3.30 (br d, J=9.4 Hz, 1H), 3.19 (br t, J=11.8 Hz, 1H), 2.54 (s, 3H), 1.95 (br d, J=12.1 Hz, 1H), 1.72-1.63 (m, 1H), 1.60 (br d, J=12.1 Hz, 1H), 1.27 (s, 6H), 0.51 (br d, J=12.5 Hz, 1H). LCMS: RT = 1.299 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 605.15; LCMS: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1.11 mL/min. HPLC Čistoća na 220 nm: 100 %.

Primer 227

6-Metansulfonil-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-9-amin

[0533]

[0534] 5-{9-Fluoro-6-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol (8.00 mg, 0.0200 mmol) je pomešan sa 0.5 M NH3u dioksanu (0.200 mL, 0.100 mmol). Ova smeša je zagrevana do 95 °C tokom 7 h i ohlađena na sobnu temperaturu. U ovu smešu je zatim dodat 0.5 M NH3u dioksanu (0.500 mL, 0.250 mmol) i zagrevana je na 125 °C tokom 14 h u zatvorenoj bočici, pod pritiskom. Smeša je ohlađena do sobne temperature i razblažena sa MeOH-om. Ona je prečišćena putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: Waters XBridge Phenyl, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 15-70% B tokom 20 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da se dobije 6-metansulfonil-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-9-amin (4.60 mg, 57%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.52 (s, 1H), 8.01 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.57 (br d, J=7.7 Hz, 2H), 7.50 (s, 2H), 7.35-7.28 (m, 2H), 7.27-7.21 (m, 1H), 6.73 (br d, J=10.1 Hz, 1H), 6.64 (s, 1H), 3.87 (br d, J=9.1 Hz, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.68 (br d, J=8.4 Hz, 1H), 3.55-3.47 (m, 1H), 3.46-3.41 (m, 1H), 3.21 (br t, J=11.6 Hz, 1H), 2.54 (s, 3H), 1.94 (br d, J=13.5 Hz, 1H), 1.73-1.56 (m, 2H), 0.55 (br d, J=12.5 Hz, 1H). LCMS: RT = 1.586 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 534.10, LCMS: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1.11 mL/min. HPLC Čistoća na 220 nm: 99 %. Primer 228

2,2,2-Trifluoro-N-{6-metansulfonil-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-9-il}etan-1-sulfonamid

[0535]

[0536] U promešani rastvor 6-metansulfonil-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-9-amina (41.2 mg, 0.0800 mmol) u DCE-u (1.00 mL) je dodat DIEA (0.200 mL, 1.15 mmol) i 2,2,2-trifluoroetansulfonil hlorid (0.0500 mL, 0.450 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 45 min i razblažena sa EtOAc-om. Dobijena smeša je oprana sa zasićen vod. NaHCO3rastvorom i slanim rastvorom. EtOAc-ni sloj je osušen (MgSO4), filtriran, i koncentrovan. Sirov proizvod je prečišćen putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: Waters XBridge Phenyl, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 15-70% B tokom 20 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da se dobije 2,2,2-trifluoro-N-{6-metansulfonil-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-9-il}etan-1-sulfonamid (2.19 mg, 3%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.72 (s, 1H), 8.35 (br d, J=8.8 Hz, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.63 (br d, J=7.7 Hz, 2H), 7.53 (br d, J=8.7 Hz, 1H), 7.34 (br t, J=7.4

21

Hz, 2H), 7.29-7.22 (m, 1H), 6.77 (br d, J=10.4 Hz, 1H), 5.14 (br d, J=9.5 Hz, 2H), 3.87 (br d, J=6.6 Hz, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.75 (br s, 1H), 3.66-3.61 (m, 1H), 3.50 (br t, J=10.6 Hz, 1H), 3.40 (br d, J=18.8 Hz, 1H), 3.21 (br t, J=11.6 Hz, 1H), 2.54 (s, 3H), 1.94 (br d, J=11.9 Hz, 1H), 1.70-1.58 (m, 2H), 0.50 (br d, J=12.1 Hz, 1H). LCMS: RT = 1.791 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 680.10. LCMS: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1.11 mL/min. HPLC Čistoća na 220 nm: 99 %.

Primer 229

5-[9-(2,2-Difluoroetoksi)-6-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il]-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol

[0537]

[0538] U promešani rastvor 5-{9-fluoro-6-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazola (28.0 mg, 0.0500 mmol) i 2,2-difluoroetanola (37.0 mg, 0.450 mmol) u NMP-u (0.30 mL) je dodat t-BuOK (112 mg, 0.210 mmol). Ova smeša je zagrevana na 65 °C tokom 5 h i ohlađena na sobnu temperaturu. Smeša je razblažena sa MeOH-om i prečišćena putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: Waters XBridge Phenyl, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 15-70% B tokom 20 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da se dobije 5-[9-(2,2-difluoroetoksi)-6-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il]-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol (6.50 mg. 20%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.61 (s, 1H), 8.29 (d, J=9.1 Hz, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.56 (br d, J=7.7 Hz, 2H), 7.38-7.29 (m, 2H), 7.28-7.22 (m, 1H), 7.20 (d, J=9.1 Hz, 1H), 6.75 (br d, J=10.1 Hz, 1H), 6.69-6.39 (m, 1H), 4.78-4.67 (m, 2H),

21

3.85 (br d, J=9.1 Hz, 1H), 3.74 (s, 3H), 3.62 (br s, 1H), 3.49 (br t, J=11.4 Hz, 1H), 3.34 (br d, J=10.8 Hz, 1H), 3.18 (br t, J=11.8 Hz, 1H), 2.54 (s, 3H), 1.96 (br d, J=12.5 Hz, 1H), 1.77-1.66 (m, 1H), 1.63-1.51 (m, 1H), 0.42 (br d, J=12.1 Hz, 1H) LCMS: RT = 1.594 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 599.05, LCMS: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1.11 mL/min. HPLC Čistoća na 220 nm: 95 %.

Primer 230

5-[9-(2,2-Difluoropropoksi)-6-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il]-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol

[0539]

[0540] U promešani rastvor 5-{9-fluoro-6-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazola (31.0 mg, 0.0600 mmol) i 2,2-difluoropropan-2-ola (27.8 mg, 0.290 mmol) u NMP-u (0.30 mL) je dodat t-BuOK (25.9 mg, 0.230 mmol). Ova smeša je zagrevana na 65 °C tokom 1 h i ohlađena na sobnu temperaturu. Smeša je razblažena sa MeOH-om i prečišćena putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: Waters XBridge Phenyl, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 15-70% B tokom 20 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da se dobije 5-[9-(2,2-difluoropropoksi)-6-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il]-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol (13.8 mg, 37%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.60 (s, 1H), 8.29 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.56 (br d, J=7.7 Hz, 2H), 7.36-7.29 (m, 2H), 7.28-7.22 (m, 1H), 7.18 (d, J=8.9 Hz, 1H), 6.74 (s, 1H), 4.67 (br t, J=12.0 Hz, 2H), 3.86 (br d, J=15.1 Hz, 1H), 3.73 (s, 3H), 3.60-3.55 (m, 1H), 3.49 (br t, J=11.5 Hz, 1H), 3.33 (br d,

21

J=11.8 Hz, 1H), 3.23-3.16 (m, 1H), 2.54 (s, 3H), 1.95 (br t, J=19.4 Hz, 3H), 1.69 (br d, J=10.8 Hz, 1H), 1.62-1.50 (m, 1H), 1.22 (br d, J=8.8 Hz, 1H), 0.43 (br d, J=12.0 Hz, 1H). LCMS: RT = 1.731 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 613.15, LCMS: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1.11 mL/min. HPLC Čistoća na 220 nm: 95 %.

Primer 231

5-{9-Fluoro-5-[(S)-(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-6-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol

[0541]

Korak 1: (S)-3-Bromo-9-fluoro-5-((2-fluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-6-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indol

[0542] U promešani rastvor 3-bromo-9-fluoro-6-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indola (100 mg, 0.290 mmol) i (R)-(2-fluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanola (123 mg, 0.580 mmol) u toluenu (2.0 mL) je dodat trifenilfosfin (153 mg, 0.580 mmol) i DIAD (0.110 mL, 0.580 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h i potom je direktno prečišćena pomoću silika gel kolonske hromatografije (Teledyne ISCO CombiFlash 0% do 100% Rastvarač A/B= heksan/EtOAc, RediSep SiO224 g, detektovanje na 254 nM, i praćenje na 220 nM). Koncentrovanje prikladnih frakcija je obezbedilo (S)-3-bromo-9-fluoro-5-[(S)-2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-6-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol (156 mg) u kvantitativnom prinosu.<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.86 (s, 1H), 8.64 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.42 (dd, J=8.9, 5.4 Hz, 1H), 8.17-8.12 (m, 1H), 8.11 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.40 (t, J=8.9 Hz, 1H), 7.37-7.31 (m, 1H), 7.07-6.99 (m, 1H), 6.96 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.77 (dt, J=12.3, 6.2 Hz, 1H), 3.89 (br d, J=10.5 Hz, 1H), 3.73 (br dd, J=11.0, 2.9 Hz, 1H), 3.64-3.58 (m, 1H), 3.56 (s, 3H), 3.40-3.33 (m, 1H), 1.93-1.66 (m, 3H), 0.70 (br d, J=11.9 Hz, 1H). HPLC: RT=2.771 min (Chromolith ODS 4.6 x 50 mm (4 min grad) eluiranje sa 10-90%

21

vodenim MeOH tokom 4 min koji sadrži 0.1 % TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm); MS (ES): m/z= 535, 537 (Br šablon) [M+H]<+>.

Korak 2: 5-{9-Fluoro-5-[(S)-(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-6-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol

[0543] U promešani rastvor (S)-3-bromo-9-fluoro-5-((2-fluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-6-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indola (216 mg, 0.400 mmol) i 4-(<2>H3)metil-1-metil-5-(tributilstanil)-1-H-1,2,3-triazola (283 mg, 0.730 mmol) u DMF-u (4.0 mL) je dodat Et3N (0.120 mL, 0.880 mmol), i smeša je pročišćena sa azotom. Tokom pročišćavanja, bakar (I) jodid (11.5 mg, 0.0600 mmol) i tetrakis(trifenilfosfin) paladijum (0) (55.9 mg, 0.0500 mmol) su dodati. Reakciona smeša je pročišćena sa azotom tokom dodatnih 5 min i zatim zagrevana na 95 °C tokom 40 min. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu, razblažena sa MeOH-om, i prečišćena putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: Waters XBridge Phenyl, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 15-70% B tokom 20 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da se dobije 5-{9-fluoro-5-[(S)-(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-6-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol (9.50 mg, 4%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.63 (s, 1H), 8.42 (dd, J=8.8, 5.3 Hz, 1H), 8.14-8.07 (m, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.41 (t, J=8.8 Hz, 1H), 7.36-7.29 (m, 2H), 7.05-6.99 (m, 1H), 6.96 (br d, J=10.4 Hz, 1H), 3.88 (br d, J=9.8 Hz, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.71 (br s, 1H), 3.57 (br s, 2H), 3.27 (br t, J=11.3 Hz, 1H), 2.54 (s, 3H), 1.95-1.84 (m, 1H), 1.83-1.69 (m, 2H), 0.74 (br d, J=12.3 Hz, 1H). LCMS: RT = 1.577 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 555.15. LCMS: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1.11 mL/min. HPLC Čistoća na 220 nm: 97 %. LCMS: RT = 1.577 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 555.15.

Primer 233

5-{9-Fluoro-5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-6-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol

[0544]

21

Korak 1: 3-Bromo-9-fluoro-5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-6-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol

[0545] U promešani rastvor 3-bromo-9-fluoro-6-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indola (100 mg, 0.290 mmol) i (R)-(4-fluorofenil)(tetrahidor-2H-piran-4-il)metanola (123 mg, 0.580 mmol) u toluenu (2.0 mL) je dodat trifenilfosfin (153 mg, 0.580 mmol) i DIAD (0.110 mL, 0.580 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h i potom je direktno prečišćena pomoću silika gel kolonske hromatografije (Teledyne ISCO CombiFlash 0% do 100% Rastvarač A/B= heksan/EtOAc, RediSep SiO224 g, detektovanje na 254 nM, i praćenje na 220 nM). Koncentrovanje prikladnih frakcija je obezbedilo 3-bromo-9-fluoro-5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-6-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol (156 mg) u kvantitativnom prinosu.<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.86 (s, 1H), 8.66 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.36 (dd, J=8.9, 5.3 Hz, 1H), 7.97 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.71 (dd, J=8.6, 5.4 Hz, 1H), 7.39 (t, J=8.9 Hz, 1H), 7.19 (t, J=8.9 Hz, 1H), 6.71 (d, J=10.4 Hz, 1H), 4.77 (dt, J=12.4, 6.2 Hz, 1H), 3.86 (br dd, J=11.0, 2.7 Hz, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.63 (br dd, J=11.1, 3.2 Hz, 1H), 3.55 (br t, J=11.0 Hz, 1H), 3.35 (br s, 1H), 3.26-3.15 (m, 1H), 1.91 (br d, J=13.4 Hz, 1H), 1.71-1.47 (m, 1H), 1.23 (br d, J=3.4 Hz, 1H), 0.36 (br d, J=11.9 Hz, 1H). HPLC: RT=2.935 min (Chromolith ODS 4.6 x 50 mm (4 min grad) eluiranje sa 10-90% vodenim MeOH-om tokom 4 min koji sadrži 0.1 % TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm); MS (ES): m/z= 535, 537 (Br šablon) [M+H]<+>.

Korak 2: 5-{9-Fluoro-5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-6-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol

[0546] U promešani rastvor 3-bromo-9-fluoro-5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-6-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indola (233 mg, 0.430 mmol) u DMF-u (4.0 mL) je dodat Et3N (0.140 mL, 0.960 mmol), i smeša je pročišćena sa azotom. Tokom pročišćavanja, bakar (I) jodid (12.4 mg, 0.0700 mmol) i tetrakis(trifenilfosfin) paladijum (0) (60.3 mg, 0.0500 mmol) su dodati. Reakciona smeša je pročišćena sa azotom tokom dodatnih 5 min i zatim zagrejana na 95 °C tokom 15 h. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu, razblažena sa

22

MeOH-om, i prečišćena putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: Waters XBridge Phenyl, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 15-70% B tokom 20 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da se dobije 5-{9-fluoro-5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-6-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol (50.3 mg, 21%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.68 (s, 1H), 8.37 (br dd, J=8.6, 5.0 Hz, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.70-7.64 (m, 2H), 7.40 (br t, J=8.7 Hz, 1H), 7.17 (br t, J=8.6 Hz, 2H), 6.75 (br d, J=10.2 Hz, 1H), 3.86 (br d, J=9.5 Hz, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.64 (br d, J=8.8 Hz, 1H), 3.53-3.51 (m, 1H), 3.37 (br s, 1H), 3.18 (br t, J=11.4 Hz, 1H), 2.54 (s, 3H), 1.90 (br s, 1H), 1.69-1.54 (m, 2H), 0.46 (br d, J=12.0 Hz, 1H). LCMS: RT = 1.604 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 555.15, LCMS: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1.11 mL/min. HPLC Čistoća na 220 nm: 99 %.

Primeri 235 & 236

3-Fluoro-2-({9-fluoro-6-metansulfonil-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-5-il}(oksan-4-il)metil)piridin

[0547]

Korak 1: 5-(9-Fluoro-6-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il)-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-trizol

[0548] U promešani rastvor 3-bromo-9-fluoro-6-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indola (50.0 mg, 0.150 mmol) i 4-(<2>H3)metil-1-metil-5-(tributilstanil)-1-H-1,2,3-triazola (102 mg, 0.260 mmol) u DMF-u (1.00 mL) je dodat Et3N (0.0500 mL, 0.320 mmol). Tokom pročišćavanja sa azotom, smeša je kombinovana sa bakar (I) jodidom (4.16 mg, 0.0200 mmol) i tetrakis(trifenilfosfin) paladijumom (0) (20.2 mg, 0.0200 mmol). Smeša je zagrevana na 95 °C tokom 7 h. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu. U ovu ohlađenu smešu je dodat 4-(<2>H3)metil-1-metil-5-(tributilstanil)-1-H-1,2,3-triazol (102 mg, 0.260 mmol), Et3N (0.0500 mL, 0.320 mmol), bakar (I) jodid (4.16 mg, 0.0200 mmol) i tetrakis(trifenilfosfin) paladijum (0) (20.2 mg, 0.0200 mmol) pod azotom. Smeša je potom zagrevana na 95 °C tokom 14 h i ohlađena na sobnu temperaturu. Smeša je razblažena sa 10% vod. LiCl rastvorom i ekstrahovana sa EtOAc-om. Kombinovani EtOAc-ni ekstrakti su oprani sa slanim rastvorom, osušeni (MgSO4), filtrirani, i koncentrovani da se dobije sirova smeša. Sirov proizvod je prečišćen pomoću silika gel kolonske hromatografije (Teledyne ISCO CombiFlash 0% do 100% Rastvarač A/B=DCM/10%MeOH u DCM-u, RediSep SiO224 g, detektovanje na 254 nM, i praćenje na 220 nM). Koncentrovanje prikladnih frakcija je obezbedilo 5-(9-fluoro-6-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il)-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-trizol (25.0 mg, 47%).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 10.99 (br s, 1H), 8.64 (s, 1H), 8.08 (dd, J=8.6, 4.6 Hz, 1H), 7.98 (d, J=1.6 Hz, 1H), 7.20 (t, J=8.9 Hz, 1H), 4.05 (s, 3H), 3.25 (s, 3H), HPLC: RT=0.65 min (Chromolith ODS 4.6 x 50 mm (4 min grad) eluiranje sa 10-90% vodenim MeOH-om tokom 4 min koji sadrži 0.1 % TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm); MS (ES): m/z= 363.1 [M+H]<+>.

Korak 2: 3-Fluoro-2-({9-fluoro-6-metansulfonil-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-5-il}(oksan-4-il)metil)piridin

[0549] U promešani rastvor 5-(9-fluoro-6-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il)-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-trizola 1 (25.0 mg, 0.0700 mmol) i (3-fluoropiridin-2-il)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanola (29.1 mg, 0.140 mmol) u toluenu (0.5 mL) je dodat trifenilfosfin (36.2 mg, 0.140 mmol) i DIAD (0.0270 mL, 0.140 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi praćena je pomoću LCMS dok se reakcija ne završi. Reakciona smeša je potom direktno prečišćena pomoću silika gel kolonske hromatografije (Teledyne ISCO CombiFlash 0% do 100% Rastvarač A/B=DCM/EtOAc, RediSep SiO212 g, detektovanje na 254 nM, i praćenje na 220 nM). Koncentrovanje prikladnih frakcija je obezbedilo racemski 3-fluoro-2-({9-fluoro-6-metansulfonil-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-5-il}(oksan-4-il)metil)piridin (14.0 mg). Ova racemska smeša je izdvojena hiralnom prep SFC (Berger SFC MGII, Kolona: Chiral OD-H 25 X 3 cm ID, 5µm Brzina protoka:85.0 mL/min. Mobilna faza:70/30 CO2/MeOH Talasna dužina detektora: 220 nm) da se dobiju Enantiomer A (5.20 mg, 14%) i Enantiomer B (4.00 mg, 10%). Enantiomer A:<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.64 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.49 (dt, J=4.2, 1.6 Hz, 1H), 8.45 (dd, J=8.9, 5.4 Hz, 1H), 8.12 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.42-7.33 (m, 2H), 7.30-7.29 (m, 1H), 7.25-7.18 (m, 1H), 4.06-3.98 (m, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.83 (br dd, J=11.6, 3.4 Hz, 1H), 3.48 (td, J=11.4, 3.1 Hz, 1H), 3.42 (s, 3H), 3.23-3.22 (m, 1H), 3.22 (td, J=11.9, 2.0 Hz, 1H), 1.96-1.88 (m, 1H), 1.84-1.74 (m, 2H), 0.56 (br d, J=11.4 Hz, 1H). LCMS (M+H) = 556.2; SFC RT = 6.457 min (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 70/30 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min); Enantiomer B:<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.64 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.49 (dt, J=4.2, 1.6 Hz, 1H), 8.45 (dd, J=8.9, 5.4 Hz, 1H), 8.12 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.42-7.33 (m, 2H), 7.30-7.29 (m, 1H), 7.25-7.18 (m, 1H), 4.06-3.98 (m, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.83 (br dd, J=11.6, 3.4 Hz, 1H), 3.48 (td, J=11.4, 3.1 Hz, 1H), 3.42 (s, 3H), 3.23-3.22 (m, 1H), 3.22 (td, J=11.9, 2.0 Hz, 1H), 1.96-1.88 (m, 1H), 1.84-1.74 (m, 2H), 0.56 (br d, J=11.4 Hz, 1H) LCMS (M+H) = 556.2; SFC RT = 8.286 min (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 70/30 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min).

Primeri 239 & 240

2-[(4,4-Difluorocikloheksil)({7-metansulfonil-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-5-il})metil]-3-fluoropiridin

[0550]

Korak 1: 4,4-Difluorocikloheksil)(3-fluoropiridin-2-il)metanon

[0551] U promešani rastvor 2-bromo-3-fluoropiridina (2.00 g, 11.4 mmol) u THF-u (20 mL) pod azotom u kupatilu sa acetonom-suvim ledom je dodavan nBuLi (2.5M u heksanu, 5.00 mL, 12.5 mmol) polako tokom 15 min preko zida reakcione posude. Smeša je mešana na -78 °C pod azotom tokom 95 min. Tada, rastvor 4,4-difluoro-N-metoksi-N-metilcikloheksankarboksamida (2.35 g, 11.4 mmol) u THF-u (4 mL) je dodavan tokom 5 min. Smeša je mešana na -78 °C tokom 10 min i na sobnoj temperaturi tokom 15 min. Smeša je kvenčovana sa zasićen vod. NH4Cl rastvorom i ekstrahovana sa EtOAc-om. EtOAc-ni ekstrakt je opran sa slanim rastvorom, osušen (MgSO4), filtriran, i koncentrovan. Sirova

22

smeša je prečišćena pomoću silika gel kolonske hromatografije (Teledyne ISCO CombiFlash 0% do 30% Rastvarač A/B=DCM/EtOAc, RediSep SiO240 g, detektovanje na 254 nM, i praćenje na 220 nM). Koncentrovanje prikladnih frakcija je obezbedilo 4,4-difluorocikloheksil)(3-fluoropiridin-2-il)metanon (722 mg, 2.97 mmol, 26%).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.48 (dt, J=4.1, 1.5 Hz, 1H), 7.59-7.42 (m, 2H), 3.83-3.72 (m, 1H), 2.27-2.10 (m, 2H), 2.00 (br dd, J=7.2, 3.1 Hz, 2H), 1.92-1.78 (m, 4H). HPLC: RT=1.937 min (Chromolith ODS 4.6 x 50 mm (4 min grad) eluiranje sa 10-90% vodenim MeOH-om tokom 4 min koji sadrži 0.1 % TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm); MS (ES): m/z= 244.1 [M+H]<+>.

Korak 2: (4,4-Difluorocikloheksil)(fenil)metanol

[0552] U promešani rastvor (4,4-difluorocikloheksil)(3-fluoropiridin-2-il)metanona (0.920 g, 3.78 mmol) u MeOH-u (10.0 mL) na 0 °C je dodat NaBH4(0.215 g, 5.67 mmol) u delovima tokom 5 min. Smeša je mešana u ledenom vodenom tokom 20 min i kvenčovana sa vodom. Dobijena smeša je ekstrahovana sa EtOAc-om. Kombinovani EtOAc-ni ekstrakti su oprani sa zasićenim vod. NaHCO3rastvorom i slanim rastvorom. Organski sloj je osušen (MgSO4), filtriran, i koncentrovan da se dobije (4,4-difluorocikloheksil)(fenil)metanol (0.860 g, 93%),<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.42 (dt, J=4.6, 1.5 Hz, 1H), 7.68 (ddd, J=10.4, 8.4, 1.3 Hz, 1H), 7.40 (dt, J=8.4, 4.3 Hz, 1H), 5.30 (d, J=6.4 Hz, 1H), 4.62-4.52 (m, 1H), 2.09-1.87 (m, 3H), 1.84-1.57 (m, 2H), 1.40-1.08 (m, 4H). HPLC: RT=0.72 min (Chromolith ODS 4.6 x 50 mm (4 min grad) eluiranje sa 10-90% vodenim MeOH-om tokom 4 min koji sadrži 0.1 % TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm); MS (ES): m/z= 246.1 [M+H]<+>.

Korak 3: 5-((4,4-Difluorocikloheksil)(4-fluoropiridin-3-il)metil)-7-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indol

[0553] U promešani rastvor 3-bromo-7-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indola (60.0 mg, 0.185 mmol) i (4,4-difluorocikloheksil)(3-fluoropiridin-2-il)metanola (91.0 mg, 0.369 mmol) u toluenu (2.0 mL) je dodat trifenilfosfin (97.0 mg, 0.369 mmol) i DIAD (0.0720 mL, 0.369 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1.5 h i potom je direktno prečišćena pomoću silika gel kolonske hromatografije (Teledyne ISCO CombiFlash 0% do 100% Rastvarač A/B=DCM/EtOAc, RediSep SiO224 g, detektovanje na 254 nM, i praćenje na 220 nM). Koncentrovanje prikladnih frakcija je obezbedilo 5-((4,4-difluorocikloheksil)(4-fluoropiridin-3-il)metil)-7-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indol (102 mg) u kvantitativnom prinosu.<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.86 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.67 (s, 1H), 8.62 (br d, J=4.6 Hz, 1H), 8.41 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.82 (br d, J=8.2 Hz, 1H), 7.74-7.64 (m, 1H), 7.51 (dt, J=8.6, 4.4 Hz, 1H), 7.46-7.30 (m, 1H), 6.32 (br d, J=11.1 Hz, 1H), 5.48-5.23 (m, 1H), 4.87 (dd, J=12.6, 6.4 Hz, 1H), 4.78 (ddd, J=18.6, 12.4, 6.3 Hz, 1H), 4.45-4.20 (m, 1H), 3.29 (br s, 3H), 1.45-1.34 (m, 1H), 1.23 (br d, J=3.5 Hz, 2H), 1.21-1.12 (m, 2H). HPLC: RT= 3.036 min (Chromolith ODS 4.6 x 50 mm (4 min gradijent) eluiranje sa 10-90% vodenim MeOH-om tokom 4 min koji sadrži 0.1 % TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm); MS (ES): m/z= 552.0 [M+H]<+>.

Korak 4: 2-[(4,4-Difluorocikloheksil)({7-metansulfonil-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-5-il})metil]-3-fluoropiridin

[0554] U promešani rastvor 3-bromo-5-((4,4-difluorocikloheksil)(4-fluoropiridin-3-il)metil)-7-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indola (77.4 mg, 0.140 mmol) i 4-(<2>H3)metil-1-metil-5-(tributilstanil)-1-H-1,2,3-triazola (98.0 mg, 0.252 mmol) u DMF-u (1.0 mL) je dodat Et3N (0.0430 mL, 0.308 mmol), i smeša je pročišćena sa azotom. Tokom pročišćavanja, bakar (I) jodid (4.00 mg, 0.0210 mmol) i tetrakis(trifenilfosfin) paladijum (0) (19.4 mg, 0.0170 mmol) su dodati. Reakciona smeša je pročišćena sa azotom tokom dodatnih 5 min i zatim zagrejana na 95 °C tokom 2 h. Smeša je ohlađena do sobne temperature i razblažena sa 10% vod. LiCl rastvorom. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc-om. Kombinovani EtOAc-ni ekstrakti su oprani sa slanim rastvorom, osušeni (MgSO4), filtrirani, i koncentrovani da se dobije sirova smeša. Sirov proizvod je potom prečišćen pomoću silika gel kolonske hromatografije (Teledyne ISCO CombiFlash 0% do 100% Rastvarač A/B=DCM/10%MeOH u DCM-u, RediSep SiO224 g, detektovanje na 254 nM, i praćenje na 220 nM). Koncentrovanje prikladnih frakcija je obezbedilo racemski 2-[(4,4-difluorocikloheksil)({7-metansulfonil-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-5-il})metil]-3-fluoropiridin (125 mg). Ova recemska smeša je izdvojena hiralnom prep SFC (Berger SFC MGII, Kolona:Chiral AD-H 25 X 3 cm ID, 5µm Brzina protoka: 85.0 mL/min, Mobilna faza: 85/15 CO2/MeOH Talasna dužina detektora: 220 nm) da se dobiju Enantiomeri A (11.8 mg, 14%) i B (12.6 mg, 15%). Enantiomer A:<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.59 (d, J=1.7 Hz, 2H), 8.56 (s, 1H), 8.53 (br d, J=3.9 Hz, 1H), 7.93 (dd, J=8.3, 1.3 Hz, 1H), 7.46-7.39 (m, 1H), 7.37-7.31 (m, 2H), 5.89 (br d, J=10.6 Hz, 1H), 4.07 (s, 3H), 3.20 (s, 3H), 2.15 (br s, 1H), 1.99-1.91 (m, 1H), 1.86 (br s, 1H), 1.55-1.44 (m, 1H), 1.39-1.24 (m, 2H), 1.12 (br d, J=12.6 Hz, 1H), 1.03-0.94 (m, 2H); LCMS (M+H) = 572.3, SFC RT = 7.453 min (Kolona: Chiralcel AD 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 85/15 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min); Enantiomer B:<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.59 (d, J=1.7 Hz, 2H), 8.57 (d, J=8.2 Hz, 1H), 8.53 (br d, J=3.9 Hz, 1H), 7.93 (dd, J=8.2, 1.2 Hz, 1H), 7.46-7.39 (m, 1H), 7.37-7.31 (m, 2H), 5.89 (br d, J=10.8 Hz, 1H), 4.07 (s, 3H), 3.20 (s, 3H), 2.15 (br s, 1H), 1.95 (br d, J=13.3 Hz, 1H), 1.88 (br d, J=14.8 Hz, 1H),

22

1.55-1.44 (m, 1H), 1.42-1.22 (m, 2H), 1.12 (br d, J=12.1 Hz, 1H). LCMS (M+H) = 572.3; SFC RT = 8.218 min (Kolona: Chiralcel AD 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 85/15 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min).

Primer 243

3-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]oksetan-3-ol

[0555]

Korak 1: ((3-(4-Bromofenil)oksetan-3-il)oksi)(terc-butil)dimetilsilan

[0556] U promešani reakcioni rastvor 3-(4-bromofenil)oksetan-3-ola (6.24 g, 27.2 mmol; WO2011/159760; (2011); (A1)), terc-butilhlorodimetilsilana (7.39 g, 49.0 mmol) i imidazola (3.71 g, 54.5 mmol) u DMF-u (50.0 mL) je dodat 4-dimetilaminopiridin (3.33 g, 27.2 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 67 h i potom razblažena sa etrom. Dobijena smeša je oprana sa 10% vod. LiCl rastvorom i slanim rastvorom. Organski sloj je osušen (MgSO4), filtriran, i koncentrovan da se dobije sirova smeša. Sirov proizvod je prečišćen pomoću silika gel kolonske hromatografije (Teledyne ISCO CombiFlash 0% do 100% Rastvarač A/B= heksan/EtOAc, RediSep SiO2120 g, detektovanje na 254 nM, i praćenje na 220 nM). Koncentrovanje prikladnih frakcija je obezbedilo ((3-(4-bromofenil)oksetan-3-il)oksi)(terc-butil)dimetilsilan (7.11 g, 76 %).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.57-7.44 (m, 4H), 5.04-4.95 (m, 2H), 4.80-4.72 (m, 2H), 0.96 (s, 9H), 0.04 (s, 6H); HPLC: RT= 1.27 min (Chromolith ODS 4.6 x 50 mm (4 min grad) eluiranje sa 10-90% vodenim MeOH-om tokom 4 min koji sadrži 0.1 % TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm).

Korak 2: terc-Butildimetil((3-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)oksetan-3-il)oksi)silan

[0557] U promešani rastvor ((3-(4-bromofenil)oksetan-3-il)oksi)(terc-butil)dimetilsilana (100 mg, 0.291 mmol) pod azotom u THF-u (2.00 mL) na -78 °C je dodat polako nBuLi (2.5 M u heksanima, 0.128 mL, 0.320 mmol). Smeša je mešana na -78 °C tokom 15 min, onda je 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborolan) (74.0 mg, 0.291 mmol) dodat. Smeša

22

je zagrejana do sobne temperature i mešana tokom 16 h. Smeša je potom kvenčovana sa zasićenim vod. NH4Cl rastvorom i ekstrahovana sa EtOAc-om. Kombinovani EtOAc-ni ekstrakti su oprani sa slanim rastvorom, osušeni (MgSO4), filtrirani, i koncentrovani da se dobije terc-butildimetil((3-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)oksetan-3-il)oksi)silan (105 mg, 92 %).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.72 (d, J=8.3 Hz, 2H), 7.27-7.24 (m, 2H), 4.87-4.84 (m, 2H), 4.73-4.68 (m, 2H), 1.23 (s, 9H), 1.14 (s, 12H), 0.82 (s, 6H); HPLC: RT= 3.875 min (Chromolith ODS 4.6 x 50 mm (4 min grad) eluiranje sa 10-90% vodenim MeOH-om tokom 4 min koji sadrži 0.1 % TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). Korak 3: 5-Bromo-2-(4-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)oksetan-3-il)fenil)-3-nitropiridin [0558] terc-Butildimetil((3-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)oksetan-3-il)oksi)silan (1.25 g, 3.20 mmol) i 2,5-dibromo-3-nitropiridin (0.990 g, 3.51 mmol) su kombinovani u dioksanu (15 mL) pod azotom. U ovu smešu je dodat 2 M vod. trikalijum fosfat (4.80 mL, 9.61 mmol), i ona je pročišćena sa azotom. Tokom pročišćavanja, PdCl2(dppf)-CH2Cl2proizvod (0.392 g, 0.480 mmol) je dodat. Smeša je zagrevana na 85 °C tokom 3 h. Smeša je koncentrovana, razblažena sa vodom, i ekstrahovana sa EtOAc-om. Kombinovani EtOAc-ni ekstrakti su oprani sa slanim rastvorom, osušeni (MgSO4), filtrirani, i koncentrovani da se dobije sirov proizvod. Sirov proizvod je prečišćen pomoću silika gel kolonske hromatografije (Teledyne ISCO CombiFlash 0% do 100% Rastvarač A/B= heksan/EtOAc, RediSep SiO280 g, detektovanje na 254 nM, i praćenje na 220 nM). Koncentrovanje prikladnih frakcija je obezbedilo 5-bromo-2-(4-(3-((tercbutildimetilsilil)oksi)oksetan-3-il)fenil)-3-nitropiridin (0.570 g, 38 %).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.93 (d, J=2.1 Hz, 1H), 8.30 (d, J=2.1 Hz, 1H), 7.77-7.69 (m, 2H), 7.60 (d, J=8.6 Hz, 2H), 5.03 (d, J=7.1 Hz, 2H), 4.84 (d, J=7.2 Hz, 2H), 0.98 (s, 9H), 0.08 (s, 6H); HPLC: RT=3.711 min (Chromolith ODS 4.6 x 50 mm (4 min grad) eluiranje sa 10-90% vodenim MeOH-om tokom 4 min koji sadrži 0.1 % TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm); MS (ES): m/z= 465; 467.1 (Br šablon) [M+H]<+>.

Korak 4: 3-Bromo-7-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)oksetan-3-il)-5H-pirido[3,2-b]indol [0559] 5-Bromo-2-(4-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)oksetan-3-il)fenil)-3-nitropiridin (1.67 g, 3.59 mmol) i 1,2-bis(difenilfosfino)etan (1.79 g, 4.49 mmol) su kombinovani u 1,2-dihlorobenzenu (35.0 mL) pod azotom. Smeša je zagrevana na 160 °C tokom 2 h i ohlađena na sobnu temperaturu. Smeša je direktno prečišćena pomoću silika gel kolonske hromatografije (Teledyne ISCO CombiFlash 0% do 100% Rastvarač A/B= DCM/EtOAc, RediSep SiO2120 g, detektovanje na 254 nM, i praćenje na 220 nM). Koncentrovanje

22

prikladnih frakcija je obezbedilo 3-bromo-7-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)oksetan-3-il)-5H-pirido[3,2-b]indol (1.03 g, 66 %).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.62 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.35 (d, J=8.3 Hz, 1H), 8.17 (br. s., 1H), 7.90 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.70 (d, J=0.9 Hz, 1H), 7.64 (dd, J=8.3, 1.5 Hz, 1H), 5.08 (d, J=7.1 Hz, 2H), 4.92 (d, J=7.1 Hz, 2H), 0.99 (s, 9H), 0.01 (s, 6H); HPLC: RT=3.416 min (Chromolith ODS 4.6 x 50 mm (4 min grad) eluiranje sa 10-90% vodenim MeOH-om tokom 4 min koji sadrži 0.1 % TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm); MS (ES): m/z= 433.1; 435.1 (Br pattern) [M+H]<+>.

Korak 5: 7-(3-((terc-Butildimetilsilil)oksi)oksetan-3-il)-3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol

[0560] Promešana smeša 3-bromo-7-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)oksetan-3-il)-5H-pirido[3,2-b]indola (503 mg, 1.16 mmol), 1,4-dimetil-5-(tributilstanil)-1H-1,2,3-triazola (896 mg, 2.32 mmol), i Et3N (0.485 mL, 3.48 mmol) u DMF-u (8.00 mL) je pročišćena sa azotom. Tokom pročišćavanja, smeša je tretirana sa bakar(I) jodidom (33.2 mg, 0.174 mmol) i Pd(Ph3P)4(134 mg, 0.116 mmol), i reakciona smeša je potom zagrejana na 95 °C tokom noći. Ohlađena smeša je razblažena sa EtOAc-om i oprana sa 10% vod. LiCl rastvorom i slanim rastvorom. Organski sloj je osušen (MgSO4), filtriran, i koncentrovan. Sirov proizvod je prečišćen pomoću silika gel kolonske hromatografije (Teledyne ISCO CombiFlash 0% do 100%; praćeno sa 100% rastvaračem A/B= heksan/EtOAc, odjednom, RediSep SiO224 g, detektovanje na 254 nM, i praćenje na 220 nM). Koncentrovanje prikladnih frakcija je obezbedilo 7-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)oksetan-3-il)-3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol (450 mg, 86 %).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 11.72 (s, 1H), 8.53 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.28 (d, J=8.2 Hz, 1H), 8.04 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.50 (dd, J=8.3, 1.5 Hz, 1H), 4.92 (s, 4H), 4.01 (s, 3H), 2.30 (s, 3H), 0.92 (s, 9H), -0.05 (s, 6H); HPLC: RT=3.048 min (Chromolith ODS 4.6 x 50 mm (4 min grad) eluiranje sa 10-90% vodenim MeOH-om tokom 4 min koji sadrži 0.1 % TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm); MS (ES): m/z= 450.2 [M+H]<+>.

Korak 6: (S)-7-(3-((terc-Butildimetilsilil)oksi)oksetan-3-il)-3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-((4-fluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol [0561] U promešani rastvor 7-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)oksetan-3-il)-3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indola (100 mg, 0.222 mmol) i ((R)-(4-fluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanola (94.0 mg, 0.445 mmol) u toluenu (1.50 mL) u hladnom vodenom kupatilu je dodat trifenilfosfin (117 mg, 0.445 mmol) i DIAD (0.0860 mL, 0.445 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 h, onda je druga serija (R)-(4-

22

fluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanola (94.0 mg, 0.445 mmol), trifenilfosfina (117 mg, 0.445 mmol), i DIAD (0.0860 mL, 0.445 mmol) dodata. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 15 h. Smeša je koncentrovana i prečišćena pomoću silika gel kolonske hromatografije (Teledyne ISCO CombiFlash 0% do 100% Rastvarač A/B= DCM/EtOAc, RediSep SiO224 g, detektovanje na 254 nM, i praćenje na 220 nM). Koncentrovanje prikladnih frakcija je obezbedilo (S)-7-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)oksetan-3-il)-3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-((4-fluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol (81.0 mg, 57 %). HPLC: RT=3.578 min (Chromolith ODS 4.6 x 50 mm (4 min grad) eluiranje sa 10-90% vodenim MeOH-om tokom 4 min koji sadrži 0.1 % TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm); MS (ES): m/z= 642.3 [M+H]<+>.

Korak 7: 3-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]oksetan-3-ol

[0562] U promešani rastvor (S)-7-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)oksetan-3-il)-3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-((4-fluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indola (81.0 mg, 0.126 mmol) u THF-u (4.00 mL) je dodat 1M TBAF u THF-u (1.20 mL, 1.20 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 10 min i koncentrovana. Sirov proizvod je rastvoren u DMF-u i prečišćen putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: Waters XBridge Phenyl, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 15-70% B tokom 20 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da se dobije 3-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]oksetan-3-ol (33.6 mg, 51 %).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.52 (s, 1H), 8.27 (d, J=8.1 Hz, 1H), 8.20 (br s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.71-7.66 (m, 3H), 7.59 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.15 (br t, J=8.6 Hz, 2H), 5.86 (br d, J=11.1 Hz, 1H), 4.88 (br s, 4H), 4.00 (br s, 3H), 3.88 (br d, J=9.4 Hz, 1H), 3.71 (br d, J=8.4 Hz, 1H), 3.47-3.41 (m, 1H), 3.23 (br t, J=11.3 Hz, 1H), 3.17-3.09 (m, 1H), 2.28 (s, 3H), 1.67 (br d, J=11.4 Hz, 1H), 1.56 (br d, J=8.8 Hz, 2H), 0.97 (br d, J=12.1 Hz, 1H).). LCMS: RT = 1.30 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 528.2, LCMS: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1.11 mL/min. HPLC Čistoća na 220 nm: 100 %.

22

Primer 244

3-[3-(Dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]oksetan-3-ol

[0563]

Korak 1 : 4-(7-(3-((terc-Butildimetilsilil)oksi)oksetan-3-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il)-3 ,5-dimetilizoksazol

[0564] U promešani rastvor 3-bromo-7-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)oksetan-3-il)-5H-pirido[3,2-b]indola (418 mg, 0.964 mmol) i (3,5-dimetilizoksazol-4-il)boronske kiseline (272 mg, 1.93 mmol) u THF-u (8.0 mL) je dodat trikalijum fosfat (2M u H2O, 1.21 mL, 2.41 mmol). Reakcija je degasirana azotom u mehurićima, zatim je dodat PdCl2(dppf)-CH2Cl2proizvod (65.3 mg, 0.0800 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 85 °C tokom 55 min. Ohlađena smeša je razblažena sa vodom i ekstrahovana sa EtOAc-om. Kombinovani EtOAcni ekstrakti su osušeni (MgSO4), filtrirani, i koncentrovani da se dobije sirova smeša. Sirov proizvod je prečišćen pomoću silika gel kolonske hromatografije (Teledyne ISCO CombiFlash 0% do 100% Rastvarač A/B=DCM/EtOAc, RediSep SiO224 g, detektovanje na 254 nM, i praćenje na 220 nM). Koncentrovanje prikladnih frakcija je obezbedilo 4-(7-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)oksetan-3-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il)-3,5-dimetilizoksazol (254 mg, 59 %).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 11.59 (s, 1H), 8.48 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.26 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.91 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.76 (d, J=1.0 Hz, 1H), 7.49 (dd, J=8.2, 1.5 Hz, 1H), 4.94 (s, 4H), 2.50 (s, 3H), 2.32 (s, 3H), 0.94 (s, 9H), -0.04 (s, 6H). HPLC: RT=2.983 min (Chromolith ODS 4.6 x 50 mm (4 min grad) eluiranje sa 10-90% vodenim MeOH-om tokom 4 min koji sadrži 0.1 % TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm); MS (ES): m/z= 450.2 [M+H]<+>.

Korak 2: (S)-4-(7-(3-((terc-Butildimetilsilil)oksi)oksetan-3-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il)-3,5-dimetilizoksazol

[0565] U promešani rastvor 4-(7-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)oksetan-3-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il)-3,5-dimetilizoksazola (250 mg, 0.556 mmol) i ((R)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanola (214 mg, 1.11 mmol) u toluenu (4.50 mL) u hladnom vodenom kupatilu je dodat

2

trifenilfosfin (292 mg, 1.11 mmol) i DIAD (0.216 mL, 1.11 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h, pri čemu je druga serija (R)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanola (214 mg, 1.11 mmol), trifenilfosfina (292 mg, 1.11 mmol), i DIAD (0.216 mL, 1.112 mmol) dodata. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 14 h. Smeša je koncentrovana i prečišćena pomoću silika gel kolonske hromatografije (Teledyne ISCO CombiFlash 0% do 100% Rastvarač A/B= DCM/EtOAc, RediSep SiO224 g, detektovanje na 254 nM, i praćenje na 220 nM). Koncentrovanje prikladnih frakcija je obezbedilo (S)-4-(7-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)oksetan-3-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il)-3,5-dimetilizoksazol (400 mg, 0.641 mmol, 115 %). HPLC: RT=3.573 min (Chromolith ODS 4.6 x 50 mm (4 min grad) eluiranje sa 10-90% vodenim MeOH-om tokom 4 min koji sadrži 0.1 % TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm); MS (ES): m/z= 624.3 [M+H]<+>.

Korak 3: 3-[3-(Dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]oksetan-3-ol

[0566] U promešani rastvor (S)-4-(7-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)oksetan-3-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il)-3,5-dimetilizoksazola (410 mg, 0.657 mmol) u THF-u (7.00 mL) je dodat 1M TBAF u THF-u (3.20 mL, 3.20 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 15 min i koncentrovana. Sirov proizvod je rastvoren u DMF-u i prečišćen putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: Waters XBridge Phenyl, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 15-70% B tokom 20 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da se dobije 3-[3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]oksetan-3-ol (16.5 mg, 5 %)<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.48 (s, 1H), 8.27 (br d, J=8.4 Hz, 3H), 7.68 (br d, J=7.4 Hz, 2H), 7.61 (br d, J=8.1 Hz, 1H), 7.36 (br t, J=7.4 Hz, 2H), 7.31-7.23 (m, 1H), 6.59 (s, 1H), 5.88 (br d, J=11.1 Hz, 1H), 4.91 (br s, 4H), 3.97-3.89 (m, 1H), 3.76 (br d, J=8.4 Hz, 1H), 3.52 (br d, J=10.8 Hz, 1H), 3.42 (br s, 1H), 3.28 (br t, J=11.3 Hz, 1H), 2.54 (br s, 3H), 2.33 (br s, 3H), 1.76 (br d, J=12.5 Hz, 1H), 1.62 (br d, J=9.8 Hz, 1H), 1.35 (br d, J=8.8 Hz, 1H), 1.00 (br d, J=13.1 Hz, 1H). LCMS: RT = 1.29 min; (ES): m/z (M+H)<+>= 510.2. LCMS: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum

2 1

acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1.11 mL/min. HPLC Čistoća na 220 nm: 96 %.

Primeri 245 & 246

2-{[9-(2,2-Difluoroetoksi)-6-metansulfonil-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-5-il](oksan-4-il)metil}-3-fluoropiridin

[0567]

Korak 1: 3-Bromo-9-(2,2-difluoroetoksi)-6-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indol [0568] U promešanu reakcionu smešu 3-bromo-9-fluoro-6-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indola (50.0 mg, 0.146 mmol) i 2,2-difluoroetanola (120 mg, 1.46 mmol) u NMP-u (0.50 mL) je dodat t-BuOK (131 mg, 1.17 mmol). Smeša je zagrevana na 65 °C tokom 17 h. Ohlađena smeša je razblažena sa EtOAc-om i oprana sa slanim rastvorom. EtOAc-ni sloj je osušen (MgSO4), filtriran, i koncentrovan da se dobije sirova smeša. Sirov proizvod je prečišćen pomoću silika gel kolonske hromatografije (Teledyne ISCO CombiFlash 0% do 100% Rastvarač A/B= DCM/10% MeOH u DCM-u, RediSep SiO212 g, detektovanje na 254 nM, i praćenje na 220 nM). Koncentrovanje prikladnih frakcija je obezbedilo 3-bromo-9-(2,2-difluoroetoksi)-6-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indol (64.0 mg, 108 %).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 11.75 (br s, 1H), 8.65 (d, J=2.1 Hz, 1H), 8.24 (d, J=2.1 Hz, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.13 (d, J=8.7 Hz, 1H), 4.72 (td, J=14.4, 3.7 Hz, 2H), 3.33-3.32 (m, 1H), 2.69 (s, 3H). HPLC: RT=2.067 min (Chromolith ODS 4.6 x 50 mm (4 min grad) eluiranje sa 10-90% vodenim MeOH-om tokom 4 min koji sadrži 0.1 % TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm); MS (ES): m/z= 405.1; 407 (Br pattern) [M+H]<+>.

Korak 2: 5-[9-(2,2-Difluoroetoksi)-6-metansulfonil-5Hpirido[3,2-b]indol-3-il]-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol

[0569] Promešani rastvor 3-bromo-9-(2,2-difluoroetoksi)-6-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indola (62.3 mg, 0.154 mmol) i 4-(<2>H3)metil-1-metil-5-(tributilstanil)-1-H-1,2,3-triazola (108 mg, 0.277 mmol) u DMF-u (0.80 mL) i Et3N (0.0470 mL, 0.338 mmol) je pročišćen sa

2 2

azotom. Tokom pročišćavanja sa azotom, u ovu smešu je dodat Pd(PPh3)4(21.3 mg, 0.0180 mmol) i bakar (I) jodid (4.39 mg, 0.0230 mmol). Reakciona smeša je zagrevana na 95 °C tokom 5 h. Ohlađena smeša je razblažena sa 10% vod. LiCl rastvorom i ekstrahovana sa EtOAc-om. Kombinovani EtOAc-ni ekstrakti su oprani sa slanim rastvorom, osušeni (MgSO4), filtrirani, i koncentrovani da se dobije sirova smeša. Sirov proizvod je prečišćen pomoću silika gel kolonske hromatografije (Teledyne ISCO CombiFlash 0% do 100% Rastvarač A/B= DCM/10% MeOH u DCM-u, RediSep SiO212 g, detektovanje na 254 nM, i praćenje na 220 nM). Koncentrovanje prikladnih frakcija je obezbedilo 5-[9-(2,2-difluoroetoksi)-6-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il]-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol (24.3 mg, 37 %).<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 8.58 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.07 (d, J=8.7 Hz, 2H), 8.02 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.00 (s, 1H), 4.68 (td, J=13.0, 4.2 Hz, 3H), 4.06 (s, 3H), 3.25 (s, 3H). HPLC: RT=1.750 min (Chromolith ODS 4.6 x 50 mm (4 min grad) eluiranje sa 10-90% vodenim MeOH-om tokom 4 min koji sadrži 0.1 % TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm); MS (ES): m/z= 425.2 [M+H]<+>.

Korak 3: 2-{[9-(2,2-Difluoroetoksi)-6-metansulfonil-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-5-il](oksan-4-il)metil}-3-fluoropiridin

[0570] 5-[9-(2,2-Difluoroetoksi)-6-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il]-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol (22.0 mg, 0.0520 mmol) i (3-fluoropiridin-2-il)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol (21.9 mg, 0.104 mmol) su kombinovani u toluenu (0.50) u hladnom vodenom kupatilu. U ovu smešu je dodat trifenilfosfin (27.2 mg, 0.104 mmol) i DIAD (0.0200 mL, 0.104 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4.5 h i prečišćena pomoću silika gel kolonske hromatografije (Teledyne ISCO CombiFlash 0% do 100% Rastvarač A/B= DCM/10% MeOH u DCM-u, RediSep SiO212 g, detektovanje na 254 nM, i praćenje na 220 nM). Koncentrovanje prikladnih frakcija je obezbedilo racemski 2-{[9-(2,2-difluoroetoksi)-6-metansulfonil-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-5-il](oksan-4-il)metil}-3-fluoropiridin (105 mg). Ova racemska smeša je izdvojena hiralnom prep SFC (Berger SFC MGII, Kolona: Chiral IB 25 X 2.1 cm ID, 5µm Brzina protoka: 50.0 mL/min. Mobilna faza: 78/22 CO2/MeOH Talasna dužina detektora: 220 nm) da se dobiju Enantiomeri A (1.10 mg, 3%) i B (1.00 mg, 3%). Enantiomer A:<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.66 (s, 1H), 8.51 (br d, J=4.4 Hz, 1H), 8.30 (d, J=9.0 Hz, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.63 (br t, J=9.5 Hz, 1H), 7.46 (dt, J=8.3, 4.2 Hz, 1H), 7.23 (d, J=8.9 Hz, 1H), 6.96 (br d, J=10.2 Hz, 1H), 6.69-6.42 (m, 1H), 4.73 (td, J=14.3, 3.2 Hz, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.83 (br d, J=10.9 Hz, 1H), 3.62 (br d, J=7.8 Hz, 1H), 3.58-3.53 (m, 1H), 3.36-3.28 (m, 1H), 3.12 (br t, J=11.7 Hz,

2

1H), 2.54 (s, 3H), 1.79-1.64 (m, 2H), 1.63-1.51 (m, 1H), 0.42 (br d, J=12.2 Hz, 1H). LCMS (M+H) = 618.3; SFC RT = 5.019 min (Kolona: Chiralcel IB 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 70/30 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min); Enantiomer B:<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.67 (s, 1H), 8.52 (br d, J=4.5 Hz, 1H), 8.30 (d, J=8.9 Hz, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.68-7.57 (m, 1H), 7.52-7.41 (m, 1H), 7.24 (d, J=9.0 Hz, 1H), 6.96 (br d, J=10.1 Hz, 1H), 6.71-6.38 (m, 1H), 4.74 (td, J=14.3, 3.2 Hz, 2H), 3.93-3.88 (m, 3H), 3.84 (br d, J=9.8 Hz, 1H), 3.63 (br d, J=9.2 Hz, 1H), 3.54 (s, 1H), 3.36-3.26 (m, 1H), 3.12 (br t, J=11.7 Hz, 1H), 2.54 (s, 3H), 1.79-1.65 (m, 2H), 1.63-1.50 (m, 1H), 0.42 (br d, J=12.0 Hz, 1H). LCMS (M+H) = 618.3. SFC RT = 6.211 min (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 70/30 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min).

Primeri 247 & 248

2-{[9-(2,2-Difluoropropoksi)-6-metansulfonil-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-5-il](oksan-4-il)metil}-3-fluoropiridin

[0571]

Korak 1: 3-Bromo-9-(2,2-difluoroetoksi)-6-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indol [0572] U promešanu reakcionu smešu 3-bromo-9-fluoro-6-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indola (50.0 mg, 0.146 mmol) i 2,2-difluoropropan-1-ola (140 mg, 1.46 mmol) u NMP-u (0.50 mL) je dodat t-BuOK (131 mg, 1.17 mmol). Smeša je zagrevana na 65 °C tokom 2 h. Ohlađena smeša je razblažena sa EtOAc-om i oprana sa vodom i slanim rastvorom. EtOAc-ni sloj je osušen (MgSO4), filtriran, i koncentrovan da se dobije sirova smeša. Sirov proizvod je prečišćen pomoću silika gel kolonske hromatografije (Teledyne ISCO CombiFlash 0% do 100% Rastvarač A/B= DCM/10% MeOH u DCM-u, RediSep SiO212 g, detektovanje na 254 nM, i praćenje na 220 nM). Koncentrovanje prikladnih frakcija je obezbedilo 3-bromo-9-(2,2-difluoroetoksi)-6-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indol (61.0 mg, 100 %).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 11.73 (br s, 1H), 8.64 (d, J=2.1 Hz, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.96 (d, J=8.7 Hz, 1H), 7.12 (d, J=8.7 Hz, 1H), 4.67 (t, J=12.2 Hz, 2H), 3.32-3.27 (m, 3H), 2.69 (s, 3H). HPLC: RT=2.392 min (Chromolith ODS 4.6 x 50 mm (4 min grad) eluiranje sa 10-90%

2 4

vodenim MeOH-om tokom 4 min koji sadrži 0.1 % TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm); MS (ES): m/z= 419; 421 (Br pattern) [M+H]<+>.

Korak 2:

5-[9-(2,2-Difluoropropoksi)-6-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il]-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol

[0573] Promešani rastvor 3-bromo-9-(2,2-difluoropropoksi)-6-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indola (60.3 mg, 0.144 mmol) i 4-(<2>H3)metil-1-metil-5-(tributilstanil)-1-H-1,2,3-triazola (101 mg, 0.259 mmol) u DMF-u (0.80 mL) i Et3N (0.044 mL, 0.316 mmol) je pročišćen sa azotom. Tokom pročišćavanja sa azotom, u ovu smešu je dodat Pd(PPh3)4(19.9 mg, 0.0170 mmol) i bakar (I) jodid (4.11 mg, 0.0220 mmol). Reakciona smeša je zagrevana na 95 °C tokom 1.5 h. Ohlađena smeša je razblažena sa 10% vod. LiCl rastvorom i ekstrahovana sa EtOAc-om. Kombinovani EtOAc-ni ekstrakti su oprani sa slanim rastvorom, osušeni (MgSO4), filtrirani, i koncentrovani da se dobije sirova smeša. Sirov proizvod je prečišćen pomoću silika gel kolonske hromatografije (Teledyne ISCO CombiFlash 0% do 100% Rastvarač A/B= DCM/10% MeOH u DCM-u, RediSep SiO212 g, detektovanje na 254 nM, i praćenje na 220 nM). Koncentrovanje prikladnih frakcija je obezbedilo 5-[9-(2,2-difluoropropoksi)-6-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il]-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol (40.0 mg, 63 %).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 11.79 (s, 1H), 8.68 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.13 (d, J=2.1 Hz, 1H), 7.98 (d, J=8.6 Hz, 1H), 7.14 (d, J=8.7 Hz, 1H), 4.70 (t, J=12.1 Hz, 2H), 4.01 (s, 3H), 3.34 (s, 3H), 2.04-1.90 (m, 3H). HPLC: RT=1.995 min (Chromolith ODS 4.6 x 50 mm (4 min grad) eluiranje sa 10-90% vodenim MeOH-om tokom 4 min koji sadrži 0.1 % TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm); MS (ES): m/z= 439.2 [M+H]<+>.

Korak 3: 2-{[9-(2,2-Difluoropropoksi)-6-metansulfonil-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-5-il](oksan-4-il)metil}-3-fluoropiridin

[0574] 5-[9-(2,2-Difluoropropoksi)-6-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il]-4-(<2>H

3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol (38.0 mg, 0.0870 mmol) i (3-fluoropiridin-2-il)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol (36.6 mg, 0.173 mmol) su mešani u toluenu (1.00 mL) u hladnom vodenom kupatilu. U ovu smešu je dodat trifenilfosfin (45.5 mg, 0.173 mmol) i DIAD (0.0340 mL, 0.173 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4.5 h i prečišćena pomoću silika gel kolonske hromatografije (Teledyne ISCO CombiFlash 0% do 100% Rastvarač A/B= DCM/10% MeOH u DCM-u, RediSep SiO212 g, detektovanje na 254 nM, i praćenje na 220 nM). Koncentrovanje prikladnih frakcija je obezbedilo racemski 2-{[9-(2,2-difluoropropoksi)-6-metansulfonil-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-

2

pirido[3,2-b]indol-5-il](oksan-4-il)metil}-3-fluoropiridin (164 mg). Ova racemska smeša je izdvojena hiralnom prep SFC (Berger SFC MGII, Kolona: Chiral IB 25 X 2.1 cm IB, 5µm Brzina protoka: 50.0 mL/min. Mobilna faza: 78/22 CO2/MeOH Talasna dužina detektora: 220 nm) da se dobiju Enantiomeri A (4.30 mg, 8%) i B (4.30 mg, 8%). Enantiomer A:<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.66 (s, 1H), 8.52 (br d, J=4.4 Hz, 1H), 8.30 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.63 (br t, J=9.6 Hz, 1H), 7.47 (dt, J=8.3, 4.2 Hz, 1H), 7.22 (d, J=9.0 Hz, 1H), 6.98 (br d, J=10.2 Hz, 1H), 4.68 (br t, J=11.9 Hz, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.84 (br d, J=9.4 Hz, 1H), 3.63 (br d, J=8.3 Hz, 1H), 3.56-3.50 (m, 1H), 3.34 (br t, J=10.9 Hz, 1H), 3.13 (br t, J=11.3 Hz, 1H), 2.54 (s, 3H), 1.97 (br t, J=19.4 Hz, 3H), 1.80-1.66 (m, 2H), 1.64-1.52 (m, 1H), 0.44 (br d, J=11.8 Hz, 1H) LCMS (M+H) = 632.3; SFC RT = 6.376 min (Kolona: Chiralcel IB 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 75/25 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min). Enantiomer B:<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.66 (s, 1H), 8.52 (br d, J=4.5 Hz, 1H), 8.30 (d, J=8.9 Hz, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.63 (br t, J=9.6 Hz, 1H), 7.47 (dt, J=8.3, 4.2 Hz, 1H), 7.22 (d, J=9.0 Hz, 1H), 6.98 (br d, J=10.1 Hz, 1H), 4.68 (br t, J=11.9 Hz, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.83 (br s, 1H), 3.63 (br d, J=8.4 Hz, 1H), 3.55-3.49 (m, 1H), 3.37-3.27 (m, 1H), 3.13 (br t, J=11.2 Hz, 1H), 2.54 (s, 3H), 1.97 (br t, J=19.4 Hz, 3H), 1.80-1.65 (m, 2H), 1.63-1.52 (m, 1H), 0.44 (br d, J=11.4 Hz, 1H). LCMS (M+H) = 632.2; SFC RT = 7.707 min (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 70/30 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min).

Primeri 249 & 250

2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(4-metoksifenil)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0575]

Korak 1: N-Metoksi-N-metiloksan-4-karboksamid

[0576] U posudu od 500 mL sa okruglim dnom koja sadrži rastvor oksan-4-karboksilne kiseline (8.00 g, 61.5 mmol) u CH2Cl2-u (100 mL), 1,1'-karbonildiimidazol (12.0 g, 73.8 mmol) je dodat u delovima. Reakcioni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 2 h.

2

N,O-Dimetilhidroksilamin hidrohlorid (6.60 g, 67.6 mmol) je potom dodat u jednom delu. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Reakciona smeša je kvenčovana sa zasićenim vod. amonijum hloridom i razdvojena. Organski sloj je opran sa zasićen vod. NaHCO3-om, osušen sa natrijum sulfatom, filtriran, i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (9.50 g, 89 %), koje je primenjeno bez prečišćavanja.<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 3.99 (ddd, J=11.5, 4.2, 2.1 Hz, 2H), 3.77 (s, 3H), 3.51 (td, J=11.8, 2.4 Hz, 2H), 1.7 Hz, 1H), 3.21 (s, 3H), 3.06 (br. s., 1H), 1.88-1.52 (m, 4H); LCMS (M+H) = 174.2; HPLC RT = 1.39 min (Kolona: Waters Sunfire C18, 2.1 x 50 mm, 3.5-µm čestice; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min, potom 1.00 min zadržavanje na 100% B; Protok: 4 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm).

Korak 2: 4-(4-Metoksibenzoil)oksan

[0577] U posudu od 100 mL sa okruglim dnom koja sadrži rastvor 1-bromo-4-metoksibenzena (3.24 g, 17.3 mmol) u THF-u (10 mL) ohlađen na -78 °C, 1.6 M nBuLi u heksanima (10.8 mL, 17.3 mmol) je dodavan u kapima. Reakcioni rastvor je postao zamućen i mešan je na -78 °C tokom 10 min, potom na sobnoj temperaturi tokom 10 min da bi se dobil bistar rastvor. Reakcija je potom ohlađena ponovo na -78 °C i tretirana sa rastvorom N-metoksi-N-metiloksan-4-karboksamida (1.00 g, 5.77 mmol) u 5 mL THF da bi se dobio veoma taman rastvor. Rastvor je mešan na -78 °C tokom 1 h. Reakcija je kvenčovana njenim sipanjem u smešu leda i zasićenog vod. NH4Cl i ekstrahovanjem proizvoda u etil acetat. Organska faza je oprana sa vodom i koncentrovana da se dobije prljavo bela čvrsta supstanca. Sirova smeša proizvoda je prečišćena primenom ISCO silika gel hromatografije (Kolona od 40 g, Gradijent od 0% do 25% EtOAc / DCM u 10 min) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.02 g, 80%).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.07-7.86 (m, 2H), 7.06-6.91 (m, 2H), 4.15-4.00 (m, 2H), 3.94-3.86 (m, 3H), 3.66-3.31 (m, 3H), 2.06-1.69 (m, 4H); LCMS (M+H) = 221.0; HPLC RT = 0.80 min (Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 1.5 min, potom 0.2-min zadržavanje na 100% B; Protok: 0.8 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm).

Korak 3: (4-Metoksifenil)(oksan-4-il)metanol

[0578] Posuda od 100 mL sa okruglim dnom je napunjena sa rastvorom 4-(4-metoksibenzoil)oksana (1000 mg, 4.54 mmol) u MeOH-u (10 mL). Reakcioni rastvor je

2

ohlađen u ledenom kupatilu. Čvrsti NaBH4(258 mg, 6.81 mmol) je dodat polako u malim serijama u reakcioni rastvor. Reakcija je mešana u kupatilu sa ledom/vodom tokom 1 h. Reakcija je kvenčovana sa vodom, i reakcioni rastvor je koncentrovan u vakuumu. Rastvor je zakišeljen sa limunskom kiselinom na pH 4, i ekstrahovan sa DCM (2x). Organska faza je oprana sa slanim rastvorom, osušena, i koncentrovana. Sirova smeša proizvoda je prečišćena primenom ISCO silika gel hromatografije (Kolona od 40 g, Gradijent od 0% do 25% EtOAc / DCM u 15 min) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.910 g, 90 %).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.28-7.21 (m, 2H), 7.35-7.17 (m, 7H), 6.91 (d, J=8.8 Hz, 2H), 4.48-3.85 (m, 4H), 3.83 (s, 3H), 3.69-3.17 (m, 2H), 1.79 (d, J=2.9 Hz, 3H), 1.57-0.97 (m, 14H); LCMS (M-18) = 205; HPLC RT = 0.70 min (Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 1.5 min, potom 0.2-min zadržavanje na 100% B; Protok: 0.8 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm).

Korak 4: Metil 3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-((4-metoksifenil)(oksan-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0579] U posudu od 25 mL sa okruglim dnom koja sadrži rastvor metil 3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (85.0 mg, 0.265 mmol) i 4-metoksifenil)(oksan-4-il)metanola (118 mg, 0.529 mmol) u DCM-u (10 mL) na 0 °C je dodat čvrsti trifenilfosfin (139 mg, 0.529 mmol) i DIAD (0.103 mL, 0.529 mmol). Dobijena suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi tokom noći i zatim koncentrovana. Sirova smeša proizvoda je prečišćena primenom ISCO silika gel hromatografije (Kolona od 40 g, Gradijent od 0% do 100% EtOAc /CH2Cl2u 15 min) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (75.0 mg, 54%). LCMS (M+H) = 526; HPLC RT = 0.93 min (Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 1.5 min, potom 0.2-min zadržavanje na 100% B; Protok: 0.8 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm). Korak 5: 2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(4-metoksifenil)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0580] Posuda od 25 mL sa okruglim dnom koja sadrži metil 3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-((4-metoksifenil)(oksan-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (75.0 mg, 0.143 mmol) u THF-u (8 mL) je ohlađena u led/MeOH kupatilu. Rastvor metilmagnezijum bromida

2

(3M u Et2O-u, 0.381 mL, 1.14 mmol) je dodavan polako u kapima. Reakcija je mešana u led/MeOH kupatilu tokom 15 min potom ostavljena da se zagreje do sobne temperature tokom 10 min. Reakcija je ponovo ohlađena u led/MeOH kupatilu, i drugi deo metilmagnezijum bromida (3M u Et2O-u, 0.381 mL, 1.14 mmol) je dodat. Nakon 15 min, reakcija je zagrevana do sobne temperature tokom 10 min. Reakcija je ponovo ohlađena u led/MeOH kupatilu i kvenčovana sa zasićenim vod. NH4Cl rastvorom i razblažena sa 10% vod. LiCl rastvorom. Vodeni sloj je ekstrahovan sa CHCl3-om (2x), i organski sloj je osušen preko Na2SO4, filtriran, i koncentrovan. Sirova smeša proizvoda je prečišćena primenom ISCO silika gel hromatografije (Kolona od 24 g, Gradijent od 0% do 100% EtOAc /CH2Cl2u 15 min) da se dobije racemsko jedinjenje iz naslova, koje je razdvojeno primenom hiralne prep SFC (Kolona: Chiralpak IB, 25 x 2 cm, 5 µm; Mobilna faza: 75/25 CO2/MeOH; Protok: 50 mL/min). Pik koji se brže eluira je naznačen kao Enantiomer A (16.0 mg, 20 %).<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.44 (s, 1H), 8.31 (d, J=8.1 Hz, 1H), 8.22 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.59-7.38 (m, 3H), 6.90 (d, J=8.6 Hz, 2H), 5.73 (d, J=11.0 Hz, 1H), 4.08-3.94 (m, 4H), 3.82 (dd, J=11.3, 3.0 Hz, 1H), 3.74 (s, 2H), 3.65-3.49 (m, 1H), 3.48-3.35 (m, 1H), 2.44-2.23 (m, 2H), 1.98 (d, J=13.2 Hz, 1H), 1.81-1.50 (m, 7H), 1.51-1.02 (m, 3H LCMS (M+H) = 526.5; HPLC RT = 8.08 min (Kolona: Sunfire C18 3.5 µm, 3.0 x 150 mm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.05% TFA; Gradijent 0-100% B tokom 15 min; Protok: 1.0 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm); Hiralne HPLC RT = 8.778 min (Kolona: Chiralpak IB, 250 X 4.6 mm, 5um čestica; Mobilna faza: 75/25 CO2/MeOH; Brzina protoka: 2.0 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm). Pik koji se sporije eluira je naznačen kao Enantiomer B (14.3 mg, 19 %).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.56-8.22 (m, 1H), 8.22-8.01 (m, 1H), 7.57 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.46 (d, J=8.1 Hz, 1H), 6.86 (d, J=8.8 Hz, 2H), 5.73 (d, J=11.1 Hz, 1H), 4.00 (br. s., 2H), 3.89 (d, J=9.1 Hz, 1H), 3.72 (d, J=8.8 Hz, 1H), 3.67-3.54 (m, 2H), 3.46 (t, J=11.4 Hz, 1H), 3.39-3.15 (m, 2H), 2.29 (s, 3H), 1.70 (d, J=12.5 Hz, 1H), 1.65-1.40 (m, 6H), 1.30 (d, J=9.1 Hz, 1H), 0.99 (d, J=11.4 Hz, 1H) LCMS (M+H) = 526.5; HPLC RT = 1.608 min Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1.11 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm; Hiralne HPLC RT = 12.020 min (Kolona: Chiralpak IB , 250 X 4.6 mm, 5um čestica; Mobilna faza: 75/25 CO2/MeOH; Brzina protoka: 2.0 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm).

2

Primer 251

2-{5-[Ciklobutil(4-fluorofenil)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0581]

Korak 1: Ciklobutil(4-fluorofenil)metanol

[0582] Smeša magnezijuma (0.783 g, 32.2 mmol), bromociklobutana (4.35 g, 32.2 mmol), i 2 kapi dibromoetana u THF-u (40.3 ml) je sonikovana tokom 2 min i zatim refluksovana tokom 1 h. Smeša je ohlađena na 0 °C praćeno polaganim dodatkom rastvora 4-fluorobenzaldehida (2.00 g, 16.1 mmol) u THF-u (5 mL). Reakcija je mešana na 0 °C tokom 2 h. Reakcija je kvenčovana sa NH4Cl-om, i smeša je ekstrahovana sa EtOAc-om (3x). Organski sloj je izdvojen, koncentrovan, i ostatak je prečišćen pomoću silika gel hromatografije (Kolona od 40 g, Gradijent od 0% do 50% EtOAc/heksani) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.50 g, 52%) kao bezbojno ulje.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.30 (dd, J=8.6, 5.7 Hz, 2H), 7.03 (t, J=8.7 Hz, 2H), 4.58 (dd, J=7.9, 3.3 Hz, 1H), 2.72-2.53 (m, 1H), 2.17-2.07 (m, 1H), 2.05-1.95 (m, 1H), 1.91 (d, J=3.3 Hz, 1H), 1.89-1.75 (m, 4H); LCMS (M+H-H2O) = 163.1; HPLC RT = 0.87 min (Kolona: BEH C182.1 x 50 mm; Mobilna faza A: Voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: Acetonitril sa 0.05% TFA; Gradijent: 2-98% B tokom 1.6 min; Protok: 0.8 mL/min).

Korak 2: 2-{5-[Ciklobutil(4-fluorofenil)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0583] Prateći procedure analogne onima koje su opisane u Koracima 4 i 5 za 2-[3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol, metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (75.0 mg, 0.230 mmol) i ciklobutil(4-fluorofenil)metanol (84.0 mg, 0.480 mmol) su konvertovani u racemski 2-{5-[ciklobutil(4-fluorofenil)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, koji je razdvojen hiralnom prep SFC da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (15.0 mg, 19%).<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.45 (d, J=1.6 Hz, 1H), 8.33 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.94 (br. s., 2H), 7.53-7.48 (m, 2H), 7.38-7.32 (m, 3H), 7.07 (t, J=8.7 Hz, 2H), 6.13 (d, J=11.0 Hz, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.70 (s, 2H), 3.66 (s, 2H), 2.28 (s, 3H), 2.08-1.98 (m, 2H),

24

1.86-1.76 (m, 2H), 1.65 (d, J=1.7 Hz, 6H); LCMS (M+H) = 484.5; HPLC RT = 0.85 min (Kolona: BEH C18 2.1 x 50 mm; Mobilna faza A: Voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: Acetonitril sa 0.05% TFA; Gradijent: 2-98% B tokom 1.6 min; Protok: 0.8 mL/min); SFC RT = 13.03 min (Kolona: Chiralcel OJ-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 89/11 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min).

Primer 252

1-[3-(Dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]-2-metilpropan-2-ol

[0584]

Korak 1: Etil 2-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)acetat

[0585] Suspenzija etil 2-(4-bromofenil)acetata (500 mg, 2.06 mmol), bis(pinakolato)diborona (1.05 mg, 4.11 mmol), i kalijum acetata (606 mg, 6.17 mmol) u dioksanu (4 mL) je degasirana sa azotom u mehurićima. PdCl2(dppf)-CH2Cl2proizvod (84.0 mg, 0.100 mmol) je dodat, i reakcija je zagrevana do 85 °C tokom 4 h. Reakcija je razblažena sa etil acetatom (30 mL) i filtrirana kroz Celite. Organski sloj je opran sa slanim rastvorom, odvojen, i osušen sa natrijum sulfatom. Rastvarač je uparen, i ostatak je prečišćen pomoću kolonske hromatografije na silika gelu (Kolona od 40 g, Gradijent od 0% do 20% EtOAc/heksani) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (471 mg, 79%) kao bezbojno ulje.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.79 (d, J=7.9 Hz, 2H), 7.32 (d, J=7.9 Hz, 2H), 4.16 (q, J=7.1 Hz, 2H), 3.64 (s, 2H), 1.36 (s, 12H), 1.26 (t, J=7.2 Hz, 3H); LCMS (M+H) = 291.3; HPLC RT = 1.03 min (Kolona: BEH C182.1 x 50 mm; Mobilna faza A: Voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: Acetonitril sa 0.05% TFA; Gradijent: 2-98% B tokom 1.6 min; Protok: 0.8 mL/min).

Korak 2: Etil 2-(4-(5-bromo-3-nitropiridin-2-il)fenil)acetat

[0586] U rastvor etil 2-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)acetata (460 mg, 1.59 mmol) i 2,5-dibromo-3-nitropiridina (447 mg, 1.59 mmol) u THF-u (5 mL) je dodat trikalijum fosfat (2M) (1.50 mL, 3.17 mmol). Reakcija je degasirana sa azotom u mehurićima praćeno dodatkom PdCl2(dppf)-CH2Cl2proizvoda (64.7 mg, 0.0790 mmol). Reakcija je zagrevana do 70 °C tokom 4 h. Reakciona smeša je prebačena u levak za odvajanje koji sadrži zasićen vodeni NaHCO3rastvor (25 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom (3 x 20 mL). Kombinovani organski slojevi su oprani sa slanim rastvorom (20 mL), osušeni preko MgSO4, filtrirani, i koncentrovani. Ostatak je prečišćen pomoću kolonske hromatografije na silika gelu (Kolona od 24 g, Gradijent od 0% do 20% EtOAc/heksani) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (265 mg, 46%) kao bezbojno ulje. LCMS (M+H) = 365.2; HPLC RT = 0.98 min (Kolona: BEH C18 2.1 x 50 mm; Mobilna faza A: Voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: Acetonitril sa 0.05% TFA; Gradijent: 2-98% B tokom 1.6 min; Protok: 0.8 mL/min).

Korak 3: Etil 2-(3-bromo-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il)acetat

[0587] Rastvor etil 2-(4-(5-bromo-3-nitropiridin-2-il)fenil)acetata (260 mg, 0.710 mmol) i DPPE (355 mg, 0.890 mmol) u o-dihlorobenzenu (2.4 mL) je zagrejana do 170 °C tokom 2 h. Rastvarač je uparen, i ostatak je prečišćen pomoću kolonske hromatografije na silika gelu (Kolona od 24 g, Gradijent od 0% do 30% EtOAc/heksani) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (155 mg, 65%).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.61 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.28 (d, J=8.1 Hz, 1H), 8.10 (br. s., 1H), 7.88 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.43 (s, 1H), 4.21 (q, J=7.1 Hz, 2H), 3.82 (s, 2H), 1.30 (t, J=7.1 Hz, 3H); LCMS (M+H) = 334.9; HPLC RT = 0.84 min (Kolona: BEH C18 2.1 x 50 mm; Mobilna faza A: Voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: Acetonitril sa 0.05% TFA; Gradijent: 2-98% B tokom 1.6 min; Protok: 0.8 mL/min).

Korak 4: Etil 2-(3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il)acetat [0588] U suspenziju etil 2-(3-bromo-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il)acetata (150 mg, 0.450 mmol) i (3,5-dimetilizoksazol-4-il)boronske kiseline (127 mg, 0.900 mmol) u DMF-u (2 mL), trikalijum fosfat (3M u H2O) (675 µl, 1.35 mmol) je dodat. Rastvor je degasiran sa azotom. PdCl2(dppf) (16.5 mg, 0.0230 mmol) je dodat, i smeša je zagrevana u bočici pod pritiskom na 80 °C tokom 3 h. Reakciona smeša je prebačena u levak za odvajanje koji sadrži zasićeni vodeni NaHCO3rastvor (25 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom (3 x 25 mL). Kombinovani organski slojevi su oprani sa slanim rastvorom (25 mL), osušeni preko MgSO4, filtrirani, i koncentrovani. Ostatak je prečišćen pomoću kolonske hromatografije na silika gelu (Kolona od 24 g, Gradijent od 0% do 5% MeOH/DCM) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (82.0 mg, 52%).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.94 (s, 1H), 8.44 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.26 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.56 (d, J=1.7 Hz, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.24 (dd, J=8.1, 1.1 Hz, 1H), 4.22 (q, J=7.2 Hz, 2H), 3.83 (s, 2H), 2.47 (s, 3H), 2.32 (s, 3H), 1.30 (t, J=7.1 Hz, 3H); LCMS (M+H) = 350.3; HPLC RT = 0.68 min (Kolona: BEH C182.1 x 50 mm; Mobilna faza A: Voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: Acetonitril sa 0.05% TFA; Gradijent: 2-98% B tokom 1.6 min; Protok: 0.8 mL/min).

Korak 5: 1-[3-(Dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]-2-metilpropan-2-ol

[0589] Prateći procedure analogne onima koje su opisane u Koracima 4 i 5 za 2-[3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol, etil 2-(3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il)acetat (30.0 mg, 0.0900 mmol) i (R)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol (33.0 mg, 0.170 mmol) su konvertovani u jedinjenje iz naslova (9.50 mg, 47%).<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.56 (d, J=1.5 Hz, 1H), 8.53 (br. s., 1H), 8.31 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.66 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.40-7.34 (m, 3H), 7.33-7.27 (m, 1H), 5.86 (d, J=11.0 Hz, 1H), 4.01 (dd, J=11.6, 2.8 Hz, 1H), 3.84 (dd, J=11.4, 2.8 Hz, 1H), 3.62 (td, J=11.8, 1.9 Hz, 1H), 3.49-3.39 (m, 2H), 3.07 (s, 2H), 2.48 (s, 3H), 2.31 (s, 3H), 1.74-1.57 (m, 1H), 1.51-1.38 (m, 1H), 1.27 (d, J=12.2 Hz, 6H), 1.14 (d, J=12.7 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 510.4; HPLC RT = 0.81 min (Kolona: BEH C182.1 x 50 mm; Mobilna faza A: Voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: Acetonitril sa 0.05% TFA; Gradijent: 2-98% B tokom 1.6 min; Protok: 0.8 mL/min).

Primeri 253 & 254

2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[4,4,4-trifluoro-1-(piridin-2-il)butil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0590]

Korak 1: 4,4,4-Trifluoro-1-(piridin-2-il)butan-1-ol

[0591] U smešu magnezijuma (0.340 g, 14.0 mmol) i dibromoetana (2 kapi) u THF-u (23.3 ml), 3-bromo-1,1,1-trifluoropropan (2.45 g, 14.0 mmol) je dodat. Smeša je zagrejana do 60 °C tokom 40 min. Reakcija je ohlađen na 0 °C praćeno sporim dodavanjem pikolinaldehida (1.00 g, 9.34 mmol). Reakcija je mešana na 0 °C tokom 1 h. Reakcija je kvenčovana sa 2 mL NH4Cl rastvora i razblažena sa vodom. Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc-om (2x). Organski sloj je izdvojen, koncentrovan, i osušen da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.10

24

g, 57 %) kao žuto smeđa čvrsta supstanca.<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 8.52-8.42 (m, 1H), 7.86 (td, J=7.8, 1.7 Hz, 1H), 7.63-7.53 (m, 1H), 7.32 (ddd, J=7.5, 4.9, 1.0 Hz, 1H), 4.76 (dd, J=8.3, 4.3 Hz, 1H), 2.36-2.19 (m, 2H), 2.14-2.00 (m, 1H), 1.96-1.85 (m, 1H); LCMS (M+H) = 206.2; HPLC RT = 0.49 min (Kolona: BEH C182.1 x 50 mm; Mobilna faza A: Voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: Acetonitril sa 0.05% TFA; Gradijent: 2-98% B tokom 1.6 min; Protok: 0.8 mL/min).

Korak 2: 2-(3-(1,4-Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(4,4,4-trifluoro-1-(piridin-2-il)butil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il)propan-2-ol

[0592] Prateći procedure analogne onima koje su opisane u Koracima 4 i 5 za 2-[3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol, metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (100 mg, 0.310 mmol) i 4,4,4-trifluoro-1-(piridin-2-il)butan-1-ol (128 mg, 0.620 mmol) su konvertovani u racemski 2-(3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(4,4,4-trifluoro-1-(piridin-2-il)butil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il)propan-2-ol, koji je razdvojen hiralnom prep SFC da se dobiju Enantiomeri A i B. Enantiomer A:<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.67 (dd, J=4.8, 0.8 Hz, 1H), 8.51 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.36 (d, J=8.3 Hz, 1H), 8.08 (d, J=1.6 Hz, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.74 (td, J=7.7, 1.8 Hz, 1H), 7.56 (dd, J=8.4, 1.3 Hz, 1H), 7.35 (dd, J=7.2, 5.3 Hz, 1H), 7.28 (d, J=7.9 Hz, 1H), 6.32 (dd, J=10.0, 5.7 Hz, 1H), 4.01 (s, 3H), 3.17-3.03 (m, 1H), 2.99-2.85 (m, 1H), 2.43 (dt, J=14.7, 5.5 Hz, 1H), 2.31 (s, 3H), 1.98-1.80 (m, 1H), 1.64 (s, 6H); LCMS (M+H) = 509.3; HPLC RT = 0.79 min (Kolona: BEH C18 2.1 x 50 mm; Mobilna faza A: Voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: Acetonitril sa 0.05% TFA; Gradijent: 2-98% B tokom 1.6 min; Protok: 0.8 mL/min); SFC RT = 5.41 (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 80/20 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min). Enantiomer B:<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.67 (dd, J=4.8, 0.8 Hz, 1H), 8.51 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.36 (d, J=8.3 Hz, 1H), 8.08 (d, J=1.6 Hz, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.74 (td, J=7.8, 1.8 Hz, 1H), 7.56 (dd, J=8.4, 1.3 Hz, 1H), 7.35 (dd, J=7.2, 5.3 Hz, 1H), 7.28 (d, J=7.9 Hz, 1H), 6.32 (dd, J=10.1, 5.6 Hz, 1H), 4.01 (s, 3H), 3.16-3.04 (m, 1H), 2.99-2.85 (m, 1H), 2.42 (s, 1H), 2.31 (s, 3H), 1.97-1.83 (m, 1H), 1.64 (s, 6H); LCMS (M+H) = 509.4; HPLC RT = 0.79 min (Kolona: BEH C18 2.1 x 50 mm; Mobilna faza A: Voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: Acetonitril sa 0.05% TFA; Gradijent: 2-98% B tokom 1.6 min; Protok: 0.8 mL/min); SFC RT = 6.68 (Kolona: Chiralcel OD-H 250 x 4.6 mm, 5 µm; Mobilna faza: 80/20 CO2/MeOH; Protok: 2 mL/min).

Primer 255

1-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-8-il]-2-metilpropan-2-ol

[0593]

Korak 1: Metil 2-(3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)acetat

[0594] Suspenzija metil 2-(3-bromofenil)acetata (5.00 g, 21.8 mmol), bis(pinakolato)diborona (11.1 g, 43.7 mmol) i kalijum acetata (6.43 g, 65.5 mmol) u dioksanu (43.7 ml) je degasirana sa azotom u mehurićima. PdCl2(dppf)-CH2Cl2proizvod (0.446 g, 0.546 mmol) je dodat, i reakcija je zagrevana do 85 °C tokom 4 h. Reakcija je razblažena sa etil acetatom (30 mL) i filtrirana kroz Celite. Organski sloj je opran sa slanim rastvorom, izdvojen, i osušen sa natrijum sulfatom. Rastvarač je uparen, i ostatak je prečišćen pomoću kolonske hromatografije na silika gelu (Kolona od 220 g, Gradijent od 0% do 40% EtOAc/heksani) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (6.00 g, 100%) kao bezbojno ulje.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.74 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.40 (t, J=1.7 Hz, 1H), 7.38-7.33 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.65 (s, 2H), 1.36 (s, 12H); LCMS (M+H) = 277.3; HPLC RT = 0.99 min (Kolona: BEH C18 2.1 x 50 mm; Mobilna faza A: Voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: Acetonitril sa 0.05% TFA; Gradijent: 2-98% B tokom 1.6 min; Protok: 0.8 mL/min).

Korak 2: Metil 2-(3-(5-bromo-3-nitropiridin-2-il)fenil)acetat

[0595] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za etil 2-(4-(5-bromo-3-nitropiridin-2-il)fenil)acetat, metil 2-(3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)acetat (5.00 g, 18.1 mmol) i 2,5-dibromo-3-nitropiridin (5.10 g, 18.1 mmol) su konvertovani u jedinjenje iz naslova (4.20 g, 66%).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9.10 (d, J=2.1 Hz, 1H), 8.82 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.44 (d, J=1.6 Hz, 1H), 7.42-7.41 (m, 1H), 3.78 (s, 2H), 3.64 (s, 3H); LCMS (M+H) = 351.1; HPLC RT = 0.93 min (Kolona: BEH C18 2.1 x 50 mm; Mobilna faza A: Voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: Acetonitril sa 0.05% TFA; Gradijent: 2-98% B tokom 1.6 min; Protok: 0.8 mL/min).

Korak 3: Metil 2-(3-bromo-5H-pirido[3,2-b]indol-8-il)acetat

[0596] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za etil 2-(3-bromo-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il)acetat, metil 2-(3-(5-bromo-3-nitropiridin-2-il)fenil)acetat (4.00 g, 11.4 mmol) i

24

DPPE (5.67 g, 14.2 mmol) su konvertovani u jedinjenje iz naslova (1.05 g, 29%).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 11.57 (s, 1H), 8.51 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.14 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.56-7.52 (m, 1H), 7.45 (dd, J=8.3, 1.7 Hz, 1H), 3.86 (s, 2H), 3.64 (s, 3H); LCMS (M+H) = 319.1; HPLC RT = 0.78 min (Kolona: BEH C18 2.1 x 50 mm; Mobilna faza A: Voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: Acetonitril sa 0.05% TFA; Gradijent: 2-98% B tokom 1.6 min; Protok: 0.8 mL/min).

Korak 4: Metil 2-(3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-8-il)acetat [0597] Rastvor metil 2-(3-bromo-5H-pirido[3,2-b]indol-8-il)acetat (100 mg, 0.313 mmol), 1,4-dimetil-5-(tributilstanil)-1H-1,2,3-triazol (242 mg, 0.627 mmol), trietilamin (87.0 µl, 0.627 mmol), i bakar(I) jodid (8.95 mg, 0.0470 mmol) u DMF-u (2089 µl) su degasirani sa azotom u mehurićima. Tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0) (36.2 mg, 0.0310 mmol) je dodat, i reakcija je zagrevana do 90 °C tokom 4 h. Reakcija je ohlađena, razblažena sa vodom, potom ekstrahovana dva puta sa EtOAc-om (2x). Organski sloj je opran sa amonijum hidroksidom, slanim rastvorom, izdvojen, i osušen preko natrijum sulfata. Rastvarač je koncentrovan, i ostatak je prečišćen pomoću kolonske hromatografije na silika gelu (Kolona od 24 g, Gradijent od 0% do 5% MeOH/DCM) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (32.0 mg, 31 %).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9.08 (s, 1H), 8.47 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.66 (d, J=1.7 Hz, 1H), 7.54-7.49 (m, 1H), 7.48-7.43 (m, 1H), 4.03 (s, 3H), 3.86 (s, 2H), 3.75 (s, 3H), 2.39 (s, 3H); LCMS (M+H) = 336.2; HPLC RT = 0.59 min (Kolona: BEH C182.1 x 50 mm; Mobilna faza A: Voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: Acetonitril sa 0.05% TFA; Gradijent: 2-98% B tokom 1.6 min; Protok: 0.8 mL/min).

Korak 5: 1-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-8-il]-2-metilpropan-2-ol

[0598] Prateći procedure analogne onima koje su opisane u Koracima 4 i 5 za 2-[3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol, metil 2-(3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-8-il)acetat (57.0 mg, 0.170 mmol) i (R)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol (66.0 mg, 0.340 mmol) su konvertovani u jedinjenje iz naslova (16.0 mg, 19%).<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.45 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.24 (d, J=1.3 Hz, 1H), 7.94 (d, J=8.6 Hz, 1H), 7.64 (d, J=7.5 Hz, 2H), 7.61 (d, J=1.5 Hz, 1H), 7.39-7.33 (m, 2H), 7.30-7.25 (m, 1H), 5.75 (d, J=11.0 Hz, 1H), 4.01 (s, 3H), 3.99 (br. s., 1H), 3.84 (dd, J=11.1, 2.6 Hz, 1H), 3.64-3.56 (m, 1H), 3.46-3.36 (m, 3H), 2.99 (s, 2H), 2.34 (s, 3H), 1.63 (dd, J=12.6, 3.9 Hz, 1H), 1.49-1.36 (m, 1H), 1.27 (s, 6H); LCMS (M+H) = 510.4; HPLC RT = 0.80 min (Kolona: BEH C18 2.1 x 50 mm; Mobilna faza A:

24

Voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: Acetonitril sa 0.05% TFA; Gradijent: 2-98% B tokom 1.6 min; Protok: 0.8 mL/min).

Primer 256

1-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]-2-metilpropan-2-ol

[0599]

Korak 1: Etil 2-(3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il)acetat [0600] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za metil 2-(3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-8-il)acetat, etil 2-(3-bromo-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il)acetat (200 mg, 0.600 mmol) i 1,4-dimetil-5-(tributilstanil)-1H-1,2,3-triazol (464 mg, 1.20 mmol) su konvertovani u jedinjenje iz naslova (111 mg, 53%). LCMS (M+H) = 350.2; HPLC RT = 0.66 min (Kolona: BEH C18 2.1 x 50 mm; Mobilna faza A: Voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: Acetonitril sa 0.05% TFA; Gradijent: 2-98% B tokom 1.6 min; Protok: 0.8 mL/min).

Korak 2: 1-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]-2-metilpropan-2-ol

[0601] Prateći procedure analogne onima koje su opisane u Koracima 4 i 5 za 2-[3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol, etil 2-(3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il)acetat (55.0 mg, 0.160 mmol) i (R)-(4-fluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol (66.2 mg, 0.320 mmol) su konvertovani u jedinjenje iz naslova (3.20 mg, 4%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.50 (s, 1H), 8.11 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.92 (br. s., 1H), 7.73 (dd, J=8.2, 5.6 Hz, 2H), 7.20 (d, J=7.7 Hz, 1H), 7.14 (t, J=8.8 Hz, 2H), 5.77 (d, J=11.1 Hz, 1H), 4.03 (br. s., 2H), 3.90 (d, J=7.4 Hz, 1H), 3.73 (d, J=9.1 Hz, 1H), 3.53-3.35 (m, 1H), 3.26 (t, J=11.1 Hz, 1H), 2.92 (br. s., 1H), 2.31 (br. s., 3H), 1.77 (s, 1H), 1.65 (d, J=12.5 Hz, 1H), 1.56-1.46 (m, 1H), 1.35-1.22 (m, 1H), 1.20 (d, J=6.1 Hz, 1H), 1.16-1.07 (m, 6H), 1.05 (d, J=12.5 Hz, 1H), 0.99 (d, J=6.1 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 528.3; HPLC RT = 0.79 min (Kolona: BEH C182.1 x 50 mm; Mobilna faza A: Voda sa

24

0.05% TFA; Mobilna faza B: Acetonitril sa 0.05% TFA; Gradijent: 2-98% B tokom 1.6 min; Protok: 0.8 mL/min).

Primer 257

5-{5-[(S)-(4-Fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-9-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol

[0602]

Korak 1: 4,4,5,5-Tetrametil-2-(2-(metilsulfonil)fenil)-1,3,2-dioksaborolan

[0603] Suspenzija 1-bromo-2-(metilsulfonil)benzena (800 mg, 3.40 mmol), bis(pinakolato)diborona (1040 mg, 4.08 mmol) i kalijum acetata (668 mg, 6.81 mmol) u dioksanu (4 ml) je degasirana sa azotom u mehurićima. PdCl2(dppf)-CH2Cl2proizvod (139 mg, 0.170 mmol) je dodat, i reakcija je zagrevana do 95 °C tokom 2 h. Reakcija je razblažena sa EtOAc-om (30 mL) i filtrirana kroz Celite. Organski sloj je opran sa slanim rastvorom i osušen sa natrijum sulfatom. Rastvarač je uparen, i ostatak je prečišćen pomoću kolonske hromatografije na silika gelu (Kolona od 40 g, Gradijent od 0% do 40% EtOAc/heksani) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (626 mg, 65 %) kao bezbojno ulje.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.03 (dd, J=7.6, 1.2 Hz, 1H), 7.72-7.67 (m, 1H), 7.61 (dtd, J=18.6, 7.4, 1.5 Hz, 2H), 5.32 (s, 1H), 3.24 (s, 3H), 1.43 (s, 12H); LCMS (M+H) = 283.2; HPLC RT = 0.89 min (Kolona: BEH C18 2.1 x 50 mm; Mobilna faza A: Voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: Acetonitril sa 0.05% TFA; Gradijent: 2-98% B tokom 1.6 min; Protok: 0.8 mL/min).

Korak 2: 5-Bromo-2-(2-(metilsulfonil)fenil)-3-nitropiridin

[0604] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za etil 2-(4-(5-bromo-3-nitropiridin-2-il)fenil)acetat, 4,4,5,5-tetrametil-2-(3-(metilsulfonil)fenil)-1,3,2-dioksaborolan (620 mg, 2.20 mmol) i 2,5-dibromo-3-nitropiridin (650 mg, 2.31 mmol) su konvertovani u jedinjenje iz naslova (554 mg, 71%). LCMS (M+H) = 359.0; HPLC RT = 0.81 min (Kolona: BEH C182.1 x 50 mm; Mobilna faza A: Voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: Acetonitril sa 0.05% TFA; Gradijent: 2-98% B tokom 1.6 min; Protok: 0.8 mL/min).

Korak 3: 3-Bromo-9-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indol

24

[0605] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za etil 2-(3-bromo-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il)acetat, 5-bromo-2-(2-(metilsulfonil)fenil)-3-nitropiridin (550 mg, 1.54 mmol) i DPPE (767 mg, 1.93 mmol) su konvertovani u jedinjenje iz naslova (201 mg, 40%).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 12.28 (s, 1H), 8.71 (d, J=2.1 Hz, 1H), 8.36 (d, J=2.1 Hz, 1H), 8.00 (dd, J=8.3, 0.8 Hz, 1H), 7.90 (dd, J=7.5, 0.9 Hz, 1H), 7.82-7.72 (m, 1H), 3.75 (s, 3H); LCMS (M+H) = 327.0; HPLC RT = 0.76 min (Kolona: BEH C18 2.1 x 50 mm; Mobilna faza A: Voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: Acetonitril sa 0.05% TFA; Gradijent: 2-98% B tokom 1.6 min; Protok: 0.8 mL/min).

Korak 4: 3-(1,4-Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indol [0606] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za 2-(3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-8-il)acetat, 3-bromo-9-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indol (200 mg, 0.615 mmol) i 1,4-dimetil-5-(tributilstanil)-1H-1,2,3-triazol (475 mg, 1.23 mmol) su konvertovani u jedinjenje iz naslova (195 mg, 93%).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 12.37 (s, 1H), 8.74 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.22 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.06-8.00 (m, 1H), 7.93 (dd, J=7.5, 0.7 Hz, 1H), 7.82-7.75 (m, 1H), 4.04 (s, 3H), 3.83 (s, 3H), 2.33 (s, 3H); LCMS (M+H) = 342.1; HPLC RT = 0.60 min (Kolona: BEH C18 2.1 x 50 mm; Mobilna faza A: Voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: Acetonitril sa 0.05% TFA; Gradijent: 2-98% B tokom 1.6 min; Protok: 0.8 mL/min).

Korak 5: 5-{5-[(S)-(4-Fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-9-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol

[0607] U suspenziju 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indola (50.0 mg, 0.146 mmol), (R)-(4-fluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanola (61.6 mg, 0.293 mmol), i trifenilfosfins (77.0 mg, 0.293 mmol) u THF-u (1.5 mL) ohlađenu u ledenom kupatilu je dodat DIAD (57.0 µl, 0.293 mmol). Dobijena suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi tokom noći i zatim koncentrovana. Ostatak je prečišćen pomoću HPLC reverznih faza (Kolona: Waters XBridge Phenyl, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 20-55% B tokom 25 min, potom 5-minutno zadržavanje na 55% B; Protok: 20 mL/min) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (18.6 mg, 24%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.77 (br. s., 1H), 7.96 (s, 2H), 7.88 (br. s., 1H), 7.75 (dd, J=8.1, 5.4 Hz, 2H), 7.18 (t, J=8.6 Hz, 2H), 6.04 (d, J=11.1 Hz, 1H), 4.05 (br. s., 3H), 3.91 (d, J=5.7 Hz, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.72 (d, J=9.8 Hz, 1H), 3.49 (d, J=10.8 Hz, 1H), 3.25 (t, J=11.6 Hz, 1H), 2.33 (br. s., 3H), 1.72 (d, J=11.8 Hz, 1H), 1.58 (d, J=9.4 Hz, 1H), 1.29 (d,

24

J=9.4 Hz, 1H), 0.94 (br. s., 1H); LCMS (M+H) = 534.2; HPLC RT = 0.83 min (Kolona: Chromolith ODS S5 4.6 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 4 mL/min).

Primer 258

2-{1-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-5-il]-4,4,4-trifluorobutil}piridin

[0608]

[0609] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za 5-{5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-9-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol, 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indol (50.0 mg, 0.150 mmol) i 4,4,4-trifluoro-1-(piridin-2-il)butan-1-ol (60.1 mg, 0.290 mmol) su konvertovani u racemski 2-{1-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-5-il]-4,4,4-trifluorobutil}piridin, koji je razdvojen primenom hiralne prep SFC (Kolona: Chiral OD-H 25 x 3 cm, 5 µm; Mobilna faza: 77/23 CO2/MeOH; Protok: 85 mL/min). Pik koji se sporije eluira je koncentrovana da se dobije 11.2 mg (15%).<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 8.72 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.64 (d, J=5.6 Hz, 1H), 8.22-8.15 (m, 2H), 8.10 (d, J=7.2 Hz, 1H), 7.85-7.78 (m, 1H), 7.74 (td, J=7.7, 1.8 Hz, 1H), 7.35 (dd, J=7.1, 5.0 Hz, 1H), 7.30 (d, J=7.7 Hz, 1H), 6.44 (dd, J=10.3, 6.0 Hz, 1H), 4.01 (s, 3H), 3.80 (s, 3H), 3.16-3.06 (m, 1H), 2.99-2.86 (m, 1H), 2.49-2.36 (m, 1H), 2.30 (s, 3H), 1.97-1.83 (m, 1H); LCMS (M+H) = 529.3; HPLC RT = 0.85 min (Kolona: BEH C18 2.1 x 50 mm; Mobilna faza A: Voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: Acetonitril sa 0.05% TFA; Gradijent: 2-98% B tokom 1.6 min; Protok: 0.8 mL/min).

Primer 259

5-{9-Metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol

[0610]

2

[0611] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za 5-{5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-9-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol, 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indol (50.0 mg, 0.150 mmol) i (R)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol (56.3 mg, 0.290 mmol) su konvertovani u jedinjenje iz naslova (15.0 mg, 20%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.96 (d, J=1.3 Hz, 1H), 8.84 (d, J=8.4 Hz, 1H), 8.77 (br. s., 1H), 8.69 (s, 1H), 8.16 (d, J=7.7 Hz, 1H), 7.98-7.93 (m, 2H), 7.86 (br. s., 1H), 7.28-7.22 (m, 1H), 6.03 (d, J=11.1 Hz, 1H), 5.36 (quin, J=6.2 Hz, 1H), 4.09 (s, 3H), 3.91 (br. s., 1H), 3.81 (s, 3H), 3.72 (d, J=9.1 Hz, 1H), 3.50 (d, J=11.8 Hz, 1H), 3.26 (t, J=11.6 Hz, 1H), 2.36 (s, 3H), 1.76 (d, J=12.8 Hz, 1H), 1.63-1.56 (m, 1H), 1.31 (d, J=9.8 Hz, 1H), 0.93 (d, J=10.8 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 516.3; HPLC RT = 0.83 min (Kolona: BEH C18 2.1 x 50 mm; Mobilna faza A: Voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: Acetonitril sa 0.05% TFA; Gradijent: 2-98% B tokom 1.6 min; Protok: 0.8 mL/min).

Primer 260

2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-metoksi-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0612]

Korak 1: Metil 3-metoksi-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzoat [0613] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za 4,4,5,5-tetrametil-2-(2-(metilsulfonil)fenil)-1,3,2-dioksaborolan, metil 4-bromo-3-metoksibenzoat (1.30 g, 5.30 mmol) i bis(pinakolato)diboron (1.62 g, 6.37 mmol) su konvertovani u jedinjenje iz naslova (820 mg, 53%). LCMS (M+H) = 293.2; HPLC RT = 0.97 min (Kolona: BEH C18 2.1 x 50

2 1

mm; Mobilna faza A: Voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: Acetonitril sa 0.05% TFA; Gradijent: 2-98% B tokom 1.6 min; Protok: 0.8 mL/min).

Korak 2: Metil 4-(5-bromo-3-nitropiridin-2-il)-3-metoksibenzoat

[0614] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za etil 2-(4-(5-bromo-3-nitropiridin-2-il)fenil)acetat, metil 3-metoksi-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzoat (820 mg, 2.81 mmol) i 2,5-dibromo-3-nitropiridin (831 mg, 2.95 mmol) su konvertovani u jedinjenje iz naslova (705 mg, 68%). LCMS (M+H) = 367.0; HPLC RT = 0.98 min (Kolona: BEH C182.1 x 50 mm; Mobilna faza A: Voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: Acetonitril sa 0.05% TFA; Gradijent: 2-98% B tokom 1.6 min; Protok: 0.8 mL/min).

Korak 3: Metil 3-bromo-9-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0615] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za etil 2-(3-bromo-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il)acetat, metil 4-(5-bromo-3-nitropiridin-2-il)-3-metoksibenzoat (620 mg, 1.69 mmol) i DPPE (841 mg, 2.11 mmol) su konvertovani u jedinjenje iz naslova (238 mg, 42%).

<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 8.54 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.10 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.85 (d, J=1.1 Hz, 1H), 7.42 (d, J=1.0 Hz, 1H), 4.14 (s, 3H), 3.99 (s, 3H); LCMS (M+H) = 335.1; HPLC RT = 0.74 min (Kolona: BEH C182.1 x 50 mm; Mobilna faza A: Voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: Acetonitril sa 0.05% TFA; Gradijent: 2-98% B tokom 1.6 min; Protok: 0.8 mL/min).

Korak 4: Metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0616] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za 2-(3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-8-il)acetat, metil 3-bromo-9-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (235 mg, 0.700 mmol) i 1,4-dimetil-5-(tributilstanil)-1H-1,2,3-triazol (542 mg, 1.40 mmol) su konvertovani u jedinjenje iz naslova (151 mg, 61%).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 11.76 (br. s., 1H), 8.56 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.80 (d, J=6.8 Hz, 1H), 7.42 (s, 1H), 4.19 (s, 3H), 3.95 (s, 3H), 3.91 (s, 3H), 2.30 (s, 3H); LCMS (M+H) = 352.2; HPLC RT = 0.61 min (Kolona: BEH C18 2.1 x 50 mm; Mobilna faza A: Voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: Acetonitril sa 0.05% TFA; Gradijent: 2-98% B tokom 1.6 min; Protok: 0.8 mL/min).

Korak 5: 2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-metoksi-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0617] Prateći procedure analogne onima koje su opisane u Koracima 4 i 5 za 2-[3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol, metil 3-

2 2

(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (150 mg, 0.430 mmol) i (R)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol (123 mg, 0.640 mmol) su konvertovani u jedinjenje iz naslova (7.90 mg, 4%).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.54 (d, J=1.7 Hz, 1H), 7.53-7.50 (m, 2H), 7.44 (d, J=7.2 Hz, 2H), 7.37-7.31 (m, 2H), 6.95 (s, 1H), 6.37 (br. s., 2H), 5.58 (d, J=10.5 Hz, 1H), 4.21 (s, 3H), 4.07 (dd, J=12.0, 2.7 Hz, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.61-3.51 (m, 1H), 3.40-3.30 (m, 1H), 3.08 (d, J=10.9 Hz, 1H), 2.28 (s, 3H), 2.09-2.00 (m, 2H), 1.76 (d, J=3.4 Hz, 6H), 1.66 (td, J=12.4, 4.0 Hz, 2H), 1.41 (dd, J=12.8, 4.2 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 526.5; HPLC RT = 0.71 min (Kolona: BEH C182.1 x 50 mm; Mobilna faza A: Voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: Acetonitril sa 0.05% TFA; Gradijent: 2-98% B tokom 1.6 min; Protok: 0.8 mL/min).

Primer 261

1-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]-2-metilpropan-2-ol

[0618]

[0619] Prateći procedure analogne onima koje su opisane u Koracima 4 i 5 za 2-[3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol, etil 2-(3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il)acetat (55.0 mg, 0.160 mmol) i (R)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol (60.5 mg, 0.320 mmol) su konvertovani u jedinjenje iz naslova (3.20 mg, 4%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.56 (s, 2H), 8.15 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.69 (d, J=7.7 Hz, 2H), 7.35-7.28 (m, 2H), 7.24 (t, J=7.7 Hz, 2H), 5.79 (d, J=11.1 Hz, 1H), 4.02 (br. s., 3H), 3.89 (d, J=7.1 Hz, 1H), 3.73 (d, J=10.1 Hz, 1H), 3.52-3.38 (m, 2H), 3.27 (t, J=11.4 Hz, 1H), 2.94 (s, 2H), 2.31 (s, 3H), 1.68 (d, J=12.8 Hz, 1H), 1.53 (d, J=9.1 Hz, 1H), 1.35-1.25 (m, 1H), 1.12 (d, J=10.4 Hz, 6H); LCMS (M+H) = 510.3; HPLC RT = 0.78 min (Kolona: BEH C182.1 x 50 mm; Mobilna faza A: Voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: Acetonitril sa 0.05% TFA; Gradijent: 2-98% B tokom 1.6 min; Protok: 0.8 mL/min).

Primer 262

2

[0620]

Korak 1: 4-(<2>H3)Metil-2-((trimetilsilil)metil)-1H-1,2,3-triazol

[0621] Rastvor natrijum askorbata (344 mg, 1.74 mmol) u vodi (2170 µL) je dodat u promešani rastvor trimetil(<2>H3-prop-1-in-1-il)silana (pripremljen u skladu sa PCT Int. Appl., 2007112352, 04. Okt 2007, 200 mg, 1.74 mmol) i (azidometil)trimetilsilana (294 mg, 1.91 mmol) u t-BuOH-u (4340 µL) na ambijentalnoj temperaturi. Bakar (II) sulfat pentahidrat (87.0 mg, 0.347 mmol) u vodi (2170 µL) je naknadno dodavan u vidu kapi. Reakcija je mešana na ambijentalnoj temperaturi tokom 16 h pre nego što je razblažena sa vodom (10 mL) i etil acetatom (20 mL). 2 sloja su razdvojena, i vodeni sloj je opran sa dodatnim etil acetatom (2 x 20 mL). Kombinovane organske materije su osušene preko natrijum sulfata, čvrste supstance su odstranjene filtriranjem, i isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen primenom silika gel kolonske hromatografije sa gradijentom etil acetata u heksanima (0-60%). 4-(<2>H3)Metil-1-((trimetilsilil)metil)-1H-1,2,3-triazol (125 mg, 0.725 mmol, 42 %) je izolovan kao bezbojno ulje.<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 7.16 (br. s., 1H), 3.89 (s, 2H), 0.15 (s, 9H); LC/MS (M+H) = 173.2; LC/MS RT = 1.20 min (Kolona: Phenomenex Luna 30 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min).

Korak 2: Metil 3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0622] (S)-Metil 3-bromo-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (174 mg, 0.363 mmol), 4-(<2>H3)metil-1-((trimetilsilil)metil)-1H-1,2,3-triazol (125 mg, 0.725 mmol), bis(trifenilfosfin) paladijum(II) hlorid (25.5 mg, 0.0360 mmol), i tetrametilamonijum acetat (72.5 mg, 0.544 mmol) su mešani u NMP-u (1810 µL) na 90 °C pod N2(g) tokom 16 h. Reakcionoj smeši je naknadno dozvoljeno da se ohladi na ambijentalnu temperaturu pre nego što su dodati dodatni delovi bis(trifenilfosfin) paladijum

2 4

(II) hlorida (25.5 mg, 0.0360 mmol) i tetrametilamonijum acetata (72.5 mg, 0.544 mmol). Reakcioni sud je pročišćen sa N2(g) i zagrevan tokom dodatnih 24 h. Isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom, i sirov materijal je prečišćen primenom silika gel kolonske hromatografije sa gradijentom etil acetata u heksanima (0-100%) da bi se dobio metil 3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (51.0 mg, 0.102 mmol, 28 %).<1>H NMR (DMSO-d6) δ: 8.73 (br. s., 1H), 8.64 (s, 1H), 8.53 (br. s, 1H), 8.37 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.93 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.67 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.32-7.37 (m, 2H), 7.24-7.28 (m, 1H), 6.00 (d, J=11.4 Hz, 1H), 4.02 (s, 3H), 3.97 (s, 3H), 3.86-3.93 (m, 1H), 3.72 (d, J=8.8 Hz, 1H), 3.35-3.52 (m, 2H), 3.25 (t, J=11.6 Hz, 1H), 1.59-1.77 (m, 2H), 1.27-1.40 (m, 1H), 0.96 (d, J=13.9 Hz, 1H); LC/MS (M+H) = 499.3; LC/MS RT = 1.10 min (Kolona: Waters Aquity BEH C182.1 X 50 mm 1.7u; Mobilna faza A: voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: Acetonitril sa 0.05% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 2-98% B tokom 1.5 min; Protok: 0.8 mL/min).

Korak 3: 2-{3-[4-(<2>H3)Metil-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0623] Metillitijum (251 µl, 0.401 mmol) u Et2O-u je dodat u promešani rastvor metil 3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (50.0 mg, 0.100 mmol) u THF-u (1000 µL) pod N2(g) na -78 °C. Reakcija je mešana na toj temperaturi tokom 1 h. Reakciona smeša je kvenčovana sa zasićenim vodenim amonijum hloridom (8 mL) i razblažena sa etil acetatom (20 mL) dok je još na -78 °C. Smeša je uklonjena iz hladnog kupatila i dozvoljeno je da se zagreje na ambijentalnu temperaturu. Slojevi su razdvojeni, i vodena faza je oprana sa drugim delom etil acetata (20 mL). Kombinovane organske supstance su osušene preko natrijum sulfata, čvrste supstance su odstranjene filtriranjem, i isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 metanol: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 metanol: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 40-100% B tokom 5 min, potom 20-min zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja. Materijal je dalje prečišćen putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 20-60% B tokom 20 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20

2

mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da se dobije 2-{3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol (6.70 mg, 0.0130 mmol, 13 %).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.50 (s, 1H), 8.41 (br. s., 1H), 8.15 (d, J=8.1 Hz, 2H), 7.67 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.48 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.36-7.29 (m, 2H), 7.28-7.21 (m, 1H), 5.82 (d, J=11.0 Hz, 1H), 5.26 (s, 1H), 4.01 (s, 3H), 3.90 (d, J=10.3 Hz, 1H), 3.75 (d, J=9.2 Hz, 1H), 3.53-3.36 (m, 2H), 3.27 (t, J=11.0 Hz, 1H), 1.72 (d, J=12.5 Hz, 1H), 1.59 (s, 7H), 1.40-1.25 (m, 1H), 1.02 (d, J=12.1 Hz, 1H);); LC/MS (M+H) = 499.3; LC/MS RT = 0.92 min (Kolona: Waters Aquity BEH C182.1 X 50 mm 1.7u; Mobilna faza A: voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: Acetonitril sa 0.05% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 2-98% B tokom 1.5 min; Protok: 0.8 mL/min).

Primer 263

5-{7-Metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol

[0624]

Korak 1: 4-(<2>H3)Metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol

[0625] TBAF (60.9 ml, 60.9 mmol) je dodat u kapima u promešani rastvor 4-(<2>H3)metil-1-((trimetilsilil)metil)-1H-1,2,3-triazola (pripremljenog u putu do metil 3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata, 8.75 g, 50.8 mmol) i vode (1.83 mL, 102 mmol) u THF-u (203 mL) na 0 °C. Reakcija je mešana na toj temperaturi tokom 1 h pre nego što je uklonjena iz hladnog kupatila i dozvoljeno je da se zagreje do ambijentalne temperature. Reakciona smeša je mešana na ambijentalnoj temperaturi tokom 16 h. Isparljive supstance su uklonjena iz vodenog sloja pod sniženim pritiskom. Dobijeno ulje je prečišćeno primenom silika gel kolonske hromatografije gradijentom metanola u etil acetatu (0-20%). 1-Metil-4-(<2>H3)metil-1H-1,2,3-triazol (4.67 g, 46.6 mmol, 92 %) je izolovan kao žuto ulje.<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 7.76 (s, 1H), 3.98 (s, 3H); LC/MS (M+H) = 101.2; LC/MS RT = 0.57 min (Kolona: Waters Aquity BEH

2

C18 2.1 X 50 mm 1.7u; Mobilna faza A: voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: Acetonitril sa 0.05% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 2-98% B tokom 1.5 min; Protok: 0.8 mL/min).

Korak 2: 4-(<2>H3)Metil-1-metil-5-(tributilstanil)-1H-1,2,3-triazol

[0626] n-BuLi (9.59 mL, 24.0 mmol) u heksanima je dodat u kapima u promešani rastvor 1-metil-4-(<2>H3)metil-1H-1,2,3-triazola (2.00 g, 20.0 mmol) u THF-u (49.9 mL) na -78 °C pod N2(g). Beli talog je formiran nakon dodatka. Reakcija je mešana na toj temperaturi tokom 30 min pre dodavanja tributiltin hlorida (5.96 mL, 22.0 mmol) u kapima. Reakcija je mešana tokom dodatnih 10 min pre uklanjanja hladnog kupatila, i reakciji je dozvoljeno da se zagreje do ambijentalne temperature tokom 30 min. Reakciona smeša je kvenčovana sa zasićenim vodenim amonijum hloridom (20 mL) i razblažena sa 10% vodenim LiCl (20 mL). Slojevi su razdvojeni i vodeni sloj je opran sa dietil etrom (3 x 30 mL). Kombinovane organske supstance su osušene preko natrijum sulfata, čvrste supstance su odstranjene filtriranjem, i isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen primenom silika gel kolonske hromatografije sa gradijentom etil acetata u heksanima (0-50%). 1-Metil-5-(tributilstanil)-4-(<2>H3)metil-1H-1,2,3-triazol (6.02 g, 15.5 mmol, 77 %) je izolovan kao bezbojno ulje.<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 3.97 (s, 3H), 1.62-1.39 (m, 6H), 1.35-1.25 (m, 6H), 1.24-1.10 (m, 6H), 0.91-0.83 (m, 9H).

Korak 3: 5-{7-Metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol

[0627] Rastvor (S)-3-bromo-7-(metilsulfonil)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indola (139 mg, 0.278 mmol), 1-metil-5-(tributilstanil)-4-(<2>H3)metil-1H-1,2,3-triazola (119 mg, 0.306 mmol), tetrakis(trifenilfosfin)paladijuma(0) (32.2 mg, 0.0280 mmol), bakar (I) jodida (10.6 mg, 0.0560 mmol), i trietilamina (46.6 µL, 0.334 mmol) u DMF-u (2783 µL) je degasiran primenom N2(g) tokom 3 min. Reakciona smeša je potom zagrevana na 80 °C tokom 16 h. Isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom, i sirov materijal je prečišćen primenom silika gel kolonske hromatografije sa gradijentom metanola u etil acetatu (0-20%). 5-{7-Metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol (114.0 mg, 0.215 mmol, 77 %) je izolovan kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.78 (br. s., 1H), 8.68 (d, J=1.3 Hz, 1H), 8.56 (br. s., 1H), 8.49 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.88 (d, J=9.1 Hz, 1H), 7.70 (d, J=7.7 Hz, 2H), 7.38-7.33 (m, 2H), 7.30-7.24 (m, 1H), 6.03 (d, J=11.3 Hz, 1H), 4.02 (s, 3H), 3.91 (d, J=7.9 Hz, 1H), 3.74 (d, J=8.5 Hz, 1H), 3.54-3.44 (m, 2H), 3.41 (s, 3H), 3.31-3.23 (m, 1H), 1.73 (d, J=13.1 Hz, 1H), 1.68-1.56 (m, 1H), 1.44-1.30 (m, 1H), 0.97 (d, J=11.7 Hz, 1H);

2

LC/MS (M+H) = 519.3; LC/MS RT = 1.41 min (Kolona: Phenomenex Luna 30 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min). Primeri 264-267

[0628] Jedinjenja u Tabeli 9 su pripremljena u skladu sa procedurama koje su opisane za 5-{7-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol. Konverzija intermedijera metil estra u finalna jedinjenja je izvedena u skladu sa procedurom koja je opisana za 2-{3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol (Korak 3):

Tabela 9

HPLC Uslovi za Tabelu 9: Metoda A: Kolona: Phenomenex Luna 30 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min. Metoda B: Kolona: Phenomenex Luna 30 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 MeOH:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min.

Primer 268

2

5-{9-Metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol

[0629]

Korak 1: 5-{9-Metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol

[0630] Rastvor 3-bromo-9-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indola (pripremljenog u putu do 5-{5-[(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-9-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazola, 300 mg, 0.923 mmol), 4-(<2>H3)metil-1-metil-5-(tributilstanil)-1H-1,2,3-triazola (395 mg, 1.02 mmol), tetrakis(trifenilfosfin)paladijuma(0) (107 mg, 0.0920 mmol), bakar (I) jodida (35.1 mg, 0.185 mmol), i Et3N (154 µL, 1.11 mmol) u DMF-u (9230 µL) je degasiran primenom N2(g) tokom 3 min. Reakciona smeša je potom zagrejana na 80 °C tokom 16 h. Sirova reakciona smeša je prečišćena primenom silika gel kolonske hromatografije sa gradijentom metanola u etil acetatu (0-15%). 5-{9-Metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H- 1,2,3-triazol (121 mg, 0.352 mmol, 38 %) je izolovan kao gumena čvrsta supstanca.<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 12.37 (s, 1H), 8.75 (d, J=1.9 Hz, 1H), 8.23 (d, J=1.9 Hz, 1H), 8.03 (dd, J=8.2, 0.9 Hz, 1H), 7.93 (dd, J=7.5, 0.9 Hz, 1H), 7.79 (t, J=7.9 Hz, 1H), 4.05 (s, 3H), 3.83 (s, 3H); LC/MS (M+H) = 345.2; LC/MS RT = 1.04 min (Kolona: Phenomenex Luna 30 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min).

Korak 2: (R)-Cikloheksil(fenil)metil metansulfonat

[0631] Metansulfonil hlorid (24.3 µL, 0.312 mmol) je dodat u kapima u promešani rastvor (R)-cikloheksil(fenil)metanola (pripremljenog u putu do (S)-2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ola, 40.0 mg, 0.208 mmol) i Et3N (58.0 µL, 0.416 mmol) u DCM-u (2080 µL) na 0 °C pod N2(g). Reakcija je mešana tokom 15 min pre uklanjanja reakcionog suda iz hladnog kupatila, i reakcionoj smeši je dozvoljeno da se zagreje do ambijentalne temperature tokom 1 h. Reakciona smeša je kvenčovana sa zasićenim vodenim NaHCO3(5 mL). Slojevi su razdvojeni, i vodeni sloj je

2

opran sa dietil etrom (2 x 7 mL). Kombinovane organske supstance su osušene preko natrijum sulfata, čvrste supstance su odstranjene filtriranjem, i isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom. Proizvod je primenjen bez dodatnog prečišćavanja.

Korak 3: 5-{9-Metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol

[0632] 5-{9-Metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol (40.0 mg, 0.116 mmol), (R)-cikloheksil(fenil)metil metansulfonat (62.8 mg, 0.232 mmol), i cezijum karbonat (151 mg, 0.465 mmol) su mešani u DMF-u (581 µL) na 60 °C pod N2(g) tokom 16 h. Isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom, i sirov materijal je prečišćen putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 25-65% B tokom 15 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da se dobije 5-{9-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol (12.7 mg, 0.0240 mmol, 21 %).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.86-8.34 (m, 3H), 7.96 (d, J=7.0 Hz, 1H), 7.92-7.77 (m, 1H), 7.69 (d, J=7.7 Hz, 2H), 7.37-7.31 (m, 2H), 7.30-7.23 (m, 1H), 6.02 (d, J=11.0 Hz, 1H), 4.04 (br. s., 3H), 3.91 (d, J=10.6 Hz, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.72 (d, J=8.8 Hz, 1H), 3.53-3.45 (m, 1H), 3.40 (br. s., 1H), 3.27 (t, J=11.4 Hz, 1H), 1.75 (d, J=11.4 Hz, 1H), 1.65-1.53 (m, 1H), 1.37-1.23 (m, 1H), 0.94 (d, J=11.7 Hz, 1H); LC/MS (M+H) = 519.3; LC/MS RT = 1.46 min (Kolona: Phenomenex Luna 30 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min).

Primeri 269 & 270

[0633] Jedinjenja u Tabeli 10 su pripremljena u skladu sa procedurama koje su opisane za 5-{9-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol:

2

Tabela 10

HPLC Uslovi za Tabelu 10: Metoda A: Kolona: Waters Aquity BEH C182.1 X 50 mm 1.7u; Mobilna faza A: voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: Acetonitril sa 0.05% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 2-98% B tokom 1.5 min; Protok: 0.8 mL/min. Metoda B: Kolona: Phenomenex Luna 30 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min.

Primer 271

2-{6-Fluoro-5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0634]

Korak 1: Metil 6-fluoro-5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0635] Metil 6-fluoro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (pripremljen u putu do (1R)-1-ciklopropil-1-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]etan-1-ola, 12.5 mg, 0.0370 mmol), (R)-(4-fluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil metansulfonat (pripremljen u skladu sa Korakom 2 u putu do 5-{9-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazola, 15.8 mg, 0.0550 mmol), i cezijum karbonat (29.7 mg, 0.0910 mmol) su mešani u DMF-u (183 µL) na 60 °C pod N2(g) tokom 16 h. Drugi deo (R)-(4-fluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil metansulfonata (15.8 mg, 0.0550 mmol) i cezijum karbonata (29.7 mg, 0.0910 mmol) su dodati. Reakcija je zagrevana do 60 °C tokom dodatnih 16 h. Isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom, i

2 1

materijal je primenjen bez dodatnog prečišćavanja. LC/MS (M+H) = 535.4; LC/MS RT = 1.66 min (Kolona: Phenomenex Luna 30 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min).

Korak 2: 2-{6-Fluoro-5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0636] Metilmagnezijum bromid (355 µL, 1.07 mmol, 3 M) je dodat u promešani rastvor metil 6-fluoro-5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (19.0 mg, 0.0360 mmol) u THF-u (355 µL) pod N2(g) na -20 °C. Reakciona smeša je mešana na toj temperaturi tokom 1 h. Reakciona smeša je potom kvenčovana sa zasićenim vodenim amonijum hloridom (8 mL) i razblažena sa etil acetatom (20 mL) dok je još na -20 °C. Smeša je uklonjena iz hladnog kupatila i dozvoljeno je da se zagreje do ambijentalne temperature. Slojevi su razdvojeni, i vodena faza je oprana sa drugim delom etil acetata (20 mL). Kombinovane organske supstance su osušene preko natrijum sulfata, čvrste supstance su odstranjene filtriranjem, i isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Gradijent: 30-70% B tokom 15 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da se dobije 2-{6-fluoro-5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol (1.30 mg, 2.47 µmol, 7 %). LC/MS (M+H) = 535.4; LC/MS RT = 1.49 min (Kolona: Phenomenex Luna 30 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min).

Primer 272

2-{6-Fluoro-5-[(S)-(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0637]

2 2

[0638] 2-{6-Fluoro-5-[(S)-(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol (3.60 mg, 6.73 µmol, 19%) je pripremljen u skladu sa procedurama opisanim za 2-{6-fluoro-5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol. LC/MS (M+H) = 535.4; LC/MS RT = 1.44 min (Kolona: Phenomenex Luna 30 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min).

Primer 273

2-{9-Metoksi-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil] -5H-pirido [3,2-b] indol-7-il}propan-2-ol

[0639]

Korak 1: Metil 9-metoksi-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0640] Rastvor metil 3-bromo-9-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (pripremljenog u putu do 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-9-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ola, 300 mg, 0.895 mmol), 1-metil-5-(tributilstanil)-4-(<2>H3)metil-1H-1,2,3-triazola (pripremljenog u putu do 5-{7-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazola, 383 mg, 0.985 mmol), tetrakis(trifenilfosfin)paladijuma(0) (103 mg, 0.0900 mmol), bakar (I) jodida (34.1 mg, 0.179 mmol), i Et3N (150 µL, 1.07 mmol) u DMF-u (8950 µL) je degasiran primenom N2(g) tokom 3 min. Reakciona smeša je potom zagrejana na 80 °C tokom 16 h. Sirova reakciona smeša je prečišćena primenom silika gel kolonske hromatografije sa gradijentom metanola u etil acetatu (0-10%). Metil 9-metoksi-3-[4-

2

(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat je izolovan kao žuta kristalna čvrsta supstanca (239 mg, 0.673 mmol, 75 %).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 11.98 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.09 (d, J=1.5 Hz, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.32 (s, 1H), 4.08 (s, 3H), 4.01 (s, 3H), 3.93 (s, 3H); LC/MS (M+H) = 555.3; LC/MS RT = 1.03 min (Kolona: Phenomenex Luna 30 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min).

Korak 2: Metil 9-metoksi-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0641] Metil 9-metoksi-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (40.0 mg, 0.113 mmol), (R)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil metansulfonat (pripremljen u putu do 5-{9-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazola, 61.0 mg, 0.226 mmol), i cezijum karbonat (147 mg, 0.451 mmol) su mešani u DMF-u (564 µL) na 60 °C pod N2(g) tokom 16 h. Isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom, i materijal je korišćen bez dodatnog prečišćavanja. LC/MS (M+H) = 529.5; LC/MS RT = 1.39 min (Kolona: Phenomenex Luna 30 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min).

Korak 3: 2-{9-Metoksi-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0642] Metilmagnezijum bromid (1120 µL, 3.35 mmol) je dodat u promešani rastvor metil 9-metoksi-3-[4-(2H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (59.0 mg, 0.112 mmol) u THF-u (1120 µL) pod N2(g) na -20 °C. Reakcija je mešana na toj temperaturi tokom 1 h. Reakciona smeša je kvenčovana sa zasićenim vodenim amonijum hloridom (8 mL) i razblažena sa etil acetatom (20 mL) dok je još na -20 °C. Reakciona smeša je uklonjena iz hladnog kupatila i dozvoljeno je da se zagreje do ambijentalne temperature. Slojevi su razdvojeni, i vodena faza je oprana sa drugim delom etil acetata (20 mL). Kombinovane organske supstance su osušene preko natrijum sulfata, Čvrsta supstance su isfiltrirane, i isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 metanol: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 metanol: voda sa 10-mM amonijum acetatom;

2 4

Gradijent: 30-70% B tokom 30 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da se dobije 2-{9-metoksi-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol (20.4 mg, 0.0370 mmol, 33%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.47 (s, 1H), 8.38-8.22 (m, 1H), 7.74-7.59 (m, 3H), 7.36-7.28 (m, 2H), 7.28-7.21 (m, 1H), 7.01 (s, 1H), 5.78 (d, J=11.4 Hz, 1H), 4.03-3.95 (m, 6H), 3.89 (d, J=12.1 Hz, 1H), 3.74 (d, J=10.6 Hz, 1H), 3.51-3.45 (m, 2H), 3.25 (t, J=11.4 Hz, 1H), 1.73 (d, J=13.6 Hz, 1H), 1.59 (d, J=6.6 Hz, 7H), 1.35-1.20 (m, 1H), 0.97 (d, J=13.2 Hz, 1H); LC/MS (M+H) = 529.5; LC/MS RT = 1.18 min (Kolona: Phenomenex Luna 30 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min).

Primeri 274 & 275

[0643] Jedinjenja u Tabeli 11 su pripremljena u skladu sa procedurama opisanim za 2-{9-metoksi-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol:

Tabela 11

HPLC Uslo

faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min.

Primer 276

2

2-{8-Fluoro-5-[(S)-(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0644]

Korak 1: Metil 8-fluoro-5-[(S)-(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0645] Metil 8-fluoro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (pripremljen u putu do 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-8-fluoro-5-[(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ola, 105 mg, 0.307 mmol), (R)-(2-fluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil metansulfonat (pripremljen slično Koraku 2 u putu do 5-{9-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazola, 221 mg, 0.767 mmol), i cezijum karbonat (400 mg, 1.23 mmol) su mešani u DMF-u (1530 µL) na 60 °C pod N2(g) tokom 16 h. Isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom, i metil 8-fluoro-5-[(S)-(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat je korišćen bez dodatnog prečišćavanja. LC/MS (M+H) = 535.3; LC/MS RT = 2.48 min (Kolona: Phenomenex Luna 30 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min).

Korak 2: 2-{8-Fluoro-5-[(S)-(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0646] Metilmagnezijum bromid (2990 µL, 8.98 mmol) je dodat u promešani rastvor metil 8-fluoro-5-[(S)-(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (160 mg, 0.299 mmol) u THF-u (2990 µL) pod N2(g) na -20 °C. Reakcija je mešana na toj temperaturi tokom 1 h. Reakciona smeša je kvenčovana sa zasićenim vodenim amonijum hloridom (8 mL) i razblažena sa etil acetatom (20 mL) dok je još na -20 °C. Smeša je uklonjena iz hladnog kupatila i dozvoljeno je da se zagreje do ambijentalne temperature. Slojevi su razdvojeni, i vodena faza je oprana sa drugim delom etil acetata (20 mL). Kombinovane organske supstance su osušene preko natrijum sulfata, čvrste

2

supstance su isfiltrirane, i isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Gradijent: 25-65% B tokom 15 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja.

[0647] Materijal je dalje prečišćen putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 metanol: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 metanol: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 40-80% B tokom 20 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da se dobije 2-{8-fluoro-5-[(S)-(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol (16.3 mg, 0.0290 mmol, 10%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.54 (s, 1H), 8.42 (br. s., 1H), 8.14 (br. s., 2H), 7.88 (d, J=11.0 Hz, 1H), 7.43-7.28 (m, 2H), 7.17-7.10 (m, 1H), 5.94 (br. s., 1H), 5.55 (s, 1H), 4.00 (br. s., 3H), 3.90 (d, J=9.2 Hz, 1H), 3.72 (d, J=11.0 Hz, 1H), 3.54-3.44 (m, 1H), 3.40 (br. s., 1H), 3.26-3.11 (m, 1H), 1.74 (d, J=11.7 Hz, 1H), 1.64-1.48 (m, 7H), 1.32 (d, J=11.7 Hz, 1H), 0.79 (br. s., 1H); LC/MS (M+H) = 535.3; LC/MS RT = 2.23 min (Kolona: Phenomenex Luna 30 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min).

Primer 277

2-{8-Fluoro-5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0648]

Korak 1: 2-{8-Fluoro-5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

2

[0649] 2- {8-Fluoro-5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol (12.3 mg, 22.0 µmol, 7%) je pripremljen u skladu sa procedurama opisanim za 2-{8-fluoro-5-[(S)-(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol.<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.53 (s, 1H), 8.44 (br. s., 1H), 8.21 (br. s., 1H), 7.90 (d, J=11.0 Hz, 1H), 7.72-7.66 (m, 2H), 7.18 (t, J=8.8 Hz, 2H), 5.76 (d, J=10.6 Hz, 1H), 5.61 (s, 1H), 4.01 (s, 3H), 3.90 (d, J=8.8 Hz, 1H), 3.74 (d, J=9.2 Hz, 1H), 3.41-3.38 (m, 2H), 3.25 (t, J=11.2 Hz, 1H), 1.68 (d, J=13.2 Hz, 1H), 1.64-1.44 (m, 7H), 1.36-1.21 (m, 1H), 0.97 (d, J=12.8 Hz, 1H); LC/MS (M+H) = 535.3; LC/MS RT = 2.30 min (Kolona: Phenomenex Luna 30 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min).

Primer 278

2-{6-Fluoro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0650]

Korak 1: 5-{7-Hloro-6-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol

[0651] 5-{7-Hloro-6-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol (680 mg, 2.13 mmol, 85%) je pripremljen od 3-bromo-7-hloro-6-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indola (pripremljenog u putu do 1-ciklopropil-1-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]etan-1-ola) u skladu sa Korakom 1 u putu do 5-{9-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazola.<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 12.47 (s, 1H), 8.63 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.11-8.05 (m, 2H), 7.43 (dd, J=8.6, 6.4 Hz, 1H), 4.01 (s, 3H); LC/MS (M+H) = 319.2; LC/MS RT = 1.30 min (Kolona: Phenomenex Luna 30 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min).

2

Korak 2: 5-{7-Hloro-6-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol

[0652] Di-terc-butil azodikarboksilat (108 mg, 0.471 mmol) u THF-u (1 mL) je dodat u kapima u promešani rastvor trifenilfosfina (123 mg, 0.471 mmol) u THF-u (2350 µL) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana tokom 10 min pre nego što je (R)-oksan-4-il(fenil)metanol (pripremljen u putu do (S)-2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-6]indol-7-il]propan-2-ola, 90.0 mg, 0.471 mmol) dodat u jednom delu. Reakcija je mešana tokom dodatnih 10 min pre nego što je 3-bromo-7-hloro-6-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol (75.0 mg, 0.235 mmol) u THF-u (1 mL) dodat u kapima tokom dodatnih 10 min. Reakciona smeša je ostavljena da se zagreje do ambijentalne temperature tokom 16 h. TFA (181 µL, 2.35 mmol) je dodat, i reakciona smeša je mešana tokom 10 min. Monobazni kalijum fosfat (5 mL, 1.5 M) je dodat u reakcionu smešu, praćeno etil acetatom (10 mL). Slojevi su razdvojeni, i organske supstance su osušene preko natrijum sulfata. Vodeni sloj je opran sa etil acetatom (2 x 10 mL), i kombinovane organske supstance su osušene preko natrijum sulfata. Čvrsta supstance su isfiltrirane, i isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen primenom preparativne HPLC na reverznoj fazi (TFA/Acetonitril/voda). 5-{7-Hloro-6-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol (116 mg, 0.235 mmol, 100 %) je izolovan kao žuto ulje. LC/MS (M+H) = 494.1; LC/MS RT = 1.88 min (Kolona: Phenomenex Luna 30 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min).

Korak 3: 1-{6-Fluoro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}etan-1-on

[0653] Rastvor 5-{7-hloro-6-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazola (116 mg, 0.235 mmol), tributil(1-etoksivinil)kalaja (170 mg, 0.471 mmol), Pd2(dba)3(21.6 mg, 0.0240 mmol), tricikloheksilfosfina (13.2 mg, 0.0470 mmol), i cezijum karbonata (153 mg, 0.471 mmol) u dioksanu (2350 µL) je degasiran sa N2(g) tokom 3 min. Reakciona smeša je zatim mešana na 105 °C tokom 72 h. IN vodena HCl (2 mL) je dodata u kapima, i reakciona smeša je mešana tokom 20 min. Reakciona smeša je kvenčovana sa 1.5 M vodenim monobaznim kalijum fosfatom (5 mL), i slojevi su razdvojeni. Vodeni sloj je opran sa etil acetatom (3 x 10 mL). Kombinovane organske supstance su osušene preko natrijum sulfata. Čvrste supstance su isfiltrirane, i isparljive

2

supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom. 1-{6-Fluoro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}etan-1-on je korišćen bez dodatnog prečišćavanja. LC/MS (M+H) = 501.5; LC/MS RT = 1.60 min (Kolona: Phenomenex Luna 30 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min).

Korak 4: 2-{6-Fluoro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0654] Metilmagnezijum bromid (2360 µL, 7.07 mmol) je dodat u promešani rastvor 1-{6-fluoro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}etan-1-ona (118 mg, 0.236 mmol) u THF-u (2360 µL) pod N2(g) na -20 °C. Reakcija je mešana na toj temperaturi tokom 1 h. Reakciona smeša je kvenčovana sa zasićenim vodenim amonijum hloridom (8 mL) i razblažena sa etil acetatom (20 mL) dok je još na -20 °C. Smeša je uklonjena iz hladnog kupatila i dozvoljeno je da se zagreje do ambijentalne temperature. Slojevi su razdvojeni, i vodena faza je oprana sa drugim delom etil acetata (20 mL). Kombinovane organske supstance su osušene preko natrijum sulfata, čvrste supstance su isfiltrirane, i isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 25-65% B tokom 15 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da se dobije 2-{6-fluoro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol (11.1 mg, 0.0210 mmol, 9%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ: 8.51 (br. s., 1H), 8.17 (br. s., 1H), 8.02 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.54-7.66 (m, 3H), 7.29-7.37 (m, 2H), 7.21-7.28 (m, 1H), 5.97 (br. s., 1H), 3.82-3.97 (m, 4H), 3.75 (d, J=7.7 Hz, 1H), 3.48 (t, J=11.0 Hz, 2H), 3.28 (t, J=11.6 Hz, 1H), 1.79 (d, J=11.7 Hz, 1H), 1.68 (s, 6H), 1.33 (d, J=10.6 Hz, 2H), 1.07 (d, J=12.1 Hz, 1H); LC/MS (M+H) = 517.5; LC/MS RT = 1.46 min (Kolona: Phenomenex Luna 30 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min).

Primer 279

2

2-{8-Fluoro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0655]

Korak 1: 5-{7-Hloro-8-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol

[0656] 5-{7-Hloro-8-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1, 2,3-triazol (334 mg, 1.05 mmol, 78%) je pripremljen od 3-bromo-7-hloro-8-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indola (pripremljenog u putu do 1-ciklopropil-1-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-8-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]etan-1-ola) u skladu sa Korakom 1 u putu do 5-{9-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazola.<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 11.84 (s, 1H), 8.58 (d, J=1.9 Hz, 1H), 8.20 (d, J=9.0 Hz, 1H), 8.11 (d, J=1.9 Hz, 1H), 7.85 (d, J=6.0 Hz, 1H), 4.01 (s, 1H); LC/MS (M+H) = 319.2; LC/MS RT = 1.28 min (Kolona: Phenomenex Luna 30 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min).

Korak 2: 5-{7-Hloro-8-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol

[0657] 5-{7-Hloro-8-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol (60.7 mg, 0.123 mmol, 78%) je pripremljen od 5-{7-hloro-8-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazola u skladu sa Korakom 2 u putu do 2-{6-fluoro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola. LC/MS (M+H) = 493.5; LC/MS RT = 1.74 min (Kolona: Phenomenex Luna 30 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min).

Korak 3: 1-{8-Fluoro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}etan-1-on

2 1

[0658] 1-{8-Fluoro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}etan-1-on je pripremljen od 5-{7-hloro-8-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazola u skladu sa Korakom 3 u putu do 2-{6-fluoro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola. LC/MS (M+H) = 501.3; LC/MS RT = 1.15 min (Kolona: Waters Aquity BEH C18 2.1 X 50 mm 1.7u; Mobilna faza A: voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: Acetonitril sa 0.05% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 2-98% B tokom 1.5 min; Protok: 0.8 mL/min).

Korak 4: 2-{8-Fluoro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0659] 2-{8-Fluoro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol (4.40 mg, 8.52 µmol, 17%) je pripremljen od 1-{8-fluoro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}etan-1-ona u skladu sa Korakom 4 u putu do 2-{6-fluoro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola.<1>H NMR (DMSO-d6) δ: 8.53 (s, 1H), 8.38-8.49 (m, 1H), 8.20-8.27 (m, 1H), 7.89 (d, J=11.0 Hz, 1H), 7.66 (d, J=7.7 Hz, 2H), 7.31-7.39 (m, 2H), 7.23-7.30 (m, 1H), 5.74 (d, J=11.4 Hz, 1H), 4.01 (s, 3H), 3.90 (d, J=10.6 Hz, 1H), 3.74 (d, J=9.5 Hz, 1H), 3.46 (t, J=11.6 Hz, 1H), 3.32-3.39 (m, 1H), 3.26 (t, J=11.2 Hz, 1H), 1.71 (d, J=12.5 Hz, 1H), 1.48-1.65 (m, 7H), 1.31 (d, J=9.2 Hz, 1H), 0.98 (d, J=12.5 Hz, 1H); LC/MS (M+H) = 517.3; LC/MS RT = 1.45 min (Kolona: Phenomenex Luna 30 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min). Primeri 280 & 281

2-{5-[(2,4-Difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0660]

2 2

Korak 1: Metil 3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0661] Metil 3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (400 mg, 1.23 mmol, 100%) je pripremljen od metil 3-bromo-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata u skladu sa Korakom 1 u putu do 5-{9-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazola.<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ: 11.94 (s, 1H), 8.62 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.36 (d, J=8.2 Hz, 1H), 8.26 (dd, J=1.3, 0.7 Hz, 1H), 8.17 (d, J=1.9 Hz, 1H), 7.91 (dd, J=8.2, 1.4 Hz, 1H), 4.03 (s, 3H), 3.94 (s, 3H).

Korak 2: Metil 5-[(2,4-difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0662] Metil 5-[(2,4-difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat je pripremljen od metil 3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata i (2,4-difluorofenil)(oksan-4-il)metanola (pripremljenog u putu do 2-{5-[(2,4-difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola) u skladu sa Korakom 2 u putu do 2-{6-fluoro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola. LC/MS (M+H) = 535.1; LC/MS RT = 1.15 min (Kolona: Waters Aquity BEH C182.1 X 50 mm 1.7u; Mobilna faza A: voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: Acetonitril sa 0.05% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 2-98% B tokom 1.5 min; Protok: 0.8 mL/min).

Korak 3: 2-{5-[(2,4-Difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0663] 2-{5-[(2,4-Difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol je pripremljen od metil 5-[(2,4-difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil- 1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata u skladu sa Korakom 2 u putu do 2-{6-fluoro-5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola. Enantiomeri A i B su razdvojeni primenom hiralne SFC (Kolona: Chiralcel OD-H preparativna kolona, 30 x 250 mm, 5µm; Mobilna faza: 15% metanol u CO2, 150 Bara; Protok: 70 mL/min; Temperatura 35 °C). Enantiomer koji prvi eluira je definisan

2

kao Enantiomer A (11.4 mg, 0.0210 mmol, 13%), i enantiomer koji drugi eluira je definisan kao Enantiomer B (13.7 mg, 0.0250 mmol, 15%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ: 8.35-8.72 (m, 2H), 8.28 (d, J=7.0 Hz, 1H), 8.15 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.98 (br. s, 1H), 7.47 (d, J=7.7 Hz, 1H), 7.12-7.24 (m, 2H), 5.99 (d, J=11.0 Hz, 1H), 4.02 (br. s., 3H), 3.85-3.94 (m, 1H), 3.72 (d, J=8.8 Hz, 1H), 3.34-3.54 (m, 2H), 3.14-3.25 (m, 2H), 1.66-1.78 (m, 1H), 1.45-1.66 (m, 6H), 1.28-1.42 (m, 1H), 0.74-0.89 (m, 1H); LC/MS (M+H) = 535.6; LC/MS RT = 1.32 min (Kolona: Phenomenex Luna 30 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min).

Primeri 282 & 283

2-{5-[(2,4-Difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-6-fluoro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0664]

Korak 1: 2-{5-[(2,4-Difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-6-fluoro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0665] 2-{5-[(2,4-Difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-6-fluoro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol je pripremljen od prethodno opisanih početnih materijala praćenjem puta do 2-{5-[(2,4-difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola.

Enantiomeri A i B su razdvojeni primenom hiralne preparativne HPLC (Kolona: Chiralpak OD 21 X 250 mm 10u; Mobilna faza: 13% etanol u heptanu sa 0.1% dietilaminom; Protok: 15 mL/min). Enantiomer koji prvi eluira je definisan kao Enantiomer A (3.50 mg, 6.33 µmol, 6%), i enantiomer koji drugi eluira je definisan kao Enantiomer B (3.70 mg, 6.70 µmol, 6%).

<1>H NMR (DMSO-d6) δ: 8.49-8.56 (m, 1H), 8.22-8.33 (m, 1H), 8.07-8.14 (m, 1H), 8.00 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.58-7.68 (m, 1H), 7.10-7.24 (m, 2H), 6.17-6.30 (m, 1H), 3.85-3.95 (m, 4H), 3.71-3.83 (m, 1H), 3.25 (t, J=11.9 Hz, 1H), 3.17 (d, J=4.8 Hz, 2H), 1.74-1.81 (m, 1H), 1.66 (br. s., 6H), 1.31-1.43 (m, 2H), 0.99-1.09 (m, 1H); LC/MS (M+H) = 553.3; LC/MS RT =

2 4

1.50 min (Kolona: Phenomenex Luna 30 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min).

Primer 284

2-{5-[(S)-(4-Fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[5-(<2>H3)metil-3-metil-1,2-oksazol-4-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0666]

Korak 1: Metil

3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0667] Metil 3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat je pripremljen od metil 3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (pripremljenog u putu do 2-[3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ola) i (R)-(4-fluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil metansulfonata u skladu sa Koracima 2 i 3 u putu do 5-{9-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazola). LC/MS (M+H) = 514.3; LC/MS RT = 1.71 min (Kolona: Phenomenex Luna 30 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min).

Korak 2:

2-[3-(Dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0668] 2-[3-(Dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol (40.0 mg, 0.0780 mmol, 50%) je pripremljen od metil 3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata u skladu sa Korakom 2 u putu do 2-{6-fluoro-5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil- 1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-

2

ola. LC/MS (M+H) = 514.3; LC/MS RT = 1.36 min (Kolona: Phenomenex Luna 30 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min).

Korak 3: 2-{5-[(S)-(4-Fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[5-(<2>H3)metil-3-metil-1,2-oksazol-4-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0669] 2-[3-(Dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol (40.0 mg, 0.0780 mmol) i natrijum terc-butoksid (44.9 mg, 0.467 mmol) su mešani u CD3OD-u (779 µL) na 80 °C tokom 16 h. Sirov materijal je prečišćen putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 40-80% B tokom 15 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da se dobije 2-{5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[5-(<2>H3)metil-3-metil-1,2-oksazol-4-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol (8.40 mg, 0.0160 mmol, 20%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.42 (s, 1H), 8.23 (br. s., 1H), 8.12 (d, J=8.1 Hz, 2H), 7.75-7.63 (m, 2H), 7.45 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.16 (t, J=8.6 Hz, 2H), 5.80 (d, J=11.0 Hz, 1H), 3.90 (d, J=5.1 Hz, 1H), 3.74 (d, J=11.0 Hz, 1H), 3.54-3.29 (m, 4H), 3.25 (t, J=11.6 Hz, 1H), 2.30 (s, 3H), 1.69 (d, J=12.5 Hz, 1H), 1.58 (s, 6H), 1.30 (d, J=8.8 Hz, 1H), 0.99 (d, J=12.5 Hz, 1H); LC/MS (M+H) = 517.3; LC/MS RT = 1.36 min (Kolona: Phenomenex Luna 30 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min). Primer 285

2-{5-[(S)-(2-Fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[5-(<2>H3)metil-3-metil-1,2-oksazol-4-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0670]

2

[0671] 2-{5-[(S)-(2-Fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[5-(<2>H3)metil-3-metil-1,2-oksazol-4-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol (23.0, 0.0450 mmol, 38%) je pripremljen u skladu sa procedurama opisanim za 2-{5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[5-(<2>H3)metil-3-metil-1,2-oksazol-4-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol.<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.42 (s, 1H), 8.30-8.07 (m, 3H), 7.95 (s, 1H), 7.44 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.39-7.26 (m, 2H), 7.11 (t, J=9.4 Hz, 1H), 5.98 (d, J=11.4 Hz, 1H), 3.90 (d, J=5.9 Hz, 1H), 3.72 (d, J=11.0 Hz, 1H), 3.55-3.32 (m, 3H), 3.27-3.14 (m, 1H), 2.29 (br. s., 3H), 1.74 (d, J=12.8 Hz, 1H), 1.67-1.43 (m, 7H), 1.43-1.25 (m, 1H), 0.81 (d, J=12.1 Hz, 1H); LC/MS (M+H) = 517.4; LC/MS RT = 1.37 min (Kolona: Phenomenex Luna 30 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min).

Primeri 286 & 287

2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(5-metil-1,2-oksazol-3-il)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0672]

Korak 1: (5-Metil-1,2-oksazol-3-il)(oksan-4-il)metanol

[0673] 4-Bromooksan (270 µL, 2.42 mmol) je dodat u kapima u promešanu suspenziju magnezijuma (58.9 mg, 2.42 mmol) i jednog kristala joda u THF-u (1700 µL) na aambijentalnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana tokom 1 h pre nego što je 5-metil-1,2-oksazol-3-karbaldehid (119 µL, 1.28 mmol) dodat u jednom delu. Reakciona smeša je potom mešana tokom 16 h. Reakciona smeša je kvenčovana sa minimalnom količinom zasićenog vodenog amonijum hlorida (5 mL), i isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom. Sirov reakcioni materijal je prečišćen primenom preparativne HPLC na reverznoj fazi (TFA/Acetonitril/voda). (5-Metil-1,2-oksazol-3-il)(oksan-4-il)metanol (90.9 mg, 0.461 mmol, 36 %) je izolovan kao bezbojno ulje. LC/MS (M+H) = 198.2; LC/MS RT = 0.84 min (Kolona: Phenomenex Luna 30 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90

2

acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min).

Korak 2: (5-Metil-1,2-oksazol-3-il)(oksan-4-il)metil metansulfonat

[0674] (5-Metil-1,2-oksazol-3-il)(oksan-4-il)metil metansulfonat (119 mg, 0.431 mmol, 94%) je pripremljen od (5-metil-1,2-oksazol-3-il)(oksan-4-il)metanola u skladu sa Korakom 2 u putu do 5-{9-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazola.<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 6.37 (s, 1H), 5.46 (d, J=7.8 Hz, 1H), 3.92-3.79 (m, 2H), 3.42-3.18 (m, 2H), 3.16 (s, 3H), 2.42 (s, 3H), 2.12 (dtd, J=11.5, 7.6, 3.9 Hz, 1H), 1.70 (d, J=11.8 Hz, 1H), 1.47-1.18 (m, 2H), 0.98 (br. s., 1H).

Korak 3: Metil 3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(5-metil-1,2-oksazol-3-il)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0675] Metil 3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(5-metil-1,2-oksazol-3-il)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat je pripremljen od (5-metil-1,2-oksazol-3-il)(oksan-4-il)metil metansulfonata i metil 3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (pripremljenog u putu do 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ola) u skladu sa Korakom 3 u putu do 5-{9-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazola. LC/MS (M+H) = 501.3; LC/MS RT = 1.42 min (Kolona: Phenomenex Luna 30 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min).

Korak 4: 2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(5-metil-1,2-oksazol-3-il)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0676] 2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(5-metil-1,2-oksazol-3-il)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol je pripremljen od metil 3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(5-metil-1,2-oksazol-3-il)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata u skladu sa Korakom 3 u putu do 2-{3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola. Sirov materijal je prečišćen putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 15-65% B tokom 30 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže

2

željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da se dobije racemski 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(5-metil-1,2-oksazol-3-il)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol. Enantiomeri A i B su razdvojeni primenom hiralne preparativne HPLC (Kolona: Chiralpak OD 21 X 250 mm 10u; Mobilna faza: 10% etanol u heptanu sa 0.1% dietilaminom; Protok: 15 mL/min). Enantiomer koji prvi eluira je definisan kao Enantiomer A (6.10 mg, 0.0120 mmol, 4%), i enantiomer koji drugi eluira je definisan kao Enantiomer B (6.00 mg, 0.0120 mmol, 4%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.56 (d, J=1.5 Hz, 1H), 8.34 (br. s., 1H), 8.17 (d, J=8.1 Hz, 1H), 8.04 (br. s., 1H), 7.50 (d, J=8.1 Hz, 1H), 6.30 (br. s., 1H), 5.97 (d, J=11.0 Hz, 1H), 4.04 (s, 3H), 3.92 (d, J=6.6 Hz, 1H), 3.69 (d, J=8.1 Hz, 1H), 3.41 (t, J=10.8 Hz, 1H), 3.19 (q, J=11.9 Hz, 2H), 2.35-2.28 (m, 6H), 1.71-1.59 (m, 1H), 1.56 (s, 6H), 1.33-1.15 (m, 2H), 0.86 (d, J=10.3 Hz, 1H); LC/MS (M+H) = 501.3; LC/MS RT = 1.19 min (Kolona: Phenomenex Luna 30 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min).

Primeri 288-307

[0677] Jedinjenja u Tabeli 12 su pripremljena od komercijalno dostupnih ili prethodno dobijenih početnih materijala u skladu sa analognim procedurama opisanim za 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(5-metil-1,2-oksazol-3-il)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol, 2-{6-fluoro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, ili 2-{5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[5-(<2>H3)metil-3-metil-1,2-oksazol-4-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol:

Tabela 12

2

21

[0678] Napomena A: Finalna jedinjenja su pripremljena primenom metillitijuma u skladu sa Korakom 3 u putu do 2-{3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola. Napomena B: (3-Metil-1,2,4-oksadiazol-5-il)(oksan-4-il)metanol pripremljen u skladu sa Amarasinghe, K. D. D.; et al. Tetrahedron Lett.2006, 47, 3629-3631.

[0679] HPLC Uslovi za Tabelu 12: Metoda A: Kolona: Chiralcel OD 21 x 250 mm 10 µm; Mobilna faza: 20:80 etanol:heptan sa 0.1% dietilaminom; Protok: 15 mL/min. Metoda B: Kolona: Chiralcel AD-H preparativna kolona, 30 x 250 mm, 5µm; Mobilna faza: 10% metanol u CO2, 100 Bara; Protok: 70 mL/min. Metoda C: Kolona: Phenomenex Luna C1850 x 2.0 MM 3u; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 0.8 mL/min. Metoda D: Kolona: Phenomenex Luna C1850 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 0.8 mL/min. Metoda E: Kolona: Chiralcel OD 21 x 250 mm 10 µm; Mobilna faza: 15:85 etanol:heptan sa 0.1% dietilaminom; Protok: 15 mL/min. Metoda F: Kolona: Chiralcel OD-H preparativna kolona,

2 2

30 x 250 mm, 5µm; Mobilna faza: 20% metanol u CO2, 150 Bara; Protok: 70 mL/min. Metoda G: Kolona: Chiralcel OD-H preparativna kolona, 30 x 250 mm, 5µm; Mobilna faza: 15% metanol u CO2, 150 Bara; Protok: 70 mL/min. Metoda H: Kolona: Waters BEH C18, 2.0 x 50 mm, 1.7-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0% B, 0-100% B tokom 3 min, potom 0.5-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1 mL/min. Metoda I: Kolona: Chiralpak AD 21 x 250 mm 10 µm; Mobilna faza: 12:78 etanol:heptan sa 0.1% dietilaminom; Protok: 15 mL/min. Metoda J: Kolona: Chiralcel OD-H preparativna kolona, 30 x 250 mm, 5µm; Mobilna faza: 10% metanol u CO2, 150 Bara; Protok: 70 mL/min.

Primeri 308 & 309

2-{5-[(5-Metil-1,2-oksazol-3-il)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0680]

Korak 1: Metil 5-[(5-metil-1,2-oksazol-3-il)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0681] Metil 5-[(5-metil-1,2-oksazol-3-il)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat je pripremljen od metil 3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (pripremljenog u putu do 2-{5-[(2,4-difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola) i (5-metil-1,2-oksazol-3-il)(oksan-4-il) metansulfonata (pripremljenog u Koraku 2 u putu do 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(5-metil-1,2-oksazol-3-il)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ola) u skladu sa Korakom 3 u putu do 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(5-metil-1,2-oksazol-3-il)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ola. LC/MS (M+H) = 504.3; LC/MS RT = 1.43 min (Kolona: Phenomenex Luna 30 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90

2

Korak 2: 2-{5-[(5-Metil-1,2-oksazol-3-il)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0682] 2-{5-[(5-Metil-1,2-oksazol-3-il)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol je pripremljen od metil 5-[(5-metil-1,2-oksazol-3-il)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata u skladu sa procedurom opisanom u Koraku 2 u putu do metil 6-fluoro-5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata. Sirov materijal je prečišćen putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 20-60% B tokom 15 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da se dobije racemski 2-{5-[(5-metil-1,2-oksazol-3-il)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol. Enantiomeri A i B su razdvojeni primenom hiralne preparativne HPLC (Kolona: Chiralcel OD 21 X 250 mm 10µm čestice; Mobilna faza A: heptan sa 0.1% dietilaminom; Mobilna faza B: etanol; Gradijent: 12% B tokom 41 min; Protok: 15 mL/min). Enantiomer koji prvi eluira je definisan kao Enantiomer A (6.60 mg, 0.0130 mmol, 9%), i enantiomer koji drugi eluira je definisan kao Enantiomer B (6.90 mg, 0.0140 mmol, 9%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.56 (s, 1H), 8.32 (br. s., 1H), 8.17 (d, J=8.1 Hz, 1H), 8.03 (br. s., 1H), 7.50 (d, J=8.1 Hz, 1H), 6.30 (br. s., 1H), 5.97 (d, J=11.0 Hz, 1H), 4.04 (s, 3H), 3.95-3.88 (m, 1H), 3.69 (d, J=9.5 Hz, 1H), 3.46-3.32 (m, 1H), 3.26-3.13 (m, 2H), 2.32 (s, 3H), 1.90 (d, J=11.7 Hz, 1H), 1.70-1.59 (m, 1H), 1.56 (s, 6H), 1.33-1.19 (m, 1H), 0.87 (d, J=11.0 Hz, 1H); LC/MS (M+H) = 504.5; LC/MS RT = 1.22 min (Kolona: Phenomenex Luna 30 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min).

Primeri 310-329

[0683] Jedinjenja u Tabeli 13 su pripremljena od komercijalno dostupnih ili prethodno dobijenih početnih materijala u skladu sa analognim procedurama opisanim za 2-{5-[(5-metil-1,2-oksazol-3-il)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-

2 4

pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, 2-{6-fluoro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, 2-{8-fluoro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, 2-{5-[(S)-(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[5-(<2>H3)metil-3-metil-1,2-oksazol-4-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, ili (1R)-1-ciklopropil-1-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]etan-1-ol. Sva jedinjenja su homohiralna:

Tabela 13

2

[0684] Napomena A: Finalna jedinjenja su pripremljena primenom metillitijuma u skladu sa Korakom 3 u putu do 2-{3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola.

[0685] HPLC Uslovi za Tabelu 13: Metoda A: Kolona: Chiralcel OJ-H preparativna kolona, 30 x 250 mm, 5µm; Mobilna faza: 30% metanol u CO2, 140 Bara; Protok: 70 mL/min. Metoda B: Kolona: Chiralcel OJ 21 x 250 mm 10 µm; Mobilna faza: 10:90 etanol:heptan sa 0.1% dietilaminom; Protok: 15 mL/min. Metoda C: Kolona: Chiralcel OD-H preparativna kolona, 30 x 250 mm, 5µm; Mobilna faza: 15% metanol u CO2, 150 Bara; Protok: 70 mL/min. Metoda D: Kolona: Chiralcel AD-H Preparativna Kolona, 30 x 250 mm, 5µm; Mobilna faza: 10% etanol u CO2, 150 Bara; Protok: 70 mL/min. Metoda E: Kolona: Chiralcel OD 21 x 250 mm 10 µm; Mobilna faza: 15:85 etanol:heptan sa 0.1% dietilaminom; Protok: 15 mL/min. Metoda F: Kolona: Chiralpak AD 21 x 250 mm 10 µm; Mobilna faza: 8:92 etanol:heptan sa 0.1% dietilaminom; Protok: 15 mL/min. Metoda G: Kolona: Chiralcel OJ-H preparativna kolona, 30 x 250 mm, 5µm; Mobilna faza: 10% metanol u CO2, 150 Bara; Protok: 70 mL/min. Metoda H: Kolona: Chiralpak IB preparativna kolona, 30 x 250 mm, 5µm; Mobilna faza: 10% metanol u CO2, 150 Bara; Protok: 70 mL/min. Metoda I: Kolona: Chiralcel OD 21 x 250 mm 10 µm; Mobilna faza: 25:75 etanol:heptan sa 0.1% dietilaminom; Protok: 15 mL/min. Metoda J: Kolona: Lux Cellulose-2 preparativna kolona, 21 x 250 mm, 5µm; Mobilna faza: 20% etanol u CO2, 150 Bara; Protok: 50 mL/min.

Primeri 330 & 331

5-{7-Metansulfonil-5-[(5-metil-1,2-oksazol-3-il)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol

[0686]

Korak 1: 5-{7-Metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol

2

[0687] 5-{7-Metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1 ,2,3-triazol (233 mg, 0.677 mmol, >100% prinos) je pripremljen od 3-bromo-7-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indola i 4-(<2>H3)metil-1-metil-5-(tributilstanil)-1H-1,2,3-triazola (pripremljenog u putu do 5-{7-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazola) u skladu sa Korakom 1 u putu do 5-{9-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazola.<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 12.13 (s, 1H), 8.66 (d, J=1.5 Hz, 1H), 8.51-8.43 (m, 1H), 8.24-8.13 (m, 2H), 7.83 (dd, J=8.2, 1.1 Hz, 1H), 4.03 (s, 3H), 3.32 (s, 3H); LC/MS (M+H) = 345.3; LC/MS RT = 1.05 min (Kolona: Phenomenex Luna 30 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min). Korak 2: 5-{7-Metansulfonil-5-[(5-metil-1,2-oksazol-3-il)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol

[0688] 5-{7-Metansulfonil-5-[(5-metil-1,2-oksazol-3-il)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol je pripremljen od 5- {7-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazola i (5-metil-1,2-oksazol-3-il)(oksan-4-il)metil metansulfonata (pripremljenog u putu do 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(5-metil-1,2-oksazol-3-il)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ola) u skladu sa Korakom 3 u putu do 5- {9-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazola. Sirov materijal je prečišćen putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: Chiralcel OD 21 X 250 mm 10µm čestice; Mobilna faza A: heptan sa 0.1% dietilaminom; Mobilna faza B: etanol; Gradijent: 12% B tokom 41 min; Protok: 15 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da se dobije racemski 5-{7-metansulfonil-5-[(5-metil-1,2-oksazol-3-il)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol. Enantiomeri A i B su razdvojeni primenom hiralne SFC (Kolona: Chiralcel OJ-H preparativna kolona, 30 x 250 mm, 5µm; Mobilna faza: 20% metanol u CO2, 150 Bara; Protok: 70 mL/min). Enantiomer koji prvi eluira je definisan kao Enantiomer A (12.1 mg, 0.0230 mmol, 10%), i enantiomer koji drugi eluira je definisan kao Enantiomer B (12.6 mg, 0.0240 mmol, 10%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.79-8.58 (m, 2H), 8.52 (d, J=8.1 Hz, 2H), 7.90 (d, J=8.4 Hz, 1H), 6.38 (br. s., 1H), 6.18 (d, J=11.0 Hz, 1H), 4.06 (s, 3H), 3.92 (d, J=8.4 Hz, 1H), 3.68 (d, J=9.5 Hz, 1H), 3.42 (t, J=12.1 Hz, 1H), 3.29-3.12 (m, 2H), 2.33 (s, 3H), 1.87 (d, J=12.1 Hz, 1H), 1.68 (d, J=11.7 Hz, 1H), 1.37-1.21

2

(m, 1H), 0.88-0.76 (m, 1H); LC/MS (M+H) = 524.4; LC/MS RT = 1.28 min (Kolona: Phenomenex Luna 30 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min).

Primeri 332-340

[0689] Jedinjenja u Tabeli 14 su pripremljena od komercijalno dobijenih aldehida u skladu sa procedurama opisanim za 5-{7-metansulfonil-5-[(5-metil-1,2-oksazol-3-il)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol. Sva jedinjenja su homohiralna:

2

[0690] HPLC Uslovi za Tabelu 14: Metoda A: Kolona: Chiralpak AD 21 x 250 mm 10 µm; Mobilna faza: 18:82 etanol:heptan sa 0.1% dietilaminom; Protok: 15 mL/min. Metoda B: Kolona: Chiralpak AD 21 x 250 mm 10 µm; Mobilna faza: 25:75 etanol:heptan sa 0.1% dietilaminom; Protok: 15 mL/min. Metoda C: Kolona: Chiralpak AD-H preparativna kolona, 30 x 250 mm, 5µm; Mobilna faza: 10% metanol u CO2, 100 Bara; Protok: 70 mL/min. Metoda D: Kolona: Chiralcel OD 21 x 250 mm 10 µm; Mobilna faza: 30:70 etanol:heptan sa 0.1% dietilaminom; Protok: 15 mL/min. Metoda E: Kolona: Chiralpak AD 21 x 250 mm 10 µm; Mobilna faza: 10:90 etanol:heptan sa 0.1% dietilaminom; Protok: 15 mL/min. Metoda F: Kolona: Chiralpak AD 21 x 250 mm 10 µm; Mobilna faza: 12:88 etanol:heptan sa 0.1% dietilaminom; Protok: 15 mL/min. Metoda G: Kolona: Chiralpak AD 21 x 250 mm 10 µm; Mobilna faza: 15:85 etanol:heptan sa 0.1% dietilaminom; Protok: 15 mL/min.

Primeri 341 & 342

2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(1,3-dimetil-1H-pirazol-5-il)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0691]

Korak 1: (1,3-Dimetil-1H-pirazol-5-il)(oksan-4-il)metanol

[0692] (1,3-Dimetil-1H-pirazol-5-il)(oksan-4-il)metanol je pripremljen u skladu sa Korakom 1 u putu do 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(5-metil-1,2-oksazol-3-il)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ola. LC/MS (M+H) = 211.2; LC/MS RT = 0.92 min (Kolona: Phenomenex Luna 30 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa

2 1

0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min).

Korak 2: Metil 3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(1,3-dimetil-1H-pirazol-5-il)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0693] Metil 3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (pripremljen u putu do 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ola, 92.0 mg, 0.285 mmol), (1,3-dimetil-1H-pirazol-5-il)(oksan-4-il)metanol (90.0 mg, 0.428 mmol), i 2-(trimetilfosforaniliden)acetonitril (856 µL, 0.428 mmol) su mešani u toluenu (2850 µL) na 85 °C pod N2(g) tokom 16 h. Isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom, i reakcioni materijal je korišćen bez daljeg prečišćavanja. LC/MS (M+H) = 514.3; LC/MS RT = 0.98 min (Kolona: Waters Aquity BEH C18 2.1 X 50 mm 1.7u; Mobilna faza A: voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: Acetonitril sa 0.05% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 2-98% B tokom 1.5 min; Protok: 0.8 mL/min).

Korak 3: 2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(1,3-dimetil-1H-pirazol-5-il)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0694] 2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(1,3-dimetil-1H-pirazol-5-il)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol je pripremljen od metil 3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(1,3-dimetil-1H-pirazol-5-il)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata u skladu sa Korakom 3 u putu do 2-{3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil) metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola. Sirov materijal je prečišćen putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 15-45% B tokom 30 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da se dobije racemski 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(1,3-dimetil-1H-pirazol-5-il)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol. Enantiomeri A i B su razdvojeni primenom hiralne SFC (Kolona: ChiralPak IC-H, 30 x 250 mm, 5µm; Mobilna faza: 40% metanol u CO2, 150 Bara; Protok: 70 mL/min; Temperatura 35 °C). Enantiomer koji prvi eluira je definisan kao Enantiomer A (2.10 mg, 3.43 µmol, 2%), i enantiomer koji drugi eluira je definisan kao Enantiomer B (3.10 mg, 5.79 µmol, 3%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.54 (s, 1H), 8.41-8.01 (m, 2H), 7.52 (d, J=7.7 Hz, 1H), 7.39 (d, J=4.4 Hz, 1H), 6.84 (br. s., 1H), 5.96 (d, J=11.0 Hz, 1H), 4.01 (br. s., 3H), 3.91 (br. s., 1H), 3.68 (d, J=9.9 Hz, 1H), 3.43

2 2

(br. s., 1H), 3.21-3.05 (m, 2H), 2.30 (br. s., 3H), 2.14 (s, 3H), 1.97-1.82 (m, 1H), 1.72-1.46 (m, 7H), 1.31-1.21 (m, 3H), 0.89-0.77 (m, 1H), 0.72 (d, J=10.6 Hz, 1H); LC/MS (M+H) = 514.3; LC/MS RT = 0.87 min (Kolona: Waters Aquity BEH C182.1 X 50 mm 1.7u; Mobilna faza A: voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: Acetonitril sa 0.05% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 2-98% B tokom 1.5 min; Protok: 0.8 mL/min).

Primeri 343 & 344

2-{5-[(3-Fluoropiridin-4-il)(oksan-4-il)(<2>H)metil]-3-[5-(<2>H3)metil-3-metil-1,2-oksazol-4-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0695]

Korak 1: (3-Fluoropiridin-4-il)(oksan-4-il)metanol

[0696] (3-Fluoropiridin-4-il)(oksan-4-il)metanol (301 mg, 1.42 mmol, 47%) je pripremljen od 3-fluoropiridin-4-karbaldehida u skladu sa Korakom 1 u putu do 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(5-metil-1,2-oksazol-3-il)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ola. LC/MS (M+H) = 212.2; LC/MS RT = 0.40 min (Kolona: Phenomenex Luna 30 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min).

Korak 2: (3-Fluoropiridin-4-il)(oksan-4-il)metil metansulfonat

[0697] (3-Fluoropiridin-4-il)(oksan-4-il)metil metansulfonat je pripremljen od (3-fluoropiridin-4-il)(oksan-4-il)metanola u skladu sa Korakom 2 u putu do 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(5-metil-1,2-oksazol-3-il)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ola.

Korak 3: Metil 3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[(3-fluoropiridin-4-il)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0698] Metil 3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[(3-fluoropiridin-4-il)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat je pripremljen od metil 3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5H-

2

pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (pripremljenog u putu do 2-[3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-6]indol-7-il]propan-2-ola) i (3-fluoropiridin-4-il)(oksan-4-il)metil metansulfonata u skladu sa Korakom 3 u putu do 5-{9-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazola. LC/MS (M+H) = 515.7; LC/MS RT = 1.46 min (Kolona: Phenomenex Luna 30 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min).

Korak 4: 3-(Dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[(3-fluoropiridin-4-il)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0699] 2-[3-(Dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[(3-fluoropiridin-4-il)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol je pripremljen od metil 3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[(3-fluoropiridin-4-il)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata u skladu sa Korakom 3 u putu do 2-{3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola. LC/MS (M+H) = 515.3; LC/MS RT = 1.18 min (Kolona: Phenomenex Luna 30 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min).

Korak 5: 2-{5-[(3-Fluoropiridin-4-il)(oksan-4-il)(<2>H)metil]-3-[5-(<2>H3)metil-3-metil-1,2-oksazol-4-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0700] 2-{5-[(3-Fluoropiridin-4-il)(oksan-4-il)(<2>H)metil]-3-[5-(<2>H3)metil-3-metil-1,2-oksazol-4-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol je pripremljen od 2-[3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[(3-fluoropiridin-4-il)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ola u skladu sa Korakom 3 u putu do 2-{5-[(2,4-difluorofenil)(oksan-4-il)metil]-6-fluoro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola. Sirov materijal je prečišćen putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18, 19 x mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 20-60% B tokom 20 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da se dobije racemski 2-{5-[(3-fluoropiridin-4-il)(oksan-4-il)(<2>H)metil]-3-[5-(<2>H3)metil-3-metil-1,2-oksazol-4-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol. Enantiomeri A i B su razdvojeni primenom hiralne SFC (Kolona: Chiralcel OD-H preparativna kolona, 30 x

2 4

250 mm, 5µm; Mobilna faza: 20% metanol u CO2, 150 Bara; Protok: 70 mL/min; Temperatura 35 °C). Enantiomer koji prvi eluira je definisan kao Enantiomer A (1.90 mg, 3.66 µmol, 2%), i enantiomer koji drugi eluira je definisan kao Enantiomer B (2.10 mg, 3.89 µmol, 2%). LC/MS (M+H) = 519.3; LC/MS RT = 1.18 min (Kolona: Phenomenex Luna 30 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min).

Primeri 345 & 346

2-[3-(Dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[(3-fluoropiridin-2-il)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0701]

Korak 1: 2-[3-(Dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[(3-fluoropiridin-2-il)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0702] 2-[3-(Dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[(3-fluoropiridin-2-il)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol je analogno pripremljen u skladu sa Koracima 1-4 u putu do 2-{5-[(3-fluoropiridin-4-il)(oksan-4-il)(<2>H)metil]-3-[5-(<2>H3)metil-3-metil-1,2-oksazol-4-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola. Sirov materijal je prečišćen putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 30-70% B tokom 15 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da se dobije racemski 2-{5-[(3-fluoropiridin-4-il)(oksan-4-il)(2H)metil]-3-[5-(<2>H3)metil-3-metil-1,2-oksazol-4-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol. Enantiomeri A i B su razdvojeni primenom hiralne preparativne HPLC (Kolona: Chiralcel OJ 21 X 250 mm 10µm čestice; Mobilna faza A: heptan sa 0.1% dietilaminom; Mobilna faza B: etanol; Gradijent: 8% B tokom 110 min;

2

Protok: 15 mL/min). Enantiomer koji prvi eluira je definisan kao Enantiomer A (10.9 mg, 0.0210 mmol, 21%), i enantiomer koji drugi eluira je definisan kao Enantiomer B (9.00 mg, 0.0170 mmol, 17%).<1>H NMR (DMSO-d6) δ: 8.60 (br. s., 1H), 8.24-8.53 (m, 2H), 7.99-8.14 (m, 2H), 7.68 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.40-7.52 (m, 2H), 6.14 (d, J=10.6 Hz, 1H), 3.87 (d, J=10.3 Hz, 1H), 3.69 (d, J=10.3 Hz, 1H), 3.44-3.52 (m, 4H), 3.18 (t, J=11.7 Hz, 1H), 2.35 (br. s, 3H), 1.71 (br. s., 1H), 1.43-1.64 (m, 8H), 1.26-1.38 (m, 1H), 0.70 (d, J=12.8 Hz, 1H); LC/MS (M+H) = 515.5; LC/MS RT = 2.50 min (Kolona: Phenomenex Luna C18 50 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 0.8 mL/min).

Primeri 347 & 348

2-{5-[(3-Fluoropiridin-4-il)(oksan-4-il)metil]-9-metoksi-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0703]

Korak 1: Metil 3-bromo-5-[(3-fluoropiridin-4-il)(oksan-4-il)metil]-9-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0704] Metil 3-bromo-5-[(3-fluoropiridin-4-il)(oksan-4-il)metil]-9-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat je pripremljen od metil 3-bromo-9-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (pripremljenog u putu do 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-9-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ola) i (3-fluoropiridin-4-il)(oksan-4-il)metil metansulfonata (pripremljenog u putu do 2-{5-[(3-fluoropiridin-4-il)(oksan-4-il)(<2>H)metil]-3-[5-(<2>H3)metil-3-metil-1,2-oksazol-4-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola) u skladu sa Korakom 3 u putu do 5- {9-metansulfbnil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazola. LC/MS (M+H) = 528.2; LC/MS RT = 2.24 min (Kolona: Phenomenex Luna 30 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10

2

acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min).

Korak 2: 2-{3-Bromo-5-[(3-fluoropiridin-4-il)(oksan-4-il)metil]-9-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0705] 2-{3-Bromo-5-[(3-fluoropiridin-4-il)(oksan-4-il)metil]-9-metoksi-5H-pirido[3, 2-b]indol-7-il}propan-2-ol (22.3 mg, 0.0420 mmol, 12%) je pripremljen od metil 3-bromo-5-[(3-fluoropiridin-4-il)(oksan-4-il)metil]-9-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata u skladu sa Korakom 2 u putu do 2-{6-fluoro-5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ola. LC/MS (M+H) = 528.2; LC/MS RT = 1.83 min (Kolona: Phenomenex Luna 30 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min). Korak 3: 2-{5-[(3-Fluoropiridin-4-il)(oksan-4-il)metil]-9-metoksi-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0706] 2-{5-[(3-Fluoropiridin-4-il)(oksan-4-il)metil]-9-metoksi-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol je pripremljen u skladu sa Korakom 3 u putu do 5-{7-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazola. Sirov materijal je prečišćen putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; Gradijent: 10-50% B tokom 20 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da se dobije racemski 2-{5-[(3-fluoropiridin-4-il)(oksan-4-il)metil]-9-metoksi-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol. Enantiomeri A i B su razdvojeni primenom hiralne preparativne HPLC (Kolona: Chiralcel OJ 21 X 250 mm 10µm čestice; Mobilna faza A: heptan sa 0.1% dietilaminom; Mobilna faza B: etanol; Gradijent: 30% B tokom 30 min; Protok: 15 mL/min). Enantiomer koji prvi eluira je definisan kao Enantiomer A (3.90 mg, 7.12 µmol, 17%), i enantiomer koji drugi eluira je definisan kao Enantiomer B (4.00 mg, 7.30 µmol, 18%). LC/MS (M+H) = 548.3; LC/MS RT = 1.11 min (Kolona: Phenomenex Luna 30 x 2.0 mm 3u; Mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min).

2

Primer 351

5-[7-(2-Fluoropropan-2-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il]-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol

[0707]

[0708] U hladan (-78 °C), promešani rastvor (S)-2-(3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il)propan-2-ola (43.2 mg, 0.0870 mmol) u dihlorometanu (9.7 mL) pod N2je dodat dietilaminosumpor trifluorid (0.050 mL, 0.378 mmol), reakciona smeša je mešana tokom 3 h, zagrejana do 0 °C, i mešana tokom 30 min. U reakciju je dodat zas. vod. NaHCO3(2 mL), i reakcija je zagrejana do sobne temperature. Smeša je razblažena sa DCM, oprana sa H2O, osušena (MgSO4), filtrirana, i koncentrovana. Sirov materijal je prečišćen putem preparativne LC/MS (Kolona: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 25-100% B tokom 25 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da se dobije (5-[7-(2-fluoropropan-2-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il]-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol (17.7 mg, 40%):<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.53 (s, 1 H), 8.43 (br. s., 1 H), 8.22 (d, J=8.1 Hz, 1 H), 8.09 (br. s., 1 H), 7.66 (d, J=7.4 Hz, 2 H), 7.40 (d, J=8.1 Hz, 1 H), 7.28-7.36 (m, 2 H), 7.21-7.27 (m, 1 H), 5.89 (d, J=11.1 Hz, 1 H), 4.00 (s, 3 H), 3.84-3.93 (m, 1 H), 3.73 (d, J=8.8 Hz, 1 H), 3.48 (t, J=11.1 Hz, 1 H), 3.37 (br. s., 1 H), 3.25 (t, J=11.4 Hz, 1 H), 2.29 (s, 3 H), 1.75-1.88 (m, 6 H), 1.70 (d, J=12.8 Hz, 1 H), 1.52-1.65 (m, 1 H), 1.25-1.40 (m, 1 H), 0.98 (d, J=12.5 Hz, 1 H); HPLC: RT=1.84 min (Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1.11 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm); MS (ES): m/z= 498 [M+1]<+>.

Primer 352

2

5-[6-Fluoro-7-(2-fluoropropan-2-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il]-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol

[0709]

[0710] U hladan (-78 °C), promešani rastvor (S)-2-(3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il)propan-2-ola (50.4 mg, 0.0980 mmol) u dihlorometanu (4.9 mL) pod N2(g) je dodat dietilaminosumpor trifluorid (0.050 mL, 0.378 mmol). Reakcija je mešana na -78 °C tokom 90 min. Reakcija je postavljena u kupatilo na 0 °C i mešana tokom 40 min. U reakciju je dodat zas. vod. NaHCO3(2 mL), i reakcija je zagrejana do sobne temperature. Smeša je razblažena sa DCM, oprana sa H2O, osušena (MgSO4), filtrirana, i koncentrovana. Sirov materijal je prečišćen putem preparativne LC/MS (Kolona: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 25-95% B tokom 20 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da se dobije (5-[6-fluoro-7-(2-fluoropropan-2-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il]-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol (20.0 mg, 40%)):<1>H NMR izgleda kao smeša atropizomera:<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.25 (br s, 1H), 8.08 (d, J=8.1 Hz, 2H), 7.94 (s, 1H), 7.64 (br s, 3H), 7.43 (br s, 2H), 7.34 (br s, 4H), 7.26 (br d, J=7.1 Hz, 2H), 6.00-5.89 (m, 2H), 4.00-3.82 (m, 7H), 3.76 (br d, J=9.1 Hz, 2H), 3.54-3.43 (m, 1H), 3.41 (br d, J=7.4 Hz, 1H), 3.27 (br t, J=11.3 Hz, 2H), 2.22 (br s, 6H), 2.01-1.69 (m, 14H), 1.34 (br d, J=10.4 Hz, 4H), 1.06 (br d, J=12.8 Hz, 2H); HPLC: RT=2.13 min (Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1.11 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm); MS (ES): m/z= 516 [M+1]<+>.

Primer 353

2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-8-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

2

Korak 1: Metil 2-metoksi-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzoat [0712] U sud sa okruglim dnom od 100 mL koji je opremljen sa štapićem za mešanje je dodat metil 4-bromo-2-metoksibenzoat (1.79 g, 7.30 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborolan) (2.78 g, 10.9 mmol), PdCl2(dppf) (0.267 g, 0.365 mmol), i kalijum acetat (2.15 g, 21.9 mmol) na ambijentalnoj temperaturi. Sud je zatvoren septumom, dioksan (36.5 ml) je dodat, i atmosfera je pročišćena sa N2(g). Reakcija je potom zagrejana na 90 °C uz mešanje tokom 3 h i ohlađena na sobnu temperaturu. Reakcija je koncentrovana, ostatak je rastvoren u EtOAc-u i opran sa 1M vod. HCl i zas. vod. NaCl-om. Organske supstance su osušene (Na2SO4), filtrirane, i koncentrovane. Ostatak je prečišćen pomoću silika gel kolonske hromatografije (Teledyne ISCO CombiFlash Rf, Gradijent 0% do 100% primenom rastvarača A/B=CH2Cl2/EtOAc tokom 15 zapremina kolona, RediSep SiO280 g, nanet kao DCM rastvor) da se dobije (metil 2-metoksi-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzoat (1.87 g, 88 %) kao mrko-žuta čvrsta supstanca:<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.76 (d, J=7.7 Hz, 1 H), 7.42 (dd, J=7.7, 0.9 Hz, 1 H), 7.39 (s, 1 H), 3.96 (s, 3 H), 3.90 (s, 3 H), 1.36 (s, 12 H); HPLC: RT=1.284 min (Waters Acquity BEH C181.7 um 2.0 x 50 mm, CH3CN/H2O/0.1% TFA, 1.5 min Gradijent, Talasna dužina=254 nm); MS (ES): m/z= 293 [M+1]<+>.

Korak 2: Metil 3-bromo-6-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat i metil 3-bromo-8-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0713] U promešani rastvor metil 2-metoksi-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzoata (1.30 g, 4.43 mmol), 2,5-dibromo-3-nitropiridina (1.04 g, 3.69 mmol), i PdCl2(dppf) (0.140 g, 0.191 mmol) u THF-u (37 mL) je dodat trikalijum fosfat (3M u H2O, 3.7 mL, 11.1 mmol), pročišćen sa N2(g), i reakcija je zagrejana do 75 °C uz mešanje tokom 30 min, ohlađena na sobnu temperaturu, delimično koncentrovana, razblažena sa EtOAc-om, oprana sa H2O, zas. vod. NaCl-om, i osušena preko natrijuma sulfata. Čvrsta supstance su isfiltrirane, i isparljive supstance su koncentrovane u vakuumu. Ostatak je prečišćen pomoću silika gel kolonske hromatografije (Teledyne ISCO CombiFlash Rf, Gradijent od 0% do 100% primenom rastvarača A/B=CH2Cl2/EtOAc tokom 15 zapremina kolone, RediSep SiO2120 g, nanet kao DCM rastvor) da se dobije smeša mono- i bis-vezanih proizvoda(1.04 g) kao bledo žuta čvrsta supstanca: HPLC za glavni prozvod: RT=1.212 min (Waters Acquity BEH C181.7 um 2.0 x 50 mm, CH3CN/H2O/0.1% TFA, 1.5min Gradijent, Talasna dužina=254nm); MS (ES): m/z= 367/369 Br<79>/Br<81>[M+1]<+>.

[0714] U sud od 100 mL sa okruglim dnom je dodata smeša iznad (1.04 g) i 1,2-bis(difenilfosfino)etan (1.27 g, 3.19 mmol) u 1,2-dihlorobenzenu (12 mL), i sud je zagrejan u prethodno zagrejanom na 170 °C bloku za zagrevanje tokom 90 min, potom ohlađena na sobnu temperaturu. Smeša je sipana u 150 mL heksana, čvrsta supstanca je prikupljena filtracijom, oprana sa heksanima, i osušena na vazduhu. Ostatak je prečišćen pomoću silika gel kolonske hromatografije (Teledyne ISCO CombiFlash Rf, Gradijent od 0% do 100% primenom rastvarača A/B=heksani/EtOAc tokom 15 zapremina kolone, RediSep SiO2220 g Gold). Čiste frakcije su stavljene na stranu, i izmešane frakcije su ponovo podvrgnute fleš hromatografiji (Teledyne ISCO CombiFlash Rf, Gradijent od 0% do 30% primenom rastvarača A/B=CH2Cl2/EtOAc tokom 19 zapremina kolona, RediSep SiO212g Gold). Dva regioizomera su dobijena: (metil 3-bromo-6-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (339.7 mg, 36 %)) kao krem čvrsta supstanca:<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.04 (s, 1 H), 8.59 (d, J=2.0 Hz, 1 H), 8.12 (d, J=2.0 Hz, 1 H), 7.98 (d, J=8.1 Hz, 1 H), 7.61 (d, J=8.1 Hz, 1 H), 4.01 (s, 3 H), 3.90 (s, 3 H); HPLC: RT=0.97 min (Waters Acquity BEH C18 1.7 um 2.0 x 50 mm, CH3CN/H2O/0.05% TFA, 1 min Gradijent, Talasna dužina=220 nm); MS (ES): m/z= 335/337 Br<79>/Br<81>[M+1]<+>i (metil 3-bromo-8-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (322 mg, 0.962 mmol, 34 %)) kao žuta čvrsta supstanca:<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.55 (s, 1 H), 8.53 (d, J=2.0 Hz, 1 H), 8.20 (d, J=2.0 Hz, 1 H), 7.87 (s, 1 H), 7.80 (s, 1 H), 3.92 (s, 3 H), 3.85 (s, 3 H); HPLC: RT=0.90 min (Waters Acquity BEH C181.7 um 2.0 x 50 mm, CH3CN/H2O/0.05% TFA, 1 min Gradijent, Talasna dužina=220 nm); MS (ES): m/z= 335/337 Br<79>/Br<81>[M+1]<+>.

Korak 3: Metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-8-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0715] U sud od 50 mL sa okruglim dnom je dodata smeša metil 3-bromo-8-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (322 mg, 0.962 mmol), 1,4-dimetil-5-(tributilstanil)-1H-1,2,3-triazola (533 mg, 1.38 mmol) i TEA (0.270 mL, 1.94 mmol) u DMF-u (19 mL), i smeša je pročišćena propuštanjem mehurića azota kroz rastvor. Tokom pročišćavanja, bakar(I) jodid (41.4 mg, 0.217 mmol) i Pd(Ph3P)4(69.5 mg, 0.0600 mmol) su dodati, sud opremljen

1

septumom, i zagrevan u bloku za zagrevanje na 95 °C uz mešanje tokom noći. Reakcija ohlađena na sobnu temperaturu i koncentrovana, ostatak je rastvoren u EtOAc-u, opran sa H2O, zas. vod. NaCl-om, osušen preko natrijum sulfata, filtriran, i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je rastvoren u MeOH/aceton, SiO2(6g) je dodat, i isparljive supstance uklonjene u vakuumu zatim osušene pod vakuumom. Materijal je potom prečišćen silika gel kolonskom hromatografijom (Teledyne ISCO CombiFlash Rf, Gradijent od 0% do 100% primenom rastvarača A/B=CH2Cl2/aceton tokom 15 zapremina kolone, RediSep SiO240 g). Metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-8-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (167.3 mg, 50 %) je dobijen kao žuta čvrsta supstanca:<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.62 (s, 1 H), 8.54 (d, J=1.8 Hz, 1 H), 8.07 (d, J=2.0 Hz, 1 H), 7.90 (s, 1 H), 7.86 (s, 1 H), 4.01 (s, 3 H), 3.94 (s, 3 H), 3.86 (s, 3 H), 2.30 (s, 3 H); HPLC: RT=0.917 min (Waters Acquity BEH C181.7 um 2.0 x 50 mm, CH3CN/H2O/0.1% TFA, 1.5 min Gradijent, Talasna dužina=254nm); MS (ES): m/z= 352 [M+1]<+>.

Korak 4: (S)-Metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-((4-fluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-8-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0716] U hladnu (0°C), promešanu suspenziju metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-8-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (89.6 mg, 0.255 mmol), (R)-(4-fluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanola (110 mg, 0.522 mmol) i trifenilfosfina (108 mg, 0.413 mmol) u toluenu (5.2 mL) pod N2(g) je dodat u kapima tokom 1 min preko šprica DIAD (0.100 mL, 0.514 mmol), rastvor mešan tokom 5 min, zatim uklonjen iz ledenog kupatila i mešan na sobnoj temperaturi tokom noći. THF (5 mL) je dodat, i mešanje je nastavljeno tokom noći. Reakcija je koncentrovana u vakuumu i osušena pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću silika gel kolonske hromatografije (Teledyne ISCO CombiFlash Rf, Gradijent od 0% do 30% primenom rastvarača A/B=CH2Cl2/MeOH tokom 20 zapremina kolone, RediSep SiO240 g, nanet kao DCM rastvor). Proizvod je ponovo prečišćen silika gel kolonskom hromatografijom (Teledyne ISCO CombiFlash Rf, Gradijent od 0% do 100% primenom rastvarača A/B=heksani/EtOAc za 12 zapremina kolone, RediSep SiO212g, nanet kao DCM rastvor, zatim rastvarači promnjeni u CH2Cl2:MeOH, Gradijent od 0% do 10% tokom 12 zapremina kolona. (S)-Metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-((4-fluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-8-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (36.0 mg, 26 %) je dobijen kao krem čvrsta supstanca:<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.47 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.58 (d, J=1.5 Hz, 1H), 7.42 (dd, J=5.2, 8.7 Hz, 2H), 7.05 (t, J=8.6 Hz, 2H), 5.46 (d, J=10.6 Hz, 1H), 4.06 (s, 3H), 4.03 (s, 3H), 3.99 (br dd,

2

J=2.6, 3.7 Hz, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.91-3.86 (m, 1H), 3.59-3.48 (m, 1H), 3.41-3.30 (m, 1H), 3.11-2.96 (m, 1H), 2.32 (s, 3H), 1.95 (br d, J=13.2 Hz, 1H), 1.67-1.58 (m, 1H), 1.50-1.36 (m, 1H), 1.13 (br d, J=12.8 Hz, 1H); HPLC: RT=1.125 min (Waters Acquity BEH C181.7 um 2.0 x 50 mm, CH3CN/H2O/0.1% TFA, 1.5 min Gradijent, Talasna dužina=254nm); MS (ES): m/z= 544 [M+1]<+>.

Korak 5: 2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-8-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0717] U hladan (-78 °C), promešani rastvor (S)-metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-((4-fluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-8-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (36.0 mg, 0.0660 mmol) u THF-u (1.3 mL) pod N2(g) je dodat metilmagnezijum bromid (3M u Et2O-u, 0.330 mL, 0.990 mmol). Nakon 20 min, reakcija je zagrejana do -15 °C (led/MeOH) tokom 10 min, zatim reakcija je kvenčovana sa zas. vod. NH4Cl-om, razblažena sa EtOAc-om, organska faza je izdvojena, oprana sa zas. vod. NaCl-om zatim osušena preko natrijum sulfata, filtrirana, i koncentrovana. Sirov materijal je prečišćen putem preparativne LC/MS (Kolona: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; Gradijent: 15-50% B tokom 25 min, potom 5-minutno zadržavanje na 50% B; Protok: 20 mL/min). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da se dobije 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-8-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol (22.8 mg, 60%):<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.46 (s, 1H), 8.35 (br s, 2H), 8.19 (br s, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.70-7.63 (m, 2H), 7.15 (brt, J=8.6 Hz, 2H), 5.67 (br d, J=11.1 Hz, 1H), 4.00 (br s, 3H), 3.92 (s, 3H), 3.88 (br d, J=7.7 Hz, 1H), 3.73 (br d, J=9.8 Hz, 1H), 3.50-3.37 (m, 1H), 3.25 (br t, J=11.1 Hz, 1H), 2.29 (s, 3H), 1.69-1.62 (m, 2H), 1.60 (br d, J=12.8 Hz, 5H), 1.54-1.43 (m, 1H), 1.35-1.20 (m, 1H), 0.98 (br d, J=12.5 Hz, 1H); HPLC: RT=1.52 min (Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1.11 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm); MS (ES): m/z= 544 [M+1]<+>.

Primer 354

2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-8-metoksi-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

Korak 1: (S)-Metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-8-metoksi-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0719] U hladnu (0 °C), promešanu suspenziju metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-8-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (39.6 mg, 0.113 mmol), (R)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanola (46.6 mg, 0.242 mmol), i trifenilfosfina (62.1 mg, 0.237 mmol) u THF-u (2.3 mL) pod N2(g) je dodat u kapima tokom 1 minuta preko šprica DIAD (0.0500 mL, 0.257 mmol). Suspenzija je rastvorena brzo, i žuti rastvor je ostavljen da se zagreje do sobne temperature i promešan tokom noći. Reakcija je koncentrovana i osušena pod vakuumom tokom noći. Ostatak je prečišćen pomoću silika gel kolonske hromatografije (Teledyne ISCO CombiFlash Rf, Gradijent od 0% do 7% primenom rastvarača A/B=CH2Cl2/MeOH tokom 30 zapremina kolone, RediSep SiO224g, nanet kao DCM rastvor). (S)-Metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-8-metoksi-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (29.2 mg, 50 %) je izolovan kao bledo žuti film. HPLC: RT=1.111 min (Waters Acquity BEH C181.7 um 2.0 x 50 mm, CH3CN/H2O/0.1% TFA, 1.5min Gradijent, Talasna dužina=254nm); MS (ES): m/z= 526 [M+1]<+>.

Korak 2: 2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-8-metoksi-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0720] U hladan (-78 °C), promešani rastvor (S)-metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-8-metoksi-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (29.2 mg, 0.0560 mmol) u THF-u (1.1 mL) pod N2(g) je dodat metilmagnezijum bromid (3M u Et2O-u, 296 µl, 0.889 mmol). Nakon 15 min, reakcija je postavljena u kupatilo sa ledenom vodom i mešana tokom 20 min. Reakcija je kvenčovana sa zas. vod. NH4Cl-om (5 mL), razblažena sa EtOAc-om, i organska faza je izdvojena i koncentrovana. Sirov materijal je prečišćen putem preparativne LC/MS (Kolona: XBridge C18, 19 x 250 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 20-85% B tokom 25 min, potom

4

5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da se dobije 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-8-metoksi-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol (14.3 mg, 49%):<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.45 (s, 1H), 8.37 (br s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.63 (br d, J=7.7 Hz, 2H), 7.36-7.29 (m, 2H), 7.27-7.20 (m, 1H), 5.65 (br d, J=11.1 Hz, 1H), 3.99 (s, 3H), 3.91 (s, 3H), 3.87 (br d, J=9.8 Hz, 1H), 3.72 (br d, J=8.8 Hz, 1H), 3.52 (br s, 1H), 3.44 (brt, J=11.3 Hz, 1H), 3.35 (br s, 1H), 3.26 (brt, J=11.3 Hz, 1H), 2.28 (s, 3H), 1.67 (br d, J=12.5 Hz, 1H), 1.60 (br d, J=14.1 Hz, 6H), 1.53-1.42 (m, 1H), 1.35-1.23 (m, 1H), 0.98 (br d, J=12.5 Hz, 1H); HPLC: RT=1.56 min (Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1.11 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm); MS (ES): m/z= 526 [M+1]<+>.

Primer 355

2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-metoksi-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0721]

Korak 1: Metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0722] U sud od 50 mL sa okruglim dnom je dodata smeša metil 3-bromo-6-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (340 mg, 1.01 mmol), 1,4-dimetil-5-(tributilstanil)-1H-1,2,3-triazola (603 mg, 1.56 mmol) i TEA (0.290 mL, 2.08 mmol) u DMF-u (21 mL), i smeša je pročišćena pod strujom azota. Tokom pročišćavanja, je dodat bakar(I) jodid (39.0 mg, 0.205 mmol) i Pd(Ph3P)4(75.1 mg, 0.0650 mmol), i bočica je zatvorena i zagrevana u bloku za zagrevanje na 95 °C uz mešanje tokom 40 h. Reakcija je ohlađena na sobnu temperaturu, SiO2(5 g) je dodat, isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom. Materijal je potom prečišćen silika gel kolonskom hromatografijom (Teledyne ISCO CombiFlash Rf, Gradijent od 0% do 100% primenom rastvarača A/B=CH2Cl2/aceton tokom 20 zapremina kolone, RediSep SiO240 g). Metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (304 mg, 85 %) je izolovan kao žuta čvrsta supstanca: HPLC: RT=0.948 min (Waters Acquity BEH C181.7 um 2.0 x 50 mm, CH3CN/H2O/0.1% TFA, 1.5 min Gradijent, Talasna dužina=254nm); MS (ES): m/z= 352 [M+1]<+>.

Korak 2: (S)-Metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-metoksi-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0723] U hladnu, promešanu suspenziju metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-metoksi-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (40.5 mg, 0.115 mmol), (R)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanola (47.1 mg, 0.245 mmol), i trifenilfosfina (60.2 mg, 0.230 mmol) u THF-u (2.4 mL) pod N2(g) je dodat u kapima tokom 1 min preko šprica DIAD (0.0500 mL, 0.257 mmol). Suspenzija je rastvorena brzo, i žuti rastvor je ostavljen da se zagreje do sobne temperature i promešan je tokom noći. Reakcija je koncentrovana i osušena pod vakuumom tokom noći. Ostatak je prečišćen pomoću silika gel kolonske hromatografije (Teledyne ISCO CombiFlash Rf, Gradijent od 0% do 7% primenom rastvarača A/B=CH2Cl2/MeOH tokom 30 zapremina kolone, RediSep SiO224g, nanet kao DCM rastvor). (S)-Metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-metoksi-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (53.0 mg, 87 %) je izolovan kao bledo žuti film: HPLC: RT=1.179 min (Waters Acquity BEH C181.7 um 2.0 x 50 mm, CH3CN/H2O/0.1% TFA, 1.5 min Gradijent, Talasna dužina=254nm); MS (ES): m/z= 526 [M+1]<+>.

Korak 3: 2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-metoksi-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0724] U hladan (-78 °C), promešani rastvor (S)-metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-metoksi-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (53.0 mg, 0.101 mmol) u THF-u (2017 µl) pod N2(g) je dodat metilmagnezijum bromid (3M u Et2O-u, 538 µl, 1.61 mmol), reakcija je mešana tokom 30 min pre nego što je ostavljena da se zagreje do 0 °C, i mešana je tokom 15 min pre nego je kvenčovana sa zas. vod. NH4Cl-om (5 mL). Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc-om, organska faza je izdvojena, i isparljive supstance uklonjene. Sirov materijal je prečišćen putem preparativne LC/MS (Kolona: Waters XBridge Shield RP18, 19 x 250 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 20-75% B tokom 25 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da se dobije 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6metoksi-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol (8.90 mg, 17%):<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.50 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.90 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.64 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.51 (br d, J=7.4 Hz, 2H), 7.25-7.20 (m, 2H), 7.19-7.14 (m, 1H), 6.15 (br d, J=11.1 Hz, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.95 (s, 3H), 3.83 (br t, J=12.3 Hz, 2H), 3.55-3.40 (m, 2H), 2.24 (s, 3H), 1.71 (s, 3H), 1.69 (s, 3H), 1.61 (br d, J=12.5 Hz, 1H), 1.54 (br d, J=9.4 Hz, 1H), 1.48-1.37 (m, 2H); HPLC: RT=1.56 min (Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1.11 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm); MS (ES): m/z= 526 [M+1]<+>.

Primer 356

[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-7-(prop-1-en-2-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-6-il]metanol

[0725]

Korak 1: 5-(Tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,3-dihidro-2-benzofuran-1-on [0726] U sud sa okruglim dnom od 100 mL je dodat 5-bromoizobenzofuran-1(3H)-on (1.00 g, 4.69 mmol), bis(pinakolato)diboron (1.31 g, 5.16 mmol), PdCl2(dppf)-CH2Cl2adukt (0.383 g, 0.469 mmol), i kalijum acetat (1.15 g, 11.7 mmol) u dioksanu (20 mL) da bi se dobila suspenzija. Sud je opremljen sa refluksnim kondenzatorom i zagrejan na 80 °C uz mešanje pod azotom tokom 16 h. Reakcija je podeljena između etil acetata (100 mL) i vode (50 mL), i Organski sloj je osušen sa Na2SO4-om, filtriran, i koncentrovan. Reakciona smeša je prečišćena primenom ISCO silika gel hromatografije (Kolona od 40 g, Gradijent od 0% do 100% EtOAc/heksani) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.695 g, 57%).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 7.97 (s, 1H), 7.85 (s, 2H), 5.43 (s, 2H), 1.33 (s, 12H) HPLC RT = 0.76 min (Kolona: Waters Acquity BEH C182.0 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 ACN:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 ACN:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 1.5 min; Protok: 1 mL/min).

Korak 2: 5-(5-Bromo-3-nitropiridin-2-il)-1,3-dihidro-2-benzofuran-1-on

[0727] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za metil 4-(5-bromo-3-nitropiridin-2-il)benzoat, 5-(tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,3-dihidro-2-benzofuran-1-on (695 mg, 2.67 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova, koje je prečišćeno primenom ISCO silika gel hromatografije (Kolona od 24 g, Gradijent od 0% do 100% EtOAc/heksani) da se dobije 568 mg (70%).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9.17 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.91 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.97 (d, J=7.9 Hz, 1H), 7.90-7.86 (m, 1H), 7.75-7.69 (m, 1H), 5.50 (s, 2H). LCMS (M+H) = 335; HPLC RT = 1.12 min (Kolona: Waters Acquity BEH C182.0 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 ACN:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 ACN:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 1.5 min; Protok: 1 mL/min).

Korak 3: 8-Bromo-1H-furo[3,4-g]pirido[3,2-b]indol-3(10H)-on

[0728] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za metil 3-bromo-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat, 5-(5-bromo-3-nitropiridin-2-il)-1,3-dihidro-2-benzofuran-1-on (568 mg, 1.70 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova, koje je precipitiralo iz reakcione smeše primenom DCM da se dobije 287 mg (56%).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.66 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.41 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.37 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.69 (d, J=8.1 Hz, 1H), 5.69 (s, 2H). LCMS (M+H) = 303; HPLC RT = 1.05 min (Kolona: Waters Acquity BEH C182.0 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 ACN:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 ACN:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 1.5 min; Protok: 1 mL/min).

Korak 4: (S)-8-Bromo-10-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-1H-furo[3,4-g]pirido[3,2-b]indol-3(10H)-on

[0729] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za metil 3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat, 8-bromo-1H-furo[3,4-g]pirido[3,2-b]indol-3(10H)-on (215 mg, 0.710 mmol) i fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol (363 mg, 0.890 mmol) su konvertovani u jedinjenje iz naslova (248 mg, 73%).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.65 (s, 1H), 8.42 (d, J=8.1 Hz, 2H), 7.78 (d, J=7.9 Hz, 1H), 7.36 (d, J=8.8 Hz, 2H), 7.33-7.27 (m, 3H), 5.76 (s, 2H), 3.95-3.85 (m, 2H), 3.71 (d, J=11.0 Hz, 2H), 3.62-3.43 (m, 3H), 1.76 (br. s., 1H), 1.65-1.53 (m, 1H), 1.41-1.30 (m, 1H). LCMS (M+H) = 477; HPLC RT = 1.32 min (Kolona: Waters Acquity BEH C182.0 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 ACN:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 ACN:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 1.5 min; Protok: 1 mL/min).

Korak 5: (S)-8-(1,4-Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-10-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-1H-furo[3,4-g]pirido[3,2-b]indol-3(10H)-on

[0730] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za alternativnu sintezu metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-y1)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata, (S)-8-bromo-10-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-1H-furo[3,4-g]pirido[3,2-b]indol-3(10H)-on (248 mg, 0.520 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (159 mg, 62%).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.48 (d, J=8.1 Hz, 1H), 8.36 (br. s., 1H), 7.80 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.72 (d, J=7.0 Hz, 2H), 7.40-7.25 (m, 4H), 5.21 (d, J=11.2 Hz, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.91 (br. s., 1H), 3.73 (d, J=9.2 Hz, 1H), 3.56-3.42 (m, 2H), 3.26 (t, J=10.8 Hz, 1H), 2.25 (s, 4H), 1.78 (d, J=13.2 Hz, 1H), 1.60 (d, J=8.4 Hz, 1H), 1.48-1.36 (m, 1H), 1.25 (d, J=2.4 Hz, 1H). LCMS (M+H) = 494; HPLC RT = 1.08 min (Kolona: Waters Acquity BEH C182.0 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 ACN:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 ACN:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 1.5 min; Protok: 1 mL/min).

Korak 6: 2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-(hidroksimetil)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0731] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za 2-[3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol, primenom (S)-8-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-10-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-1H-furo[3,4-g]pirido[3,2-b]indol-3(10H)-on (15.0 mg, 0.0300 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (3.10 mg, 20%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.46 (s, 1H), 8.14 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.63 (d, J=7.7 Hz, 2H), 7.52 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.31 (t, J=7.6 Hz, 2H), 7.25-7.17 (m, 1H), 6.65 (d, J=10.8 Hz, 1H), 5.52 (d, J=10.4 Hz, 1H), 5.48 (s, 1H), 5.35 (d, J=8.1 Hz, 1H), 5.26 (t, J=4.4 Hz, 1H), 3.90 (d, J=11.8 Hz, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.70 (d, J=8.8 Hz, 1H), 3.50 (t, J=11.4 Hz, 1H), 3.43-3.32 (m, 1H), 3.22 (t, J=11.6 Hz, 1H), 2.15 (s, 3H), 1.90 (d, J=12.8 Hz, 1H), 1.75 (s, 6H), 1.62-1.42 (m, 2H), 0.69 (d, J=12.5 Hz, 1H). LCMS (M+H) = 526; HPLC RT = 1.01 min (Kolona: Waters Acquity BEH C182.0 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 ACN:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 ACN:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 1.5 min; Protok: 1 mL/min).

Korak 7: [3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-7-(prop-1-en-2-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-6-il]metanol

[0732] Rastvor 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-(hidroksimetil)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ola (122 mg, 0.230 mmol) je tretiran sa konc. vod. H2SO4(100 µl, 1.88 mmol) i zagrejan na 50 °C tokom 60 min. Reakcija je podeljena između etil acetata i zas. vod. Na2CO3. Organska faza je osušena i uparena pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 20-55% B tokom 25 min, potom 5-minutno zadržavanje na 55% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja. Prinos proizvoda je bio 7.10 mg.<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.52 (s, 1H), 8.23 (d, J=7.7 Hz, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.63 (d, J=7.4 Hz, 2H), 7.39-7.33 (m, 2H), 7.30-7.21 (m, 2H), 5.77-5.70 (m, 1H), 5.68-5.62 (m, 1H), 5.14 (d, J=11.1 Hz, 1H), 3.94-3.84 (m, 4H), 3.74 (d, J=8.8 Hz, 1H), 3.24 (t, J=11.4 Hz, 1H), 2.22 (s, 3H), 1.77 (d, J=12.5 Hz, 1H), 1.58 (d, J=4.7 Hz, 6H), 1.52-1.42 (m, 2H), 1.32-1.18 (m, 2H), 0.88 (d, J=12.1 Hz, 1H). LCMS (M+H) = 508; HPLC RT = 1.16 min (Kolona: Waters Acquity BEH C182.0 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 ACN:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 ACN:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 1.5 min; Protok: 1 mL/min).

Primer 357

2-[3-(Dimetil-4H-1,2,4-triazol-4-il)-5-[(R)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0733]

Korak 1: Metil 3-bromo-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0734] Praćenjem procedure analogne onoj koja je opisana za metil 3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat, metil 3-bromo-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (1.00 g, 3.28 mmol) i fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol (1.26 g, 6.55 mmol) su konvertovani u jedinjenje iz naslova (0.902 g, 57%).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.62 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.33-8.27 (m, 1H), 7.89 (dd, J=8.1, 1.3 Hz, 1H), 7.63 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.40-7.33 (m, 2H), 7.31-7.22 (m, 1H), 5.93 (d, J=11.2 Hz, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.92-3.85 (m, 1H), 3.71 (dd, J=11.1, 2.5 Hz, 1H), 3.57-3.47 (m, 1H), 3.31

1

(s, 3H), 3.29-3.22 (m, 1H), 1.78-1.70 (m, 1H), 1.69-1.54 (m, 1H), 1.31 (qd, J=12.4, 4.7 Hz, 1H), 0.85 (d, J=12.1 Hz, 1H). LCMS (M+H) = 479; HPLC RT = 1.42 min (Kolona: Waters Acquity BEH C182.0 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 ACN:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 ACN:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 1.5 min; Protok: 1 mL/min).

Korak 2: Metil 3-{[(2,4-dimetoksifenil)metil]amino}-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0735] Bočica od 25 mL sa poklopcem koji se odvrće je napunjena sa metil 3-bromo-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilatom (800 mg, 1.67 mmol) i dioksanom (15 mL). Azot je potom propušten u mehurićima kroz rastvor kao 2,4-dimetoksibenzilamin (0.500 mL, 3.33 mmol), 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilksanten (97.0 mg, 0.167 mmol), i cezijum karbonat (1090 mg, 3.34 mmol) su dodati, praćeno dodavanjem bis(dibenzilideneacetone)paladijuma (77.0 mg, 0.134 mmol). Bočica je zatvorena i zagrevana do 100 °C tokom 24 h. Reakcija je filtrirana kroz Celite i isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom. Reakciona smeša je prečišćena primenom ISCO silika gel hromatografije (Kolona od 80 g, Gradijent od 0% do 100% EtOAc/heksani) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.394 g, 42%).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.40 (br. s., 1H), 8.07 (d, J=2.2 Hz, 1H), 7.97 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.74 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.40 (d, J=7.5 Hz, 2H), 7.33-7.15 (m, 5H), 6.79 (br. s., 2H), 6.66 (d, J=2.2 Hz, 2H), 6.49 (dd, J=8.5, 2.3 Hz, 2H), 5.66 (d, J=11.0 Hz, 2H), 4.28 (d, J=5.7 Hz, 2H), 3.68-3.59 (m, 1H), 3.35 (t, J=11.0 Hz, 1H), 3.30 (s, 3H), 3.15-3.00 (m, 1H), 2.84 (br. s., 2H), 1.58 (br. s., 4H), 0.78 (d, J=12.3 Hz, 2H). LCMS (M+H) = 566; HPLC RT = 1.17 min (Kolona: Waters Acquity BEH C182.0 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 ACN:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 ACN:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 1.5 min; Protok: 1 mL/min).

Korak 3: 2-[3-(Dimetil-4H-1,2,4-triazol-4-il)-5-[(R)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0736] U 20% rastvor TFA u DCM-u je dodat metil 3-{[(2,4-dimetoksifenil)metil]amino}-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (394 mg, 0.697 mmol) i dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Reakciona smeša je potom podeljena između etil acetata i zasićenog Na2CO3. Organska faza je osušena i uparen pod sniženim pritiskom. U sirovu smešu je dodat N-[1-(dimetilamino)etiliden]-N,N-dimetiletanhidrazonamid (205 mg, 1.20 mmol), i ona je zagrejana do 155 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je prečišćena primenom ISCO silika gel hromatografije (Kolona od 24 g, Gradijent od

11

0% do 20% MeOH/DCM). Dobijeni ostatak je rastvoren u THF-u (2 mL) i ohlađen do 0 °C. Metilmagnezijum bromid (3M u dietil etru, 0.320 mL, 0.970 mmol) je dodat. Reakciona smeša je zagrejana do sobne temperature i promešana na toj temperaturi tokom 16 h. Reakciona smeša je potom podeljena između etil acetata i zasićenog vod. Na2CO3. Organska faza je osušena i uparena pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 0-100% B tokom 20 min, potom 0-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da se dobije 12 mg (20%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.57 (br. s., 1H), 8.48 (s, 1H), 8.15 (d, J=8.1 Hz, 2H), 7.67 (d, J=7.7 Hz, 2H), 7.50 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.37-7.29 (m, 2H), 7.28-7.21 (m, 1H), 5.78 (d, J=11.1 Hz, 1H), 3.90 (d, J=11.4 Hz, 1H), 3.76 (d, J=9.8 Hz, 1H), 3.47 (t, J=11.1 Hz, 1H), 3.32-3.23 (m, 1H), 2.90 (s, 3H), 2.74 (s, 3H), 1.66 (d, J=12.1 Hz, 2H), 1.58 (s, 6H), 1.38-1.28 (m, 2H), 1.05 (d, J=12.5 Hz, 2H). LCMS (M+H) = 496; HPLC RT = 1.00 min (Kolona: Waters Acquity BEH C182.0 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 ACN:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 ACN:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 1.5 min; Protok: 1 mL/min).

Primer 364

3,3,3-Trifluoropropil N-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]karbamat

[0737]

Korak 1: Metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0738] U sud sa okruglim dnom od 200 mL koji sadrži metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (1.23 g, 2.49 mmol) u THF-u (25 mL) je dodat natrijum hidroksid (5M, 2.49 mL, 12.5 mmol), i reakciona smeša je zagrejana do 60 °C. Nakon 16 h, 100 g leda je dodato, i isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom. pH je podešen na pH 2 sa koncentrovanom

12

vod. HCl i ekstrahovan sa etil acetatom (2 x 250 mL). Reakciona smeša je prečišćena primenom ISCO silika gel hromatografije (Kolona od 80 g, Gradijent od 0% do 10% MeOH/DCM) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.15 g, 96%).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.69-8.49 (m, 4H), 8.35-8.26 (m, 2H), 7.93 (d, J=7.9 Hz, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.36-7.32 (m, 2H), 7.32-7.28 (m, 3H), 5.94 (d, J=11.2 Hz, 1H), 3.94-3.82 (m, 2H), 3.79-3.66 (m, 2H), 3.29-3.09 (m, 2H), 2.37-2.26 (m, 4H), 1.99 (s, 3H). LCMS (M+H) = 482; HPLC RT = 1.05 min (Kolona: Waters Acquity BEH C182.0 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 ACN:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 ACN:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 1.5 min; Protok: 1 mL/min).

Korak 2: 5-{7-Izocijanato-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol u 0.05M rastvoru u dioksanu.

[0739] U bočicu od 25 mL sa poklopcem koji se odvrće koja sadrži (S)-3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilnu kiselinu (0.193 g, 0.400 mmol), difenilfosforil azid (0.216 mL, 1.00 mmol), i TEA (0.139 mL, 1.00 mmol) je dodat dioksan (8 mL) da bi se dobio rastvor. Ovaj rastvor je zagrejan do 60 °C tokom 2 h. Rastvor je ohlađen do sobne temperature i korišćen bez prečišćavanja.

Korak 3: 3,3,3-Trifluoropropil N-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]karbamat

[0740] U 2 mL 0.05 M rastvora 5-{7-izocijanato-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazola u dioksanu je dodat 3,3,3-trifluoro-1-propanol (200 µL, 2.27 mmol), i reakciona smeša je zagrejana do 80 °C tokom 16 h. Isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: Waters XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 15-100% B tokom 20 min, potom 0-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da se dobije 7.50 mg (16%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 10.09 (br. s., 1H), 8.48 (s, 2H), 8.26 (br. s., 1H), 8.14 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.64 (d, J=7.4 Hz, 2H), 7.43 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.38-7.31 (m, 2H), 7.29-7.21 (m, 1H), 5.64 (br. s., 1H), 4.41 (t, J=5.7 Hz, 2H), 4.02 (br. s., 3H), 3.90 (br. s., 1H), 3.75 (d, J=10.8 Hz, 1H), 3.45 (br. s., 1H), 3.27 (t, J=11.4 Hz, 1H), 2.84-2.70 (m, 3H), 2.30 (s, 3H), 1.69 (d, J=12.8 Hz, 1H), 1.50 (d, J=9.1 Hz, 1H), 1.35-1.21 (m, 1H), 1.07 (d,

1

J=12.8 Hz, 1H). LCMS (M+H) = 593; HPLC RT = 0.89 min (Kolona: Waters Acquity BEH C182.0 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 ACN:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 ACN:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 1.5 min; Protok: 1 mL/min).

Primer 365

Metil N-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]karbamat

[0741]

[0742] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno primenom procedure analogne onoj koja je opisana za 3,3,3-trifluoropropilN-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]karbamat, primenom MeOH (200 µL, 4.94 mmol) da se dobije 7.90 mg (19%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 10.02 (br. s., 1H), 8.48 (s, 2H), 8.30 (br. s., 1H), 8.12 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.64 (d, J=7.4 Hz, 2H), 7.42-7.31 (m, 3H), 7.29-7.20 (m, 1H), 5.64 (br. s., 1H), 4.03 (br. s., 3H), 3.91 (s, 2H), 3.76 (s, 5H), 2.31 (s, 4H), 1.69 (d, J=12.5 Hz, 1H), 1.51 (d, J=8.8 Hz, 1H), 1.34-1.20 (m, 1H), 1.08 (d, J=11.8 Hz, 1H). LCMS (M+H) = 511; HPLC RT = 0.79 min (Kolona: Waters Acquity BEH C182.0 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 ACN:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 ACN:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 1.5 min; Protok: 1 mL/min).

Primer 366

Etil N-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]karbamat

[0743]

14

[0744] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno primenom procedure analogne onoj koja je opisana za 3,3,3-trifluoropropilN-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]karbamat, primenom EtOH (200 µL, 3.43 mmol) da se dobije 8.70 mg (21%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 9.98 (br. s., 1H), 8.48 (s, 2H), 8.29 (br. s., 1H), 8.12 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.64 (d, J=7.7 Hz, 2H), 7.42-7.18 (m, 4H), 5.64 (br. s., 1H), 4.23 (q, J=7.1 Hz, 2H), 4.03 (br. s., 3H), 3.95-3.86 (m, 1H), 3.76 (d, J=10.4 Hz, 1H), 2.31 (s, 3H), 1.69 (d, J=12.1 Hz, 1H), 1.50 (d, J=12.1 Hz, 1H), 1.38-1.21 (m, 4H), 1.08 (d, J=11.8 Hz, 1H). LCMS (M+H) = 525; HPLC RT = 0.84 min (Kolona: Waters Acquity BEH C182.0 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 ACN:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 ACN:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 1.5 min; Protok: 1 mL/min).

Primer 367

Propan-2-il N-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]karbamat

[0745]

[0746] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno primenom procedure analogne onoj koja je opisana za 3,3,3-trifluoropropilN-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]karbamat, primenom i-PrOH (200 µL, 2.60 mmol) da se dobije 7.20 mg (17%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 9.91 (br. s., 1H), 8.47 (s, 1H), 8.27 (br. s., 1H), 8.11 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.64 (d, J=7.4 Hz, 2H), 7.48-7.14 (m, 4H), 5.63 (br. s., 1H), 5.07-4.89 (m, 1H), 4.02 (br. s., 3H), 3.91 (s, 1H), 3.75 (d, J=7.7 Hz, 1H), 3.48-3.35 (m, 2H), 3.28 (t, J=11.3 Hz, 2H), 2.31 (s, 3H), 1.68 (d, J=12.1 Hz, 1H), 1.50 (d, J=11.4 Hz, 1H), 1.38-1.21 (m, 7H), 1.08 (d, J=12.8 Hz, 1H). LCMS (M+H) = 539; HPLC RT = 0.88 min (Kolona: Waters Acquity BEH C182.0 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 ACN:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 ACN:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 1.5 min; Protok: 1 mL/min).

Primer 369

1

2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0747]

Korak 1: Metil 4-(5-bromo-3-nitropiridin-2-il)-3-fluorobenzoat

[0748] U rastvor (2-fluoro-4-(metoksikarbonil)fenil)boronske kiseline (0.500 g, 2.53 mmol) i 2,5-dibromo-3-nitropiridina (0.712 g, 2.53 mmol) u THF-u (8.42 mL) je dodat vod. trikalijum fosfat (2M, 2.53 ml, 5.05 mmol). Reakcija je degasirana sa azotom u mehurićima, zatim PdCl2(dppf)-CH2Cl2adukt (0.124 g, 0.152 mmol) je dodat i reakcija je zagrevana do 70 °C tokom 2 h. Reakcija je ohlađena, razblažena sa vodom, i ekstrahovana 3 puta sa EtOAc-om. Kombinovane organske supstance su koncentrovane. Ostatak je prečišćen putem ISCO silika gel hromatografije (Kolona od 40 g; Heks/EtOAc; 0 do 100%) da se dobije metil 4-(5-bromo-3-nitropiridin-2-il)-3-fluorobenzoat (0.610 g, 68%).<1>HNMR (400MHz, CDCl3) δ 9.01 (d, J=2.1 Hz, 1H), 8.54 (d, J=2.1 Hz, 1H), 8.02 (dd, J=8.0, 1.5 Hz, 1H), 7.84-7.73 (m, 2H), 3.97 (s, 3H); LCMS (M+H) = 355.1; HPLC RT = 1.15 min. Analitička HPLC Metoda 1.

Korak 2: Metil 3-bromo-9-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0749] Rastvor metil 4-(5-bromo-3-nitropiridin-2-il)-3-fluorobenzoata (0.610 g, 1.72 mmol) i DPPE (0.855 g, 2.15 mmol) u o-dihlorobenzenu (5.73 mL) je zagrejan do 170 °C. Nakon 1 h, reakcija je postavljena na rotovap i koncentrovana. DCM i mala količina heksana su dodati u ostatak, čvrsta supstance su isfiltrirane, i čvrste supstance su oprane dva puta sa DCM-om. Filtrat je koncentrovan, i ostatak je prečišćen putem ISCO silika gel kolonske hromatografije (Kolona od 40 g; Heks/EtOAc; 0 do 50% Gradijent). Čvrsta supstanca iz filtracije je kombinovana sa materijalom dobijenim iz kolone da se dobije metil 3-bromo-9-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (0.380 g, 1.176 mmol, 68.5 %). LCMS (M+H) = 323.1; HPLC RT = 0.88 min. Analitička HPLC Metoda 1.

Korak 3: Metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

1

[0750] Rastvor 1,4-dimetil-5-(tributilstanil)-1H-1,2,3-triazola (0.272 g, 0.706 mmol), metil 3-bromo-9-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (0.190 g, 0.588 mmol), trietilamina (0.164 ml, 1.176 mmol), i bakar(I) jodida (0.017 g, 0.088 mmol) u DMF-u (3.92 ml) je degasiran sa azotom u mehurićima. Tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0) (0.068 g, 0.059 mmol) je dodat i reakcija je zagrejana do 90 °C. Nakon, 4.5 h, trietilamin (0.164 ml, 1.176 mmol), 1,4-dimetil-5-(tributilstanil)-1H-1,2,3-triazol (0.272 g, 0.706 mmol), bakar(I) jodid (0.017 g, 0.088 mmol), tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0) (0.068 g, 0.059 mmol) i trietilamin (0.164 ml, 1.176 mmol) su dodati. Nakon dodatna 3 h, reakcija je ohlađena, razblažena sa vodom, zatim ekstrahovana dva puta sa EtOAc-om. Organski slojevi su oprani sa amonijum hidroksidom, zatim slanim rastvorom, zatim osušeni preko natrijum sulfata i koncentrovani. Ostatak je prečišćen putem ISCO silika gel kolonske hromatografije (preko ISCO silika gel kolonske hromatografije (Heks/EtOAc; 0 do 100% Gradijent) da se dobije metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (0.030 g, 30.1%).

<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 10.22 (s, 1H), 8.65 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.09 (d, J=1.0 Hz, 1H), 7.82 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.70 (dd, J=10.6, 1.0 Hz, 1H), 4.04 (s, 3H), 3.99 (s, 3H), 2.39 (s, 3H); LCMS (M+H) = 340.3; HPLC RT = 0.73 min. Analitička HPLC Metoda 1.

Korak 4: (S)-2-(3-(1,4-Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-fluoro-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il)propan-2-ol

[0751] Suspenzija (R)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanola (0.0850 g, 0.442 mmol), metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (0.0600 g, 0.177 mmol), i trifenilfosfina (0.116 g, 0.442 mmol) u DCM-u (1.77 ml) je ohlađena u vodenom kupatilu, i DIAD (0.0860 mL, 0.442 mmol) je dodat. Suspendovani materijal je rastvoren nakon dodavanja. Reakcija je mešana tokom noći, zatim isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen putem ISCO silika gel kolonske hromatografije (Kolona od 24g; DCM/EtOAc 0 do 100% Gradijent) da se dobije delimično čist (S)-metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-fluoro-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat. Ovaj materijal je rastvoren u THF-u (1770 µL) i ohlađen u ledenom kupatilu. metilmagnezijum bromid (3M u Et2O, 472 µL, 1.42 mmol) je dodat. Nakon 1.25 h, reakcija je kvenčovana sa zas. vod. NH4Cl-om i ekstrahovana sa EtOAc-om. Organski sloj je opran sa slanim rastvorom, osušen sa natrijum sulfatom, i koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem ISCO silika gel kolonske hromatografije (Kolona od 12 g; DCM/MeOH; 0 do 10% Gradijent). Ovaj materijal je dalje prečišćen putem preparativne HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: Luna C18, 30 x 100 mm, 5-µm čestice;

1

Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 0.1% TFA; Gradijent: 10-100% B tokom 15 min, potom 2-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 40 mL/min da se dobije (S)-2-(3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-fluoro-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il)propan-2-ol (6.70 mg, 7%).

<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 8.46 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.62 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.40-7.32 (m, 2H), 7.29 (d, J=7.2 Hz, 1H), 7.20 (d, J=11.7 Hz, 1H), 5.79 (d, J=11.1 Hz, 1H), 3.98 (s, 4H), 3.88-3.78 (m, 1H), 3.60 (s, 1H), 3.45-3.37 (m, 1H), 2.31 (s, 3H), 1.97 (d, J=12.8 Hz, 1H), 1.66 (s, 6H), 1.62 (d, J=3.3 Hz, 2H), 1.43 (dd, J=13.0, 4.6 Hz, 1H), 1.08 (d, J=12.7 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 514.4; HPLC RT = 0.81 min. Analitička HPLC Metoda 1

Primer 370

2-[3-(Dimetil-1,2-oksazol-4-il)-9-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0752]

Korak 1: Metil 3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-9-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0753] U rastvor (3,5-dimetilizoksazol-4-il)boronske kiseline (0.166 g, 1.18 mmol) i metil 3-bromo-9-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (0.190 g, 0.588 mmol) u DMF-u (3.92 mL) je dodat trikalijum fosfat (2M vodeni, 0.882 mL, 1.76 mmol). Rastvor je degasiran sa azotom u mehurićima, zatim PdCl2(dppf)-DCM adukt (0.0480 g, 0.059 mmol) je dodat, i reakcija je zagrejana do 90 °C. Nakon 2 h, reakcija je ohlađena i razblažena sa vodom. reakcija je ekstrahovana dva puta sa EtOAc-om. Organski slojevi su oprani sa 10% LiCl rastvorom, osušeni sa natrijum sulfatom, i koncentrovani. Ostatak je prečišćen putem ISCO silika gel kolonske hromatografije (Heks/EtOAc; 0 do 100% Gradijent) da se dobije metil 3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-9-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (0.0440 g, 0.130 mmol, 22 %); LCMS (M+H) = 340.3; HPLC RT = 0.79 min. Analitička HPLC Metoda 1. Korak 2: (S)-Metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-fluoro-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

1

[0754] Praćenjem procedure analogne onoj za 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol, (R)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol (0.0850 g, 0.442 mmol) i metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (0.0600 g, 0.177 mmol) su konvertovani u jedinjenje iz naslova (3.70 mg, 6%).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 9.28 (s, 1H), 8.62 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.06 (d, J=1.1 Hz, 1H), 7.74-7.64 (m, 2H), 3.99 (s, 3H), 2.49 (s, 3H), 2.34 (s, 3H); LCMS (M+H) = 514.3; HPLC RT = 0.86 min. Analitička HPLC Metoda 1.

Primeri 371 & 372

[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il](imino)metil-λ<6>-sulfanon

[0755]

Korak 1: 5-Bromo-2-(4-(metiltio)fenil)-3-nitropiridin

[0756] U rastvor (4-(metiltio)fenil)boronske kiseline (0.500 g, 2.98 mmol) i (4-(metiltio)fenil)boronske kiseline (0.500 g, 2.98 mmol) u THF-u (9.92 ml) je dodat vod. trikalijum fosfat (2M, 2.98 ml, 5.95 mmol). Reakcija je degasirana sa azotom u mehurićima, zatim PdCl2(dppf)-DCM adukt (0.146 g, 0.179 mmol) je dodat, i reakcija je zagrejana do 70 °C. Nakon oko 1.5 h, reakcija je ohlađena, razblažena sa vodom, i ekstrahovana 3 puta sa EtOAc-om. Organski sloj je koncentrovan. Ostatak je prečišćen putem ISCO silika gel kolonske hromatografije (Kolona od 40 g; Heks/EtOAc; 0 do 50% Gradijent) da se dobije 5-bromo-2-(4-(metiltio)fenil)-3-nitropiridin (0.684 g, 71%).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.89 (d, J=2.1 Hz, 1H), 8.92-8.86 (m, 1H), 8.26 (d, J=2.1 Hz, 1H), 7.51-7.45 (m, 2H), 7.36-7.29 (m, 2H), 2.53 (s, 3H).

Korak 2: 3-Bromo-7-(metiltio)-5H-pirido[3,2-b]indol

[0757] Suspenzija 5-bromo-2-(4-(metiltio)fenil)-3-nitropiridina (0.684 g, 2.10 mmol) i 1,2-bis(difenilfosfino)etana (1.05 g, 2.63 mmol) u o-dihlorobenzenu (7.01 mL) je zagrejana do 170 °C. Suspendovani materijal je rastvoren kako je reakcija zagrevana. Nakon 1.5 h,

1

reakcija je koncentrovana. Ostatak je prečišćen putem ISCO silika gel kolonske hromatografije (Kolona od 40 g; Heks/EtOAc 0 do 100% Gradijent) da se dobije 3-bromo-7-(metiltio)-5H-pirido[3,2-b]indol (0.320 g, 1.09 mmol, 52 %).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.58 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.21 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.85 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.25 (d, J=1.6 Hz, 1H), 2.60 (s, 3H).

Korak 3: 3-Bromo-7-(metilsulfinil)-5H-pirido[3,2-b]indol

[0758] U rastvor 3-bromo-7-(metiltio)-5H-pirido[3,2-b]indola (0.220 g, 0.750 mmol) u THF-u (12.5 mL) i vodi (2.50 mL) je dodat NBS (0.160 g, 0.900 mmol). Reakcija je mešana tokom noći, zatim koncentrovana. Voda i zas. vod. NaHCO3rastvor su dodati, zatim čvrsta supstanca je isfiltrirana i oprana sa vodom. Sušenje je dalo 3-bromo-7-(metilsulfinil)-5H-pirido[3,2-b]indol (0.183 g, 0.592 mmol, 79 %). LCMS (M+H) = 309.0; HPLC RT = 0.87 min. Analitička HPLC Metoda 1.

Korak 4: 3-Bromo-7-(metilsulfinil)-5-((S)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol

[0759] Suspenzija (R)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanola (0.280 g, 1.46 mmol), 3-bromo-7-(metilsulfinil)-5H-pirido[3,2-b]indola (0.180 g, 0.582 mmol), i trifenilfosfina (0.382 g, 1.46 mmol) u DCM-u (5.82 mL) je ohlađena u ledenom kupatilu. DIAD (0.283 mL, 1.46 mmol) je dodat; suspendovani materijal je rastvoren. Reakcija je mešana tokom noći, zatim koncentrovana. Ostatak je prečišćen putem ISCO silika gel kolonske hromatografije (Kolona od 40 g; DCM/EtOAc 0 do 100% Gradijent, zatim DCM/MeOH 0 do 10% Gradijent) da se dobije 3-bromo-7-(metilsulfinil)-5-((S)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol (0.333 g, 0.689 mmol, 118 %) kao smeša 2 diastereomera na položaju sulfoksida. LCMS (M+H) = 483.2; HPLC RT = 1.07 min. Analitička HPLC Metoda 1.

Korak 5: 3-(1,4-Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-7-(metilsulfinil)-5-((S)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol

[0760] Rastvor 1,4-dimetil-5-(tributilstanil)-1H-1,2,3-triazola (0.319 g, 0.827 mmol), 3-bromo-7-(metilsulfinil)-5-((S)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indola (0.333 g, 0.689 mmol) (napomena: masa predstavlja više od 100% prinosa za prethodnu reakciju), trietilamina (0.192 mL, 1.38 mmol), i bakar(I) jodida (0.0200 g, 0.103 mmol) u DMF-u (2.30 mL) je degasiran sa azotom u mehurićima. Tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0) (0.0520 g, 0.0450 mmol) je dodat, i reakcija je zagrejana do 90 °C. Nakon 2 h, reakcija je ohlađena i potom razblažena sa vodom i EtOAc-om. Čvrsta supstanca je isfiltrirana, potom

2

amonijum hidroksid je dodat, i vodeni sloj je ekstrahovan dva puta sa EtOAc-om. Kombinovani organski slojevi su oprani sa slanim rastvorom, osušeni sa natrijum sulfatom, i koncentrovani. Ostatak je prečišćen putem ISCO silika gel kolonske hromatografije (Kolona od 40 g; DCM/MeOH; 0 do 10% Gradijent) da se dobije 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-7-(metilsulfinil)-5-((S)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol (0.111 g, 0.222 mmol, 32 %) kao smeša 2 diastereomera na položaju sulfoksida. LCMS (M+H) = 500.4; HPLC RT = 1.02 min. Analitička HPLC Metoda 1.

Korak 6: [3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il](imino)metil-λ<6>-sulfanon

[0761] 3-(1,4-Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-7-(metilsulfinil)-5-((S)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol (0.111 g, 0.222 mmol), 4-nitrobenzensulfonamid (0.0900 g, 0.444 mmol), jodobenzen diacetat (0.150 g, 0.467 mmol), i gvožđe (III) acetilacetonat (0.0160 g, 0.0440 mmol) su rastvoreni u acetonitrilu (2.222 mL). Reakcija je mešana tokom noći, zatim dodatni 4-nitrobenzensulfonamid (0.0900 g, 0.444 mmol), gvožđe (III) acetilacetonat (0.0160 g, 0.0440 mmol), i jodobenzen diacetat (0.150 g, 0.467 mmol) su dodati. Nakon dodatnih 5 h, reakcija je koncentrovana. Ostatak je prečišćen putem ISCO silika gel kolonske hromatografije (Kolona od 40 g; DCM/MeOH; 0 do 100% Gradijent) da se dobije intermedijerni sulfoksimin kao smeša diastereomera. Ovaj intermedijer je rastvoren u acetonitrilu (2.22 mL) i Cs2CO3(0.289 g, 0.888 mmol) i tiofenol (0.0870 mL, 0.844 mmol) su dodati. Nakon 6 h, dodatni Cs2CO3(0.289 g, 0.888 mmol) i tiofenol (0.0870 mL, 0.844 mmol) su dodati. Reakcija je mešana tokom noći, potom razblažena sa acetonitrilom i filtrirana. Filtrat je koncentrovan. Deo rastvoran u DCM-u je prečišćen putem ISCO silika gel kolonske hromatografije (Kolona od 24 g; DCM/MeOH; 0 do 10% Gradijent) da se dobije 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-7-(S-metilsulfonimidoil)-5-((S)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol kao smeša diastereomera, koji su razdvojeni primenom hiralne prep SFC (Kolona: Chiralpak IB 25 x 2 cm, 5 µm; Mobilna faza: 78/22 CO2/MeOH; Protok: 50 mL/min). Pik koji se brže eluira je definisan kao Diastereomer A (13.0 mg, 11%); pik koji se sporije eluira je definisan kao Diastereomer B (11.6 mg, 10%). Diastereomer A:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 8.64 - 8.59 (m, 2H), 8.57 (d, J=8.3 Hz, 1H), 8.42 (s, 1H), 7.99 (dd, J=8.3, 1.5 Hz, 1H), 7.65 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.40 - 7.34 (m, 2H), 7.31 - 7.25 (m, 1H), 5.88 (d, J=11.0 Hz, 1H), 4.04 - 3.96 (m, 4H), 3.81 (d, J=9.0 Hz, 1H), 3.61 (s, 1H), 3.45 - 3.39 (m, 2H), 3.29 - 3.27 (m, 3H), 2.33 (s, 3H), 1.98 (d, J=13.1 Hz, 1H), 1.73 - 1.59 (m, 1H), 1.52-1.38 (m, 1H), 1.06 (d, J=12.7 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 515.3; HPLC RT = 0.67 min.

21

Analitička HPLC Metoda 1. Diastereomer B:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 8.63 (s, 1H), 8.60 (d, J=1.6 Hz, 1H), 8.57 (d, J=8.3 Hz, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.99 (dd, J=8.3, 1.5 Hz, 1H), 7.64 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.41 - 7.34 (m, 2H), 7.30 (d, J=7.3 Hz, 1H), 5.88 (d, J=11.1 Hz, 1H), 4.04 - 3.96 (m, 4H), 3.82 (dd, J=11.5, 2.9 Hz, 1H), 3.61 (td, J=11.9, 2.1 Hz, 1H), 3.44 - 3.37 (m, 2H), 3.28 (s, 3H), 2.33 (s, 3H), 1.96 (d, J=13.1 Hz, 1H), 1.73 - 1.60 (m, 1H), 1.55 - 1.41 (m, 1H), 1.07 (d, J=13.3 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 515.3; HPLC RT = 0.67 min. Analitička HPLC Metoda 1.

Primeri 373 & 374

3-[3-(Dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]-3-hidroksipropannitril

[0762]

Korak 1: (S)-3-(3-(3,5-Dimetilizoksazol-4-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il)-3-oksopropannitril

[0763] U rastvor acetonitrila (0.0160 mL, 0.303 mmol) u THF-u (0.5 mL) na -78 °C je dodat nBuLi (2.5 M u heksanu, 0.121 mL, 0.303 mmol). Nakon 1 h, rastvor (S)-metil 3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (0.0500 g, 0.101 mmol) u THF-u (0.5 mL) je dodat. Nakon 2.75 h, reakcija je kvenčovana sa MeOH-om, zatim koncentrovana. Ostatak je prečišćen putem ISCO silika gel kolonske hromatografije (Kolona od 12 g; DCM/EtOAc; 0 do 100% Gradijent) da se dobije (S)-3-(3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il)-3-oksopropannitril (0.0520 g, 0.103 mmol, 102 %).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.55 - 8.47 (m, 2H), 8.41 (s, 1H), 7.83 (dd, J=8.3, 1.3 Hz, 1H), 7.66 (d, J=1.7 Hz, 1H), 7.46 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.40 - 7.29 (m, 3H), 5.59 (d, J=10.6 Hz, 1H), 4.24 (s, 2H), 4.06 (dd, J=11.7, 2.8 Hz, 1H), 3.85 (dd, J=11.7, 2.9 Hz, 1H), 3.55 (td, J=11.9, 1.9 Hz, 1H), 3.36 (td, J=11.9, 2.0 Hz, 1H), 3.14 (d, J=111.0 Hz, 1H), 2.42 (s, 3H), 2.26 (s, 3H), 2.01 (br. S., 1H), 1.71 - 1.56 (m, 1H), 1.44 - 1.32 (m, 1H), 1.14 - 1.03 (m, 1H); LCMS (M+H) = 505.4; HPLC RT = 0.91 min. Analitička HPLC Metoda 1.

22

Korak 2: 3-[3-(Dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]-3-hidroksipropannitril

[0764] U rastvor (S)-3-(3-(3,5-dimetilizoksazol-4-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il)-3-oksopropannitrila (0.0510 g, 0.101 mmol) u metanolu (1.01 mL) i THF-u (1.01 mL) je dodat natrijum borohidrid (3.82 mg, 0.101 mmol). Nakon 1 h, reakcija je kvenčovana sa malom količinom 1M vod. HCl i zatim koncentrovana. Materijal je rastvoren u DCM-u i zatim opran sa vodom. DCM sloj je osušen sa natrijum sulfatom i koncentrovan. Sirov materijal je prečišćen putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: Waters Xbridge C18, 19 x 250 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 23-63% B tokom 25 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja. Diastereomeri su razdvojeni primenom hiralne prep SFC (Kolona: Chiracel OJ-H 25 x 3 cm, 5 µm; Mobilna faza: 75/25 CO2/MeOH; Protok: 85 mL/min). Pik koji se brže eluira je definisan kao Diastereomer A (10.8 mg, 21%); pik koji se sporije eluira je definisan kao Diastereomer B (11.7 mg, 23%). Diastereomer A:<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.39 (s, 1H), 8.19 (br d, J=8.1 Hz, 1H), 8.11 (br s, 1H), 7.64 (br d, J=7.4 Hz, 2H), 7.37 (br d, J=8.1 Hz, 1H), 7.32 - 7.26 (m, 2H), 7.24 - 7.16 (m, 1H), 6.30 (br d, J=4.0 Hz, 1H), 5.72 (br d, J=11.1 Hz, 1H), 5.15 (br d, J=4.7 Hz, 1H), 3.95 - 3.83 (m, 2H), 3.69 (br d, J=7.4 Hz, 1H), 3.53 - 3.43 (m, 1H), 3.36 (br d, J=11.4 Hz, 1H), 3.26 (br t, J=11.4 Hz, 1H), 2.99 (br d, J=7.4 Hz, 2H), 2.43 (s, 3H), 2.25 (br s, 3H), 1.68 (br d, J=10.8 Hz, 1H), 1.50 (br d, J=9.8 Hz, 1H), 1.29 (br d, J=7.7 Hz, 1H), 0.97 (br d, J=9.8 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 507.3; HPLC RT = 1.66 min. Analitička HPLC Metoda 2. Diastereomer B:<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.40 (s, 1H), 8.19 (d, J=8.1 Hz, 1H), 8.13 (br s, 1H), 7.65 (br d, J=7.4 Hz, 2H), 7.35 (br d, J=8.1 Hz, 1H), 7.31 - 7.26 (m, 2H), 7.25 - 7.18 (m, 1H), 6.26 (br d, J=4.0 Hz, 1H), 5.72 (br d, J=11.1 Hz, 1H), 5.17 (br d, J=5.0 Hz, 1H), 3.87 (br d, J=9.1 Hz, 1H), 3.68 - 3.59 (m, 2H), 3.51 - 3.33 (m, 2H), 3.27 (br t, J=11.8 Hz, 1H), 3.09-2.91 (m, 2H), 2.44 (s, 3H), 2.26 (br s, 3H), 1.68 (br d, J=12.1 Hz, 1H), 1.51 (br d, J=11.1 Hz, 1H), 1.28 (br d, J=8.8 Hz, 1H), 0.97 (br d, J=12.8 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 507.4; HPLC RT = 1.66 min. Analitička HPLC Metoda 1.

Primer 375

5-{8-Metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol

2

Korak 1: 5-Bromo-2-(3-(metilsulfonil)fenil)-3-nitropiridin

[0766] Praćenjem procedure analogne onoj za metil 4-(5-bromo-3-nitropiridin-2-il)-3-fluorobenzoat, (3-(metilsulfonil)fenil)boronska kiselina (1.00 g, 5.00 mmol) i 2,5-dibromo-3-nitropiridin (1.41 g, 5.00 mmol) su konvertovani u jedinjenje iz naslova (0.740 g, 41%). LCMS (M+H) = 357.1; HPLC RT = 0.82 min. Analitička HPLC Metoda 1.

Korak 2: 3-Bromo-6-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indol i 3-bromo-8-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indol

[0767] Praćenjem procedure analogne onoj za metil 3-bromo-9-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat, 5-bromo-2-(3-(metilsulfonil)fenil)-3-nitropiridin (0.740 g, 2.07 mmol) je konvertovan do 3-bromo-6-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indola (0.318 g, 47%) i 3-bromo-8-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indola (0.105 g, 16%). 3-Bromo-6-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indol;<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 9.63 (br s, 1H), 8.70 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.62 (d, J=7.7 Hz, 1H), 8.03 (dd, J=7.7, 1.0 Hz, 1H), 8.01 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.51 (t, J=7.8 Hz, 1H), 3.21 (s, 3H). 3-Bromo-8-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indol;<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.98 (s, 1H), 8.71 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.13 (dd, J=8.6, 1.9 Hz, 1H), 7.99 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.63 (d, J=8.6 Hz, 1H), 3.15 (s, 3H).

Korak 3: 3-(1,4-Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-8-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indol [0768] Praćenjem procedure analogne onoj za metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat, 3-bromo-8-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indol (110 mg, 0.338 mmol) je konvertovan u jedinjenje iz naslova (30.0 mg, 26%). LCMS (M+H) = 342.1; HPLC RT = 0.57 min. Analitička HPLC Metoda 1.

Korak 4: 5-{8-Metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol

[0769] Praćenjem procedure analogne onoj za 3-bromo-7-(metilsulfinil)-5-((S)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol, 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-8-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indol (0.0300 g, 0.0880 mmol) je konvertovan u

24

jedinjenje iz naslova (18.0 mg, 26%).<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 8.98 (s, 1H), 8.61 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.32-8.25 (m, 1H), 8.20 (br d, J=9.0 Hz, 1H), 7.65 (br d, J=7.8 Hz, 2H), 7.39-7.33 (m, 2H), 7.30 (d, J=7.2 Hz, 1H), 5.88 (d, J=10.9 Hz, 1H), 4.00 (s, 4H), 3.80 (br s, 1H), 3.65-3.56 (m, 2H), 3.43-3.38 (m, 1H), 3.22 (s, 3H), 2.32 (s, 3H), 2.03-1.90 (m, 1H), 1.66 (s, 1H), 1.45 (s, 1H), 1.07 (br d, J=8.6 Hz, 1H);). LCMS (M+H) = 516.4; HPLC RT = 0.78 min. Analitička HPLC Metoda 1.

Primer 376

5-{6-Metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol

[0770]

Korak 1: 3-(1,4-Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indol [0771] Rastvor 1,4-dimetil-5-(tributilstanil)-1H-1,2,3-triazola (0.449 g, 1.16 mmol), 3-bromo-6-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indola (0.315 g, 0.969 mmol), bakar(I) jodida (0.221 g, 1.16 mmol) i trietilamina (0.162 mL, 1.16 mmol) u DMF-u (9.69 mL) je degasiran sa azotom u mehurićima. Tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0) (0.112 g, 0.0970 mmol) je dodat i reakcija je zagrejana do 100 °C. Nakon 7.5 h, 1,4-dimetil-5-(tributilstanil)-1H-1,2,3-triazol (0.449 g, 1.162 mmol), bakar(I) jodid (0.221 g, 1.16 mmol), i tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0) (0.112 g, 0.0970 mmol) su dodati, i reakcija je zagrejana tokom noći. Reakcija je ohlađena, potom razblažena sa vodom i vod. amonijum hidroksidom. Vodeni sloj je ekstrahovan dva puta sa EtOAc-om. Organski slojevi su oprani dva puta sa vod. 10% LiCl-om, osušeni sa natrijum sulfatom, i koncentrovani. Ostatak je prečišćen putem ISCO silika gel kolonske hromatografije (Kolona od 40 g; DCM/MeOH; 0 do 10% Gradijent) da se dobiju 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indol (0.0890 g, 0.261 mmol, 27 %). LCMS (M+H) = 342.2; HPLC RT = 0.63 min. Analitička HPLC Metoda 1.

Korak 2: 5-{6-Metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol

2

[0772] Praćenjem procedure analogne onoj za (S)-2-(3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-fluoro-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il)propan-2-ol, (R)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol (0.0510 g, 0.264 mmol) i 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indol (0.0450 g, 0.132 mmol) su konvertovani u jedinjenje iz naslova (15.0 mg, 22%).<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 8.75 (dd, J=7.8, 1.2 Hz, 1H), 8.56 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.43 (dd, J=7.9, 1.2 Hz, 1H), 7.83 (d, J=1.7 Hz, 1H), 7.66-7.56 (m, 3H), 7.41-7.33 (m, 2H), 7.32-7.26 (m, 1H), 6.97 (d, J=10.0 Hz, 1H), 3.98 (br dd, J=11.3, 2.9 Hz, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.73 (br dd, J=11.2, 3.6 Hz, 1H), 3.65-3.56 (m, 1H), 3.56 (s, 3H), 3.28-3.22 (m, 12H), 2.15 (s, 4H), 2.00-1.87 (m, 1H), 1.77 (qd, J=12.5, 4.5 Hz, 1H), 0.49 (br d, J=12.8 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 516.4; HPLC RT = 0.82 min. Analitička HPLC Metoda 1.

Primer 377

5-{6-Metansulfonil-5-[(1S)-4,4,4-trifluoro-1-fenilbutil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol

[0773]

[0774] Praćenjem procedure analogne onoj za (S)-2-(3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-9-fluoro-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il)propan-2-ol, (R)-4,4,4-trifluoro-1-fenilbutan-1-ol (0.0540 g, 0.264 mmol) i 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indol (0.0450 g, 0.132 mmol) su konvertovani u jedinjenje iz naslova (10.5 mg, 15%).<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 8.81 (dd, J=7.7, 1.1 Hz, 1H), 8.61 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.45 (dd, J=7.9, 1.1 Hz, 1H), 7.68-7.58 (m, 2H), 7.44-7.28 (m, 6H), 3.74 (s, 3H), 3.40 (s, 3H), 3.04 (s, 1H), 2.88-2.76 (m, 1H), 2.68-2.54 (m, 1H), 2.11 (s, 3H), 1.67-1.47 (m, 1H);). LCMS (M+H) = 528.3; HPLC RT = 0.92 min. Analitička HPLC Metoda 1.

Primer 378

2-{3-[4-(<2>H3)Metoksi-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0775]

2

Korak 1: (Azidometil)trimetilsilan

[0776] Sud je napunjen sa natrijum azidom (5.09 g, 78.0 mmol) i DMF (30 mL). U ovo je dodat (hlorometil)trimetilsilan (8.00 g, 65.2 mmol). Sud je opremljen sa balonom azota, postavljen u kupatilo na 80 °C, i mešan na toj temperaturi tokom 40 h. Reakcija je ostavljena da se ohladi do sobne temperature. Reakconi sud je opremljen sa obloženom vigreovom kolonom i kratkom glavom za destilaciju. Proizvod je destilovan pod ugrađenim vakuumom da bi se dobila jedna frakcija. Sakupljanje je prekinuto kada je temperatura glave počela da raste i kada se javila vidljiva promena načina na koji je destilat interagovao sa vigreovom kolonom (išlo je od toga da je uniformno obložena sa destilatom do nepravilnije raspodele na staklu vigreove kolone). Destilovani materijal je težio 7.60 g (85% čist pomoću<1>H NMR, 76 %). Materijal je korišćen bez dodatnog prečišćavanja.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 2.77 (s, 2H), 0.13 (s, 9H).<13>C NMR (101MHz, CDCl3) δ 42.1, -2.6.

Korak 2: 2-Hloro-1,1-bis(<2>H3)metoksietan

[0777] Sud je napunjen sa 2-hloroacetaldehidom (50% u vodi, 20.0 g, 127 mmol) i D4-MeOH-om (10 mL). U to je dodat kalcijum hlorid (16.5 g, 149 mmol), što je dalo značajnu egzotermu. Kada je egzoterma završen, reakcija je postavljena u kupatilo na 55 °C i držana je na toj temperaturi tokom noći. Ujutru, reakcija je sipana u levak za separaciju i slojevi su razdvojeni. Niži viskozni, vodeni sloj je ekstrahovan sa 15 mL dietil etra, koji je dodat u prvi organski sloj. Organske supstance su osušene preko MgSO4, filtrirane, opremljene sa obloženom vigreovom /kratkom destilacionim glavom, i zagrejane na grejnoj ploči. Frakcija koja je destilovala između 90 °C i 110 °C je zadržana da se dobiju 9.25 g (56 %).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 4.54 (t, J=5.4 Hz, 1H), 3.52 (d, J=5.3 Hz, 2H).<13>C NMR (101MHz, CDCl3) δ 103.1, 53.1 (m), 43.0.

Korak 3: (<2>H3)Metoksietin

[0778] U rastvor dietilamina (15.6 mL, 149 mmol) u THF-u (250 mL) na 0 °C je dodat nBuLi (2.5 M u heksanima, 59.7 mL, 149 mmol). Nakon mešanja tokom 10 min, reakcija je tretirana sa 2-hloro-1,1-bis(<2>H3)metoksietanom (5.67 mL, 49.8 mmol) tokom nekoliko minuta. Nakon mešanja tokom 30 min na 0 °C, isparljive supstance su uklonjene putem koncentracije pod

2

sniženim pritiskom, otvaranjem rotacionog uparivača prema azotu. Dobijeni prah je pumpan pod visokim vakuumom tokom 15 minuta pre nego što je potopljen u kupatilo na -78 °C. U ovo je dodato 125 mL slanog rastvora kroz levak za dodavanje koliko god je moguće brzo, vrteći sud da se pomogne potpuno kvenčovanje reakcione smeše. Sud je opremljen sa 24/40 → 14/20 adapterom i obloženom vigreovom kolonom/aparaturom za destilaciju kratkog puta. Prijemni sud je uronjen u kupatilo na -78 °C. Sud u kome se odvija ključanje je zagrejan pomoću grejne ploče. Znatna frakcija je formirana bez bilo kakve promene u temperaturi glave (Frakcija 1). Kada je temperatura glave počela da raste, prijemni sud je zamenjen (Frakcija 2). Temperatura je porasla do 38 °C i stabilizovana na toj temperaturi. Sakupljanje frakcije 2 je prekinuto kada je temperatura glave počela da pada. Obe frakcije su analizirane pomoću HNMR. Frakcija 1: 0.898 g, oko 94% čist.<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 1.54 (s, 1H).

Korak 4: 4-(<2>H3)Metoksi-1-[(trimetilsilil)metil]-1H-1,2,3-triazol

[0779] U rastvor (azidometil)trimetilsilana (85.2% čist) (2.17 g, 14.3 mmol) i (<2>H3)metoksietina (0.898 g, oko 94% čist, 14.3 mmol) u DCM-u (40.8 ml) na 0 °C je dodat rastvor bakar (II) sulfat pentahidrata (0.467 g, 1.87 mmol) u vodi (30.7 mL). U ovo je polako dodat natrijum askorbat (1.30 g, 6.54 mmol). Po dodavanju askrobata, reakcija je postala veoma tamna sa talogom, i mešanje je postalo otežano. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi preko vikenda. Dobijena smeša je tretirana sa Celite-om i filtrirana kroz drugu podlogu od Celite-a, ispiranjem sa dodatnim DCM-om. Organske supstance (vodena je uklonjena u tretiranju sa Celite-om) su osušene preko MgSO4, filtrirane, i koncentrovane da se dobije 0.750 g (28%) kao veoma tamno ulje.<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 6.88 (s, 1H), 3.83 (s, 2H), 0.16 (s, 9H).<13>C NMR (126MHz, CDCl3) δ 161.3, 106.6, 56.65-55.97 (m, 1C), 43.07-42.42 (m, 1C), -2.16 - -2.76 (m, 1C). LCMS (M+H) = 189.1.

Korak 5: Metil 3-[4-(<2>H3)metoksi-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0780] Suva, isprana sa N2(g), bočica od 1 drama je napunjena sa tetrametilamonijum acetatom (22.2 mg, 0.167 mmol), bis(trifenilfosfin)paladijum(II) dihloridom (5.86 mg, 8.34 µmοl), i (S)-metil 3-bromo-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilatom (40.0 mg, 0.083 mmol, videti Korake 1-2 za 2-[8-bromo-3-(4-bromo-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol i 2-[3-(4-bromo-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol). U ovo je dodat 4-(<2>H3)metoksi-1-[(trimetilsilil)metil]-1H-1,2,3-

2

triazol (31.4 mg, 0.167 mmol). Bočica je ponovo isprana sa azotom. U ovo je dodat NMP (0.4 mL). Dobijena smeša je mešana energično pod strujom azota tokom 10 min. Bočica je postavljena u prethodno zagrejano uljano kupatilo na 95 °C i zagrevana na toj temperaturi tokom noći. Reakcija je ohlađena na sobnu temperaturu, razblažena sa EtOAc-om, oprana sa vodom (2X), zatim slanim rastvorom, osušena preko MgSO4, filtrirana, i koncentrovana. Ostatak je prečišćen pomoću kolonske hromatografije (50% EtOAc/Heks → 100% EtOAc) da se dobije 32.0 mg (75%) kao prljavo bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.50 (s, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.38 (d, J=8.4 Hz, 1H), 8.08 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.22 (t, J=7.3 Hz, 1H), 7.21 (d, J=7.5 Hz, 1H), 7.21 (d, J=7.5 Hz, 1H), 7.18 (dd, J=7.5, 7.3 Hz, 1H), 7.18 (dd, J=7.5, 7.3 Hz, 1H), 6.52 (d, J=5.8 Hz, 1H), 4.33 (s, 3H), 3.97 (s, 3H), 3.84 (ddd, J=11.6, 4.5, 3.5 Hz, 1H), 3.84 (ddd, J=11.6, 4.5, 3.5 Hz, 1H), 3.84 (ddd, J=11.8, 11.6, 4.5 Hz, 1H), 3.84 (ddd, J=11.8, 11.6, 4.5 Hz, 1H), 2.70 (tdt, J=7.5, 5.8, 3.4 Hz, 1H), 1.70 (dddd, J=4.5, 3.5, 3.4, - 13.9 Hz, 1H), 1.67 (dddd, J=4.5, 3.5, 3.4, -13.9 Hz, 1H), 1.60 (dddd, J=11.8, 7.5, 4.5, - 13.9 Hz, 1H), 1.57 (dddd, J=11.8, 7.5, 4.5, -13.9 Hz, 1H). LCMS (M+H) = 515.5.

Korak 6: 2-{3-[4-(<2>H3)Metoksi-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0781] U rastvor metil 3-[4-(2H3)metoksi-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (32.0 mg, 0.0620 mmol) u THF-u (2 mL) na 0 °C je dodat metilmagnezijumbromid (3M u Ft2O, 0.311 mL, 0.933 mmol). Reakcija je mešana tokom 30 min na toj temperaturi. Reakcija je kvenčovana dodavanjem zas. vod. NH4Cl. Reakcija je razblažena sa etil acetatom i sipana u vodu. Slojevi su razdvojeni. Organske supstance su koncentrovane i prečišćene silika gel kolonskom hromatografijom (100% EtOAc) da se dobije uglavnom čist proizvod. Čvrsta supstanca je ponovo kristalisala iz smeše voda/EtOH (2:1). Matični rastvor je uklonjen preko pipete. Čvrsta supstanca koja je uzeta sa njim je sakupljena u špric filteru. Ponovo kristalisana čvrsta supstanca je isprana dva puta sa dodatnom hladnom smešom voda/EtOH (2:1). Ispiranja su ponovo dodata u špric filter. Čvrsta supstanca koja je ostala u filteru je rastvorena u EtOH-u i dodata nazad u ponovo kristalisanu čvrstu supstancu. Koncentracija etanola je dala 27.0 mg (80%).<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.59 (d, J=1.9 Hz, 1H), 8.34 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.86 (d, J=1.9 Hz, 1H), 7.53-7.48 (m, 2H), 7.44 (dd, J=8.2, 1.4 Hz, 1H), 7.39-7.34 (m, 2H), 7.33-7.30 (m, 1H), 5.56 (d, J=10.7 Hz, 1H), 4.08 (dd, J=11.7, 2.6 Hz, 1H), 4.03 (s, 3H), 3.88 (dd, J=11.5, 2.8 Hz, 1H), 3.56 (td, J=11.9, 2.0 Hz, 1H), 3.37 (td, J=11.9, 2.0 Hz, 1H), 3.19-3.07

2

(m, 1H), 2.01 (d, J=13.6 Hz, 1H), 1.75 (s, 6H), 1.69-1.61 (m, 1H), 1.48-1.35 (m, 2H), 1.14 (d, J=13.2 Hz, 1H). LCMS (M+H) = 515.6.

Primer 379

2-[3-(4-Metoksi-1-Metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0782]

Korak 1: 4-Metoksi-1-((trimetilsilil)metil)-1H-1,2,3-triazol

[0783] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno praćenjem procedure analogne onoj opisanoj u pripremanju metil 3-[4-(<2>H3)metoksi-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il] -5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata, počevši sa komercijalno dostupnim 2-hloro-1,1-dimetoksietanom.<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 6.88 (s, 1H), 4.00 (s, 3H), 3.83 (s, 2H), 0.17 (s, 9H).<13>C NMR (126MHz, CDCl3) δ 161.3, 106.6, 57.2, 42.8, -2.05 - -2.90 (m, 1C). LCMS (M+H) = 186.1.

Korak 2: (S)-Metil 3-(4-metoksi-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0784] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno praćenjem procedure analogne onoj opisanoj u pripremanju metil 3-[4-(<2>H3)metoksi-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il] -5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata, počevši sa 4-metoksi-1-((trimetilsilil)metil)-1H-1,2,3-triazolom.<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.66 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.44 (d, J=8.2 Hz, 1H), 8.07 (dd, J=8.2, 1.1 Hz, 1H), 7.94 (d, J=1.7 Hz, 1H), 7.51 (d, J=7.4 Hz, 2H), 7.40-7.35 (m, 2H), 7.34-7.29 (m, 1H), 5.59 (d, J=10.7 Hz, 1H), 4.16 (s, 3H), 4.11-4.06 (m, 1H), 4.05 (s, 3H), 4.04 (s, 3H), 3.87 (dd, J=11.8, 2.8 Hz, 1H), 3.56 (td, J=11.9, 2.0 Hz, 1H), 3.37 (td, J=11.9, 1.9 Hz, 1H), 3.21-3.10 (m, 1H), 2.01 (d, J=13.2 Hz, 1H), 1.70-1.58 (m, 1H), 1.49-1.37 (m, 1H), 1.10 (d, J=12.6 Hz, 1H). LCMS (M+H) = 512.5.

Korak 3: 2-[3-(4-Metoksi-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0785] U rastvor (S)-metil 3-(4-metoksi-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (77.0 mg, 0.151 mmol) u THF-u (3 mL) na 0 °C je dodat metilmagnezijum bromid (3M u Ft2O, 0.753 mL, 2.26 mmol). Reakcija je mešana tokom 30 min na toj temperaturi. Reakcija je kvenčovana dodavanjem zas. vod. NH4Cl. Reakcija je razblažena sa etil acetatom i sipana u vodu. Slojevi su razdvojeni. Organske supstance su koncentrovane i prečišćene silika gel kolonskom hromatografijom (100% EtOAc) da se dobije uglavnom čist proizvod. Dobijeni ostatak je rastvoren u EtOH-u (1.5 mL). U ovo je dodata voda u kapima. Sa svakom kapi, javljao se delić taloga praćen rastvaranjem. Po dodatku finalne kapi velika količina čvrste supstance je precipitirala. Dobijena suspenzija je zagrejana sa toplotnim pištoljem uz energično mešanje, ali je malo prešlo nazad u rastvor. Suspenzija je nežno mućkana na šejkeru tokom 48 h. Dobijena čvrsta supstanca je prikupljen filtracijom u Bihnerovom levku i isprana sa 2 mL smeše hladna voda/EtOH (2:1). Čvrsta supstanca je osušena na vazduhu da se dobije 50.0 mg (64 %) kao fini beli prah.<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.59 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.34 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.86 (d, J=1.7 Hz, 1H), 7.50 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.44 (dd, J=8.3, 1.3 Hz, 1H), 7.39-7.34 (m, 2H), 7.33-7.30 (m, 1H), 5.56 (d, J=10.7 Hz, 1H), 4.16 (s, 3H), 4.08 (dd, J=11.4, 2.4 Hz, 1H), 4.03 (s, 3H), 3.88 (dd, J=11.8, 2.7 Hz, 1H), 3.56 (td, J=11.9, 1.9 Hz, 1H), 3.37 (td, J=11.9, 2.0 Hz, 1H), 3.13 (q, J=11.2 Hz, 1H), 2.01 (d, J=12.5 Hz, 1H), 1.96 (s, 1H), 1.75 (s, 6H), 1.69-1.61 (m, 1H), 1.48-1.36 (m, 1H), 1.14 (d, J=13.2 Hz, 1H). LCMS (M+H) = 512.6.

Primer 380

2-{3-[4-(<2>H3)Metoksi-1-(<2>H3)metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0786]

Korak 1: 4-(<2>H3)Metoksi-1-(<2>H3)metil-1H-1,2,3-triazol

[0787] U rastvor (<2>H3)metoksietina (oko 11% u THF-u, 0.400 g, 0.745 mmol) i d3-jodometana (0.0700 mL, 1.127 mmol) u THF-u (0.6 mL) na 0 °C je dodat rastvor natrijum azida (0.0730 g, 1.12 mmol) u vodi (1 mL). Sud je zatvoren i promešan tokom noći na sobnoj

1

temperaturi. Reakcija je ohlađena na 0 °C i tretirana sekvencijalno sa bakar(II) sulfat pentahidratom (0.0240 g, 0.0980 mmol) i natrijum askorbatom (0.0740 g, 0.372 mmol). Smeša je mešana energično tokom 4 dana. Dobijena smeša je razblažena sa EtOAc-om, tretirana sa Celite-om, filtrirana kroz drugu podlogu od Celite-a, i koncentrovana. Sirov proizvod je prečišćen pomoću silika gel kolonske hromatografije (EtOAc/heks) da se dobije 0.0670 g (76 %).<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 6.99 (s, 1H). LCMS (M+H) = 120.1.

Korak 2: Metil 3-[4-(<2>H3)metoksi-1-(<2>H3)metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0788] Suva, isprana sa N2(g), bočica od 1 drama je napunjena sa tetrametilamonijum acetatom (16.7 mg, 0.125 mmol), bis(trifenilfosfin)paladijum(II) dihloridom (4.39 mg, 6.26 µmοl), i (S)-metil 3-bromo-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilatom (30.0 mg, 0.0630 mmol, videti Korake 1-2 za 2-[8-bromo-3-(4-bromo-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol i 2-[3-(4-bromo-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol). U to je dodat 4-(<2>H3)metoksi-1-(<2>H3)metil-1H-1,2,3-triazol (14.9 mg, 0.125 mmol). Bočica je ponovo isprana sa azotom. u to je dodat NMP (0.5 mL). Dobijena smeša je mešana energično pod strujom azota tokom 10 min. Bočica je postavljena u prethodno zagrejano uljano kupatilo na 95 °C i zagrevana na toj temperaturi tokom noći. Reakcija je ohlađena na sobnu temperaturu, razblažena sa EtOAc-om, oprana sa vodom (2X), zatim slanim rastvorom, osušena preko MgSO4, filtrirana, i koncentrovana. Ostatak je prečišćen pomoću kolonske hromatografije (50% EtOAc/heks) da se dobije 31.7 mg (98 %) kao čisto ulje. LCMS (M+H) = 518.5. HPLC RT = 1.58 min (Kolona: Phenomenex LUNA C18 2 x 30 mm; Mobilna faza A: 10:90 ACN:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 ACN:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min; Protok: 1 mL/min).

Korak 3: 2-{3-[4-(<2>H3)Metoksi-1-(<2>H3)metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0789] U rastvor metil 3-[4-(<2>H3)metoksi-1-(<2>H3)metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (31.7 mg, 0.0610 mmol) u THF-u (1 mL) na 0 °C je dodat metilmagnezijum bromid (3M u Ft2O, 0.408 mL, 1.23 mmol). Reakcija je mešana tokom 30 min na toj temperaturi. Reakcija je kvenčovana dodavanjem zas. vod. NH4Cl. Reakcija je razblažena sa etil acetatom i slanim rastvorom. Slojevi su razdvojeni. Organske supstance su koncentrovane i prečišćene pomoću preparativne HPLC (Kolona:

2

XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 20-60% B tokom 20 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min). Prinos proizvoda je 16.2 mg (51%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.52 (s, 1H), 8.40 (br. s., 1H), 8.14 (d, J=8.4 Hz, 2H), 7.65 (d, J=7.7 Hz, 2H), 7.46 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.39-7.30 (m, 2H), 7.29-7.22 (m, 1H), 5.79 (d, J=11.4 Hz, 1H), 3.90 (d, J=8.4 Hz, 1H), 3.74 (d, J=11.4 Hz, 1H), 3.54-3.32 (m, 4H), 3.26 (t, J=11.6 Hz, 1H), 1.81-1.66 (m, 1H), 1.58 (s, 7H), 1.40-1.23 (m, 1H), 0.98 (d, J=13.6 Hz, 1H). LCMS (M+H) = 518.5.

Primer 381

2-{3-[4-Metoksi-1-(<2>H3)metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0790]

Korak 1: 4-Metoksi-1-(<2>H3)metil-1H-1,2,3-triazol

[0791] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa procedurom za 2-{3-[4-(<2>H3)metoksi-1-(<2>H3)metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, počevši sa metoksietinom (pripremljen pomoću procedure korišćene da se pripremi (<2>H3)metoksietin, počevši sa komercijalno dostupnim 2-hloro-1,1-dimetoksietanom).<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 6.99 (s, 1H), 4.00 (s, 3H).<13>C NMR (126MHz, CDCl3) δ 161.8, 106.7, 57.4 (CD3nije opažen). LCMS (M+H) = 117.1.

Korak 2: 2-{3-[4-Metoksi-1-(<2>H3)metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0792] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa procedurom za 2-{3-[4-(<2>H3)metoksi-1-(<2>H3)metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, počevši sa 4-metoksi-1-(<2>H3)metil-1H-1,2,3-triazolom.<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.53 (s, 1H), 8.41 (br. s., 1H), 8.14 (d, J=8.1 Hz, 2H), 7.66 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.47 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.38-7.30 (m, 2H), 7.29-7.22 (m, 1H), 5.80 (d, J=11.0 Hz, 1H), 4.03 (s, 3H), 3.90 (d, J=8.8 Hz, 1H), 3.74 (d, J=9.2 Hz, 1H), 3.55-3.33 (m, 3H), 3.26 (t, J=11.9 Hz, 1H), 1.76-1.67 (m, 1H), 1.58 (s, 6H), 1.39-1.21 (m, 1H), 1.10-0.93 (m, 2H). LCMS (M+H) = 515.6.

Primer 382

2-[3-(4-Etoksi-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0793]

[0794] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno u skladu sa procedurom za 2-{3-[4-(<2>H3)metoksi-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, počevši sa komercijalno dostupnim metoksietinom. Jedinjenje iz naslova je prečišćeno pomoću preparativne HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18, 19 x mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 20-60% B tokom 15 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min.<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.55 (s, 1H), 8.42 (br. s., 1H), 8.14 (d, J=8.1 Hz, 2H), 7.67 (d, J=7.7 Hz, 2H), 7.47 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.38-7.30 (m, 2H), 7.29-7.21 (m, 1H), 5.82 (d, J=11.0 Hz, 1H), 4.40 (q, J=7.0 Hz, 2H), 4.07 (br. s., 3H), 3.96-3.86 (m, 1H), 3.74 (d, J=8.8 Hz, 1H), 3.56-3.33 (m, 2H), 3.27 (t, J=11.2 Hz, 1H), 3.18 (d, J=4.8 Hz, 1H), 1.73 (d, J=12.5 Hz, 1H), 1.59 (s, 7H), 1.36 (t, J=7.0 Hz, 3H), 1.34-1.25 (m, 1H), 1.00 (d, J=12.5 Hz, 1H). LCMS (M+H) = 526.3.

Primeri 383 & 384

2-[8-Bromo-3-(4-bromo-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol i 2-[3-(4-Bromo-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0795]

4

Korak 1: (R)-Fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil metansulfonat.

[0796] U (R)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol (0.750 g, 3.90 mmol) u DCM-u (26.0 mL) je dodat trietilamin (0.952 mL, 6.83 mmol), ohlađen je na 0 °C, metansulfonil hlorid (0.380 mL, 4.88 mmol) je zatim dodat u kapima, i smeša je mešana na 0 °C tokom 0.5 h, zatim sobnoj temperaturi tokom 0.5 h. Reakcija je ohlađena na 0 °C i tretirana sa 80 uL MsCl. Nakon 10 min, ledeno kupatilo je uklonjeno, i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 min. Reakcija je razblažena sa etrom, oprana sa vodom, zatim zas. vod. NaHCO3-om, zatim slanim rastvorom, osušena preko MgSO4, filtrirana, i koncentrovana da bi se dobila bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.50-7.34 (m, 5H), 5.22 (d, J=8.8 Hz, 1H), 4.07 (dd, J=11.7, 3.1 Hz, 1H), 3.93 (dd, J=11.7, 3.1 Hz, 1H), 3.40 (td, J=11.9, 2.3 Hz, 1H), 3.30 (td, J=11.8, 2.3 Hz, 1H), 2.63 (s, 3H), 2.20-2.07 (m, 1H), 2.06-1.97 (m, 1H), 1.58-1.50 (m, 1H), 1.39-1.28 (m, 1H), 1.19-1.10 (m, 1H).

[0797] Bočica je napunjena sa metil 3-bromo-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilatom (600 mg, 1.97 mmol), (R)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil metansulfonatom (1060 mg, 3.93 mmol), cezijum karbonatom (1920 mg, 5.90 mmol), i DMF-om (5960 µL). Bočica je zatvorena i zagrevana na 30 °C tokom noći. Bočica je zagrejana do 35 °C i držana na toj temperaturi 48 h. Bočica jezagrejana do 45 °C i držana na toj temperaturi tokom noći. Reakcija je ohlađena do sobne temperature i filtrirana da se uklone nerastvorene čvrste supstance. Čvrste supstance su ispranae sa EtOAc-om. Organske supstance su razblažene sa smešom voda/EtOAc, i slojevi su odvojeni. Organske supstance su oprane sa vodom, zatim slanim rastvorom, osušene preko MgSO4, filtrirane, i koncentrovane. Dobijeni ostatak je suspendovan u 4 mL DCM. Dobijena suspenzija je mućkana povremeno tokom 5 min. Suspenzija je dalje razblažena sa 4 mL 25% EtOAc/heks. Dobijena suspenzija je filtrirana kroz čep od pamuka i naneta na silika gel kolonu (150 mL SiO2, 25% EtOAc/heks), i eluirana dok uzorak nije adsorbovan na koloni. Proizvod je eluiran primenom 25% EtOAc/heks.

Frakcije su vizuelizovane prvo pomoću UV (da se pokaže proizvod i karbolin) i zatim pomoću PMA (da se pokaže benzil alkohol (koji pokazuje plavo po sagorevanju)). Dva seta frakcija su prikupljena. Prve frakcije koje su odvojene su bile proizvod, kontaminiran neizreagovanim karbolinom. Ove frakcije su prikupljene zajedno i koncentrovane. Dobijeni ostatak je rastvoren u etru da bi se dobio fin praškati beli talog. Talog (neizreagovani karbolin) je uklonjen filtracijom i odbačen. Koncentracija ove matične tečnosti je dala veoma čist proizvod (502 mg, 53%).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.61 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.38 (d, J=8.3 Hz, 1H), 8.05-7.98 (m, 2H), 7.49 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.41-7.34 (m, 2H), 7.31 (d, J=7.3 Hz, 1H), 5.46 (d, J=10.8 Hz, 1H), 4.07 (dd, J=11.4, 2.9 Hz, 1H), 4.03 (s, 3H), 3.86 (dd, J=11.8, 2.8 Hz, 1H), 3.57 (td, J=11.9, 1.6 Hz, 1H), 3.38 (td, J=11.9, 2.0 Hz, 1H), 3.22-3.06 (m, 1H), 1.99 (d, J=13.3 Hz, 1H), 1.68-1.51 (m, 1H), 1.47-1.31 (m, 1H), 1.04 (d, J=12.5 Hz, 1H). LCMS (M(<81>Br)+H) = 481.2.

Korak 3: (S)-Metil 3-(1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0798] Suva, isprana sa N2(g), bočica od 1 drama je napunjena sa tetrametilamonijum acetatom (33.3 mg, 0.250 mmol), bis(trifenilfosfin)paladijum dihloridom (8.79 mg, 0.0130 mmol) i (S)-metil 3-bromo-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilatom (60.0 mg, 0.125 mmol). U to je dodat 1-metil-1H-1,2,3-triazol (20.8 mg, 0.250 mmol). Bočica je ponovo isprana sa azotom. U to je dodat NMP (0.5 mL). Dobijena smeša je mešana energično pod strujom azota tokom 10 min. Bočica je postavljena u prethodno zagrejano uljano kupatilo na 95 °C i zagrevana na toj temperaturi tokom noći. Reakcija je ohlađena na sobnu temperaturu, razblažena sa EtOAc-om, oprana sa vodom (2X), zatim slanim rastvorom, osušena preko MgSO4, filtrirana, i koncentrovana. Ostatak je prečišćen pomoću kolonske hromatografije (100% EtOAc → 1% MeOH/EtOAc) da se dobije 39.5 mg (66%) kao prljavo bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.61 (d, J=1.6 Hz, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.47 (d, J=8.2 Hz, 1H), 8.10 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.53-7.45 (m, 2H), 7.42-7.35 (m, 2H), 7.35-7.30 (m, 1H), 5.63 (d, J=10.7 Hz, 1H), 4.11-4.03 (m, 4H), 3.98 (s, 3H), 3.86 (dd, J=11.7, 3.0 Hz, 1H), 3.57 (td, J=11.9, 1.7 Hz, 1H), 3.37 (td, J=11.9, 1.9 Hz, 1H), 3.22-3.09 (m, 1H), 2.11-2.01 (m, 1H), 1.72-1.59 (m, 1H), 1.50-1.38 (m, 1H), 1.07 (d, J=13.1 Hz, 1H). LCMS (M+H) = 482.3.

Korak 4: (S)-Metil 3-(4-bromo-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat i (S)-Metil 8-bromo-3-(4-bromo-1metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0799] U rastvor (S)-metil 3-(1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (39.5 mg, 0.0820 mmol) u DMF-u (0.5 mL) na sobnoj temperaturi je dodat NBS (16.1 mg, 0.0900 mmol). Reakcija je postavljena u prethodno zagrejano peščano kupatilo na 45 °C i držana je na toj temperaturi tokom 2 h. Reakcija je ohlađean na sobnu temperaturu, razblažena sa DCM-om, i sipana u vodu. Organske supstance su oprane sa vodom (2X), zatim slanim rastvorom, osušene preko MgSO4, filtrirane, i koncentrovane. Kolonska hromatografija (50% → 100% EtOAc/heks) je dala dva blisko eluirajuća mesta koja su prikupljena zajedno da se dobije 21.0 mg (ca. 43 %) kao smeša jedinjenja iz naslova. LCMS (Kolona: Phenomenex Luna C18 2 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 ACN:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 ACN:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 0.8 mL/min) podaci: Mono-bromid:(M+H) = 562.2. HPLC RT = 3.14 min; Di-bromid: (M(<79>Br,<81>Br) H) = 640.1. HPLC RT = 3.37 min.

Korak 5: 2-[8-Bromo-3-(4-bromo-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol i 2-[3-(4-Bromo-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol [0800] U smešu (S)-metil 3-(4-bromo-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata i (S)-metil 8-bromo-3-(4-bromo-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (21.0 mg, 0.0350 mmol) u THF-u (350 µL) na 0 °C je dodat metilmagnezijum bromid (3M u Ft2O, 117 µL, 0.350 mmol). Reakcija je mešana tokom 30 min na toj temperaturi. Reakcija je kvenčovana dodavanjem zas. vod. NH4Cl. Reakcija je razblažena sa etil acetatom i sipana u vodu. Slojevi su razdvojeni. Organske supstance su oprane sa vodom, zatim slanim rastvorom, osušene preko MgSO4, filtrirane, i koncentrovane. Dobijeni ostatak je prečišćen pomoću kolonske hromatografije (50% → 100% EtOAc/Heksani → 1% MeOH/EtOAc) da se dobiju dve frakcije. Gornje mesto (Frakcija1) je prikupljeno, koncentrovano, i ponovo prečišćeno pomoću preparativne HPLC (Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 45-85% B tokom 15 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min) da se dobiju Primer 383 (6.30 mg, 28 %). Donje mesto (Frakcija2) je prikupljeno da se dobije Primer 384 (9.40 mg, 43 %). Primer 383:<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.62 (s, 2H), 8.49 (br. s., 1H), 8.38 (s, 1H), 7.65 (d, J=7.7 Hz, 2H), 7.40-7.32 (m, 2H), 7.30-7.24 (m, 1H), 5.74 (d, J=11.0 Hz, 1H), 4.09 (s, 3H), 3.93-3.87 (m, 1H), 3.74 (d, J=8.8 Hz, 1H), 3.52-3.22 (m, 3H), 1.84-1.65 (m, 8H), 1.60-1.48 (m, 1H), 1.38-1.25 (m, 1H), 0.98 (d, J=12.1 Hz, 1H). LCMS (M(<79>Br,<81>Br)+H) = 640.1. Primer 384:<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.53 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.38 (d, J=8.2 Hz, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.83 (d, J=1.7 Hz, 1H), 7.50 (d, J=7.4 Hz, 2H), 7.47 (dd, J=8.3, 1.3 Hz, 1H), 7.38-7.33 (m, 2H), 7.30 (d, J=7.3 Hz, 1H), 5.59 (d, J=10.7 Hz, 1H), 4.07 (dd, J=12.1, 3.5 Hz, 1H), 4.02 (s, 3H), 3.87 (dd, J=11.8, 3.0 Hz, 1H), 3.56 (td, J=11.9, 1.9 Hz, 1H), 3.37 (td, J=11.9, 2.0 Hz, 1H), 3.22-3.09 (m, 1H), 2.03 (d, J=13.1 Hz, 1H), 1.76 (s, 6H), 1.69-1.57 (m, 2H), 1.48-1.37 (m, 1H), 1.12 (d, J=12.5 Hz, 1H). LCMS (M(<81>Br)+H) = 562.2.

Primer 385

2-[3-(4-Ciklopropil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0801]

[0802] 2-[3-(4-Bromo-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol (6.00 mg, 10.7 µmol), ciklopropilboronska kiselina (4.60 mg, 0.0540 mmol), bis(tricikloheksilfosfin)paladijum dihlorid (1.98 mg, 2.68 µmοl), i kalijum fosfat (11.4 mg, 0.0540 mmol) su postavljeni u bočicu, i smeša je isprana sa azotom. U to je dodat toluen (0.5 mL) i voda (0.05 mL). Bočica je isprana sa azotom tokom 15 min uz snažno mešanje. Bočica je zatvorena i postavljena u prethodno zagrejano kupatilo na 110 °C. Reakcija je držana na 110 °C tokom 4 h, ohlađena na sobnu temperaturu, i koncentrovana pod strujom azota. Dobijeni ostatak je suspendovan u DCM/voda i promešan energično. Smeša je razblažena sa EtOAc-om i slojevi su izdvojeni. Organske supstance su osušene preko MgSO4, filtrirane, i koncentrovane. Ostatak je prečišćen pomoću iterativne preparativne HPLC (1. HPLC: Kolona: XBridge C18, 19 x mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 20-60% B tokom 15 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. 2. HPLC: Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 15-55% B tokom 30 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. 3. HPLC: Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; Gradijent: 10-50% B tokom 30 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min) da se dobije 3.8 mg (55%) kao TFA salt.<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.54 (s, 1H), 8.44 (br. s., 1H), 8.15 (d, J=8.4 Hz, 2H), 7.66 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.48 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.36-7.29 (m, 2H), 7.27-7.21 (m, 1H), 5.82 (d, J=11.4 Hz, 1H), 3.98 (s, 3H), 3.93-3.86 (m, 1H), 3.74 (d, J=11.0 Hz, 1H), 3.47 (t, J=12.1 Hz, 1H), 3.26 (t, J=11.7 Hz, 1H), 3.19-3.09 (m, 1H), 2.94 (br. s., 1H), 1.83 (br. s., 1H), 1.72 (d, J=12.1 Hz, 1H), 1.58 (s, 6H), 1.37-1.22 (m, 2H), 1.02 (d, J=12.5 Hz, 1H), 0.96-0.77 (m, 4H). LCMS (M+H) = 522.3.

Primeri 386 & 387

2-[8-Hloro-3-(4-hloro-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol, i 2-[3-(4-Hloro-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0803]

[0804] Jedinjenja iz naslova su pripremljena na analogni način onom koji je korišćen da se pripremi 2-[8-bromo-3-(4-bromo-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol i 2-[3-(4-bromo-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol, zamenom N-bromosukcinimida sa N-hlorosukcinimidom. Izolacija jedinjenja iz naslova je postignuta pomoću preparativne HPLC (Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 20-80% B tokom 40 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min) da se dobiju Primeri 386 & 387. Primer 386:<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.62 (s, 2H), 8.48 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.65 (d, J=7.7 Hz, 2H), 7.39-7.31 (m, 2H), 7.30-7.23 (m, 1H), 5.74 (d, J=11.7 Hz, 1H), 4.09 (br. s., 3H), 3.94-3.87 (m, 1H), 3.74 (d, J=8.8 Hz, 1H), 3.51-3.32 (m, 2H), 3.27 (t, J=11.2 Hz, 1H), 1.73 (d, J=15.0 Hz, 7H), 1.59-1.49 (m, 1H), 1.32 (d, J=8.4 Hz, 1H), 0.97 (d, J=12.1 Hz, 1H). LCMS (M+H) = 550.5. Primer 387:<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.61-8.47 (m, 2H), 8.17 (d, J=8.1 Hz, 2H), 7.66 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.49 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.38-7.29 (m, 2H), 7.28-7.21 (m, 1H), 5.82 (d, J=11.4 Hz, 1H), 4.09 (s, 3H), 3.94-3.87 (m, 1H), 3.74 (d, J=9.2 Hz, 1H), 3.52-3.22 (m, 4H), 1.70 (d, J=13.2 Hz, 1H), 1.59 (s, 7H), 1.39-1.27 (m, 1H), 1.02 (d, J=11.7 Hz, 1H). LCMS (M+H) = 516.4.

Primer 388

2-[3-(4-Etil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0805]

Korak 1: 4-(((terc-Butildimetilsilil)oksi)metil)-1-((trimetilsilil)metil)-1H-1,2,3-triazol [0806] U rastvor (azidometil)trimetilsilana (85% čist, 2.40 g, 15.7 mmol) i tercbutildimetil(prop-2-in-1-iloksi)silana (2.95 g, 17.3 mmol) u t-butanolu (40 mL) je dodat rastvor natrijum askorbata (3.12 g, 15.7 mmol) u vodi (20 mL). U to je polako dodat rastvor bakar (II) sulfat pentahidrata (0.785 g, 3.15 mmol) u vodi (20 mL). Dobijena svetlo žuta heterogena smeša je mešana energično tokom noći. Reakcija je razblažena sa smešom EtOAc/voda što je dalo emulziju koju je delimično moguće razdvojiti. Višestruka ispiranja sa vodenim amonijakom (∼10%) su dala dva lako razdvojena sloja. Nakon koncentracije organskih supstanci, materijal je prečišćen pomoću kolonske hromatografije (12% → 25% EtOAc/heks) da se dobije 4.36 g (92 %) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.35 (s, 1H), 4.85 (s, 2H), 3.91 (s, 2H), 0.92 (s, 9H), 0.15 (s, 9H), 0.10 (s, 6H).<13>C NMR (101MHz, CDCl3) δ 148.5, 122.1, 58.1, 42.0,25.9, 18.3, -2.5, -5.2. LCMS (M+H) = 300.2.

4

Korak 2: (S)-Metil 3-(4-(((terc-butildimetilsilil)oksi)metil)-1-((trimetilsilil)metil)-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0807] U rastvor 4-(((terc-butildimetilsilil)oksi)metil)-1-((trimetilsilil)metil)-1H-1,2,3-triazola (562 mg, 1.88 mmol) u THF-u (6.3 mL) na -78 °C je dodat n-BuLi (2.5M u pentanu, 801 µL, 2.00 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na -78 °C tokom 1 h. Dobijeni žuti rastvor je tretiran sa cink hloridom (290 mg, 2.13 mmol). Nakon mešanja tokom 30 min, ledeno kupatilo je uklonjeno, i reakcija je mešana 1 h duže da bi se dobio čist, bezbojan rastvor. Dobijeni rastvor je tretiran sa (S)-metil 3-bromo-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilatom (600 mg, 1.25 mmol), Pd2dba3(22.9 mg, 0.0250 mmol), i Ru-Phos (46.7 mg, 0.100 mmol) kao smešom čvrstih supstanci u jednoj porciji pod konstantnom strujom azota. Dobijeno crvenkasto-žuto-smeđi rastvor je zatvoren i potopljen u prethodno zagrejano uljano kupatilo na 70 °C. Reakcija je ostavljena da se meša 20 h na toj temperaturi. Reakcija je razblažena sa DCM-om, sipana u vodu, i slojevi su razdvojeni. Organske supstance su oprane sa slanim rastvorom, osušene preko MgSO4, filtrirane, i koncentrovane. Kolonska hromatografija (EtOAc/heks) je dala 650 mg (74 %) kao penastu čvrstu supstancu.<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.62 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.47 (d, J=8.2 Hz, 1H), 8.08 (dd, J=8.2, 1.3 Hz, 1H), 7.97 (br. s., 1H), 7.54 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.37-7.32 (m, 2H), 7.31-7.27 (m, 1H), 5.58 (d, J=10.9 Hz, 1H), 4.80 (s, 2H), 4.05 (s, 4H), 3.85 (dd, J=11.7, 2.8 Hz, 1H), 3.66-3.51 (m, 2H), 3.35 (td, J=11.9, 1.7 Hz, 1H), 3.18 (d, J=11.0 Hz, 1H), 1.99 (d, J=13.2 Hz, 1H), 1.67-1.55 (m, 1H), 1.48-1.37 (m, 1H), 1.12 (d, J=12.9 Hz, 1H), 0.82 (s, 10H), 0.09 (s, 3H), 0.07 (s, 3H), 0.02 (s, 9H). LCMS (M+H) = 698.4.

Korak 3: (S)-2-(3-(4-(((terc-Butildimetilsilil)oksi)metil)-1-((trimetilsilil)metil)-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il)propan-2-ol

[0808] U rastvor (S)-metil 3-(4-(((terc-butildimetilsilil)oksi)metil)-1-((trimetilsilil)metil)-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (650 mg, 0.931 mmol) u THF-u (4660 µL) na -20 °C je dodat metilmagnezijum bromid (3M u Ft2O, 32483 µL, 7.45 mmol). Dobijeni rastvor je ostavljen da se postepeno zagreje do 0°C i održi na toj temperaturi tokom 15 min. Reakcija je kvenčovana opreznim dodavanjem zas. vod. NH4Cl. Reakcija je razblažena sa etil acetatom i sipana u vodu. Slojevi su razdvojeni. Organske supstance su oprane sa vodom, zatim slanim rastvorom, osušene preko MgSO4, filtrirane, i koncentrovane da se dobije 614 mg (94 %).<1>H NMR (500MHz,

41

CDCl3) δ 8.53 (d, J=1.6 Hz, 1H), 8.38 (d, J=8.2 Hz, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.88 (br. s., 1H), 7.50 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.45 (dd, J=8.4, 1.3 Hz, 1H), 7.34-7.23 (m, 3H), 5.54 (d, J=10.9 Hz, 1H), 4.79 (s, 2H), 4.03 (dd, J=11.7, 2.7 Hz, 1H), 3.84 (dd, J=11.6, 2.6 Hz, 1H), 3.65-3.50 (m, 2H), 3.32 (td, J=11.9, 1.8 Hz, 1H), 3.19-3.09 (m, 1H), 1.96 (d, J=13.2 Hz, 1H), 1.75 (s, 6H), 1.61-1.51 (m, 1H), 1.44-1.35 (m, 1H), 1.13 (d, J=12.8 Hz, 1H), 0.86-0.79 (m, 11H), 0.07 (s, 3H), 0.05 (s, 3H), -0.01 (s, 9H). LCMS (M+H) = 698.5.

Korak 4: (S)-2-(3-(4-(Hidroksimetil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il)propan-2-ol

[0809] U rastvor (S)-2-(3-(4-(((terc-butildimetilsilil)oksi)metil)-1-((trimetilsilil)metil)-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il)propan-2-ola (614 mg, 0.880 mmol) i vode (0.0320 mL, 1.76 mmol) u THF-u (5.6 mL) na 0 °C je dodat tetrabutilamonijum fluorid (1M u THF-u, 2.64 mL, 2.64 mmol). Nakon 10 min na 0 °C, ledeno kupatilo je uklonjeno i mešanje je nastavljeno tokom 1 h. Reakcija je kvenčovana dodavanjem zas. vod. NH4Cl i razblažena je sa EtOAc-om. Smeša je sipana u vodu, i slojevi su razdvojeni. Organske supstance su oprane sa vodom, zatim slanim rastvorom, osušene preko MgSO4, filtrirane, i koncentrovane. Kolonska hromatografija (2% MeOH/EtOAc → 10% MeOH/EtOAc) je dala 376 mg (84 %) kao belu čvrstu supstancu. LCMS (M+H) = 512.3. HPLC RT = 1.98 min (Kolona: Phenomenex LUNA C18, 2 x 50 mm; Mobilna faza A: 10:90 ACN:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 90:10 ACN:voda sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 4 min; Protok: 0.8 mL/min).

Korak 5: (S)-(5-(7-(2-Hidroksipropan-2-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)metil metansulfonat

[0810] U rastvor (S)-2-(3-(4-(hidroksimetil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il)propan-2-ola (125 mg, 0.244 mmol) i TEA (51.1 µL, 0.366 mmol) u DCM-u (1960 µL) na 0 °C je dodat metansulfonil hlorid (20.9 µL, 0.269 mmol) u kapima. Reakcija je držana na 0 °C tokom 30 min. Reakcija je razblažena sa EtOAc-om i kvenčovana dodavanjem zas. vod. NaHCO3. Nakon mešanja kratko na 0 °C, reakcija je sipana u levak za razdvajanje, i slojevi su razdvojeni. Organske supstance su oprane sa vodom, zatim slanim rastvorom, osušene preko MgSO4, filtrirane, i koncentrovane. Dobijeni ostatak je korišćen bez prečišćavanja. LCMS (M+H) = 590.1. HPLC RT = 1.57 min (Kolona: Waters Aquity BEH C18, 2.1 x 50 mm; Mobilna faza A: voda sa 0.05% TFA; Mobilna faza B: ACN sa 0.05% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 2-50% B tokom 1.5 min; 0.5 min zadržavanje; Protok: 0.8 mL/min).

42

Korak 6: 2-[3-(4-Etil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0811] Sud je napunjen sa bakar(I) jodidom (34.9 mg, 0.183 mmol) i ispran sa azotom. U to je dodat THF (0.5 mL). Dobijena suspenzija je energično mešana tokom 15 min, ohlađena do 0 °C, i tretirana sa metilmagnezijum bromidom (3M u Et2O, 0.122 mL, 0.366 mmol). Nakon mešanja na 0 °C tokom 15 min, heterogena smeša je tretirana sa rastvorom (S)-(5-(7-(2-hidroksipropan-2-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)metil metansulfonata (18.0 mg, 0.0310 mmol) u THF-u (0.5 mL) u kapima. Nakon mešanja tokom 30 min, reakcija je kvenčovana dodavanjem zas. vod. NH4Cl i razblažena sa EtOAc-om. Slojevi su razdvojeni. Organske supstance su oprane sa 5% amonijakom u vodi i koncentrovane. Dobijeni ostatak je prečišćen pomoću preparativne HPLC (Kolona: XBridge C18, 19 x mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 20-60% B tokom 20 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min) da se dobije 5.50 mg (35%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.52-8.32 (m, 2H), 8.16 (d, J=8.1 Hz, 2H), 7.67 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.48 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.37-7.29 (m, 2H), 7.28-7.20 (m, 1H), 5.82 (d, J=11.4 Hz, 1H), 3.99 (s, 3H), 3.94-3.85 (m, 1H), 3.75 (d, J=9.2 Hz, 1H), 3.56-3.34 (m, 2H), 3.27 (t, J=11.4 Hz, 1H), 2.77-2.53 (m, 3H), 1.71 (d, J=12.5 Hz, 1H), 1.64-1.51 (m, 7H), 1.40-1.27 (m, 1H), 1.17 (t, J=7.5 Hz, 3H), 1.03 (d, J=12.5 Hz, 1H). LCMS (M+H) = 510.3.

Primer 389

2-[3-(4-Amino-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0812]

Korak 1: (S)-5-(7-(2-Hidroksipropan-2-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-karbaldehid

[0813] U rastvor (S)-2-(3-(4-(hidroksimetil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il)propan-2-ola (230 mg, 0.450 mmol) u DCM-

4

u (2997 µL) na sobnoj temperaturi je dodat Des–Martinov perjodinan (229 mg, 0.539 mmol). Nakon 1 h, reakcija je tretirana sa drugim delom Des–Martinovog perjodinana (115 mg). Nakon 1 h, reakcija je kvenčovana dodavanjem natrijum tiosulfata (600 mg) u vodi (3 mL). Nakon mešanja na sobnoj temperaturi tokom 10 min, smeša je razblažena sa EtOAc-om i zas. vod. NaHCO3-om, i slojevi su razdvojeni. Organske supstance su oprane sa zas. vod. NaHCO3, zatim slanim rastvorom, osušene preko MgSO4, filtrirane, i koncentrovane da se dobije 220 mg (96%).<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 10.25 (s, 1H), 8.54 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.37 (d, J=8.2 Hz, 1H), 8.09 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.53 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.46 (dd, J=8.2, 1.3 Hz, 1H), 7.38-7.32 (m, 2H), 7.32-7.26 (m, 1H), 5.56 (d, J=10.9 Hz, 1H), 4.09-4.03 (m, 4H), 3.86 (dd, J=11.7, 2.8 Hz, 1H), 3.58 (td, J=11.9, 1.9 Hz, 1H), 3.47 (td, J=11.9, 1.9 Hz, 1H), 3.31-3.19 (m, 1H), 2.21 (s, 1H), 1.99 (d, J=13.2 Hz, 1H), 1.76 (d, J=1.3 Hz, 6H), 1.64-1.55 (m, 1H), 1.46-1.36 (m, 1H), 1.11 (d, J=12.5 Hz, 1H). LCMS (M+H) = 510.5.

Korak 2: (S)-5-(7-(2-Hidroksipropan-2-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-karboksilna kiselina

[0814] Koncentrovani (štok) rastvor oksidansa je pripremljen kombinovanjem natrijum hlorita (96.0 mg, 1.06 mmol), natrijum dihidrogenfosfat monohidrata (73.1 mg, 0.530 mmol), i vode (1.2 mL). Odvojeno, (S)-5-(7-(2-hidroksipropan-2-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-karbaldehid (135 mg, 0.265 mmol) je rastvoren u t-BuOH-u (2 mL) i THF-u (1.3 mL), reakciona smeša je ohlađena do 0 °C, i tretirana sa 2-metilbut-2-enom (0.312 mL, 2.65 mmol). U to je dodato 0.5 mL koncentrovanog rastvora oksidansa. Nakon mešanja 10 min, ostatak koncentrovanog rastvora je dodat u kapima. Nakon dodavanja, ledeno kupatilo je uklonjeno, i reakcija je mešana 2 h. Reakcija je sipana u vodu (3 mL) i razblažena sa EtOAc-om, koji nije uspeo da rastvori precipitat. Čvrsta supstanca je prikupljena u Bihnerov levak, isprana je sa vodom, zatim EtOAc-om, i osušena na vazduhu da se dobije 63.0 mg (45%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.74-8.48 (m, 2H), 8.20-8.05 (m, 2H), 7.67 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.48 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.33 (t, J=7.6 Hz, 2H), 7.27-7.21 (m, 1H), 5.77 (d, J=11.3 Hz, 1H), 3.99 (br. s., 3H), 3.90 (d, J=9.3 Hz, 1H), 3.74 (d, J=8.8 Hz, 1H), 3.54-3.22 (m, 5H), 1.72-1.49 (m, 8H), 1.38-1.26 (m, 1H), 1.04 (d, J=11.8 Hz, 1H). LCMS (M+H) = 526.6.

Korak 3: 2-[3-(4-Amino-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol i (S)-terc-butil (5-(7-(2-hidroksipropan-2-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)karbamat

44

[0815] Bočica je napunjena sa (S)-5-(7-(2-hidroksipropan-2-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-karboksilnom kiselinom (63.0 mg, 0.120 mmol), t-BuOH (0.75 mL), TEA (0.0250 mL, 0.180 mmol), i difenilfosforil azidom (0.0310 mL, 0.144 mmol). Bočica je zatvorena. Dobijena bela suspenzija je zagrejana do 85 °C i držana na ovoj temperaturi tokom 4 h. Reakcija je tretirana sa dodatnim delom TEA (0.0250 mL, 0.180 mmol) i difenilfosforil azidom (0.0310 mL, 0.144 mmol). Reakcija je zatvorena i zagrevana na 85 °C tokom 8 h, ohlađena na sobnu temperaturu, i koncentrovana pod strujom azota. Ostatak je razblažen sa EtOAc-om i tretiran sa zas. vod. NaHCO3-om. Slojevi su razdvojeni. Organske supstance su oprane sa vodom 3X i filtrirane kroz Bihnerov levak da se uklone nerastvorene čvrste supstance, koje su odbačene. Eluent je koncentrovan i prečišćen kolonskom hromatografijom (100% EtOAc zatim 20% MeOH/EtOAc). Karbamat je bio prvi koji je eluirao, praćeno sa slobodnim aminom. Slobodni amin je ponovo prečišćen pomoću preparativne HPLC (Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 20-60% B tokom 15 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min) da se dobije Primer 389 (13.5 mg, 22 %). Primer 389.<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.52 (s, 1H), 8.35 (br. s., 1H), 8.16-8.03 (m, 2H), 7.67 (d, J=7.7 Hz, 2H), 7.45 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.37-7.29 (m, 2H), 7.28-7.22 (m, 1H), 5.79 (d, J=11.0 Hz, 1H), 4.90 (br. s., 2H), 3.99-3.86 (m, 4H), 3.74 (d, J=9.5 Hz, 1H), 3.49 (t, J=11.6 Hz, 1H), 3.42 (s, 4H), 3.27 (t, J=11.6 Hz, 1H), 1.72 (d, J=12.1 Hz, 1H), 1.57 (br. s., 7H), 1.32 (d, J=12.8 Hz, 1H), 1.00 (d, J=13.2 Hz, 1H). LCMS (M+H) = 497.0. (S)-terc-butil (5-(7-(2-hidroksipropan-2-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)karbamat:<1>H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.48 (d, J=1.7 Hz, 1H), 8.36 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.91 (br. s., 1H), 7.48 (d, J=7.4 Hz, 2H), 7.45 (dd, J=8.3, 1.3 Hz, 1H), 7.36-7.31 (m, 2H), 7.29-7.25 (m, 1H), 6.46 (s, 1H), 5.53 (d, J=10.7 Hz, 1H), 4.08-4.01 (m, 1H), 3.93-3.81 (m, 4H), 3.54 (td, J=11.9, 1.9 Hz, 1H), 3.38 (td, J=11.9, 1.9 Hz, 1H), 3.23-3.10 (m, 1H), 1.99-1.91 (m, 1H), 1.78-1.69 (m, 9H), 1.63-1.53 (m, 1H), 1.39 (d, J=4.1 Hz, 2H), 1.32 (br. s., 9H), 1.18-1.11 (m, 1H). LCMS (M+H) = 597.7.

Primer 390

2-{3-[1-Metil-4-(metilamino)-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0816]

4

[0817] Bočica je napunjena sa (S)-terc-butil (5-(7-(2-hidroksipropan-2-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)karbamatom (13.0 mg, 0.0220 mmol, videti Korak 3 za 2-[3-(4-amino-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol) i DMF-om (0.75 mL). Dobijeni rastvor je ohlađen na 0 °C i tretiran sa natrijum hidridom (1.74 mg, 0.0440 mmol). Ledeno kupatilo je uklonjeno i mešanje nastavljeno 10 min. Reakcija je ponovo ohlađena do 0 °C i tretirana sa jodometanom (2.72 µL, 0.0440 mmol). Reakcija je mešana na 0 °C tokom 15 min i kvenčovana dodavanjem zas. vod. NH4Cl. Reakcija je razblažena sa EtOAc-om. Smeša je oprana sa vodom (2X), zatim slanim rastvorom, osušena preko MgSO4, filtrirana, i koncentrovana. Sirov Boc-zaštićeni proizvod je rastvoren u TFA/DCM (1:5 vol/vol). Nakon 30 min, reakcija je koncentrovana i prečišćena pomoću preparativne HPLC (Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 20-60% B tokom 15 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min) da se dobiju 11 mg (99%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.48 (s, 1H), 8.34 (br. s., 1H), 8.16-8.03 (m, 2H), 7.66 (d, J=7.7 Hz, 2H), 7.45 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.37-7.29 (m, 2H), 7.28-7.21 (m, 1H), 5.79 (d, J=11.0 Hz, 1H), 5.21 (d, J=5.1 Hz, 1H), 4.01-3.85 (m, 4H), 3.74 (d, J=8.4 Hz, 1H), 3.53-3.45 (m, 1H), 3.26 (t, J=11.6 Hz, 1H), 2.90 (s, 1H), 2.79 (d, J=5.1 Hz, 3H), 2.74 (s, 1H), 1.72 (d, J=13.2 Hz, 1H), 1.57 (s, 7H), 1.40-1.23 (m, 1H), 0.99 (d, J=12.5 Hz, 1H). LCMS (M+H) = 511.1.

Primer 391

5-{7-Metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-metoksi-1-metil-1H-1,2,3-triazol

[0818]

4

Korak 1: (S)-3-Bromo-7-(metilsulfonil)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol

[0819] Bočica je napunjena sa 3-bromo-7-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indolom (200 mg, 0.615 mmol) i cezijum karbonatom (601 mg, 1.85 mmol). U to je dodat rastvor (R)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil metansulfonata (333 mg, 1.23 mmol) u DMF-u (3075 µL). Bočica je isprana sa azotom, zaptivena, i postavljena u kupatilo na 50 °C. Reakcija je mešana na na ovoj temperaturi tokom 4 dana. Dobijena smeša je razblažena sa EtOAc-om, filtrirana kroz čep od pamuka, i prečišćena silika gel kolonskom hromatografijom da se dobije 215 mg (70%).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.68 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.52 (d, J=8.3 Hz, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.09 (d, J=1.7 Hz, 1H), 7.87 (dd, J=8.2, 1.3 Hz, 1H), 7.49 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.42-7.36 (m, 2H), 7.36-7.31 (m, 1H), 5.47 (d, J=11.0 Hz, 1H), 4.08 (dd, J=11.7, 2.9 Hz, 1H), 3.88 (dd, J=11.6, 3.1 Hz, 1H), 3.58 (td, J=12.0, 2.0 Hz, 1H), 3.40 (td, J=11.9, 2.0 Hz, 1H), 3.17-3.11 (m, 5H), 2.00 (d, J=13.0 Hz, 1H), 1.46-1.33 (m, 1H), 1.04 (d, J=12.5 Hz, 1H). LCMS (M (<81>Br)+H) = 501.3.

Korak 2: 5-{7-Metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-metoksi-1-metil-1H-1,2,3-triazol

[0820] Suva, isprana sa N2(g), bočica od 1 drama je napunjena sa tetrametil amonijum acetatom (18.7 mg, 0.140 mmol), bis(trifenilfosfin)paladijum(II) dihloridom (4.92 mg, 7.01 µmοl), i (S)-3-bromo-7-(metilsulfonil)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indolom (35.0 mg, 0.0700 mmol). U to je dodat 4-metoksi-1-((trimetilsilil)metil)-1H-1,2,3-triazol (26.0 mg, 0.140 mmol). Bočica je ponovo isprana sa azotom. U to je dodat NMP (0.4 mL). Dobijena smeša je mešana energično pod strujom azota tokom 10 min. Bočica je postavljena u prethodno zagrejano uljano kupatilo na 95 °C i zagrevana na toj temperaturi tokom noći. Reakcija je ohlađena na sobnu temperaturu, razblažena sa EtOAc-om, oprana sa vodom (2X), zatim slanim rastvorom, osušena preko MgSO4, filtrirana, koncentrovana, i prečišćena pomoću preparativne HPLC (Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 10-50% B tokom 20 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min) da se dobiju 7.00 mg (18%).<1>H

4

NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.75 (br. s., 1H), 8.68 (s, 1H), 8.53 (br. s., 1H), 8.48 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.86 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.68 (d, J=7.7 Hz, 2H), 7.40-7.32 (m, 2H), 7.31-7.24 (m, 1H), 6.01 (d, J=11.0 Hz, 1H), 4.08 (s, 3H), 4.04 (s, 3H), 3.91 (d, J=8.8 Hz, 1H), 3.72 (d, J=8.8 Hz, 1H), 3.26 (t, J=11.2 Hz, 1H), 2.51 (br. s., 4H), 1.79-1.57 (m, 2H), 1.42-1.18 (m, 2H), 0.92 (d, J=12.5 Hz, 1H). LCMS (M+H) = 532.5.

Primer 392

Propan-2-il N-{3-[4-(<2>H3)metoksi-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}karbamat

[0821]

Korak 1: Fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil metansulfonat

[0822] Rastvor (R)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanola (450 mg, 2.34 mmol) u DCM-u (15 mL) je tretiran sa trietilaminom (0.652 mL, 4.68 mmol). Dobijeni rastvor je ohlađen na 0 °C i tretiran sa metansulfonil hloridom (0.274 mL, 3.51 mmol) u kapima. Mešan je na 0 °C tokom 1 h zatim na sobnoj temperatuti tokom 0.5 h. Kvenčovana je sa zasićen vod. natrijum bikarbonatom i razblažena sa etrom. Organski sloj je opran sa zasićenim vod. natrijum bikarbonatom, zatim slanim rastvorom, osušen preko magnezijum sulfata, filtriran, i koncentrovan da se dobije 620 mg (kvant. prinos).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.44-7.36(m, 5H), 5.23(d, J=8.78Hz, 1H), 4.09-3.91(m, 2H), 3.4-3.3(m, 2H), 2.63(s, 3H), 2.14-2.0(m, 2H), 1.55(m, 1H), 1.35-1.28(m, 2H), 1.16-1.12(m, 1H).

[0823] U smešu metil 3-bromo-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (1.20 g, 3.93 mmol) i cezijum karbonata (2.56 g, 7.87 mmol) u DMF-u (6 mL) je dodat fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil metansulfonat (1.17 g, 4.33 mmol) u DMF-u (6 mL). Mešana je na sobnoj temperaturi tokom noći. Reakcija je zagrejana do 40 °C i držana na toj temperaturi 24 h. U to je dodat dodatni deo fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil metansulfonata (1.06 g, 3.94 mmol) i cezijum karbonata (1.28 g, 3.94 mmol). Zagrevana je na 40 °C preko vikenda. Čvrste supstance su uklonjene filtracijom i odbačene, i filtrat je koncentrovan. Biotage prećišćavanje

4

(30%EA/heks) je dalo 300 mg proizvoda (16%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.6(d, J=2.0Hz, 1H), 8.43(s, 1H), 8.39(d, J=8.03Hz, 1H), 8.05-8.01(m, 2H), 7.50(m, 2H), 7.39-7.35(m, 2H), 7.32(m, 1H), 5.489d, J-11.0Hz, 1H), 4.07(m, 1H), 4.03(s, 3H), 3.86(m, 1H), 3.57(m,1H), 3.4(m, 1H), 3.14(m, 1H), 2.99(m,1H), 1.6(m,1H), 1.4(m, 1H), 1.06(m, 1H); LCMS (M+H) = 479.1/481.1

Korak 3: Metil 3-[4-(<2>H3)metoksi-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0824] Suva, isprana sa N2(g), bočica od 1 drama je napunjena sa tetrametilamonijum acetatom (38.9 mg, 0.292 mmol), bis(trifenilfosfin)paladijum(II) hloridom (10.3 mg, 0.0150 mmol) i (S)-metil 3-bromo-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilatom (70.0 mg, 0.146 mmol). U to je dodat 4-(<2>H3)metoksi-1-[(trimetilsilil)metil]-1H-1,2,3-triazol (65.5 mg, 0.292 mmol). Bočica je ponovo isprana sa azotom i NMP (1 mL) je zatim dodat. Dobijena smeša je mešana energično pod strujom azota tokom 10 min. Bočica je postavljena u prethodno zagrejano uljano kupatilo na 95 °C i zagrevana na toj temperaturi tokom noći. Reakcija je ohlađena na sobnu temperaturu, razblažena sa etil acetatom, oprana sa vodom (2X), zatim slanim rastvorom, osušena preko magnezijum sulfata, filtrirana, i koncentrovana. Biotage prečišćavanje (70% EtOAc) je dalo 53.0 mg (71%) kao žuto ulje. LCMS (M+H) = 515.5, LC RT = 1.613 min (Kolona: Phenomenex LUNA C18, 30x2, 3u; Mobilna faza A: 90:10 voda:Acetonitril sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 10:90 voda:Acetonitril sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min, zadržavanje 1 min; Brzina protoka: 1 mL/min).

Korak 4: 3-[4-(<2>H3)Metoksi-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilna kiselina

[0825] U rastvor metil 3-[4-(<2>H3)metoksi-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (53.0 mg, 0.103 mmol) u THF-u (1 mL) je dodat kalijum hidroksid (17.3 mg, 0.309 mmol). Mešan je na 50 °C tokom noći i koncentrovan. Voda je dodata, i dobijena smeša je ekstrahovana sa EA (koji su odbačeni). Vodeni sloj je potom zakiseljen na pH 5. Kako se pH približio opsegu vrednosti kisele sredine, bela čvrsta supstanca je precipitirala. Smeša je ekstrahovana sa etil acetatom, osušena preko magnezijum sulfata, filtrirana, i koncentrovana da se dobije 42.0 mg (81%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.85(s,1H), 8.64(s, 1H), 8.6(d, J=8.0Hz, 1H), 8.29(d, J=8.3Hz, 1H), 8.04(d, J=1.5Hz, 1H), 7.56(m, 2H), 7.42-7.31(m, 3H), 5.67(d, J=10.8Hz, 1H), 4.11(s,

4

3H), 3.92(m, 1H), 3.6(m, 1H), 3.41(m, 1H), 3.2(m, 1H), 2.04(m, 2H), 1.68(m, 1H), 1.48(m, 1H), 1.14(m, 1H); LCMS (M+H) = 501.4.

Korak 5: 5-{7-Izocijanato-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metoksi-1-metil-1H-1,2,3-triazol

[0826] Bočica je napunjena sa 3-[4-(<2>H3)metoksi-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilnom kiselinom (42.0 mg, 0.0840 mmol), difenilfosforil azidom (0.0470 mL, 0.210 mmol), Et3N (0.0290 mL, 0.210 mmol), i dioksanom (1.7 mL). Smeša je zagrevana na 60 °C tokom 2 h. Rastvor izocijanata je korišćen kao u reakciji koja sledi. LCMS (M+H) = 498.25, LC RT = 1.73 min (Kolona: Phenomenex LUNA C18, 30x2, 3u; Mobilna faza A: 90:10 voda:Acetonitril sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 10:90 voda:Acetonitril sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min, zadržavanje 1 min; Brzina protoka: 1 mL/min).

Korak 6: Propan-2-il N-{3-[4-(<2>H3)metoksi-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}karbamat

[0827] Izopropanol (210 µL, 2.73 mmol) je dodat u 5-{7-izocijanato-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metoksi-1-metil-1H-1,2,3-triazol (41.8 mg, 0.0840 mmol). Zagrevan je na 80 °C tokom 3 h. Koncentrovan je i prečišćen pomoću preparativne HPLC (Kolona: XBridge 19 x 200 mm, 5µm; Mobilna faza A: 5:95 ACN:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 ACN:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Gradijent: 35-75% B tokom 20min, 5-minutno zadržavanje; Brzina protoka: 20 mL/min) da se dobije 33.8 mg proizvoda (72%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.49 (s, 1H), 8.42(bs, 1H), 8.25 (br. s., 1H), 8.10 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.63 (d, J=7.7 Hz, 2H), 7.40 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.35 (t, J=7.5 Hz, 2H), 7.29-7.23 (m, 1H), 5.6(m, 1H), 5.06-4.91 (m, 1H), 4.08 (br. s., 3H), 3.91 (d, J=8.1 Hz, 1H), 3.75 (d, J=11.0 Hz, 1H), 3.34-3.23 (m, 2H), 1.69 (d, J=12.1 Hz, 1H), 1.50 (d, J=12.5 Hz, 1H), 1.32 (d, J=6.2 Hz, 8H), 1.05 (d, J=12.5 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 558.5, LC RT = 1.49 min.

Primer 393

2-{6-Hloro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0828]

Korak 1: Metil 4-(5-bromo-3-nitropiridin-2-il)-2-hlorobenzoat

[0829] Sud napunjen sa 2,5-dibromo-3-nitropiridinom (6.55 g, 23.24 mmol) i (3-hloro-4-(metoksikarbonil)fenil)boronskom kiselinom (4.98 g, 23.24 mmol), ispran sa azotom, i tretiran sa tetrahidrofuranom (65 mL), praćeno 2M vodenim trikalijum fosfatom (23.24 mL, 46.5 mmol). Dobijena smeša je mešana dok su mehurići azota uvođeni kroz smešu tokom 30 min. U to je dodat PdCl2(dppf) (0.595 g, 0.813 mmol) i zagrevana na 75 °C tokom 2 h. Reakcija je ohlađena do sobne temperature i sipana u promešanu smešu vode i etil acetata. Slojevi su razdvojeni, organske supstance oprane sa vodom (2X), zatim slanim rastvorom, osušene preko magnezijum sulfata, filtrirane i koncentrovane. Prečišćen je pomoću silika gel kolonske hromatografije (100% DCM) da se dobije 5.76 g proizvoda (67%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.97(m, 1H), 8.40(m, 1H), 7.94(m, 1H), 7.71(m, 1H), 7.44(m, 1H), 3.99(s, 3H), LCMS (M+H) = 373.2.

Korak 2: Metil 3-bromo-6-hloro-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0830] Sud od 250 mL, napunjen sa metil 4-(5-bromo-3-nitropiridin-2-il)-2-hlorobenzoatom (5.76 g, 15.5 mmol) i 1,2-bis(difenilfosfino)etanom (6.79 g, 17.0 mmol) je ispran sa azotom, tretiran sa 1,2-dihlorobenzenom (77 mL), i promešan pod strujom azota tokom 15 min. Sud je zatvoren i potopljen u uljano kupatilo na 165 °C tokom 3 h. Reakcija je ostavljena da se ohladi do sobne temperature tokom noći. Dobijeni talog je sakupljen filtracijom, ispran je sa minimumom toluena, i odbačen. Eluent je koncentrovan i prečišćen pomoću Biotage (5-50% EA/heks) da se dobije 398 mg proizvoda (8%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.23(s,1H), 8.67(s, 1H), 8.25(d, J=8.03Hz, 1H), 8.17(s, 1H), 7.76(d, J=8.28Hz, 1H), 3.94(s, 3H); LCMS (M+H) = 341.2.

Korak 3: (S)-Metil 3-bromo-6-hloro-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0831] Suva bočica, napunjena sa metil 3-bromo-6-hloro-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilatom (160 mg, 0.471 mmol), trifenilfosfinom (247 mg, 0.942 mmol), (R)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanolom (181 mg, 0.942 mmol), i THF-om (4712 µL), je ohlađena na 0 °C i tretirana sa di-terc-butil azodikarboksilatom (217 mg, 0.942 mmol).

1

Reakcija je ostavljena da se postepeno zagreje do sobne temperature tokom noći. U to je dodat TFA (363 µL, 4.71 mmol), i reakciona smeša je mešana tokom 10 min. Kalijum fosfat (1.5 M) je dodat u reakcionu smešu, praćeno etil acetatom. Slojevi su razdvojeni, i organske supstance koncentrovane. Biotage prečišćavanje (25% EA/heks) je dalo 246 mg proizvoda kao prljavo belu čvrstu supstancu (57% čist pomoću LCMS). LCMS (M+H) = 515.3, LC RT = 2.08 min (Kolona: Phenomenex LUNA C18, 30x2, 3u; Mobilna faza A: 90:10 voda:Acetonitril sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 10:90 voda:Acetonitril sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min, zadržavanje 1 min; Brzina protoka: 1 mL/min).

Korak 4: Metil 6-hloro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0832] (S)-Metil 3-bromo-6-hloro-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (30.0 mg, 0.0580 mmol), 4-(<2>H3)metil-1-metil-5-(tributilstani)-1H-1,2,3-triazol (34.1 mg, 0.0880 mmol), trietilamin (0.0160 mL, 0.117 mmol), i bakar(I) jodid (1.11 mg, 5.84 µmol) u DMF-u (0.5 mL) je degasiran sa azotom. Tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0) (3.37 mg, 2.92 µmol) je dodat (postaje tamno), i reakcija je zagrevana na 90 °C tokom 3 h. LC/MS je ukazala na masu proizvoda. Razblažen je sa etil acetatom, opran sa vodom (x3) i slanim rastvorom, osušen preko magnezijum sulfata, filtriran, i koncentrovan. Biotage prečišćavanje (do 100% EA/heks) je dalo 11.0 mg proizvoda (35%) kao čisto ulje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.5(d, J=1.5Hz, 1H), 8.41(d, J=8.03Hz, 1H), 7.71(d, J=8.03Hz, 1H), 7.57-7.52(m,3H), 7.41-7.38(m, 2H), 7.33(m, 1H), 4.08(s, 3H), 3.86(m, 1H), 3.77(s, 3H), 3.57(m, 1H), 3.31(m, 1H), 3.02(m, 1H), 2.17(m, 1H), 1.75-1.6(m, 2H), 1.35(m, 1H), 0.72(m, 1H); LCMS (M+H) = 533.5.

Korak 5: 2-16-Hloro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0833] Praćenjem procedure analogne onoj opisanoj za 2-{5-[(1R)-2-Ciklopropil-1-(oksan-4-il)etil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, metil 6-hloro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (22.0 mg, 0.0410 mmol) je konvertovan u 5.30 mg proizvoda (24%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.52 (s, 1H), 8.22 (d, J=8.4 Hz, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.95 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.57 (d, J=7.7 Hz, 2H), 7.38-7.28 (m, 2H), 7.27-7.16 (m, 2H), 5.53 (s, 1H), 3.89 (d, J=9.2 Hz, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.75 (d, J=9.9 Hz, 1H), 3.57-3.44 (m, 2H), 3.26 (t,

2

J=11.6 Hz, 1H), 1.92 (d, J=12.5 Hz, 1H), 1.81 (d, J=11.7 Hz, 6H), 1.53-1.40 (m, 2H), 0.89 (d, J=12.1 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 533.5.

Primeri 394 & 395

2-{5-[(1R)-2-Ciklopropil-1-(oksan-4-il)etil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0834]

Korak 1: Metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat [0835] Smeša metil 3-bromo-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (0.800 g, 2.62 mmol), 1,4-dimetil-5-(tributilstanil)-1H-1,2,3-triazola (1.11 g, 2.88 mmol), trietilamina (0.731 mL, 5.24 mmol), i DMF (7 mL) je pročišćena pod strujom azota. U to je dodat bakar(I)jodid (0.0750 g, 0.393 mmol) i tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0) (0.197 g, 0.170 mmol). Bočica je zatvorena i zagrevana na 85 °C tokom 1.5 h, potom na 95 °C tokom 1 h. Dobijena smeša je ohlađena na sobnu temperaturu, pročišćena ponovo sa azotom, tretirana sa 1,4-dimetil-5-(tributilstanil)-1H-1,2,3-triazolom (0.910 g, 2.36 mmol), bakar(I)jodidom (0.0750 g, 0.393 mmol), i tetrakis(trifenilfosfin)paladijumom(0) (0.197 g, 0.170 mmol). Bočica je zatvorena i zagrevana na 100 °C tokom 2 h. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakcija je razblažena sa vodom i ekstrahovana sa etil acetatom. Organske supstance su oprane sa vodom, zatim vodenim NH4OH-om, i zatim slanim rastvorom, osušene preko MgSO4, filtrirane, i koncentrovane. Ostatak je suspendovan u maloj količini etil acetata. Dobijena čvrsta supstanca je triturisana sa malo etil acetata i osušena da se dobije 325 mg proizvoda kao bledo žuta čvrsta supstanca. Matični rastvor je koncentrovan i prečišćen silika gel kolonskom hromatografijom (40 g SiO2, 100%EA do 5-10%MeOH/CH2Cl2) da se dobije još 175 mg proizvoda kao bledo žuta čvrsta supstanca (0.500 g ukupno, 59%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 1.96 (s, 1H), 8.63 (d, J=2Hz, 1H), 8.36 (d, J=8 Hz, 1H), 8.26 (s, 1H), 8.17 (d, J=1.76Hz, 1H), 7.91 (dd, J1=1.25Hz, J2=8Hz, 1H), 4.03(s, 3H), 3.94(s, 3H), 2.31(s, 3H); LCMS (M+H) = 322.1.

Korak 2: 2-Ciklopropil-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etanol

[0836] Suv sud od 50 mL je napunjen sa magnezijumom (173 mg, 7.13 mmol) i kristalom joda. Pod azotom, čvrste supstance su mešane energično dok su zagrevane sa toplotnim pištoljem da se aerosolizuje jod. Nakon hlađenja do sobne temperature, tretiran je sa THF-om (4 mL). Smeša je zagrejana toplotnim pištoljem i tretirana sa rastvorom 4-bromotetrahidro-2H-pirana (0.530 mL, 4.76 mmol) u THF-u (4 mL) u kapima preko suvog levka za dodavanje. Kada je dodavanje završeno, smeša je postavljena u prethodno zagrejano kupatilo, i smeša je držana na refluksu tokom 30 min. Nakon hlađenja do sobne temperature, rastvor je prebačen u promešani rastvor 2-ciklopropilacetaldehida (400 mg, 2.38 mmol) u THF-u (4 mL) na -78 °C. Nakon mešanja tokom 5 min, ledeno kupatilo je uklonjeno, i reakcija je ostavljena da se zagreje do sobne temperature. Reakcija je postavljena u kupatilo na 0 °C i kvenčovana opreznim dodavanjem zas. vod. NH4Cl (∼4 mL). Reakcija je razblažena sa EtOAc-om i sipana u slani rastvor (∼10 mL). Slojevi su razdvojeni, i vodeni je ekstrahovan sa drugim delom EtOAc. Dobijene organske supstance su osušene preko magnezijum sulfata, filtrirane, i koncentrovane da se dobije proizvod (410 mg, kvant.) kao skoro bezbojno ulje, koje je primenjeno bez prečišćavanja.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 4.03-4.0 (m, 2H), 3.54-3.35 (m, 3H), 1.51-1.34 (m, 4H), 0.8 (m, 1H), 0.59-0.46 (m, 2H), 0.19-0.05 (m, 2H). Korak 3: Metil 5-(2-ciklopropil-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil)-3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0837] Rastvor trifenilfosfina (98.0 mg, 0.373 mmol) u THF-u (2 mL) je ohlađen na -20 °C i tretiran sa DIAD (0.0730 mL, 0.373 mmol). Nakon mešanja na -20 °C tokom 30 min, metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (60.0 mg, 0.187 mmol) je dodat, i mešanje je nastavljeno na -20 °C tokom 30 min. U to je dodat rastvor 2-ciklopropil-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etanola (63.6 mg, 0.373 mmol) u THF-u (1 mL) u kapima. Reakcija je ostavljena da se zagreje do sobne temperature tokom noći. Koncentrovana je i prečišćena silika gel kolonskom hromatografijom (0-1%MeOH/DCM) da se dobije 89.0 mg proizvoda (79% čistoća) kao lepljivo žuto ulje. LCMS (M+H) = 474.2, LC RT = 1.40 min (Kolona: Phenomenex LUNA C18, 30x2, 3u; Mobilna faza A: 90:10 voda:Acetonitril sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 10:90 voda:acetonitril sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min, zadržavanje 1 min; Brzina protoka: 1 mL/min).

Korak 4: 2-{5-[(1R)-2-Ciklopropil-(oksan-4-il)etil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

4

[0838] Rastvor metil 5-(2-ciklopropil-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil)-3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (89.0 mg, 0.187 mmol) u THF-u (2 mL) je ohlađen na -78 °C pod azotom. U to je dodat metilmagnezijum bromid (3M u etru, 0.312 mL, 0.935 mmol) u kapima. Nakon 10 min, ledeno kupatilo je uklonjeno i mešanje nastavljeno tokom 1 h. Reakcija je postavljena u kupatilo na 0 °C i kvenčovana opreznim dodavanjem zas. vod. amonijum hlorida. Reakcija je razblažena sa etil acetatom i sipana u slani rastvor. Slojevi su razdvojeni, i vodeni je ekstrahovan sa drugim delom etil acetata. Dobijene organske supstance su osušene preko magnezijum sulfata, filtrirane, i koncentrovane. Prep HPLC (Kolona: XBridge 19 x 200 mm, 5µm; Mobilna faza A: 5:95 ACN:voda sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 95:5 ACN:voda sa 0.1% TFA; Gradijent: 10-60% B tokom 30 min, 5-min zadržavanje; Brzina protoka: 20 mL/min) je dalo 17.5 mg (Racemski, 20%), koji je dalje prečišćen hiralnom prep SFC (Kolona: ChiralCel OD-H 30 x 250 mm, 5 µm; Mobilna faza: 85/15 CO2/MeOH; Protok: 70 mL/min, Pritisak: 150bar, Temperatura: 35 °C, UV: 272nm) da se dobiju: Enantiomer A (3.00 mg, 17%, SFC RT = 14.6-16.75 min)<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.51 (d, J=14.67 Hz, 1H), 8.44-8.31 (m, 1H), 8.23-8.16 (m, 1H), 7.93-7.91 (d, J=13.57Hz, 1H), 7.47-7.43 (m, 1H), 4.66 (br. s., 1H), 4.05 (d, J=7.3 Hz, 3H), 3.92 (d, J=11.4 Hz, 1H), 3.63 (m, 1H), 3.23-2.93 (m, 2H), 2.33 (d, J=4.4 Hz, 3H), 1.95-1.78 (m, 1H), 1.60 (br. s., 1H), 1.56 (s, 5H), 1.53 (br. s., 1H), 1.23-1.10 (m, 4H), 1.04 (br. s., 1H), 0.75 (d, J=13.6 Hz, 1H), 0.16 - -0.09 (m, 4H), -0.25 (d, J=14.7 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 474.2 i Enantiomer B (3.70 mg, 21%, SFC RT = 18.75-21.75 min) 8.51 (d, J=14.67 Hz, 1H), 8.44-8.31 (m, 1H), 8.23-8.16 (m, 1H), 7.93-7.91 (d, J=13.57Hz, 1H), 7.47-7.43 (m, 1H), 4.66 (br. s., 1H), 4.05 (d, J=7.3 Hz, 3H), 3.92 (d, J=11.4 Hz, 1H), 3.63 (m, 1H), 3.23-2.93 (m, 2H), 2.33 (d, J=4.4 Hz, 3H), 1.95-1.78 (m, 1H), 1.60 (br. s., 1H), 1.56 (s, 5H), 1.53 (br. s., 1H), 1.23-1.10 (m, 4H), 1.04 (br. s., 1H), 0.75 (d, J=13.6 Hz, 1H), 0.16 - -0.09 (m, 4H), -0.25 (d, J=14.7 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 474.2.

Primeri 396 & 397

2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(1S)-2-metoksi-1-(oksan-4-il)etil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0839]

Korak 1: N,2-Dimetoksi-N-metilacetamid

[0840] Rastvor 2-metoksisirćetne kiseline (1.70 mL, 22.2 mmol) u dihlorometanu (10 mL) je tretiran sa oksalil hloridom (2.14 mL, 24.4 mmol) na sobnoj temperaturi. U to je dodato 2 kapi DMF, i reakcija je promešana tokom noći. To je dodato u rastvor N,O-dimetilhidroksilamin hidrohlorida (3.25 g, 33.3 mmol) i TEA (6.19 mL, 44.4 mmol) u dihlorometanu (10 mL) na 0 °C. Ledeno kupatilo je uklonjeno, i dobijena smeša je promešana na sobnoj temperaturi tokom noći. Smeša je oprana sa vodom, zatim 1.5M kalijum hidrogen fosfatom, zatim IN hlorovodoničnom kiselinom, zatim slanim rastvorom, i koncentrovana da se dobije 535 mg (18%).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 4.24 (s, 2H), 3.71 (s, 3H), 3.49 (s, 3H), 3.22 (s, 3H).

Korak 2: 2-Metoksi-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etanon

[0841] Suv sud od 50 mL pod azotom je napunjen sa magnezijumom (197 mg, 8.11 mmol) i kristalom joda. Čvrste supstance su mešane energično dok su zagrevane toplotnim pištoljem da se aerosolizuje jod. Nakon hlađenja do sobne temperature, tretiran je sa THF-om (4 mL). Smeša je zagrejana sa toplotnim pištoljem i tretirana sa rastvorom 4-bromotetrahidro-2H-pirana (0.678 mL, 6.08 mmol) u THF-u (4 mL) u kapima preko suvog levka za dodavanje. Kada je dodavanje završeno, smeša je postavljena u prethodno zagrejano uljano kupatilo, i smeša je držana na refluksu tokom 30 min. Nakon hlađenja do sobne temperature, rastvor je prebačen u promešani rastvor N,2-dimetoksi-N-metilacetamida (270 mg, 2.03 mmol) u THF-u (12 mL) na -78 °C. Nakon mešanja tokom 5 min, ledeno kupatilo je uklonjeno i reakcija je ostavljena da se zagreje do sobne temperature. Reakcija je postavljena u kupatilo na 0 °C, kvenčovana dodavanjem zas. vod. amonijum hlorida, koncentrovana, razblažena sa EtOAcom, oprana sa vodom, zatim slanim rastvorom, osušena preko magnezijum sulfata, filtrirana, i koncentrovana da se dobije 260 mg (81%) kao čisto ulje. Materijal je korišćen bez prečišćavanja.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.11(s, 2H), 4.05-4.0(m, 2H), 3.5-3.44(m, 2H), 3.45(s, 3H), 2.8(m, 1H), 1.64(m, 2H), 1.32(m, 2H).

Korak 3: 2-Metoksi-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etanol

[0842] Rastvor 2-metoksi-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etanona (60.0 mg, 0.379 mmol) u metanolu (1 mL) je tretiran sa natrijum borohidridom (14.4 mg, 0.379 mmol) u delovima (penušanje) na sobnoj temperaturi. Nakon mešanja tokom 2 h, koncentrovan je, rastvoren u EA, opran sa zas. vod. amonijum hloridom, zatim slanim rastvorom, osušen preko magnezijum sulfata, filtriran, i koncentrovan da se dobije 60.0 mg (kvant.).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 4.07-3.96 (m, 2H), 3.59-3.47 (m, 1H), 3.46-3.31 (m, 4H), 1.87-1.77 (m, 1H), 1.74-1.58 (m, 4H), 1.53-1.40 (m, 2H), 1.32 (s, 1H).

Korak 4: Metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(2-metoksi-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0843] Bočica za mikrotalasnu je pročišćena sa azotom i napunjena sa metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilatom (60.0 mg, 0.187 mmol), 2-metoksi-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etanolom (59.8 mg, 0.373 mmol), i degasiranim toluenom (1.5 mL). Bočica je isprana sa azotom, napunjena sa cijanometilentrimetilfosforanom (0.747 mL, 0.373 mmol, 0.5M u THF-u), zaptivena, i zagrevana na 110 °C tokom noći. Koncentrovana je, razblažena sa etil acetatom, oprana sa vodom, zatim slanim rastvorom, i koncentrovana da se dobije 108 mg proizvoda (50% čistoća).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.67 (br. s., 1H), 8.55-8.45 (m, 2H), 8.39 (br. s., 1H), 7.95 (d, J=13.2 Hz, 1H), 4.99 (br. s., 1H), 4.18 (br. s., 1H), 4.07 (s, 3H), 3.96 (s, 4H), 3.88 (br. s., 1H), 3.62 (d, J=9.5 Hz, 1H), 3.33 (br. s., 1H), 3.23-2.98 (m, 4H), 2.72-2.62 (m, 1H), 2.35 (s, 3H), 1.81 (br. s., 1H), 1.69 (br. s., 1H), 1.15 (br. s., 1H), 0.66 (br. s., 1H); LCMS (M+H) = 464.2.

Korak 5: 2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(1S)-2-metoksi-1-(oksan-4-il)etil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0844] Praćenjem procedure analogne onoj opisanoj za 2-{5-[(1R)-2-Ciklopropil-1-(oksan-4-il)etil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(2-metoksi-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (108 mg, 0.233 mmol) je konvertovan u 40.2 mg proizvoda (racemski, 37%), koji je dalje prečišćen hiralnom prep SFC (Kolona: ChiralPak AS-H 30 x 250 mm, 5 µm; Mobilna faza: 88/12 CO2/MeOH; Brzina protoka: 70 mL/min, Pritisak: 150 bar, Temperatura: 35 °C, UV: 268nm) da se dobiju: Enantiomer A (5.60 mg, 15%, SFC RT = 8.75 min)<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.5 (br. s., 1H), 8.36-8.3 (m, 1H), 8.21-8.16 (m, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.45 (d, J=8.4 Hz, 1H), 4.81 (br. s., 1H), 4.29-4.13 (m, 1H), 4.05 (s, 3H), 3.93-3.88 (m, 2H), 3.63 (d, J=9.2 Hz, 1H), 3.42-3.23 (m, 1H), 3.15(s, 3H), 3.05 (m, 1H), 3.63 (m, 1H), 2.33 (s, 3H), 1.87 (m, 1H), 1.63 (d, J=12.1 Hz, 1H), 1.15 (dd, J=12.1, 4.0 Hz, 1H), 0.70 (br. s., 1H); LCMS (M+H) = 464.2 i Enantiomer B (6.40 mg, 17%, SFC RT = 10.52 min)<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.5 (br. s., 1H), 8.36-8.3 (m, 1H), 8.21-8.16 (m, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.45 (d, J=8.4 Hz, 1H), 4.81 (br. s., 1H), 4.29-4.13 (m, 1H), 4.05 (s, 3H), 3.93-3.88 (m, 2H), 3.63 (d, J=9.2 Hz, 1H), 3.42-3.23 (m, 1H), 3.15(s, 3H), 3.05 (m, 1H), 3.63 (m, 1H), 2.33 (s, 3H), 1.87 (m, 1H), 1.63 (d, J=12.1 Hz, 1H), 1.15 (dd, J=12.1, 4.0 Hz, 1H), 0.70 (br. s., 1H); LCMS (M+H) = 464.2.

Primeri 398 & 399

2-{5-[(S)-(4-Hlorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-illpropan-2-ol

[0845]

Korak 1: (4-Hlorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol

[0846] Praćenjem procedure analogne onoj opisanoj za 2-ciklopropil-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etanol, 4-hlorobenzaldehid (200 mg, 1.42 mmol) je konvertovan u 186 mg proizvoda (58%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.36-7.33(m, 2H), 7.26(m, 2H), 4.4(m, 1H), 4.04(m, 1H), 3.93(m, 1H), 3.41-3.27(m, 2H), 1.84-1.78(m, 1H), 1.49-1.45(m, 1H), 1.37-1.28(m, 2H), 1.2-1.17(m, 1H).

Korak 2: Metil 5-((4-hlorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0847] Praćenjem procedure analogne onoj opisanoj za metil 5-(2-ciklopropil-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil)-3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat, (4-hlorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol (141 mg, 0.622 mmol) je konvertovan u 115 mg proizvoda (70%). LCMS (M+H) = 530.2, LC RT = 1.64 min (Kolona: Phenomenex LUNA C18, 30x2, 3u; Mobilna faza A: 90:10 voda:acetonitril sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 10:90 voda:Acetonitril sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min, zadržavanje 1 min; Brzina protoka: 1 mL/min).

Korak 3: 2-{5-[(S)-(4-Hlorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0848] Praćenjem procedure analogne onoj opisanoj za 2-{5-[(1R)-2-Ciklopropil-1-(oksan-4-il)etil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, metil 5-((4-hlorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (115 mg, 0.217 mmol) je konvertovan u racemski 2-{5-[(S)-(4-hlorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, koji je razdvojen hiralnom prep (Kolona: ChiralCel OD 21 x 250 mm, 10 µm; Mobilna faza: Rastvarač A 0.1% dietilamin/Heptan, Rastvarač B etanol; Brzina protoka: 15 mL/min; Izokratski: 20%B, 28min; UV: 254 nm) da se dobiju: Enantiomer A (13.2 mg, 12%, SFC RT = 12.4 min)<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.51 (s, 1H), 8.38(m, 1H), 8.15 (d, J=8.1 Hz, 1H), 8.10(m, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.69 (d, J=8.4 Hz, 2H), 7.49 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.40 (d, J=8.4 Hz, 2H), 5.84 (d, J=11.4 Hz, 1H), 4.02 (br. s., 3H), 3.90 (d, J=7.7 Hz, 1H), 3.74 (d, J=8.8 Hz, 1H), 3.47 (t, J=11.4 Hz, 1H), 3.25 (t, J=11.2 Hz, 1H), 2.30 (s, 3H), 1.72-1.64 (m, 1H), 1.58 (br. s., 7H), 1.37-1.13 (m, 2H), 1.01 (d, J=12.1 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 530.3, LCMS (M+H) = 530.3 i Enantiomer B (13.3 mg, 12%, SFC RT = 22.5 min)<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.51 (s, 1H), 8.38(m, 1H), 8.15 (d, J=8.1 Hz, 1H), 8.10(m, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.69 (d, J=8.4 Hz, 2H), 7.49 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.40 (d, J=8.4 Hz, 2H), 5.84 (d, J=11.4 Hz, 1H), 4.02 (br. s., 3H), 3.90 (d, J=7.7 Hz, 1H), 3.74 (d, J=8.8 Hz, 1H), 3.47 (t, J=11.4 Hz, 1H), 3.25 (t, J=11.2 Hz, 1H), 2.30 (s, 3H), 1.72-1.64 (m, 1H), 1.58 (br. s., 7H), 1.37-1.13 (m, 2H), 1.01 (d, J=12.1 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 530.3, LCMS (M+H) = 530.3.

Primeri 400 & 401

2-{5-[(S)-(3-Hlorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-illpropan-2-ol

[0849]

Korak 1: (3-Hlorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol

[0850] Praćenjem procedure analogne onoj opisanoj za 2-ciklopropil-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etanol, 3-hlorobenzaldehid (200 mg, 0.162 mmol) je konvertovan u 157 mg proizvoda (49%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.35-7.28 (m, 3H), 7.22-7.19 (m, 1H), 4.39 (d, J=7.28Hz, 1H), 4.06-4.02 (m, 2H), 3.96-3.92 (m, 2H), 3.42-3.28 (m, 2H), 1.93-1.23 (m, 5H).

Korak 2: Metil 5-((3-hlorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0851] Praćenjem procedure analogne onoj opisanoj za metil 5-(2-ciklopropil-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil)-3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat, (3-hlorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol (141 mg, 0.622 mmol) je konvertovan u 120 mg proizvoda (73%). LCMS (M+H) = 530.3, LC RT = 1.62 min (Kolona: Phenomenex LUNA C18, 30x2, 3u; Mobilna faza A: 90:10 voda:Acetonitril sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 10:90 voda:Acetonitril sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min, zadržavanje 1 min; Brzina protoka: 1 mL/min).

Korak 3: 2-{5-[(S)-(3-Hlorofenil)(oksan-4-il)ametil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0852] Praćenjem procedure analogne onoj opisanoj za 2-{5-[(1R)-2-Ciklopropil-1-(oksan-4-il)etil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, metil 5-((3-hlorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (120 mg, 0.226 mmol) je konvertovan u racemski 2-{5-[(S)-(3-hlorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-, koji je razdvojen hiralnom prep (Kolona: ChiralCel OD 21 x 250 mm, 10 µm; Mobilna faza: Rastvarač A 0.1% dietilamin/Heptan, Rastvarač B etanol; Brzina protoka: 15 mL/min; Izokratski: 15%B, 60 min; UV: 254nm) da se dobije: Enantiomer A (3.20 mg, 3%, SFC RT = 18.1 min)<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.50-8.39 (m, 1H), 8.55-8.31 (m, 2H), 8.15 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.62 (d, J=7.3 Hz, 1H), 7.50 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.40-7.29 (m, 2H), 5.85 (d, J=11.4 Hz, 1H), 4.03 (br. s., 3H), 3.90 (d, J=7.7 Hz, 1H), 3.74 (d, J=11.0 Hz, 1H), 3.54-3.41 (m, 2H), 3.26 (t, J=11.4 Hz, 1H), 2.31 (s, 3H), 1.70-1.51 (m, 8H), 1.31 (d, J=9.2 Hz, 1H), 1.04 (d, J=12.5 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 530.3 i Enantiomer B (3.60 mg, 3%, SFC RT = 32.3 min)<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.50-8.39 (m, 1H), 8.55-8.31 (m, 2H), 8.15 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.62 (d, J=7.3 Hz, 1H), 7.50 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.40-7.29 (m, 2H), 5.85 (d, J=11.4 Hz, 1H), 4.03 (br. s., 3H), 3.90 (d, J=7.7 Hz, 1H), 3.74 (d, J=11.0 Hz, 1H), 3.54-3.41 (m, 2H), 3.26 (t, J=11.4 Hz, 1H), 2.31 (s, 3H), 1.70-1.51 (m, 8H), 1.31 (d, J=9.2 Hz, 1H), 1.04 (d, J=12.5 Hz, 1H); LCMS (M+H) = 530.3.

Primeri 402 & 403

2-{5-[(S)-(2-Hlorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0853]

Korak 1: (2-Hlorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol

[0854] Praćenjem procedure analogne onoj opisanoj za 2-ciklopropil-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etanol, 2-hlorobenzaldehid (200 mg, 0.162 mmol) je konvertovan u 96.0 mg proizvoda (30%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.54-7.52 (m, 1H), 7.37-7.3 (m, 2H), 7.25-7.22 (m, 1H), 4.98 (m, 1H), 4.02 (m, 2H), 3.35 (m, 2H), 1.76 (m, 1H), 1.63 (m, 2H), 1.32 (m, 2H). Korak 2: Metil 5-((2-hlorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0855] Praćenjem procedure analogne onoj opisanoj za metil 5-(2-ciklopropil-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)etil)-3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat, (2-hlorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol (85.0 mg, 0.373 mmol) je konvertovan u 49.0 mg proizvoda (50%). LCMS (M+H) = 530.2, LC RT = 1.59 min (Kolona: Phenomenex LUNA C18, 30x2, 3u; Mobilna faza A: 90:10 voda:acetonitril sa 0.1% TFA; Mobilna faza B: 10:90 voda:acetonitril sa 0.1% TFA; Temperatura: 40 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 2 min, zadržavanje 1 min; Brzina protoka: 1 mL/min).

Korak 3: 2-{5-[(S)-(2-Hlorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0856] Praćenjem procedure analogne onoj opisanoj za 2-{5-[(1R)-2-Ciklopropil-1-(oksan-4-il)etil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, metil 5-((2-hlorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (49.0 mg, 0.0920 mmol) je konvertovan u racemski 2-{5-[(S)-(2-hlorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, koji je razdvojen hiralnom prep (Kolona: ChiralCel OD 21 x 250 mm, 10

1

µm; Mobilna faza: Rastvarač A 0.1% dietilamin/Heptan, Rastvarač B etanol; Brzina protoka: 15 mL/min; Izokratski: 30%B, 120min; UV: 254nm) da se dobije; Enantiomer A (10.2 mg, 21%, SFC RT = 7.38 min)<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.52 (s, 1H), 8.33 (d, J=7.7 Hz, 1H), 8.13 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.52 (t, J=7.5 Hz, 1H), 7.46 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.37 (d, J=7.3 Hz, 1H), 5.95 (d, J=11.7 Hz, 1H), 4.00 (br. s., 3H), 3.93-3.83 (m, 1H), 3.71 (d, J=10.6 Hz, 1H), 3.48 (t, J=11.7 Hz, 1H), 3.18 (t, J=11.6 Hz, 1H), 2.29 (m, 3H), 1.71 (br. s., 1H), 1.68-1.59 (m, 1H), 1.51 (br. s., 7H), 1.42 (d, J=12.5 Hz, 1H), 0.73 (br. s., 1H); LCMS (M+H) = 530.3 i Enantiomer B (10.2 mg, 21%, SFC RT = 14.17 min)<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.52 (s, 1H), 8.33 (d, J=7.7 Hz, 1H), 8.13 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.52 (t, J=7.5 Hz, 1H), 7.46 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.37 (d, J=7.3 Hz, 1H), 5.95 (d, J=11.7 Hz, 1H), 4.00 (br. s., 3H), 3.93-3.83 (m, 1H), 3.71 (d, J=10.6 Hz, 1H), 3.48 (t, J=11.7 Hz, 1H), 3.18 (t, J=11.6 Hz, 1H), 2.29 (m, 3H), 1.71 (br. s., 1H), 1.68-1.59 (m, 1H), 1.51 (br. s., 7H), 1.42 (d, J=12.5 Hz, 1H), 0.73 (br. s., 1H); LCMS (M+H) = 530.3.

Primer 405

[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]metanol

[0857]

[0858] Rastvor metil 3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (188 mg, 0.379 mmol) u tetrahidrofuranu (4.0 mL) je ohlađen u kuptilu sa ledenom vodom tokom 5 min, zatim litijum aluminijum hidrid 2.0 M u THF-u (0.379 mL, 0.759 mmol) je dodat u kapima tokom oko 1 min. Nakon 10 min kupatilo za hlađenje je uklonjeno i mešanje je nastavljeno tokom 45 min. Smeša je ohlađena ponovo u ledenom vodenom kupatilu i kvenčovana sa 28 µL vode, 28 µL 15% NaOH, i 84 µL vode. Mala količina natrijum sulfata je dodata i smeša je mešana tokom 20 min, filtrirana, i isprana sa etil acetatom. Eluent je koncentrovan. Ovaj materijal je prečišćen na SiO2(4 g) ekvilibrisanom u 20% smeše aceton/DCM, nanet u DCM-u, i eluiran primenom 20% aceton/DCM (200 mL), 30% aceton/DCM (200 mL) 40% aceton/DCM (200 mL). Frakcije koje sadrže proizvod su koncentrovane da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (131 mg, 73%).

2

Uzorak najčištijeg dela iz ovih frakcija (12.4 mg) je dalje prečišćen putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 20-60% B tokom 15 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja.<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.55-8.48 (m, 1H), 8.48-8.38 (m, 1H), 8.19 (d, J=8.1 Hz, 1H), 8.11-8.03 (m, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.68 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.38-7.29 (m, 3H), 7.28-7.21 (m, 1H), 5.79 (d, J=11.4 Hz, 1H), 4.76 (s, 2H), 4.01 (br. s., 3H), 3.93-3.86 (m, 1H), 3.73 (d, J=11.4 Hz, 1H), 3.27 (t, J=11.4 Hz, 1H), 2.30 (s, 3H), 1.70 (d, J=12.8 Hz, 1H), 1.56 (br. s., 1H), 1.38-1.22 (m, 1H), 1.00 (d, J=13.9 Hz, 1H). LC/MS (468, [M+H]<+>).

Primer 406

{[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]metil}dimetilamin

[0859]

Korak 1: 3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karbaldehid

[0860] U rastvor oksalil hlorida (0.0140 mL, 0.164 mmol) u 1.0 mL DCM na - 78 °C je dodat DMSO (0.0230 mL, 0.329 mmol). Nakon 10 min, rastvor [3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]metanola (64.0 mg, 0.137 mmol) u 0.5 mL DCM je dodat u kapima (0.5 mL ispiranje). Ova smeša je mešana tokom oko 10 min, zatim trietilamin (0.0570 mL, 0.411 mmol) je dodat, i kupatilo za hlađenje je uklonjeno. Nakon ukupnog vremena reakcije od 2 h, ledeno kupatilo je zamenjeno, i reakcija je kvenčovana sa vodom, ostavljena da se zagreje do sobne temperature, i ekstrahovana u etil acetat. Kombinovane organske supstance su osušene preko MgSO4, filtrirane, i koncentrovane. Ovaj materijal je prečišćen na SiO2(4 g) nanet na suvu kolonu u DCM-u i eluiran primenom 10-30% aceton/DCM da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (59.0 mg, 93%) kao žuti film.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 10.25 (s, 1H), 8.60-8.56 (m, 1H), 8.54 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.92 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.51-7.44 (m, 2H), 7.41-7.29 (m, 3H), 5.64 (d, J=10.5 Hz, 1H), 4.07 (dd, J=11.4, 2.9 Hz, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.88-3.83 (m, 1H), 3.56 (td, J=11.9, 1.9 Hz, 1H), 3.41-3.31 (m, 1H), 3.14 (d, J=11.0 Hz, 1H), 2.32-2.28 (m, 3H), 2.05 (d, J=13.3 Hz, 1H), 1.69-1.56 (m, 1H), 1.50-1.35 (m, 1H), 1.10 (d, J=13.3 Hz, 1H). LC/MS (466, [M+H]<+>).

Korak 2: {[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]metil}dimetilamin

[0861] U rastvor 3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karbaldehida (24.9 mg, 0.0530 mmol) u DCM-u (1.0 mL) je dodat dimetilamin (2.0 M u metanolu, 0.267 mL, 0.535 mmol). Nakon 5 min, natrijum triacetoksiborohidrid (22.7 mg, 0.107 mmol) je dodat. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Dodatnih 10 ekvivalenata dietilamina je dodato praćeno natrijum triacetoksiborohidridom (22.7 mg, 0.107 mmol). Nakon 20 h, dodatnih 10 ekvivalenata dimetilamina je dodato praćeno natrijum triacetoksiborohidridom (22.7 mg, 0.107 mmol), i dobijena smeša je mešana 3 h duže. Smeša je koncentrovana i filtrirana kroz PVDF špric filter veličine 0.45 µm primenom metanola. Sirov materijal je prečišćen putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 20-60% B tokom 15 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (5.10 mg, 19%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.52 (s, 1H), 8.45 (br. s., 1H), 8.18 (d, J=7.7 Hz, 1H), 8.04 (br. s., 1H), 7.67 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.38-7.21 (m, 4H), 5.81 (d, J=11.4 Hz, 1H), 4.01 (s, 3H), 3.92-3.87 (m, 1H), 3.73 (d, J=11.7 Hz, 1H), 3.70 (br. s., 2H), 3.48 (t, J=11.4 Hz, 1H), 3.37 (br. s., 1H), 3.26 (t, J=11.2 Hz, 1H), 2.30 (s, 3H), 2.25-2.18 (m, 6H), 1.69 (d, J=13.2 Hz, 1H), 1.62-1.51 (m, 1H), 1.37-1.26 (m, 1H), 1.03 (d, J=12.5 Hz, 1H). LC/MS (466, [M+H]<+>).

Primer 407

[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il](<2>H2)metanol

[0862]

4

[0863] Rastvor metil 3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (22.7 mg, 0.0460 mmol) u THF-u (4.0 mL) je hlađen u kupatilu sa ledenom vodom tokom 5 min. U to je dodat litijum aluminijum deuterid (2.10 mg, 0.0500 mmol) kao čvrsta supstanca u jednoj porciji. Nakon 1 h, smeša je kvenčovana sa 2 kapi vode, 2 kapi 15% NaOH rastvora, i 3 kapi vode. Čvrsti natrijum sulfat je dodat, i ova smeša je razblažena sa etil acetatom i sonifikovana/filtrirana. Organske supstance su dalje osušene sa malom količinom MgSO4, filtrirane, i koncentrovane. Sirov materijal je prečišćen putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 20-60% B tokom 15 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (8.50 mg, 39%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.52 (s, 1H), 8.44 (br. s., 1H), 8.19 (d, J=8.1 Hz, 1H), 8.08 (br. s., 1H), 7.68 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.39-7.29 (m, 3H), 7.29-7.23 (m, 1H), 5.80 (d, J=11.4 Hz, 1H), 4.01 (br. s., 3H), 3.94-3.87 (m, 1H), 3.73 (d, J=8.1 Hz, 1H), 3.53-3.43 (m, 2H), 3.42 (br. s., 1H), 3.27 (t, J=11.7 Hz, 1H), 2.30 (s, 3H), 1.70 (d, J=13.2 Hz, 1H), 1.61-1.48 (m, 1H), 1.31 (d, J=11.7 Hz, 1H), 1.01 (d, J=12.8 Hz, 1H). LC/MS (470, [M+H]<+>).

Primer 408

Diciklopropil[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]metanol

[0864]

[0865] Rastvor metil 3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (25.5 mg, 0.0510 mmol) u THF-u (0.5 mL) je ohlađen u kupatilu sa suvim ledom-acetonom. U to je dodavan ciklopropilmagnezijum bromid (1.0 M u 2-metiltetrahidrofuranu, 0.515 mL, 0.515 mmol) tokom oko 5 min. Smeša je mešana tokom 30 min zatim prebačena u kupatilo sa ledenom vodom. Nakon 2 h, smeša je kvenčovana sa zasićen vod. amonijum hlorid rastvorom, ekstrahovana u etil acetat, oprana sa slanim rastvorom, osušena preko MgSO4, filtrirana, i koncentrovana da se dobije 40 mg žutog filma. Sirov materijal je prečišćen putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 35-75% B tokom 15 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (5.90 mg, 21%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.51 (s, 2H), 8.15 (d, J=8.1 Hz, 2H), 7.66 (d, J=7.7 Hz, 2H), 7.57 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.38-7.30 (m, 2H), 7.28-7.19 (m, 1H), 5.81 (d, J=11.0 Hz, 1H), 4.04 (s, 3H), 3.95-3.85 (m, 1H), 3.75 (d, J=9.5 Hz, 1H), 3.48 (t, J=11.2 Hz, 1H), 3.40 (br. s., 1H), 3.27 (t, J=11.2 Hz, 1H), 2.32 (s, 3H), 1.71 (d, J=12.5 Hz, 1H), 1.63-1.47 (m, 1H), 1.40-1.24 (m, 3H), 1.05 (d, J=13.9 Hz, 1H), 0.64 (br. s., 2H), 0.54-0.34 (m, 4H), 0.26 (dt, J=9.0, 4.3 Hz, 2H). LC/MS (548, [M+H]<+>).

Primer 409

2-[8-Hloro-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0866]

Korak 1: Metil 8-hloro-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0867] Smeša metil 3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (26.0 mg, 0.0520 mmol) i NCS (7.36 mg, 0.0550 mmol) je rastvorena u DMF-u (0.5 mL), i zagrejana na 45 °C. Nakon 20 h na 45 °C, temperatura je podignuta na 60 °C. Nakon 150 h, smeša je ohlađena, razblažena sa DCM-om, oprana sa vodom, zatim slanim rastvorom, osušena preko MgSO4, filtrirana, i koncentrovana da se dobije 26.8 mg žutog filma. Ovaj materijal je prečišćen putem preparativne HPLC (XBridge C18 30x100 mm; A = 95% voda, 5% Acetonitril 10 mm amonijum acetat; B = 95% Acetonitril, 5% voda 10 mm amonijum acetat. Metoda je 30% B tokom 30 min na 30 mL/min, Talasna dužina = 254nm) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čist/beli film (11.6 mg, 39%).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.51 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.46-7.41 (m, 2H), 7.39-7.31 (m, 3H), 5.53 (d, J=10.5 Hz, 1H), 4.07 (s, 3H), 4.05 (s, 1H), 3.91-3.88 (m, 3H), 3.86 (br. s., 1H), 3.55 (td, J=11.9, 1.8 Hz, 1H), 3.36 (td, J=11.9, 2.0 Hz, 1H), 3.15-3.00 (m, J=11.0, 11.0, 11.0 Hz, 1H), 2.29 (s, 3H), 2.08-2.00 (m, 1H), 1.64 (s, 1H), 1.51-1.36 (m, J=13.1, 4.3 Hz, 1H), 1.07 (d, J=12.5 Hz, 1H). LC/MS (530, [M+H]<+>).

Korak 2: 2-[8-Hloro-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0868] Rastvor metil 8-hloro-3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (8.50 mg, 0.0160 mmol) u THF-u (0.5 mL) je ohlađen u kupatilu sa suvim ledom/acetonom i metilmagnezijum bromid (1.0 M u THF-u, 0.160 mL, 0.160 mmol) je dodavan polako tokom oko 5 min. Nakon što je dodavanje završeno, smeša je mešana na ovoj temperaturi tokom 5 min, i zatim je kupatilo za hlađenje uklonjeno. Nakon 30 min, smeša je ponovo ohlađena u kupatilu sa suvim ledom/acetonom i kvenčovana sa nekoliko kapi vode, zatim ostavljena da dođe do sobne temperature i koncentrovana. Ostatak je podeljen između zasićenog vodenog rastvora amonijum hlorida i dihlorometana. Vodeni deo je dalje ekstrahovan sa 2 porcije dihlorometana. Kombinovane organske supstance su osušene preko MgSO4, filtrirane, i koncentrovane da se dobije 8.00 mg čistog filma. Sirov materijal je prečišćen putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 25-65% B tokom 15 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (4.00 mg, 47%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.56 (s, 1H), 8.46 (br. s., 2H), 8.16 (s, 1H), 7.66 (d, J=7.7 Hz, 2H), 7.40-7.31 (m, 2H), 7.30-7.24 (m, 1H), 5.74 (d, J=11.0 Hz, 1H), 4.01 (s, 3H), 3.93-3.86 (m, 1H), 3.74 (d, J=10.3 Hz, 1H), 3.46 (t, J=11.0 Hz, 1H), 3.36 (d, J=4.8 Hz, 1H), 3.31-3.22 (m, 1H), 2.30 (s, 3H), 1.73 (d, J=15.8 Hz, 7H), 1.60-1.47 (m, 1H), 1.31 (d, J=9.2 Hz, 1H), 0.97 (d, J=11.7 Hz, 1H). LC/MS (530, [M+H]<+>).

Primer 411

N-{2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-il}metansulfonamid

[0869]

Korak 1: 5-[7-(2-Azidopropan-2-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il]-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol

[0870] Rastvor 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ola (195 mg, 0.393 mmol) u DCM-u (5.0 mL) je ohlađen u kupatilu sa ledenom vodom i trimetilsilil azid (0.131 mL, 0.984 mmol) je dodat. Nakon 5 min, BF3·OEt2(0.249 mL, 1.97 mmol) je dodat, i smeša je mešana tokom 20 min pre uklanjanja kupatila za hlađenje. Nakon 18 h, smeša je razblažena sa vodom i zasićenim vodenim bikarbonatom, ekstrahovana u etil acetatu, oprana sa slanim rastvorom, osušena preko MgSO4, filtrirana, i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (200 mg, 70%) kao žuta čvrsta supstanca. Ovo je odgovaralo željenom proizvodu pomoću 1HNMR ali je sadržalo značajne nečistoće (72% čistoća). Sa njim je nastavljeno bez dodatnog prečišćavanja.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.46 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.39 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.84 (d, J=1.0 Hz, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.49-7.42 (m, 3H), 7.39-7.29 (m, 3H), 5.57 (d, J=10.0 Hz, 1H), 4.09-4.04 (m, 1H), 3.92-3.88 (m, 3H), 3.88-3.84 (m, 1H), 3.56 (td, J=12.0, 2.1 Hz, 1H), 3.36 (td, J=11.9, 1.9 Hz, 1H), 3.11 (dd, J=10.7, 3.6 Hz, 1H), 2.30 (s, 3H), 2.10-1.99 (m, 1H), 1.80 (s, 3H), 1.79 (s, 3H), 1.72-1.56 (m, 1H), 1.49-1.35 (m, 1H), 1.14 (d, J=13.1 Hz, 1H). LC/MS (521, [M+H]<+>).

Korak 2: 2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-amin

[0871] Sud koji sadrži rastvor 5-[7-(2-azidopropan-2-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il]-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazola (200 mg, 0.384 mmol) u MeOH-u (5 mL) je vakuumski pročišćen sa azotom. Pd/C (82.0 mg, 0.0770 mmol) je dodat i sud je vakuumski pročišćen sa H2(g) nekoliko puta i na kraju mešan na ambijentalnoj temperaturi pod balonom vodonika. Nakon 2 h, smeša je vakuumski pročišćena nekoliko puta sa azotom, razblažena sa etil acetatom, i filtrirana kroz Celite da se dobije 146 mg bele čvrste supstance.

Ovaj materijal je bio donekle neratsvorljiv tokom filtracije. Sirov materijal je prečišćen (12g SiO2) eluiranjem sa 10% aceton/DCM (150 mL), 20% aceton/DCM (200 mL), 40% aceton/DCM (100 mL), 50% aceton/DCM (100 mL), 10% MeOH/DCM 100 mL. Željeni proizvod je eluiran u MeOH/DCM frakcije da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (56.0 mg, 30%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 8.49 (t, J=1.9 Hz, 1H), 8.40 (dd, J=8.3, 1.3 Hz, 1H), 8.30 (br. s., 1H), 8.13 (d, J=4.8 Hz, 1H), 7.66 (d, J=7.5 Hz, 2H), 7.55 (dd, J=8.5, 1.3 Hz, 1H), 7.42-7.34 (m, 2H), 7.32-7.25 (m, 1H), 5.86 (d, J=10.8 Hz, 1H), 4.04-3.96 (m, 4H), 3.82 (d, J=9.0 Hz, 1H), 3.62 (t, J=11.2 Hz, 1H), 3.49-3.37 (m, 1H), 2.34-2.26 (m, 3H), 2.00 (d, J=13.3 Hz, 1H), 1.82 (s, 6H), 1.72-1.60 (m, 1H), 1.46 (dd, J=12.4, 4.1 Hz, 1H), 1.07 (d, J=12.8 Hz, 1H), 0.93-0.80 (m, 1H). LC/MS (495, [M+H]<+>).

Korak 3: N-{2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-il}metansulfonamid

[0872] U suspenziju 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-amina (17.5 mg, 0.0350 mmol) u DCM-u (1 mL) je dodato 2 kapi trietilamina (7.40 µL, 0.0530 mmol). Zamućena suspenzija je postala homogena i kratko je ohlađena u ledenom vodenom kupatilu i jedna kap metansulfonilhlorida (3.03 µL, 0.0390 mmol) je dodata. Bočica je uklonjena iz kupatila. Nakon 15 min, smeša je razblažena sa DCM-om, oprana sa vodom i slanim rastvorom, osušena preko MgSO4, filtrirana, i koncentrovana da bi se dobio čist film (20.4 mg). Sirov materijal je prečišćen putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 25-65% B tokom 15 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (9.70 mg, 48%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.53 (s, 1H), 8.19 (d, J=8.4 Hz, 2H), 7.72 (d, J=7.3 Hz, 3H), 7.50 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.41-7.28 (m, 2H), 7.27-7.22 (m, 1H), 5.82 (d, J=11.0 Hz, 1H), 4.03 (s, 3H), 3.95-3.88 (m, 1H), 3.73 (d, J=9.2 Hz, 1H), 3.53-3.42 (m, 2H), 3.35 (d, J=5.5 Hz, 1H), 3.29 (t, J=11.4 Hz, 1H), 2.45 (s, 3H), 2.32 (s, 3H), 1.79 (s, 3H), 1.76 (br. s., 3H), 1.71 (d, J=13.6 Hz, 1H), 1.60-1.47 (m, 1H), 1.31 (d, J=9.5 Hz, 1H), 1.01 (d, J=12.1 Hz, 1H). Sva analitička LC/MS ubrizgavanja su korišćena da bi se odredila finalna čistoća; LC/MS (573, [M+H]<+>).

Primer 412

Metil N-{2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-il}karbamat

[0873]

[0874] U suspenziju 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-amina (23.0 mg, 0.0460 mmol) u THF-u (1 mL) i DCM-u (1 mL) je dodata Hünig-ova baza (0.0160 mL, 0.0930 mmol). Smeša je kratko ohlađena u ledenom vodenom kupatilu i metil hloroformat (4.31 µl, 0.0560 mmol) je dodat. Nakon 3 h, dodatna kap hloroformata je dodata. Nakon 30 min, smeša je koncentrovana, prebačena u metanol, i prečišćena putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 40-80% B tokom 15 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (21.5 mg, 83%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.51 (s, 1H), 8.47 (br. s., 1H), 8.14 (d, J=8.4 Hz, 1H), 8.00 (br. s., 1H), 7.75 (br. s., 1H), 7.66 (d, J=7.7 Hz, 2H), 7.33 (t, J=8.1 Hz, 3H), 7.28-7.23 (m, 1H), 5.79 (d, J=11.4 Hz, 1H), 4.03 (s, 3H), 3.95-3.86 (m, 2H), 3.75 (d, J=9.2 Hz, 1H), 3.57-3.41 (m, 2H), 3.36 (d, J=4.4 Hz, 1H), 3.27 (t, J=11.2 Hz, 1H), 2.31 (s, 3H), 1.68 (d, J=4.8 Hz, 7H), 1.54 (d, J=16.1 Hz, 1H), 1.30 (d, J=8.4 Hz, 1H), 1.03 (d, J=12.8 Hz, 1H). LC/MS (553, [M+H]<+>).

Primer 413

5-[7-(3-Fluoroazetidin-1-karbonil)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il]-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol

[0875]

Korak 1: 3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilna kiselina

[0876] Bočica od 20 mL pod pritiskom je napunjena sa metil 3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilatom (200 mg, 0.404 mmol), THF (3363 µL), i vodom (673 µL). Dobijeni rastvor je tretiran sa kalijum hidroksidom (67.9 mg, 1.21 mmol), i bočica je zatvorena. Nakon 3 h, reakciona smeša je zagrejana do 50 °C i promešana na toj temperaturi tokom noći. Nakon 19 h, organske supstance su uklonjene pod strujom azota, i vodeni je prebačen u levak za odvajanje. Bazni rastvor je ekstrahovan sa etil acetatom (2X), koji je odbačen. Vodeni je zakišeljen do približno pH 4 primenom 1 mL IN vod. HCl. Ova smeša je potom prilagođena do približno pH 5 primenom 2M rastvora vodenog trikalijum fosfata. Dobijena smeša je ekstrahovana sa etil acetatom (3X). Kombinovane organske supstance su osušene preko magnezijum sulfata i koncentrovane pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (192 mg, 99 %) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.59 (s, 1H), 8.55 (d, J=1.5 Hz, 1H), 8.52 (d, J=8.3 Hz, 1H), 8.17 (dd, J=8.3, 1.0 Hz, 1H), 7.66 (d, J=1.5 Hz, 1H), 7.48 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.41-7.29 (m, 4H), 5.66 (d, J=10.5 Hz, 1H), 4.13-4.05 (m, 1H), 3.92-3.86 (m, 4H), 3.63-3.53 (m, 1H), 3.38 (td, J=12.0, 1.5 Hz, 1H), 3.14 (d, J=11.0 Hz, 1H), 2.32 (s, 3H), 2.10-2.02 (m, 1H), 1.74-1.61 (m, 1H), 1.55-1.43 (m, 1H), 1.11 (d, J=14.3 Hz, 1H). LC/MS (481, [M+H]<+>).

Korak 2: 5-[7-(3-Fluoroazetidin-1-karbonil)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il]-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol

[0877] Smeša 3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilne kiseline (10.8 mg, 0.0220 mmol), 3-fluoroazetidin hidrohlorida (5.00 mg, 0.0450 mmol), Hunigove baze (7.83 µL, 0.0450 mmol), i HATU (12.8 mg, 0.0340 mmol) u DMF-u (0.5 mL) je mešana na sobnoj temperaturi. Nakon 1.5 h, smeša je filtrirana kroz 0.45 µm PVDF syringe filter i prečišćena pomoću preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-

1

mM amonijum acetatom; Gradijent: 20-60% B tokom 15 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (7.10 mg, 56%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.60 (s, 1H), 8.49 (br. s., 1H), 8.31 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.68 (d, J=7.7 Hz, 2H), 7.59 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.40-7.29 (m, 2H), 7.29-7.22 (m, 1H), 5.96 (d, J=11.0 Hz, 1H), 5.56 (br. s., 1H), 5.45 (br. s., 1H), 4.52 (br. s., 3H), 4.17 (br. s., 1H), 4.01 (br. s., 3H), 3.94-3.88 (m, 1H), 3.72 (d, J=9.5 Hz, 1H), 3.56-3.34 (m, 3H), 3.31-3.19 (m, 1H), 2.30 (br. s., 3H), 1.79-1.68 (m, 1H), 1.61 (d, J=11.0 Hz, 1H), 1.31 (br. s., 1H), 0.95 (br. s., 1H). LC/MS (539, [M+H]<+>).

Primer 414

5-[7-(3,3-Difluoroazetidin-1-karbonil)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il]-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol

[0878]

[0879] Smeša 3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilne kiseline (10.0 mg, 0.0210 mmol), 3,3-difluoroazetidin hidrohlorida (5.38 mg, 0.0420 mmol), Hunigove baze (7.25 µL, 0.0420 mmol), i HATU (11.8 mg, 0.0310 mmol) u DMF-u je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1.5 h. Smeša je filtrirana kroz 0.45 µm PVDF syringe filter i prečišćena putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 25-65% B tokom 15 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (6.40 mg, 53%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.61 (s, 1H), 8.48 (br. s., 1H), 8.33 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.69 (d, J=7.7 Hz, 2H), 7.64 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.39-7.30 (m, 2H), 7.30-7.18 (m, 1H), 5.97 (d, J=11.4 Hz, 1H), 4.90 (br. s., 1H), 4.58 (br. s., 1H), 4.01 (br. s., 1H), 3.90 (d, J=6.6 Hz, 1H), 3.73 (d, J=8.8 Hz, 1H), 3.49 (t, J=11.4 Hz, 1H), 3.40-3.32 (m, 4H), 3.25 (t, J=11.7 Hz, 1H), 2.30 (br.

2

s., 3H), 1.73 (d, J=13.2 Hz, 1H), 1.62 (d, J=10.3 Hz, 1H), 1.33 (d, J=10.3 Hz, 1H), 0.95 (d, J=12.1 Hz, 1H). LC/MS (557, [M+H]<+>).

Primeri 415 i 416

1-Ciklopropil-1-{6-fluoro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}etan-1-ol

[0880]

[0881] 1-Ciklopropil-1-{6-fluoro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}etan-1-ol je pripremljen kao smeša dijastereomera u skladu sa procedurama opisanim za 1-ciklopropil-1-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]etan-1-ol. Razdvajanje smeše dijastereomera koja je pripremljena u poslednjem koraku je izvedeno primenom hiralne preparativne SFC da se dobiju dijastereomer A i dijastereomer B: Chiralpak OJ-H preparativna kolona, 30 x 250 mm, 5µm; Mobilna faza: 10% MeOH u CO2, 150Bara; Temp: 35°C; Brzina protoka: 70.0 mL/min. za 47min. UV praćeno na 270nm. Ubrizgavanje: 0.75 mL približno 6 mg/mL rastvora u MeOH-u (približno 19 mg prečišćeno naslaganom injekcijom). Dijastereomer A:<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.49 (s, 1H), 8.43 (br. s., 1H), 8.15 (d, J=8.4 Hz, 1H), 8.11 (br. s., 1H), 7.66 (d, J=7.7 Hz, 2H), 7.50 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.33 (t, J=7.3 Hz, 2H), 7.28-7.18 (m, 1H), 5.80 (d, J=11.0 Hz, 1H), 4.01 (s, 3H), 3.89 (d, J=8.8 Hz, 1H), 3.74 (d, J=10.3 Hz, 1H), 3.49 (s, 1H), 3.41 (br. s., 1H), 3.26 (t, J=11.6 Hz, 1H), 1.75-1.66 (m, 1H), 1.57 (br. s., 3H), 1.51 (br. s., 1H), 1.29 (br. s., 2H), 1.02 (d, J=12.8 Hz, 1H), 0.52 (br. s., 1H), 0.41 (d, J=6.2 Hz, 2H), 0.26 (d, J=7.3 Hz, 1H). SFC retenciono vreme: 33 min. Dijastereomer B:<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.49 (s, 1H), 8.44 (br. s., 1H), 8.15 (d, J=8.1 Hz, 1H), 8.11 (br. s., 1H), 7.65 (d, J=7.7 Hz, 2H), 7.49 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.32 (t, J=7.3 Hz, 2H), 7.27-7.21 (m, 1H), 5.80 (d, J=11.4 Hz, 1H), 4.01 (br. s., 3H), 3.89 (br. s., 1H), 3.74 (d, J=10.3 Hz, 1H), 3.50 (d, J=3.3 Hz, 1H), 3.39 (br. s., 1H), 3.26 (t, J=11.7 Hz, 1H), 1.71 (d, J=13.2 Hz, 1H), 1.56 (br. s., 3H), 1.54-1.50 (m, 1H), 1.31 (d, J=8.8 Hz, 2H), 1.03 (d, J=13.2 Hz, 1H), 0.51 (br. s., 1H), 0.41 (br. s., 2H), 0.25 (br. s., 1H). SFC retenciono vreme: 39 min.

Primer 417

5-{7-Metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-pirazol

[0882]

Korak 1: 5-Bromo-2-(4-(metilsulfonil)fenil)-3-nitropiridin

[0883] U smešu PdCl2(dppf)-CH2Cl2adukta (0.732 g, 1.00 mmol), kalijum fosfata (21.2 g, 100 mmol), (4-(metilsulfonil)fenil)boronske kiseline (10.0 g, 50.0 mmol), i 2,5-dibromo-3-nitropiridina (14.1 g, 50.0 mmol) u THF-u (100 mL) uvedeni su mehurići N2(g) tokom 10 min. Boca pod pritiskom je zatvorena i zagrevana na 80 °C u uljanom kupatilu tokom 3 h. Smeša je ohlađena i ulivena u vodu i EtOAc, zatim filtrirana kroz sloj Celite. Organski sloj je opran sa vodom i slanim rastvorom, zatim osušen preko natrijum sulfata da se dobije čvrsta supstanca, koja je oprana temeljno sa Et2O da se dobije 7.40 g.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.99 (d, J=2.3 Hz, 1H), 8.43 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.10-8.02 (m, 2H), 7.78-7.72 (m, 2H), 3.13 (s, 3H). LC/MS Metoda 1; RT = 1.8 min., M+H = 356.

Korak 2: 3-Bromo-7-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indol

[0884] Posuda sa okruglim dnom od 100 mL je napunjena sa 5-bromo-2-(4-(metilsulfonil)fenil)-3-nitropiridinom (2.00 g, 5.60 mmol), trifenilfosfinom (3.67 g, 14.0 mmol), i 1,2-dihlorobenzenom (50 mL). Posuda je postavljena u uljanom kupatilu, posuda je zatvorena sa kondenzatorom i zagrejana na 170 °C tokom 1.5 h. Isparljive supstance su uklonjene pod visokim vakuumom 70 °C, zatim pod strujom azota tokom 36 h da se dobije crno ulje. Ostatak je rastvoren u metilen hloridu i prečišćen na ISCO koloni od 220 g, eluiranjem sa 100% metilen hlorida do 40% EtOAc/metilen hlorid tokom 1800 mL, zatim 40% EtOAc/metilen hlorid do 80% EtOAc/metilen hlorid tokom 1800 mL. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su koncentrovane da se dobije 920 mg svetlo drap čvrste supstance.

<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 12.07 (s, 1H), 8.66 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.44 (d, J=8.3 Hz, 1H), 8.37 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.30-8.12 (m, 1H), 7.82 (dd, J=8.2, 1.6 Hz, 1H), 3.31 (s, 3H). LC/MS Metoda 2; RT = 0.92 min. M+H = 325.

4

Korak 3: (S)-3-Bromo-7-(metilsulfonil)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol

[0885] 3-Bromo-7-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indol (0.920 g, 2.83 mmol), (R)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol (0.816 g, 4.24 mmol), i trifenilfosfin (1.11 g, 4.24 mmol) su rastvoreni u 100 mL THF-a i ohlađeni do 0 °C. Ovome je dodat DIAD (0.825 ml, 4.24 mmol) u kapima putem igle veličine 18 „gauge“. Nakon 15 min, ledeno kupatilo je uklonjeno, i reakcija je mešana još 1 sat duže. Isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom, i sirov materijal je rastvoren u metilen hloridu i prečišćen na ISCO koloni od 80 g, eluiranjem sa 0% EtOAc/metilen hlorid do 40% EtOAc/metilen hlorid tokom 800 mL. Frakcije koje sadrže proizvod su koncentrovane da se dobije 1.52 g kao svetlo braon čvrsta supstanca. LC/MS Metoda 2 prikazala je glavni pik sa masama konzistentnim sa jedinjenjem iz naslova u 32% čistoće; RT = 1.17 min. M+H = 499.

Korak 4: 5-{7-Metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-pirazol

[0886] (S)-3-Bromo-7-(metilsulfonil)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol (80.0 mg, 0.0800 mmol) i 1,4-dimetil-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol (35.6 mg, 0.160 mmol) su rastvoreni u 2 mL DMSO. Ovome je dodat natrijum karbonat (25.5 mg, 0.240 mmol) i 0.1 mL vode. Argon je u mehurićima propušten kroz ovu smešu tokom 5 min pre dodavanja PdCl2(dppf)-CH2Cl2adukta (6.54 mg, 8.01 µmol), i zatim je penušala u argonu tokom sonifikacije 30 sekundi. Bočica je zatvorena i zagrevana u mikrotalasnoj na 150 °C tokom 15 min. Sirov materijal je prečišćen putem preparativne LC/MS (Preparativna HPLC Metoda 1): Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja. Prinos proizvoda bio je 14.1 mg (33%), i njegova procenjena čistoća pomoću LCMS analize bila je 98%. Dva analitička LC/MS ubrizgavanja su korišćena da se odredi finalna čistoća. Uslovi ubrizgavanja 1 LC/MS Metoda 3; HPLC RT = 1.67 min. Uslovi ubrizgavanja 2: LC/MS Metoda 4; HPLC RT = 2.51 min.<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.74 (br. s., 1H), 8.60 (s, 1H), 8.48 (d, J=8.4 Hz, 2H), 7.96 (s, 1H), 7.87 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.69 (d, J=7.7 Hz, 3H), 7.46 (s, 1H), 7.38-7.30 (m, 3H), 7.30-7.21 (m, 1H), 6.03 (d, J=11.0 Hz, 1H), 3.95-3.86 (m, 2H), 3.73 (d, J=8.4 Hz, 1H), 3.57-3.43 (m, 2H), 3.37 (br. s., 1H), 3.27 (t, J=12.1 Hz, 1H), 2.90 (s, 3H), 2.74 (s, 3H), 2.03 (s, 3H), 1.81-1.69 (m, 1H), 1.68-1.54 (m, 1H), 1.45-1.28 (m, 1H).

Primer 418

5-{7-Metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1-metil-1H-pirazol

[0887]

[0888] (S)-3-Bromo-7-(metilsulfonil)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol (40.0 mg, 0.0400 mmol) i 1-metil-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol (16.7 mg, 0.0800 mmol) su rastvoreni u 2 mL DMSO. Ovome je dodat natrijum karbonat (12.7 mg, 0.120 mmol) i 0.1 mL vode. Argon je u mehurićima propušten kroz reakcionu smešu tokom 5 min tokom sonifikovanja. Ovome je dodat PdCl2(dppf)-CH2Cl2adukt (3.27 mg, 4.00 µmol) i penušala je u argonu tokom sonifikovanja tokom 30 sekundi. Bočica je zagrejana u mikrotalasnoj na 150 °C tokom 15 min. Reakcija je filtrirana i prečišćena putem preparativne LC/MS (Preparativna HPLC Metoda 2). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja. Prinos proizvoda je 3.10 mg (16%), i njegova procenjena čistoća pomoću LCMS analize bila je 100%. Dva analitička LC/MS ubrizgavanja su korišćena da se odredi finalna čistoća. Uslovi ubrizgavanja 1: LC/MS Metoda 3; HPLC RT = 1.54 min. Uslovi ubrizgavanja 2: LC/MS Metoda 4; HPLC RT = 2.48 min.<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.69 (s, 1H), 8.55 (br. s., 1H), 8.47 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.86 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.70 (d, J=7.7 Hz, 2H), 7.60 (s, 1H), 7.40-7.32 (m, 2H), 7.28 (d, J=7.7 Hz, 1H), 6.64 (s, 1H), 6.03 (d, J=11.0 Hz, 1H), 3.91 (br. s., 3H), 3.72 (d, J=10.3 Hz, 1H), 3.56-3.45 (m, 2H), 3.35 (d, J=5.5 Hz, 3H), 3.26 (t, J=11.4 Hz, 1H), 1.80-1.69 (m, 1H), 1.63 (d, J=9.5 Hz, 1H), 1.37 (d, J=12.5 Hz, 1H).

Primer 419

1-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]ciklopropan-1-ol

[0889]

Korak 1: Metil 4-(5-bromo-3-nitropiridin-2-il)benzoat

[0890] Posuda 24/40 od 500 mL sa okruglim dnom je napunjena sa 2,5-dibromo-3-nitropiridinom (8.07 g, 28.6 mmol), 4-metoksikarbonilfenilboronskom kiselinom (4.97 g, 27.6 mmol), THF (143 mL), 1,1'-bis(difenilfosfino)ferocendihloropaladijumom(II) (1.05 g, 1.43 mmol) i kalijum fosfatom trobaznim (2M, 11.6 mL, 23.1 mmol). Posuda je zatvorena gumenim čepom, i reakciona smeša je degasirana primenom ultra čistog argona i sonifikovana tokom 5 min. Posuda je preneta u uljano kupatilo prethodno zagrejano na 65 °C i tu je ostavljena 4 h. Smeša je kvenčovana sa vodom, razblažena sa etil acetatom, i filtrirana kroz Celite jastuče. Sadržaj posude je prebačen u levak za odvajanje i slojevi su razdvojeni. Organski je opran sa vodom (2X) i slanim rastvorom (2X). Kombinovani vodeni je ponovo ekstrahovan sa etil acetatom, i vodeni je odbačen. Kombinovane organske supstance su osušene sa magnezijum sulfatom, koncentrovane pod sniženim pritiskom, i prečišćene silika gel kolonskom hromatografijom (80 g ISCO RediSep Rf, nanete na/sa: DCM i osušene, početni otpad: 0 mL, veličina frakcije: 9 mL 13x100 mm, i eluiran sa dihlorometanom u heksanima 0% [200 mL], 0-20% [300 mL], 20% [1000 mL], 20-50% [500 mL], 50% [300 mL]) da se dobiju 1.39 g (59%).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.95 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.36 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.18-8.11 (m, 2H), 7.66-7.58 (m, 2H), 3.96 (s, 3H). Pronađena masa 337 [M+H]<+>.

Korak 2: Metil 3-bromo-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0891] Posuda 14/20 od 100 mL sa okruglim dnom je napunjena sa metil 4-(5-bromo-3-nitropiridin-2-il)benzoatom (6.68 g, 19.81 mmol) i 1,2-bis(difenilfosfino)etanom (9.87 g, 24.8 mmol). Smeša je suspendovana u 1,2-dihlorobenzenu (20 mL) i posuda je zatvorena i provetrena sa balonom punim azota. Posuda je postavljena u uljanom kupatilu koje je prethodno zagrejano na 160 °C i ostavljena tamo tokom 1 h. Nakon hlađenja, rastvor je razblažen sa etrom, proizvodeći braon talog koji je uklonjen filtracijom i odbačen. Supernatant je koncentrovan pod sniženim pritiskom i prečišćen silika gel kolonskom hromatografijom (80 g ISCO RediSep Rf, nanet na/sa: DCM i osušen, početni otpad: 0 mL, veličina frakcije: 9 mL 13x100 mm, i eluiran sa dihlorometanom u heksanima 0% [200 mL], 0-100% [300 mL], 100% [1500 mL]) da se dobije 2.80 g (46%) kao bež čvrsta supstanca.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.95 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.36 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.18-8.11 (m, 2H), 7.66-7.58 (m, 2H), 3.96 (s, 3H). Pronađena masa305 [M+H]<+>.

Korak 3: Metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0892] Bočica od 40 mL pod pritiskom je napunjena sa 1,4-dimetil-5-(tributilstanil)-1H-1,2,3-triazolom (3.90 g, 10.1 mmol) i razblažena sa DMF-om (23 mL). Tom rastvoru je dodat metil 3-bromo-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (2.80 g, 9.18 mmol), bakar(I) jodid (0.262 g, 1.38 mmol), trietilamin (2.56 mL, 18.4 mmol) i Pd(Ph3P)4(0.636 g, 0.551 mmol). Bočica je zatvorena, i reakciona smeša je degasirana primenom ultra čistog argona i sonifikovana tokom 3 min. Nakon toga, bočica je postavljena u reakcioni blok unapred zagrejan na 100 °C. Nakon 30 min, smeša je razblažena sa etil acetatom i vodom, i sadržaj bočice je filtriran kroz Celite jastuče. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i prečišćena silika gel kolonskom hromatografijom (40 g ISCO RediSep Rf, naneta na/sa: DCM i osušena, početni otpad: 0 mL, veličina frakcije: 9 mL 13x100 mm, i eluiran sa acetonom u DCM 0% [100 mL], 0-30% [150 mL], 30% [300 mL], 30-60% [500 mL], 60% [200 mL]) da se dobije 1.75 g (59 %) kao svetlo drap čvrsta supstanca.<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 11.94 (s, 1H), 8.61 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.35 (dd, J=8.3, 0.5 Hz, 1H), 8.25 (dd, J=1.4, 0.6 Hz, 1H), 8.16 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.90 (dd, J=8.2, 1.4 Hz, 1H), 4.02 (s, 3H), 3.93 (s, 3H), 2.30 (s, 3H). Pronađena masa 321 [M+H]<+>.

Korak 4: (S)-Metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0893] Posuda 24/40 od 50 mL sa okruglim dnom je napunjena sa metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilatom (250 mg, 0.778 mmol), (R)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanolom (299 mg, 1.56 mmol), i trifenilfosfinom (408 mg, 1.56 mmol). Smeša je suspendovana u THF-u (7780 µL) i ohlađena do 0 °C. Di-terc-butil azodikarboksilat (358 mg, 1.56 mmol) je dodat u 1 deo. Nakon 30 min na 0 °C, reakcija je zagrejana do sobne temperature i reakcija se polako pretvorila u tamno crveno. Nakon 30 min na sobnoj temperaturi, reakciona smeša je kvenčovana sa TFA (300 µL, 3.89 mmol) i mešana tokom 30 min. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, razblažena sa etil acetatom, i neutralizovana primenom 1.5M kalijum fosfata. Sadržaj je prenet u levak za odvajanje, i slojevi su razdvojeni. Organski je opran sa slanim rastvorom, osušen preko magnezijum sulfata, koncentrovan pod sniženim pritiskom, i prečišćen silika gel kolonskom hromatografijom (24g ISCO RediSep Rf, nanet na/sa: DCM i osušen, veličina frakcije: 21 mL 16x150 mm, i eluiran sa acetonom u dihlorometanu 0% [50 mL], 0-20% [200 mL], 20% [150 mL], 20-30% [150 mL], 30% [350 mL]). Prikupljene frakcije će dati 338 mg (88 %).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.51 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.47 (d, J=8.3 Hz, 1H), 8.10 (dd, J=8.3, 1.3 Hz, 1H), 7.63 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.46 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.40-7.29 (m, 3H), 5.63 (d, J=10.5 Hz, 1H), 4.11-4.01 (m, 4H), 3.92-3.82 (m, 4H), 3.61-3.51 (m, 1H), 3.41-3.31 (m, 1H), 3.12 (q, J=11.3 Hz, 1H), 2.30 (s, 3H), 2.05 (d, J=13.3 Hz, 1H), 1.71-1.52 (m, 2H), 1.51-1.37 (m, 1H), 1.09 (d, J=12.3 Hz, 1H). Pronađena masa 495 [M+H]<+>.

Korak 5: (S)-Metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat

[0894] Posuda 14/20 od 15 mL sa okruglim dnom je napunjena sa titanikum(IV) izopropoksidom (29.6 µL, 0.101 mmol) i razblažena sa THF-om (1000 µL). Tom rastvoru je dodat (S)-metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilat (100 mg, 0.202 mmol). Etil magnezijum bromid (1.0M u THF-u, 1210 µL, 1.210 mmol) je zatim dodat na sobnoj temperaturi. Nakon 20 min, reakciona smeša je kvenčovana sa metanolom i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen putem preparativne LC/MS u sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 25-65% B tokom 15 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije su prikupljene da se dobije 8.3mg (8.17%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.49 (s, 1H), 8.39 (br. s., 1H), 8.12 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.95 (br. s., 1H), 7.65 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.36-7.29 (m, 2H), 7.27-7.21 (m, 1H), 7.15 (d, J=7.0 Hz, 1H), 6.17 (s, 1H), 5.80 (d, J=11.4 Hz, 1H), 4.05-3.94 (m, 3H), 3.89 (d, J=10.6 Hz, 1H), 3.73 (d, J=8.8 Hz, 1H), 3.47 (t, J=11.2 Hz, 1H), 3.42-3.31 (m, 1H), 3.26 (t, J=11.0 Hz, 1H), 2.34-2.23 (m, 3H), 1.71 (d, J=13.2 Hz, 1H), 1.61-1.50 (m, 1H), 1.38-1.08 (m, 5H), 0.99 (d, J=12.5 Hz, 1H). Pronađena masa 494 [M+H].

Primer 420

1,4-Dimetil-5-{5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-7-(prop-1-en-2-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1H-1,2,3-triazol

[0895]

Korak 1: 5-Bromo-2-(4-hlorofenil)-3-nitropiridin

[0896] 24/40-trogrla posuda od 500 mL sa okruglim dnom je napunjena sa 2,5-dibromo-3-nitropiridinom (12.1 g, 42.9 mmol) i (4-hlorofenil)boronskom kiselinom (7.48 g, 47.8 mmol). Smeša je suspendovana sa THF-om (150 mL) i kalijum fosfatom trobaznim, (2M, 42.9 mL, 86.0 mmol). PdCl2(dppf) (0.314 g, 0.429 mmol) je dodat, i posuda je zatvorena i degasirana primenom sonifikovanja i ultra čistog argona tokom 5 min. Smeša je zagrejana do 65 °C. Nakon 2 h, sadržaj posude je prenet u posudu od 1L sa okruglim dnom i koncentrovana je pod sniženim pritiskom. Dobijena crna kaša je razblažena sa etil acetatom i vodom i filtrirana kroz Celite jastuče. Sadržaj posude je prebačen u levak za odvajanje, i organska supstanca je oprana sa slanim rastvorom (3X). Organske supstance su osušene sa magnezijum sulfatom, koncentrovane pod sniženim pritiskom, i prečišćene silika gel kolonskom hromatografijom (120 g ISCO RediSep Rf, nanete na/sa: DCM i osušene, veličina frakcije: 18 mL 16x150 mm, i eluiran sa dihlorometan u heksanima 0% [300 mL], 0-20% [450 mL], 20% [1503 mL], 20-50% [756 mL], 50% [450 mL]). Frakcije su prikupljene do 10.8 g (80%). Konzistentan<1>H NMR je poželjan.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.92 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.31 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.53-7.43 (m, 4H). Pronađena masa 314 [M+H]<+>.

Korak 2: 3-Bromo-7-hloro-5H-pirido[3,2-b]indol

[0897] Posuda 24/40 od 250 mL sa okruglim dnom je napunjena sa 5-bromo-2-(4-hlorofenil)-3-nitropiridinom (8.83 g, 28.2 mmol) i 1,2-bis(difenilfosfino)etanom (22.4 g, 36.6 mmol). Smeša je suspendovana u 1,2-dihlorobenzenu (60 mL). Posuda je zatvorena i ispuštena u balon napunjen azotom. Reakcioni sud je postavljen u uljanom kupatilu koje je prethodno zagrejano na 160 °C. Nakon 2 h, smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobila crna kaša. Kaša je suspendovana u DCM-u, što je dalo sivi talog koji je prikupljen filtracijom da se dobije 1.5 g proizvoda. Supernatant je nanet na kolonu i prečišćen silika gel kolonskom hromatografijom (80 g ISCO RediSep Rf, naneto na/sa: DCM i osušen, početni otpad: 0 mL, veličina frakcije: 9 mL 13x100 mm, i eluiran sa dihlorometanom u heksanima 0% [200 mL], 0-100% [300 mL], 100% [1500 mL]). Frakcije su prikupljene i kombinovane sa proizvodom koji je prethodno prikupljen da se dobije 3.17 g (40%).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 11.75 (br. s., 1H), 8.56 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.22 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.19 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.69 (d, J=1.5 Hz, 1H), 7.32 (dd, J=8.3, 1.8 Hz, 1H). Pronađena masa 280 [M+H]<+>.

Korak 3: 7-Hloro-3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol

[0898] Bočica od 40 mL pod pritiskom je napunjena sa 1,4-dimetil-5-(tributilstanil)-1H-1,2,3-triazolom (5.10 g, 13.2 mmol) i razblažena sa DMF (16.5 mL). Tom rastvoru je dodat 3-bromo-7-hloro-5H-pirido[3,2-b]indol (1.86 g, 6.61 mmol), bakar(I) jodid (0.189 g, 0.991 mmol), trietilamin (1.01 mL, 7.27 mmol), i Pd(Ph3P)4(0.229 g, 0.198 mmol), redom. Bočica je zatvorena i degasirana primenom sonifikovanja i ultra čistog argona tokom 2 min. Bočica je postavljena u reakcioni blok koji je prethodno zagrejan na 100 °C. Nakon 45 min, smeša je razblažena sa etil acetatom i vodom i filtrirana kroz Celite jastuče. Sadržaj posude je prebačen u levak za odvajanje i dalje razblažen sa etil acetatom i slanim rastvorom. Slojevi su razdvojeni, i organski je opran sa vodom (2X) i slanim rastvorom (2X). Kombinovani vodeni je ekstrahovan sa etil acetatom (2X), i vodeni je odbačen. Kombinovani organski slojevi su oprani sa slanim rastvorom (2X), osušeni sa magnezijum sulfatom, i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je suspendovan u DCM-u da bi se dobila žuta čvrsta supstanca, koja je prikupljena filtracijom da se dobije 520 mg željenog proizvoda. Supernatant je prečišćen pomoću silika gel kolonske hromatografije (40 g ISCO RediSep Rf, nanet na/sa: DCM i osušen, početni otpad: 38 mL, veličina frakcije: 9 mL 13x100 mm, i eluiran sa acetonom u dihlorometanu 0% [151 mL], 0-100% [501 mL], 100% [250 mL]). Frakcije su prikupljene i kombinovane sa proizvodom prethodno prikupljenim da se dobije 1.56 (79%).

<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.68 (br. s., 1H), 8.53 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.32 (d, J=8.5 Hz, 1H), 7.70 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.56 (d, J=1.3 Hz, 1H), 7.37 (dd, J=8.5, 1.8 Hz, 1H), 4.04 (s, 3H), 2.39 (s, 3H). Pronađena masa 298 [M+H]<+>.

Korak 4: (S)-7-Hloro-3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol

[0899] Posuda 24/40 od 100 mL sa okruglim dnom je napunjena sa 7-hloro-3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indolom (250 mg, 0.840 mmol), trifenilfosfinom (440 mg, 1.68 mmol), i (R)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanolom (242 mg, 1.26 mmol). Smeša je rastvorena u THF-u (8397 µL) i ohlađena do 0 °C. Di-terc-butil azodikarboksilat (387 mg, 1.68 mmol) je dodat u jednom delu. Nakon 15 min, ledeno kupatilo je uklonjeno. Nakon 1 h, smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i prečišćena silika gel kolonskom hromatografijom (24g ISCO RediSep Rf, naneta na/sa: DCM i osušena, početni otpad: 0 mL, veličina frakcije: 9 mL 13x100 mm, i eluirana sa acetonom u dihlorometanu 0% [75 mL], 15% [102 mL], 20% [150 mL], 20-60% [402 mL]). Frakcije su prikupljene da se dobiju 286 mg (72%).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.46 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.32 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.71 (d, J=1.5 Hz, 1H), 7.58 (d, J=1.5 Hz, 1H), 7.46-7.41 (m, 2H), 7.40-7.30 (m, 4H), 5.45 (d, J=10.5 Hz, 1H), 4.06 (dd, J=11.7, 2.9 Hz, 1H), 3.92-3.84 (m, 4H), 3.55 (td, J=11.8, 2.0 Hz, 1H), 3.36 (td, J=11.9, 2.0 Hz, 1H), 3.14-3.00 (m, 1H), 2.29 (s, 3H), 2.03 (d, J=14.1 Hz, 1H), 1.67-1.53 (m, 1H), 1.50-1.34 (m, 1H), 1.10 (d, J=13.3 Hz, 1H). Pronađena masa 472 [M+H]<+>.

1

Korak 5: 1,4-Dimetil-5-{5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-7-(prop-1-en-2-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1H-1,2,3-triazol

[0900] Bočica za mikrotalasnu od 2-5 mL je napunjena sa dioksanom (10.1 mL) i tricikloheksilfosfinom (20 masenih procenata u toluenu, 0.784 mL, 0.503 mmol). Toj smeši je dodat (S)-7-hloro-3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol (475 mg, 1.01 mmol), cezijum karbonat (656 mg, 2.01 mmol), Pd2(dba)3(230 mg, 0.252 mmol), i pinakolni estar izopropenilboronske kiseline (338 mg, 2.01 mmol). Bočica je zatvorena, i reakciona smeša je degasirana primenom sonifikovanja i ultra čistog argona tokom 2 min. Bočica je postavljena u uljanom kupatilu koje je prethodno zagrejano na 130 °C. Nakon 4 h, smeša je ohlađena do sobne temperature i filtrirana kroz Celite jastuče, koncentrovana pod sniženim pritiskom, i prečišćena silika gel kolonskom hromatografijom (40 g ISCO RediSep Rf, naneta na/sa: DCM i osušena, početni otpad: 0 mL, veličina frakcije: 9 mL 13x100 mm, i eluirana sa acetonom u dihlorometanu 0% [105 mL], 15% [201 mL], 20% [201 mL], 30% [201 mL], 30-100% [402 mL]). Frakcije su prikupljene da se dobije 390 mg (81%).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.45 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.35 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.56 (td, J=4.1, 1.3 Hz, 2H), 7.48-7.42 (m, 2H), 7.40-7.29 (m, 3H), 5.57 (s, 1H), 5.28 (t, J=1.4 Hz, 1H), 4.07 (d, J=12.0 Hz, 1H), 3.92-3.83 (m, 5H), 3.61-3.51 (m, 1H), 3.41-3.29 (m, 1H), 3.10 (q, J=11.1 Hz, 1H), 2.36-2.26 (m, 5H), 2.10-1.99 (m, 1H), 1.71-1.53 (m, 2H), 1.50-1.38 (m, 1H), 1.13 (d, J=13.3 Hz, 1H). Pronđena masa 477 [M+H]<+>.

Primer 421

1-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]etan-1-on

[0901]

[0902] Bočica pod pritiskom od 40 mL je napunjena sa (S)-3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-7-(prop-1-en-2-il)-5H-pirido[3 ,2-b]indolom (200 mg, 0.419 mmol) i rastvorena u 1,4-dioksanu (4188 µL). Tom mešanom rastvoru je dodata voda (4188 µL) što je praćeno sa natrijum perjodatom (269 mg, 1.26 mmol) i osmijum tetroksidom 2.5 masenih procenata u t-butanolu (500 µL, 0.0400 mmol). Reakciona smeša je

2

mešana tokom noći. Nakon 18.5 h, sadržaj bočice je prenet u levak za odvajanje, i smeša je razblažena sa DCM i vodom. Slojevi su razdvojeni, vodeni je ekstrahovan sa DCM (2X), i vodeni je odbačen. Kombinovane organske supstance su osušene sa magnezijum sulfatom, koncentrovane pod sniženim pritiskom, i prečišćene silika gel kolonskom hromatografijom (24g ISCO RediSep Rf, nanete na/sa: DCM i osušene, početni otpad: 12 mL, veličina frakcije: 9 mL 13x100 mm, i eluirane sa acetonom u dihlorometanu 0% [75 mL], 0-100% [300 mL], 100% [150 mL]). Frakcije su prikupljene frakcije da se dobije 112 mg (56%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.71 (br. s., 1H), 8.62 (s, 1H), 8.53 (br. s., 1H), 8.34 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.91 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.70 (d, J=7.7 Hz, 2H), 7.37-7.30 (m, 2H), 7.28-7.21 (m, 1H), 6.02 (d, J=11.4 Hz, 1H), 4.01 (s, 3H), 3.94-3.85 (m, 1H), 3.72 (d, J=8.4 Hz, 1H), 3.47 (q, J=11.1 Hz, 2H), 3.25 (t, J=11.4 Hz, 1H), 2.78 (s, 3H), 2.30 (s, 3H), 1.76-1.70 (m, 1H), 1.69-1.55 (m, 1H), 1.43-1.29 (m, 1H), 0.96 (d, J=12.8 Hz, 1H). Pronađena masa 480 [M+H]<+>.

Primeri 422 i 423

1-Ciklopropil-1-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]etan-1-ol

[0903]

Korak 1: 1-Ciklopropil-1-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil] -5H-pirido [3,2-b]indol-7-il]etan-1-ol

[0903] Mikrotalasna bočica 2.0-5.0 osušena na plamenu je napunjena sa 1-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]etan-1-onom (75.0 mg, 0.156 mmol) i zatvorena. Bočica je ispražnjena i pročišćena sa azotom. THF (1 mL) je dodat i smeša je ohlađena do -78 °C. Ciklopropilmagnezijum bromid 1.0M u 1-metiltetrahidrofuranu (0.938 mL, 0.938 mmol) je dodat u kapima pretvarajući rastvor iz žute u braon boju. Nakon 15 min, bočica je uklonjena iz ledenog kupatila i dozvoljeno joj je da se zagreje do sobne temperature. Nakon 2.5 h, reakcija je kvenčovana sa zasićenim rastvor vod. amonijum hlorida i razblažena sa etil acetatom. Sadržaj posude je prebačen u levak za odvajanje, i slojevi su razdvojeni. Organski je opran sa slanim rastvorom, osušen sa magnezijum sulfatom, koncentrovan pod sniženim pritiskom, i prečišćen primenom fleš hromatografije sa silika gelom (4g ISCO RediSep Rf, nanet na/sa: DCM i osušen, početni otpad: 0 mL, veličina frakcije: 9 mL 13x100 mm, i eluiran sa acetonom u dihlorometanu 0% [51 mL], 0-60% [501 mL], 60% [99 mL]). Frakcije su prikupljene da se dobije željeni proizvod kao dijastereomerna smeša. Smeša je izdvojena hiralnom SFC: Hiralna OJ-H prep kolona, 30 x 250 mm, 5 mm, Mobilna faza: 10% MeOH u CO2, 150 bar,Temp: 35 °C, Brzina protoka: 70 mL/min tokom 46 min. UV je praćen pri 270 nm. Ubrizgavanje: 0.75 mL od približno 5mg/mL u MeOH-u (20 mg prečišćeno naslaganom injekcijom) da se dobiju Enantiomer A (9.10 mg, 17%) i Enantiomer B (10.5 mg, 19%). Enantiomer A:<1>H NMR (400MHz, METANOL-d) δ 8.44 (d, J=1.5 Hz, 1H), 8.32-8.21 (m, 2H), 8.12 (s, 1H), 7.62 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.53 (dd, J=8.4, 1.1 Hz, 1H), 7.38-7.30 (m, 2H), 7.30-7.22 (m, 1H), 5.76 (d, J=11.0 Hz, 1H), 4.00 (s, 4H), 3.87-3.78 (m, 1H), 3.65-3.55 (m, 1H), 3.45-3.34 (m, 2H), 2.32 (s, 3H), 1.96 (d, J=12.8 Hz, 1H), 1.71-1.55 (m, 4H), 1.49-1.20 (m, 2H), 1.12 (d, J=13.3 Hz, 1H), 0.89 (d, J=7.3 Hz, 1H), 0.53 (t, J=6.8 Hz, 2H), 0.50-0.38 (m, 2H). SFC retenciono vreme 33.12 min. Pronađena masa 521 [M+H]<+>. Enantiomer B:<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 8.44 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.31-8.25 (m, 2H), 8.13 (s, 1H), 7.63 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.56 (dd, J=8.3, 1.3 Hz, 1H), 7.38-7.31 (m, 2H), 7.29-7.23 (m, 1H), 5.76 (d, J=11.0 Hz, 1H), 4.03-3.94 (m, 4H), 3.82 (dd, J=11.4, 2.9 Hz, 1H), 3.59 (td, J=11.9, 1.9 Hz, 1H), 3.45-3.34 (m, 2H), 2.32 (s, 3H), 1.95 (d, J=12.8 Hz, 1H), 1.71-1.54 (m, 4H), 1.50-1.33 (m, 2H), 1.12 (d, J=12.8 Hz, 1H), 0.96-0.82 (m, 1H), 0.61-0.51 (m, 2H), 0.50-0.38 (m, 2H). SFC retenciono vreme 40.02 min. Pronađena masa 521 [M+H]<+>.

Primer 424

2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-1,2-diol

[0905]

[0906] Scintilaciona bočica od 20 mL je napunjena sa 1,4-dimetil-5-{5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-7-(prop-1-en-2-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1H-1,2,3-triazolom (100 mg, 0.209 mmol), koji je naknadno suspendovan u n-PrOH (2094 µL). Toj suspenziji je dodat NMO 50% u H20 (66.3 µL, 0.314 mmol) što je praćeno sa 4% osmijum tetroksida u H2O (133 µL, 0.0210 mmol). Nakon približno 5 min, reakciona smeša postaje homogena. Nakon

4

2.5 h, isparljive supstance su uparene primenom struje azota, i dobijeno žuto ulje je razblaženo sa etil acetatom i vodom i prebačeno je u levak za odvajanje gde su slojevi razdvojeni. Organski je opran sa vodom i slanim rastvorom. Kombinovani vodeni je ekstrahovan sa etil acetatom (2X) i vodeni je odbačen. Kombinovane organske supstance su osušene sa magnezijum sulfatom, koncentrovane pod sniženim pritiskom, i prečišćene kolonskom hromatografijom sa silika gelom (4g ISCO RediSep Rf, nanete na/sa: DCM i osušene, početni otpad: 0 mL, veličina frakcije: 6 mL 13x100 mm, i eluirane sa acetonom u dihlorometanu 0% [30 mL], 0-100% [201 mL], 100% [100 mL]). Prikupljene frakcije da se dobiju 67.0 mg (63%).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ8.45 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.39 (d, J=8.0 Hz, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.58 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.45 (d, J=7.8 Hz, 2H), 7.40-7.29 (m, 4H), 5.60 (d, J=10.3 Hz, 1H), 4.07 (d, J=8.8 Hz, 1H), 4.01-3.93 (m, 1H), 3.91-3.78 (m, 5H), 3.56 (t, J=11.9 Hz, 1H), 3.35 (t, J=11.8 Hz, 1H), 3.10 (d, J=11.0 Hz, 1H), 2.30 (s, 3H), 2.04 (d, J=11.5 Hz, 1H), 1.85-1.77 (m, 1H), 1.70 (s, 3H), 1.64 (dd, J=13.4, 4.4 Hz, 1H), 1.49-1.36 (m, 1H), 1.12 (d, J=12.8 Hz, 1H). Pronađena masa 512 [M+H].

Primer 427

1-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-8-karbonil]-3-metilazetidin-3-ol

[0907]

Korak 1: 2-Hloro-5-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)piridin-3-amin

[0908] Posuda 24/40 od 250 mL sa okruglim dnom je napunjena sa 1,4-dimetil-5-(tributilstanil)-1H-1,2,3-triazolom (5.00 g, 13.0 mmol) i razblažena sa DMF-om (43.2 mL). Tom rastvoru je dodat 5-bromo-2-hloropiridin-3-amin (5.37 g, 25.9 mmol), bakar (I) jodid (0.370 g, 1.94 mmol), trietilamin (3.61 mL, 25.9 mmol), i na kraju Pd(Ph3P)4(1.12 g, 0.971 mmol). Posuda je zatvorena i degasirana primenom ultra čistog argona i sonifikovana tokom 5 min. Posuda je postavljena u uljanom kupatilu koje je prethodno zagrejano na 100 °C. Nakon 15 h, reakciona smeša je ohlađena i filtrirana kroz Celite jastuče. Crna tečnost je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Dobijena crna kaša je razblažena sa DCM i slanim rastvorom i preneta u levak za odvajanje. Gusta emulzija onemogućila je razdvajanje slojeva.

Smeša je ponovo filtrirana kroz Celite. Slojevi su razdvojeni i organski je opran sa slanim rastvorom (2X), osušen sa magnezijum sulfatom, koncentrovan pod sniženim pritiskom, i prečišćen silika gel kolonskom hromatografijom (80 g ISCO RediSep Rf, nanet na/sa: DCM i osušen, početni otpad: 102 mL, veličina frakcije: 21 mL 16x150 mm, i eluiran sa acetonom u dihlorometanu 0% [201 mL], 0-20% [501 mL], 20-50% [1002 mL]). Frakcije su prikupljene do 898 mg (31%).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.76 (d, J=2.0 Hz, 1H), 6.96 (d, J=2.0 Hz, 1H), 4.32 (br. s., 2H), 3.97 (s, 3H), 2.33 (s, 3H). Pronađena masa 223 [M+H]<+>.

Korak 2: Metil 4-((2-hloro-5-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)piridin-3-il)amino)benzoat

[0909] Posuda 24/40 od 100 mL sa okruglim dnom je napunjena sa 2-hloro-5-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)piridin-3-aminom (300 mg, 1.34 mmol), 4-metoksikarbonilfenilboronskom kiselinom (966 mg, 5.37 mmol), i bakar(II) acetatom (609 mg, 3.35 mmol).6 g 4Å praha molekulskog sita je dodato, i bočica je zatvorena i ispražnjena i isprana sa argonom, dva puta. Toj smeši je dodat CHCl3(13.4 mL) što je praćeno piridinom (432 µL, 5.37 mmol). Zatvorena posuda je degasirana primenom vodonika i sonifikovanjem tokom 4 min, i reakcija je promešana pod atmosferom vodonika. Nakon 17 h, reakciona smeša je kvenčovana sa amonijum hidroksidom (1000 µL, 25.1 mmol) i razblažena sa hloroform. Celite i pesak su dodati da pomognu u filtraciji. Smeša je filtrirana, koncentrovana pod sniženim pritiskom, i prečišćena silika gel kolonskom hromatografijom (12 g ISCO RediSep Rf, naneto na/sa: DCM i osušen, početni otpad: 0 mL, veličina frakcije: 9 mL 13x100 mm, i eluiran sa acetonom u dihlorometanu 0% [51 mL], 5% [51 mL], 10% [150 mL], 15% [150 mL], 15-30% [252 mL]). Prikupljene frakcije daju 160 mg (33.3%).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.10-8.03 (m, 2H), 7.93 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.56 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.23-7.18 (m, 2H), 6.48 (s, 1H), 3.99 (s, 3H), 3.92 (s, 3H), 2.38-2.31 (m, 3H). Pronađena masa 357 [M+H]<+>.

Korak 3: Metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-8-karboksilat [0910] Mikrotalasna bočica od 2.0-5.0 mL je napunjena sa metil 4-((2-hloro-5-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)piridin-3-il)amino)benzoatom (276 mg, 0.771 mmol) i rastvorena u DMA (5 mL). Tom rastvoru je dodat natrijum acetat trihidrat (0.181 mL, 1.93 mmol) i bis(trifenilfosfin)paladijum(II) dihlorid (54.1 mg, 0.0770 mmol). Bočica je zatvorena i degasirana primenom ultra čistog argona i sonifikovana tokom 2 min. Reakciona smeša je postavljena u reakcionom bloku koji je prethodno zagrejan na 110 °C. Nakon 30 min, reakcija je ohlađena, i sadržaj bočice za mikrotalasnu je prenet u posudu od 100 mL sa okruglim dnom, i DMA je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo braon ulje. Sadržaj posude je prenet u levak za odvajanje i razblažen sa etil acetatom i zasićen vod. rastvorom amonijum hlorida. Kombinovane organske supstance su oprane sa slanim rastvorom (2X), osušene sa magnezijum sulfatom, koncentrovane pod sniženim pritiskom, i prečišćene silika gel kolonskom hromatografijom (12 g ISCO RediSep Rf, nanete na/sa: DCM i osušene, početni otpad: 0 mL, veličina frakcije: 9 mL 13x100 mm, i eluirane sa acetonom u dihlorometanu 0% [51 mL], 5% [51 mL], 10% [150 mL], 15% [150 mL], 15-30% [252 mL], 30-60% [500 mL]). Frakcije su prikupljene da se dobije 165 mg (67%).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 9.20-9.15 (m, 1H), 8.58 (d, J=2.0 Hz, 2H), 8.32 (dd, J=8.7, 1.6 Hz, 1H), 7.73 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.63-7.53 (m, 1H), 4.04 (s, 3H), 4.00 (s, 3H), 2.40 (s, 3H). Pronađena masa 306 [M+H]<+>.

Korak 4: (R)-Fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil metansulfonat

[0911] Posuda 24/40 od 100 mL sa okruglim dnom je napunjena sa (R)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanolom (1.07 g, 5.57 mmol) i rastvorena u DCM-u (27.8 mL). Tom rastvoru je dodat trietilamin (2.33 mL, 16.7 mmol), i smeša je ohlađena sa ledenim kupatilom do 0 °C. Mesil hlorid (0.651 mL, 8.35 mmol) je dodat u kapima. Ledenom kupatilu je dozvoljeno da istekne, i nakon 2 h smeša je kvenčovana sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata, snažno je promešana, i preneta u levak za odvajanje gde su slojevi razdvojeni. Organski je opran sa zasićenim vod. rastvorom natrijum bikarbonata, slanim rastvorom, i osušen sa magnezijum sulfatom. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom nekoliko puta primenom dietil etra da se dobije 1.51 g (100%).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.46-7.38 (m, 3H), 7.38-7.34 (m, 2H), 5.21 (d, J=9.0 Hz, 1H), 4.05 (dd, J=11.7, 3.1 Hz, 1H), 3.91 (ddd, J=11.5, 4.4, 1.1 Hz, 1H), 3.38 (td, J=11.9, 2.3 Hz, 1H), 3.29 (td, J=11.8, 2.3 Hz, 1H), 2.61 (s, 3H), 2.18-2.05 (m, 1H), 2.05-1.96 (m, 1H), 1.60-1.48 (m, 1H), 1.39-1.26 (m, 1H), 1.17-1.10 (m, 1H).

Korak 5: (S)-Metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-8-karboksilat

[0912] Bočica pod pritiskom od 2-drama je napunjena sa metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-8-karboksilatom (165 mg, 0.513 mmol) i rastvorena u DMF-u (5135 µL). Tom rastvoru je dodat cezijum karbonat (1000 mg, 3.08 mmol) što je praćeno sa (R)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metilmetansulfonatom (833 mg, 3.08 mmol). Bočica je zatvorena i smeštena u uljanom kupatilu koje je prethodno zagrejano na 40 °C. Nakon 65 h, reakciona smeša je kvenčovana sa vodom, i sadržaj bočice prebačen je u levak za odvajanje gde je razblažen sa etil acetatom i slanim rastvorom. Slojevi su razdvojeni, i organski je opran sa slanim rastvorom (2X). Kombinovani vodeni je ekstrahovan sa etil acetatom (2X), i vodeni je odbačen. Kombinovani organski slojevi su oprani sa vodom, osušeni sa magnezijum sulfatom, koncentrovani pod sniženim pritiskom, i prečišćeni silika gel kolonskom hromatografijom (12 g ISCO RediSep Rf, naneti na/sa: DCM i osušeni, početni otpad: 0 mL, veličina frakcije: 9 mL 13x100 mm, i eluiran sa acetonom u dihlorometanu 0% [51 mL], 20% [150 mL], 25% [252 mL], 25-100% [150 mL]). Frakcije su prikupljene da se dobije 147 mg (58%).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 9.16 (d, J=1.3 Hz, 1H), 8.52 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.36 (dd, J=8.8, 1.8 Hz, 1H), 7.76 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.62 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.45 (d, J=7.0 Hz, 2H), 7.40-7.29 (m, 3H), 5.56 (d, J=10.8 Hz, 1H), 4.09-4.03 (m, 1H), 4.00 (s, 3H), 3.93-3.84 (m, 4H), 3.60-3.51 (m, 1H), 3.40-3.31 (m, 1H), 3.10 (d, J=11.0 Hz, 1H), 2.30 (s, 3H), 2.09-1.99 (m, 1H), 1.68-1.58 (m, 1H), 1.44-1.35 (m, 1H), 1.10 (d, J=12.8 Hz, 1H). Pronađena masa 496 [M+H]<+>.

Korak 6: (S)-3-(1,4-Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-8-karboksilna kiselina

[0913] Posuda 24/40 od 50 mL sa okruglim dnom je napunjena sa (S)-metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-8-karboksilatom (148 mg, 0.299 mmol) i rastvorena u THF-u (2489 µL) i razblažena sa vodom (498 µL). Toj smeši je dodat kalijum hidroksid (50.3 mg, 0.896 mmol). Bočica je zatvorena sa gumenim čepom i smeštena u uljanom kupatilu koje je prethodno zagrejano na 50 °C. Nakon 17.5 h, reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Smeša je rastvorena u 2 mL vode i zakišeljena do približno pH 5 primenom 5N vod. HCl. Kako se pH približila kiselom opsegu, bela čvrsta supstanca je nataložena. Smeša je preneta u levak za odvajanje i ekstrahovana sa etil acetatom (x4), osušena sa magnezijum sulfatom, i koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije 128 mg (89%).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 9.56 (d, J=1.5 Hz, 1H), 8.59 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.43 (dd, J=8.8, 1.8 Hz, 1H), 7.81 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.67 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.46 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.41-7.30 (m, 3H), 5.59 (d, J=11.0 Hz, 1H), 4.10-4.04 (m, 1H), 3.94-3.84 (m, 4H), 3.61-3.52 (m, 1H), 3.41-3.32 (m, 1H), 3.12 (d, J=11.3 Hz, 1H), 2.32 (s, 3H), 2.06 (s, 1H), 1.70-1.56 (m, 2H), 1.46-1.40 (m, 1H), 1.12 (d, J=13.3 Hz, 1H). Pronađena masa 482 [M+H]<+>.

Korak 7: 1-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-8-karbonil]-3-metilazetidin-3-ol

[0914] Bočica od 1-drama je napunjena sa (S)-3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-8-karboksilnom kiselinom (20.0 mg, 0.0420 mmol) i rastvorena u DMF-u (500 µL). Tom rastvoru je dodat 3-metilazetidin-3-ol hidrohlorid (10.3 mg, 0.0830 mmol), Hunigova baza (14.5 µL, 0.0830 mmol), i HATU (23.7 mg, 0.0620 mmol). Nakon 1 h, smeša je razblažena sa 800 µL metanola i prečišćena pomoću preparativne HPLC: Kolona: Waters XBridge C18 100x30 mm 5u, Rastvarači: A: 95% MeCN 5% Voda B: 95% Voda 5% MeCN Pufer: 10 mm Amonijum Acetat), Brzina protoka: 30 mL/min, ubrizgavanje 1. Frakcije su prikupljene da se dobije 9.70 mg (42%).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.64 (d, J=1.5 Hz, 1H), 8.49 (d, J=1.5 Hz, 1H), 8.11 (dd, J=8.7, 1.6 Hz, 1H), 7.79 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.63 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.44 (d, J=7.0 Hz, 2H), 7.39-7.30 (m, 3H), 5.54 (d, J=10.5 Hz, 1H), 4.54-4.17 (m, 4H), 4.09-4.02 (m, 1H), 3.92-3.83 (m, 4H), 3.59-3.49 (m, 1H), 3.40-3.31 (m, 1H), 3.17-3.03 (m, 1H), 2.40 (s, 1H), 2.30 (s, 3H), 2.02 (d, J=13.6 Hz, 1H), 1.59 (s, 4H), 1.47-1.34 (m, 1H), 1.12 (d, J=12.0 Hz, 1H). Pronađena masa 550 [M+H]<+>.

Primer 428

5-[8-(3,3-Difluoroazetidin-1-karbonil)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il]-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol

[0915]

[0916] 5-[8-(3,3-Difluoroazetidin-1-karbonil)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il]-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol (14.6 mg, 63%) je pripremljen od 3,3-difluoroazetidin hidrohlorida prateći procedure analogne onima koje su opisane u sintezi 1-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-8-karbonil]-3-metilazetidin-3-ola.<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.62 (s, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.25 (br. s., 1H), 8.00-7.92 (m, 1H), 7.69 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.38-7.30 (m, 2H), 7.29-7.22 (m, 1H), 5.89 (d, J=11.4 Hz, 1H), 4.02 (br. s., 3H), 3.93-3.85 (m, 1H), 3.73 (d, J=8.4 Hz, 1H), 3.51-3.44 (m, 1H), 3.43-3.35 (m, 6H), 3.27 (t, J=11.6 Hz, 1H), 2.31 (s, 3H), 1.70 (d, J=12.8 Hz, 1H), 1.61-1.49 (m, 1H), 1.37-1.25 (m, 1H), 0.99 (d, J=11.4 Hz, 1H). Pronađena masa 556 [M+H]<+>.

Primer 429

1-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-8-karbonil]azetidin-3-ol

[0917]

[0918] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno od 3-hidroksiazetidin hidrohlorida prateći procedure analogne onima koje su opisane u sintezi 1-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-8-karbonil]-3-metilazetidin-3-ola da se dobije 20.7 mg (63%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.61 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.22 (br. s., 1H), 7.91 (d, J=6.6 Hz, 1H), 7.69 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.37-7.30 (m, 2H), 7.29-7.23 (m, 1H), 5.87 (d, J=11.4 Hz, 1H), 4.68-4.47 (m, 2H), 4.32 (br. s., 1H), 4.15 (br. s., 1H), 4.02 (br. s., 3H), 3.93-3.82 (m, 3H), 3.73 (d, J=9.2 Hz, 1H), 3.51-3.43 (m, 1H), 3.43-3.36 (m, 2H), 3.27 (t, J=11.6 Hz, 1H), 2.31 (s, 3H), 1.69 (d, J=11.7 Hz, 1H), 1.60-1.49 (m, 1H), 1.31 (d, J=9.2 Hz, 1H), 1.00 (d, J=12.5 Hz, 1H). Pronađena masa 536 [M+H]<+>.

Primer 430

5-[8-(3-Fluoroazetidin-1-karbonil)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il]-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol

[0919]

[0920] Jedinjenje iz naslova je pripremljeno od 3-fluoroazetidina prateći procedure analogne onima koje su opisane u sintezi 1-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-8-karbonil]-3-metilazetidin-3-ola da se dobije 17.2 mg (77%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.62 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.55 (br. s., 1H), 8.24 (br. s., 1H), 7.93 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.70 (d, J=7.7 Hz, 2H), 7.38-7.30 (m, 2H), 7.29-7.22 (m, 1H), 5.89 (d, J=11.0 Hz, 1H), 5.58-5.38 (m, 1H), 4.85-4.34 (m, 3H), 4.17 (br. s., 1H), 4.03 (s, 3H), 3.94-3.86 (m, 1H), 3.74 (d, J=8.1 Hz, 1H), 3.53-3.40 (m, 2H), 3.37-3.23 (m, 1H), 2.31 (s, 3H), 1.70 (d, J=12.5 Hz, 1H), 1.56 (d, J=10.3 Hz, 1H), 1.38-1.20 (d, J=12.5 Hz, 1H). Pronađena masa 538 [M+H]<+>.

Primeri 431 i 432

(1S)-1-Ciklopropil-1-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]etan-1-ol i (1R)-1-ciklopropil-1-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]etan-1-ol

[0921]

Korak 1: 5-Bromo-2-(4-hloro-3-fluorofenil)-3-nitropiridin

[0922] 24/40-trogrla posuda od 500 mL sa okruglim dnom je napunjena sa 2,5-dibromo-3-nitropiridinom (12.1 g, 42.9 mmol) i 4-hloro-3-fluorofenilboronskom kiselinom (7.48 g, 42.9 mmol). Smeša je razblažena sa THF (150 mL) i vod. kalijum fosfat trobaznim, 2.0M (42.9 mL, 86 mmol). PdCl2(dppf) (0.314 g, 0.429 mmol) je dodat, i posuda je zatvorena i degasirana primenom sonifikovanja i ultra čistog argona tokom 5 min. Smeša je zagrejana do 65 °C. Nakon 2 h, smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, razblažena sa etil acetatom i vodom, i filtrirana kroz Celite. Sadržaj bočice je prenet u levak za odvajanje, i organski je opran sa slanim rastvorom (3X), osušen sa magnezijum sulfatom, koncentrovan pod sniženim pritiskom, i prečišćen silika gel kolonskom hromatografijom (120 g ISCO RediSep Rf, nanet na/sa: DCM i osušen, veličina frakcije: 18 mL 16x150 mm, i eluiran sa dihlorometanom u heksanima 0% [300 mL], 0-20% [450 mL], 20% [1503 mL], 20-50% [756 mL], 50% [450 mL]). Samo frakcije koje sadrže čist proizvod od jednog para su prikupljene i stavljene sa strane. Preostale nečiste frakcije su prikupljene, koncentrovane pod sniženim pritiskom, i ponovo prečišćene fleš hromatografijom: (80 g ISCO RediSep Rf, nanete na/sa: DCM i osušene, početni otpad: sakupljene pomoću granične vrednosti, veličina frakcije: 18 mL 16x150 mm, i eluirane sa dihlorometanom u heksanima 0% [200 mL], 0-20% [300 mL], 20% [1000 mL], 20-50% [500 mL], 50% [275 mL]). Frakcije su kombinovane da se dobiju 10.77 g (67%).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.93 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.34 (d, J=2.0 Hz, 1H),

1

7.50 (dd, J=8.2, 7.4 Hz, 1H), 7.41 (dd, J=9.4, 2.1 Hz, 1H), 7.26-7.22 (m, 1H). Pronađena masa 331 [M+H]<+>.

Korak 2: 3-Bromo-7-hloro-6-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol i 3-bromo-7-hloro-8-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol.

[0923] Posuda pod pritiskom od 350 mL sa širokim grlom je napunjena sa 5-bromo-2-(4-hloro-3-fluorofenil)-3-nitropiridinom (10.7g, 32.5 mmol) i 1,2-bis(difenilfosfino)etanom (19.4 g, 48.7 mmol). Smeša je suspendovana u 1,2-dihlorobenzenu (65 mL). Posuda je zatvorena i smeštena u uljanom kupatilu koje je prethodno zagrejano na 160 °C. Nakon 30 min, smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Dobijene čvrste supstance su razblažene sa DCM da bi se dobila tamno čvrsta supstanca, koja je prikupljena filtracijom da se dobije 3.2 g mešavine regioizomera. Supernatant je koncentrovan pod sniženim pritiskom i prečišćen pomoću fleš hromatografije (80 g ISCO RediSep Rf, nanet na/sa: DCM i osušen, veličina frakcije: 18 mL 16x150 mm, i eluiran sa dihlorometanom u heksanima 0% [200 mL], 0-100% [500 mL], 100% [1500 mL]). Frakcije su prikupljene i kombinovane sa proizvodom koji je prethodno sakupljen. NMR je prikazala 1.5:1 odnos 8F:6F. Smeša je izdvojena hiralnom SFC: Chiralpak IB prep kolona, 30 x 250 mm, 5µm. Mobilna faza: 10% MeOH u CO2, 150 bar. Temp: 35 °C. Brzina protoka: 70 mL/min. tokom 10 min. UV praćeno pri 316 nm. Ubrizgavanje: 1.25 mL od približno 20mg/mL u 1:1:1 DMSO:MeOH:CHCl3(4.9 g prečišćeno naslaganom injekcijom). Regioizomer 1: 3-bromo-7-hloro-6-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol (1.69 g, 5.64 mmol, 17 %) je izolovan kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.65 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.30 (br. s., 1H), 8.02 (d, J=8.5 Hz, 1H), 7.96 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.33 (dd, J=8.5, 6.3 Hz, 1H). SFC retenciono vreme: 15.4 min. Pronađena masa 300 [M+H]<+>. Regioizomer 2: 3-bromo-7-hloro-8-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol (2.51 g, 8.38 mmol, 25.8 %) je izolovan kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.62 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.06 (d, J=8.5 Hz, 2H), 7.91 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.53 (d, J=5.8 Hz, 1H). SFC retenciono vreme: 19.67 min. Pronađena masa300 [M+H]<+>.

Korak 3: (S)-3-Bromo-7-hloro-6-fluoro-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol

[0924] Posuda 24/40 od 250 mL sa okruglim dnom je napunjena sa trifenilfosfinom (2.63 g, 10.0 mmol) i THF-om (30 mL) i smeštena u ledeno kupatilo. Rastvor di-terc-butil azodikarboksilata (2.31 g, 10.0 mmol) rastvoren u THF-u (5 mL) je dodat u kapima, i smeša je promešana. Nakon 30 min, (R)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol (1.93 g, 10.0 mmol) je dodat u jednom delu, i smeša je mešana tokom 30 min. 3-Bromo-7-hloro-6-fluoro-5H-

2

pirido[3,2-b]indol (1.50 g, 5.01 mmol) je dodat u malim delovima tokom 20 min na 0 °C. Nakon 15 min, ledeno kupatilo je uklonjeno. Nakon 1 h, TFA (3.86 mL, 50.1 mmol) je dodat, i smeša je mešana tokom 30 min i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Smeša je razblažena sa etil acetatom, i sadržaj posude je prenet u levak za odvajanje gde je organska supstanca neutralizovana sa 1.5M vod. rastvora kalijum fosfata. Slojevi su razdvojeni, i organske supstance su oprane sa slanim rastvorom (2X), osušene preko magnezijum sulfata, koncentrovane pod sniženim pritiskom, i prečišćene silika gel kolonskom hromatografijom (80 g ISCO RediSep Rf, naneti na/sa: DCM i osušeni, početni otpad: 0 mL, veličina frakcije: 21 mL 16x150 mm, i eluiran sa dihlorometanom u heksanima 0% [150 mL], 0-100% [500 mL], 100% [1000 mL], 2% etil acetat u DCM [500 mL]). Frakcije su prikupljene da se dobije 1.97 g (83%).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.56 (s, 1H), 8.03 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.94 (br. s., 1H), 7.55-7.43 (m, 2H), 7.41-7.28 (m, 4H), 5.92 (br. s., 1H), 4.10-3.99 (m, 1H), 3.95-3.83 (m, 1H), 3.56 (td, J=11.9, 2.1 Hz, 1H), 3.46-3.34 (m, 1H), 3.06 (br. s., 1H), 1.98 (d, J=14.1 Hz, 1H), 1.64-1.37 (m, 2H), 1.01 (d, J=13.6 Hz, 1H). Pronađena masa 473 [M+H]<+>.

Korak 4: (S)-7-Hloro-3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol

[0925] Bočica za mikrotalasnu 2.0-5.0 mL je napunjena sa 1,4-dimetil-5-(tributilstanil)-1H-1,2,3-triazolom (164 mg, 0.423 mmol) i DMF-om (3251 µL). Ovome je dodat (S)-3-bromo-7-hloro-6-fluoro-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol (154 mg, 0.325 mmol), trietilamin (49.8 µL, 0.358 mmol), i bakar(I) jodid (9.29 mg, 0.0490 mmol). Pd(Ph3P)4(28.2 mg, 0.0240 mmol) je dodat na kraju, i bočica je zatvorena i degasirana primenom ultra čistog argona i sonifikovana tokom 1 min. Bočica je postavljena u reakcionom bloku koji je prethodno zagrejan na 100 °C. Nakon 20 min, reakcija je razblažena sa vodom i etil acetatom i filtrirana kroz Celite jastuče da se ukloni crna emulzija. Filtriran rastvor je prenet u levak za odvajanje, i slojevi su razdvojeni. Organske supstance su oprane sa vodom (2X) i slanim rastvorom. Kombinovani vodeni je ekstrahovan sa etil acetatom, i vodeni je odbačen. Kombinovani organski slojevi su oprani sa slanim rastvorom, osušeni sa magnezijum sulfatom, koncentrovani pod sniženim pritiskom, i prečišćeni silika gel kolonskom hromatografijom (40 g ISCO RediSep Rf, naneti na/sa: DCM i osušeni, početni otpad: 0 mL, veličina frakcije: 18 mL 16x150 mm, i eluirani sa acetonom u dihlorometanu 0% [102 mL], 0-20% [150 mL], 20% [300 mL], 20-60% [507 mL], 60% [200 mL]). Frakcije su prikupljene da se dobije 1.10 g (89%).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.47 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.12 (dd, J=8.3, 0.5 Hz, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.49 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.447.30 (m, 4H), 6.06 (br. s., 1H), 4.10-4.01 (m, 1H), 3.93-3.86 (m, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.55 (td, J=11.9, 2.0 Hz, 1H), 3.40-3.29 (m, 1H), 3.03 (d, J=11.0 Hz, 1H), 2.05 (d, J=13.6 Hz, 1H), 1.70-1.46 (m, 5H), 1.01 (d, J=13.1 Hz, 1H). Pronađena masa 493 [M+H]<+>.

Korak 5: (S)-1-(3-(1,4-Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il)etanon

[0926] Bočica za mikrotalasnu od 10-20 mL je napunjena sa tributil(1-etoksivinil)kalajem (1.84 mL, 5.79 mmol) i rastvorena u dioksanu (19.3 mL). Ovome je dodat (S)-7-hloro-3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol (1.89 g, 3.86 mmol), cezijum karbonat (2.51 g, 7.71 mmol), Pd2(dba)3 (0.265 g, 0.289 mmol), i tricikloheksilfosfin (20 masenih procenata u toluenu, 0.901 mL, 0.579 mmol). Bočica je zatvorena i degasirana primenom ultra čistog argona i sonifikovanja tokom 1 min. Bočica je postavljena u uljanom kupatilu koje je prethodno zagrejano na 130 °C. Nakon 15 h, smeša je ohlađena do sobne temperature i HCl (3.0N, 12.9 mL, 38.6 mmol) je dodata. Nakon 30 min, smeša je filtrirana kroz Celite jastuče, kvenčovana sa 1.5M rastvorom vod. kalijum fosfata i razblažena sa etil acetatom. Sadržaj posude je prenet u levak za odvajanje gde su slojevi razdvojeni. Organske supstance su oprane sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata, zatim vodom i zatim slanim rastvorom. Kombinovane organske supstance su osušene sa magnezijum sulfatom, koncentrovane pod sniženim pritiskom, i prečišćene silika gel kolonskom hromatografijom (24g ISCO RediSep Rf, nanete na/sa: DCM i osušen, početni otpad: 0 mL, veličina frakcije: 9 mL 13x100 mm, i eluiran sa acetonom u dihlorometanu 0% [75 mL], 5% [51 mL], 10% [150 mL],10-35% [300 mL], 40% [300 mL]. Frakcije su prikupljene da se dobije 1.34 g (70%).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.51 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.22 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.84 (dd, J=8.3, 5.8 Hz, 1H), 7.60 (br. s., 1H), 7.50 (d, J=7.5 Hz, 2H), 7.43-7.36 (m, 2H), 7.34 (d, J=7.0 Hz, 1H), 6.24-6.10 (m, 1H), 4.07 (dd, J=11.9, 2.9 Hz, 1H), 3.90 (dd, J=11.8, 2.5 Hz, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.57 (td, J=11.9, 1.9 Hz, 1H), 3.36 (td, J=11.8, 1.5 Hz, 1H), 3.13-2.99 (m, 1H), 2.85 (d, J=5.3 Hz, 3H), 2.26 (s, 3H), 2.10 (d, J=15.6 Hz, 1H), 1.59 (s, 2H), 1.00 (d, J=9.5 Hz, 1H). Pronađena masa 526 [M+H]<+>.

Korak 6: (1S)-1-Ciklopropil-1-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]etan-1-ol i (1R)-1-ciklopropil-1-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]etan-1-ol

[0927] Bočica za mikrotalasnu od 10-20 mL je napunjena sa (S)-1-(3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-

4

il)etanonom (221 mg, 0.444 mmol) i zatvorena. Bočica je ispražnjena i pročišćena sa azotom. THF (2961 µL) je dodat i smeša je ohlađena do -78 °C. Ciklopropilmagnezijum bromid (1.0M u 1-metiltetrahidrofuranu, 2670 µL, 2.66 mmol) je dodat u kapima. Nakon 15 min, bočica je uklonjena iz ledenog kupatila i dopušteno je da se zagreje do sobne temperature. Nakon 2.5 h, reakcija je kvenčovana sa zasićenim rastvorom amonijum hlorida i razblažena sa etil acetatom. Sadržaj suda je prebačen u levak za odvajanje, i slojevi su razdvojeni. Organske supstance su oprane sa slanim rastvorom, osušene sa magnezijum sulfatom, koncentrovane pod sniženim pritiskom, i prečišćene silika gel kolonskom hromatografijom (12 g ISCO RediSep Rf, nanete na/sa: DCM i osušene, početni otpad: 0 mL, veličina frakcije: 9 mL 13x100 mm, i eluirane sa acetonom u dihlorometanu 0% [75 mL], 0-10% [201 mL], 15% [201 mL], 15-60% [300 mL], 60% [150 mL]). Frakcije koje sadrže oba dijastereomera su prikupljene da se dobije 189 mg. Dijastereomeri su dalje prečišćeni pomoću preparativne HPLC: Kolona: Waters XBridge C18 100x30 mm 5u, Rastvarači: A: 95:5 voda/Acetonitril; B: 95:5 Acetonitril/voda; Pufer:10 mm amonijum acetat, %B Gradijent (veme): 33% (40 min), Brzina protoka: 30 mL/min, UV praćen: 254 nm. Dijastereomeri su razdvojeni primenom hiralne SFC da se dobiju Dijastereomeri A i B: Chiralcel OJ-H prep kolona, 30 x 250 mm, 5µm; Mobilna faza: 10% MeOH u CO2, 150Bara; Temp: 35°C Brzina protoka: 70 mL/min. tokom 35 min. UV praćeno pri 220 nm. Ubrizgavanje: 0.25 mL od približno 50 mg/mL u MeOH-u. Dijastereomer A:<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.42 (s, 1H), 8.13 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.66 (dd, J=7.9, 6.7 Hz, 1H), 7.58-7.45 (m, 3H), 7.41-7.28 (m, 3H), 6.16 (br. s., 1H), 4.05 (d, J=9.3 Hz, 1H), 3.87 (d, J=9.3 Hz, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.56 (t, J=11.2 Hz, 1H), 3.40-3.29 (m, 1H), 3.05 (d, J=8.8 Hz, 1H), 2.37 (d, J=18.1 Hz, 1H), 2.24 (s, 3H), 2.07 (d, J=13.3 Hz, 1H), 1.80 (s, 3H), 1.71-1.46 (m, 3H), 1.01 (d, J=11.8 Hz, 1H), 0.70-0.57 (m, 2H), 0.53 (dd, J=8.2, 5.6 Hz, 2H). SFC retenciono vreme: 25 min. HPLC retenciono vreme: 25 min. Pronađena masa 539 [M+H]<+>. Dijastereomer B:<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.43 (d, J=1.5 Hz, 1H), 8.14 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.67 (dd, J=8.2, 6.7 Hz, 1H), 7.56-7.45 (m, 3H), 7.40-7.33 (m, 2H), 7.33-7.28 (m, 1H), 6.17 (br. s., 1H), 4.05 (dd, J=11.5, 2.5 Hz, 1H), 3.89 (dd, J=11.7, 2.4 Hz, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.56 (td, J=11.8, 1.8 Hz, 1H), 3.40-3.30 (m, 1H), 3.04 (d, J=7.8 Hz, 1H), 2.27-2.14 (m, 4H), 2.08 (d, J=13.6 Hz, 1H), 1.81 (s, 3H), 1.70-1.45 (m, 3H), 1.03 (d, J=13.1 Hz, 1H), 0.70-0.58 (m, 2H), 0.57-0.45 (m, 2H). SFC retenciono vreme 30 min. HPLC retenciono vreme: 28 min. Pronađena masa 539 [M+H]<+>.

Alternativna sinteza 3-bromo-7-hloro-6-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol

Korak 1: 5-Bromo-N-(3-hloro-2-fluorofenil)piridin-3-amin

[0928] Mikrotalasna bočica od 20 mL je napunjena sa 3-hloro-2-fluoroanilinom (473 µL, 4.22 mmol) i razblažena sa 1,4-dioksanom (16.9 mL). Tom rastvoru je dodat 3,5-dibromopiridin (1000 mg, 4.22 mmol), natrijum terc-butoksid (568 mg, 5.91 mmol), ksantfos (48.9 mg, 0.0840 mmol), i tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum(0) (38.7 mg, 0.0420 mmol). Bočica je zatvorena i degasirana primenom ultra čistog argona i sonifikovanjem tokom 1 min. Bočica je postavljena u reakcionom bloku koji je prethodno zagrejan na 80 °C. Nakon 1 h, sadržaj bočice je prenet u posudu, i isparljive supstance su koncentrovane pod sniženim pritiskom. Dobijene braon čvrste supstance su rastvorene sa etil acetatom i vodom. Sadržaj je prenet u levak za odvajanje gde su slojevi razdvojeni. Organska supstanca je oprana sa vodom i slanim rastvorom, osušena preko magnezijum sulfata, i prečišćena silika gel freš hromatografijom. Nakon rastvaranja uzorka sa DCM, bela čvrsta supstanca je opstala, prikupljena je filtracijom i oprana sa heksanima da se dobije 541 mg željenog proizvoda. Supernatant je koncentrovan pod sniženim pritiskom i prečišćen silika gel kolonskom hromatografijom (24 g ISCO RediSep Rf, nanet na/sa: DCM i osušen, početni otpad: 0 mL, veličina frakcije: 9 mL 13x100 mm, i eluiran sa etil acetatom u dihlorometanu 0% [75 mL], 0-5% [201 mL], 5% [300 mL]). Frakcije su prikupljene i kombinovane sa prethodno prikupljenim čvrstim supstancama da se dobije 921 mg (72%).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.35 (d, J=2.5 Hz, 1H), 8.31 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.58 (t, J=2.1 Hz, 1H), 7.22-7.14 (m, 1H), 7.08-7.01 (m, 2H), 5.86 (br. s., 1H). Pronađena masa 302 [M+H]<+>.

Korak 2: 3-Bromo-7-hloro-6-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol

[0929] Bočica za mikrotalasnu od 10-20 mL je napunjena sa 5-bromo-N-(3-hloro-2-fluorofenil)piridin-3-aminom (541 mg, 1.79 mmol) i rastvorena u TFA (8971 µL). Tom rastvoru je dodat paladijum (II) acetat (604 mg, 2.69 mmol). Bočica je zatvorena i smeštena u uljanom kupatilu koje je prethodno zagrejano na 85 °C. Nakon 30 min, dodatnih 200 mg (0.50 ekv.) paladijum acetata je dodato, i reakcija je mešana 1 h duže. Nakon 1 h, sadržaj bočice za mikrotalasnu je prenet u posudu sa okruglim dnom, i TFA je koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobila braon čvrsta supstanca. Čvrste supstance su rastvorene sa etil acetatom i 35 mL vodenog amonijaka (27-35%) je dodato i mešano tokom 15 min. Sadržaj je prenet u levak za odvajanje, i slojevi su razdvojeni. Organska supstanca je oprana sa slanim rastvorom (3X) i stavljena sa strane. Kombinovani vodeni je ekstrahovan sa etil acetatom (2X), i vodeni je odbačen. Kombinovane organske supstance su osušene preko magnezijum sulfata, koncentrovane pod sniženim pritiskom, i prečišćene silika gel kolonskom hromatografijom (40 g ISCO RediSep Rf, nanete na/sa: DCM i osušene, početni otpad: 0 mL, veličina frakcije: 21 mL 16x150 mm, i eluiran sa etil acetatom u dihlorometanu 0% [150 mL], 0-5% [150 mL], 5% [400 mL]). Frakcije koje sadrže proizvod su prikupljene, i isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (194 mg, 36%).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.65 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.30 (br. s., 1H), 8.02 (d, J=8.5 Hz, 1H), 7.96 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.33 (dd, J=8.5, 6.3 Hz, 1H). Pronađena masa 299 [M+H]<+>.

Primer 433 i Primer 434

(1S)-1-ciklopropil-1-{6-fluoro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}etan-1-ol i (1R)-1-ciklopropil-1-{6-fluoro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}etan-1-ol

[0930]

[0931] Dijastereomerna smeša 1-ciklopropil-1-{6-fluoro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}etan-1-ola je pripremljena u skladu sa procedurama koje su opisane za primere 431 i 432 zamenjujući 1,4-dimetil-5-(tributilstanil)-1H-1,2,3-triazol sa 4-(<2>H3)metil-1-metil-5-(tributilstanil)-1H-1,2,3-triazolom u koraku 4. Razdvajanje dijastereomerne smeše stvorene u poslednjem koraku je izvedeno primenom hiral prep SFC da se dobiju Dijastereomer A i B: ChiralCel OJ-H prep kolona, 30 x 250 mm, 5µm; Mobilna faza: 10% MeOH u CO2, 150 Bara; Temp: 35 °C Brzina protoka: 70 mL/min. tokom 35 min. UV praćeno pri 220 nm. Ubrizgavanje: 0.25 mL od približno 50 mg/mL u MeOH-u (348mg prečišćeno naslaganom injekcijom). Dijastereomer A:<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.44 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.14 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.65 (dd, J=8.3, 6.5 Hz, 1H), 7.54-7.46 (m, 3H), 7.40-7.34 (m, 2H), 7.31 (t, J=7.5 Hz, 1H), 6.16 (br. s., 1H), 4.06 (d, J=9.0 Hz, 1H), 3.90 (d, J=12.0 Hz, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.57 (t, J=10.9 Hz, 1H), 3.41-3.31 (m, 1H), 3.04 (br. s., 1H), 1.80 (s, 3H), 1.27 (s, 5H), 1.02 (d, J=13.8 Hz, 1H), 0.69-0.58 (m, 2H), 0.57-0.48 (m, 2H). SFC retenciono vreme: 25 min. Pronađena masa 543 [M+H]<+>. Dijastereomer B:<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.54 (br. s., 1H), 8.01 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.78-7.06 (m, 7H), 6.00 (br. s., 1H), 4.20-3.82 (m, 4H), 3.77 (d, J=10.3 Hz, 1H), 3.49 (t, J=11.4 Hz, 1H), 3.43-3.35 (m, 1H), 3.29 (t, J=11.6 Hz, 1H), 1.88-1.46 (m, 6H), 1.35 (d, J=9.9 Hz, 2H), 1.12 (d, J=12.5 Hz, 1H), 0.65-0.18 (m, 4H). SFC retenciono vreme 30min. Pronađena masa 543 [M+H]<+>.

Primeri 435 i 436

1-Ciklopropil-1-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-[(S)-(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]etan-1-ol

[0932]

[0933] Dijastereomerna smeša 1-ciklopropil-1-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-[(S)-(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]etan-1-ola je pripremljena u skladu sa procedurama koje su opisane za primer 431 i 432 zamenjujući (R)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol za (R)-(2-fluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol u koraku 3. Dijastereomeri stvoreni u poslednjem koraku su razdvojeni pomoću preparativne HPLC: kolona: Waters XBridge C18 100x30 mm 5u, Rastvarači: A:95:5 voda/Acetonitril; B:95:5 Acetonitril/voda; Pufer:10 mm amonijum acetat, %B Gradijent (vreme): 32% (50 min), Brzina protoka: 30 mL/min; 5 ubrizgavanje. Dijastereomer A:<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.45 (s, 1H), 8.12 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.77-7.60 (m, 3H), 7.37-7.29 (m, 1H), 7.26-7.19 (m, 1H), 7.06-6.97 (m, 1H), 6.37 (br. s., 1H), 4.10-4.02 (m, 1H), 3.96-3.81 (m, 4H), 3.59-3.50 (m, 1H), 3.43-3.29 (m, 2H), 3.17-2.99 (m, 1H), 2.43-2.34 (m, 1H), 2.29 (br. s., 3H), 1.97 (d, J=15.3 Hz, 1H), 1.80 (s, 3H), 1.59 (s, 1H), 0.97-0.81 (m, 2H), 0.70-0.56 (m, 2H), 0.50 (d, J=6.5 Hz, 2H). Pronađena masa 557 [M+H]<+>. HPLC retenciono vreme: 39 min. Dijastereomer B:<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.12 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.77-7.60 (m, 3H), 7.36-7.29 (m, 1H), 7.26-7.20 (m, 1H), 7.06-6.98 (m, 1H), 6.38 (br. s., 1H), 4.10-4.02 (m, 1H), 3.96-3.81 (m, 4H), 3.60-3.50 (m, 1H), 3.42-3.29 (m, 2H), 3.20-2.97 (m, 1H), 2.29 (br. s., 3H), 2.08-2.02 (m, 1H), 1.97 (d, J=13.6 Hz, 1H), 1.80 (s, 3H), 1.59 (br. s., 2H), 1.10 (br. s., 1H), 0.95-0.80 (m, 1H), 0.60 (t, J=7.3 Hz, 2H), 0.53 (d, J=6.5 Hz, 2H). Pronađena masa 557 [M+H]<+>. HPLC retenciono vreme: 44 min.

Primer 437 i Primer 438

1-Ciklopropil-1-{6-fluoro-5-[(S)-(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}etan-1-ol

[0934]

[0935] Dijastereomerna smeša 1-ciklopropil-1-{6-fluoro-5-[(S)-(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}etan-1-ola je pripremljena u skladu sa procedurama koje su opisane za primer 431 i 432 zamenjujući (R)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol za (R)-(2-fluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol u koraku 3 i 1,4-dimetil-5-(tributilstanil)-1H-1,2,3-triazol sa 4-(<2>H3)metil-1-metil-5-(tributilstanil)-1H-1,2,3-triazolom u koraku 4. Dijastereomeri stvoreni u poslednjem koraku su razdvojeni pomoću preparativne HPLC: Kolona: Waters XBridge C18 100x30 mm 5u, Rastvarači: A:95:5 voda/Acetonitril; B:95:5 Acetonitril/voda; Pufer: 10 mm amonijum acetat, %B Gradijent (vreme): 32% (50 min), Brzina protoka: 30 mL/min; ubrizgavanje 5. Dijastereomer A:<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.52 (br. s., 1H), 8.30-8.06 (m, 2H), 8.03-7.91 (m, 2H), 7.59 (br. s., 1H), 7.32 (d, J=8.1 Hz, 2H), 7.10 (br. s., 1H), 6.30 (br. s., 1H), 4.10 (br. s., 1H), 3.89 (br. s., 4H), 3.78 (d, J=9.9 Hz, 1H), 3.49 (t, J=11.6 Hz, 1H), 3.43-3.34 (m, 1H), 3.27 (t, J=11.6 Hz, 1H), 3.17 (br. s., 3H), 1.81 (d, J=12.5 Hz, 1H), 1.73 (br. s., 3H), 1.54 (br. s., 1H), 1.39 (br. s., 2H), 1.06 (br. s., 1H). HPLC retenciono vreme: 33 min. Dijastereomer B:<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.52 (br. s., 1H), 8.30-8.08 (m, 2H), 8.03-7.92 (m, 2H), 7.61 (br. s., 1H), 7.33 (dd, J=15.0, 7.0 Hz, 2H), 7.09 (br. s., 1H), 6.30 (br. s., 1H), 4.07 (br. s., 1H), 3.96-3.83 (m, 4H), 3.78 (d, J=9.9 Hz, 1H), 3.54-3.41 (m, 2H), 3.26 (t, J=11.7 Hz, 1H), 3.17 (br. s., 3H), 1.82 (d, J=12.8 Hz, 1H), 1.72 (br. s., 3H), 1.57-1.29 (m, 3H), 1.04 (d, J=11.0 Hz, 1H). HPLC retenciono vreme: 36 min. Pronađena masa 557 [M+H]<+>.

Primeri 439 i 440

1-Ciklopropil-1-[6-fluoro-3-(4-metoksi-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]etan-1-ol

[0936]

Korak 1: (S)-7-Hloro-6-fluoro-3-(4-metoksi-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol

[0937] Bočica za mikrotalasnu od 2.0-5.0 mL je napunjena sa 4-metoksi-1-((trimetilsilil)metil)-1H-1,2,3-triazolom (156 mg, 0.844 mmol) i razblažena sa NMP (2111 µL). (S)-3-bromo-7-hloro-6-fluoro-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol (200 mg, 0.422 mmol) je dodat što je praćeno bis(trifenilfosfin)paladijum(II) dihloridom (29.6 mg, 0.042 mmol) i tetrametilamonijum acetatom (112 mg, 0.844 mmol). Bočica je zatvorena i degasirana primenom ultra čistog argona i sonifikovanjem tokom 1 min. Bočica je postavljena u reakcionom bloku koji je prethodno zagrejan na 95 °C. Nakon 2 h, reakcija je razblažena sa etil acetatom i zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata. Sadržaj bočice je prenet u levak za odvajanje gde su slojevi razdvojeni. Organske supstance su oprane sa vodom (2X) i slanim rastvorom, osušene sa magnezijum sulfatom, koncentrovane pod sniženim pritiskom, i prečišćene silika gel kolonskom hromatografijom (24 g ISCO RediSep Rf, naneto na/sa: DCM i osušene, početni otpad: 0 mL, veličina frakcije: 18 mL 16x150 mm, i eluiran sa acetonom u dihlorometanu 0% [75 mL], 0-20% [150 mL], 20% [300 mL], 20-60% [300 mL], 60% [200 mL]). Prikupljene frakcije daju 218 mg (100%) kao žutu, amorfnu čvrstu supstancu.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.61 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.08 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.87 (br. s., 1H), 7.73-7.63 (m, 1H), 7.59-7.44 (m, 2H), 7.42-7.29 (m, 3H), 6.01 (br. s., 1H), 4.15 (s, 3H), 4.06 (dd, J=11.8, 2.8 Hz, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.89 (dd, J=12.0, 2.5 Hz, 1H), 3.54 (td, J=11.9, 1.9 Hz, 1H), 3.44-3.31 (m, 1H), 3.14-2.99 (m, 1H), 2.09-1.95 (m, 1H), 1.67-1.42 (m, 2H), 1.02 (d, J=12.0 Hz, 1H). Pronađena masa 505 [M+H]<+>.

Korak 2: (S)-1-(6-Fluoro-3-(4-metoksi-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il)etanon

[0938] Prateći proceduru analognu onoj koja je opisana u sintezi 1-ciklopropil-1-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]etan-1-ola, (S)-7-hloro-6-fluoro-3-(4-metoksi-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol (218 mg, 0.431 mmol) je konvertovan u (S)-1-(6-fluoro-3-(4-metoksi-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-

4

5H-pirido[3,2-b]indol-7-il)etanon (152 mg, 0.296 mmol, 69 %).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.65 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.18 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.90 (br. s., 1H), 7.72-7.64 (m, 1H), 7.59-7.51 (m, 2H), 7.42-7.29 (m, 3H), 6.13 (br. s., 1H), 4.14 (s, 3H), 4.07 (dd, J=11.9, 2.4 Hz, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.89 (dd, J=11.7, 2.6 Hz, 1H), 3.55 (td, J=11.8, 1.8 Hz, 1H), 3.43-3.31 (m, 1H), 3.08 (d, J=7.8 Hz, 1H), 2.83 (d, J=5.0 Hz, 3H), 2.04 (d, J=13.1 Hz, 1H), 1.69-1.45 (m, 2H), 1.00 (d, J=12.5 Hz, 1H). Pronađena masa 513 [M+H]<+>.

Korak 3: 1-Ciklopropil-1-[6-fluoro-3-(4-metoksi-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]etan-1-ol

[0939] Prateći proceduru analognu onoj koja je opisana u sintezi 1-ciklopropil-1-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]etan-1-ola, 1-ciklopropil-1-[6-fluoro-3-(4-metoksi-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]etan-1-ol (75 mg, 0.146 mmol) je konvertovan u 1-ciklopropil-1-(6-fluoro-3-(4-metoksi-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-((S)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il)etanol. Dijastereomeri su razdvojeni pomoću preparativne HPLC: 58 mg je rastvoreno u 3 mL metanola (19 mg/mL), Kolona: Waters XBridge C18 100x30 mm 5u, Rastvarači: A:95:5 voda/Acetonitril; B:95:5 Acetonitril/voda; Pufer:10 mm amonijum acetata, %B Gradijent (vreme): 35% (40 min), Brzina protoka: 30 mL/min. Dijastereomer A:<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.58 (d, J=1.5 Hz, 1H), 8.11 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.63 (dd, J=8.3, 6.5 Hz, 1H), 7.53 (d, J=7.5 Hz, 2H), 7.41-7.29 (m, 3H), 6.12 (br. s., 1H), 4.14 (s, 3H), 4.06 (dd, J=11.5, 2.3 Hz, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.88 (dd, J=11.7, 2.4 Hz, 1H), 3.56 (td, J=11.8, 1.8 Hz, 1H), 3.41-3.29 (m, 1H), 3.06 (d, J=8.0 Hz, 1H), 2.11-1.98 (m, 2H), 1.79 (s, 3H), 1.71-1.42 (m, 2H), 1.03 (d, J=11.8 Hz, 1H), 0.92-0.78 (m, 1H), 0.69-0.58 (m, 2H), 0.57-0.45 (m, 2H). HPLC retenciono vreme: 33 min. Pronađena masa 555 [M+H]<+>. Dijastereomer B:<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.58 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.11 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.62 (dd, J=8.3, 6.5 Hz, 1H), 7.53 (d, J=7.5 Hz, 2H), 7.41-7.28 (m, 3H), 6.11 (br. s., 1H), 4.14 (s, 3H), 4.06 (dd, J=11.8, 2.5 Hz, 1H), 3.95 (s, 3H), 3.88 (dd, J=11.8, 2.5 Hz, 1H), 3.55 (td, J=11.9, 1.9 Hz, 1H), 3.41-3.28 (m, 1H), 3.06 (d, J=7.8 Hz, 1H), 2.14-1.97 (m, 2H), 1.79 (s, 3H), 1.70-1.43 (m, 2H), 1.03 (d, J=12.8 Hz, 1H), 0.93-0.79 (m, 1H), 0.69-0.57 (m, 2H), 0.56-0.47 (m, 2H). HPLC retenciono vreme: 37 min. Pronađena masa [M+H]<+>.

Primer 441 i Primer 442

2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]-1,1,1-trifluoropropan-2-ol

4 1

[0941] (S)-1-(3-(1,4-Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il)etanon (100 mg, 0.201 mmol) je rastvoren u THF-u (4020 µL). Tom rastvoru je dodat (trifluorometil)trimetilsilan (297 µL, 2.01 mmol), i smeša je ohlađena do 0 °C. TBAF (1.0 M u THF-u, 52.5 mg, 0.201 mmol) je dodata u kapima. Nakon 2.5 h, 2 mL 3N vod. HCl je dodato. Smeša je razblažena sa etil acetatom i kvenčovana sa 1.5 M vod. rastvorom kalijum fosfata. Sadržaj posude je prenet u levak za odvajanje gde su slojevi razdvojeni. Organski je oprana sa vodom (2X) i slanim rastvorom (2X), osušena sa magnezijum sulfatom, koncentrovana pod sniženim pritiskom, i prečišćena silika gel kolonskom hromatografijom (12 g ISCO RediSep Rf, naneto na/sa: DCM i osušen, početni otpad: 0 mL, veličina frakcije: 9 mL 13x100 mm, i eluiran sa acetonom u dihlorometanu 0% [75 mL], 0-10% [201 mL], 15% [201 mL], 15-60% [300 mL], 60% [150 mL]). Dijastereomeri su razdvojeni pomoću preparativne HPLC: Sirova smeša je rastvorena u 2.5 mL metanola. Kolona: Waters XBridge C18 100x30 mm 5u, Rastvarači: A:95:5voda/Acetonitril; B:95:5 Acetonitril/voda; Pufer: 10 mm amonijum acetat, %B Gradijent (vreme): 38% (22 min), Brzina protoka: 30 mL/min, približno 16 mg/mL po ubrizgavanju. Dijastereomer A (17.5 mg, 0.0300 mmol, 15 %):<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.47 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.22 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.65 (dd, J=8.3, 6.8 Hz, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.48 (d, J=7.5 Hz, 2H), 7.41-7.29 (m, 3H), 6.14 (br. s., 1H), 4.06 (dd, J=11.7, 2.6 Hz, 1H), 3.89 (dd, J=11.8, 2.8 Hz, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.56 (td, J=11.9, 1.8 Hz, 1H), 3.47 (d, J=6.3 Hz, 1H), 3.34 (td, J=11.9, 1.9 Hz, 1H), 3.10-2.96 (m, 1H), 2.25 (s, 3H), 2.13-2.02 (m, 4H), 1.70-1.44 (m, 2H), 1.01 (d, J=12.5 Hz, 1H). HPLC retenciono vreme: 16 min. Pronađena masa 567 [M+H]<+>. Dijastereomer B (19.5 mg, 0.0340 mmol, 17 %).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.47 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.22 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.68 (dd, J=8.3, 6.8 Hz, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.48 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.41-7.28 (m, 3H), 6.14 (br. s., 1H), 4.06 (dd, J=11.8, 2.5 Hz, 1H), 3.89 (dd, J=11.5, 2.5 Hz, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.56 (td, J=11.9, 1.9 Hz, 1H), 3.48 (d, J=5.8 Hz, 1H), 3.35 (td, J=11.8, 1.8 Hz, 1H), 3.11-2.97 (m, 1H), 2.25 (s, 3H), 2.14-2.02 (m, 4H), 1.71-1.42 (m, 2H), 1.00 (d, J=13.1 Hz, 1H). HPLC retenciono vreme: 19 min. Pronađena masa 567 [M+H]<+>.

4 2

Primeri 443 i 444

1-Ciklopropil-1-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-8-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]etan-1-ol

[0942]

Korak 1: (S)-1-(3-(1,4-Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-8-fluoro-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il)etanon

[0943] 1-Ciklopropil-1-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-8-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]etan-1-ol je pripremljen u skladu sa procedurama opisanim u sintezi Primera 431 i 432 primenom 3-bromo-7-hloro-8-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indol umesto 3-bromo-7-hloro-6-fluoro-5H-pirido[3,2-b]indola. Regioizomeri su razdvojeni pri koraku 5 hiralnom hromatografijom: Kolona: Chiralpak OD 21x250 mm 10µ, Rastvarači: A: 0.1% dietilamin/heptan; B: Etanol, %B Gradijent (vreme): 15% izokratski (50 min), brzina protoka: 15 mL/min; ∼20 mg po ubrizgavanju. Pik 1 je izolovan kao (S)-1-(3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-8-fluoro-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il)etanon.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.50 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.30 (d, J=5.3 Hz, 1H), 8.13 (d, J=10.5 Hz, 1H), 7.64 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.46-7.40 (m, 2H), 7.39-7.29 (m, 3H), 5.56 (d, J=10.5 Hz, 1H), 4.09-4.02 (m, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.89-3.82 (m, 1H), 3.59-3.49 (m, 1H), 3.41-3.29 (m, 1H), 3.09 (d, J=11.3 Hz, 1H), 2.82 (d, J=5.8 Hz, 3H), 2.31 (s, 3H), 2.00 (d, J=13.6 Hz, 1H), 1.41 (qd, J=12.4, 4.6 Hz, 2H), 1.09 (d, J=12.8 Hz, 1H). Pronađena masa 497 [M+H]<+>.

Korak 2: 1-Ciklopropil-1-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-8-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]etan-1-ol

[0944] 1-Ciklopropil-1-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-8-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)me til]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]etan-1-ol je pripremljen u skladu sa procedurama opisanim u sintezi 1-ciklopropil-1-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]etan-1-ola. Dijastereomeri stvoreni u poslednjem koraku su razdvojeni hiralnom SFC: Chiralpak OJ-H prep Kolona, 30 x 250 mm, 5µm. Mobilna faza: 20% MeOH

4

u CO2, 130 bar. Temp: 35 °C. Brzina protoka: 70 mL/min. za 12 min. UV praćeno pri 270 nm. Ubrizgavanje: 0.4 mL od približno 10mg/mL u MeOH-u (41 mg prečišćen naslaganom injekcijom). Dijastereomer A:<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.44 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.06-7.97 (m, 2H), 7.57 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.43 (d, J=7.0 Hz, 2H), 7.38-7.28 (m, 3H), 5.54 (d, J=10.5 Hz, 1H), 4.06 (dd, J=11.8, 2.8 Hz, 1H), 3.93-3.83 (m, 4H), 3.62-3.48 (m, 1H), 3.36 (td, J=11.9, 2.1 Hz, 1H), 3.16-2.99 (m, 1H), 2.30 (s, 3H), 2.02 (d, J=13.6 Hz, 1H), 1.94 (d, J=2.3 Hz, 1H), 1.76 (d, J=1.3 Hz, 3H), 1.69-1.51 (m, 1H), 1.47-1.35 (m, 1H), 1.14 (d, J=12.0 Hz, 1H), 0.93-0.80 (m, 1H), 0.67-0.54 (m, 2H), 0.50-0.42 (m, 2H). SFC retenciono vreme: 7.35min. Pronađena masa 539 [M+H]<+>. Dijastereomer B:<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.43 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.07-7.98 (m, 2H), 7.57 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.46-7.40 (m, 2H), 7.38-7.29 (m, 3H), 5.54 (d, J=10.3 Hz, 1H), 4.05 (dd, J=11.7, 2.9 Hz, 1H), 3.92-3.84 (m, 4H), 3.59-3.50 (m, 1H), 3.35 (td, J=11.9, 2.1 Hz, 1H), 3.08 (q, J=10.9 Hz, 1H), 2.30 (s, 3H), 2.04-1.94 (m, 2H), 1.76 (d, J=1.0 Hz, 3H), 1.68-1.52 (m, 1H), 1.48-1.35 (m, 1H), 1.11 (d, J=13.1 Hz, 1H), 0.93-0.81 (m, 1H), 0.69-0.57 (m, 2H), 0.51-0.40 (m, 2H). SFC retenciono vreme: 9.31min. Pronađena masa 539 [M+H]<+>.

Primeri 445 i 446

1-Ciklopropil-1-{8-fluoro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}etan-1-ol

[0945]

[0946] 1-Ciklopropil-1-{8-fluoro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}etan-1-ol je pripremljen u skladu sa procedurama opisanim za 1-ciklopropil-1-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-8-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]etan-1-ol. U koraku 3, 1,4-dimetil-5-(tributilstanil)-1H-1,2,3-triazol je zamenjen sa 4-(<2>H3)metil-1-metil-5-(tributilstanil)-1H-1,2,3-triazolom. Dijastereomeri stvoreni u poslednjem koraku su razdvojeni hiralnom SFC: Chiralcel OJ-H prep Kolona, 30 x 250 mm, 5µm. Mobilna faza: 20% MeOH u CO2, 130 bar. Temp: 35 °C. Brzina protoka: 70 mL/min. za 12 min. UV praćeno pri 270 nm. Ubrizgavanje: 0.4 mL od približno 10 mg/mL u MeOH-u (41 mg prečišćen naslaganom injekcijom). Dijastereomer A:

4 4

<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.43 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.05-7.98 (m, 2H), 7.58 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.43 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.38-7.29 (m, 3H), 5.55 (d, J=10.5 Hz, 1H), 4.06 (dd, J=11.8, 3.0 Hz, 1H), 3.93-3.84 (m, 4H), 3.55 (td, J=11.9, 1.8 Hz, 1H), 3.36 (td, J=11.9, 1.9 Hz, 1H), 3.08 (q, J=11.0 Hz, 1H), 2.06-1.94 (m, 2H), 1.76 (d, J=1.3 Hz, 3H), 1.68-1.50 (m, 1H), 1.48-1.36 (m, 1H), 1.13 (d, J=13.1 Hz, 1H), 0.93-0.80 (m, 1H), 0.68-0.55 (m, 2H), 0.51-0.40 (m, 2H). SFC retenciono vreme: 7.05. Pronađena masa 542 [M+H]<+>. Dijastereomer B:<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.43 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.06-7.99 (m, 2H), 7.57 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.46-7.41 (m, 2H), 7.38-7.29 (m, 3H), 5.55 (d, J=10.5 Hz, 1H), 4.05 (dd, J=11.8, 2.8 Hz, 1H), 3.93-3.84 (m, 4H), 3.54 (td, J=11.9, 1.9 Hz, 1H), 3.35 (td, J=11.9, 1.8 Hz, 1H), 3.15-3.01 (m, 1H), 2.06-1.96 (m, 2H), 1.76 (d, J=1.0 Hz, 3H), 1.69-1.54 (m, 1H), 1.48-1.35 (m, 1H), 1.10 (d, J=12.3 Hz, 1H), 0.89 (t, J=6.8 Hz, 1H), 0.69-0.57 (m, 2H), 0.51-0.41 (m, 2H). SFC retenciono vreme: 8.91min. Pronađena masa 542 [M+H]<+>.

Primeri 447 i 448

1-Ciklopropil-1-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-8-fluoro-5-[(S)-(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]etan-1-ol

[0948] 1-Ciklopropil-1-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-8-fluoro-5-[(S)-(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]etan-1-ol je pripremljen u skladu sa procedurama opisanim za 1-ciklopropil-1-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-8-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]etan-1-ol. (R)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol je zamenjen za (R)-(2-fluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol. Dijastereomeri stvoreni u poslednjem koraku su razdvojeni na Chiracel OJ-H prep koloni, 30 x 250 mm, 5µm, Mobilna faza: 20% MeOH u CO2, 130 bar. Temp: 35 °C. Brzina protoka: 70 mL/min. za 10 min. UV praćeno pri 270 nm. Ubrizgavanje: 0.3 mL od približno 6 mg/mL u 1:1 MeOH:CHCl3(35 mg prečišćeno naslaganom injekcijom). Dijastereomer A:<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.47 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.05 (d, J=6.0 Hz, 1H), 8.00 (d, J=11.3 Hz, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.75 (t, J=6.9 Hz, 1H), 7.35-7.29 (m, 1H), 7.25-7.20 (m, 1H), 7.08-7.01 (m, 1H), 5.72 (d, J=11.3 Hz, 1H), 4.05 (dd, J=12.0, 3.0 Hz, 1H), 4.01 (s, 3H), 3.88 (dd, J=11.9, 2.9 Hz, 1H), 3.57-3.47 (m, 1H), 3.38-3.30 (m, 1H), 3.21-3.09 (m, 1H), 2.38 (s, 3H), 1.97 (d,

4

J=3.0 Hz, 1H), 1.88 (d, J=12.5 Hz, 1H), 1.76 (d, J=1.3 Hz, 3H), 1.64-1.49 (m, 1H), 1.46-1.32 (m, 1H), 1.13 (d, J=13.8 Hz, 1H), 0.88 (d, J=11.3 Hz, 1H), 0.67-0.54 (m, 2H), 0.49-0.37 (m, 2H). SFC retenciono vreme: 6.43 min. Pronađena masa 557 [M+H]<+>. Dijastereomer B:<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.46 (d, J=1.5 Hz, 1H), 8.06 (d, J=6.0 Hz, 1H), 8.00 (d, J=11.5 Hz, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.74 (t, J=6.8 Hz, 1H), 7.36-7.29 (m, 1H), 7.25-7.20 (m, 1H), 7.09-7.02 (m, 1H), 5.72 (d, J=11.5 Hz, 1H), 4.05 (dd, J=11.8, 2.8 Hz, 1H), 4.00 (s, 3H), 3.88 (dd, J=11.7, 2.6 Hz, 1H), 3.52 (td, J=11.9, 2.0 Hz, 1H), 3.33 (td, J=11.9, 2.0 Hz, 1H), 3.21-3.07 (m, 1H), 2.37 (s, 3H), 1.98 (d, J=2.3 Hz, 1H), 1.87 (d, J=13.6 Hz, 1H), 1.76 (d, J=1.3 Hz, 3H), 1.66-1.50 (m, 1H), 1.46-1.32 (m, 1H), 1.09 (d, J=12.8 Hz, 1H), 0.95-0.78 (m, 1H), 0.69-0.55 (m, 2H), 0.52-0.39 (m, 2H). SFC retenciono vreme: 7.59 min. Pronađena masa 557 [M+H]<+>.

Primeri 449 i 450

1-Ciklopropil-1-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6,8-difluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]etan-1-ol

[0949]

Korak 1: 2-(4-Hloro-3,5-difluorofenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan

[0950] Suva posuda 24/40 od 250 mL sa okruglim dnom je napunjena sa 5-bromo-2-hloro-1,3-difluorobenzenom (5.00 g, 22.0 mmol) i razblažena sa DMSO (44.0 mL). Bis(pinakol)diboran (6.42 g, 25.3 mmol) je dodat praćeno sa kalijum acetatom (4.32 g, 44.0 mmol), i [1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropaladijumom(II) (0.161 g, 0.220 mmol). Posuda je zatvorena i degasirana primenom ultra čistog argona i sonifikovanjem tokom 5 min. Reakciona smeša je postavljena u uljanom kupatilu koje je prethodno zagrejano na 80 °C i provetrena balonom koji je delimično napunjen sa azotom. Nakon 10 h, smeša je razblažena sa etil acetatom i vodom i prebačena u levak za odvajanje gde je organska supstanca oprana sa nekoliko volumena vode. Kombinovane organske supstance su osušene sa magnezijum sulfatom, koncentrovane pod sniženim pritiskom, i prečišćene pomoću fleš hromatografije (40 g ISCO RediSep Rf, naneto na/sa: DCM i osušen, početni otpad: 0 mL, veličina frakcije: 9 mL 13x100 mm, i eluiran sa etil acetatom u heksanima 0% [201 mL], 0-

4

5% [150 mL], 5-10% [252 mL]). Prikupljene frakcije daju 3.53 g (59 %).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.40-7.35 (m, 2H), 1.35 (s, 12H).

Korak 2: 5-Bromo-2-(4-hloro-3,5-difluorofenil)-3-nitropiridin

[0951] Posuda 24/40 od 100 mL sa okruglim dnom je napunjena sa 2,5-dibromo-3-nitropiridinom (2.00 g, 7.09 mmol) i 2-(4-hloro-3,5-difluorofenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolanom (1.95 g, 7.09 mmol). Smeša je razblažena sa THF (30 mL), i PdCl2(dppf) (0.0520 g, 0.0710 mmol) je dodat praćeno vod. kalijum fosfat trobaznim, (2.0 M, 7.09 mL, 14.2 mmol). Bočica je zatvorena i degasirana primenom ultra čistog argona i sonifikovanjem tokom 2 min. Bočica je postavljena u uljano kupatilo koje je prethodno zagrejano na 65 °C. Nakon 35 min, reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, razblažena sa etil acetatom i slanim rastvorom, i filtrirana kroz Celite jastuče. Sadržaj posude je prenet u levak za odvajanje, i organska supstanca je oprana sa slanim rastvorom (3X) i zatim ponovo ekstrahovana sa etil acetatom. Kombinovane organske supstance su osušene sa magnezijum sulfatom, koncentrovane pod sniženim pritiskom, i prečišćene silika gel kolonskom hromatografijom (40 g ISCO RediSep Rf, nanete na/sa: DCM i osušene, početni otpad: 0 mL, veličina frakcije: 9 mL 13x100 mm, i eluiran sa dihlorometanom u heksanima 0% [102 mL], 0-20% [150 mL], 20% [501 mL], 20-50% [252 mL], 50% [150 mL]). Frakcije su prikupljene da se dobiju 1.59 g (64%).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.94 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.37 (d, J=2.3 Hz, 1H), 7.23-7.16 (m, 2H). Pronađena masa 350 [M+H]<+>.

Korak 3: 3-Bromo-7-hloro-6,8-difluoro-5H-pirido[3,2-b]indol

[0952] Bočica pod pritiskom od 40 mL je napunjena sa 5-bromo-2-(4-hloro-3,5-difluorofenil)-3-nitropiridinom (1.59 g, 4.55 mmol) i 1,2-bis(difenilfosfino)etanom (2.72 g, 6.82 mmol). Smeša je suspendovana u 1,2-dihlorobenzenu (15 mL), i bočica je zatvorena i smeštena u reakcionom bloku koji je prethodno zagrejan na 160 °C. Nakon 15 min, sadržaj bočice je prenet u posudu od 250 mL sa okruglim dnom i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Braon ulje je prečišćeno pomoću silika gel kolonske hromatografije (24 g ISCO RediSep Rf, naneto na/sa: DCM i osušeno, početni otpad: 0 mL, veličina frakcije: 9 mL 13x100 mm, i eluiran sa etil acetatom u dihlorometanu 0% [1500 mL]). Frakcije su prikupljene da se dobije 722 mg (50 %).<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 8.57 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.94 (d, J=8.5 Hz, 1H). Pronađena masa 317 [M+H]<+>.

Korak 4: (S)-3-Bromo-7-hloro-6,8-difluoro-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol

4

[0953] Posuda 24/40 od 100 mL sa okruglim dnom je napunjena sa 3-bromo-7-hloro-6,8-difluoro-5H-pirido[3,2-b]indolom (349 mg, 1.10 mmol), trifenilfosfinom (432 mg, 1.65 mmol), i (R)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanolom (317 mg, 1.65 mmol). Smeša je rastvorena u THF-u (22 mL) i ohlađena do 0 °C. DIAD (342 µL, 1.65 mmol) je zatim dodat u kapima. Ledeno kupatilo je ostavljeno da istekne. Nakon 5 h, smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i prečišćena silika gel kolonskom hromatografijom (24 g ISCO RediSep Rf, naneta na/sa: DCM i osušena, početni otpad: 0 mL, veličina frakcije: 9 mL 13x100 mm, i eluirana sa dihlorometanom u heksanima 0% [75 mL], 0-100% [150 mL], 100% [1002 mL]). Frakcije su prikupljene da se dobije 445 mg (82%).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.56 (s, 1H), 7.95 (br. s., 1H), 7.90 (dd, J=7.7, 1.6 Hz, 1H), 7.47 (d, J=7.0 Hz, 2H), 7.42-7.29 (m, 3H), 5.82 (br. s., 1H), 4.05 (dd, J=11.7, 2.6 Hz, 1H), 3.89 (dd, J=11.9, 2.4 Hz, 1H), 3.56 (td, J=11.9, 2.0 Hz, 1H), 3.44-3.35 (m, 1H), 3.02 (br. s., 1H), 1.97 (d, J=11.0 Hz, 1H), 1.59-1.51 (m, 1H), 1.45 (d, J=7.0 Hz, 1H), 1.02 (d, J=12.5 Hz, 1H). Pronađena masa 491 [M+H]<+>. Korak 5: (S)-7-Hloro-3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6,8-difluoro-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol

[0954] Bočica za mikrotalasnu od 2-5 mL je napunjena sa (S)-3-bromo-7-hloro-6,8-difluoro-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indolom (150 mg, 0.305 mmol) i rastvorena u DMF-u (3050 µL). Tom rastvoru je dodat bakar(I) jodid (11.6 mg, 0.0610 mmol), trietilamin (85.0 µL, 0.610 mmol) i 1,4-dimetil-5-(tributilstanil)-1H-1,2,3-triazol (141 mg, 0.366 mmol). Pd(Ph3P)4(35.2 mg, 0.0310 mmol) je dodat poslednji, i bočica je zatvorena i degasirana primenom ultra čistog argona i sonifikovanjem za 2 min. Bočica je postavljena u reakcionom bloku koji je prethodno zagrejan na 100 °C. Nakon 30 min, reakcija je razblažena sa vodom i etil acetatom i filtrirana kroz Celite jastuče da se ukloni crna emulzija. Filtriran rastvor je prenet u levak za odvajanje i slojevi su razdvojeni. Organske supstance su oprane sa vodom (2X) i slanim rastvorom. Kombinovani vodeni je ekstrahovan sa etil acetatom, i vodeni je odbačen. Kombinovani organski slojevi su oprani sa slanim rastvorom, osušeni sa magnezijum sulfatom, koncentrovani pod sniženim pritiskom, i prečišćeni silika gel kolonskom hromatografijom (40 g ISCO RediSep Rf, naneti na/sa: DCM i osušeni, početni otpad: 0 mL, veličina frakcije: 9 mL 13x100 mm, i eluiran sa acetonom u dihlorometanu 0% [99 mL], 0-10% [201 mL], 10% [201 mL], 15% [150 mL], 20% [150 mL], 30% [150 mL]). Frakcije su prikupljene da se dobije 159 mg (103%).<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.47 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.99 (dd, J=7.7, 1.6 Hz, 1H), 7.58 (br. s., 1H), 7.51-7.29 (m, 5H), 6.00 (br. s., 1H), 4.09-4.01 (m, 1H), 3.90 (dd, J=11.7, 2.9 Hz, 1H), 3.84 (s, 3H),

4

3.55 (td, J=11.9, 2.0 Hz, 1H), 3.41-3.30 (m, 1H), 3.02 (d, J=8.0 Hz, 1H), 2.27 (s, 3H), 2.08-2.00 (m, 1H), 1.67-1.44 (m, 2H), 1.01 (d, J=12.5 Hz, 1H). Pronađena masa 508 [M+H]<+>. Korak 6: (S)-3-(1,4-Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6,8-difluoro-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-7-(prop-1-en-2-il)-5H-pirido[3,2-b]indol

[0955] (S)-3-(1,4-Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6,8-difluoro-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-7-(prop-1-en-2-il)-5H-pirido[3,2-b]indol je sintetisan primenom procedure koja je analogna onoj koja je opisana u sintezi 1-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]etan-1-ona.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.43 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.88 (dd, J=8.3, 0.8 Hz, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.49 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.41-7.28 (m, 3H), 6.05 (br. s., 1H), 5.61-5.57 (m, 1H), 5.27 (s, 1H), 4.08-4.01 (m, 1H), 3.89 (dd, J=11.7, 2.6 Hz, 1H), 3.85-3.78 (m, 3H), 3.54 (td, J=11.9, 1.9 Hz, 1H), 3.40-3.30 (m, 1H), 3.12-2.95 (m, 1H), 2.25 (s, 6H), 2.04 (d, J=13.6 Hz, 1H), 1.66-1.44 (m, 2H), 1.00 (d, J=12.5 Hz, 1H). Pronađena masa 513 [M+H]<+>.

Korak 7: (S)-1-(3-(1,4-Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6,8-difluoro-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il)etanon

[0956] (S)-1-(3-(1,4-Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6,8-difluoro-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il)etanon je sintetisan primenom procedure analogne onoj koja je opisana u 1-ciklopropil-1-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]etan-1-olu.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.49 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.95 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.59 (br. s., 1H), 7.50-7.43 (m, 2H), 7.42-7.29 (m, 3H), 6.04 (br. s., 1H), 4.11-4.01 (m, 1H), 3.90 (d, J=8.8 Hz, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.60-3.48 (m, 1H), 3.35 (t, J=11.0 Hz, 1H), 2.99 (br. s., 1H), 2.78 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 2.09-2.01 (m, 1H), 1.65-1.45 (m, 2H), 1.05-0.94 (m, 1H). Pronađena masa 515 [M+H]<+>.

Korak 8: 1-Ciklopropil-1-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6,8-difluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]etan-1-ol

[0957] 1-Ciklopropil-1-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6,8-difluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]etan-1-ol je sintetisan primenom procedure analogne onoj koja je opisana u 1-ciklopropil-1-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]etan-1-olu. Dijastereomeri su razdvojeni hiralnom SFC: Kolona: ChiralCel OJ-H, 30 x 250 mm, 5 µm Mobilna faza: 10 % MeOH / 90% CO2Pritisak: 120 bar, Temperatura: 35 °C Brzina protoka: 70 mL/min UV: 270 nm Ubrizgavanje: 0.75 mL (∼6 mg/mL u MeOH-u:CHCl3). Dijastereomer A:<1>H NMR

4

(400MHz, CDCl3) δ 8.45 (s, 1H), 7.96 (d, J=12.0 Hz, 1H), 7.58 (br. s., 1H), 7.52-7.29 (m, 5H), 6.09 (br. s., 1H), 4.06 (d, J=8.0 Hz, 1H), 3.91 (d, J=9.0 Hz, 1H), 3.82 (br. s., 3H), 3.56 (t, J=10.8 Hz, 1H), 3.42-3.30 (m, 1H), 3.01 (br. s., 1H), 2.25 (br. s., 3H), 2.08 (d, J=13.3 Hz, 1H), 1.89 (br. s., 3H), 1.69-1.45 (m, 4H), 1.03-0.94 (m, 1H), 0.93-0.79 (m, 2H), 0.67-0.49 (m, 2H). SFC retenciono vreme: 30.6 min. Pronađena masa 557 [M+H]<+>. Dijastereomer B:<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.44 (d, J=1.5 Hz, 1H), 7.88 (dd, J=11.8, 1.0 Hz, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.49-7.43 (m, 2H), 7.41-7.29 (m, 3H), 6.08 (br. s., 1H), 4.06 (dd, J=11.5, 2.5 Hz, 1H), 3.90 (dd, J=11.7, 2.4 Hz, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.56 (td, J=11.9, 1.9 Hz, 1H), 3.35 (t, J=11.0 Hz, 1H), 3.09 (dd, J=10.0, 4.0 Hz, 1H), 3.05-2.94 (m, 1H), 2.25 (s, 3H), 2.06 (d, J=13.6 Hz, 1H), 1.90 (br. s., 3H), 1.69-1.46 (m, 2H), 1.39-1.18 (m, 1H), 1.00 (d, J=13.6 Hz, 1H), 0.94-0.79 (m, 2H), 0.69-0.47 (m, 2H). SFC retenciono vreme: 37.1 min. Pronađena masa 557 [M+H]<+>.

Primer 451

2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6,8-difluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol

[0958]

[0959] 2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6,8-difluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol je pripremljen u skladu sa procedurama opisanim za sintezu 1-ciklopropil-1-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6,8-difluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]etan-1-ola zamenjujući ciklopropilmagnezijum bromid 1.0 M u 2-metiltetrahidrofuranu za metillitijum 1.6 M u dietil etru u koraku 8. Jedinjenje je prečišćeno pomoću preparativne HPLC: Kolona: Waters XBridge C18100x30 mm 5u, Rastvarači: voda/Acetonitril/10 mm amonijum acetat, % B Gradijent (vreme): 40% (12 min), Brzina protoka: 30 mL/min, 6.8 mg po ubrizgavanju.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.44 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.89 (dd, J=11.8, 1.0 Hz, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.49-7.43 (m, 2H), 7.41-7.29 (m, 3H), 6.09 (br. s., 1H), 4.06 (dd, J=11.7, 2.6 Hz, 1H), 3.90 (dd, J=11.7, 2.9 Hz, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.55 (td, J=11.9, 2.0 Hz, 1H), 3.40-3.29 (m, 1H), 3.21 (d, J=6.5 Hz, 1H), 3.07-2.94 (m, 1H), 2.25 (s, 3H), 2.10-2.02 (m, 1H), 1.92 (s, 6H), 1.68-1.43 (m, 2H), 0.96 (d, J=12.0 Hz, 1H). HPLC retenciono vreme: 7 min. Pronađena masa 531 [M+H]<+>.

41

Primer 452

2-{6,8-Difluoro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol

[0960]

[0961] 2-{6,8-Difluoro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol je pripremljen u skladu sa procedurama opisanim za 1-ciklopropil-1-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6,8-difluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]etan-1-ol zamenjujući 1,4-dimetil-5-(tributilstanil)-1H-1,2,3-triazol sa 4-(<2>H3)metil-1-metil-5-(tributilstanil)-1H-1,2,3-triazolom u koraku 5. Takođe zamenjujući ciklopropilmagnezijum bromid 1.0 M u 2-metiltetrahidrofuranu za metillitijum 1.6 M u dietil etru u koraku 8 istog primera. Jedinjenje je prečišćeno pomoću preparativne HPLC: Kolona: Waters XBridge C18 100x30 mm 5u, Rastvarači: voda/Acetonitril/amonijum acetat, %B Gradijent (vreme): 37% (25min), Brzina protoka: 30 mL/min, 2 x 250 µL ubrizgavanja (10.8mg po ubrizgavanju)<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.44 (d, J=1.8 Hz, 1H), 7.89 (dd, J=11.8, 1.0 Hz, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.46 (d, J=7.5 Hz, 2H), 7.41-7.29 (m, 3H), 6.08 (br. s., 1H), 4.06 (dd, J=11.7, 2.6 Hz, 1H), 3.90 (dd, J=11.7, 2.6 Hz, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.55 (td, J=11.9, 1.9 Hz, 1H), 3.34 (td, J=11.9, 1.6 Hz, 1H), 3.21 (d, J=6.3 Hz, 1H), 3.01 (d, J=7.8 Hz, 1H), 2.11-2.02 (m, 1H), 1.92 (br. s., 6H), 1.69-1.45 (m, 2H), 0.96 (d, J=13.3 Hz, 1H). HPLC retenciono vreme: 9 min. Pronađena masa 534 [M+H]<+>.

Primer 453

5-{7-Metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1-metil-1H-1,2,3-triazol

[0962]

Korak 1: 5-Bromo-2-(4-(metilsulfonil)fenil)-3-nitropiridin

[0963] U bocu pod pritiskom, smeša PdCl2(dppf)-CH2Cl2adukta (0.732 g, 1.00 mmol), kalijum fosfata (21.2 g, 100 mmol), (4-(metilsulfonil)fenil)boronske kiseline (10.0 g, 50.0 mmol), i 2,5-dibromo-3-nitropiridina (14.1 g, 50.0 mmol) u THF-u (100 mL) je penušala sa azotom tokom 10 min. Boca je zatvorena i zagrevana na 80 °C tokom 3 h. Nakon hlađenja, smeša je razblažena sa EtOAc i filtrirana kroz sloj SiO2. Organski sloj je opran sa vodom i slanim rastvorom, osušen preko natrijum sulfata, i koncentrovan. Dobijena čvrsta supstanca je oprana sa etrom da se dobije 7.40 g (41%) čvrste supstance.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.99 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.43 (d, J=2.0 Hz, 1H), 8.07 (d,d J=1.6, 8 Hz, 2H), 7.63 (d,d J=1.6, 8 Hz, 2H), 3.14 (s, 3H).

Korak 2: 3-Bromo-7-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indol

[0964] Posuda od 100 mL sa okruglim dnom je napunjena sa 5-bromo-2-(4-(metilsulfonil)fenil)-3-nitropiridinom (2.00 g, 5.60 mmol), trifenilfosfinom (3.67 g, 14.0 mmol) i 1,2-dihlorobenzenom (50 mL). Posuda je postavljena u uljano kupatilo, uklopljena sa kondenzatorom, i zagrejana na 170 °C tokom 1.5 h. Isparljive supstance su uklonjene na rotacionom isparivaču pod visokim vakuumom na 70 °C, zatim pod strujom azota tokom 36 h da se dobije crno ulje. Ostatak je stavljen u metilen hlorid i prečišćen na ISCO koloni od 220 g, eluiranje sa 100% metilen hloridom do 40% EtOAc/metilen hlorid tokom 1800 mL, zatim 40% EtOAc/metilen hlorid do 80% EtOAc/metilen hlorid tokom 1800 mL. Frakcije koje sadrže jedinjenje iz naslova su koncentrovane da se dobije 920 mg svetlo drap čvrste supstance, koja je bila kontaminirana sa trifenilfosfin oksidom. LC/MS primenom LC/MS Metoda 2 pokazuje jedinjenje iz naslova sa HPLC RT = 0.93 min i trifenilfosfin oksid sa HPLC RT = 1.01 min.

[0965] 3-Bromo-7-(metilsulfonil)-5H-pirido[3,2-b]indol (0.92 g, 2.83 mmol), (R)-fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metanol (0.816 g, 4.24 mmol) i trifenilfosfin (1.11 g, 4.24 mmol) su rastvoreni u 100 mL THF-a i ohlađeni do 0 °C. Ovome je dodat DIAD (0.825 mL, 4.24 mmol) u kapima pomoću igle veličine 18 „gauge“. Nakon 15 min, ledeno kupatilo je uklonjeno, i reakcija je mešana tokom 1 h. Isparljive supstance su uklonjene na rotacionom isparivaču. Ostatak je rastvoren u metilen hloridu i prečišćen na ISCO koloni od 80 g, eluiranjem sa 0% EtOAc/metilen hlorid do 40% EtOAc/metilen hlorid tokom 800 mL. Frakcije koje sadrže jedinjenje iz naslova su koncentrovane da se dobije 1.52 g bele čvrste supstance. LC/MS primenom LC/MS Metoda 2 pokazala je nečist proizvod sa HPLC RT = 1.18 min.

Korak 4: (S)-(7-(Metilsulfonil)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il)boronska kiselina

[0966] Smeša (S)-3-bromo-7-(metilsulfonil)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indola (0.700 g, 1.40 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborolan) (0.427 g, 1.68 mmol), PdCl2(dppf)-CH2Cl2adukta (0.0570 g, 0.0700 mmol), i kalijum acetata (0.275 g, 2.80 mmol) je rastvorena u 10 mL dioksana. Argon je u mehurićima propušten kroz smešu tokom 5 min tokom sonifikovanja. Bočica je zatvorena i zagrevana na 90 °C tokom noći. Isparljive supstance su uklonjene, i ostatak je rastvoren u EtOAc-u. Organske supstance su oprane sa vodom i slanim rastvorom, osušene preko MgSO4, i koncentrovane da se dobije 0.980 g braon ulja. Ulje je rastvoreno u 11 mL DMSO i prečišćeno pomoću HPLC u 1.5 mL alikvota. Kolona: Luna 10 u C18; 30X100 mm. Metoda: 10%B do 100%B tokom 17 min. A = 90% voda/10% metanol/ 0.1% TFA. B = 10% voda/90% metanol/ 0.1% TFA. Frakcije koje eluiraju iz 11-12 min su prikupljene i koncentrovane da se dobije 210 mg žutog ulja.<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 8.71 (br. s., 1H), 8.60-8.40 (m, 3H), 7.85 (dd, J=8.3, 1.5 Hz, 1H), 7.70-7.58 (m, 2H), 7.42-7.30 (m, 2H), 7.30-7.16 (m, 1H), 5.87-5.78 (m, 1H), 4.02 (d, J=15.1 Hz, 1H), 3.81 (d, J=11.0 Hz, 1H), 3.64 (t, J=11.5 Hz, 1H), 3.52-3.37 (m, 2H), 3.25-3.20 (m, 3H), 1.77-1.58 (m, 1H), 1.04 (d, J=12.0 Hz, 1H). LC/MS Metoda 2; HPLC RT = 0.83 min.

Korak 5: 5-{7-Metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1-metil-1H-1,2,3-triazol

[0967] (S)-(7-(Metilsulfonil)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il)boronska kiselina (30 mg, 0.065 mmol) i 5-bromo-1-metil-1H-1,2,3-triazol (10.5 mg, 0.0650 mmol) su rastvoreni u 1.5 mL dioksana i 0.5 mL vode. Ovome je dodat kalijum karbonat (26.8 mg, 0.194 mmol) i PdCl2(dppf)-CH2Cl2adukt (3.69 mg, 4.52 µmol) i penušala je u argonu tokom sonifikovanja tokom 5 min. Bočica je zatvorena i zagrevana na 100 °C tokom 1 h. Isparljive supstance su uklonjene. Ostatak je rastvoren u 1.5 mL DMSO, filtriran i prečišćen na preparativnoj HPLC primenom preparativne HPLC Metode 1, ali sa gradijentom 20%B-80%B tokom 20 min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja. Prinos proizvoda je 6.30 mg (18%), i njegova procena čistoće pomoću LCMS analize je 94%. Dva analitička LC/MS ubrizgavanja su korišćena da se odredi finalna čistoća. Ubrizgavanje 1: LC/MS Metoda 3; HPLC RT = 1.39 min.

41

Ubrizgavanje 2: LC/MS Metoda 4; HPLC RT = 2.20 min.<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.79-8.68 (m, J=1.5 Hz, 2H), 8.64 (br. s., 1H), 8.48 (d, J=8.3 Hz, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.86 (dd, J=8.2, 1.4 Hz, 1H), 7.69 (d, J=7.3 Hz, 2H), 7.41-7.31 (m, 2H), 7.31-7.23 (m, 1H), 6.01 (d, J=11.3 Hz, 1H), 4.12 (s, 3H), 3.94-3.91 (m, 1H), 3.71 (d, J=8.5 Hz, 1H), 3.56-3.42 (m, 2H), 3.38 (s, 3H), 2.32 (t, J=1.8 Hz, 1H), 1.74 (d, J=12.5 Hz, 1H), 1.68-1.56 (m, 1H), 1.36 (d, J=8.3 Hz, 1H), 0.91 (d, J=13.8 Hz, 1H).

Primer 454

5-{7-Metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-imidazol

[0968]

[0969] (S)-(7-(Metilsulfonil)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il)boronska kiselina (30.0 mg, 0.0650 mmol) i 5-bromo-1,4-dimetil-1H-imidazol (11.3 mg, 0.0650 mmol) su rastvoreni u 1.5 mL dioksana i 0.5 mL vode. Ovome je dodat kalijum karbonat (26.8 mg, 0.194 mmol) i PdCl2(dppf)-CH2Cl2adukt (3.69 mg, 4.52 µmol), i reakciona smeša je degasirana penušanjem u argonu tokom sonifikovanja tokom 5 min. Bočica je zatvorena i zagrevana na 100 °C tokom 1 h. Sirov materijal je prečišćen putem preparativne LC/MS (Preparativna HPLC Metoda 1) sa sledećim modifikacijama: Gradijent 30-70% B tokom 20 min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja. Prinos proizvoda je 5.80 mg, i njegova procenjena čistoća putem LCMS analize je 91%. Dva analitička LC/MS ubrizgavanja su korišćena da se odredi finalna čistoća. Ubrizgavanje 1: LC/MS Metoda 3, HPLC RT = 1.32 min. Ubrizgavanje 2: LC/MS Metoda 4, HPLC RT = 2.32 min.<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.58 (s, 1H), 8.45 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.85 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.68 (d, J=7.7 Hz, 2H), 7.34 (t, J=7.5 Hz, 2H), 7.30-7.23 (m, 1H), 6.01 (d, J=11.0 Hz, 1H), 3.91-3.84 (m, 1H), 3.73 (d, J=8.1 Hz, 1H), 3.54-3.45 (m, 1H), 3.26 (t, J=11.7 Hz, 1H), 2.17 (s, 3H), 1.91 (s, 6H), 1.73 (br. s., 1H), 1.63 (d, J=8.8 Hz, 1H), 1.46-1.28 (m, 1H), 0.94 (d, J=11.7 Hz, 1H).

Primer 455

4-{7-Metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-3-metil-1H-pirazol

[0970]

[0971] (S)-(7-(Metilsulfonil)-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il)boronska kiselina (20.0 mg, 0.0430 mmol) i 4-bromo-3-metil-1H-pirazol (13.9 mg, 0.0860 mmol) su rastvoreni u u 1.5 mL dioksana i i 0.2 mL vode. Ovome je dodat kalijum karbonat (17.9 mg, 0.129 mmol) i PdCl2(dppf)-CH2Cl2adukt (2.46 mg, 3.02 µmol), i argon je uvođen u vidu mehurića tokom sonifikovanja tokom 5 min. Bočica je zatvorena, zagrejana na 100 °C tokom 50 min, i filtrirana. Sirov materijal je prečišćen putem preparativne LC/MS (Preparativna HPLC Metoda 1) sa sledećim modifikacijama: Gradijent 10-50% B tokom 40 min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalnog uparavanja. Prinos proizvoda je 1.20 mg, i njegova procenjena čistoća pomoću LCMS analize je 96%. Dva analitička LC/MS ubrizgavanja su korišćena da se odredi finalna čistoća Ubrizgavanje 1: LC/MS Metoda 3, HPLC RT = 1.83 min. Ubrizgavanje 2: LC/MS Metoda 4, HPLC RT = 2.37 min.<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.69 (s, 2H), 8.42 (d, J=8.4 Hz, 1H), 8.27 (br. s., 1H), 8.01 (s, 1H), 7.82 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.67 (d, J=7.7 Hz, 2H), 7.36 (t, J=7.5 Hz, 2H), 7.27 (t, J=7.3 Hz, 1H), 5.99 (d, J=11.0 Hz, 1H), 3.90 (s, 2H), 3.72 (d, J=9.9 Hz, 2H), 3.60 (br. s., 2H), 3.52 (t, J=11.2 Hz, 3H), 3.27 (t, J=11.6 Hz, 1H), 2.43 (s, 3H), 1.85-1.73 (m, 1H), 1.72-1.58 (m, 1H), 1.46-1.27 (m, 1H), 0.89 (d, J=12.1 Hz, 1H).

Primeri 456-459

[0972] Jedinjenja u Tabeli 15 su pripremljena od komercijalno dostupnih ili prethodno dobijenih početnih materijala u skladu sa analognim procedurama opisanim za 2-{5-[(5-metil-1,2-oksazol-3-il)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol ili 2-{6-fluoro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol. Sva jedinjenja su homohiralna:

Tabela 15

41

HPLC Uslovi za Tabelu 15: Metoda A: Kolona: Chiralcel OJ-H preparativna kolona, 30 x 250 mm, 5µm; Mobilna faza: 10% metanol u CO2, 150 Bara; Protok: 70 mL/min. Metoda B: Kolona: Chiralpak OJ 21 x 250 mm 10 µm; Mobilna faza: 12:88 etanol:heptan sa 0.1% dietilaminom; Protok: 15 mL/min. Metoda C: Kolona: Chiralcel OJ-H preparativna kolona, 30 x 250 mm, 5µm; Mobilna faza: 15% metanol u CO2, 150 Bara; Protok: 70 mL/min. Metoda D: Kolona: Chiralpak OD 21 x 250 mm 10 µm; Mobilna faza: 25:75 etanol:heptan sa 0.1% dietilaminom; Protok: 15 mL/min.

Primer 460

3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksamid

[0973]

41

Korak 1: (S)-3-(1,4-Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilna kiselina

[0974] U rastvor (S)-metil 3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilata (videti Korak 2 iz Primera 70) (330 mg, 0.643 mmol) u THF-u (7 mL) je dodat rastvor kalijum hidroksida (124 mg, 1.928 mmol) u vodi (1.4 mL). Reakcija je mešana na 50 °C tokom noći. Reakcija je koncentrovana da se ukloni THF. Reakcija je razblažena sa vodom i ekstrahovana sa EtOAc-om (koji je odbačen). Vodeni je zakišeljen do pH 5 što je dalo talog. Smeša je ekstrahovana sa etil acetatom, oprana sa slanim rastvorom, osušena preko magnezijum sulfata, i koncentrovana da se dobije 274 mg (85%) što je primenjeno bez prečišćavanja. LCMS (M+H) = 500.4.

Korak 2: 3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksamid

[0975] U rastvor (S)-3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-karboksilne kiseline (10.0 mg, 0.020 mmol) u CH2Cl2(0.5 mL) je dodat CDI (2.82 mg, 0.020 mmol). Nakon mešanja tokom 1 h na sobnoj temperaturi, zasićen amonijum hidroksid (0.03 mL) je dodat i mešanje je nastavljeno tokom noći. Reakcija je koncentrovana i prečišćena pomoću preparativne HPLC (Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 20-60% B tokom 15 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min) da se dobije 8.3 mg (83%). LCMS: RT= 1.58 min; MS (ES): m/z= 499.1 [M+H]<+>(Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1.0 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm); HPLC RT = 1.37 min (Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; Temperatura: 50°C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 min, potom 0.75-min zadržavanje na 100% B; Protok: 1.0 mL/min; Detekcija: UV na 220 nm)

Primer 461

2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-amin

41

Korak 1: (S)-7-(2-Azidopropan-2-il)-3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indol

[0977] Rastvor 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-[oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol-Enantiomera A (Primer 70) (250 mg, 0.487 mmol) u DCM (6 mL) je ohlađen na 0°C i tretiran sa trimetilsililazidom (0.162 mL, 1.217 mmol). Nakon 5 min, BF3·OEt2(0.308 mL, 2.434 mmol) je dodat i smeša je mešana tokom 20 min. Ledeno kupatilo je uklonjeno i reakcija je promešana tokom noći. Smeša je razblažena sa vodom i zasićena vodenim bikarbonatom, i ekstrahovana sa etil acetatom. Organske supstance su oprane sa slanim rastvorom, osušene preko MgSO4, filtrirane, i koncentrovane da se dobije 236 mg (90%) koje je primenjeno bez prečišćavanja. LCMS (M+H) = 539.4. Korak 2: 2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-amin

[0978] U rastvor (S)-7-(2-azidopropan-2-il)-3-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-(fenil(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-5H-pirido[3,2-b]indola (235 mg, 0.436 mmol) u THF-u (7 mL) je dodat trimetilfosfin (1M u THF-u, 0.873 mL, 0.873 mmol) i dobijeni rastvor je promešan tokom noći. Rastvor je tretiran sa vodom (0.1 mL) i reakcija je promešana tokom noći. Reakcija je koncentrovana, razblažena sa EtOAc, i ulivena u vodu. Organske supstance su oprane sa vodom (3X), zatim slanim rastvorom, osušene preko MgSO4, filtrirane, i koncentrovane da se dobije 200 mg sirovog proizvoda. Mali deo reakcione smeše je prečišćen pomoću Prep HPLC (Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 15-90% B tokom 40 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min) da se dobiju 10.9 mg (5%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.53 (br. s., 1H), 8.20 (br. s., 1H), 8.01 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.72 - 7.50 (m, 3H), 7.40 - 7.20 (m, 3H), 5.99 (br. s., 1H), 3.99 - 3.83 (m, 4H), 3.76 (d, J=8.8 Hz, 1H), 3.50 - 3.46 (m, 1H), 3.28 (t, J=11.9 Hz, 1H), 2.23 (br. s., 3H), 1.89 (s, 6H), 1.80 (d, J=12.1 Hz, 1H), 1.64 (br. s., 3H), 1.35 (d, J=8.4 Hz, 2H), 1.07 (d, J=12.5 Hz, 1H). LCMS (M+H) = 513.0.

41

Primer 462

N-{2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-il}acetamid

[0979]

[0980] U rastvor 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-amina (20 mg, 0.039 mmol) u DCM-u (1 mL) je dodat acetil hlorid (0.039 mL, 0.039 mmol) i trietilamin (5.44 µl, 0.039 mmol). Nakon mešanja tokom 1 h na sobnoj temperaturi, reakcija je koncentrovana i prečišćena pomoću preparativne HPLC (Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 25-90% B tokom 35 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min) da se dobije 8.6 mg (39%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.53 (br. s., 1H), 8.39 (br. s., 1H), 8.20 (br. s., 1H), 7.96 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.61 (br. s., 2H), 7.38 - 7.22 (m, 4H), 5.96 (br. s., 1H), 4.02 - 3.82 (m, 4H), 3.77 (d, J=11.0 Hz, 1H), 3.48 (d, J=10.6 Hz, 1H), 3.28 (t, J=11.2 Hz, 1H), 2.23 (br. s., 3H), 1.90 (d, J=12.8 Hz, 4H), 1.77 (br. s., 7H), 1.32 (br. s., 2H), 1.10 (d, J=12.8 Hz, 1H). LCMS (M+H) = 555.5.

Primer 463

N-{2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-il}metansulfonamid

[0981]

[0982] U rastvor 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-amina (30.0 mg, 0.059 mmol) u DCM-u (1 mL) je dodat metansulfonil hlorid (4.54 µl, 0.059 mmol) i trietilamin (0.016 mL, 0.117 mmol). Nakon

41

mešanja tokom 30 min, reakcija je razblažena sa DCM, filtrirana da se uklone čvrste supstance (koje su odbačene), i koncentrovana. Ostatak je prečišćen pomoću Prep HPLC (Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 25-90% B tokom 35 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min) da se dobije 10.2 mg (28%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.54 (br. s., 1H), 8.23 (br. s., 1H), 8.03 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.79 (br. s., 1H), 7.69 - 7.54 (m, 2H), 7.46 (br. s., 1H), 7.39 - 7.22 (m, 3H), 5.98 (br. s., 1H), 3.99 - 3.84 (m, 4H), 3.75 (d, J=12.1 Hz, 1H), 3.55 - 3.44 (m, 4H), 3.28 (t, J=11.2 Hz, 1H), 2.22 (br. s., 3H), 1.86 (br. s., 8H), 1.35 (br. s., 2H), 1.09 (br. s., 1H). LCMS (M+H) = 591.4.

Primer 464

Metil N-{2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-il}karbamat

[0983]

[0984] U rastvor 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-amina (30.0 mg, 0.059 mmol) u DCM-u (1 mL) je dodat metil hloroformat (4.52 µl, 0.059 mmol) i kalijum karbonat (8.09 mg, 0.059 mmol). Reakcija je mešana tokom noći na sobnoj temperaturi. Reakcija je razblažena sa DCM, filtrirana da se uklone čvrste supstance (koje su odbačene) i koncentrovana. Dobijeni ostatak je prečišćen pomoću Prep HPLC (Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, 5-µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 40-90% B tokom 20 min, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min) da se dobije 10.1 mg (30%).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.54 (br. s., 1H), 8.22 (br. s., 1H), 7.98 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.85 (br. s., 1H), 7.62 (br. s., 2H), 7.39 - 7.21 (m, 4H), 5.97 (br. s., 1H), 4.00 - 3.83 (m, 4H), 3.77 (d, J=8.8 Hz, 1H), 3.49 - 3.39 (m, 4H), 3.29 (t, J=11.2 Hz, 1H), 2.24 (br. s., 3H), 1.77 (br. s., 8H), 1.32 (br. s., 2H), 1.10 (d, J=11.0 Hz, 1H). LCMS (M+H) = 571.5.

42

PROCENA BIOLOŠKE AKTIVNOSTI

[0985] Jedinjenja koja služe kao primeri su testirana na inhibiciju BRD2, BRD3, BRD4 i BRDT aktivnosti. Eksperimentalne procedure i rezultati su dati ispod.

Kloniranje, ekspresija i prečišćavanje humanih bromodomena za testove termalnog pomeranja (Thermal Shift Assays - TSA)

[0986] Klonovi rekombinantne DNK koji kodiraju bromodomene humanih proteina su optimizovani za ekspresiju E. Coli, hemijski sintetisani (GenScript, Piskatavej, Nju Džersi), i insertovani u modifikovani pET28 ekspresioni vektor da se kontruišu N-terminalne heksahistidinske fuzije koje se mogu cepati proteazom virusa šarenila nerava duvana (Virus šarenila nerava duvana – TVMV). Ne-nativne aminokiseline (MGSSHHHHHHSSGETVRFQSM) (SEK ID BR: 1) su odmah praćene proteinima bromodomena sa sekvencama aminokisenskih ostataka (praćeno pristupima citiranim iz i numerisanim u skladu sa Uniprot Knowledge bazom; Uniprot Konzorcijum; www.uniprot.org) kao što sledi:

CECR2(420-543), Q9BXF3-1; FALZ(2917-3037), Q12830-1; GCN5(731-837), Q92830-1; PCAF(715-831), Q92831-1; BRD2(24-472), P25440-1; BRD3(1-434), Q15059-1; BRD4(44-168), BRD4(333-460), BRD4(44-460), 060885-1; BRDT(1-383), Q58F21-1; BAZ1B(1340-1457), Q9UIG0-1; CREBBP(1081-1197), Q92793-1; EP300(1040-1161), Q09472-1; WDR9(1310-1430), Q9NSI6-1; ATAD2(981-1108), Q6PL18-1; BRD1(556-688), O95696-1; BRD7(129-236), Q9NPI1-1; BRD9(134-239), Q9H8M2-1; BRPF1(626-740), P55201-2; ATAD2B(952-1086), Q9ULI0-1; BAZ2B(2054-2168), Q9UIF8-1; SP140L(400-580), Q9H930-4; SP140(687-862), Q13342-1; TIF1(896-1014), 015164-1; TRIM28(619-805), Q13263-1; BRWD3(1295-1443), Q6RI45-1; TAF1(1377-1503), TAF1(1501-1635), P21675-1; TAF1L(1402-1522), TAF1L(1523-1654), Q8IZX4-1; ASH1L(2433-2564), Q9NR48-1; PB1(43-156), PB1(178-291), PB1(388-494), PB1(645-766), PB1(773-917), Q86U86-1; SMARCA2(1367-1511), P51531-1; SMARCA2-2(1367-1493), P51531-2.

[0987] Rekombinantni vektori su transformisani u E. coli BL21(DE3). Transformisane ćelije su kultivisane u 1L bujona „terrific broth“ u Thomson Ultra Yield sudovima za šejkiranje od 2.5L na 37°C, 230 rpm i, pri ćelijskoj gustini od OD600nm = 1.0, su indukovani sa 0.5 mM IPTG i inkubirani u šejkeru na 20°C tokom 16-18 sati. Ćelijski peleti su sakupljeni sedimentacijom i lizirani pomoću sonifikacije u puferu koji sadrži 0.1 mg/ml lizozima. Svaki uzorak je izbistren sedimentacijom, i supernatant je nanet na HisTrap afinitetnu kolonu (GE Healthcare Life Sciences). Kolona je oprana i zatim eluirana sa gradijentom imidazola.

Frakcije sa maksimumom proteina koje sadrže protein bromodomen su udružene, koncentrovane, i protein je prečišćen dalje po veličini eksluzionom hromatografijom na Superdex 200 koloni (GE Healthcare Life Sciences) ekvilibrisanoj sa puferom za finalno čuvanje (20 mM Tris-HCl pH 8.0, 200 mM NaCl, 5% glicerol, 2 mM DTT). SEC maksimalne frakcije koje sadrže prečišćen protein u 2-5 mg/ml su udružene, i grupa je podeljena u alikvote, naglo zamrznute u tečnom azotu, i sačuvane na -80°C.

Kloniranje, ekspresija, i prečišćavanje biotinilovanih humanih bromodomena za TR-FRET testove

[0988] Klonovi rekombinantne DNK koji kodiraju bromodomene humanog BRD2, BRD3, BRD4 i BRDT su optimizovani za E. coli ekspresiju, hemijski sintetisani (GenScript, Piskatavej, Nju Džersi), i insertovani u modifikovani pET28 ekspresioni vektor da se kontruišu N-terminalne heksahistidinske fuzije koje se mogu cepati proteazom virusa šarenila nerava duvana (TVMV) praćeno motivom za mesto-specifičnu biotinilaciju prepoznato pomoću E. Coli biotin ligaze (BirA). Ne-nativne aminokiseline (MGSSHHHHHHSSGETVRFQGLNDIFEAQKIEWHEDTGHM) (SEK ID BR: 2) su odmah praćene bromodomenskim konstruktima od BRD4 sa sekvencama aminokisenskih ostataka (praćeno BRD4 pristupom citiranim iz i numerisanim u skladu sa Uniprot Knowledge bazom; Uniprot Konzorcijum; www.uniprot.org) kao što sledi: BRD4(44-168), BRD4(333-460), BRD4(44-460), BRD4(1-477), 060885-1.

[0989] Svaki od rekombinantnih vektora su ko-transformisani u E. coli BL21 STAR (DE3) zajedno sa plazmidom koji kodira BirA pod hloramfenikolskom selekcijom. Transformisane ćelije su kultivisane na 37°C u Thomson Ultra Yield sudovima za šejkiranje od 2.5 L koji sadrže 1L M9-CAS medijuma (Teknova) obogaćenog sa 40 µg/ml kanamicina, 35 µg/ml hloramfenikola, i 100 µM biotina. Pri ćelijskoj gustini koja odgovara OD600nm = 0.6, kulture su indukovane sa 0.5 mM IPTG i inkubirane u šejkeru tokom dodatnih 20 sati na 20°C. Ćelijski peleti su sakupljeni sedimentacijom i lizirani pomoću sonifikacije u puferu koji sadrži 0.1 mg/ml lizozima. Svaki uzorak je izbistren sedimentacijom, i supernatant je nanet na HisTrap afinitetnu kolonu. Kolona je oprana i zatim eluirana sa gradijentom imidazola. Frakcije sa maksimumom proteina koje sadrže bromodomenski protein su udružene i inkubirane tokom 18 sati na 4°C sa prečišćenom His-TVMV proteazom (1:15 maseni odnos za TVMV:BRD4 protein). Uzorak je promenjen u pufer sa niskom koncentracijom imidazola i propušten kroz HisTrap kolonu da se uhvati iscepana His-oznaka i His-TVMV enzim. Protein koji protiče kroz HisTrap kolonu je dalje prečišćen i promenjen u pufer za finalno čuvanje (PBS pH 7.0, 5% Glicerol, 1 mM DTT) pomoću eksluzione hromatografije po veličini na Superdex 200 koloni. Da bi se poboljšala čistoća, BRD4(1-477) i BRD4(44-460) proteini su podvrgnuti dodatnom koraku prečišćavanja katjonizmenjivačkom hromatografijom pre ekskluzione hromatografije po veličini. Esencijalna kvantitativna mono-biotinilacija (+226 Da) svakog proteina je potvrđena pomoću analize masenom spektrometrijom sa elektrosprej jonizacijom na finalnom uzorku. Prečišćeni uzorci su podeljeni u alikvote, naglo smrznuti u tečnom azotu, i sačuvani na -80°C.

Test vremenski razlučenog fluorescentnog rezonantnog energetskog transfera (time resolved fluorescence resonance energy transfer - TR-FRET)

[0990] Vezivanje jedinjenja za BRD4 (44-168), BRD4 (333-460), i BRD4 bromodomena (1-477 ili 44-460) je procenjeno primenom testa vezivanja vremenski razlučenog fluorescentnog rezonantnog energetskog transfera (1), koji meri vezivanje molekula fluorescentno obeležene probe za bromodomenski protein. Bromodomenski protein, molekul fluorescentne probe (ili biotinilovani histonski peptid ili fluorescentno obeleženi mali molekul), i test jedinjenje koje je odgovorilo na dozu su inkubirani zajedno da bi se dostigla termodinamička ravnoteža. U odsustvu test jedinjenja, bromodomen i mali molekul su vezani, dovodeći do visoko fluorescentnog signala. U prisustvu dovoljne koncentracije inhibitora, ova interakcija je prekinuta dovodeći do gubitka fluorescentnog rezonantnog energetskog transfera.

[0991] Sve komponente testa su rastvorene u puferskom sastavu 20 mM Hepes pH 7.5, 150 mM NaCl, 5 mM DTT, 0.005% Tween 20, i 100 ug/ml BSA za BRD4 (1-477 i 44-460). Finalne koncentracije bromodomenskih proteina su 1.6 nM BRD4(44-168), 1 nM BRD4(333-460), i 1 nM BRD4(1-477 ili 44-460), i molekula fluorescentne probe je 100 nM, 50 nM, i 7.5 nM redom. Svi proteini su biotinilovani. Streptavidin obeležen sa terbijum kriptatom (Cisbio SA-Tb) j ekorišćen kao detekcija, i unapred izmešan sa bromodomenskim proteinom u finalnoj koncentraciji od 0.2 nM. U nekim slučajevima za BRD4 (44-460), anti-His terbijum kriptat je korišćen kao detekcija. 7.5 nl test jedinjenja sa odgovorom na dozu ili dmso nosača (0.0375 %) je prethodno naneto u crnu Corning ploču sa 384 bunarića i 10 ul svakog od reagensa za bromodomen/detekciju i rastvora fluorescentnog malog molekula su dodati u ploču, i reakcija je inkubirana tokom 60 min na sobnoj temperaturi. Ploče su zatim očitane na EnVision čitaču ploča, (λex =340 nm, λEm akceptora =520 nm, i λEm donora = 615 nm, LANCE D400 ogledalo). Merenja intenziteta fluorescencije razlučene u vremenu su načinjena u obe emisije, i odnos akceptor/ donor je izračunat i korišćen za analizu podataka.

42

Svi podaci su normalizovani na 16 „visokih“ bunarića sa nosačem i 8 „niskih“ referentnih kontrolnih bunarića, i potom je primenjeno podešavanje četvoro-parametarske krive:

Gde 'a' je minimum, 'b' je Hill-ov nagib, 'c' je IC50, i 'd' je maksimum. Histon peptid: Kupljen od GenScript

H4K5K8K12K16

Biotin-AHA-SGRGK(Ac)GGK(Ac)GLGK(Ac)GGAK(Ac)RHRKV (SEK ID BR: 3) [0992] Fluorescentno obeleženi mali molekul je korišćen kao BRD4 inhibitor poznat u oblasti 1. F.Degorce, A.Card, S.Soh, E. Trinquet, G. P. Knapik and B. Xie, HTRF: A technology tailored for drug discovery - a review of theoretical aspects and recent applications. Current Chemical Genomics (2009) 3, 22-32

Test termalnog pomeranja

[0993] Efekat vezivanja jedinjenja na termalnu stabilnost bromodomena je izmeren primenom BioRad CFX instrumenta za PCR u realnom vremenu pomoću praćenja povećanja fluorescence eksterne probe (SYPRO narandžasto) kako se ono vezuje preferencijalno za odmotani protein. Reakcije odmotavanja su izvedene u ploči sa 384 bunarića u zapremini od 4uL sa 2-8uM bromodomenskog proteina, 1-2% (v/v) DMSO u puferu koji sadrži 10 mM Hepes, pH 7.4, 500 mM NaCl. SYPRO narandžasta boja je dodata u razblaženju od 1:500. Koncentracije jedinjenja su bile u opsegu od 1.6-100uM. Reakcije odmotavanja su praćene prvo ekvilibrisanjem instrumenta na 25 °C tokom 2.4 sekundi, praćeno podizanjem temperature u uvećanjima od 0.5 °C od 25 do 95 °C sa ekvilibrisanjem od 60 s pre očitavanja na svakoj temperaturi. Filteri za ekscitaciju i emisiju za SYPRO narandžastu boju su podešeni za FRET sa opsegom ekscitacije od 450-490 nm i opsegom emisije od 560-580 nm. Srednja temperatura je određena izračunavanjem tačke infleksije pomoću drugog derivata. Opažena temperaturna pomeranja su zabeležena kao razlika između srednje tačke između referentnog bunarića koji sadrži protein sa dmso ali bez liganda i bunarića koji sadrži protein sa jedinjenjem.

[0994] Test termalnog pomeranja je biofizička tehnika koja poredi promenu u tranzicionoj temperaturi odvijanja proteina dobijenu u prisustvu i odsustvu liganda (1). Tipično, fluorescentna boja je korišćena da bi se pratilo odvijanje proteina kako se protein zagreva. Tokom procesa odvijanja, hidrofobni regioni proteina su izloženi, dovodeći do povećanja u vezivanju boje i povećanja u intenzitetu fluorescencije. Srednja tačka tranzicije odvijanja proteina je definisana kao Tm. Ligand koji se vezuje za protein uzrokuje povećanje u termalnoj stabilnosti proteina, tako povećavajući Tm, proporcionalno i koncentraciji liganda i njegovom afinitetu vezivanja.

1. M.W. Pantoliano, E.C. Petrella, J.D. Kwasnoski, V.S. Lobanov, J. Myslik, NPRraf, T. Carver, E. Asel, B.A. Springer, P. Lane, F.R. Salemme, High-density miniaturized thermal shift assays kao general strategy for drug discovery. J. Biomol. Screen 6(2001) 429-440.

2. M.D. Cummings, M. A. Farnum, M. I. Nelen, Universal screening Methods and application of ThermoFluor. J. Biomol. Screen 11 (2006) 854-863

MYC HCS Test

[0995] Tumorske ćelije u kompletnom RPMI medijumu za rast (Gibco, 11875-085) obogaćenom sa 10% FBS su sakupljene i nanete na crne PDL ploče za ćelijske kulture sa providnim dnom sa 384 bunarića u 30ul medijuma sa 10,000 ćelija po bunariću. Nakon tretmana sa jedinjenjem na 37C tokom 4 sata, ćelije su fiksirane u 4% Formaldehidu na sobnoj temperaturi tokom 30 min i zatim permeabilizovane. Nakon ispiranja i blokiranja, ploče su zatim inkubirane sa anti-myc primarnim antitelom 1:1000 (Cell Signaling Technology, 5605) na sobnoj temperaturi tokom noći. Sledećeg dana, ćelije su oprane i blokirane pre dodavanja sekundarnog antitela Alexa 488 kozjeg anti-zečjeg 1:2000 (Invitrogen, A11034) na sobnoj temperaturi u mraku tokom 1 sata. Ćelije su zatim oprane i skenirane na Cellomics ArrayScan skeneru sa sočivom objektiva 10x.

MTS test ćelijske proliferacije

[0996] Tumorske ćelije su nanete u određenim gustinama za sađenje u crne Matrix ploče sa 384 bunarića u 40ul po bunariću i inkubirane tokom noći na37°C u 5% CO2pre testiranja. Sledećeg dana, jedna grupa ploča (T0 ploče) je korišćena da se odredi ćelijska gustina pri nultom vremenu, i 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-5-(3-karboksimetoksifenil)-2-(4-sulfofenil)-2H-tetrazolijum iz neradioaktivnog kompleta za ćelijsku proliferaciju „CellTiter 96 Aqueous Non-Radioactive Cell proliferation Kit“ (Promega, G5440) je dodat pri 4 µl/bunariću u T0 ploče praćeno incubaciojom na 37°C u 5% CO2tokom tri sata. Apsorbanca na 490 nm je izmerena na Envision čitaču (Perkin Elmer, Boston, Masačusets). Istog dana, preostale ploče sa ćelijama (T72 ploče) su tretirane sa jedinjenjima na 37°C u 5% CO2. Nakon 72 sata, 4ul MTS reagenasa je potom dodato na ove ploče sa ćelijama. Ploče su dalje inkubirane na 37°C u 5% CO2tokom tri sata i vrednosti apsorbance na A490 su izmerene na Envision čitaču.

42

Modeli humanih tumorskih ksenografta kod miševa

[0997] Svi glodari su dobijeni od Jackson Laboratory. (Bar Harbor, Mejn), i održavani u sredini bez amonijaka u definisanoj i teritoriji bez patogena. Svi miševi su držani u karantinu oko 1 nedelju pre njihove upotrebe za testiranje propagacije tumora i efikasnosti leka. Miševi su hranjeni hranom i vodom po želji. Program brige o životinjama Bristol-Myers Squibb farmaceutskog istraživačkog instituta je kompletno akreditovan od strane Američke asocijacije za akreditaciju brige o laboratorijskim životinjama (American Association for Accreditation of Laboratory Animal Care - AAALAC). Svi eksperimenti su izvedeni u skladu sa Bristol-Myers Squibb (BMS) metodama i uputstvima za testiranje životinja.

[0998] Tumorski ksenografti su gajeni i održavani subkutano (SK) u NSG (nokaut za NOD scid gama lanac receptora za IL2) miševima (Jackson Lab). Tumori su rašireni kao subkutani transplanti primenom tumorskih fragmenata dobijenih od miševa donora.

Preklinička ispitivanja hemioterapije

[0999] Potrebni brojevi životinja koje su neophodne da bi se detektovao značajan odgovor su udruženi na početku eksperimenta i svakoj su dati bilateralni subkutani implanti dva tumorska fragmenta (∼ 20 mg) sa trokarom veličine 13 „gauge“. Tumorima je dozvoljeno da porastu do unapred određenih parametara veličine (tumori izvan opsega su isključeni) i životinje su jednako raspodeljene u razne grupe koje se tretiraju i kontrolne grupe. Tipično je bilo 6-8 miševa po grupama koje se tretiraju i kontrolnim grupama, koje su se sastojale od 10-12 tumora. Tretman svake životinje je baziran na individualnoj telesnoj masi. Tretirane životinje su proveravane svakodnevno na toksičnost/mortalitet povezanu sa tretmanom. Svaka grupa životinja je izmerena pre započinjanja lečenja (Wt1) i potom ponovo nakon poslednje doze tretmana (Wt2). Razlika u telesnoj masi (Wt2-Wt1) dala je meru toksičnosti koja je vezana za tretman.

[1000] Tumorski odgovor je određen merenjem tumora sa kaliperom dva puta nedeljno, dok tumori nisu dostigli unapred određenu "ciljnu" veličinu od 0.5 gm ili 1 gm u zavisnosti od tipa tumora. Mase tumora (mg) su procenjene iz formule:

[1001] Kriterijumi za tumorski odgovor su izraženi kao inhibicija tumorskog rasta (growth inhibition - %TGI). Usporavanje rasta tumora je definisano kao razlika u vremenu (dani) potrebna da bi tretirani tumori (T) dostigli unapred određenu ciljnu veličinu u poređenju sa

42

onima od kontrolne grupe (C). U ovu svrhu, masa tumora grupe je eksprimirana kao srednja masa tumora (medium tumor weight - MTW).

[1002] Inhibicija rasta tumora je izračunata kao što sledi:

gde,

Ct= Srednja kontrolna veličina tumora na kraju tretmana

C0= Srednja kontrolna veličina tumora pri započinjanju tretmana

Tt= Srednja veličina tumora tretirane grupe na kraju tretmana

T0= Srednja veličina tumora tretirane grupe pri započinjanju tretmana

[1003] Aktivnost je definisana kao postizanje trajne inhibicije rasta tumora od 50% ili više (tj. TGI ≥ 50%) za period jednak najmanje 1 vremenu potrebnom za udvostručavanje zapremine tumora i tretman lekom mora biti tokom perioda jednak najmanje kao 2 vremena potrebna za udvostručavanje zapremine tumora.

[0104] Tumorski odgovor je takođe izražen kao usporavanje rasta tumora i izražen je kao logaritamsko ubijanje ćelija (log cell kill value - LCK vrednost), definisano kao razlika u vremenu (dani) potrebnom da tretirani tumor (T) dostigne unapred određenu ciljnu veličinu u poređenju sa onima od kontrolne grupe (C).

[1005] Kad god je moguće, antitumorska aktivnost je određena u opsegu doznih nivoa do maksimalno tolerisane doze (MTD) koja je definisana kao nivo doze odmah ispod kog je došlo do prekomerne toksičnosti (tj. više od jedne smrti). Kada se desila smrt, zabeležen je dan smrti. Smatra se da su tretirani miševi koji umiru pre nego što njihovi tumori dostignu ciljnu veličinu umrli od toksičnosti leka. Kontrolni miševi koji su nosili tumore manje od ciljne veličine nisu umirali. Smatra se da grupe koje se tretiraju koje imaju više od jedne smrti izazvane toksičnošću leka imaju prekomerno toksično lečenje i njihovi podaci nisu uključeni u procenu antitumorske efikasnosti jedinjenja.

[1006] Potencijalna interakcija toksičnosti lekova koja utiče na toleranciju lečenja je značajno razmatranje u ispitivanjima kombinovane hemioterapije. Interpretacija rezultata kombinovanih lekova mora biti zasnovana na poređenju antitumorske aktivnosti najboljeg

42

mogućeg odgovora za pojedinačne agense naspram kombinacije pri uporedivo tolerisanim dozama. Stoga, terapijski sinergizam je definisan kao terapijski efekat postignut sa tolerisanim režimom kombinovanih agenasa koji su prekoračili optimalni efekat postignut pri bilo kojoj tolerisanoj dozi monoterapije. Statističke procene podataka su izvedene primenom Gehanovog generalizovanog Vilkokson testa. Statistička značajnost je proglašena pri P < 0.05.

Administracija leka

[1007] Za administraciju BET inhibitora glodarima, jedinjenja su rastvorena u 90% PEG300/10% TPGS/10% Etanol. BET inhibitori su tipično administrirani oralno po rasporedu od QDx7 ili QDx10 (5 dana-administracija-2 dana-bez administracije), iako su i drugi rasporedi procenjeni i pokazani kao efikasni.

Rezultati:

[1008] Sledeća Tabela prikazuje rezultate određenih jedinjenja pronalaska na ćelijskoj liniji H187 humanog sitnoćelijskog karcinoma i JJN3R multiplog mijeloma.

42

[1009] Podaci koji se odnose na aktivnost prikazani ispod su zasnovani na primeni jednog od opisanih FRET testova. Jedinjenja sa IC50manjim od 1500 nM su prikazani sa (+), jedinjenja sa IC50manjim od 25 nM su prikazani sa (++) i oni sa IC50manjim od 5 nM su prikazani sa (+++).

42

4

41

42

4

44

4

44

Claims

PATENTNI ZAHTEVI 1. Jedinjenje sa formulom (I)

pri čemu A je

R je nezavisno jedan ili više vodonik, CD3, halogen, haloalkil, hidroksialkil, CN, CF3, CH2F, CHF2, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil, po izboru supstituisan (C1-C6)alkoksi, po izboru supstituisan (C3-C6)cikloalkil, po izboru supstituisan heterociklo,-OR<4>, -CONR<3>R<4>, -NR<3>R<4>, NR<3>R<4>(C1-C6)alkil-, -NR<6>OCOR<3>, -NR<6>COR<3>, NR<6>COR<3>(C1-C6)alkil-, -NR<6>CO2R<3>, NR<6>CO2R<3>(C1-C6)alkil-,-NR<6>CONR<3>R<4>, -SO2NR<3>R<4>, SO2(C1-C6)alkil-, -NR<6>SO2NR<3>R<4>, -NR<6>SO2R<4>ili NR<6>SO2R4(C1-C6)alkil-; 44 X i Y su nezavisno odabrani od vodonika, po izboru supstituisanog (C1-C6)alkila, po izboru supstituisanog (C3-C8)cikloalkila, po izboru supstituisanog arila, po izboru supstituisanog heteroarila ili po izboru supstituisanog heterociklo; Z je vodonik, halogen, -OH, (C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, -NR<3>R<4>, -CONR<3>R<4>,-OCONR<3>R<4>, -NR<6>OCOR<3>, -NR<6>CONR<3>R<4>, -NR<6>SO2NR<3>R<4>ili -NR<6>SO2R<4>; R<1>je vodonik, halogen, -CN, -OR<4>, -NR<3>R<4>, -CONR<3>R<4>, -COOH, -OCONR<3>R<4>,-NR<6>OCOR<3>, -NR<6>CONR<3>R<4>, -NR<6>SO2NR<3>R<4>, -NR<6>SO2R<4>, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil, po izboru supstituisan (C2-C6)alkenil, po izboru supstituisan (C2-C6)alkinil, po izboru supstituisan (C1-C6)alkoksi, po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil, po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil (C1-C6)alkil, po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil-CO-, po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil-SO2-, po izboru supstituisan aril (C1-C6)alkoksi, po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil (C1-C6)alkoksi, po izboru supstituisan heterociklil-CO-, po izboru supstituisan heterociklil, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil-SO2-, -NR<6>SO2-po izboru supstituisan (C1-C6)alkil, - NR<6>SO2-po izboru supstituisan heterociklo, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil-NR<6>SO2- ili po izboru supstituisan heterociklo-NR<6>SO2-; R<2>je vodonik, halogen, -CN, OH, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil, po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil, po izboru supstituisan (C1-C6) alkoksi, po izboru supstituisan aril, po izboru supstituisan heteroaril ili po izboru supstituisan heterociklo; R<3>je vodonik, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil, po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil, po izboru supstituisan (C2-C6)alkenil, po izboru supstituisan (C2-C6)alkinil, cijano(C1-C6)alkil, hidroksi(C1-C6)alkil, po izboru supstituisan aril, po izboru supstituisan aril(C1-C6)alkil, po izboru supstituisan ariloksi(C1-C6)alkil, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil-SO2-, po izboru supstituisan heterociklil, po izboru supstituisan heterociklil(C1-C6)alkil, po izboru supstituisan heteroaril ili po izboru supstituisan heteroaril(C1-C6)alkil, R<4>je vodonik, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil ili po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil; ili R<3>i R<4>mogu biti uzeti zajedno sa atomom azota za koji su vezani da se formira po izboru supstituisan (C4-C8) heteroaril ili (C4-C8) heterociklični prsten; R<6>je vodonik ili po izboru supstituisan (C1-C6)alkil; i/ili njihova farmaceutski prihvatljiva so, tautomer ili stereoizomer; pri čemu se termin aril, ili sam ili kao deo veće grupe, odnosi na monociklične, biciklične i triciklične prstenaste sisteme koji imaju pet do 15 članova prstena, pri čemu je 4 najmanje jedan prsten u sistemu aromatični i pri čemu svaki prsten u sistemu sadrži tri do sedam članova prstena; i pri čemu termin heterociklo ili heterociklični se odnosi na stabilni 3-, 4-, 5-, 6-, ili 7-očlani monociklični ili biciklični ili 7-, 8-, 9-, 10-, 11-, 12-, 13-, ili 14-očlani policiklični heterociklični prsten koji je zasićen, delimično nezasićen, ili potpuno nezasićen, i koji sadrži atom ugljenika i 1, 2, 3 ili 4 heteroatoma koji su nezavisno odabrani iz grupe koja se sastoji od N, O i S; i uključuju bilo koju policikličnu grupu u kojoj bilo koji od iznad definisanih heterocikličnih prstenova je fuzionisan do benzenovog prstena.
2. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 1 sa formulom

pri čemu: A je

R je nezavisno jedan ili više vodonik, CD3, halogen, haloalkil, hidroksialkil, CN, CF3, CH2F, CHF2, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil, po izboru supstituisan (C1-C6)alkoksi, po 4 1 izboru supstituisan (C3-C6)cikloalkil, po izboru supstituisan heterociklo,-OR<4>, -CONR<3>R<4>, -NR<3>R<4>, NR<3>R<4>(C1-C6)alkil-, -NR<6>OCOR<3>, -NR<6>COR<3>, NR<6>COR<3>(C1-C6)alkil-, -NR<6>CO2R<3>, NR<6>CO2R<3>(C1-C6)alkil-,-NR<6>CONR<3>R<4>, -SO2NR<3>R<4>, SO2(C1-C6)alkil-, -NR<6>SO2NR<3>R<4>, -NR<6>SO2R<4>ili NR<6>SO2R4(C1-C6)alkil-; X i Y su nezavisno odabrani od vodonika, po izboru supstituisanog (C1-C6)alkila, po izboru supstituisanog (C3-C8)cikloalkila, po izboru supstituisanog arila, po izboru supstituisanog heteroarila ili po izboru supstituisanog heterociklo; Z je vodonik, halogen, -OH, (C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, -NR<3>R<4>, -CONR<3>R<4>,-OCONR<3>R<4>, -NR<6>OCOR<3>, -NR<6>CONR<3>R<4>, -NR<6>SO2NR<3>R<4>ili -NR<6>SO2R<4>; R<1>je vodonik, halogen, -CN, -OR<4>, -NR<3>R<4>, -CONR<3>R<4>, -COOH, -OCONR<3>R<4>,-NR<6>OCOR<3>, -NR<6>CONR<3>R<4>, -NR<6>SO2NR<3>R<4>, -NR<6>SO2R<4>, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil, po izboru supstituisan (C2-C6)alkenil, po izboru supstituisan (C2-C6)alkinil, po izboru supstituisan (C1-C6)alkoksi, po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil, po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil (C1-C6)alkil, po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil-CO-, po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil-SO2-, po izboru supstituisan aril (C1-C6)alkoksi, po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil (C1-C6)alkoksi, po izboru supstituisan heterociklil-CO-, po izboru supstituisan heterociklil, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil-SO2-, -NR<6>SO2-po izboru supstituisan (C1-C6)alkil, - NR<6>SO2-po izboru supstituisan heterociklo, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil-NR<6>SO2- ili po izboru supstituisan heterociklo-NR<6>SO2-; R<2>je vodonik, halogen, -CN, OH, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil, po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil, po izboru supstituisan (C1-C6) alkoksi, po izboru supstituisan aril, po izboru supstituisan heteroaril ili po izboru supstituisan heterociklo; R<3>je vodonik, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil, po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil, po izboru supstituisan (C2-C6)alkenil, po izboru supstituisan (C2-C6)alkinil, cijano(C1-C6)alkil, hidroksi(C1-C6)alkil, po izboru supstituisan aril, po izboru supstituisan aril(C1-C6)alkil, po izboru supstituisan ariloksi(C1-C6)alkil, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil-SO2-, po izboru supstituisan heterociklil, po izboru supstituisan heterociklil(C1-C6)alkil, po izboru supstituisan heteroaril ili po izboru supstituisan heteroaril(C1-C6)alkil, R<4>je vodonik, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil ili po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil; ili R<3>i R<4>mogu biti uzeti zajedno sa atomom azota za koji su vezani da formiraju po izboru supstituisan (C4-C8) heteroaril ili (C4-C8) heterociklični prsten; R<6>je vodonik ili po izboru supstituisan (C1-C6)alkil; i/ili njihova farmaceutski prihvatljiva so, tautomer ili stereoizomer.
3. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 1 ili 2 sa formulom

pri čemu: A je

R je nezavisno jedan ili više vodonik, CD3, halogen, haloalkil, hidroksialkil, CN, CF3, CH2F, CHF2, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil, po izboru supstituisan (C1-C6)alkoksi, po izboru supstituisan (C3-C6)cikloalkil, po izboru supstituisan heterociklo,-OR<4>, -CONR<3>R<4>, -NR<3>R<4>, NR<3>R<4>(C1-C6)alkil-, -NR<6>OCOR<3>, -NR<6>COR<3>, NR<6>COR<3>(C1-C6)alkil-, -NR<6>CO2R<3>, NR<6>CO2R<3>(C1-C6)alkil-,-NR<6>CONR<3>R<4>, -SO2NR<3>R<4>, SO2(C1-C6)alkil-, -NR<6>SO2NR<3>R<4>, -NR<6>SO2R<4>ili NR<6>SO2R4(C1-C6)alkil-; X i Y su nezavisno odabrani od vodonika, po izboru supstituisanog (C1-C6)alkila, po izboru supstituisanog (C3-C8)cikloalkila, po izboru supstituisanog arila, po izboru supstituisanog heteroarila ili po izboru supstituisanog heterociklo; Z je vodonik, halogen, -OH, (C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, -NR<3>R<4>, -CONR<3>R<4>,-OCONR<3>R<4>, -NR<6>OCOR<3>, -NR<6>CONR<3>R<4>, -NR<6>SO2NR<3>R<4>ili -NR<6>SO2R<4>; R<1>je vodonik, halogen, -CN, -OR<4>, -NR<3>R<4>, -CONR<3>R<4>, -COOH, -OCONR<3>R<4>,-NR<6>OCOR<3>, -NR<6>CONR<3>R<4>, -NR<6>SO2NR<3>R<4>, -NR<6>SO2R<4>, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil, po izboru supstituisan (C2-C6)alkenil, po izboru supstituisan (C2-C6)alkinil, po izboru supstituisan (C1-C6)alkoksi, po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil, po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil (C1-C6)alkil, po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil-CO-, po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil-SO2-, po izboru supstituisan aril (C1-C6)alkoksi, po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil (C1-C6)alkoksi, po izboru supstituisan heterociklil-CO-, 4 po izboru supstituisan heterociklil, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil-SO2-, -NR<6>SO2-po izboru supstituisan (C1-C6)alkil, - NR<6>SO2-po izboru supstituisan heterociklo, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil-NR<6>SO2- ili po izboru supstituisan heterociklo-NR<6>SO2-; R<2>je vodonik, halogen, -CN, OH, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil, po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil, po izboru supstituisan (C1-C6) alkoksi, po izboru supstituisan aril, po izboru supstituisan heteroaril ili po izboru supstituisan heterociklo; R<3>je vodonik, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil, po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil, po izboru supstituisan (C2-C6)alkenil, po izboru supstituisan (C2-C6)alkinil, cijano(C1-C6)alkil, hidroksi(C1-C6)alkil, po izboru supstituisan aril, po izboru supstituisan aril(C1-C6)alkil, po izboru supstituisan ariloksi(C1-C6)alkil, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil-SO2-, po izboru supstituisan heterociklil, po izboru supstituisan heterociklil(C1-C6)alkil, po izboru supstituisan heteroaril ili po izboru supstituisan heteroaril(C1-C6)alkil, R<4>je vodonik, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil ili po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil; ili R<3>i R<4>mogu biti uzeti zajedno sa atomom azota za koji su vezani da formiraju po izboru supstituisan (C4-C8) heteroaril ili (C4-C8) heterociklični prsten; R<6>je vodonik ili po izboru supstituisan (C1-C6)alkil; i/ili njihova farmaceutski prihvatljiva so, tautomer ili stereoizomer.
4. Jedinjenje u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1 do 3 sa formulom

pri čemu: A je

4 4

X i Y su nezavisno odabrani od vodonika, po izboru supstituisanog (C1-C6)alkila, po izboru supstituisanog (C3-C8)cikloalkila, po izboru supstituisanog arila, po izboru supstituisanog heteroarila ili po izboru supstituisanog heterociklo; Z je vodonik, halogen, -OH, (C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, -NR<3>R<4>, -CONR<3>R<4>,-OCONR<3>R<4>, -NR<6>OCOR<3>, -NR<6>CONR<3>R<4>, -NR<6>SO2NR<3>R<4>ili -NR<6>SO2R<4>; R<1>je vodonik, halogen, -CN, -OR<4>, -NR<3>R<4>, -CONR<3>R<4>, -COOH, -OCONR<3>R<4>,-NR<6>OCOR<3>, -NR<6>CONR<3>R<4>, -NR<6>SO2NR<3>R<4>, -NR<6>SO2R<4>, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil, po izboru supstituisan (C2-C6)alkenil, po izboru supstituisan (C2-C6)alkinil, po izboru supstituisan (C1-C6)alkoksi, po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil, po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil (C1-C6)alkil, po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil-CO-, po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil-SO2-, po izboru supstituisan aril (C1-C6)alkoksi, po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil (C1-C6)alkoksi, po izboru supstituisan heterociklil-CO-, po izboru supstituisan heterociklil, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil-SO2-, -NR<6>SO2-po izboru supstituisan (C1-C6)alkil, - NR<6>SO2-po izboru supstituisan heterociklo, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil-NR<6>SO2- ili po izboru supstituisan heterociklo-NR<6>SO2-; R<2>je vodonik, halogen, -CN, OH, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil, po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil, po izboru supstituisan (C1-C6) alkoksi, po izboru supstituisan aril, po izboru supstituisan heteroaril ili po izboru supstituisan heterociklo; R<3>je vodonik, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil, po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil, po izboru supstituisan (C2-C6)alkenil, po izboru supstituisan (C2-C6)alkinil, cijano(C1-C6)alkil, hidroksi(C1-C6)alkil, po izboru supstituisan aril, po izboru supstituisan aril(C1-C6)alkil, po izboru supstituisan ariloksi(C1-C6)alkil, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil-SO2-, po izboru supstituisan heterociklil, po izboru supstituisan heterociklil(C1-C6)alkil, po izboru supstituisan heteroaril ili po izboru supstituisan heteroaril(C1-C6)alkil, R<4>je vodonik, po izboru supstituisan (C1-C6)alkil ili po izboru supstituisan (C3-C8)cikloalkil; ili R<3>i R<4>mogu biti uzeti zajedno sa atomom azota za koji su vezani da se formira po izboru supstituisan (C4-C8) heteroaril ili (C4-C8) heterociklični prsten; R<6>je vodonik ili po izboru supstituisan (C1-C6)alkil; 4 i/ili njihova farmaceutski prihvatljiva so, tautomer ili stereoizomer.
5. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 1 koje je odabrano od sledećeg: 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-(1,1,1,7,7,7-heksafluoroheptan-4-il)-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol, 2-[3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol, 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(1S)-4,4,4-trifluoro-1-fenilbutil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol, 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol, 2-[3-(dimetil-1,2-oksazol-4-il)-5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol, 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol, 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol, 2-{3-[4-(hidroksimetil)-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, 5-{7-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol, 5-{5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-7-metansulfonil-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol, 2-{5-[(S)-(4-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, (1R)-1-ciklopropil-1-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]etan-1-ol, 2-{3-[5-(<2>H3)metil-3-metil-1,2-oksazol-4-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol 2-{3-[4-(<2>H3)metoksi-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, 4 2-[3-(4-metoksi-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol, (1R)-1-ciklopropil-1-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-[(S)-(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]etan-1-ol, 2-{6-fluoro-5-[(S)-(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, (1S)-1-ciklopropil-1-{6-fluoro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}etan-1-ol, (1R)-1-ciklopropil-1-{6-fluoro-3- [4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}etan-1-ol, 2-{5-[(3-fluoropiridin-2-il)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, 2-{8-fluoro-5-[(S)-(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, 2-{6-fluoro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, 2-{5-[(S)-(4,4-difluorocikloheksil)(fenil)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, 2-{8-fluoro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, (1R)-1-ciklopropil-1-{6-fluoro-5-[(S)-(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}etan-1-ol, 2-{6-fluoro-5-[(5-metil-1,2-oksazol-3-il)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, 2-{6-hloro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, 2-[(R)-(4,4-difluorocikloheksil)({9-fluoro-7-metansulfonil-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-5-il})metil]-3-fluoropiridin, (1S)-1-ciklopropil-1-{6-fluoro-5-[(S)-(2-fluorofenil)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}etan-1-ol, 2-{8-fluoro-5-[(5-metil-1,2-oksazol-3-il)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, 4 2-{5-[(5-hloropiridin-2-il)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, 2-{5-[(3-hloropiridin-2-il)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, 2-{5-[(4-hloropiridin-2-il)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, 2-{5-[(4,4-difluorocikloheksil)(3-fluoropiridin-2-il)metil]-6-fluoro-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, 2-{6-fluoro-5-[(3-fluoropiridin-2-il)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, 2-{8-fluoro-5-[(3-fluoropiridin-2-il)(oksan-4-il)metil]-3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, 2-{3-[4-(<2>H3)metoksi-1-(<2>H3)metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, 2-{3-[4-metoksi-1-(<2>H3)metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, 5-{7-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-metoksi-1-metil-1H-1,2,3-triazol, 2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-amin, N-{2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-il}acetamid, N-{2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-il}metansulfonamid, metil N-{2-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-fluoro-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-il}karbamat, 5-{6-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol, 5-{9-fluoro-6-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol, 5-{6-metansulfonil-9-metoksi-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol, 4 N-[3-(dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-6-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-9-il]ciklopropansulfonamid, 5-{9-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol, 5-{9-fluoro-7-metansulfonil-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-3-il}-4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol, ili 2-{3-[4-(<2>H3)metil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-5-il]-5-[(S)-oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il}propan-2-ol, i/ili njihova farmaceutski prihvatljiva so, tautomer ili stereoizomer.
6. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 1, koje je (S)-2-[3-(Dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-il)-5-[oksan-4-il(fenil)metil]-5H-pirido[3,2-b]indol-7-il]propan-2-ol, i/ili njihova farmaceutski prihvatljiva so, tautomer ili stereoizomer.
7. Jedinjenje, odabrano od sledećeg:
8. Farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1 do 7 i jedan ili više farmaceutski prihvatljivih nosača, razblaživača ili ekscipijenasa.
9. Kombinovani farmaceutski proizvod koji sadrži jedinjenje u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1 do 7 zajedno sa jednim ili više drugih terapijskih aktivnih agenasa. 4
10. Jedinjenje u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1 do 7 za primenu u lečenju.
11. Jedinjenje u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1 do 7 za primenu u lečenju bolesti ili stanja za koje je naznačen inhibitor bromodomena.
12. Jedinjenje za primenu u skladu sa patentnim zahtevom 11, pri čemu je bolest ili stanje kancer.
13. Jedinjenje u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1 do 7 za primenu u metodi lečenja kancera.
14. Jedinjenje za primenu iz patentnog zahteva 13, pri čemu je kancer sitnoćelijski kancer pluća, ne-sitnoćelijski kancer pluća, kolorektalni kancer, multipli mijelom, akutna mijeloidna leukemija (AML), akutna limfoblastna leukemija (ALL), kancer pankreasa, kancer jetre, hepatoćelijski kancer, neuroblastom, ostali čvrsti tumori ili ostali hematološki kanceri.
15. Jedinjenje za primenu iz patentnog zahteva 13, pri čemu je kancer sitnoćelijski kancer pluća, ne-sitnoćelijski kancer pluća, kolorektalni kancer, multipli mijelom ili AML. Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Beograd, Kneginje Ljubice 5 4