RS58103B1

RS58103B1 - Bežični video sistem za model lokomotiva

Info

Publication number: RS58103B1
Application number: RS20181567A
Authority: RS
Inventors: Richard Bartlett
Original assignee: Richard Bartlett; Bartlett William
Priority date: 2011-11-22
Filing date: 2012-11-21
Publication date: 2019-02-28
Also published as: PT2782650T; JP6214007B2; EP2782650A4; ES2706014T3; MX336993B; US8953041B1; AU2012340688B2; KR101948959B1; CA2853682A1; EP2782650A1; EP2782650B1; HRP20182181T1; MX2014006079A; SMT201900035T1; HUE041938T2; CN109104593A; DK2782650T3; PL2782650T3; JP2015512272A; CA2853682C

Description

FARMACEUTSKI PREPARATI, DOZIRANI OBLICI I POSTUPCI ZA ORALNU

PRIMENU EPOTILONA

REFERENCA UKRŠTENA SA SRODNIM APLIKACIJAMA

Ova aplikacija zahteva prioritet na osnovu provizione aplikacije sa serijskim brojevima 60/264, 228, koja je ispunjena 25. januara 2001. i 60/290, 019, koja je ispunjena 11. maja 2001, ovde navedena referencom u potpunosti.

POLJE ISTRAŽIVANJA

Pronalasci su povezani sa postupcima oralne primene epotilona kod pacijenata na način koji povećava bioraspoloživost. Buduća istraživanja povezana su sa farmaceutskim jedinjenjima, farmaceutskim doziranim oblicima i kitovima za korišćenje u ovim pronalascima. Istraživanja su naročito povezana sa čvrstim oralnim doziranim oblicima epotilona.

ISTORIJAT PRONALASKA

Epotiloni su 16-člani ciklični makrolidi, koji su našli primenu u polju farmacije.

Na primer, Epotiloni A i B su prirodna jedinjenja, koja se mogu izolovati iz nekih mikroorganizama; ova dva jedinjenja imaju sledeću strukturu:

Otkada su uvedeni epotiloni, sintetisne su mnoge grupe i testirani su analozi prirodnih epotilona u pokušaju da se dobiju korisni lekovi. (Videti D. Schinzer et al.,Angew. Chem. Int. Ed. Engl.,1997, 36, No. 3, 523-524; K. C. Nicolaou, et al.,J. Amer. Chem. Soc,1997, 119, 7974-7991; K. C. Nicaloau et al.,Angew. Chem. Int. Ed. Engl.,1996, 35, No. 20, 2399-2401; A. Balog et al.,Angew. Chem. Int. Ed. Engl.,1996, 35, No. 23/24, 2801-2803).

Poznati epotiloni vrše mikrotubule-stabilizirajuće efekte slične Taksol<®->u i pokazuju citotoksičnu aktivnost protiv brzo proliferišućih ćelija, kao što se dešava kod kancera i drugih hiperproliferišućih ćelijskih bolesti (VidetiAngew. Chem. Int. Ed. Engl.,Vol. 35, No. 13/14, 1996 I D. M. Bollag,Exp. Opin. Invest. Drugs,6 (7): 867-873, 1997.

Pre nego što se epotiloni upotrebe za lečenje bolesti kod pacijenata, oni moraju biti formulisani u farmaceutska jedinjenja, koja se mogu davati pacijentima; na primer, u doziranim oblicima pogodnim za oralnu, mukoznu (nazalna, sublinvalna, vaginalna, bukalna ili rektalna), parenteralnu (subkutana, incravenska, bolus injekcija, intramuskularna ili intraarterijalna), ili transdermalnu primenu. Formulacije za oralnu primenu su naročito pogodne, jer su mnogo pogodnije i lakše za davanje od ostalih formulacija. Takodje, oralnim unošenjem se izbegava bol i nelagodnost za razliku od parenteralne primene. Preme tome, formulacije za oralnu primenu su pogodnije za pacijente, zbog boljeg pridržavanja doziranom rasporedu.

Medjutim, uspešnost orane formulacije, zahteva da aktivni agens bude raspoloživ. Na bioraspoloživost oralno primenjenih lekova utiču različiti faktori, uključujući, na primer, apsorpciju leka kroz gastrointestinalni trakt, stabilnost leka u gastrointestinalnom traktu i efekat prvog prolaza. Preme tome, efektivna oralna raspodela aktivnog agensa zahteva da aktivna supstanca ima dovoljnu stabilnost u stomaku i intestinalnom lumenu da prodje kroz intestinalnu membranu. Medjutim, mnodi lekovi se razgrade brzo ili imaju manju apsorpciju u intestinalnom traktu, tako da, u tom slučaju, oralni način primene nije efikasan postupak za primenu leka.

Farmaceutska jedinjenja namenjena oralnoj primeni su tipične čvrste dozirane forme (tablete) ili tečni preparati (rastvori, suspenzije ili eliksiri). Čvrsti dozirani oblici, medjutim, mogu ograničiti korišćenje aktivne supstance, pošto neka grupa pacijenata ima fizičke ili psihološke poteškoće prilikom gutanja čvstih oralnih doziranih oblika. Ako je tečni dozirani oblik raspoloživ, ovi pacijenti mogu lakše dobiti potrebnu dozu aktivne supstance, uzimajući je u formi oralnog tečnog preparata, koji mogu da piju ili preko nazo-gastrične cevi. Prema tome, poželjniji su tečni dozirani oblici.

Zbog lakše primene kod pacijenata, supstancama za oralnu upotrebu u tečnom obliku potreban je pogodan rastvarač ili sistem nosača za rastvaranje ili disperziju aktivnog agensa. Sistem rastvarača mora biti kompatibilan sa aktivnom supstancom i netoksičan za pacijenta. Dakle, za tečne oralne oblike koriste se vodeni rastvarači.

Formulacija nekih epotilona osim uobičajenih poteškoća, pokazuje i nestabilnost u kiseloj sredini i/ili smanjenu rastvorljivost u vodenom medijumu, koji predstavlja medijum prvog izbora kod rastvora za oralnu primenu. Ovaj pronalazak prevazilazi teškoće i obezbedjuje postupke i farmaceutske formulacije za oralnu primenu epotilona, gde su epotiloni dovoljno raspoloživi da daju farmakološki efekat.

SAŽETAK ISTRAŽIVANJA

Ovaj pronalazak obuhvata postupak oralnog oslobadjanja epotilona kod sisara, vreme smanjenja ili izbegavanja degradacije, raspadanja ili deaktivacije epotilona preko gastrointestinalnog sistema, naročito preko gastrične tečnosti u stomaku. Postupak se sastoji u davanju epotilona u, ili sa farmaceutski prihvatljivim kiselim neutrališućim puferom, pri čemu se koriste dva rastvora, od kojih jedan čini sam aktivni epotilon, ili u farmaceutski prihvatljivom nosaču, dok se drugi sastoji iz farmaceutski prihvatljivog neutralizirajućeg pufera.

U pronalasku se koriste farmaceutska jedinjenja koja se sastoje iz epotilona u čvrstoj formi pogodnoj za formulisanje, ili rastvaranje ukoliko je liofilizirana u prihvatljivom rastvoru. U pronalasku se koriste i farmaceutske supstance, koje se sastoje iz prihvatljivog neutralizirajućeg pufera ili u čvrstoj formi pogodnoj za formulaciju ili rastvaranje ukoliko je liofiliziran u prihvatljivom rastvoru.

U specifičnom slučaju, ovaj ogled je usmeren na postupke povećanja bioraspoloživosti oralno primenjenih epotilona. Postupci obuhvataju oralno primenjen jedan ili više epotilona Formule:

gde:

G je odabran iz grupe koja sadrži alkil, supstituisani alkil, aril, supstituisani aril, heterocikl,

VV je 0 ili NR16;

X je 0; S; CHR17; ili H, Ri8;

Y je odabran iz grupe koja sadrži 0; H, H; H, OR22; OR23, OR23; NOR24; H, NOR25; H, HNR26R27; NHNR28R29; H, NHNR30R31ili CHR32, gde OR23, OR23može biti ciklični ketal;

Bxi B2su odabrani iz grupe koja sadrži H, OR33, OCOR34, OCONR35R35, NR37R38, ili NR39CONR40R41;

D je odabran iz grupe koja sadrži NR42R43ili heterocikl;

Ri, R2/R3, R4 i R5sadrže H, niži alkil;

Rs, R9, R10i Rnsu odabrani iz grupe koja sadrži H, alkil, supstituisani alkil, aril, supstituisani aril, cikloalkil, heterocikl ili supstituisani heterocikl;

R17, Ris/R22i R23SU odabrani iz grupe koja sadrži H, alkil i supstituisani alkil;

R-24, R-25/- f^26/ R-28? ^30/ ^32/ ^33/ ^34, R-35^ ^36, R-37, R-39? ^40/ ^41, ^42, R5I/ R52/ R53 i R61 su odabrani iz grupe koja sadrži H, alkil, supstituisani alkii, aril ili supstituisani aril;

R12/ R16/ R27, R29, R31, R38i R43su odabrani iz grupe koje sadrže H, alkil, supstituisani alkil, supstituisani aril, cikloalkil, heterocikl, R51C=0, R52OC=0, R53S02, hidroksi i O-alkil ili O-supstituisani alkil, ili farmaceutski prihvatljivu so, solvat, hidrat, klatrat ili prolek; i oralno primenjenih jedan ili više odgovarajućih kiselinskih pufera.

Odgovarajući kiselinski puferi mogu biti primenjeni istovremeno, pre, posle ili i pre i nakon primene jednog ili više epotilona. Kada se primenjuje pre epotilona, odgovarajući kiselinski pufer se uzima ne više od jednog sata pre njega, odnosno ne više od jednog sata posle epotilona kada se uzima posle njega.

Rastvor kiselinskog pufera, koji može biti u tečnom obliku i može biti napravljen neposredno pre upotrebe, sastoji se iz jedne ili više komponenti, koje su sposobne da neutrališu kisele rastvore, prvenstveno gastričnu tečnost u odredjenom vremenskom periodu. Komponente pufera čine farmaceutski prihvatljive slabe kiseline, slabe baze ili njihove smeše. Komponente pufera su u vodi rastvorljive materije, kao što je fosforna kiselina, vinska kiselina, mlečna kiselina, sukcinilna kiselina, limunska kiselina, sirćetna kiselina, askorbinska kiselina, aspartatna kiselina, hidrohlorna kiselina, sumporna kiselina, glutaminska kiselina i njihive soli.

Odgovarajući farmakološki kiselinski pufer primenjivan je u dovoljnoj količini da neutrališe gastrične tečnosti u stomaku i povećava količinu epotilona, koja je apsorbovana gastrointestinalnim sistemom. Ovi puferi mogu se primeniti kao vodeni rastvori, sa pH vrednostima od 5 do 9, ili kao vodeni rastvori anhidrovanog dvobaznog natrijum fosfata, natrijum citrat dihidrata i anhidrovane sirćetne kiseline.

Ovaj pronalazak povećava raspoloživost oralno primenjivanih epotilona u odnosu na oralno uzet epotilon bez neutralizirajućeg pufera. Bioraspoloživost jednog ili više epotilona ili odgovarajuće soli, solvata, klatrata, hidrata ili njihovog proleka je bar 20 %. Jedan ili više epotilona ili odgovarajuća so, solvat, klatrat, hidrat ili njihov prolek mogu biti oralno primenjeni kao rastvori propilen glikola ili etanola, u kome je, odnos propilen glikol : etanol oko 80:20.

Prioritetni epotilon je [1S-[1R<*>, 3R<*>(E), 7R<*>, 10S<*>, 11R<*>, 16S<*>]]-7, 11-dihidroksi 8, 8, 10, 12, 16-pentametil-3-[l-metii-2-(2-metil-4-tiazolil) etenil-17-oksa-4-azabiciklo [14.1.0] heptadekan-5, 9-dion.

Pronalazak, takodje, obuhvata kitove koji sadrže željene epotilone i rastvorne pufere. Pronalazak obuhvata kit koji sadrži a) epotilon pogodan za oralnu primenu i

b) kiseli neutrališući pufer pogodan za oralnu primenu.

U jednom izvodjenju kitovi sadrže:

(i) prva komponenta sastoji se iz jednog ili više epotilona Formule: Gde su G, W, X, Y, Bi, B2/D, R1;R2/R3, R4, R5, Rg, R9, Rio, Ra, R12, Ri6, R.17, R18, R22, R-23/ ^24/ R25/ ^26/ ^27/ ^23/ ^29, ^30? R-31/ ^32/ R-33, R-34, R-35/ R-36/ R-37, R-38/ ^39/ R4O/ R4I/ R42, R43/ R51, R52/ R53 i R6i definisani ranije; i (ii) druga komponenta sadrži odgovarajući farmaceutski neutrališući pufer, u kome su prva i druga komponenta tečni oralni dozirani oblici ili čvrste farmaceutske supstance koje mogu biti formulisane ili rekonstituisane sa rastvaračem do dobijanja tečnog oralnog oblika.

Za rekonstituciju rastvaračem, mogu se koristiti i farmaceutska jedinjenja u obliku

tableta. Prva ili druga komponenta mogu biti anhidrovane. Kit može da sadrži rastvarač za rekonstituciju prve ili druge komponente. Rastvarač za rekonstituciju prve komponente može biti smeša propilen glikola i etanola, gde je njihov odnos oko 80:20.

Budući eksperimenti će biti usmereni na farmaceutska jedinjenja koja sadrže:

(i) jedan ili više epotilona Formule:

Gde su G, W, X, Y, B1;B2, D, R[;R2, R3, R4, R5, R3, R9, R10, Rn, R12, Ri6, R17, R18/R22, ^23/ ^24, ^25/ ^26/ R-27/ ^28/ R-29/ R-30/ R3I/ R-33/ R-34, ^35/ R-36/ R-37/ R-38/ ^39/ ^40/ ^41/ R42, R43/ R5i, R52, R53 i Reidefinisani ranije ili odgovarajuću so, solvat, klatrat, hidrat, ili njihov prolek u čvrstom obliku; i (ii) odgovarajući čvrsti farmaceutski kiseli neutrališući pufer, u dovoljnoj količini da smanji degradaciju jednog ili više epotilona, ili farmaceutski prihvatljive soli, solvata, klatrata, hidrata ili njihovog proleka, kada se farmaceutsko jedinjenje rekonstituiše rastvaračem do dobijanja oralnog tečnog doziranog oblika.

KRATAK OPIS PRONALASKA

SLIKA1. Zavisnost srednje vrednosti koncentracije Jedinjenja (A) u plazmi od vremena kod pasa nakon IV davanja 0.5 mg/kg, vi/, i oralnog uzimanja 2 mg/kg rastvora, -Q-. Vertikalna crta predstavlja standardnu devijaciju i prikazana je gde je veća od veličine simbola.

SLIKA 2.Zavisnost srednje vrednosti koncentracije Jedinjenja (B) u plazmi od vremena kod pasa nakon IV davanja 0.5 mg/kg,?,i oralnog uzimanja 2 mg/kg rastvora, -Q-. Vertikalna crta predstavlja standardnu devijaciju i prikazana je gde je veća od veličine simbola.

DETALJNI OPIS PRONALASKA

Postoji potreba za doziranim oblicima i postupcima uzimanja epotilona, na osnovu njihovih farmakoloških prednosti, da budu dovoljno raspoloživi i imaju farmakološki efekat. Neophodni su oralni dozirani oblici i tečne dozirane oralne forme, koje mogu osloboditi dovoljnu količinu epotilona, potrebnu u terapiji bolesti. Ovaj pronalazak baziran je na otkrivanju epotilona Formule (Ia) ili (lb):

gde:

W je 0 ili NR16;

X je 0; S; CHRl7; ili H, R18;

Y je odabran iz grupe koja sadrži 0; H, H; H, OR22; OR23, 0R23; NOR24; H, NOR25; H, HNR26R27; NHNR28R29; H, NHNR30R3iili CHR32, gde OR23, OR23može biti ciklični ketal;

Bii B2su odabrani iz grupe koja sadrži H, OR33, OCOR34, OCONR35R36, NR37R3S, ili NR39CONR40R41;

D je odabran iz grupe koja sadrži NR42R43ili heterocikl;

Ri/R2, R3, R4i Rssadrže H, niži alkil;

Rs, R9, R10i Rusu odabrani iz grupe koja sadrži H, alkil, supstituisani alkil, aril, supstituisani aril, cikloalkil, heterocikl ili supstituisani heterocikl;

R17, Ris, R22 i R23SU odabrani iz grupe koja sadrži H, alkil i supstituisani alkil;

R-24, R-25/ R26/ R-28/ R-30/ ^32/ ^33/ ^34, R-35/ R-36/ R-37/ R39r R40, R-41/ ^42/ Rs2/ R53

i R61su odabrani iz grupe koja sadrži H, alkil, supstituisani alkil, aril ili supstituisani aril;

R-12, Ri6, R27, R29, R31/R38i R43su odabrani iz grupe koje sadrže H, alkil, supstituisani alkil, supstituisani aril, cikloalkil, heterocikl, R5iC=0, R52OC=0, R53S02, hidroksi i O-alkil ili O-supstituisani alkil, ili farmaceutski prihvatljivu so, solvat, hidrat, klatrat ili njihov prolek, kada u kombinaciji sa odgovarajućim kiselim neutrališućim puferom, oralno uzete budu dovoljno raspoložive da imaju farmakološki efekat. Dakle, ogled je zasnovan na postupcima povećanja bioraspoloživosti oralno primenjenih epotilona Formule (Ia) ili (lb), ili odgovarajuće soli, solvata, hidrata, klatrata ili njihovog proleka, oralnim uzimanjem jednog ili više epotilona Formule (Ia) ili (lb), ili odgovarajuće soli, solvata, hidrata, klatrata ili njihovog proleka, i oralno uzetog farmaceutski prihvatljivog kiselog neutrališućeg pufera u kombinaciji sa tim. Pronalazak, takodje, povezuje farmaceutska jedinjenja, farmaceutske dozirane oblike i kitove, koji se koriste u postupcima.

Niže je opisan prioritetni epotilon ("Jedinjenje (A)") koji se koristi u postupcima, jedinjenjima i doziranim oblicima [1S-[1R<*>, 3R<*>(E), 7R<*>, 10S<*>, 11R<*>, 16S<*>]]-7, 11-dihidroksi 8, 8, 10, 12, 16-pentametil-3-[l-metil-2-(2-metil-4-tiazolil) etenil-17-oksa-4-azabiciklo [14.1.0] heptadekan-5, 9-dion:

DEFINICIJE

Nabrajanje koje sledi definiše različite termine koji se koriste za opisivanje ovog pronalaska. Ove definicije primenjuju se za termine koji se koriste kroz ovu specifikaciju, osim ako drugačije nije indikovano u specifičnim slučajevima.

Termin"alkil" odnosi se na prav ili račvast lanac nesupstituisanih hidrokarboksilnih grupa sa 1 do 20 ugljenikovih atoma, prvenstveno 1 do 7 ugljenikovih atoma.

Termin"supstituisani alkil" odnosi se na alkil grupu supstituisanu jednim do četiri supstituenta, kao što su halo, trifluorometil, trifluorometoksi, hidroksi, alkoksi, cikloalkiloksi, heterociklooksi, okso, alkanoil, ariloksi, alkanoiloksi, amino, alkilamino, arilamino, aralkilamino, cikloalkilamino, heterocikloamino, disupstituisani amini kod kojih su 2 amino supstituenta zamenjena alkil, aril ili aralkil, alkanoilamino, aroilamino, aralkanoilamino, supstituisani alkanoilamino, supstituisani arilamino, supstituisani aralkanoilamino, tioi, alkiltio, ariltio, aralkiltio, cikloalkiltio, heterociklotio, alkiltiono, ariltiono, aralkiltiono, alkilsulfonil, ariosulfonil, aralkilsulfonil, sulfonamido (S02NH2), supstituisani sulfonamido, nitro, cijano, karboksi, karbamil (CONH2), supstituisani karbamil (CONH alkil, CONH aril, CONH aralkil ili slučajevi gde su dva supstituenta na azotu zamenjena alkil, aril ili aralkil), alkoksikarbonil, aril, supstituisani aril, gvanidino i heterocikli, kao što su indollil, imidazolil, furil, tienil, tiazolil, pirolidil, piridil i pirimidil. Kao što je poznato od ranije, naredni supstituent biće supstituisan halogenom, alkil, alkoksi, aril ili aralkil.

Termin"halogen" ili "halo" odnosi se na fluor, hlor, brom i jod.

Termin"aril"odnosi se na monociklične ili biciklične aromatične hidrokarboksilne grupe, koje sadrže 6 do 12 ugljenikovih atoma u prstenu, kao što su fenil, naftil, bifenil i difenil grupe, od kojih svaka može biti supstituisana.

Termin"aralkil"odnosi se na aril grupu vezanu direktno preko alkil grupe, kao što je benzil.

Termin "supstituisani aril" odnosi se na aril grupu supstituisanu jednim do četiri supstituenta, kao što je alkil; supstituisani alkil, fenil, supstituisani fenil, heterocikl, halo, trifluorometoksi, trifluorometil, hidroksi, alkoksi, cikloalkiloksi, heterociklooksi, alkanol, alkanoiloksi, amino, alkilamino, aralkilamino, cikloalkilamino, heterocikloamino, dialkilamino, alkanoilamino, tiol, alkiltio, cikloalkiltio, heterociklotio, ureido, nitro, cijano, karboksi, karboksialkil, karbamil, alkoksikarbonil, alkiltiono, ariltiono, alkilsulfonil, sulfonamido i ariloksi. Naredni supstituent biće supstituisan halogenom, hidroksi, alkil, alkoksi, aril, supstituisanom aril, supstituisanom alkil ili aralkil grupom.

Termin"cikloalkil"odnosi se na supstituisan, zasićen ciklični hidrokarboksilni prsten, koji prvenstveno sadrži 1 do 3 prstena i 3 do 7 ugljenika po prstenu, koji mogu biti spojeni sa nezasićenim C3-C7 karbocikličnim prstenom. Grupe sadrže ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, cikloheptil, ciklooktil, ciklodecil, ciklododecil i adamantil. Supstituenti sadrže jednu ili više alkil grupa kao što je ranije opisano, ili jednu ili više grupa opisanih ranije kao alkil supstituenti.

Termini "heterocikl","heterociklični" i "heterociklo" odnose se na delimično supstituisane zasićene ili nezasićene, aromatične ili alifatične ciklične grupe. Na primer, prsten sa 4 do 15 članova ili 4 do 7 članova monociklični, 7 do 11 biciklični ili 10 do 15 triciklični prsten, koji ima najmanje jedan heteroatom u prstenu, a sadrži najmanje jedan atom ugljenika. Svaki heterociklični prsten može da sadrži 1, 2 ili 3 heteroatoma, a najčešće su to azot, kiseonik i sumpor, gde azot i sumpor mogu takodje biti delimično oksidovani, a azot može biti kvaternizovan. Bilo koji heteroatom ili ugljenikov atom mogu napasti heterocikličnu grupu.

Monociklične heterociklične grupe sadrže pirolidinil, pirolil, indolil, pirazolil, oksetanil, pirazolinil, imidazolil, imidazolinil, imidazolidinil, oksazolil, oksazolidinil, izoksazolinil, izoksazolil, tiazolil, tiadiazolil, tiazolidinil, izotiazolil, izotiazolidinil, furil, tetrahidrofuril, tienil, oksadiazolil, priperidinil, piperazinil, 2-oksopiperazinil, 2-oksopiperidinil, 2-oksopirolidinil, 2-oksazepinil, azepinil, 4-piperodonil, piridil, N-okso-piridil, pirazinil, pirimidinil, piridazinil, tetrahidropiranil, tetrahidrotiopiranil, tetrahidrotiopiranil, sulfon, morfolinil, tiomorfolinil, tiomorfolinil sulfoksid, tiomorfolinil sulfon, 1, 3-dioksolan i tetrahidro-1, 1-dioksotienil, dioksanil, izotiazolidinil, tietanil, tiiranil, tiazinil i tiazolil grupu.

Biciklične heterociklične grupe sadrže benzotiazolil, benzoksazolil, benzotienil, hinuklidinil, hinolinil, hinolinil-N-oksid, tetrahidroizohinolinil, izohinolinil, benzimidazolil, benzopiranil, indolizinil, benzofuril, hromonil, kumarinil, hinolinil, hinoksalinil, indazolil, pirolopiridil, furopiridinil (kao furo [2, 3-c] piridinil, furo [3, 1-b] piridinil ili furo [2, 3-b] piridinil), dihidroizoindolil, dihidrohinazolinil (kao 3, 4-dihidro-4-okso-kvinazolinil), benzizotiazolil, benzizoksazolil, benzodiazinil, benzofurazanil, benzotiopiranil, benzotriazolil, benzpirazolil, dihidrobenzofuril, dihidrobenzotienil, dihidrobenzotiopiranil, dihidrobenzotiopiranil sulfon, dihidrobenzopiranil, indolinil, izohromanil, izoindolinil, naftiridinil, ftalazinil, piperonil, purinil, piridopiridil, kvinazolinil, tetrahidrokvinolinil, tienofuril, tienopiridil i tienotienil grupu.

Kao što je ranije opisano, supstituenti sadrže jednu ili više alkil grupa ili jednu ili više grupa opisanih ranije kao alkil supstituenti. Takodje, sadrže manje heterocikle kao što su epoksidi i aziridini.

Ranije je korišćen termin "heteroatomi", koji označava kiseonik, sumpor i azot.

Kao što je ranije rečeno, prefiks "niži" označava do 7, prvenstveno 4 ugljenikova atoma.

Ranije je korišćen termin "bioraspoloživost", koji označava stepen u kome je lek apsorbovan u živom sistemu i iskoristljiv u cirkulaciji. Postupci za odredjivanje bioraspoloživosti lekova su dobro poznate.

Ranije je korišćen termin"dovoljna" bioraspoloživost, koja da bi imala farmakološki efekat, znači da epotiloni imaju više od 20% bioraspoloživosti, odnosno više od 30%, a najbolje je da imaju više od 50%.

Kao što je ranije rečeno, termin farmaceutski odgovarajuća so, odnosi se na so izvedenu od epotilona Formule (Ia) ili (lb) imajući kao osnovnu funkcionalnu grupu amin, sa farmaceutski odgovarajućom netoksičnom neorganskom ili organskom kiselinom. Pogodna netoksična kiselina može biti sirćetna, benzensulfonska, benzoeva, kamforsulfonska, limunska, etensulfonska, fumarna, glukonska, glutaminska, hidrobromna, hidrohlorna, izetionska, mlečna, maleinska, jabučna, mandelična, metansulfonska, mucinska, azotna, pamoična, pantotenska, fosforna, sukcinilna, sumporna, vinska i p-toluensulfonska kiselina. Soli formirane sa kiselinama mogu se dobiti, na primer, sa epotilonom Formule (Ia) ili (lb), imajući osnovnu funkcionalnu grupu i jednaku količinu netoksične kiseline da nagradi so. Reakcija se odvija u medijumu u kome dodatkom kiseline so precipitira ili je praćena isparavanjem. Termin "farmaceutski odgovarajuća so", takodje, označava so izvedenu iz epotilona Formule (Ia) ili (lb), imajući kiselu funkcionalnu grupu, kao na primer, karboksilna funkcionalna grupa i farmaceutski odgovarajuća netoksična neorganska ili organska baza. Pogodna netoksična baza može biti od hidroksida alkalnih metala, kao što su natrijum, kalijum i litijum; hidroksida zemnoalkalnih metala, kao što su kalcijum i magnezijum; hidroksida ostalih metala, kao što su aluminijum i cink; amonijaka i organskih amina, kao što su nesupstituisani ili hidroksi-supstituisani mono-, di-, ili trialkilamini; dicikloheksilamina; tributil amina; piridina; N-metil, N-etilamin; dietilamin; trietilamin; mono-, bi-, ili tri-(2-hidroksi-niži alkil amini), kao što su mono-, bi-, ili tri-(2-hidroksietil) amin, 2-hidroksi-terc-butilamin, ili 3-(hidroksimetil) metilamin, N, N, -di-niži alkil-N-(hidroksi niži alkil) - amini, kao što su N, N-dimetil-N-(2-hidroksietil) amin, ili 3-(2-hidroksietil) amin; N-metil-D-glukamin; i amino kiseline, kao što su arginin, lizin i slične. Soli formirane sa bazom mogu da sadrže, na primer, epotilon Formule (Ia) ili (lb), sadržeći kiselu funkcionalnu grupu i jednaku količinu netoksične baze.

Reakcija se odvija u medijumu u kome so precipitira ili je praćena isparavanjem.

Pronalazak, takodje uključuje cviterjone.

Termin"farmaceutski odgovarajući kiseli neutralizirajući pufer", odnosi se na kombinaciju farmaceutski prihvatljive netoksične kiseline i farmaceutski prihvatljive netoksične soli kiseline, koja kada se doda u rastvor, čini rastvor manje osetljivim na promenu pH, u poredjenju sa rastvorom bez pufera, kada su kiselina ili baza dodate u rastvor.

Termin "farmaceutski odgovarajući kiseli neutralizirajući pufer" uključuje i bazna jedinjenja, koja, dodata u kiseli rastvor neutrališu kiselinu i povećavaju pH rastvora.

Termin "klatrat" označava jedinjenja formirana uključivanjem molekula" guest"jedinjenja u prostornu rešetku, nastalu kombinacijom nekoliko molekula

" host" jedinjenja.

Termin"pro-lek"označava derivat jedinjenja koji može da hidrolizuje, oksiduje ili drugačije reaguje pod biološkim uslovima{ in vitroiliin vivo),da stvori epotilon Formule (Ia) ili (lb). Na primer, karboksilni estar je formiran esterifikacijom karboksilne kiseline; ako epotilon Formule (Ia) ili (lb) sadrži kiselu funkcionalnu grupu, on može biti esterifikovan do dobijanja pro-leka. Dobro su poznati različiti pro-lekovi (za primer pro-lekova videti: Design of Prodrugs, edited by H. Bundgaard, Elsevier, 1985; Methods in Enzvmologv, vol. 42, p. 309-396, edited by K. VVidder et al., Academic Press, 1985; A Textbook of Drug Design and Deveiopment, edited by Krosgaard-Larsen and H, Bundgaard, chapter 5, "Design and Application of Prodrugs", by H. Bundgaard, p. 113-191, 1991; H. Bundgaard, Advanced Drug Deliver/Revievvs, 8,1-38,1992; H. Bundgaard et al. Journal of Pharmaceutical Sciences, 77,285,1988; and N. Kakeya et al., Chem. Phar. Buli., 32,692,1984).

Termin "kiseli neutralizacijski kapacitet" označava količinu IN HCI (izražena u miliekvivalentima), koja može biti pH vrednosti oko 3.5, što je definisanoU. S.

Pharmacopeia 301.

Termin "rastvor" označava tečni preparat koji sadrži jednu ili više rastvorljivih aktivnih supstanci rastvorenih u rastvaraču.

Termin "suspenzija" znači finalno podeljen, nerastvorni aktivni sastojak suspendovan u rastvaraču. • -

Termin"eliksir"označava rastvor aktivne supstance u rastvaraču, koji sadrži vodu i alkohol.

Termin "sirup" znači koncentrovan rastvor šećera, kao što je saharoza, u vodi ili drugom vodenom rastvoru, koji sadrži poliole, kao što su glicerin ili sorbitol, da odloži kristalizaciju šećera ili poveća rastvorljivost dodatih supstanci.

UPOTREBA EPOTILONA U POSTUPCIMA, PREPARATIMA I DOZIRANIM

FORMAMA

Epotilon se u pronalasku može koristiti u postupcima, preparatima i doziranim formama. Prvenstveno su epotiloni nestabilni u kiselinama i slabo rastvorljivi u vodi, tako da nisu lako raspoloživi za oralnu primenu. U specifičnim slučajevima epotiloni Formule (Ia) ili (lb) u pronalasku se koriste u postupcima, preparatima i doziranim formama. Epotiloni Formule (Ia) ili (lb) mogu se napraviti postupcima otkrivenim u našoj aplikaciji.

Ovde su navedeni serijski broj 09/280,191, ispunjen 29. marta 1999. i naša aplikacija broj 09/170, 482 ispunjena 13. oktobra 1998. Epotiloni Formule (Ia) ili (lb) mogu se dobiti odgovarajućom modifikacijom metodoloških otkrića iz, na primer, K. C. Nicolau et al., "An Approach to Epothilones Based on Olefin Metathesis", Angevv. Chem Int. Ed. Engl., 35 (20): 2399-2401 (1996); K. C. Nicolau et al. "The Total Svnthesis of Epothilone A: The Macrolactonization Approach", Angevv. Chem Int. Ed. Engl., 36 (5): 525-527 (1997); K. C. Nicolau et al., "Designed Epothilones: Combinatorial Svnthesis, Tubulin Assembv Properties, and Citoxic Action Against Taxol Resistant Tumor Cells", Angevv. Chem Int. Ed. Engl., 36 (19): 2097-2103

(1997); K. C. Nicolau et al., "The Olefin Metathesis Approach to Epothilone A and its Analogues", J. Am. Chem. Soc, 119 (34): 7960-7973 (1997); K. C. Nicolau et al., "Total Svnthesis of Epothilones A and B via a Macrolactonization-Based Strategv", J. Am. Chem. Soc, 119 (34): 7974-7991 (1997); K. C. Nicolau et al., "Svnthesis of Epothilones A and B in Solid and Solution Phase", Nature, 387: 268-272 (1997); and D. Meng et al.,"Remote Effects in Macrolide Formation Through Ring-Forming Olefin Metathesis: An Application to the Svnthesis of fullv Active Epothilone Congeners", J. Am. Chem. Soc, Vol. 119, No. 11, 2733-2734 (1997)......

Epotiloni su prvenstveno kristalne i anhidrovane forme, koje se pre upotrebe u preparatima ovog pronalaska sterilišu.

KORIŠĆENJE EPOTILONA ILI NJIHOVIH PREPARATA

U ovom pronalasku epotiloni su deflnisani kao mikrotubule-stabilizirajuće supstance, koje se mogu koristiti u terapiji različitih karcinoma ili drugih bolesti, koje se karakterišu abnormalnom proliferacijom ćelija. Postupci u pronalasku naročito su korisni za davanje jednog ili više epotilona Formule (Ia) ili (lb) ili farmaceutski odgovarajuće soli, solvata, klatrata, hidrata ili njihovog proleka, pacijentu sa karcinomom ili obolelom od drugih hiperproliferativnih bolesti. Ranije spomenut termin"kancer", označava čvrste i tumore krvi. Termin kancer odnosi se na bolest kože, tkiva, organa, kosti, hrskavice, krvi i vezikula. Termin kancer obuhvata primarne kancere i metastaze. Postupcima iz ovog pronalaska mogu se tretirati karcinomi bešike, dojke, kolona, bubrega, pluća, ovarijuma, pankreasa, abdomena, cerviksa, tiroidee i kože, uključujući skvamozne ćelijske karcinome; hematopoetski tumori limfnih žlezdi, gde spadaju leukemija, akutna limfocitna leukemija, akutna limfoblastna leukemija, B-ćelijski iimfomi, T-ćelijski limfomi, Hodgkinov limfom, non-Hodgkin limfom, složeni ćelijski limfomi i Burketts-ov limfom; u hematopoetske tumore mijeloidne loze spadaju hronične mijelogene leukemije i promijelocitne leukemije; tumori mezenhimalnog porekla uključuju fibrosarkome, rabdomiosarkome i osteosarkome; drugi tumori uključuju melanome, seminome, tetratokarcinome, neuroblastome i gliome; u tumore centralnog i perifernog nervnog sistema spadaju astrocitomi, neuroblastomi, gliomi i Schvvannomi, kao i drugi tumori, gde spadaju ksenoderma, pigmentosum, teratoaktantoma, folikularni tiroidni kancer i teratokarcinom.

Postupak ovog pronalaska koristi se u terapiji kancera, kako kod pacijenata koji jesu, tako i kod onih koji nisu bili prethodno tretirani antikancerskom terapijom, što bi značilo da se postupci i preparati iz ovog ogleda mogu koristiti i u prvoj- i u drugoj-liniji odbrane u terapiji kancera.

Postupci iz ovog pronalaska se, takodje, koriste u kombinaciji sa poznatim terapijama protiv kancera, uključujući zračenje ili davanje drugog leka, koji deluje na različite faze ćelijskog ciklusa, recimo S fazu, dok epotiloni Formule (Ia) ili (lb) ispoljavaju svoje efekte u G2-M fazi ćelijskog ciklusa.

Epotiloni Formule (Ia) ili (lb) mogu, takodje, inhibirati tumorsku angiogenezu i time uticati na abnormalnu ćelijsku proliferaciju. Prema tome, postupci iz ovog pronalaska mogu se koristiti u tretmanu nekih formi slepila, povezanih sa vaskularizacijom retine, artritisom, posebno inflamatornim artritisom, multiplom sklerozom, restinozom i psoriazom.

Epotiloni Formule (Ia) ili (lb) mogu indukovati ili inhibirati apoptozu, proces fiziološke smrti ćelije, kritičan za normalni razvoj i homeostazu. Promene normalnih apoptotičkih puteva dovode do patogeneze raznih bolesti kod ljudi. Prema tome, postupci iz ovog pronalaska mogu se koristiti u tretmanu različitih bolesti sa poremećenom apoptozom, uključujući kancer (naročito folikularne limfome, karcinome sa p53 mutacijama, tumore dojke, prostate i ovarijuma zavisne od hormona i prekancerozne iezije, kao što su familijarni adenomatozni polipi), virusne infekcije (uključujući herpesvirus, poksvirus, Epstein-Bar virus, Sindbis virus i adenovirus), autoimune bolesti (obuhvataju sistemski lupus eritromatozus, imunski posredovan glomerulonefritis, reumatoidni artritis, psoriazu, inflamatorne crevne bolesti i autoimuni diabetes melitus), neurodegenerativne bolesti (gde spadaju Alchajmerova bolest, AIDS-demencija, Parkinsonova bolest, amiotrofična lateralna skleroza, retinitis pigmentosa, spinalna muskularna atrofija i cerebelarna degeneracija), AIDS, mijelodisplastični sindromi, aplastična anemija, ishemijsko oštećenje povezano sa miokardijalnim infarktima, šokom i reperfuzionim oštećenjem, aritmija, ateroskleroza, bolesti jetre indukovane toksinima ili alkoholom, hematološke bolesti (obuhvataju hroničnu anemiju i aplastičnu anemiju), degenerativne bolesti mišićnokoštanog sistema (uključujući osteoporozu i artritis), aspirin-senzitivni rinosinuzitis, cističnu fibrozu, muitiplu sklerozu, bolesti bubrega i bol kod kancera.

Epotiloni Formule (Ia) ili (lb) mogu se davati i sa drugim terapijskim agensima, izabranim po njihovim specifičnim karakteristikama u odredjenoj terapiji.

Na primer, svako jedinjenje Formule I i II može predstavljati agens za prevenciju nauzeje, hiperosetljivosti i gastrične iritacije, kao što su anti-emetici i H:i H2antihistaminici. Pomenuti terapijski agensi, upotrebljeni u kombinaciji sa epotilonima Formule (Ia) ili (lb) mogu se koristiti u količini propisanoj u Phvsicians'Desk reference (PDR) ili kako je drugačije uobičajeno odredjeno.

KORIŠĆENJE PUFERA U POSTUPCIMA, PREPARATIMA I DOZIRANIM

FORMAMA OVOG PRONALASKA

Svrha pufera u postupcima ovog ogleda je u privremenoj neutralizaciji gastrične tečnosti i time redukciji degradacije epotilona u stomaku pacijenta. U vodenim tečnim oralnim formulacijama, koje sadrže jedan ili više epotilona Formule (Ia) ili (lb) ili farmaceutski prihvatljivu so, solvat, klatrat, hidrat ili njihov prolek, pufer redukuje degradaciju epotilona Formule (Ia) ili (lb). Pokazano je da su tečne oralne dozirane forme, koje sadrže pufer i jedan ili više epotilona Formule (Ia) ili (lb) ili farmaceutski prihvatljivu so, solvat, klatrat, hidrat ili njihov prolek, stabilnije od tečne oralne forme bez pufera.

Puferi koji se koriste u postupcima, preparatima i doziranim formama pronalaska mogu se praviti kombinovanjem jedne ili više kiselina i soli jedne ili više kiselina u odnosu, koji u kombinaciji, kada se rastvori u vodenom rastvoru, obezbedjuje rastvor sa pH vrednostima izmedju 5 i 9. Jedna ili više kiselina će imati pKa izmedju 4 i 10. Bitno je prepoznati tehniku pripremanja pufera koji će obezbediti željenu pH vrednost rastvora. U pronalasku se koriste bazne komponente, koje, dodate u kiseli rastvor povećavaju pH vrednost istog rastvora.

Različiti puferi mogu se koristiti u postupcima, preparatima i doziranim formama ovog pronalaska.

Tipične pufere čine farmaceutski prihvatljive slabe kiseline, slabe baze, ili njihove smeše. Prvenstveno su komponente pufera rastvorljive u vodi, kao što su fosforna kiselina, vinska kiselina, mlečna kiselina, sukcinilna kiselina, limunska kiselina, sirćetna kiselina, askorbinska kiselina, aspartatna kiselina, glutaminska kiselina i njihove soli.

Farmaceutski prihvatljiv kiseli neutrališući pufer je dvobazni-monobazni fosfatni pufer ili dvobazni fosfatni pufer-limunska kiselina-citratni pufer. Ovi puferi su komercijalno dostupni ili se mogu lako pripremiti uobičajenom procedurom, korišćenjem komercijalno nabavljenih puferskih supstanci, koje su gore pomenute.

POSTUPCI ZA ORALNO DAVANJE EPOTILONA NESTABILNIH U

KISELINAMA FORMULE fla) ili( lb )

Pronalazak obuhvata postupke povećanja bioraspoloživosti oralnog davanja epotilona, preko oralnog uzimanja epotilona Formule (Ia) ili (lb) ili farmaceutski prihvatljive soli, solvata, klatrata, hidrata ili njihovog proleka, i oralnog uzimanja farmaceutski prihvatljivog kiselinskog neutrališućeg pufera. Pronalazak je dobro prilagodjen za epotilone koji su nestabilni u kiselini, ali se može koristiti i za epotilone koji su osetljivi na hidrolizu u alkalnim uslovima, kao i za epotilone koji nisu osetljivi na hidrolizu. Pronalazak se može koristiti i za epotilone koji su slabo rastvorljivi u vodenom medijumu.

Epotiloni u pronalasku mogu se dati parenteralno, kada izbegavaju gastrointestinafni sistem i prevazilaze sve bioraspoložive prepreke. Medjutim, svako davanje je neugodno i nelagodno za pacijenta i obezbedjuje druge potencijalno neželjene efekte. Preparati i postupci u ovom pronalasku omogućavaju korišćenje oralnog davanja, što ima značajnu prednost, naročito kada se radi o ljudima.

Davanje jednog ili više epotilona Formule (Ia) ili (lb) ili farmaceutski prihvatljive soli, solvata, klatrata, hidrata ili njihovog proleka, u kombinaciji sa farmaceutski prihvatljivim kiselim neutrališućim puferom, dovodi do povećanja bioraspoloživosti jednog ili više epotilona Formule (Ia) ili (lb).

Veruje se da je povećanje bioraspoloživosti očekivano, jer pufer smanjuje brzinu degradacije epotilona Formule (Ia) ili (lb) ili farmaceutski prihvatljive soli, solvata, klatrata, hidrata ili njihovog proleka u kiseloj sredini gastrointestinalnog trakta.

Neki epotiloni, prvenstveno epotilon Jedinjenja (A), nestabilan je u kiseloj vodenoj sredini i razlaže se hidrolitičkim otvaranjem epoksidnog prstena; ova reakcija katalizovana je kiselinom. Na primer, vreme za koje se 5% leka razloži na 37°C za vodeni rastvor Jedinjenja (A) je oko 38 minuta na pH 7.4, ali samo oko 0.2-minuta na pH 2.5. Kada se epotiloni Formule (Ia) ili (lb) ili farmaceutski prihvatljiva so, solvat, klatrat, hidrat ili njihov prolek oralno daju, razlažu se u stomaku pacijenta, kao minimalno apsorbovani ili neapsorbovani preko gastrointestinalnog trakta.

Kada se jedan ili više epotilona Formule (Ia) ili (lb) ili farmaceutski prihvatljiva so, solvat, klatrat, hidrat ili njihov prolek primene na pacijenta u kombinaciji sa farmaceutski odgovarajućim kiselim neutrališućim puferom, onda pufer neutrališe kiselinu u stomaku pacijenta, tako da je brzina degradacije jednog ili više epotilona Formule (Ia) ili (lb) ili farmaceutski prihvatljive soli, solvata, klatrata, hidrata ili njihovog proleka, dovoljno smanjena, da jedan ili više epotilona Formule (Ia) ili (lb) ili farmaceutski prihvatljiva so, solvat, klatrat, hidrat ili njihov prolek ostaju u gastrointestinalnom traktu dovoljno dugo da se apsorbuju.

U drugom slučaju, hidroksidi aluminijuma i magnezijuma; karbonati, kao što su natrijum karbonat i kalcijum karbonat; silikati; i fosfati mogu da se koriste u neutralizaciji kiseline u stomaku pre, za vreme ili nakon davanja epotilona.

Bioraspoloživost oralno primenjenih epotilona Formule (Ia) ili (lb) ili farmaceutski prihvatljive soli, solvata, klatrata, hidrata ili njihovog proleka je najmanje 20%, a poželjnije bi bilo da iznosi 40%, odnosno 50%.

U jednom slučaju ovog pronalaska epotiloni Formule (Ia) ili (lb) ili farmaceutski prihvatljiva so, solvat, klatrat, hidrat ili njihov prolek i farmaceutski odgovarajući kiseli neutrališući pufer, primenjeni su u pojedinačnom oralnom doziranom obliku i dati istovremeno. Sastav sadrži kombinaciju jednog ili više epotilona Formule (Ia) ili (lb) ili farmaceutski prihvatljive soli, solvata, klatrata, hidrata ili njihovog proleka i farmaceutski odgovarajući kiseli neutrališući pufer. U tom slučaju može se primeniti kao čvrsti oralni dozirani oblik (tablete, kapsule, puder) ili kao tečni oralni dozirani oblik (rastvor, suspenzija ili eliksir). Rastvor ili suspenzija mogu biti napravljeni neposredno pre upotrebe korišćenjem rastvarača ili korastvarača za rastvaranje epotilona i komponenti pufera.

Na primer, jedan ili više epotilona Formule (Ia) ili (lb) ili farmaceutski prihvatljiva so, solvat, klatrat, hidrat ili njihov prolek i farmaceutski prihvatljiv kiseli neutrališući pufer, mogu biti primenjeni istovremeno kao rastvor epotilona Formule (Ia) ili (lb), rastvoren u tečnoj smeši - propilen giikohetanol:fosfatni pufer (na primer IM, oko pH 8) u odnosu oko 58:12:30.

U drugom slučaju ovog pronalaska, epotiloni Formule (Ia) ili (lb) i farmaceutski prihvatljiv kiseli neutrališući pufer, izradjuju se kao izdvojeni posebni farmaceutski preparati i primenjuju se odvojeno. Svaki od njih koristi se u obliku čvrste ili tečne oralne dozirane forme.

Kada se jedan ili više epotilona Formule (Ia) ili (lb) ili farmaceutski prihvatljiva so, solvat, klatrat, hidrat ili njihov prolek i farmaceutski odgovarajući kiseli neutrališući pufer primenjuju odvojeno, farmaceutski prihvatljiv kiseli neutrališući pufer može se dati oralno pre, posle ili i pre i nakon željenog epotilona Formule (Ia) ili (lb). Farmaceutski odgovarajući kiseli neutrališući pufer oralno je dat i pre i nakon oralno primenjenog željenog epotilona Formule (Ia) ili (lb) u dovoljnoj količini da neutrališe kiselinu u gastrointestinalnom traktu. Farmaceutski prihvatljiv kiseli neutrališući pufer može se dati 5, 3 ili 1 sat pre jednog ili više epotilona Formule (Ia) ili (lb), ili farmaceutski prihvatljive soli, solvata, klatrata, hidrata ili njihovog proleka, ali je najbolje da se primeni unutar prvih 10 minuta pre primene željenog epotilona Formule (Ia) ili (lb). Takodje, farmaceutski prihvatljiv kiseli neutrališući pufer može se dati i 5, 3 ili 1 sat pre epotilona Formule (Ia) ili (lb), ili farmaceutski prihvatljive soli, solvata, klatrata, hidrata ili njihovog proleka, ali je najbolje da se koristi 10 minuta pre davanja željenog epotilona Formule (Ia) ili (lb).

Enterosolventne tablete i kapsule obložene su supstancom koja je otporna u gastričnoj tečnosti, ali se razlaže u intestinumu.

U jednom slučaju pufer je primenjen kao rastvorena tableta.

Veličina terapijske doze željenog epotilona Formule (Ia) ili (lb), ili farmaceutski prihvatljive soli, solvata, klatrata, hidrata ili njihovog proleka, menja se u zavisnosti o kojoj se bolesti radi. Doza i učestalost primene leka, takodje variraju u zavisnosti od starosti, telesne težine, odgovora i istorije bolesti pacijenta.

Interval doziranja može se lako odrediti razmatranjem svih faktora preko-dobro ustaljenih protokola. Farmaceutski prihvatljiv epotilon Formule (Ia) ili (lb), ili farmaceutski prihvatljiva so, solvat, klatrat, hidrat ili njihov prolek, mogu se primeniti oralno u ukupnoj količini od 0.05 do 200 mg/kg/dnevno. Mnogo je bolje ako se primene od 5 do 100 mg/kg/dnevno, a najbolje davanje bilo bi u pojedinačnoj dozi manje od 100 mg/kg/dnevno, ili u 2 do 4 podeljene doze.

Istraživanje obuhvata dozirane oblike željenog epotilona, koji se sastoje od 5 mg po jedinici, 10 mg po jedinici, 15 mg po jedinici, 20 mg po jedinici, 25 mg po jedinici, 50 mg po jedinici i 100 mg po jedinici. Tečne jedinične doze sadrže 2.5 mg/ml i 10 mg/ml epotilona.

Termin "ukupna količina", znači udruženu količinu epotilona Formule (Ia) ili (lb), ili farmaceutski prihvatljive soli, solvata, klatrat, hidrata ili njihovog proleka, ako je više od jednog epotilona Formule (Ia) ili (lb), ili farmaceutski prihvatljive soli, solvata, klatrata, hidrata ili njihovog proleka, u jediničnoj doziranoj formi.

Farmaceutski prihvatljiv kiseli neutrališući pufer primenjen je u dovoljnoj količini da oslobodi najmanje oko 20, 30, 40, a najbolje 50 miliekvivalenata kiselog neutrališućeg kapaciteta.

Istraživanje, takodje, obuhvata dozirane oblike željenog pufera, koji sadrži oko 5 do 100 mg po jedinici, 22.5 mg po jedinici, ali je najbolje ako ima 22.5 mg po jedinici. Tečne jedinične doze pufera u ovom pronalasku sadrže oko 5 do 100 mg po jedinici, 22.5 mg po jedinici, ali je najbolje ako imaju 22.5 mg po jedinici, rastvoreno u oko 50 do 300 mL, 100 do 200 mL, a najbolje u oko 150 mL rastvarača.

Farmaceutski prihvatljiv kiseli neutrališući pufer primenjen je kao tečni rastvor sa pH izmedju 5 do 9, 6 do 8.5, a najbolje sa pH vrednošću od 7 do 8. Svaki farmaceutski prihvatljiv kiseli neutrališući pufer koji poseduje željeni pH rastvora može biti korišćen u postupcima ovog pronalaska. Farmaceutski prihvatljiv kiseli neutrališući pufer je dvobazni-monobazni fosfatni pufer ili dvobazni fosfatni pufer-limunska kiselina-citratni pufer.

U jednom slučaju ovog pronalaska, pacijentu je najpre dato oko 150 mL vodenog rastvora farmaceutski prihvatljivog kiselog neutrališućeg pufera, koji sadrži anhidrovani dvobazni natrijum fosfat (oko 0.2 M), natrijum citrat dihidrat (oko 0.07 M) i anhidrovanu limunsku kiselinu (oko 0.008 M) na pH oko 7.4; nakon toga oralno je primenjeno jedan ili više epotilona Formule (Ia) ili (lb), ili farmaceutski prihvatljive soli, solvata, klatrata, hidrata ili njihovog proleka kao tečni dozirani oblik u sistemu - propilen glikohetanol, u odnosu 80:20; nakon toga oralno je dato oko 150 mL drugog vodenog rastvora, koji sadrži anhidrovani dvobazni natrijum fosfat (oko 0.2 M), natrijum citrat dihidrat (oko 0.07 M) i anhidrovanu limunsku kiselinu (oko 0.008 M) na pH oko 7.4.

PREPARATI, JEDINIČNI DOZIRANI OBLICI I KITOVI

U pronalazak, su uključeni i kitovi, koji kao prvu komponentu sadrže jedan ili više epotilona Formule (Ia) ili (lb), ili farmaceutski prihvatljivu so, solvat, klatrat, hidrat ili njihov prolek, a kao drugu komponentu imaju farmaceutski odgovarajući kiseli neutrališući pufer.

Prva i druga komponenta su u obliku izdvojenih specifičnih farmaceutskih preparata, koji se primenjuju odvojeno. Obe komponente su farmaceutski dozirani oblici pogodni za oralnu primenu ili se izradjuju kao čvrste supstance koje mogu da se rekonstituišu do dobijanja tečnog oralnog doziranog oblika. Epotiloni Formule (Ia) ili (lb) pakuju se u tamne bočice.

Farmaceutski preparati i dozirani oblici za oralnu primenu mogu biti izdvojene dozirane forme, kao što su tablete (oriblete), kaplete, kapsule, praškovi, enterosolventne tablete, enterične granule, enterosolventne meke želatinske kapsule i tečnosti (sirupi). Svaka doziranaformasadrži odredjenu količinu aktivnog sastojka i može se napraviti postupcima dobro poznatim u farmaciji (Videti Remington&Apos; S Pharmaceutical scoences, 18th ed., Mack Publishing, Easton Pa (1990)).

Oralni dozirani oblici nastaju mešanjem aktivnih sastojaka sa najmanje jednom pomoćnom materijom prema uobičajenim farmaceutskim tehnikama. Pomoćne materije mogu biti raznovrsne zavisno od forme preparata koji želimo da dobijemo. Na primer, pomoćne supstance potrebne za korišćenje u čvrstom oralnom doziranom obliku (puderi, tablete, kapsule i kaplete) uključuju škrob, šećere, mikrokristalnu celulozu, rastvarače, granulišuće agense, lubrikanse, vezujuće supstance, i supstance za razlaganje. Pogodne pomoćne supstance za upotrebu u oralnim tečnim doziranim oblicima su voda, glikoli, ulja, alkoholi, mirišljave supstance, konzervansi i boje.

Tablete i kapsule predstavljaju farmaceutske preparate i oralne dozirane oblike, kod kojih se koriste čvrste pomoćne materije. Ako je potrebno, tablete se mogu obložiti standardnim vodenim i ne-vodenim tehnikama. Svaki dozirani oblik može se napraviti nekom od farmaceutskih postupaka. Farmaceutski preparati i dozirani oblici prave se uniformno mešanjem aktivnih sastojaka sa tečnim nosačima, finalno izdeljenim čvrstim nosačima, ili sa oba i zatim oblikovanjem u željeni proizvod.

Na primer, tablete se mogu praviti komprimovanjem ili oblikovanjem pomoću matrice.

Komprimovane tablete nastaju komprimovanjem aktivnih sastojaka u odgovarajućoj mašini, u formi praška ili granula, pomešanih sa pomoćnim materijama. Tablete nastale oblikovanjem u matrici nastaju u odgovarajućoj mašini mešanjem praskaste supstance ovlažene sa inertnim tečnim rastvaračem.

Primeri pomoćnih materija koje se koriste u oralnim doziranim oblicima ovog pronalaska uključuju sredstva za vezivanje, sredstva za punjenje, sredstva za razlaganje i lubrikanse.

U farmaceutskim preparatima i doziranim oblicima koriste se sredstva za vezivanje, gde spadaju škrob, želatina, prirodne i sintetičke gume, kao što su akacija, natrijum alginat, algininska kiselina, drugi alginati, tragakanta, guar guma, celuloza i njeni derivati (etil celuloza, celuloza acetat, kalcijum karboksimetil celuloza, natrijum karboksimetil celuloza), polivinil pirolidon, metil celuloza, pre-želatinizirani škrob, hidroksipropil metil celuloza, (Nos. 2208,2906,2910), mikrokristalna celuloza i njihove smeše.

Oblici mikrokristalne celuloze su AVICEL-PH-101, AVICEL-PH-103, AVICEL-RC-581, AVICEL-PH-105 (FMC Corporation, American Viscose Division, Avicel Sales, Marcus Hook, PA) i njihove smeše. Specifično sredstvo za vezivanje je smeša mikrokristalne celuloze i natrijum karboksimetil celuloze, koja se prodaje kao AVICEL RC-581. Odgovarajuće anhidrovane ili pomoćne materije niske vlažnosti ili aditivi su AVICEL-PH-103 i Starch 1500 LM.

U sredstva za punjenje koja se koriste u farmaceutskim preparatima i doziranim oblicima spadaju talk, kalcijum karbonat (granule ili praškovi), mikrokristalna celuloza, celuloza, dekstran, kaolin, manitol, silikatna kiselina, sorbitol, škrob, preželatinizirani škrob i njihove smeše. Sredstva za vezivanje ili punjenje prisutna su u oko 50 do 99 težinskih procenata farmaceutskih preparata ili doziranih oblika u ovom pronalasku.

Sredstva za razlaganje, koriste se u farmaceutskim preparatima i doziranim oblicima za pravljenje tableta, koje se razlažu u vodenoj sredini. Tablete koje sadrže mnogo ovih sredstava mogu se pre vremena razložiti, dok se one koje sadrže malo sredstava za razlaganje, ne mogu razložiti željenom brzinom ili pod odredjenim uslovima. U ovom pronalasku koristi se dovoljna količina supstance za razlaganje, koja nije ni suviše velika, niti suviše mala da škodi oslobadjanju aktivnih sastojaka, koji se koriste za formiranje farmaceutskih preparata i čvrstih oralnih doziranih oblika.

Količina sredstava za razlaganje koja se koriste zavisi od formulacije. Tipični farmaceutski preparati i dozirani oblici sadrže oko 0.5 do 15, odnosno češće od 1 do 5 težinskih procenata sredstva za razlaganje.

Sredstva za razlaganje koja se koriste u farmaceutskim preparatima i doziranim oblicima ovog pronalaska sadrže agar-agar, algininsku kiselinu, kalcijum karbonat, mikrokristalnu celulozu, natrijum karmelose, unakrsno vezani povidon, kalijum poliakrilat, natrijum škrobni glikolat, krompirov i ostali škrob, pre-želatinozni škrob, gline, druge alginate, ostale celuloze, gume i njihove smeše.

Lubrikansi koji se koriste u farmaceutskim preparatima i doziranim oblicima ovog ogleda sadrže kalcijum stearat, magnezijum stearat, mineralno ulje, svetio mineralno ulje, glicerin, sorbitol, manitol, polietilen glikol, druge glikole, stearinsku kiselinu, natrijum lauril sulfat, talk, hidrogenovano biljno ulje (ulje kikirikija, pamučno ulje, ulje suncokreta, sezamovo ulje, maslinovo ulje, kukuruzno ulje i sojino ulje), cink stearat, etil oleat, etil laureat, agar i njihove smeše. Dodatni lubrikansi sadrže, na primer, siloid silika gel (AEROSIL 200, proizveden W. R. Grace Co. of Baltimore, MD), koagulisani aerosol sintetičkog silika gela (obeležen Degussa Co. of plano, TX), Cabo-sil (pirogeni silikon dioksid produkt prodat preko Cabon Co. of Boston, MA) i njihove smeše. Lubrikansi čine najmanje jedan težinski procenat farmaceutskog preparata ili doziranog oblika u čiji sastav ulaze.

Farmaceutski preparati i dozirani oblici sadrže jedno ili više jedinjenja koja redukuju brzinu razlaganja aktivnog sastojka. Svako jedinjenje, koje je ranije definisano kao"stabilizator" sadrži antioksidanse, kao što su puferi askorbinske kiseline i njene soli.

Druge pogodne oralne dozirane oblike predstavljaju rastvori za oralnu primenu, u čijem se slučaju koristi rastvarač. Tečni oralni dozirani oblici nastaju kombinacijom aktivnog sastojka u pogodnom rastvaraču, do dobijanja rastvora, suspenzije, sirupa ili eliksira.

Rastvori, suspenzije, sirupi i eliksiri sadrže druge aditive, kao što su glicerin, sorbitol, propilen glikol, šećeri, mirišljavi agensi i stabilizatori.

Kitovi u ovom ogledu sadrže kao prvu i/ili drugu komponentu već napravljen

tečni oralni dozirani oblik spreman za primenu ili čvrstu farmaceutsku smešu, koja se može rekonstituisati sa rastvaračem do dobijanja tečnog oralnog doziranog oblika; kit može sadržati rekonstituišući rastvarač.

Rastvarač za rekonstituciju kombinuje se sa aktivnim sastojkom do dobijanja tečnog oralnog doziranog oblika aktivnog sastojka. Aktivni sastojak se rastvara u pogodnom rastvaraču i dobija se rastvor. Rastvarač može biti voda, neka ne-vodena tečnost, ili kombinacija vodene i ne-vodene komponente. Odgovarajuća ne-vodena komponenta sadrži ulja; alkohole, kao što je etanol; glicerin; i glikole, kao što je polietilen glikol i propilen glikol.

Farmaceutski prihvatljiv kiseli neutrališući pufer u pronalasku je rastvoran u

vodi, a njegov najpogodniji rastvarač je voda ili vodeni sistemi, uključujući rastvore soli ili rastvore dekstroze.

Epotiloni Formule (Ia) ili (lb), ili farmaceutski prihvatljiva so, solvat, klatrat, hidrat, ili njihov prolek su relativno nerastvorni u vodi. Za epotilone Formule (Ia) ili (lb), ili farmaceutski prihvatljivu so, solvat, klatrat, hidrat, ili njihov prolek, poželjnije su ne-vodene tečnosti ili tečnosti koje sadrže vodenu i ne-vodenu komponentu, a bolje je da se koriste ne-vodene tečnosti.

Prioritetna ne-vodena tečnost za epotilone Formule (Ia) ili (lb), ili farmaceutski prihvatljivu so, solvat, klatrat, hidrat, ili njihov prolek je surfaktant, kao što su propilen glikol i etanol, uglavnom u odnosu 80:20.

Pogodne ne-vodene tečnosti ili surfaktanti uključuju polietilen glikol, polisorbate, propilen glikol, gliceril estre, Cremofor, estre i alkohole masnih kiselina, polioksietilen i estre i etre masnih alkohola.

Kada rastvarač za epotilone Formule (Ia) ili (lb), ili farmaceutski prihvatljivu so, solvat, klatrat, hidrat, ili njihov prolek, sadrži vodenu komponentu, poželjnije je da je vodena komponenta puferovana, tako da redukuje raspadanje epotilona Formule (Ia) ili (lb). Tečni oralni dozirani oblici koji sadrže jedan ili više epotilona Formule (Ia) ili (lb), ili farmaceutski prihvatljivu so, solvat, klatrat, hidrat, ili njihov prolek, u vodenom ili delimično vodenom rastvaraču obezbedjuju stabilnije tečne oralne dozirane oblike, od tečnog oralnog doziranog oblika bez pufera. Brzina razlaganja jednog ili više epotilona Formule (Ia) ili (lb), ili farmaceutski prihvatljive soli, solvata, klatrata, hidrata,ili njihovog proleka u puferovanim tečnim oralnim formulacijama, manja je od brzine razlaganja u nepuferovanim tečnim oralnim formulacijama. Epotiloni Formule (Ia) ili (lb) su nestabilni u kiselom i baznom medijumu, verovatno zbog kiselog ili baznog katalitičkog hidrolitičkog otvaranja epoksidnog prstena. Puferovanjem tečnih oralnih formulacija moguće je održati njihovu pH vrednost, tako da brzina razlaganja epotilona Formule (Ia) ili (lb) bude dovoljna da se epotiloni Formule (Ia) ili (lb) ne razlože pre nego se primene na pacijenta. Vrednosti pH rastvora u vodenim tečnim oralnim doziranim oblicima kreću se izmedju 5 i 9, 6 i 8.5, a najbolje je ako pH vrednost iznosi izmedju 7 i 8.

Kada je aktivni sastojak čvrstog farmaceutskog sastava, on reaguje sa rastvaračem do dobijanja tečnog oralnog doziranog oblika u praškastoj formi i rastvara se sa tečnošću pre primene na pacijenta. Praškasta farmaceutska jedinjenja mogu se pakovati u bočice u koje se dodaje rastvarač.

Sadržaj bočice može se dodati u rastvarač u odvojenoj posudi. Praškasti aktivni sastojak u ovom pronalasku može biti upakovan u kesicu, kao što je folija, koja se otvara i sadržaj se dodaje u rastvarač. Praškasti aktivni sastojak može biti formulisan kao tableta, koja se rastvara kada se doda u rastvarač. Često tablete sadrže dezintegratore, koji olakšavaju rastvaranje tableta.

Ovo je istraživanje, takodje, usmereno na farmaceutska jedinjenja koja sadrže jedan ili više epotilona Formule (Ia) ili (lb), ili farmaceutski prihvatljivu so, solvat, klatrat, hidrat, ili njihov prolek u čvrstom obliku i čvrst farmaceutski prihvatljiv kiseli neutrališući pufer u dovoljnoj količini da redukuje razlaganje jednog ili više epotilona Formule (Ia) ili (lb), ili farmaceutski prihvatljive soli, solvata, klatrat, hidrata, ili njihovog proleka, kada se farmaceutska jedinjenja rekonstituišu sa tečnošću do dobijanja tečnog oralnog doziranog oblika.

Osim što obezbedjuju stabilniji tečni oralni dozirani oblik, farmaceutska jedinjenja obezbedjuju tečni oralni dozirani oblik, gde je epotilon bolje biološke rapoloživosti kada se oralno primeni na pacijenta.

Pronalazak, takodje, obuhvata tečni oralni dozirani oblik koji sadrži jedan ili više epotilona Formule (Ia) ili (lb), ili farmaceutski prihvatljivu so, solvat, klatrat, hidrat, ili njihov prolek i čvrst farmaceutski prihvatljiv kiseli neutrališući pufer rastvoren ili dispergovan u rastvaraču. Jedan ili više epotilona Formule (Ia) ili (lb), ili farmaceutski prihvatljiva so, solvat, klatrat, hidrat, ili njihov prolek i čvrst farmaceutski prihvatljiv kiseli neutrališući pufer rastvoren u tečnosti daju rastvor.

Pufer iz farmaceutskog preparata koji omogućava tečnu oralnu formulaciju, poseduje pH vrednosti izmedju 5 do 9, 6 do 8.5, a najbolje izmedju 7 do 8. Farmaceutski prihvatljiv kiseli neutrališući pufer prisutan je u dovoljnoj količini da oslobodi najmanje oko 20, 30, 40, ili najbolje je ako oslobodi 50 miliekvivalenata kiselog neutrališućeg kapaciteta, kada se rekonstituiše sa tečnošću do dobijanja tečnog oralnog doziranog oblika. Svaki farmaceutski prihvatljiv kiseli neutrališući pufer koji obezbedjuje pH vrednost unutar ovog opsega može se koristiti u ovom pronalasku. Farmaceutski prihvatljiv kiseli neutrališući pufer je dvobazni-monobazni fosfatni pufer ili dvobazni fosfatni pufer-limunska kiselina-citratni pufer.

Farmaceutska jedinjenja u ovom ogledu uključuju jedan ili više epotilona Formule (Ia) ili (lb), ili farmaceutski prihvatljivu so, solvat, klatrat, hidrat, ili njihov prolek u ukupnoj količini oko 0.05 do 200 mg, 5 do 100 mg, a najbolje je ako sadrže oko 10 do 50 mg.

Buduća istraživanja vezuju se za kitove koji sadrže farmaceutske preparate koji se sastoje iz (i) kombinacije jednog ili više epotilona Formule (Ia) ili (lb), ili farmaceutski prihvatljive soli, solvata, klatrata, hidrata, ili njihovog proleka u čvrstom obliku i čvrstog farmaceutski prihvatljivog kiselog neutrališućeg pufera i (ii) rastvarača za rekonstituciju farmaceutskog preparata do dobijanja tečnog oralnog doziranog oblika, pošte je farmaceutski prihvatljiv kiseli neutrališući pufer prisutan u dovoljnoj količini da redukuje razlaganje jednog ili više epotilona Formule (Ia) ili (lb), ili farmaceutski prihvatljive soli, solvata, klatrata, hidrata, ili njihovog proleka, kada se kombinacija rekonstituiše sa rastvaračem do dobijanja tečnog oralnog doziranog oblika.

Rastvarač za rekonstituciju kombinuje se sa aktivnim sastojkom do dobijanja tečnog oralnog doziranog oblika aktivne supstance. Tečni oralni dozirani oblik može biti rastvor ili suspenzija. Aktivni sastojak se rastvara u rastvaraču i dobija se rastvor, pri čemu rastvarač može biti voda, ne-vodena tečnost ili tečnost koja se dobija kombinacijom ne-vodene i vodene komponente. Pogodne ne-vodene komponente su ulja; alkoholi, kao što je etanol; glicerin; i glikoli, kao što je polietilen glikol i propilen glikol. Pogodan rastvarač za kitove je propilen glikol:etanol:fosfatni pufer (IM, pH 8) u odnosu oko 58:12:30.

Rastvarač sadrži aditive, kao što su glicerin, sorbitol, propilen glikol, mirišljavi agensi i konzervansi, za poboljšanje ukusa tečnog oralnog doziranog oblika.

Istraživanje obuhvata anhidrovana farmaceutska jedinjenja i dozirane forme koje sadrže aktivne sastojke, jedan ili više epotilona Formule (Ia) ili (lb), ili farmaceutski prihvatljivu so, solvat, klatrat, hidrat, ili njihov prolek i/ili farmaceutski prihvatljiv kiseli neutrališući pufer. Anhidrovana farmaceutska jedinjenja i dozirane forme su naročito pogodne, jer voda može olakšati degradaciju nekih jedinjenja. Na primer, dodavanje oko 5% vode je široko prihvaćeno u farmaceutskoj praksi, zbog stimulacije produženog zadržavanja i regulisanja poluživota ili stabilnosti formulacija u toku vremena (Videti Jens T. Cartensen, Drug Stabilitv: Principles & Practice, 2d. Ed., Marcel Dekker, NY, NY, 1995, pp 379-80. Voda i toplota ubrzavaju razlaganje nekih jedinjenja.

Dejstvo vode na formulaciju može biti od ogromnog značaja, pošto se vlaga i/ili vlažnost obično susreću u toku proizvodnje, manipulisanja, pakovanja, skladištenja, otpremanja i korišćenja formulacija. Anhidrovani farmaceutski preparati i dozirane forme su naročito pogodni, jer sadrže jedan ili više epotilona Formule (Ia) ili (lb), ili farmaceutski prihvatljivu so, solvat, klatrat, hidrat, ili njihov prolek, komponente koje su osetljive na vlagu.

Anhidrovani farmaceutski preparati i dozirane forme mogu se praviti i skladištiti tako da im se sačuva anhidrovano stanje. Anhidrovani farmaceutski preparati i dozirane forme mogu se praviti korišćenjem anhidrovanih ili sastojaka koji sadrže nisku vlagu u uslovima niske vlažnosti. Anhidrovani farmaceutski preparati i dozirane forme pakuju se korišćenjem materijala koji onemogućavaju izlaganje vodi i mogu biti uključeni u odgovarajuće kitove. Primeri pogodnih supstanci za pakovanje su hermetičke folije, plastika, jedinični sudovi (bočice), blister pakovanja i strip pakovanja.

PRIMERI

Neka izvodjenja u ovom pronalasku, kao i izvesne prednosti ogleda, ilustrovana su praćenjem sledećih primera.

Primer 1:Farmakokinetičke i farmakodinamske studije Jedinjenja (A) kod miševa, pacova i pasa

1.1 Analiza uzorka: Analiziran je uzorak plazme iz farmakokinetičkih/farmakodinamskih studija za koncentraciju Jedinjenja (A), korišćenjem LC/MS/MS (tečna hromatografija/masena spektrometrija/masena spektrometrija) eseja sa opsegom standardne krive od 5 do 20,000 ng/mL (10 do 40,000 nM) za studije na miševima i 2 do 1000 ng/mL (4 do 2000 nM) za studije na pacovima i psima. U farmakodinamskim studijama, koncentracija Jedinjenja (A) odredjena je korišćenjem LC/MS/MS eseja sa opsegom standardne krive od 5 do 20,000 ng/mL (10 do 40,000 nM) u plazmi miša. LC/MS/MS esej korišćen je i za odredjivanje koncentracije Jedinjenja (B), koje predstavlja degradacioni produkt Jedinjenja (A), formiran ustock rastvoruiliin vivouplazmi pacova i pasa. Struktura Jedinjenja (B) je:

Uzorci su analizirani dodavanjem internog standarda od 0.2 mL po uzorku, talože se acetonom, a zatim se supernatant ekstrahuje 1-hlorbutanom. Organski sloj je uklanjen i uparen do suva. Ostatak nakon sušenja je rekonstituisan i ubačen u LC/MS/MS sistem. Za humanu plazmu primenjeno je hromatografsko razdvajanje, izokratno, na YMC ODS-AQ koloni (4.6 x 50 mm, 3 mm) sa mobilnom fazom acetonitril : 0.01 M amonijum acetat, pH 5.0 (65 : 35). Za plazmu pasa, primenjeno je hromatografsko razdvajanje, izokratno, na ZORBAX Stable Bond C18 koloni (2.1 x150 mm, 5 mm), održava se na 40EC sa mobilnom fazom od 0.1 M amonijum acetat, pH 5.0 i acetonitril. Za plazmu pacova primenjeno je hromatografsko razdvajanje, izokratno, na Stable Bond C18 koloni (2.1 x 150 mm, 5 mm), održavano na 40EC sa mobilnom fazom acetonitril : 0. 1 M amonijum acetat, pH 5.0 (1 : 1). Detekcija je vršena preko negativne elektro masene spektrometrije. Standardna kriva je u opsegu od 2 do 500 mg/mL za sve analite i snabdevena je sa l/x kvadratnim regresionim modelom.

Jedinjenja (A) i (B) stabilna su na sobnoj temperaturi najmanje 4h u EDTA (etilendiamintetrasirćetna kiselina) plazmi pacova i pasa pre nego se krene u analitički rad; takodje su stabilna najmanje 24h na 4°C u autosampler-u nakon procesovanja i najmanje 5 nedelja na -20°C ili niže i kroz najmanje 3 ciklusa odmrzavanja. Oba analita su stabilna u svežoj EDTA krvi pacova i pasa na sobnoj temperaturi najmanje 0.5h.

1.2 Farmakokinetika kod miševa: Jedinjenje (A) primenjeno je intravenski (5 mg/kg) i oralno (48 mg/kg) kod ženki (CDFt) miševa. Za IV primenu, Jedinjenje (A) je rastvoreno u 20% rastvoru etanola i dato u bolus dozi. Za oralnu primenu, rastvor Jedinjenja (A) napravljen je kao smeša u odnosu 3:7, etanol:fiziološki rastvor puferovan fosfatom (0.25 M, pH 8.0) i dat preko šprica sa pumpicom za oralnu primenu.

Primeri plazme za odredjivanje koncentracije Jedinjenja (A) uzeti su iz 3 odvojena miša nakon IV doze ( 5, 15, 45 min i 2, 4, 6 h) i nakon oralne doze (15, 45 min i 2, 4, 6 h).

Nakon IV davanja, sistemski klirens ili ukupni telesni klirens (CLT) Jedinjenja

(A) koji iznosi 68 mL/min/kg i predstavlja 76% prolaska krvi kroz jetru (90

mL/min/kg) isteady- state volumenadistribucije (VSS) od 6.3 L/kg, ukazuju na široku ekstravaskularnu distribuciju, pošto je ukupna količina telesne tečnosti kod miševa približno 0.7 L/kg (Videti B. Davies and T. Morris, Phvsiological Parameters in Laboratorv Animals and Humans, "Pharmaceutical Research, 1993, 10(7), 1093-1095). Krajnja eliminacija, poluživot (T-HALF) je približno 3h.

Nakon oralne primene Jedinjenja (A), maksimalna koncentracija u plazmi (CMAX) iznosila je 5983 mg/mL i vreme za koje je postignuto CMAX (TMAX) je 0.25h od post-doze, što pokazuje izuzetno brzu apsorpciju Jedinjenja (A). Apsolutna oralna bioraspoloživost Jedinjenja (A) iznosila je 31%.

1.3 Farmakokinetika kod pacova: Mužjacima Sprague Dawley pacova (n = 3-6 životinja u grupi) dato je Jedinjenje (A) u obliku pojedinačne intraarterijske (2 mg/kg) 10 min infuzije, oralne (8 mg/kg) i intraduodenalne (8 mg/kg) doze. Svi rastvori pripremani su u 20% etanolu. Uzorci plazme dobijeni su u toku 24h perioda i koncentracija Jedinjenja (A) odredjena je korišćenjem LC/MS/MS eseja.

Nakon intraarterijskog davanja, vremenski profili koncentracije plazme pokazuju bifazni raspored sa brzim opadanjem 2h od post-doze i sporom završnom fazom. CLT (srednja vrednost = 56 mL/min/kg) Jedinjenja (A) predstavlja 100% prolaska krvi kroz jetru (56 mL/min/kg) i VSS (srednja vrednost = 23 L/kg) pokazuje široku ekstravaskularnu distribuciju, pošto je ukupna voda u telu kod pacova oko 0.7 L/kg (Videti, B. Davies and T. Morris, Phvsiological Parameters in Laborator/Animals and Humans, "Pharmaceutical Research, 1993, 10(7), 1093-1095). Srednji poluživot (T-HALF) iznosio je 9.6h.

Nakon oralnog i intraduodenalnog davanja, srednje CMAX vrednosti su 228 i 642 mg/mL; TMAX vrednosti su 0.17h i 0.08h, što ukazuje da je apsopcija Jedinjenja (A) veoma brza. Apsolutna oralna bioraspoloživost Jedinjenja (A) nakon oralne i intraduodenalne primene kod pacova je 7.5% i 27%.

U drugoj studiji Sprague Dawley pacovi (n = 2 po grupi) primili su (kanulirani žučni putevi) pojedinačnu intraarterijsku (10 mg/kg) ili oralnu (20 mg/kg) dozu Jedinjenja (A) i uzorci žuči, urina i plazme skupljeni su u periodu od 9h nakon primene doze. Prisutna je mala ekskrecija intaktnog Jedinjenja (A) preko žuči (C 1% doze). Detektovana je mala količina Jedinjenja (A) u urinu, ali stvarne koncentracije nisu kvantifikovane zbog nestabilnosti podataka za Jedinjenje (A) u urinu. Neka jedinjenja u urinu i plazmi su prethodno identifikovana preko LC/MS i uključuju izomer M+O i hidrolitički produkt (M+18). Metabolit (M-2) je odredjen u plazmi.

1.4 Farmakokinetika kod pasa: Ženke zečari (n = 3) primile su 10 min IV infuziju 0.5 mg/kg Jedinjenja (A) (data kao 10% rastvor etanola). Uzorci plazme uzeti su u toku 32h perioda nakon doze za odredjivanje koncentracije plazme Jedinjenja (A). Vremenska kriva koncentracije plazme pokazuje multifazni profil sa inicijalnim brzim opadanjem koncentracije 2h nakon primljene doze i spore završne faze eliminacije. CLT (srednja vrednost = 17.3 mL/min/kg) Jedinjenja (A) predstavlja oko 56% prolaska krvi kroz jetru (30.9 mL/min/kg) i srednja vrednost VSS 25.2 L/kg ukazuje na široku ekstravaskularnu distribuciju zasnovanu na ukupnoj telesnoj tečnosti od 0.6 L/kg kod pasa. T-HALF je procenjeno na približno 24h.

Kinetika Jedinjenja (A) je takodje procenjena kao deo pojedinačne IV doze u toksikološkoj studiji. Jedinjenje (A) je dato kao IV infuzija (15 min) u dozi od 0.5 i 5 mg/kg na 2 psa/rod/doza. Dozirani rastvori Jedinjenja (A) napravljeni su u 40% propilen glikolu, 5% Cremofor-u, 5% etanolu i 50% fosfatnom puferu (50 mM, pH 7.4) jedan dan pre doziranja. Uzorci krvi dobijeni su u 48h periodu nakon doziranja i koncentracije jedinjenja (A) i (B) u plazmi odredjene su korišćenjem LC/MS/MS eseja sa opsegom standardne krive od 2-500 ng/mL za oba analita. Za doze od 0.5 i 5 mg/kg Jedinjenja (A), srednje vrednosti CMAX za Jedinjenje (A), za muški i ženski rod iznose 218 i 5118 ng/mL, dok su srednje vrednosti AUC 316 i 6925 h. ng/mL. Za doze u odnosu 1:10, srednja vrednost CMAX i AUC vrednosti za Jedinjenje (A) su u odnosu 1:23 i 1:27, što pokazuje nelinearnu kinetiku Jedinjenja (A) izmedju 0.5 i 5 mg/kg doza. T-HALF, MRT (INF), CLT i VSS nisu odredjene zbog ograničene probe u studiji.

Za Jedinjenje (B) srednje vrednosti CMAX su 95.6 i 984 ng/mL za 0.5 i 5 mg/kg doze, dok su srednje vrednosti AUC 55.0 i 1109 h. ng/mL. Srednje vrednosti CMAX i AUC za Jedinjenje (B) su u odnosu 1:10 i 1:20. Efekat pola na kinetiku Jedinjenja (A) ne može se konačno proceniti zbog malog broja uzoraka, ali je kinetika jako slična izmedju muškog i ženskog pola.

Ova studija pokazuje da je dozno-zavisno povećanje sistemskog izlaganja Jedinjenju (A) povećano više od proporcionalnog povećanja doze. Takodje je opisano i dozno-zavisno povećanje sistemskog izlaganja Jedinjenju (B).

Primer 2:Toksikokinetika kod pacova.

Toksikokinetika Jedinjenja (A) procenjena je u pojedinačnoj IV dozi toksikološke studije kod pacova. Dozirani rastvori Jedinjenja (A) napravljeni su u 50% propilen glikolu, 10% Cremofor-u EL, 10% etanolu i 30% fosfatnom puferu (50 mM, pH 7.4) jedan dan pre doziranja. Jedinjenje (A) je dato kao IV infuzija (3 min) u dozi od 10, 25 i 30 mg/kg na 3 pacova/rod/doza. Uzorci krvi dobijeni su u 24h periodu nakon doziranja i koncentracije jedinjenja (A) i (B) u plazmi odredjene su korišćenjem LC/MS/MS eseja sa opsegom standardne krive od 2-500 ng/mL za oba analita. Za doze od 10, 25 i 30 mg/kg, srednje vrednosti CMAX za Jedinjenje (A), su kod ženki pacova 6422, 19066 i 24414 ng/mL, a kod mužjaka 8384, 20524 i 25054. Srednje vrednosti AUC za 10, 25 i 30 mg/kg su 3864, 11980 i 19269 h. ng/mL za mužjake, dok za ženke iznose 8156, 28476 i 34563 h. ng/mL. Za doze u odnosu 1:2.5:3, srednja vrednost CMAX vrednosti za Jedinjenje (A) za mužjake i ženke je u odnosu 1:3.0:3.8 i 1:2.5:3.0, i AUC vrednosti su u odnosu 1:3.1:4.9 i 1:3.5:4.2. T-HALF, srednje vreme preko vremenskog intervala od nultog do beskonačnog MRT (INF), ukupan klirens u telu (CLT) i VSS nisu odredjeni zbog ograničene probe u studiji.

Za Jedinjenje (B), CMAX i AUC vrednosti u zavisnosti od pola i doze u grupama su u opsegu izmedju 499 do 1787 ng/nt i 222 do 2003 h. ng/mL. CMAX vrednosti za Jedinjenje (B) kod mužjaka i ženki su u odnosu 1:2.6:3.6 i 1:3.0:2.8,

dok su AUC vrednosti u odnosu 1:3.4:7.0 i 1:4.3:5.5. AUC vrednosti Jedinjenja (A) i

(B) su za 1.8 do 2.4 puta i 1.3 do 2.0 puta više kod ženki u poredjenju sa mužjacima.

Ova studija pokazije da je dozno-zavisno povećanje sistemskog izlaganja

Jedinjenju (A) povećano više od proporcionalnog povećanja doze, gde ženke poseduju veću izloženost od mužjaka. Takodje je opisano i dozno-zavisno povećanje sistemskog izlaganja Jedinjenju (B).

Primer 3:Farmakodinamske studije Jedinjenja (A).

• - Serija eksperimenata izvršena je u cilju procene antikancerske aktivnosti Jedinjenja (A) primenjenog u vidu IV infuzije u toku lOh perioda kod ženki pacova sa subkutanim humanim ovarijalnim karcinomom (Pat-7 tumor). Jedinjenje (A), kao rastvor u 10% etanolu, primenjeno je u dozi od 3 do 150 mg/kg. Rezultati ovih eksperimenata pokazuju da je minimalna efektivna doza Jedinjenja (A) izmedju 3 do 6 mg/kg (definisana je kao doza potrebna za proizvodnju aktivnog ekvivalenta 0.5

log smrti ćelije). U seriji paralelnih eksperimenata, steady-state koncentracije Jedinjenja (A) odredjene su kod miševa nakon lOh IV infuzije sa dozom od 3 do 150 mg/kg. Koncentracije Jedinjenja (A) u plazmi odredjene su 2, 4 i 6 h nakon početka infuzije i uporedjene su za svaku dozu u toku vremenskog perioda, što ukazuje da je stabilno stanje preko 2h. Minimum efektivne koncentracije, definisan kaosteady-statekoncentracija postugnuta minimalnom efektivnom IV infuzionom dozom izmedju 3 do 6 mg/kg, primećen je izmedju 15 do 45 ng/mL (ca. 30 do 90 nM).

Primer 4:In V/ tro studijena metabolizam Jedinjenja (A)

Jedinjenja (A) (40 : M) inkubirano je sa mišjim, pacovskim, psećim i humanim mikrozomima jetre pojačanim nikotinamid adenin dinukleotid fosfatom (NADPH) i brzina oksidativnog metabolizme jedinjenja (A) bila je 2.1, 0.7, 1.2 i 1.3 nM/min/mg proteina. Medjutim, distribucija metabolita slična je za sve vrste (metaboliti sadrže nekoliko M+6 i M-2 jedinjenja). Kvalitativno, očigledno je da postoji sličnost u produkciji metabolita Jedinjenja (A) nakon inkubacije mišjim ili humanim hepatocitima, u poredjenju sa inkubacijom mikrozoma. Produkti, slični onim nastalim hemijskom degradacijom Jedinjenja (A), mogu biti glavni produkti u inkubaciji hepatocita.

Sposobnost jedinjenja (A) da inhibira najveći humani citohrom P450s (CYPs), odgovoran za metabolizam lekova, procenjena jein vitro korišćenjemrekombinantnih humanih CYP izoformi. Odredjene su IC50vrednosti za inhibiciju deetilacije 3-cijano-7-etoksikumarina (CYP1A2, CYP2C9, CYP2C19 i CYP2D6) i za inhibiciju dealkilacije benzoilrezorufina (CYP3A4). Jedinjenje (A) je slab inhibitor humanog CYP3A4 sa prosečnim IC50vrednostima od 7.3 p.M (3.7 p.g/mL). Jedinjenje ne inhibira CYP1A2, CYP2C9, CYP2C19 i CYP2D6. Oviin vitrorezultati pokazuju da Jedinjenje (A) može imati minimalni potencijal da menja metabolički klirens lekova, koji se metabolišu preko CYP3A4 i slab uticaj na metabolički klirens lekova, koji se metabolišu preko CYP1A2, CYP2C9,CYP2C19 i CYP2D6.

Jedinjenje (A) inkubirano je sa humanim mikrozomima jetre zajedno sa jedinjenjima specifičnim za inhibiciju pojedinačnog citohroma P450s, koji učestvuju u metabolizmu lekova. Uključeni su sledeći inhibitori: furafilin (CYP1A2), 8-metoksipsoralen (CYP2A6), orfenadrin (CYP2B6), sulfafenazol (CYP2C9), tranilcipromin (CYP2C19), hinidin (CYP2D6), troleandomicin (CYP3A4) i ketokonazol (CYP3A4). Značajna inhibicija primećena je samo sa CYP3A4 inhibitorima, koji kompletno inhibiraju biotransformaciju Jedinjenja (A). Jedinjenje (A) kod ljudi može biti supstrst za CYP3A4.

Koeficijent propustljjvosti (Pc) Jedinjenja (A) ispitivan je uin vitromodelu za intestinalnu apsorpciju kod ljudi, koji čini Caco-2 sistem ćelijske kulture. Pc Jedinjenja

(A) u koncentraciji od 10, 30 i 100 pM (ca. 5, 15 i 50 pg/mL) je 94, 105 i 128 nm/sec. U istom eksperimentu odredjen je i Pc nekih model jedinjenja, čija je

bioraspoloživost kod ljudi poznata. Ova jedinjenja uključuju salicilnu kiselinu, acetaminofen, ibuprofen i propranolol. Svi su imali Pc > 200 nm/sec i najmanje je 90% apsorbovano. Pc vrednosti od 94-128 nm/sec za Jedinjenje (A) pokazuju njegov potencijal za dobru apsorpciju kod ljudi.

Primer 5:Farmakokinetika i apsolutna oralna bioraspoloživost različitih formulacija Jedinjenja (A) kod pasa zečara - .

Procenjena je apsolutna oralna bioraspoloživost različitih formulacija Jedinjenja (A) kod adultnih mužjaka pasa zečara (n = 4). Jedinjenje (A) primenjeno je kao 10 min intravenska (IV) infuzija (0.5 mg/kg), puferovani oralni rastvor (2 mg/kg) i puferovana oralna suspenzija (1 mg/kg).

5.1. Plan eksperimenta: Plan eksperimenta za ispitivanje dat je u Tabeli 1.

Planirana je pojedinačna doza, četiri tretmana, četiri perioda, ne-randomizovano,crossover plan.Jedinjenje (A) primenjeno je na 4 adultna mužjaka psa zečara kao 10 min IV infuzija (0.5 mg/kg), puferovanog oralnog rastvora (2 mg/kg) ili puferovane oralne suspenzije (2 mg/kg). Za IV primenu, Jedinjenje (A) je formulisano kao rastvor (jačine oko 0.375 mg/mL) u 40% propilen glikolu, 5% etanolu i 55% fosfatnom puferu (50 mM, pH=7.4). Oralni rastvor Jedinjenja (A)

(jačine oko 1.5 mg/mL) napravljen je u 58% propilen glikolu, 12% etanolu i 30% fosfatnom puferu (IM, pH 8.0). Za oralnu primenu, Jedinjenje (A) je suspendovano u 1% Avicel®RCS91, koji sadrži fosfatni pufer (2M) i limunsku kiselinu (85 mM). Za rekonstituciju, pH suspenzije pufera je oko 8.0 i jačina je približno 0.75 mg/mL. Zbog kumulativne toksičnosti, doza oralne suspenzije planirana u toku tri perioda, redukovana je sa 2 mg/kg na 1 mg/kg. Četvrti tretman nije primenjen zbog nedostatka odgovarajuće formulacije. Period izmedju tretmana bio je najmanje 7 dana. Serijski uzorci krvi sakupljeni su 24h nakon davanja doze i odredjene su koncentracije Jedinjenja (A) i (B) koršćenjem LC/MS/MS eseja, sa opsegom standardne krive od 2-500 ng/mL za oba analita. Korišćen je isti LC/MS/MS esej kao u Primeru 1.

Analitičke serije sastoje se iz standarda, kontrole kvaliteta (QC) i uzoraka za ispitivanje. Zapremina plazme koja je korišćena za analize bila je 0.2 mL, dok je opseg standardne krive iznosio 2 do 500 ng/mL za oba analita. Odredjene su i donja (LLO) i gornja granica kvaliteta (ULQ). Ako je očekivana koncentracija za ispitivane uzorke manja od nižeg standarda, vrednosti očekivanih koncentracija prikazane su kao <LLQ. Ako je očekivana koncentracija za ispitivane uzorke veća od višeg standarda, rezultati analize prikazani su kao >ULQ i odredjena zapremina uzorka rastvorena je sa blank plazmom i ponovo analizirana.

5.2 Priprema životinja, postupci i primena doze: Za ispitivanje su izabrana četiri adultna mužjaka pasa sa mogućnošću primene leka venskim putem i uzimanjem krvi. Psi su se klimatizovali najmanje jednu nedelju pre uvodjenja u eksperiment i smešteni su u pojedinačne čelične kaveze. Životinje su identifikovane preko jedinstvenog broja i etikete su zalepljene na kavez. Psima je dostupna vodaad libitumi standardna ishrana jednom dnevno, osim za period dijete u toku noći (oko 12h) pre doziranja, koji se nastavlja do 4h nakon doziranja. 15 minuta pre primene puferovane oralne suspenzije, psi su tretirani pentagastrinom (6 :g/kg; intramuskularno). Pretretman sa pentagastrinom korišćen je samo za oralnu suspenziju. IV doza primenjena je kao infuzija konstantne brzine u toku perioda od 10 min, korišćenjem kalibrisane infuzione pumpe. Oralni dozirani rastvor i suspenzija primenjeni preko šprica sa pumpicom za oralno davanje, isprani su u 20 mL vode.

5.3 Skupljanje uzoraka i postupci: Serijski uzorci krvi (3 mL) sakupljeni su pre doze i 10 min (samo IV; na kraju infuzije), 15 min, 20 min (samo IV), 30 min, 45 min, 1 h, 1.5 h, 2 h, 4 h, 6 h, 8 h, 12 h i 24 h nakon doziranja. Uzorci krvi sakupljeni su u Vacutainer® epruvete, koje sadrže K3-EDTA kao antikoagulans i sadržaj je blago izmešan izvrtanjem svake epruvete. Uzorci krvi su zatim stavljeni na led. Plazma je uzeta unutar 30 min centrifugiranjem epruveta na približno 4°C i 2000xg u toku 5 min. Za koncentracije Jedinjenja (A) i (B), uzorci plazme čuvaju se na -20°C ili niže do analiziranja.

Sledeći kriterijum primenjen je apriori na svaki analitički korak za analizu Jedinjenja (A) i (B) u plazmi. Očekivane koncentracije najmanje 3-4 svih kalibracionih standarda biće unutar 15% njihovih pojedinačnih nominalnih koncentracija (20% za LLQ); najmanje jedna kopija niže koncentracije u standardnoj krivoj biće unutar 20% njihove nominalne koncentracije za nivo označen kao LLQ; i očekivane koncentracije najmanje 3-4 svih QC uzoraka biće unutar 15% njihovih nominalnih koncentracija.

5.4 Farmakokinetičke analize: Maksimalna koncentracija plazme (CMAX) i vreme za njeno postizanje (TMAX) zabeležena je iz direktnih eksperimentalnih posmatranja. Površina ispod vremenske krive koncentracije plazme od nultog do T vremena (AUC(O-T)), gde je T vreme poslednje izmerene koncentracije plazme, izračunato je korišćenjem trapezoidnog pravila (Videti, M. Gibaldi, et al., Pharmacokinetics, 2<nđ>ed., Nevv York, NY, Marcel Decker, p. 445-91982). T-HALF nije odredjeno zbog ograničene terminalne faze uzorkovanja korišćene u studiji.

Podaci srednjih vrednosti koncentracije plazme u vremenu za Jedinjenja (A) i

(B) prikazane su u tabeli 2. Odgovarajuće grafičko predstavljanje Jedinjenja (A) i (B) opisano je na Slici 1 i 2.

Srednje vrednosti farm ako kinetičkih parametara za Jedinjenja (A) i (B) prikazane su u Tabelama 3 i 4.

Vremenski profil koncentracije plazme za jednog psa nakon IV primene nije dosledan za 10 min infuziju doze, pošto je opisano TMAX bilo lh; ovaj pas nije ušao u odredjivanje farmakokinetike. Srednje vrednosti (SD) [n=3] CMAX i AUC (0-T) posle IV primene Jedinjenja (A) su 1120 (189) ng/mL i 420 (36.8) h.ng/nt. AUC vrednost dobijena u ovoj studiji nakon IV primene je umereno uporediva sa AUC vrednostima dobijenim u prethodnim IV farmakokinetičkim studijama (srednja vrednost (SD); 483 (34) h.ng/mL) prateći 0.5 mg/kg doze kod pasa.

Nakon davanja puferovanog oralnog rastvora, jedan pas povratio je nakon doziranja i stoga je morao biti izuzet iz farmakokinetičkog odredjivanja. Srednje vrednosti (SD) [n=3]CMAX i AUC (0-T) nakon primene puferovanog oralnog rastvora Jedinjenja (A) su 365 (40.9) ng/mL i 560 (159) h.ng/mL. Srednja vrednost AUC dobijena u ovoj studiji nakon oralne primene je približno 2 puta viša od normalne srednje AUC vrednosti (257 h.ng/mL), dobijene u pojedinačnoj dozi u studijama oralne toksičnosti kod pasa. Iako je oralna formulacija za obe studije identična, ukupna zapremina oralnog rastvora primenjenog u ovoj studiji je oko 1.3 mL/kg, dok je u studiji o toksičnosti 0.4 mL/kg. Miliekvivalenti pufera oslobodjeni u ovoj studiji su oko 3 puta viši od dobijenih u toksikološkoj studiji, koji mogu da obezbede bolju neutralizaciju gastričnog pH. Jedinjenje (A) je lek nestabilan u kiselini; prema tome, duža primena oralnog rastvora u ovoj studiji, u poredjenju sa toksikološkom studijom verovatno je povezana sa boljom zaštitom od degradacije gastričnom kiselinom. Za dva psa, za koja su postojali podaci farmakokinetičkih parametara nakon IV i oralne primene, apsolutna oralna bioraspoloživost bila je 48.3 i 30.6% (srednja vrednost = 39.5%).

CMAX i AUC(O-T) vrednosti za Jedinjenje (B) ukazuje da su psi bili izloženi Jedinjenju (B) nakon IV i oralne primene doze; životinje nisu bile izložene Jedinjenju (B) nakon doziranja oralnom suspenzijom. Sistemsko izlaganje Jedinjenju (B) nakon oralne primene značajno je više nego nakon IV primene.

Ovi rezultati pokazuju da je za dva psa koja su imala podatke farmakokinetičkih parametara za IV i oralnu primenu, apsolutna oralna bioraspoloživost bila 48.3% i 30.6% (srednja vrednost = 39.5%).

Primer 6:Tečna oralna formulacija farmaceutski prihvatljivog kiselog neutrališućeg pufera.

Pufer sadrži 140 mL vode, što čini ukupno 150 mL tečnog oralnog doziranog oblika, čiji je pH 7.43 ± 0.07 (6 merenja). Prosečan kiseli neutrališući kapacitet 5 tečnih oralnih doziranih oblika bio je 49.7 (standardna devijacija 0.17, relativna standardna devijacija 0.34%).

Primer 7:Stabilnost tečne formulacije Jedinjenja (A)

Stabilnost Jedinjenja (A) u odnosu 80:20 smeše propilen glikohetanol procenjena je rekonstitucijom 25 mg Jedinjenja (A) sa 80:20 smešom propilen glikohetanol, što stvara tečni oralni dozirani oblik u koncentraciji od 2.5 mg/mL do 12.5 mg/mL. Dobijeni tečni oralni dozirani oblik čuva se do 20h na spoljašnjoj temperaturi (20 do 25°C) i svetlosti i u frižideru (2 do 8°C).

Nisu opisane promene tečnog oralnog doziranog oblika za vreme njegovog čuvanja u datim uslovima. Povećanje ukupnih nečistoća i degradacionih proizvoda i smanjenje potencijala, opisano je nakon čuvanja na spoljašnjoj temperaturi i svetlosti 20h. Neznatno povećanje ukupnih nečistoća i degradacionih proizvoda opisano je i 20h nakon čuvanja u frižideru. Promene ukupnih nečistoća pripisuju se povećanju nečistoća i degradacionih produkata oksazina, čija je struktura opisana dole:

Uzorci su analizirani korišćenjem HPLC sa 75 mm x 4.6 mm i.d., 3.5 :m veličinom čestice kolone VVaters Svmetrv Shield RP8 i UV detekcijom na 240 nm. Korišćene su 10 :L injekcione zapremine, kolona se održavala na spoljšnjoj temperaturi i brzina prolaska bila je 1 mL/min. Vreme analize bilo je lh i uzorci su eluirani korišćenjem gradijenta eluacije sa vodom kao mobilnom fazom (0.05% sirćetna kiselina) (mobilna faza A) i acetonitrilom kao mobilnom fazom (0.05% sirćetna kiselina). Eluacioni profil opisan je u sledećoj tabeli.

Ovi rezultati pokazuju da tečni oralni dozirani oblik u koncentraciji od 2.5 mg/mL do 12.5 mg/mL može biti čuvan na spoljašnjoj temperaturi do 6h i u frižidreru do 20h.

Primer 8:Sinteza jedinjenja A.

[1S-[1R<*>, 3R(E), 7R<*>, 10S, 11R<*>/12R<*>, 16S<*>]]-7, ll-Dihidroksi-8, 8, 10, 12, 16-pentametil-3-[l-metil-2-(2-metil-4-tiazolil) etenil-4-aza-17-oksabiciklo[14. 1.0] heptadekan-5, 9-dion.

Jedinjenje 1: (3S, 6R, 7S, 8S, 12R, 13S, 15S)-15-azido-12, 13-epoksi-4, 4, 6, 8, 12, 16-heksametil-7-hidroksi-17-(2-metil-4-tiazolil)-5-okso-16-heptadecenska kiselina.

Rastvor epotilona B (0.35 g, 0.69 mmol) u degasiranom THF (4.5 mL) tretiran je katalitičkom količinom (80 mg, 69 mmol) tetrakis (trifenilfosfin) paladijuma (0) i suspenzija je mešana na temperaturi od 25°C u struji argona 30 min. Dobijeni svetio žuti homogeni rastvor tretiran je rastvorom natrijum azida (54 mg, 0.83 mmol) u degasiranoj vodi (2.2 mL). Reakciona smeša zagrevana je na 40°C lh, razblažena vodom (5 mL) i ekstrahovana EtOAc (4x7 mL). Organski ekstrakti isprani su zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida (15 mL), sušeni (Na2S04) i koncentrisani na vakuumu. Ostatak je prečišćenflashhromatografijom (Si02, 3.0x15 cm, 95:5.0:0.5 CHCI3-MeOH-AcOH) do dobijanja Jedinjenja 1 (0.23 g, 61%) u formi obojenog uija. MS (ESI*): 551 (M+H)<+>; MS(ESI-): 549 (M-H)-.

Jedinjenje 2: (3S, 6R, 7S, 8S, 12R, 13S, 15S)-15-amino-12, 13-epoksi-4, 4, 6, 8, 12, 16-heksametil-7-hidroksi-17-(2-metil-4-tiazolil)-5-okso-16-heptadecenska kiselina.

Rastvor Jedinjenja 1 (0.23 g, 0.42 mmol) u THF (4.0 mL) tretiran je vodom (23 mL, 1.25 mmol) i polimer sadrži trifenilfosfin (Aldrich, polistiren unakrsno povezan sa 2% DVB, 0.28 g, 0.84 mmol) na 25°C. Dobijena suspenzija mešana je na temperaturi od 25°C u struji argona (32h), filtrirana krozCelitepodlogu i koncentrisana na vakuumu. Ostatak je prečišćenflash hromatografijom(Si02, 1.5x10 cm, 95:5.0:0.5 do 90:10:1.0 CHCI3-MeOH-AcOH gradijentom eluacije) do dobijanja Jedinjenja 2 (96 mg, 44%) u formi obojenog ulja. MS (ESI<+>): 525.2; MS(ESI-): 523.4

(M-H)-.

Na dno okrugle boce od 25 mL napunjene Jedinjenjem 1 (0.26 g, 0.47 mmol) i Pt02(0.13 g, 50 wt %) dodat je apsolutni EtOH u struji argona. Dobijena crna smeša mešana je vodom lOh, nakon čega je sistem prečišćen sa N2i dodate su porcije Pt02(65 mg, 25 wt %). Reakciona smeša je mešana još jednom sa vodom lOh. Sistem je zatim prečišćen sa N2i reakciona smeša filtrirana je krozCeiitepodlogu eluiranu sa CH2CI2(3x25 mL). Rastvarači su uklonjeni na vakuumu i ostatak je prečišćen, kao što je ranije opisano, do dobijanja Jedinjenja 2 (0.19 g, 75%).

Rastvor Jedinjenja 1 (20 mg, 36 mmol) u THF (0.4 mL) tretiran je trifenilfosfinom (19 mg, 73 mmol) u struji argona. Reakciona smeša zagrevana je na 45°C, mešana 14h i ohladjena do 25°C. Dobijeni iminofosforan tretiran je amonijum hidroksidom (28%, 0.1 mL) i reakciona smeša je još jednom zagrevana do 45°C. Nakon 4h, isparljive supstance su uklonjene na vakuumu i ostatak je prečišćen, što je opisano ranije, do dobijanja Jedinjenja 2 (13 mg, 70%).

Jedinjenje A: [1S-[1R<*>, 3R(E), 7R<*>, 10S, 11R<*>, 12R<*>, 16S<*>]]-7, 11-Dihidroksi-8, 8, 10, 12, 16-pentametil-3-[l-metil-2-(2-metil-4-tiazolil) etenil-4-aza-17-oksabiciklo[14. 1.0] heptadekan-5, 9-dion.

Rastvor Jedinjenja 2 (0.33 g, 0.63 mmol) u degasiranom DMF (250 mL) tretiran je čvrstim NaHC03(0.42 g, 5.0 mmol) i difenilpirofosforil azidom (0.54 mL, 2.5 mmol) na 0°C u stuji argona. Dobijena suspenzija mešana je na 4°C 24h, razblažena fosfatnim puferom (250 mL, pH=7) na 0°C i ekstrahovana EtOAc (5x100 mL). Organski ekstrakti isprani su 10% vodenim LiCI (2x125 mL), osušeni (Na2S04) i koncentrisani na vakuumu. Ostatak je prvo prečišćenflashhromatografijom (Si02, 2.0x10 cm, 2-5% MeOH-CHCI3gradijentom eluacije) i zatim ponovo prečišćen korišćenjem Cromatotrona (2 mm Si02, GF rotor, 2-5% MeOH-CHCI3gradijentom eluacije) do dobijanja naslovnog jedinjenja (0.13 g, 40%) u formi obojenog ulja:<:>Hi NMR (CDCI3, 400 MHz)<*>6.98 (s, IH), 6.71 (d, IH, NH, J=8.1 Hz), 6.56 (s, IH), 4.69-4.62 (m, IH), 4.18-4.12 (m, IH), 4.01-3.96 (m, IH), 3.86 (s, IH), 3.38-3.34 (m, IH), 2.82 (dd, IH, J 5.6, 6.0 Hz), 2.71 (s, 3H), 2.58 (s, IH), 2.43 (dd, IH, J=9.0, 14.5 Hz), 3.34 (dd, IH, J=3.0, 14.5 Hz), 2.14 (s, 3H), 2.05-1.92 (m, 2H), 1.82-1.41 (serija višestrukih preklapanja, 7H), 1.35 (s, 3H), 1.28 (s, 3H), 1.18 (d, 3H, J=6.8 Hz), 1.14 (s, 3H), 1.00 (d, 3H, J=6.8 Hz); MS (ESI<+>): 507.2 (M+H)<+>; MS(ESI-): 505.4 (M-H)-.

Primer 9:Farmakokinetika Jedinjenja A, koje se oralno primenjuje kod pacijenata sa kan cerom

Pacijenti sa uznapredovalim malignomima primili su Jedinjenje A, nedeljno kao 30-minutnu infuziju (3 intravenske primene u toku nedelje). Pacijenti su dobili doze od 1, 2.5, 5, 10, 20, 25 ili 30 mg/m<2>. Počevši sa dozom od 20 mg/m<2>, pojedinačna oralna doza Jedinjenja A data je 6. dana u 80% propilen glikolu i 20% etanolu (v/v), uz primenu citrat/fosfatnog pufera (22.5 gm) za procenu apsolutne bioraspoloživosti Jedinjenja A. Oralna doza Jedinjenja A primenjena 6. dana odgovarala je IV dozi Jedinjenja A primenjenoj 1. dana. Serijski uzorci plazme dobijeni 6. i 1. dana, procenjuju farmakokinetiku preko LC/MS/MS. Korišćen je isti LC/MS/MS esej kao u Primeru 1.

Jedinjenje A za oralnu primenu, 25 mg/bočici, označeno je kao"lek u boci". Pufer za rastvaranje Jedinjenja A, 25 mg/bočici, predstavlja smešu 80% propilen glikola i 20% etanola (v/v). Smeša: propilen glikol/etanol napravljena je mešanjem 80 zapreminskih delova propilen glikola i 20 zapreminskih delova etanola u pogodnom sudu. Rastvor je blago vorteksiran dok se potpuno ne izmeša.

Citrat/fosfatni pufer za oralnu primenu dodat je nakon Jedinjenja A u zasebnom sudu. Pufer za rastvaranje Jedinjenja A, konstituisan je sa vodom za injekcije (WFI).

Jedinjenje A napravljeno je za primenu kod pacijenata korišćenjem pogodnog šprica za sporo injektovanje 2.5, 5 ili 10 mL smeše: propilen glikol/etanol u 20 cc bočici, koja sadrži 25 mg/bočici Jedinjenja A, za dobijanje koncentracija od 10, 5 ili 2.5 mg/mL, što zavisi od doze koja se primenjuje na pacijenta. Špric se uklanja i bočica se snažno provrti 10 sekundi, zatim se stavlja u sonifikaciono kupatilo i sonifikuje sve dok se rastvor ne izbistri. Bočice se puluju u zavisnosti od doze.

Pufer za rastvaranje Jedinjenja A obezbedjen je u 8 oz. čistih staklenih čaša i konstituiše se sa vodom za injekcije (WFI). Zaštitni poklopac je uklonjen sa boce za pufer i dodato je oko 140 mL vode za injekcije (WFI). Boca se snažno provrti ili se sonifikuje naizmeničnim vrćenjem dok se ne dobije bistar rastvor.

Prateći oralnu primenu 6. dana, 7 mL uzorka krvi skupljeno je u Becton Dickinson Vacutainer epruvete sa K3EDTA kao antikoagulansom (zatvarač lila boje) prema sledećem rasporedu (izražava se kao sati:minuti od početka oralnog davanja): predoza, 00:15, 00:30, 00:45, 1:00, 1:30, 2:00, 3:00, 4:00, 6:00, 8:00, 24:00, 48:00 i 72:00. Sledeći IV davanje 1. dana, 7 mL uzorka krvi skupljeno je u Becton Dickinson Vacutainer epruvete sa K3EDTA kao antikoagulansom (zatvarač lila boje) prema sledećem rasporedu (izražava se kao sati:minuti od početka IV infuzije): predoza, 00:15, 00:30 (završetak infuzije), 00:45, 1:00, 1:30, 2:00, 3:00, 4:00, 6:00, 8:00, 24:00, 48:00 i 72:00.

Odmah nakon skupljanja krvi, Vakutaner epruvete su izvrtane nekoliko puta zbog mešanja sa antikoagulansom i odmah zatim stavljene na led. Unutar 30 minuta od skupljanja, uzorci su centrifugirani 5 minuta na približno 2000xg i 0 do 5 EC. Plazma je zatim prenešena u odvojene, prethodno obeležene polipropilenske epruvete sa zatvaračem i čuvana na -70 EC do bioanalize. Koncentracije plazme Jedinjenja A analiziraju se korišćenjem LC/MS/MS eseja opisanog u Primeru 1.

Podaci koncentracije plazme u vremenu analizirani su korišćenjem nekompartmentalnih metoda. Farmakokinetički parametri odredjeni za Jedinjenje A uključuju maksimalno opisane koncentracije plazme (Cmax), vreme za dostizanje Cmax (Tmax), površinu ispod vremenske krive koncentracije plazme od nultog do vremena poslednjeg uzorka T(AUC(0-T)).

18 pacijenata je oralno primilo jedinjenje A kao rastvor 6. dana i preko IV infuzije 1. dana. Rezime farmakokinetičkih rezultata ovih pacijenata prikazano je u Tabeli 5.

U ovom pronalasku navedeni su primeri brojnih ekvivalenata specifičnih jedinjenja, materijala i procedura. Razmatrani su eksperimenti u ovom ogledu i obuhvaćeni su dodatnim patentnim zahtevima.

Claims

1. Postupak za povećanje bioraspoloživosti oralno primenjenih epotilona, naznačen time što oralno davanje kod ljudi obuhvata jedan ili više epotilona Formule: Gde: G je odabran iz grupe koju čine alkil, supstituisani alkil, aril, supstituisani aril, heterocikl, W je 0 ili NR16; X je O; S; CHR17; ili H, R18; Y je odabran iz grupe koja sadrži 0; H, H; H, OR22; OR23, OR23; NOR24; H, NOR25; H, HNR25R27; NHNR28R29; H, NHNR30R3iili CHR32, gde OR23, OR23može biti ciklični ketal; Bii B2su odabrani iz grupe koja sadrži H, OR33, OCOR34, OCONR35R36, NR37R38, ili NR39CONR40R41; D je odabran iz grupe koja sadrži NR42R43ili heterocikl; Ri/R2/R3/R4, i R5sadrže H, niži alkil; R8, R9, Rioi Rnsu odabrani iz grupe koja sadrži H, alkil, supstituisani alkil, aril, supstituisani aril, cikloalkil, heterocikl ili supstituisani heterocikl; R17/Ris, R22i R23SU odabrani iz grupe koja sadrži H, alkil i supstituisani alkil;<R>24, ^2Sr^ 26, ^ 2% r<R>3O/<R>32/<R>33, R34, R-35/ R36, R37, R39/<R>40/<R>4I/P^ 2t<R>5I/<R>s2/<R>53i R61su odabrani iz grupe koja sadrži H, alkil, supstituisani alkil, aril ili supstituisani aril; R12, Ri6/ R27, R29, R31/ R38i R43su odabrani iz grupe koja sadrži H, alkil, supstituisani alkil, supstituisani aril, cikloalkil, heterocikl, R51C=0, R52OC=0, R53SO2, hidroksi i O-alki! ili O-supstituisani alkil, ili farmaceutski prihvatljivu so, solvat, hidrat, klatrat ili njihov prolek; i oralno primenjenih jedan ili više odgovarajućih kiselinskih pufera.

2. Postupak prema patentnom zahtevu 1, naznačen time, što je farmaceutski prihvatljiv kiseli neutrališući pufer primenjen istovremeno sa epotilonom.

3. Postupak prema patentnom zahtevu 1, naznačen time, što je farmaceutski prihvatljiv kiseli neutrališući pufer primenjen pre epotilona.

4. Postupak prema patentnom zahtevu 3, naznačen time, što je farmaceutski prihvatljiv kiseli neutrališući pufer primenjen ne više od 1 h pre epotilona.

5. Postupak prema patentnom zahtevu 1, naznačen time, što je farmaceutski prihvatljiv kiseli neutrališući pufer primenjen nakon epotilona.

6. Postupak prema patentnom zahtevu 5, naznačen time, što je farmaceutski prihvatljiv kiseli neutrališući pufer primenjen ne više od 1 h posle epotilona.

7. Postupak prema patentnom zahtevu 1, naznačen time, što je farmaceutski prihvatljiv kiseli neutrališući pufer primenjen pre i posle epotilona.

8. Postupak prema patentnom zahtevu 7, naznačen time, što je farmaceutski prihvatljiv kiseli neutrališući pufer primenjen ne više od 1 h pre i ne više od 1 h posle davanja epotilona.

9. Postupak prema patentnom zahtevu 1, naznačen time, što je farmaceutski prihvatljiv kiseli neutrališući pufer primenjen u dovoljnoj količini da oslobodi najmanje oko 20 miliekvivalenta kiselog neutrališućeg kapaciteta.

10. Postupak prema patentnom zahtevu 1, naznačen time, što je farmaceutski prihvatljiv kiseli neutrališući pufer primenjen kao vodeni rastvor, čija je pH vrednost izmedju 5 i 9.

11. Postupak prema patentnom zahtevu 1, naznačen time, što je farmaceutski prihvatljiv kiseli neutrališući pufer primenjen kao vodeni rastvor koji sadrži anhidrovani dvobazni natrijum fosfat, natrijum citrat dihidrat i anhidrovanu limunsku kiselinu.

12. Postupak prema patentnom zahtevu 11, naznačen time, što je pH vodenog rastvora oko 7.

13. Postupak prema patentnom zahtevu 1, naznačen time, što je bioraspoloživost jednog ili više epotilona, ili farmaceutski prihvatljive soli, solvata, klatrata, hidrata ili njihovog proleka, najmanje oko 20%.

14. Postupak prema patentnom zahtevu 1, naznačen time, što je jedan ili više epotilona, ili farmaceutski prihvatljive soli, solvata, klatrata, hidrata ili njihovog proleka, oralno primenjeno kao rastvor sa propilen glikolom i etanolom, gde je odnos propilen glikohetanol oko 80:20.

15. Postupak prema patentnom zahtevu 1, naznačen time, što je jedan ili više epotilona, ili farmaceutski prihvatljive soli, solvata, klatrata, hidrata ili njihovog proleka, primenjeno u ukupnoj količini od oko 0.05 do 200 mg/kg/dnevno.

16. Postupak prema patentnom zahtevu 15, naznačen time, što je jedan ili više epotilona, ili farmaceutski prihvatljive soli, solvata, klatrata, hidrata ili njihovog proleka, primenjeno u oko 2 do 4 podeljene doze.

17. Postupak prema patentnom zahtevu 1, naznačen time, što je formula epotilona: [1S-[1R<*>, 3R<*>(E), 7R<*>, 10S<*>, 11R<*>, 16S<*>]]-7, ll-Dihidroksi-8, 8, 10, 12, 16-pentametil-3-[l-metil-2-(2-metil-4-tiazolil) etenil-17-oksa-4- ■ azabiciklo[14. 1.0] heptadekan-5, 9-dion.

18. Postupak prema patentnom zahtevu 1 obuhvata: (a) Oralno primenjen vodeni rastvor farmaceutski prihvatljivog kiselog neutrališućeg pufera, koji sadrži anhidrovani dvobazni natrijum fosfat, natrijum citrat dihidrat i anhidrovanu limunsku kiselinu; (b) Oralno primenjen jedan ili više epotilona, ili farmaceutski prihvatljiva so, solvat, klatrat, hidrat ili njihov prolek, kao rastvor propilen glikola; i (c) Oralno primenjen vodeni rastvor farmaceutski prihvatljivog kiselog neutrališućeg pufera, koji sadrži anhidrovani dvobazni natrijum fosfat, natrijum citrat dihidrat i anhidrovanu limunsku kiselinu.

19. Postupak prema patentnom zahtevu 18, naznačen time, što je formula epotilona: [1S-[1R* 3R<*>(E), 7R<*>, 10S<*>, 11R<*>, 16S<*>]]-7, ll-Dihidroksi-8, 8, 10, 12, 16-pentametil-3-[l-metil-2-(2-metil-4-tiazolil) etenil-17-oksa-4-azabiciklo[14. 1.0] heptadekan-5, 9-dion.

20. Kit za korišćenje u postupku povećanja bioraspoloživosti oralno primenjenih epotilona, koji sadrži: i. Prva komponenta sadrži jedan ili više epotilona Formule: G je odabran iz grupe koju čine alkil, supstituisani alkil, aril, supstituisani aril, heterocikl, Wje 0 ili NR16; X je 0; S; CHR17; ili H, R18; Y je odabran iz grupe koja sadrži 0; H, H; H, OR22; OR23, OR23; NOR24; H, NOR2S; H, HNR25R27; NHNR28R29; H, NHNR30R31ili CHR32, gde OR23, OR23može biti ciklični ketal; Bti B2su odabrani iz grupe koja sadrži H, OR33, OCOR34, OCONR35R36, NR37R38, ili NR39CONR40R41; D je odabran iz grupe koja sadrži NR42R43ili heterocikl; Ri, R2, R3, R4, i R5su odabrani iz grupe koja sadrži H, niži alkil; Ra, R9/Rioi Rnsu odabrani iz grupe koja sadrži H, alkil, supstituisani alkil, aril, supstituisani aril,- cikloalkil, heterocikl ili supstituisani heterocikl; R17, Ris, R22i R23SU odabrani iz grupe koja sadrži H, alkil i supstituisani alkil; R24, R25, R26, R28, R30, R32/R33, R34, R35/R36, ^ 37, R39, R40, R41, R42/R51;R52, R53i Reisu odabrani iz grupe koja sadrži H, alkil, supstituisani alkil, aril ili supstituisani aril; R12/ Ris, R27, R29, R31, R38i R43su odabrani iz grupe koja sadrži H, alkil, supstituisani alkil, supstituisani aril, cikloalkil, heterocikl, R51C=0, R52OC=0, R53S02, hidroksi i. O-alkil ili O-supstituisani alkil, ili farmaceutski prihvatljivu so, solvat, hidrat, klatrat ili njihov prolek; ii. Druga komponenta sadrži farmaceutski prihvatljiv kiseli neutrališući pufer, naznačen time, što prva i druga komponenta čine oralni dozirani oblik ili farmaceutski preparat, koji se može rekonstituisati rastvaračem, do dobijanja tečne oralne doze.

21. Kit prema patentnom zahtevu 20, naznačen time, što je barem jedna od prve ili druge komponente u čvrstom oralnom doziranom obliku.

22. Kit prema patentnom zahtevu 21, naznačen time, što je barem jedna od prve ili druge komponente anhidrovana.

23. Kit prema patentnom zahtevu 20, naznačen time, što je barem jedna od prve ili druge komponente u obliku farmaceutskog preparata, koji se može rekonstituisati rastvaračem, do dobijanja tečnog oralnog doziranog oblika.

24. Kit prema patentnom zahtevu 23, naznačen time, što je barem jedna od prve ili druge komponente u obliku tablete.

25. Kit prema patentnom zahtevu 23, naznačen time, što je barem jedna od prve ili druge komponente anhidrovana.

26. Kit prema patentnom zahtevu 23, sadržaće rastvarače za rekonstituciju prve ili druge komponente.

27. Kit prema patentnom zahtevu 26, naznačen time, što je rastvarač za rekonstituciju prve komponente smeša propilen glikola i etanola.

28. Farmaceutski preparat pogodan za oralnu primenu kod sisara sadrži: i. Jedan ili više epotilona Formule: gde je: G odabran iz grupe koju čine alkil, supstituisani alkil, aril, supstituisani aril, heterocikl, W je 0 ili NRi5; X je 0; S; CHR17; ili H, R18; Y je odabran iz grupe koja sadrži 0; H, H; H, OR22; OR23, OR23; NOR24; H, NOR2S; H, HNR26R27; NHNR28R29; H, NHNR30R3iili CHR32, gde OR23, OR23može biti ciklični ketal; Bii B2su odabrani iz grupe koja sadrži H, OR33, OCOR34, OCONR35R36, NR37R38, iii NR3<g>CONR40R4i; D je odabran iz grupe koja sadrži NR42R43ili heterocikl; Ri, R2/R3, R4, i Rssu odabrani iz grupe koja sadrži H, niži alkil; Rs/R9, Rioi Rnsu odabrani iz grupe koja sadrži H, alkil, supstituisani alkil, aril, supstituisani aril, cikloalkil, heterocikl ili supstituisani heterocikl; R17/Ris/R22i R23SU odabrani iz grupe koja sadrži H, alkil i supstituisani alkil; R24, R25, R26/R28, R30, R32, R33, R34/R35/R36, R37, R39, R40/R41/R42/ R51/R52/R53i R6isu odabrani iz grupe koja sadrži H, alkil, supstituisani alkil, aril ili supstituisani aril; R12, R16, R27, R29/R31, R38i R43su odabrani iz grupe koja sadrži H, alkil, supstituisani alkil, supstituisani aril, cikloalkil, heterocikl, R5iC=0, R52OC=0, R53S02, hidroksi i O-alkil ili O-supstituisani alkil, ili farmaceutski prihvatljivu so, solvat, hidrat, klatrat ili njihov prolek, u čvrstom obliku; i ii. čvrst farmaceutski prihvatljiv kiseli neutrališući pufer u dovoljnoj količini da redukuje razlaganje jednog ili više epotilona, ili farmaceutski prihvatljive soli, solvata, klatrata, hidrata ili njihovog proleka, kada se farmaceutski preparat rekonstituiše rastvaračem do dobijanja tečnog oralnog doziranog oblika.

29. Farmaceutski preparat prema patentnom zahtevu 28, naznačen time, što farmaceutski prihvatljiv kiseli neutrališući pufer obezbedjuje tečni oralni dozirani oblik, čiji je pH izmedju 5 i 9.

30. Farmaceutski preparat prema patentnom zahtevu 28, naznačen time, što je farmaceutski prihvatljiv kiseli neutrališući pufer prisutan u dovoljnoj količini da obezbedi najmanje oko 20 miliekvivalenata kiselog neutrališućeg kapaciteta.

31. Farmaceutski preparat prema patentnom zahtevu 28, naznačen time, što je farmaceutski prihvatljiv kiseli neutrališući pufer dvobazni fosfat-limunska kiselina-citratni pufer.

32. Farmaceutski preparat prema patentnom zahtevu 28, naznačen time, što su jedan ili više epotilona ili farmaceutski prihvatljiva so, solvat, klatrat, hidrat ili njihov prolek, prisutni u količini od oko 0.05 do 200 mg.

33. Farmaceutski preparat prema patentnom zahtevu 28, naznačen time, što je formula epotilona: [1S-[1R<*>, 3R<*>(E), 7R<*>, 10S<*>, 11R<*>, 16S<*>]]-7, ll-Dihidroksi-8, 8, 10, 12, 16-pentametil-3-[l-metil-2-(2-metil-4-tiazolil) etenil-17-oksa-4-azabiciklo[14. 1.0] heptadekan-5, 9-dion.

34. Kit sadrži farmaceutski preparat prema patentnom zahtevu 28 i ratvarač za rekonstituciju farmaceutskog preparata, koji obezbedjuje oralni dozirani oblik,

35. Kit prema patentnom zahtevu 34, naznačen time, što rastvarač sadrži propilen glikol, etanol i fosfatni pufer (1 M, pH 8).

36. Kit prema patentnom zahtevu 35, naznačen time, što je odnos propilen glikol:etanol:fosfatni pufer oko 58:12:30.

37. Tečni oralni dozirani oblik, pogodan za oralnu primenu kod sisara sadrži: i. Jedan ili više epotilona Formule: gde je: G odabran iz grupe koju čine alkil, supstituisani alkil, aril, supstituisani aril, heterocikl, W je 0 ili NR16; X je O; S; CHR17; ili H, R18; Y je odabran iz grupe koja sadrži 0; H, H; H, OR22; OR23, OR23; NOR24; H, NOR25; H, HNR26R27; NHNR28R29; H, NHNR30R3iili CHR32, gde OR23, OR23može biti ciklični ketal; Bii B2su odabrani iz grupe koja sadrži H, OR33, OCOR34, OCONR35R36, NR37R33, ili NR39CONR40R41; D je odabran iz grupe koja sadrži NR42R43ili heterocikl; R-i, R2, R3, R4, i R5su odabrani iz grupe koja sadrži H, niži alkil; R8, R9, Rioi Rn su odabrani iz grupe koja sadrži H, alkil, supstituisani alkil, aril, supstituisani aril, cikloalkil, heterocikl ili supstituisani heterocikl; R17, Ris, R22 i R23SU odabrani iz grupe koja sadrži H, alkil i supstituisani alkil; R24, R25, R26, R28, R30, R32,<R>33, R34,<R>35, R36, R37,<R>39,R40,<R>41,<R>42, Rsi,<R>52, R53i R61su odabrani iz grupe koja sadrži H, alkil, supstituisani alkil, aril ili supstituisani aril; R12, Ri6, R27, R29, R31, R38i R43su odabrani iz grupe koja sadrži H, alkil, supstituisani alkil, supstituisani aril, cikloalkil, heterocikl, R51C=0, R52OC=0, R53S02, hidroksi i O-alkil ili O-supstituisani alkil, ili farmaceutski prihvatljivu so, solvat, hidrat, klatrat ili njihov prolek; i ii. Farmaceutski prihvatljiv tečni nosač.

38. Tečni oralni dozirani oblik prema patentnom zahtevu 41, naznačen time, što je formula epotilona: [1S-[1R<*>, 3R<*>(E), 7R<*>, 10S<*>, 11R<*>716S<*>]]-7, ll-Dihidroksi-8, 8, 10, 12, 16-pentametil-3-[l-metil-2-(2-metil-4-tiazolil) etenil-17-oksa-4-azabiciklo[14. 1.0] heptadekan-5, 9-dion.

39. Tečni oralni dozirani oblik prema patentnom zahtevu 37, sadržaće farmaceutski prihvatljiv kiseli neutrališući pufer u dovoljnoj količini da redukuje razlaganje jednog ili više epotilona, ili farmaceutski prihvatljive soli, solvata, klatrata, hidrata ili njihovog proleka, u poredjenju sa farmaceutskim preparatom bez pufera.

40. Tečni oralni dozirani oblik prema patentnom zahtevu 39, naznačen time, što je pH tečnog oralnog doziranog oblika izmedju 5 i 9.

41. Tečni oralni dozirani oblik prema patentnom zahtevu 39, naznačen time, što je pufer prisutan u dovoljnoj količini da obezbedi najmanje oko 20 miliekvivalenata kiselog neutrališućeg kapaciteta.

42. Tečni oralni dozirani oblik prema patentnom zahtevu 37, naznačen time, što je rastvarač propilen glikol, etanol i voda puferovan fosfatnim puferom na pH oko 8.

43. Tečni oralni dozirani oblik prema patentnom zahtevu 42, naznačen time, što su propilen glikol, etanol i voda puferovani fosfatnim puferom, prisutni u odnosu 58:12:30.

44. Tečni oralni dozirani oblik prema patentnom zahtevu 42, naznačen time, što je formula epotilona: [1S-[1R<*>, 3R<*>(E), 7R<*>, 10S<*>, 11R<*>, 16S<*>]]-7, ll-Dihidroksi-8, 8, 10, 12, 16-pentametil-3-[l-metil-2-(2-metil-4-tiazolil) etenil-17-oksa-4-azabiciklo[14. 1.0] heptadekan-5, 9-dion.

45. Tečni oralni dozirani oblik prema patentnom zahtevu 37, naznačen time, što su jedan ili više epotilona ili farmaceutski prihvatljiva so, solvat, klatrat, hidrat ili njihov prolek, prisutni u količini od oko 0.05 do 200 mg.

46. Tečni oralni dozirani oblik prema patentnom zahtevu 39, naznačen time, što je pufer dvobazni fosfat-limunska kiselina-citratni pufer.

47. Napravljeni preparat sadrži: (a) zatvoren sud pogodan za nošenje tečnog ili čvrstog preparata; (b) jedan ili više epotilona ili farmaceutski prihvatljivu so, solvat, klatrat, hidrat ili njihov prolek; i (c) farmaceutski prihvatljiv nosač pogodan za oslobadjanje oralno primenjenog epotilona.

48. Disperzibilna puferovana tableta, sadrži: i. Jedan ili više epotilona Formule: gde je: G odabran iz grupe koju čine alkil, supstituisani alkil, aril, supstituisani aril, heterocikl, W je O ili NR15; X je 0; S; CHR17; ili H, R18; Y je odabran iz grupe koja sadrži 0; H, H; H, OR22; OR23/OR23; NOR24; H, NOR25; H, HNR26R27; NHNR28R29; H, NHNR30R3i ili CHR32;gde OR23, OR23može biti ciklični ketal; Bti B2su odabrani iz grupe koja sadrži H, OR33, OCOR34, OCONR35R35, NR37R38, ili NR39CONR40R41; D je odabran iz grupe koja sadrži NR42R43ili heterocikl; Ri, R2/R3, R4, i R5su odabrani iz grupe koja sadrži H, niži alkil; R3, R9, Rioi R-11 su odabrani iz grupe koja sadrži H, alkil, supstituisani alkil, aril, supstituisani aril, cikloalkil, heterocikl ili supstituisani heterocikl; Ri7/Ris, R22 i R23SU odabrani iz grupe koja sadrži H, alkil i supstituisani alkil; R24/R2S, R26, ^ 23i R30, R32, R33; R34, R35, R36/ R37, R39/R40, R41, R42/ R5I, Rs2/ R53i R6isu odabrani iz grupe koja sadrži H, alkil, supstituisani alkil, aril ili supstituisani aril; R12, Rie, R27, R29, R31, R38i R43su odabrani iz grupe koja sadrži H, alkil, supstituisani alkil, supstituisani aril, cikloalkil, heterocikl, R5iC=0, R52OC=0, RS3S02, hidroksi i O-alkil ili O-supstituisani alkil, ili farmaceutski prihvatljivu so, solvat, hidrat, klatrat ili njihov prolek; i ii. puferske komponente pogodne da neutrališu gastrične tečnosti u dovoljnom vremenu da se dozvoli apsorpcija epotilona.

49. Kit prema patentnom zahtevu 20, naznačen time, što su prva i druga komponenta u formi tečnih oralnih doziranih oblika.

50. Kit prema patentnom zahtevu 49, naznačen time, što su jedan ili više epotilona, ili farmaceutski prihvatljiva so, solvat, klatrat, hidrat ili njihov prolek, prisutni u količini od oko 0.05 do 200 mg i farmaceutski prihvatljiv kiseli neutrališući pufer prisutan je u dovoljnoj količini da obezbedi najmanje oko 20 miliekvivalenata kiselog neutrališućeg kapaciteta.

51. Kit prema patentnom zahtevu 20, naznačen time, što su prva i druga komponenta u obliku farmaceutskog preparata koji se može rekonstituisati rastvaračem, do dobijanja tečnog oralnog doziranog oblika; jedan ili više epotilona, ili farmaceutski prihvatljiva so, solvat, klatrat, hidrat ili njihov prolek, prisutni u količini od oko 0.05 do 200 mg; i farmaceutski prihvatljiv kiseli neutrališući pufer prisutan je u količini dovoljnoj da obezbedi najmanje oko 20 miliekvivalenata kiselog neutrališućeg kapaciteta.

52. Kit prema patentnom zahtevu 20, naznačen time, što je formula epotilona: [1S-[1R<*>, 3R<*>(E), 7R<*>, 10S<*>, HR*, 16S<*>]]-7, ll-Dihidroksi-8, 8, 10, 12, 16-pentametil-3-[l-metil-2-(2-metil-4-tiazolil) etenil-17-oksa-4-azabiciklo[14. 1.0] heptadekan-5, 9-dion, dok farmaceutski prihvatljiv kiseli neutrališući pufer sadrži dvobazni natrijum fosfat, natrijum citrat i anhidrovanu limunsku kiselinu,