RS58796B1

RS58796B1 - Heterociklična jedinjenja

Info

Publication number: RS58796B1
Application number: RS20190639A
Authority: RS
Inventors: Misaki Homma; Toru Miyazaki; Yuya Oguro; Osamu Kurasawa
Original assignee: Takeda Pharmaceuticals Co
Priority date: 2010-02-17
Filing date: 2011-02-16
Publication date: 2019-07-31
Also published as: NZ602089A; EP2540728B1; US20140235615A1; HUE043514T2; DK2540728T3; KR20130001246A; US9655900B2; MX353500B; MA34064B1; PE20130184A1; EP3533797B1; SI2540728T1; SG183304A1; MY164776A; BR112012020311A2; EA201290800A1; PH12012501650A1; HRP20190947T1; CN102844320A; PL2540728T3

Description

Opis

Polje tehnike

[0001] Ovaj pronalazak se odnosi na heterociklična jedinjenja i njihovu upotrebu. Još preciznije, ovaj pronalazak se odnosi na spojena heterociklična jedinjenja koja imaju jaku inhibitornu aktivnost na ciklus 7 deljenja ćelija (Cdc7), što je korisno za profilaksu ili tretman kancera i slično, i na upotrebu tih jedinjenja.

(Poreklo pronalaska)

[0002] Karakteristika kancera je nenormalna proliferacija ćelija sa prekinutim mehanizmom kontrole. Najveći broj ćelija kancera raste mnogo brže nego ćelije normalnih tkiva. U ciklusu deljenja ćelija, osnovno je dupliranje hromozoma a replikacija DNK u S fazi je jasno regulisana. Potvrđeno je da je inhibicija replikacije DNK efikasna terapija za tretman kancera a, na primer, inhibitori replikacije DNK kao što su hidroksiurea (HU), gemcitabin i aktivni metaboliti 5-fluorouracila i slično, se široko koriste kao terapeutska sredstva za kancer u kliničkoj praksi.

[0003] Cdc7 je evoluciono dobro očuvana serin/treonin kinaza i igra važnu ulogu u započinjanju replikacije DNK (nepatentni dokument 1). Aktivnost kinaze Cdc7 je kontrolisana vezivanjem sa njenim partnerom aktivacije. U kasnijem stepenu od G1 faze do S faze, Cdc7 formira kompleks sa Dbf4 (takođe poznat kao ASK) i fosforiliše Cdc7 supstrat zbog kontrole tranzicije od G1 faze do S faze (nepatentni dokument 2). Osim toga, u savremenim studijama je objavljeno da Cdc7 igra vežne uloge i u replikaciji DNK i u oštećenju puteva signalizacije DNK (nepatentni dokument 3).

[0004] Poslednjih godina, Cdc7 kinazi je posvećena velika pažnja kao interesantnom cilju u tretmanima koncer. U kliničkim tumorima kao što su kancer dojke, kancer kolorektuma, kancer pluća i slično i u brojnim ćelijskim linijama kancera je uočena prekomerna ekspresija Cdc7 (nepatentni dokument 4). U nekim ćelijskim linijama kancera nađeno je povećanje u broju hromozomalnih kopija faktora aktivacije, Dbf4. Zanimljivo je da ćelijska linija kancera i netransformisana ćelijska linija fibroblasta pokazuju različite odgovore na supresiju ekspresije Cdc7 korišćenjem siRNK. Supresija ekspresije Cdc7 korišćenjem siRNK dovodi do zaustavljanja S faze u ćelijskim linijama kancera i indukuje apoptoze, pri čemu u normalnim ćelijama to indukuje zaustavljanje G1 faze na način koji zavisi od aktivnosti p53 (nepatentni dokument 5). Osim toga, Cdc7 kinaza se aktivira u ćelijama pod stresnom replikacijom a apoptoze indukovane hidroksiureom i etopozidom se povećavaju u ćelijama sa smanjenom Cdc7 (nepatentni dokument 6). Prema tome, Cdc7 inhibitor, kao pojedinačno sredstvo ili u kombinaciji sa drugim hemoterapeutskim sredstvima, je koristan za selektivni tretman kancera.

[0005] Patentni dokument 1 opisuje, kao jedinjenje koje ima inhibitorno delovanje na Pim kinazu, jedinjenje predstavljeno formulom

gde su A<1>i A<2>şvaki nezavisno atom vodonika, R<1>, R<2>, R<3>, R<4>ili hidroksi grupa i slično; A<3>je atom vodonika, R<12>, R<13>, R<14>ili R<15>i slično; R<1>je fenil grupa i slično; R<2>je heteroaren i slično; R<3>je cikloalkil grupa i slično; R<4>i R<15>su alkil grupa i slično; R<12>je fenil grupa i slično; R<13>je heteroaren i slično; R<14>je cikloalkil grupa i slično; i R<15>je alkil grupa i slično.

[0006] Patentni dokument 2 opisuje, kao jedinjenje korisno za tretman bolesti povezane sa Src familijom tirozin kinaze, jedinjenje predstavljeno formulom

gde je R1atom vodonika ili alkil grupa i slično; R2je atom vodonika ili alkil grupa i slično; i R3je atom vodonika, alkil grupa i davalac vodonične veze ili veza za unakrsno vezivanje hidrazona za receptor vodonične veze.

[0007] Patentni dokument 3 opisuje, kao inhibitor protein kinaze, jedinjenje predstavljeno formulom

gde je X atom kiseonika ili atom sumpora; Y je atom kiseonika, atom sumpora ili -NR<1>-; R<1>je R, CO2R i slično; R je atom vodonika ili C1-6alifatična grupa i slično; R<2>je R, N(R)2i slično; R<3>je R ili CN i slično; i R<4>je R, N(R)2i slično.

[0008] Patentni dokument 4 opisuje, kao jedinjenje koje ima inhibitorno delovanje na B-Raf kinazu i koje je korisno za tretman kancera, jedinjenje predstavljeno formulom

gde je R<1>fenil grupa ili heterociklus i slično; R<2>je atom vodonika ili heteroaril grupa i slično; R<4>je atom vodonika ili C1-8alkil grupa i slično; R<5>je atom vodonika ili nitro grupa i slično; R<7>je C1-8alkil grupa i slično; X je atom azota i slično; X’ je atom sumpora ili =C(R<3>)- grupa i slično i Z je atom sumpora ili =C(R<3>)- grupa a samo jedan od X’ i Z je =C(R<3>)- grupa; i - - - je jednostruka veza ili dvostruka veza i dalje opisuje jedinjenje predstavljeno formulom

gde je svaki simbol kako je prethodno definisano.

[0009] Patentni dokument 5 opisuje, kao jedinjenje koje ima inhibitorno delovanje na IKB kinazu β i koje je korisno za tretman bolesti kao što su kancer i slično, jedinjenje predstavljeno formulom

gde je X atom sumpora i slično; R1je atom vodonika ili C1-10alkil grupa i slično; R2je atom vodonika ili C5-20heteroaril grupa i slično; R3je atom vodonika ili C1-10alkil grupa i slično; R4i R6su svaki atom vodonika ili C1-5alkil i slično; R6je atom vodonika ili C1-5alkil grupa i slično; a - - - je jednostruka veza ili dvostruka veza i dalje opisuje jedinjenje predstavljeno formulom

gde je svaki simbol kako je prethodno definisano.

[0010] Patentni dokument 6 opisuje, kao jedinjenje koje ima inhibitorno delovanje na Tie2 receptor tirozin kinaze i koje je korisno za tretman bolesnih stanja kao što su kancer i slično, jedinjenje predstavljeno formulom

gde A formira, zajedno sa atomom ugljenika za koji je vezan, spojeni 5-člani heteroaril prsten, pri čemu taj heteroaril prsten sadrži 1 ili 2 hetero atoma izabrana od O, N i S; 5-člani prsten koji sadrži G je vezan za prsten formiran sa A na meta položaju u odnosu na premošteni ugljenik označen sa # u formuli; G je izabran od O, S i NR<5>; Z je N i slično; Q<1>je aril, heteroaril grupa i slično; R<1>je atom vodonika ili atom halogena i slično; R<2>je atom vodonika ili amino grupa i slično; R<3>je kako je nezavisno definisano za R<4>i R<6>, pod uslovom da R<3>nije vodonik i nije vezan za atom azota u A, R<3>nije halogen; R<5>je kako je nezavisno definisano za R<4>i R<6>, pod uslovom da R<5>nije halogen; i R<4>i R<6>su isti ili različiti i svaki je vodonik, halogen, trifluorometil, trifluorometoksi, cijano grupa i slično.

[0011] Patentni dokument 7 opisuje, kao jedinjenje efikasno za tretman proliferativnih poremećaj ćelija bar delimično posredovanih sa CDC7, PKA i/ili Akt, jedinjenje predstavljeno formulom

gde je A heteroaril prsten koji sadrži azot i 5 ili 6 atoma u prstenu i 1 - 4 atoma prstena su atomi azota; n je ceo broj izabran od 0 ili 1; m je ceo broj jednak sa 0, 1 ili 2; R je atom vodonika, hidroksi grupa i slično; R<1>je halogen ili cijano grupa i slično; R<2>i R<4>su svaki nezavisno vodonik, cikloalkil grupa i slično; R<3>je atom vodonika ili C1- C5alkil grupa i slično; Q je -C(X’)NR<6>- i slično, pri čemu je X’ izabran iz grupe koja sadrži kiseonik i sumpor, R<6>je vodonik, C1- C3alkil grupa, C1- C3supstituisana alkil grupa i slično ili R<6>formira, zajedno sa Q, atomom ugljenika za koji je Q vezan, R<4>ili atomom ugljenika za koji je R<4>vezan, heterociklil ili supstituisani heterociklil i slično.

[0012] Patentni dokument 8 opisuje, kao jedinjenje efikasno za profilaksu i/ili tretman inflamatornih bolesti, jedinjenje predstavljeno formulom

gde je A<1>heteroaril grupa koja sadrži azot i koja opciono ima supstituent(e); A<2>je aril grupa koja opciono ima supstituent(e) ili cikloalkil grupa koja opciono ima supstituent(e); R<1>i R<2>su svaki nezavisno niža alkil grupa koja opciono ima supstituent(e), acil grupa koja opciono ima supstituent(e), aciloksi grupa koja opciono ima supstituent(e) i slično; m in su svaki ceo broj od 0 - 2; Q<1>, Q<2>, Q<3>i Q<4>su svaki izabrani od C, CH, CH2, C=O, O, N i NH grupe a jedan ili dva od Q<1>do Q<4>je /su N ili NH grupa; i - - - je dvostruka veza ili jednostruka veza.

[0013] Patentni dokument 9 opisuje, kao medikament koji ima inhibitorno delovanje na cGMP specifičnu fosfodiesterazu i slično, jedinjenje predstavljeno formulom

gde je R1atom vodonika ili C1-6alkil grupa; R2je opciono supstituisana C3-8cikloalkil grupa, opciono supstituisana fenil grupa i slično; R3je zasićena ili nezasićena heterociklična grupa koja sadrži 1 do 4 opciono supstituisane N, O ili S i slično; R4je atom vodonika, C1-6alkil grupa, hidroksi grupa, C1-6alkoksi grupa, halogen, C1-6haloalkil grupa, nitro grupa ili cijano grupa; i R5je cijano grupa, opciono supstituisana fenil grupa, zasićena ili nezasićena heterociklična grupa koja sadrži 1 do 4 opciono supstituisana N, O ili S i slično.

[Lista dokumenta] [patentna dokumenta]

[0014]

patentni dokument 1: US2009/0030196

patentni dokument 2: WO02/057271

patentni dokument 3: US2003/0096813

patentni dokument 4: WO2009/059272

patentni dokument 5: WO2007/102679

patentni dokument 6: WO2004/013141

patentni dokument 7: WO2005/095386

patentni dokument 8: JP-A-2002-105081

patentni dokument 9: WO02/026745

[Nepatentna dokumenta]

[0015]

nepatentni dokument 1: EMBO J.1999, 18(20), str.5703-5713

nepatentni dokument 2: J Cell Physiol. 2002, 190(3), str.287-296

nepatentni dokument 3: Oncogene. 2008, 27(24), str.3475-3482

nepatentni dokument 4: Neoplasia. 2008, 10(9), str.920-931

nepatentni dokument 5: Cancer Res.2004, 64(19), str.7110-7116

nepatentni dokument 6: J Biol Chem. 2007, 282(1), str.208-215

[KRATAK SADRŽAJ PRONALASKA]

Problemi koje pronalazak treba da reši

[0016] Očekuje se da Cdc7 inhibitor, superioran u efikasnoj ekspresiji, farmakokinetici, rastvorljivosti, interakciji sa drugim farmaceutskim produktima, bezbednosti i stabilnosti, ispolji superioran terapeutski efekat. U skladu sa tim, cilj ovog pronalaska je da obezbedi nisko toksično jedinjenje koje ima Cdc7 inhibitorno delovanje i koje je dovoljno zadovoljavajuće kao farmaceutski produkt.

Načini rešavanja problema

[0017] Naši istraživači su našli da niže data jedinjenja predstavljena formulom (I) imaju superiorno Cdc7 inhibitorno delovanje i sproveli su dalje studije i kompletirali ovaj pronalazak. U skladu sa tim, ovaj pronalazak se odnosi na sledeće.

[1] Jedinjenje predstavljeno formulom:

gde

X je atom sumpora;

Y je CH,

R1je C1-6alkil grupa opciono supstituisana sa atomom(atomima) halogena,

R2je,

(1) C1-6alkil grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana od

(a) 4-7 člane monociklične alifatične heterociklične grupe koja sadrži, kao sastavne atome prstena pored atoma ugljenika, 1 do 4 hetero atoma izabrana od atoma kiseonika, atoma sumpora i atoma azota opciono supstituisanih sa 1 do 3 supstituenta izabrana od

(i) atoma halogena,

(ii) hidroksi grupe,

(iii) C1-6alkil grupe opciono supstituisane sa 1 do 3 supstituenta izabrana od

(aa) atoma halogena,

(bb) hidroksi grupe,

(cc) C1-6alkoksi grupe i

(dd) C6-14aril grupe opciono supstituisane sa 1 do 3 C1-6alkil grupe,

(iv) C1-6alkoksi grupe,

(v) C6-14aril grupe opciono supstituisane sa 1 do 3 atoma halogena,

(vi) C6-14ariloksi grupe,

(vii) C1-6alkoksi-karbonil grupe,

(viii) C1-6alkil-karbonil grupe,

(ix) cijano grupe,

(x) C6-14arilsulfonil grupe,

(xi) karboksi grupe,

(xii) amino grupe opciono mono-ili di-supstituisane sa C1-6alkil grupom,

(xiii) 4-7 člane monociklične alifatične heterociklične grupe koja sadrži, kao sastavne atome prstena pored atoma ugljenika, 1 do 4 hetero atoma izabrana od atoma kiseonika, atoma sumpora i atoma azota opciono supstituisanih sa okso grupom i (xiv) okso grupe,

(b) C1-6alkoksi grupe,

(c) amino grupe opciono mono-ili di-supstituisane sa supstituentom(ima) izabranim od

(i) C1-6alkil grupe opciono supstituisane sa 1 do 3 supstituenta izabrana od

(aa) C6-14aril grupe opciono supstituisane sa 1 do 3 C1-6alkoksi grupe,

(bb) C1-6alkoksi-karbonil grupe,

(cc) 4-7 člane monociklične aromatične heterociklične grupe koja sadrži, kao sastavne atome prstena pored atoma ugljenika, 1 do 4 hetero atoma izabrana od atoma kiseonika, atoma sumpora i atoma azota,

(dd) C3-8cikloalkil grupe opciono supstituisane sa 4-7 članom monocikličnom aromatičnom heterocikličnom grupom koja sadrži, kao sastavne atome prstena pored atoma ugljenika, 1 do 4 hetero atoma izabrana od atoma kiseonika, atoma sumpora i atoma azota i

(ee) hidroksi grupe,

(ii) 4-7 člane monociklične alifatične heterociklične grupe koja sadrži, kao sastavne

1

atome prstena pored atoma ugljenika, 1 do 4 hetero atoma izabrana od atoma kiseonika, atoma sumpora i atoma azota opciono supstituisanih sa 1 do 3 C7-13aralkil grupe,

(iii) C6-14aril grupe opciono supstituisane sa 1 do 3 C1-6alkoksi grupe i

(iv) C3-8cikloalkil grupe,

(d) 5-ili 6-člane aromatične heterociklične grupe,

(e) C6-14aril grupe i

(f) C3-8cikloalkil grupe opciono supstituisane sa amino grupom;

(2) C6-14aril grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 atoma halogena;

(3) 4-7 člana monociklična alifatična heterociklična grupa koja sadrži, kao sastavne atome prstena pored atoma ugljenika, 1 do 4 hetero atoma izabrana od atoma kiseonika, atoma sumpora i atoma azota, premoštena alifatična heterociklična grupa ili spirociklična alifatična heterociklična grupa, pri čemu je alifatična heterociklična grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana od

(a) atoma halogena,

(b) C1-6alkil grupe opciono supstituisane sa 1 do 3 supstituenta izabrana od

(i) hidroksi grupe,

(ii) C1-6alkoksi-karbonil grupe i

(iii) karbamoil grupe,

(c) C6-14ariloksi grupe,

(d) C1-6alkoksi-karbonil grupe,

(e) C1-6alkil-karbonil grupe,

(f) C6-14aril grupe opciono supstituisane sa C1-6alkilsulfonil grupom,

(g) C7-13aralkil grupe opciono supstituisane sa 1 do 3 atoma halogena,

(h) hidroksi grupe,

(i) karbamoil grupe i

(j) 4-7 člane monociklične alifatične heterociklične grupe koja sadrži, kao sastavne atome prstena pored atoma ugljenika, 1 do 4 hetero atoma izabrana od atoma kiseonika, atoma sumpora i atoma azota;

(4) C2-6alkenil grupe opciono supstituisane sa 1 do 3 C6-14aril grupe;

(5) 5-ili 6-člane aromatične heterociklične grupe;

(6) alifatične heterociklil-karbonil grupe; ili

(7) C3-8cikloalkil grupe opciono supstituisane sa amino grupom ili njegova so.

[2] Jedinjenje prethodno pomenutog [1], pri čemu je R1C1-6alkil grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 atoma halogena; a

R2je

(1) aminometil grupa opciono supstituisana sa 1 ili 2 C1-6alkil grupe,

(2) 5-ili 6-člana alifatična heterociklil-metil grupa opciono supstituisana sa C1-6alkil grupom ili

(3) 4-7- člana monociklična alifatična heterociklična grupa koja sadrži, kao sastavne atome prstena pored atoma ugljenika, 1 do 4 hetero atoma izabrana od atoma kiseonika, atoma sumpora i atoma azota, premoštena alifatična heterociklična grupa ili spirociklična alifatična heterociklična grupa ili njegova so.

[3] Jedinjenje prethodno navedenog [1], pri čemu je R2

(1) 5-ili 6-člana alifatična heterociklil-metil grupa; ili

(2) 4-7- člana monociklična alifatična heterociklična grupa koja sadrži, kao sastavni atom prstena pored atoma ugljenika, 1 do 4 hetero atoma izabrana od atoma kiseonika, atoma sumpora i atoma azota, premoštena alifatična heterociklična grupa ili spirociklična alifatična heterociklična grupa,

ili njegova so.

[4] Jedinjenje prethodno navedenog [3], pri čemu

R2je

(1) pirolidinilmetil grupa ili

(2) alifatična heterociklična grupa koja je izabrana iz grupe koja sadrži pirolidinil, piperidinil, 1,2,3,6-tetrahidropiridil, 7-azabiciklo[2.2.1]heptanil, 2-azabiciklo[2.2.1]heptanil i 1-azabiciklo[2.2.2]oktanil, pri čemu je alifatična heterociklična grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 atoma halogena,

ili njegova so.

[5] 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S)-pirolidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on ili njegova so.

[6] 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S)-piperidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on ili njegova so.

[7] 2-(7-Azabiciklo[2.2.1]hept-1-il)-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on ili njegova so.

[8] 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S)-1,2,3,6-tetrahidropiridin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on ili njegova so.

[9] 2-[(2S)-Piperidin-2-il]-6-[5-(trifluorometil)-1H-pirazol-4-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on ili njegova so.

[10] 2-[(2S)-1-Azabiciklo[2.2.2]okt-2-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on ili njegova so.

[11] Medikament koji uključuje jedinjenje prethodno pomenutog [1] ili njegovu so.

[12] Jedinjenje prethodno navedenog [1] ili njegova so za upotrebu u profilaksi ili tretmanu kancera.

[13] Jedinjenje prethodno navedenog [1], pri čemu je jedinjenje ili njegova so hidrat.

[14] Jedinjenje prethodno navedenog [1], pri čemu je R21-azabicilo[2.2.2]oktanil ili njegova so.

[15] Jedinjenje prethodno navedenog [1], pri čemu je R1metil, etil ili trifluormetil grupa ili njegova so.

[16] Upotreba jedinjenja prethodno pomenutog [1] ili njegove soli za izradu sredstva za profilaksu ili tretman kancera.

Efekat pronalaska

[0018] Jedinjenje iz ovog pronalaska je niske toksičnosti, ispoljava jako inhibitorno delovanje na Cdc7 i korisno je jer obezbeđuje sredstvo za profilaksu ili tretman kancera, za inhibiciju rasta kancera ili sredstvo za supresiju metastaza kancera.

1

(Detaljan opis pronalaska)

[0019] Definicija svakog simbola u formuli (I) je detaljno opisana u daljem tekstu.

[0020] Ukoliko nije drugačije navedeno, "atom halogena" u ovoj specifikaciji označava atom fluora, atom hlora, atom broma ili atom joda.

[0021] Primeri "C1-6alkil (grupe)" u ovoj specifikaciji uključuju metil, etil, propil izopropil, butil izobutil, sec-butil, terc-butil, pentil izopentil, neopentil, 1-etilpropil, heksil izoheksil, 1,1-dimetilbutil, 2,2-dimetilbutil, 3,3-dimetilbutil i 2-etilbutil.

[0022] Primeri "C6-14aril (grupe)" u ovoj specifikaciji uključuju fenil, naftil, antril, fenantril, acenaftilenil i bifenilil.

[0023] Primeri "C2-6alkenil (grupe)" u ovoj specifikaciji uključuju etenil, 1-propenil, 2-propenil, 2-metil-1-propenil, 1-butenil, 2-butenil, 3-butenil, 3-metil-2-butenil, 1-pentenil, 2-pentenil, 3-pentenil, 4-pentenil, 4-metil-3-pentenil, 1-heksenil, 3-heksenil i 5-heksenil.

[0024] Primeri "C2-6alkinil (grupe)" u ovoj specifikaciji uključuju etinil, 1-propinil, 2-propinil, 1- butinil, 2-butinil, 3-butinil, 1-pentinil, 2-pentinil, 3-pentinil, 4-pentinil, 1,1-dimetilprop-2-in-1-il, 1-heksinil, 2-heksinil, 3-heksinil, 4-heksinil i 5-heksinil.

[0025] Primeri "C1-6alkoksi (grupe)" u ovoj specifikaciji uključuju metoksi, etoksi, propoksi izopropoksi, butoksi, izobutoksi, sec-butoksi, terc-butoksi, pentoksi, izopentoksi i heksoksi.

[0026] Primeri "C1-6alkil-karbonil (grupe)" u ovoj specifikaciji uključuju acetil, etilkarbonil, propilkarbonil, izopropilkarbonil, butilkarbonil, izobutilkarbonil, sec-butilkarbonil, tercbutilkarbonil, pentilkarbonil i heksilkarbonil.

[0027] Primeri "C1-6alkoksi-karbonil (grupe)" u ovoj specifikaciji uključuju metoksikarbonil, etoksi-karbonil, propoksikarbonil, izopropoksikarbonil, butoksikarbonil, izobutoksikarbonil i terc-butoksikarbonil.

[0028] Primeri "C3-8cikloalkil (grupe)" u ovoj specifikaciji uključuju ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, cikloheptil i ciklooktil.

[0029] Primeri "C3-8cikloalkan (grupe)" u ovoj specifikaciji uključuju ciklopropan, ciklobutan, ciklopentan, cikloheksan, cikloheptan i ciklooktan.

[0030] Primeri "C3-6 cikloalkan (grupe)" u ovoj specifikaciji uključuju ciklopropan, ciklobutan, ciklopentan i cikloheksan.

[0031] Primeri "C3-8cikloalkenil (grupe)" u ovoj specifikaciji uključuju ciklopropenil (na primer, 2-ciklo-propen-1-il), ciklobutenil (na primer, 2-ciklobuten-1-il), ciklopentenil (na primer, 2-ciklopenten-1-il, 3-ciklopenten-1-il) i cikloheksenil (na primer, 2-cikloheksen-1-il, 3-cikloheksen-1-il).

[0032] Primeri "C7-13aralkil (grupe)" u ovoj specifikaciji uključuju benzil, fenetil i naftilmetil.

[0033] Primeri "C4-10cikloalkadienil (grupe)" u ovoj specifikaciji uključuju ciklopentadienil grupu.

[0034] Primeri "heterociklične grupe" u ovoj specifikaciji uključuju aromatičnu heterocikličnu grupu i alifatičnu heterocikličnu grupu.

[0035] Primeri "aromatične heterociklične grupe" u ovoj specifikaciji uključuju 4- do 7-članu (preferirano 5-ili 6-članu) monocikličnu aromatičnu heterocikličnu grupu koja sadrži, kao sastavni atom prstena pored atoma ugljenika, 1 do 4 hetero atoma izabranih od atoma kiseonika, atoma sumpora (atom sumpora je opciono oksidisan) i atoma azota i spojenu aromatičnu heterocikličnu grupu. Primeri spojene aromatične heterociklične grupe uključuju grupu dobijenu od spojenog prstena pri čemu prsten odgovara 4- do 7-članoj monocikličnoj aromatičnoj heterocikličnoj grupi a spojena su 1 ili 2 prstena izabrana od 5-ili 6-članog aromatičnog heterociklusa koji sadrži 1 ili 2 atoma azota (na primer, pirol imidazol, pirazol, pirazin, piridin, pirimidin), 5-članog aromatičnog heterociklusa koji sadrži jedan atom sumpora (na primer, tiofen) i benzen prstena.

[0036] Preferirani primeri aromatične heterociklične grupe uključuju monociklične aromatične heterociklične grupe kao što su furil (na primer, 2-furil, 3-furil), tienil (na primer, 2-tienil, 3-tienil), piridil (na primer, 2-piridil, 3-piridil, 4-piridil), pirimidinil (na primer, 2-pirimidinil, 4-pirimidinil, 5-pirimidinil, 6-pirimidinil), piridazinil (na primer, 3-piridazinil, 4-piridazinil), pirazinil (na primer, 2-pirazinil), pirolil (na primer, 1-pirolil, 2-pirolil, 3-pirolil) imidazolil (na primer, 1-imidazolil, 2-imidazolil, 4-imidazolil, 5-imidazolil), pirazolil (na primer, 1-pirazolil, 3-pirazolil, 4-pirazolil), tiazolil (na primer, 2-tiazolil, 4-tiazolil, 5-tiazolil) izotiazolil (na primer, 3-izotiazolil, 4-izotiazolil, 5-izotiazolil), oksazolil (na primer, 2-oksazolil, 4-oksazolil, 5-oksazolil), izoksazolil (na primer, 3-izoksazolil, 4-izoksazolil, 5-izoksazolil), oksadiazolil (na primer, 1,2,4-oksadiazol-5-il, 1,3,4-oksadiazol-2-il), tiadiazolil (na primer, 1,3,4-tiadiazol-2-il), triazolil (na primer, 1,2,4-triazol-1-il, 1,2,4-triazol- 3-il, 1,2,3-triazol-1-il, 1,2,3-triazol-2-il, 1,2,3-triazol-4-il), tetrazolil (na primer, tetrazol-1-il, tetrazol-5-il), triazinil (na primer, 1,2,4- triazin-1-il, 1,2,4-triazin-3-il) i slično; i spojene aromatične heterociklične grupe kao što su hinolil (na primer, 2-hinolil, 3-hinolil, 4-hinolil, 6-hinolil) izohinolil (na primer, 3-izohinolil), hinazolil (na primer, 2-hinazolil, 4-hinazolil), hinoksalil (na primer, 2-hinoksalil, 6-hinoksalil), benzofuril (na primer, 2-benzofuril, 3-

1

benzofuril), benzotienil (na primer, 2-benzotienil, 3-benzotienil), benzoksazolil (na primer, 2-benzoksazolil), benzizoksazolil (na primer, 7-benzizoksazolil), benzotiazolil (na primer, 2-benzotiazolil), benzimidazolil (na primer, benzimidazol-1-il, benzimidazol-2-il, benzimidazol-5-il), benzotriazolil (na primer, 1H-1,2,3-benzotriazol-5-il), indolil (na primer indol-1-il, indol-2-il indol-3-il, indol-5-il), indazolil (na primer, 1H-indazol-3-il), pirolopirazinil (na primer, 1H-pirolo[2,3-b]pirazin-2-il, 1H-pirolo[2,3-b]pirazin-6-il), imidazopiridil (na primer, 1H-imidazo[4,5-b]piridin-2-il, 1H-imidazo[4,5-c]piridin-2-il, 2H-imidazo[1,2-a]piridin-3-il), imidazopirazinil (na primer, 1H-imidazo[4,5-b]pirazin-2-il), pirazolopiridil (na primer, 1H-pirazolo[4,3-c]piridin- 3-il), pirazolotienil (na primer, 2H-pirazolo[3,4-b]tiophen-2-il), pirazolotriazinil (na primer, pirazolo[5,1-c][1,2,4]triazin-3-il) i slično.

[0037] Primeri "alifatične heterociklične grupe" u ovoj specifikaciji uključuju 4- do 7-članu (preferirano 4- do 6-članu) monocikličnu alifatičnu heterocikličnu grupu koja sadrži, kao sastavni atom prstena pored atoma ugljenika, 1 do 4 hetero atoma izabrana od atoma kiseonika, atoma sumpora (atom sumpora je opciono oksidisan) i atoma azota i spojenu alifatičnu heterocikličnu grupu. Primeri spojene alifatične heterociklične grupe uključuju grupu dobijenu od spojenog prstena pri čemu su prsten koji odgovara 4- do 7-članoj monocikličnoj alifatičnoj heterocikličnoj grupi i 1 ili 2 prstena izabrana od 5-ili 6-članog aromatinog heterociklusa koji sadrži 1 ili 2 atoma azota (na primer, pirol imidazol, pirazol, pirazin, piridin, pirimidin), 5- članog aromatinog heterociklusa koji sadrži jedan atom sumpora (na primer, tiofen) i benzen prstena, kondenzovani a prethodno pomenuta grupa je delimično zasićena.

[0038] Preferirani primeri alifatične heterociklične grupe uključuju monociklične alifatične heterociklične grupe kao što su oksetanil (na primer, 2-oksetanil, 3-oksetanil), pirolidinil (na primer, pirolidin-1-il, pirolidin-2-il), piperidil (na primer, piperidino, piperidin-2-il, piperidin-3-il, piperidin-4-il), morfolinil (na primer, morfolino), tiomorfolinil (na primer, tiomorfolino), piperazinil (na primer, piperazin-1-il, piperazin-2-il, piperazin-3-il), heksametileniminil (na primer, heksametilenimin-1-il), oksazolidinil (na primer, oksazolidin-2-il, oksazolidin-5-il), tiazolidinil (na primer, tiazolidin-2-il) imidazolidinil (na primer imidazolidin-2-il imidazolidin-3-il), oksazolinil (na primer, oksazolin-2-il), tiazolinil (na primer, tiazolin-2-il) imidazolinil (na primer imidazolin-2-il imidazolin-3-il), dioksolil (na primer, 1,3-dioksol-4-il), dioksolanil (na primer, 1,3-dioksolan-4-il), dihidrooksadiazolil (na primer, 4,5- dihidro-1,2,4-oksadiazol-3-il), 2-tiokso-1,3-oksazolidin-5-il, piranil (na primer, 4-piranil),

1

tetrahidropiranil (na primer, 2-tetrahidropiranil, 3-tetrahidropiranil, 4-tetrahidropiranil), tiopiranil (na primer, 4-tiopiranil), tetrahidrotiopiranil (na primer, 2- tetrahidrotiopiranil, 3-tetrahidrotiopiranil, 4-tetrahidrotiopiranil), 1-oksid tetrahidrotiopiranil (na primer, 1-oksid tetrahidrotiopiran-4-il), 1,1-dioksid tetrahidrotiopiranil (na primer, 1,1-dioksid tetrahidrotiopiran-4-il), tetrahidrofuril (na primer, tetrahidrofuran-3-il, tetrahidrofuran-2-il), pirazolidinil (na primer, pirazolidin-1-il, pirazolidin-3-il), pirazolinil (na primer, pirazolin-1-il), tetrahidropirimidinil (na primer, tetrahidropirimidin-1-il), dihidrotriazolil (na primer, 2,3-dihidro-1H-1,2,3-triazol- 1-il), tetrahidrotriazolil (na primer, 2,3,4,5-tetrahidro-1H-1,2,3-triazol-1-il), azepanil (na primer, azepan-3-il, azepan-2-il), azetidinil (na primer, azetidin-1-il, azetidin-2-il), dihidropiridil (na primer, 3,6-dihidropiridin-1-il, 3,6-dihidropiridin-2-il), tetrahidropiridil (na primer, 1,2,3,6-tetrahidropiridin-2-il), oksotetrahidropirimidinil (na primer, oksotetrahidropirimidin-1-il) i slično; spojene alifatične heterociklične grupe kao što su dihidroindolil (na primer, 2,3-dihidro-1H-indol-1-il), dihidroizoindolil (na primer, 1,3-dihidro-2H-izoindol-2-il), dihidrobenzofuril (na primer, 2,3-dihidro-1-benzofuran-5-il), dihidrobenzodioksinil (na primer, 2,3-dihidro-1,4-benzodioksinil), dihidrobenzodioksepinil (na primer, 3,4-dihidro-2H-1,5-benzodioksepinil), tetrahidrobenzofuril (na primer, 4,5,6,7-tetrahidro-1-benzofuran-3-il), hromenil (na primer, 4H-hromen-2-il, 2H-hromen-3-il), dihidrohinolil (na primer, 1,2-dihidrohinolin-4-il), tetrahidrohinolil (na primer, 1,2,3,4-tetrahidrohinolin-4-il), dihidroizohinolil (na primer, 1,2-dihidroizohinolin-4-il, 3,4-dihidroizohinolin-2-il), tetrahidroizohinolil (na primer, 1,2,3,4-tetrahidroizohinolin-4-il), dihidroftalazinil (na primer, 1,4-dihidrophthalazin-4-il), oktahidroindolizinil (na primer, oktahidroindolizin-3-il, oktahidroindolizin-5-il), oktahidrohinolizinil (na primer, oktahidro-2H-hinolizin-4-il), oktahidropirolopirazinil (na primer, oktahidropirolo[1,2-a]pirazin-3-il), oktahidroindolil (na primer, oktahidro-1H-indol-2-il), oktahidrociklopenta[b]pirolil, dekahidroizohinolil (na primer, dekahidroizohinolin-1-il) i slično.

[0039] Pored toga, "alifatična heterociklična grupa" u ovoj specifikaciji može da bude premoštena alifatična heterociklična grupa ili spirociklična alifatična heterociklična grupa.

[0040] Primeri premoštene alifatične heterociklične grupe uključuju azabiciklo[2.1.1]heksanil (na primer, 2-azabiciklo[2.1.1]heks-1-il), azabiciklo[3.1.0]heksanil (na primer, 3-azabiciklo[3.1.0]heks-2-il, 3-azabiciklo[3.1.0]heks-3-il, 2-azabiciklo[3.1.0]heks-3-il, 2-azabiciklo[3.1.0]heks-1-il), azabiciklo[2.2.1]heptanil (na primer, 2-azabiciklo[2.2.1]hept-3-il, 7-azabiciklo[2.2.1]hept-1-il), azabiciklo[2.2.2]oktanil (na primer, 2-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il, 1-azabiciklo[2.2.2]okt-2-il), azabiciklo[2.2.1]heksanil (na primer, 2-azabiciklo[2.2.1]heks-1-

1

il), azabiciklo[4.1.0]heptanil (na primer, 3-azabiciklo[4.1.0]hept-4-il) i slično.

[0041] Primeri spirociklične alifatične heterociklične grupe uključuju 1,4-dioksa-7-azaspiro[4.4]non-7-il, tetrahidro-5H-spiro[1,3-oksazolo[3,4-a]pirazin-1,4’-piperidin]-1’-il, 4-azaspiro[2.4]hept-5-il i slično.

[0042] Kada jedinjenje (I) ima tautomer, svaki izomer je takođe obuhvaćen jedinjenjem (I).

[0043] Na primer, jedinjenje (I), u kome je parcijalna struktura formule

gde je svaki simbol kako je prethodno definisano, ima formulu

u kojoj je svaki simbol kako je prethodno definisano, je takođe obuhvaćeno jedinjenjem (I).

[0044] Pored toga, na primer, jedinjenje (I) u kome je parcijalna struktura formule

gde je svaki simbol kako je prethodno definisano, ima formulu

gde je svaki simbol kako je prethodno definisano, je takođe obuhvaćeno jedinjenjem (I).

[0045] U jedinjenju (I), X je atom sumpora a Y je CH.

[0046] R1je C1-6alkil grupa opciono supstituisana sa atom(ima) halogena.

1

[0047] R1je preferirano metil grupa, etil grupa, trifluorometil grupa.

[0048] R1je poželjnije metil grupa, trifluorometil grupa.

[0049] R1je čak još poželjnije metil grupa.

[0050] R2je supstituent kako je prethodno navedeno u [1].

[0051] U ne inventivnom ostvarenju "supstituent" R<2>uključuje ugljovodoničnu grupu koja opciono ima supstituent(e), heterocikličnu grupu koja opciono ima supstituent(e) i grupu od (5) - (30) niže navedenim Supstituentima Grupe A.

[0052] Primeri "ugljovodonične grupe" prethodno pomenute "ugljovodonične grupe koja opciono ima supstituent(e)" uključuju C1-6alkil grupu, C2-6alkenil grupu, C2-6alkinil grupu, C3-8cikloalkil grupu, C3-8cikloalkenil grupu, C4-10cikloalkadienil grupu i C6-14aril grupu.

[0053] Svaka prethodno pomenuta C3-8cikloalkil grupa, C3-8cikloalkenil grupa i C4-10cikloalkadienil grupa može da bude kondenzovana sa benzen prstenom. Primeri grupe spojenog prstena uključuju indanil, dihidronaftil, tetrahidronaftil i fluorenil. Pored toga, premoštena ugljovodonična grupa kao što su norbornanil, adamantil i slično je takođe obuhvaćena prethodno pomenutom ugljovodoničnom grupom.

[0054] Ugljovodonična grupa prethodno pomenute "ugljovodonične grupe koja opciono ima supstituent(e)" je preferirano C1-6alkil grupa (na primer, metil, etil), C3-8cikloalkil grupa (posebno, ciklopentil, cikloheksil), C2-6alkenil grupa (na primer, etenil) ili C6-14aril grupa (na primer, fenil). Posebno su preferirane C1-6alkil grupa (na primer, metil, etil) i

C6-14aril grupa (na primer, fenil).

[0055] C1-6alkil grupa, C2-6alkenil grupa i C2-6alkinil grupa date kao primeri u prethodno pomenutoj "ugljovodoničnoj grupi" mogu da imaju 1 do 5 (preferirano 1 do 3) supstituenta na odgovarajućem položaju(ima).

[0056] Primeri supstituenta uključuju niže date supstituente grupe A. Kada broj supstituenata nije manji od 2, odgovarajući supstituenti mogu da budu isti ili različiti.

(Supstituenti grupe A)

[0057]

(1) C3-8cikloalkil grupa (na primer, ciklopropil, ciklopentil, cikloheksil) opciono supstituisana sa amino grupom;

(2) C6-14aril grupa (na primer, fenil, naftil) opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta

1

izabrana od

(a) C1-6alkil grupe opciono supstituisane sa 1 do 3 atoma halogena,

(b) hidroksi grupe,

(c) C1-6alkoksi grupe opciono supstituisane sa 1 do 3 atoma halogena,

(d) atoma halogena (na primer, atom fluora) i

(e) C1-6alkilsulfonil grupe (na primer, metilsulfonil);

(3) aromatična heterociklična grupa (na primer, tienil, furil, piridil, pirazolil imidazolil, tetrazolil, oksazolil, tiazolil, oksadiazolil, tiadiazolil, pirolil) opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana od

(a) C1-6alkil grupe opciono supstituisane sa 1 do 3 atoma halogena,

(b) hidroksi grupe,

(c) C1-6alkoksi grupe opciono supstituisane sa 1 do 3 atoma halogena i

(d) atoma halogena;

(4) alifatična heterociklična grupa (na primer, tetrahidrofuril, morfolinil, tiomorfolinil, piperidil, pirolidinil, piperazinil, azetidinil, 3,4-dihidroizohinolil, tetrahidroizohinolil, dihidropiridil, tetrahidropiridil, 1,3-dihidro-2H- izoindolil, 1,4-dioksa-7-azaspiro[4.4]non-7-il, tetrahidro-5H-spiro[1,3-oksazolo[3,4-a]pirazin-1,4’-piperidin]-1’-il, azabiciklo[3.1.0]heks-3-il) opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana od

(a) C1-6alkil grupe (na primer, metil) opciono supstituisane sa 1 do 3 supstituenta izabrana od

(i) atoma halogena (na primer, atom fluora),

(ii) hidroksi grupe i

(iii) C6-14aril grupe (na primer, fenil) opciono supstituisane sa

(aa) atomom halogena (na primer, atom fluora),

(bb) hidroksi grupom,

(cc) C1-6alkoksi grupom (na primer, metoksi) i

2

(dd) 1 do 3 C1-6alkil grupe (na primer, metil),

(b) hidroksi grupe,

(c) C1-6alkoksi grupe (na primer, metoksi) opciono supstituisane sa 1 do 3 atoma halogena,

(d) atoma halogena (na primer, atom fluora),

(e) okso grupe,

(f) C6-14aril grupe (na primer, fenil) opciono supstituisane sa 1 do 3 atoma halogena (na primer, atom fluora),

(g) C6-14ariloksi grupe (na primer, fenoksi),

(h) C1-6alkoksi-karbonil grupe (na primer, etoksikarbonil) ili C1-6alkil-karbonil grupe (na primer, acetil),

(i) cijano grupe,

(j) C6-14arilsulfonil grupe (na primer, fenilsulfonil),

(k) karboksi grupe,

(l) amino grupe opciono mono-ili di-supstituisane sa C1-6alkil grupom(ama) (na primer, metil) i

(m) alifatične heterociklične grupe (na primer, pirolidinil, tetrahidropirimidinil) opciono supstituisane sa okso grupom;

(5) amino grupa opciono mono-ili di-supstituisana sa supstituentom(ima) izabranim od

(a) C1-6alkil grupe (na primer, metil, etil, izopropil) opciono supstituisane sa 1 do 3 supstituenta izabrana od

(i) atoma halogena,

(ii) C6-14aril grupe (na primer, fenil) opciono supstituisane sa 1 do 3 C1-6alkoksi grupe (na primer, metoksi),

(iii) C1-6alkoksi-karbonil grupe (na primer, etoksikarbonil),

(iv) aromatične heterociklične grupe (na primer, piridil),

(v) C3-8cikloalkil grupe (na primer, ciklopropil) opciono supstituisane sa 1 do 3 aromatične heterociklične grupe (na primer, tienil) i

(vi) hidroksi grupe,

(b) C1-6alkil-karbonil grupe opciono supstituisane sa 1 do 3 atoma halogena,

(c) C1-6alkoksi-karbonil grupe opciono supstituisane sa 1 do 3 atoma halogena, (d) C1-6alkilsulfonil grupe (na primer, metilsulfonil) opciono supstituisane sa 1 do 3 atoma halogena,

(e) karbamoil grupe opciono mono-ili di-supstituisane sa C1-6alkil grupom(ama) opciono supstituisane sa 1 do 3 atoma halogena,

(f) aromatične heterociklične grupe (na primer, tienil, furil, piridil, pirazolil imidazolil, tetrazolil, oksazolil, tiazolil, oksadiazolil, tiadiazolil),

(g) alifatične heterociklične grupe (na primer, pirolidinil) opciono supstituisane sa 1 do 3 C7-13aralkil grupe (na primer, benzil),

(h) C6-14aril grupe (na primer, fenil) opciono supstituisane sa 1 do 3 C1-6alkoksi grupe (na primer, metoksi) i

(i) C3-8cikloalkil grupe (na primer, ciklopentil);

(6) C1-6alkil-karbonil grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 atoma halogena;

(7) C1-6alkoksi-karbonil grupa (na primer, terc-butoksikarbonil) opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana od

(a) atoma halogena,

(b) C1-6alkoksi grupe,

(c) C6-14aril grupe(na primer, fenil) i

(d) heterociklične grupe (na primer, tetrahidrofuril);

(8) C1-6alkilsulfonil grupa (na primer, metilsulfonil, etilsulfonil izopropilsulfonil) opciono supstituisana sa 1 do 3 atoma halogena;

(9) karbamoil grupa opciono mono-ili di-supstituisana sa C1-6alkil grupom(ama) opciono supstituisana sa 1 do 3 atoma halogena;

(10) tiokarbamoil grupa opciono mono-ili di-supstituisana sa C1-6alkil grupom(ama) opciono supstituisana sa 1 do 3 atoma halogena;

(11) sulfamoil grupa opciono mono-ili di-supstituisana sa C1-6alkil grupom(ama) opciono supstituisana sa 1 do 3 atoma halogena;

(12) karboksi grupa;

(13) hidroksi grupa;

(14) C1-6alkoksi grupa (na primer, etoksi) opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana od

(a) atoma halogena,

(b) karboksi grupe,

(c) C1-6alkoksi grupe,

(d) C1-6alkoksi-karbonil grupe opciono supstituisane sa 1 do 3 C6-14aril grupe (na primer, fenil),

(e) amino grupe opciono mono-ili di-supstituisane sa supstituentom(ima) izabranim od C1-6alkil grupe i C1-6alkoksi-karbonil grupe,

(f) heterociklične grupe (na primer, tetrahidrofuril) i

(g) C3-8cikloalkil grupe;

(15) C2-6alkeniloksi grupa (na primer, eteniloksi) opciono supstituisana sa 1 do 3 atoma halogena;

(16) C7-13aralkiloksi grupa (na primer, benziloksi);

(17) C6-14ariloksi grupa (na primer, fenoksi, naftiloksi);

(18) C1-6alkil-karboniloksi grupa (na primer, acetiloksi, terc-butilkarboniloksi);

(19) C6-14aril-karbonil grupa (na primer, benzoil) opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana od

(a) atoma halogena i

(b) C1-6alkil grupe opciono supstituisane sa 1 do 3 atoma halogena;

(20) aromatična heterociklilkarbonil grupa (na primer, pirazolilkarbonil, pirazinilkarbonil izoksazolilkarbonil, piridilkarbonil, tiazolilkarbonil) opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana od C1-6alkil grupe opciono supstituisane sa 1 do 3 atoma halogena; (21) alifatična heterociklilkarbonil grupa (na primer, pirolidinilkarbonil, morfolinilkarbonil) opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana od C1-6alkil grupe opciono supstituisane sa 1 do 3 atoma halogena;

(22) C7-13aralkiloksi-karbonil grupa (na primer, benziloksikarbonil);

(23) merkapto grupa;

2

(24) C1-6alkiltio grupa (na primer, metiltio, etiltio) opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana od

(a) atoma halogena i

(b) C1-6alkoksi-karbonil grupe;

(25) C7-13aralkiltio grupa (na primer, benziltio) ;

(26) C6-14ariltio grupa (na primer, feniltio, naftiltio) ;

(27) cijano grupa;

(28) nitro grupa;

(29) atom halogena (na primer, atom hlora);

(30) C3-10 cikloalkiloksi grupa (na primer, ciklopropiloksi, ciklopentiloksi) opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana od

(a) atoma halogena (na primer, atom fluora) i

(b) C1-6alkoksi grupe (na primer, metoksi); i

(31) okso grupa.

[0058] Prethodno pomenuta C3-10 cikloalkil grupa, C3-10 cikloalkenil grupa, C4-10cikloalkadienil grupa i C6-14aril grupa date kao primeri prethodno pomenute "ugljovodonične grupe" opciono imaju 1 do 5 (preferirano 1 do 3) supstituenta na položajima koji mogu da se supstituišu.

[0059] Primeri supstituenata su niže dati u supstituentima grupe B. Kada broj supstituenata nije manji od 2, odgovarajući supstituenti mogu da budu isti ili različiti.

(Supstituent grupe B)

[0060]

(1) Grupe date kao primeri prethodno pomenutih Supstitueanta grupe A;

(2) C1-6alkil grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana od

(a) atoma halogena,

(b) karboksi grupe,

(c) hidroksi grupe,

(d) C1-6alkoksi-karbonil grupe,

(e) C1-6alkoksi grupe,

(f) amino grupe opciono mono-ili di-supstituisane sa C1-6alkil grupom(ama) i (g) karbamoil grupe;

(3) C2-6alkenil grupa (na primer, etenil, 1-propenil) opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana od

(a) atoma halogena,

(b) karboksi grupe,

(c) hidroksi grupe,

(d) C1-6alkoksi-karbonil grupe,

(e) C1-6alkoksi grupa i

(f) amino grupe opciono mono-ili di-supstituisane sa C1-6alkil grupom(ama); i

(4) C7-13aralkil grupa (na primer, benzil) opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana od

(a) C1-6alkil grupe opciono supstituisane sa 1 do 3 atoma halogena,

(b) hidroksi grupe,

(c) C1-6alkoksi grupe i

(d) atoma halogena.

[0061] Preferirani primeri supstituenta prethodno pomenute “ugljovodonične grupe koja opciono ima supstituent(e)” uključuju

(1) atom halogena (na primer, atom hlora),

(2) C1-6alkoksi grupu (na primer, metoksi, etoksi),

(3) alifatičnu heterocikličnu grupu (na primer, pirolidinil, piperidil, morfolinil, tiomorfolinil, piperazinil, azetidinil, tetrahidroizohinolil, dihidropiridil, tetrahidropiridil,

2

tetrahidrofuril, 1,3-dihidro-2H-izoindolil, 1,4-dioksa-7-aza- spiro[4.4]non-7-il, tetrahidro-5H-spiro[1,3-oksazolo[3,4-a]pirazin-1,4’-piperidin]-1’-il, azabiciklo[3.1.0]heks-3-il) opciono supstituisanu sa 1 do 4 supstituenta izabrana od

(a) atoma halogena (na primer, atom fluora),

(b) hidroksi grupe,

(c) C1-6alkil grupe (na primer, metil) opciono supstituisane sa 1 do 3 supstituenta izabrana od atoma halogena (na primer, atom fluora) i hidroksi grupe,

(d) C1-6alkoksi grupe (na primer, metoksi),

(e) C6-14aril grupe (na primer, fenil) opciono supstituisane sa 1 do 3 atoma halogena (na primer, atom fluora),

(f) C6-14ariloksi grupe (na primer, fenoksi),

(g) C1-6alkoksi-karbonil grupe (na primer, etoksikarbonil)

(h) C1-6alkil-karbonil grupe (na primer, acetil),

(i) cijano grupe,

(j) C6-14arilsulfonil grupe (na primer, fenilsulfonil),

(k) karboksi grupe,

(l) amino grupe opciono mono-ili di-supstituisane sa C1-6alkil grupom(ama)) (na primer, metil),

(m) alifatične heterociklične grupe (na primer, pirolidinil, tetrahidropirimidinil) opciono supstituisane sa okso grupom i

(n) okso grupe,

(4) amino grupa opciono mono-ili di-supstituisana sa supstituentom(ima) izabranim od

(i) C6-14aril grupe (na primer, fenil) opciono supstituisane sa C1-6alkoksi grupom (na primer, metoksi),

(ii) C1-6alkoksi-karbonil grupe (na primer, etoksikarbonil),

(iii) aromatične heterociklične grupe (na primer, piridil) i

(iv) C3-8cikloalkil grupe (na primer, ciklopropil) opciono supstituisane sa 1 do 3

2

aromatične heterociklične grupe (na primer, tienil),

(b) alifatične heterociklične grupe (na primer, pirolidinil) opciono supstituisane sa 1 do 3 C7-13aralkil grupe (na primer, benzil) i

(c) C6-14aril grupe (na primer, fenil) opciono supstituisane sa 1 do 3 C1-6alkoksi grupe (na primer, metoksi),

(5) okso grupa i

(6) 5-ili 6-člana aromatična heterociklična grupa (na primer imidazolil).

[0062] Još poželjniji primeri supstituenta prethodno pomenute “ugljovodonične grupe koja opciono ima supstituent(e)” uključuju

(1) atom halogena (na primer, atom hlora),

(2) 4- do 6-članu alifatičnu heterocikličnu grupu (na primer, pirolidinil, piperidil, morfolinil, piperazinil, azetidinil, tetrahidrofuril, dihidropiridil) opciono supstituisanu sa 1 do 3 supstituenta izabrana od

(a) atoma halogena (na primer, atom fluora),

(b) hidroksi grupe,

(d) C1-6alkoksi grupe (na primer, metoksi) i

(e) C6-14aril grupe (na primer, fenil) i

(3) C1-6alkoksi grupu (na primer, etoksi).

[0063] Posebno preferirani primeri supstituenta prethodno pomenute " ugljovodonične grupe koja opciono ima supstituent(e) " uključuju

(1) atom halogena (na primer, atom hlora) i

(2) 4- do 6-članu alifatičnu heterocikličnu grupu (na primer, pirolidinil, dihidropiridil) opciono supstituisanu sa 1 do 3 atoma halogena (na primer, atom fluora, atoma hlora).

2

[0064] Preferirani primeri heterociklične grupe prethodno pomenute "heterociklične grupe koja opciono ima supstituent(e)" uključuju alifatičnu heterocikličnu grupu. Alifatična heterociklična grupa može da bude monociklična alifatična heterociklična grupa ili spojena alifatična heterociklična grupa.

[0065] U preferirane primere prethodno pomenute monociklične alifatične heterociklične grupe spada 4- do 7- člana monociklična alifatična heterociklična grupa (na primer, pirolidinil, morfolinil, piperidil, piperazinil, tetrahidrofuril, tetrahidropiridil, azetidinil, azepanil, tiazolidinil).

[0066] Prethodno pomenuta monociklična alifatična heterociklična grupa je preferirano 5-ili 6-člana monociklična alifatična heterociklična grupa (na primer, pirolidinil, piperidil, piperazinil, morfolinil).5-ili 6-člana monociklična alifatična heterociklična grupa je poželjnije pirolidinil, piperidil, morfolinil i slično. Drugi preferirani primeri 5-ili 6-člane monociklične alifatične heterociklične grupe uključuju pirolidinil, piperidil i tetrahidropiridil.

[0067] Preferirani primeri prethodno pomenute spojenu alifatične heterociklične grupe uključuju 8- do 10-članu spojenu alifatičnu heterocikličnu grupu (na primer, oktahidroindolizinil, oktahidrohinolizinil, oktahidropirolopirazinil, oktahidroindolil, oktahidrociklopenta[b]pirolil, tetrahidrohinolil, tetrahidroizohinolil, dekahidroizohinolil).

[0068] Prethodno pomenuta alifatična heterociklična grupa može da bude premoštena alifatična heterociklična grupa ili spirociklična alifatična heterociklična grupa.

[0069] Preferirani primeri premoštene alifatične heterociklične grupe uključuju azabiciklo[3.1.0]heksanil (na primer, 3-azabiciklo[3.1.0]heks-2-il, 2-azabiciklo[3.1.0]heks-3-il), azabiciklo[2.2.2]oktanil (na primer, 2-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il), azabiciklo[2.2.1]heptanil (na primer, 2-azabiciklo[2.2.1]hept-3-il, 7-azabiciklo[2.2.1]hept-1-il), azabiciklo[2.2.1]heksanil (na primer, 2-azabiciklo[2.2.1]heks-1-il), azabiciklo[2.2.2]oktanil (na primer, 1-azabiciklo[2.2.2]okt-2-il) i azabiciklo[2.1.1]heksanil (na primer, 2-azabiciklo[2.1.1]heks-1-il). Još poželjniji primeri premoštene alifatične heterociklične grupe uključuju azabiciklo[2.2.2]oktanil (na primer, 2-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il, 2-azabiciklo[2.2.2]okt-2-il), azabiciklo[2.2.1]heptanil (na primer, 2-azabiciklo[2.2.1]hept-3-il, 2-azabiciklo[2.2.1]hept-1-il) i slično.

[0070] Preferirani primeri spirociklične alifatične heterociklične grupe uključuju azaspiro[2.4]heptil (4-azaspiro[2.4]hept-5-il) i slično.

[0071] Heterociklična grupa prethodno pomenute "heterociklične grupe koja opciono ima

2

supstituent(e)" je preferirano 4- do 7-člana monociklična alifatična heterociklična grupa (na primer, pirolidinil, piperidil, morfolinil, azetidinil, azepanil), 8- do 10-člana spojena alifatična heterociklična grupa (na primer, oktahidroindolil) ili premoštena alifatična heterociklična grupa (na primer, azabiciklo[3.1.0]heksanil, azabiciklo[2.2.1]heptanil, azabiciklo[2.2.2]oktanil).

[0072] "Heterociklična grupa" "heterociklične grupe koja opciono ima supstituent(e)" za R2može da ima 1 do 5 (preferirano 1 do 3) supstituenta na položaju(ima) koji mogu da budu supstituisani.

[0073] U primere ovakvog supstituenta spadaju grupe navedene kao primeri u prethodno datoj grupi supstituenata B. Kada je broj supstituenata dva ili više, odgovarajući supstituenti mogu da budu isti ili različiti.

[0074] Preferirani primeri supstituenta prethodno pomenute "heterociklične grupe koja opciono ima supstituent(e)" uključuju

(1) atom halogena (na primer, atom fluora),

(2) C1-6alkil grupu (na primer, metil, etil) opciono supstituisanu sa 1 do 3 supstituenta izabrana od

(a) hidroksi grupe,

(b) C1-6alkoksi-karbonil grupe (na primer, etoksikarbonil, terc-butoksikarbonil) i (c) karbamoil grupe,

(3) C1-6alkoksi grupu (na primer, metoksi),

(4) C6-14aril grupu (na primer, fenil),

(5) C6-14ariloksi grupu (na primer, fenoksi),

(6) C7-13aralkiloksi grupu (na primer, benziloksi),

(7) C1-6alkoksi-karbonil grupu (na primer, terc-butoksikarbonil),

(8) C6-14aril grupu (na primer, fenil) opciono supstituisanu sa C1-6alkilsulfonil grupom (na primer, metilsulfonil),

(9) C1-6alkil-karbonil grupu (na primer, acetil),

(10) C7-13aralkil grupu (na primer, benzil) opciono supstituisanu sa 1 do 3 atoma halogena (na primer, atom fluora),

(11) hidroksi grupu,

2

(12) karbamoil grupu i

(13) alifatičnu heterocikličnu grupu (na primer, piperidil).

[0075] Još poželjniji primeri supstituenta prethodno pomenute "heterociklične grupe koja opciono ima supstituent(e)" uključuju

(1) atom halogena (na primer, atom fluora),

(2) C6-14ariloksi grupu (na primer, fenoksi) i

(3) C1-6alkil grupu (na primer, metil).

[0076] U skladu sa pronalaskom, R2je preferirano C1-6alkil grupa koja opciono ima supstituent(e) (posebno, metil, etil, izopropil, izobutil), C6-14aril grupa (posebno, fenil) koja opciono ima supstituent(e) ili 5-ili 6-člana alifatična heterociklična grupa (posebno, pirolidinil, morfolinil) koja opciono ima supstituent(e), pri čemu su supstituenti oni navedeni u patentnom zahtevu 2. Od ovih je preferirana,

(1) 4- do 6-člana alifatična heterociklil-C1-6alkil grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 atoma halogena;

(2) C6-14aril grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 atoma halogena; ili

(3) alifatična heterociklična grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana od

(a) atoma halogena i

(b) C1-6alkil grupe.

[0077] Specifični preferirani primeri za R2uključuju

(1) C1-6alkil grupu (posebno, metil, etil, izopropil, izobutil) koja opciono ima supstituent(e),

(2) C6-14aril grupu (posebno, fenil) koja opciono ima supstituent(e),

(3) 4-7 članu monocikličnu alifatičnu heterocikličnu grupu koja sadrži, kao sastavne atome prstena pored atoma ugljenika, 1 do 4 hetero atoma izabrana od atoma kiseonika, atoma sumpora i atoma azota, premoštenu alifatičnu heterocikličnu grupu ili spirocikličnu alifatičnu heterocikličnu grupu (posebno, pirolidinil, morfolinil, piperazinil, piperidil, tetrahidrofuril, tetrahidropiridil, tetrahidrohinolil, tetrahidroizohinolil, dekahidroizohinolil, azetidinil, azepanil, oktahidropirolopirazinil, oktahidroindolil, oktahidrociklopenta[b]pirolil, tiazolidinil, azabiciklo[3.1.0]heksanil, azabiciklo[2.1.1]heksanil, azabiciklo[2.2.1]heptanil, azabiciklo[4.1.0]heptanil, azabiciklo[2.2.2]oktanil, azaspiro[2.4]heptil) koja opciono ima supstituent(e),

(4) C2-6alkenil grupu (posebno, etenil) koja opciono ima supstituent(e),

(5) 5-ili 6-članu aromatičnu heterocikličnu grupu (posebno, piridil, pirazolil, tiazolil), (6) alifatičnu heterociklil-karbonil grupu izabranu od pirolidinilkarbonil i

(7) C3-8cikloalkil grupu (posebno, ciklopentil, cikloheksil) koja opciono ima supstituent(e), pri čemu su supstituenti kako je navedeno u patentnom zahtevu 1.

[0078] Još preciznije, R<2>je

(1) C1-6alkil grupa (posebno, metil, etil, izopropil, izobutil) opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana od

(a) 4-7 člane monociklične alifatične heterociklične grupe koja sadrži, kao sastavne atome prstena pored atoma ugljenika, 1 do 4 hetero atoma izabrana od atoma kiseonika, atoma sumpora i atoma azota (posebno, pirolidinil, piperidil, morfolinil, tiomorfolinil, piperazinil, azetidinil, tetrahidroizohinolil, tetrahidropiridil, 1,3-dihidro-2H-izoindolil, 1,4-dioksa-7-azaspiro[4.4]non-7-il, tetrahidro-5H-spiro[1,3-oksazolo[3,4-a]pirazin-1,4’-piperidin]-1’-il, azabiciklo[3.1.0]heksanil) opciono supstituisane sa 1 do 3 supstituenta izabrana od

(i) atoma halogena (posebno, atom fluora),

(ii) hidroksi grupe,

(iii) C1-6alkil grupe (posebno, metil) opciono supstituisane sa 1 do 3 supstituenta izabrana od

(aa) atoma halogena (posebno, atoma fluora),

(bb) hidroksi grupe,

(cc) C1-6alkoksi grupe (posebno, metoksi) i

(dd) C6-14aril grupe (posebno, fenil) opciono supstituisane sa 1 do 3 C1-6alkil

1

grupe (posebno,

metil),

(iv) C1-6alkoksi grupe (posebno, metoksi),

(v) C6-14aril grupe (posebno, fenil) opciono supstituisane sa 1 do 3 atoma halogena (posebno, atom fluora),

(vi) C6-14ariloksi grupe (posebno, fenoksi),

(vii) C1-6alkoksi-karbonil grupe (posebno, etoksikarbonil),

(viii) C1-6alkil-karbonil grupe (posebno, acetil),

(ix) cijano grupe,

(x) C6-14arilsulfonil grupe (posebno, fenilsulfonil),

(xi) karboksi grupe,

(xii) amino grupe opciono mono-ili di-supstituisane sa C1-6alkil grupom(ama) (posebno, metil),

(xiii) 4-7-člane monociklične alifatične heterociklične grupe koja sadrži, kao sastavne atome prstena pored atoma ugljenika, 1 do 4 hetero atoma izabrana od atoma kiseonika, atoma sumpora i atoma azota (posebno, pirolidinil, tetrahidropirimidinil) opciono supstituisane sa okso grupom i

(xiv) okso grupe,

(b) C1-6alkoksi grupe (posebno, etoksi),

(i) C1-6alkil grupe (posebno, metil, etil, izopropil) opciono supstituisane sa 1 do 3 supstituenta izabrana od

(aa) C6-14aril grupe (posebno, fenil) opciono supstituisane sa 1 do 3 C1-6alkoksi grupe (posebno, metoksi),

(bb) C1-6alkoksi-karbonil grupe (posebno, etoksikarbonil),

(cc) 4-7 člane monociklične aromatične heterociklične grupe koja sadrži, kao sastavne atome prstena pored atoma ugljenika, 1 do 4 hetero atoma izabrana od atoma kiseonika, atoma sumpora i atoma azota (posebno, piridil),

(dd) C3-8cikloalkil grupe (posebno, ciklopropil) opciono supstituisane sa 4-7

2

članom monocikličnom aromatičnom heterocikličnom grupom koja sadrži, kao sastavne atome prstena pored atoma ugljenika, 1 do 4 hetero atoma izabrana od atoma kiseonika, atoma sumpora i atoma azota (posebno, tienil) i

(ee) hidroksi grupe,

(ii) 4-7 člane monociklične alifatične heterociklične grupe koja sadrži, kao sastavne atome prstena pored atoma ugljenika, 1 do 4 hetero atoma izabrana od atoma kiseonika, atoma sumpora i atoma azota (posebno, pirolidinil) opciono supstituisane sa 1 do 3 C7-13aralkil grupe (posebno, benzil),

(iii) C6-14aril grupe (posebno, fenil) opciono supstituisane sa 1 do 3 C1-6alkoksi grupe (posebno, metoksi) i

(iv) C3-8cikloalkil grupe (posebno, ciklopentil),

(d) 5-ili 6-člane aromatične heterociklične grupe (posebno imidazolil, pirolil),

(e) C6-14aril grupe (posebno, fenil) i

(f) C3-8cikloalkil grupe (posebno, ciklopropil, ciklopentil, cikloheksil) opciono supstituisane sa amino grupom,

(2) C6-14aril grupe (posebno, fenil) opciono supstituisane sa 1 do 3 atoma halogena (posebno, atom hlora),

(3) 4-7 člane monociklične alifatične heterociklične grupe koja sadrži, kao sastavne atome prstena pored atoma ugljenika, 1 do 4 hetero atoma izabrana od atoma kiseonika, atoma sumpora i atoma azota, premoštene alifatične heterociklične grupe ili spirociklične alifatične heterociklične grupe (posebno, pirolidinil, morfolinil, piperazinil, piperidil, tetrahidrofuril, tetrahidropiridil, tetrahidrohinolil, tetrahidroizohinolil, dekahidroizohinolil, azetidinil, azepanil, oktahidropirolopirazinil, oktahidroindolil, oktahidrociklopenta[b]pirolil, tiazolidinil, azabiciklo[3.1.0]heksanil, azabiciklo[2.1.1]heksanil, azabiciklo[2.2.1]heptanil, azabiciklo[4.1.0]heptanil, azabiciklo[2.2.2]oktanil, azaspiro[2.4]heptil) opciono supstituisane sa 1 do 3 supstituenta izabrana od

(a) atoma halogena (posebno, atom fluora),

(b) C1-6alkil grupe (posebno, metil, propil) opciono supstituisane sa 1 do 3 supstituenta izabrana od

(i) hidroksi grupe,

(ii) C1-6alkoksi-karbonil grupe (posebno, etoksikarbonil, terc-butoksikarbonil) i (iii) karbamoil grupe,

(c) C6-14ariloksi grupe (posebno, fenoksi),

(d) C1-6alkoksi-karbonil grupe (posebno, terc-butoksikarbonil),

(e) C1-6alkil-karbonil grupe (posebno, acetil),

(f) C6-14aril grupe (posebno, fenil) opciono supstituisane sa C1-6alkilsulfonil grupom (posebno, metilsulfonil),

(g) C7-13aralkil grupe (posebno, benzil) opciono supstituisane sa 1 do 3 atoma halogena (posebno, atom fluora),

(h) hidroksi grupe,

(i) karbamoil grupe i

(j) 4-7 člane monociklične alifatične heterociklične grupe koja sadrži, kao sastavne atome prstena pored atoma ugljenika, 1 do 4 hetero atoma izabrana od atoma kiseonika, atoma sumpora i atoma azota (posebno, piperidil),

(4) C2-6alkenil grupe (posebno, etenil) opciono supstituisane sa 1 do 3 C6-14aril grupe (posebno, fenil),

(5) 5-ili 6-člane aromatične heterociklične grupe (posebno, piridil, pirazolil, tiazolil), (6) alifatične heterociklil-karbonil grupe (posebno, pirolidinilkarbonil) i

(7) C3-8cikloalkil grupe (posebno, ciklopentil, cikloheksil) opciono supstituisane sa amino grupom.

[0079] Preferirani primeri za R2uključuju

(1) aminometil grupu opciono supstituisanu sa 1 ili 2 C1-6alkil grupe (posebno, metil grupa),

(2) 5-ili 6-članu alifatičnu heterociklil-metil grupu (posebno, pirolidinilmetil, dihidropiridilmetil) opciono supstituisanu sa C1-6alkil grupom (posebno, metil grupa) ili (3) 4-7 članu monocikličnu alifatičnu heterocikličnu grupu koja sadrži, kao sastavne atome

4

prstena pored atoma ugljenika, 1 do 4 hetero atoma izabrana od atoma kiseonika, atoma sumpora i atoma azota, premoštenu alifatičnu heterocikličnu grupu ili spirocikličnu alifatičnu heterocikličnu grupu (posebno, pirolidinil, morfolinil, piperidil, 1,2,3,6-tetrahidropiridil, azepanil, 3-azabiciklo[3.1.0]heksanil, 7-azabiciklo[2.2.1]heptanil, 2-azabiciklo[2.2.1]heptanil, 1-azabiciklo[2.2.2]oktanil, 2-azabiciklo[2.2.2]oktanil) opciono supstituisanu sa 1 do 3 atoma halogena (posebno, atom fluora).

[0080] Drugi specifični preferirani primeri za R2uključuju

(1) 5-ili 6-članu alifatičnu heterociklil-metil grupu (posebno, pirolidinilmetil) ili

(2) alifatičnu heterocikličnu grupu (posebno, pirolidinil, piperidinil, 1,2,3,6-tetrahidropiridil, 7-azabiciklo[2.2.1]heptanil, 2-azabiciklo[2.2.1]heptanil, 1-azabiciklo[2.2.2]oktanil) opciono supstituisanu sa 1 do 3 atoma halogena (posebno, atom fluora).

[0081] Drugi više specifični preferirani primeri za R2uključuju alifatičnu heterocikličnu grupu (posebno, pirolidinil, morfolinil, piperidil, 1,2,3,6-tetrahidropiridil, azepanil, 3-azabiciklo[3.1.0]heksanil, 7-azabiciklo[2.2.1]heptanil, 2-azabiciklo[2.2.1]heptanil, 1-azabiciklo[2.2.2]oktanil, 2-azabiciklo[2.2.2]oktanil) opciono supstituisanu sa 1 do 3 atoma halogena (posebno, atom fluora). Od ovih je preferirana pirolidin-2-il, piperidin-2-il, 1,2,3,6-tetrahidro-piridin-2-il, 7-azabiciklo[2.2.1]hept-1-il, 2-azabiciklo[2.2.1]hept-3-il ili 1-azabiciklo[2.2.2]okt-2-il grupa, od kojih je svaka opciono supstituisana sa 1 do 3 atoma halogena (posebno, atom fluora).

[0082] Ovde su dalje otkrivena sledeća jedinjenja.

[Jedinjenje A-2]

[0083] Jedinjenje u kome

X je atom sumpora;

Y je CH;

R1je C1-6alkil grupa (posebno, metil, etil, izopropil, izobutil) opciono supstituisana sa atomom(ima) halogena; i

R2je

(1) C1-6alkil grupa (posebno, metil, etil) koja opciono ima supstituent(e), (2) C6-14aril grupa (posebno, fenil) koja opciono ima supstituent(e),

(3) alifatična heterociklična grupa (posebno, pirolidinil, morfolinil, piperazinil, piperidil, tetrahidrofuril, tetrahidropiridil, tetrahidrohinolil, tetrahidroizohinolil, dekahidroizohinolil, azetidinil, azepanil, oktahidropirolopirazinil, oktahidroindolil, oktahidrociklopenta[b]pirolil, tiazolidinil, azabiciklo[3.1.0]heksanil, azabiciklo[2.1.1]heksanil, azabiciklo[2.2.1]heptanil, azabiciklo[4.1.0]heptanil, azabiciklo[2.2.2]oktanil, azaspiro[2.4]heptil) koja opciono ima supstituent(e),

(4) C2-6alkenil grupa (posebno, etenil) koja opciono ima supstituent(e),

(5) 5-ili 6-člana aromatična heterociklična grupa (posebno, piridil, pirazolil, tiazolil) koja opciono ima supstituent(e),

(6) alifatična heterociklil-karbonil grupa (posebno, pirolidinilkarbonil) koja opciono ima supstituent(e) ili

(7) C3-8cikloalkil grupa (posebno, ciklopentil, cikloheksil) koja opciono ima supstituent(e) ili njegova so.

[Jedinjenje A-1]

[0084] Jedinjenje u kome

X je atom sumpora;

Y je CH;

R1je C1-6alkil grupa (posebno, metil); i

R2je

(1) C1-6alkil grupa (posebno, metil, etil) koja opciono ima supstituent(e),

(2) C6-14aril grupa (posebno, fenil) koja opciono ima supstituent(e),

(3) alifatična heterociklična grupa (posebno, pirolidinil, morfolinil, piperidil, tetrahidrofuril, azetidinil, azepanil, oktahidropirolopirazinil, oktahidroindolil, tiazolidinil, azabiciklo[3.1.0]heks-2-il, azabiciklo[2.2.1]hept-3-il, azabiciklo[2.2.2]okt-3-il) koja opciono ima supstituent(e),

(4) C2-6alkenil grupa (posebno, etenil) koja opciono ima supstituent(e) ili

(5) 5-ili 6-člana aromatična heterociklična grupa (posebno, piridil) koja opciono ima supstituent(e),

ili njegova so.

[Jedinjenje A]

[0085] Jedinjenje u kome

X je atom sumpora;

Y je CH;

R1je C1-6alkil grupa (posebno, metil); i

R2je C1-6alkil grupa (posebno, metil, etil) koja opciono ima supstituent(e), C6-14aril grupa (posebno, fenil) koja opciono ima supstituent(e) ili 5-ili 6-člana alifatična heterociklična grupa (posebno, pirolidinil, morfolinil) koja opciono ima supstituent(e) ili njegova so.

[Jedinjenje B-2]

[0086] U skladu sa pronalaskom je jedinjenje u kome

X je atom sumpora;

Y je CH;

R1je C1-6alkil grupa (posebno, metil, etil) opciono supstituisana sa atomom(ima) halogena (posebno, atom fluora); i

R2je

(i) atoma halogena (posebno, atom fluora),

(ii) hidroksi grupe,

(aa) atoma halogena (posebno, atom fluora),

(bb) hidroksi grupe,

(cc) C1-6alkoksi grupe (posebno, metoksi) i

(dd) C6-14aril grupe (posebno, fenil) opciono supstituisane sa 1 do 3 C1-6alkil grupe (posebno, metil),

(iv) C1-6alkoksi grupe (posebno, metoksi),

(vi) C6-14ariloksi grupe (posebno, fenoksi),

(vii) C1-6alkoksi-karbonil grupe (posebno, etoksikarbonil),

(viii) C1-6alkil-karbonil grupe (posebno, acetil),

(ix) cijano grupe,

(x) C6-14arilsulfonil grupe (posebno, fenilsulfonil),

(xi) karboksi grupe,

(xiii) 4-7 člane monociklične alifatične heterociklične grupe koja sadrži, kao sastavne atome prstena pored atoma ugljenika, 1 do 4 hetero atoma izabrana od atoma kiseonika, atoma sumpora i atoma azota (posebno, pirolidinil, tetrahidropirimidinil) opciono supstituisane sa okso grupom i

(xiv) okso grupe,

(b) C1-6alkoksi grupe (posebno, etoksi),

(bb) C1-6alkoksi-karbonil grupe (posebno, etoksikarbonil),

(dd) C3-8cikloalkil grupe (posebno, ciklopropil) opciono supstituisane sa 4-7 članom monocikličnom aromatičnom heterocikličnom grupom koja sadrži, kao sastavne atome prstena pored atoma ugljenika, 1 do 4 hetero atoma izabrana od atoma kiseonika, atoma sumpora i atoma azota (posebno, tienil) i

(ee) hidroksi grupe,

(ii) 4-7 člane monociklične alifatične heterociklične grupe koja sadrži, kao sastavne atome prstena pored atoma ugljenika, 1 do 4 hetero atoma izabrana od atoma kiseonika, atoma sumpora i azot (posebno, pirolidinil) opciono supstituisane sa 1 do 3 C7-13aralkil grupe (posebno, benzil),

(iv) C3-8cikloalkil grupe (posebno, ciklopentil),

(d) 5-ili 6-člane aromatične heterociklične grupe (posebno imidazolil, pirolil), (e) C6-14aril grupe (posebno, fenil) i

(2) C6-14aril grupa (posebno, fenil) opciono supstituisana sa 1 do 3 atoma halogena (posebno, atom hlora),

(3) 4-7 člana monociklična alifatična heterociklična grupa koja sadrži, kao sastavne atome prstena pored atoma ugljenika, 1 do 4 hetero atoma izabrana od atoma kiseonika, atoma sumpora i atoma azota, premoštena alifatična heterociklična grupa ili spirociklična alifatična heterociklična grupa (posebno, pirolidinil, morfolinil, piperazinil, piperidil, tetrahidrofuril, tetrahidropiridil, tetrahidrohinolil, tetrahidroizohinolil, dekahidroizohinolil, azetidinil, azepanil, oktahidropirolopirazinil, oktahidroindolil, oktahidrociklopenta[b]pirolil, tiazolidinil, azabiciklo[3.1.0]heksanil, azabiciklo[2.1.1]heksanil, azabiciklo[2.2.1]heptanil, azabiciklo[4.1.0]heptanil, azabiciklo[2.2.2]oktanil, azaspiro[2.4]heptil) opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana od

(a) atoma halogena (posebno, atom fluora),

(i) hidroksi grupe,

(c) C6-14ariloksi grupe (posebno, fenoksi),

(d) C1-6alkoksi-karbonil grupe (posebno, terc-butoksikarbonil),

(e) C1-6alkil-karbonil grupe (posebno, acetil),

(h) hidroksi grupe,

(i) karbamoil grupe i

(4) C2-6alkenil grupa (posebno, etenil) opciono supstituisana sa 1 do 3 C6-14aril grupom (posebno, fenil),

(5) 5-ili 6-člana aromatična heterociklična grupa (posebno, piridil, pirazolil, tiazolil), (6) alifatična heterociklil-karbonil grupa (posebno, pirolidinilkarbonil) ili

(7) C3-8cikloalkil grupa (posebno, ciklopentil, cikloheksil) opciono supstituisana sa amino

4

grupom ili njegova so.

[Jedinjenje B-1]

[0087] Pronalaskom je takođe obuhvaćeno jedinjenje u kome

X je atom sumpora;

Y je CH;

R1je C1-6alkil grupa (posebno, metil); i

R2je

(1) C1-6alkil grupa (posebno, metil, etil) opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana od

(a) 4-7 člane monociklične alifatične heterociklične grupe koja sadrži, kao sastavne atome prstena pored atoma ugljenika, 1 do 4 hetero atoma izabrana od atoma kiseonika, atoma sumpora i atoma azota (posebno, pirolidinil, piperidil, morfolinil, tiomorfolinil, piperazinil, azetidinil, 3,4-dihidroizohinolil, dihidropiridil, 1,3-dihidro-2H-izoindolil, 1,4-dioksa-7-azaspiro[4.4]non-7-il, tetrahidro-5H-spiro[1,3-oksazolo[3,4-a]pirazin-1,4’-piperidin]-1’-il, azabiciklo[3.1.0]heks-3-il) opciono supstituisane sa 1 do 3 supstituenta izabrana od

(i) atoma halogena (posebno, atom fluora),

(ii) hidroksi grupe,

(aa) atoma halogena (posebno, atom fluora),

(bb) hidroksi grupe,

(cc) C1-6alkoksi grupe (posebno, metoksi) i

(iv) C1-6alkoksi grupe (posebno, metoksi),

(vi) C6-14ariloksi grupe (posebno, fenoksi),

(vii) C1-6alkoksi-karbonil grupe (posebno, etoksikarbonil) ili C1-6alkil-karbonil grupe (posebno, acetil),

(viii) cijano grupe,

(ix) C6-14arilsulfonil grupe (posebno, fenilsulfonil),

(x) karboksi grupe,

(xi) amino grupe opciono mono-ili di-supstituisane sa C1-6alkil grupom(ama) (posebno, metil),

(xii) 4-7 člane monociklične alifatične heterociklične grupe koja sadrži, kao sastavne atome prstena pored atoma ugljenika, 1 do 4 hetero atoma izabrana od atoma kiseonika, atoma sumpora i atoma azota (posebno, pirolidinil, tetrahidropirimidinil) opciono supstituisane sa okso grupom i

(xiii) okso grupe,

(b) C1-6alkoksi grupe (posebno, etoksi),

(bb) C1-6alkoksi-karbonil grupe (posebno, etoksikarbonil),

(cc) 4-7 člane monociklične aromatične heterociklične grupe koja sadrži, kao sastavne atome prstena pored atoma ugljenika, 1 do 4 hetero atoma izabrana od atoma kiseonika, atoma sumpora i atoma azota (posebno, piridil) i

(dd) C3-8cikloalkil grupe (posebno, ciklopropil) opciono supstituisane sa 4-7 članom monocikličnom aromatičnom heterocikličnom grupom koja sadrži, kao sastavne atome prstena pored atoma ugljenika, 1 do 4 hetero atoma izabrana od atoma kiseonika, atoma sumpora i atoma azota (posebno, tienil),

(ii) 4-7 člane monociklične alifatične heterociklične grupe koja sadrži, kao sastavne atome prstena pored atoma ugljenika, 1 do 4 hetero atoma izabrana od atoma kiseonika, atoma sumpora i atoma azota (posebno, pirolidinil) opciono supstituisane sa 1 do 3 C7-13aralkil grupe (posebno, benzil) i

(iii) C6-14aril grupe (posebno, fenil) opciono supstituisane sa 1 do 3 C1-6alkoksi grupe (posebno, metoksi),

(d) 5-ili 6-člane aromatične heterociklične grupe (posebno imidazolil) i

(e) C6-14aril grupe (posebno, fenil);

(2) C6-14aril grupa (posebno, fenil) opciono supstituisana sa 1 do 3 atoma halogena (posebno, atom hlora);

(3) 4-7 člana monociklična alifatična heterociklična grupa koja sadrži, kao sastavne atome prstena pored atoma ugljenika, 1 do 4 hetero atoma izabrana od atoma kiseonika, atoma sumpora i atoma azota, premoštena alifatična heterociklična grupa ili spirociklična alifatična heterociklična grupa (posebno, pirolidinil, morfolinil, piperidil, tetrahidrofuril, azetidinil, azepanil, oktahidropirolopirazinil, oktahidroindolil, tiazolidinil, azabiciklo[3.1.0]heks-2-il, azabiciklo[2.2.1]hept-3-il, azabiciklo[2.2.2]okt-3-il), opciono supstituisane sa 1 do 3 supstituenta izabrana od

(a) atoma halogena (posebno, atom fluora),

(b) C1-6alkil grupe (posebno, metil),

(c) C6-14ariloksi grupe (posebno, fenoksi),

(d) C1-6alkoksi-karbonil grupe (posebno, terc-butoksikarbonil),

(e) C6-14aril grupe (posebno, fenil) opciono supstituisane sa C1-6alkilsulfonil grupom (posebno, metilsulfonil) i

(f) C7-13aralkil grupe (posebno, benzil) opciono supstituisane sa 1 do 3 atoma halogena (posebno, atom fluora);

(4) C2-6alkenil grupa (posebno, etenil) opciono supstituisana sa 1 do 3 C6-14aril grupe (posebno, fenil); ili

(5) 5-ili 6- člana aromatična heterociklična grupa (posebno, piridil),

4

ili njegova so.

[Jedinjenje B]

[0088] Jedinjenje u kome

X je atom sumpora;

Y je CH;

R1je C1-6alkil grupa (posebno, metil) ; i

R2je

(a) 4- do 6-člane monociklične alifatične heterociklične grupe koja sadrži, kao sastavne atome prstena pored atoma ugljenika, 1 do 4 hetero atoma izabrana od atoma kiseonika, atoma sumpora i atoma azota (posebno, pirolidinil, piperidil, morfolinil, piperazinil, azetidinil, tetrahidrofuril), opciono supstituisane sa 1 do 3 supstituenta izabrana od

(i) atoma halogena (posebno, atom fluora),

(ii) hidroksi grupe,

(iii) C1-6alkil grupe (na primer, metil) opciono supstituisane sa 1 do 3 supstituenta izabrana od atoma halogena (posebno, atom fluora) i hidroksi grupe,

(iv) C1-6alkoksi grupe (posebno, metoksi) i

(v) C6-14aril grupe (posebno, fenil) i

(b) C1-6alkoksi grupe (posebno, etoksi),

(2) C6-14aril grupa (posebno, fenil) opciono supstituisana sa 1 do 3 atoma halogena (posebno, atom hlora) ili

(3) 5-ili 6- člana monociklična alifatična heterociklična grupa koja sadrži, kao sastavne atome prstena pored atoma ugljenika, 1 do 4 hetero atoma izabrana od atoma kiseonika, atoma sumpora i atoma azota, premoštena alifatična heterociklična grupa ili spirociklična alifatična heterociklična grupa (posebno, pirolidinil, morfolinil) opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana od

(a) atoma halogena (posebno, atom fluora) i

(b) C6-14ariloksi grupe (posebno, fenoksi),

ili njegova so.

[Jedinjenje C-1]

[0089] Jedinjenje u kome

X je atom sumpora;

Y je CH;

R1je C1-6alkil grupa (posebno, metil); i

R2je

(1) 4- do 6-člana monociklična alifatična heterociklil-C1-6alkil grupa (posebno, pirolidinilmetil, dihidropiridilmetil) opciono supstituisana sa 1 do 3 atoma halogena (posebno, atom fluora),

(3) 4-7 člana monociklična alifatična heterociklična grupa koja sadrži, kao sastavne atome prstena pored atoma ugljenika, 1 do 4 hetero atoma izabrana od atoma kiseonika, atoma sumpora i atoma azota, premoštena alifatična heterociklična grupa ili spirociklična alifatična heterociklična grupa (posebno, pirolidinil, morfolinil, piperidil, azetidinil, azepanil, oktahidroindolil, azabiciklo[3.1.0]heks-2-il, azabiciklo[2.2.1]hept-3-il, azabiciklo[2.2.2]okt-3-il) opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana od

(a) atoma halogena (posebno, atom fluora) i

(b) C1-6alkil grupe (posebno, metil),

ili njegova so.

[Jedinjenje D-2]

4

[0090] Jedinjenje u kome

X je atom sumpora;

Y je CH;

R1je C1-6alkil grupa (posebno, metil grupa) opciono supstituisana sa 1 do 3 atoma halogena (posebno, atom fluora); i

R2je

(1) aminometil grupa opciono supstituisana sa 1 ili 2 C1-6alkil grupe (posebno, metil grupa),

(2) 5-ili 6-člana alifatična heterociklil-metil grupa (posebno, pirolidinilmetil, dihidropiridilmetil) opciono supstituisana sa C1-6alkil grupom (posebno, metil grupa) ili (3) 4-7 člana monociklična alifatična heterociklična grupa koja sadrži, kao sastavne atome prstena pored atoma ugljenika, 1 do 4 hetero atoma izabrana od atoma kiseonika, atoma sumpora i atoma azota, premoštena alifatična heterociklična grupa ili spirociklična alifatična heterociklična grupa (posebno, pirolidinil, morfolinil, piperidil, 1,2,3,6-tetrahidropiridil, azepanil, 3-azabiciklo[3.1.0]heksanil, 7-azabiciklo[2.2.1]heptanil, 2-azabiciklo[2.2.1]heptanil, 1-azabiciklo[2.2.2]oktanil, 2-azabiciklo[2.2.2]oktanil) opciono supstituisana sa 1 do 3 atoma halogena (posebno, atom fluora),

ili njegova so.

[Jedinjenje E-2]

[0091] Jedinjenje u kome

X je atom sumpora;

Y je CH;

R2je

(1) 5-ili 6-člana alifatična heterociklil-metil grupa (posebno, pirolidinilmetil) ili

(2) 4-7 člana monociklična alifatična heterociklična grupa koja sadrži, kao sastavne atome prstena pored atoma ugljenika, 1 do 4 hetero atoma izabrana od atoma kiseonika, atoma

4

sumpora i atoma azota, premoštena alifatična heterociklična grupa ili spirociklična alifatična heterociklična grupa (posebno, pirolidinil, piperidinil, 1,2,3,6-tetrahidropiridil, 7-azabiciklo[2.2.1]heptanil, 2-azabiciklo[2.2.1]heptanil, 1-azabiciklo[2.2.2]oktanil)opciono supstituisana sa 1 do 3 atoma halogena (posebno, atom fluora) ili njegova so.

[Jedinjenje F-2]

[0092]

6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S)-pirolidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on (Primer 11);

6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S)-piperidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on (Primer 83);

2-(7-azabiciklo[2.2.1]hept-1-il)-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on (Primer 116);

6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S)-1,2,3,6-tetrahidropiridin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on (Primer 145);

2-[(2S)-piperidin-2-il]-6-[5-(trifluorometil)-1H-pirazol-4-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on (Primer 161);

2-[(2S)-1-azabiciklo[2.2.2]okt-2-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on (Primer 170)

ili njegova so.

[0093] So jedinjenja (I) je preferirano farmakološki prihvatljiva so a njihovi primeri uključuju soli sa neorganskim bazama, soli sa organskim bazama, soli sa neorganskim kiselinama, soli sa organskim kiselinama i soli sa baznim i kiselim amino kiselinama.

[0094] Preferirani primeri soli sa neorganskom bazom uključuju soli alkalnih metala kao što su so natrijuma, so kalijuma i slično; soli zemno alkalnih metala kao što su so kalcijuma, so magnezijuma i slično; so aluminijuma i so amonijuma.

[0095] Preferirani primeri soli sa organskom bazom uključuju so sa trimetilaminom, trietilaminom, piridinom, pikolinom, etanolaminom, dietanolaminom, trietanolaminom, trometaminom [tris(hidroksimetil)metilaminom], tercbutilaminom, cikloheksilaminom, benzilaminom, dicikloheksilaminom ili N,N-dibenziletilendiaminom.

4

[0096] Preferirani primeri soli sa neorganskom kiselinom uključuju so sa hlorovodoničnom kiselinom, bromovodoničnom kiselinom, azotnom kiselinom, sumpornom kiselinom ili fosfornom kiselinom.

[0097] Preferirani primeri soli sa organskom kiselinom uključuju so sa mravljom kiselinom, sirćetnom kiselinom, trifluorosirćetnom kiselinom, ftalnom kiselinom, fumarnom kiselinom, oksalnom kiselinom, vinskom kiselinom, maleinskom kiselinom, limunskom kiselinom, sukcinskom kiselinom, jabučnom kiselinom, metansulfonskom kiselinom, benzensulfonskom kiselinom ili p-toluensulfonskom kiselinom.

[0098] Preferirani primeri soli sa baznom amino kiselinom uključuju so sa argininom, lizinom ili ornitinom.

[0099] Preferirani primeri soli sa kiselom amino kiselinom uključuju so sa aspartanskom kiselinom ili glutaminskom kiselinom.

[0100] Između prethodno pomenutih soli, preferirana je so sa neorganskom kiselinom (preferirano hlorovodoničnom kiselinom) ili organskom kiselinom (preferirano trifluorosirćetnom kiselinom).

[0101] Postupci izrade jedinjenja (I) su objašnjeni u daljem tekstu.

[0102] Jedinjenja u niže datim šemama reakcije mogu da formiraju soli a primeri takve soli uključuju soli slične sa solima jednjenja (I).

[0103] Mada jedinjenja dobijena u određenim fazama mogu da se koriste za narednu reakciju u obliku reaktivne smeše kao sirovi produkt, mogu takođe da se izoluju iz reaktivne smeše poznatim postupcima razdvajanja kao što su rekristalizacija, destilacija, hromatografija i slično.

[0104] Jedinjenje (I) može da se dobije, na primer, u skladu sa postupkom pokaznim u narednim šemama reakcije ili postupkom analognim sa njim.

(Šema reakcije 1)

[0105] Gde je Pg zaštitna grupa azota u pirazol prstenu. Primeri zaštitne grupa uključuju terc-

4

butoksi-karbonil grupu i N,N-dimetilaminosulfonil grupu. R3je atom halogena (na primer, atom broma, atom hlora ili atom joda), R4je borna kiselina, borat (na primer, 4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il), trifluorometansulfonil grupa ili stanil grupa koja ima supstituent (na primer, tributilstanil) a drugi simboli su svaki kako je prethodno definisano.

[0106] U ovoj reakciji, jedinjenje (II) se podvrgava reakciji generalno poznatoj kao Suzuki reakcija ili Stille reakciji ili postupku sličnim sa njima, a jedinjenje se podvrgava deprotekciji za uklanjanje zaštitne grupe kada je to potrebno, kako bi moglo da se izradi jedinjenje (I).

[0107] Ova reakcija se preferirano izvodi u prisustvu paladijum katalizatora.

[0108] Količina jedinjenja (III) koja će da se koristi je približno 1 - 3 ekvivalenta u odnosu na jedinjenje (II).

[0109] Ova reakcija može da se izvede u prisustvu baze.

[0110] Primeri baze uključuju natrijum karbonat, kalijum karbonat i cezijum karbonat.

Količina baze koja će da se koristi je približno 2 do 20 ekvivalenata, u odnosu na jedinjenje (II).

[0111] Primeri paladijum katlizatora uključuju [1,1’-bis (difenilfosfino)ferocen]dihlorpaladijum(II) dihlormetan kompleks i tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0). Količina paladijum katalizatora koji će da se koristi je približno 0.01 do 1 ekvivalent, u odnosu na jedinjenje (II).

[0112] Ova reakcija se preferirano izvodi u rastvaraču. U primere rastvarača spadaju aromatični ugljovodonici (na primer, benzen, toluen, ksilen), etri (na primer, tetrahidrofuran, dioksan, 1,2-dimetoksietan), aceton, acetonitril, etil acetat, N,N-dimetilformamid, N,N-dimetilacetamid, 1-metil-2-pirolidon, dimetil sulfoksid, voda i smeše ovih rastvarača.

[0113] Ova reakcija može da se izvede na sobnoj temperaturi (približno 15 do 30°C) ili uz zagrevanje (približno 40 do 150°C). Vreme reakcije je generalno približno 1 do 50 h, preferirano približno 1 do 20 h.

[0114] Jedinjenje (III) može da bude komercijalno raspoloživ produkt ili može da se izradi u skladu sa postupkom koji je poznat kao takav.

[0115] Jedinjenje (II) se dobija u skladu sa, na primer, postupkom pokaznim u narednoj šemi reakcije ili postupkom koji je analogan sa njim.

4

(Šema reakcije 2)

gde je R5karbonil hlorid grupa ili karboksi grupa a drugi simboli su svaki kako je prethodno definisano.

(Postupak A)

[0116] U ovoj reakciji, jedinjenje (VI) može da se izradi reakcijom jedinjenja (IV) sa jedinjenjem (V).

[0117] Količina jedinjenja (V) koja se koristi u ovoj reakciji je generalno 1 - 10 ekvivalenata, preferirano 1 – 5 ekvivalenta, u odnosu na jedinjenje (IV).

[0118] Ova reakcija se preferirano izvodi u rastvaraču. Primeri rastvrača obuhvataju etre (na primer, tetrahidrofuran, dioksan, 1,2-dimetoksietan), acetonitril, amide (na primer, N,N-dimetilformamid, N,N-dimetilacetamid, N-metil-pirolidon) i smeše ovih rastvarača.

[0119] Kada se koristi jedinjenje (V) u kome je R5karbonil hlorid grupa, ova reakcija se preferirano izvodi u prisustvu baze. Primeri baze uključuju piridin, N,N-dimetilpiridin-4-amin, trietilamin i N-metil-N-(1-metiletil)propan-2-amin. Količina baze koja će da se koristi je 1 - 100 ekvivalenata, preferirano 1 - 10 ekvivalenata, u odnosu na jedinjenje (IV). Kada se koristi jedinjenje (V) u kome je R5karboksi grupa, ova reakcija može da se izvede pod poznatim uslovima reakcije kondenzacije. Primeri poznatih uslova reakcije kondenazcije uključuju uslove u kojima je N,N-dimetilformamid prisutan zajedno sa O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,N’-tetrametiluronijum heksafluorofosfatom i N-etil-N-(1-metiletil)propan-2-aminom i uslovom generalno poznatim kao postupak smeše kiselog anhidrida, na primer, pod uslovom u kome su zajedno prisutni 2-metilpropil hlorokarbonat, trietilamin i tetrahidrofuran.

[0120] Ova reakcija može da se izvede na sobnoj temperaturi (približno 15 - 30°C) ili uz zagrevanje (približno 40 - 150°C). Vreme reakcije je generalno približno 1 - 50 h, preferirano približno 1 - 5 h.

[0121] Jedinjenje (IV) i jedinjenje (V) mogu da budu komercijalno raspoloživi produkti ili mogu da se izrade primenom poznatih postupaka.

(Postupak B)

[0122] U ovoj reakciji, jedinjenje (II) se dobija ciklizacijom jedinjenja (VI) u prisustvu baze.

[0123] Primeri baze u ovoj reakciji uključuju natrijum hidroksid. Količina baze koja će da se koristi je 1 - 100 ekvivalenata, preferirano 1 - 10 ekvivalenata, u odnosu na jedinjenje (VI).

[0124] Ova reakcija se preferirano izvodi u rastvaraču. U primere rastvarača spadaju organski rastvarači kao što su alkoholi (metanol, etanol i slično); etri (tetrahidrofuran, dioksan, 1,2-dimetoksietan i slično); i slično, voda i smeše ovih rastvarača.

[0125] Ova reakcija može da se izvede na sobnoj temperaturi (približno 15 – 30°C) ili uz zagrevanje (približno 40 – 120°C). Vreme reakcije je generalno približno 1 – 20 h, preferirano približno 1 – 4 h.

[0126] Jedinjenje (II) u kome je R2metil grupa supstituisana sa amino grupom je opciono mono-ili di-supstituisano sa supstituentom(ima) izabranim od

(a) C1-6alkil grupe opciono supstituisane sa 1 do 3 atoma halogena,

(b) C1-6alkil-karbonil grupe opciono supstituisane sa 1 do 3 atoma halogena,

(e) karbamoil grupe opciono mono-ili di-supstituisane sa C1-6alkil grupom opciono supstituisanom sa 1 do 3 atoma halogena i

(f) aromatične heterociklične grupe (na primer, tienil, furil, piridil, pirazolil imidazolil, tetrazolil, oksazolil, tiazolil, oksadiazolil, tiadiazolil)

može da se izradi u skladu sa, na primer, postupkom pokaznim u narednim šemama reakcije ili postupak analognim sa njim.

1

(Šema reakcije 3)

pri čemu je R6C1-6alkil grupa, R7je atom halogena (na primer, atom hlora) a drugi simboli su svaki kako je prethodno definisano.

(Postupak C)

[0127] U ovoj reakciji, jedinjenje (IX) može da se izradi reakcijom jedinjenja (VII) sa jedinjenjem (VIII) u prisustvu kiseline.

[0128] Količina jedinjenja (VIII) koja se koristi u ovoj reakciji je generalno 1 - 10 ekvivalenata, preferirano 1 - 5 ekvivalenata, u odnosu na jedinjenje (VII). Primeri kiselina u ovoj reakciji uključuju rastvor hlorovodonična kiselina/ciklopentilmetiletar. Količina kiseline koja će da se koristi je generalno 1 - 100 ekvivalenata, preferirano 1 - 10 ekvivalenata, u odnosu na jedinjenje (VII).

[0129] Ova reakcija se preferirano izvodi u rastvaraču. U primere rastvarača spadaju etri (na primer, dietil etar, tetrahidrofuran, dioksan, 1,2-dimetoksietan).

[0130] Ova reakcija može da se izvede na sobnoj temperaturi (približno 15 - 30°C) ili uz zagrevanje (približno 40 - 120°C). Vreme reakcije je generalno približno 1 - 20 h, preferirano približno 1 - 4 h.

(Postupak D)

2

[0131] U ovoj reakciji, jedinjenje (X) može da se izradi zagrevanjem jedinjenja (IX) pod sniženim pritiskom.

[0132] Ova reakcija može da se izvede uz zagrevanje (približno 40 - 100°C). Vreme reakcije je generalno približno 1 - 8 h, preferirano približno 1 - 4 h. Reakcija se izvodi pod sniženim pritiskom (približno 4-10 Torr). Jedinjenje (VII) i jedinjenje (VIII) mogu da budu komercijalno raspoloživi produkti ili mogu da se izradi primenom poznatih postupaka.

(Postupak E)

[0133] U ovoj reakciji, jedinjenje (II) može da se izradi supstitucijom R7jedinjenja (X) sa primarnim aminom, sekundarnim aminom, amidom, karbamatom, sulfonamidom ili ureom što odgovara amino grupi opciono mono-ili di-supstituisanoj sa supstituentom(ima) izabranim od

(a) C1-6alkil grupe opciono supstituisane sa 1 do 3 atoma halogena,

(b) C1-6alkil-karbonil grupe opciono supstituisane sa 1 do 3 atoma halogena,

(f) aromatične heterociklične grupe (na primer, tienil, furil, piridil, pirazolil imidazolil, tetrazolil, oksazolil, tiazolil, oksadiazolil, tiadiazolil).

[0134] Količina primarnog amina, sekundarnog amina, amida, karbamata, sulfonamida ili uree koja će da se koristi u ovoj reakciji je generalno 1 - 10 ekvivalenata, preferirano 1 - 3 ekvivalenta, u odnosu na jedinjenje (X).

[0135] Reakcija može da se izvede u prisustvu baze.

[0136] Primeri baze uključuju kalijum karbonat. Količina baze koja će da se koristi je generalno 1 - 10 ekvivalenata, preferirano 1 - 5 ekvivalenata, u odnosu na jedinjenje (X).

[0137] Ova reakcija se preferirano izvodi u rastvaraču. U primere rastvarača spadaju etri (na primer, tetrahidrofuran, dioksan, 1,2-dimetoksietan), acetonitril, etil acetat, N,N-dimetilformamid, N,N-dmetilacetamid, 1-metil-2-pirolidon, dimetil sulfoksid i smeše ovih rastvarača.

[0138] Reakcija može da se izvede na sobnoj temperaturi (približno 15 - 30°C) ili uz zagrevanje (približno 40 - 120°C). Vreme reakcije je generalno približno 0.5 - 20 h, preferirano približno 0.5 - 4 h.

[0139] Jedinjenje (II) može takođe da se izradi u skladu sa, na primer, postupkom pokaznim u narednoj šemi reakcije ili postupkom analognim sa njim.

(Šema reakcije 4)

gde je svaki simbol kako je prethodno definisano.

[0140] U ovoj reakciji, jedinjenje (II) može da se izradi reakcijom jedinjenja (VII) sa jedinjenjem (XI) u prisustvu kiseline.

[0141] Količina jedinjenja (XI) koja se koristi u ovoj reakciji je generalno 1 - 10 ekvivalenata, preferirano 1 - 5 ekvivalenata, u odnosu na jedinjenje (VII). Primeri kiselina u ovoj reakciji uključuju rastvor hlorovodonična kiselina/ciklopentilmetiletar. Količina kiseline koja će da se koristi je generalno 1 - 100 ekvivalenata, preferirano 1 - 10 ekvivalenata, u odnosu na jedinjenje (VII). Reakcija se preferirano izvodi u rastvaraču. U primere rastvarača u reakciji spadaju etri (na primer, dietil etar, tetrahidrofuran, dioksan, 1,2-dimetoksietan).

[0142] Ova reakcija može da se izvede na sobnoj temperaturi (približno 15 - 30°C) ili uz zagrevanje (približno 40 - 120°C). Vreme reakcije je generalno približno 1 - 20 h, preferirano približno 1 - 4 h.

[0143] Jedinjenje (XI) može da bude komercijalno raspoloživ produkt ili može da se izradi primenom poznatih postupaka.

[0144] Jedinjenje (I) može da se izradi u skladu sa, na primer, postupkom pokaznim u narednoj šemi reakcije ili postupkom analognim sa njim.

4

(Šema reakcije 5)

Postupak F ostupak G

pri čemu

R8je C1-6alkil grupa (na primer, metil grupa, etil grupa) opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana od

(i) C6-14aril grupe (na primer, fenil) opciono supstituisane sa 1 do 3 C1-6alkoksi grupe (na primer, metoksi),

(ii) aromatične heterociklične grupe (na primer, piridil) i

(iii) C3-8cikloalkil grupe (na primer, ciklopropil) opciono supstituisane sa aromatičnom heterocikličnom grupom (na primer, tienil) i

drugi simboli su svaki kako je prethodno definisano.

(Postupak F)

[0145] U ovoj reakciji, jedinjenje (XII) može da se izradi supstitucijom R7jedinjenja (X) sa primarnim aminom na isti način kao u postupku E pokazanom u šemi reakciji 3. Primeri primarnog amina uključuju benzilamin.

(Postupak G)

[0146] U ovoj reakciji, jedinjenje (XIII) može da se izradi reakcijom jedinjenja (XII) sa, na primer, formaldehidom. Primeri formaldehida uključuju 37% vodeni rastvor formaldehida.

[0147] Količina formaldehida koja se koristi u ovoj reakciji je generalno 10 - 1000 ekvivalenata, u odnosu na jedinjenje (XII).

[0148] Poželjno je da se ova reakcija izvodi u rastvaraču. U primere rastvarača u reakciji spadaju aromatični ugljovodonici (na primer, benzen, toluen, ksilen), etri (na primer, tetrahidrofuran, dioksan, 1,2-dimetoksietan) i smeše ovih rastvarača.

[0149] Ova reakcija može da se izvede na sobnoj temperaturi (približno 15 - 30°C) ili uz zagrevanje (približno 40 - 150°C). Vreme reakcije je generalno približno 1 - 50 h, preferirano približno 1 - 20 h.

(Postupak H)

[0150] U ovoj reakciji, jedinjenje (XIV) može da se izradi od jedinjenja (XIII) i jedinjenja (III) na isti način kao u postupku pokazanom u šemi reakcije 1.

(Postupak I)

[0151] U ovoj reakciji, jedinjenje može da se izradi zagrevanjem jedinjenja (XIV) u trifluorosirćetnoj kiselini u prisustvu alkohola. Primeri alkohola obuhvataju metanol, etanol i smeše ovih rastvarača.

[0152] Količina trifluorosirćetne kiseline koja se koristi u ovoj reakciji je generalno 10 - 1000 ekvivalenata, u odnosu na jedinjenje (XIV).

[0153] Reakcija može da se izvede uz zagrevanje (približno 40 - 80°C). Vreme reakcije je generalno približno 1 - 20 h, preferirano približno 1 - 10 h.

[0154] Jedinjenje (I) može da se izradi u skladu sa, na primer, postupkom pokazanim u narednoj šemi reakcije ili postupkom analognim sa njim.

(Šema reakcije 6)

gde je Pg’ zaštitna grupa laktam radikala. Primeri zaštitne grupe uključuju [2-(trimetilsilil)etoksi]metil grupu i 2,4-dimetoksibenzil grupu. Drugi simboli su svaki kako je prethodno definisano.

(Postupak J)

[0155] U ovoj reakciji, jedinjenje (XV), jedinjenje (XVI) ili smeša jedinjenja (XV) i jedinjenja (XVI) može da se izradi uvođenjem zaštitne grupe u laktam radikal jedinjenja (II).

[0156] U jednom ostvarenju postupka J, to jest, kada je [2-(trimetilsilil)etoksi]metil grupa uvedena u laktam radikal, jedinjenje (XV), jedinjenje (XVI) ili smeša jedinjenja (XV) i jedinjenja (XVI) mogu da se izrade, na primer, reakcijom jedinjenja (II) sa [2-(hlormetoksi)etil](trimetil)silanom u prisustvu baze.

[0157] Primeri baze u ovoj reakciji uključuju natrijum hidrid. Količina baze koja će da se koristi je generalno 1 - 5 ekvivalenata, preferirano 1 - 2 ekvivalenta, u odnosu na jedinjenje (II).

[0158] Količina [2-(hlormetoksi)etil](trimetil)silana koja se koristi u ovoj reakciji je generalno 1 - 5 ekvivalenata, preferirano 1 - 2 ekvivalenta, u odnosu na jedinjenje (II).

Reakcija može da se izvede uz hlađenje (približno 0 - 10°C), na sobnoj temperaturi (približno 15 - 30°C) ili uz zagrevanje (približno 40 - 80°C). Vreme reakcije je generalno približno 1 -20 h, preferirano približno 1 - 3 h. Poželjno je da se ova reakcija izvodi u rastvaraču. U primere rastvarača reakcije spadaju etri (na primer, tetrahidrofuran, dioksan, 1,2-dimetoksietan).

[0159] U narednom ostvarenju postupka J, to jest, kada je 2,4-dimetoksibenzil grupa uvedena u laktam radikal, jedinjenje (XV), jedinjenje (XVI) ili smeša jedinjenja (XV) i jedinjenja (XVI) mogu da se izrade, na primer, podvrgavanjem jedinjenja (II) i (2,4-dimetoksifenil)metanola reakciji opšte poznatoj kao Mitsunobu reakcija, na primer, reakciji sa trifenilfosfinom i dietil (E)-diazen-1,2-dikarboksilatom u rastvaraču.

[0160] Količina trifenilfosfina koja se koristi u ovoj reakciji je približno 1 - 5 ekvivalenata u odnosu na jedinjenje (II).

[0161] Količina dietil (E)-diazen-1,2-dikarboksilata koja se koristi u ovoj reakciji je približno 1 - 5 ekvivalenata u odnosu na jedinjenje (II).

[0162] Količina (2,4-dimetoksifenil)metanola koja se koristi u ovoj reakciji je približno 1 - 5 ekvivalenata u odnosu na jedinjenje (II).

[0163] Primeri rastvarača u ovoj reakciji obuhvataju etre (na primer, tetrahidrofuran, dioksan, 1,2-dimetoksietan).

[0164] Reakcija može da se izvede uz hlađenje (približno 0 - 10°C), na sobnoj temperaturi (približno 15 - 30°C) ili uz zagrevanje (približno 40 - 80°C). Vreme reakcije je generalno približno 1 - 20 h, preferirano približno 1 - 8 h.

(Postupak K)

[0165] U ovoj reakciji, jedinjenje (XVII) može da se izradi od jedinjenja (XV) i jedinjenja (III) na isti način kao u postupku pokazanom u šemi reakcije 1. Pored toga, jedinjenje (XVII) može da se izradi od jedinjenja (XVI) i jedinjenja (III) na isti način. Osim toga, na isti način, jedinjenje (XVII), jedinjenje (XVIII) ili smeša jedinjenja (XVII) i jedinjenja (XVIII) mogu da se izrade od smeše jedinjenja (XV) i jedinjenja (XVI) i jedinjenja (III). Zaštitna grupa na azotu pirazola jedinjenja (XVII) i jedinjenja (XVIII) se ponekad ukloni u toku ove reakcije.

(Postupak L)

[0166] U ovoj reakciji, jedinjenje (I) može da se izradi uklanjanjem zaštitne grupe jedinjenja (XVII), jedinjenja (XVIII) ili smeše jedinjenja (XVII) i jedinjenja (XVIII) u skladu sa uobičajenim postupkom.

[0167] U jednom ostvarenju postupka L, to jest, kada je zaštitna grupa na azotu pirazola tbutoksikarbonil grupa, t-butoksikarbonil grupa može da se deprotektuje reakcijom jedinjenja (XVII), jedinjenja (XVIII) ili smeše jedinjenja (XVII) i jedinjenja (XVIII) sa kiselinom.

[0168] U primeri kiselina u ovoj reakciji spadaju trifluorosirćetna kiselina, rastvor 10% hlorovodonična kiselina/metanol i rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat. Količina kiseline koja će da se koristi je približno 10 - 5000 ekvivalenata, u odnosu na jedinjenje (XVII), jedinjenje (XVIII) ili smešu jedinjenja (XVII) i jedinjenja (XVIII).

[0169] U ovoj reakciji može da se koristi rastvarač. U primere rastvarača spadaju alkoholi (na primer, metanol, etanol). Reakcija može da se izvede na sobnoj temperaturi ili uz zagrevanje (približno 40 - 80°C). Vreme reakcije je generalno približno 0.5 - 20 h, preferirano približno 0.5 - 3 h.

[0170] U narednom ostvarenju postupka L, to jest, kada je zaštitna grupa laktam radikala [2-(trimetilsilil)etoksi]metil grupa, [2-(trimetilsilil)etoksi]metil grupa može da se deprotektuje podvrgavanjem jedinjenja (XVII), jedinjenja (XVIII) ili smeše jedinjenja (XVII) i jedinjenja (XVIII) rastvaraču koji sadrži fluorid ili reakcijom sa kiselinom.

[0171] Primeri rastvarača koji sadrži fluorid u ovoj reakciji obuhvataju rastvor 1M N,N,N-tributilbutan-1-aminijum fluorid/tetrahidrofuran. Količina fluorida koja će da se koristi je približno 5 - 50 ekvivalenata, u odnosu na jedinjenje (XVII), jedinjenje (XVIII) ili smešu jedinjenja (XVII) i jedinjenja (XVIII). Poželjno je da se reakcija izvodi uz zagrevanje (približno 40 - 80°C). Vreme reakcije je generalno približno 1 - 20 h, preferirano približno 1 -8 h. U primere kiselina u ovoj reakciji spadaju trifluorosirćetna kiselina, rastvor 10% hlorovodonična kiselina/metanol i rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat. Količina kiseline koja će da se koristi je približno 10 - 5000 ekvivalenata u odnosu na jedinjenje (XVII), jedinjenje (XVIII) ili smešu jedinjenja (XVII) i jedinjenja (XVIII). Reakcija može da se izvede na sobnoj temperaturi ili uz zagrevanje (približno 40 - 80°C). Vreme reakcije je generalno približno 1 - 20 h, preferirano približno 1 - 3 h.

[0172] U još jednom ostvarenju postupka L, to jest, kada je zaštitna grupa laktam radikala 2,4-dimetoksibenzil grupa, 2,4-dimetoksibenzil grupa može da se deprotektuje reakcijom sa kiselinom. Primeri kiselina u ovoj reakciji uključuju trifluorosirćetnu kiselinu. Količina kiseline koja će da se koristi je približno 10 - 5000 ekvivalenata, u odnosu na jedinjenje (XVII), jedinjenje (XVIII) ili smešu jedinjenja (XVII) i jedinjenja (XVIII). U ovoj reakciji može da se koristi rastvarač. U primere rastvarača spadaju dihlormetan i voda. Reakcija može da se izvede uz zagrevanje (približno 40 - 100°C). Vreme reakcije je generalno približno 1 20 h, preferirano približno 1 - 8 h.

[0173] Jedinjenje (I) može da se izradi u skladu sa, na primer, postupkom pokazanim u narednoj šemi reakcije ili postupkom analognim sa njim.

(Šema reakcije 7)

Postupak R

gde je Pg" zaštitna grupa na azotu pirazola. Primeri zaštitne grupe obuhvataju benzil grupu, terc-butil grupu i 4-metoksibenzil grupu. Drugi simboli su svaki kako je prethodno definisano.

(Postupak M)

[0174] U ovoj reakciji, jedinjenje (XIX) reaguje sa 1,1-dimetoksi-N,N-dimetilmetanaminom (postupak M-1) i nakon toga reaguje sa hidrazinom koji ima Pg" grupu ili njegovom solju (postupak M-2) da se dobije jedinjenje (XX). Jedinjenje (XIX), 1,1-dimetoksi-N,N-dimetilmetanamin i hidrazin koji ima Pg" grupu ili njegova so mogu da budu komercijalno raspoloživi produkti ili mogu da se izrade primenom poznatih postupaka.

(Postupak M-1)

[0175] Količina 1,1-dimetoksi-N,N-dimetilmetanamina koja se koristi u ovoj reakciji je generalno 1 - 10 ekvivalenata, preferirano 1 - 2 ekvivalenta, u odnosu na jedinjenje (XIX). Reakcija može da se izvede uz zagrevanje (približno 60 - 100°C). Vreme reakcije je generalno približno 1 - 50 h, preferirano približno 1 - 5 h.

(Postupak M-2)

[0176] Količina hidrazina koji ima Pg" grupu ili njegove soli koja se koristi u ovoj reakciji je generalno 1 – 5 ekvivalenata, preferirano 1 - 2 ekvivalenta, u odnosu na jedinjenje (XIX).

Reakcija se preferirano izvodi u rastvaraču. U primere rastvarača spadaju etri (na primer, tetrahidrofuran, dioksan, 1,2-dimetoksietan). Ova reakcija može da se izvede uz hlađenje (približno 0 - 10°C), na sobnoj temperaturi (približno 15 - 30°C) ili uz zagrevanje (približno 40 - 100°C). Vreme reakcije je generalno približno 30 min - 5 h, preferirano približno 30 min - 1 h.

(Postupak N)

[0177] U ovoj reakciji, jedinjenje (XX) reaguje sa Vilsmeier reagensom (postupak N-1) i nakon toga reaguje sa hidroksilamin hidrohloridom (postupak N-2) da se dobije jedinjenje (XXI). Zaštitna grupa na azotu pirazola može da se ukloni u toku reakcije u postupku N-2. Po potrebi, jedinjenje (XXI) može da se izradi reakcijom sa halidom koji ima Pg" grupu u prisustvu baze (postupak N-3).

(Postupak N-1)

[0178] Količina Vilsmeier reagensa koja se koristi u ovoj reakciji je generalno 1 - 10 ekvivalenata, preferirano 1 - 5 ekvivalenata, u odnosu na jedinjenje (XX). Vilsmeier reagens može da se izradi od N,N-dimetilformamida i fosfor oksihlorida pod uslovima koji su generalno poznati. Na primer, fosfor oksihlorid se doda u N,N- dimetilformamid uz hlađenje ledom i smeša se meša 30 min - 1 h na sobnoj temperaturi.

[0179] Reakcija može da se izvede na sobnoj temperaturi ili uz zagrevanje (približno 40 -60°C). Vreme reakcije je generalno približno 30 min - 2 h, preferirano približno 30 min - 1 h.

(Postupak N-2)

[0180] Količina hidroksilamin hidrohlorida koja se koristi u ovoj reakciji je generalno 5 - 20 ekvivalenata, preferirano 5 - 10 ekvivalenata, u odnosu na jedinjenje (XX). Zaštitna grupa na azotu pirazola može da se ukloni u toku ove reakcije. Reakcija može da se izvede uz zagrevanje (približno 50 - 80°C). Vreme reakcije je generalno približno 0.5 - 8 h, preferirano približno 0.5 - 2 h.

(Postupak N-3)

1

[0181] Primeri halida koji imaju Pg" grupu u ovoj reakciji uključuju (bromometil)benzen i 1-(hlormetil)-4-metoksibenzen. Količina halida koji imaju Pg" grupu koja će da se koristi je generalno 1 - 3 ekvivalenta, preferirano 1 - 2 ekvivalenta, u odnosu na jedinjenje (XX).

Primeri baze u ovoj reakciji uključuju kalijum karbonat. Količina kalijum karbonata koja će da se koristi je generalno 1 - 5 ekvivalenata, preferirano 1 - 3 ekvivalenta. Ova reakcija se preferirano izvodi u rastvaraču. U primere rastvarača spadaju N,N-dimetilformamid, N,N-dimetilacetamid, 1-metil-2-pirolidon i smeša ovih rastvarača. Reakcija može da se izvede na sobnoj temperaturi (približno 15 - 30°C) ili uz zagrevanje (približno 40 - 120°C). Vreme reakcije je generalno približno 2 - 48 h, preferirano približno 6 - 24 h.

(Postupak O)

[0182] U ovoj reakciji, jedinjenje (XXI) reaguje sa sulfanilacetatom koji ima R6grupu u prisustvu baze da se dobije jedinjenje (XXII).

[0183] Količina sulfanilacetata koji ima R6grupu koja se koristi u ovoj reakciji je generalno 1 - 3 ekvivalenta, preferirano 1 - 2 ekvivalenta, u odnosu na jedinjenje (XXI). Sulfanilacetat koji ima R6grupu može da bude komercijalno raspoloživ produkt ili može da se izradi primenom poznatog postupka. Primeri baze u ovoj reakciji uključuju neorganske baze (na primer, natrijum hidrid, kalijum karbonat, cezijum karbonat) i organske baze (na primer, trietilamin, N-etil-N-(1-metiletil)propan-2-amin). Ova reakcija se preferirano izvodi u rastvaraču. U primere rastvarača spada N,N-dimetilformamid. Reakcija može da se izvede uz hlađenje (približno 0 - 10°C), na sobnoj temperaturi (približno 15 - 30°C) ili uz zagrevanje (približno 40 - 100°C). Vreme reakcije je generalno približno 30 min - 5 h, preferirano približno 30 min - 2 h.

(Postupak P)

[0184] U ovoj reakciji, jedinjenje (XXIII) može da se izradi od jedinjenja (XXII) i jedinjenja (V) na isti način kao u postupku A pokazanom u šemi reakcije 2.

(Postupak Q)

[0185] U ovoj reakciji, jedinjenje (XXIV) može da se izradi od jedinjenja (XXIII) na isti

2

način kao u postupku B pokazanom u šemi reakcije 2.

(Postupak R)

[0186] U ovoj reakciji, jedinjenje (I") može da se izradi podvrgavanjem jedinjenja (XXIV) deprotekciji Pg" grupe. Na primer, jedinjenje (XXIV) koje ima benzil grupu kao Pg" grupu reaguje sa paladijum hidroksid-ugljenikom u mravljoj kiselini u atmosferi vodonika da se dobije jedinjenje (I"). Količina paladijum hidroksid-ugljenika koja se koristi u ovoj reakciji je katalitička količina – ekvivalentna količina, u odnosu na jedinjenje (XXIV). Pritisak vodonika u ovoj reakciji je 1 - 3 atm. Reakcija može da se izvede na sobnoj temperaturi (približno 15 -30°C) ili uz zagrevanje (približno 40 - 100°C). Vreme reakcije je generalno približno 2 - 120 h, preferirano približno 8 - 24 h.

[0187] Pored toga, na primer, jedinjenje (XXIV) koje ima 4-metoksibenzil grupu kao Pg" grupe se zagreva u trifluorosirćetnoj kiselini u prisustvu metoksibenzena da se dobije jedinjenje (I"). Količina metoksibenzena koja će da se koristi u reakciji je 1 - 5 ekvivalenata. Reakcija može da se izvede uz zagrevanje (približno 40 - 100°C). Vreme reakcije je generalno približno 8 - 48 h, preferirano približno 8 - 24 h.

[0188] Jedinjenje (I) može da se izradi u skladu sa, na primer, postupkom pokazanim u narednoj šemi reakcije ili postupkom analognim sa njim.

Šema reakcije 8

Postupak

gde je Pg‴ zaštitna grupa na atomu sumpora. U primere zaštitne grupe spada acetil grupa. Drugi simboli su svaki kako je prethodno definisano.

(Postupak S)

[0189] U ovoj reakciji, jedinjenje (XXV) reaguje sa hloracetil hloridom (postupak S-1) i nakon toga reaguje sa tiolom koji ima Pg‴ grupu u prisustvu baze (postupak S-2) da se dobije jedinjenje (XXVI).

(Postupak S-1)

[0190] Količina hloracetil hlorida koja se koristi u ovoj reakciji je generalno 2 - 10 ekvivalenata, preferirano 2 - 4 ekvivalenta, u odnosu na jedinjenje (XXV). Reakcija može da se izvede na sobnoj temperaturi (približno 15 - 30°C) ili uz zagrevanje (približno 40 - 120°C). Vreme reakcije je generalno približno 3 - 24 h, preferirano približno 12 - 18 h.

(Postupak S-2)

[0191] Količina tiola koji ima Pg‴ grupu koja se koristi u ovoj reakciji je generalno 1 - 2 ekvivalenta, preferirano 1 - 1.1 ekvivalent, u odnosu na jedinjenje (XXV). Količina baze (na primer, kalijum karbonat, trietilamin) koja se koristi u ovoj reakciji je generalno 1 - 2 ekvivalenta, preferirano 1 - 1.1 ekvivalent, u odnosu na jedinjenje (XXV). Reakcija se preferirano izvodi u rastvaraču. U primere rastvarača spada tetrahidrofuran. Reakcija može da se izvede uz hlađenje ledom (približno -5 - 5°C) ili na sobnoj temperaturi (približno 15 -30°C). Vreme reakcije je generalno približno 0.1 - 1 h, preferirano približno 0.1 - 0.5 h.

[0192] Jedinjenje (XXV) i hloracetil hlorid mogu da budu komercijalno raspoloživi produkti ili mogu da se izrade primenom poznatog postupka.

(Postupak T)

[0193] U ovoj reakciji, jedinjenje (XIX) reaguje sa 1,1-dimetoksi-N,N-dimetilmetanaminom (postupak T-1) i nakon toga reaguje sa terc-butilhidrazinom ili njegovom solju (postupak T-2) da se dobije jedinjenje (XXVII). Jedinjenje (XIX) i terc-butilhidrazin ili njegova so mogu da

4

budu komercijalno raspoloživi produkti.

(Postupak T-1)

[0194] Količina 1,1-dimetoksi-N,N-dimetilmetanamina koja se koristi u ovoj reakciji je generalno 1 - 10 ekvivalenata, preferirano 1 - 2 ekvivalenta, u odnosu na jedinjenje (XIX). Reakcija može da se izvede uz zagrevanje (približno 60 - 100°C). Vreme reakcije je generalno približno 1 - 50 h, preferirano približno 1 - 5 h.

(Postupak T-2)

[0195] Količina terc-butilhidrazina ili njegove soli koja se koristi u ovoj reakciji je generalno 1 - 5 ekvivalenata, preferirano 1 - 2 ekvivalenta, u odnosu na jedinjenje (XIX). Reakcija se preferirano izvodi u rastvaraču. U primere rastvarača spadaju etri (na primer, tetrahidrofuran, dioksan, 1,2-dimetoksietan). Reakcija može da se izvede uz hlađenje (približno 0 - 10°C), na sobnoj temperaturi (približno 15 - 30°C) ili uz zagrevanje (približno 40 - 100°C). Vreme reakcije je generalno približno 30 min - 5 h, preferirano približno 30 min - 1 h.

(Postupak U)

[0196] U ovoj reakciji, jedinjenje (XXVII) reaguje sa Vilsmeier reagensom (postupak U-1) i nakon toga reaguje sa hidroksilamin hidrohloridom (postupak U-2) da se dobije jedinjenje (XXVIII) .

(Postupak U-1)

[0197] Količina Vilsmeier reagensa koja se koristi u ovoj reakciji je generalno 1 - 10 ekvivalenata, preferirano 1 - 5 ekvivalenata, u odnosu na jedinjenje (XXVII). Vilsmeier reagens može da se izradi od N,N-dimetilformamida i fosfor oksihlorida pod uslovima koji su generalno poznati (na primer, fosfor oksihlorid se doda u N,N-dimetilformamid uz hlađenje ledom i smeša se meša 30 min - 1 h na sobnoj temperaturi).

[0198] Ova reakcija može da se izvede na sobnoj temperaturi ili uz zagrevanje (približno 40 -60°C). Vreme reakcije je generalno približno 30 min - 2 h, preferirano približno 30 min - 1 h.

(Postupak U-2)

[0199] Količina hidroksilamin hidrohlorida koja se koristi u ovoj reakciji je generalno 5 - 20 ekvivalenata, preferirano 5 - 10 ekvivalenata, u odnosu na jedinjenje (XXVII). Ova reakcija može da se izvede uz zagrevanje (približno 40 - 60°C). Vreme reakcije je generalno približno 30 min - 2 h, preferirano približno 30 min - 1 h.

(Postupak V)

[0200] U ovoj reakciji, jedinjenje (XXIX) može da se izradi reakcijom jedinjenja (XXVIII) sa jedinjenjem (XXVI) u prisustvu baze.

[0201] Količina jedinjenja (XXVI) koja se koristi u ovoj reakciji je generalno 1 - 1.5 ekvivalenta, preferirano 1 - 1.1 ekvivalent, u odnosu na jedinjenje (XXVIII). Količina baze (na primer, kalijum karbonat, cezijum karbonat) koja se koristi u ovoj reakciji je generalno 1 -2 ekvivalenta, preferirano 1 - 1.2 ekvivalenta, u odnosu na jedinjenje (XXVIII). Ova reakcija se preferirano izvodi u rastvaraču. U primere rastvarača spadaju tetrahidrofuran, N,N-dimetilformamid i smeša ovih rastvarača. Ova reakcija može da se izvede uz hlađenje ledom (približno -5 - 5°C) ili na sobnoj temperaturi (približno 15 - 30°C). Vreme reakcije je generalno približno 0.5 - 5 h, preferirano približno 0.5 - 2 h.

(Postupak W)

[0202] U ovoj reakciji, jedinjenje (I") može da se izradi reakcijom jedinjenja (XXIX) sa kiselinom ili bazom.

[0203] Primeri kiselina u ovoj reakciji uključuju razblaženu hlorovodoničnu kiselinu i trifluorosirćetnu kiselinu. Količina kiseline koja će da se koristi je generalno 2 - 20 ekvivalenata, preferirano 5 - 10 ekvivalenata, u odnosu na jedinjenje (XXIX). Primeri baze u ovoj reakciji uključuju vodeni rastvor natrijum hidroksida, kalijum karbonat i natrijum hidrid. Količina baze koja će da se koristi je generalno 1 - 10 ekvivalenata, preferirano 2 - 5 ekvivalenata, u odnosu na jedinjenje (XXIX). Ova reakcija se preferirano izvodi u rastvaraču. U primere rastvarača spadaju metanol, N,N-dimetilformamid i smeša ovih rastvarača. Ova reakcija može da se izvede na sobnoj temperaturi (približno 15 - 30°C) ili uz zagrevanje (približno 40 - 120°C). Vreme reakcije je generalno približno 0.2 - 72 h, preferirano približno 0.2 - 5 h.

[0204] Jedinjenje obuhvaćeno okvirom ovog pronalaska može takođe da se dobije primenom poznatog postupka za konverziju supstituenta (to jest, uvođenje supstituenta ili konverzija funkcionalne grupe) na jedinjenju (I).

[0205] Za konverziju supstituenta može da se koristi uobičajeni poznati postupak. U njegove primere spadaju konverzija u karboksilnu grupu hidrolizom estra, konverzija u karbamoil grupu amidacijom karboksilne grupe, konverzija u hidroksimetil grupu redukcijom karboksilne grupe, konverzija u alkoholno jedinjenje redukcijom ili alkilacijom karbonilne grupe, reduktivnom aminacijom karbonilne grupe, oksimacijom karbonilne grupe, acilacijom amino grupe, ureacijom amino grupe, sulfonilacijom amino grupe, alkilacijom amino grupe, supstitucijom ili aminacijom aktivnog halogena sa aminom, alkilacijom hidroksi grupe supstitucijom ili aminacijom hidroksi grupe.

[0206] Kada je u toku uvođenja supstituenata i konverzije funkcionalnih grupa prisutan reaktivni radikal koji dovodi do neželjene reakcije, ukoliko je potrebno, unapred se u reaktivni radikal poznatim postupkom uvodi zaštitna grupa, a zaštitna grupa se uklanja poznatim postupkom nakon završene reakcije, pri čemu takođe može da se dobije jedinjenje obuhvaćeno okvirom ovog pronalaska.

[0207] Na primer, kada početno jedinjenje ili međuproizvod ima kao supstituent amino grupu, karboksilnu grupu ili hidroksi grupu, ove grupe mogu da se zaštite zaštitnim grupama koje se generalno koriste u hemiji peptida i slično. U ovom slučaju, ciljano jedinjenje može da se dobije uklanjanjem zaštitne grupe, ukoliko je potrebno, nakon reakcije.

[0208] U primere amino-zaštitne grupe spadaju formil grupa; C1-6alkil-karbonil grupa, C1-6alkoksi-karbonil grupa, benzoil grupa, C7-10aralkil-karbonil grupa (na primer, benzilkarbonil), C7-14aralkiloksi-karbonil grupa (na primer, benziloksikarbonil, 9-fluorenilmetoksikarbonil), tritil grupa, ftaloil grupa, N,N-dimetilaminometilen grupa, supstituisana silil grupa (na primer, trimetilsilil, trietilsilil, dimetilfenilsilil, terc-butildimetilsilil, terc-butildietilsilil) i C2-6alkenil grupa (na primer, 1-alil). Ove grupe su opciono supstituisane sa 1 do 3 supstituenta izabrana od atoma halogena, C1-6alkoksi grupe i nitro grupe.

[0209] U primere karboksi-zaštitne grupe spadaju C1-6alkil grupa, C7-11aralkil grupa (na primer, benzil), fenil grupa, tritil, supstituisana silil grupa (na primer, trimetilsilil, trietilsilil, dimetilfenilsilil, terc-butildimetilsilil, terc-butildietilsilil) i C2-6alkenil grupa (na primer, 1-alil). Ove grupe su opciono supstituisane sa 1 do 3 supstituenta izabrana od atoma halogena, C1-6alkoksi grupe i nitro grupe.

[0210] U primere hidroksi-zaštitne grupe spadaju C1-6alkil grupa, fenil grupa, tritil grupa, C7-10aralkil grupa (na primer, benzil), formil grupa, C1-6alkil-karbonil grupa, benzoil grupa, C7-10aralkil-karbonil grupa (na primer, benzilkarbonil), 2-tetrahidropiranil grupa, 2-tetrahidrofuril grupa, supstituisana silil grupa (na primer, trimetilsilil, trietilsilil, dimetilfenilsilil, terc-butildimetilsilil, terc-butildietilsilil) i C2-6alkenil grupa (na primer, 1-alil). Ove grupe su opciono supstituisane sa 1 do 3 supstituenta izabrana od atoma halogena, C1-6alkil grupe, C1-6alkoksi grupe i nitro grupe. Za uklanjanje gore pomenute zaštitne grupe, može da se iskoristi postupak poznat kao takav, na primer, postupak opisan u Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1980). Na primer, primenjuje se postupak u kome se koriste kiselina, baza, UV svetlost, hidrazin, fenil hidrazin, natrijum N-metilditiokarbamat, tetrabutilamonijum fluorid, paladijum acetat, trialkilsilil halid (na primer, trimetilsilil jodid, trimetilsilil bromid) i slično, redukcija i slično.

[0211] U zavisnosti od vrste supstituenta u početnom jedinjenju, početno jedinjenje koje ima različit supstituent može da se izradi prethodno pomenutom konverzijom supstituenta iz, kao početnog materijala, jedinjenja dobijenog prethodno pomenutim postupkom izrade.

[0212] Jedinjenje (I), koje je izrađeno prethodno pomenutom reakcijom, može da se dobije kao pojedinačno jedinjenje ili kao smeša.

[0213] Na ovaj način dobijeno jedinjenje (I) može da se izoluje i prečisti poznatim postupcima razdvajanja kao što su koncentracija, koncentracija pod sniženim pritiskom, ekstrakcija rastvarača, kristalizacija, rekristalizacija, transfer faza, hromatografija i slično.

[0214] Kada je jedinjenje (I) dobijeno kao slobodni oblik, ono može da se konvertuje u željenu so postupkom koji je poznat kao takav ili postupkom analognim sa njim; i obrnuto, kada je jedinjenje (I) dobijeno u obliku soli, so može da se konvertuje u slobodni oblik ili drugu željenu so postupkom koji je poznat kao takav ili postupkom analognim sa njim.

[0215] Kada jedinjenje (I) ima izomer kao što su optički izomer, stereoizomer, regioizomer, rotamer i slično, takav izomer i njihova smeša su takođe obuhvaćeni jedinjenjem (I). Na primer, kada jedinjenje (I) ima optički izomer, optički izomer izdvojen iz racemata je takođe obuhvaćen jedinjenjem (I). Ovi izomeri mogu da se dobiju kao pojedinačni produkti poznatim tehnikama sinteze i tehnikama razdvajanja (na primer, koncentracijom, ekstrakcijom rastvarača, hromatografijom na koloni, rekristalizacijom).

[0216] Jedinjenje (I) može da bude u obliku kristala a kristalni oblik kristala može da bude pojedinačni ili višestruki, i oba su obuhvaćena jedinjenjem (I). Kristal može da se izradi poznatim postupkom kristalizacije.

[0217] Pored toga, jedinjenje (I) može da bude farmaceutski prihvatljiv kokristal ili kokristalna so. Ovde, kokristal ili kokristalna so označava kristalnu supstancu koja je konstituisana od dve ili više vrsta specifičnih čvrstih supstanci, od kojih svaka ima različite fizičke osobine

(na primer, strukturu, tačku topljenja, toplotu fuzije, higroskopnost i stabilnost) na sobnoj temperaturi. Kokristal i kokristalna so mogu da se izrade u skladu sa poznatim postupkom kokristalizacije.

[0218] Jedinjenje (I) može da bude hidrat, ne-hidrat, solvat ili ne-solvat, pri čemu su svi obuhvaćeni jedinjenjem (I).

[0219] Jedinjenje obeleženo sa izotopom (na primer,<2>H,<3>H,<11>C,<14>C,<18>F,<35>S,<125>I) i slično je takođe obuhvaćeno jedinjenjem (I) .

[0220] Prolek jedinjenja (I) iz ovog pronalaska označava jedinjenje koje se konvertuje u jedinjenje (I) reakcijom sa enzimom, želudačnom kiselinom, itd., pod fiziološkim uslovima u živom organizmu, to jest, jedinjenje koje se konvertuje u jedinjenje (I) oksidacijom, redukcijom, hidroizom, itd.; jedinjenje koje se enzimatički konvertuje u jedinjenje (I) hidrolizom, itd., delovanjem želudačne kiseline, itd. Prolek jedinjenja (I) može da bude jedinjenje dobijeno podvrgavanjem amino grupe u jedinjenju (I) acilaciji, alkilaciji ili fosforilaciji (na primer, jedinjenje dobijeno podvrgavanjem amino grupe u jedinjenju (I) postupku eikosanoilacije, alanilacije, pentilaminokarbonilacije, (5-metil-2-okso-1,3-dioksolen-4-il)metoksikarbonilacije, tetrahidrofurilacije, pirolidilmetilacije, pivaloiloksimetilacije ili terc-butilacije); jedinjenje dobijeno podvrgavanjem hidroksi grupe u jedinjenju (I) procesu acilacije, alkilacije, fosforilacije ili boracije (na primer, jedinjenje dobijeno podvrgavanjem hidroksi grupe u jedinjenju (I) procesu acetilacije, palmitoilacije, propanoilacije, pivaloilacije, sukcinilacije, fumarilacije, alanilacije ili dimetilaminometilkarbonilacije); jedinjenje dobijeno podvrgavanjem karboksilne grupe u jedinjenju (I) procesu esterifikacije ili amidacije (na primer, jedinjenje dobijeno podvrgavanjem karboksilne grupe u jedinjenju (I) procesu etil esterifikacije, fenil esterifikacije, karboksimetil esterifikacije, dimetilaminometil esterifikacije, pivaloiloksimetil esterifikacije, etoksikarboniloksi esterifikacije, ftalidil esterifikacije, (5-metil-2-okso-1,3-dioksolen-4-il)metil esterifikacije, cikloheksiloksikarboniletil esterifikacije ili metilamidacije) i slično. Bilo koje od ovih jedinjenja može da se dobije od jedinjenja (I) postupkom koji je poznat kao takav.

[0221] Prolek jedinjenja (I) može takođe da bude jedinjenje koje se konvertuje u jedinjenje (I) pod fiziološkim uslovima kao što je opisano u IYAKUHIN no KAIHATSU (Development of Pharmaceuticals), Vol. 7, Design of Molecules, pp.163-198, Published by HIROKAWA SHOTEN (1990).

[0222] Jedinjenje (I) (u specifikaciji, ponekad skraćeno kao " jedinjenje iz ovog pronalaska") poseduje Cdc7 inhibitornu aktivnost, što je sredstvo za profilaksu ili tretman kancera, inhibitor rasta kancera i sredstvo za supresiju metastaza kancera.

[0223] Pored toga što jedinjenje iz ovog pronalaska pokazuje jaku inhibitornu aktivnost na Cdc7, takođe je superiorno u efikasnoj supresiji, farmakokinetici (na primer, apsorpciji, distribuciji, metabolizmu, izlučivanju), rastvorljivosti (na primer, rastvorljivost u vodi), interakciji sa drugim farmaceutskim produktima (na primer, lekovi koji metabolišu inhibitorno delovanje enzima), bezbednosti (na primer, akutna toksičnost, hronična toksičnost, genetska toksičnost, reproduktivna toksičnost, kardiotoksičnost, karcinogenetičnost) i stabilnosti (na primer, hemijska stabilnost, stabilnost na enzime, itd.) i korisno je kao medikament.

[0224] Kako jedinjenje iz ovog pronalaska pokazuje malu inhibitornu aktivnost prema drugim protein kinazama osim Cdc7, korisno je kao sredstvo za profilaksu ili tretman kancera, jer ima smanjenu toksičnost za normalne ćelije.

[0225] U skladu sa tim, jedinjenje iz ovog pronalaska može da se koristi za inhibiciju povećanog (abnormalnog) delovanja Cdc7 kod sisara (na primer, miševa, pacova, hrčaka, zečeva, mačaka, pasa, goveda, ovaca, majmuna, ljudi).

[0226] Jedinjenje iz ovog pronalaska se koristi kao medikament kao sredstvo za profilaksu ili tretman bolesti kod kojih je poseban uticaj Cdc7, na primer, kancera [na primer, kancer kolorektuma (na primer, kancer kolorektuma, kancer rektuma, kancer anusa, porodični kancer kolorektuma, nasledni nepolipozni kancer kolorektuma, gastrointestinalni stromalni tumor), kancer pluća (na primer, kancer ne-malih ćelija pluća, kancer malih ćelija pluća, maligna mezotelioma), mezotelioma, kancer pankreasa (na primer, kancer pankreatičnih kanala, pankreatični endokrini tumor), kancer faringsa, kancer laringsa, kancer ezofagusa, kancer želuca (na primer, papilarni adenokarcinom, mucinozni adenokarcinom, adenoskvamozni karcinom), kancer duodenuma, kancer tankog creva, kancer dojke (na primer infiltrirajući intraduktalni karcinom, ne-infiltrirajući intraduktalni karcinom, inflamatorni kancer dojke), kancer jajnika (na primer, karcinom epitela jajnika, tumor ekstragonadalnih germ ćelija, tumor germ ćelija jajnika, tumor jajnika potencijalno malog maligniteta), tumor testisa, kancer prostate (na primer, hormon-zavisni kancer prostate, hormon nezavisni kancer prostate), kancer jetre (na primer, hepatocelularni kancer, primarni kancer jetre, kancer ekstrahepatičnih žučnih kanala), kancer tiroidee (na primer, medularni tiroidni karcinom), kancer bubrega (na primer, karcinom renalnih ćelija, karcinom tranzicionih ćelija bubrežnih čašica i mokraćnih kanala), kancer materice (na primer, kancer grlića, kancer tela materice, sarkom uterusa), tumor mozga (na primer, meduloblastom, gliom, pinealni astrocitom, pilocitični astrocitom, difuzni astrocitom, anaplastični astrocitom, adenom hipofize), retinoblastom, kancer kože (na primer, tumor bazalnih ćelija, maligni melanom), sarkom (na primer, rabdomiosarkom, leiomiosarkom, sarkom mekog tkiva), maligni tumor kostiju, kancer mokraćne bešike, hematološki kancer (na primer, multiple mijeloma, leukemija, maligni limfom, Hočkinsova bolest, hronična proliferativna bolest koštane srži), nepoznati primarni kancer], kao inhibitor rasta kancera, sredstvo za supresiju metastaza kancera, promoter apoptoze i slično.

[0227] Preciznije, jedinjenje iz ovog pronalaska je efikasno za hematološki kancer, kancer dojke, kancer kolorektuma, kancer pluća, kancer pankreasa i slično.

[0228] Jedinjenje iz ovog pronalaska može da se primeni, kao medikament, oralno ili parenteralno kao takvo ili u smeši sa farmakološki prihvatljivim nosačem na prethodno pomenute sisare.

[0229] Medikament koji uključuje jedinjenje iz ovog pronalaska (ponekad skraćeno kao "medikament iz ovog pronalaska") je detaljno opisan u daljem tekstu.

[0230] Primeri doznog oblika medikamenta iz ovog pronalaska za oralnu primenu jedinjenja iz ovog pronalaska uključuju oralne preparate kao što su tablete (uključujući tablete obložene šećerom, tablete obložene filmom, sublingvalne tablete, bukalne tablete, brzo raspadajuće oralne tablete), pilule, granule, praškovi, kapsule (uključujući meke kapsule, mikro kapsule), sirupe, emulzije, suspenzije i filmovi (na primer oralni mukozni adhezivni film). Primeri doznog oblika medikamenta iz ovog pronalaska za parenteralnu primenu uključuju injekcije, impregnante, venske infuzije, transdermalna sredstva (na primer jontoforezna transdermalna sredstva) i supozitorije. Takođe je efikasno da se izradi preparat sa kontinuiranim oslobađanjem kombinacijom jedinjenja iz ovog pronalaska sa odgovarajućom podlogom (na primer, polimer buterne kiseline, polimer glikolne kiseline, kopolimer buterne kiselineglikolne kiseline, smeša polimera buterne kiseline i polimera glikolne kiseline, estar poliglicerola masnih kiselina).

[0231] Medikament iz ovog pronalaska može da se izradi poznatim postupkom izrade koji se koristi u polju tehnike farmaceutskih preparata (na primer, postupak opisan u Japanese Pharmacopoeia). Pored toga, medikament iz ovog pronalaska može na odgovarajući način da

1

sadrži, kada je to potrebno, odgovarajuće količine aditiva koji se generalno koriste u farmaceutskoj tehnici kao što su ekscipijent, vezivno sredstvo, sredstvo za raspadanje, lubrikans, zaslađivač, surfaktant, sredstvo za suspendovanje, emulgator, sredstvo za bojenje, konzervans, sredstvo za korigovanje mirisa, korigens, stabilizator, učvršćivač i slično.

[0232] Primeri prethodno pomenutih farmakološki prihvatljivih nosača uključuju ove aditive.

[0233] Na primer, tablete mogu da se izrade upotrebom ekscipijenta, vezivnog sredstva, sredstva za raspadanje, lubrikansa i slično a pilule i granule mogu da se izrade upotrebom ekscipijenta, vezivnog sredstva i sredstva za raspadanje. Pored toga, praškovi i kapsule mogu da se izrade upotrebom ekscipijenta i slično, sirupi mogu da se izrade upotrebom zaslađivača i slično a emulzije i suspenzije mogu da se izrade upotrebom sredstva za suspendovanje, surfaktanta, emulgatora i slično.

[0234] U primere ekscipijenta spadaju laktoza, rafinirani šećer, glukoza, skrob, saharoza, kristalna celuloza, praškasti sladić, manitol, natrijum hidrogen karbonat, kalcijum fosfat i kalcijum sulfat.

[0235] U primere vezivnog sredstva spadaju 5 - 10 mt% tečna pasta skroba, 10 - 20 mt% rastvor arapske gume ili rastvor želatina, 1 - 5 mt% rastvor tragakante, rastvor karboksimetil celuloze, rastvor natrijum alginata i glicerin.

[0236] U primere sredstava za raspadanje spadaju skrob i kalcijum karbonat.

[0237] U primere lubrikansa spadaju magnezijum stearat, stearinska kiselina, kalcijum stearat i prečišćeni talk.

[0238] U primere zaslađivača spadaju glukoza, fruktoza, invertni šećer, sorbitol, ksilitol, glicerin i sirup simpleks.

[0239] U primere surfaktanta spadaju natrijum lauril sulfat, polizorbat 80, estar sorbitana i monomasnih kiselina i polioksil 40 stearat.

[0240] U primere sredstva za suspendovanje spadaju arapska guma, natrijum alginat, natrijum karboksimetil celuloza, metil celuloza i bentonit.

[0241] U primere emulgatora spadaju arapska guma, tragakanta, želatin, polizorbat 80.

[0242] Na primer, kada je medikament iz ovog pronalaska u obliku tablete, tablete mogu da se izrade u skladu sa poznatim postupkom, dodavanjem, na primer, ekscipijenta (na primer, laktoza, rafinirani šećer, skrob), sredstva za raspadanje (na primer, skrob, kalcijum karbonat), vezivnog sredstva (na primer, skrob, arapska guma, karboksimetilceluloza, polivinilpirolidon, hidroksipropilceluloza) ili lubrikansa (na primer, talk, magnezijum stearat, polietilen glikol 6000) u jedinjenje iz ovog pronalaska, kompresijom oblikovane smeše a nakon toga, kada je

2

neophodno, nanošenjem omotača poznatim postupkom u cilju maskiranja ukusa, enteričkog oblaganja ili održivosti. U primere sredstava koja se koristi za oblaganje spadaju hidroksipropilmetilceluloza, etilceluloza, hidroksimetilceluloza, hidroksipropilceluloza, polioksietilenglikol, Tween 80, pluronik F68, celuloza acetat ftalat, hidroksipropilmetilceluloza ftalat, hidroksimetilceluloza acetat sukcinat, Eudragit (proizvođača Rohm, Germany, kopolimer metakrilne kiseline-akrilne kiseline) i boja (na primer, crveni gvožđe oksid, titan dioksid). Ovako dobijena tableta može da bude bilo koji preparat sa trenutnim oslobađanjem i preparat sa kontinuiranim oslobađanjem.

[0243] U primere prethodno pomenutih injekcija spadaju intravenske injekcije kao i subkutane injekcije, intrakutanozne injekcije, intramuskularne injekcije, instilacije i slično.

[0244] Ove injekcije se izrađuju poznatim postupkom ili rastvaranjem, suspendovanjem ili emulgovanjem jedinjenja iz ovog pronalaska u sterilnoj vodenoj ili uljanoj tečnosti. U primere vodenih tečnosti spadaju izotonični rastvor koji sadrži soli, glukozu i druga pomoćna sredstva (na primer, D-SORBITOL, D-manitol, natrijum hlorid) i slično. Vodena tečnost može da sadrži pogodna sredsta za solubilizaciju, na primer, alkohol (na primer, etanol), polialkohol (na primer, propilen glikol, polietilen glikol) i nejonski surfaktant (na primer, polizorbat 80, HCO-50). U primere uljane tečnosti spadaju ulje susama, sojino ulje i slično. Uljana tečnost može da sadrži pogodna sredstva za solubilizaciju. U primere sredstava za solubilizaciju spadaju benzil benzoat, benzil alkohol i slično. Pored toga, injekcije mogu da sadrže sredstva za puferovanje (na primer, fosfatni pufer, natrijum acetatni pufer), antipeneća sredstva (na primer, benzalkonijum hlorid, prokain hidrohlorid), stabilizatore (na primer, albumin humanog seruma, polietilen glikol), konzervanse (na primer, benzil alkohol, fenol) i slično. Izrađene injekcije se generalno pune u ampule.

[0245] Mada sadržaj jedinjenja iz ovog pronalaska u medikamentu iz ovog pronalaska varira u zavisnosti od oblika farmaceutskog preparata, on je generalno približno 0.01 do 100 mt%, preferirano približno 2 do 85 mt%, poželjnije približno 5 do 70 mt%, u odnosu na ukupan preparat.

[0246] Mada sadržaj aditiva u medikamentu iz ovog pronalaska varira u zavisnosti od oblika farmaceutskog preparata, on je generalno približno 1 do 99.9 mt%, preferirano približno 10 do 90 mt%, u odnosu na ukupan preparat.

[0247] Jedinjenje iz ovog pronalaska je stabilno i nisko toksično i može bezbedno da se koristi. Mada dnevna doza varira u zavisnosti od stanja i telesne težine pacijenta, vrste jedinjenja, načina primene i slično, u slučaju, na primer oralne primene na pacijentu za tretman kancera, dnevna doza za odraslog (telesna težina približno 60 kg) je približno 1 do 1000 mg, preferirano približno 3 do 300 mg, poželjnije približno 10 do 200 mg, kao jedinjenja iz ovog pronalaska, koja može da se da pri jednoj primeni ili da se primeni 2 ili 3 puta dnevno.

[0248] Kada se jedinjenje iz ovog pronalaska primenjuje parenteralno, generalno se primenjuje u obliku tečnosti (na primer injekcijom). Mada doza varira u zavisnosti od subjekta na kome se primenjuje, ciljanog organa, simptoma, postupka primene i slično, ona je, na primer, približno 0.01 mg do približno 100 mg, preferirano približno 0.01 do približno 50 mg, poželjnije približno 0.01 do približno 20 mg, u odnosu na 1 kg telesne težine, i preferirano je intravenska injekcija.

[0249] Jedinjenje iz ovog pronalaska može da se koristi zajedno sa drugim lekovima.

Preciznije, jedinjenje iz ovog pronalaska može da se koristi zajedno sa medikamentima kao što su hormonska terapeutska sredstva, hemoterapeutska sredstva, imunoterapeutska sredstva, lekovi koji inhibiraju delovanje faktora rasta ćelija ili njihovih receptora i slično. U daljem tekstu, lekovi koji mogu da se koriste u kombinaciji sa jedinjenjem iz ovog pronalaska su skraćeno označeni kao pridruženi lekovi.

[0250] U primere "hormonskih terapeutskih sredstava" spadaju fosfestrol, dietilstilbestrol, hlortrianisen, medroksiprogesteron acetat, megestrol acetat, hlormadinon acetat, ciproteron acetat, danazol, alilestrenol, gestrinon, mepartricin, raloksifen ili meloksifen, levormeloksifen, anti-estrogens (na primer, tamoksifen citrat, toremifen citrat), preparati za kontracepciju, mepitiostan, testrolakton, aminoglutetimid, LH-RH agonisti (na primer, goserelin acetat, buserelin, leuprorelin), droloksifen, epitiostanol, etinilestradiol sulfonat, inhibitori aromataze (na primer, fadrazol hidrohlorid, anastrazol, retrozol, eksemestan, vorozol, formestan), antiandrogeni (na primer, flutamid, bikartamid, nilutamid), inhibitori 5α-reduktaze (na primer, finasterid, epristerid), lekovi sa adrenokortikalnim hormonima (na primer, deksametazon, prednizolon, betametazon, triamcinolon) inhibitori sinteze androgena (na primer, abirateron), retinoid i lekovi koji zadržavaju metabolizam retinoida (na primer, liarozol), hormoni tiroidee i njihovi DDS (lekovi sa sistemskim oslobađanjem) preparati.

[0251] U primere "hemoterapeutskih sredstava" spadaju alkilirajuća sredstva, antimetaboliti, antikancerogeni antibiotici i antikancerogena sredstva dobijena od biljaka.

[0252] U primere "alkilirajućih sredstava" spadaju azot senfa, N-oksid hidrohlorid azota senfa, hlorambucil, ciklofosfamid, ifosfamid, tiotepa, karbokvon improsulfan tosilat, busulfan, nimustin hidrohlorid, mitobronitol, melfalan, dakarbazin, ranimustin, natrijum estramustin

4

fosfat, trietilenmelamin, karmustin, lomustin, streptozocin, pipobroman, etoglucid, karboplatin, cisplatin, miboplatin, nedaplatin, oksaliplatin, altretamin, ambamustin, dibrospidijum hidrohlorid, fotemustin, prednimustin, pumitepa, ribomustin, temozolomid, treosulfan, trofosfamid, zinostatin stimalamer, adozelesin, cistemustin, bizelesin i njihovi DDS preparati.

[0253] U primere "antimetabolita" spadaju merkaptopurin, 6-merkaptopurin ribozid, tioinozin, metotreksat, pemetreksed, enocitabin, citarabin, citarabin ocfosfat, ancitabin hidrohlorid, 5-FU lekovi (na primer, fluorouracil, tegafur, UFT, doksifluridin, karmofur, galocitabin, emitefur, kapecitabin), aminopterin, nelzarabin, leukovorin kalcijum, tabloid, butocin, folinat kalcijum, levofolinat kalcijum, kladribin, emitefur, fludarabin, gemcitabin, hidroksikarbamid, pentostatin, piritreksim idoksuridin, mitoguazon, tiazofrin, ambamustin, bendamustin i njihovi DDS preparati.

[0254] U primere "antikancerogenih antibiotika" spadaju aktinomicin D, aktinomicin C, mitomicin C, hromomicin A<3>, bleomicin hidrohlorid, bleomicin sulfat, peplomicin sulfat, daunorubicin hidrohlorid, doksorubicin hidrohlorid, aklarubicin hidrohlorid, pirarubicin hidrohlorid, epirubicin hidrohlorid, neokarzinostatin, mitramicin, sarkomicin, karzinofilin, mitotan, zorubicin hidrohlorid, mitoksantron hidrohlorid i darubicin hidrohlorid i njihovi DDS preparati.

[0255] U primere "antikancerogenih sredstava dobijenih od biljaka" spadaju etopozid, etopozid fosfat, vinblastin sulfat, vinkristin sulfat, vindesin sulfat, tenipozid, paklitaksel, docetaksel, vinorelbin i njihovi DDS preparati.

[0256] U primere "imunoterapeutskih sredstava" spadaju picibanil, krestin, sizofiran, lentinan, ubenimeks interferoni, interleukini, faktor stimulacije kolonije makrofaga, faktor stimulacije kolonije granulocita, eritropoietin, limfotoksin, BCG vakcina, Corynebacterium parvum, levamizol, polisaharid K, prokodazol i anti-CTLA4 antitela.

[0257] U primere "faktora rasta ćelija" u "lekovima koji inhibiraju delovanje faktora rasta ćelija ili njihove receptore" spadaju bilo koje supstance koje promovišu proliferaciju ćelija, što su normalno peptidi koji imaju molekulsku težinu ne veću od 20,000 i koji su sposobni da ispoljavaju svoju aktivnost pri malim koncentracijama vezivanjem za receptor a njihovi specifični primeri uključuju (1) EGF (epidermalni faktor rasta) ili supstance koje poseduju skoro potpuno isto delovanje kao on [na primer, TGF-α], (2) insulin ili supstance koje poseduju skoro potpuno isto delovanje kao on [na primer insulin, IGF (insulinu sličan faktor rasta)-1, IGF-2], (3) FGF (faktor rasta fibroblasta) ili supstance koje poseduju skoro potpuno isto delovanje kao on [na primer, kiseli FGF, bazni FGF, KGF (faktor rasta keratinocita), FGF-10] i (4) drugi faktori rasta ćelija [na primer, CSF (faktor stimulacije kolonija), EPO (eritropoietin), IL-2 (interleukin-2), NGF (faktor rasta nervnih ćelija), PDGF (faktor rasta trombocita), TGF β (β faktor transformacije rasta), HGF (faktor rasta hepatocita), VEGF (faktor rasta vaskularnog endotelijuma), heregulin, angiopoietin].

[0258] U primere "receptora faktora rasta ćelija" spadaju bilo koji receptori sposobni da se vežu za prethodno pomenute faktore rasta ćelija a u njihove specifične primere spadaju EGF receptor, heregulin receptor (HER3, itd.) insulin receptor, IGF receptor-1, IGF receptor-2, FGF receptor-1 ili FGF receptor-2, VEGF receptor, angiopoietin receptor (Tie2 itd.), PDGF receptor i slično.

[0259] U primere "lekova koji inhibiraju delovanje faktora rasta ćelija i njihove receptore" spadaju EGF inhibitor, TGFα inhibitor, heregulin inhibitor, insulin inhibitor, IGF inhibitor, FGF inhibitor, KGF inhibitor, CSF inhibitor, EPO inhibitor, IL-2 inhibitor, NGF inhibitor, PDGF inhibitor, TGFβ inhibitor, HGF inhibitor, VEGF inhibitor, angiopoietin inhibitor, EGF receptor inhibitor, HER2 inhibitor, HER4 inhibitor, inhibitor insulin receptora, inhibitor IGF-1 receptora, inhibitor IGF-2 receptora, inhibitor FGF receptora-1, inhibitor FGF receptora-2, inhibitor FGF receptora-3, inhibitor FGF receptora-4, inhibitor VEGF receptora, Tie-2 inhibitor, inhibitor PDGF receptora, Abl inhibitor, Raf inhibitor, FLT3 inhibitor, c-Kit inhibitor, Src inhibitor, PKC inhibitor, Trk inhibitor, Ret inhibitor, mTOR inhibitor, Aurora inhibitor, PLK inhibitor, MEK(MEK1/2) inhibitor, MET inhibitor, CDK inhibitor, Akt inhibitor, ERK inhibitor i slično. U njihove još specifičnije primere spadaju anti-VEGF antitelo (na primer, Bevacizumab), anti-HER2 antitelo (na primer, Trastuzumab, Pertuzumab), anti-EGFR antitelo (na primer, Cetuximab, Panitumumab, Matuzumab, Nimotuzumab), anti-VEGFR antitelo, anti-HGF antitelo, Imatinib mesilat, Erlotinib, Gefitinib, Sorafenib, Sunitinib, Dasatinib, Lapatinib, Vatalanib, 4-(4-fluoro-2-metil-1H-indol-5-iloksi)-6-metoksi-7-[3-(1- pirolidinil)propoksi]hinazolin (AZD-2171), Lestaurtinib, Pazopanib, Canertinib, Tandutinib, 3-(4-bromo-2,6-difluorobenziloksi)-5-[3-[4-(1-pirolidinil)butil]ureido]izotiazol-4-karboksamid (CP-547632), Axitinib, N-(3,3-dimetil-2,3-dihidro-1H-indol-6-il)-2-(piridin-4-ilmetilamino)piridin-3-karboksamid (AMG-706), Nilotinib, 6-[4-(4-etilpiperazin-1-ilmetil)fenil]-N-[1(R)-feniletil]-7H-pirolo[2,3-d]pirimidin-4-amin (AEE-788), Vandetanib, Temsirolimus, Everolimus, Enzastaurin, N-[4-[4-(4-metilpiperazin-1-il)-6-(3-metil-1H-pirazol-5-ilamino)pirimidin-2-ilsulfanil]fenil]ciklopropankarboksamid (VX-680), 2-[N-[3-[4-[5-[N-(3fluorofenil)karbamoilmetil]-1H-pirazol-3-ilamino]hinazolin-7-iloksi]propil]-N-etilamino]etil fosfat (AZD-1152), 4-[9-hlor-7-(2,6-difluorofenil)-5H-primido[5,4-d][2]benzazepin-2-ilamino]benzoeva kiselina (MLN-8054), N-[2-metoksi-5-[(E)-2-(2,4,6-trimetoksifenil)vinilsulfonilmetil]fenil]glicin natrijumova so (ON-1910Na), 4-[8-ciklopentil-7(R)-etil-5-metil-6-okso-5,6,7,8-tetrahidropteridin-2-ilamino]-3-metoksi-N-(1-metilpiperidin-4-il)benzamid (BI-2536), 2-hidroksietil 5-(4-bromo-2-hlorfenilamino)-4-fluoro-1-metil-1H-benzimidazol-6-karbohidroksamat (AZD-6244), N-[2(R),3-dihidroksipropoksi]-3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-jodofenilamino)benzamid (PD-0325901), everolimus (RAD001) i slično.

[0260] Pored prethodno pomenutih lekova, kao pridruženi lekovi mogu takođe da se koriste L-asparaginaza, aceglaton, prokarbazin hidrohlorid, so kompleksa protoporfirin-kobalt, merkuri hematoporfirin-natrijum, inhibitor topoizomeraze I (na primer irinotekan, topotekan), inhibitor topoizomeraze II (na primer, sobuzoksan), inducer diferencijacije (na primer, retinoid, vitamin D), inhibitor drugih angiogeneza (na primer, fumagilin, ekstrakt ajkule, COX-2 inhibitor), α-bloker (na primer, tamsulosin hidrohlorid), bisfosforna kiselina (na primer, pamidronat, zoledronat), talidomid, 5-azacitidin, decitabin, inhibitor proteazoma (na primer, bortezomib), antitumorno antitelo kao što je anti-CD20 antitelo i slično, toksin obeleženo antitelo i slično.

[0261] Kombinovanjem jedinjenja iz ovog pronalaska i pridruženog leka, može da se postigne superiorni efekat kao što su

(1) doza može da bude smanjena u poređenju sa pojedinačnom primenom jedinjenja iz ovog pronalaska ili pridruženog leka,

(2) lek koji se kombinuje sa jedinjenjem iz ovog pronalaska može da bude izabran u skladu sa stanjem pacijenta (blagi slučaj, težak slučaj i slično),

(3) period tretmana može da bude duži,

(4) može da se prilagodi efekat kontinuiranog tretmana,

(5) sinergistički efekat može da se postigne kombinovanom upotrebom jedinjenja iz ovog pronalaska i pridruženog leka i slično.

[0262] U daljem tekstu, jedinjenje iz ovog pronalaska i pridruženi lek koji se koriste u kombinaciji su označeni kao "kombinovano sredstvo iz ovog pronalaska".

[0263] Za upotrebu kombinovanog sredstva iz ovog pronalaska, vreme primene jedinjenja iz ovog pronalaska i pridruženog leka nije ograničeno a jedinjenje iz ovog pronalaska i pridruženi lek mogu da se primene istovremeno ili mogu da se primene u različito vreme na subjektu koji prima terapiju. Za primenu na određeni način, vreme različito varira u zavisnosti od aktivnog sastojka koji se primenjuje, doznog oblika i načina primene. Na primer, kada se pridurženi lek primenjuje prvi, jedinjenje iz ovog pronalaska može da se primeni 1 min do 3 dana, preferirano 10 min do 1 dan, poželjnije 15 min do 1 h, nakon primene pridurženog leka. Kada se jedinjenje iz ovog pronalaska primenjuje prvo, pridruženi lek može da se primeni , 1 min do 1 dan, preferirano 10 min do 6 h, poželjnije 15 min do 1 h, nakon primene jedinjenja iz ovog pronalaska. Doza pridruženog leka može da se odredi u skladu sa dozom koja se klinički koristi i može da bude na odgovarajući način određena u zavisnosti od subjekta na kome se primenjuje, načina primene, bolesti, kombinacije i slično.

[0264] U primere načina primene jedinjenja iz ovog pronalaska i pridruženog leka spada:

(1) primena jednog preparata dobijenog istovremenom izradom jedinjenja iz ovog pronalaska i pridruženog leka,

(2) istovremena primena dve vrste preparata jedinjenja iz ovog pronalaska i pridruženog leka, koji su odvojeno izrađeni, istim načinom primene,

(3) primena dve vrste preparata jedinjenja iz ovog pronalaska i pridruženog leka, koji su odvojeno izrađeni, istim načinom primene po određenom rasporedu,

(4) istovremena primena dve vrste preparata jedinjenja iz ovog pronalaska i pridruženog leka, koji su odvojeno izrađeni, različitim načinima primene,

(5) primena dve vrste preparata jedinjenja iz ovog pronalaska i pridruženog leka, koji su odvojeno izrađeni, različitim načinima primene na određen način (na primer, primena po redu jedinjenja iz ovog pronalaska i pridruženog leka ili obrnutim redosledom) i slično.

[0265] Doza pridruženog leka je odgovarajuće određena u skladu sa njegovom kliničkom dozom. Odnos jedinjenja iz ovog pronalaska i pridruženog leka je odgovarajuće određen u zavisnosti od subjekta na kome se primenjuje, načina primene, ciljane bolesti, simptoma, kombinacije i slično. Na primer, kada je subjekt na kome se primenjuje čovek, pridruženi lek se koristi u količini od 0.01 do 100 (težinskih delova) u odnosu na 1 težinski deo jedinjenja iz ovog pronalaska.

[0266] Kombinovani lek iz ovog pronalaska je nisko toksičan i može bezbedno da se primeni oralno ili parenteralno (na primer, topično, rektalno, intravenski), na primer, nakon mešanja jedinjenja iz ovog pronalaska i/ili prethodno pomenutog pridruženog leka sa farmakološki prihvatljivim nosačem, da se dobije farmaceutska kompozicija kao što su tablete (uključujući tablete obložene šećerom i tablete obložene filmom), praškovi, granule, kapsule (uključujući meke kapsule), tečnosti, injekcije, supozitorije i sredstva za kontinuirano oslobađanje, u skladu sa poznatim postupkom, na sisarima (na primer, miševi, pacovi, hrčci, zečevi, mačke, psi, goveda, ovce, majmuni, ljudi). Injekcije mogu da se primene intravenskom, intramuskularnom, subkutanom ili intraorganskom primenom ili direktno na leziju.

[0267] U primere farmakološki prihvatljivog nosača koji se koristi za izradu kombinovanog sredstva iz ovog pronalaska spadaju oni koji su slični sa prethodno pomenutim farmakološki prihvatljivim nosačima koji se koriste za izradu medikamenta iz ovog pronalaska.

[0268] Odnos mešavine jedinjenja iz ovog pronalaska i pridruženog leka u kombinovanom leku iz ovog prtonalaska može odgovarajuće da se odredi u skladu sa subjektom na kome se primenjuje, načinom primene, bolešću i slično.

[0269] Na primer, sadržaj jedinjenja iz ovog pronalaska u kombinovanom leku iz ovog pronalaska varira u zavisnosti od oblika preparata i obično je od približno 0.01% težine do 100% težine, preferirano od približno 0.1% težine do 50% težine, poželjnije od približno 0.5% težine do 20% težine, u odnosu na ukupnu težinu preparata.

[0270] Sadržaj pridruženog leka u kombinovanom leku iz ovog pronalaska varira u zavisnosti od oblika preparata i obično je od približno 0.01% težine do 90% težine, preferirano od približno 0.1% težine do 50% težine, poželjnije od približno 0.5% težine do 20% težine, u odnosu na ukupnu težinu preparata.

[0271] Sadržaj aditiva u kombinovanom leku ovog pronalaska varira u zavisnosti od oblika preparata i obično je od približno 1% težine do 99.99% težine, preferirano od približno 10% težine do 90% težine, u odnosu na ukupan preparat.

[0272] Kada su jedinjenje iz ovog pronalaska i pridruženog leka formulisani odvojeno, sadržina može da se prilagodi.

[0273] Kombinovani lek iz ovog pronalaska može da se izradi poznatim postupkom koji se generalno koristi u polju tehnike za izradu farmaceutskih preparata.

[0274] Jedinjenje iz ovog pronalaska je preferirano oblikovano u preparate za oralnu primenu kao što su čvrsti preparati (na primer, praškovi, tablete, granule, kapsule) i slično ili oblikovani u preparate za rektalnu primenu kao što su supozitorije. Precizinije, poželjniji je preparat za oralnu primenu.

[0275] Pridruženi lek može da se izradi u prethodno pomenutom doznom obliku u zavisnosti od vrste leka.

[0276] Doza kombinovanog leka iz ovog pronalaska se razlikuje u zavisnosti od vrste jedinjenja iz ovog pronalaska; starosti; telesne težine, stanja pacijenta; doznog oblika, načina primene, perioda primene, itd., i na primer, za pacijenta sa kancerom (odrasla osoba, telesne težine približno 60 kg), kombinovani lek se primenjuje intravenski, u dozi od približno 0.01 do približno 1,000 mg/kg/dan, preferirano približno 0.01 do približno 100 mg/kg/dan, poželjnije približno 0.1 do približno 100 mg/kg/dan, posebno približno 0.1 do približno 50 mg/kg/dan, specijalno približno 1.5 do približno 30 mg/kg/dan kada se radi o jedinjenju iz ovog pronalaska ili predruženom leku, tim redom, jedanput ili više puta dnevno u podeljenim dozama. Naravno, kako doza, kako je prethodno opisano, varira u zavisnosti od različitih uslova, ponekad može da bude dovoljno da se primene manje količine od prethodno navedenih doza, a isto tako, ponekad može da bude neophodno da se primene veće količine od ovih.

[0277] Količina pridruženog leka može da bude podešena na bilo kojoj vrednosti ukoliko su neželjena dejstva problematična. Dnevna doza u smislu kombinovanog leka se razlikuje u zavisnosti od ozbiljnosti simptoma, starosti, pola, telesne težine, različite preosetljivosti subjekta, vremena i intervala primene, svojstva, prepisivanja i vrste farmaceutskog preparata, vrste efektivnog sastojka, itd., i nije posebno ograničena; na primer, u slučaju oralne primene, doza leka je uobičajeno od približno 0.001 mg do 2,000 mg, preferirano od približno 0.01 mg do 500 mg, dalje preferirano od približno 0.1 mg do 100 mg, po 1 kg telesne težine sisara, i obično se primenjuje jedanput do četiri puta dnevno u podeljenim dozama.

[0278] Osim toga, jedinjenje iz ovog pronalaska ili kombinovano sredstvo iz ovog pronalaska mogu da se primene istovremeno sa terapijom bez lekova. Preciznije, jedinjenje iz ovog pronalaska ili kombinovano sredstvo iz ovog pronalaska mogu da se kombinuju sa terapijom bez leka kao što su (1) hirurgija, (2) hipertenzivna hemo-terapija pomoću angiotenzina II, itd., (3) genska terapija, (4) termoterapija, (5) krioterapija, (6) kauterizacija laserom i (7) radioterapija.

[0279] Na primer, uz upotrebu jedinjenja iz ovog pronalaska ili kombinovanog sredstva iz ovog pronalaska pre i nakon prethodno pomenute operacije i slično, ili upotrebom pre i nakon tretmana kombinacije dve ili tri od navedenih vrsta, mogu da se ostvare efekti prevencije pojave rezistencije, produženje dužine života bez bolesti, supresija metastaza ili povraćaja kancera, apotanazija i slično.

[0280] Pored toga, tretman sa jedinjenjem iz ovog pronalaska ili kombinovanim sredstvom iz ovog pronalaska može da se kombinuje sa dodatnom terapijom [(i) primena antibiotika (na primer, β-laktama kao što su pansporin i slično, makrolida kao što je klaritromicin i slično) za komplikacije sa različitim infektivnim bolestima, (ii) primena visoko kalorične infuzije, preparata amino kiseline ili multivitaminskih preparata za poboljšanje pothranjenosti, (iii) primena morfina za ublažavanje bola, (iv) primena medikamenta za ublažavanje neželjenih dejstava kao što su mučnina, povraćanje, anoreksija, dijareja, leukopenija, trombocitopenija, smanjenje koncentracije hemoglobina, gubitak kose, hepatopatija, renopatija, DIC, groznica i slično i (v) primena medikamenta za supresiju rezistencije kancera na više lekova. itd.].

[0281] Preferirano, jedinjenje iz ovog pronalaska ili kombinovano sredstvo iz ovog pronalaska se primenjuje oralno (uključujući preparate sa kontinuiranim oslobađanjem), intravenski (uključujući boluse, infuzije i klatrate), subkutano i intramuskularno (uključujući boluse, infuzije i preparate sa kontinuiranim oslobađanjem), transdermalno, intratumoralno ili proksimalno pre ili nakon sprovođenja prethodno opisane dodatne terapije

[0282] U slučaju primene jedinjenja iz ovog pronalaska ili kombinovanog sredstva iz ovog pronalaska na primer pre operacije, itd., jedinjenje iz ovog pronalaska ili kombinovano sredstvo iz ovog pronalaska može da se primeni jedanput približno 30 min do 24 h pre operacije, itd., ili jedanput do tri puta u podeljenim dozama približno3 do 6 meseci pre operacije, itd. Na ovaj način, operacija, itd., može lako da se izvede zato što, na primer, kancerogeno tkivo može da se smanji primenom jedinjenja iz ovog pronalaska ili kombinovanog sredstva iz ovog pronalaska pre operacije i slično.

[0283] U slučaju primene jedinjenja iz ovog pronalaska ili kombinovanog sredstva iz ovog pronalaska na primer nakon operacije i slično, ono može da se primeni ponavljajuće približno 30 min do 24 h nakon operacije i slično u rasponu od nekoliko nedelja do 3 meseca. Na ovaj način, efekat operacije i slično može da se pojača primenom jedinjenja iz ovog pronalaska ili kombinovanog sredstva iz ovog pronalaska nakon operacije i slično.

Primeri

[0284] Ovaj pronalazak je detaljnije opisan u daljem tekstu pomoću Primera, Eksperimentalnih Primera i Primera formulacije.

[0285] U niže datim Primerima, "sobna temperatura" se generalno odnosi na približno 10°C do približno 35°C. Odnos izmešanih rastvarača je iskazan, ukoliko nije drugačije navedeno, zapreminskim odnosima mešavine. Ukoliko nije drugačije navedeno, % se odnosi na mt%.

1

[0286] U hromatografiji na koloni silika gela, bazna hromatografija na koloni silika gela označava upotrebu aminopropilsilan-vezanog silika gela.<1>H-NMR (spektar protona nuklearne magnetne rezonance) se meri Fourier-ovom transformacijom NMR. Veoma blagi pikovi protona u hidroksilnoj grupi, amino grupi i slično nisu opisani.

[0287] Skraćenice u Primerima i Eksperimentalnim Primerima su u skladu sa opštim primerima koji se tretnutno koriste u ovom polju tehnike i imaju značenja, na primer, kako sledi.

s: singlet

d: dablet

t: triplet

q: kvartet

dd: dvostruki dablet

m: višestruki

brs: široki singlet

J: konstanta udvajanja

DMSO: dimetil sulfoksid

Hz: herc

CDCl3: deuteriohlorform

<1>H-NMR: proton nuklearne magnetne rezonance

SDS: natrijum dodecil sulfat

PAGE: elektroforeza na poliakrilamidnom gelu

PVDF: poliviniliden fluorid

HRP: peroksidaza rena

[0288] SEQ ID NOs u listingu sekvenci ove specifikacije pokazuje sledeće sekvence.

(SEQ ID NO: 1) bazna sekvenca iz primera korišćenog u Eksperimentalnom Primeru 1 (SEQ ID NO: 2) bazna sekvenca iz primera korišćenog u Eksperimentalnom Primeru 1 (SEQ ID NO: 3) bazna sekvenca iz primera korišćenog u Eksperimentalnom Primeru 1 (SEQ ID NO: 4) bazna sekvenca iz primera korišćenog u Eksperimentalnom Primeru 1

Primer 1

2

Izrada 2-(2-hlorfenil)-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada metil 3-[(trifluoroacetil)amino]tiofen-2-karboksilata

[0289] U rastvor metil 3-aminotiofen-2-karboksilata (50 g) u acetonitrilu (650 mL) se dodaju piridin (31 mL) i trifluorosirćetni anhidrid (58.6 mL) uz mešanje i uz hlađenje ledom i smeša se meša 5 min na 0°C. Nakon mešanja, reaktivni sistem se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu i posle 10 min, sipa u ledenu vodu (6 L). Nakon 20 min mešanja, precipitat se sakupi filtriranjem i ispere sa vodom da se dobije naslovljeno jedinjenje (80 g) kao bledo smeđa čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 3.86(3H,s), 7.72(1H,d,J=5.4Hz), 8.03(1H,d,J=5.4Hz), 11.17(1H,brs). B) Izrada metil 5-bromo-3-[(trifluoroacetil)amino]tiofen-2-karboksilata

[0290] U rastvor diizopropilamina (20 mL) u tetrahidrofuranu (200 mL) se doda rastvor 1.6M n-butillitijum/heksan (82.4 mL) uz mešanje i uz hlađenje ledom i smeša se meša 15 min na 0°C. Nakon mešanja, reaktivni sistem se ohladi na -78°C i u kapima se doda rastvor metil 3-[(trifluoroacetil)amino]tiofen-2-karboksilata (10 g) u tetrahidrofuranu (50 mL). Po završetku dodavanja u kapima, smeša se meša 1 h na istoj temperaturi i doda se 1,2-dibromoetan (20.6 mL). Nakon mešanja 30 min na istoj temperaturi, reaktivni sistem se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu i meša još 30 min. Reaktivni sistem se sipa u zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata (600 mL) i smeša se ekstrahuje sa etil acetatom, ispere sa slanim rastvorom i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) da se dobije naslovljeno jedinjenje (5.3 g) kao žuta čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(CDCl3) δ 3.94(3H,s), 8.11(1H,s), 11.15(1H,brs).

C) Izrada metil 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksilata

[0291] Smeša metil 5-bromo-3-[(trifluoroacetil)amino]tiofen-2-karboksilata (5.3 g), kalijum karbonata (10 g), metanola (100 mL) i vode (25 mL) se meša 2 h na sobnoj temperaturi. Reaktivni sistem se koncentruje pod sniženim pritiskom i u njega se sipaju etil acetat i voda.

Smeša se ekstrahuje sa etil acetatom, ispere sa slanim rastvorom i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatografijom na silika gelu (etil acetat/heksan) da se dobije naslovljeno jedinjenje (3.3 g) kao žuta čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 3.70(3H,s), 6.68(2H,brs), 6.75(1H,s).

D) Izrada 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida

[0292] Smeša metil 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksilata (5.76 g), natrijum hidroksida (2.94 g), vode (25 mL) i metanola (100 mL) se meša u toku noći na 70°C. Reaktivni sistem se ohladi sa ledom, doda se 6M rastvor hlorovodonične kiseline (8.17 mL) i smeša se koncentruje pod sniženim pritiskom. U ostatak se dodaju amonijum hlorid (26.3 g), trietilamin (49.7 g) i N,N-dimetilformamid (230 mL) i smeša se meša 5 min na sobnoj temperaturi. U reaktivni sistem se dodaju 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)karbodiimid hidrohlorid (28.2 g) i 1-hidroksibenzotriazol (19.9 g) i smeša se meša 5 dana na sobnoj temperaturi. Reaktivni sistem se sipa u zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata (700 mL) i smeša se ekstrahuje sa etil acetatom (700 mL), ispere sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hidrogen karbonata i suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) da se dobije naslovljeno jedinjenje (4.1 g) kao žuta čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(300MHz, DMSO-d6) δ 6.56(2H,brs), 6.70(1H,s), 6.91(2H,brs).

E) Izrada 6-bromo-2-(2-hlorfenil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0293] Smeša 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (100 mg), 2-hlorbenzoilhlorida (57 µL), N,N- dimetilpiridin-4-amina (55 mg), piridina (1.0 mL) i N,N-dimetilformamida (2.0 mL) se meša 1.5 h na 70°C. Reaktivni sistem se koncentruje pod sniženim pritiskom, u ostatak se doda 2M vodeni rastvor natrijum hidroksida i smeša se zagreje na 120°C. Nakon 1 h, nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se neutrališe sa 1M rastvorom hlorovodonične kiseline. Precipitat se sakupi filtriranjem i ispere sa vodom da se dobije naslovljeno jedinjenje (120 mg) kao tamno narandžasta čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 7.44-7.67(4H,m), 7.69(1H,s), 13.04(1H,brs).

4

F) Izrada 2-(2-hlorfenil)-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0294] 6-Bromo-2-(2-hlorfenil)tieno[3.2-d]pirimidin-4(3H)-on (157 mg), terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilat (425 mg), natrijum karbonat (138 mg), 1,2-dimetoksietan (4.0 mL) i voda (2.0 mL) se stave u bocu a atmosfera u bocu se prečisti sa argonom. Doda se [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihloriddihlormetan kompleks (1:1) (38 mg) i atmosfera u boci se ponovo prečisti sa argonom.

Reaktivni sistem se meša 1 h na 100°C, doda se 8M vodeni rastvor natrijum hidroksida (1 mL) i smeša se meša 30 min na 100°C. Nakon mešanja, smeša se ekstrahuje sa smešom etil acetat/tetrahidrofuran i ekstrakt se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) i dobijena bledo žuta čvrsta supstanca se kristališe iz smeše metanol/etil acetat da se dobije naslovljeno jedinjenje (43 mg) kao žuta čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.43(3H,brs), 7.43-7.69(5H,m), 7.92(0.6H,brs), 8.30(0.4H,brs), 12.78(1H,brs), 13.03(1H,brs).

Primer 2

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(pirolidin-1-ilmetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada 6-bromo-2-(hlormetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0295] Smeša metil 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksilata (15 g) izrađenog u Primeru 1, faza C, hloracetonitrila (12 mL) i rastvora 4M hlorovodonična kiselina/ciklopentilmetiletar (100 mL) se meša 2 h na sobnoj temperaturi i meša 1 h na 70°C. Reaktivni sistem se koncentruje pod sniženim pritiskom i u ostatak se doda zasićen vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata. Precipitat se sakupi filtriranjem i ispere sa vodom. Dobijena čvrsta supstanca se suši 8 h na 80°C pod sniženim pritiskom da se dobije naslovljeno jedinjenje (18 g) kao bledo smeđa čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 4.51(2H,s), 7.56(1H,s), 13.00(1H,brs).

B) Izrada 6-bromo-2-(pirolidin-1-ilmetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0296] U smešu pirolidina (2.2 mL), kalijum karbonata (2.5 g), natrijum jodida (134 mg) i N,N-dimetilformamida (40 mL) se doda 6-bromo-2-(hlormetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on (2.5 g) i smeša se meša 30 min na 70°C. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem, filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom i ispere sa malom količinom etil acetata da se dobije naslovljeno jedinjenje (1.5 g) kao bledo žuta čvrsta supstanca. Filtrat se prečisti baznom hromatografijom na koloni silika gela (metanol/etil acetat) da se dobije naslovljeno jedinjenje (0.87 g) kao bledo žuta čvrsta supstanca. Ukupan prinos naslovljenog jedinjenja je 2.37 g.<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.65-1.77(4H,m), 2.52-2.60(4H,m), 3.57(2H,s), 7.60(1H,s), 12.24(1H,brs).

C) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(pirolidin-1-ilmetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0297] 6-Bromo-2-(pirolidin-1-ilmetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on (100 mg), terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilat (294 mg), natrijum karbonat (95 mg), 1,2-dimetoksietan (3.0 mL) i voda (1.5 mL) se stave u bocu a atmosfera u boci se prečisti sa argonom. Doda se [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleks (1:1) (26 mg) i atmosfera u boci se ponovo prečisti sa argonom. Reaktivni sistem se meša 3 h na 100°C, doda se 8M vodeni rastvor natrijum hidroksida (1 mL) i smeša se meša 30 min na 100°C. Nakon mešanja, smeša se ekstrahuje sa smešom etil acetat/tetrahidrofuran i ekstrakt se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti baznom hromatografijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan i metanol/etil acetat) a dobijena bledo žuta čvrsta supstanca se kristališe iz smeše metanol/etil acetat da se dobije naslovljeno jedinjenje (44 mg) kao bledo žuta čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.65-1.78(4H,m), 2.45(3H,s), 2.53-2.59(4H,m), 3.57(2H,s), 7.37(1H,s), 8.00(1H,brs), 11.84-13.16(2H,m).

MS (ESI+) : [M+H]<+>316.

MS(ESI+), nađeno: 316.

Primer 3

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-feniltieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada 6-bromo-2-feniltieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0298] Na isti način kao u Primeru 1, faza E, dobija se naslovljeno jedinjenje (111 mg) kao žuta čvrsta supstanca od 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (120 mg) i benzoil hlorida (0.063 mL), N,N-dimetilpiridin-4-amina (66 mg), piridina (1.0 mL) i N,N-dimetilformamida (2.0 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 7.50-7.61(3H,m), 7.70(1H,s), 8.07-8.14(2H,m), 12.87(1H,brs).

B) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-feniltieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0299] Na isti način kao u Primeru 1, faza F, dobija se naslovljeno jedinjenje (51 mg) kao bledo žuta čvrsta supstanca od 6-bromo-2-feniltieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (110 mg) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (331 mg), natrijum karbonata (107 mg), 1,2-dimetoksietana (3.0 mL) i vode (1.5 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (29 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.49(3H,brs), 7.49(1H,s), 7.51-7.65(3H,m), 7.94(0.6H,brs), 8.10-8.20(2H,m), 8.29(0.4H,brs), 12.65(1H,brs), 13.02(1H,brs).

Primer 4

Izrada 2-{[(3S)-3-fluoropirolidin-1-il]metil}-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada 6-bromo-2-{[(3S)-3-fluoropirolidin-1-il]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0300] Na isti način kao u Primeru 2, faza B, dobija se naslovljeno jedinjenje (197 mg) kao bledo žuta čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(hlormetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (200 mg) izrađenog u Primeru 2, faza A, (3S)-3-fluoropirolidin hidrohlorida (270 mg), kalijum karbonata (494 mg), natrijum jodida (10 mg) i N,N-dimetilformamida (4.0 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.75-2.28(2H,m), 2.44-2.54(1H,m), 2.67-2.98(3H,m), 3.61(2H,s), 4.96-5.48(1H,m), 7.62(1H,s), 12.42(1H,brs).

B) Izrada 2-{[(3S)-3-fluoropirolidin-1-il]metil}-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on

[0301] Na isti način kao u Primeru 2, faza C, dobija se naslovljeno jedinjenje (93 mg) kao bledo žuta čvrsta supstanca od 6-bromo-2-{[(3S)-3-fluoropirolidin-1-il]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (192 mg) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (392 mg), natrijum karbonata (139 mg), 1,2-dimetoksietana (4.0 mL) i vode (2.0 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihloriddihlorometan kompleksa (1:1) (47 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.75-2.30(2H,m), 2.45(3H,brs), 2.48-2.55(1H,m), 2.69-3.04(3H,m), 3.61(2H,s), 4.97-5.45(1H,m), 7.38(1H,s), 7.89(1H,brs), 12.19 (1H,brs), 12.99 (1H,brs).

Primer 5

Izrada 2-{[(3R)-3-fluoropirolidin-1-il]metil}-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada 6-bromo-2-{[(3R)-3-fluoropirolidin-1-il]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0302] Na isti način kao u Primeru 2, faza B, dobija se naslovljeno jedinjenje (192 mg) kao bledo žuta čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(hlormetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (200 mg) izrađenog u Primeru 2, faza A, (3R)-3-fluoropirolidin hidrohlorida (270 mg), kalijum karbonata (494 mg), natrijum jodida (10 mg) i N,N-dimetilformamida (4.0 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.75-2.26(2H,m), 2.41-2.51(1H,m), 2.67-2.97(3H,m), 3.60(2H,s), 5.03-5.37(1H,m), 7.61(1H,s), 12.44 (1H,brs).

B) Izrada 2-{[(3R)-3-fluoropirolidin-1-il]metil}-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0303] Na isti način kao u Primeru 2, faza C, dobija se naslovljeno jedinjenje (68 mg) kao bledo žuta čvrsta supstanca od 6-bromo-2-{[(3R)-3-fluoropirolidin-1-il]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (192 mg) i terc-butil 3-metil- 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (392 mg), natrijum karbonata (139 mg), 1,2dimetoksietana (4.0 mL) i vode (2.0 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (47 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.75-2.27(2H,m), 2.45(3H,brs), 2.48-2.57(1H,m), 2.69-3.01(3H,m), 3.61(2H,s), 5.03-5.38(1H,m), 7.38(1H,s), 7.97(1H,brs), 12.17(1H,brs), 12.98(1H,brs).

Primer 6

Izrada 2-{[(3R)-3-hidroksipirolidin-1-il]metil}-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada 6-bromo-2-{[(3R)-3-hidroksipirolidin-1-il]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0304] Na isti način kao u Primeru 2, faza B, dobija se naslovljeno jedinjenje (129 mg) kao bledo žuta čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(hlormetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (180 mg) izrađenog u Primeru 2, faza A, (3R)-pirolidin-3-ola (0.16 mL), kalijum karbonata (178 mg), natrijum jodida (9.7 mg) i N,N-dimetilformamida (3.0 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.40-1.67(1H,m), 1.88-2.11(1H,m), 2.39-2.49(2H,m), 2.65-2.80(2H,m), 3.58(2H,s), 4.11-4.22(1H,m), 4.85(1H,brs), 7.60(1H,s), 12.27(1H,brs).

B) Izrada 2-{[(3R)-3-hidroksipirolidin-1-il]metil}-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0305] Na isti način kao u Primeru 2, faza C, dobija se naslovljeno jedinjenje (20 mg) kao braon čvrsta supstanca od 6-bromo-2-{[(3R)-3-hidroksipirolidin-1-il]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (125 mg) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (257 mg), natrijum karbonata (91 mg), 1,2-dimetoksietana (3.0 mL) i vode (1.5 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (31 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.48-1.65(1H,m), 1.92-2.12(1H,m), 2.41-2.49(5H,m), 2.68-2.82(2H,m), 3.58(2H,s), 4.11-4.25(1H,m), 7.35(1H,s), 8.02(1H,brs), 12.22-13.36(2H,m).

Primer 7

Izrada 2-{[(3S)-3-hidroksipirolidin-1-il]metil}-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il) tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada 6-bromo-2-{[(3S)-3-hidroksipirolidin-1-il]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0306] Na isti način kao u Primeru 2, faza B, dobija se naslovljeno jedinjenje (99 mg) kao bledo žuta čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(hlormetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (180 mg) izrađenog u Primeru 2, faza A, (3S)-pirolidin-3-ola (0.16 mL), kalijum karbonata (178 mg), natrijum jodida (9.7 mg) i N,N-dimetilformamida (3.0 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.49-1.66(1H,m), 1.90-2.11(1H,m), 2.39-2.49(2H,m), 2.65-2.82(2H,m), 3.59(2H,s), 4.10-4.24(1H,m), 4.85(1H,brs), 7.60(1H,s), 12.11(1H,brs).

B) Izrada 2-{[(3S)-3-hidroksipirolidin-1-il]metil}-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0307] Na isti način kao u Primeru 2, faza C, dobija se naslovljeno jedinjenje (36 mg) kao braon čvrsta supstanca od 6-bromo-2-{[(3S)-3-hidroksipirolidin-1-il]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (95 mg) i terc-butil 3-metil- 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (195 mg), natrijum karbonata (69 mg), 1,2-dimetoksietana (2.0 mL) i vode (1.0 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (24 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.46-1.67(1H,m), 1.92-2.09(1H,m), 2.40-2.48(5H,m), 2.69-2.83(2H,m), 3.57(2H,s), 4.11-4.25(1H,m), 7.33(1H,s), 8.00(1H,brs), 12.49-13.20(2H,m).

Primer 8

Izrada 2-[(3,3-difluoropirolidin-1-il)metil]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada 6-bromo-2-[(3,3-difluoropirolidin-1-il)metil]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0308] Na isti način kao u Primeru 2, faza B, dobija se naslovljeno jedinjenje (162 mg) kao bledo žuta čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(hlormetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (180 mg) izrađenog u Primeru 2, faza A, 3,3-difluoro- pirolidin hidrohlorida (277 mg), kalijum karbonata (445 mg), natrijum jodida (9.7 mg) i N,N-dimetilformamida (3.0 mL).

<1>H-NMR (DMSO-d6) δ 2.13-2.36 (2H,m), 2.83(2H,t,J=7.0Hz), 3.04(2H,t,J=13.5Hz), 3.62(2H,s), 7.62(1H,s), 12.51(1H,brs).

B) Izrada 2-[(3,3-difluoropirolidin-1-il)metil]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0309] Na isti način kao u Primeru 2, faza C, dobija se naslovljeno jedinjenje (103 mg) kao bledo žuta čvrsta supstanca od 6-bromo-2-[(3,3-difluoropirolidin-1-il)metil]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (162 mg) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (314 mg), natrijum karbonata (111 mg), 1,2-dimetoksietana (3.0 mL) i vode (1.5 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (38 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.18-2.35(2H,m), 2.46 (3H,brs), 2.85 (2H,t,J=6.9Hz), 3.06 (2H,t,J=13.4Hz), 3.63 (2H,s), 7.39 (1H,s), 7.90 (0.6H,brs), 8.26 (0.4H,brs), 12.25 (1H,brs), 12.98 (1H,brs).

Primer 9

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(piperidin-1-ilmetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada 6-bromo-2-(piperidin-1-ilmetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0310] Na isti način kao u Primeru 2, faza B, dobija se naslovljeno jedinjenje (175 mg) kao bledo žuta čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(hlormetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (180 mg) izrađenog u Primeru 2, faza A, piperidina (0.19 mL), kalijum karbonata (178 mg), natrijum jodida (9.7 mg) i N,N-dimetilformamida (3.0 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.31-1.42(2H,m), 1.45-1.56(4H,m), 2.35-2.46(4H,m), 3.40(2H,s), 7.61(1H,s), 12.20(1H,brs).

B) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(piperidin-1-ilmetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

1

[0311] Na isti način kao u Primeru 2, faza C, dobija se naslovljeno jedinjenje (56 mg) kao bledo smeđa čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(piperidin-1-ilmetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (175 mg) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (361 mg), natrijum karbonata (128 mg), 1,2-dimetoksietana (4.0 mL) i vode (2.0 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (44 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.30-1.44(2H,m), 1.44-1.60(4H,m), 2.40-2.48(7H,m), 3.42(2H,s), 7.38(1H,s), 8.04(1H,brs), 12.61(2H,brs).

Primer 10

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(morfolin-4-ilmetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada 6-bromo-2-(morfolin-4-ilmetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0312] Na isti način kao u Primeru 2, faza B, dobija se naslovljeno jedinjenje (110 mg) kao bela čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(hlormetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (180 mg) izrađenog u Primeru 2, faza A, morfolina (0.17 mL), kalijum karbonata (178 mg), natrijum jodida (9.7 mg) i N,N-dimetilformamida (3.0 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.44-2.49(4H,m), 3.44(2H,s), 3.54-3.64(4H,m), 7.61(1H,s), 12.40(1H,brs).

B) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(morfolin-4-ilmetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0313] Na isti način kao u Primeru 2, faza C, dobija se naslovljeno jedinjenje (34 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(morfolin-4-ilmetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (110 mg) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (226 mg), natrijum karbonata (80 mg), 1,2-dimetoksietana (3.0 mL) i vode (1.5 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (27 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.39-2.48(7H,m), 3.45(2H,s), 3.54-3.64(4H,m), 7.38(1H,s), 7.88(0.6H,brs), 8.23(0.4H,brs), 12.11(1H,brs), 12.96(1H,brs).

2

Primer 11

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S)-pirolidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on monotrifluoroacetata

(A) Izrada terc-butil (2S)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)pirolidin-1-karboksilata

[0314] Rastvor 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (300 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D, 1-(terc-butoksikarbonil)-L-prolina (700 mg), O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,N’-tetrametiluronijum heksafluorofosfata (1.55 g) i N-etil-N-(1-metiletil)propan-2-amina (0.713 mL) u N,N-dimetilformamidu (8 mL) se meša 16 h na 90°C. U reaktivnu smešu se dodaju etil acetat (40 mL) i vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata (20 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (10 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (10 mL) i suše preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) da se dobije nerazdvojiva smeša tercbutil (2S)-2-[(5-bromo-2-karbamoiltiofen-3-il)karbamoil]pirolidin-1-karboksilata i 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (početni materijal) kao žuto ulje. U rastvor smeše terc-butil (2S)-2-[(5-bromo-2-karbamoiltiofen-3-il)karbamoil]pirolidin-1-karboksilata i 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida izrađenog kao gore u etanolu (6 mL) se doda 2M vodeni rastvor natrijum hidroksida (2.04 mL) i smeša se meša 4 h na 70°C. U reaktivnu smešu se dodaju 6M rastvor hlorovodonične kiseline (1 mL), etil acetat (20 mL) i vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata (10 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (5 mLx2).

Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (5 mL) i suše preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) da se dobije naslovljeno jedinjenje (175 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.12(9H,s, glavni), 1.37(9H,s, sporedni), 1.73-2.04(3H,m), 2.18-2.36(1H,m), 3.32-3.43(1H,m), 3.48-3.59(1H,m), 4.56(1H,dd,J=7.6,4.8Hz, glavni), 4.60-4.66(1H,m, sporedni), 7.60(1H,s, sporedni), 7.63(1H,s, glavni), 12.63(1H,brs, sporedni), 12.72(1H,brs, glavni). Odnos uočenih izomera je 2:1.

B) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S)-pirolidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on monotrifluoroacetata

[0315] terc-Butil (2S)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)pirolidin-1-karboksilat (173 mg), terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilat (266 mg), cezijum karbonat (282 mg), 1,2-dimetoksietan (5 mL) i voda (0.5 mL) se stave u bocu a atmosfera u boci se prečisti sa argonom. Doda se [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleks (1:1, 71 mg), atmosfera u boci se ponovo prečisti sa argonom i smeša se meša 2 h na 80°C. U reaktivnu smešu se dodaju etil acetat (20 mL) i voda (5 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (5 mLx2). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (5 mL) i suše preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) a predmet frakcije se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije smeša terc-butil 4-{2-[(2S)-1-(terc-butoksikarbonil)pirolidin-2-il]-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-6-il}-3-metil-1H-pirazol-1-karboksilata i terc-butil (2S)-2-[6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]pirolidin-1-karboksilata. Rastvor smeše terc-butil 4-{2-[(2S)-1-(terc-butoksikarbonil)pirolidin-2-il]-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-6-il}-3-metil-1H-pirazol-1-karboksilata i terc-butil (2S)-2-[6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]pirolidin-1-karboksilata izrađene kao gore u trifluorosirćetnoj kiselini (10 mL) se meša 1 h na sobnoj temperaturi i smeša se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se kristališe iz smeše metanol/etil acetat (1 mL/4 mL) da se dobije naslovljeno jedinjenje (129 mg) kao bledo smeđa čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.93-2.15(3H,m), 2.38-2.44(1H,m), 2.46(3H,brs), 3.35-3.50(2H,m), 4.66(1H,t,J=7.2Hz), 7.37(1H,s), 7.85-8.48(1H,m), 8.99(1H,brs), 9.52(1H,brs), 12.80(1H,brs), 13.06(1H,brs).

MS(ESI+) : [M+H]<+>302.

MS(ESI+), nađeno: 302.

Primer 12

4

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2R)-pirolidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on monotrifluoroacetata

A) Izrada terc-butil (2R)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)pirolidin-1-karboksilata

[0316] Na isti način kao u Primeru 11, faza A, dobija se naslovljeno jedinjenje (176 mg) kao bela čvrsta supstanca od 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (300 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D i 1-(terc-butoksikarbonil)-D-prolina (878 mg) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,N’-tetrametiluronijum heksafluorofosfata (2.06 g) i N- etil-N-(1-metiletil)propan-2-amina (0.95 mL) i N,N-dimetilformamida (8 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.12(9H,s, glavni), 1.37(9H,s, sporedni), 1.77-2.02(3H,m), 2.19-2.34(1H,m), 3.34-3.43(1H,m), 3.47-3.59(1H,m), 4.56(1H,dd,J=7.6,4.8Hz, glavni), 4.62(1H,dd,J=7.7,3.4Hz, sporedni), 7.59(1H,s, sporedni), 7.62(1H,s, glavni), 12.70(1H,brs). Odnos uočenih izomera je 2:1.

B) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2R)-pirolidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on monotrifluoroacetata

[0317] Na isti način kao u Primeru 11, faza B, dobija se naslovljeno jedinjenje (121 mg) kao bela čvrsta supstanca od terc-butil (2R)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)pirolidin-1-karboksilata (173 mg) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (266 mg) i cezijum karbonata (282 mg) i 1,2-dimetoksietana (5 mL) i vode (0.5 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (71 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.94-2.15(3H,m), 2.39-2.47(1H,m), 2.46(3H,s), 3.27-3.43(2H,m), 4.66(1H,t,J=7.1Hz), 7.37(1H,s), 8.09(1H,brs), 8.98(1H,brs), 9.55(1H,brs), 12.80(1H,brs).

Primer 13

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(2-pirolidin-1-iletil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada 6-bromo-2-(2-pirolidin-1-iletil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0318] U smešu 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (120 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D, trietilamina (0.083 mL) i tetrahidrofurana (3.0 mL) se doda 3-hlorpropanoil hlorid (0.057 mL) uz mešanje na sobnoj temperaturi. Nakon 10 min, doda se pirolidin (0.23 mL) i smeša se meša 10 min na sobnoj temperaturi. Reaktivni sistem se koncentruje pod sniženim pritiskom, u ostatak se doda 2M vodeni rastvor natrijum hidroksida (1.0 mL) i smeša se meša 1 h uz zagrevanje na 120°C. Smeša se ekstrahuje sa etil acetatom, ispere sa slanim rastvorom i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije naslovljeno jedinjenje (131 mg) kao bledo žuta čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.63-1.70(4H,m), 2.43-2.49(4H,m), 2.78-2.82(4H,m), 7.57(1H,s), 12.61(1H,brs).

B) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(2-pirolidin-1-iletil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0319] Na isti način kao u Primeru 1, faza F, dobija se naslovljeno jedinjenje (66 mg) kao bledo žuta čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(2-pirolidin-1-iletil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (125 mg) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (352 mg), natrijum karbonata (114 mg), 1,2-dimetoksietana (3.0 mL) i vode (1.5 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (31 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.51-1.78(4H,m), 2.40-2.49(7H,m), 2.75-2.89(4H,m), 7.34(1H,s), 8.02(1H,brs), 11.93-13.36(2H,m).

Primer 14

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(4-fenilpiperazin-1-il)metil]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada 6-bromo-2-[(4-fenilpiperazin-1-il)metil]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0320] Na isti način kao u Primeru 2, faza B, dobija se naslovljeno jedinjenje (180 mg) kao bledo žuta čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(hlormetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (180 mg) izrađenog u Primeru 2, faza A, 1-fenilpiperazina (0.29 mL), kalijum karbonata (178 mg), natrijum jodida (9.7 mg) i N,N-dimetilformamida (3.0 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.60-2.70(4H,m), 3.05-3.19(4H,m), 3.52(2H,s), 6.72-6.81(1H,m), 6.92(2H,d,J=7.9Hz), 7.13-7.26(2H,m), 7.63(1H,s), 12.36(1H,brs).

B) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(4-fenilpiperazin-1-il)metil]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0321] Na isti način kao u Primeru 2, faza C, dobija se naslovljeno jedinjenje (86 mg) kao bela čvrsta supstanca od 6-bromo-2-[(4-fenilpiperazin-1-il)metil]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (180 mg) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (410 mg), natrijum karbonata (133 mg), 1,2-dimetoksietana (3.0 mL) i vode (1.5 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (36 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.39-2.48(3H,m), 2.60-2.70(4H,m), 3.08-3.23(4H,m), 3.53(2H,s), 6.77(1H,t,J=7.2Hz), 6.92(2H,d,J=7.2Hz), 7.12-7.26(2H,m), 7.40(1H,s), 7.89(0.6H,brs), 8.26(0.4H,brs), 12.18(1H,brs), 13.00(1H,brs).

Primer 15

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(4-fenilpiperidin-1-il)metil]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada 6-bromo-2-[(4-fenilpiperidin-1-il)metil]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0322] Na isti način kao u Primeru 2, faza B, dobija se naslovljeno jedinjenje (241 mg) kao bledo žuta čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(hlormetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (240 mg) izrađenog u Primeru 2, faza A, 4-fenilpiperidina (415 mg), kalijum karbonata (237 mg), natrijum jodida (13 mg) i N,N-dimetilformamida (4.0 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.53-1.82(4H,m), 2.14-2.32(2H,m), 2.43-2.48(1H,m), 2.93-3.03(2H,m), 3.50(2H,s), 7.10-7.35(5H,m), 7.62(1H,s), 12.24(1H,brs).

B) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(4-fenilpiperidin-1-il)metil]tieno[3,2-d]pirimidin4(3H)-ona

[0323] Na isti način kao u Primeru 2, faza C, dobija se naslovljeno jedinjenje (138 mg) kao bledo žuta čvrsta supstanca od 6-bromo-2-[(4-fenilpiperidin-1-il)metil]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (240 mg) i terc-butil 3-metil- 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (549 mg), natrijum karbonata (178 mg), 1,2-dimetoksietana (4.0 mL) i vode (2.0 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (49 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.61-1.83(4H,m), 2.14-2.33(2H,m), 2.40-2.50(4H,m), 2.90-3.08(2H,m), 3.50(2H,s), 7.10-7.34(5H,m), 7.39(1H,s), 7.96(1H,brs), 12.08(1H,brs), 12.97(1H,brs).

Primer 16

Izrada 2-{[(2S)-2-(hidroksimetil)pirolidin-1-il]metil}-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada 6-bromo-2-{[(2S)-2-(hidroksimetil)pirolidin-1-il]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0324] Na isti način kao u Primeru 2, faza B, dobija se naslovljeno jedinjenje (112 mg) kao bledo žuta čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(hlormetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (180 mg) izrađenog u Primeru 2, faza A, (2S)-pirolidin-2-ilmetanola (0.19 mL), kalijum karbonata (178 mg), natrijum jodida (9.7 mg) i N,N-dimetilformamida (3.0 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.49-1.92(4H,m), 2.21-2.41(1H,m), 2.59-2.72(1H,m), 2.82-3.00(1H,m), 3.19-3.54(3H,m), 4.01 (1H,d,J=14.7Hz), 4.74(1H,brs), 7.60(1H,s), 12.04(1H,brs).

B) Izrada 2-{[(2S)-2-(hidroksimetil)pirolidin-1-il]metil}-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0325] Na isti način kao u Primeru 2, faza C, dobija se naslovljeno jedinjenje (90 mg) kao bledo žuta čvrsta supstanca od 6-bromo-2-{[(2S)-2-(hidroksimetil)pirolidin-1il]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (112 mg) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (300 mg), natrijum karbonata (78 mg), 1,2-dimetoksietana (3.0 mL) i vode (1.5 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (27 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.67-2.22(4H,m), 2.47(3H,s), 3.33-3.50(1H,m), 3.63-3.91(4H,m), 4.37-4.51(1H,m), 4.65-4.78(1H,m), 7.41(1H,s), 8.10(1H,s), 10.27 (1H,brs), 12.77(1H,brs).

Primer 17

Izrada 2-{[(2R)-2-(hidroksimetil)pirolidin-1-il]metil}-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada 6-bromo-2-{[(2R)-2-(hidroksimetil)pirolidin-1-il]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0326] Na isti način kao u Primeru 2, faza B, dobija se naslovljeno jedinjenje (122 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(hlormetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (180 mg) izrađenog u Primeru 2, faza A, (2R)-pirolidin-2-ilmetanola (0.19 mL), kalijum karbonata (178 mg), natrijum jodida (9.7 mg) i N,N-dimetilformamida (3.0 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.53-1.91(4H,m), 2.23-2.38(1H,m), 2.61-2.71(1H,m), 2.83-2.98(1H,m), 3.20-3.55(3H,m), 4.01(1H,d,J=14.7Hz), 4.33-5.67(1H,m), 7.60(1H,s), 11.13-12.68 (1H,m).

B) Izrada 2-{[(2R)-2-(hidroksimetil)pirolidin-1-il]metil}-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0327] Na isti način kao u Primeru 2, faza C, dobija se naslovljeno jedinjenje (96 mg) kao bledo žuta čvrsta supstanca od 6-bromo-2-{[(2R)-2-(hidroksimetil)pirolidin-1-il]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (122 mg) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (327 mg), natrijum karbonata (85 mg), 1,2-dimetoksietana (3.0 mL) i vode (1.5 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (29 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.69-2.23(4H,m), 2.47(3H,s), 3.31-3.52(1H,m), 3.63-3.94(4H,m), 4.35-4.54(1H,m), 4.62-4.82(1H,m), 7.40(1H,s), 8.09(1H,s), 10.29(1H,brs), 12.76(1H,brs).

Primer 18

Izrada 2-{[(3S)-3-metoksipirolidin-1-il]metil}-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada 6-bromo-2-{[(3S)-3-metoksipirolidin-1-il]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0328] Na isti način kao u Primeru 2, faza B, dobija se naslovljeno jedinjenje (152 mg) kao bledo žuta čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(hlormetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (180 mg) izrađenog u Primeru 2, faza A, (3S)-3-metoksipirolidin hidrohlorida (265 mg), kalijum karbonata (445 mg), natrijum jodida (9.7 mg) i N,N-dimetilformamida (3.0 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.59-1.76(1H,m), 1.90-2.07(1H,m), 2.52-2.59(2H,m), 2.60-2.71(1H,m), 2.75-2.85(1H,m), 3.15(3H,s), 3.55(2H,s), 3.82-3.95 (1H,m), 7.61(1H,s), 12.36(1H,brs).

B) Izrada 2-{[(3S)-3-metoksipirolidin-1-il]metil}-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0329] Na isti način kao u Primeru 2, faza C, dobija se naslovljeno jedinjenje (56 mg) kao bledo žuta čvrsta supstanca od 6-bromo-2-{[(3S)-3-metoksipirolidin-1-il]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (150 mg) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (403 mg), natrijum karbonata (105 mg), 1,2-dimetoksietana (4.0 mL) i vode (2.0 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihloriddihlormetan kompleksa (1:1) (36 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.60-1.74(1H,m), 1.92-2.07(1H,m), 2.45(3H,s), 2.52-2.61(2H,m), 2.63-2.73(1H,m), 2.77-2.87(1H,m), 3.16(3H,s), 3.56(2H,s), 3.81-4.02(1H,m), 7.38(1H,s), 7.97(1H,brs), 12.10(1H,brs), 12.96(1H,brs).

Primer 19

Izrada 2-{[(3R)-3-metoksipirolidin-1-il]metil}-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-

1

d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada 6-bromo-2-{[(3R)-3-metoksipirolidin-1-il]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0330] Na isti način kao u Primeru 2, faza B, dobija se naslovljeno jedinjenje (150 mg) kao bledo žuta čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(hlormetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (180 mg) izrađenog u Primeru 2, faza A, (3R)-3-metoksipirolidin hidrohlorida (265 mg), kalijum karbonata (445 mg), natrijum jodida (9.7 mg) i N,N-dimetilformamida (3.0 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.57-1.74(1H,m), 1.91-2.07(1H,m), 2.52-2.59(2H,m), 2.61-2.71(1H,m), 2.75-2.85(1H,m), 3.15(3H,s), 3.55(2H,s), 3.81-3.96 (1H,m), 7.61(1H,s), 12.36(1H,brs).

B) Izrada 2-{[(3R)-3-metoksipirolidin-1-il]metil}-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0331] Na isti način kao u Primeru 2, faza C, dobija se naslovljeno jedinjenje (71 mg) kao bledo žuta čvrsta supstanca od 6-bromo-2-{[(3R)-3-metoksipirolidin-1-il]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (150 mg) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (403 mg), natrijum karbonata (105 mg), 1,2-dimetoksietana (4.0 mL) i vode (2.0 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (36 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.60-1.74(1H,m), 1.92-2.07(1H,m), 2.45(3H,s), 2.52-2.61(2H,m), 2.62-2.72(1H,m), 2.77-2.86(1H,m), 3.16(3H,s), 3.56(2H,s), 3.81-3.97 (1H,m), 7.38(1H,s), 8.00(1H,brs), 12.21(1H,brs), 12.92(1H,brs).

Primer 20

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(1-pirolidin-1-iletil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada 6-bromo-2-(1-pirolidin-1-iletil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0332] U smešu 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (221 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D, trietilamina (0.15 mL) i tetrahidrofurana (5.0 mL) se doda 2-bromopropanoilhlorid

1 1

(0.11 mL) uz mešanje na sobnoj temperaturi. Nakon 10 min, doda se pirolidin (0.42 mL) i smeša se meša 1 h na 70°C. Reaktivni sistem se koncentruje pod sniženim pritiskom, u ostatak se doda 2M vodeni rastvor natrijum hidroksida (1.0 mL) i smeša se meša 2 h uz zagrevanje na 120°C. Smeša se ekstrahuje sa etil acetatom i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti baznom hromatografijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan i metanol/etil acetat) da se dobije naslovljeno jedinjenje (276 mg) kao bledo žuta čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.38(3H,d,J=6.8Hz), 1.69(4H,brs), 2.40-2.48(2H,m), 2.55-2.66(2H,m), 3.49(1H,q,J=6.8Hz), 7.59(1H,s), 12.14(1H,brs).

B) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(1-pirolidin-1-iletil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0333] Na isti način kao u Primeru 2, faza C, dobija se naslovljeno jedinjenje (145 mg) kao bledo smeđa čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(1-pirolidin-1-iletil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (270 mg) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (761 mg), natrijum karbonata (198 mg), 1,2-dimetoksietana (6.0 mL) i vode (3.0 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (67 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.39(3H,d,J=6.8Hz), 1.64-1.75(4H,m), 2.40-2.48(5H,m), 2.55-2.65(2H,m), 3.49(1H,q,J=6.8Hz), 7.37(1H,s), 8.02(1H,brs), 12.00-13.09(2H,m).

Primer 21

Izrada 6-(5-etil-1H-pirazol-4-il)-2-(pirolidin-1-ilmetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada N,N-dimetil-1H-pirazol-1-sulfonamida

[0334] Natrijum hidrid (50%, 8.46 g) se doda u rastvor pirazola (12 g) u tetrahidrofuranu (200 mL) uz mešanje na 0°C. Nakon 20 min, u kapima se doda dimetilsulfamoil hlorid (17 mL) i smeša se meša 1 h na istoj temperaturi i ostavi da se zagreva na sobnu temperaturu u toku 1 h. Reaktivni sistem se sipa u zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata i smeša se

1 2

ekstrahuje sa etil acetatom i suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) da se dobije naslovljeno jedinjenje (25.3 g) kao bezbojno ulje.

<1>H-NMR(300MHz,CDCl3) δ 2.95(6H,s), 6.40(1H,m), 7.75(1H,m), 7.99(1H,d,J=2.7Hz).

B) Izrada 5-etil-N,N-dimetil-1H-pirazol-1-sulfonamida

[0335] Rastvor 1.6M n-butillitijum/heksan (99 mL) se na -78°C u kapima doda u izmešani rastvor (200 mL) N,N-dimetil-1H-pirazol-1-sulfonamida (25.3 g) u tetrahidrofuranu. Nakon 30 min od završetka dodavanja u kapima, u kapima se doda jodoetan (12.8 mL). Smeša se meša na istoj temperaturi 30 min i reaktivni sistem se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu. Nakon 1 h, doda se tetrahidrofuran (200 mL) da omogući mešanje reaktivnog sistema i smeša se meša još 2 h. Reaktivni sistem se sipa u zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata (600 mL) i smeša se ekstrahuje sa etil acetatom (400 mLx2) i suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se podvrgne hromatografiji na koloni silika gela (etil acetat/heksan) a predmet frakcije se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije naslovljeno jedinjenje (19.8 g) kao bezbojno ulje.

<1>H-NMR(300MHz,CDCl3) δ 1.30(3H,t,J=7.8Hz), 2.94(2H,dd,J=15.0,7.5Hz), 3.03(6H,s), 6.13(1H,brs), 7.55(1H,brs).

C) Izrada 4-bromo-5-etil-N,N-dimetil-1H-pirazol-1-sulfonamida

[0336] 1-Bromopirolidin-2,5-dion (20.8 g) se na sobnoj temperaturi doda u izmešani rastvor (300 mL) 5-etil-N,N-dimetil-1H-pirazol-1-sulfonamida (19.8 g) u tetrahidrofuranu. Reaktivni sistem se zagreje na 50°C, meša 2 h i koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se sipa u zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata i smeša se ekstrahuje sa etil acetatom i suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) da se dobije naslovljeno jedinjenje (26.2 g) kao žuto ulje.<1>H-NMR(300MHz,CDCl3) δ 1.24(3H,t,J=7.5Hz), 2.97(2H,dd,J=15.0Hz,7.8Hz), 3.06(6H,s), 7.54(1H,s).

1

D) Izrada 5-etil-N,N-dimetil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-sulfonamida

[0337] 4-Bromo-5-etil-N,N-dimetil-1H-pirazol-1-sulfonamid (13.0 g), 4,4,4’,4’,5,5,5’,5’-oktametil-2,2’-bi-1,3,2-dioksaborolan (12.3 g), kalijum acetat (13.6 g) i 1,2-dimetoksietan (300 mL) se stave u bocu a atmosfera u boci se prečisti sa argonom. Doda se [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleks (1:1, 3.76 g), atmosfera u boci se ponovo prečisti sa argonom i smeša se meša na 90°C u toku noći.

Reaktivni sistem se ostavi da se ohladi na sobnu temperaturu. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. U ostatak se doda smeša etil acetata i heksana (1:1) a nerastvorni materijal se ponovo ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) da se dobije naslovljeno jedinjenje (6.32 g) kao bela čvrsta supstanca.<1>H-NMR(300MHz,CDCl3) δ 1.25(3H,t,J=7.5Hz), 1.31(12H,s), 3.03(6H,s), 3.17(2H,dd,J=15.0,7.5Hz), 7.75(1H,s).

E) Izrada 6-(5-etil-1H-pirazol-4-il)-2-(pirolidin-1-ilmetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0338] 6-Bromo-2-(pirolidin-1-ilmetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on (100 mg), 5-etil-N,N-dimetil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-sulfonamid (210 mg), cezijum karbonat (311 mg), 1,2-dimetoksietan (5 mL) i voda (1 mL) se stave u bocu a atmosfera u boci se prečisti sa argonom. Doda se [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleks (1:1) (26.0 mg), atmosfera u bocu se ponovo prečisti sa argonom i smeša se meša 3 h na 90°C. Reaktivni sistem se ostavi da se ohladi na sobnu temperaturu i dodaju se natrijum karbonat (169 mg), 5-etil-N,N-dimetil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-sulfonamid (210 mg), voda (1 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleks (1:1) (26.0 mg). Atmosfera u boci se ponovo prečisti sa argonom i smeša se meša na 90°C u toku noći. Reaktivni sistem se sipa u slani rastvor i smeša se ekstrahuje sa smešom etil acetata i tetrahidrofurana (3:1) i suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se

1 4

podvrgne baznoj hromatografiji na koloni silika gela (metanol/etil acetat) a predmet frakcije se koncentruje pod sniženim pritiskom. U ostatak se dodaju rastvor 1M hlorovodoničnae kiseline/dietiletar (5 mL) i metanol (5 mL) i smeša se meša 2 h na 60°C. Reaktivni sistem se ostavi da se ohladi na sobnu temperaturu i precipitat se sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (95.9 mg) kao bela čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.26(3H,t,J=7.5Hz), 1.99(4H,m), 2.84-2.92(2H,m), 3.17-3.25(2H,m), 3.64-3.77(2H,m), 4.51(2H,s), 7.38 (1H,s), 8.09(1H,s), 10.61(1H,brs), 12.80(1H,brs).

Primer 22

Izrada 2-[(2S)-4,4-difluoropirolidin-2-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada terc-butil (2S)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-4,4-difluoropirolidin-1-karboksilata

[0339] Na isti način kao u Primeru 11, faza A, dobija se naslovljeno jedinjenje (286 mg) kao bledo žuta čvrsta supstanca od 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (250 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D i 1-(terc-butoksikarbonil)- 4,4-difluoro-L-prolina (568 mg) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,N’-tetrametiluronijum heksafluorofosfata (1.29 g) i N-etil-N-(1-metiletil)propan-2-amina (0.592 mL) i N,N-dimetilformamida (5 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.14(9H,s, glavni), 1.39(9H,s, sporedni), 2.55-2.71(1H,m), 2.86-2.97(1H,m), 3.80-4.03(2H,m), 4.74-4.90(1H,m), 7.60(1H,s, sporedni), 7.63(1H,s, glavni), 12.84(1H,brs). Odnos uočenih izomera je 3:2.

B) Izrada 2-[(2S)-4,4-difluoropirolidin-2-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0340] Na isti način kao u Primeru 11, faza B, dobija se naslovljeno jedinjenje (163 mg) kao bela čvrsta supstanca od terc-butil (2S)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-4,4-difluoropirolidin-1-karboksilata (286 mg) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (404 mg) i cezijum karbonata (427 mg) i 1,2-dimetoksietana (7 mL) i vode (0.7 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II)

1

dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (107 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.46(3H,s), 2.75-2.95(1H,m), 3.01-3.21(1H,m), 3.89(2H,t,J=12.3Hz), 5.05(1H,t,J=8.5Hz), 7.41(1H,s), 8.11(1H,s), 10.32(1H,brs), 12.87(1H,brs).

Primer 23

Izrada 2-[(2S,4R)-4-fluoropirolidin-2-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada terc-butil (2S,4R)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-4-fluoropirolidin-1-karboksilata

[0341] Na isti način kao u Primeru 11, faza A, dobija se naslovljeno jedinjenje (239 mg) kao bledo žuta čvrsta supstanca od 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (250 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D i (4R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-fluoro-L-prolina (568 mg) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,N’-tetrametiluronijum heksafluorofosfata (1.29 g) i N-etil-N-(1-metiletil)propan-2-amina (0.592 mL) i N,N-dimetilformamida (5 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.11(9H,s, glavni), 1.37(9H,s, sporedni), 2.09-2.35(1H,m), 2.54-2.67(1H,m), 3.63-3.86(2H,m), 4.64-4.76(1H,m), 5.38(1H,d,J=53.4Hz), 7.58(1H,s, sporedni), 7.61(1H,s, glavni), 12.79(1H,brs). Odnos uočenih izomera je 2:1.

B) Izrada 2-[(2S,4R)-4-fluoropirolidin-2-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0342] Na isti način kao u Primeru 11, faza B, dobija se naslovljeno jedinjenje (139 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca od terc-butil (2S,4R)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-4-fluoropirolidin-1-karboksilata (237 mg) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (348 mg) i cezijum karbonata (368 mg) i 1,2-dimetoksietana (5 mL) i vode (0.5 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferrocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (92.3 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.29-2.45(1H,m), 2.46(3H,s), 2.76-2.93(1H,m), 3.50-3.70(2H,m), 4.80-4.96(1H,m), 5.45-5.69(1H,m), 7.37(1H,s), 8.10(1H,s), 9.38(1H,brs), 10.44(1H,brs), 12.85(1H,brs).

1

Primer 24

Izrada 2-[(2S,4S)-4-fluoropirolidin-2-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada terc-butil (2S,4S)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-4-fluoropirolidin-1-karboksilata

[0343] Na isti način kao u Primeru 11, faza A, dobija se naslovljeno jedinjenje (106 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca od 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (250 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D i (4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-fluoro-L-prolina (568 mg) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,N’-tetrametiluronijum heksafluorofosfata (1.29 g) i N-etil-N-(1-metiletil)propan-2-amina (0.592 mL) i N,N-dimetilformamida (5 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.18(9H,s, glavni), 1.42(9H,s, sporedni), 2.19-2.38(1H,m), 2.55-2.82(1H,m), 3.57-3.83(2H,m), 4.71-4.86(1H,m), 5.16-5.41(1H,m), 7.59(1H,s, sporedni), 7.62(1H,s, glavni), 12.61(1H,brs). Odnos uočenih izomera je 2:1.

B) Izrada 2-[(2S,4S)-4-fluoropirolidin-2-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0344] Na isti način kao u Primeru 11, faza B, dobija se naslovljeno jedinjenje (102 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca od terc-butil (2S,4S)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-4-fluoropirolidin-1-karboksilata (180 mg) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (265 mg) i

cezijum karbonata (281 mg) i 1,2-dimetoksietana (5 mL) i vode (0.5 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (70.3 mg).<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.46(3H,s), 2.71-2.96(1H,m), 3.47-3.77(3H,m), 4.87(1H,brs), 5.37-5.61(1H,m), 7.37(1H,s), 8.10(1H,s), 9.40(1H,brs), 10.34(1H,brs), 12.87(1H,brs).

Primer 25

Izrada 2-[(3,3-difluoroazetidin-1-il)metil]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-

1

4(3H)-ona

[0345] Na isti način kao u Primeru 2, faza B i faza C, dobija se naslovljeno jedinjenje (93 mg) kao bela čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(hlormetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (160 mg) izrađenog u Primeru 2, faza A i 3,3- difluoroazetidinhidrohlorida (200 mg) i kalijum karbonata (158 mg) i natrijum jodida (8.6 mg) i N,N-dimetilacetamida (4.0 mL) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (353 mg) i cezijum karbonata (373 mg) i 1,2-dimetoksietana (4.0 mL) i vode (1 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (26 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.42-2.47(3H,m), 3.71-3.82(6H,m), 7.36-7.38(1H,m), 7.88(0.6H,brs), 8.25(0.4H,brs), 12.28(1H,brs), 12.97(1H,brs).

Primer 26

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-{[(3R)-3-metilpirolidin-1-il]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada 6-bromo-2-{[(3R)-3-metilpirolidin-1-il]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0346] Na isti način kao u Primeru 2, faza B, dobija se naslovljeno jedinjenje (171 mg) kao bledo žuta čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(hlormetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (180 mg) izrađenog u Primeru 2, faza A, (3R)-3-metilpirolidin hidrohlorida (235 mg), kalijum karbonata (445 mg), natrijum jodida (9.7 mg) i N,N-dimetilformamida (3.0 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 0.98(3H,d,J=6.6Hz), 1.17-1.37(1H,m), 1.85-2.02(1H,m), 2.03-2.26(2H,m), 2.53-2.61(1H,m), 2.62-2.71(1H,m), 2.77-2.86 (1H,m), 3.55(2H,s), 7.59(1H,s), 12.30(1H,brs).

B) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-{[(3R)-3-metilpirolidin-1-il]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0347] Na isti način kao u Primeru 2, faza C, dobija se naslovljeno jedinjenje (36 mg) kao bledo smeđa čvrsta supstanca od 6-bromo-2-{[(3R)-3-metilpirolidin-1-il]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (170 mg) i terc-butil 3-metil- 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-

1

dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (479 mg), natrijum karbonata (124 mg), 1,2-dimetoksietana (4.0 mL) i vode (2.0 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (42 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 0.98(3H,d,J=6.6Hz), 1.21-1.37(1H,m), 1.87-2.02(1H,m), 2.06-2.26(2H,m), 2.45(3H,brs), 2.53-2.61(1H,m), 2.62-2.73(1H,m), 2.77-2.89(1H,m), 3.55(2H,s), 7.37(1H,s), 8.03(1H,brs), 12.13-12.91(2H,m).

Primer 27

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-{[(3S)-3-metilpirolidin-1-il]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada 6-bromo-2-{[(3S)-3-metilpirolidin-1-il]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0348] Na isti način kao u Primeru 2, faza B, dobija se naslovljeno jedinjenje (186 mg) kao bledo žuta čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(hlormetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (180 mg) izrađenog u Primeru 2, faza A, (3S)-3-metilpirolidin hidrohlorida (235 mg), kalijum karbonata (445 mg), natrijum jodida (9.7 mg) i N,N-dimetilformamida (3.0 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 0.98(3H,d,J=6.6Hz), 1.21-1.36(1H,m), 1.86-2.03(1H,m), 2.05-2.25(2H,m), 2.53-2.61(1H,m), 2.61-2.74(1H,m), 2.76-2.88(1H,m), 3.55(2H,s), 7.59(1H,s), 12.19(1H,brs).

B) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-{[(3S)-3-metilpirolidin-1-il]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0349] Na isti način kao u Primeru 2, faza C, dobija se naslovljeno jedinjenje (37 mg) kao bledo smeđa čvrsta supstanca od 6-bromo-2-{[(3S)-3-metilpirolidin-1-il]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (180 mg) i terc-butil 3-metil- 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (507 mg), natrijum karbonata (132 mg), 1,2-dimetoksietana (4.0 mL) i vode (2.0 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (45 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 0.98(3H,d,J=6.6Hz), 1.20-1.37(1H,m), 1.88-2.03(1H,m), 2.05-2.25(2H,m), 2.45(3H,s), 2.53-2.62(1H,m), 2.62-2.72(1H,m), 2.78-2.86(1H,m), 3.55(2H,s),

1

7.37(1H,s), 8.02(1H,brs), 11.97-13.06(2H,m).

Primer 28

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-{[3-(trifluorometil)pirolidin-1-il]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada 6-bromo-2-{[3-(trifluorometil)pirolidin-1-il]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0350] Na isti način kao u Primeru 2, faza B, dobija se naslovljeno jedinjenje (220 mg) kao bledo smeđa čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(hlormetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (200 mg) izrađenog u Primeru 2, faza A i 3-trifluorometilpirolidin hidrohlorida (377 mg) i trietilamina (0.595 mL) i natrijum jodida (10.7 mg) i N,N-dimetilformamida (4.0 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.70-1.84(1H,m), 1.95-2.10(1H,m), 2.55-2.72(3H,m), 2.91(1H,t,J=9.3Hz), 3.02-3.19(1H,m), 3.58(2H,s), 7.58(1H,s), 12.37(1H,brs).

B) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-{[3-(trifluorometil)pirolidin-1-il]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0351] Na isti način kao u Primeru 2, faza C, dobija se naslovljeno jedinjenje (57.3 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca od 6-bromo-2-{[3-(trifluorometil)pirolidin-1-il]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (218 mg) i terc-butil 3- metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (351 mg), cezijum karbonata (371 mg), 1,2-dimetoksietana (5.0 mL) i vode (0.5 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (93 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.71-1.86(1H,m), 1.96-2.12(1H,m), 2.45(3H,s), 2.57-2.78(3H,m), 2.93(1H,t,J=9.2Hz), 3.01-3.21(1H,m), 3.60(2H,s), 7.38(1H,s), 7.70-8.39(1H,m), 12.16(1H,brs), 12.97(1H,brs).

Primer 29

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-{[2-(trifluorometil)pirolidin-1-il]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

11

A) Izrada 6-bromo-2-{[2-(trifluorometil)pirolidin-1-il]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0352] Na isti način kao u Primeru 2, faza B, dobija se naslovljeno jedinjenje (35.8 mg) kao bledo žuta čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(hlormetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (200 mg) izrađenog u Primeru 2, faza A i 2-trifluorometilpirolidina (0.247 mL) i trietilamina (0.298 mL) i natrijum jodida (10.7 mg) i N,N-dimetilformamida (4.0 mL) .

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.68-1.89(3H,m), 2.02-2.17(1H,m), 2.75-2.86(1H,m), 3.03-3.13(1H,m), 3.78-3.85(1H,m), 3.87(2H,d,J=3.8Hz), 7.57(1H,s), 12.42(1H,brs).

B) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-{[2-(trifluorometil)pirolidin-1-il]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0353] Na isti način kao u Primeru 2, faza C, dobija se naslovljeno jedinjenje (8.3 mg) kao bela čvrsta supstanca od 6-bromo-2-{[2-(trifluorometil)pirolidin-1-il]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (34 mg) i terc-butil 3-metil- 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (54.8 mg), cezijum karbonata (58.0 mg), 1,2-dimetoksietana (3.0 mL) i vode (0.3 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (14.5 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.66-1.92(3H,m), 2.06-2.23(1H,m), 2.46(3H,s), 2.75-2.87(1H,m), 3.06-3.16(1H,m), 3.80-3.89(1H,m), 3.90(2H,s), 7.39(1H,s), 7.85-8.32(1H,m), 12.16(1H,brs), 12.99(1H,brs).

Primer 30

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S,4R)-4-fenoksipirolidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada terc-butil (2S,4R)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-4-fenoksipirolidin-1-karboksilata

[0354] Rastvor (4R)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-fenoksi-L-prolina (1.04 g), O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,N’-tetrametiluronijum heksafluorofosfata (1.29 g) i N-etil-N-(1metiletil)propan-2-amina (0.692 mL) u N,N-dimetilformamidu (5 mL) se meša 30 min na sobnoj temperaturi. U reaktivnu smešu se doda 3-amino-5- bromotiofen-2-karboksamid (250 mg) izrađen u Primeru 1, faza D i smeša se meša 1.5 h na 90°C. Reaktivna smeša se koncentruje pod sniženim pritiskom, u dobijeni ostatak se dodaju etil acetat (20 mL) i vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata (10 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (5 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (5 mL) i suše preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) da se dobije nerazdvojiva smeša terc-butil (2S,4R)-2-[(5-bromo-2-karbamoiltiofen-3-il)karbamoil]-4-fenoksipirolidin-1-karboksilata i nečistoća sa neodređenom strukturom kao bledo žuta čvrsta supstanca. U rastvor nerazdvojive smeše terc-butil (2S,4R)-2-[(5-bromo-2-karbamoiltiofen-3-il)karbamoil]-4-fenoksipirolidin-1-karboksilata izrađenog kao gore i nečistoća sa neodređenom strukturom u etanolu (5 mL) se doda 2M vodeni rastvor natrijum hidroksida (1.70 mL) i smeša se meša 2 h na 70°C. U reaktivnu smešu se doda 6M rastvor hlorovodonične kiseline (0.60 mL) i precipitirana čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem i ispere po redu sa vodom (5 mL), etanolom (5 mL) i dietil etrom (5 mL) da se dobije naslovljeno jedinjenje (440 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.11(9H,s, glavni), 1.34(9H,s, sporedni), 2.24-2.37(1H,m), 2.43-3.58(1H,m), 3.56-3.67(1H,m), 3.79-3.91(1H,m), 4.67-4.81(1H,m), 5.07-5.15(1H,m), 6.93-7.02(3H,m), 7.27-7.37(2H,m), 7.60(1H,s, sporedni), 7.63(1H,s, glavni), 12.77(1H,brs). Odnos uočenih izomera je 2:1.

B) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S,4R)-4-fenoksipirolidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0355] Na isti način kao u Primeru 11, faza B, dobija se naslovljeno jedinjenje (310 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca od terc-butil (2S,4R)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-4-fenoksipirolidin-1-karboksilata (450 mg) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (564 mg), cezijum karbonata (596 mg), 1,2-dimetoksietana (10 mL) i vode (1.0 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (149 mg).<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.36-2.46(1H,m), 2.47(3H,s), 2.79(1H,dd,J=14.0,6.8Hz), 3.42-3.54(1H,m), 3.78-3.92(1H,m), 4.84-4.97(1H,m), 5.28(1H,t,J=4.5Hz), 6.99-7.08(3H,m), 7.327.38(2H,m), 7.39(1H,s), 8.11(1H,s), 9.42(1H,brs), 10.67(1H,brs), 12.83(1H,brs).

Primer 31

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-morfolin-4-iltieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada 6-bromo-2-morfolin-4-iltieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0356] Smeša metil 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksilata (200 mg) izrađenog u Primeru 1, faza C, morfolin-4-karbonitrila (0.17 mL) i rastvora 4M hlorovodonične kiseline/ciklopentilmetiletar (3.0 mL) se meša 4 h na 110°C. Reaktivni sistem se koncentruje pod sniženim pritiskom i u ostatak se doda zasićen vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata. Precipitat se sakupi filtriranjem i ispere sa vodom. Dobijena bledo braon čvrsta supstanca se ispere sa smešom rastvarača etil acetat/heksan (1:1) da se dobije naslovljeno jedinjenje (144 mg) kao bledo žuta čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 3.51-3.60(4H,m), 3.61-3.71(4H,m), 7.29(1H,s), 11.50 (1H,brs).

B) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-morfolin-4-iltieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0357] Na isti način kao u Primeru 2, faza C, dobija se naslovljeno jedinjenje (81 mg) kao bledo smeđa čvrsta supstanca od 6-bromo-2-morfolin-4-iltieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (140 mg) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (410 mg), natrijum karbonata (106 mg), 1,2-dimetoksietana (3.0 mL) i vode (1.5 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (36 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.33-2.47(3H,m), 3.50-3.61(4H,m), 3.61-3.72(4H,m), 7.11(1H,s), 7.83(0.6H,brs), 8.19(0.4H,brs), 11.35 (1H,brs), 12.79-13.07 (1H,m).

Primer 32

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(tetrahidrofuran-2-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada tetrahidrofuran-2-karbonilhlorida

11

[0358] Smeša tetrahidrofuran-2-karboksilne kiseline (0.19 mL) i etandioildihlorida (0.42 mL) se meša 18 h na sobnoj temperaturi. Reaktivni sistem se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije naslovljeno jedinjenje (241 mg) kao bledo žuta tečnost.

<1>H-NMR(CDCl3) δ 2.14-2.46(2H,m), 3.50-3.63(1H,m), 3.77-4.06(3H,m), 4.06-4.16(1H,m).

B) Izrada 6-bromo-2-(tetrahidrofuran-2-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0359] U smešu 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (120 mg), izrađenog u Primeru 1, faza D, trietilamina (0.083 mL) i tetrahidrofurana (3.0 mL) se uz mešanje doda tetrahidrofuran-2-karbonilhlorid (80 mg), na sobnoj temperaturi. Reaktivna smeša se meša 10 min i reaktivni sistem se koncentruje pod sniženim pritiskom. U ostatak se doda 2M vodeni rastvor natrijum hidroksida (1.0 mL) i smeša se meša 2 h uz zagrevanje na 120°C. Smeša se ekstrahuje sa etil acetatom, ispere sa slanim rastvorom i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije naslovljeno jedinjenje (160 mg) kao bledo žuta čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.04-2.33(2H,m), 3.22-3.34(1H,m), 3.67-3.89(3H,m), 3.93-4.01(1H,m), 7.32(1H,s).

C) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(tetrahidrofuran-2-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0360] Na isti način kao u Primeru 2, faza C, dobija se naslovljeno jedinjenje (59 mg) kao bledo smeđa čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(tetrahidrofuran-2-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (160 mg) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (491 mg), natrijum karbonata (128 mg), 1,2-dimetoksietana (3.0 mL) i vode (1.5 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (43 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.18-2.31(2H,m), 2.38-2.48(3H,m), 3.38-3.52(1H,m), 3.72-3.94(3H,m), 3.99-4.06(1H,m), 7.38(1H,s), 7.89(0.6H,brs), 8.25(0.4H,brs), 12.38(1H,brs), 12.87-13.06(1H,m).

Primer 33

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-{[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]metil}tieno[3,2-d]pirimidin4(3H)-ona

A) Izrada 6-bromo-2-{[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0361] Na isti način kao u Primeru 2, faza B, dobija se naslovljeno jedinjenje (205 mg) kao žuta čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(hlormetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (180 mg), izrađenog u Primeru 2, faza A, (2R)-2-metilpirolidin hidrohlorida (235 mg), kalijum karbonata (445 mg), natrijum jodida (9.7 mg) i N,N-dimetilformamida (3.0 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.04(3H,d,J=6.0Hz), 1.28-1.42(1H,m), 1.56-1.74(2H,m), 1.80-1.97(1H,m), 2.21-2.35(1H,m), 2.52-2.57(1H,m), 2.88-3.04(1H,m), 3.32(1H,d,J=14.2Hz), 3.81(1H,d,J=14.2Hz), 7.61(1H,s), 12.18(1H,brs).

B) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-{[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0362] Na isti način kao u Primeru 2, faza C, dobija se naslovljeno jedinjenje (13 mg) kao žuta čvrsta supstanca od 6-bromo-2-{[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (200 mg) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (564 mg), natrijum karbonata (146 mg), 1,2-dimetoksietana (4.0 mL) i vode (2.0 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (50 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.06(3H,d,J=6.0Hz), 1.27-1.47(1H,m), 1.57-1.76(2H,m), 1.85-2.00(1H,m), 2.24-2.37(1H,m), 2.45(3H,s), 2.52-2.60(1H,m), 2.93-3.04(1H,m), 3.33(1H,d,J=14.0Hz), 3.81(1H,d,J=14.0Hz), 7.37(1H,s), 8.03(1H,brs), 11.92-13.20(2H,m).

Primer 34

Izrada 2-(etoksimetil)-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada etoksiacetilhlorida

[0363] Smeša etoksisirćetne kiseline (0.19 mL) i etandioildihlorida (0.42 mL) se meša 18 h na sobnoj temperaturi. Reaktivni sistem se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije

11

naslovljeno jedinjenje (220 mg) kao bledo žuta tečnost.

<1>H-NMR(CDCl3) δ 1.26 (3H, t, J=7.0Hz), 3.65(2H,q, J=7.0Hz), 4.41(2H,s).

B) Izrada 6-bromo-2-(etoksimetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0364] Na isti način kao u Primeru 32, faza B, dobija se naslovljeno jedinjenje (140 mg) kao bledo žuta čvrsta supstanca od 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (120 mg), izrađenog u Primeru 1, faza D i trietilamina (0.083 mL) i tetrahidrofurana (3.0 mL) i etoksiacetilhlorida (74 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.14(3H,t,J=7.0Hz), 3.53(2H,q,J=7.0Hz), 4.30(2H,s), 7.48(1H,s), 12.60(1H,brs).

C) Izrada 2-(etoksimetil)-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0365] Na isti način kao u Primeru 2, faza C, dobija se naslovljeno jedinjenje (59 mg) kao bledo smeđa čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(etoksimetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (140 mg) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (448 mg), natrijum karbonata (116 mg), 1,2-dimetoksietana (3.0 mL) i vode (1.5 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (40 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.17(3H,t,J=7.0Hz), 2.38-2.50(3H,m), 3.56(2H,q,J=7.0Hz), 4.38(2H,s), 7.39(1H,s), 7.89(0.6H,brs), 8.26(0.4H,brs), 12.34(1H,brs), 12.77-13.18(1H,m).

Primer 35

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-{[(2S)-2-metilpirolidin-1-il]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0366] Na isti način kao u Primeru 2, faza B i faza C, dobija se naslovljeno jedinjenje (104 mg) kao bela čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(hlormetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (140 mg), izrađenog u Primeru 2, faza A i (S)-2-metilpirolidin hidrohlorida (182 mg) i kalijum karbonata (276 mg) i natrijum jodida (7.5 mg) i N,N-dimetilacetamida (4.0 mL) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (308 mg) i

11

natrijum karbonata (265 mg) i 1,2-dimetoksietana (4.0 mL) i vode (1 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (26 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.41-1.43(3H,m), 1.62-1.74(1H,m), 1.93-2.03(2H,m), 2.17-2.27(1H,m), 2.46(3H,s), 3.28-3.38(3H,m), 4.25-4.64(2H,m), 7.40(1H,s), 8.10(1H,s), 10.24(1H,brs), 12.80(1H,brs).

Primer 36

Optička rezolucija 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(1-pirolidin-1-iletil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0367] 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(1-pirolidin-1-iletil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on (106 mg) se razdvoji visoko efikasnom tečnom hromatografijom (kolona: CHIRALPAK AD (50 mm i.d.x500 mm L, proizvođača DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES, LTD.), mobilna faza: heksan/etanol/dietilamin (500/500/1), brzina protoka: 60 mL/min, temperatura kolone: 30°C). Pod uslovima gore pomenute visoko efikasne tečne hromatografije, delovi rastvora koji sadrže optički aktivni oblik sa kraćim vremenom retencije se koncentruju da se dobije optički aktivan oblik 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(1-pirolidin-1-iletil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (53 mg, vreme retencije 10.6 min, 99.3%ee).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.39(3H,d,J=6.6Hz), 1.63-1.77(4H,m), 2.38-2.48(5H,m), 2.55-2.65(2H,m), 3.49(1H,q,J=6.6Hz), 7.37(1H,s), 8.02(1H,brs), 12.09-12.93(2H,m).

[0368] Pored toga, delovi rastvora koji sadrže optički aktivni oblik sa dužim vremenom retencije se koncentruju da se dobije optički aktivan oblik 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(1-pirolidin-1-iletil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (39 mg, vreme retencije 12.1 min, >99.9%ee).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.39(3H,d,J=6.8Hz), 1.60-1.75(4H,m), 2.37-2.48(5H,m), 2.54-2.66(2H,m), 3.49(1H,q,J=6.8Hz), 7.37(1H,s), 8.02(1H,brs), 12.12-13.00(2H,m).

[0369] Analiza se izvodi visoko efikasnom tečnom hromatografijom (kolona: CHIRALPAK AD (4.6 mm i.d.x250 mm L, proizvođača DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES, LTD.), mobilna faza: heksan/etanol/dietilamin (500/500/1), brzina protoka: 0.5 mL/min, temperatura kolone: 30°C, detekcija 220 nm).

Primer 37

11

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S)-pirolidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0370] Na isti način kao u prethodno pomenutom Primeru 83, faza C, dobija se naslovljeno jedinjenje (1.39 g) kao bezbojna čvrsta supstanca od terc-butil (2S)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)pirolidin-1-karboksilata (2.27 g), izrađenog u Primeru 11, faza A, terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (2.94 g), cezijum karbonata (3.11 g), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (779 mg), 1,2-dimetoksietana (50 mL), vode (5 mL), rastvor rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (10 mL) i metanola (50 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.93-2.16(3H,m), 2.37-2.47(1H,m), 2.46(3H,s), 3.23-3.48(2H,m), 4.61-4.74(1H,m), 7.37(1H,s), 8.10(1H,s), 8.98(1H,brs), 10.05(1H,brs), 12.85(1H,brs).

Primer 38

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(3-fenoksipirolidin-1-il)metil]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada 6-bromo-2-[(3-fenoksipirolidin-1-il)metil]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0371] Na isti način kao u Primeru 2, faza B, dobija se naslovljeno jedinjenje (212 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(hlormetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (180 mg), izrađenog u Primeru 2, faza A, 3-fenoksipirolidin hidrohlorida (385 mg), kalijum karbonata (445 mg), natrijum jodida (9.7 mg) i N,N-dimetilformamida (3.0 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.72-1.88(1H,m), 2.20-2.37(1H,m), 2.54-2.64(1H,m), 2.69-2.77(1H,m), 2.77-2.87(1H,m), 2.96-3.06(1H,m), 3.54-3.67(2H,m), 4.83-4.93(1H,m), 6.82-6.95(3H,m), 7.19-7.33(2H,m), 7.61(1H,s), 12.45(1H,brs).

B) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(3-fenoksipirolidin-1-il)metil]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

11

[0372] Na isti način kao u Primeru 2, faza C, dobija se naslovljeno jedinjenje (46 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca od 6-bromo-2-[(3-fenoksipirolidin-1-il)metil]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (210 mg) i terc-butil 3-metil- 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (478 mg), natrijum karbonata (124 mg), 1,2-dimetoksietana (3.0 mL) i vode (1.5 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (42 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.73-1.88(1H,m), 2.22-2.37(1H,m), 2.45(3H,brs), 2.55-2.67(1H,m), 2.70-2.79(1H,m), 2.79-2.90(1H,m), 2.96-3.11(1H,m), 3.53-3.69(2H,m), 4.81-4.98(1H,m), 6.80-6.97(3H,m), 7.20-7.33(2H,m), 7.38(1H,s), 7.90(0.6H,brs), 8.22 (0.4H,brs), 12.20(1H,brs), 12.97(1H,brs).

Primer 39

Izrada 2-(1,4-dioksa-7-azaspiro[4.4]non-7-ilmetil)-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada benzil 1,4-dioksa-7-azaspiro[4.4]nonan-7-karboksilata

[0373] Smeša benzil 3-oksopirolidin-1-karboksilata (2.00 g), etan-1,2-diola (2.85 mL), ptoluensulfonske kiseline monohidrat (10 mg) i toluena (20 mL) se meša 6 h uz zagrevanje u Dean-Stark aparaturi na 120°C. Smeša se ostavi da se ohladi na sobnu temperaturu, razblaži sa etil acetatom (10 mL), ispere po redu sa vodom (5 mLx2) i slanim rastvorom (5 mL) i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) da se dobije naslovljeno jedinjenje (2.1 g) kao bledo žuta tečnost.

<1>H-NMR(CDCl3) δ 2.00-2.13(2H,m), 3.42-3.49(2H,m), 3.51-3.62(2H,m), 3.93-4.02(4H,m), 5.13(2H,s), 7.28-7.41(5H,m).

B) Izrada 1,4-dioksa-7-azaspiro[4.4]nonana

[0374] U rastvor benzil 1,4-dioksa-7-azaspiro[4.4]nonan-7-karboksilata (1.1 g) u metanolu (30 mL) se doda paladijum(II) hidroksid (100 mg) na sobnoj temperaturi. Smeša se meša 2.5 h u atmosferi vodonika (0.4 Mpa). Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se

11

koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije naslovljeno jedinjenje (540 mg) kao tamno narandžasta tečnost.

<1>H-NMR (DMSO-d6) δ 1.76 (2H, t, J=7.1Hz), 2.71 (2H, s), 2.81(2H, t, J=7.1Hz), 3.81(4H, s).

C) Izrada 6-bromo-2-(1,4-dioksa-7-azaspiro[4.4]non-7-ilmetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0375] Na isti način kao u Primeru 2, faza B, dobija se naslovljeno jedinjenje (422 mg) kao bledo žuta čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(hlormetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (390 mg), izrađenog u Primeru 2, faza A, 1,4-dioksa-7-azaspiro[4.4]nonana (540 mg), kalijum karbonata (384 mg), natrijum jodida (21 mg) i N,N-dimetilformamida (3.0 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.87-1.97(2H,m), 2.63-2.71(4H,m), 3.53(2H,s), 3.73-3.87(4H,m), 7.61(1H,s), 11.63(1H,brs).

D) Izrada 2-(1,4-dioksa-7-azaspiro[4.4]non-7-ilmetil)-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0376] Na isti način kao u Primeru 2, faza C dobija se, naslovljeno jedinjenje (203 mg) kao bledo smeđa čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(1,4-dioksa-7-azaspiro[4.4]non-7-ilmetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (422 mg) i terc-butil 3- metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (1.05 g), natrijum karbonata (271 mg), 1,2-dimetoksietana (5.0 mL) i vode (2.5 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (92 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.94(2H,t,J=6.9Hz), 2.45(3H,brs), 2.63-2.75(4H,m), 3.54(2H,s), 3.74-3.88(4H,m), 7.38(1H,s), 7.89(0.6H,brs), 8.19(0.4H,brs), 12.17 (1H,brs), 12.98 (1H,brs).

Primer 40

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S,5R)-5-fenilpirolidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on monohidrohlorida

A) Izrada terc-butil (2S,5R)-2-[(5-bromo-2-karbamoiltiofen-3-il)karbamoil]-5-fenilpirolidin-1-karboksilata

12

[0377] Na isti način kao u Primeru 11, faza A, dobija se naslovljeno jedinjenje (434 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca od 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (250 mg), izrađenog u Primeru 1, faza D i (5R)-1-(terc-butoksikarbonil)-5-fenil-L-prolina (988 mg) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,N’-tetrametiluronijum heksafluorofosfata (1.28 g) i N-etil-N-(1-metiletil)propan-2-amina (0.692 mL) i N,N-dimetilformamida (5 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.11(9/2H,brs), 1.24(9/2H,brs), 1.69-1.86(1H,m), 2.01(1H,brs), 2.13-2.42(2H,m), 4.28-4.45(1H,m), 4.64-4.96(1H,m), 7.16-7.25(1H,m), 7.25-7.34(2H,m), 7.56(2H,d,J=7.4Hz), 7.74(2H,brs), 8.13(1H,s), 11.51(1H,brs).

* uočeno kao 1:1 smeša rotamera.

B) Izrada terc-butil (2S,5R)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-5-fenilpirolidin-1-karboksilata

[0378] U rastvor terc-butil (2S,5R)-2-[(5-bromo-2-karbamoiltiofen-3-il)karbamoil]-5-fenilpirolidin-1-karboksilata (430 mg), izrađenog kao gore u etanolu (5 mL) doda se 2M vodeni rastvor natrijum hidroksida (1.31 mL) i smeša se meša 2.5 h na 70°C. Reaktivna smeša se neutrališe sa 6M rastvorom hlorovodonične kiseline (0.45 mL) uz hlađenje ledom i u kapima se doda voda (4 mL) na sobnoj temperaturi. Čvrsti precipitat se sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (342 mg) kao bela čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 0.94-1.22(9H,m), 1.78-2.12(2H,m), 2.17-2.41(2H,m), 4.62-4.98(2H,m), 7.17-7.27(1H,m), 7.37(2H,t,J=7.6Hz), 7.68(1H,brs), 7.74-7.86(2H,m), 12.76 (1H,brs).

C) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S,5R)-5-fenilpirolidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on monohidrohlorida

[0379] Na isti način kao u prethodno pomenutom Primeru 83, faza C, dobija se terc-butil 4-{2-[(2S,5R)-1-(terc-butoksikarbonil)-5-fenilpirolidin-2-il]-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-6-il}-3-metil-1H-pirazol-1-karboksilat kao bezbojna čvrsta supstanca od terc-butil (2S,5R)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-5-fenilpirolidin-1-karboksilata (340 mg) izrađenog kao gore, terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (440 mg), cezijum karbonata (466 mg), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (117 mg), 1,2dimetoksietana (5 mL) i vode (0.5 mL). U rastvor terc-butil 4-{2-[(2S,5R)-1-(tercbutoksikarbonil)-5-fenilpirolidin-2-il]-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-6-il}-3-metil-1H-pirazol-1-karboksilata izrađenog kao gore u metanolu (10 mL) doda se rastvor rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (2 mL) i smeša se meša 1.5 h na 50°C. Reaktivna smeša se koncentruje pod sniženim pritiskom i dobijeni ostatak se kristališe iz smeše metanol/voda (10 mL/10 mL) da se dobije naslovljeno jedinjenje (126 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.20-2.47(3H,m), 2.47 (3H,brs), 2.53-2.62(1H,m), 4.79(1H,dd,J=10.8,6.6Hz), 4.88(1H, dd, J=8.5, 4.2Hz), 7.42(1H,s), 7.43-7.56(3H,m), 7.62-7.70(2H,m), 7.86-8.44(1H,m), 8.80(1/2H,brs), 10.91(1/2H,brs), 12.46-13.35(2H,m).

Primer 41

Izrada 2-[(dimetilamino)metil]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0380] Na isti način kao u Primeru 2, faza B i faza C, dobija se naslovljeno jedinjenje (66 mg) kao bela čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(hlormetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (140 mg), izrađenog u Primeru 2, faza A i N-metilmetanamin hidrohlorida (203 mg) i N,N-dimetilformamida (3.0 mL) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (380 mg) i natrijum karbonata (265 mg) i 1,2-dimetoksietana (4.0 mL) i vode (2 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (41 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.47(3H,s), 2.95(6H,s), 4.40(2H,s), 7.40(1H,s), 8.10(1H,s), 10.40(1H,brs), 12.82(1H,brs).

Primer 42

Izrada 2-[(dietilamino)metil]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0381] Rastvor 0.57M dietilamin/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL), rastvor 0.15M natrijum jodid/N,N-dimetilacetamid (0.2 mL) i rastvor 0.12 M 6-bromo-2-(hlormetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on/N,N-dimetilacetamid (1.0 mL) se po redu dodaju u kalijum karbonat (33.2 mg) i smeša se meša 2.5 h na 70°C. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se prečisti visoko efikasnom tečnom hromatografijom {kolona: YMC CombiPrep Pro C18 RS (20 mm i.d.x50 mm L), mobilna faza: acetonitril/10% vodeni rastvor amonijum formata}. Dobijeno jedinjenje se rastvori u 1,2-dimetoksietanu (0.5 mL), dodaju se rastvor 0.48M tercbutil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilat/DME (0.5 mL), 0.96M vodeni rastvor kalcijum karbonata (0.5 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleks (1:1) (10 mg) i smeša se meša 4 h na 100°C u atmosferi azota. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se prečisti visoko efikasnom tečnom hromatografijom {kolona: YMC CombiPrep Pro C18 RS (20 mm i.d.x50 mm L), mobilna faza: acetonitril/10% vodeni rastvor amonijum formata} da se dobije naslovljeno jedinjenje (8.5 mg).

MS (ESI+) : [M+H]<+>318.

MS(ESI+), nađeno:318.

Primer 43

Izrada 2-[(4-hidroksipiperidin-1-il)metil]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0382] Na isti način kao u Primeru 42 izuzev što se koristi rastvor 0.57M piperidin-4-ol/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL) umesto rastvora 0.57M dietilamin/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL), dobija se naslovljeno jedinjenje (12 mg).

MS(ESI+) : [M+H]<+>346.

MS(ESI+), nađeno:346.

Primer 44

Izrada 2-[(3-hidroksipiperidin-1-il)metil]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0383] Na isti način kao u Primeru 42 izuzev što se koristi rastvor 0.57M piperidin-3-ol/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL) umesto rastvora 0.57 M dietilamin/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL), dobija se naslovljeno jedinjenje (20.5 mg).

MS(ESI+) : [M+H]<+>346.

12

MS(ESI+), nađeno:346.

Primer 45

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(tiomorfolin-4-ilmetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0384] Na isti način kao u Primeru 42 izuzev što se koristi rastvor 0.57M tiomorfolin/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL) umesto rastvora 0.57 M dietilamin/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL), dobija se naslovljeno jedinjenje (9.7 mg).

MS(ESI+) : [M+H]<+>348.

MS(ESI+), nađeno:348.

Primer 46

Izrada 2-{[(2R)-2-(metoksimetil)pirolidin-1-il]metil}-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0385] Na isti način kao u Primeru 42 izuzev što se koristi rastvor 0.57M (2R)-2-(metoksimetil)pirolidin/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL) umesto rastvora 0.57 M dietilamin/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL), dobija se naslovljeno jedinjenje (17.6 mg).

MS(ESI+) : [M+H]<+>360.

MS(ESI+), nađeno:360.

Primer 47

Izrada 2-{[(2S)-2-(metoksimetil)pirolidin-1-il]metil}-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0386] Na isti način kao u Primeru 42 izuzev što se koristi rastvor 0.57M (2S)-2-(metoksimetil)pirolidin/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL) umesto rastvora 0.57M dietilamin/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL), dobija se naslovljeno jedinjenje (17.6 mg).

MS(ESI+) : [M+H]<+>360.

MS(ESI+), nađeno:360.

Primer 48

Izrada 2-(1,3-dihidro-2H-izoindol-2-ilmetil)-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0387] Na isti način kao u Primeru 42 izuzev što se koristi rastvor 0.57M 2,3-dihidro-1H-izoindol/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL) umesto rastvora 0.57M dietilamin/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL), dobija se naslovljeno jedinjenje (12.5 mg).

MS(ESI+) : [M+H]<+>364.

MS(ESI+), nađeno:364.

Primer 49

Izrada 2-{[benzil(metil)amino]metil}-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0388] Na isti način kao u Primeru 42 izuzev što se koristi rastvor 0.57M N-metil-1-fenilmetanamin/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL) umesto rastvora 0.57M dietilamin/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL), dobija se naslovljeno jedinjenje (14.1 mg).

MS(ESI+) : [M+H]<+>366.

MS(ESI+), nađeno:366.

Primer 50

Izrada 2-(3,4-dihidroizohinolin-2(1H)-ilmetil)-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0389] Na isti način kao u Primeru 42 izuzev što se koristi rastvor 0.57M 1,2,3,4-tetrahidroizohinolin/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL) umesto rastvora 0.57M dietilamin/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL), dobija se naslovljeno jedinjenje (3.6 mg).

MS(ESI+) : [M+H]<+>378.

MS(ESI+), nađeno:378.

12

Primer 51

Izrada etil 1-{[6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]metil}piperidin-3-karboksilata

[0390] Na isti način kao u Primeru 42 izuzev što se koristi rastvor 0.57M etil piperidin-3-karboksilat/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL) umesto rastvora 0.57M dietilamin/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL), dobija se naslovljeno jedinjenje (23.8 mg).

MS(ESI+) : [M+H]<+>402.

MS(ESI+), nađeno:402.

Primer 52

Izrada 1-{[6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]metil}-4-fenilpiperidin- 4-karbonitrila

[0391] Na isti način kao u Primeru 42 izuzev što se koristi rastvor 0.57M 4-fenilpiperidin-4-karbonitril monohidrohlorid/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL) umesto rastvora 0.57M dietilamin/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL), dobija se naslovljeno jedinjenje (1.4 mg).

MS(ESI+) : [M+H]<+>431.

MS(ESI+), nađeno:431.

Primer 53

Izrada 2-[(4-acetil-4-fenilpiperidin-1-il)metil]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0392] Na isti način kao u Primeru 42 izuzev što se koristi rastvor 0.57M 1-(4-fenilpiperidin-4-il)etanon monohidrohlorid/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL) umesto rastvora 0.57M dietilamin/N,N-dimetilacetamid r (0.7 mL), dobija se naslovljeno jedinjenje (13.1 mg).

MS(ESI+) : [M+H]<+>448.

MS(ESI+), nađeno:448.

12

Primer 54

Izrada 1-{[6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]metil}-L-prolina

[0393] Na isti način kao u Primeru 42 izuzev što se koristi rastvor 0.57M benzil L-prolinat monohidrohlorid/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL) umesto rastvora 0.57M dietilamin/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL), dobija se naslovljeno jedinjenje (20.6 mg).

MS(ESI+) : [M+H]<+>360.

MS(ESI+), nađeno:360.

Primer 55

Izrada 2-{[3-(dimetilamino)pirolidin-1-il]metil}-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0394] Na isti način kao u Primeru 42 izuzev što se koristi rastvor 0.57M N,N-dimetilpirolidin-3-amin/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL) umesto rastvora 0.57M dietilamin/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL), dobija se naslovljeno jedinjenje (10.3 mg).

MS(ESI+) : [M+H]<+>359.

MS(ESI+), nađeno:359.

Primer 56

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(4-(pirolidin-1-il)piperidin-1-il)metil]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0395] Na isti način kao u Primeru 42 izuzev što se koristi rastvor 0.57M 4-(pirolidin-1-il)piperidin/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL) umesto rastvora 0.57M dietilamin/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL), dobija se naslovljeno jedinjenje (22.2 mg).

MS(ESI+) : [M+H]<+>399.

MS(ESI+), nađeno:399.

12

Primer 57

Izrada 2-{[(1-benzilpirolidin-3-il)(metil)amino]metil}-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0396] Na isti način kao u Primeru 42 izuzev što se koristi rastvor 0.57M 1-benzil-N-metilpirolidin-3-amin/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL) umesto rastvora 0.57M dietilamin/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL), dobija se naslovljeno jedinjenje (16.2 mg).

MS(ESI+) : [M+H]<+>435.

MS(ESI+), nađeno:435.

Primer 58

Izrada 2-{[4-(2-fluorofenil)piperazin-1-il]metil}-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0397] Na isti način kao u Primeru 42 izuzev što se koristi rastvor 0.57M 1-(2-fluorofenil)piperazin/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL) umesto rastvora 0.57M dietilamin/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL), dobija se naslovljeno jedinjenje (1 mg).

MS(ESI+) : [M+H]<+>425.

MS(ESI+), nađeno:425.

Primer 59

Izrada etil N-{[6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]metil}-N-(piridin-2-ilmetil)glicinata

[0398] Na isti način kao u Primeru 42 izuzev što se koristi rastvor 0.57M etil N-(piridin-2-ilmetil)glicinat/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL) umesto rastvora 0.57M dietilamin/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL), dobija se naslovljeno jedinjenje (1.1 mg).

MS(ESI+) : [M+H]<+>439.

MS(ESI+), nađeno:439.

Primer 60

12

Izrada 2-{[bis(piridin-3-ilmetil)amino]metil}-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0399] Na isti način kao u Primeru 42 izuzev što se koristi rastvor 0.57M 1-(piridin-3-il)-N-(piridin-3-ilmetil)metanamin/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL) umesto rastvora 0.57M dietilamin/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL), dobija se naslovljeno jedinjenje (4.5 mg).

MS(ESI+) : [M+H]<+>444.

MS(ESI+), nađeno:444.

Primer 61

Izrada 2-{[4-(difenilmetil)piperazin-1-il]metil}-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0400] Na isti način kao u Primeru 42 izuzev što se koristi rastvor 0.57M 1-(difenilmetil)piperazin/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL) umesto rastvora 0.57M dietilamin/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL), dobija se naslovljeno jedinjenje (7.3 mg).

MS(ESI+) : [M+H]<+>497.

MS(ESI+), nađeno:497.

Primer 62

Izrada 2-{[(3,5-dimetoksifenil)amino]metil}-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0401] Na isti način kao u Primeru 42 izuzev što se koristi rastvor 0.57M 3,5-dimetoksianilin/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL) umesto rastvora 0.57M dietilamin/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL), dobija se naslovljeno jedinjenje (1.4 mg).

MS(ESI+) : [M+H]<+>398.

MS(ESI+), nađeno:398.

Primer 63

12

Izrada 2-{[(2,4-dimetoksifenil)amino]metil}-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0402] Na isti način kao u Primeru 42 izuzev što se koristi rastvor 0.57M 2,4-dimetoksianilin/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL) umesto rastvora 0.57M dietilamin/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL), dobija se naslovljeno jedinjenje (2.1 mg).

MS(ESI+) : [M+H]<+>398.

MS(ESI+), nađeno:398.

Primer 64

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2-feniltiomorfolin-4-il)metil]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0403] Na isti način kao u Primeru 42 izuzev što se koristi rastvor 0.57M 2-feniltiomorfolin/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL) umesto rastvora 0.57M dietilamin/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL), dobija se naslovljeno jedinjenje (10.8 mg).

MS(ESI+) : [M+H]<+>424.

MS(ESI+), nađeno:424.

Primer 65

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2-fenilpirolidin-1-il)metil]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0404] Na isti način kao u Primeru 42 izuzev što se koristi rastvor 0.57M 2-fenilpirolidin/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL) umesto rastvora 0.57M dietilamin/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL), dobija se naslovljeno jedinjenje (10.8 mg).

MS(ESI+) : [M+H]<+>392.

MS(ESI+), nađeno:392.

Primer 66

1

Izrada 2-{[3-(4-metilbenzil)pirolidin-1-il]metil}-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0405] Na isti način kao u Primeru 42 izuzev što se koristi rastvor 0.57M 3-(4-metilbenzil)pirolidin monohidrohlorid/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL) umesto rastvora 0.57M dietilamin/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL), dobija se naslovljeno jedinjenje (3.5 mg).

MS(ESI+) : [M+H]<+>420.

MS(ESI+), nađeno:420.

Primer 67

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-{[4-(2-oksotetrahidropirimidin-1(2H)-il)piperidin-1-il]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0406] Na isti način kao u Primeru 42 izuzev što se koristi rastvor 0.57M 1-(piperidin-4-il)tetrahidropirimidin-2(1H)-on/N,N- dimetilacetamid (0.7 mL) umesto rastvora 0.57M dietilamin/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL), dobija se naslovljeno jedinjenje (10.6 mg).

MS(ESI+) : [M+H]<+>428.

MS(ESI+), nađeno:428.

Primer 68

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-({[(1-(tiofen-2-il)ciklopropil)metil]amino}metil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada 1-(tiofen-2-il)ciklopropankarbonitrila

[0407] U suspenziju natrijum hidrida (19.1 g) u DMSO (200 mL) se u kapima doda rastvor tiofen-2-ilacetonitrila (25 g) u DMSO (20 mL) na 0°C u atmosferi azota i smeša se meša 0.5 h. U dobijenu reaktivnu smešu se u kapima u atmosferi azota doda rastvor 1-bromo-2-hloretana (25 mL) u DMSO (20 mL) na 0°C i smeša se meša 3 dana na sobnoj temperaturi. U reaktivnu smešu se doda voda i smeša se ekstrahuje sa etil acetatom. Organski sloj se suši

1 1

preko anhidrovanog magnezijum sulfata i rastvarač se upari pod sniženim pritiskom. Dobijeni ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) da se dobije naslovljeno jedinjenja kao bledo smeđe ulje (29.2 g).

<1>H-NMR(CDCl3) δ 1.39-1.46(2H,m), 1.71-1.78(2H,m), 6.94(1H,dd,J=5.1,3.6Hz), 7.06(1H,dd,J=3.6,1.1Hz), 7.19(1H,dd,J=5.2,1.2Hz).

B) Izrada 1-[1-(tiofen-2-il)ciklopropil]metanamin monohidrohlorida

[0408] U rastvor 1-(tiofen-2-il)ciklopropankarbonitrila (14.9 g) u tetrahidrofuranu (100 mL) se na sobnoj temperaturi doda 1.1M boran·tetrahidrofuran kompleks (100 mL) i smeša se meša na 60°C u toku noći. U reaktivnu smešu se pažljivo doda 6M vodeni rastvor hlorovodonične kiseline (20 mL) i smeša se meša 0.5 h na 60°C. Reaktivna smeša se ostavi da se ohladi na sobnu temperaturu i tetrahidrofuran se upari pod sniženim pritiskom. Dobijeni ostatak se razblaži sa vodom i ispere sa etil acetatom. Vodeni sloj se zaalkališe sa 8M vodenim rastvorom natrijum hidroksida i smeša se ekstrahuje sa etil acetatom. Ekstrakt se suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata i rastvarač se upari pod sniženim pritiskom. Dobijeni ostatak se rastvori u etil acetatu, doda se rastvor rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (30 mL) i rastvarač se upari pod sniženim pritiskom. Dobijena čvrsta supstanca se rekristališe iz smeše etanol-etil acetat da se dobije naslovljeno jedinjenje (10.5 g) kao beli igličasti kristali.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 0.92-1.00(2H,m), 1.11-1.22(2H,m), 3.08(2H,s), 6.98(1H,dd,J=5.1,3.4Hz), 7.08(1H, dd, J=3.5, 1.2Hz), 7.40(1H,dd,J=5.1,1.3Hz), 8.05(3H,s).

C) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[({[1-(tiofen-2-il)ciklopropil]metil}amino)metil]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0409] Na isti način kao u Primeru 42, izuzev što se koristi rastvor 0.57M 1-[1-(tiofen-2-il)ciklopropil]metanamin monohidrohlorid/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL) umesto rastvora 0.57M dietilamin/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL), dobija se naslovljeno jedinjenje (1.9 mg). MS(ESI+) : [M+H]<+>397.

MS(ESI+), nađeno:397.

Primer 69

1 2

Izrada 7-metil-1’-{[6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]metil}tetrahidro-5H-spiro[1,3-oksazolo[3,4-a]pirazin-1,4’-piperidin]-3-ona

A) Izrada terc-butil 4-metilpiperazin-1-karboksilata

[0410] Smeša 1-metilpiperazina (15 g), trietilamina (22.7 mL) i tetrahidrofurana (300 mL) se ohladi na 0°C i doda se di-terc-butil dikarbonat (22 g) uz mešanje. Posle toga se reaktivni sistem meša 3 h na sobnoj temperaturi. Reaktivna smeša se koncentruje pod sniženim pritiskom, u ostatak se doda 4M vodeni rastvor natrijum hidroksida (100 mL) i smeša se ekstrahuje sa etil acetatom (300 mL). Ekstrakt se ispere sa vodom (200 mL) i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela da se dobije naslovljeno jedinjenje (25.5 g) kao žuto ulje.

<1>H-NMR(CDCl3) δ 1.40(9H,s), 2.25(3H,s), 2.31(4H,t,J=4.8Hz), 3.40(4H,t,J=4.8Hz).

B) Izrada 1’-benzil-7-metiltetrahidro-5H-spiro[1,3-oksazolo[3,4-a]pirazin-1,4’-piperidin]-3-ona

[0411] Smeša terc-butil 4-metilpiperazin-1-karboksilata (24.2 g), N,N,N’,N’-tetrametiletan-1,2-diamina (21 g) i tetrahidrofurana (500 mL) se ohladi na -78°C u atmosferi azota i u kapima se u toku 1.5 h uz mešanje dodaje sec-butillitijum (184 mL, 1.3M rastvor cikloheksana). U nastavku, smeša se meša na istoj temperaturi 2 h, reaktivni sistem se zagreje na 30°C i smeša se meša 1.5 h. Posle toga, reaktivni sistem se ponovo ohladi na -78°C i u kapima se u toku 1 h dodaje rastvor 1-benzilpiperidin-4-ona (28.3 g) u tetrahidrofuranu (50 mL). Reaktivni sistem se meša na sobnoj temperaturi u toku noći i smeša se ohladi na 0°C. Doda se zasićeni vodeni rastvor amonijum hlorida (100 mL) i smeša se meša 30 min na sobnoj temperaturi. Smeša se ekstrahuje sa etil acetatom (300 mL) i ekstrakt se ispere sa vodom (300 mL) i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela da se dobije naslovljeno jedinjenje (17.6 g) kao braon ulje.

<1>H-NMR(CDCl3) δ 1.62-1.89(6H,m), 2.21(3H,s), 2.31-2.40(2H,m), 2.62(1H,m), 2.96(1H,m), 3.31(1H,m), 3.42(2H,m), 3.67(1H,m), 7.20-7.28 (5H,m).

1

C) Izrada 7-metiltetrahidro-5H-spiro[1,3-oksazolo[3,4-a]pirazin-1,4’-piperidin]-3-on monohidrohlorida

[0412] Smeša 1’-benzil-7-metiltetrahidro-5H-spiro[1,3-oksazolo[3,4-a]pirazin-1,4’-piperidin]-3-ona (14.6 g), 10% Pd/C (2 g) i etanola (100 mL) se meša 72 h na sobnoj temperaturi u atmosferi vodonika. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se rastvori u etil acetatu (75 mL), doda se rastvor rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (15 mL) i smeša se tretira 4 h.

Naslovljeno jedinjenje (10.45 g) se sakupi filtriranjem kao bela čvrsta supstanca.

<1>H-NMR (CD3OD) δ 2.14-2.18(2H,m), 2.19-2.31(2H,m), 3.03(3H,s), 3.19-3.37(4H,m), 3.48-3.59(4H,m), 3.75(1H,m), 4.03-4.13(2H,m).

D) Izrada 7-metil-1’-{[6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]metil}tetrahidro-5H-spiro[1,3-oksazolo[3,4-a]pirazin-1,4’-piperidin]-3-ona

[0413] Na isti način kao u Primeru 42 izuzev što se koristi rastvor 0.57M 7-metiltetrahidro-5H-spiro[1,3-oksazolo[3,4-a]pirazin-1,4’-piperidin]-3-on monohidrohlorid/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL) umesto rastvora 0.57M dietilamin/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL), dobija se naslovljeno jedinjenje (4.1 mg).

MS(ESI+) : [M+H]<+>470.

MS(ESI+), nađeno:470.

Primer 70

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-{[3-(fenilsulfonil)pirolidin-1-il]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0414] Na isti način kao u Primeru 42 izuzev što se koristi rastvor 0.57M 3-(fenilsulfonil)pirolidin/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL) umesto rastvora 0.57M dietilamin/N,N-dimetilacetamid (0.7 mL), dobija se naslovljeno jedinjenje (11.8 mg).

MS(ESI+) : [M+H]<+>456.

MS(ESI+), nađeno:456.

1 4

Primer 71

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(piperidin-2-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada terc-butil 2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)piperidin-1-karboksilata

[0415] U rastvor (2S)-1-(terc-butoksikarbonil)piperidin-2-karboksilne kiseline (518 mg) i trietilamina (0.392 mL) u tetrahidrofuranu (5 mL) se na 0°C doda 2-metilpropil hlorokarbonat (0.309 mL) i smeša se meša 30 min na sobnoj temperaturi. U reaktivnu smešu se doda rastvor 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (250 mg) izrađen u Primeru 1, faza D, u tetrahidrofuranu (5 mL) i smeša se meša 15 h na 60°C. U reaktivnu smešu se dodaju etil acetat (20 mL) i vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata (10 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (5 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (5 mL) i suše preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije terc-butil 2-[(5-bromo-2-karbamoiltiofen-3-il)karbamoil]piperidin-1-karboksilat kao bledo žuto ulje. U rastvor tercbutil 2-[(5-bromo-2-karbamoiltiofen-3-il)karbamoil]piperidin-1-karboksilata izrađenog kao gore u etanolu (5 mL) se doda 2M vodeni rastvor natrijum hidroksida (1.70 mL) i smeša se meša 4 h na 70°C. Reaktivna smeša se neutrališe sa 6M rastvorom hlorovodonične kiseline (0.6 mL) uz hlađenje ledom i u kapima se doda voda (5 mL) na sobnoj temperaturi. Čvrsti precipitat se sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (240 mg) kao bledo žuta čvrsta supstanca.

* Optička čistoća je 2.9%ee. Analiza je izvedena visoko efikasnom tečnom hromatografijom (kolona: CHIRALPAK AD-H (4.6 mm i.d.x250 mm L, proizvođača DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES, LTD.), mobilna faza: heksan/2-propanol/dietilamin (700/300/1), brzina protoka: 1 mL/min, temperatura kolone: 30°C, detekcija 220 nm).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.16-1.58(3H,m), 1.30(9H,brs), 1.59-1.86(2H,m), 1.98-2.13(1H,m), 3.36-3.53(1H,m), 3.76-3.88(1H,m), 4.90-5.07(1H,m), 7.57(1H,s), 12.64(1H,brs).

B) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(piperidin-2-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on

1

dihidrohlorida

[0416] Na isti način kao u prethodno pomenutom Primeru 83, faza C, naslovljeno jedinjenje (97.4 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od terc-butil 2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)piperidin-1-karboksilata (232 mg) izrađenog kao gore, tercbutil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (345 mg), cezijum karbonata (395 mg), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihloriddihlormetan kompleksa (1:1) (91.5 mg), 1,2-dimetoksietana (5 mL), vode (0.5 mL), rastvora rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (1 mL) i metanola (8 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.47-1.94(5H,m), 2.23-2.35(1H,m), 2.46(3H,s), 2.96-3.12(1H,m), 3.28-3.41(1H,m), 4.16-4.28(1H,m), 7.34(1H,s), 8.12(1H,s), 9.07-9.26(1H,m), 9.34-9.46(1H,m), 12.82(1H,brs).

Primer 72

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(morfolin-3-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada terc-butil 3-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)morfolin-4-karboksilata

[0417] Na isti način kao u Primeru 71, faza A, naslovljeno jedinjenje (271 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (250 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D, (3S)-4-(terc-butoksikarbonil)morfolin-3-karboksilne kiseline (548 mg), 2-metilpropil hlorokarbonata (0.309 mL), trietilamina (0.392 mL) i tetrahidrofurana (5 mL), 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (1.70 mL) i etanola (5 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.12-1.55(9H,m), 3.39-3.52(1H,m), 3.53-3.95(3H,m), 3.76(1H,dd,J=12.3,4.2Hz), 4.09-4.29(1H,m), 4.72(1H,brs), 7.58(1H,s), 12.74(1H,brs).

B) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(morfolin-3-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0418] Na isti način kao u prethodno pomenutom Primeru 83, faza C, naslovljeno jedinjenje

1

(103 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od terc-butil 3-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)morfolin-4-karboksilata (268 mg) izrađenog kao gore, tercbutil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (397 mg), cezijum karbonata (420 mg), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihloriddihlormetan kompleksa (1:1) (105 mg), 1,2-dimetoksietana (5 mL), vode (0.5 mL), rastvora rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (1 mL) i metanola (3 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.46(3H,s), 3.17-3.42(2H,m), 3.68(1H,dd,J=12.1,10.2Hz), 3.72-3.85(1H,m), 3.93-4.04(1H,m), 4.33(1H, dd, J=12.4, 3.3Hz), 4.44-4.56(1H,m), 7.37(1H, s), 8.12(1H,s), 9.69(1H,brs), 10.00 (1H,brs), 12.92(1H,brs).

Primer 73

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(3-oksopirolidin-1-il)metil]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0419] Smeša 2-(1,4-dioksa-7-azaspiro[4.4]non-7-ilmetil)-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (150 mg), izrađenog u Primeru 39, faza D, 6M rastvora hlorovodonične kiseline (3 mL) i propan-2-ola (3 mL) se meša uz zagrevanje 5 h na 90°C. U reaktivnu smešu se doda zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata (20 mL) i precipitirana čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem i ispere po redu sa etil acetatom (3 mL) i vodom (3 mL). Dobijena bledo braon čvrsta supstanca se kristališe iz smeše metanol/propan-2-ol/heksan da se dobije naslovljeno jedinjenje (115 mg) kao bledo smeđa čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.37(2H,t,J=6.9Hz), 2.46(3H,brs), 3.01(2H,t,J=6.9Hz), 3.08(2H,s), 3.71(2H,s), 7.39(1H,s), 7.89(0.6H,brs), 8.26(0.4H,brs), 12.22 (1H,brs), 12.99(1H,brs).

Primer 74

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[fenil(pirolidin-1-il)metil]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada 5-bromo-3-{[fenil(pirolidin-1-il)acetil]amino}tiofen-2-karboksamida

[0420] U smešu 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (221 mg), izrađenog u Primeru 1,

1

faza D, trietilamina (0.153 mL) i tetrahidrofurana (5.0 mL) se doda hlor(fenil)acetilhlorid (0.174 mL) uz mešanje na sobnoj temperaturi. Reaktivna smeša se meša 10 min i doda se pirolidin (0.42 mL). Reaktivna smeša se meša 1 h uz zagrevanje na 70°C i reaktivni sistem se koncentruje pod sniženim pritiskom. U ostatak se doda 2M vodeni rastvor natrijum hidroksida (1.5 mL) i smeša se meša 2 h uz zagrevanje na 120°C. Smeša se ekstrahuje sa etil acetatom i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti baznom hromatografijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan). Dobijena žuta čvrsta supstanca se ispere sa etil acetatom (2 mL) da se dobije naslovljeno jedinjenje (330 mg) kao žuta čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.67-1.80(4H,m), 2.32-2.44(2H,m), 2.44-2.49(2H,m), 3.96(1H,s), 7.26-7.45(5H,m), 7.70(2H,brs), 7.99(1H,s),12.24(1H,s).

B) Izrada 6-bromo-2-[fenil(pirolidin-1-il)metil]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0421] Smeša 5-bromo-3-{[fenil(pirolidin-1-il)acetil]amino}tiofen-2-karboksamida (320 mg), 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (3 mL) i 1,2-dimetoksietana (1 mL) se meša 30 min uz zagrevanje u mikrotalasnom reaktoru na 150°C. Smeša se ekstrahuje sa etil acetatom i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti baznom hromatografijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan i metanol/etil acetat) da se dobije naslovljeno jedinjenje (292 mg) kao bledo žuta čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.65-1.85(4H,m), 2.34-2.47(4H,m), 4.35(1H,s), 7.22-7.40(3H,m), 7.55-7.65(3H,m), 12.47(1H,brs).

C) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[fenil(pirolidin-1-il)metil]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0422] Na isti način kao u Primeru 2, faza C, naslovljeno jedinjenje (235 mg) se dobija kao bledo smeđa čvrsta supstanca od 6-bromo-2-[fenil(pirolidin-1-il)metil]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (320 mg) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (758 mg), natrijum karbonata (197 mg), 1,2-dimetoksietana (4.0 mL), vode (2.0 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (67 mg).

1

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.65-1.85(4H,m), 2.34-2.48(7H,m), 4.34(1H,s), 7.20-7.46(4H,m), 7.62(2H,d,J=7.2Hz), 7.78-8.26(1H,m), 12.26(1H,brs), 12.94(1H,brs).

Primer 75

Izrada 2-(3,6-dihidropiridin-1(2H)-ilmetil)-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada 6-bromo-2-(3,6-dihidropiridin-1(2H)-ilmetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0423] Na isti način kao u Primeru 2, faza B, naslovljeno jedinjenje (169 mg) se dobija kao bledo žuta čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(hlormetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (180 mg) izrađenog u Primeru 2, faza A, 1,2,3,6-tetrahidropiridina (0.18 mL), kalijum karbonata (178 mg), natrijum jodida (9.7 mg) i N,N-dimetilformamida (3.0 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.04-2.16(2H,m), 2.57-2.65(2H,m), 2.96-3.04(2H,m), 3.51(2H,s), 5.54-5.78(2H,m), 7.61(1H,s), 12.36 (1H,brs).

B) Izrada 2-(3,6-dihidropiridin-1(2H)-ilmetil)-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0424] Na isti način kao u Primeru 2, faza C, naslovljeno jedinjenje (81 mg) se dobija kao bledo smeđa čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(3,6-dihidropiridin-1(2H)-ilmetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (169 mg), terc-butil 3-metil- 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (479 mg), natrijum karbonata (124 mg), 1,2-dimetoksietana (3.0 mL), vode (1.5 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (42 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.03-2.18(2H,m), 2.45(3H,brs), 2.63(2H,t,J=5.7Hz), 2.97-3.09(2H,m), 3.52(2H,s), 5.47-5.90(2H,m), 7.38(1H,s), 8.02(1H,brs), 12.18(1H,brs), 12.91(1H, brs).

Primer 76

Izrada 2-[(2S)-5,5-dimetilpirolidin-2-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

1

A) Izrada terc-butil (5S)-5-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilata

[0425] Na isti način kao u Primeru 71, faza A, naslovljeno jedinjenje (431 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (250 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D, 1-(terc-butoksikarbonil)-5,5-dimetil-L-prolina (577 mg), 2-metilpropil hlorokarbonata (0.324 mL), trietilamina (0.392 mL), tetrahidrofurana (5 mL), 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (2.83 mL) i etanola (5 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.11(9H,s, glavni), 1.30-1.43(6H,m), 1.57(9H,s, sporedni), 1.66-1.88(2H,m), 1.90-2.25(2H,m), 4.67(1H,dd,J=8.3,3.6Hz, glavni), 4.70-4.77(1H,m, sporedni), 7.54(1H,s, sporedni), 7.57(1H,s, glavni), 12.68(1H,brs).

* Uočeno kao 7:4 smeša rotamera.

** Uočen je samo jedinični pik pod uslovima asimetrične analize. Analiza je izvedena visoko efikasnom tečnom hromatografijom (kolona: CHIRALPAK AD-H (4.6 mm i.d.x250 mm L, proizvođača DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES, LTD.), mobilna faza: heksan/2-propanol/dietilamin (800/200/1), brzina protoka: 1 mL/min, kolona temperature: 30°C, detekcija 220 nm).

B) Izrada 2-[(2S)-5,5-dimetilpirolidin-2-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0426] Na isti način kao u Primeru 83, faza C, terc-butil 4-{2-[(2S)-1-(terc-butoksikarbonil)-5,5-dimetilpirolidin-2-il]-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-6-il}-3-metil-1H-pirazol-1-karboksilat se dobija kao bledo žuta amorfna čvrsta supstanca od terc-butil (5S)-5-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilata (423 mg) izrađenog kao gore, terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (610 mg), cezijum karbonata (644 mg), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (162 mg), 1,2-dimetoksietana (5 mL) i vode (0.5 mL). U rastvor terc-butil 4-{2-[(2S)-1-(tercbutoksikarbonil)-5,5-dimetilpirolidin-2-il]-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-6-il}-3-metil-1H-pirazol-1-karboksilata izrađenog kao gore u metanolu (4 mL) se doda rastvor rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (1 mL) i smeša se meša 2 h na 50°C. U reaktivnu

14

smešu se dodaju etil acetat (50 mL) i vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata (10 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (10 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (5 mL) i suše preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem, filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom i dobijeni ostatak se kristališe iz smeše metanol/etil acetat (0.5 mL/4 mL) da se dobije naslovljeno jedinjenje (176 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.17(3H,s), 1.19(3H,s), 1.60(2H,t,J=7.4Hz), 1.92-2.05(1H,m), 2.23-2.38(1H,m), 2.45(3H,s), 4.24(1H,dd,J=8.6,6.3Hz), 7.37(1H,s), 8.02(1H,brs).

Primer 77

Izrada 2-[(2S)-azetidin-2-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada terc-butil (2S)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)azetidin-1-karboksilata

[0427] Na isti način kao u Primeru 71, faza A, naslovljeno jedinjenje (335 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (267 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D, (2S)-1-(terc-butoksikarbonil)azetidin-2-karboksilne kiseline (510 mg), 2-metilpropil hlorokarbonata (0.346 mL), trietilamina (0.419 mL), tetrahidrofurana (5 mL), 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (2.83 mL) i etanola (5 mL) .

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.04-1.51(9H,m), 2.20-2.35(1H,m), 2.44-2.57(1H,m), 3.84(1H,brs), 3.91-4.02(1H,m), 5.01(1H,dd,J=8.6,5.6Hz), 7.64(1H,s), 12.74(1H,brs).

* Uočen je samo jedinični pik pod uslovima asimetrične analize. Analiza je izvedena visoko efikasnom tečnom hromatografijom (kolona: CHIRALPAK AD-3 (4.6 mm i.d.x250 mm L, proizvođača DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES, LTD.), mobilna faza: heksan/etanol/dietilamin (700/300/1), brzina protoka: 1 mL/min, temperatura kolone:

30°C, detekcija 220 nm).

B) Izrada 2-[(2S)-azetidin-2-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0428] Na isti način kao u Primeru 76, faza B, naslovljeno jedinjenje (42.1 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od terc-butil (2S)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2d]pirimidin-2-il)azetidin-1-karboksilata (328 mg) izrađenog kao gore, terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (523 mg), cezijum karbonata (554 mg), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (139 mg), 1,2-dimetoksietana (10 mL), vode (1 mL), rastvora rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (1 mL) i metanola (5 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.41-2.61(2H,m), 2.45(3H,s), 3.30-3.38(1H,m), 3.61(1H,q,J=7.9Hz), 4.73(1H,t,J=7.8Hz), 7.38(1H,s), 8.03(1H,brs).

Primer 78

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S,3aS,7aS)-oktahidro-1H-indol-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada terc-butil (2S,3aS,7aS)-2-[(5-bromo-2-karbamoiltiofen-3-il)karbamoil]oktahidro-1H-indol-1-karboksilata

[0429] U rastvor (2S,3aS,7aS)-1-(terc-butoksikarbonil)oktahidro-1H-indol-2-karboksilne kiseline (638 mg) i trietilamina (0.392 mL) u tetrahidrofuranu (5 mL) se na 0°C doda 2-metilpropil hlorokarbonat (0.324 mL) i smeša se meša 30 min na sobnoj temperaturi. Posle toga, u reaktivni sistem se doda rastvor 3-amino- 5-bromotiofen-2-karboksamida (250 mg) izrađen u Primeru 1, faza D, u tetrahidrofuranu (5 mL) i smeša se meša 26 h na 60°C. U reaktivnu smešu se dodaju etil acetat (20 mL) i vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata (10 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (5 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (5 mL) i suše preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) a predmet frakcije se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije naslovljeno jedinjenje (345 mg) kao bledo žuta amorfna čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.07-1.49(13H,m), 1.53-1.67(3H,m), 1.85-2.06(2H,m), 2.07-2.20(1H,m), 2.22-2.36(1H,m), 3.70-3.81(1H,m), 4.14(1H,dd,J=9.7,7.5Hz), 7.72(2H,brs), 8.11(1H,s), 11.61(1H,brs).

B) Izrada terc-butil (2S,3aS,7aS)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2il)oktahidro-1H-indol-1-karboksilata

[0430] Na isti način kao u Primeru 40, faza B, naslovljeno jedinjenje (273 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od terc-butil (2S,3aS,7aS)-2-[(5-bromo-2-karbamoiltiofen-3-il)karbamoil]oktahidro-1H-indol-1-karboksilata (340 mg), izrađenog kao gore, 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (2.83 mL) i etanola (5 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.06-1.48(3H,m), 1.09(9H,s, glavni), 1.34(9H,s, sporedni), 1.53-1.78(4H,m), 1.92-2.18(2H,m), 2.29-2.41(1H,m), 3.40-3.49(1H,m, glavni), 3.67-3.79(1H,m), 4.35(1H,t,J=5.0Hz, sporedni), 4.50-4.62(1H,m), 7.55(1H,s, sporedni), 7.60(1H,s, glavni), 12.71(1H,brs).

* Uočeno kao 2:1 smeša rotamera.

C) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S,3aS,7aS)-oktahidro-1H-indol-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0431] Na isti način kao u Primeru 76, faza B, naslovljeno jedinjenje (84.0 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od terc-butil (2S,3aS,7aS)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)oktahidro-1H-indol-1-karboksilata (263 mg) izrađenog kao gore, terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (357 mg), cezijum karbonata (377 mg), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihloriddihlormetan kompleksa (1:1) (94.7 mg), 1,2-dimetoksietana (10 mL), vode (1 mL), rastvora rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (1 mL) i metanola (5 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ1.10-1.66(8H,m), 1.76-1.88(1H,m), 1.95-2.10(1H,m), 2.25-2.39(1H,m), 2.45(3H,s), 3.23(1H, q, J=5.2Hz), 4.19(1H,dd,J=10.0,5.5Hz), 7.38(1H,s), 7.89-8.29(1H,m).

Primer 79

Izrada 2-(azepan-2-il)-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada terc-butil 2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)azepan-1-karboksilata

14

[0432] Na isti način kao u Primeru 71, faza A, terc-butil 2-[(5-bromo-2-karbamoiltiofen-3-il)karbmoil]azepan-1-karboksilat se dobija kao žuto ulje od 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (237 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D, 1-(terc-butoksikarbonil)azepan-2-karboksilne kiseline (547 mg), 2-metilpropil hlorokarbonata (0.306 mL), trietilamina (0.371 mL) i tetrahidrofurana (5 mL). U rastvor terc-butil 2-[(5-bromo-2- karbamoiltiofen-3-il)karbamoil]azepan-1-karboksilata izrađenog kao gore u etanolu (5 mL) doda se 2M vodeni rastvor natrijum hidroksida (2.68 mL) i smeša se meša 3 h na 70°C. U reaktivnu smešu se dodaju etil acetat (20 mL), 6M rastvor hlorovodonične kiseline (1 mL) i voda (5 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (5 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (5 mL) i suše preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) a predmet frakcije se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije naslovljeno jedinjenje (438 mg) kao bledo žuta amorfna čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.12-1.46(12H,m), 1.58-1.99(4H,m), 2.11-2.35(1H,m), 3.16-3.29(1H,m), 3.77-3.88(1H,m, sporedni), 3.97(1H,dd,J=14.8,5.2Hz, glavni), 4.65(1H,dd,J=12.0,4.8Hz, glavni), 4.83(1H,dd,J=12.1,5.9Hz, sporedni), 7.58(1H,s, sporedni), 7.60(1H,s, glavni), 12.61(1H,brs).

* Uočeno kao 5:4 smeša rotamera.

B) Izrada 2-(azepan-2-il)-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0433] Na isti način kao u Primeru 76, faza B, naslovljeno jedinjenje (21.8 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od terc-butil 2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)azepan-1-karboksilata (150 mg) izrađenog kao gore, terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (215 mg), cezijum karbonata (228 mg), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (57.2 mg), 1,2-dimetoksietana (5 mL), vode (0.5 mL), rastvora rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (1 mL) i metanola (3 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.41-1.89(7H,m), 2.07-2.20(1H,m), 2.45(3H,s), 2.75-2.97(2H,m), 3.74-3.87(1H,m), 7.34(1H,s), 8.00(1H,brs).

Primer 80

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(3-fenilpirolidin-1-il)metil]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada 6-bromo-2-[(3-fenilpirolidin-1-il)metil]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0434] Na isti način kao u Primeru 2, faza B, naslovljeno jedinjenje (182 mg) se dobija kao žuta čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(hlormetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (180 mg) izrađenog u Primeru 2, faza A, 3-fenilpirolidin hidrohlorida (355 mg), kalijum karbonata (445 mg), natrijum jodida (9.7 mg) i N,N-dimetilformamida (3.0 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.71-1.85(1H,m), 2.18-2.32(1H,m), 2.55-2.63(1H,m), 2.75-2.85(2H,m), 3.04(1H,t,J=8.4Hz), 3.26-3.40(1H,m), 3.65(2H,s), 7.14-7.22(1H,m), 7.24-7.34(4H,m), 7.61(1H,s), 12.39(1H,brs).

B) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(3-fenilpirolidin-1-il)metil]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0435] Na isti način kao u Primeru 2, faza C, naslovljeno jedinjenje (106 mg) se dobija kao žuti kristali od 6-bromo-2-[(3-fenilpirolidin-1-il)metil]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (182 mg), terc-butil 3-metil- 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (431 mg), natrijum karbonata (112 mg), 1,2-dimetoksietana (4.0 mL), vode (2.0 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (38 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.72-1.87(1H,m), 2.19-2.33(1H,m), 2.45(3H,brs), 2.55-2.64(1H,m), 2.76-2.87(2H,m), 3.02-3.11(1H,m), 3.27-3.41(1H,m), 3.65(2H,s), 7.13-7.22(1H,m), 7.25-7.34(4H,m), 7.38(1H,s), 8.03(1H,brs), 11.92-13.34(2H,m).

Primer 81

Izrada 2-{[3-hidroksi-3-(trifluorometil)pirolidin-1-il]metil}-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada 3-(trifluorometil)pirolidin-3-ola

14

[0436] Smeša terc-butil 3-oksopirolidin-1-karboksilata (600 mg), trimetil(trifluorometil)silana (0.57 mL), rastvora 1M N,N,N-tributilbutan-1-aminijum fluorid/tetrahidrofuran (0.50 mL) i tetrahidrofurana (6 mL) se meša 30 min na sobnoj temperaturi. Dodaju se zasićeni vodeni rastvor amonijum hlorida (2 mL) i rastvor 1M N,N,N-tributilbutan-1-aminijum fluorid/tetrahidrofuran (1 mL) i reaktivna smeša se meša 1 h na sobnoj temperaturi. Smeša se ekstrahuje sa etil acetatom, ispere po redu sa vodom i slanim rastvorom i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) da se dobije bledo braon čvrsta supstanca. Dobijena čvrsta supstanca se rastvori u metanolu (1 mL) i doda se rastvor rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (2 mL) na sobnoj temperaturi. Reaktivna smeša se meša 4 h na sobnoj temperaturi i reaktivni sistem se koncentruje pod sniženim pritiskom. U ostatak se doda zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata (1 mL) i smeša se ekstrahuje sa smešom etil acetat/tetrahidrofuran i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije naslovljeno jedinjenje (260 mg) kao braon čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(CDCl3) δ 1.80-1.91(1H,m), 2.14-2.25(1H,m), 2.93-3.10(2H,m), 3.12-3.29(2H,m).

B) Izrada 6-bromo-2-{[3-hidroksi-3-(trifluorometil)pirolidin-1-il]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0437] Na isti način kao u Primeru 2, faza B, naslovljeno jedinjenje (163 mg) se dobija kao braon čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(hlormetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (180 mg) izrađenog u Primeru 2, faza A, 3-(trifluorometil)pirolidin-3-ola (260 mg), kalijum karbonata (356 mg), natrijum jodida (9.7 mg) i N,N-dimetilformamida (3.0 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.77-1.93(1H,m), 2.04-2.17(1H,m), 2.59-2.69(1H,m), 2.71-2.80(1H,m), 2.81-2.99(2H,m), 3.62(2H,s), 6.28(1H,brs), 7.61(1H,s), 12.35(1H,brs).

C) Izrada 2-{[3-hidroksi-3-(trifluorometil)pirolidin-1-il]metil}-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0438] Na isti način kao u Primeru 2, faza C, naslovljeno jedinjenje (102 mg) se dobija kao

14

bledo žuti kristali od 6-bromo-2-{[3-hidroksi-3-(trifluorometil)pirolidin-1-il]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (160 mg) i terc- butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (371 mg), natrijum karbonata (96 mg), 1,2-dimetoksietana (4.0 mL), vode (2.0 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (33 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.79-1.93(1H,m), 2.05-2.20(1H,m), 2.46(3H,brs), 2.60-2.71(1H,m), 2.72-2.83(1H,m), 2.83-3.00(2H,m), 3.63(2H,s), 6.28(1H,brs), 7.38(1H,s), 7.90(0.6H,brs), 8.26(0.4H,brs), 12.16(1H,brs), 12.99(1H,brs).

Primer 82

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(2-metilpirolidin-2-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada terc-butil 2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-2-metilpirolidin-1-karboksilata

[0439] U smešu 1-(terc-butoksikarbonil)-2-metilprolina (425 mg), trietilamina (0.425 mL) i tetrahidrofurana (10 mL) se doda 2-metilpropil hlorokarbonat (0.2 mL) uz mešanje na sobnoj temperaturi. Nakon 1 h, doda se 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamid (337 mg) izrađen u Primeru 1, faza D, i smeša se meša na 60°C u toku noći. Posle toga, smeša se meša 4 h u mikrotalasnom reaktoru na 120°C. Reaktivna smeša se ostavi da se ohladi na sobnu temperaturu i sipa u zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata. Smeša se ekstrahuje sa etil acetatom i ekstrakt se suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se rastvori u metanolu (5 mL), doda se 2M vodeni rastvor natrijum hidroksida (2.04 mL) i smeša se meša 1 h na 60°C i 1 h na 80°C. U reaktivnu smešu se doda etanol (4 mL) i smeša se meša 4 h na 100°C. Reaktivna smeša se ostavi da se ohladi na sobnu temperaturu i sipa u zasićen vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata i smeša se ekstrahuje sa smešom etil acetat/tetrahidrofuran. Ekstrakt se suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti baznom hromatografijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan i metanol/etil acetat) da se dobije naslovljeno jedinjenje (109 mg) kao žuta čvrsta supstanca.

14

MS (ESI+) : [M+H]<+>414.

MS (ESI+), nađeno:414.

B) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(2-metilpirolidin-2-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0440] Na isti način kao u Primeru 11, faza B, naslovljeno jedinjenje (64 mg) se dobija kao bela čvrsta supstanca od terc-butil 2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-2-metilpirolidin-1-karboksilata (109 mg), terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (162 mg), cezijum karbonata (400 mg), 1,2-dimetoksietana (4 mL), vode (0.5 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (21 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.75(3H,s), 1.84-2.40(4H,m), 2.46(3H,s), 3.30-3.42(2H,m), 7.37(1H,s), 8.10(1H,brs), 9.21(1H,brs), 9.75(1H,brs), 12.82(1H,brs).

Primer 83

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S)-piperidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona dihidrohlorida

A) Izrada terc-butil (2S)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)piperidin-1-karboksilata

[0441] U rastvor (2S)-1-(terc-butoksikarbonil)piperidin-2-karboksilne kiseline (5.00 g) i trietilamina (3.16 mL) u tetrahidrofuranu (45 mL) se na 10°C doda 2-metilpropil hlorokarbonat (2.84 mL) i smeša se meša 1 h na sobnoj temperaturi. Posle toga, u reaktivnu smešu se doda rastvor 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (2.19 g) izrađen u Primeru 1, faza D, u tetrahidrofuranu (5 mL) i smeša se meša 7 dana na sobnoj temperaturi. U reaktivnu smešu se dodaju etil acetat (50 mL) i vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata (50 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (20 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (10 mL) i suše preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije terc-butil (2S)-2-[(5-bromo-2-karbamoiltiofen-3-il)karbmoil]piperidin-1-karboksilat kao

14

bledo žuto ulje. U rastvor terc-butil (2S)-2-[(5-bromo-2-karbamoiltiofen-3-il)karbamoil]piperidin-1-karboksilata izrađenog kao gore u etanolu (50 mL) se doda 2M vodeni rastvor natrijum hidroksida (24.8 mL) i smeša se meša 3 h na 70°C. Reaktivna smeša se neutrališe sa 6M rastvorom hlorovodonične kiseline (8.5 mL) uz hlađenje ledom i u kapima se doda voda (10 mL) na sobnoj temperaturi. Čvrsti precipitat se sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (3.03 g) kao bledo žuta čvrsta supstanca. Optička čistoća je 73.8%ee. Analiza je izvedena visoko efikasnom tečnom hromatografijom (kolona:

CHIRALPAK AD-H (4.6 mm i.d. x250 mm L, proizvođača DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES, LTD.), mobilna faza: heksan/2-propanol/dietilamin (700/300/1), brzina protoka: 1 mL/min, temperatura kolone: 30°C, detekcija 220 nm).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.09-1.45(11H,m), 1.46-1.58(1H,m), 1.60-1.86(2H,m), 1.98-2.14(1H,m), 3.38-3.53(1H,m), 3.75-3.89(1H,m), 4.89-5.10(1H,m), 7.58(1H,s), 12.64(1H,brs).

B) Optička rezolucija terc-butil (2S)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)piperidin-1-karboksilata

[0442] terc-Butil (2S)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)piperidin-1-karboksilat (3.03 g, 75.5%ee) se frakcioniše visoko efikasnom tečnom hromatografijom (kolona: CHIRALPAK AD (50 mm i.d.x500 mm L, proizvođača DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES, LTD.), mobilna faza: heksan/2-propanol/dietilamin (700/300/1), brzina protoka: 80 mL/min, temperatura kolone: 30°C). terc-Butil (2S)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)piperidin-1-karboksilat (2.55 g,>99.9%ee, vreme retencije 6.1 min) i terc-butil (2R)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)piperidin-1-karboksilat (330 mg, 99.2%ee, vreme retencije 8.1 min) se dobijaju pod gore pomenutim uslovima visoko efikasne tečne hromatografije. Analiza je izvedena visoko efikasnom tečnom hromatografijom (kolona: CHIRALPAK AD-H (4.6 mm i.d.x250 mm L, proizvođača DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES, LTD.), mobilna faza: heksan/2-propanol/dietilamin (700/300/1), brzina protoka: 1 mL/min, temperatura kolone: 30°C, detekcija 220 nm).

C) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S)-piperidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0443] terc-Butil (2S)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)piperidin-1-

14

karboksilat (2.55 g) izrađen kao gore, terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilat (3.79 g), cezijum karbonat (4.01 g), 1,2-dimetoksietan (50 mL) i voda (5 mL) se stave u bocu a atmosfera u boci se prečisti sa argonom. Doda se [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleks (1:1) (502 mg), atmosfera u boci se ponovo prečisti sa argonom i smeša se meša 1.5 h na 80°C. U reaktivnu smešu se dodaju etil acetat (75 mL) i voda (50 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (20 mLx2). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (20 mL) i suše preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) a predmet frakcije se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije terc-butil (2S)-2-{6-[1-(terc-butoksikarbonil)-3-metil-1H-pirazol-4-il]-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il}piperidin-1-karboksilat kao bledo žuta čvrsta supstanca. U rastvor terc-butil (2S)-2-{6-[1-(terc-butoksikarbonil)-3-metil-1H-pirazol-4-il]-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il}piperidin-1-karboksilata izrađenog kao gore u metanolu (50 mL) se doda rastvor rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (10 mL) i smeša se meša 4 h na 50°C i 1 h na sobnoj temperaturi. Čvrsti precipitat se sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (1.18 g) kao bledo žuta čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.48-1.92(5H,m), 2.23-2.35(1H,m), 2.46(3H,s), 2.94-3.12(1H,m), 3.29-3.41(1H,m), 4.16-4.29(1H,m), 7.34(1H,s), 8.12(1H,s), 9.07-9.25(1H,m), 9.46-9.60(1H,m), 12.84(1H,brs).

MS (ESI+) : [M+H]<+>316.

MS(ESI+), nađeno:316.

D) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S)-piperidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0444] terc-Butil (2S)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)piperidin-1-karboksilat (3.25 g) dobijen u niže pomenutom Primeru 172, faza B, terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilat (4.83 g), cezijum karbonat (5.11 g), 1,2-dimetoksietan (88 mL) i voda (8.8 mL) se stave u bocu a atmosfera u boci se prečisti sa argonom. Doda se [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihloriddihlormetan kompleks (1:1) (574 mg), atmosfera u boci se ponovo prečisti sa argonom i

1

smeša se meša 1 h na 80°C. U reaktivnu smešu se dodaju etil acetat (100 mL) i voda (100 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (20 mLx2). Kombinovani organski slojevi se suše preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) a predmet frakcije se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije terc-butil (2S)-2-{6-[1-(terc-butoksikarbonil)-3-metil-1H-pirazol-4-il]-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il}piperidin-1-karboksilat kao bela čvrsta supstanca. U terc-butil (2S)-2-{6-[1-(terc-butoksikarbonil)-3-metil-1H-pirazol-4-il]-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il}piperidin-1-karboksilat izrađen kao gore se dodaju metanol (50 mL) i rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (17 mL) i smeša se meša 1 h na 50°C. Dodaju se metanol (17 mL) i etil acetat (85 mL) i smeša se dodatno meša 1 h na 50°C i još 2 h na sobnoj temperaturi. Smeša se koncentruje pod sniženim pritiskom. U ostatak se doda metanol (50 mL) i smeša se meša 1 h na 50°C i još 1 h na sobnoj temperaturi. Čvrsti precipitat se sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (1.77 g) kao bela čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.48-1.91(5H,m), 2.24-2.32(1H,m), 2.46(3H,s), 2.97-3.12(1H,m), 3.29-3.41(1H,m), 4.14-4.29(1H,m), 7.34(1H,s), 8.11(1H,s), 9.07-9.23(1H,m), 9.36-9.48(1H,m), 12.81(1H,brs).

[0445] Osnovni rastvor se koncentruje pod sniženim pritiskom, u ostatak se doda metanol (20 mL) i smeša se meša 1 h na 50°C i još 1 h na sobnoj temperaturi. Doda se etil acetat (20 mL) i precipitirana čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (215 mg) kao bela čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.51-1.91(5H,m), 2.25-2.33(1H,m), 2.46(3H,s), 2.97-3.10(1H,m), 3.29-3.40(1H,m), 4.16-4.28(1H,m), 7.34(1H,s), 8.11(1H,s), 9.07-9.22(1H,m), 9.45-9.56(1H,m), 12.83(1H,brs).

Primer 84

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(pirolidin-3-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada terc-butil 3-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)pirolidin-1-karboksilata

1 1

[0446] Na isti način kao u Primeru 71, faza A, naslovljeno jedinjenje (396 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (250 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D, 1-(terc-butoksikarbonil)pirolidin-3-karboksilne kiseline (511 mg), 2-metilpropil hlorokarbonata (0.323 mL), trietilamina (0.392 mL), tetrahidrofurana (5 mL), 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (2.83 mL) i etanola (5 mL) .

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.40(9H,s), 2.12-2.30(2H,m), 3.39-3.56(4H,m), 3.59-3.69(1H,m), 7.60(1H,s).

B) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(pirolidin-3-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0447] Na isti način kao u Primeru 83, faza C, naslovljeno jedinjenje (228 mg) se dobija kao bledo žuta čvrsta supstanca od terc-butil 3-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)pirolidin-1-karboksilata (390 mg) prethodno dobijenog, terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (601 mg), cezijum karbonata (635 mg), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (159 mg), 1,2-dimetoksietana (10 mL), vode (1 mL), rastvora rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (1 mL) i metanola (5 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.09-2.24(1H,m), 2.29-2.43(1H,m), 2.45(3H,s), 3.20-3.40(2H,m), 3.47-3.66(3H,m), 7.36(1H,s), 8.05(1H,s), 9.18 (1H,brs), 9.30(1H,brs), 12.54 (1H,brs) .

Primer 85

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2R)-piperidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0448] Na isti način kao u Primeru 83, faza C, naslovljeno jedinjenje (60.8 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od terc-butil (2R)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)piperidin-1-karboksilata (120 mg) dobijenog u Primeru 81, faza B, terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (179 mg), cezijum karbonata (189 mg), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihloriddihlormetan kompleksa (1:1) (47.3 mg), 1,2-dimetoksietana (5 mL), vode (0.5 mL), rastvora

1 2

rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (1 mL) i metanola (3 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.48-1.94(5H,m), 2.24-2.35(1H,m), 2.46(3H,s), 2.96-3.13(1H,m), 3.29-3.41(1H,m), 4.16-4.27(1H,m), 7.34(1H,s), 8.12(1H,s), 9.07-9.25(1H,m), 9.35-9.50(1H,m), 12.82(1H,brs).

Primer 86

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-{1-[4-(metilsulfonil)fenil]pirolidin-2-il}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada 6-bromo-2-{1-[4-(metilsulfonil)fenil]pirolidin-2-il}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0449] U rastvor 1-[4-(metilsulfonil)fenil]prolina (512 mg) i trietilamina (0.314 mL) u tetrahidrofuranu (10 mL) se na 0°C doda 2-metilpropil hlorokarbonat (0.259 mL) i smeša se meša 30 min na sobnoj temperaturi. Posle toga, u reaktivni sistem se doda 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamid (200 mg) izrađen u Primeru 1, faza D i smeša se meša 19 h na 60°C. U reaktivnu smešu se dodaju etil acetat (20 mL) i vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata (10 mL) i izdvojeni organski sloj se ispere sa slanim rastvorom (5 mL) i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) a predmet frakcije se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije N-(5-bromo-2-karbamoiltiofen-3-il)-1-[4-(metilsulfo- nil)fenil]prolinamid kao bledo žuta amorfna čvrsta supstanca. U rastvor N-(5-bromo-2-karbamoiltiofen-3-il)-1-[4-(metilsulfonil)fenil]prolinamida izrađenog kao gore u etanolu (5 mL) se doda 2M vodeni rastvor natrijum hidroksida (2.83 mL) i smeša se meša 10 h na 70°C. Reaktivna smeša se neutrališe sa 6M rastvorom hlorovodonične kiseline (0.6 mL) uz hlađenje ledom i u kapima se doda voda (2 mL) na sobnoj temperaturi. Čvrsti precipitat se sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (208 mg) kao bledo žuta čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.96-2.19(3H,m), 2.35-2.48(1H,m), 3.03(3H,s), 3.36-3.47(1H,m), 3.73-3.83(1H,m), 4.76(1H,dd,J=8.4,2.0Hz), 6.60(2H,d,J=8.9Hz), 7.59(1H,s), 7.62(2H,d,J=8.9Hz),12.69(1H,brs).

B) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-{1-[4-(metilsulfonil)fenil]pirolidin-2-il}tieno[3,2-

1

d]pirimidin-4(3H)-ona

[0450] 6-Bromo-2-{1-[4-(metilsulfonil)fenil]pirolidin-2-il}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on (203 mg) izrađen kao gore, terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilat (275 mg), cezijum karbonat (291 mg), 1,2-dimetoksietan (5 mL) i voda (0.5 mL) se stave u bocu a atmosfera u boci se prečisti sa argonom. Doda se [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleks (1:1)(73.0 mg), atmosfera u boci se ponovo prečisti sa argonom i smeša se meša 1.5 h na 80°C. U reaktivnu smešu se doda 2M vodeni rastvor natrijum hidroksida (1 mL) i smeša se dodatno meša 2 h na 80°C. U reaktivnu smešu se dodaju etil acetat (20 mL) i 1M rastvor hlorovodonične kiseline (3 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (5 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (5 mL) i suše preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (metanol/etil acetat) a predmet frakcije se koncentruje pod sniženim pritiskom. Dobijeni ostatak se ispere sa metanolom (5 mL) da se dobije naslovljeno jedinjenje (130 mg) kao bledo žuta čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.96-2.22(3H,m), 2.33-2.47(4H,m), 3.03(3H,s), 3.37-3.48(1H,m), 3.73-3.85(1H,m), 4.77(1H,dd,J=8.4,1.6Hz), 6.61(2H,d,J=8.9Hz), 7.34(1H,s), 7.63(2H,d,J=8.9Hz), 7.80-8.34(1H,m), 12.47(1H,brs), 12.83-13.09(1H,m).

Primer 87

Izrada 2-[(1R*,2S*,5S*)-3-azabiciklo[3.1.0]heks-2-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada terc-butil (1R*,2S*,5S*)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilata

[0451] Na isti način kao u Primeru 86, faza A, naslovljeno jedinjenje (354 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (450 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D, (1R*,2S*,5S*)-3-(terc-butoksikarbonil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-2-karboksilne kiseline (974 mg), 2-metilpropil hlorokarbonata (0.584 mL), trietilamina (0.707 mL), tetrahidrofurana (10 mL), 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (3.06 mL) i etanola

1 4

(5 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 0.47-0.62(1H,m), 0.76-0.92(1H,m), 1.07(9H,s, glavni), 1.35(9H,s, sporedni),1.62-1.76(1H,m), 1.86-1.99(1H,m), 3.47-3.59(2H,m), 4.27(1H,d,J=5.1Hz, sporedni), 4.77(1H,d,J=5.1Hz, glavni), 7.61(1H,s, sporedni), 7.65(1H,s, glavni), 12.44-12.80(1H,m).

* Uočeno kao 3:2 smeša rotamera.

B) Izrada 2-[(1R*,2S*,5S*)-3-azabiciklo[3.1.0]heks-2-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0452] Na isti način kao u Primeru 83, faza C, naslovljeno jedinjenje (36.5 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od terc-butil (1R*,2S*,5S*)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilata (200 mg) izrađenog kao gore, terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol- 1-karboksilata (299 mg), cezijum karbonata (316 mg), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (79.2 mg), 1,2-dimetoksietana (8 mL), vode (0.8 mL), rastvora rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (1 mL) i metanola (4 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 0.57-0.73(2H,m), 1.83-1.93(1H,m), 2.25-2.36(1H,m), 2.46(3H,s), 3.38-3.47(2H,m), 4.92(1H,brs), 7.32(1H,s), 8.10(1H,s), 8.74(1H,brs), 10.25(1H,brs), 13.03(1H,brs).

Primer 88

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S)-1-metilpirolidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada terc-butil (2S)-2-[(5-bromo-2-karbamoiltiofen-3-il)karbamoil]pirolidin-1-karboksilata

[0453] Na isti način kao u Primeru 78, faza A, naslovljeno jedinjenje (1.67 g) se dobija kao bledo žuta čvrsta supstanca od 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (1.00 g) izrađenog u Primeru 1, faza D, 1-(terc-butoksikarbonil)-L-prolina (2.04 g), 2-metilpropil hlorokarbonata

1

(1.29 mL), trietilamina (1.57 mL) i tetrahidrofurana (25 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.25(9H,s, glavni), 1.40(9H,s, sporedni), 1.79-1.97(3H,m), 2.12-2.30(1H,m), 3.35-3.55(2H,m), 4.09-4.21(1H,m), 7.72 (2H,brs), 8.05(1H,s), 11.66(1H,s, glavni),11.68(1H,s, sporedni).

* Uočeno kao 8:7 smeša rotamera.

B) Izrada N-(5-bromo-2-karbamoiltiofen-3-il)-L-prolinamid hidrohlorida

[0454] U rastvor terc-butil (2S)-2-[(5-bromo-2-karbamoiltiofen-3-il)karbamoil]pirolidin-1-karboksilata (1.66 g) izrađenog kao gore u smeši metanol/tetrahidrofuran (20 mL/10 mL) se doda rastvor rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (10 mL) i smeša se meša 1 h na 50°C. U reaktivnu smešu se doda etil acetat (10 mL) i precipitirana čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (1.26 g) kao bledo žuta čvrsta supstanca.<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.86-2.07(3H,m), 2.28-2.41(1H,m), 3.17-3.29(2H,m), 4.52(1H,t,J=7.5Hz), 7.84(2H,brs), 7.88(1H,s), 9.15(2H,brs), 11.46(1H,brs).

C) Izrada 6-bromo-2-[(2S)-1-metilpirolidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0455] U rastvor N-(5-bromo-2-karbamoiltiofen-3-il)-L-prolinamid hidrohlorida (1.05 g) izrađenog kao gore u metanolu (25 mL) se dodaju formalin (1.10 mL) i natrijum cijanoborohidrid (558 mg) i smeša se meša 1 h na sobnoj temperaturi. U reaktivnu smešu se doda 2M vodeni rastvor natrijum hidroksida (7.40 mL) i smeša se dodatno meša 5 h na 50°C. Reaktivna smeša se neutrališe sa 6M rastvorom hlorovodonične kiseline (2.5 mL) uz hlađenje ledom i koncentruje pod sniženim pritiskom do polovine zapreine. U ostatak se dodaju etil acetat (50 mL) i slani rastvor (10 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (2x10 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (10 mL) i suše preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) a predmet frakcije se koncentruje pod sniženim pritiskom. Dobijeni ostatak se ispere sa dietiletrom (20 mL) da se dobije naslovljeno jedinjenje (892 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.68-1.99(3H,m), 2.10-2.39(2H,m), 2.24(3H,s), 3.08-3.18(1H,m), 3.25-3.32(1H,m), 7.57(1H,s), 11.90(1H,brs).

1

D) Izrada 6-bromo-2-[(2S)-1-metilpirolidin-2-il]-3-{[2-(trimetilsilil)etoksi]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0456] U rastvor 6-bromo-2-[(2S)-1-metilpirolidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (250 mg) izrađenog kao gore u tetrahidrofuranu (5 mL) se doda natrijum hidrid (60% u ulju, 38.2 mg) uz hlađenje ledom i smeša se meša 15 min na 0°C. U reaktivnu smešu se doda [2-(hlormetoksi)etil](trimetil)silan (0.169 mL) i smeša se meša 1 h na sobnoj temperaturi. U reaktivnu smešu se dodaju etil acetat (15 mL) i vodeni rastvor amonijum hlorida (5 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (5 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (10 mL) i suše preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti baznom hromatografijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) a predmet frakcije se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije naslovljeno jedinjenje (180 mg) kao bezbojno ulje.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ -0.03(9H,s), 0.82-0.91(2H,m), 1.73-2.06(3H,m), 2.17-2.29(1H,m), 2.21(3H,s), 2.35(1H,q,J=8.4Hz), 3.05-3.15(1H,m), 3.64(2H,t,J=8.1Hz), 3.72(1H,dd,J=8.4,7.1Hz), 5.62(1H,d,J=10.5Hz), 5.72(1H,d,J=10.5Hz), 7.65(1H,s).

E) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S)-1-metilpirolidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0457] Na isti način kao u Primeru 83, faza C, terc-butil 3-metil-4-(2-[(2S)-1-metilpirolidin-2-il]-4-okso-3-{[2-(trimetilsilil)etoksi]metil}-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-6-il)-1H-pirazol-1-karboksilat se dobija kao bledo žuto ulje od 6-bromo-2-[(2S)-1-metilpirolidin-2-il]-3-{[2-(trimetilsilil)etoksi]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (160 mg) izrađenog kao gore, tercbutil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (222 mg), cezijum karbonata (234 mg), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihloriddihlormetan kompleksa (1:1) (58.8 mg), 1,2-dimetoksietana (5 mL) i vode (0.5 mL). U rastvor terc-butil 3-metil-4-(2-[(2S)-1-metilpirolidin-2-il]-4-okso-3-{[2-(trimetilsilil)etoksi]metil}-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-6-il)-1H-pirazol-1-karboksilata izrađenog kao gore u N,N-dimetilformamidu (2 mL) se doda rastvor 1M tetrabutilamonijum fluorid/tetrahidrofuran (1.44 mL) i smeša se meša 4 h na 90°C. U reaktivnu smešu se dodaju etil acetat (20 mL) i slani

1

rastvor (10 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (2x10 mL).

Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (5 mL) i suše preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti baznom hromatografijom na koloni silika gela (metanol/etil acetat) a predmet frakcije se koncentruje pod sniženim pritiskom. U rastvor ostatka u metanolu (1 mL) se dodaju rastvor rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (2 mL) i etil acetat (1.5 mL) i precipitat se sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (15.6 mg) kao bledo žuta čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.92-2.21(3H,m), 2.46(3H,s), 2.60-2.71(1H,m), 2.96(3H,s), 3.24-3.38(1H,m), 3.67-3.75(1H,m), 4.45-4.57(1H,m), 7.37(1H,s), 8.10(1H,brs), 10.08(1H,brs), 12.92(1H,brs).

Primer 89

Izrada 2-[2-(4-fluorobenzil)pirolidin-2-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada terc-butil 2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-2-(4-fluorobenzil)pirolidin-1-karboksilata

[0458] Na isti način kao u Primeru 82, faza A, naslovljeno jedinjenje (53 mg) se dobija kao bledo žuta čvrsta supstanca od 1-(terc-butoksikarbonil)-2-(4-fluorobenzil)prolina (466 mg), trietilamina (0.335 mL), tetrahidrofurana (10 mL), 2-metilpropil hlorokarbonata (0.158 mL), 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (265 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D, 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (3 mL) i etanola (5 mL).

MS(ESI+):[M+H]<+>508.

MS(ESI+), nađeno:508.

B) Izrada 2-[2-(4-fluorobenzil)pirolidin-2-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0459] Na isti način kao u Primeru 11, faza B, naslovljeno jedinjenje (13 mg) se dobija kao bela čvrsta supstanca od terc-butil 2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-

1

2-(4-fluorobenzil)pirolidin-1-karboksilata (53 mg), terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (64 mg), cezijum karbonata (200 mg), 1,2-dimetoksietana (3 mL), vode (0.25 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II)dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (8 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.75-2.73(7H,m), 3.36-3.79(4H,m), 7.09-7.12(4H,m), 7.19(1H,s), 8.07(1H,brs), 9.26(1H,brs), 9.70(1H,brs), 13.05(1H,brs).

Primer 90

Izrada 2-[(benzilamino)metil]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on monotrifluoroacetata

A) Izrada 2-[(benzilamino)metil]-6-bromotieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0460] Na isti način kao u Primeru 2, faza B, sirovi produkt (234 mg) naslovljenog jedinjenja se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(hlormetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (500 mg) izrađenog u Primeru 2, faza A, 1-fenilmetanamina (0.58 mL), kalijum karbonata (495 mg), natrijum jodida (27 mg) i N,N-dimetilformamida (5.0 mL).

B) Izrada 6-benzil-2-bromo-6,7-dihidroimidazo[1,5-a]tieno[3,2-d]pirimidin-9(5H)-ona

[0461] Smeša sirovog produkta (185 mg) 2-[(benzilamino)metil]-6-bromotieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona, 37% vodenog rastvora formaldehida (1 mL) i tetrahidrofurana (2 mL) se meša 1 h na sobnoj temperaturi. Precipitat se sakupi filtriranjem i ispere po redu sa vodom i etil acetatom da se dobije sirovi produkt (104 mg) naslovljeno jedinjenja kao bledo žuta čvrsta supstanca.

C) Izrada 6-benzil-2-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-6,7-dihidroimidazo[1,5-a]tieno[3,2-d]pirimidin-9(5H)-ona

[0462] Na isti način kao u Primeru 2, faza C, sirovi produkt (89 mg) naslovljenog jedinjenja se dobija kao bledo žuti kristali od sirovog produkta (100 mg) 6-benzil-2-bromo-6,7-dihidroimidazo[1,5-a]tieno[3,2-d]pirimidin-9(5H)-ona i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-

1

tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (255 mg), natrijum karbonata (66 mg), 1,2-dimetoksietana (3.0 mL) i vode (1.5 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (23 mg).

D) Izrada 2-[(benzilamino)metil]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on monotrifluoroacetata

[0463] Smeša sirovog produkta (80 mg) 6-benzil-2-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-6,7-dihidroimidazo[1,5-a]tieno[3,2-d]pirimidin-9(5H)-ona, metanola (2 mL) i trifluorosirćetne kiseline (2 mL) se meša 5 h uz zagrevanje na 70°C. Reaktivni sistem se koncentruje pod sniženim pritiskom a ostatak se kristališe iz smeše metanol/etil acetat da se dobije naslovljeno jedinjenje (43 mg) kao žuta čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.46(3H,brs), 4.20(2H,s), 4.31(2H,s), 7.40(1H,s), 7.42-7.58(5H,m), 8.05(1H,brs), 9.15-10.22(2H,m), 13.04(1H,brs).

Primer 91

Izrada 2-[(1R,3S,4S)-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-3-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada terc-butil (1R,3S,4S)-3-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilata

[0464] U rastvor (15 mL) (1R,3S,4S)-2-(terc-butoksikarbonil)-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-3-karboksilne kiseline (0.894 g) i trietilamina (0.541 mL) u tetrahidrofuranu se uz mešanje doda izobutil hloroformat (0.487 mL) uz hlađenje ledom. Nakon 30 min mešanja na sobnoj temperaturi, doda se rastvor 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (0.78 g) izrađen u Primeru 1, faza D, u tetrahidrofuranu (3 mL). Reaktivni sistem se meša 40 h uz zagrevanje na 60°C. U reaktivni sistem se sipa voda i smeša se ekstrahuje sa etil acetatom, ispere sa slanim rastvorom i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. U ostatak se dodaju 2M vodeni rastvor natrijum hidroksida (7.06 mL) i etanol (14 mL) i smeša se meša 5 h uz zagrevanje na 70°C. Reaktivni sistem se neutrališe sa 1M rastvorom hlorovodonične kiseline (4 mL) uz

1

mešanje i hlađenje ledom. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem. Smeša se ekstrahuje sa etil acetatom, ispere sa slanim rastvorom i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata.

Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti baznom hromatografijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) da se dobije naslovljeno jedinjenje (1.06 g) kao bledo žuta čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.07-1.83(14H,m), 2.00-2.12(1H,m), 2.58-2.67(1H,m), 4.14(1H,brs), 4.17-4.25(1H,m), 7.56-7.81(1H,m), 12.45-12.79(1H,m).

B) Izrada terc-butil (1R,3S,4S)-3-[6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilata

[0465] terc-Butil (1R,3S,4S)-3-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilat (1.03 g) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilat (1.49 g), natrijum karbonat (768 mg), 1,2-dimetoksietan (8.0 mL) i voda (4.0 mL) se stave u bocu a atmosfera u boci se prečisti sa argonom. Doda se [1,1’-Bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleks (1:1) (197 mg) i atmosfera u boci se ponovo prečisti sa argonom. Reaktivni sistem se meša 3 h na 100°C i smeša se ekstrahuje sa etil acetatom i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i ekstrakt se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) da se dobije naslovljeno jedinjenje (690 mg) kao bledo žuta čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.04-1.86(14H,m), 2.04-2.20(1H,m), 2.33-2.48(3H,m), 2.60-2.67(1H,m), 4.11-4.17(1H,m), 4.18-4.26(1H,m), 7.34-7.54(1H,m), 7.88(0.6H,brs), 8.23(0.4H,brs), 12.23-12.48(1H,m), 12.82-13.09(1H,m).

C) Izrada 2-[(1R,3S,4S)-2-azabiciklo[2.2.1]hept-3-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0466] U rastvor terc-butil (1R,3S,4S)-3-[6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilata (690 mg) u metanolu (10 mL) se doda rastvor rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (2.0 mL) uz mešanje na sobnoj temperaturi. Reaktivni sistem se meša 30 min uz zagrevanje na 50°C i smeša se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se neutrališe sa zasićenim vodenim

1 1

rastvorom natrijum hidrogen karbonata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem. Smeša se ekstrahuje sa etil acetatom i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti baznom hromatografijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan i metanol/etil acetat) i dobijena bezbojna čvrsta supstanca se kristališe iz smeše metanol/etil acetat da se dobije naslovljeno jedinjenje (220 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca. Optička čistoća je 86%ee. Analiza je izvedena visoko efikasnom tečnom hromatografijom (kolona: CHIRALPAK OD-H (4.6 mm i.d.x250 mm L, proizvođača DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES, LTD.), mobilna faza: metanol, brzina protoka: 0.5 mL/min, temperatura kolone: 30°C, detekcija 254 nm).<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.17(1H,s), 1.27-1.38 (1H,m), 1.45-1.73(4H,m), 2.45(3H,s), 2.66-2.72(1H,m), 3.57(1H,s), 3.73(1H,s), 7.35(1H,s), 8.01(1H,brs).

MS(ESI+):[M+H]<+>328.

MS(ESI+), nađeno:328.

Primer 92

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S,4S)-4-metilpirolidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada terc-butil (2S,4S)-2-[(5-bromo-2-karbamoiltiofen-3-il)karbamoil]-4-metilpirolidin-1-karboksilata

[0467] U rastvor (4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-metil-L-prolina (491 mg) i trietilamina (0.353 mL) u tetrahidrofuranu (5 mL) se doda 2-metilpropil hlorokarbonat (0.292 mL) na 0°C i smeša se meša 1 h na sobnoj temperaturi. Posle toga, u reaktivni sistem se doda 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamid (225 mg) izrađen u Primeru 1, faza D i smeša se meša 24 h na 60°C. U reaktivnu smešu se dodaju etil acetat (20 mL) i vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata (10 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (5 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (5 mL) i suše preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem, filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom a ostatak se kristališe iz etanola (5 mL). Dobijena bezbojna čvrsta supstanca se frakcioniše visoko efikasnom tečnom hromatografijom (kolona: CHIRALPAK AD (50 mm i.d.x500 mm L, proizvođača DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES, LTD.), mobilna faza:

1 2

heksan/etanol (850/150), brzina protoka: 80 mL/min, temperatura kolone: 30°C) da se dobije naslovljeno jedinjenje (302 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 0.94-1.03(3H,m), 1.22(9H,s, glavni), 1.39(9H,s, sporedni), 1.41-1.56(1H,m), 2.13-2.33(1H,m), 2.35-2.48(1H,m), 2.82-3.00(1H,m), 3.70(1H,dd,J=10.1,7.5Hz), 4.13(1H,t,J=8.1Hz), 7.71(2H,brs), 8.03(1H,s, sporedni), 8.05(1H,s, glavni), 11.65(1H,s). * Uočeno kao 3:2 smeša rotamera.

B) Izrada terc-butil (2S,4S)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-4-metilpirolidin-1-karboksilata

[0468] Na isti način kao u Primeru 40, faza B, naslovljeno jedinjenje (240 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od terc-butil (2S,4S)-2-[(5-bromo-2-karbamoiltiofen-3-il)karbamoil]-4-metilpirolidin-1-karboksilata (300 mg) izrađenog kao gore, 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (1.73 mL) i etanola (5 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 0.98-1.05(3H,m), 1.08(9H,s, glavni), 1.35(9H,s, sporedni), 1.45-1.66(1H,m), 2.18-2.33(1H,m), 2.34-2.46(1H,m), 2.97-3.13(1H,m), 3.57-3.71(1H,m), 4.49-4.60(1H,m), 7.61(1H,s, sporedni), 7.64(1H,s, glavni), 12.73(1H,brs).

* Uočeno kao 2:1 smeša rotamera.

C) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S,4S)-4-metilpirolidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0469] Na isti način kao u Primeru 83, faza C, naslovljeno jedinjenje (137 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od terc-butil (2S,4S)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-4-metilpirolidin-1-karboksilata (238 mg) izrađenog kao gore, terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (354 mg), cezijum karbonata (374 mg), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihloriddihlormetan kompleksa (1:1) (93.9 mg), 1,2-dimetoksietana (5 mL), vode (0.5 mL), rastvora rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (1 mL) i metanola (4 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.07(3H,d,J=6.6Hz), 1.59-1.75(1H,m), 2.34-2.50(1H,m), 2.46(3H,s), 2.60-2.76(1H,m), 2.82-2.99(1H,m), 3.40-3.53(1H,m), 4.59-4.76(1H,m), 7.37(1H,s), 8.10(1H,s), 9.04(1H,brs), 10.02(1H,brs), 12.85(1H,brs).

1

Primer 93

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-piridin-2-iltieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada 6-bromo-2-piridin-2-iltieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0470] U smešu 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (221 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D, trietilamina (0.42 mL) i tetrahidrofurana (15 mL) se doda piridin-2-karbonilhlorid hidrohlorid (214 mg) uz mešanje na sobnoj temperaturi. Smeša se meša 30 min na sobnoj temperaturi i na 50°C u toku noći. U reaktivnu smešu se dodaju trietilamin (0.42 mL) i piridin-2-karbonilhlorid hidrohlorid (214 mg). Posle 2 h, u reaktivnu smešu se doda vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata i smeša se ekstrahuje sa etil acetatom. Izdvojeni organski sloj se ispere sa vodom i slanim rastvorom (5 mL) i suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. U ostatak se dodaju etanol (10 mL) i 2M vodeni rastvor natrijum hidroksida (3.0 mL) i smeša se meša 1 h na 80°C. Reaktivna smeša se neutrališe sa 6M rastvorom hlorovodonične kiseline uz hlađenje ledom i smeša se ekstrahuje sa etil acetatom. Organski sloj se ispere sa slanim rastvorom (10 mL) i suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije sirovi produkt (300 mg) naslovljenog jedinjenja kao bledo narandžasta čvrsta supstanca.

MS(ESI+):[M+H]<+>309.

MS(ESI+), nađeno:308,310.

B) Izrada 6-bromo-2-piridin-2-il-3-{[2-(trimetilsilil)etoksi]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0471] Na isti način kao u Primeru 88, faza D, sirovi produkt (302 mg) naslovljenog jedinjenja se dobija kao žuto ulje od 6-bromo-2-piridin-2-iltieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (223 mg) izrađenog kao gore, tetrahidrofurana (10 mL), natrijum hidrida (60% u ulju, 70 mg) i [2-(hlormetoksi)etil](trimetil)silana (0.31 mL).

MS(ESI+):[M+H]<+>439.

MS(ESI+), nađeno:438,410.

1 4

C) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-piridin-2-iltieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0472] Na isti način kao u Primeru 83, faza C, terc-butil 3-metil-4-(4-okso-2-piridin-2-il-3-{[2-(trimetilsi- lil)etoksi]metil}-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-6-il)-1H-pirazol-1-karboksilat se dobija kao bledo narandžasto ulje od 6-bromo-2-piridin-2-il-3-{[2-(trimetilsilil)etoksi]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (302 mg) prethodno izrađenog, terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (425 mg), cezijum karbonata (1.35 g), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihloriddihlormetan kompleksa (1:1) (25.2 mg), 1,2-dimetoksietana (6 mL) i vode (2 mL). U tercbutil 3-metil-4-(4-okso-2-piridin-2-il-3-{[2-(trimetilsi- lil)etoksi]metil}-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-6-il)-1H-pirazol-1-karboksilat izrađen kao gore se doda rastvor 1M tetrabutilamonijum fluorid/tetrahidrofuran (3.0 mL) i smeša se meša 1 h na 50°C. U reaktivnu smešu se doda voda i smeša se ekstrahuje sa smešom etil acetat/tetrahidrofuran (3:1).

Organski sloj se suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. U ostatak se doda trifluorosirćetna kiselina (3 mL) i smeša se meša 1 h na sobnoj temperaturi. Reaktivna smeša se koncentruje pod sniženim pritiskom, u ostatak se doda vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata i smeša se ekstrahuje sa smešom etil acetat/tetrahidrofuran (3:1). Organski sloj se suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti baznom hromatografijom na koloni silika gela (metanol/etil acetat) a predmet frakcije se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije naslovljeno jedinjenje (18.6 mg) kao bledo žuta čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.41-2.47(3H,m), 7.54(1H,s), 7.66(1H,ddd,J=7.6,4.7,1.1Hz), 7.95(0.67H,brs), 8.08(1H,td,J=7.7,1.5Hz), 8.29-8.35(0.33H,m), 8.40(1H,d,J=7.9Hz), 8.77(1H,d,J=4.2Hz), 11.94(1H,brs), 13.05(1H,brs).

Primer 94

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(2-fenil-1-pirolidin-1-iletil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada 2-hlor-3-fenilpropanoil hlorida

1

[0473] U smešu 2-hidroksi-3-fenilpropanoatne kiseline (1.0 g) i toluena (10 mL) se doda tionil hlorid (1.3 mL) u malim porcijama. Reaktivni sistem se meša 2 h uz zagrevanje na 40°C i doda se N,N-dimetilformamid (0.093 mL). Reaktivni sistem se meša 20 h uz zagrevanje na 40°C, koncentruje pod sniženim pritiskom i doda se toluen (20 mL). Smeša se koncentruje pod sniženim pritiskom i doda se toluen (20 mL). Smeša se ponovo koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije sirovi produkt (1.2 g) naslovljeno jedinjenja kao bledo žuta tečnost.<1>H-NMR(CDCl3) δ 3.19-3.31(1H,m), 3.39-3.57(1H,m), 4.65-4.80(1H,m), 7.04-7.46(5H,m). B) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(2-fenil-1-pirolidin-1-iletil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0474] U smešu 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (221 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D, trietilamina (0.21 mL) i tetrahidrofurana (5.0 mL) se doda 2-hlor-3-fenilpropanoil hlorid (305 mg) uz mešanje na sobnoj temperaturi. Reaktivna smeša se meša 10 min i doda se pirolidin (0.42 mL). Reaktivna smeša se meša 2 h uz zagrevanje na 70°C, doda se natrijum jodid (2.0 mg) i reaktivna smeša se meša 18 h uz zagrevanje na 70°C. Smeša se ekstrahuje sa etil acetatom i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti baznom hromatografijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) da se dobije bledo žuta čvrsta supstanca (285 mg). Dobijena bledo žuta čvrsta supstanca (285 mg) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilat (435 mg), natrijum karbonat (126 mg), 1,2-dimetoksietan (4.0 mL) i voda (2.0 mL) se stave u bocu a atmosfera u boci se prečisti sa argonom. Doda se [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihloriddihlormetan kompleks (1:1) (57 mg) i atmosfera u boci se ponovo prečisti sa argonom.

Reaktivni sistem se meša 30 min na 100°C, ekstrahuje sa etil acetatom i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i ekstrakt se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti baznom hromatografijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan i metanol/etil acetat) da se dobiju dve vrste bledo žute čvrste supstance. Čvrsta supstanca ranije eluirana se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) da se dobije sirovi produkt (5.0 mg) terc-butil 3-metil-4-{4-okso-2-[(E)-2-feniletenil]-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-6-il}-1H-pirazol-1-karboksilat kao žuta čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca eluirana kasnije se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan i metanol/etil acetat) i dobijena bledo žuta čvrsta supstanca se kristališe iz

1

smeše metanol/etil acetat da se dobije naslovljeno jedinjenje (18 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.54-1.72(4H,m), 2.24-2.49(7H,m), 2.85-3.03(1H,m), 3.33-3.40(1H,m), 3.91-4.00(1H,m), 7.14-7.30(5H,m), 7.32(1H,s), 7.77-8.38(1H,m), 12.21(1H,brs), 12.96(1H,brs).

Primer 95

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(E)-2-feniletenil]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on monohidrohlorida

[0475] U rastvor sirovog produkta (5.0 mg) terc-butil 3-metil-4-{4-okso-2-[(E)-2-feniletenil]-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-6-il}-1H-pirazol-1-karboksilata izrađenog u Primeru 94, faza B u metanolu (1.0 mL) se doda rastvor rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (0.50 mL). Reaktivni sistem se meša 30 min na sobnoj temperaturi i smeša se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se kristališe iz smeše metanol/etil acetat da se dobije naslovljeno jedinjenje (1.7 mg) kao žuta čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.47(3H,s), 7.04(1H,d,J=16.1Hz), 7.41(1H,s), 7.42-7.51(3H,m), 7.63-7.70(2H,m), 7.93(1H,d,J=16.1Hz), 8.06(1H,s).

Primer 96

Izrada 2-(1H-imidazol-1-ilmetil)-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada 6-bromo-2-(1H-imidazol-1-ilmetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0476] Na isti način kao u Primeru 2, faza B, naslovljeno jedinjenje (88 mg) se dobija kao žuta čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(hlormetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (180 mg) izrađenog u Primeru 2, faza A, 1H-imidazola (131 mg), kalijum karbonata (178 mg), natrijum jodida (9.7 mg) i N,N-dimetilformamida (3.0 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 5.19(2H,s), 6.91(1H,brs), 7.21(1H,brs), 7.59(1H,s), 7.71(1H,brs), 12.92(1H,brs).

1

B) Izrada 2-(1H-imidazol-1-ilmetil)-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0477] Na isti način kao u Primeru 2, faza C, naslovljeno jedinjenje (1.8 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(1H-imidazol-1-ilmetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (88 mg) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (174 mg), natrijum karbonata (51 mg), 1,2-dimetoksietana (2.0 mL) i vode (1.0 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (23 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.37-2.47(3H,m), 5.19(2H,s), 6.92(1H,s), 7.23(1H,s), 7.36(1H,s), 7.73(1H,s), 7.88(0.6H,brs), 8.25(0.4H,brs), 12.68(1H,brs), 12.88-13.04(1H,m).

Primer 97

Izrada 2-[(2,2-dimetilpirolidin-1-il)metil]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada 6-bromo-2-[(2,2-dimetilpirolidin-1-il)metil]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0478] Na isti način kao u Primeru 2, faza B, naslovljeno jedinjenje (109 mg) se dobija kao bledo žuta čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(hlormetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (180 mg) izrađenog u Primeru 2, faza A, 2,2-dimetilpirolidin monohidrohlorida (261 mg), kalijum karbonata (445 mg), natrijum jodida (9.7 mg) i N,N-dimetilformamida (3.0 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.02(6H,s), 1.56-1.76(4H,m), 2.65-2.72(2H,m), 3.52(2H,s), 7.60(1H,s), 11.91(1H,brs).

B) Izrada 2-[(2,2-dimetilpirolidin-1-il)metil]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0479] Na isti način kao u Primeru 2, faza C, naslovljeno jedinjenje (22 mg) se dobija kao braon kristali od 6-bromo-2-[(2,2-dimetilpirolidin-1-il)metil]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (109 mg) i terc-butil 3-metil- 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (196 mg), natrijum karbonata (57 mg), 1,2-dimetoksietana (3.0 mL) i vode (1.5

1

mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (26 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.03(6H,s), 1.65(4H,s), 2.45(3H,s), 2.71(2H,brs), 3.53(2H,s), 7.37(1H,s), 8.02(1H,brs), 11.52-13.00(2H,m).

Primer 98

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(2-propilpirolidin-2-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada terc-butil 2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-2-propilpirolidin-1-karboksilata

[0480] Na isti način kao u Primeru 82, faza A, naslovljeno jedinjenje (33 mg) se dobija kao bledo žuta čvrsta supstanca od 1-(terc-butoksikarbonil)-2-propilprolina (503 mg) i trietilamina (0.454 mL) i tetrahidrofurana (10 mL) i 2-metilpropil hlorokarbonata (0.211 mL) i 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (360 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D i 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (4 mL) i etanola (10 mL).

MS(ESI+):[M+H]<+>442.

MS(ESI+), nađeno:442.

B) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(2-propilpirolidin-2-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0481] Na isti način kao u Primeru 11, faza B, naslovljeno jedinjenje (13 mg) se dobija kao bela čvrsta supstanca od terc-butil 2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-2-propilpirolidin-1-karboksilata (33 mg) i terc- butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (46 mg) i cezijum karbonata (146 mg) i 1,2-dimetoksietana (3 mL) i vode (0.2 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (3 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 0.77-0.89(3H,m), 0.90-1.02(1H,m), 1.23-1.38(1H,m), 1.74-1.89(1H,m), 1.93-2.43(5H,m), 2.46(3H,s), 3.25-3.44(2H,m), 7.34(1H,s), 8.09(1H,brs), 9.32(1H,brs), 9.55(1H,brs), 12.83(1H,brs).

1

Primer 99

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(8aR)-oktahidropirolo[1,2-a]pirazin-3-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada N-benzil-5-okso-D-prolinamida

[0482] 5-Okso-D-prolin (5.0 g), benzilamin (4.65 mL), 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)karbodiimid hidrohlorid (8.5 g) i 1-hidroksibenzotriazol (6.3 g) se izmešaju u acetonitrilu (100 mL) uz hlađenje ledom i smeša se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu i meša 3 h. Smeša se razblaži sa etil acetatom (200 mL) i ispere po redu sa 1M rastvorom hlorovodonične kiseline (50 mL), zasićenim vodenim rastvorom natrijum hidrogen karbonata (50 mL) i slanim rastvorom (50 mL). Organski sloj se suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata i koncentruje pod sniženim pritiskom. Čvrsti precipitat se sakupi filtriranjem, ispere sa dietil etrom i suši pod sniženim pritiskom da se dobije naslovljeno jedinjenje (4.02 g) kao beli prašak.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.82-1.96(1H,m), 2.02-2.36(3H,m), 3.99-4.09(1H,m), 4.29(2H,d,J=5.9Hz),7.18-7.38(5H,m), 7.85(1H,s), 8.50(1H,t,J=5.9Hz).

C) Izrada 1-fenil-N-[(2R)-pirolidin-2-ilmetil]metanamina

[0483] U suspenziju litijum aluminijum hidrida (5.40 g) u tetrahidrofuranu (150 mL) u kapima se uz hlađenje ledom doda suspenzija (350 mL) N-benzil-5-okso-D-prolinamida (11.0 g) u tetrahidrofuranu i smeša se meša 14 h uz zagrevanje na 60°C. Reaktivna smeša se ohladi na 0°C, dodaju se voda (10.8 mL), 1M vodeni rastvor natrijum hidroksida (5.4 mL) i voda (5.4 mL) i dobijeni nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem. Filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije naslovljeno jedinjenje (8.95 g) kao bledo žuto ulje. Ovo jedinjenje se koristi u sledećoj reakciji bez daljeg prečišćavanja.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.18-1.33(1H,m), 1.48-1.81(3H,m), 2.09(2H,m), 2.30-2.44(2H,m), 2.63-2.80(2H,m), 3.00-3.12(1H,m), 3.68(2H,s), 7.13-7.37(5H,m) .

C) Izrada metil (3S,8aR)-2-benziloktahidropirolo[1,2-a]pirazin-3-karboksilata

1

[0484] U suspenziju 1-fenil-N-[(2R)-pirolidin-2-ilmetil]metanamina (13.6 g) u toluenu (120 mL) se dodaju trietilamin (22.9 mL) i metil 2,3-dibromopropanoat (13.4 g) uz hlađenje ledom i smeša se meša 5 h uz zagrevanje na 90°C. Reaktivna smeša se ostavi da se ohladi na sobnu temperaturu i razblaži sa dietil etrom (200 mL) i slanim rastvorom (200 mL). Organski sloj se suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata a nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem. Filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom i prečisti hromatografijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan=10/80→50/50) da se dobije naslovljeno jedinjenje (6.86 g) kao bledo žuto ulje.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.14-1.28(1H,m), 1.53-1.77(3H,m), 1.83-2.00(2H,m), 2.31(1H,dd,J=10.7,3.9Hz), 2.61-2.95(3H,m), 3.29(1H,dd,J=10.7,2.0Hz), 3.53(1H,dd,J=3.7,1.8Hz), 3.62(3H,s) 3.89(2H,s), 7.17-7.37(5H,m).

D) Izrada 2-terc-butil 3-metil (3S,8aR)-heksahidropirolo[1,2-a]pirazin-2,3(1H)-dikarboksilata

[0485] U rastvor metil (3S,8aR)-2-benziloktahidropirolo[1,2-a]pirazin-3-karboksilata (6.80 g) u smeši 5-10% vodonik hlorid-metanol se doda 10% paladijum na ugljeniku (680 mg, 50% vlažnosti) i smeša se meša 10 h na sobnoj temperaturi u atmosferi vodonika (1 atm).

Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem kroz celite ploču i filtrat se koncentruje da se dobije bledo žuto ulje. Dobijeni metil (3S,8aR)-oktahidropirolo[1,2-a]pirazin-3-karboksilat dihidrohlorid se rastvori u zasićenom vodenom rastvoru natrijum hidrogen karbonata (25 mL) i tetrahidrofuranu (50 mL), doda se di-terc-butil dikarbonat (5.68 g) i smeša se meša 1 h na sobnoj temperaturi. Smeša se razblaži sa etil acetatom (300 mL) i ispere sa vodom (100 mL) i slanim rastvorom (100 mL). Organski sloj se suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata i koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan=10/90→20/80) da se dobije naslovljeno jedinjenje (6.50 g) kao bezbojno ulje.

<1>H-NMR(CDCl3) δ 1.18-1.39(1H,m), 1.42-1.51(9H,m), 1.61-1.94 (4H,m), 1.97-2.12(1H,m), 1.99-2.11(1H,m), 2.22-2.33(1H,m), 2.69-2.91(1H,m), 2.99-3.09(1H,m), 3.48-3.58(1H,m), 3.72-3.78(2H,m), 3.93-4.13(1H,m), 4.56-4.82(1H,m).

E) Izrada terc-butil (8aR)-3-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)heksahidropirolo[1,2-a]pirazin-2(1H)-karboksilata

1 1

[0486] U smešu (8aR)-2-(terc-butoksikarbonil)oktahidropirolo[1,2-a]pirazin-3-karboksilne kiseline (270 mg), trietilamina (0.18 mL) i tetrahidrofurana (10 mL) se doda 2-metilpropil hlorokarbonat (0.13 mL) uz mešanje na sobnoj temperaturi. Nakon 2 h, doda se 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamid (221 mg) izrađen u Primeru 1, faza D, i smeša se meša 2 h na 50°C. Reaktivna smeša se sipa u zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata i ekstrahuje sa etil acetatom. Ekstrakt se suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata.

Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se rastvori u etanolu (10 mL), doda se 2M vodeni rastvor natrijum hidroksida (2 mL) i smeša se meša 2 h na 80°C. Reaktivna smeša se ostavi da se ohladi na sobnu temperaturu i sipa u zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata. Smeša se ekstrahuje sa smešom etil acetat/tetrahidrofuran i ekstrakt se suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata.

Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti baznom hromatografijom na koloni silika gela (metanol/etil acetat) da se dobije naslovljeno jedinjenje (65 mg) kao žuta čvrsta supstanca.

MS(ESI+):[M+H]<+>455.

MS(ESI+), nađeno:455.

F) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(8aR)-oktahidropirolo[1,2-a]pirazin-3-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0487] Na isti način kao u Primeru 11, faza B, naslovljeno jedinjenje (36 mg) se dobija kao bela čvrsta supstanca od terc-butil (8aR)-3-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)heksahidropirolo[1,2-a]pirazin-2(1H)-karboksilata (65 mg) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (88 mg) i cezijum karbonata (279 mg) i 1,2-dimetoksietana (10 mL) i vode (1 mL) i [1,1’-bis(difenilphosphino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (5 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.55-4.06(14H,m), 4.57-4.85(1H,m), 7.40(1H,s), 8.11(1H,s), 12.01(1H,brs).

Primer 100

Izrada terc-butil (2S)-2-[6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-

1 2

2-il]piperidin-1-karboksilata

[0488] U suspenziju 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S)-piperidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida (1.05 g) izrađenog u Primeru 83, faza C u tetrahidrofuranu (35 mL) dodaju se trietilamin (1.87 mL) i di-terc-butil dikarbonat (0.932 mL) i smeša se meša 1.5 h na 50°C. U smešu se dodaju etil acetat (50 mL) i vodeni rastvor amonijum hlorida (30 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (10 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (10 mL) i suše preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) a predmet frakcije se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije naslovljeno jedinjenje (560 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.15-1.60(12H,m), 1.60-1.89(2H,m), 1.99-2.16(1H,m), 2.37-2.48(3H,m), 3.41-3.59(1H,m), 3.80-3.91(1H,m), 5.01(1H,brs), 7.37(1H,s), 7.84-8.37(1H,m), 12.36(1H,brs), 12.97(1H,brs).

Primer 101

Izrada 2-[(2R)-azepan-2-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Optička rezolucija terc-butil 2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)azepan-1-karboksilata

[0489] terc-Butil 2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)azepan-1-karboksilat (772 mg) izrađen u Primeru 79, faza A, se frakcioniše visoko efikasnom tečnom hromatografijom (kolona: CHIRALPAK AD (50 mm i.d.x500 mm L, proizvođača DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES, LTD.), mobilna faza: heksan/etanol (500/500), brzina protoka: 60 mL/min, temperatura kolone: 30°C). terc-Butil (2R)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin- 2-il)azepan-1-karboksilat (325 mg, >99.9%ee, vreme retencije 11.2 min) i terc-butil (2S)-2-(6-bromo-4-okso-3,4- dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)azepan-1-karboksilat (326 mg, >99.9%ee, vreme retencije 13.7 min) su dobijeni po gore pomenutim uslovima visoko efikasne tečne hromatografije. Analiza je izvedena visoko efikasnom tečnom hromatografijom (kolona: CHIRALPAK AD-H (4.6 mm i.d.x250 mm L, proizvođača

1

DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES, LTD.), mobilna faza: heksan/etanol (500/500), brzina protoka:0.5 mL/min, temperatura kolone: 30°C, detekcija 220 nm). Apsolutna sterna konfiguracija nakon optičke rezolucije je određena analizom strukture kristala frakcije X zracima uz vreme retencije od 13.7 min.

B) Izrada 2-[(2R)-azepan-2-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0490] Na isti način kao u Primeru 76, faza B, naslovljeno jedinjenje (68.8 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od terc-butil (2R)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)azepan-1-karboksilata (325 mg) izrađenog kao gore, terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (468 mg), cezijum karbonata (495 mg), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (31.0 mg), 1,2-dimetoksietana (8 mL), vode (0.8 mL), rastvora rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (1 mL) i metanola (5 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.42-1.89(7H,m), 2.07-2.21(1H,m), 2.45(3H,s), 2.74-2.96(2H,m), 3.82(1H,dd,J=9.5,4.4Hz), 7.34(1H,s), 8.01(1H,brs).

Primer 102

Izrada 2-[(2S)-azepan-2-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0491] Na isti način kao u Primeru 76, faza B, naslovljeno jedinjenje (92.7 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od terc-butil (2S)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)azepan-1-karboksilata (310 mg) izrađenog u Primeru 101, faza A, terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (446 mg), cezijum karbonata (472 mg), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihloriddihlormetan kompleksa (1:1) (29.6 mg), 1,2-dimetoksietana (8 mL), vode (0.8 mL), rastvora rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (1 mL) i metanola (5 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.40-1.89(7H,m), 2.05-2.21(1H,m), 2.45(3H,s), 2.74-2.97(2H,m), 3.76-3.86(1H,m), 7.34(1H,s), 8.01(1H,brs).

Primer 103

1 4

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S)-2-metilpirolidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada terc-butil (2S)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-2-metilpirolidin-1-karboksilata

[0492] Na isti način kao u Primeru 82, faza A, sirovi produkt (244 mg) naslovljenog jedinjenja se dobija kao bledo žuta čvrsta supstanca od 1-(terc-butoksikarbonil)-2-metil-L-prolina (1.2 g) i trietilamina (1.21 mL) i tetrahidrofurana (20 mL) i 2-metilpropil hlorokarbonata (0.566 mL) i 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (964 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D i 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (10.9 mL) i etanola (20 mL). MS(ESI+):[M+H]<+>414.

MS(ESI+), nađeno:414.

Optička čistoća (19.5 min, >99.9%ee): Analiza je izvedena visoko efikasnom tečnom hromatografijom (kolona: CHIRALPAK AD (4.6 mm i.d.x250 mm L, proizvođača DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES, LTD.), mobilna faza: heksan/etanol (900/100), brzina protoka: 1.0 mL/min, temperatura kolone: 30°C, detekcija 220 nm).

B) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S)-2-metilpirolidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0493] Na isti način kao u Primeru 11, faza B, naslovljeno jedinjenje (54 mg) se dobija kao bela čvrsta supstanca od terc-butil (2S)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-2-metilpirolidin-1-karboksilata (239 mg) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (356 mg) i cezijum karbonata (1.13 g) i 1,2-dimetoksietana (6 mL) i vode (1.5 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (21 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.74(3H,s), 1.83-2.40(4H,m), 2.46(3H,brs), 3.27-3.44(2H,m), 7.37(1H,s), 8.10(1H,brs), 9.18(1H,brs), 9.62(1H,brs), 12.81(1H,brs).

Primer 104

Izrada 2-(3-azabiciklo[3.1.0]heks-3-ilmetil)-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-

1

4(3H)-ona

A) Izrada 2-(3-azabiciklo[3.1.0]heks-3-ilmetil)-6-bromotieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0494] Na isti način kao u Primeru 2, faza B, naslovljeno jedinjenje (90 mg) se dobija kao bledo žuta čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(hlormetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (180 mg) izrađenog u Primeru 2, faza A, 3-azabiciklo[3.1.0]heksan monohidrohlorida (231 mg), kalijum karbonata (445 mg), natrijum jodida (9.7 mg) i N,N-dimetilformamida (3.0 mL).<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 0.24-0.38(1H,m), 0.66-0.75(1H,m), 1.31-1.41(2H,m), 2.43-2.48(2H,m), 2.90(2H,d,J=8.5Hz), 3.55(2H,s), 7.60(1H,s), 12.27(1H,brs).

B) Izrada 2-(3-azabiciklo[3.1.0]heks-3-ilmetil)-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0495] Na isti način kao u Primeru 2, faza C, naslovljeno jedinjenje (16 mg) se dobija kao braon kristali od 2-(3-azabiciklo[3.1.0]heks-3-ilmetil)-6-bromotieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (90 mg) i terc-butil 3-metil- 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (170 mg), natrijum karbonata (50 mg), 1,2-dimetoksietana (2.0 mL) i vode (1.0 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (23 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 0.26-0.41(1H,m), 0.65-0.78(1H,m), 1.31-1.46(2H,m), 2.38-2.49(5H,m), 2.92(2H,d,J=8.5Hz), 3.56(2H,s), 7.37(1H,s), 7.80-8.42(1H,m), 12.01(1H,brs), 12.99(1H,brs).

Primer 105

Izrada 2-{[(4-metoksibenzil)(1-metiletil)amino]metil}-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0496] Na isti način kao u Primeru 2, faza B, 6-bromo-2-{[(4-metoksibenzil)(1-metiletil)amino]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on (120 mg) se dobija kao žuta čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(hlormetil)tieno[3,2- d]pirimidin-4(3H)-ona (180 mg) izrađenog u Primeru 2, faza A, N-(4-metoksibenzil)propan-2-amin monohidrohlorida (416 mg), kalijum

1

karbonata (445 mg), natrijum jodida (9.7 mg) i N,N-dimetilformamida (3.0 mL). Na isti način kao u Primeru 2, faza C, naslovljeno jedinjenje (86 mg) se dobija kao žuta čvrsta supstanca od 6-bromo-2-{[(4-metoksibenzil)(1-metiletil)amino]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (120 mg) i terc-butil 3-metil- 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (175 mg), natrijum karbonata (51 mg), 1,2-dimetoksietana (3.0 mL) i vode (1.5 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (23 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.05(6H,d,J=6.6Hz), 2.44(3H,brs), 2.91-3.03(1H,m), 3.55-3.64(4H,m), 3.66(3H,s), 6.79(2H,d,J=8.6Hz), 7.27(2H,d,J=8.6Hz), 7.32(1H,s), 7.73-8.42(1H,m), 11.42(1H,brs), 12.96(1H,brs).

Primer 106

Izrada terc-butil (3S)-3-[6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]-2-azabiciklo[2.2.2]oktan-2-karboksilata

A) Izrada terc-butil (3S)-3-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-2-azabiciklo[2.2.2]oktan-2-karboksilata

[0497] U rastvor (3S)-2-(terc-butoksikarbonil)-2-azabiciklo[2.2.2]oktan-3-karboksilne kiseline (0.511 g) i trietilamina (0.348 mL) u tetrahidrofuranu (5 mL) se uz mešanje i hlađenje ledom doda izobutil hloroformat (0.26 mL). Nakon 30 min mešanja na sobnoj temperaturi, doda se rastvor 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (0.221 g) izrađen u Primeru 1, faza D, u tetrahidrofuranu (1 mL). Reaktivni sistem se meša 4 dana uz zagrevanje na 60°C. U reaktivni sistem se sipa voda i smeša se ekstrahuje sa etil acetatom i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. U ostatak se dodaju 2M vodeni rastvor natrijum hidroksida (3.0 mL) i 1,2-dimetoksietan (6.0 mL) i smeša se meša 1 h uz zagrevanje u mikrotalasnom reaktoru na 150°C. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i smeša se ekstrahuje sa etil acetatom i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti baznom hromatografijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) da se dobije naslovljeno jedinjenje (193 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca. Optička čistoća je 70%ee. Analiza je izvedena visoko efikasnom tečnom

1

hromatografijom (kolona: CHIRALPAK AD-H (4.6 mm i.d.x250 mm L, proizvođača DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES, LTD.), mobilna faza: heksan/etanol (800/200), brzina protoka: 1.0 mL/min, temperatura kolone: 30°C, detekcija 220 nm).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.07-1.83(16H,m), 2.03-2.23(2H,m), 3.95-4.08(1H,m), 4.51-4.56(1H,m), 7.63(1H,s), 12.50-12.77(1H,m).

B) Izrada terc-butil (3S)-3-[6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]-2-azabiciklo[2.2.2]oktan-2-karboksilata

[0498] terc-Butil (3S)-3-(6-Bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-2-azabiciklo[2.2.2]oktan-2-karboksilat (190 mg), terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilat (266 mg), natrijum karbonat (78 mg), 1,2-dimetoksietan (3.0 mL) i voda (1.5 mL) se stave u bocu a atmosfera u boci se prečisti sa argonom. Doda se [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleks (1:1) (35 mg) i atmosfera u boci se ponovo prečisti sa argonom. Reaktivni sistem se meša 3 h na 100°C i smeša se ekstrahuje sa etil acetatom i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i ekstrakt se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) i dobijena bledo žuta čvrsta supstanca kristališe iz smeše metanol/etil acetat da se dobije naslovljeno jedinjenje (146 mg) kao bledo žuta čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.08-1.85(16H,m), 2.06-2.22(2H,m), 2.39-2.48(3H,m), 3.97-4.09(1H,m), 4.52-4.56(1H,m), 7.39(0.4H,s), 7.42(0.6H,s), 7.92(0.6H,brs), 8.27(0.4H,brs), 12.24-12.46(1H,m), 12.96(1H,brs).

Primer 107

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S*,5R*)-5-fenilpiperidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on monohidrohlorida

[0499] Na isti način kao u Primeru 86, faza A, terc-butil (2S*,5R*)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-5-fenilpiperidin-1-karboksilat se dobija kao bledo žuta amorfna čvrsta supstanca od 3-amino-5-bro-motiofen-2-karboksamida (323 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D, 1-(terc-butoksikarbonil)-5-fenilpiperidin-2-karboksilne kiseline (511 mg,

1

nabavljene od ChemImpex, nepoznat odnos diastereomera), 2-metilpropil hlorokarbonata (0.418 mL), trietilamina (0.506 mL) i tetrahidrofurana (8 mL), 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (2 mL) i etanola (5 mL). Na isti način kao u Primeru 76, faza B, naslovljeno jedinjenje (119 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od terc-butil (2S*,5R*)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-5-fenilpiperidin-1-karboksilata izrađenog kao gore, terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (321 mg), cezijum karbonata (339 mg), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (21.2 mg), 1,2-dimetoksietana (5 mL), vode (0.5 mL), rastvora rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (1 mL) i metanola (5 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.66-1.89(2H,m), 2.15-2.32(1H,m), 2.47(3H,s), 2.99-3.13(1H,m), 3.34-3.44(2H,m), 3.85-4.01(1H,m), 4.72(1H,brs), 7.23-7.31(3H,m), 7.31-7.40(2H,m), 7.49(1H,s), 8.11(1H,brs), 9.29-9.43(1H,m), 9.78-9.93(1H,m), 12.67(1H,brs).

Primer 108

Izrada 2-[(3S)-2-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0500] U rastvor terc-butil (3S)-3-[6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]-2- azabiciklo[2.2.2]oktan-2-karboksilata (143 mg) izrađenog u Primeru 106, faza B u metanolu (3.0 mL) se doda rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (1.0 mL) uz mešanje na sobnoj temperaturi. Reaktivni sistem se meša 1 h uz zagrevanje na 50°C i precipitat se sakupi filtriranjem i ispere sa etil acetatom da se dobije naslovljeno jedinjenje (128 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.31-2.16(8H,m), 2.31-2.38(1H,m), 2.47(3H,s), 3.51-3.64(1H,m), 4.39-4.58(1H,m), 7.38(1H,s), 8.12(1H,s), 8.19-8.40(1H,m), 10.08-10.32(1H,m), 12.87(1H,brs).

Primer 109

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2R)-2-metilpirolidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

1

[0501] Na isti način kao u Primeru 82, faza A, naslovljeno jedinjenje (199 mg) se dobija kao bledo smeđa ulje od 1-(terc-butoksikarbonil)-2-metil-L-prolina (1.5 g) i trietilamina (3.0 mL) i tetrahidrofurana (20 mL) i 2-metilpropil hlorokarbonata (0.707 mL) i 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (1.21 g) izrađenog u Primeru 1, faza D i 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (13.6 mL) i etanola (20 mL).

MS(ESI+):[M+H]<+>414.

MS(ESI+), nađeno:414.

B) Optička rezolucija terc-butil 2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-2-metilpirolidin-1-karboksilata

[0502] terc-Butil 2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-2-metilpirolidin-1-karboksilat (180 mg) se frakcioniše visoko efikasnom tečnom hromatografijom (kolona: CHIRALPAK AD (50 mm i.d.x500 mm L, proizvođača DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES, LTD.), mobilna faza: heksan/etanol (900/100), brzina protoka: 80 mL/min, temperatura kolone: 30°C). Po gore pomenutim uslovima visoko efikasne tečne hromatografije, delovi rastvora koji sadrže optički aktivni oblik sa kraćim vremenom retencije se koncentruju da se dobije terc-butil (2R)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-2-metilpirolidin-1-karboksilat (88 mg, 9.25 min, >99.9%ee). Pored toga, delovi rastvora koji sadrže optički aktivni oblik sa dužim vremenom retencije se koncentruju da se dobije terc-butil (2S)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-2-metilpirolidin-1-karboksilat (85 mg, 19.3 min, >99.9%ee). Analiza je izvedena visoko efikasnom tečnom hromatografijom (kolona: CHIRALPAK AD (4.6 mm i.d.x250 mm L, proizvođača DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES, LTD.), mobilna faza: heksan/etanol (900/100), brzina protoka: 1.0 mL/min, temperatura kolone: 30°C, detekcija 220 nm).

Apsolutna konfiguracija se određuje poređenjem sa terc-butil (2S)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-2-metilpirolidin-1-karboksilatom izrađenim u Primeru 103, faza A.

1

C) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2R)-2-metilpirolidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0503] Na isti način kao u Primeru 11, faza B, naslovljeno jedinjenje (56 mg) se dobija kao bela čvrsta supstanca od terc-butil (2R)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-2-metilpirolidin-1-karboksilata (88 mg) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (131 mg) i cezijum karbonata (415 mg) i 1,2-dimetoksietana (2 mL) i vode (0.5 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (7.8 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.75(3H,s), 1.81-2.40(4H,m), 2.46(3H,s), 3.30-3.43(2H,m), 7.37(1H,s), 8.10(1H,brs), 9.23(1H,brs), 9.77(1H,brs), 12.81(1H,brs).

Primer 110

Izrada 2-[(1S*,2S*,5R*)-3-azabiciklo[3.1.0]heks-2-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada terc-butil (1S*,2S*,5R*)-2-[(5-bromo-2-karbamoiltiofen-3-il)karbamoil]-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilata

[0504] Na isti način kao u Primeru 78, faza A, naslovljeno jedinjenje (400 mg) se dobija kao bledo žuta amorfna čvrsta supstanca od 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (338 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D, (1S*,2S*,5R*)-3-(terc-butoksikarbonil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-2-karboksilne kiseline (695 mg), 2-metilpropil hlorokarbonata (0.398 mL), trietilamina (0.424 mL) i tetrahidrofurana (5 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 0.46-0.60(1H,m), 0.60-0.72(1H,m), 1.11-1.48(9H,m), 1.63-1.73(1H,m), 1.86-1.97(1H,m), 3.40-3.47(1H,m), 3.48-3.57(1H,m), 4.27(1H,d,J=4.9Hz), 7.69(2H,brs), 8.05(1H,s), 11.51(1H,brs).

B) Izrada 2-[(1S*,2S*,5R*)-3-azabiciklo[3.1.0]heks-2-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0505] U rastvor terc-butil (1S*,2S*,5R*)-2-[(5-bromo-2-karbamoiltiofen-3-il)karbamoil]-3-

1 1

azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilata (400 mg) izrađenog kao gore u etanolu (4 mL) se doda 2M vodeni rastvor natrijum hidroksida (4.62 mL) i smeša se meša 54 h na 70°C. Reaktivna smeša se neutrališe sa 6M rastvorom hlorovodonične kiseline (1.5 mL) uz hlađenje ledom i doda se etil acetat (30 mL). Izdvojeni vodeni sloj se ispere sa slanim rastvorom (5 mL) i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije terc-butil (1S,2S,5R)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilat kao bledo žuta čvrsta supstanca. Na isti način kao u Primeru 83, faza C, naslovljeno jedinjenje (130 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od terc-butil (1S*,2S*,5R*)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilata izrađenog kao gore, terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (572 mg), cezijum karbonata (605 mg), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (38.0 mg), 1,2-dimetoksietana (7 mL), vode (0.7 mL), rastvora rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (1 mL) i metanola (4 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 0.56-0.73(2H,m), 1.82-1.93(1H,m), 2.25-2.36(1H,m), 2.46(3H,s), 3.38-3.54 (2H,m), 4.91(1H,brs), 7.33(1H,s), 8.11(1H,s), 8.73(1H,brs), 10.50(1H,brs), 13.06(1H,brs).

Primer 111

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(4R)-1,3-tiazolidin-4-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada terc-butil (4R)-4-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-1,3-tiazolidin-3-karboksilata

[0506] Na isti način kao u Primeru 71, faza A, naslovljeno jedinjenje (774 mg) se dobija kao bledo smeđa čvrsta supstanca od 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (500 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D, (4R)-3-(terc-butoksikarbonil)-1,3-tiazolidin-4-karboksilne kiseline (1.16 g), 2-metilpropil hlorokarbonata (0.647 mL), trietilamina (0.694 mL) i tetrahidrofurana (10 mL), 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (5.65 mL) i etanola (10 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.17(9H,brs, glavni), 1.41(9H,brs, sporedni), 3.18(1H,brs), 3.51(1H,brs), 4.60(2H,q,J=8.7Hz), 4.90(1H,brs, glavni), 5.05(1H,brs, sporedni), 7.61(1H,brs),

1 2

12.77 (1H,brs).

*Uočeno kao 3:2 smeša rotamera.

B) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(4R)-1,3-tiazolidin-4-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0507] Na isti način kao u Primeru 76, faza B, naslovljeno jedinjenje (94 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od terc-butil (4R)-4-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-1,3-tiazolidin-3-karboksilata (250 mg) izrađenog kao gore, terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (369 mg), cezijum karbonata (389 mg), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihloriddihlormetan kompleksa (1:1) (24.4 mg), 1,2-dimetoksietana (5 mL), vode (0.5 mL), rastvora rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (1 mL) i metanola (3 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.47(3H,brs), 3.03(1H,dd,J=10.0,7.0Hz), 3.21(1H,dd,J=10.0,6.6Hz), 3.58(1H,brs), 4.11(1H,d,J=8.7Hz), 4.19-4.33(2H,m), 7.37(1H,s), 7.90(1H,brs, glavni), 8.26(1H,brs, sporedni), 12.28(1H,brs), 13.01(1H,brs).

*Uočeno kao 3:2 smeša tautomera.

Primer 112

Izrada 2-[(1S,2R,5R)-3-azabiciklo[3.1.0]heks-2-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada terc-butil (1R*,2S*,5S*)-2-[6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]- 3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilata

[0508] Na isti način kao u Primeru 83, faza C, terc-butil (1R*,2S*,5S*)-2-{6-[1-(tercbutoksikarbonil)-3-metil-1H-pirazol-4-il]-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il}-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilat se izrađuje kao bledo žuta amorfna čvrsta supstanca od terc-butil (1R*,2S*,5S*)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilata (293 mg) izrađenog u Primeru 87, faza A, terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (437 mg), cezijum karbonata (463 mg), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-

1

dihlormetan kompleksa (1:1) (29.0 mg), 1,2-dimetoksietana (7 mL) i vode (0.7 mL). U rastvor terc-butil (1R*,2S*,5S*)-2-{6-[1-(terc-butoksikarbonil)-3-metil-1H-pirazol-4-il]-4- okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il}-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilata izrađenog kao gore u tetrahidrofuranu (5 mL) se doda 2M vodeni rastvor natrijum hidroksida (1 mL) i smeša se meša 2 h na 60°C. U reaktivnu smešu se dodaju etil acetat (20 mL) i 1M rastvor hlorovodonične kiseline (2 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ispere sa slanim rastvorom (5 mL) i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije naslovljeno jedinjenje (156 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 0.50-0.63(1H,m), 0.79-0.96(1H,m), 1.07(9H,s, glavni), 1.36(9H,s, sporedni), 1.63-1.76(1H,m), 1.89-2.02(1H,m), 2.45(3H,s), 3.47-3.63(2H,m), 4.77(1H,d,J=5.1Hz), 7.38(1H,brs, sporedni), 7.42(1H,s,glavni), 7.77-8.43(1H,m), 12.36(1H,brs), 12.96(1H,brs).

*Uočeno kao 5:2 smeša rotamera.

B) Optička rezolucija terc-butil (1R*,2S*,5S*)-2-[6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilata

[0509] terc-Butil (1R*,2S*,5S*)-2-[6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilat (205 mg) se frakcioniše visoko efikasnom tečnom hromatografijom (kolona: CHIRALPAK AD (50 mm i.d.x500 mm L, proizvođača DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES, LTD.), mobilna faza: heksan/etanol (900/100), brzina protoka: 80 mL/min, temperatura kolone: 30°C). terc-Butil (1S,2R,5R)-2-[6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilat (80 mg, >99.9%ee, vreme retencije 20.2 min) i tercbutil (1R,2S,5S)-2-[6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilata (77 mg, 99.8%ee, vreme retencije 30.2 min) se dobijaju po gore pomenutim uslovima visoko efikasne tečne hromatografije. Analiza je izvedena visoko efikasnom tečnom hromatografijom (kolona: CHIRALPAK AD-3 (4.6 mm i.d.x250 mm L, proizvođača DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES, LTD.), mobilna faza: heksan/etanol (850/150), brzina protoka: 1 mL/min, temperatura kolone: 30°C, detekcija 220 nm). Apsolutna sterna konfiguracija nakon optičke rezolucije je određena kristalografijom frakcije X zracima uz vreme retencije 20.2 min.

1 4

C) Izrada 2-[(1S,2R,5R)-3-azabiciklo[3.1.0]heks-2-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0510] U rastvor terc-butil (1S,2R,5R)-2-[6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilata (75.0 mg) izrađenog kao gore u metanolu (5 mL) se doda rastvor rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (1 mL) i smeša se meša 2 h na 50°C. Doda se etil acetat (4 mL) i precipitirana čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (53.9 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 0.55-0.74(2H,m), 1.82-1.94(1H,m), 2.25-2.36(1H,m), 2.46(3H,s), 3.37-3.56 (2H,m), 4.91(1H,brs), 7.33(1H,s), 8.10(1H,s), 8.73(1H,brs), 10.43(1H,brs), 13.04(1H,brs).

Primer 113

Izrada 2-[(1R,2S,5S)-3-azabiciklo[3.1.0]heks-2-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0511] Na isti način kao u Primeru 110, faza C, naslovljeno jedinjenje (56.9 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od terc-butil (1R,2S,5S)-2-[6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilata (75.0 mg) izrađenog u Primeru 112, faza B, rastvora rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (1 mL) i metanola (5 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 0.57-0.73(2H,m), 1.82-1.93(1H,m), 2.25-2.36(1H,m), 2.46(3H,s), 3.36-3.56 (2H,m), 4.91(1H,brs), 7.32(1H,s), 8.10(1H,s), 8.73(1H,brs), 10.40(1H,brs), 13.04(1H,brs).

Primer 114

Izrada 2-[(2,5-dimetilpirolidin-1-il)metil]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0512] Na isti način kao u Primeru 2, faza B i faza C, naslovljeno jedinjenje (45 mg) se dobija

1

kao bledo žuta čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(hlormetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (180 mg) izrađenog u Primeru 2, faza A, 2,5-dimetilpirolidina (0.170 mL) i kalijum karbonata (178 mg) i natrijum jodida (9.7 mg) i N,N-dimetilformamida (3.0 mL) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (252 mg) i natrijum karbonata (130 mg) i 1,2-dimetoksietana (3.0 mL) i vode (1.5 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (33 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 0.96-1.06(6H,m), 1.28-1.43(2H,m), 1.75-1.91(2H,m), 2.45(3H,s), 2.72-2.85(2H,m), 3.67(2H,s), 7.37(1H,s), 7.84-8.19(1H,m), 11.48-12.21(1H,m), 12.58-13.18(1H,m).

Primer 115

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(1,2,3,4-tetrahidroizohinolin-3-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada terc-butil 3-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-3,4-dihidroizohinolin-2(1H)-karboksilata

[0513] Na isti način kao u Primeru 71, faza A, naslovljeno jedinjenje (182 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (265 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D, (3S)-2-(terc-butoksikarbonil)-1,2,3,4-tetrahidroizohinolin-3-karboksilne kiseline (699 mg), 2-metilpropil hlorokarbonata (0.327 mL), trietilamina (0.416 mL) i tetrahidrofurana (5 mL), 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (3.00 mL) i etanola (5 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.07-1.53 (9H,m), 2.97-3.28(2H,m), 4.43-5.18(3H,m), 7.06-7.32(4H,m), 7.43-7.66(1H,m), 12.77(1H,brs).

B) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(1,2,3,4-tetrahidroizohinolin-3-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0514] Na isti način kao u Primeru 83, faza C, naslovljeno jedinjenje (65 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od terc-butil 3-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-3,4-dihidroizohinolin-2(1H)-karboksilata (150 mg) izrađenog kao gore, terc-butil 3-

1

metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (200 mg), cezijum karbonata (211 mg), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihloriddihlormetan kompleksa (1:1) (13.3 mg), 1,2-dimetoksietana (5 mL), vode (0.5 mL), rastvora rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (1 mL) i metanola (4 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.48(3H,s), 3.20(1H,dd,J=16.8,11.9Hz), 3.48-3.62(1H,m), 4.35-4.52(2H,m), 4.62-4.78(1H,m), 5.95-7.55(7H,m), 8.14(1H,s), 9.92-10.17(1H,m), 10.40(1H,brs), 13.02(1H,brs).

Primer 116

Izrada 2-(7-azabiciklo[2.2.1]hept-1-il)-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on monohidrohlorida

A) Izrada metil 2-[(fenilkarbonil)amino]prop-2-enoata

[0515] U dihlormetan (400 mL) se dodaju metil serinat hidrohlorid (45.0 g) i trietilamin (132 mL) i u kapima se doda benzoil hlorid (77.0 mL). Nakon mešanja na sobnoj temperaturi u toku noći, reaktivni sistem se ispere dva puta sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hidrogen karbonata i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se rastvori u dihlormetanu (300 mL) i doda se 2,3,4,6,7,8,9,10-oktahidroprimido[1,2-a]azepin (52.0 g). Smeša se meša 4 h na sobnoj temperaturi i reaktivni sistem se ispere dva puta sa vodom i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hidrogen karbonata i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije sirovi produkt (67.0 g) naslovljenog jedinjenja kao braon ulje.

<1>H-NMR(CDCl3) δ 3.88(3H,s), 5.99(1H,s), 6.79(1H,s), 7.45-7.56(3H,m), 7.83(2H,d,J=7.2Hz), 8.53(1H,s).

B) Izrada metil 4-okso-1-[(fenilkarbonil)amino]cikloheksankarboksilata

[0516] U rastvor sirovog produkta (67.0 g) metil 2-[(fenilkarbonil)amino]prop-2-enoata izrađenog kao gore u dihlormetanu (300 mL) se doda cink jodid (104 g). U smešu se doda trimetil[(1-metilidenprop-2-en-1-il)oksi]silan (173 mL) i smeša se zagreva pod refluksom u

1

toku 24 h. Reaktivni sistem se ostavi da se ohladi na sobnu temperaturu, ispere sa vodom i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem. U filtrat se dodaju smeša (1:4,40 mL) 1M rastvor hlorovodonične kiseline i tetrahidrofurana i smeša se meša 5 h na sobnoj temperaturi. Reaktivna smeša se ispere sa slanim rastvorom, suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/petrol etar) da se dobije naslovljeno jedinjenje (56.0 g).

<1>H-NMR(CDCl3) δ 2.49-2.57(8H,m), 3.79(3H,s), 6.43(1H,s), 7.44-7.48(2H,m), 7.53-7.57(1H,m), 7.78-7.80(2H,m).

C) Izrada N-(3-okso-2-oksabiciklo[2.2.2]okt-4-il)benzamida

[0517] Rastvor metil 4-okso-1-[(fenilkarbonil)amino]cikloheksankarboksilata (56.0 g) izrađen kao gore u tetrahidrofuranu (300 mL) se ohladi na -78°C, u kapima se doda rastvor 1M litijum tri(sec-butil)borohidrid/tetrahidrofuran i smeša se meša 15 h na istoj temperaturi i ostavi da se zagreva na sobnu temperaturu u toku noći. Reakcija se neutrališe sa vodenim rastvorom amonijum hlorida i tetrahidrofuran se u najvećoj količini upari pod sniženim pritiskom.

Organski produkt se ekstrahuje iz ostatka sa etil acetatom i ekstrakt se ispere sa slanim rastvorom, suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/petrol etar) da se dobije naslovljeno jedinjenje (26.0 g).

<1>H-NMR (CDCl3) δ 1.72-1.81(2H,m), 1.93-2.00(2H,m), 2.14-2.20(2H,m), 3.25-3.33(2H,m), 4.80(1H,t,J=4.0Hz),7.43-7.54(4H,m), 7.80-7.82(2H,m).

D) Izrada metil trans-4-hidroksi-1-[(fenilkarbonil)amino]cikloheksankarboksilata

[0518] U rastvor N-(3-okso-2-oksabiciklo[2.2.2]okt-4-il)benzamida (26.0 g) izrađenog kao gore u metanolu (200 mL) se doda 4-metilbenzensulfonska kiselina (1.90 g) i smeša se zagreva pod refluksom u toku noći. Reaktivna smeša se koncentruje da se dobije naslovljeno jedinjenje (27.0 g). Dobijeno jedinjenje se koristi u sledećoj reakciji bez daljeg prečišćavanja.

<1>H-NMR(CDCl3) δ 1.73-1.85(4H,m), 1.94-2.00(2H,m), 2.39-2.47(2H,m), 3.76(3H,s), 3.98(1H,d,J=2.8Hz),6.30(1H,s), 7.42-7.54(4H,m), 7.72-7.80 (2H,m) .

1

E) Izrada metil 7-(fenilkarbonil)-7-azabiciklo[2.2.1]heptan-1-karboksilata

[0519] U rastvor metil trans-4-hidroksi-1-[(fenilkarbonil)amino]cikloheksankarboksilata (27.0 g) izrađenog kao gore u dihlormetanu (200 mL) se doda N-etil-N-(1-metiletil)propan-2-amin (33.8 mL). U kapima se doda metansulfonil hlorid (15.2 mL) i smeša se meša na sobnoj temperaturi u toku noći. Reaktivni sistem se ispere po redu sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hidrogen karbonata i slanim rastvorom, suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se rastvori u tetrahidrofuranu (300 mL) i ohladi na -78°C. U kapima se doda rastvor 1M kalijum 2-metilpropan-2-olat/tetrahidrofuran (150 mL) i smeša se meša 1 h na istoj temperaturi i reaktivni sistem se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu. Nakon mešanja u toku noći, smeša se zakiseli sa 1M rastvorom hlorovodonične kiseline i organski produkt se ekstrahuje sa etil acetatom. Ekstrakt se ispere sa slanim rastvorom, suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/petrol etar) da se dobije naslovljeno jedinjenje (4.0 g) kao bela čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(CDCl3) δ 1.53-1.62(2H,m), 1.78-1.85(2H,m), 1.89-1.96(2H,m), 2.32-2.39(2H,m), 3.81(3H,s), 4.27(1H,t,J=4.8Hz),7.38-7.50(3H,m), 7.02-7.23(2H,m).

F) Izrada 7-[(benziloksi)karbonil]-7-azabiciklo[2.2.1]heptan-1-karboksilne kiseline

[0520] Smeša metil 7-(fenilkarbonil)-7-azabiciklo[2.2.1]heptan-1-karboksilata (8.0 g) izrađenog kao gore i koncentrovane hlorovodonične kiseline (100 mL) se zagreva pod refluksom u toku 24 h i koncentruje pod sniženim pritiskom. U ostatak se doda voda (50 mL) i smeša se ispere dva puta sa etil acetatom. Dobijeni vodeni sloj se zaalkališe sa natrijum karbonatom, rastvorom natrijum karbonata (9.80 g) i benzilhlorokarbonatom (5.40 mL) u 1,4-dioksanu (30 mL) i smeša se meša na sobnoj temperaturi u toku noći. Reaktivna smeša se ispere dva puta sa etil acetatom i vodeni sloj se podesi na pH3 sa 2M rastvorom hlorovodonične kiseline. Organski produkt se ekstrahuje 3 puta sa etil acetatom (150 mL) i kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom, suše preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentruju pod sniženim pritiskom da se dobije naslovljeno jedinjenje (2.45 g) kao žuta čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(CDCl3) δ 1.49-1.56(2H,m), 1.85-1.95(4H,m), 2.16-2.20(2H,m), 4.47(1H,t,J=4.4Hz), 5.14(2H,s), 7.32-7.37(5H,m).

1

G) Izrada benzil 1-(hlorkarbonil)-7-azabiciklo[2.2.1]heptan-7-karboksilata

[0521] U smešu 7-[(benziloksi)karbonil]-7-azabiciklo[2.2.1]heptan-1-karboksilne kiseline (550 mg) izrađene kao gore, N,N-dimetilformamida (0.02 mL) i tetrahidrofurana (10 mL) u kapima se doda etandioil dihlorid (0.80 mL) na sobnoj temperaturi. Smeša se meša na sobnoj temperaturi 30 min i reaktivni sistem se koncentruje pod sniženim pritiskom. U ostatak se doda mala količina tetrahidrofurana i smeša se ponovo koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije sirovi produkt (2.0 mmol) naslovljenog jedinjenja. Dobijeni sirovi produkt naslovljenog jedinjenja se koristi za sledeću reakciju bez daljeg prečišćavanja.

H) Izrada benzil 1-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-7-azabiciklo[2.2.1]heptan-7-karboksilata

[0522] U smešu 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (221 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D, sirovog produkta (2.0 mmol) benzil 1-(hlorkarbonil)-7-azabiciklo[2.2.1]heptan-7-karboksilata izrađenog kao gore i tetrahidrofurana (10 mL) se doda N-etil-N-(1-metiletil)propan-2-amin (0.70 mL) na sobnoj temperaturi. Nakon 1 h mešanja, reaktivni sistem se sipa u zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata i smeša se ekstrahuje sa etil acetatom. Ekstrakt se suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata i koncentruje pod sniženim pritiskom. U ostatak se dodaju etanol (10 mL) i 2M rastvor natrijum hidroksida (2.5 mL) i smeša se meša na 100°C u toku noći. Reaktivni sistem se ohladi na sobnu temperaturu, sipa u zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata i smeša se ekstrahuje sa etil acetatom. Ekstrakt se suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata i koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti baznom hromatografijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan i metanol/etil acetat) da se dobije naslovljeno jedinjenje (313 mg) kao bela čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.50-1.64(2H,m), 1.78-1.93(4H,m), 2.16-2.29(2H,m), 4.37-4.42(1H,m), 4.90(2H,s), 7.06-7.27(5H,m), 7.57 (1H, s), 12.52(1H,s).

I) Izrada 2-(7-azabiciklo[2.2.1]hept-1-il)-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on monohidrohlorida

1

[0523] Benzil -(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-7-azabiciklo[2.2.1]heptan-7-karboksilat (313 mg) izrađen kao gore, terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilat (419 mg), cezijum karbonat (1.33 g), 1,2-dimetoksietan (8 mL) i voda (2.0 mL) se stave u bocu a atmosfera u boci se prečisti sa argonom. Doda se [1,1’-Bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihloriddihlormetan kompleks (1:1) (25 mg), atmosfera u boci se ponovo prečisti sa argonom i smeša se meša 1 h na 100°C. Reaktivna smeša se sipa u zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata i smeša se ekstrahuje sa 3:1 smešom etil acetat/tetrahidrofuran. Dobijeni organski sloj se suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) a predmet frakcije se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije benzil 1-{6-[1-(terc-butoksikarbonil)-3-metil-1H-pirazol-4-il]-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il}-7-azabiciklo[2.2.1]heptan-7-karboksilat (240 mg). Benzil 1-{6-[1-(terc-butoksikarbonil)-3-metil-1H-pirazol-4-il]-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il}-7-azabiciklo[2.2.1]heptan-7-karboksilat (240 mg) izrađen kao gore se rastvori u metanolu (10 mL), doda se 10% paladijum na ugljeniku (100 mg, 50% vlažan) i smeša se meša 2 h na sobnoj temperaturi u atmosferi vodonika (1 atm). Reaktivni sistem se filtrira kroz celite ploču i mravlja kiselina se propušta kroz celite ploču sve dok jedinjenje nije dovoljno eluirano. Filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom, u ostatak se doda zasićen vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata i smeša se ekstrahuje sa 3:1 smešom etil acetat/tetrahidrofuran. Organski sloj se suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata.

Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. U ostatak se doda rastvor 10% hlorovodonična kiselina/metanol (5.0 mL) i smeša se meša 1 h na 50°C. Smeša se koncentruje pod sniženim pritiskom, u ostatak se doda zagrejana 20:1 smeša etanol/voda (15 mL) i nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem. Filtrat se ostavi da stoji na sobnoj temperaturi 1 h a precipitat se sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (103 mg) kao bela čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.79-2.14(6H,m), 2.37-2.47(5H,m), 4.16-4.25(1H,m), 7.38(1H,s), 7.91-8.40(1H,m), 9.71(2H,brs), 12.66-13.15(2H,m).

MS (ESI+) : [M+H]<+>328.

MS(ESI+), nađeno:328.

Primer 117

1 1

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S,4S)-4-fenilpirolidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada terc-butil (2S,4S)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-4-fenilpirolidin-1-karboksilata

[0524] Na isti način kao u Primeru 71, faza A, naslovljeno jedinjenje (515 mg) se dobija kao bela čvrsta supstanca od 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (361 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D, (4S)-1-(terc-butoksikarbonil)-4-fenil-L-prolina (500 mg) i 2-metilpropil hlorokarbonata (0.225 mL) i trietilamina (0.239 mL) i tetrahidrofurana (10 mL) i etanola (5 mL) i 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (3.27 mL) .

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.15(5.5H,s), 1.39(3.5H,s), 2.22-2.48(2H,m), 3.33-3.39(1H,m), 3.54-3.74(1H,m), 3.89-4.08(1H,m), 4.71-4.87(1H,m), 7.18-7.38(5H,m), 7.56-7.65(1H,m), 12.72(1H,brs).

B) Izrada terc-butil (2S,4S)-2-[6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]-4-fenilpirolidin-1-karboksilata

[0525] Na isti način kao u Primeru 2, faza C, naslovljeno jedinjenje (231 mg) se dobija kao bledo žuta čvrsta supstanca od terc-butil (2S,4S)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-4-fenilpirolidin-1-karboksilata (250 mg) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (323 mg), natrijum karbonata (167 mg), 1,2-dimetoksietana (3.0 mL) i vode (1.5 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1)(43 mg).<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.17(6H,s), 1.40(3H,s), 2.21-2.48(5H,m), 3.33-3.41(1H,m), 3.62-3.79(1H,m), 3.93-4.06(1H,m), 4.76-4.91(1H,m), 7.18-7.38(5H,m), 7.43-7.53(1H,m), 7.79-8.45(1H,m), 12.32-12.59(1H,m), 12.84-13.09(1H,m).

C) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S,4S)-4-fenilpirolidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0526] Na isti način kao u Primeru 108, naslovljeno jedinjenje (186 mg) se dobija kao bledo

1 2

žuta čvrsta supstanca od terc-butil (2S,4S)-2-[6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]-4-fenilpirolidin-1- karboksilata (230 mg) i metanola (3.0 mL), rastvora rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (1.0 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.42-2.57(4H,m), 2.58-2.70(1H,m), 3.26-3.44(1H,m), 3.55-3.71(1H,m), 3.83-3.97(1H,m), 4.93-5.05(1H,m), 7.24-7.45(6H,m), 8.11(1H,s), 9.21(1H,brs), 10.59(1H,brs), 12.66-13.09(1H,m).

Primer 118

Izrada 2-(6,6-dimetilmorfolin-3-il)-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada terc-butil 5-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-2,2-dimetilmorfolin-4-karboksilata

[0527] U rastvor 4-(terc-butoksikarbonil)-6,6-dimetilmorfolin-3-karboksilne kiseline (1.00 g) i trietilamina (1.08 mL) u tetrahidrofuranu (20 mL) se doda 2-metilpropil hlorokarbonat (0.50 mL), uz mešanje i hlađenje ledom. Nakon 30 min mešanja na sobnoj temperaturi, doda se rastvor 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (568 mg) izrađen u Primeru 1, faza D, u tetrahidrofuranu (3 mL). Reaktivni sistem se meša 3 h uz zagrevanje na 60°C. U reaktivni sistem se sipa voda i smeša se ekstrahuje sa etil acetatom, ispere sa slanim rastvorom i suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. U ostatak se dodaju 2M vodeni rastvor natrijum hidroksida (7.7 mL) i etanol (20 mL) i smeša se meša 5 h uz zagrevanje na 80°C. Slani rastvor se sipa u reaktivni sistem, smeša se ekstrahuje sa 3:1 smešom etil acetat/tetrahidrofuran i ekstrakt se ispere sa slanim rastvorom i suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata.

Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti baznom hromatografijom na koloni silika gela (metanol/etil acetat) da se dobije naslovljeno jedinjenje (630 mg) kao bela čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.05-1.50(15H,m), 3.30-3.59(2H,m), 3.86-4.03(2H,m), 4.68-4.87(1H,m), 7.61(1H,brs), 12.72(1H,brs).

B) Izrada 2-(6,6-dimetilmorfolin-3-il)-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-

1

on dihidrohlorida

[0528] Na isti način kao u Primeru 83, faza C, naslovljeno jedinjenje (75 mg) se dobija kao bela čvrsta supstanca od terc-butil 5-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-2,2-dimetilmorfolin-4-karboksilata (111 mg) prethodno izrađenog, terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (154 mg), cezijum karbonata (489 mg), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1)(9.1 mg), 1,2-dimetoksietana (3 mL), vode (0.75 mL), rastvora 10% hlorovodonična kiselina/metanol (2 mL) i metanola (2 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.28(3H,s), 1.34(3H,s), 2.46(3H,s), 2.96-3.08(1H,m), 3.25-3.36(1H,m), 3.87(1H,dd,J=12.8,9.4Hz), 4.12-4.24(1H,m), 4.32-4.44(1H,m), 7.38(1H,s), 8.11(1H,s), 9.42(1H,brs), 10.43(1H,brs), 12.88(1H,brs).

Primer 119

Izrada 2-[(1S,3S,5S)-2-azabiciklo[3.1.0]heks-3-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada terc-butil (1S,3S,5S)-3-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-2-azabiciklo[3.1.0]heksan-2-karboksilata

[0529] Na isti način kao u Primeru 71, faza A, naslovljeno jedinjenje (215 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (255 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D, (1S,3S,5S)-2-(terc-butoksi- karbonil)-2-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilne kiseline (550 mg), 2-metilpropil hlorokarbonata (0.315 mL), trietilamina (0.399 mL) i tetrahidrofurana (5 mL), 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (2.88 mL) i etanola (5 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 0.64-0.92(2H,m), 1.06-1.43(9H,m), 1.49-1.63(1H,m), 1.92-2.04(1H,m), 2.55-2.77(1H,m), 3.37-3.52(1H,m), 4.88-5.08(1H,m), 7.54-7.67(1H,m), 12.63(1H,brs).

B) Izrada 2-[(1S,3S,5S)-2-azabiciklo[3.1.0]heks-3-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

1 4

[0530] Na isti način kao u Primeru 83, faza C, naslovljeno jedinjenje (56 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od terc-butil (1S,3S,5S)-3-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-2-azabiciklo[3.1.0]heksan-2-karboksilata (200 mg) izrađenog kao gore, tercbutil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (149 mg), cezijum karbonata (316 mg), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihloriddihlormetan kompleksa (1:1)(20.0 mg), 1,2-dimetoksietana (5 mL), vode (0.5 mL), rastvora rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (1 mL) i metanola (5 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 0.83-1.13(2H,m), 1.77-1.90(1H,m), 2.34(1H,dd,J=13.6,3.8Hz), 2.47(3H,s), 2.61-2.76(1H,m), 3.35-3.44(1H,m), 4.97-5.16(1H,m), 7.30-7.46(1H,m), 8.11(1H,s), 9.22(1H,brs), 10.64-11.11(1H,m), 12.86(1H,brs).

Primer 120

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S,4R)-4-fenilpirolidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada terc-butil (2S,4R)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-4-fenilpirolidin-1-karboksilata

[0531] Na isti način kao u Primeru 71, faza A, naslovljeno jedinjenje (314 mg) se dobija kao bela čvrsta supstanca od 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (361 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D i (4R)-1-(terc-butoksikarbonil)- 4-fenil-L-prolina (500 mg) i 2-metilpropil hlorokarbonata (0.225 mL) i trietilamina (0.239 mL) i tetrahidrofurana (10 mL) i etanola (5 mL) i 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (3.27 mL) .

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.15(6H,s), 1.37(3H,s), 2.01-2.21(1H,m), 2.58-2.71(1H,m), 3.41-3.61(2H,m), 3.85-3.98(1H,m), 4.64-4.75(1H,m), 7.19-7.40(5H,m), 7.60-7.67(1H,m), 12.81(1H,brs).

B) Izrada terc-butil (2S,4R)-2-[6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]-4-fenilpirolidin-1-karboksilata

[0532] Na isti način kao u Primeru 2, faza C, naslovljeno jedinjenje (218 mg) se dobija kao

1

bledo žuta čvrsta supstanca od terc-butil (2S,4R)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-4-fenilpirolidin-1-karboksilata (250 mg) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (323 mg), natrijum karbonata (167 mg), 1,2-dimetoksietana (3.0 mL) i vode (1.5 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1)(43 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.12(6H,s), 1.38(3H,s), 2.06-2.23(1H,m), 2.38-2.48(3H,m), 2.60-2.77(1H,m), 3.42-3.62(2H,m), 3.87-3.98(1H,m), 4.64-4.79(1H,m), 7.18-7.47(6H,m), 7.79-8.33(1H,m), 12.40-12.65(1H,m), 12.83-13.09(1H,m).

C) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S,4R)-4-fenilpirolidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0533] Na isti način kao u Primeru 108, naslovljeno jedinjenje (172 mg) se dobija kao bledo žuta čvrsta supstanca od terc-butil (2S,4R)-2-[6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]-4-fenilpirolidin-1-karboksilata (210 mg) i metanola (3.0 mL) i rastvora rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (1.0 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.16-2.30(1H,m), 2.47(3H,s), 2.89-3.04(1H,m), 3.28-3.45(1H,m), 3.59-3.86(2H,m), 4.78-4.93(1H,m), 7.24-7.44(6H,m), 8.11(1H,s), 9.36(1H,brs), 10.48(1H,brs), 12.90 (1H,brs).

Primer 121

Izrada 2-[amino(cikloheksil)metil]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada terc-butil [(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)(cikloheksil)metil]karbamata

[0534] Na isti način kao u Primeru 71, faza A, naslovljeno jedinjenje (620 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (265 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D, (2S)-[(terc-butoksikarbonil)amino](cikloheksil)sirćetne kiseline (648 mg), 2-metilpropil hlorokarbonata (0.327 mL), trietilamina (0.416 mL) i tetrahidrofurana (5 mL), 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (3.00 mL) i etanola (5 mL).

1

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 0.73-1.88(21H,m), 3.71-4.34(1H,m), 6.80-7.16(1H,m), 12.49(1H,brs).

B) Izrada 2-[amino(cikloheksil)metil]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0535] Na isti način kao u Primeru 83, faza C, naslovljeno jedinjenje (125 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od terc-butil [(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)(cikloheksil)metil]karbamata (499 mg) izrađenog kao gore, terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (697 mg), cezijum karbonata (737 mg), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1)(46.5 mg), 1,2-dimetoksietana (5 mL), vode (0.5 mL), rastvor rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (1 mL) i metanola (4 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 0.91-2.03 (11H,m), 2.47(3H,s), 3.98-4.18 (1H,m), 5.99(2H,brs), 7.31-7.39(1H,m), 8.11(1H,s), 8.71(3H,s), 12.80(1H,brs).

Primer 122

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(1,2,3,4-tetrahidrohinolin-2-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada terc-butil 2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-3,4-dihidrohinolin-1(2H)-karboksilata

[0536] Na isti način kao u Primeru 71, faza A, naslovljeno jedinjenje (245 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (265 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D, (2S)-1-(terc-butoksikarbonil)-1,2,3,4-tetrahidrohinolin-2-karboksilne kiseline (699 mg), 2-metilpropil hlorokarbonata (0.327 mL), trietilamina (0.416 mL) i tetrahidrofurana (5 mL), 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (3.00 mL) i etanola (5 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.22-1.33(9H,m), 1.73-1.90(1H,m), 2.24-2.40(1H,m), 2.55-2.77(2H,m), 5.10(1H,t,J=7.3Hz), 6.92-7.03(1H,m), 7.08-7.24(2H,m), 7.56(1H,s), 7.79(1H,d,J=8.1Hz), 12.85 (1H,brs).

1

B) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(1,2,3,4-tetrahidrohinolin-2-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0537] Na isti način kao u Primeru 83, faza C, naslovljeno jedinjenje (86 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od terc-butil 2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-3,4-dihidrohinolin-1(2H)-karboksilata (200 mg) izrađenog kao gore, terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (267 mg), cezijum karbonata (282 mg), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1)(17.8 mg), 1,2-dimetoksietana (5 mL), vode (0.5 mL), rastvora rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (1 mL) i metanola (4 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.09-2.24(2H,m), 2.46(3H,s), 2.63-2.86(2H,m), 4.54(1H,t,J=5.8Hz), 6.48-7.83(10H,m), 8.09(1H,s).

Primer 123

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(3aS,6aS)-oktahidrociklopenta[b]pirol-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada 1-(1-benzil-3-metil-1H-pirazol-4-il)etanona

[0538] Smeša pentan-2,4-diona (10.01 g) i 1,1-dimetoksi-N,N-dimetilmetanamina (12.51 g) se meša 1 h na 80°C. U reaktivnu smešu se doda tetrahidrofuran (20 mL), doda se hidrazin hidrat (7.51 g) u malim porcijama uz hlađenje ledom i smeša se meša 30 min na sobnoj temperaturi. Reaktivna smeša se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu, dodaju se etil acetat (100 mL) i voda (100 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (50 mLx2). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (20 mL) i suše preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije 1-(5-metil-1H-pirazol-4-il)etanon (12.40 g) kao bezbojno ulje. Ulje se rastvori u N,N-dimetilformamidu (10 mL), dodaju se bromometilbenzen (18.80 g) i kalijum karbonat (15.20 g) i smeša se meša 18 h na 60°C.

Reaktivna smeša se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu, dodaju se etil acetat (100 mL) i vode (100 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (50 mLx2). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (20 mL) i suše preko anhidrovanog

1

magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) da se dobije naslovljeno jedinjenje (9.80 g) kao bledo žuta čvrsta supstanca.<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.36(3H,s), 2.49(3H,s), 5.24(2H,s), 7.04-7.44(5H,m), 7.73(1H,s). B) Izrada (2Z)-3-(1-benzil-3-metil-1H-pirazol-4-il)-3-hlorprop-2-enenitrila

[0539] U N,N-dimetilformamid (13.4 g) se doda fosfor oksihlorid (28.1 g) u malim porcijama uz hlađenje ledom i smeša se meša 15 min na sobnoj temperaturi. U ovo se doda 1-(1-benzil-3-metil-1H-pirazol-4-il)etanon (9.80 g) izrađen kao gore u malim porcijama uz hlađenje ledom i reaktivna smeša se meša 30 min na 50°C. U smešu se doda hidroksilamin hidrohlorid u prašku (25.4 g) na 50°C u malim porcijama i reaktivna smeša se meša 30 min na 50°C. U reaktivnu smešu se doda ledena voda (200 mL) i smeša se neutrališe sa 1M vodenim rastvorom natrijum hidroksida i ekstrahuje sa etil acetatom (100 mLx2). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (20 mL) i suše preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem, filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom i ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) i kristališe iz dietil etra da se dobije naslovljeno jedinjenje (5.73 g) kao bledo žuti prašak.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.39(3H,s), 5.22(2H,s), 5.65(1H,s), 7.02-7.48(5H,m), 7.64(1H,s). C) Izrada metil 3-amino-5-(1-benzil-3-metil-1H-pirazol-4-il)tiofen-2-karboksilata

[0540] Smeša (2Z)-3-(1-benzil-3-metil-1H-pirazol-4-il)-3-hlorprop-2-enenitrila (5.73 g) izrađenog kao gore, metilsulfanil acetata (2.95 g), natrijum hidrida (0.80 g) i N,N-dimetilformamida (10 mL) se meša 2 h na 60°C. U reaktivnu smešu se dodaju etil acetat (20 mL) i voda (10 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (10 mLx2).

Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (20 mL) i suše preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem, filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom a ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) da se dobije naslovljeno jedinjenje (6.55 g) kao bezbojna čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.33(3H,s), 3.65(3H,s), 5.23(2H,s), 7.04-7.44(6H,m), 7.49(1H,s). D) Izrada 2-benzil 1-terc-butil (2S,3aS,6aS)-heksahidrociklopenta[b]pirol-1,2(2H)-dikarboksilata

1

[0541] Smeša benzil (2S,3aS,6aS)-oktahidrociklopenta[b]pirol-2-karboksilat hidrohlorida (1.00 g), di-terc-butil dikarbonata (1.16 g), trietilamina (0.72 g) i tetrahidrofurana (10 mL) se meša 18 h na sobnoj temperaturi. U reaktivnu smešu se dodaju etil acetat (20 mL) i voda (20 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (10 mLx2). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (20 mL) i suše preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem, filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom a ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) da se dobije naslovljeno jedinjenje (1.23 g) kao bezbojno ulje.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.20-1.57(11H,m), 1.57-2.05(5H,m), 2.30-2.50(1H,m), 2.58-2.73(1H,m), 4.08-4.53(2H,m), 5.00-5.30(2H,m), 7.25-7.45(5H,m).

E) Izrada (2S,3aS,6aS)-1-(terc-butoksikarbonil)oktahidrociklopenta[b]pirol-2-karboksilne kiseline

[0542] Smeša 2-benzil 1-terc-butil (2S,3aS,6aS)-heksahidrociklopenta[b]pirol-1,2(2H)-dikarboksilata (1.23 g) izrađenog kao gore, 20% paladijum hidroksida na ugljeniku (200 mg) i metanola (5 mL) se meša 1 h u atmosferi vodonika na sobnoj temperaturi. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem, filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom, u ostatak se dodaju etil acetat (50 mL) i voda (50 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (10 mLx2). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (50 mL) i suše preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije naslovljeno jedinjenje (0.91 g) kao bezbojna čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.40-1.65(13H,m), 1.65-2.00(3H,m), 2.15-2.25(1H,m), 2.35-2.45(1H,m), 2.60-2.75(1H,m), 4.12-4.23(1H,m), 4.37-4.48(1H,m).

F) Izrada terc-butil (3aS,6aS)-2-{[5-(1-benzil-3-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(metoksikarbonil)tiofen-3-il]karbmoil}heksahidrociklopenta[b]pirol-1(2H)-karboksilata

[0543] Smeša (2S,3aS,6aS)-1-(terc-butoksikarbonil)oktahidrociklopenta[b]pirol-2-karboksilne kiseline (766 mg) izrađene kao gore, 2-metilpropil hlorokarbonata (410 mg), trietilamina (304 mg) i tetrahidrofurana (10 mL) se meša 1 h uz hlađenje ledom, u dobijenu reaktivnu smešu se doda metil 3-amino-5-(1-benzil-3-metil-1H-pirazol-4-il)tiofen-2-

2

karboksilat (327 mg) izrađen u Primeru 123, faza C, uz hlađenje ledom i smeša se meša 18 h na 60°C. U reaktivnu smešu se dodaju etil acetat (20 mL) i voda (20 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (10 mLx2). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (20 mL) i suše preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem, filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom a ostatak se prečisti baznom hromatografijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) da se dobije naslovljeno jedinjenje (340 mg) kao bledo žuto ulje.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.20-1.65(12H,m), 1.65-1.85(2H,m), 1.90-2.20(4H,m), 2.48(3H,s), 2.60-3.80(1H,m), 3.85(3H,s), 4.20-4.35(1H,m), 5.24(2H,s), 7.10-7.40(6H,m), 7.60(1H,s), 8.10(1H,s).

G) Izrada terc-butil (3aS,6aS)-2-[6-(1-benzil-3-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]heksahidrociklopenta[b]pirol-1(2H)-karboksilata

[0544] Smeša terc-butil (3aS,6aS)-2-{[5-(1-benzil-3-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(metoksikarbonil)tiofen-3-il]karbamoil}heksahidrociklopenta[b]pirol-1(2H)-karboksilata (340 mg) izrađenog kao gore, 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (2 mL) i metanola (10 mL) se meša 1 h na 60°C. Reaktivna smeša se neutrališe sa 2M rastvorom hlorovodonične kiseline (2 mL) uz hlađenje ledom, dodaju se etil acetat (20 mL) i voda (20 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (10 mLx2). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (20 mL) i suše preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se rastvori u N,N-dimetilformamidu (2 mL), dodaju se 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)karbodiimid hidrohlorid (1.15 g), 1-hidroksibenzotriazol (810 mg), amonijum hlorid (1.28 g) i trietilamin (0.705 mL) i smeša se meša 18 h na 80°C. U reaktivnu smešu se dodaju etil acetat (20 mL) i voda (20 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (10 mLx2). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (20 mL) i suše preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se rastvori u metanolu (10 mL), doda se 2M vodeni rastvor natrijum hidroksida (1 mL) i smeša se meša 1 h na 60°C. Reaktivna smeša se neutrališe sa 1M rastvorom hlorovodonične kiseline uz hlađenje ledom, dodaju se etil acetat (20 mL) i voda (20 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (10 mLx2). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (20 mL) i suše preko anhidrovanog magnezijum sulfata.

2 1

Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem, filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom a ostatak se prečisti baznom hromatografijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) da se dobije naslovljeno jedinjenje (220 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.35-1.55(12H,m), 1.60-1.80(4H,m), 2.00-2.10(2H,m), 2.50(3H,s), 2.70-2.85(1H,m), 4.20-4.85(1H,m), 5.27(2H,s), 7.17(1H,s), 7.23-7.47(5H,m), 7.38(1H,s).

H) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(3aS,6aS)-oktahidrociklopenta[b]pirol-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0545] terc-Butil (3aS,6aS)-2-[6-(1-benzil-3-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]heksahidrociklopenta[b]pirol-1(2H)-karboksilat (220 mg) izrađen kao gore, mravlja kiselina (5 mL) i 20% paladijum hidroksid na ugljeniku (20 mg) se mešaju 18 h u atmosferi vodonika na 60°C. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem, filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom a ostatak se prečisti baznom hromatografijom na koloni silika gela (metanol/etil acetat) da se dobije naslovljeno jedinjenje (62 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.45-1.80(6H,m), 1.95-2.05(1H,m), 2.46(3H,s), 2.62-2.78(1H,m), 2.80-2.95 (1H,m), 4.02 (1H,brs), 4.41-4.58(1H,m), 7.39(1H,s), 8.08(1H,brs).

Primer 124

Izrada 2-(1-acetilpirolidin-2-il)-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada terc-butil 2-[5-(1-benzil-3-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(metoksikarbonil)tiofen-3-ilkarbamoil)pirolidin-1-karboksilata

[0546] Na isti način kao u Primeru 123, faza F, naslovljeno jedinjenje (1.20 g) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od metil 3-amino-5-(1-benzil-3-metil-1H-pirazol-4-il)tiofen-2-karboksilata (1.00 g) izrađenog u Primeru 123, faza C, 1-(terc-butoksikarbonil)prolina (1.97 g), 2-metilpropil hlorokarbonata (1.25 g), trietilamina (0.93 g) i tetrahidrofurana (20 mL).<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.25-1.55(10H,m), 1.85-2.05(2H,m), 2.10-2.35(2H,m), 2.48(3H,s), 3.55-3.70 (1H,m), 3.87(3H,s), 4.25-4.35(1H,m), 5.24(2H,s), 7.10-7.40(6H,m), 7.59(1H,s), 8.08(1H,s).

2 2

B) Izrada terc-butil 2-[6-(1-benzil-3-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]pirolidin-1-karboksilata

[0547] Na isti način kao u Primeru 123, faza G, naslovljeno jedinjenje (0.85 g) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od terc-butil 2-[5-(1-benzil-3-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(metoksikarbonil)tiofen-3-ilkarbamoil)pirolidin-1-karboksilata (1.20 g) izrađenog kao gore, 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (2 mL), metanola (10 mL) i 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)karbodiimid hidrohlorida (4.39 g), 1-hidroksibenzotriazola (3.10 g), amonijum hlorida (4.90 g), trietilamina (9.27 g), N,N-dimetilformamida (10 mL) i 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (1 mL) i metanola (10 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.30-1.55(13H,m), 1.90-2.10(2H,m), 2.50(3H,s), 3.15-3.25(1H,m), 5.27(1H,s), 5.32-5.38(1H,m), 7.18(1H,s), 7.26-7.38(5H,m), 7.61(1H,s).

C) Izrada 6-(1-benzil-3-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(pirolidin-2-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0548] Smeša terc-butil 2-[6-(1-benzil-3-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]pirolidin-1-karboksilata (0.85 g) izrađenog kao gore i trifluorosirćetne kiseline (5 mL) se meša 1 h uz hlađenje ledom. Reaktivna smeša se koncentruje pod sniženim pritiskom, u ostatak se dodaju etil acetat (20 mL) i voda (20 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (10 mLx2). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (20 mL) i suše preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije naslovljeno jedinjenje (0.67 g) kao bezbojna čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.45-1.90(4H,m), 2.49(3H,s), 3.05-3.20(2H,m), 4.30-4.40(1H,m), 5.27(2H,s), 5.35-5.40(1H,m), 7.10-7.20(1H,m), 7.17(1H,s), 7.26-7.38(5H,m), 7.61(1H,s).

D) Izrada 2-(1-acetilpirolidin-2-il)-6-(1-benzil-3-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0549] Smeša 6-(1-benzil-3-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(pirolidin-2-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (196 mg) izrađenog kao gore, sirćetnog anhidrida (255 mg) i piridina (5 mL) se

2

meša 18 h na 60°C. U reaktivnu smešu se dodaju etil acetat (50 mL) i voda (50 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (10 mLx2). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (20 mL) i suše preko anhidrovanog magnezijum sulfata.

Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem, filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom a ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) da se dobije naslovljeno jedinjenje (216 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.90-2.20(4H,m), 2.17(3H,s), 2.50(3H,s), 2.75-2.90(1H,m), 3.50-3.70(2H,m), 5.15-5.40(2H,m), 7.17(1H,s), 7.26-7.40(5H,m), 7.60(1H,s).

E) Izrada 2-(1-acetilpirolidin-2-il)-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0550] Na isti način kao u Primeru 123, faza H, naslovljeno jedinjenje (65 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od 2-(1-acetilpirolidin-2-il)-6-(1-benzil-3-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (216 mg) prethodno izrađenog, mravlje kiseline (5 mL) i 20% paladijum hidroksida na ugljeniku (20 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ1.90-2.10(4H,m), 2.20(3H,brs), 2.45(3H,brs), 3.50-3.65(1H,m), 3.65-3.80(1H,m), 4.77(1H,dd,J=8.3,3.6Hz), 7.34(1H,s), 7.89(1H,brs).

Primer 125

Izrada 2-[(1R*,2S*)-2-aminocikloheksil]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada terc-butil [(1R*,2S*)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)cikloheksil]karbamata

[0551] Na isti način kao u Primeru 82, faza A, sirovi produkt (63 mg) naslovljenog jedinjenja se dobija kao bela čvrsta supstanca od (1R*, 2S*)-2-[(tercbutoksikarbonil)amino]cikloheksankarboksilne kiseline (365 mg) i trietilamina (0.418 mL) i tetrahidrofurana (10 mL) i 2-metilpropil hlorokarbonata (0.195 mL) i 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (221 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D i 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (3 mL) i etanola (10 mL).

MS (ESI+) : [M+H]<+>428.

2 4

MS(ESI+), nađeno:428.

B) Izrada 2-[(1R*,2S*)-2-aminocikloheksil]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0552] Na isti način kao u Primeru 83, faza C, naslovljeno jedinjenje (20 mg) se dobija kao bela čvrsta supstanca od sirovog produkta (63 mg) terc-butil [(1R*,2S*)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)cikloheksil]karbamata izrađenog kao gore, terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (91 mg), cezijum karbonata (288 mg), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihloriddihlormetan kompleksa (1:1)(5.4 mg), 1,2-dimetoksietana (3 mL), vode (0.50 mL), rastvora 10% hlorovodonična kiselina/metanol (2 mL) i metanola (2 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.28-1.88(6H,m), 1.93-2.19(2H,m), 2.46(3H,s), 3.04-3.14(1H,m), 3.72(1H,brs), 7.38(1H,s), 7.99(3H,brs), 8.04(1H,brs), 12.40(1H,brs).

Primer 126

Izrada 2-(6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)pirolidin-1-karboksamida

A) Izrada 2-(6-(1-benzil-3-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3, 4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)pirolidin-1-karboksamida

[0553] Smeša 6-(1-benzil-3-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(pirolidin-2-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (196 mg) izrađenog u Primeru 124, faza C, N,N’-karbonildiimidazola (162 mg) i piridina (5 mL) se meša 18 h na sobnoj temperaturi. Reaktivna smeša se koncentruje pod sniženim pritiskom, ostatak se rastvori u rastvoru 8M amonijak/metanol i smeša se meša 18 h na sobnoj temperaturi. U reaktivnu smešu se dodaju etil acetat (50 mL) i voda (50 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (10 mLx2). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (20 mL) i suše preko anhidrovanog magnezijum sulfata.

Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem, filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom a ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) da se dobije naslovljeno jedinjenje (110 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca.

2

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.80-2.25(4H,m), 2.25-2.35(1H,m), 2.38(3H,s), 3.45-3.55(1H,m), 4.73(1H,dd,J=7.9,3.2Hz), 5.28(2H,s), 5.98(2H,s), 7.15-7.48(6H,m), 8.37(1H,s).

B) Izrada 2-(6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)pirolidin-1-karboksamida

[0554] Na isti način kao u Primeru 123, faza H, naslovljeno jedinjenje (23 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od 2-(6-(1-benzil-3-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)pirolidin-1-karboksamida (60 mg) izrađenog kao gore, mravlje kiseline (5 mL) i 20% paladijum hidroksida na ugljeniku (20 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.90-2.10(3H,m), 2.15-2.30(1H,m), 2.45(3H,brs), 3.50-3.65(1H,m), 3.65-3.80(1H,m), 4.77(1H,dd,J=8.3,3.6Hz), 7.34(1H,s), 7.89(1H,brs).

Primer 127

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(pirolidin-1-ilkarbonil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0555] Na isti način kao u Primeru 11, faza A, 6-bromo-2-(pirolidin-1-ilkarbonil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on se dobija kao žuta čvrsta supstanca od 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (100 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D i okso(pirolidin-1-il)sirćetne kiseline (68 mg) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,N’-tetrametiluronijum heksafluorofosfata (206 mg) i N-etil-N-(1-metiletil)propan-2-amina (0.158 mL) i N,N-dimetilformamida (2 mL) i etanola (1 mL) i 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (0.91 mL). Na isti način kao u Primeru 2, faza C, naslovljeno jedinjenje (30 mg) se dobija kao bela čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(pirolidin-1-ilkarbonil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona izrađenog kao gore i tercbutil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (263 mg), natrijum karbonata (136 mg), 1,2-dimetoksietana (2.0 mL) i vode (1.0 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1)(35 mg).<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.82-1.95(4H,m), 2.39-2.48(3H,m), 3.44-3.57(2H,m), 3.64-3.78(2H,m), 7.43(1H,s), 7.85-8.45(1H,m), 12.47-12.67(1H,m), 12.87-13.11(1H,m).

Primer 128

2

Izrada 2-[(1R*,3S,4R*,5S)-5-fluoro-2-azabiciklo[2.2.1]hept-3-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada terc-butil (1R*,3S,4R*,5S)-3-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-5-fluoro-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilata

[0556] Na isti način kao u Primeru 71, faza A, naslovljeno jedinjenje (303 mg) se dobija kao bela čvrsta supstanca od 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (200 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D i (1R*,3S,4R*,5S)-2-(terc-butoksikarbonil)-5-fluoro-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-3-karboksilne kiseline (352 mg) i 2-metilpropil hlorokarbonata (0.178 mL) i trietilamina (0.190 mL) i tetrahidrofurana (6 mL) i etanola (4 mL) i 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (1.81 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.07-1.67(11H,m), 2.00-2.33(2H,m), 2.93-3.06(1H,m), 4.05-4.24(1H,m), 4.63-4.77(1H,m), 5.18-5.51(1H,m), 7.54-7.79(1H,m), 12.59-12.98(1H,m).

B) Izrada terc-butil (1R*,3S,4R*,5S)-5-fluoro-3-[6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilata

[0557] terc-Butil (1R*,3S,4R*,5S)-3-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-5-fluoro-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilat (300 mg) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilat (416 mg), natrijum karbonat (215 mg), 1,2-dimetoksietan (3.0 mL) i voda (1.5 mL) se stave u bocu a atmosfera u boci se prečisti sa argonom. Doda se [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihloriddihlormetan kompleks (1:1)(55 mg) i atmosfera u boci se ponovo prečisti sa argonom.

Reaktivni sistem se meša 3 h na 100°C i koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) i dobijena bledo žuta čvrsta supstanca se prečisti visoko efikasnom tečnom hromatografijom {kolona: L-kolona 2 ODS (20 mm i.d.x50 mm L), mobilna faza: 0.1% vodeni rastvor trifluorosirćetne kiseline / rastvor 0.1% trifluorosirćetna kiselina-acetonitril}. Predmet frakcije se neutrališe sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hidrogen karbonata i smeša se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se sakupi filtriranjem i ispere sa vodom (3 mL) da se dobije naslovljeno jedinjenje (106 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.12-1.61(11H,m), 2.05-2.34(2H,m), 2.36-2.48(3H,m), 2.93-

2

3.07(1H,m), 4.04-4.28(1H,m), 4.58-4.83(1H,m), 5.17-5.53(1H,m), 7.33-7.54(1H,m), 7.81-8.34(1H,m), 12.31-12.61(1H,m), 12.82-13.13(1H,m).

C) Izrada 2-[(1R*,3S,4R*,5S)-5-fluoro-2-azabiciklo[2.2.1]hept-3-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0558] Na isti način kao u Primeru 108, naslovljeno jedinjenje (71 mg) se dobija kao bela čvrsta supstanca od terc-butil (1R*,3S,4R*,5S)-5-fluoro-3-[6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilata (80 mg) i metanola (1.5 mL) i rastvora rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (0.18 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.66-1.77(1H,m), 1.81-2.02(2H,m), 2.16-2.34(1H,m), 2.46(3H,s), 3.25-3.31(1H,m), 4.13-4.25(1H,m), 4.77-4.87(1H,m), 5.23-5.54(1H,m), 7.37(1H,s), 8.10(1H,s), 8.79(1H,brs), 10.23(1H,brs), 13.09(1H,brs).

Primer 129

Izrada 2-[(1R*,2R*)-2-aminocikloheksil]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada terc-butil [(1R*,2R*)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)cikloheksil]karbamata

[0559] Na isti način kao u Primeru 82, faza A, sirovi produkt (61 mg) naslovljenog jedinjenja se dobija kao bela čvrsta supstanca od (1R*,2R*)-2-[(tercbutoksikarbonil)amino]cikloheksankarboksilne kiseline (365 mg) i trietilamina (0.418 mL) i tetrahidrofurana (10 mL) i 2-metilpropil hlorokarbonata (0.195 mL) i 3-amino-5-bromotiofen-2- karboksamida (221 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D i 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (3 mL) i etanola (10 mL).

MS (ESI+) : [M+H]<+>428.

MS(ESI+), nađeno:428.

B) Izrada 2-[(1R*,2R*)-2-aminocikloheksil]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

2

[0560] Na isti način kao u Primeru 83, faza C, naslovljeno jedinjenje (27 mg) se dobija kao bela čvrsta supstanca od sirovog produkta (61 mg) terc-butil [(1R*,2R*)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)cikloheksil]karbamata izrađenog kao gore, terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1- karboksilata (87 mg), cezijum karbonata (277 mg), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihloriddihlormetan kompleksa (1:1)(5.2 mg), 1,2-dimetoksietana (3 mL), vode (0.50 mL), rastvora 10% hlorovodonične kiseline/metanol (2 mL) i metanola (2 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.16-1.55(4H,m), 1.69-1.84(2H,m), 2.01-2.15(2H,m), 2.45(3H,s), 2.75-2.87(1H,m), 3.50-3.64(1H,m), 7.36(1H,s), 7.94(3H,brs), 8.05(1H,s), 12.45(1H,brs).

Primer 130

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(1H-pirol-1-ilmetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0561] Na isti način kao u Primeru 2, faza B i faza C, naslovljeno jedinjenje (46 mg) se dobija kao bledo žuta čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(hlormetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (180 mg) izrađenog u Primeru 2, faza A i 2,5-dihidro-1H-pirola (0.150 mL) i kalijum karbonata (178 mg) i natrijum jodida (9.7 mg) i N,N-dimetilformamida (3.0 mL) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (248 mg) i natrijum karbonata (128 mg) i 1,2-dimetoksietana (3.0 mL) i vode (1.5 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1)(33 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.37-2.48 (3H, m), 5.03(2H,s), 6.02(2H,t,J=2.1Hz), 6.87(2H,t,J=2.1Hz), 7.38(1H,s), 7.79-8.31(1H,m), 12.63(1H,brs), 12.87-13.06(1H,m).

Primer 131

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-morfolin-2-iltieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada terc-butil 2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)morfolin-4-karboksilata

2

[0562] Na isti način kao u Primeru 118, faza A, naslovljeno jedinjenje (290 mg) se dobija kao bela čvrsta supstanca od 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (221 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D, 4-(terc-butoksikarbonil)morfolin-2-karboksilne kiseline (347 mg), 2-metilpropil hlorokarbonata (0.195 mL), trietilamina (0.418 mL) i tetrahidrofurana (10 mL), 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (3.0 mL) i etanola (10 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.42(9H,s), 2.91-3.06(1H,m), 3.09-3.25(1H,m), 3.53(1H,td,J=11.4,2.7Hz), 3.72-3.80(1H,m), 3.92-4.00(1H,m), 4.00-4.13(1H,m), 4.38(1H,dd,J=10.2,3.0Hz), 7.65(1H,s), 12.57(1H,brs).

B) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-morfolin-2-iltieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0563] Na isti način kao u Primeru 83, faza C, naslovljeno jedinjenje (102 mg) se dobija kao bela čvrsta supstanca od terc-butil 2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)morfolin-4-karboksilata (290 mg) izrađenog kao gore, terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (429 mg), cezijum karbonata (1.34 g), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1)(26 mg), 1,2-dimetoksietana (6 mL), vode (2 mL), rastvora 10% hlorovodonična kiselina/metanol (4 mL) i metanola (4 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.46(3H,s), 3.04-3.60(4H,m), 3.83-4.13(2H,m), 4.81(1H,dd,J=10.1,2.7Hz), 7.43(1H,s), 8.05(1H,s), 9.29-9.53(2H,m), 12.55(1H,brs).

Primer 132

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2R*,3R*)-3-fenilpirolidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada terc-butil (2R*,3R*)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-3-fenilpirolidin-1-karboksilata

[0564] Na isti način kao u Primeru 82, faza A, naslovljeno jedinjenje (27 mg) se dobija kao bela čvrsta supstanca od ((2R*,3R*)-1-(terc-butoksikarbonil)-3-fenilprolina (437 mg) i trietilamina (0.418 mL) i tetrahidrofurana (10 mL) i 2-metilpropil hlorokarbonata (0.195 mL)

21

i 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (221 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D i 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (3 mL) i etanola (10 mL).

MS(ESI+) : [M+H]<+>476.

MS(ESI+), nađeno:476.

B) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2R*,3R*)-3-fenilpirolidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0565] Na isti način kao u Primeru 83, faza C, naslovljeno jedinjenje (11 mg) se dobija kao bela čvrsta supstanca od terc-butil (2R*,3R*)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-3-fenilpirolidin-1-karboksilata (27 mg) izrađenog kao gore, terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (35 mg), cezijum karbonata (111 mg), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihloriddihlormetan kompleksa (1:1)(2.1 mg), 1,2-dimetoksietana (2 mL), vode (0.17 mL), rastvora 10% hlorovodonična kiselina/metanol (1 mL) i metanola (1 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.41-2.56(5H,m), 3.36-3.52(1H,m), 3.71-3.83(1H,m), 3.95-4.08(1H,m), 4.88-4.98(1H,m), 7.07-7.23(5H,m), 7.36(1H,s), 8.09(1H,s), 9.20(1H,brs), 10.34(1H,brs), 12.39(1H,brs).

Primer 133

Izrada 2-[(metilamino)metil]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada terc-butil [(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)metil]metilkarbamata

[0566] Na isti način kao u Primeru 71, faza A, naslovljeno jedinjenje (780 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (473 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D, N-(terc-butoksikarbonil)-N-metilglicina (850 mg), 2-metilpropil hlorokarbonata (0.583 mL), trietilamina (0.741 mL) i tetrahidrofurana (5 mL), 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (5.35 mL) i etanola (10 mL) .

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.31-1.49(9H,m), 2.77-2.87(3H,m), 3.79-3.90(2H,m), 7.60(1H,s), 12.63(1H,brs).

B) Izrada 2-[(metilamino)metil]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0567] Na isti način kao u Primeru 83, faza C, naslovljeno jedinjenje (50 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od terc-butil [(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)metil]metilkarbamata (400 mg) izrađenog kao gore, terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (659 mg), cezijum karbonata (696 mg), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1)(44.0 mg), 1,2-dimetoksietana (5 mL), vode (0.5 mL), rastvora rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (1 mL) i metanola (5 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.47(3H,s), 2.69(3H,brs), 4.23(2H,brs), 7.31-8.30 (5H,m), 9.54 (2H,brs).

Primer 134

Izrada 2-(2-amino-2-metilpropil)-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada terc-butil [2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-1,1-dimetiletil]karbamata

[0568] Na isti način kao u Primeru 71, faza A, naslovljeno jedinjenje (780 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (412 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D, 3-[(terc-butoksikarbonil)amino]-3-metilbuterne kiseline (850 mg), 2-metilpropil hlorokarbonata (0.507 mL), trietilamina (0.646 mL) i tetrahidrofurana (5 mL), 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (4.66 mL) i etanola (10 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.24-1.43(15H,m), 2.92(2H,s), 7.51(1H,s), 11.77-12.47(2H,m).

B) Izrada 2-(2-amino-2-metilpropil)-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0569] Na isti način kao u Primeru 83, faza C, naslovljeno jedinjenje (63 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od terc-butil [2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-1,1-dimetiletil]karbamata (700 mg) izrađenog kao gore, terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (1072 mg), cezijum karbonata (1134 mg), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1)(71.6 mg), 1,2-dimetoksietana (5 mL), vode (0.5 mL), rastvora rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (1 mL) i metanola (4 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.39(6H,s), 2.48(3H,s), 3.02(2H,s), 6.95(3H,brs), 7.39-7.44(1H,m), 8.09(1H,s), 8.37(3H,brs).

Primer 135

Izrada 2-(1-amino-1-metiletil)-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0570] U rastvor N-[(9H-fluoren-9-ilmetoksi)karbonil]-2-metilalanina (3.00 g) u toluenu (20 mL) se na 0°C doda tionil dihlorid (0.673 mL) i smeša se meša 3 h na sobnoj temperaturi. Reaktivna smeša se koncentruje pod sniženim pritiskom, u ostatak se dodaju 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamid (1.70 g) izrađen u Primeru 1, faza D, piridin (729 mg) i tetrahidrofuran (5 mL) i smeša se meša 15 h na 100°C. U reaktivnu smešu se dodaju etil acetat (20 mL) i voda (10 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (5 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (5 mL) i suše preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije 9H-fluoren-9-ilmetil {2-[(5-bromo-2-karbamoiltiofen-3-il)amino]-1,1-dimetil-2-oksoetil}karbamat kao bledo žuto ulje.

[0571] U rastvor 9H-fluoren-9-ilmetil {2-[(5-bromo-2-karbamoiltiofen-3-il)amino]-1,1-dimetil-2-oksoetil}karbamata, izrađenog kao gore u etanolu (50 mL) se doda 2M vodeni rastvor natrijum hidroksida (19.2 mL) i smeša se meša 15 h na 70°C. Reaktivna smeša se neutrališe sa 1M rastvorom hlorovodonične kiseline (38.4 mL) uz hlađenje ledom i koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se rastvori u tetrahidrofuranu (20 mL), doda se di-terc-butil dikarbonat (1.78 mL) i smeša se meša 15 h na sobnoj temperaturi. U reaktivnu smešu se dodaju etil acetat (20 mL) i voda (10 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (5 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (5 mL) i suše

21

preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije terc-butil [1-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-1-metiletil]karbamat kao bezbojna čvrsta supstanca. Na isti način kao u Primeru 83, faza C, naslovljeno jedinjenje (240 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od terc-butil [1-(6- bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-1-metiletil]karbamata izrađenog kao gore, terc-butil 3-metil- 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (1.03 g), cezijum karbonata (1.09 g), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (68.9 mg), 1,2-dimetoksietana (5 mL), vode (0.5 mL), rastvora rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (1 mL) i metanola (4 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.74(6H,s), 2.49(3H,s), 7.41(1H,s), 7.59-8.99(7H,m).

Primer 136

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(1,2,3,6-tetrahidropiridin-2-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada terc-butil 2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-3,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilata

[0572] Na isti način kao u Primeru 82, faza A, naslovljeno jedinjenje (663 mg) se dobija kao bledo žuta čvrsta supstanca od 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (636 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D, (2S)-1-(terc-butoksikarbonil)-1,2,3,6-tetrahidropiridin-2-karboksilne kiseline (980 mg), 2-metilpropil hlorokarbonata (0.559 mL), trietilamina (1.20 mL) i tetrahidrofurana (30 mL), 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (8.6 mL) i etanola (30 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.19-1.48(9H,m), 2.53-2.68(2H,m), 3.93-4.18(2H,m), 5.06-5.32(1H,m), 5.61-5.83(2H,m), 7.54(1H,s), 12.65 (1H,brs).

B) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(1,2,3,6-tetrahidropiridin-2-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0573] Na isti način kao u Primeru 83, faza C, naslovljeno jedinjenje (54 mg) se dobija kao bela čvrsta supstanca od terc-butil 2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-3,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilata (100 mg) prethodno izrađenog, terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (149 mg), cezijum karbonata (474 mg), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1)(8.9 mg), 1,2-dimetoksietana (3 mL), vode (0.5 mL), rastvora 10% hlorovodonična kiselina/metanol (2 mL) i metanola (3 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.35-2.47(4H,m), 2.70-2.86(1H,m), 3.62-3.84(2H,m), 4.35-6.05(3H,m), 7.37(1H,s), 8.12(1H,s), 9.71(2H,brs), 12.86(1H,brs).

Primer 137

Izrada 2-(2-aminociklopentil)-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada terc-butil [2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)ciklopentil]karbamata

[0574] Na isti način kao u Primeru 82, faza A, sirovi produkt (51 mg) naslovljenog jedinjenja se dobija kao bela čvrsta supstanca od 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (116 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D, (1R*,2S*)-2-[(tercbutoksikarbonil)amino]ciklopentankarboksilne kiseline (180 mg), 2-metilpropil hlorokarbonata (0.102 mL), trietilamina (0.219 mL) i tetrahidrofurana (6 mL), 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (1.57 mL) i etanola (6 mL).

MS (ESI+) : [M+H]<+>414.

MS(ESI+), nađeno:414.

B) Izrada 2-(2-aminociklopentil)-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0575] Na isti način kao u Primeru 83, faza C, naslovljeno jedinjenje (21 mg) se dobija kao bela čvrsta supstanca od terc-butil [2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)ciklopentil]karbamata (51 mg) izrađenog kao gore, terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (76 mg), cezijum karbonata (241 mg),

21

[1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1)(4.5 mg), 1,2-dimetoksietana (3 mL), vode (0.3 mL), rastvora 10% hlorovodonična kiselina/metanol (2 mL) i metanola (2 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.61-2.34(6H glavnog, 6H sporednog, m), 2.45(3H glavnog, 3H sporednog, s), 3.13-3.26(1H glavnog, m), 3.26-3.37(1H sporednog, m), 3.82-3.92(1H sporednog, m), 4.02-4.15(1H glavnog, m), 7.35(1H sporednog, s),7.38(1H glavnog, s), 7.93(3H sporednog, brs), 8.04(1H glavnog, 1H sporednog, brs), 8.13(3H glavnog, brs), 12.47(1H glavnog, 1H sporednog, brs).

* Odnos uočenih izomera je 2.5:1.

Primer 138

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(1,3-tiazol-2-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada 6-bromo-2-(1,3-tiazol-2-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0576] U smešu 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (200 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D, trietilamina (0.19 mL) i tetrahidrofurana (4.0 mL) se na 0°C doda 1,3-tiazol-2-karbonil hlorid (0.22 g) i smeša se meša 2 h na sobnoj temperaturi. U reaktivni sistem se sipa voda i precipitat se sakupi filtriranjem da se dobije N-(5-bromo-2-karbamoiltiofen-3-il)-1,3-tiazol-2-karboksamid (290 mg) kao bledo žuta čvrsta supstanca. U N-(5-bromo-2-karbamoiltiofen-3-il)-1,3-tiazol-2-karboksamid izrađen kao gore se dodaju 2M vodeni rastvor natrijum hidroksida (1.75 mL) i 1,2-dimetoksietan (4.0 mL) i smeša se meša 18 h na 100°C. Reaktivni sistem se na 0°C neutrališe sa 1M rastvorom hlorovodonične kiseline. Precipitat se sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (236 mg) kao bela čvrsta supstanca.<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 7.73(1H,s), 8.03-8.18(2H,m), 13.01(1H,brs).

B) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(1,3-tiazol-2-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0577] Na isti način kao u Primeru 2, faza C, naslovljeno jedinjenje (6 mg) se dobija kao bledo žuta čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(1,3-tiazol-2-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (230 mg) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (451 mg), natrijum karbonata (233 mg), 1,2-dimetoksietana (3.0 mL) i vode (1.5

21

mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1)(60 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.43-2.49(3H,m), 7.53(1H,s), 7.81-8.52(3H,m), 12.61-13.20(2H,m).

Primer 139

[0578] Na isti način kao u Primeru 82, faza A, sirovi produkt (610 mg) naslovljenog jedinjenja se dobija kao bela čvrsta supstanca od 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (663 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D, (1R*,2R*)-2-[(tercbutoksikarbonil)amino]ciklopentankarboksilne kiseline (1.03 g), 2-metilpropil hlorokarbonata (0.584 mL), trietilamina (1.25 mL) i tetrahidrofurana (30 mL), 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (9.0 mL) i etanola (30 mL).

MS (ESI+) : [M+H]<+>414.

MS(ESI+), nađeno:414.

[0579] Na isti način kao u Primeru 83, faza C, naslovljeno jedinjenje (242 mg) se dobija kao bela čvrsta supstanca od terc-butil [2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)ciklopentil]karbamata (610 mg) izrađenog kao gore, terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (907 mg), cezijum karbonata (2.88 g), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1)(54 mg), 1,2-dimetoksietana (7 mL), vode (3 mL), rastvora 10% hlorovodonična kiselina/metanol (6 mL) i metanola (6 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.66-1.89(4H,m), 2.07-2.32(2H,m), 2.46(3H,s), 3.20-3.30(1H,m), 4.03-4.15(1H,m), 7.39(1H,s), 8.05(1H,s), 8.28 (3H,brs) .

21

Primer 140

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S,3S)-3-metilpirolidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada (3S)-1-(terc-butoksikarbonil)-3-metil-L-prolina

[0580] U smešu (3S)-3-metil-L-prolina (250 mg), tetrahidrofurana (10 mL) i 1M vodenog rastvora natrijum hidroksida (2.9 mL) se uz mešanje na sobnoj temperaturi doda di-terc-butil dikarbonat (0.67 mL). Nakon mešanja u toku noći, reaktivna smeša se ohladi sa ledom i podesi do pH 4 dodavanjem 1M rastvora hlorovodonične kiseline (2.9 mL) u kapima.

Organski produkt se ekstrahuje sa etil acetatom (80 mL) i dobijeni organski sloj se ispere sa vodom i suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. U ostatak se dodaje smeša etil acetat/heksan i precipitirana čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (323 mg) kao bela čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.06-1.11(3H,m), 1.33(9H glavnog, s), 1.39(9H sporednog, s), 1.41-1.56(1H,m), 1.87-2.01(1H,m), 2.13-2.25(1H,m), 3.20-3.29(1H,m), 3.37-3.47(1H,m), 3.55-3.62(1H,m), 12.49(1H,brs). Odnos uočenih rotamera je 2:1.

B) Izrada terc-butil (2S,3S)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-3-metilpirolidin-1-karboksilata

[0581] Na isti način kao u Primeru 82, faza A, sirovi produkt (276 mg) naslovljenog jedinjenja se dobija kao bledo žuto ulje od 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (208 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D, (3S)-1-(terc-butoksikarbonil)-3-metil-L-prolina (323 mg) izrađenog kao gore, 2-metilpropil hlorokarbonata (0.183 mL), trietilamina (0.393 mL) i tetrahidrofurana (10 mL), 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (2.8 mL) i etanola (10 mL).

MS (ESI+) : [M+H]<+>414.

MS(ESI+), nađeno:414.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.03-1.07(3H,m), 1.09(9H glavnog, s), 1.33-1.38(9H sporednog, m),

21

1.47-1.62(1H,m), 1.99-2.11(1H,m), 2.24-2.38(1H,m), 3.42-3.57(2H,m), 4.05-4.15(1H,m), 7.61(1H sporednog, s), 7.63(1H glavnog, s), 12.77(1H,brs). Odnos uočenih rotamera je 5:2.

C) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S,3S)-3-metilpirolidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0582] Na isti način kao u Primeru 83, faza C, naslovljeno jedinjenje (127 mg) se dobija kao bela čvrsta supstanca od terc-butil (2S,3S)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-3-metilpirolidin-1-karboksilata (272 mg) izrađenog kao gore, terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (405 mg), cezijum karbonata (1.28 g), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihloriddihlormetan kompleksa (1:1) (24 mg), 1,2-dimetoksietana (5 mL), vode (2 mL), rastvora 10% hlorovodonična kiselina/metanol (2 mL) i metanola (3 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.17(3H,d,J=6.8Hz), 1.60-1.75(1H,m), 2.14-2.28(1H,m), 2.46(3H,s), 2.50-2.59(1H,m), 3.36-3.48(2H,m), 4.17-4.25(1H,m), 7.37(1H,s), 8.09(1H,s), 9.00(1H,brs), 10.25(1H,brs), 12.94(1H,brs).

Primer 141

Izrada 2-(4-hidroksi-4-fenilpirolidin-2-il)-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada terc-butil 2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-1-karboksilata

[0583] U rastvor metil 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksilata (1.14 g) izrađenog u Primeru 1, faza C u tetrahidrofuranu (20 mL) se na 0°C doda rastvor 1M litijum heksametildisilazidatetrahidrofuran (4.84 mL) i smeša se meša 30 min. U reaktivnu smešu se doda rastvor tercbutil (1S,4R)-3-okso-1-fenil-2-oksa- 5-azabiciklo[2.2.1]heptan-5-karboksilata (700 mg) u tetrahidrofuranu (5 mL) i smeša se meša 15 h na sobnoj temperaturi. Reaktivna smeša se neutrališe sa 1M rastvorom hlorovodonične kiseline uz hlađenje ledom i ekstrahuje sa etil acetatom (20 mL). Organski sloj se ispere sa slanim rastvorom (5 mL) i suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se

21

koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije terc-butil 2-{[5- bromo-2-(metoksikarbonil)tiofen-3-il]karbamoil}-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-1-karboksilat kao bledo žuto ulje. U rastvor terc-butil 2-{[5-bromo-2-(metoksikarbonil)tiofen-3-il]karbamoil}-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-1-karboksilata izrađenog kao gore u etanolu (15 mL) se doda 2M vodeni rastvor natrijum hidroksida (5.00 mL) i smeša se meša 2 h na 60°C. Reaktivna smeša se neutrališe sa 6M rastvorom hlorovodonične kiseline (1.7 mL) uz hlađenje ledom i koncentruje pod sniženim pritiskom. U ostatak se dodaju amonijum hlorid (137 mg), trietilamin (0.520 mL) i N,N-dimetilformamid (5 mL) i smeša se meša 5 min na sobnoj temperaturi. U reaktivni sistem se dodaju 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)karbodiimid hidrohlorid (399 mg) i 1-hidroksibenzotriazol (278 mg) i smeša se meša 15 h na sobnoj temperaturi. Reaktivni sistem se sipa u vodu (10 mL) i smeša se ekstrahuje sa etil acetatom (10 mL). Organski sloj se ispere sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hidrogen karbonata i suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije terc-butil 2-[(5-bromo-2-karbamoiltiofen-3-il)karbmoil]-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-1-karboksilat kao bledo žuto ulje. U rastvor terc-butil 2-[(5-bromo-2-karbamoiltiofen-3-il)karbamoil]-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-1-karboksilata izrađenog kao gore u etanolu (5 mL) se doda 2M vodeni rastvor natrijum hidroksida (1.71 mL) i smeša se meša 3 h na 70°C. Reaktivna smeša se neutrališe sa 1M rastvorom hlorovodonične kiseline (3.4 mL) uz hlađenje ledom i ekstrahuje sa etil acetatom (10 mL). Organski sloj se ispere sa vodom i suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem, filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom a ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) da se dobije naslovljeno jedinjenje (62 mg) kao braon čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.11-1.43(9H,m), 2.25-2.41(1H,m), 2.76-2.91(1H,m), 3.70-3.85(2H,m), 4.72-4.89(1H,m), 6.18-6.44(1H,m), 7.21-7.43(3H,m), 7.49-7.58(2H,m), 7.62-7.70(1H,m), 12.28-12.52(1H,m).

B) Izrada 2-(4-hidroksi-4-fenilpirolidin-2-il)-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0584] Na isti način kao u Primeru 83, faza C, naslovljeno jedinjenje (21 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od terc-butil 2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-4-hidroksi-4-fenilpirolidin-1-karboksilata (58 mg) izrađenog kao gore, terc-butil 3-metil-

22

4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (72.6 mg), cezijum karbonata (77.0 mg), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (4.85 mg), 1,2-dimetoksietana (5 mL), vode (0.5 mL), rastvora rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (1 mL) i metanola (4 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.48(3H,s), 2.56-5.15(6H,m), 7.27-7.60(7H,m), 8.12(1H,s), 9.12(1H,brs), 10.66(1H,brs), 12.90(1H,brs).

Primer 142

Izrada 2-[(1R,3S,4R,5S)or(1S,3S,4S,5S)-5-hidroksi-2-azabiciklo[2.2.1]hept-3-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada terc-butil (1R*,3S,4R*,5S)-3-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-5-hidroksi-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilata

[0585] U rastvor (1R*,3S,4R*,5S)-2-(terc-butoksikarbonil)-5-hidroksi-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-3-karboksilne kiseline (349 mg) i trietilamina (0.190 mL) u tetrahidrofuranu (4 mL) se na 0°C doda 2-metilpropil hlorokarbonat (0.178 mL) i smeša se meša 30 min na sobnoj temperaturi. U reaktivni sistem se doda rastvor 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (200 mg) izrađen u Primeru 1, faza D, u tetrahidrofuranu (2 mL) i smeša se meša 18 h na 60°C. U reaktivnu smešu se doda voda i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom. Organski sloj se ispere sa slanim rastvorom i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem, filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom a ostatak se prečisti baznom hromatografijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan). U dobijenu bledo žutu amorfnu čvrstu supstancu (307 mg) se dodaju 2M vodeni rastvor natrijum hidroksida (1.81 mL) i etanol (4.0 mL) i smeša se meša 5 h na 70°C. Reaktivni sistem se neutrališe sa 1M rastvorom hlorovodonične kiseline na 0°C. U reaktivni sistem se doda voda (2 mL) i smeša se ekstrahuje sa etil acetatom. Organski sloj se ispere sa slanim rastvorom i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se ispere sa etil acetatom (2 mL) da se dobije naslovljeno jedinjenje (211 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.13-1.47(11H,m), 1.88-2.15(2H,m), 2.56-2.63(1H,m), 3.97-4.10(1H,m), 4.23-4.34(1H,m), 4.79-4.88(1H,m), 5.05-5.14(1H,m), 7.47-7.74(1H,m), 12.2512.70(1H,m).

B) Optička rezolucija terc-butil (1R*,3S,4R*,5S)-3-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-5-hidroksi-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilata

[0586] terc-Butil (1R*,3S,4R*,5S)-3-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-5-hidroksi-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilat (211 mg) se frakcioniše visoko efikasnom tečnom hromatografijom (kolona: CHI- RALPAK AD (50 mm i.d.x500 mm L, proizvođača DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES, LTD.), mobilna faza: heksan/etanol (800/200) i heksan/etanol (200/800), brzina protoka: 80 mL/min, temperatura kolone: 30°C). terc-Butil (1R,3S,4R,5S) ili (1S,3S,4S,5S)-3-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-5-hidroksi-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilat (101 mg, >99.9%ee, frakcioniše se eluiranjem sa smešom heksan/etanol (800/200), vreme retencije 6.3 min) i terc-butil (1R,3S,4R,5S) ili (1S,3S,4S,5S)-3-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-5-hidroksi-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilat (100 mg, >99.9%ee, frakcioniše se eluiranjem sa smešom heksan/etanol (200/800), vreme retencije 8.9 min) su dobijeni po gore pomenutim uslovima visoko efikasne tečne hromatografije. Analiza je izvedena visoko efikasnom tečnom hromatografijom (kolona: CHIRALPAK AS-H (4.6 mm i.d.x250 mm L, proizvođača DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES, LTD.), mobilna faza: heksan/etanol (850/150), brzina protoka: 1 mL/min, temperatura kolone: 30°C, detekcija 220 nm).

C) Izrada terc-butil (1R,3S,4R,5S) ili (1S,3S,4S,5S)-5-hidroksi-3-[6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilata

[0587] Na isti način kao u Primeru 2, faza C, naslovljeno jedinjenje (91 mg) se dobija kao bela čvrsta supstanca od terc-butil (1R,3S,4R,5S) ili (1S,3S,4S,5S)-3-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-5-hidroksi-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilata (100 mg, >99.9%ee, frakcioniše se eluiranjem sa smešom heksan/etanol (800/200), vreme retencije 6.3 min) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (139 mg), natrijum karbonata (72 mg), 1,2-dimetoksietana (3.0 mL) i vode (1.5 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1)(18 mg).

<1>H-NMR(CDCl3) δ 1.32-2.01(11H,m), 2.05-2.23(2H,m), 2.42-2.64(3H,m), 2.95-3.20(1H,m), 4.14-4.39(1H,m), 4.51-4.63(1H,m), 5.08-5.25(1H,m), 7.11-7.23(1H,m), 7.73-7.89(1H,m).

D) Izrada 2-[(1R,3S,4R,5S) ili (1S,3S,4S,5S)-5-hidroksi-2-azabiciklo[2.2.1]hept-3-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0588] Na isti način kao u Primeru 108, naslovljeno jedinjenje (59 mg) se dobija kao bela čvrsta supstanca od terc- butil (1R,3S,4R,5S) ili (1S,3S,4S,5S)-5-hidroksi-3-[6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilata (90 mg) izrađenog u Primeru 142, faza C i metanola (2.0 mL), rastvora rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (0.457 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.41-1.52(1H,m), 1.62-1.72(1H,m), 1.77-1.86(1H,m), 2.01-2.15(1H,m), 2.46(3H,s), 2.91-3.01(1H,m), 4.01-4.14(1H,m), 4.28-4.42(1H,m), 4.92-5.02(1H,m), 7.35(1H,s), 8.08(1H,s), 8.57-8.68(1H,m), 9.60-9.72(1H,m), 12.97(1H,brs).

Primer 143

Izrada 2-(pirolidin-1-ilmetil)-6-[5-(trifluorometil)-1H-pirazol-4-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0589] 6-Bromo-2-(pirolidin-1-ilmetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on (372 mg) izrađen u Primeru 2, faza B, [3-(trifluorometil)-1-tritil-1H-pirazol-4-il]boronska kiselina (600 mg), natrijum karbonat (314 mg), etanol (10 mL) i voda (1.5 mL) se stave u bocu a atmosfera u boci se prečisti sa argonom. Doda se tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0) (68.4 mg), atmosfera u boci se ponovo prečisti sa argonom i smeša se meša 5 h na 80°C. U reaktivnu smešu se dodaju etil acetat (20 mL) i voda (10 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (10 mLx2). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (20 mL) i suše preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) a predmet frakcije se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije 2-(pirolidin-1-ilmetil)-6-[3-(trifluorometil)-1-tritil-1H-pirazol-4-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on kao bezbojno ulje. U 2-(pirolidin-1-ilmetil)-6-[3-(trifluorometil)-1-tritil-1H-pirazol-4-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on izrađen kao gore se doda rastvor hlorovodonična kiselina/metanol (5 mL) i smeša se meša 6 h na 60°C. U reaktivnu smešu se dodaju etil acetat

22

(20 mL) i zasićen vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata (10 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (10 mLx2). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (20 mL) i suše preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti baznom hromatografijom na koloni silika gela (etil acetat/metanol) a predmet frakcije se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije naslovljeno jedinjenje (3.8 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.66-1.78(4H,m), 2.54-2.60(4H,m), 3.58(2H,s), 7.37(1H,s), 8.53(1H,s).

Primer 144

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2R*,3S*)-3-fenilpirolidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on hidrohlorida

A) Izrada terc-butil (2R*,3S*)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-3-fenilpirolidin-1-karboksilata

[0590] Na isti način kao u Primeru 82, faza A, sirovi produkt (345 mg) naslovljenog jedinjenja se dobija kao bela čvrsta supstanca od 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (221 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D, (2R*,3S*)-1-(terc-butoksikarbonil)-3-fenilprolina (437 mg), 2-metilpropil hlorokarbonata (0.195 mL), trietilamina (0.418 mL) i tetrahidrofurana (10 mL), 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (3 mL) i etanola (10 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.09(9H glavnog, s), 1.38(9H sporednog, s), 2.03-2.35(2H glavnog, 2H sporednog, m), 3.46-3.70(3H glavnog, 2H sporednog, m), 4.00-4.13(1H sporednog, m), 4.54-4.67(1H glavnog, 1H sporednog, m), 7.19-7.36(5H glavnog, 5H sporednog, m), 7.59-7.65(1H glavnog, 1H sporednog, m), 12.78(1H glavnog, 1H sporednog, brs). Odnos uočenih rotamera je 5:2.

B) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2*,3S*)-3-fenilpirolidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on hidrohlorida

[0591] Na isti način kao u Primeru 83, faza C, naslovljeno jedinjenje (185 mg) se dobija kao bela čvrsta supstanca od terc-butil (2R*,3S*)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-3-fenilpirolidin-1-karboksilata (345 mg) izrađenog kao gore, terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (446 mg), cezijum karbonata (1.42 g), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihloriddihlormetan kompleksa (1:1) (27 mg), 1,2-dimetoksietana (6 mL), vode (2 mL), rastvora 10% hlorovodonična kiselina/metanol (4 mL) i metanola (5 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.15-2.29(1H,m), 2.43-2.60(4H,m), 3.45-3.66(2H,m), 3.76-3.90(1H,m), 4.62(1H,d,J=8.9Hz), 7.28-7.38(5H,m), 7.43(1H,s), 7.86-8.39(1H,m), 9.12-10.47(1H,m), 13.05(1H,brs).

Primer 145

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S)-1,2,3,6-tetrahidropiridin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada terc-butil (2S)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-3,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilata

[0592] U smešu (2S)-1-(terc-butoksikarbonil)-1,2,3,6-tetrahidropiridin-2-karboksilne kiseline (1.16 g), trietilamina (1.42 mL) i tetrahidrofurana (12 mL) se doda 2-metilpropil hlorokarbonat (0.662 mL) uz mešanje na sobnoj temperaturi. Nakon 1 h, doda se 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamid (752 mg) izrađen u Primeru 1, faza D i smeša se meša 2 h na 100°C u mikrotalasnom reaktoru. Reaktivna smeša se ostavi da se ohladi na sobnu temperaturu i sipa u zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata. Smeša se ekstrahuje sa etil acetatom i ekstrakt se suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se rastvori u etanolu (10 mL), doda se 2M vodeni rastvor natrijum hidroksida (10.2 mL) i smeša se meša 2 h na 90°C. Reaktivna smeša se ohladi sa ledom i u kapima se doda 6M rastvor hlorovodonične kiseline (3.33 mL). Reaktivna smeša se sipa u slani rastvor i ekstrahuje sa 3:1 smešom etil acetat/tetrahidrofuran. Ekstrakt se suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti baznom hromatografijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan i metanol/etil acetat) da se dobije naslovljeno jedinjenje (851 mg) kao bela čvrsta supstanca.

22

Optička čistoća je 51.1%ee. Analiza je izvedena visoko efikasnom tečnom hromatografuijom (kolona: CHIRALPAK IC (4.6 mm i.d.x250 mm L, proizvođača DAICEL CHEMICAL INDUS- TRIES, LTD.), mobilna faza: heksan/etanol (900/100), brzina protoka: 1 mL/min, temperatura kolone: 30°C, detekcija 220 nm).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.21-1.47(9H,m), 2.53-2.65(2H,m), 3.92-4.19(2H,m), 5.09-5.31(1H,m), 5.62-5.81(2H,m), 7.54(1H,s), 12.65(1H,brs).

B) Optička rezolucija terc-butil (2S)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-3,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilata

[0593] terc-Butil (2S)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-3,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilat (0.86 g, 51.1%ee) se frakcioniše visoko efikasnom tečnom hromatografijom (kolona: CHIRALPAK IC (50 mm i.d.x500 mm L, proizvođača DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES, LTD.), mobilna faza: heksan/etanol (900/100), brzina protoka: 80 mL/min, kolona temperature: 30°C). terc-Butil (2S)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)piperidin-1-karboksilat (0.54 g, 99.8%ee, vreme retencije 10.16 min) i terc-butil (2R)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-di-hidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)piperidin-1-karboksilat (0.20 g, >99.9%ee, vreme retencije 7.31 min) su dobijeni po gore pomenutim uslovima visoko efikasne tečne hromatografije. Analiza je izvedena visoko efikasnom tečnom hromatografijom (kolona: CHIRALPAK IC (4.6 mm i.d.x250 mm L, proizvođača DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES, LTD.), mobilna faza: heksan/etanol (900/100), brzina protoka: 1 mL/min, temperatura kolone: 30°C, detekcija 220 nm).

C) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S)-1,2,3,6-tetrahidropiridin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0594] terc-Butil (2S)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-3,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilat (900 mg) izrađen kao gore, terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilat (1.35 g), cezijum karbonat (4.27 g), 1,2-dimetoksietan (12 mL) i voda (4 mL) se stave u bocu a atmosfera u boci se prečisti sa argonom. Doda se [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleks (1:1)(80 mg), atmosfera u boci se ponovo prečisti sa argonom i smeša se meša 1 h na 90°C. Reaktivna smeša se sipa u zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata i

22

smeša se ekstrahuje sa 3:1 smešom etil acetat/tetrahidrofuran. Dobijeni organski sloj se ispere po redu sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hidrogen karbonata i slanim rastvorom (20 mL) i suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) a predmet frakcije se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije terc-butil (2S)-2-{6-[1-(terc-butoksikarbonil)-3-metil-1H-pirazol-4-il]-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il}-3,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilat kao bela čvrsta supstanca. U rastvor terc-butil (2S)- 2-{6-[1-(terc-butoksikarbonil)-3-metil-1H-pirazol-4-il]-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]-3,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilata izrađenog kao gore u metanolu (15 mL) se doda rastvor 10% hlorovodonična kiselina/metanol (14 mL) i smeša se meša 1 h na 50°C. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, precipitirana čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (620 mg) kao bela čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.37-2.53(4H,m), 2.71-2.86(1H,m), 3.61-3.83(2H,m), 4.34-4.51(1H,m), 5.74-6.02(2H,m), 7.36(1H,s), 8.13(1H,brs), 9.74(1H,brs), 9.85-9.96(1H,m), 12.89(1H,brs).

MS (ESI+) : [M+H]<+>314.

MS(ESI+), nađeno:314.

Primer 146

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2R)-1,2,3,6-tetrahidropiridin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0595] Na isti način kao u Primeru 145, faza C, naslovljeno jedinjenje (88 mg) se dobija kao bela čvrsta supstanca od terc-butil (2R)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)piperidin-1-karboksilata (117 mg) izrađenog u Primeru 145, faza B, terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (175 mg), cezijum karbonata (555 mg), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (10 mg), 1,2-dimetoksietana (3 mL), vode (1 mL), rastvora 10% hlorovodonična kiselina/metanol (2 mL) i metanola (3 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.38-2.48(4H,m), 2.72-2.87(1H,m), 3.61-3.85(2H,m), 4.36-4.49(1H,m), 5.76-6.02(2H,m), 7.37(1H,s), 8.12(1H,s), 9.62-9.94(2H,m), 12.88(1H,brs).

22

Primer 147

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(piperazin-2-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on ditrifluoroacetata

A) Izrada di-terc-butil 2-{[5-(1-benzil-3-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(metoksikarbonil)tiofen-3-il]karbmoil}piperazin-1,4-dikarboksilata

[0596] Na isti način kao u Primeru 123, faza F, naslovljeno jedinjenje (250 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od metil 3-amino-5-(1-benzil-3-metil-1H-pirazol-4-il)tiofen-2-karboksilata (327 mg) izrađenog u Primeru 123, faza C, 1,4-bis(tercbutoksikarbonil)piperazin-2-karboksilne kiseline (496 mg), 2-metilpropil hlorokarbonata (205 mg), trietilamina (304 mg) i tetrahidrofurana (10 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.41(9H,s), 1.57(9H,s), 2.47(3H,s), 2.92-3.10(2H,m), 3.30-3.45(4H,m), 3.80-3.90(1H,m), 3.85(3H,s), 5.24(2H,s), 7.10-7.20(1H,m), 7.26-7.40(4H,m), 7.59(1H,s), 8.07(1H,s), 10.76(1H,brs).

B) Izrada di-terc-butil 2-[6-(1-benzil-3-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]piperazin-1,4-dikarboksilata

[0597] Na isti način kao u Primeru 123, faza G, naslovljeno jedinjenje (150 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od di-terc-butil 2-{[5-(1-benzil-3-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(metoksikarbonil)tiofen-3-il]karbamoil}piperazin-1,4-dikarboksilata (250 mg) izrađenog kao gore, 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (1 mL), metanola (5 mL) i 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)karbodiimid hidrohlorida (1.92 g), 1-hidroksibenzotriazola (1.35 g), amonijum hlorida (2.14 g), trietilamina (4.05 g), N,N-dimetilformamida (5 mL) i 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (1 mL) i metanola (10 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.41(9H,s), 1.58(9H,s), 2.49(3H,s), 3.20-3.50(4H,m), 3.85-4.00(2H,m), 5.07-5.17(1H,m), 5.27(2H,s), 7.12-7.20(2H,m), 7.25-7.40(4H,m), 7.61(1H,s), 10.00(1H,brs).

C) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-piperazin-2-iltieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on

22

ditrifluoroacetata

[0598] Na isti način kao u Primeru 123, faza H, 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(piperazin-2-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on (90 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od di-tercbutil 2-[6-(1-benzil-3-metil-1H-pirazol-4-il)- 4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]piperazin-1,4-dikarboksilata (150 mg) izrađenog kao gore, mravlje kiseline (5 mL) i 20% paladijum hidroksida na ugljeniku (20 mg). Smeša se rastvori u trifluorosirćetnoj kiselini (5 mL), smeša se koncentruje pod sniženim pritiskom a ostatak se kristališe iz dietil etra da se dobije naslovljeno jedinjenje (35 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.47(3H,s), 3.05-3.12(1H,m), 3.90-4.01(4H,m), 4.22-4.32(1H,m), 5.20-5.25(1H,m), 7.44(1H,s), 8.26(1H,s).

Primer 148

Izrada 2-(2-azabiciklo[2.1.1]heks-1-il)-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on hidrohlorida

A) Izrada terc-butil 1-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-2-azabiciklo[2.1.1]heksan-2-karboksilata

[0599] Na isti način kao u Primeru 71, faza A, naslovljeno jedinjenje (180 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (327 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D, 2-(terc-butoksikarbonil)-2-azabiciklo[2.1.1]heksan-1-karboksilne kiseline (455 mg), 2-metilpropil hlorokarbonata (273 mg), trietilamina (202 mg) i tetrahidrofurana (10 mL) i 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (1 mL) i metanola (5 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.02(9H,brs), 1.70(2H,dd,J=4.5,1.7Hz), 1.97(2H,brs), 2.64(1H,t,J=2.9Hz), 3.34-3.38(2H,m), 7.19(1H,s).

B) Izrada 2-(2-azabiciklo[2.1.1]heksan-1-il)-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on hidrohlorida

[0600] Na isti način kao u Primeru 83, faza C, naslovljeno jedinjenje (98 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od terc-butil 1-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-

22

2-il)-2-azabiciklo[2.1.1]heksan-2-karboksilata (150 mg) izrađenog kao gore, terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (270 mg), cezijum karbonata (290 mg), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihloriddihlormetan kompleksa (1:1) (18 mg), 1,2-dimetoksietana (10 mL), vode (1 mL) i rastvora rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (2 mL) i metanola (10 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.80-1.92(2H,m), 2.47(3H,s), 2.68-2.82(2H,m), 2.92-3.02(1H,m), 3.28-3.40(2H,m), 7.42(1H,s), 8.12(1H,s), 9.95(2H,brs).

Primer 149

Izrada 2-[(ciklopentilamino)metil]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada terc-butil [(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)metil]ciklopentilkarbamata

[0601] Na isti način kao u Primeru 71, faza A, naslovljeno jedinjenje (620 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (431 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D, N-(terc-butoksikarbonil)-N-ciklopentilglicina (996 mg), 2-metilpropil hlorokarbonata (0.531 mL), trietilamina (0.676 mL) i tetrahidrofurana (5 mL), 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (4.88 mL) i etanola (5 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.05-2.00(17H,m), 3.63-4.52(3H,m), 7.57(1H,s), 12.42(1H,brs).

B) Izrada 2-[(ciklopentilamino)metil]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0602] Na isti način kao u Primeru 83, faza C, naslovljeno jedinjenje (242 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od terc-butil [(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)metil]ciklopentilkarbamata (700 mg) izrađenog kao gore, terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (1.01 g), cezijum karbonata (1.07 g), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (67.2 mg), 1,2-dimetoksietana (5 mL), vode (0.5 mL), rastvora rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (1 mL) i metanola (4 mL).

2

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.46-1.61(2H,m), 1.66-1.82(4H,m), 1.91-2.06(2H,m), 2.47(3H,s), 3.56-3.73(1H,m), 4.24(2H,qd), 7.39(1H,s), 8.11(1H,s), 9.63(2H,brs).

Primer 150

Izrada 2-[(1R,3S,4R,5S) ili (1S,3S,4S,5S)-5-hidroksi-2-azabiciklo[2.2.1]hept-3-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada terc-butil (1R,3S,4R,5S) ili (1S,3S,4S,5S)-5-hidroksi-3-[6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilata

[0603] Na isti način kao u Primeru 2, faza C, naslovljeno jedinjenje (87 mg) se dobija kao bledo smeđa čvrsta supstanca od terc-butil (1R,3S,4R,5S) ili (1S,3S,4S,5S)-3-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-5-hidroksi-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilata izrađenog u Primeru 142, faza B (100 mg), >99.9%ee, frakcioniše se eluiranjem sa smešom heksan/etanol (200/800), vreme retencije 8.9 min) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (139 mg), natrijum karbonata (72 mg), 1,2-dimetoksietana (3.0 mL) i vode (1.5 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1)(18 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.10-1.49(11H,m), 1.88-2.23(2H,m), 2.37-2.48(3H,m), 2.57-2.67(1H,m), 4.00-4.12(1H,m), 4.24-4.40(1H,m), 4.78-4.93(1H,m), 5.01-5.17(1H,m), 7.32-7.55(1H,m), 7.77-8.36(1H,m), 11.98-12.43(1H,m), 12.80-13.12(1H,m).

B) Izrada 2-[(1R,3S,4R,5S) ili (1S,3S,4S,5S)-5-hidroksi-2-azabiciklo[2.2.1]hept-3-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0604] Na isti način kao u Primeru 108, naslovljeno jedinjenje (50 mg) se dobija kao bela čvrsta supstanca od terc-butil (1R,3S,4R,5S) ili (1S,3S,4S,5S)-5-hidroksi-3-[6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilata (86 mg) izrađenog u Primeru 150, faza A i metanola (2.0 mL), rastvora rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (0.436 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.39-1.51(1H,m), 1.62-1.72(1H,m), 1.78-1.88(1H,m), 2.01-2.15(1H,m), 2.46(3H,s), 2.89-2.99(1H,m), 4.00-4.13(1H,m), 4.29-4.42(1H,m), 4.93-

2 1

5.01(1H,m), 7.35(1H,s), 8.08(1H,s), 8.53-8.71(1H,m), 9.46-9.65(1H,m), 12.91-13.04(1H,m).

Primer 151

Izrada 2-(ciklopentilmetil)-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada 5-bromo-3-[(ciklopentilacetil)amino]tiofen-2-karboksamida

[0605] Na isti način kao u Primeru 11, faza A, naslovljeno jedinjenje (290 mg) se dobija kao žuto ulje od 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (200 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D i ciklopentilsirćetne kiseline (0.113 mL) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,N’-tetrametiluronijum heksafluorofosfata (413 mg) i N-etil-N-(1-metiletil)propan-2-amina (0.316 mL) i N,N-dimetilformamida (2.0 mL).

<1>H-NMR(CDCl3) δ 1.13-1.30(2H,m), 1.60(4H,s), 1.81-1.94(2H,m), 2.24-2.38(1H,m), 2.39-2.45(2H,m), 5.42(2H,brs), 8.28(1H,s), 10.86(1H,brs).

B) Izrada 6-bromo-2-(ciklopentilmetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0606] U 5-bromo-3-[(ciklopentilacetil)amino]tiofen-2-karboksamid (290 mg) se dodaju 2M vodeni rastvor natrijum hidroksida (1.75 mL) i etanol (3.0 mL) i smeša se meša 2 h na 70°C. Reaktivni sistem se neutrališe sa 1M rastvorom hlorovodonične kiseline na 0°C. Doda se voda (2 mL) i precipitat se sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (165 mg) kao bela čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.12-1.28(2H,m), 1.42-1.75(6H,m), 2.24-2.35(1H,m), 2.60(2H,d,J=7.6Hz), 7.57(1H,s), 12.52(1H,brs).

C) Izrada 2-(ciklopentilmetil)-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0607] Na isti način kao u Primeru 2, faza C, naslovljeno jedinjenje (57 mg) se dobija kao bela čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(ciklopentilmetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (160 mg) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (315 mg), natrijum karbonata (162 mg), 1,2-dimetoksietana (3.0 mL) i vode (1.5 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (42 mg).

2 2

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.09-1.32(2H,m), 1.40-1.78(6H,m), 2.25-2.40(1H,m), 2.45(3H,brs), 2.61(2H,d,J=7.4Hz),7.34(1H,s), 7.73-8.37(1H,m), 12.26(1H,brs), 12.95(1H,brs).

Primer 152

Izrada etil {2-[6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-illpirolidin-1-il}acetata

A) Izrada etil {2-[6-(1-benzil-3-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]pirolidin-1-il}acetata

[0608] Smeša 6-(1-benzil-3-metil-1H-pirazol-4-il)-2-(pirolidin-2-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (391 mg) izrađenog u Primeru 124, faza C, etil 2-bromoacetata (184 mg), N-etil-N-(1-metiletil)propan-2-amina (258 mg) i N,N-dimetilformamida (5 mL) se meša 2 h na 60°C. Dodaju se etil acetat (50 mL) i voda (50 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (10 mLx2). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (20 mL) i suše preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem, filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom a ostatak se prečisti baznom hromatografijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) da se dobije naslovljeno jedinjenje (140 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.26(3H,t,J=7.2Hz), 1.73-2.12(3H,m), 2.35-2.57(1H,m), 2.49(3H,s), 2.84(1H,td,J=9.2,6.6Hz), 3.28-3.41(1H,m), 3.41-3.64(2H,m), 4.04(1H,dd,J=9.5,4.1Hz), 4.18(2H,q,J=7.2Hz), 5.27(2H,s), 7.16(1H,s), 7.24-7.47(5H,m), 7.62(1H,s), 10.52(1H,brs).

B) Izrada etil {2-[6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]pirolidin-1-il}acetata

[0609] Na isti način kao u Primeru 123, faza H, naslovljeno jedinjenje (13 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od etil {2-[6-(1-benzil-3-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]pirolidin-1-il}acetata (40 mg) izrađenog kao gore, paladijum hidroksida (10 mg) i mravlje kiseline (5 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.27(3H,t,J=6.9Hz), 1.73-2.14(3H,m), 2.39-2.54(1H,m), 2.55(3H,s), 2.84(1H,td,J=9.2,6.6Hz), 3.36(1H,ddd,J=8.9,6.7,2.5Hz), 3.42-3.64(2H,m),

2

4.05(1H,dd,J=9.4,4.1Hz), 4.19(2H,q,J=7.1Hz), 7.22(1H,s), 7.83(1H,s).

Primer 153

Izrada 2-(dekahidroizohinolin-1-il)-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0610] Na isti način kao u Primeru 71, faza A, terc-butil 1-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)oktahidroizohinolin-2(1H)-karboksilat (180 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca izrađena od 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (0.22 g) izrađenog u Primeru 1, faza D, 2-(terc-butoksikarbonil)-2-azabiciklo[2.1.1]heksan-1-karboksilne kiseline (0.57 g), 2-metilpropil hlorokarbonata (0.27 g), trietilamina (0.20 g) i tetrahidrofurana (10 mL) i 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (1 mL) i metanola (5 mL). Na isti način kao u Primeru 83, faza C, 2-(dekahidroizohinolin-1-il)-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on hidrohlorid se dobija od gore izrađenog jedinjenja, terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (270 mg), cezijum karbonata (290 mg), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (18 mg), 1,2-dimetoksietana (10 mL), vode (1 mL) i rastvora rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (2 mL) i metanola (10 mL). Jedinjenje se prečisti baznom hromatografijom na koloni silika gela (metanol/etil acetat) da se dobije naslovljeno jedinjenje (36 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.21-1.46(8H,m), 1.48-1.70(2H,m), 1.83-1.93(1H,m), 2.13-2.23(1H,m), 2.45(3H,s), 2.65-2.85(2H,m), 3.80-3.90(1H,m), 7.36(1H,s), 8.02(1H,s).

Primer 154

Izrada 2-[2-(1-aminociklopropil)etil]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0611] Na isti način kao u prethodno pomenutom Primeru 155, faza G, naslovljeno jedinjenje (18 mg) se dobija kao bela čvrsta supstanca od 2-(trimetilsilil)etil {1-[2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)etil]ciklopropil}karbamata (57 mg) izrađenog u Primeru

2 4

155, faza F, terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (77 mg), cezijum karbonata (243 mg), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (4.6 mg), 1,2-dimetoksietana (3 mL), vode (0.3 mL) i rastvora 10% hlorovodonična kiselina/metanol (5 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 0.71-0.79(2H,m), 0.88-0.96(2H,m), 2.00-2.11(2H,m), 2.45(3H,s), 2.77-2.87(2H,m), 7.33(1H,s), 8.03(1H,brs), 8.34(3H,brs), 12.34(1H,brs).

Primer 155

Izrada 2-(4-azaspiro[2.4]hept-5-il)-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada etil 2-(dietoksifosforil)heks-5-enoata

[0612] Natrijum hidrid (60% u ulju, 65.0 g) se suspenduje u tetrahidrofuranu (800 mL) u atmosferi azota i u kapima se u toku 30 min dodaje etil (dietoksifosforil)acetat (200 g) na sobnoj temperaturi. Po završetku dodavanja u kapima, smeša se dodatno meša mehaničkom mešalicom u toku 30 min. U kapima se u reaktivnu smešu dodaje 4-bromobut-1-en (217 g) u toku 30 min. Reaktivna smeša se zagreva 5 h pod refluksom, ostavi da se ohladi na sobnu temperaturu i neutrališe dodavanjem 1M vodenog rastvora amonijum hlorida (300 mL). Smeša se koncentruje pod sniženim pritiskom, u ostatak se dodaju voda (500 mL) i dietiletar (500 mL) i smeša se podeli. Vodeni sloj se zasiti sa natrijum hloridom i smeša se ekstrahuje sa dietiletrom (500 mLx2). Kombinovani ekstrakti se isperu sa slanim rastvorom i suše preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije sirovi produkt (241.6 g) naslovljenog jedinjenja kao žuto ulje. Ovo ulje se koristi u sledećoj reakciji bez daljeg prečišćavanja.

<1>H-NMR(CDCl3) δ 1.21-1.30(9H,m), 1.80-2.15(4H,m), 2.88-2.97(1H,m), 4.05-4.20(6H,m), 4.91-5.01(2H,m), 5.65-5.73(1H,m).

B) Izrada 1-but-3-en-1-ilciklopropankarboksilne kiseline

[0613] Natrijum hidrid (60% u ulju, 42 g) se suspenduje u toluenu (500 mL) u atmosferi azota

2

i u kapima se u toku 1 h na sobnoj temperaturi dodaje rastvor etil 2-(dietoksifosforil)heks-5-enoata (241.6 g) izrađen kao gore u toluenu (200 mL). Doda se katalitička količina etanola (0.6 mL) i reaktivna smeša se ohladi na 0°C u ledenom kupatilu. U reaktivnu smešu se pomoću kanile doda oksiran (176.6 g) u boci ohlađenoj smešom suvi led/etanol. Ledeno kupatilo se ukloni i reaktivna smeša se lagano zagreva pod refluksom u toku 6 h. Reaktivna smeša se neutrališe pažljivim dodavanjem 1M rastvora amonijum hlorida (500 mL) na 0°C i smeša se 3 puta ekstrahuje sa dietil etrom (600 mL). Kombinovani ekstrakti se isperu sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hidrogen karbonata (400 mL), vodom (400 mL) i slanim rastvorom (400 mL) i suše preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Dobijeno ulje se rastvori u etanolu (500 mL) i doda se vodeni rastvor (500 mL) natrijum hidroksida (90.3 g). Smeša se meša i zagreva pod refluksom u toku 12 h. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, etanol se upari pod sniženim pritiskom. Ostatak se ohladi i podesi do pH 1 dodavanjem koncentrovane hlorovodonične kiseline u kapima uz održavanje na 0°C. Iz dobijene suspenzije organski produkt se ekstrahuje 3 puta sa etil acetatom (400 mL) a kombinovani ekstrakti se isperu sa slanim rastvorom i suše preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije sirovi produkt (88 g) naslovljenog jedinjenja kao žuto ulje. Ovo ulje se koristi u sledećoj reakciji bez daljeg prečišćavanja.

<1>H-NMR(CDCl3) δ 1.92-2.37(4H,m), 3.53-4.22(4H,m), 5.02-5.06(2H,m), 5.75-5.87(1H,m), 7.81(1H,brs).

C) Izrada 2-(trimetilsilil)etil (1-but-3-en-1-ilciklopropil)karbamata

[0614] Sirovi produkt (130.5 g) 1-but-3-en-1-ilciklopropankarboksilne kiseline, izrađen kao gore, se rastvori u tetrahidrofuranu (1300 mL) i smeša se ohladi na 0°C u atmosferi azota. Dodaju se po redu trietilamin (263 mL) i etil hlorokarbonat (152.0 g) i smeša se meša 1 h na 0°C. U reaktivnu smešu se doda vodeni rastvor (500 mL) natrijum azida (152 g) i smeša se meša 2 h na 0°C. U reaktivnu smešu se dodaju etil acetat (500 mL) i voda (300 mL) i smeša se podeli. Organski sloj se izdvoji i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se rastvori u toluenu (1000 mL) i smeša se zagreva pod refluksom u toku 1 h. U reaktivnu smešu se doda 2-(trimetilsilil)etanol (118 g) i smeša se dalje zagreva pod refluksom u toku 6 h.

2

Reaktivna smeša se razblaži sa etil acetatom (600 mL) i smeša se ispere po redu sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hidrogen karbonata, vodom i slanim rastvorom i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/petrol etar) da se dobije naslovljeno jedinjenje (148.0 g) kao žuto ulje.

<1>H-NMR(CDCl3) δ 0.09(9H,m), 0.65-1.00(6H,m), 1.66-1.68(2H,m), 2.18-2.24(2H,m), 4.14(2H,t,J=7.2Hz), 4.96-5.07(3H,m), 5.83-5.87(1H,m).

D) Izrada 2-(trimetilsilil)etil 5-(hidroksimetil)-4-azaspiro[2.4]heptan-4-karboksilata

[0615] U rastvor 2-(trimetilsilil)etil (1-but-3-en-1-ilciklopropil)karbamata (120.0 g) izrađenog kao gore u dihlormetanu (1000 mL) se doda 3-hlorbenzenkarboperoksidna kiselina (122.0 g) i smeša se meša 3 h na sobnoj temperaturi. Reaktivna smeša se razblaži sa dihlormetanom (500 mL) i smeša se ispere po redu sa vodenim rastvorom natrijum tiosulfata (500 mL) i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hidrogen karbonata (500 mL) i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se rastvori u sirćetnoj kiselini i smeša se meša 24 h na sobnoj temperaturi. Rastvarač se upari pod sniženim pritiskom a ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (etil acetat/petrol etar) da se dobije naslovljeno jedinjenje (127.0 g) kao bezbojno ulje.

<1>H-NMR(CDCl3) δ 0.01(9H,s), 0.46-1.71(11H,m), 3.64-3.69(1H,m), 4.06-4.10 (3H,m).

E) Izrada 4-{[2-(trimetilsilil)etoksi]karbonil}-4-azaspiro[2.4]heptan-5-karboksilne kiseline

[0616] U rastvor 2-(trimetilsilil)etil 5-(hidroksimetil)-4-azaspiro[2.4]heptan-4-karboksilata (42.0 g) prethodno izrađenog u acetonu (600 mL) se doda Jones reagens (257 mL). Dobijena suspenzija se meša 30 min na sobnoj temperaturi i neutrališe dodavanjem 2-propanola (30 mL). Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem. Organski sloj se izdvoji od filtrata i razblaži sa etil acetatom a smeša se ispere sa vodom i slanim rastvorom i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/petrol etar) da se dobije sirovi produkt (21.0 g) naslovljenog jedinjenja kao žuto ulje.

<1>H-NMR(CDCl3) δ 0.01-0.05(9H,m), 0.47-0.96(4H,m), 1.74-1.87(2H,m), 2.03-2.51(4H,m),

2

4.06-4.50(3H,m), 9.60(1H,s).

F) Izrada 2-(trimetilsilil)etil 5-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-4-azaspiro[2.4]heptan-4-karboksilata

[0617] Na isti način kao u Primeru 82, faza A, naslovljeno jedinjenje (133 mg) se dobija kao bela čvrsta supstanca od 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (221 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D, sirovog produkta (571 mg) 4-{[2-(trimetilsilil)etoksi]karbonil}-4-azaspiro[2.4]heptan-5-karboksilne kiseline izrađene kao gore, 2-metil-propil hlorokarbonata (0.259 mL), trietilamina (0.418 mL) i tetrahidrofurana (10 mL), 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (3 mL) i etanola (10 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ -0.15(9H,s), 0.44-0.68(4H,m), 1.20-2.37(6H,m), 3.79-3.95(2H,m), 4.84(1H,dd,J=8.3Hz,3.6Hz), 7.61(1H,s), 12.70(1H,brs).

[0618] Pored toga, dobija se 2-(trimetilsilil)etil {1-[2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)etil]ciklopropil}karbamat (57 mg). Smatra se da sirovi produkt 4-{[2-(trimetilsilil)etoksi]karbonil}-4- azaspiro[2.4]heptan-5-karboksilne kiseline izrađen kao gore sadrži 3-[1-({[2-(trimetilsilil)etoksi]karbonil}amino)ciklopropil]propanoatnu kiselinu.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ -0.01(9H,s), 0.58(4H,d,J=14.4Hz), 0.80-0.92(2H,m), 1.79-1.91(2H,m), 2.62-2.75(2H,m), 3.91-4.02(2H,m), 7.33(1H,brs), 7.53(1H,s), 12.52(1H,brs).

G) Izrada 2-(4-azaspiro[2.4]hept-5-il)-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0619] 2-(Trimetilsilil)etil 5-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-4-azaspiro[2.4]heptan-4-karboksilat (133 mg) izrađen kao gore, terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1- karboksilat (174 mg), cezijum karbonat (553 mg), 1,2-dimetoksietan (5 mL) i voda (0.8 mL) se stave u bocu a atmosfera u boci se prečisti sa argonom. Doda se [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihloriddihlormetan kompleks (1:1)(10 mg), atmosfera u boci se ponovo prečisti sa argonom i smeša se meša 30 min na 90°C. Reaktivna smeša se sipa u zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata i smeša se ekstrahuje sa etil acetatom. Dobijeni organski sloj se suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela

2

(etil acetat/heksan) a predmet frakcije se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije 2-(trimetilsilil)etil 5-{6-[1-(terc-butoksikarbonil)-3-metil-1H-pirazol-4-il]-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il}-4-azaspiro[2.4]heptan-4-karboksilat kao bledo žuta bela čvrsta supstanca. U rastvor 2-(trimetilsilil)etil 5-{6-[1-(terc-butoksikarbonil)-3-metil-1H-pirazol-4-il]-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin- 2-il}-4-azaspiro[2.4]heptan-4-karboksilata izrađenog kao gore u metanolu (5 mL) se doda rastvor 10% hlorovodonična kiselina/metanol (5 mL) i smeša se meša na 60°C u toku noći. Reaktivna smeša se koncentruje pod sniženim pritiskom, u ostatak se doda 2-propanol (5 mL) i smeša se meša 30 min na 80°C. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, precipitirana čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (55 mg) kao bela čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 0.82-0.95(2H,m), 1.19-1.36(2H,m), 1.98-2.32(3H,m), 2.46-4.89(5H,m), 7.38(1H,s), 8.10(1H,s), 9.22(1H,brs), 10.22(1H,brs), 12.86(1H,brs).

Primer 156

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S)-4-piperidin-1-ilpirolidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada terc-butil (2S)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-4-piperidin-1-ilpirolidin-1-karboksilata

[0620] Na isti način kao u Primeru 11, faza A, terc-butil (2S)-2-[(5-bromo-2-karbamoiltiofen-3-il)karbmoil]-4-piperidin-1-ilpirolidin-1-karboksilat se dobija kao bledo smeđa amorfna čvrsta supstanca (132 mg) od 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (200 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D i 1-(terc-butoksikarbonil)-4-piperidin-1-il-L-prolina (270 mg) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,N’-tetrametiluronijum heksafluorofosfata (413 mg) i N-etil-N-(1-metiletil)propan-2-amina (0.316 mL) i N,N-dimetilformamida (5.0 mL). U terc-butil (2S)-2-[(5-bromo-2-karbamoiltiofen-3-il)karbamoil]-4-piperidin-1-ilpirolidin-1-karboksilat izrađen kao gore se dodaju 2M vodeni rastvor natrijum hidroksida (0.52 mL) i etanol (1.0 mL) i smeša se meša 2 h na 70°C. Reaktivni sistem se neutrališe sa 1M rastvorom hlorovodonične kiseline na 0°C. Smeša se ekstrahuje sa etil acetatom i smeša se ispere sa slanim rastvorom i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika

2

gela (etil acetat/heksan) da se dobije naslovljeno jedinjenje (63 mg) kao bledo smeđa amorfna čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(CDCl3) δ 1.23-2.01(16H,m), 2.21-2.43(1H,m), 2.49-2.74(4H,m), 3.18-3.32(1H,m), 3.88-4.25(3H,m), 7.27(1H,s).

B) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S)-4-piperidin-1-ilpirolidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0621] Na isti način kao u Primeru 2, faza C, terc-butil (2S)-2-[6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]-4-piperidin-1-ilpirolidin-1-karboksilat se dobija kao bledo smeđa čvrsta supstanca (57 mg) od terc-butil (2S)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-4-piperidin-1-ilpirolidin-1-karboksilata (60 mg) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (76 mg), natrijum karbonata (40 mg), 1,2-dimetoksietana (1.5 mL) i vode (0.75 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1) (10 mg). U rastvor terc-butil (2S)-2-[6-(5-metil-1H-pirazol- 4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]-4-piperidin-1-ilpirolidin-1-karboksilata izrađenog kao gore u metanolu (1.0 mL) se uz mešanje na sobnoj temperaturi doda rastvor rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (0.26 mL). Nakon 3 h mešanja reaktivnog sistema uz zagrevanja na 50°C, reaktivna smeša se koncentruje pod sniženim pritiskom i u ostatak se dodaju etil acetat (1 mL) i zasićen vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata (0.5 mL). Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem, filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom a ostatak se prečisti baznom hromatografijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan i metanol/etil acetat).

Dobijena bledo žuta čvrsta supstanca se kristališe iz smeše metanol/etil acetat/heksan da se dobije naslovljeno jedinjenje (19 mg) kao bela čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.02-1.37(2H,m), 1.51-1.64(1H,m), 1.66-1.91(4H,m), 2.09-2.25(1H,m), 2.25-2.48(6H,m), 2.53-2.64(1H,m), 2.78-2.98(2H,m), 3.16-3.25(1H,m), 3.79-3.91(1H,m), 7.34(1H,s), 8.01(1H,s).

Primer 157

Izrada 2-[(1S,5R)-2-azabiciklo[3.1.0]heks-1-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

24

A) Izrada (4S)-4-(2-hloretil)-1,3,2-dioksatiolan 2,2-dioksida

[0622] U rastvor (2S)-butan-1,2,4-triola (10.0 g) i piridina (15.2 mL) u acetonitrilu (100 mL) se na 0°C doda tionil hlorid (34.4 mL) i smeša se meša 15 h na sobnoj temperaturi. U reaktivnu smešu se dodaju etil acetat (20 mL) i 0.1M rastvor hlorovodonične kiseline (10 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (10 mLx2). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (20 mL) i suše preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) a predmet frakcije se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije (4S)-4-(2-hloretil)-1,3,2-dioksatiolan 2-oksid kao braon ulje. Smeša (4S)-4-(2-hloretil)-1,3,2-dioksatiolan 2-oksida izrađenog kao gore, natrijum perjodata (19.6 g), rutenijum hlorid monohidrata (172 mg), acetonitrila (200 mL) i vode (40 mL) se meša 15 h na sobnoj temperaturi. Acetonitril se upari pod sniženim pritiskom i vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (10 mLx2). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (20 mL) i suše preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) a predmet frakcije se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije naslovljeno jedinjenje (14.2 g) kao bezbojno ulje.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.87-2.43(2H,m), 3.62-3.87(2H,m), 4.26-5.40(3H,m).

B) Izrada etil (1S,5R)-2-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-karboksilat hidrohlorida

[0623] U suspenziju natrijum hidrida (3.21 g) u 1,2-dimetoksietanu (100 mL) se na 0°C dodaju (4S)-4-(2-hloretil)-1,3,2-dioksatiolan 2,2-dioksid (7.50 g) izrađen kao gore i etil N-(difenilmetiliden)glicinat (10.7 g) i smeša se meša 15 h pod refluksom. U reaktivnu smešu se doda voda (100 mL) i smeša se ekstrahuje sa etil acetatom (100 mL). Organski sloj se suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata i rastvarač se upari pod sniženim pritiskom. Ostatak se rastvori u dietiletru (100 mL), doda se 1M rastvor hlorovodonične kiseline (48.2 mL) i smeša se meša 15 h na sobnoj temperaturi. Izdvojeni vodeni sloj se ispere sa etil acetatom (100 mL) i rastvarač se upari pod sniženim pritiskom. Ostatak se rastvori u etanolu (50 mL), doda se kalijum karbonat (5.55 g) i smeša se meša 15 h na sobnoj temperaturi. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i u filtrat se doda rastvor rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (10 mL). Rastvarač se upari pod sniženim pritiskom. U ostatak se dodaju etil acetat (8 mL) i etanol (2 mL) i precipitirana čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem i ispere sa etil acetatom da se dobije naslovljeno jedinjenje (2.51 g) kao braon čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.23(3H,t,J=7.1Hz), 1.48-1.73(2H,m), 1.90-2.37(3H,m), 2.87-3.02(1H,m), 3.26-3.40(1H,m), 4.13-4.26(2H,m), 10.22 (2H,brs) .

C) Izrada (1S,5R)-2-(terc-butoksikarbonil)-2-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-karboksilne kiseline

[0624] Rastvor etil (1S,5R)-2-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-karboksilat hidrohlorida (1.50 g), diterc-butil dikarbonata (1.91 mL) i trietilamina (2.18 mL) u tetrahidrofuranu (15 mL) se meša 15 h na sobnoj temperaturi. U reaktivnu smešu se doda voda (10 mL) i smeša se ekstrahuje sa etil acetatom (20 mL). Organski sloj se suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata.

Rastvarač se upari pod sniženim pritiskom. Ostatak se rastvori u etanolu (7 mL), doda se 8M vodeni rastvor natrijum hidroksida (1 mL) i smeša se meša 2 h na sobnoj temperaturi.

Reaktivna smeša se zakiseli sa 6M rastvorom hlorovodonične kiseline (1.5 mL) uz hlađenje ledom a precipitirana čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (1.20 g) kao bezbojna čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 0.99(1H,t,J=5.3Hz), 1.40(9H,s), 1.72(1H,dd,J=8.9,4.7Hz), 1.77-1.90(1H,m), 1.95-2.06(1H,m), 2.10-2.24(1H,m), 3.22-3.46(1H,m), 3.60(1H,ddd,J=11.0,9.4,6.2Hz), 12.35(1H,brs).

D) Izrada terc-butil (1S,5R)-1-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-2-azabiciklo[3.1.0]heksan-2-karboksilata

[0625] Na isti način kao u Primeru 71, faza A, naslovljeno jedinjenje (330 mg) se dobija kao bezbojno ulje od 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (321 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D, (1S,5R)-2-(terc-butoksikarbonil)-2-azabiciklo[3.1.0]heksan-1-karboksilne kiseline (495 mg) izrađene kao gore, 2-metilpropil hlorokarbonata (0.283 mL), trietilamina (0.503 mL) i tetrahidrofurana (10 mL), 8M vodenog rastvora natrijum hidroksida (1.00 mL) i etanola (10 mL) .

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.00-1.51(10H,m), 1.87-2.05(3H,m), 2.17-2.35(1H,m), 3.22-3.31(1H,m), 3.77(1H,td,J=10.4,4.0Hz), 7.54(1H,s), 12.65(1H,brs).

E) Izrada 2-[(1S,5R)-2-azabiciklo[3.1.0]heks-1-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0626] Na isti način kao u Primeru 83, faza C, naslovljeno jedinjenje (145 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od terc-butil (1S,5R)-1-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-2-azabiciklo[3.1.0]heksan-2-karboksilata (301 mg) izrađenog kao gore, tercbutil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (448 mg), cezijum karbonata (474 mg), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihloriddihlormetan kompleksa (1:1) (29.9 mg), 1,2-dimetoksietana (5 mL), vode (0.5 mL), rastvora rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (1 mL) i metanola (5 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.77(2H,d,J=7.7Hz), 2.05-2.30(2H,m), 2.46(3H,s), 2.64-2.76(1H,m), 2.94-3.14(1H,m), 3.33-3.48(1H,m), 7.38(1H,s), 8.12(1H,s), 9.82(1H,brs), 10.53(1H,brs).

Primer 158

Izrada 2-[1-(2-hidroksietil)pirolidin-2-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada 6-(1-benzil-3-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[1-(2-hidroksietil)pirolidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0627] Smeša etil {2-[6-(1-benzil-3-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]piridin-1-il}acetata (80 mg) izrađenog u Primeru 152, faza A, natrijum borohidrida (63 mg), tetrahidrofurana (5 mL) i etanola (5 mL) se meša 2 h na sobnoj temperaturi. U reaktivnu smešu se doda 1M rastvor hlorovodonične kiseline (2 mL) uz hlađenje ledom i smeša se neutrališe sa 1M vodenim rastvorom natrijum hidroksida (2 mL), dodaju se etil acetat (20 mL) i voda (20 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (10 mLx2). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (20 mL) i suše preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem, filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom i smeša se kristališe iz dietiletra da se dobije naslovljeno jedinjenje (73 mg) kao beli prašak.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.55-1.74(2H,m), 1.82-2.06(1H,m), 2.07-2.26(1H,m), 2.27-

24

2.47(5H,m), 2.74-2.90(1H,m), 3.17-3.35(1H,m), 3.39-3.59(3H,m), 5.20(2H,s), 7.08(1H,s), 7.18-7.39(5H,m), 7.49(1H,s).

B) Izrada 2-[1-(2-hidroksietil)pirolidin-2-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0628] Na isti način kao u Primeru 123, faza H, naslovljeno jedinjenje (40 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od 6-[1-benzil-3-metil-1H-pirazol-4-il]-2-[1-(2-hidroksietil)pirolidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (73 mg) izrađenog kao gore, 20% paladijum hidroksida na ugljeniku (20 mg) i mravlje kiseline (5 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.69-1.98(3H,m), 2.15-2.33(1H,m), 2.58(3H,s), 3.41(1H,brs), 3.45-3.59(1H,m), 3.65(1H,dd,J=9.2,5.1Hz), 3.98-4.17(4H,m), 4.75(1H,brs), 7.34(2H,s).

Primer 159

A) Izrada terc-butil (1R*,3S,4R*,5R)-3-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-5-fluoro-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilata

[0629] U rastvor (1R*,3S,4R*,5R)-2-(terc-butoksikarbonil)-5-fluoro-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-3-karboksilne kiseline (352 mg) i trietilamina (0.190 mL) u tetrahidrofuranu (4 mL) se na 0°C doda 2-metilpropil hlorokarbonat (0.178 mL) i smeša se meša 30 min na sobnoj temperaturi. U reaktivni sistem se doda rastvor 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (200 mg) izrađen u Primeru 1, faza D, u tetrahidrofuranu (2 mL) i smeša se meša 18 h na 60°C. U reaktivnu smešu se doda voda i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom. Organski sloj se ispere sa slanim rastvorom i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem, filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom a ostatak se prečisti baznom hromatografijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan). U dobijenu bledo žutu čvrstu supstancu (328 mg) dodaju se 2M vodeni rastvor natrijum hidroksida (1.81 mL) i etanol (4.0 mL) i smeša se meša 5 h na 70°C. Reaktivni sistem se na 0°C neutrališe sa 1M rastvorom hlorovodonične kiseline. U reaktivni sistem se doda voda (2 mL) i precipitat se sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (274 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.13(5H,s), 1.39(4H,s), 1.47-1.90(2H,m), 2.01-2.21(2H,m), 2.842.94(1H,m), 4.02-4.11(1H,m), 4.16-4.30(1H,m), 4.91-5.20(1H,m), 7.64-7.71(1H,m), 12.67(1H,brs).

B) Optička rezolucija terc-butil (1R*,3S,4R*,5R)-3-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-5-fluoro-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilata

[0630] terc-Butil (1R*,3S,4R*,5R)-3-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-5-fluoro-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilat (274 mg) se frakcioniše visoko efikasnom tečnom hromatografijom (kolona: CHI- RALPAK AD (50 mm i.d.x500 mm L, proizvođača DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES, LTD.), mobilna faza: heksan/etanol (800/200), brzina protoka: 80 mL/min, temperatura kolone: 30°C). terc-Butil (1R,3S,4R,5R) ili (1S,3S,4S,5R)-3-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-5-fluoro-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilat (130 mg, >99.9%ee, vreme retencije 5.4 min) i terc-butil (1R,3S,4R,5R) ili (1S,3S,4S,5R)-3-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-5-fluoro-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilat (127 mg, >99.9%ee, vreme retencije 7.5 min) su dobijeni po gore pomenutim uslovima visoko efikasne tečne hromatografije. Analiza je izvedena visoko efikasnom tečnom hromatografijom (kolona: CHIRALPAK AS-H (4.6 mm i.d.x250 mm L, proizvođača DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES, LTD.), mobilna faza: heksan/etanol (850/150), brzina protoka: 1 mL/min, temperatura kolone: 30°C, detekcija 220 nm).

C) Izrada terc-butil (1R,3S,4R,5R) ili (1S,3S,4S,5R)-5-fluoro-3-[6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidro- tieno[3,2-d]pirimidin-2-il]-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilata

[0631] Na isti način kao u Primeru 2, faza C, naslovljeno jedinjenje (116 mg) se dobija kao bledo žuta čvrsta supstanca od terc-butil (1R,3S,4R,5R) ili (1S,3S,4S,5R)-3-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-5-fluoro-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilata (125 mg, >99.9%ee, vreme retencije 5.4 min) izrađenog u Primeru 159, faza B i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (173 mg), natrijum karbonata (89 mg), 1,2-dimetoksietana (3.0 mL) i vode (1.5 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1)(23 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.14(5H,s), 1.40(4H,s), 1.48-1.87(2H,m), 2.04-2.23(2H,m), 2.46(3H,brs), 2.83-2.95(1H,m), 4.02-4.14(1H,m), 4.16-4.32(1H,m), 4.89-5.21(1H,m), 7.39-

24

7.51(1H,m), 7.77-8.37(1H,m), 12.38(1H,brs), 12.96(1H,brs).

D) Izrada 2-[(1R,3S,4R,5R) ili (1S,3S,4S,5R)-5-fluoro-2-azabiciklo[2.2.1]hept-3-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0632] Na isti način kao u Primeru 108, naslovljeno jedinjenje (66 mg) se dobija kao bela čvrsta supstanca od terc-butil (1R,3S,4R,5R) ili (1S,3S,4S,5R)-5-fluoro-3-[6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilata (115 mg) izrađenog u Primeru 159, faza C i metanola (2.0 mL), rastvora rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (0.581 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.75-1.98(3H,m), 2.46(3H,s), 2.53-2.64(1H,m), 3.18-3.25(1H,m), 4.20-4.33(2H,m), 4.93-5.19(1H,m), 7.35(1H,s), 8.09(1H,s), 8.62(1H,brs), 10.04 (1H,brs), 12.95(1H,brs).

Primer 160

Izrada 2-[(1R,3S,4R,5R) ili (1S,3S,4S,5R)-5-fluoro-2-azabiciklo[2.2.1]hept-3-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada terc-butil (1R,3S,4R,5R) ili (1S,3S,4S,5R)-5-fluoro-3-[6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidro-tieno[3,2-d]pirimidin-2-il]-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilata

[0633] terc-Butil (1R,3S,4R,5R) ili (1S,3S,4S,5R)-3-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-5-fluoro-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilat (125 mg, >99.9%ee, vreme retencije 7.5 min) izrađen u Primeru 159, faza B i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilat (173 mg), natrijum karbonat (89 mg), 1,2-dimetoksietan (3.0 mL) i voda (1.5 mL) se stave u bocu a atmosfera u boci se prečisti sa argonom. Doda se [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleks (1:1) (23 mg) i atmosfera u boci se ponovo prečisti sa argonom. Reaktivni sistem se meša 3 h na 100°C i doda se voda. Smeša se ekstrahuje sa etil acetatom i ekstrakt se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) da se dobije naslovljeno jedinjenje (108 mg) kao bledo žuta čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.14(5H,s), 1.40(4H,s), 1.50-1.87(2H,m), 2.04-2.23(2H,m), 2.39-

24

2.48(3H,m), 2.86-2.95(1H,m), 4.03-4.12(1H,m), 4.18-4.32(1H,m), 4.92-5.18(1H,m), 7.37-7.49(1H,m), 7.82-8.33(1H,m), 12.29-12.47(1H,m), 12.88-13.02(1H,m).

B) Izrada 2-[(1R,3S,4R,5R) ili (1S,3S,4S,5R)-5-fluoro-2-azabiciklo[2.2.1]hept-3-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0634] U rastvor terc-butil (1R,3S,4R,5R) ili (1S,3S,4S,5R)-5-fluoro-3-[6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilata (105 mg) izrađenog u Primeru 160, faza A u metanolu (2.0 mL) se na sobnoj temperaturi doda rastvor rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (0.53 mL) uz mešanje. Reaktivni sistem se meša 30 min uz zagrevanje na 50°C i precipitat se sakupi filtriranjem i ispere sa etil acetatom da se dobije naslovljeno jedinjenje (65 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.71-2.00(3H,m), 2.46(3H,s), 2.51-2.61(1H,m), 3.18-3.27(1H,m), 4.17-4.33(2H,m), 4.93-5.19(1H,m), 7.35(1H,s), 8.09(1H,s), 8.63(1H,brs), 9.88(1H,brs), 12.92(1H,brs).

MS (ESI+) : [M+H]<+>346.

MS(ESI+), nađeno:346.

Primer 161

Izrada 2-[(2S)-piperidin-2-il]-6-[5-(trifluorometil)-1H-pirazol-4-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on hidrohlorida

[0635] terc-butil (2S)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)piperidin-1-karboksilat (1.41 g) dobijen u Primeru 83, faza B, [3-(trifluorometil)-1-tritil-1H-pirazol-4-il]boronska kiselina (1.72 g), natrijum karbonat (902 mg), etanol (15 mL) i voda (3 mL) se stave u bocu a atmosfera u boci se prečisti sa argonom. Doda se tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0) (197 mg), atmosfera u boci se ponovo prečisti sa argonom i smeša se meša 15 h na 80°C. U reaktivnu smešu se dodaju etil acetat (20 mL) i voda (10 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (10 mLx2). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (20 mL) i suše preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom.

24

Ostatak se prečisti baznom hromatografijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) a predmet frakcije se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije terc-butil (2S)-2-{4-okso-6-[3-(trifluorometil)-1-tritil-1H-pirazol-4-il]-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il}piperidin-1-karboksilat kao bezbojno ulje. U rastvor terc-butil (2S)-2-{4-okso-6-[3-(trifluorometil)-1-tritil-1H-pirazol-4-ill-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il}piperidin-1-karboksilata izrađenog kao gore u metanolu (4 mL) se doda rastvor rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (1 mL) i smeša se meša 15 h na 60°C. Čvrsti precipitat se sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (530 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.47-1.93(5H,m), 2.23-2.36(1H,m), 2.95-3.11(1H,m), 3.28-3.34(1H,m), 4.22-4.34(1H,m), 7.39(1H,s), 8.64(1H,s), 9.13(1H,brs), 9.78(1H,brs), 13.04(1H,brs), 14.30(1H,brs).

MS(ESI+) : [M+H]<+>370.

MS(ESI+), nađeno:370.

Primer 162

Izrada 6-(5-etil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S)-piperidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada N,N-dimetil-1H-pirazol-1-sulfonamida

[0636] Pirazol (12 g) se rastvori u tetrahidrofuranu (200 mL) i na 0°C se uz mešanje doda natrijum hidrid (60% u ulju, 8.46 g) u atmosferi azota. Nakon 20 min, u kapima se doda dimetilsulfamoil hlorid (17 mL) i smeša nastavi da se meša na istoj temperaturi 1 h i na sobnoj temperaturi 1 h. Reaktivna smeša se sipa u zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata (400 mL), smeša se ekstrahuje sa etil acetatom (400 mL) i ekstrakt se suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) a predmet frakcije se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije naslovljeno jedinjenje (25.3 g) kao bezbojno ulje.

<1>H-NMR(CDCl3) δ 2.95(6H,s), 6.40(1H,m), 7.75(1H,m), 7.99(1H,d,J=2.7Hz).

24

B) Izrada 5-etil-N,N-dimetil-1H-pirazol-1-sulfonamida

[0637] N,N-dimetil-1H-pirazol-1-sulfonamid (25.3 g) izrađen kao gore se rastvori u tetrahidrofuranu (200 mL) i smeša se ohladi na -78°C. U kapima se uz mešanje doda rastvor 1.6M n-butillitijum/heksan (99 mL). Po završetku dodavanja u kapima, smeša se meša 30 min i u kapima se doda jodoetan (12.8 mL). Reaktivna smeša se meša još 30 min i ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu. Nakon 1 h, kako mešanje postaje otežano zbog precipitacije, doda se tetrahidrofuran (200 mL) da rastvori precipitat. Nakon 2 h mešanja, reaktivna smeša se sipa u zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata (600 mL) i smeša se ekstrahuje dva puta sa etil acetatom (400 mL) a kombinovani ekstrakti se suše preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) a predmet frakcije se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije naslovljeno jedinjenje (19.8 g) kao bezbojno ulje.

<1>H-NMR(CDCl3) δ 1.30(3H,t,J=7.8Hz), 2.94(2H,dd,J=15.0Hz,7.5Hz), 3.03(6H,s), 6.13(1H,brs), 7.55(1H,brs).

C) Izrada 4-bromo-5-etil-N,N-dimetil-1H-pirazol-1-sulfonamida

[0638] 5-etil-N,N-dimetil-1H-pirazol-1-sulfonamid (19.8 g) izrađen kao gore se rastvori u tetrahidrofuranu (300 mL) i doda se 1-bromopirolidin-2,5-dion (20.8 g). Smeša se meša 2 h na 50°C. Reaktivna smeša se koncentruje pod sniženim pritiskom a ostatak se sipa u zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata i smeša se ekstrahuje sa etil acetatom (400 mL). Ekstrakt se ispere sa slanim rastvorom i suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata.

Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) a predmet frakcije se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije naslovljeno jedinjenje (26.2 g) kao žuto ulje.

<1>H-NMR(CDCl3) δ 1.24(3H,t,J=7.5Hz), 2.97(2H,dd,J=15.0Hz,7.8Hz), 3.06(6H,s), 7.54(1H,s).

24

[0639] 4-Bromo-5-etil-N,N-dimetil-1H-pirazol-1-sulfonamid (13.0 g) izrađen kao gore, 4,4,4’,4’,5,5,5’,5’-oktametil-2,2’-bi-1,3,2-dioksaborolan (12.3 g), kalijum acetat (13.6 g) i 1,2-dimetoksietan (300 mL) se stave u bocu a atmosfera u boci se prečisti sa argonom. Doda se [1,1’-Bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleks (1:1)(3.76 g), atmosfera u boci se ponovo prečisti sa argonom i smeša se meša na 90°C u toku noći.

Reaktivna smeša se ostavi da se ohladi na sobnu temperaturu i nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem. Filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom, u ostatak se doda 1:1 rastvor etil acetat/heksan i nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem. Filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom a ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan). Predmet frakcije se koncentruje pod sniženim pritiskom i dobijeni ostatak se ostavi da stoji na sobnoj temperaturi u toku noći. Precipitat se sakupi filtriranjem i ispere sa heksanom da se dobije naslovljeno jedinjenje (6.32 g) kao bela čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(CDCl3) δ 1.25(3H,t,J=7.5Hz), 1.31(12H,s), 3.03(6H,s), 3.17(2H,dd,J=15.0,7.5Hz), 7.75(1H,s).

E) Izrada 6-(5-etil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S)-piperidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0640] 5-etil-N,N-dimetil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-sulfonamid (658 mg) izrađen kao gore, terc-butil (2S)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)piperidin-1-karboksilat (414 mg) izrađen u Primeru 83, faza B, cezijum karbonat (1.96 g), 1,2-dimetoksietan (6 mL) i voda (2 mL) se stave u bocu a atmosfera u boci se prečisti sa argonom. Doda se [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleks (1:1)(37 mg), atmosfera u boci se ponovo prečisti sa argonom i smeša se meša 1 h na 90°C. Reaktivna smeša se sipa u zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata i smeša se ekstrahuje sa 3:1 smešom etil acetat/tetrahidrofuran. Dobijeni organski sloj se ispere po redu sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hidrogen karbonata i slanim rastvorom i suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti baznom hromatografijom na koloni silika gela (metanol/etil acetat) a predmet frakcije se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije terc-butil (2S)-2-{6-[1-(dimetilsulfamoil)-5-etil-1H-pirazol-4-il]-4-okso- 3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il}piperidin-1-karboksilat kao bela čvrsta supstanca. U rastvor terc-butil (2S)-

2

2-{6-[1-(dimetilsulfamoil)-5-etil-1H-pirazol-4-il]-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il}piperidin-1-karboksilata izrađenog kao gore u metanolu (10 mL) se doda rastvor 10% hlorovodonična kiselina/metanol (8 mL) i smeša se meša 1 h na 50°C. Reaktivna smeša se ostavi da se ohladi na sobnu temperaturu i doda se etil acetat (10 mL). Čvrsti precipitat se sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (136 mg) kao bela čvrsta supstanca.<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.25(3H,t,J=7.6Hz), 1.50-1.92(5H,m), 2.24-2.33(1H,m), 2.87(2H,q,J=7.6Hz), 2.96-3.11(1H,m), 3.29-3.40(1H,m), 4.15-4.29(1H,m), 7.32(1H,s), 8.09(1H,s), 9.06-9.22(1H,m), 9.40-9.52(1H,m), 12.82(1H,brs).

Primer 163

Izrada 2-{2-[6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]pirolidin-1-il}acetamida

A) Izrada 2-{2-[6-(1-benzil-3-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]pirolidin-1-il}acetamida

[0641] Smeša etil {2-[6-(1-benzil-3-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]piridin-1-il}acetata (80 mg) izrađenog u Primeru 152, faza A, 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (1 mL) i metanola (5 mL) se meša 2 h na 60°C. U reaktivnu smešu se doda 1M rastvor hlorovodonične kiseline (2 mL) uz hlađenje ledom, dodaju se etil acetat (20 mL) i voda (20 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (10 mLx2). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (20 mL) i suše preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se rastvori u N,N-dimetilformamidu (2 mL), dodaju se 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)karbodiimid hidrohlorid (675 mg), 1-hidroksibenzotriazol (397 mg), amonijum hlorid (628 mg) i trietilamin (1.19 g) i smeša se meša 18 h na 80°C. U reaktivnu smešu se dodaju etil acetat (20 mL) i voda (20 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (10 mLx2). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (20 mL) i suše preko anhidrovanog magnezijum sulfata.

Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti baznom hromatografijom na koloni silika gela (metanol/etil acetat) da se dobije naslovljeno jedinjenje (60 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca.

2 1

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.81-2.04(2H,m), 2.26-2.69(2H,m), 2.50(3H,s), 2.91-3.04(1H,m), 3.19(1H,d,J=16.4Hz), 3.48(1H,d,J=16.4Hz), 3.62(1H,brs),3.84(1H,dd,J=9.0,6.2Hz), 5.28(2H,s), 5.58(2H,brs), 7.12-7.24(2H,m), 7.24-7.47(4H,m), 7.65(1H,s), 8.13(1H,brs).

B) Izrada 2-{2-[6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]pirolidin-1-il}acetamida

[0642] Na isti način kao u Primeru 123, faza H, naslovljeno jedinjenje (22 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od 2-{2-[6-(1-benzil-3-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]pirolidin-1-il}acetamida (60 mg) izrađenog kao gore, 20% paladijum hidroksida na ugljeniku (20 mg) i mravlje kiseline (5 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.75-2.07(4H,m), 2.43(3H,s), 2.56-2.70(1H,m), 2.88-3.05(1H,m), 3.15-3.25(2H,m), 3.72(1H,brs), 7.19(1H,brs), 7.32-7.41(2H,m), 7.84(1H,brs).

Primer 164

Izrada 2-[(2R)-1-azabiciklo[2.2.2]okt-2-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on trifluoroacetata

A) Izrada terc-butil 4-(2-hidroksietil)piperidin-1-karboksilata

[0643] U izmešani rastvor 2-piperidin-4-iletanola (5.0 g), vode (12 mL) i 2-metilpropan-2-ola (9 mL) se na 0°C doda natrijum hidroksid (1.6 g) i reaktivni sistem se meša 30 min. U malim porcijama se doda di-terc-butil dikarbonat (8.5 g) i reaktivni sistem se meša u toku noći na sobnoj temperaturi. Reaktivni sistem se sipa u vodu (100 mL) i smeša se ekstrahuje sa etil acetatom (200 mL). Ekstrakt se ispere sa vodom i slanim rastvorom i koncentruje da se dobije naslovljeno jedinjenje (8.8 g).

<1>H-NMR(CDCl3) δ 1.19-1.23(2H,m), 1.50(9H,s), 1.59-1.61(6H,m), 2.68-2.72(2H,m), 3.68-3.73(2H,m), 4.08(2H,s).

B) Izrada terc-butil 4-(2-oksoetil)piperidin-1-karboksilata

[0644] U rastvor piridinijum hlorhromata (125.0 g) i natrijum acetata (48.0 g) u dihlormetanu

2 2

(300 mL) se na 0°C doda rastvor terc-butil 4-(2-hidroksietil)piperidin-1-karboksilata (89.0 g) u dihlormetanu (150 mL). Reaktivni sistem se meša 3 h na 25°C, doda se dietil etar (300 mL) i nerastvorni materijal se sakupi filtriranjem, prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela i ispere sa dietil etrom (1000 mL) i smešom dihlormetan/dietil etar (1000 mL). Filtrat se koncentruje da se dobije naslovljeno jedinjenje (60.0 g).

<1>H-NMR (CDCl3) δ 1.18-1.22(2H,m), 1.46(9H,s), 1.68-1.72(2H,m), 2.08-2.10(1H,m), 2.38-2.42(2H,m), 2.73-2.77(2H,m), 4.06-4.10(2H,m), 9.78(1H,s).

C) Izrada terc-butil 4-(2-cijano-2-hidroksietil)piperidin-1-karboksilata

[0645] U rastvor terc-butil 4-(2-oksoetil)piperidin-1-karboksilata (60 g) u dietiletru (150 mL) se na 0°C u malim porcijama dodaju rastvor natrijum cijanida (32.4 g) u vodi (100 mL) i koncentrovana hlorovodonična kiselina (55 mL). Reaktivni sistem se meša 4 h i organski sloj se ispere sa slanim rastvorom, suši i koncentruje da se dobije naslovljeno jedinjenje (67.0 g).

<1>H-NMR(CDCl3) δ 1.20-1.24(2H,m), 1.50(9H,s), 1.79-1.83(5H,m), 2.70-2.74(2H,m), 3.50-3.54(1H,m), 4.11-4.15(2H,m), 4.56-4.60(1H,m).

D) Izrada terc-butil 4-{2-cijano-2-[(metilsulfonil)oksi]etil}piperidin-1-karboksilata

[0646] U rastvor terc-butil 4-(2-cijano-2-hidroksietil)piperidin-1-karboksilata (67.0 g) i trietilamina (35.0 g) u dihlormetanu (500 mL) se polako dodaje rastvor metansulfonil hlorida (36.3 g) u dihlormetanu (200 mL). Reaktivni sistem se meša 2 h na sobnoj temperaturi i sipa u ledenu vodu (300 mL). Organski sloj se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata, nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje da se dobije naslovljeno jedinjenje (80.0 g).

<1>H-NMR (CDCl3) δ 1.18-1.22(2H,m), 1.48(9H,s), 1.73-1.77(3H,m), 1.93-1.97(1H,m), 2.03-2.07(1H,m), 2.72-2.76(2H,m), 3.23(3H,s), 4.13-4.15(2H,m), 5.27-5.29(1H,m).

E) Izrada 1-azabiciklo[2.2.2]oktan-2-karbonitrila

[0647] U rastvor terc-butil 4-{2-cijano-2-[(metilsulfonil)oksi]etil}piperidin-1-karboksilata (80.0 g) u dihlormetanu (200 mL) se doda rastvor trifluorosirćetne kiseline (137.0 g) u dihlormetanu (200 mL) i reaktivni sistem se meša na sobnoj temperaturi u toku noći.

2

Reaktivni sistem se koncentruje, u ostatak se doda acetonitril (200 mL) a polako se na 0°C dodaje trietilamin (98.0 g). Smeša se koncentruje, ostatak se razblaži sa dihlormetanom i smeša se ispere sa slanim rastvorom i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje. Ostatak se prečisti fleš hromatografijom na koloni silika gela (etil acetat/petrol etar) da se dobije naslovljeno jedinjenje (13.0 g) kao žuto ulje.

<1>H-NMR(CDCl3) δ 1.58-1.62(3H,m), 1.80-1.84(3H,m), 2.00-2.02(1H,m), 2.88-2.92(3H,m), 3.23-3.27(1H,m), 3.86-3.90(1H,m).

F) Izrada hidrohlorida (2R)-1-azabiciklo[2.2.2]oktan-2-karboksilne kiseline

[0648] Na isti način kao u dokumentu (Mi, Y.; Corey, E.J. Tetrahedron Lett. 2006, 47, 2515-2516), sprovodi se postupak optičke rezolucije diastereomerne soli za sintezu naslovljenog jedinjenja. To jest, u rastvor 1-azabiciklo[2.2.2]oktan-2-karbonitrila (20.0 g) u metanolu (100 mL) se polako dodaje rastvor (+)-vinske kiseline (22.0 g) u metanolu (100 mL) na 0°C. Reaktivni sistem se meša 90 min i koncentruje a dobijena čvrsta supstanca se kristališe 4 puta iz metanola. Precipitat se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje. U ostatak se doda voda (150 mL) a natrijum hidrogen karbonat se doda da se dostigne pH 8. Smeša se ekstrahuje sa dihlormetanom (200 mLx3) i ekstrakt se ispere sa slanim rastvorom, suši i koncentruje. Dobijena bela čvrsta supstanca (15.0 g) se rastvori u metanolu (100 mL) i rastvor (-)-vinske kiseline (16.5 g) u metanolu (100 mL) se polako dodaje na 0°C. Reaktivni sistem se meša 90 min i koncentruje a dobijena čvrsta supstanca se kristališe 4 puta iz metanola da se dobije (-)-tartrat (2R)-1-azabiciklo[2.2.2]oktan-2-karbonitrila (4.0 g, >90%ee). U dobijenu čvrsta supstanca se doda voda (50 mL) a natrijum hidrogen karbonat se dodaje da se dostigne pH 8. Smeša se ekstrahuje sa dihlormetanom (100 mLx3) i ekstrakt se ispere sa slanim rastvorom, suši i koncentruje. Dobijena bela čvrsta supstanca (1.75 g) se rastvori u koncentrovanoj hlorovodoničnoj kiselini (50 mL) i reaktivna smeša se zagreva pod refluksom u toku noći. Nakon koncentracije, u ostatak se polako dodaje rastvor natrijum hidroksida (1.04 g) u vodi (10 mL) na 0°C. Smeša se koncentruje, doda se koncentrovana hlorovodonična kiselina (5 mL) i smeša se ponovo koncentruje. Dobijena bela čvrsta supstanca se ekstrahuje sa metanolom (10 mL). Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje da se dobije naslovljeno jedinjenje (0.80 g).

<1>H-NMR(CDCl3) δ 1.68-1.72(4H,m), 1.88-1.92(1H,m), 2.13-2.17(2H,m), 3.32-3.36(4H,m),

2 4

4.43(1H,t,J=9.6Hz), 9.89(1H,s), 14.15(1H,brs).

G) Izrada 2-[(2R)-1-azabiciklo[2.2.2]okt-2-il]-6-bromotieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0649] U rastvor 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (200 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D, hidrohlorida (2R)-1-azabiciklo[2.2.2]oktan-2-karboksilne kiseline (173 mg) i N-etil-N-(1-metiletil)propan-2-amina (0.395 mL) u N,N-dimetilformamidu (4.0 mL) se na 0°C doda O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,N’-tetrametiluronijum heksafluorofosfat (413 mg) i reaktivni sistem se meša 20 h na 70°C. U reaktivnu smešu se doda voda i smeša se ekstrahuje sa etil acetatom. Organski sloj se ispere sa vodom i slanim rastvorom i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije smeša (2R)-N-(5-bromo-2-karbamoiltiofen-3-il)-1-azabiciklo[2.2.2]oktan-2-karboksamida i naslovljenog jedinjenja. Izmešani rastvor (2R)-N-(5-bromo-2-karbamoiltiofen-3-il)-1-azabiciklo[2.2.2]oktan-2-karboksamida i naslovljenog jedinjenja izrađenog kao gore i etanola (2.0 mL) i 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (1.8 mL) se meša 2 h na 70°C. Reaktivna smeša se neutrališe sa 1M rastvorom hlorovodonične kiseline na 0°C i smeša se ekstrahuje sa etil acetatom. Organski sloj se ispere sa slanim rastvorom i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti baznom hromatografijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan i metanol/etil acetat) da se dobije naslovljeno jedinjenje (114 mg) kao žuta čvrsta supstanca.

<1>H-NMR (DMSO-d6) δ 1.39-1.52 (2H,m), 1.52-1.66(2H,m), 1.73-1.85(1H,m), 1.85-1.94(1H,m), 2.19-2.32(1H,m), 2.59-2.77(2H,m), 2.83-2.97(1H,m), 3.03-3.16(1H,m), 3.93-4.01(1H,m), 7.60(1H,s).

H) Izrada 2-[(2R)-1-azabiciklo[2.2.2]okt-2-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on trifluoroacetata

[0650] 2-[(2R)-1-Azabiciklo[2.2.2]okt-2-il]-6-bromotieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on (110 mg) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilat (199 mg), natrijum karbonat (103 mg), 1,2-dimetoksietan (2.0 mL) i voda (1.0 mL) se stave u bocu a atmosfera u boci se prečisti sa argonom. Doda se [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleks (1:1)(26 mg) i

2

atmosfera u boci se ponovo prečisti sa argonom. Reaktivni sistem se meša 2 h na 100°C, doda se slani rastvor i smeša se ekstrahuje sa etil acetatom. Ekstrakt se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata, nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan i metanol/etil acetat) a dobijena bledo braon čvrsta supstanca (96 mg) se kristališe iz smeše etil acetat/heksan da se dobije sirovi produkt (50 mg) 2-[(2R)-1-azabiciklo[2.2.2]okt-2-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on kao bledo smeđa čvrsta supstanca. U suspenziju sirovog produkta (50 mg) 2-[(2R)-1-azabiciklo[2.2.2]okt-2-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2- d]pirimidin-4(3H)-ona izrađenog kao gore u N,N-dimetilformamidu (1.0 mL) se dodaju trietilamin (0.020 mL) i diterc-butil dikarbonat (0.034 mL). Reaktivna smeša se meša 18 h na sobnoj temperaturi, doda se voda i smeša se ekstrahuje sa etil acetatom. Ekstrakt se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata, nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) da se dobije terc-butil 4-{2-[(2R)-1-azabiciklo[2.2.2]okt-2-il]-4-okso-3,4- dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-6-il}-3-metil-1H-pirazol-1-karboksilat (položaj Boc na pirazol prstenu nije identifikovan) kao bledo žuta čvrsta supstanca (22 mg). U terc-butil 4-{2-[(2R)-1-azabiciklo[2.2.2]okt-2-il]-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-6-il}-3-metil-1H-pirazol-1-karboksilat izrađen kao gore se dodaju voda (0.50 mL) i trifluorosirćetna kiselina (51.6 mg) i reaktivni sistem se meša 30 min na 90°C. Reaktivni sistem se koncentruje pod sniženim pritiskom i ostatak se ispere sa metanolom (2 mL) i etil acetatom (2 mL) da se dobije naslovljeno jedinjenje (4.0 g) kao narandžasta čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.74-1.97(4H,m), 2.06-2.29(2H,m), 2.36-2.48(4H,m), 3.22-3.29(2H,m), 3.42-3.79(2H,m), 4.67-4.81(1H,m), 7.44(1H,s), 7.86-8.29(1H,m), 9.83(1H,brs), 12.68(1H,brs).

Primer 165

Izrada 2-(2-azabiciklo[2.1.1]heks-1-il)-6-[5-(trifluorometil)-1H-pirazol-4-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0651] Na isti način kao u Primeru 161, naslovljeno jedinjenje (12 mg) se dobija kao bezbojna čvrsta supstanca od terc-butil 1-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-2-

2

azabiciklo[2.1.1]heksan-2-karboksilata (35.0 mg) izrađenog u Primeru 148, faza A, [3-(trifluorometil)-1-tritil-1H-pirazol-4-il]boronske kiseline (71.7 mg), natrijum karbonata (22.5 mg), etanola (5 mL), vode (0.5 mL), tetrakis(trifenilfosfin)paladijuma(0) (4.90 mg), metanola (4 mL) i rastvora rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (1 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.84-1.90(2H,m), 2.72-2.81(2H,m), 2.94-2.99(1H,m), 3.30-3.38(2H,m), 7.43(1H,s), 8.63(1H,s), 9.88-10.26(3H,m), 13.03(1H,brs), 14.26(1H,brs).

Primer 166

Izrada 2-cikloheksil-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada 6-bromo-2-cikloheksiltieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0652] U izmešani rastvor 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (200 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D, trietilamina (0.19 mL) i tetrahidrofurana (4.0 mL) se na 0°C doda cikloheksankarbonil hlorid (0.18 mL) i smeša se meša 30 min na sobnoj temperaturi. U reaktivni sistem se sipa voda, smeša se ekstrahuje sa etil acetatom i ekstrakt se ispere sa slanim rastvorom i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije 5-bromo-3-[(cikloheksilkarbonil)amino]tiofen-2-karboksamid. U 5-bromo-3-[(cikloheksilkarbonil)amino]tiofen-2-karboksamid izrađen kao gore se dodaju 2M vodeni rastvor natrijum hidroksida (0.90 mL) i etanol (2.0 mL) i smeša se meša 2 h na 70°C.

Reaktivni sistem se neutrališe sa 1M rastvorom hlorovodonične kiseline na 0°C. Doda se voda (2 mL) i precipitat se sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (252 mg) kao bela čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.14-1.38(3H,m), 1.44-1.62(2H,m), 1.63-1.95(5H,m), 2.55-2.67(1H,m), 7.57(1H,s), 12.45(1H,brs).

B) Izrada 2-cikloheksil-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0653] Na isti način kao u Primeru 2, faza C, naslovljeno jedinjenje (158 mg) se dobija kao bledo žuta čvrsta supstanca od 6-bromo-2-cikloheksiltieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (250 mg) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-

2

karboksilata (492 mg), natrijum karbonata (254 mg), 1,2-dimetoksietana (4.0 mL) i vode (2.0 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1)(65 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.11-1.97(10H,m), 2.45(3H,s), 2.54-2.68(1H,m), 7.35(1H,s), 7.95(1H,brs), 12.20(1H,brs), 12.96(1H,brs).

Primer 167

Izrada 2-metil-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada 6-bromo-2-metiltieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0654] Na isti način kao u Primeru 166, faza A, naslovljeno jedinjenje (131 mg) se dobija kao bela čvrsta supstanca od 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (200 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D, trietilamina (0.19 mL), tetrahidrofurana (4.0 mL) i acetil hlorida (0.096 mL) i 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (0.45 mL) i etanola (2.0 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.36(3H,s), 7.54(1H,s), 12.55(1H,brs).

B) Izrada 2-metil-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0655] Na isti način kao u Primeru 2, faza C, naslovljeno jedinjenje (74 mg) se dobija kao bela čvrsta supstanca od 6-bromo-2-metiltieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (130 mg) i tercbutil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (327 mg), natrijum karbonata (169 mg), 1,2-dimetoksietana (3.0 mL) i vode (1.5 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1)(43 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.36(3H,s), 2.44(3H,s), 7.31(1H,s), 7.98(1H,brs), 12.30(1H,brs), 12.96(1H,brs).

Primer 168

Izrada 2-{[(2-hidroksi-2-metilpropil)amino]metil}-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

2

[0656] Na isti način kao u Primeru 2, faza B, 6-bromo-2-{[(2-hidroksi-2-metilpropil)amino]metil}tieno[3,2- d]pirimidin-4(3H)-on (160 mg) se dobija kao bela čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(hlormetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (300 mg) izrađenog u Primeru 2, faza A i 1-amino-2-metilpropan-2-ola (191 mg) i kalijum karbonata (445 mg) i natrijum jodida (16 mg) i N,N-dimetilformamida (5.0 mL). Smeša 6-bromo-2-{[(2-hidroksi-2-metilpropil)amino]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (130 mg) izrađenog kao gore, trietilamina (0.060 mL), di-terc-butil dikarbonata (0.100 mL), N,N-dimetilpiridin-4-amina (4.78 mg) i N,N-dimetilformamida (2.0 mL) se meša 2 h na 50°C. Smeša se prečisti baznom hromatografijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan i metanol/etil acetat) da se dobije terc-butil [(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)metil] (2-hidroksi-2-metilpropil)karbamat (položaj Boc na pirazol prstenu nije identifikovan) (96 mg) kao bela čvrsta supstanca. Na isti način kao u Primeru 2, faza C, terc-butil (2-hidroksi-2-metilpropil){[6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]metil}karbamat (30 mg) se dobija kao bledo žuta čvrsta supstanca od terc-butil [(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)metil] (2-hidroksi-2-metilpropil)karbamata (95 mg) izrađenog kao gore i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (135 mg), natrijum karbonata (70 mg), 1,2-dimetoksietana (2.0 mL) i vode (1.0 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1)(18 mg). U rastvor terc-butil (2-hidroksi-2-metilpropil){[6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]metil}karbamata (30 mg) izrađenog kao gore u metanolu (3.0 mL) se doda, uz mešanje na sobnoj temperaturi, rastvor rastvor 4M hlorovodonična kiselina/etil acetat (1.0 mL). Reaktivni sistem se meša 5 h uz zagrevanje na 50°C i koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti baznom hromatografijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan i metanol/etil acetat) i dobijena bledo žuta čvrsta supstanca se kristališe iz smeše metanol/etil acetat da se dobije naslovljeno jedinjenje (13 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.09(6H,s), 2.41(2H,s), 2.45(3H,s), 3.70(2H,s), 4.38(1H,brs), 7.36(1H,s), 8.01(1H,brs).

Primer 169

Izrada 2-{[(2-hidroksietil)(metil)amino]metil}-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

2

A) Izrada 6-bromo-2-{[(2-hidroksietil)(metil)amino]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0657] Na isti način kao u Primeru 2, faza B, naslovljeno jedinjenje (128 mg) se dobija kao bledo smeđa čvrsta supstanca od 6-bromo-2-(hlormetil)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (300 mg) izrađenog u Primeru 2, faza A i 2-(metilamino)etanola (0.172 mL) i kalijum karbonata (445 mg) i natrijum jodida (16 mg) i N,N-dimetilformamida (5.0 mL).

<1>H-NMR (DMSO-d6) δ 2.22 (3H, s), 2.52-2.57 (2H, m), 3.50(2H,t,J=5.5Hz), 3.55(2H,s), 4.63(1H,s), 7.60(1H,s), 12.10(1H,brs).

B) Izrada 2-{[(2-hidroksietil)(metil)amino]metil}-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0658] Na isti način kao u Primeru 2, faza C, naslovljeno jedinjenje (10 mg) se dobija kao bledo smeđa čvrsta supstanca od 6-bromo-2-{[(2-hidroksietil)(metil)amino]metil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (28 mg) i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (54 mg), natrijum karbonata (28 mg), 1,2-dimetoksietana (1.0 mL) i vode (0.5 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1)(7 mg).

<1>H-NMR (DMSO-d6) δ 2.24 (3H, s), 2.45 (3H, s), 2.55 (2H,t,J=5.6Hz), 3.51(2H,t,J=5.6Hz), 3.55(2H,s), 7.36(1H,s), 7.92(1H,brs), 12.98(1H,brs).

Primer 170

Izrada 2-[(2S)-1-azabiciklo[2.2.2]okt-2-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on trifluoroacetata

A) Izrada hidrohlorida (2S)-1-azabiciklo[2.2.2]oktan-2-karboksilne kiseline

[0659] Na isti način kao u dokumentu (Mi, Y.; Corey, E.J. Tetrahedron Lett. 2006, 47, 2515-2516), sprovodi se postupak optičke rezolucije diastereomerne soli za sintezu naslovljenog jedinjenja. To jest, u rastvor 1-azabiciklo[2.2.2]oktan-2-karbonitrila (20.0 g) izrađenog u Primeru 164, faza E u metanolu (100 mL) se polako na 0°C dodaje rastvor (+)-vinske kiseline

2

(22.0 g) u metanolu (100 mL). Reaktivni sistem se meša 90 min i koncentruje a dobijena čvrsta supstanca se kristališe 4 puta iz metanola da se dobije (+)-tartarat (2S)-1-azabiciklo[2.2.2]oktan-2-karbonitrila (3.0 g, >90%ee). U dobijenu čvrstu supstancu se dodaju voda (50 mL) i dodaje se natrijum hidrogen karbonat da se dostigne pH 8. Smeša se ekstrahuje sa dihlormetanom (100 mL33) i ekstrakt se ispere sa slanim rastvorom, suši i koncentruje. Dobijena bela čvrsta supstanca (1.4 g) se rastvori u koncentrovanoj hlorovodoničnoj kiselini (50 mL) i reaktivna smeša se zagreva pod refluksom u toku noći. Nakon koncentracije, u ostatak se polako dodaje rastvor natrijum hidroksida (0.83 g) u vodi (10 mL) na 0°C. Smeša se koncentruje, doda se koncentrovana hlorovodonična kiselina (5 mL) i smeša se ponovo koncentruje. Dobijena bela čvrsta supstanca se ekstrahuje sa metanolom (10 mL). Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje da se dobije naslovljeno jedinjenje (1.7 g).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.88-1.92(5H,m), 2.13-2.17(2H,m), 3.32-3.36(4H,m), 4.43(1H,t,J=9.6Hz), 10.01(1H,s), 14.10(1H,brs).

B) Izrada 2-[(2S)-1-azabiciklo[2.2.2]okt-2-il]-6-bromotieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0660] U rastvor 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (600 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D, hidrohlorida (2S)-1-azabiciklo[2.2.2]oktan-2-karboksilne kiseline (520 mg) i N-etil-N-(1-metiletil)propan-2-amina (1.19 mL) u N,N-dimetilformamidu (10 mL) se na 0°C doda O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,N’-tetrametiluronijum heksafluorofosfat (1.24 g) i reaktivni sistem se meša 20 h na 70°C. U reaktivnu smešu se doda voda i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom. Organski sloj se ispere sa vodom i slanim rastvorom i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije smeša (2S)-N-(5-bromo-2-karbamoiltiofen-3-il)-1-azabiciklo[2.2.2]oktan-2-karboksamida i naslovljenog jedinjenja. Izmešani rastvor (2S)-N-(5-bromo-2-karbamoiltiofen-3-il)-1-azabiciklo[2.2.2]oktan-2-karboksamida i naslovljenog jedinjenja izrađenog kao gore u etanolu (4.0 mL) i 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (2.7 mL) se meša 2 h na 70°C. Reaktivna smeša se neutrališe sa 1M rastvorom hlorovodonične kiseline na 0°C i smeša se ekstrahuje sa etil acetatom. Organski sloj se ispere sa slanim rastvorom i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti baznom hromatografijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan i metanol/etil acetat)

2 1

da se dobije naslovljeno jedinjenje (220 mg) kao žuta čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.40-1.63(4H,m), 1.73-1.94(2H,m), 2.18-2.30(1H,m), 2.60-2.71(2H,m), 2.83-2.97(1H,m), 3.04-3.17(1H,m), 3.89-4.01(1H,m), 7.60(1H,s).

C) Izrada 2-[(2S)-1-azabiciklo[2.2.2]okt-2-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on trifluoroacetata

[0661] 2-[(2S)-1-Azabiciklo[2.2.2]okt-2-il]-6-bromotieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on (210 mg) i terc-butil 3-metil- 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilat (571 mg), natrijum karbonat (196 mg), 1,2-dimetoksietan (4.0 mL) i voda (2.0 mL) se stave u bocu a atmosfera u boci se prečisti sa argonom. Doda se [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleks (1:1)(252 mg) i atmosfera u boci se ponovo prečisti sa argonom. Reaktivni sistem se meša 2 h na 100°C, doda se slani rastvor i smeša se ekstrahuje sa etil acetatom. Ekstrakt se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan i metanol/etil acetat) da se dobije sirovi produkt (96 mg) 2-[(2S)-1-azabiciklo[2.2.2]okt-2-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on kao bledo smeđa čvrsta supstanca. U suspenziju sirovog produkta (96 mg) 2-[(2S)-1-azabiciklo[2.2.2]okt-2-il]- 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona izrađenog kao gore u N,N-dimetilformamidu (1.0 mL) se dodaju trietilamin (0.039 mL) i di-terc-butil dikarbonat (0.065 mL). Reaktivna smeša se meša 18 h na 50°C, doda se voda i smeša se ekstrahuje sa etil acetatom. Ekstrakt se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata, nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) da se dobije terc-butil 4-{2-[(2S)-1-azabiciklo[2.2.2]okt-2-il]-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-6-il}-3-metil-1H-pirazol-1-karboksilat (položaj Boc na pirazol prstenu nije identifikovan) kao bledo žuta čvrsta supstanca (49 mg). U terc-butil 4-{2-[(2S)-1-azabiciklo[2.2.2]okt-2-il]-4-okso- 3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-6-il}-3-metil-1H-pirazol-1-karboksilat izrađen kao gore se dodaju voda (0.50 mL) i trifluorosirćetna kiselina (50.6 mg) i reaktivni sistem se meša 30 min na 90°C. Reaktivni sistem se koncentruje pod sniženim pritiskom a ostatak se prečisti baznom hromatografijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan i metanol/etil acetat) da se dobije bledo žuta čvrsta supstanca. Dobijena bledo žuta čvrsta supstanca se prečisti visoko efikasnom tečnom hromatografijom {kolona: L-kolona 2 ODS (20 mm i.d.x50 mm L), mobilna faza: 0.1% vodeni rastvor trifluorosirćetne

2 2

kiseline/0.1% rastvor trifluorosirćetne kiseline u acetonitrilu}. Predmet frakcije se koncentruje pod sniženim pritiskom a ostatak se kristališe iz smeše etil acetat/heksan da se dobije naslovljeno jedinjenje (6 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.70-1.95(4H,m), 2.05-2.25(2H,m), 2.36-2.48(4H,m), 3.21-3.31(2H,m), 3.42-3.56(1H,m), 3.59-3.78(1H,m), 4.57-4.84(1H,m), 7.44(1H,s), 7.81-8.44(1H,m), 9.81(1H,brs), 12.43-13.20(2H,m).

MS (ESI+) : [M+H]<+>342.

MS(ESI+), nađeno:342.

Primer 171

Izrada 2-[(1R*,6R*)-3-azabiciklo[4.1.0]hept-4-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

A) Izrada metil 2-[(terc-butoksikarbonil)amino]pent-4-enoata

[0662] Smeša 2-[(terc-butoksikarbonil)amino]pent-4-oleinske kiseline (20.0 g), kalijum karbonata (13.2 g) i N,N-dimetilformamida (100 mL) se meša 15 min. Smeša se ohladi na 0°C, doda se jodometan (9.2 g) i smeša se meša 2 h na sobnoj temperaturi. Reaktivna smeša se filtrira i ispere sa etil acetatom. Filtrat se ispere po redu sa 5% hlorovodoničnom kiselinom i slanim rastvorom i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije naslovljeno jedinjenje (21.0 g).

<1>H-NMR(CDCl3) δ 1.45(9H,s), 2.47-2.58(2H,m), 3.75(3H,s), 4.40(1H,q,J=6.4Hz), 5.07(1H,d,J=5.6Hz), 5.13-5.16(2H,m), 5.66-5.74(1H,m).

B) Izrada metil 2-[(terc-butoksikarbonil)(prop-2-en-1-il)amino]pent-4-enoata

[0663] Rastvor metil 2-[(terc-butoksikarbonil)amino]pent-4-enoata (10.5 g) izrađenog kao gore u etanolu (50 mL) se ohladi na -20°C, dodaju se 3-bromoprop-1-en (6.1 g) i natrijum hidrid (60% u ulju, 2.0 g) i smeša se meša 1.5 h na -20°C i neutrališe dodavanjem zasićenog vodenog rastvora amonijum hlorida (20 mL). Organski produkt se ekstrahuje sa dietiletrom i ekstrakt se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji

2

filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije naslovljeno jedinjenje (9.9 g).

<1>H-NMR(CDCl3) δ 1.47(9H,s), 2.59-2.75(2H,m), 3.72(3H,s), 3.79-4.15(3H,m), 5.08-5.36(4H,m), 5.74-5.84(2H,m).

C) Izrada terc-butil [1-(hidroksimetil)but-3-en-1-il]prop-2-en-1-ilkarbamata

[0664] U smešu metil 2-[(terc-butoksikarbonil)(prop-2-en-1-il)amino]pent-4-enoata (5.0 g) izrađenog kao gore i tetrahidrofurana (100 mL) se na 0°C doda rastvor 1M diizobutilaluminijum hidrid/toluen (60 mL) i smeša se meša 15 min na istoj temperaturi. Reaktivna smeša se razblaži sa vodenim rastvorom kalijum natrijum tartrata i smeša se ekstrahuje sa etil acetatom. Ekstrakt se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije naslovljeno jedinjenje (3.76 g).

<1>H-NMR(CDCl3) δ 1.45(9H,s), 2.35-2.37(2H,m), 3.49-3.84(5H,m), 5.01-5.18(4H,m), 5.69-5.87(2H,m).

D) Izrada 2-[(terc-butoksikarbonil)(prop-2-en-1-il)amino]pent-4-en-1-il 4-nitrobenzoata

[0665] U smešu terc-butil [1-(hidroksimetil)but-3-en-1-il]prop-2-en-1-ilkarbamata (15.0 g) izrađenog kao gore, trietilamina (19.0 g) i dihlormetana (150 mL) se doda N,N-dimetilpiridin-4-amin (0.7 g). U smešu se u kapima doda rastvor 4-nitrobenzoil hlorida (14.2 g) u dihlormetanu (30 mL) i smeša se meša 30 min na 0°C. Reaktivna smeša se razblaži sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hidrogen karbonata, smeša se ekstrahuje sa dihlormetanom i ekstrakt se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/petrol etar) da se dobije naslovljeno jedinjenje (14.1 g).

<1>H-NMR(CDCl3) δ 1.45(9H,s) 2.33-2.38(1H,m) 2.42-2.47(1H,m), 3.73(1H,s), 3.84(1H,s), 4.38-4.52(3H,m), 5.01-5.16(4H,m), 5.72-5.79(2H,m), 8.19(2H,d,J=8.0Hz), 8.26-8.28(2H,m).

E) Izrada terc-butil 2-({[(4-nitrofenil)karbonil]oksi}metil)-3,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilata

2 4

[0666] Rastvor 2-[(terc-butoksikarbonil)(prop-2-en-1-il)amino]pent-4-en-1-il 4-nitrobenzoata (14.0 g) izrađen kao gore u benzenu (300 mL) se zagreva 15 min pod refluksom u atmosferi azota i ohladi na 10°C. Doda se Grubbs reagens (1.9 g) na 10°C i reaktivna smeša se meša 3 h. Doda se dimetil sulfoksid (8.6 mL) i smeša se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/petrol etar) da se dobije naslovljeno jedinjenje (11.3 g).

<1>H-NMR(CDCl3) δ 1.25-1.33(9H,m), 2.01-2.09(1H,m), 2.51-2.56(1H,m), 3.60-3.64(1H,m), 4.14-4.44(3H,m), 4.75-4.79(1H,m), 5.69-5.77(2H,m), 8.20(2H,d,J=8.4Hz), 8.25(2H,s).

F) Izrada terc-butil (1R*,4S*,6R*)-4-({[(4-nitrofenil)karbonil]oksi}metil)-3-azabiciklo[4.1.0]heptan-3-karboksilata

[0667] terc-Butil 2-({[(4-nitrofenil)karbonil]oksi}metil)-3,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilat (10.0 g) izrađen kao gore se rastvori u smeši 5% diazometan/dietil etar (1.4L), doda se paladijum acetat (689 mg) na 10°C i smeša se meša 40 min na istoj temperaturi. Reaktivna smeša se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (etil acetat/petrol etar) da se dobije smeša terc-butil 2-({ [(4-nitrofenil)karbonil]oksi}metil)-3,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilata i naslovljenog jedinjenja. Dobijena smeša se 3 puta podvrgne slično sličnom reaktivnom postupku da se dobije naslovljeno jedinjenje (8.4 g).

<1>H-NMR(CDCl3) δ 0.12-0.15(1H,m), 0.69-0.74(1H,m), 0.95-1.02(2H,m), 1.40(9H,s), 1.80-1.97(2H,m), 3.39-3.43(1H,m), 3.82-3.91(1H,m), 4.24-4.48(3H,m), 8.16-8.20(2H,m), 8.27-8.29(2H,m).

G) Izrada terc-butil (1R*,4S*,6R*)-4-(hidroksimetil)-3-azabiciklo[4.1.0]heptan-3-karboksilata

[0668] U smešu terc-butil (1R*,4S*,6R*)-4-[(4-nitrofenil)karbonil]oksi}metil)-3-azabiciklo[4.1.0]heptan-3-karboksilata (8.2 g) izrađenog kao gore, tetrahidrofurana (70 mL), metanola (70 mL) i vode (35 mL) se doda litijum hidroksid monohidrat (2.7 g). Smeša se meša 1 h na sobnoj temperaturi. Reaktivna smeša se razblaži sa slanim rastvorom i smeša se ekstrahuje sa etil acetatom. Ekstrakt se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se

2

prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/petrol etar) da se dobije naslovljeno jedinjenje (3.5 g).

<1>H-NMR(CDCl3) δ 0.24(1H,brs), 0.61-0.64(1H,m), 0.88-0.92(2H,m), 1.24-1.29(1H,m), 1.45(9H,m), 1.73(2H,brs), 1.88(1H,brs), 3.47(1H,brs), 3.58-3.61(1H,m), 3.67-3.72(1H,m), 4.00-4.13(1H,m).

H) Izrada terc-butil (1R*,4S*,6R*)-4-formil-3-azabiciklo[4.1.0]heptan-3-karboksilata

[0669] Rastvor terc-butil (1R*,4S*,6R*)-4-(hidroksimetil)-3-azabiciklo[4.1.0]heptan-3-karboksilata (200 mg) izrađen kao gore i Dess-Martin perjodinana (450 mg) u dihlormetanu (10 mL) se meša 3 h na 0°C. Doda se voda (10 mL) i smeša se ekstrahuje sa dihlormetanom. Ekstrakt se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/petrol etar) da se dobije naslovljeno jedinjenje (160 mg).<1>H-NMR(CDCl3) δ 0.17-0.27(1H,m), 0.67-0.72(1H,m), 0.85-1.14(2H,m), 1.42-1.48(9H,m), 1.66-1.77(1H,m), 2.27-2.39(1H,m), 3.49-3.89(2H,m), 3.97-4.25(1H,m), 9.52(1H,s).

I) Izrada (1R*,4S*,6R*)-3-(terc-butoksikarbonil)-3-azabiciklo[4.1.0]heptan-4-karboksilne kiseline

[0670] U rastvor terc-butil (1R*,4S*,6R*)-4-formil-3-azabiciklo[4.1.0]heptan-3-karboksilata (700 mg) izrađenog kao gore u t-butanolu (20 mL) se dodaju 2-metilbut-2-en (0.5 mL), natrijum hlorit (367 mg) i 1.67M vodeni rastvor natrijum dihidrogen fosfata (1.67 mL). Reakcija oksidacije se nastavi 2 h na sobnoj temperaturi i neutrališe sa vodom. Smeša se podesi na pH 4 sa 5% rastvorom hlorovodonične kiseline i ekstrahuje sa dietiletrom. Ekstrakt se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/petrol etar) da se dobije naslovljeno jedinjenje (562 mg).

<1>H-NMR(CDCl3) δ 0.07-0.17(1H,m), 0.56-0.62(1H,m), 0.88-0.97(1H,m), 1.31-1.39(9H,m), 1.72-1.76(1H,m), 2.16-2.31(1H,m), 3.33-3.38(2H,m), 3.52-3.63(1H,m), 4.02-4.21(1H,m).

J) Izrada terc-butil (1R*,6R*)-4-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-3-azabiciklo[4.1.0]heptan-3-karboksilata

2

[0671] Na isti način kao u Primeru 82, faza A, naslovljeno jedinjenje (310 mg) se dobija kao bela čvrsta supstanca od 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (663 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D, (1R*,4S*,6R*)-3-(terc-butoksikarbonil)-3-azabiciklo[4.1.0]heptan-4-karboksilne kiseline (1.09 g) izrađene kao gore, 2-metilpropil hlorokarbonata (0.584 mL), trietilamina (1.25 mL) i tetrahidrofurana (12 mL), 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (9 mL) i etanola (12 mL).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 0.18-1.37(13H,m), 1.87-2.39(2H,m), 3.52-4.59(3H,m), 7.57-7.63(1H,m), 12.63(1H,brs).

K) Izrada 2-[(1R*,6R*)-3-azabiciklo[4.1.0]hept-4-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0672] Na isti način kao u Primeru 83, faza C, naslovljeno jedinjenje (148 mg) se dobija kao bela čvrsta supstanca od terc-butil (1R*,6R*)-4-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-3-azabiciklo[4.1.0]heptan-3-karboksilata (310 mg) izrađenog kao gore, tercbutil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (448 mg), cezijum karbonata (711 mg), [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihloriddihlormetan kompleksa (1:1) (53 mg), 1,2-dimetoksietana (7.5 mL), vode (0.75 mL), rastvora 4M hlorovodonične kiseline/ciklopentil-metiletar (2 mL) i metanola (3 mL) .

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 0.51-2.27(6H glavnog, 6H sporednog, m), 2.42-2.47(3H glavnog, 3H sporednog, m), 3.02-4.03(3H glavnog, 3H sporednog, m), 7.32(1H sporednog, s), 7.34(1H glavnog, s), 8.11-8.12(1H glavnog, 1H sporednog, m), 8.99-9.72(2H glavnog, 2H sporednog, m), 12.71-12.91(1H glavnog, 1H sporednog, m). Odnos uočenih diastereomera je 3:2.

Primer 172

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S)-piperidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on hidrohlorida

2

[0673] Rastvor (2S)-1-(terc-butoksikarbonil)piperidin-2-karboksilne kiseline (37.8 g) u tetrahidrofuranu (375 mL) se ohladi na unutrašnju temperaturu od 10°C u ledenom kupatilu. Doda se trietilamin (23.0 mL) i smeša se meša 10 min na istoj temperaturi. U smešu se u kapima dodaje 2-metilpropil hlorokarbonat (21.4 mL) u toku 30 min (unutrašnja temperatura 8-13°C). Ledeno kupatilo se ukloni i smeša se meša 1 h na sobnoj temperaturi. Nakon toga se u reaktivnu smešu doda 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamid (16.6 g) izrađen u Primeru 1, faza D i smeša se meša 12 h na 60°C. Reaktivna smeša se meša 8 h na sobnoj temperaturi i dodaju se etil acetat (750 mL) i vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata (750 mL).

Precipitat se sakupi filtriranjem i ispere sa vodom da se dobije sirovi produkt (18.6 g) tercbutil (2S)-2-[(5-bromo-2-karbamoiltiofen-3-il)karbamoil]piperidin-1-karboksilat kao bela čvrsta supstanca. Organski sloj se izdvoji od osnovnog rastvora i suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Dobijeni žuti uljani ostatak (38 g) i sirovi produkt (18.6 g) terc-butil (2S)-2-[(5-bromo- 2-karbamoiltiofen-3-il)karbamoil]piperidin-1-karboksilata izrađen kao gore se kombinuju i dodaju se etanol (375 mL) i 2M vodeni rastvor natrijum hidroksida (188 mL). Smeša se meša 2 h na 75°C i ohladi u ledenom kupatilu i doda se voda (125 mL). Smeša se podesi na pH 7 sa 6M rastvorom hlorovodonične kiseline (117 mL) uz održavanje unutrašnje temperature na 4-8°C. Reaktivna smeša se meša 30 min u ledenom kupatilu i precipitat se sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (24.8 g) kao bela čvrsta supstanca. Optička čistoća je 38.7%ee. Analiza je izvedena visoko efikasnom tečnom hromatografijom (kolona: CHIRALPAK AD-H (4.6 mm i.d.x250 mm L, proizvođača DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES, LTD.), mobilna faza: heksan/2-propanol/dietilamin (700/300/1), brzina protoka: 1 mL/min, temperatura kolone: 30°C, detekcija 220 nm).

[0674] terc-Butil (2S)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)piperidin-1-karboksilat (10.1 g, 38.7%ee) se frakcioniše visoko efikasnom tečnom hromatografijom (kolona: CHIRALPAK AD (50 mm i.d.x500 mm L, proizvođača DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES, LTD.), mobilna faza: heksan/2-propanol/dietilamin (700/300/1), brzina

2

protoka: 80 mL/min, temperatura kolone: 30°C). terc-Butil (2S)-2-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)piperidin-1-karboksilat (6.59 g, >99.9%ee, vreme retencije 6.32 min) i terc-butil (2R)-2-(6-bromo-4- okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)piperidin-1-karboksilat (2.71 g, >99.9%ee, vreme retencije 8.6 min) su dobijeni po gore pomenutim uslovima visoko efikasne tečne hromatografije. Analiza je izvedena visoko efikasnom tečnom hromatografijom (kolona: CHIRALPAK AD-H (4.6 mm i.d.x250 mm L, proizvođača DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES, LTD.), mobilna faza: heksan/2-propanol/dietilamin (700/300/1), brzina protoka: 1 mL/min, temperatura kolone: 30°C, detekcija 220 nm) .

C) Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S)-piperidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on hidrohlorida

[0675] Osnovni rastvor konačno dobijen kristalizacijom faze u Primeru 83, faza D, se koncentruje pod sniženim pritiskom. U ostatak se doda etanol (7 mL) i smeša se zagreva uz mešanje na 80°C. Doda se voda (0.5 mL) i dobijena rastvor se postepeno ohladi na sobnu temperaturu uz mešanje. Nakon 2 h, precipitirana čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (75 mg) kao bela čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.51-1.92(5H,m), 2.25-2.33(1H,m), 2.46(3H,s), 2.97-3.10(1H,m), 3.35-3.39(1H,m), 4.16-4.25(1H,m), 7.34(1H,s), 8.00(1H,brs), 9.23(1H,brs), 13.02(1H,brs). MS(ESI+) : [M+H]<+>316.

MS(ESI+), nađeno:316.

Primer 173

Izrada 2-{2-[(2-hidroksietil) (metil)amino]etil}-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0676] U smešu 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (300 mg) izrađenog u Primeru 1, faza D, trietilamina (0.208 mL) i tetrahidrofurana (7.0 mL) se doda 3-hlorpropanoil hlorid (0.143 mL) uz mešanje na 0°C. Reaktivna smeša se meša 30 min na sobnoj temperaturi i doda se 2-(metilamino)etanol (0.542 mL). Reaktivna smeša se meša 18 h uz zagrevanje na 70°C. Reaktivna smeša se na 0°C neutrališe sa 1M vodenim rastvorom hlorovodonične kiseline i

2

koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti baznom hromatografijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan i metanol/etil acetat) da se dobije 6-bromo-2-{2-[(2-hidroksietil)(metil)amino]etil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on (405 mg) kao bledo žuta čvrsta supstanca. Na isti način kao u Primeru 2, faza C, naslovljeno jedinjenje (22 mg) se dobija kao bledo smeđa čvrsta supstanca od 6-bromo-2-{2-[(2-hidroksietil)(metil)amino]etil}tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (50 mg) izrađenog kao gore i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilata (93 mg), natrijum karbonata (48 mg), 1,2-dimetoksietana (1.0 mL) i vode (0.5 mL) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleksa (1:1)(12 mg).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.24(3H,s), 2.39-2.48(5H,m), 2.70-2.84(4H,m), 3.46(2H,t,J=6.2Hz), 4.42(1H,brs), 7.33(1H,s), 7.67-8.32(1H,m), 12.15-13.16(2H,m).

Primer 174

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S)-piperidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0677] 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S)-piperidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorid (255 mg) izrađen u Primeru 83, faza D, se suspenduje u metanolu (7 mL) i doda se trietilamin (0.28 mL) da se dobije rastvor. U smešu se doda bazni silika gel (5 g) i sve se izmeša. Rastvarač se upari pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti baznom hromatografijom na koloni silika gela (metanol/etil acetat). Predmet frakcije se koncentruje pod sniženim pritiskom i u dobijeni ostatak se doda etil acetat (10 mL). Precipitat se sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (183 mg) kao bela čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.36-1.62(4H,m), 1.77-1.94(2H,m), 2.44(3H,s), 2.59-2.69(1H,m), 2.98-3.08(1H,m), 3.60-3.68(1H,m), 7.31(1H,s), 8.00(1H,brs).

MS(ESI+):[M+H]<+>316.

MS(ESI+), nađeno:316.

Primer 175

Izrada 2-[(1R,3S,4R,5R) ili (1S,3S,4S,5R)-5-fluoro-2-azabiciklo[2.2.1]hept-3-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on hidrohlorida

2

[0678] U rastvor (1R*,3S,4R*,5R)-2-(terc-butoksikarbonil)-5-fluoro-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-3-karboksilne kiseline (2.65 g) i trietilamina (1.42 mL) u tetrahidrofuranu (35 mL) se na 0°C doda 2-metilpropil hlorokarbonat (1.34 mL) i smeša se meša 30 min na sobnoj temperaturi. U reaktivni sistem se doda rastvor 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamida (1.88 g) izrađen u Primeru 1, faza D, u tetrahidrofuranu (10 mL) i smeša se meša 18 h na 60°C. U reaktivnu smešu se doda voda i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom. Organski sloj se ispere sa slanim rastvorom i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem, filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom a ostatak se prečisti baznom hromatografijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan). U dobijenu bledo žutu čvrstu supstancu se dodaju 2M vodeni rastvor natrijum hidroksida (34 mL) i etanol (200 mL) i smeša se meša 8 h na 80°C. Reaktivni sistem se neutrališe sa 1M rastvorom hlorovodonične kiseline na 0°C. U reaktivni sistem se doda voda (20 mL) i precipitat se sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (2.82 g) kao bezbojna čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.06-1.45(9H,m), 1.50-1.86(2H,m), 2.01-2.22(2H,m), 2.83-2.95(1H,m), 4.03-4.13(1H,m), 4.15-4.32(1H,m), 4.91-5.20(1H,m), 7.57-7.75(1H,m), 12.58-12.76(1H,m).

[0679] terc-Butil (1R*,3S,4R*,5R)-3-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-5-fluoro-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilat (274 mg) se frakcioniše visoko efikasnom tečnom hromatografijom (kolona: CHIRALPAK AD (50 mm i.d.x500 mm L, proizvođača DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES, LTD.), mobilna faza: heksan/etanol (800/200), brzina protoka: 80 mL/min, temperatura kolone: 30°C). terc-Butil (1R,3S,4R,5R) ili (1S,3S,4S,5R)-3-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-5-fluoro-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilat (1.39 g, >99.9%ee, vreme retencije 7.1 min) i terc-butil (1R,3S,4R,5R) ili (1S,3S,4S,5R)-3-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-5-fluoro-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilat (1.40 g, 99.8%ee, vreme retencije 14.2 min) su dobijeni

2 1

po gore pomenutim uslovima visoko efikasne tečne hromatografije. Analiza se izvodi visoko efikasnom tečnom hromatografijom (kolona: CHIRALPAK AD-H (4.6 mm i.d.x250 mm L, proizvođača DAICEL CHEMICAL INDUSTRIES, LTD.), mobilna faza: heksan/etanol (800/200), brzina protoka: 1 mL/min, temperatura kolone: 30°C, detekcija 220 nm).

C) Izrada 2-[(1R,3S,4R,5R) ili (1S,3S,4S,5R)-5-fluoro-2-azabiciklo[2.2.1]hept-3-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on hidrohlorida

[0680] terc-Butil (1R,3S,4R,5R) ili (1S,3S,4S,5R)-3-(6-bromo-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il)-5-fluoro- 2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilat (1.40 g, 99.8%ee, vreme retencije 14.2 min) izrađen u Primeru 175, faza B i terc-butil 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-karboksilat (1.94 g), natrijum karbonat (1.00 g), 1,2-dimetoksietan (30 mL) i voda (15 mL) se stave u bocu a atmosfera u boci se prečisti sa argonom. Doda se [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleks (1:1)(257 mg) i atmosfera u boci se ponovo prečisti sa argonom. Reaktivni sistem se meša 1 h na 100°C i doda se voda. Smeša se ekstrahuje sa etil acetatom i ekstrakt se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata, nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) da se dobije terc-butil (1R,3S,4R,5R) ili (1S,3S,4S,5R)-5-fluoro-3-[6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilat (1.39 g) kao bledo žuta čvrsta supstanca. U rastvor tercbutil (1R,3S,4R,5R) ili (1S,3S,4S,5R)-5-fluoro-3-[6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-3,4-dihidrotieno[3,2-d]pirimidin-2-il]-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilata (1.39 g) izrađenog kao gore u metanolu (15 mL) se doda, uz mešanje na sobnoj temperaturi, rastvor 5% hlorovodonična kiselina/metanol (15 mL). Reaktivni sistem se meša uz zagrevanje 3 h na 50°C i reaktivna smeša se koncentruje pod sniženim pritiskom. U ostatak se doda etanol (15 mL) i polako se na 100°C dodaje voda (2 mL). Rastvor se ohladi na sobnu temperaturu i precipitat se sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (826 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.75-1.96(3H,m), 2.46(3H,s), 2.53-2.62(1H,m), 3.18-3.26(1H,m), 4.19-4.31(2H,m), 4.93-5.18(1H,m), 7.35(1H,s), 8.09(1H,s), 8.64(1H,brs), 9.98(1H,brs), 12.94(1H,brs).

MS(ESI+) : [M+H]<+>346.

2 2

MS(ESI+), nađeno:346.

Primer 176

Izrada 2-(1-azabiciklo[2.2.2]okt-2-il)-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada 1-(1-terc-butil-5-metil-1H-pirazol-4-il)etanona

[0681] Smeša pentan-2,4-diona (5.01 g) i 1,1-dimetoksi-N,N-dimetilmetanamina (6.26 g) se meša 1 h na 80°C. U reaktivnu smešu se doda tetrahidrofuran (10 mL), zatim se dodaje tercbutilhidrazin hidrohlorid u malim porcijama uz hlađenje ledom i smeša se meša 30 min na 60°C. Reaktivna smeša se ostavi da se ohladi na sobnu temperaturu, dodaju se etil acetat (100 mL) i voda (100 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (50 mLx2).

Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (20 mL) i suše preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem, filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom a ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) da se dobije naslovljeno jedinjenje (7.47 g) kao bezbojno ulje.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.67(9H,s), 2.42(3H,s), 2.77(3H,s), 7.76(1H,s).

B) Izrada (2Z)-3-hlor-3-(5-metil-1H-pirazol-4-il)prop-2-enenitrila

[0682] U N,N-dimetilformamid (12.1 g) se doda fosfor oksihlorid (25.4 g) u malim porcijama uz hlađenje ledom i smeša se meša 15 min na sobnoj temperaturi. U smešu se u malim porcijama doda 1-(1-terc-butil-5-metil-1H-pirazol-4-il)etanon (7.47 g) izrađen kao gore uz hlađenje ledom i reaktivna smeša se meša 30 min na 50°C. U ovo se doda prašak (11.5 g) hidroksilamin hidrohlorid u malim porcijama na 50°C i reaktivna smeša se meša 30 min na 50°C. U reaktivnu smešu se doda ledena voda (200 mL) i smeša se neutrališe sa 1M vodenim rastvorom natrijum hidroksida i ekstrahuje sa etil acetatom (100 mLx2). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (20 mL) i suše preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem, filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom a ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) i kristališe iz dietiletra da se dobije naslovljeno jedinjenje (3.02 g) kao bledo

2

žuti prašak.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.48(3H,s), 5.68(1H,s), 7.82(1H,s).

C) Izrada metil 3-amino-5-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tiofen-2-karboksilata

[0683] Smeša (2Z)-3-hlor-3-(5-metil-1H-pirazol-4-il)prop-2-enenitrila (3.08 g) izrađenog kao gore, metilsulfanil acetata (2.15 g), natrijum hidrida (1.47 g) i N,N-dimetilacetamida (10 mL) se meša 2 h na 60°C. U reaktivnu smešu se dodaju etil acetat (20 mL) i voda (10 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (10 mLx2). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (20 mL) i suše preko anhidrovanog magnezijum sulfata.

Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem, filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom a ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) da se dobije naslovljeno jedinjenje (3.57 g) kao bezbojna čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.39(3H,s), 3.68(3H,s), 6.53(2H,s), 6.65(1H,s), 7.46-8.26(1H,m), 12.83(1H,brs).

D) Izrada metil 3-amino-5-[1-(4-metoksibenzil)-3-metil-1H-pirazol-4-il]tiofen-2-karboksilata i metil 3-amino-5-[1-(4-metoksibenzil)-5-metil-1H-pirazol-4-il]tiofen-2-karboksilata

[0684] Smeša metil 3-amino-5-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tiofen-2-karboksilata (3.50 g) izrađenog kao gore, kalijum karbonata (2.45 g), 1-(hlormetil)-4-metoksibenzena (2.43 g) i N,N-dimetilformamida (30 mL) se meša 15 h na 100°C. U reaktivnu smešu se dodaju etil acetat (20 mL) i voda (10 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (10 mLx2). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (20 mL) i suše preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem, filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom a precipitirana čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (4.98 g) kao bezbojna čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.29(2H,s), 2.39(1H,s), 3.68-3.75(6H,m), 5.16(1.33H,s), 5.29(0.67H,s), 6.54(2H,s), 6.61-6.67(1H,m), 6.86-6.94(2H,m), 7.10-7.17(0.67H,m), 7.21-7.29(1.33H,m), 7.72(0.33H,s), 8.15(0.67H,s).

E) Izrada metil 3-[(1-azabiciklo[2.2.2]okt-2-ilkarbonil)amino]-5-[1-(4-metoksibenzil)-3-metil-1H-pirazol-4-il]tiofen-2-karboksilata i metil 3-[(1-azabiciklo[2.2.2]okt-2-

2 4

ilkarbonil)amino]-5-[1-(4-metoksibenzil)-5-metil-1H-pirazol-4-il]tiofen-2-karboksilata

[0685] Smeša 1-azabiciklo[2.2.2]oktan-2-karboksilne kiseline (488 mg), tionil hlorida (5 mL) i N,N-dimetilformamida (23 mg) se meša 15 h na sobnoj temperaturi. Reaktivna smeša se koncentruje pod sniženim pritiskom a ostatak se rastvori u tetrahidrofuranu (5 mL). U smešu metil 3-amino-5-[1-(4-metoksibenzil)-3-metil-1H-pirazol-4-il]tiofen-2-karboksilata i metil 3-amino-5-[1-(4-metoksibenzil)-5-metil-1H-pirazol-4-il]tiofen-2-karboksilata (750 mg) izrađenog kao gore se doda N-etil-N-(1-metiletil)propan-2-amin (0.916 mL) i smeša se meša 2 h na 60°C. U reaktivnu smešu se dodaju etil acetat (20 mL) i voda (10 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (10 mLx2). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (20 mL) i suše preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem, filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom a ostatak se prečisti baznom hromatografijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) da se dobije naslovljeno jedinjenje (534 mg) kao bezbojno ulje.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.31-1.59(4H,m), 1.73-1.87(3H,m), 2.33(2H,s), 2.43(1H,s), 2.55-3.11(4H,m), 3.54-3.66(1H,m), 3.70-3.85(6H,m), 5.18(1.33H,s), 5.31(0.67H,s), 6.84-6.95(2H,m), 7.10-7.32(2H,m), 7.82(0.33H,s), 8.09-8.15(1H,m), 8.32(0.67H,s), 11.24(1H,s).

F) Izrada N-{2-karbamoil-5-[1-(4-metoksibenzil)-3-metil-1H-pirazol-4-il]tiofen-3-il}-1-azabiciklo[2.2.2]oktan-2-karboksamida i N-{2-karbamoil-5-[1-(4-metoksibenzil)-5-metil-1H-pirazol-4-il]tiofen-3-il}-1-azabiciklo[2.2.2]oktan-2-karboksamida

[0686] Smeša metil 3-[(1-azabiciklo[2.2.2]okt-2-ilkarbonil)amino]-5-[1-(4-metoksibenzil)-3-metil-1H-pirazol-4-il]tiofen-2-karboksilata i metil 3-[(1-azabiciklo[2.2.2]okt-2-ilkarbonil)amino]-5-[1-(4-metoksibenzil)-5-metil-1H-pirazol-4-il]tiofen-2-karboksilata (500 mg) izrađenog kao gore, 8M vodenog rastvora natrijum hidroksida (1 mL) i etanola (7 mL) se meša 2 h na 60°C. Reaktivna smeša se neutrališe sa 6M rastvorom hlorovodonične kiseline (1.4 mL) uz hlađenje ledom i koncentruje pod sniženim pritiskom. U ostatak se dodaju amonijum hlorid (162 mg), trietilamin (0.705 mL) i N,N-dimetilformamid (5 mL) i smeša se meša 5 min na sobnoj temperaturi. U reaktivni sistem se dodaju 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)karbodiimid hidrohlorid (235 mg) i 1-hidroksibenzotriazol (205 mg) i smeša se meša 15 h na sobnoj temperaturi. Reaktivni sistem se sipa u vodu (10 mL) i smeša se ekstrahuje sa etil acetatom (10 mL). Organski sloj se ispere sa zasićenim vodenim rastvorom

2

natrijum hidrogen karbonata i suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije naslovljeno jedinjenje (316 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.31-1.55(4H,m), 1.71-1.86(3H,m), 2.33(1H,s), 2.41-2.45(2H,m), 2.55-3.05(4H,m), 3.50-3.59(1H,m), 3.70-3.76(3H,m), 5.18(0.67H,s), 5.30(1.33H,s), 6.87-6.96(2H,m), 7.10-7.50(4H,m), 7.72(0.67H,s), 8.06-8.11(1H,m), 8.17(0.33H,s), 11.85(1H,s).

G) Izrada 2-(1-azabiciklo[2.2.2]okt-2-il)-6-[1-(4-metoksibenzil)-3-metil-1H-pirazol-4-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona i 2-(1-azabiciklo[2.2.2]okt-2-il)-6-[1-(4-metoksibenzil)-5-metil-1H-pirazol-4-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0687] Smeša N-{2-karbamoil-5-[1-(4-metoksibenzil)-3-metil-1H-pirazol-4-il]tiofen-3-il}-1-azabiciklo[2.2.2]oktan-2-karboksamida i N-{2-karbamoil-5-[1-(4-metoksibenzil)-5-metil-1H-pirazol-4-il]tiofen-3-il}-1-azabiciklo[2.2.2]oktan-2-karboksamida (200 mg) izrađenog kao gore, 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (1 mL) i etanola (3 mL) se meša 3 h na 80°C. Reaktivna smeša se neutrališe sa 1M rastvorom hlorovodonične kiseline uz hlađenje ledom i smeša se ekstrahuje sa etil acetatom (20 mL). Organski sloj se ispere sa slanim rastvorom (5 mL) i suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem, filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom i čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (142 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca.<1>H-NMR(DMSO-d6) δ .38-3.14(14H,m), 3.72-3.75(3H,m), 3.92(1H,t,J=8.9Hz), 5.19(1.8H,s), 5.32(0.2H,s), 6.88-6.96(1.8H,m), 7.17(0.2H,d,J=8.5Hz), 7.27(2H,d,J=8.5Hz), 7.38(0.9H,s), 7.45(0.1H,s), 7.92(0.1H,s), 8.32(0.9H,s).

H) Izrada 2-(1-azabiciklo[2.2.2]okt-2-il)-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0688] Smeša 2-(1-azabiciklo[2.2.2]okt-2-il)-6-[1-(4-metoksibenzil)-3-metil-1H-pirazol-4-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona i 2-(1-azabiciklo[2.2.2]okt-2-il)-6-[1-(4-metoksibenzil)-5-metil-1H-pirazol-4-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona (120 mg) izrađenog kao gore, trifluorosirćetne kiseline (3 mL) i metoksibenzena (0.3 mL) se meša 24 h na 70°C. Reaktivna smeša se koncentruje pod sniženim pritiskom, neutrališe sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hidrogen karbonata i ekstrahuje sa smešom rastvarača etil acetat/tetrahidrofuran (20

2

mLx3). Organski sloj se ispere sa vodom i suši preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem, filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom a ostatak se prečisti baznom hromatografijom na koloni silika gela (etil acetat/metanol) da se dobije naslovljeno jedinjenje (52 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.35-1.63(4H,m), 1.69-1.81(1H,m), 1.83-1.92(1H,m), 2.22-2.34(1H,m), 2.46(3H,s), 2.55-2.67(2H,m), 2.79-2.93(1H,m), 3.01-3.15(1H,m), 3.86-3.97(1H,m), 7.44(1H,s), 8.04(1H,s), 12.21(1H,brs).

MS(ESI+) : [M+H]<+>342.

MS(ESI+), nađeno:342.

Primer 177

Izrada 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S)-1,2,3,6-tetrahidropiridin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on hidrohlorida

[0689] 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S)-1,2,3,6-tetrahidropiridin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorid (350 mg) izrađen u Primeru 145, faza C, se suspenduje u etanolu (12 mL) i smeša se meša uz zagrevanje na 90°C. Doda se voda (1.6 mL) da se dobije rastvor i rastvor se ostavi da se ohladi na sobnu temperaturu. Smeša se koncentruje pod sniženim pritiskom, u ostatak se doda metanol (8 mL) i smeša se meša na 65°C uz zagrevanje. Doda se voda (0.8 mL) i smeša se ostavi da se ohladi na sobnu temperaturu. Precipitat se sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (169 mg) kao bela čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.37-2.53(4H,m), 2.71-2.86(1H,m), 3.62-3.84(2H,m), 4.41(1H,dd,J=11.1,4.5Hz), 5.77-5.85(1H,m), 5.92-6.01(1H,m), 7.37(1H,s), 7.98(0.6H,brs), 8.31(0.4H,brs), 9.75(1H,brs), 13.06(1H,brs).

MS(ESI+) : [M+H]<+>314.

MS(ESI+), nađeno:314.

Primer 178

Izrada 2-[(2S)-1-azabiciklo[2.2.2]okt-2-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

2

A) Izrada 1-(1-benzil-5-metil-1H-pirazol-4-il)etanona

[0690] Smeša pentan-2,4-diona (10.01 g) i 1,1-dimetoksi-N,N-dimetilmetanamina (12.51 g) se meša 1 h na 80°C. U reaktivnu smešu se doda tetrahidrofuran (20 mL), zatim se doda benzilhidrazin dihidrohlorid (21.46 g) u malim porcijama uz hlađenje ledom i smeša se meša 30 min na 60°C. Reaktivna smeša se ostavi da se ohladi na sobnu temperaturu, dodaju se etil acetat (100 mL) i voda (100 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (50 mLx2). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (20 mL) i suše preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem, filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom a ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) da se dobije naslovljeno jedinjenje (13.53 g) kao bezbojno ulje.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.44(3H,s), 2.51(3H,s), 5.31(2H,s), 7.05-7.15(2H,m), 7.18-7.40(3H,m), 7.89(1H,s).

B) Izrada (2Z)-3-(1-benzil-5-metil-1H-pirazol-4-il)-3-hlorprop-2-enenitrila

[0691] U N,N-dimetilformamid (17.55 g) se doda fosfor oksihlorid (36.8 g) u malim porcijama uz hlađenje ledom i smeša se meša 15 min na sobnoj temperaturi. U smešu se u malim porcijama doda 1-(1-benzil-5-metil-1H-pirazol- 4-il)etanon (12.86 g) izrađen kao gore uz hlađenje ledom i reaktivna smeša se meša 30 min na 50°C. U ovo se na 50°C doda prašak (33.40 g) hidroksilamin hidrohlorid u malim porcijama i reaktivna smeša se meša 30 min na 50°C. U reaktivnu smešu se doda ledena voda (200 mL) i smeša se neutrališe sa 1M vodenim rastvorom natrijum hidroksida i ekstrahuje sa etil acetatom (100 mLx2). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (20 mL) i suše preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem, filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom a ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) i kristališe iz dietiletra da se dobije naslovljeno jedinjenje (6.71 g) kao bledo žuti prašak.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.37(3H,s), 5.33(2H,s), 5.57(1H,s), 7.03-7.19(5H,m), 7.73(1H,s).

C) Izrada metil 3-amino-5-(1-benzil-5-metil-1H-pirazol-4-il)tiofen-2-karboksilata

[0692] Smeša (2Z)-3-(1-benzil-5-metil-1H-pirazol-4-il)-3-hlorprop-2-enenitrila (5.73 g)

2

izrađenog kao gore, metilsulfanil acetata (2.95 g), natrijum hidrida (0.80 g) i N,N-dimetilformamida (10 mL) se meša 2 h na 60°C. U reaktivnu smešu se dodaju etil acetat (20 mL) i voda (10 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (10 mLx2).

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 2.33(3H,s), 3.65(3H,s), 5.23(2H,s), 7.04-7.44(6H,m), 7.49(1H,s).

D) Izrada metil 3-{[(2S)-1-azabiciklo[2.2.2]okt-2-ilkarbonil]amino}-5-(1-benzil-5-metil-1H-pirazol-4-il)tiofen-2-karboksilata

[0693] U rastvor hidrohlorida (2S)-1-azabiciklo[2.2.2]oktan-2-karboksilne kiseline (0.62 g) izrađenog u Primeru 170, faza A u tionil hloridu (4.93 mL) se doda N,N-dimetilformamid (0.038 mL) i smeša se meša 24 h na sobnoj temperaturi. Reaktivni sistem se koncentruje pod sniženim pritiskom i u ostatak se dodaju metil 3-amino-5-(1-benzil-5-metil-1H-pirazol-4-il)tiofen-2-karboksilat (704 mg) izrađen u Primeru 178, faza C i tetrahidrofuran (7.0 mL). U reaktivnu smešu se na 0°C doda N-etil-N-(1-metiletil)propan-2-amin (0.939 mL), smeša se meša 1 dan na 80°C i doda se voda. Smeša se ekstrahuje sa etil acetatom i ekstrakt se ispere sa slanim rastvorom i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) da se dobije naslovljeno jedinjenje (481 mg) kao narandžasta amorfna čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(CDCl3) δ 1.43-1.61(4H,m), 1.86-1.99(3H,m), 2.42(3H,s), 2.71-3.18(4H,m), 3.47-3.58(1H,m), 3.88(3H,s), 5.34(2H,s), 7.09-7.16(2H,m), 7.27-7.38(3H,m), 7.75(1H,s), 8.18(1H,s), 11.35(1H,brs).

E) Izrada 2-[(2S)-1-azabiciklo[2.2.2]okt-2-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on dihidrohlorida

[0694] Smeša rastvarača metil 3-{[(2S)-1-azabiciklo[2.2.2]okt-2-ilkarbonil]amino}-5-(1-benzil-5-metil-1H-pirazol-4-il)tiofen-2-karboksilata (480 mg), metanola (15 mL) i 2M vodenog rastvora natrijum hidroksida (3.1 mL) se meša 4 h na 60°C. Reaktivna smeša se

2

neutrališe sa 1M rastvorom hlorovodonične kiseline na 0°C i koncentruje pod sniženim pritiskom. U ostatak se dodaju amonijum hlorid (2.2 g), trietilamin (5.74 mL) i N,N-dimetilformamid (15 mL) i smeša se meša 5 min na sobnoj temperaturi. U reaktivni sistem se dodaju 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)karbodiimid hidrohlorid (1.98 g) i 1-hidroksibenzotriazol (1.39 g) i smeša se meša 18 h na sobnoj temperaturi. U reaktivni sistem se sipa voda, smeša se ekstrahuje sa etil acetatom i ekstrakt se ispere sa vodom i slanim rastvorom i suši preko anhidrovanog natrijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) da se dobije sirovi produkt (226 mg) (2S)-N-[5-(1-benzil-3- metil-1H-pirazol-4-il)-2-karbamoiltiofen-3-il]-1-azabiciklo[2.2.2]oktan-2-karboksamid kao žuta čvrsta supstanca. U sirovi produkt (2S)-N-[5-(1-benzil-3-metil-1H-pirazol-4-il)-2-karbamoiltiofen-3-il]-1-azabiciklo[2.2.2]oktan-2-karboksamida se dodaju mravlja kiselina (10 mL) i 20% paladijum hidroksida na ugljeniku (50 mg) i smeša se meša 3 h na 80°C u atmosferi vodonika. Operacija dodavanja 20% paladijum hidroksida na ugljeniku (50 mg) i mešanje smeše 3 h na 80°C se ponovi 8 puta u atmosferi vodonika (ukupno vreme reakcije: 27 h, ukupno se koristi: 450 mg paladijum hidroksida na ugljeniku). Paladijum hidroksid na ugljeniku se ukloni filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan i metanol/etil acetat) da se dobije bledo žuta čvrsta supstanca. Dobijena bledo žuta čvrsta supstanca se prečisti visoko efikasnom tečnom hromatografijom {kolona: L-kolona 2 ODS (20 mm i.d.x50 mm L), mobilna faza: 0.1% vodeni rastvor trifluorosirćetne kiseline/0.1% rastvora trifluorosirćetna kiselina u acetonitrilu} i predmet frakcije se koncentruje pod sniženim pritiskom. U ostatak (91 mg) se dodaju etanol (1.0 mL) i 2M vodeni rastvor natrijum hidroksida (0.38 mL) i smeša se meša 30 min na 70°C. Reaktivna smeša se koncentruje pod sniženim pritiskom a ostatak se prečisti baznom hromatografijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan i metanol/etil acetat) da se dobije bela čvrsta supstanca. U dobijenu čvrstu supstancu se dodaju metanol (2 mL) i rastvor 4M hlorovodonične kiseline/etil acetat (2 mL) i smeša se meša 30 min na sobnoj temperaturi. Precipitat se sakupi filtriranjem da se dobije naslovljeno jedinjenje (57 mg) kao bela čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.73-1.92(4H,m), 2.09-2.29(2H,m), 2.37-2.47(4H,m), 3.23-3.39(2H,m), 3.44-3.56(1H,m), 3.61-3.76(1H,m), 4.70-4.81(1H,m), 7.44(1H,s), 8.10(1H,brs), 9.99(1H,brs), 12.72(1H,brs).

MS(ESI+) : [M+H]<+>342.

2

MS(ESI+), nađeno:342.

Primer 179

Izrada 2-(1-azabiciklo[2.2.2]okt-2-il)-6-[5-(trifluorometil)-1H-pirazol-4-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

A) Izrada 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-3-(trifluorometil)-1-tritil-1H-pirazola

[0695] 4-Bromo-3-(trifluorometil)-1-tritil-1H-pirazol (3.45 g), 4,4,4’,4’,5,5,5’,5’-oktametil-2,2’-bi-1,3,2-dioksaborolan (5.75 g), kalijum acetat (3.70 g) i N,N-dimetilformamid (30 mL) se stave u bocu a atmosfera u boci se prečisti sa argonom. Doda se [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleks (1:1)(621 mg), atmosfera u boci se ponovo prečisti sa argonom i smeša se meša 15 h na 80°C. U reaktivnu smešu se dodaju etil acetat (50 mL) i voda (50 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (30 mLx2). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (50 mL) i suše preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni silika gela (etil acetat/heksan) a predmet frakcije se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije naslovljeno jedinjenje (3.81 g) kao bezbojna čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.23(12H,s), 6.99-7.07(6H,m), 7.36-7.46(9H,m), 7.60(1H,d,J=0.9Hz).

B) Izrada 2-(1-azabiciklo[2.2.2]okt-2-il)-6-bromotieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0696] Smeša hidrohlorida 1-azabiciklo[2.2.2]oktan-2-karboksilne kiseline (2.57 g), tionil hlorida (10 mL) i N,N-dimetilformamida (100 mg) se meša 15 h na sobnoj temperaturi.

Reaktivna smeša se koncentruje pod sniženim pritiskom, ostatak se rastvori u tetrahidrofuranu (30 mL), dodaju se 3-amino-5-bromotiofen-2-karboksamid (2.00 g) izrađen u Primeru 1, faza D i N-etil-N-(1-metiletil)propan-2-amin (4.74 mL) i smeša se meša 2 h na 60°C. U reaktivnu smešu se dodaju etil acetat (50 mL) i voda (50 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (30 mLx2). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (50 mL) i suše preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se ukloni filtriranjem, filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom a ostatak se prečisti hromatogrfijom na koloni

2 1

silika gela (etil acetat/heksan) da se dobije N-(5-bromo-2-karbamoiltiofen-3-il)-1-azabiciklo[2.2.2]oktan-2-karboksamid. Smeša N-(5-bromo-2-karbamoiltiofen-3-il)-1-azabiciklo[2.2.2]oktan-2-karboksamida izrađenog kao gore u etanolu (10 mL) i 8M vodenog rastvora natrijum hidroksida (3 mL) se meša 3 h na 80°C. Reaktivna smeša se neutrališe sa 1M rastvorom hlorovodonične kiseline na 0°C i koncentruje. U ostatak se doda metanol (5 mL), nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se prečisti baznom hromatografijom na koloni silika gela (etil acetat/metanol) da se dobije naslovljeno jedinjenje (430 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(DMSO-d6) δ 1.40-1.65(4H,m), 1.73-1.94(2H,m), 2.24(1H,dd,J=12.9,7.8Hz), 2.56-2.74(2H,m), 2.83-2.97(1H,m), 3.05-3.17(1H,m), 3.97(1H,t,J=8.8Hz), 7.60(1H,s).

C) Izrada 2-(1-azabiciklo[2.2.2]okt-2-il)-6-[5-(trifluorometil)-1H-pirazol-4-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona

[0697] 2-(1-Azabiciklo[2.2.2]okt-2-il)-6-bromotieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on (400 mg) izrađen kao gore, 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-3-(trifluorometil)-1-tritil-1H-pirazol (889 mg), cezijum karbonat (766 mg), 1,2- dimetoksietan (10 mL) i voda (1 mL) se stave u bocu a atmosfera u boci se prečisti sa argonom. Doda se [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid-dihlormetan kompleks (1:1)(48.4 mg), atmosfera u boci se ponovo prečisti sa argonom i smeša se meša 15 h na 80°C. U reaktivnu smešu se dodaju etil acetat (20 mL) i voda (10 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (10 mLx2). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (20 mL) i suše preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti baznom hromatografijom na koloni silika gela (etil acetat/metanol) i hromatografijom na koloni silika gela (etil acetat/metanol) a predmet frakcije se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije 2-(1-azabiciklo[2.2.2]okt-2-il)-6-[3-(trifluorometil)-1-tritil-1H-pirazol-4-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on kao bezbojno ulje. U rastvor 2-(1-azabiciklo[2.2.2]okt-2-il)-6-[3-(trifluorometil)-1-tritil-1H-pirazol-4-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-ona izrađenog kao gore u metanolu (4 mL) se doda rastvor 4M hlorovodonične kiseline/etil acetat (4 mL) i smeša se meša 15 h na 60°C. Reaktivna smeša se koncentruje pod sniženim pritiskom, u ostatak se dodaju etil acetat (10 mL) i voda (10 mL) i izdvojeni vodeni sloj se ispere sa etil acetatom (10 mL). Dobijena vodeni sloj se zaalkališe sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hidrogen karbonata i

2 2

ekstrahuje sa etil acetatom (10 mLx2). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (10 mL) i suše preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Nerastvorni materijal se izdvoji filtriranjem i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti baznom hromatografijom na koloni silika gela (etil acetat/metanol) a predmet frakcije se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije naslovljeno jedinjenje (3.0 mg) kao bezbojna čvrsta supstanca.

<1>H-NMR(CDCl3) δ 0.72-2.20(7H,m), 2.46-2.64(1H,m), 2.74-3.18(3H,m), 3.80-3.92(1H,m), 7.42-7.48(1H,m), 7.92(1H,s).

[0698] Strukturne formule jedinjenja opisana u Primerima 1 - 179 su pokazana kako sledi.

2

[Tabela 1-1]

24 [Tabela 1-2]

2 [Tabela 1-3]

2 [Tabela 1-4]

2 [Tabela 1-5]

2 [Tabela 1-6]

2 [Tabela 1-7]

2 [Tabela 1-8]

21 [Tabela 1-9]

22 [Tabela 1-10]

2 [Tabela 1-11]

24 [Tabela 1-12]

2 [Tabela 1-13]

2 [Tabela 1-14]

2 (Tabela 1-15)

2 (Tabela 1-16)

2 (Tabela 1-17)

(Tabela 1-18)

1 (Tabela 1-19)

2 (Tabela 1-20)

(Tabela 1-21)

4 (Tabela 1-22)

(Tabela 1-23)

Eksperimentalni Primer 1: izrada humano-dobijenog MCM2 proteina

[0699] Niže opisani postupci genetičkog inžinjeringa slede postupak opisan u knjizi (Maniatis i saradnici, Molecular Cloning, Cold Spring Harbor Laboratory, 1989) ili postupak opisan u pratećem protokolu za reagens.

[0700] N terminus His-repića rekombinantnog humanog MCM2 proteina koji odgovara 10 – 294-tim amino kiselinama iz N terminusa je kloniran na pET21 vektoru ekspresije Escherichia coli. pET21-HH vektor se izrađuje umetanjem sledećeg 6xHis-repića sintetičke DNK

5’-TATGCATCATCATCATCATCACGGATCCCATCATCATCATCATCACTGAGC-3’ (SEQ ID NO: 1); i

5’-GCCGCTCAGTGATGATGATGATGATGGGATCCGTGATGATGATGATGATGCA-3’ (SEQ ID NO: 2)

u Nde I-Not I položaju pET-21a(+) (Novagen).

[0701] Mcm2(10-294 a.a.) gen koji enkodira 10 – 294-te amino kiseline od N terminalne strane humanog MCM2 proteina je kloniran pomoću PCR koristeći sintetičku DNK

5’-CGCGGATCCATGGCATCCAGCCCGGCCCA-3’ (SEQ ID NO: 3); i

5’-ATTCTTATGCGGCCGCTCACAGCTCCTCCACCAGAGGCA-3’ (SEQ ID NO: 4)

izrađenu po referenci sa baznom sekvencom opisanom u GenBank pristupni broj:

NM_004526, kao prajmeru i dDNK bibliotekom humanih testisa (TAKARA BIO INC.) kao templatu. PCR reakcija se izvodi u skladu sa protokolom datim uz Pyrobest (TAKARA BIO INC.).

[0702] Dobijeni 883 bp fragment se digestira sa BamHI i NotI enzimima za restrikciju, umetnutim na BamHI-NotI položaju pET21-HH a potvrđeno je da umetnuta bazna sekvenca daje pET21-HHhMcm2(10-294) plazmid. pET21-HHhMcm2(10-294) plazmid je uključen u BL21(DE3) ćelijsku liniju Escherichia coli (American Type Culture Collection).

[0703] Ćelije Escherichia coli uključene u prethodno pomenuti plazmid se uzgajaju u LB medijumu (1% tripton, 0.5% ekstrakt kvasca, 0.5% natrijum hlorid) koji sadrži 50 mg/L ampicilina a ekspresija MCM2 je indukovana dodavanjem 1 mM IPTG u toku 6 h. Ćelije Escherichia coli u kojima se ekspresuje MCM2 se odvoje centrifugiranjem (6000 rpm, 10 min), isperu sa puferom fosfatnih soli i zamrznu radi čuvanja na -80°C. Prethodno pomenute zamrznute ćelije Escherichia coli se otope na ledu i suspenduju u Complete EDTA (Roche Diagnostics GmbH, Mannheim, Germany) uz dodatak pufera A (25 mM tris-hidrohlorid (pH 7.4), 2.7 mM kalijum hlorid, 137 mM natrijum hlorid). Prethodno pomenute suspendovane ćelije Escherichia coli se liziraju sa 1 mg/mL lizozima i soniciraju 4 puta 30 sec u Insonator 201M (Kubota) na 170W uz hlađenje sa ledenom vodom. Ovaj ekstrakt se ultracentrifugira 20 min pri15000 opm na 4°C a dobijeni supernatant se propusti kroz filter promera 0.22 µm da se dobije ekstrakt ćelija bez ćelija Escherichia coli. Ekstrakt ćelija bez ćelija Escherichia coli se propusti kroz nikl-NTA Superflow smolu i dobijena smola se ispere sa puferom A i eluira sa puferom B (25 mM tris-hidrohlorid (pH 7.4), 2.7 mM kalijum hlorid, 137 mM natrijum hlorid, 10% glicerol, 200 mM imidazol). Eluat se koncentruje pomoću Amicon Ultra 4 (5K MWCO, Millipore, MA, U.S.A.) i prečisti gel filtracijom korišćenjem HiLoad 16/60 Superdex 200 pg (GE healthcare, Chalfont St. Giles, UK) uravnoteženim sa puferom C (25 mM tris-hidrohlorid (pH 7.4), 2.7 mM kalijum hlorid, 137 mM natrijum hlorid, 10% glicerol, 200 mM imidazol). Frakcija koja sadrži MCM2 protein se koncentruje kao prečišćeni uzorak i zamrzne na -80°C.

Eksperimentalni Primer 2: merenje inhibitorne aktivnosti Cdc7 kinaze

[0704] Cela dužina Cdc7 ko-ekspresovane sa Dbf4 cele dužine je nabavljena od Carna Biosciences (Kobe). Aktivnost enzima Cdc7/Dbf4 kompleksa se detektuje Transcreener ADP postupkom analize vremenski razložene homogene fluorescencije (Cisbio Inc., MA, U.S.A.). Reakcija enzima se izvodi u kinaza puferu (20 mM HEPES pH 7.5, 10 mM magnezijum acetat, 1 mM ditiotreitol) obogaćenim sa 1.0 µm ATP i 10 µg/ml MCM2 (izrađenog u Eksperimentalnom Primeru 1) 0.1 µg/ml. Slobodna ADP dobijena hidrolizom ATP se detektuje pomoću Eu3+-Cryptate-obeleženog anti-ADP monoklonalnog antitela u poređenju sa d2-obeleženim ADP i meri se njihova dobijena količina. Dobijeni signal transfera energije vremenski razložene fluorescentne rezonance se meri pomoću EnVision (Perkin Elmer Inc., MA, U.S.A.). Stopa inhibicije (%) test jedinjenja za Cdc7 se izračunava po sledećoj formuli.

Stopa inhibicije (%) = (1 – (količina test jedinjenja-slepa proba) ÷

(kontrola-slepa proba)) x 100

[0705] Količina Cdc7/Dbf4 reaktivne smeše pod uslovima bez jedinjenja se uzima kao kontrola a količina bez jedinjenja i pod uslovima bez Cdc7/Dbf4 se uzima kao slepa proba.

[0706] Stopa inhibicije jedinjenja iz ovog pronalaska za Cdc7 kinazu je pokazana u Tabeli 2.

Tabela 2

n l

[0707] Eksperimentalni Primer je pokazao da jedinjenje iz ovog pronalaska ima superiornu Cdc7 inhibitornu aktivnost.

Eksperimentalni Primer 3: merenje inhibitorne aktivnosti na rast humanih Colo205 kolorektalnih kancerogenih ćelija.

[0708] Inhibicija rasta Colo205 kolorektalnih kancerogenih ćelija sa jedinjenjem iz ovog pronalaska može da se meri na sledeći način.

[0709] Suspenzija ćelija (100 µl) humanih Colo205 kolorektalnih kancerogenih ćelija (nabavljenih od ATCC) (3,000 ćelija/udubljenje) se nanese u ploču sa 96 udubljenja i uzgaja 1 dan na 37°C u inkubatoru sa 5% gasa ugljen dioksida. Doda se po 100 µl rastvora svakog test jedinjenja u koncentraciji od 2 µM i ćelije se uzgajaju 3 dana. U ploču sa 96 otvora se doda CellTiter-GloTM Luminescent Cell Viability reagens za analizu (50 µl, Promega), meri se nivo luminescencije pomoću luminometra a količina rezidualne ATP se uzima kao količina ćelija. Vrednost luminescencije u udubljenjima bez ćelija se uzima kao slepa proba. Stopa inhibicije proliferacije ćelija (%) test jedinjenjem se izračunava po sledećoj formuli.

Stopa inhibicije (%) = (1 – (nivo luminescencije test jedinjenja – slepa proba) ÷ (nivo luminescencije kontrolne grupe – slepa proba)) x 100

[0710] Stopa inhibicije svakog test jedinjenja je pokazana u Tabeli 3.

Tabela 3

1

[0711] Eksperimentalni Primer je pokazao da jedinjenje iz ovog pronalaska ima superiorno supresivno delovanje na proliferaciju kancerogenih (kolorektalni kancer) ćelija.

Eksperimentalni Primer 4: merenje inhibitorne aktivnosti na fosforilaciju MCM2 u humanim kolorektalnim kancerogenim ćelijama Colo205

[0712] Supresivno delovanje jedinjenja iz ovog pronalaska na fosforilaciju MCM2 u humanim kolorektalnim kancerogenim ćelijama Colo205 može da se meri na sledeći način.

[0713] Suspenzija ćelija (500 µl) humanih kolorektalnih kancerogenih ćelija Colo205 (nabavljenih od ATCC) (50,000 ćelija/udubljenje) se nanese u ploču sa 24 udubljenja i ćelije odgajaju 1 dan na 37°C u inkubatoru sa 5% ugljen dioksid gasa. Doda se po 500 µl rastvora svakog test jedinjenja u koncentraciji od 2 µM i ćelije se uzgajaju u toku 8 h. Ploča se ispere sa PBS, ćelije se liziraju u Laemmli puferu za uzorak (BioRad) i lizat ćelija se tretira 5 min na 95°C. Nakon toga se sprovede SDS-PAGE i protein se transfektuje na PVDF membranu pomoću iBlot™ gel transfer sistema (Invitrogen). Membrana se blokira sa StartingBlock T20 (PBS) puferom za blokiranje (Thermo Scientific) i reaguje sa anti-fosforilisanim MCM2 (Ser40/Ser41) (Betil Laboratories, A300-788A) razblaženim 1000 puta sa Can Get rastvorom 1 za pojačavanaje signala imunoreakcije (TOYOBO). Membrana se ispere sa trispuferovanim solima (BioRad) koje sadrže 0.05% Tween 20 (Bio-Rad) i reaguje 1h na sobnoj temperaturi sa HRP-obeleženim zečjim IgG poliklonalnim antitelom (Amersham Biosciences, NA9340) razblaženim 10000 puta sa Can Get rastvorom 2 za pojačavanje signala imunoreakcije (TOY- OBO). Membrana se ispere na isti način kao prethodno, hemijska luminescencija antitelom obeleženog fosforilisanog MCM2 proteina pomoću SuperSignal West FemtoMaximum Sensitivity Substrate (Pierce Biotechnology) se detektuje pomoću LAS-1000 analajzera lumino slike (Fuji Film).

[0714] Pomoću anti-MCM2 antitela (Santa Cruzu Biotechnology, sc-9839) i HRP-obeleženog kozjeg IgG poliklonalnog antitela (Santa Cruzu Biotechnology, sc-2020) i na isti način kao prethodno, detektuje se MCM2 protein.

[0715] Specifična aktivnost fosforilisanog MCM2 svakog uzorka se izračunava po sledećoj formuli.

11

Specifična aktivnost fosforilisanog MCM2 = (nivo luminescencije fosforilisanog MCM2 -početna vrednost) ÷ (nivo luminescencije MCM2 – početna vrednost)

[0716] Stopa inhibicije (%) fosforilisanog MCM2 proteina test jedinjenjem se izračunava po sledećoj formuli i pokazana je u Tabeli.

Stopa inhibicije (%) = (1-specifična aktivnost fosforilisanog MCM2 test jedinjenja ÷ specifična aktivnost fosforilisanog MCM2 kontrolne grupe) x 100

[0717] Stopa inhibicije svakog test jedinjenja je pokazana u Tabeli 4.

Tabela 4

[0718] Eksperimentalni Primer je pokazao da jedinjenje iz ovog pronalaska ima superiorno inhibitorno delovanje na fosforilaciju MCM2 kancerogenih (kancer kolorektuma) ćelija, to jest, da jedinjenje iz ovog pronalaska ima superiorno inhibitorno delovanje na Cdc7 u kancerogenim (kancer kolorektuma) ćelijama.

Eksperimentalni Primer 5: merenje inhibitorne aktivnosti na fosforilaciju MCM2 u tumoru u ćelijama humanog kolorektalnog kancera Colo205 kod miševa.

[0719] Inhibitorna aktivnost na fosforiliaciju MCM2 jedinjenja iz ovog pronalaska u tumoru u ćelijama humanog kolorektalnog kancera Colo205 kod miševa može da se meri na sledeći

12

način.

[0720] Ćelije humanog kolorektalnog kancera Colo205 se suspenduje u 50% Matrigel rastvoru i subkutanom injekcijom transplantuju u 6- do 7- nedelja stare ženke BALB/c miševa (CLEA Japan, Inc.) u količini od 5.0x10<6>ćelija. Meri se promer ugrađenog tumora 7 do 14 dana nakon transplantacije a zapremina tumora se izračunava po sledećoj formuli.

Zapremina tumora = duži promer x kraći promer x kraći promer x (1/2)

[0721] Suspenzija test jedinjenja u 0.5% rastvoru metilceluloze (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) se oralno primeni u dozi pokazanoj u Tabeli na miševima koji imaju zapreminu tumora od 150 - 600 mm<3>. Tumor se ukloni pod anestezijom 4 h nakon primene test jedinjenja i homogenizuje u puferu za lizu ćelija (ćelijska signalizacija). Uz korišćenje BCA kita za analizu proteina (Thermo Scientific), kvantifikuje se protein u lizatu tumora a količina proteina se podesi. Prethodno navedeni rastvor proteina se tretira sa Laemmli puforom za uzorke (BioRad) 5 min na 95°C.

[0722] Nakon toga, izvrši se SDS-PAGE i protein se prenese na PVDF membranu pomoću iBlot™ gel sistema prenosa (Invitrogen). Membrana se blokira sa StartingBlock T20 (PBS) puferom za blokiranje (Thermo Scientific) i reaguje sa anti-fosforilisanim MCM2 (Ser40/Ser41) (Betil Laboratories, A300-788A), razblaženim 1000 puta sa Can Get rastvorom 1 za pojačivače signala imunoreakcije (TOYOBO). Membrana se ispere sa tris-puferovanim rastvorom soli (BioRad) koji sadrži 0.05% Tween 20 (Bio-Rad) i reaguje 1 h na sobnoj temperaturi sa HRP-obeleženim zečjim IgG poliklonalnim antitelom (Amersham Biosciences, NA9340) razblaženim 10000 puta sa Can Get rastvorom 2 za pojačivače signala imunoreakcije (TOYOBO). Membrana se ispere na isti način kao prethodno, a hemijska luminescencija antitelom-obeleženog fosforilisanog MCM2 proteina pomoću SuperSignal West FemtoMaximum Sensitivity Substrate (Pierce Biotechnology) se detektuje LAS-1000 analajzerom lumino slike (Fuji Film).

[0723] Koristeći anti-MCM2 antitelo (Santa Cruzu Biotechnology, sc-9839) i HRP-lobeleženo kozje IgG poliklonalno antitelo (Santa Cruzu Biotechnology, sc-2020) i na isti način kao prethodno, detektuje se MCM2 protein.

[0724] Specifična aktivnost fosforilisanog MCM2 svakog uzorka se izračunava po sledećoj formuli.

1

Specifična aktivnost fosforilisanog MCM2 = (nivo luminescencije fosforilisanog MCM2 -osnovna vrednost) ÷ (nivo luminescencije MCM2 – početna vrednost)

[0725] Inhibitorna stopa (%) fosforilisanog MCM2 proteina test jedinjenje se izračunava po niže datoj formuli i pokazana je u Tabeli.

Stopa inhibicije (%) = (1-specifična aktivnost test jedinjenja na fosforilisani MCM2 ÷ specifična aktivnost fosforilisanog MCM2 kontrolne grupe) x 100

[0726] Stopa inhibicije svakog test jedinjenja je pokazana u Tabeli 5.

[Tabela 5]

[0727] Eksperimentalni Primer pokazuje da jedinjenje iz ovog pronalaska ima superiorno inhibitorno delovanje na fosforilaciju MCM2 u kancerogenim (kolorektalni kancer) ćelijama kod miševa i da jedinjenje iz ovog pronalaska ima superiorno Cdc7 inhibitorno delovanje na kancerogene (kolorektalni kancer) ćelije kod miševa.

Eksperimentalni Primer 6: merenje antitumorne aktivnost na Colo205 kancerogenim ćelijama humanog kolorektalnog kancera kod miševa

[0728] Antitumorno delovanje jedinjenja iz ovog pronalaska na Colo205 kancerogene ćelije humanog kolorektalnog kancera kod miševa može da se meri na sledeći način.

[0729] Colo205 kancerogene ćelije humanog kolorektalnog kancera se suspenduju u 50% Matrigel rastvoru i subkutanom injekcijom transplantuju u 6- do 7- nedelja stare ženke ALB/c miševa (CLEA Japan, Inc.) u količini od 5.0x10<6>ćelija. Meri se promer ugrađenog tumora 7 do 14 dana od transplantacije a zapremina tumora se izračunava po sledećoj formuli.

14

Zapremina tumora = duži promer x kraći promer x kraći promer x (1/2)

[0730] Miševi koji imaju zapreminu ugrađenog tumora od približno 200 mm<3>se izdvoje i za eksperiment se koristi 5 miševa po grupi. Suspenzija test jedinjenja u 0.5% rastvoru metilceluloze (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) se oralno primeni u dozi iz Tabele 1 dva puta dnevno u toku 14 dana. Promer tumora se meri jedan dan pre početka primene i narednog dana nakon završene primene i izračuna se zapremina tumora.

[0731] Stepen rasta tumora u grupi koja je primala test jedinjenje u poređenju sa grupom koja je primala kontrolni uzorak se uzima kao T/C(%) i izračunava po sledećoj formuli.

T/C (%) = (zapremina tumora grupe koja je primala test jedinjenje nakon završene primene – zapremina tumora grupe koja je primala test jedinjenje jedan dan pre početka primene) / (zapremina tumora grupe koja je primala kontrolu nakon završene primene – zapremina tumora grupe koja je primala kontrolu jedan dan pre početka primene)) x 100

[0732] T/C svakog test jedinjenja je pokazan u Tabeli 6.

[Tabela 6]

[0733] Eksperimentalni Primer je pokazao da jedinjenje iz ovog pronalaska ima superiorno antitumorno delovanje.

Primer 1 formulacije

[0734] Medikament koji sadrži jedinjenje iz ovog pronalaska kao aktivni sastojak može da se izradi u skladu sa, na primer, sledećom formulacijom.

1. Kapsula

1

(1) jedinjenje dobijeno u Primeru 1 40 mg

(2) laktoza 70 mg

(3) mikrokristalna celuloza 9 mg

(4) magnezijum stearat 1 mg

1 kapsula 120 mg

(1), (2), (3) i 1⁄2 od (4) se izmešaju i granuliraju. U to se doda ostatak od (4) i ukupna količina se puni u želatinsku kapsulu.

2. Tableta

[0736]

(1) jedinjenje dobijeno u Primeru 1 40 mg

(2) laktoza 58 mg

(3) kukuruzni skrob 18 mg

(4) mikrokristalna celuloza 3.5 mg

(5) magnezijum stearat 0.5 mg

1 tableta 120 mg

(1), (2), (3), 2/3 od (4) i 1/2 od (5) se izmešaju i granuliraju. U granule se doda ostatak od (4) i (5) i smeša se kompresijom modelira u tablete.

Primer 2 formulacije

[0737] Jedinjenje (50 mg) dobijeno u Primeru 1 se rastvori u destilovanoj vodi za injekcije po japanskoj farmakopeji (50 ml), i u rastvor se doda destilovana voda za injekcije po japanskoj farmakopeji do zapremine od 100 ml. Ovako dobijeni rastvor se filtrira pod sterilnim uslovima. Uzme se rastvor (1 ml), prenese u bočicu za injekcije pod sterilnim uslovima i zamrzne sušenjem nakon čega se bočica zatvori.

Primenljivost u industriji

1

[0738] Kako jedinjenje iz ovog pronalaska ima superiorno inhibitorno delovanje na cdc7, korisno je kao sredstvo za profilaksu ili tretman bolesti povezanih sa cdc7 (na primer, kancer, itd.). Pored toga, kako je jedinjenje iz ovog pronalaska superiorno u ekspresiji efikasnosti, farmakokinetici, rastvorljivosti, interakciji sa drugim farmaceutskim produktima, bezbednosti i stabilnosti, korisno je kao farmaceutski produkt.

[0739] Ova aplikacija se zasniva na patentnim prijavama broj 2010-031899 i 2010-131950 podnetim u Japanu.

1

Claims

Patentni zahtevi 1. Jedinjenje predstavljeno formulom:

gde X je atom sumpora; Y je CH, R1je C1-6alkil grupa opciono supstituisana sa atomom (atomima) halogena, R2je, (1) C1-6alkil grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana od (a) 4-7 člane monociklične alifatične heterociklične grupe koja sadrži, kao sastavni atom prstena pored atoma ugljenika, 1 do 4 hetero atoma izabrana od atoma kiseonika, atoma sumpora i atoma azota opciono supstituisanih sa 1 do 3 supstituenta izabrana od (i) atoma halogena, (ii) hidroksi grupe, (iii) C1-6alkil grupe opciono supstituisane sa 1 do 3 supstituenta izabrana od (aa) atoma halogena, (bb) hidroksi grupe, (cc) C1-6alkoksi grupe i (dd) C6-14aril grupe opciono supstituisane sa 1 do 3 C1-6alkil grupe, (iv) C1-6alkoksi grupe, 2 (v) C6-14aril grupe opciono supstituisane sa 1 do 3 atoma halogena, (vi) C6-14ariloksi grupe, (vii) C1-6alkoksi-karbonil grupe, (viii) C1-6alkil-karbonil grupe, (ix) cijano grupe, (x) C6-14arilsulfonil grupe, (xi) karboksi grupe, (xii) amino grupe opciono mono-ili di-supstituisane sa C1-6alkil grupom(ama), (xiii) 4-7 člane monociklične alifatične heterociklične grupe koja sadrži, kao sastavni atom prstena pored atoma ugljenika, 1 do 4 hetero atoma izabrana od atoma kiseonika, atoma sumpora i atoma azota opciono supstituisanih sa okso grupom i (xiv) okso grupe, (b) C1-6alkoksi grupe, (c) amino grupe opciono mono-ili di-supstituisane sa supstituentom(ima) izabranim od (i) C1-6alkil grupe opciono supstituisane sa 1 do 3 supstituenta izabrana od (aa) C6-14aril grupe opciono supstituisane sa 1 do 3 C1-6alkoksi grupe, (bb) C1-6alkoksi-karbonil grupe, (cc) 4-7 člane monociklične aromatične heterociklične grupe koja sadrži, kao sastavni atom prstena pored atoma ugljenika, 1 do 4 hetero atoma izabrana od atoma kiseonika, atoma sumpora i atoma azota, (dd) C3-8cikloalkil grupe opciono supstituisane sa 4-7 članom monocikličnom aromatičnom heterocikličnom grupom koja sadrži, kao sastavne atome prstena pored atoma ugljenika, 1 do 4 hetero atoma izabrana od atoma kiseonika, atoma sumpora i atoma azota i (ee) hidroksi grupe, (ii) 4-7 člane monociklične alifatične heterociklične grupe koja sadrži, kao sastavni atom prstena pored atoma ugljenika, 1 do 4 hetero atoma izabrana od atoma kiseonika, atoma sumpora i atoma azota opciono supstituisanih sa 1 do 3 C7-13aralkil grupe, (iii) C6-14aril grupe opciono supstituisane sa 1 do 3 C1-6alkoksi grupe i (iv) C3-8cikloalkil grupe, (d) 5-ili 6-člane aromatične heterociklične grupe, (e) C6-14aril grupe i (f) C3-8cikloalkil grupe opciono supstituisane sa amino grupom; (2) C6-14aril grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 atoma halogena; (3) 4-7 člana monociklična alifatična heterociklična grupa koja sadrži, kao sastavni atom prstena pored atoma ugljenika, 1 do 4 hetero atoma izabrana od atoma kiseonika, atoma sumpora i atoma azota, premoštena alifatična heterociklična grupa ili spirociklična alifatična heterociklična grupa, pri čemu je alifatična heterociklična grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana od (a) atoma halogena, (b) C1-6alkil grupe opciono supstituisane sa 1 do 3 supstituenta izabrana od (i) hidroksi grupe, (ii) C1-6alkoksi-karbonil grupe i (iii) karbamoil grupe, (c) C6-14ariloksi grupe, (d) C1-6alkoksi-karbonil grupe, (e) C1-6alkil-karbonil grupe, (f) C6-14aril grupe opciono supstituisane sa C1-6alkilsulfonil grupom, (g) C7-13aralkil grupe opciono supstituisane sa 1 do 3 atoma halogena, (h) hidroksi grupe, (i) karbamoil grupe i (j) 4-7 člane monociklične alifatične heterociklične grupe koja sadrži, kao sastavni atom prstena pored atoma ugljenika, 1 do 4 hetero atoma izabrana od atoma kiseonika, atoma sumpora i atoma azota; (4) C2-6alkenil grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 C6-14aril grupe; 22 (5) 5-ili 6-člana aromatična heterociklična grupa; (6) alifatična heterociklil-karbonil grupa izabrana od pirolidinilkarbonil grupe, ili (7) C3-8cikloalkil grupa opciono supstituisana sa amino grupom ili njegova so.
2. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 1, naznačeno time što R1je C1-6alkil grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 atoma halogena; i R2je (1) aminometil grupa opciono supstituisana sa 1 ili 2 C1-6alkil grupe, (2) 5-ili 6-člana alifatična heterociklil-metil grupa opciono supstituisana sa C1-6alkil grupom ili (3) 4-7-člana monociklična alifatična heterociklična grupa koja sadrži, kao sastavni atom prstena pored atoma ugljenika, 1 do 4 hetero atoma izabrana od atoma kiseonika, atoma sumpora i atoma azota, premoštena alifatična heterociklična grupa ili spirociklična alifatična heterociklična grupa ili njegova so.
3. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 2, naznačeno time što R2je (1) 5-ili 6-člana alifatična heterociklil-metil grupa ili (2) 4-7-člana monociklična alifatična heterociklična grupa koja sadrži, kao sastavni atom prstena pored atoma ugljenika, 1 do 4 hetero atoma izabrana od atoma kiseonika, atoma sumpora i atoma azota, premoštena alifatična heterociklična grupa ili spirociklična alifatična heterociklična grupa ili njegova so.
4. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 3, naznačeno time što R2je (1) pirolidinilmetil grupa ili (2) alifatična heterociklična grupa izabrana iz grupe koja sadrži pirolidinil, piperidinil, 1,2,3,6-tetrahidropiridil, 7-azabiciklo[2.2.1]heptanil, 2-azabiciklo[2.2.1]heptanil i 1- 2 azabiciklo[2.2.2]oktanil grupu pri čemu je alifatična heterociklična grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 atoma halogena, ili njegova so.
5. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 1 naznačeno time što je to 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S)-pirolidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on ili njegova so.
6. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 1 naznačeno time što je to 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S)-piperidin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on ili njegova so.
7. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 1 naznačeno time što je to 2-(7-azabiciklo[2.2.1]hept-1-il)-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on ili njegova so.
8. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 1 naznačeno time što je to 6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[(2S)-1,2,3,6-tetrahidropiridin-2-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on ili njegova so.
9. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 1 naznačeno time što je to 2-[(2S)-piperidin-2-il]-6-[5-(trifluorometil)-1H-pirazol-4-il]tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on ili njegova so.
10. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 1 naznačeno time što je to 2-[(2S)-1-azabiciklo[2.2.2]okt-2-il]-6-(5-metil-1H-pirazol-4-il)tieno[3,2-d]pirimidin-4(3H)-on ili njegova so.
11. Medikament naznačen time što uključuje jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 1 ili njegovu so.
12. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 1 ili njegova so naznačeno time što je za upotrebu u profilaksi ili tretmanu kancera.
13. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 1, naznačeno time što su jedinjenje ili 24 njegova so hidrat.
14. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 4, naznačeno time što je R21-azabiciklo[2.2.2]oktanil grupa ili njegova so.
15. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 14, naznačeno time što je R1metil, etil ili trifluorometil grupa ili njegova so.
16. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 1, naznačeno time što je jedinjenje tautomer izomera predstavljeno parcijalnom strukturom formule:
17. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 1, naznačeno time što je jedinjenje tautomer izomera predstavljeno parcijalnom strukturom formule:
18. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 10, naznačeno time što je jedinjenje tautomer izomera predstavljeno parcijalnom strukturom formule:

gde je R1metil grupa na položaju 5 ili njegova so. 2
19. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 10, naznačeno time što je jedinjenje tautomer izomera predstavljeno parcijalnom strukturom formule:

gde je R1metil grupa na položaju 3 ili njegova so. Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Beograd, Kneginje Ljubice 5 2