RS59783B1 - Nova metil-piperidin jedinjenja korisna za inhibiciju mikrozomalne prostaglandin e2 sintaze-1 - Google Patents

Nova metil-piperidin jedinjenja korisna za inhibiciju mikrozomalne prostaglandin e2 sintaze-1

Info

Publication number
RS59783B1
RS59783B1 RS20200015A RSP20200015A RS59783B1 RS 59783 B1 RS59783 B1 RS 59783B1 RS 20200015 A RS20200015 A RS 20200015A RS P20200015 A RSP20200015 A RS P20200015A RS 59783 B1 RS59783 B1 RS 59783B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
mmol
mixture
add
methyl
collect
Prior art date
Application number
RS20200015A
Other languages
English (en)
Inventor
Matthew Joseph Fisher
Steven Lee Kuklish
Peter Rudolph Manninen
Katherine Marie Partridge
Matthew Allen Schiffler
Alan M Warshawsky
Jeremy Schulenburg York
Original Assignee
Lilly Co Eli
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=54478248&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RS59783(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Lilly Co Eli filed Critical Lilly Co Eli
Publication of RS59783B1 publication Critical patent/RS59783B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/451—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine having a carbocyclic group directly attached to the heterocyclic ring, e.g. glutethimide, meperidine, loperamide, phencyclidine, piminodine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4545—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pipamperone, anabasine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4709—Non-condensed quinolines and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/472—Non-condensed isoquinolines, e.g. papaverine
    • A61K31/4725—Non-condensed isoquinolines, e.g. papaverine containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/36—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/60—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D211/62—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals attached in position 4
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Hydrogenated Pyridines (AREA)

Description

Opis
[0001] Predmetni pronalazak se odnosi na nova jedinjenja; na farmaceutske kompozicije koje sadrže jedinjenja; jedinjenja za upotrebu u tretmanu bola i/ili inflamacije povezane sa artritisom; i intermedijerima i procesima korisnim u sintezi jedinjenja.
[0002] Artritis uključuje inflamaciju zglobova i često je praćen bolom i ukočenošću. Osteoartritis, najčešći oblik artritisa, je kompleksna degenerativna bolest zglobova koja se karakteriše progresivnom destrukcijom zglobne hrskavice; peri-artikularne strukture uključujući kosti, sinovijum, i povezana fibrozna tkiva zgloba; i različite stepene inflamacije. Postojeće terapije lekovima korišćenjem ne-steroidnih, anti-inflamatornih lekova (NSAIDs) i inhibitora ciklooksigenaze-2 (COX-2 inhibitori) mogu smanjiti bol povezan sa osteoartritisom, ali mogu biti samo umereno efikasni tokom vremena i svaki ima varijabilna razmatranja u odnosu na rizik/korist.
[0003] NSAIDs i COX-2 inhibitori smanjuju inflamaciju i bol preko inhibicije COX-2 enzima. Kao odgovor na pro-inflamatorne stimuluse, COX-2 enzimi metabolizuju arahidonsku kiselinu do prostaglandina H2 (PGH2). PGH2 se dalje metabolizuje sa različitim enzimima u druge eikozanoide uključujući prostaglandin E2 (PGE2), prostaglandin I2 (PGI2), prostaglandin F2α (PGF2α), prostaglandin D2 (PGD2), i tromboksan A2 (TXA2). Poznato je da ovi metaboliti izazivaju fiziološke i patofiziološke efekte. Smatra se da neravnoteža PGI2 i TXA2 izazvana lekom može objasniti zašto NSAIDs i COX-2 inhibitori proizvode štetne gastrointestinalne i kardiovaskularne sporedne efekte. Kao posledica toga, ove klase lekova mogu biti kontraindikovane kod mnogih pacijenata usled prethodno postojećih ili urgentnih kardiovakularnih i/ili gastrointestinalnih stanja. Dodatno, pacijenti tokom vremena mogu postati refraktorni na tretmane specifičnim lekovima.
[0004] Od metabolida arahidonske kiseline, PGE2 je identifikovan kao važan medijator stanja povezanih sa osteoartritisom; na primer, groznica, bol i zapaljenje. Prostaglandin E2 je specifično proizveden preko metabolizma PGH2 od strane mikrozomalne prostaglandin E2 sintaze-1 (mPGES-1). Smatra se da selektivna inhibicija mPGES-1 može obezbediti novu opciju tretmana za pacijente koji boluju od artritisa.
[0005] Objava WO 2013/146970 opisuje tri-supstituisana hinolin jedinjenja i sugeriše da opisana jedinjenja mogu biti, između ostalog, korisna za tretiranje inflamatornih bolesti. Međutim, ta objava ne opisuje jedinjenja za koja je tražena zaštita u ovoj prijavi.
[0006] Ostaje potreba za dodatnim opcijama za tretiranje inflamacije i ublažavanje bola povezanog sa artritisom. Predmetni pronalazak obezbeđuje nova jedinjenja koja inhibiraju mPGES-1 i koja mogu biti korisna za tretiranje pacijenata koji pate od artritisa i osteoartritisa.
[0007] Predmetni pronalazak obezbeđuje jedinjenja prema Formuli 1, ili njihove farmaceutski prihvatljive soli,
naznačeno time da R1 je H ili -CH3; R je izabran od:
i
G je izabran od:
[0008] Predmetni pronalazak obezbeđuje jedinjenja prema Formuli 2, ili njihove farmaceutski prihvatljive soli:
naznačeno time da R1 je H ili -CH3; R je izabran od:
G je izabran od:
[0009] Predmetni pronalazak takođe obezbeđuje jedinjenja prema Formulama 1 ili 2, ili njihove faramceutski prihvatljive soli, gde R1 je -CH3.
[0010] Ovde su opisana jedinjenja Formula 1 ili 2, ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, naznačeno time da R je izabran od:
[0011] Ovde su takođe opisana jedinjenja Formula 1 ili 2, ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, R je izabran od:
[0012] Za poželjna jedinjenja Formula 1 ili 2, ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, R je izabran od:
[0013] Za poželjna jedinjenja Formula 1 ili 2, ili njihove farmaceutske soli, G je:
[0014] Predmetni pronlaazk takođe obezbeđuje jedinjenje prema Formuli 3, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so.
[0015] U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema Formulama 1, 2, ili 3 su obezbeđena kao neutralne vrste. U sledećem primeru izvođenja, jedinjenja su obezbeđena kao farmaceutski prihvatljive soli. U jednom poželjnom obliku soli, jedinjenje prema Formuli 3 je obezbeđeno kao hidrohloridna so.
[0016] Predmetni pronalazak takođe obezbeđuje farmaceutski prihvatljivu kompoziciju koja uključuje jedinjenje prema Formulama 1, 2, ili 3, ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so, i najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv nosač, razblaživač, ili ekscipijent.
[0017] Predmetni pronalazak opisuje jedijnjenje prema Formulama 1, 2 ili 3 za upotrebu u tretmanu bola povezanog sa artritisom ili osteoartritisom. Tretman sadrži primenu na pacijenta efikasne količine farmaceutski prihvatljive kompozicije koja uključuje jedinjenje prema Formulama 1, 2, ili 3, ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so, i najmanje jedan od farmaceutski prihvatljivog nosača, razblaživača, ili ekscipijenta.
[0018] Predmetni pronalazak otkriva jedinjenje prema Formulama 1, 2 ili 3 za upotrebu u tretmanu artritisa ili osteoartritisa. U jednom obliku, predmetni pronalazak obezbeđuje jedinjenje prema Formulama 1, 2 ili 3 za upotrebu u tretmanima znakova i/ili simptoma osteoartritisa. Tretman sadrži primenu na pacijenta efikasne količine jedinjenja prema Formulama 1, 2, ili 3, ili njihove farmaceutski prihvatljive soli.
[0019] Predmetni pronalazak otkriva jedinjenje prema Formulama 1, 2 ili 3 za upotrebu u tretmanu inflmacije povezane sa artritisom ili osteoartritisom. Tretman sadrži primenu na pacijenta efikasne količine farmaceutski prihvatljive kompozicije koja uključuje jedinjenje prema Formulama 1, 2, ili 3, ili njihovu farmacutski prihvatljivu so, i najmanje jedan od farmaceutski prihvatljivog nosača, razblaživača, ili ekscipijenta.
[0020] Predmetni pronalazak otkriva jedinjenje prema Formulama 1, 2 ili 3 za upotrebu u tretmanu bola povezanog sa artritisom. Tretman sadrži primenu na pacijenta efikasne količine jedinjenja prema Formulama 1, 2, ili 3, ili njihove farmaceutski prihvatljive soli. Predmetni pronalazak dodatno obezbeđuje jedinjenje prema Formulama 1, 2 ili 3 za upotrebu u tretmanu bola povezanog sa osteoartritisom. Tretman sadrži primenu na pacijenta efikasne količine jedinjenja prema Formulama 1, 2, ili 3, ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so.
[0021] Predmetni pronalazak opisuje jedinjenje prema Formulama 1, 2, ili 3 za upotrebu kao medikament. Medikament ili jedinjenje može biti korišćeno za terapiju. Terapija može uključivati tretman pacijenta za artritis ili osteoartritis. U jednom primeru izvođenja terapiija može biti tretman bola ili inflamacije povezane sa artritisom ili osteoartritisom.
[0022] Predmetni pronalazak takođe opisuje upotrebu jedinjenja za proizvodnju medikamenta za tretiranje artritisa ili osteoartritisa. U jednom obliku, medikament je korišćen da se tretira bol ili inflamacija povezna sa artritisom ili osteoartritisom.
[0023] Kao što je ovde korišćeno, termini "tretiranje" ili "tretirati" uključuju zaustavljanje ili smanjenje težine postojećeg simptoma ili poremećaja, naročito bola i/inflamacije, povezanih sa artritisom ili osteoartritisom.
[0024] Kao što je ovde korišćeno, termin "pacijent" se odnosi na sisare, kao što su zamorci, pacovi, psi, mačke, krave, konji, ovce, koze ili ljudi; ili živina kao što su kokoške ili patke. Poželjan pacijent je sisar, poželjnije čovek.
[0025] Primeri jedinjenja predmetnog pronalaska mogu se formulisati u farmaceutske kompozicije u skladu sa prihvaćenom praksom. Primeri farmaceutski prihvatljivih nosača, ekscipijenata, i razblaživača mogu se naći u Remington’s Pharmaceutical Sciences, Gennaro, Ed., Mack Publishing Co. Easton Pa. 1990. Neograničavajući primeri uključuju sledeće: skrob, šećeri, manitol, i silika derivate; vezujuća sredstva kao što su karboksimetil celluloza i drugi celulozni derivati, glicerol monostearat; adsorptivni nosači kao što su kaolin i bentonit; i lubrikanti kao što su talk, kalcijum, i magnezijum stearat, i čvrsti polietil glikoli. U jednom obliku, farmaceutska formulacija uključuje 20% Captisol u 25 mM fosfatnog pufera pH 2.
[0026] Poželjne farmaceutske kompozicije se mogu formulisati kao tableta ili kapsula za oralnu primenu ili kao injektabilni rastvor. Tableta, kapsula, ili rastvor će uključivati jedinjenje prema predmetnom pronalasku u količini efikasnoj za tretiranje pacijenta kome je potreban tretman.
[0027] Kao što je ovde korišćeno, termin "efiaksna količina" odnosi se na količinu ili dozu jedinjenja prema pronalasku, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, koja, nakon primene jedne ili više doza pacijenta, obezbeđuje željeni efekat, kao što je, smanjenje ili eliminacija bola i/ili inflamacije kod pacijenta sa dijagnozom ili tretmanom.
[0028] Efikasna količine se može lako odrediti od strane zaduženog lekara korišćenjem poznatih tehnika i posmatranjem rezultata dobijenih pod analognim okolnostima. Za određivanje efikasne količine za pacijenta, brojni faktori se mogu razmatrati od strane zaduženog lekara, uključujući, ali se ne ograničavajući na: vrstu sisara, njegovu veličinu, starost, i opšte zdravstveno stanje; težinu simptoma; odgovora pojedinačnog pacijenta; načina primene; karakteristika bioraspoloživosti jedinjenja Formula 1, 2, ili 3 ili oblika njihove farmaceutski prihvatljive soli, kao formulisanog proizvoda leka u izabranom doznom režimu; upotrebe istovremenog medikamenata; i druge relevantne okolnosti.
[0029] U jednom primeru izvođenja, efikasna količina može biti od oko 0.0005 mg/kg telesne težine do oko 100 mg/kg. Poželjnije, efikasna količina može biti od oko 0.001 mg/kg do oko 50 mg/kg. Poželjnije, efikasna količina može biti od oko 0.001 mg/kg do oko 20 mg/kg.
[0030] Jedinjenje prema predmetnom pronalasku može se kombinovati sa drugim postupcima tretmana i/ili dodatnim terapeutskim sredstvima. Poželjno jedinjenje prema predmetnom pronalasku može se kombinovati sa drugim sredstvima koja su takođe efiaksna za tretman artritisa ili osteoartritisa. Primeri ovih dodatnih terapeutskih sredstava uključuju: NSAIDs ili COX-2 inhibitore kao što su ibuprofen, aspirin, acetaminofen, celekoksib, naproksen, i ketoprofen; opioide kao što su oksikodon, i fentanil; i kortikosteroide kao što su hidrokortizon, prednizolon, i prednizon.
[0031] Jedinjenja prema pronalasku i dodatno terapeutsko sredstvo (sredstva) mogu se primeniti ili zajedno preko istog puta isporuke i uređaja kao što je jedna pilula, kapsula, tableta, ili rastvor; ili se mogu primeniti ili zasebno u isto vreme u zasebnim uređajima za isporuku ili se mogu primeniti sekvencijalno.
[0032] Jedinjenje prema predmetnom pronalasku može se obezbediti kao farmaceutski prihvatljiva so. "Farmaceutski prihvatljiva so" odnosi se na soli jedinjenja prema pronalasku za koje se smatra da su prihvatljive za kliničku i/ili veterinarsku upotrebu. Farmacreutski prihvatljive soli i uobičajena metodologija za njihovu pripremu su dobro poznati u tehnici. Videti, npr., P. Stahl, et al., Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use, (VCHA/Wiley-VCH, 2002); S.M. Berge, et al., "Pharmaceutical Salts," Journal of Pharmaceutical Sciences, Vol.66, No.1, January 1977.
[0033] Jedinjenje prema predmetnom pronalasku, ili njegova so, može se pripremiti različitim procedurama poznatim u tehnici, od kojih su neke ilustrovane u Šemama, Pripremama, i Primerima u nastavku. Prosečan stručnjak prepoznaje da se specifični koraci sinteze za svaki od opisanih puteva mogu kombinovati na različite načine, ili zajedno sa koracima iz različitih šema, da bi se pripremila jedinjenja prema pronalasku, ili njihove soli. Proizvodi svakog koraka u šemama u nastavku mogu se rekuperovati ili prečistiti konvencionalnim postupcima, uključujući ekstrakciju, uparavanje, taloženje, hromatografiju, superkritičnu fluidnu hromatografiju, filtraciju, trituraciju, i kristalizaciju.
[0034] Pojedinačni izomeri, enantiomeri, ili dijastereomeri se mogu odvojiti ili razdvojiti od strane stručnjaka u bilo kojoj pogodnoj tački u sintezi jedinjenja Formule 1 sa postupcima kao što su tehnike selektivne kristalizacije ili hiralne hromatografije (Videti na primer, J. Jacques, et al., "Enantiomers, Racemates, and Resolutions", John Wiley and Sons, Inc., 1981, and E.L. Eliel and S.H. Wilen," Stereochemistry of Organic Compounds", Wiley- Interscience, 1994). Dodatno, intermedijeri opisani u sledećim pripremama sadrže azotne i kiseonične zaštitne grupe. Uslovi protekcije i deprotekcije su dobro poznati stručnjaku i opisani su u literaturi (Videti na primer "Greene’s Protective Groups in Organic Synthesis", Fourth Edition, by Peter G.M. Wuts and Theodora W. Greene, John Wiley and Sons, Inc.2007).
[0035] Reagensi i početni materijali su generalno lako dostupni stručnjaku. Drugi se mogu stvoriti standardnim tehnikama organske i heterociklične hemije i procedurama opisanim u Pripremama i Primerima u nastavku.
[0036] Prikaz veze sa linijom kroz nju kao što je ilustrovano u nastavku ukazuje na tačku vezivanja supstituenta za ostatak molekula.
[0037] Ovde korišćene skraćenice su definisane prema Aldrichimica Acta, Vol.17, No.1, 1984. Druge skraćenice su definisane kao što sledi: "δ" označava deo na milion down-field od tetrametilsilana; "ATCC" se odnosi na American type culture collection; "BOP" se odnosi na (benzotriazol-1-iloksi)tris(dimetilamino)fosfonijum heksafluorofosfat; "BSA" se odnosi na goveđi serum albumin; "CDI" se odnosi na 1,1’-karbonildiimidazol; "DCC" se odnosi na 1,3-dicikloheksilkarbodiimid; "DCM" se odnosi na dihlorometan; "DIC" se odnosi na 1,3-diizopropilkarbodiimid; "DMF" se odnosi na dimetilformamid; "DMSO" se odnosi na dimetilsulfoksid; "EDCI" se odnosi na 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilkarbodiimid hidrohlorid; "EDTA" se odnosi na etilenediamintetrasirćetnu kiselinu; "ee" se odnosi na višak enantiomera; "EIA" se odnosi na imunoenzimski test; "EIMS" se odnosi na elektron jonizujuću masenu spektrometriju; "ESMS" se odnosi na elektrosprej masenu spektrometriju; "EtOAc" se odnosi na etil acetat; "EtOH" se odnosi na etanol or etil alkohol; "Pr. br." se odnosi na Primer br.; "HATU" se odnosi na (1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]piridinijum 3-oksid heksafluorofosfat); "HBTU" se odnosi na (1H-benzotriazol-1-iloksi)(dimetilamino)-N,N-dimetilmetaniminijum heksafluorofosfat; "HOAT" se odnosi na 1-hidroksi-7-azobenzotriazol; "HOBT" se odnosi na 1-hidroksilbenzotriazol hidrat; "IC50" se odnosi na koncentraciju sredstva koje proizvodi 50% maksimalnog inhibitornog odgovora mogućeg za to sredstvo; "i-PrOH" se odnosi na izopropanol ili izopropil alkohol; "LPS" se odnosi na lipopolisaharid; "MeOH" se odnosi na metanol; "min" se odnosi na minute; NSAIDs" se odnosi na nesteroidne antiinflammatorne lekove; "PBS" se odnosi na fosfatno puferovani fiziološki rastvor; "PGE2" se odnosi na prostaglandin E2; "PGH2" se odnosi na prostaglandin H2; "PGI2" se odnosi na prostaglandin I2; "PyBOP" se odnosi na (benzotriazol-1-il-oksitripirolidinofosfonijum heksafluorofosfat); "PyBrOP" se odnosi na bromo(tripirolidinil) fosfonijumheksafluorofosfat; "rhIL-1β" se odnosi na rekombinantni humani interleukin 1β; "SCF" se odnosi na superkritični fluid; "SFC" se odnosi na superkritičnu fluidnu hromatografiju; "TBME" se odnosi na t-butil etar metil etar; "THF" se odnosi na tetrahidrofuran; i "tR" se odnosi na retenciono vreme.
[0038] Generalni LCMS postupci. Sve analize su izvedene korišćenjem korišćenjem Agilent 1200 Infinity Series Liquid Chromatography (LC) sistema, koji se sastoji od 1260 HiP degasser (G4225A), 1260 Binary Pump (G1312B), 1290 auto-sampler (G4226A), 1290 thermo-stated column compartment (G1316C) i 1260 Diode Array Detector (G4212B) kuplovanim sa Agilent 6150 single quadrupole mass spectrometry (MS) detektorom. MS je upravljan sa elektro-sprej jonizacionim izvorom (ESI) i u pozitivnom & negativnom modu jona. Pritisak nebulizatora je postavljen na 50 psi, temperatura i protok gasa za sušenje na 350 °C i 12.0 L/min respektivno. Korišćene kapilarne voltaže su 4000 V u pozitivnom modu i 3500 V u negativnom modu. Dobijanje podataka je izvedeno sa Agilent Chemstation softverom.
[0039] HPLC Postupak 1. Analize su izvedene na Daicel ChiralPak AD-3R koloni (dužina 100 mm, unutrašnji prečnik 4.6 mm, veličina čestice 3 µm). Korišćena pokretna faza je: A2=voda sa 10 mM amonijum bikarbonatom, podešenim na pH 9 sa amonijum hidroksidom; i B2 = acetonitril. Izvođenje je bilo na temperaturi od 25 °C i stopi protoka od 1.5 mL/min sa gradijentom eluiranja od 50 % do 95 % (B2) tokom 3.0 min praćeno sa 3.0 min zadržavanjem na 95 % (B2). UV (DAD) akvizicija je izvedena na 40 Hz, sa opsegom skeniranja od 190-400 nm (sa 5 nm korakom). 1:1 deljeni protok je korišćen pre MS detektora. Opseg MS akvizicije je podešen na 100-800 m/z sa veličinom koraka od 0.2 m/z u oba moda polariteta. Voltaža fragmentora je postavljena na 70 (ESI+) ili 120 (ESI-), dobit na 0.40 (ESI+) ili 1.00 (ESI-) i prag brojanja jona na 4000 (ESI+) ili 1000 (ESI-). Ukupno vreme MS ciklusa skeniranja je 0.15 s/ciklus.
[0040] SFC Postupak 1. Analize su izvedene na Daicel ChiralPak OJ-H koloni (dužina 100 mm, unutrašnji prečnik 4.6 mm, veličina čestice 5 µm). Pokretna faza je: 8 % (20 mM NH3u i-PrOH) i 92 % CO2(scf)na pritisku od 100 bar. Izvedeno je na temperaturi od 35 °C i stopi protoka od 3 mL/minut. UV (DAD) akvizicija je izvedena na talasnoj dužini od 220 nm.
[0041] SFC Postupak 2. Analize su izvedene na Daicel ChiralPak AS-H koloni (dužina 100 mm, unutrašnji prečnik 4.6 mm, veličina čestice 5 µm). Pokretna faza je: 20 % (20 mM NH3u i-PrOH) i 80 % CO2(scf)na pritisku od 100 bar. Izvedeno je na temperaturi od 35 °C i stopi protoka od 5 mL/minut. UV (DAD) akvizicija je izvedena na talasnoj dužini od 220 nm.
[0042] Sledeće Šeme dodatno ilustruju pronalazak.
Šema 1.
[0043] U Šemi 1, Korak 1, trifluorometil sulfonil grupa je instalirana na piperidinu da bi delovala kao odlazeća grupa u narednoj reakciji iz Koraka 2. "PG" je zaštitna grupa razvijena za amino grupu, kao što su karbamati i amidi. Proizvod iz Koraka 1 je zatim podvrgnut karbonilaciji korišćenjem paladijuma katalizatora da bi se dobio proizvod estar iz Koraka 2. Dvoguba veza u tetrahidropiridinu može se redukovati pod hidrogenacionim uslovima. U Koraku 3, podkorak 2, piperidin amin može biti deprotektovan pod kiselim uslovima. Piperidin proizvod iz Koraka 3 zatim može reagovati sa halogen supstituisanom G grupom pod uslovima pogodnim za nukleofilnu aromatičnu supstituciju da bi se dobio proizvod iz Koraka 4. Na primer, neorganska baza kao što je K2CO3ili organska baza kao što je N,N-diizopropiletilamin, piridin, ili trietilamin može se koristiti da bi se dobio proizvod iz Koraka 4, podkorak 1. Alternativno, piperidin proizvod iz koraka 3 može reagovati sa hinolon N-oksidom korišćenjem aktivirajućeg sredstva, kao što je PyProp, da bi se dobio proizvod iz Koraka 4. Deprotekcija piperidin karboksi grupe može se postići pod standardnim uslovima sa neorganskom bazom kao što je vodeni rastvor natrijum hidroksida ili litijum hidroksida da bi se dobio proizvod iz Koraka 4, podkorak 2 ili pod kiselim uslovima korišćenjem 4 M HCl ili vodenog rastvora sumporne kiseline.
Šema 2
[0044] U Šemi 2, proizvod piperidin karboksilne kiseline iz Koraka 4 može se kuplovati sa odgovarajućim aminom, RNH2, pod amidacionim uslovima korišćenjem organske baze kao što je trietilamin ili diizopropiletilamin, kuplujućeg reagensa kao što je EDCI, i kuplujućeg aditiva kao što je HOBT da bi se dobila jedinjenja iz Koraka 5, podkorak 1. Stručnjak će prepoznati da postoje brojni postupci i reagensi za formiranje amida što rezultuje iz reakcije karboksilnih kiselina i amina. Na primer, reakcija amin jedinjenja sa odgovarajućom karboksilnom kiselinom u prisustvu kuplujućeg reagensa sa ili bez organske baze može obezbediti jedinjenje Formule 1. Kuplujući reagensi uključuju karbodidimide, kao što su DCC, DIC, EDCI ili karbonildiimidazol kao što je CDI. Amid kuplujući aditivi, kao što su HOBT i HOAt mogu se takođe koristiti da se poboljša reakcija. Dodatno, uronijum ili fosfonijum soli nenukleofilnih anjona, kao što su HBTU, HATU, BOP, PyBOP, i PyBrOP mogu se koristiti umesto tradicionalnijih kuplujućih reagenasa. Aditiv kakav je DMAP mogu se koristiti da bi se poboljšala reakcija. Proizvod iz Koraka 5, podkorak 1 se zatim može deprotektovati, ukoliko je neophodno, pod standardnim uslovima sa neorganskom bazom kao što je vodeni rastvor natrijum hidroksida ili litijum hidroksida u rastvaraču kao što je MeOH i THF da bi se dobila jedijnjenja Formule 1.
[0045] Farmaceutski prihvatljiva so jedinjenja prema pronalasku, kao što je hidrohloridna so, mogu se formirati, na primer reakcijom odgovarajuće slobodne baze Formule 1 i odgovarajuće farmaceutski prihvatljive kiseline, kao što je hlorovodonična kiselina, u pogodnom rastvaraču kao što je dietil etar pod standardnim uslovima. Dodatno, formiranje takvih soli može se desiti istovremeno nakon deprotekcije azotne zaštitne grupe. Formiranje takvih soli je dobro poznato i cenjeno u tehnici. Videti, na primer, Gould, P.L., "Salt selection for basic drugs," International Journal of Pharmaceutics, 33: 201-217 (1986); Bastin, R.J., et al. "Salt Selection and Optimization Procedures for Pharmaceutical New Chemical Entities," Organic Process Research and Development, 4: 427-435 (2000); and Berge, S.M., et al., "Pharmaceutical Salts," Journal of Pharmaceutical Sciences, 66: 1-19, (1977).
[0046] Sledeće Pripreme i Primeri doddatno ilustruju pronalazak.
Priprema 1
terc-Butil 3,3-dimetil-4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)-3,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilat
[0047]
[0048] Pod atmosferom azota, ohladiti rastvor diizopropilamina (260 mL, 1.85 mol) u THF (1.0 L) do -20 °C zatim dodati rastvor n-butillitiujma (2.50 M u heksanima, 650 mL, 1.60 mol) u kapima tokom 30 minuta. Dozvoliti da se smeša zagreje do -10 °C i mešati 1 čas. Ohladiti smešu do -74 °C i dodati rastvor terc-butil 3,3-dimetil-4-oksopiperidin- 1-karboksilata (260 g, 1.14 mol) u THF (1.0 L mL) u kapima tokom 60 minuta. Mešati smešu na -74 °C 2 časa, i zatim dodati rastvor N-fenilbis(trifluorometansulfonimida) (430 g, 1.20 mol) u THF (1.0 L). Zagrejati smešu do 0 °C i mešati 2 časa. Dozvoliti da se smeša zagreje do sobne temeprature i mešati preko noći. Ugasiti reakciju sa zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl (1.0 L); razblažiti sa vodom (2.0 L); razdvojiti slojeve; i ekstrahovati vodeni sloj sa EtOAc (2 x 2 L). Kombinovati organske ekstrakte; osušiti preko Na2SO4; filtrirati; sakupiti filtrat; i koncentrisati filtrat pod sniženim pritiskom. Podvrgnuti rezultujući sirovi materijal flash hromatografiji na silika gelu, eluiranjem sa gradijentom od 0 % do 15 % TBME u heksanima, da bi se obezbedilo jedinjenje iz naslova kao narandžasto ulje sa oko 75% čistoće po masi kao što je procenjeno sa<1>H NMR (430 g, 78%).
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 1.05 (s, 6H), 1.40 (s, 9H), 3.36 (s, 2H), 4.02 (d, J = 3.4 Hz, 2H), 5.82 (br s, 1H).
Priprema 2
O1-terc-Butil-O4-metil 3,3-dimetil-2,6-dihidropiridin-1,4-dikarboksilat
[0049]
[0050] Kombinovati paladijum(II) acetat (4.40 g, 20.0 mmol), 1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen (13.3 g, 22.8 mmol), terc-butil 3,3-dimetil-4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)-3,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilat (72.0 g, 150 mmol), anhidrovani acetonitril (850 mL), anhidrovani MeOH (570 mL), i trietilamin (36.0 mL, 245 mmol) u 2-L PARR™ autoklav opremljen sa mehaničkom mešalicom. Zapečatiti autoklav. Pročistiti i zatim staviti autoklav pod pritisak sa ugljen monoksidom do 689 kPa. Zagrevati smešu do 65 °C 2.25 časa; ohladiti smešu do sobne temperature; i pažljivo provetriti autoklav. (Pažnja! Otrovan gas!). Koncentrovati pod smanjenim pritiskom da bi se dobio sirovi materijal. Kombinovati ovaj materijal sa pet drugih serija materijala pripremljenog sa analognom procedurom u sličnoj razmeri. Podvrgnuti kombinovani materijal flash hromatografiji na silika gelu, eluiranjem sa gradijentom od 0 % do 20 % TBME u heksanima, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuto ulje sa oko 83% čistoće po masi (260 g, 88%). MS (m/z): 214 (M - t-Bu 2H)+.
Priprema 3
(±)-O1-terc-Butil-O4-metil 3,3-dimetilpiperidin-1,4-dikarboksilat
[0051]
[0052] Suspendovati paladijum (10 tež% na ugljeniku, 5.4 g, 5.1 mmol) u MeOH (700 mL) zatim dodati rastvor O1-terc-butil-O4-metil 3,3-dimetil-2,6-dihidropiridin-1,4-dikarboksilata (130 g, 396 mmol) rastvoren u MeOH (700 mL) u 2.25 L PARR™ reaktor. Zapečatiti reaktor i pročistiti ga prvo sa gasovitim azotom zatim sa gasovitim vodonikom. Staviti reaktor pod pritisak do 414 kPa sa vodonikom i mešati smešu na sobnoj temperaturi 1.5 čas. Osloboditi pritisak i filtrirati smešu da bi se uklonio katalizator. Kombinovati filtrat sa onim dobijenim iz druge suštinski identične reakcije i koncentrovati pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuto ulje sa oko 85% čistoće po težini (240 g, 95%). MS (m/z): 216 (M - t-Bu 2H)+.
Priprema 4
(±)-Metil 3,3-dimetilpiperidin-4-karboksilat hidrohlorid
[0053]
[0054] Dodati HCl (4.0 M rastvor u 1,4-dioksanu, 2.0 L, 8.0 mol) rastvoru O1-terc-butil-O4metil 3,3-dimetilpiperidin- 1,4-dikarboksilata (240 g, 752 mmol) u 1,4-dioksanu (500 mL). Mešati rezultujuću smešu na sobnoj temperaturi preko noći i koncentrovati pod sniženim pritiskom. Razblažiti ostatak sa TBME (500 mL) i pokupiti rezultujuće čvrste supstance filtracijom. Isprati filter kolač sa TBME (2 x 400 mL) i sušiti čvrste supstance u vakuum peći na 35 °C preko noći da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (144 g, 92%). MS (m/z): 172 (M H)+.
Priprema 5
(-)-Metil (4S)-3,3-dimetil-1-(8-metil-2-hinolil)piperidin-4-karboksilat
[0055]
[0056] Dodati K2CO3(210 g, 1.52 mol) smeši metil 3,3-dimetilpiperidin-4-karboksilat hidrohlorida (144 g, 693 mmol) i 2-hloro-8-metilhinolina (125 g, 704 mmol) u DMSO (1.4 L). Mešati rezultujuću smešu prekonoći na 131 ± 1 °C. Ohladiti smešu do sobne temeprature; filtrirati da bi se uklonile čvrste supstance; sakupiti filtrat; razblažiti filtrat sa vodom (2 L); zatim ekstrahovati sa EtOAc (2 x 3 L). Isprati kombinovane organske ekstrakte sa vodom (3 x 1.5 L); osušiti preko Na2SO4; filtrirati; sakupiti i koncentrovati filtrat pod sniženim pritiskom. Podvrgnuti rezultujući sirovi materijal flash hromatografiji na silika gelu, eluirati gradijentom od 25 % do 30 % (10 % TBME u DCM) u heksanima, da bi se obezbedio racemat jedinjenja iz naslova. Razblažiti ovaj materijal u MeOH (7.5 L) i filtrirati. Podvrgnuti materijal hiralnoj SFC (Chiralpak OJ-H, 50 mm x 250 mm x 5 µm) korišćenjem 15 % (0.2 % dimetiletilamin u i-PrOH) u CO2(scf)kao pokretna faza sa stopom protoka od 400 g/min, injektiranjem 5 mL rastvora svakih 95 sekundi dok nije sav materijal podvrgnut. Za svaku injekciju, sakupiti prvu frakciju za eluiranje (tR = 2.57 min sa SFC Postupkom 1). Kombinovati sakupljene frakcije sa onima iz prethodne reakcije pripremljene slično da bi se obezbedilo 98 g sirovog metil 3,3dimetilpiperidin-4-karboksilat hidrohlorida. Koncentrovati smešu pod sniženim pritiskom i rekristalizovati materijal iz vrućeg EtOH (1.38 L). Sakupiti kristale i sušiti kristalni materijal u vakuum peći na 40 °C preko noći da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela kristalna čvrsta supstanca (156 g, 43 % prinos na osnovu proporcionalnosti prem aseriji). MS (m/z): 313 (M H)+, [α]<20>D-45° (c 0.21, DCM). ee = >99 % kao što je određeno sa SFC Postupkom 1.
Priprema 6
(-)-(4S)-3,3-Dimetil-1-(8-metil-2-hinolil)piperidin-4-karboksilna kiselina
[0057]
[0058] Tretirati metil (4S)-3,3-dimetil-1-(8-metil-2-hinolil)piperidin-4-karboksilat (154 g, 493 mmol) sa sumpornom kiselinom (10% zapr/zapr u vodi, 2.31 L, 2.75 mol) i refluksovati smešu preko noći. Ohladiti smešu do sobne temperature i dodati NaOH (50 tež% u vodi) dok pH dostigne 13. Dodati TBME (500 mL) da bi se obezbedila trofazna smeša. Obeležiti slojeve od gornjeg do donjeg kao: "Sloj A," "Sloj B," i "Sloj C." Ukloniti Sloj C (donji sloj). Dodati vodu (600 mL) Slojevima A i B i razdvojiti vodeni sloj od organskih slojeva. Skloniti sa strane organske slojeve (A i B). Kombinovati vodeni sloj sa Slojem C. Ekstrahovati kombinovane vodene slojeve sa TBME (500 mL); razdvojiti slojeve; i sa strane skloniti organske ekstrakte. Dodati HCl (5.0 M) vodenom sloju do pH 6.5. Ekstrahovati rezultujuću vodenu smešu sa TBME (2 x 400 mL). Kombinovati sve organske ekstrakte (uključujući Slojeve A i B); osušiti preko MgSO4; filtrirati; sakupiti i koncentrovati filtrat pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta bela supstanca sa 96 % čistoće (145 g, 95%). MS (m/z): 299 (M H)+. [α]<20>D-59.6° (c 3.12, CH3OH).
Priprema 7
(±)-2-((Benziloksi)metil)-2,3-dihidro-4H-piran-4-on
[0059]
[0060] Dodati rastvor ZnCl2u THF (0.5 M, 1.21 L, 607 mmol) hladnom (0 °C) rastvoru (E)-1-metoksi-3-(trimetilsilil) oksi-1,3-butadiena (95% čistoća, 100 g, 551 mmol) i (benziloksi)acetaldehida (97 % čistoća, 80 mL, 551.370 mmol) u toluenu (551 mL) tokom 90 minuta uz održavanje unutrašnje temperature reakcione smeše ispod 10 °C. Dozvoliti da se smeša zagreje do sobne temperature i mešati preko noći. Podeliti reakcionu smešu u dva jednaka dela; izvesti sledeće procedure na svakom delu. Dodati trifluorosirćetnu kiselinu (35 mL, 457 mmol) u četiri dela. Nakon 20 minuta, koncentrovati rezultujuću smešu pod sniženim pritiskom; razblažiti sa EtOAc; dodati višak zasićenog NaHCO3; filtrirati da bi se uklonile čvrste supstance; sakupiti filtrat; razdvojiti i sakupiti organski sloj. Isprati organski rastvor sa zasićenim vodenim rastvorom NaCl; izolovati organske ekstrakte; osušiti preko MgSO4; filtrirati; sakupiti filtrat; i koncentrovati pod sniženim pritiskom. Kombinovati rezultujući materijal iz svakog od prethodno razdvojenih delova. Podvrgnuti rezultujući materijal flash hromatografiji na silika gelu, eluiranjem sa gradijentom od 20% do 50% EtOAc u heksanima, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao narandžasto ulje sa 92% čistoće (96 g, 73%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.40-7.28 (m, 6H), 5.42 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 4.65-4.56 (m, 3H), 3.74-3.67 (m, 2H), 2.75 (dd, J = 16.8, 14.3 Hz, 1H), 2.42 (dd, J = 16.9, 3.2 Hz, 1H).
Priprema 8
(±)-2-(Benziloksimetil)tetrahidropiran-4-on
[0061]
[0062] Mešati smešu EtOAc (880 mL), (±)-2-((benziloksi)metil)-2,3-dihidro-4H-piran-4-ona (96 g, 0.440 mol), trietilamina (123 mL, 0.882 mol), i paladijum (10% na ugljeniku, 4.68 g, 4.40 mmol) pod atmosferom vodonika na sobnoj temepraturi 73 časa. Filtrirati smešu preko dijatomejske zemlje; isprati filter kolač sa EtOAc (250 mL); i sekvencijalno isprati filtrat sa vodenim rastvorom HCl (0.1 M), zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3, i zasićenim vodenim rastvorom NaCl. Osušiti organski sloj preko MgSO4; filtrirati; sakupiti filtrat; i koncentrovati pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao svetlo žuti materijal (81.4 g, 84%). LC/MS (ESI+): 221 [M+H]+, 238 [M+NH4]+, 243 [M+Na]+.
Priprema 9 (2S,4R)-2-(Benziloksimetil)tetrahidropiran-4-ol
[0063]
[0064] Ohladiti rastvor (±)-2-(benziloksimetil)tetrahidropiran-4-ona (40.6 g, 184 mmol) u THF (1.08 L) do -78 °C. Dodati rastvor LiAlH4(1.0 M u THF, 240 mL, 240 mmol) u kapima tokom 15 minuta. Dozvoliti da se smeša zagreje do 0 °C nakon što je dodavanje završeno i polako dodati vodu (8.4 mL) u kapima. Nakon mešanja smeše 5 minuta, dodati rastvor NaOH (15 masenih % u vodi, 8.4 mL) i mešati dodatnih 5 minuta. Zatim dodati vodu (3 x 8.4 mL) i dozvoliti smeši da se zagreje do sobne temperature. Nakon 30 minuta, filtrirati suspenziju da bi se uklonile čvrste susptance i koncentrovati filtrat pod sniženim pritiskom da bi se obezbedilo jedinjenje iz naslova kao bezbojno ulje. Isprati čvrste supstance jednom sa THF; filtrirati; i koncentrovati filtrat pod sniženim pritiskom. Kombinovati ovaj materijal sa onima dobijenim iz prethodnih reakcija izvedenih suštinski u skladu sa istom procedurom počinjući sa 40 g, 22 g, i 45 g (±)-2-(benziloksimetil)tetrahidropiran-4-ona. Razblažiti kombinovani materijal u i-PrOH (637 mL). Podvrgnuti materijal hiralnoj SFC (Chiralpak AS-H, 50 mm x 150 mm x 5 µm) korišćenjem 25% i-PrOH u CO2(scf) kao pokretne faze na stopi protoka od 300 g/min, injektirajući 1.35 g rastvora svakih 114 sekundi dok sav materijal nije injektiran. Za svaku injekciju, sakupiti prvu frakciju za eluiranje (glavni izomer). Kombinovati sve sakupljene frakcije da bi se dobilo jedinjenje iz naslova sa >99 % ee kao što je određeno SFC Postupkom 2 (62.8 g, 42 % prinos na osnovu proprocionalnosti seriji). LC/MS (ESI): 223 [M+H]+, 240 [M+NH4]+, 245 [M+Na]+, 467 [2M+Na]+.
Priprema 10
((2S,4R)-2-(Benziloksimetil)tetrahidropiran-4-il)metanesulfonat
[0065]
[0066] U kapima dodati rastvor metansulfonil hlorida (11.7 mL, 150.6 mmol) u DCM (70 mL) smeši (2S,4R)-2-(benziloksimetil)tetrahidropiran-4-ola (31 g, 139.5 mmol), DCM (1.40 L), i N,N-diizopropiletilamina (73.0 mL, 418.4 mmol) na 0 °C. Dozvoliti da se smeša zagreje do sobne temperature i mešati je preko noći. Nakon toga dodati rastvor metansulfonil hlorida (0.537 mL, 6.98 mmol) u DCM (5 mL) i mešati smešu 5 minuta na sobnoj temperaturi. Ohladiti smešu do 0 °C, sipati je u vodu; razdvojiti; i sakupiti organski sloj. Isprati organski sloj sa vodom (500 mL); kombinovati organski sloj sa organskim slojevima/ekstraktima dobijenim iz drugih, suštinski identičnih reakcija. Osušiti kombinovane organske rastvore preko MgSO4; filtrirati; sakupiti filtrat; i koncentrovati filtrat pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao svetlo narandžasto ulje (84.7 g, 97 % prinos na osnovu proprocionalnosti seriji).<1>H NMR (400 MHz, d6-DMSO) δ 7.36-7.24 (m, 5H), 4.86-4.77 (m, 1H), 4.47 (s, 2H), 3.96 (dd, J = 7.6, 4.4 Hz, 1H), 3.60-3.54 (m, 1H), 3.48-3.36 (m, 3H), 3.18 (s, 3H) 2.05 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 1.98 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 1.58 (app qd, J = 12.0, 4.8 Hz, 1H), 1.40 (app q, J = 11.8 Hz, 1H).
Priprema 11
((2S,4S)-4-Aminotetrahidro-2H-piran-2-il)metanol hidrohlorid
[0067]
[0068] Dodati natrijum azid (12.85 g, 191.7 mmol) rastvoru ((2S,4R)-2(benziloksimetil)tetrahidropiran-4-il)metanesulfonata (32.0 g, 106.5 mmol) u DMF (304 mL). Zagrejati rezultujuću smešu do 100 °C i mešati je 4 časa. Ohladiti reakcionu smešu do sobne temperature. Sipati smešu u vodu (400 mL) i zatim ekstrahovati sa EtOAc (2 x 400 mL). Kombinovati organske ekstrakte i isprati sa zasićenim vodenim rastvorom NaCl (3 x 200 mL). Osušiti organske ekstrakte preko MgSO4; filtrirati; i sakupiti filtrat. Koncentrovati filtrat pod sniženim pritiskom do oko 100 mL ukupne zapremine. Rastvoriti rezultujuću smešu u EtOAc (700 mL) i dodati je u PARR™ sud koji sadrži PtO2(2.7 g, 12 mmol) i EtOAc (700 mL). Pročistiti sud sa azotom; zatim staviti pod pritisak sa vodonikom do 414 kPa. Agitovati smešu 4 časa na sobnoj temperaturi. Filtrirati smešu i koncentrovati bezbojni filtrat pod sniženim pritiskom da bi se obezbedila 23.2 g bezbojnog ulja. Kombinovati sa 36.2 g materijala od prethodne reakcije pripremeljene sa suštinski istom procedurom. Rastvoriti kombinovani materijal u EtOH (600 mL) i dodati HCl (37 tež% u H2O, 50 mL). Dodati rezultujuću smešu u PARR™ sud koji sadrži Pd (10% na ugljeniku, 10.0 g, 9.40 mmol) i EtOH (600 mL). Pročistiti reaktor sa azotom i staviti ga pod pritisak sa vodonikom do 414 kPa. Agitovati smešu na sobnoj temperaturi 1 čas. Filtrirati smešu; sakupiti filtrat; i koncentrovati bezbojni filtrat pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao tamno, gusto ulje sa oko 72 % čistoće (54.2 g, 85 %). LC/MS (ESI): 132 [M+H]+.
Priprema 12
(±)-(Metil 3,3-dimetil-1-[4-(trifluorometil)fenil]piperidin-4-karboksilat
[0069]
[0070] Dodati K2CO3(460 mg, 3.33 mmol) smeši metil 3,3-dimetilpiperidin-4-karboksilat hidrohlorida (300 mg, 1.44 mmol), 1-fluoro-4-(trifluorometil)benzena (475 mg, 2.89 mmol) i DMSO (2 mL). Mešati rezultujuću smešu na 130°C 2 dana. Ohladiti smešu do sobne temperature i mešati 3 dana. Podvrgnuti rezultujući materijal reverzno-faznoj flash hromatografiji na C18 silika gelu, eluiranjem sa gradijentom od 10 % do 100 % acetonitrila (0.1 % mravlja kiselina) u vodi (0.1 % mravlja kiselina), da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuto ulje (113 mg, 25 %). MS (m/z): 316 (M H)+.
Priprema 13
(±)-3,3-Dimetil-1-[4-(trifluorometil)fenil]piperidin-4-karboksilna kiselina.
[0071]
[0072] Dodati 2M vodenog rastvora NaOH (1 mL, 2 mmol) smeši metil (±)-3,3-dimetil-1-[4-(trifluorometil)fenil]piperidin- 4-karboksilata (113 mg, 0.36 mmol), MeOH (1 mL), i THF (5 mL). Mešati rezultujuću smešu na 50 °C preko noći. Ohladiti smešu do sobne temperature, i dodati HCl (33 tež% u vodi) do pH smeše 3. Koncentrovati smešu pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca sa 88 % čistoće (123 mg, 99 % prinos). MS (m/z): 302 (M H)+.
Priprema 14
(±)-3,3-Dimetil-1-[5-(trifluorometil)pirimidin-2-il]piperidin-4-karboksilna kiselina
[0073]
[0074] Dodati trietilamin (7.65 mL, 54.9 mmol) smeši (±)-metil 3,3-dimetilpiperidin-4-karboksilat hidrohlorid (8.55 g, 41.2 mmol), 2-hloro-5-(trifluorometil)pirimidin (5.0 g, 27.4 mmol), i acetonitril (67 mL). Zagrevati smešu u mikrotalasnoj do 180 °C 1 čas; zatim ohladiti smešu do sobne temperature; i koncentrovati pod sniženim pritiskom. Dodati MeOH (40 mL), THF (80 mL), i 2 M vodeni rastvor NaOH (40 mL, 80 mmol). Mešati rezultujuću smešu 2 dana na 50 °C. Dodati 2 M vodenog rastvora NaOH (45 mL, 90 mmol) i mešati rezutlujuću smešu 4 časa na 50 °C. Ohladiti smešu do sobne temperature, i zatim dodati HCl (33 tež% u vodi) do pH 3. Koncentrovati pod sniženim pritiskom. Razblažiti sa 1 N vodenim rastvorom HCl (100 mL) i ekstrahovati sa EtOAc (2 x 100 mL). Isprati kombinovane organske ekstrakte sa fiziološkim rastvorom (100 mL); osušiti preko Na2SO4; filtrirati; sakupiti filtrat; i koncentrovati pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (7.60 g, 61 %). MS (m/z): 302 (M H)+.
Priprema 155,8-Dimetilhinolin-1-oksid
[0075]
[0076] Dodati 3-hloroperoksibenzoevu kiselinu (5.96 g, 24.1 mmol) smeši 5,8-dimetilhinolina (2 g, 12.1 mmol) i DCM (80 mL) održavanoj na 0 °C. Nakon 1 časa, dodati Na2SO4(5 g) i filtrirati smešu. Sakupiti filtrat. Mešati rezultujuću smešu na sobnoj temperaturi preko noći. Razblažiti sa DCM (100 mL); isprati sa 1 N vodenim rastvorom NaOH (3 x 50 mL); osušiti preko Na2SO4; filtrirati; sakupiti filtrat; i koncentrovati do sušenja pod sniženim pritiskom. Podvrgnuti rezultujući sirovi materijal reverzno-faznoj flash hromatografiji na C18 silika gelu, eluiranjem sa gradijentom od 15 % do 70 % acetonitrila (10 mM amonijum bikarbonat) u vodi (10mM amonijum bikarbonat) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (372 mg, 18 %). MS (m/z): 327 (M H)+.
Priprema 16
(±)-Metil 1-(5,8-dimetil-2-hinolil)-3,3-dimetil-piperidin-4-karboksilat.
[0077]
[0078] Dodati N,N-diizopropiletilamin (2.02 mL, 11.6 mmol) i PyBroP (1.75 g, 3.75 mmol) smeši (±)-metil 3,3-dimetilpiperidin-4-karboksilat hidrohlorida (600 mg, 2.89 mmol), 5,8-dimetilhinolin-1-oksida (678 mg, 3.91 mmol), i DCM (15 mL). Mešati rezultujuću smešu na sobnoj temepraturi 3 dana. Podvrgnuti sirovu reakciju reverzno faznoj flash hromatografiji na C18 silika gelu, eluiranjem sa gradijentom od 10% to 100% acetonitrila (0.1% mravlja kiselina) u vodi (0.1% mravlja kiselina). Kombinovati frakcije koje sadrže željeni proizvod i koncentrovati pod vakuumom do približno 30 mL zapremine. Podesiti pH do 6 sa dodatkom 1N vodenog rastvora NaOH. Ekstrahovati vodeni rastvor sa EtOAc (2 x 30 mL), isprati sa pH 6 vodenim rastvorom pufera (4 x 30 mL), osušiti preko MgSO4; filtrirati; i koncentrovati pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (166 mg, 18%). MS (m/z): 327 (M H)+.
Priprema 17
(±)-1-(5,8-Dimetil-2-hinolil)-3,3-dimetil-piperidin-4-karboksilna kiselina.
[0079]
[0080] Kombinovati smešu metil (±)-1-(5,8-dimetil-2-hinolil)-3,3-dimetil-piperidin-4-karboksilata (166 mg, 0.51 mmol), MeOH (0.1 mL), THF (0.5 mL), i 1 M vodenog rastvora NaOH (2.5 mL, 2.5 mmol) u sudu za mikrotalasnu. Zagrevati rezultujuću smešu na 120 °C 2 časa u mikrotalasnom reaktoru. Ohladiti smešu do sobne temeprature i dodati 1 N vodeni rastvor HCl do pH 6. Ekstrahovati sa CHCl3(2 x 25 mL); osušiti preko Na2SO4; filtrirati; sakupiti filtrat; i koncentrovati pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (135 mg, 85 %). MS (m/z): 312 (M H)+.
Priprema 18
(±)-Metil 1-(8-hloro-2-hinolil)-3,3-dimetil-piperidin-4-karboksilat.
[0081]
[0082] Dodati K2CO3(1.07 g, 7.75 mmol) smeši metil (±)-3,3-dimetilpiperidin-4-karboksilat hidrohlorida (700 mg, 3.37 mmol), 2,8-dihlorohinolina (876 mg, 4.38 mmol), i DMSO (4.5 mL). Mešati rezultujuću smešu na 130 °C preko noći. Ohladiti smešu do sobne temperature; filtrirati da bi se uklonile čvrste supstance; razblažiti sa vodom (5 mL); i ekstrahovati sa EtOAc (4 x 20 mL). Isprati kombinovane organske ekstrakte sa vodom (20 mL) zatim fiziološkim rastvorom (20 mL). Osušiti organske ekstrakte preko MgSO4; filtrirati; sakupiti filtrat; i koncentrovati pod sniženim pritiskom. Podvrgnuti rezultujući materijal flash hromatografiji na silika gelu, eluiranjem sa gradijentom od 0 % do 40 % EtOAc u heksanima, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.1 g, 98 %). MS (m/z): 332 (M H)+.
Priprema 19
(±)-1-(8-hloro-2-hinolil)-3,3-dimetil-piperidin-4-karboksilna kiselina
[0083]
[0084] Kombinovati smešu (±)-metil 1-(8-hloro-2-hinolil)-3,3-dimetil-piperidin-4-karboksilata (1.1 g, 3.3 mmol), MeOH (0.8 mL), THF (3.3 mL), i 1 M vodenog rastvora NaOH (3.3 mL, 17 mmol) u mikrotalasnom sudu. Zagrevati rezultujuću smešu na 120 °C 2 časa u mikrotalasnoj. Ohladiti smešu do sobne temperature i zatim dodati 5 N vodeni rastvor HCl do pH 6. Ekstrahovati smešu sa EtOAc (3 x 10 mL). Kombinovati organske ekstrakte; osušiti preko Na2SO4; filtrirati; sakupiti filtrat; i koncentrovati pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (815 mg, 77 %). MS (m/z): 318 (M H)+.
Priprema 20
Metil 4-anilino-2,5-dihidrofuran-3-karboksilat
[0085]
[0086] Dodati p-toluenesulfonsku kiselinu (500 mg, 3.16 mmol) smeši (±)-metil 4-oksotetrahidrofuran-3-karboksilata (6.6 g, 45.8 mmol), anilina (4.3 mL, 47.2 mmol) i toluena (70 mL). Opremiti reakcioni sud sa Dean-Stark zamkom i zagrevati do 140 °C. Mešati rezultujuću smešu na sobnoj temperaturi preko noći. Zagrevati reakciju do 140 °C i mešati 2 časa. Ohladiti smešu i dodati dietil etar (100 mL) i vodu (100 mL). Ekstrahovati smešu sa dietil etrom (3 x 50 mL); osušiti preko MgSO4; filtrirati; sakupiti filtrat; i koncentrovati pod sniženim pritiskom. Podvrgnuti rezultujući sirovi materijal flash hromatografiji na silika gelu, eluiranjem sa gradijentom od 0 % do 100 % EtOAc u heptanu, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (6.7 g, 67 %). MS (m/z): 220 (M H)+.
Priprema 21
(±)-Metil-3-(jodometil)-4-fenilimino-tetrahidrofuran-3-karboksilat
[0087]
[0088] Dodati rastvor (±)-metil 4-anilino-2,5-dihidrofuran-3-karboksilata (3.6 g, 16.4 mmol) i 18-crown-6 (4.8 g, 18 mmol) u toluenu (15 mL) smeši kalijum terc-butoksida (2.0 g, 17.8 mmol) i toluena (15 mL). Mešati rezultujuću smešu na sobnoj temepraturi 30 minuta. Dodati dijodometan (4 mL) i mešati reakciju na sobnoj temepraturi preko noći. Dodati vodu (50 mL) i ekstrahovati sa dietil etrom (2 x 50 mL). Sakupiti organske ekstrakte i isprati ih sa fiziološkim rastvorom (50 mL). Osušiti organske ekstrakte preko MgSO4; filtrirati; sakupiti filtrat; i koncentrovati pod sniženim pritiskom. Podvrgnuti rezultujući sirovi materijal flash hromatografiji na on silika gelu, eluiranjem sa gradijentom od 0 % do 60 % EtOAc u heptanu, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.0 g, 17 %). MS (m/z): 359 (M H)+.
Priprema 22
(±)-Metil 5-oksotetrahidropiran-3-karboksilat
[0089]
[0090] Zagrejati smešu tri-n-butilkalaj hidrida (1.12 mL, 4.18 mmol), 2,2’-azobis(2-metilpropionitrila) (35 mg, 0.21 mmol) i toluena (10 mL) do refluksa. Dodati rastvor (±)-metil-3-(jodometil)-4-fenilimino-tetrahidrofuran-3- karboksilata (1.0 g, 2.78 mmol) u toluenu (50 mL) u kapima tokom tri časa. Mešati rezultujuću smešu na refluksu 3 časa. Koncentrovati reakciju pod sniženim pritiskom. Podvrgnuti rezultujući sirovi materijal flash hromatografiji na silika gelu, eluiranjem sa gradijentom od 0 % do 80 % EtOAc u heptanu, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.37 g, 84 %).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.09-3.99 (m, 4H), 3.72 (s, 3H), 3.16 (m, 1H), 2.82 (dd, J= 7.2, 16.9 Hz, 1H), 2.66 (dd, J= 6.3, 16.9 Hz, 1H).
Priprema 23
(±)-Metil trans-5-(benzilamino)tetrahidropiran-3-karboksilat
[0091]
[0092] Dodati natrijum triacetoksiborohidrid (0.96 g, 4.53 mmol) smeši (±)-metil 5-oksotetrahidropiran-3- karboksilata (0.33 g, 2.08 mmol), benzilamina (0.31 mL, 2.84 mmol) i 1,2-dihloroetana (5 mL). Mešati rezultujuću smešu na sobnoj temperaturi 2.5 časa. Dodati zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata (10 mL); ekstrahovati sa DCM (3 x 10 mL); razdvojiti organski sloj; isprati sa fiziološkim rastvorom (10 mL); osušiti preko MgSO4; filtrirati; sakupiti filtrat; i koncentrovati pod sniženim pritiskom. Podvrgnuti rezultujući sirovi materijal flash hromatografiji na silika gelu, eluiranjem sa gradijentom od 0 % do 60 % EtOAc u heptanu, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.085 g, 16 % prinos). MS (m/z): 250 (M H)+.
Priprema 24
(±)-Metil trans-5-aminotetrahidropiran-3-karboksilat
[0093]
[0094] Dodati 10 % paladijum na ugljeniku (0.07 g, 0.66 mmol) smeši (±)-metil trans-5-(benzilamino)tetrahidropiran-3-karboksilata (0.085 g, 0.34 mmol) i etanola (8 mL). Pročistiti smešu sa vodonikom i mešati rezultujuću smešu na sobnoj temperaturi pod vodonikom (1 atm) preko noći. Filtrirati smešu i koncentrovati pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.045 g, 83 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.82-3.77 (m, 2H), 3.68 (m, 4H), 3.38-3.31 (m, 1H), 3.11-3.08 (m, 1H), 2.85-2.80 (m, 1H), 2.17-2.11 (m, 1H), 1.78-1.71 (m, 3H).
Priprema 25
(±)-Metil trans-5-[[(4S)-3,3-dimetil-1-(8-metil-2-hinolil)piperidin-4-karbonil]amino]tetrahidro piran -3-karboksilat
[0095]
[0096] Dodati EDCI (0.087 g, 0.45 mmol) smeši (-)-(4S)-3,3-dimetil-1-(8-metil-2-hinolil)piperidin-4-karboksilne kiseline (0.087 g, 0.29 mmol), (±)-metil-trans-5-aminotetrahidropiran-3-karboksilata (0.045 g, 0.28 mmol), HOBT (9 mg, 0.06 mmol), trietilamina (0.15 mL, 1.08 mmol), u DCM (5 mL). Mešati rezultujuću smešu na sobnoj temepraturi 3 časa. Podvrgnuti rezultujuću smešu flash hromatografiji na silika gelu, eluiranjem sa gradijentom od 5 % do 100 % EtOAc u heptanu, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.085 g, 66 %). MS (m/z): 439 (M H)+.
Priprema 26
(±)-Metil trans-3-(dibenzilamino)cikloheksanekarboksilat
[0097]
[0098] Dodati kalijum karbonat (3.53 g, 25.6 mmol) i benzil bromid (1.9 mL, 15.9 mmol) smeši (±)-metiltrans- 3-aminocikloheksanekarboksilat (1.07 g, 6.8 mmol) u acetonitrilu (40 mL). Zagrevati rezultujuću smešu do 80 °C i mešati 5 časa. Ohladiti smešu i dodati acetonitril (40 mL). Filtrirati preko dijatomejske zemlje i koncentrovati filtrat pod sniženim pritiskom. Podvrgnuti rezultujući sirovi materijal flash hromatografiji na silika gelu, eluiranjem sa gradijentom od 0 % do 20 % EtOAc u heksanima, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.6 g, 70 %). MS (m/z): 338 (M H)+.
Priprema 27
(±)-2-[trans-3-(Dibenzilamino)cikloheksil]propan-2-ol
[0099]
[0100] Dodati metilmagnezijum bromid (3.0 M rastvor u dietil etru, 16 mL, 48 mmol) smeši (±)-metil trans-3-(dibenzilamino)cikloheksanekarboksilata (1.6 g, 4.7 mmol) i THF (50 mL), održavanom na 0 °C. Dozvoliti da se reakcija zagreje do sobne temperature i mešati preko noći. Dodati vodu (25 mL) i filtrirati kroz dijatomejsku zemlju. Sakupiti vodeni filtrat. Ekstrahovati rezultujući vodeni materijal sa EtOAc (50 mL). Sakupiti organske ekstrakte; osušiti preko Na2SO4; filtrirati; sakupiti filtrat; i koncentrovati pod sniženim pritiskom. Dodati EtOAc (50 mL); isprati sa zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl (2 x 25 mL); osušiti preko Na2SO4; filtrirati; sakupiti filtrat; i koncentrovati pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.1 g, 69 %). MS (m/z): 338 (M H)+.
Priprema 28
2-[(1S,3S)-3-(Dibenzilamino)cikloheksil]propan-2-ol
[0101]
[0102] Rastvoriti (±)-2-[trans-3-(dibenzilamino)cikloheksil]propan-2-ol (1.1 g, 3.26 mmol) u etanolu (13 mg/mL). Podvrgnuti materijal hiralnoj SFC (Chiralpak IA, 2 cm x 15 cm) korišćenjem 12 % (0.1 % dimetiletilamina u i-PrOH) u CO2(scf)kao pokretne faze na 220 nm i stopi protoka od 70 mL/minut. Sakupiti i kombinovati prvu frakciju da se eluira i koncentrovati pod sniženim pritiskom, da bi se obezbedilo jedinjenje iz naslova (0.54 g, 49 %), ee = >99 %. MS (m/z): 338 (M H)+. SFC Analitički postupak (Chiralpak IA, (15 cm x 0.46 cm) korišćenjem 10 % (0.1 % dimetiletilamin u i-PrOH) u CO2(scf)kao pokretne faze 220 nm i stopi protoka od 3 mL/minut).
Priprema 292-[(1S,3S)-3-Aminocikloheksil]propan-2-olhidrohlorid
[0103]
[0104] Dodati paladijum hidroksid (20% na ugljeniku, 0.51 g, 3.7 mmol) smeši 2-[(1S,3S)-3-(dibenzilamino)cikloheksil]propan-2-ola (0.54 g, 1.6 mmol) u MeOH (20 mL) u Parr™ šejker sudu. Pročistiti i staviti pod pritisak sa vodonikom do 414 kPa. Šejkirati smešu 4 dana na sobnoj temperaturi. Filtrirati smešu preko dijatomejske zemlje i koncentrovati filtrat pod sniženim pritiskom. Razblažiti smešu u dietil etru (25 mL) i DCM (25 mL). Dodati HCl (4.0 M rastvor u 1,4-dioksanu, 0.8 mL) i koncentrovati pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.24 g, 77 %). MS (m/z): 158 (M H)+.
Priprema 30
terc-Butil N-[(1RS,2RS,4SR,6RS)-6-(hidroksimetil)norbornan-2-il]karbamat
[0105]
[0106] Kombinovati (acetilacetonato)dikarbonilrodijum (10 mg, 0.03 mmol), 1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen (27 mg, 0.05 mmol), metil biciklo[2.2.1]hept-2-en-5-karboksilat (2.5 g, 11.9 mmol) i terc-butanol (25 mL) u PARR™ autoklavu sa mehaničkom mešalicom. Proćistiti i staviti pod pritisak sud sa Syngas (1:1 smeša ugljen monoksida i vodonika, 310 kPa). Mešati preko noći. Koncentrovati smešu pod sniženim pritiskom. Razblažiti u DCM (29 mL) i MeOH (2.9 mL). Dodati natrijum borhidrid (0.26 g, 6.9 mmol) i mešati 20 min na sobnoj temperaturi. Dodati DCM (60 mL) i isprati sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum karbonata (2 x 25 mL) i fiziološkim rastvorom (25 mL). Osušiti organski sloj preko Na2SO4; filtrirati; sakupiti filtrat; i koncentrovati pod sniženim pritiskom. Podvrgnuti rezultujući sirovi materijal flash hromatografiji na silika gelu eluiranjem sa rastvorom od 30 % DCM, 30 % terc-butil metil etra i 40 % heksana, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao smeša dijastereomera (0.58 g, 21 %).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.71-4.59 (m, 1H), 3.92-3.81 (m, 1H), 3.46-3.45 (m, 2H), 2.36 (d, J= 3.0 Hz, 1H), 2.21-2.05 (m, 3H), 1.55 (br s, 1H), 1.49-1.25(m, 12H), 1.16-1.09 (m, 1H), 0.68 (ddd, J= 12.9, 4.5, 2.4 Hz, 1H).
Priprema 31
[(1RS,2RS,4SR,6RS)-6-Aminonorbornan-2-il]metanol hidrohlorid
[0107]
[0108] Dodati HCl (4.0 M rastvor u 1,4-dioksanu, 2.1 mL, 8.3 mmol) smeši terc-butil N-[(1RS,2RS,4SR,6RS)- 6-(hidroksimetil)norbornan-2-il]karbamata (0.2 g, 0.83 mmol) u DCM (8 mL) održavanoj na 0 °C. Omogućiti rezultujućoj smeši da se zagreje do sobne temperature i mešati 3 časa. Koncentrovati smešu pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.15 g, 100%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.17-8.02 (m, 3H), 4.93-4.90 (br, 1H), 3.47-3.45 (m, 1H), 3.19-3.15 (m, 2H), 2.31 (m, 1H), 2.14-2.12 (m, 1H), 2.01-1.94 (m, 1H), 1.92-1.88 (m, 1H), 1.44-1.35 (m, 2H), 1.22 (m, 1H), 1.04-0.98 (m, 2H).
Priprema 32
terc-Butil ((cis-4-((terc-butoksikarbonil)amino)cikloheksil)metil)(sulfamoil)karbamat
[0109]
[0110] Dodati diizopropil azodikarboksilat (1.6 mL, 7.8 mmol) smeši terc-butil cis-4-(hidroksimetil)cikloheksilkarbamata (1.5g, 6.5 mmol), terc-butil N-sulfamoilkarbamat (1.9 g, 9.8 mmol), trifenilfosfin (2.1 g, 7.8 mmol), i EtOAc (33 mL). Mešati preko noći na sobnoj temperaturi. Dodati vodu (50 mL); ekstrahovati sa EtOAc (2 x 50 mL); sakupiti organske ekstrakte. Isprati organske ekstrakte sa fiziološkim rastvorom (25 mL); osušiti preko MgSO4; filtrirati; sakupiti filtrat; i koncentrovati pod sniženim pritiskom. Podvrgnuti rezultujući sirovi materijal flash hromatografiji na silika gelu, eluiranjem sa gradijentom od 10 % do 80 % EtOAc u heksanu, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.78 g, 67 %). MS (m/z): 430 (M Na)+.
Priprema 33
cis-1-amino-4-[(sulfamoilamino)metil]cikloheksan hidrohlorid
[0111]
[0112] Dodati HCl (4.0 M rastvor u 1,4-dioksanu, 15 mL, 60 mmol) terc-butil ((cis-4-((tercbutoksikarbonil)amino)cikloheksil)metil)(sulfamoil)karbamatu (1.78 g, 4.37 mmol). Mešati rezultujuću smešu preko noći na sobnoj temperaturi. Koncentrovati pod sniženim pritiskom.
Razblažiti u MeOH (10 mL) i dodati u kapima dietil etar (150 mL) uz snažno mešanje. Sakupiti rezultujući beli talog vakuum filtracijom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.68 g, 56 %). MS (m/z): 208 (M H)+.
Priprema 34
Metil (1RS,3RS)-3-((S)-3,3-dimetil-1-(8-metilhinolin-2-il)piperidin-4-karboksamido)ciklo heksan-1-karboksilat
[0113]
[0114] Dodati trietilamin (0.9 mL, 7 mmol) smeši (-)-(4S)-3,3-dimetil-1-(8-metil-2-hinolil)piperidin-4- karboksilne kiseline (0.8 g, 3 mmol), (±)-metil trans-3-aminocikloheksanekarboksilat hidrohlorida (0.5 g, 3 mmol), BOP (2.0 g, 3 mmol) i DMF (5 mL). Mešati rezultujuću smešu na sobnoj temperaturi preko noći. Dodati zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata (20 mL) i ekstrahovati sa EtOAc (2 x 25 mL). Sakupiti organske ekstrakte; isprati sa fiziološkim rastvorom (25 mL); osušiti preko MgSO4; filtrirati; sakupiti filtrat; i koncentrovati pod sniženim pritiskom. Podvrgnuti rezultujući sirovi materijal flash hromatografiji na silika gelu, eluiranjem sa gradijentom od 10 % do 90 % EtOAc u heksanima, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.00 g, 80 %). MS (m/z): 438 (M H)+.
Primer 1
(S)-N-((2S,4S)-2-(Hidroksimetil)tetrahidro-2H-piran-4-il)-3,3-dimetil-1-(8-metilhinolin-2-il)piperidin-4-karboksamid
[0115]
[0116] Dodati benzotriazol-1-il-oksitripirolidinofosfonijum heksafluorofosfat (153 g, 293 mmol) kao gustu suspenziju u DMF (152 mL) hladnoj smeši (10 °C) (-)-(4S)-3,3-dimetil-1-(8-metil-2-hinolil)piperidin-4-karboksilne kiseline (76.0 g, 245 mmol), ((2S,4S)-4-aminotetrahidro-2H-piran-2-il)metanol hidrohlorida (72 % čistoća, 57.37 g, 246 mmol), trietilamina (153 mL, 1.10 mol), i DMF (380 mL) uz održavanje unutrašnje temperature reakcije ispod 20 °C. Nakon toga dozvoliti da se smeša zagreje do sobne temperature i mešati je 30 minuta. Sipati smešu u ledenu vodu (1.5 L) uz mešanje. Ekstrahovati smešu sa DCM (2 x 600 mL) i isprati kombinovane organske ekstrakte sa polu-zasićenim vodenim rastvorom NaCl (1.0 L). Osušiti organski rastvor preko MgSO4; filtrirati; sakupiti filtrat; i koncentrovati filtrate pod sniženim pritiskom da bi se dobila vlažna čvrsta supstanca. Triturisati čvrstu vlažnu supstancu sa vodom i izolovati čvrstu supstancu filtracijom. Triturisati ponovo čvrstu supstancu sa vodom (1.5 L) i izolovati čvrstu supstancu filtracijom. Isprati čvrstu supstancu sa vodom (2 x 250 mL). Staviti po strani ovu prvu seriju izolovane čvrste supstance. Sakupiti vodena ispiranja; ekstrahovati sa DCM (2 x 800 mL); kombinovati DCM ekstrakte. Dodati prvu seriju izolovanih čvrstih supstanci kombinovanim DCM ekstraktima i isprati sa vodenim rastvorom HCl (2.5 M, 2 x 800 mL). Razdvojiti vodeni sloj i dodati 50% vodeni rastvor NaOH vodenom sloju do pH 12 da bi se indukovalo taloženje. Filtrirati smešu da bi se prikupila rezultujuća čvrsta supstanca. Isprati čvrstu supstancu sa vodom (2 x 300 mL). Osušiti čvrstu supstancu u vakuum peći na 50 °C 3 časa. Rastvoriti čvrstu supstancu u MeOH (1.2 L); dodati merkaptopropil mezopornu silika smolu za rekuperovanje (1.2 mmol/g, 715 m2/g, 54 µm prosečna veličina čestica); i mešati na 50 °C preko noći. Filtrirati da bi se uklonile čvrste supstance sakupljanjem filtrata. Isprati čvrste supstance sa 1:1 CH2Cl2:MeOH (2 x 500 mL). Kombinovati filtrate i koncentrovati pod sniženim pritiskom da bi se dobila bela čvrsta supstanca. Triturisati čvrstu supstancu sa TBME (1.5 L), i sakupiti čvrste supstance. Kristalizovati čvrstu supstancu iz vrućeg EtOH (1.8 L). Osušiti čvrstu supstancu u vakuum peći na 50 °C 2.5 časa da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao kristalna, bela čvrsta supstanca (76.7 g, 76 %). LC/MS (ESI): 412 [M+H]+.
[0117] Sledeći Primeri u Tabeli 1 mogu se pripremiti suštinski procedurom iz Pripreme 34 korišćenjem odgovarajućeg početnog amina umesto (±)-metil-trans-3-aminocikloheksankarboksilat hidrohlorida i odgovarajuće početne karboksilne kiseline umesto (-)-(4S)-3,3-dimetil-1-(8-metil-2-hinolil)piperidin-4-karboksilne kiseline.
Tabela 1.
[0118] Postupak prečišćavanja (Prečišćavanje - Postupak): A= Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom normalne faze na silika gelu eluiranjem sa gradijentom EtOAc u heksanima. B= Sirovi proizvod je prečišćen C18 reverzno faznom hromatografijom na koloni eluiranjem sa gradijentom od acetonitrila i vode. C= Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na hiralnoj koloni sa Chiralpak AS-H, 21 x 150 mm) korišćenjem 15% IPA u CO2kao pokretna faza na stopi protoka od 70 mL/min.
Primer 13
(4S)-N-[(1S,3S)-3-(1-Hidroksi-1-metil-etil)cikloheksil]-3,3-dimetil-1-(8-metil-2-hinolil)piperidin-4-karboksamid
[0120] Dodati N,N-diizopropiletilamin (0.7 mL, 4 mmol) i HATU (0.31 g, 0.8 mmol) smeši (-)-(4S)-3,3-dimetil-1-(8-metil-2-hinolil)piperidin-4-karboksilne kiseline (0.2 g, 0.67 mmol), 2-[(1S,3S)-3-aminocikloheksil]propan-2-ol hidrohlorid (0.13 g, 0.67 mmol) i DMF (5 mL). Mešati rezultujuću smešu na sobnoj temepraturi 45 minuta. Podvrgnuti rezultujuću reakcionu smešu reverzno faznoj flash hromatografiji na C18, eluiranjem sa gradijentom od 5 % do 80 % ACN u vodi, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.26 g, 88 %). MS (m/z): 438 (M H)+.
[0121] Pripremiti sledeće Primere u Tabeli 2 suštinski procedurom za primer 13 korišćenjem odgovarajuće karboksilne kiseline umesto (-)-(4S)-3,3-dimetil-1-(8-metil-2-hinolil)piperidin-4-karboksilne kiseline.
Tabela 2
[0122] Pripremiti sledeće Primere u Tabli 3 suštinski procedurom za Pripremu 25 korišćenjem odgovarajućeg početnog amina umesto metil (±)-trans-5-aminotetrahidropiran-3-karboksilata i odgovarajuće početne karboksilne kiseline umesto (-)-(4S)-3,3-dimetil-1-(8-metil-2-hinolil)piperidin-4-karboksilne kiseline.
Tabela 3.
[0123] Postupci prečišćavanja. A= Sirovi proizvod je prečišćen normal hromatografijom normalne faze na silika gelu eluiranjem sa gradijentom EtOAc u heksanima. C= Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na hiralnoj koloni korišćenjem hiralne SFC (Chiralcel OD-H, 21 x 250 mm) korišćenjem 25% EtOH (0.2% IPAm) u CO2(scf)kao pokretna faza na stopi protoka od 70 mL/min.
Primer 18
(S)-N-((3RS,5SR)-5-(Hidroksimetil)tetrahidro-2H-piran-3-il)-3,3-dimetil-1-(8-metilhinolin-2-il)piperidin-4-karboksamid
[0125] Dodati 5 N vodeni rastvor NaOH (0.5 mL) smeši metil (3RS,5RS)-5-((4S)-3,3-dimetil-1-(8-metil-2-hinolil)piperidin-4-karbonil]amino]tetrahidropiran-3-karboksilata (0.085 g, 0.19 mmol), MeOH (2 mL), i THF (2 mL). Mešati rezultujuću smešu na sobnoj temperaturi 1 čas. Dodati 5 N vodeni rastvor HCl (0.5 mL) i koncentrovati. Razblažiti sirovu smešu u THF (6 mL) i ohladiti do 0 °C. Dodati 2 M rastvor boran-THF kompleksa u THF (0.15 mL, 0.3 mmol) u kapima. Polako zagrevati smešu do sobne temperature i mešati na sobnoj temperaturi preko noći. Dodati zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata (10 mL) i ekstrahovati smešu sa EtOAc (3 x 10 mL). Sakupiti organske ekstrakte; isprati sa fiziološkim rastvorom (10 mL); osušiti preko MgSO4; filtrirati; sakupiti filtrat; i koncentrovati pod sniženim pritiskom. Podvrgnuti rezultujući sirovi materijal flash hromatografiji na silika gelu eluiranjem sa 100 % EtOAc da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.046 g, 59 % prinos u 2 koraka). MS (m/z): 411 (M H)+.
Primer 19
Metil (1RS,3RS)-3-((S)-3,3-Dimetil-1-(8-metil-2-hinolil)piperidin-4-karbonil]amino]cikloheksan karboksilna kiselina
[0126]
[0127] Dodati 5 N vodeni rastvor NaOH (2.2 mL) smeši metil (±)-trans-[[(4S)-3,3-dimetil-1-(8metil-2-hinolil)piperidin-4-karbonil]amino]cikloheksan-3-karboksilata (1.0 g, 2.2 mmol), MeOH (2 mL), i THF (8 mL). Mešati rezultujuću smešu na sobnoj temperaturi preko noći. Dodati 5 N vodeni rastvor HCl (2.2 mL) da bi se podesila pH do 6.5. Ekstrahovati sa EtOAc (2 x 25 mL) i sakupiti organske ekstrakte. Isprati organske ekstrakte sa fiziološkim rastvorom (25 mL); osušiti preko MgSO4; filtrirati; sakupiti filtrat; i koncentrovati pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.935 g, 98 %). MS (m/z): 424 (M H)+.
Primer 20
(S)-N-((1RS,3RS)-3-(Etilkarbamoil)cikloheksil)-3,3-dimetil-1-(8-metilhinolin-2-il)piperidin-4-karboksamid
[0128]
[0129] Dodati trietilamin (0.7 mL, 5 mmol) smeši (±)-trans-3-[[(4S)-3,3-dimetil-1-(8-metil-2-hinolil)piperidin-4-karbonil]amino]cikloheksanekarboksilne kiseline (0.9 g, 2 mmol), etanamina (2 mL, 3 mmol), BOP (1.0 g, 3 mmol) i DMF (4 mL). Mešati rezultujuću smešu na sobnoj temperaturi 3 časa. Dodati zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata (20 mL). Ekstrahovati rezultujuću smešu sa EtOAc (2 x 50 mL). Sakupiti organske ekstrakte; isprati sa fiziološkim rastvorom (3 x 25 mL); osušiti preko MgSO4; filtrirati; sakupiti filtrat; i koncentrovati pod sniženim pritiskom. Podvrgnuti rezultujući materijal reverzno-faznoj flash hromatografiji na C18 silika gelu, eluiranjem sa gradijentom od 20 % to 80 % acetonitrila (0.1 % mravlja kiselina) u vodi (0.1 % mravlja kiselina), da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.25 g, 30 %). MS (m/z): 450 (M H)+.
Biološke analize
Analiza inhibicije humanog mPGES-1 enzima
[0130] Humani mPGES-1 (Invitrogen™ (Cat# 97002RG, clone ID 6374722)) je subkloniran u pcDNA3.1 i prolazno eksprimiran u 293E ćelijama. Mikrozomi su pripremljeni iz ćelijskog peleta na osnovu objavljenih postupaka (Oullet et al., Purification and characterization of recombinant microsomal prostaglandine E sintase-1, Protein Expression and Purification, 26 pp 489-495 (2002); and Thoren et al., Human Microsomal Prostanglandine E Sintase-1, J. Biol Chem. 278(25) pp 22199-22209 (2003)). Ukratko, peleti su stavljeni u homogenizacioni pufer (15 mM Tris-HCl, pH 8.0; 0.25 M saharoza; 0.1 mM EDTA; 1 mM glutation) i obrađeni ultrazvukom 5 x 30 sekundi na ledu. Homogenat je centrifugiran na 5,0003 g 10 minuta na 4 °C. Frakcija supernatanta je dekatovana i napunjena u Beckman Quick-Seal® epruvete i centrifugirana na 150,000 x g. 90 minuta na 4 °C. Frakcija supernatanta je odbačena dekantovanjem i peleti su resuspendovani u puferu za analizu (10 mM natrijum fosfat, pH 7.0; 10% glicerol; 2.5 mM glutation; Complete Protease Inhibitor Cocktail (Roche)). Koncentracija proteina je određena korišćenjem Pierce Coomassie Plus™ reagensa.
[0131] Za enzimsku analizu, mikrozomi su razblaženi u puferu za analizu i 14 µL/bunarčiću rezultujućeg rastvora je dodat u analitičke ploče sa 384 bunarčića. Ploče sa razblaženjem jedinjenja (Nunc Cat#249944) su generisane na Tecan_MC384™ i 4 µL/bunarčiću su dodati analitičkim pločama. Prostaglandin H2 (PGH2) je razblažen u test puferu neposredno pre upotrebe i 14 µL/bunarčiću je dodato analitičkim pločama. Finalne koncetracije su 6.55 µg/mL mikrozoma i 1.67 µM PGH2. Nakon 1.5 minuta inkubacije na sobnoj temperaturi, 5 µL/bunarčiću od 1 µg/mL SnCl2u 0.5 N HCl je dodato da bi se zaustavila reakcija. Pet µL zaustavljen reakcije je preneto u ploču sa 384 bunarčića koji sadrže 45 µL 0.1% mravlje kiseline, i ploče su uskladištene na -80 °C. Ploče su poslate Agilent Technologies, prethodno Biocius Lifesciences (Wakefield, MA 01880) za standardnu LC/MS analizu PGE2. Podaci su korišćeni da se izračuna IC50(µM). Jedinjenja iz Primera inhibiraju humani mPGES-1 sa IC50µM vrednošću manjom od 100 nM. Jedinjenje iz Primera 1 inhibira humani mPGES-1 sa IC50µM vrednošću od 0.00193, ± 0.00064, n=17. Ovaj rezultat pokazuje da jedinjenje iz Primera 1 je potentni inhibitor mPGES-1 enzima u preparatu izolovanog enzima.
Analiza zasnovana na ćelijama za merenje eikozanoidne selektivnosti
[0132] Ćelijska linija A549 humanog epitelnog karcinoma pluća je dobijena od ATCC (CCL-85) i održavana u Kaighn-ovom F12 medijumu ćelijske kulture 10% fetalnog goveđeg seruma (FBS) (medijum za ploču) pod standardnom 5% CO2vlažnom atmosferom na 37 °C. Ćelije su pasažirane na 1:3 dva puta nedeljno.
[0133] Za analize, ćelije su oslobođene iz boca ispiranjem jednom sa PBS, zatim jednom sa tripsin/EDTA. Nakon 3-5 minuta na 37 °C, ćelije su suspendovane u medijumu za ploče i centrifugirane na 2,000 rpm, 25 °C, 5 minuta. Supernatant je aspiriran i ćelijski pelet je resuspendovan u F12K medijumu za postavljanje na ploče. Broj ćelija je određen brojanjem alikvota ćelija koje su razblažene u PBS i Trypan blue na hemocitometrom. Ćelije su stavljene na ploče na 40,000/bunarčiću u 96 komorne Falcon ploče 24 časa pre tretmana. Jedinjenja su razblažena u DMSO do 100 x finalne koncentracije u Screen Mates epruvetama. Medijum je uklonjen iz ćelija i svež medijum (90 µL/bunarčiću) je dodato ćelijama. Jedinjenjea su dodata sa 1 µL/bunarčiću, n=2, da bi se dobilo za svaku sedam koncentracija. Ćelije su prethodno tretirane sa jedinjenjeima 30 minuta na 37 °C, 5% CO2. Proizvodnja prostaglandina E2 je indukovana dodavanjem rekombinantnog humanog interleukina (rhIL-1β) razblaženog u medijumu za postavljanje na ploču do 10 x finalnog. Alikvot od 10 µL/bunarčiću je dodat da bi se dobila finalna koncentracija rhIL-1β od 0.1 ng/mL. Period tretmana je oko 18 časova. Kondicionirani medijum je premešten u poliproppilenske ploče sa v-dnom. Kondicionirani medijum je analiziran u odnosu na nivoe PGE2 i prostaglandin I2 (PGI2) sa specifičnim imunoenzimskim testom EIAs, prema protokolu proizvođača (Cayman). Ukratko, kondicionirani medijum (1 µL) je dodat u svaki bunarčić ploče sa 96 bunarčića obložene sa antitelom za hvatanje i koji sadrži EIA pufer (49 µL) obezbeđen od strane proizvođača. Trejser je razblažen sa EIA puferom (50 µL). Detekciono antitelo je razblaženo sa EIA puferom (50 µL). Ploča je pokrivena sa adhezivnim filmom za zatvaranje i inkubirana 1 čas na sobnoj temperaturi na orbitalnom šejkeru na 100 rpm. Pufer za ispiranje je razblažen u MILLIPORE prečišćenoj vodi, i ploča je isprana 5 x 350 mL/bunarčiću, korišćenjem ispirača za ploče. Supstrat (Ellman reagens) je razblažen sa MILLIPORE prečišćenom vodom i zatim dodat ploči sa 200 µL/bunarčiću. Nakon približno 90-120 minuta na sobnoj temperaturi na orbitalnom šejkeru na 100 rpm, ploče su očitane na A412 na čitaču ploča. Standardna kriva PGE2 je korišćena za kalibrisanje nepoznatih. Primeri jedinjenja iz Primera 1 inhibira formiranje PGE2 sa IC50od 0.00471 mM ± 0.00301, n=2.
Analiza kompletne humane krvi
[0134] Krv je sakupljena od normalnih donora dobrovoljaca u natrijum heparin VACUTAINER epruvete. Donori su izabrani, delimično, po njihovoj potvrdi da nisu uzimali NSAIDs, aspirin, Celebrex®, ili glukokortikoide u roku od dve nedelje pre donacije. Sve epruverte/donori su pulovani u 250 mL Corning konusne epruvete za centrifugu i 436.5 µL/bunarčiću je distribuirano u polipropilenske ploče sa dubokim bunarčićima. Jedinjenja su razblažena u DMSO do 100 x finalno i 4.5 µL/bunarčiću u duplikatu ili triplikatu je dodato da bi se dobila kriva sa 7 tačaka. Krv je prethodno tretirana sa jedinjenjima na 37 °C, 5% CO2, u vlažnoj atmosferi, pokrivena sa MicroClime Environmental Microplate lid, 30 minuta nakon čega je dodato 9 µL/bunarčić rastvora 5 mg/mL of LPS (Sigma, serotype 0111:B4) u 1 mg/mL BSA/PBS da bi se dobila finalna LPS koncentracija od 100 µg/mL. Ploče su inkubirane 20-24 časa, na 37 °C, 5% CO2, u vlažnoj atmosferi. Ploče su snažno zapečaćene sa poklopcima od aluminijumske folije i ohlađene na ledu oko 1 čas. Zatim su ploče centrifugirane na 1,800 x g, 10 minuta, 4 °C, u Eppendorf 5810R centrifugi. Plazma je uklonjena iz sloja ćelija korišćenjem Rainin L200 sa vrhovima sa sterilnim filterom i preneta na polipropilenske ploče sa v-dnom. Sto mikrolitara je kvantitativno preneto u blokove Costar klaster epruveta i dodato je 400 µL/bunarčiću MeOH stop reagensa i internih standarda, d4-PGE2, d4-PGF2α, i d4-TXA2β. Uzorci su vorteksovani 5 minuta i postavljeni na -20 °C najmanje jedan čas. Uzorci su centrifugirani 10 minuta na 4000 rpm u Eppendorf 5810R.
[0135] Ekstrakcija čvrste faze je izvedena korišćenjem Waters HLB 30 mg/bed ploče sa 96 bunarčića na vakuum cevi: Korak 1, matriks je ispran sa MeOH (1 mL), zatim sa 0.1% mravljom kiselinom u vodi (1 mL); Korak 2, 400 µL uzorka je primenjeno zajedno sa 0.1% mravljom kiselinom u vodi (900 µL) i dozvoljeno je vezivanje u trajanju od 5 minuta; Korak 3, matriks je ispran sa 0.1% mravljom kiselinom u vodi (600 mL), zatim sa 80/20 voda/MeOH (600 µL); Korak 4, proizvodi su eluirani sa 2-500 µL zapreminama EtOAc; Korak 5 uzorci su osušeni pod azotom i rekonstituisani u 75/25 voda/acetonitril sa 0.1% mravljom kiselinom (50 µL). Proizvodi su analizirani sa LC/MS/MS. Primer 1 inhibira formiranje PGE2 u ovoj analizi sa IC50od 0.00205 ± 0.00082, n=11. Ovaj rezultat podržava da Primer 1 inhibira PGE2 sintezu u kompletnoj humanoj krvi.

Claims (10)

  1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje Formule 1:
    naznačeno time da: R1 je H ili -CH3; R je izabran od:
    i G je izabran od:
    i ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  2. 2. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, Formule 2: naznačeno time da: R1 je H ili -CH3; R je izabran od:
    i
    i ili njegova farmaceutska so.
  3. 3. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 ili 2, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time da R je izabran od:
  4. 4. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 3, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time da G je:
  5. 5. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 koje je:
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  6. 6. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 5 naznačeno time da farmaceutski prihvatljiva so je hidrohloridna so.
  7. 7. Farmaceutski prihvatljiva kompozicija koja sadrži jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 6 i najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv nosač, razblaživač, ili ekscipijent.
  8. 8. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 6 za upotrebu u terapiji.
  9. 9. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 6 za upotrebu u tretmanu artritisa ili osteoartritisa.
  10. 10. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 6 za upotrebu u tretmanu bola ili inflamacije povezane sa artritisom ili osteoartritisom. Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Beograd, Kneginje Ljubice 5
RS20200015A 2014-10-29 2015-10-22 Nova metil-piperidin jedinjenja korisna za inhibiciju mikrozomalne prostaglandin e2 sintaze-1 RS59783B1 (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201462072196P 2014-10-29 2014-10-29
EP15791432.6A EP3230278B1 (en) 2014-10-29 2015-10-22 Novel methyl-piperidine compounds useful for inhibiting microsomal prostaglandin e2 synthase-1
PCT/US2015/056960 WO2016069376A1 (en) 2014-10-29 2015-10-22 Novel methyl-piperidine compounds useful for inhibiting microsomal prostaglandin e2 synthase-1

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS59783B1 true RS59783B1 (sr) 2020-02-28

Family

ID=54478248

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20200015A RS59783B1 (sr) 2014-10-29 2015-10-22 Nova metil-piperidin jedinjenja korisna za inhibiciju mikrozomalne prostaglandin e2 sintaze-1

Country Status (26)

Country Link
US (2) US9962375B2 (sr)
EP (1) EP3230278B1 (sr)
JP (1) JP6393830B2 (sr)
KR (1) KR101898829B1 (sr)
CN (1) CN107074829B (sr)
AR (2) AR102362A1 (sr)
AU (1) AU2015339644B2 (sr)
CA (1) CA2963321C (sr)
CL (1) CL2017001017A1 (sr)
CY (1) CY1122534T1 (sr)
DK (1) DK3230278T3 (sr)
EA (1) EA032428B1 (sr)
ES (1) ES2773439T3 (sr)
HR (1) HRP20200216T1 (sr)
HU (1) HUE047895T2 (sr)
JO (1) JO3581B1 (sr)
LT (1) LT3230278T (sr)
MX (1) MX376479B (sr)
NZ (1) NZ730724A (sr)
PL (1) PL3230278T3 (sr)
PT (1) PT3230278T (sr)
RS (1) RS59783B1 (sr)
SI (1) SI3230278T1 (sr)
TW (1) TWI605039B (sr)
WO (1) WO2016069376A1 (sr)
ZA (1) ZA201702198B (sr)

Families Citing this family (42)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TW201627299A (zh) 2014-10-29 2016-08-01 美國禮來大藥廠 用於抑制微粒體前列腺素ｅ合成酶１之新穎羧酸化合物
CN111655253A (zh) 2018-01-09 2020-09-11 杨百翰大学 用于用汉黄芩素治疗疼痛的组合物和方法
CN108558806B (zh) * 2018-05-31 2020-04-17 南京药石科技股份有限公司 一种5-氧代-四氢吡喃-3-羧酸酯的关键中间体及其制备方法
US20210346328A1 (en) * 2018-09-21 2021-11-11 The Johns Hopkins University Compositions and methods for treating metabolic disorders
WO2020263830A1 (en) 2019-06-25 2020-12-30 Gilead Sciences, Inc. Flt3l-fc fusion proteins and methods of use
ES2973832T3 (es) 2019-10-18 2024-06-24 Forty Seven Inc Terapias combinadas para el tratamiento de síndromes mielodisplásicos y leucemia mieloide aguda
JP2022552748A (ja) 2019-10-31 2022-12-19 フォーティ セブン， インコーポレイテッド 抗ｃｄ４７及び抗ｃｄ２０による血液癌の治療
TWI778443B (zh) 2019-11-12 2022-09-21 美商基利科學股份有限公司 Mcl1抑制劑
IL294032A (en) 2019-12-24 2022-08-01 Carna Biosciences Inc Compounds that regulate diacylglycerol kinase
TWI890283B (zh) 2020-02-14 2025-07-11 美商基利科學股份有限公司 結合ccr8之抗體及融合蛋白及其用途
IL297327B2 (en) 2020-05-01 2026-01-01 Gilead Sciences Inc 4,2-dioxopyrimidine compounds CD73 inhibitors
TWI854147B (zh) * 2020-08-21 2024-09-01 南韓商治納輔醫藥科技有限公司 對前列腺素e2受體具有抑制活性的新穎化合物及其用途
TW202302145A (zh) 2021-04-14 2023-01-16 美商基利科學股份有限公司 ＣＤ４７／ＳＩＲＰα結合及ＮＥＤＤ８活化酶Ｅ１調節次單元之共抑制以用於治療癌症
WO2022245671A1 (en) 2021-05-18 2022-11-24 Gilead Sciences, Inc. Methods of using flt3l-fc fusion proteins
JP7686091B2 (ja) 2021-06-23 2025-05-30 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド ジアシルグリセロールキナーゼ調節化合物
AU2022299051B2 (en) 2021-06-23 2025-03-13 Gilead Sciences, Inc. Diacylglyercol kinase modulating compounds
MX2023014762A (es) 2021-06-23 2024-01-15 Gilead Sciences Inc Compuestos moduladores de diacilglicerol quinasa.
JP7651018B2 (ja) 2021-06-23 2025-03-25 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド ジアシルグリセロールキナーゼ調節化合物
AU2022375782B2 (en) 2021-10-28 2026-02-26 Gilead Sciences, Inc. Pyridizin-3(2h)-one derivatives
JP7787991B2 (ja) 2021-10-29 2025-12-17 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド Ｃｄ７３化合物
US12122764B2 (en) 2021-12-22 2024-10-22 Gilead Sciences, Inc. IKAROS zinc finger family degraders and uses thereof
KR20240123836A (ko) 2021-12-22 2024-08-14 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 이카로스 아연 핑거 패밀리 분해제 및 이의 용도
MX2024008003A (es) 2021-12-28 2024-07-12 Nippon Shinyaku Co Ltd Compuesto de indazol y composicion farmaceutica.
TW202340168A (zh) 2022-01-28 2023-10-16 美商基利科學股份有限公司 Ｐａｒｐ７抑制劑
WO2023178181A1 (en) 2022-03-17 2023-09-21 Gilead Sciences, Inc. Ikaros zinc finger family degraders and uses thereof
KR20240165995A (ko) 2022-03-24 2024-11-25 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 Trop-2 발현 암의 치료를 위한 병용요법
TWI876305B (zh) 2022-04-05 2025-03-11 美商基利科學股份有限公司 用於治療結腸直腸癌之組合療法
CR20240451A (es) 2022-04-21 2024-12-04 Gilead Sciences Inc Compuestos de modulación de kras g12d
KR20250028371A (ko) 2022-07-01 2025-02-28 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 Cd73 화합물
WO2024064668A1 (en) 2022-09-21 2024-03-28 Gilead Sciences, Inc. FOCAL IONIZING RADIATION AND CD47/SIRPα DISRUPTION ANTICANCER COMBINATION THERAPY
AU2023409398A1 (en) 2022-12-22 2025-06-05 Gilead Sciences, Inc. Prmt5 inhibitors and uses thereof
AU2024252725A1 (en) 2023-04-11 2025-11-06 Gilead Sciences, Inc. Kras modulating compounds
CR20250446A (es) 2023-04-21 2025-12-02 Gilead Sciences Inc Inhibidores de prmt5 y usos de los mismos
AU2024306338A1 (en) 2023-06-30 2026-01-08 Gilead Sciences, Inc. Kras modulating compounds
CN121620513A (zh) 2023-07-26 2026-03-06 吉利德科学公司 Parp7抑制剂
KR20260046403A (ko) 2023-07-26 2026-04-07 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 Parp7 저해제
US20250109147A1 (en) 2023-09-08 2025-04-03 Gilead Sciences, Inc. Kras g12d modulating compounds
US20250101042A1 (en) 2023-09-08 2025-03-27 Gilead Sciences, Inc. Kras g12d modulating compounds
US20250154172A1 (en) 2023-11-03 2025-05-15 Gilead Sciences, Inc. Prmt5 inhibitors and uses thereof
WO2025137640A1 (en) 2023-12-22 2025-06-26 Gilead Sciences, Inc. Azaspiro wrn inhibitors
WO2025245003A1 (en) 2024-05-21 2025-11-27 Gilead Sciences, Inc. Prmt5 inhibitors and uses thereof
US20260098049A1 (en) 2024-08-12 2026-04-09 Gilead Sciences, Inc. Kras modulating compounds

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6355010B1 (en) * 1999-03-31 2002-03-12 Coaxia, Inc. Intravascular spinal perfusion and cooling for use during aortic surgery
EP1627869B1 (en) * 2003-05-20 2012-05-02 Ajinomoto Co., Inc. Vanilloid receptor modulators
US20050239921A1 (en) * 2004-04-27 2005-10-27 Birmingham John N Preparation of organic additive-treated, pyrogenic silica-encapsulated titanium dioxide particles
UY32470A (es) * 2009-03-05 2010-10-29 Boehringer Ingelheim Int Derivados de 2-{2-cloro-5-[(sustituido) metil]fenilamino} -1-metil]fenilamino}-1-metilbencimidazol-5-carboxamidas-n-(sustituidas) y sus sales fisiológicamente aceptables, composiciones conteniéndolos y aplicaciones
WO2011023812A1 (en) * 2009-08-27 2011-03-03 Novasaid Ab Microsomal prostaglandin e synthase-1 (mpges1) inhibitors
WO2011048004A1 (en) * 2009-10-23 2011-04-28 Boehringer Ingelheim International Gmbh Inhibitors of the microsomal prostaglandin e2 synthase-1
WO2013146970A1 (ja) * 2012-03-29 2013-10-03 第一三共株式会社 新規キノリン誘導体
CA2916101A1 (en) * 2013-06-20 2014-12-24 Novasaid Ab Piperidinyl benzoimidazole derivatives as mpge-1 inhibitors
TW201627299A (zh) 2014-10-29 2016-08-01 美國禮來大藥廠 用於抑制微粒體前列腺素ｅ合成酶１之新穎羧酸化合物

Also Published As

Publication number Publication date
LT3230278T (lt) 2020-03-10
MX2017005659A (es) 2017-06-26
CL2017001017A1 (es) 2017-12-11
JO3581B1 (ar) 2020-07-05
CY1122534T1 (el) 2021-01-27
JP6393830B2 (ja) 2018-09-19
CA2963321C (en) 2020-01-14
AR134022A2 (es) 2025-11-26
JP2017537073A (ja) 2017-12-14
SI3230278T1 (sl) 2020-02-28
PT3230278T (pt) 2020-02-20
EP3230278B1 (en) 2019-12-11
AR102362A1 (es) 2017-02-22
EA032428B1 (ru) 2019-05-31
US9962375B2 (en) 2018-05-08
CA2963321A1 (en) 2016-05-06
EP3230278A1 (en) 2017-10-18
KR20170055025A (ko) 2017-05-18
EA201790766A1 (ru) 2017-12-29
CN107074829B (zh) 2020-11-13
DK3230278T3 (da) 2020-01-20
TW201627285A (zh) 2016-08-01
AU2015339644A1 (en) 2017-04-20
NZ730724A (en) 2018-09-28
HRP20200216T1 (hr) 2020-05-15
WO2016069376A1 (en) 2016-05-06
TWI605039B (zh) 2017-11-11
HUE047895T2 (hu) 2020-05-28
US20180250282A1 (en) 2018-09-06
ZA201702198B (en) 2018-12-19
PL3230278T3 (pl) 2020-06-01
ES2773439T3 (es) 2020-07-13
KR101898829B1 (ko) 2018-09-13
AU2015339644B2 (en) 2018-03-29
MX376479B (es) 2025-03-07
CN107074829A (zh) 2017-08-18
US20170326128A1 (en) 2017-11-16
BR112017007011A2 (pt) 2017-12-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RS59783B1 (sr) Nova metil-piperidin jedinjenja korisna za inhibiciju mikrozomalne prostaglandin e2 sintaze-1
EP3221304B1 (en) Novel carboxylic acid compounds useful for inhibiting microsomal prostaglandin e2 synthase-1
AU2013347933C1 (en) Glutaminase inhibitors and methods of use
JP2024501641A (ja) 置換大環状化合物及び関連する治療方法
JP7846113B2 (ja) 置換ピペリジノ化合物及び関連する治療方法
MX2008015638A (es) Acidos fenil aceticos sustituidos como antagonistas de dp-2.
JP5829689B2 (ja) ピロリジン−３−イル酢酸誘導体
TW202204343A (zh) 經取代之３－苯氧基氮雜環丁烷－１－基－吡
JP2021522290A (ja) １−イミダゾチアジアゾロ−２ｈ−ピロール−５−オン誘導体
BR112017007011B1 (pt) Compostos de metil-piperidina, composição farmaceuticamente aceitável que o compreende e seu uso