RS60001B1 - Pripremanje gadobutrola visoke čistoće - Google Patents

Description

Opis

[0001] Predmetno obelodanjivanje se odnosi na postupak za pripremu gadobutrola visoke čistoće, gadobutrola čistoće veće od 99.7 ili 99.8 ili 99.9% i na upotrebu za proizvodnju farmaceutskih formulacija za parenteralnu primenu.

[0002] Novija dešavanja u oblasti MR kontrastnih sredstava koja sadrže gadolinijum (EP 0448191 B1, US Patent 5,980,864, EP 0643705 B1, EP 0986548 B1, EP 0596586 B1) uključuju MRT kontrastno sredstvo gadobutrol (Gadovist® 1.0) koje je relativno dugo odobreno u Evropi, a odnedavno i u SAD pod nazivom Gadavist®.

[0003] Kontrastno delovanje zasnovano je na gadobutrolu, nejonskom kompleksu koji se sastoji iz gadolinijuma(III) i makrocikličnog liganda dihidroksihidroksimetilpropiltetraazaciklodekantriacetne kiseline (butrola), koji, između ostalog, dovodi do klinički preporučenih doza do kraćeg vremena opuštanja protona tkivne vode.

[0004] Zahvaljujući njihovoj važnosti kao dijagnostika slikama, naročito kao MRI dijagnostika, kompleksi metala, naročito gadolinijum kompleks N-(1-hidroksimetil-2,3-dihidroksipropil)-1,4,7-triskarboksimetil-1,4,7,10-tetraazaciklododekan "gadobutrol" (DE 4009119) može se pripremiti na više načina. Uprkos napretku ostvarenom u poređenju sa prvobitnim procesima, još uvek postoji potreba za sintezama koje su ekološki prihvatljivije i isplativije, a pogodne su za primenu posebno na industrijskom nivou. Konkretno, postoji velika potražnja za visokim protokom proizvoda i visokim kvalitetom. Poslednjih godina je primećen trend zamene nekih ili svih kontrastnih sredstava otvorenog lanca cikličkim kontrastnim sredstvima. Ovde postoji zahtev za proizvodnjom posebno čistih proizvoda, koji bi takođe trebalo da budu isplativi. Uopšteno, ovo su zahtevi koji se međusobno isključuju, budući da se visokokvalitetni proizvodi skupo proizvode zbog posebnih mera prečišćavanja. Za optimalnu kontrolu kvaliteta potrebno je imati visoko pouzdani postupak za analitičko određivanje koje omogućava detekciju i kvantifikaciju svih prisutnih manjih komponenti.

[0005] Shodno tome, postoji potreba za ekonomski povoljnim procesom za proizvodnju gadobutrola, a takođe i za analitički postupak koji omogućava selektivno otkrivanje i kvantifikaciju minimalnih količina manjih komponenti (praćenje proizvodnje).

[0006] Veoma važni aspekti u pripremi gadobutrola su kvalitet i troškovi proizvodnje krajnjeg proizvoda. Zbog regulatornih zahteva, moraju se ispuniti visoki standardi kvaliteta. Interes u ovom kontekstu su čistoća i sadržaj aktivnog jedinjenja. Zajedno sa čistoćom, potrebno je nadgledati spektar nusproizvoda. Manje komponente moraju biti toksikološki kvalifikovane i procenjene. U skladu s tim, navedene su u specifikacijama i definisana je maksimalna količina proizvoda. Iz razloga sigurnosti proizvoda i za dobro pacijenta, spektar nusprodukata i/ili prisustvo pojedinih kontaminanata održavaju se što je moguće niže.

[0007] U ovom je kontekstu polimorfizam aktivnog jedinjenja od značaja, budući da je to usko povezano sa rastvorljivošću u vodi i rokom skladištenja. Shodno tome, poželjno je da postupak prema pronalasku proizvede polimorfni oblik koji ima najbolju rastvorljivost u vodi i najviše je stabilan.

[0008] Stanje tehnike opisuje preparat gadobutrola visokog prinosa počevši od ciklona (1,4,7,10-tetraazaciklodeodekan) formule 1, koji je poznat iz literature (DE19608307).

[0009] Najbliže prethodno stanje tehnike (Inorg. Chem.1997, 36, 6086-6093 i DE 19724186 A, DE19608307 A) i EP 1343770 B1 opisuje procese gde je butrol ligand izolovan kao litijum kompleks i dalje se pretvara u krajnji proizvod.

[0010] EP 0988294 A1 odnosi se na postupak za dobijanje kompleksa makrocikličnih helacija sa paramagnetnim metalnim trovalentnim jonima, koji obuhvataju: a) reakciju 1,4,7,10-tetraazaciklododekana sa trietil ortoformatom da bi se dobio 5H, 9bH-2a, 4a, 7,9aoktahidrotetraazaciklookta[cd]pentalen; b) reakcija karboksimetilacije u vodi; c) reakcija hidrolize u osnovnim uslovima; d) alkilovanje prema poznatim postupcima sa epoksidom u vodi; e) kompleksiranje prema poznatim postupcima sprovedenim u vodi dodavanjem paramagnetne metalne soli; f) prečišćavanje dijafiltracijom, konačno uklanjanje vode od rastvora na jonoizmenjivačkim smolama i g) kristalizacija ili obnavljanje.

[0011] US 5994536 A odnosi se na postupak za mono- i 1,7-bis-N-β-hidroksialkilaciju ciklena, odgovarajući mono-i 1,7-bis-N-β-hidroksialkil-1,4,7,10-tetraazaciklododekan-Li so kompleksi kao intermedijarni proizvodi u postupku i upotreba N- (6-hidroksi-2,3-dimetil-1,3-dioksepana-5-il)-1,4,7,10-tetraazaciklododekana-LiCI kompleksa za proizvodnju gadobutrola.

[0012] Opisuje reakciju 1,4,7,10-tetraazaciklododekana sa 4,4-dimetil-3,5,8-trioksabiciklo[5,1,0]oktanom i litijum-hloridom u izopropanolu pri povišenim temperaturama, pri čemu je dobijeni proizvod: izolovan iz MTB-etra. Ovaj proizvod dalje reaguje sa hlorosirćetnom kiselinom i NaOH.

[0013] Cilj je predmetnog pronalaska da obezbedi postupak koji omogućava da se gadobutrol proizvodi sa visokim prinosom i najvećom čistoćom (u skladu sa specifikacijom).

[0014] Cilj pronalaska je postignut postupkom za proizvodnju gadobutrola visoke čistoće (= kompleks gadolinijuma N-(1-hidroksimetil-2,3-dihidroksipropil)-1,4,7-triskarboksimetil-1,4,7,10-tetraazaciklododekan), gde je polazni materijal ciklen (1,4,7,10-tetraazaciklododekan) reagovao je sa 4,4-dimetil-3,5,8-trioksabiciklo[5,1,0]oktanom i litijumhloridom u izopropanolu na povišenim temperaturama, zatim je destilovan u vodi i alkilovan natrijum-monohloroacetatom u alkalnoj podlozi, obrađen pod hlorovodoničnim uslovima, soli se uklanjaju dodavanjem metanola, a sirovi ligand reaguje sa gadolinijum oksidom u vodi na povišenim temperaturama, pH se podešava sa litijum hidroksidom na 7.1-7.4, rastvor se koncentruje i dodaje se etanol u takvoj količini da je dostignut sadržaj vode od 7.0-9.5%, smeša je zatim zagrevana uz refluks najmanje 60 minuta, a sirovi proizvod je nakon hlađenja izolovan i osušen na 46°-48°C, sirovi proizvod je rastvoren u vodi i prečišćen u jonoizmenjivačkoj kaskadi, gde se rastvor najpre propušta kroz kiseli, a zatim kroz bazni jonoizmenjivač, koja ima provodljivost < 20 µS/cm, zatim se koncentruje, tretira aktivnim ugljem, podvrgava se sterilnoj filtraciji i merenim dodavanjem etanola, podešava na sadržaj vode u opsegu 10 - 12%, zatim se zagreva uz refluks i hladi, a proizvod je izolovan i osušen na 53-55°C.

[0015] Obelodanjen je postupak za proizvodnju gadobutrola visoke čistoće (= kompleksa gadolinijuma od N-(1-hidroksimetil-2,3-dihidroksipropil)-1,4,7-triskarboksimetil-1,4,7,10-tetraazaciklododekan) koji obuhvata reakciju polaznog ciklona (1,4,7,10-tetraazaciklodeodekan) sa 4,4-dimetil-3,5,8-trioksabiciklo[5,1,0]oktana i litijum-hlorid u alkoholu na povišenim temperaturama, alkilovanjem natrijum-monohloroacetatom u alkalnoj podlozi, obrada u kiselim uslovima, uklanjanje soli i dodavanje gadolinijum oksida, zatim podešavanje pH sa litijum hidroksidom od neutralne do neznatno bazne vrednosti, koncentracija rastvora i dodavanje alkohola, zatim zagrevanje uz refluks i nakon hlađenja, izolovanje i sušenje sirovog proizvoda, rastvaranje sirovog proizvoda u vodi i prečišćavanje na jonoizmenjivaču, zatim tretiranje aktivnim ugljem, zatim sterilnom filtracijom, zatim ključanjem uz refluks, hlađenjem i izolovanjem i sušenjem proizvoda.

[0016] Dalje je obelodanjen proces, gde je početni materijal ciklen (1,4,7,10-tetraazaciklododekan) reagovao je sa 4,4-dimetil-3,5,8-trioksabiciklo[5,1,0]oktanom i litijumhloridom u izopropanolu na povišenim temperaturama, zatim je destilovan u vodi i alkilovan natrijum-monohloroacetatom u alkalnoj podlozi, obrađen pod hlorovodoničnim uslovima, soli se uklanjaju dodavanjem metanola, a sirovi ligand reaguje sa gadolinijum oksidom u vodi na povišenim temperaturama, pH se podešava sa litijum hidroksidom na 7.1-7.4, rastvor se koncentruje i dodaje se etanol u takvoj količini da je dostignut sadržaj vode od 7 - 17%, poželjno 8.0-9.0% smeša je zatim zagrevana uz refluks najmanje 60 minuta, a sirovi proizvod je nakon hlađenja izolovan i osušen, poželjno osušen na 46°-48°C, sirovi proizvod je rastvoren u vodi i prečišćen u jonoizmenjivačkoj kaskadi, gde se rastvor najpre propušta kroz kiseli, a zatim kroz bazni jonoizmenjivač, koja ima provodljivost < 40 µS/cm, zatim se koncentruje, tretira aktivnim ugljem, podvrgava se sterilnoj filtraciji i merenim dodavanjem etanola, podešava na sadržaj vode u opsegu 7 - 17%, poželjno oko 11%, zatim se zagreva uz refluks i hladi, a proizvod je izolovan i osušen.

[0017] Ovo je posebno proces, gde je početni materijal ciklen (1,4,7,10-tetraazaciklododekan) reagovao je sa 4,4-dimetil-3,5,8-trioksabiciklo[5,1,0]oktanom i litijumhloridom u izopropanolu na povišenim temperaturama, zatim je destilovan u vodi i alkilovan natrijum-monohloroacetatom u alkalnoj podlozi i obrađen pod hlorovodoničnim uslovima, soli se uklanjaju dodavanjem metanola, a sirovi ligand reaguje sa gadolinijum oksidom u vodi na povišenim temperaturama, pH se podešava sa litijum hidroksidom na 7.1-7.4, rastvor se koncentruje i dodaje se etanol u takvoj količini da je dostignut sadržaj vode posebno poželjno 8.5%, smeša je zatim zagrevana uz refluks najmanje 60 minuta, a sirovi proizvod je nakon hlađenja izolovan i osušen, poželjno osušen na 46°-48°C, sirovi proizvod je rastvoren u vodi i prečišćen u jonoizmenjivačkoj kaskadi, gde se rastvor najpre propušta kroz kiseli, a zatim kroz bazni jonoizmenjivač, koja ima provodljivost < 20 µS/cm, zatim se koncentruje, tretira aktivnim ugljem, zatim se podvrgava sterilnoj filtraciji i merenim dodavanjem etanola tokom perioda od 120 minuta, podešava na sadržaj vode u opsegu 10 - 12%, poželjno oko 11%, zatim se zagreva uz refluks i hladi, a proizvod je izolovan i osušen na 53-55°C.

[0018] U poželjnom otelotvorenju proces prema pronalasku je naznačen time da početni materijal ciklen (1,4,7,10-tetraazaciklododekan) reaguje sa 4,4-dimetil-3,5,8-trioksabiciklo[5,1,0]oktanom LiCI u izopropanolu na povišenim temperaturama, zatim je destilovan u vodi i alkilovan natrijum-monohloroacetatom u alkalnoj podlozi i obrađen pod hlorovodoničnim uslovima, soli se uklanjaju dodavanjem metanola, a sirovi ligand reaguje sa gadolinijum oksidom u vodi na povišenim temperaturama, pH se podešava sa litijum hidroksidom na 7.1-7.4, rastvor se koncentruje i dodaje se etanol u takvoj količini da je dostignut sadržaj vode posebno poželjno 8.5%, smeša je zatim zagrevana uz refluks najmanje 60 minuta, a sirovi proizvod je nakon hlađenja izolovan i osušen, poželjno osušen na 46°-48°C, sirovi proizvod je rastvoren u vodi i prečišćen u jonoizmenjivačkoj kaskadi, gde se rastvor najpre propušta kroz kiseli jonoizmenjivač, prečišćeni rastvor koji ima provodljivost < 20 µS/cm, zatim se koncentruje, tretira aktivnim ugljem, zatim se podvrgava sterilnoj filtraciji i merenim dodavanjem etanola tokom perioda od 120 minuta, podešava na sadržaj vode u opsegu 10 - 12%, zatim se zagreva uz refluks i hladi, a proizvod je izolovan i osušen na 53-55°C.

[0019] U sledećem poželjnom otelotvorenju postupak pronalaska je naznačeno time da je dobijeni Gadobutrol ima čistoću (prema HPLC) veću od 99.7% koja sadrži manje od 0.01% slobodnih jona gadolinijuma(III),

koji sadrži sadržaj ostatka rastvarača u etanolu manji od 200 ppm i koji sadrži proporciju butil liganda (= N-(1-hidroksimetil-2,3-dihidroksipropil)-1,4,7-triskarboksimetil-1,4,7,10-tetraazaciklododekan)manji od 0.03%.

[0020] Za kaskade jonoizmjenjivača u procesu se koriste sledeći izmenjivači:

Pogodni izmenjivači su uobičajeni komercijalni jonoizmenjivači.

[0021] Povoljno je da se koristi kiseli jonoizmenjivač Amberlite IRC 50, a bazni izmenjivač se koristi IRA 67. Posle ovog prečišćavanja jonoizmenjivačkom kaskadom, gde se rastvor prvo propušta kroz kiseli, a zatim kroz bazni jonoizmenjivač, tako očišćen rastvor, koji ima provodljivost < 20 µS/cm, zatim se koncentriše, tretira aktivnim ugljem, poput aktivnog uglja Norit SX Plus, zatim podvrgnut sterilnoj filtraciji i merenim dodavanjem etanola tokom 120 minuta, podešen na sadržaj vode od poželjno 11%, zatim prokuvan uz refluks i hlađen, a proizvod je izolovan i osušen na 53-55°C.

[0022] Detaljno je opisan novi postupak postupka prema pronalasku:

• Posle kompleksiranja butrol liganda, prisutnog u vodenom rastvoru, sa gadolinijum oksidom (120 minuta, 90°C) i podešavanjem pH sa litijum hidroksid monohidratom na pH 7.1 - 7.4, smeša se uglavnom koncentruje pod redukovanim pritiskom. U rastvor koji ostaje dodaje se etanol. Ovde je zagarantovano da postignuti konačni sadržaj vode iznosi 7.0 - 9.5%, poželjno 8.0 - 9.0%, a naročito poželjno 8.5% (ovo se postiže dodatnim dodavanjem etanola ili alternativno vode). Smeša je zagrevana uz refluks (60 minuta), a mešanje je nastavljeno na temperaturi obloge od 100°C tokom 480 minuta. Smeša je ohlađena do 20°C. Sirovi proizvod je izolovan pomoću centrifuge ili oraha pod pritiskom, a filterski kolač je ispran etanolom, a zatim osušen na 58°C (omotač) pod redukovanim pritiskom dok se ne postigne unutrašnja temperatura od 48°C.

• Sirovi proizvod (gadobutrol, sirov) je rastvoren u vodi. Dalje prečišćavanje se vrši kaskadom jonoizmjenjivača na sledeći način: vodeni rastvor se inicijalno dodaje u kiseli jonoizmenjivač AMBERLITE IRC 50. Eluat se zatim dodaje direktno u bazni izmenjivač IRA 67. Eluat se vraća na kiseli izmenjivač itd. Rastvor se reciklira sve dok provodljivost rastvora ne dostigne vrednost < 20 uS/cm. Na isparivaču u tankom sloju, rastvor se zatim pažljivo i lagano koncentriše na 50 mbar. Tretman jonoizmenjivačima omogućava proizvod koji je već veoma kvalitetan. Analiza pokazuje da su još uvek prisutne vrlo male količine sledećih komponenti:

• Videti Sl.14, formula III

• Zbog svog negativnog naelektrisanja, Gd-DOTA se apsorbuje u potpunosti na anjonski izmenjivač. Gd-DO3A je električno neutralno jedinjenje i zbog toga se ne apsorbuje u jonoizmenjivaču. Za razliku od druge dve primese (di-TOBO ligandi i butrol ligand), Gd-DO3A ima više lipofilne prirode. Međutim, iznenađujuće je da analiza otkriva dijastereomerne di-TOBO ligande (potencijalni Gd kompleksi, koji nisu veoma stabilni, mogu izgubiti gadolinijum na katjonskom izmenjivaču). Štaviše, primećuje se pojava slobodnog butrol liganda (ovde takođe kiseli jonoizmenjivač može da ukloni Gd iz kompleksa). Osobi koja je vešta u ovoj oblasti, pojava di-TOBO liganda i butrol liganda nakon ovog koraka prečišćavanja je iznenađujuća, jer bi se moglo očekivati da se potencijalno supstance koje sadrže aminske i kisele grupe kvantitativno apsorbuju na jonoizmenjivaču.

• S obzirom da su navedena 3 nusprodukta kritične primese koje bi u svim slučajevima trebalo da budu što niže, neophodan je dalji korak prečišćavanja. Ovde se uslovi moraju odabrati tako da se postigne maksimalan prinos i optimalni kvalitet.

Dodavanjem vode, koncentrovana frakcija koja sadrži proizvod iz prečišćavanja jon-razmene se podešava na koncentraciju od 19.1 do 20.9% (w/w). Nakon toga sledi tretman aktivnim ugljem, čija je svrha najveće moguće smanjenje vrednosti endotoksina proizvoda (priprema za parenteralno davanje). U tom cilju, proizvod se meša sa NORIT SX Plus (provodljivost 20 µS) na 20°C tokom 60 minuta, a zatim se odvoji od ugljenika filtracijom, a filtrat se filtrira kroz sterilnu filtracionu sveću i blago koncentruje pod redukovanim pritiskom (temperatura obloge najviše 80°C). Temperatura obloge se spušta na 75°C i dodaje se prva delimična količina etanola, zatim se dodaje druga delimična količina etanola u periodu od 120 minuta, tako da (unutrašnja) temperatura ne padne ispod 72°C. Sadržaj vode u rastvoru je određen prema Karl-Fišeru. Vrednost treba da bude od 10.0 do 12.0, poželjno 10.5-11.5%, posebno poželjno 11%. Ako ciljna vrednost nije dostignuta, ona se može tačno postaviti dodatnim dodavanjem vode ili etanola. Smeša se zatim prokuva uz refluks tokom 120 minuta. Smeša se ostavi da se ohladi na 20°C i proizvod se izoluje pomoću centrifuge ili pod pritiskom, filterski kolač se ispere etanolom.

[0023] Sušenje gadobutrola, čisto se vrši pod redukovanim pritiskom na unutrašnjoj temperaturi od > 53°C i temperaturi obloge od 55°C. Krajnji proizvod se puni u PE vrećice obložene aluminijumom. Prikladnim odabirom parametara sušenja moguće je smanjiti preostalu količinu etanola na < 202 ppm.

[0024] Obelodanjivanje se takođe odnosi na gadobutrol čistoću (prema HPLC) veću od 99.7 ili 99.8 ili 99.9% i

do gadobutrola čistoće veće od 99.7 ili 99.8 ili 99.9%, koji sadrži slobodne jone gadolinijuma(III) u količini manjoj od 0.01%,

koji ima sadržaj ostatka rastvarača u etanolu manji od 200 ppm i koji sadrži butil liganda (= N-(1-hidroksimetil-2,3-dihidroksipropil)-1,4,7-triskarboksimetil-1,4,7,10-tetraazaciklododekan) u proporciji manjoj od 0.03%.

[0025] Jedan od zahteva je da se sadržaj nekadašnjeg slobodnog kompleksa (butrol ligand, formula 3) održi na najnižem mogućem nivou.

[0026] Tokom pripreme leka GADOVIST®, mali suvišni sloj nekadašnjeg kompleksa (otprilike 0.1%) u obliku kalcijum/butrol kompleksa (Inorg. Chem.1997, 36, 6086-6093) je dodat formulaciji. Kalkobutrol je aditiv u farmaceutskim formulacijama gadobutrola i ima zadatak da spreči oslobađanje slobodnog gadolinijuma u formulaciji (rastvori)(videti EP 0 270 483 B2).

[0027] Ovaj pristup osigurava maksimalnu stabilnost vodenih rastvora i omogućava skladištenje tokom relativno dugog vremenskog perioda. Problem sa kojim se susreću tokom skladištenja kontrastnih sredstava koje sadrže gadolinijum u vodenom rastvoru je transhelacija gadolinijuma iz kompleksa sa jonima metala iz staklene bočice (na primer Zn, Cr, itd.), koji takođe formiraju stabilne komplekse i rezultiraće formiranjem toksičnih slobodnih jona gadolinijuma. Ako se u formulaciju ne dodaje višak složenog oblika, formira se slobodni gadolinijum. Suprotno tome, termodinamički manje stabilan kalcijumov kompleks butrol liganda lako izmenjuje kalcijum. Pošto je kalcijum element koji se prirodno pojavljuje u telu, toksikološki je prihvatljiv i na taj način obezbeđuje apsolutnu sigurnost pacijenta (stvaranje slobodnog gadolinijuma se može apsolutno isključiti).

[0028] Višak nekadašnjeg kompleksa (u obliku kalcijumovog kompleksa) u formulaciji je ograničen vrlo uskom specifikacijom (0.08 - 0.14%) i upotrebom gadobutrola visoke čistoće u kojem je udeo butrol liganda najniži stoga je preduslov, jer bi inače ukupni nekadašnji kompleks bio > 0.14 mol% (zbir kalcijum/butrol kompleksa i butrol ligand). To dovodi do serija "izvan spektra", tj. serija koje ne zadovoljavaju specifikacije, u farmaceutskoj proizvodnji, što bi moglo rezultirati znatnim ekonomskim gubicima. Ovo je predstavljalo ozbiljan problem u početnoj pripremi gadobutrola, pa je postojala hitna potreba da se kontrola ove manje komponente (butrol ligand) stabilnim proizvodnim procesom i osetljivim analitičkim postupkom.

[0029] Bitan preduslov za pripremu gadobutrola visoke čistoće je posebni analitički postupak koji omogućava otkrivanje i kvantifikaciju glavnih proizvoda i nusproizvoda (primesa). Dugo vremena, glavni problem posebno u gadobutrol analizi bilo je kvantifikacija proporcije slobodnog butrol liganda. Pošto je otkrivanje izvršeno samo neselektivnim titracijskim postupkom (videti primere), mereni su i di-TOBO ligandi (videti šemu formule ispod) i prikazana je suma. Sve gadobutrol serije pripremljene u skladu sa prethodnim nivoom tehnike naznačene su ovim "zbirnim postupkom". S obzirom na iznad opisanu kritičnu granicu zasnovanu na sadržaju nekadašnjeg slobodnog kompleksa (butrol ligand), ovo je bila apsolutno nezadovoljavajuća situacija, koju je trebalo rešiti. Pored cilja pružanja optimalnog postupka pripreme koji će dobiti proizvod vrhunskog kvaliteta, bio je, dakle, još jedan cilj da se osigura analitički postupak za selektivno nadgledanje glavnih primesa koji omogućava određivanje sadržaja butrol liganda i di-TOBO liganda sa tačnost <0.01%. Samo kombinovanjem procesa analize i pripreme moguće je proizvesti gadobutrol od > 99.7% (=> 99.9% jedno mesto/vršni kvalitet).

[0030] Novi postupak prema pronalasku omogućava, kombinacijom posebno kontrolisanih uslova kristalizacije, zajedno sa visoko selektivnim analitičkim postupkom, detekciju nusprodukata < 0.01%, i na taj način da se obezbedi veoma dobra kontrola čistoće aktivnog jedinjenja gadobutrol, i da nivo primesa bude što niži.

1

[0031] Šema pripremanja ispod služi da ilustruje poreklo glavnih primesa gadobutrola: Videti Sl.12, formule II

[0032] Počevši od ciklen (1,4,7,10-tetraazaciklodeodekan), koji je poznat iz literature, u prvom koraku se bicikliorioksaoktanski prsten (TOBO) spaja na način opisan u EP 0986548 B1 (Schering AG) (otvaranje epoksida sa litijum hloridom u izopropanolu uz refluks dovodi do kompleksa N-(6-hidroksi-2,2-dimetil-1,3-dioksepan-5-il)-1,4,7,10-tetraazaciklododekan/LiCl ). Pored željenog monosupstituisanog jedinjenja, kao dodatni proizvodi se dobijaju još dva jedinjenja. To su dvostruko alkilovani proizvodi (Di-TOBO = 1,7- i 1,4-bis(N-(6-hidroksi-2,2-dimetil-1,3-dioksepan-5-il)-1,4, 7,10-tetraazaciklododekan/LiCl kompleks), koji se takođe dobijaju u obliku Li kompleksa (4 dijastereomera 1,4- i 1,7-supstituisanih jedinjenja u racemskom obliku, tj. ukupno 8 vrsta). Nakon reakcije, proizvodi se ne izoluju, već se smeša direktno dalje obrađuje. Sirovi proizvod ovog koraka reakcije još uvek sadrži zaostali nereagovani ciklen (1) koji se prenosi u sledeći korak (destilacijom se izopropanolni rastvarač zamenjuje vodom).

[0033] U sledećem koraku, koristeći natrijumovu so hlorosirćetne kiseline, proizvodi se alkilišu pod bazno kontrolisanim uslovima dajući odgovarajuće sirćetne kiseline (stepen butrola). Važno je da pH uvek bude > 12. U ovom koraku procesa, nečistoće sadržane u glavnom proizvodu su takođe alkilovane, što daje karakteristični spektar nečistoća u ovoj fazi. Pored dijastereomernih DI-TOBO liganda, DOTA i DO3A (nepotpunom alkilacijom) formiraju se iz ciklena. Nakon kisele obrade hlorovodonične kiseline, soli (uglavnom NaCl) se filtriraju nakon dodavanja metanola i butrol ligand se priprema kao vodeni rastvor za kompleksiranje sa gadolinijum oksidom.

[0034] Kompleks sa gadolinijum oksidom u vodi daje odgovarajući sirovi proizvod koji, kao glavnu komponentu, sadrži pretežno gadobutrol. Međutim, iznad opisani sporedni proizvodi su takođe ligandi koji komplikuju gadolinijum i oni daju odgovarajuće Gd komplekse (4 dijastereomerna Gd-di-TOBO kompleksa, Gd-DOTA, Gd-DO3A).

[0035] U ovom pogledu, postupak je analogan proceduri prethodnog stanja tehnike. Stanje tehnike opisuje upotrebu etanola za kristalizaciju sirovog i čistog gadobutrola, a vodeni etanol se takođe pominje.

[0036] Iznenađujuće, sada je utvrđeno da je odgovarajućim izborom parametara kristalizacije i na gadobutrol sirovoj i čistoj fazi moguće postići odlične prinose i vrhunske kvalitete proizvoda.

[0037] Ono što je novo je specifičan postupak opisan u nastavku koji omogućava dobijanje gadobutrola visoke čistoće sa čistoćom (prema HPLC) od > 99.7 ili 99.8 ili 99.9% u 4 koraka postupka:

[0038] Važan faktor novog postupka prema pronalasku je iznenađujuće tačno prilagođavanje određenog sadržaja vode u kristalizaciji i sirovog i čistog proizvoda. Iznenađujuće su ograničenja vrlo uska i daju optimalne rezultate samo u ovom rasponu. Iznenađujuće, odabirom određenog sadržaja vode, moguće je smanjiti količinu i lipofilnih nečistoća (na primer DO3A), kao i snažno hidrofilnih nečistoća (Di-TOBO ligandi, butrol ligand), sa optimalnim ukupnim prinosom gadobutrola. Stručnoj osobi ovo nije očigledno i zato je iznenadilo za sve.

[0039] Ukupni prinosi dobijeni novim postupkom prema pronalasku (počevši od ciklena) su odlični i prikazani su u tabeli ispod:

[0040] U kombinaciji sa veoma visokom čistoćom, tako visok ukupan prinos dovodi do značajnog poboljšanja ekonomskog aspekta proizvodnog procesa.

[0041] Šematski prikaz u nastavku rezimira kako su ukupni prinos i čistoća povezani sa sadržajem vode u konačnoj kristalizaciji (princip se takođe odnosi na prvu kristalizaciju): Pogledajte Sl.4 Prinos, čistoća i sadržaj vode nakon krajnje kristalizacije

[0042] Sa povećanjem sadržaja vode (leva strana), primećuje se smanjenje prinosa i istovremeno povećanje lipofilnih nečistoća. Sa padom sadržaja vode (desna strana), prinos se povećava; međutim, u isto vreme se povećava udeo hidrofilnih primesa. Shodno tome, bilo je vrlo iznenađujuće da se tako visok ukupni prinos (u poređenju sa prethodnim stanjem tehnike) može postići u kombinaciji sa odličnim kvalitetom.

[0043] Sledeća važna tačka postupka prema pronalasku zasniva se na činjenici da se u preparatu dobija praktično samo jedan glavni polimorf (primećen je i drugi neželjeni polimorf, ali samo u beznačajnim količinama). Fizička svojstva su od velikog interesa i veoma su važna jer su povezana sa stabilnošću skladištenja i rastvorljivošću proizvoda. Uz dugi rok trajanja, moguće je proizvesti zalihe proizvoda koje se potom mogu koristiti na zahtev farmaceutskog preparata, u ovom slučaju GADOVIST®. To omogućava optimalnu fleksibilnost u procesu pripremanja.

[0044] Utvrđeno je da su dva polimorfa prisutna u obliku monohidrata (sadržaj vode 3-3.5%):

Monohidrat I i monohidrat II (videti primere u sledećem odeljku)

[0045] Utvrđeno je da, kada se dostigne veoma visoka čistoća, poželjno > 99.7 ili 99.8 ili 99.9%, ono što je prisutno je u osnovi polimorf I. Ovo je važno jer ovaj polimorf ima takođe povoljnija svojstva u poređenju sa polimorfom II, naročito s obzirom na rastvorljivost polimorfa u vodi. Bolja rastvorljivost polimorfa I osigurava optimalnu pripremu

1

farmaceutskih formulacija (rastvori za parenteralnu primenu u vodi). Ovde je posebno zanimljivo 1-molarno GADOVIST® rastvor koji je zasnovan upravo na visokoj rastvorljivosti gadobutrola. Što je rastvorljivost materijala u farmaceutskoj proizvodnji bolja, to je bolji i ponovljiviji postupak. Ovo osigurava visoku sigurnost i obnovljivost u preparatu.

[0046] U sledećem poželjnom otelotvorenju postupak prema pronalasku je naznačen time da dobijeni Gadobutrol ima sadržaj vode od 3.0 do 3.5%.

Rastvorljivost polimorfa I i II u vodi

[0047] Tabela ispod prikazuje rastvorljivost dva polimorfa I i II gadobutrola na 20°C u vodi

[0048] Vrednosti utvrđene za rastvorljivost gadobutrola pokazuju da je rastvorljiv u vodi u gotovo bilo kom odnosu. Začudo, polimorfni monohidrat I je rastvorljiviji od monohidrata II. Ovo je povoljno u odnosu na postupak pripreme formulacije, ali nema uticaja na bezbednost preparata (u slučaju polimorfa II, potrebno je duže mešanje/uopšte, serije sa procentom polimorfa II se ne koriste za radi standardizovanog postupka pripreme).

Stabilnost pri skladištenju

[0049] Tri grupe monohidrata I i jedna serija monohidrata II su čuvane u ICH uslovima. Oba oblika su ostala nepromenjena 6 meseci pri 40°C/75% relativne atmosferske vlage i 36 meseci pri 25°C/60% relativne atmosferske vlažnosti i 30°C/75% relativne atmosferske vlažnosti. Nisu primećeni produkti raspadanja, niti su neki drugi parametri specifikacije suštinski promenjeni. Nakon skladištenja, serije su održavale čvrsto stanje.

Ponašanje monohidrata tokom pripreme leka

[0050] Primećene su razlike između dva monohidrata I i II tokom rastvaranja aktivnog jedinjenja. Uopšteno, vreme potrebno da se monohidrat I uđe u rastvor je 45 minuta na 40-50°C. Za to vreme, monohidrat II je nepotpuno rastvoren. Za rastvaranje potrebni su znatno duži vremenski periodi.

Analitička karakterizacija gadobutrola

[0051] Kao što je već pomenuto, glavni problem u analizi bio je analiza diferencijacije i kvantifikacije butrol liganda i di-TOBO liganda. Iznenađujuće, pronađeni su uslovi koji omogućavaju određivanje ovih glavnih primesa analitičkom tačnošću < 0.01%, što predstavlja veliki proboj u celom proizvodnom lancu. Ovim postupkom je prvi put bilo moguće razlikovati procese kristalizacije s obzirom na njihovu efikasnost i produktivnost. U tabelama ispod prikazani su osnovni parametri ovog postupka (videti takođe primere).

[0052] Kvalitet serija gadobutrola pripremljenih novim postupkom prema pronalasku za specifičnu kristalizaciju može se rezimirati na sledeći način:

1

[0053] Postupak prema pronalasku omogućava ekonomičnu proizvodnju gadobutrola u pojedinačnim serijama na skali od 100 kg. Ovde je odabirom parametara kristalizacije bilo moguće postići optimalan prinos u kombinaciji sa optimalnom čistoćom. Zahvaljujući visokoj čistoći, moguće je proizvesti polimorf I na reproduktivni način, što u prvom redu znači veliku fleksibilnost u pogledu skladištenja aktivnog jedinjenja i drugo dobru brzinu rastvaranja u farmaceutskoj proizvodnji formulacije.

[0054] Dalje je obelodanjeno korišćenje gadobutrola visoke čistoće za proizvodnju farmaceutskih formulacija za parenteralnu primenu. Uslovi takve pripreme su poznati iz stanja tehnike i poznati su stručnjaku (EP 0448191 B1, CA Patent 1341176, EP 0643705 B1, EP 0986548 B1, EP 0596586 B1).

[0055] Pronalazak je ilustrovan niže navedenim primerima, gde su korišćeni sledeći analitički postupci:

Postupci:

1.) Postupci za određivanje čistoće:

[0056] Postupak opisan u nastavku prvo je korišćen i služio je za određivanje čistoće postupaka pripreme opisanih u prethodnom stanju tehnike.

1.1. Postupak: Neselektivna fotometrijska titracija slobodnih nekadašnjih kompleksa

Princip postupka

[0057] Aktivno jedinjenje je kvantifikovano titracijom. Promena boje se prati fotometrijski.

Reagensi

[0058] rastvor natrijum hidroksida 1N

hlorovodonična kiselina 1 % [m/V]

voda

Rg 0688, rastvor indikatora/pufera III

rastvor gadolinijum sulfata 0.00025N standardni rastvor

rastvor natrijum edetata 0.00025M standardni rastvor

1

Postupak testiranja

[0059] Za laboratorije koje sadrže robote za automatizovanu analizu, ispod navedeni radni postupak ne važi; zamenjuje se odgovarajućim postupkom u laboratoriji.

Rastvor za testiranje

[0060] U čaši od 50 ml rastvoreno je 0.2250 - 0.2750 g ispitivane materije, m u čaši od 50 ml u 5.00 ml rastvora gadolinijum sulfata, V[1]. Rastvor je zatim zagrevan u vreloj vodenoj kupki tokom 15 minuta. Nakon hlađenja, dodaje se 10.0 ml Rg 0688 indikatora/pufer rastvora III, a pH se podešava na 5.00.1 korišćenjem 1% hlorovodonične kiseline [w/v] ili 1N rastvora natrijum hidroksida. PH se meri potenciometrijski korišćenjem kombinovane staklene elektrode.

Praksa

[0061] Magnetnim mešanjem, rastvor natrijum edetata, V[2], titrira se u ispitni rastvor dok se ne postigne elektronski određena krajnja tačka. Promena boje iz ljubičasto-crvene preko žutonarandžaste u žutu nadgleda se fotometrijski. Evaluacija se izvodi crtanjem krive ili korišćenjem softvera s instrumentima. Tačka ekvivalencije određuje se proširenjem početne linije i tangenta okreta; očitani volumen titracije odgovara standardnom rastvoru V[2], koji se troši.

Uslovi testiranja

[0062]

V[1]

1

= potrošnja rastvora gadolinijum sulfata u ml

V[2]

= potrošnja standardnog rastvora natrijum edetata u ml

T[1]

= titar rastvora gadolinijum sulfata

T[2]

= titar rastvora natrijum edetata

m

= merena ispitivana supstanca, u g

W

= rezultat postupka merenja ispitivanja vode u %

LM

= rezultat postupka merenja ispitivanja etanola u %

450.49

= molarna masa ZK 00150307 u g/mol

[0063] 1 ml standardnog rastvora natrijum edetata odgovara 450,49 mg ZK 00150307.

2.) Novi selektivni postupak za određivanje butrola i di-TOBO liganda

[0064] U kontekstu razvoja novog postupka pripreme prema pronalasku za gadobutrol, vrlo specifičan HPLC postupak za razlikovanje butrol liganda od ostalih primesa (npr.: di-TOBO ligand) je razvijen:

Parametri postupka

[0065]

1

[0066] U tabeli ispod prikazana su vremena zadržavanja gadobutrola i relevantne glavne primese:

Vremena zadržavanja i relativna vremena zadržavanja

[0067]

Sinteza Gd-di-TOBO (br. 1b, korišćeni kontrajon je acetat umesto hlorid):

[0068] Za nedvosmisleni postupak određivanja gadolinijum kompleksa di-TOBO liganda, ovo je specijalno pripremljeno (EP 0985548 B1, Primer 1). Međutim, u istraživanjima je utvrđeno da ne postoji Gd kompleks di-TOBO liganda koji postoji u krajnjem proizvodu (kompleks nije dovoljno stabilan i verovatno se raspada na kiselom jonoizmenjivaču)

1

Videti Sl.13, formule III

Videti Sl.5, MS-Spektar

Primer 1

Dobijanje gadobutrola (Gd kompleks N-(1-hidroksimetil-2,3-dihidroksipropil)-1,4,7-triskarboksimetil-1,4,7,10-tetraazaciklododekan)

[0069] Slično Primeru 1 i Primeru 5 otvorene objave EP 0986548 B1, počevši od ciklona, gadobutrola, sirovi materijal se priprema u reakciji u jednom loncu, zatim se prečišćava na jonoizmenjivačima i na kraju pretvara kristalizacijom u gadobutrol, čist.

A. Pripremanje gadobutrola, sirovog

[0070] 160 kg ciklena (1,4,7,10-tetraazaciklodeodekan), 154 kg 4,4-dimetil-3,5,8-trioksabiciklo[5,1,0]oktana i 34.7 kg litijum-hlorida početno se puni u 325 kg izopropanola i zagreva uz refluks 1320 minuta.

[0071] Dodaje se 1250 l vode i smeša se destiluje dok se ne postigne unutrašnja temperatura od 78°C. Smeša je zatim dopunjena sa 805 l vode, a 375 kg natrijum monohloroacetata je dodato na 35°C, a zatim 120 kg 50% vodenog rastvora natrijum hidroksida. Smeša se zagreva na unutrašnju temperaturu od 65°C i dodaje se dodatnih 85 kg 50% vodenog rastvora natrijum hidroksida. Ako pH padne ispod 12, on se ponovo podešava sa 10 kg 50% vodenog rastvora natrijum hidroksida (postupno). Smeša se meša na unutrašnjoj temperaturi od 65°C tokom 90 minuta. Nakon hlađenja na 50°C, doda se 240 kg 36% vodene hlorovodonične kiseline tako da je pH sada 3.1 - 4.9 (ako je potrebno, treba dodati dodatnu hlorovodoničnu kiselinu; važno je da se dostigne ciljna pH vrednost). Na temperaturi omotača od 95°C i pod redukovanim pritiskom, rastvarač (smeša izopropanol/voda) se zatim destiluje do ukupne količine od 1200 kg.

[0072] Na 40°C dodaje se 2554 kg metanola i pH se podešava na 1.4 ili manje (1.1 - 1.3, optimalno 1.2) koristeći 282 kg 36% vodene hlorovodonične kiseline. Smeša je mešana na 40°C 35 minuta. Smeša se zatim ohladi na 20°C, a istaloženi natrijum hlorid (NaCl) odvoji se pomoću centrifuge ili filtera sa matricom pod pritiskom (filterski kolač se ispere metanolom jer je proizvod u rastvoru). 996 (ovo se još ispituje) dodaje se voda, a metanol se u osnovi destilira na temperaturi obloge od 90°C (250 mbar), vodom, smeša se koncentruje na masu od 966 kg, i zatim se doda još 1200 l vode. U ovaj rastvor se dodaje 155 kg gadolinijum oksida i smeša se zagreva na 95°C tokom 120 minuta. Pusti se da se ohladi na 50°C i podesi

2

na pH 7.1 - 7.4 koristeći litijum-hidroksid monohidrat (za to je potrebno oko 85 kg litijumhidroksid-monohidrata). Na temperaturi plašta od 120°C i pod redukovanim pritiskom, 895 kg vode se zatim destiluje. Smeša se ostavi da se ohladi na 73°C, dodaje se 5286 kg alkohola (MEK = denaturizovan metil etil keton) i sadržaj vode proveri pomoću Karl-Fišerovog postupka. Sadržaj vode se podešava na 8.5%. (Ako je vrednost manja od 7.0, dodaje se odgovarajuća izračunata količina vode. Ako je vrednost veća od 9.5%, dodaje se odgovarajuća količina etanola. Za proces je važno da vrednost bude u opsegu od 7.0 do 9.5). Smeša je zatim zagrevana uz refluks (78°C) tokom 60 minuta. Na kraju dolazi do spontane kristalizacije. Smeša je mešana na temperaturi obloge od 100°C tokom 480 minuta, a zatim je ostavljena da se ohladi do 20°C.

[0073] Proizvod se izoluje pomoću centrifuge ili pod pritiskom, pri čemu se filterski kolač dva puta ispere etanolom. U loncu za sušenje, sirovi proizvod se suši na temperaturi obloge od 58°C tokom 90 minuta pod redukovanim pritiskom (dok se ne postigne pritisak < 62 mbar i temperatura od > 46°C) ili tri puta ispere etanolom i suši na < 34°C. Proizvod se zatim suši na unutrašnjoj temperaturi od 48°C tokom 60 minuta. Sirovi proizvod se hladi do 20°C i puni u posude. Ovo daje 540 kg bezbojnog kristalnog praha (prinos > 96%).

B. Pročišćavanje jonoizmenjivača gadobutrola, sirovog

[0074] Deo pripremljene serije je prečišćen na sledeći način:

120 kg sirovog gadobutrola rastvoreno je u 1200 kg vode i isprva se pumpa u kolonu koja sadrži kiseli jonoizmenjivač (AMBERLITE IRC 50). Eluat se pumpa direktno na kolonu na bazno jonoizmenjivač (IRA 67), a eluat se zatim vraća na kiseli jonoizmjenjivač (i tako dalje). Rastvor se recirkulira dok se ne dostigne granična vrednost provodljivosti < 20 uS/cm.

[0075] Rastvor se prenese u isparivač tankog sloja i pažljivo se koncentriše na 50 mbar (89 kg u oko 585 l vode, prinos 74.1%)

C. Krajnja kristalizacija gadobutrola, sirovog

[0076] 16 kg aktivnog uglja NORIT SX PLUS se doda 324 kg gadobutrola, sirovog (19.1 -20.9% rastvora u vodi) (provodljivost 20 uS), i smeša se meša na 20°C 60 minuta. Aktivirani ugalj se filtrira i ispere dva puta vodom. Rastvor filtrata koji sadrži proizvod se zatim filtrira kroz sterilnu filtarsku sveću i koncentruje se na temperaturi obloge od 80°C pod redukovanim pritiskom (količina destilata oko 1600 l). Temperatura obloge se zatim podiže na 75°C i u prvom koraku se odmerava 100 kg alkohola, temperatura obloge se zatim poveća na 98°C (unutrašnja temperatura > od 75°C) i dodaje se još 1360 kg alkohol tako da unutrašnja temperatura ne padne ispod 72°C (ukupno vreme za dozirano dodavanje oko 120 minuta). U ovom trenutku se određuje sadržaj vode u rastvoru prema Karl-Fišeru. Idealno, vrednost bi trebala biti 10 - 12%. Ako je vrednost veća ili niža, podešava se na 11% tačno dodavanjem vode ili alkohola (u malim obrocima). Jednom kada se postigne željeni sadržaj vode, smeša se zagreva uz refluks na 120 minuta. Smeša se ostavi da se ohladi na 20°C i proizvod se izoluje pomoću centrifuge ili pod pritiskom, filterski kolač se ispere etanolom. Proizvod se zatim suši pod redukovanim pritiskom (temperatura obloge 55°C) dok se ne postigne unutrašnja temperatura od > 53°C. Proizvod se zatim puni u PE-kese obložene aluminijumom.

Prinos: 314 kg (96.9% teorijski) bezbojnog kristalnog praha, polimorf I

sadržaj vode (Karl-Fišer): 3.1%

količina ostatka rastvarača etanola: < 200 ppm

sadržaj: 100.4% (u poređenju sa spoljnim referencama)

HPLC (100% postupak): > 99.7% (99.8 ili 99.9%)

slobodan Gd<3+>: < 0.01%

butrol ligand: < 0.03%

di-TOBO ligand uopšteno < 0.03%

Gd-DO3A: ne može se otkriti < 0.03%

endotoksini: < 0.5 EU

neodređene primese: < 0.03%

[0077] U tabeli ispod prikazani su analitički podaci za 6 serija uzetih tokom proizvodnje gadobutrola i proizvedenih iznad opisanim postupkom:

Primer 2

Karakterizacija polimorfa I i II

1. Rendgenska difrakcija

[0078] Grafičke ilustracije u nastavku prikazuju rendgenske difrakcijske spektra dva polimorfa u poređenju sa amorfnim materijalom.

Postupak

Rendgenska difrakcija praška (XRPD)

[0079] Merenje je izvršeno u režimu prenosa pomoću STOE difraktometra u prahu STADI P.

2

[0080] Pogledajte Sl.6 Rendgenski difraktogram polimorfnog monohidrata I (iznad) u poređenju sa izračunatim teorijskim difraktogramom monohidrata (ispod)

Pogledajte Sl.7, Rendgenski difraktogram polimorfa II monohidrata II

Pogledajte Sl.8, difraktogram amorfnog gadobutrola

2. IR spektar

[0081] Videti Sl.9, IR spektar monohidrata I (preparat nujol)

Videti Sl.10, IR spektar monohidrata II (preparat nujol)

Sl. 11, IP spektar amorfnog materijala (preparat nujol)

3. Diferencijalna termička analiza (DTA) i termogravimetrija (TG)

Postupak

[0082] Istovremena DTA/TG merenja se beleže na Seteram DSC 111.

[0083] Videti Sl.1, DTA/TG tragovi monohidrata I

Videti Sl.2, DTA/TG tragovi monohidrata II

Videti Sl.3, DTA/TG tragovi amorfne faze

Opis slika i formula

[0084]

Sl. 1, DTA/TG tragovi monohidrata I

Sl. 2, DTA/TG tragovi monohidrata II

Sl. 3, DTA/TG tragovi amorfne faze

Sl. 4 Prinos, čistoća i sadržaj vode nakon krajnje kristalizacije

Sl. 5, MS-Spektar

Sl. 6 Rendgenski difraktogram polimorfnog monohidrata I (iznad) u poređenju sa izračunatim teorijskim difraktogramom monohidrata (ispod)

Sl. 7, Rendgenski difraktogram polimorfa II monohidrata II Sl. 8, Rendgenski difraktogram amorfnog gadobutrola Sl. 9, JR spektar monohidrata I (preparat nujol)

Sl. 11, JR spektar amorfnog materijala (preparat nujol) Sl. 12 formule I

Sl. 13 formule II

Sl. 14 formule III

2

Claims (4)

Patentni zahtevi

1. Proces za proizvodnju gadobutrola visoke čistoće (= kompleks gadolinijuma N-(1-hidroksimetil-2,3-dihidroksipropil)-1,4,7-triskarboksimetil-1,4,7,10-tetraazaciklododekan), naznačen time da je polazni materijal ciklen (1,4,7,10-tetraazaciklododekan) reagovao sa 4,4-dimetil-3,5,8-trioksabiciklo[5,1,0]oktanom i litijum-hloridom u izopropanolu na povišenim temperaturama, zatim je destilovan u vodi i alkilovan natrijummonohloroacetatom u alkalnoj podlozi, obrađen pod hlorovodoničnim uslovima, soli se uklanjaju dodavanjem metanola, a sirovi ligand reaguje sa gadolinijum oksidom u vodi na povišenim temperaturama, pH se podešava sa litijum hidroksidom na 7.1-7.4, rastvor se koncentruje i dodaje se etanol u takvoj količini da je dostignut sadržaj vode od 7.0-9.5%, smeša je zatim zagrevana uz refluks najmanje 60 minuta, a sirovi proizvod je nakon hlađenja izolovan i osušen na 46°-48°C, sirovi proizvod je rastvoren u vodi i prečišćen u jonoizmenjivačkoj kaskadi, gde se rastvor najpre propušta kroz kiseli, a zatim kroz bazni jonoizmenjivač, koja ima provodljivost < 20 µS/cm, zatim se koncentruje, tretira aktivnim ugljem, podvrgava se sterilnoj filtraciji i merenim dodavanjem etanola, podešava na sadržaj vode u opsegu 10 - 12%, zatim se zagreva uz refluks i hladi, a proizvod je izolovan i osušen na 53-55°C.

2. Proces prema patentnom zahtevu 1, naznačen time da početni materijal ciklen (1,4,7,10-tetraazaciklododekan) reaguje sa 4,4-dimetil-3,5,8-trioksabiciklo[5,1,0]oktanom i LiCl u izopropanolu na povišenim temperaturama, zatim je destilovan u vodi i alkilovan natrijummonohloroacetatom u alkalnoj podlozi i obrađen pod hlorovodoničnim uslovima, soli se uklanjaju dodavanjem metanola, a sirovi ligand reaguje sa gadolinijum oksidom u vodi na povišenim temperaturama, pH se podešava sa litijum hidroksidom na 7.1-7.4, rastvor se koncentruje i dodaje se etanol u takvoj količini da je dostignut sadržaj vode posebno poželjno 8.5%, smeša je zatim zagrevana uz refluks najmanje 60 minuta, a sirovi proizvod je nakon hlađenja izolovan i osušen, poželjno osušen na 46°-48°C, sirovi proizvod je rastvoren u vodi i prečišćen u jonoizmenjivačkoj kaskadi, gde se rastvor najpre propušta kroz kiseli jonoizmenjivač, prečišćeni rastvor koji ima provodljivost < 20 µS/cm, zatim se koncentruje, tretira aktivnim ugljem, zatim se podvrgava sterilnoj filtraciji i merenim dodavanjem etanola tokom perioda od 120 minuta, podešava na sadržaj vode u opsegu 10 - 12%, zatim se zagreva uz refluks i hladi, a proizvod je izolovan i osušen na 53-55°C.

3. Proces prema patentnom zahtevu 1 ili 2, naznačen time da dobijeni Gadobutrol ima

2

čistoću (prema HPLC) veću od 99.7% koji sadrži manje od 0.01% slobodnih jona gadolinijuma(III),

koji sadrži sadržaj ostatka rastvarača u etanolu manji od 200 ppm i koji sadrži proporciju butil liganda (= N-(1-hidroksimetil-2,3-dihidroksipropil)-1,4,7-triskarboksimetil-1,4,7,10-tetraazaciklododekan) manju od 0.03%.

4. Proces prema patentnom zahtevu 3, naznačen time da dobijeni Gadobutrol ima sadržaj vode od 3.0 do 3.5%.