RS50125B

RS50125B - Kalcijum kompleks etilendiaminskih derivata koji sadrže fosfor

Info

Publication number: RS50125B
Application number: YUP-161/02A
Authority: RS
Inventors: Johannes Platzek; Ulrich Niedeballa; Gunter Michl
Original assignee: Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft,
Priority date: 1999-09-09
Filing date: 2000-09-06
Publication date: 2009-03-25
Also published as: NZ517708A; BG106488A; WO2001018011A1; HUP0202873A3; EP1210353B1; CN100341883C; CN1373765A; EE05106B1; CA2380766A1; NO20021167L; PL354749A1; BR0013871A; KR100650090B1; DE19964224A1; IL148563A; DE60003931D1; HK1050202A1; UA74165C2; CZ2002834A3; ES2202178T3

Abstract

Kalcijum kompleks [[(4R)-4-[bis[(karboksi-. .kapa.-0)metil]amino-.kapa.N]-6,9-bis[(karboksi-.kapa.0) metil]-l-[ (4,4-difenilcikloheksil)oksi]-l-hidroksi-2-oksa-6,9-di-aza-l-fosfaundekan-11-ilik-kiselina-.kapa. N6,.kapa.N9,.-.kapa.011]-1-oksidato (6-)],heksahidrogen (MS-325), ili njegove soli sa fiziološki kampatibilnim katjonom, u svakom slučaju u suštini bez Gd-MS-325. Prijava sadrži još 12 patentnih zahteva.

Description

Sadržina ovog pronalaska je okarakterisana u zahtevima, naime odnosi se na kalcijum kompleks [[(4-R)-4— [bis[(karb-oksi-.kapa.0)metil]araino-,kapa.N]-6,9-bis[(karboksi.kapa.0)-metil]-l-[ (4-, 4—dif enilcikloheksil)oksi]-l-hidroksi-2-oksa-6,9-diaza-l-fosfaundekan-ll-ilik-kiselina-,kapa.N6,.kapa.-N9,.kapa.011]l-oksidato(6-)]-, heksahidrogen, njegove soli, farmaceutska sredstva koja sadrže ove komplekse, na proizvodnju sredstava za redukciju dejstava koja su prouzrokovana od teških metala kao i na postupke za njihovu proizvodnju.

U medicini, kompleksna jedinjenja se upotrebljavaju posebno za tretiranje trovanja od teških metala, patološke pre-zasićenosti od gvoždja kao i proizvodnju farmaceutskih sredstava za pretpostavljene dijagnoze.

Specifikacija EP 71564- opisuje, naime meglumin so gadolinijum(III) kompleksa dietilentriaminpentasirćetne kiseline (DTPA) kao kontrast medijum za NMR tomografiju. Preparat ko-ji sadrži ovaj kompleks je priznat u ćelom svetu kao prvi kontrast medijum pod imenom Magnevist<v><y>. Ovaj kontrast medijum je dispergovan ekstracelularno posle intravenoznog davanja i eliminisan je renalno pomoću glomerularne sekre-cije. Prolaz intaktnih ćelijskih membrana u suštini nije uočen. Magnevist^ 'je posebno podešen za vidnost patološ-

kih površina (.na pr., upala, tumora).

Jedinjenja koja sadrže DTPA- ili Ca-DTPA su dalje upo-trebljena klinički u slučaju trovanja od metala.

Prema tome, postoji potreba za sredstvima koja reduku-ju dejstva prouzrokovana od teških metala.

Cilj pronalaska je proizvedu dostupna takva jedinjenja i sredstva kao i da se obezbedi postupak za njihovu proizvodnju. Realizacija ovog cilja je postignuta na osnovu ovog pronalaska.

U podnetoj specifikaciji W0 96/23526 opisuje se upotreba gadolinato(4—) , [[(4-R)-4— [bis[(karboksi-.kapa.O)metil]-amino-.kapa.Nj-6,9-bis[(karboksi-,kapa.0)metil j-1-[ (z^-,4-di-f enilcikloheksil)oksi J-hidroksi-2-oksa-6,9-diaza-l-f osf aun-dekan-ll-.-ilik-kiselina-.kapa.N6, ,kapa.N9, .kapa.011]l-oksi-dato(6-)]-trihidrogena, takodje saopsten kao Gd-MS-325, kao sredstvo za zalihu krvi. Gd-MS-325 je prepoznatljiv po tome što se vezuje za humani serum albumin (HSA) i tako ostaje u intravaskularnom prostoru. Proizvodnja Gd-MS-325 formulacije je takodje opisana u W0 96/23526. Tako, u primeru 10, opisana je proizvodnja 200 mmolarnog rastvora Gd-MS-325 (megluminska so) sa 5^-nira viškom sredstva za kompleksiranje MS-325. Dodavanje kalcijumovih soli u formulaciju je zaštićeno u zahtevu 101, ali nije posebno izneto u tekstu i u primerima.

U specifikaciji WO-96/23526 opisuje se proizvodnja Gd-MS-325 formulacija sa 5^-nim viškom sredstva za komplesiranje MS-325 (primer 10). Pokušaj da se proizvede Ca-MS-325 kompleks u ovoj formulaciji ostao je bez uspeha (videti testo-ve I-III).

Pokušaj da se napravi kompleks sa 5#-nim viškom sredstva za kompleksiranje sa Ca-hidroksidora ili Ca-karbonatom je učinjen in situ. U ovom slučaju javlja se zamućenje, posebno kada su u pitanju veće šarže (1-10 1). AAS analiza u ve-zi ovog dobijenogmutnog materijalaukazuje da je materijal u pitanju komponenta koja sadrži Gd. (U toku postupka kompleksiranja, MS-325 verovatno obrazuje se kinetički mogući intermedijarni proizvod, koji dovodi do zamućenja usled njegove slabe rastvorijivosti. Takvi oblici su verovatno Ca kompleksi fosfatnog estra. Činjenica da kada je pitanju kinetički proizveden intermedijarni proizvod za isti je potvrdjeno da ukoliko se takav mutan-zamućen rastvor refluksuje u toku 4-8 časova, talog se rastvori i dobi ja se bistar rastvor). Takodje, upotrebom HPLC (hromatografija visoke moći razdvajanja u tečnoj fazi), uočena je već deli-mična dekompozicija. Budući da će se zamućenje otkloniti filtrovanjem, čiji intenzitet delimično zavisi kojom se br-zinom kalcijum dodaje u rastvor, nereproduktivni sadržaji od Ca-MS-325 i Gd-MS-325 su dobijeni u formulaciji. Ova procedura za galensku proizvodnju takvih farmaceutskih formulacija je tako ultimativno neprihvatljiva.

Radi toga cilj je da se obezbedi prihvatljiva formulacija Gd-MS-325 koja odgovara zahtevima galenske proizvodnje, naime, formulacija koja se razlikuje od drugih i nije zamu-ćena. Ovaj cilj je postignut primenora ovog pronalaska.

Sada je pronadjeno da je gore pomenut cilj ostvaren odvojenom proizvodnjom Ca kompleksa za MS-325 ligand u suš-tini bez MS-325 helata metala koji se upotrebljavaju za di-jagnostičko oslikavanje, na pr., paramagnetičkih metala i onih koji su podesni za x-zrake ili ultrasvetlosno oslikavanje, naime pomenutih metala sa atomskim brojevima 21-29, 4-2, 44-, 57-83 i radioaktivnih metala, na pr., Tc, Re, Co, Cu, Au, Ag, Pb, Bi, In, Ga, ili u osnovi za ultraviolet-no/vidljivo/infracrveno oslikavanjebilo kojeg metalnog helata, (skupno nazvani "oslikavajući metali"). (Videti W0 96/-23.526). Zatim se vrši dodavanje u na pr., Gd-MS-325 rastvor. Ovo je prikazano, na pr., u primerima 14—29 u kojima u svakom slučaju dobijen rastvor je bistar i bez zamućenja.

Formulacije tako dobiene na ovaj način takodje po-kazuju konstantne i reprodukujuće analitičke podatke u slu-čaju većih šarži. Takodje, iste imaju bolju kompatibilnost, potpuniju ekskreziju metala i bolje osobine kardiovaskular-nog sistema nego originalna Gd-MS-325 formulacija.

Pronalazak se zato odnosi na kalcijum kompleks [[(4-R)-4— [bisC(karboksi.kapa.O)metil]amino-.kapa.N]-6,9-bis[(karb-oksi-.kapa.0)metil]-l-C(4,4-difenilcikloheksil)oksi]-l-hidroksi-2-oksa-6,9-diaza-l-fosfaundekan-ll-ilik-kiselina-,kapa.N6,,N9, .kapa.011]l-oksidat0(6-) ]-, heksahidrogena, njegovu proizvodnju i soli ovih kompleksa sa fiziološki kompatibilnim neorganskira i/ili organskim katjonima, kao na pr., što su natrijum, kalcijum, kalijum, meglumin, etanolamin, dietanolamin, morfolin, glukamin, dimetilglukamin, lizin, arginin i/ili ornitin, i na galenske formulacije sa Gd-MS-325 koje sa na taj način proizvode.

Pronalazak se dalje odnosi na upotrebu Ca-MS-325 i njegovih soli za proizvodnju farmaceutskih sredstava, posebno kao antidot protiv trovanja teškim metalima.

Proizvodnja jedinjenja shodno sa ovim pronalaskom:

Sredstvo za kompleksiranje se pretvara u kalcijum kompleks (Ca-MS-325) pomoću reakcije sa rastvorom kalcijum hidroksida, kalcijum oksidom, kalcijum karbonatom ili kalcijum bikarbonatom. Zatim, ako se želi, postojeći kiseli vodonikovi atomi iz kiselinskih grupa se supstituišu sa katjonima neorganskih i/ili organskih baza ili amino kise-linama.

U ovom slučaju, neutralizacija se vrši pomoću neorganskih baza (na pr., hidroksidima, karbonatima ili bikarbonati-ma) kao što su natrijum, kalijum, litijum ili kalcijumove baze i/ili organskih baza, kao što su primarni, sekundarni i tercijarni amini, kao što je na primer etanolamin, glukamin, N.metil- i N,N-dimetilglukamin kao i pomoću baznih aminokiselina, kao što je na primer lizin, arginin i ornitin.

Kako Ca kompleks sadrži četiri slobodne kiselinske grupe, poželjno je da se proizvedu neutralne mešovite soli'ta-ko da sadrže oba neorganska i organska katjona kao suprot-ni joni.

Na primer, ovo se dešava kod primera Ca-MS-325 kada reaguje u vodenom rastvoru sa oksidom ili sa soli željenog metala i opciono količinom neorganske ili otganske baze koja je potrebna za neutralizaciju, kompleksna obrazovana so se izoluje i opciono prečisti. Sekvenca adicione baze se može ispitati.

Proizvodnja Gd-MS-325 formulacija prema ovom pronalasku vrši se sa kalcijum kompleksnim jedinjenjima prema pronalasku zajedno sa Gd-MS-325-opciono dodavanjem aditiva ko-ji se uobičajeno upotrebljavaju u galenskoj proizvodnji-rastvoreni u vodenoj sredini i zatim rastvor se opciono ste-riliš. Može biti povoljno za proizvodnju zadnjeg primenom kalcijum kompleksnim jedinjenjima prema ovom pronalasku pri čemu se reakcija vrši sa slobodnim sredstvom za kompleksiranje MS-325 i stehiometrijskom količinom gadolinijum oksida ili soli kao i količinom neorganske ili organske baze u vodenoj sredini koja količina je potrebna za neutralizaciju gadolinijum kompleksa. Podesni aditivi su, na primer, fizio-ločki neškodljivim puferi (kao na primer,trometamin), elek-troliti (kao na primer, natrijum hlorid) kao i antioksidan-si (kao na primer, askorbinska kiselina).

Farmaceutska sredstva prema ovom pronalasku sadrže l^mol/l - 1 mol/l Gd-komplesnu so, poželjno 0,5 mmol/1 -

500 mmol/1 i 0,05-15 mol#, poželjno 0,5-5 mol# Ca-MS-325

i generalno su dozirani u količinama od 0,005 - 2 mmol/kg telesne težine, poželjno 50^/umol/kg - 500^mol/kg.

Primeri koji slede upotrebijeni su radi detaljnijeg objašnjenja subjekta iz pronalaska.

Test za in-situ proizvodnje Gd-MS-325 sa Ca-MS-325

I

Proizvodnja in situ formulacije gadolinijum kompleksa MS-325 u obliku meglumin soli (200 mmol) sa Ca-MS-325 sredstva za kompleksiranje u višku.

181,25 g (0,5 mol) gadolinijum oksida, 815,35 g (1,05

mol/95^ sadržaja (prema težini) MS-325 (ligand) i 683,25 g (3,5 mol) N-metilglukamina dodaju se u 3500 ml dejonizovane vode, i zatim 3,70 g (50 mmol) kalcijum hidroksida. Smesa se meša u toku 6 časova na 95°C. Obrazovan je zamućen rastvor. Posle hladjenja, rastvor se podesi sa dejonizova-nom vodom do zapremine od 5000 ml, zatim se filtruje radi odvajanja mutnog materijala (2 /Ufilter).

Zamućeni talog se suši u vakuum (60 oC) (prinos: 2,86 g) i rastvori u azotna kiselina/vodonik peroksidu (mikrotalasi) za AAS analizu. Nadjen je Gd sadržaj od 8,1$ (u odnosu na čvrstu materiju).

II

Proizvodnja in-situ formulacije gadolinijum kompleksa MS-235 u obliku megluminske soli (200 mmol) sa 5$ Ca-MS-32 u višku sredstva za kompleksiranje.

181,25 g (0,5 mol) gadolinijum oksida, 815,35 g (1,05 mol/oko 95$ sadržaja) (odnosu na težinu) MS-325 (ligand) i

683,25 g (3,5 mola) N-metilglukamina dodaju se u 3500 ml dejonizovane vode i zatim 5,00 g (50 mmol.) kalcijum karbonata. Sve se meša u toku 6 časova na 95°C. Mutan, neprovidan rastvor, je obrazovan. Posle hladjenja, doda se dejonizovana vo-da do ukupne zapremine od 5000 ml, i zatim se filtrovanje odvoji od mutnog materijala (2^u filter). Zamućen talog se odvoji filtrovanjem i suši (60 C u vakumu), pa se dobija 3,14 g. (Za analizu isti se rastvori u azotna kiselina/- vodonik peroksidu (mikrotalasi). Gd sadržaj iznosi 9,6#

(u odnosu na čvrstu materiju.

III

Proizvodnja in—situ formulacije gadolinijum kompleksa MS-325 u uobliku megluminske soli (200 mmol.) sa 5$ Ca-Ms-

325 viška sredsta za kompleksiranje).

18,12 g (50 mmol.) gadolinijum oksida, 81,54 g (105 mola/oko 95# sadržaja (prema težini) MS-325 liganda i 68,3 g (350 mmol.) N-metilglukamina dodaju se u 350 ml dejonizovane

vode, i zatim 0,37 g (5 mmola) kalcijum hidroksida doda. Smesa se refluksuje u toku 4 8 časova (u ovom slučaju, početno mutan bezbojan rastvor lagano se bistri i poprima svetio žutu boju), ostavi se da ohladi i tretira sa dejoni-zovanom vodom do ukupne zapremine od 500 ml. Svetio žuti rastvor se filtruje i analizira pomoću hromatografije visoke moći razdvajanja u tečnoj fazi (HPLC). Sadržaj Gd-MS-325 je odredjen sa 100$ metodom (spoljni standard: HPLC-prečošćeni Gd-MS-325). Dobijen je 96,3^-ni sadržaj. Mali sadržaj i žute boje rastvora ukazuje na razlaganje.

Za uporsdjenj : Sadržaj posle HPLC/95°C (6 časova): 98,935.

Primeri uskladjeni sa pronalaskom

Primer 1

Kalcijum(4-) , C [(4R)-4-[bis[(karboksi-.kapa.O)metil]amino-.kapa.N]-6,9-bis[(karboksi-.kapa.0)metil]-l-[(4,4-difenilcikloheksil)oksiJ-l-hidroksi-2-oksa-6,9-diaza-l-fosfaun-dekan-ll-ilik-kiselina-.kapa.N9,.kapa.011]l-oksidato(6-)]-, tetranatrijum

10,0 g (12,88 mraol/95^ sadržaj (po težini) MS-35 liganda, 0,954 g (12,88 mmola) kalcijum hidroksida i 1,546 g (38,64

mmola) natrijum hidroksida se rastvore u 2000 ml dejonizovane vode i smesa meša 5 časova na 95°0. Smesa ostavi da ohladi, pa se doda drugih 0,515 g (12,88 mmola) natrijum hidroksida, zatim filtruje sa 2^u filterom, i naslovni proizvod

se izoluje iz filtrata i suši zamrzavanjem u obliku bezbojnog amorfnog praha.

Prinos: 12,40 g (kvantitativan),sadržaj vode: 10,3$ Elementarna analiza (u odnosu na anhidrovanu supstancu): Izračunato: G 45,89/H 4,43/N 4,87/Ca 4,64/Na 10,65/P 3,59

nadjeno: C 46,01/H 4,52/N 4,99/Ca 4,53/Na 10,77/ 3,70

Primer 2

Kalcijura(4-),[C(R)-4-[bis[(karboksi-.kapa.0)metil]amino-.kapa.Nl-6,9-bis[(karboksi-.kapa.0)metil]-l-C(4,4-difenilcikloheksil)oksi J-l-hidroksi-2-oksa-6,9-diaza-l-fosfaun-dekan-ll-ilik-kiselina-,kapa.N6,,N9,,kapa.011)l-oksidato-(6-)J-, kalcijum dinatrijum

10,0 g (12,88 mmoa/95# sadržaj (po težini) MS-325 Ugan-da, 2,578 g (25,76 mmola) kalcijum karbonata i 0,515 g ili 12,88 mola natrijum hidroksida rastvore se u 2000 ml dejonizovane vode i smesa meša 5 časova na 95°C. Ista se ostavi da ohladi, i drugih 0,515 g ili 12,88 mola natrijum hidroksida se doda, posle filtrovanja sa 2^u filtrom naslovni proizvod se izoluje iz filtrata sušenjem zamrzavanjem, pa se dobija bezbojan amorfan prah.

Prinos: 12,25S(kvantitativan), sadržaj vode: 9,8$ Elementarna analiza (u odnosu na anhidrovanu supstancu): Izračunato: C 46,21/H 4,47/N 4,90/Ca 9,3VNa 5,36/P 3,61

Nadjeno: C 46,32/H 4,55/N 5,00/Ca 9,22/Na 5,45/P 5,73

Primer 5

Kalcijum(4-) , [[(4R)-4-[bisE(karboksi-.kapa.0)meti1]amino-.kapa.N]-6,9-bis[( karboksi-.kapa.0)metil]-l-[ (4-, 4-difenilcikloheksil)oksiJ-l-hidroksi-2-oksa-6,9-diaza-l-fosfaun-dekan-ll-ilik-kiselina-.kapa.N6,.kapa.N9,.kapa.011]l-oksi-dato(6-)]-, dikalcijum

10,0 g (12,88 mmola/95^ sadržaj (po težini) MS-325 liganda, 3,867 g (38,64- mmola) kalcijum karbonata se rastvore u 200 ml dejonizovane vode i smesa se meša 5 časova na 95°C. Smesa se ostavi da ohladi, filtruje sa 2^u filtrom i naslovni proizvod se izoluje iz filtrata pomoću smrzava-nja-sušenja kao bezbojan, amorfan prah.

Prinos: 11,91 g (kvantitativan), sadržaj vode: 7,9^ Elementarna analiza (u odnosu na anhidrovanu supstancu): Izračunato: C 46,53/H 4-,50/N 4,93/Ca 14,11/P 3,64

Nadjeno: C 46,41/H 4,61/N 5,02/Ca 14,22/P 3,75

Primer 4

Kalcijum(4-),[[(4R)-4-[bis[(karboksi-.kapa.0)metilJamino-.kapa.N]-6,9-bis[(karboksi-.kapa.0)metil]-l-[(4,4-difenilcikloheksil)oksiJ-l-hidroksi-2-oksa-6,9-diaza-l-fosfaun-dekan-ll-ilik-kiselina,.kapa.011]l-oksidato(6-)]-, tetrameglumin

10,0 g (12,88 mraola/95# sadržaj (po težini MS-325 liganda, 1,288 g (12,88 mmola) kalcijum karbonata i 8,80 g

(4-5,08 mmola) megluma rastvore se u 2000 ml dejonizovane vode i smesa se meša 5 časova na 95°0. ista se ostavi da ohladi, i drugih 1,257 g (6,4-4- mmola meglumina se doda, filtruje sa^u filtrom i naslovni proizvod se izoluje iz filtrata sušenjem zamrzavanjem u obliku bezbojnog amorfnog praha.

Prinos: 22,27 g (kvantitativan), sadržaj vode 10,0$ Elementarna analiza (u odnosu na anhidrovanu supstancu): Izračunato: G 4-7,07/H 7,12/N 6,30/Ca 2,57/P 1,99

Nadjeno: C 4-7,20/H 7,21/N 6,43/Ca 2,69/P 2,10

Primer 5

Kalcijum(4— ) , [ [(4R)-4-[bis[(karboksi-.kapa.0)metil]amino-,kapa.N]-6,9-bis[(karboksi-.kapa.0)metil]-l-[(4-,4~dif enil-cikloheksil)oksi]-l-hidroksi-2-oksa-6,9-diaza-l-fosfaunde-kan-ll-ilik-kiselina-.kapa.N6,.kapa.N9, .kapa.01131-oksida-to(6-)t>dinatrijum, dihidrogen

10,0 g (12,88 mmola/95 sadržaj (po težini MS-325 liganda, 1,91 g (25,76 mmola) kalcijum hidroksida i 3,77 g (19,32 mmola) meglumina se rastvore u 200 ml dejonizovane vode i smesa meša 5 časova na 95°C Ista se ostavi da ohladi, pa se doda drugih 1,257 (6,4-4 mmola) meglumina, zatim se filtruje pomoću^u filtra i proizvod se izoluje iz filtrata posle sušenja zamrzavanjem u obliku bezbojnog amorfnog praha.

Prinos: 17,06 g (kvantitativan), sadržaj vode: 9,1% Elementarna analiza (u odnosu na anhidrovanu supstancu): Izračunato: C 46,88/H 6,19/N 5,82/Ca 6,66/P 2,57

Nadjeno: C 47,01/H 6,29/N 5,93/Ca 6,58/P 2,69

Primer 6

Kalcijum(4-),[[(4R)-4-[bis[(karboksi-.kapa.0)metil3amino-.kapa.Nj-6,9-bis[(karboksi-.kapa.0)metil]-l-[(4,4-difenilcikloheksil)oksi]-l-hidroksi-2-oksa-6,9-diaza-l-fosfaun-dekan-ll-ilik-kiselina-.kapa.N6,,kapaN9,.kapa.011Jl-oksi-dato(6-)]■-, kalcijum, dihidrogen

10,0 g (12,88 mmola/95% sadržaj (po težini) MS-325 ligand a i 1,91 g (25,76 mmola) kalcijum hidroksida se rastvo-

re u 200 ml dejonizovane vode i smesa meša u toku 5 časo-va na 95°C. Ista se ostavi da ohladi, filtruje preko22yUfiltra i naslovni proizvod se izoluje iz filtarta postupkom zamrzavanje-sušenje, pa se dobija u obliku bezbojnog amorfnog praha.

Prinos: 11,30 g (kvantitativan), sadržaj vode: 7,3% Elementarna analiza (u odnosu na anhidrovanu supstancu): Izračunato: 0 51,09/H 5,46/N 5,42/Ca 5,17/P 5,99

Nadjeno: C 51,21/H 5,55/N 5,53/Ca 5,08/P 4,10

Primer 7

Kalcijum(4-),[[(4R)-4-[bis[(karboksi-.kapa.0)metil]amino-.kapa.N]-6,9-bis[(karboksi-.kapa.0)metilJ-l-[(4,4-difenil-ciiloheksil)oksiJ-l-hidroksi-2-oksa-6,9-diaza-l-fosfaun-dekan-ll-ilik-kiselina-.kapa,N5,•kapa. N9, •kapa.011]1-oksi dato(6-)]-, tetrahidrogen

10 g (12,88 mmola) MS-325 i 0,954 g (12,88 mmola) kalcijum hidroksidadodaju se u 100 ml vode i doda se 1,55 g (38,64 mmola) natrijum hidroksida. Smesa se zagreva u toku 5 časova na 80°0 i zatim se ohladi do 10° i podesi na pH 2,5 sa 10%-nom codenom hlorovodoničnom kiselinom. Zatim, doda se 200 ml izopropanola i smesa ohaldi do 0°C. Ostavi se da se taloži u toku 3 časa na 0°C, pa se zatim filtruje

od staloženog taloga. Talog koji je odvojen filtrovanjem ispere se dva puta sa 100 ml dietil etra i suši u vakumu.

Prinos: 8,76 g (87% od teorijskog) bezbojnog, kristal-nog praha.

Sadržaj vode: 7,6%

Elementarna analiza (u odnosu na anhidrovanu supstancu): Izračunato: C 51,09/H 5,46/M 5,42/Ca 5,17/P 3,99

Nadjeno: C 50,87/H 5,64/N 5,28/Ca 5,01/P 3,72

Primer 8

Kalcijum(4-),[[(4R)-4-[bis[(karboksi-.kapa.0)metilJ amino-.kapa.N]-6,9-bis[(karboksi-,kapa.0)metil]-l-[(4,4-difenilcikloheksil)oksi]-l-hidroksi-2-oksa-6,9-diaza-l-fosfaun-dekan-ll-ilik-kiselina-.kapa.N6, .kapa.N9,,kapa.011)l-oksi-dato(6-)]-, dinatrijum; dihidrogen 10,0 g (12,88 mraola/95% sadržaj (po težini) MS-325 liganda, 1,288 g (12,88 mmola) kalcijum karbonata i 1,03 g (25,76 mmola) natrijum hidroksida se rastvore u 200 ml dejonizovane vode i smesa meša u toku 5 časova na 95°C. Ista se ostavi da ohladi, filtruje sa 2^u filtrom i naslovni proizvod

se izoluje iz filtrata i posle sušenja-zamrzavanje dobija se proizvod u obliku bezbojnog, amorfnog praha.

Prinos: 11,70 g (kvantitativan), sadržaj vode: 9,8% Elementarna analiza (u odnosu na anhidrovanu supstancu): Izračunato: C 48,35/H 4,92/N 5,13/Ca 4,89/Na 5,61/P 3,78

Nadjeno: C 48,49/H 5,01/N 5,24/Ca 5,00/Na 5,50/P 3,90

Primer 9

Kalcijum(4-), [ [(4R)-4- [bisC(karboksi-.kapa.0)metil]araino-.kapa.N]-6,9-bis[(karboksi-.kapa.0)metilJ-l-[(4,4-difenilcikloheksil)oksi]-l-hidroksi-2-oksa-6,9-diaza-fosfaundekan--ll-ilik-kiselina-.kapa.N6,.kapa.N9,wkapa.011]l-oksidato-(6-)J-, trinatrijum, monohidrogen

10,0 g (12,88 mmola/95% sadržaj (po težini) MS-325 liganda, 0,954 g (12,88 mmola) kalcijum hidroksida i 1,546 g (38,64 mmola) natrijum hidroksida se rastvore u 200 ml dejonizovane vode i smesa meša u toku 5 časova na 95°0. Ista se ostavi da ohladi, filtruje sa 2 yU filtrom i naslovni proizvod se izoluje iz filtrata zamrzavanjem-sušenjem, pa se dobija proizvod u obliku bezbojnog, amorfnog praha.

Prinos: 12,14 g (kvantitativan), sadržaj vode: 10,7% Elementarna analiza (u odnosu na anhidrovanu supstancu): Izračunato: C 47,09/H 4,67/N 4,99/Ca 4,76/Na 8,19/P 3,68

Nadjeno: C 47,33/H 4,78/N 5,12/Ca 4,70/Na 8,27/P 3,80

Primer 10

Kalcijum(4-),[[(4R)-4-[bis[(karboksi-.kapa.0)metil]amino-.kapa.N]-6,9-bis[(karboksi-,kapa.0)metil]-l-[(4,4-difenilcikloheksil)oksi]-l-hidroksi-2-oksa-6,9-diaza-l-fosfaundekan-ll-ilik-kiselina-.kapa.N6,,kapa.N9,.kapa.011]l-oksidato-(6-)J-, dimeglumin, dihidrogen

10,0 g (12,88 mmola/95% sadržaj (po težini) MS-325 liganda, 0,954 g (12,88 mmola) kaldijum hidroksida i 5,03 g

(25,76 mmola) meglumina se rastvore u 200 ml dejonizovane vode i smesa mesa u toku 5 časova na 95°C. Ista se ostavi da ohladi, filtruje sa 2^u filtrom i naslovni proizvod se izoluje iz filtrata postupkom zamrzavanje-sušenje, pa se dobija bezbojni proizvod u obliku amorfnog praha.

Prinos: 17,22 g (kvantitativan), sadržaj vode 12,8% Elementarna analiza (u odnosu na anhidrovanu supstancu): Izračunato: C 48,41/H 6,57/N 6,01/Ca 3,44/P 2,66

Nađ^n-r.48,28/H 6,69/N 6,12/Ca 3,52/P 2,77

Primer 11

Kalcijum(4— ),[[(4R)-4- [bis[(karboksi-,kapa.O)metilJamino-.kapa.N]-6,9-bis[(karboksi-.kapa.0)metil]-l-[(4,4-đifenil-cikloheksil)oksiJ-l-hidroksi-2-oksa-6,9-diaza-l-fosfaudekan-ll-ilik-kiselina-.kapa.N6,.kapa.N9,.kapa.011]l-oksidato-(6-)]-, trimeglumin, monohidrogen

10,0 g (12,88 mmola/95% sadržaj (po težini) MS-325 liganda, 1,288 g (12,88 mmola) kalcijum karbonata i 7,54Sili 38,64- mmola meglumina se rastvore u 200 ml dejonizovane vo-de i smesa-rastvor se meša u toku 5 časova na 95°C. Isti se ostavi da ohladi, filtruje (2^u filtar) i naslovni proizvod se izoluje iz filtrata zamrzavanjem i posle sušenja dobija se proizvod u obliku bezbojnog amorfnog praha.

Prinos: 19,70 g (kvantitativan), sadržaj vode 11,0% Elementarna analiza (u odnosu na anhidrovanu supstancu): Izračunato: C 47,64/H 6,88/N 6,17/Ca 2,94/P 2,28

Nadjeno: C 47,80/H 6,97/N 6,28/Ca 3,00/P 2,4-0

Primer 12

Kalcijum(4—), [[(4-R)-4~[bis[(karboksi-.kapa.0)metil-amino-. kapa.N]-6,9-bis[( karboksi-. kapa. 0)metil]-l-[ (4-, 4-dif enil-cikloheksil)oksi]-l-hidroksi-2-oksa-5,9-diaza-l-fosfaudekan-ll-ilik-kiselina-.kapa.N6,,kapa.N9,.kapa.Olljl-oksidato-(6-)J-, natrijum 3,5 hidrogen 0,5

10,0 g (12,88 mmola/95% sadržaj (po težini) MS-325 liganda, 1,288 g ili 12,88 mmola kalcijum karbonata i 1,546 g ili 38,64 mmola natrijum hidroksida se rastvore u 200 ml dejonizovane vode i rastvor meša u tpli 5 časova na 95°C. Isti

se ostavi da ohladi i pH podesi na 7,4 dodavanjem 5%-nog vodenog rastvora natrijum hidroksida. Posle filtrovanja izolovano je naslovno jedinjenje postupkom-zamrzavanje-sušenje.

Prinos: 12,01 g (kvantitativan) bezbojnog praha sa

sadržajem vode od 8,6%

Elementarna analiza (u odnosu na anhidrovanu supstancu):

računato kao 3,5 natrijumov so

Izračunato: C 46,68/H 4,55/N 4,93/Ca 4,70/Na 9,44/P 3,63

Nadjeno: C 46,6l/H 4,43/N 5,02/Ca 4,81/Na 9,51/P 3,71

Primer 15

Kalcijum(4-), [ [(4Pl)-4-[bis[(karboksi-.kapa.0)metil]amino-.kapa.N]-6,9-bis C(karboks i-.kapa.0)metilj-1-[(4,4-difenilcikloheksil)oksi]-l-hidroksi-2-oksa-6,9-diaza-l-fosfaundekan-ll-ilik-kiselina-.kapa.N6,.kana.N9,.kapa.011]1-oksidato-(6-)], meglumin 3,5 hidrogen 0,5

10,0 g (12,88 mmola/sadržaj 95% (°težini)MS-325 liganda, 1,288 g ili 12,88 mmola kalcijum karbonata i 7,54 g ili 38,64 mmola meglumina se rastvore u 200 ml dejonizovane vode i rastvor meša u toku 5 časova na 95°G. Isti se ostavi da ohladi i pH se podesi na 7,4 sa 5%-nim vodenim rastvorom meglumina. Posle filtrovanja naslovno jedinjenje je izolovano postupkom zamrzavanje-sušenje.

Prinos: 20,82 g (kvantitativan) bezbojnog oraha, sadr-žaj vode: 9,7%

Elementarna analiza (u odnosu na anhidrovanu supstancu)

računato kao 3,5 megluminska so

Izračunato: C 47,32/H 7,04/N 6,24/Ca 2,75/P 2,12

Nadjeno: C 47,48/H 7,15/N 6,36/Ca 2,87/P 2,17

Primer 14

Proizvodnja formulacije gadolinijum kompleksa MS-325 u obliku natrijumove soli (200 mmola) (5%-ni višak sredstva za kompleksiranje za naslovno jedinjenje iz primera 1)

18,12 g (50 mmola) gadolinijum oksida, 77,65 (100

mmola/95% sadržaj(po težini) MS-325, 4,318 g (5,0 mmola naslovnog jedinjenja iz primera 1, i 11,2 g (280 mmola) natrijum hidroksida se mešaju u 350 ml tris-HCl puferu (10 mmola/1) na pH 7,4 u toku 6 časova na 95°C. Smesa se ostavi da postig-ne sobnu temperaturu i pH se podesi na 7,4 sa 20%-nim vodenim rastvorom natrijum hidroksidom. Zatim se smesa sa tris-HCl puferom (10 mmola/litar) podesi na 7,4 do ukupne zapremine od 500 ml, rastvor se filtruje (2^u filtar) i filtrat dekantuje u ampule..

Primer 14

Proizvodnja formulacije gadolinijum kompleksa MS-325 kao natrijumove soli (200 mmola) (5%-ni višak sredstva za kom-lleksiranje od naslovnog jedinjenja iz primera 1)

L8,2 g (50 mmola gadolinijum oksida, 77,65 (100 mmola/- 95% sadržaj (po težini) MS-325, 4,318 (5,0 mmola) naslovnog jedinjenja iz primera 1, i 11,2 g (280 mmola) natrijum hidroksida se mešaju u 350 ml tris-HCl pufera (10 mmola) na pH 7,4 u toku 6 časova na 95°C. Smesa se ostavi da ohladi do sobne temperature i podesi na pH 7,4 sa 20%-nim vodenim natrijum hidroksidom. Zatim se smesa sa tris-HCl puferom (10 mmola/litar) podesi na pH 7,4 do ukupne zapremine od 500 ml, rastvor se filtruje (2^u filtar) i filtrat se dekantuje u ampule.

Primer 15

Proizvodnja formulacije gadolinijum kompleksa MS-325 kao megluminske soli (200 mmola) (5%.ni višak sredstva za kompleksiranje od naslovnog jedinjenja iz primera 4)

18,12 g (50 mmola) gadolinijum oksida, 77,65 (100 mmola/95% sadržaja (po težini) MS-325, 7,783 g (5,0 mola) naslovnog jedinjenja iz primera 4 i 54,66 g (280 mmola) meglumina se mešaju u 350 ml tris-HCl pufera (10 mmola/- litar)na pH 7,4 u toku od 6 časova. Smesa se ostavi da zauzme sobnu temperaturu, i pH se podesi na 7,4 sa 20%-nim vodenim megluminom. Zatim se smesa podesi sa tris-HCl puferom (10 mmola/litar/pH 7,4) do ukupne zapremine od 5°0 ml,

rastvor se filtruje (2^u filtar), pa se filtrat dekantuje u ampule,

Primer 16

Proizvodnja formulacije gadolinijum kompleksa MS-325 kao natrijuraove soli (200 mmola)(5%-ni višak sredstva za kotti-pleksiranje od naslovnog jedinjenja iz primera 7)

18,12 g (50 mmola) gadolinijum oksida, 77,65 (100 mmola/95% sadržaj po težini)MS-325, 5,879 g (5,0 mmola naslovnog jedinjenja iz primera 7 i 11,2 g (280 mmola) natrijum hidroksida se mešaju u 350 ml tris-HCl pufera (10 mmola/litar, pH 7,4) u toku 6 časova na95°C.Smesa se ostavi da zauzme sobnu temperaturu iodesi na pH 7,4 sa 20%-nim vodenim natrijum hidroksidom. Zatim, smesa se sa tris-HCluferom (10 mmol/litar/pH 7,4) podesi na ukupnu zapreminu od 500 ml, rastvor se filtruje (2^u filtar) i filtrat se dekantuje u ampule.

Primer 17

Proizvodnja formulacije gadolinijum kompleksa MS-325 kao natrijumove soli (200 mmola) (5%-ni višak sredstva za kompleksiranje od jedinjenja iz primera 8)

18,12 g (50 mmola) gadolinijum oksida, 77,65 (100 mmola/- 95% sadržaj (težinski) MS-325, 4,099 g (5,0 mmola) naslovnog jedinjenja iz primera 8 i 11,2 g (280 mmola) natrijum hidroksida se mešaju u 350 ml tris-HCl šuferu (10 mmola/- litar, pH 7,4) u toku 6 časova na 95°C. Smesa se ostavi da zauzme sobnu temperaturu i pH podesi na 7,4 sa 20%-nim vodenim natrijum hidroksidom. Zatim, smesa se sa tris-HCl puferom (10 mmola/litar/pH 7,4) podesi na ukupnu zapreminu od 500 ml, rastvor se filtruje(2^ufiltar) i filtrat se dekantuje u ampule.

Primer 18

Proizvodnja formulacije gadolinijum kompleksa MS-325 kao natrijumove soli (200 mmola) (5%-ni višak sredstva za kompleksiranje od jedinjenja iz primera 9)

18,12 g (50 mmola) gadolinijum oksida, 77,65 (100 mmola/-

95% sadržaj (težinski) 143*325, 4,209 g (5,0 mmola naslovnog jedinjenja iz primera 9 i 11»2 g (280 mmola) natrijum hidroksida se mešaju u 350 ml tris-HCl puferu (10 mmola/- litar, pH 7,4) u toku 6 časova na 95°C Smesa se ostavi da zauzme sobnu temperaturu i podesi na pH 7,4 sa 20%-nim vodenim natrijum hidroksidom. Zatim se sa tris-HCl puferom (lOmmola/litar/pH 7,4) podesi smesa do ukupne zapremine od 500 ml, rastvor se filtruje (2^u filtar),i filtrat se dekantuje u ampule. ;Primer 19 ;Proizvodnja formulacije gadolinijum kompleksa MS-325 kao natrijumove soli (200 mmola)(5%-ni višak sredstva za kompleksiranje od naslovnog jedinjenja iz primera 12) ;18,12 g (50 mmola) gadolinijum oksida, 77,65 (100 mmola/95% saržaj (realna težina K3-325, 4,26 g (5,° mmola) naslovnog jedinjenja iz primera 12 i 11,2 g (280 mmola) natrijum hidroksida se mešaju u 350 ral tris-HCl pufera (10 ;mmola/litar, pH 7,4 u toku od 6 časova na 95°C. Smesa se ostavi da zauzme sobnu temperaturu i pH podesi na 7,4 sa 20%-nim vodenim natrijum hidroksidom.Zatim se sa tris-HCl puferom (10 mmol/litar/pH 7,4) podesi smesa do ukupne zapremine od 500 ml, rastvor se filtruje (2^u filtar) i flitrat se dekantuje u ampule. ;Primer 20 ;Proizvodnja formulacije gadolinijum kompleksa MS-325 kao megluminske soli (200 mmol)(5%-ni višak sredstva za kompleksiranje od naslovnog jedinjenja iz primera 13 ;18,12 g (50 mmola) gadolinijum oksida, 77,65 (100 mmola/95% sadržaj, po težini) MS-325, 7,297 g (5,0 mmola) naslovnog jedinjenja iz primera 13 i 54,66 g (280 mmola) megluminske soli se mešaju u 35° ml tris-HCl puferu (10 mmola/litar) na pH 7,4 u toku 5 časova na 95°C. Smesa se ostavi da zauzme sobnu temperaturu i pH podesi na 7,4 sa 20%-nim vodenil megluminom. Zatim, sa tris-HCl puferom smesa podesi do ukupne zapremine od 500 ml, rastvor se filtruje (2yUfiltar) i filtrat dekantuje u ampule. ;Primer 21 ;Proizvodnja formulacije gadolinijum kompleksa MS-325 kao megluminske soli (200 mmola)(5%-ni višak sredstva za kompleksiranje od naslovnog jedinjenja iz primera 10) ;18,12 g gadolinijum oksida, 77,65 (100 mmol/95% sadr žaj-po težini) MS-325, 5,83 g (5,0 mmola) naslovnog jedinjenja iz primera 10 i 54,66 g (280 mmola) meglumina se mešaju u 350 ml tris-HCl pufera (10 mmol/litar) na pH 7,4 u toku od 6 časova na 95°C. Smesa se ostavi da zauzme sobnu temperaturu i pH podesi na 7,4 sa 20%-nim vodenim megluminom. Zatim se sa tris-HCl puferom (lOmmola/litar/pH 7,4) sme- ;sa podesi do ukupne zaoremine od 500 ml, rastvor se filtruje (2yUfiltar) i filtrat dekantuje u ampule. ;Primer 22 ;Proizvodnja formulacije gadolinijum kompleksa MS-325 kao natrijumove soli (200 mmola)(5%-ni višak sredstva za kompleksiranje od naslovnog jedinjenja iz primera 1) ;18,12 g (50 mmola) gadolinijum oksida, 77,65 (100 mmola/- 95% sadržaj, težinski MS-325, 1,08 g (1,25 mmola) naslovnog jedinjenja iz primera 1 i 11,2 g (280 mmola) natrijum hidroksida se mešaju u 350 ml tris-HCl pufera (10 mmola/litar, pH 7,4) u toku 6 časova na 95°C. Smesa se ostavi da zauzme sobnu temperaturu ipođesi na pH 7,4 sa 20%-nim vodenim natrijum hidroksidom. Zatim se smesa sa tris-HCl puferom (10 mmol/litar/pH 7,4) podesi do ukupne zapremine od 500 ml, rastvor se filtruje (2^u filtar) i filtrat dekantuje u ampule. ;Primer 25 ;Proizvodnja formulacije gadolinijum komleksa MS-325 kao natrijumove soli (200 mmol)(2,5%-ni višak sredstva za kompleksiranje od naslovnog jedinjenja iz primera 1) ;18,12 g (50 mmola) gadolinijum oksida, 77,65 (100 mmola/95% sadržaj (težinski) MS-325, 2,16 g (2,50 mmola naslovnog jedinjenja iz primera 1 i 11,2 g (280 mmola) ;natrijum hidroksida se mešaju u 350 ml tris-HCl pufera ;(10 mmola/litar/pH 7,4) u toku 6 časova na 95°C Smesa se ostavi da zauzme sobnu temperaturu. Ista se zatim sa tris-HCl puferom (10 mmol/litar/pH 7,4) podesi do ukupne zapremine od 500 ml, rastvor se filtruje (2^u filtar) i filtrat dekantuje u ampule. ;Primer 24 ;Proizvodnja formulacije gadolinijum kompleksa MS-325 kao megluminske soli (200 mmola)(1,25%-ni višak sredstva za kompleksiranje od naslovnog jedinjenja iz primera 4) ;18,12 g (50 mmola) gadolinijum oksida, 77,55 (100 mraola/- 95?4 sadržaj, težinski MS-325, 1,946 g (1,25 mmola) naslovnog jedinjenja iz primera 4 i 54,66 g (280 mmola) meglumina se mešaju u 350 ml tris-HCl pufera (10 mmola/litar) na pH u toku 6 časova na 95 C. Smesa se ostavi da zauzme sobnu temperaturu i pH se podesi na 7,4 sa 20%-nim vodenim megluminom. Zatim, smesa se sa tris-HCl puferom (10 mmola/litar/pH 7,4) dopuni do ukupne zapremine od 500 ml, rastvor se filtruje (2yufiltar) i filtrat se dekantuje u ampule. ;Primer 25 ;Proizvodnja formulacije gadolinijum kompleksa MS-325 kao megluminske soli (200 mmola)(2,5%-ni višak sredstva za kompleksiranje od naslovonog jedinjenja iz primera 4) ;18,12 g gadolinijum oksida, 77,65 (100 mmola/95% sadržaj, težinski MS-325, 3,891 (2,5 mmola) naslovnog jedinjenja iz primera 4 i 54,66 g (280 mmola) meglumina se mešaju u 350 ml tris-HCl pufera (10 mmola/litar/pH 7,4) u toku 6 časova na 95°C. Smesa se ostavi da zauzme sobnu temperaturu i podesi pH na 7,4 sa 20%-nim vodenim megluminom. Zatim, smesa se sa tris-HCl puferom dotera do ukupne zapremine od 500 ml (HC1 pufer upotrebljen sadrži 10 mmola/litar/pH 7,^0, ;posle čega se rastvor filtruje sa ( 2jn filtrom) i dobijeni filtrat se dekantuje u ampule. ;Primer 26 ;Proizvodnja formulacije gadolinijum kompleksa MS-325 kao natrijumove soli (200 mmola)(5%-ni višak sredstva za kompleksiranje odod naslovnog jedinjenja iz primera 1) ;Alternativni postupak ;18,12 g (50 mmola) gadolinijum oksida, 77,65 (100 mmola/95% sadržaj (težinski MS-325, i 11,2 g (280 mmola) natrijum hidroksida se mešaju u 350 ml tris-HC. pufera (10 mmol/litar, pH 7,4) u toku od 6 Časova na 95°C. Smesa se ostavi da zauzme sobnu temperaturu, 4,318 g (5,0 mmola) naslovnog jedinjenja iz primera 1 se doda, i pHodesi na 7,4 sa 20%-nim vodenim natrijum hidroksidom.Zatim, smesa se dopuni sa tris-HCl puferom (10 mmola/litar, pH 7,4) do ukupne zapremine od 500 ml, rastvor se filtruje (2^ufiltar) i filtrat se dekantuje u ampule. ;Primer 27 ;Proizvodnja formulacije gadolinijum kompleksa MS-235 kao megluminske soli (200 mmola)(5%-ni višak sredstva za kompleksiranje od jedinjenja iz primera 4) ;Alternativni postupak ;18,12 g (50 mmola) gadolinijum oksida, 77,65 (100 mmola/95% sadržaj(po težini) MS-325, i 54,66 g (280 mmola) meglumina se mešaju u 350 ml tris-HCl pufera (10 mmol/litar, pH 7,4) u toku od 6 časova na 95°C. Smesa se ostavi da zauzme sobnu temeraturu, doda se 7,783 g (5,0 mmola) naslovnog jedinjenja iz primera 4 i pH se podesi na 7,4 sa 20%-nim vodenim megluminom. Tada se smesa dopuni sa tris-HCl puferom (10 mmol/litar, pH 7,4) do ukupne zapremine od 500 ml, rastvor se filtruje (2^ufiltar) i filtrat dekantuje u ampule. ;Primer 28 ;Proizvodnja formulacije gadolinijum kompleksa MS-325 kao natrijumove soli (200 mmola)(2,50%-ni višak sredstva za kompleksiranje od naslovnog jedinjenja iz primera 1) Alternativni postupak ;18,12 g (50 mmola) gadolinijum oksida, 77,65 (100 ;mmola/95% sadržaj (težinski) MS-325 i 11,2 g (280 mmola) natrijum hidroksida se mešaju u 550 ml tris-HCl puferu (10 mmol/litar, pH 7,4) u toku 6 časova na 95 C. Smesa se ostavi da ohladi do sobne temperature, doda se 2,16 g (2,50 mmola) naslovnog jedinjenja iz primera 1, i pH se podesi ;sa tris-HCl puferom (10 mmol/litar, pH 7,4) na ukupnu zapreminu od 500 ml, rastvor se filtruje (2yufiltar), i filtrat dekantuje u ampule. ;Primer 29 ;Proizvodnja formulacije gadolinijum kompleksa "0-325 kao megluminske soli (200 mmol)(2,50%-ni višak sredstva za kompleksiranje od naslovnog jedinjenja iz primera 4) Alternativni postupak ;18,12 g (50 mmola) gadolinijum oksida, 77,65 (100 mmol/- 95% sadržaj)(težinski) MS-325, i 54,66 g (280 mmola) meglumina se mešaju u 350 ral tris-HCl pufera (10 mmola/litar, ;pH 7,4) u toku 5 časova na 95°C. Smesa se ostavi da zauzme sobnu temperaturu, doda se 3,891 g (2,50 mmola) naslovnog jedinjenja iz primera 4 i pH se podesi na 7,4 sa 20%-nim vodenim meglumino. Zatim, smesa se dopuni sa tris-HCl puferom (10 mmola/litar, pH 7,4) do ukupne zapremine od 500 ml, rastvor se filtruje (2^,u filtar i filtrat dekantuje u ampule. ;Primer 50 ;1 H 1 • J 31P NMR spektri za jedinjenja iz primera 1 i 2 ;Sva merenja su vršena na AMX 400 NMR-spektometru ;(400 MHz, Bruker) ;*H hemijski pomeraji su označeni u 6 (ppm) u odnosu na rastvarač D?0 6 = 4,8 ppm)

31P hemijski pomeraji su označeni u 6 (ppm) u odnosu na

spoljni standard

H^PO^(85%, 5 = 0 ppm).

Naslovna jedinjenja iz primera 1 i 2 su rastvorena u DgO i spektri su vršeni na sobnoj temperaturi.

Rezultati:

Naslovno jedinjenje iz primera 1

<X>H: 1,4-1,7 (m, 2H), 1,8-2,1 (m,JH), 2,15-225 (ra, 2H),

2,52 (t, 12Hz, IH), 2,5-2,92 (m, 7H), 2,95-3,4

(ra, 8H), 3,45 (d 16Hz, IH), 3,66 (d 16Hz, IH), 3,8-3,95 Cm, 2H), 4,23 (m, IH), 7,15-7,25 (m, 2H), 7,25-7,5 O, 8H)

<51>P: 0,38 (q, 6Hz), 0,51 (q, 6Hz)

Naslovno jedinjenje iz primera 2

Hl: 1,20-1,45 (širok,2H), 1,5-1,7 (širok,2K), 1,75-2,05 (m,3H), 2,1-2,5 (m, 6H), 2,65-3,20 (m, 8H), 3,24 (dl6Hz, b IH), 3,45 (d 16Hz, IH), 3,50-3,80 (m, 4H), 4,02 (m,lH), 6,75-7,20 (m, 10H)

<51>P<:>0,25 (q, 6Hz), 0,10 (q, 5Hz)

Claims

1. Kalcijum kompleks [[(4R)-4-[bis((karboksi-..kapa.-0)metil]amino-.kapa.N]- 6,9-bis[(karboksi-.kapa.0)metil]-1-[(4,4-difenilcikloheksil)oksi]-l-hidroksi-2-oksa-6,9-di-aza-l-fosfaundekan-ll-ilik-kiselina-.kapa.N6,.kapa.N9,.- .kapa.011]-1-oksidato ( 6-)],heksahidrogen (MS-325), ili njegove soli sa fiziološki kampatibilnim katjonom, u svakom slučaju u suštini bez Gd-MS-325.

2. Jedinjenje prema Zahtevu 1, naznačeno time, što je najmanje jedan od fiziološki kompatibilnih katjona natrijum, kalcijum, kalijum, meglumin, etanolamin, dietanolamin, morfolin, glukamin, dimetilglukamin, lizin, arginin ili ornitin.

3. Jedinjenje prema zahtevu jedan, naznačeno time, što je odabrano od grupe koja sadrži: Kalcijum(4-),[[(4R)-4-[bis[(karboksi-..kapa.-0)metil]amino-.kapa.N]-6,9-bis[(karboksi-.kapa.0)metil]-l-[ (4,4-difenilcikloheksil)oksi]-1-hidroksi-2-oksa-6,9-di-aza-l-f osf aundekan-ll-ilik-kiselina- .kapa.N6,.kapa.N9,- .kapa.011]-1-oksidato(6-)],tetranatrijum; Kalcij um(4-), [[(4R)-4-[bis[(karboksi-..kapa.-0)metil]amino-.kapa.N]-6,9-bis[(karboksi-.kapa.0)metil]-1- [ (4,4-difenilcikloheksil)oksi]-l-hidroksi-2-oksa-6,9-di-aza-l-f osfaundekan-11-i lik-kiselina-.kapa.N6,.kapa.N9,- .kapa.011]-1-oksidato(6-)], kalcijum, dinatrijum; Kalcij um(4-), [[(4R)-4-[bis[(karboksi-..kapa.-0)metil]amino-.kapa.N]-6,9-bis[(karboksi-.kapa.0)metil]-l-[ (4,4-difenilcikloheksil)oksi]-l-hidroksi-2-oksa-6,9-di-aza-l-f osf aundekan-ll-ilik-kiselina- .kapa.N6,.kapa.N9,- .kapa.011]-1-oksidato (6-)], dikalcijum; Kalcijum(4-),[[(4R)-4-[bis[(karboksi-..kapa.-0)metil]amino-.kapa.N]-6,9-bis[(karboksi-.kapa.0)metil]-l-[ (4,4-difenilcikloheksil)oksi]-l-hidroksi-2-oksa-6,9-di-aza-l-f osf aundekan-ll-ilik-kiselina- . kapa .N6, . kapa . N9, - .kapa.011]-l-oksidato(6-)], tetrameglumin; Kalcij um(4-), [[(4R)-4-[bis[(karboksi-..kapa.-0)metil]amino-.kapa.N]-6,9-bis[(karboksi-.kapa.0)metil]-1-[(4,4-difenilcikloheksil)oksi]-l-hidroksi-2-oksa-6, 9-di-aza-l-f osf aundekan-ll-ilik-kiselina- . kapa . N6, . kapa . N9, - .kapa.011]-1-oksidato ( 6-)], kalcijum, dimeglumin; Kalcijum(4-),[[(4R)-4-[bis[(karboksi-..kapa.-0)metil]amino-.kapa.N]-6,9-bis[(karboksi-.kapa.0)metil]-l-[(4,4-difenilcikloheksil)oksi]-l-hidroksi-2-oksa-6,9-di-aza-l-f osf aunde kan- 1 1-i lik- kiselina- .kapa.N6,.kapa.N9,- .kapa.011]-l-oksidato(6-)], kalcijum,dihidrogen; Kalcij um(4-), [[(4R)-4-[bis[(karboksi-..kapa.-0)metil]amino-.kapa.N]-6,9-bis[(karboksi-.kapa.0)metil]-l-[(4,4-difenilcikloheksil)oksi]-l-hidroksi-2-oksa-6,9-di-aza-l-f osf aundekan-ll-ilik-kiselina- .kapa.N6,.kapa.N9,- .kapa.011]-1-oksidato(6-)], tetrahidrogen; Kalcij um(4-), [[ (4R)-4-[bis[(karboksi-..kapa.-0}metil]amino-.kapa.N]-6,9-bis[(karboksi-.kapa.0)metil]-1-[ (4,4-difenilcikloheksil)oksi]-l-hidroksi-2-oksa-6, 9-di-aza-l-f osf aundekan-ll-ilik-kiselina- .kapa. N6, .kapa.N9,- .kapa.011]-1-oksidato(6-)], dinatrijum, dihidrogen; Kalcij um(4-), [[(4R)-4-[bis[(karboksi-..kapa.-0)metil]amino-.kapa.N]-6,9-bis[(karboksi-.kapa.0)metil]-l-[(4,4-difenilcikloheksil)oksi]-l-hidroksi-2-oksa-6,9-di-aza-1-fosfaundekan-11-ilik-kiselina-.kapa.N6,.kapa.N9,- .kapa.011]-1-oksidato ( 6-)], trinatrijum, monohidrogen; Kalcijum(4-),[[(4R)-4-[bis[(karboksi-..kapa.-0)metil]amino-.kapa.N]-6,9-bis[(karboksi-.kapa.0)metil]-l-[ (4,4-difenilcikloheksil)oksi]-l-hidroksi-2-oksa-6,9-di-aza-l-f osfaundekan-ll-ilik-kiselina-.kapa. N6,.kapa.N9,- .kapa.011]-1-oksidato(6-)], dimeglumin, dihidrogen; Kalcijum(4-),[[(4R)-4-[bis[(karboksi-..kapa.-0)metil]amino-.kapa.N]-6,9-bis[(karboksi-.kapa.0)metil]-1-[(4,4-difenilcikloheksil)oksi]-l-hidroksi-2-oksa-6,9-di-aza-l-f osfaundekan-11-ilik-kiselina-.kapa.N6,.kapa.N9,- .kapa.011]-1-oksidato ( 6-)], trimeglumin, monohidrogen; Kalcijum(4-),[[(4R)-4-[bis[(karboksi-..kapa.-0)metil]amino-.kapa.N]-6,9-bis[(karboksi-.kapa.0)metil]-l-[(4, 4-difenilcikloheksil)oksi]-l-hidroksi-2-oksa-6,9-di-aza-l-f osfaundekan-11-ilik-kiselina-.kapa.N6,.kapa.N9,- .kapa.011]-1-oksidato (6-)], dinatrijum 3,5, vodonik 0,5; ili Kalcijum(4-),[[(4R)-4-[bis[(karboksi-..kapa.-0)metil]amino-.kapa.N]-6,9-bis[(karboksi-.kapa.0)metil]-1-[ (4,4-difenilcikloheksil)oksi]-l-hidroksi-2-oksa-6,9-di-aza-l-f osfaundekan-11-ilik-kiselina-.kapa.N6,.kapa.N9,- .kapa.011]-1-oksidato(6-)], meglumin 3,5, vodonik 0,5 u svakom slučaju u suštini bez Gd-MS-325.

4. Farmaceutsko sredstvo, naznačeno time, što najmanje sadrži jedno fiziološki kompatibilno jedinjenje prema jednom od Zahteva 1-3, opciono sa aditivima koji se uobičajeno upotrebljavaju u galenskim lekovima.

5. Postupak za proizvodnju galenske formulacije Gd-MS-325, naznačen time, što gadolinijum oksid, [[(4R)-4-[bis[(karboksi-..kapa.-0)metil]amino-.kapa.N]-6,9-bis[(karboksi-.kapa.0)metil]-l-[(4, 4-difenilcikloheksil) oksi]-l-hidroksi-2-oksa-6,9-diaza-l-fosfaundekan-11-ilik-kiselina-.kapa.N6,.kapa.N9,.-.kapa.011]-l-oksidato(6-)], heksahidrogen, fiziološki kompatibilni pufer i neorganska baza reaguju sa kalcijum kompleksom iz Zahteva 1.

6. Postupak za proizvodnju galenske formulacije Gd-MS-325, naznačen time, što gadolinijum oksid, [[(4R)-4-[bis[(karboksi-..kapa.-0)metil]amino-.kapa.N]- 6,9-bis[(karboksi-.kapa.0)metil]-l-[(4,4-difenilcikloheksil) oksi]-l-hidroksi-2-oksa-6,9-diaza-l-fosfaundekan-11-ilik-kiselina-.kapa.N6,.kapa.N9,.-.kapa,011]-l-oksidato(6-)], heksahidrogen, fiziološki kompatibilni pufer i organska baza reaguju sa kalcijum kompleksom iz Zahteva 1.

7. Postupak za proizvodnju galenske formulacije Gd-MS-325, naznačen time, što gadolinijum oksid i so [[(4R)-4-[bis[(karboksi-..kapa.-0)metil]amino-.kapa.N]-6,9-bis[(karboksi-.kapa.0)metil]-l-[(4, 4-difenilcikloheksil) oksi]-l-hidroksi-2-oksa-6,9-diaza-l-fosfaundekan-ll-ilik-kiselina-. kapa.N6, .kapa.N9,-.kapa.011]-l-oksidato(6-)] , heksahidrogen, tris-pufer I natrijum oksid reaguju dajući gadolinijum(3-),[[(4R)-4-[bis[(karboksi-..kapa.-0)metil]-amino-.kapa.N]-6,9-bis[(karboksi-.kapa.0)metil]-l-[(4,4-difenilcikioheksil)oksij-l-hidroksi-2-oksa-6,9-di-aza-l-fosfaundekan-ll-ilik-kiselina-.kapa.N6,.kapa.N9,.- .kapa.011]-1-oksidato(6-)] i zatim se mešanje vrši sa kalcijum kompleksom iz Zahteva 1.

8. Farmaceutsko sredstvo koje sadrži Gd-MS-325 i količinu posebno obrazovanog kalcijum kompleksa iz Zahteva 1, naznaečno time, što je ta količina 0,05-15 mol% u odnosu na količinu Gd-MS-325 i koja nije zamućena.

9. Farmaceutsko sredstvo prema Zahtevu 8, naznačeno time, što je količina pomenutog kalcijum kompleksa 0,5-5 mol% u odnosu na količinu Gd-MS-325.

10. Farmaceutsko sredstvo prema Zahtevu 8, naznačeno time, što je rastvor 200 mmolaran u Gd-MS-325.

11. Upotreba najmanje jednog fiziološki kompatibilnog jedinjenja prema Zahtevu 1 za proizvodnju sredstava za redukciju dejstava koja su prouzrokovana od teških metala.

12. Upotreba najmanje jednog fiziološki kompatibilnog jedinjenja prema Zahtevu 1 za proizvodnju sredstava za NMR dijagnostiku i/ili dijagnostičku radiologiju.

13. Kalcijum kompleks [[(4R)-4-[bis[(karboksi-..kapa.-0)metil]amino-.kapa.N]-6,9-bis[(karboksi-.kapa.0)metil]-l-[(4,4-difenilcikloheksil)oksi]-l-hidroksi-2-oksa-6, 9-di-aza-l-f osfaundekan-11-ilik-kiselina-.kapa.N6,.kapa.N9,.- .kapa.011]-1-oksidato ( 6-)],heksahidrogen (MS-325), ili njegova so sa fiziološki kampatibilnim katjonom, u svakom slučaju u suštini bez helata za pretpostavljene metale i MS-325.