RS60719B1 - Liofilizovani preparat citotoksičnih dipeptida - Google Patents

Liofilizovani preparat citotoksičnih dipeptida

Info

Publication number
RS60719B1
RS60719B1 RS20201030A RSP20201030A RS60719B1 RS 60719 B1 RS60719 B1 RS 60719B1 RS 20201030 A RS20201030 A RS 20201030A RS P20201030 A RSP20201030 A RS P20201030A RS 60719 B1 RS60719 B1 RS 60719B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
melphalan flufenamide
solution
lyophilized
cyclodextrin
pharmaceutical preparation
Prior art date
Application number
RS20201030A
Other languages
English (en)
Inventor
Jack Spira
Fredrik Lehmann
Original Assignee
Oncopeptides Ab
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Oncopeptides Ab filed Critical Oncopeptides Ab
Publication of RS60719B1 publication Critical patent/RS60719B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/10—Alcohols; Phenols; Salts thereof, e.g. glycerol; Polyethylene glycols [PEG]; Poloxamers; PEG/POE alkyl ethers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
    • A61K31/197—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group the amino and the carboxyl groups being attached to the same acyclic carbon chain, e.g. gamma-aminobutyric acid [GABA], beta-alanine, epsilon-aminocaproic acid or pantothenic acid
    • A61K31/198—Alpha-amino acids, e.g. alanine or edetic acid [EDTA]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/215—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids
    • A61K31/22—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acyclic acids, e.g. pravastatin
    • A61K31/222—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acyclic acids, e.g. pravastatin with compounds having aromatic groups, e.g. dipivefrine, ibopamine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/05—Dipeptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/10—Peptides having 12 to 20 amino acids
    • A61K38/105—Bombesin; Related peptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/02—Inorganic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/12—Carboxylic acids; Salts or anhydrides thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • A61K47/40—Cyclodextrins; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • F—MECHANICAL ENGINEERING; LIGHTING; HEATING; WEAPONS; BLASTING
    • F26—DRYING
    • F26B—DRYING SOLID MATERIALS OR OBJECTS BY REMOVING LIQUID THEREFROM
    • F26B5/00—Drying solid materials or objects by processes not involving the application of heat
    • F26B5/04—Drying solid materials or objects by processes not involving the application of heat by evaporation or sublimation of moisture under reduced pressure, e.g. in a vacuum
    • F26B5/06—Drying solid materials or objects by processes not involving the application of heat by evaporation or sublimation of moisture under reduced pressure, e.g. in a vacuum the process involving freezing

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Mechanical Engineering (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Description

Opis
Tehnička oblast
[0001] Predmetni pronalazak je usmeren na liofilizovane farmaceutske preparate koji sadrže citotoksične dipeptide ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, postupke za njihovu pripremu, preparate koji sadrže liofilizovane farmaceutske preparate i njihovu upotrebu u lečenju raka.
Stanje tehnike
[0002] Rak je bolest koju je teško izlečiti i koja može biti fatalna. U skladu s tim, napori za razvoj novih terapija u lečenju raka su konstantno u toku u istraživačkom društvu. Velika većina karcinoma je prisutna u obliku solidnih tumora, npr. karcinom pluća, karcinom dojke, rak prostate, a ostalo su hematološki i limfoidni maligniteti, npr. leukemije i limfomi.
[0003] Hemoterapija se često koristi u pokušajima izlečenja ili ublažavanja bolesti. Kako se ćelije raka obično brzo dele, hemoterapija obično deluje ubijanjem ćelija koje se brzo dele. U širem smislu, većina hemoterapijskih lekova deluje smanjujući mitozu (tj. deobu ćelija), efikasno ciljajući ćelije koje se brzo dele. Pošto ovi lekovi uzrokuju oštećenje ćelija nazvani su citotoksični. Neki lekovi uzrokuju da ćelije prolaze apoptozu (tzv "programiranu ćelijsku smrt"). Često se koristi kombinovana hemoterapija, kada se dva ili više lekova koji imaju različite načine delovanja koriste zajedno kako bi se optimizovao antitumorski efekat, umanjili neželjeni efekti i sprečio razvoj rezistencije. Rezultati dobijeni hemoterapijom variraju u zavisnosti od tipa tumora. Neki tumori su vrlo osetljivi i lečenje tada ima veliku verovatnoću da dovede do izlečenja.
[0004] Hemoterapeutski lekovi, mogu generalno biti podeljeni na sredstva za alkilovanje, antimetabolite, antracikline, biljne alkaloide, inhibitore topoizomeraze i druge antitumorske agense. Lekovi utiču na ćelijsku deobu ili sintezu DNK.
[0005] Sredstva za alkilovanje, kao što su lekovi dobijeni iz azotnog iperita, tj. derivati bis (2-hloroetil) amina, koriste se kao hemoterapeutski lekovi u lečenju širokog spektra neoplastičnih bolesti. Sredstva za alkilovanje imaju sposobnost kovalentnog vezanja alkilnih grupa za elektronegativne položaje u ćelijama. Stoga, ovi agensi deluju smanjujući ćelijsku funkciju formiranjem kovalentne veze sa heteroatomima u biološki važnim molekulama poput RNK, DNK i proteina. Primeri alkilujućih agenasa su mehloretamin, ciklofosfamid, hlorambucil, ifosfamid, temozolomid i melfalan koji hemijski modifikuju DNK ćelije.
[0006] WO01/96367 opisuje alkilujuće di- i tripeptide i jednu ili dve dodatne aminokiseline ili derivate aminokiselina. Pokazano je da ovi derivati imaju poboljšanu efikasnost kod različitih tipova tumora.
[0007] Melfalan, tj. p-[bis-(2-hloroetil) amino] fenilalanin, je konjugat azotnog iperita i aminokiseline fenilalanin, koji je sintetizovan sredinom 1950-ih (američki patent br.
3,032,584). Ova klasična alkilujuća supstanca je ubrzo postala dragoceni lek u hemoterapijskoj oblasti i još uvek je od važnosti u lečenju, na primer, mijeloma. Klinička upotreba melfalana u lečenju solidnih tumora u kasnom stadijumu je, međutim, imala ograničenu efikasnost. U potrazi za selektivnijim dejstvom na maligne ćelije, sintetisani su melfalanski analozi.
[0008] Larionov L. F., Cancer Res (1961), 21, 99-104 otkriva različite derivate povezane sa melfalanom.
[0009] STN datoteke registra RN: 1060633-95-5, RN: 887609-28-1, RN 790650-89-4, RN: 781606-39-1, RN: 773046-98-3, RN: 767621-58-9, RN: 760165-58-0 i RN: 757941-61-0 otkrivaju različite derivate povezane sa melfalanom.
[0010] Koltun, M i sar., Biopharmaceutics & Drug disposition (210), 31, 450-454 otkrivaju oblike melfalana.
[0011] Ma D Q i sar., International Journal of Pharmaceutics (1999), 189, 227-234, otkrivaju oblike melfalana.
[0012] Murav’ev I i sar., Farmatsiya (1978), 27, (2), 13-15 (sa apstraktom u Chemical Abstracts br. 1978: 412066) otkrivaju derivate povezane sa melfalanom.
[0013] Baheti i sar., Journal of Excipients and Food Chemicals, 2010, 1(1), 41-54, opisuju ekscipijense korišćene u različitim liofilizovanim formulacijama malih molekula.
[0014] Liofilizacija ili sušenje smrzavanjem je metoda za dehidriranje uzoraka korišćena za očuvanje ili povećanje stabilnosti ili za zaustavljanje razgradnje. Zbog niskog sadržaja vode u liofilizovanim proizvodima, obično oko 1-4%, inhibirano je dejstvo mikroorganizama i enzima i time je produžen vek proizvoda. U liofilizaciji, uzorak koji se liofilizuje je rastvoren u vodenom rastvoru i potom zamrznut nakon čega se smanjuje okolni pritisak. Uzorak je zatim podvrgnut sublimaciji, opciono primenom toplote, kako bi smrznuta voda direktno sublimirala iz čvrste u gasovitu fazu. Konačni sadržaj vode u proizvodu je veoma nizak, obično oko 1% do 4%. Liofilizacija se obično koristi u farmaceutskoj oblasti da bi se povećao rok trajanja farmaceutskih proizvoda.
Suština pronalaska
[0015] Generalno, lipofilni dipeptidni estarski derivati imaju slabu rastvorljivost u vodenim rastvorima. Zbog toga je upotreba organskih rastvarača, kao što je DMA (dimetilacetamid), neophodna za rastvaranje takvih dipeptida. Međutim, organski rastvarači su često toksični i mogu takođe, izazvati uništenje medicinskih uređaja korišćenih za primenu dipeptida kod subjekata, kao što su pacijenti sa karcinomom. Shodno tome, za prevazilaženje problema sa rastvaranjem i obezbeđivanjem citotoksičnih dipeptida u organskom rastvaraču, postoji potreba za alternativnim farmaceutskim preparatima citotoksičnih dipeptida koji imaju dovoljnu rastvorljivost u fiziološki prihvatljivim rastvorima.
[0016] Predmetni pronalazak se odnosi na liofilizovane preparate koji sadrže etil estar melfalanil-L-p-fluorofenilalanina, takođe, poznat kao melfalan flufenamid, kao i njegovu farmaceutski prihvatljivu so, posebno, melfalanil-L-p-fluorofenilalanin etil estar hidrohlorid, takođe, poznat kao melfalan flufenamid hidrohlorid, ili J1.
[0017] Aspekt sadašnjeg pronalaska je usmeren na liofilizovani farmaceutski preparat koji sadrži
(i) melfalan flufenamid ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so; i
(ii) najmanje jedan ekscipijens izabran iz grupe koja sadrži β-ciklodekstrin; αciklodekstrin; hidroksipropil-β-ciklodekstrin; i sulfobutiletar-β-ciklodekstrin.
[0018] Ipak, aspekt sadašnjeg pronalaska je liofilizovani farmaceutski preparat koji je rastvorljiv u vodenom rastvoru.
[0019] Štaviše, aspekt sadašnjeg pronalaska je postupak za pripremu liofilizovanog farmaceutskog preparata kao što je ovde opisano, pri čemu:
a. melfalan flufenamid, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, je
rastvoren(a) u organskom rastvaraču da se dobije rastvor melfalan flufenamida;
b. rastvoru melfalan flufenamida dodaje se voda kako bi se dobio vodeni rastvor melfalan flufenamida, u koncentraciji od oko 0,2-3,0 mg/ml;
c. rastvoru melfalan flufenamida dodat je najmanje jedan ekscipijens izabran iz grupe koja sadrži β-ciklodekstrin; α-ciklodekstrin; hidroksipropil-β-ciklodekstrin; i sulfobutiletar-βciklodekstrin; i
d. vodeni rastvor melfalan flufenamida koji sadrži ekscipijens(e) je podvrgnut liofilizaciji.
[0020] Još jedan aspekt ovog pronalaska je komplet iz delova, koji obuhvata prvi kontejner koji sadrži liofilizovani farmaceutski preparat kako je ovde definisano, i drugi kontejner koji sadrži fiziološki prihvatljiv rastvor.
[0021] Ipak, aspekt sadašnjeg pronalaska je liofilizovani farmaceutski preparat, kao što je ovde opisano, za upotrebu kao lek.
[0022] Ovde je otkriven komplet iz delova kao što je ovde opisano, za upotrebu kao lek.
[0023] Aspekt sadašnjeg pronalaska je liofilizovani farmaceutski preparat kako je ovde opisano, za upotrebu u lečenju i/ili prevenciji raka, kao što su rak jajnika, rak pluća, rak mokraćne bešike, mezoteliom, multipli mijelom, karcinom dojke i/ili bilo koji drugi solidni ili hematološki rak.
[0024] Još jedan aspekt sadašnjeg pronalaska je komplet delova kao što je ovde opisano, za upotrebu u lečenju i/ili prevenciji karcinoma, kao što su rak jajnika, rak pluća, rak mokraćne bešike, mezoteliom, multipli mijelom, rak dojke i/ili bilo koji drugi solidni ili hematološki rak. Ovde je otkriven postupak za lečenje i/ili prevenciju karcinoma, poput raka jajnika, raka pluća, raka mokraćne bešike, mezotelioma, multiplog mijeloma, raka dojke i/ili bilo kojeg čvrstog ili hematološkog karcinoma, pri čemu je liofilizovani farmaceutski preparat, kao što je ovde opisano, primenjen u terapeutski efikasnoj dozi kod subjekta kome je potrebno.
[0025] Ukoliko nije drugačije definisano, svi tehnički i naučni izrazi ovde korišćeni imaju isto značenje kao što je uobičajeno poznato prosečnim stručnjacima iz oblasti tehnike na koju se pronalazak odnosi. Iako postupci i materijali slični ili ekvivalentni onima koji su ovde opisani, mogu biti korišćeni u praksi ili testiranju sadašnjeg pronalaska, odgovarajući postupci i materijali su opisani u daljem tekstu.
[0026] Ostale karakteristike i prednosti pronalaska biće očigledne iz sledećeg detaljnog opisa, crteža, primera i patentnih zahteva.
Kratak opis crteža
[0027]
Slike 1A-D sadrže grafikone od četiri ponovljena merenja brzine rastvaranja melfalan flufenamida, liofilizovanog bez ekscipijenasa metodom A u skladu sa Primerom 2. Uzorci su izvučeni u naznačenim vremenskim tačkama i količina rastvorenog melfalan flufenamida je određena HPLC-om. Y-osa pokazuje količinu melfalan flufenamida u mg/ml.
Slike 2A-E sadrže grafikone merenja brzine rastvaranja melfalan flufenamida, liofilizovanog u prisustvu ekscipijenasa, kao što je prikazano na slikama metodom A prema Primeru 2. Uzorci su izvučeni u naznačenim vremenskim tačkama i količina rastvorenog melfalan flufenamida je određena pomoću HPLC-a. Y-osa pokazuje količinu melfalan flufenamida u mg/ml.
Slika 3 je grafikon merenja brzine rastvaranja melfalan flufenamida bez ekscipijenasa pomoću metode B prema Primeru 2. Uzorci su povučeni u naznačenim vremenskim tačkama i količina rastvorenog melfalan flufenamida je određena HPLC-om. Y-osa pokazuje količinu melfalan flufenamida u mg/ml.
Slike 4A-E sadrže grafikone merenja brzine rastvaranja melfalan flufenamida, liofiliziranog u prisustvu ekscipijenasa, kao što je prikazano na slikama metodom B. Uzorci su izvučeni u naznačenim vremenskim tačkama i količina rastvorenog melfalan flufenamida je određena HPLC-om. Y-osa pokazuje količinu melfalan flufenamida u mg/ml.
Slika 5 sadrži grafikone merenja brzine rastvaranja, kao što sledi: A: melfalan flufenamid liofilizovan bez Polisorbata 80; B melfalan flufenamid liofilizovan u prisustvu 10% Polisorbata 80; C melfalan flufenamid liofilizovan u prisustvu 50% Polisorbata 80; D melfalan flufenamid liofilizovan u prisustvu 100% Polisorbata 80. Količine su u odnosu na količinu melfalan flufenamida. Y-osa pokazuje količinu rastvorenog melfalan flufenamida u odnosu na interni standard, kao što je određeno pomoću HPLC-a.
Slika 6 je fotografija staklenih epruveta sa melfalan flufenamidom (J1) koji je nakon liofilizacije rastvoren u koncentraciji od 1 mg/ml u 5% rastvoru glukoze koji sadrži 50% (mol) Polisorbata 80 (levo) i bez Polisorbata 80 (desno).
Slika 7 sadrži strukturne formule melfalan flufenamida (L-melfalanil-L-pfluorofenilalanin-etil estar), L-melfalanil-L-p-fluorofenilalanin izopropil estra (JV28), L-prolinil-L-melfalanil-L-p-fluorofenilalanin etil estra (J3).
Detaljan opis pronalaska
[0028] Ne-liofilizovani citotoksični dipeptidi ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, mogu imati nisku rastvorljivost u vodenim rastvorima, što može zahtevati upotrebu organskih rastvarača, kao što je DMA (dimetilacetamid), za rastvaranje pomenutih dipeptida ili njihovih farmaceutski prihvatljivih soli. Stoga, kada citotoksični dipeptid treba primeniti kod pacijenta, supstanca se prvo mora rastvoriti u organskom rastvaraču, kao što je DMA, i potom razblažiti u rastvoru za infuziju pre primene kod pacijenta. Pacijent je ovom metodom izložen organskim rastvaračima, izlaganju koje može biti opasno za pacijenta. Takođe, organski rastvarač može uništiti medicinske uređaje korišćene za primenu melfalan flufenamida kod subjekata, kao što su pacijenti oboleli od raka.
[0029] Sadašnji pronalazači su sada iznenađujuće otkrili da kada se određeni citotoksični dipiptidi ili njihove farmaceutski prihvatljive soli liofilizuju u prisustvu ekscipijensa, nastali liofilizovani farmaceutski preparat može imati još veću rastvorljivost u fiziološki prihvatljivom rastvoru. U stvari, rastvorljivost može biti toliko visoka da korak rastvaranja citotoksičnog dipeptida ili njegove farmaceutski prihvatljive soli u organskom rastvaraču može biti izostavljen, a citotoksični dipeptid može biti direktno rastvoren u vodenom, fiziološki prihvatljivom rastvoru i primenjen pacijentu. Poželjno, navedeni citotoksični dipeptid je melfalan flufenamid ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
[0030] U prethodnim preparatima, melfalan flufenamid je dobijen sintezom u obliku belog praška, u kristalnom obliku. Ovaj kristalni oblik može biti rastvoren samo u visoko kiselim vodenim rastvorima, što je za praktične potrebe proizvodnje nemoguće. Prisustvo ekscipijenasa kao takvih nije dovoljno poboljšalo rastvorljivost. Zbog toga je prethodno melfalan flufenamid rastvoren u DMA (dimetilacetamidu) u rastvoru glukoze. Priprema je izvodjiva, ali je nestabilna: razgradnja 7% / h. Nadalje, dolazi do dimerizacije i rastvor postaje svetložut. Međutim, ovaj preparat je bio nepouzdan i stopa polimerizacije je varirala na neprihvatljiv način.
[0031] Shodno tome, postoji potreba za identifikovanjem alternativnih načina dobijanja preparata koji sadrži melfalan flufenamid ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so koja je rastvorljiva sa povećanom stabilnošću. Dalje, preparat treba da bude rastvorljiv u vodi da se izbegnu negativni ishodi prisustva organskog rastvarača u proizvodu koji je obezbeđen za pacijenta (kao što je DMA).
[0032] Aspekt sadašnjeg pronalaska je liofilizovani farmaceutski preparat koji sadrži
(i) melfalan flufenamid ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so; i
(ii) najmanje jedan ekscipijens izabran iz grupe koja sadrži β-ciklodekstrin; αciklodekstrin; hidroksipropil-β-ciklodekstrin; i sulfobutiletar-β-ciklodekstrin.
[0033] U drugoj realizaciji ovog aspekta, pomenuti melfalan flufenamid je melfalan flufenamid hidrohlorid (J1).
[0034] U drugom aspektu pronalaska, obezbeđen je farmaceutski preparat koji sadrži
(i) melfalan flufenamid hidrohlorid (J1); i
(ii) najmanje jedan ekscipijens odabran iz grupe koja sadrži β-ciklodekstrin; αciklodekstrin; hidroksipropil-β-ciklodekstrin; i sulfobutiletar-β-ciklodekstrin.
[0035] Pronalazak obezbeđuje liofilizovani preparat koji je stabilan u suvom obliku i rastvorljiv u vodenom rastvoru bez prisustva organskog rastvarača. Iako je ranije bilo moguće pripremiti liofilizovani preparat melfalan flufenamida samostalno, ovaj preparat se isuviše polako rastvarao u vodenim rastvorima u poređenju sa vremenom razgradnje. Uključivanje ekscipijensa u liofilizovani preparat melfalan flufenamida (putem inicijalnog rastvora u organskom rastvaraču) značajno poboljšava vreme rekonstitucije, ali ne menja značajno stabilnost rekonstituisanog melfalan flufenamida. Kao rezultat, proširen je vremenski okvir za rekonstituisani melfalan flufenamid, što poboljšava lečenje pacijenata, npr. omogućavajući niže brzine infuzije, tamo gde je to potrebno. Preparat „bez prisustva organskog rastvarača“ može da sadrži količine organskog rastvarača u tragovima, obično manje od 0,5% (m/m).
[0036] Liofilizovani farmaceutski preparat melfalan flufenamida ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, kako je ovde opisano, je beli, pahuljasti prašak za razliku od ne-liofilizovanog melfalan flufenamida ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, koji može biti u obliku gustog, blago žućkastog praška.
[0037] Tipično, liofilizacija obuhvata četiri koraka, prethodni tretman, zamrzavanje, primarno sušenje i sekundarno sušenje. U koraku prethodne obrade, supstanca koja će biti liofilizovana se priprema za liofilizaciju, npr. pripremanjem rastvora koji ima željenu koncentraciju ili mešanjem supstance sa drugim komponentama kako bi se dobio prihvatljiv rezultat. Korak zamrzavanja može biti izvršen u boci za sušenje zamrzavanjem u hlađenom kupatilu, npr. mehaničkim hlađenjem, suvim ledom i metanolom, ili tečnim azotom. Mašine za sušenje zamrzavanjem su dostupne za liofilizaciju u većem obimu. Obično su temperature zamrzavanja između -50 ° C i -80 ° C.
[0038] U primarnom koraku sušenja, pritisak je snižen do opsega od nekoliko milibara, a može se dostaviti toplota za sublimaciju vode iz materijala. Količina potrebne toplote se može izračunati korišćenjem latentne toplote sublimacije sublimacionih molekula. Trajanje ovog perioda zavisi, ali može trajati danima kako bi se očuvala struktura materijala.
[0039] Cilj finalnog sekundarnog koraka sušenja je uklanjanje bilo kojih nezamrznutih molekula vode. U ovoj fazi temperatura može biti i veća od 0 ° C, kako bi se prekinule bilo kakve fizičko-hemijske interakcije koje su nastale između molekula vode i zaleđenog materijala.
[0040] U kontekstu sadašnjeg pronalaska, treba razumeti da je melfalan flufenamid ili njegova farmaceutski prihvatljiva so liofilizovan(a). Izraz "liofilizovani farmaceutski preparat melfalan flufenamida ili njegove farmaceutski prihvatljive soli", se stoga podrazumeva da označava da je melfalan flufenamid ili njegova farmaceutski prihvatljiva liofilizovan(a).
[0041] Dalji aspekti sadašnjeg pronalaska obezbeđuju liofilizovani melfalan flufenamid ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, komplet delova koji sadrže takav melfalan flufenamid, postupke za dobijanje takvog melfalan flufenamida ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, preparate koji sadrže takav liofilizovani melfalan flufenamid ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i njihove upotrebe.
[0042] "Liofilizacija", "liofilizovan" itd., mogu u sadašnjem kontekstu biti korišćeni naizmenično sa izrazima "sušenje zamrzavanjem", "osušen zamrzavanjem" itd.
[0043] Primeri citotoksičnih dipeptida koji mogu biti liofilizovani, kao što je ovde opisano, ali koji ne ulaze unutar zahteva dalje su izneti u WO01/96367. Poželjno je da N-završetak molekula nije zaštićen kao amid ili karbamat. Ovo znači da R4u formuli I poželjno, ne treba da bude zaštitna grupa, poput formil, acetil ili propionil, ili benzoil, pošto zaštićeni oblik jedinjenja generalno, ima nižu citotoksičnu aktivnost od odgovarajućeg slobodnog oblika. Prirodne aminokiseline se odnose na aminokiseline koje normalno postoje i obavljaju svoje funkcije u živim organizmima. Modifikovane aminokiseline se odnose na aminokiseline koje su na neki način modifikovane u drugačiju hemijsku strukturu i hemijski sastav od prirodne aminokiseline. Primer prirodne ciklične aminokiseline je prolin. Primeri aromatičnih aminokiselina su fenilalanin, tirozin, triptofan i histidin.
[0044] Citotoksični dipeptidi, poput melfalan flufenamida, takođe, mogu da sadrže neprirodne proporcije atomskih izotopa na jednom ili više njegovih atoma. Na primer, jedinjenja mogu biti radioaktivno obeležena sa radioaktivnim izotopima, kao što su na primer tricijum (<3>H), deuterijum (<2>H), jod-125 (<125>J) ili ugljenik-14 (<14>C).
[0045] Citotoksični dipeptid melfalan flufenamid se jasno razlikuje od melfalana:
■ Razlika u strukturi (melfalan flufenamid je etil estar na C-završetku umesto karboksilne kiseline u melfalanu. Melfalan je time cviterjon, ali melfalan flufenamid nije).
■ Razlika u veličini (melfalan flufenamid je dipeptid, tj. približno dvostruko veći od melfalana).
■ Razlika u lipofilnosti, gde je melfalan flufenamid jasno lipofilniji.
■ Razlika u stabilnosti vodenih rastvora. Melfalan je 10000 puta stabilniji u vodenim rastvorima u poređenju sa J1. J1 brzo hidrolizuje u vodi.
■ Razlika u putevima degradacije. Glavni put razgradnje u melfalan flufenamidu uključuje hidrolizu etil estra, dok se glavna degradacija u melfalanu odnosi na reaktivnost (hloro) alkil grupa.
[0046] Na osnovu gornjih razlika, ali ne ograničavajući se na njih, jasno je da se učenja o melfalanu, a naročito o njegovim preparatima i formulacijama, ne primenjuju na melfalan flufenamid i njegove preparate i formulacije.
[0047] Uključivanje najmanje jednog ekscipijensa obezbeđuje liofilizovani preparat koji je stabilan kao takav i rastvorljiv u vodi bez prisustva organskog rastvarača, pri dovoljnoj brzini u poređenju sa brzinom razgradnje, i samim tim je koristan u terapiji i manje toksičan.
[0048] Liofilizovani farmaceutski preparat prema pronalasku, može da sadrži samo melfalan flufenamid ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so ili smešu melfalan flufenamida sa jednim ili više različitih citotoksičnih dipeptida ili njihovim farmaceutski prihvatljivim solima. Dalje, liofilizovani farmaceutski preparat može da sadrži mešavinu dve ili više različitih farmaceutski prihvatljivih soli.
1
[0049] Jedan aspekt pronalaska je liofilizovani farmaceutski preparat, koji sadrži
(i) melfalan flufenamid; i
(ii) kombinaciju dva ili više ekscipijenasa izabranih iz grupe koja sadrži polisorbat; polietilenglikol; β-ciklodekstrin; α-ciklodekstrin; hidroksipropil-β-ciklodekstrin; sulfobutiletar-β-ciklodekstrin; laktozu; benzil alkohol; dinatrijum sukcinat; propilen glikol; Cremophor EL; Dimetil sulfoksid; D-manitol; Trehalozu; Saharozu; i aminokiselinu.
[0050] Ipak, aspekt pronalaska je liofilizovani farmaceutski preparat, koji sadrži:
(i) melfalan flufenamid hidrohlorid (J1); i
(ii) kombinaciju dva ili više ekscipijenasa izabranih iz grupe koja sadrži polisorbat; polietilenglikol; β-ciklodekstrin; α-ciklodekstrin; hidroksipropil-β-ciklodekstrin; sulfobutiletar-β-ciklodekstrin; laktozu; benzil alkohol; dinatrijum sukcinat; propilen glikol; Cremophor EL; Dimetil sulfoksid; D-manitol; Trehalozu; Saharozu; i aminokiselinu.
[0051] Farmaceutski prihvatljive soli za sve aspekte sadašnjeg pronalaska mogu biti, na primer, kisele adicione soli od jedinjenja ovde opisanog koje je dovoljno bazno, na primer, kisela adiciona so sa, na primer, neorganskom ili organskom kiselinom, na primer, hlorovodoničnom, bromovodoničnom, azotnom, metansulfonskom, sumpornom, fosfornom, trifluorosirćetnom, paratoluen sulfonskom, 2-mezitilen sulfonskom, limunskom, sirćetnom, vinskom, fumarnom, mlečnom, jantarnom, jabučnom, malonskom, maleinskom, 1,2-etandisulfonskom, adipinskom, asparaginskom, benzensulfonskom, benzojevom, etansulfonskom ili nikotinskom kiselinom.
[0052] U ovom dokumentu, kada se koristi izraz "melfalan flufenamid", predviđeno je da uključuje i njegove farmaceutski prihvatljive soli, čak i ako to nije izričito navedeno.
[0053] Kao što je prethodno pomenuto, kada je melfalan flufenamid ili njegova farmaceutski prihvatljiva so liofilizovan(a) u prisustvu farmaceutski prihvatljivog ekscipijensa, poput bilo kojeg odabranog od polisorbata; polietilenglikola; β-ciklodekstrina; α-ciklodekstrina; hidroksipropil-β-ciklodekstrina; sulfobutiletar-β-ciklodekstrina; laktoze; benzil alkohola; dinatrijum sukcinata; propilenglikola; Cremophor EL; Dimetil sulfoksida; D-manitola; Trehaloze; Saharoze; i aminokiseline; može se dobiti neočekivano veliko povećanje rastvorljivosti liofilizovanog farmaceutskog preparata, što omogućava direktno rastvaranje liofilizovanog melfalan flufenamida u vodenom rastvoru, kao što je fiziološki prihvatljiv rastvor. To je u suprotnosti sa ne-liofilizovanim melfalan flufenamidom, koji nije moguće direktno rastvoriti u vodenom rastvoru, već se prvo mora rastvoriti u organskom rastvaraču pre razblaživanja u vodenom rastvoru. Ovde je otkriven liofilizovani farmaceutski preparat koji sadrži melfalan flufenamid ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, pri čemu je melfalan flufenamid liofilizovan u prisustvu ekscipijensa.
[0054] Melfalan flufenamid ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, mogu biti liofilizovani u prisustvu jednog ili više pomoćnih sastojaka (npr., jedan, dva, tri, četiri, pet, ili više ekscipijenasa). Primeri ekscipijenasa koji se mogu koristiti kao što je ovde opisano uključuju, bez ograničenja, polisorbate kao što su Polisorbat 20, Polisorbat 40, Polisorbat 60 i Polisorbat 80; polietilenglikole poput PEG 400 i PEG 300; β-ciklodekstrin, α-ciklodekstrin, sulfobutiletar-β-ciklodekstrin, hidroksipropil-β-ciklodekstrin, laktozu, benzil alkohol, dinatrijum sukcinat, propilenglikol, Cremophor EL, dimetil sulfoksid, D-manitol, trehalozu, saharozu i aminokiseline poput histidina.
[0055] U jednom aspektu pronalaska, ekscipijens je izabran od bilo kog od β-ciklodekstrina; α-ciklodekstrina; hidroksipropil-β-ciklodekstrina; i sulfobutiletar-β-ciklodekstrina.
[0056] Količina ekscipijensa poput β-ciklodekstrina je tipično oko 10-100 tež.% količine melfalan flufenamida, poput 100, 90, 80, 70, 60, 50, 40, 30, 20 ili 10 tež.% količine melfalan flufenamida.
[0057] U još jednom aspektu pronalaska, količina ekscipijensa poput β-ciklodekstrina je tipično oko 10-50 tež.% količine melfalan flufenamida, poput 100, 90, 80, 70, 60, 50, 40, 30, 20 ili 10 tež.% količine melfalan flufenamida.
[0058] Ipak aspekt ovog pronalaska je liofilizovani farmaceutski preparat koji sadrži
(i) melfalan flufenamid, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so; i
(ii) najmanje jedan ekscipijens izabran iz grupe koja obuhvata β-ciklodekstrin; αciklodekstrin; hidroksipropil-β-ciklodekstrin; i sulfobutiletar-β-ciklodekstrin;
pri čemu je količina ekscipijensa oko 10-100 mas.% melfalan flufenamida.
[0059] U drugoj realizaciji ovog aspekta, melfalan flufenamid je predstavljen melfalan flufenamid hidrohloridom (J1).
[0060] Ipak aspekt ovog pronalaska je liofilizovani farmaceutski preparat koji sadrži
(i) melfalan flufenamid, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so; i
(ii) najmanje jedan ekscipijens izabran iz grupe koja obuhvata β-ciklodekstrin; αciklodekstrin; hidroksipropil-β-ciklodekstrin; i sulfobutiletar-β-ciklodekstrin;
pri čemu je količina ekscipijensa oko 10-50 tež.% melfalan flufenamid hidrohlorida (J1).
[0061] U drugoj realizaciji ovog aspekta, melfalan flufenamid je predstavljen melfalan flufenamid hidrohloridom (J1).
[0062] Ipak, aspekt ovog pronalaska je liofilizovani farmaceutski preparat koji sadrži
(i) melfalan flufenamid hidrohlorid (J1); i
(ii) najmanje jedan ekscipijens izabran iz grupe koja sadrži β-ciklodekstrin; αciklodekstrin; hidroksipropil-β-ciklodekstrin; i sulfobutiletar-β-ciklodekstrin;
pri čemu je količina ekscipijensa oko 10-100 mas.% melfalan flufenamid hidrohlorida (J1).
[0063] Ipak, aspekt ovog pronalaska je liofilizovani farmaceutski preparat koji sadrži
(i) melfalan flufenamid hidrohlorid (J1); i
(ii) najmanje jedan ekscipijens izabran iz grupe koja sadrži β-ciklodekstrin; αciklodekstrin; hidroksipropil-β-ciklodekstrin; i sulfobutiletar-β-ciklodekstrin;
pri čemu je količina ekscipijensa oko 10-50 masenih % melfalan flufenamid hidrohlorida (J1).
[0064] U jednoj realizaciji prema pronalasku, količina ekscipijensa, može biti do klinički prihvatljive količine.
[0065] Aspekt ovog pronalaska je kombinacija ekscipijenasa Polisorbata 80, PEG 400 i βciklodekstrina, poput 80 tež.% Polisorbata 80, 80 tež.% PEG 400 i 50 tež. % β-ciklodekstrina, od količine melfalan flufenamida. Liofilizovani farmaceutski preparat derivata melfalana ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, može u skladu sa pronalaskom da sadrži jedan ili više derivata melfalana ili njegove farmaceutski prihvatljive soli i jedan ili više ekscipijenasa, kao što je ovde definisano.
1
[0066] Kao što je ovde ranije pomenuto, jedan efekat prisustva ekscipijensa tokom liofilizacije je da rezultirajući liofilizovani farmaceutski preparat koji sadrži melfalan flufenamid, ima poboljšanu rastvorljivost u vodenim rastvorima, kao što je fiziološki prihvatljiv rastvor, u poređenju sa kada je melfalan flufenamid liofilizovan bez ekscipijensa, kao što je ovde opisano. Posebno, rastvorljivost u vodenim rastvorima melfalan flufenamida kada je liofilizovan u prisustvu jednog ili više ekscipijenasa je veća u poređenju sa rastvorljivošću proizvoda koji nije liofilizovan. Ova povećana rastvorljivost melfalan flufenamida, posebno kada je liofilizovan u prisustvu ekscipijensa kao što je ovde opisano, u poređenju sa ne-liofilizovanim proizvodom, ima značajne prednosti kada je reč o primeni melfalan flufenamida kod pacijenta.
[0067] Zbog niske rastvorljivosti ne-liofilizovanog melfalan flufenamida u vodenim, fiziološki prihvatljivim rastvorima koji se koriste za davanje leka pacijentu, potrebno je prvo rastvoriti ne-liofilizovani melfalan flufenamid u organskom rastvaraču, kao što je DMA. Melfalan flufenamid je zato često skladišten rastvoren u DMA. Prethodno nije bilo moguće direktno rastvoriti melfalan flufenamid u vodenom rastvoru, ali organski rastvarači su morali da budu korišćeni. Jednom rastvoren u organskom rastvaraču, rastvor melfalan flufenamida i organskog rastvarača, može biti rastvoren u fiziološki prihvatljivim rastvorima za primenu kod subjekta.
[0068] Pošto je melfalan flufenamid veoma toksičan, kako bi se minimalizovalo izlaganje medicinskog osoblja takvim lekovima, koriste se posebni uređaji za prenošenje lekova nakon rastvaranja u organskim rastvaračima u rastvor za primenu. Ovi uređaji za transfer su često plastične cevi koje sadrže polikarbonat. Međutim, takve cevi su osetljive na prisustvo i mogu biti razorene od strane organskih rastvarača, kao što je DMA. Zbog toga, u slučajevima kada je lek koji će biti primenjen rastvoren u takvom organskom rastvaraču, možda neće biti moguće korišćenje uređaja za transfer, a rastvoreni lek umesto toga treba direktno dodati u fiziološki prihvatljiv rastvor korišćen za primenu, neposredno pre perioda primene kod pacijenta. Ovo može biti opasno za medicinsko osoblje, koje je tada pod rizikom da bude izloženo toksičnom leku.
[0069] Kao što je gore pomenuto, liofilizacija melfalan flufenamida povećava njegovu rastvorljivost u fiziološki prihvatljivim rastvorima. Ovo povećanje može biti još izraženije kada je melfalan flufenamid liofilizovan u prisustvu jednog ili više pomoćnih sastojaka. Kao što je ovde opisano, kada je melfalan flufenamid liofilizovan u prisustvu ekscipijensa, kao što je ovde otkriveno, rastvorljivost melfalan flufenamida može biti povećana u poređenju sa neliofilizovanim melfalan flufenamidom. Upotreba organskog rastvarača, kao što je DMA, za prvo rastvaranje melfalan flufenamida se može izbeći.
[0070] Melfalan flufenamid koji je liofilizovan u prisustvu najmanje jednog ekscipijensa, poput polisorbata koji, na primer, može biti polisorbat 80; polietilenglikola koji, na primer, može biti PEG 400 ili PEG 300; β-ciklodekstrina; α-ciklodekstrina; hidroksipropil-β-ciklodekstrina; sulfobutiletar-β-ciklodekstrina; laktoze; benzil alkohola; dinatrijum sukcinata; propilenglikola; Cremophor EL; Dimetil sulfoksida; D-manitola; Trehaloze; Saharoze; ili aminokiseline kao što je histidin; ili kombinacije dva ili više ovih pomoćnih sastojaka; može biti direktno rastvoren u fiziološki prihvatljivom rastvoru, kao što je oko 4,5-5,5 tež.%, npr. oko 5%, rastvor glukoze ili vodeni rastvor NaCl (npr. oko 0,9 tež.% NaCl). Na taj način se mogu koristiti uređaji koji sadrže polikarbonat i koji se koriste za primenu melfalan flufenamida, minimalizujući rizik od izlaganja medicinskog osoblja leku. Takođe, na ovaj način se izbegava primena toksičnog DMA kod pacijenta. Ovo omogućava direktnu pripremu rastvora koji sadrži melfalan flufenamid, u koncentraciji pogodnoj za primenu kod pacijenta. Alternativno, koncentrovani rastvor koji sadrži liofilizovani farmaceutski preparat melfalan flufenamida u fiziološki prihvatljivom rastvoru, može biti prvo pripremljen, a zatim prebačen u kesu za infuziju korišćenjem najčešće korišćenih uređaja za transfer.
[0071] Takođe, kada je melfalan flufenamid rastvoren u DMA, može biti obrazovan adukt između melfalan flufenamida i DMA. Korišćenjem liofilizovanog farmaceutskog preparata obezbeđenog u skladu sa pronalaskom, moguće je direktno rastvaranje liofilizovanog melfalan flufenamida u fiziološki prihvatljivom rastvoru, izbegavajući prvo rastvaranje melfalan flufenamida u DMA. Na taj način se može izbeći stvaranje adukata DMA-melfalan flufenamida i pacijentu se ne daje ni adukt ni DMA.
[0072] Takođe je obezbeđen farmaceutski preparat koja sadrži liofilizovani farmaceutski preparat melfalan flufenamida ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, kao što je ovde definisano, opciono dobijen postupkom za pripremu takvog liofilizovanog preparata koji je ovde otkriven. Takav farmaceutski preparat može dalje da sadrži fiziološki prihvatljiv rastvor, kao što je vodeni NaCl (npr. oko 0,9 tež.%) ili rastvor glukoze (npr. oko 4,5-5,5 tež.%, kao što je oko 5 tež.%, glukoza). Ovaj farmaceutski preparat može biti koncentrovani rastvor namenjen za razblaživanje pre primene subjektu ili kao rastvor koji omogućava direktno davanje pacijentu.
[0073] Usled povećane rastvorljivosti melfalan flufenamida nakon liofilizacije u prisustvu jednog ili više ekscipijenasa, kao što je ovde opisano, moguće je pripremiti rastvorljivi melfalan flufenamidni rastvor, kao što je farmaceutski preparat koji sadrži melfalan flufenamid ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, koja je suštinski bez organskih rastvarača kao što su DMA, dihlorometan, tetrahidrofuran, 2-metil tetrahidrofuran, etil acetat, aceton,
1
dimetilformamid, acetonitril, dimetil sulfoksid, dioksan, dietil etar, sirćetna kiselina, n-butanol, izopropanol, n-propanol, terc-butanol, sek-butanol, metanol, etanol i sirćetna kiselina. Pod "suštinski slobodnim" se u ovom dokumentu podrazumeva da farmaceutski preparat sadrži samo organske rastvarače u tragovima, kao što su manje od oko, ukupno od oko 0,1 tež.% organskog rastvarača. U jednom aspektu, liofilizovani preparat ili farmaceutski preparat ne sadrže bilo koje merljive količine organskog rastvarača. Takvi preparati bi bili manje toksični i stoga ih pacijent više podnosi, tj. daju manje neželjenih efekata kao što su povraćanje, mučnina ili drugi opšti simptomi kada se primenjuju infuzijom.
[0074] U jednom aspektu pronalaska, obezbeđen je liofilizovani farmaceutski preparat prema pronalasku, koji je oslobođen ili u osnovi bez organskih rastvarača.
[0075] Pronalazak obezbeđuje farmaceutski preparat koji se sastoji od liofilizovanog farmaceutskog preparata prema pronalasku, koji sadrži melfalan flufenamid ili njegovu farmaceutsku so i fiziološki prihvatljiv rastvor, kao što je rastvor glukoze. Kao što je ovde ranije otkriveno, derivat melfalana može biti melfalan flufenamid ili mešavina melfalan flufenamida i jednog ili više različitih citotoksičnih dipeptida, bilo zajedno liofilizovanih ili odvojeno.
[0076] Farmaceutski preparat može biti dobijen rastvaranjem melfalan flufenamida ili njegove farmaceutske soli u fiziološki prihvatljivom rastvoru. Postupak za pripremu farmaceutskog preparata koji obuhvata korak rastvaranja liofilizovanog farmaceutskog preparata koji sadrži melfalan flufenamid ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so u fiziološki prihvatljivom rastvoru je stoga takođe, ovde otkriven.
[0077] Izraz "fiziološki prihvatljiv rastvor" je ovde definisan, je vodeni rastvor, kao što je rastvor NaCl (kao što je oko 0,9 tež.% NaCl) ili rastvor glukoze, kao što je oko 4,5-5,5 mas.% glukoze, npr. oko 5 tež.%, ili neki drugi fiziološki prihvatljiv rastvor. Bilo koji takav rastvor može opciono biti puferovan.
[0078] Farmaceutski preparat koji sadrži liofilizovani melfalan flufenamid i fiziološki prihvatljiv rastvor za direktnu primenu kod subjekta, obično sadrži melfalan flufenamid u koncentraciji od oko 1 mg/ml ili manje, kao što je oko 0,2 mg/ml. Međutim, farmaceutski preparat može da sadrži melfalan flufenamid u koncentraciji do oko 4 mg/ml za razblaživanje u fiziološki prihvatljivom rastvoru pre primene kod pacijenta.
[0079] Jedan aspekt ovog pronalaska obezbeđuje metodu za pripremu liofilizovanog farmaceutskog preparata, pri čemu:
a) melfalan flufenamid, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, je rastvoren (a) u
1
organskom rastvaraču da bi se dobio rastvor melfalan flufenamida;
b) rastvoru melfalan flufenamida dodata je voda da bi se dobio vodeni rastvor melfalan flufenamida, u koncentraciji od oko 0,2-3,0 mg/ml;
c) u rastvor melfalan flufenamida dodat je najmanje jedan ekscipijens izabran iz grupe koja obuhvata β-ciklodekstrin; α-ciklodekstrin; hidroksipropil-β-ciklodekstrin; i sulfobutiletar-β-ciklodekstrin; i
d) vodeni rastvor melfalan flufenamida koji sadrži ekscipijens(e) je podvrgnut liofilizaciji.
[0080] U jednoj realizaciji ovog aspekta, obezbeđen je postupak kojim:
a) melfalan flufenamid ili njegova farmaceutski prihvatljiva so je rastvoren(a) u organskom rastvaraču;
b) dodaje se voda u rastvor dobijen u koraku a) kako bi se dobio rastvor pomenutog melfalan flufenamida ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, u koncentraciji od oko 0,2-3,0 mg/ml;
c) najmanje jedan ekscipijens izabran iz grupe koja obuhvata β-ciklodekstrin; αciklodekstrin; hidroksipropil-β-ciklodekstrin; i sulfobutiletar-β-ciklodekstrin je dodat u rastvor dobijen u koraku b); i
d) rastvor dobijen u koraku c) je podvrgnut liofilizaciji.
[0081] Organski rastvarač može biti izabran od bilo kojeg od etanola, etanola koji sadrži kiselinu, glicerina, propilenglikola, benzil alkohola, dimetilacetamida (DMA), N-metil-2-pirolidona, izopropanola, n-butanola, terc-butanola, metil terc- butil etra, propilenglikola, dimetilsulfoksida, tetrahidrofurana, 2-metil tetrahidrofurana, acetona, dimetilformamida, acetonitrila, dioksana, sirćetne kiseline, mlečne kiseline, propionske kiseline, n-butanola, izopropanola, n-propanola, terc-butanola, sek-butanola, metanola i smeša etanola i vode. Poželjno, navedeni organski rastvarač je etanol.
1
[0082] Pomoćni sastojak može biti izabran iz grupe koja sadrži β-ciklodekstrin; αciklodekstrin; hidroksipropil-β-ciklodekstrin; i sulfobutiletar-β-ciklodekstrin.
[0083] Melfalan flufenamid u pomenutim metodama je poželjno, melfalan flufenamid hidrohlorid (J1).
[0084] Ovde je otkriven postupak za pripremu liofilizovanog farmaceutskog preparata kao što je ovde opisano, kojim
a) melfalan flufenamid, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so je rastvoren(a) u organskom rastvaraču;
b) dodaje se voda u rastvor dobijen u koraku a) da bi se dobio rastvor pomenutog melfalan flufenamida ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, u koncentraciji od oko 0,2-3,0 mg/ ml;
c) najmanje jedan ekscipijens kao što je ovde definisano, dodaje se rastvoru dobijenom u koraku b); i
d) rastvor dobijen u koraku c) je podvrgnut liofilizaciji.
[0085] Poželjno, navedeni organski rastvarač je etanol.
[0086] Ovde je otkriven postupak za pripremu liofilizovanog farmaceutskog preparata kao što je ovde opisano, kojim
a) melfalan flufenamid hidrohlorid (J1) je rastvoren u organskom rastvaraču;
b) dodaje se voda u rastvor dobijen u koraku a) da bi se dobio rastvor pomenutog melfalan flufenamid hidrohlorida (J1), ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, u koncentraciji od oko 0,2-3,0 mg/ml;
c) najmanje jedan ekscipijens kao što je ovde definisano, dodat je rastvoru dobijenom u koraku b); i
d) rastvor dobijen u koraku c) podvrgnut je liofilizaciji.
1
[0087] Primeri organskih rastvarača korisnih za rastvaranje melfalan flufenamida, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli u koraku a), mogu biti bilo koji izabrani od etanola, etanola koji sadrži kiselinu, glicerina, propilenglikola, benzil alkohola, dimetilacetamida (DMA), N-metil-2-pirolidona, izopropanola, n-butanola, terc-butanola, metil terc-butil etra, propilenglikola, dimetilsulfoksida, tetrahidrofurana, 2-metil tetrahidrofurana, acetona, dimetilformamida, acetonitrila, dioksana, acetatne kiseline, mlečne kiseline, propionske kiseline, n-butanola, izopropanola, n-propanola, terc-butanola, sek-butanola, metanola i smeše etanola i vode.
[0088] Ovde se nalazi otkriven postupak za pripremu liofilizovanog farmaceutskog preparata kao što je ovde opisano, pomoću kojeg
a) melfalan flufenamid, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so je rastvoren(a) u organskom rastvaraču, izabranom od bilo kog od etanola, etanola koji sadrži kiselinu, glicerina, propilenglikola, benzil alkohola, dimetilacetamida (DMA), N-metil-2-pirolidona, izopropanola, n-butanola, terc-butanola, metil terc-butil etra, propilenglikola, dimetilsulfoksida, tetrahidrofurana, 2-metil tetrahidrofurana, acetona, dimetilformamida, acetonitrila, dioksana, sirćetne kiseline, mlečne kiseline, propionske kiseline, n-butanola, izopropanola, n-propanola, terc-butanola, sek-butanola, metanola i smeše etanola i vode;
b) dodaje se voda u rastvor dobijen u koraku a) kako bi se dobio rastvor pomenutog melfalan flufenamida ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, u koncentraciji od oko 0,2-3,0 mg/ml;
c) najmanje jedan ekscipijens kao što je ovde definisano, dodaje se rastvoru dobijenom u koraku b); i
d) rastvor dobijen u koraku c) je podvrgnut liofilizaciji.
[0089] Nalazi se ovde otkriven postupak za pripremu liofilizovanog farmaceutskog preparata kao što je ovde opisano, pomoću kojeg
a) melfalan flufenamid hidrohlorid (J1) je rastvoren u organskom rastvaraču izabranom između bilo kog od etanola, etanola koji sadrži kiselinu, glicerina, propilenglikola, benzil alkohola, dimetilacetamida (DMA), N-metil-2-pirolidona, izopropanola, n-butanola,
1
terc-butanola, metil terc-butil etra, propilenglikola, dimetilsulfoksida, tetrahidrofurana, 2-metil tetrahidrofurana, acetona, dimetilformamida, acetonitrila, dioksana, sirćetne kiseline, mlečne kiseline, propionske kiseline, n-butanola, izopropanola, n-propanola, terc-butanola, sek-butanola, metanola i smeše etanola i vode;
b) rastvoru dobijenom u koraku a) dodata je voda kako bi se dobio rastvor pomenutog melfalan flufenamid hidrohlorida (J1), ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, u koncentraciji od oko 0,2-3,0 mg/ml;
c) najmanje jedan ekscipijens kao što je ovde definisano, dodat je rastvoru dobijenom u koraku b); i
d) rastvor dobijen u koraku c) je podvrgnut liofilizaciji.
[0090] Kada je korišćen etanol koji sadrži kiselinu za rastvaranje melfalan flufenamida ili njegove farmaceutski prihvatljive soli u koraku a) u gornjem postupku, kiselina može biti HCl, u koncentraciji od na primer 5-20 mM, ili koncentracija HCl može biti na primer 10 mM, u etanolu.
[0091] Kada je melfalan flufenamid ili njegova farmaceutski prihvatljiva so rastvorena u etanolu i vodi, koncentracija etanola može biti oko
10-100 vol.%, kao što su 10-90 vol.%, 50-90 vol.% Ili oko 70 vol.%.
[0092] Voda koja se koristi za rastvaranje i/ili razblaživanje uzoraka liofilizovanog farmaceutskog preparata u skladu sa sadašnjim pronalaskom je sterilna ili prečišćena voda, ili voda za injekcije (WFI).
[0093] Kada je etanol korišćen za rastvaranje melfalan flufenamida ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, rastvor dobijen u koraku a) je razblažen u koraku b) tako da je koncentracija etanola oko 2% -100 vol.%, kao što je oko 2, 5, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 ili 100%, ili kao što su 5-15%, ili kao što su 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 ili 15%. Tipično je koncentracija etanola nakon koraka razblaživanja b) oko 9%.
[0094] Rastvor dobijen u koraku b) može biti sterilno filtriran pre koraka liofilizacije c).
[0095] Korak liofilizacije c) obuhvata tipične korake zamrzavanja, i primarnog i sekundarnog sušenja, kao što je ovde opisano. Informacije o tome kako se izvodi liofilizacija mogu se naći, na pr. u Rey, L. i May, J. Sušenjem zamrzavanjem/liofilizacija farmaceutskih i bioloških proizvoda (2010), ISBN 978-1439B2575-4. U koraku zamrzavanja, uzorak je na primer
2
zamrznut u kupatilu sa suvim ledom-acetonom na temperaturi od oko -70 ° C do -90 ° C, kao što su oko -70 ° C, -75 ° C, -78 ° C, -80 ° C, -82 ° C, -85 ° C, -88 ° C ili -90 ° C, na primer, tokom 10 minuta do 120 minuta.
[0096] Alternativno, uzorak se može zamrznuti u zamrzivaču na temperaturi od oko
-14 ° C do -25 ° C, kao što su -14 ° C, -16 ° C, -18 ° C, -20 ° C, -22 ° C ili -25 ° C, na primer, oko 10 min do 24 sati. Takođe je moguće zamrzavanje uzorka u tečnom azotu.
[0097] Korak c) može biti izveden primenom uobičajenih tehnika za liofilizaciju, videti npr. Rey, L. i May, J. Sušenje zamrzavanjem/liofilizacija farmaceutskih i bioloških proizvoda (2010), ISBN 978-1439B2575-4.
[0098] Na primer, u koraku primarnog sušenja, pritisak može biti snižen na oko otprilike 0,1 mbar do 50 mbar, kao što je 1 mbar do 10 mbar. Temperatura je obično ispod 0 ° C, kao što je -50 do 0 ° C, ili -20 do -1 ° C, npr. -50, -40, -30, -20, -10 ili -5 ° C. Ova faza može, na primer, da traje od 4 do 48 sati, npr.12 sati do 24 sata.
[0099] U finalnom sekundarnom koraku sušenja, kada je većina vode isparila, temperatura može biti kao u koraku primarnog sušenja ili iznad 0 ° C.
[0100] Kada jedan ili više ekscipijenasa, kao što je ovde definisano, treba da budu prisutni tokom liofilizacije, oni se mogu dodati u koraku b) pre ili posle razblaživanja rastvora dobijenog u koraku a) i pre obavljanja liofilizacije. Ekscipijensi mogu biti dodati u obliku praška, ali su obično dodati u obliku vodenog rastvora. Ekscipijensi mogu, dakle, biti prisutni tokom liofilizacije.
[0101] Nalazi se ovde otkriven liofilizovani farmaceutski preparat kako je ovde definisano, koji se može dobiti gornjim, otkrivenim postupkom.
[0102] Ovde je takođe obezbeđen komplet delova koji sadrži:
(i) prvi kontejner koji sadrži liofilizovani farmaceutski preparat koji sadrži melfalan flufenamid kao što je ovde opisano; i
(ii) drugi kontejner koji sadrži fiziološki prihvatljiv rastvor, kao što su rastvor NaCl (poput oko 0,9 tež.% NaCl) ili rastvor glukoze, kao što je oko 4,5-5,5 mas.% rastvora glukoze, npr. oko 5 tež.% rastvora glukoze ili drugog fiziološki prihvatljivog rastvora.
[0103] Takav komplet može takođe da sadrži uređaj za mešanje sadržaja dva kontejnera jednog sa drugim i/ili za prenos dobijene smeše u uređaj, kao što je kesa koja sadrži rastvor glukoze, za davanje pacijentu.
[0104] Takav komplet može da se sastoji od prvog kontejnera koji sadrži liofilizovani farmaceutski preparat koji sadrži melfalan flufenamid, kao što je ovde opisano, i drugi kontejner koji sadrži fiziološki prihvatljiv rastvor. Melfalan flufenamid u kompletu takođe, može biti u mešavini sa farmaceutski prihvatljivim nosačem i/ili ekscipijensom. Jedan primer je 5% glukoza sa npr. 1% albumina ili drugog proteina ili jedinjenja. Količina fiziološki prihvatljivog rastvora može biti bilo mala količina da bi se pripremio koncentrovani rastvor liofilizovanog farmaceutskog preparata koji sadrži melfalan flufenamid, ili veća količina kako bi se omogućilo dobijanje rastvora koji ima željenu koncentraciju za davanje pacijentu. Alternativno, komplet može da sadrži oba, i kontejner koji sadrži fiziološki prihvatljiv rastvor za pripremu koncentrovanog rastvora liofilizovanog farmaceutskog preparata i drugi kontejner, kao što je kesa za infuziju, koja sadrži veću količinu fiziološki prihvatljivog rastvora za pripremu još razblaženijeg rastvora za primenu kod subjekta.
[0105] Liofilizovani farmaceutski preparat, farmaceutska kompozicija ili komplet ovde obezbeđen, može da sadrži samo melfalan flufenamid ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so kao antitumorsko sredstvo. Međutim, melfalan flufenamid takođe, može biti kombinovan sa jednim ili više antitumorskih agenasa, poput drugih antitumorskih supstanci kao što su gemcitabin, etopozid, doksorubicin ili taksani ili drugim terapeutski efikasnim supstancama. Kada je kombinovan sa drugim antitumorskim agensima, oni mogu biti mešani bilo sa melfalan flufenamidom ili njegovom farmaceutski prihvatljivom soli pre liofilizacije i naknadno liofilizovani zajedno sa melfalan flufenamidom ili njegovom farmaceutski prihvatljivom soli ili kombinovani sa liofilizovanim melfalan flufenamidom ili njegovom farmaceutski prihvatljivom soli nakon liofilizacije, kao što je u kompletu ili farmaceutskom sastavu. Liofilizovani melfalan flufenamid takođe, može biti pomešan sa jednom ili više antitumorskih supstanci u suvom obliku, iako nije liofilizovan, nakon liofilizacije melfalan flufenamida ili njegove farmaceutski prihvatljive soli.
[0106] Ovde obezbeđen melfalan flufenamid ima citotoksičnu aktivnost i stoga, može biti korišćen u prevenciji i/ili lečenju raka, kao što je opisano drugde (videti npr. WO 01/96367). Smanjenje preživljavanja tumorskih ćelija od strane jedinjenja je prikazano u WO 01/96367, za različite hematološke i/ili čvrste tumore, npr. karcinom pluća, mijelom, limfom, leukemiju, rak dojke i karcinom jajnika. Dalje, jedinjenje je u WO 01/96367 pokazalo da zaobilazi melfalansku rezistenciju. Jedinjenje stoga, može biti korišćeno u prevenciji i/ili lečenju raka, smanjujući rast tumora i/ili uništavajući tumorske ćelije. Stoga, jedinjenje može biti korišćeno za lečenje i/ili produženje preživljavanja pacijenata obolelih od karcinoma.
[0107] Ovde je takođe, obezbeđen liofilizovani farmaceutski preparat, komplet ili farmaceutski sastav, kao što je ovde otkriveno i navedeno u patentnim zahtevima, za upotrebu kao lek. Pronalazak se takođe odnosi na takav liofilizovani farmaceutski preparat, komplet ili farmaceutski preparat, za upotrebu u lečenju i/ili prevenciji raka, kao što su rak jajnika, rak pluća, rak mokraćne bešike, mezoteliom, multipli mijelom, karcinom dojke i/ili bilo koji drugi čvrsti ili hematološki rak.
[0108] Ovde je takođe otkrivena upotreba liofilizovanog farmaceutskog preparata, kompleta ili farmaceutskog preparata, kako je ovde otkriveno i navedeno u zahtevima, za proizvodnju leka za lečenje i/ili prevenciju karcinoma, kao što su rak jajnika, rak pluća, rak mokraćne bešike, mezoteliom, multipli mijelom, rak dojke i/ili bilo koji drugi čvrsti ili hematološki karcinom.
[0109] Ipak, aspekt sadašnjeg pronalaska je liofilizovani farmaceutski preparat, ili farmaceutski sastav koji sadrži melfalan flufenamid hidrohlorid (J1) u kombinaciji sa drugim lekom korisnim u lečenju raka, za upotrebu u lečenju i/ili prevenciji raka, kao što su rak jajnika, rak pluća, rak mokraćne bešike, mezoteliom, multipli mijelom, rak dojke i/ili bilo koji drugi čvrsti ili hematološki karcinom.
[0110] Ovde je takođe otkriven postupak za lečenje i/ili prevenciju karcinoma, kao što su rak jajnika, rak pluća, rak mokraćne bešike, mezoteliom, multipli mijelom, rak dojke i/ili bilo kog drugi čvrsti ili hematološki karcinom. Postupak može da obuhvati primenu liofilizovanog farmaceutskog preparata, kompleta ili farmaceutskog sastava kao što je ovde navedeno, u terapeutski efikasnoj dozi kod subjekta kome je to potrebno. Subjekt je tipično čovek ili domaća životinja.
[0111] Ovde je takođe otkriven postupak za lečenje i/ili prevenciju raka, kao što su rak jajnika, rak pluća, rak mokraćne bešike, mezoteliom, multipli mijelom, rak dojke i/ili bilo kog drugi čvrsti ili hematološki karcinom, pri čemu je liofilizovani farmaceutski preparat, komplet ili farmaceutski sastav koji sadrži melfalan flufenamid hidrohlorid (J1) obezbeđen u terapijski efikasnoj dozi kod subjekta kome je potreban, u kombinaciji sa drugim lekom, korisnim u lečenju raka. Subjekt je obično čovek ili domaća životinja.
[0112] Primena liofiliziranog farmaceutskog preparata, kompleta ili farmaceutske kompozicije kod subjekta kome je potreban se može odvijati intravenskim injekcijama. Takođe je moguće primeniti liofilizovani melfalan flufenamid ili farmaceutski preparat koji sadrži takav liofilizovani melfalan flufenamid u telesne šupljine, poput instilacije u mokraćnu bešiku, ili u peritonealnu ili pleuralnu šupljinu.
2
[0113] Melfalan flufenamid ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, mogu biti primenjeni u količini od oko 20-130 mg, kao što je 30-75 mg, na primer 50 mg ukupne količine melfalan flufenamida po primeni. Ovde obezbeđena farmaceutska kompozicija ili komplet koji sadrži melfalan flufenamid može stoga, imati izvesnu količinu liofilizovanog melfalan flufenamida tako da ta količina može biti primenjena.
[0114] Liofilizovani melfalan flufenamid ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, mogu biti primenjivani svaki dan, svaki drugi ili treći dan, nedeljno, svake druge, treće ili četvrte nedelje ili čak kao visoka pojedinačna doza (npr., pre transplantacije), u zavisnosti od subjekta i oblika koji će biti lečen.
[0115] Izraz "prevencija", kako je ovde korišćen, ima za cilj da uključi terapiju kod pacijenta koji je podvrgnut hemoterapiji protiv bilo kojeg oblika raka, kao što je ovde opisano, i koji je podvrgnut kontinuiranoj terapiji sa ciljem sprečavanja bilo kakve metastaze koja potiče od navedenog karcinoma.
[0116] Ovde je otkrivena upotreba ekscipijensa odabranog iz grupe koja obuhvata Polisorbat 80; PEG 400; β-ciklodekstrin; α-ciklodekstrin; hidroksipropil-β-ciklodekstrin; sulfobutiletarβ-ciklodekstrin; laktozu; benzil alkohol; dinatrijum sukcinat; propilenglikol; PEG 300; Cremophor EL; Dimetil sulfoksid; D-manitol; trehalozu; saharozu; i histidin, u liofilizovanom preparatu melfalan flufenamida, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, za smanjenje vremena rekonstitucije liofilizovanog preparata melfalan flufenamida, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, kada je rekonstituisan u vodenom rastvaraču.
[0117] Pomenuti melfalan flufenamid, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, je na primer melfalan flufenamid hidrohlorid (J1).
[0118] Pomenuti melfalan flufenamid, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, je na primer rastvoren/a u etanolu pre nego što je navedeni melfalan flufenamid podvrgnut pomenutom pomoćnom materijalu.
[0119] U ovom dokumentu „liofilizacija“, „sušenje-zamrzavanjem“, „liofilizovani“, „osušen zamrzavanjem“ i slično mogu biti korišćeni naizmenično.
[0120] Polisorbat 80 (koji ima hemijski naziv Polioksietilen 20 sorbitan monooleat i CAS registarski broj 9005-65-6) je komercijalno dostupan od kompanije npr. Fluka ili Sigma-Aldrich.
[0121] PEG 400 ima empirijsku formulu HOCH2(CH2OCH2)mCH2OH, gde m je 8,7, a prosečna molekulska masa je 380-420, i komercijalno je dostupan od npr. Fluka ili Sigma-Aldrich.
[0122] PEG 300 ima empirijsku formulu HOCH2(CH2OCH2)mCH2OH, gde m je 6,4, a prosečna molekulska masa je 285-315, i komercijalno je dostupan od kompanija npr. Fluka ili Sigma-Aldrich.
[0123] Cremophor EL® je zaštitni znak koji prodaje kompanija Sigma-Aldrich, a on je polioksietilen ricinusovo ulje koji ima CAS registarski broj 61791-12-6.
[0124] Primeri citotoksičnih dipeptida koji mogu biti korišćeni kao što je ovde opisano su takođe, otkriveni u WO01/96367 i mogu imati formulu V
pri čemu
R1je alkiloksi, cikloalkiloksi, ariloksi, arilalkiloksi, NH2, alkilamino, cikloalkilamino ili arilamino;
R3je NH2, OH, O-alkil, N-alkil, O-acil, NH-acil, N(CH2CH2Cl)2, NO2, F, CF3ili H; i R4je prirodna ili modifikovana ciklična ili aromatična aminokiselina, ili H; kao i njihove farmaceutski prihvatljive soli.
[0125] Takođe, citotoksični peptidi koji se mogu koristiti kao što je ovde opisano, uključuju peptide formule I ili V, gde je R3F. Dipeptidi su primeri peptida formule I ili V, gde R1je alkiloksi; R3je F, CF3, H, OH, O-alkil, NO2, N(CH2CH2Cl)2, NH-acil ili NH2; a R4je H.
[0126] Tripeptidi su primer peptida formule I ili V, gde je R1alkiloksi; R3je F, CF3, H, OH, O-alkil, NH-acil, NO2, N(CH2CH2Cl)2ili NH2; i R4je prirodna ili modifikovana ciklična ili aromatična aminokiselina.
[0127] Melfalan flufenamid, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, mogu biti pripremljeni kao što je otkriveno u WO 01/96367. Primer 1 WO 01/96367 opisuje sintetski postupak za izradu melfalan flufenamida (L-melfalanil-L-p-fluorofenilalanin etil estra), kao i njegove
2
hidrohloridne soli - melfalan flufenamid hidrohlorida J1 (L-melfalanil-L-p-fluorofenilalanin etil estar, jedinjenje J1).
[0128] Dipeptidni derivati otkriveni u WO 01/96367, mogu biti sintetizovani iz melfalana zaštićenog terc-butoksikarbonilom (Boc), kao što je ovde otkriveno, i mogu se liofilizovati i koristiti kao što je ovde opisano. Takođe, WO 01/96367 otkriva dobijanje tripeptidnih derivata, u kojima su aminokiseline zaštićene od Boc kuplovane sa dipeptidnim derivatom koji sadrži melfalan korišćenjem EDC/NMM/HOBt kao reagense za kuplovanje (EDC je trietilamin ili 1-[3-dimetilamino) propil]-3-etilkarbodiimid hidrohlorid, NMM je N-metilmorfolin, a HOBt je 1-hidroksibenzotriazol). Ovde je otkriveno da takvi tripeptidni derivati mogu biti liofilizovani i korišćeni kao što je ovde opisano.
[0129] Ovde je otkriveno da primeri derivata melfalana koji mogu biti liofilizovani i korišćeni kao što je ovde opisano uključuju, melfalan flufenamid, L-melfalanil-L-p-fluorofenilalanin izopropil estar (JV28), L-prolinil-L-melfalanil-L-p-fluorofenilalanin etil estar (J3) (slika 7) i njegove farmaceutski prihvatljive soli. Ova jedinjenja su ranije otkrivena u WO 01/96367, koji takođe obezbeđuje postupke za njihovu pripremu. Melfalan flufenamid, JV28 i J3 mogu u telu biti transformisani u melfalan. U WO 01/96367, ovi derivati su pokazali da imaju pojačanu aktivnost ćelijskog ubijanja protiv tumora, čak i kada se koriste u nižim koncentracijama od melfalana. Pored toga, rezistencija melfalana može biti izbegnuta.
[0130] Pronalazak će biti dalje opisan sledećim primerima.
Eksperimentalni odeljak
Primer 1: Liofilizacija melfalan flufenamid hidrohlorida (J1) pod različitim uslovima
[0131] U ovom eksperimentu ispitivana je liofilizacija melfalan flufenamid hidrohlorida (J1), pod različitim uslovima.
Primer 1A
[0132] Izmerene količine J1 su rastvorene u različitim zapreminama dejonizovane vode u ultrazvučnom kupatilu, uz blago zagrevanje da bi se dobili bistri rastvori. Uzorci su zamrznuti u kupatilu sa suvim ledom - acetonom (-78 ° C, uzorci A1-A3) ili u zamrzivaču na -16 ° C (uzorci B1 - B3). Sušenje smrzavanjem je zatim sprovedeno tokom 16 sati, pod pritiskom od 1 mbara na sobnoj temperaturi sa rešetkom za suvi led-aceton (-78 ° C) između tikvice za sušenje i pumpe.
2
[0133] Organoleptički izgled nakon sušenja je prikazan u Tabeli 1.
Primer 1B
[0134] Uzorci osušenih jedinjenja su rastvoreni u 50% vodenom acetonitrilu i analizirani pomoću HPLC-a (ACE-kolona, C8, 50x3 mm, 10-97% CH3CN u 3 min, 1 mL/min). U jednom slučaju (J1A1) vodeni rastvor je analiziran pomoću HPLC-a pre sušenja smrzavanjem (J1A1-početak). Čistoće nakon sušenja su prikazane u Tabeli 2.
Primer 1C
[0135] Sledeće je ispitano korišćenje bilo blago zakiseljene vode (na primer 0,01% HCl) da bi se povećala brzina rastvaranja ili da se prvo rastvori J1 u etanolu, pre dodavanja vode (neutralne ili blago kisele).
2
[0136] Tri uzorka J1 su pripremljena rastvaranjem melfalan flufenamida (ca 3 mg) u 70% vod. etanolu (0,5 mL). Rastvori su razblaženi sa 5 mM HCl da bi se dobila koncentracija od 0,4 mg/ mL. Pošto je melfalan flufenamid brzo rastvoren u vod. etanolu nije bilo potrebno koristiti ultrazvučno kupatilo ili grejanje da bi se dobio bistri rastvor. Rastvori su zatim zamrznuti u kupatilu suvog leda-acetona (-78 ° C) rešetke između tikvice za sušenje i pumpe. Vizuelni izgled nakon sušenja je prikazan u Tabeli 3.
Primer 1D
[0137] Na svakom uzorku su urađena dva propuštanja na koloni HPLC: jedno od čvrstog jedinjenja koje se moglo ukloniti iz tikvice i jedno rastvaranjem ostatka u jedinjenju u tikvici (tabela 4).
2
[0138] U zaključku, rastvaranjem J1 u 70% -tnom etanolu, razblaživanjem sa 5 mM HCl i liofilizacijom, dobijena su tri uzorka čistoće > 95%.
Primer 1E
[0139] Zatim je ispitano da se izostavi kiselina i umesto toga etanol razblaži sa dejonizovanom vodom. Tri uzorka J1 su pripremljena rastvaranjem J1 (ca 3 mg) u 70% vod. etanolu (0,5 mL) na sobnoj temperaturi. Rastvori su razblaženi sa dejonizovanom vodom da bi se dobila koncentracija od 0,4 mg/mL. Rastvori su onda zamrznuti u kupatilu od suvog leda-acetona (-78 ° C). Sušenje zamrzavanjem je zatim sprovedeno tokom 16 h pri pritisku od 1 mbara, na sobnoj temperaturi sa rešetkom za suvi led-aceton (-78 ° C) između tikvice za sušenje i pumpe. Vizuelni izgled nakon sušenja je prikazan u tabeli 5, a čistoće u tabeli 6.
[0140] Rastvaranjem J1 u 70% etanolu, razblaživanjem sa vodom i liofilizacijom; dobijena su tri ponovljena uzorka iste čistoće kao i početni materijal.
Primer 2: Uticaj ekscipijenasa na brzinu rastvaranja liofilizovanog melfalan flufenamida
[0141] U ovom eksperimentu ispitivan je uticaj na brzinu rastvaranja dodavanjem ekscipijenasa u procesu sušenja-zamrzavanjem melfalan flufenamid hidrohlorida (J1). Sledeći pomoćni sastojci su korišćeni, koji su svi uobičajeni formulacioni agensi generalno smatrani kao bezbedni (GRAS) prema FDA (Američka uprava za hranu i lekove):
2
- D-manitol, trehaloza i saharoza;
- Trizma hidrohlorid i L-histidin;
- Polisorbat 80, β-ciklodekstrin;
[0142] J1 je korišćen u svim eksperimentima.
D-Mannitol, je nabavljen od kompanije Sigma br.33440;
D-(+)-Trehaloza dihidrat je nabavljena od kompanije Sigma br. T9449-25 g;
Trizma hidrohlorid je nabavljen od kompanije Sigma br. T3253-100 g;
β-ciklodekstrin hidrat je nabavljen od kompanije Sigma br.856088-5 g;
Polisorbat 80 je nabavljen od kompanije Fluka 59924-100 g.
[0143] Sušenje-zamrzavanjem je izvršeno na Leybold Lyovac GT2 opremi. LCMS (tečna hromatografija-masena spektrometrija) je izvršena na HP1100 sistemu korišćenjem acetonitrila-0,1% trifluorosirćetne kiseline u vodi kao eluensa. Korišćena je ACE kolona C8, 50 x 3 mm i gradijent 10-97% acetonitrila u 3 min. Bočice sa filterom su nabavljene od Whatmana, Mini-UniPrep, 0,45 μm.
(i) Metoda A. sušenje-zamrzavanjem
[0144] Melfalan flufenamid (30,1 mg) je rastvoren u 5 ml 70% etanola sa 1 mM HCl, potpuno rastvaranje u roku od 12 min na 18-19 ° C. Rastvor je razblažen sa vodom (70 mL) i distribuiran (10 mL) u tikvice okruglog dna od 250 mL sa i bez ekscipijensa (npr. β-ciklodekstrin, 9 mg). Kada se sav materijal rastvorio, rastvori su zamrznuti potapanjem u kupatilo sa suvim ledom/acetonom na -78 ° C. Zamrznuti rastvori su zatim liofilizirani pri pritisku <0,1 mbara preko noći i sobnoj temperaturi, isparavanjem zadržavajući uzorke zamrznutim do sušenja.
(ii) Metoda A, merenje brzine rastvaranja
[0145] 5% rastvor glukoze (10 mL) je dodat u jednom delu na 18,5-19 ° C liofilizovanom materijalu i mešan magnetom. Alikvoti (ca 0,3 mL) su uzeti sa 1-mL špricem u različito vreme i filtrirani kroz filter bočicu (0,45 μm). Filtrat (8 μL) je analiziran pomoću HPLC.
(iii) Metoda B, sušenje zamrzavanjem
[0146] Melfalan flufenamid (10,2 mg) je rastvoren u 1,67 ml 70% -tnog etanola sa 5 mM HCl, potpuno rastvaranje u roku od 5 minuta na 25 ° C. Rastvor je razblažen sa vodom (23,3 mL) i distribuiran (10 mL) u boce sa i bez pomoćnih sastojaka (npr. β-ciklodekstrin, 9 mg). Rastvor J1 i ekscipijensa je raspodeljen u plastične bočice sa umetkom od filtera 0,45 μm (0,25 mL u svaku bočicu). Bočice su zamrznute uranjanjem u kupatilo sa suvim ledom/acetonom na -78 ° C, a zatim su držane na -20 ° C preko noći u stalku u kome su stavljene bočice. Smrznute bočice su bile prekrivene aluminijumskom folijom da bi se sprečila unakrsna kontaminacija i držane u stalku prethodno ohlađenom do -20 ° C, dok su stalak izlagali u desikatoru do <0,1 mbara preko noći, evaporacijom zadržavajući uzorke zamrznutim do sušenja.
(iv) Metoda B, merenje brzine rastvaranja
[0147] Dodat je 5% rastvor glukoze (0,5 mL), koji je sadržao interni standard (3-metoksibenzojeva kiselina, 0,08 mg/mL). Nakon različitih vremenskih peroda (15 s - 12 min), sadržaj bočica je filtriran, filtrat je direktno prenet u staklene bočice kako bi se sprečilo curenje nerastvorenog materijala u filtrat i 8 μL filtrata je injektovano u LCMS.
Određivanje brzine rastvaranja
[0148] U prvom pristupu, Metoda A, vodeni rastvori J1 sa različitim dodacima su osušeni zamrzavanjem u bočicama okruglog dna. Svakom liofilizovanom jedinjenju dodat je rastvor glukoze uz kontrolisano mešanje. Mali alikvoti su izvučeni špricem u određeno vreme i filtrirani kroz 0,45 μm GHP filter šprica. Stepen rastvaranja J1 u filtratu je zatim određen pomoću HPLC. Ovaj metod je korišćen sa liofilizovanim melfalan flufenamidom samostalno i zajedno sa D-manitolom, trehalozom, saharozom, Polisorbatom 80 i β-ciklodekstrinom. Rezultat ovih testova je pokazao da je J1 bio potpuno rastvoren u roku od 2-4 min, bez obzira na pomoćne materije (videti Sl. 1, bez pomoćnih sastojaka i Sl. 2, sa pomoćnim sastojcima. Videti takođe Tabelu 7). U stvari, brzina rastvaranja liofilizovanog J1 sa ekscipijensima je bila zapravo brža nego što je moglo biti izmereno ovom metodom.
1
Tabela 7. Dodavanje ekscipijenasa u J1 (4 mg) pri sušenju zamrzavanjem, metoda A.
[0149] Da bi se poboljšala preciznost i omogućilo merenje rastvaranja u kraćim intervalima, razvijena je metoda B. U ovoj metodi, vodeni rastvori melfalan flufenamida i pomoćnih sastojaka (videti Tabelu 2) su dodati u plastične bočice od 2 mL i osušeni zamrzavanjem. Zatim je dodat rastvor glukoze sa unutrašnjim standardom 3-metoksibenzojevom kiselinom bez mešanja. Nakon različitih vremena (15 s-6 min), sadržaj bočice je filtriran preko uloška za bočicu od 0,45 µm GHP, filtrat je prenet u staklenu bočicu i stepen rastvaranja melfalan flufenamid hidrohlorida (J1) je određen HPLC-om sa unutrašnjim standardom. Nedostatak mešanja omogućio je sporiji proces rastvaranja, i klinički relevantniji i lakši za merenje kinetike.
[0150] Ovom metodom može biti praćena kinetika rastvaranja liofiliziranog J1 do potpunog rastvaranja nakon 3-4 min (videti Sliku 3, bez pomoćnih sastojaka i Sl. 4, sa pomoćnim sastojcima, videti takođe Tabelu 8).
Tabela 8. Dodavanje ekscipijenasa u J1 (4 mg) pri liofilizaciji, Metoda B.
2
[0151] Brzine rastvaranja J1, sa i bez aditiva, određene metodom A i metodom B, prikazane su u tabeli 9.
Tabela 9. Rezime vremena brzine rastvaranja J1 sa i bez aditiva, Metode A i B.
Čistoća i obnavljanje J1
[0152] Uzorak melfalan flufenamid hidrohlorida (J1) je rastvoren u 50% vod. rastvoru acetonitrila i odmah analiziran pomoću LCMS (tečna hromatografija-masena spektrometrija), pokazujući samo jedan pik (> 99%). Čistoća J1 neposredno nakon rastvaranja u 70% -tnom etanolu koji sadrži 1 mM HCl ili 5 mM HCl je nađena da je oko 97%, s manjim nusproduktom od oko 3%. Količina ovog nusprodukta se povećava ako je rastvor ostavljen na sobnoj temperaturi.
[0153] Rezultati pokazuju da je brzina rastvaranja liofilizovanog J1 u rastvoru glukoze uz mešanje bila brža nego što je moglo biti izmereno (Metoda A), ne omogućavajući uočavanje efekta dodavanja pomoćnih sastojaka. Korišćenjem klinički relevantnije Metode B bez mešanja, rastvaranje liofilizovanog melfalan flufenamida u rastvoru glukoze se može pratiti do potpunosti nakon 3-4 minuta. Sva dodavanja ekscipijenasa β-ciklodekstrina, Polisorbata 80*, Manitola* i Trehaloze* u rastvor melfalan flufenamida pre sušenja zamrzavanjem daju potpuno rastvaranje ispod 1 minuta. Najbrže rastvaranje je postignuto dodavanjem Polisorbata 80*, dajući potpuno rastvaranje u prvoj vremenskoj tački 15 sekundi. [*Primer izvan patentnih zahteva.]
Primer 3: Ispitivanje uticaja koncentracije ekscipijensa Polisorbata 80 na brzinu rastvaranja melfalan flufenamida [*Primer izvan patentnih zahteva.]
[0154] Sledeće je izvršeno za ispitivanje količine ekscipijensa polisorbata 80 koji će biti dodat u procesu sušenja zamrzavanjem melfalan flufenamida i za maksimalno povećanje brzine rastvaranja u 5% rastvoru glukoze. Korišćeno je 0, 10, 50 i 100 tež.% polisorbata 80 u odnosu na melfalan flufenamid. Eksperimenti su izvođeni u duplikatu.
[0155] Melfalan flufenamid hidrohlorid (J1) je korišćen u svim eksperimentima. Korišćeni polisorbat 80 je nabavljen od kompanije Fluka, 59924-100 g.
[0156] Sušenje zamrzavanjem je izvršeno na Leybold Lyovac GT2 opremi. LCMS se izvodi na HP1100 sistemu koristeći acetonitril-0,1% trifluorosirćetne kiseline u vodi kao eluens. Korišćena je ACE-kolona C8, 50 x 3 mm i gradijent 10-97% acetonitrila u 3 min. Filter bočice su od Whatmana, Mini-UniPrep, 0,45 μm.
[0157] Generalna priprema osnovnog rastvora od 2 mg/mL melfalan flufenamida, pre sušenja zamrzavanjem je izvršena na sledeći način:
11,0 mg melfalan flufenamida je suspendovano u 10 mM rastvora HCl u apsolutnom EtOH (0,5 mL). Smeša je mešana tokom 30 minuta pre dodavanja 0,2 mL vode. Smeša je mešana tokom 10 minuta na sobnoj temperaturi (bistri rastvor) pre nego što je dodata u 0 ° C rastvor vode (4,8 mL).0,25 mL rastvora je preneto u plastičnu bočicu koja sadrži 10%, 50% ili 100 mas.% polisorbata 80. Bočica je mućkana, ohlađena i osušena zamrzavanjem.
4
[0158] 5% rastvor glukoze sa unutrašnjim standardom 3-metoksibenzojevom kiselinom je pripremljen rastvaranjem 3-metoksibenzojeve kiseline (1,2 mg) u vodi (15 mL). Smeša je mešana tokom 1 sata pre dodavanja 750 mg glukoze uz mešanje. 0,5 mL 5% rastvora glukoze je dodato u svaku plastičnu bočicu osušenu smrzavanjem i smeše su filtrirane, u različitim vremenskim tačkama, prebačene u staklenu bočicu, a rastvaranje J1 je određeno HPLC-om.
Određivanje brzine rastvaranja
[0159] J1 (11 mg) je suspendovan u EtOH (0,5 mL) i mešan tokom 30 minuta, na sobnoj temperaturi pre dodavanja vode (5 mL). Rastvor je podeljen u 4 različite tikvice koje sadrže 0%, 10%, 50% ili 100% mase (u odnosu na J1) polisorbata 80. Rastvori su prebačeni u 2 mL plastične bočice i preko noći osušeni zamrzavanjem.
[0160] 5% rastvor glukoze sa unutrašnjim standardom 3-metoksibenzojevom kiselinom je dodat u svaku bočicu bez mešanja i smeše su filtrirane kroz GHP uložak bočice od 0,45 µm, pri različitim vremenskim tačkama (2 do 300 sekundi). Filtrat je odmah prebačen u staklenu bočicu da se spreči curenje iz nerastvorenog materijala. Količina rastvorenog J1 u odnosu na interni standard je određena pomoću HPLC metode.
Rezultati
[0161] Brzina rastvaranja J1 (1 mg/mL u 5% rastvoru glukoze) sa i bez polisorbata 80 je sažeta u tabeli 10 i prikazana na slici 5.
Tabela 10.
[0162] Tabela 10 pokazuje da se svi uzorci koji sadrže liofilizirani J1 i pomoćni sastojak Polisorbat 80 rastvaraju mnogo brže nego J1 liofiliziran u odsustvu ekscipijensa. Posebna pažnja je posvećena uzorku koji sadrži 10% polisorbata 80, a vremenske tačke u ovom eksperimentu su bile:
neposredna filtracija, 2 sekunde, 15 sekundi, 30 sekundi i 5 minuta. U prvoj vremenskoj tački gde je uzorak odmah filtriran, oko 40% je rastvoreno, a nakon 2 sekunde je rastvoreno približno 70%. Potpuno rastvaranje je postignuto nakon 30-60 sekundi.
[0163] Brzina rastvaranja liofilizovanog J1 pri 1 mg/mL koji sadrži različite količine polisorbata 80 u 5% rastvoru glukoze je bila ispod 1 minuta za sve uzorke. Najniža količina polisorbata 80 za brzo rastvaranje je bila između 10 i 50 težinskih%.
Primer 4: Ispitivanje uticaja koncentracija ekscipijenasa Polisorbata 80, PEG 400 i βciklodekstrina na brzinu rastvaranja melfalan flufenamida
[0164] Ovaj primer je izveden kako bi se ispitao efekat različitih koncentracija pomoćnih sastojaka polisorbata 80, PEG 400 i β-ciklodekstrina dodatih u procesu liofilizacije melfalan flufenamida za maksimalno povećanje rastvorljivosti i brzine rastvaranja u 5% rastvoru glukoze, prema dugoročnom cilju razvoja liofiliziranog materijala, stabilnog za skladištenje i sa lakom pripremom za doziranje.
[0165] Melfalan flufenamid hidrohlorid (J1) je bio korišćen u svim eksperimentima.
[0166] Korišćeni polisorbat 80 je nabavljen od kompanije Fluka (59924-100 g), β-ciklodekstrin od Aldricha (856088) i PEG 400 od Clarianta (100316).
[0167] Sušenje zamrzavanjem je izvršeno na Leybold Lyovac GT2 opremi. LCMS je izvedena na HP1100 sistemu korišćenjem acetonitrila-0,1% trifluorosirćetne kiseline u vodi kao eluensa. Korišćena je ACE-kolona C8, 50 x 3 mm i gradijent 10-97% acetonitrila u 3 min. Bočice sa filterom su nabavljene od Whatmana, Mini-UniPrep, 0,45 μm.
Opšta priprema osnovnog rastvora 2 mg/mL melfalan flufenamida za sušenje zamrzavanjem
[0168] 11,1 mg melfalan flufenamida je suspendovano u 10 mM rastvora HCl u apsolutnom EtOH (0.5 mL). Smeša je mešana tokom 30 minuta pre dodavanja 0,2 mL vode. Smeša je mešana tokom 10 minuta na sobnoj temperaturi (bistar rastvor), pre nego što je dodata u kapima u rastvor vode 0 ° C (4,8 mL).0,25 mL ili 0,5 mL rastvora je prebačeno u plastičnu bočicu koja sadrži ekscipijense. Bočica je mućkana, ohlađena i osušena zamrzavanjem.
Eksperiment rastvorljivosti
[0169] 5% rastvor glukoze sa unutrašnjim standardom je pripremljen rastvaranjem 3-metoksibenzojeve kiseline (1,2 mg) u vodi (15 mL). Smeša je mešana tokom 1 sata pre dodavanja 750 mg glukoze tokom mešanja. 0,2 mL 5% rastvora glukoze je dodato u svaku plastičnu bočicu osušenu zamrzavanjem i smeše su mućkane tokom 10-15 sekundi i filtrirane nakon 5 minuta. Filtrat je prenet u staklenu bočicu, a rastvorljivost melfalan flufenamida je određena HPLC-om i kalibracionom krivom.
Određivanje rastvorljivosti
[0170] Korišćeno je 2 mg/mL osnovnog rastvora melfalan flufenamid hidrohlorida (J1) kao u prethodnim eksperimentima.
[0171] Za rastvorljivost 2,5 mg/mL J1 u 5% rastvoru glukoze, 0,25 mL osnovnog rastvora je podeljeno u plastične bočice od 2 mL koje sadrže mešavinu pomoćnih sastojaka određenu eksperimentalnim dizajnom i smeše su odmah ohlađene i osušene zamrzavanjem.
[0172] Visoki/niski nivoi svakog ekscipijensa (u težinskim % u odnosu na melfalan flufenamid) su bili sledeći: Polisorbat 80 (8% -80%), PEG 400 (80% -400%) i β-ciklodekstrin (10% -50 %). Najveća količina svakog pomoćnog sastojka je određena iz baze podataka FDA neaktivnih sastojaka registrovanih lekova koji se primenjuju IV, β-ciklodekstrin se nalazi na FDA-ovoj listi GRAS (generalno prepoznat kao siguran), ali prema našim saznanjima nisu date preporuke za intravenske injekcije, što je prouzrokovalo prilično konzervativni visoki nivo koji treba postaviti. Maseni procenat svakog ekscipijensa u odnosu na melfalan flufenamid hidrohlorid (J1) (masa) je prikazan u Tabeli 11.
Tabela 11. Maseni procenat svakog ekscipijensa u odnosu na J1.
[0173] Kao što je ovde pokazano u drugim eksperimentima, brzina rastvaranja J1 je znatno povećana dodatkom polisorbata 80, u procesu sušenja zamrzavanjem. Izvedena su tri eksperimenta kako bi se pokušala postići rastvorljivost od 5 mg/mL. Osnovni rastvor J1 je dodat u 3 različite plastične bočice (eksp 12, 13 i 14) koje sadrže polisorbat 80 (10%, 50% i 100% mase u odnosu na melfalan flufenamid). Smeše su odmah ohlađene i osušene zamrzavanjem.
[0174] U svaku bočicu je dodat 5% rastvor glukoze sa unutrašnjim standardom (3-metoksibenzojeva kiselina) i bočice su mućkane i ostavljene da odstoje 5 minuta. Smeše su filtrirane kroz 0,45 µm GHP filter bočice, a filtrat je odmah prebačen u staklenu bočicu da se spreči curenje od nerastvorenog materijala. Količina rastvorenog J1 je određena pomoću HPLC metode i kalibracione krive.
Rezultati
[0175] Rastvorljivost J1 u mg/mL sa visokim/niskim sadržajima ekscipijenasa Polisorbata 80, PEG 400 i β-ciklodekstrina sumirana je u Tabeli 12.
Tabela 12. Rastvorljivost J1 u mg/mL.
[0176] Rezultati prikazani u Tabeli 12, pokazuju da je rastvorljivost J1 povećana u svim eksperimentima koji sadrže ekscipijense, u poređenju sa J1 koji nije liofiliziran (unos 15 i 16). Velika odstupanja u rastvorljivosti J1 koji nije liofiliziran su verovatno usled različitih veličina čestica u šarži, pošto je unos 15 bio suspenzija finog belog praška, dok je unos 16 bio u obliku krupnijih komada koji daju nižu brzinu rastvaranja i stoga, nižu rastvorljivost J1 u 5 minuta. Preciznost analize je prikazana u centralnim eksperimentima 9-11 (1,9, 1,8 i 1,7) sa identičnim koncentracijama ekscipijenasa. 3 uzorka sa polisorbatom 80 kao pomoćnim sastojkom (10, 50 i 100%) su pokazala rastvorljivost od 1,0, 1,2 i 1,4 mg/mL, respektivno.
[0177] Unosi sa mešavinom pomoćnih sastojaka Polisorbat 80a, PEG 400 i β-ciklodekstrina su pokazali nekoliko kombinacija sa rastvorljivošću na ili blizu 2 mg/mL. Najveća određena rastvorljivost 2,0 (unosi 3, 5 i 7) je dostižna samo sa visokim sadržajima PEG 400, dajući tečne ili polučvrste materije nakon sušenja zamrzavanjem.
[0178] Uzorci sa nižom količinom PEG 400 (unosi 2, 4, 6 i 8) su obrazovali beli, pahuljasti prašak nakon sušenja zamrzavanjem, sa najvećom utvrđenom rastvorljivošću od 1,9 mg/mL u unosu 8. Ovo je podstaklo ispitivanje da li se može dobiti veća rastvorljivost smanjenjem količine PEG 400 i povećanjem količine β-ciklodekstrina. Dodatni uzorak (red 17 u tabeli 12) je osušen zamrzavanjem, a koji sadrži 50% polisorbata 80, 80% PEG 400 i 100% βciklodekstrina. Rastvorljivost J1 sa ovom mešavinom pomoćnih sastojaka je bila 1,2 mg/mL.
[0179] Rezultati pokazuju da je maksimalna rastvorljivost J1 sa kombinacijama pomoćnih sastojaka blizu 2 mg/mL.
[0180] Sa eksperimentom 13 (primer van zahteva), pokazano je da rastvor J1 sa 50% polisorbata daje rastvorljivost od oko 1,2 mg/ml samostalno, dovoljnu za formulaciju od 1,0 mg/mL i omogućava isključenje PEG 400 i β-ciklodekstrina.
Eksperimenti organoleptičke potvrde
[0181] Kako bi se potvrdilo rastvaranje u klinički relevantnijim uslovima, izveden je eksperiment od veće šarže u prozirnim staklenim bočicama umesto plastičnih bočica. Bočica 1 sadrži rastvor 4,8 mg melfalan flufenamid hidrohlorida (J1) i 2,4 mg polisorbata 80. Kao kontrolna bočica 2 sadržala je 4,8 mg melfalan flufenamid hidrohlorida (J1) i bez polisorbata 80. Bočice su preko noći osušene zamrzavanjem.
[0182] U svaku bočicu koja sadrži liofilizirani melfalan J1 kao beli pahuljasti materijal, dodato je 4,70 ml 5% rastvora glukoze da bi se dobila koncentracija J1 od 1,02 mg/mL. Smeše su mućkane 10-15 sekundi, a ispitivana epruveta koja sadrži J1 i 50% polisorbata 80 je pokazala bistri rastvor nakon 15 sekundi, videti Sl. 6, leva bočica. Referentna epruveta sa liofiliziranim J1 bez polisorbata je pokazala male čestice i sadržaj nije bio potpuno rastvoren nakon 30 minuta, videti sliku 6, desna bočica. LC-MS analiza je pokazala da je čistoća melfalan flufenamida nakon 30 minuta bila > 95%, u obe bočice.
[0183] Ovde obezbeđeni rezultati pokazuju da rastvorljivost J1 u 5% rastvoru glukoze može biti povećana korišćenjem smeše pomoćnih sastojaka polisorbata 80, PEG 400 i βciklodekstrina do 1,9 mg/mL. Takva smeša ekscipijenasa sa J1 je rezultirala belom, pahuljastom, čvrstom supstancom nakon liofilizacije.
[0184] Liofilizacija J1 sa 50 mas.% polisorbata 80 je rezultirala belom, pahuljastom, čvrstom supstancom koja se brzo rastvara u 5% rastvoru glukoze. Koncentracija zasićenosti 1,2 mg/mL je dovoljna za upotrebu u kliničkim postavkama za pripremu doziranja od 1,0 mg/mL.
Primer 5: Test stabilnosti [Primer van patentnih zahteva]
[0185] Svrha prvog dela ove studije je bila da se ispita brzina rastvaranja melfalan flufenamid hidrohlorida (J1) (liofiliziran zajedno sa polisorbatom 80) u 5% rastvoru glukoze.
[0186] Brzina rastvaranja J1 (liofiliziran) u 5% rastvoru glukoze koji sadrži Polisorbat 80 biće izmerena u drugom eksperimentu.
[0187] Konačno će biti izmerena brzina rastvaranja J1 koji nije liofiliziran u 5% rastvoru glukoze koji sadrži polisorbat 80.
4
[0188] Drugi deo je istraživanje degradacije J1 u dve različite vrste preparata na povišenoj temperaturi. Prvi preparat je liofilizovana, čvrsta supstanca koja sadrži polisorbat 80, a drugi je 25 mg/ml rastvora J1 u N,N-dimetilacetamidu (DMA). Razgradnja je praćena tokom 1 meseca na 40 ° C, korišćenjem dva preparata.
(i) Određivanje brzine rastvaranja.
[0189] U svaku plastičnu bočicu koja sadrži J1 dodat je 5% rastvor glukoze. Bočice su mućkane i filtrirane u različitim vremenskim tačkama. Filtrat je prenet u staklene bočice i količina rastvorenog J1 je određena HPLC-om.
(ii) Dizajn ubrzane studije stabilnosti.
[0190] 10 Bočica sa liofiliziranim J1 i polisorbatom 80, i 10 bočica J1 rastvora u DMA, skladišteno je na 40 ° C, tokom 1 meseca. Dve bočice liofiliziranog materijala (nazvane osušene zamrzavanjem 1 i 2, u tabeli ispod) i jedna bočica DMA rastvora (nazvana DMA u tabeli 1 ispod) su izvađene iz komore na 40 ° C i čuvane na -20 ° C i istovremeno analizirane za ispitivanje i čistoću J1. Vremena uzorkovanja su bila 0, 1, 3, 10 i 30 dana. Svaka liofilizirana bočica je sadržala 0,25 mg J1. Rastvor od 25 mg/ml u DMA je bio od Onkopeptida.
(iii) Analiza i rezultati
[0191] Uzorci osušeni zamrzavanjem su rastvoreni u 500 μl DMA u Whatman-ovim 0,45 μm filter bočicama. Uzorci su nakratko centrifugirani pre izvlačenja dva dela bočice zajedno i tako, filtriranjem uzorka. Uzorci rastvora od 25 mg/ml su razblaženi sa DMA alikvotiranjem 20 μl rastvora u HPLC bočice i razblaživanjem sa 980 μl DMA.4 μl je injektovano u hromatografski sistem.
[0192] Stabilnost je procenjena kao relativna čistoća, budući da je došlo do neznatnih varijacija u količini J1 u liofiliziranim bočicama. Korišćenjem relativne čistoće, svaki uzorak je standardizovan u odnosu na sebe i efekat promenljive količine J1 je minimiziran na rezultat stabilnosti.
[0193] Brzina rastvaranja J1 u 5% glukoze u prisustvu PS je sumirana u tabeli 13:
Tabela 13: Kratak pregled eksperimentalnog ispitivanja brzine rastvaranja.
Rezultati ispitivanja stabilnosti
[0194]
Tabela 14. Rezultati testa stabilnosti na 40 ° C, poređenje između rastvora DMA i liofiliziranog J1 na 40 ° C/relativna vlažnost okoline
[0195] Rezultati u tabeli 14 pokazuju da je liofilizirani materijal suštinski nepromenjen tokom perioda ispitivanja. Primećena je samo neznatna promena čistoće. Takođe, brzina rastvaranja liofiliziranog J1 pri 1 mg/mL u 5% rastvoru glukoze je bila ispod 1 min u prisustvu Polisorbata 80. Brzina rastvaranja ne-liofiliziranog J1 pri 1 mg/mL u 5% rastvoru glukoze koji sadrži Polisorbat 80 je procenjena na 1-2 min.
[0196] J1 u rastvoru DMA je značajno razgrađen tokom skladištenja na 40 ° C, tokom jednog meseca. Relativna količina je smanjena od oko 96,8% na 86,9%. J1 skladišten u obliku liofilizovane, suve čvrste supstance je pokazao nisku degradaciju od 98,7% na 98,3% tokom istog vremenskog perioda.

Claims (17)

PATENTNI ZAHTEVI
1. Liofilizovani farmaceutski preparat koji sadrži
(i) melfalan flufenamid ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so; i
(ii) najmanje jedan ekscipijens izabran iz grupe koja sadrži β-ciklodekstrin; αciklodekstrin; hidroksipropil-β-ciklodekstrin; i sulfobutiletar-β-ciklodekstrin.
2. Liofilizovani farmaceutski preparat prema patentnom zahtevu 1, naznačen time, da je količina ekscipijensa oko 10-100 težinskih% od pomenutog melfalan flufenamida.
3. Liofilizovani farmaceutski preparat prema patentnom zahtevu 2, naznačen time, da je količina ekscipijensa 10-50 težinskih% od pomenutog melfalan flufenamida.
4. Liofilizovani farmaceutski preparat prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 3, naznačen time, da je navedeni melfalan flufenamid u obliku melfalan flufenamid hidrohlorida (J1).
5. Liofilizovani farmaceutski preparat prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 4, koji dalje sadrži fiziološki prihvatljiv rastvor.
6. Liofilizovani farmaceutski preparat prema patentnom zahtevu 5, naznačen time, da je navedeni fiziološki prihvatljiv rastvor rastvor glukoze.
7. Liofilizovani farmaceutski preparat prema patentnom zahtevu 6, naznačen time, što je količina glukoze 4,5-5,5 mas.% liofilizovanog preparata.
8. Liofilizovani farmaceutski preparat prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 7, koji je oslobođen ili u osnovi bez organskih rastvarača.
9. Komplet od kombinacije delova koji sadrži
(i) liofilizovani farmaceutski preparat prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 4; i (ii) fiziološki prihvatljiv rastvor.
4
10. Liofilizovani farmaceutski preparat prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 4, za upotrebu kao lek.
11. Liofilizovani farmaceutski preparat prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 4, za upotrebu u lečenju i/ili prevenciji raka.
12. Liofilizovani farmaceutski preparat za upotrebu, prema patentnom zahtevu 11, naznačen time što je pomenuti karcinom bilo koji od raka jajnika, raka pluća, raka mokraćne bešike, mezotelioma, multiplog mijeloma, raka dojke ili hematološkog karcinoma.
13. Komplet od kombinacije delova prema patentnom zahtevu 9, za upotrebu u lečenju raka.
14. Postupak za pripremu liofilizovanog farmaceutskog preparata prema prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 3, naznačen time, da:
a. melfalan flufenamid, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, je rastvoren(a) u organskom rastvaraču da bi se dobio rastvor melfalan flufenamida;
b. voda se dodaje rastvoru melfalan flufenamida da bi se dobio vodeni rastvor melfalan flufenamida, u koncentraciji od oko 0,2-3,0 mg/ml;
c. najmanje jedan ekscipijens izabran iz grupe koja sadrži sadrži β-ciklodekstrin; αciklodekstrin; hidroksipropil-β-ciklodekstrin; i sulfobutiletar-β-ciklodekstrin je dodat u rastvor melfalan flufenamida; i
d. vodeni rastvor melfalan flufenamida koji sadrži ekscipijens(e) je podvrgnut liofilizaciji.
15. Postupak prema patentnom zahtevu 14, pri čemu:
a. melfalan flufenamid, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, je rastvoren(a) u organskom rastvaraču;
b. dodaje se voda u rastvor dobijen u koraku a) da bi se dobio rastvor pomenutog melfalan flufenamida ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, u koncentraciji oko 0,2 -3,0 mg/ml;
c. najmanje jedan ekscipijens izabran iz grupe koja sadrži sadrži β-ciklodekstrin; αciklodekstrin; hidroksipropil-β-ciklodekstrin; i sulfobutiletar-β-ciklodekstrin je dodat u rastvor dobijen u koraku b); i
d. rastvor dobijen u koraku c) je podvrgnut liofilizaciji.
16. Postupak prema patentnom zahtevu 14 ili 15, naznačen time, da je organski rastvarač izabran između bilo kog od etanola, etanola koji sadrži kiselinu, glicerola, propilenglikola, benzil alkohola, dimetilacetamida (DMA), N-metil-2-pirolidona, izopropanola, n-butanola, terc-butanola, metil terc-butil etra, propilenglikola, dimetilsulfoksida, tetrahidrofurana, 2-metil tetrahidrofurana, acetona, dimetilformamida, acetonitrila, dioksana, sirćetne kiseline, mlečne kiseline, propionske kiseline, n-butanola, izopropanola, n-propanola, terc-butanola, sek-butanola, metanola i smeše etanola i vode.
17. Postupak prema bilo kom od patentnih zahteva 14 do 16, naznačen time, da je navedeni melfalan flufenamid, melfalan flufenamid hidrohlorid (J1).
4
RS20201030A 2011-04-28 2012-04-25 Liofilizovani preparat citotoksičnih dipeptida RS60719B1 (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SE1150371 2011-04-28
US201161535126P 2011-09-15 2011-09-15
EP17173249.8A EP3228319B1 (en) 2011-04-28 2012-04-25 Lyophilized preparation of cytotoxic dipeptides

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS60719B1 true RS60719B1 (sr) 2020-09-30

Family

ID=47071620

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20171002A RS56462B1 (sr) 2011-04-28 2012-04-25 Liofilizovani preparat citotoksičnih dipeptida
RS20201030A RS60719B1 (sr) 2011-04-28 2012-04-25 Liofilizovani preparat citotoksičnih dipeptida
RS20221059A RS63747B1 (sr) 2011-04-28 2012-04-25 Liofilizovani preparat citotoksičnih dipeptida

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20171002A RS56462B1 (sr) 2011-04-28 2012-04-25 Liofilizovani preparat citotoksičnih dipeptida

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20221059A RS63747B1 (sr) 2011-04-28 2012-04-25 Liofilizovani preparat citotoksičnih dipeptida

Country Status (29)

Country Link
US (8) US20140128462A1 (sr)
EP (4) EP2701720B1 (sr)
JP (1) JP6042412B2 (sr)
KR (2) KR101808895B1 (sr)
CN (2) CN108096563A (sr)
AU (1) AU2012247545B2 (sr)
BR (2) BR112013027584B1 (sr)
CA (2) CA3024230C (sr)
CY (2) CY1119453T1 (sr)
DK (3) DK3656393T3 (sr)
ES (2) ES2930140T3 (sr)
FI (1) FIC20230004I1 (sr)
FR (1) FR23C1000I2 (sr)
HR (2) HRP20171523T1 (sr)
HU (3) HUE060783T2 (sr)
IL (3) IL228889A0 (sr)
LT (3) LT2701720T (sr)
LU (1) LUC00291I2 (sr)
MX (1) MX345102B (sr)
NL (1) NL301206I2 (sr)
NO (1) NO2023004I1 (sr)
PL (3) PL3228319T3 (sr)
PT (2) PT2701720T (sr)
RS (3) RS56462B1 (sr)
RU (1) RU2597154C2 (sr)
SI (2) SI3228319T1 (sr)
SM (3) SMT202200450T1 (sr)
WO (1) WO2012146625A1 (sr)
ZA (1) ZA201308765B (sr)

Families Citing this family (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
LT2701720T (lt) 2011-04-28 2017-11-10 Oncopeptides Ab Liofilizuotas citotoksinių dipeptidų preparatas
JP5827178B2 (ja) * 2012-06-05 2015-12-02 北越紀州製紙株式会社 セルロース多孔質体及びその製造方法
PT2928463T (pt) * 2012-10-26 2020-02-25 Oncopeptides Ab Preparações liofilizadas de melfalano flufenamida
KR102205592B1 (ko) * 2012-10-26 2021-01-20 온코펩타이드즈 아베 멜팔란 플루펜아미드의 동결건조 제제
GB201507903D0 (en) 2015-05-08 2015-06-24 Oncopeptides Ab Process for preparation of nitrogen mustard derivatives
GB201521217D0 (en) * 2015-12-01 2016-01-13 Oncopeptides Ab Dosage regimens
US10507165B2 (en) 2017-05-31 2019-12-17 Adienne Pharma & Biotech Sa Multi chamber flexible bag and methods of using same
US10369077B2 (en) * 2017-05-31 2019-08-06 Adienne Pharma & Biotech Sa Multi chamber flexible bag and methods of using the same
US12152087B2 (en) * 2018-10-18 2024-11-26 Oncopeptides Innovation Ab Deuterated melflufen compounds
WO2020201542A1 (en) 2019-04-03 2020-10-08 Oncopeptides Ab Treatment of al amyloidosis with melflufen
GB201905477D0 (en) * 2019-04-17 2019-05-29 Oncopeptides Ab Novel formulations
WO2021053185A1 (en) 2019-09-20 2021-03-25 Oncopeptides Ab Melflufen formulations and their use in the treatment or prophylaxis of osteosarcoma
CA3176803A1 (en) * 2020-05-08 2021-11-11 Cjb Applied Technologies, Llc Pesticidal compositions and related methods
KR20230131815A (ko) * 2020-08-19 2023-09-14 셀액트 파마 게엠베하 에토포시드 토니리베이트 제제
US12077809B2 (en) 2021-04-27 2024-09-03 Enplas Corporation Freeze-dried structure and producing method thereof
GB202109896D0 (en) 2021-07-08 2021-08-25 Oncopeptides Ab Novel treatments
GB202109894D0 (en) 2021-07-08 2021-08-25 Oncopeptides Ab Novel treatments
EP4366721A1 (en) 2021-07-08 2024-05-15 Oncopeptides Innovation AB Melflufen for use in the treatment of multiple myeloma
GB202109895D0 (en) 2021-07-08 2021-08-25 Oncopeptides Ab Novel treatments
KR102757193B1 (ko) * 2021-10-19 2025-01-21 단국대학교 천안캠퍼스 산학협력단 피리미딘-2,4-다이온 유도체를 유효성분으로 포함하는 근감소증의 예방 또는 치료용 조성물
GB202204171D0 (en) 2022-03-24 2022-05-11 Oncopeptides Ab Novel formulations

Family Cites Families (24)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB750155A (en) 1953-03-17 1956-06-13 Nat Res Dev Substituted alanines
GB8727157D0 (en) * 1987-11-19 1987-12-23 Wellcome Found Pharmaceutical formulations
JP3176716B2 (ja) 1991-06-21 2001-06-18 武田薬品工業株式会社 溶解性が向上した難水溶性薬物組成物
US5595756A (en) * 1993-12-22 1997-01-21 Inex Pharmaceuticals Corporation Liposomal compositions for enhanced retention of bioactive agents
SE0002202D0 (sv) 2000-06-13 2000-06-13 Karolinska Innovations Ab New peptides
US6992207B2 (en) 2000-06-13 2006-01-31 Oncopeptides Ab Melphalan derivatives and their use as cancer chemotherapeutic drugs
EP1438019A1 (en) 2001-10-24 2004-07-21 PARI GmbH Spezialisten für effektive Inhalation Kit for the preparation of a pharmaceutical composition
ATE397440T1 (de) * 2002-02-22 2008-06-15 Schering Corp Pharmazeutische zubereitungen von antineoplastischen wirkstoffen, insbesondere temozolomid, verfahren zu ihrer herstellung und deren verwendung
US6780324B2 (en) * 2002-03-18 2004-08-24 Labopharm, Inc. Preparation of sterile stabilized nanodispersions
US7323479B2 (en) * 2002-05-17 2008-01-29 Celgene Corporation Methods for treatment and management of brain cancer using 1-oxo-2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-4-methylisoindoline
US20040034099A1 (en) * 2002-06-27 2004-02-19 Ramsey Beverly J. Pharmaceutical composition
US20050152979A1 (en) * 2003-09-05 2005-07-14 Cell Therapeutics, Inc. Hydrophobic drug compositions containing reconstitution enhancer
MX2007001663A (es) 2004-08-12 2007-04-10 Schering Corp Formulacion de interferon pegilado estable.
ATE368461T1 (de) * 2004-10-29 2007-08-15 Pharma Mar Sa Zusammensetzungen enthaltend ecteinascidin und einen disaccharide
EP1674098A1 (en) 2004-12-23 2006-06-28 Schering Aktiengesellschaft Stable and tolerable parental formulations of highly reactive organic drug substances with low or no solubility in water
GB0522082D0 (en) * 2005-10-31 2005-12-07 Pharma Mar Sa Formulations
TWI360549B (en) 2006-07-07 2012-03-21 Gilead Sciences Inc Novel pyridazine compound and use thereof
HUE037109T2 (hu) 2006-11-21 2018-08-28 Jina Pharmaceuticals Inc Endoxifén rák kezelésében történõ alkalmazásra
CN101584669B (zh) * 2009-06-19 2010-12-29 江苏奥赛康药业有限公司 美法仑冻干粉针剂
WO2011078782A1 (en) * 2009-12-22 2011-06-30 Oncopeptides Ab A composition comprising of melphalan derivatives and gemcitabine or etoposide useful in the treatment of cancer
AR077384A1 (es) 2010-07-05 2011-08-24 Eriochem Sa Una formulacion farmaceutica inyectable de melfalano.
ES2823805T3 (es) * 2011-04-15 2021-05-10 Janssen Pharmaceutica Nv Nanosuspensiones de fármacos secadas por congelamiento
LT2701720T (lt) 2011-04-28 2017-11-10 Oncopeptides Ab Liofilizuotas citotoksinių dipeptidų preparatas
KR102205592B1 (ko) 2012-10-26 2021-01-20 온코펩타이드즈 아베 멜팔란 플루펜아미드의 동결건조 제제

Also Published As

Publication number Publication date
LT2701720T (lt) 2017-11-10
RU2013152751A (ru) 2015-06-10
CY1119453T1 (el) 2018-03-07
BR112013027584B1 (pt) 2020-11-03
BR112013027584A2 (pt) 2016-09-06
SI3228319T1 (sl) 2020-10-30
DK3656393T3 (da) 2022-11-14
CN103547279A (zh) 2014-01-29
US10543274B2 (en) 2020-01-28
EP4122482A1 (en) 2023-01-25
KR102122416B1 (ko) 2020-06-12
KR101808895B1 (ko) 2017-12-13
US11344622B2 (en) 2022-05-31
EP3656393B1 (en) 2022-08-24
FR23C1000I2 (fr) 2024-03-15
IL272429A (en) 2020-03-31
PL3656393T3 (pl) 2023-01-16
ES2930140T3 (es) 2022-12-07
RS56462B1 (sr) 2018-01-31
EP3228319A1 (en) 2017-10-11
NO2023004I1 (no) 2023-01-16
US20200121794A1 (en) 2020-04-23
SMT201700459T1 (it) 2017-11-15
US20170049894A1 (en) 2017-02-23
WO2012146625A1 (en) 2012-11-01
ES2642676T3 (es) 2017-11-17
EP3656393A1 (en) 2020-05-27
US10869928B2 (en) 2020-12-22
PL2701720T3 (pl) 2017-12-29
AU2012247545A1 (en) 2013-10-31
FIC20230004I1 (fi) 2023-01-19
RU2597154C2 (ru) 2016-09-10
SMT202000447T1 (it) 2020-09-10
US20200009252A1 (en) 2020-01-09
NZ617197A (en) 2015-06-26
US20200345848A1 (en) 2020-11-05
CA3024230A1 (en) 2012-11-01
MX2013012545A (es) 2014-04-16
HRP20221355T1 (hr) 2022-12-23
DK2701720T3 (en) 2017-10-09
HUS2300005I1 (hu) 2023-02-28
KR20140041497A (ko) 2014-04-04
LTC2701720I2 (sr) 2024-09-25
IL265457B (en) 2021-02-28
RS63747B1 (sr) 2022-12-30
PL3228319T3 (pl) 2021-02-08
CA2833500C (en) 2019-01-08
CY1123242T1 (el) 2021-10-29
JP2014512402A (ja) 2014-05-22
PT3656393T (pt) 2022-11-03
IL265457A (en) 2019-05-30
FR23C1000I1 (fr) 2023-03-10
US20220323585A1 (en) 2022-10-13
AU2012247545B2 (en) 2016-08-11
HUE037863T2 (hu) 2018-09-28
EP2701720A1 (en) 2014-03-05
US20140128462A1 (en) 2014-05-08
LUC00291I2 (sr) 2025-05-12
HUE060783T2 (hu) 2023-04-28
CA2833500A1 (en) 2012-11-01
KR20170140409A (ko) 2017-12-20
BR122019017088B1 (pt) 2021-11-16
NL301206I2 (nl) 2023-01-24
CN108096563A (zh) 2018-06-01
US10322182B2 (en) 2019-06-18
EP2701720B1 (en) 2017-07-12
CA3024230C (en) 2022-10-18
US11896668B2 (en) 2024-02-13
DK3228319T3 (da) 2020-09-07
JP6042412B2 (ja) 2016-12-14
IL272429B (en) 2022-05-01
IL228889A0 (en) 2013-12-31
EP3228319B1 (en) 2020-06-03
ZA201308765B (en) 2016-02-24
US20190240332A1 (en) 2019-08-08
MX345102B (es) 2017-01-16
US20240358838A1 (en) 2024-10-31
SI2701720T1 (sl) 2017-11-30
PT2701720T (pt) 2017-10-20
LT3656393T (lt) 2022-12-12
HRP20171523T1 (hr) 2017-11-17
SMT202200450T1 (it) 2023-01-13
NL301206I1 (en) 2022-12-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11896668B2 (en) Lyophilized preparation of cytotoxic dipeptides
IL280812B2 (en) A lyophilic preparation of cytotoxic dipeptides
HK40081253A (en) Lyophilized preparation of cytotoxic dipeptides
HK40018864A (en) Lyophilized preparation of cytotoxic dipeptides
HK40018864B (en) Lyophilized preparation of cytotoxic dipeptides
HK1245124B (en) Lyophilized preparation of cytotoxic dipeptides
HK1245124A1 (en) Lyophilized preparation of cytotoxic dipeptides
NZ617197B2 (en) Lyophilized preparation of cytotoxic dipeptides