RS60857B1

RS60857B1 - Nova kisela adiciona so 1-(5-(2,4-difluorofenil)-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-4-metoksi-1h-pirol-3-il)-n- metilmetanamina

Info

Publication number: RS60857B1
Application number: RS20201178A
Authority: RS
Inventors: Aeri Kim; Kwan Hyung Cho
Original assignee: Daewoong Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2016-03-25
Filing date: 2017-03-17
Publication date: 2020-10-30
Also published as: HK1254394A1; US20190031609A1; TN2018000269A1; US10487053B2; PH12018501845B1; HRP20201571T1; AU2017238917B2; JOP20170071B1; JP2019509320A; CO2018008834A2; CA3014753A1; PL3433232T3; BR112018069540A2; DOP2021000001A; EP3433232B1; PT3433232T; MY196355A; TW201737908A; AR107964A1; KR102417830B1

Description

Opis

OBLAST TEHNIKE

[0001] Predmetni pronalazak je definisan u priloženim patentnim zahtevima i odnosi se na novu kiselu adicionu so 1-(5-(2,4-difluorofenil)-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-4-metoksi-1H-pirol-3-il)-N-metilmetanamina.

STANJE TEHNIKE

[0002] Izbor farmaceutski prihvatljivih soli je kritičan korak u procesu istraživanja i razvoja novih lekova. Ovo je iz razloga što soli izvesnih lekova često mogu biti važne determinante lakoće dobijanja sirovina za lekove, rastvorljivosti, stabilnosti u toku distribucije i skladištenja, lakoće formulacije i farmakokinetičkih svojstava.

[0003] Proizvodnja različitih vrsta soli može biti sredstvo za promenu fizikohemijskih i bioloških svojstava lekova bez promene hemijske strukture specifičnih lekova. Pri izboru poželjne soli, moraju se razmotriti svojstva mnogih soli. Na primer, može biti uzeta u obzir zavisnost od okruženja i situacije gde se koriste različiti faktori kao što su lakoća proizvodnje, stabilnost, rastvorljivost i/ili higroskopnost soli.

[0004] Posebno postoji kontinualna potreba za formulacijama lekova koje odlikuje bolja bioraspoloživost ili bolja stabilnost i zbog toga se sprovodi kontinualno ispitivanje novih soli ili čistijih soli postojećih medicinskih molekula. EP 1803709 A1 opisuje jedinjenja za koja se navodi da imaju "superiorno dejstvo protonske pumpe i ... antiulcersku aktivnost i slično posle konverzije u inhibitor protonske pumpe u telu". WO 2016/175555 A2 opisuje "derivat 4-metoksi pirola ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, postupak za njegovo dobijanje i farmaceutsku kompoziciju koja ga sadrži". Za derivate 4-metoksi pirola se navodi da imaju "ne samo odličnu aktivnost inhibicije protonske pumpe, aktivnost inhibiranja gastričnih oštećenja i efekte pojačanja odbrambenog faktora, već takođe i odličnu aktivnost iskorenjivanja H. pylori".

[0005] Shodno tome, aktuelni pronalazači su otkrili da se može dobiti nova kisela adiciona so 1-(5-(2,4-difluorofenil)-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-4-metoksi-1H-pirol-3-il)-N-metilmetanamina koja je nova aktivna medicinska supstanca i da se može farmaceutski primeniti na osnovu svojih fizikohemijskih svojstava i stabilnosti, čime upotpunjavaju predmetni pronalazak.

DETALJNI OPIS PRONALASKA

TEHNIČKI PROBLEM

[0006] Cilj predmetnog pronalaska je da se realizuje farmaceutski prihvatljiva kisela adiciona so 1-(5-(2,4-difluorofenil)-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-4-metoksi-1H-pirol-3-il)-N-metilmetanamina koja ima visoku rastvorljivost u vodi i odličnu stabilnost.

TEHNIČKO REŠENJE

[0007] Da bi se ostvario gore navedeni cilj, predmetnim pronalaskom su realizovani:

1-(5-(2,4-difluorofenil)-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-4-metoksi-1H-pirol-3-il)-N-metilmetanamin sukcinat,

1-(5-(2,4-difluorofenil)-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-4-metoksi-1H-pirol-3-il)-N-metilmetanamin tartrat, i

1-(5-(2,4-difluorofenil)-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-4-metoksi-1H-pirol-3-il)-N-metilmetanamin fumarat.

[0008] Ovde je takođe opisan 1-(5-(2,4-difluorofenil)-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-4-metoksi-1H-pirol-3-il)-N-metilmetanamin hidrohlorid.

[0009] Predmetni pronalazak će biti detaljno opisan u nastavku.

[0010] 1-(5-(2,4-difluorofenil)-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-4-metoksi-1H-pirol-3-il)-N-metilmetanamin, koji je nova aktivna medicinska supstanca, je jedinjenje koje je predstavljeno sledećom hemijskom formulom (1), koja odgovara derivatu 4-metoksipirola:

[Hemijska Formula 1]

[0012] Gore navedeni 1-(5-(2,4-difluorofenil)-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-4-metoksi-1H-pirol-3-il)-N-metil metanamin i njegova farmaceutski prihvatljiva so mogu imati ne samo aktivnost inhibicije protonske pumpe, aktivnost inhibiranja gastričnih oštećenja i efekte pojačanja odbrambenog faktora, već takođe i odličnu aktivnost iskorenjivanja Helicobacter pylori (H. pylori). Shodno tome, 1-(5-(2,4-difluorofenil)-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-4-metoksi-1H-pirol-3-il)-N-metilmetanamin i njegova farmaceutski prihvatljiva so se mogu efektivno primeniti za prevenciju i lečenje gastrointestinalne povrede usled čira gastrointestinalnog trakta, gastritisa, refluksnog ezofagitisa ili H. pylori.

[0013] Farmaceutski prihvatljiva so 1-(5-(2,4-difluorofenil)-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-4-metoksi-1H-pirol-3-il)-N-metilmetanamina može biti kisela adiciona so 1-(5-(2,4-difluorofenil)-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-4-metoksi-1H-pirol-3-il)-N-metilmetanamina.

[0014] U ovom slučaju kiselina može biti ćilibarna kiselina, vinska kiselina ili fumarna kiselina.

[0015] Kisela adiciona so 1-(5-(2,4-difluorofenil)-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-4-metoksi-1H-pirol-3-il)-N-metilmetanamina se može dobiti postupkom za dobijanje koji sadrži korake:

1) rastvaranja 1-(5-(2,4-difluorofenil)-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-4-metoksi-1H-pirol-3-il)-N-metilmetanamina i kiseline, respektivno, u organskom rastvaraču da bi se dobio rastvor 1-(5-(2,4-difluorofenil)-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-4-metoksi-1H-pirol-3-il)-N-metilmetanamina i rastvor kiseline; i

2) mešanja rastvora 1-(5-(2,4-difluorofenil)-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-4-metoksi-1H-pirol-3-il)-N-metilmetanamina i rastvora kiseline, a zatim mešanje pomešanih rastvora.

[0016] Korak 1) je korak dobijanja odgovarajućih rastvora uz korišćenje dobrog rastvarača koji je sposoban za potpuno rastvaranje 1-(5-(2,4-difluorofenil)-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-4-metoksi-1H-pirol-3-il)-N-metilmetanamina i kiseline, respektivno, a rastvarači koji se koriste za rastvaranje 1-(5-(2,4-difluorofenil)-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-4-metoksi-1H-pirol-3-il)-N-metilmetanamina i kiselina mogu biti isti ili različiti.

[0017] U ovom slučaju, kao kiselina se može koristiti ćilibarna kiselina, vinska kiselina, ili fumarna kiselina.

[0018] Dalje, organski rastvarač može biti jedan ili više izabranih iz grupe koja se sastoji od n-heksana, etil acetata, butil acetata, acetonitrila, hloroforma, dietil etra, acetona, metanola i etanola.

[0019] Specifično, u koraku dobijanja rastvora 1-(5-(2,4-difluorofenil)-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-4-metoksi-1H-pirol-3-il)-N-metilmetanamina, može se koristiti organski rastvarač kao 1-20-struka zapremina (ml/g), ili prvenstveno kao 1-10-struka zapremina (ml/g), u odnosu na težinu 1-(5-(2,4-difluorofenil)-1-((3-fluorofenil)-sulfonil)-4-metoksi-1H-pirol-3 -il)-N-metilmetanamina.

[0020] Dalje, u koraku dobijanja rastvora kiseline, može se koristiti organski rastvarač kao 1-30-struka zapremina (ml/g), ili prvenstveno kao 5-30-struka zapremina (ml/g), u odnosu na težinu kiseline.

[0021] Korak 2) je korak mešanja rastvora dobijenih u koraku 1), a zatim mešanja pomešanih rastvora da bi se dobila so u kojoj su 1-(5-(2,4-difluorofenil)-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-4-metoksi-1H-pirol-3-il)-N-metilmetanamin i kiselina hemijski povezani.

[0022] U ovom slučaju, u koraku mešanja pripremljenih rastvora, kiselina se može koristiti sa 0.5 do 3 ekvivalenta ili prvenstveno sa 0.5 do 2 ekvivalenta, u odnosu na 1-(5-(2,4-difluorofenil)-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-4-metoksi-1H-pirol-3-il)-N-metilmetanamin. U okviru gornjeg opsega, može se proizvesti so u kojoj su 1-(5-(2,4-difluorofenil)-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-4-metoksi-1H-pirol-3-il)-N-metilmetanamin i kiselina vezani u molskom odnosu od 1:0.5, 1:1, 1:1.5, ili 1:2.

[0023] Sledeći korak mešanja pomešanih rastvora može se izvoditi na temperaturi od 24°C do 28°C tokom 30 minuta do 4 sata. Za ovo vreme brzina mešanja može biti u opsegu od 50 rpm do 300 rpm. U okviru ovog opsega mogu se proizvesti soli sa visokim prinosom i visokom čistoćom.

[0024] Kisela adiciona so 1-(5-(2,4-difluorofenil)-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-4-metoksi-1H-pirol-3-il)-N-metilmetanamina dobijena gornjim postupkom za dobijanje se može izdvojiti iz rastvora postupkom vakuumskog filtriranja. Ako je neophodno, izdvojena kisela adiciona so se ispira i suši pod vakuumom da bi se dobila kisela adiciona so visoke čistoće. Pored toga, reakcioni uslovi, kao što su udeo rastvarača, temperaturski opseg, vreme procesa i slično koji su opisani u gornjem postupku za dobijanje se mogu podesiti u zavisnosti od izabranog rastvarača.

[0025] Sa druge strane, predmetnim pronalaskom je realizovana farmaceutska kompozicija za primenu u prevenciji i lečenju gastrointestinalne povrede usled čira gastrointestinalnog trakta, gastritisa, refluksnog ezofagitisa, ili H. pylori, koja sadrži jednu ili više kiselih adicionih soli izabranih iz grupe koja se sastoji od sukcinata, tartrata i fumarata 1-(5-(2,4-difluorofenil)-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-4-metoksi-1H -pirol-3-il)-N-metilmetanamina.

[0026] Takva farmaceutska kompozicija može sadržati farmaceutski prihvatljive nosače koji se obično koriste. Nosač je onaj koji se obično primenjuje u vreme formulisanja i on obuhvata laktozu, dekstrozu, saharozu, sorbitol, manitol, skrob, guma akaciju, kalcijum fosfat, alginat, želatin, kalcijum silikat, mikrokristalnu celulozu, polivinilpirolidon, celulozu, vodu, sirup, metil celulozu, metil hidroksibenzoat, propil hidroksibenzoat, talk, magnezijum stearat, mineralno ulje i slično, ali nije ograničen na njih. Farmaceutska kompozicija može dalje sadržati lubrikans, sredstvo za vlaženje, zaslađivač, aromu, emulgator, sredstvo za suspendovanje, konzervans itd. pored gornjih komponenata.

[0027] Farmaceutska kompozicija se može davati oralno ili davati parenteralno, uključujući intravenske, intramuskularne, intraperitonealne, subkutane i transdermalne načine primene.

[0028] U ovom slučaju se farmaceutska kompozicija može davati u terapeutski efektivnoj količini, na primer, u efektivnoj količini u opsegu od oko 0.001 mg/kg do oko 100 mg/kg dnevno. Doziranje može varirati u zavisnosti od metoda formulacije, metoda administracije, starosti pacijenta, telesne težine, seksualno prenete infekcije, režima ishrane, vremena administracije, načina primene, brzine izlučivanja ili osetljivosti.

[0029] Farmaceutska kompozicija može biti formulisana postupkom koji mogu lako izvesti stručnjaci iz odgovarajuće oblasti uz korišćenje farmaceutski prihvatljivog nosača i/ili ekscipijensa u obliku pojedinačne doze ili kontejnera za više doza. U ovom slučaju, formulacija se može koristiti bez ograničenja sve dok ima bilo koji oblik koji je podesan za farmaceutske preparate uključujući oralne farmaceutske oblike, kao što su praškovi, granule, tablete, kapsule, suspenzije, emulzije, sirupi ili aerosoli, eksterni preparati, kao što su melemi ili kreme, supozitorije i sterilizovani rastvori za injekcije. Pored toga, dalje može biti uključen dispergans ili stabilizator.

POŽELJNI EFEKTI

[0030] Kisele adicione soli 1-(5-(2,4-difluorofenil)-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-4-metoksi-1H-pirol-3-il)-N-metilmetanamina prema predmetnom pronalasku imaju visoku rastvorljivost u vodi i odličnu stabilnost pod uslovima zaštićenosti od vlage i uslovima izlaganja visokoj vlažnosti i zbog toga se mogu farmaceutski primeniti.

DETALJNI OPIS PRIMERA IZVOĐENJA

[0031] Dole će biti dati poželjni primeri izvođenja sa ciljem da se omogući razumevanje

[0032] predmetnog otkrivanja. Međutim, ovi primeri su predviđeni samo radi ilustracije predmetnog pronalaska i ne treba smatrati da je predmetni pronalazak ograničen na ove primere. Pronalazak je definisan priloženim patentnim zahtevima.

Primer dobijanja: Dobijanje 1-(5-(2,4-difluorofenil)-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-4-metoksi-1H-pirol-3-il)-N-metilmetanamina (slobodna baza)

Korak 1-1) Dobijanje 2-(2,4-difluorofenil)-2-((3-metoksi-2-(metoksikarbonil)-3-oksoprop-1-en-1-il)amino)sirćetne kiseline

[0033] 2,4-difluorofenil glicin (150.0 g, 801.5 mmol), dimetil 2-(metoksimetilen)malonat (126.9 g, 728.6 mmol) i natrijum acetat (65.8 g, 801.5 mmol) bili su dodati metanolu (800.0 ml), i smeša je onda refluksovala na 60 °C tokom 4 sata. Reakciona smeša je bila ohlađena na sobnu temperaturu, pa je koncentrovana pod smanjenim pritiskom da bi se odstranilo oko 70% metanola, a zatim je isfiltrirana. Dobijena čvrsta materija je bila osušena pod smanjenim pritiskom da bi se dobilo 190.0 g jedinjenja iz naslova. (Prinos: 79.2%).

<1>H-NMR (500 MHz, CDCl3): 8.02-7.99 (m, 1H), 7.45-7.40 (m, 1H), 7.00-6.95 (m, 2H), 5.16 (s, 1H), 3.74 (s, 3H), 3.76 (s, 3H)

Korak 1-2) Dobijanje metil 5-(2,4-difluorofenil)-4-hidroksi-1H-pirol-3-karboksilata

[0034] Anhidrid sirćetne kiseline (1731.2 ml) i trietilamin (577.1 ml) su bili dodati 2-(2,4-difluorofenil)-2-((3-metoksi-2-(metoksikarbonil)-3-oksoprop-1-en-1-il)amino)sirćetnoj kiselini (190.0 g, 577.1 mmol) dobijenoj u koraku 1-1. Reakciona smeša je refluksovala na 140 °C tokom 30 minuta, a zatim je bila ohlađena na 0°C. Reakcionoj smeši je dodata ledena voda (577.1 ml) na 0°C, pa je mešana na sobnoj temperaturi 1 sat, a zatim je ekstrahovana etil acetatom. Dobijeni ekstrakt je bio osušen preko anhidrovanog magnezijum sulfata, pa je koncentrovan pod smanjenim pritiskom. Rezultujuće jedinjenje je bilo isfiltrirano uz korišćenje silika gela da bi se odstranile čvrste materije, a zatim je koncentrovano pod smanjenim pritiskom.

[0035] Tetrahidrofuran (140.0 ml) i voda (120.0 ml) su bili dodati rezultujućem ostatku, pa je smeša bila ohlađena na 0°C i onda joj je bio dodat natrijum hidroksid (46.17 g, 1154.2 mmol). Reakciona smeša je bila mešana na 0°C tokom 30 minuta, pa je neutralizovana IN vodenim rastvorom hlorovodonične kiseline, a zatim je bila ekstrahovana etil acetatom. Dobijeni ekstrakt je bio osušen preko anhidrovanog magnezijum sulfata, a zatim je koncentrovan pod smanjenim pritiskom. Rezultujući ostatak je bio prečišćen pomoću kolonske hromatografije na silika gelu (etil acetat: nheksan = 1:4 (v/v)) da bi se dobilo 22.0 g jedinjenja iz naslova. (Prinos: 15.1%).

<1>H-NMR (500 MHz, CDCl3): 8.80 (s, 1H), 8.17-8.12 (m, 2H), 7.13 (d, 1H), 6.95 (t, 1H), 6.86-6.83 (m, 1H), 3.88 (s, 3H)

Korak 1-3) Dobijanje metil 5-(2,4-difluorofenil)-4-metoksi-1H-pirol-3-karboksilata

[0036] Metil 5-(2,4-difluorofenil)-4-hidroksi-1H-pirol-3-karboksilat (22.0 g, 86.9 mmol) koji je dobijen u koraku 1-2 bio je rastvoren u tetrahidrofuranu (434.5 ml) i metanolu (173.9 ml). Reakcionoj smeši je bio dodat (trimetilsilil)diazometan (2.0 M dietil etarskog rastvora, 173.8 ml), pa je mešana na sobnoj temperaturi tokom 48 sati. Reakcionoj smeši je onda dodata voda, a zatim je ekstrahovana etil acetatom.

Dobijeni ekstrakt je bio osušen preko anhidrovanog magnezijum sulfata i koncentrovan je pod smanjenim pritiskom. Rezultujući ostatak je bio prečišćen pomoću kolonske hromatografije na silika gelu (etil acetat: n-heksan = 1:4 (v/v)) da bi se dobilo 18.1 g jedinjenja iz naslova.(Prinos: 75.3%)

<1>H-NMR (500 MHz, CDCl3): 8.78 (s, 1H), 8.12 (m, 1H), 7.30 (d, 1H), 6.95 (t, 1H), 6.88 (t, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.85 (s, 3H)

Korak 1-4) Dobijanje metil 5-(2,4-difluorofenil)-4-metoksi-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-1H-pirol-3-karboksilata

[0037] Metil 5-(2,4-difluorofenil)-4-metoksi-1H-pirol-3-karboksilat (18.0 g, 67.4 mmol) koji je dobijen u koraku 1-3 bio je rastvoren u dimetilformamidu (335.0 ml).

Dobijenom rastvoru je bio dodat natrijum hidrid (60%, disperzija u tečnom parafinu) (4.0 g, 101.0 mmol) na sobnoj temperaturi i onda je smeša bila mešana na sobnoj temperaturi 10 minuta. Reakcionoj smeši je bio dodat 3-fluorobenzensulfonil hlorid (13.37 ml, 101.0 mmol), a zatim je smeša bila mešana na sobnoj temperaturi 1 sat. Reakcionoj smeši je dodata voda, pa je ekstrahovana etil acetatom. Dobijeni ekstrakt je bio osušen preko anhidrovanog magnezijum sulfata, a zatim je koncentrovan pod smanjenim pritiskom. Rezultujući ostatak je bio prečišćen pomoću kolonske hromatografije na silika gelu (etil acetat: n-heksan = 1: 4 (v/v)) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (26.1 g). (Prinos: 91.1%).

<1>H-NMR (500 MHz, CDCl3): 7.98 (s, 1H), 7.43-7.39 (m, 1H), 7.30 (t, 1H), 7.23 (d, 1H), 7.15 (q, 1H), 7.67 (q, 1H), 6.91 (t, 1H), 6.77 (t, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.61 (s, 3H)

Korak 1-5) Dobijanje 5-(2,4-difluorofenil)-4-metoksi-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-1H-pirol-3-karbaldehida

[0038] Metil 5-(2,4-difluorofenil)-4-metoksi-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-1H-pirol-3-karboksilat (26.0 g, 61.1 mmol) koji je dobijen u koraku 1-4 je bio rastvoren u tetrahidrofuranu (300.0 ml). Diizobutil aluminijum hidrid (1.0 M tetrahidrofuranskog rastvora) (183.4 ml, 183.4 mmol) je dodat dobijenom rastvoru na 0°C, pa je smeša bila mešana na sobnoj temperaturi 1 sat, te je neutralizovana IN rastvorom hlorovodonične kiseline, a zatim je ekstrahovana etil acetatom. Dobijeni ekstrakt je bio osušen preko anhidrovanog magnezijum sulfata, pa je onda koncentrovan pod smanjenim pritiskom.

[0039] Rezultujući ostatak je bio rastvoren u dihlorometanu (300.0 ml), a zatim su mu bili dodati celit (26.0 g) i piridinijum hlorohromat (39.5 g, 183.4 mmol). Reakciona smeša je bila mešana na sobnoj temperaturi 1 sat, pa je onda isfiltrirana da bi se odstranila čvrsta materija, a dobijeni filtrat je bio koncentrovan pod smanjenim pritiskom. Rezultujući ostatak je bio prečišćen pomoću kolonske hromatografije na silika gelu (etil acetat: n-heksan = 1:2 (v/v)) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (17.2 g). (Prinos: 70.9%).

<1>H-NMR (500 MHz, CDCl3): 9.89 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.45-7.41 (m, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.25 (d, 1H), 7.18 (q, 1H), 7.05 (s, 1H), 6.92 (t, 1H), 6.77 (t, 1H), 3.63 (s, 3H)

Korak 1-6) Dobijanje 1-(5-(2,4-difluorofenil)-4-metoksi-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-1H-pirol-3-il)-N-metilmetanamina

[0040] 5-(2,4-difluorofenil)-4-metoksi-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-1H-pirol-3-karbaldehid (17.0 g, 43.0 mmol) koji je dobijen u koraku 1-5 je bio rastvoren u metanolu (430.0 ml). Dobijenom rastvoru je bio dodat metilamin (9.8 M metanolski rastvor) (87.8 ml, 860.0 mmol), pa je smeša bila mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta. Reakcionoj smeši je bio dodat natrijum borohidrid (16.3 g, 430.0 mmol), a zatim je smeša bila mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta. Reakcionoj smeši je bila dodata voda, pa je ekstrahovana etil acetatom. Dobijeni ekstrakt je bio osušen preko anhidrovanog magnezijum sulfata, a zatim je koncentrovan pod smanjenim pritiskom. Rezultujući ostatak je bio prečišćen pomoću kolonske hromatografije na silika gelu (etil acetat: nheksan = 1:2 (v/v)) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (15.2 g). (Prinos: 86.1%).<1>H-NMR(500 MHz, CDCl3): 7.39-7.35 (m, 1H), 7.26-7.20 (m, 2H), 7.15 (q, 1H), 7.06 (d, 1H), 6.87 (t, 1H), 6.78 (t, 1H), 3.60 (d, 2H), 3.44 (s, 3H), 2.45 (s, 3H)

[0041] U nastavku, u sledećim primerima je bio korišćen 1-(5-(2,4-difluorofenil)-4-metoksi-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-1H-pirol-3-il)-N-metilmetanamin (slobodna baza) koji je dobijen u Primeru dobijanja.

1

Primer 1: Dobijanje 1-(5-(2,4-difluorofenil)-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-4-metoksi-1H-pirol-3-il)-N-metilmetanamin hidrohlorida (referentni primer)

[0042]

[0043] 1-(5-(2,4-difluorofenil)-4-metoksi-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-1H-pirol-3-il)-N-metilmetanamin (15.0 g, 36.6 mmol) koji je dobijen u Primeru dobijanja bio je rastvoren u etil acetatu (36.6 ml) kome je bio dodat rastvor hlorovodonične kiseline (2.0 M dietil etarski rastvor) (36.6 ml, 73.1 mmol). Reakciona smeša je bila mešana na sobnoj temperaturi 1 sat, a zatim je isfiltrirana, pa je dobijena čvrsta materija bila osušena pod smanjenim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (15.1 g). (Prinos: 92.5%).

Molekulska težina 446.87

<1>H-NMR (500 MHz, MeOD): 7.69(s, 1H), 7.58-7.53(m, 1H), 7.45(t, 1H), 7.30(d, 1H), 7.20-7.15(m, 2H), 7.02-6.94(m, 2H), 4.07(d, 2H), 3.46(s, 3H), 2.71(s, 3H)

[0044] Jedinjenja iz sledećih dodatnih primera su bila dobijena postupkom koji je sličan postupku za dobijanje iz gornjeg primera, osim što su polazni materijali bili zamenjeni na podesan način da bi bili u skladu sa strukturom jedinjenja koja su trebala da budu dobijena, uz uzimanje u obzir postupaka za dobijanje u okviru predmetnog otkrivanja.

Primer 2: Dobijanje 1-(5-(2,4-difluorofenil)-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-4-metoksi-1H-pirol-3-il)-N-metilmetanamin sukcinata

[0045]

<1>H-NMR (500 MHz, MeOD): 7.60(s, 1H), 7.57-7.52(m, 1H), 7.46-7.43(t, 1H), 7.30(d, 1H), 7.19-7.14(m, 2H), 7.01-6.94(m, 2H), 3.91(s, 2H), 3.45(s, 3H), 2.59(s, 3H), 2.50(s, 2H)

Primer 3: Dobijanje 1-(5-(2,4-difluorofenil)-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-4-metoksi-1H-pirol-3-il)-N-metilmetanamin tartrata

[0046]

<1>H-NMR (500 MHz, MeOD): 7.70(s, 1H), 7.58-7.53(m, 1H), 7.49-7.44(t, 1H), 7.31(d, 1H), 7.20-7.15(m, 2H), 7.03-6.94(m, 2H), 4.4(s, 2H), 4.07(s, 2H), 3.46(s, 3H), 2.71(s, 3H)

Primer 4: Dobijanje 1-(5-(2,4-difluorofenil)-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-4-metoksi-1H-pirol-3-il)-N-metilmetanamin fumarata

[0047]

[0048]<1>H-NMR (500 MHz, MeOD): 7.63(s, 1H), 7.58-7.53(m, 1H), 7.48-7.44(t, 1H), 7.30(d, 1H), 7.20-7.16(m, 2H), 7.02-6.94(m, 2H), 6.68 (s, 1H), 3.97(s, 2H), 3.45(s, 3H), 2.64(s, 3H)

Primer testa 1: Inhibitorni efekti na aktivnost protonske pumpe (H+/K+-ATPase)

[0049] Inhibitorni efekti 1-(5-(2,4-difluorofenil)-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-4-metoksi-1H-pirol-3-il)-N-metilmetanamin hidrohlorida koji je dobijen u Primeru 1 na aktivnost protonske pumpe (H+/K+-ATPase) su bili izmereni kao što sledi.

[0050] Gastrične vezikule su bile pripremljene od svinjskog želuca prema poznatom metodu (Edd C. Rabon et al., Preparation of Gastric H+,K+-ATPase., Methods in enzymology, vol.157 Academic Press Inc.,(1988), str.649-654). Sadržaji proteina gastričnih vezikula pripremljenih na ovaj način su bili kvantitativno izmereni pomoću kita sa bicinhoninskom kiselinom (BCA) (Thermo).80μl (prethodno određena koncentracija testiranog jedinjenja, 0.5% DMSO, 2.5 mM MgCl2, 12.5 mM KCl, 1.25 mM EDTA, 60 mM Tris-HCl, pH7.4) je dodato u svaki bunarčić ploča sa 96 bunarčića. 10 μl reakcionog rastvora koji je sadržao gastrične vezikule (60 mmol/l, Tris-HCl pufer, pH 7.4) i 10 μl Tris puferskog rastvora koji je sadržao adenozin trifosfat (10 mM ATP, Tris-HCl puferski rastvor, pH 7.4) bilo je dodato u svaki bunarčić, te su podvrgnuti enzimskoj reakciji na 37°C tokom 40 minuta.50 μl rastvora malahit zelene (0.12% rastvora malahit zelene u 6.2 N sumporne kiseline, 5.8% amonijum molibdata i 11% Tween 20 je bilo pomešano u odnosu 100: 67: 2) je bilo dodato tome da bi se zaustavila enzimska reakcija, pa je tome bilo dodato 50 μl 15.1% natrijum citrata. Količina monofosfata (Pi) u reakcionom rastvoru je bila

1

izmerena na 570 nm korišćenjem čitača mikroploča (FLUOstar Omega, BMG).

Stepen inhibicije (%) je bio izmeren na osnovu vrednosti aktivnosti za kontrolnu grupu i vrednosti aktivnosti testiranih jedinjenja u različitim koncentracijama.

Koncentracija (IC50) koja inhibira aktivnost H<+>/K<+>-ATPase za 50% je bila izračunata na osnovu svake % vrednosti inhibicije jedinjenja uz korišćenje Logistic 4-parametarske funkcije Sigmaplot 8.0 programa.

[0051] Kao rezultat, 1-(5-(2,4-difluorofenil)-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-4-metoksi-1H-pirol-3-il)-N-metilmetanamin hidrohlorid koji je dobijen u Primeru 1 je ispoljio IC50 vrednost od 0.024 μM. Shodno tome, kisela adiciona so 1-(5-(2,4-difluorofenil)-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-4-metoksi-1H-pirol-3-il)-N-metilinetanamina prema jednom primeru izvođenja predmetnog pronalaska je imala odličnu aktivnost inhibicije protonske pumpe i zahvaljujući tome se može koristiti za farmaceutsku kompoziciju za prevenciju i lečenje gastrointestinalne povrede usled čira gastrointestinalnog trakta, gastritisa, refluksnog ezofagitisa ili H. pylori.

Primer testa 2: Test higroskopnosti

[0052] Test higroskopnosti je bio izveden za kisele adicione soli koje su dobijene u gornjim Primerima. Prvo je 40 mg soli iz Primera bilo hermetički zatvoreno i svaka je bila čuvana u staklenom desikatoru koji je sadržao zasićeni vodeni rastvor nekoliko soli tokom najmanje dva dana pod uslovima konstantne relativne vlažnosti, kao što je prikazano dole u Tabeli 1. Posle toga, rezultat merenja promene težine za svaku od ovih soli je pokazao da nije bila uočena promena težine zbog vlage. Shodno tome, moglo je biti utvrđeno da kisele adicione soli koje su dobijene u Primerima nisu bile higroskopne.

[Tabela 1]

Primer testa 3: test potvrđivanja stabilnosti

[0053] Test stabilnosti je bio izveden za kisele adicione soli dobijene u Primerima da bi se odredio stepen do koga su se formirale nečistoće tokom čuvanja pod teškim uslovima (uslovi zaštićenosti od vlage i uslovi izlaganja visokoj vlažnosti). Rezultati testa stabilnosti pod uslovima zaštićenosti od vlage su prikazani dole u Tabeli 2, a rezultati testa stabilnosti pod uslovima izlaganja visokoj vlažnosti su prikazani dole u Tabeli 3.

[0054] Za test stabilnosti, bočice koje su sadržale 10 mg svakog uzorka, koji je bio precizno odmeren i uzet, bile su pripremljene u planiranoj količini, pa su one bile čuvane tako što su podeljene na uslove zaštićenosti od vlage (60°C i manje od 10% relativne vlažnosti) i uslove izlaganja visokoj vlažnosti (60°C i 95% relativne vlažnosti). Međutim, pod uslovima izlaganja visokoj vlažnosti nije bio upotrebljen čep bočice da bi se uzorak održao u dovoljnom kontaktu sa vlagom iz vazduha. U fiksnim vremenskim trenucima posle početka testa, bile su uzete po dve bočice u svakom vremenskom trenutku (broj uzoraka po testu n = 2). Svakoj bočici je bilo dodato 10 ml metanola da bi se uzorak rastvorio, pa su zatim centrifugirane. Rezultujući supernatant je bio analiziran korišćenjem tečne hromatografije. Površina pika je bila određena integracijom svih detektovanih pikova, pa je bila izračunata relativna površina pika za glavnu komponentu i za ukupne nečistoće i izražena je kao srednja vrednost.

[Tabela 2]

1

[Tabela 3]

[0055] Kao što je prikazano u Tabelama 2 i 3, moglo je biti potvrđeno da kisele adicione soli dobijene u Primerima ne ispoljavaju smanjenje površina pika glavne komponente i povećanje površina pika ukupnih nečistoća, što je bilo značajno pod uslovima zaštićenosti od vlage i pod uslovima izlaganja visokoj vlažnosti. Shodno tome, bilo je potvrđeno da su kisele adicione soli dobijene u Primerima sprečile povećanje nečistoća bez obzira na uticaj vlažnosti pod teškim uslovima i da su ispoljile odličnu hemijsku stabilnost.

Primer testa 4: Test rastvorljivosti u vodi

1

[0056] Test rastvorljivosti u vodi je bio izveden za kisele adicione soli dobijene u Primerima, a rezultati su prikazani dole u Tabeli 4. Za test rastvorljivosti u vodi, uzorak manji od 10 mg je bio prvo precizno odmeren i uzet, te stavljen u bočicu kojoj je bilo dodato 50 μl dejonizovane vode, pa je mućkana 30 sekundi i onda je bilo izvršeno ultrazvučno mućkanje tokom 1 minuta, a zatim su ovi procesi bili ponovljeni nekoliko puta. Rastvorljivost u vodi je bila izračunata merenjem količine vode upotrebljene za rastvaranje svih uzoraka.

[Tabela 4]

[0057] Kao što je prikazano u Tabeli 4, moglo je biti potvrđeno da kisele adicione soli koje su dobijene u Primerima imaju rastvorljivost u vodi koja je 10-tostruka ili veća u poređenju sa onom od slobodne baze dobijene u Primeru dobijanja. Pored toga, kisele adicione soli dobijene u Primerima odlikuje visoka rastvorljivost po redosledu hidrohlorid, sukcinat, tartrat i fumarat.

1

Claims

Patentni zahtevi

1. Kisela adiciona so 1-(5-(2,4-difluorofenil)-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-4-metoksi-1H-pirol-3-il)-N-metilmetanamina, pri čemu je kiselina ćilibarna kiselina, vinska kiselina, ili fumarna kiselina.

2. Postupak za dobijanje kisele adicione soli 1-(5-(2,4-difluorofenil)-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-4-metoksi-1H-pirol-3-il)-N-metilmetanamina prema zahtevu 1 koji sadrži korake:

2) mešanja rastvora 1-(5-(2,4-difluorofenil)-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-4-metoksi-1H-pirol-3-il)-N-metilmetanamina i rastvora kiseline, a zatim mešanja pomešanih rastvora.

3. Postupak za dobijanje kisele adicione soli 1-(5-(2,4-difluorofenil)-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-4-metoksi-1H-pirol-3-il)-N-metilmetanamina prema zahtevu 2,

pri čemu je kiselina ćilibarna kiselina, vinska kiselina, ili fumarna kiselina.

4. Postupak za dobijanje kisele adicione soli 1-(5-(2,4-difluorofenil)-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-4-metoksi-1H-pirol-3-il)-N-metil metanamina prema zahtevu 2,

pri čemu je organski rastvarač jedan ili više izabranih iz grupe koja se sastoji od n-heksana, etil acetata, butil acetata, acetonitrila, hloroforma, dietil etra, acetona, metanola i etanola.

5. Farmaceutska kompozicija za primenu u prevenciji i lečenju gastrointestinalne povrede usled čira gastrointestinalnog trakta, gastritisa, refluksnog ezofagitisa, ili Helicobacter pylori (H. pylori), koja sadrži kiselu adicionu so 1-(5-(2,4-difluorofenil)-1-((3-fluorofenil)sulfonil)-4-metoksi-1H-pirol-3-il)-N-metilmetanamina prema zahtevu 1.

Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Beograd, Kneginje Ljubice 5