RS61434B1

RS61434B1 - Jedinjenja

Info

Publication number: RS61434B1
Application number: RS20210152A
Authority: RS
Inventors: Stephen Brand; Peter George Dodd; Eun Jung Ko; Martin Maria Marco; Timothy James Miles; Lars Henrik Sandberg; Michael George Thomas; Stephen Thompson
Original assignee: Glaxosmithkline Ip Dev Ltd; Univ Dundee
Priority date: 2015-08-07
Filing date: 2016-08-03
Publication date: 2021-03-31
Also published as: RU2018107657A3; KR20180043289A; TWI746454B; IL257336A; SMT202100147T1; MY197042A; CY1124151T1; EP3331885A1; HRP20210402T1; AR105606A1; BR112018002597B1; HUE052932T2; US20180222911A1; JP2018522058A; CN108137599A; AU2016307230A1; KR102652898B1; ZA201800733B; PL3331885T3; DK3331885T3

Description

Opis

Polje tehnike pronalaska

[0001] Ovaj pronalazak daje grupu jedinjenja, njihove soli, kompozicije koje ih sadrže, procese za njihovu izradu i njihovu upotrebu u terapiji. Na primer, u tretmanu ili prevenciji parazitskih bolesti kao što su Šagasova bolest, Humana Afrička Tripanozomijaza (HAT), Životinjska Afrička Tripanozomijaza (AAT) i lajšmanijaze, posebno visceralna lajšmanijaza (VL).

Poreklo pronalaska

Lajšmanijaza

[0002] Kod ljudi i životinja lajšmanijaza je izazvana protozoalnim parazitima iz više vrsta lajšmanija koje se prenose na domaćine preko uboda inficiranih ženki peščanih muva.

[0003] Postoje tri glavna humana oblika lajšmanijaze - visceralna (često poznata kao kalaazar i najozbiljniji je oblik bolesti), kutanozna (najčešća) i mukokutanozna (najviše izobličuje). Večina lajšmanijaza su zoonoze (bolesti koje se prenose sa životinje na ljude) a domaćini rezervoari uključuju brojne vrste sisara. Psi su važni rezervoari L. Infantum odgovornih za visceralne lajšmanijaze.

[0004] Životinje mogu takođe da obole od visceralnih, kutanoznih i mukokutanoznih oblika bolesti.

[0005] Procenjeno je da je 350 miliona ljudi pod rizikom od oboljevanja (većina njih su deca), sa 1.3 miliona novih slučajeva i 20.000 do 30.000 umrlih po godini. (Leishmaniasis Worldwide i Global Estimates of Its Incidence. Alvar J. i saradnici (2012) PLoS ONE 7(5): e35671. doi:10.1371/journal.pone.0035671)

[0006] Savremeni tretmani imaju ozbiljne nedostatke u smislu efikasnosti, bezbednosti, rezistencije leka, stabilnosti, cene i većini nedostaje opcija oralnog doziranja (Structures, Targets i Recent Approaches in Anti-Leishmanial Drug Discovery i Development. Seifert K., Open Med Chem J.2011; 5:31-39. doi: 10.2174/1874104501105010031). Počelo se sa sagledavanjem varijacija geografske efikasnosti u savremenim tretmanima – na primer, efikasnost lipozomalnog amfotericina B u Istočnoj Africi je ispod efikasnosti koja je uočena na Indijskom potkontinentu za istu dozu ((a) Berman JD, Badaro R, Thakur CP, Wasunna KM, Behbehani K i saradnici (1998) Efficacy i safety of liposomal amfotericin B (AmBizome) for visceral leishmaniasis in endemic developing countries. Bull World Health Organ 76: 25-32. (b) Eltahir A. G. Khalil, Teklu Wel- degebreal, Brima M. Younis i saradnici Safety i Efficacy of Single Dose versus Multiple Doses of AmBizome® for Treatment of Visceral Leishmaniasis in Eastern Africa: A Randomised Trial. PLOS Neglected Tropical Diseases: published 16 Jan 2014 (info:doi/10.1371/journal.pntd.0002613). Takođe su nađene razlike u stepenu efikasnosti unutar Afrike (Hailu A, Musa A, Wasunna M, Balasegaram M, Yifru S i saradnici (2010) Geographical Variation in Response of Visceral Leishmaniasis do Paromomycin in East Africa: A Multicentre, Open-Label, Randomized Trial. PLoS Negl Trop Dis 4(10): e709. doi: 10.1371/journal.pntd.0000709).

[0007] Zbog toga postoji realna nezadovoljena medicinska potreba za novim oralnim lekovima i kombinovanom terapijom za tretman i potencijalnu eliminaciju lajšmanijaza u određenim geografskim oblastima, što zahteva razvoj više novih oralnih agenasa.

Šagasova bolest

[0008] Šagasova bolest je antropozoonoza izazvana bičastim protozoalnim parazitom Trypanosoma cruzi. Na ljude i druge sisare se prenosi inficiranim fecesom triatomina buba koje sišu krv ubodom insekta, preko drugih oštećenja kože ili preko mukoznih membrana, uključujući konjuktivu i oralno/digestivnu mukozu, povremeno izazivajući epidemije preko kontaminirane hrane. Takođe je moguć prenos preko transfuzije krvi, trudnoće i porođaja a ređe, preko transplantiranog organa ili laboratorijskih akcidenata.

[0009] Šagasova bolest je endemična u većem delu Meksika, Centralne Amerike i Južne Amerike gde se procenjuje da je inficirano 7-8 miliona ljudi. Triatomina bube se šire zbog loših uslova stanovanja (na primer, zidovi od blata, slamnati krovovi), tako da u endemičnim zemljama, ljudi koji žive u ruralnim oblastima su u najvećem riziku da budu inficirani.

Savremena migracija populacije iz zemalja gde je ova bolest endemska je povećala geografsku distribuciju Šagasove bolesti, tako da ona postaje važno zdravstveno pitanje u USA i Kanadi i u mnogim delovima Evrope i zapadnog Pacifika. Najčešća destinacija migranata iz Latinske Amerike su USA, gde je više od trista hiljada pojedinaca inficirano sa T. cruzi. Španija ima drugi najveći broj inficiranih imigranata, procenjeno je šezdeset sedam hiljada pacijenata. Približno trinaest hiljada umre svake godine od komplikacija bolesti srca izazvanih Šagasovom bolešću kao rezultat hronične infekcije.

[0010] Sama Šagasova bolest je prisutna u dve faze. Početna, akutna faza se javlja približno 2 meseca nakon infekcije. U toku akutne faze, veliki broj parazita cirkuliše u krvi. U najvećem broju slučajeva simptoma nema ili su blagi ali mogu da se jave groznica, glavobolja, uvećanje limfnih žlezda, bledilo, bol u mišićima, teškoće u disanju, otoci i bol u abdomenu ili grudima. Manifestacije akutne bolesti prolaze spontano kod približno 90% inficiranih pojedinaca, čak iako infekcija nije tretirana sa tripanocidalnim lekovima. Prilbližno 60-70% ovih pacijenata neće nikada da razviju kliničku sliku bolesti. Ovi pacijenti imaju neodrediv oblik hronične Šagasove bolesti, koji se karakteriše pozitivnim rezultatom na antitela T. cruzi u serumu, normalnim 12-kanalnim elektrokardiogramom (ECG) i normalnim radiološkim ispitivanjem grudi, jednjaka i kolona. Preostalih 30-40% pacijenata će naknadno razviti odredivi oblik hronične bolesti.

[0011] Do 30% pacijenata sa odredivim oblikom mogu da boluju od kardijačnih poremećaja a do 10% od digestivnih (obično uvećanje jednjaka ili kolona), neuroloških ili mešovitih promena ili poremećaja. Infekcija može da dovede do iznenadne smrti ili insuficijencije srca izazvane progresivnom destrukcijom srčanog mišića.

[0012] Trenutno ne postoji vakcina za Šagasovu bolest. Opcije sa hemoterapijom su ograničene: benznidazol i mifurtimoks su jedini raspoloživi tripanocidni lekovi sa dokazanom efikasnošću za Šagasovu bolest. Oba leka su skoro 100% efikasna u eliminaciji bolesti ukoliko se daju brzo nakon infekcije na početku akutne faze. Međutim, mada su studije pokazale da ovi nitroderivati mogu da smanje parazitemiju u hroničnom neodredivom obliku bolesti, jasni dokaz o njihovom uticaju na stanje pacijenta ostaje nejasan. Osim toga, benznidazol i nifurtimoks se ne koriste konzistentno delimično zbog svojih značajnih neželjenih efekata (periferna neurotoksičnost, iritacija digestivnog sistema i teška dermatološka stanja).

[0013] Hitno su potrebni noviji, bezbedniji i mnogo efikasniji tretmani Šagasove bolesti.

Humana Afrička Tripanozomijaza (HAT)

[0014] Humana Afrička Tripanozomijaza (HAT), takođe poznata kao afrička bolest spavanja, je parazitska bolest izazvana protozoom Trypanosoma brucei a prenose je inficirane cece muve (Glossina spp.), sa majke na dete u toku trudnoće i može mehanički da se prenese preko krvnih produkata.

[0015] Postoje dva oblika bolesti u zavisnosti od sub-vrsta parazita:

-Trypanosoma brucei gambiense (T.b. gambiense) koja se javlja u zapadnoj i centralnoj Africi, predstavlja približno 95% zabeleženih slučajeva bolesti spavanja i izazvanih hroničnih infekcija. Osoba može da bude inficirana mesecima ili čak godinama bez izraženih znakova ili simptoma bolesti. Kada se simptomi pojave, pacijent je često već u fazi 2 bolesti.

- Trypanosoma brucei rhodesiense (T.b. rhodesiense) je nađena u istočnoj i južnoj Africi i predstavlja približno 5% zabeleženih slučajeva. Sub-vrste parazita izazivaju akutnu infekciju. Prvi znaci i simptomi faze 2 bolesti se uočavaju nekoliko meseci ili nedelja nakon infekcije.

[0016] Bolest napreduje kroz dve odvojene faze. Faza 1 je početna hemolimfatična faza infekcije i prisutna je uz ne-sepcifične simptome, uključujući groznicu, svrab i zamor.

Netretirana faza 1 HAT dovodi do faze 2 bolesti ili neurološke faze, u kojoj paraziti napadaju centralni nervni sistem uzrokujući ozbiljne neurološke simptome i čak smrt. Poremećaj ciklusa spavanja, po kome je bolest dobila svoje ime, je važna karakteristika ove druge faze.

[0017] Trenutno su registrovana četiri leka za tretman bolesti spavanja. Oni pokazuju različite profile efikasnosti u zavisnosti od subtipa T. brucei i faze bolesti. Savremeni standardni tretman za fazu 1 je intravenski ili intramuskularni pentamidin (za T. b. gambiense) ili intravenski suramin (za T. b. rhodesiense). Za fazu 2, prva linija tretmana je intravenski melarosoprol, intravenski eflornitin sam ili eflornitin u kombinaciji sa nifurtimoksom. Takođe može da se koristi intravenski melarosoprol u kombinaciji sa oralnim nifurtimoksom. Svi lekovi imaju problem sa neželjenim a u nekim slučajevima ozbiljnim neželjenim efektima. .

[0018] Hitno su potrebni bezbedniji i mnogo efikasniji tretmani za HAT.

Životinjska Afrička Tripanozomijaza (AAT)

[0019] Životinjska Tripanozomijaza je takođe poznata kao Životinjska Afrička Tripanozomijaza (AAT) i to je bolest životinja kičmenjaka. Humana Afrička Tripanozomijaza (HAT) je obično poznata kao bolest spavanja. Životinjska Tripanozomijaza je izazvana različitim vrstama parazita i podvrstama Trypanosoma genus, tripanozoma koje su patogene za životinje, uključujući Trypanosoma congolense, Trypanosoma vivax, Trypanosoma brucei, Trypanosoma simiae, Trypanosoma godfreyi, Trypanosoma suis i Trypanosoma evansi.

Smatra se da postoje i druge, ne-identifikovane tripanozoma vrste ili podvrste koje su patogene za životinje i takođe izazivaju životinjsku tripanozomijazu. Triupanozomi su protozoalni paraziti iz familije Trypanosomatidae i najveći broj tripanozoma prenose cece muve sa tripanozomom kojima inficiraju krv životinje. Kao takva, inficirana životinja može da ima ulogu rezervoara bolesti sa potencijalom za dalje širenje bolesti u oblastima u kojima ima cece muva. U Africi, bolest je uobičajena u oblastima u kojima ima cece muva i šire je ujedom inficirane cece ili druge inficirane muve. Mnoge različite životinje mogu da budu inficirane životinjskom tripanozomijazom, uključujući domaće životinje, kao što su goveda, koze, svinje, ovce i kamile. Takođe je nađeno da i divlje životinje, uključujući slonove i leoparde imaju tripanozomijazu. Različiti paraziti napadaju različite delove organizma.

Životinje su primarno u riziku od ove bolesti gde god postoje tripanozome i vektor cece muve a u Africi ovaj "cece pojas" je između 15° N i 29° S geografske širine, od južnog kraja pustinje Sahara do Zimbabvea, Angole i Mozambika.

[0020] Kod goveda, bolest je često fatalna, ukoliko se ne tretira. Simptomi ugključuju gubitak snage, ozbiljan gubitak težine / iznurenost, anemiju i groznicu. Savremeni tretmani za životinjsku tripanozimijazu su uvedeni pre više od 50 godina sa izometamid hloridom, etidijum bromidom i dimiazen acetatom koji i danas predstavljaju glavne tretmane. Međutim, kako su naveli Chitanga i saradnici, poslednjih godina se javljaju povećani problemi zbog rezistencije na trenutno raspoložive tretmane, Chitanga i saradnici, "High Prevalence of Drug Resistance in Animal Trypanosomes with History of Drug Exposure". PLoS Neglected Tropical Diseases, 2011, 5, e1454.

[0021] Bolest je poseban problem u Podsaharskoj Africi, gde je obično označena kao Aat, nagana ili nagana pest i ima ograman uticaj na poljoprivredu. U regionima gde su zaražena stada, nije značajno smanjena samo proizvodnja mleka i mesa već je kompromitovana i upotreba inficiranih životinja za vitalne potrebe kao što je oranje. Bouyer i saradnici "Community- i farmer-based management of animal African tripanozomijaza in cattle". Trends in Par- asitology, 2013, 29, 519-522.

[0022] Prema tome, bilo bi od velike ekonomske koristi za farmere stoke u regionima pogođenim životinjskom tripanozomijazom a posebno za farmere u Podsaharskoj Africi da se obezbedi poboljšan tretman za AAT, poboljšan AAT tretman pogodan za intramuskularnu injekciju, poboljšan AAT tretman pogodan za intramuskularne injekcije formulisane kao pojedinačna doza za direktno delovanje (tretman inficirane životinje) i/ili profilaktičku upotrebu (neinficirane životinje).

[0023] Prema tome, postoji potreba za novim i efikasnim anti-životinjskim tripanozomijaznim sredstvima. Preciznije, postoji potreba za novim anti-životinjskim tripanozomijaznim sredstvima koja: su efikasna za Trypanosoma congolense, Trypanosoma vivax, Trypanosoma brucei, Trypanosoma simiae, Trypanosoma godfreyi, Trypanosoma suis, i/ili Trypanosoma evansi infekcija; su efikasna protiv Trypanosoma congolense i/ili Trypanosoma vivax rezistentne na lekove; imaju potencijal blokiranja transmisije; koja mogu da se formulišu za farmaceutsku ili veterinarsku upotrebu, na primer za intramuskularnu ili oralnu primenu; ili koja mogu da se formulišu kao subkutane injekcije; ili dalje koja mogu da se koriste za jednodozni tretman; ili koja mogu da se koriste za profilaktički tretman. .

[0024] WO 2014/151784 i US 2014/0275119 otkriva neka jedinjenja imidazopirimidina korisna za lečenje, prevenciju, inhibiciju, ublažavanje ili iskorenjivanje patologije i/ili simptomatologije bolesti izazvanih parazitom, kao što su lajšmanijaza, Humana Afrička Tripanozomijaza i Šagasova bolest.

[0025] WO 2014/151630 i US 2014/0275013 otkriva neka jedinjenja jedinjenja korisna za lečenje, prevenciju, inhibciju, ublažavanje ili iskorenjivanje patologije i/ili simptomatologije bolesti izazvanih parazitom, kao što su lajšmanijaza, Humana Afrička Tripanozomijaza i Šagasova bolest

[0026] WO 2015/095477 i US 2015/175613 otkriva neka [1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin jedinjenja korisna za lečenje, prevenciju, inhibciju, ublažavanje ili iskorenjivanje patologije i/ili simptomatologije bolesti izazvanih parazitom, kao što su lajšmanijaza, Humana Afrička Tripanozomijaza i Šagasova bolest.

[0027] US 2008/0039457 otkriva neka [1,2,4]triazolo[4,3-b][1,2,4]triazin jedinjenja korisna za tretman kancera i drugih bolesti povezanih sa poremećenom regulacijom puteva kinaze.

[0028] WO 2014/151729 otkriva neka biciklična jedinjenja za tretman ili prevenciju parazitskih bolesti uključujući lajšmaniju. WO2010/059418 otkriva neka biciklična jedinjenja korisna za tretman i prevenciju protozoalnih bolesti sisara, uključujući Afričku Tripanozomijazu, Šagasovu bolest i druge povezane infekcije.

Kratak sadržaj pronalaska

[0029] Ovaj pronalazak obezbeđuje jedinjenje Formule (I) ili njegovu so,

pri čemu

A1je CH;

A2je izabran od CR13i N;

R1je izabran od C1-C6alkil, C3-C7cikloalkil, C4-C7heterocikloalkil, fenil, C5-C6heteroaril, C1-C6alkoksi, -OC3-C7cikloalkil i NR10aR10b; gde su C3-C7cikloalkil, C4-C7heterocikloalkil, fenil, C5-C6heteroaril i -OC3-C7cikloalkil opciono supstituisani sa jednom do tri grupe nezavisno izabrane od hidroksi, metoksi, C1-C3alkil i halo;

L1je linker grupa izabrana od -C(O)- i -S(O)n-, gde n predstavlja 1 do 2;

R3je izabran od vodonika, halo, metil, metoksi i cijano grupe;

R4je izabran od vodonika, halo, metil, metoksi i cijano grupe;

R2je izabran od vodonika, halo, Ar, Cy, X, NR5aR5bi -C(O)-R15;

Ar je izabran od fenil i C5-C6heteroaril grupe, od kojih je svaka opciono supstituisana sa jednom do tri grupe nezavisno izabrane od halo i -L2-R7;

L2je linker grupa izabrana od veze, -( CH2)m-, -O(CH2)m-, -C2-C4alkenil-, -OC2-C4alkenil-, -(CH2)p-NH-( CH2)q- i -(CH2)pC(O)-(CH2)q-; gde m predstavlja 1 do 4 a p i q nezavisno predstavljaju 0 do 4;

R7je izabran od vodonika; hidroksi; NR8aR8b; C4-C7heterocikloalkil grupe opciono supstituisane sa jednom ili dve C1-C3alkil grupe; C3-C7cikloalkil; C1-C6alkoksi grupe opciono supstituisane sa jednom NR14aR14bgrupom; i fenil grupe opciono supstituisane sa jednom do tri grupe nezavisno izabrane od halo, metoksi i metil grupe;

Cy je izabran od C3-C7cikloalkil, C4-C7heterocikloalkil, C5-C7cikloalkenil i C5-C7heterocikloalkenil grupe, od kojih je svaka opciono supstituisana sa jednom do tri grupe nezavisno izabrane od C1-C3alkil, C1-C3alkoksi, C4-C7heterocikloalkil, NR11aR11b, =O, -C(O)-R15i -C(O)O-R15;

X je izabran od C1-C6alkil, C2-C6alkenil i C1-C6alkoksi grupe, od kojih je svaka opciono supstituisana sa jednom do tri grupe nezavisno izabrane od hidroksi, metoksi, halo, NR13aR13bi C4-C7heterocikloalkil grupe, gde je C4-C7heterocikloalkil grupa opciono supstituisana sa jednom do tri C1-C3alkil grupe;

R5aje izabran od vodonika; C1-C6alkil grupe opciono supstituisane sa jednom grupom izabranom od Ar i Cy; -C(O)-R9; -C(O)-OR9; i -SO2-R9;

R5bje izabran od vodonika i C1-C3alkil grupe;

R8ai R8bsu nezavisno izabrani od vodonika i C1-C3alkil grupe;

R9je izabran od C1-C6alkil, C3-C7cikloalkil, C4-C7heterocikloalkil, fenil i C5-C6heteroaril grupe;

R10ai R10bsu nezavisno izabrani od vodonika i C1-C3alkil grupe;

R11ai R11bsu nezavisno izabrani od vodonika i C1-C3alkil grupe;

R12je izabran od vodonika, halo i metil grupe;

R13je izabran od vodonika, C1-C3alkil, -C(O)-C4-C7heterocikloalkil, -C(O)- C1-C3alkil i -C(O)-C3-C7cikloalkil grupe;

R13ai R13bsu nezavisno izabrani od vodonika i C1-C3alkil grupe;

R14ai R14bsu nezavisno izabrani od vodonika i C1-C3alkil grupe; i

R15je izabran od C1-C6alkil, Ar, C3-C7cikloalkil i C4-C7heterocikloalkil grupe.

[0030] Ovaj pronalazak se takođe odnosi na jedinjenje Formule (I) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so.

[0031] Ovaj pronalazak se takođe odnosi na jedinjenje Formule (I) koje je

[0032] Ovaj pronalazak se dalje odnosi na farmaceutsku kompoziciju koja uključuje (a) jedinjenje Formule (I) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i (b) farmaceutski prihvatljivu podlogu.

[0033] Ovaj pronalazak se takođe odnosi na kombinaciju koja uključuje (a) jedinjenje Formule (I) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i (b) najmanje jedno dodatno terapeutsko sredstvo.

[0034] Ovaj pronalazak se dalje odnosi na jedinjenje Formule (I) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, za upotrebu u terapiji.

[0035] Ovaj pronalazak se takođe odnosi na jedinjenje Formule (I) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, za upotrebu u tretmanu ili prevenciji parazitskih bolesti izabranih od Šagasove bolesti, humane afričke tripanozomijaze i lajšmanijaze. U jednom ostvarenju, parazitska bolest je lajšmanijaza. U jednom ostvarenju, lajšmanijaza je visceralna lajšmanijaza. U narednom ostvarenju, parazitska bolest je Šagasova bolest. U narednom ostvarenju, parazitska bolest je Humana Afrička Tripanozomijaza.

[0036] Takođe je otkrivena upotreba jedinjenje Formule (I) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli u proizvodnji medikamenta za tretman ili prevenciju parazitske bolesti izabrane od Šagasove bolesti, humane afričke tripanozomijaze i lajšmanijaze. U jednom otkriću, parazitska bolest je lajšmanijaza. U jednom otkriću, lajšmanijaza je visceralna lajšmanijaza. U još jednom otkriću, parazitska bolest je Šagasova bolest.

[0037] Dalje je otkriven postupak za tretman ili prevenciju parazitske bolesti izabrane od Šagasove bolesti, humane afričke tripanozomijaze i lajšmanijaze, pri čemu postupak uključuje primenu terapeutski efektivne količine jedinjenja Formule (I) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli na sisaru kome je to potrebno. U jednom otkriću, sisari su ljudi. U još jednom otkriću, lajšmanijaza je visceralna lajšmanijaza. U narednom otkriću, parazitska bolest je Šagasova bolest.

[0038] Ovde je takođe otkriveno jedinjenje Formule (IA) ili njegova so,

1

gde

A1je CH;

A2je izabran od CR13i N;

R1je izabran od C1-C6alkil, C3-C7cikloalkil, C4-C7heterocikloalkil, fenil, C5-C6heteroaril, C1-C6alkoksi, -OC3-C7cikloalkil i NR10aR10b; gde su C3-C7cikloalkil, C4-C7heterocikloalkil, fenil, C5-C6heteroaril i -OC3-C7cikloalkil opciono supstituisani sa jednom do tri grupe izabrane od hidroksi, metoksi, C1-C3alkil i halo;

L1je linker grupa izabrana od -C(O)- i -S(O)n-; gde n predstavlja 1 do 2;

R3je izabran od vodonika, halo, metil, metoksi i cijano grupe;

R4je izabran od vodonika, halo, metil, metoksi i cijano grupe;

R2je izabran od vodonika, halo, Ar, Cy, X i NR5aR5b;

Ar je izabran od fenil i C5-C6heteroaril grupe, od kojih je svaka opciono supstituisana sa jednom do tri grupe nezavisno izabrane od NR6aR6bi -L2-R7;

L2je linker grupa izabrana od veze, -(CH2)m-, -O(CH2)m-, -C2-C4alkenil- i -OC2-C4alkenil-; gde m predstavlja 1 do 4;

R7je izabran od vodonika, C4-C7heterocikloalkil, C3-C7cikloalkil, C1-C6alkoksi, hidroksi i NR8aR8b;

Cy je izabran od C3-C7cikloalkil, C4-C7heterocikloalkil, C5-C7cikloalkenil i C5-C7heterocikloalkenil grupe, od kojih je svaka opciono supstituisana sa jednom do tri grupe nezavisno izabrane od C1-C3alkil, C4-C7heterocikloalkil i NR11aR11b;

X je izabran od C1-C6alkil, C2-C6alkenil i C1-C6alkoksi grupe, od kojih je svaka opciono supstituisana sa jednom do tri grupe nezavisno izabrane od hidroksi, metoksi, halo i C4-C7heterocikloalkil grupe, gde je C4-C7heterocikloalkil grupa opciono supstituisana sa jednom do tri C1-C3alkil grupe;

R5aje izabran od vodonika, C1-C6alkil, -C(O)-R9, -C(O)-OR9i -SO2-R9;

R5bje izabran od vodonika i C1-C3alkil grupe;

R6ai R6bsu nezavisno izabrani od vodonika i C1-C3alkil grupe;

R8ai R8bsu nezavisno izabrani od vodonika i C1-C6alkil grupe;

R10ai R10bsu nezavisno izabrani od vodonika i C1-C3alkil grupe;

R11ai R11bsu nezavisno izabrani od vodonika i C1-C3alkil grupe;

R12je izabran od vodonika, halo i metil grupe; i

R13je izabran od vodonika i C1-C3alkil grupe.

[0039] Ovde je takođe otkriveno jedinjenje Formule (IA) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

[0040] Ovde je takođe otkriveno jedinjenje Formule (IA) koje je

[0041] Takođe su otkrivene farmaceutske kompozicije koje uključuju jedinjenje Formule (IA) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so. U skladu sa tim, takođe je otkrivena farmaceutska kompozicija koja uključuje jedinjenje Formule (IA) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so. Takođe je otkrivena farmaceutska kompozicija koja uključuje (i) jedinjenje Formule (IA) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so; i (ii) farmaceutski prihvatljivu podlogu.

[0042] Takođe je otkrivena kombinacija koja uključuje (a) jedinjenje Formule (IA) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i (b) najmanje jedno dodatno farmaceutsko sredstvo.

[0043] Ovde je takođe otkriveno jedinjenje Formule (IA) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu u terapiji. Ovde je takođe otkriveno jedinjenje Formule (IA) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu u terapiji, pri čemu je terapija humana ili veterinarska.

[0044] Takođe je otkriven postupak za tretman ili prevenciju parazitske bolesti, na primer Šagasove bolesti, humane afričke tripanozomijaze, životinjske afričke tripanozomijaze ili lajšmanijaze, posebno visceralne lajšmanijaze, pri čemu postupak uključuje primenu terapeutski efektivne količine jedinjenja Formule (IA) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli na sisaru kome je to potrebno. U jednom otkriću, sisari su ljudi. U skladu sa tim, otkriven je postupak za tretman ili prevenciju parazitske bolesti izabrane od Šagasove bolesti, humane afričke tripanozomijaze i lajšmanijaze, pri čemu postupak uključuje primenu terapeutski efektivne količine jedinjenja Formule (IA) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli na sisaru kome je to potrebno. U jednom otkriću, sisari su ljudi. U jednom otkriću, parazitska bolest je lajšmanijaza. U još jednom otkriću, lajšmanijaza je visceralna lajšmanijaza. U narednom otkriću, parazitska bolest je Šagasova bolest. U narednom otkriću, parazitska bolest je Humana Afrička Tripanozomijaza.

[0045] Ovde je takođe otkriveno jedinjenje Formule (IA) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu u tretmanu parazitske bolesti, na primer Šagasove bolesti, humane afričke tripanozomijaze, životinjske afričke tripanozomijaze ili lajšmanijaze, prvenstveno visceralne lajšmanijaze. U skladu sa tim, ovde je takođe otkriveno jedinjenje Formule (IA) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu u tretmanu ili prevenciji parazitske bolesti izabrane od Šagasove bolesti, humane afričke tripanozomijaze i lajšmanijaze. U jednom otkriću, parazitska bolest je lajšmanijaza. U jednom otkriću, lajšmanijaza je visceralna lajšmanijaza. U još jednom otkriću, parazitska bolest je Šagasova bolest. U narednom otkriću, parazitska bolest je Humana Afrička Tripanozomijaza.

[0046] Takođe je otkrivena upotreba jedinjenja Formule (IA) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli u proizvodnji medikamenta za tretman ili prevenciju parazitske bolesti, na primer Šagasove bolesti, humane afričke tripanozomijaze, životinjske afričke tripanozomijaze ili lajšmanijaze, posebno visceralne lajšmanijaze. U skladu sa tim, takođe je otkrivena upotreba jedinjenja Formule (IA) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli u proizvodnji medikamenta za tretman ili prevenciju parazitske bolesti izabrane od Šagasove bolesti, humane afričke tripanozomijaze i lajšmanijaze. U jednom otkriću, parazitska bolest je lajšmanijaza. U jednom otkriću, lajšmanijaza je visceralna lajšmanijaza. U još jednom otkriću, parazitska bolest je Šagasova bolest. U narednom otkriću, parazitska bolest je humana afrička tripanozomijaza.

Detaljan opis pronalaska

[0047] U prvom aspektu, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenje Formule (I) ili njegovu so.

1

[0048] U drugom aspektu, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenje Formule (I) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so.

[0049] Jasno je da ovde dat izraz "jedinjenje iz pronalaska" označava jedinjenje Formule (I) ili njegovu so.

[0050] Kako je jedinjenje iz pronalaska namenjeno za upotrebu u farmaceutskim kompozicijama jasno je da je ono dato u značajno čistom obliku, na primer najmanje 60% čistoće, još pogodnije najmanje 75% čistoće, poželjno je najmanje 85%, a posebno najmanje 98% čistoće (% su težinsko težinski). Nečisti preparati jedinjenja iz pronalaska mogu da se koriste za izradu mnogo čistijih oblika korišćenih u farmaceutskim kompozicijama; ovi manje čisti preparati jedinjenja treba da sadrže najmanje 1%, još poželjnije najmanje 5% a preferirano od 10 do 59% jedinjenja iz pronalaska ili njegove farmaceutski prihvatljive soli.

[0051] U jednom aspektu, pronalazak se odnosi na jedinjenje Formule (I) koje je u obliku slobodne baze. U narednom aspektu, pronalazak se odnosi na farmaceutski prihvatljivu so jedinjenja Formule (I).

[0052] Soli jedinjenja Formule (I) ili (IA) obuhvataju farmaceutski prihvatljive soli i soli koje nisu farmaceutski prihvatljive ali mogu da budu korisne u izradi jedinjenja Formule (I) ili (IA) i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli. Soli mogu da se dobiju od nekih neorganskih ili organskih kiselina ili baza.

[0053] Primeri soli su farmaceutski prihvatljive soli. Farmaceutski prihvatljive soli uključuju soli nastale dodatkom kiseline. Za pregled odgovarajućih soli videti Berge i saradnici, J.

Pharm. Sci., 66:1-19 (1977).

[0054] Primeri farmaceutski prihvatljivih soli jedinjenja Formule (I) ili (IA) nastalih dodatkom kiseline uključuju neorganske kiseline kao što su, na primer, hlorovodonična kiselina, bromovodonična kiselina, ortofosforna kiselina, azotna kiselina, fosforna kiselina ili sumporna kiselina ili organske kiseline kao što su, na primer, metansulfonska kiselina, etansulfonska kiselina, p-toluensulfonska kiselina, sirćetna kiselina, propionska kiselina, mlečna kiselina, limunska kiselina, fumaratna kiselina, jabučna kiselina, sukcinatna kiselina, salicilna kiselina, maleinska kiselina, glicerofosforna kiselina, vinska, benzoeva, glutaminska, aspartanska, benzensulfonska, naftalensulfonska kao što su 2-naftalensulfonska, heksanska kiselina ili acetilsalicilna kiselina.

[0055] U jednom aspektu pronalaska, jedinjenje Formule (I) ili (IA) je u obliku soli hlorovodonične kiseline, bromovodonične kiseline, ortofosforne kiseline, azotne kiseline, fosforne kiseline ili sumporne kiseline.

[0056] Primeri soli jedinjenja Formule (I) ili (IA) nastalih dodavanjem farmaceutski prihvatljive neorganske baze uključuju soli amonijuma, kalcijuma, bakra, gvožđa<+3>, gvožđa<+2>, litijuma, magnezijuma, mangana<+7>, mangana<+4>, kalijuma, natrijuma, cinka i slično.

[0057] So jedinjenja Formule (I) ili (IA) može da egzistira u svim mogućim stehiometrijskim i ne-stehiometrijskim oblicima.

[0058] Soli mogu da se formiraju postupcima dobro poznatim u tehnici, na primer precipitacijom iz rastvora a nakon toga filtriranjem ili evaporacijom rastvarača.

[0059] Soli mogu da se izrade in situ u toku konačnog izdvajanja i prečišćavanja jedinjenja ili odvojenom reakcijom prečišćenog jedinjenja u oblik njegove slobodne baze sa odgovarajućom kiselinom ili bazom, tim redom. So može da precipitira iz rastvora i da se sakupi filtriranjem ili može da se povrati evaporacijom rastvarača.

[0060] Uobičajeno, farmaceutski prihvatljiva so nastala dodatkom kiseline može da se formira reakcijom jedinjenja Formule (I) ili (IA) sa odgovarajućom kiselinom (kao što su bromovodonična, hlorovodonična, sumporna, maleinska, p-toluensulfonska, metansulfonska, naftalensulfonska ili sukcinatna kiselina), opciono u pogodnom rastvaraču kao što je organski rastvarač, da se dobije so koja se obično izdvoji na primer kristalizacijom i filtracijom.

[0061] Jedinjenje Formule (I) ili (IA) može takođe da se izradi kao N-oksid.

[0062] Poznato je da brojna organska jedinjenja mogu da formiraju komplekse sa rastvaračima u kojima reaguju ili iz kojih se precipitiraju ili kristališu. Ovi kompleksi su poznati kao "solvati". Na primer, kompleks sa vodom je poznat kao "hidrat". Rastvarači sa visokim tačkama ključanja i/ili rastvarači sa jakim sposobnostima da formiraju vodonične veze kao što su voda, etanol, izo-propil alkohol i N-metil pirolidinon mogu da se koriste u obliku solvata. Postupci za identifikaciju solvatisanog oblika uključuju, ali se ne ograničavaju samo na, NMR i mikroanalize. U skladu sa tim, jedinjenja Formule (I) ili (IA) mogu da

1

egzistiraju kao solvati. Kako se ovde koristi, naziv solvat obuhvata solvate i jedinjenja u obliku slobodne baze kao i bilo koju njihovu so.

[0063] Nerka jedinjenja iz pronalaska sadrže asimetrične atome i stoga mogu da egzistiraju u jednom ili više (najmanje jednom) stereoizomernih oblika. Ovaj pronalazak obuhvata sve stereoizomere jedinjenja iz pronalaska, uključujući optičke izomere, bez obzira da li su pojedinačni stereoizomeri ili njihove smeše, uključujući racematne modifikacije. Bilo koji stereoizomer može da sadrži manje od 10% težine, na primer manje od 5% težine ili manje od 0.5% težine bilo koji drugi stereoizomer. Na primer, bilo koji optički izomer može da sadrži manje od 10% težine, na primer manje od 5% težine ili manje od 0.5% težine, svog antipoda. Ukoliko nije drugačije navedeno (na primer kada je pokazana apsolutna stereohemija), za jedinjenja iz pronalaska koja poseduju najmanje jedan stereocentar i koja time formiraju enantiomere, jedinjenje može da sadrži smešu enantiomera, na primer 1:1 smešu enantiomera, to jest racematnu smešu enantiomera. Ova smeša enantiomera može da se razdvoji uobičajenim tehnikama kao što je asimetrična HPLC. Za izomer jedinjenja iz pronalaska za koje je utvrđena apsolutna stereohemija ili koje je na bilo koji drugi način opisano kao pojedinačni enantiomer, navedeni izomer jedinjenja iz pronalaska ima, u jednom ostvarenju, najmanje 80% e.e. U narednom ostvarenju, navedeni izomer jedinjenja iz pronalaska ima najmanje 90% e.e., na primer najmanje 95% e.e. U narednom ostvarenju navedeni izomer jedinjenja iz pronalaska odgovara najmanje 98% e.e, na primer najmanje 99% e.e.

[0064] Jedinjenja iz pronalaska mogu da budu u kristalnom ili amofrnom obliku. Osim toga, neki kristalni oblici jedinjenja iz pronalaska mogu da egzistiraju kao polimorfi, pri čemu su svi obuhvaćeni okvirom ovog pronalaska. Od posebnog interesa su termodinamički najstabilniji polimorfni oblik ili oblici jedinjenja iz pronalaska. U jednom aspektu pronalaska, jedinjenje Formule (I) je kristal.

[0065] Polimorfni oblici jedinjenja iz pronalaska mogu da se okarakterišu i diferenciraju preko brojnih uobičajenihi analitičkih tehnika, uključujući ali bez ograničenja na, difrakciju X-zraka praškastog uzorka (XRPD), infracrvenu spektroskopiju (IR), Raman spektroskopiju, diferencijalnu skenirajuću kalorimetriju (DSC), termogravimetrijske analize (TGA) i nuklernu magnetnu rezonancu čvrstog stanja (ssNMR).

[0066] Jedinjenja Formule (I) ili (IA) mogu da egzistiraju u obliku izotopnih varijacija.

Izotopna varijacija jedinjenja Formule (I) ili (IA) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli se definiše kao oblik u kome je najmanje jedan atom zamenjen sa atomom koji ima isti atomski broj ali se atomska masa razlikuje od atomske mase koja se uobičajeno nalazi u prirodi.

1

Primeri izotopa koji mogu da budu inkorporirani u jedinjenja iz pronalaska uključuju izotope vodonika, ugljenika, azota, kiseonika, fluora i hlora kao što su<2>H,<3>H,<13>C,<14>C,<15>N,<17>O,<18>O,<18>F i<36>Cl, tim redom. Neke izotopne varijacije jedinjenja Formule (I) ili (IA) ili njihove soli ili solvata, na primer, one u kojima je inkorporiran radioaktivni izotop kao što su<3>H ili<14>C su korisni u studijama lekova i/ili distribucije supstrata tkiva. Tricijum, to jest,<3>H i ugljenik-14, to jest,<14>C, izotopi su posebno preferirani zbog svoje lake izrade i detektabilnosti. Dalje, supstitucija sa izotopima kao što je deuterijum, to jest,<2>H, može da obezbedi neke terapeutske prednosti koje su rezultat veće metaboličke stabilnosti, na primer povećanog polu-života in vivo ili smanjene zahtevane doze i stoga mogu da imaju prednost u nekim situacijama.

Izotopne varijacije jedinjenja Formule (I) ili (IA) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, mogu generalno da se izrade uobičajenim procedurama kao što su pokazani postupci ili postupcima opisanim u niže datim Primerima upotrebom odgovarajućih izotopnih varijacija u pogodnim reagensima.

[0067] Iz prethodno navedenog je jasno da jedinjenja Formule (I) ili (IA) i njihove soli mogu da egzistiraju kao solvati, hidrati, izomeri i polimorfni oblici.

[0068] Stručnjaku sa iskustvom u praksi je poznato da neki derivati jedinjenja Formule (I) ili (IA), mada ne nužno poseduju farmakološku aktivnost kao takvi, mogu da se primene i nakon toga metabolišu u organizmu u oblike jedinjenja Formule (I) ili (IA) koji su farmakološki aktivni. Ovakvi derivati su u daljem tekstu označeni kao "prolekovi". U skladu sa tim, jedinjenje Formule (I) ili (IA) može da egzistira u obliku proleka. Primeri odgovarajućih derivata su opisani u Drugs of Today, Volume 19, Number 9, 1983, pp 499 - 538 i u Topics in Chemistry, Chapter 31, pp 306 - 316 i in "Design of Prodrugs" by H. Bundgaard, Elsevier, 1985, Chapter 1.

Nazivi i definicije

[0069] Kako se ovde koristi za Formulu (IA), naziv "C1-C6alkil" označava ugljovodoničnu grupu (alkil) ravnog ili račvastog lanaca koja sadrži najmanje jedan a najviše šest atoma ugljenika. Primeri C1-C6alkil grupe uključuju, ali se ne ograničavaju samo na, metil, etil, npropil, izopropil, n-butil, izobutil, terc-butil, pentil, neopentil ili heksile.

[0070] Kako se ovde koristi za Formulu (IA), naziv "C1-C3alkil" označava alkil grupu ravnog ili račvastog lanaca koja sadrži najmanje jedan a najviše tri atoma ugljenika. Primeri C1-C3alkil grupe uključuju metil, etil, n-propil i izopropil.

1

[0071] Kako se ovde koristi za Formulu (IA), naziv "C2-C6alkenil" označava nezasićenu ugljovodoničnu grupu ravnog ili račvastog lanca koja sadrži najmanje dva a najviše šest atoma ugljenika, pri čemu ugljovodonična grupa ima jedan ili više položaja nezasićenosti od kojih je svaki predstavljen kao dvostruka veza. Primeri C2-C6alkenil grupa uključuju, ali bez ograničenja na, etenil (-CH=CH-), propenil (-CH2-CH=CH-), izopropenil, butenil, pentenil, heksenil, 1-propenil, 2- butenil i 2-metil-2-butenil.

[0072] Kako se ovde koristi za Formulu (IA), naziv "-C2-C4alkenil-" označava dvovalentni radikal (deluje kao linker grupa) C2-C4alkena, koji je nezasićena ugljovodonična grupa ravnog ili račvastog lanca koja sadrži najmanje dva a najviše četiri atoma ugljenika, pri čemu ugljovodonična grupa ima jedan ili više položaja nezasićenosti od kojih je svaki predstavljen kao dvostruka veza. Primeri -C2-C4alkenil- grupe uključuju, ali se ne ograničavaju samo na, -etenil-, -propenil-and -izopropenil-.

[0073] Kako se ovde koristi za Formulu (IA), naziv "-OC2-C4alkenil-" označava dvovalentni radikal (deluje kao linker grupa) O-C2-C4alkena, gde C2-C4alken ovde definisan i pri čemu je jedan od radikala na atomu kiseonika a drugi radikal je na jednom od atoma ugljenika.

Primeri -OC2-C4alkenila- uključuju, ali se ne ograničavaju samo na, -Oetenil-, -Opropenil- ili -Oizopropenil-.

[0074] Kako se ovde koristi za Formulu (IA), naziv "C1-C6alkoksi" označava ravnu ili račvastu OC1-C6alkil grupu koja sadrži najmanje jedan a najviše šest atoma ugljenika. Primeri C1-C6alkoksi grupe uključuju, ali se ne ograničavaju samo na, metoksi, etoksi, n-propoksi, izopropoksi, butoksi, izobutoksi, pentoksi i heksoksi.

[0075] Kako se ovde koristi za Formulu (IA), naziv "C3-C7cikloalkil" označava alifatični zasićeni karbociklični prsten koji sadrži najmanje tri a najviše sedam atoma ugljenika. Primeri C3-C7cikloalkil grupa uključuju ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil i cikloheptil.

[0076] Kako se ovde koristi za Formulu (IA), naziv "C5-C7cikloalkenil" označava alifatični, nezasićeni karbociklični prsten koji sadrži najmanje pet a najviše sedam atoma ugljenika. Primeri C5-C7cikloalkenil grupa uključuju ciklopentenil, cikloheksenil i cikloheptenil.

[0077] Kako se ovde koristi za Formulu (IA), naziv "-OC3-C7cikloalkil" označava C3-C7cikloalkil grupu, kako je ovde definisao, vezanu za atom kiseonika, atom kiseonika koji ima radikal koji formira tačku vezivanja za -OC3-C7cikloalkil grupu. Primeri-OC3-C7cikloalkil grupe uključuju ciklopropiloksi, ciklobutiloksi, ciklopentiloksi, cikloheksiloksi i cikloheptiloksi.

[0078] Kako se ovde koristi za Formulu (IA), naziv "C4-C7heterocikloalkil" označava zasićeni

1

prsten koji sadrži najmanje četiri a najviše sedam atoma, a koji uključuje jedan ili više, na primer dva, heteroatoma izabrana od azota, kiseonika i sumpora u prstenu. Primeri C4-C7heterocikloalkil grupa uključuju, ali se ne ograničavaju samo na, tetrahidrofuranil tetrahidropiranil, tetrahidrotiopiranil, pirolidinil, tetrahidrotiofenil, piperidinil, piperazinil, morfolinil, 1,4-dioksanil, tiomorfolinil, 1,4-oksatianil, 1,4-ditianil, dioksepanil, azepanil, oksepanil i diazepanil. Tačka vezivanja za ostatak molekule može da bude bilo koji pogodan atom ugljenika ili azota.

[0079] Kako se ovde koristi za Formulu (IA), naziv "C5-C7heterocikloalkenil" označava alifatični nezasićeni prsten koji sadrži najmanje pet a najviše sedam atoma, uključujući jedan ili više, na primer dva, heteroatoma u prstenu izabrana od azota, kiseonika i sumpora. Primeri C5-C7heterocikloalkenil grupe uključuju, ali se ne ograničavaju samo na, dihidropiranil, dihidrofuranil, dihidrotiofenil, pirolinil, azepinil, oksepinil, tiepinil, dioksepinil, dihidropirolil, dihidropirazolil, dihidroimidazolil, dihidrooksazolil, dihidrotiazolil i dihidrotiopiranil.

[0080] Kako se ovde koristi za Formulu (IA), naziv "C5-C6heteroaril" se odnosi na aromatični prsten koji uključuje peti ili šest heteroatoma izabranih od N, O i S. Primeri C5-C6heteroaril grupa uključuju, ali se ne ograničavaju samo na, furanil, tiofenil, pirolil, piridil, pirimidil, imidazolil i izoksazolil.

[0081] Kako se ovde koristi za Formulu (IA), naziv "halo" se odnosi na fluor (F), hlor (CI), brom (Br) ili jod (I).

[0082] Kako se ovde koristi za Formulu (I), naziv "C1-C6alkil" označava zasićenu ugljovodoničnu grupu (alkil) ravnog ili račvastog lanca koja sadrži najmanje jedan a najviše šest atoma ugljenika. Primeri C1-C6alkil grupa uključuju, ali se ne ograničavaju samo na, metil, etil, n-propil, izopropil, n-butil, izobutil, terc-butil, pentil, neopentil ili heksil.

[0083] Kako se ovde koristi za Formulu (I), naziv "C1-C3alkil" označava ravnu ili račvastu alkil grupu koja sadrži najmanje jedan a najviše tri atoma ugljenika. Primeri C1-C3alkil grupa uključuju metil, etil, n-propil i izopropil.

[0084] Kako se ovde koristi za Formulu (I), naziv "C2-C6alkenil" označava nezasićenu ugljovodoničnu grupu ravnog ili račvastog lanca koja sadrži najmanje dva a najviše šest atoma ugljenika, pri čemu ugljovodonična grupa ima jedan ili više (najmanje jedan) položaj nezasićenosti od kojih je svaki predstavljen kao dvostruka veza. Primeri C2-C6alkenil grupa uključuju, ali se ne ograničavaju samo na, etenil (CH=CH), propenil (CH2-CH=CH), izopropenil, butenil, pentenil, heksenil, 1-propenil, 2-butenil i 2-metil-2-butenil.

[0085] Kako se ovde koristi za Formulu (I), naziv "-C2-C4alkenil-" označava dvovalentni

1

radikal (reaguje kao linker grupa) C2-C4alkena, koji je nezasićena ugljovodonična grupa ravnog ili račvastog lanca koja sadrži najmanje dva a najviše četiri atoma ugljenika, pri čemu ugljovodonična grupa ima jedan ili više (najmanje jedan) položaj nezasićenosti od kojih je svaki prisutan kao dvostruka veza. Primeri -C2-C4alkenil- grupa uključuju, ali se ne ograničavaju samo na, -etenil, -propenil- i -izopropenil-.

[0086] Kako se ovde koristi za Formulu (I), naziv "-OC2-C4alkenil-" označava dvovalentni radikal (deluje kao linker grupa) O-C2-C4alkena, gde je C2-C4alken prethodno definisan i gde je jedan od radikala na atomu kiseonika a drugi radikal je na jednom od atoma ugljenika. Primeri -OC2-C4alkenil- grupa uključuju, ali se ne ograničavaju samo na, -Oetenil-, -Opropenil- ili -Oizopropenil-.

[0087] Kako se ovde koristi za Formulu (I), naziv "C1-C6alkoksi" označava ravnu ili račvastu OC1-C6alkil grupu koja sadrži najmanje jedan a najviše šest atoma ugljenika. Primeri C1-C6alkoksi grupa uključuju, ali se ne ograničavaju samo na, metoksi, etoksi, n-propoksi, izopropoksi, butoksi, izobutoksi, pentoksi i heksoksi.

[0088] Kako se ovde koristi za Formulu (I), naziv "C3-C7cikloalkil" označava alifatični zasićeni karbociklični prsten koji sadrži najmanje tri a najviše sedam atoma ugljenika.

Primeri C3-C7cikloalkil grupe uključuju ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil i cikloheptil.

[0089] Kako se ovde koristi za Formulu (I), naziv "C5-C7cikloalkenil" označava alifatični nezasićeni karbociklični prsten koji sadrži najmanje pet a najviše sedam atoma ugljenika. Primeri C4-C7cikloalkenil grupa uključuju ciklopentenil, cikloheksenil i cikloheptenil.

[0090] Kako se ovde koristi za Formulu (I), naziv "-OC3-C7cikloalkil" označava C3-C7cikloalkil grupu, kako je ovde definisano, vezanu za atom kiseonika, atom kiseonika koji ima radikal koji formira tačku vezivanja za -OC3-C7cikloalkil grupu. Primeri -OC3-C7cikloalkil grupa uključuju ciklopropiloksi, ciklobutiloksi, ciklopentiloksi, cikloheksiloksi i cikloheptiloksi.

[0091] Kako se ovde koristi za Formulu (I), naziv "C4-C7heterocikloalkil" označava zasićeni prsten koji sadrži najmanje četiri a najviše sedam atoma u prstenu, pri čemu je najmanje jedan od atoma prstena heteroatom izabran od azota, kiseonika i sumpora. Primeri C4-C7heterocikloalkil grupa uključuju, ali se ne ograničavaju samo na, tetrahidrofuranil tetrahidropiranil, tetrahidrotiopiranil, pirolidinil, tetrahidrotiofenil, piperidinil, piperazinil, morfolinil, 1,4-dioksanil, tiomorfolinil, 1,4-oksatianil, 1,4-ditianil, dioksepanil, azepanil, oksepanil i diazepanil. Tačka vezivanja za ostatak molekule može da bude bilo koji

2

odgovarajući atom ugljenika ili azota.

[0092] Kako se ovde koristi za Formulu (I), naziv "C5-C7heterocikloalkenil" označava alifatični nezasićeni prsten koji sadrži najmanje pet a najviše sedam atoma u prstenu, pri čemu je najmanje jedan od atoma prstena heteroatom izabran od atoma, kiseonika i sumpora.

Primeri C5-C7heterocikloalkenil grupa uključuju, ali se ne ograničavaju samo na, dihidropiranil, dihidrofuranil, dihidrotiofenil, pirolinil, azepinil, oksepinil, tiepinil, dioksepinil, dihidropirolil, dihidropirazolil, dihidroimidazolil, dihidrooksazolil, dihidrotiazolil i dihidrotiopiranil.

[0093] Kako se ovde koristi za Formulu (I), naziv "C5-C6heteroaril" se odnosi na aromatični prsten koji uključuje pet ili šest atoma u prstenu, pri čemu je najmanje jedan od atoma prstena heteroatom izabran od azota, kiseonika i sumpora. Primeri C5-C6heteroaril grupa uključuju, ali se ne ograničavaju samo na, furanil, tiofenil, pirolil, piridil, pirimidil, imidazolil i izoksazolil.

[0094] Kako se ovde koristi za Formulu (I), naziv "halo" se odnosi na fluor (F), hlor (CI), brom (Br) ili jod (I).

[0095] Kako se ovde koristi, naziv "nezasićen" označava postojanje jedne ili više (najmanje jedne) dvostruke veze.

[0096] U odnosu na Formulu (I), u jednom aspektu pronalaska, A2je N. U još jednom aspektu, A2je CR13. U još jednom aspektu, A2je CH.

[0097] U odnosu na Formulu (I), u jednom aspektu pronalaska, R1je C4-C7heterocikloalkil opciono supstituisan sa jednom C1-C3alkil grupom ili sa jednim ili dva halo atoma. U jednom aspektu, R1je pirolidinil, oksazolil ili azetidinil, svaki je opciono supstituisan sa jednom metil grupom ili jednim ili dva fluora. U jednom aspektu, R1je pirolidinil, difluroroazetidinil ili difluoropirolidinil. U još jednom aspektu, R1je pirolidinil. U još jednom aspektu, R1je 1-pirolidinil.

[0098] U odnosu na Formulu (I), u jednom aspektu pronalaska, L1je izabran od -C(O)- i -S(O)n-; gde n predstavlja 2. U još jednom aspektu, L1je -C(O)-.

[0099] U odnosu na Formulu (I), u jednom ostvarenju pronalaska, L1-R1je

[0100] U odnosu na Formulu (I), u jednom aspektu pronalaska, R3je izabran od vodonika, halo, metil i metoksi grupe. U još jednom aspektu, R3je vodonik ili halo. U još jednom aspektu, R3je halo. U još jednom aspektu, R3je fluor ili hlor. U narednom aspektu, R3je fluor. U još jednom aspektu, R3je vodonik. U narednom aspektu, R3je vodonik ili fluor.

[0101] U odnosu na Formulu (I), u jednom aspektu pronalaska, R4je vodonik, halo ili metil grupa. U još jednom aspektu, R4je vodonik.

[0102] U odnosu na Formulu (I), u jednom aspektu pronalaska, R3je izabran od fluora, hlora, metil i metoksi grupe a R4je vodonik; ili R4je izabran od fluora, hlora i metil grupe a R3je vodonik.

[0103] U odnosu na Formulu (I), u jednom aspektu pronalaska, R2je izabran od vodonika, halo, Ar, Cy i X. U još jednom aspektu, R2je vodonik.

[0104] U odnosu na Formulu (I), u jednom aspektu pronalaska, R2je halo. U još jednom aspektu, R2je fluor ili hlor.

[0105] U odnosu na Formulu (I), u jednom aspektu pronalaska, R2je Ar.

[0106] U odnosu na Formulu (I), u jednom aspektu pronalaska, Ar je izabran od fenil i C5-C6heteroaril grupe, od kojih je svaka opciono supstituisana sa jednom grupom izabranom od halo i -L2-R7.

[0107] U odnosu na Formulu (I), u jednom aspektu pronalaska, Ar je izabran od fenil i C5-C6heteroaril grupe, od kojih je svaka opciono supstituisana sa jednom grupom koja je -L2-R7.

[0108] U odnosu na Formulu (I), u jednom aspektu pronalaska, Ar je opciono supstituisana fenil grupa. U još jednom aspektu, Ar je nesupstituisana fenil grupa.

[0109] U odnosu na Formulu (I), u jednom aspektu pronalaska, Ar je opciono supstituisani C5-C6heteroaril. U jednom aspektu, Ar je opciono supstituisani piridil. U još jednom aspektu, Ar je opciono supstituisani 2-piridil. U još jednom aspektu, Ar je opciono supstituisani 3-piridil. U još jednom aspektu, Ar je opciono supstituisani 4-piridil. U jednom aspektu pronalaska, Ar je nesupstituisani C5-C6heteroaril.

[0110] U odnosu na Formulu (I), u jednom aspektu pronalaska, L2je izabran od veze, -(CH2)m- i -O(CH2)m-, gde m predstavlja 1 do 4. U još jednom aspektu, L2je veza. U još jednom aspektu, L2je -(CH2)m-. U narednom aspektu, L2je C2-C4alkenil-. U jednom aspektu, m predstavlja 1 do 3.

[0111] U odnosu na Formulu (I), u jednom aspektu pronalaska, R7je izabran od vodonika, C4-C7heterocikloalkil i C1-C6alkoksi grupe. U još jednom aspektu, R7je vodonik. U još jednom aspektu, R7je C4-C7heterocikloalkil, na primer morfolinil. U još jednom aspektu, R7je C1C6alkoksi, na primer metoksi grupa.

[0112] U odnosu na Formulu (I), u jednom aspektu pronalaska, R2je Cy.

[0113] U odnosu na Formulu (I), u jednom aspektu pronalaska, Cy je izabran od C4-C7heterocikloalkil i C5-C7heterocikloalkenil grupe, od kojih je svaka opciono supstituisana sa jednom do tri C1-C3alkil grupe.

[0114] U odnosu na Formulu (I), u jednom aspektu pronalaska, Cy je izabran od C4-C7heterocikloalkil i C5-C7heterocikloalkenil grupe, od kojih je svaka opciono supstituisana sa jednom ili dve grupe nezavisno izabrane od C1-C3alkil, C1-C3alkoksi, =O, -C(O)-R15i -C(O)O-R15. U još jednom aspektu, Cy je izabran od C4-C7heterocikloalkil i C5-C7heterocikloalkenil grupe, od kojih je svaka opciono supstituisana sa jednom ili dve C1-C3alkil grupe, na primer sa jednom ili dve metil grupe.

[0115] U odnosu na Formulu (I), u jednom aspektu pronalaska, Cy je opciono supstituisani C4-C7heterocikloalkil. U još jednom aspektu, Cy je nesupstituisani C4-C7heterocikloalkil. U jednom aspektu, Cy je morfolinil. U još jednom aspektu, Cy je 4-morfolinil.

[0116] U odnosu na Formulu (I), u jednom aspektu pronalaska, Cy je opciono supstituisani C5-C7heterocikloalkenil. U još jednom aspektu, Cy je nesupstituisani C4-C7heterocikloalkenil [0117] U odnosu na Formulu (I), u jednom aspektu pronalaska, R2je X.

[0118] U odnosu na Formulu (I), u jednom aspektu pronalaska, X je izabran od C1-C6alkil i C2-C6alkenil grupe, od kojih je svaka opciono supstituisana sa jednom do tri grupe nezavisno izabrane od hidroksi, metoksi, halo i C4-C7heterocikloalkil grupe, gde je C4-C7heterocikloalkil grupa opciono supstituisana sa jednom do tri C1-C3alkil grupe. U još jednom aspektu, X je izabran od C1-C6alkil i C2-C6alkenil grupe od kojih je svaka opciono supstituisana sa jednom grupom izabranom od hidroksi, metoksi, halo i C4-C7heterocikloalkil grupe, gde je C4-C7heterocikloalkil grupa opciono supstituisana sa jednom do tri C1-C3alkil grupe.

[0119] U odnosu na Formulu (I), u jednom aspektu pronalaska, X je opciono supstituisana C1-C6alkil grupa. U još jednom aspektu, X je C1-C6alkil grupa supstituisana sa jednom hidroksi grupom. U još jednom aspektu, X je C1-C6alkil grupa supstituisana sa jednom C4-C7heterocikloalkil grupom koja je opciono supstituisana sa jednom do tri C1-C3alkil grupe. U još jednom aspektu, X je -CH2- grupa supstituisana sa jednom C4-C7heterocikloalkil grupom koja je opciono supstituisana sa jednom do tri C1-C3alkil grupe. U odnosu na Formulu (I), u jednom aspektu, X je -CH2- grupa supstituisana sa jednom C4-C7heterocikloalkil grupom izabranom od morfolinila, piperazinila i piperidinila, od kojih je svaki opciono supstituisan sa jednom do tri C1-C3alkil grupe, na primer metil grupom. U još jednom aspektu, X je

2

nesupstituisana C1-C6alkil grupa.

[0120] U odnosu na Formulu (I), u jednom aspektu pronalaska, X je opciono supstituisana C2-C6alkenil grupa. U još jednom aspektu, X je C2-C6alkenil grupa supstituisana sa jednom hidroksi grupom. U još jednom aspektu, X je nesupstituisana C2-C6alkenil grupa.

[0121] U odnosu na Formulu (I), u jednom aspektu pronalaska, R5aje izabran od vodonika i C1-C6alkil grupe.

[0122] U odnosu na Formulu (I), u jednom aspektu pronalaska, R5bje vodonik.

[0123] U odnosu na Formulu (I), u jednom aspektu pronalaska, R5ai R8bsu nezavisno izabrani od C1-C3alkil grupe.

[0124] U odnosu na Formulu (I), u jednom aspektu pronalaska, R9je C1-C6alkil grupa.

[0125] U odnosu na Formulu (I), u jednom aspektu pronalaska, R10ai R10bsu nezavisno izabrani od vodonika i metil grupe.

[0126] U odnosu na Formulu (I), u jednom aspektu pronalaska, R11ai R11bsu nezavisno izabrani od vodonika i metil grupe.

[0127] U odnosu na Formulu (I), u jednom aspektu pronalaska, R12je izabran od vodonika i metil grupe. U još jednom aspektu, R12je vodonik.

[0128] U odnosu na Formulu (I), u jednom aspektu pronalaska, R13je izabran od vodonika, C1-C3alkil i -C(O)-C4-C7heterocikloalkil grupe. U još jednom aspektu, R13je izabran od vodonika, metil i etil grupe. U još jednom aspektu, R13je vodonik.

[0129] U odnosu na Formulu (I), u jednom aspektu pronalaska, R12je vodonik a R13je izabran od vodonika i C1-C3alkil grupe. U još jednom aspektu, R12je vodonik a R13je izabran od vodonika, metil i etil grupe. U još jednom aspektu, R12je metil a R13je vodonik.

[0130] U odnosu na Formulu (I), u jednom aspektu pronalaska, R15je C1-C6alkil grupa.

[0131] U jednom aspektu pronalaska, dato je jedinjenje Formule (I) ili njegova so, gde:

A1je CH;

A2je izabran od CR13i N;

R1je C4-C7heterocikloalkil grupa, opciono supstituisana sa jednom metil ili jednim ili dva halo atoma;

L1je -C(O)-;

R3je izabran od vodonika i halo;

R4je izabran od vodonika, halo i metil grupe;

R2je izabran od vodonika, halo, Ar, Cy i X;

Ar je izabran od fenil i C5-C6heteroaril grupe, od kojih je svaka opciono supstituisana sa jednom grupom izabranom od halo i -L2-R7;

L2je linker grupa izabrana od -(CH2)m- i -O(CH2)m-, gde m predstavlja 1;

R7je vodonik;

Cy je C4-C7heterocikloalkil grupa, koja je opciono supstituisana sa jednom ili dve grupe nezavisno izabrane od metil, metoksi, -C(O)-R15i -C(O)O-R15;

X je C1-C6alkil grupa, koja je opciono supstituisana sa jednom C4-C7heterocikloalkil grupom; R12je izabran od vodonika, halo i metil grupe;

R13je izabran od vodonika, C1-C3alkil i -C(O)-C4-C7heterocikloalkil grupe; i

R15je C1-C6alkil grupa.

[0132] U jednom aspektu pronalaska, ovde je dato jedinjenje Formule (I) ili njegova so, gde:

A1je CH;

A2je CH;

R1je C4-C7heterocikloalkil;

L1je -C(O)-;

R3je halo;

R4je vodonik;

R2je C4-C7heterocikloalkil grupa; i

R12je vodonik.

[0133] U jednom aspektu pronalaska, jedinjenje Formule (I) je izabrano od:

N-(3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

N-(3-(3-fenilimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

N-(4-fluor-3-(3-fenilimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

N-(4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

N-(4-fluor-3-(3-(piperidin-1-il)imidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida; N-(3-(7-bromoimidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-3-il)-4-fluorofenil)pirolidin-1-karboksamida; N-(4-fluor-3-(7-fenilimidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-3-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

N-(4-fluor-3-(7-morfolinoimidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-3-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida; N-(3-(7-morfolinoimidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-3-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

2

N-(3-(7-fenilimidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-3-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

N-(4-fluor-3-(imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-3-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

N-(4-fluor-3-(5-metil-3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

N-(3-(5-etil-3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)-4-fluorofenil)pirolidin-1-karboksamida; N-(3-(6-metil-3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

N-(4-fluor-3-(6-metil-3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

N-(4-fluor-3-(imidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

N-(4-fluor-3-(3-izobutilimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

N-(4-fluor-3-(3-izopropilimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

N-(4-fluor-3-(3-(tetrahidro-2H-piran-4-il)imidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

N-(4-fluor-3-(3-(morfolinometil)imidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida; N-(4-fluor-3-(3-(4-(morfolinometil)fenil)imidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

N-(3-(3-(1,4-oksazepan-4-il)imidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)-4-fluorofenil)pirolidin-1-karboksamida;

3-fluor-N-(4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

(R)-3-fluor-N-(4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

(S)-3-fluor-N-(4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

3,3-difluoro-N-(4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)azetidin-1-karboksamida;

3,3-difluoro-N-(4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

N-(4-fluor-3-(3-(piridin-2-il)imidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida; N-(4-fluor-3-(3-(pirazin-2-il)imidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida; N-(4-fluor-3-(3-(6-metoksipiridin-2-il)imidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

N-(4-fluor-3-(3-(2-metilmorfolino)imidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-

2

karboksamida;

N-(3-(3-(2,6-dimetilmorfolino)imidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)-4-fluorofenil)pirolidin-1-karboksamida;

N-(3-(3-((2S,6R)-2,6-dimetilmorfolino)imidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)-4-fluorofenil)pirolidin-1-karboksamida;

N-(4-fluor-3-(3-(3-metilmorfolino)imidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

N-(4-fluor-3-(3-(piperazin-1-il)imidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida; N-(4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)-2-metilpirolidin-1-karboksamida;

(R)-N-(4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)-2-metilpirolidin-1-karboksamida;

(S)-N-(4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)-2-metilpirolidin-1-karboksamida;

N-(4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)-3-metilpirolidin-1-karboksamida;

(R)-N-(4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)-3-metilpirolidin-1-karboksamida;

(S)-N-(4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)-3-metilpirolidin-1-karboksamida;

terc-butil 4-(7-(2-fluor-5-(pirolidin-1-karboksamido)fenil)imidazo[1,2-a]pirimidin-3-il)piperazin-1-karboksilata;

N-(4-fluor-3-(3-(4-metilpiperazin-1-il)imidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

N-(4-fluor-3-(3-(6-metilpiridin-2-il)imidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

N-(4-fluor-3-(3-(morfolin-3-il)imidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida; N-(4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)-2,4-dimetiloksazol-5-karboksamida;

N-(4-fluor-3-(3-(2-metilmorfolino)imidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

(S)-N-(4-fluor-3-(3-(2-metilmorfolino)imidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

2

N-(3-(3-(2,2-dimetilmorfolino)imidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)-4-fluorofenil)pirolidin-1-karboksamida;

N-(3-(3-(3,3-dimetilmorfolino)imidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)-4-fluorofenil)pirolidin-1-karboksamida;

N-(4-fluor-3-(3-(4-metilmorfolin-3-il)imidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

terc-butil 3-(7-(2-fluor-5-(pirolidin-1-karboksamido)fenil)imidazo[1,2-a]pirimidin-3-il)morfolin-4-karboksilata;

N-(4-fluor-3-(3-((tetrahidrofuran-2-il)metil)imidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

N-(2,4-difluoro-5-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida; N-(4-fluor-3-(3-(4-metoksipiperidin-1-il)imidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

N-(3-(3-(4-acetilpiperazin-1-il)imidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)-4-fluorofenil)pirolidin-1-karboksamida;

N-(4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)-3-metilazetidin-1-karboksamida; N-(4-fluor-3-(5-(pirolidin-1-karbonil)imidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

N-(4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)azetidin-1-karboksamida;

N-(4-fluor-3-(3-(3-oksopiperazin-1-il)imidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

N-(4-fluor-3-(3-((tetrahidrofuran-3-il)metil)imidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

N-(4-fluor-3-(3-(6-fluoropiridin-2-il)imidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

N-(4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)tetrahidrofuran-3-karboksamida; N-(4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)tetrahidrofuran-2-karboksamida; i

N-(3-(3-bromoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)-4-fluorofenil)pirolidin-1-karboksamida;

ili njihove soli

[0134] U jednom aspektu pronalaska, jedinjenje Formule (I) je izabrano od:

2

N-(3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

N-(3-(3-fenilimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

N-(3-(7-fenilimidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-3-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

N-(4-fluor-3-(imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-3-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

N-(4-fluor-3-(imidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

(R)-3-fluor-N-(4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamid;

2

N-(3-(3-(2,6-dimetilmorfolino)imidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)-4-fluorofenil)pirolidin-1-karboksamid;

(R)-N-(4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)-2-metil pirolidin-1-karboksamida;

N-(4-fluor-3-(3-(morfolin-3-il)imidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida; N-(4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)-2,4-dimetiloksazol-5karboksamida;

N-(4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)azetidin-1-karboksamida; i N-(4-fluor-3-(3-(3-oksopiperazin-1-il)imidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

ili njihove soli.

[0135] U jednom aspektu pronalaska, jedinjenje Formule (I) je izabrano od:

N-(3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

N-(3-(3-fenilimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

1

N-(4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida; N-(4-fluor-3-(3-(piperidin-1-il)imidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida; N-(3-(7-bromoimidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-3-il)-4-fluorofenil)pirolidin-1-karboksamida; N-(4-fluor-3-(7-fenilimidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-3-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

N-(4-fluor-3-(7-morfolinoimidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-3-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida; N-(3-(7-morfolinoimidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-3-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida; i N-(3-(7-fenilimidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-3-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

ili njihove soli

[0136] U jednom aspektu pronalaska, jedinjenje Formule (I) je N-(4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamid ili njegova so.

[0137] U jednom aspektu pronalaska, jedinjenje Formule (I) je N-(4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamid.

[0138] U jednom aspektu pronalaska, jedinjenje Formule (I) je

ili njegova so.

[0139] U jednom aspektu pronalaska, jedinjenje Formule (I) je

[0140] U odnosu na Formulu (IA), A2je N. U još jednom otkriću, A2je CR13.

2

[0141] U odnosu na Formulu (IA), R1je C4-C6heterocikloalkil. U još jednom otkriću, R1je pirolidinil.

[0142] U odnosu na Formulu (IA), L1je izabran od -C(O)- i -S(O)n-; gde n predstavlja 2. U još jednom otkriću, L1je -C(O)-.

[0143] U odnosu na Formulu (IA), R3je vodonik ili halo. U još jednom otkriću, R3je halo. U još jednom aspektu, R3je fluor ili hlor. U narednom otkriću, R3je fluor. U još jednom aspektu, R3je vodonik. U narednom otkriću, R3je vodonik ili fluor.

[0144] U odnosu na Formulu (IA), R4je vodonik.

[0145] U odnosu na Formulu (IA), R2je vodonik.

[0146] U odnosu na Formulu (IA), R2je halo. U još jednom otkriću, R2je fluor ili hlor.

[0147] U odnosu na Formulu (IA), R2je NR5aR5b.

[0148] U odnosu na Formulu (IA), R2je Ar.

[0149] U odnosu na Formulu (IA), Ar je izabran od fenil i C5-C6heteroaril grupe, od kojih je svaka opciono supstituisana sa jednom grupom izabranom od NR6aR6bi -L2-R7.

[0150] U odnosu na Formulu (IA), Ar je izabran od fenil i C5-C6heteroaril grupe, od kojih je svaka opciono supstituisana sa jednom grupom koja je NR6aR6b.

[0151] U odnosu na Formulu (IA), Ar je izabran od fenil i C5-C6heteroaril grupe, od kojih je svaka opciono supstituisana sa jednom grupom koja je -L2-R7.

[0152] U odnosu na Formulu (IA), Ar je opciono supstituisana fenil grupa. U još jednom otkriću, Ar je nesupstituisana fenil grupa.

[0153] U odnosu na Formulu (IA), Ar je opciono supstituisana C5-C6heteroaril grupa. U jednom otkriću, Ar je opciono supstituisani piridil. U još jednom otkriću, Ar je opciono supstituisani 2-piridil. U još jednom otkriću, Ar je opciono supstituisani 3-piridil.

[0154] U narednom otkriću, Ar je opciono supstituisani 4-piridil. U jednom otkriću pronalaska, Ar je nesupstituisani C5-C6heteroaril.

[0155] U odnosu na Formulu (IA), L2je izabran od veze, -(CH2)m- i -O(CH2)m-, gde m predstavlja 1 do 4. U još jednom otkriću, L2je veza. U još jednom otkriću, L2je -(CH2)m-. U narednom otkriću, L2je C2-C4alkenil-. U jednom otkriću, m predstavlja 1 do 3.

[0156] U odnosu na Formulu (IA), R7je izabran od vodonika, C4-C7heterocikloalkil i C1-C6alkoksi grupe. U još jednom otkriću, R7je vodonik. U još jednom otkriću, R7je C4-C7heterocikloalkil grupa, na primer morfolinil. U još jednom otkriću, R7je C1-C6alkoksi grupa, na primer metoksi.

[0157] U odnosu na Formulu (IA), R2je Cy.

[0158] U odnosu na Formulu (IA), Cy je izabran od C4-C7heterocikloalkil i C5-C7heterocikloalkenil grupe, od kojih je svaka opciono supstituisana sa jednom do tri C1-C3alkil grupe.

[0159] U odnosu na Formulu (IA), Cy je izabran od C4-C7heterocikloalkil i C5-C7heterocikloalkenil grupe, od kojih je svaka opciono supstituisana sa jednom ili dve C1-C3alkil grupe, na primer sa jednom ili dve metil grupe.

[0160] U odnosu na Formulu (IA), Cy je opciono supstituisana C4-C7heterocikloalkil grupa. U još jednom otkriću, Cy je nesupstituisana C4-C7heterocikloalkil grupa. U jednom otkriću, Cy je morfolinil.

[0161] U odnosu na Formulu (IA), Cy je opciono supstituisana C5-C7heterocikloalkenil grupa. U još jednom otkriću, Cy je nesupstituisana C4-C7heterocikloalkenil grupa.

[0162] U odnosu na Formulu (IA), R2je X.

[0163] U odnosu na Formulu (IA), X je izabran od C1-C6alkil i C2-C6alkenil grupe, od kojih je svaka opciono supstituisana sa jednom do tri grupe nezavisno izabrane od hidroksi, metoksi, halo i C4-C7heterocikloalkil grupe, gde je C4-C7heterocikloalkil grupa opciono supstituisana sa jednom do tri C1-C3alkil grupe. U još jednom otkriću, X je izabran od C1-C6alkil i C2-C6alkenil grupe, od kojih je svaka opciono supstituisana sa jednom grupom izabranom od hidroksi, metoksi, halo i C4-C7heterocikloalkil grupe, gde je C4-C7heterocikloalkil grupa opciono supstituisana sa jednom do tri C1-C3alkil grupe.

[0164] U odnosu na Formulu (IA), X je opciono supstituisana C1-C6alkil grupa. U još jednom otkriću, X je C1-C6alkil grupa supstituisana sa jednom hidroksi grupom. U još jednom otkriću, X je C1-C6alkil grupa supstituisana sa jednom C4-C7heterocikloalkil grupom koja je opciono supstituisana sa jednom do tri C1-C3alkil grupe.

[0165] U još jednom otkriću, X je -CH2- grupa supstituisana sa jednom C4-C7heterocikloalkil grupom koja je opciono supstituisana sa jednom do tri C1-C3alkil grupe.

[0166] U odnosu na Formulu (IA), X je -CH2- grupa supstituisana sa jednom C4-C7heterocikloalkil grupom izabranom od morfolinila, piperazinila i piperidinila, od kojih je svaki opciono supstituisan sa jednom do tri C1-C3alkil grupe, na primer metil grupom. U još jednom otkriću, X je nesupstituisana C1-C6alkil grupa.

[0167] U odnosu na Formulu (IA), X je opciono supstituisana C2-C6alkenil grupa. U još jednom otkriću, X je C2-C6alkenil grupa supstituisana sa jednom hidroksi grupom. U još jednom otkriću, X je nesupstituisana C2-C6alkenil grupa.

[0168] U odnosu na Formulu (IA), R5aje izabran od vodonika i C1-C6alkil grupe.

4

[0169] U odnosu na Formulu (IA), R5bje vodonik.

[0170] U odnosu na Formulu (IA), R6ai R6bsu nezavisno izabrani od C1-C3alkil grupe. U još jednom otkriću, R6ai R6bsu oba metil grupa.

[0171] U odnosu na Formulu (IA), R8ai R8bsu nezavisno izabrani od C1-C6alkil grupe.

[0172] U odnosu na Formulu (IA), R9je C1-C6alkil grupa.

[0173] U odnosu na Formulu (IA), R10ai R10bsu nezavisno izabrani od vodonika i metil grupe.

[0174] U odnosu na Formulu (IA), R11ai R11bsu nezavisno izabrani od vodonika i metil grupe.

[0175] U odnosu na Formulu (IA) R12je izabran od vodonika i metil grupe. U još jednom otkriću, R12je vodonik.

[0176] U odnosu na Formulu (IA), R13je izabran od vodonika, metil i etil grupe. U još jednom otkriću, R13je vodonik.

[0177] Jedinjenje Formule (I) ili (IA) je izabrano od:

N-(3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

N-(3-(3-fenilimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

N-(3-(7-fenilimidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-3-il)fenil) pirolidin-1-karboksamida;

N-(3-(3-morfolino-[1,2,4]triazolo[4,3-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida;

ili njegove soli.

Izrada Jedinjenja

[0178] Jedinjenje Formule (I) ili (IA) i njegove soli mogu da se izrade po metodologiji koja je ovde niže opisana.

[0179] Opšte procedure koje mogu da se koriste za sintezu jedinjenja Formule (I) ili (IA) su sumirane u Šemama reakcije 1 do 3 i ilustrovane su u Primerima.

Šema 1

[0180] Jedinjenja Formule (Ia), koja su jedinjenja Formule (I) ili (IA) gde je A1CH i A2je CR13, mogu da se izrade u skladu sa procedurom u Šemi 1.

[0181] Jedinjenja Formule (Ia), gde je R2= Ar, C4-C7heterocikloalkil, C5-C7heterocikloalkenil, NR5aR5bili X, mogu da se dobiju reakcijom Jedinjenja Formule (Ia), gde je R2brom, sa R2-Y, gde je R2Ar, C4-C7heterocikloalkil, C5-C7heterocikloalkenil NR5aR5bili X, a Y je vodonik ili borna kiselina ili njen estar, na primer tetrafluoroborat.

[0182] Na primer, kada je R2-Y morfolin, pirolidin ili piperidin (Y je vodonik), reakcija može da se izvede procesom sonikacije ili mikrotalasima.

[0183] Na primer, kada je R2-Y HNR5aR5b, reakcija može da se izvede reakcijom udvajanja u priustvu paladijum sredstva kao što je tris(dibenzilidenaceton)-dipaladijum(0) i pogodne baze, kao što su litijum bis(trimetilsilil)amid i pogodnog liganda, na primer paladijum(ii) fenetilamin hlorida.

[0184] Na primer, kada je R2-Y = X-H, reakcija sa jedinjenjem (Ia), gde je R2brom, može da se izvede reakcijom udvajanja u prisustvu pogodnog paladijum sredstva, kao što je paladijum acetat.

[0185] U drugoj alternativi, jedinjenja Formule (Ia) mogu da se dobiju reakcijom jedinjenja Formule 8, gde su R3, R4, R12i R13kako je definisano za Formulu (I) ili (IA), sa R1(L1)Cl, gde su L1i R1kako je definisano za Formulu (I) ili (IA), u prisustvu pogodne baze, u pogodnom rastvaraču, kao što su DCM:piridin, gde je piridin i korastvarač i baza ili upotrebom baze kao što je Et3N u pogodnom rastvaraču, kao što je 1,2-dihloretan.

[0186] Na primer, kada je R1(L1)Cl = R1C(O)Cl, gde je R1kako je definisano za Formulu (I) ili (IA), reakcija može da se izvede u pogodnoj bazi kao što je dimetilaminopiridin u piridinu, u pogodnom rastvaraču kao što je DCM, na povišenoj temperaturi ili alternativno Jedinjenja 8 mogu da reaguju sa trifozgenom u pogodnom rastvaraču kao što je 1,2-dihloretan, a nakon toga reakcijom sa R1-H, na primer pirolidinom, u prisustvu pogodne baze kao što je Et3N.

[0187] R1(L1)Cl može da bude komercijalno raspoloživ ili može da se izradi po standardnim procedurama, na primer od R1C(O)OH, koji je ili komercijalno raspoloživ ili može da se izradi po standardnim procedurama.

[0188] Jedinjenja Formule 8 mogu da se izrade od Jedinjenja Formule 7, gde je R2izabran od vodonika, halo, Ar, Cy, NR5aR5b, C1-C6alkil ili C1-C6alkoksi grupe; R3, R4, R12i R13su kako je definisano za Formulu (I) ili (IA), redukcijom nitro grupe u Jedinjenju 7 u amino grupu, koristeći pogodno redukciono sredstvo. Na primer, Jedinjenje 7 može da reaguje sa gvožđem u amonijum hloridu u pogodnom rastvaraču kao što su EtOH i voda, na povišenoj temperaturi.

[0189] Alternativno, jedinjenja Formule 8 mogu da se izrade reakcijom ciklizacije između Jedinjenja Formule 14, gde su R1, R3, R4, R12i R13kako je definisano za Formulu (I) ili (IA) i pogodnih reagenasa, u procesu analognim sa procesom za izradu Jedinjenja Formule 7 ili Jedinjenja Formule (I) ili (IA) od Jedinjenja 15.

[0190] Jedinjenja Formule 7 mogu da se izrade reakcijom ciklizacije između Jedinjenja Formule 4, gde su; R3, R4R12i R13kako je definisano za Formulu (I) ili (IA) i pogodnih reagenasa. Na primer, kada je R2= Ar, reagens može da bude ArCH(Br)C(O)H, gde je Ar kako je definisano za Formulu (I) ili (IA), u prisustvu pogodnog rastvarača kao što su DCE ili acetonitril. Kada je R2N-vezaniCy reagens može da bude [(N-vezaniCy)(Bt) ¶CH-]2, gde je N-vezaniCy Cy kako je definisano za Formulu (I) ili (IA) gde Cy sadrži atom azota koji je vezan za ostatak molekule, u prisustvu pogodnog katalizatora kao što je metal halid, na primer cink bromid.

[0191] Jedinjenja Formule 4 mogu da se izrade reakcijom udvajanja između Jedinjenja Formule 3a, gde je R12izabran od vodonika i metil grupe a R13je kako je definisano za Formulu (I) ili (IA) i borne kiseline i jedinjenja Formule 3b, gde je R3izabran od vodonika, metil, metoksi i cijano grupe a R4je izabran od vodonika, metil, metoksi i cijano grupe, u prisustvu pogodnog katalizatora kao što je paladijum katalizator, na primer Pd(PPh3)4i pogodne baze kao što je NaHCO3, u pogodnom rastvaraču kao što je dioksan, na povišenoj temperaturi.

[0192] Jedinjenja Formule 3a i 3b mogu da se nabave, na primer od firme ALDRICH ili mogu da se izrade pod standardnim procedurama.

[0193] U narednoj alternativi, jedinjenja Formule (Ia) mogu da se izrade reakcijom ciklizacije između Jedinjenja Formule 15, gde su R1, R3, R4, R12i R13kako je definisano za Formulu (I) ili (IA) i pogodnih reagenasa. Na primer, kada je R2Ar, reagens može da bude ArCH(Br)C(O)H, gde je Ar kako je definisano za Formulu (I) ili (IA), u prisustvu pogodnog rastvarača kao što su DCE ili acetonitril. Kada je R2N-vezaniCy, reagens može da bude [(N-vezani-Cy)(Bt))CH-]2, gde je N-vezaniCy Cy kako je definisano za Formulu (I) ili (IA) pri čemu Cy sadrži atom azota koji je vezan za ostatak molekule, u prisustvu pogodnog katalizatora kao što je metal halid, na primer cink bromid.

[0194] Jedinjenja Formule 15 mogu da se dobiju reakcijom Formule 14, gde su R3, R4, R12i R13kako je definisano za Formulu (I) ili (IA), sa R1(L1)Cl, gde su L1i R1kako je definisano za Formulu (I) ili (IA), u prisustvu pogodne baze, u pogodnom rastvaraču, kao što je DCM:piridin, pri čemu je piridinu i ko-rastvarač i baza ili koristeći bazu kao što je Et3N u pogodnom rastvaraču, kao što je 1,2-dihloretan.

[0195] Na primer, kada je R1(L1)Cl = R1C(O)Cl, gde je R1kako je definisano za Formulu (I) ili (IA), reakcija može da se izvede u pogodnoj bazi kao što je dimetilaminopiridin u piridinu, u pogodnom rastvaraču kao što je DCM, na povišenoj temperaturi ili alternativno Jedinjenja 14 mogu da reaguju sa trifozgenom u pogodnom rastvaraču kao što je 1,2-dihloretan, a nakon toga reakcijom sa R1-H, na primer pirolidinom, u prisustvu pogodne baze kao što je Et3N.

[0196] R1(L1)Cl može da bude ili komercijalno raspoloživ ili može da se izradi po standardnim procedurama, na primer od R1C(O)OH, koji takođe može da bude ili komercijalno raspoloživ ili može da se izradi pod standardnim procedurama.

[0197] Jedinjenja Formule 14 mogu da se dobiju od Jedinjenja Formule 4, gde su R3, R4R12i R13kako je definisano za Formulu (I) ili (IA), redukcijom nitro grupe Jedinjenja 4 u amino grupu upotrebom pogodnog redukcionog sredstva. Na primer, Jedinjenje 4 može da reaguje sa gvožđem u amonijum hloridu, u pogodnom rastvaraču kao što je smeša vode, 1,4-dioksana i EtOH, na povišenoj temperaturi.

[0198] Alternativno, jedinjenja Formule 15 mogu da se dobiju reakcijom udvajanja između Jedinjenja Formule 3a, gde su R12i R13kako je definisano za Formulu (I) i boratnih estara Formule BB, gde su R3, R4, L1i R1kako je definisano za Formulu (I), u prisustvu pogodnog katalizatora kao što je paladijum katalizator, na primer Pd(PPh3)4i pogodne baze kao što je Na2Na2CO3, u pogodnom rastvaraču kao što je dioksan, na povišenoj temperaturi.

[0199] Jedinjenja Formule BB mogu da se izrade postupkom borilacije od Jedinjenja Formule CC, u prisustvu pogodnog katalizatora kao što je paladijum katalizator, na primer Pd2(dba)3i liganda kao što je XPhos, pogodne baze kao što je KOAc, u pogodnom rastvaraču kao što je dioksan, na povišenoj temperaturi.

[0200] Jedinjenja Formule CC mogu da se dobiju od Jedinjenja Formule DD, gde su R3i R4isti kako je definisano za Formulu (I), pod standardnim uslovima za izradu uree, kao što je reakcija sa 1,1’-karbo-ildiimidazolom u prisustvu pogodne baze, kao što je DIPEA, koristeći DCM kao rastvarač, a nakon toga reakcijom odgovarajućeg R1, u odgovarajućem rastvaraču kao što je DCM, na primer na RT.

[0201] Jedinjenja Formule 3a mogu da budu ili komercijalno raspoloživa ili mogu da se izrade po standardnim procedurama.

Šema 1a

[0202] Jedinjenja Formule 15 mogu alternativno da se izrade reakcijom kristalizacije između Jedinjenja Formule B, gde su R1, R3i R4kako je definisano za Formulu (I) ili (IA) i jedinjenja Formule C (gvanidin karbonat), zagrevanjem smeše u prisustvu pogodne baze, na primer MeONa, u pogodnom rastvaraču, na primer MeOH. Jedinjenje Formule C (gvanidin karbonat) može da reaguje i kao reagens i kao baza. Preferirano, gvanidin karbonat (Formula C) reaguje i kao reagens i kao baza, rastvarač je etanol i reakcija se zagreva na 80 °C u toku noći.

[0203] Jedinjenja Formule B mogu da se izrade od Jedinjenja Formule A, gde su R1, R3i R4kako je definisano za Formulu (I) ili (IA), reakcijom formiranja enamina, na primer upotrebom DMF-DMA (N-dimetilformamid dimetil acetal) kao izvora za N.

[0204] Jedinjenja Formule A mogu da se dobiju pod standardnim uslovima izrade uree od Jedinjenja Formule 34, gde su R3i R4kako je definisano za Formulu (I) ili (IA), kao što je reakcija sa 1,1’-karbonildiimidazolom u prisustvu pogodne baze kao što je DIPEA koristeći kao rastvarač DCM, a nakon toga reakcijom odgovarajućeg R1, upotrebom pogodnog rastvarača, kao što je DCM na primer na RT. Preferirano, jedinjenje formule R1-C(O)Cl se doda u ohlađeni rastvor Jedinjenja Formule 34 i DMAP u smeši piridin/DCM i reaktivna smeša se nakon toga zagreva na 50 °C u toku noći.

4

Šema 2

[0205] Jedinjenja Formule (Ic-i), koja predstavljaju jedinjenja Formule (I) ili (IA) gde je A1CH, A2je N, R2je Ar kako je definisano za Formulu (I) ili (IA), R3i R4su nezavisno izabrani od vodonika, metil, metoksi i cijano grupe, R12je izabran od vodonika i metil grupe a R13je kako je definisano za Formulu (I) ili (IA), mogu da se izrade u skladu sa postupkom u Šemi 2.

[0206] Jedinjenja Formule (Ic-i) mogu da se dobiju redukcijom nitro grupe u amino grupu Jedinjenja Formule 29, gde su R3i R4nezavisno izabrani od vodonika, metil, metoksi i cijano grupe a R12je izabran od vodonika i metil grupe i Ar je kako je definisano za Formulu (I) ili (IA), upotrebom pogodnog redukcionog sredstva, a nakon toga reakcijom sa pogodnim reagensima tako da se uvede L1-R1grupa, gde su L1i R1kako je definisano za Formulu (I) ili (IA). Na primer, jedinjenja Formule 29 mogu da reaguju sa gvožđem u amonijum hloridu u pogodnom rastvaraču kao što je voda, na povišenoj temperaturi. Nakon toga može da se izvrši reakcija sa R1(L1)Cl, gde su L1i R1kako je definisano za Formulu (I) ili (IA), u prisustvu pogodne baze, u pogodnom rastvaraču, kao što je DCM:piridin, pri čemu je piridin i korastvarač i baza ili upotrebom baze kao što je Et3N u pogodnom rastvaraču, kao što je 1,2-dihloretan.

[0207] Na primer, kada je R1(L1)Cl = R1C(O)Cl, gde je R1kako je definisano za Formulu (I) ili (IA), reakcija može da se izvede u pogodnoj bazi kao što je dimetilaminpirimidin u piridinu, u pogodnom rastvaraču kao što je DCM, na povišenoj temperaturi ili alternativno, jedinjenja mogu da reaguju sa trifozgenom u pogodnom rastvaraču kao što je 1,2-dihloretan, a nakon toga reakcijom sa R1-H, na primer pirolidinom, u prisustvu pogodne baze kao što je Et3N.

[0208] R1(L1)Cl može da bude ili komercijalno raspoloživ ili može da se izradi po standardnim procedurama, na primer od R1C(O)OH, koji je isto tako ili raspoloživ na tržištu ili može da se izradi po standardnim procedurama.

[0209] Jedinjenja Formule 29 mogu da se dobiju reakcijom udvajanja između Jedinjenja Formule 27, gde su R3i R4nezavisno izabrani od vodonika, metil, metoksi i cijano grupe a R12je izabran od vodonika i metil grupe i jedinjenja R2-Y.

[0210] Jedinjenja Formule 29, gde je R2Ar, C4-C7heterocikloalkil, C5-C7heterocikloalkenil, NR5aR5bili X, mogu da se dobiju reakcijom Jedinjenja Formule 27, sa R2-Y, gde je R2Ar, C4-C7heterocikloalkil, C5-C7heterocikloalkenil NR5aR5bili X a Y je vodonik ili borna kiselina ili estar, na primer tetrafluoroborat.

[0211] Na primer, kada je R2-Y Ar-boratni estar, reakcija može da se izvrši u prisustvu pogodnog katalizatora na primer paladijum katalizatora kao što je tetrakis (trifenilfosfin)paladijum, sa pogodnom bazom, kao što je natrijum karbonat u pogodnom rastvaraču, kao što su DMF i voda, na povišenoj temperaturi.

[0212] Na primer, kada je R2-Y morfolin, pirolidin ili piperidin (Y je vodonik), reakcija može da se izvede posutpkom sonifikacije ili mikrotalasima.

[0213] Na primer, kada je R2-Y HNR5aR5b, reakcija može da se izvede reakcijom udvajanja u prisustvu paladijum sredstva kao što je tris(dibenzilidenaceton)-dipaladijum(0) i pogodne baze, kao što je litijum bis(trimetilsilil)amid i odgovarajućeg liganda, na primer paladijum(ii) fenetilamin hlorida.

[0214] Na primer, kada je R2-Y = X-H, reakcija sa Jedinjenjima Formule 27 može da se izvede reakcijom udvajanja, u prisustvu pogodnog paladijum sredstva, kao što je paladijum acetat.

[0215] Jedinjenja Formule 27 mogu da se dobiju od Jedinjenja Formule 26, gde su R3i R4nezavisno izabrani od vodonika, metil, metoksi i cijano grupe i R12je izabran od vodonika i metil grupe, tretiranjem Jedinjenja Formule 26 sa pogodnim sredstvom za brominaciju kao što je brom u sirćetnoj kiselini, u prisustvu katalizatora kao što je natrijum acetat ili na sličan način tretiranjem sa pogodnim sredstvom za hlorinaciju ili sredstvom za jodinaciju, po želji.

[0216] Jedinjenja Formule 26 mogu da se izrade od Jedinjenja Formule 24, gde su R3i R4nezavisno izabrani od vodonika, metil, metoksi i cijano grupe i R12je izabran od vodonika i metil grupe. Jedinjenja Formule 24 mogu da reaguju sa 2-brom-1,1-dietoksi-etanom (Jedinjenje 25) u prisustvu pogodne kiseline kao što je HBr, u pogodnom rastvaraču kao što je etanol, na povišenoj temperaturi.

[0217] Jedinjenja Formule 24, gde je R12vodonik, mogu da se dobiju reakcijom između Jedinjenja Formule 22, gde su R3i R4nezavisno izabrani od vodonika, metil, metoksi i cijano grupe i Jedinjenje 23.

[0218] Jedinjenja Formule 22 mogu da budu komercijalno raspoloživa ili sintetisana u skladu sa standardnim procedurama. Na primer, jedinjenja Formule 22, gde su R3ili R4izabrani od broma, metil, metoksi i cijano grupe mogu da se izrade od Jedinjenja Formule 22a, reakcijom dibrominacije kako su opisali K., Shoji i saradnici Bull. Chem. Soc. Japan, 1987, 60(7), 2667.

[0219] Jedinjenja Formule 24, gde je R12metil grupa, mogu da se izrade od Jedinjenja Formule A, gde su R3i R4nezavisno izabrani od vodonika, metil, metoksi i cijano grupe. Jedinjenje 23 može da reaguje sa Jedinjenjima Formule A u pogodnom rastvaraču, na primer EtOH i vodi, na primer kako su opisali Jonge, I. de i saradnici, Australian Journal of Chemistry, 1987, 40 (12), 1979 - 1988.

[0220] Jedinjenja Formule A mogu da se izrade od Jedinjenja Formule Z, gde su R3i R4nezavisno izabrani od vodonika, metil, metoksi i cijano grupe, na primer tretiranjem Jedinjenja Formule Z sa natrijum perjodatom, u prisustvu katalizatora kao što je C31H29Br2N3Ru*CH2Cl2, u pogodnom rastvaraču kao što su i voda i acetonitril, na primer

4

kako su opisali Bera, J.K. i saradnici, Journal of American Chemical Society, 2014 , 136 (40), 13987-13990.

[0221] Jedinjenja Formule Z mogu da budu komercijalno raspoloživa ili da se izrade u skladu sa standardnim procedurama.

Šema 3

[0222] Jedinjenja Formule (Ic-ii), koja su jedinjenja Formule (I) ili (IA) gde je A1CH, A2je N i R2, R3, R4R12i R13su kako je definisano za Formulu (I) ili (IA), mogu da se izrade u skladu sa procedurom u Šemi 3.

[0223] Stručnjaku sa iskustvom će biti veoma jasno da Šema 3 opisuje u suštini iste sintetičke faze kao u Šemi 2, ali različitim redosledom i da zbog toga u Šemi 3 mogu da se koriste isti uslovi reakcije za svaku od ekvivalentnih faza sinteze kako je dato u Šemi 2.

[0224] Jedinjenja Formule 32, gde je R12halo, mogu da se izrade reakcijom halogenacije Jedinjenja Formule 32, gde je R12vodonik. Na primer, za izradu Jedinjenja Formule 32, gde je R12Br, može da se izvrši reakcija brominacije upotrebom sredstva za brominaciju, kao što je N-bromosukcinimid, u pogodnom rastvaraču, kao što je DMF.

[0225] Primeri zaštitnih grupa koje mogu da se koriste u postupcima sinteze koji su ovde opisani i način njihovog uklanjanja mogu da se nađu u T. W. Greene Protective Groups in Organic Synthesis, 4th Edition, J. Wiley and Sons, 2006.

[0226] Za bilo koju prethodno opisanu reakciju ili procese, mogu da se koriste uobičajeni postupci zagrevanja i hlađenja, na primer uljana kupatila sa regulisanom temperaturom ili vrući blokovi sa regulisanom temperaturom i led/so kupatila ili suvi led/aceton kupatila, tim redom. Mogu da se koriste uobičajeni postupci za izdvajanje, na primer ekstrakcija iz ili u vodene ili ne-vodene rastvarače. Mogu da se primene uobičajeni postupci sušenja organskih rastvarača, rastvora ili ekstrakta, kao što je mućkanje sa anhidrovanim magnizijum sulfatom ili anhidrovanim natrijum sulfatom ili propuštanjem kroz hidrofobni frit. Kada je potrebno, mogu da se koriste uobičajeni postupci prečišćavanja, na primer kristalizacija i hromatografija, na primer hromatografija na silika gelu ili reverzno fazna hromatografija. Kristalizacija može da se izvrši pomoću uobičajenih rastvarača kao što su etil acetat, metanol, etanol ili butanol ili njihove vodene smeše. Jasno je da vreme i temperatura specifične reakcije može obično da se odredi tehnikama praćenja reakcije, na primer hromatografijom na tankom sloju i LC-MS.

[0227] Pojedinačni izomerni oblici jedinjenja iz pronalaska mogu da se izrade kao pojedinačni izomeri koristeći uobičajene procedure kao što su frakciona kristalizacija diastereoizomernih derivata ili asimetrična visoko efikasna tečna hromatografija (asimetrična HPLC).

[0228] Apsolutna stereohemija jedinjenja može da se odredi uobičajenim postupcima kao što je kristalografija X-zracima.

Postupci upotrebe

[0229] Stručnjaku sa iskustvom u tehnici će biti jasno da se ovde date reference za tretman

4

odnose na tretman utvrđenih stanja. Međutim, jedinjenja Formule (I) ili (IA) i njihove farmaceutski prihvatljive soli mogu, u zavisnosti od uslova, takođe da budu korisna u prevenciji (profilaksi) određenih bolesti. Prema tome, u jednom ostvarenju, ovde je obezbeđen tretman ili prevencija bolesti. U narednom ostvarenju, obezbeđen je tretman bolesti. U narednom ostvarenju, obezbeđena je prevencija bolesti.

[0230] Prema tome, kao naredni aspekt iz pronalaska obezbeđena je upotreba jedinjenja Formule (I) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli u terapiji.

[0231] Jasno je da kada se jedinjenje Formule (I) ili (IA) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so koristi u terapiji, ono se koristi kao aktivno terapeutsko sredstvo.

[0232] Stoga je takođe obezbeđeno jedinjenje Formule (I) ili (IA) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu u tretmanu ili prevenciji parazitske bolesti, na primer Šagasove bolesti, humane afričke tripanozomijaze, životinjske afričke tripanozomijaze ili lajšmanijaze, posebno visceralne lajšmanijaze. Ovde je dalje obezbeđeno jedinjenje Formule (I) ili (IA) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu u tretmanu ili prevenciji Šagasove bolesti. Ovde je dalje obezbeđeno jedinjenje Formule (I) ili (IA) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu u tretmanu lajšmanijaze. Ovde je dalje obezbeđeno jedinjenje Formule (I) ili (IA) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu u tretmanu ili prevenciji visceralne lajšmanijaze. Ovde je dalje obezbeđeno jedinjenje Formule (I) ili (IA) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu u tretmanu ili prevenciji humane afričke tripanozomijaze.

[0233] Ovde je dalje obezbeđena upotreba jedinjenja Formule (I) ili (IA) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli u proizvodnji medikamenta za tretman ili prevenciju parazitske bolesti, na primer Šagasove bolesti, humane afričke tripanozomijaze, životinjske afričke tripanozomijaze ili lajšmanijaze, posebno visceralne lajšmanijaze. Takođe je obezbeđena upotreba jedinjenja Formule (I) ili (IA) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli u proizvodnji medikamenta za tretman ili prevenciju lajšmanijaze. Ovde je dalje obezbeđena upotreba jedinjenja Formule (I) ili (IA) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli u proizvodnji medikamenta za tretman ili prevenciju visceralne lajšmanijaze. Ovde je dalje obezbeđena upotreba jedinjenja Formule (I) ili (IA) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli u proizvodnji medikamenta za tretman ili prevenciju Šagasove bolesti. Ovde je dalje obezbeđena upotreba jedinjenja Formule (I) ili (IA) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli u proizvodnji medikamenta za tretman ili prevenciju humane afričke tripanozomijaze.

[0234] Ovde je dalje obezbeđen postupak za tretman ili prevenciju parazitske bolesti, na

4

primer Šagasove bolesti, humane afričke tripanozomijaze, životinjske afričke tripanozomijaze ili lajšmanijaze, posebno visceralne lajšmanijaze, pri čemu postupak uključuje primenu terapeutski efektivne količine jedinjenje Formule (I) ili (IA) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli na humanom subjektu kome je to potrebno. Ovde je takođe obezbeđen postupak za tretman ili prevenciju lajšmanijaze, pri čemu postupak uključuje primenu terapeutski efektivne količine jedinjenje Formule (I) ili (IA) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli na humanom subjektu kome je to potrebno. Ovde je takođe obezbeđen postupak za tretman ili prevenciju visceralne lajšmanijaze, pri čemu postupak uključuje primenu terapeutski efektivne količine jedinjenje Formule (I) ili (IA) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli na humanom subjektu kome je to potrebno. Ovde je takođe obezbeđen postupak za tretman ili prevenciju Šagasove bolesti, pri čemu postupak uključuje primenu terapeutski efektivne količine jedinjenje Formule (I) ili (IA) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli na humanom subjektu kome je to potrebno. Ovde je takođe obezbeđen postupak za tretman ili prevenciju humane afričke tripanozomijaze, pri čemu postupak uključuje primenu terapeutski efektivne količine jedinjenje Formule (I) ili (IA) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli na humanom subjektu kome je to potrebno.

[0235] Ovde je takođe obezbeđen N-(4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamid ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu u tretmanu ili prevenciji parazitske bolesti, na primer Šagasove bolesti, humane afričke tripanozomijaze, životinjske afričke tripanozomijaze ili lajšmanijaze, posebno visceralne lajšmanijaze. Ovde je dalje obezbeđen N-(4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamid ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu u tretmanu ili prevenciji Šagasove bolesti. Ovde je dalje obezbeđen N-(4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamid ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu u tretmanu ili prevenciji humane afričke tripanozomijaze. Ovde je dalje obezbeđen N-(4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamid ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu u tretmanu ili prevenciji lajšmanijaze. Ovde je dalje obezbeđen N-(4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamid ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu u tretmanu ili prevenciji visceralne lajšmanijaze.

[0236] Ovde je dalje obezbeđena upotreba N-(4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida ili njegove farmaceutski prihvatljive soli u proizvodnji medikamenta za tretman ili prevenciju parazitske bolesti, na primer Šagasove bolesti, humane

4

afričke tripanozomijaze, životinjske afričke tripanozomijaze ili lajšmanijaze, posebno visceralne lajšmanijaze. Ovde je dalje obezbeđena upotreba N-(4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida ili njegove farmaceutski prihvatljive soli u proizvodnji medikamenta za tretman ili prevenciju Šagasove bolesti. Ovde je dalje obezbeđena upotreba N-(4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida ili njegove farmaceutski prihvatljive soli u proizvodnji medikamenta za tretman ili prevenciju humane afričke tripanozomijaze. Ovde je dalje obezbeđena upotreba N-(4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida ili njegove farmaceutski prihvatljive soli u proizvodnji medikamenta za tretman ili prevenciju lajšmanijaze. Ovde je dalje obezbeđena upotreba N-(4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida ili njegove farmaceutski prihvatljive soli u proizvodnji medikamenta za tretman ili prevenciju visceralne lajšmanijaze.

[0237] Ovde je dalje obezbeđen postupak za tretman ili prevenciju parazitske bolesti, na primer Šagasove bolesti, humane afričke tripanozomijaze, životinjske afričke tripanozomijaze ili lajšmanijaze, posebno visceralne lajšmanijaze, pri čemu postupak uključuje primenu terapeutski efektivne količine N-(4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida ili njegove farmaceutski prihvatljive soli na humanom subjektu kome je to potrebno. Ovde je dalje obezbeđen postupak za tretman ili prevenciju Šagasove bolesti, pri čemu postupak uključuje primenu terapeutski efektivne količine N-(4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida ili njegove farmaceutski prihvatljive soli na humanom subjektu kome je to potrebno. Ovde je dalje obezbeđen postupak za tretman ili prevenciju humane afričke tripanozomijaze pri čemu postupak uključuje primenu terapeutski efektivne količine N-(4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida ili njegove farmaceutski prihvatljive soli na humanom subjektu kome je to potrebno. Ovde je dalje obezbeđen postupak za tretman ili prevenciju lajšmanijaze, pri čemu postupak uključuje primenu terapeutski efektivne količine N-(4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida ili njegove farmaceutski prihvatljive soli na humanom subjektu kome je to potrebno. Ovde je dalje obezbeđen postupak za tretman ili prevenciju visceralne lajšmanijaze, pri čemu postupak uključuje primenu terapeutski efektivne količine N-(4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida ili njegove farmaceutski prihvatljive soli na humanom subjektu kome je to potrebno.

4

Kompozicije i formulacije

[0238] Mada je moguće da, za upotrebu u otkrivenim postupcima, jedinjenje Formule (I) ili (IA) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, može da se primeni kao samostalna supstanca, obično je poželjnije da je prisutno kao aktivni sastojak u farmaceutskoj formulaciji, na primer, gde je sredstvo izmešano sa najmanje jednim farmaceutski prihvatljivim nosačem izabranim u zavisnosti od nameravanog načina primene i u skladu sa standardnom farmaceutskom praksom.

[0239] Naziv "nosač" se odnosi na razblaživač, podlogu i/ili vehikulum sa kojim se primenjuje aktivno jedinjenje. Farmceutske kompozicije iz pronalaska mogu da sadrže kombinacije jednog ili više nosača. Ovakvi farmaceutski nosači mogu da budu sterilne tečnosti, kao što su voda, rastvori soli, vodeni rastvori dekstroze, vodeni rastvori glicerola i ulja, uključujući ulja od vazelina, životinja, biljaka ili ulja sintetičkog porekla, kao što su kikirikijevo ulje, sojino ulje, mineralno ulje, susamovo ulje i slično. Voda ili sterilni vodeni rastvori soli i vodeni rastvori dekstroze i glicerola se preferirano koriste kao nosači, posebno za injektabilne rastvore. Pogodni farmaceutski nosači su opisani u "Remington’s Pharmaceutical Sciences" od strane E.W. Martin, 18th Edition. Izbor farmaceutskog nosača zavisi od nameravanog načina primene i standardne farmaceutske prakse. Farmaceutske kompozicije mogu pored nosača, da uključe bilo koje vezivno sredstvo(a), lubrikans(e), sredstvo(a) za suspendovanje, sredstvo(a) za oblaganje i/ili sredstvo(a) za solubilizaciju.

[0240] Kako se ovde koristi "farmaceutski prihvatljiv" se odnosi na soli, molekularne entitete i druge sastojke kompozicija koji su generalno fiziološki prihvatljivi i koji obično ne dovode do neželjenih reakcija kada se primene na sisaru (na primer ljudima). Prikladno je, kako se ovde koristi, da naziv "farmaceutski prihvatljiv" označava sredstvo odobreno od strane regulatorne agencije federacije ili vlade države za upotrebu na sisarima a još preciznije na ljudima ili koja su navedena u U.S. Farmakopeji ili drugim generalno poznatim tekstovima, na primer, Međunarodna unija za čistu i primenjenu hemiju (IUPAC) Handbook of Pharmaceutical Salts, 2011 Edition.

[0241] "Farmaceutski prihvatljiva podloga" označava podlogu koja je pogodna za izradu farmaceutske kompozicije koja je generalno bezbedna, netoksična i ni biološki ni na bilo koji drugi način nepoželjna i uključuje podlogu koja je prihvatljiva za veterinarsku upotrebu kao i za humanu farmaceutsku upotrebu. Kako se koristi u ovoj prijavi "farmaceutski prihvatljiva

4

podloga" obuhvata i jednu i više ovakvih podloga.

[0242] Jedinjenja iz pronalaska mogu da budu formulisana za primenu na bilo koji uobičajeni način za upotrebu u humanoj ili veterinarskoj medicini, po analogiji sa formulacijama antibaktericida, kao što su anti-tuberkulozna sredstva ili formulacija antimalaričnih sredstava.

[0243] Jedinjenja iz pronalaska će normalno, ali ne neophodno, da budu formulisana u farmaceutske kompozicije pre primene na pacijentu. U jednom aspektu, pronalazak se odnosi na farmaceutsku kompoziciju koja uključuje jedinjenje Formule (I) ili (IA) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so. U još jednom aspektu, pronalazak se odnosi na farmaceutsku kompoziciju koja uključuje jedinjenje Formule (I) ili (IA) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, zajedno sa jednim farmaceutski prihvatljivim nosačem. Nosač mora da bude "prihvatljiv" u smislu da je kompatibilan sa drugim sastojcima formulacije i da nije štetan za primaoca.

[0244] Terapeutski efektivna količina jedinjenja iz ovog pronalaska može da se odredi postupcima dobro poznatim u tehnici. Terapeutski efektivna količina će da zavisi od godina starosti i od opšteg fiziološkog stanja subjekta, načina primene i primenjene farmaceutske formulacije. Terapeutske doze su generalno između približno 1 i 2000 mg/dan, na primer između približno 500 i 2000 mg/dan. Dnevna doza, ukoliko se primenjuje za tretman ljudi će da bude u rasponu od 1 do 2000 mg, i može da se primeni u jednoj ili dve dnevne doze, na primer u zavisnosti od načina primene i stanja subjekta. Kada kompozicija uključuje jediničnu dozu, svaka jedinica sadrži 1 mg do 2 g aktivnog sastojka. Kada je dozni oblik tableta, ukupna težina tablete je obično 1000mg ili manje.

[0245] Generalno, odgovarajuća doza za životinje će da bude u rasponu od približno 0.01 do približno 50 mg/kg telesne težine dnevno. Jedinjenje se obično primenjuje u jediničnom doznom obliku koji na primer sadrži 0.01 do 50 mg/kg aktivnog sastojka. Ove doze su zasnovane na prosečnoj težini goveda koja je od približno 20kg do 1500kg i još preciznije od 600kg do 800kg.

[0246] Ovaj pronalazak se dalje odnosi na farmaceutsku kompoziciju koja uključuje jedinjenje Formule (I) ili (IA) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so<.>

[0247] Ovaj pronalazak se dalje odnosi na farmaceutsku kompoziciju za tretman parazitske bolesti, na primer Šagasove bolesti, humane Afričke Tripanozomijaze, životinjske afričke tripanozomijaze ili lajšmanijaze, posebno visceralne lajšmanijaze, i uključuje jedinjenje Formule (I) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so.

[0248] Ovaj pronalazak se čak dalje odnosi na farmaceutsku kompoziciju koja uključuje jedinjenje Formule (I) ili (IA) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so zajedno sa najmanje jednim farmaceutski prihvatljivim nosačem.

[0249] Ovaj pronalazak se čak dalje odnosi na farmaceutsku kompoziciju koja uključuje jedinjenje Formule (I) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i b) farmaceutski prihvatljiv nosač.

[0250] U jednom ostvarenju, data je farmaceutska kompozicija koja uključuje a) N-(4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamid ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i b) farmaceutski prihvatljiv nosač.

[0251] Jasno je da farmaceutske kompozicije za upotrebu u skladu sa ovim pronalaskom mogu da budu u obliku za oralnu, parenteralnu, transdermalnu, inhalacionu, sublingvalnu, topičnu, implantnu, nazalnu ili enteralnu primenu (ili drugu mukozalnu primenu), u obliku suspenzija, kapsula ili tableta, koje mogu da budu formulisane na uobičajeni način upotrebom jednog ili više (najmanje jednog) farmaceutski prihvatljivog nosača ili podloga. U jednom aspektu, farmaceutska kompozicija je formulisana za oralnu primenu.

[0252] Farmaceutske kompozcije iz pronalaska uključuju one koje su u obliku prilagođenom za oralnu upotrebu na sisarima, uključujući ljude.

[0253] Farmaceutske kompozcije iz pronalaska uključuju one koje su u obliku prilagođenom za oralnu upotrebu i koje mogu da se koriste za tretman parazitskih bolesti, na primer Šagasove bolesti, humane Afričke Tripanozomijaze, životinjske afričke tripanozomijaze ili lajšmanijaze, posebno visceralne lajšmanijaze, na sisarima, uključujući ljude.

[0254] Jedinjenje iz ovog pronalaska može da se primeni za aplikacije sa tretnutnim, odloženim, modifikovanim, kontinuiranim, pulsiranim ili kontrolisanim oslobađanjem.

[0255] Kompozicija može da bude formulisana za primenu bilo kojim uobičajenim načinom. Za tretman parazitske bolesti, na primer Šagasove bolesti, humane Afričke Tripanozomijaze, životinjske afričke tripanozomijaze ili lajšmanijaze, posebno visceralne lajšmanijaze, kompozicije mogu da budu u obliku tableta, kapsula, praškova, granula, lozengi, aerosola ili tečnih preparata za oralnu upotrebu.

[0256] Tablete i kapsule za oralnu primenu mogu da budu u jediničnom doznom obliku i mogu da sadrže uobičajene podloge kao što su vezivna sredstva, na primer, sirup, akacija, želatin, sorbitol, tragakanta ili polivinilpirolidon; punioci, na primer laktoza, šećer, kukuruzni skrob, kalcijum fosfat, sorbitol ili glicin; lubrikansi za tabletiranje, na primer magnezijum stearat, talk, polietilen glikol ili silicijum; dezintegratori, na primer krompirov skrob; ili prihvatljiva sredstva za vlaženje kao što je natrijum lauril sulfat. Tablete mogu da budu

1

obložene u skladu sa postupcima dobro poznatim u noramlnoj farmaceutskoj praksi. Tečni oralni preparati mogu da budu u obliku, na primer, vodenih ili uljanih suspenzija, rastvora, emulzija, sirupa ili eliksira ili mogu da budu kao suvi produkti za rekonstituciju sa vodom ili drugim pogodnim vehikulumom pre upotrebe. Ovakvi tečni preparati mogu da sadrže uobičajene aditive kao što su sredstva za suspendovanje, na primer, sorbitol, metil celuloza, sirup glukoze, želatin, hidroksietil celuloza, karboksimetil celuloza, aluminijum stearatni gel ili hidrogenizovane jestive masti, sredstva za emulgovanje, na primer lecitin, sorbitan monooleat ili akacija; nevodene vehikulume (koji mogu da uključe jestiva ulja), na primer bademovo ulje, uljane estre kao što su glicerin, propilen glikol ili etil alkohol; konzervanse, na primer metil ili propil p-hidroksi-benzoat ili sorbinska kiselina, i ukoliko je potrebno uobičajena sredstva za bojenje i korigovanje ukusa.

[0257] Jedinjenje Formule (I) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, može da bude samostalno terapeutsko sredstvo u kompozicijama iz pronalaska ili može da se nalazi u formulaciji u kombinaciji sa jednim ili više (najmanje jednim) dodatnim terapeutskim sredstvom.

[0258] Prema tome, u narednom aspektu, pronalazak obezbeđuje kombinaciju koja uključuje (a) jedinjenje Formule (I) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i (b) najmanje jedno dodatno terapeutsko sredstvo. Kombinacija opciono dalje uključuje najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv nosač. U jednom aspektu pronalaska ovde je data farmaceutska kompozicija koja uključuje jedinjenje Formule (I) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, zajedno sa najmanje jednim farmaceutski prihvatljivim nosačem i jednim ili više (najmanje jednim) dodatnim farmaceutskim sredstvom.

[0259] Primeri ovakvog jednog ili više (najmanje jednog) dodatnog terapeutskog sredstva su anti-lajšmanijska sredstva, uključujući, ali se ne ograničavajući samo na, miltefosin, paromomicin, natrijum stibuglukonat, meglumin antimonijat, amfotericin B deoksiholat ili lipozomalni amfotericin B. U jednom aspektu pronalaska za oralni tretman dodatno terapeutsko sredstvo je miltefosin. Ovakvu hemoterapiju određuje ordinirajući lekar svojom procenom korišćenjem preferiranih kombinacija lekova. Pored prethodno pomenutog, buduća terapeutska sredstva protiv lajšmanije nastala iz kliničkih studija mogu takođe da se koriste kao jedno ili više (najmanje jedno) dodatno terapeutsko sredstvo u kombinaciji sa jedinjenjem Formule (I) ili (IA).

[0260] U još jednom aspektu, pronalazak daje kombinaciju koja uključuje jedinjenje Formule (I) ili (IA) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, zajedno sa jednim ili više (najmanje

2

jednim) dodatnim terapeutskim sredstvom, kao što su anti-parazitsko sredstvo, anti-AIDS ili anti-HIV sredstvo ili anti-TB sredstvo.

[0261] U narednom aspektu, jedno ili više (najmanje jedno) dodatno terapeutsko sredstvo je, na primer, sredstvo korisno za tretman parazitske bolesti kod sisara, terapeutska vakcina, anti-TB sredstvo ili sredstvo za tretman HIV / AIDS.

[0262] Jedinjenja Formule (I) ili (IA) ili njihova farmaceutski prihvatljiva so i drugo terapeutsko sredstvo(a) mogu da se koriste u kombinaciji primenom istovremeno u jediničnoj farmaceutskoj kompoziciji koja uključuje oba sredstva. Alternativno, kombinacija može da se primeni odvojeno u odvojenim farmaceutskim kompozicijama, od kojih svaka po redu uključuje jedno od sredstava, pri čemu, na primer, jedinjenje Formule (I) ili (IA) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so se primenjuje prvo a drugo sredstvo kao drugo i vice versa.

Ovakva primena po redu može da bude vremenski bliska (na primer istovremena) ili u velikim vremenskim razmacima. Na primer, primena sredstva nekoliko minuta ili nekoliko desetina minuta nakon primene prvog sredstva i primena drugog sredstva nekoliko sati do nekoliko dana nakon primene prvog sredstva su obuhvaćene okvirom ovog pronalaska, pri čemu vremenski razmak nije ograničen. Na primer, jedno sredstvo može da se primeni jedanput dnevno a drugo sredstvo može da se primeni dva ili tri puta dnevno, ili jedno sredstvo može da se primeni jedanput nedeljno a drugo sredstvo može da se primeni jedanput dnevno.

[0263] Kada se primenjuju po redu, ili jedinjenje iz ovog pronalaska ili jedno ili više (najmanje jedno) dodatno terapeutsko sredstvo može da se primeni prvo. Kada je primena istovremena, kombinacija može da se primeni ili u istoj ili u različitoj farmaceutskoj kompoziciji. Kada se kombinuju u istoj formulaciji, jasno je da jedinjenje i sredstva moraju da budu stabilna i kompatibilna međusobno i sa srugim komponentama formulacije. Kada su formulisani odvojeno mogu da budu u bilo kojoj uobičajenoj formulaciji, na takav način koji je u tehnici pogodan i poznat za takva jedinjenja.

[0264] U toku režima tretmana, jasno je da primena svakog sredstva u kombinaciji može da se ponovi jedanput ili više puta (najmanje jedanput).

[0265] Osim toga, sredstva mogu da se primene u istom ili različitim doznim oblicima, na primer jedno sredstvo može da se primeni topično a drugo jedinjenje može da se primeni oralno. Pogodno je da se oba sredstva primene oralno.

[0266] Kombinacije mogu da budu u obliku kombinovanog kita. Pod nazivom "kombinovani kit" ili "komplet delova" kako se ovde koristi označava farmaceutsku kompoziciju ili kompozicije koje se koriste za primenu kombinacije u skladu sa pronalaskom. Kada se sastojci kombinacije primenjuju istovremeno, kit kombinacije može da sadrži sredstva u jednoj farmaceutskoj kompoziciji kao što je tableta ili u odvojenim farmaceutskim kompozicijama. Kada se sredstva ne primenjuju istovremeno, kit kombinacije će da sadrži svako sredstvo u odvojenoj farmaceutskoj kompoziciji ili u pojedinačnom pakovanju ili u odvojenim farmaceutskim kompozicijama u odvojenim pakovanjima. Kit kombinacije može takođe da sadrži uputstva, kao što su uputstva za doziranje i primenu. Ovakva uputstva za doze i primenu mogu da budu namenjena doktoru, na primer oznaka leka ili mogu da budu vrsta koju daje doktor, kao što su uputstva za pacijenta.

[0267] U jednom aspektu, jedno ili više (najmanje jedno) dodatno terapeutsko sredstvo je terapeutska vakcina. Jedinjenje Formule (I) ili (IA) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, može prema tome da se primeni zajedno sa vakcinacijom protiv parazitske infekcije.

Postojeće veterinarske vakcine za lajšmanijazu uključuju CaniLeish i Leishmune.

[0268] Jedinjenje Formule (I) ili (IA) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, mogu ili i) da se primene na pojedincu koji je prethodno vakcinisan protiv parazitske infekcije; ii) primene na pojedincu koji je naknadno vakcinisan protiv parazitske infekcije; ili iii) može da se primeni zajedno sa vakcinom protiv parazitske infekcije, ili primenom jedinjenja iz pronalaska i vakcine zajedno u istom doznom obliku ili zajedničkom primenom jedinjenja iz pronalaska i vakcine u odvojenim doznim oblicima.

[0269] Kada se jedinjenje Formule (I) ili (IA) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so koristi u kombinaciji sa jednim ili više (najmanje jednim) dodatnim terapeutskim sredstvom, doza jedinjenja ili sredstva može da se razlikuje od doze kada se jedinjenje ili sredstvo koristi samo. Odgovarajuće doze će da budu lako prepoznate od stručnjaka sa iskustvom u tehnici. Jasno je da će količina jedinjenja iz pronalaska i jednog ili više (najmanje jednog) dodatnog teraputskog sredstva potrebnog za upotrebu u tretmanu da vairira u zavisnosti od prirode stanja koje se tretira i starosnog doba i stanja pacijenta i da će u krajnjoj liniji zavisiti od odluke ordinirajućeg lekara ili veterinara.

Skraćenice

[0270] U opisu pronalaska, hemijski elementi su označeni u skladu sa Periodnim sistemom elemenata. Skraćenice i simboli koji su ovde korišćeni su u skladu sa uobičajenom upotrebom ovakvih skraćenica i simbola od strane stručnjaka sa uobičajenim iskustvom u tehnici. Ovde

4

se koriste sledeće skraćenice:

AcOEt Etil acetat

AIDS Stečeni imuno deficijentni sindrom

approx. približno

Bt 1, 2, 3-Benzotriazol

CDCl3Deuterisani hlorform

CLND Hemiluminiscentna detekcija azota

CO2Ugljen dioksid

Cy Cikloheksani

DAPI 4’,6-Diamidino-2-fenilindol

DAST Dietilaminosumpor trifluorid

DCE 1,2-dihloretan

DCM Dihlormetan

DIPEA Diizopropiletilamin

DMAP 4- Dimetilaminopiridin

DME 1,2-Dimetoksietan

DMEM Dulbekov modifikovani Eagle medijum

DMF N,N-Dimetilformamid

DMSO Dimetilsulfoksid

DMSO-d6Deuterisani dimetilsulfoksid

Et2O Dietil etar

EtOAc Etil acetat

EtOH Etanol

FBS serum fetusa govečeta

g gram

GFP Zeleni fluorescentni protein

h sat

H2O Voda

HCl hlorovodonična kiselina

HEPES 2-[4-(2-hidroksietil)piperazin-1-il]etansulfonska kiselina HIV Humani imunodeficijentni virus

HPLC visoko efikasna tečna hromatografija

Hz herc

KOH kalijum

L litar

LCMS tečna hromatografija/masena spektrometrija

M Mol

MeCN acetonitril

MEM 2-metoksietoksi metil

MeOH metanol

min Minut

mL Mililitar

mmol Milimol

nM Milimolarni

mM mikromolarni

MS Maseni spektar

N Normalna koncentracija

NaOH Natrijum hidroksid

NMR Nuklearna magnetna rezonantna spektroskopija

PBS Puferovana fosfatna so

PBS-A Albumin seruma govečeta

Pd(dppf)Cl2.DCM [1,1’-Bis(difenilfosfino)ferocen]dihlorpaladijum(II), kompleks sa dihlormetanom

PMA Forbol 12-miristat 13-acetat

RB Okruglo dno

RPMI Roswell Park Memorial Institut

rt/RT sobna temperatura

SM početni materijal

SNAP Biotage® kertridži za flash hromatografiju

THF Tetrahidrofuran

THP Tetrahidropiranil

THP-1 ćelijska linija humane akutne monocitne leukemije

TLC Hromatografija na tankom sloju

UPLC Ultra efikasna tečna hromatografija

XPhos 2-Dicikloheksilfosfino-2’,4’,6’-triizopropilbifenil

ksantfos 4,5-Bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilksanten

Primeri

[0271] Naredni primeri ilustruju pronalazak, kao vodič za stručnjake za izradu i upotrebu jedinjenja, kompozicija i postupaka iz pronalaska. Mada su opisana određena ostvarenja iz pronalaska, stručnjak sa iskukstvom će znati da mogu da se izvrše različite promene i modifikacije. U vezi sa izradama koje se izvode na sličan način ili opštim postupkom, druge izrade mogu da obuhvate promene u uobičajenim parametrima kao što su vreme, temperatura, uslovi dorade, manje promene u količini reagensa, itd.

[0272] Beleži se spektar protonske nuklearne magnetne rezonance (<1>H NMR) a hemijske promene se beleže u delovima po milion (ppm) u opadanju od unutrašnjeg standarda tetrametilsilana (TMS). Skraćenice za NMR vrednosti su kako sledi: s = singlet, d = dablet, t = triplet, q = kvartet, m = multiplet, dd = dablet dableta, dt = dablet tripleta, app = vidljiv, br = široko. Maseni spektri su dobijeni tehnikama elektrosprej (ES) jonizacije. Sve temperature su izražene u stepenima Celzijusa.

[0273] Reakcije koje uključuju hidride metala (uključujući natrijum hidrid) i organo-metalne reagense se izvode pod argonom ili azotom, ukoliko nije drugačije navedeno.

[0274] U narednim Međuproizvodima i Primerima, gde je identifikovana relativna stehiometrija jedinjenja, navedeni su i naziv i struktura jedinjenja.

[0275] U nekim od narednih Međuproizvoda i Primera, početni materijali su identifikovani u odnosu na druge Međuproizvode ili brojeve Primera. To ne znači da se korišćeni materijal (ili serija) dobijen od bilo kog određenog Međuproizvoda ili Primera upotrebljava u narednoj fazi koja je ovde data, već se koristi kao skraćenica koja označava naziv relevantnog jedinjenja .

[0276] Nazivi međuproizvoda i primera su dobijeni upotrebom programa za imenovanje jedinjenja u okviru "ChemBioDraw Ultra v12" ili "ACD Name Pro 6.02".

Međuproizvodi

Međuproizvod 1: 1,2-bis(1H-benzo[d][1,2,3]triazol-1-il)-1,2-dimorfolino-etan

[0277]

[0278] Benzotriazol (3.5 g, 29.4 mmol) i morfolin (2.57 ml, 29.4 mmol) se mešaju 5 min u etanolu (50 mL) na 20 °C. U reaktivnu smešu se doda glioksal (2.13 g, 14.7 mmol) i mešanje nastavi u toku noći na istoj temperaturi. Čvrsta supstanca se filtrira i ispere sa etanolom da se dobije 4.13 g traženog produkta (65% prinos)

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.43 (1H, d), 8.14 (2H, m), 7.64 (1H, m), 7.48 (2H, m), 7.25 (2H, m), 6.99 (1H, s,b), 3.66 (3H, m), 3.32 (1H, s,b), 3.11 (2H, s), 2.85 (5H, m), 2.56 (4H, s,b).

Međuproizvod 2: 2-brom-2-fenilacetaldehid

[0279]

[0280] U rastvor fenilacetaldehida (1g, 8.3 mmol) u DCM (3mL) se na -10 °C u kapima u toku 30 minuta dodaje rastvor broma (1.3g, 8.3 mmol) u DCM (3 mL). Dobijeni rastvor se ostavi da se zagreje na rt i meša na 50°C u toku noći. U ohlađenu smešu se doda vodeni rastvor NaHCO3i rastvor se ekstrahuje sa DCM. Organski sloj se suši (Na2SO4), filtrira i upari pod sniženim pritiskom da se dobije sirovi produkt (1.8 g) kao tečnost zelene boje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 9.59 (1H, d), 7.44 (5H, m), 5.28 (1H, d).

Međuproizvod 4: 4-(3-nitrofenil)pirimidin-2-amin

[0281]

[0282] Izmešani rastvor 2-amino-4-hlorpirimidina (Međuproizvod 3, ALDRICH, 1.0 g, 7.75 mmol) i 3-nitrofenilborne kiseline (ALDRICH, 1.2 g, 7.75 mmol) u 1,4-dioksanu (50mL) i zasićenom rastvoru NaHCO3(12.5mL) se degasira 10 minuta sa azotom. Nakon toga se doda Pd(PPh3)4(ALDRICH, 0.447 g, 0.38 mmol) i reakcija se zagreva na 95°C u toku noći.

Reakcija se ostavi da se ohladi na sobnu temperaturu i nakon toga sipa u vodu i EtOAc.

Organski sloj se izdvoji, suši (Na2SO4), filtrira i upari pod sniženim pritiskom. Flash hromatografijom ostatka (SNAP 55 KP-NH, 100% DCM) se dobija naslovljeno jedinjenje (1.5g, 93% prinos) kao žuta čvrsta supstanca.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.92 (1H, m), 8.51 (1H, dt), 8.41 (1H, d), 8.36 (1H, ddd), 7.81 (1H, t), 7.29 (1H,d), 6.87 (2H, s,b).

m/z= 217 (M+H)

Međuproizvod 5: 4-(2-fluor-5-nitrofenil)pirimidin-2-amin

[0283]

[0284] Izmešani rastvor 2-amino-4-hlorpirimidina (ALDRICH, 2.0g, 15.43 mmol) i 2-fluor-5-nitrofenil)borne kiseline (ALFA AESAR, 2.8g, 15.43 mmol) u 1,4-dioksanu (100mL) i zasićenom rastvoru NaHCO3(25mL) se degasira 10 minuta sa azotom. Nakon toga se doda Pd(PPh3)4(ALDRICH, 0.891g, 0.77 mmol) i reakcija se zagreva na 95°C u toku noći.

Organski sloj se izdvoji, suši (Na2SO4), filtrira i upari pod sniženim pritiskom. Flash hromatografijom ostatka (SNAP 55 KP-NH, 100% DCM) se dobija naslovljeno jedinjenje (2.4g, 66% prinos) kao žuta čvrsta supstanca.

m/z= 235 (M+H)

Međuproizvod 6: 7-(2-fluor-5-nitrofenil)-3-fenilimidazo[1,2-a]pirimidin

[0285]

[0286] U izmešani rastvor 4-(2-fluor-5-nitrofenil)pirimidin-2-amina (Međuproizvod 5, 0.5 g, 2.3 mmol) u DCE (20mL) se doda 2-brom-2-fenilacetaldehid (Međuproizvod 2, 2.3 mmol). Dobijena reaktivna smeša se meša pod refluksom u toku noći. Smeša se upari pod sniženim pritiskom.

[0287] Hromatografijom ostatka (SNAP KP-Si 50g, 100% DCM) se dobija naslovljeno jedinjenje (0.4 g) sa niskim stepenom čistoće (45% po UPLC). Nečisti produkt se prečisti hromatografijom preko NH-modifikovanog silika gela (SNAP 28g, Cy/DCM, 95:5 - 0:100) da se dobije naslovljeno jedinjenje kao narandžasta čvrsta supstanca (0.105 g, 13% prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.20 (1H, d), 8.96 (1H, dd), 8.48 (1H, m), 8.16 (1H, s), 7.77 (3H, m), 7.61 (3H, m), 7.51 (1H, m).

m/z= 335 (M+H)

Međuproizvod 7: 7-(3-nitrofenil)-3-fenilimidazo[1,2-a]pirimidin

[0288]

[0289] U izmešanu suspenziju 4-(3-nitrofenil)pirimidin-2-amina (Međuproizvod 4, 0.500 g, 2.31 mmol) u CH3CN (20mL) se doda 2-brom-2-fenilacetaldehid (Međuproizvod 2, 2.31 mmol). Dobijena reaktivna smeša se meša 3h pod refluksom. UPLC proverom se pokazuje da je reakcijom izvršeno ~40% konverzije. Doda se još 2-brom-2-fenilacetaldehida

(2.31 mmol) i smeša se meša pod refluksom u toku noći. UPLC proverom se pokazuje da je reakcijom izvršeno ~40% konverzije. Smeša se upari pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatografijom preko NH-modifikovanog silika gela (SNAP 55g) uz eluiranje sa DCM da se dobije naslovljeno jedinjenje kao narandžasta čvrsta supstanca (0.165 g, 22% prinos).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.17 (1H, d), 9.06 (1H, m), 8.73 (1H, m), 8.41 (1H, m), 8.10 (1H, s), 7.90 (2H, m), 7.78 (2H, m), 7.61 (2H, m), 7.50 (1H, m).

m/z= 317 (M+H)

Međuproizvod 8: 3-(3-fenilimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)anilin

[0290]

[0291] U rastvor 7-(3-nitrofenil)-3-fenilimidazo[1,2-a]pirimidina (Međuproizvod 7, 0.165 g, 0.52mmol) u EtOH (3mL) se doda gvožđe (ALDRICH, 0.232 g, 4.16 mmol) a nakon toga rastvor amonijum hlorida (0.111 g, 2.08 mmol) u vodi (1 mL). Reaktivna smeša se ostavi da se zagreje na 75°C i meša 3h na toj temperaturi. Reaktivna smeša se ostavi da se ohladi na rt i propusti kroz separator faze. Rastvarači se uklone pod sniženim pritiskom da se dobije traženo jedinjenje kao žuta čvrsta supstanca (0.13 , 87% prinos).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.03 (1H, d), 7.99 (1H, s), 7.73 (2H, m), 7.53 (4H, m), 7.36 (1H, m), 7.21 (2H, m), 6.76 (1H, m) 5.37 (2H, s, b) m/z= 287 (M+H)

1

Međuproizvod 9: 4-fluor-3-(3-fenilimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)anilin

[0292]

[0293] U rastvor 7-(2-fluor-5-nitrofenil)-3-fenilimidazo[1,2-a]pirimidina (Međuproizvod 6, 0.105 g, 0.31 mmol) u etanolu (2.5 mL) se doda gvožđe (ALDRICH) a nakon toga rastvor amonijum hlorida (0.066 g, 1.24 mmol) u vodi (0.75 mL). Reaktivna smeša se ostavi da se zagreje na 75°C i meša 1h na toj temperaturi. UPLC proverom se pokazuje da je reakcija završena. Reaktivna smeša se ostavi da se ohladi na rt i dodaju se DCM i voda. Smeša se propusti kroz separator faze i organski deo se upari pod sniženim pritiskom da se dobije sirovi produkt (0.086 g, 91% prinos) koji se direktno koristi u sledećoj fazi.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.03 (1H, s), 7.76 (2H, m), 7.59 (2H, t), 7.48 (2H, m), 7.36 (1H, m), 7.06 (1H, m), 6.74 (1H, m), 5.25 (2H, s, b)

m/z= 305 (M+H)

Međuproizvod 10: 4-(7-(2-fluor-5-nitrofenil)imidazo[1,2-a]pirimidin-3-il)morfolin

[0294]

2

[0295] Smeša 4-(2-fluor-5-nitrofenil)pirimidin-2-amina (Međuproizvod 5, 0.5 g, 2.13 mmol), 1,2-bis(1H-benzo[d][1,2,3]triazol-1-il)-1,2-dimorfolinetana (Međuproizvod 1, 0.927 g, 2.13 mmol) i cink bromida (ALDRICH, 0.095 g, 0.42 mmol) se refluksuje u 1,2-dihloretanu u toku noći. Reaktivna smeša se nakon toga ohladi na rt. U rastvor se doda KOH (0.12 g)

i meša 30 minuta. Nakon toga se čvrsta supstanca izdvoji filtriranjem i ispere sa DCM.

Rastvarači se uklone pod sniženim pritiskom. Flash hromatografijom ostatka (SNAP KP-Si 50g, Cy/DCM, 100:0-0:100) se dobija naslovljeno jedinjenje (0.08 g, 10% prinos).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.90 (1H, dd), 8.85 (1H, d), 8.45 (1H, m), 7.73 (1H, m), 7.61 (2H, m), 3.85 (4H, m), 3.07 (4H, m).

m/z= 344 (M+H)

Međuproizvod 11: 4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)anilin

[0296]

[0297] U rastvor 4-(7-(2-fluor-5-nitrofenil)imidazo[1,2-a]pirimidin-3-il)morfolina (Međuproizvod 10, 0.080 g, 0.23 mmol) u etanolu (2.0 mL) se doda gvožđe (ALDRICH, 0.104 g, 1.8 mmol) a nakon toga rastvor amonijum hlorida (0.049 g, 0.92 mmol) u vodi (0.5 mL). Reaktivna smeša se ostavi da se zagreje na 75°C i meša 1h na toj temperaturi. UPLC proverom se pokazuje da je reakcija završena. Reaktivna smeša se ostavi da se ohladi na rt i dodaju se DCM i voda. Smeša se propusti kroz separator faze i organski deo se upari pod sniženim pritiskom da se dobije traženi sirovi produkt (0.080 g) koji se direktno koristi u sledećoj fazi. m/z= 314 (M+H)

Međuproizvod 12: 4-(7-(3-nitrofenil)imidazo[1,2-a]pirimidin-3-il)morfolin

[0299] 4-(3-Nitrofenil)pirimidin-2-amin (Međuproizvod 4, 0.1 g), 1,2-bis(1H-benzo[d][1,2,3]triazol-1-il)-1,2-dimorfolinetan (Međuproizvod 1, 0.2 g) i cink bromid (ALDRICH, 0.01 g) se suspenduju u 1,2-dihloretanu (3 mL) i smeša se mućka 3 sata na 100°C.

[0300] Smeša se ispere sa vodom, organska faza se suši i upari.

[0301] Sirovi proizvod se prečisti na KP-NH koloni uz eluiranje sa smešom cikloheksan/AcOEt 1:1, da se dobije traženo jedinjenje kao narandžasta čvrsta supstanca (0.07 g).

<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.99 (1H, m), 8.65 (1H, m), 8.43 (1H, d), 8.37 (1H, m), 7.73 (1H, t), 7.58 (1H, s), 7.46 (1H, d), 3.96 (4H, m), 3.13 (4H, m).

Međuproizvod 13: 3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)anilin

[0302]

[0303] U rastvor 4-(7-(3-nitrofenil)imidazo[1,2-a]pirimidin-3-il)morfolina (Međuproizvod 12, 0.07 g) u EtOH (5 mL) se doda gvožđe (ALDRICH, 0.092 g), nakon toga zasićeni rastvor NH4Cl (2 mL), nakon toga se smeša refluksuje. Nakon hlađenja na rt, smeša se filtrira preko

4

Celite ploče uz ispiranje sa MeOH; isparive supstance se upare a ostatak se razblaži sa AcOEt i ispere sa vodom. Organske faze se razdvoje, suše i upare, da se dobije traženo jedinjenje kao žuta čvrsta supstanca (0.04 g) koja se koristi u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.

<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.31 (1H, d), 7.67 (1H, m), 7.48 (1H, s), 7.46 (1H, m), 7.35 (1H, d), 7.29 (1H, m), 6.83 (1H, m), 3.93 (4H, m), 3.10 (4H, m).

m/z= 296 (M+H)

Međuproizvod 14 : 4-(5-amino-2-fluorofenil)pirimidin-2-amin

[0304]

[0305] Rastvor amonijum hlorida (3.29 g) u vodi (100 mL) se na sobnoj temperaturi doda u izmešanu suspenziju gvožđa u prahu (ALDRICH, 4.40 g) i 4-(2-fluor-5-nitrofenil)pirimidin-2-amina (Međuproizvod 5, 4.01 g) u etanolu (150 ml) i 1,4-dioksanu (150 mL). Dobijena smeša se zagreva 3 sata na 50 °C. Reaktivna smeša se ohladi na sobnu temperaturu, razblaži sa EtOAc (300 ml), filtrira kroz kratku Celite ploču i ispere sa velikom količinom EtOAc. Filtrat se delimično upari da se uklone organski rastvarači a nakon toga se ostatak razblaži sa vodom (100 mL) i pH podesi na pH8 sa rastvorom natrijum bikarbonata. Smeša se ekstrahuje sa dihlormetanom. Kombinovane organske faze se filtriraju kroz hidrofobni frit (separator faze) i upare pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatografijom na NH-modifikovanom silika gelu (SNAP 375) uz eluiranje sa EtOAc da se dobije traženi produkt (3.05 g) kao bledo žuta čvrsta supstanca.

Međuproizvod 15: N-(3-(2-aminopirimidin-4-il)-4-fluorofenil)pirolidin-1-karboksamid

[0306]

[0307] Pirolidin-1-karbonil hlorid (ALDRICH, 1.91 ml) se na sobnoj temperaturi doda u izmešanu suspenziju 4-(5-amino-2-fluorofenil)pirimidin-2-amina (Međuproizvod 14, 3.53 g) i dimetilaminpirimidina (0.106 g) u piridinu (10 mL) i dihlormetanu (100 mL) i dobijena smeša se zagreva na refluksu u toku noći. Reaktivna smeša se prenese u bocu okruglog dna sa navojnim zatvaračem koja se zatvori i zagreva na 55 °C još 24 sata. Reaktivna smeša se neutrališe sa vodom (200 mL), pH se podesi na pH 7 i smeša se ekstrahuje sa dihlormetanom (4 x 250 mL). Kombinovane organske faze se isperu sa slanim rastvorom (100 mL), filtriraju kroz hidrofobni frit (separator faze) i upare pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti hromatografijom na silika gelu (SNAP340) uz eluiranje sa gradijentom 30-100% smeše rastvarača A u cikloheksanu, gde je smeša rastvarača A MeOH/EtOAc 5:95, da se dobije traženi produkt (2.05g) kao bela čvrsta supstanca.

[0308] Alternativno, Međuproizvod 15 može da se izradi sledećom reakcijom:

[0309] Smeša 4-hlorpirimidin-2-amina (1.5 g, 11.58 mmol), N-(4-fluor-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida (Međuproizvod 17, 5.52 g, 16.52 mmol) i 1 N vodenog rastvora NaHCO3(23.16 mL, 23.16 mmol) u 1,4-dioksanu (57.9 mL) se degasira sa azotom. Doda se tetrakis(trifenilfosfin)paladijum (0) (1.338 g, 1.158 mmol) i dobijena smeša zagreva 1.5 h na 90°C.

[0310] Reakcija se filtrira kroz celite ploču i eluira sa dihlormetanom (10x35 mL). Filtrat se ispere sa vodom (150 mL), vodeni sloj ekstrahuje sa dihlormetanom (2x50 mL) i organski slojevi se kombinuju, suše sa anhidrovanim Na2SO4, filtriraju i koncentruju do orandž polučvrste supstance. Ostatak precipitira sa dietil etrom i dobijena čvrsta supstanca se triturira sa 10% EtAcO/Et2O, 1:3 EtAcO/Et2O i 50% EtAcO/Et2O da se dobije traženi produkt kao bledo braon čvrsta supstanca (3.52 g).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.3- 8.30 (m, 2H), 8.04 (dd, J=7.1, 2.8 Hz, 1H), 7.66-7.62 (m, 1H), 7.18 (dd, J= 11.1, 8.8 Hz, 1H), 6.90 (dd, J= 5.1, 2.5 Hz, 1H), 6.68 (br s, 2H), 3.38-3.34 (m, 4H), 1.87- 1.83 (m, 4H).

m/z= 302 (M+H)

Međuproizvod 16: N-(3-brom-4-fluorofenil)pirolidin-1-karboksamid

[0311]

[0312] U rastvor 3-brom-4-fluoroanilina (5 g, 26.3 mmol) u dihlormetanu (150 mL) se dodaju N,N-diizopropiletil-amin (9.19 mL, 52.6 mmol) i 1,1’-karbonildiimidazol (8.53 g, 52.6 mmol). Dobijeni rastvor se meša na sobnoj temperaturi u toku noći. Doda se pirolidin (4.40 mL, 52.6 mmol) i reakcija se meša 2 h na sobnoj temperaturi. Doda se voda (malo zakiseljena) i slojevi se razdvoje. Vodeni sloj se ekstrahuje sa dihlormetanom (60 mL).

Organski slojevi se kombinuju, suše sa anhidrovanim Na2SO4, filtriraju i koncentruju. Ostatak se triturira sa dietil etrom da se dobije traženi produkt (6.57 g, bela čvrsta supstanca).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.28 (br s, 1H), 7.93- 7.71 (m, 1H), 7.53- 7.49 (m, 1H), 7.24 (, t, J= 8.8 Hz, 1H), 3.36-3.32 (m, 4H), 1.86- 1.83 (m, 4H).

Međuproizvod 17. N-(4-fluor-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2il)fenil)pirolidin-1-karboksamid

[0313]

[0314] Suspenzija N-(3-brom-4-fluorofenil)pirolidin-1-karboksamida (Međuproizvod 16,5 g, 17.41 mmol), bis(pinakolato)diborona (6.63 g, 26.1 mmol) i kalijum acetata (4.27 g, 43.5 mmol) u 1,4-dioksanu (62.4 mL) se degasira. Nakon toga se dodaju Xphos (0.697 g, 1.463 mmol) i Pd2(dba)3(0.399 g, 0.435 mmol). Nakon dva ciklusa sprovođenja vakuum/azot, suspenzija se zagreva na 90°C u toku noći. Reakcija se filtrira kroz celite ploču, eluira sa dihlormetanom i filtrat koncentruje pod vakuumom da se dobije crvena čvrasta supstanca (12.6 g). Ostatak se triturira sa dietil etrom (3x10 mL) da se dobije traženi produkt kao čvrsta supstanca krem boje (5.52 g).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.19 (br s, 1H), 7.75- 7.70 (m, 2H), 7.02- 6.97 (m, 1H), 3.36- 3.33 (m, 4H), 1.85- 1.82 (m, 4H), 1.29 (br s, 12H).

m/z= 335 (M+H)

Međuproizvod 24. 5-(3-nitrofenil)-1,2,4-triazin-3-amin.

[0315]

[0316] Izrađuje se u skladu sa postupkom koji su dali Kim, Junwon i saradnici, (Med. Chem. Lett., 2012, 3(8), 678-682) od 2,2-dibromo-1-(3-nitrofenil)etanona (5.50 g, 17.0 mmol, izrađenog dibrominacijom komercijalno raspoloživog 3-nitrofeniletanona u skladu sa postupkom koji su dali K., Shoji i saradnici Bull. Chem. Soc. Japan, 1987, 60(7), 2667), THF (100mL), morfolina (6.23 g, 71.5 mmol) i 1-aminogvanidin hidrogen karbonata (ALFA AESAR, 2.3 g, 17.0 mmol) da se dobije 5-(3-nitrofenil)-1,2,4-triazin-3-amin (2.11 g, 54% prinos) kao beli prašak.

<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 9.39 (1H, s), 8.99 (1H, s), 8.62 (1H, d, J = 7.9 Hz), 8.44 (1H, d, J = 8.3 Hz), 7.88 (1H, t, J = 7.8 Hz), 7.46 (2H, s br).

Međuproizvod 26. 3-(3-nitrofenil)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin.

[0317]

[0318] Izmešani rastvor 2-brom-1,1-dietoksi-etana (ALDRICH, 5.60 g, 28.4 mmol) u HBr (48% vodeni rastvor, 0.50 mL) i etanolu (20 mL) se meša 1 h na 90°C, ohladi, razblaži sa etanolom (10ml) i zaalkališe pažljivim dodavanjem čvrstog NaHCO3. Smeša se filtrira, ispere sa etanolom (10 mL), u filtrat se doda 5-(3-nitrofenil)-1,2,4-triazin-3-amin (međuproizvod 24, 1.30 g, 5.7 mmol) i rastvor meša u toku noći na 100°C. Reakcija se ohladi, rastvarač koncentruje pod vakuumom i sirovi materijal podeli između vate (50 mL) i EtOAc (50 mL). Organska faza se ispere sa slanim rastvorom (10 mL), filtrira kroz separator faze koji sadrži MgSO4i koncentruje pod vakuumom. Doda se dietiletar i dobijena čvrsta supstanca sakupi, ispere sa dietiletrom i suši pod vakuumom da se dobije 3-(3-nitrofenil)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin (1.33 g, 97% prinos) kao tamno mrki prašak.

<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 9.56 (1H, s), 9.01 (1H, s), 8.74 (1H, d, J = 7.8 Hz), 8.47 (1H, s), 8.43 (1H, d, J = 8.1 Hz), 8.10 (1H, s), 7.91 (1H, t, J = 7.9 Hz).

Međuproizvod 27. 7-brom-3-(3-nitrofenil)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin.

[0319]

[0320] Izmešani rastvor 3-(3-nitrofenil)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazina (Međuproizvod 26, 1.32 g, 5.5 mmol) u sirćetnoj kiselini (10 mL) se na rt tretira sa natrijum acetatom (6.73 g, 8.2 mmol) a nakon toga bromom (0.962 g, 6.0 mmol) i meša 1 sat. Reaktivna smeša se nakon toga u kapima doda u izmešanu smešu zasićenog vodenog rastvora NaHCO3(20

mL) i EtOAc (20 mL) i dobijena čvrsta supstanca sakupi, ispere sa vodom, EtOAc i suši pod vakuumom da se dobije 7- brom-3-(3-nitrofenil)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin (1.2 g, 65% prinos) kao tamno mrki prašak.

<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 9.68 (1H, s), 9.08 (1H, s), 8.76 (1H, d, J = 7.8 Hz), 8.45 (1H, d, J = 8.1 Hz), 8.24 (1H, s), 7.93 (1H, t, J = 7.9 Hz).

Međuproizvod 29. 3-(3-nitrofenil)-7-fenilimidazo[1,2-b][1,2,4]triazin.

[0321]

[0322] Rastvor 7-brom-3-(3-nitrofenil)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazina (Međuproizvod 27, 0.2 g, 0.59 mmol), 4,4,5,5-tetrametil-2-fenil-1,3,2-dioksaborolana (ALDRICH, 0.242 g, 1.19 mmol), tetrakis (trifenilfosfin)paladijuma (ALDRICH, 0.069 g, 0.06 mmol) i natrijum karbonata (0.188 g, 1.78 mmol) u DMF (3 mL) i vodi (1 mL) se meša u toku noći na 80°C u zatvorenoj epruveti. Reaktivna smeša se nakon toga sipa u dobro promešanu smešu vode (10 mL) i EtOAc (10 mL) i dobijena čvrsta supstanca sakupi, ispere sa vodom, EtOAc i suši pod vakuumom da se dobije 3-(3-nitrofenil)-7-fenil-imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin (0.18 g, 91% prinos) kao tamno mrki prašak.

<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 9.67 (1H, s), 9.10 (1H, s), 8.78 (1H, d, J = 7.9 Hz), 8.65 (1H, s), 8.44 (1H, d, J = 8.2 Hz), 8.21 (2H, d, J = 7.7 Hz), 7.94 (1H, t, J = 8.1 Hz), 7.60 (2H, t, J = 8.0 Hz), 7.47 (1H, t, J = 7.1 Hz).

Međuproizvod 30: 4-(3-(3-nitrofenil)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-7-il)morfolin.

[0323]

[0324] Rastvor 7-brom-3-(3-nitrofenil)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazina (Međuproizvod 27, 0.4 g, 1.25 mmol), morfolina (ALDRICH, 0.544 g, 6.25 mmol), cezijum karbonata (ADLRICH, 0.814 g, 2.5 mmol), tris(dibenzilidenaceton)dipaladijuma(0) (ALDRICH, 0.057 g, 0.063 mmol) i ksantfosa (ALDRICH, 0.072 g, 0.13 mmol) u 1,4-dioksanu (5 mL) se uz mešanje mikrotalasima zagreva 2 h na 150°C. Reaktivna smeša se nakon toga sipa u EtOAc (10 mL) i vodu (10 mL), organska faza se izdvoji, ispere sa slanim rastvorom (10 mL), suši (MgSO4) i upari. Hromatografijom (SiO2, 100% EtOAc) se dobija 4-[3-(3-nitrofenil)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-7-il]morfolin (0.075 g, 18% prinos) kao žuti prašak.

<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 9.45 (1H, s), 9.01 (1H, s), 8.69 (1H, d, J = 8.0 Hz), 8.39 (1H, d, J = 8.0 Hz), 7.89 (1H, t, J = 8.8 Hz), 7.72 (1H, s), 3.84 (4H, s br), 3.28 (4H, s br).

Međuproizvod 31. N-[3-(2,2-dibromoacetil)-4-fluor-fenil]pirolidin-1-karboksamid.

[0325]

[0326] Izmešani rastvor 1-(5-amino-2-fluor-fenil)etanona (APOLLO, 10.0 g, 65.3 mmol) i

1

DMAP (0.4 g, 3.3 mmol) u piridinu (100 mL) i DCM (400 mL) se u kapima na rt tretira sa pirolidin-1-karbonil hloridom (ALDRICH, 13.08 g, 97.9 mmol). Reakcija se meša 72 h na 50°C sve dok TLC (heksan/EtOAc 1:1) ne pokaže da je reakcija završena. Reakcija se nakon toga koncentruje pod vakuumom, preostalo gusto ulje razblaži sa DCM (400 mL), ispere sa slanim rastvorom (200 mL), nakon toga sa 1M rastvorom hlorovodonične kiseline (200 mL) i organska faza suši (MgSO4), koncentruje pod vakuumom da se dobije prašak koji se triturira sa 1:1 EtOAc:Et2O (200 mL), meša 12h na rt, nakon toga sakupi filtriranjem i suši da se dobije N-(3-acetil-4-fluoro-fenil)pirolidin-1-karboksamid (13.55 g, 82% prinos) kao bledoljubičasti prašak.

<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 8.37 (1H, s), 7.94 (1H, dd, J = 6.7 Hz, 2.8 Hz), 7.85-7.81 (1H, m), 7.23 (1H, dd, J = 10.9 Hz, 9.0 Hz), 3.38-3.34 (4H, m), 2.56 (3H, d, J = 4.6 Hz), 1.88-1.83 (4H, m).

[0327] U rastvor N-(3-acetil-4-fluor-fenil)pirolidin-1-karboksamida (1.70 g, 6.45 mmol) u THF (50 mL) se nakon toga u porcijama doda trimetilfenilamonijum tribromid (ALDRICH, 9.70 g, 25.8 mmol), reakcija meša 10 min na rt a nakon toga se reakcija zagreje na 60 °C i meša 12 h. Reaktivna smeša se nakon toga filtrira da se ukloni čvrsta supstanca, rastvarač ukloni pod vakuumom i ostatak prečisti hromatografijom (SiO2, 5-90% EtOAc/heptan) da se dobije N-[3-(2,2-dibromoacetil)-4-fluor-fenil]pirolidin-1-karboksamid (1.26 g, 46% prinos) kao svetlo braon čvrsta supstanca.

<1>H NMR (500 MHz, CDCl3): δ 8.07-8.03 (1H, m), 7.71-7.67 (1H, m), 7.15 (1H, t, J = 10.0 Hz), 6.89-6.86 (1H, m), 6.43 (1H, s), 3.50 (4H, s), 2.05 (4H, s).

Međuproizvod 32. N-(3-(3-amino-1,2,4-triazin-5-il)-4-fluorofenil)pirolidin-1-karboksamid.

[0328]

[0329] Izrađuje se u skladu sa postupkom za Međuproizvod 24, 3-(3-nitrofenil)imidazo[1,2-

2

b][1,2,4]triazin od N-[3-(2,2-dibromoacetil)-4-fluor-fenil]pirolidin-1-karboksamida (međuproizvod 31, 1.47 g, 3.60 mmol), morfolina (ALDRICH, 1.32 g, 15.13 mmol) i 1-aminogvanidin hidrogen karbonata (ALFA AESAR, 0.487 g, 3.60 mmol) u sirćetnoj kiselini (44 mg, 0.74 mmol) da se dobije N-[3-(3-amino-1,2,4-triazin-5-il)-4-fluor-fenil]pirolidin-1-karboksamid (0.295 g, 26% prinos) kao bledo žuti prašak.

<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 8.93 (1H, s), 8.40 (1H, s), 8.12 (1H, d, J = 6.3 Hz), 7.76-7.70 (1H, m), 7.32 (2H, s br), 7.28 (1H, t, J = 10.0 Hz), 3.38 (4H, s), 1.87 (4H, s).

Primeri

Primer 1: N-(3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamid

[0330]

[0331] Trifozgen (ALDRICH, 0.163 g, 0.55 mmol) se na sobnoj temperaturi doda u izmešanu suspenziju 3-(3-morfolinoimidazo[1,2- a]pirimidin-7-il)anilina (Međuproizvod 13, 0.04 g) u 1,2-dihloretanu (3 mL). Smeša se meša 5 minuta. Doda se trietilamin (ALDRICH, 0.03 mL) na 0°C i smeša se meša 30 minuta na rt. Doda se pirolidin (ALDRICH, 0.124 mL) i smeša se meša 1 sat. Smeša se razblaži sa DCM, doda se voda i mešanje nastavi još 5 min. Faze se razdvoje i organska faza se suši i upari. Sirovi produkt se prečisti na KP-NH koloni uz eluiranje sa AcOEt 100%, da se dobije traženo jedinjenje kao žuta čvrsta supstanca (0.030 g).

<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.47 (1H, m), 8.22 (1H, s, b), 7.81 (2H, m), 7.48 (3H, m), 7.19 (1H, m), 3.95 (4H, m), 3.59 (4H, m), 3.13 (4H, m), 2.03 (4H, m). m/z= 393 (M+H)

Primer 2: N-(3-(3-fenilimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamid

[0333] Trifozgen (ALDRICH, 0.025 g, 0.086 mmol) se na sobnoj temperaturi doda u izmešani rastvor 3-(3-fenilimidazo[1,2- a]pirimidin-7-il)anilina (Međuproizvod 8, 0.07 g, 0.24 mmol) u 1,2-dihloretanu (1 ml). Smeša se meša 5 minuta za koje vreme se formira precipitat. Smeša se ohladi na 0°C i doda se trietilamin (ALDRICH, 0.066 mL); smeša se meša 30 minuta na rt. Dodaju se nove količine trietilamina (0.006 mL) i pirolidina (ALDRICH, 0.020 mL) i smeša se meša 1 sat. UPLC proverom se pokazuje da je reakcija završena. Doda se voda i smeša ekstrahuje sa DCM. Organska faza se upari pod sniženim pritiskom.

Hromatografijom ostatka (SNAP kertridž, KP-NH, 12g, DCM/MeOH, 100:0-95:5) se dobija naslovljeno jedinjenje kao žuta čvrsta supstanca (0.035 g, 38% prinos).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.08 (1H, d), 8.43 (2H, d), 8.00 (1H, s), 7.76 (4H, m), 7.61 (3H, m), 7.44 (2H, m), 3.42 (4H, m), 1.88 (4H, m) m/z= 384 (M+H)

Primer 3: N-(4-fluor-3-(3-fenilimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamid

[0334]

[0335] Trifozgen (ALDRICH, 0.029 g, 0.10 mmol) se na sobnoj temperaturi doda u izmešani

4

rastvor 4-fluor-3-(3-fenilimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)anilina (Međuproizvod 9, 0.086 g, 0.28 mmol) u 1,2-dihloretanu (6 ml). Smeša se meša 5 minuta za koje vreme se formira precipitat. Smeša se ohladi na 0°C i doda se trietilamin (ALDRICH, 0.078 mL); smeša se meša 30 minuta na rt. Dodaju se nove količine trietilamina (0.008 mL) i pirolidina (ALDRICH, 0.023 mL) i smeša se meša 1 sat. UPLC proverom se pokazuje da je reakcija završena. Doda se voda i smeša se ekstrahuje sa DCM. Organska faza se upari pod sniženim pritiskom.

Hromatografijom ostatka (SNAP kertridž, KP-NH, 12g, DCM) se dobija naslovljeno jedinjenje kao žuta čvrsta supstanca (0.050 g). NMR pokazuje prisustvo DCM. Jedinjenje se rastvori u MeOH i rastvor upari pod sniženim pritiskom da se dobije traženo jedinjenje (0.048 g, 42% prinos).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.10 (1H, d), 8.45 (1H, s), 8.29 (1H, dd), 8.07 (1H, s), 7.82 (1H, m), 7.77 (2H, m), 7.60 (2H, m), 7.50 (2H, m), 7.29 (1H, m), 3.41 (4H, m), 1.88 (4H, m). m/z= 402 (M+H)

Primer 4: N-(4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamid

[0336]

[0337] Trifozgen (ALDRICH, 0.087 g, 0.29 mmol) se na sobnoj temperaturi doda u izmešani rastvor 4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)anilina (Međuproizvod 11, 0.260 g, 0.83 mmol) u 1,2-dihloretanu (17 mL). Smeša se meša 5 minuta za koje vreme se formira precipitat. Smeša se ohladi na 0°C i doda se trietilamin (0.23 mL, 1.66 mmol); smeša se meša 30 minuta na rt. Dodaju se nove količine trietilamina (0.023 mL) i pirolidina (ALDRICH, 0.069 mL, 0.83 mmol) i smeša se meša 1 sat. UPLC proverom se pokazuje da je reakcija završena. Doda se voda i smeša se ekstrahuje sa DCM. Organska faza se upari pod sniženim pritiskom. Hromatografijom ostatka (SNAP kertridž, KP-NH, 28g DCM/Me- OH 95:5) se dobija naslovljeno jedinjenje kao žuta čvrsta supstanca. NMR pokazuje prisustvo DCM. Produkt se rastvori u MeOH i rastvor upari pod sniženim pritiskom da se dobije traženo jedinjenje kao žuta čvrsta supstanca (0.070 g, 42% prinos).

<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.83 - 1.91 (m, 4H), 3.01 - 3.07 (m, 4H), 3.36 - 3.41 (m, 4H), 3.79 - 3.83 (m, 4H), 7.25 (dd, J=11.53, 9.06 Hz, 1H), 7.41 (dd, J=7.40, 2.20 Hz, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.75 - 7.80 (m, 1H), 8.20 (dd, J=7.14, 2.74 Hz, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.75 (d, J=7.41 Hz, 1H)

m/z= 411 (M+H)

Primer 5: N-(4-fluor-3-(3-(piperidin-1-il)imidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamid

[0338]

[0339] N-[3-(2-Aminopirimidin-4-il)-4-fluorofenil]pirolidin-1-karboksamid (Međuproizvod 15 , 0.2 g) se na sobnoj temperaturi doda u izmešanu suspenziju 1-[2-(1H-1,2,3-benzotriazol-1-il)-1,2-bis(piperidin-1-il)etil]-1H-1,2,3-benzotriazola (izrađen korišćenjem sličnih postupaka kao za Međuproizvod 1, 0.567 g) u 1,2-dihloretanu (13 mL). Doda se cink bromid (0.148 g) i smeša se zagreva 4 sata na 70 °C za koje vreme se formira precipitat.

[0340] Reaktivna smeša se ohladi na sobnu temperaturu, razblaži sa dihlormetanom i ispere sa vodom. Faze se razdvoje i vodena faza se dalje ekstrahuje sa dihlormetanom. Kombinovane organske faze se suše (Na2SO4), filtriraju i upare pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti flash hromatografijom (SNAP KP-NH, DCM-MeCH, 100:0-95:5) a zatim prečisti preparativnom HPLC da se dobije traženi produkt (21mg, 9%) kao žuta čvrsta supstanca<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.63 (d, 1H), 8.44- 8.4 (br s, 1H), 8.24- 8.2 (dd, 1H), 7.82-7.76 (m, 1H), 7.45- 7.4 (dd, 2H), 7.3- 7.22 (m, 1H), 3.44- 3.37 (m, 4H), 3.1- 2.9 (m, 4H), 1.92-1.84 (m, 4H), 1.78- 1.71 (br, 4H), 1.65- 1.58 (br, 2H).

m/z = 408 (M+ H)

Primer 6. N-(3-(7-bromoimidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-3-il)-4-fluorofenil)pirolidin-1-karboksamid.

[0341]

[0342] Izrađuje se u skladu sa postupkom za Međuproizvod 27, 7-brom-3-(3-nitrofenil)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin od N-(4-fluor-3-(imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-3-il)fenil)pirolidin-1-karboksamida (Primer 11, 0.085 g, 0.26 mmol) u sirćetnoj kiselini (1 mL), natrijum acetata (0.032 g, 0.39 mmol) i broma (0.046 g, 0.29 mmol) da se dobije traženi produkt (0.058 g, 49% prinos) kao bledo žuti prašak.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.17 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.29 (m, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.85 (m, 1H), 7.34 (dd, 1H), 3.41 (m, 4H), 1.87 (m, 4H). m/z = 405 (M+H)

Primer 7: N-(4-fluor-3-(7-fenilimidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-3-il)fenil)pirolidin-1-karboksamid.

[0343]

[0344] Izrađuje se u skladu sa postupkom za Međuproizvod 29, 3-(3-nitrofenil)-7-fenilimidazo[1,2-b][1,2,4]triazin od N-[3-(7-bromoimidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-3-il)-4-fluorofenil]pirolidin-1-karboksamida (Primer 6, 0.03 g, 0.074 mmol), 4,4,5,5-tetrametil-2-fenil-1,3,2-dioksaborolana (ALDRICH, 0.03 g, 0.15 mmol), natrijum karbonata (0.024 g, 0.22 mmol), tetrakis (trifenilfosfin)paladijuma (ALDRICH, 0.0017 g, 0.0015 mmol) u DMF (1.5 mL) i vodi (0.5 mL) na 80°C da se dobije traženi produkt (0.012 g, 38% prinos) kao bledo žuti prašak.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.16 (s, 1H), 8.61 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.34 (d, 1H), 8.22 (m, 2H), 7.86 (m, 1H), 7.59 (m, 2H), 7.45 (dd, 1H), 7.34 (dd, 1H), 3.41 (m, 4H), 1.88 (m, 4H). m/z = 403 (M+H)

Primer 8: N-(4-fluor-3-(7-morfolinoimidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-3-il)fenil)pirolidin-1-karboksamid.

[0345]

[0346] Izrađuje se u skladu sa postupkom za Međuproizvod 30, 4-(3-(3-nitrofenil)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-7-il)morfolin od N-[3-(7-bromoimidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-3-il)-4-fluorofenil]pirolidin-1-karboksamida (Primer 6, 0.126 g, 0.28 mmol), morfolina (ALDRICH, 0.122 g, 1.4 mmol), cezijum karbonata (0.182 g, 0.56 mmol), tris(dibenzilidenaceton)dipaladijuma(0) (ALDRICH, 0.013 g, 0.014 mmol) i ksantfosa (ALDRICH, 0.016 g, 0.028 mmol) u 1,4-dioksanu (3 mL) da se dobije traženi produkt (0.015 g, 12% prinos) kao bledo žuti prašak.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.97 (s, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.24 (m, 1H), 7.81 (m, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.30 (dd, 1H), 3.83 (m, 4H), 3.39 (m, 4H), 3.29 (m, 4H), 1.87 (m, 4H). m/z = 412 (M+H)

Primer 9: N-(3-(7-morfolinoimidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-3-il)fenil)pirolidin-1-karboksamid.

[0347]

[0348] Izrađuje se u skladu sa postupkom za Primer 10 od 4-[3-(3-nitrofenil)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-7-il]morfolina (Međuproizvod 30, 0.06 g, 0.18 mmol), gvožđa u prahu (ALDRICH, 0.041 g, 0.74 mmol), amonijum hlorida (0.039 g, 0.74 mmol), pirolidin-1-karbonil hlorida (ALDRICH, 0.049 g, 0.37 mmol) i DMAP (0.002 g) da se dobije traženi produkt (0.010 g, 13% prinos) kao bledo žuti prašak.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.21 (s, 1H), 8.41 (m, 2H), 7.79 (m, 2H), 7.58 (s, 1H), 7.44 (m, 2H), 3.83 (m, 4H), 3.41 (m, 4H), 3.27 (m, 4H), 1.88 (m, 4H). m/z = 394 (M+H)

Primer 10. N-(3-(7-fenilimidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-3-il)fenil)pirolidin-1-karboksamid.

[0349]

[0350] U izmešani rastvor 3-(3-nitrofenil)-7-fenil-imidazo[1,2-b][1,2,4]triazina (Međuproizvod 29, 0.15 g, 0.47 mmol) u etanolu (3 mL) se doda suspenzija gvožđa u prahu (ALDRICH, 0.106 g, 1.9 mmol) i amonijum hlorida (0.025 g, 0.47 mmol) u vodi (0.5 mL) i reakcija zagreva 2 h na 80°C. Reaktivna smeša se nakon toga filtrira kroz celite, celite obilno ispere sa vrućim metanolom i filtrat koncentruje pod vakuumom. Ostatak se rastvori u DCM (3 mL) i piridinu (1 mL), doda se DMAP (6 mg) i rastvor tretira u kapima sa pirolidin-1-karbonil hloridom (ALDRICH, 0.126 g, 0.94 mmol). Reakcija se zagreva na 60°C u zatvorenoj epruveti u toku noći, nakon toga koncentruje pod vakuumom i ostatak prečisti hromatografiom (SiO2, 100% EtOAc) da se dobije traženi produkt (0.036 g, 19% prinos) kao bledo braon prašak.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.41 (s, 1H), 8.51 (m, 2H), 8.45 (s, 1H), 8.18 (m, 2H), 7.87 (m, 2H), 7.57 (dd, 2H), 7.47 (m, 2H), 3.43 (m, 4H), 1.19 (m, 4H). m/z = 385 (M+H)

Primer 11 N-(4-fluor-3-(imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-3-il)fenil)pirolidin-1-karboksamid.

[0351]

[0352] Izrađuje se u skladu sa postupkom za Međuproizvod 26, 3-(3-nitrofenil)imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin od 2- brom-1,1-dietoksi-etana (ALDRICH, 0.7 g, 3.56 mmol), HBr (48% vodeni rastvor, 0.5 mL) i N-[3-(3-amino-1,2,4-triazin-5-il)-4-fluor-fenil]pirolidin-1-karboksamida (Međuproizvod 32, 0.215 g, 0.71 mmol) da se dobije N-(4-fluor-3-imidazo[1,2-b][1,2,4]triazin-3-il-fenil)pirolidin-1-karboksamid (0.09 g, 37% prinos) kao bledo žuti prašak.

<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 9.0 (s, 1H), 8.47 (m, 2H), 8.28 (d, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.85 (m, 1H), 7.33 (dd, 1H), 3.41 (m, 4H), 1.87 (m, 4H). m/z = 326 (M+H)

[0353] Naredni Primeri su izrađeni u skladu sa analognim procedurama koje su prethodno opisane.

1

(nastavla se)

2 (nastavla se)

(nastavla se)

4 (nastavla se)

(nastavla se)

1 (nastavl a se)

[0354] Naredna jedinjenja mogu da se izrade procesima koji su analogni prethodno opisanim: N-(4-fluor-3-(3-(pirolidin-1-il)imidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamid

Biološka aktivnost

2

Analiza 1. Analiza intramakrofaga Leishmania donovani

[0355] Analiza inatramakrofaga Lajšmanija se izvodi korišćenjem modifikovane verzije postupka opisanog od De Rycker i saradnici (Antimicrob Agents Chemother. 2013 Jul;57(7):2913-22. Comparizon of high-throughput high-content intracellular Leishmania donovani assay with an axenic amastigote assay. De Rycker M, Hallyburton I, Thomas J, Campbell L, Wyllie S, Joshi D, Cameron S, Gilbert IH, Wyatt PG, Frearson JA, Fairlamb AH, Gray DW.). Procedura: 350nl jedinjenja se prvo podeli u sterilne intermedijarne ploče sa 384 udubljenja. Za proveravanje jedne tačke, u sva udubljenja kolone 24 se doda amfotericin B kao pozitivna kontrola (finalna koncentracija 2 µM) a DMSO u kolonu 23. Za određivanje potencije, deset tačaka, izrade se krive sa trostrukim razblaženjem sa najvećom koncentracijom koja je 50 µM i za svaku ploču se uključi kontrolna kriva amfotericina B. Kontrole su kako sledi: kolone 11 i 12: DMSO, kolone 23 i 24: amfotericin B (finalna koncentracija 2 µM). Za ploče između, doda se 35 µl THP-1 medijuma i ploče se mućkaju >5 min da se osigura potpuno mešanje. THP-1 ćelije (8,000 po udubljenju, 50 µl) se prenesu u crne ploče sa 384 udubljenja providnog dna (Corning) u prisustvu 20 nM PMA. Nakon 20 min na RT, ploče se inkubiraju 75 h na 37°C sa 5% CO2u inkubatoru uz prisustvo vlage. Ćelije se nakon toga isperu sa 450 µl sterilnog pufera fosfatnih soli (PBS) obogaćenim sa 1 mM CaCl2, 0.5 mM MgCl2, 0.1% (m/v) albuminom seruma govečeta (PBS-A) i u sve otvore se dodaju amastigoti da se multiplicira infekcija za 5 (40,000 amastigota po udubljenju).

Nakon 40 min na RT, ploče se vrate u inkubator. Amastigoti se inkubiraju 16 h u prisustvu THP-1 makrofaga. Svi preostali ekstracelularni amastigoti se nakon toga uklone ispiranjem prelivanjem sa 1 mL PBS-A po udubljenju (pufer za ispiranje se aspirira sa vrha udubljenja po kome je raširen) a nakon toga dodavanjem 25 µl prethodno razblaženog jedinjenja upotrebom Fluidx Ipette-pro sistema za pipetiranje. Finalno razblaženje svakog jedinjenja je 200-puta. Ploče se inkubiraju 96 h a nakon toga isperu (250 µl PBS-A) i fiksiraju (4 % (v/v) formaldehid-PBS, 30 min, RT). Nakon fiksacije, udubljenja se isperu sa 250 µl PBS, oboje (10 µg/mL DAPI, 0.4 µg mL-1 HCS Cellmask Deep Red u PBS 0.1% (v/v) Triton X-100, 30 min, RT) i isperu sa 250 µl PBS. Na kraju se u udubljenja doda PBS 0.05% (v/v) timerosala, ploče se zatvore i snime visoko efikasnim mikroskopom (GE IN Cell 2000) sa 10x uvećanjem. Analiza snimaka se izvodi na GE IN Cell Analyzer 1000 Workstation koristeći "Multi Target Analysis" modul. Podešavanja za segmentaciju su bila sledeća: nukleus: minimalna oblast: 142.384 µm<2>, osetljivost: 81, postupak: cilindar; ćelije: karakteristična oblast: 2500 µm<2>, osetljivost: 60, postupak: višeskalni cilindar; organele (amastigoti): granule veličine 1 - 3, 3 skale, osetljivost: 90, detekcija u unutrašnjosti ćelija. Za svako udubljenje se izračunava i) broj THP-1 ćelija (očitavanje citotoksičnosti) i ii) prosečan broj amastigota po ćeliji (očitavanje potencije), oba prema pEC50vrednostima.

Rezultati analize intramakofaga Leishmania donovani (Analiza 1)

[0356] Primeri 1-22, 23a, 24-27, 29-36, 38-44, 46-50 i 52 su testirani analizom intramakrofaga Leishmania donovani.

[0357] Nađeno je da Primeri 1-10, 12, 13, 17-19, 21, 22, 24, 26, 27, 29-31, 33, 34, 34a, 35, 39-44 i 47 imaju pEC50vrednosti između 5.0 i 6.6 na Leishmania donovani. Nađeno je da primeri 11, 15, 16, 20, 25, 36, 38 i 49 imaju pEC50vrednosti između 4.7 i 4.9 a za Primere 14, 23a, 32, 33a, 46, 48, 50 i 52 je nađeno da imaju pEC50vrednost manju od 4.3. Za sve testirane primere je nađeno da pokazuju citotoksičnost za THP-1 ćelije sa pEC50vrednošću od 4.4 ili manju. Nađeno je da Primer 4 ima pEC50vrednost za Leishmania donovani od 5.8 i da ispoljava citotoksičnost za THP-1 ćelije sa pEC50manjom od 4.3.

[0358] Naredna jedinjenja su takođe testirana u Analizi 1 i nađeno je da imaju pEC50vrednost za Leishmania donovani manju od 4.3: N-(4-cijano-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamid, N-(4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)-3,3-dimetilazetidin-1-karboksamid, N-(4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)-3,3-dimetilpirolidin-1-karboksamid, N-(4-fluor-3-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksamid i N-(4-fluor-2-metil-5-(3-morfolinoimidazo[1,2-a]pirimidin-7-il)fenil)pirolidin-1-karboksamid.

Analiza 2. Analiza intracelularne Trypanosoma cruzi

[0359] Jedinjenja su akustičnom dispenzijom (LabCyte ECHO) podeljena u crne ploče za analizu sa 384 udubljenja (Greiner). Za određivanje potencije, izrađene su krive razblaženja, jedan u tri, od jedanaest tačaka, sa maksimalnom koncentracijom od 50µM. Ćelije kardiomiocita H9C2 pacova su podeljene u T225 boce za kulturu tkiva i nakon 4 sata se u toku 18 sati inficiraju sa T.cruzi tripomastigotima u istim T225 bocama za kulturu tkiva uz umnožavanje infekcije od 1. Nakon toga, preostali slobodni tripomastigoti se uklone ispiranjem sa PBS a inficirane H9C2 ćelije se sakupe tripsinizacijom. Inficirane H9C2 ćelije

4

se nakon toga prenesu u ploče sa 384 udubljenja koje sadrže jedinjenja koja se testiraju, sa 2500 ćelija po udubljenju u DMEM medijumu sa 2% FBS, 1% Penicillin/Streptomicin, 2mM L-glutamina, 1mM Na piruvijata i 25mM HEPES. Nakon 72h inkubacije na 37°C u prisustvu 5% CO2, ploče se fiksiraju i oboje sa 4% formaldehidom i 2 µM Draq5 u toku 3 sata, na sobnoj temperaturi. Ploče se snimaju na Perkin Elmer Opera sistemu za obradu slike visoke efikasnosti koristeći objektiv sa 20x uvećanjem. Slike se analiziraju pomoću Acapella building blocks system (Perkin Elmer). Algoritmom za analizu slika se prvo identifikuju H9C2 nukleusi a nakon toga se odvoji citoplazma i identifikuju se intracelularni amastigoti. Ovim algoritmom se beleži prosečan broj parazita po H9C2 ćeliji, procenat inficiranih H9C2 ćelija i ukupan broj H9C2 ćelija.

Rezultati analize intracelularne Trypanosoma cruzi (Analiza 2)

[0360] Primeri 1-5, 7-42 i 44-51 su testirani analizom intracelularne Trypanosoma cruzi i nađeno je da imaju pEC50vrednost za Trypanosoma cruzi između 5.3 i 8.2, izuzev Primera 23a i 33a, za koje je nađeno da imaju pEC50vrednost od 4.5 i 4.9, tim redom. Za sve testirane Primere je nađeno da ispoljavaju citotoksičnost za RnH9c2 ćelije sa pEC50ispod 4.3, izuzev Primera 7, 17, 19, 26, 28 i 37, za koje je nađeno da ispoljavaju citotoksičnost za RnH9c2 ćelije sa pEC50od 4.7, 5.3, 4.4, 4.4, 5.1 i 4.6, tim redom. Nađeno je da Primer 4 ima pEC50vrednost za Trypanosoma cruzi od 7.4 i da ispoljava citotoksičnost za RnH9c2 ćelije sa pEC50od <4.3.

Analiza 3. Analiza inhibicije rasta ćelija Trypanosoma brucei

[0361] Merenje sposobnosti jedinjenja da inhibiraju rast tripanozoma (T. b. brucei, BSF427, VSG118) ćelija se izvodi koristeći modifikaciju analize ćelijske viabilnosti koju su prethodno opisali Raz i saradnici (Raz B.; Iten M.; Gretar-Buhler Y.; Kaminski R.; Brun R. Alamar Blue assay do determine drug sensitivity of African trypanosomes (T. b. rhodesiense i T. b. gambiense) in vitro. Acta Trop.1997, 68, 139-147). Jedinjenja se rastvore u DMSO u maksimalnoj koncentraciji od 10 mM i serijski razblaže u fazama po polovine logaritma da se dobije opseg finalnih koncentracija analize od 50 µM do 0.5 nM. Za svaku koncentraciju (200-puta finalno) se jedinjenje doda u providne ploče za kulturu tkiva sa 96 udubljenja u zapremini od 1 µM. Nakon toga se 2000 ćelija po udubljenju u odgovarajućem medijumu za rast (HMI-9T za T. brucei, modifikacija HMI-9 kako su opisali Hurumi i saradnici (Hirumi H.; Hirumi K. Continuous cultivation of Trypanosoma brucei blood stream forms in medium containing low concentration of serum-protein without feeder cell-layers. J. Parasitol.1989, 75, 985-989.) gde je 0.2 mM 2-merkaptoetanola zamenjeno sa 0.056 mM tiolglicerola a MEM sa 10% FBS za MRC5) doda u kolone 1-11 ploča u zapremini od 199 µM. U kolonu 12, se doda 200 µM medijuma da se obezbedi kontrola bez ćelija. Ploče se nakon toga inkubiraju 69h na 37 °C u atmosferi 5% CO2, a nakon toga se doda 20 µL rastvora rezasurina u koncentraciji od 500 µM i dalje inkubira 4 h. Ploče se nakon toga očitavaju na BioTek flx800 čitaču fluorescentne ploče a procenat inhibicije se poredi sa maksimalnim i minimalnim kontrolama analize. Krive efekta koncentracije su dobijene preko nelinearne regresije koristeći XLFit 4.2 i odrede se EC50vrednosti.

Rezultati analize inhibicije rasta trypanosoma brucei ćelija (Analiza 3)

[0362] Primeri 1-5, 7-8, 11-15, 18 i 20 su testirani u analizi inhibicije rasta Trypanosoma brucei ćelija.

[0363] Za sve testirane primere je nađeno da imaju pEC50vrednosti između 6.2 i 8.2 Trypanosoma brucei, za Primer 4 je nađeno da ima pEC50vrednost od 8.0 protiv Trypanosoma brucei.

Analiza 4. Ispitivanje rastvorljivosti – hemiluminiscentna detekcija azota (CLND)

I. Jedinjenja

[0364] Izradi se osnovni rastvor jedinjenja u koncentraciji od 10 mM u DMSO.

Rastvarači i puferi

[0365] Koriste se organski rastvarači stepena za HPLC. Koristi se ultra čista voda (stepen Milli-Q). Puferi se izrađuju sa ultra čistom vodom i filtriraju kroz kameo filtere 0.45 µ.

Vodeni rastvor pufera:

[0366] Pufer fosfatnih soli (PBS) sa pH 7.4 se izrađuje od Sigma pakovanja bezvodnog praška, P-3813. Svaki od praškova se razblaži do 1 litar sa dejonizovanom vodom. Pre upotrebe rastvora se proveri pH

II. Procedure.

[0367]

a) Izmeri se koncentracija DMSO. U ploče se dodaju DMSO slepe probe i standardi ondansetrona i kofeina (kolona 12, A,B,C & D za blank a E,F,G, & H za standarde). Ploče se pokriju folijom. Kada se utvrdi da su početne linije UV i CLND detektora stabilne, CLND se podesi na nulu.

b) Kada se završe merenja koncentracije DMSO, pripremi se filtraciona ploča za svaku početnu ploču razblaživanjem sa po 5 µL osnovnog rastvora DMSO koncentracije 10 mM do 100 L sa PBS pH 7.4.

c) Nakon što su ploče pripremljene, pokriju se sa poklopcem ploče i ostave da se inkubiraju 1h na sobnoj temperaturi.

d) Uzorci se filtriraju preko MILLIPORE Multiscreen Solubility (MSSLBPC10) Filtration Plates, u NUNC ploče sa V udubljenjima. Filter ploče se uklone a NUNC ploča se zatvori sa električnim zaptivačem ploča.

e) HPLC/CLND instrumenti se podese i ostave da se uravnoteže. Mobilne faze (MeOH:H2O 1:1, brzina protoka: 0.2 ml/min, osetljivost z10, Gain High). Uzorci se propuste.

f) Kriva analize se dobija linearnom regresijom a vrednosti rastvorljivosti su izražene u µM.

Rezultati analize rastvorljivosti (CLND)

[0368] Primeri 1-5, 12-42 i 44-51 su testirani u analizi rastvorljivosti (CLND).

[0369] U ovoj analizi je nađeno da svi testirani primeri imaju prosečnu vrednost rastvorljivosti od 24 µM ili veću, izuzev Primera 28, za koji je nađeno da ima prosečnu vrednost rastvorljivosti <1 µM. Za Primer 4 je nađeno da ima prosečnu vrednost rastvorljivosti od ≥444 µM.

Analiza 5. Analiza intracelularne Leishmania donovani

[0370] Jedinjenja su akustičnom dispenzijom (LabCyte ECHO) podeljena u crne ploče za analizu sa 384 udubljenja (Greiner). Za određivanje potencije, trostrukim razblaženjem su izrađene krive razblaženja od jedanaest tačaka sa maksimalnom koncentracijom od 50µM. THP-1 ćelije humanih monocita se raspodele u T225 boce za kulturu tkiva i diferenciraju pomoću 30nM PMA, nakon 24 sata se inficiraju u toku noći sa Leishmania donovani ekspresijom amastigota zelenog fluorescentnog proteina (eGFP) u istim T225 bocama za kulturu tkiva i umnožavanjem infekcije od 10. Nakon toga se preostali slobodni amastigoti uklone ispiranjem sa PBS a inficirane THP-1 ćelije se sakupe tripsiniziacijom. Inficirane ćelije se nakon toga prenesu u ploče sa 384 udubljenja koje sadrže jedinjenja koja se testiraju, u količini od 3000 ćelija po udubljenju u RPMI medijumu sa 2% FBS i 25mM natrijum bikarbonata. Nakon 96h inkubacije na 37°C u prisustvu 5% CO2, ploče se fiksiraju 30 minuta sa 4% formaldehidom, isperu sa PBS i boje 30 minuta sa 0.1mg/mL DAPI i ponovo isperu sa PBS. Ploče se snimaju na Perkin Elmer Opera sistemu za obradu slike visoke efikasnosti koristeći objektiv sa 20x uvećanjem sa dve ekspozicije, jednom za DAPI boju i drugu za eGFP. Snimci se analiziraju koristeći Acapella building blocks system (Perkin Elmer).

Algoritmom za analize slika se prvo identifikuju THP-1 nukleusi a nakon toga se odvoji citoplazma i identifikuju intracelularni amastigoti.

[0371] Ovim algoritmom se beleži prosečan broj parazita po THP-1 ćeliji, procenat inficiranih THP-1 ćelija i ukupan broj THP-1 ćelija.

Rezultati analize intracelularne Leishmania donovani (Analiza 5)

[0372] Primeri 1-5, 12-37 i 39-51 su testirani u analizi intracelularne Leishmania donovani.

[0373] Nađeno je da Primeri 1-5, 12-13, 17-23, 24-31, 33, 34-37, 39-49 i 51 imaju pEC50vrednost između 5.0 i 6.9 za Leishmania donovani. Za Primere 14-16, 32, 33a i 50 je nađeno da imaju pEC50vrednost između 4.4 i 4.9 za Leishmania donovani dok je za Primer 23a nađeno da ima pEC50vrednost manju od 4.3. Za sve testirane Primere je nađeno da ispoljavaju citotoksičnost na THP-1 ćelije uz pEC50vrednost manju od 4.3, izuzev Primera 2, 3, 5, 16, 26, 28 i 37, za koje je nađeno da ispoljavaju citotoksičnost sa pEC50vrednošću između 4.3 i 4.9. Nađeno je da Primer 4 ima pEC50vrednost za Leishmania donovani od 6.2 i da pokazuje citotoksičnost za THP-1 ćelije se pEC50manjom od 4.3.

Claims

Patentni zahtevi 1. Jedinjenje Formule (I) ili njegova so,

naznačeno time što A1je CH; A2je izabran od CR13i N; R1je izabran od C1-C6alkil, C3-C7cikloalkil, C4-C7heterocikloalkil, fenil, C5-C6heteroaril, C1-C6alkoksi, -OC3-C7cikloalkil i NR10aR10b; gde su C3-C7cikloalkil, C4-C7heterocikloalkil, fenil, C5-C6heteroaril i -OC3-C7cikloalkil opciono supstituisani sa jednom do tri grupe nezavisno izabrane od hidroksi, metoksi, C1-C3alkil i halo; L1je linker grupa izabrana od -C(O)- i -S(O)n-, gde n predstavlja 1 do 2; R3je izabran od vodonika, halo, metil, metoksi i cijano grupe; R4je izabran od vodonika, halo, metil, metoksi i cijano grupe; R2je izabran od vodonika, halo, Ar, Cy, X, NR5aR5bi -C(O)-R15; Ar je izabran od fenil i C5-C6heteroaril grupe, od kojih je svaka opciono supstituisana sa jednom do tri grupe nezavisno izabrane od halo i -L2-R7; L2je linker grupa izabrana od veze, -( CH2)m-, -O(CH2)m-, -C2-C4alkenil-, -OC2-C4alkenil-, -(CH2)p-NH-(CH2)q- i -(CH2)pC(O)-(CH2)q-; gde m predstavlja 1 do 4 a p i q nezavisno predstavljaju 0 do 4; R7je izabran od vodonika; hidroksi; NR8aR8b; C4-C7heterocikloalkil grupe opciono supstituisane sa jednom ili dve C1-C3alkil grupe; C3-C7cikloalkil; C1-C6alkoksi grupe opciono supstituisane sa jednom NR14aR14bgrupom; i fenil grupe opciono supstituisane sa jednom do tri grupe nezavisno izabrane od halo, metoksi i metil grupe; Cy je izabran od C3-C7cikloalkil, C4-C7heterocikloalkil, C5-C7cikloalkenil i C5-C7heterocikloalkenil grupe, od kojih je svaka opciono supstituisana sa jednom do tri grupe nezavisno izabrane od C1-C3alkil, C1-C3alkoksi, C4-C7heterocikloalkil, NR11aR11b, =O, -C(O)-R15i -C(O)O-R15; X je izabran od C1-C6alkil, C2-C6alkenil i C1-C6alkoksi grupe, od kojih je svaka opciono supstituisana sa jednom do tri grupe nezavisno izabrane od hidroksi, metoksi, halo, NR13aR13bi C4-C7heterocikloalkil grupe, gde je C4-C7heterocikloalkil grupa opciono supstituisana sa jednom do tri C1-C3alkil grupe; R5aje izabran od vodonika; C1-C6alkil grupe opciono supstituisane sa jednom grupom izabranom od Ar i Cy; -C(O)-R9; -C(O)-OR9; i -SO2-R9; R5bje izabran od vodonika i C1-C3alkil grupe; R8ai R8bsu nezavisno izabrani od vodonika i C1-C3alkil grupe; R9je izabran od C1-C6alkil, C3-C7cikloalkil, C4-C7heterocikloalkil, fenil i C5-C6heteroaril grupe; R10ai R10bsu nezavisno izabrani od vodonika i C1-C3alkil grupe; R11ai R11bsu nezavisno izabrani od vodonika i C1-C3alkil grupe; R12je izabran od vodonika, halo i metil grupe; R13je izabran od vodonika, C1-C3alkil, -C(O)-C4-C7heterocikloalkil, -C(O)-C1-C3alkil i -C(O)-C3-C7cikloalkil grupe; R13ai R13bsu nezavisno izabrani od vodonika i C1-C3alkil grupe; R14ai R14bsu nezavisno izabrani od vodonika i C1-C3alkil grupe; i R15je izabran od C1-C6alkil, Ar, C3-C7cikloalkil i C4-C7heterocikloalkil grupe.
2. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 1, naznačeno time što je R1C4-C7heterocikloalkil grupa opciono supstituisana sa jednom C1-C3alkil ili sa jednim ili dva halo.
3. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 1 ili patentnim zahtevom 2, naznačeno time što je L1-C(O)- grupa.
4. Jedinjenje u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1 do 3, naznačeno time što je R2izabran od vodonika, halo, Ar, Cy i X.
5. Jedinjenje u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1 do 4, naznačeno time što je R2Cy 1 i Cy je opciono supstituisan C4-C7heterocikloalkil grupom.
6. Jedinjenje u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1 do 5, naznačeno time što je R3vodonik ili halo i R4je vodonik, halo ili metil grupa.
7. Jedinjenje Formule (I) u skladu sa patentnim zahtevom 1, naznačeno time što je to
8. Jedinjenje Formule (I) u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1 do 7 ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
9. Farmaceutska kompozicija naznačena time što uključuje (a) jedinjenje Formule (I) u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1 do 8 ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i (b) farmaceutski prihvatljiv nosač.
10. Kombinacija, naznačena time što uključuje (a) jedinjenje Formule (I) u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1 do 8 ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i (b) najmanje jedno dodatno terapeutsko sredstvo.
11. Jedinjenje Formule (I) u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1 do 8 ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je za upotrebu u terapiji.
12. Jedinjenje Formule (I) u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1 do 8 ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je za upotrebu u tretmanu ili prevenciji parazitske bolesti izabrane od Šagasove bolesti, humane afričke tripanozomijaze, životinjske afričke tripanozomijaze i lajšmanijaze. 1 1
13. Jedinjenje Formule (I) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu u skladu sa patentnim zahtevom 12, naznačeno time što je parazitska bolest lajšmanijaza.
14. Jedinjenje Formule (I) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu u skladu sa patentnim zahtevom 12 ili 13, naznačeno time što je lajšmanijaza visceralna lajšmanijaza.
15. Jedinjenje Formule (I) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu u skladu sa patentnim zahtevom 14, naznačeno time što je visceralna lajšmanijaza izazvana sa Leishmania donovani. Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Beograd, Kneginje Ljubice 5 1 2