RS61442B1 - Farmaceutske kombinacije i upotrebe usmerene na poremećaje lizozomalnog skladištenja - Google Patents

Description

Opis

[0001] Poremećaji lizozomalnog skladištenja (LSD) su grupa naslednih metaboličkih bolesti izazvanih defektima u lizozomalnoj homeostazi. Do danas, LSD obuhvata preko 70 bolesti, sa zajedničkom kliničkom učestalošću od 1:5000 živorođenih. Ove bolesti mogu da se klasifikuju u dve glavne grupe: poremećaji primarnog skladištenja koji proizilaze od direktnog nedostatka puteva razgradnje (obično poremećaji nedostatka lizozomalnih enzima), i poremećaji sekundarnog skladištenja koji su izazvani neispravnošću nizvodnih lizozomalnih proteina ili procesima koji imaju uticaj na lizozom (npr., defekti u putevima prenosa).

[0002] Patologija LSD-a pogađa mnoge od sistema organizma, ali najčešće nervni sistem. Napredna neurodegeneracija koja dovodi do fizičkog invaliditeta i mentalnog pogoršanja su česti simptomi. Takvi poremećaji su uopšteno veoma progresivni i uporni. Oni se javljaju u prvih nekoliko godina života i ozbiljna progresina rezultuje čestom hospitalizacijom. Ako se ne leče, pacijenti često umiru u srednjim tinejdžerskim godinama. Takođe su opisani pacijenti sa pojavom u odraslom dobu.

[0003] Bremova T. et al., (Acetyl-DL_leucine in Niemann-Pick type C; American academy of neurology, 2015), se odnosi na ispitivanje upotrebe N-acetil-DL-leucina u malom kohortu za lečenje NPC.

[0004] Trenutni terapeutski pristupi za LSD su ograničeni. Postoji nekoliko, ako ih ima, lekovitih tretmana, a mnoge terapeutske opcije samo poboljšavaju kvalitet života. Na primer, neki LSD su odgovorni za transplantaciju koštane srži ili terapiju zamene enzima. Dodatno, neka korist je prijavljena u kliničkoj probi terapije redukcije supstrata (SRT) upotrebom inhibitora biosinteze glikosfingolipida (GSL): lek iminošećera sugar, miglustat (Patterson, 2006). Međutim, trenutno ne postoje opšti nespecifični tretmani koji su od koristi svim LSD-a. Zbog toga, postoji potreba za razvojem poboljšanih lečenja LSD-a.

[0005] Ovaj pronalazak zadovoljava ovu potrebu i obezbeđuje acetil-leucin za lečenje Niemann-Pickove bolesti tipa C kod subjekta kom je to potrebno.

[0006] Predmet ovog pronalaska je onakav kako je definisano u zahtevima.

[0007] Ovaj pronalazak u jednom aspektu obezbeđuje acetil-leucin, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, za upotrebu u lečenju Niemann-Pickove bolesti tipa C kod subjekta kom je to potrebno, pri čemu ta upotreba obuhvata davanje terapeutski efektivne količine acetil-leucina subjektu kom je to potrebno u trajanju izabranom od najmanje oko 6 meseci, najmanje oko 1 godine, najmanje oko 2 godine, i najmanje oko 5 godina.

[0008] U jednom otkrivanju, acetil-leucin, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, je otkrivena za upotrebu u postupku lečenja LSD kod subjekta kom je to potrebno, pri čemu LSD predstavlja Niemann-Pickovu bolest tipa C i pri čemu je subjekt asimptomatski.

[0009] U nekom drugom otkrivanju, opisan je acetil-leucin, ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu u postupku odlaganja pojave LSD-a ili jednog ili više simptoma LSD-a za koje bi se inače moglo očekivati da se manifestuju prema uobičajenoj progresiji bolesti, pri čemu LSD predstavlja Niemann-Pickovu bolest tipa C.

[0010] Ovaj pronalazak uključuje acetil-leucin, ili neku njegovu farmaceutski prihvatljivu so, za upotrebu u postupku lečenja LSD-a ili jednog ili više simptoma povezanih sa LSD-em kod subjekta kom je to potrebno, pri čemu LSD predstavlja Niemann-Pickovu bolest tipa C a postupak obuhvata davanje terapeutski efektivne količine acetil-leucina subjektu kom je to potrebno u trajanju odabranom od najmanje oko 6 meseci, najmanje oko 1 godine, najmanje oko 2 godine, i najmanje oko 5 godina.

[0011] Ovaj pronalazak opisuje acetil-leucin, ili neku njegovu farmaceutski prihvatljivu so, za upotrebu u postupku odlaganja progresije LSD-a ili jednog ili više simptoma povezanih sa LSD-em tokom vremena u poređenju sa uobičajenim napretkom bolesti, pri čemu LSD predstavlja Niemann-Pickovu bolest tipa C a postupak obuhvata davanje terapeutski efektivne količine acetil-leucina subjektu kom je to potrebno u trajanju odabranom od najmanje oko 6 meseci, najmanje oko 1 godine, najmanje oko 2 godine, i najmanje oko 5 godina.

[0012] U daljem otkrivanju, acetil-leucin, ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so, je opisan za upotrebu u postupku preokretanja napretka LSD-a ili jednog ili više simptoma povezanih sa LSD-em tokom vremena, pri čemu LSD predstavlja Niemann-Pickovu bolest tipa C a postupak obuhvata davanje terapeutski efektivne količine acetil-leucina subjektu kom je to potrebno u trajanju odabranom od najmanje oko 6 meseci, najmanje oko 1 godine, najmanje oko 2 godine, i najmanje oko 5 godina.

[0013] U drugom otkrivanju, acetil-leucin, ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so, je opisan za upotrebu u postupku poboljšanja, kod subjekta kom je to potrebno, biohemijskog markera LSD tokom vremena, pri čemu LSD predstavlja Niemann-Pickovu bolest tipa C a postupak obuhvata davanje terapeutski efektivne količine acetil-leucina subjektu kom je to potrebno u trajanju odabranom od najmanje oko 6 meseci, najmanje oko 1 godine, najmanje oko 2 godine, i najmanje oko 5 godina.

[0014] U daljem otkrivanju, ovaj pronalazak uključuje acetil-leucin, ili neku njegovu farmaceutski prihvatljivu so, za upotrebu u postupku obezbeđivanja neuroprotekcije kod subjekta koji ima, za kog se sumnja da ima, ili je u riziku da ima LSD, pri čemu LSD predstavlja Niemann-Pickovu bolest tipa C a postupak obuhvata davanje terapeutski efektivne količine acetil-leucina subjektu u trajanju odabranom od najmanje oko 6 meseci, najmanje oko 1 godine, najmanje oko 2 godine, i najmanje oko 5 godina.

[0015] Dodatna otkrivanja, acetil-leucin, ili neku njegovu farmaceutski prihvatljivu so, za upotrebu u postupku odlaganja progresije nekog poremećaja lizozomalnog skladištenja (LSD) kod subjekta, pri čemu LSD predstavlja Niemann-Pickovu bolest tipa C. Acetil-leucin, ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu u postupku obezbeđivanja neuroprotekcije kod subjekta koji ima LSD. Acetil-leucin je u obliku racemata, u enantiomernom višku L-enantiomera ili u enantiomernom višku D-enantiomera. Postupci dalje obuhvataju davanje acetil-leucina u dozi između 1,5 g i 10 g dnevno. Dalje, postupci obuhvataju davanje acetil-leucina za lečenje koje traje dve nedelje ili duže. Postupci mogu takođe da obuhvataju davanje acetil-leucina, ili neke njegove farmaceutski prihvatljive soli, pre pojave simptoma LSD-a. Postupci dalje mogu da obuhvataju davanje druge terapije ili agensa namenjenog da spreči ili leči LSD. Dalji primer izvođenja ovog pronalaska je komplet za upotrebu u odlaganju progresije LSD-a kod subjekta, pri čemu taj komplet obuhvata sredstvo za dijagnozu ili prognozu LSD-a, i acetil-leucin ili neku njegovu farmaceutski prihvatljivu so. Komplet obuhvata sredstvo za dijagnozu ili prognozu LSDa-a, i acetil-leucin ili neku njegovu farmaceutski prihvatljivu so. Još jedan drugi primer izvođenja ovog pronalaska je upotreba acetil-leucina, ili neke njegove farmaceutski prihvatljive soli, kao neuroprotektivnog agensa kod subjekta koji ima LSD. U tom postupku, kompletu, ili upotrebi LSD predstavlja Niemann-Pickovu bolest tipa C.

[0016] Ovi i ostali primeri izvođenja i karakteristike ovog pronalaska biće jasni iz opisa i patentnih zahteva koji slede.

Kratak opis slika

[0017]

Fig.1 prikazuje fotografije lečenih (Fig.1A) i nelečenih (Fig.1B) Npc1<-/->miševa starosti devet nedelja.

Fig.2A i 2B prikazuju podatke mase za Npc1<-/->miševe u poređenju sa (Npc1<+/+>) miševima divljeg tipa, sa i bez tretiranja acetil-DL-leucinom od odvikavanja.

Fig.3A - 3G prikazuju podatke analize hoda za Npc1<-/->miševe u poređenju sa (Npc1<+/+>) miševima divljeg tipa, sa i bez tretiranja acetil-DL-leucinom od odvikavanja. Na primer, podaci za dijagonalno oslanjanje, kadencu i sekvencu koraka prikazani su na Fig.3A - 3C, respektivno. Fig.3D i 3E prikazuju podatke za prednje šape (FP) (srednja vrednost stajanja i ciklus koraka u panelu D; radni ciklus u panelu E). Fig.3F i 3G prikazuju podatke za zadnje šape (HP) (srednja vrednost stajanja i ciklus koraka u panelu F; radni ciklus u panelu G).

Fig.4A - 4H prikazuju podatke analize motornih funkcija za Npc1<-/->miševe u poređenju sa (Npc1<+/+>) miševima divljeg tipa, sa i bez tretiranja acetil-DL-leucinom od odvikavanja. Centrirano podizanje, aktivnost, podizanje i broj od prednjeg do zadnjeg dela (FR) prikazani su na Fig.4A - 4D, respektivno. Vreme aktivnosti, vreme pokretljivosti, vreme podizanja i ukupan broj manuelnih podizanja prikazani su na Fig.4E - 4H, respektivno.

Fig.5 prikazuje da je tretiranje sa acetil-DL-leucinom (0,1 g/kg starosti od 3 nedelje) povezano sa malim ali statistički značajnim povećanjem životnog veka kod Npc1<-/->miševa.

Fig.6A i 6B prikazuju smanjenje lizozomalne zapremine u ne-neuronalnim NPC ćelijama nakon tretiranja sa acetil-DL-leucinom. Fig.6C-6H prikazuju efekat tretiranja sa acetil-DL-Leucinom na lizozomalnu zapreminu u fibroblastima pacijenta sa NPA, MLII, MPS IIIB, aspartilglukozaminurijom, MLIIIA, i MPS VII, respektivno.

Fig.7A (referenca) prikazuje krivu preživljavanja koja predstavlja smrtnost kod netretiranih ili acetilleucin-tretiranih miševa divljeg tipa i Sendhofovim miševima. Fig.7B prikazuje ocene prelaza preko šipke za netretirane i acetil-leucin-tretirane miševe Sendhofovog modela. Fig.7C prikazuje vreme ciklusa koraka za netretirane i acetil-leucin-tretirane Sendhofove miševe ocenjene u 12 nedelji starosti.

Fig.8A-8C prikazuju efekat lečenja sa acetil-DL-leucinom na glikosfingolipidnim (GSL) nivoima u fibroblastima pacijenta sa GM2 gangliozidozama (Tay-Sachs bolest, Sendhofova bolest i AB varijanta Tay-Sachs bolesti, respektivno).

Fig.9A i 9B prikazuju efekat lečenja sa acetil-DL-leucinom tokom vremena na ukupnu kliničku ocenu ozbiljnosti (CSS) i ukupnu godišnja ocena povećanja ozbiljnosti (ASIS), respektivno, deset NPC pacijenata.

Fig.10A-10J prikazuju efekat lečenja sa acetil-DL-leucinom tokom vremena na CSS podocene za svaki od deset NPC pacijenata.

Opis

[0018] Acetil-leucin u obliku racemata (acetil-DL-leucin) i soli istog efektivne su u lečenju vrtoglavica različitih porekla, posebno Meniere-ove vrtoglavice i vrtoglavice zapaljenskog (vestibular neuritis) ili toksičnog porekla. Na primer, acetil-leucin na tržište stavlja Pierre Fabre Medicament u obliku racemata kao lek protiv vrtoglavice pod trgovačkim nazivom Tanganil®. Klinički rezultati Tanganil® prijavljeni od strane različitih autora demonstriraju poboljšanje simptomologije vrtoglavice u više od 95% slučajeva, uključujući nestanak napada vrtoglavice.

[0019] Acetil-DL-leucin koristi se u Francuskoj za lečenje akutne vrtoglavice od 1957. god. i ima odličan bezbednosni profil, ali njegova dugotrajna bezbednost u hroničnoj upotrebi nije određena. Uprkos brojnim hipotezama, uključujući stabilizaciju membranskog potencijala, njegovi farmakološki i elektrofiziološki režimi dejstva ostaju nejasni. (Vibert et al. (2001) Eur J Neurosci; 13(4): 735-48; Ferber-Viart et al. (2009) Audiol Neurootol; 14(1): 17-25). FDG-µPET ispitivanje u pacovskom modelu akutne jednostrane labirintektomije (Zwergal et al. (2016) Brain Struct Funct; 221(1): 159-70) pokazalo je značajan efekat L-enantiomera, N-acetil-L-leucina, na posturalnu kompenzaciju aktiviranjem vestibulocerebeluma i deaktiviranjem posterolateralnog talamusa (Gunther et al. (2015) PLoS One; 10(3): e0120891). Poboljšanje simptoma cerebelarne ataksije upotrebom acetil-DL-leucina prikazano je u serijama slučajeva sa cerebelarnim pacijentima (Strupp et al. (2013) J Neurol; 260(10): 2556-61). Druge serije slučajeva nemaju korist (Pelz et al. (2015) J Neurol; 262(5): 1373-5). Kvantitativna analiza hoda pokazala je da je acetil-DL-leucin poboljšao promenljivost hoda sa vremenom kod pacijenata sa cerebelarnom ataksijom (Schniepp et al. (2015) Cerebellum; 3:8). U jednomesečnom ispitivanju koje uključuje 12 pacijenata sa Niemann-Pickovom bolesti tip C (NPC), pokazano je poboljšanje simptoma ataksije (Bremova et al. (2015) Neurology; 85(16): 1368-75). Dalje, PET ispitivanje kod pacijenata sa ataksijom koji ma je davan acetil-DL-leucin demonstriralo je pojačan metabolizam u srednjem mozgu i nižem moždanom stablu kod ispitanika (Becker-Bense et al. (2015) Abstract EAN).

[0020] Međutim, nije poznato da acetil-leucin leči LSD-e, koji uopšteno napreduju tokom godina do dekada. Ovaj pronalazak iznenađujuće prikazuje da acetil-leucin, ili farmaceutski prihvatljiva so istog, može da se koristi u postupku za lečenja LSD-a kod subjekta kom je to potrebno, na primer, odlaganjem pojave LSD ili jednog ili više simptoma LSD-a za koje bi se inače moglo očekivati da se manifestuju prema uobičajenoj progresiji bolesti, i/ili odlaganjem ili preokretanjem progresije LSD ili jednog ili više simptoma LSD-a, kao što je tokom dugog trajanja, kao što je u poređenju sa uobičajenom progresijom bolesti. Ove primerne upotrebe prema ovom pronalasku, kao i ostale opisane ovde, bile su u potpunosti neočekivane, jer takve koristi nisu primećene, i nije moglo da se zaključi, iz učenja stanja tehnike. LSD su jedna od heterogene grupe naslednih poremećaja često okarakterisanih akumulacijom nesvarenih ili delimično svarenih makromolekula što rezultuje ćelijskom disfunkcijom (npr., povećana lizozomalna zapremina u poređenju sa zdravim subjektima) i kliničkim abnormalnostima. Kao što se vidi iz primera, ali bez vezivanja za bilo koju specifičnu teoriju, pronalazači su otkrili, inter alia, da, kod subjekata pogođenih LSD-em, acetil-leucin može da poboljša ćelijsku disfunkciju (npr., smanjenjem lizozomalne zapremine ka kontrolnim vrednostima) i kliničkim abnormalnostima.

[0021] Posledično, ovaj pronalazak obezbeđuje acetil-leucin, ili neku farmaceutski prihvatljivu so istog, za upotrebu u postupku lečenja LSD ili jednog ili više simptoma LSD-a kod subjekta kom je to potrebno.

[0022] "LSD", kao što se ovde koristi, odnosi se na bilo koji poremećaj koji uključuje disfunkciju ili remećenje u kasnijem endozomalnom/lizozomalnom sistemu i akumulaciju nesvarenih ili delimično svarenih makromolekula. LSD može da uključuje povećano skladištenje lipida ili ne-lipida. U svrhu ovog otkrivanja „LSD“ se uvek odnosi na Niemann-Pickovu bolest tipa C osim ukoliko nije drugačije naznačeno.

[0023] "Subjekt", kako se ovde koristi, može da bude kičmenjak, sisar ili domaća životinja. Stoga, kombinacije prema ovom pronalasku mogu da se koriste za lečenje bilo kog sisara, na primer stoke (npr., konj, krava, ovca ili svinja), kućnih ljubimaca (npr., mačka, pas, zec ili zamorac), neke laboratorijske životinje (npr., miš ili pacov), ili može da se koristi u ostalim veterinarskim primenama. Na primer, subjekt je čovek.

[0024] Kao što se ovde koristi, oblik jednine "neki," "neka," i "taj" uključuju množinu.

[0025] Pojmovi "približno" i "oko" znači da je blizu iste kao referentni broj ili vrednost uključujući prihvatljivi stepen greške za izmerenu količinu s obzirom na prirodu ili preciznost merenja. Kao što se ovde koristi, pojmovi "približno" i "oko" trebalo bi uopšteno da se razumeju da obuhvataju ± 20% naznačene količine, učestalosti ili vrednosti. Numeričke količine date ovde su približne ako nije drugačije navedeno, što znači da pojam "oko" ili "približno" može da se izvede kada nije izričito navedeno.

[0026] Pojmovi "primena," "davanje," ili "administracija" kao što se ovde koristi odnosi se na (1) obezbeđivanje, davanje, doziranje i/ili propisivanje ili od strane zdravstvenog radnika ili njegovog ovlašćenog zastupnika ili prema njegovom uputstvu, neke kombinacije prema ovom pronalasku, i (2) stavljanje u, uzimanje ili konzumiranje od strane pacijenta ili njega ili nje, neke kombinacije prema ovom pronalasku.

[0027] Reference "acetil-leucin" kroz tekst uključuju farmaceutski prihvatljive soli istog, čak i ako nije izričito navedeno.

[0028] Acetil-leucin može da bude u racemskom obliku, što znači da jedinjenje obuhvata približno jednake količine enantiomera. Alternativno, može da bude prisutan u enantiomernom višku ili L-enantiomera ili D-enantiomera. Acetil-leucin može da bude u jednom enantiomernom obliku ili L-enantiomera ili D-enantiomera. U jednom primeru izvođenja, jedan enantiomerni oblik je L-enantiomer. Racemski i enantiomerni oblici mogu da se dobiju u skladu sa poznatim procedurama u tehnici.

[0029] "Farmaceutski prihvatljiva so" kako je ovde navedeno, je bilo koji preparat soli koji je pogodan za upotrebu u farmaceutskoj primeni. Farmaceutski prihvatljive soli uključuju, ali bez ograničenja na, aminske soli, kao što su N,N'-dibenziletilendiamin, hloroprokain, holin, amonijak, dietanolamin i ostali hidroksialkilamini, etilendiamin, N-metilglukamin, prokain, N-benzilfenetilamin, 1-para-hloro- benzil-2-pirolidin-1'-ilmetilbenzimidazol, dietilamin i ostali alkilamini, piperazin, tris(hidroksimetil)aminometan i slično; soli alkalnih metala, kao što su litijum, kalijum, natrijum i slično; soli zemnoalkalnih metala, kao što su barijum, kalcijum, magnezijum i slično; soli prelaznih metala, kao što su cink, aluminijum i slično; ostale soli metala, kao što su natrijum hidrogen fosfat, dinatrijum fosfat i slično; mineralnih kiselina, kao što su hidrohloridi, sulfati i slično; i soli organskih kiselina, kao što su acetati, laktati, malati, tartarati, citrati, askorbati, sukcinati, butirati, valerati, fumarati i slično.

[0030] Acetil-leucin, ili neka farmaceutski prihvatljiva so istog, može da se formuliše i daje subjektu u skladu sa poznatim učenjima u tehnici. Na primer, acetil-leucin, ili neka farmaceutski prihvatljiva so istog, može da se formuliše kao farmaceutska kombinacija. Farmaceutska kombinacija može da obuhvata acetil-leucin ili neku farmaceutski prihvatljivu so istog i neki farmaceutski prihvatljiv nosač. Referenca na farmaceutsku kombinaciju obuhvata aktivni agens sam ili u obliku farmaceutske kombinacije.

[0031] Farmaceutska kombinacija može da ima bilo koju od brojnih različitih oblika u zavisnosti, posebno, od načina u kom će se koristiti. Tako, na primer, može da bude u obliku praška, tablete, kapsule, tečnosti, masti, kreme, gela, hidrogela, aerosola, spreja, micelarnog rastvora, transdermalnog flastera, suspenzije lipozoma ili bilo kom drugom pogodnom obliku koji može da se daje osobi ili životinji kojoj je potreban tretman.

[0032] "Farmaceutski prihvatljiv nosač" kako je ovde pomenuto, je bilo koje poznato jedinjenje ili kombinacija poznatih jedinjenja koja su poznata prosečnim stručnjacima u tehnici da su korisna u formulisanju farmaceutskih kombinacija. Smatra se da nosač farmaceutske kombinacije treba da bude onaj kojeg toleriše subjekt kom se daje.

[0033] U jednom primeru izvođenja, farmaceutski prihvatljiv nosač može da bude čvrsta supstanca, a kombinacija može da bude u obliku praška ili tablete. Čvrst farmaceutski prihvatljiv nosač može da uključuje, ali bez ograničenja na, jednu ili više supstanci koje takođe mogu da deluju kao agensi za ukus, puferi, lubrikanti, stabilizatori, solubilizatori, suspendujući agensi, agensi za vlaženje, emulgatori, boje, punioci, glidanti, pomagala kompresije, inertna veziva, zaslađivači, konzervansi, boje, omotači, ili agensi za dezintegraciju tableta. Nosač može takođe da bude materijal za kapsuliranje. U praškovima, nosač može da bude fino podeljena čvrsta supstanca koja je umešana sa fino podeljenim aktivnim agensima prema ovom pronalasku. U tabletama, aktivni agens može da bude umešan sa nosačem koji ima potrebna svojstva kompresije u odgovarajućim proporcijama i može da bude zbijen u željeni oblik i veličinu. Praškovi i tablete mogu, na primer, da sadrže do 99% aktivnih agenasa. Pogodni čvrsti nosači uključuju, na primer, kalcijum fosfat, magnezijum stearat, talk, šećere, laktozu, dekstrin, skrob, želatin, celulozu, polivinilpirolidin, voskove niske temperature topljenja i jonoizmenjivačke smole. U drugom primeru izvođenja, farmaceutski prihvatljiv nosač može da bude gel, a kombinacija može da bude u obliku krema ili slično.

[0034] Nosač može da uključuje, ali nije ograničen na, jedan ili više ekscipijenasa ili razblaživača. Primeri tih ekscipijenasa su želatin, guma arabika, laktoza, mikrokristalina celuloza, skrob, natrijum skrob glikolat, kalcijum hidrogen fosfat, magnezijum stearat, talk, koloidalni silikon dioksid i slično.

[0035] U nekom drugom primeru izvođenja, farmaceutski prihvatljiv nosač može da bude tečnost. U jednom primeru izvođenja, farmaceutska kombinacija je u obliku rastvora. Tečni nosači se koriste u pripremi rastvora, suspenzija, emulzija, sirupa, eliksira i kombinacija pod pritiskom. Acetil-leucin može da bude rastvoren ili suspendovan u farmaceutski prihvatljivom tečnom nosaču kao što je voda, organski rastvarač, mešavina oba ili farmaceutski prihvatljiva ulja ili masti. Tečni nosač može da sadrži ostale pogodne farmaceutske aditive kao što su solubilizatori, emulgatori, puferi, konzervansi, zaslađivači, agensi za ukus, suspendujući agensi, agensi za zgušnjavanje, boje, regulatori viskoznosti, stabilizatori ili osmoregulatori. Pogodni primeri tečnih nosača za oralno i parenteralno davanje uključuju vodu (delimično sadrži aditive kao što su gore navedeni, npr. derivate celuloze, kao što je rastvor natrijum karboksimetil celuloze), alkohole (uključujući monohidroksilni alkoholi i polihidroksilni alkoholi, npr. glikoli) i njihove derivate, i ulja (npr. frakcionisano kokosovo ulje i ulje kikirikija). Za parenteralno davanje, nosač može takođe da bude uljani estar kao što je etil oleat i izopropil miristat. Sterilni tečni nosači su korisni u sterilnim kombinacijama u tečnom obliku za parenteralno davanje. Tečni nosač za kombinacije pod pritiskom može da bude halogenovani ugljovodonik ili neko drugo farmaceutski prihvatljivo gorivo.

[0036] Tečne farmaceutske kombinacije, koje su sterilni rastvori ili suspenzije, mogu da se koriste, na primer, intramuskularnom, intratekalnom, epiduralnom, intraperitonealnom, intravenoznom i delimično subkutanom injekcijom. Aktivni agens može da se pripremi kao sterilna čvrsta kombinacija koja može da se rastvori ili suspenduje u vreme davanja upotrebom sterilne vode, slanog rastvora, ili nekog drugog odgovarajućeg sterilnog injektibilnog medijuma.

[0037] Kombinacije mogu da se daju oralno u obliku sterilnog rastvora ili suspenzije koja sadrži ostale rastvorene supstance ili suspendujuće agense (na primer, dovoljno slanog rastvora ili glukoze kako bi se napravio izotoničan rastvor), žučne soli, akaciju, želatin, sorbitan monoleat, polisorbat 80 (oleat estre sorbitola i njegove anhidride kopolimerizovane sa etilen oksidom) i slično. Kombinacije mogu takođe da se daju oralno ili u tečnom ili u čvrstom obliku kombinacije. Kombinacije pogodne za oralno davanje uključuju čvrste oblike, kao što su pilule, kapsule, granule, tablete, i praškovi, i tečni oblici, kao što su rastvori, sirupi, eliksiri, i suspenzije. Oblici korisni za parenteralno davanje uključuju sterilne rastvore, emulzije, i suspenzije.

[0038] Acetil-leucin i kombinacije koje obuhvataju isti mogu alternativno da se daju inhalacijom (npr. intranazalno). Kombinacije mogu takođe da se formulišu za topikalnu upotrebu. Na primer, kremovi ili masti mogu da se nanose na kožu.

[0039] Acetil-leucin može da se inkorporira unutar sredstva za sporo ili odloženo oslobađanje. Takva sredstva mogu, na primer, da se nanesu na ili ispod kože, a lek može da se oslobađa tokom nedelja ili čak meseci. Takva sredstva mogu da budu povoljna kada je potrebno da se koristi dugotrajna terapija sa acetil-leucinom prema ovom pronalasku, a koja će obično da zahteva često davanje (npr. najmanje svakodnevno davanje).

[0040] U jednom primeru izvođenja, farmaceutska kombinacija je u obliku tablete. U tabletama, aktivni agens može da se umeša sa nosiocem, kao što je farmaceutski prihvatljiv nosač, koji ima neophodna svojstva kompresije u odgovarajućim proporcijama i može da se suzbije u željenom obliku i veličini. Tablete mogu da sadrže do 99 mas.% aktivnih agenasa.

[0041] Na primer, acetil-leucin, ili neka farmaceutski prihvatljiva so istog, može da se obezbedi u čvrstom doznom obliku pogodnom za oralno davanje, posebno u obliku tablete.

[0042] Farmaceutske kombinacije u čvrstom oralnom doznom obliku, kao što su tablete, mogu da se pripreme bilo kojim postupkom poznatim u oblasti farmacije. Farmaceutske kombinacije obično se pripremaju umešavanjem acetil-leucina, ili neke njegove farmaceutski prihvatljive soli, sa uobičajenim farmaceutski prihvatljivim nosačima.

[0043] Tableta može da se formuliše kao što je poznato u tehnici. Tanganil®, na primer, uključuje pšenični skrob, preželatinizirani kukuruzni (kukuruz) skrob, kalcijum karbonat i magnezijum stearat kao ekscipijense. Isti, ili slični, ekscipijensi, na primer, mogu da se koriste sa ovim pronalaskom.

[0044] Sastav svake 700 mg Tanganil® tablete je kao što sledi: 500 mg acetil-DL-leucina, 88 mg pšeničnog skroba, 88 mg preželatiniziranog kukuruznog (kukuruz) skroba, 13 mg kalcijum karbonata i 11 mg magnezijum stearata. Iste tablete, na primer, mogu da se koriste sa ovim pronalaskom.

[0045] Ovaj pronalazak opisuje acetil-leucin, uključujući kombinacije i njihove postupke, za lečenje LSD ili jednog ili više simptoma LSD-a kod subjekta kom je to potrebno. Subjekt kom je to potrebno može da ima genetički, biohemijski, ili neki drugi sličan identifikacioni marker LSD-a. Na primer, marker LSD-a može da bude celularni marker. Subjekt kom je to potrebno može da se dijagnostikuje kao da ima LSD. Na primer, kod subjekta može da se dijagnostikuje neki LSD prema genetičkom, biohemijskom, ili nekom drugom sličnom identifikacionom markeru. Kod subjekta kom je to potrebno može da se posumnja da ima ili je u riziku da ima LSD. Na primer, subjekt može da ima genetičke predispozicije za LSD (npr., subjekt može da ima jednog ili više članova porodice sa LSD-em). Subjekt kom je to potrebno može da bude simptomatski (tj., ima jedan ili više simptoma povezanih sa LSD-em). Subjekt kom je to potrebno može da bude asimptomatski. Smatra se da se pojmovi "simptomaski" i "asimptomatski" koriste upućivanjem na simptome LSD-a. Subjekti koji imaju genetički, biohemijski, ili neki drugi sličan identifikacioni marker LSD-a, kao što su subjekti kod kojih je dijagnostikovan LSD na osnovu genetičkog, biohemijskog, ili nekog drugog sličnog identifikacionog markera, ali koji nemaju dalje simptome bolesti su uključeni unutar obima "asimptomatski" za svrhe ovog pronalaska.

[0046] Kao što se ovde koristi, "lečenje LSD ili jednog ili više simptoma LSD-a" i slično odnosi se na odlaganje pojave LSD ili jednog ili više simptoma LSD-a za koje bi se inače moglo očekivati da se manifestuju prema uobičajenoj progresiji bolesti, smanjenje ozbiljnosti LSD-a ili smanjenje ozbiljnosti ili eliminisanje jednog ili više postojećih simptoma povezanih sa LSD-em, odlaganje progresije LSD ili jednog ili više simptoma LSD-a tokom vremena u poređenju sa uobičajenom progresijom bolesti, i/ili preokretanje progresije LSD ili jednog ili više simptoma LSD-a tokom vremena. "Lečenje LSD ili jednog ili više simptoma LSD-a" može takođe da se odnosi na poboljšanje biohemijskog markera za LSD.

[0047] Kao što se ovde koristi, "uobičajena progresija bolesti," "progresija bolesti koje može obično da se očekuje" i slično odnose se na uobičajenu ili očekivanu progresiju LSD, jednog ili više simptoma povezanih sa LSD-em, ili nekog biohemijskog markera LSD ako se subjekt ne leči. Uobičajena ili očekivana progresija bolesti može da bude bazirana, na primer, na poznatoj skali, indeksu, proceni, ili oceni, ili nekom drugom pogodnom testu, za ocenjivanje progresije LSD, jednog ili više simptoma povezanih sa LSD-em, ili biohemijskog markera za LSD, kao što su oni opisani ovde. Skala, indeks,

1

procena, ocena, neki drugi pogodan test mogu da odgovaraju progresiji LSD ukupno ili progresiji jednog ili više simptoma povezanih sa LSD-em. Na primer, uobičajena ili očekivana progresija bolesti može da bude na osnovu uobičajene ili očekivane pojave ili ozbiljnosti LSD ili simptoma ili kolekcije simptoma povezanih sa LSD-em. Uobičajena ili očekivana progresija bolesti može da se odredi na subjekt-posubjekt osnovi ili može da se bazira na onom što se obično primeti za ili iskusi prikupljanjem subjekata pogođenih sa LSD, kao što su populacija ili podpopulacija subjekata. Podpopulacije mogu da uključuju, na primer, podpopulacije istog pola, istog ili sličnog godišta, istog ili sličnog vremena pojave jednog ili više simptoma, itd.

[0048] U jednom otkrivanju, "lečenje LSD ili jednog ili više simptoma LSD-a" odnosi se na odlaganje pojave LSD ili jednog ili više simptoma LSD-a za koje bi se inače moglo očekivati da se manifestuju prema uobičajenoj progresiji bolesti. Kao što se ovde koristi, "odlaganje pojave LSD ili jednog ili više simptoma LSD-a" i slično odnosi se na produženje vremena za, ili sprečavanje, pojavu LSD ili jednog ili više simptoma LSD-a. Na primer, može se reći da će pojava da se odloži kada je vreme za manifestaciju LSD ili jednog ili više simptoma LSD-a najmanje 5% duže od onog zapaženog prema uobičajenoj progresiji bolesti. Dalje, na primer, porast vremena od najmanje 10%, najmanje 15%, najmanje 20%, najmanje 25%, najmanje 30%, najmanje 40%, najmanje 50%, najmanje 60%, najmanje 70%, najmanje 80%, najmanje 90% ili najmanje 100% je opažen. U jednom primeru izvođenja, subjekt je asimptomatski. Davanje acetil-leucina može da se inicira u vreme kada je subjekt asimptomatski kako bi se odložila pojava LSD ili jednog ili više simptoma LSD-a za koje bi se inače moglo očekivati da se manifestuju prema uobičajenoj progresiji bolesti. U nekom drugom primeru izvođenja, subjekt je simptomatski. Davanje acetil-leucina može da se inicira u vreme kada subjekt ima neke simptome kako bi se odložila pojava jednog ili više dodatnih simptoma LSD-a za koje bi se inače moglo očekivati da se manifestuju prema uobičajenoj progresiji bolesti. Subjekt kom je to potrebno može da nastavi da prima terapiju sa acetilleucinom u skladu sa trajanjima opisanim ovde. U jednom otkrivanju, terapija sprečava pojavu jednog ili više simptoma LSD-a za koje bi se inače moglo očekivati da se manifestuju prema uobičajenoj progresiji bolesti.

[0049] U jednom otkrivanju, "lečenje LSD ili jednog ili više simptoma LSD-a" odnosi se na smanjenje ozbiljnosti LSD ili smanjenje ozbiljnosti ili eliminisanje jednog ili više postojećih simptoma povezan sa LSD-em. Ozbiljnost LSD ili postojećeg(ih) simptoma može da se oceni upotrebom poznate skale, indeksa, procene, ili ocene, kao što su one opisane kao primeri ovde, ili nekog drugog pogodnog testa za procenu ozbiljnosti. Na primer, skala, indeks, procena, ocena, neki drugi pogodan test može da odgovara ozbiljnosti LSD ukupno ili ozbiljnosti jednog ili više simptoma povezanih sa LSD-em. U jednom primeru izvođenja, lečenje poboljšava takvu procenu od vrednosti ili stepena karakterističnog za simptomatskog pacijenta do vrednosti ili stepena karakterističnog za ne-simptomatskog pacijenta.

[0050] U jednom otkrivanju, "lečenje LSD ili jednog ili više simptoma LSD-a" odnosi se na odlaganje progresije LSD ili jednog ili više simptoma povezanih sa LSD-em tokom vremena u poređenju sa uobičajenom progresijom bolesti, ili preokretanje progresije LSD ili jednog ili više simptoma povezanih sa LSD-em tokom vremena. Vreme tokom kojeg lečenje odlaže ili preokreće progresiju može da se podudara sa trajanjem lečenja kao što je opisano gore. Lečenje može da odloži ili preokrene progresiju tokom trajanja od, na primer, oko sedam dana ili više, oko dve nedelje ili više, oko tri nedelje ili više, oko jednog meseca ili više, oko šest nedelja ili više, oko sedam nedelja ili više ili oko dva meseca ili više. Na primer, lečenje odlaže ili preokreće progresiju tokom trajanja od oko tri meseca ili više, oko četiri meseca ili više, oko pet meseci ili više ili oko šest meseci ili više. Dalje, na primer, odlaže ili preokreće progresiju tokom trajanja od oko 1 godine ili više, oko 2 godine ili više, oko 3 godine ili više, oko 4 godine ili više, oko 5 godina ili više, ili oko 10 godina ili više. Lečenje može da odloži ili preokrene progresiju LSD ili jednog ili više simptoma povezanih sa LSD-em tokom životnog veka pacijenta.

[0051] U jednom otkrivanju, "lečenje LSD ili jednog ili više simptoma LSD-a" odnosi se na odlaganje napredovanja LSD ili jednog ili više simptoma LSD-a tokom vremena u poređenju sa uobičajenom progresijom bolesti. Kao što se ovde koristi, "odlaganje progresije LSD ili jednog ili više simptoma povezanih sa LSD-em tokom vremena" i slično odnosi se na usporavanje i/ili zaustavljanje progresije LSD ili jednog ili više simptoma LSD-a (npr., usporavanje i/ili zaustavljanje pogoršanja ili porasta ozbiljnosti LSD ili jednog ili više simptoma LSD-a) tokom vremena. Progresija bolesti može da se odredi, na primer, upotrebom poznate skale, indeksa, procene, ili ocene, kao što su oni opisani kao primeri ovde, ili ostali pogodni testovi za ocenjivanje progresije. Na primer, skala, indeks, procena, ocena, ili neki drugi pogodan test može da odgovara progresiji LSD ukupno ili progresiji jednog ili više simptoma povezanih sa LSD. U jednom otkrivanju, "odlaganje progresije LSD ili jednog ili više simptoma povezanih sa LSD" znači da se vrednost ozbiljnosti bolesti kod subjekta (npr., ukupna ozbiljnost ili ozbiljnost jednog ili više simptoma) određena poznatom skalom, indeksom, procenom, ocenom, itd., ili nekim drugim pogodnim testom za evaluaciju ozbiljnosti, smisleno ne povećava (npr., najmanje ostaje suštinski konstantna). U jednom otkrivanju, "odlaganje progresije LSD ili jednog ili više simptoma LSD-a" znači da se preči subjekt od dostizanja, ili porasta vremena uzetog za subjekt da dostigne (npr., smanjenje brzine promene rastuće ozbiljnosti), vrednost ozbiljnosti prema poznatoj skali, indeksu, proceni, oceni, itd., ili nekom drugom pogodnom testu, za ocenjivanje progresije u poređenju sa vrednošću koja odgovara uobičajenoj progresiji bolesti. Na primer, za progresiju se može reći da je odložena kada vreme za dostizanje vrednosti ozbiljnosti traje najmanje 5% duže od onog opaženog prema uobičajenoj progresiji bolesti. Dalje, na primer, produženje vremena od najmanje 10%, najmanje 15%, najmanje 20%, najmanje 25%, najmanje 30%, najmanje 40%, najmanje 50%, najmanje 60%, najmanje 70%, najmanje 80%, najmanje 90% ili najmanje 100% je primećeno. Vreme tokom kojeg lečenje odlaže progresiju LSD ili jednog ili više simptoma LSD-a može da se podudara sa trajanjem lečenja kao što je opisano gore. U jednom otkrivanju, lečenje odlaže progresiju za najmanje oko tri meseca, najmanje oko četiri meseca, najmanje oko pet meseci, ili najmanje oko šest meseci. U nekom drugom otkrivanju, lečenje odlaže progresiju za najmanje oko 1 godine, najmanje oko 2 godine, najmanje oko 3 godine, najmanje oko 4 godine, najmanje oko 5 godina, ili najmanje oko 10 godina. Lečenje može da odloži progresiju tokom životnog veka pacijenta.

[0052] U jednom otkrivanju, "lečenje LSD ili jednog ili više simptoma LSD" odnosi se na preokretanje napredovanja LSD ili jednog ili više simptoma LSD tokom vremena. Kao što se ovde koristi, "preokretanje napredovanja LSD ili jednog ili više simptoma LSD-a tokom vremena" i slično odnose se na zaustavljanje napredovanja i smanjenje ozbiljnosti LSD ili jednog ili više simptoma LSD-a tokom vremena. Progresija i ozbiljnost bolesti može da se odredi, na primer, upotrebom poznate skale, indeksa, procene, ili ocene, kao što su oni opisani kao primeri ovde, ili nekog drugog pogodnog testa za procenjivanje progresije i ozbiljnosti. Na primer, skala, indeks, procena, ocena, ili neki drugi pogodni test može da odgovara progresiji i ozbiljnosti LSD ukupno ili progresiji i ozbiljnosti jednog ili više simptoma povezanih sa LSD. U jednom otkrivanju, "preokretanje napredovanja LSD ili jednog ili više simptoma LSD-a tokom vremena" znači da se vrednost ozbiljnosti bolesti kod subjekta (npr., ukupna ozbiljnost ili ozbiljnost jednog ili više simptoma) određena poznatom skalom, indeksom, procenom, ocenom, itd., ili nekim drugim pogodnim testom, za evaluaciju ozbiljnosti, poboljšava tokom vremena (tj., pokazuje smanjenje u ozbiljnosti tokom vremena). Vreme tokom kojeg lečenje preokreće progresiju LSD ili jednog ili više simptoma LSD-a može da se podudara sa trajanjem lečenja kao što je opisano ovde. U jednom otkrivanju, lečenje preokreće progresiju za najmanje oko tri meseca, najmanje oko četiri meseca, najmanje oko pet meseci, ili najmanje oko šest meseci. U nekom drugom primeru izvođenja, lečenje preokreće progresiju za najmanje oko 1 godine, najmanje oko 2 godine, najmanje oko 3 godine, najmanje oko 4 godine, najmanje oko 5 godina, ili najmanje oko 10 godina. Lečenje može da preokrene progresiju tokom životnog veka pacijenta.

[0053] U jednom otkrivanju, "lečenje LSD ili jednog ili više simptoma LSD" odnosi se na poboljšanje biohemijskog markera za LSD kod pacijenta (npr., povišeni nivoi skladištenog(ih) metabolita ili sekundarnih biohemijskih promena koje proizilaze iz primarnog skladištenja). Biohemijski marker je signal aktivnosti bolesti i može da obezbeđuje tekuće indikacije ozbiljnosti i progresije bolesti tokom vremena. U jednom primeru izvođenja, biohemijski marker je poboljšan u pogledu kontrolne vrednosti. U jednom primeru izvođenja, biohemijski marker je odabran od povećane lizozomalne zapremine i povišenih nivoa glikosfingolipida (GSL). U jednom primeru izvođenja, biohemijski marker je povećana lizozomalna zapremina i lečenje smanjuje lizozomalnu zapreminu kod subjekta. U jednom primeru izvođenja, biohemijski marker je povišeni nivoi glikosfingolipida (GSL) i lečenje smanjuje GSL nivoe kod subjekta. U jednom primeru izvođenja, lečenje poboljšava biohemijski marker tokom vremena. Na primer, u jednom primeru izvođenja, poboljšanje biohemijskog markera tokom vremena znači da

1

lečenje poboljšava biohemijski marker tokom vremena ka kontrolnoj vrednosti, sprečava progresiju biohemijskog markera tokom vremena, i/ili odlaže progresiju biohemijskog markera tokom vremena u poređenju sa uobičajenom progresijom bolesti. Vreme tokom kojeg lečenje poboljšava biohemijski marker može da se podudara sa trajanjem lečenja kao što je ovde opisano. U jednom primeru izvođenja, lečenje poboljšava biohemijski marker za najmanje oko tri meseca, najmanje oko četiri meseca, najmanje oko pet meseci, ili najmanje oko šest meseci. U daljem primeru izvođenja, lečenje poboljšava biohemijski marker za najmanje oko 1 godine, najmanje oko 2 godine, najmanje oko 3 godine, najmanje oko 4 godine, najmanje oko 5 godina, ili najmanje oko 10 godina. Lečenje može da poboljša biohemijski marker tokom životnog veka pacijenta.

[0054] "Simptom" LSD-a uključuje bilo koju kliničku ili laboratorijsku manifestaciju povezanu sa LSD-em i nije ograničen na ono što subjekt može da oseti ili opazi. Simptomi kao što je ovde opisano uključuju, ali nisu ograničeni na, neurološke simptome i psihijatrijske simptome. Primeri neuroloških simptoma uključuju ataksiju, ostale poremećaje kretanja kao što su hipokinezija, tegoba, tremor ili distonija, centralne okularne motorne poremećaje kao što je vertikalna i horizontalna supranuklearna paraliza pomeranja očiju/zurenja i neuropsihološke deficite kao što je demencija. Primeri psihijatrijskih simptoma uključuju depresiju, poremećaje ponašanja ili psihozu. Pojava simptoma može da bude u opsegu od rođenja do zrelog doba.

[0055] Progresija LSD ili jednog ili više simptoma LSD-a tokom vremena ili tokom lečenja može da se prati, na primer, upotrebom jednog ili više poznatih testova u dve ili više vremenskih tačaka i poređenjem rezultata. Progresija i/ili ozbiljnost bolesti može da se oceni, na primer, upotrebom Skale za procenjivanje i ocenjivanje ataksije (SARA), Funkcionalnog indeksa spinocerebelarne ataksije (SCAFI), Međunarodne kooperativne skale za ocenjivanje ataksije (ICARS), kratke skale za ocenjivanje ataksije (BARS), modifikovane skale za ocenjivanje invalidnosti (mDRS), EuroQol 5Q-5D-5L (EQ-5D-5L), vizuelne analogne skale (VAS), Wechsler skale inteligencije za odrasle osobe-revidirana (WAIS-R), Wechsler skale inteligencije za decu-IV (WISC-IV), Montrealske procene kognicije (MoCA) ili ostalih pogodnih testova. Za određene LSD-e, kao što je NPC, određene ocene su razvijene i validirane tokom poslednjih dekada, na primer, klinička ocena ozbiljnosti (CSS) i godišnja ocena povećanja ozbiljnosti (ASIS) (videti Yanjanin et al., "Linear Clinical Progression, Independent of Age of Onset, in Niemann-Pick Disease, Type C," Am J Med Genet Part B 153B:132-140) i modifikovana 6-domenska skala NP-C invalidnosti (mDRS ocena). Na primer, NPC ozbiljnost kod pacijenta može da se kvantifikuje dodeljivanjem CSS, koja procenjuje razne parametre bolesti (ambulacija, napadi, pomeranje očiju, itd.) i daje svakom parametru rezultat od 5. Viša ocena jednaka je većoj ozbiljnosti. ASIS kvantifikuje godišnju stopu promene u CSS, izračunata deljenjem CSS sa starošću pacijenta. U vezi sa tim, određene ocene u ovim testovima su karakteristike simptomatskih LSD pacijenata i dokaz progresije i/ili ozbiljnosti bolesti.

[0056] Tako, "lečenje LSD ili jednog ili više simptoma LSD-a," na primer, može da se izjednači sa postizanjem poboljšanog procenjivanja, kao što su oni opisani ovde, SARA, SCAFI, ICARS, BARS, mDRS, EQ-5D-5L, VAS, WAIS-R, WISC-IV, CSS i/ili MoCA ocena, ili rezultata drugog testa pogodnog za karakterisanje LSD subjekta. Na primer, u jednom otkrivanju, "smanjenje ozbiljnosti LSD ili smanjenje ozbiljnosti ili eliminisanje jednog ili više postojećih simptoma LSD-a" znači poboljšanje SARA, SCAFI, ICARS, BARS, mDRS, EQ-5D-5L, VAS, WAIS-R, WISC-IV, CSS i/ili MoCA ocene, ili rezultata nekog drugog pogodnog testa za evaluaciju ozbiljnosti, kao što je poboljšanje ocene ili rezultata od vrednosti ozbiljnosti karakteristične za simptomatskog subjekta do vrednosti karakteristične za ne-simptomatskog subjekta. U nekom drugom otkrivanju, "odlaganje progresije LSD ili jednog ili više simptoma LSD-a" znači da se SARA, SCAFI, ICARS, BARS, mDRS, EQ-5D-5L, VAS, WAIS-R, WISC-IV, CSS i/ili MoCA ocena subjekta, ili rezultat nekog drugog pogodnog testa za evaluaciju progresije, smisleno ne povećava (npr., najmanje ostaje suštinski konstantna). U daljem otkrivanju, "odlaganje progresije LSD ili jednog ili više simptoma LSD-a" znači sprečavanje SARA, SCAFI, ICARS, BARS, mDRS, EQ-5D-5L, VAS, WAIS-R, WISC-IV, CSS i/ili MoCA ocene subjekta, ili rezultat nekog drugog pogodnog testa za evaluaciju progresije, da dostigne, ili da poveća vreme da se dostigne, vrednost u odnosu na onu uobičajene progresije bolesti. U nekom drugom primeru izvođenja, "preokretanje progresije LSD ili jednog ili više simptoma LSD-a tokom vremena" znači da se SARA, SCAFI, ICARS, BARS, mDRS, EQ-5D-5L, VAS, WAIS-R, WISC-IV, CSS i/ili MoCA ocena subjekta, ili rezultat nekog drugog pogodnog testa za evaluaciju progresije, poboljšava tokom vremena (tj., pokazuje smanjenje u ozbiljnosti tokom vremena).

[0057] Na primer, radi evaluacije ukupnog neurološkog statusa, mDRS, četvoro-domenska skala (ambulacija, manipulacija, jezik i gutanje), može da se primeni. Cerebelarna funkcija može da se oceni upotrebom SARA, klinička skala za ocenjivanje sa osam stavki (hod, stav, sedenje, govor, fina motorna funkcija i taksija; opseg 0-40, gde je 0 najbolji neurološki status, a 40 najgori), i SCAFI, koja obuhvata 8-m-hodajuće-vreme (8MW; izvodi se tako što pacijenti hodaju dvaput brže što je moguće od jedne linije do druge isključujući okrete), 9-rupa-klin-test (9HPT) i broj "PATA" ponavljanja tokom 10 s. Subjektivno oštećenje i kvalitet života može da se oceni upotrebom EQ-5D-5L upitnika i VAS. Kako bi se ocenila očna motorna funkcija, 3-dimenzionalna videookulografija (EyeSeeCam) može da se koristi za merenje brzine pika pomeranja očiju, dobit od finog praćenja očima, pika sporo-fazne brzine zurenjem-provociranog nistagmusa (funkcija zadržavanja pogleda), pika sporo-fazne brzine optokinetičkog nistagmusa, i dobit od horizontalne vestibulo-okularne refleksije. Kako bi se ocenilo kognitivno stanje, WAIS-R ili WISC-IV, i MoCA, ocenjivanje različitih kognitivnih domena, uključujući pažnju i koncentraciju, funkcije izvršavanja, pamćenje, jezik, vizuelnokonstrukcione veštine, konceptualno razmišljanje, proračune, i orijentaciju sa maksimumom od 30 poena i prekidnom ocenom od 26, može da se koristi. Prosečan stručnjak znaće kako da izvede ove i druge takve testove.

1

[0058] Acetil-leucin, ili neka farmaceutski prihvatljiva so istog, može da se daje, na primer, u dozi koja je u opsegu od oko 500 mg do oko 15 g dnevno ili u opsegu od oko 500 mg do oko 10 g dnevno, kao što je u opsegu od oko 1,5 g do oko 10 g dnevno, opciono čvrstim oralnim ili tečnim oralnim putem. Acetilleucin, ili neka farmaceutski prihvatljiva so istog, može da se daje, na primer, u dozi prema onoj Tanganil®, koji se propisuje odraslima u dozi od 1,5 g do 2 g dnevno, 3-4 tablete u dve doze, ujutru i uveče.

[0059] Ako se jedan enantiomer daje, doze mogu da se redukuju prema tome. Na primer, ako se samo acetil-L-leucin ili ako se samo acetil-D-leucin daje, doza može da bude u opsegu od oko 250 mg do oko 15 g dnevno, opsegu od oko 250 mg do oko 10 g dnevno, ili opsegu od oko 250 mg do oko 5 g dnevno, kao što je od oko 0,75 g do oko 5 g dnevno.

[0060] U jednom primeru izvođenja, dati dozni opsezi od oko 1 g do oko 15 g dnevno, od oko 1 g do oko 10 g dnevno, ili od oko 1,5 g do oko 7 g dnevno. Može da bude od oko 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, ili 14 g do oko 15 g dnevno. Može biti od oko 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 ili 9 g do oko 10 g dnevno. Može biti više od oko 1,5 g dnevno, ali manje od oko 15, 14, 13, 12, 11, 10, 9, 8, 7, 6 ili 5 g dnevno. U jednom primeru izvođenja, doza je u opsegu od oko 4 g do oko 6 g dnevno. U nekom drugom primeru izvođenja, doza je u opsegu od oko 4 g do oko 5 g dnevno. U jednom primeru izvođenja, doza je oko 4,5 g dnevno. U jednom primeru izvođenja, doza je oko 5 g dnevno. U jednom primeru izvođenja, doze se daju u čvrstom oralnom doznom obliku, posebno tablete. U nekom drugom primeru izvođenja, ove doze su za acetilleucin kada je u svom racemskom obliku. Doze za acetil-leucin kada je prisutan enantiomerni višak mogu biti niže od onih navedenih ovde, na primer, oko 50% niže. Gore navedeni dozni opsezi kada se prepolove tako su takođe eksplicitno obuhvaćeni ovim pronalaskom.

[0061] Ukupna dnevna doza može da se raširi na više davanja, tj. davanje može da bude dva ili više puta dnevno kako bi se postigla ukupna dnevna doza. Kao na primer, potreban broj tableta radi obezbeđivanja ukupne dnevne doze acetil-leucina može da bude podeljen na dva davanja (na primer, ujutru i uveče) ili tri davanja (na primer, ujutru, u podne i uveče). Svaka doza može da bude pogodna za davanje sa ili bez hrane. Na primer, acetil-leucin može da se daje oko 1 ili oko 2 sata pre obroka, kao što je najmanje oko 20 minuta, najmanje oko 30 minuta, najmanje oko 40 minuta, ili najmanje oko 1 sat pre obroka, ili može da se daje oko 1, oko 2, ili oko 3 sata posle obroka, kao što je čekanje od najmanje oko 20 minuta, najmanje oko 30 minuta, najmanje oko 1 sata, najmanje oko 1,5 sati, najmanje oko 2 sata, ili najmanje oko 2,5 sata nakon obroka. Na primer, ukupna dnevna doza od 4,5 g acetil-DL-leucina može da se daje kao tri tablete Tanganil® (ili ekvivalenta) pre, sa, ili posle doručka, tri dodatne tablete pre, sa, ili posle ručka, i tri dodatne tablete pre, sa, ili posle večere.

[0062] Davanje acetil-leucina u skladu sa ovim pronalaskom može da se započne pre ili posle otkrivanja da subjekt ima genetički, biohemijski, ili neki drugi slični identifikacioni marker LSD-a, kao što je, u slučaju prethodnog, kada se za subjekt sumnja da ima ili je u riziku da ima LSD. Davanje može da se

1

započne u ili oko vremena kada je otkriveno da subjekt ima genetički, biohemijski, ili neki drugi sličan identifikacioni marker LSD-a. Slično, davanje može da se započne pre, u ili oko vremena, ili nakon što se kod subjekta dijagnostikuje LSD, kao što je pre, u ili oko vremena, ili nakon što se kod subjekta otkrije da ima genetički, biohemijski, ili neki drugi sličan identifikacioni marker LSD-a. Davanje acetil-leucina može da se započne kada je subjekt simptomatski ili asimptomatski. Posebno, jedna od prednosti lečenja acetil-leucinom, prema ovom pronalasku, je da davanje acetil-leucina može da se započne već u vreme nakon što se otkrije da subjekt ima genetički i/ili biohemijski marker za LSD ali pre nego što subjekt pokaže simptome LSD-a (drugačije od genetičkog i/ili biohemijskog markera, tj., subjekt je asimptomatski) ili pre nego što subjekt pokaže jedan ili više simptoma koji se smatraju obeležjima bolesti. Lečenje može da odloži pojavu LSD ili jednog ili više simptoma povezanih sa LSD-em, kao što je ovde opisano. Lečenje može takođe da se nastavi neko vreme kao što je ovde opisano.

[0063] Kao što je ovde opisano, prednost lečenja acetil-leucinom, prema ovom pronalasku, je da acetilleucin može da se daje tokom dugotrajnog vremena kako bi se, na primer, odložila ili čak preokrenula progresija LSD ili jednog ili više simptoma LSD-a kod subjekta u poređenju sa uobičajenom progresijom bolesti. Trajanje lečenja može da bude, na primer, oko sedam dana ili duže, oko dve nedelje ili duže, oko tri nedelje ili duže, oko jednog meseca ili duže, oko šest nedelja ili duže, oko sedam nedelja ili duže, ili oko dva meseca ili duže. U jednom primeru izvođenja, ono je oko tri meseca ili duže, oko četiri meseca ili duže, oko pet meseci ili duže ili oko šest meseci ili duže. Trajanje lečenja može da bude oko 1 godine ili duže, oko 2 godine ili duže, oko 4 godine ili duže, oko 5 godina ili duže, ili oko 10 godina ili duže.

Trajanje lečenja može da bude tokom celog života pacijenta.

[0064] Bilo koja i sve kombinacije doznog oblika, dozna količina, dozni raspored i trajanje lečenja predviđeni su i obuhvaćeni ovim pronalaskom. U jednom primeru izvođenja, doza je od oko 4 g do oko 10 g dnevno, uzeta putem jednog, dva, ili tri davanja dnevno, za trajanje lečenja od oko dva meseca ili više. U nekom drugom primeru izvođenja, doza je veća od 4 g ali ne veća od 5 g dnevno, uzeta putem jednog dva ili tri davanja dnevno, za trajanje lečenja od oko šest meseci ili više. Dozni oblik može da bude čvrsti oralni dozni oblik, posebno tablete.

[0065] Farmaceutska kombinacija može da se koristi kao monoterapija (npr., upotreba aktivnog agensa samog) za lečenje LSD kod subjekta. Alternativno, farmaceutska kombinacija može da se koristi kao dopuna, ili u kombinaciji sa, ostalim poznatim terapijama, npr., za lečenje LSD kod subjekta.

[0066] U jednom primeru izvođenja, acetil-leucin, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, leče gubitak mase, pogoršanje hoda, i/ili pogoršanje motorne funkcije povezano sa Niemann-Pickovom bolesti tipa C. Na primer, acetil-leucin, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, može da odloži pojavu, smanji ozbiljnost ili eliminiše, ili odloži ili preokrene progresiju gubitka mase, pogoršanja hoda, i/ili pogoršanja motorne funkcije povezanog sa Niemann-Pickovom bolesti tipa C.

1

[0067] Dalje je otkriven postupak lečenja LSD ili jednog ili više simptoma LSD kod subjekta kom je to potrebno, pri čemu taj postupak obuhvata davanje terapeutski efektivne količine acetil-leucina, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, subjektu.

[0068] "Terapeutski efektivna količina" agensa je bila koja količina koja, kada se daju subjektu, je količina agensa koja je potrebna kako bi se proizveo željeni efekat, koji, za ovaj opis, može da bude terapeutski i/ili profilaktički. Doza može da se odredi prema raznim parametrima, kao što je specifičan oblik korišćenog acetil-leucina; starost, masa i stanje pacijenta koji se leči; tip bolesti; put davanja; i potreban režim. Lekar će biti moći da odredi potreban put davanja i dozu za bilo kog određenog pacijenta. Na primer, dnevna doza može da bude od oko 10 do oko 225 mg po kg, od oko 10 do oko 150 mg po kg, ili od oko 10 do oko 100 mg po kg telesne mase.

[0069] Takođe je opisan komplet za lečenje LSD kod subjekta kom je to potrebno (npr., subjekt koji ima, za kog se sumnja da ima, ili je u riziku da ima LSD), koji obuhvata sredstva za dijagnostikovanje ili prognozu LSD-a, i acetil-leucin ili neku njegovu farmaceutski prihvatljivu so.

[0070] Sredstva za dijagnostikovanje ili prognozu nekog LSD mogu da uključuju specifični vezujući agens, sondu, prajmer, par ili kombinaciju prajmera, neki enzim ili antitelo, uključujući fragment antitela, koja mogu da detektuju ili pomognu u detekciji nekog LSD, kao što je definisano ovde. Komplet može da obuhvata LysoTracker®, koji je fluorescentni marker i komercijalno je dostupan i od Invitrogen kao i od Lonza. LysoTracker® može da bude plav, plavo-beli, žut, zelen ili crven.

[0071] Komplet takođe obuhvata acetil-leucin ili neku njegovu farmaceutski prihvatljivu so, kao što je definisano ovde. Komplet može dalje da obuhvata pufere ili vodene rastvore. Komplet može dalje da obuhvata instrukcije za upotrebu acetil-leucina ili neke njegove farmaceutski prihvatljive soli u postupku ovog pronalaska.

[0072] U daljem otkrivanju, opisan je acetil-leucin, ili neka njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu u postupku obezbeđivanja neuroprotekcije kod subjekta koji ima, za kog se sumnja da ima, ili je u riziku da ima LSD.

[0073] "Neuroprotekcija" i njene srodne reči, kao što se ovde koriste, odnose se na prevenciju, usporavanje, i/ili preokrenutu progresiju neurodegeneracije, uključujući, ali bez ograničenja na, progresivni gubitak neuronske strukture, progresivni gubitak neuronske funkcije, i/ili progresivnu smrt neurona. Obezbeđivanje neuroprotekcije može da rezultuje odlaganjem pojave LSD-a ili jednog ili više simptoma LSD-a za koje bi se inače moglo očekivati da se manifestuju prema uobičajenoj progresiji bolesti, smanjenjem ozbiljnosti LSD-a ili smanjenjem ozbiljnosti ili eliminisanjem jednog ili više postojećih simptoma povezanih sa LSD-om, odlaganjem progresije LSD-a ili jednog ili više simptoma LSD-a tokom vremena u poređenju sa uobičajenom progresijom bolesti, i/ili preokretanjem progresije LSD-a ili jednog ili više simptoma LSD-a tokom vremena. Vreme tokom kog je neuroprotekcija obezbeđena može da se podudara sa trajanjem lečenja kao što je ovde opisano. Lečenje može da obezbedi

1

neuroprotekciju tokom nekog vremena, na primer, oko sedam dana ili više, oko dve nedelje ili više, oko tri nedelje ili više, oko jednog meseca ili više, oko šest nedelja ili više, oko sedam nedelja ili više ili oko dva meseca ili više. Dalje, na primer, lečenje obezbeđuje neuroprotekciju tokom nekog vremena od oko tri meseca ili više, oko četiri meseca ili više, oko pet meseci ili više ili oko šest meseci ili više. U nekom drugom primeru izvođenja, obezbeđuje neuroprotekciju tokom nekog vremena od oko 1 godine ili više, oko 2 godine ili više, oko 3 godine ili više, oko 4 godine ili više, oko 5 godina ili više, ili oko 10 godina ili više. Lečenje može da obezbedi neuroprotekciju tokom životnog veka pacijenta.

[0074] Kao što je dokazano u primerima, pronalazači veruju da acetil-leucin deluje kao neuroprotektivni agens i da tako inhibira neurodegeneraciju za koju bi se inače moglo očekivati da se manifestuje.

[0075] U jednom otkrivanju, postoji postupak obezbeđivanja neuroprotekcije kod subjekta koji ima, za kog se sumnja da ima, ili je u riziku da ima LSD, pri čemu taj postupak obuhvata davanje terapeutski efektivne količine acetil-leucina, ili neke njegove farmaceutski prihvatljive soli, subjektu.

[0076] Takođe je opisan komplet za obezbeđivanje neuroprotekcije kod subjekta koji ima, za kog se sumnja da ima, ili je u riziku da ima LSD, pri čemu taj komplet obuhvata sredstva za dijagnostikovanje ili prognoziranje LSD-a, i acetil-leucin ili neku njegovu farmaceutski prihvatljivu so.

[0077] Ovaj pronalazak dalje uključuje upotrebu acetil-leucina, ili neke njegove farmaceutski prihvatljive soli, kao neuroprotektivnog agensa kod subjekta koji ima, za kog se sumnja da ima, ili je u riziku da ima LSD.

[0078] Sve karakteristike opisane ovde (uključujući bilo koje prateće patentne zahteve, apstrakt i crteže), i/ili sve faze bilo kog postupka tako opisane, mogu da se kombinuju sa bilo kojim od gornjih aspekata u bilo kojoj kombinaciji, osim kombinacija gde su najmanje neka od tih karakteristika i/ili faza međusobno isključive.

Primeri

[0079] Ovaj pronalazak u nastavku će biti detaljnije objašnjen putem primera koji slede, a koji demonstriraju korisnost acetil-leucina u lečenju LSD-a kod subjekta i obezbeđivanju neuroprotekcije kod pomenutog subjekta.

Primer 1

In Vivo ispitivanje na miševima - Postupci

Mišji model

[0080] U ovom ispitivanju koristi se autentičan mišji model NPC-a, Npc1<-/->(BALB/cNctr-Npc1<m1N>/J) miš, koji je nula za NPC1 protein i pokazuje sva obeležja kliničke bolesti (Loftus, 1997).

[0081] Ovaj mutantni soj nastao je spontano i ima životni vek u opsegu od 10-14 nedelja i, zbog toga, ima tok bolesti više akutan od velike većine pacijenata. Mutantni miš je iskorišćen uspešno, ne samo za

1

određivanje ontogena bolesti i patogenih mehanizama koji su u osnovi, već i za evaluaciju eksperimentalnih terapija. Analize koje koriste ove miševe preduzete su na celoj životinji, ćelijskim i molekulskim nivoima (Baudry, 2003; Smith, 2009; Cologna, 2014; Cologna, 2012). To je najintenzivnije ispitivani životinjski model NPC-a.

[0082] Pre oko 4-5 nedelje starosti Npc1<-/->miševi nemaju primetnu bihejvrioralnu indikaciju bolesti koja ih razlikuje od parnjaka divljeg tipa iz legla. Prve indikacije bihejvrioralnih deficita, kao što su tremor i ataksični hod, javljaju se u nedeljama 5-6; gde u nedeljama 7-8 defekti u motornoj koordinaciji postaju očigledniji, a u 9-10 nedelji ataksija je napredovala i praćena je povećanim gubitkom mase i lošim stanjem krzna jer su ishrana i pijenje postali otežani (primenjena humana krajnja tačka) (Smith, 2009).

[0083] (Npc1<+/+>) parnjaci divljeg tipa iz legla korišćeni su kao kontrole.

Protokol tretiranja

[0084] Grupa Npc1<-/->miševa i grupa Npc1<+/+>miševa tretirane su sa 0,1 g/kg acetil-DL-leucina, koji je obezbeđen umešan u mišju hranu, od odvikavanja (tri nedelje starosti). Odvojene grupe Npcr<-/->i Npc1<+/+>miševa ostavljene su netretirane, kao kontrole.

Stanje krzna

[0085] Stanje krzna Npc1<-/->miševa, sa i bez terapije acetil-DL-leucina, upoređeno je jednostavnim posmatranjem miševa starosti devet nedelja.

Podaci o masi

[0086] Životinje su merene dvaput nedeljno. Određene su prosečne (srednje) vrednosti mase za sve miševe u svakoj grupi i upoređene.

Analiza hoda

[0087] Analiza hoda je izvedena na miševima starosti od osam nedelja upotrebom CatWalk® 15.0 sistema prema instrukcijama proizvođača (Noldus, Nottingham, UK). Zabeleženo je pet serija po životinji.

[0088] Izmereni CatWalk® bili su:

1. Srednja vrednost stajanja: prosečno trajanje(a) kontakta šapa sa staklenom pločom;

2. Ciklus koraka: trajanje(a) između dva uzastopna kontakta iste šape;

3. Radni ciklus: procenat vremena za koje su šape u kontaktu sa pločom u poređenju sa vremenom potrebnim da se završi ciklus koraka;

4. Sekvenca koraka (AB): procenat vremena koji provede šetajući u LF-RH-RF-LH naizmeničnom obrascu (LF: leva prednja; RH: desna zadnja; RF: desna prednja; LH leva zadnja);

2

5. Kadenca: korak po sekundama u probi;

6. Dijagonalno oslanjanje: procenat vremena sa istovremenim kontaktom dijagonalnih šapa sa staklenom pločom (RF i LH ili RH i LF).

Analiza motornih funkcija

[0089] Analiza motornih funkcija izvedena je na miševima starosti osam i devet nedelja upotrebom Praćenja aktivnosti u otvorenom prostoru prema instrukcijama proizvođača (Linton Instruments, Amlogger Software). Svaki miš je stavljen u plastični kavez sa prostirkom i analiziran tokom pet minuta. Podizanja su brojanja manuelno.

[0090] Izmereni parametri motornih funkcija bili su:

1. Centrirano podizanje: podizanje miševa na zadnje noge bez oslanjanja;

2. Podizanje: podizanje miševa na zadnje noge sa i bez oslanjanja na zidove kaveza;

3. Aktivnost: pravilno kretanje životinje uključujući hodanje;

4. Broj od prednjeg do zadnjeg dela (FR): kretanje životinje od prednjeg do zadnjeg dela kaveza; 5. Vreme aktivnosti: trajanje (s/min) aktivnosti u vezi sa kretanjem;

6. Vreme pokretljivosti: trajanje (s/min) pokretljivosti;

7. Vreme podizanja: trajanje bilo kog podizanja.

Rezultati

Stanje krzna

[0091] Fig.1 B prikazuje netretiranog Npc1<-/->parnjaka istih godina u leglu. Kod Npc1<-/->miševa primećeno je da imaju loše stanje krzna u starosti od devet nedelja, jer su ishrana i pijenje postali otežani (videti Fig.1B).

[0092] U jasnom kontrastu, Fig.1A prikazuje Npc1<-/->miša tretiranog sa acetil-DL- leucinom od odvikavanja. Npc1<-/->miševi tretirani sa acetil-DL-leucinom imali su glatko i sjajno krzno, koje podseća na ono (Npc1<+/+>) parnjaka divljeg tipa iz legla (videti Fig.1A).

Podaci o masi

[0093] Kao što se može videti na Fig.2A, (Npc1<+/+>) miševi divljeg tipa progresivno su dobili na masi tokom trajanja ovog ispitivanja, tj. starosti od tri nedelje do 10 nedelja. Dalje, Fig.2A prikazuje srednju vrednost mase po grupi miševa u svakoj vremenskoj tački (Npc1<-/->netretirani, n = 1; Npcr1<-/->acetil-DL-leucin 0,1 g/kg, n = 3; Npc1<+/+>netretirani, n = 3; Npc1<+/+>acetil-DL-leucin 0,1 g/kg, n = 2).

[0094] Tretiranje acetil-DL-leucinom nije imalo značajan efekat na ovaj dobitak mase.

[0095] Npc1<-/->miševi inicijalno dobili su na masi, u velikoj meri na isti način kao Npc1<+/+>kontrole.

Međutim, Npc1<-/->miševi zatim su počeli da gube na masi u šestoj nedelji starosti. Na kraju ispitivanja (10 nedelja starosti), miševi su imali masu skoro jednako malu kao u četvrtoj nedelji starosti.

[0096] Tretiranje acetil-DL-leucinom odložilo je ove simptome gubitka mase za dve nedelje u poređenju sa netretiranom grupom.

[0097] Poređenje promena mase kod Npc1<-/->miševa, sa i bez tretiranja acetil-DL-leucinom, prikazano je na Fig.2B. Posebno, Fig.2 B prikazuje promenu mase (%) po grupi miševa u svakoj vremenskoj tački, za Npc1<-/->miševe samo. Koristan efekat terapije acetil-DL-leucinom u odlaganju gubitka mase veoma je očigledan sa ove slike.

Analiza hoda

[0098] Rezultati analize hoda prikazani su na Fig.3. Podaci za dijagonalno oslanjanje, kadencu i sekvencu koraka prikazani su na Fig.3A - 3C, respektivno. Fig.3D i 3E prikazuju podatke za prednje šape (FP) (srednja vrednost stajanja i ciklus koraka na Fig.3D; radni ciklus na Fig.3E). Fig.3F i 3G prikazuju podatke za zadnje šape (HP) (srednja vrednost stajanja i ciklus koraka na Fig.3F; radni ciklus na Fig.3G). Podaci su predstavljeni kao srednja vrednost ± SEM. n=3 za Npc1<+/+>netretirane, n=2 za Npc1<+/+>tretirane, n=1 za Npc1<-/->netretirane (stoga nije izvedena nikakva statistička analiza), n=3 za Npc1<-/->tretirane.

[0099] Prvi stubić u svakom dijagramu prikazuje osobine hoda (Npc1<+/+>) miševa divljeg tipa.

[0100] Drugi stubić u svakom dijagramu prikazuje osobine hoda (Npc1<+/+>) miševa divljeg tipa tretiranih acetil-DL-leucinom. Nije postojala značajna razlika u osobinama hoda između ovih miševa i njihovih netretiranih parnjaka iz legla.

[0101] Treći stubić u svakom dijagramu prikazuje osobine hoda Npc1<-/->miševa. U celosti, ovaj miš pokazao je loš hod u poređenju sa Npc1<+/+>miševima. Miš je proveo izuzetno malo vremena, ako i toliko, u dijagonalnom oslanjanju (Fig.3A) ili sekvenci koraka (Fig.3C), a funkcija njegovih zadnjih šapa u srednjoj vrednosti stajanja (Fig.3F) i radni ciklus (Fig.3G) takođe su drastično otežani.

[0102] Četvrti stubić u svakom dijagramu prikazuje osobine hoda Npc1<-/->miševa tretiranih acetil-DL-leucinom. Ovi miševi demonstrirali su značajno poboljšanje hoda u poređenju sa njihovim netretiranim parnjacima iz legla. Zaista, pokazali su slične osobine hoda Npc1<+/+>miševima.

Analiza motornih funkcija

[0103] Analiza u osmoj nedelji starosti nije otkrila nikakvu razliku u osobinama motornih funkcija između Npc1<-/->i (Npc1<+/+>) miševa divljeg tipa (podaci nisu prikazani).

[0104] U devetoj nedelji starosti, međutim, defekti u motornoj koordinaciji postali su očigledni.

[0105] Rezultati analize motornih funkcija u devetoj nedelji starosti prikazani su na Fig.4. Centrirano podizanje, aktivnost, podizanje i broj od prednjeg do zadnjeg dela (FR) prikazani su na Fig.4A - 4D, respektivno. Vreme aktivnosti, vreme pokretljivosti, vreme podizanja i ukupan broj manuelnog podizanja prikazani su na Fig.4E - 4H, respektivno. Podaci su predstavljeni kao srednja vrednost ± SEM. n=3 za Npc1<+/+>netretirane, n=2 za Npc1<+/+>tretirane, n=1 za Npc1<-/->netretirane (stoga nije izvedena nikakva statistička analiza), n=3 za Npc1<-/->tretirane.

[0106] Prvi stubić u svakom dijagramu prikazuje osobine motornih funkcija (Npc1<+/+>) miševa divljeg tipa.

[0107] Drugi stubić u svakom dijagramu prikazuje osobine motornih funkcija (Npc1<+/+>) miševa divljeg tipa tretiranih acetil-DL-leucinom. Nije postojala značajna razlika u osobinama motornih funkcija između ovih miševa i njihovih netretiranih parnjaka iz legla.

[0108] Treći stubić u svakom dijagramu prikazuje osobine motornih funkcija Npc1<-/->miševa. U celosti, ovaj miš je pokazao lošu motornu funkciju u poređenju sa Npc1<+/+>miševima. Miš je proveo izuzetno malo vremena, ako i toliko, u podizanju (panel H), naročito na njegove zadnje šape bez oslanjanja (panel A).

[0109] Četvrti stubić u svakom dijagramu prikazuje osobine motornih funkcija Npc1<-/->miševa tretiranih acetil-DL-leucinom. Ovi miševi demonstrirali su značajno poboljšanje motorne funkcije u poređenju sa njihovim netretiranim parnjacima iz legla. Zaista, pokazali su slične osobine motornih funkcija Npc1<+/+>miševa.

Životni vek

[0110] Primećeno je da je tretiranje Npc1-/- miševa acetil-DL-leucinom (0,1 g/kg od 3 nedelja starosti) povezano sa statistički značajnim porastom životnog veka (Fig.5). Ovaj podatak dalje ukazuje na efekat acetil-leucina u odlaganju pojave bolesti.

Zaključak

[0111] Gde su Npc1<-/->miševi imali primetnu indikaciju bolesti koja ih razlikuje od parnjaka divljeg tipa iz legla od 5-6 nedelja starosti, Npc1<-/->parnjaci iz legla tretirani acetil-DL-leucinom od odvikavanja nisu pokazali takve simptome do dve ili više nedelja kasnije. Tretiranje Npc1<-/->miševa acetil-DL-leucinom odložilo je pojavu i progresiju NPC simptoma i pokazalo je dokaz neuroprotekcije.

Primer 2

Postupci

[0112] Fibroblastna ćelijska linija iz NPC pacijenta je tretirana tokom 3 dana N-acetil-DL-leucinom (1 mM) i relativna lizozomalna zapremina je kvantifikovana putem LysoTracker, fluorescentna boja koja se nagomilava u kiselim organelama. Povećana LysoTracker fluorescencija je pokazatelj povećanja lizozomalne veličine i/ili broja, i obeležje je NPC ćelija.

2

[0113] Dodatno, fibroblasti dobijeni iz pacijenata sa Niemann-Pickovom bolesti tip A (NPA), mukolipidozom tip II (MLII), mukopolisaharidozom tip IIIB (MPS IIIB), aspartilglukozaminurijom, mukolipidozom tip IIIA (MLIIIA), i mukopolisaharidozom tip VII (MPS VII) tretirani su acetil-DL-Leucinom (1 mM) tokom 6 dana i lizozomalna zapremina je kvantifikovana putem LysoTracker.

Rezultati

[0114] Tretiranje fibroblasta dobijenih iz NPC pacijenta umerene kliničke ozbiljnosti, sa 1 mM N-acetil-DL-leucina povezano je sa značajnim smanjenjem LysoTracker fluorescencije, pokazatelj smanjene lizozomalne zapremine tokom vremena (Fig.6A). Ova otkrića ponovljena su u fibroblastima dobijenim iz dodatnih NPC pacijenata promenljive kliničke ozbiljnosti koji su tretirani sa 1 mM N-acetil-DL-leucina tokom 72 sata (Fig.6B).

[0115] Za fibroblaste dobijene iz pacijenata sa NPA, MLII, MPS IIIB, aspartilglukozaminurijom, MLIIIA, i MPS VII primećeno je imaju povišene nivoe LysoTracker fluorescencije u odnosu na kontrole divljeg tipa iste starosti (Fig.s 6C-6H). Ovo je pokazatelj proširenog lizozoma koji se javlja kao rezultat skladištenja lipida u poređenju sa fibroblastima iz zdravih pojedinaca. Tretiranje acetil-leucinom povezano je sa statistički začajnim smanjenjem LysoTracker fluorescencije ka kontrolnom nivou u NPA, MLII, i MPS IIIB fibroblastima u odnosu na netretirane NPA, MLII, i MPS IIIB fibroblaste, respektivno (Fig.6C-6E), i povezano je trendom smanjenja LysoTracker fluorescencije ka kontrolnom nivou u fibroblastima aspartilglukozaminurije, MLIIIA i MPS VII u odnosu na netretirane fibroblaste aspartilglukozaminurije, MLIIIA i MPS VII, respektivno (Fig.6F-6H). Smanjenje LysoTracker fluorescencije bilo je pokazatelj smanjenja lizozomalne zapremine (Fig.6C-6H). Podaci predstavljeni na Fig.6A - 6D prikazuju rezultate lečenja za svaku ćelijsku liniju, respektivno, sa lizozomalnom zapreminom izraženom kao višestruka promena u odnosu na netretirane fibroblaste divljeg tipa. Zvezdice (*/****) označavaju p-vrednosti (<0,05/0,001) nasuprot netretirane fibroblaste bolesti.

Zaključak

[0116] Tretiranje N-acetil-DL-leucinom je povezano sa rektifikacijom poremećenog lizozomalnog skladištenja smanjenjem lizozomalne zapremine i, time, direktno ispravlja fenotip ovih poremećaja lizozomalnog skladištenja. Ove bolesti predstavljaju različite klase LSD-a, a, time, ovi rezultati dalje podržavaju korisnost efekta acetil-leucina protiv širokog spektra poremećaja lizozomalnog skladištenja.

Primer 3

[0117] Sendhofova bolest je poremećaj koji može da rezultuje autozomalno recesivno nasleđe mutacija u HEXB genu, koji kodira beta-podjedinicu beta-heksozaminidaze. Kao rezultat ovoga, GM2 gangliozid se ne razgrađuje i akumulira se unutar lizozoma u ćelijama perifernog i centralnog nervnog sistema (CNS).

[0118] U ovom ispitivanju korišćen je mišji model Sendhofove bolesti, Hexb<-/->miš, kao što je opisano u Jeyakumar et al. (Jeyakumar, M. et al. (1999) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 96: 6388-6393).

[0119] (Hexb<+/+>) miševi divljeg tipa korišćeni su kao kontrole.

Životni vek

[0120] Tretiranje acetil-DL-Leucinom je povezano sa statistički začajnim povećanjem životnog veka Sendhofovog miš (Fig.7A). Na Fig.7A, acetil-leucin-tretiran miševi su tretirani sa 0,1 g/kg acetil-leucina od 3. nedelje starosti. Zvezdica (*) označava p-vrednost <0,05 vs netretirani Sendhofovi miševi. Podaci su prosek za n=6 miševa po grupi. Bez tretiranja, srednje vreme preživljavanja Sendhofovih miševa bilo je 112 dana. Tretiranje acetil-leucinom (0,1 g/kg telesne mase od 3. nedelje starosti) povećalo je srednji životni vek na 120 dana.

Motorna funkcija

[0121] Tretiranje Sendhofovih miševa acetil-leucinom dovelo je do poboljšanja motorne funkcije kao što je pokazano ispitivanjima prelaza preko šipke i ciklusa koraka.

Test prelaza preko šipke

[0122] Test prelaza preko šipke je postupak za ocenjivanje motorne funkcije kod miševa, u kom se miš stavlja da visi sa centra horizontalne šipke pomoću svojih prednjih udova. Miš divljeg tipa sa normalnom motornom funkcijom moći će da angažuje svoje zadnje udove i na taj način da se pomeri na jednu od platformi na nekom kraju šipke, i tako završi test.

[0123] Netretiran Sendhofov miš može da završi test do oko 11. nedelje starosti. Nakon ovog trenutka, motorna funkcija i pokretljivost/angažovanje zadnjih udova pogoršava se do tačke do koje miš ne može da završi test, i pašće sa šipke na tapaciranu površinu ispod.

[0124] Tretiranje Sendhofovog mišjeg modeal acetil-DL-leucinom (0,1 g/kg telesne mase od 3 nedelja starosti) povezano je sa poboljšanom motornom funkcijom i pokretljivošću/angažovanjem zadnjih udova kao što je ispitano testom prelaza preko šipke (Fig.7B). Na Fig.7 B, tretiranje acetil-leucinom od 0,1 g/kg telesne mase obezbeđeno je od 3. nedelje starosti. Acetil-leucinom tretirani Sendhofovi miševi su zadržali sposobnost da završe test do 13. nedelje starosti (zaključno). Prikazani podaci su srednja vrednost za 6 miševa po grupi. Tretirani Sendhofovi miševi zadržali su sposobnost da završe test do 13. nedelje starosti (zaključno).

Ciklus koraka

[0125] Ciklus koraka je dužina vremena koje protekne tokom kretanja pomoću uda od vremena kada on napusti tlo dok ne napusti tlo sledećom prilikom.

2

[0126] Vreme ciklusa koraka ocenjeno je u 12. nedelji starosti kod netretiranih i acetil-leucinom tretiranih miševa Sendhofovog modela. Tretiranje acetil-leucinom predstavljalo je o.ig/kg acetilleucina/kg telesne mase od 3. nedelje starosti.

[0127] Tretiranje Sendhofovog mišjeg modela acetil-leucinom povezano je sa značajno bržim vremenima ciklus koraka prednjim udovima (p<0,05 vs netretiran SH miš), značajno bržim vremenima ciklusa koraka zadnjim udovima (p<0,01 vs netretiran SH miš) i značajno bržim prosečnim vremenima ciklusa koraka (p<0,001 vs netretiran SH miš) (Fig.7C). Na Fig.7 C, tretiranje acetil-leucinom od 0,1 g/kg telesne mase obezbeđeno je od 3. nedelje starosti. Ciklus koraka prednjim udovima odnosi se na mišje prednje udove, ciklus koraka zadnjim udovima na mišje zadnje udove, a prosečan ciklus koraka uzima u obzir sve mišje udove. Zvezdice (*/**/***) označavaju p-vrednosti od \<0,05/0,01/0,001 nasuprot netretiranog Sendhofovog miša. Prikazani podaci su srednja vrednost ± Stdev.

[0128] Tako, tretiranje acetil-leucinom povezano je sa bržim ciklusom koraka u Sendhofovom mišjem modelu, što može da ukazuje na poboljšanje motorne funkcije.

Zaključci

[0129] Ova ispitivanja demonstriraju da tretiranje acetil-leucinom mišjeg modela Sendhofove bolesti može da dovede do poboljšanja motorne funkcije kao što je ispitano pomoću dva nezavisna eksperimenta, kao i do značajnog povećanja životnog veka.

Primer 4

[0130] GM2 gangliozidoze su grupa poremećaja lizozomalnog skladištenja koja potiče od defekata u aktivnosti β-heksozaminidaze. Ta grupa obuhvata Tay-Sachs bolest, Sendhofovu bolest, i AB varijantu Tay-Sachs bolesti.

[0131] Fibroblasti dobijeni iz GM2 pacijenata (Tay-Sachs bolest, Sendhofova bolest, i AB varijanta Tay-Sachs bolesti) i zdravih kontrola, tretirani su acetil-DL-leucinom (1 mM tokom 6 dana) pre ekstrakcije i kvantifikacije nivoa glikosfingolipida (GSL) pomoću tečne hromatografije visokih performansi (HPLC).

[0132] U odsustvu tretmana, fibroblasti dobijeni iz sva 3 varijeteta GM2 gangliozidoze demonstrirali su povišene GSL nivoe u poređenju sa netretiranim kontrolama divljeg tipa. U sva 3 slučaja, tretiranje acetil-DL-leucinom (1 mM tokom 6 dana) bili su povezani sa smanjenjem GSL skladišta. U slučaju Tay-Sachs bolesti, ovo smanjenje bilo je statistički značajno (p<0,05). U slučaju Sendhofove bolesti i AB varijante Tay-Sachs bolesti, postojao je trend ka smanjenim GSL nivoima povezanim sa tretmanom. Podaci predstavljeni na Fig.8A - 8C prikazuju rezultate tretmana za svaku ćelijsku grupu, respektivno, sa GSL nivoima podešenim za sadržaj proteina i izraženi su kao višestruka promena u odnosu na nivoe u netretiranim fibroblastima divljeg tipa.

2

Primer 5

Pacijent 1

[0133] Pacijent u ovom ispitivanju slučaja bio je 28 godina star muškarac kod koga je genetički dijagnostikovana Tay-Sachs bolest i koji je ispoljio disartrofoniju, tremor, ataksiju stava i hoda, paraparezu i atrofije mišića. Posebno, pacijent nije mogao da stoji ili hoda, mogao je da načini pojedinačne korake uz snažan oslonac, imao je izrazitu posturalnu nestabilnost, poremećaj pomeranja očiju, disfagiju i dizartriju, i blag poremećaj kognitivnih funkcija. Prvi simptomi primećeni su u 16. godini starosti.

[0134] Pre početka lečenja, ispitivanjem je pacijentu dodeljena ocena od 15,5/40 skale za procenjivanje i ocenjivanje ataksije (SARA). Dodatno, rezultati iz analize funkcionalnog indeksa spinocerebelarne ataksije (SCAFI) kod pacijenta bili su:

Srednja vrednost testa hodanja 8-metara (8MW): 21,6 s

MW test ploča sa 9-otvora za klinove dominantni (9HPTD) (desni): 48,3 s

MW test ploča sa 9-otvora za klinove ne-dominantni (9HPTND): 44,9 s

MW PATA test sa rečima: 20

Montrealska procena kognicije (MoCA): 18/30

[0135] Video pacijenta takođe je snimljen radi kasnijeg poređenja.

[0136] Dan nakon ovog ispitivanja, pacijent je započeo terapiju acetil-leucinom, u dozi od 3 g dnevno za prvu nedelju, nakon čega je usledila doza od 5 g dnevno za drugu nedelju nadalje.

[0137] Nakon jednog meseca i četiri meseca, respektivno, pacijent je ponovo pregledan nastavljajući lečenje. Nakon jednog meseca, pacijent je poboljšao fine motorne veštine i smanjio tremor ruku, na primer dok jede ili pije. Hodanje se nije značajno promenilo. Nakon četiri meseca, pacijent je bio u stabilnom stanju sa blagom poboljšanom kognitivnom funkcijom ali imao je pogoršanje stava, hoda i fine motorne funkcije. SARA ocene pacijenta i rezultati iz SCAFI analiza pacijenta prikazane su dole u poređenju sa osnovnom linijom.

Tabela 1. Parametri evaluacije pacijenata.

2

[0138] Ukupno, pacijent je pokazao poboljšanje u simptomima koji su pratili tretiranje acetil-leucinom.

Pacijent 2

[0139] Pacijent u ovom ispitivanju slučaja bila je 32 godine stara žena koja je imala genetički dijagnostikovanu Tay-Sachs bolest i koja je pokazivala ataksiju stava i hoda, fino motorno pogoršanje, paraparezu donjih ekstremiteta, i atrofije mišića. Posebno, hodanje nije bilo moguće bez oslonca, a pacijent bolovao je od disfagije i poremećaja govora, poremećaja pomeranja očiju, i blagog poremećaja kognitivnih funkcija. Prvi simptomi primećeni su u 7. godini.

[0140] Pre početka lečenja, ispitivanjem je pacijentu dodeljena ocena od 10,5/40 skale za procenjivanje i ocenjivanje ataksije (SARA). Dodatno, rezultati iz analize funkcionalnog indeksa spinocerebelarne ataksije (SCAFI) bili su:

Srednja vrednost testa hodanja 8-metara (8MW): 12,5 s

MW test ploča sa 9-otvora za klinove dominantni (9HPTD) (desni): 21,5 s

MW test ploča sa 9-otvora za klinove ne-dominantni (9HPTND): 35,5 s

MW PATA test sa rečima: 18

Montrealska procena kognicije (MoCA): 21/30

[0141] Video pacijenta takođe je snimljen radi kasnijeg poređenja.

[0142] Dan nakon ovog ispitivanja, pacijent je započeo terapiju acetil-leucinom u dozi od 3 g dnevno za prvu nedelju, nakon čega je usledila doza od 5 g dnevno za drugu nedelju nadalje.

[0143] Nakon jednog meseca, pacijent je ponovo pregledan nastavljajući lečenje i pokazao je poboljšanu dikciju, poboljšanu posturalnu stabilnost, i poboljšanu kognitivnu funkciju. Stav i hod bili su mogući bez oslonca. SARA ocene pacijenta i rezultati iz SCAFI analize pacijenta prikazani su dole u poređenju sa osnovnom linijom.

Tabela 2. Parametri evaluacije pacijenata.

2

Pacijent 3

[0144] Pacijent u ovom ispitivanju slučaja bio je 8 godina star dečak koji je imao genetički dijagnostikovanu Tay-Sachs bolest i koji je imao epileptičke napade (tonične-klonične, oko 10 sekundi, samo-ograničavajuće) skoro svaki dan pre nego što zaspi, poremećaj pomeranja očiju, anartriju, izrazite probleme u kognitivnoj funkciji i koncentraciji (neurološko ispitivanje nije bilo moguće), nije mogao da stoji ili hod sam, i bio je veoma ograničen u dnevnim aktivnostima (da jede , da se pere ili oblači sam nije bilo moguće). Prvi simptomi primećeni su u uzrastu od 9 meseci.

[0145] Pre početka lečenja, ispitivanjem je pacijentu dodeljena ocena od 36/40 skale za procenjivanje i ocenjivanje ataksije (SARA), mRDS ocena od 18/24, EQ-5D-5L vizuelna skala od 50, i 8MWT od 18,1 (samo sa snažnim osloncem).

[0146] Pacijent je započeo terapiju acetil-leucinom u dozi od 1,5 g dnevno tokom prve nedelje, nakon čega je usledila doza od 3 g dnevno tokom druge nedelje nadalje.

[0147] Nakon jednog meseca, pacijent je ponovo pregledan uz nastavak lečenja i pokazao je poboljšanje finih motornih veština (mogao je da uhvati male stvari), povećanu motivaciju (više je pokušavao da sam hoda), poboljšanu posturalnu stabilnost, hod i stav, i mogao je da izgovara pojedinačne reči. Ocene SARA, mRDS, EQ-5D-5L vizuelne skale, i 8MWT za pacijenta prikazane su dole u poređenju sa osnovnom linijom.

Tabela 3. Parametri evaluacije pacijenata.

Primer 6

2

[0148] Pacijent u ovom ispitivanju slučaja bio je 13 godina star dečak kod koga je genetički dijagnostikovana GM1 gangliozidoza i koji nije mogao da stoji ili radi sam, bio je veoma ograničen u dnevnim aktivnostima (nije bilo moguće sam da jede, da se pere, oblači), i imao je poremećaj pomeranja očiju, anartrija, i izrazite probleme u kognitivnoj funkciji i koncentraciji (neurološko ispitivanje nije bilo moguće). Prvi simptomi primećeni su u 2. godini starosti.

[0149] Pre početka lečenja, ispitivanjem je pacijentu dodeljena ocena od 35/40 skale za procenjivanje i ocenjivanje ataksije (SARA), mRDS ocena od 15, i EQ-5D-5L vizuelna skala od 50.

[0150] Pacijent je započeo terapiju acetil-leucinom u dozi od 1,5 g dnevno tokom prve nedelje, nakon čega je usledila doza od 3 g dnevno tokom druge nedelje, nadalje.

[0151] Nakon jednog meseca, pacijent je ponovo pregledan uz nastavak lečenja i pokazao je stabilno opšte stanje, poboljšan hod (više tečan), i stabilan stav u prirodnom položaju. Ocene SARA, mRDS, i EQ-5D-5L vizuelne skale za pacijenta prikazane su dole u poređenju sa osnovnom linijom.

Tabela 4. Parametri evaluacije pacijenata.

Primer 7

[0152] NPC ozbiljnost kod pacijenta može da se kvantifikuje dodeljivanjem kliničke ocene ozbiljnosti (CSS), koja ocenjuje različite parametre bolesti i daje svakom parametru ocenu od 5 (viša ocena = veća ozbiljnost). Videti Yanjanin et al., "Linear Clinical Progression, Independent of Age of Onset, in Niemann-Pick Disease, Type C," Am J Med Genet Part B 153B:132-140. Kod netretiranog pacijenta, obično može da se predvidi kako će CSS da se menja tokom vremena kod pojedinca, jer progresija bolesti izgleda da je linearna. Na primer, ako se pacijent A pomeri od CSS od 8 do CSS od 12 između meseca o i meseca 12, može da se predvidi da će do meseca 36, pacijent imati CSS od 20. Godišnja ocena povećanja ozbiljnosti (ASIS) iznosi godišnju stopu promene u CSS, izračunata deljenjem CSS pacijenta sa godinama pacijenta. Na primer, ako je netretiran pacijent B imao CSS od 8 za dve godine starosti, ASIS pacijenta će biti 4. Svake godine, očekuje se da pacijent napreduje za 4 CSS poena, tako da bi u 4 godini starosti CSS pacijenta bio 16. Ako terapeutska intervencija uspori ili zaustavi progresiju bolesti, može da se očekuje da će pacijent imati manju ASIS ocenu nakon takve terapije nego na osnovnoj liniji.

[0153] Deset NPC pacijenata uzimalo je acetil-leucin od 4,5 g/dan tokom dužeg vremena. CSS je određena na osnovnoj liniji, i u raznim vremenskim tačkama, za pomeranje očiju, ambulaciju, govor, gutanje, fine motorne veštine, kogniciju, pamćenje, i napade. Ukupna CSS je izračunata na osnovnoj liniji i u svakoj takvoj vremenskoj tački dodavanjem pojedinačnih CSS vrednosti za svaki parametar (pomeranje očiju, ambulacija, itd.). Broj dana nakon početka terapije u kojoj je ocenjen CSS razlikovao se za svakog pacijenta, kao što je prikazano u tabeli 5.

Tabela 5. Dani nakon početka davanja acetil-leucina u kojima su procenjene CSS.

[0154] Tabele 6-14 dole prikazuju svaku CSS za ukupno, pomeranje očiju, ambulaciju, govor, gutanje, fine motorne veštine, kogniciju, pamćenje i napade, respektivno.

Tabela 6. CSS ukupno.

1

Tabela 7. CSS pomeranje očiju.

Tabela 8. CSS ambulacija.

2

Tabela 9. CSS govor.

Tabela 10. CSS gutanje.

K

o

P

1

2

3

4

5

6

7

8

9

1

Tabela 11. CSS fine motorne veštine.

4

Tabela 12. CSS kognicija.

Tabela 13. CSS pamćenje.

Tabela 14. CSS napadi.

K

o

P

1

2

3

4

5

6

7

8

9

1

[0155] ASIS na osnovnoj liniji i svaka vremenska tačka je izračunato korišćenjem CSS i godina svakog pacijenta u vreme ocenjivanja. Ukupno ASIS za svakog pacijent u svakoj vremenskoj tački je prikazano dole u tabeli 15.

Tabela 15. ASIS ukupno.

[0156] Kao što je prikazano u tabeli 6 i na Fig.9A, nijedan od deset pacijenata nije pokazao ukupno povećanje CSS tokom trajanja eksperimenta. Pacijent 6 pokazao je povećanu CSS između osnovne linije i vremenske tačke 2, ali se vratio na osnovnu liniju za vremensku tačku 3 i ostao je tamo u vremenskoj tački 4. Četiri od deset pacijenata (pacijenti 2, 5, 6, i 7) imalo je konstantnu CSS tokom trajanja eksperimenta, što ukazuje da bolest nije napredovala kod ovih pojedinaca. Šest od deset pacijenata (pacijenti 1, 3, 4, 8, 9, i 10) pokazalo je smanjenje CSS tokom trajanja eksperimenta, što ukazuje da bolest nije napredovala i da je u stvari postala manje ozbiljna. Poboljšanja su zapažena u različitim podocenama: pacijent 1: ambulacija; pacijent 3: fine motorne veštine; pacijent 4: ambulacija i govor; pacijent 8: pomeranje očiju i fine motorne veštine; pacijent 9: pamćenje; pacijent 10: kognicija. Podaci prikazani na Fig.10A-10J pokazuju CSS podocene za svakog pacijent, respektivno, u obliku dijagrama sa stubićima.

[0157] Kao što je prikazano u tabeli 15 i Fig.9B, svih deset pacijenata pokazalo je smanjenje ASIS tokom lečenja u odnosu na ASIS na osnovnoj liniji. Kod pacijenata 2, 5, 6, i 7, CSS ostale su iste dok je uzrast rastao, što rezultuje malim smanjenjem ASIS. Kod pacijenata 1, 3, 4, 8, 9, i 10, smanjenje ASIS je bilo veće zbog CSS opadanja dok je uzrast rastao.

Claims (12)

Patentni zahtevi

1. Acetil-leucin, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu u lečenju Niemann-Pickove bolesti tipa C ili jednog ili više simptoma povezanih sa Niemann-Pickovom bolešću tipa C kod subjekta kom je to potrebno, pri čemu ta upotreba obuhvata davanje terapeutski efektivne količine acetil-leucina subjektu kom je to potrebno u trajanju izabranom od najmanje 6 meseci, najmanje 1 godine, najmanje 2 godine, i najmanje 5 godina.

2. Acetil-leucin, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu prema zahtevu 1 kako bi se odložilo napredovanje Niemann-Pickove bolesti tipa C ili jednog ili više simptoma povezanih sa Niemann-Pickovom bolešću tipa C tokom vremena u poređenju sa uobičajenim napredovanjem bolesti, pri čemu ta upotreba obuhvata davanje terapeutski efektivne količine acetil-leucina subjektu kom je to potrebno u trajanju izabranom od najmanje 6 meseci, najmanje 1 godine, najmanje 2 godine, i najmanje 5 godina.

3. Acetil-leucin, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu prema zahtevu 1 kako bi se obrnulo napredovanje Niemann-Pickove bolesti tipa C ili jednog ili više simptoma povezanih sa Niemann-Pickovom bolešću tipa C tokom vremena, pri čemu ta upotreba obuhvata davanje terapeutski efektivne količine acetil-leucina subjektu kom je to potrebno u trajanju izabranom od najmanje 6 meseci, najmanje 1 godine, najmanje 2 godine, i najmanje 5 godina.

4. Acetil-leucin, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu prema zahtevu 1 kako bi se kod subjekta kom je to potrebno poboljšao biohemijski marker Niemann-Pickove bolesti tipa C tokom vremena, pri čemu ta upotreba obuhvata davanje terapeutski efektivne količine acetil-leucina subjektu kom je to potrebno u trajanju izabranom od najmanje 6 meseci, najmanje 1 godine, najmanje 2 godine, i najmanje 5 godina.

5. Acetil-leucin, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu prema zahtevu 4, pri čemu biohemijski marker predstavlja povećanu lizozomalnu zapreminu.

6. Acetil-leucin, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu prema bilo kom od zahteva 1-5, pri čemu postupak obuhvata započinjanje davanja terapeutski efektivne količine acetil-leucina subjektu kom je to potrebno kada taj subjekat nema simptome.

7. Acetil-leucin, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu prema zahtevu 6, pri čemu dolazi do inicijalnog davanja nakon otkrivanja da subjekt ima genetički i/ili biohemijski marker Niemann-Pickove bolesti tipa C.

8. Acetil-leucin, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu prema zahtevu 1-7, pri čemu acetilleucin predstavlja acetil-DL-leucin.

9. Acetil-leucin, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu prema bilo kom od zahteva 1-7, pri čemu acetil-leucin ima enatiomerni višak L-enantiomera ili D-enantiomera.

10. Acetil-leucin, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu prema bilo kom od zahteva 1-7, pri čemu je acetil-leucin jedan enantiomerni oblik, ili L-enantiomer ili D-enantiomer.

11. Acetil-leucin, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu prema zahtevu 10, pri čemu jedan enantiomerni oblik predstavlja L-enantiomer.

12. Acetil-leucin, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu prema bilo kom od zahteva 1-7, pri čemu je terapeutski efektivna količina acetil-leucina od oko 1 g do oko 15 g dnevno, od oko 1 g do oko 10 g dnevno, od oko 1,5 g do oko 7 g dnevno, od oko 4 g do oko 6 g dnevno, ili od oko 4 g do oko 5 g dnevno.