RS61771B1 - Amidno supstituisani derivati piridiniltriazola i njihove primene - Google Patents

Amidno supstituisani derivati piridiniltriazola i njihove primene

Info

Publication number
RS61771B1
RS61771B1 RS20210517A RSP20210517A RS61771B1 RS 61771 B1 RS61771 B1 RS 61771B1 RS 20210517 A RS20210517 A RS 20210517A RS P20210517 A RSP20210517 A RS P20210517A RS 61771 B1 RS61771 B1 RS 61771B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
compound
general formula
compounds
triazol
methyl
Prior art date
Application number
RS20210517A
Other languages
English (en)
Inventor
Marie-Pierre Collin
Peter Kolkhof
Thomas Neubauer
Chantal Fürstner
Elisabeth Pook
Matthias Beat Wittwer
Klemens Lustig
Anja Buchmüller
Hanna Tinel
Karoline DRÖBNER
Thomas Mondritzki
Heiko Schirmer
Axel Kretschmer
Carsten Schmeck
Pierre Wasnaire
Hana Cernecka
Original Assignee
Bayer Pharma AG
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Bayer Pharma AG filed Critical Bayer Pharma AG
Publication of RS61771B1 publication Critical patent/RS61771B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4439—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. omeprazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/08—Drugs for disorders of the urinary system of the prostate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/10—Drugs for disorders of the urinary system of the bladder
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/22—Anxiolytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/24—Antidepressants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A61P27/06—Antiglaucoma agents or miotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/06—Antiarrhythmics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Description

Opis
[0001] Predmetni pronalazak se odnosi na nove derivate 5-(karboksamid)-1-piridinil-1,2,4-triazola, na postupke za pripremu takvih jedinjenja, na farmaceutske sastave koji sadrže takva jedinjenja i na upotrebu takvih jedinjenja ili smeša za tretman i/ili prevenciju bolesti, posebno za tretman i/ili prevenciju bubrežnih i kardiovaskularnih bolesti.
[0002] Vazopresin je neurohormon koji suštinski reguliše homeostazu vode i vaskularni tonus. Proizvodi se u specijalizovanim endokrinim neuronima u Nucleus supraopticus i N. paraventricularis u zidu treće komore (hipotalamus) i odatle se transportuje duž neuronskih procesa u posteriorne režnjeve hipofize (neurohipofiza). Tamo se hormon pušta u krvotok kao odgovor na različite fiziološke i patofiziološke stimuluse.
[0003] Poremećena neurohormonska regulacija se suštinski manifestuje povišenjem simpatetičkog tona i neadekvatnom aktivacijom renin-angiotenzin-aldosteron sistema (RAAS). Iako je inhibicija ovih komponenti blokatorima beta receptora, sa jedne strane, i ACE inhibitorima ili blokatorima angiotenzin receptora, sa druge strane, danas sastavni deo farmakološkog tretmana kardiovaskularnih bolesti, neodgovarajuće povišenje lučenja vazopresina još uvek ne može adekvatno da se tretira.
[0004] Vazopresin vrši svoje delovanje uglavnom vezujući se za tri receptora, koji su klasifikovani kao V1a, V1b i V2 receptori, i koji pripadaju porodici receptora povezanih sa G proteinima.
[0005] V2 receptori se nalaze u distalnom tubularnom epitelu i epitelu sabirnih tubula u bubregu. Njihovim aktiviranjem ovi epiteli postaju propusni za vodu. Ovaj fenomen je rezultat ugradnje akvaporina (posebnih vodenih kanala) u luminalnu membranu epitelnih ćelija. Shodno tome, farmakološka inhibicija dejstva vazopresina na V2 receptor dovodi do povećanog izlučivanja urina. Stoga se lekovi sa V2 antagonističkom aktivnošću čine posebno pogodnim za tretman svih bolesti koje su povezana sa preopterećenjem tela vodom.
[0006] V1b receptori (takođe nazvani V3 receptori) uglavnom se mogu detektovati u centralnom nervnom sistemu. Zajedno sa hormonom koji oslobađa kortikotropin (CRH), vazopresin reguliše bazalno i stresom izazvano lučenje adrenokortikotropnog hormona (ACTH) preko V1b receptora.
[0007] V1a receptori su uglavnom locirani na ćelijama vaskularnih glatkih mišića (VSMC), ali i na kardiomiocitima, fibroblastima i specijalizovanim bubrežnim ćelijama poput glomerularnih mezangijskih ćelija ili macula densa ćelija koje kontrolišu oslobađanje renina [Wasilewski MA, Myers VD, Recchia FA, Feldman AM, Tilley DG, Cell Signal., 28(3), 224-233, (2016)]. Aktivacija VSMC V1a receptora vazopresinom dovodi do unutarćelijskog oslobađanja kalcijuma i do prateće vazokonstrikcije. Zbog toga stimulacija VSMC V1a receptora uzrokuje povećani vaskularni otpor i povećano naknadno srčano opterećenje. Na srčani učinak negativno utiče vazokonstrikcija koju posreduje V1a. Povećanje naknadnog opterećenja i direktna stimulacija V1a receptora na kardiomiocitima mogu dovesti do hipertrofije srca i remodeliranja, uključujući fibrozu. Kod miševa sa srčano specifičnim prekomernim eksprimiranjem V1a receptora razvija se srčana hipertrofija koja dovodi do dilatacije i disfunkcije leve komore, što ukazuje na suštinsku ulogu V1a receptora u razvoju srčane insuficijencije [Li X, Chan TO, Myers V, Chowdhury I, Zhang XQ, Song J, Zhang J, Andrel J, Funakoshi H, Robbins J, Koch WJ, Hyslop T, Cheung JY, Feldman AM, Circulation.; 124, 572-581 (2011)].
[0008] V1a receptor se takođe eksprimira u bubrežnoj kortikalnoj i medularnoj vaskulaturi, gde posreduje u vazokonstrikciji bubrežnih sudova i utiče na ukupni bubrežni protok krvi. Dakle, aktivacija V1a receptora može smanjiti bubrežni medularni protok krvi izazivajući dalje patološke procese kao što su tkivna hipoksija, smanjeno snabdevanje kiseonikom i shodno tome energijom za tubularne transportne procese, kao i direktno oštećenje mesangijalnih i macula densa ćelija. Pokazano je da aktivacija mesangijalnog V1a receptora posreduje TGFβ signalizaciju i uzrokuje povećanje proizvodnje kolagena IV. Iako ovo signaliziranje doprinosi akumulaciji i preuređivanju vanćelijske matrice u bubregu, veruje se da se slični signalni putevi javljaju u srčanim ćelijama, posebno nakon infarkta miokarda, što naglašava centralnu ulogu V1a receptora u razvoju hipertrofičnih i fibrotičnih procesa kao odgovor na povišen patofiziološki nivo nivo vazopresina [Wasilewski MA, Myers VD, Recchia FA, Feldman AM, Tilley DG. Arginine vasopressin receptor signaling and functional outcomes in heart failure. Cell Signal., 28(3), 224-233 (2016)].
[0009] S obzirom da se V1a receptori uglavnom eksprimiraju na VSMC-ima i na taj način učestvuju u vaskularnoj funkciji, moguća je veza sa vaskularnim bolestima kao što su periferna vaskularna bolest (PVB), uključujući klaudikaciju i kritičnu ishemiju udova, kao i koronarnu mikrovaskularnu disfunkciju (KMD).
[0010] Pored ovoga, V1a receptori se takođe eksprimiraju na ljudskim trombocitima i u jetri. Značenje receptora trombocita V1a nije potpuno razumljivo, iako vazopresin indukuje agregaciju ljudskih trombocita preko V1a receptora u visokim koncentracijama ex vivo. Stoga je inhibicija agregacije trombocita izazvane vazopresinom pomoću antagonista V1a receptora korisna farmakološka ex vivo test koji koristi ljudsko tkivo koje endogeno eksprimira V1a receptor [Thibonnier M, Roberts JM, J Clin Invest.; 76: 1857-1864, (1985)].
[0011] Vazopresin stimuliše glukoneogenezu i glikogenolizu aktiviranjem jetrenog V1a receptora. Studije na životinjama pokazale su da vazopresin narušava toleranciju na glukozu koju antagonist V1a receptora može inhibirati, pružajući tako vezu vazopresin V1a receptora sa dijabetes melitusom. [Taveau C, Chollet C, Vaeckel L, Desposito D, Bichet DG, Arthus MF, Magnan C, Philippe E, Paradis V, Foufelle F, Hainault I, Enhorning S, Velho G, Roussel R, Bankir L, Melander O, Boubi N Vazopresin i hidratacija igraju glavnu ulogu u razvoju intolerancije na glukozu i steatoze jetre kod gojaznih pacova. Diabetologia, 58 (5), 1081-1090, (2015)].
[0012] Pokazano je da vazopresin doprinosi razvoju albuminurije i nefropatiji izazvanoj dijabetesom na životinjskim modelima, što je u skladu sa epidemiološkim nalazima kod ljudi.
[0013] Nedavno je utvrđeno da vazopresin takođe igra uzročnu ulogu u razvoju preeklampsije. Hronična infuzija vazopresina tokom trudnoće kod miševa dovoljna je da indukuje sve glavne fenotipove majke i fetusa povezane sa ljudskom preeklampsijom, uključujući hipertenziju specifičnu za trudnoću [Santillan MK, Santillan DA, Scroggins SM, Min JY, Sandgren JA, Pearson NA, Leslie KK, Hunter SK, Zamba GK, Gibson-Corley KN, Grobe JL. Vasopressin in preeclampsia: a novel very early human pregnancy biomarker and clinically relevant mouse model. Hypertension. 64(4), 852-859, (2014)].
[0014] Nivo vazopresina može biti povišen kod žena sa dismenorejom (ginekološki poremećaj koji se karakteriše cikličnim grčevima koji izazivaju bol u karlici) tokom menstruacije, a čini se da povećava kontrakciju glatkih mišića miometrija. Nedavno je utvrđeno da selektivni antagonist vazopresin V1a receptora (relcovaptan/SR-49059) može smanjiti intrauterine kontrakcije izazvane vazopresinom.
[0015] Iz ovih razloga, agensi koji inhibiraju dejstvo vazopresina na V1a receptor izgledaju pogodni za tretman nekoliko kardiovaskularnih bolesti. Konkretno, agensi koji selektivno inhibiraju delovanje vazopresina na V1a receptor nude posebno idealan profil za tretman inače normovolemičnih pacijenata, tj. onih koji ne ispunjavaju uslove za dekongestiju npr. velike doze diuretika u petlji ili V2 antagonista, i tamo gde akvareza indukovana V2 inhibicijom može biti neželjena.
[0016] Za neke derivate 4-fenil-1,2,4-triazol-3-ila u WO 2005/063754-A1 i WO 2005/105779-A1 opisano je da deluju kao antagonisti vazopresin V1a receptora koji su korisni za tretman ginekoloških poremećaja, naročito menstrualnih poremećaja kao što je dismenoreja.
[0017] U WO 2011/104322-A1, određena grupa bis-aril-vezanih 1,2,4-triazol-3-ona, uključujući njihovih 5 fenil-1,2,4-triazol-3-il i 1-fenil-1,2,3-triazol-4-il derivata, obelodanjeni su kao antagonisti vazopresin V2 i/ili V1a receptora koji su korisni za tretman i/ili prevenciju kardiovaskularnih bolesti. Opisana jedinjenja, međutim, ne pokazuju dovoljnu selektivnost prema V1a receptoru i uglavnom pokazuju kombinovanu aktivnost i na vazopresin V1a i V2 receptorima. Ipak, kao što je gore navedeno, visok afinitet, kao i selektivnost za V1a receptor, poželjni su preduslovi za tretman bolesnih stanja u kojima dekongestija nije poželjna i može dovesti do poremećene homeostaze telesne tečnosti, uključujući smanjenu osmolalnost krvne plazme u inače normovolemičnim pojedincima.
[0018] U WO 2016/071212-A1 obelodanjeni su određeni derivati 5-(hidroksialkil)-1-fenil-1,2,4-triazola, koji deluju kao snažni antagonisti za oba vazopresin V1a i V2 receptora, i pored toga pokazuju značajno pojačanu akvaretičku potenciju in vivo nakon oralne primene. Opisana su jedinjenja koja su korisna za tretman i/ili prevenciju kardiovaskularnih i bubrežnih bolesti. Ipak, kao što je gore navedeno, visok afinitet, kao i selektivnost za V1a receptor, poželjan je preduslov za tretman bolesnih stanja u kojima dekongestija nije poželjna i može dovesti do poremećene homeostaze telesne tečnosti, uključujući smanjenu osmolalnost krvne plazme u inače normovolemičnim pojedincima.
[0019] Profil aktivnosti sa visokom selektivnošću za V1a receptor ima mali potencijal da izazove neželjene povezane efekte van ciljem, i takođe bi pomogao smanjenju količine supstance koja će biti potrebna za postizanje i održavanje željenog terapeutskog efekta, čime ograničava potencijal za neprihvatljive neželjene efekte i/ili neželjene lek-lek interakcije tokom tretmana pacijenata koji bi mogli biti već u velikom riziku, kao što su, na primer, akutne ili hronične bolesti srca i bubrega.
[0020] Stoga se tehnički problem koji treba rešiti prema predmetnom pronalasku može pogledati u identifikovanju i pružanju novih jedinjenja koja deluju kao snažni antagonisti vazopresin V1a receptora. Dalji cilj pronalaska je identifikacija i pružanje novih jedinjenja sa visokim afinitetom i selektivnošću u odnosu na vazopresin V1a receptor. Jedinjenja su namenjena izbegavanju indukovanja akvareze putem V2 inhibicije. Dalje se predviđa da jedinjenja imaju sličan ili poboljšani terapeutski profil u poređenju sa jedinjenjima poznatim iz stanja tehnike, na primer u pogledu njihovih in vivo svojstava, na primer njihovih farmakokinetičkih i farmakodinamičkih karakteristika i/ili njihovog metaboličkog profila i/ili njihovog doza-aktivnost odnosa.
[0021] Iznenađujuće je sada pronađeno da određeni derivati 5-(karboksamid)-1-piridinil-1,2,4-triazola predstavljaju visoko potentne i selektivne antagoniste V1a receptora. Ovaj specifični profil čini jedinjenja predmetnog pronalaska korisnim za tretman i/ili prevenciju bolesti koje su povezane sa aktivacijom V1a receptora. Jedinjenja predmetnog pronalaska su posebno korisna za tretman i/ili prevenciju bubrežnih i kardiovaskularnih bolesti kod pacijenata koji ne pate od preopterećenja tečnošću, i koji zbog toga ne bi trebalo da budu dekongestirani.
[0022] Jedinjenja predmetnog pronalaska imaju dragocena farmakološka svojstva i mogu se koristiti za prevenciju i/ili tretman različitih bolesti i stanja izazvanih bolestima kod ljudi i drugih sisara.
[0023] U jednom aspektu, predmetni pronalazak se odnosi na derivate 5-(karboksamid)-1-piridinil-1,2,4-triazola opšte formule (I)
gde
R<1>predstavlja grupu formule
gde
#<1>predstavlja tačku vezivanja za atom azota,
Ar predstavlja grupu formule
gde
#<2>predstavlja tačku vezivanja za atom azota,
R<2A>predstavlja grupu izabranu od atoma hlora, atoma broma, trifluorometila, trifluorometoksija, etoksikarbonila i -C(=O)NH2
R<2B>predstavlja grupu izabranu od atoma hlora, trifluorometila, i etoksikarbonila.
[0024] Jedinjenja prema predmetnom pronalasku takođe mogu biti prisutna u obliku svojih soli, solvata i/ili solvata soli.
[0025] Izraz „sadrži“ kada se koristi u specifikaciji uključuje „sastoji se od“.
[0026] Ako se u ovom tekstu bilo koja stavka naziva „kao što je ovde navedeno“, to znači da se može navesti bilo gde u ovom tekstu.
[0027] Izrazi navedeni u ovom tekstu imaju naredna značenja:
Izraz „C1-C4-alkil“ označava linearnu ili razgranatu, zasićenu, monovalentnu ugljovodoničnu grupu koja ima 1, 2, 3 ili 4 atoma ugljenika, npr. metil, etil, propil, izopropil, butil, sek-butil, izobutil, terc-butil, ili njihov izomer. Naročito navedena grupa ima 1, 2, 3 ili 4 atoma ugljenika („C1-C4-alkil“), npr. metil, etil, propil, izopropil, butil, sek-butil izobutil ili tercbutil grupa, tačnije 1, 2 ili 3 atoma ugljenika („C1-C3-alkil“), npr. metil, etil, n-propil ili izopropil grupa, još određenije metil grupa.
[0028] Moguće je da jedinjenja opšte formule (I) postoje kao izotopske varijante. Pronalazak stoga uključuje jednu ili više izotopskih varijanti jedinjenja opšte formule (I), posebno jedinjenja koja sadrže deuterijum opšte formule (I).
[0029] Izraz „izotopska varijanta“ jedinjenja ili reagensa je definisan kao jedinjenje koje pokazuje neprirodan udeo jednog ili više izotopa koji čine takvo jedinjenje.
[0030] Izraz „izotopska varijanta jedinjenja opšte formule (I)“ je definisan kao jedinjenje opšte formule (I) koje pokazuje neprirodan udeo jednog ili više izotopa koji čine takvo jedinjenje.
[0031] Izraz „neprirodan udeo“ označava udeo takvog izotopa koji je veći od njegove prirodne zastupljenosti. Prirodne zastupljenosti izotopa koje će se primeniti u ovom kontekstu opisane su u „Isotopic Compositions of the Elements 1997”, Pure Appl. Chem., 70(1), 217-235, 1998.
[0032] Primeri takvih izotopa uključuju stabilne i radioaktivne izotope vodonika, ugljenika, azota, kiseonika, fosfora, sumpora, fluora, hlora, broma i joda, kao što su<2>H (deuterijum),<3>H (tricijum),<11>C,<13>C,<14>C,<15>N,<17>O,<18>O,<32>P,<33>P,<33>S,<34>S,<35>S,<36>S,<18>F,<36>Cl,<82>Br,<123>I,<124>I,<125>I,<129>I i<131>I, respektivno.
[0033] U pogledu tretmana i/ili prevencije ovde navedenih poremećaja, izotopska varijanta jedinjenja opšte formule (I) poželjno sadrži deuterijum („jedinjenja koja sadrže deuterijum opšte formule (I)“). Izotopske varijante jedinjenja opšte formule (I) u kojima su uključeni jedan ili više radioaktivnih izotopa, kao što su<3>H ili<14>C, korisne su npr. u studijama distribucije tkiva lekova i/ili supstrata. Ovi izotopi su posebno poželjni zbog svoje lakoće ugrađivanja i detektovanja. Izotopi koji emituju pozitron kao što su<18>F ili<11>C mogu se ugraditi u jedinjenje opšte formule (I). Ove izotopske varijante jedinjenja opšte formule (I) korisne su za in vivo primene slikanja. Jedinjenja opšte formule (I) koja sadrže deuterijum i<13>C mogu se koristiti u analizama masene spektrometrije u kontekstu pretkliničkih ili kliničkih studija.
[0034] Izotopske varijante jedinjenja opšte formule (I) mogu se generalno pripremiti postupcima poznatim stručnjaku, kao što su oni opisani u šemama i/ili primerima ovde, zamenom reagensa za izotopsku varijantu navedenog reagensa, poželjno za reagens koji sadrži deuterijum. U zavisnosti od željenih mesta deuteracije, u nekim slučajevima se deuterijum iz D2O može ugraditi bilo direktno u jedinjenja, ili u reagense koji su korisni za sintezu takvih jedinjenja. Gasoviti deuterijum je takođe koristan reagens za ugradnju deuterijuma u molekule. Katalitička deuteracija olefinskih i acetilenskih veza je direktan put za ugradnju deuterijuma. Metalni katalizatori (tj. Pd, Pt i Rh) u prisustvu gasovitog deuterijuma mogu se koristiti za direktnu razmenu deuterijuma za vodonik u funkcionalnim grupama koje sadrže ugljovodonike. Raznovrsni deuterisani reagensi i sintetički gradivni blokovi komercijalno su dostupni od kompanija kao što su na primer C/D/N Isotopes, Quebec, Canada; Cambridge Isotope Laboratories Inc., Andover, MA, USA; i CombiPhos Catalysts, Inc., PrincetoN,NJ, USA.
[0035] Izraz „jedinjenje koje sadrži deuterijum opšte formule (I)“ je definisano kao jedinjenje opšte formule (I), u kom su jedan ili više atoma vodonika zamenjeni jednim ili više atoma deuterijuma, i kod kojih je zastupljenost deuterijuma na svakom deuterisanom položaju jedinjenja opšte formule (I) veća od prirodne zastupljenosti deuterijuma, koja iznosi oko 0,015%. Naročito je u jedinjenju koje sadrži deuterijum opšte formule (I) zastupljenost deuterijuma na svakom deuterisanom položaju jedinjenja opšte formule (I) viša od 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60 %, 70% ili 80%, poželjno viša od 90%, 95%, 96% ili 97%, još poželjnije viša od 98% ili 99% na navedenom položaju (položajima). Podrazumeva se da je zastupljenost deuterijuma na svakom deuterisanom položaju nezavisna od zastupljenosti deuterijuma na drugim deuterisanim položajima.
[0036] Selektivno uključivanje jednog ili više atoma deuterijuma u jedinjenje opšte formule (I) može promeniti fizičko-hemijske osobine (kao što je na primer kiselost[C. L. Perrin, i dr., J. Am. Chem. Soc., 2007, 129, 4490], baznost [C. L. Perrin i dr., J. Am. Chem. Soc., 2005, 127, 9641], lipofilnost [B. Testa i dr., Int. J. Pharm., 1984, 19(3), 271]) i/ili metabolički profil molekula i može rezultovati promenama u odnosu matičnog jedinjenja prema metabolitima ili u količini nastalih metabolita. Takve promene mogu rezultovati određenim terapijskim prednostima i stoga mogu biti poželjne u nekim okolnostima. Prijavljene su smanjene stope metabolizma i metaboličke zamene, gde se menja odnos metabolita (A. E. Mutlib i dr., Toxicol. Appl. Pharmacol., 2000, 169, 102). Ove promene izloženosti matičnom leku i metabolitima mogu imati važne posledice u pogledu farmakodinamike, podnošljivosti i efikasnosti jedinjenja koje sadrži deuterijum opšte formule (I). U nekim slučajevima supstitucija deuterijuma smanjuje ili eliminiše stvaranje neželjenog ili toksičnog metabolita i pospešuje stvaranje željenog metabolita (npr. Nevirapine: A. M. Sharma i dr., Chem. Res. Toxicol., 2013, 26, 410; Efavirenz: A. E. Mutlib i dr., Toxicol. Appl. Pharmacol., 2000, 169, 102). U drugim slučajevima glavni efekat deuteracije je smanjenje brzine sistemskog čišćenja. Kao rezultat, biološki poluživot jedinjenja se povećava. Potencijalne kliničke koristi bi uključivale sposobnost održavanja slične sistemske izloženosti sa smanjenim vršnim nivoima i povećanim najnižim nivoima. To bi moglo rezultovati nižim neželjenim efektima i povećanom efikasnošću, u zavisnosti od farmakokinetičkog/farmakodinamičkog odnosa određenog jedinjenja. ML-337(C. J. Wenthur i dr., J. Med. Chem., 2013, 56, 5208) i Odanacatib (K. Kassahun i dr., WO2012/112363) su primeri za ovaj efekat deuterijuma. Takoiđe su zabeleženi drugi slučajevi u kojima smanjena stopa metabolizma dovodi do povećanja izloženosti leku bez promene brzine sistemskog klirensa (npr. Rofekoksib: F. Schneider i dr., Arzneim. Forsch. / Drug. Res., 2006, 56, 295; Telaprevir: F. Maltais i dr., J. Med. Chem., 2009, 52, 7993). Deuterisani lekovi koji pokazuju ovaj efekat mogu imati smanjene potrebe za doziranjem (npr. manji broj doza ili niže doziranje kako bi se postigao željeni efekat) i/ili mogu proizvesti manje opterećenja metabolitima.
[0037] Jedinjenje opšte formule (I) može imati više potencijalnih mesta napada za metabolizam. Kako bi se optimizovali gore opisani efekti na fizičko-hemijska svojstva i metabolički profil, mogu se odabrati jedinjenja koja sadrže deuterijum opšte formule (I) koja imaju određeni obrazac jedne ili više deuterijum-vodonik razmene. Naročito, atomi deuterijuma jedinjenja koja sadrže deuterijum opšte formule (I) su vezani za atom ugljenika i/ili se nalaze na onim položajima jedinjenja opšte formule (I), koja su mesta napada metabolizma enzima kao što su npr citokrom P450.
[0038] Kada se ovde koristi oblik množine reči jedinjenja, soli, polimorfi, hidrati, solvati i slično, podrazumeva se i pojedinačno jedinjenje, so, polimorf, hidrat, solvat ili slično.
1
[0039] Pod „stabilnim jedinjenjem“ ili „stabilnom strukturom“ podrazumeva se jedinjenje koje je dovoljno robusno da preživi izolaciju do korisnog stepena čistoće iz reakcione smeše i formulaciju u efikasan terapijski agens.
[0040] Jedinjenja predmetnog pronalaska opciono sadrže jedan asimetrični centar, u zavisnosti od mesta i prirode različitih željenih supstituenata. Moguće je da je jedan asimetrični atom ugljenika prisutan u (R) ili (S) konfiguraciji, što može rezultovati racemičnim smešama. U određenim slučajevima je moguće da asimetrija bude prisutna i zbog ograničene rotacije oko date veze, na primer, centralne veze koja susedna dva supstituisana aromatična prstena navedenih jedinjenja. Poželjna jedinjenja su ona koja proizvode poželjniju biološku aktivnost. Odvojeni, čisti ili delimično prečišćeni izomeri i stereoizomeri ili racemične smeše jedinjenja predmetnog pronalaska takođe su obuhvaćeni obimom predmetnog pronalaska. Prečišćavanje i odvajanje takvih materijala može se izvršiti standardnim tehnikama poznatim u struci.
[0041] Optički izomeri se mogu dobiti rastvaranjem racemskih smeša prema konvencionalnim postupcima, na primer, stvaranjem dijastereoizomernih soli upotrebom optički aktivne kiseline ili baze ili stvaranjem kovalentnih dijastereomera. Primeri odgovarajućih kiselina su vinska, diacetil-vinska, ditoluoil-vinska i kamforsulfonska kiselina. Smeše dijastereoizomera mogu se razdvojiti na svoje pojedinačne dijastereomere na osnovu njihovih fizičkih i/ili hemijskih razlika postupcima poznatim u struci, na primer hromatografijom ili frakcionom kristalizacijom. Optički aktivne baze ili kiseline se zatim oslobađaju iz odvojenih dijastereomernih soli. Drugačiji postupak za razdvajanje optičkih izomera uključuje upotrebu hiralne hromatografije (npr., HPLC kolone koje koriste hiralnu fazu), sa ili bez konvencionalne derivatizacije, optimalno odabrane da maksimizuju razdvajanje enantiomera. Pogodne HPLC kolone koje koriste hiralnu fazu su komercijalno dostupne, poput onih koje je proizveo Daicel, npr., Chiracel OD i Chiracel OJ, između ostalih, koji se svi rutinski mogu izabrati. Takođe su korisna enzimska razdvajanja, sa ili bez derivatizacije. Optički aktivna jedinjenja predmetnog pronalaska se takođe mogu dobiti hiralnim sintezama koristeći optički aktivne početne materijale. Kako bi se razlikovali različiti tipovi izomera, poziva se na IUPAC Rules Section E (Pure Appl Chem 45, 11-30, 1976).
[0042] Predmetni pronalazak uključuje sve moguće stereoizomere jedinjenja predmetnog pronalaska kao pojedinačne stereoizomere ili kao bilo koju smešu navedenih stereoizomera, npr. (R)- ili (S)- izomeri, u bilo kom odnosu. Izolacija jednog stereoizomera, npr. pojedinačni enantiomer ili pojedinačni dijastereomer jedinjenja predmetnog pronalaska postiže se bilo kojim pogodnim postupkom u struci, kao što je hromatografija, posebno hiralna hromatografija, npr.
[0043] Dalje, moguće je da jedinjenja predmetnog pronalaska postoje kao tautomeri.
Predmetni pronalazak uključuje sve moguće tautomere jedinjenja predmetnog pronalaska kao pojedinačne tautomere ili kao bilo koju smešu navedenih tautomera, u bilo kom odnosu.
[0044] Dalje, jedinjenja predmetnog pronalaska mogu postojati kao N-oksidi, koji su definisani tako što je najmanje jedan azot jedinjenja predmetnog pronalaska oksidiran.
Predmetni pronalazak uključuje sve takve moguće N-okside.
[0045] Predmetni pronalazak takođe obuhvata korisne oblike jedinjenja predmetnog pronalaska, kao što su hidrati, solvati, soli, naročito farmaceutski prihvatljive soli i/ili kotalozi.
[0046] Jedinjenja predmetnog pronalaska mogu postojati kao hidrat ili kao solvat, gde jedinjenja predmetnog pronalaska sadrže polarne rastvarače, naročito vodu, metanol ili etanol, na primer, kao strukturni element kristalne rešetke jedinjenja. Moguće je da količina polarnih rastvarača, posebno vode, postoji u stehiometrijskom ili nestehiometrijskom odnosu. U slučaju stehiometrijskih solvata, npr. hidrat, hemi-, (polu-), mono-, seskvi-, di-, tri-, tetra-, penta- itd. mogući su solvati ili hidrati. Predmetni pronalazak uključuje sve takve hidrate ili solvate. Hidrati su poželjni solvati u kontekstu predmetnog pronalaska.
[0047] Konkretno, derivati 3,3,3-trifluoro-2-oksopropila formule (I-B) prema pronalasku (ketonski oblik) takođe mogu biti prisutni u 3,3,3-trifluoro-2,2-dihidroksipropil obliku (I-B)' (hidratni oblik) (pogledati šemu 1 u nastavku); oba oblika su izričito obuhvaćena predmetnim pronalaskom.
[0048] Dalje, moguće je da jedinjenja predmetnog pronalaska postoje u slobodnom obliku, npr. kao slobodna baza, ili kao slobodna kiselina, ili kao cviterjon, ili da postoje u obliku soli. Navedena so može biti bilo koja so, bilo organska ili neorganska adiciona so, naročito bilo koja farmaceutski prihvatljiva organska ili neorganska adiciona so, koja se uobičajeno koristi u farmaciji ili koja se koristi, na primer, za izolovanje ili prečišćavanje jedinjenja predmetnog pronalaska.
[0049] Izraz „farmaceutski prihvatljiva so“ odnosi se na neorgansku ili organsku kiselu adicionu so jedinjenja predmetnog pronalaska. Na primer, pogledati S. M. Berge, i dr.
„Pharmaceutical Salts,” J. Pharm. Sci.1977, 66, 1-19.
[0050] Pogodna farmaceutski prihvatljiva so jedinjenja predmetnog pronalaska može biti, na primer, kisela adiciona so jedinjenja predmetnog pronalaska koja nosi atom azota, na primer u lancu ili u prstenu, koja je dovoljno bazna, kao što je kisela adiciona so sa anorganskom kiselinom ili „mineralnom kiselinom“, kao što su hlorovodonična, bromovodonična, jodovodonična, sumporna, sulfamska, bisulfurna, fosforna ili azotna kiselina, na primer, ili sa organskom kiselinom, kao što su mravlja, sirćetna, sirćetna, acetosirćetna, trifluorosirćetna, propionska, buterna, heksanoanska, heptanska, undekanska, laurinska, benzojeva, salicilna, 2-(4-hidroksibenzoil)-benzojeva, kamforna, cimetna, ciklopentanpropionska, diglukonska, 3-hidroksi-2-natoinska, nikotinska, pamoinska, pektinska, 3-fenilpropionska, pivalnska, 2-hidroksietansulfonska, itakonska, trifluorometansulfonska, dodecilsumporna, etansulfonska, benzensulfonska, para-toluensulfonska, metansulfonska, 2-naftalensulfonska, natalindisulfonska, kamforslufonska kiselina, limunska, vinska, stearinska, mlečna, oksalna, malonska, sukcinska, jabučna, adipinska, alginska, maleinska, fumarna, D-glukonska, mandelinska, askorbinska, glukoheptanska, glicerofosforna, asparaginska, sulfosalicilna ili tiocijanska kiselina, na primer.
1
[0051] Dalje, još jedna pogodno farmaceutski prihvatljiva so jedinjenja predmetnog pronalaska koja je dovoljno kisela je so alkalnog metala, na primer natrijumova ili kalijumova so, so zemnoalkalnog metala, na primer so kalcijuma, magnezijuma ili stroncijuma, ili so aluminijuma ili cinka, ili so amonijuma, izvedena iz amonijaka ili iz organskog primarnog, sekundarnog ili tercijarnog amina koji ima 1 do 20 atoma ugljenika, kao što su etilamin, dietilamin, trietilamin, etildiizopropilamin, monoetanolamin, dietanolamin, trietanolamin, dicikloetilaminoilamin, dicikloheksilamino, dietilaminoetanol, tris(hidroksimetil)aminometan, prokain, dibenzilamiN,N-metilmorfolin, arginin, lizin, 1,2-etilendiamiN,N-metilpiperidiN,N-metil-glukamiN,N,N-dimetil-glukamiN,N-etil-glukamin, 1,6-heksandiamin, glukozamin, sarkozin, serinol, 2-amino-1,3-propandiol, 3-amino-1,2-propandiol, 4-amino-1,2,3-butanetriol ili so sa kvartararnim amonijum jonom koji ima 1 do 20 atoma ugljenika, kao što je tetrametilamonijum, tetraetilamonijum, tetra (n-propil) amonijum, tetra (n-butil) amonijum, N-benzil-N,N,N-trimetilamonijum, holin ili benzalkonijum.
[0052] Stručnjaci će dalje prepoznati da je moguće da se kisele adicione soli navedenih jedinjenja dobiju reakcijom jedinjenja sa odgovarajućom neorganskom ili organskom kiselinom putem bilo kog od brojnih poznatih postupaka. Alternativno, soli alkalnih i zemnoalkalnih metala kiselih jedinjenja predmetnog pronalaska se pripremaju reakcijom jedinjenja predmetnog pronalaska sa odgovarajućom bazom kroz niz poznatih postupaka.
[0053] Predmetni pronalazak uključuje sve moguće soli jedinjenja predmetnog pronalaska kao pojedinačne soli, ili kao bilo koju mešavinu navedenih soli, u bilo kom odnosu.
[0054] U ovom tekstu, posebno u eksperimentalnom odeljku, za sintezu intermedijera i primera predmetnog pronalaska, kada se jedinjenje pominje kao oblik soli sa odgovarajućom bazom ili kiselinom, tačan stehiometrijski sastav navedenog oblika soli, kako je dobijeno odgovarajućim postupkom pripreme i/ili prečišćavanja, u većini slučajeva je nepoznat.
[0055] Ako nije drugačije naznačeno, sufiksi hemijskih naziva ili strukturnih formula koje se odnose na soli, kao što su „hidrohlorid“, „trifluoroacetat“, „natrijumova so“ ili „x HCl“, „x CF3COOH“, „x Na<+>“, na primer, znače oblik soli, čija stehiometrija nije navedena.
[0056] Ovo se odnosi analogno na slučajeve u kojima su dobijeni intermedijeri sinteze ili primeri njihovih jedinjenja ili njihovih soli, opisanim postupcima pripreme i/ili prečišćavanja, kao solvati, poput hidrata, sa (ako je definisano) nepoznatim stehiometrijskim sastavom.
[0057] Dalje, predmetni pronalazak uključuje sve moguće kristalne oblike ili polimorfe jedinjenja predmetnog pronalaska, bilo kao pojedinačni polimorf, ili kao smešu više od jednog polimorfa, u bilo kom odnosu.
[0058] U zasebnom otelotvorenju, predmetni pronalazak se odnosi na jedinjenja formule (I), supra, gde
R<1>predstavlja grupu formule
gde
#<1>predstavlja tačku vezivanja za atom azota, Ar predstavlja grupu formule
gde
#<2>predstavlja tačku vezivanja za atom azota,
R<2A>predstavlja grupu izabranu od atoma hlora, atoma broma, trifluorometila, trifluorometoksija, etoksikarbonila i -C(=O)NH2,
ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, hidrat i/ili solvat.
[0059] U poželjnom otelotvorenju, predmetni pronalazak se odnosi na jedinjenja prema formuli (I), supra, gde
R<1>predstavlja grupu formule
gde
#<1>predstavlja tačku vezivanja za atom azota,
Ar predstavlja grupu formule
1
gde
#<2>predstavlja tačku vezivanja za atom azota,
R<2A>predstavlja grupu izabranu od atoma hlora, trifluorometila i trifluorometoksija, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, hidrat i/ili solvat.
[0060] U skladu sa daljim poželjnim otelotvorenjem, predmetni pronalazak pokriva jedinjenja opšte formule (I), supra, gde
R<1>predstavlja (2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil grupu formule
gde
#<1>predstavlja tačku vezivanja za atom azota,
ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, hidrat i/ili solvat.
[0061] R<1>predstavlja (2R)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil grupu formule
gde
#<1>predstavlja tačku vezivanja za atom azota,
ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, hidrat i/ili solvat.
[0062] U posebnom daljem otelotvorenju prvog aspekta, predmetni pronalazak pokriva kombinacije dve ili više gore navedenih otelotvorenja pod naslovom „Dalja otelotvorenja prvog aspekta predmetnog pronalaska“.
[0063] Predmetni pronalazak pokriva bilo koju pod-kombinaciju u bilo kom otelotvorenju ili aspektu predmetnog pronalaska jedinjenja opšte formule (I), supra.
[0064] Predmetni pronalazak pokriva bilo koju pod-kombinaciju u bilo kom otelotvorenju ili aspektu predmetnog pronalaska intermedijernih jedinjenja opšte formule (II), (III), (IV), (V),
1
(VI) i (VIII), (VIII). Predmetni pronalazak pokriva jedinjenja opšte formule (I) koja su otkrivena u Odeljku primera ovog teksta, u nastavku.
[0065] U skladu sa drugim aspektom, predmetni pronalazak pokriva postupke za pripremu jedinjenja opšte formule (I) kako je definisano supra, gde navedeni postupci obuhvataju korak
1. [A] omogućavanja intermedijer jedinjenju formule (II):
gde je R<1>kako je definisano za jedinjenje opšte formule (I) kako je definisano supra, i
R<3>predstavlja (C1-C4)-alkil grupu, naročito metil grupu,
da reaguje u prvom koraku u prisustvu baze sa jedinjenjem opšte formule (III):
gde
R<4>predstavlja (C1-C4)-alkil grupu, naročito metil grupu,
kako bi se dobilo intermedijer jedinjenje, kom je zatim omogućeno da reaguje u prisustvu baze, i opciono soli bakra, u drugom koraku sa jedinjenjem hidrazina opšte formule (IV) ili sa njegovom odgovarajućom soli
gde je Ar kako je definisano za jedinjenje opšte formule (I) kako je definisano supra, čime se dobija jedinjenje opšte formule (V) :
1
gde su R<1>i Ar kako je definisano za jedinjenje opšte formule (I) kako je definisano supra, i
R<4>predstavlja (C1-C4)-alkil grupu, naročito metil grupu,
praćeno narednim korakom
2. [B] omogućavanja jedinjenju formule (V) koje je dobijeno u koraku [A] da reaguje sa amonijakom čime se dobija jedinjenje opšte formule (I):
gde su R<1>i Ar kako je definisano za jedinjenje opšte formule (I) kako je definisano supra, opciono praćeno korakom
3. [C] konverzije alkohola opšte formule (I-A):
gde je Ar kako je definisano za jedinjenje opšte formule (I) kako je definisano supra, u ketone opšte formule (I-B):
gde je Ar kako je definisano za jedinjenje opšte formule (I) kako je definisano supra, koristeći poznate postupke oksidacije,
svaki ┌A┐, ┌B┐ i ┌C┐ je opciono praćen, gde je odgovarajuće, (i) razdvajanjem jedinjenja formule (I) dobijenih tako na svoje odgovarajuće enantiomere, i/ili (ii) konverzijom jedinjenja formule (I) u svoje odgovarajuće hidrate, solvate, soli i/ili
1
hidrate ili solvate soli tretiranjem sa odgovarajućim rastvaračima i/ili kiselinama ili bazama.
[0066] Predmetni pronalazak pokriva postupke pripreme jedinjenja predmetnog pronalaska opšte formule (I), gde navedeni postupci sadrže korake opisane u Eksperimentalnom odeljku ovde.
[0067] Šeme i postupci opisani u nastavku ilustruju sintetičke puteve do jedinjenja opšte formule (I) pronalaska i nisu namenjeni ograničavanju. Stručnjaku je jasno da se redosled transformacija kao što je prikazano u šemama 2, 3, 4, 5, 6 i 7 može modifikovati na različite načine. Redosled transformacija prikazan u ovim šemama, prema tome, nije ograničen. Pored toga, međusobna konverzija bilo kog supstituenta, R<1>, R<2>, R<3>, R<4>i Ar se može postići pre i/ili nakon primernih transformacija. Ove modifikacije mogu biti kao što su uvođenje zaštitnih grupa, razdvajanje zaštitnih grupa, redukcija ili oksidacija funkcionalnih grupa, halogeniranje, metalacija, supstitucija ili druge reakcije poznate stručnjaku. Ove transformacije uključuju one koje uvode funkcionalnost koja omogućava dalju međusobnu konverziju supstituenata. Odgovarajuće zaštitne grupe i njihovo uvođenje i razdvajanje dobro su poznati stručnjaku (pogledati na primer T.W. Greene and P.G.M. Wuts in Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd edition, Wiley 1999). Konkretni primeri su opisani u narednim pasusima.
[0068] Višekomponentna ciklizacija (II) → (V) se izvodi reakcijom imidata formule (II) sa kiselim hloridom formule (III) u prisustvu baze dajući intermedijer koji u narednom koraku reaguje sa jedinjenjem aril hidrazina formule (IV). Obično nastali intermedijer nije izolovan i reakcija u dva koraka se izvodi u jednom loncu. Arilhidrazinsko jedinjenje za formulu (I) takođe se može koristiti u obliku njegovih soli, kao što su hidrohloridna so ili tozilatna so. U alkalnim uslovima reakcije, hidrazinska so će se ponovo pretvoriti u oblik slobodne baze. Iznos dodate osnovice se tada može prilagoditi u tom pogledu. U drugom koraku može biti korisno dodavanje soli bakra ili cinka, kao što su bakar(II) sulfat, bakar(II) hlorid, cink(II) sulfat i cink(II) hlorid, tipično a poželjno se koriste bakar(II) sulfat i cink(II) sulfat.
[0069] Pogodne baze za oba koraka su tipično baze tercijarnih amina, kao što su N,N-diizopropiletilamin (DIPEA), trietilamin, triizopropilamiN,N-metilimidazol, N-metilmorfolin, piridin i 4-(N,N-dimetilamino) piridin. Poželjno, N,N-diizopropiletilamin (DIPEA) se koristi kao baza. Reakcija se izvodi u inertnom organskom rastvaraču, kao što su dihlorometan, 1,2-
1
dihloroetan, metil terc-butil etar, tetrahidrofuran, 1,4-dioksan, 1,2-dimetoksietan, toluen, piridin, etil acetat, acetonitril ili N,N-dimetilformamid, ili u smeši ovih rastvarača. Poželjno je da se kao rastvarači koriste tetrahidrofuran ili dioksan ili njihova smeša. Prvi korak se generalno izvodi na temperaturi u rasponu od -10°C do 120°C, poželjno na 0°C. Drugi korak se generalno izvodi na temperaturi u rasponu od 20°C do 120°C, poželjno na sobnoj temperaturi. Istovremeno mikrotalasno zračenje takođe može imati povoljan efekat u ovoj reakciji na temperaturi u rasponu od 60°C do 150°C, poželjno na 120°C.
[0070] Reakcija aminolize (V) → (I) obično se izvodi u rastvoru amonijaka. Pogodni rastvori amonijaka za ovaj korak su zasićeni rastvori amonijaka, naročito rastvor amonijaka u metanolu, etanolu, izopropanolu, tetrahidrofuranu, dioksanu ili vodi, ili njihova smeša.
Poželjno je da se koristi metanolni rastvor amonijaka. Reakcija se poželjno izvodi direktno u rastvoru amonijaka u odsustvu bilo kog drugog rastvarača za reakciju. Ovaj korak se obično izvodi na temperaturi u rasponu od 20°C do 120°C, poželjno na sobnoj temperaturi.
Istovremeno mikrotalasno zračenje takođe može imati povoljan efekat u ovoj reakciji na temperaturi u rasponu od 60°C do 150°C, poželjno na 120°C.
[0071] Reakcija oksidacije (I-A) → (I-B) sprovodi se pomoću uobičajenih postupaka oksidacije poznatih iz literature [npr. JOC, 1983, 48, 4155 (Des-Martinova oksidacija); Tet Lett, 1994, 35, 3485 (IBX oksidacija); JOC, 1970, 35, 3589 (oksidacija kiselog dihromata); Tet Lett, 1979, 399 (PDC oksidacija); Tetrahedron, 1978, 34, 1651 (Svernova oksidacija)]. Dakle, alkoholna grupa u jedinjenjima opšte formule (I-A) je poželjno oksidisana upotrebom Des-Martinovog perjodinana (DMP). U tipičnom postupku reakcija se izvodi u dihlorometanu na temperaturi od 0°C i zatim zagreva na sobnu temperaturu.
[0072] Jedinjenja opšte formule (II) kako su definisana supra, mogu se pripremiti postupkom koji obuhvata korak
1. [a] omogućavanja intermedijer jedinjenju formule (VI):
gde je R<1>kako je definisano za jedinjenje opšte formule (I) kako je definisano supra,
2
da reaguje sa jedinjenjem nitrila opšte formule (VII),
gde X predstavlja odlazeću grupu, kao što su hlor, brom, jod, mesilat ili tosilat, posebno hlor ili brom,
čime se dobija jedinjenje opšte formule (VIII)
gde R<1>je kako je definisano za jedinjenje opšte formule (I) kako je definisano supra, praćeno narednim korakom
2. [b] omogućavanja jedinjenju formule (VIII) koje je dobijeno u koraku [a] da reaguje sa baznim alkoholatom, poželjno natrijum metanolatom, čime se dobija jedinjenje opšte formule (II),
gde je R<1>kako je definisano za jedinjenje opšte formule (I) kako je definisano supra, i R<3>predstavlja (C1-C4)-alkil grupu, naročito metil grupu.
[0073] Reakcija N-alkilacije (VI) (VII) → (VIII) (korak [a]) obično se izvodi u prisustvu baze. Tipične i primerne baze uključuju natrijum karbonat, kalijum karbonat, cezijum karbonat, N,N-diizopropiletilamin, trietilamiN,Natrijum terc-butilat ili kalijum terc-butilat u acetonitrilu, metilizobutilketonu, dioksanu, dimetilformamidu, dimetilacetamidu, N-metilpirolidinonu, dimetilsulfoksidu i sulfolanu, prednost se daje kalijum karbonatu u metilizobutilketonu ili acetonitrilu. Reakcija se može opciono izvesti na povoljan način uz dodavanje katalizatora alkilacije kao što su, na primer, litijum bromid, natrijum jodid, litijum jodid, tetra-n-butilamoniumbromid, tetra-n-butilamonijum-jodid ili benziltrietilamonijumhlorid. Reakcije se generalno izvode u temperaturnom rasponu od 40°C do 120°C, poželjno od 60°C do 80°C. Reakcije se mogu izvoditi pri atmosferskom, povišenom ili smanjenom pritisku (na primer pri 0,5 do 5 bara); generalno, reakcije se izvode pod atmosferskim pritiskom. Može biti korisno polako izvoditi dodavanje agensa za alkilaciju (VII) tokom dužeg vremenskog perioda.
[0074] Konverzija u imidat opšte formule (II) može se postići putem standardnih reakcionih protokola poznatih stručnjaku (korak [b]: (VIII) → (II)). Reakcija se obično izvodi u baznim reakcionim uslovima reakcijom sa baznim alkoholatom. Tipične baze koje se mogu koristiti su natrijum metanolat, natrijum etanolat, natrijum propanolat, natrijum izopropoksid, natrijum terc-butilat ili kalijum terc-butilat u metanolu, etanolu, n-propanolu, izopropanolu, n-butanolu, izobutanolu i terc-butanolu. Prednost se daje natrijum metanolatu u metanolu. Reakcije se generalno izvode u temperaturnom rasponu od 20 do 80°C, poželjno na 20 do 40°C.
[0075] Alternativno, nitrilna jedinjenja opšte formule (VIII) mogu se opciono takođe pripremiti kao što je prikazano u šemi sinteze 2 u nastavku:
TFAA = anhidrid trifluorosirćetne kiseline
[0076] Amidno spajanje (IX) → (X) može se izvršiti direktno uz pomoć kondenzacionog agensa ili aktivacionog agensa u prisustvu baze ili u dva koraka preko acil hlorida ili imidazolida karboksilne kiseline. Tipični kondenzacioni i aktivacioni agensi za stvaranje amida u fazama procesa (IX) → (X) uključuju, na primer, karbodiimide kao što su N,N'-dietil-, N,N'-dipropil-, N,N'-diizopropil- N,N'-dicikloheksilkarbodiimid (DCC) ili N-(3-dimetilaminoizopropil)-N'-etilkarbodiimid hidrohlorid (EDC), derivati fosgena kao što su N,N' karbonildiimidazol (CDI), 1,2-oksazolijum jedinjenja kao što su 2-etil-5-fenil-1,2-oksazolijum-3-sulfat ili 2-terc-butil-5-metil-izoksazolijum perhlorat, acilamino jedinjenja kao što su 2-etoksi-1-etoksikarbonil-1,2-dihidrokinolin ili izobutil hloroformiat, anhidrid propanfosfonske kiseline, dietil cijanofosfonat, bis(2-okso-3-oksazo-lidinil)fosforil hlorid, benzotriazol-1-iloksitris(dimetil-amino)fosfonijum heksafluorofosfat, benzotriazol-1-iloksitris(pirolidino)fosfonijum heksafluorofosfat (PyBOP), O-(benzotriazol-1-il)-N,N,N',N'tetrametiluronijum tetrafluoroborat (TBTU), O-(benzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijum heksafluorofosfat (HBTU), 2-(2-okso-l-(2H)-piridil)-1,1,3,3-tetrametiluronijum tetrafluoroborat (TPTU), O-(7-aza-benzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijumbeksafluorofosfat (HATU) ili O-(1H-6-hloro-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronijum tetrafluoroborat (TCTU), opciono u kombinaciji sa drugim aditivima kao što si 1-hidroksibenzotriazol (HOBt) ili N-hidroksisukcinimid (HOSu). Acil hloridi se obično pripremaju sa tionil hloridom ili oksalil hloridom u inertnom rastvaraču poput dihlorometana ili N,N-dimetilformamida. Takođe je moguće koristiti smeše navedenih rastvarača
[0077] Tipične i primerne baze uključuju natrijum karbonat, kalijum karbonat, cezijum karbonat, N,N-diizopropiletilamin, trietilamin, natrijum-terc-butilat ili kalijum-terc-butilat u acetonitrilu, metilizobutilketon, dioksan, dimetilformamid, dimetilacetamid, N-metilpirolidinon, dimetilsulfoksid i sulfolan, a prednost se daje kalijum karbonatu u metilizobutilketonu ili acetonitrilu. Reakcija se može opciono izvesti na povoljan način uz dodavanje katalizatora alkilacije, kao što su, na primer, litijum bromid, natrijum jodid, litijum jodid, tetra-n-butilamonijumromidid, tetra-n-butilamonijumjodid ili benziltrietilamonijumhlorid. Konverzija u nitril (X) → (XI) može se izvršiti uz pomoć agensa za dehidrataciju. Tipični agensi za dehidrataciju uključuju, na primer, anhidrid trifluorosirćetne kiseline, fosfor pentoksid (P4O10), fosforil hlorid (POCl3), fosfor pentahlorid (PCl5), CCl4-PPh3(Appel reagens), heksametilfosforamid (HMPA); metil N-(trietilamonijum-sulfonil) karbamat (Burgesov reagens), (hlorometilen)dimetiliminijumhlorid (Vilsmajerov reagens), oksalil-hlorid/DMSO i tionil-hlorid (SOCl2).
[0078] Tipični i primerni rastvarači za oba koraka (IX) → (X) i (X) → (XI) uključuju, na primer, etre kao što su dietil etar, dioksan, tetrahidrofuran, glikol dimetil etar ili dietilen glikol dimetil etar, ugljovodonike kao što su benzen, toluen, ksilen, heksan, cikloheksan ili mineralno ulje, fragmente, halogenizovane ugljovodonike kao što su dihlormetan, trihlorometan, ugljenik tetrahlorid, 1,2-dihloroetan, trihloretilen ili hlorobenzen ili drugi rastvarači kao što su aceton, etil acetat, acetonitritil, piridin, dimetil sulfoksid, N,N-dimetilformamid, N,N'-dimetilpropileneurea (DMPU) ili N-metilpirolidon (NMP). Takođe je moguće koristiti smeše navedenih rastvarača.
[0079] U tipičnom i poželjnom postupku karboksilna kiselina (IX) najpre reaguje sa pivaloil hloridom u prisustvu piridina kako bi se dobio intermedijer koji u narednom koraku reaguje
2
sa amonijakom. Obično nastali intermedijer nije izolovan i reakcija u dva koraka se izvodi u jednoj posudi. Odgovarajuće baze za prvi korak poželjno su piridin, 4-(N,N-dimetilamino)piridin ili N,N-diizopropiletilamin (DIPEA). Konverzija karboksamida (X) u nitril (VIII) se tada obično izvodi reakcijom sa trifluorosirćetnim anhidridom. Obe reakcije se izvode u inertnom organskom rastvaraču, poželjno tetrahidrofuranu.
[0080] Jedinjenja formule (VI) i (IX) mogu se sintetisati postupcima opisanim u Međunarodnoj patentnoj prijavi WO 2010/105770 i WO 2011/104322 (pogledati takođe šeme sinteze 3 i 4 u nastavku).
[0081] Jedinjenja formula (III), (IV) i (VII) su ili komercijalno dostupna, poznata iz literature ili se mogu pripremiti iz lako dostupnih polaznih materijala prilagođavanjem standardnih postupaka opisanih u literaturi. Detaljni postupci i reference na literaturu za pripremu polaznih materijala mogu se naći i u Eksperimentalnom delu u odeljku o pripremi polaznih materijala i intermedijera.
[0082] Priprema jedinjenja prema pronalasku može se ilustrovati pomoću narednih šema sinteze:
[cf. Međunarodna patentna prijava WO 2011/104322-A1].
[cf. Međunarodna patentna prijava WO 2011/104322-A1].
TFAA: anhidrid trifluorosirćetne kiseline
2
[0083] Jedinjenja opšte formule (I) predmetnog pronalaska mogu se pretvoriti u bilo koju so, poželjno farmaceutski prihvatljivu so, kako je ovde opisano, bilo kojim postupkom koji je poznat stručnjaku. Slično tome, bilo koja so jedinjenja opšte formule (I) predmetnog pronalaska može se pretvoriti u slobodno jedinjenje, bilo kojim postupkom koji je poznat stručnjaku.
[0084] Jedinjenja predmetnog pronalaska imaju dragocena farmakološka svojstva i mogu se koristiti za prevenciju i/ili tretman različitih bolesti i stanja izazvanih bolestima kod ljudi i drugih sisara. Jedinjenja opšte formule (I) predmetnog pronalaska pokazuju vredan farmakološki spektar delovanja i farmakokinetički profil, od kojih nijedan nije mogao da se predvidi. Iznenađujuće je pronađeno da jedinjenja predmetnog pronalaska efikasno inhibiraju vazopresin V1a receptor i stoga je moguće da se navedena jedinjenja koriste za tretman i/ili prevenciju bolesti, poželjno bubrežnih i kardiovaskularnih bolesti kod ljudi i životinja.
[0085] U kontekstu predmetnog pronalaska, izraz „tretman“ ili „tretiranje“ uključuje inhibiranje, odlaganje, ublažavanje, olakšavanje, zaustavljanje, smanjenje ili izazivanje regresije bolesti, poremećaja ili stanja, njihovog razvoja i/ili njihovog napretka i/ili simptoma. Izraz „prevencija“ ili „sprečavanje“ uključuje smanjenje rizika od nastanka, početka ili doživljavanja bolesti, poremećaja, stanja ili stanja, njihovog razvoja i/ili napredovanja i/ili njihovih simptoma. Izraz prevencija uključuje profilaksu. Tretman ili prevencija poremećaja, bolesti ili stanja mogu biti delimični ili potpuni.
[0086] U celom ovom dokumentu, radi jednostavnosti, upotrebi oblika jednine daje se prednost nad oblikom množine, ali se obično podrazumeva da uključuje jezik množine ako nije drugačije naznačeno.
[0087] Jedinjenja predmetnog pronalaska su visoko potentna, posebno selektivni antagonisti vazopresin V1a receptora. Stoga se očekuje da će jedinjenja prema pronalasku biti veoma vredna kao terapijski agensi za tretman i/ili prevenciju bolesti, posebno za tretman i/ili prevenciju bubrežnih i kardiovaskularnih bolesti.
[0088] Kako se ovde koristi, izraz „antagonist vazopresin V1a receptora“ odnosi se na
2
jedinjenje koje deluje inhibicijom (delimično ili u potpunosti) ili blokiranjem vazopresin V1a receptora, sprečavajući tako aktivaciju receptora vazopresinom.
[0089] U jednom otelotvorenju, ovde opisana jedinjenja su aktivna na V1a receptoru. U drugom otelotvorenju ovde opisana jedinjenja pokazuju inhibiciju V1a receptora prema studiji u B-1 sa IC50<100 nM. U drugom otelotvorenju ovde opisana jedinjenja pokazuju inhibiciju V1a receptora prema studiji u B-1 sa IC50<20 nM. U drugom otelotvorenju ovde opisana jedinjenja pokazuju inhibiciju V1a receptora prema studiji u B-1 sa IC50<10 nM. U drugom otelotvorenju ovde opisana jedinjenja pokazuju inhibiciju V1a receptora prema studiji u B-1 sa IC50<5 nM. U drugom otelotvorenju ovde opisana jedinjenja pokazuju inhibiciju V1a receptora prema studiji u B-1 sa IC50<2 nM.
[0090] U daljem otelotvorenju, ovde opisana jedinjenja su selektivno aktivna na V1a receptoru i manje su aktivna, značajno manje aktivna i/ili neaktivna na drugim receptorima vazopresina, kao što su V1b i/ili V2 podtipovi. U drugom otelotvorenju, ovde opisana jedinjenja su najmanje 10 puta selektivnija za V1a receptor u poređenju sa V2 receptorom kako je određeno prema studiji u B-1. U drugom otelotvorenju, ovde opisana jedinjenja su najmanje 15 puta selektivnija za V1a receptor u poređenju sa V2 receptorom kako je određeno prema studiji u B-1. U drugom otelotvorenju, ovde opisana jedinjenja su najmanje 20 puta selektivnija za V1a receptor u poređenju sa V2 receptorom kako je određeno prema studiji u B-1. U drugom otelotvorenju, ovde opisana jedinjenja su najmanje 30 puta selektivnija za V1a receptor u poređenju sa V2 receptorom kako je određeno prema studiji u B-1.
[0091] Jedinjenja prema pronalasku su pogodna za tretman i/ili prevenciju bubrežnih bolesti, naročito akutnih i hroničnih bubrežnih bolesti, dijabetičkih bubrežnih bolesti i akutne i hronične bubrežne insuficijencije. Opšti izrazi „bubrežna bolest“ ili „bolest bubrega“ opisuju klasu stanja u kojima bubrezi ne uspevaju da filtriraju i uklone otpadne materije iz krvi. Postoje dva glavna oblika bubrežnih bolesti: akutna bubrežna bolest (akutna povreda bubrega, AKI) i hronična bubrežna bolest (CKD). Jedinjenja prema pronalasku mogu se dalje koristiti za tretman i/ili prevenciju posledica akutne povrede bubrega nastale usled višestrukih povreda poput ishemija-reperfuzija povrede, primene radiokontrasta, operacije kardiopulmonalnog bajpasa, šoka i sepse. U smislu predmetnog pronalaska, izraz bubrežna insuficijencija ili bubrežni prekid uključuje i akutne i hronične manifestacije bubrežne
2
insuficijencije, kao i osnovne ili srodne bubrežne bolesti kao što su bubrežna hipoperfuzija, intradijalitička hipotenzija, opstruktivna uropatija, glomerulopatije, IgA nefropatija, glomerulonefritis, akutni glomerulonefritis, glomeruloskleroza, tubulointersticijske bolesti, nefropatske bolesti kao što su primarna i urođena bubrežna bolest, nefritis, Alportov sindrom, upala bubrega, bubrežne bolesti izazvane imunološkim kompleksom kao što je odbacivanje transplantata bubrega, bubrežne bolesti izazvane imunim kompleksom, nefropatija izazvana toksičnim supstancama, kontrast nefropatija izazvana kontrast medijumom; minimalna promena glomerulonefritisa (lipoid); membranski glomerulonefritis; fokalna segmentna glomeruloskleroza (FSGS); hemolitički uremični sindrom (HUS), amiloidoza, Gudpasterov sindrom, Vegenerova granulomatoza, Purpura Schonlein-Henoch, dijabetička i nedijabetična nefropatija, pijelonefritis, bubrežne ciste, nefroskleroza, hipertenzivna nefroskleroza i nefrotski sindrom, koji može biti okarakterisan dijagnostički, na primer abonormalno redukovanim izlučivanjem kreatinina i/ili vode, abonormalno povećanom koncentracijom uree, azota, kalijuma i/ili kreatinina u krvi, izmenjenom aktivnosti bubrežnih enzima kao što je, na primer, glutamil sintetaza, promenjenom osmolarnosti ili zapreminom urina, povećanom mikroalbuminurijom, makroalbuminurijom, lezijama glomerula i arteriola, tubularnom dilatacijom, hiperfosfatemijom i/ili potrebom za dijalizom. Predmetni pronalazak takođe obuhvata upotrebu jedinjenja prema pronalasku za tretman i/ili prevenciju posledica bubrežne insuficijencije kao što su, na primer, plućni edem, srčana insuficijencija, uremija, anemija, poremećaji elektrolita (npr. hiperkalemija, hiponatriemija) i poremećaji u kostima i metabolizmu ugljenih hidrata. Jedinjenja prema pronalasku su takođe pogodna za tretman i/ili prevenciju policistične bubrežnih bolesti (PCKD) i sindroma neadekvatnog lučenja ADH (SIADH).
[0092] Kardiovaskularne bolesti u ovom kontekstu koje se mogu tretirati i/ili sprečiti jedinjenjima prema pronalasku uključuju, ali nisu ograničene na naredno: akutna i hronična srčana insuficijenciju, uključujući pogoršanje hronične srčane insuficijencije (ili hospitalizaciju zbog srčane insuficijencije) i uključujući kongestivnu srčanu insuficijenciju, arterijska hipertenzija, rezistentna hipertenzija, arterijska plućna hipertenzija, koronarna bolest srca, stabilna i nestabilna angina pektoris, atrijalne i ventrikularne aritmije, poremećaji atrijalnog i ventrikularnog ritma i poremećaji provodnosti, na primer atrioventrikularni blokovi stepena I-III (AVB I -III), supraventrikularna tahiaritmija, atrijalna fibrilacija, atrijalno treperenje, ventrikularna fibrilacija, ventrikularno treperenje, ventrikularna tahiaritmija, torsade-de-pointes tahikardija, atrijalni i ventrikularni ektrasistoli, AV-spoj
2
ekstrasistoli, sindrom bolesnog sinusa, sinkopi, tahikardija ponovnog ulaska AV-čvora i Volf-Parkinson-Vajtov sindrom, akutni koronarni sindrom (ACS), autoimune bolesti srca (perikarditis, endokarditis, valvulitis, aortitis, kardiomiopatije), šok kao što je kardiogeni šok, septički šok i anafilaktički šok, aneurizme, bokserska kardiomiopatija (preuranjena kontrakcija komore), dalje tromboembolijske bolesti i ishemije kao što su periferni perfuzioni poremećaji, perfuziona povreda, arterijske i venske tromboze, insuficijencija miokarda, endotelna disfunkcija, mikro- i makrovaskularno oštećenje (vaskulitis) i za sprečavanje restenoza kao što su terapije trombolizom, perkutana transluminalna angioplastika (PTA), perkutana transluminalna koronarna angioplastika (PTCA), transplantacija srca i operacije bajbapasa, arterioskleroza, poremećaji lipidnog metabolizma, hipolipoproteinemije, dislipidemije, hipertrigliceridemije, hiperlipidemije i kombinovane hiperlipidemije, hiperholesterolemije, abetalipoproteinemija, sitosterolemija, ksantomatoza, Tangier bolest, adipositas, gojaznost, metabolički sindrom, transitorni i ishemijski napadi, moždani udar, upalne kardiovaskularne bolesti, periferne i srčane vaskularne bolesti, poremećaji periferne cirkulacije, grčevi koronarnih arterija i perifernih arterija i edemi kao što su, na primer, plućni edem, cerebralni edem, bubrežni edem i edem povezan sa srčanom insuficijencijom.
[0093] U smislu predmetnog pronalaska, izraz srčana insuficijencija takođe uključuje specifičnije ili srodne oblike bolesti kao što su desna srčana insuficijencija, leva srčana insuficijencija, globalna insuficijencija, ishemijska kardiomiopatija, dilatativna kardiomiopatija, urođene srčane mane, defekti srčanih zalistaka, srčana insuficijencija sa defektima srčanog zaliska, stenoza mitralnog zaliska, insuficijencija mitralnog zaliska, stenoza aortnog zaliska, insuficijencija aortnog zaliska, trikuspidalna stenoza, tricuspidalna insuficijencija, stenoza plućnog zaliska, insuficijencija plućnog zaliska, kombinovani defekti srčanog zaliska, upala srčanog mišića (miokarditis), hronični miokarditis, akutni miokarditis, virusni miokarditis, dijabetična srčana insuficijencija, alkoholno toksična kardiomiopatija, bolesti skladištenja srca, srčana insuficijencija sa očuvanim fragmentom izbacivanja (HFpEF ili dijastolna srčana insuficijencija) i srčana insuficijencija sa smanjenim fragmentom izbacivanja (HFrEF ili sistolna srčana insuficijencija).
[0094] Jedinjenja predmetnog pronalaska mogu biti posebno korisna za tretman i/ili prevenciju kardiorenalnog sindroma (CRS) i njegovih različitih podtipova. Ovaj izraz obuhvata određene poremećaje srca i bubrega, gde akutna ili hronična disfunkcija jednog organa može izazvati akutnu ili hroničnu disfunkciju drugog.
2
[0095] Štaviše, jedinjenja prema pronalasku mogu se koristiti za tretman i/ili prevenciju periferne vaskularne bolesti (PVB), uključujući klaudikaciju i uključujući kritičnu ishemiju udova, koronarnu mikrovaskularnu disfunkciju (KMD) uključujući KMD tip 1-4, primarni i sekundarni Rejnoov fenomen, poremećaje mikrocirkulacije, periferne i autonomne neuropatije, dijabetične mikroangiopatije, dijabetičnu retinopatiju, čireve udova dijabetičara, gangrenu, CREST sindrom, eritematozne poremećaje, reumatske bolesti i za pospešivanje zarastanja rana.
[0096] Dalje, jedinjenja pronalaska su pogodna za tretman uroloških bolesti i bolesti muškog i ženskog urogenitalnog sistema, kao što su, na primer, benigni sindrom prostate (BPS), benigna hiperplazija prostate (BPH), benigno povećanje prostate (BPE), opstrukcija na izlazu bešike (BOO), sindromi donjeg urinarnog trakta (LUTS), neurogena prekomerno aktivna bešika (OAB), intersticijski cistitis (IC), urinarna inkontinencija (UI) kao što je na primer mešavina, nagon, stres i prekomerna inkontinencija (MUI, UUI, SUI, OUI), bolovi u karlici, erektilna disfunkcija, dismenoreja i endometrioza.
[0097] Jedinjenja prema pronalasku mogu se takođe koristiti za tretman i/ili prevenciju upalnih bolesti, astmatičnih bolesti, hronične opstruktivne plućne bolesti (COPD), akutnog respiratornog distres sindroma (ARDS), akutne povrede pluća (ALI), nedostatka alfa-1-antitripsina (AATD), plućne fibroze, plućnog emfizema (npr. plućni emfizem izazvan pušenjem) i cistične fibroze (CF). Pored toga, jedinjenja predmetnog pronalaska mogu se koristiti za tretman i/ili prevenciju plućne arterijske hipertenzije (PAH) i drugih oblika plućne hipertenzije (PH), uključujući plućnu hipertenziju povezanu sa bolešću leve komore, HIV infekcijom, anemijom srpastih ćelija, tromboembolijom (CTEPH), sarkoidozom, hroničnom opstruktivnom bolesti pluća (COPD) ili plućnom fibrozom.
[0098] Pored toga, jedinjenja prema pronalasku mogu se koristiti za tretman i/ili prevenciju ciroze jetre, ascitesa, dijabetes melitusa i dijabetičkih komplikacija kao što su, na primer, neuropatija i nefropatija.
[0099] Dalje, jedinjenja pronalaska su pogodna za tretman i/ili prevenciju poremećaja centralnog nerva kao što su stanja anksioznosti, depresija, glaukom, rak kao što su naročito plućni tumori i neusklađenost cirkadijskog ritma kao što je džet leg i rad po smenama.
[0100] Dalje, jedinjenja prema pronalasku mogu biti korisna za tretman i/ili prevenciju stanja bolova, bolesti nadbubrežnih žlezda kao što su, na primer, feohromocitom i nadbubrežna apopleksija, bolesti creva kao što su, na primer, Kronova bolest i dijareja, menstrualni poremećaji kao što su, na primer, dismenoreja, endometrioza, prevremeni porođaj i tokoliza.
[0101] Usled svoje aktivnosti i profila selektivnosti, veruje se da su jedinjenja predmetnog pronalaska posebno pogodna za tretman i/ili prevenciju akutnih i hroničnih bubrežnih bolesti, uključujući dijabetičnu nefropatiju, akutnu i hroničnu srčanu insuficijenciju, preeklampsiju, perifernu vaskularnu bolest (PVB), koronarnu mikrovaskularnu disfunkciju (KMD), Rejnoov sindrom i dismenoreju.
[0102] Gore navedene bolesti su dobro okarakterisane kod ljudi, ali takođe postoje sa uporedivom etiologijom kod drugih sisara i mogu se tretirati sa jedinjenjima i postupcima predmetnog pronalaska.
[0103] Prema tome, predmetni pronalazak se dalje odnosi na upotrebu jedinjenja prema pronalasku za tretman i/ili prevenciju bolesti, posebno gore navedenih bolesti.
[0104] Predmetni pronalazak se dalje odnosi na upotrebu jedinjenja prema pronalasku za pripremu farmaceutske smeše za tretman i/ili prevenciju bolesti, naročito gore navedenih bolesti.
[0105] Predmetni pronalazak se dalje odnosi na upotrebu jedinjenja prema pronalasku u postupku za tretman i/ili prevenciju bolesti, naročito gore navedenih bolesti.
[0106] Predmetni pronalazak se dalje odnosi na postupak za tretman i/ili prevenciju bolesti, posebno gore navedenih bolesti, korišćenjem efikasne količine najmanje jednog od jedinjenja prema pronalasku.
[0107] U skladu sa drugim aspektom, predmetni pronalazak pokriva farmaceutske kombinacije, naročito lekove, koji sadrže najmanje jedno jedinjenje opšte formule (I) predmetnog pronalaska i najmanje jedan ili više dodatnih aktivnih sastojaka, naročito za tretman i/ili prevenciju bolesti, posebno gore navedenih bolesti.
1
[0108] Predmetni pronalazak naročito obuhvata farmaceutsku kombinaciju koja sadrži:
• jedan ili više prvih aktivnih sastojaka, naročito jedinjenja opšte formule (I) kako je definisano supra, i
• jedan ili više aktivnih sastojaka, posebno za tretman i/ili prevenciju bolesti, posebno gore navedenih bolesti.
[0109] Izraz „kombinacija“ u predmetnom pronalasku koristi se kako je poznat stručnjacima, i moguće je da navedena kombinacija bude fiksna kombinacija, ne-fiksna kombinacija ili komplet delova.
[0110] „Fiksna kombinacija“ u predmetnom pronalasku se koristi kako je poznata stručnjacima i definiše se kao kombinacija u kojoj su, na primer, prvi aktivni sastojak, kao što je jedno ili više jedinjenja opšte formule (I) predmetnog pronalaska, i dodatni aktivni sastojak prisutni zajedno u jednoj jediničnoj dozi ili u jednoj jedinici. Jedan primer „fiksne kombinacije“ je farmaceutski sastav u kom su prvi aktivni sastojak i naredni aktivni sastojak prisutni u smeši za istovremenu primenu, kao što je formulacija. Naredni primer „fiksne kombinacije“ je farmaceutska kombinacija u kojoj su prvi aktivni sastojak i naredni aktivni sastojak prisutni u jednoj jedinici bez mešanja.
[0111] Kombinacija koja nije fiksna ili „komplet delova“ u predmetnom pronalasku koristi se kao što je poznato stručnjacima i definiše se kao kombinacija u kojoj su prvi aktivni sastojak i naredni aktivni sastojak prisutni u više od jedne jedinice. Jedan primer kombinacije koja nije fiksna ili kompleta delova je kombinacija u kojoj su prvi aktivni sastojak i naredni aktivni sastojak prisutni odvojeno. Moguće je da se komponente kombinacije koja nije fiksna ili kompleta delova primenjuju odvojeno, uzastopno, istovremeno, istovremeno ili da budu hronološki raspoređene.
[0112] Jedinjenja predmetnog pronalaska mogu se primenjivati kao jedini farmaceutski agens ili u kombinaciji sa jednim ili više drugih farmaceutski aktivnih sastojaka, kada kombinacija ne izaziva neprihvatljive štetne efekte. Predmetni pronalazak takođe pokriva takve farmaceutske kombinacije. Na primer, jedinjenja predmetnog pronalaska mogu se kombinovati sa poznatim agensima za tretman i/ili prevenciju bolesti, posebno gore navedenih bolesti.
2
[0113] Konkretno, jedinjenja predmetnog pronalaska mogu se koristiti u fiksnoj ili odvojenoj kombinaciji sa članovima grupe koju čine
• antitrombotički agensi, na primer, i poželjno iz grupe inhibitora agregacije trombocita, antikoagulansa i profibrinolitičkih supstanci;
• agensi za snižavanje krvnog pritiska, na primer, i poželjno iz grupe antagonista kalcijuma, antagonista angiotenzina AII, ACE inhibitora, NEP inhibitora, inhibitora vazopeptidaze, antagonista endotelina, inhibitora renina, alfa blokatora, beta blokatora, antagonista mineralokortikoidnih receptora i diuretika;
• antidijabetički agensi (hipoglikemijski ili antihiperglikemijski agensi), kao što su na primer, poželjno insulin i derivati, sulfonilurea, bigvanidi, tiazolidindioni, akarboza, inhibitori DPP4, analozi GLP-1 ili inhibitori SGLT (gliflozini).
• organski nitrati i NO donori, na primer natrijum nitroprusid, nitroglicerin, izosorbid mononitrat, izosorbid dinitrat, molsidomin ili SIN-1 i inhalacioni NO;
• jedinjenja koja inhibiraju razgradnju cikličnog gvanozin monofosfata (cGMP), na primer inhibitori fosfodiesteraza (PDE) 1, 2, 5 i/ili 9, naročito inhibitori PDE-5 kao što su sildenafil, vardenafil, tadalafil, udenafil, dasantafil, avanafil, mirodenafil, lodenafil, CTP-499 ili PF-00489791;
• natriuretički peptidi, kao što su na primer atrijalni natriuretički peptid (ANP, anaritid), B-tip natriuretički peptid ili moždani natriuretički peptid (BNP, nesiritid), natriuretički peptid C-tipa (CNP) ili urodilatin;
• senzibilizatori na kalcijum, kao što su na primer i poželjno levosimendan;
• NO- i heme-nezavisni aktivatori rastvorljive gvanilat ciklaze (sGC), na primer, i poželjno jedinjenja opisana WO 01/19355, WO 01/19776, WO 01/19778, WO 01/19780, WO 02/070462 i WO 02/070510;
• NO-nezavisni, ali heme-zavisni stimulatori gvanilat-ciklaze (sGC), na primer, i poželjno jedinjenja opisana u WO 00/06568, WO 00/06569, WO 02/42301, WO 03/095451, WO 2011/147809, WO 2012/004258, WO 2012/028647 i WO 2012/059549;
• agensi, koji stimulišu cGMP sintezu, na primer, i poželjno sGC modulatori, na primer, i poželjno riociguat, cinaciguat, vericiguat ili BAY 1101042;
• inhibitori ljudske neutrofilne elastaze (HNE), kao što su na primer sivelestat ili DX-890 (reltran);
• jedinjenja koja inhibiraju kaskadu signalne transdukcije, posebno inhibitori tirozina i/ili serin/treonin kinaze, kao što su na primer nintedanib, dasatinib, nilotinib, bosutinib, regorafenib, sorafenib, sunitinib, cediranib, aksitinib, telatinib, imatinita, brivani, gefitinib, erlotinib, lapatinib, kanertinib, lestaurtinib, pelitinib, semaksanib ili tandutinib;
• jedinjenja koja utiču na energetski metabolizam srca, kao što su na primer i poželjno etomoksir, dihloroacetat, ranolazin ili trimetazidin, ili potpuni ili delimični agonisti adenozin A1 receptora kao što su GS-9667 (ranije poznat kao CVT-3619), kapadenozon i neladenoson bialanat (BAY 1067197);
• jedinjenja koja utiču na srčanu frekvenciju, kao što su na primer i poželjno ivabradin; • srčani aktivatori miozina, kao što su na primer i poželjno omecamtiv mecarbil (CK-1827452);
• protivupalni lekovi kao što su nesteroidni protivupalni lekovi (NSAID), uključujući acetilsalicilnu kiselinu (aspirin), ibuprofen i naproksen, glukokortikoide, kao što su na primer, poželjno prednizon, prednizolon, metilprednizolon, triamcinolon, deksametazon, beklometazon, betametazon, flumetazon, budezonid ili flutikazon, derivati 5-aminosalicilne kiseline, antagonisti leukotriena, inhibitori TNF-alfa i antagonisti receptora hemokina kao što su CCR1, 2 i/ili 5 inhibitori;
• agensi koji menjaju metabolizam masti, na primer, i poželjno iz grupe agonista receptora štitaste žlezde, inhibitori sinteze holesterola, kao što su na primer, poželjno inhibitori HMG-CoA-reduktaze ili sinteze skvalena, ACAT inhibitori, CETP inhibitori, MTP inhibitori, PPAR-alfa PPAR-gama i/ili PPAR-delta agonisti, inhibitori apsorpcije holesterola, inhibitori lipaze, polimerni adsorberi žučne kiseline, inhibitori reapsorpcije žučne kiseline i antagonisti lipoproteina.
[0114] Antitrombotične agense je poželjno shvatiti kao jedinjenja iz grupe inhibitora agregacije trombocita, antikoagulansa i profibrinolitičkih supstanci.
[0115] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa inhibitorom agregacije trombocita kao što su, na primer, i poželjno aspirin, klopidogrel, tiklopidin ili dipiridamol.
[0116] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u
4
kombinaciji sa inhibitorom trombina kao što su, na primer, i poželjno kselagatran, dabigatran, melagatran, bivalirudin ili enoksaparin.
[0117] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa GPIIb/IIIa antagonistom kao što su, na primer, i poželjno tirofiban ili abciksimab.
[0118] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa inhibitorom faktora Xa kao što su, na primer, i poželjno rivaroksaban, apiksaban, otamiksaban, fideksaban, razaksaban, fondaparinuks, idraparinuks, DU-176b, PMD-3112, YM-150, KFA-1982, EMD-503982, MCM-17, MLN-1021, DX 9065a, DPC 906, JTV 803, SSR-126512 ili SSR-128428.
[0119] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa heparinom ili derivatom heparina sa niskom molekularnom težinom (LMW).
[0120] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa antagonistom vitamina K kao što je, na primer, i poželjno kumarin.
[0121] Agense za snižavanje krvnog pritiska poželjno je shvatiti kao jedinjenja iz grupe antagonista kalcijuma, antagonista angiotenzina AII, ACE inhibitora, NEP inhibitora, inhibitora vazopeptidaze, antagonista endotelina, inhibitora renina, alfa blokatora, beta blokatora, antagonista mineralokortikoidnih receptora i diuretika.
[0122] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa antagonistom kalcijuma kao što su, na primer, i poželjno nifedipin, amlodipin, verapamil ili diltiazem.
[0123] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa blokatorom alfa-1-receptora kao što su, na primer, poželjno prazosin ili tamsulozin.
[0124] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa beta-blokatorom kao što su, na primer, i poželjno propranolol, atenolol, timolol, pindolol, alprenolol, oksprenolol, penbutolol, bupranolol, metipranolol, nadolol, mepindolol, karazolol, sotalol, metoprolol, betaksolol, celiprolol, bisoprolol, karteolol, esmolol, labetalol, karvedilol, adaprolol, landiolol, nebivolol, epanolol ili bucindolol.
[0125] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa antagonistom angiotenzin AII receptora kao što su, na primer, i poželjno losartan, kandesartan, valsartan, telmisartan, irbesartan, olmesartan, eprosartan, embursartan ili azilsartan.
[0126] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa inhibitorom vazopeptidaze ili inhibitorom neutralne endopeptidaze (NEP), kao što su na primer i poželjno sacubitril, omapatrilat ili AVE-7688.
[0127] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa dvostrukim antagonistom angiotenzin AII receptora/NEP inhibitorom (ARNI) kao što su, na primer, i poželjno LCZ696.
[0128] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa ACE inhibitorom kao što su, na primer, i poželjno enalapril, kaptopril, lizinopril, ramipril, delapril, fosinopril, kinopril, perindopril, benazepril ili trandopril.
[0129] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa antagonistom endotelina kao što su, na primer, i poželjno bosentan, darusentan, ambrisentan, tezosentan, sitaksentan, avosentan, macitentan ili atrasentan.
[0130] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa inhibitorom renina kao što su, na primer, i poželjno aliskirenom, SPP-600 ili SPP-800.
[0131] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa antagonistom mineralokortikoidnih receptora kao što su, na primer, i poželjno finerenon, spironolakton, kanrenon, kalijum kanrenoat, eplerenon, esakserenon (CS-3150) ili apararenon (MT -3995).,
U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa diuretikom, kao što su na primer i poželjno furosemid, bumetanid, piretanid, torsemid, bendroflumetiazid, hlorotiazid, hidrohlorotiazid, ksipamid, indapamid, hidroflumetietizididia, miometmetiklozidid politiazid, trihlorometazid, hlorotalidon, metolazon, kinetazon, acetazolamid, dihlorofenamid, metazolamid, glicerin, izosorbid, manitol, amilorid ili triamteren.
[0132] Agense za promenu metabolizma masti poželjno je shvatiti kao jedinjenja iz grupe CETP inhibitora, agonista receptora štitaste žlezde, inhibitora sinteze holesterola kao što su HMG-CoA-reduktaza ili inhibitori sinteze skvalena, ACAT inhibitori, MTP inhibitori, PPAR-alfa, PPAR-gama i/ili PPAR-delta agonisti, inhibitori apsorpcije holesterola, polimerni adsorberi žučne kiseline, inhibitori reabsorpcije žučne kiseline, inhibitori lipaze i antagonisti lipoproteina.
[0133] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa CETP inhibitorom kao što su, na primer, i poželjno dalcetrapib, anacetrapib, BAY 60-5521 ili CETP-vakcina (Avant).
[0134] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa agonistom tiroidnih receptora kao što su, na primer, i poželjno D-tiroksin, 3,5,3'-trijodotironin (T3), CGS 23425 ili aksitirom (CGS 26214).
[0135] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa inhibitorom HMG-CoA-reduktaze iz klase statina kao što su, na primer, i poželjno lovastatin, simvastatin, pravastatin, fluvastatin, atorvastatin, rosuvastatin ili pitavastatin.
[0136] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa inhibitorom sinteze skvalena kao što su, na primer, i poželjno BMS-188494 ili TAK-475.
[0137] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa ACAT inhibitorom kao što su, na primer, i poželjno avasimibom, melinamidom, paktimibom, eflucimibom ili SMP-797.
[0138] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa MTP inhibitorom kao što su, na primer, i poželjno implitapid, R-103757, BMS-201038 ili JTT-130.
[0139] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa PPAR-gama agonistom kao što su, na primer, i poželjno pioglitazon ili rosiglitazon.
[0140] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa PPAR-delta agonistom kao što su, na primer, i poželjno GV 501516 ili BAY 68-5042.
[0141] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa inhibitorom apsorpcije holesterola kao što su, na primer, i poželjno ezetimib, tikvezid ili pamakezid.
[0142] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa inhibitorom lipaze kao što je, na primer, i poželjno sa orlistatom.
[0143] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa polimernim adsorberom žučne kiseline kao što su, na primer, i poželjno holestiramin, kolestipol, kolezolvam, holestagel ili kolestimid.
[0144] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa inhibitorom reabsorpcije žučne kiseline kao što su, na primer, i poželjno ASBT (= IBAT) inhibitori kao što su AZD-7806, S-8921, AK-105, BARI -1741, SC-435 ili SC-635.
[0145] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa antagonistom lipoproteina kao što su, na primer, i poželjno gemkaben kalcijum (CI-1027) ili nikotinska kiselina.
[0146] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa TGFbeta antagonistom kao što su, na primer, i poželjno pirfenidon ili fresolimumab.
[0147] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa HIF-PH inhibitorima kao što su, na primer, i poželjno molidustat ili roksadustat.
[0148] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa CCR2 antagonistom kao što je, na primer, i poželjno CCX-140.
[0149] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa antagonistom TNFalfa kao što je, na primer, i poželjno adalimumab.
[0150] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa inhibitorom galektin-3 kao što je, na primer, i poželjno GCS-100.
[0151] U poželjnom ostvarenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa BMP-7 agonistom kao što je, na primer, i poželjno THR-184.
[0152] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa NOX1/4 inhibitorom kao što je, na primer, i poželjno GKT-137831.
[0153] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa lekom koji utiče na metabolizam vitamina D kao što su, na primer, i poželjno holekalciferol ili parakalcitol.
[0154] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa citostatskim agensom kao što su, na primer, i poželjno ciklofosfamidom.
[0155] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa imunosupresivnim agensom kao što je, na primer, i poželjno ciklosporin.
[0156] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa fosfatnim veznikom kao što su, na primer, i poželjno sevelamer ili lantan karbonat.
[0157] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa kalcimimetikom za terapiju hiperparatiroidizma.
[0158] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa agensima za terapiju deficita gvožđa, kao primer i sa željenim proizvodima od gvožđa.
[0159] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa agensima za terapiju hiperurikemije kao što su, na primer, i poželjno alopurinol ili rasburikaza.
[0160] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa glikoproteinskim hormonom za terapiju anemije kao što je, na primer, i poželjno eritropoetin.
[0161] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa biološkim agensima za imunoterapiju kao što su, na primer, i poželjno abatacept, rituksimab, ekulizumab ili belimumab.
[0162] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa Jak inhibitorima kao što su, na primer, i poželjno ruksolitinib, tofacitinib, baricitinib, CYT387, GSK2586184, lestaurtinib, pacritinib (SB1518) ili TG101348.
[0163] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa analozima prostaciklina za terapiju mikrotromba.
[0164] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa alkalnom terapijom kao što je, na primer, i poželjno natrijum bikarbonat.
[0165] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa mTOR inhibitorom kao što su, na primer, i poželjno everolimus ili rapamicin.
4
[0166] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa NHE3 inhibitorom kao što je, na primer, i poželjno AZD1722.
[0167] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa eNOS modulatorom kao što je, na primer, i poželjno sapropterin.
[0168] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa CTGF inhibitorom kao što je, na primer, i poželjno FG-3019.
[0169] U poželjnom otelotvorenju pronalaska, jedinjenja prema pronalasku primenjuju se u kombinaciji sa antidijabeticima (hipoglikemijski ili antihiperglikemijski agensi), kao što su na primer, i poželjno insulin i derivati, sulfoniluree kao što su tolbutamid, karbutamid, acetoheksamid, hlorpropamid, glipizid, gliklazid, glibenklamid, gliburid, glibornurid, glikvidon, glisoksepid, glikokloramid, glimepirid, JB253 i JB558, meglitinidi kao što su repaglinid i nateglinid, bigvanidi kao što su metformin i buformin, tiazolidindioni kao što su rosiglitazon i pioglitazon, inhibitori alfa-glukozidaze kao što su miglitol, akarboza i vogliboza, DPP4 inhibitori kao što su vildagliptin, sitagliptin, saksagliptin, linagliptin, alogliptin, septagliptin i teneligliptin, GLP-1 analozi kao što su eksenatid (takođe eksendin-4, liraglutid, liksisenatid i taspoglutid, ili SGLT inhibitori (glifozini) kao što su kanagliflozin, dapagliflozin i empagliflozin.
[0170] U posebno poželjnom otelotvorenju, jedinjenja predmetnog pronalaska se primenjuju u kombinaciji sa jednim ili više dodatnih terapijskih agenasa izabranih iz grupe koju čine diuretici, antagonisti angiotenzina, ACE inhibitori, blokatori beta receptora, antagonisti mineralokortikoidnih receptora, antidijabetički agensi, organski nitrati i NO donori, aktivatori i stimulatori rastvorljive gvanilat ciklaze (sGC) i pozitivno-inotropni agensi.
[0171] U još jednom posebno poželjnom otelotvorenju, jedinjenja predmetnog pronalaska se primenjuju u kombinaciji sa jednim ili više dodatnih terapijskih agenasa izabranih iz grupe koju čine diuretici, antagonisti angiotenzina All, ACE inhibitori, blokatori beta receptora, antagonisti mineralokortikoidnih receptora, antidijabetički agensi, organski nitrati i NO donori, aktivatori i stimulatori rastvorljive gvanilat ciklaze (sGC), protivupalni agensi, imunosupresivni agensi, veznici za fosfate i/ili jedinjenja koja moduliraju metabolizam vitamina D. Prema tome, u daljem otelotvorenju, predmetni pronalazak se odnosi na farmaceutske sastave koji sadrže najmanje jedno jedinjenje prema pronalasku i jedan ili više dodatnih terapijskih agenasa za tretman i/ili prevenciju bolesti, naročito gore navedenih bolesti.
[0172] Dalje, jedinjenja predmetnog pronalaska mogu se koristiti kao takva ili u sastavima, u istraživanju i dijagnostici, ili kao analitički referentni standardi i slično, koji su dobro poznati u struci.
[0173] Kada se jedinjenja predmetnog pronalaska primenjuju kao farmaceutski proizvodi, ljudima i drugim sisarima, mogu se dati per se ili kao farmaceutski sastav koji sadrži, na primer, 0,1% do 99,5% (još poželjnije 0,5% do 90%) aktivnog sastojka u kombinaciji sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih ekscipijenasa.
[0174] Prema tome, u drugom aspektu, predmetni pronalazak se odnosi na farmaceutske sastave koji sadrže najmanje jedno jedinjenje prema pronalasku, konvencionalno, zajedno sa jednim ili više inertnih, netoksičnih, farmaceutski prihvatljivih ekscipijensa, i na njihovu upotrebu za tretman i/ili prevenciju bolesti, posebno gore navedenih bolesti.
[0175] Moguće je da jedinjenja prema pronalasku imaju sistemsku i/ili lokalnu aktivnost. U tu svrhu mogu se primenjivati na pogodan način, kao što je, na primer, oralnim, parenteralnim, plućnim, nazalnim, sublingvalnim, lingvalnim, bukalnim, rektalnim, vaginalnim, dermalnim, transdermalnim, konjunktivnim, očnim putem ili kao implantat ili stent.
[0176] Za ove načine primene, moguće je da se jedinjenja prema pronalasku primenjuju u odgovarajućim oblicima za primenu.
[0177] Za oralnu primenu moguće je formulisati jedinjenja prema pronalasku za oblike doziranja poznate u struci koji brzo i/ili modifikovano isporučuju jedinjenja pronalaska, kao što su, na primer, tablete (obložene ili neobložene tablete, na primer sa enteričkim oblogama ili oblogama sa kontrolisanim oslobađanjem koje se rastvaraju sa zakašnjenjem ili su nerastvorljive), tablete za oralno raspadanje, filmovi/vaferi, filmovi/liofilizati, kapsule (na primer tvrde ili mekane želatinske kapsule), šećerom obložene tablete, granule, pelete, praškovi, emulzije, suspenzije, aerosoli ili rastvori. Jedinjenja prema pronalasku je moguće ugraditi u navedene dozne oblike u kristalnom i/ili amorfizovanom i/ili rastvorenom obliku.
[0178] Parenteralna primena može se izvršiti izbegavanjem koraka apsorpcije (na primer intravenozno, intraarterijski, intrakardijalno, intraspinalno ili intralumbalno) ili sa uključivanjem apsorpcije (na primer intramuskularno, subkutano, intrakutano, perkutano ili intraperitonealno). Oblici primene koji su pogodni za parenteralnu primenu su, između ostalog, preparati za injekcije i infuzije u obliku rastvora, suspenzija, emulzija, liofilizata ili sterilnih prahova.
[0179] Primeri koji su pogodni za druge načine primene su farmaceutski oblici za inhalaciju [između ostalog inhalatori u prahu, nebulizatori], kapi za nos, nazalni rastvori, sprejevi za nos; tablete/filmovi/vaferi/kapsule za lingvalnu, sublingvalnu ili bukalnu primenu; supozitorijumi; kapi za oči, očne masti, kupke za oči, očni ulošci, kapi za uši, sprejevi za uši, prašci za uši, agensi za ispiranje ušiju, tamponi za uši; vaginalne kapsule, vodene suspenzije (losioni, mikturae agitandae), lipofilne suspenzije, emulzije, masti, kreme, transdermalni terapijski sistemi (kao što su, na primer, flasteri), mleko, paste, pene, praškovi, implantati ili stentovi.
[0180] Jedinjenja prema pronalasku se mogu ugraditi u navedene oblike primene. Ovo se može postići na način poznat sam po sebi mešanjem sa farmaceutski pogodnim ekscipijensima. Farmaceutski pogodni ekscipijensi uključuju, između ostalog, članove grupe koju čine:
• punila i nosači (na primer celuloza, mikrokristalna celuloza (kao što je, na primer, Avicel®), laktoza, manitol, skrob, kalcijum fosfat (kao što je, na primer, Di-Cafos®)), • masne baze (na primer vazelin, parafini, trigliceridi, voskovi, vuneni vosak, alkoholi od vunenog voska, lanolin, hidrofilna mast, polietilen glikoli),
• baze za supozitorijume (na primer polietilen glikoli, kakao puter, tvrda mast), • rastvarači (na primer voda, etanol, izopropanol, glicerol, propilen glikol, masna ulja triglicerida srednje dužine lanca, tečni polietilen glikoli, parafini),
• tenzidi, emulgatori, disperzanti ili ovlaživači (na primer natrijum dodecil sulfat), lecitin, fosfolipidi, masni alkoholi (kao što je, na primer, Lanette®), estri masnih kiselina sorbitana (kao što je, na primer, Span®), estri masnih kiselina polioksietilen
4
sorbitana (kao što je, na primer, Tween®), gliceridi masnih kiselina polioksietilena (kao što je, na primer, Cremophor®), estri masnih kiselina polioksietilena, estri masnih kiselina polioksietilen alkohola, estri masnih kiselina glicerola, poloksameri (kao što je na primer, Pluronic®),
puferi, kiseline i baze (na primer fosfati, karbonati, limunska kiselina, sirćetna kiselina, hlorovodonična kiselina, rastvor natrijum hidroksida, amonijum karbonat, trometamol, trietanolamin),
agensa za izotoničnost (na primer glukoza, natrijum hlorid),
adsorbenti (na primer visoko disperzne silike),
agensi za povećanje viskoznosti, oblikovaoci gela, zgušnjivači i/ili venzici (na primer polivinilpirolidon, metilceluloza, hidroksipropilmetilceluloza, hidroksipropilceluloza, karboksimetilceluloza-natrijum, skrob, karbomeri, poliakrilne kiseline (kao što je, na primer, Carbopol®); alginati, želatin),
agensi za razgradnju (na primer modifikovani skrob, karboksimetilceluloza-natrijum, natrijum skrob glikolat (kao što je, na primer, Explotab®), umreženi polivinilpirolidon, kroskarmeloza-natrijum (kao što je, na primer, AcDiSol®)), regulatori protoka, lubrikanti, agensi za klizanje i agensi za oslobađanje plesni (na primer magnezijum stearat, stearinska kiselina, talk, visoko-disperzni silicijumdioksidi (kao što je, na primer, Aerosil®)),
materijali za oblaganje (na primer šećer, šelak) i oblikovači filmova za filmove ili difuzijske membrane koji se brzo ili modifikovano rastvaraju (na primer polivinilpirolidoni (kao što je, na primer, Kollidon®), polivinil alkohol, hidroksipropilmetilceluloza, hidroksipropilceluloza, etilceluloza, hidroksipropilmetilceluloza ftalat, celulozni acetat, celulozni acetat ftalat, poliakrilati, polimetakrilati kao što je, na primer, Eudragit®)),
materijali za kapsule (na primer želatin, hidroksipropilmetilceluloza),
sintetički polimeri (na primer polilaktidi, poliglikolidi, poliakrilati, polimetakrilati (kao što je, na primer, Eudragit®)), polivinilpirolidoni (kao što je, na primer, Kollidon®), polivinil alkoholi, polivinil acetati, polietilen oksidi, polietilen glikoli i njihovi kopolimeri i blok-kopolimeri),
plastifikatori (na primer polietilen glikoli, propilen glikol, glicerol, triacetin, triacetil citrat, dibutil ftalat),
pojačivači penetracije,
• stabilizatori (na primer antioksidanti kao što su, na primer, askorbinska kiselina, askorbil palmitat, natrijum askorbat, butilhidroksianisol, butilhidroksitoluen, propil galat),
• konzervansi (na primer parabeni, sorbinska kiselina, tiomersal, benzalkonijum hlorid, hlorheksidin acetat, natrijum benzoat),
• boje (na primer neorganski pigmenti kao što su, na primer, oksidi gvožđa, titanijum dioksid),
• arome, zaslađivači, agensi koji maskiraju arome i/ili mirise.
Predmetni pronalazak se dalje odnosi na farmaceutski sastav koji sadrži najmanje jedno jedinjenje prema pronalasku, konvencionalno, zajedno sa jednim ili više farmaceutski pogodnih ekscipijenasa, i na njihovu upotrebu prema predmetnom pronalasku.
[0181] Na osnovu standardnih laboratorijskih tehnika koje su poznate za procenu jedinjenja korisnih za tretman kardiovaskularnih i bubrežnih poremećaja, standardnim testovima toksičnosti i standardnim farmakološkim testovima za određivanje tretmana gore navedenih stanja kod sisara i upoređivanjem ovih rezultata sa rezultatima poznatih aktivnih sastojaka ili lekova koji se koriste za tretman ovih stanja, efikasna doza jedinjenja predmetnog pronalaska se lako može odrediti za tretman svake željene indikacije. Količina aktivnog sastojka koji se primenjuje pri tretmanu jednog od ovih stanja može se široko razlikovati u zavisnosti od određenog jedinjenja i dozne jedinice koja se koristi, načina primene, perioda tretmana, starosti i pola tretiranog pacijenta, i prirodu i obim tretiranog stanja.
[0182] Ukupna količina aktivnog sastojka koji se primenjuje obično će se kretati od oko 0,001 mg/kg do oko 200 mg/kg telesne težine dnevno, i poželjno od oko 0,01 mg/kg do oko 20 mg/kg telesne težine dnevno. Klinički korisni rasponi doziranja kretaće se od jednog do tri puta dnevno do doziranja jednom u četiri nedelje. Pored toga, moguće je da „pauze od leka“, u kojima pacijent određeno vreme ne dobija lek, budu korisni za ukupnu ravnotežu između farmakološkog efekta i podnošljivosti. Moguće je da jedinična doza sadrži od oko 0,5 mg do oko 1500 mg aktivnog sastojka i može se primenjivati jedan ili više puta dnevno ili manje od jednom dnevno. Prosečna dnevna doza za primenu injekcijama, uključujući intravenske, intramuskularne, subkutane i parenteralne injekcije, i upotreba infuzionih tehnika biće poželjno od 0,01 do 200 mg/kg ukupne telesne težine. Ilustrativno, jedinjenje predmetnog pronalaska može se primenjivati parenteralno u dozi od oko 0,001 mg/kg do oko 10 mg/kg,
4
poželjno od oko 0,01 mg/kg do oko 1 mg/kg telesne težine. U oralnoj primeni, raspon doza je oko 0,01 do 100 mg/kg, poželjno oko 0,01 do 20 mg/kg, i poželjnije oko 0,1 do 10 mg/kg telesne težine. Rasponi između gore navedenih vrednosti takođe su namenjeni da budu deo pronalaska.
[0183] Naravno, specifični inicijalni i kontinuirani režim doziranja za svakog pacijenta variraće u zavisnosti od prirode i težine stanja koje određuje lekar dijagnostičar, aktivnosti određenog jedinjenja koje se koristi, uzrasta i opšteg stanja pacijenta, vremena primene, načina primene, brzine izlučivanja leka, kombinacije lekova i slično. Željeni način tretmana i broj doza jedinjenja predmetnog pronalaska ili njegove farmaceutski prihvatljive soli ili estra ili njihove smeše mogu da utvrde stručnjaci u praksi koristeći konvencionalne testove tretmana.
[0184] Naredna primerna otelotvorenja ilustruju pronalazak. Pronalazak nije ograničen na primere.
[0185] Procenti u narednim testovima i primerima su, osim ako nije drugačije naznačeno, težinski; delovi su težinski. Odnosi rastvarača, odnosi razblaženja i koncentracije prijavljeni za tečnost/tečnost rastvore zasnivaju se na zapremini.
EKSPERIMENTALNI ODELJAK
[0186] Oblici vršnih NMR navode se onako kako se pojavljuju u spektrima, mogući efekti višeg reda nisu uzeti u obzir. Hemijska imena su generisana pomoću ACD/Name softvera od ACD/Labs. U nekim slučajevima umesto imena koja generiše ACD/Name korišćena su opšteprihvaćena imena komercijalno dostupnih reagensa.
[0187] Naredna tabela 1 navodi skraćenice korišćene u ovom pasusu i u odeljku Primeri, ukoliko nisu objašnjene u okviru teksta. Ostale skraćenice imaju svoja značenja uobičajena stručnjaku per se.
Tabela 1: Skraćenice
[0188] Naredna tabela navodi ovde korišćene skraćenice.
4
[0189] Razni aspekti pronalaska opisani u ovoj prijavi ilustrovani su narednim primerima koji nisu namenjeni ograničavanju pronalaska na bilo koji način.
[0190] Ovde opisani primeri testiranih eksperimenata služe za ilustraciju predmetnog pronalaska, i pronalazak nije ograničen na date primere.
EKSPERIMENTALNI ODELJAK - OPŠTI DEO
[0191] Svi reagensi, za koje sinteza nije opisana u eksperimentalnom delu, su ili komercijalno dostupni, ili su poznata jedinjenja ili ih stručnjak može formirati od poznatih jedinjenja poznatim postupcima.
[0192] Jedinjenjima i intermedijerima proizvedenim prema postupcima prema pronalasku
4
može biti potrebno prečišćavanje. Prečišćavanje organskih jedinjenja je dobro poznato stručnjaku i može postojati nekoliko načina prečišćavanja istog jedinjenja. U nekim slučajevima možda neće biti potrebno pročišćavanje. U nekim slučajevima, jedinjenja se mogu prečistiti kristalizacijom. U nekim slučajevima nečistoće se mogu mešati upotrebom pogodnog rastvarača. U nekim slučajevima, jedinjenja se mogu prečistiti hromatografijom, naročito fleš hromatografijom na koloni, koristeći na primer unapred upakovane kertridže sa silika gelom, npr. Biotage SNAP kartidže KP-Sil® ili KP-NH® u kombinaciji sa Biotage sistemom za samoprečišćavanje (SP4® ili Isolera One®) i eluentima kao što su gradijenti heksana/etil acetata ili dihlorometana/metanola. U nekim slučajevima, jedinjenja se mogu prečistiti preparativnom HPLC koristeći, na primer, Waters sistem za samoprečišćavanje opremljen detektorskim nizom dioda i/ili on-line maseni spektrometar jonizacije elektrosprejem kombinaciji sa odgovarajućom unapred upakovanom kolonom reverznih faza i eluentima kao što su gradijenti vode i acetonitrila koji mogu sadržati aditive kao što su trifluorosirćetna kiselina, mravlja kiselina ili vodeni amonijak.
[0193] U nekim slučajevima, gore opisani postupci prečišćavanja mogu pružiti ona jedinjenja predmetnog pronalaska koja poseduju dovoljno baznu ili kiselu funkcionalnost u obliku soli, kao što je, u slučaju jedinjenja predmetnog pronalaska koje je dovoljno bazno, so trifluoroacetata ili formata, na primer, ili, u slučaju jedinjenja predmetnog pronalaska koje je dovoljno kiselo, na primer, amonijumova so. So ove vrste može se transformisati u svoju slobodnu bazu ili u oblik slobodne kiseline, različitim postupcima poznatim stručnjaku, ili se može koristiti kao so u narednim biološkim testovima. Podrazumeva se da specifični oblik (npr. so, slobodna baza itd.) jedinjenja predmetnog pronalaska kako je izolovano i kako je ovde opisano nije nužno jedini oblik u kom se navedeno jedinjenje može primeniti na biološki test kako bi se kvantifikovale specifične biološke aktivnosti.
Standardne UPLC-MS procedure
Postupak 1 (LC/MS):
[0194] Instrument: Agilent MS Quad 6150;HPLC: Agilent 1290; Kolona: Waters Acquity UPLC HSS T31,8 µ 50 x 2,1 mm; Eluent A: 11 Voda 0,25 ml 99% mravlja kiselina, Eluent B: 11 Acetonitril 0,25 ml 99% mravlja kiselina; Gradijent: 0,0 min 90% A → 0,3 min 90% A → 1,7 min 5% A → 3,0 min 5% A Peć: 50°C; Protok: 1,20 ml/min; UV-Detekcija: 205 - 305 nm.
4
Postupak 2 (LC/MS):
[0195] Instrument: Waters ACQUITY SQD UPLC System; Kolona: Waters Acquity UPLC HSS T31,8 µ 50 x 1 mm; Eluent A: 11 Voda 0,25 ml 99% mravlja kiselina, Eluent B: 11 Acetonitril 0,25 ml 99% mravlja kiselina; Gradijent: 0,0 min 90% A → 1,2 min 5% A → 2,0 min 5% A Peć: 50 °C; Protok: 0,40 ml/min; UV-Detekcija: 208 - 400 nm.
Postupak 3 (LC/MS):
[0196] Instrument MS: Thermo Scientific FT-MS; Gerätetyp UHPLC+: Thermo Scientific UltiMat 3000; Kolona: Waters, HSST3, 2,1 x 75 mm, C181,8 µm; Eluent A: 11 Voda 0,01% mravlja kiselina; Eluent B: 11 Acetonitril 0,01% mravlja kiselina; Gradijent: 0,0 min 10% B → 2,5 min 95% B → 3,5 min 95% B; Peć: 50 °C; Protok: 0,90 ml/min; UV-Detekcija: 210 nm/ Optimalni put integracije 210-300 nm.
Postupak 4 (LC/MS):
[0197] Instrument: Waters ACQUITY SQD UPLC System; Kolona: Waters Acquity UPLC HSS T31,8 µ 50 x 1 mm; Eluent A: 11 Waters 0,25 ml 99%ige mravlja kiselina, Eluent B: 11 Acetonitril 0,25 ml 99% mravlja kiselina; Gradijent: 0,0 min 95% A → 6,0 min 5% A → 7,5 min 5% A Peć: 50°C; Protok: 0,35 ml/min; UV- Detekcija: 210 - 400 nm.
Postupak 5 (preparativna HPLC):
[0198] Kolona: Chromatorex ili Reprosil C1810 µm; 125 x 30 mm, Protok: 75 ml/min, Run time: 20 min, Detekcija at 210 nm, Eluent A: water 0,1% mravlja kiselina, Eluent B: acetonitril 0,1% mravlja kiselina; Gradijent: 3 min 10% B; 17,5 min : 95% B; 19,5 min 100% B, 20 min 10% B.
EKSPERIMENTALNI ODELJAK - POČETNI MATERIJALI I INTERMEDIJERI
Primer 1A
5-(4-hlorofenil)-4-[(2R)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-2,4-dihidro-3H-1,2,4-triazol-3-on
[0199]
4
[0200] Rastvor 5-(4-hlorofenil)-4-(3,3,3-trifluoro-2,2-dihidroksipropil)-2,4-dihidro-3H-1,2,4-triazol-3-ona (sinteza je opisana kao Primer 4A u WO 2010/105770-A1) (10,0 g, 30,9 mmol), N-[(1R,2R)-2-amino-1,2-difeniletil]-4-metilbenzensulfonamida (56,6 mg, 154 µmol) i 1-metil-4-(propan-2-il)benzen - dihlororutenijuma (47,3 mg, 77,2 µmol) u etil acetatu je tretiran sa trietilaminom (8,6 ml, 62 mmol) praćeno dodavanjem mravlje kiseline (5,8 ml, 150 mmol). Rezultujuća smeša je zagrejana pod refluksom tokom 3 sata i zatim ohlađena do sobne temperature. Reakciona smeša je razređena sa hlorovodoničnom kiselinom (70 ml, IN).
Organska faza je oprana dvaput sa hlorovodoničnom kiselinom (IN). Vodena faza je ekstrahovana dvaput sa etil acetatom. Kombinovane organske faze su isparene. Ostatak je ponovo uzet u metanolu (22,5 ml) i rezultujuća suspenzija je zagrejana do 60°C dok čvrsta materija nije potpuno rastvorena. Hlorovodonična kiselina (22,5 ml, IN) je dodata i rezultujuća suspenzija je zagrejana na 78°C tokom 10 minuta i ohlađena do sobne temperature. Čvrsta materija je filtrirana i osušena pod vakuumom. Čvrsta materija je ponovo uzeta u hlorovodoničnoj kiselini (30 ml, IN), zagrejana na 35°C. Rezultujuća suspenzija je tretirana sa metanolom (30 ml), zagrejana 4 sata na 35°C i filtrirana na 35°C. Rastvor filtrata je isparen čime je dobijeno 4,9 g (ee = 99,6%, 51% th.) 5-(4-hlorofenil)-4-[(2R)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-2,4-dihidro-3H-1,2,4-triazol-3-ona.
LC-MS (Postupak 3): Rt = 1,40 min; MS (ESIpos): m/z = 308 [M+H]<+>
<1>H-NMR (400MHz, DMSO): δ [ppm] = 12,10 (s, 1H), 7,52 - 7,79 (m, 4H), 6,84 (d, 1H), 3,54 - 4,52 (m, 3H).
Primer 2A
{3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il} acetonitril
[0201]
[0202] U 2L reakcionu posudu, 100 g (273 mmol) {3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}sirćetne kiseline (sinteza je opisana kao Primer 8A u WO 2010/105770-A1), 43,3 g (547 mmol) piridina i 33 mg (0,3 mmol) 4-dimetilaminopiridina je rastvoreno u 300 ml THF. Rezultujući rastvor je tretiran na 5 °C sa 52,8 g (438 mmol) 2,2-dimetilpropanoilhlorida tokom 15 minuta i rezultujuća smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2,5 sata. Nakon hlađenja do 0 °C, 183 ml 28% vodenog rastvora amonijaka je dodato tokom 1 sata dok je temperatura rastvora održavana između 10 °C i 20 °C i rezultujuća smeša je zatim mešana na 5 °C tokom dodatnog perioda od 1 sata.500 ml metil terc-butiletra i 300 ml 20% vodene limunske kiselinae je zatim dodato uz održavanje unutrašnje temperature između 10 °C i 20 °C. Faze su razdvojene i organska faza je oprana sa 300 ml 20% vodene limunske kiseline praćeno sa 300 ml zasićenog vodenog rastvora natrijum hidrogenkarbonata i konačno sa 300 ml 10% vodenog rastvora natrijum hlorida. Organska faza je isparena na 60 °C pod redukovanim pritiskom dok nije dobijen uljani ostatak. 300 ml THF je zatim dodato i rastvor je isparen ponovo dok nije dobijen uljani rastvor. Ova operacija je ponovljena drugi put. Uljani ostatak je ponovo uzet u 360 ml THF i tretiran sa 172 g (820 mmol) anhidrida trifluorosirćetne kiseline tokom 20 minuta na temperaturi između 10 °C i 20 °C. Rezultujući rastvor je zatim mešan na sobnoj temperaturi tokom 1 sata.720 ml 4-metil-2-pentanona i 650 ml 7,5% vodenog rastvora natrijum hidroksida su dodati na temperaturi između 10 °C i 20 °C. Konačno pH vrednost je prilagođena do pH = 9,5 koristeći 7,5% vodeni rastvor natrijum hidroksida. Nakon razdvajanja faza, organska faza je oprana dvaput sa 450 ml 10% vodenog rastvora natrijum hlorida. Organska faza je isparena na temperaturi od 80 °C pod redukovanim pritiskom dok je dodavano 1200 ml n-heptana. Formirana suspenzija je ohlađena do 20 °C i formirala se čvrsta materija koja je filtrirana i oprana sa 200 ml n-heptana i zatim osušena pod redukovanim pritiskom (50°C, 30 mbar) čime je dobijeno 88 g (93 % od th.) {3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}acetonitril kao čvrsta supstanca.
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7,78 (d, 2H), 7,55 (d, 2H), 6,91 (d, 1H), 5,17 (s, 2 H), 4,34-4,23 (m, 1 H), 3,98 (dd, 1H), 3,81 (dd, 1H).
Primer 3A
{3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2R)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il} acetonitril
[0203]
1
[0204] Rastvor 40 g (130 mmol) 5-(4-hlorofenil)-4-[(2R)-3,3,3-trifluor-2-hidroksipropil]-2,4-dihidro-3H-l,2,4-triazol-3-ona (Primer 1A) u 400 ml metilizobutil ketona je tretiran sa 17,9 g (143 mmol) bromoacetonitrila i 53,9 g (390 mmol) kalijum karbonata i mešan tokom 4 sata na 60°C. Nakon hlađenja do 20 °C, 200 ml vode je dodata i smeša je mešana tokom 10 minuta. Nakon razdvajanja faza, organska faza je oprana sa 200 ml vode. Organska faza je isparena na 80 °C pod redukovanim pritiskom dok je dodavano 300 ml n-heptana. Formirana suspenzija je ohlađena do 20 °C i formirala se čvrsta materija koja je filtrirana i oprana sa 50 ml n-heptana i zatim osušena pod redukovanim pritiskom (50°C, 30 mbar) čime je dobijeno 25,2 g (56 % od th.) {3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2R)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il} acetonitrila.
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7,78 (d, 2H), 7,65 (d, 2H), 6,91 (d, 1H), 5,17 (s, 2 H), 4,34-4,23 (m, 1 H), 3,98 (dd, 1H), 3,81 (dd, 1H).
Primer 4A
Metil-2-{3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2S)-3,3,3-trifluor-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}etanimidat
[0205]
[0206] U 4 L reakcionoj posudi, 200 g (576,9 mmol) {3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}acetonitrila (Primer 2A) u 1600 ml metanola je tretirano sa 5,2 g (28 mmol) natrijum metanolata (30% u metanolu) i rezultujuća smeša je mešana na 50 °C tokom 2,5 sata. Rastvor je zatim isparen na 50 °C pod
2
redukovanim pritiskom dok nije dobijen uljani rastvor. 2000 ml metil terc-butiletra je dodato i rastvor je koncentrovan dok nije postignuta zapremina od 800 ml.3000 ml n-heptana je zatim dodato i suspenzija se formirala. Nakon hlađenja na 20 °C, čvrsta materija je filtrirana i oprana sa 500 ml n-heptana i zatim osušena pod redukovanim pritiskom (50°C, 30 mbar) čime je dobijeno 175 g (80 % od th.) metil 2-{3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}etanimidata kao čvrsta supstanca.
<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 8,01 (s, 1H), 7,78 (d, 2H), 7,62 (d, 2H), 6,93 (br. S, 1H), 4,50 (s, 2 H), 4,35-4,23 (m, 1 H), 3,96 (dd, 1H), 3,81 (dd, 1H), 3,67 (s, 3 H).
Primer 5A
Metil-2-{3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2R)-3,3,3-trifluor-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}etanimidat
[0207]
[0208] Rastvor 8,58 g (24,7 mmol) {3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2R)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}acetonitrila (Primer 3A) u metanolu (43 ml) je tretiran sa 229 µl (1,24 mmol) rastvora natrijum metoksida (30% u metanolu). Rezultujuća smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi i zatim je isparena čime je dobijeno 9,31 g (99% od th.) jedinjenja iz naslova.
<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ [ppm] = 8,01 (s, 1H), 7,81-7,58 (m, 4H), 7,00-6,84 (m, 1H), 4,50 (s, 2H), 4,40-4,23 (m, 1H), 4,04-3,74 (m, 2H), 3,66 (s, 3H).
Primer 6A
Metil 3-({3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}metil)-1-(3-hloropiridin-2-il)-1H-1,2,4-triazol-5-karboksilat
[0209]
[0210] Rastvor 150 mg metil-2-{3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2S)-3,3,3-trifluor-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}etanimidata (Primer 4A) (26,4 mmol) u 3 ml THF je ohlađen do 0 °C i zatim tretiran sa 58,2 mg (0,48 mmol) metil hlorooksoacetata i 275 µL (1,58 mmol) N,N-diizopropiletilamina. Rezultujuća smeša je zagrejana do sobne temperature i mešana tokom 1 sata i ohlađena ponovo do 0 °C.62,6 mg (0,436 mmol) 3-hloro-2-hidrazinopiridin je zatim dodat i reakciona smeša je zagrejana do sobne temperature i zatim je mešana tokom 1 sata, praćeno sa 1 satom na 120 °C u zapečaćenoj bočici pod mikrotalasnim zračenjem. Sirov proizvod je prečišćen preparativnom HPLC (Postupak 5). Liofilizacija proizvoda koji sadrži fragmente dala je 25,3 mg (11% od th.) jedinjenja iz naslova.
LC-MS (Postupak 3): Rt = 1,82 min; MS(ESIpos): m/z = 558,1 [M+H]<+>
<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ = 8,70-8,24 (m, 2H), 7,89-7,56 (m, 5H), 6,92 (d, 1H), 5,22 (s, 2H), 4,46-4,20 (m, 1H), 3,79 (s, 5H).
Primer 7A
Metil 3-({3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}metil)-1-[3-(trifluorometil)piridin-2-il] -1H-1,2,4-triazol-5-karboksilat
[0211]
[0212] Rastvor 1,0 g metil-2-{3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-l(2S)-3,3,3-trit1uor-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}etanimidata (Primer 4A) (2,64 mmol) u 20
4
ml 1,4-dioksana je ohlađen do 10 °C i zatim tretiran sa 388 mg (3,17 mmol) metil hlorooksoacetata i 0,55 mL (3,18 mmol) N,N-diizopropiletilamina. Rezultujuća smeša je zatim mešana tokom 30 minuta. Unapred mešan rastvor 1,10 g (3,17 mmol) 2-hidrazino-3-(trifluorometil)piridina (4-metilbenzensulfonat so 1:1), 0,65 mL (3,72 mmol) N,N-diizopropiletilamin i 506 mg (3,19 mmol) bezvodnog bakar(II) sulfata u 10 ml 1,4-dioksana su dodati reakcionoj smeši i rezultujuća smeša je zatim mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Voda je zatim dodata i vodena faza je ekstrahovana sa etil acetatom, kombinovane organske faze su oprane sa vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene preko magnezijum sulfata i isparene u vakuumu čime je dobijeno 777 mg (50% od th.) jedinjenja iz naslova kao čvrstu supstancu.
LC-MS (Postupak 2): Rt = 1,00 min; MS(ESIpos): m/z = 592,6 [M+H]<+>
<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ = 8,93 (d, 1H), 8,60 (dd, 1H), 7,98 (dd, 1H), 7,75 (d, 2H), 7,67-7,57 (m, 2H), 6,91 (d, 1H), 5,22 (s, 2H), 4,37-4,22 (m, 1H), 4,10-3,97 (m, 1H), 3,85 (dd, 1H), 3,77 (s, 3H).
Primer 8A
Metil 3-({3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}metil)-1-[3-(trifluorometoksi)piridin-2-il] -1H-1,2,4-triazol-5-karboksilat
[0213]
[0214] Rastvor 150 mg metil-2-{3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2S)-3,3,3-trifluor-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}etanimidata (Primer 4A) (0,40 mmol) u 3 ml THF je ohlađen do 0 °C i tretiran sa 58 mg (0,48 mmol) metil hlorooksoacetata i 275 µL (1,58 mmol) N,N-diizopropiletilamina. Rezultujuća smeša je zagrejana do sobne temperature i zatim je mešana tokom 1 sata i potom ohlađena ponovo do 0 °C.159 mg (0,44 mmol) 2-hidrazino-3-(trifluorometoksi)piridina (4-metilbenzensulfonat so 1:1) je zatim dodato i reakciona smeša je zatim zagrejana do sobne temperature i mešana tokom 1 sata, praćeno sa 1 satom na 120 °C u zapečaćenoj bočici pod mikrotalasnim zračenjem. Sirov proizvod je prečišćen preparativnom HPLC (Postupak 5). Liofilizacija proizvoda koji sadrži fragmente dala je 51,5 mg (21% od th.) jedinjenja iz naslova kao čvrstu supstancu.
LC-MS (Postupak 2): Rt= 1,02 min; MS(ESIpos): m/z = 608,1 [M+H]<+>.
Primer 9A
Metil 1-(3-bromopiridin-2-il)-3-({3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil] -4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il} metil)-1H-1,2,4-triazol-5-karboksilat [0215]
[0216] Rastvor 1,0 g metil-2-{3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2S)-3,3,3-trifluor-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}etanimidata (Primer 4A) (2,64 mmol) u 20 ml 1,4-dioksana je ohlađen do 10 °C i zatim tretiran sa 388 mg (3,17 mmol) metil hlorooksoacetata i 0,55 mL (3,18 mmol) N,N-diizopropiletilamina. Rezultujuća smeša je mešana tokom 30 minuta. Unapred mešan rastvor 595 mg (3,17 mmol) 3-bromo-2-hidrazinopiridina i 506 mg (3,19 mmol) bezvodnog bakar(II) sulfata u 10 ml 1,4-dioksana je zatim dodat reakcionoj smeši i rezultujuća smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Voda je zatim dodata i vodena faza je ekstrahovana sa etil acetatom, kombinovane organske faze su oprane sa vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene preko magnezijum sulfata i isparene u vakuumu. Sirov proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, cikloheksan/EtOAc 12% → 100%), čime je dobijeno 696 mg (44% od th.) jedinjenja iz naslova.
LC-MS (Postupak 3): Rt = 1,82 min; MS(ESIpos): m/z = 602,0 [M+H]<+>.
<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ = 8,63 (dd, 1H), 8,45 (dd, 1H), 7,76 (d, 2H), 7,66 (dd, 1H), 7,62 (d, 2H), 6,92 (d, 1H), 5,22 (s, 2H), 4,38-4,25 (m, 1H), 4,09-3,96 (m, 1H), 3,85 (dd, 1H), 3,79 (s, 3H).
Primer 10A
Etil 2-[3-({3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}metil)-5-(metoksikarbonil)-1H-1,2,4-triazol-1-il]nikotinat [0217]
[0218] Rastvor 2,35 g metil-2-{3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2S)-3,3,3-trifluor-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}etanimidata (Primer 4A) (26,19 mmol) u 47 ml 1,4-dioksana je ohlađen do 10 °C i zatim tretiran sa 910 mg (7,41 mmol) metil hlorooksoacetata i 1,20 mL (7,41 mmol) N,N-diizopropiletilamina. Rezultujuća smeša je zatim mešana tokom 30 minuta. Unapred mešan rastvor 1,87 g (7,41 mmol) etil 2-hidrazinonikotinata i 1,45 mg (9,10 mmol) bezvodnog bakar(II) sulfata u 23 ml 1,4-dioksana je zatim dodat reakcionoj smeši i rezultujuća smeša je mešana tokom 96 sati na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen u vakuumu i sirov proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, dihlorometan/metanol, 92/8), čime je dobijeno 833 mg (23% od th.) jedinjenja iz naslova kao čvrsta supstanca.
LC-MS (Postupak 2): Rt= 0,98 min; MS(ESIpos): m/z = 596,1 [M+H]+
<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ = 8,82 (dd, 1H), 8,51 (dd, 1H), 7,85 (dd, 1H), 7,75 (d, 2H), 7,65-7,57 (m, 2H), 6,91 (d, 1H), 5,17 (s, 2H), 4,38-4,24 (m, 1H), 4,13-3,96 (m, 3H), 3,85 (dd, 1H), 3,77 (s, 3H), 0,97 (t, 3H).
Primer 11A
Metil 3-({3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}metil)-1-(4-hloropiridin-3-il)-1H-1,2,4-triazol-5-karboksilat [0219]
[0220] Rastvor 1,0 g metil-2-{3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2S)-3,3,3-trifluor-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}etanimidata (Primer 4A) (2,64 mmol) u 18 ml THF je ohlađen do 0 °C i tretiran sa 388 mg (3,17 mmol) metil hlorooksoacetata i 1,06 mL (6,07 mmol) N,N-diizopropiletilamina. Rezultujuća smeša je zagrejana do sobne temperature i zatim je mešana tokom 1 sata i ohlađena ponovo do 0 °C.523 mg (2,90 mmol) 4-hloro-3-hidrazinopiridin (hidrohloridna so 1:1) je dodat i reakciona smeša je zagrejana do sobne temperature i zatim je mešana tokom 1 sata, praćeno sa 1 satom na 120 °C u zapečaćenoj bočici pod mikrotalasnim zračenjem. Sirov proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, cikloheksan/EtOAc, gradijent), čime je dobijeno 1,03 g (66% od th.) jedinjenja iz naslova kao čvrsta supstanca.
LC-MS (Postupak 2): Rt= 1,00 min; MS(ESIpos): m/z = 558,2 [M+H]+
<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ = 9,00-8,62 (m, 2H), 7,96-7,55 (m, 5H), 6,91 (d, 1H), 5,21 (s, 2H), 4,42-4,21 (m, 1H), 4,11-3,66 (m, 5H).
Primer 12A
Metil 3-({3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}metil)-1-[4-(trifluorometil)piridin-3-il] -1H-1,2,4-triazol-5-karboksilat
[0221]
[0222] Rastvor 150 mg metil-2-{3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2S)-3,3,3-trifluor-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}etanimidata (Primer 4A) (0,40 mmol) u 3 ml THF je ohlađen do 0 °C i tretiran sa 53 mg (0,44 mmol) metil hlorooksoacetata i 75 µL (0,44 mmol) N,N-diizopropiletilamina. Rezultujuća smeša je mešana tokom 30 minuta na 0 °C. 77 mg (0,44 mmol) 3-hidrazino-4-(trifluorometil)piridina je dodato i reakciona smeša je zatim zagrejana do sobne temperature i mešana tokom 1 sata, praćeno sa 1 satom na 100 °C u zapečaćenoj bočici pod mikrotalasnim zračenjem. Sirov proizvod je prečišćen preparativnom HPLC (Postupak 5). Liofilizacija proizvoda koji sadrži fragmente dala je 104 mg (41% od th.) jedinjenja iz naslova kao čvrstu supstancu.
LC-MS (Postupak 3): Rt= 1,84 min; MS(ESIpos): m/z = 592,1 [M+H]+
<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ = 9,12-9,04 (m, 2H), 8,07 (d, 1H), 7,75 (d, 2H), 7,63 (d, 2H), 6,91 (d, 1H), 5,20 (d, 2H), 4,39 - 4,20 (br m, 1H), 4,05-3,98 (m, 1H), 3,86 (dd, 1H), 3,77 (s, 3H).
Primer 13A
Etil 3-[3-({3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}metil)-5-(metoksikarbonil)-1H-1,2,4-triazol-1-il]izonikotinat [0223]
[0224] Rastvor 500 mg metil-2-{3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2S)-3,3,3-trifluor-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}etanimidata (Primer 4A) (1,32 mmol) u 10 ml THF je ohlađen do 0 °C i tretiran sa 178 mg (1,45 mmol) metil hlorooksoacetata i 252 µL (1,45 mmol) N,N-diizopropiletilamina. Rezultujuća smeša je mešana tokom 30 minuta na 0 °C. 309 mg (1,45 mmol) etil 3-hidrazinoizonikotinat je zatim dodat i reakciona smeša je zagrejana do sobne temperature i zatim je mešana tokom 16 sati, praćeno zagrevanjem do refluksa tokom 16 sati. Sirov proizvod je prečišćen preparativnom HPLC (Postupak 5).
Liofilizacija proizvoda koji sadrži fragmente dala je 416 mg (26% od th.) jedinjenja iz naslova.
LC-MS (Postupak 3): Rt = 1,83 min; MS(ESIpos): m/z = 596,1 [M+H]<+>
<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ = 9,00-8,90 (m, 2H), 7,96 (d, 1H), 7,75 (d, 2H), 7,67-7,60 (m, 2H), 6,91 (d, 1H), 5,17 (s, 2H), 4,37-4,22 (m, 1H), 4,09-3,97 (m, 3H), 3,86 (dd, 1H), 3,76 (s, 3H), 0,93 (t, 3H).
Primer 14A
Metil 3-({3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2R)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}metil)-1-(3-hloropiridin-2-il)-1H-1,2,4-triazol-5-karboksilat [0225]
[0226] Rastvor 546 mg metil-2-{3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2R)-3,3,3-trifluor-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}etanimidata (Primer 5A) (1,44 mmol) u 10 ml THF je ohlađen do 0 °C i tretiran sa 194 mg (1,59 mmol) metil hlorooksoacetata i 277 µL (1,59 mmol) N,N-diizopropiletilamina. Rezultujuća smeša je mešana tokom 30 minuta na 0 °C. 227 mg (1,59 mmol) 3-hloro-2-hidrazinopiridina je zatim dodato i reakciona smeša je zagrejana do sobne temperature i zatim je mešana tokom 1 sata, praćeno sa 1 satom na 120 °C u zapečaćenoj bočici pod mikrotalasnim zračenjem i dodatnih 36 sati na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim tretirana sa metanolom/vodom i prečišćen preparativnom HPLC (Postupak 5). Liofilizacija proizvoda koji sadrži fragmente dala je 121 mg (14% od th.) jedinjenja iz naslova kao čvrstu supstancu.
LC-MS (Postupak 3): Rt= 1,85 min; MS(ESIpos): m/z = 558,1 [M+H]+
<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ = 8,81-8,18 (m, 2H), 7,92-7,48 (m, 5H), 6,91 (d, 1H), 5,22 (s, 2H), 4,44-4,16 (m, 1H), 3,79 (s, 5H).
Primer 15A
Metil 3-({ 3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2R)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}metil)-1-[3-(trifluorometil)piridin-2-il]-1H-1,2,4-triazol-5-karboksilat
[0227]
[0228] Rastvor 340 mg metil-2-{3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2R)-3,3,3-trifluor-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}etanimidata (Primer 5A) (898 µmol) u 8 ml 1,4-dioksana je ohlađen do 10 °C i tretiran sa 132 mg (1,08 mmol) metil hlorooksoacetata i 305 µL (2,33 mmol) N,N-diizopropiletilamina. Rezultujuća smeša je mešana tokom 30 minuta. Unapred mešan rastvor 376 mg (1,08 mmol) 2-hidrazino-3-(trifluorometil)piridin (4-metilbenzensulfonat so 1:1) i 172 mg (1,08 mmol) bezvodnog bakar(II) sulfata u 4 ml 1,4-dioksana je zatim dodat reakcionoj smeši i rezultujuća smeša je mešana tokom 16 sati na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen u vakuumu i sirov proizvod je rastvoren u EtOAc i opran sa rastvorom 10% EDTA u vodi (ponovljeno je četiri puta) praćeno sa vodom i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida. Nakon sušenja preko magnezijum sulfata isparljive materije su uklonjene i dobijen sirov proizvod je prečišćen preparativnom HPLC (Postupak 5). Liofilizacija proizvoda koji sadrži fragmente dala je 167 mg (31% od th.) jedinjenja iz naslova kao čvrstu supstancu.
LC-MS (Postupak 3): Rt= 1,88 min; MS(ESIpos): m/z = 592,1 [M+H]+
<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ = 8,93 (d, 1H), 8,60 (dd, 1H), 7,98 (dd, 1H), 7,80-7,67 (m, 2H), 7,67-7,58 (m, 2H), 6,91 (d, 1H), 5,28-5,13 (m, 2H), 4,37-4,24 (m, 1H), 4,06-3,95 (m, 1H), 3,85 (dd, 1H), 3,77 (s, 3H).
Primer 16A
Metil 3-({3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2R)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}metil)-1-(4-hloropiridin-3-il)-1H-1,2,4-triazol-5-karboksilat [0229]
[0230] Rastvor 330 mg metil-2-{3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2R)-3,3,3-trifluor-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}etanimidata (Primer 5A) (871 µmol) u 6,6 ml THF je ohlađen do 0 °C i tretiran sa 117 mg (958 µmol) metil hlorooksoacetata i 166 µL (958 µmol) N,N-diizopropiletilamina. Rezultujuća smeša je zatim mešana tokom 30 minuta
1
na 0 °C.166 µL (958 µmol) N,N-diizopropiletilamina i 172 mg (958 µmol) 4-hloro-3-hidrazinopiridina (hidrohloridna so 1:1) je dodato i rezultujuća reakciona smeša je zagrejana do sobne temperature i zatim je mešana tokom 16 sati, praćeno sa dodatnim 1 satom na 100 °C u zapečaćenoj bočici pod mikrotalasnim zračenjem. Sirov proizvod je prečišćen preparativnom HPLC (Postupak 5). Liofilizacija proizvoda koji sadrži fragmente dala je 126 mg (26% od th.) jedinjenja iz naslova kao čvrstu supstancu
LC-MS (Postupak 3): Rt= 1,75 min; MS(ESIpos): m/z = 558,1 [M+H]+
<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ = 8,86 (s, 1H), 8,75 (d, 1H), 7,89 (d, 1H), 7,80-7,73 (m, 2H), 7,65-7,60 (m, 2H), 6,91 (d, 1H), 5,21 (s, 2H), 4,36-4,24 (m, 1H), 4,08-3,99 (m, 1H), 3,86 (dd, 1H), 3,79 (s, 3H).
Primer 17A
Metil 3-({3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2R)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}metil)-1-[4-(trifluorometil)piridin-3-il]-1H-1,2,4-triazol-5-karboksilat
[0231]
[0232] Rastvor 350 mg metil-2-{3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2R)-3,3,3-trifluor-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}etanimidata (Primer 5A) (0,924 mmol) u 7,0 ml THF je ohlađen do 0 °C i tretiran sa 124 mg (1,02 mmol) metil hlorooksoacetata i 177 µL (1,102 mmol) N,N-diizopropiletilamina. Rezultujuća smeša je mešana tokom 30 minuta na 0 °C. 180 mg (1,02 mmol) 3-hidrazino-4-(trifluorometil)piridina je dodato i reakciona smeša je zagrejana do sobne temperature i mešana tokom 16 sati, praćeno sa 1 satom na 100 °C u zapečaćenoj bočici pod mikrotalasnim zračenjem. Sirov proizvod je prečišćen preparativnom HPLC (Postupak 5). Liofilizacija proizvoda koji sadrži fragmente dala je 125 mg (23% od th.) jedinjenja iz naslova kao čvrstu supstancu
LC-MS (Postupak 3): Rt= 1,85 min; MS(ESIpos): m/z = 592,1 [M+H]+
2
<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ = 9,09 (d, 1H), 9,07 (s, 1H), 8,07 (d, 1H), 7,77-7,73 (m, 2H), 7,65-7,61 (m, 2H), 6,91 (d, 1H), 5,20 (d, 2H), 4,39 - 4,20 (br m, 1H), 4,04-3,98 (m, 1H), 3,86 (dd, 1H), 3,77 (s, 3H).
EKSPERIMENTALNI ODELJAK - PRIMERI
Primer 1
3-({3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}metil)-1-(3-hloropiridin-2-il)-1H-1,2,4-triazol-5-karboksamid [0233]
[0234] 5,1 g metil 3-({3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}metil)-1-(3-hloropiridin-2-il)-1H-1,2,4-triazol-5-karboksilata (Primer 6A, 9,134 mmol) je rastvoreno u 42,5 ml rastvora amonijaka (7N u metanolu, 297 mmol). Rezultujuća smeša je mešana tokom 2 sata na sobnoj temperaturi. Rastvor je zatim sipan na led i smeša je mešana tokom 10 minuta. Talog je filtriran i opran sa vodom, što je dalo 3,5 g sirovog proizvoda. Vodena faza je ekstrahovana sa etil acetatom. Organska faza je osušena preko magnezijum sulfata, filtrirana i rastvarač je uklonjen u vakuumu. Sirov proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, dihlorometan/metanol, 97/3), čime je dobijeno 4,00 g (81% od th.) jedinjenja iz naslova kao čvrsta supstanca.
LC-MS (Postupak 3): Rt= 1,62 min; MS(ESIpos): m/z = 543,1 [M+H]+
<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ = 8,55 (dd, 1H), 8,39 (s, 1H), 8,25 (dd, 1H), 8,00 (s, 1H), 7,76 (d, 2H), 7,69 (dd, 1H), 7,62 (d, 2H), 6,90 (d, 1H), 5,18 (d, 2H), 4,36-4,23 (m, 1H), 4,06-3,97 (m, 1H), 3,85 (dd, 1H).
Primer 2
3-({3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}metil)-1-[3-(trifluorometil)piridin-2-il]-1H-1,2,4-triazol-5-karboksamid
[0236] 1,80 g metil 3-({3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}metil)-1-[3-(trifluorometil)piridin-2-il]-1H-1,2,4-triazol-5-karboksilata (Primer 7A, 3,04 mmol) je rastvoreno u 10,0 ml rastvora amonijaka (7N u metanolu, 70,0 mmol). Rezultujuća smeša je mešana tokom 1 sata na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen u vakuumu i sirov proizvod je prečišćen preparativnom HPLC (Postupak 5). Liofilizacija proizvoda koji sadrži fragmente dala je 1,49 g (85% od th.) jedinjenja iz naslova kao čvrstu supstancu.
LC-MS (Postupak 1): Rt= 1,20 min; MS(ESIpos): m/z = 577 [M+H]+
<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ =8,87 (d, 1H), 8,51 (d, 1H), 8,39 (s, 1H), 7,99 (s, 1H), 7,90 (dd, 1H), 7,82-7,68 (m, 2H), 7,63 (d, 2H), 6,90 (s, 1H), 5,22-5,07 (m, 2H), 4,39 - 4,20 (br m, 1H), 4,16-3,94 (m, 1H), 3,85 (dd, 1H).
Primer 3
3-({3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil] -4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}metil)-1-[3-(trifluorometoksi)piridin-2-il]-1H-1,2,4-triazol-5-karboksamid
[0237]
[0238] 51,0 mg Metil 3-({3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}metil)-1-[3-(trifluorometoksi)piridin-2-il]-1H-1,2,4-triazol-5-karboksilata (Primer 8A, 84 µmol) je rastvoreno u 5,0 ml rastvora amonijaka (7N u metanolu, 35,0 mmol). Rezultujuća smeša je mešana tokom 1 sata na sobnoj temperaturi.
4
Rastvarač je uklonjen u vakuumu i sirov proizvod je prečišćen preparativnom HPLC (Postupak 5). Liofilizacija proizvoda koji sadrži fragmente dala je 44,2 mg (89% od th.) jedinjenja iz naslova kao čvrstu supstancu.
LC-MS (Postupak 3): Rt= 1,69 min; MS(ESIpos): m/z = 593,1 [M+H]+
<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ = 8,71-7,53 (m, 9H), 6,90 (d, 1H), 5,17 (d, 2H), 4,42-4,17 (m, 1H), 4,08-3,73 (m, 2H).
Primer 4
1-(3-Bromopiridin-2-il)-3-(13-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}metil)-1H-1,2,4-triazol-5-karboksamid [0239]
[0240] 100 mg metil l-(3-bromopiridin-2-il)-3-({3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}metil)-1H-1,2,4-triazol-5-karboksilata (Primer 9A, 0,166 mmol) je rastvoreno u 10,0 ml rastvora amonijaka (7N u metanolu, 70,0 mmol). Rezultujuća smeša je mešana tokom 1 sata na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen u vakuumu i sirov proizvod je prečišćen preparativnom HPLC (Postupak 5). Liofilizacija proizvoda koji sadrži fragmente dala je 83,1 mg (85% od th.) jedinjenja iz naslova kao čvrstu supstancu.
LC-MS (Postupak 2): Rt= 0,91 min; MS(ESIpos): m/z = 587,0 [M+H]+
<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ = 8,57 (dd, 1H), 8,36 (dd, 2H), 7,98 (s, 1H), 7,80-7,73 (m, 2H), 7,62 (d, 2H), 7,60-7,56 (m, 1H), 6,92 (d, 1H), 5,17 (d, 2H), 4,41-4,19 (m, 1H), 4,11-3,95 (m, 1H), 3,85 (dd, 1H).
Primer 5
Etil 2-[5-karbamoil-3-({3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}metil)-1H-1,2,4-triazol-1-il]nikotinat
[0241]
[0242] 50,0 mg Primera 10A (84 µmol) je rastvoreno u 1,25 ml rastvora amonijaka (7N u metanolu, 0,175 mmol). Rezultujuća smeša je mešana tokom 1 sata na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen u vakuumu i sirov proizvod je prečišćen preparativnom HPLC (Postupak 5). Liofilizacija proizvoda koji sadrži fragmente dala je 27,8 mg (57% od th.) jedinjenja iz naslova kao čvrstu supstancu.
LC-MS (Postupak 1): Rt= 1,16 min; MS(ESIpos): m/z = 581,0 [M+H]+
<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ =8,76 (dd, 1H), 8,46 (dd, 1H), 8,29 (s, 1H), 7,90 (s, 1H), 7,83-7,77 (m, 1H), 7,77-7,70 (m, 2H), 7,68-7,57 (m, 2H), 6,90 (d, 1H), 5,14 (s, 2H), 4,35-4,23 (m, 1H), 4,06-3,97 (m, 3H), 3,85 (dd, 1H), 0,97 (t, 3H).
Primer 6
3-({3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil] -4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}metil)-1-(4-hloropiridin-3-il)-1H-1,2,4-triazol-5-karboksamid [0243]
[0244] 100 mg Primera 11A (0,179 mmol) je rastvoreno u 1,0 ml rastvora amonijaka (7N u metanolu, 7,09 mmol). Rezultujuća smeša je mešana tokom 16 sati na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen u vakuumu i sirov proizvod je prečišćen preparativnom HPLC (Postupak 5). Liofilizacija proizvoda koji sadrži fragmente dala je 76,7 mg (79% od th.) jedinjenja iz naslova kao čvrstu supstancu.
LC-MS (Postupak 3): Rt= 1,55 min; MS(ESIpos): m/z = 543,1 [M+H]+
<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ = 8,91-7,52 (m, 9H), 6,90 (d, 1H), 5,17 (d, 2H), 4,40-4,18 (m, 1H), 4,07-3,72 (m, 2H).
Primer 7
3-({3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}metil)-1-[4-(trifluorometil)piridin-3-il]-1H-1,2,4-triazol-5-karboksamid [0245]
[0246] 78,5 mg Primera 12A (0,133mmol) je rastvoreno u 8,0 ml rastvora amonijaka (7N u metanolu, 1,14 mmol). Rezultujuća smeša je mešana tokom 1 sata na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen u vakuumu i sirov proizvod je prečišćen preparativnom HPLC (Postupak 5). Liofilizacija proizvoda koji sadrži fragmente dala je 49,7 mg (77% od th.) jedinjenja iz naslova kao čvrstu supstancu.
LC-MS (Postupak 2): Rt= 0,93 min; MS(ESIpos): m/z = 577,1 [M+H]+
<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ =9,03 (d, 1H), 8,97 (s, 1H), 8,36 (s, 1H), 8,00 (d, 2H), 7,86-7,70 (m, 2H), 7,69-7,58 (m, 2H), 6,90 (d, 1H), 5,17 (d, 2H), 4,39 - 4,20 (br m, 1H), 4,06-3,94 (m, 1H), 3,86 (dd, 1H).
Primer 8
Etil 3-[5-karbamoil-3-({3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}metil)-1H-1,2,4-triazol-1-il]izonikotinat
[0247]
[0248] 100 mg Primera 13A (151 µmol) je rastvoreno u 1,0 mL NH3u EtOH (2,00 mmol, 2 N). Rezultujuća smeša je mešana tokom 16 sati na sobnoj temperaturi i dodatnih 1,0 ml rastvora amonijaka (7N u metanolu, 2,00 mmol) je dodato i mešanje je nastavljeno tokom 16 sati na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen u vakuumu i sirov proizvod je prečišćen preparativnom HPLC (Postupak 5). Liofilizacija proizvoda koji sadrži fragmente dala je 46,0 mg (49% od th.) jedinjenja iz naslova kao čvrstu supstancu.
LC-MS (Postupak 3): Rt= 1,63 min; MS(ESIpos): m/z = 581,1 [M+H]+
<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ =8,89 (d, 1H), 8,83 (s, 1H), 8,28 (s, 1H), 7,94 (s, 1H), 7,90 (d, 1H), 7,78-7,72 (m, 2H), 7,69-7,58 (m, 2H), 6,89 (d, 1H), 5,14 (d, 2H), 4,40-4,24 (m, 1H), 4,10-3,96 (m, 3H), 3,86 (dd, 1H), 0,95 (t, 3H).
Primer 9
2-[5-karbamoil-3-(13-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}metil)-1H-1,2,4-triazol-1-il]nikotinamid
[0249]
[0250] 80 mg Primera 10A (134 µmol) je rastvoreno u 10 ml rastvora amonijaka (7N u metanolu, 70,0 mmol). Rezultujuća smeša je mešana tokom 10 minuta na 70 °C, rastvarač je uklonjen u vakuumu i ostatak je rastvoren sa 10 ml rastvora amonijaka (7N u metanolu, 70,0 mmol) i mešan tokom 3 sata na 120 °C u mikrotalasnoj. Rastvarač je uklonjen u vakuumu i sirov proizvod je prečišćen preparativnom HPLC (Postupak 5). Liofilizacija proizvoda koji sadrži fragmente dala je 22,0 mg (28% od th.) jedinjenja iz naslova kao čvrstu supstancu. LC-MS (Postupak 3): Rt= 1,31 min; MS(ESIpos): m/z = 552,1 [M+H]+
<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ = 8,61 (dd, 1H), 8,24-8,14 (m, 2H), 7,90-7,83 (m, 1H), 7,86 (br d, 1H), 7,79-7,74 (m, 2H), 7,69 (dd, 1H), 7,65-7,60 (m, 2H), 7,49 (s, 1H), 6,92 (d, 1H), 5,10 (d, 2H), 4,39 - 4,21 (br m, 1H), 4,06-3,93 (m, 1H), 3,84 (dd, 1H).
Primer 10
3-({3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2R)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}metil)-1-(3-hloropiridin-2-il)-1H-1,2,4-triazol-5-karboksamid [0251]
[0252] 110 mg Primera 14A (0,197 mmol) je rastvoreno u 1,0 ml rastvora amonijaka (7N u metanolu, 7,09 mmol). Rezultujuća smeša je mešana tokom 1 sata na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen u vakuumu i sirov proizvod je prečišćen preparativnom HPLC (Postupak 5). Liofilizacija proizvoda koji sadrži fragmente dala je 92,0 mg (86% od th.) jedinjenja iz naslova kao čvrstu supstancu.
LC-MS (Postupak 3): Rt= 1,60 min; MS(ESIpos): m/z = 543,1 [M+H]+
<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ = 8,69-7,48 (m, 9H), 6,90 (d, 1H), 5,18 (d, 2H), 4,47-4,16 (m, 1H), 4,08-3,71 (m, 2H).
Primer 11
3-({3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2R)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}metil)-1-[3-(trifluorometil)piridin-2-il]-1H-1,2,4-triazol-5-karboksamid [0253]
[0254] 160 mg Primera 15A (270 µmol) je rastvoreno u 5,0 ml rastvora amonijaka (7N u metanolu, 2,00 mmol). Rezultujuća smeša je mešana tokom 1,5 sati na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen u vakuumu i sirov proizvod je prečišćen preparativnom HPLC (Postupak 5). Liofilizacija proizvoda koji sadrži fragmente dala je 162,1 mg (quant.) jedinjenja iz naslova kao čvrstu supstancu.
LC-MS (Postupak 4): Rt= 2,73 min; MS(ESIpos): m/z = 577,3 [M+H]+
<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ = 8,90-8,81 (m, 1H), 8,51 (dd, 1H), 8,39 (s, 1H), 7,99 (s, 1H), 7,90 (dd, 1H), 7,80-7,70 (m, 2H), 7,66-7,59 (m, 2H), 6,90 (d, 1H), 5,25-5,12 (m, 2H), 4,40 - 4,20 (br m, 1H), 4,03-3,96 (m, 1H), 3,85 (dd, 1H).
Primer 12
3-({3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2R)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}metil)-1-(4-hloropiridin-3-il)-1H-1,2,4-triazol-5-karboksamid [0255]
[0256] 118 mg Primera 16A (211 µmol) je rastvoreno u 5,0 ml rastvora amonijaka (7N u metanolu, 35,0 mmol). Rezultujuća smeša je mešana tokom 1 sata na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen u vakuumu i sirov proizvod je prečišćen preparativnom HPLC (Postupak 5). Liofilizacija proizvoda koji sadrži fragmente dala je 111 mg (97% od th.) jedinjenja iz naslova kao čvrstu supstancu.
LC-MS (Postupak 3): Rt= 1,53 min; MS(ESIpos): m/z = 543,1 [M+H]+
<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ = 8,78 (s, 1H), 8,69 (d, 1H), 8,35 (s, 1H), 8,01 (s, 1H), 7,82 (d, 1H), 7,79-7,73 (m, 2H), 7,66-7,58 (m, 2H), 6,90 (d, 1H), 5,17 (d, 2H), 4,39 - 4,20 (br m, 1H), 4,07-3,95 (m, 1H), 3,85 (dd, 1H).
Primer 13
3-({3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2R)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}metil)-1-[4-(trifluorometil)piridin-3-il]-1H-1,2,4-triazol-5-karboksamid
[0257]
[0258] 118 mg Primera 17A (199 µmol) je rastvoreno u 5,0 ml rastvora amonijaka (7N u metanolu, 2,00 mmol). Rezultujuća smeša je mešana tokom 20 minuta na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen u vakuumu i sirov proizvod je prečišćen preparativnom HPLC (Postupak 5). Liofilizacija proizvoda koji sadrži fragmente dala je 99,5 mg (87% od th.) jedinjenja iz naslova kao čvrstu supstancu.
LC-MS (Postupak 3): Rt= 1,63 min; MS(ESIpos): m/z = 577,1 [M+H]+
<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ = 9,03 (d, 1H), 8,96 (s, 1H), 8,36 (s, 1H), 8,00 (d, 2H), 7,77-7,70 (m, 2H), 7,68-7,59 (m, 2H), 6,89 (d, 1H), 5,28-5,05 (m, 2H), 4,39 - 4.20 (br m, 1H), 4,05-3,96 (m, 1H), 3,85 (dd, 1H).
Primer 14
3-{[3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-(3,3,3-trifluoro-2-oksopropil)-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il]metil}-1-(3-hloropiridin-2-il)-1H-1,2,4-triazol-5-karboksamid (ketonski oblik) ili 3-{[3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-(3,3,3-trifluoro-2,2-dihidroksipropil)-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il]metil}-1-[2-(trifluorometil)fenil]-1H-1,2,4-triazol-5-karboksamid (hidratni oblik)
[0259]
[0260] Rastvor 250 mg Primera 1 (460 µmol) u 5,0 ml dihlorometana je ohlađena do 0 °C i 780 mg (1,84 mmol) Des-Martinovog perjodinana i 9,0 µL (506 mmol) vode su dodati.
Rezultujuća smeša je mešana tokom 1 sata na sobnoj temperaturi. Reakcionoj smeši su dodati 5 ml zasićenog vodenog rastvora natrijum tiosulfata i 5 ml zasićenog vodenog rastvora
1
natrijum bikarbonata i rezultujuća smeša je mešana tokom 10 minuta. Faze su razdvojene i vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom (10 mL, ponovljeno je tri puta), kombinovane organske faze su osušene preko magnezijum sulfata i isparene. Sirov proizvod je prečišćen preparativnom HPLC (Postupak 5). Liofilizacija proizvoda koji sadrži fragmente dala je 230 mg (87% od th.) jedinjenja iz naslova kao čvrstu supstancu
LC-MS (Postupak 3): Rt= 1,57 min; MS(ESIpos): m/z = 541,0 [M+H]<+>(ketonski oblik).<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ = 8,54 (dd, 1H), 8,40 (s, 1H), 8,25 (dd, 1H), 8,00 (s, 1H), 7,76-7,63 (m, 3H), 7,62-7,53 (m, 2H), 7,44 (s, 2H), 5,19 (s, 2H), 4,05 (s, 2H)) (hidratni oblik).
Primer 15
1-(3-Bromopiridin-2-il)-3-{[3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-(3,3,3-trifluoro-2-oksopropil)-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il]metil}-1H-1,2,4-triazol-5-karboksamid (ketonski oblik) ili 1-(3-Bromopiridin-2-il)-3-{[3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-(3,3,3-trifluoro-2,2-dihidroksipropil)-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il]metil)-1H-1,2,4-triazol-5-karboksamid (hidratni oblik)
[0261]
[0262] Rastvor 68,0 mg Primera 4 (116 µmol) u 1,3 ml dihlorometana je ohlađen do 0 °C i 196 mg (463 mmol) Des-Martinovog perjodinana i 2,3 µL (127 mmol) vode su dodati.
Rezultujuća smeša je zagrejana do sobne temperature i zatim je mešana tokom 1 sata.
Reakcionoj smeši su dodati 1,3 ml zasićenog vodenog rastvora natrijum tiosulfata i 1,3 ml zasićenog vodenog rastvora natrijum bikarbonata i smeša je mešana tokom 10 minuta. Faze su razdvojene i vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom (3 x 10 mL), kombinovane organske faze su zatim osušene preko magnezijum sulfata i isparene. Sirov proizvod je prečišćen preparativnom HPLC (Postupak 5). Liofilizacija proizvoda koji sadrži fragmente dala je 30,1 mg (42% od th.) jedinjenja iz naslova kao čvrstu supstancu
LC-MS (Postupak 3): Rt= 1,58 min; MS(ESIpos): m/z = 585,0 [M+H]<+>(ketonski oblik).
2
<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ = 8,57 (dd, 1H), 8,40-8,34 (m, 2H), 7,98 (s, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,58 (d, 3H), 7,44 (s, 2H), 5,20-5,16 (m, 2H), 4,05 (s, 2H) (hidratni oblik).
Primer 16
3-{[3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-(3,3,3-trifluoro-2-oksopropil)-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il]metil}-1-(4-hloropiridin-3-il)-1H-1,2,4-triazol-5-karboksamid (ketonski oblik) ili 3-{[3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-(3,3,3-trifluoro-2,2-dihidroksipropil)-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il]-metil}-1-(4-hloropiridin-3-il)-1H-1,2,4-triazol-5-karboksamid (hidratni oblik)
[0263]
[0264] Rastvor 120 mg Primera 6 (221 µmol) i 4,3 µL (243 mmol) vode u 2,4 ml dihlorometana je ohlađen do 0 °C i 140,5 mg (331 mmol) Des-Martinovog perjodinana je zatim dodato. Rezultujuća smeša je zagrejana do sobne temperature i zatim je mešana tokom 2 sata. Suspenziji je zatim dodato 5 mL THF i mešanje je nastavljeno tokom 72 sata na 4 °C praćeno sa dodatnih 3 sata na sobnoj temperaturi. Reakcionoj smeši su dodati 2 mL zasićenog vodenog rastvora natrijum tiosulfata i 2 mL zasićenog vodenog rastvora natrijum bikarbonata i smeša je zatim mešana tokom 10 minuta. Faze su razdvojene i vodeni sloj je ekstrahovan sa dihlorometanom (10 mL, ponovljeno je četiri puta), kombinovane organske faze su oprane sa vodom i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene preko magnezijum sulfata i isparene. Sirov proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (silika gel, cikloheksan/etil acetat 1:1 → etil acetat). Isparavanje proizvoda koji sadrži fragmente dalo je 8,0 mg (7% od th.) jedinjenja iz naslova kao čvrstu supstancu
LC-MS (Postupak 4): Rt= 2,43 min; MS(ESIpos): m/z = 541,2 [M+H]<+>(ketonski oblik).<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ = 8,78 (s, 1H), 8,69 (d, 1H), 8,36 (s, 1H), 8,00 (s, 1H), 7,82 (d, 1H), 7,71 (d, 2H), 7,58 (d, 2H), 7,43 (s, 2H), 5,19 (s, 2H), 4,06 (s, 2H) (hidratni oblik).
Primer 17
3-{[3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-(3,3,3-trifluoro-2-oksopropil)-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il]metil}-1-[3-(trifluorometil)piridin-2-il]-1H-1,2,4-triazol-5-karboksamid (ketonski oblik) ili 3-{[3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-(3,3,3-trifluoro-2,2-dihidroksipropil)-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il]metil}-1-[3-(trifluorometil)piridin-2-il]-1H-1,2,4-triazol-5-karboksamid (hidratni oblik)
[0265]
[0266] Rastvor 100 mg Primera 2 (173 µmol) u 1,9 ml dihlorometana je ohlađen do 0 °C i 294 mg (693 mmol) Des-Martinovog perjodinana i 3,5 µL (191 mmol) vode je zatim dodata. Rezultujuća smeša je zagrejana do sobne temperature i zatim je mešana tokom 1 sata.
Reakcionoj smeši su dodati 2 mL zasićenog vodenog rastvora natrijum tiosulfata i 2 mL zasićenog vodenog rastvora natrijum bikarbonata i rezultujuća smeša je zatim mešana tokom 10 minuta. Vodeni sloj je ekstrahovan sa dihlorometanom (10 mL, ponovljeno je četiri puta), kombinovane organske faze su oprane sa vodom i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, osušene preko magnezijum sulfata i isparene. Sirov proizvod je prečišćen preparativnom HPLC (Postupak 5). Liofilizacija proizvoda koji sadrži fragmente dala je 18,4 mg (19% od th.) jedinjenja iz naslova kao čvrstu supstancu
LC-MS (Postupak 3): Rt= 1,64 min; MS(ESIpos): m/z = 575,0 [M+H]<+>(ketonski oblik).<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ = 8,88-8,85 (m, 1H), 8,51 (dd, 1H), 8,40 (s, 1H), 7,98 (s, 1H), 7,90 (dd, 1H), 7,73-7,67 (m, 2H), 7,58 (d, 2H), 7,43 (s, 2H), 5,18 (s, 2H), 4,05 (s, 2H) (hidratni oblik).
EKSPERIMENTALNI ODELJAK- BIOLOŠKI TESTOVI
Skraćenice i akronimi:
[0267]
Pr. br.
pristupni broj
AVP
arginin vazopresin
4
Bmax
maksimalni kapacitet vezivanja liganda
BSA
goveđi serumski albumin
cAMP
ciklični adenozin monofosfat
Kat. br.
kataloški broj
cDNK
komplementarna deoksiribonukleinska kiselina
CHO
jajnik kineskog hrčka
CRE
element odgovora cAMP
Ct
prag ciklusa
DMEM/F12
Dulbekoov modifikovani Iglov medijum/Hamov F12 medium (1:1) DNK
dezoksiribonukleinska kiselina
DMSO
dimetil sulfoksid
DTT
ditiotreitol
EC50
polu-maksimalna efektivna koncentracija
EDTA
etilendiamin-tetracetna kiselina
FAM
karboksifluorescein sukcinimidil estar
k.c.
konačna koncentracija
FCS
fetalni teleći serum
HEPES
4-(2-hidroksietil)piperazin-1-etansulfonska kiselina
IC50
polovina maksimalne inhibitorne koncentracije
Kd
konstanta disocijacije
Ki
konstanta disocijacije inhibitora
mRNK
mesendžer ribonukleinska kiselina
PBS
fosfatni pufer
PEG
polietilen glikol
p.o.
per os, peroralno
RNK
ribonukleinska kiselina
RTPCR
lančana reakcija polimeraze u realnom vremenu
SPA
test blizine scintilacije
TAMRA
karboksitetrametilrodamin
TRIS; Tris
2-amino-2-hidroksimetilpropan-1,3-diol
[0268] Primeri su testirani u odabranim biološkim testovima jedan ili više puta. Kada se testiraju više puta, podaci se prikazuju ili kao prosečne vrednosti ili kao srednje vrednosti, gde
• prosečna vrednost, koja se naziva i aritmetička srednja vrednost, predstavlja zbir dobijenih vrednosti podeljen brojem testiranih puta, i
• srednja vrednost predstavlja srednji broj grupe vrednosti kada je rangirana u rastućem ili opadajućem redosledu. Ako je broj vrednosti u skupu podataka neparan, medijana je srednja vrednost. Ako je broj vrednosti u skupu podataka paran, medijana je aritmetička sredina dve srednje vrednosti.
[0269] Primeri su sintetisani jedan ili više puta. Kada se sintetišu više puta, podaci iz bioloških ispitivanja predstavljaju prosečne vrednosti ili srednje vrednosti izračunate pomoću skupova podataka dobijenih ispitivanjem jedne ili više serija sinteze.
[0270] Demonstracija aktivnosti jedinjenja predmetnog pronalaska može se postići putem in vitro, ex vivo, i in vivo testovi koji su dobro poznati u struci. Na primer, kako bi se pokazala aktivnost jedinjenja predmetnog pronalaska, mogu se koristiti naredni testovi.
B-1. Ćelijski in vitro test za određivanje aktivnosti vazopresin receptora
[0271] Identifikacija agonista i antagonista vazopresina V1a i V2 receptora kod ljudi, pacova i pasa, kao i kvantifikacija aktivnosti jedinjenja prema pronalasku se vrši pomoću rekombinantnih ćelijskih linija. Ove ćelijske linije izvorno potiču iz epitelne ćelije jajnika hrčka (Jajnik kineskog hrčka, CHO K1, ATCC: American Type Culture Collection, Manassas, VA 20108, SAD). Testirane ćelijske linije konstitutivno eksprimiraju ljudske, pacovske ili pseće V1a ili V2 receptore. U slučaju Gαq-spojenih V1a receptora, ćelije su takođe stabilno transficirane modifikovanim oblikom fotoproteina osetljivih na kalcijum ekuorin (ljudski i pacovski V1a) ili obelin (pseći V1a), koji nakon rekonstitucije sa kofaktor koelenterazinom emituju svetlost kada dođe do povećanja koncentracije slobodnog kalcijuma [Rizzuto R, Simpson AW, Brini M, Pozzan T, Nature 358, 325-327 (1992); Illarionov BA, Bondar VS, Illarionova VA, Vysotski ES, Gene 153 (2), 273-274 (1995)]. Dobijene ćelije vazopresin receptora reaguju na stimulaciju rekombinantno eksprimiranih V1a receptora unutarćelijskim oslobađanjem jona kalcijuma, što se može kvantifikovati rezultujućom luminiscencijom fotoproteina. Gs-spojeni V2 receptori se stabilno transficiraju u ćelijske linije koje eksprimiraju gen za luciferazu svica pod kontrolom promotora koji je odgovoran za CRE. Aktivacija V2 receptora indukuje aktivaciju promotora koji reaguje na CRE putem cAMP povećanja, indukujući tako eksprimiranje luciferaze svica. Svetlost koju emituju fotoproteini V1a ćelijskih linija kao i svetlost koju emituje luciferaza svica od V2 ćelijskih linija odgovara aktiviranju ili inhibiciji odgovarajućeg vazopresin receptora.
Bioluminiscencija ćelijskih linija otkriva se pomoću odgovarajućeg luminometra [Milligan G, Marshall F, Rees S, Trends in Pharmacological Sciences 17, 235-237 (1996)].
Postupak ispitivanja:
Ćelijske linije V1a vazopresin receptora:
[0272] Dan pre ispitivanja, ćelije su stavljene u medijum za kulturu (DMEM/F12, 2% FCS, 2 mM glutamina, 10 mM HEPES, 5 µg/ml koelenterazina) u mikrotitarske ploče sa 384 komorice i čuvane su u ćelijskom inkubatoru (96% vlažnosti, 5% v/v CO2, 37°C). Na dan ispitivanja, ispitivana jedinjenja u različitim koncentracijama stavljaju se na 10 minuta u komorice mikrotitarske ploče pre nego što se doda [Arg<8>]-vazopresin agonist pri EC50koncentraciji. Dobijeni svetlosni signal meri se odmah u luminometru.
Ćelijske linije V2 vazopresin receptora:
[0273] Dan pre ispitivanja, ćelije su stavljene u medijum za kulturu (DMEM/F12, 2% FCS, 2 mM glutamina, 10 mM HEPES) u mikrotitarske ploče sa 384 komorice i čuvane su u ćelijskom inkubatoru (vlažnost 96%, 5 % v/v CO2, 37°C). Na dan ispitivanja, ispitivana jedinjenja u različitim koncentracijama i [Arg<8>]-vazopresin agonist pri EC50koncentraciji zajedno se dodaju u komorice i ploče se inkubiraju 3 sata u ćelijskom inkubatoru. Po dodavanju reagensa za lizu ćelija Triton™ i supstrata luciferina, luminiscencija luciferaze svica meri se u luminometru.
[0274] Tabela 1A u nastavku navodi pojedinačne IC50vrednosti za jedinjenja pronalaska (uključujući racemske smeše kao i odvojene enantiomere) koje su dobijena iz ćelijskih linija transficiranih ljudskim V1a ili V2 receptorima:
Tabela 1A
[0275] IC50podaci navedeni u Tabeli 1A pokazuju da jedinjenja predmetnog pronalaska deluju kao selektivni i snažni antagonisti vazopresin V1a receptora.
[0276] Za uporedne svrhe, izabrani derivati fenil-triazola za koje se smatralo da su predstavnici najbližeg stanja tehnike (cf. Međunarodna patentna prijava WO 2011/104322-A1 i tamo opisani primeri jedinjenja) takođe su testirani u ćelijskim V1a i V2 testovima opisanim iznad. IC50vrednosti za ova jedinjenja dobijena iz ćelijskih linija transficiranih ljudskim V1a ili V2 receptorima navedene su u Tabeli 1B u nastavku:
Tabela 1B
[0277] Za uporedne svrhe, dodatno izabrani derivati fenil-triazola za koje se smatralo da su predstavnici najbližeg stanja tehnike (cf. Međunarodna patentna prijava WO 2016/071212-A1 i tamo opisani primeri jedinjenja) takođe su testirani u ćelijskim V1a i V2 testovima opisanim iznad. IC50vrednosti za ova jedinjenja dobijena iz ćelijskih linija transficiranih ljudskim V1a ili V2 receptorima navedene su u Tabeli 1C u nastavku:
Tabela 1C
B-2. Test radioaktivnog vezivanja
[0278] IC50i Kivrednosti se mogu odrediti u testovima radioaktivnog vezivanja korišćenjem membranskih fragmenata rekombinantnih ćelijskih linija ljudskog embrionalnog bubrega 293 (HEK293) ili CHO-K1 ćelijskih linija koje eksprimiraju odgovarajuće ljudske vazopresin V1a i V2 receptore.
[0279] Ljudski rekombinantni vazopresin V1a receptori eksprimirani u HEK293 ćelijama koriste se u 50 mM Tris-HCl puferu, pH 7,4, 5 mM MgCl2, 0,1% BSA primenom standardnih tehnika. Alikvoti pripremljenih membrana se inkubiraju sa ispitivanim jedinjenjima u različitim koncentracijama u duplikatima i 0,03 nM [<125>I]fenilacetil-D-Tyr(Me)-Phe-Gln-Asn-Arg-Pro-Arg-Tyr-NH2tokom 120 minuta na 25°C. Nespecifično vezivanje se procenjuje u prisustvu 1 µM [Arg<8>]vazopresin a. Receptori se filtriraju i operu, filteri se zatim broje kako bi se utvrdio specifično vezan [<125>I]fenilacetil-D-Tyr(Me)-Phe-Gln-Asn-Arg-Pro-Arg-Tyr-NH2.
[0280] CHO-K1 ćelije stabilno transficirane plazmidom koji kodira ljudski vazopresin V2 receptor koriste se za pripremu membrana u 50 mM Tris-HCl puferu, pH 7,4, 10 mM MgCl2, 0,1% BSA primenom standardnih tehnika. Alikvoti pripremljene membrane se inkubiraju sa ispitivanim jedinjenjima u različitim koncentracijama u duplikatima i 4 nM [<3>H](Arg<8>)-vazopresina tokom 120 minuta na 25°C. Nespecifično vezivanje se procenjuje u prisustvu 1 mM (Arg<8>)-vazopresina. Membrane se filtriraju i operu 3 puta i filteri se broje kako bi se utvrdio specifično vezan [<3>H](Arg<8>)-vazopresin.
[0281] IC50vrednosti se određuju nelinearnom regresionom analizom najmanjih kvadrata korišćenjem MathIQTM (ID Business Solutions Ltd., UK). Konstanta inhibicije Kiizračunava se pomoću Cheng i Prusoff jednačine (Cheng, Y., Prusoff, W.H., Biochem.
Pharmacol. 22:3099-3108, 1973).
B-3. Ćelijski in vitro test za otkrivanje delovanja antagonista vazopresin V1a receptora na regulaciju profibrotičnih gena
[0282] Ćelijska linija H9C2 (American Tipe Culture Collection ATCC br. CRL-1446), opisana kao kardiomiocitni tip izolovan iz srčanog tkiva pacova, endogeno eksprimira vazopresin V1a receptor AVPR1A u velikom broju kopija, dok eksprimiranje AVPR2 ne može da se detektuje. Slično tome, NRK49F ćelijska linija (ATCC br. CRL1570) izolovana iz tkiva bubrega pacova, pokazuje sličan obrazac eksprimiranja visokog AVPR1A mRNK eksprimiranja i smanjenog AVPR2 eksprimiranja. Za ćelijske testove koji detektuju inhibiciju AVPR1A receptor-zavisnu regulacije eksprimiranja gena antagonistima receptora, postupak je naredni:
H9C2 ćelije ili NRK49F ćelije se prosejavaju u mikrotitarske ploče sa 6 komorica za ćelijsku kulturu sa ćelijskom gustinom od 50000 ćelija/komorica u 2,0 ml Opti-MEM medijumu (Invitrogen Corp., Carlsbad, CA, USA, Kat. br.11058 -021) i čuvaju se u ćelijskom inkubatoru (vlažnost 96%, 8% v/v CO2, 37°C). Posle 24 sata, kompleti od tri komorice (triplikat) napune se rastvorom nosača (negativna kontrola) i rastvorom vazopresina ([Arg8] -vazopresin acetat, Sigma, Kat. br. V9879) ili ispitivanim jedinjenjem (rastvoreno u nosaču: voda sa 20% v/v etanola) i rastvorom vazopresina. U ćelijskoj kulturi konačna koncentracija vazopresina iznosi 1 nM. Rastvor ispitivanog jedinjenja se dodaje ćelijskoj kulturi u malim količinama, tako da konačna koncentracija od 0,03% etanola u ćelijskom testu nije prekoračena. Posle vremena inkubacije od 5 sati, supernatant kulture se izvlači usisavanjem, zalepljene ćelije se liziraju u 350 µl RLT pufera (Qiagen, Kat. br.79216), i RNK se izoluje iz lizata pomoću RNeasy kompleta (Qiagen, Kat. br.74104). Sledi digestija DNKaze (Invitrogen, Kat. br.18068-015), sinteza cDNK (Promaga, ImProm-II sistem reverzne
1
transkripcije, Kat. br. A3800) i lančana reakcija polimeraze reverzne transkripcije (RTPCR) (pPCR MasterMix RT- KP2X-03-075, Eurogentec, Seraing, Belgium). Sve procedure se odvijaju u skladu sa radnim protokolima proizvođača ispitivanih reagenasa. Setovi prajmera za RTPCR odabrani su na osnovu sekvenci mRNK gena (NCBI GenBank Entrez Nucleotide Data Base) pomoću Primer3Plus programa sa 6-FAM TAMRA obeleženim sondama.
RTPCR za određivanje relativnog eksprimiranja mRNK u ćelijama različitih serija ispitivanja izvodi se pomoću Applied Biosystems ABI Prism 7700 detektora sekvence u formatu mikrotitarske ploče sa 384 komorice u skladu sa uputstvima za upotrebu instrumenta.
Relativno eksprimiranje gena predstavljeno je delta-delta Ct vrednošću [Applied Biosystems, User Bulletin No.2 ABI Prism 7700 SDS, 11. decembra 1997. (ažurirano 10/2001)] u odnosu na nivo eksprimiranja L -32 gena ribozomskog proteina (GenBank Pr. br. NM_013226) i graničnom vrednosti Ct od Ct = 35.
B-4. Inhibicija agregacije ljudskih trombocita izazvane vazopresinom
[0283] Ljudski trombociti endogeno eksprimiraju V1a receptor. Otkriveno je da relativno visoke koncentracije vazopresina (oko 50-100 nM) stimulišu agregaciju trombocita ex vivo. Stoga, trombociti obogaćeni ljudskom krvlju mogu poslužiti kao tkivo koje eksprimira V1a za farmakološke studije sa odgovarajućim visokim koncentracijama antagonista vazopresina.
[0284] Ljudska krv se sakuplja u 10 mM rastvoru trinatrijum citratna putem venske punkcije zdravih dobrovoljaca koji ne puše (n=4-8) koji su bili bez leka najmanje 1 nedelju. Plazma bogata trombocitima (PRP) dobija se centrifugiranjem uzorka krvi na 140 g tokom 20 minuta na 4°C. Rezultujući trombociti se dalje centrifugiraju (15.000 o/min, 2 min) kako bi se dobila plazma siromašna trombocitima (PPP). Agregacija trombocita meri se turbidimetrijski pomoću agregometra (APACT 4). Reakciju prati praćenje promena u prenosu svetlosti na alikvotima od 178 µL PRP, uz neprekidno mešanje na 37°C, protiv PPP kontrole. Razne koncentracije antagonista vazopresina (u 2 µL) dodaju se u PRP 5 minuta pre dodavanja 20 µL Arg-vazopresina (krajnja koncentracija 100 nM. Inhibitorni efekti jedinjenja određuju se merenjem visine agregacionog talasa od dna promene oblika u poređenju sa kontrolnim odgovorom. IC50vreednosti se izračunavaju krivom inhibicije odgovora na dozu pomoću iterativnog programa nelinearne regresije.
B-5. Efekti na kontrakciju prstenova izolovanih pacovskih sudova
Izolovana aorta
2
[0285] Ispitivana jedinjenja mogu se istražiti na izolovanim aortnim prstenovima mužjaka Wistar pacova koji endogeno eksprimiraju V1a receptor. Mužjaci Wistar pacova su eutanazirani pomoću ugljen dioksida. Aorta se uklanja i stavlja u ledeno hladni Krebs-Henseleitov pufer narednog sastava (u mmol/l): NaCl 112, KCl 5,9, CaCl22,0, MgCl21,2, NaH2PO41,2, NaHCO325, glukoza 11,5. Aorta se iseče na prstenove od 3 mm i prenese u kupke od 20 ml sa organima koji sadrže Krebs-Henseleitov rastvor uravnotežen sa 95% O2, 5% CO2na 37°C. Za snimanje izometrijske napetosti prstenovi su postavljeni između dve kuke. Napetost u mirovanju se podešava na 3 g. Posle perioda ravnoteže, svaki eksperiment započinje izlaganjem preparata K+ (50 mM) Krebs-Henseleitom rastvoru. Aortni prstenovi su prethodno kontraktovani upotrebom 1 nmol/l Arg-vazopresina. Nakon uspostavljanja stabilne kontrakcije, konstruiše se kriva kumulativnog odgovora doze ispitivanog jedinjenja.
Stabilizovana kontrakcija indukovana Arg-vazopresinom definiše se kao 100% napetost. Opuštenost se izražava u procentima napetosti.
Izolovani A. renalis
[0286] Mužjaci Wistar pacova (200-250 g) su eutanazirani upotrebom ugljen dioksida. A. renalis se uklanja i stavlja u ledeno hladni Krebs-Henseleitov pufer narednog sastava (u mmol/l): NaCl 112, KCl 5,9, CaCl22,0, MgCl21,2, NaH2PO41,2, NaHCO325, glukoza 11,5. Za merenje izometrijske napetosti, prstenasti segmenti, dužine 2 mm, montirani su u miograf komore sa malom posudom (Danish Myo Technology A/S, Danska) pomoću dve volframske žice pričvršćene za otvore za montiranje. Jedan otvor za montiranje pričvršćen je na mikrometar, omogućavajući kontrolu obima posude. Drugi otvor za montiranje je pričvršćen na pretvarač sile za merenje razvoja napetosti. Čitav preparat se čuva u komori sa slanim fiziološkim rastvorom na 37°C, penušan sa kiseonikom. Posle 30 min perioda ravnoteže, posude se istežu do optimalnog prečnika lumena za razvoj aktivne napetosti koji se određuje na osnovu odnosa zategnutosti unutrašnjeg obima i zida. Unutrašnji obim je podešen na 90% onoga što bi posude imale da su izložene pasivnoj napetosti ekvivalentnoj onoj koja nastaje transmuralnim pritiskom od 100 mmHg.
[0287] Posle toga, posude se operu tri puta sa Krebs-Henseleitovim puferom i ostave da se uravnoteže tokom 30 minuta. Kontraktilnost se zatim ispituje dvostrukim izlaganjem visokom K<+>rastvori (50 mmol/l KCl). Posle pranja sa Krebs-Henseleitovim puferom, posude se unapred kontraktuju pomoću 1 nmol/l Arg-vazopresina. Nakon uspostavljanja stabilne kontrakcije, konstruiše se kriva kumulativnog odgovora doze ispitivanog jedinjenja.
Stabilizovana kontrakcija indukovana Arg-vazopresinom definiše se kao 100% napetost. Opuštenost se izražava u procentima napetosti.
B-6. In vivo test za otkrivanje kardiovaskularnih efekata: merenje krvnog pritiska kod anesteziranih pacova (model ‘izazivanja‘ vazopresina)
[0288] Muški Sprague-Dawley pacovi (250-350 g telesne težine) koriste se pod injekcijom ketamin/ksilazin/pentobarbital anestezije. Polietilenske epruvete (PE-50, Intramedic®), prethodno napunjene izotoničnim rastvorom natrijum hlorida koji sadrži heparin (500 IU/ml), uvode se u vratnu venu i femoralnu venu, a zatim se vezuju. Arg-vazopresin (SIGMA) se injektira putem jednog venskog pristupa uz pomoć šprica; primenjuje se ispitivana supstanca putem drugog venskog pristupa. Za određivanje sistolnog krvnog pritiska, kateter pritiska (Millar SPR-3202F) vezan je u karotidnu arteriju. Arterijski kateter je povezan sa pretvaračem pritiska koji svoje signale šalje na računar za snimanje opremljen odgovarajućim softverom za snimanje. U tipičnom eksperimentu, eksperimentalnoj životinji primenjuju se 3-4 uzastopne bolus injekcije u intervalima od 10-15 min sa definisanom količinom Argvazopresina (30 ng/kg) u izotoničnom rastvoru natrijum hlorida. Kada krvni pritisak ponovo dostigne početni nivo, ispitivana supstanca se primenjuje u bolusu, uz naknadnu kontinuiranu infuziju, u pogodnom rastvaraču. Posle toga, u određenim intervalima (10-15 minuta), ponovo se primenjuje ista količina Arg-vazopresina kao na početku. Na osnovu vrednosti krvnog pritiska, utvrđuje se u kojoj meri se ispitivana supstanca suprotstavlja hipertenzivnom dejstvu Arg-vazopresina. Kontrolne životinje dobijaju samo rastvarač umesto ispitivane supstance.
[0289] Nakon intravenske primene, jedinjenja pronalaska, u poređenju sa kontrolama rastvarača, dovode do inhibicije povećanja krvnog pritiska izazvanog Arg-vazopresinom. B.-7. In vivo test za detektovanje zaštitnih bubrežnih efekata: Model akutne ishemije/reperfuzione povrede kod glodara
[0290] Laboratorijski uzgajani mužjaci miševa C57B1/6J stari 6-8 nedelja dobijaju se od Taconic Biosciences, i mužjaci 6-8 nedelja starih Sprague Dawley® pacova dobijaju se od Charles River. I pacovi i miševi se održavaju u standardnim laboratorijskim uslovima, tokom 12-časovnih ciklusa svetlo-tamno, sa pristupom normalnoj hrani i pitkoj vodi na libitumu. Za model ishemije reperfuzione povrede koristi se ukupno 10-12 pacova ili miševa u svakoj kontrolnoj i eksperimentalnoj grupi.
[0291] Životinje se anesteziraju kontinuiranim inhalacijskim izofluranom. Desna
4
nefrektomija se izvodi rezom desnog boka 7 dana pre ishemijskih postupaka u kontralateralnim bubrezima. Za ishemiju bubrega napravljen je rez na levom boku. Bubrežni sudovi su izloženi disekcijom levog boka bubrega. Netraumatične vaskularne stezaljke koriste se za zaustavljanje protoka krvi (arterija i vena) tokom 45 minuta (pacovi) ili 25 minuta (miševi) ishemije. Reperfuzija se uspostavlja uklanjanjem stezaljki.
[0292] Trbušni zid (mišićni sloj i koža) zatvoren je sa 5.0 polipropilenskih šavova.
Temgesic® (Buprenorfin, 0,025 mg/kg s.c.) primenjuje se kao analgetik.
[0293] Urin svake životinje sakuplja se u metaboličkim kavezima tokom noći pre žrtvovanja na 24 sata nakon ishemije. Nakon žrtvovanja, uzorci krvi uzimaju se u terminalnoj anesteziji. Nakon centrifugiranja uzoraka krvi, izoluje se serum. Kreatinin u serumu i urea u serumu mere se kliničkim biohemijskim analizatorom (Pentra 400). Za procenu biomarkera povrede bubrega u serumu i urinu (lipokalin povezan sa neutrofilnom želatinazom [NGAL], molekul povrede bubrega-1 [KIM-1] i Osteopontin) ELlSA se izvode prema protokolu proizvođača. I urin kreatinin i albumin se mere kako bi se utvrdio albumin/kreatinin odnos.
[0294] Ukupna RNK je izolovana iz bubrega. Levi bubrezi su brzo zamrznuti u tečnom azotu prilikom žrtvovanja. Zatim se tkivo bubrega homogenizuje i dobije se RNK. Ukupna RNK se transkribuje u cDNK. Korišćenjem TaqMan PCR u realnom vremenu analizira se eksprimiranje NGAL bubrega, Osteopontina, KIM-1, Nefrina i Podocina u celom bubrežnom tkivu.
[0295] Razlike među grupama analiziraju se pomoću jednosmernog ANOVA sa Dunnettovim korekcijama za višestruka poređenja. Statistički značaj je definisan kao p < 0,05. Sve statističke analize se izvode pomoću GraphPad Prism 6.
B-8. In vivo test za detektovanje kardiovaskularnih efekata: hemodinamička ispitivanja kod anesteziranih pasa
[0296] Muški bigl psi (Beagle, Marshall BioResources, SAD) sa težinom između 10 i 15 kg anesteziraju se pentobarbitalom (30 mg/kg iv, Narcoren®, Merial, Nemačka) za hirurške intervencije i hemodinamička i funkcionalna završna ispitivanja. Pankuroniumbromid (Pancuronium Inresa, Inresa, Germany, 2-4 mg/životinja i.v.) dodatno služi kao relaksant mišića. Psi su intubirani i ventilirani smešom kiseonika/ambijentalnog vazduha (30/70%), oko 2,5-4 L/min. Ventilacija se odvija pomoću ventilatora od GE Healthcare (Avance, Nemačka) i nadgleda se pomoću analizatora ugljen dioksida (-Datex Ohmeda). Anestezija se održava kontinuiranom infuzijom pentobarbitala (50 µg/kg/min); fentanil se koristi kao analgetik (10 µg/kg/h).
[0297] U pripremnim intervencijama, psi su opremljeni srčanim pejsmejkerom. Na početku eksperimenta, srčani pejsmejker od Biotronika (Logos®, Nemačka) ugrađuje se u subkutani džep kože i dovodi se u dodir sa srcem putem elektrode pejsmejkera (Siello S60®, Biotronik, Nemačka) koja prolazi kroz spoljnu vratnu venu., sa osvetljenjem, u desnu komoru.
[0298] Nakon toga uređaji se uklanjaju i pas se spontano budi iz anestezije. Nakon narednih 7 dana, gore opisani pejsmejker se aktivira i srce se stimuliše frekvencijom od 220 otkucaja u minuti.
[0299] Eksperimenti za ispitivanje lekova odvijaju se 28 dana nakon početka stimulacije pejsmejkera, koristeći naredne instrumente:
• Uvođenje katetera u bešiku radi oslobađanja bešike i za merenje protoka urina • Pričvršćivanje elektrokardiografije (EKG) dovodi do ekstremiteta za EKG merenje • Uvođenje omotača ispunjenog rastvorom natrijum hlorida u femoralnu arteriju. Ova cev je povezana sa senzorom pritiska (Braun Melsungen, Melsungen, Nemačka) za merenje sistemskog krvnog pritiska
• Uvođenje Millar Tip katetera (tip 350 PC, Millar Instruments, Houston, SAD) kroz otvor osiguran u karotidnoj arteriji, za merenje srčane hemodinamike.
• Uvođenje Swan-Ganz katetera (CCOmbo 7.5F, Edwards, Irvine, SAD) preko vratne vene u plućnu arteriju, za merenje srčanog izlaza, zasićenja kiseonikom, plućnih arterijskih pritisaka i centralnog venskog pritiska
• Postavljanje venskog katetera u cefaličnu venu, za infuziju pentobarbitala, za nadoknađivanje tečnosti i za uzimanje uzoraka krvi (određivanje nivoa supstance u plazmi ili drugih kliničkih vrednosti u krvi)
• Postavljanje venskog katetera u safensku venu, za infuziju fentanila i za primenu supstance
• Infuzija vazopresina (Sigma) sa rastućom dozom, do doze od 4 mU/kg/min. Zatim se farmakološke supstance ispituju sa ovom dozom.
[0300] Primarni signali se pojačavaju ako je potrebno (ACQ7700, Data Sciences International, SAD ili Edwards-Vigilance-Monitor, Edwards, Irvine, SAD) i potom unose u Ponemah sistem (Data Sciences International, SAD) radi procene. Signali se neprekidno snimaju tokom eksperimentalnog perioda, i dalje se obrađuju digitalno pomoću navedenog softvera i uprosečuju na 30 sekundi.
B-9. Određivanje farmakokinetičkih parametara nakon intravenske i oralne primene [0301] Farmakokinetički parametri jedinjenja prema pronalasku određeni su kod mužjaka C57bl6 miševa, mužjaka Wistar pacova, ženki bigl pasa i ženki cinomolgus majmuna.
Intravenska primena u slučaju miševa i pacova vrši se pomoću formulacije plazme/DMSO specifične za vrstu, a u slučaju pasa i majmuna pomoću vode/PEG400/etanola. Kod svih vrsta, oralna primena rastvorene supstance se vrši putem sonde, na osnovu formulacije voda/PEG400/etanol. Uzimanje krvi kod pacova pojednostavljeno je umetanjem silikonskog katetera u desnu stranu Vena jugularis externa pre primene supstance. Operacija se izvodi najmanje jedan dan pre eksperimenta sa izofluran anestezijom i primenom analgetika (atropin/rimadil (3/1) 0,1 ml s.c.). Krv se uzima (obično u najmanje 10 vremenskih tačaka) u vremenskom periodu koji uključuje krajnje vremenske tačke od najmanje 24 do najviše 72 sata nakon primene supstance. Kada se krv uzme, ona se prenosi u heparinizovane epruvete. Tada se krvna plazma dobija centrifugiranjem i po želji se čuva na -20°C do dalje obrade.
[0302] Interni standard (koji takođe može biti hemijski nepovezana supstanca) dodaje se uzorcima jedinjenja prema pronalasku, kalibracionim uzorcima i kvalifikatorima, i sledi precipitaciju proteina pomoću viška acetonitrila. Dodavanje puferskog rastvora koji se podudara sa LC uslovima, i naknadno vrtloženje, prati centrifugiranje na 1000 g. Supernatant se analizira pomoću LC-MS/MS koristeći C18 ili bifenil reverzno-fazne kolone i promenljive smeše pokretnih faza. Supstance su kvantifikovane preko visina vrhova ili površina iz ekstrahovanih jonskih hromatograma specifičnih izabranih eksperimenata za praćenje jona.
[0303] Utvrđeni grafikoni koncentracije u plazmi/vremena koriste se za izračunavanje farmakokinetičkih parametara kao što su AUC (površina ispod krive), Cmax(maksimalna koncentracija), t1/2(terminalni poluživot), F (bioraspoloživost), MRT (srednje vreme boravka) i CL (klirens), koristeći validirani program farmakokinetičkog proračuna.
[0304] S obzirom da se kvantifikacija supstance vrši u plazmi, neophodno je odrediti distribuciju supstance u krvi/plazmi kako bi se farmakokinetski parametri mogli prilagoditi u skladu s tim. U tu svrhu, definisana količina supstance se inkubira u heparinizovanoj celokupnoj krvi dotične vrste u smeši za valjanje tokom 20 minuta. Posle centrifugiranja na 1000 g, koncentracija u plazmi se meri (pomoću LC-MS/MS; pogledati gore) i određuje izračunavanjem odnosa koncentracije u celoj krvi prema koncentraciji u plazmi (Ckrv/Cplazmavrednost).
B-10. Studija metabolizma
[0305] Kako bi se utvrdio metabolički profil jedinjenja prema pronalasku, ona se inkubiraju sa rekombinantnim enzimima ljudskog citokroma P450 (CYP), mikrozomima jetre ili primarnim svežim hepatocitima različitih životinjskih vrsta (npr. pacovi, psi, majmuni), a takođe i ljudskog porekla, kako bi se dobili i uporedili podaci o značajno kompletnom metabolizmu jetre faze I i II, i o enzimima koji učestvuju u metabolizmu.
[0306] Jedinjenja prema pronalasku su inkubirana sa koncentracijom od oko 0,1-10 µM. U tu svrhu pripremljeni su osnovni rastvori jedinjenja prema pronalasku koja imaju koncentraciju 0,01-1 mM u acetonitrilu, a zatim su pipetirani sa razblaženjem 1:100 u smešu za inkubaciju. Mikrozomi jetre i rekombinantni enzimi su inkubirani na 37°C u 50 mM puferu kalijum fosfata pH 7,4, sa i bez sistema za proizvodnju nikotinamid adenin dinukleotid fosfata (NADPH) koji se sastoji od 1 mM NADP<+>, 10 mM glukoza 6-fosfata i 1 jedinice glukoza 6-fosfat dehidrogenaze. Primarni hepatociti su inkubirani u suspenziji u Williams E medijumu, takođe na 37°C. Posle vremena inkubacije od 0 - 4 sata, smeše za inkubaciju zaustavljene su acetonitrilom (krajnja koncentracija oko 30%), i protein je centrifugiran na oko 15000 x g. Tako zaustavljeni uzorci su ili direktno analizirani ili čuvani na -20°C do analize.
[0307] Analiza se vrši pomoću tečne hromatografije visokih performansi sa ultraljubičastom i masenom spektrometrijom (HPLC-UV-MS/MS). U tu svrhu, supernatanti inkubacionih uzoraka se hromatografišu sa odgovarajućim C18 kolonama reverzne faze i promenljivim smešama pokretne faze acetonitrila i 10 mM vodenog rastvora amonijum-formata ili 0,05% mravlje kiseline. UV hromatogrami zajedno sa podacima masene spektrometrije služe za identifikaciju, strukturno razjašnjenje i kvantitativnu procenu metabolita i za kvantitativnu metaboličku procenu jedinjenja prema pronalasku u smešama za inkubaciju.
B-11. Ispitivanje permeabilnosti Caco-2
[0308] Permeabilnost ispitivane supstance može se utvrditi uz pomoć Caco-2 ćelijske linije, uspostavljene u in vitro modelu za predviđanje permeabilnosti na gastrointestinalnoj barijeri (Artursson, P. and Karlsson, J. (1991). Correlation between oral drug absorption in humans and apparent drug permeability coefficients in human intestinal epithelial (Caco-2) cells. Biochem. Biophys.175 (3), 880-885). CaCo-2 ćelije (ACC br.169, DSMZ, Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen, Braunschweig, Nemačka) seju se u ploče sa 24 komorice sa umetkom i kultivišu se 14 do 16 dana. Za studije permeabilnosti, ispitivana supstanca se rastvara u DMSO i razblažava transportnim puferom (Henkov puferisani slani rastvor, Gibco/Invitrogen, sa 19,9 mM glukoze i 9,8 mM HEPES) do konačne ispitivane koncentracije. Kako bi se utvrdila permeabilnost od apikalne do bazolateralne strane (PappA-B) ispitivane supstance, rastvor koji sadrži ispitivanu supstancu postavlja se na apikalnu stranu monosloja Caco-2 ćelije, a transportni pufer na bazolateralnu stranu. Kako bi se utvrdila permeabilnost od bazolateralne do apikalne strane (PappB-A) ispitivane supstance, rastvor koji sadrži ispitivanu supstancu stavlja se na bazolateralnu stranu monosloja Caco-2 ćelija, a transportni pufer na apikalnu stranu. Na početku eksperimenta uzimaju se uzorci iz odgovarajućeg odeljka za donore kako bi se naknadno izračunao bilans mase. Posle dvočasovne inkubacije na 37°C, uzimaju se uzorci iz dva odeljka. Uzorci se analiziraju pomoću LC-MS/MS, i koeficijenti primećene permeabilnosti (Papp) se izračunavaju. Za svaki ćelijski monosloj, određena je Lucifer Yellow permeabilnost kako bi se osigurao integritet ćelijskog sloja. U svakom izvođenju ispitivanja, permeabilnost atenolola (marker za malu permeabilnost) i sulfasalazina (marker za aktivno izlučivanje) takođe se određuju kao kontrola kvaliteta.
C) Radni primeri farmaceutskih sastava
[0309] Supstance prema pronalasku mogu se pretvoriti u farmaceutske preparate na naredni način:
Tableta:
Sastav:
[0310] 100 mg jedinjenja iz Primera 1, 50 mg laktoze (monohidrat), 50 mg kukuruznog skroba, 10 mg polivinilpirolidona (PVP 25) (od BASF, Nemačka) i 2 mg magnezijum stearata.
[0311] Težina tablete 212 mg. Prečnik 8 mm, radijus zakrivljenosti 12 mm.
Proizvodnja:
[0312] Smeša jedinjenja iz Primera 1, laktoze i skroba granulira se sa 5% rastvorom snage (m/m) od PVP u vodi. Posle sušenja, granule se mešaju sa magnezijum stearatom tokom 5 minuta. Ova smeša se kompresuje u konvencionalnoj presi za tabletiranje (pogledati oblik tablete gore).
Oralna suspenzija:
Sastav:
[0313] 1000 mg jedinjenja iz Primera 1, 1000 mg etanola (96%), 400 mg rodigela (ksantanska guma) (od FMC, SAD) i 99 g vode.
[0314] 10 ml oralne suspenzije odgovara jednoj dozi od 100 mg jedinjenja pronalaska. Proizvodnja:
[0315] Rodigel se suspenduje u etanolu, i suspenziji se dodaje jedinjenje iz Primera 1. Voda se dodaje uz mešanje. Smeša se meša oko 6 sati dok se ne završi bubrenje Rodigela.
Sterilni i.v. rastvor:
[0316] Jedinjenje prema pronalasku se rastvara u koncentraciji ispod zasićene rastvorljivosti u fiziološki prihvatljivom rastvaraču (na primer izotonični rastvor natrijum hlorida, rastvor glukoze 5% i/ili rastvor PEG 40030%). Rastvor se steriliše filtracijom i puni u sterilne kontejnere za injekcije bez pirogena.

Claims (12)

  1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje opšte formule (I)
    gde R<1>predstavlja grupu formule
    gde #<1>predstavlja tačku vezivanja za atom azota, Ar predstavlja grupu formule
    gde #<2>predstavlja tačku vezivanja za atom azota, R<2A>predstavlja grupu izabranu od atoma hlora, atoma broma, trifluorometila, trifluorometoksija, etoksikarbonila i -C(=O)NH2, R<2B>predstavlja grupu izabranu od atoma hlora, trifluorometila, i etoksikarbonila, ili njegova farmaceutski prihvatljivu so, hidrat i/ili solvat.
  2. 2. Jedinjenje opšte formule (I) prema patentnom zahtevu 1, gde R<1>predstavlja grupu formule
    gde #<1>predstavlja tačku vezivanja za atom azota, Ar predstavlja grupu formule
    gde #<2>predstavlja tačku vezivanja za atom azota, R<2A>predstavlja grupu izabranu od atoma hlora, atoma broma, trifluorometila, trifluorometoksija, etoksikarbonila i -C(=O)NH2, ili njegova farmaceutski prihvatljivu so, hidrat i/ili solvat.
  3. 3. Jedinjenje opšte formule (I) prema patentnom zahtevu 1 ili 2, gde R<1>predstavlja grupu formule
    gde #<1>predstavlja tačku vezivanja za atom azota, Ar predstavlja grupu formule
    gde #<2>predstavlja tačku vezivanja za atom azota, R<2A>predstavlja grupu izabranu od atoma hlora, trifluorometila i trifluorometoksija, ili njegova farmaceutski prihvatljivu so, hidrat i/ili solvat.
  4. 4. Postupak za pripremu jedinjenja opšte formule (I) prema bilo kom patentnom zahtevu od 1 do 3, gde navedeni postupak sadrži korak [A] omogućavanja intermedijer jedinjenju formule (II):
    gde R<1>je kako je definisano za jedinjenje opšte formule (I) prema bilo kom patentnom zahtevu od 1 do 3, R<3>predstavlja (C1-C4)-alkil grupu, naročito metil grupu, da reaguje u prvom koraku u prisustvu baze, i opciono soli bakra, sa jedinjenjem opšte formule (III):
    gde R<4>predstavlja (C1-C4)-alkil grupu, naročito metil grupu, kako bi se dobilo intermedijer jedinjenje, kom je zatim omogućeno da reaguje u prisustvu baze u drugom koraku sa jedinjenjem hidrazina opšte formule (IV) ili sa njegovom odgovarajućom soli
    gde je Ar kako je definisano za jedinjenje opšte formule (I) prema bilo kom patentnom zahtevu od 1 do 3, čime se dobija jedinjenje opšte formule (V) :
    gde R<1>i Ar su kako je definisano za jedinjenje opšte formule (I) prema bilo kom patentnom zahtevu od 1 do 3, i R<4>predstavlja (C1-C4)-alkil grupu, naročito metil grupu, praćeno narednim korakom [B] omogućavanja jedinjenju formule (V) koje je dobijeno u koraku [A] da reaguje sa amonijakom čime se dobija jedinjenje opšte formule (I):
    gde R<1>i Ar su kako je definisano za jedinjenje opšte formule (I) prema bilo kom patentnom zahtevu od 1 do 3, opciono praćeno korakom [C] konverzije alkohola opšte formule (I-A):
    gde je Ar kako je definisano za jedinjenje opšte formule (I) prema bilo kom patentnom zahtevu od 1 do 3, u keton opšte formule (I-B):
    gde je Ar kako je definisano za jedinjenje opšte formule (I) prema bilo kom patentnom zahtevu od 1 do 3, koristeći poznat postupke oksidacije, svaki [A], [B] i [C] je opciono praćen, gde je odgovarajuće, (i) razdvajanjem jedinjenja formule (I) dobijenih tako na svoje odgovarajuće enantiomere, i/ili (ii) konverzijom jedinjenja formule (I) u svoje odgovarajuće hidrat, solvat, soli i/ili hidrat ili solvat soli tretiranjem sa odgovarajućim rastvaračima i/ili kiselinama ili bazama.
  5. 5. Jedinjenje kako je definisano u bilo kom patentnom zahtevu od 1 do 3 za upotrebu u tretmanu i/ili prevenciji bolesti.
  6. 6. Jedinjenje kako je definisano u bilo kom patentnom zahtevu od 1 do 3, za upotrebu u postupku za tretman i/ili prevenciju akutnih i hroničnih bubrežnih bolesti, uključujući dijabetičnu nefropatiju, akutnu i hroničnu srčanu insuficijenciju, preeklampsiju, perifernu vaskularnu bolest (PVB), koronarnu mikrovaskularnu disfunkciju (KMD), Rejnoov sindrom i dismenoreju.
  7. 7. Upotreba jedinjenja prema bilo kom patentnom zahtevu od 1 do 3 za proizvodnju farmaceutskog sastava za tretman i/ili prevenciju akutnih i hroničnih bubrežnih bolesti, uključujući dijabetičnu nefropatiju, akutnu i hroničnu srčanu insuficijenciju, preeklampsiju, perifernu vaskularnu bolest (PVB), koronarna mikrovaskularna disfunkcija (KMD), Rejnoov sindrom i dismenoreja.
  8. 8. Farmaceutski sastav koja sadrži jedinjenje kako je definisano u bilo kom patentnom zahtevu od 1 do 3, i jedan ili više farmaceutski prihvatljivih ekscipijenasa.
  9. 9. Farmaceutski sastav prema patentnom zahtevu 8, koji sadrži jedan ili više prvih aktivnih sastojaka jedinjenja opšte formule (I) prema bilo kom patentnom zahtevu od 1 do 4, i jedan ili više dodatnih aktivnih sastojaka, posebno jedan ili više dodatnih terapeutskih agenasa izabranih iz grupe koju čine diuretici, angiotenzin All antagonisti, ACE inhibitori, blokatori beta receptora, antagonisti mineralokortikoidnih receptora, antidijabetici, organski nitrati i NO donori, aktivatori i stimulatori rastvorljive gvanilat ciklaze (sGC), protivupalni agensi, imunosupresivni agensi, veznici fosfata i/ili jedinjenja koja moduliraju metabolizam vitamina D.
  10. 10. Farmaceutski sastav kako je definisan u patentnom zahtevu 8 ili 9 za upotrebu u tretmanu i/ili prevenciji akutnih i hroničnih bubrežnih bolesti, uključujući dijabetičnu nefropatiju, akutnu i hroničnu srčanu insuficijenciju, preeklampsiju, perifernu vaskularnu bolest (PVB), koronarnu mikrovaskularnu disfunkciju (KMD), Rejnoov sindrom i dismenoreju.
  11. 11. 3-({3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}metil)-1-[3-(trifluorometil)piridin-2-il]-1H-1,2,4-triazol-5-karboksamid prema patentnom zahtevu 1, koji ima narednu formulu
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, hidrat i/ili solvat.
  12. 12. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 11, gde jedinjenje jeste 3-({3-(4-hlorofenil)-5-okso-4-[(2S)-3,3,3-trifluoro-2-hidroksipropil]-4,5-dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-il}metil)-1-[3-(trifluorometil)piridin-2-il]-1H-1,2,4-triazol-5-karboksamid, naredne formule
    Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Beograd, Kneginje Ljubice 5
RS20210517A 2016-05-03 2017-05-02 Amidno supstituisani derivati piridiniltriazola i njihove primene RS61771B1 (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP16168165 2016-05-03
PCT/EP2017/060356 WO2017191102A1 (en) 2016-05-03 2017-05-02 Amide-substituted pyridinyltriazole derivatives and uses thereof
EP17720147.2A EP3452463B1 (en) 2016-05-03 2017-05-02 Amide-substituted pyridinyltriazole derivatives and uses thereof

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS61771B1 true RS61771B1 (sr) 2021-05-31

Family

ID=55910850

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20210517A RS61771B1 (sr) 2016-05-03 2017-05-02 Amidno supstituisani derivati piridiniltriazola i njihove primene

Country Status (42)

Country Link
US (4) US9988367B2 (sr)
EP (1) EP3452463B1 (sr)
JP (1) JP6932140B2 (sr)
KR (1) KR20190003655A (sr)
CN (2) CN109415347B (sr)
AR (1) AR108262A1 (sr)
AU (1) AU2017259870B2 (sr)
BR (1) BR112018072542A2 (sr)
CA (1) CA3022749A1 (sr)
CL (1) CL2018003105A1 (sr)
CO (1) CO2018011933A2 (sr)
CR (1) CR20180522A (sr)
CU (1) CU24567B1 (sr)
CY (1) CY1124084T1 (sr)
DK (1) DK3452463T3 (sr)
DO (1) DOP2018000240A (sr)
EA (1) EA035596B1 (sr)
EC (1) ECSP18081881A (sr)
ES (1) ES2866109T3 (sr)
GE (2) GEP20207158B (sr)
HR (1) HRP20210648T1 (sr)
HU (1) HUE053908T2 (sr)
IL (1) IL262557B (sr)
JO (1) JOP20170105B1 (sr)
LT (1) LT3452463T (sr)
MA (1) MA44851B1 (sr)
MX (1) MX381787B (sr)
NI (1) NI201800115A (sr)
PE (1) PE20190116A1 (sr)
PH (1) PH12018502268A1 (sr)
PL (1) PL3452463T3 (sr)
PT (1) PT3452463T (sr)
RS (1) RS61771B1 (sr)
SG (1) SG11201809752VA (sr)
SI (1) SI3452463T1 (sr)
SV (1) SV2018005771A (sr)
TN (1) TN2018000368A1 (sr)
TW (1) TWI772295B (sr)
UA (1) UA123791C2 (sr)
UY (1) UY37220A (sr)
WO (1) WO2017191102A1 (sr)
ZA (1) ZA201808131B (sr)

Families Citing this family (24)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9988367B2 (en) * 2016-05-03 2018-06-05 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Amide-substituted pyridinyltriazole derivatives and uses thereof
WO2017191115A1 (en) * 2016-05-03 2017-11-09 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Oxoalkyl-substituted phenyltriazole derivatives and uses thereof
PL3458443T3 (pl) 2016-05-03 2021-03-08 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Aromatyczne pochodne sulfonamidowe
JOP20170103A1 (ar) * 2016-05-03 2017-11-03 Bayer Pharma AG عملية لتحضير مشتقات 1-فنيل-1، 2، 4-تريازول مستبدلة بـ 5-هيدروكسي ألكيل
US10893352B2 (en) * 2016-08-24 2021-01-12 Matthew Hawkes Programmable interactive stereo headphones with tap functionality and network connectivity
US10954197B2 (en) * 2017-03-08 2021-03-23 Yogee's Bioinnovations Private Limited Cathepsin-D and angiogenesis inhibitors and compositions thereof for treating breast cancer
AU2018313853A1 (en) 2017-08-08 2020-01-02 Fresenius Medical Care Holdings, Inc. Systems and methods for treating and estimating progression of chronic kidney disease
US20210253557A1 (en) 2017-10-24 2021-08-19 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Substituted triazole derivatives and uses thereof
WO2019081306A1 (en) 2017-10-24 2019-05-02 Bayer Pharma Aktiengesellschaft SUBSTITUTED TRIAZOLE DERIVATIVES AND USES THEREOF
WO2019081303A1 (en) 2017-10-24 2019-05-02 Bayer Pharma Aktiengesellschaft SUBSTITUTED TRIAZOLE DERIVATIVES AND USES THEREOF
EP3700900A1 (en) 2017-10-24 2020-09-02 Bayer Aktiengesellschaft Substituted triazole derivatives and uses thereof
EP3700896A1 (en) 2017-10-24 2020-09-02 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Amine substituted triazole derivatives and uses thereof
PT3700913T (pt) 2017-10-24 2022-01-31 Bayer Pharma AG Profármacos de derivados de triazol substituído e utilizações dos mesmos
WO2019081291A1 (en) 2017-10-24 2019-05-02 Bayer Aktiengesellschaft PRODRUGS OF SUBSTITUTED TRIAZOLE DERIVATIVES AND USES THEREOF
TW201938171A (zh) 2017-12-15 2019-10-01 匈牙利商羅特格登公司 作為血管升壓素Ｖ１ａ受體拮抗劑之三環化合物
HU231206B1 (hu) 2017-12-15 2021-10-28 Richter Gedeon Nyrt. Triazolobenzazepinek
US11020351B2 (en) * 2018-03-26 2021-06-01 Hetero Labs Limited Stable bilayer tablet compositions
US20210016350A1 (en) * 2018-04-10 2021-01-21 Hewlett-Packard Development Company, L.P. Preheat dyed build materials with preheating sources
WO2021132010A1 (ja) * 2019-12-24 2021-07-01 東京エレクトロン株式会社 成膜方法及び成膜システム
US12569481B2 (en) 2020-06-12 2026-03-10 Vanderbilt University Methods of treatment for gastrointestinal motility disorders
WO2021259852A1 (en) 2020-06-25 2021-12-30 Bayer Aktiengesellschaft Process for preparing 5-(alkoxycarbonyl)-and 5-(carboxamide)-1-aryl-1,2,4-triazole derivatives
WO2022112213A1 (en) 2020-11-30 2022-06-02 Bayer Aktiengesellschaft Crystalline forms of 3-[[3-(4-chlorophenyl)-5-oxo-4-((2s)-3,3,3-trifluoro- 2-hydroxypropyl)-4,5-dihydro-1h-1,2,4-triazol-1-yl]methyl]-1-[3- (trifluoromethyl)pyridin-2-yl]-1h-1,2,4-triazole-5-carboxamide
WO2024118667A1 (en) * 2022-11-29 2024-06-06 The United States Government As Represented By The Department Of Veterans Affairs Eif4a1 inhibitors with antitumor activity
WO2026035773A1 (en) * 2024-08-06 2026-02-12 Retex Pharmaceuticals, Inc. Vasopressin receptor 2 modulators and methods of use thereof

Family Cites Families (60)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3042466A1 (de) 1980-11-11 1982-06-16 A. Nattermann & Cie GmbH, 5000 Köln N-substituierte (omega) -(2-oxo-4-imidazolin-l-yl)-alkansaeure-derivate, verfahren zu ihrer herstellung und diese enthaltende pharmazeutische praeparate
US5468448A (en) 1989-12-28 1995-11-21 Ciba-Geigy Corporation Peroxide disinfection method and devices therefor
DE4107857A1 (de) 1991-03-12 1992-09-17 Thomae Gmbh Dr K Cyclische harnstoffderivate, diese verbindungen enthaltende arzneimittel und verfahren zu ihrer herstellung
CA2109524A1 (en) 1991-05-10 1992-11-11 Prasun K. Chakravarty Acidic aralkyl triazole derivatives active as angiotensin ii antagonists
US5326776A (en) 1992-03-02 1994-07-05 Abbott Laboratories Angiotensin II receptor antagonists
SK94393A3 (en) 1992-09-11 1994-08-10 Thomae Gmbh Dr K Cyclic derivatives of urea, process for their production and their pharmaceutical agents with the content of those
GB9311920D0 (en) 1993-06-09 1993-07-28 Pfizer Ltd Therapeutic agents
US6844005B2 (en) 2002-02-25 2005-01-18 Trutek Corp Electrostatically charged nasal application product with increased strength
FR2708608B1 (fr) 1993-07-30 1995-10-27 Sanofi Sa Dérivés de N-sulfonylbenzimidazolone, leur préparation, les compositions pharmaceutiques en contenant.
US5897858A (en) 1994-02-03 1999-04-27 Schering-Plough Healthcare Products, Inc. Nasal spray compositions exhibiting increased retention in the nasal cavity
US20010020100A1 (en) 1994-06-14 2001-09-06 G.D. Searle & Co. N-substituted-1, 2, 4-triazolone compounds for treatment of cardiovascular disorders
EA003095B1 (ru) 1997-12-17 2002-12-26 Мерк Энд Ко., Инк. Антагонисты рецепторов интегринов
DE19816882A1 (de) 1998-04-17 1999-10-21 Boehringer Ingelheim Pharma Triazolone mit neuroprotektiver Wirkung
JP2002521373A (ja) 1998-07-24 2002-07-16 バイエル アクチェンゲゼルシャフト 置換されたベンゾイルシクロヘキサンジオン類
DE19834044A1 (de) 1998-07-29 2000-02-03 Bayer Ag Neue substituierte Pyrazolderivate
DE19834047A1 (de) 1998-07-29 2000-02-03 Bayer Ag Substituierte Pyrazolderivate
DE19914140A1 (de) 1999-03-27 2000-09-28 Bayer Ag Substituierte Benzoylpyrazole
PL350884A1 (en) 1999-04-01 2003-02-10 Pfizer Prod Inc Aminopyrimidines as sorbitol dehydrogenase inhibitors
DE19920791A1 (de) 1999-05-06 2000-11-09 Bayer Ag Substituierte Benzoylisoxazole
DE19921424A1 (de) 1999-05-08 2000-11-09 Bayer Ag Substituierte Benzoylketone
DE19929348A1 (de) 1999-06-26 2000-12-28 Bayer Ag Verfahren zur Herstellung von 2-Heterocyclylmethyl-benzoesäurederivaten
US6531142B1 (en) 1999-08-18 2003-03-11 The Procter & Gamble Company Stable, electrostatically sprayable topical compositions
DE19943636A1 (de) 1999-09-13 2001-03-15 Bayer Ag Neuartige Dicarbonsäurederivate mit pharmazeutischen Eigenschaften
DE19943634A1 (de) 1999-09-13 2001-04-12 Bayer Ag Neuartige Dicarbonsäurederivate mit pharmazeutischen Eigenschaften
DE19943639A1 (de) 1999-09-13 2001-03-15 Bayer Ag Dicarbonsäurederivate mit neuartigen pharmazeutischen Eigenschaften
DE19943635A1 (de) 1999-09-13 2001-03-15 Bayer Ag Neuartige Aminodicarbonsäurederivate mit pharmazeutischen Eigenschaften
AR027575A1 (es) 2000-03-06 2003-04-02 Bayer Ag Benzoilciclohexenonas substituidas
US7080644B2 (en) 2000-06-28 2006-07-25 Microdose Technologies, Inc. Packaging and delivery of pharmaceuticals and drugs
AR031176A1 (es) 2000-11-22 2003-09-10 Bayer Ag Nuevos derivados de pirazolpiridina sustituidos con piridina
WO2002066447A1 (en) 2001-02-21 2002-08-29 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. 4h-1,2,4-triazole-3(2h)-thione deratives as sphingomyelinase inhibitors
DE10110750A1 (de) 2001-03-07 2002-09-12 Bayer Ag Neuartige Aminodicarbonsäurederivate mit pharmazeutischen Eigenschaften
DE10110749A1 (de) 2001-03-07 2002-09-12 Bayer Ag Substituierte Aminodicarbonsäurederivate
US20040071757A1 (en) 2001-11-20 2004-04-15 David Rolf Inhalation antiviral patch
DE10220570A1 (de) 2002-05-08 2003-11-20 Bayer Ag Carbamat-substituierte Pyrazolopyridine
EP1606264B1 (en) 2003-03-14 2012-05-02 Merck Sharp & Dohme Corp. Monocyclic anilide spirohydantoin cgrp receptor antagonists
CA2571907A1 (en) 2003-06-27 2005-01-27 Berglin Corporation Of Washington Machine for precision low stress coring and slicing of apples and other soft-cored or pitted fruits
EA010132B1 (ru) 2003-12-22 2008-06-30 Пфайзер Инк. Производные триазола в качестве антагонистов вазопрессина
US20080139560A1 (en) 2004-03-08 2008-06-12 Scion Pharmaceuticals, Inc. Ion Channel Modulators
WO2005086836A2 (en) 2004-03-08 2005-09-22 Wyeth Ion channel modulators
CA2563963A1 (en) 2004-04-28 2005-11-10 Pfizer Inc. 3-heterocyclyl-4-phenyl-triazole derivatives as inhibitors of the vasopressin v1a receptor
EP1824831A2 (en) 2004-12-16 2007-08-29 Takeda San Diego, Inc. Histone deacetylase inhibitors
WO2006117657A1 (en) 2005-05-03 2006-11-09 Ranbaxy Laboratories Limited Triazolone derivatives as anti-inflammatory agents
DE102006024024A1 (de) 2006-05-23 2007-11-29 Bayer Healthcare Aktiengesellschaft Substituierte Arylimidazolone und -triazolone sowie ihre Verwendung
DE102008060967A1 (de) 2008-12-06 2010-06-10 Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft Substituierte Phenylsulfonyltriazolone und ihre Verwendung
DE102010001064A1 (de) 2009-03-18 2010-09-23 Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft Substituierte 2-Acetamido-5-Aryl-1,2,4-triazolone und deren Verwendung
DE102009013642A1 (de) 2009-03-18 2010-09-23 Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft Substituierte Phenylalaninderivate und deren Verwendung
DE102009028929A1 (de) 2009-08-27 2011-07-07 Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft, 13353 Heterocyclisch-substituierte 2-Acetamido-5-Aryl-1,2,4-triazolone und deren Verwendung
UA109650C2 (xx) * 2010-02-27 2015-09-25 Біс-арилзв'язані арилтриазолони та їх застосування
DE102010021637A1 (de) 2010-05-26 2011-12-01 Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft Substituierte 5-Fluor-1H-Pyrazolopyridine und ihre Verwendung
EA201390060A1 (ru) 2010-07-09 2013-07-30 Байер Интеллектуэль Проперти Гмбх Аннелированные пиримидины и триазины и их применение для лечения и/или профилактики сердечно-сосудистых заболеваний
DE102010040187A1 (de) 2010-09-02 2012-03-08 Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft Substituierte N-Phenethyl-triazolonacetamide und ihre Verwendung
DE102010040233A1 (de) 2010-09-03 2012-03-08 Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft Bicyclische Aza-Heterocyclen und ihre Verwendung
PL2623499T3 (pl) * 2010-10-01 2015-09-30 Taisho Pharmaceutical Co Ltd Pochodne 1,2,4-triazolonu
DE102010043379A1 (de) 2010-11-04 2012-05-10 Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft Substituierte 6-Fluor-1H-Pyrazolo[4,3-b]pyridine und ihre Verwendung
US8791162B2 (en) 2011-02-14 2014-07-29 Merck Sharp & Dohme Corp. Cathepsin cysteine protease inhibitors
WO2013138860A1 (en) 2012-03-22 2013-09-26 Biota Europe Limited Antibacterial compounds
SI3215498T1 (sl) 2014-11-03 2018-11-30 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Hidroksialkil-substituirani derivati feniltriazola in njihove uporabe
WO2017191115A1 (en) * 2016-05-03 2017-11-09 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Oxoalkyl-substituted phenyltriazole derivatives and uses thereof
JOP20170103A1 (ar) * 2016-05-03 2017-11-03 Bayer Pharma AG عملية لتحضير مشتقات 1-فنيل-1، 2، 4-تريازول مستبدلة بـ 5-هيدروكسي ألكيل
US9988367B2 (en) * 2016-05-03 2018-06-05 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Amide-substituted pyridinyltriazole derivatives and uses thereof

Also Published As

Publication number Publication date
CY1124084T1 (el) 2022-05-27
AU2017259870A1 (en) 2018-11-15
US10472348B2 (en) 2019-11-12
IL262557B (en) 2022-01-01
WO2017191102A1 (en) 2017-11-09
US20190144423A1 (en) 2019-05-16
HUE053908T2 (hu) 2021-07-28
PE20190116A1 (es) 2019-01-16
UA123791C2 (uk) 2021-06-02
SV2018005771A (es) 2019-01-04
CU20180134A7 (es) 2019-06-04
ES2866109T3 (es) 2021-10-19
CO2018011933A2 (es) 2018-11-22
PH12018502268A1 (en) 2019-07-15
MX381787B (es) 2025-03-13
KR20190003655A (ko) 2019-01-09
TWI772295B (zh) 2022-08-01
CR20180522A (es) 2019-01-15
GEAP202014945A (en) 2020-05-11
EA201892505A1 (ru) 2019-04-30
JOP20170105B1 (ar) 2022-03-15
US20200017473A1 (en) 2020-01-16
DOP2018000240A (es) 2019-03-15
CN109415347B (zh) 2021-05-07
SG11201809752VA (en) 2018-12-28
JP6932140B2 (ja) 2021-09-08
PT3452463T (pt) 2021-04-28
AU2017259870B2 (en) 2021-07-15
MA44851B1 (fr) 2021-09-30
SI3452463T1 (sl) 2021-07-30
TN2018000368A1 (en) 2020-06-15
CL2018003105A1 (es) 2019-02-15
EA035596B1 (ru) 2020-07-14
JP2019514945A (ja) 2019-06-06
IL262557A (en) 2018-12-31
US11091463B2 (en) 2021-08-17
DK3452463T3 (da) 2021-04-26
EP3452463A1 (en) 2019-03-13
US9988367B2 (en) 2018-06-05
CN113121504A (zh) 2021-07-16
EP3452463B1 (en) 2021-03-24
BR112018072542A2 (pt) 2019-03-26
MA44851A (fr) 2019-03-13
UY37220A (es) 2017-11-30
ECSP18081881A (es) 2018-11-30
PL3452463T3 (pl) 2021-08-09
US20180251447A1 (en) 2018-09-06
GEP20207158B (en) 2020-10-12
AR108262A1 (es) 2018-08-01
CN109415347A (zh) 2019-03-01
ZA201808131B (en) 2021-05-26
NI201800115A (es) 2019-03-14
LT3452463T (lt) 2021-04-26
HRP20210648T1 (hr) 2021-05-28
US20170320854A1 (en) 2017-11-09
MX2018013335A (es) 2019-05-09
CA3022749A1 (en) 2017-11-09
CU24567B1 (es) 2022-01-13
TW201806941A (zh) 2018-03-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11091463B2 (en) Amide-substituted pyridinyltriazole derivatives and uses thereof
EP3452470B1 (en) Amide-substituted phenyltriazole derivatives and uses thereof
US10525041B2 (en) Fluoroalkyl-substituted aryltriazole derivatives and uses thereof
US10526314B2 (en) Hydroxyalkyl-substituted heteroaryltriazole derivatives and uses thereof
WO2019081302A1 (en) SUBSTITUTED TRIAZOLE DERIVATIVES AND USES THEREOF
WO2019081291A1 (en) PRODRUGS OF SUBSTITUTED TRIAZOLE DERIVATIVES AND USES THEREOF
US11298367B2 (en) Prodrugs of substituted triazole derivatives and uses thereof
US11149023B2 (en) Substituted triazole derivatives and uses thereof
HK40005398B (zh) 酰胺取代的吡啶基三唑衍生物及其用途
HK40005398A (en) Amide-substituted pyridinyltriazole derivatives and uses thereof