RS61890B1

RS61890B1 - Derivati hromana, izohromana i dihidroizobenzofurana kao mglur2-negativni alosterni modulatori, kompozicije i njihova upotreba

Info

Publication number: RS61890B1
Application number: RS20210649A
Authority: RS
Inventors: Iyassu K Sebhat; Ashok Arasappan; Scott B Hoyt; Robert R Wilkening; Duane Demong
Original assignee: Merck Sharp & Dohme
Priority date: 2016-09-27
Filing date: 2017-09-25
Publication date: 2021-06-30
Also published as: EP3519416B1; CR20190147A; JOP20190058A1; ECSP19020742A; AR109714A1; MX392132B; LT3519416T; MD3519416T2; IL265366B; AU2020270468B2; US20190247374A1; US20210015800A1; AU2020270468A1; WO2018063955A1; US10335399B2; CA3037537A1; CN109983022B; CN109983022A; UA123687C2; GEP20217279B

Description

Pronalazak je usmeren na određene derivate hromana, izohromana i dihidroizobenzofurana, njihove soli, farmaceutske kompozicije koje ih sadrže i njihovu upotrebu u terapiji ljudskog tela. Utvrđeno je da jedinjenja prema pronalasku moduliraju metabotropni glutamatni receptor 2 (mGluR2), pa se stoga očekuje da budu korisna u lečenju Alzheimer-ove bolesti i drugih bolesti posredovanih preko mGluR2 receptora.

OSNOVA PRONALASKA

Poznato je da metabotropni glutamatni receptori sadrže jedno ili više alosteričnih mesta, što može promeniti afinitet sa kojim se glutamat i drugi metabotropni glutamatni (mGluR) ligandi vezuju za primarna vezujuća ili ortosterna mesta. Kako je ortosterno mesto vezivanja visoko očuvano između svih poznatih metabotropnih receptora glutamata, funkcionalna selektivnost se najbolje može postići alosteričnom interakcijom sa receptorom.

Pokazalo se da modulacija metabotropnog receptora glutamata 2 (mGluR2), koja prevladava na presinaptičkim nervnim krajevima u korteksu i hipokampusu i reguliše oslobađanje glavnog moždanog ekscitatornog neurotransmitera glutamata u ključnim neuronskim sinapsama, ima glavnu ulogu u kognitivnoj obradi. Smatra se da na neurodegenerativne bolesti i poremećaje koji utiču na kogniciju utiče prenos signala glutamata. Takve neurodegenerativne bolesti i poremećaji koji utiču na kogniciju uključuju (ali nisu ograničeni na) različite oblike demencije, uključujući demenciju Alzheimer-ovog tipa (Alzheimer-ova bolest), uključujući blagu, umerenu i tešku Alzheimer-ovu bolest, blago kognitivno oštećenje i druge. Takve bolesti i poremećaji mogu rezultirati u ili biti identifikovani manifestacijama kao što su progresivno oštećenje memorije, gubitak jezičkih sposobnosti i vizuelno-prostornih veština, poremećaji u ponašanju i drugi. Potencijal inhibicije mGluR2 za poboljšanje kognitivnih performansi pokazan je genetički i farmakološki u prekliničkim vrstama (Higgins et al., [2004], Neuropharmacology 46, 907-917). Dalje, inhibicija mGluR2/3 negativnim alosteričnim modulatorom pokazuje prekognitivne efekte kod ne-humanih primata (Goeldner et al., [2013], Neuropharmacology 64, 337-346). Slično tome, očekuje se da inhibicija mGluR2 negativnim alosteričnim modulatorima poboljša kogniciju i reverznu demenciju povezanu sa drugim poremećajima, kao što je šizofrenija (Marek [2010], Eur J Pharmacol 639, 81-90) i opšte blago kongenitivno oštećenje, jer se pokazalo da pojačavanje nishodne glutamatergičke signalizacije klinički poboljšava kogniciju (Linch et al.

[1997], Exp Neurol 145, 89-92). Iz ovih razloga se veruje da su inhibitori mGluR2 korisni u poboljšanju kognitivnih performansi povezanih sa različitim oblicima demencije, uključujući Alzheimer-ovu bolest, kognitivno oštećenje povezano sa šizofrenijom i drugim bolestima i poremećajima. Prijavljeni su patenti koji otkrivaju inhibitore mGluR2/3 za ove (i druge) indikacije (Celanire et al., [2015], Expert Opin Ther Patents 25, 69-90).

S obzirom na sposobnost presinaptičkog mGluR2 da modulira oslobađanje glutamata, farmakološka inhibicija mGluR2 negativnim alosteričnim modulatorima ima sposobnost da pojača prenos signala glutamata da ublaži druge poremećaje koji uključuju prenos signala glutamata. Među njima su poremećaji raspoloženja, uključujući veliki depresivni poremećaj (MDD), depresiju povezanu sa bipolarnim poremećajem i anksioznost. Inhibicija mGluR2 i mGluR3 od strane ortosteričnih antagonista pokazala je efikasnost u modelima depresije kod glodara (Chaki et al., [2004], Neuropharmacology 46, 457-67) kao i negativni alosterični modulatori (Campo et al., [2011], J Neurogenet 25, 152-66). Antagonisti mGluR2 i mGluR3 takođe su pokazali efikasnost u modelima anksioznosti glodara (Shimazaki et al., [2004], Eur J Pharmacol 501, 121-5; Iijima et al., [2007], Psychopharmacology (Berl) 190, 233-9) što je rezultiralo podnošenjem patenata za inhibitore mGluR2/3 za ove (i druge) indikacije (Celanire et al., [2015], Expert Opin Ther Patents 25, 69-90).

Takođe se očekuje da inhibicija mGluR2 receptora negativnim alosteričnim modulatorima modulira spavanje i uzbuđenje i cirkadijalno vreme ciklusa budnosti i spavanja. Aktivacija mGluR2 pozitivnim alosteričnim modulatorom rezultira dubokim snom kod pacova i klinički kod zdravih dobrovoljaca (Ahnaou et al., [2016], Neuropharmacology 103, 290-305) tako da se očekuje da inhibicija negativnim alosteričnim modulatorom stimuliše uzbuđenje podudarno sa poboljšanom kognicijom. Prenos signala glutamata modulirano preko mGluRs grupe II (mGluR2, mGluR3) takođe je uključen u cirkadijalno vreme ciklusa spavanja/budnosti, tako da se može očekivati da inhibicija mGluR2 poboljša koordinaciju aktivnosti u svetlosnim/tamnim ciklusima okoline. Genetski gubitak mGluR2 i mGluR3 kao i farmakološka inhibicija negativnim alosteričnim modulatorima ovih receptora rezultiraju poboljšanim odgovorima na znakove privlačenja svetlosti (Pritchett et al., [2015], PLoS One 10, e0125523).

Takođe se očekuje da inhibicija mGluR2 jedinjenjima negativnim alosteričnim modulatorima modulira osećaj bola i odgovore na bol. Prenos signala glutamata posreduje kako u prenošenju informacija o bolu, tako i u perifernim i centralnim mehanizmima preosetljivosti na bol, tako da modulacija ovog signala putem inhibicije mGluR2 ima potencijal da utiče na nocicepciju, kao i na centralnu percepciju pamćenja bola (Chiechio [2016], Adv Pharmacol 75, 63-89).

Izvesni supstituisani kinolin karboksamidi, kinolin karbonitrili, tetrahidronaftiridini i drugi, poznati su u stanju tehnike kao inhibitori mGluR2 ili za drugu upotrebu. Pogledajte, na primer, WO2016/032921, WO2013/066736, SAD patentnu prijavu br.2008/0188521, WO2007/038865, WO 1996/13500, od kojih svaki otkriva jedinjenja kao inhibitore leukotriena, i kanadsku patentnu prijavu br. 2169231, koja otkriva jedinjenja kao inhibitore leukotriena i SRS-A. U struci ostaje potreba za novim jedinjenjima koja su efikasna kao nekonkurentni mGluR2 modulatori i/ili mGluR2 negativni alosterični modulatori (NAM).

KRATAK OPIS PRONALASKA

U jednom primeru izvođenja, ovaj pronalazak je usmeren na neke nove supstituisane derivate hromana, izohromana i dihidroizobenzofurana, koji se ovde kolektivno ili pojedinačno nazivaju „jedinjenjem (jedinjenjima) pronalaska“. Jedinjenja pronalaska, opisana u nastavku, su nekonkurentni negativni alosterični modulatori metabotropnog receptora glutamata 2 (mGluR2 NAM) i mogu biti korisna u lečenju bolesti ili poremećaja kod kojih je korisna inhibicija mGluR2 receptora. Takve bolesti ili poremećaji uključuju, ali ne moraju biti ograničeni na, Alzheimer-ovu bolest, kognitivno oštećenje, šizofreniju i druge poremećaje raspoloženja, poremećaje bola i poremećaje spavanja. U još jednom izvođenju, ovaj pronalazak je takođe usmeren na farmaceutske kompozicije koje sadrže efikasnu količinu jedinjenja pronalaska, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, i farmaceutski prihvatljiv nosač, i, u još jednom izvođenju, na upotrebu jedinjenja i farmaceutske kompozicije pronalaska u lečenju takvih bolesti ili poremećaja. U drugim primerima izvođenja, ovaj pronalazak je takođe usmeren na kombinaciju koja sadrži jedinjenje pronalaska i jedno, dva, tri ili više drugih terapeutskih sredstava, i za upotrebu pomenute kombinacije u lečenju ovde opisanih bolesti ili poremećaja. Ovi i drugi primeri izvođenja su ovde detaljno opisani.

DETALJAN OPIS PRONALASKA

U jednom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska imaju strukturnu formulu (I):

ili njegov stereoizomer, ili farmaceutski prihvatljiva so navedenog jedinjenja ili navedenog stereoizomera, gde:

prsten A je ostatak odabran od:

gde:

R2 je izabran od: H, ciklopropil, -(C1-C4)alkil, -(C1-C4)alkil-OH, -(C1-C4)alkil-OCH3, -(C1-C4)haloalkil, -(C1-C4)alkil-O-(C1-C4)haloalkil, -CH2-O-(C1-C4)haloalkil, - CH(CH3)-O-(C1-C4)haloalkil, -CH2-NH-(C1-C4)haloalkil, i -CH2-N(CH3)-(C1-C4)haloalkil,

R2A je izabran od: H i metil;

R3 je izabran od: H i metil;

R3A je izabran od: H i metil;

prsten B je ostatak izabran iz grupe koja se sastoji od: fenil, heteroaril, -(C5-C6) cikloalkil, i -(C5-C6) cikloalkenil;

n je 0, 1, 2, ili 3, pod uslovom da vrednost n ne prelazi maksimalan broj atoma vodonika na prstenu B koji se mogu supstituisati; i

svaki R1 (kada je prisutan) je nezavisno izabran iz grupe koja se sastoji od sledećih: halogen, -CN, -OH, -(C1-C6) alkil, -O-(C1-C6) alkil, -(C1-C6) haloalkil, -O-(C1-C6) haloalkil, ciklopropil, ciklobutil, -NH2, -NH(C1-C6)alkil, -N(C1-C6alkil)2, -C(O)O(C1-C6) alkil, i fenil.

U primerima izvođenja gde prsten A je ostatak:

formula (I) ima oblik formule (IA):

gde su prsten B, n i svaki R1 kao što su definisani u formuli (I).

U jednom primeru izvođenja, u formuli (IA):

R2 je izabran od: H, ciklopropil, -CH3, -CH(CH3)2, -CH2-OH, -CH2-OCH3, -CH2F, - CHF2, -CF3, -CH2CH2F, -CH2CHF2, -CH2CF3, -CH2-O-CH2F, -CH2-O-CHF2, -CH(CH3)-O-CH2F, -CH(CH3)-O-CHF2, -CH2-NH-CH2CF3, i -CH2-N(CH3)-CH2CF3;

R2A je izabran od: H i metil;

R3 je izabran od: H i metil;

R3A je izabran od: H i metil;

i prsten B, n, i svaki R1 je kao što je definisan u formuli I.

U sledećem primeru izvođenja, u formuli (IA):

R2 je izabran od: H, ciklopropil, -CH3, -CH(CH3)2, -CH2-OH, -CH2-OCH3, -CH2F, - CHF2, -CF3, -CH2CH2F, -CH2CHF2, -CH2CF3, -CH2-O-CH2F, -CH2-O-CHF2, -CH(CH3)-O-CH2F, -CH(CH3)-O-CHF2, -CH2-NH-CH2CF3i -CH2-N(CH3)-CH2CF3;

R2A je izabran od: H i metil;

R3 je izabran od: H i metil;

R3A je H;

i prsten B, n i svaki R1 je kao što je definisan u formuli I.

U sledećem primeru izvođenja, u formuli (IA):

R2 i R2A su oba metil;

R3 i R3A su oba H;

i prsten B, n, i svaki R1 je kao što je definidan u formuli I.

U sledećoj alternativi neposredno prethodnog primera izvođenja, u primerima izvođenja gde prsten A je ostatak:

formula (I) ima oblik formule (IB):

gde su prsten B, n i svaki R1 kao što su definisani u formuli (I). U primerima izvođenja gde prsten A je ostatak:

formula (I) ima oblik formule (IC):

formula (I) ima oblik formule (ID):

gde su prsten B, n i svaki R1 kao što su definisani u formuli (I).

Sledeći alternativni primeri izvođenja prstena B, n, i R<1>odnose se na svaki od primera izvođenja koji su opisani u prethodnom tekstu.

U jednom primeru izvođenja, u svakoj od formula (I), (IA), (IB), (IC), i (ID):

prsten B je ostatak izabran iz grupe koja se sastoji od: fenil, ciklopentil, cikloheksil, piridinil, pirimidinil, pirazolil, tienil, tiazolil, tiadiazolil, izoksazolil, oksadiazolil i oksazolil;

svaki R1 (kada je prisutan) je nezavisno izabran iz grupe koja se sastoji od: halogen, -CN, -OH, -(C1-C6) alkil, -O-(C1-C6) alkil, -(C1-C6) haloalkil, -O-(C1-C6) haloalkil, ciklopropil, ciklobutil, -NH2, -NH(C1-C6)alkil, -N(C1-C6alkil)2, -C(O)O(C1-C6) alkil, i fenil.

U alternativi neposredno prethodnog primera izvođenja, n je 0, 1, ili 2; i

svaki R1 (kada je prisutan) je nezavisno izabran iz grupe koja se sastoji od: fluoro, hloro, -CN, -OH, -(C1-C6) alkil, -O-(C1-C6) alkil, -(C1-C6) haloalkil, -O-(C1-C6) haloalkil, ciklopropil, ciklobutil, -NH2, -NH(C1-C6)alkil, -N(C1-C6alkil)2, -C(O)O(C1-C6) alkil, i fenil.

U sledećem primeru izvođenja, u svakoj od formula (I), (IA), (IB), (IC), i (ID):

prsten B je ostatak izabran iz grupe koja se sastoji od: fenil, pirazolil, piridinil, tienil, izoksazolil, oksadiazolil i oksazolil;

n je 0, 1, 2, ili 3; i

svaki R1 (kada je prisutan) je nezavisno izabran iz grupe koja se sastoji od fluoro, hloro, -CN, -OH, -(C1-C6) alkil, -O-(C1-C6) alkil, -(C1-C6) haloalkil, -O-(C1-C6) haloalkil, ciklopropil, ciklobutil, -NH2, -NH(C1-C6)alkil, -N(C1-C6alkil)2, -C(O)O(C1-C6) alkil, i fenil.

U alternativi neposredno prethodnog primera izvođenja, n je 0, 1, ili 2.

n je 0, 1, 2, ili 3; i

svaki R1 (kada je prisutan) je nezavisno izabran iz grupe koja se sastoji od fluoro, hloro, -CH3, i -CHCF2.

U alternativi neposredno prethodnog primera izvođenja, n je 0, 1, ili 2.

Neograničavajući primeri prstena B, n, i R<1>su prikazani u odgovarajućem položaju svakog od primera jedinjenja prema pronalasku kao što su prikazana u preparativnim primerima i priloženim patentnim zahtevima.

Kao što je opisano u formulama (I), (IA), (IB), (IC), i (ID), i u svakom od alternativnih primera izvođenja prstena B, n i R<1>navedenih ovde, prsten B može biti supstituisan sa 0, 1, 2, ili 3 nezavisno izabrane R1 grupe, pod uslovom da vrednost n ne prelazi maksimalan broj atoma vodonika na prstenu B koji se mogu supstituisati. Na taj način, u primerima izvođenja gde prsten B je fenil, -(C5-C6) cikloalkil, -(C5-C6) cikloalkenil, piridinil, pirimidinil, ili tienil, n je 0, 1, 2, ili 3. U alternativi svakog takvog primera izvođenja, n je 0, 1, ili 2. U sledećoj alternativi svakog takvog primera izvođenja, n je 0 ili 1. Kada je prsten B jedna pirazolil, tiazolil, izoksazolil, oksadiazolil, ili oksazolil, n je 0, 1, ili 2. U alternativi svakog takvog primera izvođenja, n je 0 ili 1. I kada je prsten B jednak tiadiazolil, n je 0 ili 1.

Sledeći primer izvođenja je jedinjenje formule (IA-1):

ili njegov steroizomer ili farmaceutski prihvatljiva so navedenog jedinjenja ili navedenog stereoizomera, gde:

R2A je izabran od: H i CH3;

R3 je izabran od: H i CH3; i

R3A je izabran od: H i CH3.

Sledeći primer izvođenja je jedinjenje formule (IA-1), ili njegov stereoizomer, ili farmaceutski prihvatljiva so navedenog jedinjenja ili navedenog stereoizomera, gde:

R2A je izabran od: H i CH3;

R3 je izabran od: H i CH3; i

R3A je H.

R2A je H;

R3 je izabran od: H i CH3; i

R3A je H.

R2A je H;

R3 je H; i

R3A je H.

Sledeći primer izvođenja je jedinjenje formule (IA-1a):

1

ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde:

R3 je H; i

R3A je CH3.

Sledeći primer izvođenja je jedinjenje formule (IA-1a), ili njegov stereoizomer, ili farmaceutski prihvatljiva so navedenog jedinjenja ili navedenog stereoizomera, gde:

R3 je CH3; i

R3A je H.

R3 je H; i

R3A je H.

Sledeći primer izvođenja je jedinjenje formule (IA-1b):

ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde:

R3 je H; i

R3A je CH3.

Sledeći primer izvođenja je jedinjenje formule (IA-1b), ili njegov stereoizomer, ili farmaceutski prihvatljiva so navedenog jedinjenja ili navedenog stereoizomera, gde:

R3 je CH3; i

R3A je H.

R3 je H; i

R3A je H.

U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku sadrže, zajednički i pojedinačno, svaki od primera jedinjenja prikazanih u tabelama u daljem tekstu, i njihove farmaceutski prihvatljive soli. Pogodne farmaceutski prihvatljive soli svakog od ovih jedinjenja obuhvataju one razmatrane ovde u daljem tekstu.

DEFINICIJE

Termini koji se ovde koriste imaju svoje uobičajeno značenje i značenje takvih izraza je nezavisno pri svakoj pojavi. Bez obzira na to i osim ako nije drugačije naznačeno, sledeće definicije se primenjuju u celoj specifikaciji i patentnim zahtevima. Hemijski nazivi, uobičajeni nazivi i hemijske strukture mogu se koristiti naizmenično za opisivanje te iste strukture. Ove definicije se primenjuju bez obzira da li se termin koristi pojedinačno ili u kombinaciji sa drugim terminima, osim ako nije drugačije naznačeno. Stoga se definicija za "alkil" odnosi na "alkil", kao i na "alkil" deo "hidroksialkila", "haloalkila", arilalkila-, alkilarila-, "alkoksi" itd.

Biće jasno da, u različitim ovde opisanim primerima izvođenja pronalaska, bilo koja promenljiva koja nije eksplicitno definisana u kontekstu ovog izvođenja kao što je definisana u Formuli (I). Za sve valence koje nisu eksplicitno popunjene pretpostavlja se da su ispunjene vodonikom. "Pacijent" označava čoveka kome je potreban ovde opisan tretman, koji je odredio nadležni lekar ili drugi zdravstveni radnik ili koji je određen pomoću bilo kog drugog pogodnog postupka poznatog stručnjacima. Dok je subjekat ili pacijent na koga se primenjuju jedinjenja i kompozicije prema ovom pronalasku generalno ljudsko biće, takvi subjekti mogu takođe da uključuju sisare koji nisu ljudi, uključujući pse, mačke, miševe, pacove, goveda, konje, ovce, zečeve, majmune, šimpanze ili druge majmune ili primate, za koje je poželjno lečenje gore navedenih bolesti i poremećaja, ili ispitivanje biološke aktivnosti predmetnih jedinjenja.

"Farmaceutska kompozicija" (ili "farmaceutski prihvatljiva kompozicija") označava kompoziciju pogodnu za primenu na pacijenta. Takve kompozicije mogu sadržati jedinjenje (ili jedinjenja) pronalaska ili njihove smeše ili njihove soli, solvate, prolekove, izomere ili tautomere, pojedinačno ili opciono, zajedno sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih nosača ili razblaživača. Termin "farmaceutska kompozicija" takođe treba da obuhvati i kompoziciju u balku i pojedinačne jedinice doze koje se sastoje od više od jednog (npr. dva) farmaceutski aktivnog sredstva, kao što su, na primer, jedinjenje predmetnog pronalaska i dodatno sredstvo izabrano iz liste ovde opisanih dodatnih sredstava, zajedno sa bilo kojim farmaceutski neaktivnim ekscipijensima. Kompozicija u balku i svaka pojedinačna jedinica doze mogu sadržati fiksne količine gore pomenutog „više od jednog farmaceutski aktivnog sredstva“. Kompozicija u balku je materijal koji još uvek nije formiran u pojedinačne jedinice doze. Ilustrativna jedinica doze je oralna jedinica doze kao što su tablete, pilule i slično. Slično tome, ovde opisani postupak lečenja pacijenta primenom farmaceutske kompozicije ovog pronalaska takođe je namenjen obuhvatanju primene gore pomenute kompozicije u balku i pojedinačnih jedinica doze.

1

„Halogen“ (ili „halo“) označava fluor (F), hlor (Cl), brom (Br) ili jod (I). Poželjni su fluor, hlor i brom. Poželjniji su fluor i hlor.

"Alkil" označava alifatičnu ugljovodoničnu grupu, koja može biti prava ili razgranata, koja sadrži 1 do 6 atoma ugljenika. "Niži alkil" označava pravu ili razgranatu alkil grupu koja sadrži 1 do 4 atoma ugljenika. Razgranato znači da su jedna ili više nižih alkil grupa kao što su metil, etil ili propil, vezane za linearni alkil lanac. Neograničavajući primeri pogodnih alkil grupa uključuju metil (Me ili CH3), etil (Et), n-propil, izopropil, n-butil, i-butil i t-butil.

"Alkenil" označava alifatičnu ugljovodoničnu grupu koja sadrži najmanje jednu dvostruku vezu ugljenik-ugljenik i koja može biti prava ili razgranata i sadrži 2 do 10 atoma ugljenika u pravom ili razgranatom lancu. Razgranato znači da su jedna ili više nižih alkil grupa kao što su metil, etil propil, etenil ili propenil vezane za prav ili razgranat alkenil lanac. „Niži alkenil“ znači 2 do 4 atoma ugljenika u lancu koji mogu biti pravi ili razgranati. Neograničavajući primeri pogodnih alkenil grupa uključuju etenil, propenil, n-butenil, 3-metilbut-2-enil, n-pentenil, oktenil i decenil. "Heteroaril" označava aromatični monociklični ili multiciklični sistem prstenova koji sadrži 5 do 14 atoma u prstenu, poželjno 5 do 10 atoma u prstenu, u kojima je jedan ili više atoma u prstenu element koji nije ugljenik, na primer azot, kiseonik ili sumpor, pojedinačno ili u kombinaciji. Poželjni heteroarili sadrže 5 do 6 atoma u prstenu. "Heteroaril" može biti opciono supstituisan sa jednim ili više supstituenata, koji mogu biti isti ili različiti, kako je ovde definisano. Prefiks aza, oksa ili tia ispred imena heteroarilnog korena znači da je najmanje atom azota, kiseonika ili sumpora prisutan kao atom prstena. Atom azota heteroarila može biti opciono oksidovan u odgovarajući N-oksid, a da ne spada van definicije heteroarila. "Heteroaril" takođe može obuhvatati heteroaril kako je gore definisano kondenzovan sa arilom kako je gore definisano. Neograničavajući primeri pogodnih heteroarila uključuju piridil, pirazinil, furanil, tienil (koji se alternativno mogu označavati kao tiofenil), pirimidinil, piridon (uključujući N-supstituisane piridone), izoksazolil, izotiazolil, oksazolil, oksadiazolil, tiazoalizolil, tiazoalizolil, tiazoalizolil, tiazoalizolil, tiazozazolil, tiazozazolil, tiazozazolil, tiazozazolil, tiazoazolil, tiazoazolil, tiazoazolil, tiazozalil, tiazolil, tiazolil, tiazolil, tiazolil, tiazolil, tiazolil, tiazolil, tiazolil, piridon, neograničavajući heteroaril, furazanil, pirolil, triazolil, 1,2,4-tiadiazolil, pirazinil, piridazinil, kinoksalinil, ftalazinil, oksindolil, imidazo[1,2-a]piridinil, imidazo[2,1-b]tiazolil, benzofurazanil, indolil, benzimidazolil, benzotienil, kinolinil, imidazolil, tienopiridil, kinazolinil, tienopirimidil, pirolopiridil, imidazopiridil, izokinolinil, benzoazaindolil, 1,2,4-triazinil, benzotiazolil i slično. Termin "heteroaril" takođe se odnosi na delimično zasićene heteroaril ostatke kao što su, na primer, tetrahidroizokinolil, tetrahidrohinolil i slično. Termin "monociklični heteroaril" odnosi se na monociklične verzije heteroarila kako je gore opisano i uključuje 4- do 7-člane monociklične heteroarilne grupe koje sadrže 1 do 4 heteroatoma u prstenu, pri čemu su navedeni heteroatomi u prstenu nezavisno izabrani od N, O i S i njihovih oksida. Tačka vezivanja za matični deo je bilo koji raspoloživi ugljenik u prstenu ili heteroatom u prstenu. Neograničavajući primeri monocikličnih heteroaril ostataka uključuju piridil (ili piridinil), pirazinil, furanil, tienil, pirimidinil, piridazinil, piridoneil, tiazolil, izotiazolil, oksazolil, oksadiazolil, izoksazolil, pirazolil, furazanil, pirolil, triazolil, tiadiazolil (npr, 1,2,4-tiadiazolil), imidazolil i triazinil (npr.

1,2,4-triazinil) i njihove okside.

"Cikloalkil" znači nearomatični monociklični ili multiciklični sistem prstena koji sadrži 3 do 10 atoma ugljenika, poželjno 3 do 6 atoma ugljenika. Cikloalkil može biti opciono supstituisan sa jednim ili više supstituenata, koji mogu biti isti ili različiti, kako je ovde opisano. Monociklični cikloalkil se odnosi na monociklične verzije ovde opisanih cikloalkil ostataka. Neograničavajući primeri pogodnih monocikličnih cikloalkila uključuju ciklopropil, ciklopentil, cikloheksil, cikloheptil i slično. Neograničavajući primeri multicikličnih cikloalkila uključuju [1.1.1]-biciklopentan, 1-dekalinil, norbornil, adamantil i slično.

"Cikloalkenil" označava nearomatični mono ili multiciklični sistem prstena koji sadrži 3 do 10 atoma ugljenika, poželjno 4 do 6 atoma ugljenika koji sadrže najmanje jednu dvostruku vezu ugljenik-ugljenik. Poželjni cikloalkenilni prstenovi sadrže 5 do 6 atoma u prstenu. Termin "monociklični cikloalkenil" odnosi se na monociklične verzije ovde opisanih cikloalkenil grupa i uključuje nearomatične 3- do 7-člane monociklične cikloalkil grupe koje sadrže jednu ili više dvostrukih veza ugljenik-ugljenik. Neograničavajući primeri uključuju ciklopropenil, ciklobutenil, ciklopentenil, cikloheksenil, ciklohetpenil, ciklohepta-1,3-dienil i slično. Neograničavajući primer pogodnog multicikličnog cikloalkenila je norbornilenil.

Bilo koja od prethodno navedenih funkcionalnih grupa može biti nesupstituisana ili supstituisana kako je ovde opisano. Termin "supstituisani" znači da se jedan ili više vodonika na naznačenom atomu zamenjuje izborom iz naznačene grupe, pod uslovom da normalna valencija naznačenog atoma u postojećim okolnostima nije prekoračena i da supstitucija rezultira stabilnim jedinjenjem. Kombinacije supstituenata i/ili promenljivih su dozvoljene samo ako takve kombinacije rezultiraju stabilnim jedinjenjima. Pod „stabilno jedinjenje“ ili „stabilna struktura“ podrazumeva se jedinjenje koje je dovoljno robusno da preživi izolaciju do korisnog stepena čistoće iz reakcione smeše i formulaciju u efikasno terapeutsko sredstvo.

1

Termin "opciono supstituisan" označava opcionu supstituciju sa navedenim grupama, radikalima ili delovima.

Kada se promenljiva pojavljuje više puta u grupi, npr. R<6>u -N(R<6>)2, ili se promenljiva pojavljuje više puta u ovde predstavljenoj strukturi, promenljive mogu biti iste ili različite.

Linija -, kao veza generalno označava smešu, ili jedan od, mogućih izomera, npr., koji sadrži (R)- i (S)- stereohemiju. Na primer:

označava da sadrži oba

Talasasta linija

kao što je ovde korišćena, označava tačku vezivanja za ostatak jedinjenja. Linije nacrtane u sistemima prstena, kao što je, na primer:

označavaju da naznačena linija (veza) može biti vezana za bilo koje atome uugljenika u prstenu koji se mogu susptituisati.

"Okso" označava atom kiseonika koji je dvostrukom vezom vezan za ugljenik u prstenu u cikloalkil, cikloalkenil, heterociklil, heterociklenil, ili takvim drugim prstenovima kao što su ovde opisani, npr.,

U ovoj specifikaciji, tamo gde ima više atoma kiseonika i/ili sumpora u sistemu prstena, tu ne može biti bilo kog susednog kiseonika i/ili sumpora prisutnog u navedenom sistemu prstena.

1

Kao što je dobro poznato u stanju tehnike, vezan nacrtana od određenog atoma gde nije prikazan nijedan ostatak na terminalnom kraju veze označava metil grupu vezanu preko te veze za atom, osim ukoliko nije navedeno drugačije. Na primer:

predstavlja

U sledećem primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska i/ili kompozicije koje ih sadrže prisutni su u izolovanom i/ili prečišćenom obliku. Termin "prečišćen", "u prečišćenom obliku" ili "u izolovanom i prečišćenom obliku" za jedinjenje odnosi se na fizičko stanje pomenutog jedinjenja nakon izolovanja iz sintetičkog postupka (npr. iz reakcione smeše), ili prirodnog izvora ili njihove kombinacije. Prema tome, termin "prečišćen", "u prečišćenom obliku" ili "u izolovanom i prečišćenom obliku" za jedinjenje odnosi se na fizičko stanje pomenutog jedinjenja (ili njegovog tautomera, ili farmaceutski prihvatljive soli pomenutog jedinjenja ili navedenog tautomera) posle dobijanja iz postupka prečišćavanja ili ovde opisanih postupaka ili dobro poznatih stručnjaku (npr. hromatografija, rekristalizacija i slično), u dovoljnoj čistoći da budu pogodni za in vivo ili medicinsku upotrebu i/ili da se mogu okarakterisati standardnim analitičkim tehnikama koje su ovde opisane ili dobro poznate stručnjaku.

Kada je funkcionalna grupa u jedinjenju označena terminom "zaštićena", to znači da je grupa u modifikovanom obliku da bi sprečila neželjene sporedne reakcije na zaštićenom mestu kada je jedinjenje podvrgnuto reakciji. Pogodne zaštitne grupe prepoznaće stručnjaci sa uobičajenim znanjem, kao i pozivanjem na standardne udžbenike kao što je, na primer, T. W. Greene et al, Protective Groups in organic Synthesis (1991), Wiley, New York.

Stručnjaci u ovoj oblasti prepoznaće slučajeve u kojima se jedinjenja prema pronalasku mogu pretvoriti u prolekove i/ili solvate, što je još jedan primer izvođenja ovog otkrića. Diskusija o prolekovima je data u T. Higuchi i V. Stella, Pro-drugs as Novel Delivery Systems (1987) 14 of the A.C.S. Symposium Series, i u Bioreversible Carriers in Drug Design, (1987) Edward B. Roche, ed., American Pharmaceutical Association and Pergamon Press. Termin "prolek" označava jedinjenje (na primer, prekursor leka) koje se transformiše in vivo da bi se dobilo

1

jedinjenje iz pronalaska ili farmaceutski prihvatljiva so, hidrat ili solvat jedinjenja. Do transformacije može doći različitim mehanizmima (npr. metaboličkim ili hemijskim procesima), kao što je, na primer, hidroliza u krvi. Diskusiju o upotrebi prolekova daju T. Higuchi i W. Stella, "Pro-drugs as Novel Delivery Systems," Vol. 14 of the A.C.S. Symposium Series, i Bioreversible Carriers in Drug Design, ed. Edward B. Roche, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987.

Jedno ili više jedinjenja prema pronalasku mogu postojati u nesolvatiranim, kao i u solvatnim oblicima sa farmaceutski prihvatljivim rastvaračima, kao što su voda, etanol i slično, i namerava se da pronalazak obuhvati i solvatirane i nesolvatirane oblike tamo gde postoje. "Solvat" označava fizičku povezanost jedinjenja pronalaska sa jednim ili više molekula rastvarača. Ovo fizičko povezivanje uključuje različit stepen jonske i kovalentne veze, uključujući vezu vodonika. U određenim slučajevima solvat će biti sposoban za izolaciju, na primer kada je jedan ili više molekula rastvarača ugrađeno u kristalnu rešetku kristalne čvrste supstance. "Solvat" obuhvata solvate u fazi rastvora i solvate koji se mogu izolovati. Neograničavajući primeri pogodnih solvata uključuju etanolate, metanolate i slično. "Hidrat" je solvat u kome je molekul rastvarača H2O.

„Efikasna količina“ ili „terapeutski efikasna količina“ označava količinu jedinjenja ili kompozicije ovog pronalaska koja će izazvati biološki ili medicinski odgovor tkiva, sistema, životinje ili čoveka koji traži istraživač, veterinar, lekar ili drugi kliničar ili praktičar. U kombinovanim terapijama ovog pronalaska, efikasna količina se može odnositi na svako pojedinačno sredstvo ili na kombinaciju u celini, pri čemu su količine svih primenjenih sredstava zajedno efikasne. U nekim primerima izvođenja, jedna ili više komponenti sredstava kombinacije mogu biti prisutni pojedinačno u količini manjoj od količine koja je potrebna da bi bila efikasna kada se primenjuje pojedinačno, kao što je dalje opisano u nastavku. „Terapeutski efikasna količina“ može da varira u zavisnosti od, između ostalog, jedinjenja, bolesti i njene težine i starosti, telesne težine, itd., subjekta koji se leči.

Termin "tretman" ili "lečenje" označava bilo koju primenu jedinjenja ili kompozicije ovog pronalaska na subjekta kome je to potrebno, samostalno ili u kombinaciji sa jednim ili više dodatnih terapeutskih sredstava, i uključuje (1) inhibiranje ili ublažavanje patologije i/ili simptomatologije bolesti ili poremećaja kod navedenog subjekta, npr. životinje, osobe ili pacijenta ili drugog subjekta koji doživljava ili pokazuje patologiju ili simptomatologiju bolesti ili poremećaja. Termin "prevencija" ili "profilaksa" označava bilo koju primenu jedinjenja ili kompozicije ovog pronalaska na subjekta kojem je to potrebno, samostalno ili u kombinaciji sa

1

jednim ili više dodatnih terapeutskih sredstava, i uključuje (1) inhibiranje ili ublažavanje patologije i/ili simpatomotologije bolesti ili poremećaja kod navedenog subjekta, npr. životinje, osobe ili pacijenta ili drugog subjekta pre početka ili manifestacije patologije ili simptomatologije bolesti ili poremećaja. Termin "kontrolisanje" uključuje sprečavanje, lečenje, iskorenjivanje, ublažavanje ili na drugi način smanjivanje težine bolesti ili poremećaja ili jednog ili više simptoma.

Jedinjenja i kompozicije ovog pronalaska, pojedinačno ili u kombinaciji sa jednim ili više dodatnih terapeutskih sredstava, takođe mogu biti korisni u lečenju ili prevenciji navedenih bolesti ili poremećaja ili jednog ili više njihovih simptoma, čiji su lečenje i prevencija takođe razmatrani kao dodatna ostvarenja ovog pronalaska.

Stručnjaci u ovoj oblasti prepoznaće slučajeve u kojima jedinjenja pronalaska mogu da formiraju soli. U takvim slučajevima, drugi primer izvođenja obezbeđuje farmaceutski prihvatljive soli jedinjenja pronalaska. Termin "so(li)", kako se ovde koristi, označava bilo šta od sledećeg: kisele soli formirane sa neorganskim i/ili organskim kiselinama, kao i bazne soli formirane sa neorganskim i/ili organskim bazama. Pored toga, kada jedinjenje pronalaska sadrži oba, bazni ostatak, kao što je, ali ne ograničavajući se na piridin ili imidazol, i kiseli ostatak, kao što je, ali bez ograničenja na karboksilna kiselina, cviterjoni ("unutrašnje soli") mogu biti formirani i uključene su u termin "so(li)" kako se ovde koristi. Poželjne su farmaceutski prihvatljive (tj. netoksične, fiziološki prihvatljive) soli, mada su i druge soli potencijalno korisne. Soli jedinjenja prema pronalasku mogu se formirati postupcima poznatim onima koji su stručnjaci u ovoj oblasti, na primer, reakcijom jedinjenja pronalaska sa količinom kiseline ili baze, kao što je ekvivalentna količina, u medijumu kao što je kao onaj u kome se so taloži ili u vodenom medijumu što je praćeno liofilizacijom.

Primeri kiselih adicionih soli koje bi mogle biti korisne uključuju acetate, askorbate, benzoate, benzensulfonate, bisulfate, borate, butirate, citrate, kamforate, kamforsulfonate, fumarate, hidrohloride, hidrobromide, hidrojodide, laktate, maleate, metansulfonate, naftalensulfonate, nitrate, oksalate, fosfate, propionate, salicilate, sukcinate, sulfate, tartarate, tiocijanate, toluensulfonate (poznati i kao tozilati) i slično. Pored toga, o kiselinama koje se generalno smatraju pogodnim za formiranje farmaceutski korisnih soli iz osnovnih farmaceutskih jedinjenja raspravlja se, na primer, u P. Stahl et al, Camille G. (eds.) Handbook of Pharmaceutical Salts. Properties, Selection and Use. (2002) Zurich: Wiley-VCH; S. Berge et al, Journal of Pharmaceutical Sciences (1977) 66(1) 1-19; P. Gould, International J. of Pharmaceutics (1986) 33201-217; Anderson et al, The Practice of Medicinal Chemistry (1996),

1

Academic Press, New York; i u The Orange Book (Food & Drug Administration, Washington, D.C. na njihovoj veb stranici). Ova otkrića su ovde obuhvaćena pozivajući se na njih.

Primeri baznih soli uključuju amonijum soli, soli alkalnih metala kao što su soli natrijuma, litijuma i kalijuma, soli zemnoalkalnih metala kao što su soli kalcijuma i magnezijuma, soli sa organskim bazama (na primer, organski amini) kao što su dicikloheksilamini, t-butil amini, i soli sa aminokiselinama kao što su arginin, lizin i slično. Bazne grupe koje sadrže azot mogu se kvaternizovati sredstvima kao što su niži alkil halogenidi (npr. metil, etil i butil hloridi, bromidi i jodidi), dialkil sulfati (npr. dimetil, dietil i dibutil sulfati), dugolančani halogenidi (npr. decil, lauril i stearil hloridi, bromidi i jodidi), aralkil halogenidi (npr. benzil i fenetil bromidi) i drugi. Sve takve kisele soli i bazne soli namenjene su da budu farmaceutski prihvatljive soli u okviru pronalaska, a sve kisele i bazne soli smatraju se potencijalno korisnim alternativama slobodnim oblicima odgovarajućih jedinjenja u svrhe pronalaska.

Sledeći primer izvođenja koji može biti koristan uključuje farmaceutski prihvatljive estre jedinjenja pronalaska. Takvi estri mogu da obuhvataju sledeće grupe: (1) estre karboksilne kiseline dobijene esterifikacijom hidroksi grupa, u kojima je nekarbonilni ostatak dela karboksilne kiseline u grupi estara izabran iz alkila pravog ili razgranatog lanca (na primer, acetil, n-propil, t-butil ili n-butil), alkoksialkila (na primer, metoksimetil), aralkila (na primer, benzil), ariloksialkila (na primer, fenoksimetil), arila (na primer, fenil opciono supstituisan sa, na primer, halogenom, C1-4alkilom, ili C1-4alkoksi ili amino); (2) sulfonatne estre, kao što su alkilili aralkilsulfonil (na primer, metansulfonil); (3) estre aminokiselina (na primer, L-valil ili L-izoleucil); (4) estre fosfonata i (5) estre mono-, di- ili trifosfata. Fosfatni estri mogu se dalje esterifikovati pomoću, na primer, C1-20alkohola ili njegovog reaktivnog derivata ili pomoću 2,3-di (C6-24) acil glicerola.

Jedinjenja pronalaska mogu imati jedan ili više hiralnih (asimetričnih) centara. Ovaj pronalazak obuhvata sve stereoizomerne oblike jedinjenja formule I. Centri asimetrije koji su prisutni u jedinjenjima formule I mogu svi nezavisno jedan od drugog da imaju (R) ili (S) konfiguraciju. Kao što je gore navedeno, kada su veze sa hiralnim ugljenikom prikazane kao prave linije u strukturnim formulama pronalaska ili kada se ime jedinjenja navodi bez (R) ili (S) hiralne oznake za hiralni ugljenik, razume se da su obe konfiguracije i (R) i (S) konfiguracija svakog takvog hiralnog ugljenika, a samim tim i svakog enantiomera ili dijastereomera i njihovih smeša, obuhvaćene Formulom ili nazivom.

2

Tamo gde su mogući različiti stereoizomeri jedinjenja prema pronalasku, sledeći primer izvođenja obezbeđuje dijastereomerne smeše i pojedinačne enantiomere jedinjenja prema pronalasku. Dijastereomerne smeše se mogu razdvojiti u njihove pojedinačne dijastereomere na osnovu njihovih fizičko-hemijskih razlika postupcima koji su dobro poznati stručnjacima, kao što su, na primer, hromatografija i/ili frakciona kristalizacija. Enantiomeri se mogu razdvojiti pretvaranjem enantiomerne smeše u dijastereomernu smešu reakcijom sa odgovarajućim optički aktivnim jedinjenjem (npr. hiralnim pomoćnim sredstvom kao što su hiralni alkohol ili Mošerov kiseli hlorid), odvajanjem dijastereomera i prevođenjem (npr. hidrolizom) pojedinačnih dijastereomera do odgovarajućih čistih enantiomera. Enantiomeri se takođe mogu razdvojiti upotrebom hiralne HPLC kolone.

Svi stereoizomeri (na primer, geometrijski izomeri, optički izomeri i slično) jedinjenja pronalaska (uključujući stereoizomere soli, solvata, estra i prolekova jedinjenja, kao i soli, solvate i estre prolekova), kao što su oni koji mogu postojati zahvaljujući asimetričnim ugljenicima na različitim supstituentima, uključujući enantiomerne oblike (koji mogu postojati čak i u odsustvu asimetričnih ugljenika), rotamerni oblici, atropizomeri i dijastereomerni oblici, razmatrani su kao primeri izvođenja unutar obima ovog pronalaska. (Na primer, ako jedinjenje pronalaska sadrži dvostruku vezu ili fuzionisani prsten, i cis- i trans-oblici, kao i smeše, obuhvaćeni su obimom pronalaska. Takođe, na primer, svi keto-enolni i imin-enaminski oblici jedinjenja su obuhvaćeni pronalaskom.).

Pojedinačni stereoizomeri jedinjenja prema pronalasku mogu, na primer, u osnovi biti bez drugih izomera ili se mogu mešati, na primer, kao racemati ili sa svim ostalim, ili drugim odabranim stereoizomerima. Hiralni centri ovog pronalaska mogu imati S ili R konfiguraciju kako je definisano IUPAC 1974 Recommendations. Upotreba termina "so", "solvat", "estar", "prolek" i slično, namenjena je podjednakoj primeni na so, solvat, estar i prolek enantiomera, stereoizomera, rotamera, tautomera, racemata ili prolekova inventivnih jedinjenja.

Sledeći primer izvođenja koji može biti koristan uključuje izotopski obeležena jedinjenja pronalaska. Takva jedinjenja su identična onima koja su ovde navedena, ali zbog činjenice da su jedan ili više atoma zamenjeni atomom koji ima atomsku masu ili maseni broj različit od atomske mase ili masenog broja koji se obično nalaze u prirodi. Primeri izotopa koji se mogu ugraditi u jedinjenja pronalaska uključuju izotope vodonika, ugljenika, azota, kiseonika, fosfora, fluora i hlora, kao što su<2>H,<3>H,<11>C,<13>C,<14>C,<15>N,<18>O,<17>O,<31>P,<32>P,<35>S,<18>F, i<36>Cl, respektivno.

U jedinjenjima pronalaska, atomi mogu pokazivati svoje prirodne izotopske abundanse, ili jedan ili više atoma mogu biti veštački obogaćeni određenim izotopom koji ima isti atomski broj, ali atomsku masu ili maseni broj različit od atomske mase ili masenog broja koji se pretežno nalazi u prirodi. Predmetni pronalazak treba da obuhvati sve pogodne izotopske varijacije jedinjenja pronalaska. Na primer, različiti izotopski oblici vodonika (H) uključuju protijum (<1>H) i deuterijum (<2>H). Protijum je pretežni izotop vodonika koji se nalazi u prirodi. Obogaćivanje deuterijumom može pružiti određene terapeutske prednosti, poput povećanja in vivo vremena poluraspada ili smanjenje doze ili može pružiti jedinjenje korisno kao standard za karakterizaciju bioloških uzoraka. Izotopski obogaćena jedinjenja pronalaska mogu se pripremiti bez nepotrebnog eksperimentisanja konvencionalnim tehnikama dobro poznatim stručnjacima ili postupcima analognim onima opisanim u šemama i primerima ovde, koristeći odgovarajuće izotopski obogaćene reagense i/ili intermdijere.

Polimorfni oblici jedinjenja prema pronalasku i soli, solvati, estri i prolekovi jedinjenja prema pronalasku treba da budu obuhvaćeni ovim otkrićem.

KOMPOZICIJE I PRIMENA

Sledeći primer izvođenja obezbeđuje farmaceutske kompozicije koje sadrže terapeutski efikasnu količinu jedinjenja pronalaska, ili njegovog steroizomera, ili farmaceutski prihvatljive soli navedenog jedinjenja ili navedenog stereoizomera i farmaceutski prihvatljiv nosač.

Reprezentativna doza je oko 0,001 do 100 mg/kg telesne težine/dan jedinjenja pronalaska. Poželjna doza je oko 0,01 do 10 mg/kg telesne težine/dan jedinjenja pronalaska ili njegove farmaceutski prihvatljive soli.

Termin "farmaceutska kompozicija" je takođe određen tako da obuhvata kompoziciju u balku i pojedinačne jedinice doze koje se sastoje od više od jednog (npr., dva) farmaceutski aktivnog sredstva, kao što su, na primer, jedinjenje predmetnog pronalaska i dodatno terapeutsko sredstvo odabrano sa spiska dodatnih ovde opisanih sredstava, zajedno sa bilo kojim farmaceutski neaktivnim ekscipijensima. Kompozicija u balku i svaka pojedinačna jedinica doze mogu sadržati fiksne količine prethodno navedenog „više od jednog farmaceutski aktivnog sredstva“. Kompozicija u balku je materijal koji još uvek nije formiran u pojedinačne jedinice doze. Ilustrativna jedinica doze je oralna jedinica doze kao što su tablete, pilule i slično. Slično tome, ovde opisani postupak lečenja pacijenta primenom farmaceutske kompozicije ovog pronalaska takođe je namenjen obuhvatanju primene gore pomenute kompozicije u balku i pojedinačnih jedinica doze.

Za pripremu farmaceutskih kompozicija od jedinjenja opisanih u ovom pronalasku, inertni, farmaceutski prihvatljivi nosači mogu biti čvrsti ili tečni. Preparati u čvrstom obliku uključuju praškove, tablete, disperzibilne granule, kapsule, skrobne kapsule i supozitorije. Praškovi i tablete mogu se sastojati od oko 5 do oko 95 procenata aktivnog sastojka. U struci su poznati pogodni čvrsti nosači, npr. magnezijum karbonat, magnezijum stearat, talk, šećer ili laktoza. Tablete, praškovi, skrobne kapsule i kapsule mogu se koristiti kao čvrsti oblici doze pogodni za oralnu primenu. Primeri farmaceutski prihvatljivih nosača i postupci proizvodnje različitih kompozicija mogu se naći u A. Gennaro (ed.), Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th Edition, (1990), Mack Publishing Co., Easton, Pennsylvania.

Preparati u tečnom obliku uključuju, na primer, rastvore, suspenzije i emulzije. Primeri materijala korisnih za formiranje takvih preparata u tečnom obliku uključuju vodu ili rastvor vode-propilen glikola za parenteralnu injekciju ili zaslađivače i sredstva za zamućivanje za oralne rastvore, suspenzije i emulzije. Preparati u tečnom obliku mogu takođe sadržati rastvore ili suspenzije za intranazalnu primenu.

Aerosol preparati pogodni za inhalaciju mogu da sadrže rastvore i čvrste materije u obliku praha, koji mogu biti u kombinaciji sa farmaceutski prihvatljivim nosačem, kao što je inertni komprimovani gas, npr. azot.

Takođe su uključeni preparati u čvrstom obliku koji su namenjeni prevođenju, neposredno pre upotrebe, u preparate u tečnom obliku za oralnu ili parenteralnu primenu. Takvi tečni oblici uključuju rastvore, suspenzije i emulzije.

Jedinjenja pronalaska takođe mogu da se isporuče transdermalno. Transdermalne kompozicije mogu imati oblik tečnih rastvora, krema, losiona, aerosola i/ili emulzija i mogu se uključiti u transdermalni flaster tipa matrice ili rezervoara, kao što je uobičajeno u struci za ovu svrhu. Jedinjenja ovog pronalaska se takođe mogu davati subkutano.

Poželjno je da se jedinjenje daje oralno.

Poželjno je da je farmaceutski preparat u obliku jedinične doze. U takvom obliku, preparat je podeljen u odgovarajuće veličine jediničnih doza koje sadrže odgovarajuće količine aktivne komponente, npr. efikasnu količinu za postizanje željene svrhe.

Količina aktivnog jedinjenja u jediničnoj dozi preparata može se varirati ili prilagoditi od oko 0,001 mg do oko 100 mg po kg telesne težine sisara, poželjno od oko 0,01 mg do oko 10 mg po

2

kg. Stvarna doza koja se koristi može se menjati u zavisnosti od zahteva pacijenta i težine stanja koje se leči. Određivanje odgovarajućeg režima doziranja za određenu situaciju je u okviru znanja u datoj oblasti tehnike. Radi pogodnosti, ukupna dnevna doza se može podeliti i primenjivati u delovima tokom dana po potrebi.

Kompozicije prema pronalasku mogu dalje da sadrže jedno ili više dodatnih terapeutskih sredstava, kao što je detaljnije razmotrano u nastavku. Shodno tome, u jednom primeru izvođenja, ovaj pronalazak obezbeđuje kompozicije koje sadrže: (i) jedinjenje pronalaska, ili njegov stereoizomer, ili farmaceutski prihvatljivu so pomenutog jedinjenja ili navedenog stereoizomera; (ii) jedno ili više dodatnih terapeutskih sredstava, koja nisu jedinjenja pronalaska; i (iii) farmaceutski prihvatljiv nosač, pri čemu su količine u smeši zajedno efikasne za lečenje jedne od ovde navedenih bolesti ili stanja.

UPOTREBE JEDINJENJA PREMA PRONALASKU

Sledeći primer izvođenja otkrića pruža postupak za lečenje pacijenta (npr. humanog pacijenta ili životinje za istraživanje) za bolesti ili poremećaje u koje je uključen mGluR2 receptor. Ovi postupci uključuju primenu efikasne količine jedinjenja prema pronalasku ili kompozicije koja sadrži jedinjenje pronalaska (ili njegov stereoizomer, ili farmaceutski prihvatljivu so pomenutog jedinjenja ili navedenog stereoizmera), na pacijenta kome je to potrebno, za lečenje bolesti ili poremećaja u koje je uključen mGluR2 receptor.

Sledeći primer izvođenja obezbeđuje jedinjenje pronalaska za upotrebu u lečenju bolesti ili poremećaja u koje je uključen mGluR2 receptor, primenom efikasne količine jedinjenja pronalaska ili njegove farmaceutski prihvatljive soli na pacijenta kome je to potrebno. Sledeći primer izvođenja obezbeđuje upotrebu jedinjenja pronalaska za proizvodnju leka za lečenje bolesti ili poremećaja u koje je uključen mGluR2 receptor, primenom efikasne količine jedinjenja pronalaska ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, na pacijenta kome je to potrebno. Primeri takvih bolesti i poremećaja su ovde opisani.

U jednom primeu izvođenja, jedinjenja pronalaska koja su korisna u navedenim postupcima ili navedenim upotrebama sadrže jedinjenje prema bilo kojoj od Formula (I), (IA), (IA-1), (IA-1a), (IA-1b) , (IB), (IC) i (ID) kao što je gore opisano, ili prema bilo kom od ovde opisanih različitih primera izvođenja, ili njegov stereoizomer, ili farmaceutski prihvatljivu so pomenutog jedinjenja ili navedenog stereoizomera, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu kompoziciju. U sledećem primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska koja su korisna u navedenim postupcima ili pomenutim upotrebama sadrže jedinjenje iz primera 2-5, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu kompoziciju. U sledećem primeru izvođenja, jedinjenje pronalaska korisno u pomenutim postupcima ili pomenutim upotrebama sadrži jedinjenje iz primera 2-3A ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu kompoziciju. U sledećem primeru izvođenja, jedinjenje pronalaska korisno u pomenutim postupcima ili pomenutim upotrebama sadrži jedinjenje iz primera 2-3B ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu kompoziciju. U sledećem primeru izvođenja, jedinjenje pronalaska korisno u navedenim postupcima ili pomenutim upotrebama sadrži jedinjenje iz primera 3-1A ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu kompoziciju. U sledećem primeru izvođenja, jedinjenje pronalaska korisno u navedenim postupcima ili pomenutim upotrebama sadrži jedinjenje iz primera 3-1B ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu kompoziciju. U sledećem primeru izvođenja, jedinjenje pronalaska korisno u pomenutim postupcima ili pomenutim upotrebama sadrži jedinjenje iz primera 3-7A ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu kompoziciju. U sledećem primeru izvođenja, jedinjenje pronalaska korisno u navedenim postupcima ili pomenutim upotrebama sadrži jedinjenje iz primera 3-7B ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu kompoziciju.

U jednom primeru izvođenja, ovo otkriće je usmereno na postupak lečenja neurodegenerativne bolesti ili poremećaja koji utiču na kogniciju, pri čemu pomenuti postupak sadrži primenu jedinjenja pronalaska, ili njegovog stereoizomera, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, na subjekta kome je to potrebno. Takve bolesti ili poremećaji koji utiču na kognitivnu sposobnost uključuju, ali nisu ograničeni na, Alzheimer-ovu bolest, kognitivno oštećenje, kogniciju povezanu sa Parkinsonovom bolešću, šizofreniju, poremećaje raspoloženja, uključujući depresiju i anksioznost, gastrointestinalne poremećaje, poremećaje bola i poremećaje spavanja i druge kako su ovde opisani.

Dodatni primeri poremećaja bola uključuju akutni bol, inflamatorni bol i neuropatski bol. Neuropatski bol uključuje, ali nije ograničen na, postherpetičnu neuralgiju, povredu nerva, "dinije", npr. vulvodiniju, fantomski bol udova, avulzije korena, bolnu dijabetičku neuropatiju, bolnu traumatsku mononeuropatiju, bolnu polineuropatiju. Dodatni primeri poremećaja bola uključuju sindrome centralnog bola (potencijalno izazvane praktično bilo kojom lezijom na bilo kom nivou nervnog sistema); posthirurške sindrome bola (npr. sindrom postmastektomije, sindrom post-torakotomije, bol u patrljku); bolove u kostima i zglobovima (osteoartritis), bolove

2

kod ponavljajućih pokreta, dentalni bol, bol kod kancera, miofascijalni bol (povreda mišića, fibromijalgija); perioperativni bol (opšta operacija, ginekološka), hronični bol, dismenoreju, kao i bol povezan sa anginom i inflamatorni bol različitog porekla (npr. osteoartritis, reumatoidni artritis, reumatska bolest, tenosinovitis i giht), glavobolju, migrenu i klaster glavobolju, glavobolju, primarnu hiperalgeziju, sekundarnu hiperalgeziju, primarnu alodiniju, sekundarnu alodiniju ili drugi bol izazvan centralnom senzitizacijom.

Dodatni primeri kognitivnih poremećaja uključuju blago kognitivno oštećenje. Ostala stanja koja se mogu lečiti jedinjenjima i kompozicijama pronalaska uključuju Parkinsonovu bolest, plućnu hipertenziju, hroničnu opstruktivnu bolest pluća (HOBP), astmu, urinarnu inkontinenciju, glaukom, trizomiju 21 (Daunov sindrom), cerebralnu amiloidnu angiopatiju, degenerativnu demenciju, naslednu cerebralnu hemoragiju sa amiloidozom holandskog tipa (HCHWA-D), Creutzfeld-Jakobovu bolest, prionske poremećaje, amiotrofičnu lateralnu sklerozu, progresivnu supranuklearnu paralizu, traumu glave, moždani udar, pankreatitis, miozitis sa inkluzijskim telima, druge periferne amiloidoze, dijabetes i aterosklerozu.

U poželjnim primerima izvođenja, jedinjenja pronalaska mogu biti korisna u lečenju Alzheimerove bolesti, kognitivnih poremećaja, šizofrenije, poremećaja bola i poremećaja spavanja. Na primer, jedinjenja mogu biti korisna za prevenciju demencije Alzheimer-ovog tipa, kao i za lečenje rane faze, srednje faze ili kasne faze demencije Alzheimer-ovog tipa.

Potencijalna stanja ili poremećaji šizofrenije za koja jedinjenja prema pronalasku mogu biti korisna uključuju jedno ili više sledećih stanja ili bolesti: šizofreniju ili psihozu, uključujući šizofreniju (paranoična, neorganizovana, katatonična ili nediferencirana), šizofreniformni poremećaj, šizoafektivni poremećaj, deluzioni poremećaj, kratki psihotični poremećaj, deljeni psihotični poremećaj, psihotični poremećaj usled opšteg zdravstvenog stanja i indukovan supstancom ili lekom (fenciklidin, ketanin i drugi disocijativni anestetici, amfetamin i drugi psihostimulansi i kokain), psihozu, psihotični poremećaj, psihozu povezanu sa afektivnim poremećajima, kratku reaktivnu psihozu, šizoafektivnu psihozu, poremećaje „spektra šizofrenije“ kao što su šizoidni ili šizotipni poremećaji ličnosti ili bolesti povezane sa psihozom (kao što su velika depresija, manični depresivni (bipolarni) poremećaj, Alzheimer-ova bolest i posttraumatski stresni sindrom), uključujući oba, pozitivne i negativne simptome šizofrenije i drugih psihoza; kognitivne poremećaje uključujući demenciju (povezanu sa Alzheimer-ovom bolešću, ishemijom, multi-infarktnom demencijom, traumom, vaskularnim problemima ili moždanim udarom, HIV bolešću, Parkinsonovom bolešću, Huntingtonovom bolešću, Pikovom bolešću, Creutzfeldt-Jacobovom bolešću, perinatalnom hipoksijom, drugim opštim medicinskim stanjima

2

ili zloupotrebom supstancu); delirijum, amnestične poremećaje ili kognitivni pad povezan sa starenjem.

U sledećem primeru izvođenja, ovo otkriće pruža postupak za lečenje šizofrenije ili psihoze, koji sadrži primenu na pacijenta kome je to potrebno, efikasne količine jedinjenja (ili kompozicije koja daje jedinjenje) prema pronalasku, ili njegovog stereoizomera.

Potencijalni uslovi spavanja ili poremećaji za koje jedinjenja iz ovog pronalaska mogu biti korisna uključuju pojačanje kvaliteta spavanja; poboljšanje kvaliteta spavanja; povećanje održavanja spavanja; povećanje vrednosti koja se izračunava iz vremena tokom koga subjekat spava, podeljenog sa vremenom u kome subjekat pokušava da spava; smanjenje kašnjenja ili početka spavanja (vreme potrebno da se zaspi); smanjenje poteškoća kod padanja u san; povećanje kontinuiteta spavanja; smanjenje broja buđenja tokom spavanja; smanjenje ustajanja tokom noći; smanjenje vremena provedenog u budnom stanju nakon početnog spavanja; povećanje ukupne količine sna; smanjenje fragmentacije sna; promenu vremena, učestalosti ili trajanja REM faze spavanja; promenu vremena, učestalosti ili trajanja sporog talasa (tj. faze 3 ili 4) spavanja; povećanje količine i procenta spavanja u fazi 2; stimulaciju sporotalasnog spavanja; pojačavanje EEG-delta aktivnosti tokom spavanja; povećanje dnevne budnosti; smanjenje dnevne pospanosti; lečenje ili smanjenje prekomerne dnevne pospanosti; nesanicu; hipersomniju; narkolepsiju; prekinut san; apneju tokom spavanja; budnost; noćni mioklonus; prekide REM spavanja; „jet-lag“; poremećaje spavanja kod radnika koji rade u smenama; disomnije; noćni strah; nesanice povezane sa depresijom, emocionalne poremećaje/poremećaje raspoloženja, kao i hodanje u snu i enurezu, i poremećaje spavanja koji prate starenje; sindrom zalazećeg sunca Alzheimer-a; stanja povezana sa cirkadijalnim ritmom, kao i mentalni i fizički poremećaji povezani sa putovanjem kroz vremenske zone i rotirajućim rasporedima kod rada u smenama; stanja koja su posledica lekova koji uzrokuju smanjenja REM spavanja kao sporedni efekat; sindromi koji se manifestuju ne-restorativnim spavanjem i bolovima u mišićima ili apneju tokom spavanja koja je povezana sa respiratornim poremećajima tokom spavanja; i stanja koja su rezultat smanjenog kvaliteta sna.

Jedinjenja pronalaska se takođe mogu koristiti za lečenje ili sprečavanje diskinezija. Dalje, jedinjenja prema pronalasku mogu se koristiti za smanjenje tolerancije i/ili zavisnosti od opioidnog lečenja bola i za lečenje pastinencijalnog sindroma, npr. alkohola, opioida i kokaina. Subjekat ili pacijent na koga se primenjuju jedinjenja iz ovog pronalaska je obično ljudsko biće, muško ili žensko, kod kojeg je poželjna inhibicija mGluR2 receptora, ali može obuhvatati i

2

druge sisare kao što su gore navedeni, uključujući pse, mačke, miševe, pacove, goveda, konje, ovce, zečeve, majmune, šimpanze ili druge majmune ili primate, za koje je poželjno lečenje gore navedenih poremećaja, ili proučavanje mGluR2.

Sledeći primer izvođenja obezbeđuje lek ili farmaceutsku kompoziciju za negativnu alosteričku modulaciju mGluR2 receptora i/ili za lečenje bilo koje od gore navedenih bolesti ili poremećaja kod pacijenta (poželjno čoveka) kome je potreban takvo lečenje, koje sadrži jedinjenje (ili kompoziciju koja sadrži jedinjenje) pronalaska, ili njegov stereoizomer, ili farmaceutski prihvatljivu so pomenutog jedinjenja ili navedenog stereoizomera, i farmaceutski prihvatljiv nosač.

Sledeći primer izvođenja obezbeđuje postupak za proizvodnju leka ili farmaceutske kompozicije za negativnu alosteričku modulaciju mGluR2 receptora i/ili za lečenje jedne ili više gore navedenih bolesti ili stanja, koji sadrži kombinovanje jedinjenja (ili kompozicije koja sadrži jedinjenje) pronalaska, ili njegovog stereoizomera, ili farmaceutski prihvatljive soli pomenutog jedinjenja ili navedenog stereoizomera, sa farmaceutski prihvatljivim nosačem.

KOMBINOVANA TERAPIJA

Jedinjenja i kompozicije pronalaska mogu se koristiti u kombinaciji sa jednim ili više drugih lekova u lečenju bolesti ili stanja za koja su jedinjenja pronalaska korisna, tamo gde je kombinacija lekova poželjna, npr. gde je kombinacija lekova bezbednija ili efikasnija od bilo kog leka pojedinačno. Jedinjenja prema pronalasku mogu se koristiti u kombinaciji sa jednim ili više drugih lekova koji leče, sprečavaju, kontrolišu, poboljšavaju ili smanjuju rizik od neželjenih efekata ili toksičnosti jedinjenja pronalaska. Takvi drugi lekovi mogu se primenjivati putem i u količini koja se za to obično koristi, istovremeno ili uzastopno sa jedinjenjima ovog pronalaska. Shodno tome, farmaceutske kompozicije ovog pronalaska uključuju one koje sadrže jedan ili više drugih aktivnih sastojaka, pored jedinjenja ovog pronalaska. Kombinacije se mogu opciono primenjivati kao deo kombinovanog proizvoda jediničnog oblika doze ili kao komplet ili protokol lečenja, gde se jedan ili više dodatnih lekova daje u odvojenim oblicima doze kao deo režima lečenja. U jednom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska korisna u pomenutim kombinacijama sadrže jedinjenje prema bilo kojoj od formula (I), (IA), (IA-1), (IA-1a), (IA-1b), (IB), (IC) i (ID) kako su ovde opisani, ili prema bilo kom od ovde opisanih različitih primera izvođenja, ili njegov stereoizomer, ili farmaceutski prihvatljivu so pomenutog jedinjenja ili

2

pomenutog stereoizomera, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu kompozicija. U sledećem primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska korisna u pomenutim kombinacijama sadrže jedinjenja primera, na primer, onako kako su navedena kao primeri jedinjenja pronalaska. U sledećem primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska korisna u pomenutim kombinacijama sadrže jedinjenje iz primera 2-5 ili farmaceutski prihvatljivu so navedenog jedinjenja, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu kompoziciju. U sledećem primeru izvođenja, jedinjenje pronalaska korisno u navedenim kombinacijama sadrži jedinjenje primera 2-3A ili farmaceutski prihvatljivu so navedenog jedinjenja, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu kompoziciju. U sledećem primeru izvođenja, jedinjenje pronalaska korisno u navedenim kombinacijama sadrži jedinjenje primera 2-3B ili farmaceutski prihvatljivu so navedenog jedinjenja, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu kompoziciju. U sledećem primeru izvođenja, jedinjenje pronalaska korisno u navedenim kombinacijama sadrži jedinjenje primera 3-1A ili farmaceutski prihvatljivu so navedenog jedinjenja, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu kompoziciju. U sledećem primeru izvođenja, jedinjenje pronalaska korisno u pomenutim kombinacijama sadrži jedinjenje primera 3-1B ili farmaceutski prihvatljivu so navedenog jedinjenja, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu kompoziciju. U sledećem primeru izvođenja, jedinjenje pronalaska korisno u pomenutim kombinacijama sadrži jedinjenje primera 3-7A ili farmaceutski prihvatljivu so navedenog jedinjenja, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu kompoziciju. U sledećem primeru izvođenja, jedinjenje pronalaska korisno u navedenim kombinacijama sadrži jedinjenje primera 3-7B ili farmaceutski prihvatljivu so navedenog jedinjenja, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu kompoziciju.

U sledećem primeru izvođenja, jedinjenje ili kompozicija prema pronalasku može se koristiti u kombinaciji sa inhibitorima acetilholinesteraze kao što su donepezil i rivastigmin, antagonistima NMDA kao što su memantin, modulatorima muskarinskih receptora, modulatorima AMPA receptora, modulatorima mGluR3 receptora, nikotinskim alfa-7 i alfa-modulatorima 4-beta 2 receptora, modulatorima 5-HT6 i 5-HT4 receptora, modulatorima fosfodiesteraza (PDE), anagonistima alfa 2c receptora, histonskim deacetilazama i antioksidativnim terapijama.

U sledećem primeru izvođenja, jedinjenje ili kompozicija pronalaska mogu se koristiti u kombinaciji sa terapijama koje mogu izmeniti ili modifikovati tok napredovanja bolesti, uključujući terapije modulacijom beta-amiloida kao što su inhibitori BACE, BACE antitela, modulatori gama-sekretaze, tau i/ili modulatori fosfor-tau, i biološke terapije koje moduliraju plakove povezane sa neurološkim poremećajima, uključujući antitela, RNAi, miRNA i ćelijske terapije. Pogodni inhibitori BACE uključuju, ali nisu ograničeni na, verubecestat (Merck & Co.,

2

Inc.), AZD2392 (Eli Lilly & Co./AstraZeneca), CTS-21166 (CoMentis), E2609 (Biogen Idec, Inc./Esai Co., Ltd.) i BAN2401 (Biogen Idec, Inc./Esai Co., Ltd.).

U sledećem primeru izvođenja, jedinjenje ili kompozicija prema pronalasku može se koristiti u kombinaciji sa levodopom (sa ili bez selektivnog inhibitora ekstracerebralne dekarboksilaze kao što je karbidopa ili benserazid), antiholinergicima kao što je biperiden (opciono kao njegova hidrohloridna ili laktatna so) i triheksifenidil (benzheksol) hidrohlorid, inhibitorima COMT kao što su entakapon, inhibitorima MOA-B, antioksidantima, antagonistima receptora adenozina A2a, holinergičnim agonistima, antagonistima NMDA receptora, antagonistima receptora serotonina i agonistima receptora dopamina kao što su alentemol, bromokriptin, fenoldopam, lisurid, naksagolid, pergolid ili pramipreksol. Biće jasno da agonist dopamina može biti u obliku farmaceutski prihvatljive soli, na primer, alentemol hidrobromid, bromokriptin mezilat, fenoldopam mezilat, naksagolid hidrohlorid i pergolid mezilat.

Dodatni primeri kombinacija jedinjenja uključuju kombinacije sa sredstvima za lečenje bola, na primer nesteroidna antiinflamatorna sredstva, kao što su aspirin, diklofenak, duflunizal, fenoprofen, flurbiprofen, ibuprofen, indometacin, ketoprofen, ketorolak, naproksen, oksaprozin, piroksikam, sulindak i tolmetin; inhibitorima COX-2, kao što su celekoksib, rofekoksib, valdekoksib, 406381 i 644784; agonistima CB-2, kao što su 842166 i SAB378; antagonistima VR-1, kao što su AMG517, 705498, 782443, PAC20030, V114380 i A425619; antagonistima receptora za bradikinin B1, kao što su SSR240612 i NVPSAA164; blokatorima i antagonistima natrijumovih kanala, kao što su VKS409 i SPI860; inhibitorima azot-oksid-sintaze (NOS) (uključujući inhibitore iNOS i nNOS), kao što su SD6010 i 274150; antagonistima mesta glicina, uključujući lakozamid; neuronskim nikotinskim agonistima, kao što je ABT 894; antagonistima NMDA, kao što je AZD4282; otvaračima kalijumovih kanala; antagonistima AMPA/kainatnih receptora; blokatorima kalcijumovih kanala, kao što su zikonotid i NMED160; IO modulatorima receptora GABA-A (npr. agonistom GABA-A receptora); inhibitorima matrične metaloproteaze (MMP); trombolitičkim sredstvima; opioidnim analgeticima kao što su kodein, fentanil, hidromorfon, levorfanol, meperidin, metadon, morfin, oksikodon, oksimorfon, pentazocin, propoksifen; faktorom inhibicije neutrofila (NIF); pramipeksolom, ropinirolom; antiholinergicima; amantadinom; inhibitorima monoaminooksidaze B15 ("MAO-B"); agonistima ili antagonistima 5HT receptora; antagonistima mGlu5, kao što je AZD9272; alfa agonistima, kao što je AGNXX/YY; neuronskim nikotinskim agonistima, kao što je ABT894; agonistima ili antagonistima NMDA receptora, kao što je AZD4282; antagonistima NKI; selektivnim inhibitorima ponovnog preuzimanja serotonina ("SSRI") i/ili selektivnim inhibitorima ponovnog preuzimanja serotonina i norepinefrina ("SSNRI"), kao što je duloksetin; tricikličnim antidepresivima, modulatorima noradrenalina; litijumom; valproatom; gabapentinom; pregabalinom; rizatriptanom; zolmitriptanom; naratriptanom i sumatriptanom.

U sledećem primeru izvođenja, jedinjenja i kompozicije prema pronalasku mogu se primenjivati u kombinaciji sa jedinjenjima korisnim za lečenje šizofrenije ili za poboljšanje kvaliteta spavanja i sprečavanje i lečenje poremećaja spavanja i poremećaja spavanja, uključujući npr. sedative, hipnotike, anskiolitike, antipsihotike, sredstva protiv anksioznosti, antihistaminike, benzodiazepine, barbiturate, ciklopirolone, antagoniste oreksina (kao što je suvoreksant), agoniste oreksina, antagoniste alfa-1, agoniste GABA, antagoniste 5HT-2, uključujući antagoniste 5HT-2A i antagoniste 5HT-2A/2C, antagoniste histamina uključujući antagoniste histamina H3, inverzne agoniste histamina H3, imidazopiridine, manja sredstva za smirenje, agoniste i antagoniste melatonina, melatonergična sredstva, agoniste i antagoniste prokineticina, pirazolopirimidine, antagoniste kalcijumovih kanala T-tipa, triazolopiridine i slično, ili se jedinjenje predmetnog pronalaska može primenjivati zajedno sa upotrebom fizičkih postupaka kao što je svetlosna terapija ili električna stimulacija.

Kada se primenjuje kombinovana terapija na pacijenta kod koga postoji potreba za takvom primenom, terapeutska sredstva u kombinaciji ili farmaceutska kompozicija ili kompozicije koje sadrže terapeutska sredstva mogu se primenjivati u bilo kom redosledu, kao što je, na primer, uzastopno, istovremeno, zajedno, istovremeno i slično.

U jednom primeru izvođenja, jedinjenje prema pronalasku se primenjuje tokom vremena kada dodatno terapeutsko sredstvo (sredstva) ispoljava svoj profilaktički ili terapeutski efekat, ili obrnuto.

U sledećem primeru izvođenja, jedinjenje pronalaska i dodatno terapeutsko sredstvo (sredstva) primenjuju se u dozama koje se obično koriste kada se takva sredstva koriste kao monoterapija za lečenje poremećaja.

U sledećem primeru izvođenja, jedinjenje pronalaska i dodatno terapeutsko sredstvo (sredstva) primenjuju se u dozama nižim od doza koje se obično koriste kada se takva sredstva koriste kao monoterapija za lečenje poremećaja.

U jednom aspektu, jedinjenje pronalaska i dodatni terapeutski agens (i) su prisutni u istoj kompoziciji, koja je pogodna za oralnu primenu.

U nekim primerima izvođenja, jedinjenje pronalaska i dodatno terapeutsko sredstvo(a) mogu delovati aditivno ili sinergistički. Sinergistička kombinacija može omogućiti upotrebu nižih doza

1

jednog ili više sredstava i/ili ređu primenu jednog ili više sredstava kombinovane terapije. Niža doza ili ređa primena jednog ili više sredstava mogu smanjiti toksičnost terapije bez smanjenja efikasnosti terapije.

Doze i režim doziranja dodatnih terapeutskih sredstava koji se koriste u kombinovanim terapijama ovog pronalaska za lečenje ili prevenciju bolesti ili poremećaja može odrediti nadležni lekar, uzimajući u obzir odobrene doze i režim doziranja u umetku u pakovanju; starost, pol i opšte zdravlje pacijenta; i vrstu i težinu virusne infekcije ili povezanu bolest ili poremećaj. Sledeći primer izvođenja obezbeđuje komplet koji sadrži terapeutski efikasnu količinu jedinjenja (ili kompozicije koja sadrži jedinjenje) pronalaska, ili njegov stereoizomer, ili farmaceutski prihvatljivu so pomenutog jedinjenja ili navedenog stereoizomera, opciono zajedno sa najmanje jednim dodatnim terapeutskim sredstvom navedenim u prethodnom tekstu i farmaceutski prihvatljiv nosač, vehikulum ili razblaživač.

Kada se primenjuje kombinovana terapija na pacijenta kome je takva primena potrebna, terapeutska sredstva u kombinaciji ili farmaceutska kompozicija ili kompozicije koje sadrže terapeutska sredstva mogu se primenjivati u bilo kom redosledu, kao što je, na primer, uzastopno, istovremeno, zajedno, istovremeno i slično.

U jednom primeru izvođenja, jedinjenje pronalaska se primenjuje tokom vremena kada dodatno terapeutsko sredstvo (sredstva) ispoljavaju svoj profilaktički ili terapeutski efekat, ili obrnuto. U jednom primeru izvođenja, jedinjenje pronalaska i dodatno terapeutsko sredstvo (sredstva) su prisutni u istoj kompoziciji, koja je pogodna za oralnu primenu.

PREPARATIVNI PRIMERI

Generalno, jedinjenja u pronalasku mogu se proizvesti različitim postupcima poznatim stručnjacima i pomoću poznatih postupaka koji su im analogni. Pronalazak koji je ovde otkriven ilustrovan je sledećim preparacijama i primerima koji ne bi trebalo da se tumače kao ograničavajući za obim pronalaska. Alternativni mehanistički putevi i analogne strukture biće očigledni stručnjacima u ovoj oblasti. Stručnjak nije ograničen na ove postupke.

Stručnjak u ovoj oblasti razume će da će jedan put biti optimizovan u zavisnosti od izbora supstituenata dodataka. Pored toga, stručnjak u ovoj oblasti razumeće da se u nekim slučajevima mora kontrolisati redosled koraka kako bi se izbegla nekompatibilnost funkcionalne grupe.

2

Pripremljena jedinjenja mogu se analizirati na njihov sastav i čistoću, kao i okarakterisati standardnim analitičkim tehnikama kao što su, na primer, elementarna analiza, NMR, masena spektroskopija i IR spektri.

Stručnjak u ovoj oblasti razumeće da se reagensi i rastvarači koji se stvarno koriste mogu odabrati između nekoliko reagensa i rastvarača koji su u struci dobro poznati kao efikasni ekvivalenti. Dakle, kada se pominje specifično rastvarač ili reagens, to treba da bude ilustrativni primer uslova poželjnih za tu određenu reakcionu šemu ili za pripremu opisanu u nastavku.

Tamo gde su predstavljeni NMR podaci, 1H spektri su dobijeni ili na Varian 400, AVANCE III 400 ili Varian AS500, a hemijska pomeranja su prikazana kao ppm sa brojem protona i mnoštvom naznačenim u zagradama. Tamo gde su predstavljeni LC/MS podaci, analize su izvršene pomoću Waters Acquity UPLC (BEH C18 kolona, 1,0 k 50 mm, 1,7 um, UV 254 nm, 2 min 10-99% MeCN/voda 0,05% TFA gradijent, ESI pozitivan) ili seriju Agilent 1200 ili Shimadzu 20AB (Xtimate C18 kolonom, 2,1 x 30 mm, 3um, UV 220 ili 254 nm, 1,5 ml/4 L TFA u vodi (rastvarač A) i 0,75 ml/4 L TFA u acetonitrilu (rastvarač B), koristeći gradijent eluiranja 10% -80% (rastvarač B) tokom 0,9 minuta i sa zadržavanjem na 80% tokom 0,6 minuta pri brzini protoka od 1,2 ml/min, ESI pozitivan).

Preparativna hiralna HPLC razdvajanja se generalno vrše primenom superkritične tečne hromatografije eluiranjem hiralne kolone kao što je OJ-H, (4,6 x 250 mm, Chiral Technologies, Inc., West Chester, Pennsylvania) sa pokretnom fazom izopropanola i superkritičnog CO2.

U tekstu se mogu koristiti sledeće skraćenice:

Ac = acetil; aq = vodeni; CO = ugljen monoksid; Me = metil; Et = etil; t-Bu: = terc-butil; Ar: = aril; Ph = fenil; Bn = benzil; EtOH = etil alkohol; IPA = izopropil alkohol; AIBN = azobisizobutironitril; ACN = acetonitril; AcOK = kalijum acetat; Boc = terc-butiloksikarbonil; BOP: = benzotriazoliloksitris (dimetilamino) fosfonijum heksafluorofosfat; izrač. = izračunato; hiralna SFC = superkritična tečna hromatografija na hiralnoj koloni; ClZn = hlorocink; DAST = dietilaminosumpor trifluorid; DCE = dihloroetan; DCM = dihlorometan; DCM / i-PrOH = dihlorometan / izo-propanol; DEA = dietilamin; DIBAL-H = diizobutilalumin hidrid; DIPEA = N, N-diizopropiletilamin; DMA = dimetilacetamid; DMEM = Dulbecco-ov modifikovani Eagle medijum (visok sadržaj glukoze); DMF: = dimetilformamid; DMFDMA = N, N-dimetilformamid dimetilacetal; DMP = Des-Martin perjodinane; DMSO = dimetilsulfoksid; dppf = difenilfosforni ferocenil; FBS = fetusni goveđi serum; HATU = N,N,N',N'-tetrametil-O-(7-azabenzotriazol-1-il)uronijum heksafluorofosfat; (HCHO)n= paraformaldehid; HMDS = heksametildisilazan; HPLC = tečna hromatografija visokog učinka; m-CPBA = metahloroperoksibenzojeva kiselina; M = molarni; m-CPBA (ili mCPBA) = metahloroperoksibenzojeva kiselina; MS = masena spektrometrija; MS (ESI) izrač. = masena spek. (elektrosprej jonizacija); Ms = mezil; NMO = N-metil morfolin N-oksid; Pd(dtbpf)Cl2= 1,1'-bis (di-terc-butilfosfino)ferocen]dihloropaladijum (II); PMB = p-metoksibenzil; Prep-TLC = preparativna hromatografija na tankom sloju; rt = sobna temperatura; SFC = superkritična fluidna hromatografija; TEA = trietilamin; TFA = trifluorosirćetna kiselina; THF = tetrahidrofuran; TPAP = tetra-n-propil amonijum per-rutenat.

Sledeća intermedijerna jedinjenja su pripremljena kako je opisano u nastavku za upotrebu u pripremi jedinjenja prema pronalasku.

INTERMEDIJER 2-1

2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)nikotinaldehid

Korak 1: 4-bromo-2,6-dihloronikotinska kiselina

n-Butil litijum (38.8 mL, 97 mmol) dodat je ukapavanjem u diizopropilamin (14.91 mL, 106 mmol) u THF (50 mL) na -78 °C. Rastvor je mešan na -78 °C 0.5 h i na 0 °C 0.5 h. Sirovi svetlo žuti rastvor litijum diizopropilamida je korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. U mešani i ohlađeni (-78 °C) rastvor 4-bromo-2,6-dihloropiridina (20 g, 88 mmol) u THF (550 mL) ukapavanjem je dodavan prethodno formirani rastvor litijum diizopropilamida pod atmosferom N2. Smeša je mešana na -78 °C 1 h, (suvi led) u reakcionu smešu je dodat ugljen dioksid (50 g, 1136 mmol) na -78 °C i mešan 1 h. 1 M vodeni rastvor Na2CO3(1 L) je dodat da bi se ugasila reakcija. Smeša je ekstrahovana etil acetatom (1 L), vodeni rastvor je zakišeljen sa 1M vodenim rastvorom HCl do pH∽4. Smeša je ekstrahovana etil acetatom (2 x 1L). Spojene organske faze su sušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom da bi se dobio proizvod koji je korišćen u narednim koracima bez dodatnog prečišćavanja. MS (ESI) izrač. za (C6H3BrCl2NO2)[M+H]+ , [271.86], zabeleženo, [271.7].

4

1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.48 - 7.66 (m, 1H)

Korak 2: (trimetilsilil)metil 4-bromo-2,6-dihloronikotinat i metil 4-bromo-2,6-dihloronikotinat

U rastvor 4-bromo-2,6-dihloronikotinske kiseline (19.5 g, 72.0 mmol) u THF (500 mL) ukapavanjem je dodat (trimetilsilil)diazometan (54.0 mL, 108 mmol) na 15 °C. Smeša je mešana na 15 °C 8 h. Smeša je ugašena sa HCl (2M) (20 mL), sušena preko Na2SO4, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu (ISCO®; 120 g SepaFlash® kolona, eluiranje sa 0 do 5% etil acetatom/petroletrom) da bi se dobila smeša proizvoda. MS (ESI) izrač. za (C10H13BrCl2NO2Si)[M+H]+ , 357.9, zabeleženo, 357.8. MS (ESI) izrač. za (C7H5BrCl2NO2) [M+H]+ , 285.9, zabeleženo, 285.8.

Korak 3: 4-bromo-2,6-dihloronikotinaldehid

U rastvor (trimetilsilil)metil 4-bromo-2,6-dihloronikotinata i metil 4-bromo-2,6-dihloronikotinata (17 g, ∽60 mmol) u toluenu (400 mL) ukapavanjem je dodat DIBAL-H (65.6 mL, 65.6 mmol) na -78 °C. Smeša je mešana na -78 °C 2 h. Smeša je ugašena zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl (300 mL). Dodat je vodeni rastvor HCl (2M, 150 mL) i smeša je ekstrahovana etil acetatom (2 x 500 mL), kombinovane organske materije su sušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (ISCO®; 120 g SepaFlash® kolona, eluiranje sa 0 do 3% etil acetata/petroletra) da bi se dobio proizvod. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 10.36 (s, 1H), 7.77 -7.63 (m, 1H)

Korak 4: 2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)nikotinaldehid

Smeša (2,4-difluorofenil)boronske kiseline (4.52 g, 28.6 mmol), 4-bromo-2,6-dihloronikotinaldehida (7.3 g, 28.6 mmol) i Na2CO3(6.07 g, 57.3 mmol) u 1,4-dioksanu (120 mL) i vodi (12 mL) dodat je PdCl2(dppf) (1.0 g, 1.4 mmol) pod N2. Smeša je zagrevana do 100 °C 2 h. Posle hlađenja do 20 °C, smeša je sipana u vodu (500 mL) i ekstrahovana etil acetatom (2 x 500 mL), kombinovani organski slojevi su sušeni preko Na2SO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (ISCO®; 80 g SepaFlash® kolona, eluiranje sa 0 do 3% etil acetatom/petroletrom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 10.34 (s, 1H), 7.29 - 7.19 (m, 2H), 7.01 (dt, J=1.5, 8.3 Hz, 1H), 6.95 - 6.86 (m, 1H)

INTERMEDIJER 2-2

etil (E)-4-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)-2-oksobut-3-enoat

Videti postupak za Primer 2-1A i 2-1B, Korak 1

INTERMEDIJER 2-3

etil 4-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)-2-hidroksibutanoat

Videti postupak za Primer 2-1A i 2-1B, Korak 2

INTERMEDIJER 2-4

etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-(hidroksimetil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat Videti postupak za Primer 2-1A i 2-1B, Korak 5

INTERMEDIJERI 2-5A, 2-5B, 2-5C i 2-5D

etil (2S,3R)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(hidroksimetil)-3-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat, etil (2S,3S)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(hidroksimetil)-3-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat, etil (2R,3R)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(hidroksimetil)-3-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat i etil (2R,3S)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(hidroksimetil)-3-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat

Videti postupak za Primer 2-2A, 2-2B, 2-2C i 2-2D, Korak 8

INTERMEDIJER 2-6

metil 3-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)propanoat

Videti postupak za Primer 2-3A i 2-3B, Korak 3

INTERMEDIJER 2-7

3-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)propanal

Videti postupak za Primer 2-3A i 2-3B, Korak 5

INTERMEDIJER 3-1

etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-formil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat Videti postupak za Primer 3-7A i 3-7B, Korak 1

INTERMEDIJER 3-2

7-hloro-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-2-karboksilna kiselina Videti postupak za Primer 2-9A, 2-9B, 2-9C i 2-9D, Korak 1

Jedinjenja formule I (pri čemu, u Šemi 1, X je most dva metilena ili nije prisutan, prsten B, n, i svaki R1 su kao što su definisani u formuli I, i R i R' su H ili metil) mogu biti pripremljena prema Šemi 1 aminacijom aldehida 1-1, nakon čega sledi acilacija i ciklizacija 1-3 da bi se formirao piridin 1-4. Piridin 1-4 je uzastopno deacilovan, hlorovan i karbonilovan da bi se generisao hloropiridin 1-7. Hloropiridn 1-7 može biti kuplovan direktno sa aromatičnom boronskom kiselinom ili može biti sam preveden u boronsku kiselinu 1-7a i kuplovan za aromatičan bromid, da bi se formirao 1-8 koji je tretiran amonijakom da bi se dobio 1-9.

PRIMER 1-1

4-(2,4-difluorofenil)-5,8-dihidro-6H-pirano[3,4-b]piridin-2-karboksamid

Korak 1: Etil 5-amino-3,6-dihidro-2H-piran-4-karboksilat

Smeša metil 5-(3-metoksi-3-oksopropil)tetrahidrofuran-2-karboksilata (3 g, 17.4 mmol) i NH4OCONH2(2.65 g, 34.9 mmol) u MeOH (20 mL) je mešana na 25°C 2 h. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (eluiranjem sa 5:1 petroletrom/etil acetatom) da bi se dobio proizvod. 1H NMR (400MHz, CD3OD) δ 4.17 - 4.03 (m, 4H), 3.73 (t, J=5.5 Hz, 2H), 2.37 - 2.19 (m, 2H), 1.24 (t, J=7.0 Hz, 3H).

Korak 2: etil 5-(3-metoksi-3-oksopropanamido)-3,6-dihidro-2H-piran-4-karboksilat

Etil 5-amino-3,6-dihidro-2H-piran-4-karboksilat (2.6 g, 15 mmol) i Et3N (6 mL, 45 mmol) su rastvoreni u DCM (50 mL), dodat je metil 3-hloro-3-oksopropanoat (2.26 g, 16 mmol) i dobijeni rastvor je mešan 2 h na 0°C. Smeša je ugašena vodom (30 mL) i ekstrahovana sa DCM (3 x 40 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (30 mL), sušeni preko Na2SO4, filtrirani i koncentrovani. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (eluiranjem sa 10:1 petroletrom/etil acetatom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C12H18NO6) [M+H]+ , 272.1, zabeleženo, 271.9.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 4.77 (s, 1H), 4.17 (q, J=7.0 Hz, 1H), 3.79 - 3.63 (m, 3H), 3.35 (s, 1H), 2.38 (t, J=5.3 Hz, 1H), 1.24 (t, J=7.0 Hz, 3H).

Korak 3: Metil 2,4-dihidroksi-6,8-dihidro-5H-pirano[3,4-b]piridin-3-karboksilat

4

Etil 5-(3-metoksi-3-oksopropanamido)-3,6-dihidro-2H-piran-4-karboksilat (1.15 g, 4 mmol) je rastvoren u MeOH (15 mL), dodat je natrijum metanolat (0.25 g, 4.6 mmol) i dobijeni rastvor je mešan 1 h na 80 °C. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobio proizvod koji je korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. MS (ESI) izrač. za (C10H12NO5)[M+H]+ , 225.0, zabeleženo, 225.9.<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 4.18 - 4.03 (m, 3H), 3.73 (t, J=5.7 Hz, 2H), 2.27 (t, J=5.7 Hz, 2H), 1.24 (t, J=7.0 Hz, 2H).

Korak 4: 6,8-dihidro-5H-pirano[3,4-b]piridin-2,4-diol

Vodeni rastvor HCl (6 M, 20 mL, 120 mmol) je dodat u metil 2,4-dihidroksi-6,8-dihidro-5H-pirano[3,4-b]piridin-3-karboksilat (1 g, sirovi) i smeša je mešana na 100 °C 4 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da bi se dobio proizvod koji je korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. MS (ESI) izrač. za (C8H10NO3)[M+H]+ , 168.0, zabeleženo, 167.8.

Korak 5: 2,4-dihloro-6,8-dihidro-5H-pirano[3,4-b]piridin

Smeša 6,8-dihidro-5H-pirano[3,4-b]piridin-2,4-diola (0.9 g, crude) i DMF (5 mL, 64 mmol) u fosforil trihloridu (4.3 mL, 48.5 mmol) je mešana na 80 °C 12 h. Smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature i sipana u ledenu vodu i smeša je podešena do pH 9 zasićenim vodenim rastvorom Na2CO3. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (45 mL), sušeni preko Na2SO4, filtrirani i koncentrovani. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (eluiranjem sa 100:0 do 20:1 petroletrom/etil acetatom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C8H8C12NO)[M+H]+ , 204.0, zabeleženo, 203.9. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.29 (s, 1H), 5.10 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 4.86 (br. s., 1H), 3.24 - 3.12 (m, 2H), 2.52 (d, J = 17.4 Hz, 2H), 2.11 (t, J = 9.6 Hz, 2H).

Korak 6: etil 4-hloro-6,8-dihidro-5H-pirano[3,4-b]piridin-2-karboksilat

U rastvor 2,4-dihloro-6,8-dihidro-5H-pirano[3,4-b]piridina (100 mg, 0.49 mmol) u EtOH (20 mL) dodat je kalijum acetat (96 mg, 0.98 mmol) i PdCl2(dppf) (36 mg, 0.049 mmol) pod N2. smeša je degazirana i ponovo napunjena sa CO (tri puta). Dobijena smeša je mešana pod 50 psi CO na 60°C 1.5 h. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobio sirovi proizvod, koji je prečišćen hromatografijom na silika gelu (ISCO®; 40 g SepaFlash® kolona, eluiranje sa 0 do 20% etil acetat/petroletar na 40 mL/min) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C11H12ClNO3) [M+H]+ , 242.0, zabeleženo, 241.9.<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 8.00 (s, 1H), 4.75 (s, 2H), 4.41 (q, J=7.2 Hz, 2H), 4.01 (t, J=5.9 Hz, 2H), 2.93 (t, J=5.7 Hz, 2H), 1.39 (t, J=7.2 Hz, 3H).

Korak 7: Etil 4-(2,4-difluorofenil)-6,8-dihidro-5H-pirano[3,4-b]piridin-2-karboksilat

U smešu etil 4-hloro-6,8-dihidro-5H-pirano[3,4-b]piridin-2-karboksilata (100 mg, 0.613 mmol), (2,4-difluorofenil)boronske kiseline (260 mg, 1.65mmol) i K3PO4(263 mg, 1.24 mmol) u THF (4.5 mL) i vodi (0.5 mL) dodat je PdCl2(dppf) (51 mg, 0.082 mmol), i smeša je degazirana i ponovo napunjena sa N2(tri puta). Smeša je zagrevana do 80°C 2 h. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobio sirovi proizvod, koji je prečišćen pomoću Prep-TLC (silika gel, eluiranjem sa 1:1 etil acetatom/petroletrom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C17H16F2NO3) [M+H]+ ,320.1, zabeleženo, 319.9.<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 7.85 (s, 1H), 7.46 - 7.34 (m, 1H), 7.13 (q, J=7.7 Hz, 2H), 4.41 (q, J=7.0 Hz, 2H), 4.03 - 3.85 (m, 2H), 2.80 -2.66 (m, 2H), 1.39 (t, J=7.2 Hz, 3H).

Korak 8: 4-(2,4-difluorofenil)-6,8-dihidro-5H-pirano[3,4-b]piridin-2-karboksamid

Smeša etil 4-(2,4-difluorofenil)-6,8-dihidro-5H-pirano[3,4-b]piridin-2-karboksilata (80 mg, 0.25 mmol) u NH3u MeOH (15 mL, 150 mmol) je mešana na 25°C 12 h. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i prečišćena pomoću Prep-HPLC (Kolona: Agela ASB 150×25 mm, 5 um; Pokretna faza: 30% do 60% vode (koja sadrži 0.1% TFA)-ACN; Stopa protoka: 25 mL/min) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. MS (ESI) izrač. za (C15H14F2N2O2) [M+H]+ ,291.1, zabeleženo, 291.0.<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 7.82 (s, 1H), 7.44 - 7.32 (m, 1H), 7.18 - 7.05 (m, 2H), 3.93 (t, J=5.7 Hz, 2H), 2.70 (t, J=5.3 Hz, 2H).

PRIMER 1-2A i 1-2B

(6S,9R)-4-(2,4-difluorofenil)-6,7,8,9-tetrahidro-5H-6,9-epoksiciklohepta[b]piridin-2-karboksamid i (6R,9S)-4-(2,4-difluorofenil)-6,7,8,9-tetrahidro-5H-6,9-epoksiciklohepta[b] piridin-2-karboksamid

Korak 1: metil 5-(3-metoksi-3-oksopropil)furan-2-karboksilat

Smeša metil 5-bromofuran-2-karboksilata (10 g, 64 mmol), metil akrilata (16.5 g, 192 mmol), (MeO)3P (0.4 g, 0.32 mmol), Et3N(17 mL, 128 mmol) i Pd(OAc)2(0.36 g, 0.16 mmol) u DMF (120 mL) je degazirana i ponovo napunjena sa N2(tri puta). Smeša je zagrevana do 110°C 3 h. Ohlađena smeša je otfiltrirana i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (eluiranjem sa 5:1 petroletrom/etil acetatom) da bi se dobio proizvod. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.45 (d, J = 15.9 Hz, 1H), 7.20 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 6.68 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 6.57 (d, J = 15.9 Hz, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.81 (s, 3H).

Korak 2: metil 5-(3-metoksi-3-oksopropil)tetrahidrofuran-2-karboksilat

U rastvor metil 5-(3-metoksi-3-oksopropil)furan-2-karboksilata (4.7 g, 22 mmol) u etil acetatu (100 mL) dodat je Pd/C (1 g) (10% tež.) pod atmosferom N2. Smeša je degazirana i ponovo napunjena sa H2(tri puta). Dobijena smeša je mešana pod 40 psi H2na 50°C 15 h. Smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio proizvod koji je korišćen u narednim koracima bez dodatnog prečišćavanja.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.42 (dd, J = 5.0, 8.5 Hz, 1H), 4.07 - 3.95 (m, 1H), 3.74 - 3.67 (m, 3H), 3.64 (s, 3H), 2.57 - 2.36 (m, 2H), 2.20 (qd, J = 8.4, 12.6 Hz, 1H), 2.11 - 1.81 (m, 5H), 1.58 (qd, J = 8.2, 11.9 Hz, 1H).

Korak 3: metil 2-okso-8-oksabiciklo[3.2.1]oktan-3-karboksilat

4

U smešu metil 5-(3-metoksi-3-oksopropil)tetrahidrofuran-2-karboksilata (4.6 g, 21mmol) u THF (60 mL) dodat je NaH (840 mg, 60% u ulju) lagano pod N2i smeša je zagrevana na refluksu 6 h. Reakcija je ugašena sa NH4Cl (50 mL) i ekstrahovana etil acetatom (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (60 mL), sušeni preko Na2SO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (eluiranjem sa 5:1 petroletar/etil acetat) da bi se dobio proizvod.1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.65 - 4.48 (m, 1H), 4.41 - 4.22 (m, 1H), 3.75 - 3.64 (m, 1H), 2.69 (dd, J = 4.9, 15.7 Hz, 1H), 2.40 - 2.29 (m, 1H), 2.18 - 2.01 (m, 3H), 1.94 - 1.72 (m, 2H).

Korak 4: metil 2-amino-8-oksabiciklo[3.2.1]okt-2-en-3-karboksilat

Smeša metil 2-okso-8-oksabiciklo[3.2.1]oktan-3-karboksilata (200 mg, 1.08 mmol) i NH4OAc (770 mg, 10 mmol) u MeOH je mešana u hermetički zatvorenu epruvetu na 90°C 15 h. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u vodi (10 mL) i ekstrahovan etil acetatom (5 x 15 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (30 mL), sušeni preko Na2SO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (eluiranjem sa 5:1 petroletrom/etil acetatom) da bi se dobio proizvod. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.52 (t, J = 5.0 Hz, 1H), 4.38 (br. s., 1H), 3.52 (s, 3H), 2.56 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 2.00 - 1.82 (m, 5H), 1.58 (t, J = 8.2 Hz, 1H).

Korak 5: Metil 2-(3-etoksi-3-oksopropanamido)-8-oksabiciklo[3.2.1]okt-2-en-3-karboksilat

Metil 2-amino-8-oksabiciklo[3.2.1]okt-2-en-3-karboksilat (490 mg, 2.67 mmol) i Et3N (0.7 mL, 5.3 mmol) su rastvoreni u DCM (20 mL), dodat je etil-3-hloro-3-oksopropanoat (481 mg, 3.1 mmol) i dobijeni rastvor je mešan 2 h na 20°C. Smeša je ugašena vodom (15 mL) i ekstrahovana etil acetatom (3 x 20 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (20 mL), sušeni preko Na2SO4, filtrirani i koncentrovani. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (eluiranjem sa 4:1 petroletrom/etil acetatom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C14H20NO6) [M+H]+ , 298.1, zabeleženo, 298.1.

Korak 6: metil 2,4-dihidroksi-6,7,8,9-tetrahidro-5H-6,9-epoksiciklohepta[b]piridin-3-karboksilat

Metil 2-(3-etoksi-3-oksopropanamido)-8-oksabiciklo[3.2.1]okt-2-ene-3-karboksilat (4.8 g, 16 mmol) je rastvoren u MeOH (80 mL), dodat je metanolat (368 mg, 16.1 mmol) i dobijeni rastvor je mešan 1.5 h na 80°C. Ohlađena smeša je filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobio proizvod koji je korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. MS (ESI) izrač. za (C12H14NO5) [M+H]+ , 252.1, zabeleženo, 252.0.

Korak 7: 6,7,8,9-tetrahidro-5H-6,9-epoksiciklohepta[b]piridin-2,4-diol

Vodeni rastvor HCl (20 mL, 120 mmol, 6 M) je dodat u metil 2,4-dihidroksi-6,7,8,9-tetrahidro-5H-6,9-epoksiciklohepta[b]piridin-3-karboksilat (1.2 g, 4.8 mmol) i smeša je mešana na 100°C 20 h. Smeša je ekstrahovana sa 3:1 DCM/i-PrOH (4 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobio proizvod koji je korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. MS (ESI) izrač. za (C10H11NO3) [M+H]+ , 194.1, zabeleženo, 193.9.

Korak 8: 2,4-dihloro-6,7,8,9-tetrahidro-5H-6,9-epoksiciklohepta[b]piridin

Smeša 6,7,8,9-tetrahidro-5H-6,9-epoksiciklohepta[b]piridin-2,4-diola (1.2 g, 6.21 mmol) i DMF (6.5 mL, 6.21 mmol) u fosforil trihloridu (8.48 g, 55.3 mmol) je mešana na 90°C 15 h. Dodat je DMF (0.2 mL) i smeša je mešana na 90°C 15 h. Ohlađena smeša je sipana u ledenu vodu i pH je podešena do 7 zasićenim NaHCO3. Smeša je ekstrahovana etil acetatom (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (45 mL), sušeni preko Na2SO4, filtrirani i koncentrovani, ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (eluiranjem sa 4:1 petroletrom/etil acetatom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C10H10Cl2NO) [M+H]+ , 230.0, zabeleženo, 230.1.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.29 (s, 1H), 5.10 (d, J= 6.4 Hz, 1H), 4.86 (br. s., 1H), 3.24 - 3.12 (m, 2H), 2.52 (d, J= 17.4 Hz, 2H), 2.11 (t, J = 9.6 Hz, 2H).

Korak 9: etil 4-hloro-6,7,8,9-tetrahidro-5H-6,9-epoksiciklohepta[b]piridin-2-karboksilat

4

U rastvor 2,4-dihloro-6,7,8,9-tetrahidro-5H-6,9-epoksiciklohepta[b]piridina (330 mg, 1.434 mmol) u EtOH (10 mL) dodat je kalijum acetat (282 mg, 2.87 mmol) i PdCl2(dppf) (105 mg, 0.143 mmol) pod atmosferom N2. Smeša je degazirana i ponovo napunjena sa CO (tri puta). Dobijena smeša je mešana pod 50 psi CO na 80°C 2 h. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobio sirovi proizvod, koji je prečišćen hromatografijom na silika gelu (ISCO®; 40 g SepaFlash® kolona, eluiranje sa 0 do 20% etil acetatom / petroletrom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C13H15ClNO3) [M+H]+ , 268.1, zabeleženo, 268.1.

Korak 10: etil 4-(2,4-difluorofenil)-6,7,8,9-tetrahidro-5H-6,9-epoksiciklohepta[b]piridin-2-karboksilat

U smešu etil 4-hloro-6,7,8,9-tetrahidro-5H-6,9-epoksiciklohepta[b]piridin-2-karboksilata (140 mg, 0.523 mmol), (2,4-difluorofenil)boronske kiseline (165 mg, 1.046 mmol) i K2CO3(145 mg, 1.046 mmol) u 1,4-dioksanu (5 mL) i vodi (0.5 mL) dodat je PdCl2(dppf) (38.3 mg, 0.052 mmol). Smeša je degazirana i ponovo napunjena sa N2(tri puta), zatim zagrevana do 100 °C 2 h. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobio sirovi proizvod, koji je prečišćen hromatografijom na silika gelu (ISCO®; 40 g SepaFlash® kolona, eluiranje sa od 0 do 30% etil acetata/ petroletra) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C19H18F2NO3) [M+H]+ , 346.1, zabeleženo, 346.0.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3)δ 7.86 (s, 1 H), 7.21 (d, J = 6.26 Hz, 1 H), 6.91 -7.06 (m, 2 H), 5.37 (d, J = 6.26 Hz, 1 H), 4.73 - 4.80 (m, 1 H), 4.49 (d, J = 7.04 Hz, 2 H), 3.12 -3.22 (m, 1 H), 2.20 - 2.36 (m, 4 H), 1.57 - 1.76 (m, 2 H), 1.43 (t, J = 7.04 Hz, 3 H).

Korak 11: etil (6S,9R)-4-(2,4-difluorofenil)-6,7,8,9-tetrahidro-5H-6,9-epoksiciklohepta[b]piridin-2-karboksilat i etil (6R,9S)-4-(2,4-difluorofenil)-6,7,8,9-tetrahidro-5H-6,9-epoksiciklohepta[b]piridin-2-karboksilat

4

Racemski etil 4-(2,4-difluorofenil)-6,7,8,9-tetrahidro-5H-6,9-epoksiciklohepta[b]piridin-2-karboksilat (100 mg, 0.290 mmol) je odvojen preko hiralne SFC (Kolona: Chiralpak AD 250×30 mm, 5 um; Pokretna faza: 15% do 15% EtOH (koji sadrži 0.05% DEA) u CO2; Stopa protoka: 60 mL/min) da bi se dobila dva enantiomera.

Korak 12: (6S,9R)-4-(2,4-difluorofenil)-6,7,8,9-tetrahidro-5H-6,9-epoksiciklohepta[b]piridin-2-karboksamid i (6R,9S)-4-(2,4-difluorofenil)-6,7,8,9-tetrahidro-5H-6,9-epoksiciklohepta[b]piridin-2-karboksamid

Jedan enantiomer etil 4-(2,4-difluorofenil)-6,7,8,9-tetrahidro-5H-6,9-epoksiciklohepta[b]piridin-2-karboksilata (40 mg, 0.116 mmol) je mešan sa amonijakom u MeOH (15 mL, 150 mmol) i mešan na 20 °C 17 h. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobio jedan enantiomer jedinjenja iz naslova. MS (ESI) izrač. za (C17H15F2N2O2) [M+H]+ , 317.1, zabeleženo, 317.0. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.82 (s, 1 H), 7.31 - 7.41 (m, 1 H), 7.07 - 7.18 (m, 2 H), 5.17 (d, J= 5.95 Hz, 1 H), 4.75 (t, J = 5.84 Hz, 1 H), 3.11 (br. s., 1 H), 2.03 - 2.39 (m, 5 H), 1.69 (br. s., 1 H).

Sličan tretman drugog enantiomera etil 4-(2,4-difluorofenil)-6,7,8,9-tetrahidro-5H-6,9-epoksiciklohepta[b]piridin-2-karboksilata dao je drugi enantiomer jedinjenja iz naslova. MS (ESI) izrač. za (C17H15F2N2O2) [M+H]+ , 317.1, zabeleženo, 317.0.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.81 (s, 1 H), 7.36 (d, J= 6.39 Hz, 1 H), 7.07 - 7.18 (m, 2 H), 5.17 (d, J= 5.95 Hz, 1 H), 4.74 (br. s., 1 H), 3.12 (dd, J = 17.42, 5.29 Hz, 1 H), 2.03 - 2.39 (m, 4 H), 1.62 - 1.72 (m, 1 H).

Sledeća jedinjenja su pripremljena prema postupcima opisanim u prethodnom tekstu.

4

(6S,9R)-4-(3,5-difluoropiridin-2-il)-6,7,8,9-tetrahidro-5H-6,9-epoksiciklohepta[b]piridin-2-karboksamid i (6R,9S)-4-(3,5-difluoropiridin-2-il)-6,7,8,9-tetrahidro-5H-6,9-epoksiciklohepta[b]piridin-2-karboksamid

Korak 1: (2-(etoksikarbonil)-6,7,8,9-tetrahidro-5H-6,9-epoksiciklohepta[b]piridin-4-il)boronska kiselina

Smeša etil 4-hloro-6,7,8,9-tetrahidro-5H-6,9-epoksiciklohepta[b]piridin-2-karboksilata (Primer 1-2 Korak 9) (200 mg, 0.75 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborolana)

1

(1900 mg, 7.5 mmol), Pd(dtbpf)Cl2(48.7 mg, 0.08 mmol) i AcOK (220 mg, 2.2 mmol) u 1,4-dioksanu (5 mL) mešana na 100°C pod N22 h. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću Prep-HPLC (Kolona: Waters Xbridge Prep OBD C18100×19 mm, 5 um; Pokretna faza: 28% do 58% vode (koja sadrži 0.05% amonijum hidroksida zapr./zapr.)-ACN; Stopa protoka: 25 mL/min) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C13H17BNO5) [M+H]+ , 278.1, zabeleženo, 277.9.

Korak 2: Etil 4-(3,5-difluoropiridin-2-il)-6,7,8,9-tetrahidro-5H-6,9-epoksiciklohepta[b]piridin-2-karboksilat

Smeša (2-(etoksikarbonil)-6,7,8,9-tetrahidro-5H-6,9-epoksiciklohepta[b]piridin-4-il)boronske kiseline (100 mg, 0.361 mmol), 2-bromo-3,5-difluoropiridina (140 mg, 0.722 mmol), Pd(dtbpf)Cl2(23.5 mg, 0.04 mmol) i K3PO4(230 mg, 1.08 mmol) u THF (5 mL) i H2O (1 mL) je mešan na 80°C pod N22 h. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i prečišćena pomoću Prep-HPLC (Kolona: Phenomenex Synergi C18150×30 mm, 4 um; Pokretna faza: 41% do 61% vode (koja sadrži 0.1% TFA)-ACN; Stopa protoka: 25 mL/min) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C18H17F2N2O3) [M+H]+ , 347.1, zabeleženo, 346.9.

Korak 3: etil (6R,9S)-4-(3,5-difluoropiridin-2-il)-6,7,8,9-tetrahidro-5H-6,9-epoksiciklohepta[b]piridin-2-karboksilat i etil (6S,9R)-4-(3,5-difluoropiridin-2-il)-6,7,8,9-tetrahidro-5H-6,9-epoksiciklohepta[b]piridin-2-karboksilat

Racemski etil 4-(3,5-difluoropiridin-2-il)-6,7,8,9-tetrahidro-5H-6,9-epoksiciklohepta[b]piridin-2-karboksilat (30 mg, 0.087 mmol) je odvojen pomoću hiralne SFC (Kolona: Chiralpak AD 250×30 mm, 10 um; Pokretna faza: 45% EtOH (koji sadrži 0.05% DEA) u CO2; Stopa protoka: 80 mL/min) da bi se dobila dva enantiomera.

Korak 4: (6R,9S)-4-(3,5-difluoropiridin-2-il)-6,7,8,9-tetrahidro-5H-6,9-epoksiciklohepta[b]piridin-2-karboksamid i (6S,9R)-4-(3,5-difluoropiridin-2-il)-6,7,8,9-tetrahidro-5H-6,9-epoksiciklohepta[b]piridin-2-karboksamid

2

Rastvor jednog enantiomera etil 4-(3,5-difluoropiridin-2-il)-6,7,8,9-tetrahidro-5H-6,9-epoksiciklohepta[b]piridin-2-karboksilata (12 mg, 0.035 mmol) u amonijaku (10M u MeOH) (20 mL) je mešan na 26°C 12 h. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i prečišćena pomoću Prep-HPLC (Kolona: Phenomenex Synergi C18150×30mm, 4 um; Pokretna faza: 25% do 45% vode (koja sadrži 0.1% TFA)-ACN; Stopa protoka: 25 mL/min) da bi se dobio jedan enantiomer jedinjenja iz naslova. MS (ESI) izrač. za (C16H14F2N3O2) [M+H]+ , 318.1, zabeleženo, 317.9. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.53 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.79 (t, J = 8.38 Hz, 1H), 5.19 (d, J = 5.95 Hz, 1H), 4.68 - 4.79 (m, 1H), 3.25 (dd, J= 5.40, 17.75 Hz, 1H), 2.48 (d, J= 17.86 Hz, 1H), 2.07 - 2.32 (m, 4H), 1.71 (br. s., 1H).

Sličan tretman drugog enantiomera etil 4-(3,5-difluoropiridin-2-il)-6,7,8,9-tetrahidro-5H-6,9-epoksiciklohepta[b]piridin-2-karboksilata dao je drugi enantiomer jedinjenja iz naslova. MS (ESI) izrač. za (C16H14F2N3O2) [M+H]+ , 318.1, zabeleženo, 317.9.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD)δ 8.53 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.79 (t, J = 8.16 Hz, 1H), 5.19 (d, J = 5.51 Hz, 1H), 4.65 -4.80 (m, 1H), 3.20 - 3.27 (m, 1H), 2.48 (d, J = 17.42 Hz, 1H), 2.16 - 2.31 (m, 2H), 2.05 - 2.16 (m, 1H), 1.71 (br. s., 1H).

PRIMER 1-7A i 1-7B

(6S,9R)-4-(5-hloro-3-fluoropiridin-2-il)-6,7,8,9-tetrahidro-5H-6,9-epoksiciklohepta[b]piridin-2-karboksamid i (6R,9S)-4-(5-hloro-3-fluoropiridin-2-il)-6,7,8,9-tetrahidro-5H-6,9-epoksiciklohepta[b]piridin-2-karboksamid

Jedinjenja iz naslova su pripremljena prema istom postupku kao Primer 1-6A i 1-6B, supstitucijom 2-bromo-5-hloro-3-fluoropiridin for 2-bromo-3,5-difluoropiridina.

Enantiomer 1: MS (ESI) izrač. za (C16H13ClFN3O2) [M+H]+ , 334.07, zabeleženo, 333.8.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD)δ 8.56 (s, 1H), 7.94 - 8.00 (m, 2H), 5.18 (d, J= 5.87 Hz, 1H), 4.73 (t, J = 5.67 Hz, 1H), 3.20 - 3.26 (m, 1H), 2.48 (d, J= 17.61 Hz, 1H), 2.17 - 2.27 (m, 2H), 2.08 (t, J = 9.78 Hz, 1H), 1.63 - 1.75 (m, 1H).

Enantiomer 2: MS (ESI) izrač. za (C16H13ClFN3O2) [M+H]+ , 334.07, zabeleženo, 333.8.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.56 (s, 1H), 7.93 - 8.00 (m, 2H), 5.17 (d, J= 6.26 Hz, 1H), 4.73 (t, J = 5.87 Hz, 1H), 3.24 (dd, J= 17.80, 5.28 Hz, 1H), 2.47 (d, J= 18.00 Hz, 1H), 2.12 - 2.30 (m, 2H), 2.04 - 2.12 (m, 1H), 1.63 - 1.75 (m, 1H).

Jedinjenja formule I (gde, u Šemi 2, R<2>, R<2A>, R<3>, R<3A>, prsten B, n, i svaki R<1>su kao što su opisani u Formuli I, i gde R2x , R2y R3x , R3y odgovaraju R2 , R2A , R3, R3A , ili mogu biti prevedeni pomoću postupaka poznatih stručnjacima iz date oblasti tehnike u R<2>, R<2A>R<3>, R<3A>, respektivno) mogu biti pripremljena prema Šemi 2 pomoću Wittig reakcije sa aldehidom 2-1 nakon čega sledi redukcija (i/ili dodavanje kako je odgovarajuće) i ciklizacija 2-3 da bi se formirao biciklus 2-4.

4

Alternativno, 2-3 može biti formiran preko alkilacije aldehida 2-1 nakon čega sledi deoksigenacija radikala i kasnija redukcija (i/ili dodavanje kako je odgovarajuće). Biciklus 2-4 je uzastopno karbonilovan i tretiran amonijakom da bi se dobio 2-6. Reakcije na lancu ugljenika 2-2 i 2-3 i/ili na R2x , R2y R3x , R3y grupi 2-2, 2-2a, 2-3 ili 2-4 mogu se koristiti za pripremu dodatnih promena bicikličnog jezgra ili njegovih supstituenata.

PRIMER 2-1A i 2-1B

(S)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(hidroksimetil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid i (R)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(hidroksimetil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid Korak 1: etil (E)-4-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)-2-oksobut-3-enoat (INTERMEDIJER 2-2)

U mešani rastvor 2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)nikotinaldehida (INTERMEDIJER 2-1, 500 mg, 1.7 mmol) u THF (30 mL) dodat je etil 2-okso-3-(trifenilfosforaniliden)propanoat (653 mg, 1.7 mmol) na 15°C, zatim je rastvor mešan na 80 °C 24 h. Reakcija je koncentrovana pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (ISCO®; 24 g SepaFlash® kolona, eluiranje sa 0 do 5% etil acetat/petroletar) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C17H12Cl2F2NO3) [M+H]+ , 386.0, zabeleženo, 385.9.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.72 (d, J=16.4 Hz, 1H), 7.25 - 7.19 (m, 2H), 7.02 (t, J=7.2 Hz, 1H), 6.96 - 6.87 (m, 1H), 6.82 (d, J=16.4 Hz, 1H), 4.34 - 4.25 (m, 2H), 1.33 (t, J=7.2 Hz, 3H)

Korak 2: etil 4-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)-2-hidroksibutanoat (INTERMEDIJER 2-3)

U rastvor (E)-etil 4-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)-2-oksobut-3-enoata dobijenog iz Koraka 1 (1.1 g, 2.85 mmol) u etanolu (20 mL) dodat je NaBH4(0.11 g, 2.85 mmol) na 20 °C i smeša je mešana na 20 °C 25 min. Reakcija je ugašena vodom (250 mL) i ekstrahovana etil acetatom (2 x 200 mL), kombinovani organski slojevi su sušeni preko Na2SO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (ISCO®; 24 g SepaFlash® kolona, eluiranje sa 5-15% etil acetatom/petroletrom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C17H16Cl2F2NO3) [M+H]+ , 390.0, zabeleženo, 389.9.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.21 - 7.13 (m, 1H), 7.11 (s, 1H), 7.04 - 6.88 (m, 2H), 4.28 - 3.98 (m, 3H), 2.79 - 2.54 (m, 2H), 1.99 - 1.69 (m, 2H), 1.24 (t, J=7.2 Hz, 3H)

Korak 3: etil 7-hloro-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-2-karboksilat

Smeša etil 4-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)-2-hidroksibutanoata (INTERMEDIJER 2-3, 450 mg, 1.2 mmol) i Cs2CO3(751 mg, 2.3 mmol) u acetonitrilu (20 mL) je mešana na 90°C 2.5 h. Smeša je razblažena u vodi (100 mL) i ekstrahovana etil acetatom (2 x 100 mL), kombinovani organski slojevi su sušeni preko Na2SO4, filtrirani i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom i prečišćen hromatografijom na silika gelu (ISCO®; 12 g SepaFlash® kolona, eluiranje sa 0 do 20% etil acetata/petroletra na 30 mL/min) da bi se dobio proizvod. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.23 - 7.14 (m, 1H), 7.02 - 6.87 (m, 2H), 6.86 (s, 1H), 4.96 (t, J=4.9 Hz, 1H), 4.25 (qq, J=7.2, 10.8 Hz, 2H), 2.50 (br. s., 2H), 2.25 - 2.10 (m, 2H), 1.33 - 1.17 (m, 3H.)

Korak 4: (7-hloro-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-2-il)metanol

U mešani rastvor etil 7-hloro-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-2-karboksilata (300 mg, 0.85 mmol) u etanolu (6 mL) dodat je NaBH4(32 mg, 0.85 mmol) na 20°C, i smeša je mešana na 20 °C 1.5 h. Dodat je NaBH4(32 mg, 0.85 mmol) i smeša je mešana na 20°C 2 h. Dodat je aceton (1 mL) da bi se ugasila reakcija, zatim je smeša rastvorena u vodi (60 mL) i ekstrahovana etil acetatom (2 x 60 mL), kombinovane organske materije su sušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (ISCO®; 4 g SepaFlash® kolona, eluiranje sa 30 do 70% etil acetata/petroletra) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C15H13ClF2NO2) [M+H]+ , 312.0, zabeleženo, 311.9.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.25 - 7.17 (m, 1H), 7.03 - 6.90 (m, 2H), 6.86 (s, 1H), 4.46 - 4.29 (m, 1H), 4.01 - 3.85 (m, 1H), 3.85 - 3.69 (m, 1H), 2.68 (d, J=11.7 Hz, 1H), 2.54 - 2.43 (m, 1H), 2.16 (t, J=6.8 Hz, 1H), 2.00 - 1.91 (m, 1H), 1.89 - 1.75 (m, 1H)

Korak 5: etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-(hidroksimetil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat (INTERMEDIJER 2-4)

U mešani rastvor (7-hloro-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-2-il)metanola (160 mg, 0.51 mmol) u etanolu (20 mL) dodat je PdCl2(dppf) (38 mg, 0.05 mmol) i kalijum acetat (101 mg, 1.0 mmol) na 80°C pod atmosferom N2. Smeša je degazirana i ponovo napunjena sa CO (tri puta). Dobijena smeša je mešana pod 50 psi CO na 80°C 20 h. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (ISCO®; 4 g SepaFlash® kolona, eluiranje sa 30 do 80% etil acetata/petroletra) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C18H18F2NO4) [M+H]+ , 350.1, zabeleženo, 350.1.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.66 (s, 1H), 7.25 - 7.20 (m, 1H), 7.10 - 6.89 (m, 2H), 4.53 - 4.32 (m, 3H), 4.00 - 3.90 (m, 1H), 3.86 - 3.74 (m, 1H), 2.60 (d, J=17.2 Hz, 1H), 2.25 (t, J=6.6 Hz, 1H), 2.02 -1.80 (m, 2H), 1.41 (t, J=7.2 Hz, 3H)

Korak 6: etil (S)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(hidroksimetil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat i etil (R)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(hidroksimetil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat

Racemski etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-(hidroksimetil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]-piridin-7-karboksilat (60 mg, 0.17 mmol) je odvojen pomoću hiralne SFC (kolona: Chiralpak Whelk 250×30 mm, 10 um; Pokretna faza: 40% do 40% MeOH (koja sadrži 0.05% DEA) u CO2; Stopa protoka: 60 mL/min) da bi se dobila dva enantiomera.

Korak 7: (S)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(hidroksimetil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid i (R)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(hidroksimetil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid

Rastvor jednog enantiomera etil (S)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(hidroksimetil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilata (25 mg, 0.07 mmol) u amonijaku (10M u MeOH) (10 mL) i mešan na 26°C 12 h. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen pomoću prep-TLC (silica gel, eluiranjem sa 4:1 etil acetatom/petroletrom) da bi se dobio jedan enantiomer jedinjenja iz naslova. MS (ESI) izrač. za (C16H15F2N2O3)[M+H]+ , [321.1], zabeleženo, [321.0].<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.55 (s, 1H), 7.40 -7.35 (m, 1H), 7.14 - 7.08 (m, 2H), 4.59 - 4.32 (m, 1H), 3.79 - 3.77 (m, 2H), 2.83 - 2.75 (m, 1H), 2.59 - 2.55 (m, 1H), 2.06 - 2.02 (m, 1H), 1.75 - 1.73 (m, 1H).

Sličan tretman drugog enantiomera etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-(hidroksimetil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilata dao je drugi enantiomer jedinjenja iz naslova. MS (ESI) izrač. za (C16H15F2N2O3)[M+H]+ , [321.1], zabeleženo, [321.0].<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.56 (s, 1H), 7.42 -7.38 (m, 1H), 7.15 - 7.12 (m, 2H), 4.36 - 4.34 (m, 1H), 3.8 (s, 2H), 2.84 - 2.76 (m, 1H), 2.60 - 2.56 (m, 1H), 2.07 - 2.03 (m, 1H), 1.80 - 1.75 (m, 1H).

PRIMER 2-2A, 2-2B, 2-2C i 2-2D

(2S,3R)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(hidroksimetil)-3-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid, (2S,3S)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(hidroksimetil)-3-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3b]piridin-7-karboksamid, (2R,3R)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(hidroksimetil)-3-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid, (2R,3S)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(hidroksimetil)-3-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid

Korak 1: etil 4-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)-2-oksobutanoat

Rastvor (E)-etil 4-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)-2-oksobut-3-enoata (INTERMEDIJER 2-2, 1.6 g, 4.14 mmol) i tris(trifenilfosfin)rodijum(I) hlorida (0.77 g, 0.83 mmol) u THF (20 mL) i t-BuOH (20.00 mL) je mešan na 35°C pod 50 psi H21.5 h. Rastvor je koncentrovan in vacuo, ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (ISCO®; 24 g SepaFlash® kolona, eluiranje sa [0∽5]% etil acetatom/petroletrom na 35 mL/min) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C17H14Cl2F2NO3)[M+H]+ , 389.1, zabeleženo, 387.7.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.05-7.22 (m, 2H), 6.84-6.99 (m, 2H), 4.22 (q, J=7.04 Hz, 2H), 2.94-3.05 (m, 2H), 2.83 (d, J=7.43 Hz, 2H), 1.24-1.33 (m, 3H).

Korak 2: etil 3-((2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)metil)-2-oksobut-3-enoat

U rastvor etil 4-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)-2-oksobutanoata (3 g, 7.73 mmol) i N-metilanilinijum trifluoroacetata (6.84 g, 31 mmol) u THF (70 mL) dodat je paraformaldehid (234 mg, 7.7 mmol), zatim je smeša mešana na 70°C pod N214 h. Reakcija je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (eluiranjem sa 50:1 do 10:1 petroletrom:etil acetatom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C18H14Cl2F2NO3)[M+H]+ , 400.2, zabeleženo: 399.9.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.21 (s, 1H), 7.09-7.17 (m, 1H), 6.88-7.00 (m, 2H), 6.21 (s, 1H), 5.73 (s, 1H), 4.34 (q, J=7.06 Hz, 2H), 3.62 (br. s., 2H), 1.36 (t, J=7.06 Hz, 3H).

Korak 3: etil 4-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3 -il)-3 -metil-2-oksobutanoat

Rastvor etil 3-((2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)metil)-2-oksobut-3-enoata (750 mg, 1.87 mmol) i tris(trifenilfosfin)rodijum (I) hlorida (347 mg, 0.38 mmol) u THF (15 mL) i t-BuOH (15.00 mL) je mešan na 40°C pod 50 psi H22 h. Rastvor je koncentrovan in vacuo, ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (ISCO®; 4 g SepaFlash® kolona, eluiranje sa 0% do 5% etil acetata/petroletra) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C18H16Cl2F2NO3)[M+H]+ , 402.1, zabeleženo, 401.9.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.10-7.17 (m, 1H), 7.07 (s, 1H), 6.86-6.98 (m, 2H), 4.13-4.20 (m, 2H), 2.37-3.20 (m, 3H), 1.13-1.32 (m, 6H)

Korak 4: etil 4-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)-2-hidroksi-3-metilbutanoat

U rastvor etil 4-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)-3-metil-2-oksobutanoata (470 mg, 1.169 mmol) u EtOH (15 mL) dodat je NaBH4(30 mg, 0.79 mmol) na 0°C pod N2. Reakciona smeša je mešana 0.5 h. Zatim je smeša sipana u 15 mL zasićenog vodenog rastvora NH4Cl. Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (30 mL x 3). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (zasićeni 10 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4, filtrirani i koncentrovani. Sirovo jedinjenje je prečišćeno hromatografijom na silika gelu (ISCO®; 4 g SepaFlash® kolona, eluiranje sa 0% do 10% etil acetata/petroletra) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C18H18Cl2F2NO3)[M+H]+ , 404.0, zabeleženo, 403.9.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.03-7.17 (m, 2H), 6.83-6.98 (m, 2H), 4.01-4.22 (m, 3H), 2.41-2.87 (m, 3H), 1.11-1.27 (m, 6H) Korak 5: etil 7-hloro-5-(2,4-difluorofenil)-3-metil-3,4-dihidro-2H-piranor[2,3-b]piridin-2-karboksilat

U rastvor etil 4-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)-2-hidroksi-3-metilbutanoata (410 mg, 1.01 mmol) u acetonitrilu (30 mL) dodat je Cs2CO3(661 mg, 2.03 mmol), reakciona smeša je mešana na 85°C 2 h pod N2. smeša je filtrirana i filtrat je isparavan. Sirova smeša je prečišćena hromatografijom na silika gelu (eluiranjem sa 20:1 do 5:1 petroletra:etil acetata) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C

18H17ClF2NO3)[M+H] , 368.0, zabeleženo, 368.0.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.11-7.23 (m, 1H), 6.83-7.02 (m, 3H), 4.59-4.86 (m, 1H), 4.13-4.32 (m, 2H), 2.11-2.67 (m, 3H), 1.23-1.27 (m, 3H), 0.96-1.09 (m, 3H).

Korak 6: (7-hloro-5-(2,4-difluorofenil)-3-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-2-il)metanol

U rastvor etil 7-hloro-5-(2,4-difluorofenil)-3-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-2-karboksilata (310 mg, 0.84 mmol) u THF (15 mL) dodat je LiBH4(73.4 mg, 3.37 mmol) i smeša je mešana na 20 °C pod N21 h. Smeša je sipana u 15 mL zasićenog vodenog rastvora NH4Cl. Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (30 mL x 3). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (sat. 10 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4, filtrirani i filtrat je isparavan. Sirova smeša je prečišćena hromatografijom na silika gelu (ISCO®; 4 g SepaFlash® kolona, eluiranje sa 0% do 40% etil acetatom/petroletrom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C16H15ClF2NO2)[M+H]+ , 326.1, zabeleženo, 325.9.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.15-7.23 (m, 1H), 6.88-7.02 (m, 2H), 6.83 (d, J=3.52 Hz, 1H), 3.86-4.04 (m, 2H), 3.66-3.85 (m, 1H), 2.16-2.48 (m, 3H), 0.86-1.05 (m, 3H).

Korak 7: etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-(hidroksimetil)-3-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat

U rastvor (7-hloro-5-(2,4-difluorofenil)-3-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-2-il)metanola (210 mg, 0.65 mmol), kalijum acetata (190 mg, 1.93 mmol) u suvom EtOH (50 mL) dodat je Pd(dppf)Cl2(70.8 mg, 0.10 mmol) pod atmosferom CO. Reakciona smeša je mešana na 70°C pod 50 psi CO 14 h. Rastvor je koncentrovan in vacuo, ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (ISCO®; 4 g SepaFlash® kolona, eluiranje sa 0% do 70% etil acetatom/petroletrom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C19H20F2NO4) [M+H]+ , 364.1, zabeleženo, 364.3.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.66 (d, J=2.65 Hz, 1H), 7.19-7.25 (m, 1H), 6.87-7.06 (m, 2H), 4.45 (q, J=7.06 Hz, 2H), 3.92-4.15 (m, 2H), 3.69-3.88 (m, 1H), 2.20-2.63 (m, 2H), 2.05-2.14 (m, 1H), 1.41 (t, J=7.06 Hz, 3H), 0.88-1.09 (m, 3H).

1

Korak 8: etil (2S,3R)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(hidroksimetil)-3-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat, etil (2S,3S)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(hidroksimetil)-3-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat, etil (2R,3R)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(hidroksimetil)-3-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat i etil (2R,3S)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(hidroksimetil)-3-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,2-b]piridin-7-karboksilat (INTERMEDIJERI 2-5A, 2-5B, 2-5C, 2-5D)

Diastereomerni etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-(hidroksimetil)-3-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat (30 mg, 0.083 mmol) je odvojen pomoću hiralne SFC (kolona: Chiralpak Whelk-01 250×30 mm, 10 um; Pokretna faza: 40% do 40% MeOH (koji sadrži 0.05% DEA) u CO2; Stopa protoka: 60 mL/min) da bi se dobila četiri izomera jedinjenja iz naslova.

Korak 9: (2S,3R)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(hidroksimetil)-3-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid, (2S,3S)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(hidroksimetil)-3-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid, (2R,3R)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(hidroksimetil)-3-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid, (2R,3S)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(hidroksimetil)-3-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid

Rastvor jednog odvojenog izomera etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-(hidroksimetil)-3-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilata (8 mg, 0.028 mmol) u amonijaku (10 M u MeOH) (10 mL) je mešan na sobnoj temperaturi 10 h. Smeša je koncentrovana i ostatak je prečišćen pomoću Prep-HPLC (kolona: Phenomenex Synergi C18150×30 mm, 4 um; Pokretna

2

faza: 42% do 62% vode (koja sadrži 0.1% TFA)-ACN; Stopa protoka: 25 mL/min) da bi se dobio jedan izomer jedinjenja iz naslova. MS (ESI) izrač. za (C

17H17F2N2O3)[M+H] , 335.0, zabeleženo, 334.9.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.57 (s, 1H), 7.29-7.45 (m, 1H), 7.02-7.19 (m, 2H), 4.00-4.09 (m, 1H), 3.90-3.99 (m, 1H), 3.77-3.89 (m, 1H), 2.53-2.67 (m, 1H), 2.40-2.52 (m, 1H), 2.05 (d, J=16.32 Hz, 1H), 1.05 (d, J=6.39 Hz, 3H).

Sličan tretman drugih izomera etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-(hidroksimetil)-3-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilata dao je druge izomere jedinjenja iz naslova.

Izomer 2: MS (ESI) izrač. za (C17H17F2N2O3)[M+H]+ , 335.0, zabeleženo, 334.9.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.65-7.82 (m, 2H), 7.18-7.24 (m, 1H), 6.86-7.08 (m, 2H), 5.98-6.18 (m, 1H), 4.47 (br. s., 1H), 3.92-4.05 (m, 1H), 3.77-3.88 (m, 1H), 2.76-2.94 (m, 1H), 2.19-2.42 (m, 2H), 0.94 (d, J=6.39 Hz, 3H).

Izomer 3: MS (ESI) izrač. za (C17H17F2N2O3)[M+H]+ , 335.0, zabeleženo, 334.9.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.55 (s, 1H), 7.29-7.44 (m, 1H), 6.99-7.21 (m, 2H), 3.98-4.07 (m, 1H), 3.89-3.97 (m, 1H), 3.77-3.87 (m, 1H), 2.51-2.63 (m, 1H), 2.38-2.50 (m, 1H), 1.97-2.13 (m, 1H), 1.03 (d, J=6.65 Hz, 3H).

Izomer 4: MS (ESI) izrač. za (C17H17F2N2O3)[M+H]+ , 335.0, zabeleženo, 334.9.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.67 (br. s., 2H), 7.13-7.18 (m, 1H), 6.78-6.99 (m, 2H), 5.82 (br. s., 1H), 4.41 (br. s., 1H), 3.86-4.08 (m, 1H), 3.75 (d, J=9.00 Hz, 1H), 2.68-2.96 (m, 1H), 2.15-2.40 (m, 2H), 0.87 (d, J=5.87 Hz, 3H).

PRIMER 2-3A i 2-3B

2-3A: (R)-2-ciklopropil-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid i 2-3B: (S)-2-ciklopropil-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid

Korak 1: (E)-metil 3-(4-bromo-2,6-dihloropiridin-3-il)akrilat

Rastvor 4-bromo-2,6-dihloronikotinaldehida (6 g, 23.8 mmol) i metil 2-(trifenilfosforaniliden)acetata (9.5 g, 30 mmol) u THF (150 mL) je mešan na 80°C pod N22 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom, ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (eluiranjem sa 20:1 petroletrom /etil acetatom) da bi se dobio proizvod.

Korak 2: (E)-metil 3-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)akrilat

Smeša (E)-metil 3-(4-bromo-2,6-dihloropiridin-3-il)akrilata (6.5 g, 21 mmol), (2,4-difluorofenil)boronske kiseline (3.3 g, 21 mmol), Pd(dppf)Cl2(1.5 g, 2.1 mmol) i NaHCO3(3.5 g, 42 mmol) u 1,4-dioksanu/vodi (50 mL/10 mL) je mešana na 100 °C pod N23 h. Smeša je koncentrovana in vacuo. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (20:1 petroletar/etil acetat) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C15H10Cl2F2NO2) [M+H]+ , 344.0, zabeleženo, 344.2.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.55 (d, J= 16 Hz, 1H), 6.96 - 7.20 (m, 2H), 6.86 - 6.92 (m, 2H), 5.90 (m, 1H), 3.71 (s, 3H).

Korak 3: metil 3-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)propanoat

(INTERMEDIJER 2-6)

Rastvor Rh(PPh3)Cl2(1.35 g, 1.46 mmol) i (E)-metil 3-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)akrilata (2.5 g, 7.3 mmol) u THF/t-BuOH (20 mL/20 mL) je mešan na 40°C pod 50 psi H212 h. MeOH je uklonjen pod sniženim pritiskom i sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (5:1 petroletar/etil acetat) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C15H12Cl2F2NO2) [M+H]+ , 346.0, zabeleženo, 346.1.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.10 - 7.17 (m, 2H), 6.92 - 7.01 (m, 2H), 3.58 (s, 3H), 2.86 - 2.90 (m, 2H), 2.44 - 2.48 (m, 2H).

Korak 4: 3 -(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)propan-1-ol

U rastvor metil 3-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)propanoata (850 mg, 2.5 mmol) u THF (15 mL) dodat je LiBH4(68.2 mg, 9.82 mmol) na 0°C pod N2. Dobijena smeša je mešana

4

na 18 °C 16 h. Reakcija je sipana u vodu (30 mL) i ekstrahovana etil acetatom (30 mL×3). Kombinovani organski slojevi su koncentrovani in vacuo i ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (ISCO®; 4 g SepaFlash® kolona, eluiranje sa 0-30% etil acetatom/petroletrom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C14H12Cl2F2NO) [M+H]+ , 318.0, zabeleženo, 318.1.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.15 - 7.22 (m, 1H), 7.12 (s, 1H), 6.91 - 7.03 (m, 2H), 3.49 - 3.55 (m, 2H), 2.66 (br. s., 2H), 1.68 (br. s., 2H).

Korak 5: 3-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)propanal (INTERMEDIJER 2-7)

U rastvor 3-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)propan-1-ola (525 mg, 1.65 mmol) u DCM (10 mL) dodat je DMP (840 mg, 1.980 mmol) na 0°C i reakcija je mešana na 0°C 1 h. Smeša je koncentrovana in vacuo i ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (ISCO®; 12 g SepaFlash® kolona, eluiranje sa 15% etil acetatom/petroletrom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C14H10Cl2F2NO) [M+H]+ , 316.0, zabeleženo, 315.9.

Korak 6: 1-ciklopropil-3-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)propan-1-ol

U rastvor 3-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)propanala (350 mg, 1.1 mmol) u THF (15 mL) na 0°C dodat je ciklopropilmagnezijum bromid (4.4 mL, 2.2 mmol). Smeša je mešana na 0°C 1 h. Reakcija je sipana u zasićeni vodeni rastvor NH4Cl (30 mL). Smeša je ekstrahovana etil acetatom (20 mL×3), kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (50 mL), sušeni preko Na2SO4, filtrirani i koncentrovani in vacuo. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (ISCO®; 12 g SepaFlash® kolona, eluiranje sa 15% etil acetatom/petroletrom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C17H16Cl2F2NO) [M+H]+ , 358.1, zabeleženo, 357.9.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.07 - 7.15 (m, 1H), 7.04 (s, 1H), 6.83 -6.95 (m, 2H), 3.40 (s, 2H), 2.60 - 2.69 (m, 2H), 1.52 (br. s., 1H), 0.66 (dd, J = 4.41, 8.16 Hz, 1H), 0.35 (d, J = 7.94 Hz, 2H), 0.07 - 0.15 (m, 1H), -0.02 - 0.06 (m, 1H).

Korak 7: 7-hloro-2-ciklopropil-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin

Smeša 1-ciklopropil-3-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il) propan-1-ola (250 mg, 0.698 mmol) i Cs2CO3(568 mg, 1.745 mmol) u MeCN (10 mL) je mešana na 90°C 16 h. Smeša je koncentrovana in vacuo i ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (ISCO®; 12 g SepaFlash® kolona, eluiranje sa 15% etil acetatom/petroletrom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C17H15ClF2NO) [M+H]+ , 322.0, zabeleženo, 321.9.

Korak 5: Etil 2-ciklopropil-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat

Smeša 7-hloro-2-ciklopropil-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridina (180 mg, 0.56 mmol), kalijum acetata (110 mg, 1.1 mmol) i PdCl2(dppf) (82 mg, 0.11 mmol) u EtOH (15 mL) je mešana na 80°C pod 50 Psi CO 5 h. Smeša je koncentrovana in vacuo i ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (ISCO®; 4 g SepaFlash® kolona, eluiranje sa 20% etil acetatom/petroletrom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C20H19F2NO3Na)[M+Na]+ , 382.1, zabeleženo, 382.0.

Korak 8: etil (S)-2-ciklopropil-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat i etil (R)-2-ciklopropil-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat

Racemski etil 2-ciklopropil-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat (160 mg, 0.45 mmol) je odvojen pomoću hiralne SFC (Kolona: Chiralpak AD 250×30 mm, 5 um; Pokretna faza: 40% do 40% EtOH (koji sadrži 0.05% DEA) u CO2; Stopa protoka: 65 mL/min) da bi se dobila dva enantiomera.

Korak 9: (S)-2-ciklopropil-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid i (R)-2-ciklopropil-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid

Rastvor jednog enantiomera etil 2-ciklopropil-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilata (70 mg, 0.20 mmol) u amonijaku (10 M u MeOH) (15 mL) je mešan na 19 °C 5 h. Reakcija je koncentrovana in vacuo i ostatak je prečišćen pomoću Prep-HPLC (Kolona: Phenomenex Synergi C18150×30 mm, 4 um; Pokretna faza: 50% do 70% vode (koja sadrži 0.1% TFA)-ACN; Stopa protoka: 25 mL/min) da bi se dobio jedan enantiomer jedinjenja iz naslova. MS (ESI) izrač. za (C18H17F2N2O2) [M+H]+ , 331.1, zabeleženo, 331.0.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.18 (s, 1H), 6.96 - 7.06 (m, 1H), 6.69 - 6.80 (m, 2H), 3.28 (t, J= 8.27 Hz, 1H), 2.31 - 2.43 (m, 1H), 2.17 - 2.28 (m, 1H), 1.79 (d, J = 13.67 Hz, 1H), 1.38 - 1.51 (m, 1H), 0.72 -0.84 (m, 1H), 0.13 - 0.34 (m, 3H), -0.01 - 0.08 (m, 1H).

Sličan tretman drugog enantiomera etil 2-ciklopropil-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilata dao je drugi enantiomer jedinjenja iz naslova. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.19 (s, 1H), 6.96 - 7.05 (m, 1H), 6.70 - 6.79 (m, 2H), 3.28 (t, J= 8.38 Hz, 1H), 2.31 - 2.44 (m, 1H), 2.15 - 2.28 (m, 1H), 1.79 (d, J= 13.89 Hz, 1H), 1.37 - 1.51 (m, 1H), 0.72 -0.83 (m, 1H), 0.13 - 0.34 (m, 3H), -0.02 - 0.07 (m, 1H).

PRIMER 2-4A i 2-4B

(S)-5-(2,4-difluorofenil)-2-izopropil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid i (R)-5-(2,4-difluorofenil)-2-izopropil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid

Korak 1: (E)-etil 3-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)akrilat

Rastvor 2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)nikotinaldehida (6 g, 21 mmol) i etil 2-(trifenilfosforaniliden)acetata (8.7 g, 25 mmol) u THF (100 mL) je mešan na 70°C 12 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (10:1 petroletar/etil acetat) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C16H12Cl2F2NO2) [M+H]+ , 358.0, zabeleženo, 358.2.

Korak 2: etil 3-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)propanoat

Rastvor Rh(PPh3)Cl2(5.8 g, 6.3 mmol) i (E)-etil 3-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)akrilata (7.5 g, 21.0 mmol) u THF/t-BuOH (50 mL/50 mL) je mešan na 50°C pod 40 psi H212 h. MeOH je uklonjen pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (10:1 petroletar/etil acetat) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C16H14Cl2F2NO2) [M+H]+ , 360.0, zabeleženo, 360.2.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.32 - 7.38 (m, 2H), 7.18 -7.10 (m, 2H), 4.01 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.89 (m, 2H), 2.43 (t, J = 8.4 Hz, 2H), 1.14 (t, J = 7.6 Hz, 3H).

Korak 3: 3-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)propionska kiselina

Etil 3-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)propanoat (0.6 g, 1.7 mmol) je rastvoren u (40 mL) (THF:H2O =3:1). Smeša je mešana na 25°C. Zatim je LiOH (0.21 g, 5.1 mmol) dodat u rastvor. Smeša je mešana na 25°C 4 h. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i podešena do pH 5 sa monohidratom limunske kiseline. Smeša je ekstrahovana etil acetatom (20 mL x 3) i sušena preko anhidrovanog Na2SO4. Kombinovani organski slojevi su koncentrovani da bi se dobio proizvod koji je korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. MS (ESI) izrač. za (C14H10Cl2F2NO2) [M+H]+ , 332.0, zabeleženo, 331.9.

Korak 4: 3-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)-N-metoksi-N-metilpropanamid

U rastvor 3-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)propionske kiseline (0.5 g, 1.5 mmol) u THF (15 mL) dodat je HATU (0.76 g, 2 mmol), a zatim TEA (0.45 g, 4.5 mmol). Smeša je mešana na 25°C 10 min. Zatim je u smešu dodat N,O-dimetilhidroksilamin hidrohlorid (0.2 g, 2.0 mmol). Reakcija je mešana na 25°C 1 h. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (ISCO®; 4 g SepaFlash® kolona, eluiranje sa 0% do 20% etil acetatom/petroletrom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C16H15Cl2F2N2O2) [M+H]+ , 375.0, zabeleženo, 374.9.

Korak 5: 1-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluoropheny1)piridin-3-il)-4-metilpentan-3-on

U rastvor 3-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)-N-metoksi-N-metilpropanamida (0.5 g, 1.3 mmol) u THF (20 mL) na 0°C pod N2ukapavanjem je dodat izopropilmagnezijum hlorid (1.3 mL). Smeša je mešana na 25°C 6 h. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i sipana u vodu (50 mL) i ekstrahovana etil acetatom (30 mL x 3). Kombinovane organske faze su isprane sa HCl (1 M, 2x 20 mL) i fiziološkim rastvorom (20 mL), sušene preko Na2SO4i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (eluiranjem etil acetatom/petroletrom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C17H16Cl2F2NO) [M+H]+ , 358.0, zabeleženo, 357.9.

Korak 6: 1-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)-4-metilpentan-3-ol

U rastvor 1-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)-4-metilpentan-3-ona (0.14 g, 0.39 mmol) u CH3OH (10 mL) na 0 °C pod N2dodat je NaBH4(0.015 g, 0.4 mmol). Smeša je mešana na 0°C 0.5 h. Smeša je sipana u vodu (10 mL) i ekstrahovana etil acetatom (20 mL x 3). Kombinovani organski slojevi su koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću Prep-TLC (silika gel, eluiranjem sa 1:10 etil acetatom/petroletrom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C17H18Cl2F2NO) [M+H]+ , 360.1, zabeleženo, 359.9.

Korak 7: 7-hloro-5-(2,4-dimetilfenil)-2-izopropil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin

U rastvor 1-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)-4-metilpentan-3-ola u CH3CN (20 mL) dodat je Cs2CO3(0.2 g, 0.6 mmol) i smeša je mešana na 90°C 10 h. Rastvor je sipan u H2O (20 mL) i ekstrahovan etil acetatom (20 mL x 3). Kombinovani organski slojevi su koncentrovani pod sniženim pritiskom i prečišćeni pomoću Prep-TLC (silika gel, eluiranjem sa 1:10 etil acetatom/petroletrom) da bi se dobio proizvod. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.18 - 7.07 (m, 1H), 6.96 - 6.80 (m, 2H), 6.72 (s, 1H), 3.98 - 3.85 (m, 1H), 2.64 - 2.46 (m, 1H), 2.42 - 2.30 (m, 1H), 2.00 - 1.81 (m, 2H), 1.66 - 1.47 (m, 1H), 1.05 - 0.90 (m, 6H)

Korak 8: etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-izopropil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat

U rastvor 7-hloro-5-(2,4-dimetilfenil)-2-izopropil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridina (0.1 g, 0.29 mmol) u EtOH (15 mL) dodat je Pd(dppf)Cl2(0.021 g, 0.029 mmol) i KOAc (0.058 g, 0.58 mmol). Smeša je mešana na 60°C pod atmosferom CO 10 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen pomoću Prep-TLC (silika gel, eluiranjem sa 1:4 etil acetatom/petroletrom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C20H22F2NO3) [M+H]+ , 362.0, zabeleženo, 361.9.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.56 (s, 1H), 7.27 - 7.13 (m, 1H), 7.03 -6.82 (m, 2H), 4.40 (q, J=7.3 Hz, 2H), 3.98 (dd, J=5.7, 9.2 Hz, 1H), 2.79 - 2.44 (m, 2H), 2.11 -1.82 (m, 3H), 1.72 - 1.54 (m, 1H), 1.37 (t, J=7.0 Hz, 3H), 1.11 - 0.93 (m, 6H).

Korak 9: etil (S)-5-(2,4-difluorofenil)-2-izopropil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat i etil (R)-5-(2,4-difluorofenil)-2-izopropil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat

Racemski etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-izopropil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat (90 mg, 0.25 mmol) je odvojen pomoću hiralne SFC (kolona: Chiralpak AD 250×30 mm, 5 um; Pokretna faza: 40% do 40% EtOH (koji sadrži 0.05% DEA) u CO2; Stopa protoka: 65 mL/min) da bi se dobila dva enantiomera.

Korak 10:

(S)-5-(2,4-difluorofenil)-2-izopropil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid i etil (R)-5-(2,4-difluorofenil)-2-izopropil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat

Rastvor jednog enantiomera etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-izopropil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilata (40 mg, 0.11 mmol) u amonijaku (10 M u MeOH) (20 mL) je mešan na 20°C 16 h. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću Prep-TLC da bi se dobio jedan enantiomer jedinjenja iz naslova. MS (ESI) izrač. za (C18H19F2N2O2) [M+H]+ , 333.1, zabeleženo, 332.9.<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 7.46 (br. s., 1H), 7.35 - 7.24 (m, 1H), 7.09 - 6.97 (m, 2H), 3.96 (dd, J=5.6, 9.2 Hz, 1H), 2.76 - 2.60 (m, 1H), 2.54 - 2.39 (m, 1H), 2.00 - 1.82 (m, 2H), 1.67 - 1.47 (m, 1H), 0.99 (dd, J=6.8, 16.8 Hz, 6H)

Sličan tretman drugog enantiomera etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-izopropil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilata dao je drugi enantiomer jedinjenja iz naslova. MS (ESI) izrač. za (C18H19F2N2O2) [M+H]+ , 333.1, zabeleženo, 332.9.<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 7.56 (br. s., 1H), 7.43 - 7.34 (m, 1H), 7.18 - 7.06 (m, 2H), 4.05 (dd, J=5.4, 9.4 Hz, 1H), 2.87 - 2.68 (m, 1H), 2.64 - 2.49 (m, 1H), 2.13 - 1.91 (m, 2H), 1.77 - 1.59 (m, 1H), 1.09 (dd, J=6.7, 16.6 Hz, 6H).

PRIMER 2-5

5-(2,4-difluorofenil)-2,2-dimetil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid

Korak 1: 4-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)-2-metilbutan-2-ol

Metilmagnezijum bromid (0.64 mL, 1.9 mmol) dodat je ukapavanjem u rastvor metil 3-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)propanoata (INTERMEDIJER 2-6, 110 mg, 0.32 mmol) u THF (3 mL) na 0°C pod atmosferom N2. Dobijena smeša je mešana na 0°C 1 h. Smeša je ugašena zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl (20 mL). Zatim je smeša ekstrahovana etil acetatom (10 mL x 3). Smeša je koncentrovana in vacuo i ostatak je prečišćen pomoću Prep-TLC

1

(silica gel, eluiranjem sa 1:3 etil acetatom/petroletrom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C16H16Cl2F2NO) [M+H]+ , 346.0, zabeleženo,345.9.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.22 - 7.14 (m, 1H), 7.11 (s, 1H), 7.04 - 6.91 (m, 2H), 2.64 (br. s., 2H), 1.53 (d, J=3.9 Hz, 2H), 1.09 (s, 6H). Korak 2: 7-hloro-5-(2,4-difluorofenil)-2,2-dimetil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin

Smeša 4-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)-2-metilbutan-2-ola (65 mg, 0.19 mmol) i Cs2CO3(120 mg, 0.38 mmol) u DMA (5 mL) mešana je na 120°C 19 h. Reakciona smeša je isprana vodom (10 mL) i ekstrahovana etil acetatom (5 mL x 3). Kombinovani organski slojevi su koncentrovani in vacuo da bi se dobio sirovi proizvod, koji je prečišćen pomoću Prep-TLC (silika gel, eluiranjem sa 1:3 etil acetatom/petroletrom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C16H15ClF2NO) [M+H]+ , 310.1, zabeleženo, 310.1.

Korak 3: etil 5-(2,4-difluorofenil)-2,2-dimetil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat

U rastvor 7-hloro-5-(2,4-difluorofenil)-2,2-dimetil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridina (25 mg, 0.08 mmol) i kalijum acetata (15.8 mg, 0.16 mmol) u EtOH (10 mL) dodat je PdCl2(dppf) (11.8 mg, 0.016 mmol) pod atmosferom N2. Smeša je degazirana i ponovo napunjena sa CO (tri puta). Dobijena smeša je mešana pod 50 psi CO na 80°C 30 h. Katalizator je otfiltriran i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom i prečišćen pomoću Prep-TLC (silika gel, eluiranjem sa 1:5 etil acetatom/petroletrom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C19H20F2NO3) [M+H]+ , 348.1, zabeleženo,348.5.

Korak 4: 5-(2,4-difluorofenil)-2,2-dimetil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid

Rastvor 5-(2,4-difluorofenil)-2,2-dimetil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilata (15 mg, 0.05 mmol) u NH3/MeOH (20 mL) je mešan na 25°C 24 h. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i prečišćena pomoću Prep-TLC (silika gel, etil acetat) da bi se dobilo

2

jedinjenje iz naslova. MS (ESI) izrač. za (C17H17F2N2O2) [M+H]+ , 319.1, zabeleženo, 318.9.<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 7.55 (s, 1H), 7.45 - 7.35 (m, 1H), 7.19 - 7.07 (m, 1H), 2.66 (t, J=6.5 Hz, 2H), 1.84 (t, J=6.7 Hz, 2H), 1.43 (s, 6H).

PRIMER 2-6A i 2-6B

(R)-5-(2,4-difluorofenil)-2-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid i (S)-5-(2,4-difluorofenil)-2-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid

Korak 1: 4-(2, 6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)butan-2-ol

Metilmagnezijum bromid (1.7 mL, 5.1 mmol) je dodat u rastvor 3-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)propanala (INTERMEDIJER 2-7, 270 mg, 0.85 mmol) u THF (10 mL) na 0°C pod N2. dobijena smeša je mešana na 0°C 1.5 h. Smeša je ugašena zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl (50 mL) i ekstrahovana etil acetatom (50 mL x 3). Kombinovani organski slojevi su koncentrovani in vacuo i prečišćeni hromatografijom na silika gelu (ISCO®; 4 g SepaFlash® kolona, eluiranje sa 0-30% etil acetatom/petroletrom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C15H14Cl

2F2NO) [M+H] , 332.0, zabeleženo,331.9.

Korak 2: 7-hloro-5-(2,4-difluorofenil)-2-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin

Smeša 4-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)butan-2-ola (200 mg, 0.60 mmol) i Cs2CO3(392 mg, 1.20 mmol) u MeCN (10 mL) je mešana na 90°C 22 h. Reakciona smeša je sipana u vodu (50 mL) i ekstrahovana etil acetatom (30 mL x 3). Kombinovani organski slojevi su koncentrovani in vacuo i prečišćeni pomoću Prep-TLC (silica gel, eluiranjem sa 1:3 etil acetatom/petroletrom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C15H13ClF2NO) [M+H]+ , 296.1, zabeleženo, 296.1.

Korak 3: etil (R)-5-(2,4-difluorofenil)-2-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat i etil (S)-5-(2,4-difluorofenil)-2-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat

U rastvor 7-hloro-5-(2,4-difluorofenil)-2-metil-3,4-dihidro-2H- pirano[2,3-b]piridina (120 mg, 0.41 mmol) u EtOH (10 mL) dodat je kalijum acetat (80 mg, 0.81 mmol) i PdCl2(dppf) (30 mg, 0.04 mmol) pod atmosferom N2. Smeša je degazirana i ponovo napunjena sa CO (tri puta). Dobijena smeša je mešana pod 50 psi CO na 70°C 7 h. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobio sirovi proizvod, koji je prečišćen pomoću prep-TLC (silika gel, eluiranjem sa 5:1 petroletrom:etil acetatom) da bi se dobio racemski proizvod. MS (ESI) izrač. za (C18H18F2NO3) [M+H]+ , 334.1, zabeleženo, 334.1.

Racemski etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat je odvojen pomoću hiralne SFC (kolona: Chiralpak Whelk-01250×30 mm, 10 um; Pokretna faza: 40% do 40% MeOH (koji sadrži 0.05% DEA) u CO2; Stopa protoka: 50 mL/min) da bi se dobila dva enantiomera.

Korak 4: (R)-5-(2,4-difluorofenil)-2-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid i (S)-5-(2,4-difluorofenil)-2-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid

Rastvor jednog enantiomera etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilata (35 mg, 0.11 mmol) u amonijaku (10 M u MeOH) (20 mL) je mešan na 15°C 15 h. Smeša je koncentrovana in vacuo i prečišćena pomoću Prep-HPLC (kolona: Phenomenex Synergi C18 150×30 mm, 4 um; Pokretna faza: 43% do 63% vode (koja sadrži 0.1% TFA)-ACN; Stopa protoka: 25 mL/min) da bi se dobio jedan enantiomer jedinjenja iz naslova. MS (ESI) izrač. za (C16H15F2N2O ) [M+H]+

2, 305.1, zabeleženo, 305.0.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.79 - 7.66 (m, 2H), 7.27 - 7.20 (m, 1H), 7.03 - 6.88 (m, 2H), 5.81 (br. s., 1H), 4.50 - 4.38 (m, 1H), 2.75 (br. s., 1H), 2.56 (d, J= 16.5 Hz, 1H), 2.07 - 1.97 (m, 1H), 1.76 -1.59 (m, 1H), 1.52 (d, J= 6.2 Hz, 3H).

4

Sličan tretman drugog enantiomera etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilata dao je drugi enantiomer jedinjenja iz naslova. MS (ESI) izrač. za (C16H15F2N2O2) [M+H]+ , 305.1, zabeleženo, 305.0.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.72 (s, 2H), 7.26 - 7.20 (m, 1H), 7.03 - 6.88 (m, 2H), 5.66 (br. s., 1H), 4.50 - 4.39 (m, 1H), 2.73 (br. s., 1H), 2.62 - 2.50 (m, 1H), 2.07 - 1.97 (m, 1H), 1.76 - 1.62 (m, 1H), 1.52 (d, J= 6.2 Hz, 3H).

PRIMER 2-7

5-(2,4-difluorofenil)-3,3-dimetil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid

Korak 1: metil 3-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)-3-hidroksi-2,2-dimetilpropanoat

U rastvor metil izobutirata (1.7 g, 17 mmol) u THF (20 mL) pod N2na -60 °C dodat je LDA (8.35 mL, 16.7 mmol). Reakcija je mešana na -60°C 0.5 h. 2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)nikotinaldehid (INTERMEDIJER 2-1, 4 g, 14 mmol) je dodavan lagano tokom 30 min. Reakcija je mešana na -60°C 1 h. Smeša je ugašena zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl (20 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (50 mL). Kombinovani organski ekstrakti su koncentrovani pod sniženim pritiskom i prečišćeni pomoću hromatografije na silika gelu (ISCO®; 40 g SepaFlash® kolona, eluiranje sa 10%-20% etil acetatom/petroletrom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C17H16C12F2NO3) [M+H]+ , 390.0, zabeleženo, 389.9.<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 7.51 - 7.32 (m, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.15 - 6.96 (m, 2H), 3.60 (s, 3H), 1.02 - 0.91 (m, 6H).

Korak 2: 1-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)-3-metoksi-2,2-dimetil-3-oksopropil etil oksalat

Smeša 3-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)-3-hidroksi-2,2-dimetilpropanoata (1.2 g, 3.1 mmol), etil 2-hloro-2-oksoacetata (830 mg, 6.1 mmol) i piridina (478 mg, 6.1 mmol) u DCM (20 mL) je mešana na 25°C 12 h. Smeša je ugašena vodom (20 mL), ekstrahovana sa EtOAc (50 mL) i koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobio proizvod koji je korišćen u narednim koracima bez dodatnog prečišćavanja.

Korak 3: metil 3 -(2, 6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)-2,2-dimetilpropanoat

U smešu 1-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)-3-metoksi-2,2-dimetil-3-oksopropil etil oksalata (750 mg, 1.5 mmol), i Bu3SnH (890 mg, 3.1 mmol) u toluenu (20 mL) dodat je AIBN (75 mg, 0.46 mmol) pod atmosferom N2. Reakcija je mešana na 80°C 1 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću Prep-TLC (silika gel, eluiranjem sa 5:1 etil acetatom/petroletrom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C17H16C12F2NO2) [M+H]+ , 374.0, zabeleženo, 374.0.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.19 - 7.12 (m, 1H), 7.06 (s, 1H), 6.99 -6.83 (m, 2H), 3.48 (s, 3H), 3.27 - 3.12 (m, 1H), 3.05 - 2.89 (m, 1H), 0.88 (d, J=10.6 Hz, 6H). Korak 4: 3-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)-2,2-dimetilpropan-1-ol

U rastvor metil 3-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)-2,2-dimetilpropanoata (130 mg, 0.34 mmol) u THF (4 mL) dodat je LiBH4(14.5 mg, 0.66 mmol) pod atmosferom N2. Reakcija je mešana na 60°C 4h zatim je ugašena zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl (5 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (10 mL x 3). Kombinovani organski slojevi su sušeni preko Na2SO4, filtrirani i koncentrovani da bi se dobio ostatak koji je prečišćen hromatografijom na silika gelu (eluiranjem sa 10:1 etil acetatom/petroletrom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C16H16Cl2F2NO) [M+H]+ , 346.0, zabeleženo, 345.9.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.19 - 7.13 (m, 1H), 7.07 (s, 1H), 6.99 - 6.83 (m, 2H), 3.09 (br. s., 2H), 2.99 - 2.85 (m, 1H), 2.73 (br. s., 1H), 0.61 (br. s., 6H).

Korak 5: 7-hloro-5-(2,4-difluorofenil)-3,3-dimetil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin

Smeša 3-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)-2,2-dimetilpropan-1-ola (100 mg, 0.29 mmol) i Cs2CO3(190 mg, 0.58 mmol) u CH3CN (20 mL) je mešana na 70°C 12 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (eluiranjem sa 10:1 etil acetatom/petroletrom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C16H15ClF2NO) [M+H]+ , 310.0, zabeleženo, 310.1.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.22 - 7.13 (m, 1H), 7.01 - 6.88 (m, 2H), 6.80 (s, 1H), 3.95 (s, 2H), 2.26 (br. s., 2H), 0.96 (s, 6H).

Korak 6: etil 5-(2,4-difluorofenil)-3,3-dimetil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat

U rastvor 7-hloro-5-(2,4-difluorofenil)-3,3-dimetil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridina (60 mg, 0.19 mmol) u EtOH (10 mL) dodat je kalijum acetat (98 mg, 0.58 mmol) i PdCl2(dppf) (28 mg, 0.04 mmol) pod atmosferom N2. Smeša je degazirana i ponovo napunjena sa CO (tri puta). Dobijena smeša je mešana pod 50 psi CO na 70°C 8 h. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen pomoću Prep-TLC (silika gel, eluiranjem sa 5:1 etil acetatom/petroletrom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C19H20F2NO3) [M+H]+ ,348.1, zabeleženo, 348.0.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.63 (s, 1H), 7.25 - 7.18 (m, 1H), 7.05 - 6.90 (m, 2H), 4.43 (q, J=7.1 Hz, 2H), 4.00 (s, 2H), 1.41 (t, J=7.1 Hz, 3H), 0.99 (s, 6H).

Korak 7: 5-(2,4-difluorofenil)-3,3-dimetil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid

Smeša etil 5-(2,4-difluorofenil)-3,3-dimetil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilata (50 mg, 0.14 mmol) i amonijaka u MeOH (15 mL, 150 mmol) je mešana na 25°C 12 h. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. MS (ESI) izrač. za (C17H17F2N2O2) [M+H]+ , 319.1, zabeleženo, 319.1.<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 7.57 (s, 1H), 7.42 - 7.32 (m, 1H), 7.19 - 7.08 (m, 2H), 4.04 (s, 2H), 2.43 (s, 2H), 1.93 (s, 2H), 0.99 (s, 6H). PRIMER 2-8A i 2-8B

(S)-2-((difluorometoksi)metil)-5-(2,4-difluorofenil)-2-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid

Korak 1: etil 4-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)-2-oksobutanoat

U mešani rastvor etil (E)-4-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)-2-oksobut-3-enoata (INTERMEDIJER 2-2, 2.1 g, 5.44 mmol) u THF (20 mL) i t-BuOH (20 mL) dodat je tris(trifenilfosfin)rodijum(I) hlorid (1.0 g, 1.1 mmol) na 25°C, rastvor je mešan na 40°C pod 50 psi H219 h. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (ISCO®; 40 g SepaFlash® kolona, eluiranje sa 0% do 3% etil acetata/petroletra) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C17H14Cl2F2NO3) [M+H]<+>, 388.0, zabeleženo, 388.0.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.23 - 7.16 (m, 1H), 7.14 (s, 1H), 7.06 -6.91 (m, 2H), 4.34 - 4.22 (m, 2H), 3.16 - 2.98 (m, 2H), 2.90 (d, J=6.8 Hz, 2H), 1.34 (t, J=7.1 Hz, 3H)

Korak 2: etil 4-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)-2-hidroksi-2-metilbutanoat

MeMgBr (0.54 mL, 1.73 mmol) ukapavanjem je lagano dodat u rastvor etil 4-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)-2-oksobutanoata (670 mg, 1.73 mmol) u THF (18 mL) na 0°C pod atmosferom N2. Smeša je mešana na 25°C 1 h. Dodat je zasićeni vodeni rastvor NH4Cl (30 mL) i vodena faza je ekstrahovana etil acetatom (30 mL x 2). Kombinovani organski slojevi su sušeni preko Na2SO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (ISCO®; 12 g SepaFlash® kolona, eluiranje sa 0% do 10% etil acetata/petroletra) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C18H17Cl2F2NO3)[M+H]+ , 406.2, zabeleženo 405.9.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.27 - 7.18 (m, 1 H), 7.16 (s, 1 H), 7.09 - 6.95 (m, 2 H), 4.28 - 4.18 (m, 1 H), 4.18 - 4.07 (m, 1 H), 3.09 (s, 1 H), 2.79 (dt, J = 3.8, 12.9 Hz, 1 H), 2.48 (dt, J= 4.8, 12.9 Hz, 1 H), 1.95 (dt, J= 4.5, 12.8 Hz, 1 H), 1.81 - 1.68 (m, 1 H), 1.35 (s, 3 H), 1.33 - 1.26 (m, 3 H).

Korak 3: etil 7-hloro-5-(2,4-difluorofenil)-2-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-2-karboksilat

U rastvor etil 4-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)-2-hidroksi-2-metilbutanoata (270 mg, 0.66 mmol) u DMA (5 mL), dodat je Cs2CO3(429 mg, 1.32 mmol). Smeša je degazirana i ponovo napunjena sa N2tri puta. Smeša je mešana na 100°C 100 min. Rastvor je sipan u vodu (25 mL) i ekstrahovan etil acetatom (25mL x 2). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (20 mL), sušeni anhidrovanim Na2SO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (ISCO®; 12 g SepaFlash® kolona, eluiranje sa 0% do 10% etil acetatom/petroletrom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C18H16ClF2NO3)[M+H]+ , 368.0, zabeleženo 367.9.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.17 - 7.07 (m, 1 H), 6.95 - 6.81 (m, 2 H), 6.78 (s, 1 H), 4.25 - 4.07 (m, 2 H), 2.95 - 2.83 (m, 1 H), 2.46 -2.25 (m, 3 H), 1.64 (s, 3 H), 1.14 (t, J = 7.3 Hz, 3 H).

Korak 4: (7-hloro-5-(2,4-difluorofenil)-2-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-2-il)metanol

U rastvor etil 7-hloro-5-(2,4-difluorofenil)-2-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-2-karboksilata (166 mg, 0.45 mmol) u EtOH (5 mL) dodat je NaBH4(34.8 mg, 0.9 mmol). Smeša je mešana na 0 °C 1.5 h pod N2. U smešu je dodat aceton (1 mL), rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (ISCO®; 12 g SepaFlash® kolona, eluiranje sa 10% do 30% etil acetatom/petroletrom) da bi se dobio proizvod.

MS (ESI) izrač. za (C16H14ClF2NO2)[M+H]+ , 326.0, zabeleženo 325.9.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.25 - 7.19 (m, 1 H), 7.04 - 6.90 (m, 2 H), 6.85 (s, 1 H), 3.81 - 3.71 (m, 1 H), 3.67 -3.57 (m, 1 H), 2.56 - 2.43 (m, 1 H), 2.08 - 1.94 (m, 1 H), 1.76 - 1.65 (m, 1 H), 1.36 (s, 3 H), 1.29 - 1.21 (m, 1 H).

Korak 5: etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-(hidroksimetil)-2-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat

U smešu (7-hloro-5-(2,4-difluorofenil)-2-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-2-il) metanola (106 mg, 0.326 mmol) i Pd(dppf)Cl2(24 mg, 0.03 mmol) u EtOH (30 mL) pod argonom dodat je KOAc (63.9 mg, 0.652 mmol). Smeša je degazirana i ponovo napunjena argonom tri puta. Dobijena smeša je mešana pod 50 Psi CO na 70°C 24 h. Smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (ISCO®; 12 g SepaFlash® kolona, eluiranje sa 10% do 60% etil acetatom/petroletrom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C19H19F2NO4)[M+H]+ , 364.1, zabeleženo 364.0.

Korak 6: etil 2-((difluorometoksi)metil)-5-(2,4-difluorofenil)-2-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat

U mešani rastvor etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-(hidroksimetil)-2-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilata (70 mg, 0.193 mmol) u acetonitrilu (7 mL) na 25°C pod N2dodat je bakar jodid (7.34 mg, 0.04 mmol) i 2,2-difluoro-2-(fluorosulfonil)sirćetna kiselina (68.6 mg, 0.39 mmol). Rastvor je mešan na 50°C 30 min. Dodatna porcija 2,2-difluoro-2-(fluorosulfonil)sirćetne kiseline (137 mg, 0.771 mmol) je dodata na 50°C i rastvor je mešan na 50°C 40 min. Rastvor je sipan u zasićeni vodeni rastvor NaHCO3(40 mL) i ekstrahovan etil acetatom (40 mL x 2), kombinovani organski slojevi su sušeni preko Na2SO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-TLC (silika gel, eluiranjem sa 2:1 petroletrom:etil acetatom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C

20H20F4NO4) [M+H] , 414.1, zabeleženo, 414.0.

Korak 7: etil (S)-2-((difluorometoksi)metil)-5-(2,4-difluorofenil)-2-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat i etil (R)-2-((difluorometoksi)metil)-5-(2,4-difluorofenil)-2-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat

Racemski etil 2-((difluorometoksi)metil)-5-(2,4-difluorofenil)-2-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat (22.8 mg, 0.055 mmol) je odvojen pomoću hiralne SFC (kolona: Chiralpak AY 250×30 mm, 10 um; Pokretna faza: 10% do 10% EtOH (koji sadrži 0.05% DEA) u CO2; Stopa protoka: 60 mL/min) da bi se dobila dva enantiomera.

Korak 8: (S)-2-((difluorometoksi)metil)-5-(2,4-difluorofenil)-2-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid i (R)-2-((difluorometoksi)metil)-5-(2,4-difluorofenil)-2-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid

Rastvor jednog enantiomera etil 2-((difluorometoksi)metil)-5-(2,4-difluorofenil)-2-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilata (10 mg, 0.024 mmol) u amonijaku (10 M u MeOH) (20 mL) je mešan na 25°C 18 h. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen pomoću Prep-HPLC (kolona: Phenomenex Synergi C18 150×30 mm, 4 um; Pokretna faza: 50% do 70% vode (koja sadrži 0.1% TFA)-ACN; Stopa protoka: 25 mL/min) da bi se dobio jedan enantiomer jedinjenja iz naslova. MS (ESI) izrač. za (C18H17F4N2O3) [M+H]+ , 385.1, zabeleženo, 385.0.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.90 (br. s., 1 H), 7.74 (s, 1 H), 7.30 -7.26 (m, 1 H), 7.07 - 6.87 (m, 2 H), 6.66 (br. s., 1 H), 6.53 - 6.07 (m, 1 H), 4.08 - 3.87 (m, 2 H), 2.10 - 1.96 (m, 1 H), 1.91 - 1.73 (m, 1 H), 1.48 (s, 3 H).

Sličan tretman drugog enantiomera etil 2-((difluorometoksi)metil)-5-(2,4-difluorofenil)-2-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilata dao je drugi enantiomer jedinjenja iz naslova. MS (ESI) izrač. za (C18H17F4N2O3) [M+H]+ , 385.1, zabeleženo, 385.0.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.92 (br. s., 1 H), 7.74 (s, 1 H), 7.29 (br. s., 1 H), 7.07 - 6.90 (m, 2 H), 6.78 (br. s., 1 H), 6.59 - 6.02 (m, 1 H), 4.08 - 3.86 (m, 2 H), 2.10 - 1.96 (m, 1 H), 1.90 - 1.75 (m, 1 H), 1.48 (s, 3 H).

PRIMER 2-9A, 2-9B, 2-9C i 2-9D

1

(S)-2-((S)-1-(difluorometoksi)etil)-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid, (S)-2-((R)-1-(difluorometoksi)etil)-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid, (R)-2-((S)-1-(difluorometoksi)etil)-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid i (R)-2-((R)-1-(difluorometoksi)etil)-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid

Korak 1: 7-hloro-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-2-karboksilna kiselina

(INTERMEDIJER 3-2)

U rastvor etil 4-(2,6-dihloro-4-(2,4-difluorofenil)piridin-3-il)-2-hidroksibutanoata (INTERMEDIJER 2-3, 1.15 g, 2.9 mmol) i Cs2CO3(1.9 g, 5.8 mmol) u CH3CN (15 mL). Smeša je mešana na 90°C 6 h. Smeša je sipana u vodu (60 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (20mL). Vodena faza je podešena do pH∽4 sa limunskom kiselinom i ekstrahovana sa EtOAc (40 mL x 3). Kombinovani organski ekstrakti su koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobio proizvod koji je korišćen u sledećem koraku bez prečišćavanja. MS (ESI) izrač. za (C O

15H11ClF2N3)[M+H] , 325.9 zabeleženo, 325.9.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.30 - 7.08 (m, 2H), 7.03 - 6.85 (m, 2H), 4.98 (dd, J=3.9, 6.7 Hz, 1H), 2.78 - 2.43 (m, 2H), 2.36 - 2.07 (m, 2H).

2

Korak 2: 7-hloro-5-(2,4-difluorofenil)-N-metoksi-N-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-2-karboksamid

Smeša 7-hloro-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-2-karboksilne kiseline (0.8 g, 2.5 mmol), N,O-dimetilhidroksilamin hidrohlorida (264 mg, 2.7 mmol), HATU (1.02 g, 2.7 mmol) i Et3N (720 mg, 7.35 mmol) u DCM (15 mL) je mešana na 25°C 2 h. Reakcija je sipana u vodu (20 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (50 mL x 3). Kombinovani organski slojevi su sušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i isparavani i ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (eluiranjem sa 1:1 petroletrom/etil acetatom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C17H16ClF2N2O3) [M+H]+ , 369.0, zabeleženo, 369.1.

Korak 3: 1-(7-hloro-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-2-il)etanon

U rastvor 7-hloro-5-(2,4-difluorofenil)-N-metoksi-N-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-2-karboksamida (400 mg, 1.1 mmol) u THF (10 mL) ukapavanjem je dodat MeMgBr (0.4 mL, 1.2 mmol) na -65°C pod N2i reakcija je mešana 2 h na -65°C. Reakcija je ugašena zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl (10 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (200 mL x 3). Kombinovani organski slojevi su sušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i isparavani i prečišćeni hromatografijom na silika gelu (eluiranjem sa 5:1 petroletrom/etil acetatom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C16H13ClF2NO2) [M+H]+ , 324.0, zabeleženo, 324.1.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.23 - 7.14 (m, 1H), 7.03 - 6.85 (m, 3H), 4.77 - 4.56 (m, 1H), 2.69 - 2.53 (m, 1H), 2.52 - 2.42 (m, 1H), 2.39 (s, 3H), 2.26 - 2.13 (m, 1H), 2.00 - 1.85 (m, 1H).

Korak 4: 1-(7-hloro-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-2-il)etanol

Smeša 1-(7-hloro-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-2-il)etanona (130 mg, 0.40 mmol) i NaBH4(16 mg, 0.40 mmol) u MeOH (5 mL) je mešana na 0°C 0.5 h. Reakcija je sipana u vodu (20 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (50 mL x 3). Kombinovani organski slojevi su sušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i isparavani i ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (eluiranjem sa 5:1 petroletar/etil acetat) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C16H15ClF2NO2) [M+H]+ , 326.0, zabeleženo, 325.8.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.25 - 7.16 (m, 1H), 7.04 - 6.90 (m, 2H), 6.85 (d, J=3.3 Hz, 1H), 4.25 - 4.01 (m, 2H), 2.56 - 2.42 (m, 1H), 2.04 (s, 1H), 2.03 - 1.91 (m, 1H), 1.35 - 1.29 (m, 3H).

Korak 5: etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-(1-hidroksietil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat

U rastvor 1-(7-hloro-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-2-il)etanola (130 mg, 0.4 mmol) u EtOH (20 mL) dodat je kalijum acetat (117 mg, 1.2 mmol) i PdCl2(dppf) (29 mg, 0.05 mmol) pod atmosferom N2. Smeša je degazirana i ponovo napunjena sa CO (tri puta). Dobijena smeša je mešana pod 50 psi CO na 70°C 12 h. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobio sirovi proizvod, koji je prečišćen hromatografijom na silika gelu (ISCO®; 4 g SepaFlash® kolona, eluiranje sa 0% do 20% etil acetatom/petroletrom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C19H20F2NO4) [M+H]+,364.1, zabeleženo, 364.1. 1H NMR (400MHz, CD3OD) δ 7.58 (s, 1H), 7.46 - 7.35 (m, 1H), 7.23 - 7.03 (m, 2H), 4.44 - 4.34 (m, 2H), 4.20 - 4.05 (m, 1H), 4.02 - 3.87 (m, 1H), 2.79 (dtd, J=6.0, 11.9, 17.5 Hz, 1H), 2.66 - 2.53 (m, 1H), 2.22 - 2.02 (m, 1H), 1.83 - 1.68 (m, 1H), 1.42 - 1.29 (m, 6H).

Korak 6: etil (S)-2-((S)-1-(difluorometoksi)etil)-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat, etil (S)-2-((R)-1-(difluorometoksi)etil)-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat, etil (R)-2-((S)-1-(difluorometoksi)etil)-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat i etil (R)-2-((R)-1-(difluorometoksi)etil)-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat

4

U rastvor etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-(1-hidroksietil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilata (85 mg, 0.23 mmol) i CuI (17 mg, 0.09 mmol) u CH3CN (3 mL) ukapavanjem je dodata 2,2-difluoro-2-(fluorosulfonil)sirćetna kiselina (200 mg, 1.13 mmol) na 45°C pod N2i reakcija je mešana 2 h na 50°C. Reakcija je ugašena zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(5 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (20 mL x 3). Kombinovani organski slojevi su sušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i isparavani da bi se dobio sirovi proizvod, koji je prečišćen hromatografijom na silika gelu (eluiranjem sa 5:1 petroletrom/etil acetatom) da bi se dobila dva diastereomera proizvoda. MS (ESI) izrač. za (C20H20F4NO4) [M+H]+ , 414.1, zabeleženo, 414.0 i MS (ESI) izrač. za (C20H20F4NO4) [M+H]+ , 414.1, zabeleženo, 414.0.

Svaka diastereomerna smeša enantiomera je odvojena pomoću hiralne SFC (kolona: Chiralpak Whelk-01 250×30 mm, 10 um; Pokretna faza: 45% do 45% EtOH (koji sadrži 0.05% DEA) u CO2; Stopa protoka: 60 mL/min) da bi se dobila četiri izomera proizvoda.

Izomer 1: MS (ESI) izrač. za (C20H20F4NO4) [M+H]+ , 414.1, zabeleženo, 414.1.

Izomer 2: MS (ESI) izrač. za (C20H20F4NO4) [M+H]+ , 414.1, zabeleženo, 414.1.

Izomer 3: MS (ESI) izrač. za (C20H19F4NO4) [M+H]+ , 414.1, zabeleženo, 414.1

Izomer 4: MS (ESI) izrač. za (C20H19F4NO4) [M+H]+ , 414.1, zabeleženo, 414.1

Korak 7: (S)-2-((S)-1-(difluorometoksi)etil)-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid, (S)-2-((R)-1-(difluorometoksi)etil)-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid, (R)-2-((S)-1-(difluorometoksi)etil)-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid i (R)-2-((R)-1-(difluorometoksi)etil)-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid

Rastvor jednog izomera etil 2-(1-(difluorometoksi)etil)-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilata (10 mg, 0.023 mmol) u amonijaku (10 M u MeOH) (15 mL) je mešan na 25°C 12 h. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobio jedan izomer jedinjenja iz naslova. MS (ESI) izrač. za (C18H17F4N2O3) [M+H]+ , 385.1, zabeleženo, 385.1. 1H NMR (400MHz, CD3OD) δ 7.59 (s, 1H), 7.45 - 7.35 (m, 1H), 7.20 - 7.07 (m, 2H), 6.77 - 6.31 (m, 1H), 4.54 - 4.43 (m, 1H), 4.34 (d, J=11.0 Hz, 1H), 2.82 (ddd, J=5.7, 12.2, 17.4 Hz, 1H), 2.59 (dd, J=2.2, 17.4 Hz, 1H), 2.05 (td, J=2.6, 13.9 Hz, 1H), 1.88 - 1.73 (m, 1H), 1.45 (d, J=6.4 Hz, 3H).

Sličan tretman drugih izomera etil 2-(1-(difluorometoksi)etil)-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilata dao je druge izomere jedinjenja iz naslova.

Izomer 2: MS (ESI) izrač. za (C18H17F4N2O3) [M+H]+ , 385.1, zabeleženo, 385.1.<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 7.58 (br. s., 1H), 7.44 - 7.33 (m, 1H), 7.21 - 7.03 (m, 2H), 6.77 - 6.26 (m, 1H), 4.45 (d, J=5.5 Hz, 1H), 4.39 - 4.26 (m, 1H), 2.90 - 2.72 (m, 1H), 2.67 - 2.49 (m, 1H), 2.04 (d, J=9.4 Hz, 1H), 1.85 - 1.69 (m, 1H), 1.44 (d, J=6.3 Hz, 3H).

Izomer 3: MS (ESI) izrač. za (C18H17F4N2O3) [M+H]+ , 385.1, zabeleženo, 385.1.<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 7.58 (s, 1H), 7.46 - 7.31 (m, 1H), 7.12 (q, J=7.7 Hz, 2H), 6.75 - 6.26 (m, 1H), 4.53 - 4.42 (m, 1H), 4.31 (d, J=11.0 Hz, 1H), 2.79 (ddd, J=5.7, 12.1, 17.4 Hz, 1H), 2.67 -2.51 (m, 1H), 2.14 (dd, J=2.7, 11.0 Hz, 1H), 1.84 - 1.65 (m, 1H), 1.50 - 1.37 (m, 3H).

Izomer 4: MS (ESI) izrač. za (C18H17F4N2O3) [M+H]+ , 385.1, zabeleženo, 385.1.<1>HNMR (400MHz, CD3OD) δ 7.58 (s, 1H), 7.45 - 7.32 (m, 1H), 7.23 - 7.02 (m, 2H), 6.81 - 6.23 (m, 1H), 4.58 - 4.41 (m, 1H), 4.30 (d, J=10.6 Hz, 1H), 2.79 (ddd, J=5.5, 12.0, 17.3 Hz, 1H), 2.66 - 2.52 (m, 1H), 2.21 - 2.07 (m, 1H), 1.84 - 1.66 (m, 1H), 1.48 - 1.34 (m, 3H).

Jedinjenja formule I (gde, u Pemi 3, R2A , i R3A su svaki vodonik i R2 , R3, prsten B, n, i svaki R1 su kao što su opisani u formuli I ili alternativnim primerima izvođenja koji su ovde opisani) mogu biti pripremljeni prema Šemi 3 pomoću različitih reakcija na alkoholu 3-1 (npr. alkilacija, fluorinacija, oksidacija nakon koje sledi fluorinacija, itd.) nakon čega sledi tretman amonijakom. PRIMER 3-1A i 3-1B

3-IA: (R)-2-((difluorometoksi)metil)-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid i 3-1B: (S)-2-((difluorometoksi)metil)-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid

Korak 1: etil 2-((difluorometoksi)metil)-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat

U smešu etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-(hidroksimetil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilata (INTERMEDIJER 2-4, 94 mg, 0.27 mmol) i bakar (I) jodida (10.3 mg, 0.05 mmol) u MeCN (10 mL) dodata je 2,2-difluoro-2-(fluorosulfonil)sirćetna kiselina (96 mg, 0.54 mmol) i smeša je mešana na 45°C 2.5 h pod zaštitom N2. Reakcija je hlađena do sobne temperature, bazifikovana do pH∽8 zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3i vodom (10 mL) i ekstrahovana etil acetatom (2 x 10 mL). Organske faze su sušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom da bi se dobio sirovi proizvod, koji je prečišćen pomoću Prep-TLC (silika gel, eluiranjem sa 1:1 petroletrom/etil acetatom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C19H18F4NO4) [M+H]+ , 400.2, zabeleženo, 400.2.<1>H NMR (400MHz, CD3OD) δ 7.61 (s, 1H), 7.37 - 7.46 (m, 1H), 7.07 - 7.20 (m, 2H), 6.30 - 6.71 (m, 1H), 4.51 - 4.61 (m, 1H), 4.39 (q, J= 7.1 Hz, 2H), 4.08 - 4.20 (m, 2H), 2.85 (ddd, J= 5.8, 11.9, 17.4 Hz, 1H), 2.57 - 2.67 (m, 1H), 2.10 (td, J= 2.8, 13.8 Hz, 1H), 1.75 - 1.88 (m, 1H), 1.38 (t, J= 7.2 Hz, 3H).

Korak 2: etil (S)-2-((difluorometoksi)metil)-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat i etil (R)-2-((difluorometoksi)metil)-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat

Racemski etil 2-((difluorometoksi)metil)-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat (40 mg, 0.100 mmol) je odvojen pomoću hiralne SFC (kolona: Chiralpak AD 250×30 mm, 5 um; Pokretna faza: 30% do 30% IPA (koji sadrži 0.05% DEA) u CO2; Stopa protoka: 70 mL/min) da bi se dobila dva enantiomera.

Korak 3: (S)-2-((difluorometoksi)metil)-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid i (R)-2-((difluorometoksi)metil)-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid

Rastvor jednog enantiomera etil 2-((difluorometoksi)metil)-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilata (20 mg, 0.05 mmol) u amonijaku (10 M u MeOH) (40 mL) je mešan na 20°C 16 h. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću Prep-HPLC (kolona: Phenomenex Gemini C18 250×21.2 mm, 5 um; Pokretna faza: 30% do 60% voda (koja sadrži 10 mM NH4HCO3)-ACN; Stopa protoka: 25 mL/min) da bi se dobio jedan enantiomer jedinjenja iz naslova. MS (ESI) izrač. za (C17H15F4N2O3) [M+H]+ , 371.1, zabeleženo, 371.0.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.58 (s, 1H), 7.34 - 7.42 (m, 1H), 7.07 - 7.16 (m, 2H), 6.25 - 6.70 (m, 1H), 4.49 - 4.56 (m, 1H), 4.06 - 4.17 (m, 2H), 2.82 (dd, J= 5.67, 11.93, 17.22 Hz, 1H), 2.58 (d, J = 16.04 Hz, 1H), 2.03 - 2.11 (m, 1H), 1.72 - 1.85 (m, 1H) Sličan tretman drugog enantiomera etil 2-((difluorometoksi)metil)-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat dao je drugi enantiomer jedinjenja iz naslova. MS (ESI) izrač. za (C17H15F4N2O3) [M+H]+ , 371.1, zabeleženo, 371.0.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.58 (s, 1H), 7.33 - 7.42 (m, 1H), 7.07 - 7.17 (m, 2H), 6.27 - 6.71 (m, 1H), 4.49 - 4.56 (m, 1H), 4.06 -4.16 (m, 2H), 2.82 (dd, J= 5.48, 11.84, 17.12 Hz, 1H), 2.58 (d, J = 16.43 Hz, 1H), 2.03 - 2.12 (m, 1H), 1.72 - 1.85 (m, 1H).

Sledeća jedinjenja su pripremljena prema postupcima opisanim za Primer 3-1A i 3-1B.

1

PRIMER 3-5A i 3-5B

(S)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(metoksimetil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid i (R)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(metoksimetil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid Korak 1: etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-(metoksimetil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat

U mešani rastvor etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-(hidroksimetil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilata (INTERMEDIJER 2-4, 150 mg, 0.43 mmol) i jodometana (67.0 mg, 0.47 mmol) u suvom DMF (4 mL) dodat je natrijum hidrid (18.89 mg, 0.472 mmol) na 0°C pod atmosferom N2. Dobijena smeša je mešana na 0°C 30 min. Rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom, ostatak je prečišćen pomoću prep-TLC (silika gel, eluiranjem sa 2:1 etil acetatom/petroletrom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C19H20F2NO4) [M+H]+ , 364.1, zabeleženo, 364.0. Korak 2: etil (S)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(metoksimetil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-blpiridin-7-karboksilat i etil (R)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(metoksimetil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat

Racemski etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-(metoksimetil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat (93 mg, 0.256 mmol) je odvojen pomoću SFC (kolona: Chiralpak OJ 250×30 mm, 5

2

um; Pokretna faza: 45% do 45% MeOH (koji sadrži 0.05% DEA) u CO2; Stopa protoka: 60 mL/min) da bi se dobila dva enantiomera.

Korak 3: (S)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(metoksimetil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid i (R)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(metoksimetil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid

Rastvor jednog enantiomera etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-(metoksimetil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilata (41 mg, 0.11 mmol) u amonijaku (10 M u MeOH) (15 mL) je mešan na 26°C 12 h. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen pomoću prep-TLC (silika gel, eluiranjem sa 2:1 etil acetatom/petroletrom) da bi se dobio jedan enantiomer jedinjenja iz naslova. MS (ESI) izrač. za (C17H17F2N2O3)[M+H]+ , [335.1], zabeleženo, [335.0].<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.71 (s, 2H), 7.26 -7.22 (m, 1H), 6.99 - 6.89 (m, 2H), 5.50 (s, 1H), 4.46 - 4.44 (m, 1H), 3.73 - 3.62 (m, 2H), 3.44 (s, 3H), 2.74 - 2.56 (m, 2H), 2.15 - 2.02 (m, 1H), 1.85 - 1.79 (m, 1H).

Sličan tretman drugog enantiomera etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-(metoksimetil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilata dao je drugi enantiomer jedinjenja iz naslova. MS (ESI) izrač. za (C17H17F2N2O3)[M+H]+ , [335.1], zabeleženo, [335.0].<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.66 (s, 2H), 7.21 -7.15 (m, 1H), 6.94 - 6.84 (m, 2H), 5.50 (s, 1H), 4.41 - 4.39 (m, 1H), 3.68 -3.57 (m, 2H), 3.39 (s, 3H), 2.70 - 2.50 (m, 2H), 2.10 - 1.97 (m, 1H), 1.80 - 1.74 (m, 1H).

PRIMER 3-6A i 3-6B

(S)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(fluorometil)-3,4-dihidro-2H-piranor[2,3-b]piridin-7-karboksamid i (R)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(fluorometil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid Korak 1: etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-(fluorometil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat

U rastvor etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-(hidroksimetil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilata (INTERMEDIJER 2-4, 300mg, 0.86 mmol) u DCM (15 mL) na -40°C dodat je DAST (0.34 ml, 2.6 mmol) u DCM (3 mL). Reakciona smeša je mešana na 0°C 100 min pod N2. Smeša je ugašena zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(30 mL) i ekstrahovana sa DCM (2 x 20 mL). Kombinovane organske materije su sušene sa Na2SO4, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (eluiranjem sa 20:1 do 1:3 petroletrom/etil acetatom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C18H17F3NO3)[M+H]+ , 352.1, zabeleženo, 352.1

Korak 2: etil (S)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(fluorometil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-blpiridin-7-karboksilat i etil (R)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(fluorometil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat

Racemski etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-(fluorometil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat (990 mg, 2.82 mmol) je odvojen pomoću hiralne SFC (kolona: Chiralpak Whelk-01 250×30 mm, 10 um; Pokretna faza: 50% do 50% EtOH (koji sadrži 0.05% DEA) u CO2; Stopa protoka: 60mL/min) da bi se dobila dva enantiomera.

Korak 3: (S)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(fluorometil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid i (R)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(fluorometil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid

Rastvor jednog enantiomera etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-(fluorometil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilata (485 mg, 1.38 mmol) u amonijaku (10 M u MeOH) (50 mL) je mešan na 23°C 4 h. Smeša je koncentrovana in vacuo da bi se dobio proizvod. Čvsrta supstanca je isprana sa CH3CN (2 mL). Smeša je filtrirana i čvrsti ostatak je sušen pod sniženim pritiskom da bi se dobio jedan enantiomer jedinjenja iz naslova. MS (ESI) izrač. za (C16H14F3N2O2)[M+H]+ , 323.0,

4

zabeleženo,323.1.<1>HNMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.59 (s, 1H), 7.43 - 7.37 (m, 1H), 7.16 - 7.10 (m, 2H), 4.87 - 4.54 (m, 3H), 2.87 - 2.80 (m, 1H), 2.63 - 2.58 (m, 1H), 2.09 - 2.06 (m, 1H), 1.84 - 1.79 (m, 1H).

Sličan tretman drugog enantiomera etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-(fluorometil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilata dao je drugi enantiomer jedinjenja iz naslova. MS (ESI) izrač. za (C16H14F3N2O2)[M+H]+ , 323.0, zabeleženo, 323.1.<1>HNMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.59 (s, 1H), 7.43 -7.37 (m, 1H), 7.16 - 7.10 (m, 2H), 4.87 - 4.54 (m, 3H), 2.86 - 2.81 (m, 1H), 2.63 -2.59 (m, 1H), 2.09 - 2.04 (m, 1H), 1.82 - 1.79 (m, 1H).

PRIMER 3-7A i 3-7B

3-7A: (R)-2-(difluorometil)-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid i 3-7B: (S)-2-(difluorometil)-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid

Korak 1: etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-formil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat (INTERMEDIJER 3-1)

Mešani rastvor racemskog etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-(hidroksimetil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilata (INTERMEDIJER 2-4, 300 mg, 0.86 mmol) u DCM (20 mL) dodat je DMP (474 mg, 1.1 mmol) na 0 °C pod atmosferom N2. Dobijena smeša je mešana na 0°C 1 h. Dodat je zasićeni vodeni rastvor NaHCO3(50 mL). Organski sloj je odvojen, sušen preko anhidrovanog NaSO4, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio proizvod koji je korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. MS (ESI) izrač. za (C18H18F2NO5) [M+H+H2O]+ , 366.1, zabeleženo, 366.1.

Korak 2: etil 2-(difluorometil)-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat

U rastvor etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-formil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilata (380 mg, 1.1 mmol) u DCM (20 mL) i EtOH (0.01 mL) dodat je DAST (0.289 ml, 2.2 mmol) na 0°C. Posle dodavanja, smeša je mešana na 24°C 2 h. U reakcionu smešu je lagano dodavan zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata (20 mL). Organski sloj je odvojen, sušen preko natrijum sulfata i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću prep-TLC (silika gel, eluiranjem sa 1:2 etil acetatom/petroletrom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C18H16F4NO3) [M+H]+ , 370.2, zabeleženo, 370.0.

Korak 3: 2-(difluorometil)-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid

Rastvor etil 2-(difluorometil)-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]-piridin-7-karboksilata (81 mg, 0.22 mmol) u amonijaku (10 M u MeOH) (15 mL) je mešan na 25°C 3 h. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C16H13F4N2O2)[M+H]+ , [341.1], zabeleženo, [341.0].

Korak 4: (R)-2-(difluorometil)-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid i (S)-2-(difluorometil)-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid

Racemski etil 2-(difluorometil)-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid (64 mg, 0.19 mmol) je odvojen pomoću SFC (kolona: Chiralpak AD 250×30 mm, 5 um; Pokretna faza: 20% do 20% MeOH (koji sadrži 0.05% DEA) u CO2; Stopa protoka: 60mL/min) da bi se dobila dva enantiomera:

Jedan enantiomer: MS (ESI) izrač. za (C16H13F4N2O2) [M+H]+ , 341.1, zabeleženo, 341.0.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.63 (s, 1H), 7.43 -7.38 (m, 1H), 7.17 - 7.11 (m, 2H), 6.22 - 5.94 (m, 1H), 4.87 - 4.54 (m, 1H), 3.30 - 2.81 (m, 1H), 2.67 - 2.63 (m, 1H), 2.19 - 2.16 (m, 1H), 1.90 - 1.84 (m, 1H).

Drugi enantiomer: MS (ESI) izrač. za (C16H13F4N2O2) [M+H]+ , 341.1, zabeleženo, 341.0.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.63 (s, 1H), 7.43 -7.38 (m, 1H), 7.17 - 7.11 (m, 2H), 6.22 - 5.94 (m, 1H), 4.62 - 4.54 (m, 1H), 3.30 - 2.81 (m, 1H), 2.67 - 2.63 (m, 1H), 2.19 - 2.16 (m, 1H), 1.90 - 1.84 (m, 1H).

PRIMER 3-8A i 3-8B

(S)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(2,2,2-trifluoroetil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid i (R)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(2,2,2-trifluoroetil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid

Korak 1: etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-(2,2,2-trifluoro-1-hidroksietil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat i 5-(2,4-difluorofenil)-2-(2,2,2-trifluoro-1-((trimetilsilil)oksi)etil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat

U rastvor etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-formil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilata (INTERMEDIJER 3-1, 700 mg, 2.0 mmol), cezijum fluorida (918 mg, 6.1 mmol) u THF (15 mL) dodat je trimetil(trifluorometil)silan (860 mg, 6.1 mmol) na 0°C pod N2. Reakciona smeša je mešana na 0°C 2 h pod N2. Smeša je ugašena sa H2O (15 mL), i ekstrahovana sa EtOAc (3 x 25 mL). Kombinovani organski slojevi su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4, filtrirani i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Hromatografija na silika gelu eluiranjem sa 20:1 do 2:1 petroletrom:etil acetatom dala je proizvode. MS (ESI) izrač. za (C22H25F5NO4Si)[M+H]+ , 490.5, zabeleženo, 490.4.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.48 (s, 1H), 6.97-7.07 (m, 1H), 6.72-6.88 (m, 2H), 4.21-4.38 (m, 3H), 2.59 (br. s., 1H), 2.47 (br. s., 1H), 1.83-2.04 (m, 1H), 1.62-1.83 (m, 1H), 1.23 (t, J=7.04 Hz, 3H), 0.01 (d, J=11.35 Hz, 9H).

Korak 2: etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-(2,2,2-trifluoro-1-hidroksietil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat

U rastvor etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-(2,2,2-trifluoro-1-((trimetilsilil)oksi)etil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilata (300 mg, 0.61 mmol) u etanolu (15 mL) dodat je K2CO3(102 mg, 0.74 mmol) na 18°C. Smeša je mešana na 18°C 40 min. Smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan in vacuo i ostatak je prečišćen pomoću prep-TLC (silika gel, eluiranjem sa 2:1 petroletrom:etil acetatom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C19H17F5NO4) [M+H]+ , 418.0, zabeleženo, 417.9.<1>HNMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.68 (d, J=10.17 Hz, 1H), 7.22 (br. s., 1H), 6.86-7.06 (m, 2H), 4.53-4.66 (m, 1H), 4.43 (quin, J=7.24 Hz, 2H), 4.11 (q, J=7.30 Hz, 1H), 2.81 (br. s., 1H), 2.58-2.69 (m, 1H), 2.04-2.19 (m, 2H), 1.40 (q, J=7.43 Hz, 3H).

Korak 3: 5-(2,4-difluorofenil)-2-(2,2,2-trifluoro-1-(((metiltio)karbonotioil)oksi)etil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilna kiselina

U rastvor etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-(2,2,2-trifluoro-1-hidroksietil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilata (280 mg, 0.67 mmol) u THF (2 mL) dodat je NaH (40.3 mg, 1.0 mmol) na 0°C pod N2. Posle mešanja od 30 min, dodati su ugljen disulfid (0.10 mL, 1.68 mmol) i jodometan (0.31 mL, 5.00 mmol) i smeša je mešana na 0 °C pod N21 h. Reakcija je razblažena sa 15 mL vode i 5 kapi HCl (koncentrovane, 12M), ekstrahovana sa EtOAc (3 x 15 mL), kombinovane organske materije su sušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane in vacuo da bi se dobio proizvod, koji je korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. MS (ESI) izrač. za (C19H15F5NO4S2)[M+H]+ , 480.1, zabeleženo, 480.2.

Korak 4: etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-(2,2,2-trifluoro-1-(((metiltio)karbonotioil)oksi)etil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat

U rastvor 5-(2,4-difluorofenil)-2-(2,2,2-trifluoro-1-(((metiltio)karbonotioil)oksi)etil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilne kiseline (430 mg, 0.90 mmol) u suvom EtOH (10 mL) dodat je sumpor dihlorid (320 mg, 2.69 mmol) pod N2. Smeša je mešana na 85°C pod 2.5 h. Smeša je ugašena sa H2O (15 mL), zatim je smeša podešena do pH = 8 sa čvrstim NaHCO3. smeša je ekstrahovana sa EtOAc (3 x 20 mL). Kombinovani organski slojevi su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Hromatografija na silika gelu eluiranjem sa 10:1 do 5:1 petroletrom:etil acetatom dala je proizvod. MS (ESI) izrač. za (C21H19F5NO4S2)[M+H]+ , 508.4, zabeleženo, 508.3.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.65 (d, J=2.74 Hz, 1H), 7.17-7.23 (m, 1H), 6.87-7.04 (m, 2H), 4.68-4.82 (m, 1H), 4.42 (dq, J=2.35, 7.04 Hz, 2H), 2.70-2.89 (m, 1H), 2.66 (br. s., 1H), 2.60 (s, 3H), 2.07-2.25 (m, 1H), 1.80-2.00 (m, 1H), 1.39 (dt, J=1.96, 7.04 Hz, 3H).

Korak 5: etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-(2.2.2-trifluoroetil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat

U rastvor etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-(2,2,2-trifluoro-1-(((metiltio)karbonotioil)oksi)etil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilata (230 mg, 0.45 mmol) i tributilstanana (1.18 g, 4.05 mmol) u toluenu (10 mL) dodat je azobisizobutironitril (20 mg, 0.12 mmol) pod N2. Reakciona smeša je zagrevana do 100 °C i mešana pod N21 h. Reakcija je razblažena sa 20 mL vode, ekstrahovana sa EtOAc (20 mL x 3), kombinovani organski slojevi su sušeni preko Na2SO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobio sirovi proizvod. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (eluiranjem sa 10:1 do 5:1 petroletra:etil acetata) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C19H17F5NO3)[M+H]+ , 402.1, zabeleženo, 402.1.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.65 (s, 1H), 7.18-7.24 (m, 1H), 6.87-7.04 (m, 2H), 4.58 (td, J=5.23, 10.27 Hz, 1H), 4.42 (q, J=7.04 Hz, 2H), 2.71-2.94 (m, 2H), 2.42-2.65 (m, 2H), 2.12-2.24 (m, 1H), 1.69-1.86 (m, 1H), 1.39 (t, J=7.04 Hz, 3H).

Korak 6: etil (S)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(2,2,2-trifluoroetil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-blpiridin-7-karboksilat i etil (R)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(2,2,2-trifluoroetil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat

Racemski etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-(2,2,2-trifluoroetil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat (120 mg, 0.3 mmol) je odvojen preko hiralne SFC (Kolona: Chiralpak IC 250×30 mm, 10 um; Pokretna faza: 30% do 30% IPA (koji sadrži 0.05% DEA u CO2; Stopa protoka: 6 mL/min) da bi se dobila dva enantiomera koji su korišćeni u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.

Korak 7: (S)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(2,2,2-trifluoroetil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid i (R)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(2,2,2-trifluoroetil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid

Rastvor jednog enantiomera etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-(2,2,2-trifluoroetil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilata (45 mg, 0.11 mmol) u amonijaku (10 M u MeOH) (20 mL) je mešan na 10°C 20 h. Smeša je koncentrovana i prečišćena pomoću Prep-HPLC (Kolona: Phenomenex Synergi C18 150×30 mm, 4 um; Pokretna faza: 43% do 63% vode (koja sadrži 0.05% HCl)-ACN; Stopa protoka: 25 mL/min) da bi se dobio jedan enantiomer jedinjenja iz naslova. MS (ESI) izrač. za (C17H14F5N2O2)[M+H]+ , 373.1, zabeleženo, 372.9.<1>HNMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.59 (br. s., 1H), 7.38 (d, J=6.26 Hz, 1H), 7.01-7.18 (m, 2H), 4.65 (br. s., 1H), 2.49-2.89 (m, 4H), 2.05-2.24 (m, 1H), 1.79 (br. s., 1H).

Sličan tretman drugog enantiomera etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-(2,2,2-trifluoroetil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilata dao je drugi enantiomer jedinjenja iz naslova. MS (ESI) izrač. za (C17H14F5N2O2)[M+H]+ , 373.1, zabeleženo, 372.9.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.60 (s, 1H), 7.35-7.45 (m, 1H), 7.08-7.18 (m, 2H), 4.67 (br. s., 1H), 2.54-2.90 (m, 4H), 2.09-2.20 (m, 1H), 1.73-1.88 (m, 1H)

1

PRIMER 3-9A, 3-9B, 3-9C i 3-9D

(2S,3R)-2-((difluorometoksi)metil)-5-(2,4-difluorofenil)-3-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid, (2S,3S)-2-((difluorometoksi)metil)-5-(2,4-difluorofenil)-3-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid, (2R,3R)-2-((difluorometoksi)metil)-5-(2,4-difluorofenil)-3-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid i (2R,3S)-2-((difluorometoksi)metil)-5-(2,4-difluorofenil)-3-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid

Korak 1: etil 2S,3R)-, (2S,3S)-, (2R,3R) ili (2R,3S)-2-((difluorometoksi)metil)-5-(2,4-difluorofenil)-3-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat

U rastvor jednog izomera etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-(hidroksimetil)-3-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilata (INTERMEDIJER 2-5A, 2-5B, 2-5C ili 2-5D) 140 mg, 0.39 mmol) u acetonitrilu (8 mL) dodat je bakar(I) jodid (14.7 mg, 0.077 mmol) i smeša je zagrevana do 45°C pod N2. 2,2-difluoro-2-(fluorosulfonil)sirćetna kiselina (0.2 mL, 1.9 mmol) je dodata ukapavanjem, smeša je mešana na 45°C 2 h. Smeša je hlađena u ledenom kupatilu i dodat je zasićeni vodeni rastvor NaHCO3(15 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (25 mL x 3). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (zasićen 20 mL), sušeni preko Na2SO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobio sirovi proizvod. Ostatak je prečišćen pomoću Prep-TLC (silika gel, eluiranjem sa 2:1 petroletrom:etil acetatom) da bi se

1 1

dobio jedan izomer proizvoda. MS (ESI) izrač. za (C20H20F4NO4) [M+H]+, 414.1, zabeleženo, 414.3. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.59 (d, J=6.26 Hz, 1H), 7.13-7.19 (m, 1H), 6.85-7.01 (m, 2H), 5.99-6.48 (m, 1H), 4.37 (q, J=7.04 Hz, 2H), 3.93-4.26 (m, 3H), 2.01-2.61 (m, 3H), 1.24-1.41 (m, 3H), 0.77-1.06 (m, 3H).

Sličan tretman drugih izomera etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-(hidroksimetil)-3-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilata dao je druge izomere proizvoda.

Korak 2: (2S,3R)-, (2S,3S)-, (2R,3R) ili (2R,3S)-2-((difluorometoksi)metil)-5-(2,4-difluorofenil)-3-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid

Rastvor jednog izomera etil 2-((difluorometoksi)metil)-5-(2,4-difluorofenil)-3-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilata (13 mg, 0.03 mmol) u amonijaku (10 M u MeOH) (10 mL) je mešan na sobnoj temperaturi 10 h. Smeša je koncentrovana i ostatak je prečišćen pomoću Prep-HPLC (Kolona: Phenomenex Synergi C18150×30 mm, 4 um; Pokretna faza: 40% do 60% vode (koja sadrži .1% TFA)-ACN; Stopa protoka: 25 mL/min) da bi se dobio izomer jedinjenja iz naslova. MS (ESI) izrač. za (C18H17F4N2O3)[M+H]+ , 385.1, zabeleženo, 385.0.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.59 (s, 1H), 7.28-7.45 (m, 1H), 6.99-7.21 (m, 2H), 6.23-6.71 (m, 1H), 4.58 (br. s., 1H), 4.01-4.19 (m, 2H), 2.88-3.03 (m, 1H), 2.23-2.44 (m, 2H), 0.90 (d, J=6.26 Hz, 3H).

Sličan tretman drugih izomera etil 2-((difluorometoksi)metil)-5-(2,4-difluorofenil)-3-metil-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilata dao je druge izomere jedinjenja iz naslova.

Izomer 2: MS (ESI) izrač. za (C18H17F4N2O3)[M+H]+ , 385.1, zabeleženo, 385.0.<1>HNMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.59 (br. s., 1H), 7.29-7.44 (m, 1H), 7.04-7.19 (m, 2H), 6.24-6.73 (m, 1H), 4.59 (br. s., 1H), 4.10 (br. s., 2H), 2.97 (br. s., 1H), 2.32 (br. s., 2H), 0.90 (d, J=5.87 Hz, 3H).

Izomer 3: MS (ESI) izrač. za (C18H17F4N2O3)[M+H]+ , 385.1, zabeleženo, 385.0.<1>HNMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.57 (br. s., 1H), 7.38 (d, J=5.09 Hz, 1H), 7.12 (d, J=7.43 Hz, 2H), 6.22-6.71 (m, 1H), 4.07-4.32 (m, 3H), 2.40-2.69 (m, 2H), 2.06 (br. s., 1H), 1.04 (d, J=4.30 Hz, 3H).

Izomer 4: MS (ESI) izrač. za (C18H17F4N2O3)[M+H]+ , 385.1, zabeleženo, 385.0.<1>HNMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.58 (s, 1H), 7.29-7.46 (m, 1H), 7.04-7.20 (m, 2H), 6.25-6.68 (m, 1H), 4.10-4.31 (m, 3H), 2.41-2.69 (m, 2H), 2.07 (br. s., 1H), 1.05 (d, J=6.65 Hz, 3H).

1 2

Jedinjenja formule I (gde, u Šemi 4, R je -(C1-4)haloalkil, R' je H ili metil, prsten B, n, i svaki R1 su kao što su opisani u formuli I ili alternativnim primerima izvođenja opisanim ovde) mogu biti pripremljena prema Šemi 4 preko ciklizacije 4-1 da bi se generisala kiselina 4-2. Nakon ovoga sledi formiranje amida i redukcija do amina. Kasnija alkilacija (ili zaštita za sekundarne amine) praćena karbonilacijom i tretmanom amonijakom daje tercijarne amine (finalna deprotekcija je dala sekundarne amine).

PRIMER 4-1A i 4-1B

1

(S)-5-(2,4-difluorofenil)-2-((metil(2,2,2-trifluoroetil)amino)metil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid i (R)-5-(2,4-difluorofenil)-2-((metil(2,2,2-trifluoroetil)amino)metil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid

Korak 1: 7-hloro-5-(2,4-difluorofenil)-N-(2,2,2-trifluoroetil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-2-karboksamid

U rastvor 7-hloro-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-2-karboksilne kiseline (INTERMEDIJER 3-2, 0.8 g, 2.5 mmol) i HATU (1.2 g, 3.7 mmol) u DMF (10 mL). Smeša je mešana na 25°C 10 min pod N2. Zatim je dodat DIPEA (0.68 g, 4.9 mmol), a zatim je usledilo sporo dodavanje 2,2,2-trifluoroetanamina (0.37 g, 3.7 mmol). Smeša je mešana na 25°C 2 h. Smeša je sipana u H2O (100 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (30 mL x 3). Kombinovani organski slojevi su prečišćeni pomoću hromatografije na silika gelu [ISCO®:4 g SepaFlash kolona eluiranjem sa 0% do 20% etil acetatom/petroletrom] da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C17H13ClF5N2O2)[M+H]+ , 407.0 zabeleženo, 407.0

Korak 2: N-((7-hloro-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-2-il)metil)-2,2,2-trifluoroetanamin

U rastvor 7-hloro-5-(2,4-difluorofenil)-N-(2,2,2-trifluoroetil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-2-karboksamida (0.45 g, 1.1 mmol) i BH3S(CH3)2(44 mmol) u THF (10 mL). Smeša je mešana na 0°C 10 min zatim na 45°C još 2 h. Smeša je ugašena sa CH3OH (40 mL) i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu

1 4

[ISCO®:4 g SepaFlash kolona eluiranjem sa 0% do 20% etil acetatom/petroletrom] da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C17H15ClF5N2O)[M+H]+ , 392.9 zabeleženo, 392.9

Korak 3: N-((7-hloro-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-2-il)metil)-2,2,2-trifluoro-N-metiletanamin

Rastvor N-((7-hloro-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-2-il)metil)-2,2,2-trifluoroetanamina (0.1 g, 0.26 mmol) i CH2O (0.016 g, 0.51 mmol) u DCE (10 mL) je mešan na 25°C. NaBH(OAc)3(0.11 g, 0.51 mmol) je dodat u rastvor, a zatim je ukapavan AcOH. Smeša je mešana na 25°C 8 h. Smeša je sipana u H2O (20 mL), pH je podešena do ~9 uz dodavanje NaHCO3i smeša je ekstrahovana sa EtOAc (20 mL x 3). Kombinovani organski ekstrakti su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4, filtrirani i koncentrovani. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu [ISCO®:4 g SepaFlash kolona eluiranjem sa 0% do 20% etil acetatom/petroletrom] da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C16H19ClF5N2O)[M+H]+ , 407.0 zabeleženo, 407.0.

Korak 4: etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-((metil(2,2,2-trifluoroetil)amino)metil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat

U mešani rastvor N-((7-hloro-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-2-il)metil)-2,2,2-trifluoro-N-metiletanamin (0.13 g, 0.32 mmol) u EtOH (20 mL) dodat je Pd(dppf)Cl2(0.023 g, 0.032 mmol) i KOAc (0.064 g, 0.64 mmol). Smeša je zagrevana do 60 °C i mešana 18 h pod 50 psi CO. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i dobijeni rastvor je razblažen vodom (20 mL) i ekstrahovan etil acetatom (20mL x 3). Kombinovani organski slojevi su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4, filtrirani i koncentrovani. Ostatak je prečišćen pomoću Prep-TLC (silika gel, eluiranjem sa 4:1 petroletrom/etil acetatom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C21H22F5N2O3) [M+H]+ , 445.1, zabeleženo, 445.0.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.56 (s, 1H), 7.24 - 7.11 (m, 1H), 6.99 - 6.79 (m, 2H), 4.36 (q, J=7.0 Hz,

1

2H), 4.28 (td, J=4.9, 9.8 Hz, 1H), 3.10 (q, J=9.0 Hz, 2H), 3.04 - 2.91 (m, 1H), 2.78 (dd, J=6.7, 13.3 Hz, 1H), 2.49 (s, 3H), 2.16 - 2.02 (m, 1H), 1.74 - 1.56 (m, 1H), 1.33 (t, J=7.2 Hz, 3H) Korak 5: etil (S)-5-(2,4-difluorofenil)-2-((metil(2,2,2-trifluoroetil)amino)metil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat i etil (R)-5-(2,4-difluorofenil)-2-((metil(2,2,2-trifluoroetil)amino)metil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat

Racemski etil-5-(2,4-difluorofenil)-2-((metil(2,2,2-trifluoroetil)amino)metil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat (100 mg, 0.28 mmol) je razložen pomoću hiralne SFC (kolona: Chiralpak AD 250×30 mm, 5 um; Pokretna faza: 20% do 20% IPA (koji sadrži 0.05% DEA) u CO2; Stopa protoka: 60 mL/min) da bi se dobila dva enantiomera. MS (ESI) izrač. za (C21H22F5N2O3) [M+H]+ , 445.1, zabeleženo, 445.0. MS (ESI) izrač. za (C21H22F5N2O3) [M+H]+ , 445.1, zabeleženo, 445.0.

Korak 6:

Rastvor jednog enantiomera etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-((metil(2,2,2-trifluoroetil)amino)metil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilata (40 mg, 0.09 mmol) u amonijaku (10 M u MeOH) (40 mL) je mešan na 20°C 16 h. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću Prep-TLC da bi se dobio jedan enantiomer jedinjenja iz naslova. MS (ESI) izrač. za (C19H19F5N3O2) [M+H]+ , 416.1, zabeleženo, 416.3.

Sličan tretman drugog enantiomera etil 5-(2,4-difluorofenil)-2-((metil(2,2,2-trifluoroetil)amino)metil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilata dao je drugi enantiomer jedinjenja iz naslova. MS (ESI) izrač. za (C19H19F5N3O2) [M+H]+ , 416.1, zabeleženo, 416.3.

PRIMER 4-2A i 4-2B

1

(S)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(((2,2,2-trifluoroetil)amino)metil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid i (R)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(((2,2,2-trifluoroetil)amino)metil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid

Korak 1: terc-butil ((7-hloro-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-2-il)metil)(2,2,2-trifluoroetil)karbamat

U mešani rastvor N-((7-hloro-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-2-il)metil)-2,2,2-trifluoroetanamina (150 mg, 0.38 mmol) u DCM (10 mL) dodat je di-terc-butil dikarbonata (194 mg, 3.3 mmol), Et3N (820 mg, 3.8 mmol) i N,N-dimetilpiridin-4-amina (4.7 mg, 0.04 mmol). Zatim je smeša mešana na 25°C 16 h. Rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (eluiranjem sa 1:0 do 20:1 petroletrom/etilacetatom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C22H23ClF5N2O3) [M+H]+ , 493.12, zabeleženo, 493.

Korak 2: etil 2-(((terc-butoksikarbonil)(2,2,2-trifluoroetil)amino)metil)-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat

U mešani rastvor N-((7-hloro-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-2-il)metil)-2,2,2-trifluoroetanamina (71 mg, 0.14 mmol) u EtOH (15 mL) dodat je Pd(dppf)Cl2(10.6 mg, 0.014 mmol) i KOAc (28 mg, 0.29 mmol). Zatim je rastvor zagrevan do 60°C i mešan 18 h pod 50 psi CO. Rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Dobijeni rastvor je razblažen vodom (20 mL) i ektrahovan sa EtOAc (20 mL x 3). Kombinovani organski slojevi su sušeni preko Na2SO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen

1

pomoću Prep-TLC (silika gel, eluiranjem sa 3:1 petroletrom:etil acetatom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C25H28F5N2O5) [M+H]+ , 531.18, zabeleženo, 531.3.

Korak 3: terc-butil ((7-karbamoil-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-2-il)metil)(2,2,2-trifluoroetil)karbamat

Etil 2-(((terc-butoksikarbonil)(2,2,2-trifluoroetil)amino)metil)-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksilat (53 mg, 0.1 mmol) u NH3/MeOH (10 M, 15 mL) je mešan na 25°C 16 h. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobio proizvod koji je korišćen u narednim koracima bez dodatnog prečišćavanja. MS (ESI) izrač. za (C23H25F5N3O4) [M+H]+ , 502.17, zabeleženo, 502.2.

Korak 4: terc-butil (S)-((7-karbamoil-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-2-il)metil)(2,2,2-trifluoroetil)karbamata i terc-butil (R)-((7-karbamoil-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-2-il)metil)(2,2,2-trifluoroetil)karbamata

Terc-butil((7-karbamoil-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-2-il)metil)(2,2,2-trifluoroetil)karbamat (40 mg, 0.08 mmol) je odvojen pomoću SFC (kolona: Chiralpak AS 250×30 mm, 5 um; Pokretna faza: 10% do 10% MeOH (koji sadrži 0.05% DEA) u CO2; Stopa protoka: 60 mL/min) da bi se dobila dva enantiomera.

Korak 4: (S)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(((2,2,2-trifluoroetil)amino)metil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid i (R)-5-(2,4-difluorofenil)-2-(((2,2,2-trifluoroetil)amino)metil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-7-karboksamid

Jedan enantiomer terc-butil ((7-karbamoil-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-2-il)metil)(2,2,2-trifluoroetil)karbamata (20 mg, 0.04 mmol) je mešan u DCM (3 mL) i TFA (0.5 mL) na 25°C 1 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se

1

dobio jedan enantiomer jedinjenja iz naslova. MS (ESI) izrač. za (C18H17F5N3O2) [M+H]+ , 402.1, zabeleženo, 402.1.

Sličan tretman drugog enantiomera terc-butil ((7-karbamoil-5-(2,4-difluorofenil)-3,4-dihidro-2H-pirano[2,3-b]piridin-2-il)metil)(2,2,2-trifluoroetil)karbamata dao je drugi enantiomer jedinjenja iz naslova. MS (ESI) izrač. za (C18H17F5N3O2) [M+H]+ , 402.1, zabeleženo, 402.1.

PRIMER 5A i 5B

(5S,8R)-4-(2,4-difluorofenil)-5,6,7,8-tetrahidro-5,8-epoksihinolin-2-karboksamid i (5R,8S)-4-(2,4-difluorofenil)-5,6,7,8-tetrahidro-5,8-epoksihinolin-2-karboksamid

Korak 1: 3-(trimetilsilil)piridin-2-ol

U rastvor diizopropilamina (31.0 mL, 218 mmol) u THF (200 mL) dodat je n-butil litijum (95 mL, 238 mmol) na -78°C. Posle mešanja od 1h, rastvor piridin-2-ola (9 g, 95 mmol) u THF (100 mL) dodat je na -78°C. Smeša je postepeno zagrevana do 0°C tokom 1 h. Hlorotrimetilsilan (13.20 mL, 104 mmol) dodat je u smešu na 0°C. Dobijena smeša je postepeno zagrevana do 25°C tokom 14 h. Reakcija je ugašena sa H2O (300 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (50 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4, filtrirani i koncentrovani. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (ISCO®; 40 g SepaFlash® kolona, eluiranje sa 0-30% etil acetatom/petroletrom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C8H14NOSi) [M+H]+ , 168.1, zabeleženo, 168.0.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 12.07 (br. s., 1H), 7.54 (dd, J= 1.8, 6.5 Hz, 1H), 7.33 (dd, J= 2.0, 6.3 Hz, 1H), 6.23 (t, J= 6.5 Hz, 1H), 0.28 (s, 9H).

Korak 2: 3-(trimetilsilil)piridin-2-il trifluorometansulfonat

U rastvor 3-(trimetilsilil)piridin-2-ola (13 g, 78 mmol) u piridinu (100 mL) dodat je anhidrid trifluorometansulfonske kiseline (16 mL, 95 mmol) na 0°C pod N2tokom 20 min. Smeša je postepeno zagrevana do 25°C i mešana još 14 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod

1

sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (ISCO®; 120 g SepaFlash® kolona, eluiranje sa 0-10% etil acetatom/petroletrom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C9H13F3NO3SSi) [M+H]+ , 300.0, zabeleženo, 300.0.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.33 (dd, J= 2.0, 4.7 Hz, 1H), 7.92 (dd, J= 1.6, 7.0 Hz, 1H), 7.31 (dd, J= 5.1, 7.0 Hz, 1H), 0.38 (s, 9H).

Korak 3: 5,8-dihidro-5,8-epoksihinolin

U rastvor furana (1.21 mL, 16.74 mmol) i cezijum fluorida (1.015 g, 6.68 mmol) u acetonitrilu (10 mL) lagano je dodat 3-(trimetilsilil)piridin-2-il trifluorometansulfonat (1g, 3.34 mmol) u acetonitrilu (10 mL) na 0°C. Smeša je mešana na 28°C 15 h. Smeša je koncentrovana. Dodata je voda (20 mL) i smeša je ekstrahovana etil acetatom (3 x 20 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (20 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4, filtrirani i koncentrovani. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (ISCO®; 12 g SepaFlash® kolona, eluiranje sa 0 do 40% metiltetrabutiletrom/petroletrom) da bi se dobio proizvod. 1H NMR (400MHz, CDCl3)δ 8.03 (d, J= 5.1 Hz, 1H), 7.42 (d, J= 7.0 Hz, 1H), 7.19 - 7.07 (m, 2H), 6.90 - 6.79 (m, 1H), 5.78 (s, 1H), 5.61 (s, 1H).

Korak 4: 5,6,7,8-tetrahidro-5,8-epoksihinolin

U rastvor 5,8-dihidro-5,8-epoksihinolin (500 mg, 3.44 mmol) u EtOH (14 mL) dodat je hidrazin hidrat (0.683 mL, 13.78 mmol) pod 10 Psi atmosfere O2. Smeša je mešana na 30°C 15 h. Smeša je koncentrovana. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (ISCO®; 12 g SepaFlash® kolona, eluiranje sa 0 do 30% etil acetatom/petroletrom) da bi se dobio proizvod.1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.32 - 8.23 (m, 1H), 7.49 (d, J= 6.8 Hz, 1H), 7.05 (dd, J= 5.1, 7.4 Hz, 1H), 5.50 - 5.34 (m, 2H), 2.17 - 2.08 (m, 2H), 1.56 - 1.37 (m, 2H).

Korak 5: 5,6,7,8-tetrahidro-5,8-epoksihinolin 1-oksid

U rastvor 5,6,7,8-tetrahidro-5,8-epoksihinolin (200 mg, 1.359 mmol) u DCM (2 mL) dodat je m-CPBA (630 mg, 3.10 mmol). Smeša je mešana na 25°C 15 h. Smeša je ugašena zasićenim vodenim rastvorom Na2SO3i ekstrahovana sa DCM (3 x 10 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (10 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4, filtrirani i

11

koncentrovani. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (ISCO®; 20 g SepaFlash® kolona, eluiranje sa 0% do 5% DCM/MeOH) da bi se dobio proizvod. 1H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.99 (d, J= 5.7 Hz, 1H), 7.18 - 7.04 (m, 2H), 5.85 (br. s., 1H), 5.50 (br. s., 1H), 2.19 (d, J= 7.9 Hz, 2H), 1.67 (t, J= 8.7 Hz, 1H), 1.51 - 1.40 (m, 1H).

Korak 6: 4-hloro-5,6,7,8-tetrahidro-5,8-epoksihinolin

U smešu 5,6,7,8-tetrahidro-5,8-epoksihinolin 1-oksida (230 mg, 1.410 mmol) i litijum hlorida (72 mg, 1.698 mmol) u acetonitrilu (6 mL) dodat je fosforil trihlorid (1.08 g, 7.04 mmol) na 25°C. Dobijena smeša je mešana na 100°C 2 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je sipana u 50 g leda i bazifikovana sa čvrstim NaHCO3do pH ∼8. smeša je ekstrahovana sa EtOAC (3 x 20 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (10 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću Prep-TLC (silika gel, eluiranjem sa 4:1 etil acetatom/petroletrom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C9H ]+

9ClNO) [M+H , 182.0, zabeleženo, 181.8.<1>HNMR (400MHz, CDCl3) δ 8.15 (d, J= 5.5 Hz, 1H), 7.02 (d, J= 5.5 Hz, 1H), 5.56 (d, J= 3.5 Hz, 1H), 5.38 (d, J= 3.9 Hz, 1H), 2.14 (dd, J= 2.7, 9.8 Hz, 2H), 1.47 (d, J= 9.0 Hz, 2H).

Korak 7: 4-hloro-5,6,7,8-tetrahidro-5,8-epoksihinolin 1-oksid

Smeša 4-hloro-5,6,7,8-tetrahidro-5,8-epoksihinolina (150 mg, 0.826 mmol) i mCPBA (335 mg, 1.652 mmol) u DCM (5 mL) je mešana na 40°C 14 h. Reakciona smeša je ugašena zasićenim vodenim rastvorom Na2SO3(20 mL) i ekstrahovana sa DCM (3 x 15 mL). Kombinovane organske faze su isprane fiziološkim rastvorom (10 mL), sušene preko anhidrovanog Na2SO4, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću Prep-TLC (silika gel, eluiranjem sa 10:1 DCM/MeOH) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C9H9ClNO2) [M+H]+ , 198.0, zabeleženo, 197.8.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 7.88 (d, J= 6.8 Hz, 1H), 7.05 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 5.83 (d, J= 3.5 Hz, 1H), 5.57 (d, J= 3.5 Hz, 1H), 2.28 - 2.14 (m, 2H), 1.66 (t, J= 8.7 Hz, 1H), 1.57 - 1.43 (m, 1H).

Korak 8: 4-hloro-5,6,7,8-tetrahidro-5,8-epoksihinolin-2-karbonitril

U smešu 4-hloro-5,6,7,8-tetrahidro-5,8-epoksihinolin 1-oksida (44 mg, 0.223 mmol) i trimetilsilankarbonitrila (66 mg, 0.665 mmol) u CHCl3(2 mL) dodat je dimetilarbaminski hlorid (72 mg, 0.670 mmol) na 25°C. Dobijena smeša je mešana na 60°C 14 h. Smeša je koncentrovana i prečišćena pomoću Prep-TLC (silika gel, eluiranjem sa 4:1 petroletrom/etil acetatom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C10H8ClN2O) [M+H]+ , 207.0, zabeleženo, 206.8.<1>HNMR (400MHz, CDCl3)δ 7.42 (s, 1H), 5.55 (d, J= 4.3 Hz, 1H), 5.38 (d, J= 3.9 Hz, 1H), 2.16 (dd, J= 3.1, 10.6 Hz, 2H), 1.53 - 1.36 (m, 2H).

Korak 9: 4-(2,4-difluorofenil)-5,6,7,8-tetrahidro-5,8-epoksihinolin-2-karbonitril

Smeša 4-hloro-5,6,7,8-tetrahidro-5,8-epoksihinolin-2-karbonitrila (80 mg, 0.387 mmol), (2,4-difluorofenil)boronske kiseline (183 mg, 1.162 mmol), K3PO4(250 mg, 1.178 mmol), i PdCl2(dtbpf) (40 mg, 0.061 mmol) u THF (4 mL) je degazirana i ponovo napunjena sa N2(tri puta). Smeša je zagrevana do 85°C 2.5 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena vodom (10 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3 x 10 mL). Kombinovane organske faze su isprane fiziološkim rastvorom (5 mL), sušene preko anhidrovanog Na2SO4, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću Prep-TLC (silika gel, eluiranjem sa 1:4 etil acetatom/petroletrom) da bi se dobio proizvod. MS (ESI) izrač. za (C16H11F2N2O) [M+H]+ , 285.1, zabeleženo, 284.9.<1>HNMR (400MHz, CDCl3) δ 7.53 (s, 1H), 7.39 - 7.29 (m, 1H), 7.12 - 6.96 (m, 2H), 5.47 - 5.37 (m, 2H), 2.23 (d, J= 8.2 Hz, 2H), 1.63 (d, J= 11.7 Hz, 2H).

Korak 10: (5S,8R)-4-(2,4-difluorofenil)-5,6,7,8-tetrahidro-5,8-epoksihinolin-2-karbonitril i (5R,8S)-4-(2,4-difluorofenil)-5,6,7,8-tetrahidro-5,8-epoksihinolin-2-karbonitril

Racemski 4-(2,4-difluorofenil)-5,6,7,8-tetrahidro-5,8-epoksihinolin-2-karbonitril (90 mg, 0.317 mmol) je razložen pomoću hiralne SFC (kolona: Chiralpak AD 250x30mm, 5um; Pokretna faza: 20% do 100% EtOH (koji sadrži 0.05% DEA) u CO2; Stopa protoka: 65mL/min) da bi se dobila dva enantiomera.

Korak 11: (5S,8R)-4-(2,4-difluorofenil)-5,6,7,8-tetrahidro-5,8-epoksihinolin-2-karboksamid i (5R,8S)-4-(2,4-difluorofenil)-5,6,7,8-tetrahidro-5,8-epoksihinolin-2-karboksamid

U rastvor jednog enantiomera 4-(2,4-difluorofenil)-5,6,7,8-tetrahidro-5,8-epoksihinolin-2-karbonitrila (40 mg, 0.141 mmol) u DMSO (2 mL) dodat je vodonik peroksid (65 mg, 0.573 mmol) i K2CO3(10 mg, 0.072 mmol) na 25°C. Dobijena smeša je mešana na 25°C 2 h. Reakcija je ugašena zasićenim vodenim rastvorom Na2SO3(0.2 mL) i smeša je direktno prečišćena pomoću Prep-HPLC (Kolona: Waters Xbridge Prep OBD C18150×30 mm, 5 um; Pokretna faza: 24% do 54% vode (koja sadrži 0.05% amonijum hidroksid zapr./zapr.)-ACN; Stopa protoka: 25 mL/min) da bi se dobio jedan enantiomer jedinjenja iz naslova. MS (ESI) izrač. za (C16H13F2N2O2) [M+H]+ , 303.1, zabeleženo, 303.1.<1>HNMR (400MHz, CDCl3) δ 8.08 (s, 1H), 7.79 (br. s., 1H), 7.50 - 7.37 (m, 1H), 7.13 - 6.93 (m, 2H), 5.63 (br. s., 1H), 5.42 (br. s., 2H), 2.31 - 2.20 (m, 2H), 1.66 (d, J= 7.0 Hz, 2H).

Sličan tretman drugog enantiomera 4-(2,4-difluorofenil)-5,6,7,8-tetrahidro-5,8-epoksihinolin-2-karbonitrila dao je drugi enantiomer jedinjenja iz naslova. MS (ESI) izrač. za (C16H13F2N2O2) [M+H]+ , 303.1, zabeleženo, 303.1.<1>HNMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.08 (s, 1H), 7.79 (br. s., 1H), 7.51 - 7.37 (m, 1H), 7.15 - 6.93 (m, 2H), 5.61 (br. s., 1H), 5.41 (d, J=3.9 Hz, 2H), 2.30 - 2.19 (m, 3H), 1.66 (d, J=7.0 Hz, 2H).

BIOLOŠKE ANALIZE

Korist od jedinjenja pronalaska kao inhibitora aktivnosti metabotropnog receptora glutamata, posebno aktivnosti mGluR2, može se pokazati metodologijom poznatom u struci i kako je opisano u sledećem tekstu. Konstante inhibicije (IC50S; koncentracija jedinjenja potrebna da obezbedi 50% maksimalne aktivnosti) određuju se na sledeći način. Jedinjenja pronalaska su testirana u testu na bazi uređaja za očitavanje fluorescentnih laserskih imadžing ploča. Ovaj test je uobičajeni funkcionalni test za praćenje mobilizacije Ca<2+>u celim ćelijama koje eksprimiraju rekombinantni receptor uparen sa promiskuitetnim G-proteinom. CHO (jajnik kineskog hrčka) dhfr- ćelije koje stabilno eksprimiraju rekombinantne humane mGluR2 i Gα16 napunjene sa Fluo-4 AM (Invitrogen, Carlsbad California, USA) tretirane su različitim koncentracijama svakog od testiranih jedinjenja pronalaska i Ca2+ odgovor je praćen na instrumentu FLIPR384 (Molecular Devices, Sunnydale California, USA). Izmerena je maksimalna aktivnost agonista u prisustvu 2.500 nM glutamata i inhibicija obezbeđena opsegom koncentracija jedinjenja

11

dovoljnih da minimalno i maksimalno inhibiraju odgovor zavisan od glutamata prati se tokom vremena. Maksimalni odgovor kalcijuma pri svakoj koncentraciji jedinjenja za agonist ili antagonist oprikazan je na grafikonu kao odgovor na dozu, a krive su aprokismirane logističkom jednačinom od četiri parametra koja daje IC50i Hill koeficijent upotrebom iterativnog softvera za aproksimaciju nelinearnih krivih ADA (Merck & Co., Inc.). Podaci u sledećoj tabeli navode aktivnost svakog jedinjenja za inhibiciju glutamat-zavisne aktivnosti mGluR2 u ovom ćelijskom testu.

Iako je pronalazak opisan i ilustrovan referencama na određene njegove primere izvođenja, stručnjaci u ovoj oblasti razumeće da se mogu izvršiti razne adaptacije, promene, modifikacije, zamene, brisanja ili dodavanja postupaka i protokola, bez odstupanja od duha i obima pronalaska. Stoga je namera da pronalazak bude definisan obimom zahteva koji slede i da se takvi zahtevi tumače onoliko široko koliko je razumno.

11

Claims

Patentni zahtevi 1. Jedinjenje formule (I):

ili njegov stereoizomer, ili farmaceutski prihvatljiva so navedenog jedinjenja ili navedenog stereoizomera, naznačeno time što: prsten A je ostatak izabran od:

u kojima: R2 je izabran od: H, ciklopropil, -(C1-C4)alkil, -(C1-C4)alkil-OH, -(C1-C4)alkil-OCH3, -(C1-C4)haloalkil, -(C1-C4)alkil-O-(C1-C4)haloalkil, -CH(CH3)2, -CH2-O-(C1-C4)haloalkil, -CH(CH3)-O-(C1-C4)haloalkil, -CH2-NH-(C1-C4)haloalkil i -CH2-N(CH3)-(C1-C4)haloalkil, R2A je izabran od: H i metil; R3 je izabran od: H i metil; R3A je izabran od: H i metil; prsten B je ostatak izabran iz grupe koja se sastoji od sledećih: fenil, heteroaril, -(C5-C6) cikloalkil, i -(C5-C6) cikloalkenil; n je 0, 1, 2 ili 3, pod uslovom da vrednost n ne prelazi maksimalan broj atoma vodonika na prstenu B koji se mogu supstituisati; i svaki R1 (kada je prisutan) je nezavisno izabran iz grupe koja se sastoji od sledećih: halogen, -CN, -OH, -(C1-C6) alkil,-O-(C1-C6) alkil, -(C1-C6) haloalkil, -O-(C1-C6) haloalkil, ciklopropil, ciklobutil, -NH2, -NH(C1-C6)alkil, -N(C1-C6alkil)2, -C(O)O(C1-C6) alkil i fenil.
2. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što prsten A je ostatak:

i formula (I) ima oblik formule (IA):
3. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 2, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je R<2>izabran od: H, ciklopropil, -CH3, -CH(CH3)2, -CH2-OH, -CH2-OCH3, -CH2F, - CHF2, -CF3, -CH2CH2F, -CH2CHF2, -CH2CF3, -CH2-O-CH2F, -CH2-O-CHF2, -CH(CH3)-O-CH2F, -CH(CH3)-O-CHF2, -CH2-NH-CH2CF3i -CH2-N(CH3)-CH2CF3; R2A je izabran od: H i metil; R3 je izabran od: H i metil; i R3A je izabran od: H i metil. 4. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 2, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što R<2>i R<2A>su oba metil; i R3 i R3A su oba H. 5. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što prsten A je ostatak:
i formula (I) ima oblik formule (IB):
11 6. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što prsten A je ostatak:
i formula (I) ima oblik formule (IC):
7. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što prsten A je ostatak:

i formula (I) ima oblik formule (ID):
8. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1-7, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što: prsten B je ostatak izabran iz grupe koja se sastoji od sledećh: fenil, ciklopentil, cikloheksil, piridinil, pirimidinil, pirazolil, tienil, tiazolil, tiadiazolil, izoksazolil, oksadiazolil i oksazolil; n je 0, 1, 2, ili 3, pod uslovom da vrednost n ne prelazi maksimalan broj atoma vodonika na prstenu B koji se mogu supstituisati; i 11 svaki R1 (kada je prisutan) je nezavisno izabran iz grupe koja se sastoji od sledećih: halogen, -CN, -OH, -(C1-C6) alkil,-O-(C1-C6) alkil, -(C1-C6) haloalkil, -O-(C1-C6) haloalkil, ciklopropil, ciklobutil, -NH2, -NH(C1-C6)alkil, -N(C1-C6alkil)2, -C(O)O(C1-C6) alkil i fenil. 9. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1-7, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što: prsten B je ostatak izabran iz grupe koja se sastoji od sledećih: fenil, pirazolil, piridinil, tienil, izoksazolil, oksadiazolil i oksazolil; n je 0, 1, ili 2; i svaki R1 (kada je prisutan) je nezavisno izabran iz grupe koja se sastoji od fluoro, hloro, -CH3i -CHCF2. 10. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, koje ima formulu (IA-1):
ili njegov steroizomer ili farmaceutski prihvatljiva so navedenog jedinjenja ili navedenog stereoizomera, naznačeni time što: R2 je izabran od: H, ciklopropil, -CH3, -CH(CH3)2, -CH2-OH, -CH2-OCH3, -CH2F, - CHF2, -CF3, -CH2CH2F, -CH2CHF2, -CH2CF3, -CH2-O-CH2F, -CH2-O-CHF2, -CH(CH3)-O-CH2F, -CH(CH3)-O-CHF2, -CH2-NH-CH2CF3i -CH2-N(CH3)-CH2CF3; R2A je izabran od: H i CH3; R3 je izabran od: H i CH3; i R3A je izabran od: H i CH3. 11. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu je navedeno jedinjenje izabrano iz grupe koja se sastoji od: 11
��
��
12. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time što navedeno jedinjenje ima strukturu: 12
13. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time što navedeno jedinjenje ima strukturu:
pri čemu je navedeno jedinjenje u obliku farmaceutski prihvatljive soli. 14. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time što navedeno jedinjenje ima strukturu:
15. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time što navedeno jedinjenje ima strukturu:
pri čemu je navedeno jedinjenje u obliku farmaceutski prihvatljive soli. 16. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time što navedeno jedinjenje ima strukturu: 12
17. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time što navedeno jedinjenje ima strukturu:
pri čemu je navedeno jedinjenje u obliku farmaceutski prihvatljive soli. 18. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time što navedeno jedinjenje ima strukturu:
19. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time što navedeno jedinjenje ima strukturu:
pri čemu je navedeno jedinjenje u obliku farmaceutski prihvatljive soli. 20. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time što navedeno jedinjenje ima strukturu:
21. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time što navedeno jedinjenje ima strukturu:
pri čemu je navedeno jedinjenje u obliku farmaceutski prihvatljive soli. 22. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time što navedeno jedinjenje ima strukturu:
23. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time što navedeno jedinjenje ima strukturu:
pri čemu je navedeno jedinjenje u obliku farmaceutski prihvatljive soli. 24. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time što navedeno jedinjenje ima strukturu: 12
25. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time što navedeno jedinjenje ima strukturu:

pri čemu je navedeno jedinjenje u obliku farmaceutski prihvatljive soli.
26. Farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1-12, 14, 16, 18, 20, 22, ili 24, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, i farmaceutski prihvatljiv nosač.
27. Kombinacija koja sadrži jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1-12, 14, 16, 18, 20, 22, ili 24, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so ili solvat i jedan, dva, tri ili više drugih terapeutskih sredstava.
28. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1-12, 14, 16, 18, 20, 22, ili 24, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu u lečenju Alzheimer-ove bolesti, blagog kognitivnog oštećenja, šizofrenije, poremećaja raspoloženja ili poremećaja spavanja.
29. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1-12, 14, 16, 18, 20, 22, ili 24, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu u terapiji.
30. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1-12, 14, 16, 18, 20, 22, ili 24, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu u lečenju neurodegenerativnih bolesti ili poremećaja koji pogađaju kogniciju.
31. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1-12, 14, 16, 18, 20, 22, ili 24, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu u lečenju Alzheimer-ove bolesti.
32. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1-12, 14, 16, 18, 20, 22, ili 24, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu u lečenju depresije. 12
33. Kombinacija koja sadrži jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1-12, 14, 16, 18, 20, 22, ili 24, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so ili solvat i donepezil. Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Beograd, Kneginje Ljubice 5 1