RS62311B1

RS62311B1 - Terapeutsko sredstvo za disfunkciju frontalnog režnja

Info

Publication number: RS62311B1
Application number: RS20211061A
Authority: RS
Inventors: Takako Horita
Original assignee: Kyowa Kirin Co Ltd
Priority date: 2015-03-19
Filing date: 2016-03-18
Publication date: 2021-09-30
Also published as: DK3270923T3; SI3270923T1; MY196076A; CR20170405A; ECSP17069712A; LT3270923T; CY1124459T1; CA2978426A1; WO2016148308A1; ZA201706136B; JP2018508540A; TWI723012B; ES2884846T3; CO2017008814A2; GEP20197007B; KR20170129764A; TN2017000369A1; GEAP201914604A; BR112017018165A2; EA032511B1

Description

Opis

Oblast tehnike

[0001] Ovaj pronalazak se odnosi na terapeutsko i/ili profilaktičko sredstvo za upotrebu kod disfunkcije frontalnog režnja, pri čemu je disfunkcija frontalnog režnja kognitivni poremećaj izabran iz grupe koja se sastoji od kognitivnog poremećaja u Parkinsonovoj bolesti (na primer, izvršna disfunkcija, poremećaj pamćenja (posebno kratkotrajni poremećaj pamćenja), poremećaj u vizuelnoj prostornoj spoznaji, poremećaj čula mirisa i slično), kognitivni poremećaj izazvan hroničnim stresom, demencija sa Levijevim telima i frontotemporalna demencija, ili bolest Levijevih tela (na primer, kognitivni poremećaj u Parkinsonovoj bolesti, bolest difuzije Levijevih tela, demencija sa Levijevim telima, poremećaj kretanja povezan sa bolešću Levijevih tela i slično).

Poreklo tehnike

[0002] Prefrontalni korteks frontalnog režnja mozga je odgovaran za kognitivne funkcije (na primer, razumevanje, procena, sposobnost računanja, orijentacija, izvršne funkcije i slično). Neurotransmiteri kao što su dopamin, serotonin, norepinefrin, gama-aminobutirna kiselina i slično su uključeni u funkciju prefrontalnog korteksa, a nedostatak ovih supstanci izaziva kognitivni poremećaj. Na primer, zabeleženo je da su pad funkcije dopamina i pad kognitivne funkcije u korelaciji kod starijih ljudi (American Journal of Psychiatry 155:3, p.344 (1998)). Takođe je zabeleženo da je pad u funkciji dopamina u prefrontalnom korteksu moguće povezati sa kognitivnim poremećajem u Parkinsonovoj bolesti i kognitivnim poremećajem izazvanim hroničnim stresom (Archives of Neurology, 57, p.470 (2000); The Journal of Neuroscience, 20(4), p.1568 (2000)). Takođe je zabeleženo da je dopamin deficijentan u prefrontalnom korteksu pacijenata sa Parkinsonovom bolešću sa demencijom i kod pacijenata sa demencijom sa Levijevim telima (Neurology, 74, p.885 (2010)).

[0003] α-Sinuklein je protein u velikim količinama prisutan u intracerebralnom presinaptičkom terminusu i uključen je u sinaptičku plastificiranost i neurotransmisiju (Journal of Chemical Neuroanatomy, 42, p.242 (2011)). α-Sinukleinopatija je generički naziv za neurodegenerativnu bolest koju karakteriše akumulacija i formiranje agregata α-sinukleina, a primeri za ovo su bolesti Levijevih tela (na primer, demencija kod Parkinsonove bolesti, bolest difuzije Levijevih tela, demencija sa Levijevim telima, poremećaj kretanja povezan sa bolešću Levijevih tela i slično), višestruka atropija sistema (na primer, olivopontocerebralna atropija, straitonigralna degeneracija, Shy-Drager sindrom i slično) i slično.

[0004] U bolesti Levijevih tela, Levijeva tela koja kao glavnu komponentu sadrže agregate αsinukleina su nađena u nervnim ćelijama a u višestrukoj sistemskoj atropiji α-sinukleinpozitivna inkluzivna tela su nađena u glijalnim ćelijama. Različiti simptomi kao što su parkinsonizam, kognitivni poremećaj, autonomni simptom, cerebralna ataksija i slični se manifestuju u zavisnosti od nivoa distribucije ovih patologija (Parkinsonism i povezani poremećaji, 20S1, p.S62 (2014)).

[0005] Smatra se da kognitivni poremećaji kod bolesti Levijevih tela uključuju dopaminergične i holinergične hipofunkcije u frontalnom režnju (Brain, 137, p.2493 (2014); Neurology, 74, p.885 (2010)). Prefrontalni korteks frontalnog režnja u mozgu je region odgovoran za kognitivne funkcije (na primer, razumevanje, procena, sposobnost računanja, orijentacija, izvršne funkcije i slično). Neurotransmiteri kao što su dopamin, serotonin, norepinefrin, gama-aminobuterna kiselina i slično su uključeni u funkciju prefrontalnog korteksa a nedostatak ovih supstanci dovodi do kognitivnog poremećaja.

[0006] S druge strane, u vezi sa odnosom između adenozin A2A receptora i kognitivne funkcije, poznato je da adenozin A2A receptor deficijentni miševi pokazuju povećanje radne memorije (ne-patentni dokument 1). Poznato je da triazoltriazin derivat koji ima antagonističku aktivnost na adenozin A2A receptor poboljšava poremećaje kratkotrajne socijalne memorije kod pacova sa hipertenzijom (ne-patentni dokument 2). Osim toga, poznato je da antagonist adenozin A2A receptora, istradefilin, ima supresivno delovanje na neurodegeneraciju (na primer, patentni dokukment 1), poboljšani efekat na kognitivni poremećaj u Parkinsonovoj bolesti (ne-patentni dokument 3) i slično.

[0007] Poznato je da jedinjenje predstavljeno formulom (I) ima afinitet za adenozin A2A receptore i ima terapeutski efekat na Parkinsonovu bolest (patentni dokukment 2). Takođe, poznato je da je jedinjenje korisno kao terapeutsko i/ili profilaktičko sredstvo za poremećaje kretanja (patentni dokukment 3). Patentni dokument 4 se odnosi na farmaceutske kombinacije koje uključuju antagonist A2a za koje je zabeleženo da deluju kao pojačivači kognitivnih i motornih funkcija.

[Prethodno stanje tehnike]

Patentna dokumenta

[0008]

[patentni dokukment 1] WO 99/12546 [patentni dokukment 2] WO 2005/063743 [patentni dokukment 3] WO 2010/126082 [patentni dokukment 4] WO 2012/060844 A1

Ne-patentna dokumenta

[0009]

[ne-patentni dokument 1] “Brain Research”, 2009, vol.1303, p.74

[ne-patentni dokument 2] “Behavioural Brain Research”, 2005, vol.159, p.197 [nepatentni dokument 3] “Psychopharmacology”, 2013, vol.230, p.345

KRATAK SADRŽAJ PRONALASKA

Problemi koje pronalazak treba da reši

[0010] Cilj ovog pronalaska je da obezbedi terapeutsko i/ili profilaktičko sredstvo za upotrebu kod disfunkcije frontalnog režnja, pri čemu je disfunkcija frontalnog režnja kognitivni poremećaj izabran iz grupe koja se sastoji od kognitivnog poremećaja u Parkinsonovoj bolesti (na primer, izvršna disfunkcija, poremećaj pamćenja (posebno kratkotrajni poremećaj pamćenja), poremećaj u vizuelnoj prostornoj spoznaji, poremećaj čula mirisa i slično), kognitivni poremećaj izazvan hroničnim stresom, demencija sa Levijevim telima i frontotemporalna demencija, ili bolest Levijevih tela (na primer, kognitivni poremećaj u Parkinsonovoj bolesti, bolest difuzije Levijevih tela, demencija sa Levijevim telima, poremećaj kretanja povezan sa bolešću Levijevih tela i slično).

Sredstva za rešavanje problema

[0011] Ovaj pronalazak se odnosi na sledećege delove:

1. Jedinjenje predstavljeno formulom (I):

ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, za upotrebu u tretmanu i/ili profilaksi disfunkcije frontalnog režnja, pri čemu je disfunkcija frontalnog režnja:

(1) kognitivni poremećaj izabran iz grupe koja se sastoji od kognitivnog poremećaja u Parkinsonovoj bolesti, kognitivnog poremećaja izazvanog hroničnim stresom, demencije sa Levijevim telima i frontogemporalne demencije; ili

(2) kognitivnog poremećaja zbog smanjenja u funkciji dopamina u srednjem prefrontalnom korteksu.

2. Jedinjenje ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so za upotrebu u skladu sa stavom 1, pri čemu je kognitivni poremećaj kognitivni poremećaj u Parkinsonovoj bolesti.

3. Jedinjenje ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so za upotrebu u skladu sa stavom 2, pri čemu je kognitivni poremećaj u Parkinsonovoj bolesti izvršna disfunkcija, poremećaj pamćenja, poremećaj u vizuelnoj prostornoj spoznaji ili poremećaj čula mirisa.

4. Jedinjenje ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so za upotrebu u skladu sa stavom 1, pri čemu je kognitivni poremećaj kognitivni poremećaj izazvan hroničnim stresom.

5. Jedinjenje ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so za upotrebu u skladu sa stavom 1, pri čemu je kognitivni poremećaj demencija sa Levijevim telima.

6. Jedinjenje predstavljeno formulom (I):

ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, za upotrebu u tretmanu i/ili profilaksi bolesti Levijevih tela.

7. Jedinjenje ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so za upotrebu u skladu sa stavom 6, pri čemu je bolest Levijevih tela kognitivni poremećaj u Parkinsonovoj bolesti.

8. Jedinjenje ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so za upotrebu u skladu sa stavom 6, pri čemu je bolest Levijevih tela bolest difuzije Levijevih tela.

9. Jedinjenje ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so za upotrebu u skladu sa stavom 6, pri čemu je bolest Levijevih tela demencija sa Levijevim telima.

10. Jedinjenje ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so za upotrebu u skladu sa stavom 6, pri čemu je bolest Levijevih tela poremećaj kretanja povezan sa bolešću Levijevih tela. >>

Efekat pronalaska

[0012] U skladu sa ovim pronalaskom, kao aktivni sastojak je obezbeđeno terapeutsko i/ili profilaktičko sredstvo i slično za disfunkciju frontalnog režnja, pri čemu je disfunkcija frontalnog režnja kognitivni poremećaj izabran iz grupe koja se sastoji od kognitivnog poremećaja u Parkinsonovoj bolesti (na primer, izvršna disfunkcija, poremećaj pamćenja (posebno kratkotrajni poremećaj pamćenja), poremećaj u vizuelnoj prostornoj spoznaji, poremećaj čula mirisa i slično), kognitivni poremećaj izazvan hroničnim stresom, demencija sa Levijevim telima i frontotemporalna demencija, ili bolest Levijevih tela (na primer, kognitivni poremećaj u Parkinsonovoj bolesti, bolest difuzije Levijevih tela, demencija sa Levijevim telima, poremećaj kretanja povezan sa bolešću Levijevih tela, koji uključuje jedinjenje predstavljeno formulom (I):

ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

[0013] Terapeutsko i/ili profilaktičko sredstvo iz ovog pronalaska može da se koristi za tretman i/ili profilaksu, na primer, bolesti kao što su disfunkcija frontalnog režnja, između ostalih, kognitivni poremećaj zbog opadanja funkcije dopamina u srednjem prefrontalnom korteksu.

Način realizacije pronalaska

[0014] Primeri disfunkcije frontalnog režnja u ovom pronalasku uključuju kognitivni poremećaj u Parkinsonovoj bolesti (na primer, izvršna disfunkcija, poremećaj pamćenja (posebno kratkotrajni poremećaj pamćenja), poremećaj u vizuelnoj prostornoj spoznaji, poremećaj čula mirisa i slično), kognitivni poremećaj izazvan hroničnim stresom, demencija sa Levijevim telima i frontotemporalna demencija.

[0015] Ove bolesti su povezane sa opadanjem funkcije dopamina u srednjem prefrontalnom korteksu.

[0016] Primeri bolesti Levijevih tela u ovom pronalasku uključuju kognitivni poremećaj u Parkinsonovoj bolesti, bolest difuzije Levijevih tela, demenciju sa Levijevim telima, poremećaj kretanja povezan sa bolešću Levijevih tela i slično.

[0017] U daljem tekstu, jedinjenje predstavljeno formulom (I) je ponekad označeno kao jedinjenje (I).

[0018] Farmaceutski prihvatljiva so jedinjenja (I) obuhvata, na primer, farmaceutski prihvatvljivu so nastalu dodavanjem kiseline, so metala, so amonijuma, so nastalu dodavanjem organskog amina, so nastalu dodavanjem amino kiseline i slično. Primeri farmaceutski prihvatljive soli jedinjenja (I) nastali dodavanjem kiseline uključuju soli neorganske kiseline kao što su hidrohlorid, hidrobromid, nitrat, sulfat, fosfat i slično, soli organske kiseline kao što su acetat, oksalat, maleat, fumarat, citrat, benzoat, metansulfonat i slično, i slično. Primeri farmaceutski prihvatljive soli metala uključuju soli alkalnih metala kao što su so natrijuma, so kalijuma i slično, soli zemno alkalnih metala kao što su so magnezijuma, so kalcijuma i slično, so aluminijuma, so cinka i slično. Primeri farmaceutski prihvatljive soli amonijuma uključuju soli amonijuma, tetrametilamonijuma i slično, primeri farmaceutski prihvatljive soli nastale dodavanjem organskog amina uključuju soli nastale dodavanjem morfolina, piperidina i slično, a primeri farmaceutski prihvatljive soli nastale dodavanjem amino kiseline uključuju soli nastale dodavanjem lizina, glicina, fenilalanina, aspartanske kiseline, glutaminske kiseline i slično.

[0019] Jedinjenje (I) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli za upotrebu u ovom pronalasku mogu da se izrade, na primer, postupkom opisanim u Primeru 504 iz WO 2005/063743.

[0020] Kada se želi so jedinjenja (I) a jedinjenje (I) je dobijeno u obliku soli, jedino je potrebno da se direktno prečisti, ili kada je dobijeno kao slobodni oblik, jedinjenje (I) se rastvori ili suspenduje u pogodnom rastvaraču i doda se kiselina ili baza da se formira so koja se izoluje i prečisti.

[0021] Takođe, jedinjenje (I) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so može da bude prisutno u obliku adukta sa vodom ili različitim rastvaračima i takav adukt može takođe da se koristi kao terapeutsko i/ili profilaktičko sredstvo iz ovog pronalaska.

[0022] Dalje, reprezentativni farmakološki efekat jedinjenja (I) je konkretno objašnjen preko Eksperimentalnih primera.

[Eksperimentalni Primer 1] Efekat jedinjenja (I) u testu prepoznvanja predmeta koristeći pacove sa lezijama na medijalnom prefrontalnom dopaminergičnom terminusu.

[0023] Test prepoznavanja predmeta je poznat kao sistem procene kognitivne funkcije koji koristi osobine životinje da voljno istraži novi predmet (Behavioural Brain Research 31, p.47 (1988)). Životinja se stavi u aparat koji sadrži dva identična predmeta i ostavi da slobodno istražuje (provera akvizicije), nakon čega se jedan od predmeta u aparatu zameni sa drugim koji ima različit oblik (novi predmet) i životinja se ostavi da slobodno istraži (test provera). Kada životinja zapamti oblik predmeta datog u proveri akvizicije, ona pokazuje osobinu da istražuje novi predmet duže vreme. U ovom testu, ovakva osobina se procenjuje kao indeks kognitivne funkcije. Pacovi sa lezijama na srednjem prefrontalnom dopaminergičnom terminusu, korišćeni u ovom testu, pokazuju smanjenje sadržaja dopamina i smanajenje početnihvrednosti dopamina oslobođenog u medijalnom prefrontalnom korteksu, kao i poremećaje radne memorije, i smatra se modelom koji odražava smanjenje u funkciji prefrontalnog korteksa (Psychopharmacology, 230, p.345 (2013)).

[0024] CD(SD)IGS pacov (mužjak, Charles River) je primio Pentobarbital natrijumovu so (Tokyo Chemical Industry Co., Ltd., 30 mg/kg) intraperitonealno i pričvršćen je na aparatu za stereotaksu mozga (SR-6, Narishige kagaku kikai kenkyusho) pod anestezijom. Pomoću mikroinjekcione pumpe (CMA/100, Carnegie Medicine), dopaminergični neurotoksin, 6-hidroksidopamin hidrohlorid (6-OHDA, Sigma-Aldrich) je injektovan u toku približno 1 minut u (1) 3.2 mm prednje, 0.8 mm levo bočno i 3.0 mm trbušno, (2) 3.2 mm prednje, 0.8 mm desno bočno i 3.0 mm trbušno, (3) 3.2 mm prednje, 0.8 mm levo bočno i 5.0 mm trbušno, (4) 3.2 mm prednje, 0.8 mm desno bočno i 5.0 mm trbušno, (5) 4.2 mm prednje, 0.8 mm levo bočno i 4.0 mm trbušno, i (6) 4.2 mm prednje, 0.8 mm desno bočno i 4.0 mm trbušno, svako od šava temena pacova do lezije dopaminergičnih terminusa u srednjem prefrontalnom korteksu. 6-OHDA je izrađen u koncentraciji od 4 µg/µL, injektovan pri brzini protoka od 1 µL/min u toku 1 min, i zadržan 1 min. U kontrolnoj grupi, kanila od nerđajućeg čelika je uneta na ista mesta. U ovom slučaju, da bi se sprečila lezija noradrenergičnih neurona, desipramin hidrohlorid (Sigma-Aldrich, 25 mg/kg) je intraperitonealno primenjen približno 30 minuta pre injekcije 6-OHDA. Zapremine doziranja pentobarbital natrijuma i dezipramin hidrohlorida su izračunate za 1 i 5 ml/kg na bazi telesne težine merene na dan primene. Pacovi su korišćeni za studiju efikasnosti nakon perioda oporavka od najmanje 5 dana nakon operacije.

[0025] Korišćen je žuto-beli aparat kružnog oblika (promer 82 cm, visina 20 cm). Kao predmet su korišćeni braon staklena boca (promer 5 cm, visina 8 cm) i sivi ahatni avan (promer 8.5 cm, visina 5 cm). Dva predmeta su stavljena u aparat 20 cm od zida. Aparat i predmeti su korišćeni za svako ispitivanje nakon čišćenja sa 50% etanolom.

[0026] Za upoznavanje pacova sa osobom koja sprovodi eksperiment, pacovi su čuvani 3 dana pre testa.60 minuta pre testa, jedinjenje (I) (suspendovano u 0.5 m/v% vodenom rastvoru metilceluloze 400 (MC) izrađeno po 0.5 mL po 100 g telesne težine pacova na dan primene) je oralno primenjeno u dozi od 0.3 mg/kg, ili je vehikulum (0.5 m/v% vodeni rastvor MC) bez test jedinjenja oralno primenjen po 0.5 mL po 100 g telesne težine pacova na dan primene. Dva identična predmeta su stavljena u aparat i pacovi su pušteni unutra i ostavljeni 10 minuta da slobodno istražuju (provera akvizicije), i ponovo vraćeni u svoj kavez. Nakon tri minuta, predmet koji ima isti oblik kao predmet prisutan u proveri akvizicije (poznat oblik) i predmet koji ima različit oblik (novi predmet) su stavljeni u aparat, pacovi su pušteni u aparat i ostavljeni 3 minuta da slobodno istražuju (test provera). Meri se vreme pacova provedeno u istraživanju (njuškanju) svakog predmeta u testu provere i izračunava odnos (%) u odnosu na ukupno vreme istraživanja. Za analizu rezultata, korišćeni su samo rezultati pacova koji su imali ukupno vreme istraživanja ne manje od 5 sekundi u testu provere.

[0027] Tabela 1 pokazuje odnos vremena istraživanja poznatog predmeta i novog predmeta u odnosu na ukupno vreme istraživanja kao prosečna vrednost ± standardna greška. Za statističke analize, korišćen je softver statističke analize SAS (Release 9.1.3, SAS Institute Inc.). Za poređenje vremena istraživanja poznatog predmeta i novog predmeta, nakon potvrde normalne distribucije Shapiro-Wilk testom sproveden je upareni t-test. Nivo statističkog značaja je postavljen na p<0.05.

1

Tabela 1

U Tabeli, "lezija" označava da je izvedena operacija oštećenja dopaminergičnih terminusa u srednjem prefrontalnom korteksu.

[0028] U kontrolnoj grupi, vreme istraživanja novog predmeta je značajno duže nego za poznati predmet (p<0.01). U grupi koja je primila vehikulum, vreme istraživanja dva predmeta se ne razlikuje. Nasuprot tome, u grupi koja je primila jedinjenje (I), vreme istraživanja novog predmeta je značajno duže nego vreme istraživanja poznatog predmeta (p<0.001).

[0029] Po prethodno navedenom testu, potvrđeno je da jedinjenje (I) povećava kognitivno oštećenje zbog smanjenja funkcije dopamina u srednjem prefrontalnom korteksu.

[0030] To jest, smatra se da će jedinjenje (I) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so da bude korisno za tretman i/ili profilaksu disfunkcije frontalnog režnja, pri čemu je disfunkcija frontalnog režnja kognitivni poremećaj izabran iz grupe koja se sastoji od kognitivnog poremećaja u Parkinsonovoj bolesti (na primer, izvršna disfunkcija, poremećaj pamćenja (posebno kratkotrajni poremećaj pamćenja), poremećaj u vizuelnoj prostornoj spoznaji, poremećaj čula mirisa i slično), kognitivnog poremećaja izazvanog hroničnim stresom, demencije sa Levijevim telima i frontotemporalne demencija.

[Eksperimentalni Primer 2] Efekat jedinjenja (I) u modelu α-sinukleinopatije

[0031] Pozivajući se na radove (Science, 338, p.949 (2012); Behavioral Brain Reexplore, 208, p.274 (2010)), generisan je životinjski model sposoban da potvrdi efekat tretmana i/ili profilakse na α-sinukleinopatiju, na primer, bolest Levijevih tela (na primer, kognitivni poremećaj u Parkinsonovoj bolesti, bolest difuzije Levijevih tela, demencija sa Levijevim telima, poremećaj kretanja povezan sa bolešću Levijevih tela i slično).

[0032] Odgovarajuća doza rastvora α-sinukleina (rPeptide, S-100) ili NAC61-95 (po narudžbini, Sigma) rastvorenog u puferu fosfatnih soli (PBS) je injektovan u striatum ili lateralnu cerebralnu ventrikulu SLC: ICR mužjaka miševa da se indukuje kognitivni poremećaj i/ili poremećaj kretanja. Nakon potvrde indukovane patologije, na mišu se primeni odgovarajuća doza jedinjenja (I). Poboljšanje patologije miševa u toku nekoliko sati nakon primene je potvrđeno farmakološkom evaluacijom ponašanja kao što je Y-maze test, količinom spontane motorne aktivnost, CAT- WALK i slično.

[0033] U prethodno navedenom testu je potvrđeno da jedinjenje (I) ima efekat tretmana i/ili profilakse na α-sinukleinopatiju na primer bolest Levijevih tela (na primer, kognitivni poremećaj u Parkinsonovoj bolesti, bolest difuzije Levijevih tela, demencija sa Levijevim telima, poremećaj kretanja povezan sa bolešću Levijevih tela i slično).

[Eksperimentalni Primer 3] Efekat jedinjenja (I) u modelu α-sinukleinopatije

[0034] Pozivajući se na radove (Science, 338, p.949 (2012); Behavioral Brain Reexplore, 208, p.274 (2010)), generisan je životinjski model sposoban da potvrdi efekat tretmana i/ili profilakse na α-sinukleinopatiju, na primer, bolest Levijevih tela (na primer, kognitivni poremećaj u Parkinsonovoj bolesti, bolest difuzije Levijevih tela, demencija sa Levijevim telima, poremećaj kretanja povezan sa bolešću Levijevih tela i slično).

[0035] Kognitivna funkcija je procenjena pomoću zadatka spontane alternacije. Zadatak spontane alternacije je poznat kao sistem procene kognitivne funkcije koristeći osobine životinje da voljno istražuje novo okruženje (Neuroscience and Biobehavioral Reviews 28, p.

497 (2004)). To jest, ukoliko životinja zapamti put kojim je prethodno pri istraživanju ušla u Y-maze aparat, spontana odluka da uđe u drugu putanju se izražava stopom promene ponašanja i koristi kao indeks kognitivne funkcije. Motorna funkcija se procenjuje analizom funkcije hoda u uslovima prirodnog hoda koristeći sistem analize hoda.

[0036] NAC61-95 (po narudžbi, Sigma) se rastvori u PBS da se izradi 4 µg/µL rastvora NAC61-95.

[0037] Pod anestezijom pentobarbitalom (Somnopentyl, Kyoritsuseiyaku, 50 mg/kg, i.p.), 5 µL NAC61-95 rastvora se injektuje pomoću Hamilton-ovog šprica (10 µL) opremljenim sa dvostrukom iglom (27G, dužina igle 3 mm) u desnu lateralnu cerebralnu ventrikulu Slc:ICR miša (mužjak, Japan SLC) u toku približno 1 min, i zadrži 1 minut da se indukuje kognitivni poremećaj i/ili poremećaj kretanja. Kontrolna grupa se injektuje sa 5 µL PBS.

[0038] Koristi se Y-maze aparat pri čemu su tri kraka crnih akrilnih zidova (visina 20 cm, dužina 25 cm, širina 5 cm) povezana pod uglom od 120 stepeni svaki.

[0039] Miševi se donesu u eksperimentalnu sobu dan pre testa zbog prilagođavanja. Miševi se stave na vrh bilo kog od krakova Y-maze aparata i ostave 7 minuta da slobodno istražuju lavirint. Ulazak miša sa sve četiri šape u jedan krak se definše kao ulazak u krak i beleži se redosled ulaska miševa u krak. Ponašanje kontinuiranog ulaska u sva tri različita kraka se definiše kao ponašanje spontane promene, a procenat promene ponašanja se izračunava sledećom formulom.

broj spontanih promena ponašanja

Promena ponašanja (%) =<x 100>

(ukupan broj ulazaka u krak)-2

[0040] Za izračunavanje promene ponašanja, korišćeni su rezultati miševa sa ne manje od ukupno 10 potpunih ulazaka u krak.

[0041] Korišćen je sistem analize hoda (CatWalk XT, ver.9.1, Noldus). Sistem je sačinjen od staze sa luminiscentnim staklom koje reaguje na pritisak i izvorom svetla, luminescentnim plafonom, visoko osetljivom kamerom velike brzine i softverom za analizu, a hod je analiziran digitalizacijom sjaja svetla koje emituje luminescentno staklo koje reaguje na pritisak kao odgovor na pritisak. Rezultati hoda se automatski beleže i analiziraju softverom za analizu samo kada se miš u prethodno određenoj oblasti na stazi kreće pravo bez zaustavljanja.

1

[0042] Miševi se prenesu u eksperimentalnu sobu bez svetla i ostave da se prilagode ne manje od 1 h. Miševi se stave u aparat i ostave da se slobodno šetaju dok se za svakog miša ne dobiju rezultati 6 kretanja. Korišćeni su rezultati prva tri kretanja koja mogu da se analiziraju i izračunava se srednja vrednost. Po referenci radova koji se odnose na životinjski model poremećaja kretanja u Parkinsonovoj bolesti (Journal of Biomedical Science 17, p.9 (2010)), smanjenje u maksimumu kontaktne površine (ukupna površina određene šape u trenutku maksimalnog kontakta šape) i štampana oblast (ukupna površina oblasti otiska šape), kao i promena u načinu hoda (sekvenca kontakta 4 šape) se koriste kao indikacija za poremećaj kretanja.

[0043] 60 minuta pre testa, jedinjenje (I) (suspendovano u 0.5 m/v% vodenom rastvoru MC, i pripremljeno za 0.5 mL po 100 g telesne težine miša na dan primene) se oralno primeni u dozi od 0.1 mg/kg, ili se vehikulum (0.5 m/v% vodeni rastvor MC) bez test jedinjenja oralno primeni u količini od 0.5 mL po 100 g telesne težine miša na dan primene.

[0044] Tabela 2 pokazuje promenu ponašanja u testu spontane promene kao srednju vrednost ± standardna greška. Za statističke analize, korišćen je SAS (Release 9.2, SAS Institute Inc.) softver za statističku analizu. Za poređenje dve grupe, homoscedastičnost je pretpostavljena iz rezultata F-testa, a izvršen je Student-ov t-test. Nivo statističkog značaja je postavljen na p<0.05.

Tabela 2

[0045] Grupa na kojoj je primenjen vehikulum pokazuje značajno manje promene ponašanja u poređenju sa kontrolnom grupom (p<0.01), a kognitivni poremećaj je indukovan tretmanom sa NAC61-95. Nasuprot tome, grupa u kojoj je primenjeno jedinjenje (I) pokazuje značajno veću promenu ponašanja u poređenju sa grupom u kojoj je primenjen vehikulum (p<0.01), a nađeno je napredovanje kognitivnog poremećaja tretmanom sa NAC61-95.

Tabela 3 pokazuje svaki parametar hoda u testu hoda kao prosek ± standardna greška.

Tabela 3

1

n l

[0046] Grupa koja je primila vehikulum je pokazala veoma malu oblast maksimalnog kontakta i malu oblast hoda desne prednje šape i leve zadnje šape u poređenju sa kontrolnom grupom (obe p<0.05), promena u obliku hoda (smanjenje u uzorku AB, povećanje u uzorku CB) a poremećaj kretanja je indukovan tretmanom sa NAC61-95. Nasuprot tome, grupa u kojoj je primenjeno jedinjenje (I) pokazuje izrazito veliku oblast maksimalnog kontakta i oblast kretanja leve zadnje šape u poređenju sa grupom na kojoj je primenjen vehikulum (p<0.05), uz tendenciju da se oblast maksimalnog kontakta i oblast kretanja desne prednje šape poveća (p<0.1), a oblast kretanja poveća u uzorku AB i smanji u uzorku CB. Iz prethodnog, poboljšanje poremećaja kretanja indukovano tretmanom sa NAC61-95 je nađeno u grupi u kojoj je primenjeno jedinjenje (I).

[0047] Iz prethodno obavljenog testa, može da se potvrdi da jedinjenje (I) ima efekat tretmana i/ili profilakse na α-sinukleinopatiju, na primer, bolesti Levijevih tela (na primer, kognitivni poremećaj u Parkinsonovoj bolesti, bolest difuzije Levijevih tela, demencija sa Levijevim telima, poremećaj kretanja povezan sa bolešću Levijevih tela i slično) i slično.

[0048] Mada jedinjenje (I) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so može kao takvo da se direktno primeni, generalno je poželjnije da se primeni u obliku različitih farmaceutskih preparata. Ovakvi farmaceutski preparati se koriste za životinje ili ljude.

[0049] Farmaceutski preparat iz ovog pronalaska može da sadrži samo jedinjenje (I) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so kao aktivni sastojak ili kao smešu sa drugim aktivnim sastojcima. Pored toga, ovakvi farmaceutski preparati se izrađuju mešanjem aktivnog sastojka sa jednom ili više vrsta farmaceutski prihatljivih nosača (na primer, razblaživač, rastvarač, podloga i slično) i u skladu sa bilo kojim postupkom dobro poznatim u polju tehnike za formulaciju lekova.

1

[0050] Kao način primene, poželjno je da se koristi najefikasniji način za primenu, što može da bude oralno ili parenteralno, na primer, intravenski, transdermalno i slično.

[0051] Primeri oblika za primenu uključuju tablete, injekcije, praparate za spoljašnju upotrebu i slično.

[0052] Oblik pogodan za oralnu primenu, na primer, tableta i slično, može da se izradi korišćenjem podloge kao što je laktoza i slično, sredstva za raspadanje kao što je skrob i slično, lubrikansa kao što je magnezijum stearat i slično, vezivnog sredstva kao što je hidroksipropilceluloza i slično, i slično.

[0053] Oblik pogodan za parenteralnu primenu, na primer, injekcija i slično, može da se izradi upotrebom razblaživača ili rastvarača kao što su rastvor soli, rastvor glukoze i smeša vodenog rastvora soli i glukoze, i slično, i slično.

[0054] Mada dozni oblik pogodan za eksternu primenu nije posebno ograničen, može da se pomene, na primer, mast, krem, liniment, losion, kataplazma, flaster, traka i slično. Na primer, mast, krem i slično mogu da se izrade, na primer rastvaranjem ili mešanjem i dispergovanjem aktivnog sastojka u podlozi kao što je beli vazelin i slično.

[0055] Doza i učestalost primene jedinjenja (I) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli varira u zavisnosti od primenjenog oblika, starosti i telesne težine pacijenta, prirode ili težine simptoma koji se tretira i slično. U slučaju oralnog načina, generalno se primenjuje 0.01 -1000 mg, poželjno je 0.05 - 100 mg, na odrasloj osobi više puta dnevno. U slučaju parenteralne primene kao što je intravenska primena i slično, generalno se primenjuje 0.001 -1000 mg, poželjno je 0.01 - 100 mg, na odrasloj osobi jedanput do nekoliko puta dnevno. U slučaju transdermalne primene, preparat za eksternu upotrebu koji sadrži 0.001 - 10% jedinjenja (I) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli se generalno primenjuje nanošenjem jedanput do više puta dnevno. Međutim, ovakva doza i učestalost primene variraju u zavisnosti od prethodno pomenutih različitih stanja.

[0056] Ovaj pronalazak je detaljnije opisan u niže datim Primerima, koje ne treba tumačiti kao ograničavajuće.

Primeri

[Primer 1]

[0057] Tableta koja ima niže datu kompoziciju se izrađuje uobičajenim postupkom. Jedinjenje

1

(I) (40 g), laktoza (286.8 g) i krompirov skrob (60 g) se izmešaju i u to se doda 10% vodeni rastvor hidroksipropilceluloze (120 g). Smeša se umesi, granulira, suši i proseje da se dobiju granule za tabletiiranje uobičajenim postupkom. Granule se izmešaju sa magnezijum stearatom (1.2 g) i smeša se tabletira u mašini za tabletiranje sa klipom od 8 mm (proizvođača Kikusui, RT-15) da se dobiju tablete (koje sadrže 20 mg aktivnog sastojka po tableti).

Tabela 4

Formulacija

Jedinjenje (I) 20 mg

laktoza 143.4 mg

krompirov skrob 30 mg hidroksipropilceluloza 6 mg

magnezijum stearat 0.6 mg

200 mg

[Primer 2]

[0058] Injekcija koja ima niže datu kompoziciju se izrađuje uobičajenim postupkom.

Jedinjenje (I) (1 g) se izmeša sa vodom za injekcije, pH se podesi na 7 dodavanjem hlorovodonične kiseline i vodenog rastvora natrijum hidroksida, i doda se voda za injekcije da se izradi ukupna količina od 1000 mL. Dobijena smeša se u količini od po 2 mL pod aseptičnim uslovima puni u staklene bočice da se dobiju injekcije (koje sadrže 2 mg aktivnog sastojka po bočici).

Tabela 5

Formulacija

Jedinjenje (I) 2 mg hlorovodonična kiselina q.s.

vodeni rastvor natrijum hidroksida q.s.

voda za injekcije q.s.

2.00 mL

[Referentni Primer 1]

1

[0059] Jedinjenje (I) se dobija u skladu sa postupkom opisanim u Primeru 504 u WO 2005/063743.

Primenljivost u industriji

[0060] Ovaj pronalazak može da se koristi za tretman i/ili profilaksu disfunkcije frontalnog režnja, pri čemu je disfunkcija frontalnog režnja kognitivni poremećaj izabran iz grupe koja se sastoji od kognitivnog poremećaja u Parkinsonovoj bolesti (na primer, izvršna disfunkcija, poremećaj pamćenja (posebno kratkotrajni poremećaj pamćenja), poremećaj u vizuelnoj prostornoj spoznaji, poremećaj čula mirisa i slično), kognitivni poremećaj izazvan hroničnim stresom, demencija sa Levijevim telima i frontotemporalna demencija, ili bolest Levijevih tela (na primer, kognitivni poremećaj u Parkinsonovoj bolesti, bolest difuzije Levijevih tela, demencija sa Levijevim telima, poremećaj kretanja povezan sa bolešću Levijevih tela i slično).

1

Claims

Patentni zahtevi 1. Jedinjenje predstavljeno formulom (I):

ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je za upotrebu u tretmanu i/ili profilaksi disfunckije frontalnog režnja, pri čemu je disfunkcija frontalnog režnja (1) kognitivni poremećaj izabran iz grupe koja se sastoji od kognitivnog poremećaja u Parkinsonovoj bolesti, kognitivnog poremećaja izazvanog hroničnim stresom, demencije sa Levijevim telima i frontotemporalne demencije; ili (2) kognitivni poremećaj zbog umanjenja funkcije dopamina u medijalnom prefrontalnom korteksu.
2. Jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu u skladu sa patentnim zahtevom 1, naznačeno time što je kognitivni poremećaj kognitivni poremećaj u Parkinsonovoj bolesti.
3. Jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu u skladu sa patentnim zahtevom 2, naznačeno time što je kognitivni poremećaj u Parkinsonovoj bolesti disfunkcija spoznaje, poremećaj pamćenja, poremećaj u vizuelnoj prostornoj spoznaji ili poremećaj čula mirisa.
4. Jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu u skladu sa patentnim zahtevom 1, naznačeno time što je kognitivni poremećaj kognitivni poremećaj izazvan hroničnim stresom.
5. Jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu u skladu sa patentnim 2 zahtevom 1, naznačeno time što je kognitivni poremećaj demencija sa Levijevim telima.
6. Jedinjenje predstavljeno formulom (I):

ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je za upotrebu u tretmanu i/ili profilaksi bolesti Levijevih tela.
7. Jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu u skladu sa patentnim zahtevom 6, naznačeno time što je bolest Levijevih tela kognitivni poremećaj u Parkinsonovoj bolesti.
8. Jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu u skladu sa patentnim zahtevom 6, naznačeno time što je bolest Levijevih tela bolest difuzije Levijevih tela.
9. Jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu u skladu sa patentnim zahtevom 6, naznačeno time što je bolest Levijevih tela demencija sa Levijevim telima.
10. Jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu u skladu sa patentnim zahtevom 6, naznačeno time što je bolest Levijevih tela poremećaj kretanja povezan sa bolešću Levijevih tela. Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Beograd, Kneginje Ljubice 5