RS63231B1 - Primena derivata hinolina u lečenju upalnih bolesti - Google Patents

Primena derivata hinolina u lečenju upalnih bolesti

Info

Publication number
RS63231B1
RS63231B1 RS20220479A RSP20220479A RS63231B1 RS 63231 B1 RS63231 B1 RS 63231B1 RS 20220479 A RS20220479 A RS 20220479A RS P20220479 A RSP20220479 A RS P20220479A RS 63231 B1 RS63231 B1 RS 63231B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
chloro
quinolin
trifluoromethoxy
amine
group
Prior art date
Application number
RS20220479A
Other languages
English (en)
Inventor
Jamal Tazi
Romain Najman
Florence Mahuteau
Didier Scherrer
Michael Hahne
Karim Chebli
Original Assignee
Abivax
Centre Nat Rech Scient
Inst Curie
Univ Montpellier
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=51220531&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RS63231(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Abivax, Centre Nat Rech Scient, Inst Curie, Univ Montpellier filed Critical Abivax
Publication of RS63231B1 publication Critical patent/RS63231B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
    • C12Q1/6883—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for diseases caused by alterations of genetic material
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene or sparfloxacin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/4965—Non-condensed pyrazines
    • A61K31/497—Non-condensed pyrazines containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D215/00—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems
    • C07D215/02—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D215/16—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D215/38—Nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/553—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07F9/576—Six-membered rings
    • C07F9/60—Quinoline or hydrogenated quinoline ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/6558—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing at least two different or differently substituted hetero rings neither condensed among themselves nor condensed with a common carbocyclic ring or ring system
    • C07F9/65583—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing at least two different or differently substituted hetero rings neither condensed among themselves nor condensed with a common carbocyclic ring or ring system each of the hetero rings containing nitrogen as ring hetero atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6869—Methods for sequencing
    • C12Q1/6874—Methods for sequencing involving nucleic acid arrays, e.g. sequencing by hybridisation
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
    • G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
    • G01N33/502—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics for testing non-proliferative effects
    • G01N33/5023—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics for testing non-proliferative effects on expression patterns
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
    • G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
    • G01N33/5044—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics involving specific cell types
    • G01N33/5047—Cells of the immune system
    • G01N33/5055—Cells of the immune system involving macrophages
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4709—Non-condensed quinolines and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/136—Screening for pharmacological compounds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/158—Expression markers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/178—Oligonucleotides characterized by their use miRNA, siRNA or ncRNA

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)

Description

Opis
OBLAST PRONALASKA
[0001] Pronalazak se odnosi na identifikaciju novih derivata hinolina koji su efikasni u lečenju i/ili prevenciji upalnih bolesti, kao i na nove terapijske primene derivata hinolina za lečenje upalnih bolesti.
[0002] Pronalazak se takođe odnosi na oblast biomarkera u vezi sa takvim upalnim oboljenjima.
STANJE TEHNIKE
[0003] Upala je zaštitni odgovor imunog sistema na oštećenje tkiva i na infekciju. Međutim, inflamatorni odgovor, u nekim okolnostima, može oštetiti telo. U akutnoj fazi upalu karakteriše bol, toplota, crvenilo, otok i gubitak funkcije. Postoji širok spektar upalnih stanja koja pogađaju milione ljudi širom sveta.
[0004] Zaista, upalne bolesti obuhvataju širok spektar stanja uključujući, inflamatorno oboljenje udruženo sa autoimunom bolešću, upalnu bolest centralnog nervnog sistema (CNS), zapaljensko oboljenje zglobova, upalnu bolest digestivnog trakta i zapaljensko oboljenje kože. Među njima su zapaljenska bolest creva, reumatoidni artritis i multipla skleroza od posebnog značaja.
[0005] Zapaljenska bolest creva (ZBC) je složena multifaktorska bolest (Perše i Cerar, 2012). Obično se odnosi na ulcerozni kolitis (UK) i Kronovu bolest (KB), dva hronična stanja koja uključuju upalu creva. ZBC je česta u razvijenim zemljama, sa do 1 na 200 ljudi u severnoevropskom regionu koji pate od ovih bolesti. Pacijenti sa ZBC predstavljaju nekoliko klinički izazovnih problema za lekare. DSS-indukovani kolitis udružen je sa uzlaznom regulacijom različitih proinflamatornih citokina uključujući TNFalpha i IFN gama. Nedavno se pokazalo da je miR-124 deregulisan posebno kod pedijatrijskih pacijenata sa aktivnim UK, što je dovelo do povećanog nivoa transduktora i aktivatora ekspresije transkripcije 3 (STAT3) i transkripcione aktivacije njegovih nizvodnih ciljeva među kojima su proinflamatorni citokini (Koukos i sar., Gastroenterologija, 145(4):842-52:2013). Međutim, uprkos nedavnim naprecima, ostaje potreba za bezbednom, dobro podnošljivom terapijom sa brzim početkom delovanja i povećanim kapacitetom za održavanje dugoročne remisije.
[0006] Reumatoidni artritis (RA) je najčešća autoimuna bolest sa prevalencijom od oko 0,3 do 1% populacije širom sveta i često je udružena smanjenom pokretljivošću, povećanom socijalnom zavisnošću i invaliditetom. RA je sistemska zapaljenska bolest koja utiče na tkivo zglobne obloge koje se naziva sinovium. Reumatoidno sinovijalno tkivo karakteriše hiperproliferacija sinoviocita sličnih fibroblastima (FLS) u sloju unutrašnjem sloju obloge i infiltracija obloge makrofagima, T i B ćelijama i drugim inflamatornim ćelijama koje promovišu upalu i uništavanje kostiju i hrskavice. Intraartikularna i sistemska ekspresija proinflamatornih citokina, posebno faktora tumorske nekroze alfa (TNFa), interleukina 1 (IL-1) i 6 (IL-6), koje prvenstveno proizvode sinovijalni makrofagi, igra presudnu ulogu u patogenezi RA, npr. doprinoseći hiperproliferaciji FLS u RA. Pacijenti sa RA se generalno leče grupom malih molekularnih lekova koji se nazivaju antireumatski lekovi koji modifikuju bolest (DMARD). DMARD na neki način potiskuju preaktivan imuni i/ili inflamatorni sistem tela, čime usporavaju napredovanje bolesti. Pacijenti sa RA koji ne reaguju na DMARD leče se biološkim agensima kao što su antagonisti faktora tumorske nekroze (TNF). Međutim, iako su TNF antagonisti efikasni kod oko dve trećine pacijenata, pacijenti koji reaguju često ne reaguju u periodu od pet godina. Zbog toga su potrebni alternativni tretmani. Značajno je da postoji poseban interes za nove terapijske pristupe dizajnirane za pacijente sa RA u ranim fazama, pre nego što bolest postane hronična.
[0007] Multipla skleroza (MS) je zapaljenska autoimuna, demijelinizirajuća bolest centralnog nervnog sistema koja uništava mijelin, oligodendrocite i aksone. MS karakterišu višestruka žarišta zapaljenja i infiltracija makrofaga i encefalitogenih T ćelija u centralnom nervnom sistemu. Mikroglijalne ćelije se nalaze u celom centralnom nervnom sistemu i učestvuju u nastanku i napredovanju zapaljenskih odgovora CNS-a. Mikroglijalne ćelije, kada se aktiviraju, veoma oštećuju funkciju CNS-a kroz proizvodnju neurotoksina, inflamatornih ćelija (inflamatorni protein-10, inflamatorni protein makrofaga-1, inflamatorni protein makrofaga-2, C-C hemokinski ligand 19, monocitni hemoatraktni protein-1, monocitni hemoatraktni protein -2) i imune ćelije koje proizvode antitela. Microglijalne ćelije usmeravaju zapaljenske odgovore koji mogu dovesti do infiltracije mozga i kičmene moždine imunim ćelijama u borbi protiv stranih osvajača, kao i T-ćelijama koje uništavaju mijelinske proteine. Periferne makrofage se pojavljuju u CNS-u tokom upale i ove ćelije imaju visoko aktiviran fenotip, efikasno stimulišu ekspanziju encefalitogenih T ćelija, te se smatra da doprinose uništenju neuronskog tkiva.
[0008] MikroRNK (miRNK), najsveobuhvatnija nekodirajća grupa, je klasa od oko 22 nt nekodirajuće RNK koje inhibiraju ekspresiju gena vezivanjem za netranslantirani region (UTR) ciljnih transkripata mRNK (Lai I sar., Nature Genetics, tom 30, broj 4, str.363-364, 2002; Bartel I sar., Cell, tom 136, br.2, str.215-233, 2009). Geni miRNK predstavljaju oko 1-2% poznatih eukariotskih genoma. Predviđanja sugerišu da svaka miRNK može ciljati više od 200 transkripata i da se jedna mRNK može regulisati višestrukim miRNK (LINDOV, DNK Cell Biol., tom 26(5), str.339-351, 2007). miRNK se generišu iz endogenih transkripata u obliku ukosnice i deluju uparivanjem baza sa ciljnim mRNK, što dovodi do cepanja mRNK ili translacione represije, u zavisnosti od stepena uparivanja baza.
Dva postupka obrade dovode do formiranja zrele miRNK: prvo, transkripti miRNK u nastajanju (pri-miRNK) se obrađuju u prekursore od 70 nukleotida (pre-miRNK) koji se izvoze iz jezgra i cepaju u citoplazmi da bi stvorili kratke (dužine od oko 22 nukleotida) zrele miRNK (LEE, EMBO J., tom 21, str; 4663-4670, 2002). miRNK mogu biti smeštene inter- ili intragenski. Kada su smeštene intergenski, njihovom ekspresijom upravljaju druge miRNK kao klaster (Altuvia I sar., Nucleic Acids Research, tom 33, br.8, str.2697-2706, 2005, Ozsolak i sar., Genes and Development, tom 22, br.22, str.3172-3183, 2008). Kada su smeštene intragenski, naime, kada su pozicionirane unutar protein kodirajućeg gena (skoro isključivo u intronima), one se često eksprimuju iz istog lanca kao i njihov gen domaćin (Liu I sar., Cell Research, tom 18, br.10, str.985-996, 2008, Kim I sar., EMBO JouRNKl, tom.
26, br.3, str.775-783, 2007) i na povezanim nivoima (Baskerville I sar., RNK, tom.11, br.
3,str. 241-247, 2005).
[0009] Sada je pokazano da prekomerna ekspresija miRNK, odnosno miR-124, deaktivira inflamatorne makrofage i pretvara ih u ćelije slične mikroglijalnim. Veruje se da miR-124 inhibira aktivaciju makrofaga ciljanjem na CEBPa, transkripcioni faktor odgovoran za diferencijaciju ćelija mijeloidne loze. Intravenska injekcija lipozoma koji sadrže miR-124 značajno potiskuje kliničke simptome EAE i inhibira infiltraciju encefalitogenih T ćelija i inflamatornih makrofaga u CNS-u.
[0010] Uz to, Ponomarev i sar. („mikoRNK-124 promoviše mirovanje mikroglije i potiskuje EAE tako što deaktivira makrofage koristeći C/EBP-a-PU.1 put“; Nature Medicine (2011); 17:1: 64-71) sugeriše da bi miR-124 mogao da igra ulogu ključnog regulatora mirovanja mikroglije i kao modulatora aktivacije monocita i makrofaga. Na osnovu modela eksperimentalnog autoimunog encefalomijelitisa (EAE), ova studija ukazuje na to da je, kod miševa sa EAE, obrazac ekspresije miR-124 modulisan (bilo ushodnom ili nishodnom regulacijom u zavisnosti od tipa ćelije).
[0011] WO2010/151755 takođe govori o primeni miR-124 u lečenju zapaljenske bolesti centralnog nervnog sistema (CNS).
[0012] Sun i sar. („mikroRNK-124 posreduje u holinergičkom protivupalnom delovanju kroz inhibiciju proizvodnje proinflamatornih citokina“; Cell Research (2013); 23:1270-1283) takođe govori da miR-124 može da posreduje u holinergičkom protivupalnom delovanju ciljanjem na STAT3 i TACE.
[0013] S druge strane, identifikovana su nova jedinjenja, koja se takođe nazivaju „derivati hinolina“, ali za drugačije indikacije.
[0014] Da pomenemo, hinolin je heterociklično aromatično organsko jedinjenje formule:
[0015] Prema tome, „derivati hinolina“ uključuju supstituisane hinoline, kao što su monosupstituisani ili polisupstituisani hinolini.
[0016] WO2010/143170 govori o upotrebi jedinjenja za lečenje stanja povezanih sa preranim starenjem.
[0017] WO2010/143169 i VO2012/080953 govore o upotrebi jedinjenja za lečenje AIDS-a.
[0018] WO2010/143168 poučava upotrebu jedinjenja za lečenje određenih karcinoma.
Pokazalo se da ta jedinjenja mogu da isprave defekte alternativnog splajsovanja.
[0019] WO2004/007461 obelodanjuje derivate 8-hidroksihinolina za lečenje neurodegenerativnih poremećaja, uključujući multiplu sklerozu. O.A. Ianborisova i sar.; Pharmaceutical Chemistry JouRNKl; tom29(6), 1995, strane 404-405 i O. Ianborisova i sar., Khimiko-Farmatsevticheskii ZhuRNKl, tom 28(1), 1994, strane 29-31 obelodanjuju protivupalno dejstvo derivata 2-arilaminocinhoninske kiseline.
[0020] WO2007/103162 obelodanjuje derivat hinolina za inhibiciju steroidogeneze i primenu u lečenju multiple skleroze.
SAŽETAK PRONLASKA
[0021] Sada je pronađeno da su jedinjenja koja su definisana u formuli (I) u daljem tekstu korisna u lečenju i/ili prevenciji upalnih bolesti.
[0022] Ovaj pronalazak se stoga odnosi na jedinjenja formule (I), kao što je definisano u nastavku, za upotrebu u lečenju i/ili prevenciji upalne bolesti, kao što je definisano u zahtevima.
[0023] Konkretno, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja formule (I), kao što je definisano u nastavku, za primenu u lečenju i/ili prevenciji zapaljenja, i/ili zapaljenja koje se može javiti zajedno sa navedenim upalnim bolestima.
[0024] U aspektu koji nije obuhvaćen zahtevima, ovo otkriće se takođe odnosi na in vitro ili ex vivo upotrebu najmanje jednog miRNK, pri čemu je najmanje jedan miRNK miR-124, kao biomarker za skrining, derivat hinolina, a posebno, jedinjenje formule (I), za koje se pretpostavlja da je efikasno u lečenju i/ili prevenciji upalne bolesti.
[0025] Pronalazak se dalje odnosi na jedinjenje formule (Id) kako je u daljem tekstu definisano kao takvo.
[0026] Pronalazak se dalje odnosi na farmaceutsku formulaciju koja sadrži najmanje jedno jedinjenje formule (Id)
[0027] Takođe se odnosi na jedinjenje kao takvo, izabrano sa liste koja sadrži sledeće:
(8) 8-hloro-5-(3-(piperidin-1-il)propoksi)-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)hinolin-2-amin
(9) 8-hloro-N4-(3-(piperidin-1-il)propil)-N2-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)hinolin-2,4-diamin
(10) 8-hloro-N-metil-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)hinolin-2-amin
(11) 8-hloro-N4-(2-morfolinoetil)-N2-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)hinolin-2,4-diamin
(13) 4,8-dihloro-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)hinolin-2-amin
(14) 8-hloro-N-(3-morfolinopropil)-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)hinolin-2-amin (15) 8-hloro-6-(2-morfolinoetoksi)-N-(3-morfolinopropil)-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)hinolin-2-amin
(16) 8-hloro-5-(2-morfolinoetoksi)-N-(3-morfolinopropil)-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)hinolin-2-amin
(17) 8-hloro-6-(2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi)-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)hinolin-2-amin
(18) 8-hloro-6-(2-(piperidin-1-il)etoksi)-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)hinolin-2-amin
(19) 8-hloro-6-(3-(piperidin-1-il)propoksi)-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)hinolin-2-amin
(20) 8-hloro-N-(3-fluoro-4-(trifluorometil)piridin-2-il)hinolin-2-amin
(21) N-(5-bromo-4-(trifluorometil)piridin-2-il)-8-hlorokinolin-2-amin
(22) N<2>-(8-hlorohinolin-2-il)-N5-(3-(4-metilpiperazin-1-il)propil)-4-(trifluorometil)piridin-2,5-diamin
(28) 8-hloro-N-metil-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2-amin
(29) 8-hloro-5-(3-(piperidin-1-il)propoksi)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2-amin
(30) 8-hloro-N-(3-(piperidin-1-il)propil)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2-amin (31) 8-hloro-N-(2-morfolinoetil)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2-amin (32) 8-hloro-N-(2-(pirolidin-1-il)etil)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2-amin (33) 8-hloro-N-(4-morfolinobutil)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2-amin (34) 8-hloro-N<4>-(3-(piperidin-1-il)propil)-N<2>-(4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2,4-diamin
(35) 4,8-dihloro-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2-amin
(36) 8-hloro-5-(2-morfolinoetoksi)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2-amin (37) N<1>-(4,8-dihlorokinolin-2-il)-4-(trifluorometoksi)benzen-1,2-diamin
(38) 4,8-dihloro-N-(2-morfolinoetil)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2-amin (39) 8-hloro-6-(2-morfolinoetoksi)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2-amin (40) 8-hloro-N<2>-(2-morfolinoetil)-N4-(3-(piperidin-1-il)propil)-N<2>-(4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2,4-diamin
(41) 8-hloro-N-(2-morfolinoetil)-N-(2-nitro-4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2-amin (42) N<1>-(8-hlorokinolin-2-il)-N<1>-(2-morfolinoetil)-4-(trifluorometoksi)benzen-1,2-diamin
(43) 8-hloro-5-(2-morfolinoetoksi)-N-(2-morfolinoetil)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2-amin
(44) N<1>-(8-hloro-5-(2-morfolinoetoksi)hinolin-2-il)-4-(trifluorometoksi)benzen-1,2-diamin
(46) 8-hloro-2-((4-(trifluorometil)piridin-2-il)oksi)hinolin
(47) 4-(2-((8-hloro-2-((4-(trifluorometil)piridin-2-il)oksi)hinolin-6-il)oksi)etil)morfolin
(48) 8-hloro-2-(4-(trifluorometoksi)fenoksi)hinolin
(49) 4-(2-((8-hloro-2-(4-(trifluorometoksi)fenoksi)hinolin-6-il)oksi)etil)morfolin (50) 4-(2-((8-hloro-2-(4-(trifluorometoksi)fenoksi)hinolin-5-il)oksi)etil)morfolin (51) mono-[8-hloro-2-(4-trifluorometil-piridin-2-ilamino)-hinolin-6-il] estar fosforne kiseline
(52) mono-[2-(8-hloro-hinolin-2-ilamino)-5-trifluorometoksi-fenil] estar fosforne kiseline
(53) mono-[8-hloro-2-(4-trifluorometoksi-fenilamino)-hinolin-6-il] estar fosforne kiseline
i njihove farmaceutski prihvatljive soli, posebno odabrane od jedinjenja (8), (9), (10), (11), (30), (46), (47), (48), (49) i (50) kako je gore definisano ili jedna od njegovih farmaceutskih soli.
[0028] Takođe se odnosi na farmaceutsku formulaciju koja sadrži najmanje jedno jedinjenje formule (Id), ili jedno od jedinjenja (8), (9), (10), (11), (13), (14), (15), (16), (17), (18), (19), (20), (21), (22), (28), (29), (30), (31), (32), (33), (34), (35), (36), (37), (38), (39), (40), (41), (42), (43), (44), (46), (47), (48), (49), (50), (51), (52) i (53), i, preciznije, jedno od jedinjenja (8), (9), (10), (11), (30), (46), (47), (48), (49) i (50) kako je gore definisano.
[0029] U aspektu koji nije obuhvaćen zahtevima, ovaj pronalazak se dalje odnosi na in vitro ili ex vivo postupak za povećanje ekspresije miR-124 u eukariotskoj ćeliji i obuhvata najmanje jedan od koraka:
a) obezbeđenje eukariotske ćelije,
b) dovođenje u kontakt navedene ćelije sa derivatom hinolina, a posebno jedinjenjem formule (I).
[0030] U aspektu koji nije obuhvaćen zahtevima, ovaj pronalazak se dalje odnosi na in vitro ili ex vivo postupak za skrining derivatnog jedinjenja, a posebno jedinjenja formule (I), za koje se pretpostavlja da je efikasno u lečenju i/ili prevenciji upalne bolest i koji se sastoji od najmanje jednog od koraka:
a) obezbeđenje eukariotske ćelije,
b) dovođenje u kontakt navedene ćelije sa derivatom hinolina, a posebno jedinjenjem formule (I),
c) merenje ekspresije miR-124 u pomenutoj ćeliji i
d) selektovanje kandidata za koji se pretpostavlja da je efikasan u lečenju i/ili prevenciji upalne bolesti kada se nivo ekspresije miR-124 izmeren u koraku (c) poveća u odnosu na referentnu vrednost.
KRATAK OPIS SLIKA
[0031]
Slika 1: Model 1 kolitisa izazvanog dekstran natrijum sulfatom (DSS) -Varijacija procentualnog gubitka težine tokom vremena (dana), na DSS-mišjem modelu, u prisustvu derivata jedinjenja hinolina (24) kako je definisano u nastavku. Procenat gubitka težine (%) je prikazan na y-osi. DSS tretman se primenjuje od 3. do 10. dana (x-osa). Gavaža derivatom hinolina u metilcelulozi (MC), ili samo metilcelulozom (MC), primenjuje se između 3. i 29. dana
Slika 2: Model 2 kolitisa izazvanog dekstran natrijum sulfatom (DSS) – Varijacija procentualnog gubitka težine tokom vremena (dana), na DSS modelu miša, nakon drugog ciklusa DSS u prisustvu jedinjenja derivata hinolina (24 ) kako je definisano u daljem tekstu. Procenat gubitka težine (%) je prikazan na y-osi. DSS tretman je počeo 12. dana i trajao 5 dana (x-osa). Gavaža derivatom hinolina u metilcelulozi (MC), ili samo metilcelulozom (MC), se primenjuje se između 3. i 29. dana.
Slika 3: Model kolitisa izazvanog dekstran natrijum sulfatom (DSS) – Debelo crevo je uklonjeno 2-3 dana nakon drugog DSS tretmana (koji je trajao 5 dana) i izmerena je varijacija veličine debelog creva (cm).. (ns) označava nestatistički značajnu razliku. Statistička analiza je izvršena korišćenjem Man-Vitnijevog testa; jedna zvezdica označava značajnu razliku (p<0,5), dve zvezdice označavaju veoma značajnu razliku (p<0,05)
Slika 4: Model kolitisa izazvanog dekstran natrijum sulfatom (DSS-) – Debelo crevo je uklonjeno 3 dana nakon drugog tretmana DSS-om i analizirano na broj lezija. Lezije su posmatrane pod mikroskopom i merene.
Slika 5: Model kolitisa izazvanog dekstran natrijum sulfatom (DSS-) - Debelo crevo je uklonjeno 3 dana nakon drugog tretmana DSS i određena je površina lezije (mm2).
Slika 6: Model artritisa izazvanog kolagenom – Varijacija otoka zglobova (mm) tokom vremena (nedelje) na prosečnoj kohorti od 10 osoba. Oticanje zglobova
1
(mm) je prikazano na y-osi. Varijacija između netretiranih i tretiranih grupa se procenjuje tokom 12 nedelja.
DETALJAN OPIS PRONALASKA
[0032] Postoji potreba za identifikacijom novih jedinjenja za upotrebu u lečenju i/ili prevenciji upalne bolesti.
[0033] Takođe postoji potreba za novim biomarkerom za procenu dejstva lekova kandidata, kao što su derivati hinolina, na upalne bolesti.
[0034] Ovaj pronalazak ima za cilj da zadovolji ove potrebe.
Derivati hinolina
[0035] Prema prvom aspektu, predmet ovog pronalaska se odnosi na jedinjenje formule (I):
Pri čemu:
Z = C ili N,
V = C ili N,
označava aromatični prsten u kome je V = C ili N, kada je V = N, V je in ortho, meta ili para-Z, tj. formira, ovim redom, piridinsku, piridazinsku, pirimidinsku ili pirazinsku grupu,
Q = N ili O, pod uslovom da R" ne postoji kada je Q = O,
R3i R4nezavisno predstavljaju atom vodonika, Li<+>, Na<+>, K<+>, N<+>(Ra)4ili benzil grupu, n je 1, 2 ili 3,
n' je 1, 2 ili 3,
Ra predstavlja atom vodonika, (C1-C5)alkil grupu ili (C3-C6)cikloalkil grupu, R" je atom vodonika, (C1-C4)alkil grupa ili grupa
pri čemu je m = 2 ili 3, a X1je O, CH2ili N-CH3.
[0036] R nezavisno predstavlja atom vodonika, metil grupu, metoksi grupu, trifluorometil grupu, trifluorometoksi grupu, amino grupu, atom halogena i -O-P(=O)-(OR3)(OR4) grupu, a posebno, atom fluora ili hlora, trifluorometoksi grupu i amino grupu.
[0037] R' nezavisno predstavljaju atom vodonika, atom halogena i posebno atom fluora ili hlora, amino grupu, metil grupu, -O-P(=O)-(OR3)(OR4) grupu ili grupu
pri čemu je A = O ili NH, m je 2 ili 3 i X1je O, CH2ili N-CH3, pod uslovom da, kada je R' takva grupa, onda je n' 1 ili 2, a kada je n' = 2, onda je druga R' grupa različita od rečene grupe. ili
[0038] R' alternativno nezavisno predstavljaju atom halogena, a posebno atom fluora ili hlora, metil grupu ili grupu
pri čemu je A = O ili NH, m je 2 i X1je O, CH2ili N-CH3, pod uslovom da, kada je R' takva grupa, onda je n' 1 ili 2, a kada je n' = 2, onda je druga R' grupa različita od rečene grupe ili bilo koje njene farmaceutski prihvatljive soli za primenu u lečenju i/ili prevenciji upalne bolesti kako je definisano u zahtevima.
[0039] Sve prethodne i sledeće konkretne realizacije se, naravno, mogu kombinovati zajedno i činiti deo pronalaska.
[0040] Jedinjenja formule (I) uključuju jedinjenja formule (Ia), (Ib), (Ic), (Id) i (Ie), kao što je definisano u nastavku.
[0041] Prema jednoj konkretnoj realizaciji, drugi predmet ovog pronalaska je primena jedinjenja formule (Ia)
pri čemu su R, R', R", n i n' kao što je opisano u prethodnom tekstu,
u lečenju i/ili prevenciji rečene upalne bolesti.
[0042] Prema jednom aspektu rečene poželjne realizacije, n je 1 ili 2.
[0043] Prema jednom aspektu rečene poželjne realizacije, n’ je 1 ili 2.
[0044] Prema jednom aspektu rečene poželjne realizacije, R" je atom vodonika, (C1-C4)alkil grupa ili grupa
pri čemu je m = 2 ili 3, a X1je O, CH2ili N-CH3, a poželjno je R" atom vodonika ili metil grupa.
[0045] Prema jednoj konkretnoj realizaciji, drugi predmet ovog pronalaska je primena jedinjenja formule (Ib)
pri čemu su R, R', R", n i n' kao što je opisano u prethodnom tekstu,
u lečenju i/ili prevenciji rečene upalne bolesti.
[0046] Prema jednom aspektu rečene poželjne realizacije, n je 1 ili 2.
[0047] Prema jednom aspektu rečene poželjne realizacije, n' je 1, 2 ili 3.
[0048] Prema jednom aspektu rečene poželjne realizacije, R" je atom vodonika, (C1-C4)alkil grupa ili grupa
1
pri čemu je m = 2 ili 3, a X1je O, CH2ili N-CH3, a, poželjno, R" je atom vodonika ili metil grupa.
[0049] Prema jednoj konkretnoj realizaciji, drugi predmet ovog pronalaska je primena jedinjenja formule (Ic)
pri čemu su R, R', R", n i n' definisani kao u prethodnom tekstu, u lečenju i/ili prevenciji rečene upalne bolesti.
[0050] Prema jednom aspektu rečene poželjne realizacije, n je 1.
[0051] Prema jednom aspektu rečene poželjne realizacije, n' je 1.
[0052] Prema jednom aspektu rečene poželjne realizacije, R' alternativno nezavisno predstavlja atom vodonika ili atom halogena.
[0053] Prema jednom aspektu rečene poželjne realizacije, R" je atom vodonika, (C1-C4)alkil grupa ili grupa
pri čemu je m = 2 ili 3 i X1je O, CH2ili N-CH3, a, poželjno, R" je atom vodonika ili metil grupa.
[0054] Prema jednoj konkretnoj realizaciji, drugi predmet ovog pronalaska je primena jedinjenja formule (Id)
pri čemu su R, R', n i n' definisani kao u prethodnom tekstu, u lečenju i/ili prevenciji rečene upalne bolesti.
[0055] Prema jednom aspektu rečene poželjne realizacije, n je 1.
[0056] Prema jednom aspektu rečene poželjne realizacije, n' je 1.
[0057] Prema jednom aspektu rečene poželjne realizacije, R' alternativno nezavisno predstavlja atom vodonika ili atom halogena.
[0058] Prema jednom aspektu rečene poželjne realizacije, R" je atom vodonika, (C1-C4)alkil grupa ili grupa
pri čemu je m = 2 ili 3, a X1je O, CH2ili N-CH3, a, poželjno, R" je atom vodonika ili metil grupa.
[0059] Prema jednoj konkretnoj realizaciji, drugi predmet ovog pronalaska je primena jedinjenja formule (Ie)
pri čemu su R, R', n i n' definisani kao u prethodnom tekstu, u lečenju i/ili prevenciji rečene upalne bolesti
[0060] Prema jednom aspektu rečene poželjne realizacije, n je 1.
[0061] Prema jednom aspektu rečene poželjne realizacije, n' je 1.
[0062] Prema jednom aspektu rečene poželjne realizacije, R' alternativno nezavisno predstavlja atom vodonika ili atom halogena.
1
[0063] Prema jednom aspektu rečene poželjne realizacije, R" je atom vodonika, (C1-C4)alkil grupa ili grupa
pri čemu je m = 2 ili 3, a X1je O, CH2ili N-CH3, a, poželjno, R" je atom vodonika ili metil grupa.
[0064] Prema još jednoj konkretnoj realizaciji, jedinjenja (Id), prema gornjem objašnjenju, kao takva, takođe su deo ovog pronalaska.
[0065] Prema poželjnoj realizaciji ovog pronalaska, neka jedinjenja formule (I) su nova, čine deo ovog pronalaska i izabrana su između jedinjenja (broj se nalazi na tabeli 1 u nastavku ovog teksta):
(8) 8-hloro-5-(3-(piperidin-1-il)propoksi)-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)hinolin-2-amin
(9) 8-hloro-N<4>-(3-(piperidin-1-il)propil)-N<2>-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)hinolin-2,4-diamin
(10) 8-hloro-N-metil-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)hinolin-2-amin
(11) 8-hloro-N<4>-(2-morfolinoetil)-N<2>-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)hinolin-2,4-diamin (13) 4,8-dihloro-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)hinolin-2-amin
(14) 8-hloro-N-(3-morfolinopropil)-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)hinolin-2-amin (15) 8-hloro-6-(2-morfolinoetoksi)-N-(3-morfolinopropil)-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)hinolin-2-amin
(16) 8-hloro-5-(2-morfolinoetoksi)-N-(3-morfolinopropil)-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)hinolin-2-amin
(17) 8-hloro-6-(2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi)-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)hinolin-2-amin
(18) 8-hloro-6-(2-(piperidin-1-il)etoksi)-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)hinolin-2-amin
(19) 8-hloro-6-(3-(piperidin-1-il)propoksi)-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)hinolin-2-amin
(20) 8-hloro-N-(3-fluoro-4-(trifluorometil)piridin-2-il)hinolin-2-amin
(21) N-(5-bromo-4-(trifluorometil)piridin-2-il)-8-hlorohinolin-2-amin
1
(22) N<2>-(8-hlorohinolin-2-il)-N<5>-(3-(4-metilpiperazin-1-il)propil)-4-(trifluorometil)piridin-2,5-diamin
(28) 8-hloro-N-metil-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2-amin
(29) 8-hloro-5-(3-(piperidin-1-il)propoksi)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2-amin
(30) 8-hloro-N-(3-(piperidin-1-il)propil)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2-amin (31) 8-hloro-N-(2-morfolinoetil)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2-amin (32) 8-hloro-N-(2-(pirolidin-1-il)etil)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2-amin (33) 8-hloro-N-(4-morfolinobutil)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2-amin (34) 8-hloro-N<4>-(3-(piperidin-1-il)propil)-N<2>-(4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2,4-diamin
(35) 4,8-dihloro-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2-amin
(36) 8-hloro-5-(2-morfolinoetoksi)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2-amin (37) N<1>-(4,8-dihlorohinolin-2-il)-4-(trifluorometoksi)benzen-1,2-diamin
(38) 4,8-dihloro-N-(2-morfolinoetil)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2-amin (39) 8-hloro-6-(2-morfolinoetoksi)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2-amin (40) 8-hloro-N<2>-(2-morfolinoetil)-N<4>-(3-(piperidin-1-il)propil)-N<2>-(4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2,4-diamin
(41) 8-hloro-N-(2-morfolinoetil)-N-(2-nitro-4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2-amin (42) N<1>-(8-hlorohinolin-2-il)-N<1>-(2-morfolinoetil)-4-(trifluorometoksi)benzen-1,2-diamin
(43) 8-hloro-5-(2-morfolinoetoksi)-N-(2-morfolinoetil)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2-amin
(44) N<1>-(8-hloro-5-(2-morfolinoetoksi)hinolin-2-il)-4-(trifluorometoksi)benzen-1,2-diamin
(46) 8-hloro-2-((4-(trifluorometil)piridin-2-il)oksi)hinolin
(47) 4-(2-((8-hloro-2-((4-(trifluorometil)piridin-2-il)oksi)hinolin-6-il)oksi)etil)morfolin
(48) 8-hloro-2-(4-(trifluorometoksi)fenoksi)hinolin
(49) 4-(2-((8-hloro-2-(4-(trifluorometoksi)fenoksi)hinolin-6-il)oksi)etil)morfolin (50) 4-(2-((8-hloro-2-(4-(trifluorometoksi)fenoksi)hinolin-5-il)oksi)etil)morfolin (51) mono-[8-hloro-2-(4-trifluorometil-piridin-2-ilamino)-hinolin-6-il] estar fosforne kiseline
1
(52) mono-[2-(8-hloro-hinolin-2-ilamino)-5-trifluorometoksi-fenil] estar fosforne kiseline
(53) mono-[8-hloro-2-(4-trifluorometoksi-fenilamino)-hinolin-6-il] estar fosforne kiseline
i njihove farmaceutski prihvatljive soli
[0066] U svrhu ovog pronalaska, jedinjenje formule (I) uključuje bilo koje od jedinjenja formule (Ia), (Ib), (Ic), (Id) i (Ie), kao i njihove kombinacije. Jedinjenja formule (I) uključuju jedinjenja (1) do (53), kao što je definisano u Tabeli I, i njihove kombinacije.
[0067] Jedinjenja ovog pronalaska mogu postojati u obliku slobodnih baza ili adicionih soli sa farmaceutski prihvatljivim kiselinama.
[0068] Pogodne fiziološki prihvatljive kiselinske adicione soli jedinjenja formule (I) uključuju hidrobromid, tartarat, citrat, trifluoroacetat, askorbat, hidrohlorid, tartarat, triflat, maleat, mezilat, format, acetat i fumarat.
[0069] Jedinjenja formule (I) i/ili njihove soli mogu da formiraju solvate ili hidrate i ovaj pronalazak obuhvata sve takve solvate i hidrate.
[0070] Termini "hidrati" i "solvati" jednostavno znače da jedinjenja (I) prema pronalasku mogu biti u obliku hidrata ili solvata, tj. kombinovana ili udružena sa jednim ili više molekula vode ili rastvarača. Ovo je samo hemijska karakteristika takvih jedinjenja, koja se može primeniti za sva organska jedinjenja ovog tipa.
[0071] Jedinjenja formule (I) mogu da sadrže jedan ili više asimetričnih atoma ugljenika. Stoga mogu postojati u obliku enantiomera ili dijastereoizomera. Ovi enantiomeri, dijastereoizomeri i njihove smeše, uključujući racemske smeše, obuhvaćeni su obimom ovog pronalaska.
[0072] U kontekstu ovog pronalaska, termin:
"halogen" podrazumeva hlor, fluor, brom ili jod, a posebno označava hlor, fluor ili brom,
1
"(C1-C5)alkil", kako se ovde koristi, odnosi se na, ovim redom, C1-C5normalan, sekundarni ili tercijarni zasićeni ugljovodonik. Primeri su, ali nisu ograničeni na, metil, etil, 1-propil, 2-propil, butil, pentil,
"(C3-C6)cikloalkil", kako se ovde koristi, odnosi se na ciklični zasićeni ugljovodonik. Primeri su, ali nisu ograničeni na ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, "(C1-C4)alkoksi", kako se ovde koristi, odnosi se na, ovim redom, O-(C1-C4)alkilni deo, pri čemu je alkil definisan u prethodnom tekstu. Primeri su, ali nisu ograničeni na, metoksi, etoksi, 1-propoksi, 2-propoksi, butoksi,
"fluoroalkil grupa" i "fluoroalkoksi grupa" se odnose na alkil grupu, odnosno alkoksi grupu, kao što je gore definisano, pri čemu su navedene grupe supstituisane najmanje jednim atomom fluora.
Primeri su perfluoroalkil grupe, kao što su trifluorometil ili perfluoropropil, "zasićeni 5- ili 6-člani heterociklus", kako se ovde koristi, odnosi se na zasićeni ciklus koji sadrži najmanje jedan heteroatom. Primeri su, ali nisu ograničeni na, morfolin, piperazin, tiomorfolin, piperidin, pirolidin,
"pacijent" se može proširiti na ljude ili sisare, kao što su mačke ili psi.
[0073] Jedinjenja formule (I) koja su pogodna za pronalazak mogu se pripremiti kako je opisano u WO2010/143170, WO2010/143169, WO2012/080953 i WO2010/143168, i/ili kao što je opisano dalje u nastavku.
[0074] Tačnije, jedinjenja formule (I) za koja nije traženo pravo u kojima R' predstavlja grupu izabranu između:
mogu se pripremiti sintetskim putevima kao što je opisano u WO2012/080953, tačnije kada je A = O.
[0075] Kada je A = N, može se primeniti sledeći način sinteze. Derivat hinolina formule (VII) može se sintetizovati kao gradivni blok pre dodatnih reakcija unakrsnog kuplovanja.
1
[0076] Da bi se dobilo pomenuto jedinjenje formule (VII), može se izvesti sledeća sekvenca reakcija, kao što je prikazano na shemi 1 u nastavku.
Slika 1
[0077] Jedinjenje formule (II), gde je R' različit od H i kao što je definisan gore i može posebno biti atom hlora, može se staviti u piridin, zatim se može dodati jedinjenje formule (III) u molarnom odnosu u rasponu od 1 do 2, na primer 1,5, u odnosu na jedinjenje formule (II). Reakciona smeša se može mešati na temperaturi u rasponu od 110 do 150°C, na primer na 130°C, tokom perioda od 8 sati do 18 sati, na primer 14 sati. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša se može koncentrovati pod sniženim pritiskom i rezultujući ostatak se može razblažiti organskim rastvaračem kao što je dihlorometan. Organska faza se zatim može isprati zasićenim vodenim rastvorom neorganske baze kao što je Na2CO3, osušiti preko MgSO4, filtrirati i koncentrovati pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje formule (IV).
[0078] Jedinjenje formule (IV) se može staviti u smešu THF/voda, zatim se može dodati natrijum hidroksid u molarnom odnosu u rasponu od 1 do 1,5, na primer 1,2, u odnosu na jedinjenje formule (IV), i reakciona smeša se može mešati na sobnoj temperaturi tokom
2
perioda od 8 sati do 18 sati, na primer 14 sati. Zatim se može dodati koncentrovana hlorovodonična kiselina dok se ne postigne pH 2 i dobijeni rastvor se može ekstrahovati organskim rastvaračem kao što je etil acetat. Organska faza se zatim može osušiti preko MgS04, filtrirati i koncentrovati pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje formule (V).
[0079] Jedinjenje formule (V) se može staviti u polifosfornu kiselinu, dodati u molarnom odnosu u rasponu od 5 do 15, na primer 10, u odnosu na jedinjenje formule (V) i reakciona smeša se može mešati na temperaturi u rasponu od 110 do 150°C, na primer na 130°C, u periodu u rasponu od 8 sati do 18 sati, na primer 14 sati. Nakon hlađenja do sobne temperature, može se polako dodati vodeni rastvor natrijum hidroksida molarnosti u rasponu od 1 do 5M, na primer 2M. Dobijeni talog se može filtrirati, isprati vodom i osušiti pod sniženim pritiskom u eksikatoru da bi se dobilo jedinjenje formule (VI).
[0080] Jedinjenje formule (VI) se može staviti u POCl3, dodati u molarnom odnosu u rasponu od 5 do 15, na primer 10, u odnosu na jedinjenje formule (VI) i reakciona smeša se može mešati na temperaturi u rasponu od 80 do 120°C, na primer na 100°C, u periodu u rasponu od 1 sata do 5 sati, na primer 2 sata. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, može se polako dodavati voda. Dobijeni precipitat se može filtrirati, isprati vodom i osušiti pod sniženim pritiskom u eksikatoru da bi se dobilo jedinjenje formule (VII).
[0081] Navedeno intermedijerno jedinjenje formule (VII) se može koristiti za formiranje jedinjenja formule (I) unakrsnim kuplovanjem sa derivatom anilina, derivatom aminopiridina, derivatom pirimidina, derivatom hidroksipiridina, derivatom fenola ili derivatom hidroksipirimidina, kao što je opisano u WO2010/143170, WO2010/143169, WO2012/080953 i WO2010/143168 i/ili kao što je opisano dalje u nastavku teksta.
[0082] Hlor na poziciji 4 intermedijarnog jedinjenja formule (VII) može se zatim supstituisati aminom da bi se formirao derivat hinolina koji nosi grupu formule (IIa) sa A = NH.
[0083] Kada je K = N i R" različit od H, mogu se primeniti sledeći putevi, ilustrovani shemama 2 i 3.
[0084] Da bi se dobila jedinjenja formule (IX), sledeća reakcija se može izvesti kao što je prikazano u shemi 2 u nastavku.
Slika 2
[0085] Jedinjenje formule (VIII), pri čemu su Z, V, n, n', R i R' kao što je gore definisano, može se staviti u anhidrovani polarni rastvarač kao što je anhidrovani N,N-dimetilformamid u prisustvu AlkHal, gde Alk predstavlja (C1-C4)alkil grupu, a Hal predstavlja atom halogena, u molarnom odnosu u rasponu od 1 do 2, na primer 1,1, u prisustvu neorganske baze kao što je kalijum terc-butoksid u molarnom odnosu u rasponu od 1 do 2, na primer 1,1, u odnosu na jedinjenje formule (VIII). Reakciona smeša se može mešati na sobnoj temperaturi tokom vremena u rasponu od 7 sati do 24 sata, na primer 16 sati. Reakciona smeša se može podeliti na vodu i organski rastvarač kao što je etil acetat. Organske faze se zatim mogu sakupiti, isprati zasićenim vodenim rastvorom slanog rastvora, osušiti preko MgS04, filtrirati i koncentrovati pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje formule (IX).
[0086] Da bi se dobila jedinjenja formule (XII), sledeća reakcija se može izvesti kao što je prikazano na shemi 3 u nastavku.
Slika 3
[0087] Jedinjenje formule (X), gde su Z, V, n, n', R i R' kao što je gore definisano, može se staviti u anhidrovani polarni rastvarač kao što je anhidrovani N,N-dimetilformamid u prisustvu NaH u molarnom odnosu u rasponu od 2 do 5, na primer 3, i ova reakciona smeša se može mešati na sobnoj temperaturi tokom vremena u rasponu od 10 minuta do 50 minuta, na primer 30 minuta. Jedinjenje formule (XI), gde su m, B, Ra i Rb kao što je gore definisano, može se zatim staviti, u molarnom odnosu u rasponu od 1 do 2, na primer 1, u anhidrovani polarni rastvarač kao što je anhidrovani N, N-dimetilformamid u prisustvu KI u molarnom odnosu u rasponu od 1 do 2, na primer 1, i u prisustvu organske baze kao što je Et3N u molarnom odnosu u rasponu od 1 do 2, na primer 1, u odnosu na jedinjenje formule (X) i ova reakciona smeša se može mešati na sobnoj temperaturi tokom vremena u rasponu od 10 minuta do 50 minuta, na primer 30 minuta, u atmosferi inertnog gasa, na primer argona. Aktivirano jedinjenje (X) se zatim može dodati jedinjenju (XI) i dobijena reakciona smeša se može mešati na temperaturi u rasponu od 70 do 110°C, na primer na 90°C, tokom vremena u rasponu od 2 sata do 10 sati, na primer 4 sata. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša se može koncentrisati pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak se može razblažiti organskim rastvaračem kao što je etil acetat. Organska faza se zatim može isprati zasićenim vodenim rastvorom slanog rastvora, osušiti preko MgS04, filtrirati i koncentrovati pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje formule (XII).
[0088] Kada
nosi supstituciju koja je amino grupa formule (IIa), gde je A = NH, može se primeniti sledeći put, kao na shemi 4.
Slika 4
[0089] Jedinjenje formule (XIII), gde su Z, V, n', R i R' kao što je definisano gore, a X je atom halogena kao što je Br, može se staviti u polarnu smešu rastvarača kao što je smeša dioksan / N,N -dimetilformamid. Jedinjenje formule (XIV), gde su B, Ra i Rb kao što su definisani gore, se zatim dodaje u molarnom odnosu u rasponu od 1 do 2, na primer 1,5, u odnosu na jedinjenje formule (XIII), u prisustvo nenukleofilne organske baze, kao što je
2
natrijum terc-butoksid ili kalijum terc-butoksid, u molarnom odnosu u rasponu od 2 do 5, na primer 3, u prisustvu difosfina, kao što je ksantfos (4,5-bis( difenilfosfino)-9,9-dimetilksanten) ili X-Phos (2-dicikloheksilfosfino-2',4',6'-triizopropilbifenil) u količini koja se kreće od 5 mol% do 40 mol% u odnosu na ukupnu količinu jedinjenja formule (XIII), i u prisustvu katalizatora, kao što je Pd(OAc)2ili Pd2(dba)3u količini koja se kreće od 2 mol% do 15 mol% u odnosu na ukupnu količinu jedinjenja formule (XIII). Reakciona smeša se može zagrevati u mikrotalasnom reaktoru na temperaturi u rasponu od 90 do 150°C, na primer na 120°C, tokom vremena u rasponu od 30 minuta do 100 minuta, na primer 70 minuta. Reakciona smeša se može koncentrovati pod sniženim pritiskom, a ostatak se može razblažiti organskim rastvaračem kao što je etil acetat. Organska faza se može isprati vodom, dekantovati, osušiti preko magnezijum sulfata, filtrirati i koncentrovati pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje formule (XV).
[0090] Jedinjenja opšte formule (Id) kao što je gore definisano mogu se dobiti prema shemi 5 u nastavku.
Slika 5
[0091] Jedinjenje formule (XVI), gde su n' i R' kao što je gore definisano, a X je atom halogena kao što je Cl, može se staviti u polarni rastvarač kao što je N,N-dimetilformamid u prisustvu neorganske baze kao što je Cs2CO3u molarnom odnosu u rasponu od 2 do 5, na primer 3, i u prisustvu CuI u molarnom odnosu u rasponu od 1 do 2, na primer 1. Jedinjenje formule (XVII), gde su R, V i n kao što je gore definisano, zatim se može dodati u molarnom odnosu u rasponu od 1 do 2, na primer 1, u odnosu na jedinjenje formule (XVI). Reakciona smeša se može zagrevati u mikrotalasnom reaktoru na temperaturi u rasponu od 130 do 170°C, na primer na 150°C, tokom vremena u rasponu od 30 minuta do 100 minuta, na primer 50 minuta. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, u reakcionu smešu se može dodati voda, nerastvorene čvrste materije se mogu filtrirati kroz celit i dobijeni filtrat se može ekstrahovati organskim rastvaračem kao što je etil acetat. Organska faza se zatim može isprati vodom i zasićenim vodenim rastvorom slanog rastvora, osušiti preko MgS04, filtrirati i koncentrovati pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje formule (Id).
[0092] Jedinjenja opšte formule (Ie) kao što je gore definisano mogu se dobiti prema shemi 6 u nastavku.
Slika 6
[0093] Jedinjenje formule (XVI), gde su n' i R' kao što je gore definisano, a X je atom halogena kao što je Cl, može se staviti u polarni rastvarač kao što je N,N-dimetilformamid u prisustvu neorganske baze kao što je Cs2CO3u molarnom odnosu u rasponu od 2 do 5, na primer 3, i u prisustvu CuI u molarnom odnosu u rasponu od 1 do 2, na primer 1. Jedinjenje formule (XIX), gde su R, V i n kao što je gore definisano, zatim se mogu dodati u molarnom odnosu u rasponu od 1 do 2, na primer 1, u odnosu na jedinjenje formule (XVI). Reakciona smeša se može zagrevati u mikrotalasnom reaktoru na temperaturi u rasponu od 130 do 170°C, na primer na 150°C, tokom vremena u rasponu od 30 minuta do 100 minuta, na primer 50 minuta. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, u reakcionu smešu se može dodati voda, nerastvorene čvrste materije se mogu filtrirati kroz celit i dobijeni filtrat se može ekstrahovati organskim rastvaračem kao što je etil acetat. Organska faza se zatim može isprati vodom i zasićenim vodenim rastvorom slanog rastvora, osušiti preko MgS04, filtrirati i koncentrovati pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje formule (Ie).
[0094] Konkretnije, jedinjenja formule (I) u kojima R' predstavlja -O-P(=O)-(OR3)(OR4) grupu mogu se pripremiti počevši od jedinjenja formule (XX) gde je R' OH grupa, na sledeći način:
2
Slika 7
[0095] Jedinjenje formule (XX), gde su Z, V, n, n', R i R' kao što je gore definisano, može se staviti u anhidrovani hloroalkan rastvarač kao što je anhidrovani dihlorometan, na 0°C u inertnoj atmosferi gasa, na primer argona, u prisustvu dietilhlorfosfata u molarnom odnosu od 1, i u prisustvu organske baze kao što je trietilamin u molarnom odnosu u rasponu od 1 do 2, na primer 1,2 u odnosu na jedinjenje formule ( XX). Reakciona smeša se može mešati na sobnoj temperaturi tokom vremena u rasponu od 7 sati do 24 sata, na primer 14 sati.
Reakciona smeša se zatim može koncentrovati pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak se može odvojiti na vodeni rastvor hlorovodonične kiseline sa molarnošću u rasponu od 1 do 2 M, na primer 1M, i organski rastvarač kao što je etil acetat. Organske faze se zatim mogu sakupiti, isprati zasićenim vodenim rastvorom neorganske baze kao što je Na2CO3, osušiti preko MgSO4, filtrirati i koncentrovati pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje formule (XXI).
[0096] Jedinjenje formule (XXI) se može staviti u polarni aprotični rastvarač kao što je acetonitril, u prisustvu trimetilsililbromida u molarnom odnosu u rasponu od 1 do 5, na primer 4, u odnosu na jedinjenje formule (XXI). Reakciona smeša se može mešati pod mikrotalasnim zračenjem na temperaturi u rasponu od 50 do 70°C, na primer na 60°C, tokom vremena u rasponu od 15 sati do 60 minuta, na primer 30 minuta. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, polako se može dodati smeša MeOH/voda (95/5). Dobijeni talog se može filtrirati, isprati vodom i osušiti pod sniženim pritiskom u eksikatoru da bi se dobilo jedinjenje formule (XXII).
[0097] Isti postupak se može primeniti za dobijanje jedinjenja formule (I) gde R predstavlja -O-P(=O)-(OR3)(OR4) grupu, počevši od jedinjenja formule (I) gde je R grupa OH grupa.
Upalne bolesti
2
[0098] Prema tome, pronalazak se takođe odnosi na jedinjenje formule (Ia), (Ib), (Ic), (Id) i (Ie), za primenu u lečenju i/ili prevenciji upalne bolesti, kao što je definisano u zahtevima.
[0099] Iznenađujuće, pronalazači su uspeli da pokažu da su jedinjenja formule (I) dovela do dramatičnog poboljšanja znakova udruženih sa upalnim bolestima kao što su zapaljenska bolest creva (ZBC) i reumatoidni artritis (RA), na osnovu dva in vivo modela miša.
[0100] Kapacitet modulacije upale koji imaju jedinjenja formule (I) je sada procenjen primenom dva utvrđena modela miša za dve upalne bolesti: zapaljensku bolest creva (ZBC) i reumatoidni artritis (RA). Za proučavanje zapaljenske bolesti creva (ZBC) korišćen je mišji model kolitisa izazvanog dekstran natrijum sulfatom (DSS-) (videti Perše & Cerar; "Dextran Sodium Sulphate Colitis Mouse Model: Traps and Tricks"; JouRNKl of Biomedicine and Biotechnology (2012); 718617). Model kolagen-indukovanog artritisa korišćen je za proučavanje reumatoidnog artritisa, kao što su pokazali Brand i sar. ("Collagen-induced arthritis"; Nature Protocols; (2007); 2(5):1269-75).
[0101] Zaista, pronalazači su pokazali da je primena jedinjenja koje pripada formuli (I) dovela in vivo do poboljšanja dužine debelog creva i smanjenja promena u limfoidnim organima kao što su Pejerove ploče, kod (DSS-) indukovanog kolitisana modelu miša.
Pronalazači su dalje pokazali da je primena jedinjenja formule (I) dovela do značajnog smanjenja otoka i smanjenih znakova upale na osnovu mišjeg modela artritisa izazvanog kolagenom.
[0102] Prema pronalasku, „upalu“ karakteriše bol, toplota, crvenilo i otok, a može biti rezultat infekcije, iritacije ili povrede.
[0103] Prema tome, „upalna bolest“ se odnosi na grupu bolesti i/ili poremećaja koji su izazvani prekomernom ili neregulisanom upalom.
[0104] Prema pronalasku, „lečenje i/ili prevencija upalne bolesti“ može se odnositi ili na lečenje i/ili prevenciju upalne bolesti ili na samu upalu koja se može javiti zajedno sa navedenom upalnom bolešću kod pojedinca.
2
[0105] Prema tome, lečenje i/ili prevencija upalne bolesti takođe uključuje lečenje i/ili prevenciju upale kao takve.
[0106] Prema pronalasku, „lečenje i/ili prevencija“ upalne bolesti uključuje lečenje, smanjenje verovatnoće razvoja, odnosno odlaganje pojave navedene upalne bolesti.
[0107] Prema pronalasku, „pojedinac“ se može odnositi na čoveka ili ne-ljudskog sisara, a poželjno na čoveka.
[0108] Na neograničavajući način, upalne bolesti obuhvataju: zapaljensko oboljenje udruženo sa nekom autoimunom bolešću, zapaljensko oboljenje centralnog nervnog sistema (CNS), upalu zglobova, zapaljensko oboljenje digestivnog trakta, zapaljensko oboljenje kože i druge upalne bolesti povezane sa epitelnim ćelijama kao što su bronhitis, zapaljenje udruženo sa karcinomom kao što je karcinom debelog creva, zapaljenje udruženo sa iritacijom i zapaljenje udruženo sa povredom.
[0109] Prema tome, upalna bolest se može izabrati sa liste koju čine: upalna bolest udružena sa nekom autoimunom bolešću, zapaljensko oboljenje centralnog nervnog sistema (CNS), zapaljensko oboljenje zglobova, upalna bolest digestivnog trakta, zapaljensko oboljenje kože i druge upalne bolesti u vezi sa epitelnim ćelijama, zapaljenje udruženo sa karcinomom, zapaljenje udruženo sa iritacijom i zapaljenje udruženo sa povredom.
[0110] Prema pronalasku, upalna bolest je odabrana sa liste koja se sastoji od: zapaljenske bolesti creva, reumatoidnog artritisa, Kronove bolesti, ulceroznog kolitisa, multiple skleroze, osteoartritisa, ankilozirajućeg spondilitisa, psorijaze, Sjogrenovog sindroma, bronhitisa, astme i upale udružene sa karcinomom.
[0111] Konkretnije, upalna bolest prema pronalasku je izabrana sa liste koja se sastoji od: zapaljenske bolesti creva, reumatoidnog artritisa, Kronove bolesti, ulceroznog kolitisa, multiple skleroze, osteoartritisa, ankilozirajućeg spondilitisa, psorijaze, Sjogrenovog sindroma, bronhitisa i upale udružene sa karcinomom debelog creva.
2
[0112] Konkretnije, upalna bolest prema pronalasku je odabrana sa liste koja se sastoji od: zapaljenske bolesti creva, reumatoidnog artritisa, Kronove bolesti, ulceroznog kolitisa, multiple skleroze, osteoartritisa, ankilozirajućeg spondilitisa i psorijaze.
[0113] Poželjno, upalna bolest prema pronalasku uključuje zapaljensku bolest creva, Kronovu bolest, ulcerozni kolitis, reumatoidni artritis i multiplu sklerozu.
[0114] Još poželjnije, upalna bolest prema pronalasku uključuje zapaljensku bolest creva, reumatoidni artritis i multiplu sklerozu.
[0115] U aspektu na koji se ne traži pravo, upalna bolest može takođe da obuhvati Alchajmerovu bolest, Parkinsonovu bolest, aterosklerozu i dermatitis.
[0116] Kao dermatitis, može se navesti ekcem.
[0117] Imajući u vidu gore navedeno, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenje formule (I) za upotrebu u lečenju i/ili prevenciji upalne bolesti kao što je definisano u zahtevima, koji obuhvata upalu kao takvu i upalu udruženu sa pomenutom upalnom bolešću.
[0118] Prema drugom aspektu, predmet ovog pronalaska se odnosi na jedinjenje (Id), (8), (9), (10), (11), (44), (46), (47), ( 48), (49), (50), (51), (52), (53) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, za upotrebu kao lek.
[0119] Prema još jednom od svojih predmeta, ovaj pronalazak se odnosi na farmaceutsku formulaciju koja sadrži jedinjenje (Id), (8), (9), (10), (11), (44), (46), (47), ( 48), (49), (50), (51), (52), (53) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, same ili u kombinaciji.
miRNK-124
[0120] MikroRNK (miRNK) su male, jednolančane nekodirajuće molekule RNK koje mogu delovati u citoplazmi ćelije da izazovu smanjenje ekspresije svojih srodnih ciljnih RNK molekula glasnika ili translaciju proteinskih produkata tih mikro ribonukleinskih kiselina. Zrele miRNK su tipično dugačke oko 19-23 nukleotida. Ova sposobnost miRNK da inhibiraju proizvodnju svojih ciljnih proteina za posledicu ima regulaciju mnogih tipova
2
ćelijskih aktivnosti, kao što su određivanje ćelijske sudbine, apoptoza, diferencijacija i onkogeneza.
[0121] miR-124 je prvobitno kloniran kod miša. Prekursor humanog miR-124 (ili miRN-124 ili miRNK-124 ili mikroRNK 124) je kloniran od embrionalnih matičnih ćelija. Do sada je identifikovano 9 haplotipova prekursora miR-124 (Guo i sar., PLoS ONE, 2009, 4(11):e7944), od kojih su tri prisutna kod ljudi, hsa-miR-124-1, hsa-miR-124-2 i hsa-miR-124-3. (SEQ ID NO:1, SEQ ID NO:2, odnosno SEQ ID NO:3).
[0122] Prekursor miR-124, mikroRNK je mali nekodirajući RNK molekul. Zreli 21-nukleotidni mikroRNK se dobijaju iz sekvenci prekursora ukosnice pomoću enzima Dicer. Te zrele sekvence su SEQ ID NO: 4 za miR-124-3p i SEQ ID NO: 5 za miR-124-5p.
[0123] Prema jednom aspektu pronalaska na koji se ne traži pravo, merenje nivoa ekspresije miR-124 obuhvata i merenje nivoa ekspresije i prekursora i zrelog miR-124. U jednom aspektu na koji se ne traži pravo, pronalazak se takođe odnosi na jedinjenje formule (I) za povećanje ekspresije miR-124 u biološkom uzorku.
[0124] Prema tome, prema drugom od svojih predmeta, otkriće se odnosi na in vitro ili ex vivo postupak za povećanje ekspresije miR-124 u eukariotskoj ćeliji, koji se sastoji od najmanje jednog od sledećih koraka:
a) obezbeđivanje eukariotske ćelije,
b) dovođenje u kontakt navedene ćelije sa derivatom jedinjenja, a posebno sa jedinjenjem formule (I).
Postupak skrininga jedinjenja kandidata
[0125] Jedan od ključnih faktora za uspeh razvoja datog leka ili vakcine je mogućnost da se efikasno i brzo proceni njegova efikasnost. Stoga je ključno imati odgovarajuće alate, kao što su specifični biomarkeri, na koje ćete se oslanjati za procenu efikasnosti leka ili vakcine.
[0126] Iznenađujuće, otkriveno je da, tokom upale, miR-124 igra važnu ulogu. Zaista, pronalazači su pokazali da su jedinjenja formule (I) sposobna da modulišu ekspresiju miR-124. Konkretno, pronalazači su pokazali da bi jedinjenja pronalaska mogla da regulišu ekspresiju miR-124 (do 100 puta jaču) na mononuklearnim ćelijama periferne krvi (PBMC) donora, izolovanim centrifugiranjem na FICOLL™ gradijentu.
[0127] Pošto su pronalazači sada utvrdili da su jedinjenja formule (I) sposobna da modulišu ekspresiju miR-124, u aspektu na koji se ne traži pravo, ovo otkriće se takođe odnosi na in vitro ili ex vivo postupak skrininga derivata hinolina, a posebno jedinjenja formule (I), za koje se pretpostavlja da je efikasno u lečenju i/ili prevenciji upalne bolesti.
[0128] Prema tome, prema drugom njegovom predmetu, otkriće se odnosi na in vitro ili ex vivo upotrebu najmanje jednog miRNK, pri čemu je rečeno da je najmanje jedan miRNK miR-124, kao biomarker za skrining derivata hinolina, a posebno jedinjenja formule (I), za koju se pretpostavlja da je efikasan u lečenju i/ili prevenciji upalne bolesti.
[0129] Prema tome, u aspektu na koji nije traženo pravo, ovaj pronalazak se takođe odnosi na in vitro ili ex vivo postupak skrininga derivata hinolina, a posebno jedinjenja formule (I), za koje se pretpostavlja da je efikasno u lečenju i/ili prevenciji upalne bolesti, a koji se sastoji od a) obezbeđivanje eukariotske ćelije,
b) dovođenje u kontakt navedene ćelije sa jedinjenjem formule (I),
c) merenja ekspresije miR-124 u rečenoj ćeliji i
d) izbora kandidata za koji se pretpostavlja da je efikasan u lečenju i/ili prevenciji upalne bolesti kada je nivo ekspresije miR-124 izmeren u koraku c) moduliran u odnosu na referentnu vrednost.
[0130] Prema otkriću “modulacija“ nivoa ekspresije uključuje i ushodnu i nishodnu regulaciju nivoa ekspresije. U smislu pronalaska, „modulacija“ nivoa ekspresije miR-124 se prvenstveno odnosi na ushodnu regulaciju.
[0131] Konkretno, u aspektu na koji nije traženo pravo, otkriće se odnosi na in vitro ili ex vivo postupak skrininga derivata hinolina, a posebno jedinjenja formule (I), za koje se pretpostavlja da je efikasno u lečenju i/ili prevenciji upalne bolesti, koji obuhvata najmanje jedan od koraka:
a) obezbeđivanje eukariotske ćelije,
b) dovođenje u kontakt navedene ćelije sa jedinjenjem formule (I),
c) merenja ekspresije miR-124 u rečenoj ćeliji i
1
d) izbor kandidata za koji se pretpostavlja da je efikasan u lečenju i/ili prevenciji upalne bolesti kada je nivo ekspresije miR-124 izmeren u koraku c) relativno povišen u odnosu na referentnu vrednost.
[0132] Prema jednom aspektu, prisustvo ili nivo ekspresije miR-124 se meri iz eukariotske ćelije iz biološkog uzorka i upoređuje se sa kontrolnom referentnom vrednošću.
[0133] Posebno, „biološki uzorak“ pogodan za pronalazak može biti biološka tečnost, kao što je krv, plazma ili serum, pljuvačka, intersticijska tečnost ili uzorak urina; uzorak ćelije, kao što je ćelijska kultura, ćelijska linija, linija matičnih ćelija ili uzorak koji sadrži mononuklearne ćelije periferne krvi (PBMC), biopsija tkiva, kao što je tkivo usne duplje, gastrointestinalno tkivo, koža, uzorak sluzokože usne duplje ili više uzoraka iz kliničkog ispitivanja. Uzorak može biti sirov uzorak ili može biti prečišćen u različitim stepenima pre skladištenja, obrade ili merenja.
[0134] Posebno, biološki uzorak pogodan za ovaj pronalazak je mononuklearna ćelija periferne krvi (PBMC) ili uzorak koji sadrži PBMC. Prema tome, biološki uzorak iz ovog otkrića može se obraditi iz periferne pune krvi korišćenjem uobičajenih tehnika u struci, kao što je centrifugiranje po gradijentu gustine, tačnije korišćenjem FICOLL™ gradijenta.
[0135] PBMC uzorci, posebno oni koji su obrađeni korišćenjem FICOLL™ gradijenta, podložni su uključivanju limfocita (T ćelije, B ćelije i NK ćelije), monocita i dendritskih ćelija. Kod ljudi, učestalost ovih populacija varira među pojedincima.
[0136] Prema tome, eukariotska ćelija uključuje, na neograničavajući način, bilo koji od tipova ćelija navedenih u prethodnom tekstu, kao što su limfociti (T ćelije, B ćelije i NK ćelije), monociti i dendritske ćelije.
[0137] Korak prikupljanja bioloških uzoraka za upotrebu u pronalasku i postupci pronalaska izvodi se pre realizacije pronalaska i nije korak primene ili postupka prema ovom otkriću.
[0138] Uzorci za procenu miRNK mogu se uzimati u bilo kom željenom intervalu. Na primer, uzorci se mogu uzimati na sat, dva puta dnevno, jednom dnevno, nedeljno, mesečno,
2
svakog drugog meseca, godišnje ili slično. Uzorak se može odmah testirati ili se može sačuvati za kasnije testiranje.
[0139] Uzorci se mogu prečistiti pre testiranja. U nekim realizacijama, miR-124 se može izolovati iz preostalog sadržaja ćelije pre testiranja. Dalje, molekuli miR-124 se mogu odvojiti od ostatka mRNK u uzorku, ako se želi. Na primer, miR-124 se može odvojiti od mRNK na osnovu razlika u veličini pre testiranja
[0140] Kontrolna referentna vrednost koja se koristi za poređenje izmerenog nivoa ekspresije miR-124 u testiranom biološkom uzorku dobija se iz kontrolnog uzorka.
[0141] Kontrolni uzorci se mogu uzeti iz različitih izvora. U nekim realizacijama, kontrolni uzorci se uzimaju od pacijenta pre lečenja ili pre prisustva bolesti (kao što je arhivski uzorak krvi). U drugim realizacijama, kontrolni uzorci se uzimaju iz skupa normalnih, ne-bolesnih članova populacije. U drugom aspektu, ćelijski test se može izvesti na kontrolnoj ćelijskoj kulturi, na primer, koja nije tretirana test jedinjenjem ili je tretirana referentnim jedinjenjem, kao što je DMSO, metilceluloza (MC) ili voda.
[0142] Prema jednoj realizaciji, za određivanje ili praćenje upalne bolesti kod pacijenta, kontrolna referentna vrednost se može dobiti iz izolovanog biološkog uzorka dobijenog od pojedinca ili grupe pojedinaca za koje se zna da ne pate od takvog stanja.
[0143] Prema drugoj realizaciji, za određivanje ili praćenje efikasnosti lečenja upalne bolesti kod pacijenta, kontrolna referentna vrednost se može dobiti iz izolovanog biološkog uzorka dobijenog od pojedinca ili grupe pojedinaca za koje se zna da ne pate od takve bolesti, stanja i/ili ne primanje terapije čiju efikasnost treba utvrditi ili pratiti. Alternativno, kontrolna referentna vrednost se može dobiti iz izolovanog biološkog uzorka dobijenog od pacijenta koji boluje od upalne bolesti i koji prima terapiju čiju efikasnost treba utvrditi ili pratiti, pri čemu se izolovani biološki uzorak uzima od pacijenta pre primene leka.
[0144] Stručnjaku su dostupne brojne metode za merenje prisustva ili nivoa ekspresije biomarkera miR-124.
[0145] Na primer, testovi ili nizovi nukleinske kiseline mogu se koristiti za procenu prisustva i/ili nivoa ekspresije miR-124 u uzorku.
[0146] Sekvenca miR-124 se može koristiti za pripremu odgovarajućeg nukleotida koji deluje kao komplementarna sonda ili prajmer koji će se koristiti u različitim testovima nukleinske kiseline za otkrivanje ekspresije ili prisustva biomarkera miR-124 u uzorku, kao što je, ali ne ograničeno na Northern blot i postupke zasnovane na PCR-u (npr. PCR reverzne transkripcije u realnom vremenu ili qRT-PCR). Postupci kao što je qRT-PCR mogu se koristiti za preciznu kvantifikaciju količine miRNK u uzorku.
[0147] Sens i anti-sens sonde ili prajmeri, prema ovom otkriću, mogu se dobiti korišćenjem svakog procesa poznatog stručnjaku u ovoj oblasti, posebno onih koji su opisali Sambrook i sar. (Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 3rd ED., 2001, Cold Spring Harbour, N. Y.).
[0148] Postupci koji se odnose na detekciju i kvantifikaciju RNK ili DNK su dobro poznati u struci. Čovek iz struke može se, na primer, pozvati na Wang i sar. (1989, Proc Natl Acad Sci USA, tom 86 : 917-921), de Wong i sar. (2005, Bio Techniques, tom 39 (1): 75-85), de Nolan i sar. (2006, Nat Protoc, tom 1(3) : 1559-1582) et de Klinck i sar. (2008, Cancer Research, tom 68 : 657-663) ili i na opšti pregled objavljen od strane Bustin (2000, JouRNKl of Molecular Endocrinology, tom 25 : 169-193).
[0149] Izolovana sonda nukleinske kiseline pogodna za merenje prisustva ili nivoa ekspresije miR-124 je sonda nukleinske kiseline koja može da se specifično hibridizuje u miR-124, na primer u prekursor ili zreli miR-124.
[0150] Takva sonda nukleinske kiseline može da se sastoji od 18 do 30 nukleotida, posebno od 20 do 27, poželjno od 20 do 25, poželjno od 20, 22 ili 25, a poželjnije od oko 25 nukleotida. Kao što je prethodno navedeno, takve sonde nukleinske kiseline mogu biti pripremljene prema bilo kom poznatom postupku u struci.
[0151] Postupci i formule su dobro poznate u struci za predviđanje optimalne temperature hibridizacije za datu sondu i dati cilj.
4
[0152] Prema tome, stručnjak u ovoj oblasti može lako da izračuna optimalnu temperaturu hibridizacije na osnovu skupa sondi, na datoj ciljnoj sekvenci i uz posebne uslove hibridizacije.
[0153] Prednost je da je optimalna temperatura hibridizacije navedenih sondi između 40°C i 60°C, a posebno između 45°C i 55°C, a poželjno je oko 48°C.
[0154] Kao primeri pufera korisnih za hibridizaciju sonde nukleinske kiseline iz otkrića u biomarker iz otkrića, može se pomenuti, kao pufer za hibridizaciju, pufer koji sadrži 100 mM MES, 1 M [Na+], 20 mM EDTA, Tween 0,01% -20, kao nestrogi pufer za pranje, pufer koji sadrži 6X SSPE, 0,01% Tween-20, i kao jak pufer za pranje koji sadrži 100 mM MES, 0,1 M [Na+], 0,01% Tween-20.
[0155] U jednoj realizaciji, postupak za detekciju i kvantifikaciju nukleinskih kiselina može biti postupak zasnovan na fluorescentnoj boji, pri čemu se koncentracija nukleinske kiseline procenjuje merenjem intenziteta fluorescencije liganada, kao što su boje, koji se vezuju za navedene nukleinske kiseline. Fluorescentne boje su dobro poznate u struci.
[0156] Alternativno, navedena nukleinska kiselina se može kvantifikovati korišćenjem spektrofotometrije.
[0157] U drugoj realizaciji, postupak za detekciju i kvantifikaciju nukleinskih kiselina može biti postupak zasnovan na hibridizaciji. Navedeni postupci zasnovani na hibridizaciji mogu uključivati PCR i kvantitativne-PCR tehnike (qRT-PCR ili q-PCR) ili tehnike zasnovane na reverznoj transkriptazi/polimerazi. Prednost je u tome što navedeni postupak može da sadrži fazu sekvencioniranja ili da se sa njim dalje kombinuje.
[0158] Ovi postupci mogu da obuhvataju (i) korak ekstrakcije ćelijskih mRNK, (ii) korak reverzne transkripcije mRNK u DNK korišćenjem reverzne transkriptaze i (iii) korak amplifikacije DNK iz DNK dobijene u prethodnom koraku. Obično se amplifikuju sledeće nukleinske kiseline počevši od istog uzorka: (a) DNK dobijena nakon koraka reverzne transkripcije ciljne mRNK i (b) DNK ili mnoštvo DNK dobijenih nakon reverzne transkripcije mRNK koji se konstitutivno i stalno eksprimiraju u ćelijama („geni za održavanje“), kao što su RNK kodirani genima MRPL19, PUM1 i GADPH.
[0159] Amplifikovana DNK se može kvantifikovati, nakon odvajanja elektroforezom, i merenja DNK traka. Rezultati koji se odnose na ciljne mRNK(e) su izraženi kao relativne jedinice u poređenju sa mRNK kodiranim genima za „održavanje“. U nekim realizacijama, korak razdvajanja amplificiranih DNK se postiže nakon elektroforeze u agaroznom gelu, a zatim bojenja DNK traka etidijum bromidom pre denzitometrijske kvantifikacije DNK sadržane u tim migracionim trakama. U drugim realizacijama, može se koristiti mikrokanalni uređaj u kome se amplifikovana DNK odvaja kapilarnom elektroforezom, pre kvantifikacije emitovanog signala korišćenjem laserskog zraka. Takav uređaj može biti LabChip® uređaj, na primer iz serije «GX», komercijalizovan od strane kompanije Caliper LifeSciences (Hopkinton, MA, SAD).
[0160] Kvantitativni rezultati dobijeni primenom qRT-PCR ponekad mogu biti informativniji od kvalitativnih podataka i mogu pojednostaviti standardizaciju testa i upravljanje kvalitetom. Stoga, u nekim realizacijama, testovi zasnovani na qRT-PCR mogu biti korisni za merenje nivoa miRNK u ćelijskim testovima. qRT-PCR postupak takođe može biti koristan u praćenju terapije pacijenata. Komercijalno dostupne metode zasnovane na qRT-PCR (npr. TaqmanR Array™)
[0161] Za određivanje ekspresije ili prisustva miRNK u uzorku može se koristiti bilo koja pogodna platforma za ispitivanje. Na primer, test može biti u obliku merne šipke, membrane, čipa, diska, test trake, filtera, mikrosfere, stakalca, ploče sa više otvora ili optičkog vlakna. Sistem za analizu može imati čvrstu podlogu na koju je vezan oligonukleotid koji korespondira sa miRNK. Čvrsti nosač može da sadrži, na primer, plastiku, silicijum, metal, smolu, staklo, membranu, česticu, talog, gel, polimer, list, sferu, polisaharid, kapilaru, film ploču ili slajd. Komponente testa se mogu pripremiti i upakovati zajedno kao komplet za detekciju miRNK.
[0162] U nekim realizacijama, niz oligonukleotida za ispitivanje derivata hinolina ili aktivnosti leka kandidata u biološkom uzorku može se pripremiti ili kupiti. Jedan niz obično sadrži čvrstu podlogu i najmanje jedan oligonukleotid koji dolazi u kontakt sa nosačem, pri čemu oligonukleotid odgovara najmanje jednom delu miR-124 biomarkera. U nekim realizacijama, taj deo biomarkera miR-124 sadrži najmanje 5, 10, 15, 20 ili više baza.
[0163] Prema jednoj realizaciji, prisustvo ili ekspresija miR-124 se može ispitati u kombinaciji sa drugim miRNK koji se takođe koriste kao biomarkeri. U takvoj varijanti, neki niz se može koristiti za procenu ekspresije ili prisustva višestrukih miRNK u uzorku, uključujući miRNK-124. Uopšteno, metoda obuhvata sledeće korake: a) dovođenje u kontakt uzorka sa nizom koji sadrži set sonde pod uslovima dovoljnim da dođe do specifičnog vezivanja; i b) ispitivanje niza da bi se otkrilo prisustvo bilo koje detektabilnog obeležja, čime se procenjuje količina odgovarajućih ciljnih miRNK u uzorku. Upotreba ekspresionog niza omogućava dobijanje ekspresionog profila miRNK za dati uzorak.
[0164] Postupci pripreme testova ili nizova za ispitivanje miRNK su dobro poznate u struci i nije potrebno da se ovde detaljnije objašnjavaju.
[0165] Nizovi nukleinskih kiselina se mogu koristiti za otkrivanje prisustva ili diferencijalne ekspresije miRNK u biološkim uzorcima. Polinukleotidni nizovi (kao što su DNK ili RNK nizovi) tipično obuhvataju regione polinukleotida obično različite sekvence („agensi za hvatanje“) raspoređenih u unapred određenoj konfiguraciji na nosaču. Ti nizovi su „adresabilni” po tome što ovi regioni (ponekad se pominju kao „karakteristike niza”) imaju različite unapred određene lokacije („adrese”) na nosaču niza. Region (tj. „karakteristika“ ili „tačka“ niza) na određenoj unapred određenoj lokaciji (tj. „adresi“) u nizu će otkriti neki konkretni cilj na miRNK. Nizovi polinukleotida se obično proizvode na planarnim nosačima bilo deponovanjem prethodno dobijenih polinukleotida na nosač na način specifičan za dato mesto, bilo in situ sintezom polinukleotida na nosaču specifičnoj za mesto. Nizovi za detekciju ekspresije miRNK mogu se proizvesti deponovanjem (npr. kontaktnim ili mlaznim postupcima ili fotolitografijom) bilo prekursorskih jedinica (kao što su nukleotidni ili aminokiselinski monomeri) ili prethodno sintetizovanog agensa za hvatanje. Nakon nanošenja agensa za hvatanje polinukleotida na nosač, nosač se obično obrađuje (npr. pere i blokira) i skladišti do upotrebe.
[0166] Niz za detekciju miRNK ekspresije ima najmanje dve, tri, četiri ili pet različitih predmetnih sondi. Međutim, u određenim realizacijama, predmetni niz može uključivati set sondi koji ima najmanje 10, najmanje 20, najmanje 50, najmanje 100, najmanje 200, najmanje 500 ili najmanje 1.000 ili više sondi koje mogu otkriti odgovarajući broj miRNK. U nekim realizacijama, predmetni nizovi mogu uključivati sonde za otkrivanje najmanje jednog dela ili svih identifikovanih miRNK organizma, ili mogu uključivati ortologne sonde iz više organizama.
[0167] Niz nukleinskih kiselina može biti u kontaktu sa uzorkom ili obeleženim uzorkom koji sadrži miRNK analite pod uslovima koji podstiču specifično vezivanje miRNK u uzorku za jedan ili više agenasa za hvatanje prisutnih u datom nizu i na taj način pokazati uočeni obrazac vezivanja. Ovaj obrazac vezivanja se može otkriti nakon ispitivanja niza. Na primer, ciljne miRNK u uzorku mogu biti obeležene odgovarajućom obeležjem (kao što je fluorescentno jedinjenje) i ta obeležja se zatim mogu tačno videti (na primer, posmatranjem fluorescentnog uzorka) na nizu nakon izlaganja tog niza uzorku. Uočeni obrazac vezivanja može ukazivati na prisustvo i/ili koncentraciju jedne ili više komponenti miRNK u uzorku.
[0168] Obeležavanje miRNK se može izvesti korišćenjem metoda dobro poznatih u struci, kao što je korišćenje DNK ligaze, terminalne transferaze, ili obeležavanjem RNK kičme, itd. U nekim realizacijama, miRNK mogu biti obeležene fluorescentnom oznakom. Primeri fluorescentnih boja uključuju, ali nisu ograničene na ksanten boje, fluoresceinske boje, rodaminske boje, fluorescein izotiocijanat (FITC), 6 karboksifluorescein (FAM), 6 karboksi-2 1,4 1,7',4,7-heksahlorofluorescein (HEX) , 6 karboksi 4', 5' dihloro 2', 7' dimetoksifluorescein (JOE ili J), N,N,N',N' tetrametil 6 karboksirodamin (TAMRA ili T), 6 karboksi X rodamin (ROKS ili R), 5 karboksirodamin 6G (R6G5 ili G5), 6 karboksirodamin 6G (R6G6 ili G6) i rodamin 110; cijaninske boje, npr. Cy3, Cy5 i Cy7 boje; Alexa boje, npr. Alexa-fluor-555; kumarin, dietilaminokumarin, umbeliferon; benzimidne boje, npr. Hoechst 33258; fenantridinske boje, npr. Texas Red; etidijum boje; akridinske boje; karbazolne boje; fenoksazinske boje; porfirinske boje; polimetinske boje, BODIPY boje, hinolinske boje, piren, fluorescein hlorotriazinil, R110, eozin, JOE, R6G, tetrametilrodamin, lisamin, ROX, nafto fluorescein i slične.
[0169] U nekim realizacijama, niz oligonukleotida za procenu imunomodulatorne aktivnosti može se pripremiti ili kupiti, na primer od kompanije Affimetrix. Takav niz može da sadrži čvrsti nosač i veći broj oligonukleotida koji dolaze u kontakt sa nosačem. Oligonukleotidi mogu biti prisutni na specifičnim, adresabilnim lokacijama na čvrstoj podlozi; svaka odgovara najmanje jednom delu miRNK sekvenci koje mogu biti diferencijalno eksprimirane nakon tretmana derivata hinolina ili kandidata za lek u ćeliji ili pacijentu. MiRNK sekvence sadrže najmanje jednu miR-124 sekvencu.
[0170] Kada se niz koristi za procenu miRNK, tipičan postupak može da sadrži korake 1) dobijanja niza koji sadrži predmetne sonde vezane za površinu; 2) hibridizacija populacije miRNK u sonde vezane za površinu pod uslovima dovoljnim da obezbede specifično vezivanje (3) ispiranja posle hibridizacije radi uklanjanja nukleinskih kiselina koje nisu vezane u hibridizaciji; i (4) detekcija hibridizovanih miRNK. Reagensi koji se koriste u svakom od ovih koraka i uslovi za njihovu upotrebu mogu se razlikovati u zavisnosti od konkretne primene.
[0171] Hibridizacija se može izvesti pod pogodnim uslovima hibridizacije, koji mogu varirati u strogosti po želji. Tipični uslovi su dovoljni da se proizvedu kompleksi sonde/cilja na površini niza između komplementarnih vezujućih članova, tj. između površinski vezanih predmetnih sondi i komplementarnih miRNK u uzorku. U određenim realizacijama, mogu se primeniti strogi uslovi hibridizacije. Hibridizacija se obično izvodi pod strogim uslovima hibridizacije. Standardne tehnike hibridizacije koje su dobro poznate u struci (npr. pod uslovima dovoljnim da obezbede specifično vezivanje ciljnih miRNK u uzorku za sonde u nizu) se koriste za hibridizaciju uzorka sa nizom nukleinskih kiselina. Izbor odgovarajućih uslova, uključujući temperaturu, koncentraciju soli, koncentraciju polinukleotida, vreme hibridizacije, strogost uslova pranja i slično, zavisiće od eksperimentalnog dizajna, uključujući izvor uzorka, identitet agenasa za hvatanje, očekivani stepen komplementarnosti, itd., i može se odrediti kao stvar rutinskog eksperimentisanja za one sa uobičajenim veštinama u ovoj oblasti. Uopšteno govoreći, „strogi uslovi hibridizacije“ i „strogi uslovi ispiranja kod hibridizacije“ u kontekstu hibridizacije nukleinske kiseline, obično su zavisni od sekvence i različiti su pod različitim eksperimentalnim uslovima. Hibridizacija se može obaviti u periodu od oko 12 do oko 24 sata. Strogi uslovi pranja mogu uticati na stepen do kojeg se miRNK sekvence specifično hibridizuju sa komplementarnim agensima za hvatanje. Oni sa uobičajenim veštinama će lako prepoznati da se alternativni, ali uporedivi uslovi hibridizacije i pranja mogu koristiti za obezbeđivanje uslova slične strogosti.
[0172] Za ilustraciju, u jednoj varijanti, eksperimenti profilisanja miRNK ekspresije mogu biti sprovedeni korišćenjem Affimetrix Genechip miRNK Array 2.0 i prateći protokole opisane u uputstvu za upotrebu.
[0173] U jednoj konkretnoj realizaciji, navedena hibridizacija može da se izvede korišćenjem GeneChip® kompleta za hibridizaciju, pranje i bojenje (Affimetrix Ref. #900720). Povoljno je da se navedena hibridizacija izvodi prema protokolima proizvođača.
[0174] Posle postupka miRNK hibridizacije, polinukleotidi vezani na površini niza se obično ispiraju da bi se uklonile nevezane nukleinske kiseline. Pranje se može obaviti korišćenjem bilo kog prikladnog protokola pranja, gde su uslovi pranja tipično strogi, kao što je gore opisano. Na primer, korak pranja može da se izvede korišćenjem pufera za pranje koje prodaje kompanija Affimetrix (Ref. #900721 i #900722). Hibridizacija ciljnih miRNK sa sondama se zatim detektuje korišćenjem standardnih tehnika čitanja niza. Čitanje rezultujućeg hibridizovanog niza može se postići, na primer, osvetljavanjem niza i čitanjem lokacije i intenziteta rezultujuće fluorescencije na svakoj osobini niza da bi se detektovali kompleksi za vezivanje miRNK/sonde.
[0175] Modulacija prisustva ili nivoa ekspresije miR-124 u odnosu na kontrolnu referencu, kao što je kontrolna referentna vrednost od zdravog donora, može ukazivati na upalnu bolest. Posebno smanjeno ili potisnuto prisustvo, ili smanjeni nivo ekspresije, pomenute miRNK u odnosu na kontrolnu referentnu vrednost (tj. kontrolnu referentnu vrednost od zdravog donora) može ukazati na upalnu bolest.
[0176] Prema tome, u jednoj realizaciji, upotreba ovog otkrića može da obuhvata dobijanje ili merenje nivoa ekspresije miR-124 u izolovanom biološkom uzorku i poređenje navedenog izmerenog nivoa ekspresije sa kontrolnom referentnom vrednošću. Posmatranje modulacije navedenog izmerenog nivoa u odnosu na navedenu kontrolnu referentnu vrednost može biti indikativno za upalnu bolest ili za lečenje navedene upalne bolesti.
[0177] Povećan ili ushodno regulisan nivo ekspresije miR-124 u prisustvu leka kandidata, u odnosu na kontrolnu referentnu vrednost (tj., bez terapije lekom kandidatom, kao što je derivat hinolina) ukazuje na to se pretpostavlja da je lek kandidat efikasan u lečenju i/ili prevenciji upalne bolesti.
[0178] Shodno tome, kada je miR-124 iz uzorka „povećan“ ili „ushodno regulisan“ u biološkom uzorku, u poređenju sa kontrolnom referentnom vrednošću, ovo povećanje može biti od oko 5%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 90%, 100%, 200%, 300%, 500%,
4
1,000%, 5,000% ili više od uporedne kontrolne referentne vrednosti (tj., bez terapije derivatom hinolina).
[0179] Konkretno, izmereni nivo ekspresije miR-124 može biti najmanje dvostruk, poželjno najmanje četvorostruk, poželjno najmanje šestostruk, poželjno najmanje osmostruk, a poželjnije najmanje desetostruko povećan u odnosu na navedenu kontrolnu referentnu vrednost.
[0180] U skladu sa poželjnom realizacijom, izmereni nivo ekspresije miR-124 može biti najmanje 100 puta viši u odnosu na navedenu kontrolnu referentnu vrednost.
[0181] U skladu sa jednom realizacijom, upotreba ili postupak u skladu sa otkrićem se može primeniti za optimizaciju režima doziranja pacijenta. Pacijenti mogu različito reagovati na dati derivat hinolina, posebno na jedinjenje formule (I), u zavisnosti od faktora kao što su starost, zdravlje, genetska pozadina, prisustvo drugih komplikacija, napredovanje bolesti i istovremena primena drugih lekova. Može biti korisno koristiti miR-124 biomarker za procenu i optimizaciju režima doziranja, kao što je veličina doze i/ili raspored doze, derivata hinolina kod pacijenta. S tim u vezi, biomarker zasnovan na miR-124 se takođe može koristiti za praćenje i prilagođavanje efikasnosti lečenja pojedinačnih pacijenata tokom vremena. Biomarker se može koristiti za prikupljanje informacija potrebnih za prilagođavanje terapije pacijenta, povećanje ili smanjenje doze agensa po potrebi. Na primer, pacijent koji prima derivat hinolina može se testirati korišćenjem biomarkera zasnovanog na miR-124 da bi se videlo da li doza postaje efikasna ili treba da se primeni agresivniji plan lečenja. Količina primenjenog leka, vreme primene, učestalost primene, trajanje primene mogu se zatim prilagoditi u zavisnosti od rezultata merenja biomarkera miR-124.
[0182] Biomarker miR-124 se takođe može koristiti za praćenje komplijanse pacijenta tokom individualnih režima lečenja ili tokom kliničkih ispitivanja. Ona se može pratiti u određenim intervalima kako bi se osiguralo da pacijenti uključeni u ispitivanje uzimaju lekove prema uputstvima. Štaviše, pacijent koji prima derivat hinolina može se testirati korišćenjem biomarkera miR-124 da bi se utvrdilo da li se pacijent pridržava režima doziranja u okviru plana lečenja. Povećani nivo ekspresije biomarkera u poređenju sa netretiranim kontrolnim uzorkom ukazuje na usklađenost sa protokolom.
[0183] Prema tome i bez odstupanja od područja primene pronalaska, kontrolna referentna vrednost može se dobiti od eukariotske ćelije koja je dobijena iz: biološkog uzorka zdravog donora i/ili donora koji nije prethodno lečen datim lekom kandidatom, kao što je dati derivat hinolina.
[0184] Biomarker ovog otkrića se može primeniti da proceni i prati efikasnost derivata hinolina, posebno jedinjenja formule (I). Shodno tome, prisustvo ili nivo ekspresije miR-124 se može meriti u izolovanom biološkom uzorku dobijenom od pacijenta koji je prethodno lečen derivatom hinolina, kao što je jedinjenje formule (I).
[0185] Zatim se izmereno prisustvo ili nivo ekspresije miR-124 u izolovanom biološkom uzorku može uporediti sa kontrolnom referentnom vrednošću.
[0186] Kada se primeti povećanje izmerenog nivoa ekspresije miR-124 u odnosu na kontrolnu referentnu vrednost, tada ta izmerena vrednost ukazuje na aktivnost derivata hinolina, a posebno jedinjenja formule (I).
[0187] U drugoj realizaciji, kada se primeti povećanje izmerenog nivoa ekspresije miR-124 u odnosu na kontrolnu referentnu vrednost, tada ta izmerena vrednost može ukazivati na reakciju pacijenta na terapiju navedenim derivatima hinolina, posebno pomenutim jedinjenjima formule (I).
[0188] U drugoj realizaciji, kada se primeti povećanje izmerenog nivoa u odnosu na kontrolnu referentnu vrednost, tada ta izmerena vrednost ukazuje na efikasnost terapije navedenim derivatima hinolina, posebno pomenutim jedinjenjima formule (I).
[0189] U drugoj realizaciji, kada se primeti povećanje izmerenog nivoa ekspresije miR-124 u odnosu na kontrolnu referentnu vrednost, tada ta mera ukazuje na terapijsku efikasnost navedenih derivata hinolina, posebno navedenih jedinjenja formule (I), kao terapijsko sredstvo za prevenciju i/ili lečenje upalne bolesti.
[0190] U drugoj realizaciji, kada se primeti povećanje izmerenog nivoa ekspresije miR-124 u odnosu na kontrolnu referentnu vrednost, tada ta mera ukazuje na terapijsku efikasnost određenog režima doziranja navedenih derivata hinolina, posebno navedenih jedinjenja formule (I), kao terapijsko sredstvo za prevenciju i/ili lečenje upalne bolesti, ako je kontrolna referentna vrednost merena iz biološkog uzorka koji je izveden od pacijenta lečenog drugim režimom doziranja.
[0191] Hemijske strukture i spektroskopski podaci nekih jedinjenja formule (I) ovog pronalaska su ilustrovani u Tabeli I u nastavku i Tabeli II (videti primere).
Tabela I
4
4
4
[0192] Primeri koji su ovde dati su namenjeni da budu samo primeri, a stručnjaci iz ove oblasti prepoznaće, ili će moći da utvrde koristeći samo rutinsko eksperimentisanje, brojne ekvivalente određenih jedinjenja, materijala i procedura. Smatra se da su svi takvi ekvivalenti unutar obima pronalaska kada su obuhvaćeni priloženim zahtevima.
PRIMERI
Primer 1: 8-hloro-N<4>-(3-(piperidin-1-il)propil)-N<2>-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)hinolin-2,4-diamin; jedinjenje (9)
[0193] o-hloroanilin (5,3 ml, 50 mmol, 1 ekv.) je stavljen u piridin (8 ml). Zatim je dodat dietil malonat (11,4 ml, 75 mmol, 1,5 ekv.) i reakciona smeša je mešana na 130°C tokom 14 sati. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i dobijeni ostatak je razblažen dihlorometanom. Organska faza je zatim isprana zasićenim vodenim rastvorom Na2C03, osušena preko MgS04, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela da bi se dobio etil 2-[(2-hlorofenil)karbamoil]acetat (2,7 g, 22%).
[0194]<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9.74 (br s, 1H), 8.38 (dd, J = 8.1, 1.5 Hz, 1H), 7.40 (dd, J = 8.1, 1.5 Hz, 1H), 7.28 (td, J = 8.1, 1.5 Hz, 1H), 7.07 (td, J = 8.1, 1.5 Hz, 1H), 4.30 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.54 (s, 2H), 1.34 (t, J = 7.1 Hz, 3H).
[0195] Etil 2-[(2-hlorofenil)karbamoil]acetat (2,4 g, 9,93 mmol, 1 ekv.) je stavljen u mešavinu THF (9,9 ml)/voda (3,8 ml). Zatim je dodat natrijum hidroksid (477 mg, 11,92 mmol, 1,2 ekv.) i reakciona smeša je mešana 14 sati na sobnoj temperaturi. Potom je dodata koncentrovana hlorovodonična kiselina dok se ne postigne pH 2 i dobijeni rastvor je ekstrahovan etil acetatom. Organska faza je zatim osušena preko MgS04, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobila 2-[(2-hlorofenil)karbamoil]sirćetna kiselina (2 g, 94%).
[0196]<1>H NMR (300 MHz, MeOD) δ 7.98 (dd, J = 8.1, 1.5 Hz, 1H), 7.45 (dd, J = 8.1, 1.5 Hz, 1H), 7.30 (td, J = 8.1, 1.5 Hz, 1H), 7.16 (td, J = 8.1, 1.5 Hz, 1H), 3.54 (s, 2H).
[0197] Reakciona smeša 2-[(2-hlorofenil)karbamoil]sirćetne kiseline (3,7 g, 17,32 mmol, 1 ekv.) u polifosfornoj kiselini (17 g, 173,2 mmol, 10 ekv.) je mešana na 130°C tokom 14 sati. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, a zatim je polako dodat 2M vodeni rastvor natrijum hidroksida. Dobijeni precipitat je filtriran, ispran vodom i osušen pod sniženim pritiskom u eksikatoru da bi se dobio 8-hlorokinolin-2,4-diol (3 g, 89%).
[0198]<1>H NMR (300 MHz, DMSO) δ 11.66 (br s, 1H), 10.40 (br s, 1H), 7.78 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.17 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 5.81 (s, 1H).
[0199] MS (ESI) [M-H]<->= 194.1
[0200] Reakciona smeša 8-hlorokinolin-2,4-diola (1,5 g, 7,67 mmol, 1 ekv.) u POCl3(7,1 ml, 76,7 mmol, 10 ekv.) je mešana na 100°C tokom 2 sata. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, a zatim je polako dodavana voda. Dobijeni precipitat je filtriran, ispran vodom i osušen pod sniženim pritiskom u eksikatoru da bi se dobio 2,4,8-trihlorokinolin (1,6 g, 90%).
[0201]<1>H NMR (300 MHz, DMSO) δ 8.21 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.14 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.78 (t, J = 8.4 Hz, 1H).
1
[0202] Reakciona smeša 2,4,8-trihlorokinolina (1 g, 4,30 mmol, 1 ekv.), 2-amino-4-trifluorometilpiridina (768 mg, 4,73 mmol, 1,1 ekv.), Pd(OAc)2(19 mg, 0,09 mmol, 2 mol%), XantPhos (50 mg, 0,09 mmol, 2 mol%) i Cs2CO3(3,9 g, 12,04 mmol, 2,8 ekv.) u t-BuOH (17,2 ml) je zagrevana na 90°C tokom 2 dana. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i dobijeni ostatak je razblažen etil acetatom. Organska faza je zatim isprana vodom, osušena preko MgS04, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela da bi se dobio (4,8-dihloro-hinolin-2-il)-(4-trifluorometil-piridin-2-il)-amin (13) (588 mg, 38%) .
[0203]<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9.40 (s, 1H), 8.46 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 8.06 (dd, J = 8.1, 1.5 Hz, 1H), 7.86 (dd, J = 8.1, 1.5 Hz, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.40 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 7.25 (s, 1H), 7.22 (d, J = 5.4 Hz, 1H).
[0204] MS (ESI) [M+H]<+>= 358.1
[0205] Reakciona smeša (4,8-dihloro-hinolin-2-il)-(4-trifluorometil-piridin-2-il)-amina (200 mg, 0,54 mmol, 1 ekv.), 3-(piperidin-1- il)propan-1-amina (94 µl, 0,59 mmol, 1,1 ekv.), CuI (10 mg, 0,05 mmol, 0,1 ekv.), L-prolina (9 mg, 0,11 mmol, 0,2 ekv.), kalijum karbonata (148 mg, 1,01 mmol, 2 ekv.) u DMSO (1,4 ml) je mešana na 90°C tokom 24 sata u inertnoj atmosferi argona. Reakciona smeša je zatim podeljena između etil acetata i vode. Nakon dekantacije, vodena faza je dalje ekstrahovana dihlorometanom. Organske faze su sakupljene, osušene preko MgS04, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela da bi se dobio 8-hloro-N<4>-(3-piperidin-1-ilpropil)-N<2>-(4-trifluorometil-piridin-2-il)-hinolin-2,4 -diamin (9) (48 mg, 7%).
[0206]<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9.55 (s, 1H), 8.40 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.77 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.18 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.10 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 5.88 (s, 1H), 3.41 - 3.31 (m, 2H), 2.59 (t, J = 5.4 Hz, 2H), 2.57 - 2.43 (m, 4H), 2.01 - 1.92 (m, 2H), 1.79 - 1.70 (m, 4H), 1.65 - 1.54 (m, 2H).
[0207]<13>C NMR (75 MHz, CDCl3) δ 154.9, 154.0, 152.3, 148.5, 144.2, 132.2, 129.7, 121.7, 119.7, 118.4, 112.4, 109.8, 88.0, 59.6, 55.1, 44.9, 26.1, 24.4, 23.4.
2
[0208] MS (ESI) [M+H]<+>= 464.2
Primer 2: 2-N-(8-hlorohinolin-2-il)-5-N-[3-(4-metilpiperazin-1-il)propil]-4-(trifluorometil)piridin-2,5-diamin; jedinjenje (22)
[0209] Reakciona smeša 2,8-dihlorohinolina (198 mg, 1,0 mmol, 1 ekv.), 5-bromo-4-(trifluorometil)piridin-2-amina (241 mg, 1,0 mmol, 1 ekv.), Pd(OAc)2(4,5 mg, 0,02 mmol, 2 mol%), XantPhos (11,6 mg, 0,02 mmol, 2 mol%) i Cs2CO3(782 mg, 2,4 mmol, 2,4 ekv.) u t-BuOH (4 ml) je zagrevana u mikrotalasnom reaktoru na 120°C u trajanju od 70 minuta.
Nakon hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i dobijeni ostatak je razblažen etil acetatom. Organska faza je zatim isprana vodom, osušena preko MgS04, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela da bi se dobio N-[5-bromo-4-(trifluorometil)piridin-2-il]-8-hlorohinolin-2-amin (21) (300 mg, 75%).
[0210]<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9.71 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.06 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.81 (m, 2H), 7.65 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.33 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.00 (d, J = 9.0 Hz, 1H).
[0211] MS (ESI) [M+H]<+>= 403.7
[0212] Reakciona smeša N-[5-bromo-4-(trifluorometil)piridin-2-il]-8-hlorohinolin-2-amina (101 mg, 0,250 mmol, 1 ekv.), 3-(4-metilpiperazin-1 -il)propan-1-amina (64 µl, 0,375 mmol, 1,5 ekv.), Pd2(dba)3(28 mg, 0,030 mmol, 12 mol%), XantPhos (43,4 mg, 0,075 mmol, 30 mol%) i natrijum tert-butoksida (72 mg, 0,75 mmol, 3 ekv.) u mešavini dioksana (1 ml / DMF (0,1 ml) je zagrevana u mikrotalasnom reaktoru na 120°C tokom 70 minuta. Nakon hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i dobijeni ostatak je razblažen etil acetatom. Organska faza je zatim isprana vodom, osušena preko MgS04, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela da bi se dobio 2-N-(8-hlorohinolin-2-il)-5-N-[3-(4-metilpiperazin-1-il)propil]-4-(trifluorometil )piridin-2,5-diamin (22) (52 mg, 43%).
[0213]<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9.39 (s, 1H), 7.97 - 7.86 (m, 2H), 7.82 (br s, 1H), 7.73 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.23 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 6.94 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 3.34 - 3.22 (m, 2H), 2.80 - 2.44 (m, 10H), 2.37 (s, 3H), 1.87 (t, J = 6.0 Hz, 2H).
[0214] MS (ESI) [M+H]<+>= 479.0
Primer 3: 8-hloro-N-metil-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2-amin; jedinjenje (28)
[0215] 8-hloro-N-[4-(trifluorometoksi)fenil]hinolin-2-amin, tj. jedinjenje (24), sintetizovano je kao u WO2010/143169, u primeru 5.
[0216] Reakciona smeša 8-hloro-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2-amina (24) (340 mg, 1,0 mmol, 1 ekv.), kalijum tert-butoksida (124 mg, 1,1 mmol, 1,1) ekv.), i jodometana (69 µl, 1,1 mmol, 1,1 ekv.), u DMF (2 ml) je mešana na sobnoj temperaturi 4 sata. Reakciona smeša je zatim podeljena između etil acetata i vode. Organske faze su sakupljene, osušene preko MgS04, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela da bi se dobio 8-hloro-N-metil-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2-amin (28) (247 mg, 70%).
[0217]<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.69 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 7.49 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.36 - 7.25 (m, 4H), 7.14 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 6.75 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 3.69 (s, 3H).
[0218] MS (ESI) [M+H]<+>= 353.1
Primer 4: 8-hloro-N-(3-(piperidin-1-il)propil)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2-amin; jedinjenje (30)
[0219] 8-hloro-N-[4-(trifluorometoksi)fenil]hinolin-2-amin, tj. jedinjenje (24), sintetizovano je kao u WO2010/143169, u primeru 5.
[0220] Reakciona smeša 8-hloro-N-[4-(trifluorometoksi)fenil]hinolin-2-amina (24) (500 mg, 1,47 mmol, 1 ekv.) i NaH (177 mg, 4,43 mmol, 3 ekv.) u anhidrovanom DMF (2 ml) je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta. Reakciona smeša 1-(3-hloropropil)piperidin hidrohlorida (292 mg, 1,47 mmol, 1 ekv.), KI (245 mg, 1,47 mmol, 1 ekv.) i Et3N (205 µl, 1,47 mmol, 1 ekv.) u anhidrovanom DMF (5 ml) je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta u inertnoj atmosferi argona. Aktivirani hinolin je zatim dodat u lanac piperidina i dobijena reakciona smeša je mešana na 90°C tokom 4 sata. Reakciona smeša je zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom i dobijeni ostatak je razblažen etil acetatom. Organska faza je isprana zasićenim vodenim rastvorom slanog rastvora, osušena preko MgS04, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela da bi se dobio 8-hloro-N-(3-(piperidin-1-il)propil)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2-amin (30) (472 mg, 69%).
4
[0221]<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.73 - 7.63 (m, 2H), 7.48 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.39 -7.26 (m, 4H), 7.13 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 6.67 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 4.26 - 4.14 (m, 2H), 2.52 -2.33 (m, 6H), 2.11 - 1.97 (m, 2H), 1.64 - 1.52 (m, 4H), 1.45 (s, 2H).
[0222]<13>C NMR (75 MHz, CDCl3) δ 156.5, 147.3, 144.1, 143.5, 137.1, 130.8, 129.7, 129.1, 126.4, 124.7, 122.7, 122.4, 118.9 (t, J = 222 Hz), 112.5, 56.9, 54.5, 49.6, 25.6, 24.6, 24.3.
[0223] MS (ESI) [M+H]<+>= 464.4
Primer 5: 8-hloro-2-((4-(trifluorometil)piridin-2-il)oksi)hinolin; jedinjenje (46)
[0224] Reakciona smeša 2,8-dihlorohinolina (79 mg, 0,4 mmol, 1 ekv.), 2-hidroksi-4-(trifluorometil)piridina (65 mg, 0,4 mmol, 1 ekv.), CuI (76 mg, 0,4 mmol), 1 ekv.) i Cs2CO3(391 mg, 1,2 mmol, 3 ekv.) u DMF (6 ml) je zagrevana u mikrotalasnom reaktoru na 150°C tokom 50 minuta. Nakon hlađenja do sobne temperature, u reakcionu smešu je dodata voda. Nerastvorene čvrste materije su filtrirane kroz celit i dobijeni filtrat je dva puta ekstrahovan etil acetatom. Organska faza je isprana vodom i zasićenim vodenim rastvorom slanog rastvora, osušena preko MgS04, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela da bi se dobio 8-hloro-2-{[4-(trifluorometil)piridin-2-il]oksi}hinolin (46) (68 mg, 52%).
[0225]<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.40 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 8.34 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 8.18 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.90 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.85 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.56 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.53 (d, J = 7.9 Hz, 1H).
[0226]<13>C NMR (75 MHz, CDCl3) δ 161.6, 151.2, 143.4, 142.3, 138.7, 138.2, 137.4, 133.4, 130.6, 129.1, 127.6, 126.7, 120.2, 119.7, 102.3.
[0227] MS (ESI) [M+H]<+>= 325.1
Primer 6: 8-hloro-2-(4-(trifluorometoksi)fenoksi)hinolin; jedinjenje (48)
[0228] Reakciona smeša 2,8-dihlorohinolina (2× 79 mg, 2× 0,4 mmol, 1 ekv.), 4-(trifluorometoksi)fenola (2× 52 µl, 2× 0,4 mmol, 1 ekv.), CuI (2 × 76 mg, 2 × 0,4 mmol, 1 ekv.) i Cs2CO3(2 × 391 mg, 2 × 1,2 mmol, 3 ekv.) u DMF (2 × 6 ml) je zagrevana u mikrotalasnom reaktoru na 150°C tokom 50 minuta. Nakon hlađenja do sobne temperature, u reakcionu smešu je dodata voda. Nerastvorene čvrste materije su filtrirane kroz celit i dobijeni filtrat je dva puta ekstrahovan etil acetatom. Organska faza je isprana vodom i zasićenim vodenim rastvorom slanog rastvora, osušena preko MgS04, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela da bi se dobio 8-hloro-2-[4-(trifluorometoksi)fenoksi]hinolin 48 (212 mg, 78%).
[0229]<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.12 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.73 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 9.1 Hz, 2H), 7.38 - 7.22 (m, 3H), 7.12 (d, J = 8.8 Hz, 1H).
[0230]<13>C NMR (75 MHz, CDCl3) δ 161.5, 151.9, 145.9, 142.7, 140.5, 132.0, 130.3, 127.0, 126.4, 125.1, 122.8, 122.2, 119.0 (t, J = 255 Hz), 113.6.
[0231] MS (ESI) [M+H]<+>= 340.1
[0232] Strukture drugih jedinjenja ovog pronalaska su potvrđene NMR spektrima.
Tabela II
1
2
Farmakološki podaci
[0233] Jedinjenja pronalaska su bila predmet farmakoloških ispitivanja koja su pokazala njihovu relevantnost kao aktivnih supstanci u lečenju, a posebno u prevenciji upalne bolesti. .
Primer 7: Modulacija ekspresije miR-124 derivatima hinolina na in vivo modelu inflamatorne bolesti creva
A. Materijal i postupci
Ex vivo studije
Ekstrakcija mononuklearnih ćelija periferne krvi (PBMC) korišćenjem FICOLL™ gradijenta
[0234] U tu svrhu, mononuklearne ćelije periferne krvi (PBMC) zdravih donora su izolovane centrifugiranjem na FICOLL™ gradijentu prema standardnim protokolima.
[0235] Ukratko, 60-70 ml buffy premaza (engl. buffy-coat) se sipa u posudu od 175 cm<2>, a zapremina se podesi na 300 ml korišćenjem PBS da se dobije razblaženje oko 5 puta jače od buffy premaza; 38 ml razblaženog buffy premaza se zatim dodaje u Falcon™ epruvete od 50 ml koje sadrže 12 ml FICOLL™ (Histopack-1077) na sobnoj temperaturi. Preparat je centrifugiran 30 minuta na 515 rcf na sobnoj temperaturi. Prsten limfocita je izvučen iz Falcon™ epruvete pipetom za transfer (Pastette®), a zatim ispran sa PBS-om pomoću centrifugiranja 10 minuta na 290 rcf i na sobnoj temperaturi dok supernatant ne postane bistar.
[0236] Ćelije se zatim resuspenduju na 37°C do gustine od 1,5×10<6>ćelija/ml u RPMI Glutamax podlozi (Life Technologies Ref 61870-010) u koju se dodaje 10% fetalnog telećeg seruma (FCS) (Thermo Fischer Ref. SV030160 ) i bez aktivacije. Ćelije se inkubiraju 48 sati na 37°C u prisustvu 5% CO2.
Tretman ćelija skrinovanim molekulima
[0237] Za skrining su korišćene ploče sa šest otvora. U svaki otvor koji sadrži 3,10<6>ćelija/4 ml RPMI podloge sa dodatih 10% fetalnog telećeg seruma i 40 j/ml IL-2 (Peprotech Ref 200-02), dodaju se skrinovani molekuli; 100% DMSO (4 µl) se dodaje u otvor i testira se kao negativna kontrola.
[0238] Svaki testirani uslov se postavlja kao što je opisano u nastavku i konačna odgovarajuća zapremina u otvoru se prema tome podešava:
1) Derivati hinolina u 100% DMSO - (5 µM i konačna zapremina 4 µl)
2) Antiretrovirusni lekovi: maravirok, efavirenz, darunavir, AZT (10 µM za sve - konačna zapremina 4 µl).
[0239] Otvori se inkubiraju tri dana na 37°C u prisustvu 5% CO2. Podloga se menja (dan 3) prema standardnim protokolima. Ukratko, ploče se centrifugiraju na 290 rcf tokom 5 minuta i 3 ml supernatanta se uklanja; 3 ml RPMI podloge u koju je dodato 10% fetalnog telećeg seruma i 40 j/ml IL-2 se zatim dodaje 3 µl osnovnog rastvora skrinovanog molekula na 5 mM u 100% DMSO ili 3 µl 100% DMSO kao negativne kontrole.
Ekstrakcija miRNK (dan 6)
[0240] Ćelije se regenerišu u Falcon™ epruvete od 15 ml, koje se centrifugiraju na 290 rcf tokom 5 minuta, a zatim ispiraju u 10 ml PBS i dalje centrifugiraju na 290 rcf tokom 5 minuta. Ćelije se zatim resuspenduju u 1 ml PBS i broje.
[0241] 6 × 10<6>ćelija je dobijeno i centrifugirano na 290 rcf tokom 5 minuta. Ćelijska peleta se lizira u 300 µl pufera za lizu ML iz kompleta za ekstrakciju miRNK Macherey Nagel Nucleospin® (Macherei Nagel Ref 740971), i dalje se čuva na -20°C.
[0242] Za svaki uzorak se dodaju 5 µl 2×10<8>kopija/µl spike-in kontrole (Ce_miR-39 iz QIAGEN<Ⓒ>- reference 219610 SEQ ID N°6). Ekstrakcija miRNK se postiže korišćenjem
4
protokola iz Macherei Nagel Nucleospin® kompleta za ekstrakciju miRNA koristeći zapreminu eluiranja za RNK od 50 µL i za miRNA od 30 µL, i dalje se čuva na -20°C.
Reverzna transkripcija miRNA (6. dan)
[0243] Korak reverzne transkripcije se prati za 12 µL miRNK koristeći miScript RT II komplet za reverznu transkripciju (RT) od kompanije KIAGENⒸ koristeći miScript HiSpec pufer, i dalje se čuva na -20°C.
Kvantitativni PCR test miRNK (6. dan)
[0244] Kvantitativni PCR korak se postiže korišćenjem KIAGENⒸ miScript SIBR® Green PCR kompleta i miScript prajmer testova prema protokolu proizvođača.
Sastav reakcione mešavine miScript za ploče sa 384 otvora:
[0245] Reakcija se ponavlja u tri primerka na ploči sa 384 otvora u skladu sa protokolom proizvođača koristeći sistem LightCicler® 380 Roche PCR u realnom vremenu. Uslovi za uspostavljanje ciklusa su takođe podešeni prema protokolu proizvođača:
[0246] Relativna kvantifikacija qPCR-a je poznata u struci i detaljnije je opisana u nastavku.
Relativna kvantifikacija
[0247] Od razblaženja do 1/10-ti u H2O za miR-124 kPCR (Hs_miR-124a) ili do 1/100-ti za referentni gen/gen održavanja qPCR (Hs_miR-26a i Hs_miR-191, koristeći miScript prajmer testove (Hs_miR-124a, Hs_miR-26a and Hs_miR-191 ili QIAGEN<Ⓒ>-reference ms00006622, ms00029239 i ms00003682).
[0248] Analiza je vršena korišćenjem relativnih modela kvantifikacije bez korekcije efikasnosti (2-<ΔΔCp>) korišćenjem proseka vrednosti prelaznih tačaka (Cp) iz triplikata miR-124 i proseka proseka triplikata miR-26a i miR-191.
B. Rezultati
[0249] Jedan skup donora (1 do 7 donora testiranih za svako jedinjenje) procenjen je u prisustvu različitih jedinjenja formule (I).
[0250] Koristeći gore opisani protokol, srednja preklopna promena (u poređenju sa DMSO) u ekspresiji miR-124 je procenjena kod različitih donora (bilo koji od 1 do 7) relativnom kvantifikacijom i predstavljena je u tabeli III u nastavku:
Tabela III
Molekul Preklopna promena u poređenju sa ćelijama Broj
[0251] Prema tome, eksperimentalni dokazi pokazuju da gore pomenuti derivati hinolina formule (I) ushodno regulišu nivoe ekspresije miR-124 u PBMC, u poređenju sa referentnom vrednošću utvrđenom na netretiranim PBMC.
[0252] Nasuprot tome, nijedan od poznatih antiretrovirusnih lekova (maravirok, efavirenc, darunavir ili AZT) nema značajan uticaj na prekomernu ekspresiju miR-124 u PBMC dobijenih od četiri donora.
Primer 8: Efekat derivata hinolina na model DSS-izazvanog kolitisa
A. Materijal i postupci
Model miša
DSS model
[0253] Obično korišćeni model miša za zapaljenske bolesti creva je model kolitisa izazvanog dekstran natrijum sulfatom (DSS). Tipične histološke promene akutnog DSS-kolitisa su iscrpljivanje mucina, degeneracija epitela i eventualno uništavanje mukozne barijere, što dovodi do upale i kolitisa.
[0254] Tri grupe C57BL/6 miševa starih 6 nedelja (svaka po 8 miševa) primale su DSS u vodi za piće (2,5%) tokom 9 dana (Slike 1-2). Svakodnevno su mereni gubitak težine i potrošnja vode. Potrošnja vode je utvrđivana merenjem zapreminskog gubitka vode za piće u odgovarajućim uređajima. Miševi su tretirani gavažom sa 200 ul 0,5 MC samog (DSS+ MC grupa) ili zajedno sa 40 mg/kg jedinjenja 24 (grupa DSS MC 24). U trenutku kada kontrolni miševi izgube do 20% svoje težine (DSS), tretman sa DSS se prekida i zamenjuje vodom za piće. Ostali tretmani su nastavljeni 21 dan.
[0255] Tri grupe C57BL/6 miševa starih 16 nedelja (po 7 miševa) primale su 2,5% DSS u vodi za piće (Slika 3). Miševi su tretirani gavažom sa 200 ul 0,5 MC samog (DSS+ MC grupa) ili zajedno sa 40 mg/kg jedinjenja 24 (grupa DSS MC 24). Miševi su tretirani DSS-om tokom 6 dana i u trenutku kada su kontrolni miševi izgubili do 15% svoje težine (DSS), svi miševi su eutanazirani i debelo crevo je uzeto na dalje analize.
[0256] Debelo crevo je mereno pomoću lenjira i za histološku analizu celo debelo crevo je pripremljeno u skladu sa Sviss roll procedurom (Vhittem i sar.; “Murine Colitis Modeling using Dextran Sulfate Sodium (DSS)“, J Vis Exp 2010 (35) 1652) fiksirano formaldehidom i ugrađeno u parafin. Sekcije od po 4 µm su deparafinizovane i obojene hematoksilinom i eozinom i analizirane na veličinu lezije i druge promene (Slike 4-6). Uporedili smo netretirane i tretirane miševe tokom DSS-ciklusa sa derivatima hinolina suspendovanim u metilcelulozi ili samo sa metilcelulozom (MC). Statistička analiza je izvršena korišćenjem Man-Vitni testa, zvezdica označava značajnu razliku (p<0,5), dve zvezdice označavaju veoma značajnu razliku (p<0,05).
B. Rezultati
[0257] Prikazani rezultati koji su utvrđeni korišćenjem derivata hinolina (24), čija je struktura predstavljena u nastavku radi reference :
[0258] Nakon 5 dana primene DSS-a, miševi tretirani derivatom hinolina su ispoljili gubitak težine manji od 1% u proseku za razliku od MC, odnosno, netretirani miševi su imali gubitak težine između 10% i 20% (Slike 1 i 2).
[0259] Iznenađujuće je to što smo primetili veću potrošnju vode kod miševa tretiranih lekovima, što ukazuje na efekat prigušenja bolesti derivatima hinolina. Tretmanom derivatima hinolina takođe se značajno kontrolisao gubitak težine kod miševa tokom druge primene DSS-a, što ukazuje na to da miševi ne reaguju i da su derivati hinolina pogodni za ponovljenu primenu. Nakon jednog ciklusa DSS-a, dužina debelog creva kod miševa tretiranih derivatima hinolina (6,4 cm /-0,6 cm) bila je značajno veća u poređenju sa onima tretiranim primenom samo MC (5,9 cm /-0,8 cm) i netretiranima (5,8 cm /- 0,8 cm) (Slika 3). Ova razlika je bila još izraženija kod miševa koji su primili dva ciklusa DSS-a; dužina debelog creva kod miševa tretiranih derivatima hinolina (5,7 cm /-0,9 cm) bila je značajno veća u poređenju sa tretiranim primenom samo MC (4,3 cm /- 0,5 cm). ) i netretiranima (4,4 cm /-0,4 cm) (Slika 3). Miševi iz različitih kohorti razvili su uporediv broj lezija (Slika 4), ali je prosečna veličina površine lezije bila upadljivo niža kod miševa tretiranih derivatima hinolina, tj. bila je 2,1 mm<2>naspram 8,4 mm<2>kod miševa tretiranim primenom samo MC (Slika 5). Ova razlika se održala kod miševa koji su primili dva ciklusa DSS-a (3,8 mm<2>naspram 12,2 mm<2>.
[0260] Konačno, primetili smo smanjenje promena na limfoidnim organima kao što su Pejerove ploče nakon dva DSS ciklusa, što sugeriše da tretman derivatima hinolina modulira imune odgovore.
Primer 9: Efekat derivata hinolina na model artritisa izazvanog kolagenom
A. Materijali i postupci
Modeli miša
Model artritisa izazvanog kolagenom:
[0261] Grupe DBA/1 miševa starih od 9 do 10 nedelja imunizovane su intradermalno sa goveđim kolagenom tipa II emulgovanim u proporciji 1:1 sa kompletnim Frojndovim adjuvansom. Miševi su izloženi 21 dan nakon prve imunizacije, a fenotipski izgled artritisa je procenjen praćenjem svakog drugog dana. Debljina svakog skočnog zgloba zadnje šape merena je pomoću kalipera sa brojčanikom (0- do 10 mm) za merenje debljine. Miševi su svakodnevno tretirani dve nedelje derivatima hinolina suspendovanim u metilcelulozi ili samo metilcelulozom (MC), a zatim je praćen razvoj bolesti. Statistička analiza je izvršena korišćenjem Man-Vitni testa, gde zvezdice označavaju značajnu razliku (p<0,5).
B. Rezultati
[0262] Samo jedan od deset miševa lečenih ispitivanim derivatom hinolina (jedinjenje 24), pokazao je znake upale (u poređenju, 8 od 10 miševa lečenih koji su primali MC razvilo je bolest). Miševi tretirani derivatima hinolina pokazali su značajno smanjenje otoka u poređenju sa miševima tretiranim samo MC (1,9 mm naspram oko 2,2 mm) (Slika 6)
[0263] Prema tome, rezultati testova sprovedenih na jedinjenjima obelodanjenim u predmetnom pronalasku pokazuju da navedena jedinjenja mogu biti korisna za lečenje i/ili prevenciju upalnih bolesti kao što je gore opisano.
[0264] U tu svrhu, efikasna količina pomenutog jedinjenja može se davati pojedincu koji pati od upalnih bolesti.
[0265] Prema tome, jedinjenje prema ovom pronalasku može se primeniti u farmaceutsku formulaciju koja može da sadrži efikasnu količinu pomenutog jedinjenja i jedan ili više farmaceutskih ekscipijenasa.
[0266] Gore pomenuti ekscipijensi se biraju prema obliku doziranja i željenom načinu primene.
[0267] U tom kontekstu oni mogu biti prisutni u bilo kom farmaceutskom obliku koji je pogodan za enteralnu ili parenteralnu primenu, zajedno sa odgovarajućim ekscipijensima, na primer u obliku običnih ili obloženih tableta, tvrdih, mekih želatinskih i drugih kapsula, supozitorija ili u obliku tečnosti kao što su suspenzije, sirupi ili rastvori ili suspenzije za injekcije, u dozama koje omogućavaju dnevnu primenu od 0,1 do 1000 mg aktivne supstance.
[0268] Može se koristiti bilo koji način primene. Na primer, jedinjenje formule (I) se može primeniti oralnim, parenteralnim, intravenskim, transdermalnim, intramuskularnim, rektalnim, sublingvalnim, mukoznim, nazalnim ili drugim načinima. Pored toga, jedinjenje formule (I) se može primeniti u obliku farmaceutske formulacije i/ili oblika jediničnog oblika doziranja.
[0269] Posebno, farmaceutske formulacije ovog pronalaska mogu se primenjivati oralno i/ili parenteralno
1
[0270] Pogodni oblici doziranja uključuju, između ostalog, kapsule, tablete (uključujući tablete za brzo rastvaranje i odloženo oslobađanje), prah, sirupe, oralne suspenzije i rastvore za parenteralnu primenu.
[0271] Farmaceutska formulacija može takođe da sadrži drugi antiinflamatorni agens, dobro poznat stručnjaku iz ove oblasti, u kombinaciji sa jedinjenjem prema ovom pronalasku.
2
LISTA SEKVENCI [0272]
4

Claims (13)

  1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje formule (I)
    pri čemu: Z je C ili N, V je C ili N,
    označava aromatični prsten pri čemu je V C ili N i kada je V N, V je u orto, meta ili para od Z, tj. formira piridinsku, piridazin, pirimidinsku, odnosno pirazinsku grupu, R nezavisno predstavljaju atom vodonika, metil grupu, metoksi grupu, trifluorometil grupu, trifluorometoksi grupu, amino grupu, atom halogena i -O-P(=O)-(OR3)(OR4) grupu, a posebno atom fluora ili hlora, trifluorometoksi grupu i amino grupu, Q je N ili O, pod uslovom da R" ne postoji kada je Q O, R3i R4nezavisno predstavljaju atom vodonika, Li<+>, Na<+>, K<+>, N<+>(Ra)4ili benzil grupu, Ra predstavlja atom vodonika, a (C1-C5)alkil grupu ili (C3-C6)cikloalkil grupu, n je 1, 2 ili 3, n' je 1, 2 ili 3, R' nezavisno predstavljaju atom vodonika, atom halogena i konkretnije atom fluora ili hlora, amino grupu, metil grupu, -O-P(=O)-(OR3)(OR4) grupu ili grupu
    pri čemu je A O ili NH, m je 2 ili 3 i X1je O, CH2ili N-CH3, pod uslovom da kada je takva grupa R', n' je 1 ili 2, a kada je n' 2, druga R' grupa se razlikuje od navedene grupe ili alternativno R' nezavisno predstavlja atom vodonika, atom halogena i konkretnije atom fluora ili hlora, metil grupu ili grupu
    , pri čemu je A O ili NH, m je 2 i X1je O, CH2ili N-CH3, pod uslovom da kada je takva grupa R', n' je 1 ili 2, a kada je n' 2, druga R' grupa se razlikuje od navedene grupe, R" je atom vodonika, (C1-C4)alkil grupa ili grupa
    pri čemu je m 2 ili 3 i X1je O, CH2ili N-CH3, ili bilo koja od njegovih farmaceutski prihvatljivih soli, za upotrebu u lečenju i/ili prevenciji upalne bolesti, pri čemu je navedena upalna bolest izabrana sa liste koja se sastoji od: zapaljenske bolesti creva, Kronove bolesti, ulceroznog kolitisa, multiple skleroze, osteoartritisa, ankilozantnog spondilitisa, psorijaze, Sjogrenovog sindroma, bronhitisa, astme i upala udružena sa karcinomom debelog creva.
  2. 2. Jedinjenje za upotrebu prema zahtevu 1, pri čemu je Q N.
  3. 3. Jedinjenje za upotrebu prema zahtevima 1 ili 2, izabrano iz
    pri čemu su R, R', R", n i n' kao što su definisani u zahtevu 1.
  4. 4. Jedinjenje za upotrebu prema prethodnom zahtevu, izabrano iz
    pri čemu su R, R', R", n i n' kao što su definisani u zahtevu 1.
  5. 5. Jedinjenje za upotrebu prema bilo kom od prethodnih zahteva, pri čemu je jedinjenje formule (I) jedinjenje formule (24)
    i upalna bolest je zapaljenska bolest creva.
  6. 6. Jedinjenje formule (24)
    za upotrebu u lečenju reumatoidnog artritisa.
  7. 7. Jedinjenje formule (Id):
    pri čemu su R, R', n i n' kao što su definisani u zahtevu 1.
  8. 8. Jedinjenje formule (Ie)
    pri čemu su R, R', n i n' kao što su definisani u zahtevu 1, za upotrebu u lečenju i/ili prevenciji upalne bolesti, pri čemu je navedena upalna bolest izabrana sa liste koja se sastoji od: zapaljenske bolesti creva, Kronove bolesti, ulceroznog kolitisa, multiple skleroze, osteoartritisa, ankilozantnog spondilitisa, psorijaze, Sjogrenovog sindroma, bronhitisa, astme i upala udružena sa karcinomom debelog creva.
  9. 9. Jedinjenje izabrano sa liste koja obuhvata: - (8) 8-hloro-5-(3-(piperidin-1-il)propoksi)-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)hinolin-2-amin - (9) 8-hloro-N<4>-(3-(piperidin-1-il)propil)-N<2>-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)hinolin-2,4-diamin - (10) 8- hloro-N-metil-N-(4-( trifluorometil)piridin-2-il)hinolin-2-amin - (11) 8-hloro-N<4>-(2-morfolinoetil)-N<2>-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)hinolin-2,4-diamin - (13) 4,8-dihloro-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)hinolin-2-amin - (14) 8-hloro-N-(3-morfolinopropil)-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)hinolin-2-amin - (15) 8-hloro-6-(2-morfolinoetoksi)-N-(3-morfolinopropil)-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)hinolin-2-amin - (16) 8-hloro-5-(2-morfolinoetoksi)-N-(3-morfolinopropil)-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)hinolin-2-amin - (17) 8-hloro-6-(2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi)-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)hinolin-2-amin - (18) 8-hloro-6-(2-(piperidin-1-il)etoksi)-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)hinolin-2-amin - (19) 8-hloro-6-(3-(piperidin-1-il)propoksi)-N-(4-(trifluorometil)piridin-2-il)hinolin-2-amin - (20) 8-hloro-N-(3-fluoro-4-(trifluorometil)piridin-2-il)hinolin-2-amin - (21) N-(5-bromo-4-( trifluorometil)piridin-2-il)-8-hlorohinolin-2-amin - (22) N<2>-(8-hlorokinolin-2-il)-N<5>-(3-(4-metilpiperazin-1-il)propil)-4-(trifluorometil)piridin-2,5-diamin - (28) 8-hloro-N-metil-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2-amin - (29) 8-hloro-5-(3-(piperidin-1-il)propoksi)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2-amin - (30) 8-hloro-N-(3-(piperidin-1-il)propil)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2-amin - (31) 8-hloro-N-(2-morfolinoetil)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2-amin - (32) 8-hloro-N-(2-(pirolidin-1-il)etil)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2-amin - (33) 8-hloro-N-(4-morfolinobutil)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2-amin - (34) 8-hloro-N<4>-(3-(piperidin-1-il)propil)-N<2>-(4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2,4-diamin - (35) 4,8-dihloro-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2-amin 4 - (36) 8-hloro-5-(2-morfolinoetoksi)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2-amin - (37) N<1>-(4,8-dihlorokinolin-2-il)-4-(trifluorometoksi)benzen-1,2-diamin - (38) 4,8-dihloro-N-(2-morfolinoetil)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2-amin - (39) 8-hloro-6-(2-morfolinoetoksi)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2-amin - (40) 8-hloro-N<2>-(2-morfolinoetil)-N<4>-(3-(piperidin-1-il)propil)-N<2>-(4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2,4-diamin - (41) 8-hloro-N-(2-morfolinoetil)-N-(2-nitro-4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2-amin - (42) N<1>-(8-hlorokinolin-2-il)-N<1>-(2-morfolinoetil)-4-(trifluorometoksi)benzen-1,2-diamin - (43) 8-hloro-5-(2-morfolinoetoksi)-N-(2-morfolinoetil)-N-(4-(trifluorometoksi)fenil)hinolin-2-amin - (44) N<1>-(8-hloro-5-(2-morfolinoetoksi)hinolin-2-il)-4-(trifluorometoksi)benzen-1,2-diamin - (46) 8-hloro-2-((4-(trifluorometil)piridin-2-il)oksi)hinolin - (47) 4-(2-((8-hloro-2-((4-(trifluorometil)piridin-2-il)oksi)hinolin-6-il)oksi)etil)morfolin - (48) 8-hloro-2-(4-(trifluorometoksi)fenoksi)hinolin - (49) 4-(2-((8-hloro-2-(4-(trifluorometoksi)fenoksi)hinolin-6-il)oksi)etil)morfolin - (50) 4-(2-((8-hloro-2-(4-(trifluorometoksi)fenoksi)hinolin-5-il)oksi)etil)morfolin - (51) mono-[8-hloro-2-(4-trifluorometil-piridin-2-ilamino)-hinolin-6-il] estar fosforne kiseline - (52) mono-[2-(8-hloro-hinolin-2-ilamino)-5-trifluorometoksi-fenil] estar fosforne kiseline - (53) mono-[8-hloro-2-(4-trifluorometoksi-fenilamino)-hinolin-6-il] estar fosforne kiseline - i njihove farmaceutski prihvatljive soli, a konkretnije izabrane iz jedinjenja (8), (9); (10); (11); (30); (46); (47); (48); (49) i (50) kao što su definisana iznad ili jedna od njihovih farmaceutskih soli.
  10. 10. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1 do 5, za upotrebu u lečenju, smanjenju verovatnoće razvoja ili odlaganju pojave pomenute upalne bolesti.
  11. 11. Jedinjenje za upotrebu prema bilo kom od zahteva 1 do 4, pri čemu je navedena upalna bolest izabrana sa liste koja se sastoji od: zapaljenske bolesti creva, Kronove bolesti, ulceroznog kolitisa, multiple skleroze, osteoartritisa, ankilozirajućeg spondilitisa, psorijaze, Sjogrenovog bronhitisa i upala udružena sa karcinomom debelog creva, a konkretno od: zapaljenske bolesti creva, Kronove bolesti, ulceroznog kolitisa i multiple skleroze, a još konkretnije od zapaljenske bolesti creva i multiple skleroze.
  12. 12. Jedinjenje (Id) kao što je definisano u zahtevu 7 ili jedno od jedinjenja izabranih iz jedinjenja (8), (9), (10), (11), (44), (46), (47), (48), (49), (50), (51), (52), (53) ili njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, za upotrebu kao lek.
  13. 13. Farmaceutska formulacija koja sadrži najmanje jedno jedinjenje formule (Id) kao što je definisano u zahtevu 7 ili jedno od jedinjenja izabranih iz jedinjenja (8), (9), (10), (11), (13), (14), (15), (16), (17), (18), (19), (20), (21), (22), (28), (29), (30), (31), (32), (33), (34), (35), (36), (37), (38), (39), (40), (41), (42), (43), (44), (46), (47), (48), (49), (50), (51), (52) i (53) i preciznije jedno od jedinjenja (8), (9); (10); (11); (30); (46); (47); (48); (49) i (50) kao što je definisano u zahtevu 9. 1
RS20220479A 2014-07-17 2015-07-17 Primena derivata hinolina u lečenju upalnih bolesti RS63231B1 (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP14306164.6A EP2974729A1 (en) 2014-07-17 2014-07-17 Quinoline derivatives for use in the treatment of inflammatory diseases
EP15738916.4A EP3169328B1 (en) 2014-07-17 2015-07-17 Quinoline derivatives for the treatment of inflammatory diseases
PCT/EP2015/066458 WO2016009065A2 (en) 2014-07-17 2015-07-17 Quinoline derivatives for the treatment of inflammatory diseases

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS63231B1 true RS63231B1 (sr) 2022-06-30

Family

ID=51220531

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20220479A RS63231B1 (sr) 2014-07-17 2015-07-17 Primena derivata hinolina u lečenju upalnih bolesti

Country Status (22)

Country Link
US (6) US10435370B2 (sr)
EP (3) EP2974729A1 (sr)
JP (4) JP6884690B2 (sr)
KR (3) KR20240161231A (sr)
CN (5) CN117205212A (sr)
AU (4) AU2015289033A1 (sr)
CA (2) CA2954951C (sr)
CU (2) CU24459B1 (sr)
CY (1) CY1125586T1 (sr)
DK (2) DK3998070T3 (sr)
ES (2) ES3009243T3 (sr)
FI (1) FI3998070T3 (sr)
HR (2) HRP20220598T1 (sr)
HU (2) HUE058713T2 (sr)
LT (1) LT3169328T (sr)
MX (2) MX383351B (sr)
PL (2) PL3998070T3 (sr)
PT (2) PT3169328T (sr)
RS (1) RS63231B1 (sr)
RU (1) RU2760686C2 (sr)
SI (2) SI3169328T1 (sr)
WO (1) WO2016009065A2 (sr)

Families Citing this family (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10253020B2 (en) * 2009-06-12 2019-04-09 Abivax Compounds for preventing, inhibiting, or treating cancer, AIDS and/or premature aging
EP2757161A1 (en) 2013-01-17 2014-07-23 Splicos miRNA-124 as a biomarker of viral infection
EP2974729A1 (en) * 2014-07-17 2016-01-20 Abivax Quinoline derivatives for use in the treatment of inflammatory diseases
EP3058940A1 (en) 2015-02-23 2016-08-24 Abivax Quinoline derivatives for use in the treatment or prevention of viral infection
EP3059591A1 (en) 2015-02-23 2016-08-24 Abivax Methods for screening compounds for treating or preventing a viral infection or a virus-related condition
EP3059236A1 (en) 2015-02-23 2016-08-24 Abivax A new quinoline derivative for use in the treatment and prevention of viral infections
EP3669873A1 (en) 2018-12-20 2020-06-24 Abivax Quinoline derivatives for use ine the traeatment of inflammation diseases
EP3669874A1 (en) * 2018-12-20 2020-06-24 Abivax Quinoline derivatives for use in the treatment or prevention of cancer
KR102399037B1 (ko) * 2020-01-06 2022-05-17 성균관대학교산학협력단 아민화된 아진의 신규한 제조방법
EP3858815A1 (en) * 2020-01-31 2021-08-04 Abivax Co-crystals and salts of 8-chloro-n-(4-(trifluoromethoxy)phenyl)quinolin-2-amine
CN114073700B (zh) * 2020-08-19 2023-08-01 中山大学中山眼科中心 Iox1在自身免疫性疾病的预防和/或治疗中的应用
CN117222414A (zh) 2021-03-01 2023-12-12 脱落性治疗公司 用于激活恒定自然杀伤t-细胞的化合物和用于消除炎性衰老细胞的方法
US20240327388A1 (en) * 2021-05-27 2024-10-03 Jiangsu Hengrui Pharmaceuticals Co., Ltd. Quinolinamine compound, preparation method therefor and application thereof in pharmaceuticals
EP4212156A1 (en) 2022-01-13 2023-07-19 Abivax Combination of 8-chloro-n-(4-(trifluoromethoxy)phenyl)quinolin-2-amine and its derivatives with a s1p receptor modulator
TW202333698A (zh) * 2022-01-24 2023-09-01 大陸商江蘇恆瑞醫藥股份有限公司 喹啉胺類化合物、其製備方法及其在醫藥上的應用
EP4215196A1 (en) * 2022-01-24 2023-07-26 Abivax Combination of 8-chloro-n-(4-(trifluoromethoxy)phenyl)quinolin-2-amine and its derivatives with a jak inhibitor
EP4624469A4 (en) 2022-11-25 2026-04-15 Jiangsu Hengrui Pharmaceuticals Co Ltd CRYSTALLINE FORM OF QUINOLEIN AMINE COMPOUND AND ITS PREPARATION PROCESS
TW202436295A (zh) * 2022-11-25 2024-09-16 大陸商江蘇恒瑞醫藥股份有限公司 喹啉胺類化合物的可藥用鹽、晶型及其製備方法
CN118373771A (zh) * 2023-01-20 2024-07-23 江苏柯菲平医药股份有限公司 一种喹啉衍生化合物或其可药用的盐及其制备方法和应用
KR20260042485A (ko) 2023-08-01 2026-03-31 아비박스 궤양성 대장염의 치료를 위한 오베파지모드
IL326865A (en) * 2023-08-30 2026-04-01 Jiangsu Chia Tai Fenghai Pharmaceutical Co Ltd Compound for regulating microRNA activity A-124
CN120698979A (zh) * 2024-03-26 2025-09-26 深圳信立泰药业股份有限公司 一种吲哚类化合物及其制备方法与miR上调应用

Family Cites Families (89)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB585362A (en) 1944-08-31 1947-02-05 Francis Henry Swinden Curd New heterocyclic compounds
BE486034A (sr) 1947-11-28
DE958647C (de) 1952-12-28 1957-02-21 Hoechst Ag Verfahren zur Herstellung von 7-Amino-2-oxy-4-methyl-chinolinen
JPS5272821A (en) * 1975-12-15 1977-06-17 Mitsubishi Petrochem Co Ltd Herbicide
FR2387229A1 (fr) 1977-04-13 1978-11-10 Anvar Dipyrido (4,3-b) (3,4-f) indoles, procede d'obtention, application therapeutique et compositions pharmaceutiques les contenant
FR2436786A1 (fr) 1978-09-21 1980-04-18 Anvar Nouveaux derives des pyrido (4,3-b) carbazoles (ellipticines), substitues en position 1 par une chaine polyaminee, leur obtention et leur application a titre de medicaments
JPS5651454A (en) * 1979-10-01 1981-05-09 Nissan Chem Ind Ltd Hydroquinone derivative and its preparation
US4738710A (en) 1979-11-19 1988-04-19 Ici Australia Limited Herbicidal alkane carboxylic acid derivatives
JPS5772968A (en) 1980-10-24 1982-05-07 Nissan Chem Ind Ltd Aniline derivative and its preparation
US4425343A (en) 1980-10-24 1984-01-10 Nissan Chemical Industries, Ltd. Benzoazine ether or thioether linkage containing urea compounds, process for producing same and insecticides containing said compounds
FR2627493B1 (fr) 1988-02-23 1991-10-31 Sanofi Sa Procede de preparation de derives d'isoquinoleine
FR2645861A1 (fr) 1989-04-17 1990-10-19 Inst Nat Sante Rech Med Utilisation de dipyrido (4,3-b) (3,4-f) indoles pour la preparation de medicaments utiles pour le traitement du sida
US6177401B1 (en) 1992-11-13 2001-01-23 Max-Planck-Gesellschaft Zur Forderung Der Wissenschaften Use of organic compounds for the inhibition of Flk-1 mediated vasculogenesis and angiogenesis
US6180632B1 (en) 1997-05-28 2001-01-30 Aventis Pharmaceuticals Products Inc. Quinoline and quinoxaline compounds which inhibit platelet-derived growth factor and/or p56lck tyrosine kinases
WO2000059875A2 (en) 1999-04-05 2000-10-12 City Of Hope Novel inhibitors of formation of advanced glycation endproducts (age's)
UA75055C2 (uk) 1999-11-30 2006-03-15 Пфайзер Продактс Інк. Похідні бензоімідазолу, що використовуються як антипроліферативний засіб, фармацевтична композиція на їх основі
DE10013318A1 (de) 2000-03-17 2001-09-20 Merck Patent Gmbh Formulierung enthaltend Chinoxalinderivate
WO2002074726A2 (en) 2001-01-22 2002-09-26 Memory Pharmaceuticals Corporation Aniline derivatives useful as phosphodiesterase 4 inhibitors
GB0109103D0 (en) 2001-04-11 2001-05-30 Pfizer Ltd Novel compounds
EP2258366B1 (en) 2001-06-22 2013-04-03 Kirin Pharma Kabushiki Kaisha Quinoline derivatives capable of inhibiting autophosphorylation of hepatocyte growth factor receptors, and pharmaceutical composition comprising the same
US6498254B1 (en) 2001-10-29 2002-12-24 Uniroyal Chemical Company, Inc. Antiretroviral compounds and compositions
WO2003099284A1 (en) 2002-05-22 2003-12-04 Amgen Inc. Amino-pyridine, -pyridine and pyridazine derivatives for use as vanilloid receptor ligands for the treatment of pain
AU2002950217A0 (en) * 2002-07-16 2002-09-12 Prana Biotechnology Limited 8- Hydroxy Quinoline Derivatives
EP1539697A1 (en) 2002-07-19 2005-06-15 Memory Pharmaceutical Corporation Phosphodiesterase 4 inhibitors, including n-substituted aniline and diphenylamine analogs
WO2006081444A2 (en) 2005-01-28 2006-08-03 The Government Of The Usa As Represented By The Secretary Of The Dept. Of Health And Human Services Farnesyltransferase inhibitors for treatment of laminopathies, cellular aging and atherosclerosis
FR2849474B3 (fr) 2002-12-27 2004-12-03 Olivier Jean Noel Juin Installation de transformation de l'energie cinetique d'un fluide en energie electrique
WO2004078731A1 (en) 2003-03-06 2004-09-16 'chemical Diversity Research Institute', Ltd. Quinoline-carboxylic acids and the derivatives thereof, a focused library
MXPA05009722A (es) 2003-03-10 2006-03-09 Schering Corp Inhibidores heterociclicos de cinasa: metodos de uso y sintesis.
FR2859474B1 (fr) 2003-09-04 2006-01-13 Centre Nat Rech Scient Utilisation de composes derives d'indole pour la preparation d'un medicament utile pour le traitement de maladies genetiques resultant de l'alteration des processus d'epissage
FR2859475A1 (fr) 2003-09-04 2005-03-11 Centre Nat Rech Scient Utilisation de composes derives d'ellipticine et d'aza-ellipticine pour la preparation d'un medicament utile pour le traitement de maladies genetiques resultant de l'alteration des processus d'epissage
CN1882345A (zh) 2003-10-16 2006-12-20 希龙公司 作为raf激酶抑制剂以治疗癌症的2,6－二取代的喹唑啉、喹喔啉、喹啉和异喹啉
WO2005042542A1 (en) * 2003-10-31 2005-05-12 Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd. 2,3-dihydro-6-nitroimidazo (2,1-b) oxazole compounds for the treatment of tuberculosis
CA2546353A1 (en) 2003-11-19 2005-06-09 Array Biopharma Inc. Bicyclic inhibitors of mek and methods of use thereof
EA009994B1 (ru) * 2003-12-23 2008-06-30 Пфайзер Инк. Новые хинолиновые производные
EP3287130A1 (en) 2004-05-21 2018-02-28 Japan Tobacco Inc. Combinations comprising a 4-isoquinolone derivative and protease inhibitors
EP1814856A1 (en) 2004-11-12 2007-08-08 Galapagos N.V. Nitrogen heteroaromatic compounds which bind to the active site of protein kinase enzymes
MX2007006230A (es) 2004-11-30 2007-07-25 Amgen Inc Quinolinas y analogos de quinazolinas y su uso como medicamentos para tratar cancer.
CA2600869A1 (en) 2005-03-18 2006-09-28 The Regents Of The University Of California Compounds having activity in correcting mutant-cftr processing and uses thereof
CN101213260A (zh) 2005-06-29 2008-07-02 株式会社Adeka 树脂添加剂组合物和其树脂组合物
WO2007042899A2 (en) 2005-10-10 2007-04-19 Council Of Scientific And Industrial Research Human microrna targets in hiv genome and a method of identification thereof
WO2007103162A2 (en) * 2006-03-01 2007-09-13 Samaritan Pharmaceuticals, Inc. Structure based drug design of steroidogenesis inhibitors
CA2656825C (en) 2006-06-22 2013-12-10 Prana Biotechnology Limited Method of treatment and agents useful for same
FR2903312B1 (fr) 2006-07-05 2008-09-26 Univ Aix Marseille Ii Utilisation d'inhibiteurs d'hmg-coa reductase et de farnesyl-pyrophosphate synthase dans la preparation d'un medicament
US8030487B2 (en) 2006-07-07 2011-10-04 Targegen, Inc. 2-amino—5-substituted pyrimidine inhibitors
TW200820970A (en) 2006-09-21 2008-05-16 Nicholas Piramal India Ltd Compounds for the treatment of metabolic disorders
MX2009007661A (es) 2007-01-19 2009-12-14 Ardea Biosciences Inc Inhibidores de mek.
FR2912745A1 (fr) 2007-02-19 2008-08-22 Centre Nat Rech Scient Nouveaux composes derives d'indole et compositions pharmaceutiques les contenant
US20100249184A1 (en) 2007-03-16 2010-09-30 Mount Sinai School Of Medicine Induction and/or maintenance of tumor dormancy by disruption of urokinase plasminogen activator receptor-integrin interaction
EA017389B1 (ru) 2007-03-23 2012-12-28 Амген Инк. Гетероциклические соединения и их применение
PL2139881T3 (pl) * 2007-04-04 2012-04-30 Pulmagen Therapeutics Asthma Ltd Chinoliny i ich zastosowanie terapeutyczne
US8222634B2 (en) 2007-05-17 2012-07-17 Lg Chem, Ltd. Anthracene derivatives and organic electronic device using the same
WO2008153692A2 (en) 2007-05-22 2008-12-18 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Microrna expression profiling of cerebrospinal fluid
UY31272A1 (es) 2007-08-10 2009-01-30 Almirall Lab Nuevos derivados de ácido azabifenilaminobenzoico
AU2008286760A1 (en) 2007-08-15 2009-02-19 Memory Pharmaceuticals Corporation 3' substituted compounds having 5-HT6 receptor affinity
WO2009029617A1 (en) 2007-08-27 2009-03-05 Kalypsys, Inc. Diarylamine-substituted quinolones useful as inducible nitric oxide synthase inhibitors
EP2235213A2 (en) 2007-12-20 2010-10-06 Celgene Corporation Use of micro-rna as a biomarker of immunomodulatory drug activity
KR100974562B1 (ko) 2007-12-31 2010-08-06 다우어드밴스드디스플레이머티리얼 유한회사 신규한 유기 발광 화합물 및 이를 발광재료로서 채용하고있는 유기 발광 소자
FR2926297B1 (fr) 2008-01-10 2013-03-08 Centre Nat Rech Scient Molecules chimiques inhibitrices du mecanisme d'epissage pour traiter des maladies resultant d'anomalies d'epissage.
JP2009174368A (ja) 2008-01-23 2009-08-06 Toyota Motor Corp 内燃機関の排気浄化装置
CN102015650A (zh) * 2008-03-07 2011-04-13 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 作为5-ht5a受体拮抗剂的2-氨基喹啉衍生物
EP2271931A4 (en) 2008-04-25 2011-10-12 Merck Sharp & Dohme MICRO-RNA BIOMARKERS FOR TISSUE INJURIES
US20160041153A1 (en) 2008-11-12 2016-02-11 Kirk Brown Biomarker compositions and markers
DE102009008851A1 (de) * 2009-02-13 2010-08-19 Amw Gmbh Transdermales System mit Immunmodulator
JP2012520891A (ja) 2009-03-19 2012-09-10 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング スルホニルキノリンの製造方法
WO2010127208A1 (en) * 2009-04-30 2010-11-04 Forest Laboratories Holdings Limited Inhibitors of acetyl-coa carboxylase
JP5647673B2 (ja) 2009-05-05 2015-01-07 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング ブロモ置換キノリンの調製方法
CN102459272B (zh) 2009-05-27 2014-08-06 健泰科生物技术公司 对P110δ具有选择性的为PI3K抑制剂的二环嘧啶化合物和使用方法
EP2266972A1 (en) 2009-06-12 2010-12-29 Splicos New chemical molecules that inhibit the splicing mechanism for treating diseases resulting from splicing anomalies
HRP20191460T1 (hr) 2009-06-12 2019-11-15 Abivax Spojevi korisni za liječenje raka
US10253020B2 (en) * 2009-06-12 2019-04-09 Abivax Compounds for preventing, inhibiting, or treating cancer, AIDS and/or premature aging
SI2440547T1 (sl) 2009-06-12 2023-05-31 Abivax Nove kemične molekule, ki zavirajo mehanizem spajanja za zdravljenje bolezni, ki so posledica napak pri spajanju
US8962583B2 (en) * 2009-06-25 2015-02-24 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Treatment of inflammatory diseases using miR-124
WO2011041847A1 (en) * 2009-10-09 2011-04-14 Cbio Limited Chaperonin 10 variants
EP2496714B1 (en) 2009-11-04 2016-08-31 DiamiR, LLC Methods of using micro-rna from bodily fluids for diagnosis and monitoring of mild cognitive impairment
PT2585470T (pt) * 2010-06-23 2017-03-06 Hanmi Science Co Ltd Novos derivados fundidos de pirimidina para inibição da actividade da tirosina cinase
EP2465502A1 (en) 2010-12-15 2012-06-20 Société Splicos Compounds useful for treating AIDS
US9290453B2 (en) * 2010-12-23 2016-03-22 Merck Sharp & Dohme Corp. Quinolines and aza-quinolines as CRTH2 receptor modulators
US20140051085A1 (en) 2011-03-01 2014-02-20 The Scripps Research Institute Direct reprogramming of human fibroblasts to functional neurons under defined conditions
AU2012309226B2 (en) 2011-09-15 2017-12-14 Self-Screen B.V. Methylation analysis on self-samples as triage tool for HPV-positive women
JP2016504268A (ja) 2012-10-04 2016-02-12 オヤジェン インコーポレイテッドＯｙａＧｅｎ， Ｉｎｃ． Ｖｉｆの自己会合を撹乱する抗ｈｉｖ剤としての小分子及びその使用方法
EP2757161A1 (en) * 2013-01-17 2014-07-23 Splicos miRNA-124 as a biomarker of viral infection
CA2916623C (en) * 2013-07-05 2021-09-14 Abivax Bicyclic compounds useful for treating diseases caused by retroviruses
EP3110415A4 (en) * 2014-02-28 2017-12-13 The Texas A & M University System Compositions and methods for inhibition of mycobacteria
EP2974729A1 (en) * 2014-07-17 2016-01-20 Abivax Quinoline derivatives for use in the treatment of inflammatory diseases
EP2975034A1 (en) 2014-07-17 2016-01-20 Abivax A quinoline derivative for the treatment of inflammatory diseases and AIDS
EP3058940A1 (en) 2015-02-23 2016-08-24 Abivax Quinoline derivatives for use in the treatment or prevention of viral infection
EP3059236A1 (en) 2015-02-23 2016-08-24 Abivax A new quinoline derivative for use in the treatment and prevention of viral infections
PT3429998T (pt) 2016-03-18 2021-11-04 Prosynergia S A R L Processo para preparação de derivados de quinolin-2-il-fenilamina e seus sais
EP3669873A1 (en) * 2018-12-20 2020-06-24 Abivax Quinoline derivatives for use ine the traeatment of inflammation diseases

Also Published As

Publication number Publication date
US12202804B2 (en) 2025-01-21
KR20240161231A (ko) 2024-11-12
AU2023202386A1 (en) 2023-06-29
JP2024180386A (ja) 2024-12-26
EP3169328A2 (en) 2017-05-24
JP6884690B2 (ja) 2021-06-09
RU2017101407A3 (sr) 2019-01-17
ES2914066T3 (es) 2022-06-07
MX383351B (es) 2025-03-13
EP3998070B1 (en) 2024-12-18
CN117379426A (zh) 2024-01-12
AU2020200333A1 (en) 2020-02-06
DK3169328T3 (da) 2022-05-30
DK3998070T3 (da) 2025-01-20
AU2015289033A1 (en) 2017-02-02
US11649210B2 (en) 2023-05-16
RU2021134325A (ru) 2021-12-02
JP2017522313A (ja) 2017-08-10
JP7550425B2 (ja) 2024-09-13
JP7208957B2 (ja) 2023-01-19
US20250100971A1 (en) 2025-03-27
KR102537958B1 (ko) 2023-05-30
HRP20250093T1 (hr) 2025-03-28
LT3169328T (lt) 2022-06-10
CA2954951A1 (en) 2016-01-21
US20210047273A1 (en) 2021-02-18
KR20170032361A (ko) 2017-03-22
US20190382347A1 (en) 2019-12-19
PL3169328T3 (pl) 2022-07-11
FI3998070T3 (fi) 2025-01-21
SI3998070T1 (sl) 2025-03-31
CN107207463A (zh) 2017-09-26
MX2017000533A (es) 2017-04-27
EP3169328B1 (en) 2022-03-09
PL3998070T3 (pl) 2025-03-24
CN117281805A (zh) 2023-12-26
CU20170004A7 (es) 2017-06-05
PT3998070T (pt) 2025-02-03
MX2021006754A (es) 2021-07-15
CN117568459A (zh) 2024-02-20
AU2021201960A1 (en) 2021-04-29
HUE070068T2 (hu) 2025-05-28
KR20230078827A (ko) 2023-06-02
RU2017101407A (ru) 2018-08-17
CN117205212A (zh) 2023-12-12
RU2760686C2 (ru) 2021-11-29
HRP20220598T1 (hr) 2022-06-24
US10981874B2 (en) 2021-04-20
EP3998070A1 (en) 2022-05-18
CY1125586T1 (el) 2024-12-13
PT3169328T (pt) 2022-05-27
HUE058713T2 (hu) 2022-09-28
CU24565B1 (es) 2022-01-13
JP2021038219A (ja) 2021-03-11
AU2021201960B2 (en) 2023-02-23
SI3169328T1 (sl) 2022-11-30
US10435370B2 (en) 2019-10-08
WO2016009065A3 (en) 2016-03-24
US11649211B2 (en) 2023-05-16
CU20190043A7 (es) 2019-12-03
CA3166018A1 (en) 2016-01-21
AU2020200333B2 (en) 2021-01-21
US20170204063A1 (en) 2017-07-20
EP2974729A1 (en) 2016-01-20
US20220315535A1 (en) 2022-10-06
CN107207463B (zh) 2023-10-24
AU2023202386B2 (en) 2024-06-20
WO2016009065A2 (en) 2016-01-21
CA2954951C (en) 2022-10-18
CN117281805B (zh) 2026-03-17
BR112017000682A2 (pt) 2018-01-09
CU24459B1 (es) 2019-12-03
US20210087145A1 (en) 2021-03-25
JP2023052265A (ja) 2023-04-11
ES3009243T3 (en) 2025-03-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP7550425B2 (ja) 炎症性疾患の処置のためのキノリン誘導体
RU2851631C2 (ru) Производные хинолина для лечения воспалительных заболеваний
HK40102984A (zh) 用於治疗炎性疾病的喹啉衍生物
HK1241868B (zh) 用於治疗炎性疾病的喹啉衍生物
HK1241868A1 (en) Quinoline derivatives for the treatment of inflammatory diseases