RS64258B1 - Heteroarilfenoksi benzamid ligandi kapa opioida - Google Patents

Heteroarilfenoksi benzamid ligandi kapa opioida

Info

Publication number
RS64258B1
RS64258B1 RS20230453A RSP20230453A RS64258B1 RS 64258 B1 RS64258 B1 RS 64258B1 RS 20230453 A RS20230453 A RS 20230453A RS P20230453 A RSP20230453 A RS P20230453A RS 64258 B1 RS64258 B1 RS 64258B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
methyl
pyrazol
phenoxy
pyrrolidin
benzamide
Prior art date
Application number
RS20230453A
Other languages
English (en)
Inventor
Kapildev Kashmirilal Arora
Michael Aaron Brodney
Matthew Francis Dunn
Michael Eric Green
Natasha Mariam Kablaoui
Gregory Wayne Kauffman
Scot Richard Mente
Justin Ian Montgomery
Danica Antonia Rankic
Bruce Nelsen Rogers
Patrick Robert Verhoest
Original Assignee
Pfizer
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Pfizer filed Critical Pfizer
Publication of RS64258B1 publication Critical patent/RS64258B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D231/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings
    • C07D231/02—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings
    • C07D231/10—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D231/14—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D231/18—One oxygen or sulfur atom
    • C07D231/20—One oxygen atom attached in position 3 or 5
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
    • C07B2200/13—Crystalline forms, e.g. polymorphs

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Description

Opis
OBLAST PRONALASKA
[0001] Ovaj pronalazak se generalno odnosi na jedinjenja koja su ligandi kapa opioida, na primer antagonisti kapa opioida i na farmaceutske kompozicije koje sadrže jedinjenja i na njihovu upotrebu u postupcima tretmana u kojima se koriste jedinjenja.
OSNOVA PRONALASKA
[0002] Opioidni ligandi deluju na jedan ili više od četiri poznata opioidna receptora, to jest µ (MOR), δ (DOR), κ (KOR) i receptore slične opioidu (ORL). Opioidni receptori pripadaju klasi A (slične rodopsinu) γ subfamiliji G protein-udvojenih receptora (GPCRs) i obično imaju sedmo-transmembransku spiralnu građu. Od četiri opioidna receptora, µ (MOR), δ (DOR) i κ (KOR) su bliže povezani, jer dele približno 70% homologija sekvenci u njihovim sedam-transmembranskim domenima sa više varijacija koje su prisutne u njihovim ekstracelularnim petljama i čak većim varijacijama u njihovim N i C terminusima. Kristalna struktura humanog KOR (hKOR) je rešena sa receptorom u kompleksu sa selektivnim antagonist ligandom JDTic, to jest ((3R)-7-hidroksi-N-[(1S)-1-(((3R,4R)-4-(3-hidroksifenil)-3,4-dimetil-1-piperidinil)metil)-2-metilpropil]-1,2,3,4-tetrahidro-3-izohinolinkarboksamidom. Utvrđeno je da je džep za vezivanje hKOR relativno velik i delimično prekriven ekstracelularnom petljom 2 (ECL2) β-ukosnice, sa relativno uskim i dubokim džepom koji sadrži aspartatni bočni lanac (Asp138). Aspartatni ostatak je sačuvan u svim aminergičnim GPCR-ovima, uključujući opioidne receptore i kritičan je pri selektivnosti aminergičnih receptora u odnosu na ligande koji sadrže protonirani amin. Wu, H. i saradnici "Structure of the human kappa opioid receptor in complex with JDTic" Nature 2012 485(7398): 327-332.
[0003] Farmakološke studije su zabeležile da je KOR Gi/o-udvojeni receptor koji je selektivno aktiviran endogenim dinorfin opioidnim peptidima. Utvrđeno je da se KOR široko ekspresuje u mozgu, kičmenoj moždini i perifernim tkivima. Određene oblasti mozga u kojima je nađen KOR su povezane sa nagradom, kognitivnom funkcijom i odgovorima na stres i uključuju ventralnu tegmentalnu oblast (VTA), nucleus accumbens, prefrontalni korteks, hipokampus, strijatum, amigdalu, locus coeruleus, supstanciju nigra, dorzalno rafa jezgro i hipotalamus. Dokazi su pokazali da su vrednosti dinorfina povećane u uslovima bola i stresa i da poremećaj KOR može da proizvede anti-stres efekat. Utvrđeno je da stres i zloupotreba lekova unakrsno moduliraju molekularne puteve zavisne od dinorfina, što ukazuje na to da su oslobađanje dinorfina izazvano stresom i aktivacija KOR uključeni u farmakološke procese povezane sa depresijom i zloupotrebom supstanci. Ovakvi nalazi su stimulisali interes u traženju KOR antagonista kao potencijalne farmakoterapije za poremećaje kao što su depresija, anksioznost, poremećaji zavisnosti i drugi stresovi povezani sa psihijatrijskim stanjima. Na primer, jedinjenja KOR antagonisti mogu da budu korisna u tretmanu zavisnosti, kao što su povratna zavisnost, na lekovite supstance kao što su psihostimulansi kokain, amfetamin, metamfetamin i slično; opioide kao što su heroin, morfin, oksikodon, hidrokodon, hidromorfon i slično; nikotin; kanabinoidi, kao što je marihuana; i alkohol. Pored toga, KOR antagonisti mogu takođe da budu korisni za tretman depresije i drugih psihijatrijskih poremećaja. (Videti na primer Bruchas, M.R. i saradnici "The Dynorphin-Kappa Opioid System as Modulator of Stress-induced and Pro-addictive Behaviors", Brain Res.2010 February 16;
1314C:44;doi:10:1016/j.brain- res.2009.08.062; Lalanne, L. i saradnici "The kappa opioid receptor: from addiction to depression and back", Frontiers in Psychiatry 2014, 5, 170; doi: 10.3389/fpsyt.2014.00170; i Kissler, J.L. i saradnici "The One-Two Punch of Alcoholism: Role of Central Amygdala Dynorphinsl Kappa-Opioid Receptors" Biol. Psychiatry 2014, 75, 774-782; doi: 10.1016/j.biopsych.2013.03.014.)
[0004] Nova ili unapređena sredstva koja moduliraju (na primer antagoniziraju) kapa opioidne receptore su potrebni da obezbede bolje terapeutske opcije za tretman bolesti ili stanja povezanih sa neregulisanom aktivnošću kapa opioidnog receptora/dinorfin sistema, kao što su ona koja su ovde opisana. Takođe može da bude poželjno da se osmisle nova sredstva koja pokazuju selektivnost za kapa opioidni receptor u odnosu na blisko povezane mu i delta opioidne receptore. Videti na primer Urbano, M. i saradnici "Antagonists of the kappa opioid receptor", Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 2014, 24, 2021-2032; Munro, T.A. i saradnici "Selective κ Opioid Antagonists nor-BNI, GNTI i JDTic Have Low Affinities for Non- Opioid Receptors and Transporters", Plos One 2013, 8(8) e70701; oi:10.1371/journal.pone.0070701; Mitch, C.H. i saradnici "Discovery of Aminobenziloksiarilamids as κ Opioid Receptor Selective Antagonists: Application to Preclinical Development of κ Opioid Receptor Antagonist Receptor Occupancy Tracer", J. Med. Chem.2011, 54, 8000-8012; doi: 10.1021/jm2007789r; i Rorick-Kehn, L.M. i saradnici "Determining Pharmacological Selectivity of the Kappa Opioid Receptor Antagonist LY2456302 Using Pupillometry as Translational Biomarker in Rat i Human", International Journal of Neuropsychopharmacology 2015, 1-11; doi: 10.1093/ijnplpyu036.
[0005] US 2009/186873 A1 opisuje jedinjenja selektivne antagoniste kapa opioidnog receptora za upotrebu u lečenju psihijatrijskih poremećaja, koja se razlikuju od jedinjenja Formule I iz ovog pronalaska bar po tome što je supstituent R<4>na heterocikličnom prstenu koji sadrži azot 3,5-dimetilfenil.
KRATAK SADRŽAJ PRONALASKA
[0006] Prvo ostvarenje prvog aspekta iz ovog pronalaska je jedinjenje Formule I
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so; pri čemu je R<1>vodonik, fluor ili hidroksi grupa; R<2>i R<3>su svaki nezavisno vodonik ili fluor; X je CR<5>R<6>ili O; m je 1 ili 2; n je 0, 1 ili 2; R<4>je izabran iz grupe koja se sastoji od
R<5>i R<6>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik, fluor, hidroksi, C1-C3alkil i C1-C3alkoksi grupu; R<7>i R<8>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik, C1-C6alkil i C1-C6alkoksi grupu; pri čemu su C1-C6alkil i C1-C6alkoksi grupa opciono supstituisane sa jedan do tri fluora; i R<9>je u svakom pojavljivanju nezavisno izabran od fluora, C1-C3alkil i C1-C6alkoksi grupe, pri čemu su C1-C3alkil i C1-C6alkoksi grupa opciono supstituisane sa jedan do tri fluora.
[0007] Naredno ostvarenje ovog pronalaska je farmaceutska kompozicija koja uključuje jedinjenja Formule I, ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so zajedno sa farmaceutski prihvatljivim vehikulumom, razblaživačem ili nosačem. Ovde opisane farmaceutske kompozicije mogu da se koriste za modulaciju kapa opioidnog receptora (kao što je antagoniziranje kapa opioidnog receptora) kod pacijenta; i za lečenje bolesti ili poremećaja povezanih sa kapa opioidnim receptorom, kao što su neurološki poremećaj, neurokognitivni poremećaj, poremećaj zloupotrebe supstanci, depresivni poremećaj, anksiozni poremećaj, poremećaj povezan sa traumom i stresom ili poremećaj unosa hrane.
[0008] Naredno ostvarenje ovog pronalaska se odnosi na kristalne oblike 4-(4-{[(2S)-2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il] metil}fenoksi)benzamida, pri čemu svaki čvrsti oblik može jedinstveno da bude identifikovan pomoću više različitih analitičkih parametara, samih ili u kombinaciji, kao što su, ali bez ograničenja na: modeli pikova difrakcije X-zraka praška (PXRD) ili kombinacije dva ili više PXRD pikova;<13>C NMR hemijske promene čvrstog stanja (ssNMR) ili kombinacije dve ili više ssNMR hemijskih promena; i promene Raman pika ili kombinacije dve ili više promena Raman pika.
[0009] Na osnovu ovde datog otkrića, stručnjak sa uobičajenim iskustvom u tehnici će razumeti da prvi i drugi kristalni oblik 4-(4-{[(2S)-2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il] metil}fenoksi)benzamida (ovde označeni kao "Oblik 1" i "Oblik 2") mogu jedinstveno da budu identifikovani preko više različitih pikova spektra ili modela u različitim kombinacijama. Na primer, kristalni oblik 4-(4-{[(2S)-2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il] metil}fenoksi)benzamida (Oblik 2) može da se karakteriše listom pikova difrakcije X-zraka praška (PXRD) opisanom u Tabeli 9, listom Raman pika opisanom u Tabeli 10 i listom pikova NMR čvrstog stanja (ssNMR) opisanom u Tabeli 11 ili njihovim kombinacijama. Kristalni oblik 4-(4-{[(2S)-2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il] metil}fenoksi)benzamida (Oblik 1) može da se karakteriše listom Raman pika opisanom u Tabeli 16, ili listom pika NMR čvrstog stanja (ssNMR) opisanom u Tabeli 17 ili njihovim kombinacijama.
[0010] Naredno ostvarenje ovog pronalaska se odnosi na kristalni oblik 4-(4-{[(2S)-2-(3-metoksi-1- metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il] metil}fenoksi)benzamida (Oblik 2), pri čemu kristalni oblik ima analitički parametar izabran iz grupe koja se sastoji od: i) NMR spektra čvrstog stanja koji uključuje<13>C hemijske promene (ppm) za 37.9 ± 0.2, 119.6 ± 0.2, 124.2 ± 0.2, 126.4 ± 0.2 i 152.6 ± 0.2; ii) model difrakcije X-zraka praška koji uključuje pikove za uglove difrakcije (2θ) od 13.3 ± 0.2, 17.8 ± 0.2, 10.1 ± 0.2, 15.1 ± 0.2 i 24.7 ± 0.2; pri čemu je analiza difrakcije X-zraka izvedena na Bruker AXS D4 Endeavor difraktometru opremljenom sa izvorom Cu radijacije, prorezom divergencije od 0.6 mm, naponom i snagom cevi X-zraka od 40 kV i 40 mA, tim redom a rezultati su sakupljeni u Teta-2Teta goniometru za Cu k-alfa proseku od 3.0 do 40.0 stepeni 2-Teta koristeći veličinu faze od 0.037 stepeni i vreme po fazi od 10 sekundi i iii) Raman spektra koji sadrži promene Raman pika (cm<-1>) za 639 t2, 1174 t2, 1660 t2, 1597 ± 2 i 815 ± 2, pri čemu je Raman spektar sakupljen koristeći Nicolet NXR FT-Raman dodatak vezan za FT-IR držač opremljen sa 1064 nm Nd:YV04 laserom i detektorom germanijuma hlađenim tečnim azotom korišćenjem snage lasera od 0.5 W, 512 pridodatih skenova, 2 cm<-1>rezolucije i Happ-Genzel apodizacije.
[0011] Naredno ostvarenje ovog pronalaska se odnosi na farmaceutsku kompoziciju koja uključuje kristalni oblik 4-(4-f[(2S)-2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il] metil}fenoksi)benzamida (Oblik 2) u terapeutski efektivnoj količini u smeši sa najmanje jednim farmaceutski prihvatljivim ekscpijentom.
[0012] Ovde je takođe opisan kristalni oblik 4-(4-{[(2S)-2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il] metil}fenoksi)benzamida (Oblik 1), pri čemu kristalni oblik ima NMR spektar čvrstog stanja koji uključuje<13>C hemijske promene (ppm) za 121.6 ± 0.2, 127.9 ± 0.2 i 153.7 ± 0.2.
[0013] Ovde je dalje opisana farmaceutska kompozicija koja uključuje kristalni oblik 4-(4-{[(2S)-2-(3- metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il] metil}fenoksi)benzamida (Oblik 1) u terapeutski efektivnoj količini u smeši sa najmanje jednim farmaceutski prihvatljivim ekscpijentom.
[0014] Ovde je dalje opisana upotreba u postupku modulacije kapa opioidnih receptora, postupku koji uključuje primenu na pacijentu terapeutski efektivne količine kristalnog oblika 4-(4-{[(2S)-2-(3-metoksi-1-metil- 1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il] metil}fenoksi)benzamida (Oblik 1).
[0015] Naredno ostvarenje ovog pronalaska se odnosi na kristalni oblik 4-(4-{[(2S)-2-(3-metoksi-1- metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il] metil}fenoksi)benzamida (Oblik 2) za upotrebu u lečenju neuroloških poremećaja ili psihijatrijskih poremećaja.
[0016] Ovde je takođe opisana upotreba u postupku lečenja neurološkog poremećaja ili psihijatrijskog poremećaja kod pacijenta, u postupku koji uključuje primenu na pacijentu terapeutski efektivne količine kristalnog oblika 4-(4-{[(2S)-2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il] metil}fenoksi)benzamida (Oblik 1).
[0017] Dalji primeri kombinacija vrednosti karakterističnih pikova koje mogu da se koriste za identifikaciju Oblika 1 i Oblika 2 su niže opisani i ni na koji način ove primere kombinacija ne treba posmatrati kao ograničenje drugih kombinacija vrednosti pika koje su ovde otkrivene.
[0018] Ovde su takođe opisane upotrebe u postupcima tretmana koji koriste Jedinjenja Formule I, kao što su:
(1) upotreba u postupcima modulacije kapa opioidnog receptora (kao što je antagonizacija kapa opioidnog receptora), primenom terapeutski efektivne količine jedinjenja Formule I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli i farmaceutski prihvatljivog vehikuluma, razblaživača ili nosača, na pacijentu kome je to potrebno. (2) upotreba u postupcima za lečenje poremećaja stanja ili bolesti centralnog nervnog sistema i neuroloških poremećaja u kojima mogu da budu uključeni kapa opioidni receptori kao što su kognitivni poremećaji (uključujući demenciju povezanu sa HIV, Alzheimer-ovu bolest i blago kognitivno oštećenje ("MCI"), demenciju Lewy-jevi tela, vaskularnu demenciju, demenciju povezanu sa lekovima); poremećaja povezanih sa spazmom mišića, slabošću, tremorom ili horeom (Parkinsonova bolest, demencija Lewy-jevog tela, Huntington-ova bolest, tardivna diskinezija, frontotemporalna demencija, Creutzfeldt-Jacob bolest, mioklonusi, distonija, delirijum, Gilles de la Tourette-ov sindrom, epolepsija, mišićni spazmi); poremećaj sna (uključujući hipersomniju, poremećaj cirkadijalnog ritma spavanja, insomniju, parasomniju); i psihijatrijske poremećaje ako su povezani sa anksioznošću (uključujući poremećaj akutnog stresa, opšti anksiozni poremećaj, poremećaj socijalne anksioznosti, poremećaj panike, poremećaj post-traumatičnog stresa, agorofobiju i opsesivno-kompulsivni poremećaj); poremećaj kontrole impulsa (uključujući kompulsivno kockanje i povremeni eksplozivni poremećaj); poremećaje raspoloženja (uključujući bipolarni I poremećaj, bipolarni II poremećaj, maniju, izmešano afektivno stanje, veliku depresiju, hroničnu depresiju, sezonsku depresiju, psihotičnu depresiju, sezonsku depresiju, premenstrualni sindrom (PMS), premenstrualni disforični poremećaj (PDD) i postporođajnu depresiju); psihomotorni poremećaj; psihotične poremećaje (uključujući šizofreniju, šizoafektivni poremećaj, šizofreni oblik i deluzioni poremećaj); poremećaj zloupotrebe supstanci uključujući zavisnost od droge (to jest, zavisnost uključujući povratnu zavisnost), kao što je zavisnost od narkotika (uključujući zavisnost od opioida kao što su heroin, oksikodon, morfin, hidrokodon, hidromorfon i slično), alkoholizam, zavisnost od amfetamina, zavisnost od metamfetamina, zavisnost od kokaina, zavisnost od nikotina, zavisnost od kanabinoida (kao što je zavisnost od marihuane (THC) i sindrom odvikavanja od lekova); poremećaj ishrane (uključujući anoreksiju, bulimiju, poremećaj osesivnog prejedanja, hiperfagiju, gojaznost, poremećaje kompulsivnog prejedanja i pagofagiju); poremećaj seksualne disfunkcije, kao što je prevremena ejakulacija; i pedijatrijski psihijatrijski poremećaji (uključujući poremećaj smanjene pažnje, poremećaj nedostatka pažnje/hiperaktivnost,poremećaj ponašanja i poremećaj iz spektra autizma) kod sisara, preferirano ljudi, uključujući primenu na tom sisaru terapeutski efektivne količine jedinjenja Formule I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli. Jedinjenja Formule I mogu takođe da budu korisna za poboljšanje kognitivnog deficita i memorije (i kratkotrajnog i dugotrajnog) i sposobnosti učenja. Revidiran tekst četvrtog izdanja Diagnostic i Statistical Manual of Mental Disorders (DSM-IV-TR) (2000, American Psychiatric Association, Washington, D.C.) daje dijagnostičke alate za identifikaciju brojnih poremećaja koji su ovde opisani. Stručnjak sa iskustvom će da prepozna da postoje alternativne nomenklature, nozologije i sistemi klasifikacije za poremećaje koji su ovde opisani, uključujući one kako je opisano u DMS-IV-TR i da ova terminologija i sistemi klasifikacije evoluiraju sa naučnim napretkom medicine; (3) upotreba u postupcima za lečenje neuroloških poremećaja (kao što su sindromi spinocerebralne ataksije, Parkinsonova bolest (to jest diskinezija indukovana levodopom kod Parkinsonove bolesti; kognitivni poremećaj; ili poremećaj sna) ili psihijatrijskih poremećaja (kao što je anksioznost; činjenični poremećaj; poremećaj impulsivne kontrole; poremećaj raspoloženja; psihomotorni poremećaj; psihotični poremećaj; zavisnost od lekova; poremećaj ishrane; i pedijatrijski psihijatrijski poremaji) kod sisara, preferirano ljudi, uključujući primenu na tom sisaru terapeutski efektivne količine jedinjenja Formule I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli;
(4) upotreba u postupcima tretmana poremećaja hranjenja i/ili ishrane (na primer, poremećaj izbegavanja/ograničenja uzimanja hrane, anoreksija nervoza, bulimija nervoza, poremećaj prejedanja) ili gojaznost; i
(5) upotreba u postupcima tretmana poremećaja zloupotrebe supstanci uključujući zavisnost, kao što su negativna afektivna stanja u toku odvikavanja kao i povratne zavisnosti, pri čemu zavisnost od supstanci uključuje, ali bez ograničenja na, alkohol, kokain, amfetamin, metamfetamin, opioid, kanabinoid (marihuana), sedative, hipnotike, anksiolitike ili zavisnost od nikotina (duvan).
[0019] Ovde su dalje opisane kombinovane terapije pri čemu jedinjenja iz ovog pronalaska mogu da se koriste zajedno sa drugim farmaceutskim sredstvima za upotrebu u tretmanu bolesti, stanja i/ili poremećaja koji su ovde opisani. Prema tome, ovde su takođe opisani postupci lečenja koji uključuju primenu jedinjenja iz ovog pronalaska u kombinaciji sa drugim farmaceutskim sredstvima.
[0020] Druge karakteristike i prednosti ovog pronalaska će biti jasne iz ovih specifikacija i pridodatih zahteva koji opisuju pronalazak.
KRATAK OPIS SLIKA
[0021]
Slika 1 opisuje karakteristike PXRD modela Oblika 2 dobijenog na Bruker AXS D4 Endeavor difraktometru opremljenim sa izvorom Cu zračenja. Prorez divergencije je podešen na 0.6 mm dok druge optike koriste promenljive proreze. Difraktovano zračenje je detektovano pomoću PSD-Lynx Eye detektora.
Slika 2 opisuje karakterističan Raman spektar Oblika 1 dobijen na Nicolet NXR FT-Raman dodatku vezanom za FT-IR držač. Spektrometar je opremljen sa 1064 nm Nd:YVO4 laserom i detektorom germanijuma hlađenim tečnim azotom.
Slika 3 opisuje karakterističan Raman spektar Oblika 2 dobijen na Nicolet NXR FT-Raman dodatku vezanom za FT-IR držač. Spektrometar je opremljen sa 1064 nm Nd:YVO4 laserom i detektorom germanijuma hlađenim tečnim azotom.
Slika 4 opisuje karakterističan<13>C NMR spektar čvrstog stanja Oblika 1 dobijen na CPMAS sondi postavljenoj u Bruker-BioSpin Avance III 500 MHz (<1>H frekvencija) NMR spektrometru.
Slika 5 opisuje karakterističan<13>C NMR spektar čvrstog stanja Oblika 2 dobijen na CPMAS sondi postavljenoj u Bruker-BioSpin Avance III 500 MHz (<1>H frekvencija) NMR spektrometru.
DETALJAN OPIS PRONALASKA
[0022] Ovaj pronalazak može mnogo lakše da se razume preko niže datog detaljnog opisa primernih ostvarenja iz pronalaska i primera koji su ovde uključeni.
[0023] U ovoj specifikaciji i u zahtevima koji slede, pažnja će biti posvećena brojnim nazivima koji će da budu definisani tako da imaju sledeća značenja:
kako se ovde koristi, "poremećaji hrane i ishrane" se odnose na bolesti u kojima pacijent pati od poremećaja u svom ponašanju u ishrani i povezanim mislima i emocijama. Reprezentativni primeri poremećaja hrane i ishrane uključuju prejedanje, bulimiju nervoza, anoreksiju nervoza, poremećaj izbegavanja/ograničenja unosa hrane, poremećaj prejedanja, kompulsivnu dijetu, poremećaj ishrane u vezi sa noćnim spavanjem, picu, Prader-Willi sindrom i sindrom uzimanja hrane noću.
[0024] "Pacijent" se odnosi na toplokrvne životinje kao što su, na primer, zamorci, miševi, pacovi, gerbili, mačke, zečevi, psi, goveda, koze, ovce, konji, majmuni, šimpanze i ljudi.
[0025] Naziv "farmaceutski prihvatljiv" označava da supstanca ili kompozicija mora da bude kompatibilna, hemijski i/ili toksikološki, sa drugim sastojcima koji se nalaze u formulaciji, i/ili sa sisarom koji će da bude tretiran sa njom.
[0026] Naziv "terapeutski efektivna količina" označava količinu jedinjenja iz ovog pronalaska
1
koja (i) leči ili sprečava određenu bolest, stanje ili poremećaj, (ii) ublažava, poboljšava ili eliminiše jedan ili više simptoma određene bolesti, stanja ili poremećaja, ili (iii) sprečava ili odlaže početak jednog ili više simptoma određene bolesti ili poremećaja koji su ovde opisani. Pažnja je usmerena na tretman bolesti ili poremećaja posredovanih kapa opioidom (na primer, neurološki poremećaj, neurokognitivni poremećaj, poremećaj zloupotrebe supstanci, depresivni poremećaj, anksiozni poremećaj, poremećaj povezan sa traumom i stresom i poremećaj ishrane), terapeutski efektivna količina se odnosi na onu količinu koja ima efekat ublažavanja do nekog nivoa (ili, na primer, eliminacije) jednog ili više simptoma povezanih sa bolešću ili poremećajem posredovanih kapa opioidom (na primer, neurološki poremećaj izabran od sindroma spinocerebralne ataksije i diskinezije u Parkinsonovoj bolesti indukovane levodopom; neurokognitivni poremećaj izabran od neuropsihijatrijskih simptoma zbog Alzheimer-ove bolesti (na primer, apatija, anksioznost i depresija) i front-temporalna demencija; poremećaj zloupotrebe supstanci izabran od poremećaja uzimanja stimulansa, odvikavanja od stimulansa, poremećaj uzimanja alkohola, odvikavanja od alkohola, poremećaj korišćenja duvana, odvikavanja od duvana, poremećaj uzimanja opioida, odvikavanja od opioida, poremećaj korišćenja kanabisa, poremećaj korišćenja sedativa, poremećaj uzimanja hipnotika i poremećaj uzimanja naksiolitika; depresivni poremećaj izabran od poremećaja velike depresije, poremećaja uporne depresije, bipolarnog poremećaja, i premenstrualnog disforičnog poremećaja; anksiozni poremećaj izabran od poremećaja društvene anksioznosti, opsesivno-kompulsivnog poremećaja, poremećaja specifičnih fobija, paničnog poremećaja i poremećaja opšte anksioznosti; poremećaj povezan sa traumom i stresom koji je poremećaj postraumatičnog stresa; poremećaj ishrane izabran od poremećaja izbegavanja/ograničenja unosa hrane, anoreksija nervoza, bulimija nervoza i poremećaj prejedanja).
[0027] Naziv "lečenje", kako se ovde koristi, ukoliko nije drugačije navedeno, označava preobražaj, ublažavanje, inhibiciju napredovanja, odlaganje napredovanja, odlaganje početka, ili sprečavanje bolesti, poremećaja ili stanja na koje se taj termin primenjuje ili jednog ili više simptoma tih bolesti, poremećaja ili stanja. Naziv "tretman", kako se ovde koristi, ukoliko nije drugačije navedeno, se odnosi na čin lečenja kako je "lečenje" neposredno prethodno definisano. Naziv "lečenje" takođe uključuje pomoćni i neo-pomoćni tretman subjekta. Da bi se izbegla sumnja, pažnja usmerena na "tretman" uključuje pažnju na kurativni, palijativni i profilaktički tretman i na primenu medikamenta za upotrebu u ovakvom tretmanu.
[0028] Naziv "alkil" se odnosi na ravan ili račvasti lanac zasićenog hidrokarbil supstituenta (to jest, substituent dobijen od ugljovodonika uklanjanjem vodonika); u jednom ostvarenju sadrži od jedan do šest atoma ugljenika (C1-C6alkil). U ne-ograničavajuće primere ovakvih supstituenata spadaju metil, etil, propil (uključujući n-propil i izopropil), butil (uključujući nbutil, izobutil, sec-butil i terc-butil), pentil, izoamil, heksil i slično. Naredno ostvarenje je alkil grupa koja sadrži od jedan do tri ugljenika (C1-C3alkil), koja uključuje metil, etil, propil i izopropil.
[0029] Naziv "alkoksi" se odnosi na ravan ili račvast lanac zasićenog hidrokarbil supstituenta vezanog za kiseonični radikal (to jest, supstituent dobijen od ugljovodničnog alkohola uklanjanjem vodonika iz OH grupe); u jednom ostvarenju sadrži od jedan do šest atoma ugljenika (C1-C6alkoksi). Ne-ograničavajući primeri ovakvih supstituenta uključuju metoksi, etoksi, propoksi (uključujući n-propoksi i izopropoksi), butoksi (uključujući n-butoksi, izobutoksi, sec-butoksi i terc-butoksi), pentoksi, heksoksi i slično. Naredno ostvarenje je alkoksi grupa koja sadrži od jedan do tri ugljenika (C1-C3alkoksi) uključujući metoksi, etoksi, propoksi i izopropoksi.
[0030] U nekim slučajevima, broj atoma ugljenika u hidrokarbil supstituentu (to jest alkil) je naveden prefiksom "Cx-Cy-" ili "Cx-y", pri čemu je x minimalni a y je maksimalni broj atoma ugljenika u supstituentu. Prema tome, na primer, "C1-C6-alkil" ili " C1-6alkil" se odnosi na alkil supstituent koji sadrži od 1 do 6 atoma ugljenika. Kao dalja ilustracija, "C1-C3alkil" se odnosi na supstituent koji sadrži od 1 do 3 atoma ugljenika.
[0031] Naziv "hidroksi" ili "hidroksil" se odnosi na -OH grupu. Kada se koristi u kombinaciji sa drugim nazivom(ima), prefiks "hidroksi" ukazuje da je supstituent za koji je prefiks vezan supstituent sa jednim ili više hidroksi supstituenata. Jedinjenja u kojima se nalazi ugljenik za koji je vezano jedan ili više hidroksi supstituenata uključuju, na primer, alkohole, enole i fenole. Naziv "fluoro" se odnosi na fluor (koji može da bude označen kao -F).
[0032] Ukoliko su supstituenti opisani kao "nezavisni" koji imaju više od jedne promenljive, svaki slučaj supstituenta je nezavisno izabran od drugog(ih) sa liste mogućih promenljivih. Prema tome, svaki supstituent može da bude identičan sa ili različit od drugog supstituenta(ata).
[0033] Ako su supstituenti opisani kao "nezavisno izabrani" iz grupe, svaki slučaj supstituenta je izabran nezavisno od drugog(ih). Prema tome, svaki supstituent može da bude identičan sa ili različit od drugog supstituenta(ata).
[0034] Kako se ovde koristi, naziv "Formula I" može da se odnosi na "jedinjenje(a) iz pronalaska," "ovaj pronalazak," i "jedinjenje Formule I." Ovakvi nazivi su takođe definisani da uključe sve oblike jedinjenja Formule I, uključujući hidrate, solvate, izomere, kristalne i ne-kristalne oblike, izomorfe, polimorfe i njihove metabolite. Na primer, jedinjenja iz pronalaska, ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, mogu da egzistiraju u nesolvatisanim i solvatisanim oblicima. Kada su rastvarač ili voda čvrsto vezani, kompleks će da ima jasno definisanu stehiometriju nezavisno od vlage. Međutim, kada su rastvarač ili voda slabo vezani, kao u kanalnim solvatima i higroskopnim jedinjenjima, sadržaj vode/rastvarača će da zavisi od vlage i uslova sušenja. U ovim slučajevima, ne-stehiometrija će da bude norma.
[0035] Jedinjenja iz pronalaska mogu da egzistiraju kao klatrati ili drugi kompleksi (uključujući ko-kristale). U okvir pronalaska su uključeni kompleksi kao što su klatrati, kompleksi inkluzije lek-domaćin u kojima su lek i domaćin prisutni u stehiometrijskim ili nestehiometrijskim količinama. Takođe su uključeni kompleksi jedinjenja iz pronalaska koji sadrže dve ili više organskih i/ili neorganskih komponenti koje mogu da budu u stehiometrijskim ili ne-stehiometrijskim količinama. Nastali kompleksi mogu da budu jonizovani, delimično jonizovani ili ne-jonizovani. Za pregled ovakvih kompleksa, videti J. Pharm. Sci., 64 (8), 1269-1288 by Haleblian (August 1975). Ko-kristali se obično definišu kao kristalni kompleksi molekularno neutralnih konstituenata koji su međusobno vezani preko ne-kovalentnih interakcija, ali takođe mogu da budu kompleks neutalne molekule sa solju. Ko-kristali mogu da se izrade kristalizacijom otopine, rekristalizacijom iz rastvarača ili zajedničkim fizičkim usitnjavanjem komponenti; videti O. Almarsson and M. J. Zaworotko, Chem. Commun. 2004, 17, 1889-1896. Za opšti pregled multi-komponentnih kompleksa, videti J. K. Haleblian, J. Pharm. Sci.1975, 64, 1269-1288.
[0036] Jedinjenja iz pronalaska (uključujući njihove soli) mogu takođe da egzistiraju u mezomorfnom stanju (mezofaza ili tečni kristal) kada se podvrgnu odgovarajućim uslovima. Mezomorfno stanje je međustanje između pravog kristalnog stanja i pravog tečnog stanja (ili otopina ili rastvor). Mezomorfizam koji nastaje kao rezultat promene u temperaturi je opisan kao ’termotropni’ a onaj koji nastaje dodavanjem druge komponente, kao što su voda ili drugi rastvarač, je opisan kao ’liotropni’. Jedinjenja koja imaju potencijal da formiraju liotropne mezofaze su opisana kao ’ampifilna’ i sadrže molekule koje poseduju jonske (kao što su -COO- Na<+>, -COO-K<+>, ili - SO3-Na<+>) ili ne-jonske (kao što je -N-N<+>( CH3)3) polarne vodeće grupe. Za više informacija, videti Crystals and the Polarizing Microscope by N. H. Hartshorne and A. Stuart, 4th Edition (Edward Arnold, 1970).
[0037] Okvirom pronalaska su takođe obuhvaćeni metaboliti Jedinjenja Formule I, to jest, jedinjenja formirana in vivo nakon primene leka.
1
[0038] Jedinjenja iz pronalaska mogu da imaju asimetrične atome ugljenika. Ugljenikugljenik veze jedinjenja iz pronalaska mogu ovde da budu označene korišćenjem pune linije (—), punog klina ( ) ili isprekidanog klina ( ). Upotreba pune linije za oznaku veza za asimetrične atome ugljenika treba da označi da su uključeni svi mogući stereoizomeri (na primer, specifični enantiomeri, racematne smeše, itd.) za taj atom ugljenika, ukoliko nije drugačije navedeno. Upotreba ili punog ili isprekidanog klina za opis veza na asimetričnim atomima ugljenika treba da označi da je uključen samo pokazani stereoizomer. Moguće je da jedinjenja Formule I mogu da sadrže više od jednog asimetričnog atoma ugljenika. U takvim jedinjenjima, upotreba pune linije za označavanje veza za asimetrične atome ugljenika treba da pokaže da su uključeni svi mogući stereoizomeri, ukoliko nije drugačije označeno. Na primer, ukoliko nije drugačije navedeno, to ukazuje da jedinjenja Formule I mogu da egzistiraju kao enantiomeri i diastereomeri ili kao racemati i njihove smeše. Upotreba pune linije za označavanje veza za jedan ili više asimetričnih atoma ugljenika u jedinjenju Formule I i upotreba punog ili isprekidanog klina za označavanje veza za druge asimetrične atome ugljenika u istom jedinjenju treba da pokaže da je prisutna smeša diastereomera.
[0039] Stereoizomeri Formule I uključuju cis i trans izomere, optičke izomere kao što su R i S enantiomeri, diastereomere, geometrijske izomere, rotacione izomere, konformacione izomere i tautomere jedinjenja iz pronalaska, uključujuči jedinjenja koja ispoljavaju više od jednog tipa izomerizma; i njihove smeše (kao što su racemati i diastereomerni parovi). Takođe su uključene soli nastale dodatkom kiseline ili dodatkom baze, pri čemu je kaunterjon optički aktivan, na primer, D-laktat ili L-lizin, ili racematni, na primer, DL-tartarat ili DL-arginin.
[0040] Naka od jedinjenja Formule I mogu da ispolje fenomen tautomerizma; treba razumeti da se ovakvi tautomeri takođe smatraju jedinjenjima iz pronalaska.
[0041] Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu takođe da se koriste u obliku soli dobijenih od neorganskih ili organskih kiselina. U zavisnosti od određenog jedinjenja, so jedinjenja može da ima prednost zbog jedne ili više fizičkih karakteristika soli kao što su pojačana farmaceutska stabilnost u uslovima različitih temperatura i vlažnosti ili tražena rastvorljivost u vodi ili ulju. U nekim slučajevima, so jedinjenja može takođe da se koristi kao pomoć pri izdvajanju, prečišćavanju i/ili rezoluciji jedinjenja.
[0042] Kada je so namenjena za primenu na pacijentu (za razliku od, na primer, upotrebe u in vitro kontekstu), so je preferirano farmaceutski prihvatljiva. Naziv "farmaceutski prihvatljiva so" se odnosi na so izrađenu kombinacijom jedinjenja Formule I sa kiselinom čiji se anjon, ili bazom čiji je katjon, generalno smatra pogodnim za ljudsku upotrebu. Farmaceutski prihvatljive soli su posebno korisne kao produkti postupaka iz ovog pronalaska zbog svoje veće rastvorljivosti u vodi u odnosu na osnovno jedinjenje. Za upotrebu u medicini, soli jedinjenja iz ovog pronalaska su netoksične "farmaceutski prihvatljive soli." Soli obuhvaćene nazivom "farmaceutski prihvatljive soli" su netoksične soli jedinjenja iz ovog pronalaska koje su generalno izrađene reakcijom slobodne baze sa odgovarajućom organskom ili neorganskom kiselinom.
[0043] Pogodne farmaceutski prihvatljive soli jedinjenja iz ovog pronalaska nastale dodatkom kiseline, kada je to moguće, uključuju one soli dobijene od neorganskih kiselina, kao što su hlorovodonična, bromovodonična, fluorovodonična, borna, fluoroborna, fosforna, metafosforna, azotna, karbonatna, sulfonska i sumporna kiselina i organskih kiselina kao što su sirćetna, benzensulfonska, benzojeva, limunska, etansulfonska, fumarna, glukonska, glikolna, izetionska, mlečna, laktobionska, maleinska, malinska, metansulfonska, trifluorometansulfonska, sukcinska, toluensulfonska, vinska i trifluorosirćetna kiselina.
Pogodne organske kiseline generalno obuhvataju, na primer, alifatične, cikloalifatične, aromatične, aralifatične, heterociklične, karbociklične i sulfonske grupe organskih kiselina.
[0044] Specifični primeri odgovarajućih organskih kiselina uključuju acetatnu, trifluoroacetatnu, formatnu, propionatnu, sukcinatnu, glikolatnu, glukonatnu, diglukonatnu, laktatnu, malatnu, vinsku kiselinu, citratnu, askorbatnu, glukuronatnu, maleatnu, fumaratnu, piruvatnu, aspartatnu, glutamatnu, benzoatnu, antranilatnu, stearatnu, salicilatnu, phidroksibenzoatnu, fenilacetatnu, mandelatnu, embonatnu (pamoatnu), metansulfonatnu, etansulfonatnu, benzensulfonatnu, pantotenatnu, toluensulfonatnu, 2-hidroksietansulfonatnu, sufanilatnu, cikloheksilaminosulfonatnu, algininsku kiselinu, β-hidroksibuternu kiselinu, galaktaratnu, galakturonatnu, adipatnu, alginatnu, butiratnu, kamforatnu, kamforsulfonatnu, ciklopentanpropionatnu, dodecilsulfatnu, glikoheptanoatnu, glicerofosfatnu, heptanoatnu, heksanoatnu, nikotinatnu, 2-naftalensulfonatnu, oksalatnu, palmoatnu, pektinatnu, 3-fenilpropionatnu, pikratnu, pivalatnu, tiocijanatnu i undekanoatnu.
[0045] Osism toga, kada jedinjenja iz pronalaska imaju kiseli ostatak, njihove odgovarajuće farmaceutski prihvatljive soli mogu da uključe soli lakih alkalnih metala, to jest, soli natrijuma ili kalijuma; soli zemno alkalnih metala, na primer, soli kalcijuma ili magnezijuma; i soli formirane sa odgovarajućim organskim ligandima, na primer, kvaternarne amonijumove soli. U narednom ostvarenju, bazne soli su formirane od baza koje grade netoksične soli, uključujući soli aluminijuma, arginina, benzatina, holina, dietilamina, diolamina, glicina, lizina, meglumina, olamina, trometamina i cinka.
1
[0046] Organske soli mogu da budu formirane od soli sekundarnih, tercijernih ili kvaternarnih amina, kao što su trometamin, dietilamin, N,N’-dibenziletilendiamin, hlorprokain, holin, dietanolamin, etilendiamin, meglumin (N-metilglukamin) i prokain. Bazne grupe koje sadrže azot mogu da bude kvaternizovane sa sredstvima kao što su niži alkil (C1-C6) halidi (na primer, metil, etil, propil i butil hloridi, bromidi i jodidi), dialkil sulfati (na primer, dimetil, dietil, dibutil i diamil sulfati), halidi dugog lanca (na primer, decil, lauril, miristil i stearil hloridi, bromidi i jodidi), arilalkil halidi (na primer, benzil i fenetil bromidi) i drugi.
[0047] U jednom ostvarenju, takođe mogu da se formiraju hemisoli kiselina i baza, na primer, hemisulfatne i hemikalcijumove soli.
[0048] Ovde su takođe opisani takozvani "prolekovi" jedinjenja iz pronalaska. Prema tome, neki derivati jedinjenja iz pronalaska koji sami mogu da imaju malu ili su bez farmakološke aktivnosti mogu, kada se primene u ili na organizam, da se konvertuju u jedinjenje iz pronalaska koje ima željenu aktivnost, na primer, hidrolitičkim cepanjem. Ovakvi derivati su označeni kao "prolekovi." Dodatne informacije o upotrebi prolekova mogu da se nađu u "Prodrugs as Novel Delivery Systems, Vol.4, ACS Symposium Series (T. Higuchi and V. Stella) i "Bioreversible Carriers in Drug Design," Pergamon Press, 1987 (ed. E. B. Roche, American Pharmaceutical Association). Kako je ovde opisano, prolekovi mogu, na primer, da se produkuju zamenom odgovarajućih funkcionalnih grupa prisutnih u bilo kom od jedinjenja Formule I sa nekim ostacima koji su stručnjaku sa iskustvom u tehnici poznati kao "proostaci" kako je opisano, na primer, u "Design of Prodrugs" od H. Bundgaard (Elsevier, 1985).
[0049] Ovaj pronalazak takođe uključuje izotopno obeležena jedinjenja, koja su identična sa jedinjenjima navedenim u Formuli I, ali je činjenica da su jedan ili više atoma zamenjeni sa atomom koji ima atomsku masu ili maseni broj različit od atomske mase ili masenog broja koji se uobičajeno nalazi u prirodi. Primeri izotopa koji mogu da budu inkorporirani u jedinjenja iz ovog pronalaska uključuju izotope vodonika, ugljenika, azota, kiseonika, sumpora, fluora i hlora, kao što su<2>H,<3>H,<13>C,<11>C,<14>C,<15>N,<18>O,<17>O,<32>P,<35>S,<18>F i<36>Cl, tim redom. Neka izotopno obeležena jedinjenja iz ovog pronalaska, na primer ona u koja su inkorporirani radioaktivni izotopi kao što su<3>H i<14>C su korisna u ispitivanju lekova i/ili distribucije u substratu tkiva. Tricijum, to jest,<3>H i ugljenik-14, to jest,<14>C, izotopi su posebno preferirani zbog svoje lake pripreme i detektabilnosti. Osim toga, supstitucija sa težim izotopima, kao što je deuterijum, to jest,<2>H, može da omogući neke terapeutske prednosti nastale zbog veće metaboličke stabilnosti, na primer, povećanja polu-života in vivo ili smanjenja zahtevanih doza i, na taj način, mogu da imaju prednost u nekim situacijama.
1
Supstitucija sa pozitron-emitujućim izotopima, kao što su<11>C,<18>F,<15>O i<13>N, može da bude korisna u studijama pozitron emisionom tomografijom (PET) za ispitivanje zauzetosti receptora substrata.
[0050] Izotopno obeležena jedinjenja Formule I iz ovog pronalaska mogu generalno da se izrade po procedurama otkrivenim u niže datim Šemama i/ili Primerima i Izradama, zamenom ne-izotopno obeleženog reagensa sa lako raspoloživim izotopno obeleženim reagensom.
[0051] Jedinjenja Formule I (uključujući njihove soli) mogu da egzistiraju u kontinuiranom čvrstom stanju u rasponu od potpuno amorfnih do potpuno kristalnih. Naziv ’amorfno’ se odnosi na stanje u kome materijal nema trajni raspored na molekularnom nivou i u zavisnosti od temperature može da ispoljava fizičke osobine čvrstog stanja ili tečnosti. Ovakvi materijali obično ne daju karakteristične modele difrakcije X-zraka a, kada ispoljavaju karakteristike čvrstog stanja, su mnogo formalnije opisani kao tečnost. Nakon zagrevanja, dolazi do promena iz prividno čvrstog stanja do materijala sa karakteristikama tečnosti, što se karakteriše promenom stanja, obično drugog reda (’tranzicija stakla’). Naziv ’kristalni’ se odnosi na čvrstu fazu u kojoj materijal ima jasno definisanu unutrašnju strukturu na molekularnom nivou i daje karakterističan model difrakcije X-zraka sa definisanim pikovima. Kada se ovakvi materijali dovoljno zagreju takođe ispoljavaju karakteristike tečnosti, ali se promena od čvrstog stanja u tečnost karakteriše promenom faze, obično prvog reda (’tačka topljenja’).
[0052] Naziv "polimorf" se odnosi na različite kristalne oblike istog jedinjenja i uključuju, ali bez ograničenja na, druge molekularne oblike čvrstog stanja, uključujući hidrate (na primer, vezanu vodu prisutnu u kristalnoj strukturi) i solvate (na primer, vezane rastvarače koji nisu voda) istog jedinjenja.
[0053] Naziv "solvat" opisuje molekularni kompleks koji uključuje lekovitu supstancu i stehiometrijsku ili ne-stehiometrijsku količinu jedne ili više molekula rastvarača (na primer, etanola). Kada je rastvarač čvrsto vezan za lek, nastali kompleks će da ima jasno definisanu stehiometriju koja je nezavisna od vlage. Međutim, kada je rastvarač slabo vezan, kao u kanalnim solvatima i higroskopnim jedinjenjima, sadržaj rastvarača će da zavisi od vlage i uslova sušenja. U takvim slučajevima, kompleks će često da bude ne-stehiometrijski. .
[0054] Naziv "hidrat" opisuje solvat koji uključuje lekovitu supstancu i stehiometrijsku ili nestehiometrijsku količinu vode.
[0055] Naziv "model difrakcije X-zraka praška" ili "PXRD model" se odnosi na eksperimentalno uočeni difraktogram ili parametre dobijene iz njega. Modeli difrakcije X-
1
zraka praška se karakterišu položajem pika (apscisa) i intenzitetima pika (ordinata).
[0056] Naziv "2 teta vrednost" ili "2θ" se odnosi na položaj pika u stepenima na osnovu eksperimentalne postavke eksperimenta difrakcije X-zraka i obično predstavlja jedinicu na apscisi u modelima difrakcije. Eksperimentalna postavka zahteva da ako se refleksija difraktuje kada ulazni snop formira ugao teta (6) sa određenom ravni rešetke, reflektovani snop je snimljen pod uglom 2 teta (2θ). Trebalo bi razumeti da ovde date reference za specifične 2θ vrednosti za određeni čvrsti oblik treba da označe 2θ (u stepenima) izmerene koristeći eksperimentalne uslove difrakcije X-zraka kako je ovde opisano.
[0057] Kako je ovde opisano, naziv "Oblik 1" je pojedinačni kristal jedinjenja 4-(4-{[(2S)-2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il] metil}fenoksi)benzamida, pojedinačni enantiomer (Primer 12), ranije označen kao "Oblik B" u U.S. privremenoj patentnoj prijavi broj. 62/426,980, podnetoj 28. novembra 2016. i U.S. privremenoj patentnoj prijavi broj. 62/576,435, podnetoj 26. oktobra 2017.
[0058] Kako je ovde opisano, naziv "Oblik 2" je pojedinačni kristal jedinjenja 4-(4-{[(2S)-2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il] metil}fenoksi)benzamida, pojedinačni enantiomer (Primer 12), ranije označen kao "Oblik A u U.S. privremenoj patentnoj prijavi broj. 62/426,980, podnetoj 28. novembra 2016. i U.S. privremenoj patentnoj prijavi broj. 62/576,435, podnetoj 26. oktobra, 2017.
[0059] Drugo ostvarenje prvog aspekta ovog pronalaska je jedinjenje prvog aspekta pri čemu je m = 1; X je CR<5>R<6>; R<5>i R<6>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja se sastoji od vodonika, fluora i metil grupe; R<7>je izabran iz grupe koja se sastoji od vodonika, metil i metoksi grupe; i R<8>je metil grupa ili vodonik; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
[0060] Treće ostvarenje prvog aspekta ovog pronalaska je jedinjenje drugog ostvarenja prvog aspekta koje je jedinjenje Formule Ia
1
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
[0061] Četvrto ostvarenje prvog aspekta ovog pronalaska je jedinjenje trećeg ostvarenja prvog aspekta pri čemu
R<4>je
R<5>i R<6>su svaki vodonik i R<7>je metil ili metoksi grupa; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
[0062] Peto ostvarenje prvog aspekta ovog pronalaska je jedinjenje prvog ostvarenja prvog aspekta pri čemu je m = 2; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
[0063] Šesto ostvarenje prvog aspekta ovog pronalaska je jedinjenje petog ostvarenja prvog aspekta, pri čemu je X = O; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
[0064] Sedmo ostvarenje prvog aspekta ovog pronalaska je jedinjenje šestog ostvarenja Formule Ib
pri čemu je R<4>
1
R<7>je metil ili metoksi grupa; i R<8>je metil grupa ili vodonik; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
[0065] Osmo ostvarenje prvog aspekta ovog pronalaska je jedinjenje petog ostvarenja prvog aspekta pri čemu je X = CR<5>R<6>grupa; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
[0066] Deveto ostvarenje prvog aspekta ovog pronalaska je jedinjenje osmog ostvarenja prvog aspekta Formule Ic
pri čemu je R<4>
2
R<5>i R<6>su svaki vodonik; R<7>je metil ili metoksi grupa; i R<8>je metil grupa ili vodonik; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
[0067] Deseto ostvarenje prvog aspekta ovog pronalaska je jedinjenje prvog ostvarenja prvog aspekta izabrano iz grupe koja obuhvata: (+/-)-4-(4-{[2-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}-2-fluorofenoksi)benzamid; (+)-4-(4-{[2-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}-2-fluorofenoksi)benzamid; (-)-4-(4-{[2-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}-2-fluorofenoksi)benzamid; (+/-)-4-(4-{[2-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)-3-fluorobenzamid; 4-(4-{[2-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)-3-fluorobenzamid, ENT-1; 4-(4-{[2-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)-3-fluorobenzamid, ENT-2; (+/-)-3-fluor-4-(4-{[2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid; (-)-3-fluor-4-(4-{[2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid; (+)-3-fluor-4-(4-{[2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid; 4-(4-{[(2S)-2-(5-metil-1,2,4-tiadiazol-3-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid; 4-(4-{[(2S)-2-(1,3-dimetil- 1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid; 4-(4-{[2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1- il]metil}fenoksi)benzamid, pojedinačni enantiomer; (+/-)-4-(4-{[2-(3-metoksi-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid; (-)-4-(4-{[2-(3-metoksi-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid; (+)-4-(4-{[2-(3- metoksi-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid; (+/-)-4-(4-{[2-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)-2-hidroksibenzamid; (+)-4-(4-{[2-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)-2-hidroksibenzamid; (-)-4-(4-{[2-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)-2-hidroksibenzamid; 3-fluor-4-(4-{[(2S)-2-(1-metil-1H-pirazol-3-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid; 3-fluor- 4-(4-{[3-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)morfolin-4-il]metil}fenoksi)benzamid, ENT-1; 4-(4-{[2-(3-metoksi- 1-metil-1H-pirazol-4-il)piperidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid, ENT-1; 4-(2-fluor-4-{[3-(3-metoksi-1-metil- 1H-pirazol-4-il)morfolin-4-il]metil}fenoksi)benzamid, ENT-1; 4-(4-{[3-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)morfolin-4-il]metil}fenoksi)benzamid, ENT-1; 4-(4-{[4-fluor-2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid, Izomer 2, pretpostavljeni racemat, ili cis ili trans; 4-(4-{[2-(1,3-dimetil-1H-pirazol- 4-il)-4-fluoropirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid, Izomer 1; 4-(4-{[2-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)-4-fluoropirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid, Izomer 2; 4-(4-{[(2S)-2-(1,3-dimetil-1H-pirazol-5-il)pirolidin-1il]metil}fenoksi)-2-hidroksibenzamid; 3-fluor-4-(4-{[2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)-4-metilpirolidin-1-il] metil}fenoksi)benzamid, Izomer 1; 3-fluor-4-(4-{[2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)-4-metilpirolidin-1-il] metil}fenoksi)benzamid, Izomer 2; 3-fluor-4-(4-{[2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)-4-metilpirolidin-1-il] metil}fenoksi)benzamid, Izomer 3; 3-fluor-4-(4-{[2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)-4-metilpirolidin-1-il] metil}fenoksi)benzamid, Izomer 4; 4-(2-fluor-4-{[2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid, ENT-2; 2-hidroksi-4-(4-{[2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid, ENT-2; 2-hidroksi-4-(4-{[(2S)-2-(1-metil-1H-pirazol-3-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid; 4-(4-{[2-(1,5-dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)-3-fluor benzamid, ENT-1; (+/-)- 4-(4-{[2-(1,5-dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid; (+/-)-3-fluor-4-(4-{[2-(1,3,5-trimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid; 4-(4-{[2-(2,5-dimetil-2H-1,2,3-triazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid, ENT-2; 3-fluor-4-(4-{[2-(5-metil-1,2-oksazol-3-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid; 4-(4-{[2-(3-metil-1,2,4-tiadiazol-5-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid, ENT-2; 3-fluor- 4-(4-{[2-(3-metil-1,2-oksazol-5-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid; 4-(4-{[2-(1,4-dimetil-1H-pirazol-5-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)-3-fluor benzamid; 4-(4-{[2-(1,5-dimetil-1H-pirazol-3-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)-3-fluor benzamid; 4-(4-{[2-(2,5-dimetil-2H-1,2,3-triazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}-2-fluorofenoksi)benzamid, ENT-2; 4-(4-{[2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-5-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid, ENT-2; 4-(4-{[(2S)-2-(1,3-dimetil-1H-pirazol-5-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)-3-fluorobenzamid; i/ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so.
[0068] Ostvarenje prvog aspekta ovog pronalaska je jedinjenje (-)-4-(4-{[2-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}-2-fluorofenoksi)benzamid; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so. Naredno ostvarenje prvog aspekta ovog pronalaska je jedinjenje 4-(4-{[2-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)-3-fluorobenzamida, ENT-1; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so. Naredno ostvarenje prvog aspekta ovog pronalaska je jedinjenje 4-(4-{[(2S)-2-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il] metil}fenoksi)benzamid; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so. Jedanaesto ostvarenje prvog aspekta ovog pronalaska je jedinjenje 4-(4-{[2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il] metil}fenoksi)benzamid, ponedinačni enantiomer; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so. Naredno ostvarenje prvog aspekta ovog pronalaska je jedinjenje (-)-4-(4-{[2-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il] metil}fenoksi)-2-hidroksibenzamid; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so. Naredno ostvarenje prvog aspekta ovog pronalaska je jedinjenje 3-fluor-4-(4-{[2-(3-metoksi-1-metil1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid, ENT-1; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so. Naredno ostvarenje prvog aspekta ovog pronalaska je jedinjenje 4-(4-{[(2S)-2-(5-metil-1,2,4-tiadiazol-3-il)pirolidin-1-il] metil}fenoksi)benzamid; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so. Dvanaesto ostvarenje prvog aspekta ovog pronalaska je jedinjenje 4-(4-{[(2S)-2-(3-metoksi- 1-metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il] metil}fenoksi)benzamid; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
[0069] U petnaestom ostvarenju, kristalni oblik 4-(4-{[(2S)-2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin- 1-il] metil}fenoksi)benzamida (Oblik 2) ima analitički parametar izabran iz grupe koja se sastoji od: NMR spektra čvrstog stanja koji uključuje<13>C hemijske promene (ppm) za 37.9 ± 0.2, 119.6 ± 0.2, 124.2 ± 0.2, 126.4 ± 0.2 i 152.6 ± 0.2; model difrakcije X-zraka praška koji uključuje pikove za uglove difrakcije (2θ) od 13.3 ± 0.2, 17.8 ± 0.2, 10.1 ± 0.2, 15.1 ± 0.2 i 24.7 ± 0.2; i Raman spektar koji dalje uključuje promene Raman pika (cm<-1>) za 639 ± 2, 1174 ± 2, 1660 ± 2, 1597 ± 2 i 815 ± 2.
[0070] Ovde je takođe opisan kristalni oblik 4-(4-{[(2S)-2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il] metil}fenoksi)benzamida (Oblik 1) koji ima NMR spektar čvrstog stanja koji dalje uključuje<13>C hemijske promene (ppm) za 39.0 ± 0.2.
[0071] Ovde je takođe opisan kristalni oblik 4-(4-{[(2S)-2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il] metil}fenoksi)benzamida (Oblik 1) koji ima NMR spektar čvrstog stanja koji dalje uključuje<13>C hemijske promene (ppm) za 119.0 ± 0.2.
[0072] Naredno ostvarenje ovog pronalaska se odnosi na kristalni Oblik 2 za upotrebu u lečenju neuroloških poremećaja ili psihijatrijskih poremećaja kod pacijenta primenom na pacijentu terapeutski efektivne količine kristalnog Oblika 2, pri čemu je neurološki poremećaj izabran od sindroma spinocerebralne ataksije i diskinezije u Parkinsonovoj bolesti izazvane levodopom a psihijatrijski poremećaj je izabran od neurokognitivnog poremećaja, poremećaja zloupotrebe supstanci, depresivnog poremećaja, anksioznog poremećaja, poremećaja povezanog sa traumom ili stresom i poremećaja u ishrani.
[0073] Naredno ostvarenje ovog pronalaska se odnosi na kristalni Oblik 2 za upotrebu u lečenju neurološkog poremećaja ili psihijatrijskog poremećaja kod pacijenta primenom na pacijentu terapeutski efektivne količine kristalnog Oblika 2, pri čemu je neurološki poremećaj izabran od sindroma spinocerebralne ataksije i diskinezije u Parkinsonovoj bolesti indukovane levodopom.
[0074] Naredno ostvarenje ovog pronalaska se odnosi na kristalni Oblik 2 za upotrebu u lečenju neurokognitivnog poremećaja kod pacijenta primenom na pacijentu terapeutski
2
efektivne količine kristalnog Oblika 2, pri čemu je neurokognitivni poremećaj izabran od neuropsihijatrijskih simptoma zbog Alzheimer-ove bolesti i frontotemporalne demencije.
[0075] Naredno ostvarenje ovog pronalaska se odnosi na kristalni Oblik 2 za upotrebu u lečenju kognitivnog smanjenja povezanog sa Alzheimer-ovom bolešću kod pacijenta primenom na pacijentu terapeutski efektivne količine kristalnog Oblika 2.
[0076] Naredno ostvarenje ovog pronalaska se odnosi na kristalni Oblik 2 za upotrebu u lečenju poremećaja zloupotrebe supstanci kod pacijenta primenom na pacijentu terapeutski efektivne količine kristalnog Oblika 2, pri čemu je poremećaj zloupotrebe supstanci izabran od poremećaja korišćenja stimulansa, od odvikavanja od stimulansa, poremećaja korišćenja alkohola, odvikavanja od alkohola, poremećaja korišćenja duvana, odvikavanja od duvana, poremećaja korišćenja opioida, odvikavanja od opioida, poremećaja korišćenja kanabisa, poremećaja korišćenja sedativa, poremećaja korišćenja hipnotika i poremećaja korišćenja anksiolitika.
[0077] Naredno ostvarenje ovog pronalaska se odnosi na kristalni Oblik 2 za upotrebu u lečenju depresivnih poremećaja kod pacijenta primenom na pacijentu terapeutski efektivne količne kristalnog Oblika 2, pri čemu je depresivni poremećaj izabran od poremećaja velike depresije, upornog depresivnog poremećaja, bipolarnog poremećaja i premenstrualnog disforičnog poremećaja.
[0078] Naredno ostvarenje ovog pronalaska se odnosi na kristalni Oblik 2 za upotrebu u lečenju anksioznog poremećaja kod pacijenta primenom terapeutski efektivne količine kristalnog Oblika 2, pri čemu je anksiozni poremećaj izabran od socijalnog anksioznog poremećaja, opsesivno-kompulsivnog poremećaja, poremećaja specifičnih fobija, poremećaja panike, poremećaja opšte anksioznosti i poremećaja post-traumatičnog stresa.
[0079] Naredno ostvarenje ovog pronalaska se odnosi na kristalni Oblik 2 za upotrebu u lečenju poremećaja ishrane ili psihijatriskog poremećaja kod pacijenta primenom na pacijentu terapeutski efektivne količine kristalnog Oblika 2, pri čemu je poremećaj ishrane izabran od poremećaja izbegavanja/izbegavanja unosa hrane, anoreksije nervoze, bulimija nervoze i poremećaja prejedanja.
[0080] Prvo ostvarenje drugog aspekta ovog pronalaska je farmaceutska kompozicija koja uključuje terapeutski efektivnu količinu jedinjenja bilo kod od prvog do dvanaestog ili petnaestog ostvarenja prvog aspekta ili njihove farmaceutski prihvatljive soli i farmaceutski prihvatljivog vehikuluma, razblaživača ili nosača.
[0081] Prvo ostvarenje trećeg aspekta ovog pronalaska je jedinjenje iz bilo kog od prvog do dvanaestog ili petnaestog ostvarenja prvog aspekta, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu u lečenju poremećaja izabranog iz grupe koja se sastoji od neurološkog poremećaja, neurokognitivnog poremećaja, poremećaja zloupotrebe supstanci, depresivnog poremećaja, anksioznog poremećaja, poremećaja povezanog sa traumom i stresom i poremećaja ishrane kod pacijenta, pri čemu postupak uključuje primenu teraputski efektivne količine jedinjenje iz bilo kog od prvog do sedamnaestog ostvarenja prvog aspekta, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli na pacijentu kome je potreban tretman poremećaja.
[0082] Drugo ostvarenje trećeg aspekta ovog pronalaska je jedinjenje za upotrebu u prvom ostvarenju trećeg aspekta, pri čemu je poremećaj koji se tretira neurološki poremećaj izabran od sindroma spinocerebralne ataksije i diskinezije u Parkinsonovoj bolesti indukovane levodopom.
[0083] Treće ostvarenje trećeg aspekta ovog pronalaska je jedinjenje za upotrebu u prvom ostvarenju trećeg aspekta pri čemu je poremećaj koji se tretira neurokognitivni poremećaj izabran od neuropsihijatrijskih simptoma zbog Alzheimer-ove bolesti i frontotemporalne demencije.
[0084] Četvrto stvarenje trećeg aspekta ovog pronalaska je jedinjenje za upotrebu u prvom ostvarenju trećeg aspekta pri čemu je poremećaj koji se tretira poremećaj zloupotrebe supstanci izabran od poremećaja upotrebe stimulansa, odvikavanja od stimulansa, poremećaja upotrebe alkohola, odvikavanja od alkohola, poremećaja upotrebe duvana, odvikavanja od duvana, poremećaja upotrebe opioida, odvikavanja od opioida, poremećaja upotrebe kanabisa, poremećaja upotrebe sedativa, poremećaja upotrebe hipnotika i poremećaja upotrebe anksiolitika.
[0085] Peto ostvarenje trećeg aspekta ovog pronalaska je jedinjenje za upotrebu u prvom ostvarenju trećeg aspekta pri čemu je poremećaj koji se tretira depresivni poremećaj izabran od poremećaja velike depresije, upornog depresivnog poremećaja, bipolarnog poremećaja i premenstrualnog disforičnog poremećaja.
[0086] Šesto ostvarenje trećeg aspekta ovog pronalaska je jedinjenje za upotrebu u prvom ostvarenju trećeg aspekta pri čemu je poremećaj koji se tretira izabran od socijalnog anksioznog poremećaja, opsesivno-kompulsivnog poremećaja, poremećaja specifičnih fobija, poremećaja panike, poremećaja opšte anksioznosti.
[0087] Sedmo ostvarenje trećeg aspekta ovog pronalaska je jedinjenje za upotrebu u prvom ostvarenju trećeg aspekta pri čemu je poremećaj koji se tretira poremećaj povezan sa traumom i stresom koji je poremećaj posttraumatičnog stresa.
2
[0088] Osmo ostvarenje trećeg aspekta ovog pronalaska je jedinjenje za upotrebu u prvom ostvarenju trećeg aspekta pri čemu je poremećaj koji se tretira poremećaj ishrane izabran od poremećaja izbegavanja/izbegavanja unosa hrane, anoreksije nervoza, bulimije nervoza i poremećaja prejedanja.
[0089] Prvo ostvarenje četvrtog aspekta ovog pronalaska je jedinjenje u skladu sa bilo kojim od prvog do dvanaestog ili petnaestog ostvarenja prvog aspekta, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu u tretmanu poremećaja izbarnog iz grupe koja se sastoji od neurološkog poremećaja, neurokognitivnog poremećaja, poremećaja zloupotrebe supstanci, depresivnog poremećaja, anksioznog poremećaja, poremećaja povezanog sa traumom i stresom i poremećaja u ishrani.
[0090] Drugo ostvarenje četvrtog aspekta ovog pronalaska je jedinjenje za upotrebu u prvom ostvarenju četvrtog aspekta, pri čemu je poremećaj koji se tretira neurološki poremećaj izabran od sindroma spinocerebralne ataksije i diskinezije u Parkinsonovoj bolesti indukovane levodopom.
[0091] Treće ostvarenje četvrtog aspekta ovog pronalaska je jedinjenje za upotrebu u prvom ostvarenju četvrtog aspekta pri čemu je poremećaj koji se tretira neurokognitivni poremećaj izabran od neuropsihijatrijskih simptoma zbog Alzheimer-ove bolesti i frontotemporalne demencije
[0092] Četvrto stvarenje četvrtog aspekta ovog pronalaska je jedinjenje za upotrebu u prvom ostvarenju četvrtog aspekta pri čemu je poremećaj koji se tretira poremećaj zloupotrebe supstanci izabran od poremećaja upotrebe stimulansa, odvikavanja od stimulansa, poremećaja upotrebe alkohola, odvikavanja od alkohola, poremećaja upotrebe duvana, odvikavanja od duvana, poremećaja upotrebe opioida, odvikavanja od opioida, poremećaja upotrebe kanabisa, poremećaja upotrebe sedativa, poremećaja upotrebe hipnotika i poremećaja upotrebe anksiolitika.
[0093] Peto ostvarenje četvrtog aspekta ovog pronalaska je jedinjenje za upotrebu u prvom ostvarenju četvrtog aspekta pri čemu je poremećaj koji se tretira depresivni poremećaj izabran od poremećaja velike depresije, upornog depresivnog poremećaja, bipolarnog poremećaja i premenstrualnog disforičnog poremećaja.
[0094] Šesto ostvarenje četvrtog aspekta ovog pronalaska je jedinjenje za upotrebu u prvom ostvarenju četvrtog aspekta pri čemu je poremećaj koji se tretira izabran od socijalnog anksioznog poremećaja, opsesivno-kompulsivnog poremećaja, poremećaja specifičnih fobija, poremećaja panike, poremećaja opšte anksioznosti.
2
[0095] Sedmo ostvarenje četvrtog aspekta ovog pronalaska je jedinjenje za upotrebu u prvom ostvarenju četvrtog aspekta pri čemu je poremećaj koji se tretira poremećaj povezan sa traumom i stresom koji je poremećaj posttraumatičnog stresa.
[0096] Ovaj pronalazak takođe obezbeđuje kompozicije (na primer, farmaceutske kompozicije) koje uključuju novo jedinjenje Formule I (uključujući njegovu farmaceutski prihvatljivu so) kako je opisano u drugom aspektu pronalaska. U skladu sa tim, u jednom ostvarenju pronalazak obezbeđuje farmaceutsku kompoziciju koja uključuje terapeutski efektivnu količinu novog jedinjenja Formule I (ili njegove farmaceutski prihvatljive soli) i opciono uključuje farmaceutski prihvatljiv nosač. Ovde je takođe opisana farmaceutska kompozicija koja uključuje terapeutski efektivnu količinu jedinjenja Formule I (ili njegove farmaceutski prihvatljive soli) opciono uključujući farmaceutski prihvatljiv nosač i opciono, najmanje jedno dodatno medicinsko ili farmaceutsko sredstvo (kao što su lekovi korišćeni u tretmanu zavisnosti, lekovi korišćeni u tretmanu poremećaja kontrole impulsa ili antipsihotropna sredstva ili sredstva za lečenje šizofrenije ili sredstva za lečenje Parkinsonove bolesti ili sredstva za lečenje Alzheimer-ove bolesti kako je ovde opisano). Kako je ovde opisano, dodatno medicinsko ili farmaceutsko sredstvo je lek korišćen u tretmanu zavisnosti. Kako je ovde opisano, dodatno medicinsko ili farmaceutsko sredstvo je lek korišćen u tretmanu poremećaja kontrole impulsa. Ovde takođe opisano dodatno medicinsko ili farmaceutsko sredstvo je sredstvo protiv šizofrenije kako je ovde opisano. Ovde dalje opisano dodatno medicinsko ili farmaceutsko sredstvo je lek korišćen u tretmanu ili prevenciji kognitivnog smanjenja ili sredstvo korišćeno kao pomoć spoznaji.
[0097] Farmaceutski prihvatljiv nosač može da uključi bilo koji uobičajeni farmaceutski nosač ili podlogu. U pogodne farmaceutske nosače spadaju inertni razblaživači ili punioci, voda i različiti organski rastvarači (kao što su hidrati i solvati). Ukoliko je potrebno, farmaceutske kompozicije mogu da sadrže dodatne sastojke kao što su arome, vezivna sredstva, podloge i slično. Prema tome, za oralnu primenu, tablete koje sadrže različite ekscipijente kao što je limunska kiselina mogu da se upotrebe zajedno sa različitim sredstvima za raspadanje kao što su skrob, alginatna kiselina i neki kompleksi silikata i sa vezivnim sredstvima kao što su saharoza, želatin i akacija. Pored toga, lubrikantna sredstva kao što su magnezijum stearat, natrijum lauril sulfat i talk su često korisna u svrhu tabletiranja. Čvrste kompozicije sličnog tipa mogu takođe da se primene u mekim i čvrstim punjenim želatinskim kapsulama. Prema tome, neograničavajući primeri materijala uključuju laktozu ili mlečni šećer i polietilen glikole velike molekulske težine. Kada se za oralnu primenu žele vodene
2
suspenzije ili eliksiri, njihovo aktivno jedinjenje može da se kombinuje sa različitim zaslađivačima i sredstvima za korekciju ukusa, sredstvima za bojenje ili bojama i, ukoliko je potrebno, sredstvima za emulgovanje ili sredstvima za suspendovanje, zajedno sa razblaživačima kao što su voda, etanol, propilen glikol, glicerin, ili njihove kombinacije.
[0098] Farmaceutska kompozicija može, na primer, da budu u obliku pogodnom za oralnu primenu kao tableta, kapsula, pilula, prašak, formulacija sa kontinuiranim oslobađanjem, rastvor ili suspenzija, za parenteralnu injekciju kao sterilni rastvor, suspenzija ili emulzija, za topičnu primenu kao mast ili krem ili za rektalnu primenu kao supozitorija.
[0099] Primerni oblici za parenteralnu primenu uključuju rastvore ili suspenzije aktivnih jedinjenja u sterilnim vodenim rastvorima, na primer vodenim rastvorima propilen glikola ili dekstroze. Ovakvi dozni oblici mogu da budu odgovarajuće puferovani, ukoliko je potrebno.
[0100] Farmaceutska kompozicija može da bude u jediničnim doznim oblicima pogodnim za pojedinačnu primenu precizne doze. Stručnjak sa uobičajenim iskustvom u tehnici će razumeti da kompozicija može da bude formulisana u subterapeutskoj dozi kada su predviđene višestruke doze.
[0101] U jednom ostvarenju, kompozicija uključuje terapeutski efektivnu količinu jedinjenja Formule I (ili njegove farmaceutski prihvatljive soli) i farmaceutski prihvatljiv nosač.
[0102] Jedinjenja Formule I (uključujući njihove farmaceutski prihvatljive soli) su modulatori kapa opioida. U nekim ostvarenjima, jedinjenje Formule I je antagonist kapa opioida [to jest, vezuje (ima afinitet za) i deaktivira kapa opioidne receptore]. Kako se ovde koristi, kada se odnosi na jedinjenje, naziv "modulator kapa opioida" ili "antagonist kapa opioid" se odnosi na jedinjenje koje je modulator kapa opioidnog receptora ili antagonist kapa opioidnog receptora, tim redom (to jest, nije nužna potpuna selektivnost između/među subtipova opioidnih receptora; na primer, jedinjenje može da bude selektivno, ili čak visoko selektivno, za kapa opioidni receptor ali možda nije sasvim tako, posebno u odnosu na blisko povezani mu opioidni receptor).
[0103] Primena Jedinjenja Formule I može da bude ometana upotrebom bilo kog postupka koji onemogućava oslobađanje jedinjenja na mestu delovanja. U ove postupke spadaju, na primer, enteralni putevi (na primer, oralni putevi, bukalni putevi, sublabialni putevi, sublingvalni putevi), intranazalni putevi, inhalacioni putevi, intraduodenalni putevi, parenteralne injekcije (uključujući intravenski, subkutano, intramuskularno, intravaskularno ili infuziju), intratekalni putevi, epiduralni putevi, intracerebralni putevi, intracerebroventrikularni putevi, topični putevi i rektalna primena.
2
[0104] U jednom ostvarenju ovog pronalaska, jedinjenja Formule I mogu da se primene oralni načinom.
[0105] Dozni režimi mogu da se podese tako da obezbede optimum željenog odgovora. Na primer, može da se primeni pojedinačni bolus, može da se primeni više podeljenih doza u toku vremena ili doza može da bude proporcionalno smanjena ili povećana kako uslovljava terapeutska situacija. Prednost može da bude formulisanje parenteralnih kompozicija u jediničnom doznom obliku zbog lake primene i uniformnosti doziranja. Jedinični dozni oblik, kako se ovde koristi, odnosi se na fizički odvojene jedinice pogodne za pojedinačno doziranje na sisarima koji se tretiraju; svaka jedinica sadrži prethodno odmerenu količinu aktivnog jedinjenja izrčunatu da produkuje željeni terapeutski efekat zajedno sa potrebnim farmaceutskim nosačem. Specifikacije za jedinične dozne oblike iz pronalaska su uslovljene različitim faktorima kao što su pojedinačne karakteristike terapeutskog sredstva i određeni terapeutski ili profilaktički efekat koji treba da se postigne. U jednom ostvarenju ovog pronalaska, jedinjenja Formule I mogu da se koriste za lečenje ljudi.
[0106] Treba zabeležiti da vrednosti doza mogu da variraju u zavisnosti od tipa i težine stanja koje treba da se popravi i mogu da uključe jednu ili više doza. Dalje treba razumeti da za bilo koji određeni subjekt, specifični dozni režimi treba da se podese u toku vremena u skladu sa potrebama pojedinaca i profesionalnom procenom osobe koja primenjuje ili nadgleda primenu kompozicije, a da su rasponi doza koji su ovde navedeni samo kao primeri i nemaju za cilj da ograniče okvir ili kompozicije za koju se traži zaštita. Na primer, doze mogu da budu podešene na osnovu farmakokinetičkih ili farmakodinamičkih parametara koji mogu da uključe kliničke efekte kao što su toksični efekti i/ili laboratorijske vrednosti. Prema tome, ovaj pronalazak obuhvata porast doze unutar pacijenta kako je odredio stručnjak sa iskustvom. Određivanje odgovarajućeg doziranja i režima primene hemoterapeutskog sredstva je dobro poznato u relevantnoj tehnici i podrazumeva se da je obuhvaćeno od strane stručnjaka kada primeni znanja koja su ovde otkrivena.
[0107] Primenjena količina jedinjenja Formule I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli će da zavisi od subjekta koji se tretira, ozbiljnosti poremećaja ili stanja, brzine primene, dispozicije jedinjenja i odluke odgovarajućeg lekara. Generalno, efektivna doza je u rasponu od približno 0.0001 do približno 50 mg po kg telesne težine po danu, na primer približno 0.01 do približno 10 mg/kg/dan, u jednoj ili podeljenim dozama. Za čoveka od 70 kg to će da bude količina od približno 0.007 mg do približno 3500 mg/dan, na primer približno 0.7 mg do približno 700 mg/dan. U nekim slučajevima, vrednosti doze ispod donje granice prethodno
2
navedenog opsega mogu da budu više nego adekvatne dok u drugim slučajevima mogu da se primene čak i veće doze bez izazivanja bilo kakvog ozbiljnog neželjenog efekta, pod uslovom da se ove veće doze prvo podele u nekoliko malih doza za primenu u toku dana.
[0108] Kako se ovde koristi, naziv "kombinovana terapija" se odnosi na primenu jedinjenja Formule I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli zajedno sa najmanje jednim dodatnim farmaceutskim ili medicinskim sredstvom (na primer, lekom korišćenim u tretmanu zavisnosti od lekova, Parkinsonove bolesti, Alzheimer-ove bolesti ili sredstva protiv šizofrenije) ili odvojeno ili istovremeno.
[0109] Ovaj pronalazak uključuje upotrebu kombinacije jedinjenja Formule I (ili njegove farmaceutski prihvatljive soli) i jednog ili više dodatnih farmaceutski aktivnih sredstava. Ukoliko se primenjuje kombinacija aktivnih sredstava, tada ona mogu da se primene po redu ili istovremeno, u odvojenim doznim oblicima ili kombinovani u jednom doznom obliku. Ovde su takođe opisane farmaceutske kompozicije koje uključuju količinu: (a) prvog sredstva koje obuhvata jedinjenje Formule I ili farmaceutski prihvatljivu so jedinjenja; i (b) drugog farmaceutski aktivnog sredstva; i (c) farmaceutski prihvatljiv nosač, vehikulum ili razblaživač.
[0110] Jedinjenje Formule I (uključujući njegovu farmaceutski prihvatljivu so) se opciono koristi u kombinaciji sa drugim aktivnim sredstvom. Ovo aktivno sredstvo može da bude, na primer, jedinjenje za lečenje zavisnosti, atipični antipsihotik ili sredstvo protiv Parkinsonove bolesti ili sredstvo protiv Alzheimer-ove bolesti. U skladu sa tim, ovde su takođe opisani postupci za lečenje poremećaja posredovanih kapa opioidima (na primer, neuroloških i psihijatrijskih poremećaja povezanih sa kapa opioidnim receptorom), uključujući primenu na sisaru efektivne količine jedinjenja Formule I (uključujući farmaceutski prihvatljivu so jedinjenja) i dalje uključujući primenu drugog aktivnog sredstva. Za upotrebu u konjukciji sa jedinjenjima Formule I (uključujući njihove farmaceutski prihvatljive soli) mogu da se izaberu različita farmaceutski aktivna sredstva u zavisnosti od bolesti, poremećaja ili stanja koje se tretira. Farmaceutski aktivna sredstva koja mogu da se koriste u kombinaciji sa kompozicijama iz ovog pronalaska uključuju, ali bez ograničenja:
(i) inhibitore acetilholinesteraze kao što je donepezil hidrohlorid (ARICEPT, MEMAC); ili antagoniste Adenosine A2Areceptora kao što su Preladenant (SCH 420814) ili SCH 412348; (ii) amiloid-β (ili njegovi fragmenti), kao što je Aβ1-15 konjugovan sa pan HLA DR-vezujućim epitopom (PADRE) i ACC- 001 (ElanlWyeth);
(iii) antitela za amiloid- β (ili njegove fragmente), kao što su bapineuzumab (takođe poznat kao AAB-001) i AAB-002 (Wyeth/Elan);
(iv) sredstva za smanjivanje ili inhibiciju amiloida (uključujući ona koja smanjuju produkciju, akumulaciju i fibrilizaciju amiloida) kao što su kolostrinin i bisnorkumserin (takođe poznat kao BNC);
(v) agoniste alfa-adrenergičnog receptora kao što je klonidin (CATAPRES);
(vi) sredstva koja blokiraju beta-adrenergični receptor (beta blokeri) kao što je karteolol; (vii) antiholinergike kao što je amitriptilin (ELAVIL, ENDEP);
(viii) antikonvulzante kao što je karbamazepin (TEGRETOL, CARBATROL);
(ix) antipsihotike, kao što je lurasidon (takođe poznat kao SM-13496; Dainippon Sumitomo); (x) blokere kalcijumovog kanala kao što je nilvaldipin (ESCOR, NIVADIL);
(xi) inhibitore katehol O-metiltransferaze (COMT) kao što je tolkapon (TASMAR);
(xii) stimulatore centralnog nervnog sistema kao što je kofein;
(xiii) kortikosteroide kao što je prednizon (STERAPRED, DELTASONE);
(xiv) agoniste dopamin receptora kao što je apomorfin (APOKYN);
(xv) antagoniste dopamin receptora kao što je tetrabenazin (NITOMAN, XENAZINE, antagonisti dopamin D2 kao što je Quetiapine); antagoniste ili parcijalne agoniste dopamin D3 kao što su BP 897, PG 619, YQA14, RGH 188 (kariprazin), [3H]LS-3-134, SB277011A, GSK598809, Buspirone (Buspar®), NGB 2904, CJB 090, PG01037, PG 622, R-PG 648, BAK 2-66, S33138, BP1.4979, SR 21502;
(xvi) inhibitore ponovnog preuzimanja dopamina kao što je nomifensin maleat (MERITAL); (xvii) agoniste receptora gama-aminobutirne kiseline (GABA) kao što je baklofen (LIORESAL, KEMSTRO);
(xviii) antagoniste histamina 3 (H3) kao što je ciproksifan;
(xix) imunomodulatore kao što je glatiramer acetat (takođe poznat kao kopolimer-1;
COPAXONE);
(xx) imunosupresante kao što je metotreksat (TREXALL, RHEUMATREX);
(xxi) interferone, uključujući interferon beta-1a (AVONEX, REBIF) i interferon beta-1b (BETASERON, BETAFER- ON);
(xxii) levodopu (ili njegov metil ili etil estar), sam ili u kombinaciji sa inhibitorom DOPA dekarboksilaze (na primer, karbidopa (SINEMET, CARBILEV, PARCOPA));
(xxiii) antagoniste N-metil-D-aspartat (NMDA) receptora kao što je memantin (NAMENDA, AXURA, EBIXA);
1
(xxiv) inhibitore monoamin oksidaze (MAO) kao što je selegilin (EMSAM);
(xxv) agoniste muskarinskog receptora (posebno M1 subtipa) kao što je betanhol hlorid (DUVOID, URECHO- LINE);
(xxvi) neuroprotektivne lekove kao što je 2,3,4,9-tetrahidro-1H-karbazol-3-on oksim;
(xxvii) agoniste nikotinskog receptora kao što je epibatidin;
(xxviii) inhibitore ponovnog preuzimanja norepinefrina (noradrenalina) kao što je atomoksetin (STRATTERA);
(xxix) inhibitore fosfodiesteraze (PDE), na primer, PDE9 inhibitori kao što je BAY 73-6691 (Bayer AG) i PDE 10 (na primer, PDE10A) inhibitori kao što je papaverin;
(xxx) inhibitore drugih PDE uključujući (a) PDE1 inhibitore (na primer, vinpocetin), (b) PDE2 inhibitore (na primer, eritro-9-(2- hidroksi-3-nonil)adenin (EHNA)), (c) PDE4 inhibitore (na primer, rolipram) i (d) PDE5 inhibitore (na primer, sildenafil (VIA- GRA, REVATIO));
(xxxi) hinoline kao što je kinin (uključujući njegove hidrohloridne, dihidrohloridne, sulfatne, bisulfatne i glukonatne soli);
(xxxii) inhibitore β-sekretaze kao što je WY-25105;
(xxxiii) inhibitore γ-sekretaze kao što je LY-411575 (Lilly);
(xxxiv) antagoniste serotonin (5-hidroksitriptamin) 1A (5-HT1A) receptora kao što je spiperon; (xxxv) agoniste serotonin (5-hidroksitriptamin) 4 (5-HT4) receptora kao što je PRX-03140 (Epix);
(xxxvi) antagoniste serotonin (5-hidroksitriptamin) 6 (5-HTs) receptora kao što je mianserin (TORVOL, BOLVIDON, NORVAL);
(xxxvii) inhibitore ponovnog preuzimanja serotonina (5-HT) kao što su alaproklat, citalopram (CELEXA, CIPRAMIL);
(xxxviii) trofične faktore, kao što su faktor rasta nerava (NGF), faktor rasta baznog fibroblasta (bFGF; ERSOFERMIN), neurotrofin-3 (NT-3), kardiotrofin-1, neutrofni faktor izdvojen iz mozga (BDNF), neublastin, meteorin i neurotrofični faktor koji potiče od žleze (GDNF) i sredstva koja stimulišu produkciju trofičnih faktora kao što je propentofilin; i slično.
(xxxix) lekove korišćene u tretmanu različitih zavisnosti od lekova kao što su metadon, buprenofrin (Suboksone® i Subutex®), nalokson (Narcan®, Evzio®), naltrekson (ReVia®), Levo-alfa Acetil Methadol (LAAM), bupropion (Wellbutrin®, Buproban®, Aplenzin®, Budeprion®, Zyban®), vareniklin (Chantix®), nikotinske pastile ili gume, akamprosat (Campral®), disulfiram (Antabuse®) i topiramat (Topamax®).
2
[0111] Pored prethodno datog opisa, u određene klase antidepresanata koje mogu da se koriste u kombinaciji sa jedinjenjima iz pronalaska spadaju inhibitori ponovnog preuzimanja norepinefrina, selektivni inhibitori ponovnog preuzimanja serotonina (SSRIs), antagonisti NK-1 receptora, inhibitori monoamin oksidaze (MAOIs), reverzibilni inhibitori monoamin oksidaze (RIMAs), inhibitori ponovnog preuzimanja serotonina i noradrenalina (SNRIs), antagonisti kortikotropin oslobađajućeg faktora (CRF), antagonisti α-adrenoreceptora i atipični antidepresanti. U pogodne inhibitore ponovnog preuzimanja norepinefrina spadaju triciklični tercijerni amin i triciklični sekundarni amin. U primere odgovarajućih tricikličnih tercijernih amina i tricikličnih sekundarnih amina spadaju amitriptilin, klomipramin, doksepin, imipramin, trimipramin, dotiepin, butriptilin, iprindol, lofepramin, nortriptilin, protriptilin, amoksapin, desipramin i maprotilin. U primere pogodnih selektivnih inhibitora ponovnog preuzimanja serotonina spadaju fluoksetin, fluvoksamin, paroksetin i sertralin. U primere inhibitora monoamin oksidaze spadaju izokarboksazid, fenelzin i tranilciklopramin. U primere pogodnih reverzibilnih inhibitora monoamin oksidaze spada moklobemid. U primere pogodnih inhibitora ponovnog preuzimanja serotonina i noradrenalina za upotrebu u ovom pronalasku spada venlafaksin. U primere pogodnih atipičnih anti-depresanata spadaju bupropion, litijum, nefazodon, trazodon i viloksazin. U primere sredstava protiv Alzheimerove bolesti spadaju Dimebon, antagonisti NMDA receptora kao što je memantin; i inhibitori holinesteraze kao što su donepezil i galantamin. U primere pogodnih klasa anti-anksioznih sredstava koja mogu da se koriste u kombinaciji sa jedinjenjima iz pronalaska spadaju benzodiazepini i agonisti ili antagonisti serotonina 1A (5-HT1A), posebno parcijalni agonisti 5-HT1Ai antagonisti kortikotropin oslobađajućeg faktora (CRF). U pogodne benzodiazepine spadaju alprazolam, hlordiazepoksid, klonazepam, hlorazepat, diazepam, halazepam, lorazepam, oksazepam i prazepam. U pogodne agoniste ili antagoniste 5-HT1Areceptora spadaju buspiron, flesinoksan, gepiron i ipsapiron. U pogodne atipične antipsihotike spadaju paliperidon, bifeprunoks, ziprasidon, risperidon, aripiprazol, olanzapin i kvetiapin. U pogodne agoniste nikotin acetilholina spadaju isproniklin, vareniklin i MEM 3454. U sredstva protiv bola spadaju pregabalin, gabapentin, klonidin, neostigmin, baklofen, midazolam, ketamin i zikonotid. U primere pogodnih sredstava protiv Parkinsonove bolesti spadaju L-DOPA (ili njegov metil ili etil estar), inhibitor DOPA dekarboksilaze (na primer, karbidopa (SINEMET, CARBILEV, PARCOPA), antagonist adenozin A2Areceptora [na primer, Preladenant (SCH 420814) ili SCH 412348], benserazid (MADOPAR), α-metildopa, monofluorometildopa, difluorometildopa, brokrezin, ili m-hidroksibenzilhidrazin), agonist dopamina [kao što su apomorfin (APOKYN), bromokriptin (PARLODEL), kabergolin (DOSTINEX), dihidreksidin, dihidroergokriptin, fenoldopam (CORLOPAM), lizurid (DOPERGIN), pergolid (PERMAX), piribedil (TRIVASTAL, TRASTAL), pramipeksol (MIRAPEX), kvinpirol, ropinirol (REQUIP), rotigotin (NEUPRO), SKF-82958 (GlaxoSmithKline) i sarizotan], inhibitor monoamin oksidaze (MAO) [kao što su selegiline (EMSAM), selegilin hidrohlorid (L-deprenil, ELDEPRYL, ZELAPAR), dimetilselegilen, brofaromin, fenelzin (NARDIL), tranilcipromin (PARNATE), moklobemid (AURORIX, MANERIX), befloksaton, safinamid, izokarboksazid (MARPLAN), nialamid (NIAMID), rasagilin (AZILECT), iproniazid (MARSILID, IPROZID, IPRONID), CHF-3381 (Chiesi Farmaceutici), iproklozid, toloksaton (HUMORYL, PERENUM), bifemelan, dezoksipeganin, harmin (takođe poznat kao telepatin ili banasterin), harmalin, linezolid (ZYVOX, ZYVOXID) i pargilin (EUDATIN, SUPIRDYL)], inhibitor katehol O-metiltransferaze (COMT) [kao što su tolkapon (TASMAR), entakapon (COMTAN) i tropolon], antagonist N-metil-D-aspartat (NMDA) receptora [kao što je amantadin (SYMMETREL)], antiholinrgici [kao što su amitriptilin (ELAVIL, ENDEP), butriptilin, benztropin mesilat (COGENTIN), triheksipenidil (ARTANE), difenhidramin (BENADRYL), orfenadrin (NOR- FLEX), hiosciamin, atropin (ATROPEN), skopolamin (TRANSDERM-SCOP), skopolamin metilbromid (PARMINE), dikloverin (BENTYL, BYCLOMINE, DIBENT, DILOMINE, tolterodin (DETROL), oksibutinin (DITROPAN, LYRINEL XL, OXYTROL), pentienat bromid, propantelin (PRO-BANTHINE), ciklizin, imipramin hidrohlorid (TOFRANIL), imipramin maleat (SURMONTIL), lofepramin, desipramin (NORPRAMIN), doksepin (SINEQUAN, ZONALON), trimipramin (SURMONTIL) i glikopirolat (ROBINUL)], ili njihova kombinacija. U primere sredstava protiv šizofrenije spadaju ziprasidon, risperidon, olanzapin, kvetiapin, aripiprazol, asenapin, blonanserin, ili iloperidon. U primere nekih dodatnih aktivnih sredstava spadaju rivastigmin (Exelon), Clozapine, Levodopa, Rotigotine, Aricept, Metilphenidate, memantin, milnacipran, guanfacin, bupropion i atomoksetin.
[0112] Kako je prethodno navedeno, jedinjenja Formule I (uključujući njihove farmaceutski prihvatljive soli) mogu da se koriste u kombinaciji sa jednim ili više dodatnih sredstava koja su ovde opisana. Kada se koristi kombinovana terapija, jedno ili više dodatnih sredstava može da se primeni odvojeno ili istovremeno sa jedinjenjem iz pronalaska. Kako je ovde opisano, dodatno sredstvo se primenjuje na sisaru (na primer, čoveku) pre primene jedinjenja iz pronalaska. Takođe je ovde opisano da se dodatno sredstvo primenjuje na sisaru nakon
4
primene jedinjenja iz pronalaska. Ovde je dalje opisano da se dodatno sredstvo primenjuje na sisaru (na primer, čoveku) istovremeno sa primenom jedinjenja iz pronalaska ili njegovom farmaceutski prihvatljivom solju.
[0113] Ovde je takođe opisana farmaceutska kompozicija za upotrebu u tretmanu poremećaja zloupotrebe supstanci (kao što je zavisnost) na sisaru, uključujući ljude, koja sadrži određenu količinu jedinjenja Formule I (ili njegove farmaceutski prihvatljive soli) kako je ovde definisano (uključujući hidrate, solvate i polimorfe navedenog jedinjenja ili njegove farmaceutski prihvatljive soli) u kombinaciji sa jednim ili više (na primer jedan do tri) lekova korišćenih u tretmanu zavisnosti kao što su metadon, buprenofrin, nalokson, naltrekson, levoalfa-acetil-methadol (LAAM), bupropion, vareniklin, nikotinske pastile ili gume, akamprosat, disulfiram i topiramat, pri čemu su količine aktivnog sredstva i kombinacije kada se uzme kao celina terapeutski efektivne za upotrebu u lečenju zavisnosti. Izbor dodatnih sredstava korišćenih u farmaceutskoj kompoziciji može da bude usmeren na poremećaj za određenu supstancu (kao što je zavisnost(i)) koja se tretira.
[0114] Ovde je dalje opisana farmaceutska kompozicija za upotrebu u tretmanu poremećaja kontrole impulsa (uključujući poremećaje kao što su intermitentni eksplozivni poremećaj, kleptomanija, patološko kockanje, piromanija, trihotilomanija i dermatotilomanija) kod sisara, uključujući ljude, koja uključuje količinu jedinjenja Formule I (ili njegove farmaceutski prihvatljive soli) kako je prethodno definisano (uključujući hidrate, solvate i polimorfe tog jedinjenja ili njegovih farmaceutski prihvatljivih soli), u kombinaciji sa jednim ili više (na primer jedan do tri) sredstava korišćenih za lečenje poremećaja kontrole impulsa kao što su klomipramin, selektivni inhibitori ponovnog preuzimanja serotonina (SSRIs), pimozid, antikonvulzanti kao što je topiramat, anti-psihotici i anti-anksiolitici kao što su benzodiazepini, pri čemu su količine aktivnog sredstva i kombinacije kada se uzme u celini terapeutski efektivne za lečenje određenog poremećaja kontrole impulsa.
[0115] Jedinjenja iz pronalaska ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, mogu da se izrade različitim postupcima koji su analogni sa postupcima poznatim u tehnici. Niže opisane šeme reakcije, zajedno sa postupcima sinteze poznatim u tehnici organske hemije ili njihove modifikacije i derivatizacije su bliske stručnjaku sa uobičajenim iskustvom u tehnici i ilustruju postupke za izradu jedinjenja. Ostalo, uključujući njihove modifikacije će stručnjaku sa iskustvom u tehnici biti prihvatljive.
[0116] Početni materijali koji su ovde korišćeni su komercijalno raspoloživi ili mogu da se pripreme rutinskim postupcima poznatim u tehnici (kao što su postupci otkriveni u standardnim referentnim knjigama kao što su COMPENDIUM OF ORGANIC SYNTHETIC METHODS, Vol. I-XIII (objavio Wiley-Interscience)). Preferirani postupci uključuju, ali bez ograničenja na, one koji su niže opisani.
[0117] Reakcije za izradu jedinjenja iz pronalaska mogu da se izvedu u pogodnim rastvaračima, koje stručnjak sa uobičajenim iskustvom u tehnici organskih sinteza može lako da izabere. Pogodni rastvarači mogu da budu u potpunosti ne-reaktivni sa početnim materijalima (reaktantima), međuproizvodima, ili produktima na temperaturama na kojima se reakcije izvode, na primer, temperature mogu da budu u rasponu od temperature zamrzavanja rastvarača do temperature ključanja rastvarača. Data reakcija može da se izvede u jednom rastvaraču ili u smeši više od jednog rastvarača. Uzimajući u obzir određenu fazu reakcije, stručnjak sa iskustvom može da odabere pogodne rastvarače za određenu fazu reakcija.
[0118] U toku bilo koje od niže datih sintetičkih sekvenci, može da bude potrebno i/ili poželjno da se zaštite osetljive ili reaktivne grupe na bilo kojoj odgovarajućoj molekuli. To može da se postigne pomoću uobičajenih zaštitnih grupa kao što je opisano u T. W. Greene, Protective Groups in Organic Chemistry, John Wiley & Sons, 1981; T. W. Greene and P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Chemistry, John Wiley & Sons, 1991; i T. W. Greene and P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Chemistry, John Wiley & Sons, 1999; i T. W. Greene and P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Chemistry, John Wiley & Sons, 2007.
[0119] Jedinjenja iz ovog pronalaska ili farmaceutski prihvatljive soli tih jedinjenja ili tautomeri i radioizotopi mogu da se izrade u skladu sa šemama reakcije koje su niže objašnjene. Ukoliko nije drugačije navedeno, supstituenti u šemama su kako je prethodno definisano. Izdvajanje i prečišćavanje produkata se izvodi standardnim procedurama koje su poznate hemičaru sa uobičajenim iskustvom.
[0120] Stručnjak sa iskustvom u tehnici će prepoznati da će u nekim slučajevima, jedinjenja u Šemama 1 do 5 biti generisana kao smeša diastereomera i/ili enantiomera koji mogu da se razdvoje na različitim nivoima Šeme sinteze koristeći uobičajene tehnike ili kombinaciju takvih tehnika, kao što su, ali bez ograničenja na, kristalizacija, normalno-fazna hromatografija, reverzno-fazna hromatografija i asimetrična hromatografija, da se dobiju pojedinačni enantiomeri pronalaska.
[0121] Stručnjak sa iskustvom u tehnici će razumeti da su različiti simboli, superskripti i subskripti korišćeni u Šemi, postupcima i primerima korišćeni za uobičajenu prezentaciju i/ili da pokažu redosled po kome se uvode u Šemu i nije neophodno da odgovaraju simbolima, superskriptima i subskriptima u pridodatim zahtevima. Šeme predstavljaju postupke korisne u sintezi jedinjenja iz ovog pronalaska.
[0122] Stručnjak sa iskustvom u tehnici razume da neke od zaštitnih grupa ne mogu da izdrže neke od uslova reakcije opisane u niže datim šemama reakcije. Prema tome, za neke zaštitne grupe može da bude potrebna manipulacija kako bi se na adekvatan način završila sinteza. Zbog višestrukih mogućnosti zaštite-deprotekcije, ove manipulacije neće biti posebno opisane.
Opšte šeme sinteza
[0123] Jedinjenja Formule I mogu da se izrade niže opisanim postupcima, zajedno sa postupcima sinteze poznatim u tehnici organske hemije, ili modifikacijama i transformacijama koje su bliske stručnjaku sa uobičajenim iskustvom u tehnici. Početni materijali koji su ovde korišćeni su komercijalno raspoloživi ili mogu da se izrade uobičajenim postupcima poznatim u tehnici [kao što su postupci otkriveni u standardnim referentnim knjigama kao što su Compendium of Organic Synthetic Methods, Vol. I-XII (izdavač Wiley-Interscience)].
Preferirani postupci uključuju, ali bez ograničenja na, one koji su niže opisani.
[0124] U toku bilo koje od niže datih sekvenci sinteze može da bude potrebna i/ili poželjna zaštita osetljivih ili reaktivnih grupa na bilo kojoj od prisutnih molekula. To se postiže pomoću uobičajenih zaštitnih grupa kao što su opisali T. W. Greene, Protective Groups in Organic Chemistry, John Wiley & Sons, 1981; T. W. Greene and P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Chemistry, John Wiley & Sons, 1991; i T. W. Greene and P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Chemistry, John Wiley & Sons, 1999.
[0125] Jedinjenja Formule I, ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, mogu da se izrade u skladu sa niže objašnjenim Šemama reakcije. Ukoliko nije drugačije navedeno, supstituenti u šemama su kako je prethodno definisano. Izdvajanje i prečišćavanje produkata se izvodi standardnimi procedurama koje su poznate hemičaru sa uobičajenim iskustvom.
[0126] Stručnjak sa iskustvom u tehnici će razumeti da su različiti simboli, superskripti i subskripti korišćeni u Šemama, postupcima i primerima korišćeni za uobičajenu prezentaciju i/ili da pokažu redosled po kome se uvode u Šeme i nije neophodno da odgovaraju simbolima, superskriptima i subskriptima u pridodatim zahtevima. Pored toga, stručnjak sa iskustvom u tehnici će razumeti da su u mnogim slučajevima ova jedinjenja smeše i enantiomeri koji mogu da se razdvoje u različitim nivoima Šema sinteze koristeći uobičajene tehnike kao što su, ali bez ograničenja na, kristalizacija, normalno fazna hromatografija, reverzno fazna hromatografija i asimetrična hromatografija da se dobiju pojedinačni enantiomeri. Šeme predstavljaju postupke korisne za sintezu jedinjenja iz ovog pronalaska.
[0127] Šema 1 se odnosi na izradu jedinjenja Formule I. Prema Šemi 1a, jedinjenja II i III mogu da se kombinuju standardnom procedurom reduktivne aminacije upotrebom standardnih reduktanata, na primer, ali bez ograničenja na, natrijum triacetoksiborhidrida, u standardnom rastvaraču, na primer, ali bez ograničenja na, dihlormetanu, da se formiraju jedinjenja Formule I. U nekim slučajevima, jedinjenja Formule II su pojedinačni enantiomeri IIa (Šema 1b) ili IIb (Šema 1b) i dovode do izrade pojedinačnih enantiomera jedinjenja Formule I, ili Ia ili Ib. U nekim slučajevima, racematna jedinjenja Formule I se razdvoje u pojedinačne enantiomere Ia ili Ib dodatnom fazom asimetričnog razdvajanja.
Šema 1
[0128] Šema 2 predstavlja alternativnu sintezu za izradu Jedinjenja Formule I. Prema Šemi 2a, jedinjenja II i IIIa, gde je Y = Cl, Br, I, mesilat ili tosilat mogu da se kombinuju standardnom procedurom alkilacije amina koristeći standardnu bazu, na primer, ali bez ograničenja na, kalijum karbonat, u standardnom rastvaraču, na primer, ali bez ograničenja na DMF, da se formiraju Jedinjenja Formule I. U nekim slučajevima, Jedinjenja Formule II su pojedinačni enantiomeri Ila (Šema 2b) ili IIb (Šema 2b) i dovode do izrade pojedinačnih enantiomera Jedinjenja Formule I, ili Ia ili Ib. U nekim slučajevima, racematna Jedinjenja Formule I se razdvajaju u pojedinačne enantiomere Ia ili Ib u dodatnoj fazi asimetričnog razdvajanja.
Šema 2
[0129] Šema 3 se odnosi na izradu jedinjenja Ic. Jedinjenja II i VI mogu da se kombinuju da se formiraju jedinjenja Formule V standardnom procedurom reduktivne aminacije upotrebom standardnog reduktanta, na primer, ali bez ograničenja na, natrijum triacetoksiborhidrida, u standardnom rastvaraču, na primer, ali bez ograničenja na, dihlormetanu. Tretmanom benzodioksanona jedinjenja V sa rastvorom amonijuma u pogodnom rastvaraču, kao što je, ali bez ograničenja, metanol, formiraju se jedinjenja Formule Ic. U nekim slučajevima Jedinjenja Formule Ic su razdvojena u pojedinačne enantiomere dodatnom fazom asimetričnog razdvajanja. Na način analogan sa Šemom 2, Jedinjenja Formule Ic mogu takođe da se izrade standardnom procedurom alkilacije amina.
Šema 3
[0130] Jedinjenja Formule II se izrađuju putem nekoliko različitih procesa. Šema 4 se odnosi na izradu podskupa jedinjenja Formule II, uključujući specifična jedinjenja Formule IIc. Jedinjenja Formule VII, gde je Y = Br ili I i R<7>’ ovde može da se definiše kao R<7>, mogu da se metalizuju, na primer, ali bez ograničenja na, tretmanom sa n-butillitijumom ili izopropil magnezijum hloridom, da se dobije odgovarajuće metalizovani pirazol Formule VIII tretmanom sa odgovarajuće izabranim zaštićenim gama laktamom Formule IX, dobijaju se jedinjenja Formule X. Zaštitna grupa P<1>u ovom slučaju se odnosi na grupe za zaštitu amina dobro poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Na primer, P<1>može da bude tercbutoksikarbonil (BOC), koji može da se cepa u kiselim uslovima u odgovarajućem rastvaraču, uključujući, ali bez ograničenja na, tretman sa rastvorom HCl u dioksanu. Alternativno, P<1>može da bude jedna od brojnih drugih zaštitnih grupa pogodnih za amine, uključujući karboksibenzil (Cbz) ili benzoil grupu (Bz) i mogu da se cepaju pod standardnim uslovima poznatim stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Deprotekcijom jedinjenja Formule X utiče se na ciklizaciju u 3,4-dihidropirole Formule XI. Jedinjenja Formule IIc se nakon toga izrađuju redukcijom jedinjenja XI sa redukcionim sredstvom kakvo je, ali bez ograničenja na, natrijum borhidrid, u rastvaraču kao što je, ali bez ograničenja na, metanol.
4
Šema 4
[0131] Šema 5a se odnosi na izradu podskupa jedinjenja Formule II, posebno Jedinjenja Formule IId. Cijano-supstituisani pirolidini Formule XII, zaštićeni sa zaštitnom grupom P<1>, odnosi se na grupe dobro poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici za zaštitu amina (videti prethodno), mogu da se konvertuju u karboksimidamide Formule XIII tretmanom sa natrijum metoksidom a nakon toga tretmanom sa amonijum hloridom. Kondenzacijom jedinjenja Formule XIII sa trihlor(hlorsulfanil) metanom pod baznim uslovima, na primer sa, ali bez ograničenja na, smešom N,N-diizo-propiletilamina u DCM, dobijaju se hlorotiadiazoli Formule XIV. Konverzija hloro tiadiazola Formule XIV u odgovarajući zaštićeni alkil tiadiazol Formule A može da se izvrši reakcijom unakrsnog udvajanja uz metal katalizator, kao što je, ali bez ograničenja na, Suzuki reakcija uz katalizator paladijum. Zaštićeni alkil tiadiazol Formule A može nakon toga na odgovarajući način da se deprotektuje postupcima dobro poznatim stručnjaku sa iskustvom u tehnici deprotekcije amina da se dobiju pirazoli Formule IId.
Šema 5a
[0132] Šema 5b se odnosi na izradu podskupa jedinjenja Formule II, posebno Jedinjenja Formule IIe i IIf. Weinreb amidi Formule B, zaštićeni sa zaštitnom grupom P<1>, odnosi se na grupe dobro poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici za zaštitu amina, mogu da se konvertuju u alkinil ketone Formule C tretmanom sa odgovarajuće metalizirano zaštićenim acetilenom, gde je P<3>odgovarajuće zaštićena alkinil grupa, kao što je, ali bez ograničenja na, trimetil silil, a nakon toga tretmanom sa amonijum hloridom. Kondenzacijom jedinjenja Formule C sa odgovarajućim alkil hidrazinom dobijaju se oba pirazol izomera zaštićenih pirolidina Formule D. Konverzija jedinjenja Formule D u odgovarajuće pirolidine Formule IIe i IIf može da se izvrši postupcima deprotekcije dobro poznatim stručnjacima sa iskustvom u tehnici deprotekcije amina.
Šema 5b
[0133] Šema 5c se odnosi na izradu podskupa jedinjenja Formule II, posebno Jedinjenja Formula IIg i IIh. Weinreb amidi Formule B, zaštićeni sa zaštitnom grupom P<1>, odnosi se na grupe dobro poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici za zaštitu amina, mogu da se konvertuju u alkil ketone Formule E tretmanom sa odgovarajućim etil organometalima, kao što su, ali bez ograničenja na, alkil Grignardovi reagensi, a nakon toga tretmanom sa amonijum hloridom. Tretmanom jedinjenja jedinjenja Formule E sa N, N-dimetil formamid dimetil acetalom dobijaju se enamini Formule F. Kondenzacijom enamina Formule F sa hidrazinom se dobijaju zaštićeni pirolidini Formule G. Alkilacijom jedinjenja Formule G, upotrebom standardnih alkilujućih sredstava, kao što su ali bez ograničenja na, alkil jodidi, u prisustvu baze, kao što je ali bez ograničenja na natrijum hidrid, dobijaju se izomerno zhaštićeni pirolidini Formule H. U nekim slučajevima ova faza može da se izbegne kada se žele jedinjenja u kojima je R<8>= H. Deprotekcija pirolidina Formule H može da se izvrši postupcima deprotekcije dobro poznatim stručnjaku sa iskustvom u tehnici deprotekcije amina da se dobiju pirolidini Formule IIg i IIh.
Šema 5c
[0134] Šema 6 se odnosi na izradu podskupa jedinjenja Formule II, posebno Jedinjenja Formule IIc. Šema počinje sa pirazol aldehidom Formule XV, gde je R<8>’ ili C1-C6alkil grupa ili zaštitna grupa P<2>, na primer ali bez ograničenja na, benzil grupa, koja može da se ukloni na primer, upotrebom paladijuma na ugljeniku u prisustvu vodonik gasa. Imini Formule XVI mogu da se generišu reakcijom aldehida Formule XV sa prop- 2-en-1-aminom (alil aminom) u odgovarajućem rastvaraču kao što je dihlormetan. Dodavanje vinil Grignard reagensa i zaštitom sa odgovarajućom amin zaštitnom grupom P<1>, odnosi se na grupe dobro poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici za zaštitu amina, dobija se bis-olefinski amin Formule XVII. Završnim zatvaranjem prstena, koristeći, na primer, ali bez ograničenja na, Grubbs-ovu drugu generaciju katalizatora benziliden[1,3-bis(2,4,6-trimetilfenil)imidazolidin-2-iliden] dihlor(tricikloheksilfosfin)rutenijuma, dobija se 2,5-dihidropirol pirazol Formule XVIII. Pirolidini Formule XIX mogu da se izrade redukciom jedinjenja XVIII sa redukcionim sredstvom kao što je, ali bez ograničenja na, paladijum na ugljeniku u prisustvu trietilsilana. Finalnom deprotekcijom ili samo P<1>dobijaju se jedinjenja Formule IIc; u slučaju kada je R<8>’ zaštitna grupa, R<8>u jedinjenju IIe je vodonik kada se sprovodi druga faza deprotekcije.
4
Šema 6
[0135] Šema 7 opisuje opšti postupak za izradu jedinjenja Formule III. Reakcija nukleofilne aromatične supstitucije cijano fenola Formule XX i fluor benzaldehida Formule XXI dovodi do formiranja bifenil etara Formule XXII. Hidrolizom cijano ostatka, koristeći na primer, ali bez ograničenja na, vodonik peroksid i kalijum karbonat u DMSO dobijaju se bifenil etar amidi Formule III. Redukcija aldehida u amide Formule III može da se izvrši upotrebom standardnih redukcionih sredstava, kao što je, ali bez ograničenja na, natrijum borhidrid da se dobiju alkoholi Formule J. U nekim slučajevima, tretmanom alkohla Formule J sa halogenizujućim sredstvom kao što je ali bez ograničenja na, tionil hlorid u slučaju kada je Y = Cl, dobijaju se benzil halidi (Y = Cl, Br ili I) Formule IIIa. Alternativno, tretmanom alkohola Formule J sa odgovarajućim sulfonil hloridom ili anhidridom u prisustvu baze, kao što je ali bez ograničenja na, diizopropil etil amin, mogu da se dobiju sulfonati (Y = mesilat ili tosilat) Formule IIIb.
Šema 7
[0136] Šema 8 se odnosi na opšti postupak za izradu jedinjenja Formule VI. Protekcija 2,4-dihidroksikarboksilne kiseline Formule XXIII da se generišu jedinjenja Formule XXIV može da se izvede tretmanom sa na primer, acetonom i trifluoroacetatnim anhidridom u prisustvu trifluoroacetatne kiseline. Reakcijom nukleofilne aromatične supstitucije jedinjenja Formula XXIV i XXV dolazi do formiranja bifenil etara Formule VI.
Šema 8
[0137] Alternativno, stručnjak sa iskustvom u tehnici može da predvidi izradu Jedinjenja Formule I solvolizom jedinjenja Formule K kako je opisano u Šemi 9, gde bi voda bila odgovarajući nukleofil za sintezu jedinjenja Formule Ka i Kb a amonijum bi bio odgovarajući nukleofil za sintezu jedinjenja Formule Kc.
4
Šema 9
[0138] Jedinjenja Formule K mogu da se izrade bazom izazvane nukleofilne aromatične supstitucije fluorobenzilnitrila Formule L i hidroksi benzilamina Formule IV kako je opisano u Šemi 10. Takođe, jedinjenja Formule Kc mogu da se izrade nukleofilnom aromatičnom supstitucijom derivata supstituisane fluorosalicilne kiseline Formule M sa hidroksi benzilaminima Formule IV kako je opisano u Šemi 11. U oba ova slučaja, reakcija nukleofilne supstitucije može da se izvede u rastvaraču kao što je, ali bez ograničenja, DMF i u prisustvu baze kao što je, ali bez ograničenja na, kalijum karbonat.
4
Šema 10
[0139] Hidroksibenzil amid Formule IV može pojedini stručnjak sa iskustvom u tehnici da izradi reduktivnom aminacijom amina Formule II sa hidroksibenzaldehidima Formule N kako je opisano u Šemi 12. Ove reakcije mogu da se izvedu pod standardnim uslovima reduktivne aminacije koristeći redukciono sredstvo kao što je, ali bez ograničenja na, natrijum triacetoksiborhidrid, u rastvaraču kao što je, ali bez ograničenja na, dihlormetan.
4
Šema 12
[0140] Kako se ovde koristi, naziv "reagovanje" (ili "reakcija" ili "reagovano") se odnosi na spajanje željenih hemijskih reaktanata tako da se izvrši hemijska transformacija generisanjem jedinjenja različitog od bilo kog početnog jedinjenja uvedenog u sistem. Reakcije mogu da se izvrše u prisustvu ili bez prisustva rastvarača.
[0141] Jedinjenja Formule I mogu da egzistiraju kao stereoizomeri, kao što su atropizomeri, racemati, enantiomeri ili diasereomeri. Uobičajene tehnike za izradu/izdvajanje pojedinačnih enantiomera uključuju asimetrične sinteze od odgovarajućeg optički čistog prekursora ili rezoluciju racemata koristeći, na primer, asimetričnu visoko efikasnu tečnu hromatografiju (HPLC) ili asimetričnu super kritičnu hromatografiju fluida. Alternativno, racemat (ili racematni prekursor) može da reaguje sa odgovarajućim optički aktivnim jedinjenjem, na primer, alkoholom, ili u slučaju kada jedinjenje sadrži kiseli ili bazni ostatak, sa kiselinom ili bazom kao što su tartaratna kiselina ili 1-feniletilamin. Dobijena diastereomerna smeša može da se razdvoji hromatografijom i/ili frakcionom kristalizacijom a jedan ili oba diastereoizomera konvertuju u odgovarajući čist enantiomer(e) postupcima dobro poznatim
4
stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Asimetrična jedinjenja Formule I (i njihovi asimetrični prekursori) mogu da se dobiju u enantiomerno obogaćenom obliku koristeći hromatografiju, obično HPLC, na asimetričnoj smoli sa mobilnom fazom koja se sastoji od ugljovodonika, obično heptana ili heksana, a koji sadrži od 0% do 50% 2-propanol, obično od 2% do 20% i od 0% do 5% alkilamina, obično 0.1% dietilamina. Koncentracijom eluata se dobija obogaćena smeša. Stereoizomerni konglomerati mogu da se razdvoje uobičajenim tehnikama poznatim stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Videti, na primer, Stereochemistry of Organic Jedinjenja by E. L. Eliel and S. H. Wilen (Wiley, New York, 1994. Odgovarajuće stereoselektivne tehnike su dobro poznate stručnjaku sa uobičajenim iskustvom u tehnici.
[0142] Kada jedinjenje Formule I sadrži alkenil ili alkenilen (alkiliden) grupu, mogući su geometrijski cis/trans (ili Z/E) izomeri. Cis/trans izomeri mogu da se razdvoje uobičajenim tehnikama dobro poznatim stručnjaku sa uobičajenim iskustvom u tehnici, na primer, hromatografijom i frakcionom kristalizacijom. Soli iz ovog pronalaska mogu da se izrade u skladu sa postupcima poznatim stručnjaku sa iskustvom u tehnici.
[0143] Jedinjenja Formule I koja su po prirodi bazna su sposobna da formiraju veliki broj različitih soli sa različitim neorganskim i organskim kiselinama. Mada ove soli moraju da budu farmaceutski prihvatljive za primenu na životinjama, često je u praksi potrebno da se iz reaktivne smeše prvo izdvoji jedinjenje iz ovog pronalaska u obliku farmaceutski neprihatljive soli a nakon toga jednostavno ponovo konvertuje u jedinjenje u obliku slobodne baze tretmanom sa alkalnim reagensom, a nakon toga se slobodna baza ponovo konvertuje u farmaceutski prihvatljivu so nastalu dodatkom kiseline. Soli baznih jedinjenja iz ovog pronalaska nastale dodatkom kiseline mogu da se izrade tretiranjem baznog jedinjenja sa potpuno ekvivalentnom količinom izabrane ili organske kiseline u medijumu vodenog rastvarača ili u pogodnom organskom rastvaraču, kao što su metanol ili etanol. Nakon evaporacije rastvarača, dobija se tražena so u čvrstom stanju. Tražena so kiseline može takođe da precipitira iz rastvora slobodne baze u organskom rastvaraču dodavanjem u rastvor odgovarajuće mineralne ili organske kiseline.
[0144] Ukoliko je jedinjenje iz pronalaska baza, tražena farmaceutski prihvatljiva so može da se izradi bilo kojim pogodnim postupkom raspoloživim u tehnici, na primer, tretmanom slobodne baze sa neorganskom kiselinom kao što su hlorovodonična kiselina, bromovodonična kiselina, sumporna kiselina, azotna kiselina, fosforna kiselina i slično, ili sa organskom kiselinom, kao što su sirćetna kiselina, maleinska kiselina, sukcinska kiselina, mandelatna kiselina, fumarna kiselina, malonska kiselina, piruvijatna kiselina, oksalatna
4
kiselina, glikolna kiselina, salicilatna kiselina, izonikotinska kiselina, mlečna kiselina, pantotenatna kiselina, askorbinska kiselina, 2,5-dihidroksibenzojeva kiselina, glukonska kiselina, saharinska kiselina, mravlja kiselina, metansulfonska kiselina, etansulfonska kiselina, benzensulfonska kiselina, p-toluensulfonska kiselina i pamoatna [to jest, 4,4’-metandiilbis(3-hidroksinaftalen-2-karboksilic kiselina)] kiselina, piranosidilna kiselina, kao što su glukuronatna kiselina ili galakturonatna kiselina, alfa-hidroksi kiselina, kao što su limunska kiselina ili vinska kiselina, amino kiselina, kao što su aspartatna kiselina ili glutaminska kiselina, aromatična kiselina, kao što su benzoeva kiselina ili cinamitna kiselina, sulfonska kiselina, kao što je etansulfonska kiselina, ili slično.
[0145] Ona jedinjenja Formule I koja su po prirodi kisela su sposobna da formiraju bazne soli sa različitim farmakološki prihvatljivim katjonima. U primere ovakvih soli spadaju soli alkalnih metala ili zemno alkalnih metala a posebno soli natrijuma i kalijuma. Sve ove soli se izrađuju uobičajenim tehnikama. Hemijske baze koje se koriste kao reagensi za izradu farmaceutski prihvatljivih baznih soli iz ovog pronalaska su one koje formiraju netoksične bazne soli sa kiselim jedinjenjima Formule I. Ove soli mogu da se izrade bilo kojim pogodnim postupkom, na primer, tretmanom slobodne kiseline sa neorganskom ili organskom bazom kao što su amin (primarni, sekundarni ili tercijerni), hidroksid alkalnog metala ili hidroksid zemno alkalnog metala, ili slično. Ove soli mogu takođe da se izrade tretiranjem odgovarajućih kiselih jedinjenja sa vodenim rastvorom koji sadrži tražene farmakološki prihvatljive katjone a nakon toga evaporacijom dobijenog rastvora do sušenja, na primer, pod sniženim pritiskom. Altgernativno, takođe mogu da se izrade mešanjem nižih alkanolnih rastvora kiselih jedinjenja zajedno sa traženim alkoksidom alkalnog metala a nakon toga evaporacijom dobijenog rastvora do sušenja na isti način kao prethodno. U oba slučaja, korišćene su stehiometrijske količine reagenasa, kako bi se, na primer, osigurala kompletnost reakcije i maksimalan prinos traženog finalnog produkta.
[0146] Farmaceutski prihvatljive soli jedinjenja Formule I mogu da se izrade jednim ili više od tri postupka:
(i) reakcijom jedinjenja Formule I sa željenom kiselinom ili bazom;
(ii) uklanjanjem kiselo- ili bazno-labilne zaštitne grupe iz pogodnog prekursora jedinjenja Formule I ili otvaranjem prstena pogodnog cikličnog prekursora, na primer, laktona ili laktama, koristeći željenu kiselinu ili bazu; ili
(iii) konverzijom jedne soli jedinjenja Formule I u drugu reakcijom sa odgovarajućom kiselinom ili bazom ili pogodne kolone za izmenu jona.
[0147] Sve tri reakcije se obično izvode u rastvoru. Dobijena so može da precipitira iz rastvora i da se sakupi filtriranjem ili može da se povrati evaporacijom rastvarača. Stepen jonizacije nastale soli može da varira od potpuno jonizovane do skoro nejonizovane.
[0148] Polimorfi mogu da se izrade u skladu sa tehnikama dobro poznatim stručnjaku sa iskustvom u tehnici, na primer, kristalizacijom.
[0149] Kada bilo koji racemat kristališe, mogući su kristali dva različita tipa. Prvi tip je racematno jedinjenje (pravi racemat) kako je prethodno pomenuto pri čemu se produkuje jedan homogeni oblik kristala koji sadrži oba enantiomera u ekvimolarnim količinama. Drugi tip je racematna smeša ili konglomerat pri čemu su dobijena dva oblika kristala u ekvimolarnim količinama, od kojih svaki sadrži pojedinačni enantiomer.
[0150] Mada oba kristalna oblika prisutna u racematnoj smeši mogu da imaju skoro potpuno identične fizičke karakteristike, mogu da imaju različite fizičke karakteristike u poređenju sa pravim racematom. Racematne smeše mogu da se razdvoje uobičajenim tehnikama poznatim stručnjaku sa iskustvom u tehnici - videti, na primer, Stereochemistry of Organic Jedinjenja by E. L. Eliel and S. H. Wilen (Wiley, New York, 1994).
[0151] Pronalazak takođe uključuje izotopno obležena jedinjenja Formule I pri čemu je jedan ili više atoma zamenjen sa atomom koji ima isti atomski broj ali je atomska masa ili maseni broj različit od atomske mase ili masenog broja koji se obično nalazi u prirodi. Izotopno obeležena jedinjenja Formule I (ili njihove farmaceutski prihvatljive soli ili njihovi N-oksidi) mogu generalno da se izrade uobičajenim tehnikama poznatim stručnjaku sa iskustvom u tehnici ili procesima analognim sa onim koji su ovde opisani, koristeći odgovarajući izotopno obeleženi reagens umesto neobeleženog reagensa koji se inače koristi.
[0152] Treba da se procene biofarmaceutske karakteristike jedinjenja Formule I, kao što su rastvorljivost i stabilnost rastvora (promenom pH), permeabilnost, itd., kako bi se izabrao najpogodniji dozni oblik i način primene za tretman određene indikacije. Jedinjenja iz pronalaska namenjena za farmaceutsku upotrebu mogu da se primene kao kristalni ili amorfni produkti. Mogu da se dobiju, na primer, kao čvrste pločice, praškovi ili filmovi postupcima kao što su precipitacija, kristalizacija, sušenje zamrzavanjem, sušenje raspršivanjem ili sušenje evaporacijom. U ovu svrhu može takođe da se koristi sušenje mikrotalasima ili radiofrekvencijom.
[0153] Jedinjenja iz pronalaska mogu da se primene sama ili u kombinaciji sa jednim ili više drugih jedinjenja iz pronalaska ili u kombinaciji sa jednim ili više drugih lekova (ili kao
1
njihova kombinacija). Generalno, mogu da se primene kao formulacija zajedno sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih ekscipijenata. Naziv "ekscipijent" se ovde koristi da opiše bilo koji sastojak koji nije jedinjenje(a) iz pronalaska. Izbor ekspicijenta će u velikoj meri da zavisi od faktora kao što su određeni način primene, uticaj ekscipijenta na rastvorljivost i stabilnost i priroda doznog oblika. Farmaceutske kompozicije pogodne za oslobađanja jedinjenja iz ovog pronalaska (ili njihove farmaceutski prihvatljive soli) i postupci za njihovu izradu su lako prihvatljivi stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Ovakve kompozicije i postupci za nihovu izradu mogu da se nađu, na primer, u Remington’s Pharmaceutical Sciences, 19th Edition (Mack Publishing Company, 1995).
[0154] Jedinjenja iz pronalaska (uključujući njihove farmaceutski prihvatljive soli i njihove N-okside) mogu da se primene oralno. Oralna primena može da uključi gutanje, tako da jedinjenje ulazi u gastrointestinalni trakt i/ili bukalnu, lingvalnu ili sublingvalnu primenu, pri čemu jedinjenje direktno iz usta ulazi u krvotok.
[0155] Formulacije pogodne za oralnu primenu uključuju čvrste, polu-čvrste i tečne sisteme kao što su tablete; meke i čvrste kapsule koje sadrže multi- ili nano-partikulate, tečnosti ili praškovi; lozenge (uključujući punjene tečnošću); gume za žvakanje; gele; brzo-disperzijuće dozne oblike; filmove; ovule; sprejove; i bukalne/mukoadhezivne flastere. Tečne formulacije uključuju suspenzije, rastvore, sirupe i eliksire. Ovakve formulacije mogu da se koriste kao punioci u mekim i čvrstim kapsulama (izrađenim, na primer, od želatina ili hidroksipropil metilceluloze) i obično uključuju nosač, na primer, vodu, etanol, polietilen glikol, propilen glikol, metilcelulozu ili odgovarajuće ulje i jedno ili više emulgujućih sredstava i/ili suspendujuće sredstvo. Tečne formulacije mogu takođe da se izrade rekonstitucijom čvrste formulacije, na primer, sahete. Jedinjenja iz pronalaska mogu takođe da se koriste u brzorastvorljivim, brzo-raspadajućim doznim oblicima kao što su oni koje su opisali Liang and Chen, Expert Opinion in Therapeutic Patents 2001, 11, 981-986.
[0156] Za tablete kao dozne oblike, u zavisnosti od doze, lek može da čini od 1 težinskih % do 80 težinskih % doznog oblika, mnogo češće od 5 težinskih % do 60 težinskih % doznog oblika. Pored leka, tablete generalno sadrže dezintegrante. Primeri dezintegranata uključuju natrijum skrob glikolat, natrijum karboksimetil celulozu, kalcijum karboksimetil celulozu, kroskarmelozu natrijum, krospovidon, polivinilpirolidon, metilcelulozu, mikrokristalnu celulozu, hidroksipropil celulozu supstituisanu nižim alkilom, skrob, preželatinizirani skrob i natrijum alginat. Generalno, dezintegrant će da čini od 1 težinskih % do 25 težinskih %, na primer od 5 težinskih % do 20 težinskih % doznog oblika.
2
[0157] Vezivna sredstva se generalno koriste da poboljšaju kohezivne kvalitete tabletne formulacije. U pogodna vezivna sredstva spadaju mikrokristalna celuloza, želatin, šećeri, polietilen glikol, prirodne i sintetičke gume, polivinilpirolidon, preželatinizirani skrob, hidroksipropil celuloza i hidroksipropil metilceluloza. Tablete mogu takođe da sadrže razblaživače, kao što su laktoza (monohidratna, monohidratna sušena raspršivanjem, anhidrovana i slično), manitol, ksilitol, dekstroza, sukroza, sorbitol, mikrokristalna celuloza, skrob i dibazni kalcijum fosfat dihidrat.
[0158] Tablete mogu takođe opciono da uključe površinski aktivna sredstva kao što su natrijum lauril sulfat i polisorbat 80 i glidanse kao što su silicijum dioksid i talk. Kada su prisutna, površinski aktivna sredstva mogu da čine od 0.2 težinskih % do 5 težinskih % tablete, a glidansi mogu da od 0.2 težinskih % do 1 težinskih % tablete.
[0159] Tablete takođe generalno sadrže lubrikanse kao što su magnezijum stearat, kalcijum stearat, cink stearat, natrijum stearil fumarat i smeše magnezijum stearata sa natrijum lauril sulfatopm. Lubrikansi generalno čine od 0.25 težinskih % do 10 težinskih % , na primer od 0.5 težinskih % do 3 težinskih % tablete.
[0160] U druge moguće sastojke spadaju antioksidansi, boje, arome, konzervansi i sredstva za prikrivanje ukusa.
[0161] Primerne tablete sadrže do približno 80% lek, od približno 10 težinskih % do približno 90 težinskih % vezivno sredstvo, od približno 0 težinskih % do približno 85 težinskih % razblaživač, od približno 2 težinska % do približno 10 težinskih % dezintegrant i od približno 0.25 težinskih % do približno10 težinskih % lubrikans.
[0162] Tabletne smeše mogu da se komprimuju direktno ili preko valjaka da se formiraju tablete. Tabletne smeše ili delovi smeša mogu alternativno da se pre tabletiranja vlažno-, suvo- ili topljenjem- granuliraju, zgusnu topljenjem ili ekstrudiraju. Finalna formulacija može da se sastoji od jednog ili više slojeva i može da bude obložena ili neobložena a čak može da bude enkapsulirana.
[0163] Formulacija tableta je diskutovana u Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets, Vol.1, by H. Lieberman and L. Lachman (Marcel Dekker, New York, 1980).
[0164] Jestivi oralni filmovi za humanu ili veterinarsku upotrebu su tipično savitljivi oblici za doziranje rastvorljivi u vodi ili tankoslojni film oblici koji bubre u vodi koji mogu brzo da se rastvore ili su mukoadhezivni i obično uključuju jedinjenje Formule I, polimer koji formira film, vezivno sredstvo, rastvarač, humektans, plastifikator, stabilizator ili emulgator, sredstvo za modifikaciju viskoziteta i rastvarač. Neke komponente formulacije mogu da imaju više od jedne funkcije.
[0165] Jedinjenje Formule I (ili njegove farmaceutski prihvatljive soli) može da bude rastvorljivo ili nerastvorljivo u vodi. Jedinjenje rastvorljivo u vodi obično čini od 1 težinski % do 80 težinskih %, još tipičnije od 20 težinskih % do 50 težinskih % rastvoraka. Manje rastvorljiva jedinjenja mogu da čine manji deo kompozicije, obično do 30 težinskih % rastvoraka. Alternativno, jedinjenje Formule I može da bude u obliku multipartikularnih perlica.
[0166] Polimer koji formira film može da bude izabran od prirodnih polisaharida, proteina ili sintetičkih hidrokoloida i uobičajeno je prisutan u rasponu od 0.01 do 99 težinskih %, još češće u rasponu od 30 do 80 težinskih %.
[0167] U druge moguće sastojke spadaju anti-oksidansi, boje, arome i pojačivači arome, konzervansi, sredstva za stimulaciju salivacije, hladeće sredstvo, korastvarači (uključujući ulja), emolijenti, sredstva za dopunjavanje, antipeneća sredstva, surfaktanti i sredstva za maskiranje ukusa.
[0168] Filmovi u skladu sa pronalaskom se obično izrađuju evaporativnim sušenjem tankih vodenih filmova nanetih na podlogu ili papir sa kog mogu da se odlepe. Ovo može da se izvede u sušnici ili tunelu, obično u kombinovanoj mašini za sušenje ili sušenjem zamrzavanjem ili vakumiranjem.
[0169] Čvrste formulacije za oralnu primenu mogu da budu formulisane za trenutno i/ili modifikovano oslobađanje. Formulacije sa modifikovanim oslobađanjem uključuju odloženo, kontinuirano, pulsirano, kontrolisano, ciljano i programirano oslobađanje.
[0170] Odgovarajuće formulacije sa modifikovanim oslobađanjem u svrhu pronalaska su opisane u US Patentu broj 6,106,864. Detalji drugih pogodnih tehnologija oslobađanja, kao što su visoko-enrgetske disperzije i osmotske i obložene partikule mogu da se nađu u Verma i saradnici, Pharmaceutical Technology On-line, 25(2), 1-14 (2001). Upotreba gume za žvakanje za postizanje kontrolisanog oslobađanja je opisana u WO 00/35298.
[0171] Jedinjenja iz pronalaska (uključujući njihove farmaceutski prihvatljive soli) mogu takođe da se primene direktno u krvotok, u mišić ili u unutrašnji organ. Pogodni načini parenteralne primene uključuju intravenski, intraarterijalno, intraperitonealno, intratekalno, intraventrikularno, intrauretralno, intrasternalno, intrakranijalno, intramuskularno, intrasinovijalno i subkutano. Pogodna sredstva za parenteralnu primenu uključuju injektore sa iglom (uključujući mikroigle), injektore bez igle i infuzione tehnike.
[0172] Parenteralne formulacije su obično vodeni rastvori koji mogu da sadrže ekscipijente
4
kao što su soli, ugljeni hidrati i sredstva za puferovanje (na primer, za pH od 3 do 9), ali za neke aplikacije, može da bude mnogo pogodnije da su formulisane kao sterilni nevodeni rastvor ili kao suvi oblik za upotrebu u konjukciji sa pogodnim vehikulumom kao što je sterilna apirogena voda.
[0173] Izrada parenteralnih formulacija pod sterilnim uslovima, na primer, liofilizacijom, može jednostavno da se izvede pomoću standardnih farmaceutskih tehnika dobro poznatih stručnjaku sa iskustom u tehnici.
[0174] Rastvorljivost jedinjenja Formule I (uključujući njihove farmaceutski prihvatljive soli) korišćenih u izradi parenteralnih rastvora može da se poveća upotrebom odgovarajućih tehnika formulisanja kao što je inkorporisanje sredstava za povećanje rastvorljivosti.
[0175] Formulacije za parenteralnu primenu mogu da budu formulisane za trenutno i/ili modifikovano oslobađanje. Formulacije sa modifikovanim oslobađanjem uključuju odloženo, kontinuirano, pulsirano, kontrolisano, ciljano i programirano oslobađanje. Prema tome, jedinjenja iz pronalaska mogu da budu formulisana kao suspenzije ili kao čvrste, polu-čvrste ili tiksotropne tečnosti za primenu kao implantirani depo koji omogućava modifikovano oslobađanje aktivnog jedinjenja. U primere ovakvih formulacija spadaju stenti obloženi lekom i polučvrsti oblici i suspenzije koje uključuju poli(DL-laktatna koglikolna kiselina) (PLGA) mikrosfere obložene lekom.
[0176] Jedinjenja iz pronalaska (uključujući njihove farmaceutski prihvatljive soli) mogu takođe da se primene topično, intradermalno ili transdermalno na kožu ili mukozu. U uobičajene formulacije za ovu svrhu spadaju geli, hidrogeli, losioni, rastvori, kreme, masti, praškovi za posipanje, prelivi, pene, filmovi, flasteri, pločice, implanti, sunđeri, gaze, zavoji i mikroemulzije. Takođe mogu da se koriste lipozomi. U uobičajene nosače spadaju alkohol, voda, mineralno ulje, tečni parafin, beli vazelin, glicerin, polietilen glikol i propilen glikol. Mogu da budu inkorporirani pojačivači penetracije. Videti, na primer, Finnin and Morgan, J. Pharm. Sci.1999, 88, 955-958.
[0177] Drugi načini topične primene uključuju oslobađanje elektroporacijom, jontoforezom, fonoforezom, sonoforezom i injektorom sa mikro iglom ili bez igle (na primer, Powderject™, Bioject™, itd.).
[0178] Formulacije za topičnu primenu mogu da budu formulisane tako da budu sa trenutnim i/ili modifikovaniim oslobađanjem. Formulacije sa modifikovanim oslobađanjem uključuju odloženo, kontinuirano, pulsirano, kontrolisano, ciljano i programirano oslobađanje.
[0179] Jedinjenja iz pronalaska (uključujući njihove farmaceutski prihvatljive soli) mogu takođe da se primene intranazalno ili inhalacijom, obično u obliku suvog praška (ili samog ili kao smeše, na primer, u suvoj smeši sa laktozom; ili kao smeša čestica komponenti, na primer, smeša sa fosfolipidima, kao što je fosfatidilholin) iz inhalera suvog praška, kao aerosol sprej iz kontejnera pod pritiskom, pumpe, spreja, atomizera (na primer, atomizera koji koristi elektrohidrodinamiku za stvaranje fine magle), ili nebulizera, sa ili bez upotrebe pogodnog propelanta, kao što su 1,1,1,2-tetrafluoroetan ili 1,1,1,2,3,3,3-heptafluoropropan, ili kao kapi za nos. Za intranazalnu upotrebu, prašak može da uključi bioadhezivno sredstvo, na primer hitozan ili ciklodekstrin.
[0180] Kontejner pod pritiskom, pumpa, sprej, atomizer ili nebulizer sadrži rastvor ili suspenziju jedinjenja iz pronalaska uključujući kao rastvarač, na primer, etanol, razblaženi etanol ili pogodno alternativno sredstvo za disperziju, solubilizaciju ili pojačavanje oslobađanja aktivnog sredstva, propelant(e) i opciono surfaktant kao što su sorbitan trioleat, oleinska kiselina, ili oligolaktatna kiselina.
[0181] Pre upotrebe u formulaciji suvog praška ili suspenzije, lekoviti produkt se mikronizuje do veličine pogodne za oslobađanje inhalacijom (obično manje od 5 mikrona). Ovo može da se postigne bilo kojim odgovarajućim postupkom usitnjavanja, kao što je mlevenje spiralnim mlazom, mlevenje mlazom sa fluidnim slojem, superkritično procesuiranje fluida da se formiraju nano partikule, homogenizacija pod visokim pritiskom ili sušenje raspršivanjem.
[0182] Kapsule (izrađene na primer od želatina ili hidroksipropil metilceluloze), blisteri i kartridži za upotrebu u inhaleru ili insuflatoru mogu da budu formulisani da sadrže praškastu smešu jedinjenja iz pronalaska i odgovarajuće praškaste baze kao što su laktoza ili skrob i modifikator karakteristika kao što su L-leucin, manitol ili magnezijum stearat. Laktoza može da bude anhidrovana ili u obliku monohidrata. U druge pogodne ekscipijente spadaju dekstran, glukoza, maltoza, sorbitol, ksilitol, fruktoza, sukroza i trehaloza.
[0183] Pogodna formulacija rastvora za upotrebu u atomizeru koristeći elektrohidrodinamiku za produkciju fine magle može da sadrži od 1 µg do 20 mg jedinjenja iz pronalaska po aktiviranju a zapremina aktiviranja može da varira od 1 µl do 100 µl. Uobičajena formulacija može da uključi jedinjenje Formule I ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, propilen glikol, sterilnu vodu, etanol i natrijum hlorid. Alternativni rastvarači koji mogu da se koriste umesto propilen glikola su glicerol i polietilen glikol.
[0184] U ove formulacije iz pronalaska namenjene za inhalacionu/intranazalnu primenu mogu da se dodaju pogodne arome kao što su mentol i levomentol, ili zaslađivači kao što su saharin ili saharin natrijum.
[0185] Formulacije za inhalacionu/intranazalnu primenu mogu da budu formulisane tako da budu za trenutno i/ili modifikovano oslobađanje koristeći, na primer, PGLA. U formulacije sa modifikovanim oslobađanjem spadaju odloženo, kontinuirano, pulsirano, kontrolisano, ciljano i programirano oslobađanje.
[0186] U slučaju inhalera suvog praška ili aerosola, dozna jedinica je određena pomoću ventila koji oslobađa odmerenu količinu. Jedinice u skladu sa pronalaskom su obično uređene tako da se primeni odmerena doza ili "puf" koji sadrži od 0.01 do 100 mg jedinjenja Formule I. Ukupna dnevna doza je obično u rasponu od 1 µg do 200 mg koja može da bude primenjena kao pojedinačna doza ili, mnogo češće, kao podeljene doze u toku dana.
[0187] Jedinjenja iz pronalaska mogu da se primene rektalno ili vaginalno, na primer u obliku supozitorija, pesara ili enema. Kakao buter je tradicionalna podloga za supozitorije, ali po potrebi mogu da se koriste različite alternative.
[0188] Formulacije za rektalnu/vaginalnu primenu mogu da budu formulisane za trenutno i/ili modifikovano oslobađanje. Formulacije sa modifikovanim oslobađanjem uključuju odloženo, kontinuirano, pulsirano, kontrolisano, ciljano i programirano oslobađanje.
[0189] Jedinjenja iz pronalaska (uključujući njihove farmaceutski prihvatljive soli) mogu takođe da se primene direktno na oko ili uho, obično u obliku kapi, mikronizirane suspenzije ili rastvora u izotoničnom, pH-podešenom sterilnom rastvoru soli. Druge formulacije pogodne za okularnu i auralnu primenu uključuju masti, gele, biodegradibilne (na primer, upijajuće gel sunđere, kolagen) i ne-biodegradabilne (na primer, silikon) implante, pločice, sočiva i partikulatne ili vezikularne sisteme, kao što su niozomi ili lipozomi. Polimer kao što su unakrsno vezana poliakrilna kiselina, polivinilalkohol, hijaluronska kiselina, celulozni polimer, na primer, hidroksipropil metilceluloza, hidroksietil celuloza, ili metilceluloza, ili heteropolisaharidni polimer, na primer, gelan guma, može da bude inkorporiran zajedno sa konzervansom kao što je benzalkonijum hlorid. Ovakve formulacije mogu takođe da se oslobode jontoforezom
[0190] Formulacije za okularnu/auralnu primenu mogu da budu formulisane za trenutno i/ili modifikovano oslobađanje. Formulacije sa modifikovanim oslobađanjem uključuju odloženo, kontinuirano, pulsirano, kontrolisano, ciljano ili programirano oslobađanje.
[0191] Jedinjenja iz pronalaska (uključujući njihove farmaceutski prihvatljive soli) mogu da se kombinuju sa rastvorljivim makromolekularnim entitetima, kao što su ciklodekstrin i njegovi odgovarajući derivati ili polimeri koji sadrže polietilen glikol, kako bi se poboljšala njihova rastvorljivost, brzina rastvaranja, maskiranje ukusa, bioraspoloživost i/ili stabilnost za upotrebu u bilo kom od prethodno pomenutih načina primene.
[0192] Nađeno je da su kompleksi lek-ciklodekstrin, na primer, generalno korisni za najveći broj doznih oblika i načina primene. Mogu da se koriste i inkluzivni i ne-inkluzivni kompleksi. Kao alternativa direktnom kompleksiranju sa lekom, ciklodekstrin može da se koristi kao pomoćni aditiv, to jest, kao nosač, razblaživač ili solubilizator. Najčešće korišćeni u ovu svrhu su alfa, beta i gama ciklodekstrini, čiji primeri mogu da se nađu u Internacionalnoj patentnoj prijavi, brojevi WO 91/11172, WO 94/02518 i WO 98/55148.
[0193] Ovde je takođe opisana upotreba u tretmanu bolesti/stanja koja su ovde opisana uz kombinaciju aktivnih sastojaka koji mogu da se primene odvojeno, a dalje je ovde opisana kombinacija odvojenih farmaceutskih kompozicija u obliku kita. Kit sadrži dve odvojene farmaceutske kompozicije: jedinjenje Formule I, njegov prolek ili so tog jedinjenja ili proleka i drugo jedinjenje kako je prethodno opisano. Kit uključuje sredstvo za čuvanje odvojenih kompozicija kao što su kontejner, podeljena boca ili podeljeni paket folije. Uobičajeno, kit uključuje uputstvo za primenu odvojenih komponenti. Kit kao oblik ima posebnu prednost kada se odvojene komponente, na primer, primenjuju u različitim doznim oblicima (na primer, oralno i parenteralno), primenjuju u različitim intervalima doziranja ili kada je potrebna titracija pojedinačnih komponenti kombinacije od strane lekara koji porpisuje lek.
[0194] Primer ovakvog kita je takozvano blister pakovanje. Blister pakovanja su dobro poznata u industriji pakovanja i široko su rasprostranjena za pakovanje farmaceutskih pojedinačnih doznih oblika (tablete, kapsule i slično). Blister pakovanja se generalno sastoje od lista relativno čvrstog materijala pokrivenog sa folijom providnog plastičnog materijala. U toku procesa pakovanja se u plastičnoj foliji formiraju udubljenja. Udubljenja imaju veličinu i oblik tableta ili kapsula koje se pakuju. Nakon toga, tablete ili kapsule se unesu u udubljenja i zatvore se listom relativno čvrstog materijala preko plastične folije. Nakon toga, tablete ili kapsule se postavljaju u udubljenja i list relativno čvrstog materijala se zalepi za plastičnu foliju na prednjoj strani folije koja je na suprotnoj strani od pravca u kome su udubljenja formirana. Kao rezultat, tablete ili kapsule su zatvorene u udubljenjima između plastične folije i lista. U nekim ostvarenjima, čvrstina lista je takva da tablete ili kapsule mogu da se istisnu iz blister pakovanja ručno primenjujući pritisak na udubljenje, pri čemu se na listu na mestu udubljenja formira otvor. Nakon toga tableta ili kapsula može da se izvadi preko tog otvora.
[0195] Može da bude potrebno da se obezbedi pomoć za pamćenje na kitu, na primer u obliku brojeva pored tableta ili kapsula pri čemu brojevi odgovaraju danima režima u kojem tako određene tablete ili kapsule treba da se unose. Drugi primer ovakve pomoći pamćenja je kalendar odštampan na kartici, na primer, ovako "Prva nedelja, ponedeljak, utorak, itd... druga nedelja, ponedeljak, utorak..... " itd. Druge varijante pomoći pamćenja će biti lako prihvatljive. "Dnevna doza" može da bude jedna tableta ili kapsula ili nekoliko pilula ili kapsula uzetih tog dana. Takođe, dnevna doza jedinjenja Formule I može da se sastoji od tablete ili kapsule dok dnevna doza drugog jedinjenja može da se sastoji od nekoliko tableta ili kapsula i obrnuto. Pomoć za pamćenje bi trebala da ovo odražava.
[0196] Kako je ovde opisano, obezbeđen je dozator dizajniran za izdavanje dnevnih doza jedne po jedne po redosledu njihove namenjene upotrebe. Na primer, dozator je opremljen sa memorijskom pomoći tako da dalje omogućava usaglašenost sa režimom. Primer ovakve memorijske pomoći je mehanički brojač koji određuje broj dnevnih doza koje su iskorišćene. Drugi primer ovakve memorijske pomoći je memorijski mikro čip na baterije povezan sa ekranom od tečnog kristala ili sa zvučnim signalom koji na primer očitava podatke kada je poslednji put uzeta dnevna doza i/ili podseća pojedinca kada treba uzeti narednu dozu.
Eksperimentalne procedure
[0197] Niže su ilustrovane sinteze različitih jedinjenja i ovog pronalaska. Druga jedinjenja u okviru ovog pronalaska mogu da se izrade po postupcima ilustrovanim u ovim Primerima, ili samim ili u kombinaciji sa tehnikama generalno poznatim u tehnici. Eksperimenti se generalno izvode u inertnoj atmosferi (azot ili argon) posebno u slučajevima kada se koriste reagensi ili međuproizvodi osetljivi na kiseonik ili vlagu. Komercijalno nabavljeni rastvarači ili reagensi su generalno korišćeni bez naknadnog prečišćavanja. Kada je potrebno, korišćeni su anhidrovani rastvarači, generlano AcroSeal® produkti od firme Acros Organics, Aldrich® Sure/Seal™ od Sigma-Aldrich, ili DriSolv® produkti od EMD Chemicals. U drugim slučajevima, komercijalni rastvarači su propušteni kroz kolone napunjene sa 4Å molekularnim sitima, dok se ne dostignu naredni QC standardi za vodu: a) <100 ppm za dihlormetan, toluen, N,N-dimetilformamid i tetrahidrofuran; b) <180 ppm za metanol, etanol, 1,4-dioksan i diizopropilamin. Za veoma osetljive reakcije, rastvarači su dalje tretirani sa metalom natrijumom, kalcijum hidridom ili molekularnim sitima i destilovani neposredno pre upotrebe. Produkti se generalno suše pod vakuumom pre korišćenja u narednim reakcijama i podvrgavanju biološkom ispitivanju. Rezultati masene spektrometrije su beleženi instrumentima ili tečne hromatografije masene spektrometrije (LCMS), hemijske jonizacije atmosferskog pritiska (APCI) ili gasne hromatografije-masena spektrometrija (GCMS).
Rezultati hemijskih promena za nuklearnu magnetnu rezonancu (NMR) su izraženi u delovima po milion (ppm, δ) u odnosu na rezidualne pikove od korišćenih deuterisanih rastvarača. U nekim primerima, vrši se asimetrično razdvajanje da se razdvoje asimetrični enantiomeri nekih jedinjenja iz pronalaska (u nekim primerima, razdvojeni enantiomeri su označeni kao ENT-1 i ENT-2, u skladu sa redosledom njihove eluacije). U nekim primerima, optička rotacija enantiomera se meri pomoću polarimetra. U skladu sa rezultatima njegove uočene rotacije (ili rezultatima njegove specifične rotacije), enantiomer sa rotacijom u smeru kazaljki sata se označava kao (+)-enantiomer a enantioimer sa rotacijom suprotno kazaljki sata se označava kao (-)-enantiomer. Racematna jedinjenja su označena prisustvom (+/-) pored strukture; u ovim slučajevima, bilo koja označena stereohemija predstavlja relativnu (pre nego apsolutnu) konfiguraciju supstituenata na jedinjenju.
[0198] Reakcije koje se odvijaju preko detektabilnih međuproizvoda se generlano prate pomoću LCMS i dozvoli se da se izvrši potpuna konverzija pre dodavanja narednog reagensa. Za sinteze koje se odnose na procedure u drugim primerima ili postupcima, uslovi reakcije (vreme reakcije i temperatura) mogu da variraju. Generalno, reakcije se prate hromatografijom na tankom sloju ili masenom spektrometrijom i podvrgavaju doradi kada je to potrebno. Prečišćavanje može da varira između eksperimenata: generalno, rastvarači i odnosi rastvarača korišćenih kao eluenti/gradijenti su izabrani tako da obezbede odgovarajuća Rfs ili vremena zadržavanja. Svi početni materijali u ovim Izradama i Primerima su ili komercijalno raspoloživi ili mogu da se izrade postupcima u tehnici ili kako je ovde opisano.
[0199] Naredne skraćenice koje mogu da se pojave u eksperimentalnim procedurama su ovde opisane:
9-BBN = 9-borbiciklo[3.3.1]nonan; BF3· Et2O = bor trifluorid dietil eterat; BINAP = 1,1’-binaftalen-2,2’-diilbis(difenilfosfan); Boc = terc-butoksikarbonil; br = široko; n-BuLi = nbutillitijum; t-BuONa = natrijum terc-butoksid; t-ButilXPhos = di-terc-butil[2’,4’,6’-tri(propan-2-il)bifenil-2-il]fosfan; Bz = benzoil; CDCl3= deuterohlorform; CD3OD = deuterometanol; CF3COOH = trifluorosirćetna kiselina; d = dablet; dd = dablet od dableta; ddd = dablet od dablet od dableta; DBU = 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en; DCM = dihlormetan; DEPT = poboljšanje prenosa polarizacije bez izobličenja; DMB = (2,4-dimetoksifenil)metil; dppf = 1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen; EDC ili EDCl = 1-[3-(dimetilamino)propil]-3-etilkarbodiimid hidrohlorid; EtOAc = etil acetat; EtOH = etanol; g = gram; GCMS = gasna hromatografija-masena spektrometrija; h = sat; H2O = voda; HATU = O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N,N’-tetrametiluronijum heksafluorofosfat; HCl = hlorovodonična kiselina ili vodonik hlorid; HPLC = visoko efikasna tečna hromatografija; Hz = herc; K2CO3= kalijum karbonat; KF = kalijum fluorid; kg = kilogram; L = litar; LCMS = tečna hromatografija masena spektrometrija; m = multiplet; M = molar; m-CPBA =
3-hlorperoksibenzojeva kiselina; MeOH = metanol; mg = miligram; MHz = megaherc; min = minuti; mL = mililitar; µL = mikrolitar; mmol = milimol; µmol = mikromol; Mo(CO)6= molibden heksakarbonil; mol = mol; MPa = megapaskal; N = normal; N2= azot; NaH = natrijum hidrid; NaHCO3= natrijum bikarbonat; NaOAc = natrijum acetat; NaOt-Bu =natrijum terc-butoksid; NaOCl = natrijum hipohlorit; NaOH = natrijum hidroksid; NaOMe = natrijum metoksid; Na2SO4= natrijum sulfat; NEts = trietilamin; NH4Cl = amonijum hlorid; NH2OH·HCl = hidroksilamin hidrohlorid; NMR = nuklearna magnetna rezonanca;
Overhauzerov efekat; Pd(amfos)2Cl2= bis[di-terc-butil(4-dimetilaminofenil)fosfin] dihlorpaladijum(II); Pd2(dba)3= tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum(0); Pd(dppf)Cl2= [1,1’-bis(difenilfosfino)-ferocen]dihlorpaladijum(II); Pd(dtbpf)Cl2= [1,1-bis(di-terc-butilfosfino)-ferocen]dihlorpaladijum(II); Pd(PCy3)2Cl2= dihlorbis(tricikloheksilfosfin)paladijum(II); PPh3= trifenilfosfin; psi = funti po inču na kvadrat; q = kvartet; rt = sobna temperatura; s = singlet; T3P = 2,4,6-tripropil-1,3,5,2,4,6- trioksatrifosfinan 2,4,6-trioksid; TBAF = tetrabutilamonijum fluorid; TEA = trietilamin; TEA·3HF = trietilamin trihidrofluorid; TFA = trifluorosirćetna kiselina; THF = tetrahidrofuran; TLC = hromatografija na tankom sloju; t = triplet; Xantphos = 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilksanten.
Izrada P1: 1,3-Dimetil-4-(pirolidin-2-il)-1H-pirazol (P1)
[0200]
1
Faza 1. Sinteza 4-jod-1,3-dimetil-1H-pirazola (C1).
[0201] Jod (66 g, 260 mmol) i vodonik peroksid (30% u vodi, 35.4 g, 312 mmol) se dodaju u rastvor 1,3-dimetil-1H-pirazola (50 g, 520 mmol) u vodi (500 mL) i reaktivna smeša se meša 20 sati na 20 °C. Nakon toga se doda zasićeni vodeni rastvor natrijum sulfita (100 mL) i dobijena suspenzija se ekstrahuje sa etil acetatom (2 x 300 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida (400 mL), suše preko natrijum sulfata, filtriraju i koncentruju pod vakuumom da se dobije produkt kao žuto ulje. Prinos: 100 g, 450 mmol, 87%.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.32 (s, 1H), 3.85 (s, 3H), 2.24 (s, 3H).
Faza 2. Sinteza terc-butil [4-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)-4-oksobutil]karbamata (C2).
[0202] Rastvor izopropilmagnezijum hlorida u tetrahidrofuranu (2 M, 29.7 mL, 59.4 mmol) se na 5 °C u kapima doda u rastvor C1 (12 g, 54.0 mmol) u tetrahidrofuranu (60 mL), takvom brzinom da se unutrašnja temperatura smeše održava ispod 10 °C. Reakcija se ostavi na 5 °C i alikvote se neutrališu u metanolu i analiziraju pomoću HPLC da se prati obim Grignardovog formiranja; kada se uoči potpuna konverzija (~5 do 10 minuta), se u kapima doda rastvor tercbutil 2-oksopirolidin-1-karboksilata (11.0 g, 59.4 mmol) u tetrahidrofuranu (60 mL), ponovo takvom brzinom da se unutrašnja temperatura smeše održava ispod 10 °C. Reakcija se prati pomoću HPLC i kada više nema dodatne konverzije (~1 sat), reakcija se neutrališe pažljivim dodavanjem vodenog rastvora sirćetne kiseline (10%, 60 mL) i etil acetata (100 mL).
Organski sloj se izdvoji i ispere sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida (2 x 100 mL), suši preko magnezijum sulfata, filtrira i koncentruje do mase od 35 g. Doda se heptan (40 mL), do ukupne zapremine od približno 80 mL a približno 20 mL rastvarača se ukloni zagrevanjem pod atmosferskim pritiskom. Smeša se polako ohladi na 20 °C i dobijena gusta smesa se ostavi da se meša u toku noći na 20 °C, nakon čega se filtrira. Filter pogača se ispere sa hladnim heptanom (0 °C, 30 mL) da se dobije produkt kao bela čvrsta supstanca. Prinos: 9.59 g, 34.1 mmol, 63%.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.79 (s, 1H), 4.72-4.58 (br s, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.24-3.14 (m, 2H), 2.74 (dd, J=7.3, 7.0 Hz, 2H), 2.48 (s, 3H), 1.95-1.83 (m, 2H), 1.42 (s, 9H).
Faza 3. Sinteza 4-(3,4-dihidro-2H-pirol-5-il)-1,3-dimetil-1H-pirazola (C3).
2
[0203] p-Toluensulfonska kiselina monohidratna (10.29 g, 54.1 mmol) se doda u rastvor C2 (10.0 g, 35.6 mmol) u tetrahidrofuranu (100 mL) i reaktivna smeša se meša 18 sati na 55 °C. Nakon toga se tretira sa vodenim rastvorom natrijum hidroksida (3 M, 100 mL) i razblaži sa dihlormetanom (50 mL). Vodeni sloj se ekstrahuje sa dihlormetanom (30 mL) i kombinovani organski slojevi se suše preko magnezijum sulfata, filtriraju i koncentruju pod vakuumom da se dobije produkt kao bezbojno ulje. Prinos: 5.80 g, 35.5 mmol, kvantitativan.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.58 (s, 1H), 3.99 (tt, J=7.3, 1.8 Hz, 2H), 3.85 (s, 3H), 2.83-2.75 (m, 2H), 2.49 (s, 3H), 2.00-1.90 (m, 2H).
Faza 4. Sinteza 1,3-dimetil-4-(pirolidin-2-il)-1H-pirazola (P1).
[0204] Rastvor C3 (5.80 g, 35.5 mmol) u metanolu (58 mL) se ohladi na 5 °C i tretira sa natrijum borhidridom (1.6 g, 42 mmol). Nakon toga se doda sirćetna kiselina (0.20 mL, 3.5 mmol) {Pažnja: egzotermna} i reaktivna smeša se meša 1.75 sati na 5 °C, kada se doda još natrijum borhidrida (0.40 g, 11 mmol). Nakon ukupno 3 sata vremena reakcije, doda se vodeni rastvor natrijum hidroksida (3 M, 50 mL), a nakon toga se doda dihlormetan (50 mL). Vodeni sloj se ekstrahuje sa dihlormetanom (25 mL) i kombinovani organski slojevi se suše preko magnezijum sulfata, filtriraju i koncentruju pod vakuumom da se dobije produkt kao bledo žuto ulje. Prinos: 5.45 g, 33.0 mmol, 93%.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.20 (s, 1H), 3.98 (dd, J=8.3, 7.0 Hz, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.14 (ddd, J=10.4, 7.9, 5.3 Hz, 1H), 2.94 (ddd, J=10.4, 8.4, 6.8 Hz, 1H), 2.25 (s, 3H), 2.17-2.07 (m, 1H), 1.93-1.8 (m, 2H, pretpostavljeno; delimično prekriveno vodenim pikom), 1.64-1.53 (m, 1H).
Izrada P2: 1,3-Dimetil-4-[(2S)-pirolidin-2-il]-1H-pirazol, hidrohloridna so (P2)
[0205]
Faza 1. Sinteza 4-(3,4-dihidro-2H-pirol-5-il)-1,3-dimetil-1H-pirazola, hidrohloridne soli (C4).
[0206] Izvode se tri identične reakcije. Rastvor vodonik hlorida u 1,4-dioksanu (4 M, 1.5 L, 6 mol) se u kapima na 0 °C doda u rastvor C2 (100 g, 0.355 mol) u dihlormetanu (500 mL). Reaktivna smeša se meša 6 sati na 25 °C, nakon čega se reaktivne smeše komobinuju i koncentruju pod vakuumom, da se dobije sirovi produkt (300 g). Ovaj materijal se direktno prenese u sledeću fazu.
Faza 2. Sinteza 1,3-dimetil-4-(pirolidin-2-il)-1H-pirazola (P1).
[0207] U rastvor C4 (iz prethodne faze; 300 g, ≤1.06 mol) u metanolu (3 L) se na 0 °C u toku 30 minuta dodaje natrijum borhidrid (299 g, 7.90 mol). Nakon 5 sati mešanja reaktivne smeše na 25 °C, smeša se neutrališe dodavanjem zasićenog vodenog rastvora amonijum hlorida (5 L). Dobijena smeša se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije sirovi produkt kao rastvor, koji se direktno koristi u narednoj fazi.
4
Faza 3. Sinteza terc-butil 2-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-karboksilata (C5).
[0208] U rastvor P1 (iz prethodne faze; ≤1.06 mol) u metanolu (1.5 L) se doda natrijum karbonat (349 g, 3.29 mol). Nakon toga se uvede di-terc-butil dikarbonat (476 g, 2.18 mol) i reaktivna smeša se meša 16 sati na 25 °C. Uklanjanjem rastvarača pod vakuumom se dobija žuto ulje, koje se prečisti hromatografijom na silika gelu (Eluent: 3:1 petrol etar / etil acetat) da se dobije produkt kao bela čvrsta supstanca. Iz<1>H NMR analize, pretpostavlja se da ovaj materijal egzistira kao smeša rotamera. Prinos: 125 g, 471 mmol, 44% kroz 3 faze. LCMS m/z 265.9 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.02 (s, 1H), 4.97-4.65 (br m, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.58-3.37 (br m, 2H), 2.23-2.07 (br m, 1H), 2.21 (s, 3H), 1.98-1.81 (m, 2H), 1.80-1.71 (m, 1H), [1.45 (br s) i 1.30 (br s), ukupno 9H].
Faza 4. Izdvajanje terc-butil (2R)-2-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-karboksilata (C6) i terc-butil (2S)-2-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-karboksilata (C7).
[0209] Razdvajanje C5 (130 g, 490 mmol) u njegove sastavne enantiomere se izvodi pomoću superkritične tečne hromatografije [kolona: Phenomenex Lux Cellulose-2, 5 µm; mobilna faza: 85:15 ugljen dioksid / (1:1 metanol / acetonitril)]. Prvi eluirani produkt, dobijen kao bela čvrsta supstanca koja ispoljava pozitivnu (+) rotaciju, je označen kao C6. Iz<1>H NMR analize, pretpostavlja se da ovaj materijal egzistira kao smeša rotamera. Prinos: 55.0 g, 207 mmol, 42%. LCMS m/z 266.5 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.02 (s, 1H), 4.96-4.64 (br m, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.58-3.37 (br m, 2H), 2.22 (s, 3H), 2.2-2.08 (br m, 1H), 1.97-1.81 (m, 2H), 1.80-1.71 (m, 1H), [1.45 (br s) i 1.30 (br s), ukupno 9H].
[0210] Drugi eluirani produkt, takođe dobijen kao bela čvrsta supstanca, ispoljava negativnu (- ) rotaciju i označen je kao C7. Iz<1>H NMR analize, pretpostavlja se da ovaj materijal egzistira kao smeša rotamera. Prinos: 57.8 g, 218 mmol, 44%. LCMS m/z 266.3 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.00 (s, 1H), 4.94-4.63 (br m, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.56-3.35 (br m, 2H), 2.19 (s, 3H), 2.18-2.06 (br m, 1H), 1.96-1.78 (m, 2H), 1.78-1.68 (m, 1H), [1.43 (br s) i 1.28 (br s), ukupno 9H].
[0211] Po analitičkoj HPLC (kolona: Phenomenex Lux Cellulose-2, 4.6 x 250 mm, 5 µm; mobilna faza A: ugljen dioksid; mobilna faza B: 1:1 metanol / acetonitril; gradijent: 5% B od 0 do 1.00 minut, 5% do 60% B za 8.00 minuta; brzina protoka: 3.0 mL/minut), C6 pokazuje vreme zadržavanja od 4.02 minuta. Koristeći isti sistem analize, C7 pokazuje vreme zadržavanja od 4.33 minuta. Navedena apsolutna konfiguracija za C6 i C7 je dodeljena na osnovu određivanja strukture X-zracima izvedenog na C6 (videti niže). Sporom kristalizacijom uzorka C6 iz heptana dobija se kristal korišćen za određivanje strukturno.
Određivanje strukture pojedinačnog kristala X-zracima za C6
Analiza pojedinačnog kristala X-zracima
[0212] Sakupljanje rezultata se izvodi na Bruker APEX difraktometru na sobnoj temperaturi. Sakupljene vrednosti se sastoje od omega i phi skeniranja.
[0213] Struktura je rešena direktnim postupcima koristeći SHELX softver paket u ortorombičnoj klasi prostorne grupe P212121. Struktura je nakon toga redefinisana metodom najmanjeg kvadrata pune matrice. Nađeni su svi atomi koji nisu vodonik i redefinisani koristeći parametre anizotropnog pomeranja.
[0214] Atomi vodonika su postavljeni u izračunate pozicije i bilo im je dozvoljeno da se postave na svoje noseće atome. Finalna redefinicija je uključila parametre izotropnog razmeštanja za sve atome vodonika.
[0215] Analize apsolutne strukture korišćenjem postupaka verovatnoće (Hooft 2008) su izvedene pomoću PLATON (Spek 2010). Rezultati su ukazali da je apsolutna struktura ispravno data. Postupkom je izračunato da je verovatnoća da je struktura korektno data 1.0000 i da je verovatnoća da struktura nije korektna je 0.000. Hooft parameter je zabeležen kao -0.11 sa esd od 0.10.
[0216] Finalni R-indeks je 3.7%. Finalna Fourier razlika je otkrila da nema nedostatka ili pogrešno postavljene gustine elektrona.
[0217] Relevantni kristal, sakupljeni rezultati i prečišćena informacija su sumirani u Tabeli 1. Atomske koordinate, dužina veza, uglovi veza i parametri pomeranja su navedeni u Tabelama 2-4.
Softver i reference
[0218] SHELXTL, Version 5.1, Bruker AXS, 1997.
[0219] PLATON, A. L. Spek, J. Appl. Cryst. 2003, 36, 7-13.
[0220] MERCURY, C. F. Macrae, P. R. Edington, P. McCabe, E. Pidcock, G. P. Shields, R.
Taylor, M. Towler i J. van de Streek, J. Appl. Cryst.2006, 39, 453-457.
[0221] OLEX2, O. V. Dolomanov, L. J. Bourhis, R. J. Gildea, J. A. K. Howard i H. Puschmann, J. Appl. Cryst.2009, 42, 339-341.
[0222] R. W. W. Hooft, L. H. Straver i A. L. Spek, J. Appl. Cryst.2008, 41, 96-103.
[0223] H. D. Flack, Acta Cryst.1983, A39, 867-881.
Tabela 1. Vrednosti kristala i prečišćena struktura za C6.
Empirijska formula C14H23N3O2
Težina formule 265.36
Temperatura 296(2) K
Talasna dužina 1.54178 Å
Sistem kristala Ortorombični
Prostorna grupa P212121
Dimenzije pojedinačne ćelija a = 5.7468(2) Å α = 90°
b = 13.2277(5) Å β = 90° c = 20.1470(8) Å γ = 90° Zapremina 1531.51(10) Å<3>
Z 4
Gustina (izračunata) 1.151 Mg/m<3>
Koeficijent apsorpcije 0.627 mm<-1>
F(000) 576
Veličina kristala 0.600 x 0.160 x 0.100 mm<3>
Teta opseg za prikupljanje podataka 3.998 do 70.206°
Opseg indeksa -6<=h<=6, -16<=k<=16, -24<=/<=24 Prikupljene refleksije 23490
Nezavisne refleksije 2911 [Rint= 0.0663]
Potpunost do teta = 67.679° 100.0%
Korekcija apsorpcije empirijska
Postupak prečišćavanja uključeni najmanji kvadrati pune matrice na F<2>Podaci / ograničenja / parametri 2911 / 0 / 178
Goodness-of-fit on F<2>1.028
Konačni R indeksi [l>2σ(l)] R1 = 0.0370, wR2 = 0.1011
R indeksi (sve vrednosti) R1 = 0.0391, wR2 = 0.1030
(nastavlja se)
Parametar apsolutne strukture 0.03(8) Koeficijent ekstinkcije 0.0092(13) Najveći pik i rupa difrakcije 0.162 i -0.115 e.Å<-3>
Tabela 3. Dužine [Å] i uglovi [°] veza za C6.
N(1)-C(1) 1.341(2)
N(1)-N(2) 1.353(2)
(nastavlja se)
N(1)-C(2) 1.450(3) N(2)-C(3) 1.330(3) N(3)-C(10) 1.346(2) N(3)-C(9) 1.461(3) N(3)-C(6) 1.472(2) O(1)-C(10) 1.207(2) O(2)-C(10) 1.355(2) O(2)-C(11) 1.467(2) C(1)-C(5) 1.368(3) C(1)-H(1) 0.9300 C(2)-H(2A) 0.9600 C(2)-H(2B) 0.9600 C(2)-H(2C) 0.9600 C(3)-C(5) 1.410(2) C(3)-C(4) 1.496(3) C(4)-H(4A) 0.9600 C(4)-H(4B) 0.9600 C(4)-H(4C) 0.9600 C(5)-C(6) 1.499(3) C(6)-C(7) 1.533(3) C(6)-H(6) 0.9800 C(7)-C(8) 1.513(4) C(7)-H(7A) 0.9700 C(7)-H(7B) 0.9700 C(8)-C(9) 1.525(3) C(8)-H(8A) 0.9700 C(8)-H(8B) 0.9700 C(9)-H(9A) 0.9700 C(9)-H(9B) 0.9700 C(11)-C(13) 1.499(4) C(11)-C(12) 1.504(3) C(11)-C(14) 1.521(3) (nastavlja se)
C(12)-H(12A) 0.9600 C(12)-H(12B) 0.9600 C(12)-H(12C) 0.9600 C(13)-H(13A) 0.9600 C(13)-H(13B) 0.9600 C(13)-H(<13>C) 0.9600 C(14)-H(14A) 0.9600 C(14)-H(14B) 0.9600 C(14)-H(14C) 0.9600 C(1)-N(1)-N(2) 112.04(16) C(1)-N(1)-C(2) 127.65(18) N(2)-N(1)-C(2) 120.31(18) C(3)-N(2)-N(1) 104.73(15) C(10)-N(3)-C(9) 125.32(16) C(10)-N(3)-C(6) 121.13(16) C(9)-N(3)-C(6) 112.77(15) C(10)-O(2)-C(11) 120.84(16) N(1)-C(1)-C(5) 107.57(16) N(1)-C(1)-H(1) 126.2 C(5)-C(1)-H(1) 126.2 N(1)-C(2)-H(2A) 109.5 N(1)-C(2)-H(2B) 109.5 H(2A)-C(2)-H(2B) 109.5 N(1)-C(2)-H(2C) 109.5 H(2A)-C(2)-H(2C) 109.5 H(2B)-C(2)-H(2C) 109.5 N(2)-C(3)-C(5) 111.31(18) N(2)-C(3)-C(4) 121.01(18) C(5)-C(3)-C(4) 127.7(2) C(3)-C(4)-H(4A) 109.5 C(3)-C(4)-H(4B) 109.5 H(4A)-C(4)-H(4B) 109.5 (nastavlja se)
C(3)-C(4)-H(4C) 109.5 H(4A)-C(4)-H(4C) 109.5 H(4B)-C(4)-H(4C) 109.5 C(1)-C(5)-C(3) 104.35(18) C(1)-C(5)-C(6) 128.59(16) C(3)-C(5)-C(6) 127.04(18) N(3)-C(6)-C(5) 112.28(15) N(3)-C(6)-C(7) 101.27(16) C(5)-C(6)-C(7) 113.00(17) N(3)-C(6)-H(6) 110.0 C(5)-C(6)-H(6) 110.0 C(7)-C(6)-H(6) 110.0 C(8)-C(7)-C(6) 103.33(18) C(8)-C(7)-H(7A) 111.1 C(6)-C(7)-H(7A) 111.1 C(8)-C(7)-H(7B) 111.1 C(6)-C(7)-H(7B) 111.1 H(7A)-C(7)-H(7B) 109.1 C(7)-C(8)-C(9) 103.7(2) C(7)-C(8)-H(8A) 111.0 C(9)-C(8)-H(8A) 111.0 C(7)-C(8)-H(8B) 111.0 C(9)-C(8)-H(8B) 111.0 H(8A)-C(8)-H(8B) 109.0 N(3)-C(9)-C(8) 103.34(17) N(3)-C(9)-H(9A) 111.1 C(8)-C(9)-H(9A) 111.1 N(3)-C(9)-H(9B) 111.1 C(8)-C(9)-H(9B) 111.1 H(9A)-C(9)-H(9B) 109.1 O(1)-C(10)-N(3) 124.52(17) O(1)-C(10)-O(2) 125.74(18)
1 (nastavlja se)
N(3)-C(10)-O(2) 109.74(16)
O(2)-C(11)-C(13) 110.06(18)
O(2)-C(11)-C(12) 111.8(2)
C(13)-C(11)-C(12) 111.8(3)
O(2)-C(11)-C(14) 101.85(19)
C(13)-C(11)-C(14) 110.6(2)
C(12)-C(11)-C(14) 110.3(2)
C(11)-C(12)-H(12A) 109.5
C(11)-C(12)-H(12B) 109.5
H(12A)-C(12)-H(12B) 109.5
C(11)-C(12)-H(12C) 109.5
H(12A)-C(12)-H(12C) 109.5
H(12B)-C(12)-H(12C) 109.5
C(11)-C(13)-H(13A) 109.5
C(11)-C(13)-H(13B) 109.5
H(13A)-C(13)-H(13B) 109.5
C(11)-C(13)-H(<13>C) 109.5
H(13A)-C(13)-H(<13>C) 109.5
H(13B)-C(13)-H(<13>C) 109.5
C(11)-C(14)-H(14A) 109.5
C(11)-C(14)-H(14B) 109.5
H(14A)-C(14)-H(14B) 109.5
C(11)-C(14)-H(14C) 109.5
H(14A)-C(14)-H(14C) 109.5
[0224] Transformacije simetrija korišćenih za generisanje ekvivalentnih atoma.
2
Faza 5. Sinteza 1,3-dimetil-4-[(2S)-pirolidin-2-il]-1H-pirazola, hidrohloridne soli (P2).
[0225] Rastvor C7 (1.80 g, 6.78 mmol) u dietil etru (25 mL) se tretira sa rastvorom vodonik hlorida u 1,4-dioksanu (4 M, 8.5 mL, 34 mmol). Nakon mešanja reaktivne smeše na sobnoj temperaturi u toku noći, smeša se koncentruje pod vakuumom, da se dobije produkt kao gusto ulje. Prinos: 1.10 g, 5.45 mmol, 80%. LCMS m/z 166.1 [M+H]<+>.<1>H NMR (500 MHz, CD3OD) [uzorak korišćen za NMR je dobijen deprotekcijom različitog lota C7, koristeći isti postupak] δ 8.07 (s, 1H), 4.66 (dd, J=9.4, 6.8 Hz, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.46-3.41 (m, 2H), 2.50-2.42 (m, 1H), 2.39 (s, 3H), 2.32-2.24 (m, 1H), 2.24-2.11 (m, 2H).
Izrada P3: 3-Metoksi-1-metil-4-(pirolidin-2-il)-1H-pirazol, hidrohloridna so (P3)
[0226]
Faza 1. Sinteza 1-metil-1,2-dihidro-3H-pirazol-3-ona (C8).
[0227] Rastvor metil 2-hlorprop-2-enoata (1.36 kg, 11.3 mol) u tetrahidrofuranu (10.9 L) se ohladi na 0 °C do 5 °C. U kapima se na 0 °C do 5 °C dodaje metilhidrazin (670 g, 14.5 mol); po završetku dodavanja, reaktivna smeša se zagreje na 15 °C do 25 °C i ostavi da se meša 10 sati, nakon čega se dodaje 20% vodeni rastvor natrijum karbonata sve dok pH ne dostigne 8 -9. Nakon uklanjanja tetrahidrofurana koncentrovanjem pod sniženim pritiskom, pH preostalog materijala se podesi na 9 - 10 dodavanjem 20% vodenog rastvora natrijum karbonata.
Dobijena smeša se ohladi na 0 °C do 5 °C i meša 1 - 2 sata pri čemu dolazi do kristalizacije. Sakupljanjem precipitata filtriranjem dobija se produkt kao čvrsta supstanca (910 g). Filtrat se ekstrahuje sa etil acetatom (3 x 2.5 zapremine) i kombinovani organski slojevi se koncentruju
4
pod vakuumom da se dobije dodatni produkt (60 g). Kombinovani prinos: 970 g, 9.89 mol, 88%.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.07 (s, 1H), 5.57 (s, 1H), 3.69 (s, 3H).
Faza 2. Sinteza 3-metoksi-1-metil-1H-pirazola (C9).
[0228] Natrijum terc-butoksid (940 g, 9.78 mol) se u porcijama dodaje u rastvor C8 (750 g, 7.64 mol) u tetrahidrofuranu (7.5 L) i dobijena suspenzija se zagreje na 45 °C do 55 °C. U kapima se u toku 60 minuta na 45 °C do 55 °C dodaje dimetil sulfat (1.14 Kg, 9.04 mol) i reaktivna smeša se meša 5 sati, nakon čega se ohladi na 10 °C do 20 °C i tretira u kapima sa vodom (3.75 L). Dobijena smeša se koncentruje da se ukloni tetrahidrofuran i nakon toga ekstrahuje sa etil acetatom (3 x 3.75 L). Kombinovani organski slojevi se isperu po redu sa vodom (2.25 L) i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida (2.25 L) i koncentruju da se dobije produkt kao braon ulje. Prinos: 530 g, 4.73 mol, 62%. LCMS m/z 113.2 [M+H]<+>.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.08 (d, J=2.2 Hz, 1H), 5.57 (d, J=2.3 Hz, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.69 (s, 3H).
Faza 3. Sinteza 4-jod-3-metoksi-1-metil-1H-pirazola (C10).
[0229] Jod (510 g, 2.01 mol) se u jednoj porciji na 20 °C do 25 °C doda u smešu C9 (450 g, 4.01 mol) u vodi (4.5 L) i reaktivna smeša se ostavi da se meša 30 minuta. Nakon toga se u reaktivnu smešu u kapima dodaje vodonik peroksid (84 g, 2.5 mol) u toku približno 1.5 sati, dovoljnom brzinom da se temperatura reakcije održi ispod 30 °C. Po završetku dodavanja, mešanje se nastavi 4 sata, nakon čega se reaktivna smeša tretira sa vodenim rastvorom natrijum sulfita (10%, 900 mL). Dobijena smeša se ekstrahuje sa terc-butil metil etrom (2 x 4.5 L) i kombinovani organski slojevi se koncentruju pod sniženim pritiskom na 30 °C do 35 °C, do zapremine od približno 900 mL. Polako se dodaje heptan (2.25 L) i smeša se ohladi na 10 °C do 15 °C i meša 3 sata. Čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem da se dobije produkt kao bledožuta čvrsta supstanca. Prinos: 706 g, 2.97 mol, 74%. LCMS m/z 239.0 [M+H]<+>.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.16 (s, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.74 (s, 3H).
Faza 4. Sinteza terc-butil [4-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)-4-oksobutil]karbamata (C11).
[0230] Rastvor C10 (300 g, 1.26 mol) u tetrahidrofuranu (1.8 L) se pet puta degasira i prečisti sa azotom. Nakon hlađenja rastvora na -30 °C do -40 °C, u kapima se u toku 1 sat dodaje rastvor izopropilmagnezijum hlorida u tetrahidrofuranu (2 M, 830 mL, 1.66 mol), nakon čega se mešanje nastavi 40 minuta na -30 °C do -40 °C. Nakon toga se u kapima u toku 1 sat dodaje rastvor terc-butil 2-oksopirolidin-1-karboksilata (260 g, 1.40 mol) u tetrahidrofuranu (600 mL), takvom brzinom da se temperatura reakcije održi ispod -30 °C. Reaktivna smeša se održava 40 minuta na -30 °C do -40 °C, nakon čega se tretira sa vodenim rastvorom limunske kiseline (10%, 1.5 L) i ekstrahuje sa etil acetatom (2.4 L). Organski sloj se ispere sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida (232.4 L) i koncentruju do zapremine od 600 do 900 mL. U toku 30 minuta se dodaje heptan (1.5 L) i dobijena smeša se ohladi na 10 °C do 20 °C u toku 30 minuta i nakon toga meša 5 sati. Čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem i ispere sa hladnim heptanom (600 mL) da se dobije produkt kao bela čvrsta supstanca. Prinos: 320 g, 1.08 mol, 86%. LCMS m/z 298.2 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.69 (s, 1H), 4.81-4.67 (br s, 1H), 3.97 (s, 3H), 3.74 (s, 3H), 3.21-3.11 (m, 2H), 2.76 (t, J=7.0 Hz, 2H), 1.88-1.78 (m, 2H), 1.42 (s, 9H).
Faza 5. Sinteza 4-(3,4-dihidro-2H-pirol-5-il)-3-metoksi-1-metil-1H-pirazola, so trifluorosirćetne kiseline (C12).
[0231] Rastvor C11 (550 g, 1.85 mol) u dihlormetanu (3.3 L) se zagreje na 35 °C do 39 °C. U kapima se dodaje trifluorosirćetna kiselina (1.05 kg, 9.21 mol) i mešanje nastavi 16 sati na 35 °C do 39 °C, nakon čega se reaktivna smeša koncentruje do finalne zapremine od približno 1 L. Doda se metanol (1.65 L) i dobijena smeša koncentruje da se dobije produkt kao ulje, koje se generalno direktno koristi u sledećoj fazi, bez dodatnog prečišćavanja. LCMS m/z 180.1 [M+H]<+>.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.43 (br s, 1H), 4.06-3.99 (m, 2H), 4.02 (s, 3H), 3.84 (s, 3H), 3.32 (dd, J=8.2, 7.9 Hz, 2H), 2.35-2.26 (m, 2H).
Faza 6. Sinteza 3-metoksi-1-metil-4-(pirolidin-2-il)-1H-pirazola (C13).
[0232] Rastvor C12 (280 g, 1.56 mol) u metanolu (2.24 L) se ohladi na 0 °C do 5 °C i u porcijama se dodaje natrijum borhidrid (50 g, 1.3 mol), dovoljnom brzinom da se temperatura reakcije održi ispod 5 °C. Nakon 2 sata mešanja reaktivne smeše na 0 °C do 5 °C, smeša se tretira sa vodenim rastvorom natrijum hidroksida (3 M, približno 1.6 L) sve dok pH ne dostigne 10 do 11. Dobijena smeša se koncentruje do zapremine od približno 2.5 L, razblaži sa vodom (1.4 L) i ekstrahuje sa dihlormetanom (3 x 1.68 L). Kombinovani organski slojevi se koncentruju da se dobije produkt. Prinos: 243 g, 1.34 mol, 86%. LCMS m/z 182.1 [M+H]<+>.
<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.03 (s, 1H), 3.93-3.86 (m, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.66 (s, 3H), 3.07 (ddd, J=10.3, 8.0, 5.2 Hz, 1H), 2.90-2.82 (m, 1H), 2.08 (br s, 1H), 2.05-1.96 (m, 1H), 1.88-1.71 (m, 2H), 1.69-1.59 (m, 1H).
Faza 7. Sinteza 3-metoksi-1-metil-4-(pirolidin-2-il)-1H-pirazola, hidrohloridne soli (P3).
[0233] Rastvor vodonik hlorida u 1,4-dioksanu (13% težinski; 260 g, 0.93 mol) se u kapima dodaje u rastvor C13 (170 g, 0.938 mol) u 1,4-dioksanu (1.7 L) i održava na 25 °C do 30 °C. Reaktivna smeša se meša 3 sata na 25 °C do 30 °C, nakon čega se polako ohladi na 15 °C do 20 °C i meša dodatna 3 sata. Akumulirana čvrsta supstanca se izdvoji filtriranjem i ispere sa 1,4-dioksanom (340 mL), da se dobije produkt kao bela čvrsta supstanca. Prinos: 150 g, 0.689 mol, 73%.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 9.73-9.58 (br s, 1H), 8.78-8.64 (br s, 1H), 7.73 (s, 1H), 4.40-4.30 (m, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.68 (s, 3H), 3.22-3.13 (m, 2H), 2.25-2.16 (m, 1H), 2.09-1.86 (m, 3H).
Izrada P4: 3-Metoksi-1-metil-4-(pirolidin-2-il)-1H-pirazol (pojedinačni enantiomer, iz rezolucije dibenzoil-L-vinske kiseline) (P4)
[0234]
(poj
iz rezouc e enzo - - r z rezo uc e enzo -L-vinske kiseline) vinske kiseline)
P4 C15
Faza 1. Sinteza 4-(1-benzilpirolidin-2-il)-3-metoksi-1-metil-1H-pirazola (C14).
[0235] Benzaldehid (6.39 mL, 62.9 mmol) se doda u rastvor C13 (9.5 g, 52 mmol) u dihlormetanu (200 mL). Uvede se natrijum triacetoksiborhidrid (98%, 11.3 g, 52.3 mmol) i reaktivna smeša se meša 1 sat na sobnoj temperaturi, nakon čega se smeša podeli između 1 M vodenog rastvora natrijum hidroksida i dihlormetana. Nakon što se organski sloj osuši preko natrijum sulfata, filtrira i koncentruje pod vakuumom, ostatak se prečisti koristeći hromatografiju na silika gelu (gradijent: 0% do 10% metanol u dihlormetanu) da se dobije produkt kao ulje. Prinos: 13.0 g, 47.9 mmol, 92%. LCMS m/z 272.2 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.30-7.26 (m, 4H, pretpostavljeno; delimično pokriven pikom rastvarača), 7.25-7.19 (m, 1H), 7.17 (s, 1H), 3.95 (d, J=13 Hz, 1H, pretpostavljeno; delimično pokriven pikom na 3.93 ppm), 3.93 (s, 3H), 3.73 (s, 3H), 3.32 (dd, J=8.0, 7.6 Hz, 1H), 3.10 (d, J=13.1 Hz, 1H), 3.03-2.97 (m, 1H), 2.18-2.07 (m, 2H), 1.90-1.68 (m, 3H).
Faza 2. Rezolucija C14 da se dobije 4-(1-benzilpirolidin-2-il)-3-metoksi-1-metil-1H-pirazol (pojedinačni enantiomer, iz rezolucije dibenzoil-L-vinske kiseline) (C15).
[0236] (2R,3R)-2,3-Bis(benzoiloksi)butandioinska kiselina (dibenzoil-L-vinska kiselina; 15.6 g, 43.5 mmol) se rastvori u etanolu (125 mL). Doda se rastvor C14 (11.8 g, 43.5 mmol) u etanolu (25 mL) i dobijena smeša se meša u toku noći na sobnoj temperaturi. Precipitat se izdvoji filtriranjem i ispere sa etanolom; dobijena čvrsta supstanca (13.7 g) rekristališe iz etanola (425 mL). Mali uzorak rekristalisanog materijala se podeli između 1 M vodenog rastvora natrijum hidroksida i dietil etra. Organski sloj iz ovog uzorka se koncentruje do ulja, za koje je analizom enantiomernog viška pokazano da se sastoji od pojedinačnog enantiomera. Rasuti materijal se dakle podeli između vodenog rastvora natrijum hidroksida (1 M, 100 mL) i dietil etra. Organski sloj se ispere sa vodenim rastvorom natrijum hidroksida (1 M, 2 x 100 mL), suši preko magnezijum sulfata, filtrira i koncentruje pod vakuumom da se dobije produkt kao ulje. Prinos: 6.0 g, 22 mmol, 51%. LCMS m/z 272.2 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.30-7.26 (m, 4H, pretpostavljeno; delimično pokriven pikom rastvarača), 7.25-7.19 (m, 1H), 7.17 (s, 1H), 3.95 (d, J=13 Hz, 1H, pretpostavljeno; delimično pokriven pikom na 3.93 ppm), 3.93 (s, 3H), 3.73 (s, 3H), 3.32 (dd, J=8.0, 7.6 Hz, 1H), 3.09 (d, J=13.1 Hz, 1H), 3.03-2.97 (m, 1H), 2.18-2.07 (m, 2H), 1.90-1.68 (m, 3H).
Faza 3. Sinteza 3-metoksi-1-metil-4-(pirolidin-2-il)-1H-pirazola (pojedinačni enantiomer, iz rezolucije dibenzoil-L-vinske kiseline) (P4).
[0237] Paladijum na ugljeniku (3.11 g) se doda u rastvor C15 (6.0 g, 22 mmol) u metanolu (100 mL). Uvede se amonijum format (7.11 g, 113 mmol) i reaktivna smeša se meša 1 sat na sobnoj temperaturi. Smeša se nakon toga razblaži sa etil acetatom, tretira sa diatomejskom zemljom, filtrira i koncentruje pod vakuumom do 1/3 potrebne zapremine. Filtriranjem i koncentrovanjem filtrata pod sniženim pritiskom se dobije produkt kao gusto ulje. Prinos: 4.0 g, 22 mmol, kvantitativan. LCMS m/z 182.1 [M+H]<+>.
Izrada P5: Benzil (2S)-2-(5-metil-1,2,4-tiadiazol-3-il)pirolidin-1-karboksilat (P5)
[0238]
Faza 1. Sinteza benzil (2S)-2-karbamimidoilpirolidin-1-karboksilata, hidrohloridne soli (C16).
[0239] Ovaj eksperiment se izvodi u 2 identične serije. Natrijum hidrid (60% u mineralnom ulju; 782 mg, 19.6 mmol) se doda u metanol (75 mL) da se izradi rastvor natrijum metoksida. Ovaj rastvor se doda u rastvor benzil (2S)-2-cijanopirolidin-1-karboksilata (9.0 g, 39 mmol) u metanolu (75 mL) i reaktivna smeša se meša 16 sati na 40 °C. U reaktivnu smešu se doda amonijum hlorid (4.18 g, 78.1 mmol) u jednoj porciji na 40 °C i mešanje se nastavi na ovoj temperaturi još 24 sata. U ovom trenutku, dve reaktivne serije se komobinuju i koncentruju pod vakuumom. Ostatak se izmeša sa dihlormetanom (500 mL) i filtrira; filtrat se koncentruje pod vakuumom da se dobije produkt kao žuta guma. Iz<1>H NMR analize, ovaj materijal može da egzistira kao smeša rotamera. Prinos: 17.0 g, 59.9 mmol, 77%.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.45-7.25 (m, 5H), 5.25-5.04 (m, 2H), 4.84-4.53 (m, 1H), 3.80-3.36 (m, 2H), 2.55-1.84 (m, 5H).
Faza 2. Sinteza benzil (2S)-2-(5-hlor-1,2,4-tiadiazol-3-il)pirolidin-1-karboksilata (C17).
[0240] Ova reakcija se izvodi u dve identične serije. Trihlor(hlorsulfanil)metan (6.12 g, 32.9 mmol) se na 0 °C doda u rastvor C16 (8.5 g, 30 mmol) i N,N-diizopropiletilamina (19.4 g, 150 mmol) u dihlormetanu (200 mL). Reaktivna smeša se meša 1 sat na 0 °C, nakon čega se dve serije komobinuju i koncentruju pod vakuumom. Hromatografijom na silika gelu (gradijent: 0% do 25% etil acetat u petrol etru) se dobija produkt kao žuto ulje. Iz<1>H NMR analize, pretpostavlja se da ovaj materijal egzistira kao smeša rotamera. Prinos: 8.0 g, 25 mmol, 42%. LCMS m/z 323.9 (uočen je model izotopa hlora) [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.41-7.23 (m, 4H, pretpostavljeno; delimično pokriven pikom rastvarača), 7.14-7.07 (m, 1H), 5.24-5.12 (m, 2H), [5.09 (d, polovina od AB kvarteta, J=12.6 Hz) i 4.92 (d, polovina od AB kvarteta, J=12.6 Hz), ukupno 1H], 3.82-3.72 (m, 1H), 3.68-3.54 (m, 1H), 2.42-2.26 (m, 1H), 2.14-2.02 (m, 2H), 2.02-1.90 (m, 1H).
Faza 3. Sinteza benzil (2S)-2-(5-metil-1,2,4-tiadiazol-3-il)pirolidin-1-karboksilata (P5).
[0241] Ova reakcija se izvodi u dve identične serije. Smeša C17 (1.70 g, 5.25 mmol), metilborne kiseline (943 mg, 15.8 mmol), trimetilboroksina (1.98 g, 15.8 mmol), paladijum(ll) acetata (118 mg, 0.526 mmol), 2-dicikloheksilfosfino-2’,4’,6’-triizopropilbifenila (501 mg, 1.05 mmol) i kalijum karbonata (2.18 g, 15.8 mmol) u tetrahidrofuranu (20 mL) i vodi (2 mL) se meša 20 sati na 67 °C. Glavni pik pri LCMS reaktivne smeše je odgovarajući za produkt (LCMS m/z 303.9 [M+H]<+>). Dve reakcije se komobinuju i koncentruju pod vakuumom, uz dva prečišćavanja koristeći hromatografiju na silika gelu (gradijent: 0% do 30% etil acetat u petrol etru) da se dobije produkt kao narandžasta guma. Iz<1>H NMR analize, pretpostavlja se da ovaj materijal egzistira kao smeša rotamera. Prinos: 1.71 g, 5.64 mmol, 54%.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.41-7.20 (m, 4H), 7.11-7.03 (m, 1H), [5.30-5.04 (m) i 4.92 (d, polovina od AB kvarteta, J=12.6 Hz), ukupno 3H], 3.84-3.73 (m, 1H), 3.69-3.54 (m, 1H), [2.78 (s) i 2.70 (s), ukupno 3H], 2.42-2.25 (m, 1H), 2.14-2.01 (m, 2H), 2.01-1.88 (m, 1H).
Izrada P6: 3-Metoksi-4-(pirolidin-2-il)-1H-pirazol (P6)
[0242]
1
Faza 1. Sinteza etil 1-benzil-3-okso-2,3-dihidro-1H-pirazol-4-karboksilata (C18).
[0243] Rastvor natrijum etoksida u etanolu (2.6 M, 44 mL, 114 mmol) se razblaži sa 100 mL etanola (100 mL) i ohladi u ledenom kupatilu. Doda se dietil (etoksimetiliden)propandioat (4.99 g, 23.1 mmol), a nakon toga se u porcijama dodaje benzilhidrazin dihidrohlorid (4.50 g, 23.1 mmol); u toku ovog dodavanja, unutrašnja temperatura se održava ispod 10 °C. Po završenom dodavanju, reaktivna smeša se zagreje na sobnoj temperaturi i meša 2 sata, nakon čega se sipa u hladnu hlorovodoničnu kiselinu (1 M, 250 mL). Dobijena smeša se nakon toga meša u toku noći, a čvrsta susptanca sakupi filtriranjem da se dobije produkt kao čvrsta supstanca. Prinos: 3.6 g, 14.6 mmol, 63%. LCMS m/z 247.4 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.06 (br s, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.41-7.33 (m, 3H), 7.31-7.27 (m, 2H), 5.13 (s, 2H), 4.31 (q, J=7.2 Hz, 2H), 1.34 (t, J=7.1 Hz, 3H).
Faza 2. Sinteza etil 1-benzil-3-metoksi-1H-pirazol-4-karboksilata (C19).
[0244] Rastvor C18 (3.60 g, 14.6 mmol) u N,N-dimetilformamidu (40 mL) se tretira sa kalijum karbonatom (4.04 g, 29.2 mmol), a nakon toga sa jodmetanom (1.09 mL, 17.5 mmol). Reaktivna smeša, koja pokazuje glavni pik u LCMS konzistentnim sa produktom (LCMS m/z 261.4 [M+H]<+>), se meša 3 sata na sobnoj temperaturi, nakon čega se smeša podeli između vode i dietil etra. Vodeni sloj se ekstrahuje sa dietil etrom a kombinovani organski slojevi se suše preko natrijum sulfata, filtriraju i koncentruju pod vakuumom. Produkt se dobija kao
2
čvrsta supstanca, koja se koristi bez dodatnog prečišćavanja. Prinos: 3.8 g, 14.6 mmol, 100%.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.63 (s, 1H), 7.41-7.32 (m, 3H), 7.27-7.22 (m, 2H), 5.13 (s, 2H), 4.26 (q, J=7.1 Hz, 2H), 4.00 (s, 3H), 1.31 (t, J=7.1 Hz, 3H).
Faza 3. Sinteza (1-benzil-3-metoksi-1H-pirazol-4-il)metanola (C20).
[0245] Rastvor C19 (5.40 g, 20.7 mmol) u tetrahidrofuranu (100 mL) se ohladi u ledenom kupatilu i u kapima tretira sa rastvorom litijum aluminijum hidrida u tetrahidrofuranu (1 M, 41 mL, 41 mmol). Nakon 30 minuta mešanja reaktivne smeše na 0 °C, smeša se zagreje na sobnoj temperaturi i ostavi da se meša dodatnih 30 minuta a zatim hladi u ledenom kupatilu. Reakcija se neutrališe po redu dodavanjem vode (1.5 mL), vodenog rastvora natrijum hidroksida (15%, 1.5 mL) i vode (4.5 mL), nakon čega se zagreje na sobnu temperaturu i meša u toku noći. Dobijena smeša se filtrira i sakupljene čvrste supstance se isperu sa tetrahidrofuranom. Kombinovani filtrati se koncentruju pod sniženim pritiskom da se dobije produkt kao gusto ulje. Prinos: 3.60 g, 16.5 mmol, 80%.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.38-7.28 (m, 3H), 7.25-7.20 (m, 2H), 7.14 (s, 1H), 5.11 (s, 2H), 4.47 (d, J=5.5 Hz, 2H), 3.95 (s, 3H), 1.56 (t, J=5.7 Hz, 1H, pretpostavljeno, delimično prekriveno vodenim pikom).
Faza 4. Sinteza 1-benzil-3-metoksi-1H-pirazol-4-karbaldehida (C21).
[0246] Mangan(IV) oksid (99%, 7.24 g, 82.4 mmol) se doda u rastvor C20 (3.60 g, 16.5 mmol) u tetrahidrofuranu (50 mL). Reaktivna smeša se zagreva 2 sata pod refluksom, nakon čega se ohladi na sobnu temperaturu, tretira sa diatomejskom zemljom i koncentruje pod vakuumom. Prečišćavanjem hromatografijom na silika gelu (gradijent: 5% do 30% etil acetat u heptanu) dobija se produkt kao bela čvrsta supstanca. Prinos: 3.0 g, 14 mmol, 85%.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.73 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.43-7.35 (m, 3H), 7.30-7.25 (m, 2H, pretpostavljeno; delimično pokriven pikom rastvarača), 5.14 (s, 2H), 4.01 (s, 3H).
Faza 5. Sinteza (E)-1-(1-benzil-3-metoksi-1H-pirazol-4-il)-N-(prop-2-en-1-il)metanimina (C22).
[0247] Rastvor C21 (3.0 g, 14 mmol) u dihlormetanu (100 mL) se tretira sa magnezijum sulfatom (16.9 g, 140 mmol), a nakon toga prop-2-en-1-aminom (3.12 mL, 41.6 mmol) i reaktivna smeša se meša na sobnoj temperaturi u toku noći. Smeša se nakon toga filtrira i filtrat se koncentruje pod vakuumom, da se dobije produkt kao ulje. Prinos: 3.60 g, 14 mmol, kvantitativan.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.11 (br s, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.39-7.30 (m, 3H), 7.27-7.23 (m, 2H), 6.05-5.94 (m, 1H), 5.21-5.14 (m, 1H), 5.14-5.08 (m, 1H), 5.12 (s, 2H), 4.13-4.09 (m, 2H), 3.98 (s, 3H).
Faza 6. Sinteza benzil [1-(1-benzil-3-metoksi-1H-pirazol-4-il)prop-2-en-1-il]prop-2-en-1-ilkarbamata (C23).
[0248] Benzil hloroformat (1.99 mL, 13.9 mmol) se doda u rastvor C22 (3.56 g, 13.9 mmol) u tetrahidrofuranu (50 mL). Reaktivna smeša se zagreva 1 sat na 60 °C, nakon čega se ohladi na sobnu temperaturu i nakon toga ostavi u kupatilo suvi led/aceton. Rastvor vinilmagnezijum bromida u tetrahidrofuranu (0.7 M, 21.9 mL, 15.3 mmol) se u kapima dodaje u toku približno 15 minuta; po završenom dodavanju, reaktivna smeša se ostavi 1 sat da se zagreje na sobnu temperaturu. Doda se zasićeni vodeni rastvor amonijum hlorida i dobijena smeša se ekstrahuje sa etil acetatom. Kombinovani organski slojevi se suše preko natrijum sulfata, filtriraju, koncentruju pod vakuumom i prečiste hromatografijom na silika gelu (gradijent: 5% do 30% etil acetat u heptanu). Produkt se dobija kao ulje. Prinos: 3.29 g, 7.88 mmol, 57%. LCMS m/z 418.5 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.39-7.28 (m, 8H), 7.20-7.14 (m, 2H), 7.2-6.9 (v br s, 1H), 6.11-5.97 (m, 1H), 5.74-5.58 (m, 2H), 5.22-5.10 (m, 4H), 5.08 (s, 2H), 5.00-4.88 (m, 2H), 3.96-3.86 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.76-3.68 (m, 1H).
Faza 7. Sinteza benzil 2-(1-benzil-3-metoksi-1H-pirazol-4-il)-2,5-dihidro-1H-pirol-1-karboksilata (C24).
[0249] Rastvor C23 (3.20 g, 7.66 mmol) u dihlormetanu (100 mL) se tretira sa benziliden[1,3-bis(2,4,6-trimetilfenil)imidazolidin-2-iliden]dihlor (tricikloheksilfosfin)rutenijumom (druga generacija Grubb-ovog katalizatora; 350 mg, 0.412 mmol). Reaktivna boca se zaštiti od svetlosti i reaktivna smeša se meša 1.5 sat na sobnoj temperaturi, nakon čega se doda diatomejska zemlja i smeša se koncentruje pod vakuumom. Prečišćavanjem hromatografijom na silika gelu (gradijent: 10% do 50% etil acetat u heptanu) se dobija produkt kao ulje. Iz<1>H NMR analize, pretpostavlja se da ovaj materijal egzistira kao smeša rotamera. Prinos: 2.60 g, 6.68 mmol, 87%. LCMS m/z 390.4 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ [7.39-7.24 (m),
4
7.23-7.09 (m) i 6.90 (s), ukupno 11H, pretpostavljeno; delimično pokriven pikom rastvarača], 5.85-5.70 (m, 2H), 5.55-5.44 (m, 1H), [5.19 (d, polovina od AB kvarteta, J=12.5 Hz) i 5.13-5.00 (m), ukupno 4H], 4.36-4.19 (m, 2H), [3.89 (s) i 3.79 (s), ukupno 3H].
Faza 8. Sinteza 1-benzil-3-metoksi-4-(pirolidin-2-il)-1H-pirazola (C25).
[0250] Rastvor C24 (2.00 g, 5.14 mmol) u etanolu (25 mL) se tretira sa paladijumom na ugljeniku (1.00 g), a nakon toga sa mravljom kiselinom (10 mL). Nakon 4 sata, reaktivna smeša se filtrira i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Ostatak se podeli između 1 M vodenog rastvora natrijum hidroksida i dihlormetana. Organski sloj se suši preko natrijum sulfata, filtrira i koncentruje pod vakuumom da se dobije produkt kao gusto ulje. Prinos: 1.27 g, 4.94 mmol, 96%. LCMS m/z 258.5 [M+H]<+>.
Faza 9. Sinteza 1-[2-(1-benzil-3-metoksi-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]-2,2,2-trifluoroetanona (C26).
[0251] Etil trifluoroacetat (1.76 mL, 14.8 mmol), C25 (1.27 g, 4.94 mmol) i 1,3,4,6,7,8-heksahidro-2H-piramido[1,2-a]pirimidin (97%, 708 mg, 4.93 mmol) se komobinuju u acetonitrilu (25 mL). Reaktivna smeša se meša u toku noći na sobnoj temperaturi, nakon čega se smeša podeli između 1 M rastvora hlorovodonične kiseline i etil acetata. Organski sloj se suši preko natrijum sulfata, filtrira, koncentruje pod vakuumom i podvrgne hromatografiji na silika gelu (gradijent: 10% do 50% etil acetat u heptanu), da se dobije produkt kao ulje. Iz<1>H NMR analize, pretpostavlja se da ovaj materijal egzistira kao smeša rotamera. Prinos: 872 mg, 2.47 mmol, 50%. LCMS m/z 354.4 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.38-7.28 (m, 3H), 7.22-7.12 (m, 2H), [7.08 (s) i 6.90 (s), ukupno 1H], [5.20-5.16 (m) i 5.12-5.03 (m), ukupno 3H], [3.91 (s) i 3.90 (s), ukupno 3H], 3.82-3.61 (m, 2H), 2.22-2.06 (m, 3H), 2.01-1.88 (m, 1H).
Faza 10. Sinteza 2,2,2-trifluoro-1-[2-(3-metoksi-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]etanona (C27).
[0252] Rastvor C26 (1.0 g, 2.8 mmol) u etanolu (25 mL) se tretira sa paladijumom na ugljeniku (1.0 g), a nakon toga sa mravljom kiselinom (5 mL) i reaktivna smeša se zagreva 3 sata pod refluksom. Smeša se nakon toga ohladi na sobnu temperaturu i filtrira. Filtrat se koncentruje pod vakuumom da se dobije produkt kao gusto ulje, koje se prenese direktno u sledeću fazu. LCMS m/z 264.3 [M+H]<+>.
Faza 11. Sinteza 3-metoksi-4-(pirolidin-2-il)-1H-pirazola (P6).
[0253] Kalijum karbonat (3.0 g, 22 mmol) se doda u rastvor C27 (iz prethodne faze, ≤2.8 mmol) u metanolu (10 mL). Reaktivna smeša se meša na sobnoj temperaturi u toku noći i nakon toga filtrira; filtrat se podeli između vode i dihlormetana. Vodeni sloj se ekstrahuje sa dihlormetanom i kombinovani organski slojevi se koncentruju pod vakuumom da se dobije produkt kao ulje. Prinos: 228 mg, 1.36 mmol, 49% preko 2 faze.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.21 (s, 1H), 3.99 (dd, J=8, 7 Hz, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.14 (ddd, J=10.6, 7.9, 5.2 Hz, 1H), 2.93 (ddd, J=10.5, 8.3, 6.7 Hz, 1H), 2.12-2.02 (m, 1H), 1.95-1.66 (m, 3H).
Izrada P7: 1-Metil-3-[(2S)-pirolidin-2-il]-1H-pirazol (P7)
[0254]
Faza 1. Sinteza terc-butil (2S)-2-[3-(trimetilsilil)prop-2-inoil]pirolidin-1-karboksilata (C28).
[0255] Rastvor n-butillitijuma u heksanima (2.5 M, 16.7 mL, 41.8 mmol) se u kapima na -70 °C dodaje u rastvor etinil(trimetil)silana (4.11 g, 41.8 mmol) u tetrahidrofuranu (150 mL). Nakon 1 sat mešanja reaktivne smeše na -70 °C, doda se rastvor terc-butil (2S)-2[metoksi(metil)karbamoil]pirolidin-1-karboksilata (6.0 g, 23 mmol) u tetrahidrofuranu (20 mL). Mešanje se nastavi 1 sat na -70 °C, nakon čega se reaktivna smeša zagreje na 0 °C i ostavi da se meša 2 sata. Doda se zasićeni vodeni rastvor amonijum hlorida (200 mL) i dobijena smeša se ekstrahuje sa etil acetatom (2 x 300 mL). Kombinovani organski slojevi se suše preko natrijum sulfata, filtriraju, koncentruju pod vakuumom i prečiste hromatografijom na silika gelu (gradijent: 9% do 20% etil acetat u petrol etru), da se dobije produkt kao bledo žuto ulje. Iz<1>H NMR analize, pretpostavlja se da ovaj materijal egzistira kao smeša rotamera. Prinos: 3.80 g, 12.9 mmol, 56%.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ [4.41 (dd, J=8.8, 4.3 Hz) i 4.23 (dd, J=8.5, 5.0 Hz), ukupno 1H], 3.58-3.40 (m, 2H), 2.30-2.14 (m, 1H),
2.08-1.81 (m, 3H), [1.48 (s) i 1.43 (s), ukupno 9H], [0.24 (s) i 0.24 (s), ukupno 9H].
Faza 2. Sinteza terc-butil (2S)-2-(1-metil-1H-pirazol-3-il)pirolidin-1-karboksilata (C29) i terc-butil (2S)-2-(1- metil-1H-pirazol-5-il)pirolidin-1-karboksilata (C30).
[0256] Natrijum karbonat (10.9 g, 103 mmol) i metilhidrazin hidrohlorid (6.37 g, 77.2 mmol) se dodaju u rastvor C28 (3.80 g, 12.9 mmol) u etanolu (100 mL) i reaktivna smeša se zagreva 2 sata pod refluksom. Smeša se nakon toga ohladi na 28 °C i koncentruje pod sniženim pritiskom da se ukloni etanol; ostatak se podeli između vode (50 mL) i etil acetata (100 mL). Organski sloj se suši preko natrijum sulfata, filtrira, koncentruje pod vakuumom i prečisti hromatografijom na silika gelu (gradijent: 17% do 25% etil acetat u petrol etru) da se dobije smeša produkata kao žuto ulje. Prinos: 2.20 g, 8.75 mmol, 68%. LCMS m/z 252.1 [M+H]<+>.
Faza 3. Sinteza 1-metil-3-[(2S)-pirolidin-2-il]-1H-pirazola (P7) i 1-metil-5-[(2S)-pirolidin-2-il]-1H-pirazola (C31).
[0257] U smešu C29 i C30 (2.20 g, 8.75 mmol) se na 28 °C doda rastvor vodonik hlorida u etil acetatu (4.0 M, 50 mL). Reaktivna smeša se meša 16 sati na 28 °C, nakon čega se koncentruje pod vakuumom. Ostatak se razdvoji na svoje regioizomerne komponente koristeći superkritičnu tečnu hromatografiju (kolona: Chiral Technologies Chiralpak IC-3, 3 µm; mobilna faza A: ugljen dioksid; mobilna faza B: etanol koji sadrži 0.05% dietilamina; gradijent: 5% do 40% B). Regiohemija proizvoda je dodeljena na osnovu nuklearnih Overhauser efekata (NOE) u NMR studijama. Jedinjenje P7 se izdvoji kao braon ulje. Prinos: 650 mg, 4.30 mmol, 49%.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.55 (d, J=2.5 Hz, 1H), 6.29 (d, J=2.5 Hz, 1H), 4.41-4.35 (m, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.3-3.21 (m, 1H), 3.17-3.08 (m, 1H), 2.35-2.23 (m, 1H), 2.11-1.94 (m, 3H).
[0258] Jedinjenje C31 se dobija kao žuta čvrsta supstanca. Prinos: 610 mg, 4.03 mmol, 46%.
<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.51 (d, J=2.0 Hz, 1H), 6.55 (d, J=2.0 Hz, 1H), 4.95-4.9 (m, 1H, pretpostavljeno; u velikoj meri zaklonjeno vodenim pikom), 3.95 (s, 3H), 3.49-3.42 (m, 2H), 2.58-2.48 (m, 1H), 2.33-2.13 (m, 3H).
Izrada P8:4-(4-Fluoropirolidin-2-il)-1,3-dimetil-1H-pirazol (P8)
[0259]
Faza 1. Sinteza terc-butil 4-fluor-2-oksopirolidin-1-karboksilata (C32).
[0260] Rastvor terc-butil 4-hidroksi-2-oksopirolidin-1-karboksilata (2.00 g, 9.94 mmol) u dihlormetanu (25 mL) se ohladi u kupatilu suvi led/aceton i nakon toga tretira sa [bis(2-metoksietil)amino]sumpor trifluoridom (Deokso-Fluor; 2.5 mL, 14 mmol). Reaktivna smeša se ostavi 16 sati da se polako zagreje na sobnu temperaturu, nakon čega se smeša podeli između dihlormetana i vodenog rastvora natrijum bikarbonata. Organski sloj se suši preko natrijum sulfata, filtrira i koncentruje pod vakuumom. Hromatografijom na silika gelu (gradijent: 10% do 50% etil acetat u heptanu) se dobija produkt kao bela čvrsta supstanca. Prinos: 966 mg, 4.75 mmol, 48%.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5.08 (ddd, J=51.6, 7.8, 7.6 Hz, 1H), 3.89 (dddd, J=11.2, 8.8, 3.5, 0.8 Hz, 1H), 3.65-3.57 (m, 1H), 2.54-2.41 (m, 1H), 2.29-2.13 (m, 1H), 1.55 (s, 9H).
Faza 2. Sinteza terc-butil [4-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)-2-fluor-4-oksobutil]karbamata (C33).
[0261] Rastvor n-butillitijuma u heksanima (2.5 M, 0.92 mL, 2.3 mmol) se na -78 °C doda u rastvor C1 (510 mg, 2.30 mmol) i C32 (485 mg, 2.39 mmol) u tetrahidrofuranu (20 mL) i mešanje se nastavi 30 minuta na -78 °C. Doda se sirćetna kiselina (670 µL) na -78 °C i ostavi uz mešanje dodatnih 30 minuta na toj temperaturi, kada se kupatilo za hlađenje ukloni. U reaktivnu smešu se doda voda (10 mL), koja se nakon toga ekstrahuje sa etil acetatom (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi se suše preko magnezijum sulfata, filtriraju i koncentruju pod vakuumom. Nakon prečišćavanja hromatografijom na silika gelu (gradijent: 30% do 75% etil acetat u heptanu), dobija se produkt kao guma. Prinos: 370 mg, 1.24 mmol, 54%. GCMS m/z 299.1 [M<+>].<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.03 (d, J=3.4 Hz, 1H), 5.12 (ddd, J=49.9, 8.0, 4.2 Hz, 1H), 4.75-4.67 (br s, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.38-3.29 (m, 2H), 2.48 (s, 3H), 2.24-2.05 (m, 2H), 1.42 (s, 9H).
Faza 3. Sinteza 4-(3-fluor-3,4-dihidro-2H-pirol-5-il)-9,3-dimetil-1H-pirazola (C34).
[0262] Rastvor C33 (370 mg, 1.24 mmol) u dihlormetanu (10 mL) se tretira sa rastvorom vodonik hlorida u 1,4-dioksanu (4.0 M, 3.1 mL, 12.4 mmol). Reaktivna smeša se meša 18 sati na sobnoj temperaturi, nakon čega se koncentruje pod sniženim pritiskom, da se dobije produkt kao bela guma. Ovaj materijal sadrži neke nečistoće, utvrđene pomoću<1>H NMR. Prinos: 210 mg, 1.16 mmol, 94%. GCMS m/z 181.1 [M<+>].<1>H NMR (500 MHz, CD3OD), karakteristični pikovi produkta: δ 8.38 (d, J=2.7 Hz, 1H), 5.43 (ddd, J=48.7, 8.2, 4.0 Hz, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.22-3.10 (m, 2H), 2.44 (s, 3H).
Faza 4. Sinteza 4-(4-fluoropirolidin-2-il)-1,3-dimetil-1H-pirazola (P8).
[0263] Natrijum borhidrid (88 mg, 2.3 mmol) se doda u rastvor C34 (210 mg, 1.16 mmol) u metanolu (8 mL). Reaktivna smeša se meša 1 sat na sobnoj temperaturi, nakon čega se razblaži sa zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida (4 mL) i vodom (4 mL). Dobijena smeša se ekstrahuje sa etil acetatom (3 x 100 mL) i kombinovani organski slojevi se suše preko magnezijum sulfata, filtriraju i koncentruju pod sniženim pritiskom. Produkt se dobija kao svetlo žuta guma, za koju se pretpostavlja da se sastoji od smeše cis i trans produkata i sadrži neke nečistoće utvrđene<1>H NMR analizom. Prinos: 182 mg, 0.993 mmol, 86%. GCMS m/z 183.1 [M<+>].<1>H NMR (500 MHz, CD3OD), karakteristični pikovi produkta: δ 7.62 (d, J=2.9 Hz, 1H), [5.24-5.21 (m) i 5.14-5.10 (m), JHF=53 Hz, 1H], [4.27-4.23 (m) i 4.20-4.17 (m), ukupno 1H], 3.81 (s, 3H), 2.25 (s, 3H).
Izrada P9: 1,5-Dimetil-4-(pirolidin-2-il)-1H-pirazol, hidrohloridne soli (P9)
[0264]
Faza 1. Sinteza 4-jod-1,5-dimetil-1H-pirazola (C35).
[0265] N-Jodsukcinimid (35.8 g, 159 mmol) se na 10 °C doda u rastvor 1,5-dimetil-1Hpirazola (15.3 g, 159 mmol) u N,N-dimetilformamidu (20 mL). Reaktivna smeša se meša 16 sati na 10 °C i 48 sati na 15 °C, nakon čega se razblaži sa etil acetatom (500 mL) i ispere po redu sa vodom (3 x 100 mL), vodenim rastvorom natrijum sulfita (100 mL) i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida (50 mL). Organski sloj se suši preko natrijum sulfata, filtrira i koncentruje pod vakuumom da se dobije produkt kao bela čvrsta supstanca. Prinos: 28.0 g, 126 mmol, 79%.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.41 (s, 1H), 3.85 (s, 3H), 2.29 (s, 3H).
Faza 2. Sinteza terc-butil [4-(1,5-dimetil-1H-pirazol-4-il)-4-oksobutil]karbamata (C36).
[0266] Rastvor n-butillitijum u heksanima (2.5 M, 49.8 mL, 124 mmol) se na -65 °C doda u rastvor C35 (26.3 g, 118 mmol) u tetrahidrofuranu (300 mL) i reaktivna smeša se meša 1 sat na -60 °C do -70 °C. Nakon toga se u kapima dodaje rastvor terc-butil 2-oksopirolidin-1-karboksilata (23.0 g, 124 mmol) u tetrahidrofuranu (50 mL), uz održavanje temperature reaktivne smeše na -60 °C do -70 °C. Mešanje se nastavi 2 sata na toj temperaturi, nakon čega se reakcija neutrališe dodavanjem vodenog rastvora amonijum hlorida (50 mL) i vode (100 mL). Dobijena smeša se ekstrahuje sa etil acetatom (3 x 150 mL) i kombinovani organski slojevi se isperu sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida (100 mL), suše preko natrijum sulfata, filtriraju i koncentruju pod vakuumom. Hromatografijom na silika gelu (gradijent: 20% do 33% etil acetat u petrol etru) dobija se produkt kao svetlo žuta čvrsta supstanca. Prinos: 8.55 g, 30.4 mmol, 26%.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.81 (s, 1H), 4.73-4.60 (br s, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.24-3.14 (m, 2H), 2.80 (dd, J=7.5, 7.0 Hz, 2H), 2.56 (s, 3H), 1.93-1.84 (m, 2H), 1.43 (s, 9H).
Faza 3. Sinteza 4-(3,4-dihidro-2H-pirol-5-il)-1,5-dimetil-1H-pirazola, trihidrohloridne soli (C37).
[0267] Rastvor vodonik hlorida u 1,4-dioksanu (4 M, 60 mL) se doda u rastvor C36 (8.55 g, 30.4 mmol) u dihlormetanu (100 mL) i reaktivna smeša se meša 16 sati na 20 °C. Smeša se nakon toga koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije produkt kao žuta čvrsta supstanca, koja se direktno koristi u narednoj fazi. LCMS m/z 164.1 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.2-8.0 (br s, 3H), 7.98 (s, 1H), 3.75 (s, 3H), 2.89 (dd, J=7.3, 7.3 Hz, 2H), 2.85-2.75 (m, 2H), 2.48 (s, 3H), 1.89-1.79 (m, 2H).
1
Faza 4. Sinteza 1,5-dimetil-4-(pirolidin-2-il)-1H-pirazola (C38).
[0268] Natrijum borhidrid (5.55 g, 147 mmol) se u porcijama na 0 °C dodaje u rastvor C37 (iz prethodne faze, ≤30.4 mmol) u metanolu (250 mL) {Pažnja: gas evaluira.} Reaktivna smeša se nakon toga ostavi da se meša 18 sati na 18 °C, nakon čega se ponovo doda natrijum borhidrid (2.22 g, 58.7 mmol) i mešanje se nastavi 3 sata na 15 °C. Doda se vodeni rastvor amonijum hlorida (150 mL) i dobijena smeša se koncentruje pod vakuumom da se dobije vodeni rastvor (približno 150 mL), koji se direktno koristi u sledećoj fazi.
Faza 5. Sinteza terc-butil 2-(1,5-dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-karboksilata (C39).
[0269] Natrijum karbonat (7.77 g, 73.3 mmol) i di-terc-butil dikarbonat (12.8 g, 58.6 mmol) se na 15 °C dodaju u smešu vodenog rastvora C38 (iz prethodne faze; ≤30.4 mmol) i metanola (200 mL). Reaktivna smeša se meša 16 sati na 18 °C, nakon čega se razblaži sa vodom (200 mL) i ekstrahuje sa etil acetatom (3 x 150 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida (60 mL), suše preko natrijum sulfata, filtriraju i koncentruju pod vakuumom. Hromatografijom na silika gelu (gradijent: 17% do 50% etil acetat u petrol etru) se dobija produkt kao bezbojno ulje. Iz<1>H NMR analize, pretpostavlja se da ovaj materijal egzistira kao smeša rotamera. Prinos: 3.50 g, 13.2 mmol, 43% preko tri faze. LCMS m/z 266.2 M+H<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3δ 7.19 (s, 1H), 4.90-4.62 (br m, 1H), 3.74 (br s, 3H), 3.59-3.36 (br m, 2H), 2.25-2.08 (br m, 1H), 2.21 (br s, 3H), 2.04-1.81 (m, 2H), 1.79-1.67 (m, 1H), [1.43 (br s) i 1.28 (br s), ukupno 9H].
Faza 6. Sinteza 1,5-dimetil-4-(pirolidin-2-il)-1H-pirazola, hidrohloridne soli (P9).
[0270] U rastvor C39 (3.50 g, 13.2 mmol) u dihlormetanu (40 mL) se doda rastvor vodonik hlorida u 1,4-dioksanu (4 M, 20 mL) i reaktivna smeša se meša 5 sati na 20 °C.
Koncentrovanjem pod vakuumom se dobija čvrsta supstanca, koja se kombinuje sa produktom slične reakcije izvedene sa C39 (500 mg, 1.9 mmol) i ispere sa heksanima (30 mL), da se dobije produkt kao beličasta čvrsta supstanca. Kombinovani prinos: 2.80 g, 13.9 mmol, 92%. LCMS m/z 166.1 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.23-10.09 (br s, 1H), 8.96-8.81 (br s, 1H), 7.64 (s, 1H), 4.46-4.35 (m, 1H), 3.73 (s, 3H), 3.29-3.11 (m, 2H), 2.29 (s, 3H),
2
2.23-2.15 (m, 1H), 2.11-1.88 (m, 3H).
Izrada P10: Smeša terc-butil 2-(1,4-dimetil-1H-pirazol-5-il)pirolidin-1-karboksilata i tercbutil 2-(1,4- dimetil-1H-pirazol-3-il)pirolidin-1-karboksilata (P10)
[0271]
Faza 1. Sinteza terc-butil 2-propanoilpirolidin-1-karboksilata (C40).
[0272] Rastvor etilmagnezijum bromida u dietil etru (3.0 M, 14.2 mL, 42.6 mmol) se u kapima na 0 °C dodaje u rastvor terc-butil 2-[metoksi(metil)karbamoil]pirolidin-1-karboksilata (10.0 g, 38.7 mmol) u tetrahidrofuranu (100 mL). Reaktivna smeša se meša 2 sata na sobnoj temperaturi, nakon čega se doda zasićeni vodeni rastvor amonijum hlorida. Vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (2 x 200 mL) i kombinovani organski slojevi se isperu sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida, suše preko natrijum sulfata, filtriraju i koncentruju pod vakuumom. Prečišćavanjem hromatografijom na silika gelu (gradijent: 0% do 30% etil acetat u petrol etru) dobije se produkt kao svetlo ulje. Iz<1>H NMR analize, pretpostavlja se da ovaj materijal egzistira kao smeša rotamera. Prinos: 6.10 g, 26.8 mmol, 69%.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ [4.35 (dd, J=8.5, 4.0 Hz) i 4.24 (dd, J=8.5, 5.0 Hz), ukupno 1H], 3.59-3.38 (m, 2H), 2.57-2.35 (m, 2H), 2.25-2.06 (m, 1H), 1.94-1.75 (m, 3H), [1.46 (s) i 1.40 (s), ukupno 9H], [1.08 (t, J=7.3 Hz) i 1.06 (t, J=7.5 Hz), ukupno 3H].
Faza 2. Sinteza terc-butil 2-[3-(dimetilamino)-2-metilprop-2-enoil]pirolidin-1-karboksilata (C41).
[0273] Rastvor C40 (500 mg, 2.20 mmol) u N,N-dimetilformamid dimetil acetalu (20 mL) se zagreva 16 sati pod refluksom. Reaktivna smeša se koncentruje pod vakuumom da se dobije produkt kao crno ulje. Prinos: 550 mg, 1.95 mmol, 89%.
Faza 3. Sinteza terc-butil 2-(4-metil-1H-pirazol-5-il)pirolidin-1-karboksilata (C42).
[0274] U rastvor C41 (550 mg, 1.95 mmol) u etanolu (15 mL) se doda rastvor hidrazin hidrata (2 mL). Reaktivna smeša se zagreva 16 sati pod refluksom, nakon čega se koncentruje pod vakuumom da se dobije produkt kao žuto ulje. Prinos: 450 mg, 1.79 mmol, 92%.
Faza 4. Sinteza smeše terc-butil 2-(1,4-dimetil-1H-pirazol-5-il)pirolidin-9-karboksilata i tercbutil 2-(1,4- dimetil-1H-pirazol-3-il)pirolidin-1-karboksilata (P10).
[0275] U rastvor C42 (450 mg, 1.79 mmol) u tetrahidrofuranu (20 mL) se doda natrijum hidrid (129 mg, 5.38 mmol). Nakon 1 sat mešanja reaktivne smeše, smeša se tretira sa jodmetanom (2.54 g, 17.9 mmol) i reakcija se ostavi da stoji dok se ponoću LCMS ne pokaže da je završena i ispolji glavni pik produkta (LCMS m/z 265.9 [M+H]<+>). U ovom trenutku se doda voda (50 mL) i dobijena smeša se ekstrahuje sa etil acetatom (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida (50 mL), suše preko natrijum sulfata, filtriraju i koncentruju pod vakuumom. Hromatografijom na silika gelu (Eluent: 1:1 petrol etar / etil acetat) se dobije produkt (pretpostavlja se da je to smeša dva regioizomera) kao bezbojno ulje. Prinos: 210 mg, 0.791 mmol, 44%.
Primeri 1, 2 i 3
(+/-)-4-(4-{[2-(1,3-Dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}-2-fluorofenoksi)benzamid (1), (+)-4-(4-{[2-(1,3-Dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}-2-fluorofenoksi)benzamid (ENT-1) (2) i (-)-4-(4-{[2-(1,3-Dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}-2-fluorofenoksi)benzamid (ENT-2) (3)
4
Faza 1. Sinteza 1,3-dimetil-4-(pirolidin-2-il)-1H-pirazola, hidrohloridne soli (C43).
[0277] Rastvor C5 (1.85 g, 6.97 mmol) u etil acetatu (25 mL) se tretira sa rastvorom vodonik hlorida u etil acetatu (1 M, 35 mL). Reaktivna smeša se meša na sobnoj temperaturi u toku noći, nakon čega se koncentruje pod vakuumom da se dobije produkt kao gusto ulje. Ovaj materijal se koristi bez daljeg prečišćavanja. Prinos: 1.10 g, 5.45 mmol, 78%. LCMS m/z 166.1 [M+H]<+>.
Faza 2. Sinteza 4-(2-fluor-4-formilfenoksi)benzonitrila (C44).
[0278] 3,4-Difluorobenzaldehid (3.00 g, 21.1 mmol) se doda u smešu 4-hidroksibenzonitrila (3.02 g, 25.4 mmol) i kalijum karbonata (5.84 g, 42.2 mmol) u N,N-dimetilformamidu (42 mL) i reaktivna smeša se ostavi da se meša na 100 °C u toku noći. Smeša se nakon toga ohladi na sobnu temperaturu i sipa u vodu (300 mL) uz mešanje; nakon 15 minuta, čvrsta susptanca se sakupi filtriranjem da se dobije produkt kao beličasta čvrsta supstanca. Prinos: 4.52 g, 18.7 mmol, 89%.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.98 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.77 (dd, polovina od ABX uzorka, J=10.2, 1.8 Hz, 1H), 7.73 (ddd, polovina od ABXY uzorka, J=8.3, 1.7, 1.0 Hz, 1H), 7.68 (br d, J=9.0 Hz, 2H), 7.29-7.25 (m, 1H, pretpostavljeno; delimično pokriven pikom rastvarača), 7.09 (br d, J=8.8 Hz, 2H).
Faza 3. Sinteza 4-(2-fluor-4-formilfenoksi)benzamida (C45).
[0279] Vodonik peroksid (30% rastvor u vodi, 0.6 mL) se polako dodaje u smešu C44 (280 mg, 1.16 mmol) i kalijum karbonata (481 mg, 3.48 mmol) u dimetil sulfoksidu (3 mL), takvom brzinom da se temperatura reakcije održi ispod 20 °C. Nakon 3 sata mešanja na 20 °C, reaktivna smeša se sipa u vodeni rastvor natrijum sulfita (5 mL), uz održavanje temperature ispod 20 °C. Dobijena smeša se ekstrahuje sa dihlormetanom (23 10 mL) koji sadrži dovoljno metanola da omogući ekstrakciju produkta a kombinovani organski slojevi se isperu sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida (5 mL), suše preko natrijum sulfata, filtriraju i koncentruju pod vakuumom da se dobije produkt kao čvrsta supstanca. Prinos: 300 mg, 1.16 mmol, kvantitativan.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.95 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.87 (br d, J=8.8 Hz, 2H), 7.74 (dd, J=10.3, 1.8 Hz, 1H), 7.67 (br ddd, J=8.3, 1.8, 1.0 Hz, 1H), 7.18 (dd, J=8, 8 Hz, 1H), 7.10 (br d, J=8.8 Hz, 2H).
Faza 4. Sinteza (+/-)-4-(4-{[2-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}-2-fluorofenoksi)benzamida (1), (+)-4-(4-{[2-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}-2-fluorofenoksi)benzamida (ENT-1) (2) i (-)-4-(4-{[2-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}-2-fluorofenoksi)benzamida (ENT-2) (3).
[0280] Rastvor C43 (303 mg, 1.50 mmol) u dihlormetanu (6 mL) se tretira sa N,N-diizopropiletilaminom (0.97 mL, 5.57 mmol) i meša 15 minuta, nakon čega se doda C45 (475 mg, 1.83 mmol) i mešanje se nastavi 20 minuta. Doda se natrijum triacetoksiborhidrid (98%, 1.19 g, 5.50 mmol) i reaktivna smeša se meša u toku noći na sobnoj temperaturi. Smeša se nakon toga podeli između dihlormetana (50 mL) i zasićenog vodenog rastvora natrijum bikarbonata (50 mL) a vodeni sloj se ekstrahuje dva puta sa dihlormetanom. Kombinovani organski slojevi se suše preko magnezijum sulfata, filtriraju, koncentruju pod vakuumom i prečiste hromatografijom na silika gelu (gradijent: 0% do 5% metanol u dihlormetanu), da se dobije racematni produkt 1 kao beličasta pena. Prinos racematnog meterijala: 510 mg, 1.25 mmol, 83%. LCMS m/z 409.4 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.78 (br d, J=8.6 Hz, 2H), 7.29 (br s, 1H), 7.16 (d, J=11.7 Hz, 1H), 7.08-7.01 (m, 2H), 6.97 (br d, J=9.0 Hz, 2H), 6.15-5.85 (v br s, 2H), 3.89 (d, J=13.3 Hz, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.39-3.27 (m, 1H), 3.15-3.00 (m, 2H), 2.28 (s, 3H), 2.22-2.10 (m, 2H), 1.97-1.69 (m, 3H).
[0281] Racemat 1 se razdvoji na svoje enantiomere pomoću superkritične tečne hromatografije (kolona: Phenomenex Lux Cellulose-2, 5 µm; mobilna faza A: ugljen dioksid; mobilna faza B: metanol koji sadrži 0.2% amonijum hidroksid; gradijent: 5% do 60% B). Prvi eluirani produkt, dobijen kao žutomrka čvrsta supstanca, ispoljava pozitivnu (+) rotaciju i označen je kao 2. Prinos: 219 mg, 0.536 mmol, 43% za razdvajanje. LCMS m/z 409.6 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.79 (br d, J=8.6 Hz, 2H), 7.29-7.26 (1H, pretpostavljeno; zaklonjen pikom rastvarača), 7.16 (brd, J=11.3 Hz, 1H), 7.08-7.02 (m, 2H), 6.97 (br d, J=8.6 Hz, 2H), 6.3-5.4 (v br m, 2H), 3.90 (br d, J=13.3 Hz, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.38-3.27 (m, 1H), 3.15-2.98 (m, 2H), 2.28 (s, 3H), 2.22-2.07 (m, 2H), 1.98-1.63 (m, 3H). Ovi NMR rezultati su dobijeni više meseci nakon izdvajanja 2 i ispoljavaju proširene signale. Sintezom manjeg obima su dobijeni ovi rezultati neposredno nakon izdvajanja: LCMS m/z 431.0 [M+Na<+>].<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.78 (br d, J=9.0 Hz, 2H), 7.3-7.25
(1H, pretpostavljeno; zaklonjen pikom rastvarača), 7.16 (d, J=11 Hz, 1H), 7.07-7.03 (m, 2H), 6.98 (br d, J=8.0 Hz, 2H), 3.90 (d, J=13.0 Hz, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.32 (dd, J=8.5, 8.0 Hz, 1H), 3.12-3.06 (m, 1H), 3.04 (d, J=13.0 Hz, 1H), 2.29 (s, 3H), 2.20-2.09 (m, 2H), 1.95-1.69 (m, 3H).
[0282] Drugi eluirani produkt (210 mg), koji ispoljava negativnu (-) rotaciju, se suspenduje u etil acetatu (5 mL) i filtrira; sakupljena čvrsta supstanca je označena kao 3. Prinos: 155 mg, 0.379 mmol, 30% za razdvajanje. LCMS m/z 409.4 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.78 (br d, J=8.6 Hz, 2H), 7.29-7.25 (1H, pretpostavljeno; zaklonjen pikom rastvarača), 7.16 (d, J=11.7 Hz, 1H), 7.08-7.02 (m, 2H), 6.97 (br d, J=8.6 Hz, 2H), 6.2-5.3 (v br m, 2H), 3.90 (d, J=13.3 Hz, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.32 (dd, J=8.2, 8.2 Hz, 1H), 3.13-3.05 (m, 1H), 3.04 (d, J=13.3 Hz, 1H), 2.29 (s, 3H), 2.21-2.09 (m, 2H), 1.97-1.69 (m, 3H).
[0283] Po analitičkoj HPLC (kolona: Phenomenex Lux Cellulose-2, 4.6 x 250 mm, 5 µm; mobilna faza A: ugljen dioksid; mobilna faza B: metanol sadrži 0.2% amonijum hidroksid; gradijent: 5% B od 0 do 1.00 minut, 5% do 60% B u toku 8.00 minuta; brzina protoka: 3.0 mL/minut), 2 pokazuje vreme zadržavanja od 8.95 minuta. Koristeći isti sistem analize, 3 pokazuje vreme zadržavanja od 10.00 minuta.
Primeri 4, 5 i 6
(+/-)-4-(4-{[2-(1,3-Dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)-3-fluorobenzamid (4), 4-(4-{[2-(1,3-Dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)-3-fluorobenzamid, ENT-1 (5) i 4-(4-{[2-(1,3-Dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)-3-fluorobenzamid, ENT-2 (6)
[0284]
Faza 1. Sinteza 3-fluor-4-(4-formilfenoksi)benzonitrila (C46).
[0285] Kalijum karbonat (19.9 g, 144 mmol) se doda u smešu 3,4-difluorobenzonitrila (10.0 g, 71.9 mmol) i 4-hidroksibenzaldehida (8.78 g, 71.9 mmol) u N,N-dimetilformamidu (200 mL). Reaktivna smeša se zagreva 4 sata na 100 °C, nakon čega se ohladi na sobnu temperaturu i podeli između vode i etil acetata. Organski sloj se ispere sa vodom (3 x 200 mL), suši preko natrijum sulfata, filtrira i koncentruje pod vakuumom, da se dobije produkt kao žuta čvrsta supstanca (17.7 g). Na osnovu<1>H NMR, ovaj materijal sadrži malo N,N-dimetilformamida. Prinos, korigovan za N,N-dimetilformamid: 16.8 g, 69.6 mmol, 97%.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.99 (s, 1H), 7.93 (br d, J=8.6 Hz, 2H), 7.58-7.48 (m, 2H), 7.21 (dd, J=8.4, 8.0 Hz, 1H), 7.14 (br d, J=8.6 Hz, 2H).
Faza 2. Sinteza 3-fluor-4-(4-formilfenoksi)benzamida (C47).
[0286] Rastvor C46 (iz prethodne faze; 16.8 g, 69.6 mmol) u dimetil sulfoksidu (100 mL) se ohladi u ledenom kupatilu i tretira sa kalijum karbonatom (5.007 g, 36.7 mmol). U kapima se dodaje vodeni rastvor vodonik peroksida (30%, 8.24 mL, 80.7 mmol) i reaktivna smeša se meša 5 minuta na 0 °C i nakon toga zagreje na sobnu temperaturu. Nakon 2 sata, sipa se u vodu (500 mL) i meša 30 minuta na sobnoj temperaturi. Čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem i čvrsta susptanca ispere sa vodom da se dobije produkt. Prinos: 16.3 g, 62.9 mmol, 90%.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.96 (s, 1H), 7.90 (br d, J=8.6 Hz, 2H), 7.74 (dd, J=10.7, 1.8 Hz, 1H), 7.63 (br d, J=8.2 Hz, 1H), 7.22 (dd, J=8.2, 8.2 Hz, 1H), 7.10 (br d, J=8.6 Hz, 2H), 6.2-5.5 (v br m, 2H).
Faza 3. Sinteza (+/-)-4-(4-{[2-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il] metil}fenoksi)-3-fluorobenzamida (4), 4-(4-{[2-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il) pirolidin-1-il]metil}fenoksi)-3-fluorobenzamida, ENT-1 (5) i 4-(4-{[2-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)-3-fluorobenzamida, ENT-2 (6).
[0287] Rastvor C43 (760 mg, 3.77 mmol) i N,N-diizopropiletilamina (3.3 mL, 19 mmol) u dihlormetanu (12.5 mL) se meša 15 minuta, nakon čega se doda C47 (975 mg, 3.76 mmol) i mešanje se nastavi još 2 sata. Nakon toga se doda natrijum triacetoksiborhidrid (98%, 4.07 g, 18.8 mmol) i reaktivna smeša se meša u toku noći na sobnoj temperaturi. Nakon dodavanja zasićenog vodenog rastvora natrijum bikarbonata (50 mL), vodeni sloj se tri puta ekstrahuje sa dihlormetanom a kombinovani organski slojevi se suše preko magnezijum sulfata, filtriraju i koncentruju pod vakuumom. Hromatografijom na silika gelu (gradijent: 0% do 5% metanol u dihlormetanu) dobija se racematni produkt kao staklo. Prinos racemata 4: 1.12 g, 2.74 mmol, 73%. LCMS m/z 409.2 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.68 (dd, J=11.1, 2.1 Hz, 1H), 7.51 (ddd, J=8.6, 2.0, 1.2 Hz, 1H), 7.30-7.24 (m, 3H, pretpostavljeno; delimično pokriven pikom rastvarača), 7.00-6.93 (m, 3H), 6.2-5.8 (v br m, 2H), 3.90 (d, J=13.3 Hz, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.30 (dd, J=8.2, 7.8 Hz, 1H), 3.09-3.00 (m, 2H), 2.28 (s, 3H), 2.20-2.09 (m, 2H), 1.93-1.67 (m 3H).
[0288] Racemat 4 se razdvoji u svoje enantiomere pomoću superkritične tečne hromatografije [kolona: Chiral Technologies Chiralcel OJ-H, 5 µm; mobilna faza: 85:15 ugljen dioksid /
1
(metanol sadrži 0.2% amonijum hidroksid)]. Prvi eluirani enantiomer se rastvori u dihlormetanu, filtrira kroz najlon Acrodisc®, koncentruje pod vakuumom i podvrgne hromatografiji na silika gelu (gradijent: 50% do 100% etil acetat u heptanu), da se dobije 5 kao beličasta pena. Prinos: 378 mg, 0.925 mmol, 34% za razdvajanje. LCMS m/z 409.3 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.68 (dd, J=10.9, 2.0 Hz, 1H), 7.51 (br d, J=8 Hz, 1H), 7.29-7.24 (m, 3H, pretpostavljeno; delimično pokriven pikom rastvarača), 7.00-6.94 (m, 3H), 6.2-5.5 (v br m, 2H), 3.90 (d, J=13.3 Hz, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.30 (dd, J=8.6, 7.8 Hz, 1H), 3.09-3.02 (m, 1H), 3.03 (d, J=13.3 Hz, 1H), 2.28 (s, 3H), 2.20-2.09 (m, 2H), 1.93-1.67 (m, 3H).
[0289] Drugi eluirani enantiomer iz superkritične tečne hromatografije se ponovo prečisti na isti način kao 5, da se dobije 6 kao beličasta pena. Prinos: 371 mg, 0.908 mmol, 33% za razdvajanje. LCMS m/z 409.3 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.68 (dd, J=10.9, 2.0 Hz, 1H), 7.51 (br d, J=8.6 Hz, 1H), 7.29-7.24 (m, 3H, pretpostavljeno; delimično pokriven pikom rastvarača), 7.00-6.94 (m, 3H), 6.2-5.6 (v br m, 2H), 3.90 (d, J=12.9 Hz, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.30 (dd, J=8.6, 7.8 Hz, 1H), 3.08-3.01 (m, 1H), 3.02 (d, J=13.3 Hz, 1H), 2.28 (s, 3H), 2.20-2.08 (m, 2H), 1.93-1.67 (m, 3H).
[0290] Po analitičkoj HPLC (kolona: Chiral Technologies Chiralcel OJ-H, 4.6 x 250 mm, 5 µm; mobilna faza A: ugljen dioksid; mobilna faza B: metanol sadrži 0.2% amonijum hidroksid; gradijent: 5% B od 0 do 1.00 minut, 5% do 60% B za 8.00 minuta; brzina protoka: 3.0 mL/minut), 5 pokazuje vreme zadržavanja od 5.68 minuta. Koristeći isti sistem analize, 6 pokazuje vreme zadržavanja od 6.08 minuta.
Primeri 7, 8 i 9
(+/-)-3-Fluoro-4-(4-{[2-(3-metoksi-9-metil-9H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid (7), (-)-3- Fluoro-4-(4-{[2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il) pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid (ENT-1) (8) i (+)- 3-Fluoro-4-(4-{[2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid (ENT-2) (9)
[0291]
1 1
[0292] Natrijum triacetoksiborhidrid (98%, 3.46 g, 16.0 mmol) se doda u smešu C13 (1.45 g, 8.00 mmol) i C47 (2.07 g, 7.98 mmol) u dihlormetanu (50 mL) i reaktivna smeša se meša 3 dana na sobnoj temperaturi. Smeša se nakon toga podeli između zasićenog vodenog rastvora natrijum bikarbonata i dihlormetana i vodeni sloj se ekstrahuje sa dihlormetanom.
Kombinovani organski slojevi se suše preko natrijum sulfata, filtriraju i koncentruju pod vakuumom. Hromatografijom na silika gelu (gradijent: 0% do 10% metanol u etil acetatu) dobija se racemat 7 kao beličasta pena. Prinos racemata 7: 2.60 g, 6.13 mmol, 77%. LCMS m/z 425.3 [M+H]<+>.
[0293] Razdvajanje 7 u njegove sastavne enantiomere se izvodi pomoću superkritične tečne hromatografije [kolona: Chiral Technologies Chiralpak AD-H, 5 µm; mobilna faza: 85:15 ugljen dioksid / (etanol sadrži 0.2% amonijum hidroksid)]. Prvi eluirani produkt, koji ispoljava negativnu (-) rotaciju, se ponovo prečisti hromatografijom na silika gelu (gradijent: 0% do 10% metanol u etil acetatu) da se dobije penasta čvrsta supstanca, označena kao 8. Prinos: 1.12 g, 2.64 mmol, 43% za razdvajanje. LCMS m/z 425.4 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.67 (dd, J=11.1, 1.8 Hz, 1H), 7.50 (br d, J=8 Hz, 1H), 7.30-7.25 (m, 2H, pretpostavljeno; delimično pokriven pikom rastvarača), 7.16 (s, 1H), 7.00-6.94 (m, 3H), 6.2-5.4 (v br m, 2H), 3.94-3.88 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.73 (s, 3H), 3.32 (dd, J=7.8, 7.4 Hz, 1H), 3.10 (d, J=12.9 Hz, 1H), 3.06-2.98 (m, 1H), 2.20-2.09 (m, 2H), 1.92-1.70 (m, 3H).
[0294] Drugi eluirani produkt, dobijen kao žutomrka penasta čvrsta supstanca, ispoljava pozitivnu (+) rotaciju i označen je kao 9. Prinos: 1.18 g, 2.78 mmol, 45% za razdvajanje.
1 2
LCMS m/z 425.6 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.68 (dd, J=10.9, 2.0 Hz, 1H), 7.51 (br d, J=8 Hz, 1H), 7.34-7.25 (m, 2H, pretpostavljeno; delimično pokriven pikom rastvarača), 7.17 (br s, 1H), 7.02-6.93 (m, 3H), 6.3-5.4 (v br m, 2H), 3.97-3.89 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.74 (s, 3H), 3.43-3.25 (m, 1H), 3.22-2.94 (m, 2H), 2.27-2.06 (m, 2H), 1.97-1.70 (m, 3H). Ovi NMR rezultati su dobijeni više meseci nakon izdvajanja 9 i ispoljavaju proširene signale. Sintezom manjeg obima su dobijeni ovi rezultati neposredno nakon izdvajanja: LCMS m/z 425.1 [M+H]<+>;<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.67 (dd, J=11.0, 2.0 Hz, 1H), 7.50 (ddd, J=8.5, 2.3, 1.2 Hz, 1H), 7.30-7.25 (m, 2H, pretpostavljeno; delimično pokriven pikom rastvarača), 7.17 (br s, 1H), 7.00-6.93 (m, 3H), 6.15-5.5 (v br m, 2H), 3.95-3.87 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.73 (s, 3H), 3.33 (dd, J=8, 7 Hz, 1H), 3.11 (d, J=13.0 Hz, 1H), 3.06-2.98 (m, 1H), 2.22-2.07 (m, 2H), 1.92-1.7 (m, 3H).
[0295] Po analitičkoj HPLC (kolona: Chiral Technologies Chiralpak AD-H, 4.6 x 250 mm, 5 µm; mobilna faza A: ugljen dioksid; mobilna faza B: etanol sadrži 0.2% amonijum hidroksid; gradijent: 5% B od 0 do 1.00 minut, 5% do 60% B za 8.00 minuta; brzina protoka: 3.0 mL/minut), 8 pokazuje vreme zadržavanja od 6.55 minuta. Koristeći isti sistem analize, 9 pokazuje vreme zadržavanja od 7.05 minuta.
Primer 8, (L)-Laktatna so
3-Fluoro-4-(4-{[2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid, ENT-1, (L)-laktatna so (8, (L)-Laktatna so)
[0296]
,
8, (L)-laktatna so
[0297] Rastvor 8 (1.00 g, 2.36 mmol) u etil acetatu (10 mL) se tretira sa rastvorom L-(+)-
1
mlečna kiselina [(2S)-2-hidroksipropanoatna kiselina; 98%, 282 mg, 3.07 mmol) u etil acetatu (2 mL) i meša na sobnoj temperaturi. Nakon 30 minuta, rastvor se zaseje sa produktom i mešanje se nastavi još 3 dana. Sakupi se filtriranjem da se dobije produkt kao čvrsta supstanca, za koji se difrakcijom X-zraka praška potvrdi da je kristalni. Prinos: 1.05 g, 2.04 mmol, 86%. LCMS m/z 425.3 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.79 (dd, J=11.5, 2.2 Hz, 1H), 7.72 (ddd, J=8.5, 2.0, 1.1 Hz, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.38 (br d, J=8.6 Hz, 2H), 7.15 (dd, J=8.2, 8.2 Hz, 1H), 7.04 (br d, J=8.8 Hz, 2H), 4.25-4.14 (m, 2H), 4.05 (q, J=6.8 Hz, 1H), 3.95-3.86 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.74 (s, 3H), 3.3-3.24 (m, 1H, pretpostavljeno; delimično pokriven pikom rastvarača), 3.10-2.98 (m, 1H), 2.41-2.31 (m, 1H), 2.24-2.14 (m, 1H), 2.14-2.03 (m, 2H), 1.33 (d, J=6.8 Hz, 3H).
Primer 10
4-(4-{[(2S)-2-(5-Metil-1,2,4-tiadiazol-3-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid (10)
[0298]
1 4
Faza 1. Sinteza 4-(4-formilfenoksi)benzamida (C48).
[0299] Ovaj eksperiment se izvodi u dve identične serije. Vodeni rastvor vodonik peroksida (30%, 21.2 g, 187 mmol) se u kapima na 0 °C dodaje u smešu 4-(4-formilfenoksi)benzonitrila (38.0 g, 170 mmol) i kalijum karbonata (11.8 g, 85.4 mmol) u dimetil sulfoksidu (380 mL). Reaktivna smeša se nakon toga meša 2 sata na 29 °C, nakon čega se dve serije kombinuju i sipaju u vodeni rastvor natrijum sulfita (2.4 L). Dobijena čvrsta supstanca se izdvoji filtriranjem, ispere sa vodom i nakon toga podeli između vode i dihlormetana. Organski sloj se suši preko natrijum sulfata, filtrira i koncentruje pod vakuumom, da se dobije produkt kao bela čvrsta supstanca. Prinos: 51.0 g, 211 mmol, 62%. LCMS m/z 241.9 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.97 (s, 1H), 7.91 (br d, J=8.5 Hz, 2H), 7.88 (br d, J=8.5 Hz, 2H), 7.14 (br d, J=8.5 Hz, 4H).
Faza 2. Sinteza 5-metil-3-[(2S)-pirolidin-2-il]-1,2,4-tiadiazola (C49).
[0300] Bor tribromid (3.51 g, 14.0 mmol) se polako, na -20 °C, u kapima dodaje u rastvor P5 (1.70 g, 5.60 mmol) u dihlormetanu (20 mL). Reaktivna smeša se ostavi da se meša 3 sata na 24 °C, nakon čega se ohladi na -20 °C i neutrališe sa metanolom (20 mL). Dobijeni rastvor se meša 30 minuta na 20 °C i nakon toga koncentruje pod vakuumom, da se dobije produkt kao narandžasta čvrsta susptanca (1.6 g), koja se koristi u sledećoj fazi bez dodatnog prečišćavanja.
Faza 3. Sinteza 4-(4-{[(2S)-2-(5-metil-1,2,4-tiadiazol-3-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamida (10).
[0301] Smeša C48 (1.50 g, 6.22 mmol), C49 (iz prethodne faze; 1.6 g, ≤5.60 mmol) i natrijum acetata (918 mg, 11.2 mmol) u 1,2-dihloretanu (30 mL) se meša 2.5 sata na 23 °C. U reaktivnu smešu se doda natrijum triacetoksiborhidrid (3.56 g, 16.8 mmol) i mešanje se nastavi još 16 sati, nakon čega se dobijena čvrsta supstanca sakupi filtriranjem. Ova čvrsta supstanca se podeli između etil acetata (100 mL) i vode (100 mL). Vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (2 x50 mL) i kombinovani organski slojevi se suše preko natrijum sulfata, filtriraju i koncentruju pod sniženim pritiskom. Prečišćavanje se izvodi prvo koristeći
1
superkritičnu tečnu hromatografiju [kolona: Chiral Technologies Chiralpak AD, 5 µm; mobilna faza: 3:2 ugljen dioksid / (2-propanol sadrži 0.1% amonijum hidroksid)], a nakon toga reverzno faznom HPLC (kolona: Agela Durashell, 5 µm; mobilna faza A: 0.05% amonijum hidroksid u vodi; mobilna faza B: acetonitril; gradijent: 33% do 53% B), da se dobije produkt kao bledožuta čvrsta supstanca. Prinos: 701 mg, 1.78 mmol, 32% preko 2 faze. LCMS m/z 394.9 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.77 (d, J=8.5 Hz, 2H), 7.32-7.25 (m, 2H, pretpostavljeno; delimično pokriven pikom rastvarača), 6.97 (d, J=9.0 Hz, 2H), 6.94 (d, J=8.5 Hz, 2H), 6.2-5.6 (br m, 2H), 3.90 (dd, J=8.0, 7.5 Hz, 1H), 3.82 (d, J=13.0 Hz, 1H), 3.47 (d, J=13.0 Hz, 1H), 3.25-3.17 (m, 1H), 2.80 (s, 3H), 2.47-2.38 (m, 1H), 2.33-2.21 (m, 1H), 2.19-1.98 (m, 2H), 1.92-1.81 (m, 1H).
Primer 11
4-(4-{[(2S)-2-(1,3-Dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid (11)
[0302]
[0303] Trietilamin (2.70 mL, 19.4 mmol) se doda u rastvor P2 (1.30 g, 6.44 mmol) i C48 (1.87 g, 7.75 mmol) u dihlormetanu (25 mL) i smeša se meša 30 minuta na sobnoj temperaturi. Doda se natrijum triacetoksiborhidrid (98%, 2.79 g, 12.9 mmol) i reaktivna smeša se ostavi da se meša 2 sata na sobnoj temperaturi, nakon čega se smeša podeli između zasićenog vodenog rastvora natrijum bikarbonata i dihlormetana. Organski sloj se suši preko natrijum sulfata, filtrira, koncentruje pod vakuumom i podvrgne hromatografiji na silika gelu (gradijent: 0% do 5% metanol u dihlormetanu). Dobijeni materijal rekristališe iz etil acetata (65 mL) da se dobije bela čvrsta supstanca (1.6 g). Osnovni rastvor se koncentruje i prečisti hromatografijom na silika gelu (gradijent: 0% do 10% metanol u etil acetatu); dobijeni
1
materijal se kombinuje sa belom čvrstom supstancom koja je prethodno izdvojena da se dobije 2.0 g nečistog produkta. Ovaj materijal se rekristališe iz etil acetata (60 mL) da se dobije produkt kao čvrsta supstanca, za koju se pomoću difrakcije X-zraka praška pokaže da je kristalna. Prinos: 1.69 g, 4.33 mmol, 67%. LCMS m/z 391.4 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.78 (br d, J=8.8 Hz, 2H), 7.30-7.25 (m, 3H, pretpostavljeno; delimično pokriven pikom rastvarača), 7.00 (br d, J=8.6 Hz, 2H), 6.98 (br d, J=8.4 Hz, 2H), 6.2-5.3 (v br m, 2H), 3.91 (d, J=13.1 Hz, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.30 (dd, J=8.4, 7.6 Hz, 1H), 3.10-3.03 (m, 1H), 3.03 (d, J=13.1 Hz, 1H), 2.29 (s, 3H), 2.20-2.09 (m, 2H), 1.94-1.68 (m, 3H).
Primer 12
4-(4-{[(2S)-2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il] metil}fenoksi)benzamid (pojedinačni enantiomer, sintetisano iz P4) (12)
[0304]
(pojedinačni enantiomer, iz pojedinačni enantiomer, iz P4 rezolucije dibenzoil-L-vinske 12
kiseline)
P4
[ P04305] Natrijum triacetoksiborhidrid (98%, 7.16 g, 33.1 mmol) se doda u rastvor P4 (5.00 g, 27.6 mmol) i C48 (6.99 g, 29.0 mmol) u dihlormetanu (100 mL). Reaktivna smeša se meša na sobnoj temperaturi u toku noći, nakon čega se smeša podeli između 1 M vodenog rastvora natrijum hidroksida i dihlormetana. Dobijena smeša se filtrira kroz diatomejsku zemlju i vodeni sloj se ekstrahuje sa dihlormetanom. Kombinovani organski slojevi se isperu sa vodom, suše preko natrijum sulfata, filtriraju i koncentruju pod vakuumom. Kada se dobijeno gusto ulje (12.6 g) rastvori u etil acetatu (25 mL), zaseje se sa uzorkom produkta i meša u toku noći na sobnoj temperaturi. Čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem da se dobije blago pastasta čvrsta supstanca (9 g), filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom i prečisti
1
koristeći hromatografiju na silika gelu (gradijent: 0% do 20% metanol u etil acetatu).
Materijal iz kolone se kombinuje sa čvrstom supstancom koja je prethodno izdvojena (kombinovana težina: 10 g) i rekristališe iz etil acetata (ukupna zapremina, 50 mL) da se dobije 5 g materijala.
[0306] Produkt iz slične reakcije izvedene koristeći P4 (2.0 g, 11.0 mmol) se kombinuje sa osnovnim rastvorom iz ove rekristalizacije i koncentruje; hromatografijom na silika gelu (gradijent: 0% do 10% metanol u etil acetatu) dobija se lepljiva pena (5 g). Dve serije od po 5 g se komobinuju i rekristališu iz etil acetata (ukupna zapremina, 75 mL) da se nakon ispiranja sa dietil etrom dobije produkt kao čvrsta supstanca. Kombinovani prinos: 7.0 g, 17 mmol, 44%. LCMS m/z 407.6 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.78 (br d, J=8.8 Hz, 2H), 7.31-7.25 (m, 2H, pretpostavljeno; delimično pokriven pikom rastvarača), 7.16 (s, 1H), 7.02-6.95 (m, 4H), 6.2-5.5 (v br m, 2H), 3.94-3.88 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.74 (s, 3H), 3.32 (dd, J=7.8, 7.6 Hz, 1H), 3.11 (d, J=13.1 Hz, 1H), 3.07-3.00 (m, 1H), 2.21-2.07 (m, 2H), 1.93-1.70 (m, 3H).
[0307] Alternativno, Primer 12 može da se izradi koristeći naredni postupak:
rastvor P4 (2.5 g, 14 mmol, 1.15 equiv) u izopropil alkoholu (49 mL) se razblaži sa izopropil alkoholom (30 mL). Rastvor se koncentruje do 30 mL ukupne zapremine na atmosferskom pritisku da se ukloni eventualna preostala voda iz prethodne faze. Ovaj rastvor se analizira i konstatuje se da sadrži sirćetnu kiselinu (2.13% v/v) i vodu (0.12%). Temperatura se snizi na 15 °C i u rastvor P4 se doda C48 (2.9 g, 12 mmol, 1.0 equiv) što rezultira žitkom smesom. Doda se tetrahidrofuran (15 mL) a nakon toga se doda jedna porcija natrijum triacetoksiborhidrida (3.8 g, 18 mmol, 1.5 equiv). Reakcija se meša 90 minuta na 15 °C, nakon čega se smeša neutrališe sa 2 M vodenim rastvorom natrijum hidroksida i smeša nakon toga meša 30 min. Smeša se koncentruje pod sniženim pritiskom (45 °C, 75 mbar) dok se ne ukloni najveći deo organskog rastvarača. U preostalu smešu (43 mL) se doda dihlormetan (38 mL), prenese u levak za razdvajanje i slojevi se razdvoje. Vodeni sloj se ekstrahuje sa novom količinom dihlormetana (38 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa vodom (38 mL) što za rezultat ima mutni organski sloj koji se filtrira kroz celite. Filtrat se koncentruje do ~30 mL pod atmosferskim pritiskom i nakon toga razblaži sa etil acetatom (29 mL). Ponovo, rastvor se koncentruje do ~ 30 mL pod atmosferskim pritiskom i nakon toga razblaži sa etil acetatom (29 mL). Postupak koncentrovanja rastvora do ~ 30 mL ukupne zapremine se ponovo izvede sa rastvorom zagrejanim na 78 °C. Dodaje se etil acetat sve dok se ne dostigne ukupna zapremina od ~ 40 mL i temperatura se snizi na 58 °C u toku 10 min. Produkt za
1
zasejavanaje (0.049 g, 0.12 mmol) se doda i temperatura se održava 30 min na 58 °C a nakon toga ohladi na 20 °C u toku 2 h. Smeša se ostavi na 20 °C u toku noći. Žitka smesa se filtrira i boca i pogača se isperu sa etil acetatom (8.7 mL). Filter pogača se suši u vakuumskoj pećnici 4 h da se dobije produkt kao bela čvrsta supstanca. Prinos: 4.18 g, 10.3 mmol, 86%.
EKSPERIMENTALNO X-ZRAČNJE POJEDINAČNOG KRISTALA: Oblik 2
[0308] Pojedinačni kristal jedinjenja 4-(4-{[(2S)-2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il] metil}fenoksi)benzamida, pojedinačni enantiomer (Primer 12) se dobija kristalizacijom iz acetona (označen Oblik 2) na sledeći način:
približno 20 mg Oblika 1, se odmeri u reaktivnu bocu i nakon toga doda približno 1 mL acetona. Dobija se bistar rastvor. Nakon toga se reaktivna boča labavo zatvori i rastvarač ostavi da polako isparava. Nakon dva dana, uočava se formiranje kristala visokog kvaliteta. Kristalni produkt se nakon toga posmatra pod mikroskopom sa polarizovanim svetlom (PLM) da se potvrdi kristalnost i dobijaju se više nego dovoljno kristala za analizu difrakcije X-zraka pojedinačnog kristala (SXRD).
[0309] Rezultati su sakupljeni na Bruker APEX difraktometru na sobnoj temperaturi.
Sakupljeni rezultati se sastoje od omega i phi snimaka. Struktura je rešena direktnim metodama koristeći SHELX softver paket u Monoclinic klasi prostorne grupe P21. Struktura je naknadno rafinisana metodom najmanjih kvadrata pune matrice. Nađeni su svi atomi koji nisu vodonik i rafinisani koristeći parametre anizotropnog premeštanja. Atomi vodonika smešteni na azotu su nađeni iz Fourier-ove mape razlike i rafinisani sa ograničenim razdaljinama. Preostali atomi vodonika su smešteni na izračunate pozicije i omogućeno je da ostanu na svojim nosećim atomima. Završno preciziranje uključivalo je parametre izotropnog pomeranja za sve atome vodonika. Analize apsolutne strukture koristeći metode verovatnoće (Hooft 2008) su izvršene pomoću PLATON (Spek 2010). Pod pretpostavkom da je dostavljen uzorak enantiočist, rezultati pokazuju da je apsolutna struktura ispravno dodeljena.
Postupkom je izračunato da je verovatnoća da je struktura korektno dodeljena 1.000. Hooft parameter je zabeležen kao 0.04 sa esd od 0.005. Finalni R-indeks je 3.0%. Konačna razlika Furije je otkrila da elektronska gustina nije nedostajala ili je pogrešno postavljena.
Odgovarajući kristal, sakupljeni i precizirani rezultati su sumirani u Tabeli 5 X-zraka.
Atomske koordinate, dužine veze, uglovi veze i parametri premeštanja su navedeni u Tabelama 6-8 X-zračenja. Nađeno je da je apsolutna stereohemija kristalnog Oblika 2 (S) na
1
položaju 2 pirolidin prstena. Pojedinačni enantiomer Primera 12 je prema tome 4-(4-{[(2S)-2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il] metil}fenoksi)benzamid.
Softver i reference
[0310]
SHELXTL, Version 5.1, Bruker AXS, 1997
PLATON, A.L. Spek, J. Appl. Cryst. 2003, 36, 7-13.
MERCURY, C.F. Macrae, P.R. Edington, P. McCabe, E. Pidcock, G.P. Shields, R. Taylor, M. Towler and J. van de Streek, J. Appl. Cryst. 39, 453-457, 2006.
OLEX2, Dolomanov, O.V.; Bourhis, L.J.; Gildea, R.J.; Howard, J.A.K.; Puschmann, H., (2009). J. Appl. Cryst., 42, 339-341.
R.W.W. Hooft i saradnici J. Appl. Cryst. (2008).41. 96-103.
H.D. Flack, Acta Cryst.1983, A39, 867-881.
Tabela 5 X-zraka. Rezultati i prečišćena struktura kristala za Oblik 2.
Identifikacioni kod Z740
Kristalizacija Aceton
Empirijska formula C23 H26 N4 O3
Težina formule 406.48
Temperatura 296(2) K
Talasna dužina 1.54178 Å
Sistem kristala Monoklinički
Prostorna grupa P21
Dimenzije pojedinačne ćelije a = 8.8154(3) Å α = 90°.
b = 10.1601(3) Å β = 92.4570(10)°. c = 11.7413(4) Å γ = 90°.
Zapremina 1050.65(6) Å<3>
Z 2
Gustina (izračunata) 1.285 Mg/m<3>
Koeficijent apsorpcije 0.702 mm<-1>
F(000) 432
11
(nastavlja se)
Veličina kristala 0.320 x 0.200 x 0.100 mm<3>
Teta opseg za sakupljene rezultate 3.768 do 70.092°.
Opseg indeksa -10<=h<=10, -12<=k<=12, -14<=I<=13 Prikupljene refleksije 20883
Nezavisne refleksije 3986 [R(int) = 0.0289]
Potpunost za teta = 67.679°99.9 %
Korekcija apsorpcije empirijska
Postupak prečišćavanja uključeni najmanji kvadrati pune matrice na F<2>Podaci / ograničenja / parametri 3986 / 3 / 279
Dobro uklopljeno na F<2>1.039
Konačni R indeksi [I>2sigma(I)] R1 = 0.0297, wR2 = 0.0748
R indeksi (sve vrednosti) R1 = 0.0309, wR2 = 0.0758
Parametar apsolutne strukture 0.04(5)
Koeficijent ekstinkcije n/a Najveći pik difrakcije i otvora 0.122 i -0.111 e.Å<-3>
(nastavlja se)
C(6) 3094(3) 7131(2) 7196(2) 54(1) C(7) 3515(2) 8349(2) 7625(2) 44(1) C(8) 5765(2) 7483(2) 8509(2) 46(1) C(9) 5401(3) 6610(2) 9344(2) 54(1) C(10) 6316(3) 5535(2) 9557(2) 55(1) C(11) 7618(2) 5337(2) 8961(2) 49(1) C(12) 7991(3) 6253(2) 8158(2) 59(1) C(13) 7058(3) 7328(2) 7914(2) 57(1) C(14) 8605(3) 4151(2) 9219(2) 63(1) C(15) 8755(3) 1805(2) 9504(2) 57(1) C(16) 8145(3) 564(3) 8924(2) 68(1) C(17) 7404(3) 1045(2) 7813(2) 61(1) C(18) 7736(2) 2527(2) 7766(2) 48(1) C(19) 6579(2) 3301(2) 7071(2) 44(1) C(20) 6824(2) 4121(2) 6173(2) 52(1) C(21) 5000(2) 3354(2) 7156(2) 42(1) C(22) 2711(3) 3110(3) 8095(3) 79(1) C(23) 5210(4) 5578(3) 4890(2) 80(1)
Tabela 7 X-zraka. Dužine veza [Å] i uglovi [°] za Oblik 2.
N(1)-C(4) 1.332(3) C(12)-C(13) 1.390(3) N(1)-H(1X) 0.91(2) C(12)-H(12) 0.9300 N(1)-H(1Y) 0.93(2) C(13)-H(13) 0.9300 N(2)-C(14) 1.459(3) C(14)-H(14A) 0.9700 N(2)-C(15) 1.466(3) C(14)-H(14B) 0.9700 N(2)-C(18) 1.466(3) C(15)-C(16) 1.520(4) N(3)-C(21) 1.328(2) C(15)-H(15A) 0.9700 N(3)-N(4) 1.373(3) C(15)-H(15B) 0.9700 N(4)-C(20) 1.335(3) C(16)-C(17) 1.515(4) N(4)-C(23) 1.450(3) C(16)-H(16A) 0.9700 O(1)-C(4) 1.224(3) C(16)-H(16B) 0.9700 O(2)-C(7) 1.374(2) C(17)-C(18) 1.534(3) (nastavlja se)
O(2)-C(8) 1.401(2) C(17)-H(17A) 0.9700 O(3)-C(21) 1.349(2) C(17)-H(17B) 0.9700 O(3)-C(22) 1.418(3) C(18)-C(19) 1.500(3) C(1)-C(7) 1.376(3) C(18)-H(18) 0.9800 C(1)-C(2) 1.376(3) C(19)-C(20) 1.369(3) C(1)-H(1) 0.9300 C(19)-C(21) 1.401(3) C(2)-C(3) 1.388(3) C(20)-H(20) 0.9300 C(2)-H(2) 0.9300 C(22)-H(22A) 0.9600 C(3)-C(5) 1.383(3) C(22)-H(22B) 0.9600 C(3)-C(4) 1.494(3) C(22)-H(22C) 0.9600 C(5)-C(6) 1.377(3) C(23)-H(23A) 0.9600 C(5)-H(5) 0.9300 C(23)-H(23B) 0.9600 C(6)-C(7) 1.382(3) C(23)-H(23C) 0.9600 C(6)-H(6) 0.9300
C(8)-C(9) 1.370(3) C(4)-N(1)-H(1X) 119(2) C(8)-C(13) 1.371(3) C(4)-N(1)-H(1Y) 125(2) C(9)-C(10) 1.374(3) H(1X)-N(1)-H(1Y) 117(3) C(9)-H(9) 0.9300 C(14)-N(2)-C(15) 111.01(16) C(10)-C(11) 1.384(3) C(14)-N(2)-C(18) 115.38(18) C(10)-H(10) 0.9300 C(15)-N(2)-C(18) 104.22(16) C(11)-C(12) 1.374(3) C(21)-N(3)-N(4) 103.38(15) C(11)-C(14) 1.509(3) C(20)-N(4)-N(3) 111.26(16) C(20)-N(4)-C(23) 128.6(2) C(12)-C(11)-C(10) 118.4(2) N(3)-N(4)-C(23) 120.0(2) C(12)-C(11)-C(14) 121.7(2) C(7)-O(2)-C(8) 117.16(15) C(10)-C(11)-C(14) 119.8(2) C(21)-O(3)-C(22) 116.50(17) C(11)-C(12)-C(13) 121.1(2) C(7)-C(1)-C(2) 120.01(18) C(11)-C(12)-H(12) 119.5 C(7)-C(1)-H(1) 120.0 C(13)-C(12)-H(12) 119.5 C(2)-C(1)-H(1) 120.0 C(8)-C(13)-C(12) 118.9(2) C(1)-C(2)-C(3) 121.15(19) C(8)-C(13)-H(13) 120.6 C(1)-C(2)-H(2) 119.4 C(12)-C(13)-H(13) 120.6 C(3)-C(2)-H(2) 119.4 N(2)-C(14)-C(11) 114.81(16)
11
(nastavlja se)
C(5)-C(3)-C(2) 117.65(19) N(2)-C(14)-H(14A) 108.6
C(5)-C(3)-C(4) 117.85(19) C(11)-C(14)-H(14A) 108.6
C(2)-C(3)-C(4) 124.48(19) N(2)-C(14)-H(14B) 108.6
O(1)-C(4)-N(1) 122.0(2) C(11)-C(14)-H(14B) 108.6
O(1)-C(4)-C(3) 121.0(2) H(14A)-C(14)-H(14B) 107.5
N(1)-C(4)-C(3) 116.97(19) N(2)-C(15)-C(16) 105.18(16) C(6)-C(5)-C(3) 121.94(19) N(2)-C(15)-H(15A) 110.7
C(6)-C(5)-H(5) 119.0 C(16)-C(15)-H(15A) 110.7
C(3)-C(5)-H(5) 119.0 N(2)-C(15)-H(15B) 110.7
C(7)-C(6)-C(5) 119.19(19) C(16)-C(15)-H(15B) 110.7
C(7)-C(6)-H(6) 120.4 H(15A)-C(15)-H(15B) 108.8
C(5)-C(6)-H(6) 120.4 C(17)-C(16)-C(15) 104.5(2)
C(1)-C(7)-O(2) 116.31(17) C(17)-C(16)-H(16A) 110.9
C(1)-C(7)-C(6) 120.00(18) C(15)-C(16)-H(16A) 110.9
O(2)-C(7)-C(6) 123.68(18) C(17)-C(16)-H(16B) 110.9
C(9)-C(8)-C(13) 121.0(2) C(15)-C(16)-H(16B) 110.9
C(9)-C(8)-O(2) 120.24(19) H(16A)-C(16)-H(16B) 108.9
C(13)-C(8)-O(2) 118.76(18) C(16)-C(17)-C(18) 105.8(2)
C(8)-C(9)-C(10) 119.5(2) C(16)-C(17)-H(17A) 110.6
C(8)-C(9)-H(9) 120.3 C(18)-C(17)-H(17A) 110.6
C(10)-C(9)-H(9) 120.3 C(16)-C(17)-H(17B) 110.6
C(9)-C(10)-C(11) 121.1(2) C(18)-C(17)-H(17B) 110.6
C(9)-C(10)-H(10) 119.5 H(17A)-C(17)-H(17B) 108.7
C(11)-C(10)-H(10) 119.5 N(2)-C(18)-C(19) 115.08(17) N(2)-C(18)-C(17) 102.61(18)
C(19)-C(18)-C(17) 114.03(19)
N(2)-C(18)-H(18) 108.3
C(19)-C(18)-H(18) 108.3
C(17)-C(18)-H(18) 108.3
C(20)-C(19)-C(21) 102.77(17)
C(20)-C(19)-C(18) 127.75(18)
C(21)-C(19)-C(18) 129.47(18)
(nastavlja se)
N(4)-C(20)-C(19) 109.15(18)
N(4)-C(20)-H(20) 125.4
C(19)-C(20)-H(20) 125.4
N(3)-C(21)-O(3) 122.22(17)
N(3)-C(21)-C(19) 113.44(18)
O(3)-C(21)-C(19) 124.34(17)
O(3)-C(22)-H(22A) 109.5
O(3)-C(22)-H(22B) 109.5
H(22A)-C(22)-H(22B) 109.5
O(3)-C(22)-H(22C) 109.5
H(22A)-C(22)-H(22C) 109.5
H(22B)-C(22)-H(22C) 109.5
N(4)-C(23)-H(23A) 109.5
N(4)-C(23)-H(23B) 109.5
H(23A)-C(23)-H(23B) 109.5
N(4)-C(23)-H(23C) 109.5
H(23A)-C(23)-H(23C) 109.5
H(23B)-C(23)-H(23C) 109.5
[0311] Transformacije simetrije koje se koriste za generisanje ekvivalentnih atoma:
11
(nastavlja se)
C(1) 64(1) 33(1) 60(1) -8(1) -4(1) 3(1) C(2) 57(1) 39(1) 59(1) -1(1) -3(1) 7(1) C(3) 50(1) 42(1) 43(1) 2(1) 4(1) -1(1) C(4) 56(1) 50(1) 50(1) 1(1) -1(1) -5(1) C(5) 68(1) 36(1) 61(1) -9(1) -10(1) -2(1) C(6) 62(1) 35(1) 63(1) -6(1) -9(1) 8(1) C(7) 51(1) 38(1) 43(1) -2(1) 1(1) -1(1) C(8) 49(1) 40(1) 48(1) -6(1) -6(1) -1(1) C(9) 52(1) 61(1) 49(1) -1(1) 7(1) 0(1) C(10) 59(1) 60(1) 46(1) 8(1) -3(1) -3(1) C(11) 44(1) 45(1) 57(1) -5(1) -13(1) -4(1) C(12) 45(1) 53(1) 79(2) -2(1) 15(1) -4(1) C(13) 63(1) 46(1) 63(1) 4(1) 12(1) -4(1) C(14) 44(1) 57(1) 86(2) -4(1) -24(1) -1(1) C(15) 49(1) 60(1) 61(1) 7(1) -14(1) 8(1) C(16) 76(2) 54(1) 72(2) -1(1) -14(1) 17(1) C(17) 63(1) 52(1) 67(1) -10(1) -12(1) 15(1) C(18) 34(1) 61(1) 47(1) 1(1) -1(1) 8(1) C(19) 40(1) 50(1) 41(1) -2(1) -3(1) 5(1) C(20) 44(1) 66(1) 46(1) 3(1) 5(1) 4(1) C(21) 39(1) 40(1) 45(1) -2(1) -5(1) 2(1) C(22) 51(1) 81(2) 105(2) 27(2) 23(1) 13(1) C(23) 90(2) 97(2) 54(1) 29(1) 6(1) 22(2)
[0312] Oblik 2 je kristalni oblik jedinjenja iz Primera 12. Oblik 2 je karakterisan difrakcijom X-zraka praška (PXRD) pokazanom na Slici 1. PXRD analiza Oblika 2 je izvedena na Bruker AXS D4 Endeavor difraktometru opremljenom sa izvorom Cu zračenja. Prorez divergencije je podešen na 0.6 mm dok je sekundarna optika koristila promenljive proreze. Difraktovano zračenje je detektovano pomoću PSD-Lynx Eye detektora. Napon i snaga cevi X-zraka su podešeni na 40 kV i 40 mA tim redom. Podaci su sakupljeni u Teta-2Teta goniometru za Cu (k-alfa prosek) od 3.0 do 40.0 stepeni 2-Teta koristeći veličinu faze od 0.037 stepeni i vreme po fazi od 10 sekundi. Uzorci su pripremljeni stavljanjem u plitki silikonski nosač uzoraka i
11
rotiranjem u toku uzimanja uzoraka.
[0313] Rezultati su sakupljeni pomoću Bruker DIFFRAC Plus XRD Commander Version 2.6.1 i analiza je izvršena pomoću EVA diffract plus softvera (verzija 4.2.1). PXRD datoteka nije obrađena pre ispitivanja pika. Za izradu preliminarne procene pika, su izabrani pikovi sa graničnom vrednošću od 1. Za osiguranje validnosti, podešavanja su vršena ručno; rezultat automatskog pregleda je vizuelno proveren a pozicije pika su podešene na maksimum pika. Generalno su izabrani pikovi sa relativnim intenzitetom ≥ 3%. Pikovi koji nisu rešeni ili su bili u skladu sa šumom nisu odabrani. Tipična greška povezana sa pozicijom pika kristalnog materijala, iz PXRD, po USP, je do /- 0.2° 2-Teta (USP-941).
Tabela 9 daje listu PXRD pikova za Oblik 2. Položaji pikova sa zvezdicom predstavljaju karakteristične pikove Oblik 2.
Tabela 9
[0314] Oblik 2 se takođe karakteriše modelom Raman spektra pokazanim na Slici 3. Raman spektar je dobijen koristeći Nicolet NXR FT-Raman dodatak vezan za FT-IR nosač.
Spektrometar je opremljen sa 1064 nm Nd:YVO4 laserom i detektorom germanijuma hlađenim tečnim azotom. Pre uzimanja rezultata, performanse instrumenta i verifikacije
11
kalibracije su izvedene pomoću polistirena. API uzorci su analizirani u staklenim NMR cevima koje su statične u toku sakupljanja spektra. Spektri su prikupljeni koristeći laser snage od 0.5 W i 512 pridodatih snimaka. Opseg sakupljanja je 3700-100 cm<-1>. Ovi spektri su beleženi koristeći 2 cm<-1>rezoluciju i Happ-Genzel apodizaciju. Koristeći prethodno navedeni Raman postupak, moguća varijabilnost povezana sa merenjem spektra je ± 2 cm<-1>. API uzorci su uzimani pod uslovima sredine (~23°C i između 30%-60%RH). Oblik 2 može da se čuva pod uslovima sredine (15-30°C i vlažnošću sredine).
[0315] Skala intenziteta je normalizovana na 1 pre izbora pika. Pikovi su ručno identifikovani koristeći Thermo Nicolet Omnic 9.7.46 softver. Pozicija pika je izabrana za maksimum pika i pikovi su identifikovani samo kao takvi, ukoliko postoji pad na svakoj strani; vrhovi na pikovima nisu uključeni. Za čist API tokom izbora pika je korišćen prag od 0,015 (Oblik 2) sa osetljivošću od 68-88. Za tablete za izbor pika je korišćen apsolutni prag od 0.046 do 0.052 sa osetljivošću od 64 do 67. Položaj pika je zaokružen na najbliži ceo broj koristeći standardnu praksu (0.5 se zaokružuje na gore, 0.4 se zaokružuje na dole). Pikovi sa normalizovanim intenzitetom pika između (1-0.75), (0.74-0.30), (0.29-0) su obeleženi kao jaki, srednji i slabi, tim redom.
[0316] Tabela 10 daje ukupnu listu Raman pikova za Oblik 2. Pozicije pikova sa zvezdicom su jedinstvene za Oblik 2.
Tabela 10
11
(nastavlja se)
[0317] Oblik 2 se takođe karakteriše sa NMR čvrstog stanja (ssNMR) kako je pokazano na Slici 5. NMR analiza čvrstog stanja (ssNMR) je izvedena na CPMAS sondi pozicioniranoj u Bruker-BioSpin Avance III 500 MHz (<1>H frekvencija) NMR spektrometru. Materijal je
11
smešten u 4 mm rotoru zatvorenim sa standardnim pogonskim zatvaračem. Rezultati su dobijeni na temperaturi sredine.<13>C ssNMR spektri su dobijeni korišćenjem eksperimenta sa protonskom razdvojenom unakrsnom polarizacijom sa okretanjem magičnog ugla (CPMAS). Korišćena je brzina okretanja magičnog ugla od 15.0 kHz. Tokom spektralne akvizicije je primenjeno fazno modulisano polje razdvajanja protona od 80-90 kHz. Vreme kontakta udvojene polarizacije je podešeno na 2 ms i ponavljanje je podešeno na 40 sekundi. Broj snimaka je podešen tako da se dobije adekvatan odnos signala i šuma. Skala hemijske promene ugljenika je predstavljena pomoću<13>C CPMAS eksperimenta na eksternom standardu kristalnog adamantana, postavljajući njegovu rezonancu uzlaznog polja na 29,5 ppm (kako je određeno iz čistog TMS).
[0318] Automatski izbor pika se izvodi na Bruker-BioSpin TopSpin version 3.5 softveru. Generalno, vrednost praga od 5% relativnog intenziteta se koristi za preliminarni izbor pika. Rezultat automatskog izbora pika se vizuelno proverava da se osigura validnost i proceni da li je potrebno ručno podešavanje. Mada su ovde zabeležene specifične vrednosti pika<13>C NMR čvrstog stanja, ovde postoji opseg za ove vrednosti pika zbog razlika u instrumentima, uzorcima i pripremi uzoraka. Ovo je česta praksa u tehnici NMR čvrstog stanja zbog varijacije svojstvene položajima pika. Tipična varijabilnost za vrednost<13>C hemijske promene x-ose je plus ili minus 0.2 ppm za čvrsti kristal. Najveći ovde zabeleženi pikovi čvrstog stanja su relativnog intenziteta. Intenziteti NMR čvrstog stanja mogu da variraju u zavisnosti od trenutno podešenih CPMAS eksperimentalnih parametara i toplotne istorije uzorka. Tabela 11 daje listu pikova<13>C NMR čvrstog stanja za Oblik 2. Pozicije pikova sa zvezdicom predstavljaju karakteristične pikove Oblika 2.
Tabela 11
12
(nastavlja se)
EKSPERIMENTALNO X-ZRAČNJE POJEDINAČNOG KRISTALA: Oblik 1
[0319] Pojedinačni kristal jedinjenja 4-(4-{[(2S)-2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il] metil}fenoksi)benzamida, pojedinačni enantiomer (Primer 12) se dobija kristalizacijom iz DMSO (naznačen Oblik 1) na sledeći način:
približno 2 mg Oblika 1, se izmeri u reaktivnoj bočici a nakon toga se doda približno 20 µL dimetil sulfoksida (DMSO). Dobija se bistar rastvor. Reaktivna bočica se nakon toga zatvori. Pregrada na zatvaraču reaktivne boce se probuši iglom i reaktivna boca ostavi da rastvarač polako upari. Nakon nekoliko nedelja, uočava se formiranje visoko kvalitetnog kristala. Kristalni produkt se nakon toga posmatra pod mikroskopom sa polarizovanom svetlošću (PLM) za potvrdu kristalnosti i dobijeni su dovoljno veliki kristali za analizu difrakcije X-zraka pojedinačnog kristala (SXRD).
[0320] Rezultati su sakupljeni na Bruker D8 Quest difraktometru na sobnoj temperaturi.
Sakupljeni rezultati se sastoje od omega i phi snimaka. Struktura je rešena direktnim metodama koristeći SHELX softver paket u Orthorhombic klasi prostorne grupe P212121. Struktura je naknadno rafinisana metodom najmanjih kvadrata pune matrice. Nađeni su svi atomi koji nisu vodonik i rafinisani koristeći parametre anizotropnog premeštanja. Atomi vodonika smešteni na azotu su nađeni iz Fourier-ove mape razlike i rafinisani sa ograničenim razdaljinama. Preostali atomi vodonika su smešteni na izračunate pozicije i omogućeno je da ostanu na svojim nosećim atomima. Završno preciziranje uključivalo je parametre izotropnog pomeranja za sve atome vodonika. Analize apsolutne strukture koristeći metode verovatnoće (Hooft 2008) su izvršene pomoću PLATON (Spek 2010). Pod pretpostavkom da je dostavljen uzorak enantiočist, rezultati pokazuju da je apsolutna struktura ispravno dodeljena.
Postupkom je izračunato da je verovatnoća da je struktura korektno dodeljena 100.0. Hooft parameter je zabeležen kao 0.07 sa esd od 0.019. Finalni R-indeks je 4.8%. Konačna razlika Furije je otkrila da elektronska gustina nije nedostajala ili je pogrešno postavljena.
Odgovarajući kristal, sakupljeni i precizirani rezultati su sumirani u Tabeli 12 X-zraka.
Atomske koordinate, dužine veze, uglovi veze i parametri premeštanja su navedeni u Tabelama 13-15. Nađeno je da je apsolutna stereohemija kristalnog Oblika 1 (S) na položaju 2 pirolidin prstena. Nađeno je da je pojedinačni enantiomer Primera 124-(4-{[(2S)-2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il] metil}fenoksi)benzamid.
Softver i reference
[0321]
SHELXTL, Version 5.1, Bruker AXS, 1997
PLATON, A.L. Spek, J. Appl. Cryst. 2003, 36, 7-13.
MERCURY, C.F. Macrae, P.R. Edington, P. McCabe, E. Pidcock, G.P. Shields, R. Taylor, M. Towler i J. van de Streek, J. Appl. Cryst. 39, 453-457, 2006.
OLEX2, Dolomanov, O.V.; Bourhis, L.J.; Gildea, R.J.; Howard, J.A.K.; Puschmann, H., (2009). J. Appl. Cryst., 42, 339-341.
R.W.W. Hooft i saradnici J. Appl. Cryst. (2008).41. 96-103.
H.D. Flack, Acta Cryst.1983, A39, 867-881.
Tabela 12 X-zraka. Rezultati i prečišćena struktura kristala za Oblik 1.
Kod za identifikaciju Z768
Kristalizacija DMSO
Empirijska formula C23 H26 N4 O3
Težina formule 406.48
Temperatura 296(2) K
Talasna dužina 1.54178 Å
Sistem kristala Ortorombični
Prostorna grupa P212121
Dimenzije pojedinačne ćelije a = 4.9599(3) Å α= 90°.
b = 9.6376(6) Å β= 90°.
c = 44.314(2) Å γ = 90°.
Zapremina 2118.3(2) Å<3>
Z 4
Gustina (izračunata) 1.275 Mg/m<3>
Koeficijent apsorpcije 0.697 mm<-1>
F(000) 864
Veličina kristala 0.300 x 0.160 x 0.040 mm<3>
Teta opseg za sakupljene rezultate 3.990 do 70.170°.
Opseg indeksa -5<=h<=5, -11<=k<=11, -53<=l<=53 Prikupljene refleksije 23933
Nezavisne refleksije 3982 [R(int) = 0.0915]
Potpunost za teta = 67.679° 99.9 %
Korekcija apsorpcije empirijska
Postupak prečišćavanja uključeni najmanji kvadrati pune matrice na F<2>Podaci / ograničenja / parametri 3982 / 2 / 280
Goodness-of-fit on F<2>1.099
Konačni R indeksi [I>2sigma(I)] R1 = 0.0477, wR2 = 0.1033
R indeksi (sve vrednosti) R1 = 0.0609, wR2 = 0.1099
Parametar apsolutne strukture 0.01(19)
Koeficijent ekstinkcije 0.0043(6)
Najveći pik difrakcije i otvora 0.161 i -0.140 e.Å<-3>
12
(nastavlja se)
C(22) 9036(10) 8463(4) 5265(1) 83(1) C(23) 1888(8) 8475(4) 6085(1) 62(1)
Tabela 14 X-zraka. Dužine veze [Å] i uglovi [°] za Oblik 1
N(1)-C(7) 1.331(4) C(11)-C(14) 1.510(4)
N(1)-H(1X) 0.96(2) C(12)-C(13) 1.376(5)
N(1)-H(1Y) 0.95(2) C(12)-H(12) 0.9300
N(2)-C(15) 1.460(4) C(13)-H(13) 0.9300
N(2)-C(14) 1.466(4) C(14)-H(14A) 0.9700
N(2)-C(18) 1.469(4) C(14)-H(14B) 0.9700
N(3)-C(20) 1.346(4) C(15)-C(16) 1.498(6)
N(3)-N(4) 1.357(4) C(15)-H(15A) 0.9700
N(3)-C(23) 1.446(4) C(15)-H(15B) 0.9700
N(4)-C(21) 1.314(4) C(16)-C(17) 1.511(5)
O(1)-C(7) 1.229(4) C(16)-H(16A) 0.9700
O(2)-C(3) 1.383(4) C(16)-H(16B) 0.9700
O(2)-C(8) 1.396(4) C(17)-C(18) 1.535(5)
O(3)-C(21) 1.361(4) C(17)-H(17A) 0.9700
O(3)-C(22) 1.434(4) C(17)-H(17B) 0.9700
C(1)-C(2) 1.378(5) C(18)-C(19) 1.496(4)
C(1)-C(6) 1.381(4) C(18)-H(18) 0.9800
C(1)-H(1) 0.9300 C(19)-C(20) 1.362(4)
C(2)-C(3) 1.375(5) C(19)-C(21) 1.404(4)
C(2)-H(2) 0.9300 C(20)-H(20) 0.9300
C(3)-C(4) 1.375(5) C(22)-H(22A) 0.9600
C(4)-C(5) 1.386(4) C(22)-H(22B) 0.9600
C(4)-H(4) 0.9300 C(22)-H(22C) 0.9600
C(5)-C(6) 1.382(4) C(23)-H(23A) 0.9600
C(5)-H(5) 0.9300 C(23)-H(23B) 0.9600
C(6)-C(7) 1.492(4) C(23)-H(23C) 0.9600
C(8)-C(9) 1.356(5)
C(8)-C(13) 1.373(5) C(7)-N(1)-H(1X) 123(2)
12
(nastavlja se)
C(9)-C(10) 1.387(5) C(7)-N(1)-H(1Y) 117(2) C(9)-H(9) 0.9300 H(1X)-N(1)-H(1Y) 118(3) C(10)-C(11) 1.374(4) C(15)-N(2)-C(14) 112.5(3) C(10)-H(10) 0.9300 C(15)-N(2)-C(18) 104.8(2) C(11)-C(12) 1.377(5) C(14)-N(2)-C(18) 113.3(3) C(20)-N(3)-N(4) 111.9(3) C(11)-C(10)-C(9) 121.6(3) C(20)-N(3)-C(23) 128.5(3) C(11)-C(10)-H(10) 119.2 N(4)-N(3)-C(23) 119.5(3) C(9)-C(10)-H(10) 119.2 C(21)-N(4)-N(3) 103.2(2) C(10)-C(11)-C(12) 117.6(3) C(3)-O(2)-C(8) 119.2(2) C(10)-C(11)-C(14) 121.4(3) C(21)-O(3)-C(22) 115.6(3) C(12)-C(11)-C(14) 121.0(3) C(2)-C(1)-C(6) 121.1(3) C(13)-C(12)-C(11) 121.3(3) C(2)-C(1)-H(1) 119.4 C(13)-C(12)-H(12) 119.3 C(6)-C(1)-H(1) 119.4 C(11)-C(12)-H(12) 119.3 C(3)-C(2)-C(1) 119.4(3) C(8)-C(13)-C(12) 119.7(3) C(3)-C(2)-H(2) 120.3 C(8)-C(13)-H(13) 120.2 C(1)-C(2)-H(2) 120.3 C(12)-C(13)-H(13) 120.2 C(4)-C(3)-C(2) 120.7(3) N(2)-C(14)-C(11) 111.3(3) C(4)-C(3)-O(2) 123.0(3) N(2)-C(14)-H(14A) 109.4 C(2)-C(3)-O(2) 116.2(3) C(11)-C(14)-H(14A) 109.4 C(3)-C(4)-C(5) 119.4(3) N(2)-C(14)-H(14B) 109.4 C(3)-C(4)-H(4) 120.3 C(11)-C(14)-H(14B) 109.4 C(5)-C(4)-H(4) 120.3 H(14A)-C(14)-H(14B) 108.0 C(6)-C(5)-C(4) 120.7(3) N(2)-C(15)-C(16) 104.9(3) C(6)-C(5)-H(5) 119.6 N(2)-C(15)-H(15A) 110.8 C(4)-C(5)-H(5) 119.6 C(16)-C(15)-H(15A) 110.8 C(1)-C(6)-C(5) 118.7(3) N(2)-C(15)-H(15B) 110.8 C(1)-C(6)-C(7) 119.1(3) C(16)-C(15)-H(15B) 110.8 C(5)-C(6)-C(7) 122.2(3) H(15A)-C(15)-H(15B) 108.8 O(1)-C(7)-N(1) 121.8(3) C(15)-C(16)-C(17) 106.0(3) O(1)-C(7)-C(6) 121.6(3) C(15)-C(16)-H(16A) 110.5 N(1)-C(7)-C(6) 116.7(3) C(17)-C(16)-H(16A) 110.5
12
(nastavlja se)
C(9)-C(8)-C(13) 120.3(3) C(15)-C(16)-H(16B) 110.5 C(9)-C(8)-O(2) 118.1(3) C(17)-C(16)-H(16B) 110.5 C(13)-C(8)-O(2) 121.4(3) H(16A)-C(16)-H(16B) 108.7 C(8)-C(9)-C(10) 119.4(3) C(16)-C(17)-C(18) 104.9(3) C(8)-C(9)-H(9) 120.3 C(16)-C(17)-H(17A) 110.8 C(10)-C(9)-H(9) 120.3 C(18)-C(17)-H(17A) 110.8 C(16)-C(17)-H(17B) 110.8
C(18)-C(17)-H(17B) 110.8
H(17A)-C(17)-H(17B) 108.8
N(2)-C(18)-C(19) 112.4(2)
N(2)-C(18)-C(17) 102.9(3)
C(19)-C(18)-C(17) 114.4(3)
N(2)-C(18)-H(18) 109.0
C(19)-C(18)-H(18) 109.0
C(17)-C(18)-H(18) 109.0
C(20)-C(19)-C(21) 102.7(3)
C(20)-C(19)-C(18) 129.0(3)
C(21)-C(19)-C(18) 128.2(3)
N(3)-C(20)-C(19) 108.2(3)
N(3)-C(20)-H(20) 125.9
C(19)-C(20)-H(20) 125.9
N(4)-C(21)-O(3) 123.1(3)
N(4)-C(21)-C(19) 113.9(3)
O(3)-C(21)-C(19) 123.0(3)
O(3)-C(22)-H(22A) 109.5
O(3)-C(22)-H(22B) 109.5
H(22A)-C(22)-H(22B) 109.5
O(3)-C(22)-H(22C) 109.5
H(22A)-C(22)-H(22C) 109.5
H(22B)-C(22)-H(22C) 109.5
N(3)-C(23)-H(23A) 109.5
N(3)-C(23)-H(23B) 109.5
12
(nastavlja se)
H(23A)-C(23)-H(23B) 109.5
N(3)-C(23)-H(23C) 109.5
H(23A)-C(23)-H(23C) 109.5
H(23B)-C(23)-H(23C) 109.5
[0322] Transformacije simetrije koje se koriste za generisanje ekvivalentnih atoma:
12
(nastavlja se)
C(16) 157(5) 69(3) 53(2) -9(2) -6(3) -11(3) C(17) 120(4) 64(2) 36(2) -2(2) 5(2) 7(2) C(18) 65(2) 42(2) 43(2) 1(1) 14(2) 6(2) C(19) 51(2) 41(2) 38(2) 7(1) 6(1) 3(1) C(20) 56(2) 42(2) 44(2) 5(1) 7(2) -3(2) C(21) 49(2) 46(2) 38(2) 5(1) 5(1) 2(2) C(22) 108(4) 63(2) 78(3) 22(2) 35(3) -11(2) C(23) 64(2) 58(2) 63(2) -10(2) 8(2) 11(2)
[0323] Oblik 1 je kristalni oblik jedinjenja iz Primera 12. Oblik 1 se karakteriše modelom Raman spektra pokazanim na Slici 2. Raman spektar je dobijen koristeći Nicolet NXR FT-Raman dodatak vezan za FT-IR nosač. Spektrometar je opremljen sa 1064 nm Nd:YVO4 laserom i detektorom germanijuma hlađenim tečnim azotom. Pre uzimanja rezultata, performanse instrumenta i verifikacije kalibracije su izvedene pomoću polistirena. API uzorci su analizirani u staklenim NMR cevima koje su statične u toku sakupljanja spektra. Spektri su prikupljeni koristeći laser snage od 0.5 W i 512 pridodatih snimaka. Opseg sakupljanja je 3700-100 cm<-1>. Ovi spektri su beleženi koristeći 2 cm<-1>rezoluciju i Happ-Genzel apodizaciju. Koristeći prethodno navedeni Raman postupak, moguća varijabilnost povezana sa merenjem spektra je ± 2 cm<-1>. API uzorci su uzimani pod uslovima sredine (~23°C i između 30%-60%RH). Oblik 1 može da se čuva pod uslovima sredine (15-30°C i vlažnošću sredine).
[0324] Skala intenziteta je normalizovana na 1 pre izbora pika. Pikovi su ručno identifikovani koristeći Thermo Nicolet Omnic 9.7.46 softver. Pozicija pika je izabrana za maksimum pika i pikovi su identifikovani samo kao takvi, ukoliko postoji pad na svakoj strani; vrhovi na pikovima nisu uključeni. Za čist API tokom izbora pika je korišćen prag od 0,012 (Oblik 1) sa osetljivošću od 68-88. Za tablete za izbor pika je korišćen apsolutni prag od 0.046 do 0.052 sa osetljivošću od 64 do 67. Položaj pika je zaokružen na najbliži ceo broj koristeći standardnu praksu (0.5 se zaokružuje na gore, 0.4 se zaokružuje na dole). Pikovi sa normalizovanim intenzitetom pika između (1-0.75), (0.74-0.30), (0.29-0) su obeleženi kao jaki, srednji i slabi, tim redom.
[0325] Tabela 16 daje ukupnu listu Raman pikova za Oblik 1. Pikovi sa zvezdicom su jedinstveni za Oblik 1.
12
Tabela 16
1 (nastavlja se)
[0326] Oblik 1 se takođe karakteriše sa NMR čvrstog stanja (ssNMR) kako je pokazano na Slici 4. NMR analiza čvrstog stanja (ssNMR) je izvedena na CPMAS sondi pozicioniranoj u Bruker-BioSpin Avance III 500 MHz (<1>H frekvencija) NMR spektrometru. Materijal je smešten u 4 mm rotoru zatvorenim sa standardnim pogonskim zatvaračem. Rezultati su dobijeni na temperaturi sredine.<13>C ssNMR spektri su dobijeni korišćenjem eksperimenta sa protonskom razdvojenom unakrsnom polarizacijom sa okretanjem magičnog ugla (CPMAS). Korišćena je brzina okretanja magičnog ugla od 15.0 kHz. Tokom spektralne akvizicije je primenjeno fazno modulisano polje razdvajanja protona od 80-90 kHz. Vreme kontakta udvojene polarizacije je podešeno na 2 ms i ponavljanje je podešeno na 40 sekundi. Broj snimaka je podešen tako da se dobije adekvatan odnos signala i šuma. Skala hemijske promene ugljenika je predstavljena pomoću<13>C CPMAS eksperimenta na eksternom standardu kristalnog adamantana, postavljajući njegovu rezonancu uzlaznog polja na 29,5 ppm (kako je određeno iz čistog TMS).
[0327] Automatski izbor pika se izvodi na Bruker-BioSpin TopSpin version 3.5 softveru. Generalno, vrednost praga od 5% relativnog intenziteta se koristi za preliminarni izbor pika. Rezultat automatskog izbora pika se vizuelno proverava da se osigura validnost i proceni da li je potrebno ručno podešavanje. Mada su ovde zabeležene specifične vrednosti pika<13>C NMR čvrstog stanja, ovde postoji opseg za ove vrednosti pika zbog razlika u instrumentima, uzorcima i pripremi uzoraka. Ovo je česta praksa u tehnici NMR čvrstog stanja zbog varijacije svojstvene položajima pika. Tipična varijabilnost za vrednost<13>C hemijske promene x-ose je plus ili minus 1300.2 ppm za čvrsti kristal. Najveći ovde zabeleženi pikovi čvrstog
1 1
stanja su relativnog intenziteta. Intenziteti NMR čvrstog stanja mogu da variraju u zavisnosti od trenutno podešenih CPMAS eksperimentalnih parametara i toplotne istorije uzorka. Tabela 17 daje listu pikova<13>C NMR čvrstog stanja za Oblik 1. Pozicije pikova sa zvezdicom predstavljaju karakteristične pikove.
Tabela 17
1 2
Primeri 13, 14 i 15
(+/-)-4-(4-{[2-(3-Metoksi-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid (13), (-)-4-(4-{[2-(3-Metoksi-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid (ENT-1) (14) i (+)-4-(4-{[2-(3-Metoksi-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid (ENT-2) (15)
[0328]
[0329] Natrijum triacetoksiborhidrid (98%, 310 mg, 1.43 mmol) se doda u rastvor P6 (200 mg, 1.20 mmol) i C48 (288 mg, 1.19 mmol) u dihlormetanu (5 mL). Reaktivna smeša se meša u toku noći na sobnoj temperaturi a nakon toga se reakcija neutrališe dodavanjem 1 M vodenog rastvora natrijum hidroksida. Dobijena smeša se energično meša 15 minuta i vodeni sloj se ekstrahuje sa dihlormetanom. Kombinovani organski slojevi se suše preko natrijum sulfata, filtriraju i koncentruju pod vakuumom. Hromatografijom na silika gelu (gradijent: 0% do 10% metanol u etil acetatu) dobija se racemat 13 kao guma. Prinos racemata 13: 380 mg, 0.969 mmol, 81%. LCMS m/z 393.3 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.78 (br d, J=8.8 Hz, 2H), 7.41 (s, 1H), 7.31-7.25 (m, 2H, pretpostavljeno; delimično pokriven pikom rastvarača), 6.99 (br d, J=8.8 Hz, 2H), 6.97 (br d, J=8.6 Hz, 2H), 6.2-5.4 (v br m, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.91 (d, J=13.5 Hz, 1H), 3.39 (dd, J=7.8, 7.6 Hz, 1H), 3.14 (d, J=13.1 Hz, 1H), 3.10-3.02 (m, 1H), 2.25-2.11 (m, 2H), 1.95-1.73 (m, 3H).
1
[0330] Jedan deo 13 (290 mg, 0.739 mmol) se izdvoji u njegove sastavne enantiomere pomoću superkritične tečne hromatografije {kolona: Chiral Technologies Chiralcel OJ, 5 µm; mobilna faza: 7:3 ugljen dioksid / [metanol sadrži 0.2% (7 M rastvor amonijaka u metanolu)]}. Prvi eluirani enantiomer, dobijen kao žutomrka čvrsta supstanca koja ispoljava negativnu (-) rotaciju, je označen kao 14. Prinos: 72 mg, 0.183 mmol, 25% za razdvajanje. LCMS m/z 393.5 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.86 (br d, J=9.0 Hz, 2H), 7.47 (s, 1H), 7.30 (br d, J=8.6 Hz, 2H), 7.01-6.95 (m, 4H), 3.89 (s, 3H), 3.83 (d, J=12.9 Hz, 1H), 3.46-3.37 (m, 1H), 3.22 (d, J=12.9 Hz, 1H), 3.04-2.96 (m, 1H), 2.34-2.25 (m, 1H), 2.19-2.08 (m, 1H), 1.93-1.75 (m, 3H).
[0331] Drugi eluirani enantiomer, takođe dobijen kao žutomrka čvrsta supstanca, ispoljava pozitivnu (+) rotaciju i označen je kao 15. Prinos: 84 mg, 0.214 mmol, 29% za razdvajanje. LCMS m/z 393.5 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDsOD) δ 7.86 (br d, J=9.0 Hz, 2H), 7.48 (s, 1H), 7.30 (br d, J=8.6 Hz, 2H), 7.01-6.95 (m, 4H), 3.89 (s, 3H), 3.84 (d, J=12.9 Hz, 1H), 3.47-3.38 (m, 1H), 3.23 (d, J=12.9 Hz, 1H), 3.05-2.96 (m, 1H), 2.36-2.24 (m, 1H), 2.20-2.08 (m, 1H), 1.94-1.76 (m, 3H).
[0332] Po analitičkoj HPLC [kolona: Chiral Technologies Chiralcel OJ, 4.6 x 150 mm, 5 µm; mobilna faza A: ugljen dioksid; mobilna faza B: metanol sadrži 0.2% (7 M rastvor amonijaka u metanolu); gradijent: 5% B od 0 do 1.00 minut, 5% do 60% B za 8.00 minuta; brzina protoka: 3.0 mL/minut], 14 pokazuje vreme zadržavanja od 5.64 minuta. Koristeći isti sistem analize, 15 pokazuje vreme zadržavanja od 6.26 minuta.
Primeri 16, 17 i 18
(+/-)-4-(4-{[2-(1,3-Dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)-2-hidroksibenzamid (16), (+)-4-(4-{[2-(1,3-Dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)-2-hidroksibenzamid (ENT-1) (17) i (-)- 4-(4-{[2-(1,3-Dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)-2-hidroksibenzamid (ENT-2) (18)
[0333]
1 4
Faza 1. Sinteza 7-hidroksi-2,2-dimetil-4H-1,3-benzodioksin-4-ona (C50).
[0334] Trifluoroacetatni anhidrid (300 mL) i aceton (150 mL) se na 0 °C u kapima dodaju u suspenziju 2,4-dihidroksibenzojeve kiseline (55.0 g, 357 mmol) u trifluorosirćetnoj kiselini (500 mL) i reaktivna smeša se meša 3 dana na 25 °C. Isparive supstance se uklone pod vakuumom, ostatak se doda u zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata (500 mL) i dobijena smeša se ekstrahuje sa etil acetatom (3 x 500 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu po redu sa vodom (500 mL) i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida (500 mL), suše preko natrijum sulfata, filtriraju i koncentruju pod sniženim pritiskom. Trituriranjem sa dihlormetanom (200 mL) dobija se produkt kao bela čvrsta supstanca. Prinos: 41.0 g, 211 mmol, 59%. LCMS m/z 194.7 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDsOD) δ 7.73 (d, J=8.5 Hz, 1H), 6.58 (dd, J=8.5, 2.0 Hz, 1H), 6.35 (d, J=2.0 Hz, 1H), 1.69 (s, 6H).
Faza 2. Sinteza 4-[(2,2-dimetil-4-okso-4H-1,3-benzodioksin-7-il)oksi]benzaldehida (C51).
1
[0335] 4-Fluorobenzaldehid (21.1 g, 170 mmol) se u kapima na 20 °C dodaje u suspenziju C50 (30.0 g, 154 mmol) i kalijum karbonata (42.7 g, 309 mmol) u N,N-dimetilformamidu (500 mL). Reaktivna smeša se meša 4 dana na 80 °C i nakon toga 16 sati na 100 °C. U ovom trenutku, smeša se kombinuje sa sličnom reaktivnom smešom dobijenom od C50 (1.00 g, 5.15 mmol) i filtrira. Filtrat se koncentruje do sušenja pod vakuumom i ostatak se rastvori u etil acetatu (1 L) i ispere sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida (5 x 300 mL).
Organski sloj se suši preko natrijum sulfata, filtrira, koncentruje pod sniženim pritiskom i prečisti hromatografijom na silika gelu (gradijent: 10% do 50% etil acetat u petrol etru), da se dobije produkt kao žuta čvrsta supstanca. Kombinovani prinos: 32.0 g, 107 mmol, 67%.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.00 (s, 1H), 7.98 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.95 (brd, J=8.8 Hz, 2H), 7.22 (br d, J=8.8 Hz, 2H), 6.78 (dd, J=8.5, 2.3 Hz, 1H), 6.57 (d, J=2.3 Hz, 1H), 1.75 (s, 6H).
Faza 3. Sinteza 7-(4-{[2-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)-2,2-dimetil-4H-1,3-benzodioksin-4-ona (C52).
[0336] Trietilamin (4.84 mL, 34.7 mmol) se doda u smešu C43 (1.40 g, 6.94 mmol) i C51 (2.28 g, 7.64 mmol) u dihlormetanu (25 mL). Nakon 30 minuta mešanja dobijene smeše na sobnoj temperaturi, smeša se tretira sa natrijum triacetoksiborhidridom (98%, 3.00 g, 13.9 mmol). Reaktivna smeša se meša na sobnoj temperaturi u toku noći, nakon čega se pomoću LCMS analize otkriva da je glavni pik konzistentan sa produktom: LCMS m/z 448.3 [M+H]<+>. Reaktivna smeša se podeli između zasićenog vodenog rastvora natrijum bikarbonata i etil acetata. Nakon ekstrakcije vodenog sloja sa etil acetatom, kombinovani organski slojevi se suše preko natrijum sulfata, filtriraju i koncentruju pod vakuumom da se dobije produkt kao gusto ulje. Prinos: 3.10 g, 6.93 mmol, kvantitativan.
Faza 4. Sinteza (+/-)-4-(4-{[2-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)-2-hidroksibenzamida (16), (+)-4-(4-{[2-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)-2-hidroksibenzamida (ENT-1) (17), i
(-)-4-(4-{[2-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)-2-hidroksibenzamida (ENT-2) (18).
[0337] Smeša C52 (3.10 g, 6.93 mmol), koncentrovanog amonijum hidroksida (25 mL) i
1
rastvora amonijaka u metanolu (7 M, 25 mL) se zagreva na 50 °C u toku noći. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, reaktivna smeša se koncentruje da se ukloni metanol i nakon toga se pH podesi na neutralni dodavanjem koncentrovane hlorovodonične kiseline. Dobijena smeša se ekstrahuje sa etil acetatom i kombinovani organski slojevi se suše preko natrijum sulfata, filtriraju i koncentruju preko diatomejske zemlje. Hromatografijom na silika gelu (gradijent: 0% do 5% metanol u dihlormetanu) se dobije produkt kao beličasta pena. Prinos racemata 16:
2.70 g, 6.64 mmol, 96%. LCMS m/z 407.3 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 12.5-12.2 (v br s, 1H), 7.48 (d, J=8.6 Hz, 1H), 7.29-7.24 (m, 3H, pretpostavljeno; delimično pokriven pikom rastvarača), 6.95 (br d, J=8.6 Hz, 2H), 6.53 (dd, J=8.8, 2.5 Hz, 1H), 6.24 (br d, J=2 Hz, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.78 (d, J=12.9 Hz, 1H), 3.35-3.24 (m, 2H), 3.17-3.09 (m, 1H), 2.28-2.11 (m, 2H), 2.22 (s, 3H), 1.96-1.85 (m, 1H), 1.85-1.66 (m, 2H).
[0338] Razdvajanje 16 u njegove sastavne enantiomere se izvodi pomoću superkritične tečne hromatografije [kolona: Chiral Technologies Chiralcel OJ-H, 5 µm; mobilna faza: 85:15 ugljen dioksid / (metanol sadrži 0.2% amonijum hidroksid)]. Prvi eluirani enantiomer, dobijen kao penasta žutomrka čvrsta supstanca koja ispoljava pozitivnu (+) rotaciju, je označen kao 17. Prinos: 1.18 g, 2.90 mmol, 44% za razdvajanje. LCMS m/z 407.6 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 12.35 (br s, 1H), 7.48 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.33-7.19 (m, 3H, pretpostavljeno; delimično pokriven pikom rastvarača), 7.02-6.91 (m, 2H), 6.53 (dd, J=8.8, 2.4 Hz, 1H), 6.25 (br s, 1H), 3.86-3.72 (m, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.37-3.20 (m, 2H), 3.17-3.06 (m, 1H), 2.29-2.10 (m, 2H), 2.22 (s, 3H), 1.97-1.66 (m, 3H). Ovi NMR podaci su dobijeni više meseci nakon izdvajanja 17 i ispoljavaju proširene signale. Sinteza manjeg obima dala je sledeće podatke odmah nakon izolacije: LCMS m/z 407.0 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.37 (br s, 1H), 8.34-8.25 (br s, 1H), 7.84 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.84-7.79 (br s, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.30 (br d, J=8.5 Hz, 2H), 7.03 (br d, J=8.5 Hz, 2H), 6.44 (dd, J=9.0, 2.5 Hz, 1H), 6.27 (d, J=2.5 Hz, 1H), 3.75 (d, J=13.0 Hz, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.27 (dd, J=8.5, 7.5 Hz, 1H), 3.01 (d, J=13.0 Hz, 1H), 2.93-2.85 (m, 1H), 2.15 (s, 3H), 2.12-2.01 (m, 2H), 1.82-1.56 (m, 3H).
[0339] Drugi eluirani enantiomer se dalje prečisti hromatografijom na silika gelu (gradijent: 0% do 5% metanol u etil acetatu), da se dobije enantiomer kao čvrsta supstanca koja ispoljava negativnu (-) rotaciju. Ovaj materijal je označen kao 18. Prinos: 1.10 g, 2.71 mmol, 41% za razdvajanje. LCMS m/z 407.3 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.49 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.28-7.24 (m, 3H, pretpostavljeno; delimično pokriven pikom rastvarača), 6.95 (br d, J=8.6 Hz, 2H), 6.52 (dd, J=9.0, 2.3 Hz, 1H), 6.24 (d, J=2.3 Hz, 1H), 5.75-5.3 (v br s, 2H), 3.78 (d, J=12.9 Hz, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.31 (dd, J=8.2, 8.2 Hz, 1H), 3.26 (d, J=12.9 Hz, 1H), 3.15-3.08
1
(m, 1H), 2.26-2.10 (m, 2H), 2.22 (s, 3H), 1.96-1.84 (m, 1H), 1.84-1.66 (m, 2H).
[0340] Po analitičkoj HPLC (kolona: Chiral Technologies Chiralcel OJ-H, 4.6 x 250 mm, 5 µm; mobilna faza A: ugljen dioksid; mobilna faza B: metanol sadrži 0.2% amonijum hidroksid; gradijent: 5% B od 0 do 1.00 minut, 5% do 60% B za 8.00 minuta; brzina protoka: 3.0 mL/minut), 17 pokazuje vreme zadržavanja od 6.07 minuta. Koristeći isti sistem analize, 18 pokazuje vreme zadržavanja od 6.62 minuta.
Primer 19
3-Fluoro-4-(4-{[(2S)-2-(1-metil-1H-pirazol-3-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid (19)
[0341]
Faza 1. Sinteza 3-fluor-4-[4-(hidroksimetil)fenoksi]benzamida (C53).
[0342] Natrijum borhidrid (2.92 g, 77.2 mmol) se u porcijama na 0 °C dodaje u rastvor C47 (10.0 g, 38.6 mmol) u metanolu (200 mL). Reaktivna smeša se meša 30 minuta na 25 °C, nakon čega se doda zasićeni vodeni rastvor amonijum hlorida (50 mL) a metanol se ukloni koncentrovanjem pod vakuumom. Dobijena vodena suspenzija se filtrira i sakupljena čvrsta supstanca se ispere sa vodom (3 x 100 mL), da se dobije produkt kao bela čvrsta supstanca. Prinos: 9.95 g, 38.1 mmol, 99%. LCMS m/z 261.7 [M+H]<+>.
Faza 2. Sinteza 4-[4-(hlormetil)fenoksi]-3-fluorobenzamida (C54).
1
[0343] U rastvor C53 (9.95 g, 38.1 mmol) i trietilamina (38.5 g, 380 mmol) u tetrahidrofuranu (200 mL) se na 0 °C u kapima dodaje metansulfonil hlorid (43.6 g, 381 mmol). Reaktivna smeša se meša 18 sati na 25 °C, nakon čega se razblaži sa vodom (500 mL) i ekstrahuje sa etil acetatom (2 x 500 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu po redu sa vodom (2 x 500 mL) i zasićenim vodenim rastvorom natrijum hlorida (500 mL), suše preko natrijum sulfata, filtriraju i koncentruju pod vakuumom. Hromatografijom na silika gelu (gradijent: 0% do 50% etil acetat u petrol etru) se dobije produkt kao bela čvrsta supstanca. Prinos: 7.10 g, 25.4 mmol, 67%.<1>H NMR (400 MHz, CDsOD) δ 7.78 (dd, J=11.5, 2.0 Hz, 1H), 7.70 (ddd, J=8.5, 2.0, 1.0 Hz, 1H), 7.44 (br d, J=8.5 Hz, 2H), 7.11 (dd, J=8.5, 8.0 Hz, 1H), 7.01 (br d, J=8.5 Hz, 2H), 4.65 (s, 2H).
Faza 3. Sinteza 3-fluor-4-(4-{[(2S)-2-(1-metil-1H-pirazol-3-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamida (19).
[0344] Kalijum karbonat (521 mg, 3.77 mmol) i C54 (548 mg, 1.96 mmol) se dodaju u rastvor P7 (228 mg, 1.51 mmol) u N,N-dimetilformamidu (10 mL). Nakon 2 sata zagrevanja na 100 °C, reaktivna smeša se filtrira. Filtrat se direktno podvrgne prečišćavanju reverzno faznom HPLC (kolona: Phenomenex Gemini C18, 10 µm; mobilna faza A: 0.225% amonijum hidroksid u vodi; mobilna faza B: acetonitril; gradijent: 40% do 70% B) da se dobije produkt kao bela čvrsta supstanca. Prinos: 220 mg, 0.558 mmol, 37%. LCMS m/z 395.1 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, CDsOD) δ 7.76 (dd, J=11.5, 2.0 Hz, 1H), 7.67 (ddd, J=8.5, 2.0, 1.0 Hz, 1H), 7.53 (d, J=2.0 Hz, 1H), 7.28 (br d, J=8.5 Hz, 2H), 7.03 (dd, J=8.5, 8.5 Hz, 1H), 6.95 (br d, J=8.5 Hz, 2H), 6.33 (d, J=2.5 Hz, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.80 (d, J=12.6 Hz, 1H), 3.53-3.46 (m, 1H), 3.19 (d, J=13.0 Hz, 1H), 3.07-2.99 (m, 1H), 2.33-2.24 (m, 1H), 2.22-2.11 (m, 1H), 1.95-1.78 (m, 3H).
1
Tabela 18. postupak izrade, struktura i fizikohemijski podaci za Primere 20-46.
14
(nastavlja se)
(nastavlja se)
(nastavlja se)
14 (nastavlja se)
(nastavlja se)
14 (nastavlja se)
14 (nastavlja se)
14 (nastavlja se)
1. terc-butil 3-metoksimorfolin-4-karboksilat se izrađuje putem anodne oksidacije terc-butil morfolin-4-karboksilata u metanolu, u prisustvu tetraetilamonijum p-toluensulfonata (videti K. J. Frankowski i saradnici, Angew. Chem., Int. Ed.2015, 54, 10555-10558). Reakcijom sa
14
(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)litijumom (dobijenim iz tretmana C10 sa nbutillitijumom) u prisustvu bakar(I) bromid-dimetil sulfid kompleksa i bor trifluorid dietil eterata (videti S. Hanessian i saradnici, J. Org. Chem.2002, 67, 4261-4274) dobija se tercbutil 3-(3- metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)morfolin-4-karboksilat. Ovaj materijal se podvrgne reakciji sa vodonik hloridom da se dobije tražena 3-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)morfolin, hidrohloridna so.
2. Racematni produkt se razdvoji u svoje enantiomere pomoću superkritične tečne hromatografije (kolona: Phenomenex Lux Cellulose-1, 5 µm; mobilna faza: 85:15 ugljen dioksid / metanol). Primer 20 je prvi eluirani enantiomer. Na analitičkoj HPLC (kolona: Phenomenex Lux Cellulose-1, 4.6 x 100 mm, 5 µm; mobilna faza: 3:1 ugljen dioksid / metanol; brzina protoka: 1.5 mL/minut), Primer 20 pokazuje vreme zadržavanja od 3.52 minuta. Enantiomer Primera 20, 3-fluor-4-(4-{[3-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)morfolin-4-il]metil}fenoksi)benzamid, ENT-2, ima vreme zadržavanja od 3.78 minuta pod istim uslovima. Enantiomer Primera 20, LCMS m/z 441.2 [M+H]<+>, ispoljava sledeće biološke vrednosti: hKOR Ki 145 nM; hMOR Ki >564 nM.
3. U ovom slučaju, višak sirćetne kiseline se koristi u reakciji pre nego N,N-diizopropiletilamin.
4. 2-(3-Metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)piperidin, hidrohloridna so, se sintetiše koristeći postupak opisan u fusnoti 1, ali upotrebom terc-butil piperidin-1-karboksilata kao početnog materijala.
5. Racematni produkt se razdvoji u svoje enantiomere pomoću superkritične tečne hromatografije [kolona: Chiral Technologies Chiralpak AD-H, 5 µm; mobilna faza: 4:1 ugljen dioksid / (metanol sadrži 0.2% amonijum hidroksid)]. Primer 21 je prvi eluirani enantiomer. Na analitičkoj HPLC [kolona: Chiral Technologies Chiralpak AD-H, 4.6 x 100 mm, 5 µm; mobilna faza: 7:3 ugljen dioksid / (metanol sadrži 0.2% amonijum hidroksid)]; brzina protoka: 1.5 mL/minut), Primer 21 pokazuje vreme zadržavanja od 2.72 minuta. Enantiomer Primera 21, 4-(4-{[2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)piperidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid, ENT-2, ima vreme zadržavanja od 3.00 minuta pod istim uslovima. Enantiomer Primera 21, LCMS m/z 421.4 [M+H]<+>, ispoljava sledeće biološke vrednosti: hKOR Ki 15.5 nM; hMOR Ki 135 nM.
6. Ovaj Primer se sintetiše kao racemat; racematni produkt se razdvoji u svoje enantiomere pomoću superkritične tečne hromatografije (kolona: Phenomenex Lux Cellulose-1, 5 µm; mobilna faza: 4:1 ugljen dioksid / metanol). Primer 22 je prvi eluirani enantiomer. Na
14
analitičkoj HPLC (kolona: Phenomenex Lux Cellulose- 1, 4.6 x 100 mm, 5 µm; mobilna faza: 7:3 ugljen dioksid / metanol; brzina protoka: 1.5 mL/minut), Primer 22 pokazuje vreme zadržavanja od 4.07 minuta. Enantiomer Primera 22, 4-(2-fluor-4-{[3-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)morfolin-4-il]metil}fenoksi)benzamid, ENT-2, ima vreme zadržavanja od 4.50 minuta pod istim uslovima. Enantiomer Primera 22, LCMS m/z 441.2 [M+H]<+>, ispoljava sledeće biološke vrednosti: hKOR Ki 263 nM; hMOR Ki >564 nM.
7. Ovaj Primer se sintetiše kao racemat; racematni produkt se razdvoji u svoje enantiomere pomoću superkritične tečne hromatografije (kolona: Phenomenex Lux Cellulose-1, 5 µm; mobilna faza: 85:15 ugljen dioksid / metanol). Primer 23 je prvi eluirani enantiomer. Na analitičkoj HPLC (kolona: Phenomenex Lux Cellulose- 1, 4.6 x 100 mm, 5 µm; mobilna faza: 3:1 ugljen dioksid / metanol; brzina protoka: 1.5 mL/minut), Primer 23 pokazuje vreme zadržavanja od 4.30 minuta. Enantiomer Primera 23, 4-(4-{[3-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)morfolin-4-il]metil}fenoksi)benzamid, ENT-2, ima vreme zadržavanja od 4.82 minuta pod istim uslovima. Enantiomer Primera 23, LCMS m/z 423.2 [M+H]<+>, ispoljava sledeće biološke vrednosti: hKOR Ki 223 nM; hMOR Ki >564 nM.
8. Jedinjenja C10 i C32 reaguju i dalje se transformišu koristeći postupake opisane u Izradi P8, da se dobije traženi 4-(4-fluoropirolidin-2-il)-3-metoksi-1-metil-1H-pirazol.
9. Ovaj Primer se sintetiše kao racematna smeša cis i trans izomera; NMR podaci za ovu smešu:<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.78 (br d, J=8.8 Hz, 2H), 7.33-7.27 (m, 3H), 7.02-6.95 (m, 4H), [5.03-4.97 (m) i 4.91-4.86 (m), JHF=55 Hz, ukupno 1H], 6.2-5.5 (v br m, 2H), 3.96-3.91 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.76 (s, 3H), 3.40-3.30 (m, 1H), 3.16-3.08 (m, 2H), 2.35-2.21 (m, 1H), 2.18-2.04 (m, 2H). Ovaj materijal se razdvoji u svoje sastavne racematne izomere pomoću superkritične tečne hromatografije [kolona: Phenomenex Lux Cellulose-4, 5 µm; mobilna faza: 65:35 ugljen dioksid / (0.2% amonijum hidroksid u metanolu)], da se dobije Primer 24 kao drugi eluirani izomer. Za Primer 24 se pretpostavlja da je ili cis ili trans racematni produkt, ali mu nije dodeljena stereohemija. Na analitičkoj HPLC [kolona:
Phenomenex Lux Cellulose-4, 4.6 x 100 mm, 5 µm; mobilna faza: 1:1 ugljen dioksid / (0.2% amonijum hidroksid u metanolu); brzina protoka: 1.5 mL/minut], Primer 24 pokazuje vreme zadržavanja od 4.71 minuta. Racematni izomer Primera 24 ima vreme zadržavanja od 3.71 minuta pod istim uslovima. Izomer Primera 24, LCMS m/z 425.2 [M+H]<+>, ispoljava sledeće biološke vrednosti: hKOR Ki 36.3 nM; hMOR Ki 1210 nM.
10. Primeri 25 i 26 su sintetizovani kao pretpostavljene racematne smeše cis i trans izomera. Razdvajanje se izvodi pomoću superkritične tečne hromatografije [kolona: Chiral
1
Technologies Chiralcel OJ-H, 5 µm; mobilna faza: 85:15 ugljen dioksid / (metanol sadrži 0.3% amonijum hidroksid)], ali su izdvojena samo dva od 4 moguća izomera. Primer 25 eluira pre Primera 26.
11. Redukcijom C51 sa natrijum borhidridom dobija se 7-[4-(hidroksimetil)fenoksi]-2,2-dimetil-4H-1,3-benzodioksin-4-on, koji se konvertuje u 7-(4-{[(2S)-2-(1,3-dimetil-1H-pirazol-5-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)-2,2-dimetil-4H-1,3-benzodioksin-4-on koristeći opšte postupke opisane u Primeru 19. Narednom reakcijom sa vodenim rastvorom amonijum hidroksida u 1,4-dioksanu na povišenoj temperaturi dobija se Primer 27.
12. 4-Hidroksi-4-metilpirolidin-2-on se konvertuje u terc-butil 4-metil-2-okso-2,5-dihidro-1H-pirol-1-karboksilat tretmanom sa di-terc-butil dikarbonatom i 4-(dimetilamino)piridinom. Redukcijom sa natrijum borohidridom i nikl(II) hloridom se nakon toga dobija terc-butil 4-metil-2-oksopirolidin-1-karboksilat, koji reaguje sa C10 i dalje transformiše, koristeći opšte postupke opisane u Izradi P8, da se dobije traženi 3- metoksi-1-metil-4-(4-metilpirolidin-2-il)-1H-pirazol.
13. Primeri 28 do 31 su sintetizovani kao racematna smeša geometrijskih izomera. Četiri komponente se razdvoje pomoću superkritične tečne hromatografije [kolona: Phenomenex Lux Cellulose-3, 5 µm; mobilna faza: 4:1 ugljen dioksid / (etanol sadrži 0.2% amonijum hidroksid)].
[0345] Na analitičkoj HPLC (kolona: Phenomenex Lux Cellulose-3, 4.6 x 250 mm, 5 µm; mobilna faza A: ugljen dioksid; mobilna faza B: etanol sadrži 0.2% amonijum hidroksid; gradijent: 5% B za 1.0 minut, nakon toga 5% do 60% B za 8.0 minuta; brzina protoka: 3.0 mL/minut), Primer 28 pokazuje vreme zadržavanja od 5.29 minuta i Primer 31 ima vreme zadržavanja od 4.88 minuta.
[0346] Smeša Primera 29 i 30 eluirana između Primera 28 i 31; ova smeša se izdvoji koristeći superkritičnu tečnu hromatografiju {kolona: Princeton Metansulfonamid, 5 µm; mobilna faza: 9:1 ugljen dioksid / [metanol sadrži 0.2% (7 M rastvor amonijaka u metanolu)]}. Prvi eluirani izomer iz ove kolone je Primer 29, a nakon toga Primer 30. Na analitičkoj HPLC [kolona: Princeton Metansulfonamid, 4.6 x 150 mm, 5 µm; mobilna faza A: ugljen dioksid; mobilna faza B: metanol sadrži 0.2% (7 M rastvor amonijaka u metanolu); gradijent: 5% B za 1.0 minut, nakon toga 5% do 60% B za 8.0 minuta; brzina protoka: 3.0 mL/minut], Primer 29 pokazuje vreme zadržavanja od 5.12 minuta i Primer 30 ima vreme zadržavanja od 5.34 minuta.
1 1
[0347] 14. Ovaj Primer se sintetiše kao racemat; racematni produkt se razdvoji u svoje enantiomere pomoću superkritične tečne hromatografije [kolona: Chiral Technologies Chiralpak IC, 5 µm; mobilna faza: 85:15 ugljen dioksid / (metanol sadrži 0.2% amonijum hidroksid)]. Primer 32 je drugi eluirani enantiomer. Na analitičkoj HPLC [kolona: Chiral Technologies Chiralpak AD-H, 4.6 x 100 mm, 5 µm; mobilna faza: 3:1 ugljen dioksid / (metanol sadrži 0.2% amonijum hidroksid); brzina protoka: 1.5 mL/minut], Primer 32 pokazuje vreme zadržavanja od 3.53 minuta. Enantiomer Primera 32, 4-(2-fluor-4-{[2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid, ENT-1, ima vreme zadržavanja od 3.13 minuta pod istim uslovima. Enantiomer Primera 32, LCMS m/z 425.3 [M+H]<+>, ispoljava sledeće biološke vrednosti: hKOR Ki 0.629 nM; hMOR Ki 13.7 nM.
[0348] 15. Pretposlednje jedinjenje u sintezi, 7-(4-{[2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)-2,2-dimetil-4H-1,3-benzodioksin-4-on, se deprotektuje tretmanom sa amonijakom u metanolu da se dobije racemat Primera 33.
[0349] 16. Ovaj Primer se sintetiše kao racemat; racematni produkt se razdvoji u svoje enantiomere pomoću superkritične tečne hromatografije [kolona: Chiral Technologies Chiralcel OJ, 5 µm; mobilna faza: 7:3 ugljen dioksid / (etanol sadrži 0.1% amonijum hidroksid)]. Primer 33 je drugi eluirani enantiomer. Na analitičkoj HPLC [kolona: Chiral Technologies Chiralcel OJ, 5 µm; mobilna faza: 7:3 ugljen dioksid / (metanol sadrži 0.05% dietilamin)], Primer 33 pokazuje vreme zadržavanja od 5.38 minuta. Enantiomer Primera 33, 2-hidroksi- 4-(4-{[2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid, ENT-1, ima vreme zadržavanja od 4.88 minuta pod istim uslovima. Enantiomer Primera 33, LCMS m/z 423.2 [M+H]<+>, ispoljava sledeće biološke vrednosti: hKOR Ki 28.7 nM; hMOR Ki 308 nM.
[0350] 17. U ovom slučaju, za reduktivnu aminaciju se koristi titanijum(IV) izopropoksid umesto natrijum acetata.
[0351] 18. Racematni produkt se razdvoji u svoje enantiomere pomoću superkritične tečne hromatografije [kolona: Chiral Technologies Chiralpak AD, 10 µm; mobilna faza: 45:55 ugljen dioksid / (etanol sadrži 0.05% amonijum hidroksid)]. Primer 35 je prvi eluirani enantiomer. Na analitičkoj HPLC (kolona: Chiral Technologies Chiralpak AD-3, 4.6 x 50 mm, 3 µm; mobilna faza A: ugljen dioksid; mobilna faza B: 0.05% dietilamin u 2-propanolu; gradijent: 5% B za 0.2 minuta, nakon toga 5% do 40% B za 1.4 minuta, nakon toga zadržavanje na 40% B; brzina protoka: 4 mL/minut), Primer 35 pokazuje vreme zadržavanja od 1.77 minuta. Enantiomer Primera 35, 4-(4-{[2-(1,5-dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-
1 2
il]metil}fenoksi)-3-fluorobenzamid, ENT-2, ima vreme zadržavanja od 1.91 minuta pod istim uslovima. Enantiomer Primera 35, LCMS m/z 409.0 [M+H]<+>, ispoljava sledeće biološke vrednosti: hKOR 92.8 Ki nM; hMOR Ki 245 nM.
[0352] 19. Uslovi za analitičku HPLC. Kolona: Waters Atlantis dC18, 4.6 x 50 mm, 5 µm; mobilna faza A: 0.05% trifluorosirćetna kiselina u vodi (v/v); mobilna faza B: 0.05% trifluorosirćetna kiselina u acetonitrilu (v/v); gradijent: 5.0% do 95% B, linearno u toku 4.0 minuta; brzina protoka: 2 mL/minut.
[0353] 20. Smeša terc-butil pirolidin-1-karboksilata i (1S,2S)-N,N’-bis(3,3-dimetilbutil)-N,N’-dimetilciklo heksan-1,2-diamina se tretira sa s-butillitijumom. Naknadnim dodavanjem cink hlorida se dobijaju cinkatne vrste, koje reaguju sa 4-bromo-1,3,5-trimetil-1H-pirazolom u prisustvu bis(tri-terc-butilfosfin) paladijuma(0). Uklanjanjem zaštitne grupe sa trifluorosirćetnom kiselinom dobija se traženi 1,3,5-trimetil-4-(pirolidin-2-il)-1H-pirazol.
[0354] 21. U 4-Bromo-2,5-dimetil-2H-1,2,3-triazol se uvodi litijum pomoću n-butillitijuma i reaguje sa terc-butil 2-oksopirolidin-1-karboksilatom, da se dobije terc-butil [4-(2,5-dimetil-2H-1,2,3-triazol-4-il)-4-oksobutil]karbamat. Tretmanom sa vodonik hloridom dolazi do deprotekcije i ciklizacije da se dobije 4-(3,4-dihidro-2H-pirol-5-il)-2,5-dimetil-2H-1,2,3-triazol, koji se direktno podvrgne reduktivnoj aminaciji sa odgovarajućim aldehidom.
[0355] 22. Racematni produkt se razdvoji u svoje enantiomere pomoću superkritične tečne hromatografije [kolona: Chiral Technologies Chiralpak AD-H, 5 µm; mobilna faza: 3:1 ugljen dioksid / (metanol sadrži 0.2% amonijum hidroksid)]. Primer 38 je drugi eluirani enantiomer. Na analitičkoj HPLC [kolona: Chiral Technologies Chiralpak AD-H, 4.6 x 100 mm, 5 µm; mobilna faza: 7:3 ugljen dioksid / (metanol sadrži 0.2% amonijum hidroksid); brzina protoka 1.5 mL/minut], Primer 38 pokazuje vreme zadržavanja od 4.20 minuta. Enantiomer Primera 38, 4-(4-{[2-(2,5- dimetil-2H-1,2,3-triazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid, ENT-1, ima vreme zadržavanja od 3.54 minuta pod istim uslovima. Enantiomer Primera 38, LCMS m/z 392.4 [M+H]<+>, ispoljava sledeće biološke vrednosti: hKOR Ki >119 nM; hMOR Ki 252 nM.
[0356] 23. Racematni produkt se razdvoji u svoje enantiomere superkritičnom tečnom hromatografijom, koristeći iste uslove kao što je opisano u fusnoti 22. Primer 39 je drugi eluirani enantiomer. Na analitičkoj HPLC, koristeći isti HPLC sistem upotrebljen u fusnoti 22, Primer 39 pokazuje vreme zadržavanja od 3.44 minuta. Enantiomer Primera 39, 4-(4-{[2-(2,5-dimetil-2H-1,2,3-triazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}-2-fluorofenoksi)benzamid, ENT-1, ima vreme zadržavanja od 2.99 minuta pod istim uslovima. Enantiomer Primera 39, LCMS m/z
1
410.4 [M+H]<+>, ispoljava sledeće biološke vrednosti: hKOR Ki 74.5 nM; hMOR Ki 132 nM.
[0357] 24. U ovom slučaju, reduktivna aminacija se izvodi koristeći natrijum cijanoborhidrid i sirćetnu kiselinu.
[0358] 25. Uslovi za analitičku HPLC. Kolona: Restek C18, 2.1 x 30 mm, 3 µm; mobilna faza A: 0.05% mravlja kiselina u vodi (v/v); mobilna faza B: acetonitril (v/v); gradijent: 2% B za 0.75 minuta, nakon toga 2% do 10% B za 0.25 minuta, nakon toga 10% do 98% B za 1.0 minut; brzina protoka: 1.5 mL/minut).
[0359] 26. Reakcijom terc-butil 2-karbamoilpirolidin-1-karboksilata sa Lawesson-ovim reagensom (2,4-bis(4-metoksi-fenil)-1,3,2,4-ditiadifosfetan-2,4-dition) se dobija terc-butil 2-karbamotioilpirolidin-1-karboksilat, koji se tretira sa 1,1-dimetoksi-N,N-dimetiletanaminom da se dobije terc-butil 2-{[(1E)-1-(dimetilamino) etiliden]karbamotioil}pirolidin-1-karboksilat. Naknadnom reakcijom sa hidroksil amin-O-sulfonskom kiselinom, a nakon toga uklanjanjem zaštitne grupe sa vodonik hloridom u 1,4-dioksanu, dobija se traženi 3-metil-5-(pirolidin-2-il)-1,2,4-tiadiazol.
[0360] 27. U ovom slučaju, reduktivna aminacija se vrši koristeći natrijum cijanoborhidrid uz dodavanje trietilamina i magnezijum sulfata.
[0361] 28. Racematni produkt se razdvoji u svoje enantiomere pomoću superkritične tečne hromatografije [kolona: Chiral Technologies Chiralcel OJ-H, 5 µm; mobilna faza: 3:1 ugljen dioksid / (etanol sadrži 0.1% amonijum hidroksid)]. Primer 41 je drugi eluirani enantiomer. Na analitičkoj HPLC (kolona: Chiral Technologies Chiralpak AD-3, 4.6 x 100 mm, 3 µm; mobilna faza A: ugljen dioksid; mobilna faza B: 0.05% dietilamin u metanolu; gradijent: 5% do 40% B za 4.5 minuta, nakon toga 40% B za 2.5 minuta; brzina protoka: 2.8 mL/minut), Primer 41 pokazuje vreme zadržavanja od 6.00 minuta. Enantiomer Primera 41, 4-(4-{[2-(3-metil-1,2,4-tiadiazol-5-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid, ENT-1, ima vreme zadržavanja od 5.43 minuta pod istim uslovima. Enantiomer Primera 41, LCMS m/z 394.9 [M+H]<+>, ispoljava sledeće biološke vrednosti: hKOR Ki >388 nM; hMOR Ki >558 nM.
[0362] 29. Deprotekcija P10 se izvodi koristeći vodonik hlorid u etil acetatu i metanolu, pre nego što se izvede reduktivna aminacija.
[0363] 30. Primer 43 se izdvoji reverzno-faznom HPLC (kolona: Dikma Technologies Diamonsil, 4 µm; mobilna faza A: 0.225% mravlja kiselina u vodi; mobilna faza B: acetonitril; gradijent: 17% do 37% B). Indikovana regiohemija metil grupa u produktu je podržana NOE studijama.
[0364] 31. Traženi 3-metoksi-1-metil-5-(pirolidin-2-il)-1H-pirazol se sintetiše iz metil 2-
1 4
metil-5-okso-2,5-dihidro-1H-pirazol-3-karboksilata, koristeći postupak opisan u Izradi P6 za konverziju C18 u C25. U ovom slučaju, konačno uklanjanje benziloksikarbonil grupe se vrši sa paladijumom na ugljeniku i trietilsilanom.
[0365] 32. Racematni produkt se razdvoji u svoje enantiomere pomoću superkritične tečne hromatografije [kolona: Chiral Technologies Chiralcel OJ-H, 5 µm; mobilna faza: 87:13 ugljen dioksid / (metanol sadrži 0.2% amonijum hidroksid)]. Primer 46 je drugi eluirani enantiomer. Na analitičkoj HPLC [kolona: Phenomenex Lux Cellulose- 3, 4.6 x 100 mm, 5 µm; mobilna faza: 4:1 ugljen dioksid / (metanol sadrži 0.2% amonijum hidroksid); brzina protoka: 1.5 mL/minut], Primer 46 pokazuje vreme zadržavanja od 3.57 minuta. Enantiomer Primera 46, 4-(4-{[2-(3- metoksi-1-metil-1H-pirazol-5-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid, ENT-1, ima vreme zadržavanja od 3.03 minuta pod istim uslovima. Enantiomer Primera 46, LCMS m/z 407.2 [M+H]<+>, ispoljava sledeće biološke vrednosti: hKOR Ki 111 nM; hMOR Ki 120 nM.
[0366] 33. Ove NMR vrednosti su dobijene na racematu Primera 46.
[0367] Naredna ispitivanja su korišćena za generisanje bioloških podataka kako je dato u Tabelama 6-11 koje su niže navedene.
[0368] Ispitivanje kapa i mu radioligand vezivanja: ispitivanje vezivanja na membranama CHO ćelija na kojima se ekspresuju humani kapa ili mu opioidni receptori se izvodi u skladu sa standardnim procedurama. Zamrznuta ćelijska pasta se homogenizuje u 50 mM Tris HCl puferu (pH 7.4 @ 4 stepena C) koji sadrži 2.0 mM MgCl2koristeći Polytron i centrifugira deset minuta pri 40,000g. Finalni pelet se resuspenduje u puferu za analizu (50 mM Tris HCl pufer, pH 7.4, koji sadrži 1 mM EDTA, 5 mM MgCl2). Inkubacije se započinju dodavanjem membrana u ploče sa 96 udubljenja u kojima se nalaze test lekovi i [3H]diprenofrin (0.6nM finalna koncentracija za kapa opioidni receptor i 0.5nM finalna koncentracija za mu) u finalnoj zapremini od 250 µl. Nespecifično vezivanje se određuje vezivanjem radioliganda u prisustvu zasićene koncentracije naltreksona (10 µM). Nakon jedan sat perioda inkubacije na sobnoj temperaturi, uzorci za analizu se brzo filtriraju kroz PEl obložene, GF/B pečene Unifilter ploče (PerkinElmer) i isperu sa ledeno hladnim 50 mM Tris puferom (pH 7.4). Nivo membrana sa vezanim [3H]diprenofrinom se određuje brojanjem tečnom scintilacijom filterploča u Ecolume scintilacionoj tečnosti. IC50vrednost (koncentracija pri kojoj dolazi do 50% inhibicije specifičnog vezivanja) se izračunava koristeći logaritamski 4 parametarski model podataka za koncentraciju-odgovor. Kivrednosti su izračunate u skladu sa Cheng Prusoff jednačinom, Ki= IC50/(1 (L/Kd)), gde je L koncentracija radioliganda korišćenog u
1
eksperimentu a Kdvrednost je konstanta disocijacije za radioligand (prethodno određena analizom zasićenja).
Životinje
[0369] Odrasli mužjaci C576BL/J6 miševa od Jackson Labs (Bar Harbor, ME) su minimum 7 dana pre upotrebe zajedno smešteni na pojedinačno ventilirane police kaveza u odajama za životinje sa kontrolisanom sredinom (svetlo/tama-6:00 am/6:00 pm). Za progresivni nivo studija, miševima je hrana ograničena na 80 - 85% njihove telesne težine pre početka testiranja. Sve procedure na životinjama su odobrene od strane Pfizer Inc. IACUC i sprovedene u skladu sa NIH vodičem za brigu i upotrebu laboratorijskih životinja.
Odgovarajući progresivni odnos:
[0370] Motivacija i operantno ponašanje uzrokovano hranom su procenjeni u testu progresivnog odnosa. Odraslim mužjacima C576BL/J6 miševa je hrana ograničena na 80-85% od njihove telesne težine u toku jedne nedelje i držani su u svojim kavezima. Miševi su trenirani da zabadaju nos za hranu kao nagradu. Pelete sa nagradnom hranom su deljene po rasporedu progresivnog odnosa tako da je jedno guranje nosa rezultiralo prvom nagradom, druga nagrada je davana samo nakon 3 zabadanja nosa, a treća nakon 7 zabadanja nosa i tako dalje. Miševi su procenjivani u cesijama od 60 minuta, pri čemu je broj dobijenih nagrada korišćen kao surogat nivoa motivacije. Kada je miš jednom dostigao stabilan nivo odgovora, doziran mu je agonist kapa opioidnog receptora, spiradolin (3.2 mg/kg s.c.), za indukovanje smanjenja motivacije. Na miševima su istovremeno primenjene povećane doze antagonista kapa opioidnog receptora (0.0032-3.2 mg/kg s.c.) za procenu njihove sposobnosti da antagoniziraju deficit indukovan spiradolinom.
Okupiranost receptora in vivo
[0371] Okupiranost receptora in vivo se ispituje na odraslim mužjacima C57BL6/J miševa. Na miševima je primenjena povećana doza (0.001 - 32 mg/kg s.c.) 30 min pre primene liganda kapa opioidnog receptora, [3H]GR103545 (100 µCi/kg, intraorbitalno). Životinje su 10 min kasnije eutanazirane cervikalnom dislokacijom i mozak je izvađen. Po jedna hemisfera
1
se ostavi na -40 °C za naredna merenja koncentracije jedinjenja, a druga se homogenizuje u ledenom Tris-HCl puferu (50 mM, pH 7.4; 1:10 m/v) u toku dvadeset sekundi. Uzorci homogenata mozga se filtriraju kroz 0.3 do 0.5% PEI-obloženim GF/B filtere i filteri dva puta isperu sa ledenim puferom pre brojanja radioaktivnosti u toku noći pomoću brojača scintilacije. Vezivanje liganda u cerebelumu se koristi za određivanje nespecifičnog vezivanja.
[0372] In Vitro određivanje unutrašnjeg mikrozomalnog klirensa ljudske jetre: jedinjenja su pripremljena kao rastvori u metanolu. Finalna koncentracija metanola u medijumu za inkubaciju je 0.2% (v/v). In vitro t1/2svakog jedinjenja je određena u triplikatu inkubacijom sa sadržajem substrata (2 µM) sa mikrozomima ljudske jetre (P450 koncentracija, 0.25 µM) u 0.1 M kalijum fosfatnom puferu (pH 7.4) na 37°C. Ukupna zapremina inkubacije je 1 mL. Reaktivna smeša se prethodno zagreva 2 min na 37°C a nakon toga doda NADPH (1.2 mM). Alikvote (75 µL) reaktivne smeše se za 0, 5, 10, 15 i 30 min dodaju u acetonitril (200 µL) koji sadrži unutrašnji standard (terfenadin)(0.05 µg/mL) i uzorci se centrifugiraju 5 min pri 2500g a nakon toga se za svako jedinjenje izvrši analiza tečnom hromatografijom/tandem masenom spektrometrijom (LC/MS-MS) praćenjem višestrukih reakcija (MRM). Za kontrolu eksperimenata, NADPH je izostavljen iz ovih inkubacija.
[0373] Polu-život mikrozoma (t1/2) se dobija od logaritma linearnog prikaza pražnjenja substrata u odnosu na vreme inkubacije i izradi skala unutrašnjeg hepatičkog klirensa (CLint) po sledećoj jednačini, gde se t1/2ondosi na in vitro polu-život:
[0374] Uslovi ispitivanja IC50DDI koktela u više tačaka: substrati aktivnosti standardnog markera su inkubirani sa dobijenim mikrozomima ljudske jetre (HL-MIX-102) u prisustvu NADPH (1.2 mM) u 100 mM KH2PO4, pH 7.4 koji sadrži 3.3 mM MgCl2na 37 °C.
Zapremina inkubacije je 0.1 mL, koristeći format ploče sa 384 udubljenja. Koncentracije mikrozomalnog proteina (0.1 mg/mL) i koncentracija P450 (0.035 µM) se koristi za podlogu svakog substrata pri sledećim koncentracijama [takrine (1A2) 2 uM; diklofenak (2C9) 5 µM; dekstrometorfan (2D6) 5 µM; midazolam (3A4) 2 µM; taksol (2C8) 5 µM; S-mefenitoin
1
(2C19) 40 µM]. Koncentracije substrata su bliske Km vrednostima koje su pretnodno određene a vremena inkubacije su izabrana na osnovu određivanja linearnosti brzine reakcije. Svako test jedinjenje/prototipni inhibitor je testirano u koncentraciji u rasponu od 0-30 µM u triplikatu, u finalnom vehikulumu uz koncentraciju rastvarača od 0.9% acetonitrila i 0.1% DMSO. inkubacije su inicirane dodavanjem NADPH. Po završetku perioda inkubacije, doda se rastvarač za prekid reakcije koji sadrži unutrašnji standard, smeša završene inkubacije se centrifugira da precipitira mikrozomalni protein. Uzorci se direktno injektuju na HPLC-MS/MS sistem. Biomek FX radna stanica je korišćena za rukovanje tečnostima i inkubaciju uzorka.
Ispitivanje inhibicije u zavisnosti od jedne vremenske tačke (SPTDI):
Zimmerlin i saradnici Drug Metabolism i Disposition 39(6), 1039-1046 (2011)
[0375] Cilj ove studije je da ispita potencijal serija karboksamida da budu vremenski zavisni inaktivatori CYP3A izozima, in vitro, koristeći midazolam i testosteron kao probne substrate za aktivnost CYP 3A4/5 inkubirane sa dobijenim mikrozomima ljudske jetre (HLM).
Dobijeni HLMs (0.1-1.0 mg/ml) se prethodno inkubiraju sa pojedinačnim karboksamidima sa početnim koncentracijama substrata od 6 ili 10 µM u prisustvu i bez prisustva NADPH (1.3 mM). Preinkubacije (n =2/jedinjenje) se izvode u toku 30 min na 37°C. Nakon preinkubacije se doda 10-puta razblaženi inkubat (0.02 ml) u inkubat probnog substrata (0.18 ml) koji sadrži određeni probni substrat P450 izozima (midazolam ili testosteron za CYP3A, 1uM) i inkubira na 37°C. Kombinovane reakcije inkubacije se prekidaju i analiziraju za aktivnost marker substrata (primer: hidroksil metabolit midazolama i 6β hidroksi testesterona) kako je prethodno opisano (Walsky and Obach, 2004; Obach i saradnici, 2007). Smeše zaustavljenih inkubacija se filtriraju i analiziraju tečnom hromatografijom (LC)-tandem masenom spektrometrijom (MS/MS) na metabolite kako je prethodno opisano (Walsky and Obach, 2004). Za određivanje kobs,appvrednosti, smanjenje prirodnog logaritma aktivnosti u odnosu na vreme se zabeleži za svaku koncentraciju inaktivatora a kobs,appvrednosti su opisane kao negativni nagibi linija. Kinetički parametri inaktivacije su određeni preko nelinearne regresije rezultata za ekspresiju u jednačini 1:
1
Statistički značaj kobsizmeđu rastvarača i test inkubacija je izveden preko analiza koje su dali Yates i saradnici. (Yates P, Eng H, Di L, Obach RS. Drug Metab Dispos 2012;40:2289-96).
[0376] Ispitivanje transformisanog endotelijuma ljudske jetre (THLE): smanjenje ATP se meri nakon 72 sata izlaganja određenoj koncentraciji hemikalija. Detaljnije, THLE-2 (transformisani epitel ljudske jetre) ćelije su dobijene od ATCC (CRL-2706 ili CRL-10149) i uzgajane u skladu sa preporukom ATCC. Medijum se sastoji od bazalnog medijuma (BEGM Bullet Kit, Lonza Cat#: CC-3170), obogaćenog sa 10% seruma fetusa govečeta (Sigma Cat# :F4135) i 2.5ng/l hEFG (BD Biosciences Cat#: 356052) i 700 ng/L fosfoetanolamina (Sigma Cat#: p-0503). Ćelije se uzgajaju u bocama obloženim sa T175 humanim fibronektinom/kolagenom/albuminom seruma govečeta. Za svaki eksperiment, ćelije se prenesu u ploče sa 384 udubljenja (384 obložene sa humanim fibronektinom/kolagenom/albuminom seruma govečeta, po porudžbini, BD Biosciences Cat#: 359298) uz gustinu ćelija od 2.5 x 10<3>/udubljenje u ukupnoj zapremini medijuma od 25 µl/udubljenje. Ploče se inkubiraju 24 sata na 37 °C, 5% CO2.
[0377] Ploče sa test jedinjenjem se pripreme koristeći protokole 10 doza, 2.0 puta razblaženje sa finalnom koncentracijom za analizu u rasponu od 300 - 0.058 µM. Sva jedinjenja su na početku solubilizirana u 100% DMSO. Ova šema doziranja sadrži 32 jedinjenja po ploči. Osnovne ploče su pripremljene koristeći 1 µl alikvote od 100x jedinjenje/udubljenje (30 mM -0.058 mM). Za doziranje se ploče pripreme dodavanjem 99 µl medijuma sa ćelijskom kulturom i mešanjem. Test jedinjenja se dodaju u ploče sa ćelijskom kulturom usisavanjem medijuma sa kulturom u toku noći i zamenom sa 25 µL/udubljenje medijuma koji sadrži test jedinjenje koristeći postupak koji je niže naveden. Finalna koncentracija DMSO u svakom udubljenju je 1.0%. Nakon 72 sata izlaganja test jedinjenjima, u svakom udubljenju odredi se vitalnost ćelije merenjem koncentracije celularnog ATP koristeći Lonza VialightTM Plus Cell Proliferation / Cytoxicity Kit (Lonza cat: LT07-121) u skladu sa protokolom proizvođača. Koncentracija ATP se određuje očitavanjem luminescencije pomoću Wallac Envision čitača ploča (Perkin Elmer, Waltham, Massachusetts, USA). Za svako udubljenje se određuje procenat vitalnih ćelija u odnosu na kontrole ne-tretirane lekom. Konačni rezultati se dobijaju izračunavanjem LC50vrednosti koja opisuje dozu projektovanu da ubije 50% ćelija nakon 72 sata izlaganja.
[0378] HepG2_Glu ATP vitalnost 72hr IC50: ovo ispitivanje se izvodi slično ispitivanju koje je opisano od strane Marroquin i saradnika, Toxicological Sciences 97(2), 539-547 (2007) uz
1
modifikaciju tako da je osnovno ispitivanje izvedeno u periodu od 72 sata, kako je niže opisano.
[0379] Cilj ovog ispitivanja je da se izmeri citotoksičnost jedinjenja merenjem vitalnosti ćelija. Da bi se identifikovala vitalnost ćelija, meri se količina prisutnog ATP, što ukazuje da su prisutne metabolički aktivne ćelije. Reagens korišćen za kvantifikaciju prisustva ATP je Promega Cell Titer-Glo. Ovaj reagens deluje katalizacijom luciferina sa luciferazom u prisustvu Mg<2+>, ATP i molekulskog kiseonika, tako što emituje luminescentni signal koji je proporcionalan sa količinom ATP prisutnog u uzorku.
[0380] HepG2 ćelije uzgajane u medijumu obogaćenom glukozom se prenesu u ploče sa 384 udubljenja pri gustini od 1000 ćelija/udubljenje za ispitivanje u trajanju od 72 sata u ukupnoj zapremini medijuma od 25 µl/udubljenje. Ploče se nakon toga inkubiraju 24 sata na 37°C, 95% vlage i 5% CO2nakon čega se doda jedinjenje.
[0381] Nakon što se ćelije ostave 24 sata da se vežu za ploču, HepG2 ćelije se izlože test jedinjenjima u formatu odgovora na dozu od 11 tačaka sa serijskim razblaženjem u rasponu od 300 uM do 0.029 uM, u toku 72 sata. Sva jedinjenja su testirana u triplikatu. Nakon 72 sata izlaganja test jedinjenjima, vitalnost ćelija se određuje merenjem koncentracije celularnog ATP dodavanjem Promega Cell Titer-Glo u skladu sa uputstvom proizvođača. Ploče se nakon toga očitavaju na čitaču fluorescencije ploča a rezultati se analiziraju upotrebom ActivityBase softvera. Iz dobijenih finalnih rezultata se izračunavaa IC50vrednost koja opisuje dozu predviđenu da ubije 50% ćelija nakon 72 sata izlaganja.
[0382] Ispitivanje respirometrijskom skrining tehnologijom (RST): ovo ispitivanje se u potpunosti sprovodi kako su opisali Hynes i saradnici, Toxicological Sciences 91(1), 186-200 (2006). Još preciznije, uslovi ispitivanja su slični sa uslovima opisanim za "Fluorescencebased assay of mitochondrial respiration" na stranama 188-189 Hynes reference.
[0383] Određivanje LogD mućkanjem boce (SFLogD): Određivanja LogD se izvode na sličan način kako su opisali Hay i saradnici, Drug Metabolism and Disposition 37(9), 1864-1870, 2009, procedurom koja je generalno niže opisana.
[0384] Određivanje Log D(7.4). Koeficijent distribucije test jedinjenja između oktan-1-ola i o.1 M natrijum fosfatnog pufera, pH 7.4, se određuje metodologijom mućkanja boce na automatizovan način. 0.3 mg jedinjenja se rastvori u 300 µL oktan-1-ola i ravnomerno podeli u duplikatu u blok sa 96 udubljenja. U otvore se doda trista mikrolitara prezasićenog pufera (2 litra pufera prezasićeno sa 10 mL oktan-1-ola) i rastvor se intenzivno meša. Nakon centrifugiranja se razdvoje dve faze. Deset mikrolitara 1:200 razblaženja oktan-1-ol sloja i 10
1
µL 1:20 razblaženja sloja pufera se direktno injektuju na visoko efikasnu tečnu hromatografiju (HPLC) (na primer koristeći odgovarajuću C18 kolonu, izokratnu eluaciju sa 90% metanola, 10% vode, 2 mM amonijum acetata i 0.03% mravlje kiseline pri brzini protoka od 2 mL/min). Oblasti pika se koriguju za faktore razblaženja a primenjuje se niže dato izračunavanje za određivanje srednje log D vrednosti za pH 7.4 (log D(7.4)):
Tabela 19. IUPAC naziv i biološka aktivnost za Primere 1-46.
1 1
nastavla se
12 nastavla se
1 nastavla se
14 nastavla se
[0385] Niže date Tabele 20-24 daju biološke podatke za jedinjenja iz Primera 11, 8, 12, 45, 10 kao i iz komparatora A-F. Komparator jedinjenja A, B i D su Primeri 345, 343 i 344 iz US Patenta 7,560,463 (odgovara WO 2004026305), komparator jedinjenja C i F su Primeri 18 i 24 od Mitch i saradnici, J. Med. Chem.2011, 54, 8000-8012 i komparator E je Primer 1A iz US patenta 7,709,522 B2; ova komparator jedinjenja mogu da se izrade kako je izvorno opisano.
[0386] Niže data Tabela 20 obezbeđuje Ki vezujućeg radioliganda humanog kapa opioidnog receptora (hKOR) i Ki vezujućeg radioligand humanog mu opioidnog receptora (hMOR) i odnose selektivnosti izračunate deljenjem hMOR Ki sa hKOR Ki. Niže su date strukture za Primere 11, 8, 12, 45, 10, 35, 37, 38, 40-44, 46 i komparatore A-F iz literature.
Potencija i selektivnost komparatora:
[0387]
<jedinjenje 11>jedinjenje 8 jedinjenje 12 jedinjenje 45 jedinjenje 10 jedinjenje 38 jedinjenje 35
1
komparator B jedinjenje 46 komparator C komparator D komparator E komparator F
komparator B jedinjenje 46 komparator C komparator D komparator E komparator F
Tabela 20: Ki vezivanja radioligand humanog kapa opioidnog receptora (hKOR), Ki vezivanja radioligand humanog mu opioidnog receptora (hMOR) i odnosi selektivnosti izračunati deljenjem hMOR Ki sa hKOR Ki. Niže su dati rezultati za Primere 11, 8, 12, 45, 10, 35, 37, 38, 40-44, 46 i komparatore A-F iz literature.
1
nastavla se
[0388] Nekontrolisano oslobađanje dinorfina, koji su endogeni agonisti kapa opioidnog receptora (KOR), mogu da dovedu do simptoma anksioznosti, loše emocionalne regulacije, anhedonije i gubitka spoznaje. Ovi simptomi doprinose psihopatologiji brojnih CNS poremećaja, uključujući Alzheimer-ovu bolest, Parkinsonovu bolest, poremećaj zloupotrebe supstanci i depresiju. Blokiranje aktivacije kapa opioidnog receptora sa antagonistom može da se koristi za poboljšanje simptoma izazvanih viškom dinorfina; međutim, istovremeno blokiranje mu opioidnog receptora (MOR) sa antagonistom bi trebalo izbeći ili to može da dovede do ozbiljnih neželjenih efekata uključujući mučninu, povraćanje, druge gastrointestinalne efekte i vrtoglavicu. Neželjeni efekti antagonista mu opioidnog receptora su povezani sa zauzetošću humanog receptora od približno 50%. Da bi se održala zauzetost receptora za KOR na preko 80% uz održavanje zauzetosti MOR receptora konzistentno ispod 50%, stručnjak sa iskustvom u tehnici će ceniti da je poželjna više od 25 puta veća selektivnost za KOR vezivanje u odnosu na mu vezivanje. Pored toga, stručnjak sa iskustvom u tehnici će ceniti da bi prihvatljiva potencija za visoku penetraciju GPCR antagonista u mozak ciljajući centralni nervni sistem trebalo da ima potenciju manju od 10 nM za ciljani receptor. Iznenađujuće, postoje značajne razlike u potenciji i selektivnosti jedinjenja koja sadrže pirazol u odnosu na regioizomer metil i metoksi supstituenata. Primeri 11, 8 i 12 imaju model 1,3,4-supstitucije i imaju odličnu potenciju (1-3 nM) i selektivnost (31-42 puta); regioizomeri ovih jedinjenja, Primeri 35 i 37, su iznenađujuće manje selektivni za KOR u odnosu na MOR, uz selektivnost za KOR u odnosu na MOR od samo 2.5 puta i 0.9 puta, tim redom. Primer 45 je primer 1,3,5-supstituisanog regioizomer pirazola koji takođe ima odličnu potenciju i selektivnost u odnosu na MOR, dok povezani komparatori 43 i 44 iznenađujuće i neočekivano imaju neprihvatljivo manje vrednosti selektivnosti (MOR/KOR). Jasno je
1
demonstrirana kritičnost regioizomernog modela supstitucije na pirazolu za prihvatljive vrednosti KOR potencije i selektivnosti u odnosu na MOR.
[0389] Nađeno je da je nekoliko drugih heterociklusa efikasno za održavanje potencije i selektivnosti kao neki modeli disupstituisanih pirazola. Primer 10 pokazuje da jedan regioizomer tiadiazola ima dobru potenciju i selektivnost ali drugi regioizomer, Primer 41, iznenađujuće i neočekivano ima KOR potenciju >100 nM. Slično tome, Primeri 42 i 40 takođe imaju nisku KOR potenciju. Takođe je iznenađujuće i neočekivano da su Primeri 11, 8, 12, 45, 10 i 38 mnogo selektivniji od fenil primera, komparatora A i B. Stručnjak sa iskustvom u tehnici će ceniti da potencijalni uticaj selektivnosti na neželjene spsoredne efekte potiče od zauzetosti MOR većoj od 50%.
[0390] Jedinjenja 11, 8 i 12 su potentni antagonisti kapa opioidnog receptora uz više od 30 puta veću selektivnost vezivanja u odnosu na mu opioidni receptor.
[0391] Niže data Tabela 21, pokazuje in vivo EC50zauzetosti receptora (IVRO) miševa i rezultate progresivnog odnosa za jedinjenja 11, 8, 12, 45 i komparator E.
Primer 11 Primer 8 Primer 12 Primer 45 Komparator E
Tabela 21: progresivni odnos (PR) i in vivo zauzetost receptora (IVRO), mereno premeštanjem KOR agonist liganda, [3H]GR103545, rezultati za Primere 11, 8, 12, 45 i komparator E.
1
[0392] Merenje in vivo KOR zauzetosti nakon subkutanog doziranja Primera 11, 8, 12, 45 i komparatora E miševima pokazuje da je svih pet jedinjenja zamenilo vezivanje radioliganda ([<3>H]GR103545) KOR agonista u mozgu na način zavistan od ekspozicije. Sposobnost ovih jedinjenja da antagoniziraju efekat KOR agonista in vivo je takođe merena koristeći ispitivanje progresivnog odnosa, koristeći test ponašanja kojim se meri motivacija miševa sa ograničenom hranom da rade za nagradu u hrani. Životinje moraju postepeno da rade više za svaku nagradu za hranu koju dobiju, a broj nagrada za koje su spremne da rade pre nego što prestanu da reaguju („prelomna tačka“) koristi se kao surogat mera njihovog nivoa motivacije. KOR agonist, spiradolin, izaziva značajno smanjenje u broju nagrada za koje miševi rade. Jedinjenja KOR antagonisti u Tabeli 21 su ko-primenjeni sa spiradolinom da antagoniziraju deficit u motivaciji izazvan spiradolinom. Mada svih pet jedinjenja produkuju dozno-zavisni preokret efekta spiradolina, Primeri 11, 8 i 12 su sposobni da dostignu 50% preokreta uz samo 25 - 30% zauzetosti receptora (kako je mereno pomeranje [<11>C]GR103545 u posebnoj grupi životinja), ali je za Primer 45 i komparator E potrebno >70% zauzetosti receptora da se dostigne isti stepen antagonizma. Jedinjenja 11, 8 i 12 deluju antagonizujuće u ovom in vivo testu miševa na značajno nižem stepenu zauzetosti receptora nego doze komparatora E.
Stručnjak sa iskustvom u tehnici će ceniti da bi potencijal za ovu razliku u RO neophodan da preobrati efekte egzogenog KOR agonist mogao da se proširi na niži RO neophodan da preokrene efekte endogenog KOR agonista za jedinjenja 11, 8 i 12.
[0393] Niže data Tabela 22 pokazuje unutrašnji mikrozomalni klirens ljudske jetre (HLM CLint), potencijal za reverzibilnu inhibiciju CYP450 izozima i kinetičke konstante inhibicije zavisne od jedne vremenske tačke (SPTDI) kod podataka CIP3A4 za Primere 11, 8, 12 i 46 i komparatore A-F.
Klirens, DDI i TDI komparatora:
[0394]
1
jedinjenje 11 jedinjenje 8 jedinjenje 12 jedinjenje 46 komparator A
komparator B komparator C komparator D komparator E komparator F
Tabela 22: rezultati unutrašnjeg mikrozomalnog klirensa ljudske jetre (HLM CLint), potencijala za reverzibilnu inhibiciju CYP450 izozima i kinetičke konstante vremensko zavisne inhibicije u jednoj tački (SPTDI) za CYP3A4 za Primere 11, 8, 12 i 46 i komparatore A-F.
1
[0395] Hepatički klirens KOR antagonista je važan za razmatranje izbora održivih kandidata za lek. Stručnjak sa iskustvom u tehnici će ceniti da je negativni uticaj višeg klirensa jedinjenja za projektovanu dozu za ljude, dozni režim i potencijalni rizik povezan sa metabolitima i povećanjim opterećenjem organizma. Generalno, bazni amini koji se predominantno izlučuju hepatičkim metabolizmom sa niskim do umerenim klirensom (CLint<20 mL/min/kg) u mikrozomima ljudske jetre su mnogo poželjniji nego jedinjenja kod kojih dolazi do brzog klirensa. Iz prethodno pokazanih rezultata, stručnjak sa iskustvom u tehnici će ceniti da svaki od Primera 11, 8 i 12 poseduje povoljan profil niskog hepatičkog klirensa uz CLint<20 mL/min/kg. Iznenađujuće i neočekivano je da ovi primeri imaju povoljan mali metabolički klirens u poređenju sa višim metaboličkim klirensom regioizomernog metoksi pirazola Primera 46. Komparatori B i C takođe pokazuju visok hepatički klirens mereno mikrozomalnim testom humane jetre. Vrednosti niskog hepatičkog klirensa ispoljene za jedinjenja iz Primera 11, 8 i 12 treba da omoguće prihvatljive doze i režime doziranja kod ljudi.
[0396] CYP450 izozimi katalizuju oksidativni metabolizam većine endogenih jedinjenja i više od 80% lekova sa tržišta; prema tome, inhibicija ove familije enzima može da dovede do farmakokinetičkih lek-lek interakcija (DDIs). Inhibicija CYP450 izozima može da prati reverzibilnu, kompetitivnu kinetiku ili ireverzibilnu, vremenski zavisnu kinetiku. Inhibicija glavnih CYP450 izozima je od posebne važnosti zbog potencijala za promenom farmakokinetike pridruženih substrata koji se predominantno eliminišu metabolizmom sa CYP3A4/5, CPY2D6, CPY2C8 i CYP2C19. Stručnjak sa iskustvom u tehnici će ceniti da se želi da se minimizira ili preferencijalno eliminiše potencijal za inhibiciju glavnih CYP450 izozima kod održivog kliničkog kandidata. Jedinjenja u Tabeli 22 su testirana da se odredi i reverzibilni i ireverzibilni CYP inhibitorni potencijal.
[0397] Reverzibilni CYP450 inhibitorni potencijal za svako jedinjenje je ispitan korišćenjem CYP450 DDI koktel testa, merenjem inhibicije metabolizma substrata poznate podloge svakog od glavnih CYP izozima pri koncentraciji od 3 µM. Stručnjak sa iskustvom u tehnici će ceniti da procenat inhibicije datog CYP450 enzima od >25% pri koncentraciji od 3 µM pokazuje srednji do visoki rizik za DDI. Kao što je pokazano u Tabeli 22, Primeri 11, 8 i 12 ne ispoljavaju značajan rizik od reverzibilne inhibicije pri 3 µM za sve glavne CYP450 izozime. Svaki komparator C, D i E pokazuje rizik za reverzibilni DDI za CYP450 izozime 2C8, 2C9, 3A4, i/ili 2D6.
[0398] Ireverzibilna inhibicija, ili vremenski zavisna inhibicija (TDI) citohroma P450s
1 1
(CYPs) se generalno karakteriše povećanjem inhibicije enzima u odnosu na vreme i koncentraciju inhibitora (Grimm 2009). U slučaju kada inhibicija enzima zahteva metabolički preokret, mehanizam generalno uključuje formiranje reaktivnog inhibitornog međuproizvoda koji može ireverzibilno da inaktivira CYPs; ovaj mehanizam može da izazove kliničke lek-lek interakcije zbog inhibicije relevantnog CYP odgovornog za metabolizam leka žrtve (Grimm 2009; Rowland Yeo 2011). Procena opasnosti za ireverzibilni CYP450 inhibitorni potencijal CYP3A je izvršena za nekoliko jedinjenja iz Tabele 22 korišćenjem testa inhibicije zavisne od jedne vremenske tačke (SPTDI), čime se meri konstanta brzine inaktivacije pseudo prvog reda (kobs) pri pojedinačnoj visokoj koncentraciji (6-10 µM) test jedinjenja (Zimmerlin 2011). Na osnovu analiza izvedenih od strane Yates (2008), za jedinjenja koja pokazuju kobs>0.008 min<-1>u ovom ispitivanju se smatra da imaju potencijal za TDI, a kobs<0.008 min<-1>su negativna ili mogu da imaju veoma slab potencijal za TDI za CYP3A4. Svi Primeri 11, 8 i 12 imaju kobsvrednosti <0.008 min<-1>(testirana sa 10 µM) i prema tome imaju mali do ne značajni rizik za TDI za CYP3A4. Međutim, komparatori E i F imaju kobsvrednosti od 0.011 min<-1>(testirano sa 6 µM) i 0.0133 min<-1>(testirano 10 µM) što ukazuje na potencijalni rizik od CYP3A4 TDI (Zimmerlin 2011; Yates 2012).
[0399] Jedinjenja 11, 8 i 12 imaju iznenađujuće nisku stopu unutrašnjeg metaboličkog preokreta u mikrozomima ljudske jetre. Jedinjenja 11, 8 i 12 ne pokazuju značajan rizik od reverzibilne inhibicije za glavne CYP izozime i nisu vremenski zavisni inaktivatori za CYP3A4.
[0400] Niže data Tabela 23 pokazuje rezultate ćelijske toksičnosti in vitro za Primere 11, 8 i 12 i komparatore A-F. Rezultati su dobijeni iz ispitivanja transformacije endotelijuma ljudske jetre (THLE), HepG2 Glu 72 sata ispitivanja, tehnologije respirometrijskog skrininga (RST) i SFLogD ispitivanja.
Ćelijska toksičnost komparatora:
[0401]
1 2
jedinjenje 11 jedinjenje 8 jedinjenje 12 komparator A komparator B
komparator C komparator D komparator E komparator F
Tabela 23: rezultati ćelijske toksičnosti in vitro za Primere 11, 8 i 12 i komparatore A-F. Rezultati su dobijeni iz ispitivanja transformacije endotelijuma ljudske jetre (THLE), HepG2 Glu 72 sata ispitivanja, tehnologije respirometrijskog skrininga (RST) i SFLogD ispitivanja.
[0402] Potencijalna klinička hepatotoksičnost ili oštećenje jetre indukovano lekovima (DILI) je jedan od glavnih razloga za povlačenje jedinjenja sa tržišta (Holt i Ju, 2010). Stručnjak sa
1
iskustvom u tehnici će ceniti da je opšta ćelijska toksičnost rani indikator potencijalnih neželjenih događaja i u modelima prekliničkog ispitivanja bezbednosti (Shah 2014, Green 2010, Benbow 2010) i u kliničkim modelima (Shah 2015, Thompson 2012). Dva uobičajena ispitivanja za razumevanje stepena opšte ćelijske toksičnosti su THLE i HepG2 ispitivanja. Ovim ispitivanjima se meri vitalnost ćelija merenjem sadržaja celularnog ATP nakon inkubacije test jedinjenja u toku 72 sata u transformisanom endotelijumu ljudske jetre (THLE) i ćelijskim linijama ljudskih hepatoma (HepG2). Stručnjak sa iskustvom u tehnici će ceniti da ukoliko su LD50jedinjenja u jednom ili oba od THLE ili HepG2 ispitivanjima <50 µM, postoji veći rizik da jedinjenje izazove DILI ili druge negativne pojave u studijama životinja i/ili kliničkim studijama na ljudima. U tabeli 23 su dati rezultati vitalnosti ćelija za Primere 11, 8 i 12 i komparator jedinjenja A - F. Primeri 11, 8 i 12 pokazuju malu ili ne pokazuju citotoksičnost ni u jednoj od ovih ćelijskih linija, što je prednost jer smanjuju potencijalni rizik za DILI prilikom uzimanja ovih jedinjenja u korišćenju ovih jedinjenja u lečenju.
Međutim, komparator jedinjenja E i F produkuju citotoksičnost pri manjim koncentracijama i mogu da poseduju potencijalni rizik za DILI ili toksičnost za druge organe u lečenju ukoliko su potrebne veće koncentracije tog jedinjenja od predviđenih što rezultira nižom marginom sigurnosti.
[0403] Sa mehaničkog stanovišta, pokazano je da je mitohondrijalna disfunkcija jedan od kritičnih mehanizama u DILI (Aleo 2014). Mitohondrijalna disfunkcija je takođe označena kao karakteristična odlika brojnih hroničnih bolesti, uključujući bipolarni poremećaj, Parkinsonovu bolest, šizofreniju, depresiju, autizam i sindrom hroničnog umora (Morris 2015). Mitohondrijalna disfunkcija može da se proceni merenjem potrošnje kiseonika od strane mitohondrija u izolovanim mitohondrijama pacova koristeći luminescentne kiseonikosetljive podloge u ispitivanju respirometrijskom skrining tehnologijom (RST) (Hynes 2006); ispitivanje i inhibicije i neudvojene oksidativne fosforilacije u RST su mereni za jedinjenja uiz Tabele 23. Dok Primeri 11, 8 i 12 ne pokazuju značajnu aktivnost u RST ispitivanju, komparator jedinjenja C i E pokazuju µM inhibitornu aktivnost.
[0404] Analize 812 lekova iz četiri najveće farmaceutske kompanije (Waring 2015) pokazuju statistički značajnu razliku u lipofilnosti između jedinjenja koji su prošli u Fazu II studija u poređenju sa onima koji su iz razloga bezbednosti zaustavljeni u Fazi I, sa prosečnim cLogP od 3.1 i 3.8 za one koji su prošli i odbačena jedinjenja, tim redom. Sličan trend je zabeležen u cLogD, sa prosečnim vrednostima od 2.1 i 2.8 za jedinjenja koja su prošla i koja su odbačena, tim redom. Primeri 11, 8 i 12 imaju cLogP i LogD mnogo više u skladu sa lekovima koji
1 4
prelaze u Fazu II, dok komparatori B-F imaju značajno veće cLogP vrednosti a komparatori E i F imaju značajno veće LogD vrednosti. Generalno je opštepriznato od strane stručnjaka u tehnici da je manje verovatno da će jedinjenja sa manjom lipofilnošću biti manje korišćena za lečenje zbog svoje toksičnosti.
[0405] Jedinjenja 11, 8 i 12 su čista u ispitivanju ćelijske toksičnosti i imaju fizikohemijske karakteristike konzistentne sa smanjenjem verovatnoće trošenja za lečenje na bazi toksičnosti.
[0406] Sveukupno, Primeri 11, 8 i 12 imaju iznenađujuće i neočekivano usklađene povoljne karakteristike i biološke rezultate (Tabela 24). Primeri 11, 8 i 12 imaju povoljnu potenciju za kapa opoiodni receptor, selektivnost u odnosu na mu opioidni receptor i procenat kapa opioidnih receptora neophodan za preobražaj efekta agonista kapa opioida koji je važan za angažovanje receptora, bezbednost i farmakodinamički efekat. Primeri 11, 8 i 12 imaju pogodan unutrašnji mikrozomalni klirens ljudske jetre i imaju mali potencijal ili za reverzibilnu ili ireverzibilnu inhibiciju citohroma P450, što je važno za režim doziranja i izbegavanje farmakokinetičkih lek-lek interakcija. Jedinjenja 11, 8 i 12 su takođe čisti u ispitivanju ćelijske toksičnosti (THLE, HepG2 i RST) i imaju pogodne fizikohemijske karakteristike koje su konzistentne sa smanjenjem verovatnoće trošenja za lečenje na osnovu toksičnosti. Tabele 24A i 24B ističu iznenađujuću i neočekivanu prirodu ovih usklađenosti za jedinjenja 11, 8 i 12 uz napomenu da komparatori iz literature ne dele ovu povoljnu usklađenost.
[0407] Tabele 24A i 24B: sažetak ukupnih bioloških i fizikohemijskih rezultata za Primere 11, 8 i 12 i komparatore A-F. Primeri 11, 8 i 12 imaju neočekivanu usklađenost poželjnih karakteristika i bioloških rezultata. Rubrike koje sadrže rezultete koji nisu u idealnom opsegu za dato ispitivanje su osenčene sivim. "NT" = nije testirano.
1
Tabela 24A
Tabela 24B:
1 (nastavlja se)
Reference:
[0408]
N. Green i saradnici Using an in vitro cytotoxicity assay to aid in compound selection for in vivo safety studies, BMCL, 2010, 5308.
J. Benbow i saradnici Predicting safety toleration of pharmaceutical chemical leads:
Cytotoxicity correlations to exploratory toxicity studies, Toxicology Letters, 2010, 175. F. Shah i saradnici Chemotypes sensitivity and predictivity of in vivo outcomes for cytotoxic assays in THLE and HepG3 cell lines, BMCL, 2014, 2753.
R. A. Thompson i saradnici In vitro approach to assess the potential for risk of idiosyncratic adverse reactions caused by candidate drugs, Chemical research in Toxicology, 2012, 1616. F. Shah i saradnici Setting clinical exposure levels of concern for drug-induced liver injury (DILI) using mechanistic in vitro assays, Toxicology Sciences, 147(2), 2015, 500.
M. Waring i saradnici An analysis of the attrition of drug candidates from four major pharmaceutical companies, Nature Reviews Drug Discovery, 2015, 475.
M Holt i C Ju. Drug induced livery injury, Handb. Exp. Pharmacol., 2010, 3.
M Aleo i saradnici Human Drug-induced Liver Injury Severity Is Highly Associated with Dual Inhibition of Liver Mitochondrial Function and Bile Salt Export Pump. Hepatology vol
1
60, no 3, 2014.
G Morris i M Berk The many roads to mitochondrial dysfunction in neuroimmune and neuropsychiatric disorders. BMC Medicine (2015) 13:68
J Hynes i saradnici Investigation of Drug-induced Mitochondrial Toxicity Using Flourescence_Based Oxygen-Sensitive Probes. Toxicological Sciences 91(1), 186-200 (2006).
S. W. Grimm i saradnici The Conduct of in Vitro Studies to Address Time-Dependent Inhibition of Drug-Metabolizing Enzymes: A Perspective of the Pharmaceutical Research and Manufacturers of America. Drug Metabolism and Deposition, 37 (7), 1355 (2009)
K. Rowland Yeo i saradnici Prediction of Time-Dependent CYP3A4 Drug-Drug interactions by Physiologically Based Pharmacokinetic Modelling: Impact of Inactivation Parameters and Enzyme Turnover. European Journal of Pharmaceutical Sciences, 43 (3), 160 (2011) A. Zimmerlin i saradnici CYP3A Time-Dependent Inhibition Risk Assessment Validated with 400 Reference Drugs. Drug Metabolism i Deposition, 39 (6), 1039 (2011)
P. Yates i saradnici Statistical Methods for Analysis of Time-Dependent Inhibition of Cytochrome P450 Enzymes. Drug Metabolism and Deposition, 40 (12), 2289 (2012) Obach, R. S.; Walsky, R. L.; Venkatakrishnan, K. Mechanism Based Inactivation of Human Cytochrome P450 Enzymes and the Prediction of Drug Drug Interactions. Drug Metab.
Dispos. 2007, 35, 246-55
Berry L.; Zhao, Z. An Examination of IC50and IC50-Shift Experiments in Assessing Time-Dependent Inhibition of CYP3A4, CYP2D6 and CYP2C9 in Human Liver Microsomes. Drug Metabolism Letters, 2008, 2, 51-59
Hay T.; Jones R.; Beaumont K.; Kemp M. Modulation of the partition coefficient between octanol and pufer at pH 7.4 and pKa to achieve the optimum balance of blood clearance and volume of distribution for series of tetrahidropyran histamin type 3 receptor antagonisti. Drug Metab. Dispos.2009, 37(9), 1864-1870.
1

Claims (18)

  1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje Formule I
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so; naznačeno time što R<1>je vodonik, fluor ili hidroksi grupa; R<2>i R<3>su svaki nezavisno vodonik ili fluor; X je CR<5>R<6>ili O; m je 1 ili 2; n je 0, 1 ili 2; R<4>je iuzabran iz grupe koja se sastoji od
    R<5>i R<6>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja se sastoji od vodonika, fluora, hidroksi, C1-C3alkil i C1-C3alkoksi grupe; R<7>i R<8>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja se sastoji od vodonika, C1-C6alkil i C1-C6alkoksi grupe; pri čemu su C1-C6alkil i C1-C6alkoksi grupe opicono supstituisane sa jedan do tri fluora; i R<9>je u svim pojavljivanjima nezavisno izabran od fluora, C1-C3alkil i C1-C6alkoksi grupe, pri čemu su C1-C3alkil i C1-C6alkoksi grupe opciono supstituisane sa jedan do tri fluora.
  2. 2. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 1, naznačeno time što: m je 1; X je CR<5>R<6>; R<5>i R<6>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja se sastoji od vodonika, fluora i metil grupe; R<7>je izabran iz grupe koja se sastoji od vodonika, metil i metoksi grupe; i R<8>je metil grupa ili vodonik; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  3. 3. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 2, naznačeno time što ima Formulu Ia
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  4. 4. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 3, naznačeno time što: R<4>je 1
    R<5>i R<6>su svaki vodonik i R<7>je metil ili metoksi grupa; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  5. 5. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 1, naznačeno time što: m je 2; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  6. 6. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 5, naznačeno time što: X je O; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  7. 7. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 6 koje ima Formulu Ib
    naznačeno time što: R<4>je 1 1
    R<7>je metil ili metoksi grupa; i R<8>je metil grupa ili vodonik; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  8. 8. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 5, naznačeno time što: X je CR<5>R<6>; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  9. 9. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 8 koje ima Formulu Ic
    naznačeno time što: R<4>je 1 2
    R<5>i R<6>su svaki vodonik; R<7>je metil ili metoksi grupa; i R<8>je metil grupa ili vodonik; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  10. 10. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 1, naznačeno time što je izabrano iz grupe koja sadrži: (+/-)-4-(4-{[2-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}-2-fluorofenoksi)benzamid; (+)-4-(4-{[2-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}-2-fluorofenoksi)benzamid; (-)-4-(4-{[2-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}-2-fluorofenoksi)benzamid; (+/-)-4-(4-{[2-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)-3-fluorobenzamid; 4-(4-{[2-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)-3-fluorobenzamid, ENT-1; 4-(4-{[2-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)-3-fluorobenzamid, ENT-2; (+7-)-3-fluor-4-(4-{[2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid; (-)-3-fluor-4-(4-{[2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid; (+)-3-fluor-4-(4-{[2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid; 4-(4-{[(2S)-2-(5-metil-1,2,4-tiadiazol-3-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid; 4-(4-{[(2S)-2-(1,3-dimietil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid; 4-(4-{[(2S)-2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid; (+/-)-4-(4-{[2-(3-metoksi-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid; (-)-4-(4-{[2-(3-metoksi-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid; (+)-4-(4-{[2-(3-metoksi-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid; 1 (+/-)-4-(4-{[2-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)-2-hidroksibenzamid; (+)-4-(4-{[2-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)-2-hidroksibenzamid; (-)-4-(4-{[2-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)-2-hidroksibenzamid; 3-fluor-4-(4-{[(2S)-2-(1-metil-1H-pirazol-3-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid; 3- fluor-4-(4-{[3-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)morfolin-4-il]metil}fenoksi)benzamid, ENT-1; 4-(4-{[2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)piperidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid, ENT-1; 4-(2-fluor-4-{[3-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)morfolin-4-il]metil}fenoksi)benzamid, ENT-1; 4-(4-{[3-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)rnorpholin-4-il]metil}fenoksi)benzamid, ENT-1; 4-(4-{[4-fluor-2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid, Izomer 2, pretpostavljeno racematni, ili cis ili trans; 4-(4-{[2-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)-4-fluoropirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid, Izomer 1; 4-(4-{[2-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)-4-fluoropirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid, Izomer 2; 4-(4-{[(2S)-2-(1,3-dimetil-1H-pirazol-5-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)-2-hidroksibenzamid; 3-fluor-4-(4-{[2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)-4-metilpirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid, Izomer 1; 3-fluor-4-(4-{[2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)-4-metilpirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid, Izomer 2; 3-fluor-4-(4-{[2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)-4-metilpirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid, Izomer 3; 3-fluor-4-(4-{[2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)-4-metilpirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid, Izomer 4; 4-(2-fluor-4-{[2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid, ENT-2; 2-hidroksi-4-(4-{[2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid, ENT-2; 2-hidroksi-4-(4-{[(2S)-2-(1-metil-1H-pirazol-3-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid; 4-(4-{[2-(1,5-dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)-3-fluor benzamid, ENT-1; (+/-)-4-(4-{[2-(1,5-dimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid; (+/-)-3-fluor-4-(4-{[2-(1,3,5-trimetil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid; 1 4 4-(4-{[2-(2,5-dimetil-2H-1,2,3-triazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid, ENT-2; 3-fluor-4-(4-{[2-(5-metil-1,2-oksazol-3-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid; 4-(4-{[2-(3-metil-1,2,4-tiadiazol-5-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid, ENT-2; 3- fluor-4-(4-{[2-(3-metil-1,2-oksazol-5-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid; 4-(4-{[2-(1,4-dimetil-1H-pirazol-5-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)-3-fluor benzamid; 4-(4-{[2-(1,5-dimetil-1H-pirazol-3-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)-3-fluor benzamid; 4-(4-{[2-(2,5-dimetil-2H-1,2,3-triazol-4-il)pirolidin-1-il]metil}-2-fluorofenoksi)benzamid, ENT-2; 4-(4-{[2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-5-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)benzamid, ENT-2; 4-(4-{[(2S)-2-(1,3-dimetil-1H-pirazol-5-il)pirolidin-1-il]metil}fenoksi)-3-fluorobenzamid; i ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  11. 11. Jedinjenje 4-(4-{[2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il] metil}fenoksi)benzamid; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  12. 12. Jedinjenje 4-(4-{[(2S)-2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il] metil}fenoksi)benzamid; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  13. 13. Farmaceutska kompozicija, naznačena time što uključuje terapeutski efektivnu količinu jedinjenja u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1 do 12 ili njegove farmaceutski prihvatljive soli zajedno sa farmaceutski prihvatljivim vehikulumom, razblaživačem ili nosačem.
  14. 14. Kristalni oblik 4-(4-{[(2S)-2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il] metil}fenoksi)benzamida (Oblik 2), naznačen time što navedeni kristalni oblik ima analitički parametar izabran iz grupe koja se sastoji od: NMR spektra čvrstog stanja koji uključuje<13>C hemijske promene (ppm) za 37.960.2, 119.6 60.2, 124.260.2, 126.460.2 i 152.660.2; modela difrakcije X-zraka praška koji uključuje pikove za uglove difrakcije (2θ) od 13.360.2, 17.8 60.2, 10.160.2, 15.160.2 i 24.760.2, pri čemu je analiza difrakcije X-zraka izvedena na Bruker AXS D4 Endeavor difraktometru opremljenim sa izvorom Cu zračenja, divergencionim prorezom od 0.6 mm, cevi X-zraka napona i snage od 40 kV i 40 mA, tim 1 redom a rezultati su sakupljeni u Teta-2Teta goniometru sa Cu k-alfa prosekom od 3.0 do 40.0 stepeni 2-Teta koristeći veličinu faze od 0.037 stepeni i vreme po fazi od 10 sekundi; i Raman spektra koji uključuje promene (cm<-1>) Raman pika za 639 ± 2, 1174 ± 2, 1660 ± 2, 1597 ± 2 i 815 ± 2, pri čemu je Raman spektar dobijen koristeći FT Nicolet NXR FT-Raman dodatak povezan sa FT- IR nosačem opremljenim sa 1064 nm Nd:YV04 laserom i germanijum detektorom hlađenim tečnim azotom koristeći snagu lasera od 0.5 W, 512 kododatih skenova, 2 cm<-1>rezoluciju i Happ-Genzel apodizaciju.
  15. 15. Farmaceutska kompozicija, naznačena time što uključuje kristalni oblik 4-(4-{[(2S)-2-(3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)pirolidin-1-il] metil}fenoksi)benzamida (Oblik 2) u skladu sa patentnim zahtevom 14 u terapeutski efektivnoj količini zajedno sa najmanje jednom farmaceutski prihvatljivom podlogom.
  16. 16. Farmaceutska kompozicija u skladu sa patentnim zahtevom 13 ili 15, jedinjenje u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1 do 12 ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili kristalni oblik u skladu sa patentnim zahtevom 14, naznačeni time što su za upotrebu u lečenju poremećaja, stanja ili bolesti centralnog nervnog sistema i neuroloških poremećaja u kojima može da bude uključen kapa opioidni receptor, pri čemu su poremećaji, stanja ili bolesti centralnog nervnog sistema i neurološki poremećaji u kojima može da bude uključen kapa opioidni receptor izabrani od kognitivnih poremećaja, posebno demencije povezane sa HIV, Alzheimer-ove bolesti i blagog kognitivnog poremećaja, demencije Lewy-jevih tela, vaskularne demencije, demencije povezane sa lekovima; poremećaja povezanih sa spazmom, slabošću, tremorom ili horeom mišića, Parkinsonove bolesti, demencije Lewy-jevih tela, Huntington-ove bolesti, tardivne diskinezije, frontotemporalne demencije, Creutzfeldt-Jacob bolesti, mioklonusa, distonije, delirijuma, Gilles de la Tourette-ovog sindroma, epilepsije, mišićnog spazma; poremećaja spavanja, posebno hipersomnije, poremećaja cirkadijalnog ritma spavanja, insomnije, parasomnije i psihijatrijskih poremećaja koji su povezani sa anksioznošću, posebno poremećaj akutnog stresa, opšti anksiozni poremećaj, poremećaj društvene anksioznosti, poremećaj panike, poremećaj post-traumatičnog stresa, agorafobija i opsesivno-kompulsivni poremećaj; poremećaja kontrole nagona, porebno kompulsivnog kockanja i povremeni eksplozivni poremećaj; poremećaja ponašanja, posebno bipolarni I poremećaj, bipolarni II poremećaj, manija, mešovito afektivno stanje, velika depresija, hronična depresija, sezonska depresija, psihotična depresija, sezonska depresija, 1 premenstrualni sindrom, premenstrualni disforični poremećaj i postporođajna depresija; psihomotornog poremećaja; psihotičnih poremećaja, posebno šizofrenije, šizoafektivnog poremećaja, šizofrenog oblika i deluzionog poremećaja; poremećaja zloupotrebe supstanci, posebno zavisnost od droge, posebno recidiv zavisnosti kao što je zavisnost od narkotika, posebno zavisnost od opioida kao što su heroin, oksikodon, morfon, hidrokodon, hidromorfon, alkoholizam, zavisnost od amfetamina, zavisnost od metamfetamina, zavisnost od kokaina, zavisnost od nikotina, zavisnost od kanabinoida, kao što je zavisnost od marihuane i sindrom zloupotrebe lekova; poremećaji ishrane, preciznije anoreksija, bulimija, poremećaj opsesivnog prejedanja, hiperfagija, gojaznost, poremećaji kompulsivnog unosa hrane i pagofagija; poremećaji seksualne disfunkcije, kao što je prevremena ejakulacija; i pedijatrijski psihijatrijski poremećaji, preciznije poremećaj nedostatka pažnje, poremećaj nedostatka pažnje/hiperaktivnost, poremećaj ponašanja i poremećaji iz spektra autizma.
  17. 17. Farmaceutska kompozicija u skladu sa patentnim zahtevom 13 ili 15, jedinjenje u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1 do 12 ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili kristalni oblik u skladu sa patentnim zahtevom 14, naznačen time što je za upotrebu u lečenju neuroloških poremećaja ili psihijatrijskog poremećaja.
  18. 18. Farmaceutska kompozicija, jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili kristalni oblik za upotrebu u skladu sa patentnim zahtevom 17, naznačeno time što je neurološki poremećaj izabran od sindroma spinocerebralne ataksije i diskinezije indukovane levodopom kod Parkinsonove bolesti a psihijatrijski poremećaj je izabran od neurokognitivnog poremećaja, poremećaja zloupotrebe supstanci, depresivnog poremećaja, anksioznog poremećaja, poremećaja povezanog sa traumom i stresom i poremećaja ishrane. 1
RS20230453A 2016-11-28 2017-11-27 Heteroarilfenoksi benzamid ligandi kapa opioida RS64258B1 (sr)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201662426980P 2016-11-28 2016-11-28
US201762576435P 2017-10-24 2017-10-24
US201762585016P 2017-11-13 2017-11-13
PCT/IB2017/057418 WO2018096510A1 (en) 2016-11-28 2017-11-27 Heteroarylphenoxy benzamide kappa opioid ligands
EP17818281.2A EP3544972B8 (en) 2016-11-28 2017-11-27 Heteroarylphenoxy benzamide kappa opioid ligands

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS64258B1 true RS64258B1 (sr) 2023-07-31

Family

ID=60782279

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20230453A RS64258B1 (sr) 2016-11-28 2017-11-27 Heteroarilfenoksi benzamid ligandi kapa opioida

Country Status (18)

Country Link
US (1) US10316021B2 (sr)
EP (1) EP3544972B8 (sr)
JP (1) JP7051853B2 (sr)
CN (1) CN110234638B (sr)
AU (1) AU2017365123B2 (sr)
DK (1) DK3544972T3 (sr)
ES (1) ES2947293T3 (sr)
FI (1) FI3544972T3 (sr)
HR (1) HRP20230518T1 (sr)
HU (1) HUE061945T2 (sr)
IL (1) IL266962B (sr)
MX (1) MX389806B (sr)
PH (1) PH12019501172A1 (sr)
PL (1) PL3544972T3 (sr)
PT (1) PT3544972T (sr)
RS (1) RS64258B1 (sr)
TW (1) TWI720272B (sr)
WO (1) WO2018096510A1 (sr)

Families Citing this family (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP3585485A2 (en) 2017-02-24 2020-01-01 Xeniopro GmbH Aromatic compounds which enhance notch signaling, for use in therapy
WO2018154118A2 (en) * 2017-02-24 2018-08-30 Reinmueller Viktoria Novel aromatic compounds
US11266627B1 (en) 2021-05-04 2022-03-08 Janssen Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for the treatment of depression
CN111233768B (zh) * 2020-03-18 2021-08-03 徐州圣元化工有限公司 一种3-(二氟甲基)-1-甲基-1h-吡唑-4-羧酸乙酯的制备方法
PH12021552872A1 (en) * 2020-04-05 2022-03-21 Pfizer Compounds and methods for the treatment of covid-19
US12161622B2 (en) 2021-05-04 2024-12-10 Janssen Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for the treatment of depression
CN119156211A (zh) 2022-03-07 2024-12-17 杨森制药公司 用于治疗重性抑郁障碍的多晶型形式的阿替卡普兰
WO2023170547A1 (en) * 2022-03-07 2023-09-14 Janssen Pharmaceuticals, Inc. Pure forms of crystalline aticaprant
EP4489730B1 (en) 2022-03-07 2026-01-21 Janssen Pharmaceuticals, Inc. Compositions comprising aticaprant
PE20251585A1 (es) * 2022-10-12 2025-06-16 Adama Makhteshim Ltd Proceso para la preparacion de derivados de aminopiridazina

Family Cites Families (27)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5376645A (en) 1990-01-23 1994-12-27 University Of Kansas Derivatives of cyclodextrins exhibiting enhanced aqueous solubility and the use thereof
KR0166088B1 (ko) 1990-01-23 1999-01-15 . 수용해도가 증가된 시클로덱스트린 유도체 및 이의 용도
GB9518953D0 (en) 1995-09-15 1995-11-15 Pfizer Ltd Pharmaceutical formulations
WO2000035296A1 (en) 1996-11-27 2000-06-22 Wm. Wrigley Jr. Company Improved release of medicament active agents from a chewing gum coating
GB9711643D0 (en) 1997-06-05 1997-07-30 Janssen Pharmaceutica Nv Glass thermoplastic systems
JP2000159747A (ja) * 1998-09-21 2000-06-13 Takeda Chem Ind Ltd 新規チオ―ル誘導体、その製造法および用途
WO2000017162A1 (en) 1998-09-21 2000-03-30 Takeda Chemical Industries, Ltd. Novel thiol derivatives, process for producing the same and utilization thereof
IT1303737B1 (it) 1998-11-11 2001-02-23 Smithkline Beecham Spa Derivati fenilpiperidinici procedimento per la loro preparazione eloro uso come ligandi del recettore orl-1.
KR101025633B1 (ko) 2002-09-19 2011-03-30 일라이 릴리 앤드 캄파니 오피오이드 수용체 안타고니스트로서의 디아릴 에테르
US7365209B2 (en) 2003-02-11 2008-04-29 Pharmacopeia, Inc. Nitrogen heterocycle biaryls for osteoporosis and other diseases
US7396943B2 (en) 2003-03-07 2008-07-08 Eli Lilly And Company Opioid receptor antagonists
RU2366655C2 (ru) 2003-03-14 2009-09-10 Оно Фармасьютикал Ко., Лтд. Азотсодержащие гетероциклические производные и лекарственные средства, содержащие их в качестве активного ингредиента
ZA200700811B (en) 2004-08-06 2008-10-29 Otsuka Pharma Co Ltd Aromatic compound
EP1849835B1 (en) 2005-02-18 2017-08-30 Nippon Soda Co., Ltd. Organic-inorganic composite body
CA2644368A1 (en) 2006-03-10 2007-09-20 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Nitrogenated heterocyclic derivative, and pharmaceutical agent comprising the derivative as active ingredient
DK2001456T3 (da) 2006-04-04 2010-04-12 Emodys Gmbh Anvendelse af kappa-opiodreceptorantagonistholde sammensætninger til behandling af dissociative forstyrrelser
WO2009094260A1 (en) 2008-01-22 2009-07-30 Eli Lilly And Company Kappa selective opioid receptor antagonist
WO2009102893A2 (en) 2008-02-14 2009-08-20 Amira Pharmaceuticals, Inc. CYCLIC DIARYL ETHER COMPOUNDS AS ANTAGONISTS OF PROSTAGLANDIN D2 receptors
CR11559A (es) 2008-03-25 2010-10-20 Lilly Co Eli Antagonista del receptor opioide selectivo kappa
US8048895B2 (en) 2008-04-18 2011-11-01 Research Triangle Institute Kappa opioid receptor ligands
NZ603525A (en) 2008-06-27 2015-02-27 Celgene Avilomics Res Inc Pyrimidine based compound and uses thereof
JP2012512877A (ja) 2008-12-18 2012-06-07 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング セロトニン５−ｈｔ２ｂ受容体阻害剤
HN2010001319A (es) 2009-01-26 2013-01-15 Lilly Co Eli Antagonista del receptor opioide selectivo kappa
WO2013059648A1 (en) 2011-10-21 2013-04-25 Neurotherapeutics Pharma, Inc. 2,3,5 trisubstituted aryl and heteroaryl amino derivatives, compositions, and methods of use
JP2015531382A (ja) 2012-10-02 2015-11-02 メルク パテント ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツングＭｅｒｃｋ Ｐａｔｅｎｔ Ｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ ｍｉｔ ｂｅｓｃｈｒａｅｎｋｔｅｒ Ｈａｆｔｕｎｇ ピロリジン
WO2015109080A1 (en) 2014-01-15 2015-07-23 Research Triangle Institute Kappa-opioid receptor selective opioid receptor antagonists
US10118896B2 (en) 2014-11-26 2018-11-06 University Of Kansas Antagonists of the kappa opioid receptor

Also Published As

Publication number Publication date
JP7051853B2 (ja) 2022-04-11
TW201831460A (zh) 2018-09-01
AU2017365123B2 (en) 2022-02-17
US20180148432A1 (en) 2018-05-31
NZ754862A (en) 2024-11-29
CA3045242A1 (en) 2018-05-31
PT3544972T (pt) 2023-06-20
IL266962A (en) 2019-07-31
MX389806B (es) 2025-03-20
PH12019501172A1 (en) 2019-12-11
HRP20230518T1 (hr) 2023-08-04
FI3544972T3 (fi) 2023-06-02
PL3544972T3 (pl) 2023-07-24
DK3544972T3 (da) 2023-05-30
TWI720272B (zh) 2021-03-01
AU2017365123A1 (en) 2019-07-11
JP2019535799A (ja) 2019-12-12
IL266962B (en) 2022-02-01
EP3544972B8 (en) 2023-06-07
US10316021B2 (en) 2019-06-11
EP3544972B1 (en) 2023-04-26
ES2947293T3 (es) 2023-08-04
CN110234638B (zh) 2022-10-21
MX2019006220A (es) 2019-10-07
EP3544972A1 (en) 2019-10-02
HUE061945T2 (hu) 2023-09-28
WO2018096510A1 (en) 2018-05-31
CN110234638A (zh) 2019-09-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU2017365123B2 (en) Heteroarylphenoxy benzamide kappa opioid ligands
KR102161364B1 (ko) LRRK2 억제제로서 이미다조[4,5-c]퀴놀린 및 이미다조[4,5-c][1,5]나프티리딘 유도체
US9388192B2 (en) Benzimidazole derivatives as Kinase Inhibitors
JP2015157826A (ja) 内臓痛を治療するためのインドール化合物および方法
CA3045816A1 (en) Oga inhibitor compounds
US11390623B2 (en) 6,7,8,9-tetrahydro-5H-pyrido[2,3-d]azepine dopamine D3 ligands
EA030085B1 (ru) 2-АМИНО-6-МЕТИЛ-4,4a,5,6-ТЕТРАГИДРОПИРАНО[3,4-d][1,3]ТИАЗИН-8a(8H)-ИЛ-1,3-ТИАЗОЛ-4-ИЛ АМИДЫ
US20080081833A1 (en) Novel Pyrazole Derivatives And Their Use As Modulators Of Nicotinic Acetylcholine Receptors
US20170066753A1 (en) Oxadiazine compounds and methods of use thereof
CN104337812B (zh) 取代的杂芳基化合物及其使用方法和用途
TWI675826B (zh) 環狀經取代之咪唑并［４，５－ｃ］喹啉衍生物
US20210300943A1 (en) Oga inhibitor compounds
CA3045242C (en) Heteroarylphenoxy benzamide kappa opioid ligands
HK40014240B (zh) 杂芳基苯氧基苯甲酰胺kappa阿片类配体
HK40014240A (en) Heteroarylphenoxy benzamide kappa opioid ligands
US20070197609A1 (en) Salts of inducible nitric oxide synthase dimerization inhibitors
JP7713954B2 (ja) 核内受容体に対して活性な化合物
US20260125359A1 (en) Heteroaryl compounds as multi-target protein kinase inhibitors
TW202014191A (zh) 具有選擇性ｂａｃｅ１抑制活性的四氫哌喃并衍生物