RS64641B1 - Supstituisana jedinjenja naftiridinona korisna kao aktivatori t ćelija - Google Patents

Supstituisana jedinjenja naftiridinona korisna kao aktivatori t ćelija

Info

Publication number
RS64641B1
RS64641B1 RS20230895A RSP20230895A RS64641B1 RS 64641 B1 RS64641 B1 RS 64641B1 RS 20230895 A RS20230895 A RS 20230895A RS P20230895 A RSP20230895 A RS P20230895A RS 64641 B1 RS64641 B1 RS 64641B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
methyl
dihydro
oxo
naphthyridine
carbonitrile
Prior art date
Application number
RS20230895A
Other languages
English (en)
Inventor
Upender Velaparthi
Louis S Chupak
Chetan Padmakar Darne
Min Ding
Robert G Gentles
Yazhong Huang
Manjunatha Narayana Rao Kamble
Scott W Martin
Raju Mannoori
Ivar M Mcdonald
Richard E Olson
Hasibur Rahaman
Prasada Rao Jalagam
Saumya Roy
Gopikishan Tonukunuru
Sivasudar Velaiah
Jayakumar Sankara Warrier
Xiaofan Zheng
John S Tokarski
Bireshwar Dasgupta
Kotha Rathnakar Reddy
Thiruvenkadam Raja
Original Assignee
Bristol Myers Squibb Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Bristol Myers Squibb Co filed Critical Bristol Myers Squibb Co
Publication of RS64641B1 publication Critical patent/RS64641B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene or sparfloxacin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Description

Opis
[0001] Predmetni pronalazak se generalno odnosi na supstituisana jedinjenja naftiridinona koja aktiviraju T ćelije, promovišu proliferaciju T ćelija i/ili pokazuju antitumorsku aktivnost. Ovde su prikazana supstituisana jedinjenja naftiridinona, kompozicije koje sadrže takva jedinjenja i njihove upotrebe. Pronalazak se dalje odnosi na farmaceutske kompozicije koje sadrže najmanje jedno jedinjenje prema pronalasku koje je korisno za lečenje proliferativnih poremećaja, kao što su kancer i virusne infekcije.
STANJE TEHNIKE
[0002] Ljudski kanceri nose brojne genetske i epigenetske promene, stvarajući neoantigene potencijalno prepoznatljive od strane imunološkog sistema (Sjoblom i sarad. (2006) Science 314:268-74). Adaptivni imuni sistem, koji sadrži T i B limfocite, ima moćan anti-kancer potencijal, sa širokim kapacitetom i izuzetnom specifičnošću da odgovori na različite tumorske antigene. Dalje, imuni sistem pokazuje značajnu plastičnost i memorijsku komponentu. Uspešno korišćenje svih ovih atributa adaptivnog imunog sistema učinilo bi imunoterapiju jedinstvenom među svim modalitetima lečenja kancera. Međutim, iako je endogeni imuni odgovor na kancer primećen kod pretkliničkih modela i pacijenata, ovaj odgovor je neefikasan, a utvrđeni kanceri se posmatraju kao „samostalni“ i imunološki sistem ih toleriše. Doprinoseći ovom stanju tolerancije, tumori mogu iskoristiti nekoliko distinktivnih mehanizama da aktivno podrivaju antitumorski imunitet. Ovi mehanizmi uključuju disfunkcionalnu T-ćelijsku signalizaciju (Mizoguchi i sarad., (1992) Science 258:1795-98), supresivne regulatorne ćelije (Facciabene i sarad., (2012) Cancer Res. 72:2162-71), i kooptiranje endogenih „imunoloških kontrolnih tačaka“, koje služe za smanjenje intenziteta adaptivnih imunih odgovora i zaštitu normalnih tkiva od kolateralnog oštećenja, tumorima kako bi se izbeglo uništavanje imuniteta (Topalian i sarad., (2012) Curr. Opin. Immunol. 24:1-6; Mellman i sarad. (2011) Nature 480:480-489).
[0003] Diacilglicerol kinaze (DGK) su lipidne kinaze koje posreduju u konverziji diacilglicerola u fosfatidinsku kiselinu čime se prekidaju funkcije T ćelija propagiranih putem TCR signalnog puta. Dakle, DGK služe kao intracelularne kontrolne tačke i očekuje se da će inhibicija DGK poboljšati T ćelijske signalne puteve i T ćelijsku aktivaciju. Potkrepljujući dokazi uključuju nokaut modele miša od ili DGKα ili DGKζ koji pokazuju hiper-reaktivan T ćelijski fenotip i poboljšanu antitumorsku imunološku aktivnost (Riese M.J. i sarad., Journal of Biological Chemistry, (2011) 7: 5254-5265; Zha Y i sarad., Nature Immunology, (2006) 12:1343; Olenchock B.A. i sarad., (2006) 11: 1174-81). Štaviše, primećeno je da tumor infiltrirajući limfociti izolovani od pacijenata sa humanim karcinomom bubrežnih ćelija prekomerno eksprimiraju DGKα što je dovelo do inhibicije T ćelijske funkcije (Prinz, P.U. i sarad., J Immunology (2012) 12:5990-6000). Time, DGKα i DGKζ se posmatraju kao mete za imunoterapiju kancera (Riese M.J. i sarad., Front Cell Dev Biol. (2016) 4: 108; Chen, S.S. i sarad., Front Cell Dev Biol. (2016) 4: 130; Avila-Flores, A i sarad., Immunology and Cell Biology (2017) 95: 549-563; Noessner, E., Front Cell Dev Biol. (2017) 5: 16; Krishna, S., i sarad., Front Immunology (2013) 4:178; Jing, W. i sarad., Cancer Research (2017) 77: 5676-5686.
[0004] Dokument US 2005/266510 se odnosi na T ćelijsku anergiju koja je preokrenuta aktivnim Ras i regulisana diacilglicerol kinazom, a WO 2017/177037 se odnosi na kompozicije koje sadrže ritanserin ili njegov analof za lečenje kancera, kao što su glioblastomi i melanimas i za inhibiciju diacilglicerol kinaze alfa.
[0005] Ostaje potreba za jedinjenjima korisnim kao inhibitori jednog ili oba DGKα i DGKζ. Pored toga, ostaje potreba za jedinjenjima korisnim u vidu inhibitora jednog od oba DGKα i DGKζ koji imaju selektivnost u odnosu na druge diacilglicerol kinaze, protein kinaze i/ili druge lipid kinaze.
[0006] Shodno tome, agens koji je bezbedan i efikasan u obnavljanju aktivacije T ćelija, snižavajući prag antigena, poboljšavajući antitumorske funkcionalnosti, i/ili prevazilazeći supresivne efekte jedne ili više endogenih imunih kontrolnih tačaka, kao što su PD-1, LAG-3 i TGFβ, bio bi važan dodatak za lečenje pacijenata sa proliferativnim poremećajima, kao što je kancer, kao i virusne infekcije.
[0007] Podnosioci su otkrili jedinjenja koja imaju aktivnost u vidu inhibitora jednog ili oba DGKα i DGKζ. Dalje, podnosioci su otrkili jedinjenja koja imaju aktivnost u vidu inhibitora jednog ili oba DGKα i DGKζ i imaju selektivnost u odnosu na druge diacilglicerol kinaze, protein kinaze i/ili druge lipid kinaze. Predviđeno je da ova jedinjenja budu korisna kao farmaceutici sa poželjnom stabilnošću, biodostupnošću, terapijskim indeksom i vrednostima toksičnosti koje su važne za njihovu drugabilnost (eng. drugability).
KRATAK OPIS PRONALASKA
[0008] Predmetni pronalazak obezbeđuje supstituisana jedinjenja naftiridinona formule (I), koja su korisna kao inhibitori DGKα, DGKζ, ili oba DGKα i DGKζ, uključujući njihove soli.
[0009] Predmetni pronalazak takođe obezbeđuje farmaceutske kompozicije koje sadrže jedinjenje formule (I) i/ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so; i farmaceutski prihvatljiv nosač.
[0010] Predmetni pronalazak takođe obezbeđuje procese i intermedijere za pravljenje jedinjenja formule (I) i/ili njihovih soli.
[0011] Predmetni pronalazak takođe obezbeđuje jedinjenje formule (I) i/ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, za upotrebu u terapiji.
[0012] Predmetni pronalazak takođe obezbeđuje jedinjenja formule (I) i/ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, za lečenje proliferativnih poremećaja, kao što su kancer i virusne infekcije.
[0013] Jedinjenja formule (I) i kompozicije koje sadrže jedinjenja formule (I) se mogu koristiti u lečenju, prevenciji ili izlečenju virusnih infekcija i različitih proliferativnih poremećaja, kao što je kancer. Farmaceutske kompozicije koje sadrže ova jedinjenja su korisne u lečenju, prevenciji ili usporavanju progresije bolesti ili poremećaja u različitim terapijskim oblastima, kao što su virusne infekcije i kancer.
[0014] Ove i druge karakteristike pronalaska će biti izložene u proširenom obliku kako se opis bude nastavljao.
DETALJAN OPIS
[0015] Prvi aspekt predmetnog pronalaska obezbeđuje najmanje jedno jedinjenje formule (I):
ili so navedenog, pri čemu:
R1je H, F, Cl, Br, -CN, C1-3alkil supstituisan sa nula do 4 R1a, C3-4cikloalkil supstituisan sa nula do 4 R1a, C1-3alkoksi supstituisan sa nula do 4 R1a, -NRaRa, -S(O)nRe, ili -P(O)ReRe; svaki R1aje nezavisno F, Cl, -CN, -OH, -OCH3, ili -NRaRa;
svaki Raje nezavisno H ili C1-3alkil;
svaki Reje nezavisno C3-4cikloalkil ili C1-3alkil supstituisan sa nula do 4 R1a;
R2je H, C1-3alkil supstituisan sa nula do 4 R2a, ili C3-4cikloalkil supstituisan sa nula do 4 R2a;
svaki R2aje nezavisno F, Cl, -CN, -OH, -O(C1-2alkil), C3-4cikloalkil, C3-4alkenil, ili C3-4alkinil;
R3je H, F, Cl, Br, -CN, C1-3alkil, C1-2fluoroalkil, C3-4cikloalkil, C3-4fluorocikloalkil, ili -NOz;
R4je -CH2R4a, -CH2CH2R4a, -CH2CHR4aR4d, -CHR4aR4b, ili -CR4aR4bR4c;
R4ai R4bsu nezavisno:
(i) C1-6alkil supstituisan sa nula do 4 supstituenta nezavisno izabranih iz F, Cl, -CN, -OH, -OCH3, -SCH3, C1-3fluoroalkoksi, -NRaRa, -S(O)2Re, ili -NRaS(O)2Re;
(ii) C3-6cikloalkil, heterociklil, fenil, ili heteroaril, svaki supstituisan sa nula do 4 supstituenta nezavisno izabranih iz F, Cl, Br, -CN, -OH, C1-6alkila, C1-3fluoroalkila, C1-4hidroksialkila, -(CH2)1-2O(C1-3alkila), C1-4alkoksi, -O(C1-4hidroksialkil), -O(CH)1-3O(C1-3alkila), C1-3fluoroalkoksi, -O(CH)1-3NRcRc, -OCH2CH=CH2, -OCH2C≡CH, -C(O)(C1-4alkila), -C(O)OH, -C(O)O(C1-4alkila), -NRcRc, -NRaS(O)2(C1-3alkila), -NRaC(O)(C1-3alkila), -NRaC(O)O(C1-
4alkila), -P(O)(C1-3alkila)2, -S(O)2(C1-3alkila), -O(CH2)1-2(C3-6cikloalkila), -O(CH2)1-2(morfolinila), ciklopropila, cijanociklopropila, metilazetidinila, acetilazetidinila, (terc-butoksikarbonil)azetidinila, triazolila, tetrahidropiranila, morfolinila, tiofenila, metilpiperidinila, i Rd; ili
(iii) C1-4alkil supstituisan sa jednom cikličnom grupom odabranom iz C3-6cikloalkila, heterociklila, arila, i heteroarila, pri čemu je navedena ciklična grupa supstituisana sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabrana iz F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-6alkila, C1-3fluoroalkila, C1-3alkoksi, C1-3fluoroalkoksi, -OCH2CH=CH2, -OCH2C≡CH, -NRcRc, -NRaS(O)2(C1-3alkila), -NRaC(O)(C1-3alkila), -NRaC(O)O(C1-4alkila), i C3-6cikloalkila;
ili R4ai R4bzajedno sa atomom ugljenika za kojeg su vezani formiraju C3-6cikloalkil ili 3-do 6-člani heterociklil, svaki supstituisan sa nula do 3 Rf;
svaki Rfje nezavisno F, Cl, Br, -OH, -CN, =O, C1-6alkil, C1-3fluoroalkil, C1-3alkoksi, C1-
3fluoroalkoksi, -OCH2CH=CH2, -OCH2C≡CH, -NRcRc, ili ciklična grupa odabrana iz C3-
6cikloalkila, 3- do 6-članog heterociklila, fenila, monocikličnog heteroarila, i bicikličnog heteroarila, pri čemu je svaka ciklična grupa supstituisana sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabrana iz F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-6alkila, C1-3fluoroalkila, C1-3alkoksi, C1-3fluoroalkoksi, i -NRcRc;
R4cje C1-6alkil ili C3-6cikloalkil, svaki supstituisan sa nula do 4 supstituenta nezavisno izabranih iz F, Cl, -OH, C1-2alkoksi, C1-2fluoroalkoksi, i -CN;
R4dje -OCH3;
svaki Rcje nezavisno H ili C1-2alkil;
Rdje fenil supstituisan sa nula do 1 supstituentom odabranim iz F, Cl, -CN, -CH3, i -OCH3; svaki R5je nezavisno -CN, C1-6alkil supstituisan sa nula do 4 Rg, C2-4alkenil supstituisan sa nula do 4 Rg, C2-4alkinil supstituisan sa nula do 4 Rg, C3-4cikloalkil supstituisan sa nula do 4 Rg, fenil supstituisan sa nula do 4 Rg, oksadiazolil supstituisan sa nula do 4 Rg, piridinil supstituisan sa nula do 4 Rg, -(CH2)1-2(heterociklil supstituisan sa nula do 4 Rg), -(CH2)1-
2NRcC(O)(C1-4alkil), -(CH2)1-2NRcC(O)O(C1-4alkil), -(CH2)1-2NRcS(O)2(C1-4alkil), -C(O)(C1-4alkil), -C(O)OH, -C(O)O(C1-4alkil), -C(O)O(C3-4cikloalkil), -C(O)NRaRa, ili -C(O)NRa(C3-4cikloalkil);
svaki Rgje nezavisno F, Cl, -CN, -OH, C1-3alkoksi, C1-3fluoroalkoksi, -O(CH2)1-2O(C1-2alkil), ili -NReRe;
m je 1, 2, ili 3; i
n je nula, 1, ili 2.
[0016] Drugi aspekt predmetnog pronalaska obezbeđuje najmanje jedno jedinjenje formule (I) ili so navedenog, pri čemu:
R1je H, F, Cl, Br, -CN, C1-3alkil supstituisan sa nula do 4 R1a, C3-4cikloalkil supstituisan sa nula do 4 R1a, C1-3alkoksi supstituisan sa nula do 4 R1a, -NRaRa, -S(O)nRe, ili -P(O)ReRe; svaki R1aje nezavisno F, Cl, -CN, -OH, -OCH3, ili -NRaRa;
svaki Raje nezavisno H ili C1-3alkil;
svaki Reje nezavisno C3-4cikloalkil ili C1-3alkil supstituisan sa nula do 4 R1a;
R2je H, C1-3alkil supstituisan sa nula do 4 R2a, ili C3-4cikloalkil supstituisan sa nula do 4 svaki R2aje nezavisno F, Cl, -CN, -OH, -0(Ci-z alkil), C3-4cikloalkil, C3-4alkenil, ili C3-4alkinil;
R3je H, F, Cl, Br, -CN, C1-3alkil, C1-2fluoroalkil, C3-4cikloalkil, C3-4fluorocikloalkil, ili -NO2;
R4je -CH2R4a, -CH2CH2R4a, -CH2CHR4aR4d, -CHR4aR4b, ili -CR4aR4bR4c;
R4ai R4bsu nezavisno:
(i) C1-6alkil supstituisan sa nula do 4 supstituenta nezavisno izabranih iz F, Cl, -CN, -OH, -OCH3, C1-3fluoroalkoksi i -NRaRa;
(ii) C3-6cikloalkil, heterociklil, fenil, ili heteroaril, svaki supstituisan sa nula do 4 supstituenta nezavisno izabranih iz F, Cl, Br, -CN, -OH, C1-6alkila, C1-3fluoroalkila, -CH2OH, C1-3alkoksi, C1-3fluoroalkoksi, -OCH2CH=CH2, -OCH2C=CH, -C(O)(CI-3 alkil), -C(O)OH, -C(O)O(C1-3alkila), -NRcRc, -NRaS(O)2(C1-3alkila), -NRaC(O)(C1-3alkila), -NRaC(O)O(C1-4alkila), -S(O)2(C1-3alkila), ciklopropila, cijanociklopropila, (tercbutoksikarbonil)azetidinila, tetrahidropiranila, morfolinila, metilpiperidinila, i Rd; ili
(iii) C1-4alkil supstituisan sa jednom cikličnom grupom odabranom iz C3-6cikloalkila, heterociklila, arila, i heteroarila, pri čemu je navedena ciklična grupa supstituisana sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabrana iz F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-6alkila, C1-3fluoroalkila, C1-3alkoksi, C1-3fluoroalkoksi, -OCH2CH=CH2, -OCH2C≡CH, -NRcRc, -NRaS(O)2(C1-3alkil), -NRaC(O)(C1-3alkila), i -NRaC(O)O(C1-4alkila);
ili R4ai R4bzajedno sa atomom ugljenika za kojeg su vezani formiraju C3-6cikloalkil ili 3-do 6-člani heterociklil, svaki supstituisan sa nula do 3 Rf;
svaki Rfje nezavisno F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-6alkil, C1-3fluoroalkil, C1-3alkoksi, C1-3fluoroalkoksi, -OCH2CH=CH2, -OCH2C≡CH, -NRcRc, ili ciklična grupa odabrana iz C3-6cikloalkila, 3- do 6-članog heterociklila, fenila, monocikličnog heteroarila, i bicikličnog heteroarila, pri čemu je svaka ciklična grupa supstituisana sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabrana iz F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-6alkila, C1-3fluoroalkila, C1-3alkoksi, C1-3fluoroalkoksi, i -NRcRc;
R4cje C1-6alkil ili C3-6cikloalkil, svaki supstituisan sa nula do 4 supstituenta nezavisno izabranih iz F, Cl, -OH, C1-2alkoksi, C1-2fluoroalkoksi, i -CN;
R4dje -OCH3;
svaki Rcje nezavisno H ili C1-2alkil;
Rdje fenil supstituisan sa nula do 1 supstituentom odabranim iz F, Cl, -CH3, i -OCH3; svaki R5je nezavisno -CN, C1-6alkil supstituisan sa nula do 4 Rg, C2-4alkenil supstituisan sa nula do 4 Rg, C2-4alkinil supstituisan sa nula do 4 Rg, C3-4cikloalkil supstituisan sa nula do 4 Rg, fenil supstituisan sa nula do 4 Rg, piridinil supstituisan sa nula do 4 Rg, -C(O)(C1-
4alkil), -C(O)OH, -C(O)O(C1-4alkil), -C(O)O(C3-4cikloalkil), -C(O)NRaRa, -C(O)NHNHC(O)CH3, ili -C(O)NRa(C3-4cikloalkil);
svaki Rgje nezavisno F, Cl, -CN, -OH, C1-3alkoksi, ili C1-3fluoroalkoksi;
m je 1, 2, ili 3; i
n je nula, 1, ili 2.
[0017] Treći aspekt predmetnog pronalaska obezbeđuje najmanje jedno jedinjenje formule (I) ili so navedenog, pri čemu:
R1je H, F, Cl, Br, -CN, C1-3alkil supstituisan sa nula do 4 R1a, C3-4cikloalkil supstituisan sa nula do 4 R1a, C1-3alkoksi supstituisan sa nula do 4 R1a, -NRaRa, -S(O)nRe, ili -P(O)ReRe; svaki R1aje nezavisno F, Cl, -CN, -OH, -OCH3, ili -NRaRa;
svaki Raje nezavisno H ili C1-3alkil;
svaki Reje nezavisno C3-4cikloalkil ili C1-3alkil supstituisan sa nula do 4 R1a;
R2je H, C1-3alkil supstituisan sa nula do 4 R2a, ili C3-4cikloalkil supstituisan sa nula do 4 R2a;
svaki R2aje nezavisno F, Cl, -CN, -OH, -O(C1-2alkil), C3-4cikloalkil, C3-4alkenil, ili C3-4alkinil;
R3je H, F, Cl, Br, -CN, C1-3alkil, C1-2fluoroalkil, C3-4cikloalkil, C3-4fluorocikloalkil, ili -NOz;
R4je -CH2R4a, -CHR4aR4b, ili -CR4aR4bR4c;
R4ai R4bsu nezavisno:
(i) C1-6alkil supstituisan sa nula do 4 supstituenta nezavisno izabranih iz F, Cl, -CN, -OH, -OCH3, C1-3fluoroalkoksi i -NRaRa;
(ii) C3-6cikloalkil, heterociklil, aril, ili heteroaril, svaki supstituisan sa nula do 4 supstituenta nezavisno izabranih iz F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-6alkila, C1-3fluoroalkila, -CH2OH, C1-3alkoksi, C1-3fluoroalkoksi, -OCH2CH=CH2, -OCH2C≡CH, -NRcRc, -NRaS(O)2(C1-3alkil), -NRaC(O)(C1-3alkila), -NRaC(O)O(C1-4alkila), i Rd; ili
(iii) C1-4alkil supstituisan sa jednom cikličnom grupom odabranom iz C3-6cikloalkila, heterociklila, arila, i heteroarila, pri čemu je navedena ciklična grupa supstituisana sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabrana iz F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-6alkila, C1-3fluoroalkila, C1-3alkoksi, C1-3fluoroalkoksi, -OCH2CH=CH2, -OCH2C≡CH, -NRcRc, -NRaS(O)2(C1-3alkila), -NRaC(O)(C1-3alkila), i -NRaC(O)O(C1-4alkila);
ili R4ai R4bzajedno sa atomom ugljenika za kojeg su vezani formiraju C3-6cikloalkil ili 3-do 6-člani heterociklil, svaki supstituisan sa nula do 3 Rf;
svaki Rfje nezavisno F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-6alkil, C1-3fluoroalkil, C1-3alkoksi, C1-3fluoroalkoksi, -OCH2CH=CH2, -OCH2C≡CH, -NRcRc, ili ciklična grupa odabrana iz C3-6cikloalkila, 3- do 6-članog heterociklila, fenila, monocikličnog heteroarila, i bicikličnog heteroarila, pri čemu je svaka ciklična grupa supstituisana sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabrana iz F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-6alkila, C1-3fluoroalkila, C1-3alkoksi, C1-3fluoroalkoksi, i -NRcRc;
R4cje C1-6alkil ili C3-6cikloalkil, svaki supstituisan sa nula do 4 supstituenta nezavisno izabranih iz F, Cl, -OH, C1-2alkoksi, C1-2fluoroalkoksi, i -CN;
svaki Rcje nezavisno H ili C1-2alkil;
Rdje fenil supstituisan sa nula do 1 supstituentom odabranim iz F, Cl, -CH3, i -OCH3; svaki R5je nezavisno -CN, C1-6alkil supstituisan sa nula do 4 Rg, C2-4alkenil supstituisan sa nula do 4 Rg, C2-4alkinil supstituisan sa nula do 4 Rg, C3-4cikloalkil supstituisan sa nula do 4 Rg, fenil supstituisan sa nula do 4 Rg, piridinil supstituisan sa nula do 4 Rg, -C(O)OH, -C(O)O(C1-4alkil), -C(O)O(C3-4cikloalkil), -C(O)NRaRa, -C(O)NHNHC(O)CH3, ili -C(O)NRa(C3-4cikloalkil); svaki Rgje nezavisno F, Cl, -CN, -OH, C1-3alkoksi, ili C1-3fluoroalkoksi;
m je 1, 2, ili 3; i
n je nula, 1, ili 2.
[0018] U jednom tehničkom rešenju, jedinjenje formule (I) ili so navedenog je obezbeđena pri čemu: R1je H, F, Cl, Br, -CN, C1-3alkil supstituisan sa nula do 4 R1a, ciklopropil supstituisan sa nula do 3 R1a, C1-3alkoksi supstituisan sa nula do 3 R1a, -NRaRa, -S(O)nCH3, ili -P(OXCH3)2; svaki R1aje nezavisno F, Cl, ili -CN; svaki Raje nezavisno H ili C1-3alkil; R2je H ili C1-2alkil supstituisan sa nula do 2 R2a; svaki R2aje nezavisno F, Cl, -CN, -OH, -0(Ci-z alkil), ciklopropil, C3-4alkenil, ili C3-4alkinil; R3je H, F, Cl, Br, -CN, C1-2alkil, -CF3, ciklopropil, ili -NO2; R4ai R4bsu nezavisno: (i) C1-4alkil supstituisan sa nula do 4 supstituenta nezavisno izabranih iz F, Cl, -CN, -OH, -OCH3, -SCH3, C1-3fluoroalkoksi, i -NRaRa; (ii) C3-6cikloalkila, heterociklila, fenila, ili heteroarila, svaki supstituisan sa nula do 4 supstituenta nezavisno izabranih iz F, Cl, Br, -CN, -OH, C1-6alkila, C1-3fluoroalkila, -CH2OH, -(CH2)1-2O(C1-2alkila), C1-4alkoksi, -O(C1-4hidroksialkila), -O(CH)1-2O(C1-2alkila), C1-3fluoroalkoksi, -O(CH)1-2NRcRc, -OCH2CH=CH2, -OCH2C≡CH, -C(O)(C1-4alkila), -C(O)OH, -C(O)O(C1-4alkila), -NRcRc, -NRaS(O)2(C1-3alkila), -NRaC(O)(C1-3alkila), -NRaC(O)O(C1-4alkila), -P(OXC1-2alkil)2, -S(O)2(C1-3alkila), -O(CH2)1-2(C3-4cikloalkila), -O(CH2)1-2(morfolinila), ciklopropila, cijanociklopropila, metilazetidinila, acetilazetidinila, (terc-butoksikarbonil)azetidinila, triazolila, tetrahidropiranila, morfolinila, tiofenila, metilpiperidinila, i Rd; ili (iii) C1-3alkil supstituisan sa jednom cikličnom grupom odabranom iz C3-6cikloalkila, heterociklila, fenila, i heteroarila, pri čemu je navedena ciklična grupa supstituisana sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabrana iz F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-3alkila, C1-2fluoroalkila, C1-3alkoksi, C1-2fluoroalkoksi, -OCH2CH=CH2, -OCH2C≡CH, -NRcRc, -NRaS(O)2(C1-3alkila), -NRaC(O)(C1-3alkila), -NRaC(O)O(C1-4alkila), i C3-4cikloalkila; ili R4ai R4bzajedno sa atomom ugljenika za kojeg su vezani, formiraju C3-6cikloalkil ili 3- do 6-člani heterociklil, svaki supstituisan sa nula do 3 Rf; svaki Rfje nezavisno F, Cl, Br, -OH, -CN, =O, C1-4alkil, C1-2fluoroalkil, C1-3alkoksi, C1-2fluoroalkoksi, -OCH2CH=CH2, -OCH2C≡CH, -NRcRc, ili ciklična grupa odabrana iz C3-6cikloalkila, 3- do 6-članog heterociklila, fenila, monocikličnog heteroarila, i bicikličnog heteroarila, pri čemu je svaka ciklična grupa supstituisana sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabrana iz F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-4alkila, C1-2fluoroalkila, C1-3alkoksi, C1-2fluoroalkoksi, i -NRcRc; R4cje C1-4alkil ili C3-6cikloalkil, svaki supstituisan sa nula do 4 supstituenta nezavisno izabranih iz F, Cl, -OH, C1-2alkoksi, C1-2fluoroalkoksi, i -CN; i svaki R5je nezavisno -CN, C1-5alkil supstituisan sa nula do 4 Rg, C2-3alkenil supstituisan sa nula do 4 Rg, C2-3alkinil supstituisan sa nula do 4 Rg, C3-4cikloalkil supstituisan sa nula do 4 Rg, fenil supstituisan sa nula do 3 Rg, oksadiazolil supstituisan sa nula do 3 Rg, piridinil supstituisan sa nula do 3 Rg, -(CH2)1-2(heterociklil supstituisan sa nula do 4 Rg), -(CH2)1-2NRcC(O)(C1-4alkil), -(CH2)1-2NRcC(O)O(C1-4alkil), -(CH2)1-2NRcS(O)2(C1-4alkil), -C(O)(C1-4alkil), -C(O)OH, -C(O)O(C1-
4alkil), -C(O)O(C3-4cikloalkil), -C(O)NRaRa, ili -C(O)NRa(C3-4cikloalkil).
[0019] U jednom tehničkom rešenju, jedinjenje formule (I) ili so navedenog je obezbeđena pri čemu: R1je H, F, Cl, Br, -CN, C1-3alkil supstituisan sa nula do 4 R1a, ciklopropil supstituisan sa nula do 3 R1a, C1-3alkoksi supstituisan sa nula do 3 R1a, -NReRe, -S(O)nCH3, ili -P(O)CH3)2; svaki R1aje nezavisno F, Cl, ili -CN; svaki Raje nezavisno H ili C1-3alkil; svaki Reje nezavisno C3-4cikloalkil ili C1-2alkil supstituisan sa nula do 4 R1a; R2je H ili C1-2alkil supstituisan sa nula do 2 R2a; svaki R2aje nezavisno F, Cl, -CN, -OH, -0(Ci-z alkil), ciklopropil, C3-4alkenil, ili C3-4alkinil; R3je H, F, Cl, Br, -CN, C1-2alkil, -CF3, ciklopropil, ili -NO2; R4ai R4bsu nezavisno: (i) C1-4alkil supstituisan sa nula do 4 supstituenta nezavisno izabranih iz F, Cl, -CN, -OH, -OCH3, C1-3fluoroalkoksi, C3-6cikloalkila, i -NRaRa; (ii) C3-6cikloalkila, heterociklila, fenila, ili heteroarila, svaki supstituisan sa nula do 4 supstituenta nezavisno izabranih iz F, Cl, Br, -CN, -OH, C1-6alkila, C1-3fluoroalkila, -CH2OH, C1-3alkoksi, C1-3fluoroalkoksi, -OCH2CH=CH2, -OCH2C≡CH, -C(O)(C1-3alkila), -C(O)OH, -C(O)O(C1-3alkila), -NRcRc, -NRaS(O)2(C1-3alkila), -NRaC(O)(C1-3alkila), -NRaC(O)O(C1-4alkila), -S(O)2(C1-3alkila), ciklopropila, cijanociklopropila, (terc-butoksikarbonil)azetidinila, tetrahidropiranila, morfolinila, metilpiperidinila, i Rd; ili (iii) C1-3alkil supstituisan sa jednom cikličnom grupom odabranom iz C3-6cikloalkila, heterociklila, fenila, i heteroarila, pri čemu je navedena ciklična grupa supstituisana sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabrana iz F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-3alkila, C1-2fluoroalkila, C1-3alkoksi, C1-2fluoroalkoksi, -OCH2CH=CH2, -OCH2C≡CH, -NRcRc, -NRaS(O)2(C1-3alkila), -NRaC(O)(C1-3alkila), i -NRaC(O)O(C1-4alkila); ili R4ai R4bzajedno sa atomom ugljenika za kojeg su vezani formiraju C3-6cikloalkil ili 3- do 6-člani heterociklil, svaki supstituisan sa nula do 3 Rf; svaki Rfje nezavisno F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-4alkil, C1-2fluoroalkil, C1-3alkoksi, C1-2fluoroalkoksi, -OCH2CH=CH2, -OCH2C≡CH, -NRcRc, ili ciklična grupa odabrana iz C3-6cikloalkila, 3- do 6-članog heterociklila, fenila, monocikličnog heteroarila, i bicikličnog heteroarila, pri čemu je svaka ciklična grupa supstituisana sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabrana iz F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-4alkila, C1-2fluoroalkila, C1-3alkoksi, C1-2fluoroalkoksi, i -NRcRc; R4cje C1-4alkil ili C3-6cikloalkil, svaki supstituisan sa nula do 4 supstituenta nezavisno izabranih iz F, Cl, -OH, C1-2alkoksi, C1-
2fluoroalkoksi, i -CN; i svaki R5je nezavisno -CN, C1-5alkil supstituisan sa nula do 4 Rg, C2-3alkenil supstituisan sa nula do 4 Rg, C2-3alkinil supstituisan sa nula do 4 Rg, C3-4cikloalkil supstituisan sa nula do 4 Rg, fenil supstituisan sa nula do 3 Rg, oksadiazolil supstituisan sa nula do 3 Rg, piridinil supstituisan sa nula do 3 Rg, -C(O)(C1-4alkil), -C(O)OH, -C(O)O(C1-4alkil), -C(O)O(C3-4cikloalkil), -C(O)NRaRa, ili -C(O)NRa(C3-4cikloalkil); m je 1, 2, ili 3; i n je nula, 1, ili 2.
[0020] U jednom tehničkom rešenju, jedinjenje formule (I) ili so navedenog je obezbeđena pri čemu: R1je H, F, Cl, Br, -CN, C1-3alkil supstituisan sa nula do 4 R1a, ciklopropil supstituisan sa nula do 3 R1a, C1-3alkoksi supstituisan sa nula do 3 R1a, -NRaRa, -S(O)nCH3, ili -P(O)(CH3)2; svaki R1aje nezavisno F, Cl, ili -CN; svaki Raje nezavisno H ili C1-3alkil; svaki Reje nezavisno C3-4cikloalkil ili C1-2alkil supstituisan sa nula do 4 R1a; R2je H ili C1-2alkil supstituisan sa nula do 2 R2a; svaki R2aje nezavisno F, Cl, -CN, -OH, -O(C1-2alkil), ciklopropil, C3-4alkenil, ili C3-4alkinil; R3je H, F, Cl, Br, -CN, C1-2alkil, -CF3, ciklopropil, ili -NO2; R4ai R4bsu nezavisno: (i) C1-4alkil supstituisan sa nula do 4 supstituenta nezavisno izabranih iz F, Cl, -CN, -OH, -OCH3, C1-3fluoroalkoksi, i -NRaRa; (ii) C3-6cikloalkil, heterociklil, fenil, ili heteroaril, svaki supstituisan sa nula do 4 supstituenta nezavisno izabranih iz F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-6alkila, C1-3fluoroalkila, -CH2OH, C1-3alkoksi, C1-3fluoroalkoksi, -OCH2CH=CH2, -OCH2C≡CH, -NRcRc, -NRaS(O)2(C1-3alkila), -NRaC(O)(C1-3alkila), -NRaC(O)O(C1-4alkila), i Rd; ili (iii) C1-3alkil supstituisan sa jednom cikličnom grupom odabranom iz C3-6cikloalkila, heterociklila, fenila, i heteroarila, pri čemu je navedena ciklična grupa supstituisana sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabrana iz F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-3alkila, C1-2fluoroalkila, C1-3alkoksi, C1-2fluoroalkoksi, -OCH2CH=CH2, -OCH2C≡CH, -NRcRc, -NRaS(O)2(C1-3alkila), -NRaC(O)(C1-3alkila), i -NRaC(O)O(C1-4alkila); ili R4ai R4bzajedno sa atomom ugljenika za kojeg su vezani formiraju C3-6cikloalkil ili 3- do 6-člani heterociklil, svaki supstituisan sa nula do 3 Rf; svaki Rfje nezavisno F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-4alkil, C1-2fluoroalkil, C1-3alkoksi, C1-
2fluoroalkoksi, -OCH2CH=CH2, -OCH2C≡CH, -NRcRc, ili ciklična grupa odabrana iz C3-6cikloalkila, 3- do 6-članog heterociklila, fenila, monocikličnog heteroarila, i bicikličnog heteroarila, pri čemu je svaka ciklična grupa supstituisana sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabrana iz F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-4alkila, C1-2fluoroalkila, C1-3alkoksi, C1-2fluoroalkoksi, i -NRcRc; R4cje C1-4alkil ili C3-6cikloalkil, svaki supstituisan sa nula do 4 supstituenta nezavisno izabranih iz F, Cl, -OH, C1-2alkoksi, C1-2fluoroalkoksi, i -CN; svaki R5je nezavisno -CN, C1-5alkil supstituisan sa nula do 4 Rg, C2-3alkenil supstituisan sa nula do 4 Rg, C2-3alkinil supstituisan sa nula do 4 Rg, C3-4cikloalkil supstituisan sa nula do 4 Rg, fenil supstituisan sa nula do 3 Rg, oksadiazolil supstituisan sa nula do 3 Rg, piridinil supstituisan sa nula do 3 Rg, -C(O)OH, -C(O)O(C1-4alkil), -C(O)O(C3-4cikloalkil), -C(O)NRaRa, ili -C(O)NRa(C3-4cikloalkil); svaki Rgje nezavisno F, Cl, -CN, -OH, C1-3alkoksi, ili C1-3fluoroalkoksi; m je 1, 2, ili 3; i n je nula, 1, ili 2.
[0021] U jednom tehničkom rešenju, jedinjenje formule (I) ili so navedenog je obezbeđena pri čemu: R1je H, Cl, Br, -CN, ili -OCH3; R2je -CH3; R3je H, F, Cl, Br, -CN, -CH3, ciklopropil, ili -NO2; R4je -CH2R4a, -CH2CH2R4a, -CH2CHR4aR4d, ili -CHR4aR4b; R4aje fenil, piridinil, pirimidinil, pirazinil, piridazinil, pirazolil, imidazolil, izoksazolil, izotiazolil, oksazolil, oksadiazolil, tetrazolil, tiadiazolil, tiazolil, triazolil, tiofenil, tetrahidropiranil, dihidrobenzo[b][1,4]dioksinil, dihidrobenzo[b][1,4]dioksepinil, dihidrobenzofuranil, benzo[d]izoksazolil, benzoksazinil, benzoksazinonil, indazolil, indolil, benzo[d][1,3]dioksolil, pirazolo[1,5-a]piridinil, dioksidotetrahidrotiopiranil, hinolinil, ili naftiridinil, svaki supstituisan sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabranih iz F, Cl, Br, -CN, -OH, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -C(CH3)3, -CHF2, -CF3, -CH2OH, -CH2OCH3, -OCH3, -OCH2CH3, -OCH(CH3)2, -OC(CH3)3, -OCH2C(CH3)2OH, -OCH2CH2OCH3, -OCHF2, -OCF3, -OCH2CH2N(CH3)2, -C(O)CH3, -C(O)C(CH3)3, -C(O)OH, -C(O)OCH3, -C(O)OC(CH3)3, -N(CH3)2, -P(O)(CH3)2, -S(O)2CH3, -OCH2(ciklopropila), -OCH2CH2(ciklopropila), -OCH2CH2(morfolinila), ciklopropila, cijanociklopropila, metilazetidinila, acetilazetidinila, (tercbutoksikarbonil)azetidinila, triazolila, tetrahidropiranila, morfolinila, fenila, fluorofenila, cijanofenila, tiofenila, fluorofenila, i metilpiperidinila; R4bje: (i) -CH3, -CH2CH3, -CH2CH2CH3, -C(CH3)3, -CH2F, -CF3, -CH2OH, -C(CH3)2OH, -CH2OCH3, -CH2OCHF2, -CF2CH2OH, -CF2CH2OCH3, -CH2SCH3, ciklopropil, -CH2(cikloheksil), ili -CH2(ciklopropiloksadiazolil); ili (ii) fenil, piridinil, pirimidinil, pirazinil, piridazinil, pirazolil, imidazolil, izoksazolil, izotiazolil, oksazolil, oksadiazolil, tetrazolil, tiadiazolil, tiazolil, triazolil, tiofenil, tetrahidropiranil, dihidrobenzo[b][1,4]dioksinil, dihidrobenzo[b][1,4]dioksepinil, dihidrobenzofuranil, benzo[d]izoksazolil, benzoksazinil, benzoksazinonil, indazolil, indolil, benzo[d][1,3]dioksolil, pirazolo[1,5-a]piridinil, dioksidotetrahidrotiopiranil, hinolinil, ili naftiridinil, svaki supstituisan sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabranih iz F, Cl, Br, -CN, -OH, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -C(CH3)3, -CHF2, -CF3, -CH2OH, -CH2OCH3, -OCH3, -OCH2CH3, -OCH(CH3)2, -OC(CH3)3, -OCH2C(CH3)2OH, -OCH2CH2OCH3, -OCHF2, -OCF3, -OCH2CH2N(CH3)2, -C(O)CH3, -C(O)C(CH3)3, -C(O)OH, -C(O)OCH3, -C(O)OC(CH3)3, -N(CH3)2, -P(O)(CH3)2, -S(O)2CH3, -OCH2(ciklopropila), -OCH2CH2(ciklopropila), -OCH2CH2(morfolinila), ciklopropila, cijanociklopropila, metilazetidinila, acetilazetidinila, (terc-butoksikarbonil)azetidinila, triazolila, tetrahidropiranila, morfolinila, fenila, fluorofenila, cijanofenila, tiofenila, fluorofenila, i metilpiperidinila; ili R4ai R4bzajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani formiraju oksotetrahidrofuranil ili ciklopropil supstituisan sa fluorofenilom; svaki R5je nezavisno -CN, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2F, -C(CH3)2F, CF(CH3)CH(CH3)2, -CH2CN, -CH2OH, -C(CH3)2OH, -C(CH3)(OH)CH(CH3)2, -CH2OCH3, -CH2OCH2CH3, -CH2OCHF2, -CH2OCH2CH2OCH3, -CH2N(CH3)2, -CH2NHC(O)CH3, -CH2NHC(O)OCH3, -CH2NHS(O)2CH3, -C(O)C(CH3)2, -CH2(hidroksiazetidinila), -CH2(morfolinila), -CH2(metilpiperazinila), -C(O)OH, -C(O)OCH3, -C(O)OC(CH3)2, -C(O)NH2, -C(O)NH(ciklopropila), -C(O)O(ciklopropila), ciklopropila, fenila, metiloksadiazolila, ili metilpiridinila; i m je 1 ili 2.
[0022] U jednom tehničkom rešenju, jedinjenje formule (I) ili so navedenog je obezbeđena pri čemu: R1je H, Br, -CN, ili -OCH3; R2je -CH3; R3je H, F, Cl, Br, -CN, -CH3, ciklopropil, ili -NO2; R4je -CH2R4a, -CH2CH2R4a, -CH2CHR4aR4d, ili -CHR4aR4b; R4aje fenil, piridinil, pirimidinil, pirazinil, pirazolil, imidazolil, izoksazolil, izotiazolil, oksazolil, oksadiazolil, tetrazolil, tiadiazolil, tiazolil, triazolil, tetrahidropiranil, dihidrobenzo[b][1,4]dioksinil, dihidrobenzo[b][1,4]dioksepinil, dihidrobenzofuranil, benzoksazinil, benzoksazinonil, indazolil, indolil, benzo[d][1,3]dioksolil, pirazolo[1,5-a]piridinil, hinolinil, ili naftiridinil, svaki supstituisan sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabranih iz F, Cl, Br, -CN, -OH, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -C(CH3)3, -CHF2, -CF3, -OCH3, -OCH2CH3, -OCH(CH3)2, -OCHF2, -OCF3, -C(O)CH3, -C(O)OH, -C(O)OCH3, -C(O)OC(CH3)3, -N(CH3)2, -S(O)2CH3, ciklopropila, cijanociklopropila, (terc-butoksikarbonil)azetidinila, tetrahidropiranila, morfolinila, fenila, fluorofenila, i metilpiperidinila; R4bje: (i) -CH3, -CH2CH3, -CH2CH2CH3, -C(CH3)3, -CH2F, -CF3, -CH2OH, -CH2OCH3, -CH2OCHF2, -CH2(cikloheksil), ili ciklopropil; ili (ii) fenil, piridinil, pirimidinil, pirazinil, pirazolil, imidazolil, izoksazolil, izotiazolil, oksazolil, oksadiazolil, tetrazolil, tiadiazolil, tiazolil, triazolil, tetrahidropiranil, dihidrobenzo[b][1,4]dioksinil, dihidrobenzo[b][1,4]dioksepinil, dihidrobenzofuranil, benzoksazinil, benzoksazinonil, indazolil, indolil, benzo[d][1,3]dioksolil, pirazolo[1,5-a]piridinil, hinolinil, ili naftiridinil, svaki supstituisan sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabranih iz F, Cl, Br, -CN, -OH, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -C(CH3)3, -CHF2, -CF3, -OCH3, -OCH2CH3, -OCH(CH3)2, -OCHF2, -OCF3, -C(O)CH3, -C(O)OH, -C(O)OCH3, -C(O)OC(CH3)3, -N(CH3)2, -S(O)2CH3, ciklopropila, cijanociklopropila, (tercbutoksikarbonil)azetidinila, tetrahidropiranila, morfolinila, fenila, fluorofenila, i metilpiperidinila; R4dje -OCH3; svaki R5je nezavisno -CN, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CHC(CH3)2, -CH2F, -C(CH3)2F, -CF(CH3)CH(CH3)2, -CH2OH, -C(CH3)2OH, -C(CH3)(OH)CH(CH3)2, -CH2OCH3, -C(O)C(CH3)2, -C(O)OH, -C(O)OCH3, -C(O)OC(CH3)2, -C(O)NH2, -C(O)NH(ciklopropil), -C(O)O(ciklopropil), ciklopropil, fenil, metiloksadiazolil, ili metilpiridinil; i m je 1 ili 2.
[0023] U jednom tehničkom rešenju, jedinjenje formule (I) ili so navedenog je obezbeđena pri čemu: R1je H, Br, -CN, ili -OCH3; R2je -CH3; R3je H, F, Cl, Br, -CN, -CH3, ciklopropil, ili -NO2; R4je -CH2R4aili -CHR4aR4b; R4aje fenil ili piridinil, svaki supstituisan sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabranih iz F, Cl, -CN, -OH, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CHF2, -CF3, -CH2OH, -OCH3, -OCH2CH3, -OCH(CH3)2, i -OCF3; R4bje -CH3, -C(CH3)3, ili fenil supstituisan sa nula do 1 supstituentom odabranim iz F, Cl, -CH3, i -CH2OH; svaki R5je nezavisno -CN, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CHC(CH3)2, -CH2F, -C(CH3)2F, -CF(CH3)CH(CH3)2, -CH2OH, -C(CH3)2OH, -C(CH3)(OH)CH(CH3)2, -CH2OCH3, -C(O)C(CH3)2, -C(O)OH, -C(O)OCH3, -C(O)OC(CH3)2, -C(O)NH2, -C(O)NH(ciklopropil), -C(O)O(ciklopropil), ciklopropil, fenil, metiloksadiazolil, ili metilpiridinil; i m je 1 ili 2. U ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima je svaki R5nezavisno -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CHC(CH3)2, -CH2F, -C(CH3)2F, -CF(CH3)CH(CH3)2, -CH2OH, -C(CH3)2OH, -C(CH3)(OH)CH(CH3)2, -CH2OCH3, -C(O)C(CH3)2, -C(O)OCH3, -C(O)OC(CH3)2, -C(O)O(ciklopropil), ciklopropil, fenil, metiloksadiazolil, ili metilpiridinil.
[0024] U jednom tehničkom rešenju, jedinjenje formule (I) ili so navedenog je obezbeđena pri čemu R4je -CH2R4a, -CD2R4a, ili -CH2CH2R4a. U ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima R4je -CH2R4aili -CD2R4a. Takođe u ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima je R4afenil, piridinil, tetrahidropiranil, benzoksazinil, benzo[d][1,3]dioksolil, benzoksazinonil, indazolil, indolil, ili hinolinil, svaki supstituisan sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabranih iz F, Cl, Br, -CN, -OH, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -C(CH3)3, -CHF2, -CF3, -OCH3, -OCH2CH3, -OCH(CH3)2, -OCHF2, -OCF3, -C(O)CH3, -C(O)OC(CH3)3, -N(CH3)2, cijanociklopropila, i fenila.
[0025] U jednom tehničkom rešenju, jedinjenje formule (I) ili so navedenog je obezbeđena pri čemu R4je -CHR4aR4b, -CDR4aR4b, ili -CH2CHR4aR4d. U ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima R4je -CHR4aR4bili -CDR4aR4b. Takođe u ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima je R4afenil, piridinil, dihidrobenzofuranil, benzodioksolil, izoksazolil, naftiridinil, hinolinil, ili tiazolil, svaki supstituisan sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabranih iz F, Cl, Br, -CN, -OH, -CH3, -CF3, -OCH3, -OCHF2, -OCF3, -C(O)OH, -C(O)OCH3, i ciklopropila; R4bje -CH3, -CH2CH3, -CH2CH2CH3, -C(CH3)3, -CH2F, -CF3, -CH2OH, -C(CH3)2OH, -CH2OCH3, -CH2OCHF2, -CF2CH2OH, -CF2CH2OCH3, -CH2SCH3, ciklopropil, -CH2(cikloheksil), ili -CH2(ciklopropil-oksadiazolil); i R4dje -OCH3.
[0026] U jednom tehničkom rešenju, jedinjenje formule (I) ili so navedenog je obezbeđena pri čemu R4je -CHR4aR4bili -CHR4bCH2R4a. U ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima R4je -CHR4aR4b. Takođe u ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima R4ai R4bsu nezavisno fenil, piridinil, pirimidinil, pirazinil, piridazinil, pirazolil, imidazolil, izoksazolil, izotiazolil, oksazolil, oksadiazolil, tetrazolil, tiadiazolil, tiazolil, triazolil, tiofenil, tetrahidropiranil, dihidrobenzo[b][1,4]dioksinil, dihidrobenzo[b][1,4]dioksepinil, dihidrobenzofuranil, benzo[d]izoksazolil, benzoksazinil, benzoksazinonil, indazolil, indolil, benzo[d][1,3]dioksolil, pirazolo[1,5-a]piridinil, dioksidotetrahidrotiopiranil, hinolinil, ili naftiridinil, svaki supstituisan sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabranih iz F, Cl, Br, -CN, -OH, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -C(CH3)3, -CHF2, -CF3, -CH2OH, -CH2OCH3, -OCH3, -OCH2CH3, -OCH(CH3)2, -OC(CH3)3, -OCH2C(CH3)2OH, -OCH2CH2OCH3, -OCHF2, -OCF3, -OCH2CH2N(CH3)2, -C(O)CH3, -C(O)C(CH3)3, -C(O)OH, -C(O)OCH3, -C(O)OC(CH3)3, -N(CH3)2, -P(O)(CH3)2, -S(O)2CH3, -OCH2(ciklopropila), -OCH2CH2(ciklopropila), -OCH2CH2(morfolinila), ciklopropila, cijanociklopropila, metilazetidinila, acetilazetidinila, (terc-butoksikarbonil)azetidinila, triazolila, tetrahidropiranila, morfolinila, fenila, fluorofenila, cijanofenila, tiofenila, fluorofenila, i metilpiperidinila.
[0027] U jednom tehničkom rešenju, jedinjenje formule (I) ili so navedenog je obezbeđena pri čemu R4je -CH2R4a, -CD2R4a, -CHR4aR4b, ili -CDR4aR4b. U ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima R4je -CH2R4a, ili -CHR4aR4b. Takođe u ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima R4je -CH2R4a, -CD2R4a, -CHR4aR4b, ili -CDR4aR4b.
[0028] U jednom tehničkom rešenju, jedinjenje formule (I) ili so navedenog je obezbeđena pri čemu R4je -CHR4aR4b: R4aje fenil ili piridinil, svaki supstituisan sa nula do 2 supstituenta nezavisno odabrana iz F, Cl, Br, -CN, -CH3, i -OCF3; i R4bje fenil, piridinil, pirimidinil, pirazinil, piridazinil, pirazolil, imidazolil, izoksazolil, izotiazolil, oksazolil, oksadiazolil, tetrazolil, tiadiazolil, tiazolil, triazolil, tiofenil, tetrahidropiranil, dihidrobenzo[b][1,4]dioksinil, dihidrobenzo[b] [1,4]dioksepinil, dihidrobenzofuranil, benzo[d]izoksazolil, benzoksazinil, benzoksazinonil, indazolil, indolil, benzo[d][1,3]dioksolil, pirazolo[1,5-a]piridinil, dioksidotetrahidrotiopiranil, hinolinil, ili naftiridinil, svaki supstituisan sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabranih iz F, Cl, Br, -CN, -OH, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -C(CH3)3, -CHF2, -CF3, -CH2OH, -CH2OCH3, -OCH3, -OCH2CH3, -OCH(CH3)2, -OC(CH3)3, -OCH2C(CH3)2OH, -OCH2CH2OCH3, -OCHF2, -OCF3, -OCH2CH2N(CH3)2, -C(O)CH3, -C(O)C(CH3)3, -C(O)OH, -C(O)OCH3, -C(O)OC(CH3)3, -N(CH3)2, -P(O)(CH3)2, -S(O)2CH3, -OCH2(ciklopropila), -OCH2CH2(ciklopropila), -OCH2CH2(morfolinila), ciklopropila, cijanociklopropila, metilazetidinila, acetilazetidinila, (terc-butoksikarbonil)azetidinila, triazolila, tetrahidropiranila, morfolinila, fenila, fluorofenila, cijanofenila, tiofenila, fluorofenila, i metilpiperidinila.
[0029] U jednom tehničkom rešenju, obezbeđeno je jedinjenje formule (I) ili njegova so, pri čemu ima strukturu formule (II):
pri čemu su jedan, dva ili tri od R5a, R5b, R5c, i R5dsvaki R5i zaostali R5a, R5b, R5c, i R5dsu svaki vodonik. U ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima je svaki R5nezavisno -CN, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CHC(CH3)2, -CH2F, -C(CH3)2F, -CF(CH3)CH(CH3)2, -CH2OH, -C(CH3)2OH, -C(CH3)(OH)CH(CH3)2, -CH2OCH3, -C(O)C(CH3)2, -C(O)OH, -C(O)OCH3, -C(O)OC(CH3)2, -C(O)NH2, -C(O)NH(ciklopropil), -C(O)O(ciklopropil), ciklopropil, fenil, metiloksadiazolil, ili metilpiridinil.
[0030] U jednom tehničkom rešenju, obezbeđeno je jedinjenje formule (I) ili njegova so, pri čemu ima strukturu formule (II):
pri čemu:
(i) R5aje -CN, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2F, -CH2OH, -C(O)OH, -C(O)OCH3, -C(O)NH2, ciklopropil, -C(O)NH(ciklopropil), ili fenil, i R5b, R5c, i R5dsu svaki H;
(ii) R5aje ciklopropil, R5bje H, R5cje ciklopropil, i R5dje H;
(iii) R5bje -CN, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2F, -C(CH3)2F, -CF(CH3)CH(CH3)2, -
CH2OH, -C(CH3)2OH, -CH2OCH3, -C(O)OH, -C(O)OCH3, -C(O)C(CH3)2, -C(O)OCH3, -
C(O)OC(CH3)2, -C(O)NH2, -C(CH3)(OH)CH(CH3)2, -C(O)NH(ciklopropil), -C(O)O(ciklopropil), ili metiloksadiazolil, i R5a, R5c, i R5dsu svaki H;
(iv) R5bje -CH3ili metil-piridinil, R5cje -CH3, i R5ai R5dsu svaki H;
(v) R5aje -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2OH, ili -CH2OCH3, R5cje -CH3, i R5bi R5dsu svaki H; ili
(vi) R5aje -CH3, R5bje -CH3ili -CH2OCF2, i R5ci R5dsu svaki H;
(vii) R5aje -CH3, R5cje -CH2CH3, -CH2CN, -CH2OH, -CH2OCH3, -CH2OCH2CH3, -
CH2OCH2CH2OH3, -CH2N(CH3)2, -CH2NHC(O)CH3, -CH2NHC(O)OCH3, -
CH2NHS(O)2CH3, -CH2(morfolinil), -CH2(hidroksiazetidinil), ili -CH2(metilpiperazinil), i R5bi R5dsu svaki H; ili
(viii) R5aje -CH2CH3, R5cje -CH2CH3ili -CH2OCH3, i R5bi R5dsu svaki H; i R1, R2, R3, i R4su definisani u prvom aspektu, drugom aspektu, ili trećem aspektu. U ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima R1je Cl, -CN, ili -OCH3; R2je -CH3; i R3je H, F, Cl, ili -CN.
[0031] U jednom tehničkom rešenju, obezbeđeno je jedinjenje formule (I) ili njegova so, pri čemu ima strukturu formule (II):
pri čemu:
(i) R5aje -CN, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2F, -CH2OH, -C(O)OH, -C(O)OCH3, -C(O)NH2, ciklopropil, -C(O)NH(ciklopropil), ili fenil, i R5b, R5c, i R5dsu svaki H;
(ii) R5aje ciklopropil, R5bje H, R5cje ciklopropil, i R5dje H;
(iii) R5bje -CN, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2F, -C(CH3)2F, -CF(CH3)CH(CH3)2, -
CH2OH, -C(CH3)2OH, -CH2OCH3, -C(O)CH3, -C(O)OH, -C(O)OCH3, -C(O)OC(CH3)2, -
C(O)NH2, -C(CH3)(OH)CH(CH3)2, -C(O)NH(ciklopropil), -C(O)O(ciklopropil), ili metiloksadiazolil, i R5a, R5c, i R5dsu svaki H;
(iv) R5bje -CH3, R5cje -CH3, i R5ai R5dsu svaki H;
(v) R5aje -CH3, -CH2CH3, ili -CH(CH3)2, R5cje -CH3, i R5bi R5dsu svaki H;
(v) R5aje -CH3, R5cje -CH2OH, i R5bi R5dsu svaki H;
(vii) R5aje -CH3ili -CH2CH3, R5cje -CH2CH3ili -CH2OCH3i R5bi R5dsu svaki H; ili (viii) R5aje -CH3, R5bje -CH3, i R5ci R5dsu svaki H;
i R1, R2, R3, i R4su definisani u prvom aspektu, drugom aspektu, ili trećem aspektu.
[0032] U jednom tehničkom rešenju, obezbeđeno je jedinjenje formule (I) ili njegova so, pri čemu ima strukturu formule (II) pri čemu:
(i) R5aje -CN, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2F, -CH2OH, -C(O)OH, -C(O)OCH3, -C(O)NH2, ciklopropil, -C(O)NH(ciklopropil), ili fenil, i R5b, R5c, i R5dsu svaki H;
(ii) R5aje ciklopropil, R5bje H, R5cje ciklopropil, i R5dje H;
(iii) R5bje -CN, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2F, -C(CH3)2F, -CF(CH3)CH(CH3)2, -
CH2OH, -C(CH3)2OH, -CH2OCH3, -C(O)OH, -C(O)OCH3, -C(O)OC(CH3)2, -C(O)NH2, -
C(CH3)(OH)CH(CH3)2, -C(O)NH(ciklopropil), -C(O)O(ciklopropil), ili metiloksadiazolil, i R5a, R5c, i R5dsu svaki H;
(iv) R5bje -CH3ili metil-piridinil, R5cje -CH3, i R5ai R5dsu svaki H;
(v) R5aje -CH3ili -CH(CH3)2, R5cje -CH3, i R5bi R5dsu svaki H; ili
(vi) R5aje -CH3, R5bje -CH3, i R5ci R5dsu svaki H;
i R1, R2, R3, i R4su definisani u prvom aspektu, drugom aspektu, ili trećem aspektu. U ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima:
(i) R5aje -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2F, -CH2OH, -C(O)OCH3, ciklopropil, ili fenil, i R5b, R5c, i R5dsu svaki H;
(ii) R5aje ciklopropil, R5bje H, R5cje ciklopropil, i R5dje H;
(iii) R5bje -CN, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2F, -C(CH3)2F, -CF(CH3)CH(CH3)2, -
CH2OH, -C(CH3)2OH, -CH2OCH3, -C(O)OCH3, -C(O)OC(CH3)2, -
C(CH3)(OH)CH(CH3)2, -C(O)O(ciklopropil), ili metiloksadiazolil, i R5a, R5c, i R5dsu svaki H;
(iv) R5bje -CH3ili metil-piridinil, R5cje -CH3, i R5ai R5dsu svaki H;
(v) R5aje -CH3ili -CH(CH3)2, R5cje -CH3, i R5bi R5dsu svaki H; ili
(vi) R5aje -CH3, R5bje -CH3, i R5ci R5dsu svaki H.
[0033] U jednom tehničkom rešenju, obezbeđeno je jedinjenje formule (I) ili njegova so, pri čemu ima strukturu formule (II) pri čemu R5aje -CH3, R5cje -CH3, i R5bi R5dsu svaki H; i R1, R2, R3, i R4su definisani u prvom aspektu, drugom aspektu, ili trećem aspektu.
[0034] U jednom tehničkom rešenju, obezbeđeno je jedinjenje formule (I) ili njegova so, pri čemu ima strukturu formule (II) pri čemu R5aje -CH2CH3, R5cje -CH2CH3, i R5bi R5dsu svaki H; i R1, R2, R3, i R4su definisani u prvom aspektu, drugom aspektu, ili trećem aspektu.
[0035] U jednom tehničkom rešenju, obezbeđeno je jedinjenje formule (I) ili njegova so, pri čemu ima strukturu formule (II) pri čemu R5bje -CH3, R5cje -CH2CH3, i R5bi R5dsu svaki H; i R1, R2, R3, i R4su definisani u prvom aspektu, drugom aspektu, ili trećem aspektu.
[0036] U jednom tehničkom rešenju, obezbeđeno je jedinjenje formule (I) ili njegova so, pri čemu ima strukturu formule (II) pri čemu R5bje -CH2CH3, R5cje -CH3, i R5bi R5dsu svaki H; i R1, R2, R3, i R4su definisani u prvom aspektu, drugom aspektu, ili trećem aspektu.
[0037] U jednom tehničkom rešenju, obezbeđeno je jedinjenje formule (I) ili njegova so, pri čemu ima strukturu formule (II) pri čemu R5aje -CH3, i R5b, R5c, i R5dsu svaki H; i R1, R2, R3, i R4su definisani u prvom aspektu, drugom aspektu, ili trećem aspektu.
[0038] U jednom tehničkom rešenju, jedinjenje formule (I) ili so navedenog je obezbeđena pri čemu: R1je H, F, Cl, Br, -CN, C1-3alkil supstituisan sa nula do 4 R1a, ciklopropil supstituisan sa nula do 3 R1a, C1-3alkoksi supstituisan sa nula do 3 R1a, -NRaRa, -S(O)nCH3, ili -P(O)CH3)2; i R1a, Ra, R2, R3, R4, R5, m, i n su definisani u prvom aspektu, drugom aspektu, ili trećem aspektu. U ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima R1je H, F, Cl, Br, -CN, C1-3alkil supstituisan sa nula do 4 R1a, ciklopropil supstituisan sa nula do 3 R1a, C1-3alkoksi supstituisan sa nula do 3 R1a, ili -NRaRa. Takođe u ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima R1je H, F, Cl, Br, -CN, -CH3, ciklopropil, ili -NRaRa; i svaki R1aje nezavisno H ili -CH3. Dodatno, u ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima R1je H, Br, -CN, ili -OCH3.
[0039] U jednom tehničkom rešenju, jedinjenje formule (I) ili so navedenog je obezbeđena pri čemu: R2je H, C1-3alkil supstituisan sa nula do 3 R2a, ili C3-4cikloalkil supstituisan sa nula do 3 R2a; i R1, R2a, R3, R4, R5i m su definisani u prvom aspektu, drugom aspektu, ili trećem aspektu. U ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima R2je H, C1-2alkil supstituisan sa nula do 2 R2a, ili ciklopropil supstituisan sa nula do 2 R2a. Takođe u ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima R2je H ili C1-2alkil supstituisan sa nula do 2 R2a. Dodatno, u ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima R2je -CH3.
[0040] U jednom tehničkom rešenju, jedinjenje formule (I) ili so navedenog je obezbeđena pri čemu: R3je H, F, Cl, Br, -CN, C1-3alkil, C1-2fluoroalkil, C3-4cikloalkil, ili -NO2; i R1, R2, R4, R5i m su definisani u prvom aspektu, drugom aspektu, ili trećem aspektu. U ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima R3je H, F, Cl, Br, -CN, C1-2alkil, -CF3, ciklopropil, ili -NO2. Takođe u ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima R3je H, F, Cl, Br, -CN, -CH3, ciklopropil, ili -NO2. Dodatno, u ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima R3je H, F, Cl, ili -CN.
[0041] U jednom tehničkom rešenju, jedinjenje formule (I) ili so navedenog je obezbeđena pri čemu: R4je -CH2R4a, -CHR4aR4b, ili -CR4aR4bR4c; R4ai R4bsu nezavisno: (i) C1-4alkil supstituisan sa nula do 4 supstituenta nezavisno izabranih iz F, Cl, -CN, -OH, -OCH3, C1-3fluoroalkoksi, i -NRaRa; (ii) C3-6cikloalkil, heterociklil, fenil, ili heteroaril, svaki supstituisan sa nula do 4 supstituenta nezavisno izabranih iz F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-6alkila, C1-3fluoroalkila, -CH2OH, C1-3alkoksi, C1-3fluoroalkoksi, -OCH2CH=CH2, -OCH2C≡CH, -NRcRc, -NRaS(O)2(C1-3alkila), -NRaC(O)(C1-3alkila), -NRaC(O)O(C1-4alkila), i Rd; ili (iii) C1-3alkil supstituisan sa jednom cikličnom grupom odabranom iz C3-6cikloalkila, heterociklila, fenila, i heteroarila, pri čemu je navedena ciklična grupa supstituisana sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabrana iz F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-3alkila, C1-2fluoroalkila, C1-3alkoksi, C1-2fluoroalkoksi, -OCH2CH=CH2, -OCH2C≡CH, -NRcRc, -NRaS(O)2(C1-3alkila), -NRaC(O)(C1-3alkila), i -NRaC(O)O(C1-4alkila); ili R4ai R4bzajedno sa atomom ugljenika za kojeg su vezani formiraju C3-6cikloalkil ili 3- do 6-člani heterociklil, svaki supstituisan sa nula do 3 Rf; i R1, R2, R3, R5, Ra, Rc, Rd, Rf, i m su definisani u prvom aspektu, drugom aspektu, ili trećem aspektu. U ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima je R4afenil ili heteroaril, svaki supstituisan sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabranih iz F, Cl, -CN, -OH, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CHF2, -CF3, -CH2OH, -OCH3, -OCH2CH3, -OCH(CH3)2, i -OCF3; i R4bje C1-3alkil, ili fenil supstituisan sa nula do 1 supstituentom odabranim iz F, Cl, -CH3, i -CH2OH.
[0042] U jednom tehničkom rešenju, jedinjenje formule (I) ili so navedenog je obezbeđena pri čemu: R4ai R4bsu nezavisno: (i) C1-6alkil supstituisan sa nula do 4 supstituenta nezavisno izabranih iz F, Cl, -CN, -OH, -OCH3, C1-3fluoroalkoksi i -NRaRa; (ii) C3-6cikloalkil, 5- do 14-člani heterociklil, 5- do 10-člani aril, ili 5- do 10-člani heteroaril, svaki supstituisan sa nula do 4 supstituenta nezavisno izabranih iz F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-6alkila, C1-3fluoroalkila, -CH2OH, C1-3alkoksi, C1-3fluoroalkoksi, -OCH2CH=CH2, -OCH2C≡CH, -NRcRc, -NRaS(O)2(C1-3alkila), -NRaC(O)(C1-3alkila), -NRaC(O)O(C1-4alkila), i Rd; ili (iii) C1-4alkil supstituisan sa jednom cikličnom grupom odabranom iz C3-6cikloalkila, 5- do 14-članog heterociklila, 5- do 10-članog arila, ili 5- do 10-članog heteroarila, pri čemu je navedena ciklična grupa supstituisana sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabrana iz F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-6alkila, C1-3fluoroalkila, C1-3alkoksi, C1-3fluoroalkoksi, -OCH2CH=CH2, -OCH2C≡CH, -NRcRc, -NRaS(O)2(C1-3alkila), -NRaC(O)(C1-3alkila), i -NRaC(O)O(C1-4alkila); ili R4ai R4bzajedno sa atomom ugljenika za kojeg su vezani formiraju C3-6cikloalkil ili 3- do 6-člani heterociklil, svaki supstituisan sa nula do 3 Rf; i R1, R2, R3, R5, Ra, Rc, Rd, Rf, i m su definisani u prvom aspektu, drugom aspektu, ili trećem aspektu. U ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima R4ai R4bsu nezavisno: (i) C1-6alkil supstituisan sa nula do 4 supstituenta nezavisno izabranih iz F, Cl, -CN, -OH, -OCH3, C1-3fluoroalkoksi i -NRaRa; (ii) C3-6cikloalkil, 5- do 6-člani heterociklil, fenil, naftalenil, 5- do 6-člani heteroaril, svaki supstituisan sa nula do 4 supstituenta nezavisno izabranih iz F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-6alkila, C1-3fluoroalkila, -CH2OH, C1-3alkoksi, C1-3fluoroalkoksi, -OCH2CH=CH2, -OCH2C≡CH, -NRcRc, -NRaS(O)2(C1-3alkila), -NRaC(O)(C1-3alkila), -NRaC(O)O(C1-4alkila), i Rd; ili (iii) C1-
4alkil supstituisan sa jednom cikličnom grupom odabranom iz C3-6cikloalkila, 5- do 6-članog heterociklila, 5- do 10-članog arila, ili 5- do 6-članog heteroarila, pri čemu je navedena ciklična grupa supstituisana sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabrana iz F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-6alkila, C1-3fluoroalkila, C1-3alkoksi, C1-3fluoroalkoksi, -OCH2CH=CH2, -OCH2C≡CH, -NRcRc, -NRaS(O)2(C1-3alkila), -NRaC(O)(C1-3alkila), i -NRaC(O)O(C1-4alkila); ili R4ai R4bzajedno sa atomom ugljenika za kojeg su vezani formiraju C3-6cikloalkil ili 3- do 6-člani heterociklil, svaki supstituisan sa nula do 3 Rf.
[0043] U jednom tehničkom rešenju, jedinjenje formule (I) ili so navedenog je obezbeđena pri čemu: R4je -CH2R4aili -CHR4aR4b; i R1, R2, R3, R4a, R4b, R5, i m su definisani u prvom aspektu, drugom aspektu, ili trećem aspektu. U ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima R4ai R4bsu nezavisno: (i) C1-4alkil supstituisan sa nula do 4 supstituenta nezavisno izabranih iz F, Cl, -CN, -OH, -OCH3, C1-3fluoroalkoksi, i -NRaRa; (ii) C3-6cikloalkil, heterociklil, fenil, ili heteroaril, svaki supstituisan sa nula do 4 supstituenta nezavisno izabranih iz F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-6alkila, C1-3fluoroalkila, -CH2OH, C1-3alkoksi, C1-3fluoroalkoksi, -OCH2CH=CH2, -OCH2C≡CH, -NRcRc, -NRaS(O)2(C1-3alkila), -NRaC(O)(C1-3alkila), -NRaC(O)O(C1-4alkila), i Rd; ili (iii) C1-3alkil supstituisan sa jednom cikličnom grupom odabranom iz C3-6cikloalkila, heterociklila, fenila, i heteroarila, pri čemu je navedena ciklična grupa supstituisana sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabrana iz F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-3alkila, C1-2fluoroalkila, C1-3alkoksi, C1-2fluoroalkoksi, -OCH2CH=CH2, -OCH2C≡CH, -NRcRc, -NRaS(O)2(C1-3alkila), -NRaC(O)(C1-3alkila), i -NRaC(O)O(C1-4alkila); i Ra, Rc, i Rdsu definisani u prvom aspektu, drugom aspektu, ili trećem aspektu. U ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima R4ai R4bsu nezavisno: (i) C1-6alkil supstituisan sa nula do 4 supstituenta nezavisno izabranih iz F, Cl, -CN, -OH, -OCH3, C1-3fluoroalkoksi i -NRaRa; (ii) C3-6cikloalkil, 5- do 6-člani heterociklil, fenil, naftalenil, 5- do 6-člani heteroaril, svaki supstituisan sa nula do 4 supstituenta nezavisno izabranih iz F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-6alkila, C1-3fluoroalkila, -CH2OH, C1-3alkoksi, C1-3fluoroalkoksi, -OCH2CH=CH2, -OCH2C≡CH, -NRcRc, i Rd; ili (iii) C1-4alkil supstituisan sa jednom cikličnom grupom odabranom iz C3-6cikloalkila, 5- do 6-članog heterociklila, 5- do 10-članog arila, ili 5- do 6-članog heteroarila, pri čemu je navedena ciklična grupa supstituisana sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabrana iz F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-6alkila, C1-3fluoroalkila, C1-3alkoksi, C1-3fluoroalkoksi, -OCH2CH=CH2, -OCH2C≡CH, i -NRcRc,; i Ra, Re, i Rdsu definisani u prvom aspektu, drugom aspektu, ili trećem aspektu. Takođe u ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima je R4afenil ili piridinil, svaki supstituisan sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabranih iz F, Cl, -CN, -OH, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CHF2, -CF3, -CH2OH, -OCH3, -OCH2CH3, -OCH(CH3)2, i -OCF3; i R4bje -CH3, -C(CH3)3, ili fenil supstituisan sa nula do 1 supstituentom odabranim iz F, Cl, -CH3, i -CH2OH.
[0044] U jednom tehničkom rešenju, jedinjenje formule (I) ili so navedenog je obezbeđena pri čemu: R4je -CH2R4a; i R1, R2, R3, R4a, R5, i m su definisani u prvom aspektu, drugom aspektu, ili trećem aspektu. U ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima R4aje: (i) C1-4alkil supstituisan sa nula do 4 supstituenta nezavisno izabranih iz F, Cl, -CN, -OH, -OCH3, C1-3fluoroalkoksi, i -NRaRa; (ii) C3-6cikloalkil, heterociklil, fenil, ili heteroaril, svaki supstituisan sa nula do 4 supstituenta nezavisno izabranih iz F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-6alkila, C1-3fluoroalkila, C1-3alkoksi, C1-3fluoroalkoksi, -OCH2CH=CH2, -OCH2C≡CH, -NRcRc, i Rd; ili (iii) C1-3alkil supstituisan sa jednom cikličnom grupom odabranom iz C3-6cikloalkila, heterociklila, fenila, i heteroarila, pri čemu je navedena ciklična grupa supstituisana sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabrana iz F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-3alkila, C1-2fluoroalkila, C1-3alkoksi, C1-2fluoroalkoksi, -OCH2CH=CH2, -OCH2C≡CH, i -NReRe; i Ra, Re, i Rdsu definisani u prvom aspektu, drugom aspektu, ili trećem aspektu. Takođe u ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima R4aje fenil ili piridinil, svaki supstituisan sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabranih iz F, Cl, -CN, -OH, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CHF2, -CF3, -CH2OH, -OCH3, -OCH2CH3, -OCH(CH3)2, i -OCF3.
[0045] U jednom tehničkom rešenju, jedinjenje formule (I) ili so navedenog je obezbeđena pri čemu: R4je -CH2R4a, -CD2R4a, ili -CH2CH2R4a; i R1, R2, R3, R4a, R5, i m su definisani u prvom aspektu, drugom aspektu, ili trećem aspektu. U ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima R4je -CH2R4aili -CD2R4a. Takođe, u ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima je R4afenil, piridinil, tetrahidropiranil, benzoksazinil, benzo[d][1,3]dioksolil, benzoksazinonil, indazolil, indolil, ili hinolinil, svaki supstituisan sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabranih iz F, Cl, Br, -CN, -OH, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -C(CH3)3, -CHF2, -CF3, -OCH3, -OCH2CH3, -OCH(CH3)2, -OCHF2, -OCF3, -C(O)CH3, -C(O)OC(CH3)3, -N(CH3)2, cijanociklopropila, i fenila.
[0046] U jednom tehničkom rešenju, jedinjenje formule (I) ili so navedenog je obezbeđena pri čemu: R4je -CHR4aR4b; i R1, R2, R3, R4a, R4b, R5, i m su definisani u prvom aspektu, drugom aspektu, ili trećem aspektu. U ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima R4ai R4bsu nezavisno (i) C1-4alkil supstituisan sa nula do 4 supstituenta nezavisno izabranih iz F, Cl, -CN, -OH, -OCH3, C1-3fluoroalkoksi, i -NRaRa; (ii) C3-6cikloalkil, heterociklil, fenil, ili heteroaril, svaki supstituisan sa nula do 4 supstituenta nezavisno izabranih iz F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-6alkila, C1-3fluoroalkila, -CH2OH, C1-3alkoksi, C1-3fluoroalkoksi, -OCH2CH=CH2, -OCH2C≡CH, -NRcRc, i Rd; ili (iii) C1-3alkil supstituisan sa jednom cikličnom grupom odabranom iz C3-6cikloalkila, heterociklila, fenila, i heteroarila, pri čemu je navedena ciklična grupa supstituisana sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabrana iz F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-3alkila, C1-2fluoroalkila, C1-3alkoksi, C1-2fluoroalkoksi, -OCH2CH=CH2, -OCH2C≡CH, i -NRcRc; i Ra, Rc, i Rdsu definisani u prvom aspektu, drugom aspektu, ili trećem aspektu. Takođe u ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima je R4afenil ili piridinil, svaki supstituisan sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabranih iz F, Cl, -CN, -OH, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CHF2, -CF3, -CH2OH, -OCH3, -OCH2CH3, -OCH(CH3)2, i -OCF3; i R4bje C1-3alkil, ili fenil supstituisan sa nula do 1 supstituentom odabranim iz F, Cl, -CH3, i -CH2OH. Dodatno, u ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima je R4afenil ili piridinil, svaki supstituisan sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabranih iz F, Cl, -CN, -OH, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CHF2, -CF3, -CH2OH, OCH3, -OCH2CH3, -OCH(CH3)2, i -OCF3; i R4bje -CH3ili -C(CH3)3.
[0047] U jednom tehničkom rešenju, jedinjenje formule (I) ili so navedenog je obezbeđena pri čemu: R4je -CHR4aR4b; R4aje: (i) C1-4alkil supstituisan sa nula do 4 supstituenta nezavisno izabranih iz F, Cl, -CN, -OH, -OCH3, C1-3fluoroalkoksi, i -NRaRa; (ii) C3-6cikloalkil, heterociklil, fenil, ili heteroaril, svaki supstituisan sa nula do 4 supstituenta nezavisno izabranih iz F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-6alkila, C1-3fluoroalkila, -CH2OH, C1-3alkoksi, C1-3fluoroalkoksi, -OCH2CH=CH2, -OCH2C≡CH, -NRcRc, i Rd; ili (iii) C1-3alkil supstituisan sa jednom cikličnom grupom odabranom iz C3-6cikloalkila, heterociklila, fenila, i heteroarila, pri čemu je navedena ciklična grupa supstituisana sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabrana iz F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-3alkila, C1-2fluoroalkila, C1-3alkoksi, C1-2fluoroalkoksi, -OCH2CH=CH2, -OCH2C≡CH, i -NRcRc; R4bje C1-4alkil supstituisan sa nula do 4 supstituenta nezavisno izabranih iz F, Cl, -CN, -OH, -OCH3, C1-3fluoroalkoksi, i -NRaRa; i R1, R2, R3, R5, Ra, Rc, Rd, i m su definisani u prvom aspektu, drugom aspektu, ili trećem aspektu. U ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima R4aje (i) C3-6cikloalkil, 5- do 14-člani heterociklil, 5- do 10-člani aril, ili 5- do 10-člani heteroaril, svaki supstituisan sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabranih iz F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-6alkila, C1-3fluoroalkila, -CH2OH, C1-3alkoksi, C1-3fluoroalkoksi, -OCH2CH=CH2, -OCH2C≡CH, -NRcRc, i Rd; ili (ii) C1-4alkil supstituisan sa jednom cikličnom grupom odabranom iz C3-6cikloalkila, 5- do 14-članog heterociklila, 5- do 10-članog arila, ili 5- do 10-članog heteroarila, pri čemu je navedena ciklična grupa supstituisana sa nula do 4 supstituenta nezavisno izabranih iz F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-6alkila, C1-3fluoroalkila, C1-3alkoksi, C1-3fluoroalkoksi, -OCH2CH=CH2, -OCH2C≡CH, -NRcRc, -NRaS(O)2(C1-3alkila), -NRaC(O)(C1-3alkila), i -NRaC(O)O(C1-4alkila). Takođe u ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima R4aje C3-6cikloalkil, 5- do 14-člani heterociklil, 5- do 10-člani aril, ili 5- do 10-člani heteroaril, svaki supstituisan sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabranih iz F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-6alkila, C1-3fluoroalkila, -CH2OH, C1-3alkoksi, C1-3fluoroalkoksi, -OCH2CH=CH2, -OCH2C≡CH, -NRcRc, -NRaS(O)2(C1-3alkila), -NRaC(O)(C1-3alkila), -NRaC(O)O(C1-4alkila), i Rd. Dodatno, u ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima je R4afenil ili piridinil, svaki supstituisan sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabranih iz F, Cl, -CN, -OH, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CHF2, -CF3, -CH2OH, -OCH3, -OCH2CH3, -OCH(CH3)2, i -OCF3.
[0048] U jednom tehničkom rešenju, jedinjenje formule (I) ili so navedenog je obezbeđena pri čemu: R4je -CHR4aR4b, -CDR4aR4b, ili -CH2CHR4aR4d; R4aje fenil, piridinil, dihidrobenzofuranil, benzodioksolil, izoksazolil, naftiridinil, hinolinil, ili tiazolil, svaki supstituisan sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabranih iz F, Cl, Br, -CN, -OH, -CH3, -CF3, -OCH3, -OCHF2, -OCF3, -C(O)OH, -C(O)OCH3, i ciklopropila; R4bje -CH3, -CH2CH3, -CH2CH2CH3, -C(CH3)3, -CH2F, -CF3, -CH2OH, -CH2OCH3, -CH2OCHF2, -CH2(cikloheksil), ili ciklopropil; R4dje -OCH3; i R1, R2, R3, R5, i m su definisani u prvom aspektu, drugom aspektu, ili trećem aspektu.
[0049] U jednom tehničkom rešenju, jedinjenje formule (I) ili so navedenog je obezbeđena pri čemu: R4je -CHR4aR4bili -CDR4aR4b; R4aje fenil, piridinil, dihidrobenzofuranil, benzodioksolil, izoksazolil, naftiridinil, hinolinil, ili tiazolil, svaki supstituisan sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabranih iz F, Cl, Br, -CN, -OH, -CH3, -CF3, -OCH3, -OCHF2, -OCF3, -C(O)OH, -C(O)OCH3, i ciklopropila; R4bje -CH3, -CH2CH3, -CH2CH2CH3, -C(CH3)3, -CH2F, -CF3, -CH2OH, -CH2OCH3, -CH2OCHF2, -CH2(cikloheksil), ili ciklopropil; i R1, R2, R3, R5, i m su definisani u prvom aspektu, drugom aspektu, ili trećem aspektu.
[0050] U jednom tehničkom rešenju, jedinjenje formule (I) ili so navedenog je obezbeđena pri čemu: R4je -CH2R4a, -CD2R4a, ili -CH2CH2R4a, -CHR4aR4b, -CDR4aR4b, ili -CH2CHR4aR4d; R4aje fenil, piridinil, tetrahidropiranil, benzoksazinil, benzo[d][1,3]dioksolil, dihidrobenzofuranil, benzodioksolil, benzoksazinonil, indazolil, indolil, izoksazolil, tiazolil, hinolinil, ili naftiridinil, svaki supstituisan sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabranih iz F, Cl, Br, -CN, -OH, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -C(CH3)3, -CHF2, -CF3, -OCH3, -OCH2CH3, -OCH(CH3)2, -OCHF2, -OCF3, -C(O)CH3, -C(O)OH, -C(O)OCH3, -C(O)OC(CH3)3, -N(CH3)2, ciklopropil, cijanociklopropil, i fenil; R4bje -CH3, -CH2CH3, -CH2CH2CH3, -C(CH3)3, -CH2F, -CF3, -CH2OH, -CH2OCH3, -CH2OCHF2, -CH2(cikloheksil), ili ciklopropil; R4dje -OCH3; i R1, R2, R3, R5, i m su definisani u prvom aspektu, drugom aspektu, ili trećem aspektu. U ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima R4je -CH2R4a, -CD2R4a, ili -CH2CH2R4a, -CHR4aR4b, ili -CDR4aR4b. Takođe u ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima R4je -CH2R4a, -CH2CH2R4a, ili -CHR4aR4b.
[0051] U jednom tehničkom rešenju, jedinjenje formule (I) ili so navedenog je obezbeđena pri čemu: R4je -CHR4aR4b; R4ai R4bsu nezavisno fenil, piridinil, pirimidinil, pirazinil, pirazolil, imidazolil, izoksazolil, izotiazolil, oksazolil, oksadiazolil, tetrazolil, tiadiazolil, tiazolil, triazolil, dihidrobenzo[b][1,4]dioksinil, dihidrobenzo[b][1,4]dioksepinil, dihidrobenzofuranil, benzo[d][1,3]dioksolil, ili pirazolo[1,5-a]piridinil, svaki supstituisan sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabranih iz F, Cl, Br, -CN, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -C(CH3)3, -CHF2, -OCH3, -OCH2CH3, -OCH(CH3)2, -OCF3, -CF3, -S(O)2CH3, ciklopropila, (tercbutoksikarbonil)azetidinila, tetrahidropiranila, morfolinila, fluorofenila, i metilpiperidinila; i R1, R2, R3, R5, i m su definisani u prvom aspektu, drugom aspektu, ili trećem aspektu.
[0052] U jednom tehničkom rešenju, jedinjenje formule (I) ili so navedenog je obezbeđena pri čemu: R4je -CHR4aR4b: R4aje fenil ili piridinil, svaki supstituisan sa nula do 2 supstituenta nezavisno odabrana iz F, Cl, Br, -CN, -CH3, i -OCF3; R4bje fenil, piridinil, pirimidinil, piridazinil, pirazinil, imidazolil, izotiazolil, izoksazolil, oksadiazolil, oksazolil, pirazolil, tetrazolil, tiazolil, tiadiazolil, triazolil, tetrahidropiranil, pirazolo[1,5-a]piridinil, benzodioksolil, dihidrobenzofuranil, benzo[d][1,3]dioksolil, ili dihidrobenzo[b][1,4]dioksepinil, svaki supstituisan sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabranih iz F, Cl, -CN, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -C(CH3)3, -CHF2, -CF3, -OCH3, -OCH2CH3, -OCH(CH3)2, -OCF3, -S(O)2CH3, ciklopropila, (terc-butoksikarbonil)azetidinila, tetrahidropiranila, morfolinila, i metilpiperidinila; i R1, R2, R3, R5, i m su definisani u prvom aspektu, drugom aspektu, ili trećem aspektu.
[0053] U jednom tehničkom rešenju, jedinjenje formule (I) ili so navedenog je obezbeđena pri čemu: R4je -CHR4aR4b; R4ai R4bzajedno sa atomom ugljenika za kojeg su vezani formiraju C3-6cikloalkil ili 3- do 6-člani heterociklil, svaki supstituisan sa nula do 3 Rf; i R1, R2, R3, R5, Rf, i m su definisani u prvom aspektu, drugom aspektu, ili trećem aspektu. U ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima R4ai R4bzajedno sa atomom ugljenika za kojeg su vezani formiraju C3-6cikloalkil supstituisan sa nula do 3 Rf. Takođe u ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima R4ai R4bzajedno sa atomom ugljenika za kojeg su vezani formiraju 3- do 6-člani heterociklil supstituisan sa nula do 3 Rf.
[0054] U jednom tehničkom rešenju, jedinjenje formule (I) ili so navedenog je obezbeđena pri čemu R4je:
(i)
(ii) Ċ
ili
(iii)
i R1, R2, R3, R5i m su definisani u prvom aspektu, drugom aspektu, ili trećem aspektu. U ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima R1je H, Br, -CN, ili -OCH3; R2je -CH3; i R3je H, F, Cl, ili -CN.
[0055] U jednom tehničkom rešenju, jedinjenje formule (I) ili so navedenog je obezbeđena pri čemu R4je:
i R1, R2, R3, R5, i m su definisani u prvom aspektu, drugom aspektu, ili trećem aspektu. U ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima R1je H, Br, -CN, ili -OCH3; R2je -CH3; i R3je H, F, Cl, ili -CN. Takođe u ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima R1je -CN; R2je -CH3; i R3je H, F, ili -CN.
[0056] U jednom tehničkom rešenju, jedinjenje formule (I) ili so navedenog je obezbeđena pri čemu navedeno jedinjenje ima strukturu formule (III):
pri čemu R1je -CN; R2je -CH3; R3je H, F, ili -CN; R5ai R5csu nezavisno H, -CH3, ili -CH2CH3, pri čemu najmanje jedan od R5ai R5cje -CH3ili -CH2CH3; i R4je:
(i)
(ii) Ċ
ili (iii)
U ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima R4je:
[0057] U jednom tehničkom rešenju, jedinjenje formule (I) ili so navedenog je obezbeđena pri čemu je navedeno jedinjenje:
[0058] U jednom tehničkom rešenju, jedinjenje formule (I) ili so navedenog je obezbeđena pri čemu navedeno jedinjenje ima strukturu formule (III):
i R1, R2, R3, i R4su definisani u prvom aspektu, drugom aspektu, ili trećem aspektu. U ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima R1je H, F, Cl, Br, -CN, C1-3alkil supstituisan sa nula do 4 R1a, ciklopropil supstituisan sa nula do 3 R1a, C1-3alkoksi supstituisan sa nula do 3 R1a, -NRaRa, -S(O)nCH3, ili -P(O)(CH3)2; svaki R1aje nezavisno F, Cl, ili -CN; svaki Raje nezavisno H ili C1-3alkil; R2je H ili C1-2alkil supstituisan sa nula do 2 R2a; svaki R2aje nezavisno F, Cl, -CN, -OH, -O(C1-2alkil), ciklopropil, C3-4alkenil, ili C3-4alkinil; R3je H, F, Cl, Br, -CN, C1-2alkil, -CF3, ciklopropil, ili -NO2; R4je -CH2R4a, -CHR4aR4b, ili -CR4aR4bR4c; R4ai R4bsu nezavisno: (i) C1-4alkil supstituisan sa nula do 4 supstituenta nezavisno izabranih iz F, Cl, -CN, -OH, -OCH3, C1-3fluoroalkoksi, i -NRaRa; (ii) C3-6cikloalkila, heterociklila, fenila, ili heteroarila, svaki supstituisan sa nula do 4 supstituenta nezavisno izabranih iz F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-6alkila, C1-3fluoroalkila, -CH2OH, C1-3alkoksi, C1-3fluoroalkoksi, -OCH2CH=CH2, -OCH2C=CH, -NRcRc, -NRaS(O)2(C1-3alkila), -NRaC(O)(C1-3alkila), -NRaC(O)O(C1-4alkila), i Rd; ili (iii) C1-3alkil supstituisan sa jednom cikličnom grupom odabranom iz C3-6cikloalkila, heterociklila, fenila, i heteroarila, pri čemu je navedena ciklična grupa supstituisana sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabrana iz F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-3alkila, C1-2fluoroalkila, C1-3alkoksi, C1-2fluoroalkoksi, -OCH2CH=CH2, -OCH2C=CH, -NRcRc, -NRaS(O)2(C1-3alkila), -NRaC(O)(C1-3alkila), i -NRaC(O)O(C1-4alkila); ili R4ai R4bzajedno sa atomom ugljenika za kojeg su vezani formiraju C3-6cikloalkil ili 3- do 6-člani heterociklil, svaki supstituisan sa nula do 3 Rf;svaki Rfje nezavisno F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-4alkil, C1-32fluoroalkil, C1-3alkoksi, C1-2fluoroalkoksi, -OCH2CH=CH2, -OCH2C=CH, -NRcRc, ili ciklična grupa odabrana iz C3-6cikloalkila, 3- do 6-članog heterociklila, fenila, monocikličnog heteroarila, i bicikličnog heteroarila, pri čemu je svaka ciklična grupa supstituisana sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabrana iz F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-4alkila, C1-2fluoroalkila, C1-3alkoksi, C1-2fluoroalkoksi, i -NRcRc; R4cje C1-4alkil ili C3-6cikloalkil, svaki supstituisan sa nula do 4 supstituenta nezavisno izabranih iz F, Cl, -OH, C1-2alkoksi, C1-
2fluoroalkoksi, i -CN; svaki Rcje nezavisno H ili C1-2alkil; Rdje fenil supstituisan sa nula do 1 supstituentom odabranim iz F, Cl, -CH3, i -OCH3; i n je nula, 1, ili 2.
[0059] U jednom tehničkom rešenju, jedinjenje formule (I) ili so navedenog je obezbeđena pri čemu R4je -C(CH3)R4a; i R1, R2, R3, R4a, R5, i m su definisani u prvom aspektu, drugom aspektu, ili trećem aspektu. U ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima je R4afenil ili piridinil, svaki supstituisan sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabranih iz F, Cl, -CN, -CH3, -CF3, -OCH3, -OCHF2, i -OCF3. Takođe u ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima je R4afenil ili piridinil, svaki supstituisan sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabranih iz F, Cl, -CN, -CH3, -CF3, -OCH3, -OCHF2, i -OCF3; R1je -CN; R2je -CH3; i R3je vodonik ili -CN. Dodatno, u ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima je R4afenil ili piridinil, svaki supstituisan sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabranih iz F, Cl, -CN, -CH3, -CF3, -OCH3, -OCHF2, i -OCF3. Takođe u ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima je R4afenil supstituisan sa 1 do 2 supstituenta nezavisno odabrana iz F, Cl, -CN, -CH3, -CF3, -OCH3, -OCHF2, i -OCF3; R1je -CN; R2je -CH3; R3je vodonik ili -CN; m je 1 ili 2; i svaki R5je nezavisno -CN, -CH3, ili -CH2CH3.
[0060] U jednom tehničkom rešenju, jedinjenje formule (I) ili so navedenog je obezbeđena pri čemu R4je -C(CH3)R4a; R4aje fenil supstituisan sa 1 do 2 supstituenta nezavisno odabrana iz F, Cl, -CN, -CH3, -CF3, -OCH3, -OCHF2, i -OCF3; i R1, R2, R3, R5, i m su definisani u prvom aspektu, drugom aspektu, ili trećem aspektu. U ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima je R4afenil supstituisan sa 1 do 2 supstituenta nezavisno odabrana iz F, -CF3, -OCHF2, i -OCF3. Takođe u ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima je R4afenil supstituisan sa -CF3, -OCHF2, i -OCF3; R1je -CN; R2je -CH3; i R3je vodonik ili -CN. Dodatno, u ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima je R4afenil supstituisan sa -CF3, -OCHF2, i -OCF3; R1je -CN; R2je -CH3; R3je vodonik ili -CN; m je 1 ili 2; i svaki R5je nezavisno -CN, -CH3, ili -CH2CH3.
[0061] U jednom tehničkom rešenju, jedinjenje formule (I) ili so navedenog je obezbeđena pri čemu navedeno jedinjenje ima strukturu formule (IV):
pri čemu Rxje -CF3, -OCHF2, ili -OCF3; i R1, R2, R3, R5, i m su definisani u prvom aspektu, drugom aspektu, ili trećem aspektu. U ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima R1je -CN; R2je -CH3; R3je vodonik ili -CN; m je 1 ili 2; i svaki R5je nezavisno -CH3ili -CH2CH3.
[0062] U jednom tehničkom rešenju, jedinjenje formule (I) ili so navedenog je obezbeđena pri čemu navedeno jedinjenje ima strukturu formule (IVA):
pri čemu Rxje -CF3, -OCHF2, ili -OCF3; i R1, R2, R3, R5a, i R5csu definisani u prvom aspektu, drugom aspektu, ili trećem aspektu. U ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima R1je -CN; R2je -CH3; R3je vodonik ili -CN; i R5ai R5csu nezavisno -CH3ili -CH2CH3. Takođe u ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima Rxje -CF3ili -OCF3. Dodatno, u ovo tehničko rešenje su uključena jedinjenja u kojima R5aje -CH3i R5cje -CH3; ili R5aje -CH2CH3i R5cje -CH2CH3.
[0063] U jednom tehničkom rešenju, jedinjenje formule (I) ili so navedenog je obezbeđena pri čemu je navedeno jedinjenje: 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(hidroksimetil) piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1-2); 8-((2S,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (3); 8-((2R,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (4); 4-((2R,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril (5); 8-((2R,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (6); 4-((2R,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril (7); 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(fluorometil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (8); 4-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(fluorometil)piperazin-1-il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril (9); (S)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-izopropilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2karbonitril (10); (S)-4-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-izopropilpiperazin-1-il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril (11); (S)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-izopropilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (12); (S)-4-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-izopropilpiperazin-1-il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril (13); 4-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(hidroksimetil)piperazin-1-il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril (14); 4-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(hidroksimetil)piperazin-1-il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril (15-16); 4-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(hidroksimetil)piperazin-1-il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril (17); 8-((2S,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1 - il)-7-hloro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (18); 8-((2S,SR)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-7-bromo-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (19); 8-((2S,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-7-ciklopropil-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (20); 8-((2S,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-7-bromo-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (21); 8-((2S,SR)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5,7-dimetil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (22); 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-ciklopropilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (23-24); 8-((2S,5R)-4-(bis(4-hlorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (25); 8-((2S,5R)-4-(bis(4-hlorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-7-hloro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (26); metil 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat (27); (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (28); (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-7-hloro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (29); (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-7-fluoro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (30); (R)-4-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril (31); (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (32); (R)-8-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (33); (R)-8-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-7-fluoro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (34); (S)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metipiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (35); (S)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-7-hloro-5-metil-6okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (36); (S)-4-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-6-bromo- 1-metil-2-okso-1,2-dihidro- 1,5-naftiridin-3-karbonitril (37); (S)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (38); metil 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat (39-40); 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksamid (41-42); 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-cijanopiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (43); 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-cijanopiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (44-45); 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-N-ciklopropilpiperazin-2-karboksamid (46-48); metil 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-bromo-3-cijano- 1-metil-2-okso- 1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat (49); metil 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(3,6-dicijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat (50-51); 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-bromo-3-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilna kiselina (52); 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(3,6-dicijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilna kiselina (53-54); 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilna kiselina (55); 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-bromo-3-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksamid (56); 1-(bis (4-fluorofenil)metil)-4-(3,6-dicijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksamid (57-58); 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-bromo-3-cijano- 1-metil-2-okso- 1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-N-ciklopropilpiperazin-2-karboksamid (59); 1 -(bis(4-fluorofenil)metil)-N-ciklopropil-4-(3,6-dicijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksamid (60-61); izopropil 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat (62-63); izopropil 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(3,6-dicijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat (64-65); metil (S)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat (66); metil 4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-1-((4-fluoro-2-metoksifenil)(4-fluorofenil)metil)piperazin-2-karboksilat (67-68); metil 4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-1-((4-fluoro-2-metoksifenil)(4-fluorofenil)metil)piperazin-2-karboksilat (69-70); metil 4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-1-((4-fluoro-2-metoksifenil)(4-fluorofenil)metil)piperazin-2-karboksilat (71-72); metil 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1-metil-3-nitro-2-okso-1,2dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat (73); metil 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-3-fluoro-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat (74-75); metil 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(3-hloro-6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat (76-77); 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(2-hidroksipropan-2-il)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (78-79); 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(2-fluoropropan-2-il)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (80-81); 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metil-5-(2-metilpiridin-4-il)piperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (84); 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-izobutirilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (86-87); 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(2-hidroksi-3-metilbutan-2-il)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (88-89); 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(2-fluoro-3-metilbutan-2-il)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA (90-91); 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(metoksimetil)piperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (92-93); metil 1-(bis(4-hlorofenil)metil)-4-(6-cijano-3-fluoro-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat (94-95); metil 1-(bis(4-hlorofenil)metil)-4-(6-cijano-1 -metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat (96-97); (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-7-bromo-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (98); (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5,7-dimetil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (99); 8-(4-(bis (4-fluorofenil)metil)-3-(hidroksimetil)piperazin-1-il)-7-hloro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (100-101); (R)-4-(4-(bis(4-dilorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril (102); (R)-8-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (103); (R)-8-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, dimetilformamid (104); (R)-8-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-7-hloro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, dimetilformamid (105); ciklopropil 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat (106-107); 8-((2S,SR)-4-((4-fluoro-2-metoksifenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (108-109); 6-bromo-4-((2S,5R)-4-((4-fluoro-2-metoksifenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-1-meti1-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril (110); 8-((2S,5R)-4-((4-fluoro-2-metoksifenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (111-112); metil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-1-(6-bromo-3-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat (113); metil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-1-(3,6-dicijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat (114); metil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-1-(6-bromo-3-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat (115); metil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-1-(3,6-dicijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat (116-117); 4-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-(hidroksimetil)piperazin-1-il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril (118); 8-((2R,5S)-4-((4-fluoro-2-metoksifenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (119); 8-((2R,5S)-4-((4-fluoro-2-metoksifenilX4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-7-nitro-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (120); 8-((2S,5R)-4-((4-fluoro-2-metoksifenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-7-nitro-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (121-122); 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,3-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (123-124); 8-((2S,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-izopropil-5-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (125); 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(5-metil-1,3,4-oksadiazol-2-il)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (126); (S)-8-(4-(bis(4-fluorofenil) metil)-2-etilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (127); (S)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (128); 8-((2S)-4-((4-fluoro-2-metoksifenil)(4-fluorofenil)metil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (129-130); 8-((2R,5R)-4-(bis(4-fluorofenil) metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (131); 8-((2R,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)-7-hloro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (132); 8-((2S,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (133); (S)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (134); (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (135); metil 4-(bis(4-fluorofenil) metil)-1-(6-cijano-1-metil-2-okso- 1,2-dihidro- 1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat (136-137); 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-1-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilna kiselina (138); 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-1-(6-cijano-1-metil-2-okso- 1,2-dihidro1,5-naftiridin-4-il)-N-ciklopropilpiperazin-2-karboksamid (139-140); 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-1-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksamid (141-142); 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-cijanopiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (143-144); 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-cijanopiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (145); 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-(hidroksimetil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (146-148); 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-(fluorometil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (149-151); 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-diciklopropilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (152-153); 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-fenilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (154-156); 8-((2S,SR)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-7-fluoro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (157); 4-((2S,SR)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril (158); 8-((2S,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (159); 4-((2S,SR)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril (160); 8-((2S,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-7-nitro-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (161); metil 4-(bis(4-fluorofenil)meti1)-1-(3-bromo-6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat (162); 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (163); (R)-8-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-izopropilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (167); (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-izopropilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (168); (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-izopropilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (169); (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-etilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (170); 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3,3-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (171); (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (172); (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (173); (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-il)-7-fluoro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril(174); (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-il)-7-hloro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (175); (R)-8-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)3-etilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (176); (R)-8-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-il)-7-hloro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (177); (R)-8-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-il)-7-fluoro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (178); (R)-8-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (179); (R)-8-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (180); (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-izopropilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (181); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenilXfenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (182); 8-[(2S,SR)-4-[(4-fluorofenil)(fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (183-184); 8-[(2S,5R)-4-[1-(4-fluoro-2-metoksifenil)-2,2-dimetilpropil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (185-186); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenilX3-fluoropiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (187); 8-[(2S,SR)-4-[(4-fluorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (188); 8-[(2S,SR)-4-[(4-hlorofenilx3-fluoropiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (189-190); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(5-fluoropiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (191-192); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenilX5-fluoropiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (193-194); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(6-fluoropiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (197-198); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenilXpiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1 - il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (197-198); 8-[(2S,5R)-4-[(5-hloropiridin-2-il)(4-metilfenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (201-202); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(5-hloropiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (201-202); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(6-metilpiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (203-204); 8-[(2S,5R)-4-[(2-etoksipiridin-3-il)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (205-206); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)[2-(propan-2-iloksi)piridin-3-il]metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (207-208); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(2-metoksipiridin-3-il)metil]2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (209-210); 8-[(2S,5R)-4-[(5-hloropiridin-2-il)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (211-212); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(5-metilpiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (213-214); 8-[(2S,5R)-4-[(3-fluorofenil)(5-metilpiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (215-216); 7-hloro-8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (217-218); 3-hloro-4-{4-[(4-fluorofenil)(fenil)metil]piperazin-1-il}-6-metoksi-1-metil-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-2-on (219-220); 8-[(2S,5R)-2,5-dimetil-4-{fenil[4-(trifluorometoksi)fenil]metil } piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (221-222); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(3-metilfenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (223-224); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(2-etil-4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (225-226); 8-[(2S,5R)-4-[(2-etil-4-fluorofenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (227-228); 8-[(2S,5R)-4-[(2-etoksi-4-fluorofenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (229-230); 4-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(2-etil-4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-6-metoksi-1-metil-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-2-on (231-232); 4-[(2S,5R)-4-[(2-etil-4-fluorofenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-6-metoksi-1-metil-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-2-on (233-234); 4-[(2S,5R)-4-[(2-etilfenilX4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-6-metoksi-1-metil-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-2-on (235-236); 8-[(2S,5R)-4-(difenilmetil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (237); 4-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-6-metoksi-1-metil-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-2-on (238-239); 4-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenilX4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-6-metoksi-1-metil-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-2-on (240); 4-[(2S,5R)-4-[bis(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-6-metoksi-1-metil-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-2-on (241); 8-[(2S,5R)-4-{[2-(difluorometil)-4-fluorofenil]metil}-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (242); 8-[(2S,5R)-4-{[2-fluoro-4-(trifluorometoksi)fenil]metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (243); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hloro-2-hidroksifenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (244); 8[(2S,5R)-4-[(2-hidroksifenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (245); 8-[(2S,SR)-2,5-dimetil-4-[(2,4,6-trifluorofenil)metil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (246); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(4-metilfenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (247); 8-[(2S,SR)-4-[(3-fluorofenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (248); 8-[(2S,SR)-4-[(3-fluorofenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (249); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(4-metilfenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (250); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(4-metilfenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (251); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(4-metilfenil)metil]-2,5-dimetipiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (252); 8-[(2S,SR)-4-[(4-cijano-2-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (253); 8-[(2S,5R)-4-{[2-fluoro-6-(trifluorometil)fenil]metil}-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (254); 8-[(2S,5R)-4-[(2-fluoro-6-metilfenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (255); 8-[(2S,5R)-4-[1-(2,6-difluorofenil)etil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (256); 8-[(2S,SR)-4-[bis(3-hlorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (257); 8-[(2S,SR)-4-[bis(2-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (258); 8-[(2S,5R)-4-[(2-hlorofenil)(fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (259); 8-[(2S,5R)-4-[(2-hloro-6-cijanofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (260); 8-[(2S,SR)-4-[(2-hloro-6-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (261); 8-[(2S,5R)-4-[(2,5-difluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (262); 8-[(2S,SR)-4-[(2,6-dihlorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (263); 8-[(2S,5R)-4-benzil-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (264); 8-[(2S,5R)-4-[(2,6-dimetilfenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (265); 8-[(2S,5R)-4-[(2-hloro-3,6-difluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (266); 8-[(2S,5R)-4-[(4-cijano-2,6difluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (267); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hloro-2,6-difluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (268); 8-[(2S,SR)-4-[(2-cijano-6-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (269); 8-[(2S,5R)-4-[bis(3-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (270); 8-[(2S,5R)-4-[(2,6-difluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (271); 8-[(2S,SR)-4-[(2,6-difluorofenil)(fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (272); 8-[(2S,5R)-4-[(2,6-difluorofenil)(fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA (273); 8-[(2S,5R)-4-[(2,6-difluorofenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (274); 8-[(2S,5R)-4-[(2,6-difluorofenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (275); 8-[(2S,5R)-4-[(2,3-difluorofenil)(fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (276); 8-[(2S,5R)-4-[(2,4-difluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (277); 8-[(2S,5R)-2,5-dimetil-4-{[6-(trifluorometil)piridin-2-il]metil}piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (278); 8-[(2S,5R)-2,5-dimetil-4-{[2-metil-6-(trifluorometil)piridin-3-il]metil } piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (279); 8-[(2S,5R)-4-{[2-metoksi-6-(trifluorometil)piridin-4-il]metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (280); 8-[(2S,5R)-4-([2-hloro-6-(trifluorometil)piridin-3-il]metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (281); 8-[(2S,5R)-4-[(3-hlorofenil)(fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (282); 8-[(2S,5R)-4-[(2,4-difluorofenil)(fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (283); 8-[(2S,5R)-4-[(2-fluorofenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (284); 8-[(2S,SR)-4-[(2-fluorofenil)(fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (285); 8-[(2S,SR)-4-[(2,3-difluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (286); 8-[(2S,5R)-4-[(2-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (287); 8-[(2S,SR)-4-[(3,5-difluorofenil)(fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (288); 8[(2S,SR)-4-[(3,5-difluorofenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (289); 8-[(2S,5R)-4-[(3,5-difluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (290); 8-[(2S,SR)-4-[(3,4-difluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (291); 8-[(2S,5R)-4-[(3-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (292); 8-[(2S,5R)-4-[(3-fluorofenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (293); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)[4-(trifluorometil)fenil]metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (294); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(4-metilfenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (295); 8-[(2S,5R)-4-[(3-fluorofenil)(fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (296); 8-[(2S,SR)-4-[(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (297); 8-((2S,5R)-4-((4-hlorofenil)(4-cijanofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (298); 8-[(2S,5R)-4-[(4-htorofenit)(4-metilfenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (299); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (300); 8-[(2S,5R)-4-[bis(4-metilfenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (301); 8-((2S,5R)-4-((4-hlorofenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (302); 8-((2S,5R)-4-((4-hlorofenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (303); 8-((2S,5R)-4-((2-fluorofenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (304); 8-((2S,5R)-4-((2-fluorofenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (305); 8-((2S,5R)-4-((4-cijanofenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (306); 8-((2S,5R)-4-((4-cijanofenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (307); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (308-309); 8-((2S,5R)-4-((4-cijanofenil)(p-tolil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA so (310-311); 8-((3R)-4-((4-fluorofenil)(pirimidin-4-il)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (312-313); 8-((3R)-4-((4-hlorofenil)(2-metilpirimidin-5-il)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (314); 8-((3R)-4-((4-fluorofenil)(2-metilpirimidin-4-il)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (315-316); 8-((3R)-4-((4-fluorofenil)(pirimidin-5-il)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (317-318); 8-((3R)-4-((4-hlorofenil)(pirimidin-4-il)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (319-320); 8-((3R)-4-((2-(terc-butil)pirimidin-4-il)(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (321); 8-((2S,5R)-4-((4-cijanofenil)(p-tolil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-7-fluoro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (322); 8-((2S,5R)-4-((4-htorofenit)(4-(trifluorometoksi)fenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-7-fluoro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (323-324); 7-fluoro-8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenit)(4-(trifluorometil)fenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (325-326); 8-((2S,5R)-4-((4-cijanofenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-7-fluoro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (327-328); 8-((2S,5R)-4-((2,6-difluorofenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-7-fluoro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (329 i 336); 7-fluoro-8-((2S,5R)-4-((3-fluorofenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (330-331); 7-fluoro-8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(p-tolil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (332); 7-fluoro-8-((2S,5R)-4-((2-fluorofenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (333-334); 7-fluoro-8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(p-tolil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (335); 8-((2S,5R)-4-(1-(2,4-diftuorofenit)propit)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (337-339); 8-[(2S,5R)-5-etil-2-metil-4-[(piridin-2-il)[4-(trifluorometoksi)fenil] metil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (340-341); 8-((2S,5R)-5-etil-2-metil-4-(piridin-2-il(4-(trifluorometoksi)fenil)metil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (342-343); 8-((2S,5R)-4-(1-(3,4-difluorofenil)propil)2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (344); 8-((2R,5S)-2,5-dimetil-4-(1-(4-(trifluorometil)fenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (345-346); 8-((2S,SR)-4-(1-(2,4-difluorofenil)propil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (347-349); 8((2S,5R)-4-((5-etilpiridin-2-il)(3-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (350-351); 8-((2S,SR)-4-(2-metoksi-4-(trifluorometoksi)benzil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (352); 8-((2S,SR)-4-(1-(5-hloro-2,3-dihidrobenzofuran-7-il)propil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (353 i 356-357); 8-((2S,SR)-4-((5-etilpiridin-2-il)(3-fluorofenil) metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (354); 8-((2S,5R)-4-((3-hlorofenil)(5-etilpiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (354-355); 8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (358-359); 8-((2S,5R)-4-((4-cijanofenil)(5-metilpiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (360-361); 8-((2S,5R)-4-((4-hlorofenil)(4-metilpiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (362 i 364); 8-((2S,SR)-4-((4-hlorofenil)(5-metilpiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (363-365); 8-((2S,5R)-4-((3,4-difluorofenil)(piridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (366); 8-((2S,5R)-4-((6-fluoropiridin-2-il)(4-(trifluorometoksi)fenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (367-368); 8-((2S,5R)-4-((3-hlorofenil)(5-metilpiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (369); 8-((2S,SR)-4-((3-fluorofenil)(5-(trifluorometil)piridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (370-371); 8-((2S,5R)-4-((3-hlorofenil)(5-metilpiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (372); 8-((2S,5R)-4-((3-hloro-4-metilfenil)(5-metilpiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (373 i 380); 8-((2S,SR)-4-((3-fluorofenil)(piridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (374 i 379); 8-((2S,SR)-4-((3,4-difluorofenil)(piridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (375-376); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-(piridin-2-il(4-(trifluorometoksi)fenil)metil) piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (377-378); 8-((2S,5R)-4-((4-hlorofenil)(piridin-2-it)metil)-2,5-dimetitpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (381 i 382); 8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(piridazin-3-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5naftiridin-2-karbonitril (383-384); 8-((2S,5R)-4-((4-hlorofenil) (2-metilpirimidin-5-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (385); 8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(5-fluoropiridin-3-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (386); 8-((2S,SR)-4-((4-fluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (387-388); 8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(2-metilpirimidin-4-il) metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (389); 8-((2S,SR)-4-((3-fluorofenil)(6-metilpiridin-3-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (390); 8-((2S,SR)-4-((5-fluoropiridin-3-il)(ptolil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (391); 8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(pirimidin-4-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (392); 8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil) (pirimidin-5-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (393-394); 8-((2S,5R)-4-((3-fluorofenil)(6-metilpiridin-3-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (395); 8-((2S,5R)-4-((4-hlorofenil)(pirimidin-4-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (396-397); 8-((2S,5R)-4-((3-hlorofenil)(5-metilpiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (398); 8-((2S,5R)-4-((3-hloro-4-metilfenil)(5-metilpiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (399); 8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(5-fluoropiridin-3-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (400); 8-((2S,SR)-4-((4-fluorofenil)(2-metilpirimidin-4-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (401); 8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(pirimidin-4-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (402); 8-((2S,5R)-4-((4-hlorofenil)(piridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (403); 8-((2S,5R)-4-((3-fluorofenil)(piridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (404); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-(piridin-2-il(4-(trifluorometoksi) fenil)metil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (405); 8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(2-metilpirimidin-5-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (406); 8-((2S,5R)-4-(bis(5-fluoropiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (407); 8-((2S,5R)-4-((2-(terc-butil)pirimidin-4-il)(4fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (408-409); 8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(2-metilpirimidin-5-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-meti1-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (410); 8-((2S,SR)-4-(1-(3,4-difluorofenil)propil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (411); 8-((2S,5R)-4-(1-(2-fluoro-4-(trifluorometil)fenil) etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (412); 8-((3R)-4-((4-hlorofenil)(2-metilpirimidin-5-il)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (413-414); 8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(5-fluoropiridin-3-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (415); 8-((2S,5R)-4-((5-fluoropiridin-3-il)(p-tolil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (416); 8-((2S,5R)-4-((3-fluorofenil)(6-metilpiridin-3-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (417); 8-((2S,SR)-5-etil-4-((4-fluorofenil)(2-metilpirimidin-4-il)metil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (418-419); 8-((2S,SR)-5-etil-4-(1-(2-fluoro-4-(trifluorometoksi)fenil)propil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (420-421); 8-((2S,5R)-4-((4-hlorofenil) (piridin-2-il)metil)-5-etil-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (422-423); 7-fluoro-8-((2S,SR)-4-(1-(4-fluorofenil)etil-1-d)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril i 7-fluoro-8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)etil-1-d)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (424-425); 7-fluoro-8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)etil-1-d)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (426-427); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)etil-1-d)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (428-429); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-((2,4,6-trifluorofenil)metil-d2)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (430); 8-((2S,5R)-4-(1-(2-fluoro-4-(trifluorometil)fenil) etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (431); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-(1-(2,4,6-trifluorofenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (432); 8-((2S,5R)-4-(1-(2-hloro-4-fluoro-3-metilfenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (433); 8-((2S,5R)-4-(1-(2-fluoro-4-(trifluorometil)fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (434); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (435-436); 8-((2S,5R)-4-(1-(2-fluoro-4-(trifluorometoksi) fenil)etil)-2,5dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (437, 439, i 442); 8-((2S,5R)-4-(1-(2-fluoro-4-(trifluorometoksi)fenil)propil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (438 i 440-441); 8-((2S,5R)-4-((4-hlorofenil)(6-metilpiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (443); 8-((2S,5R)-4-((5-fluoropiridin-2-il)(p-tolil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (444); 8-((2S,5R)-4-((3,4-dihidro-2H-benzo[b][1,4]dioksepin-6-il)(3-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (445); 8-((2S,5R)-4-((4-hlorofenil)(4-fluoropiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (446); 8-((2S,5R)-4-((4-hlorofenil)(2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioksin-5-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (447); 8-((2S,5R)-4-((4-hlorofenil)(4-metilpiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (448); 8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(5-metilpiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (449); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-((6-metilpiridin-2-il)(p-tolil)metil) piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (450); 8-((2S,5R)-4-((3,4-dihidro-2H-benzo[b][1,4]dioksepin-6-il)(5-metilpiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (451); 8-((2S,5R)-4-((4-cijanofenil)(5-metilpiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (452-453); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-((5-metilpiridin-2-il)(p-tolil)metil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (454, 457); 8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(4-metilpiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (455-456); 8-((2S,5R)-4-((4-hlorofenil)(4-fluoro-2,2-dimetil-2,3-dihidrobenzofuran-7-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (458-459); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-((4-metilpiridin-2-il)(ptolil)metil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (460-461); 8-((2S,5R)-4-((5-fluoropiridin-2-il)(4-(trifluorometoksi)fenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (462, 466, 468); 8-((2S,5R)-4-((4-cijanofenil)(5-fluoropiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (463-464); 8-((2S,5R)-4-((2,2-dimetil-2,3-dihidrobenzofuran-7-il)(5-fluoropiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (465, 467); 8-((2S,5R)-4-((3,4-dihidro-2H-benzo[b][1,4]dioksepin-6-il)(5-metilpiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5naftiridin-2-karbonitril (469); 8-((2S,5R)-4-((3-fluorofenil)(6-metilpiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (470); 8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(6-fluoropiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (471); 8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(4-fluoropiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (472-474); 8-((2S,SR)-2,5-dimetil-4-((1-metil-1H-indazol-4-il)metil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (475); 8-((2S,5R)-4-((6-fluoropiridin-2-il)(p-tolil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (476, 478-479); 8-((2S,5R)-4-(ciklopropil(2-fluoro-4-(trifluorometoksi)fenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (480-481); 8-((2S,SR)-5-etil-4-(1-(4-metoksifenil)etil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (482-483); 8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(4-metilpiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (484); 8-((2S,SR)-2,5-dimetil-4-((4-metilpiridin-2-il)(p-tolil)metil) piperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (485); 8-((2S,5R)-4-(1-(2-hloro-4,5-difluorofenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (486); 8-((2S,SR)-4-(1-(2-hloro-4-fluoro-3-metilfenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (487); 8-((2S,SR)-2,5-dimetil-4-(1-(2,4,6-trifluorofenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (488-489, 555); 8-[(2S,5R)-4-[2-fluoro-1-(4-fluorofenil)etil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (556); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)-2-hidroksietil)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (557-558); 8-((2S,SR)-4-(1-(4-fluorofenil)-2-metoksietil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (559-560); 8-((2S,5R)-4-(2-(4-fluorofenil)-2-metoksietil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (561); 8-((2S,SR)-4-(4-(1-cijanociklopropil)benril)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (567); 8-((2S,SR)-4-((1-etil-1H-benzo[d]imidazol-7-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (568-569); 7-(difluorometil)-8-((2S,SR)-4-(2-fluoro-4-(trifluorometoksi)benzil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (570); 8-((2S,5R)-4-(3-(dimetilamino)benzil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (573); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)propil-1-d)-2,5dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (574-575); 8-((2S,SR)-4-(2-cijano-4-(trifluorometoksi) benzil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (581); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-(2,2,2-trifluoro-1-(4-fluorofenil)etil) piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridino-2-karbonitril (582-583); 8-((2S,5R)-4-(3-cijano-4-(trifluorometoksi)benzil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (584); 8-((2S,5R)-4-(4-fluoro-3-(trifluorometoksi)benzil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (585); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-(3-(trifluorometoksi)benzil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (586); 8-((2S,5R)-4-(4-(tercbutil)benzil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (587); 8-((2S,5R)-4-(4-(difluorometoksi)benzil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (588); 8-((2S,SR)-4-((2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (589); 8-((2S,5R)-4-(4-(difluorometoksi)-2-fluorobenzil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (590); 8-((2S,5R)-4-(2-fluoro-4-(trifluorometoksi)benzil)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (591); 8-((2S,5R)-4-(1-(2,6-difluoro-4-hidroksifenil)-2,2,2-trifluoroetil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (592); 8-((2S,5R)-4-(2-bromo-4-(trifluorometoksi)benzil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (593); 8-((2S,5R)-4-(3-izopropoksibenzil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (594); 8-((2S,SR)-4-(2-izopropoksibenzil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (595); 8-((2S,SR)-4-((1-etil-3-fluoro-1H-indol-4-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (596); 8-((2S,5R)-4-(4-fluoro-2-izopropoksibenzil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (598); 8-((2S,5R)-4-(3-etoksibenzil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (599); 8-((2S,5R)-4-(2-metoksi-5-(trifluorometoksi)benzil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (601); 8-((2S,5R)-4-(4-izopropilbenzil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (602); 8-((2S,5R)-4-(4-hlorobenzil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (603); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-((1-metil-1H-indol-4-il)metil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (606); 8((2S,5R)-4-(2-hloro-4-(trifluorometoksi)benzil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (607); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-(2-metil-4-(trifluorometoksi)benzil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (608); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-(4-(trifluorometoksi)benzil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (609); 8-((2S,5R)-4-(3-fluoro-4-(trifluorometoksi)benzil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (610); 8-((2S,SR)-4-(3-hloro-4-(trifluorometoksi)benzil)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (611); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-((tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (623); 8-((2S,5R)-4-(2-fluoro-4-(trifluorometoksi)benzil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (624); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-(2,2,2-trifluoro-1 -(2-fluoro-4-hidroksifenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (625); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-(2,2,2-trifluoro-1 -(4-hidroksifenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (626); 8-((2S,5R)-4-(1-(2,6-difluoro-4-hidroksifenil)-2,2,2-trifluoroetil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (627-628); 8-((2S,5R)-4-(3-bromo-4-(trifluorometoksi)benzil)-2,5-dimetilpiperazin-1 - il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (629); terc-butil 8-{[(2R,5S)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-2,5-dimetilpiperazin-1-il]metil}-3,4-dihidro-2H-1,4-benzoksazino-4-karboksilat (630); 8-[(2S,SR)-4-[(4-acetil-3,4-dihidro-2H-1,4-benzoksazin-8-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (631); 8-[(2S,SR)-2,5-dimetil-4-(2-feniletil)piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (632); 8-[(2S,5R)-2,5-dimetil-4-[2-(4-metilfenil)etil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (633); 8-[(2S,5R)-4-[(3,4-dihidro-2H-1,4-benzoksazin-8-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (634); 8-[(2S,5R)-2,5-dimetil-4-[(4-metil-3-okso-3,4-dihidro-2H-1,4-benzoksazin-5-il)metil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (635); 8-[(2S,SR)-2,5-dimetil-4-{1-[6-(trifluorometil)piridin-2-il]etil}piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (636-637); 8-[(2S,5R)-2,5-dimetil-4-[1-(hinolin-5-il)etil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (638-639); 8-[(2S,5R)-4-[1-(5-fluoropiridin-2-il)etil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (640-641); 8-[(2S,5R)-2,5-dimetil-4- (1-[5-(trifluorometil)piridin-2-il] etil) piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2karbonitril (642-643); 8-[(2S,5R)-4-[1-(5-metoksipiridin-2-il)etil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (644-645); 8-[(2S,5R)-4-[1-(4-ciklopropil-1,3-tiazol-2-il)etil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (646-647);8-[(2S,5R)-2,5-dimetil-4-[1-(5-metil-1,2-oksazol-3-il)etil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (648-649); 8-[(2S,5R)-2,5-dimetil-4-[1-(hinoksalin-6-il) etil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (650-651); 8-[(2S,5R)-4-{1-[4-(difluorometoksi)fenil]etil}-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (652-653); 8-[(2S,SR)-4-[1-(2,2-difluoro-2H-1,3-benzodioksol-5-il)etil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (654-655); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(2,2-difluoro-2H-1,3-benzodioksol-5-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (656-657); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(4-metoksifenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (658-659); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(3-metoksifenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (660-661); 8-[(2S,SR)-4-[(4-fluorofenil) [4-(morfolin-4-il)fenil]metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (662-663); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)[2-(morfolin-4-il)fenil]metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (664-665); 8-[(2S,5R)-4-{[4-(difluorometil) fenil](4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (666-667); 8-[(2S,SR)-4-[(2,2-difluoro-2H-1,3-benzodioksol-4-il)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (668-669); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil) (fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (670-671); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)[3-(morfolin-4-il)fenil]metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (672-673); 8-[(2S,SR)-4-[(4-fluorofenil)(pirazin-2-il) metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (674-675); 8-[(2S,SR)-4-[(4-fluorofenil)(pirimidin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (676-677); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)[6-(trifluorometil)piridin-2-il]metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (678-679); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)[5-(trifluorometil)piridin-2-il]metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (680-681); 8-[(2S,5R)-4-[(2,4-difluorofenil)(piridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (682-683); 8-[(2S,5R)-4-[(2,4-difluorofenil)(5-fluoropiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (684-685); 8-[(2S,5R)-4-[(3-fluorofenil)(5-metoksipiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (686-687); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(3-metansulfonilfenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (688-689); 8-[(2S,5R)-4-[(3-fluorofenil)[5-(propan-2-iloksi)piridin-2-il]metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (690-691); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(2,4,6-trifluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (692-693); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenilXfpirazolo[1,5-a]piridin-7-il})metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (694-695); 8-[(2S,5R)-4-{[6-(difluorometil)piridin-2-il](4-fluorofenil)metil}-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (696-697); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(pirazolo[1,5-a]piridin-3-il})metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (698-699); 8-((2S,5R)-4-((4-ciklopropiltiazol-2-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5, 6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (700-701); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(1-metil-1H-pirazol-4-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (702-703); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(1-metil-1H-imidazol-5-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (704-705); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(1,2-oksazol-3-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (706-707); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(1-metil-1H-imidazol-4-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (708); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(1,3-oksazol-4-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (709-710); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(1,3-tiazol-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (711-712); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(1-metil-1H-imidazol-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (713-714); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(1,2-tiazol-4-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (715-716); 8-[(2S,SR)-4-[(4-fluorofenil)(1,3-oksazol-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (717-718); 8-[(2S,SR)-4-[(4-fluorofenil)(1,2-tiazol-5-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (719-720); 8-[(2S,SR)-4-[(4-fluorofenil)(1,3-tiazol-4il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (721-722); 8-[(2S,5R)-4-[(2-ciklopropil-1,3-tiazol-4-il)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (723-724); 8-[(2S,5R)-4-[(1-ciklopropil-1H-pirazol-4-il)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (725-726); 8-[(2S,5R)-4-[(2-ciklopropil-1,3-tiazol-5-il)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (727-728); 8-((2S,5R)-4-((5-ciklopropilizoksazol-3-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (729-730); 8-((2S,5R)-4-((5-(terc-butil)izoksazol-3-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (731-732); 8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(5-metilizoksazol-3-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (733-734); 8-((2S,5R)-4-((3-ciklopropil-1,2,4-oksadiazol-5-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (735-736); 8-[(2S,5R)-4-[(3-terc-butil-1,2,4-oksadiazol-5-il)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (737-738); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)[3-(oksan-4-il)-1,2,4-oksadiazol-5-il]metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (739-740); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)[3-(4-fluorofenil)-1,2,4-oksadiazol-5-il]metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (741-742); 8-[(2S,5R)-4-([3-(difluorometil)-1,2,4-oksadiazol-5-il](4-fluorofenil)meti}-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (743-744); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(3-metil-1,2,4-oksadiazol-5-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (745-746); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)[3-(propan-2-il)-1,2,4-oksadiazol-5-il]metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (747-748); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)[3-(morfolin-4-il)-1,2,4-oksadiazol-5-il]metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (749-750); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)[3-(1-metilpiperidin-4-il)-1,2,4-oksadiazol-5-il]metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (751-752); 8-[(2S,SR)-4-[(3-etil-1,2,4-oksadiazol-5-il)(4-fluorofenil) metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (753-754); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(1,2,4-oksadiazol-5-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (755); terc-butil 3-(5-{[(2R,5S)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-2,5dimetilpiperazin-1-il](4-fluorofenil)metil}-1,2,4-oksadiazol-3-il)azetidin-1-karboksilat (756-757); 8-[(2S,5R)-4-[(3-ciklopropil-1,2,4-oksadiazol-5-il)[4-(trifluorometoksi)fenil]metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (758-759); 8-[(2S,5R)-4-[(4-bromofenil)(3-ciklopropil-1,2,4-oksadiazol-5-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (760-761); 8-((2S,SR)-4-((5-ciklopropil-1,3,4-oksadiazol-2-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (762-763); 8-((2S,5R)-4-((5-(terc-butil)-1,2,4-oksadiazol-3-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (764-765); 8-((2S,5R)-4-((5-ciklopropil-4H-1,2,4-triazol-3-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (766-767); 8-((2S,5R)-4-((3-ciklopropil-1-metil-1H-1,2,4-triazol-5-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (768-769); 8-((2S,5R)-4-((1-(terc-butil)-1H-tetrazol-5-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (770-771); 8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(5-izopropil-1,3,4-tiadiazol-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (772-773); 8-((2S,5R)-4-((5-ciklopropil-1,3,4-tiadiazol-2-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (774-775); 8-((2S,5R)-4-((4-ciklopropiloksazol-2-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (776-777); 8-[(2S,SR)-4-[(4-terc-butil-1,3-oksazol-2-il)(4-fluorofenil) metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (778-779); 8-((2S,5R)-4-(1-(2,6-difluorofenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (780-781); 8-[(2S,5R)-4-[1-(4-fluorofenil)etil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (782-783); 8-[(2S,SR)-2,5-dimetil-4-[1-(4-metilfenil)etil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (784-785); 4-{ 1-[(2R,5S)-4-(3,6-dicijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-2,5-dimetilpiperazin-1-il]etil}benzoeva kiselina (786-787); 8-[(2S,5R)-2,5-dimetil-4-{1-[4-(trifluorometil)fenil]etil}piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (788); 8-[(2S,SR)-4-[1-(4-bromofenil)etil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (789-790); 8-[(2S,SR)-4-[1-(4-hlorofenil)etil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (791-792); metil 4-{1-[(2R,5S)-4-(3,6-dicijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-2,5-dimetilpiperazin-1-il]etil}benzoat (793-794); metil 3-{1[(2R,5S)-4-(3,6-dicijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-2,5-dimetilpiperazin-1-il]etil} benzoat (795-796); 8-[(2S,5R)-4-[1-(2-fluorofenil) etil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (797-798); 8-[(2S,SR)-4-[1-(5-metoksipiridin-2-il)etil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (799-800); 8-[(2S,5R)-2,5-dimetil-4-{1-[4-(trifluorometoksi)fenil]etil}piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (801-802); 8-[(2S,5R)-2,5-dimetil-4-[1-(5-metil-1,2-oksazol-3-il)etil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (803-804); 8-[(2S,5R)-4-[bis(4-hlorof enil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (805); 8-[(2S,5R)-4-[bis(4-metilfenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (806); 8-[(2S,SR)-4-[(4-fluorofenil)(fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (807-808); 8-[(2S,5R)-4-[(2-etilfenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (809-810); 8-[(2S,5R)-4-[(4-etilfenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (811-812); 8-[(2S,5R)-4-[(3,5-difluorofenil)(fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (813-814); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil) (6-metilpiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (815-816); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenit)(4-metilfenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (817-818); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (819 i 822); 8-[(2S,SR)-4-[(4-fluorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (820-821); 8-[(2S,5R)-4-[(4-cijanofenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (823-824); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(4-metilfenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (825-826); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(5-fluoropiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (827-828); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(5-fluoropiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (829-830); 8-[(2S,5R)-4-[(2-hloro-4-fluorofenil)(5-metilpiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (831-832); 8-[(2S,5R)-4-[(5-fluoropiridin-2-il)(4metilfenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (833); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (834-835); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)[5-(trifluorometil)piridin-2-il] metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (836-837); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(4-metoksifenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (838-839); 8-[(2S,5R)-4-[(3-fluorofenil)[5-(trifluorometil)piridin-2-il]metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (840-841); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(piridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (842-843); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)[6-(trifluorometil)piridin-2-il]metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (844-845); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(1-metil-1H-pirazol-4-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (846-847); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(1-metil-1H-imidazol-5-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (848-849); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(1,2-oksazol-3-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (850-851); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(1-metil-1H-imidazol-4-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (852-853); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(1,2-tiazol-5-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (854-855); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(1,3-tiazol-4-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (856-857); 8-[(2S,5R)-4-[(2-ciklopropil-1,3-tiazol-4-il)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (858-859); 8-[(2S,5R)-4-[(3-ciklopropil-1,2,4-oksadiazol-5-il)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (860-861); 8-[(2S,5R)-4-[(3-terc-butil-1,2,4-oksadiazol-5-il)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (862-863); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(5-metil-1,2-oksazol-3-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (864-865); 8-[(2S,SR)-4-[(5-tercbutil-1,2-oksazol-3-il) (4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (866-867); 8-[(2S,SR)-4-[(5-ciklopropil-1,2-oksazol-3-il)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (868-869); 8-[(3R)-4-[bis(4-metilfenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (870); 8-[(3R)-4-[(4-cijanofenil)(4-fluorofenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (871); 8-[(3R)-4-[(4-hlorofenil)(4-cijanofenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (872-873); 8-[(3R)-4-[(3,5-difluorofenil) (fenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (874-875); 8-[(3R)-4-[(2-etilfenil)(4-fluorofenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (876-877); 8-[(3R)-4-[(4-fluorofenil)(fenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (878-879); 8-[(3R)-4-[(3-fluorofenil)(4-fluorofenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (880-881); 8-[(3R)-4-[(2-fluorofenil)(4-fluorofenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (882-883); 8-[(3R)-4-[(4-etilfenil)(4-fluorofenil) metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (884-885); 8-[(3R)-4-[(4-hlorofenil)(fenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (886-887); 8-[(3R)-4-[(4-fluorofenil)(4-metilfenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (888-889); 8-[(3R)-4-[(3-fluoropiridin-2-il)(4-metilfenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (890 i 892); 8-[(3R)-4-[(4-fluorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (891 i 893); 8-[(3R)-4-[(4-fluorofenil) (2-metoksipiridin-3-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (894-895); 8-[(3R)-4-[(4-fluorofenil)[5-(trifluorometil)piridin-2-il]metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (896-897); 8-[(3R)-4-[(5-fluoropiridin-2-il)(4-metilfenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (898-899); 8-[(3R)-4-[(4-hlorofenil)(5-fluoropiridin-2-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (900-901); 8-[(3R)-4-[(4-fluorofenil)(5-fluoropiridin-2-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (902-903); 8-[(3R)-4-[(4-fluorofenil)(5-metilpiridin-2-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (904); 8-[(3R)-4-[(4-fluorofenil)(6-metilpiridin-2-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (905-906); 8-[(3R)-4-[(4-hlorofenil)(4-metilfenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (907); 8-[(3R)-4-[(5-cijanopiridin-2-il)(4-fluorofenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (908); 8-[(3R)-4-[(4-hlorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (909); 8-[(3R)-4-[(4-fluorofenil)[4-(trifluorometil)fenil]metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (910); 8-[(3R)-4-[(3-fluorofenil)(5-fluoropiridin-2-il)metil]-3-metilpiperazin-1 -il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (911); 8-[(3R)-4-[(3-fluorofenil)(5-metilpiridin-2-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (912); 8-[(3R)-4-[(4-hlorofenil) (3-fluoropiridin-2-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (913); 8-[(3R)-4-[(4-fluorofenil)[4-(trifluorometil) fenil]metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (914); 8-[(3R)-4-[(4-fluorofenil)(5-metilpiridin-2-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (915); 8-[(3R)-4-[(4-fluorofenil)(3-metilfenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (916-917); 8-[(3R)-4-[(4-fluorofenil)(piridin-2-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (918-919); 8-[(3R)-4-[(4-cijanofenil)(4-fluorofenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (920); 8-[(3R)-4-[(4-fluorofenil)[6-(trifluorometil) piridin-2-il]metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (921-922); 8-[(3R)-4-[(3-fluorofenil)(5-metilpiridin-2-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (923); 8-[(3R)-4-[(5-cijanopiridin-2-il)(4-fluorofenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (924); 8-[(3R)-4-[(3-fluorofenil)(5-fluoropiridin-2-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (925); 8-[(3R)-4-[(3-hlorofenil)(5-fluoropiridin-2-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (926-927); 8-[(3R)-4-[(3-hlorofenil) (5-metilpiridin-2-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (928-929); 8-[(3R)-4-[(4-hlorofenil)(5-hloropiridin-2-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (930-931); 8-[(3R)-4-[(5-hloropiridin-2-il)(4-fluorofenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (932-933); 8-[(3R)-4-[(2,2-dimetil-2,3-dihidro-1-benzofuran-7-il)(4-fluorofenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (934-935); 8-[(3R)-4-[(5-hloropiridin-2-il)(4-metilfenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (936-937); 8-[(3R)-4-[(2-hloro-4-fluorofenil)(5-metilpiridin-2-il)metil]-3metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (938); 8-[(3R)-4-[(2,2-difluoro-2H-1,3-benzodioksol-4-il)(4-fluorofenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (939-940); 8-[(3R)-4-[(4-hlorofenil)(2,2-difluoro-2H-1,3-benzodioksol-5-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (941-942); 8-[(3R)-4-[(4-fluorofenil)(pirazin-2-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (943); 8-[(3R)-4-[(4-hlorofenil)(4-metilfenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (944-945); 8-[(3R)-4-[(2,4-difluorofenil)(4-fluorofenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (946-947); 8-[(3R)-4-[(3-fluorofenil)[5-(trifluorometil)piridin-2-il]metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (948-949); 8-[(3R)-4-[1-(2,6-difluorofenil)etil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (950-951); 5-metil-8-[(3R)-3-metil-4-[1-(4-metilfenil)etil]piperazin-1-il]-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (952-953); 8-[(3R)-4-[1-(4-cijanofenil)etil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (954-955); 8-[(3R)-4-[1-(3,4-difluorofenil)etil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (956); 8-[(3R)-4-[1-(4-fluorofenil)etil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (957 i 959); 5-metil-8-[(3R)-3-metil-4-{1-[4-(trifluorometoksi)fenil]etil} piperazin-1-il]-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (958 i 962); 5-metil-8-[(3R)-3-metil-4-{1-[4-(trifluorometil)fenil]etil}piperazin-1-il]-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (960-961); 5-metil-8-[(3R)-3-metil-4-[1-(piridin-2-il)etil]piperazin-1-il]-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (963 i 965); 5-metil-8-[(3R)-3-metil-4-[1-(6-metilpiridin-2-il)etil]piperazin-1-il]-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (964); 5-metil-8-[(3R)-3-metil-4-{1-[2-(trifluorometil)fenil]etil}piperazin-1-il]-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (966 i 968); 5-metil-8-[(3R)-3-metil-4-[1-(6-metilpiridin-2-il)etil]piperazin-1-il]-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (967); 8-[(3R)-4-[1-(2,4-difluorofenil)etil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (969-970); 5-metil-8-[(3R)-3-metil-4- {1-[3-(trifluorometil)fenil]etil} piperazin-1-il]-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (971-972); 4-{1-[(2R)-4-(3,6-dicijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-2-metilpiperazin-1-il]etil}benzoeva kiselina (973-974); 8-[(3R)-4-[1-(4-bromofenil)etil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (974-975); 8-[(3R)-4-[1-(2,5-dimetilfenil)etil]-3metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (976-977); 8-[(3R)-4-[1-(4-hlorofenil) etil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (978-979); metil 4-{1-[(2R)-4-(3,6-dicijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-2-metilpiperazin-1-il]etil}benzoat (980-981); metil 3-{1-[(2R)-4-(3,6-dicijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-2-metilpiperazin-1-il]etil}benzoat (982-983); 8-[(3R)-4-[(2-hloro-6-fluorofenil) metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (984); 8-[(3R)-4-[(2,4-difluorofenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (985); 5-metil-8-[(3R)-3-metil-4-[(2,4,6-trifluorofenil)metil]piperazin-1-il]-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (986); 8-[(3R)-4-[(3,4-difluorofenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (987); 5-metil-8-[(3R)-3-metil-4-[(6-metilpiridin-2-il)metil]piperazin-1-il]-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (988); 8-[(3R)-4-[(6-cijanopiridin-2-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (989); 5-metil-8-[(3R)-3-metil-4-[(piridin-2-il)metil]piperazin-1-il]-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (990); 5-metil-8-[(3R)-3-metil-4- {[6-(trifluorometil)piridin-2-il]metil} piperazin-1-il]-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (991); 5-metil-8-[(3R)-3-metil-4-[(hinolin-2-il) metil]piperazin-1-il]-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (992); 8-[(3R)-4-[(2-hloro-4-fluorofenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (993); 8-[(3R)-4-({[1,1'-bifenil]-4-il} metil)-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (994); 8-[(3R)-4-[(4-fluoro-3-metilfenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (995); 8-[(3R)-4-[(3,4-dihlorofenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (996); 8-[(3R)-4-[(2-hlorofenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (997); 5-metil-8-[(3R)-3-metil-4-[(piridin-3-il)metil]piperazin-1-il]-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (998); 5-metil-8-[(3R)-3-metil-4-{[2-(trifluorometoksi)fenil]metil } piperazin-1-il]-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (999); 8-[(3R)-4-[(3,5-dimetilfenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1000); 8-[(3R)-4-[(5-fluoro-2-metilfenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1001); 8-[(3R)-4-[(3-fluoro-4-metilfenil) metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1002); 5-metil-8-[(3R)-3-metil-4-{[3-(trifluorometil)fenil]metil} piperazin-1-il]-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1003); 8-[(3R)-4-({[1,1'-bifenil]-3-il}metil)-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1004); 8-[(3R)-4-[(3-fluorofenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1005); 8-[(3R)-4-[(2-fluoro-5-metilfenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1006); 5-metil-8-[(3R)-3-metil-4-[(4-metilfenil)metil]piperazin-1-il]-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1007); 5-metil-8-[(3R)-3-metil-4-{[3-(trifluorometoksi)fenil] metil}piperazin-1-il]-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1008); 8-[(3R)-4-[(2-cijanofenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1009); 8-[(3R)-4-[(3-fluoro-2-metilfenil) metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1010); 8-[(3R)-4-[(4-hlorofenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1011); 5-metil-8-[(3R)-3-metil-4-[(3-metilfenil)metil]piperazin-1-il]-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1012); 8-[(3R)-4-[(4-terc-butilfenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1013); 5-metil-8-[(3R)-3-metil-4-{[2-(trifluorometil)fenil]metil}piperazin-1-il]-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1014); 8-[(3R)-4-[(4-hloro-3-fluorofenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1015); 8-[(3R)-4-[(4-fluorofenil)(1-metil-1H-pirazol-4-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1016-1017); 8-[(3R)-4-[(4-fluorofenil)(1-metil-1H-imidazol-5-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1018-1019); 8-[(3R)-4-[(4-fluorofenil)(1,3-oksazol-4-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1022-1023); 8-[(3R)-4-[(4-fluorofenil)(1,3-tiazol-2-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1024-1025); 8-[(3R)-4-[(4-fluorofenil)(1-metil-1H-imidazol-4-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1026-1027); 8-[(3R)-4-[(4-fluorofenil)(1,2-tiazol-4-il)metil]-3-metilpiperazin-1-i1]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1028); 8-[(3R)-4-[(3-ciklopropil-1,2,4-oksadiazol-5-il)(4-fluorofenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1029-1030); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dietilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1031); 8-[(2S,SR)-4-[bis(4-hlorofenil) metil]-2,5-dietilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1032); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(5-fluoropiridin-2-il)metil]-2,5-dietilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1033-1034); 8[(2S,5R)-4-[(4-cijanofenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dietilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1035-1036); 8-[(2S,SR)-2,5-dietil-4-[(4-fluorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metil] piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridino-2-karbonitril (1037-1038); 8-[(2S,5R)-2,5-dietil-4-[(4-fluorofenil)[5-(trifluorometil)piridin-2-il] metil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1039-1040); 8-[(2S,SR)-2,5-dietil-4-[(3-fluorofenil)(5-fluoropiridin-2-il)metil] piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1041-1042); 8-[(2S,5R)-2,5-dietil-4-[(4-fluorofenil)(piridin-2-il)metil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1043-1044); 8-[(2S,5R)-2,5-dietil-4-[(4-fluorofenil)[6-(trifluorometil)piridin-2-il]metil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1045-1046); 8-[(2S,5R)-2,5-dietil-4-[(3-fluorofenil)(5-metoksipiridin-2-il)metil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1047-1048); 8-[(2S,5R)-2,5-dietil-4-[1-(4-fluorofenil)etil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1049-1050); 8-[(2S,5R)-2,5-dietil-4-{1-[4-(trifluorometil)fenil] eti1}piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1051-1052); 8-[(2S,5R)-2,5-dietil-4-{1-[4-(trifluorometoksi)fenil]etil}piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1053-1054); 8-[(2S,SR)-4-[1-(2,4-difluorofenil)etil]-2,5-dietilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1055-1056); 8-[(2S,5R)-2,5-dietil-4-{1-[2-fluoro-4-(trifluorometoksi)fenil]propil}piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1057-1058); 8-[(2S,5R)-2,5-dietil-4-{1-[4-(trifluorometoksi)fenil]propil}piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1059-1060); 8-[(2S,5R)-2,5-dietil-4-[(4-fluorofenil) metil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1 ,5-naftiridin-2-karbonitril (1061); 8-[(2S,SR)-4-[(2,4-difluorofenil)metil]-2,5-dietilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1062); 8-[(2S,5R)-4-[(2,2-difluoro-2H-1,3-benzodioksol-5-il)metil]-2,5-dietilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1063); 8-[(2S,SR)-4-[(3-ciklopropil-1,2,4-oksadiazol-5-il)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dietilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1064-1065); 8-[(2S,SR)-4-[(4-ciklopropil-1,3-tiazol-2-il)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dietilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1066-1067); 8-[(2S,5R)-2,5-dietil-4-[(4-fluorofenil)(1,3-oksazol-4-il)metil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1068-1069); 8-[(2S,5R)-2,5-dietil-4-[(4-fluorofenil) (1,3-tiazol-4-il)metil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1070-1071); 8-[(2S,SR)-2,5-dietil-4-[(4fluorofenil)(1,2-oksazol-3-il)metil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1072-1073); 8-[(2S,5R)-4-[(5-ciklopropil-1,2-oksazol-3-il)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dietilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1074-1075); 8-[(2S,5R)-4-benzil-5-etil-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1076); 8-[(2S,5R)-4-[(2,4-difluorofenil) metil]-5-etil-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1077); 8-[(2S,5R)-4-[(2-hloro-4-fluorofenil)metil]-5-etil-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1078); 8-[(2S,SR)-5-etil-4-[(4-fluorofenil)metil]-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1079); 8-[(2S,5R)-5-etil-2-metil-4-[(2,4,6-trifluorofenil)metil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1080); 8-[(2S,5R)-5-etil-4-{[2-metoksi-4-(trifluorometoksi)fenil]metil}-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1081); 8-[(2S,5R)-4-[(2,2-difluoro-2H-1,3-benzodioksol-5-il)metil]-5-etil-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1082); 8-[(2S,5R)-5-etil-4-[1-(4-fluorofenil)etil]-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1083-1084); 8-[(2S,5R)-5-etil-4-{ 1 -[2-fluoro-4-(trifluorometil)fenil]etil}-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1085-1086); 8-[(2S,5R)-4-[1-(2,4-difluorofenil)etil]-5-etil-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1087-1088); 8-[(2S,5R)-5-etil-2-metil-4-[1-(2,4,6-trifluorofenil)etil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1089-1090); 8-[(2S,SR)-4-[1-(3,4-difluorofenil)etil]-5-etil-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1091-1092); 8-[(2S,5R)-5-etil-2-metil-4-{1-[4-(trifluorometil)fenil]etil}piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1093-1094); 8-[(2S,5R)-5-etil-4-{1-[2-fluoro-4-(trifluorometoksi)fenil]etil}-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1095-1096); 8-[(2S,SR)-4-[bis(4-fluorofenil)metil]-5-etil-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1097); 8-[(2S,5R)-4-[bis(4-metilfenil)metil]-5-etil-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1098); 8-[(2S,SR)-4-[bis(4-hlorofenil)metil]-5-etil-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1099); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(4-fluorofenil)metil]-5-etil-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1100-1101); 8-[(2S,5R)-4-[(4-cijanofenil)(4-fluorofenil)metil]-5-etil-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1102-1103); 8-[(2S,5R)-5-etil-4-[(4-fluorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metil]-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1104-1105); 8-[(2S,5R)-5-etil-4-[(4-fluorofenil)[5-(trifluorometil)piridin-2-il]metil]-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1106-1107); 8-[(2S,5R)-5-etil-4-[(3-fluorofenil)(5-fluoropiridin-2-il)metil]-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1108-1109); -fluoropiridin-2-il)metil]-5-etil-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1110-1111); 8-[(2S,5R)-5-etil-4-[(4-fluorofenil)[6-(trifluorometil)piridin-2-il]metil]-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1112-1113); 8-[(2S,5R)-5-etil-4-[(4-fluorofenil)(1,2-oksazol-3-il)metil]-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1114-1115); 8-[(2S,SR)-4-[(3-ciklopropil-1,2,4-oksadiazol-5-il)(4-fluorofenil)metil]-5-etil-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1116-1117); 8-[(2S,5R)-4-[bis(4-fluorofenil)metil]-2-etil-5-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1118); 8-[(2S,SR)-4-[bis(4-metilfenil)metil]-2-etil-5-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1119); 8-[(2S,SR)-4-[bis(4-hlorofenil)metil]-2-etil-5-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1120); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(4-metilfenil)metil]-2-etil-5-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1121-1122); 8-[(2S,5R)-4-[(4-cijanofenil)(4-fluorofenil)metil]-2-etil-5-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1123-1124); 8-[(2S,5R)-2-etil-4-[(3-fluorofenil)(5-metilpiridin-2-il)metil]-5-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1125-1126); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(4-fluorofenil)metil]-2-etil-5-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1127-1128); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(5-fluoropiridin-2-il)metil]-2-etil-5-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1129-1130); 8-[(2S,5R)-2-etil-4-[(4-fluorofenil)[5-(trifluorometil)piridin-2-il]metil]-5-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1131-1132); 8-[(2S,5R)-2-etil-4-[(4-fluorofenil)[6-(trifluorometil)piridin-2-il]metil]-5-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1133-1134); 8-[(2S,5R)-2-etil-4-[1-(4-fluorofenil)etil]-5-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1135-1136); 8-[(2S,SR)-4-[1-(2,4-difluorofenil) etil]-2-etil-5-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1137-1138); 8-[(2S,5R)-4-[1-(3,4-difluorofenil)etil]-2-etil-5-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1139-1140); 8-[(2S,5R)-2-etil-5-metil-4- (1-[4-(trifluorometoksi)fenil]etil) piperazin-1-il]-5-metil-6okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridino-2-karbonitril (1141-1142); 8-[(2S,5R)-2-etil-5-metil-4-{1-[4-(trifluorometil)fenil]etil}piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1143-1144); 8-[(2S,5R)-4-{1-[4-(difluorometoksi)fenil]etil}-2-etil-5-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1145); 8-[(2S,5R)-2-etil-5-metil-4-{1-[4-(trifluorometoksi)fenil]propil}piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1146-1147); 8-[(2S,5R)-2-etil-5-metil-4-[(2,4,6-trifluorofenil)metil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,64hidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1148); 8-[(2S,5R)-2-etil-5-metil-4-[(3,4,5-trifluorofenil)metil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1149); 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(hidroksimetil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1150); 8-[(2S,5S)-4-[bis(4-fluorofenil)metil]-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1151); 8-[(2S,5S)-4-[bis(4-hlorofenil)metil]-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1152); 8-[(2S,5S)-4-[(3-fluorofenil)(5-metilpiridin-2-il)metil]-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1153-1154); 8-((2S,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-l-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1155); 8-[(2S,5S)-4-[bis(4-metilfenil) metil]-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1156); 8-((2S,5S)-4-((4-cijanofenil)(4-fluorofenil) metil)-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1157-1158); 8-((2S,5S)-4-(1-(4-fluorofenil)etil)-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1159-1160); 8-[(2S,5S)-5-(metoksimetil)-2-metil-4-[(3,4,5-trifluorofoil)metil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1161); 8-[(2S,5S)-5-(metoksimetil)-2-metil-4-{ 1-[4-(trifluorometoksi)fenil]etil } piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (1162-1163); 8-((2S,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-5-(etoksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1164); N-(((2R,SS)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-5-metilpiperazin-2-il)metil)acetamid (1165); metil (((2R,5S)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-5-metilpiperazin-2-il)metil)karbamat (1166); 8-((2S,SR)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-metil-5-(morfolinometil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1167); 8-[(2S,5R)-4-[bis(4-fluorofenil)metil]-5-[(3-hidroksiazetidin-1-il)metil]-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1168); 8[(2S,5R)-4-[bis(4-fluorofenil)metil]-5-[(dimetilamino)metil]-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1169); 8-((2S,5S)-4-((4-cijanofenil) (4-fluorofenil) metil)-2-etil-5-(metoksimetil) piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1170-1171); 8-((2R,5R)-4-(bis(4-fluorofenil) metil)-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1172); 8-[(2R,5R)-4-[bis(4-metilfenil)metil]-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1173); 8-[(2R,5R)-4-[(4-hlorofenil)(4-fluorofenil)metil]-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1174-1175); 8-[(2R,5R)-4-[(4-cijanofenil)(4-fluorofenil)metil]-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1176-1177); 8-[(2R,SR)-4-[1-(4-fluorofenil) etil]-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1178-1179); 8-[(2R,SR)-5-(hidroksimetil)-2-metil-4-{1-[4-(trifluorometoksi)fenil]etil}piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1180-1181); 8-[(2R,5R)-5-(hidroksimetil)-2-metil-4-[(2,4,6-trifluorofenil)metil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1182); 8-((2R,5R)-4-(bis(4-fluorofenil) metil)-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1183); 8-(4-(2-hloro-4-fluorobenzil)-3-((difluorometoksi) metil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1184-1185); 8-{4-[bis(4-fluorofenil)metil]-3-[(difluorometoksi)metil]piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1186-1187); 8-((2S,5R)-4-(2-(difluorometoksi)-1-(4-fluorofenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1188-1189); 8-[(2S,5R)-4-{ciklopropil[4-(trifluorometoksi)fenil]metil}-5-etil-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1190); 4-[(2S,5R)-2,5-dimetil-4-(1-[4-(trifluorometoksi)fenil]etil}piperazin-1-il]-1,6-dimetil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril (1191-1192); 8-[(2S,5R)-5-etil-2-metil-4-(1-fenilbutil)piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1193-1194); 8-[(2S,SR)-4-{2-cikloheksil-1-[4-(trifluorometoksi)fenil] etil}-5-etil-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1195-1196); 8-[(2S,SR)-4-{[2,4-bis(trifluorometil)fenil]metil}-5-etil-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1197); 8-[(2S,SR)-5-etil-2-metil-4-{1-[4-(trifluorometoksi)fenil] propil } piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (1198-1199); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-ciklopropil-2-fluorofenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2karbonitril (1200-1201); 8-((2S,5R)-4-(1-(2-fluoro-5-(trifluorometoksi)fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (1202-1203); 8-((2S,SR)-4-(1-(3-fluoro-4-(trifluorometoksi)fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (1204-1205); 8-((2S,5R)-4-(1-(2-fluoro-5-(trifluorometoksi)fenil)propil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (1206-1207); 8-((2S,5R)-4-(1-(2-fluoro-3-(trifluorometoksi)fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (1208-1209); 8-((2S,5R)-4-(1-(3-fluoro-5-(trifluorometoksi)fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (1210-1211); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-(1-(2-(trifluorometoksi)fenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1212-1213); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-ciklopropilfenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1214-1215); 8-((2S,SR)-4-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-4-il)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1216-1217); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-ciklopropil-2-fluorofenil)propil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1218-1219); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-ciklopropilfenil) propil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1220-1221); 8-((2S,5R)-4-(1-(6-(difluorometil)piridin-2-il)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (1222-1223); 8-((2S,5R)-4-(1-(5-(difluorometoksi)piridin-2-il)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (1224-1225); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-cijano-2-fluorofenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1226-1227); 8-((2S,5R)-4-(1-(5-(difluorometoksi)-2-fluorofenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1228-1229); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-hloro-2-fluorofenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1230); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluoro-3-metoksifenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1231-1232); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-izopropilfenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1233-1234); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-(3,4,5-trifluorobenzil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1235); 8-((2S,SR)-4-(1-(4-fluoro-2-metoksifenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1236-1237); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-(1H-1,2,4-triazol-1-il) fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1238-1239); 8-((2S,SR)-2,5-dimetil-4-(1-(3,4,5-trifluorofenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1240-1241); 8-((2S,5R)-4-(1-(2,6-difluoro-4-metoksifenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1242-1243); 8-((2S,5R)-4-(1-(2,5-difluoro-4-metoksifenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1244-1245); 8-((2S,5R)-4-(1-(2-fluoro-4,5-dimetoksifenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (1246-1247); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-metoksi-3-(trifluorometil)fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (1248-1249); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-(1-cijanociklopropil)-2-fluorofenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (1250-1251); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-(1-cijanociklopropil)fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1253-1254); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluoro-3-metilfenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1255); 8-((2S,5R)-4-(1-(3-hloro-4-fluorofenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1256-1257); 8-((2S,SR)-4-(1-(2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioksin-6-il)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1258-1259); 8-((2S,SR)-2,5-dimetil-4-(1-(2-metilbenzo[d]oksazol-4-il)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1260-1261); 8-((2S,5R)-4-(1-(3-cijano-4-fluorofenil) etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1262); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-(1-(2-metilbenzo[d]tiazol-6-il)etil) piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1263-1264); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-(metoksimetil)fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1265-1266); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-(1-(3-(trifluorometoksi)fenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1267-1268); 8-((2S,5R)-4-(1-(3-fluoro-4-(trifluorometoksi)fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1269-1270); 8-((2S,SR)-4-(1-(3-(difluorometoksi)fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1271-1272); 8-((2S,SR)-2,5-dimetil-4-(1-(2-(trifluorometil)tiazol-4-il)etil)piperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1273-1274); 8-((2S,SR)-4-(4-etoksi-2,6-difluorobenzil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1275-1276); 8-((2S,5R)-4-(2-metoksi-1-(5-(trifluorometil)piridin-2-il) etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1277-1278); 8-((2S,5R)-4-(2-hidroksi-1-(5-(trifluorometil)piridin-2-il) etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (1279-1280); 8-((2S,5R)-4-(1-(5-ciklopropilizoksazol-3-il)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1281-1282); 8-((2S,SR)-4-(1-(5-(tercbutil)izoksazol-3-il)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1283-1284); 8-((2S,5R)-4-((4-hlorofenil)(3-ciklopropil-1,2,4-oksadiazol-5-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1285-1286); 8-((2S,5R)-4-((2-(dimetilfosforil)fenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1287-1288); 8-((2S,5R)-4-(4-(dimetilfosforil)benzil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1289); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-(dimetilfosforil)fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1290-1291); 8-((2S,5R)-4-((4-(dimetilfosforil)fenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1292-1293); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-(dimetilfosforil)fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1294-1295); 8-((2S,SR)-4-((3-(1-acetilazetidin-3-il)-1,2,4-oksadiazol-5-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1296-1297); 8-((2S,SR)-4-((4-fluorofenil)(3-(1-metilazetidin-3-il)-1,2,4-oksadiazol-5-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (1298-1299); 8-((2S,5R)-4-((1,1-dioksidotetrahidro-2H-tiopiran-4-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1300-1301); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-metoksi-3-(2-metoksietoksi)fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1302-1303); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-metoksi-3-(2-morfolinoetoksi)fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1304-1305); 8-((2S,SR)-4-(1-(3-ciklopropil-1,2,4-oksadiazol-5-il)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1306-1307); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)-2-hidroksi-2-metilpropil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1308-1309); 8-((2S,5R)-4-(2,2-difluoro-1-(4-fluorofenil)-3-hidroksipropil)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1310-1311); 8-((2S,5R)-4-(2,2-difluoro-1-(4-fluorofenil)-3-metoksipropil)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1312-1313); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluoro-2-(metoksimetil) fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1314-1315); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluoro-3-(metoksimetil) fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1316-1317); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)-2-(metiltio)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1318-1319); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-cijano-3-(2-metoksietoksi)fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1320-1321); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-cijano-3-(2-(dimetilamino)etoksi)fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1322-1323); 8-((2S,SR)-4-(1-(6-izopropoksipiridin-3-il)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1324-1325); 8-((2S,5R)-4-(2-(3-ciklopropil-1,2,4-oksadiazol-5-il)-1-(4-fluorofenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1326-1327); 8-((2S,SR)-5-etil-2-metil-4-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etil)piperazin-1-il)-7-fluoro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1328-1329); 8-((2S,5R)-4-(4-(difluorometoksi)benzil)-5-etil-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1330); 8-((2S,5R)-4-(4-hloro-2-fluorobenzil)-5-etil-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridino-2-karbonitril (1331); 8-((2S,5R)-5-etil-4-(3-fluoro-4-(trifluorometoksi)benzil)-2-metilpiperazin-1 - il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1332); 8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(2-(trifluorometil)tiazol-4-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1333-1334); 8-((2S,5R)-4-(bis(4-(hidroksimetil)fenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1335); 8-((2S,5R)-4-((4-cijanofenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1336-1337); 8-((2S,5R)-4-((4-ciklopropiltiazol-2-il)(4-fluorofenil) metil)-5-etil-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1338-1339); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-ciklopropil-2-fluorofenil)etil)5-etil-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1340-1341); 8-((2S,5R)-4-(4-(difluorometoksi)benzil)-5-etil-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1342); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-(difluorometoksi)fenil)etil)-5-etil-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1343-1344); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-cijanofenil)etil)-5-etil-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1345-1346); 8-((2S,5R)-5-etil-4-(2-fluoro-4-(trifluorometoksi)benzil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1347); 8-((2S,5R)-5-etil-4-(1-(4-izopropoksifenil)etil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1348-1349); 8-((2S,SR)-5-etil-4-(1-(4-metoksifenil) etil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1350-1351); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-hloro-2fluorofenil)etil)-5-etil-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1352-1353); 8-((2S,5R)-2,5-dietil-4-(3,4,5-trifluorobenzil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1354); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-ciklopropilfenil)etil)-2,5-dietilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1355-1356); 8-((2S,5R)-4-(I-(4-ciklopropil-2-fluorofenil)etil)-2,5-dietilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1357-1358); 8-((2S,5R)-4-(I-(4-ciklopropil-2-fluorofenil)propil)-2,5-dietilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1359-1360); 8-((2S,5R)-2,5-dietil-4-((4-fluorofenil)(2-(trifluorometil)tiazol-4-il)metil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1361-1362); 8-((2S,5R)-2,5-dietil-4-(4-(trifluorometoksi) benzil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1363); 8-((2S,SR)-2,5-dietil-4-(1-(2-fluoro-4-(trifluorometil)fenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1364-1365); 8-((2S,SR)-2,5-dietil-4-(1-(4-metoksifenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1366-1367); 8-((2S,5R)-4-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)etil)-2,5-dietilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1368-1369); 8-((2S,5R)-2,5-dietil-4-(2-fluoro-4-(trifluorometoksi)benzil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1370); 8-((2S,5R)-2,5-dietil-4-(1-(2-fluoro-4-trifluorometoksi)fenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1371-1372); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-(difluorometoksi)fenil) etil)-2,5-dietilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1 ,5-naftiridin-2-karbonitril (1373-1374); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-(difluorometoksi)fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1375-1376); 8-((2S,5R)-2-etil-4-(1-(2-fluoro-4-(trifluorometoksi)fenil)propil)-5-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1377-1378); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-(difluorometoksi)fenil)etil)-2-etil-5-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1379); 8-((2S,5R)-2-etil-4-(1-(2-fluoro-5-(trifluorometoksi)fenil)propil)-5-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1380-1381); 8-((2S,5R)-2-etil-5-metil-4-(1-(3,4,5-trifluorofenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1382-1383); 8-((2S,5R)-2-etil-4-(1-(3-fluoro-5-(trifluorometoksi)fenil)etil)-5-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1384-1385); 8-((2S,5S)-5-(hidroksimetil)-2-metil-4-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1386-1387); 8-((2S,SS)-4-((4-fluorofenil)(5(trifluorometil)piridin-2-il)metil)-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1388-1389); 8-((2S,5S)-4-((2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)metil)-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1390); 8-((2S,5S)-4-((4-fluorofenil)(izoksazol-3-il)metil)-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1391-1392); 8-((2S,SS)-4-((3-ciklopropil-1,2,4-oksadiazol-5-il)(4-fluorofenil)metil)-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1393-1394); 8-((2S,5S)-4-((4-ciklopropiltiazol-2-il)(4-fluorofenil)metil)-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1395-1396); 8-((2S,5S)-5-(etoksimetil)-2-metil-4-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1397-1398); 8-((2S,SS)-4-((4-fluorofenil)(izoksazol-3-il)metil)-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1399-1400); 8-((2S,5S)-4-((4-fluorofenil)(5-(trifluorometil)piridin-2-il)metil)-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1401-1402); 8-((2S,5S)-5-(etoksimetil)-4-((4-fluorofenil)(5-(trifluorometil)piridin-2-il)metil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1403-1404); 8-((2S,5S)-5-((2-metoksietoksi)metil)-2-metil-4-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil) etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1405-1406); 8-((2S,5S)-4-((2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)metil)-2-etil-5-(metoksimetil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1407); 8-((2S,5S)-2-etil-5-(metoksimetil)-4-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1408-1409); N-(((2S,SS)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro- 1,5-naftiridin-4-il)-5-metilpiperazin-2-il)metil)metansulfonamid (1410); 8-((2S,SR)-5-(cijanometil)-2-metil-4-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1411-1412); 8-((2S,5R)-5-((dimetilamino) metil)-2-metil-4-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etil) piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1413-1414); 5-metil-8-((2S,SR)-2-metil-5-(morfolinometil)-4-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etil)piperazin-1-il)-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1415-1416); 5-metil-8-((2S,SR)-2-metil-5-((4-metilpiperazin-1-il)metil)-4-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etil) piperazin-1-il)-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1417-1418); 8-((2R,5R)-2-(hidroksimetil)-5-metil-4-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etil) piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1419-1420); 8((2R,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-(metoksimetil)-5-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1421); 8-((2S,5R)-4-((4-cijanotiofen-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1422); 8-((2S,SR)-4-((1-ciklopropil-1H-tetrazol-5-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1423); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-((5-metilizoksazol-3-il)metil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1424); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-((3-fenilizoksazol-5-il)metil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1425); 8-((2S,5R)-4-((3,5-dimetilizoksazol-4-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1426); 8-((2S,5R)-4-((3-(2-cijanofenil)izoksazol-5-il) metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (1427); 8-((2S,5R)-4-(izoksazol-4-ilmetil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1428); 8-((2S,5R)-4-((2-(3-fluorofenil)-5-metiloksazol-4-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1429-1430); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-((5-metilizoksazol-4-il)metil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1431); 8-((2S,SR)-4-((5-izopropil-1,2,4-oksadiazol-3-il) metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1432); 8-((2S,5R)-4-(benzo[d]izoksazol-3-ilmetil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1433); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-((2-(tiofen-2-il)oksazol-4-il)metil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1434); 8-((2S,SR)-2,5-dimetil-4-((1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)metil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1435); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-((5-(trifluorometil)-1,3,4-oksadiazol-2-il)metil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1436); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-(1-(5-metil-1,3,4-oksadiazol-2-il)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1437-1438); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-(ciklopropilmetoksi)fenil)propil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1439-1440); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-(terc-butoksi)fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1441-1442); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-(terc-butoksi)fenil)propil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1443-1444); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-(2-ciklopropiletoksi)fenil)propil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1445-1446); 8-((2S,SR)-5-etil-4-(1-(4-izopropoksifenil)propil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (1447-1448); 8((2S,5R)-4-(1-(4-izopropoksifenil)propil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1449-1450); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-(ciklopropilmetoksi)fenil)propil)-5-etil-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1451); 8-((2S,SR)-4-(1-(4-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)fenil)propil)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1452); 8-((2S,SR)-4-(1-(4-(2-ciklopropiletoksi)fenil)propil)-5-etil-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1453); ili 8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)ciklopropil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1454). Predmetni pronalazak obuhvata sve kombinacije aspekata i/ili tehničkih rešenja pronalaska zabeleženog ovde unutar. Smatra se da bilo koja i sva tehnička rešenja predmetnog pronalaska mogu biti uzeta u spoju sa bilo kojim drugim tehničkim rešenjem ili tehničkim rešenjima da se opišu dodatna tehnička rešenja. Smatra se, takođe, da je svaki individualni element tehničkih rešenja namenjen da bude kombinovan sa bilo kojim i svim drugim elementima iz bilo kog tehničkog rešenja da bi se opisalo dodatno tehničko rešenje.
DEFINICIJE
[0064] Karakteristike i prednosti pronalaska mogu biti lakše shvaćene od strane stručnjaka iz oblasti nakon što pročitaju sledeći detaljan opis. Treba imati na umu da određene karakteristike pronalaska koje su, iz razloga jasnoće, opisane gore i dole u kontekstu odvojenih tehničkih rešenja, mogu takođe biti kombinovane da bi se formiralo jedno tehničko rešenje. Nasuprot tome, različite karakteristike pronalaska koje su, iz razloga sažetosti, opisane u kontekstu jednog tehničkog rešenja, mogu takođe da se kombinuju tako da formiraju podkombinacije navedenog. Tehnička rešenja koja su identifikovana ovde kao egzemplarna ili poželjna su namenjena da budu ilustrativna, a ne ograničavajuća.
[0065] Osim ako nije drugačije navedeno ovde, navedene reference u jednini mogu takođe uključivati množinu. Na primer, engleski članovi "a" i "an" se mogu odnositi ili na jedno, ili jedno ili više.
[0066] Kako je ovde upotrebljeno, fraza "jedinjenja i/ili soli navedenog" se odnosi na najmanje jedno jedinjenje, najmanje jednu so jedinjenja ili njihovu kombinaciju. Na primer, jedinjenja formule (I) i/ili soli navedenog uključuju jedinjenje formule (I); dva jedinjenja formule (I); so jedinjenja formule (I); jedinjenje formule (I) i jednu ili više soli jedinjenja formule (I); i dve ili više soli jedinjenja formule (I).
[0067] Osim ako nije drugačije naznačeno, pretpostavlja se da svaki atom sa nezadovoljenim valencama ima atome vodonika dovoljne da zadovolje valence.
[0068] Definicije koje su ovde izložene imaju prednost u odnosu na definicije date u bilo kojem patentu, patentnoj prijavi i/ili objavi patentne prijave pomenute ovde.
[0069] Dole su izlistane definicije različitih termina koji se koriste za opisivanje predmetnog pronalaska. Ove definicije se primenjuju na termine kako se koriste u celoj specifikaciji (osim ako su drugačije ograničene u određenim slučajevima) bilo pojedinačno ili kao deo veće grupe.
[0070] Kroz specifikaciju, njene grupe i supstituenti mogu biti odabrane od strane stručnjaka iz oblasti da bi se obezbedili stabilni segmenti i jedinjenja.
[0071] U skladu sa konvencijom koja se koristi u struci,,
se koristi u strukturnim formulama ovde da opiše vezu koja je tačka vezivanja segmenta ili supstituenta za jezgro ili kičmenu strukturu.
[0072] Termini "halo" i "halogen", kako se ovde koriste, odnose se na F, Cl, Br, i I.
[0073] Termin "cijano" se odnosi na grupu -CN.
[0074] Termin "amino" se odnosi na grupu -NHz.
[0075] Termin "okso" se odnosi na grupu =O.
[0076] Termin "alkil" kako se ovde koristi, odnosi se i na razgranate i zasićene alifatične ugljovodonične grupe ravnog lanca koje sadrže, na primer, od 1 do 12 atoma ugljenika, od 1 do 6 atoma ugljenika i od 1 do 4 atoma ugljenika. Primeri alkil grupa uključuju, ali nisu ograničeni na, metil (Me), etil (Et), propil (npr., n-propil i i-propil), butil (npr., n-butil, i-butil, sek-butil, i t-butil), i pentil (npr., n-pentil, izopentil, neopentil), n-heksil, 2-metilpentil, 2-etilbutil, 3-metilpentil, i 4-metilpentil. Kada se brojevi pojavljuju u subskriptu nakon simbola "C", subskript definiše preciznije broj atoma ugljenika koje određena grupa može da sadrži. Na primer, "C1-4alkil" označava alkil grupe ravnog i razgranatog lanca sa jednim do četiri atoma ugljenika.
[0077] Termin "fluoroalkil" kako se ovde koristi treba da obuhvati i razgranate i zasićene alifatične ugljovodonične grupe ravnog lanca supstituisane sa jednim ili više atoma fluora. Na primer, "C1-4fluoroalkil" treba da uključuje C1, C2, C3, i C4alkil grupe supstituisane sa jednim ili više atoma fluora. Reprezentativni primeri fluoroalkil grupa uključuju, ali nisu ograničeni na, -CF3i -CH2CF3.
[0078] Termin "hidroksialkil" uključuje i razgranate i ravnolančane zasićene alkil grupe supstituisane sa jednom ili više hidroksilnih grupa. Na primer,, "hidroksialkil" uključuje -CHzOH, -CHzCHzOH, i C1-4hidroksialkil.
[0079] Termin "alkenil" se odnosi na ugljovodonični radikal ravnog ili razgranatog lanca koji sadrži od 2 do 12 atoma ugljenika i najmanje jednu dvostruku vezu ugljenik-ugljenik. Egzemplarne takve grupe uključuju etenil ili alil. Na primer, "C2-6alkenil" označava alkenil grupe ravnog i razgranatog lanca sa dva do šest atoma ugljenika.
[0080] Termin "alkinil" se odnosi na ugljovodonični radikal ravnog ili razgranatog lanca koji sadrži od 2 do 12 atoma ugljenika i najmanje jednu trostruku vezu ugljenik-ugljenik. Egzemplarne takve grupe uključuju etinil. Na primer, "C2-6alkinil" označava alkinil grupe ravnog i razgranatog lanca sa dva do šest atoma ugljenika.
[0081] Termin "cikloalkil," kako se ovde koristi, odnosi se na grupu izvedenu iz nearomatičnog monocikličnog ili policikličnog molekula ugljovodonika uklanjanjem jednog atoma vodonika sa zasićenog atoma ugljenika u prstenu. Reprezentativni primeri cikloalkil grupa uključuju, ali nisu ograničeni na, ciklopropil, ciklopentil, i cikloheksil. Kada se brojevi pojavljuju u subskriptu iza simbola "C", subskript definiše preciznije broj atoma ugljenika koje određena cikloalkil grupa može da sadrži. Na primer, "C3-6cikloalkil" označava cikloalkil grupe sa tri do šest atoma ugljenika.
[0082] Termin"fluorocikloalkil" kako se ovde koristi treba da uključi cikloalkil grupu supstituisanu sa jednim ili više atoma fluora.
[0083] Termin "alkoksi," kako se ovde koristi, odnosi se na alkil grupu vezanu za osnovni molekularni segment preko atoma kiseonika, na primer, metoksi grupu (-OCH3). Na primer, "C1-3alkoksi" označava alkoksi grupe sa jednim do tri atoma ugljenika
[0084] Termini "fluoroalkoksi" i "-O(fluoroalkil)" predstavljaju fluoroalkil grupu kako je gore definisano vezane krozkiseoničnu vezu (-O-). Na primer, "C1-4fluoroalkoksi" je namereno da uključuje C1, C2, C3, i C4fluoroalkoksi grupe.
[0085] Termini "karbociklo", "karbociklično" ili "karbociklil" mogu se koristiti naizmenično i odnose se na ciklične grupe koje imaju najmanje jedan zasićeni ili delimično zasićeni nearomatični prsten u kome su svi atomi svih prstenova ugljenik. Karbociklil prsten može biti nesupstituisan ili može sadržati jedan ili više supstituenata koliko valenca dozvoljava. Dakle, termin uključuje nearomatične prstenove kao što su, na primer, cikloalkil, cikloalkenil, i cikloalkinil prstenovi. Egzemplarne biciklične karbociklil grupe uključuju, indanil, indenil, dihidronaftalenil, tetrahidronaftenil, heksahidronaftalenil, oktahidronaftalenil, dekahidronaftalenil, bicikloheptanil, biciklooktanil, i biciklononanil.
[0086] Termin "aril" kako se ovde koristi, odnosi se na grupu atoma koja je izvedena iz molekula koji sadrži aromatični prsten (prstenove) uklanjanjem jednog vodonika koji je vezan za aromatični prsten(prstenove). Reprezentativni primeri aril grupa uključuju, ali nisu ograničeni na, fenil i naftil. Aril prsten može biti nesupstituisan ili može sadržati jedan ili više supstituenata koliko valenca dozvoljava.
[0087] Termin "benzil," kako se ovde koristi, odnosi se na metil grupu u kojoj je jedan od atoma vodonika zamenjen fenil grupom. Fenilni prsten može biti nesupstituisan ili može sadržati jedan ili više supstituenata koliko valenca dozvoljava.
[0088] Termin "heteroatom" se odnosi na kiseonik (O), sumpor (S), i azot (N).
[0089] Termin "heterociklo", "heterociklično", ili "heterociklil mogu se koristiti naizmenično i odnose se na ciklične grupe koje imaju najmanje jedan zasićeni ili delimično zasićeni nearomatični prsten i gde jedan ili više prstenova imaju najmanje jedan heteroatom (O, S ili N), pomenuti heteroatom sadrži prsten poželjno ima 1 do 3 heteroatoma nezavisno izabrana između O, S i/ili N. Prsten takve grupe koji sadrži heteroatom može sadržati jedan ili dva atoma kiseonika ili sumpora i / ili od jednog do četiri atoma azota pod uslovom da je ukupan broj heteroatoma u svakom prstenu četiri ili manje, i dalje pod uslovom da prsten sadrži najmanje jedan atom ugljenika. Atomi azota i sumpora mogu opciono biti oksidovani, a atomi azota mogu opciono biti kvatemizovani. Heterociklo grupa može biti vezana za bilo koji raspoloživi atom azota ili ugljenika. Heterociklo prsten može biti nesupstituisan ili može sadržati jedan ili više supstituenata kako valenca dozvoljava.
[0090] Egzemplarne monociklične heterociklil grupe uključuju pirolidinil, imidazolinil, oksazolidinil, izoksazolinil, tiazolidinil, izotiazolidinil, tetrahidrofuranil, piperidinil, piperazinil, 2-oksopiperazinil, 2-oksopiperidinil, 2-oksopirolodinil, 2-oksoazepinil, azepinil, 4-piperidonil, tetrahidropiranil, morfolinil, tiamorfolinil, tiamorfolinil sulfoksid, tiamorfolinil sulfon, 1,3-dioksolan, tetrahidro-1,1 -di oksotienil, dihidroizoindolil, i tetrahidrohinolinil [0091] Termin "heteroaril" se odnosi na supstituisane i nesupstituisane aromatične 5- ili 6-člane monociklične grupe i 9- ili 10-člane biciklične grupe koje imaju najmanje jedan heteroatom (O, S ili N) u najmanje jednom od prstena, navedeni prsten koji sadrži heteroatom poželjno ima 1, 2 ili 3 heteroatoma nezavisno izabrana između O, S i/ili N. Svaki prsten heteroaril grupe koji sadrži heteroatom može sadržati jedan ili dva atoma kiseonika ili sumpora i/ili od jedan do četiri atoma azota pod uslovom da je ukupan broj heteroatoma u svakom prstenu četiri ili manje i da svaki prsten ima najmanje jedan atom ugljenika. Fuzionisani prstenovi koji kompletiraju bicikličnu grupu su aromatični i mogu da sadrže samo atome ugljenika. Atomi azota i sumpora mogu opciono biti oksidovani, a atomi azota mogu opciono biti kvaternizovani. Biciklične heteroaril grupe moraju uključivati samo aromatične prstenove. Heteroaril grupa može biti vezana na bilo koji raspoloživi atom azota ili ugljenika u bilo kom prstenu. Heteroaril prstenasti sistem može biti nesupstituisan ili može da sadrži jedan ili više supstituenata.
[0092] Egzemplarne monociklične heteroaril grupe uključuju pirolil, pirazolil, pirazolinil, imidazolil, oksazolil, izoksazolil, tiazolil, tiadiazolil, izotiazolil, furanil, tiofenil, oksadiazolil, piridinil, pirazinil, pirimidinil, piridazinil, i triazinil.
[0093] Egzemplarne biciklične heteroaril grupe uključuju indolil, benzotiazolil, benzodioksolil, benzoksazolil, benzotienil, hinolinil, tetrahidroizohinolinil, izohinolinil, benzimidazolil, benzopiranil, indolizinil, benzofuranil, hromonil, kumarinil, benzopiranil, kinolinil, hinoksalinil, indazolil, i pirolopiridil.
[0094] Izraz "farmaceutski prihvatljiv" se ovde koristi da se odnosi na ona jedinjenja, materijale, kompozicije i/ili forme doziranja koje su, u okviru razumne medicinske procene, pogodni za upotrebu u kontaktu sa tkivima ljudskih bića i životinja bez prekomerne toksičnosti, iritacije, alergijskog odgovora ili drugih problema ili komplikacija, srazmerno razumnom odnosu koristi/rizika.
[0095] Jedinjenja formule (I) mogu da formiraju soli koje su takođe u okviru ovog pronalaska. Osim ako nije drugačije naznačeno, podrazumeva se da pozivanje na inventivno jedinjenje uključuje referencu na jednu ili više njegovih soli. Termin "so (soli)" označava kisele i/ili bazne soli formirane sa neorganskim i/ili organskim kiselinama i bazama. Pored toga, izraz „so (soli) može uključivati cviterjone (unutrašnje soli), npr. kada jedinjenje formule (I) sadrži i bazni segment, kao što je amin ili piridin ili imidazolni prsten, i kiseli segment, kao što je karboksilna kiselina. Poželjne su farmaceutski prihvatljive (tj. netoksične, fiziološki prihvatljive) soli, kao što su, na primer, prihvatljive metalne i amin soli u kojima katjon ne doprinosi značajno toksičnosti ili biološkoj aktivnosti soli. Međutim, druge soli mogu biti korisne, na primer, u koracima izolacije ili prečišćavanja koje se mogu koristiti tokom pripreme, i stoga su razmatrane u okviru pronalaska. Soli jedinjenja formule (I) mogu se formirati, na primer, reakcijom jedinjenja formule (I) sa količinom kiseline ili baze, kao što je ekvivalentna količina, u medijumu kao što je onaj u kome se so taloži ili u vodenom medijumu praćeno liofilizacijom.
[0096] Egzemplarne kiselinske adicione soli uključuju acetate (kao što su oni formirani sa sirćetnom kiselinom ili trihalosirćetnom kiselinom, na primer, trifluorosirćetnom kiselinom), adipate, alginate, askorbate, aspartate, benzoate, benzensulfonate, bisulfate, borate, butirate, citrate, kamforate, kamforsulfonate, ciklopentanpropionate, diglukonate, dodecilsulfate, etansulfonate, fumarate, glukoheptanoate, glicerofosfate, hemisulfate, heptanoate, heksanoate, hidrohloride (formirane sa hidrohlornom kiselinom), hidrobromide (formirane sa hidrogen bromidom), hidrojodide, maleate (formirane sa maleinskom kiselinom), 2-hidroksietansulfonate, laktate, metansulfonate (formirane sa metansulfonskom kiselinom), 2-naftalensulfonate, nikotinate, nitrate, oksalate, pektinate, persulfate, 3-fenilpropionate, fosfate, pikrate, pivalate, propionate, salicilate, sukcinate, sulfate (kao što su oni formirani sa sumpornom kiselinom), sulfonate (kao što su oni pomenuti ovde), tartrate, tiocijanate, toluensulfonate kao što su tozilati, undekanoati, i slični.
[0097] Egzemplarne bazne soli uključuju amonijum soli, soli alkalnog metala kao što su soli natrijuma, litijuma, i kalijuma; soli zemnoalkalnih metala kao što su soli kalcijuma i magnezijuma; soli barijuma, cinka, i aluminijuma; soli sa organskim bazama (na primer, organskim aminima) kao što su trialkilamini kao što je trietilamin, prokain, dibenzilamin, N-benzil-β-fenetilamin, 1-efenamin, N,N'-dibenziletilen-diamin, dehidroabietilamin, N-etilpiperidin, benzilamin, dicikloheksilamin ili slični farmaceutski prihvatljivi amini i soli sa amino kiselinama kao što su arginin, lizin i slične. Bazne azot-sadržeće grupe mogu biti kvaternizovane sa agensima kao što su niži alkil halidi (npr.., metil, etil, propil, i butil hloridi, bromidi i jodidi), dialkil sulfati (npr.., dimetil, dietil, dibutil, i diamil sulfati), halidi dugog lanca (npr.., decil, lauril, miristil i stearil hloridi, bromidi i jodidi), aralkil halidi (npr., benzil i fenetil bromidi), i drugi. Poželjne soli uključuju monohidrohlorid, hidrogensulfat, metansulfonat, fosfat ili soli nitrata.
[0098] Jedinjenja formule (I) mogu biti obezbeđena kao amorfne čvrste supstance ili kristalne čvrste supstance. Liofilizacija se može primeniti da bi se dobila jedinjenja formule (I) u vidu čvrste supstance.
[0099] Dodatno, jedinjenja formule (I), nakon njihovog dobijanja, mogu se izolovati i prečistiti da bi se dobila kompozicija koja sadrži količinu po težini jednaku ili veću od 99% jedinjenja formule (I) („suštinski čista"), koja se zatim koristi ili formuliše kako je ovde opisano. Takva "suštinski čista" jedinjenja formule (I) su takođe razmatrana ovde kao deo predmetnog pronalaska.
[0100] „Stabilno jedinjenje“ i „stabilna struktura“ treba da označavaju jedinjenje koje je dovoljno robusno da preživi izolaciju do korisnog stepena čistoće iz reakcione smeše i formulaciju u efikasan terapijski agens. Predmetni pronalazak je namenjen da realizuje stabilna jedinjenja.
[0101] „Terapijski efektivna količina“ je namenjeno da uključuje količinu jedinjenja iz ovog pronalaska samog ili količinu kombinacije jedinjenja koja je zahtevana ili količinu jedinjenja iz predmetnog pronalaska u kombinaciji sa drugim aktivnim sastojcima efektivnim da deluju kao inhibitor DGKα i/ili DGKζ, ili efektivnim da leče ili preveniraju virusne infekcije i proliferative poremećaje, kao što je kancer.
[0102] Kako se ovde koristi, "lečenje" ili "tretman" pokrivaju lečenje stanja bolesti kod sisara, naročito kod čoveka, i uključuju: (a) sprečavanje pojavljivanja stanja bolesti da se dogodi kod sisara, naročito , kada je takav sisar predispozicioniran za stanje bolesti, ali još nije dijagnostikovano da ga ima; (b) inhibiranje stanja bolesti, tj. zaustavljanje njegovog razvoja; i/ili (c) ublažavanje stanja bolesti, tj. izazivanje regresije stanja bolesti.
[0103] Jedinjenja predmetnog pronalaska imaju za cilj da uključe sve izotope atoma koji se javljaju u predmetnim jedinjenjima. Izotopi uključuju one atome koji imaju isti atomski broj, ali različite masene brojeve. Kao opšti primer i bez ograničenja, izotopi vodonika uključuju deuterijum (D) i tricijum (T). Izotopi ugljenika uključuju<13>C i<14>C. Izotopski obeležena jedinjenja pronalaska se generalno mogu pripremiti konvencionalnim tehnikama poznatim stručnjacima u ovoj oblasti ili postupcima analognim onima koji su ovde opisani, korišćenjem odgovarajućeg izotopski obeleženog reagensa umesto neobeleženog reagensa koji se inače koristi.
[0104] Jedinjenja u skladu sa formulom (I) i/ili njihove farmaceutski prihvatljive soli mogu se administrirati na bilo koji način pogodan za stanje koje se leči, što može zavisiti od potrebe za lokacijsko-specifičnim lečenjem ili količine jedinjenja formule (I) koje treba isporučiti.
[0105] Takođe sadržana unutar predmetnog pronalaska je klasa farmaceutskih kompozicija koje sadrže jedinjenje formule (I) i/ili njegove farmaceutski prihvatljive soli; i jedan ili više netoksičnih, farmaceutski prihvatljivih nosača i/ili diluenata i/ili adjuvansa (koji se ovde zajednički nazivaju "nosač" materijali) i, ukoliko je željeno, druge aktivne sastojke. Jedinjenja formule (I) se mogu administrirati bilo kojim pogodnim putem, poželjno u obliku farmaceutske kompozicije prilagođene takvom putu, i u dozi efektivnoj za predviđeno lečenje. Jedinjenja i kompozicije ovog pronalaska mogu se, na primer, administrirati oralno, mukozno ili parenteralno, uključujući intravaskularno, intravenozno, intraperitonealno, subkutano, intramuskularno i intrasternalno u dozno jediničnim formulacijama koje sadrže konvencionalne farmaceutski prihvatljive nosače, adjuvanse i vehikulume. Na primer, farmaceutski nosač može da sadrži smešu manitola ili laktoze i mikrokristalnu celulozu. Smeša može da sadrži dodatne komponente kao što je lubrikantni agens, npr. magnezijum stearat i sredstvo za dezintegraciju kao što je krospovidon. Nosač smeša se može puniti u želatinsku kapsulu ili kompresovati kao tableta. Farmaceutska kompozicija se može administrirati kao oralni dozni oblik ili kao infuzija, na primer.
[0106] Za oralnu administraciju, farmaceutska kompozicija može biti u obliku, na primer, tablete, kapsule, tečne kapsule, suspenzije ili tečnosti. Farmaceutska kompozicija je poželjno napravljena u obliku dozne jedinice koja sadrži određenu količinu aktivnog sastojka. Na primer, farmaceutska kompozicija može biti obezbeđena kao tableta ili kapsula koja sadrži količinu aktivnog sastojka u opsegu od oko 0.1 do 1000 mg, poželjno od oko 0.25 do 250 mg, i poželjnije od oko 0.5 do 100 mg. Pogodna dnevna doza za čoveka ili drugog sisara može da varira u velikoj meri u zavisnosti od stanja pacijenta i drugih faktora, ali se može odrediti korišćenjem rutinskih postupaka.
[0107] Bilo koja farmaceutska kompozicija koja se ovde razmatra može, na primer, biti isporučena oralno putem bilo kog prihvatljivog i pogodnog oralnog preparata. Egzemplarni oralni preparati uključuju, ali nisu ograničeni na, na primer, tablete, pastile, lozenge, vodene i uljane suspenzije, disperzibilne prahove ili granule, emulzije, tvrde i meke kapsule, tečne kapsule, sirupe i eliksire. Farmaceutske kompozicije namenjene za oralnu administraciju se mogu pripremiti prema bilo kom postupku poznatom u tehnici za proizvodnju farmaceutskih kompozicija namenjenih za oralnu administraciju. U cilju obezbeđivanja farmaceutski ukusnih preparata, farmaceutska kompozicija u skladu sa pronalaskom može sadržati najmanje jedan agens izabran između zaslađujućih agenasa, agenasa za ukus, agenasa za bojenje, demulcenta, antioksidanata, i agenasa za prezervaciju.
[0108] Tableta se, na primer, može pripremiti mešanjem najmanje jednog jedinjenja formule (I) i/ili najmanje jedne njegove farmaceutski prihvatljive soli sa najmanje jednim netoksičnim farmaceutski prihvatljivim ekscipijentom pogodnim za proizvodnju tableta. Egzemplarni ekscipijenti uključuju, ali nisu ograničeni na, na primer, inertne diluente, kao što su, na primer, kalcijum karbonat, natrijum karbonat, laktoza, kalcijum fosfat i natrijum fosfat; granulirajući i dezintegracioni agensi, kao što su, na primer, mikrokristalna celuloza, natrijum kroskarmeloza, kukuruzni skrob i alginska kiselina; vezivni agensi, kao što su, na primer, skrob, želatin, polivinil-pirolidon i akacija; i lubrikantni agensi, kao što su, na primer, magnezijum stearat, stearinska kiselina i talk. Dodatno, tableta može biti neobložena ili obložena poznatim tehnikama kako bi se ili prikrio loš ukus leka neprijatnog ukusa, ili odložila dezintegracija i apsorpcija aktivnog sastojka u gastrointestinalnom traktu, čime bi se održali efekti aktivnog sastojka duži period. Egzemplarni materijali za maskiranje ukusa rastvorljivi u vodi, uključuju, ali nisu ograničeni na, hidroksipropil-metilcelulozu i hidroksipropilcelulozu. Egzemplarni materijali za odlaganje vremena uključuju, ali nisu ograničeni na, etil celulozu i celulozu acetat butirat.
[0109] Tvrde želatinske kapsule mogu se, na primer, pripremiti mešanjem najmanje jednog jedinjenja formule (I) i/ili najmanje jedne njegove soli sa najmanje jednim inertnim čvrstim diluentom, kao što je, na primer, kalcijum karbonat; kalcijum fosfat i kaolin.
[0110] Meke želatinske kapsule se mogu, na primer, pripremiti mešanjem najmanje jednog jedinjenja formule (I) i/ili najmanje jedne njegove farmaceutski prihvatljive soli sa najmanje jednim vodorastvornim nosačem, kao što je, na primer, polietilen glikol; i najmanje jednim uljanim medijumom, kao što je, na primer, ulje od kikirikija, tečni parafin i maslinovo ulje.
[0111] Vodena suspenzija se može pripremiti, na primer, mešanjem najmanje jednog jedinjenja formule (I) i/ili najmanje jedne njegove farmaceutski prihvatljive soli sa najmanje jednim ekscipijentom pogodnim za proizvodnju vodene suspenzije. Primeri ekscipijenata pogodnih za proizvodnju vodene suspenzije, uključuju, ali nisu ograničeni na, na primer, agense za suspendovanje, kao što su, na primer, natrijum karboksimetilceluloza, metilceluloza, hidroksipropilmetil-celuloza, natrijum alginat, alginska kiselina, polivinil-pirolidon, tragakant guma i guma akacija; dispergujuće ili agense za vlaženje, kao što je, na primer, fosfatid koji se javlja u prirodi, npr. lecitin; produkte kondenzacije alkilen oksida sa masnim kiselinama, kao što je, na primer, polioksietilen stearat; produkte kondenzacije etilen oksida sa alifatičnim alkoholima dugog lanca, kao što je, na primer, heptadekaetilen-oksicetanol; produkte kondenzacije etilen oksida sa parcijalnim estrima poteklim iz masnih kiselina i heksitola, kao što je, na primer, polioksietilen sorbitol monooleat; i produkte kondenzacije etilen oksida sa delimičnim estrima dobijenim iz masnih kiselina i heksitol anhidrida, kao što je, na primer, polietilen sorbitan monooleat. Vodena suspenzija takođe može da sadrži najmanje jedan konzervans, kao što je, na primer, etil i n-propil p-hidroksibenzoat; najmanje jedan agens za bojenje; najmanje jedan agens arome; i/ili najmanje jedan agens za zaslađivanje, uključujući ali bez ograničenja na, na primer, saharozu, saharin i aspartam.
[0112] Uljne suspenzije se mogu, na primer, pripremiti suspendovanjem najmanje jednog jedinjenja formule (I) i/ili najmanje jedne njegove farmaceutski prihvatljive soli u biljnom ulju, kao što je, na primer, ulje arahisa; maslinovo ulje; susamovo ulje; i kokosovo ulje; ili u mineralnom ulju, kao što je, na primer, tečni parafin. Uljana suspenzija takođe može da sadrži najmanje jedno sredstvo za zgušnjavanje, kao što je, na primer, pčelinji vosak; tvrdi parafin; i cetil alkohol. Da bi se obezbedila ukusna uljana suspenzija, u uljnu suspenziju se može dodati bar jedan od agenasa za zaslađivanje koji su već opisani gore, i/ili najmanje jedan agens arome. Uljana suspenzija može dalje da sadrži najmanje jedan konzervans, uključujući, ali ne ograničavajući se na, na primer, antioksidans, kao što je, na primer, butilovani hidroksianizol i alfa-tokoferol.
[0113] Disperzibilni praškovi i granule mogu se, na primer, pripremiti mešanjem najmanje jednog jedinjenja formule (I) i/ili najmanje jedne njegove farmaceutski prihvatljive soli sa najmanje jednim agensom za dispergovanje i/ili vlaženje; najmanje jednim agensom za suspendovanje; i/ili najmanje jednim konzervansom. Pogodni agensi za dispergovanje, agensi za vlaženje i agensi za suspendovanje su kao što je već opisano iznad. Egzemplarni konzervansi uključuju, ali nisu ograničeni na, na primer, antioksidante, npr., askorbinsku kiselinu. Dodatno, disperzibilni praškovi i granule takođe mogu da sadrže najmanje jedan ekscipijent, uključujući, ali ne ograničavajući se na, na primer, agense za zaslađivanje; agense arome; i agense za bojenje.
[0114] Emulzija najmanje jednog jedinjenja formule (I) i/ili najmanje jedne njegove farmaceutski prihvatljive soli može se, na primer, pripremiti kao emulzija ulje u vodi. Uljana faza emulzija koje sadrže jedinjenja formule (I) može biti sastavljena od poznatih sastojaka na poznat način. Uljana faza može biti obezbeđena od strane, ali nije ograničena na, na primer, biljnog ulja, kao što je, na primer, maslinovo ulje i ulje arahisa; mineralnog ulja, kao što je, na primer, tečni parafin; i njihove smeše. Iako faza može da sadrži samo emulgator, ona može da sadrži smešu najmanje jednog emulgatora sa mašću ili uljem ili sa mašću i uljem. Pogodni agensi za emulgovanje uključuju, ali nisu ograničeni na, na primer, fosfatide koji se javljaju u prirodi, npr., lecitin sojinog semena; estri ili parcijalni estri dobijeni od masnih kiselina i heksitol anhidrida, kao što je, na primer, sorbitan monooleat; i produkti kondenzacije parcijalnih estara sa etilen oksidom, kao što je, na primer, polioksietilen sorbitan monooleat. Poželjno, hidrofilni emulgator je uključen zajedno sa lipofilnim emulgatorom koji deluje kao stabilizator. Takođe je poželjno uključiti i ulje i mast. Zajedno, emulgator (emulgatori) sa ili bez stabilizatora sačinjavaju takozvani emulgujući vosak, a vosak zajedno sa uljem i masti čine takozvanu bazu emulgatorske masti koja formira uljanu dispergovanu fazu formulacije kreme. Emulzija takođe može da sadrži agens za zaslađivnje, agens arome, konzervans i/ili antioksidans. Emulgatori i stabilizatori emulzije pogodni za upotrebu u formulaciji ovog pronalaska uključuju Tween 60, Span 80, cetostearil alkohol, miristil alkohol, gliceril monostearat, natrijum lauril sulfat, gliceril distearat sam ili sa voskom, ili druge materijale dobro poznate u tehnici.
[0115] Jedinjenja formule (I) i/ili najmanje jedna njihova farmaceutski prihvatljiva so mogu se, na primer, takođe davati intravenozno, subkutano i/ili intramuskularno preko bilo koje farmaceutski prihvatljive i pogodne injektabilne forme. Egzemplarne injektabilne forme obuhvataju, ali nisu ograničene na, na primer, sterilne vodene rastvore koji sadrže prihvatljive vehikule i rastvarače, kao što su, na primer, voda, Ringerov rastvor i izotonični rastvor natrijum hlorida; sterilne mikroemulzije ulja u vodi; i vodene ili suspenzije bogate uljem.
[0116] Formulacije za parenteralnu administraciju mogu biti u obliku vodenih ili nevodenih izotoničnih sterilnih injekcionih rastvora ili suspenzija. Ovi rastvori i suspenzije se mogu pripremiti od sterilnih prahova ili granula korišćenjem jednog ili više nosača ili diluenata navedenih za upotrebu u formulacijama za oralnu administraciju ili korišćenjem drugih pogodnih agenasa za dispergovanje ili vlaženje i agenasa za suspendovanje. Jedinjenja se mogu rastvoriti u vodi, polietilen glikolu, propilen glikolu, etanolu, kukuruznom ulju, ulju semena pamuka, ulju od kikirikija, susamovom ulju, benzil alkoholu, natrijum hloridu, tragakant gumi i/ili raznim puferima. Drugi adjuvansi i načini administracije su dobro i široko poznati u farmaceutskoj oblasti. Aktivni sastojak se takođe može administrirati injekcijom kao kompozicija sa pogodnim nosačima uključujući fiziološki rastvor, dekstrozu ili vodu, ili sa ciklodekstrinom (tj. Captisol), korastvarač solubilizacijom (tj. propilen glikol) ili micelarnom solubilizacijom (tj. Tween 80).
[0117] Sterilni injektabilni preparat može takođe biti sterilni injektabilni rastvor ili suspenzija u netoksičnom parenteralno prihvatljivom diluentu ili rastvaraču, na primer kao rastvor u 1,3-butandiolu. Među prihvatljivim vehikulumima i rastvaračima koji se mogu koristiti su voda, Ringerov rastvor i izotonični rastvor natrijum hlorida. Pored toga, sterilna, fiksna ulja se konvencionalno koriste kao rastvarač ili medijum za suspendovanje. U tu svrhu može se koristiti bilo koje blago (eng. bland) fiksno ulje, uključujući sintetičke mono- ili digliceride. Pored toga, masne kiseline kao što je oleinska kiselina nalaze primenu u pripremi injektabila.
[0118] Sterilna injektabilna mikroemulzija ulje u vodi može se, na primer, pripremiti 1) rastvaranjem najmanje jednog jedinjenja formule (I) u uljanoj fazi, kao što je, na primer, smeša sojinog ulja i lecitina; 2) kombinovanjem uljane faze koja sadrži formulu (I) sa vodom i glicerolnom smešom; i 3) obradu kombinacije da se formira mikroemulzija.
[0119] Sterilna vodena ili uljasta suspenzija se može pripremiti u skladu sa postupcima koji su već poznati u tehnici. Na primer, sterilni vodeni rastvor ili suspenzija se može pripremiti sa netoksičnim parenteralno prihvatljivim diluentom ili rastvaračem, kao što je, na primer, 1,3-butan diol; i sterilna uljasta suspenzija se može pripremiti sa sterilnim netoksičnim prihvatljivim rastvaračem ili medijumom za suspendovanje, kao što su, na primer, sterilna fiksna ulja, npr. sintetički mono- ili digliceridi; i masne kiseline, kao što je, na primer, oleinska kiselina.
[0120] Farmaceutski prihvatljivi nosači, adjuvansi i vehikulumi koji se mogu koristiti u farmaceutskim kompozicijama predmetnog pronalaska uključuju, ali nisu ograničeni na, jonske izmenjivače, aluminijum, aluminijum stearat, lecitin, sisteme za isporuku leka koji se samoemulguju (SEDDS) kao što je d-alfa-tokoferol polietilenglikol 1000 sukcinat, surfaktante koji se koriste u farmaceutskim doznim oblicima kao što su Tween-ovi, polietoksilovano ricinusovo ulje kao što je CREMOPHOR surfaktant (BASF) ili druge slične polimerne matrice za isporuku, proteine seruma, kao što je humani serum albumin, pufer supstance kao što su fosfati, glicin, sorbinska kiselina, kalijum sorbat, parcijalne gliceridne smeše zasićenih biljnih masnih kiselina, vode, soli ili elektrolita, kao što su protamin sulfat, dinatrijum hidrogen fosfat, kalijum hidrogen fosfat, natrijum hlorid, cink soli, koloidni silicijum, magnezijum trisilikat, polivinil pirolidon, supstance na bazi celuloze, polietilen glikol, natrijum karboksimetilceluloza, poliakrilati, voskovi, polietilen-polioksipropilen-blok polimeri, polietilen glikol i vunena mast. Ciklodekstrini kao što su alfa-, beta- i gama-ciklodekstrin, ili hemijski modifikovani derivativi kao što su hidroksialkilciklodekstrini, uključujući 2- i 3-hidroksipropil-ciklodekstrine, ili drugi solubilizovani derivativi takođe mogu da se pogodno koriste za poboljšanje isporuke jedinjenja sa formulama opisanim ovde.
[0121] Farmaceutski aktivna jedinjenja predmetnog pronalaska mogu se obraditi u skladu sa konvencionalnim farmaceutskim postupcima da bi se proizveli lekoviti agensi za administraciju pacijentima, uključujući ljude i druge sisare. Farmaceutske kompozicije mogu biti podvrgnute konvencionalnim farmaceutskim operacijama kao što je sterilizacija i/ili mogu sadržati konvencionalne adjuvanse, kao što su konzervansi, stabilizatori, agensi za vlaženje, emulgatori, puferi itd. Tablete i pilule se mogu dodatno pripremiti sa enteričkim oblogama. Takve kompozicije mogu takođe sadržati adjuvanse, kao što su agensi vlaženja, zaslađivanja, aroma i mirisa.
[0122] Količine jedinjenja koje se administriraju i dozni režim za lečenje stanja bolesti sa jedinjenjima i/ili kompozicijama ovog pronalaska zavise od niza faktora, uključujući starost, težinu, pol, zdravstveno stanje subjekta, tip bolesti, ozbiljnost bolesti, put i učestanost administracije i određeno jedinjenje koje se primenjuje. Dakle, dozni režim može uveliko varirati, ali se može rutinski odrediti korišćenjem standardnih metoda. Dnevna doza od oko 0.001 do 100 mg/kg telesne težine, poželjno između oko 0.0025 i oko 50 mg/kg telesne težine i najpoželjnije između oko 0.005 do 10 mg/kg telesne težine, može biti odgovarajuća. Dnevna doza se može administrirati u jednoj do četiri doze po danu. Drugi dozni rasporedi uključuju jednu dozu po nedelji i jednu dozu po ciklusu od dva dana.
[0123] Za terapijske svrhe, aktivna jedinjenja predmetnog pronalaska se obično kombinuju sa jednim ili više adjuvanasa odgovarajućih za naznačeni put administracije. Ukoliko se administriraju oralno, jedinjenja se mogu mešati sa laktozom, saharozom, skrobnim prahom, celuloznim estrima alkanskih kiselina, celuloznim alkil estrima, talkom, stearinskom kiselinom, magnezijum stearatom, magnezijum oksidom, natrijumovim i kalcijumovim solima fosfornih i sumpornih kiselina, želatinom, gumom akacije, natrijum alginatom, polivinilpirolidonom i/ili polivinil alkoholom, a zatim tabletiraju ili inkapsuliraju za pogodnu administraciju. Takve kapsule ili tablete mogu da sadrže formulaciju sa kontrolisanim otpuštanjem koja se može obezbediti u disperziji aktivnog jedinjenja u hidroksipropilmetil celulozi.
[0124] Farmaceutske kompozicije predmetnog pronalaska sadrže najmanje jedno jedinjenje formule (I) i/ili najmanje jednu njegovu farmaceutski prihvatljivu so, i opciono dodatni agens izabran od bilo kog farmaceutski prihvatljivog nosača, adjuvansa, i vehikuluma. Alternativne kompozicije ovog pronalaska sadrže jedinjenje formule (I) koje je ovde opisano i farmaceutski prihvatljiv nosač, adjuvans ili vehikulum.
KORISNOST
[0125] Jedinjenja formule (I) su korisna za lečenje kancera.
[0126] U drugom tehničkom rešenju, predmetni pronalazak obezbeđuje kombinovani preparat jedinjenja formule (I), i/ili farmaceutski prihvatljive soli navedenog, stereoizomera navedenog ili tautomera navedenog, i dodatni terapijski agens (agense) za istovremenu, odvojenu ili sekvencijalnu upotrebu u lečenju i/ili profilaksi višestrukih bolesti ili poremećaja povezanih sa DGK ciljnom inhibicijom u T ćelijama.
[0127] U drugom aspektu, pronalazak obezbeđuje tehničko rešenje za lečenje pacijenta koji pati ili je podložan medicinskom stanju koje je povezano sa DGK ciljnom inhibicijom u T ćelijama. Brojna medicinska stanja se mogu lečiti. Na primer, ovde opisana jedinjenja mogu da se koriste za lečenje ili prevenciju virusnih infekcija i proliferativnih bolesti kao što je kancer.
[0128] Jedinjenja formule (I) i farmaceutske kompozicije koje sadrže najmanje jedno jedinjenje formule (I) su korisne u lečenju ili prevenciji bilo koje bolesti ili stanja koja su povezana sa DGK ciljnom inhibicijom u T ćelijama. To uključuje virusne i druge infekcije (npr. infekcije kože, GI infekcije, infekcije urinarnog trakta, genito-urinarne infekcije, sistemske infekcije) i proliferativne bolesti (npr. kancer). Jedinjenja formule (I) i farmaceutske kompozicije koje sadrže najmanje jedno jedinjenje formule (I) mogu se administrirati životinjama, poželjno sisarima (npr. pripitomljenim životinjama, mačkama, psima, miševima, pacovima), i još poželjnije ljudima. Bilo koji postupak administriranja se može koristiti za isporuku jedinjenja ili farmaceutske kompozicije pacijentu. U određenim tehničkim rešenjima, jedinjenje formule (I) ili farmaceutska kompozicija koja sadrži najmanje jedinjenje formule (I) se administrira oralno. U drugim tehničkim rešenjima, formula (I) ili farmaceutska kompozicija koja sadrži najmanje jedinjenje formule (I) se administrira parenteralno.
[0129] Jedinjenja formule (I) mogu inhibirati aktivnost diacilglicerol kinaze alfa i zeta (DGKα/ζ). Na primer, jedinjenja formule (I) se mogu koristiti za inhibiciju aktivnosti DGKα i DGKζ u ćeliji ili kod pojedinca kome je potrebna modulacija DGKα i DGKζ administriranjem inhibirajuće količine jedinjenja formule (I) ili soli navedenog.
[0130] Predmetni pronalazak dalje obezbeđuje jedinjenje formule (I) ili farmaceutsku kompoziciju navedenog za upotrebu u lečenju bolesti povezanih sa aktivnošću ili eksprimovanjem, uključujući abnormalnu aktivnost i/ili prekomernu ekspresiju, DGKα i DGKζ kod pojedinca (npr. pacijent) kome je potreban takav tretman. Primeri bolesti mogu uključiti bilo koju bolest, poremećaj ili stanje koje je direktno ili indirektno povezano sa ekspresijom ili aktivnošću DGKα i DGKζ enzima, kao što je prekomerna ekspresija ili abnormalna aktivnost. Bolest povezana sa DGKα i DGKζ takođe može uključiti bilo koju bolest, poremećaj ili stanje koje se može sprečiti, poboljšati ili izlečiti modulacijom DGKα i DGKζ enzimske aktivnosti. Primeri bolesti povezanih sa DGKα i DGKζ uključuju kancer i virusne infekcije kao što su HIV infekcija, hepatitis B i hepatitis C.
[0131] U jednom aspektu, jedinjenje (jedinjenja) formule (I) se administriraju sekvencijalno pre administracije imunoonkološkog agensa. U drugom aspektu, jedinjenje (jedinjenja) formule (I) se administriraju istovremeno sa imunoonkološkim agensom. U još jednom aspektu, jedinjenje (jedinjenja) sa formulom (I) se administriraju sekvencijalno nakon administracije imunoonkološkog agensa.
[0132] U drugom aspektu, jedinjenja formule (I) mogu biti ko-formulisana sa imunoonkološkim agensom.
[0133] Imunoonkološki agensi uključuju, na primer, mali molekulski lek, antitelo ili drugi biološki ili mali molekul. Primeri bioloških imunoonkoloških agenasa uključuju, ali nisu ograničeni na, kancer vakcine, antitela i citokine. U jednom aspektu, antitelo je monoklonsko antitelo. U drugom aspektu, monoklonsko antitelo je humanizovano ili humano.
[0134] U jednom aspektu, imuno-onkološki agens je (i) agonist stimulatornog (uključujući ko-stimulatorni) receptora ili (ii) antagonist inhibitornog (uključujući ko-inhibitorni) signala na T ćelijama, od kojih oba rezultiraju pojačavanjem antigen-specifičnih T ćelijskih odgovora (često nazivanih regulatori imunoloških kontrolnih tačaka).
[0135] Određeni stimulativni i inhibitorni molekuli su članovi imunoglobulinske superfamilije (IgSF). Jedna važna familija membranski vezanih liganada koji se vezuju za kostimulatorne ili ko-inhibitorne receptore je familija B7, koja uključuje B7-1, B7-2, B7-H1 (PD-L1), B7-DC (PD-L2), B7-H2 (ICOS-L), B7-H3, B7-H4, B7-H5 (VISTA), i B7-H6. Druga familija membranski vezanih liganada koji se vezuju za ko-stimulatorne ili ko-inhibitorne receptore je TNF familija molekula koji se vezuju za srodne TNF receptor familija članove, što uključuje CD40 i CD40L, OX-40, OX-40L, CD70, CD27L, CD30, CD30L, 4-1BBL, CD137 (4-1BB), TRAIL/Apo2-L, TRAILR1/DR4, TRAILR2/DR5, TRAILR3, TRAILR4, OPG, RANK, RANKL, TWEAKR/Fn14, TWEAK, BAFFR, EDAR, XEDAR, TACI, APRIL, BCMA, LTβR, LIGHT, DcR3, HVEM, VEGI/TL1A, TRAMP/DR3, EDAR, EDA1, XEDAR, EDA2, TNFR1, Limfotoksin α/TNFβ, TNFR2, TNFα, LTβR, Limfotoksin a 1β2, FAS, FASL, RELT, DR6, TROY, NGFR.
[0136] U jednom aspektu, T ćelijski odgovori mogu biti stimulisani kombinacijom jedinjenja formule (I) i jednog ili više od (i) antagonista proteina koji inhibira T ćelijsku aktivaciju (npr. inhibitori imunoloških kontrolnih tačaka) kao što je kao CTLA-4, PD-1, PD-L1, PD-L2, LAG-3, TIM-3, Galektin 9, CEACAM-1, BTLA, CD69, Galektin-1, TIGIT, CD113, GPR56, VISTA, 2B4, CD48, GARP, PD1H, LAIR1, TIM-1, i TIM-4, i (ii) agonist proteina koji stimuliše T ćelijsku aktivaciju kao što su B7-1, B7-2, CD28, 4-1BB (CD137), 4-1BBL, ICOS, ICOS-L, OX40, OX40L, GITR, GITRL, CD70, CD27, CD40, DR3 i CD28H.
[0137] Drugi agensi koji se mogu kombinovati sa jedinjenjima formule (I) za lečenje kancera uključuju antagoniste inhibitornih receptora na NK ćelijama ili agoniste aktivirajućih receptora na NK ćelijama. Na primer, jedinjenja formule (I) mogu da se kombinuju sa antagonistima KIR, kao što je lirilumab.
[0138] Ipak drugi agensi za kombinacione terapije uključuju agense koji inhibiraju ili iscrpljuju makrofage ili monocite, uključujući, ali ne ograničavajući se na CSF-1R antagoniste kao što su CSF-1R antagonistička antitela uključujući RG7155 (WO11/70024, WO11/107553, WO11/131407, WO13/87699, WO13/119716, WO13/132044) ili FPA-008 (WO11/140249; WO13169264; WO14/036357).
[0139] U drugom aspektu, jedinjenja formule (I) se mogu koristiti sa jednim ili više agonističkih agenasa koji spajaju pozitivne kostimulatorne receptore, blokirajućih agenasa koji prigušuju signalizaciju preko inhibitornih receptora, antagonista i jednog ili više agenasa koji sistemski povećavaju učestanost antitumorskih T ćelija, agenasa koji prevazilaze različite imunosupresivne puteve unutar tumorskog mikrookruženja (npr. blokiraju inhibitorno angažovanje receptora (npr. PD-L1/PD-1 interakcije), iscrpljuju ili inhibiraju Treg (npr. korišćenjem anti-CD25 monoklonskog antitela (npr. daclizumab) ili ex vivo iscrpljivanjem anti-CD25 zrnaca), inhibiraju metaboličke enzime kao što je IDO, ili reverzuju/sprečavaju T ćelijsku anergiju ili iscrpljivanje) i agense koji pokreću urođenu imunološku aktivaciju i/ili inflamaciju na mestima tumora.
[0140] U jednom aspektu, imuno-onkološki agens je CTLA-4 antagonist, kao što je antagonističko CTLA-4 antitelo. Pogodna CTLA-4 antitela uključuju, na primer, YERVOY (ipilimumab) ili tremelimvnab.
[0141] U drugom aspektu, imuno-onkološki agens je PD-1 antagonist, kao što je antagonističko PD-1 antitelo. Pogodna PD-1 antitela uključuju, na primer, OPDIVO (nivolumab), KEYTRUDA (pembrolizumab) ili MEDI-0680 (AMP-514; WO2012/145493). Imuno-onkološki agens može takođe uključiti pidilizumab (CT-011), iako je njegova specifičnost za vezivanje PD-1 dovedena u pitanje. Drugi pristup za ciljanje PD-1 receptora je rekombinantni protein sastavljen od ekstracelularnog domena PD-L2 (B7-DC) fuzionisanog sa Fc delom IgG1, nazvanog AMP-224
[0142] U drugom aspektu, imuno-onkološki agens je PD-L1 antagonist, kao što je antagonističko PD-L1 antitelo. Pogodna PD-L1 antitela uključuju, na primer, MPDL3280A (RG7446; WO2010/077634), durvalumab (MEDI4736), BMS-936559 (WO2007/005874), i MSB0010718C (WO2013/79174).
[0143] U drugom aspektu, imuno-onkološki agens je LAG-3 antagonist, kao što je antagonističko LAG-3 antitelo. Pogodna LAG3 antitela uključuju, na primer, BMS-986016 (WO10/19570, WO14/08218), ili IMP-731 ili IMP-321 (WO08/132601, WO09/44273).
[0144] U drugom aspektu, imuno-onkološki agens je CD137 (4-1BB) agonist, kao što je agonističko CD137 antitelo. Pogodna CD137 antitela uključuju, na primer, urelumab i PF-05082566 (WO12/32433).
[0145] U drugom aspektu, imuno-onkološki agens je GITR agonist, kao što je agonističko GITR antitelo. Pogodna GITR antitela uključuju, na primer, BMS-986153, BMS-986156, TRX-518 (WO06/105021, WO09/009116) i MK-4166 (WO11/028683).
[0146] U drugom aspektu, imuno-onkološki agens je IDO antagonist. Pogodni IDO antagonisti uključuju, na primer, INCB-024360 (WO2006/122150, WO07/75598, WO08/36653, WO08/36642), indoksimod, BMS-986205, ili NLG-919 (WO09/73620, WO09/1156652, WO11/56652, WO12/142237).
[0147] U drugom aspektu, imuno-onkološki agens je OX40 agonist, kao što je agonističko OX40 antitelo. Pogodna OX40 antitela uključuju, na primer, MEDI-6383 ili MEDI-6469.
[0148] U drugom aspektu, imuno-onkološki agens je OX40L antagonist, kao što je antagonističko OX40 antitelo. Pogodni OX40L antagonisti uključuju, na primer, RG-7888 (WO06/029879).
[0149] U drugom aspektu, imuno-onkološki agens je CD40 agonist, kao što je agonističko CD40 antitelo. U još jednom tehničkom rešenju, imuno-onkološki agens je CD40 antagonist, kao što je antagonističko CD40 antitelo. Pogodna CD40 antitela uključuju, na primer, lukatumumab ili dacetuzumab.
[0150] U drugom aspektu, imuno-onkološki agens je CD27 agonist, kao što je agonističko CD27 antitelo. Pogodna CD27 antitela uključuju, na primer, varlilumab.
[0151] U drugom aspektu, imuno-onkološki agens je MGA271 (do B7H3) (WO11/109400).
[0152] Kombinaciona terapija je namenjena da sadrži primenu ovih terapijskih agenasa na sekvencijalni način, to jest, pri čemu se svaki terapijski agens administrira u različito vreme, kao i administriranje ovih terapijskih agenasa, ili najmanje dva terapijska agensa, na suštinski simultani način. Suštinski simultana administracija se može postići, na primer, administriranjem subjektu pojedinačni dozni oblik koji ima fiksni odnos svakog terapijskog agensa ili u višestrukim, pojedinačnim doznim oblicima za svaki od terapijskih agenasa. Sekvencionalna ili suštinski simultana administracija od svakog terapijskog agensa može se izvršiti bilo kojim odgovarajućim putem uključujući, ali bez ograničenja na, oralne puteve, intravenske puteve, intramuskularne puteve i direktnu apsorpciju kroz tkiva mukozne membrane. Terapijski agensi se mogu administrirati istim putem ili različitim putevima. Na primer, prvi terapijski agens odabrane kombinacije može se administrirati intravenskom injekcijom, dok se drugi terapijski agensi iz kombinacije mogu administrirati oralno. Alternativno, na primer, svi terapijski agensi se mogu administrirati oralno ili se svi terapijski agensi mogu administrirati intravenskom injekcijom. Kombinaciona terapija takođe može da sadrži administraciju terapijskih agenasa kao što je gore opisano u daljoj kombinaciji sa drugim biološki aktivnim sastojcima i ne-lek terapijama (npr. operacija ili tretman zračenjem). Gde kombinaciona terapija dalje obuhvata ne-lek tretman, ne-lek tretman se može sprovesti u bilo koje pogodno vreme sve dok se postigne povoljan efekat od ko-dejstva kombinacije terapijskih agenasa i ne-lek tretmana. Na primer, u odgovarajućim slučajevima, blagotvorno dejstvo se i dalje postiže kada se ne-lek tretman privremeno ukloni od administracije terapijskih agenasa, možda za dane ili čak nedelje.
[0153] Kako se ovde koristi, termin "ćelija" je nameren da se odnosi na ćeliju koja je in vitro, ex vivo ili in vivo. U nekim tehničkim rešenjima, ex vivo ćelija može biti deo uzorka tkiva koji je izrezan iz organizma kao što je sisar. U nekim tehničkim rešenjima, in vitro ćelija može biti ćelija u ćelijskoj kulturi. U nekim tehničkim rešenjima, in vivo cell ćelija je ćelija koja živi u organizmu kao što je sisar.
[0154] Kako se ovde koristi, termin "kontaktiranje" se odnosi na dovođenje zajedno naznačenih segmenata u in vitro sistemu ili in vivo sistemu. Na primer, "kontaktiranje" DGKα i DGKζ enzima sa jedinjenjem formule (I) uključuje administraciju jedinjenja predmetnog pronalaska pojedincu ili pacijentu, kao što je čovek, koji ima DGKα i DGKζ, kao i, na primer, uvođenje jedinjenja formule (I) u uzorak koji sadrži ćelijski ili prečišćeni preparat koji sadrži DGKα i DGKζ enzim.
[0155] Izraz " DGKα i DGKζ inhibitor " se odnosi na agens sposoban da inhibira aktivnost diacilglicerol kinaze alfa i/ili diacilglicerol kinaze zeta (DGKα i DGKζ) u T ćelijama što rezultira T ćelijskom stimulacijom. DGKα i DGKζ inhibitor može biti reverzibilni ili ireverzibilni DGKα i DGKζ inhibitor. "Reverzibilni DGKα i DGKζ inhibitor " je jedinjenje koje reverzibilno inhibira DGKα i DGKζ enzimsku aktivnost bilo na katalitičkom mestu ili na nekatalitičkom mestu, a "ireverzibilni DGKα i DGKζ inhibitor " je jedinjenje koje ireverzibilno uništava DGKα i DGKζ enzimsku aktivnost formiranjem kovalentne veze sa enzimom.
[0156] Tipovi kancera koji se mogu lečiti jedinjenjem formule (I) uključuju, ali nisu ograničeni na, kancere mozga, kancere kože, kancere bešike, kancere jajnika, kancere dojke, kancere želuca, kancere pankreasa, kancere prostate, kancere debelog creva, kancere krvi, kancere pluća i kancere kostiju. Primeri takvih vrsta kancera uključuju neuroblastom, karcinom creva, kao što je karcinom rektuma, karcinom debelog creva, karcinom familijarna adenomatozna polipoza i hereditarni ne-polipozni kolorektalni kancer, karcinom jednjaka, karcinom labije, karcinom larinksa, karcinom hipofarinksa, karcinom jezika, karcinom pljuvačne žlezde, karcinom želuca, adenokarcinom, medularni tiroidni karcinom, papilarni tiroidni karcinom, renalni karcinom, karcinom bubrežnog parenhima, karcinom jajnika, karcinom grlića materice, karcinom korpusa uterusa, karcinom endometrijuma, horiokarcinom, karcinom pankreasa, karcinom prostate, karcinom testisa, karcinom dojke, urinarni karcinom, melanom, tumori mozga, poput glioblastoma, astrocitoma, meningeoma, meduloblastoma i periferni neuroektodermalni tumori, Hodžkin limfom, ne- Hodžkin limfom, Burkit limfom, akutna limfatična leukemija (ALL), hronična limfatična leukemija (CLL), akutna mijeloidna leukemija (AML), hronična mijeloidna leukemija (CML), adultni T ćelijski leukemija limfom, difuzni B krupnoćelijski limfom (DLBCL), hepatocelularni karcinom, karcinom žučne kese, bronhijalni karcinom, mikrocelularni karcinom pluća, ne-mikrocelularni karcinom pluća, multipli mijelom, bazaliom, teratom, retinoblastom, melanom horoidee, seminom, rabdomiosarkom, kraniofaringiom, osteosarkom, hondrosarkom, miosarkom, liposarkom, fibrosarkom, Juingov sarkom i plazmocitom.
[0157] Jedan ili više dodatnih farmaceutskih agenasa ili postupaka lečenja kao što su, na primer, antivirusni agensi, hemoterapeutici ili anti-kancer agensi, pojačivači imuniteta, imunosupresivi, zračenje, antitumorske i antivirusne vakcine, citokinska terapija (npr., IL2 i GM-CSF), i/ili tirozin kinaza inhibitori mogu se opciono koristiti u kombinaciji sa jedinjenjima formule (I) za lečenje DGKα i DGKζ asociranih bolesti, poremećaja ili stanja. Agensi se mogu kombinovati sa prisutnim jedinjenjima u pojedinačnoj doznoj formi, ili se agensi mogu administrirati simultano ili sekvencijalno kao odvojene dozne forme.
[0158] Pogodni hemoterapijski ili drugi anti-kancer agensi uključuju, na primer, alkilujuće agense (uključujući, bez ograničenja, azotne iperite, derivate etilenimina, alkil sulfonate, nitrozouree i triazene) kao što su uramustin (eng. uracil mustard), hlormetin, ciklofosfamid (CYTOXAN<®>), ifosfamid, melfalan, hlorambucil, pipobroman, trietilen-melamin, trietilentiofosforamin, busulfan, karmustin, lomustin, streptozocin, dakarbazin i temozolomid.
[0159] U lečenju melanoma, pogodni agensi za upotrebu u kombinaciji sa jedinjenjima formule (I) uključuju: dakarbazin (DTIC), opciono, zajedno sa drugim lekovima za hemoterapiju kao što su karmustin (BCNU) i cisplatin; "Dartmouth režim", koji se sastoji od DTIC, BCNU, cisplatina i tamoksifena; kombinacija cisplatina, vinblastina i DTIC-a, temozolomida ili YERVOY<™>. Jedinjenja formule (I) se takođe mogu kombinovati sa imunoterapijskim lekovima, uključujući citokine kao što su interferon alfa, interleukin 2 i faktor nekroze tumora (TNF) u lečenju melanoma.
[0160] Jedinjenja formule (I) se takođe mogu koristiti u kombinaciji sa terapijom vakcinom u lečenju melanoma. Antimelanom vakcine su na neki način slične antivirusnim vakcinama koje se koriste za prevenciju bolesti uzrokovanih virusima kao što su poliomijelitis, boginje i zauške. Oslabljene ćelije melanoma ili delovi ćelija melanoma koji se nazivaju antigeni mogu se ubrizgati pacijentu da bi se stimulisao imuni sistem tela da uništi ćelije melanoma.
[0161] Melanomi koji su ograničeni na ruke ili noge mogu se takođe lečiti kombinacijom agenasa uključujući jedno ili više jedinjenja Formule (I), korišćenjem tehnike hipertermične izolovane perfuzije ekstremiteta. Ovaj protokol lečenja privremeno odvaja cirkulaciju zahvaćenog ekstremiteta od ostatka tela i ubrizgava visoke doze hemoterapije u arteriju koja napaja ekstremitet, čime se obezbeđuju visoke doze na područje tumora bez izlaganja unutrašnjih organa ovim dozama koje bi inače mogle izazvati ozbiljne neželjene efekte. Obično se fluid zagreva na 38.9 °C do 40 °C. Melfalan je lek koji se najčešće koristi u ovoj hemoterapijskoj proceduri. Ovo se može dati sa drugim agensom koji se zove faktor nekroze tumora (TNF).
[0162] Pogodni hemoterapijski ili drugi anti-kancer agensi uključuju, na primer, antimetabolite (uključujući, bez ograničenja, antagoniste folne kiseline, analoge pirimidina, analoge purina i inhibitore adenozin deaminaze) kao što su metotreksat, 5-fluorouracil, floksuridin, citarabin, 6-merkaptopurin, 6-tioguanin, fludarabin fosfat, pentostatin, i gemcitabin.
[0163] Pogodni hemoterapijski ili drugi anti-kancer agensi dalje uključuju, na primer, određene prirodne proizvode i njihove derivate (na primer, vinka alkaloide, antitumor antibiotike, enzime, limfokine i epipodofilotoksine) kao što su vinblastin, vinkristin, vindezin, bleomicin, daktinomicin, daunorubicin, doksorubicin, epirubicin, idarubicin, ara-C, paklitaksel (Taxol), mitramicin, deoksiko-formicin, mitomicin-C, L-asparaginaza, interferoni (naročito IFN-a), etopozid, i tenipozid.
[0164] Ostali citotoksični agensi uključuju navelben, CPT-11, anastrazol, letrazol, kapecitabin, reloksafin i droloksafin.
[0165] Takođe su pogodni citotoksični agensi kao što je epidofilotoksin; antineoplastični enzim; inhibitor topoizomeraze; prokarbazin; mitoksantron; koordinacioni kompleksi platine kao što su cisplatin i karboplatin; modifikatori biološkog odgovora; inhibitori rasta; antihormonski terapijski agensi; leucovorin; tegafur; i hematopoetski faktori rasta.
[0166] Drugi anti-kancer agens (agensi) uključuju antitelo terapeutike kao što je trastuzumab (HERCEPTIN<®>), antitela na kostimulatorne molekule kao što su CTLA-4, 4-1BB i PD-1, ili antitela na citokine (IL-1O ili TGF-β).
[0167] Drugi anti-kancer agensi takođe uključuju one koji blokiraju migraciju imunih ćelija, kao što su antagonisti na hemokinske receptore, uključujući CCR2 i CCR4.
[0168] Drugi anti-kancer agensi takođe uključuju one koji povećavaju imuni sistem, kao što su adjuvansi ili adoptivni T ćelijski transfer.
[0169] Anti-kancer vakcine uključuju dendritske ćelije, sintetičke peptide, DNK vakcine i rekombinantne viruse.
[0170] Farmaceutska kompozicija pronalaska može opciono da uključuje najmanje jedan inhibitor signalne transdukcije (STI). "Inhibitor signalne transdukcije" je agens koji selektivno inhibira jedan ili više vitalnih koraka u signalnim putevima, u normalnoj funkciji ćelija kancera, time dovodeći do apoptoze. Pogodni STI uključuju, ali nisu ograničene na: (i) inhibitore bcr/abl kinaze kao što je, na primer, STI 571 (GLEEVEC<®>); (ii) inhibitori receptora epidermalnog faktora rasta (EGF) kao što su, na primer, inhibitori kinaze (IRESSA<®>, SSI-774) i antitela (Imclone: C225 [Goldstein i sarad., Clin. Cancer Res., 1:1311-1318 (1995)], i Abgenix: ABX-EGF); (iii) inhibitori her-2/neu receptora kao što su inhibitori farnezil transferaze (FTI) kao što je, na primer, L-744,832 (Kohl i sarad., Nat. Med., 1(8):792-797 (1995)) ; (iv) inhibitori Akt familije kinaze ili Akt puta, kao što je, na primer, rapamicin (videti, na primer, Sekulic i sarad., Cancer Res., 60:3504-3513 (2000)); (v) ćelijski ciklus kinaza inhibitori kao što su, na primer, flavopiridol i UCN-O1 (videti, na primer, Sausville, Curr. Med. Chem. Anti-Canc. Agents, 3:47-56 (2003)); i (vi) fosfatidil inozitol kinaza inhibitori kao što je, na primer, LY294002 (videti, na primer, Vlahos i sarad., J. Biol. Chem., 269:5241-5248 (1994)). Alternativno, najmanje jedan STI i najmanje jedno jedinjenje formule (I) mogu biti u odvojenim farmaceutskim kompozicijama. U specifičnom tehničkom rešenju predmetnog pronalaska, najmanje jedno jedinjenje formule (I) i najmanje jedan STI mogu biti administrirani pacijentu istovremeno ili sekvencijalno. Drugim rečima, najmanje jedno jedinjenje formule (I) se može administrirati prvo, najmanje jedan STI se može administrirati prvo, ili najmanje jedno jedinjenje formule (I) i najmanje jedan STI mogu biti administrirani u isto vreme. Dodatno, kada se koristi više od jednog jedinjenja formule (I) i/ili STI, jedinjenja se mogu administrirati bilo kojim redosledom.
[0171] Predmetni pronalazak dalje obezbeđuje farmaceutsku kompoziciju za lečenje hronične virusne infekcije kod pacijenta koja sadrži najmanje jedno jedinjenje formule (I), opciono, najmanje jedan hemoterapijski lek i, opciono, najmanje jedan antivirusni agens, u farmaceutski prihvatljivom nosaču.
[0172] Takođe je obezbeđena efikasna količina gornje farmaceutske kompozicije za upotrebu u lečenju hronične virusne infekcije kod pacijenta.
[0173] U specifičnom tehničkom rešenju predmetnog pronalaska, najmanje jedno jedinjenje formule (I) i najmanje jedan hemoterapijski agens se administriraju pacijentu istovremeno ili uzastopno. Drugim rečima, najmanje jedno jedinjenje formule (I) se može administrirati prvo, najmanje jedan hemoterapijski agens se može administrirati prvo, ili najmanje jedno jedinjenje formule (I) i najmanje jedan STI mogu biti administrirani u isto vreme. vreme. Dodatno, kada se više od jednog jedinjenja formule (I) i/ili hemoterapijskog agensa koristi, jedinjenja se mogu administrirati bilo kojim redosledom. Slično, bilo koji antivirusni agens ili STI se takođe mogu administrirati u bilo kom trenutku u poređenju sa administracijom jedinjenja Formule (I).
[0174] Hronične virusne infekcije koje se mogu lečiti korišćenjem predmetnog kombinatornog lečenja uključuju, ali nisu ograničene na, bolesti uzrokovane: virusom hepatitisa C (HCV), humanim papiloma virusom (HPV), citomegalovirusom (CMV), herpes simpleks virusom (HSV), Epštajn-Bar virus (EBV), varičela zoster virus, Koksaki virus, virus humane imunodeficijencije (HIV). Posebno, parazitske infekcije (npr. malarija) se takođe mogu lečiti gore navedenim postupcima gde se jedinjenja za koja se zna da leče parazitska stanja opciono dodaju umesto antivirusnih agenasa.
[0175] Pogodni antivirusni agensi predviđeni za upotrebu u kombinaciji sa jedinjenjem formule (I) mogu da sadrže nukleozidne i nukleotidne inhibitore reverzne transkriptaze (NRTI), ne-nukleozidne inhibitore reverzne transkriptaze (NNRTI), inhibitore proteaze i druge antivirusne lekove.
[0176] Primeri pogodnih NRTI uključuju zidovudin (AZT); didanozin (ddl); zalkitabin (ddC); stavudin (d4T); lamivudin (3TC); abakavir (1592U89); adefovir dipivoksil [bis(POM)-PMEA]; lobukavir; BCH-I0652; emitricitabin [(-)-FTC]; beta-L-FD4 (takođe nazvan beta-L-D4C i nazvan beta-L-2',3'-dikleoksi-5-fluoro-citiden); DAPD, ((-)-beta-D-2,6-diamino-purin dioksolan); i lodenozin (FddA). Tipični pogodni NNRTI uključuju nevirapin (BI-RG-587); delaviradin (BHAP, U-90152); efavirenz (DMP-266); PNU-142721; AG-1549; MKC-442 (1-(etoksi-metil)-5-(1-metiletil)-6-(fenilmetil)-(2,4(1H,3H)-pirimidindion); i (+)-kalanolid A (NSC-675451) i B. Tipični pogodni inhibitori proteaze uključuju sakvinavir (Ro 31-8959); ritonavir (ABT-538); indinavir (MK-639); nelfnavir (AG-1343); amprenavir (141W94); lasinavir; DMP-450; BMS-2322623; ABT-378; i AG-1549. Drugi antivirusni agensi uključuju hidroksiureu, ribavirin, IL-2, IL-12, pentafuzid i Yissum projekat br.11607.
[0177] Predmetni pronalazak takođe uključuje farmaceutske komplete korisne, na primer, u lečenju ili prevenciji DGKα i DGKζ-povezanih bolesti ili poremećaja, i drugih bolesti na koje se ovde poziva, a koje uključuju jedan ili više kontejnera koji sadrže farmaceutsku kompoziciju koja sadrži terapijski efektivnu količinu jedinjenja formule (I). Takvi kompleti mogu dalje da uključuju, ukoliko je željeno, jednu ili više od različiti konvencionalni farmaceutski komplet komponenti, kao što su, na primer, kontejneri sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih nosača, dodatni kontejneri, kao što će biti očigledno stručnjacima u oblasti. Uputstva, bilo kao umetci ili kao etikete, koja ukazuju na količine komponenti koje treba administrirati, smernice za administraciju, i/ili smernice za mešanje komponenti, takođe mogu biti uključene u komplet.
[0178] Kombinaciona terapija ima za cilj da sadrži administraciju ovih terapijskih agenasa na sekvencijalni način, to jest, pri čemu se svaki terapijski agens administrira u različito vreme, kao i administriranje ovih terapijskih agenasa, ili najmanje dva terapijska agenasa, na suštinski simultani način. Suštinski istovremena administracija se može postići, na primer, administracijom subjektu pojedinačnog doznog oblika koji ima fiksni odnos svakog terapijskog agensa ili u višestrukim, pojedinačnim doznim oblicima za svaki od terapijskih agenasa. Sekvencijalna ili suštinski simultana administracija svakog terapijskog agensa može se izvršiti bilo kojim odgovarajućim putem uključujući, ali ne ograničavajući se na, oralne puteve, intravenske puteve, intramuskularne puteve i direktnu apsorpciju kroz tkiva mukozne membrane. Terapijski agensi se mogu administrirati istim putem ili različitim putevima. Na primer, prvi terapijski agens odabrane kombinacije može se administrirati intravenskom injekcijom, dok se drugi terapijski agensi iz kombinacije mogu administrirati oralno. Alternativno, na primer, svi terapijski agensi se mogu administrirati oralno ili se svi terapijski agensi mogu administrirati intravenskom injekcijom. Kombinaciona terapija takođe može da sadrži administraciju terapijskih agenasa kao što je gore opisano u daljoj kombinaciji sa drugim biološki aktivnim sastojcima i ne-lek terapijama (npr. operacija ili tretman zračenjem). Gde kombinaciona terapija dalje sadrži ne-lek tretman, ne-lek tretman se može sprovesti u bilo koje pogodno vreme sve dok se postigne koristan efekat od ko-dejstva kombinacije terapijskih agenasa i ne-lek tretmana. Na primer, u prikladnim slučajevima, korisno dejstvo se i dalje postiže kada se ne-lek tretman privremeno ukloni od administracije terapijskih agenasa, možda za dane ili čak nedelje.
[0179] Pronalazak takođe obezbeđuje farmaceutski prihvatljive kompozicije koje sadrže terapijski efektivnu količinu jednog ili više jedinjenja formule (I), formulisanih zajedno sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih nosača (aditiva) i/ili diluenata, i opciono, jednog ili više dodatnih terapijskih agenasa opisanih gore.
[0180] Jedinjenja ovog pronalaska se mogu administrirati za bilo koju od ovde opisanih upotreba na bilo koji pogodan način, na primer, oralno, kao što su tablete, kapsule (od kojih svaka uključuje formulaciju održanog oslobađanja ili tempiranog oslobađanja), pilule, praškovi, granule, eliksiri, tinkture, suspenzije (uključujući nanosuspenzije, mikrosuspenzije, disperzije osušene raspršivanjem), sirupe, i emulzije; sublingvalno; bukalno; parenteralno, kao što je subkutana, intravenska, intramuskularna, ili intrastemalna injekcija, ili infuzionim tehnikama (npr. kao sterilni injektabilni vodeni ili nevodeni rastvori ili suspenzije); nazalno, uključujući administraciju na nazalne membrane, kao što je inhalacioni sprej; topikalno, kao što je u obliku kreme ili masti; ili rektalno kao u obliku supozitorija. Oni se mogu administrirati sami, ali generalno će se administrirati sa farmaceutskim nosačem odabranim na osnovu izabranog puta administracije i standardne farmaceutske prakse.
[0181] Fraza "farmaceutski prihvatljiv nosač" kako se ovde koristi označava farmaceutski prihvatljiv materijal, kompoziciju ili vehikulum, kao što je tečni ili čvrsti punilac, diluent, ekscipijent, proizvodno pomoćno sredstvo (npr. lubrikant, talk magnezijum, kalcijum ili cink stearat, ili sterična (eng. steric) kiselina), ili rastvarač enkapsulirajući materijal, uključen u nošenje ili transport predmetnog jedinjenja iz jednog organa, ili dela tela, do drugog organa ili dela tela. Svaki nosač mora biti "prihvatljiv" u smislu da je kompatibilan sa ostalim sastojcima formulacije, uključujući, tj. adjuvans, ekscipijent ili vehikulum, kao što su diluenti, konzervirajući agensi, punioci, agensi regulacije protoka, agensi za dezintegraciju, agensi za vlaženje, emulgacioni agensi, agensi za suspendovanje, agensi za zaslađivanje, agensi za ukus, agensi za miris, antibakterijski agensi, antifungalni agensi, agensi za lubrikaciju i agensi za izdavanje (eng. dispensing), u zavisnosti od prirode načina primene i doznih oblika; i ne-štetan za pacijenta.
[0182] Termin "farmaceutska kompozicija" označava kompoziciju koja sadrži jedinjenje pronalaska u kombinaciji sa najmanje jednim dodatnim farmaceutski prihvatljivim nosačem.
[0183] Farmaceutski prihvatljivi nosači su formulisani u skladu sa brojnim faktorima koji su u okviru delokruga stručnjaka iz oblasti. Ovo uključuje, bez ograničenja: tip i prirodu aktivnog agensa koje se formuliše; subjekt kome treba da se administrira agens-sadržeća kompozicija; nameravani put administracije kompozicije; i terapijsku indikaciju koja je ciljana. Farmaceutski prihvatljivi nosači obuhvataju i vodene i nevodene tečne medijume, kao i raznolike čvrste i polučvrste dozne forme. Takvi nosači mogu uključivati brojne različite sastojke i aditive pored aktivnog agensa, pri čemu su takvi dodatni sastojci uključeni u formulaciju iz raznih razloga, npr. stabilizacija aktivnog agensa, veziva, itd., dobro poznatih stručnjacima iz oblasti. Opisi pogodnih farmaceutski prihvatljivih nosača, i faktori uključeni u njihovu selekciju, nalaze se u raznolikim lako dostupnim izvorima kao što su, na primer, Allen, L. V. Jr. i sarad. Remington: The Science and Practice of Pharmacy (2 Volumes), 22. izdanje (2012), Pharmaceutical Press.
[0184] Dozni režim za jedinjenja predmetnog pronalaska će, naravno, varirati u zavisnosti od poznatih faktora, kao što su farmakodinamičke karakteristike određenog agensa i njegov način i put administracije; vrsta, starost, pol, zdravlje, zdravstveno stanje i težina primaoca; priroda i obim simptoma; vrsta istovremenog lečenja; učestanost lečenja; put administracije, funkcija bubrega i jetre pacijenta i željeni efekat.
[0185] Putem opštih uputa, dnevna oralna doza svakog aktivnog sastojka, kada se koristi za naznačene efekte, će biti u opsegu između oko 0.001 do oko 5000 mg na dan, poželjno između oko 0.01 do oko 1000 mg na dan, a najpoželjnije između oko 0.1 do oko 250 mg na dan. Intravenozno, najpoželjnije doze će biti opsegu od oko 0.01 do oko 10 mg/kg/minutu tokom infuzije konstantne brzine. Jedinjenja ovog pronalaska se mogu administrirati u pojedinačnoj dnevnoj dozi, ili se ukupna dnevna doza može administrirati u podeljenim dozama od dva, tri ili četiri puta na dan.
[0186] Jedinjenja se tipično administriraju u smeši sa pogodnim farmaceutskim diluentima, ekscipijentima ili nosačima (koji se ovde zajednički nazivaju farmaceutski nosači) koji su prikladno odabrani u odnosu na nameravani oblik administracije, npr. oralne tablete, kapsule, eliksiri, i sirupi, i konzistentni sa konvencionalnom farmaceutskom praksom.
[0187] Dozni oblici (farmaceutske kompozicije) pogodni za administraciju mogu da sadrže od oko 1 miligrama do oko 2000 miligrama aktivnog sastojka po doznoj jedinici. U ovim farmaceutskim kompozicijama aktivni sastojak će obično biti prisutan u količini od oko 0.1-95% po težini na osnovu ukupne težine kompozicije.
[0188] Tipična kapsula za oralnu administraciju sadrži najmanje jedno od jedinjenja predmetnog pronalaska (250 mg), laktozu (75 mg) i magnezijum stearat (15 mg). Smeša je propuštena kroz 60 mrežasto sito i pakovana u želatinsku kapsulu br. L.
[0189] Tipičan preparat za injekcije se proizvodi aseptičkim stavljanjem najmanje jednog od jedinjenja iz ovog pronalaska (250 mg) u bočicu, aseptičkim sušenjem zamrzavanjem i zatvaranjem. Za upotrebu, sadržaj bočice se pomeša sa 2 mL fiziološkog rastvora, da bi se dobio preparat za injekcije.
[0190] Predmetni pronalazak uključuje u okviru svog obima farmaceutske kompozicije koje sadrže, kao aktivni sastojak, terapijski efektivnu količinu najmanje jednog od jedinjenja predmetnog pronalaska, samog ili u kombinaciji sa farmaceutskim nosačem. Opciono, jedinjenja predmetnog pronalaska se mogu koristiti sama, u kombinaciji sa drugim jedinjenjima pronalaska, ili u kombinaciji sa jednim ili više drugog (drugih) terapijskog (terapijskih) agensa (agenasa), npr., antikancer agensom ili drugim farmaceutski aktivnim materijalom.
[0191] Bez obzira na odabrani put administracije, jedinjenja predmetnog pronalaska, koja se mogu koristiti u odgovarajućoj hidratizovanoj formi, i/ili farmaceutske kompozicije predmetnog pronalaska, su formulisane u farmaceutski prihvatljive dozne forme pomoću konvencionalnih postupaka poznatih stručnjaku iz oblasti.
[0192] Stvarni dozni nivoi aktivnih sastojaka u farmaceutskim kompozicijama ovog pronalaska mogu biti varirani tako da se dobije količina aktivnog sastojka koja je efektivna za postizanje terapijskog odgovora za određenog pacijenta, kompoziciju i način administracije, a da nije toksična za pacijenta.
[0193] Izabrani dozni nivo će zavisiti od raznih faktora, uključujući aktivnost određenog jedinjenja predmetnog pronalaska koje je upotrebljeno, ili estra, soli ili amida navedenog, put administracije, vreme administracije, brzinu izlučivanja ili metabolizam određenog jedinjenja koje se koristi, brzinu i obim apsorpcije, trajanje tretmana, druge lekove, jedinjenja i/ili materijale koji se koriste u kombinaciji sa određenim jedinjenjem koje se koristi, starost, pol, težinu, stanje, opšte zdravlje i prethodnu medicinsku istoriju pacijenta koji se leči, i slične faktore dobro poznate u medicinskim oblastima.
[0194] Lekar ili veterinar koji je stručan oblasti može lako da odredi i prepiše efektivnu količinu potrebne farmaceutske kompozicije. Na primer, lekar ili veterinar bi mogao da započne sa dozama jedinjenja pronalaska upotrebljenog u farmaceutskoj kompoziciji na nivoima nižim od onih potrebnih da bi se postigao terapijski efekat i postepeno povećavati dozu dok se efekat ne postigne.
[0195] Generalno, pogodna dnevna doza jedinjenja pronalaska će biti ona količina jedinjenja koja je najniža doza efektivna da proizvede terapijski efekat. Takva efektivna doza će generalno zavisiti od gore opisanih faktora. Generalno, oralne, intravenske, intracerebroventrikularne i subkutane doze jedinjenja ovog pronalaska za pacijenta će biti u opsegu od oko 0.01 do oko 50 mg po kilogramu telesne težine na dan.
[0196] Ukoliko je željeno, efektivna dnevna doza aktivnog jedinjenja se može administrirati kao dve, tri, četiri, pet, šest ili više poddoza (eng. sub-doses) administriranih odvojeno u odgovarajućim intervalima tokom dana, opciono, u jediničnim doznim formama. U određenim aspektima pronalaska, doziranje je jedna administracija dnevno.
[0197] Iako je moguće da se jedinjenje iz predmetnog pronalaska administrira samo, poželjno je da se jedinjenje administrira kao farmaceutska formulacija (kompozicija).
[0198] Gornji drugi terapijski agensi, kada se koriste u kombinaciji sa jedinjenjima predmetnog pronalaska, mogu se koristiti, na primer, u onim količinama koje su naznačene u Physicians' Desk Reference (PDR) ili kako je na drugi način određeno od strane nekoga stručnog u oblasti. U tehničkim rešenjima predmetnog pronalaska, takav(takvi) drugi terapijski agens(i) se mogu administrirati prethodno, simultano sa, ili prateći administraciju inventivnih jedinjenja.
POSTUPCI PRIPREME
[0199] Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu se sintetizovati mnogim postupcima dostupnim stručnjacima iz oblasti organske hemije. Opšte sintetičke sheme za pripremu jedinjenja predmetnog pronalaska su opisane ispod. Ove sheme su ilustrativne i nisu namenjene da ograniče moguće tehnike koje stručnjak iz oblasti može da koristi za pripremu jedinjenja koja su ovde otkrivena. Stručnjacima iz oblasti će biti očigledni različiti postupci za pripremu jedinjenja predmetnog pronalaska. Primeri jedinjenja predmetnog pronalaska pripremljeni postupcima opisanim u opštim shemama dati u odeljku Primeri koji je dat u daljem tekstu. Priprema homohiralnih primera može se izvesti tehnikama koje su poznate stručnjaku iz oblasti. Na primer, homohiralna jedinjenja mogu biti pripremljena separacijom racemskih proizvoda ili dijastereomera pomoću preparativne HPLC hiralne faze. Alternativno, jedinjenja primera mogu biti pripremljena postupcima za koje je poznato da daju enantiomerno ili dijastereomerno obogaćene proizvode.
[0200] Reakcije i tehnike opisane u ovom odeljku se izvode u rastvaračima pogodnim za upotrebljene reagense i materijale i pogodni su za transformacije koje se vrše. Takođe, u opisu sintetičkih metoda datih ispod, treba razumeti da su svi predloženi reakcioni uslovi, uključujući izbor rastvarača, reakcionu atmosferu, reakcionu temperaturu, trajanja eksperimenta i postupaka dorade, izabrani da budu uslovi standardni za tu reakciju, koju će stručnjak iz oblasti lako prepoznati. Stručnjak iz oblasti organske sinteze razume da funkcionalnost prisutna na različitim delovima molekula mora biti kompatibilna sa reagensima i reakcijama koji su predloženi. Takva ograničenja na supstituente koji su kompatibilni sa reakcionim uslovima biće lako očigledna stručnjaku iz oblasti, sa potrebnim alternativama kada su prisutni nekompatibilni supstituenti. Ovo će ponekad zahtevati procenu da se modifikuje redosled sintetičkih koraka ili da se izabere jedna posebna procesna shema u odnosu na drugu da bi se dobilo jedinjenje pronalaska. Takođe će biti shvaćeno da je još jedno glavno razmatranje u planiranju bilo kog sintetičkog puta u ovoj oblasti razborit izbor zaštitne grupe koja se koristi za zaštitu reaktivnih funkcionalnih grupa prisutnih u jedinjenjima opisanim u ovom pronalasku. Autoritativan izveštaj koji opisuje mnoge alternative naučenom praktičaru je Wuts i Greene, Greene's Protective Groups in Organic Synthesis, četvrto izdanje, Wiley and Sons (2007).
PRIMERI
[0201] Sledeći primeri ilustruju posebna i poželjna tehnička rešenja predmetnog pronalaska i ne ograničavaju obim predmetnog pronalaska. Hemijske skraćenice i simboli, kao i naučne skraćenice i simboli imaju svoja uobičajena i običajna značenja osim ako nije drugačije naznačeno. Dodatne skraćenice upotrebljene u Primerima i drugde u ovoj prijavi su definisane gore. Uobičajeni intermedijeri su generalno korisni za pripremu više od jednog primera i identifikovani su sekvencijalno (npr. Intermedijer 1, Intermedijer 2, itd.) i skraćeni kao Int.1 ili I1, Int.2 ili I2, itd. Jedinjenja iz Primera su identifikovana primerom i korakom u kojem su pripremljena (npr. "1-A" označava Primer 1, korak A), ili samo primerom u kome je jedinjenje naslovljeno jedinjenje iz primera (na primer, "1" označava naslovljeno jedinjenje Primera 1). U nekim slučajevima su opisane alternativne pripreme intermedijera ili primera. Često hemičari vešti u oblasti sinteze mogu da osmisle alternativne pripreme koji mogu biti željene na osnovu jednog ili više razmatranja kao što je kraće vreme reakcije, jeftiniji početni materijali, slučaj operacije ili izolacije, poboljšani prinos, podložni katalizi, izbegavanje toksičnih reagensa, dostupnost specijalizovane instrumentacije i smanjen broj linearnih koraka, itd. Namera opisa alternativnih priprema je da se dalje omogući priprema primera ovog pronalaska. U nekim slučajevima neke funkcionalne grupe u navedenim primerima i patentnim zahtevima mogu biti zamenjene dobro poznatim bioizosteričnim zamenama poznatim u oblasti, na primer, zamena grupe karboksilne kiseline sa tetrazolnim ili fosfatnim segmentom.<1>H NMR podaci prikupljeni u deuterisanom dimetil sulfoksidu koristili su potiskivanje vode u obradi podataka. Prijavljeni spektri nisu korigovani za efekte potiskivanja vode. Protoni u blizini frekvencije potiskivanja vode od 3.35 ppm pokazuju smanjeni intenzitet signala.
SKRAĆENICE
[0202]
Ac acetil
ACN acetonitril
AcOH sirćetna kiselina
Ac2O anhidrid sirćetne kiseline
anhid. anhidrovani
aq. vodeni
Bn benzil
BOC terc-butoksikarbonil
BOP benzotriazol-1-iloksitris-(dimetilamino)-fosfonijum heksafluorofosfat
Bu butil
CV zapremine kolone
DAST dietilaminosumpor trifluorid
DCM dihlorometan
DEA dietilamin
DIEA ili DIPEA diizopropiletilamin
DMA N,N-dimetilacetamid
DMAP 4-dimetilaminopiridin
DMF dimetilformamid
DMSO dimetil sulfoksid
dppf 1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen
Et etil
EtOAc etil acetat
EtzO dietil etar
EtOH etanol
Et3N trietil amin
h, sati sat (sati)
HATU (1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b] piridinijum 3-oksid heksafluorofosfat)
HCl hidrohlorna kiselina
HPLC tečna hromatografija visokih performansi KHMDS kalijum bis(trimetilsilil)amid
KOAc kalijum acetat
LAH litijum aluminijum hidrid
LC tečna hromatografija
LCMS tečna hromatografija- masena spektrometrija
M molarno
mM milimolarno
Me metil
Mel metil jodid
MeOH metanol
Mezil-Cl metansulfonil hlorid
MHz megaherc
minuti (eng. mins) minut (minuti)
M<+1>(M+H)<+>
MS masena spektrometrija
n ili N normalni
NBS N- bromosukcinimid
NCS N-hlorosukcinimid
NH4OAc amonijum acetat
nM nanomolarno
NMP N-metilpirolidinon
Pd2(dba)3tris-(dibenzilidenaceton)dipaladijum
PdCl2(dppf) [1,1'-bis(difenilfosfino)ferocenldihloropaladijum(II) Pd(PPh3)4tetrakis(trifenilfosfin)paladijum
pet etar petrol etar
Ph fenil
POCl3fosfor oksihlorid
rt ili Ret vreme retenciono vreme
zas. zasićen
Selectfluof<®>1-hlorometil-4-fluoro-1,4-diazoniabiciklo[2.2.2]oktan bis(tetrafluoroborat)
t-BuOH tercijarni butanol
TBAI tetrabutilamonijum jodid
TEA trietilamin
TFA trifluorosirćetna kiselina
TFAA anhidrid trifluorosirćetne kiseline
THF tetrahidrofuran
TLC tankoslojna hromatografija
TMS-OTf trimetilsilil triflat
Xantphos 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9 dimetilksanten
INTERMEDIJER 1
1-(terc-butil) 3-metil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-1,3-dikarboksilat
[0203]
[0204] Rastvoru 4,4'-(hlorometilen)bis(fluorobenzena) (1.5 g, 6.29 mmol) u acetonitrilu (15 mL) dodat je 1-(terc-butil) 3-metil piperazin-1.3-dikarboksilat (1.842 g, 7.54 mmol), praćeno DIPEA (3.29 mL, 18.86 mmol). Reakciona smeša je mešana na 85 °C tokom noći. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se uklonile isparljive supstance i ostatak je rastvoren u etil acetatu (150 mL) i ispran sa vodom. Vodeni sloj je povratno-ekstrahovan sa etil acetatom (100 mL x 2). Kombinovan organski sloj je ispran sa koncentrovanim rastvorom soli, osušen preko Na2SO4, filtriran i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da da sirov proizvod. Sirovi ostatak je prečišćen putem silika gel hromatografije na ISCO<®>(5-10 % EtOAc/petrol etar; 40 g kolona) da se priušti 1-(terc-butil) 3-metil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-1,3-dikarboksilat (2.15 g, 4.82 mmol, 77 % prinos). LCMS: m/z = 447.4 (M+H); rt 2.16 min. (LCMS Postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 x 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minuta, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
INTERMEDIJER 2
terc-butil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(hidroksimetil)piperazin-1-karboksilat
[0205]
[0206] Rastvoru 1-(terc-butil) 3-metil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-1,3-dikarboksilata (1.0 g, 2.24 mmol) u etanolu (20 mL) na sobnoj temperaturi su dodati NaBH4(0.85 g, 22.4 mmol) i kalcijum hlorid (1.24 g, 11.2 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 24 h. Reakciona smeša je filtrirana kroz umetak celita i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da da sirov proizvod. Sirov proizvod je prečišćen silika gel kolonskom hromatografijom koristeći 24 g fleš kolonu, eluirajući sa 50-80 % EtOAc u petrol etru. Frakcije su koncentrovane pod sniženim pritiskom da daju terc-butil 4-(bis(4-fluorofenil) metil)-3-(hidroksimetil)piperazin-1-karboksilat (535 mg, 57.1 % prinos). LCMS: m/z = 419.2 (M+H); rt 3.304 min. (LCMS Postupak: Kolona: Kinetex XB-C18 (3 x 75 mm) 2.6 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum format: acetonitril (98:2), Mobilna faza B: 10 mM amonijum format: acetonitril (2:98), Gradijent = 20-100 % B tokom 4 minuta, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B; Temperatura: 27 °C; Protok: 1.0 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
INTERMEDIJER 4
(1-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-2-il)metanol, HCl
[0207]
[0208] Rastvoru terc-butil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(hidroksimetil) piperazin-1-karboksilata (50 mg, 0.12 mmol) u DCM (1 mL) dodata je HCl (0.3 mL, 1.2 mmol, 4 M u dioksanu) i reakciona smeša je mešana 3 h. Reakciona smeša je isparena pod sniženim pritiskom i sirov proizvod je triturisan sa heksanom. Čvrsta supstanca je filtrirana kroz sinterovani levak, osušena pod vakuumom da da HCl so od (1-(bis(4-fluorofenil)metil)pipεrazin-2-il)metanola (41 mg, 96 % prinos). LCMS: m/z = 319.2 (M+H); rt 2.28 min. (LCMS Postupak: Kolona: Kinetex XB-C18 (3 x 75 mm) 2.6 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum format:acetonitril (98:2), Mobilna faza B: 10 mM amonijum format:acetonitril (2:98), Gradijent = 20-100 % B tokom 4 minuta, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B; Temperatura: 27 °C: Protok: 1.0 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
PRIMERI 1 I 2
8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(hidroksimetil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0209]
[0210] Mešanom rastvoru 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (Intermedijer 32) (100 mg, 0.300 mmol) u acetonitrilu (3 mL) su dodati DIPEA (0.157 mL, 0.900 mmol) i (1-(bis(4-fluorofenil)metil) piperazin-2-il) metanol (143 mg, 0.450 mmol). Reakciona smeša je mešana na 85 °C tokom noći. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i ostatak je rastvoren u etil acetatu (100 mL). Organski sloj je ispran sa koncentrovanim rastvorom soli, osušen preko Na2SO4i koncentrovan pod sniženim pritiskom da da sirov proizvod, koji je prečišćen pomoću preparativne hiralne HPLC (HPLC Postupak: Kolona: Sunfire C18, 150 x 19 mm ID, 5 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat u vodi; Mobilna faza B: acetonitril; Gradijent: 0-100 % B tokom 18 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; Tok: 17 mL/min) da da pik-1 (Enantiomer 1) i pik-2 (Enantiomer 2). Frakcija-1 (pik-1) je koncentrovana pod sniženim pritiskom i ostatak je razblažen sa (EtOH/HzO, 1:5) i liofilizovan da da Primer 1 (2.7 mg, 1.7% prinos); LCMS: m/z = 502.2 (M+H); rt 1.977 min; (LCMS Postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 x2.1 mm), 2.5µ; Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% Voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100 %).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 8.15 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.07 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.53 (dd, J=8.7, 5.7 Hz, 4H), 7.15 (q, J=8.8 Hz, 4H), 6.11 (s, 1H), 5.24 (s, 1H), 4.40 (br. s., 2H), 3.88 (d, J=11.0 Hz, 1H), 3.83-3.70 (m, 3H), 3.53 (s, 3H), 3.34 (br. s., 1H), 3.23 (br. s., 1H), 2.89-2.79 (m, 2H). Frakcija-2 (pik-2) je koncentrovana pod sniženim pritiskom i ostatak je razblažen sa (EtOH/H2O,1:5) i liofilizovan da da Primer 2 (3.4 mg, 2.2 % prinos); LCMS: m/z = 502.2 (M+H); rt 1.978 min; (LCMS Postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 x2.1 mm), 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% Voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100 %).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 8.7, 5.7 Hz, 4H), 7.15 (q, J=8.8 Hz, 4H), 6.11 (s, 1H), 5.24 (s, 1H), 4.40 (t, J=5.1 Hz, 1H), 3.89 (d, J=9.8 Hz, 1H), 3.81-3.67 (m, 3H), 3.53 (s, 3H), 3.35 (d, J=2.4 Hz, 1H), 3.26-3.19 (m, 1H), 2.91-2.80 (m, 3H).
INTERMEDIJER 5
terc-butil (2S,SR)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat
[0211]
[0212] Rastvoru 4,4'-(hlorometilen)bis(fluorobenzena) (3.76 g, 15.75 mmol) u acetonitrilu (15 mL) dodat je terc-butil (2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (2.25 g, 10.50 mmol), praćen DIPEA (5.50 mL, 31.5 mmol). Reakciona smeša je mešana na 85 °C tokom noći. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da se uklone isparljive supstance, ostatak je rastvoren u etil acetatu (150 mL), i ispran sa vodom. Vodeni sloj je povratnoekstrahovan sa etil acetatom (100 mL x 2). Kombinovan organski sloj je ispran sa koncentrovanim rastvorom soli, osušen preko Na2SO4i koncentrovan pod sniženim pritiskom da da sirov proizvod, koji je prečišćen pomoću silika gel hromatografije na ISCO<®>(5-10 % EtOAc/petrol etar; 80 g kolona) da priušti terc-butil (2S,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (3.55 g, 81 % prinos). LCMS: m/z = 417.4 (M+H); rt 1.561 min. (LCMS Uslovi: Kolona: Kinetex XB-C18 (3 x 75 mm) 2.6 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum format:acetonitril (98:2), Mobilna faza B: 10 mM amonijum format:acetonitril (2:98), Gradijent = 20-100 % B tokom 4 minuta, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B; Temperatura: 27 °C; Protok: 1.0 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
INTERMEDIJER 6
(2R,5S)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin hidrohlorid
[0213]
[0214] Rastvoru terc-butil (2S,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (600 mg, 1.441 mmol) u DCM (10 mL) dodata je 4 M HCl (1.801 mL, 7.20 mmol) u dioksanu. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Reakciona smeša je isparena pod sniženim pritiskom i sirov materijal je triturisan sa heksanom. Čvrsta supstanca je filtrirana kroz sinterovani levak, osušena pod vakuumom da da HCl so od (2R,5S)-1-(bis(4-fluorofenil) metil)-2,5-dimetilpiperazina (437 mg, 86 % prinos). LCMS: m/z = 317.4 (M+H); rt 1.53 min. (LCMS Uslovi: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 x 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minuta, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
PRIMER 3
8-((2S,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0215]
[0216] Mešanom rastvoru 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin4-il trifluorometansulfonata (40 mg, 0.12 mmol) u acetonitrilu (5 mL) su dodati DIPEA (0.063 mL, 0.360 mmol) i (2R,SS)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin (57.0 mg, 0.18 mmol). Reakciona smeša je mešana na 80 °C tokom noći. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i ostatak je rastvoren u etil acetatu (15 mL). Organski sloj je ispran sa koncentrovanim rastvorom soli, osušen preko Na2SO4i koncentrovan pod sniženim pritiskom da da sirov proizvod, koji je prečišćen pomoću preparativne HPLC. (HPLC Postupak: Kolona: DAD 1: Bridge Phenyl (250 mm x 4.6 mm) 5 µm, DAD-2: Inersil ODS (250MMX 4.6MM) 5µm, Tok: 2 mL/min; Mobilna faza A:10 mM amonijum acetat u vodi pH: 4.5, Mobilna faza B: metanol:acetonitril: 50: 50, Gradijent = 60-100 % B tokom 15 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da priušte 8-((2S,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (7.6 mg, 12.2 % prinos); LCMS: m/z, 500.3 (M+H); rt 2.47 min. (LCMS Postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 x 2.1) mm, 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% Voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda:95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100 %).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.14 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.06 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.67-7.49 (m, 4H), 7.24-7.04 (m, 4H), 6.00 (s, 1H), 4.70 (s, 1H), 4.58 (br. s., 1H), 3.54-3.66 (m, 2H), 3.51 (s, 3H), 3.15-3.02 (m, 1H), 2.86 (dd, J=11.6, 3.5 Hz, 1H), 2.38-2.24 (m, 1H), 1.30 (d, J=6.4 Hz, 3H), 1.06 (d, J=6.4 Hz, 3H).
INTERMEDIJER 7
terc-butil (2R,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1 -karboksilat
[0217]
[0218] Rastvoru bis(4-fluorofenil)metil trifluorometansulfonata (500 mg, 1.419 mmol) u acetonitrilu (6 mL) dodat je terc-butil (2R,SS)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (365 mg, 1.703 mmol), praćen DIPEA (0.744 mL, 4.26 mmol). Reakciona smeša je mešana na 85 °C tokom noći. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da se uklone isparljive supstance, ostatak je rastvoren u etil acetatu i ispran sa vodom. Vodeni sloj je povratnoekstrahovan sa etil acetatom (50 mL x 2). Kombinovan organski sloj je ispran sa koncentrovanim rastvorom soli, osušen preko Na2SO4i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen silika gel hromatografijom na ISCO<®>(5-10 % EtOAc/pet etar; 12 g kolona) da priušti terc-butil (2R,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (195 mg, 33.0 % prinos); LCMS: m/z = 417.2 (M+H); rt 4.125 min. (LCMS Uslovi: Kolona: Kinetex XB-C18 (3 x 75 mm) 2.6 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum format:acetonitril (98:2), Mobilna faza B: 10 mM amonijum format:acetonitril (2:98), Gradijent = 20-100 % B tokom 4 minuta, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B; Temperatura: 27 °C; Protok: 1.0 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
INTERMEDIJER 8
(2S,5R)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin, HCl
[0219]
[0220] Rastvoru terc-butil (2R,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (190 mg, 0.456 mmol) u DCM (10 mL) dodat je 4 M HCl (0.570 mL, 2.281 mmol) rastvor u dioksanu. Reakciona smeša je mešana 3 h. Reakciona smeša je isparena pod sniženim pritiskom i sirov proizvod je triturisan sa heksanom. Čvrsta supstanca je filtrirana kroz sinterovani levak i osušena pod vakuumom da da HCl so od (2S,5R)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazina (142 mg, 88 % prinos); LCMS: m/z = 317.4 (M+H); rt 1.33 min. (LCMS Postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 x 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minuta, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
PRIMER 4
8-((2R,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0221]
[0222] Mešanom rastvoru 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (45.3 mg, 0.136 mmol) u acetonitrilu (5 mL) su dodati DIPEA (0.06 mL, 0.34 mmol) i HCl so od (2S,SR)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazina (40 mg, 0.113 mmol). Reakciona smeša je mešana na 85 °C tokom noći. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i ostatak je rastvoren u etil acetatu (15 mL). Organski sloj je ispran sa koncentrovanim rastvorom soli, osušen preko Na2SO4i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC. (HPLC Postupak: kolona: DAD 1: Bridge Phenyl (250 mm x 4.6 mm) 5µm; DAD-2: Inersil ODS (250 mm x 4.6 mm) 5 µm; Tok: 2mL/min; Mobilna faza A:10 mM amonijum acetat u vodi pH:4.5; Mobilna faza B: metanol:acetonitril: 50: 50; Gradijent = 70-100 % B tokom 15 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; Temperatura: 50 °C; Detekcija: UV pri 220 nm). Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da priušte 8-((2R,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (8.6 mg, 15.19 % prinos); LCMS: m/z = 500.3 (M+H); rt 2.398 min. (LCMS Postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 x2.1mm), 2.5µm; Mobilna faza A: 95% Voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda:95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.14 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.06 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.69-7.49 (m, 4H), 7.15 (q, J=8.8 Hz, 4H), 6.00 (s, 1H), 4.70 (s, 1H), 4.59 (br. s., 1H), 3.69 (d, J=12.7 Hz, 1H), 3.60-3.45 (m, 4H), 3.07 (d, J=7.1 Hz, 1H), 2.86 (dd, J=11.9, 3.5 Hz, 1H), 2.33 (d, J=11.2 Hz, 1H), 1.30 (d, J=6.6 Hz, 3H), 1.06 (d, J=6.6 Hz, 3H).
PRIMER 5
4-((2R,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)-6-bromo-1 - metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril
[0223]
[0224] Mešanom rastvoru 6-bromo-3-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (80 mg, 0.194 mmol) u acetonitrilu (5 mL) su dodati DIPEA (0.102 mL, 0.582 mmol) i HCl so od (2S,5R)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazina (75 mg, 0.214 mmol). Reakciona smeša je mešana na 85 °C tokom noći. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i ostatak je rastvoren u etil acetatu (15 mL). Organski sloj je ispran sa koncentrovanim rastvorom soli, osušen preko Na2SO4i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak prečišćen silika gel kolonskom hromatografijom koristeći 24 g fleš kolonu, eluirajući sa 50-80 % EtOAc u petrol etru. Frakcije su koncentrovane pod sniženim pritiskom da daju 4-((2R,SS)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril (95 mg, 85 % prinos); LCMS: m/z = 578.2 (M+H); rt 3.916 min.
PRIMER 6
8-((2R,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril
[0225]
[0226] Rastvoru 4-((2R,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitrila (80 mg, 0.138 mmol) u NMP (3 mL) dodat je cink (1.81 mg, 0.028 mmol), dppf (4.60 mg, 8.30 µmol), i cink cijanid (32.5 mg, 0.277 mmol). Reakciona smeša je degasirana sa N2praćeno dodavanjem Pd2(dba)3(12.66 mg, 0.014 mmol). Reakciona smeša je zagrejana na 80 °C tokom 3 h. Reakciona smeša je razblažena sa vodom i ekstrahovana dva puta sa etil acetatom (20 mL). Kombinovan organski sloj je osušen preko Na2SO4i isparen do suvoće pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC koristeći sledeće uslove: Kolona: Sunfire C18, 19 × 150 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: acetonitril; Gradijent: 40-100 % B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; Tok: 19 mL/min. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da priušte 8-((2R,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (4.1 mg, 5.48 % prinos); LCMS: m/z = 525.3 (M+H); rt 2.256 min.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.26 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.16 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.62 (dd, J=11.0, 8.6 Hz, 2H), 7.63 (dd, J=10.9, 8.7 Hz, 2H), 7.25-7.06 (m, 4H), 4.74 (s, 2H), 4.24 (d, J=10.5 Hz, 1H), 3.60-3.47 (m, 3H), 3.42 (d, J=12.0 Hz, 1H), 3.15-3.08 (m, 1H), 3.03 (br. s., 1H), 2.40 (d, J=11.5 Hz, 1H), 1.44 (d, J=6.6 Hz, 3H), 0.91 (d, J=6.4 Hz, 3H) ppm.
INTERMEDIJER 9
terc-butil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(fluorometil)piperazin-1-karboksilat
[0227]
[0228] Rastvoru terc-butil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(hidroksimetil) piperazin-1-karboksilata (150 mg, 0.358 mmol) u DCM (5 mL) na 0 °C dodat je DAST (0.095 mL, 0.717 mmol) razblažen sa 2 mL DCM kap po kap. Reakciona smeša je zagrejana do sobne temperature i mešana 5 h. Reakciona smeša je razblažena sa DCM (20 mL) i isprana sa zasićenim vodenim NaHCO3. Organski sloj je osušen preko Na2SO4i koncentrovan pod sniženim pritiskom da da terc-butil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(fluorometil)piperazin-1-karboksilat; LCMS: m/z = 421.2 (M+H); rt 4.114 min (LCMS Postupak: Kolona: Kinetex XB-C18 (3 × 75 mm) 2.6 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum format:acetonitril (98:2), Mobilna faza B: 10 mM amonijum format:acetonitril (2:98), Gradijent = 20-100 % B tokom 4 minuta, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B; Temperatura: 27 °C; Protok: 1.0 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
INTERMEDIJER 10
1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-(fluorometil)piperazin, HCl
[0229]
[0230] Rastvoru terc-butil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(fluorometil) piperazin-1-karboksilata (180 mg, 0.428 mmol) u DCM (10 mL) dodata je HCl (2.14 mL, 4.28 mmol) kao 4 M rastvor u dioksanu. Reakciona smeša je mešana 3 h. isparena pod sniženim pritiskom i sirov materijal je triturisan sa heksanom. Čvrsta supstanca je filtrirana kroz sinterovani levak, osušena pod vakuumom da da 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-(fluorometil)piperazin, HCl (115 mg, 75 % prinos); LCMS: m/z = 321.2 (M+H); rt 2.698 min (LCMS Postupak: Kolona: Kinetex XB-C18 (3 × 75 mm) 2.6 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum format:acetonitril (98:2), Mobilna faza B: 10 mM amonijum fonat:acetonitril (2:98), Gradijent = 20-100 % B tokom 4 minuta, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B; Temperatura: 27 °C; Protok: 1.0 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
PRIMER 8
8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(fluorometil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0231]
[0232] Mešanom rastvoru 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (39.2 mg, 0.118 mmol) u acetonitrilu (5 mL) su dodati DIPEA (0.044 mL, 0.252 mmol) i HCl so od 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-(fluorometil)piperazina (30 mg, 0.084 mmol). Reakciona smeša je mešana na 85 °C tokom noći. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i ostatak je rastvoren u etil acetatu (15 mL). Organski sloj je ispran sa koncentrovanim rastvorom soli, osušen preko Na2SO4i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC uz sledeće uslove: Kolona: Sunfire C18, 19 × 150 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat pH-4.5 sa sirćetnom kiselinom; Mobilna faza B: metanol: acetonitril (1:1); Gradijent: 50-100 % B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; Tok: 17 mL/min. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju 8-(4-(bis(4-fluorofenil) metil)-3-(fluorometil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (6.8 mg, 15.2 % prinos); LCMS: m/z = 504.3 (M+H); rt 2.16 min (LCMS Postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5µm; Mobilna faza A: 95% Voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% Voda:95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100 %);<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.17 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.07 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.55-7.33 (m, 4H), 7.21-7.05 (m, 4H), 6.08 (s, 1H), 5.06 (br. s., 1H), 4.94 (br. s., 1H), 4.89 (s, 1H), 4.43-4.31 (m, 1H), 4.28-4.20 (m, 1H), 3.77-3.62 (m, 2H), 3.54 (s, 3H), 2.26-2.91(m, 4H).
PRIMER 9
4-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(fluorometil)piperazin-1-il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril
[0233]
[0234] Mešanom rastvoru 6-bromo-3-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (20 mg, 0.05 mmol) u acetonitrilu (1 mL) su dodati DIPEA (0.025 mL, 0.146 mmol) i HCl so od 1-(bis(4-fluorofenil) metil)-2-(fluorometil)piperazina (26.0 mg, 0.07 mmol). Reakciona smeša je mešana na 85 °C tokom 12 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i ostatak je rastvoren u etil acetatu (10 mL). Organski sloj je ispran sa koncentrovanim rastvorom soli, osušen preko Na2SO4i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC uz sledeće uslove: Kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; Gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 15% B, 15-50 % B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; Protok: 15 mL/min; Temperatura Kolone: 25 °C. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju 4-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(fluorometil)piperazin-1-il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril (6.7 mg, 22.5 % prinos); LCMS: m/z = 582.2 (M+H); rt 2.171 min (LCMS Postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda:95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100 %);<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.96 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.90 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.59 (br. s., 4H), 7.24-7.04 (m, 4H), 5.31 (br. s., 1H), 4.20 (d, J=13.7 Hz, 1H), 4.09 (d, J=11.0 Hz, 1H), 3.64 (br. s., 2H), 3.52 (s, 3H), 3.26 (br. s., 1H), 3.18 (s, 2H), 2.88 (br. s., 1H), 2.61 (br. s., 1H).
INTERMEDIJER 11
terc-butil (S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-izopropilpiperazin-1-karboksilat
[0235]
[0236] Rastvoru 4,4'-(hlorometilen)bis(fluorobenzena) (0.784 g, 3.28 mmol) u acetonitrilu (10 mL) dodat je terc-butil (S)-3-izopropilpiperazin-1-karboksilat (0.5 g, 2.19 mmol), praćen DIPEA (1.147 mL, 6.57 mmol). Reakciona smeša je mešana na 85 °C tokom noći. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da se uklone isparljive supstance i ostatak je rastvoren u etil acetatu i ispran sa vodom. Vodeni sloj je povratno-ekstrahovan sa etil acetatom (20 mL × 2). Kombinovan organski sloj je ispran sa koncentrovanim rastvorom soli, osušen preko Na2SO4i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen silika gel hromatografijom na ISCO<®>(5-10 % EtOAc/petrol etar; 24g kolona) da se priušti terc-butil (S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-izopropilpiperazin-1-karboksilat (425 mg,, 45.1 % prinos); LCMS: m/z = 431.2 (M+H); rt 2.215 min (LCMS Postupak: Kolona: Kinetex XB-C18 (3 × 75 mm) 2.6 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum format:acetonitril (98:2), Mobilna faza B: 10 mM amonijum format:acetonitril (2:98), Gradijent = 20-100 % B tokom 4 minuta, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B; Temperatura: 27 °C; Protok: 1.0 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
INTERMEDIJER 12
(S)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-izopropilpiperazin, HCl
[0237]
[0238] Rastvoru terc-butil (S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-izopropilpiperazin-1-karboksilata (250 mg, 0.581 mmol) u DCM (1 mL) dodata je HCl (0.176 mL, 5.81 mmol) kao 4 M rastvor u dioksanu. Reakciona smeša je mešana 3 h. Reakciona smeša je isparena pod sniženim pritiskom i sirov proizvod je triturisan sa heksanom. Čvrsta supstanca je filtrirana kroz sinterovani levak, osušena pod vakuumom da da HCl so od ((S)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-izopropilpiperazina. LCMS: m/z = 331.4 (M+H); rt 1.54 min (LCMS Postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minuta, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
PRIMER 10
(S)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-izopropilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0240] Mešanom rastvoru 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (50 mg, 0.15 mmol) u acetonitrilu (3 mL) su dodati DIPEA (0.079 mL, 0.450 mmol) i HCl so od (S)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-izopropilpiperazina (83 mg, 0.225 mmol). Reakciona smeša je mešana na 85 °C tokom noći. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i ostatak je rastvoren u etil acetatu (15 mL). Organski sloj je ispran sa koncentrovanim rastvorom soli, osušen preko Na2SO4i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC (HPLC Postupak: Kolona: Sunfire C18, 150 × 4.6 mm, 5 µm); Mobilna faza A: 0.05 % TFA u vodi; Mobilna faza B: acetonitril; Gradijent: 0-100 % B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; Tok: 1 mL/min). Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju (S)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-izopropilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (48.2 mg, 61.9 % prinos); LCMS: m/z = 514.3 (M+H); rt 2.521 min (LCMS Postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 ×2.1 mm), 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda:95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.16 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.08 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.58-7.42 (m, 4H), 7.26-7.03 (m, 4H), 6.12 (s, 1H), 5.50 (s, 1H), 3.82 (dd, J=12.7, 3.7 Hz, 1H), 3.62-3.47 (m, 4H), 3.36 (br. s., 1H), 3.15-3.01 (m, 2H), 2.61-2.53 (m, 1H), 2.30-2.21 (m, 1H), 1.08 (d, J=6.6 Hz, 3H), 0.94 (d, J=6.6 Hz, 3H). Jedan proton se spojio sa DMSO-d6.
PRIMER 11
(S)-4-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-izopropilpiperazin-1-il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril
[0242] Mešanom rastvoru 6-bromo-3-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (99 mg, 0.24 mmol) u acetonitrilu (5 mL) su dodati DIPEA (0.114 mL, 0.654 mmol) i HCl so od (S)-1-(bis(4-fluorofenil) metil)-2-izopropilpiperazina (80 mg, 0.22 mmol). Reakciona smeša je mešana na 85 °C tokom noći. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i ostatak je rastvoren u etil acetatu (15 mL). Organski sloj je ispran sa koncentrovanim rastvorom soli, osušen preko Na2SO4i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen silika gel kolonskom hromatografijom upotrebom 24 g fleš kolone, eluirajući sa 50-80 % EtOAc u petrol etru. Frakcije su koncentrovane pod sniženim pritiskom da daju (S)-4-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-izopropilpiperazin-1-il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro- 1,5-naftiridin-3-karbonitril (79 mg, 0.133 mmol, 61.1 % prinos); LCMS: m/z = 594.2 (M+H); rt 1.45 min (LCMS Postupak: Kolona: Kinetex XB-C18 (3 × 75 mm) 2.6 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum format:acetonitril (98:2), Mobilna faza B: 10 mM amonijum format:acetonitril (2:98), Gradijent = 20-100 % B tokom 4 minuta, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B; Temperatura: 27 °C; Protok: 1.0 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
PRIMER 12
(S)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-izopropilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril
[0243]
[0244] Rastvoru (S)-4-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-izopropilpiperazin-1-il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitrila (70 mg, 0.118 mmol) u NMP (5 mL) su dodati cink (1.55 mg, 0.024 mmol), dppf (3.93 mg, 7.09 µmol) i cink cijanid (27.7 mg, 0.236 mmol). Reakciona smeša je degasirana pod N2i Pd2(dba)3(10.82 mg, 0.012 mmol) je dodat. Reakciona smeša je zagrevana na 80 °C tokom 3 h. Reakciona smeša je razblažena sa vodom i ekstrahovana dva puta sa etil acetatom (20 mL). Kombinovan organski sloj je osušen preko Na2SO4i isparen do suvoće pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC uz sledeće uslove: Kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 40 % B, 40-73% B tokom 22 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; Protok: 15 mL/min; Temperatura Kolone: 25 °C. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju (S)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-izopropilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (8.5 mg, 12.4 % prinos); LCMS: m/z = 539.3 (M+H); rt 2.307 min (LCMS Postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda:95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100 %).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.25 (d, J=9.0 Hz, 1H), 8.15 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.59-7.41 (m, 4H), 7.16 (td, J=8.9, 7.2 Hz, 4H), 5.56 (s, 1H), 4.26 (dd, J=13.3, 3.3 Hz, 1H), 3.91 (d, J=12.7 Hz, 1H), 3.80-3.67 (m, 2H), 3.53 (s, 3H), 3.41-3.32 (m, 1H), 2.60-2.53 (m, 1H), 2.48 (d, J=3.7 Hz, 1H), 2.26 (dd, J=14.4, 7.1 Hz, 1H), 1.06 (d, J=6.8 Hz, 3H), 0.71 (d, J=6.6 Hz, 3H).
PRIMERI 15 I 16
4-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(hidroksimetil)piperazin-1-il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril
[0245]
[0246] Rastvoru 4-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(hidroksimetil)piperazin-1-il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitrila (80 mg, 0.138 mmol) u NMP (5 mL) su dodati cink (1.802 mg, 0.028 mmol), dppf (4.58 mg, 8.27 µmol) i cink cijanid (32.4 mg, 0.276 mmol). Reakciona smeša je degasirana pod N2i Pd2(dba)3(12.62 mg, 0.014 mmol) je dodat. Reakciona smeša je zagrejana na 80 °C tokom 3 h. Reakciona masa je razblažena sa vodom i ekstrahovana dva puta sa etil acetatom (20 mL). Kombinovan organski sloj osušen preko Na2SO4i isparen do suvoće pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(hidroksimetil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (55 mg, 76 % prinos) u vidu racemske smeše. Racemska smeša je odvojena hiralnom separacijom na enantiomere 1 i 2. Hiralna separacija (HPLC Postupak: Kolona: DAD-1: CELLULOSE-2 (250 X 4.6mm), 5 mikrona; DAD-2 CELLULOSE-4 (250 X 4.6 mm), 5 µm; Mobilna faza: 0.1% DEA u metanolu; Tok: 2 mL/min): Enantiomer 1 (Primer 15, 5.4 mg, 9.8 % prinos); LCMS: m/z = 527.2 (M+H); rt 1.888 min (HPLC Postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 x 2.1) mm, 2.5µm; Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda:95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100 %);<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 8.26 (d, J=9.0 Hz, 1H), 8.16 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.58 (dd, 7=8.1, 5.9 Hz, 4H), 7.27-7.04 (m, 4H), 5.24 (s, 1H), 4.43 (br. s., 1H), 4.21 (d, J=14.2 Hz, 1H), 4.12 (d, J=12.7 Hz, 1H), 3.89 (dd, J=13.0, 3.4 Hz, 1H), 3.69-3.45 (m, 6H), 3.12 (t, J=10.3 Hz, 1H), 2.84 (d, J=3.4 Hz, 1H), 2.66-2.56 (m, 1H). Enantiomer 2 (Pik-2) (Primer 16, 4.1 mg, 7.36 % prinos); LCMS: m/z = 527.2 (M+H); rt 1.888 min (LCMS Postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 x 2.1) mm, 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda:95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100 %);<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 8.26 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.16 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.58 (dd, J=8.1, 5.9 Hz, 4H), 7.33-7.04 (m, 4H), 5.24 (s, 1H), 4.43 (t, J=5.1 Hz, 1H), 4.21 (d, J=14.2 Hz, 1H), 4.12 (d, J=12.7 Hz, 1H), 3.89 (dd, J=12.6, 3.1 Hz, 1H), 3.69-3.49 (m, 5H), 3.12 (t, J=10.4 Hz, 1H), 2.84 (d, J=4.2 Hz, 1H), 2.66-2.55 (m, 2H).
PRIMER 17
4-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(hidroksimetil)piperazin-1-il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril
[0247]
[0248] Mešanom rastvoru 6-bromo-3-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (20 mg, 0.049 mmol) u acetonitrilu (1 mL) su dodati DIPEA (0.025 mL, 0.146 mmol) i HCl so od (1-(bis(4-fluorofenil) metil)piperazin-2-il)metanola (20.6 mg, 0.058 mmol). Reakciona smeša je mešana na 85 °C tokom 12 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i ostatak je rastvoren u etil acetatu (10 mL). Organski sloj je ispran sa koncentrovanim rastvorom soli, osušen preko Na2SO4i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC uz sledeće uslove: Kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 0.1%TFA; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; Gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 15% B, 15-60 % B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; Protok: 15 mL/min; Temperatura Kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je izazvano MS signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju 4-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(hidroksimetil) piperazin-1il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril (3.3 mg, 11.7 % prinos); LCMS: m/z = 582.2 (M+H); rt 2.394 min (LCMS Postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda:95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100 %);<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 7.98 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.92 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.50 (td, J=9.1, 5.5 Hz, 4H), 7.26-7.03 (m, 4H), 5.30 (d, J=-3.9 Hz, 1H), 5.18 (d, J=5.1 Hz, 1H), 4.92 (s, 1H), 4.45-4.36 (m, 1H), 4.21 (dd, J=15.2, 8.8 Hz, 1H), 3.88-4.18(m, 2H), 3.54 (s, 3H), 3.00-3.10 (m, 1H), 2.87-2.99 (m, 2H), 2.68-2.71 (m, 1H).
PRIMER 18
8-((2S,SR)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-7-hloro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0249]
[0250] Mešanom rastvoru 8-((2S,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (50 mg, 0.1 mmol) u DCM (3 mL) dodat je NCS (26.7 mg, 0.2 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom noći. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i ostatak je rastvoren u etil acetatu (20 mL). Organski sloj je ispran sa, zasićenim vodenim NaHCO3, koncentrovanim rastvorom soli, osušen preko NazSOi i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC uz sledeće uslove: Kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetat; Gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 40 % B, 40-79% B tokom 15 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; Protok: 15 mL/min; Temperatura Kolone: 25 °C. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju 8-((2S,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin1-il)-7-hloro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (39.6 mg, 72.6 % prinos); LCMS: m/z = 534.2 (M+H); rt 2.554 min (LCMS Postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% Voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% Voda:95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100 %);<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 8.25-8.10 (m, 2H), 7.59 (dd, J=7.6, 5.6 Hz, 4H), 7.15 (td, J=8.8, 4.6 Hz, 4H), 4.77 (s, 1H), 4.19 (d, J=9.8 Hz, 1H), 4.12 (br. s., 1H), 3.64 (s, 3H), 3.12 (dd, J=11.2, 3.7 Hz, 1H), 2.99-2.83 (m, 2H), 2.28 (d, J=9.0 Hz, 1H), 1.30 (d, J=6.6 Hz, 3H), 0.97 (d, J=6.1 Hz, 3H).
PRIMER 19
8-((2S,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-7-bromo-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0251]
[0252] Mešanom rastvoru 8-((2S,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (300 mg, 0.601 mmol) u DMF (8 mL) dodat je NBS (160 mg, 0.901 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i ostatak je rastvoren u etil acetatu (50 mL). Organski sloj je ispran sa koncentrovanim rastvorom soli, osušen preko Na2SO4i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen putem silika gel hromatografije na ISCO<®>(40-80 % EtOAc/Petrol etar; 80 g kolona) da priušti 8-((2S,SR)-4-(bis(4-fluorofenil) metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-7-bromo-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (305 mg, 88 % prinos); LCMS: m/z = 580.2 (M+H); rt 1.297 min (LCMS Postupak: Kolona: Kinetex XB-C18 (3 × 75 mm) 2.6 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum format:acetonitril (98:2), Mobilna faza B: 10 mM amonijum format:acetonitril (2:98), Gradijent = 20-100 % B tokom 4 minuta, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B; Temperatura: 27 °C; Protok: 1.0 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
PRIMER 20
8-((2S,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-7-ciklopropil-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0253]
[0254] Rastvoru 8-((2S,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-7-bromo-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (50 mg, 0.086 mmol) u dioksanu (5 mL) su dodati Na3CO3(27.5 mg, 0.259 mmol) i ciklopropilboronska kiselina (14.85 mg, 0.173 mmol). Reakciona smeša je degasirana pod N2i PdCl2(dppf) (6.32 mg, 8.64 µmol) je dodat. Reakciona smeša je zagrevana na 100 °C tokom 16 h. Isparljive supstance su uklonjene iz reakcione smeše. Ostatak je rastvoren u etil acetatu i ispran sa vodom. Vodeni sloj je povratno ekstrahovan sa etil acetatom. Kombinovan organski sloj je ispran sa koncentrovanim rastvorom soli, osušen preko Na2SO4i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC uz sledeće uslove: Kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetata; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetata; Gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 15% B, 15-85% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; Protok: 15 mL/min; Temperatura Kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je izazvano MS signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju 8-((2S,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-7-ciklopropil-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (7.7 mg, 16.5 % prinos); LCMS: m/z = 540.3 (M+H); rt 2.730 min (LCMS Postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% Voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda:95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100 %);<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 8.16-7.98 (m, 2H), 7.60-7.37 (m, 4H), 7.29-7.06 (m, 4H), 4.98 (s, 1H), 4.20 (br. s., 1H), 3.81 (br. s., 1H), 3.53 (s, 3H), 3.20-3.12 (m, 1H), 3.08-2.97 (m, 1H), 2.74 (br. s., 1H), 2.18-2.03 (m, 2H), 1.43 (d, J=5.6 Hz, 1H), 1.10 (d, J=6.6 Hz, 3H), 1.02 (d, J=6.1 Hz, 4H), 0.92-0.79 (m, 1H), 0.71 (dd,J=6.1, 2.9 Hz, 1H).
PRIMER 22
8-((2S,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-l-il)-5,7-dimetil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0255]
[0256] Rastvoru 8-((2S,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-7-bromo-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (50 mg, 0.086 mmol) u dioksanu (4 mL) su dodati K2CO3(35.8 mg, 0.259 mmol) i metil boronska kiselina (7.76 mg, 0.130 mmol). Reakciona smeša je degasirana sa N2tokom 10 min i PdCl2(dppf) (6.32 mg, 8.64 µmol) je dodat. Reakciona smeša je zagrejana na 110 °C tokom 12 h. Isparljive supstance su uklonjene iz reakcione smeše. Ostatak je rastvoren u etil acetatu (50 mL) i ispran sa vodom. Vodeni sloj je povratno ekstrahovan sa etil acetatom (20 mL × 2). Kombinovan organski sloj je ispran sa koncentrovanim rastvorom soli, osušen preko Na2SO4i koncentrovan pod sniženim pritiskom da da sirovi proizvod koji je prečišćen pomoću preparativnog HPLC prečišćavanja (Postupak: Kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Gradijent: zadržavanje od 2 minuta pri 42% B, 42-82% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; Protok: 15 m/min; Temperatura Kolone: 25 °C. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju 8-((2S,SR)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5,7-dimetil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (11.0 mg, 24.8%). LCMS: m/z = 514.3 (M+H); rt 2.647 min. (LCMS Postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda:95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100 %).<1>H NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.20-8.02 (m, 2H), 7.67-7.40 (m, 4H), 7.26-7.02 (m, 4H), 4.98 (s, 1H), 3.99 (br. s., 1H), 3.73 (br. s., 1H), 3.61 (s, 3H), 3.12-2.86 (m, 2H), 2.75 (d, J=7.6 Hz, 1H), 2.21-2.00 (m, 4H), 1.17-0.92 (m, 6H).
INTERMEDIJER 12
2-ciklopropilpirazin
[0257]
[0258] Rastvoru 2-hloropirazina (500 mg, 4.37 mmol) u toluenu (20 mL)/ vodi (2 mL) su dodati Cs2CO3(4267 mg, 13.10 mmol) i ciklopropilboronska kiselina (750 mg, 8.73 mmol). Reakciona smeša je degasirana sa N2tokom 10 min i PdCl2(dppf) (319 mg, 0.437 mmol) je dodat. Reakciona smeša je zagrejana na 110 °C tokom 12 h. Isparljive supstance su uklonjene iz reakcione smeše. Ostatak je rastvoren u etil acetatu i ispran sa vodom. Vodeni sloj je povratno ekstrahovan sa etil acetatom. Kombinovan organski sloj je ispran sa koncentrovanim rastvorom soli, osušen preko Na2SO4i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovo jedinjenje je prečišćeno sa Combi (24 g Silika gel kolona, eluirano sa 30-50 % etil acetata/ petrol etra) da da 2-ciklopropilpirazin (259 mg, 2.156 mmol, 49.4 % prinos); LCMS: m/z = 121.4 (M+H); rt 0.81 min (LCMS Postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minuta, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
INTERMEDIJER 13
2-ciklopropilpiperazin, 2 HCl
[0259]
[0260] Rastvoru 2-ciklopropilpirazina (255 mg, 2.122 mmol) u AcOH (10 mL) dodat je platina (IV) oksid (24.10 mg, 0.106 mmol). Rastvor je mešan na H2atmosferi (Balon) tokom 3 h. Reakciona smeša je filtrirana kroz umetak celita, isprana sa sirćetnom kiselinom i DCM. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Čvrsta supstanca je isprana sa HCl u dioksanu pod sniženim pritiskom da da diHCl so od 2-ciklopropilpiperazina (385 mg, 91 % prinos); LCMS: m/z - 127.2 (M+H); rt 0.361 min (LCMS Postupak: Kinetex XB-C18 (3 x 75 mm) 2.6 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum format:acetonitril (98:2), Mobilna faza B: 10 mM amonijum format:acetonitril (2:98), Gradijent = 20-100 % B tokom 4 minuta, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B; Temperatura: 27 °C; Protok: 1.0 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
INTERMEDIJER 14
1-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-ciklopropilpiperazin
[0261]
[0262] Rastvoru 4,4'-(hlorometilen)bis(fluorobenzena) (0.528 g, 2.213 mmol) u acetonitrilu (10 mL) dodata je HCl so od 2-ciklopropilpiperazina (0.3 g, 1.844 mmol), praćeno DIPEA (1.611 mL, 9.22 mmol). Reakciona smeša je mešana na 85 °C tokom noći. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da se uklone isparljive supstance i rastvorena u etil acetatu i isprana sa vodom. Vodeni sloj je povratno ekstrahovan sa etil acetatom (10 mL × 2).
Kombinovan organski sloj je ispran sa koncentrovanim rastvorom soli, osušen preko Na2SO4i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen putem silika gel hromatografije na ISCO<®>(5-10 % metanol/CHCl3; 24 g kolona) da priušti 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-ciklopropilpiperazin (123 mg, 0.375 mmol, 20.31 % prinos); LCMS: m/z -= 329.2 (M+H); rt 3.645 min (LCMS Postupak: Kolona: Kinetex XB-C18 (3 × 75 mm) 2.6 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum format:acetonitril (98:2), Mobilna faza B: 10 mM amonijum format:acetonitril (2:98), Gradijent = 20-100 % B tokom 4 minuta, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B; Temperatura: 27 °C; Protok: 1.0 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
PRIMERI 23 I 24
8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-ciklopropilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0263]
[0264] Mešanom rastvoru 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (82 mg, 0.247 mmol) u acetonitrilu (7 mL) su dodati DIPEA (0.108 mL, 0.617 mmol) i HCl so od 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-ciklopropilpiperazina (75 mg, 0.206 mmol). Reakciona smeša je mešana na 85 °C tokom noći. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i ostatak je rastvoren u etil acetatu (50 mL). Organski sloj je ispran sa koncentrovanim rastvorom soli, osušen preko Na2SO4i koncentrovan pod sniženim pritiskom (enantiomerska smeša). Individualni enantiomeri su odvojeni koristeći hiralnu HPLC. Hiralna separacija (HPLC Postupak: kolona: Cellulose-C4 (250*21mm) 5 µm; Mobilna faza: 0.1% DEA u metanolu; Detekcija: UV pri 254 nm. Protok: 20 mL/min) enantiomerske smeše je dala individualne enantiomere. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju individualne enantiomere.
[0265] Enantiomer 1 (Primer 23, 5.0 mg, 4.71 % prinos); LCMS: m/z = 512.2 (M+H); rt 2.362 min (LCMS Postupak: kolona: Cellulose-C4 (250*21mm) 5 µm; Mobilna faza: 0.1% DEA u metanolu; Detekcija: UV pri 254 nm. Protok: 20 mL/min);<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.14 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.07 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.54 (dd, J=8.8, 5.6 Hz, 4H), 7.23-7.10 (m, 4H), 6.10 (s, 1H), 4.47 (s, 1H), 4.18 (d, J=10.0 Hz, 1H), 3.66-3.57 (m, 1H), 3.54 (s, 3H), 3.22 (d, J=13.0 Hz, 1H), 2.93-2.82 (m, 2H), 2.37-2.32 (m, 1H).2.22-2.14 (m, 1H), 1.87 (br. s., 1H), 0.41 (dd, J=8.9.4.5 Hz, 1H).0.30 (dd, J=7.7, 4.0 Hz, 1H), -0.11 (dd, J=9.3, 4.9 Hz, 1H), -0.41 (dd, J=9.3, 4.2 Hz, 1H).
[0266] Enantiomer 2: (Primer 24, 4.4 mg, 4.1% prinos); LCMS: m/z = 512.2 (M+H); rt 2.362 min (LCMS Postupak: kolona: Cellulose-C4 (250*21mm) 5 µm; Mobilna faza: 0.1% DEA u metanolu; Detekcija: UV pri 254 nm. Protok: 20 mL/min);<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.14 (d, J=9.0 Hz, 1H), 8.07 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.54 (dd, J=8.7, 5.5 Hz, 4H), 7.22-7.12 (m, 4H), 6.10 (s, 1H), 4.47 (s, 1H), 4.18 (d, J=9.8 Hz, 1H), 3.61 (dd, J=11.9, 9.2 Hz, 1H), 3.54 (s, 3H), 3.22 (d, J=12.2 Hz, 1H), 2.93-2.80 (m, 2H), 2.37-2.32 (m, 1H), 2.23-2.12 (m, 1H), 1.87 (d, J=4.9 Hz, 1H), 0.46-0.37 (m, 1H), 0.34-0.26 (m, 1H), -0.11 (dd, J=9.3,4.4 Hz, 1H), -0.41 (dd, J=9.2, 4.3 Hz, 1H).
INTERMEDIJER 15
terc-butil (2S,SR)-4-(bis(4-hlorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboilat
[0267]
[0268] Rastvoru 4,4'-(bromometilen)bis(hlorobenzena) (0.147 g, 0.467 mmol) u acetonitrilu (2 mL) dodat je terc-butil (2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (0.05 g, 0.233 mmol), praćeno DIPEA (0.122 mL, 0.700 mmol). Reakciona smeša je mešana na 82 °C tokom noći. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da se uklone isparljive supstance, i rastvorena u etil acetatu i isprana sa vodom. Vodeni sloj je povratno ekstrahovan sa etil acetatom (50 mL × 2). Kombinovan organski sloj je ispran sa koncentrovanim rastvorom soli, osušen preko Na2SO4i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen putem silika gel hromatografije na ISCO<®>(5-10 % EtOAc/petrol etar: 12 g kolona) da priušti tercbutil (2S,5R)-4-(bis(4-hlorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (90 mg, 86 % prinos); LCMS: m/z = 451.2 (M+H); rt 2.532 min (Kolona: Kinetex XB-C18 (3 × 75 mm) 2.6 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum format:acetonitril (98:2), Mobilna faza B: 10 mM amonijum format:acetonitril (2:98), Gradijent = 20-100 % B tokom 4 minuta, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B; Temperatura: 27 °C; Protok: 1.0 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
INTERMEDIJER 16
(2R,5S)-1-(bis(4-hlorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin, HCl
[0269]
[0270] Rastvoru terc-butil (2S,SR)-4-(bis(4-hlorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (0.3 g, 0.668 mmol) u DCM (10 mL) dodata je HCl (0.834 mL, 3.34 mmol) u 4 M dioksanu. Reakciona smeša je mešana 3 h. Reakciona smeša je isparena pod sniženim pritiskom i sirov materijal je triturisan sa heksanom. Čvrsta supstanca je filtrirana kroz sinterovani levak i osušena pod vakuumom da da HCl so od (2R,5S)-1-(bis(4-hlorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazina (Sirovina = 286 mg). LCMS: m/z = 349.0 (M+H); rt 1.73 min (Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minuta, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
PRIMER 25
8-((2S,5R)-4-(bis(4-hlorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0272] Mešanom rastvoru 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (0.065 g, 0.194 mmol) u acetonitrilu (2 mL) su dodati DIPEA (0.068 mL, 0.39 mmol) i HCl so od (2R,5S)-1-(bis(4-hlorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazina (0.05 g, 0.13 mmol). Reakciona smeša je mešana na 85 °C tokom noći. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i ostatak je rastvoren u etil acetatu (20 mL). Organski sloj je ispran sa koncentrovanim rastvorom soli, osušen preko Na2SO4i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC uz sledeće uslove: Kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Gradijent: zadržavanje od 2 minuta pri 41% B, 41-82% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; Protok: 15 mL/min; Temperatura Kolone: 25 °C. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju 8-((2S,5R)-4-(bis(4-hlorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (7.3 mg, 10.6 % prinos); LCMS: m/z = 532.1 (M+H); rt 2.636 min (LCMS Postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda:95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100 %);<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.14 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.06 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.57 (d, J=8.3 Hz, 2H), 7.60 (d, J=8.6 Hz, 2H), 7.38 (t, J=8.4 Hz, 4H), 6.00 (s, 1H), 4.71 (s, 1H), 4.60 (br. s., 1H), 3.68 (d, J=11.7 Hz, 1H), 3.61-3.45 (m, 4H), 3.06 (br. s., 1H), 2.92-2.83 (m, 1H), 2.34-2.29 (m, 1H), 1.30 (d, J=6.6 Hz, 3H), 1.06 (d, J=6.6 Hz, 3H).
PRIMER 26
8-((2S,5R)-4-(bis(4-hlorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-7-hloro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0273]
[0274] Mešanom rastvoru 8-((2S,SR)-4-(bis(4-hlorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (40 mg, 0.075 mmol) u DCM (3 mL) dodat je NCS (20.06 mg, 0.150 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom noći. Sirovi LCMS je pokazao formiranje proizvoda. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i ostatak je rastvoren u etil acetatu (20 mL). Organski sloj je ispran sa koncentrovanim rastvorom soli, osušen preko Na2SO4i koncentrovan pod sniženim pritiskom da da sirovi proizvod, koji je koji je prečišćen pomoću preparativne HPLC za prečišćavanje. (HPLC Postupak: Kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 10 % B, 10-45% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; Protok: 15 mL/min; Temperatura Kolone: 25 °C. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju 8-((2S,SR)-4-(bis(4-hlorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)-7-hloro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (25.2 mg, 52%).); LCMS: m/z = 566.2 (M+H); rt 2.873 min. (LCMS Postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda:95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100 %);<1>H NMR (400 MHz, DMSO-ck) δ ppm 8.27-8.07 (m, 2H), 7.59 (d, J=8.6 Hz, 4H), 7.38 (dd, J=8.4, 5.3 Hz, 4H), 4.78 (s, 1H), 4.19 (d, J=9.8 Hz, 1H), 4.11 (br. s., 1H), 3.64 (s, 3H), 3.22-3.05 (m, 1H), 2.98-2.78 (m, 2H), 2.27 (d, J=9.3 Hz, 1H), 1.30 (d, J=6.6 Hz, 3H), 0.97 (d, J=6.1 Hz, 3H).
INTERMEDIJER 17
Etil 3-aminopikolinat
[0275]
[0276] Mešanoj suspenziji 3-aminopikolinske kiseline (150 g, 1086 mmol) u etanolu (1500 mL) na 0-5 °C dodata je H2SO4(463 mL.8688 mmol) kroz 1 L levak za dodavanje tokom 60 min. Nakon završetka dodavanja, reakciona smeša se pretvorila u bistar braon rastvor koji je refluksovan na 90 °C tokom 24 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i sipana na pelete leda u 10 L laboratorijsku čašu sa mešanjem na gornjem delu, alkalisana koristeći NH4OH rastvor (~2 L je potrebno) do pH ~9, i mešana na sobnoj temperaturi tokom 60 min. Čvrsti materijal je zapažen u laboratorijskoj čaši koji je filtriran kroz Bihnerov levak, ispran sa vodom (1 L) i osušen pod linijskim (eng. line) vakuumom da da 60 g proizvoda u vidu žućkaste (eng. off yellow) čvrste supstance. Matična tečnost (eng. mother liquor) je sadržala proizvod koji je ekstrahovan triput koristeći DCM (3 × 1000 mL), Kombinovan organski sloj ispran sa koncentrovanim rastvorom soli (1 × 1.5 L) i zatim osušen preko Na2SO4i koncentrovan da da etil 3-aminopikolinat (116 g, 691 mmol, 63.6 % prinos) uključujući prvih 60 g jedinjenja. LCMS: m/z = 167.2 (M+H); RT 0.783 min; Postupak: Kolona-KINETEX-XB-C18 (75 X 3mm-2.6 µm); Mobilna faza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (98:2); Mobilna faza B: 10 mM amonijum format u vodi:acetonitrilu(2:98); Gradijent: 20-100 % B tokom 4 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B protok 1.5 mL/min; zatim Gradijent: 100-20 % B tokom 0.1 minuta, protok 1.5 mL/min.
INTERMEDIJER 18
Etil 3-acetamidopikolinat
[0277]
[0278] Mešanom rastvoru etil 3-aminopikolinata (115 g, 692 mmol) u THF (1000 mL) dodat je AcaO (588 mL, 6228 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrejana na 60 °C pod atmosferom azota tokom ~7-8 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i isparljive supstance su isparene na temperaturi vodenog kupatila (~ 50 °C) pod linijskim vakuumom, praćeno sirćetnom kiselinom pod visokim vakuumom na 50 °C da daju beličastu (eng. off-white) čvrstu supstancu. Čvrsta supstanca je triturisana sa petrol etrom (500 mL), mešana 30 min na sobnoj temperaturi, zatim filtrirana kroz Bihnerov levak i isprana sa petrol etrom (500 mL) nakon filtracije, osušena pod vakuumom na sobnoj temperaturi tokom 3 h da da etil 3-acetamidopikolinat (139 g, 641 mmol, 93 % prinos) u vidu beličaste čvrste supstance; LCMS: m/z = 209.3 (M+H); rt 0.76 min; LC-MS Postupak: Kolona-KINETEX-XB-C18 (75 × 3mm- 2.6µm); Mobilna faza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (98:2); Mobilna faza B: 10 mM amonijum format u vodi:acetonitrilu (2:98); Gradijent: 20-100 % B tokom 4 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B protok 1.5 mL/min; zatim Gradijent: 100-20 % B tokom 0.1 minuta, protok 1.5 mL/min.
INTERMEDIJER 19
Etil 3-(N-metilacetamido)pikolinat
[0279]
[0280] Mešanoj svetlo braon suspenziji etil 3-acetamidopikolinata (75 g, 360 mmol) i cezijum karbonata (176 g, 540 mmol) u DMF (750 mL) dodat je metil jodid (36.0 mL, 576 mmol) na sobnoj temperaturi (blaga egzotermnost primećena). Rezultujuća delimično braon smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom ∼8 h. Reakcija je kvenčovana sa vodom (1500 mL) [blaga egzotermnost primećena] i ekstrahovana sa DCM (3 X 1000 mL). Razdvojen organski sloj ispran sa vodom (2 × 1000 mL) i vodeni sloj je ponovo ekstrahovan sa DCM (2 × 500 mL). Kombinovani organski rastvori su isprani sa koncentrovanim rastvorom soli (2 × 1000 mL), osušeni preko Na2SO4i koncentrovani na ~50 °C, i zatim osušeni pod vakuumom na ∼60 °C da daju rastvor braon boje (sadrži nešto DMF). Materijal je osušen pod visokim vakuumom da se ukloni DMF na 58° C tokom 25 min da da braon čvrstu supstancu koja je rastvorena u petrol etru (1000 mL), mešana 30 min na sobnoj temperaturi, filtrirana kroz Bihnerov levak, isprana sa petrol etrom (500 mL) nakon filtracije, osušena pod linijskim vakuumom tokom 8 h da da etil 3-(N-metilacetamido)pikolinat (70 g, 302 mmol, 84 % prinos) u vidu braon čvrste supstance; LCMS: m/z = 223.2 (M+H); rt 0.641 min; LC-MS Postupak: Kolona-KINETEX-XB-C18 (75 X 3mm-2.6µm); Mobilna faza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (98:2); Mobilna faza B: 10 mM amonijum format u vodi:acetonitrilu (2:98); Gradijent: 20-100 % B tokom 4 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B protok 1.5 mL/min; zatim Gradijent: 100-20 % B tokom 0.1 minuta, protok 1.5 mL/min.
INTERMEDIJER 20
2-(etoksikarbonil)-3-(N-metilacetamido)piridin 1-oksid
[0281]
[0282] Mešanom braon bistrom rastvoru etil 3-(N-metilacetamido)pikolinata (70 g, 315 mmol) u DCM (700 mL) na 0-5 °C dodat je urea vodonik peroksid (44.4 g, 472 mmol), praćen trifluoroanhidridom sirćetne kiseline (66.7 mL, 472 mmol) polako tokom 40 min kroz 100 mL levak za dodavanje. Reakciona smeša se solidifikovala tokom dodavanja trifluoroanhidrida sirćetne kiseline. Nakon završetka dodavanja, reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom -2 h. Reakcija je kvenčovana sa 10 % NaHCO3rastvorom (700 mL). Reakciona smeša je ekstrahovana sa DCM (3 × 500 mL). Kombinovan organski sloj je ispran sa koncentrovanim rastvorom soli (2 × 500 mL), osušen preko Na2SO4i koncentrovan da da 2-(etoksikarbonil)-3-(N-metilacetamido) piridin 1-oksid (70 g, 285 mmol, 90 % prinos) u vidu svetlo žute čvrste supstance; LCMS: m/z = 239.0 (M+H); rt 0.482 min; LC-MS Postupak: Kolona-KINETEXXB-C18 (75 X 3mm- 2.6 µm); Mobilna faza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (98:2); Mobilna faza B: 10 mM amonijum format u vodi:acetonitrilu (2:98); Gradijent: 20-100 % B tokom 4 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B protok 1.5 mL/min; zatim Gradijent: 100-20 % B tokom 0.1 minuta, protok 1.5 mL/min.
INTERMEDIJER 21
Etil 6-cijano-3-(N-metilacetamido)pikolinat
[0283]
[0284] Mešanom bledo žutom rastvoru etil 3-(N-metilacetamido)-1-(11-oksidanil)-114-piridin-2-karboksilata (50 g, 210 mmol) u DCM (500 mL) na sobnoj temperaturi dodat je trimetilsilil cijanid (39.4 mL, 294 mmol). Reakciona smeša je mešana 10 min i ohlađena je smeša na -10 °C. Potom, je benzoil hlorid (34.1 mL, 294 mmol) dodat kroz 50 mL levak za dodavanje tokom 15 min praćen TEA (41.0 mL, 294 mmol) kroz 50 mL levak za dodavanje polako tokom 20 min. Primećena je egzotermna reakcija tokom TEA dodavanja. Reakciona smeša se pretvorila u turbidnu smešu (TEA so) koja je mešana 2.5 h na istoj temperaturi. Reakcija je kvenčovana sa 10 % NaHCO3rastvorom (500 mL) i ekstrahovana sa DCM (3 × 300 mL). Kombinovan organski rastvor je ispran sa koncentrovanim rastvorom soli (2 × 250 mL) zatim osušen preko Na2SO4i koncentrovan da da svetlo žuti sirovi materijal. Sirovi materijal je prečišćen kroz RediSep silika kolonu normalne faze na ISCO<®>koristeći EA/ petrol etar u vidu eluenta. Proizvod je izolovan pomoću 65-70 % EA/ petrol etara, frakcije su koncentrovane da priušte etil 6-cijano-3-(N-metilacetamido)pikolinat (43 g, 83 % prinos) u vidu svetlo braon tečnosti; LCMS: m/z = 248.0 (M+H); rt 1.255 min; LC-MS Postupak: Kolona-KINETEX-XB-C18 (75 X 3mm- 2.6 µm); Mobilna faza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (98:2); Mobilna faza B: 10 mM amonijum format u vodi:acetonitrilu (2:98); Gradijent: 20-100 % B tokom 4 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B protok 1.5 mL/min; zatim Gradijent: 100-20 % B tokom 0.1 minuta, protok 1.5 mL/min.
INTERMEDIJER 22
8-Hidroksi-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0285]
[0286] Mešanom rastvoru etil 6-cijano-3-(N-metilacetamido)pikolinata (0.9 g, 3.64 mmol) u tetrahidrofuranu (10 mL) dodat je KHMDS (4.80 mL, 4.37 mmol) na -78 °C tokom 10 min. Reakciona smeša je mešana 15 min. Reakciona smeša je polako zagrevana do sobne temperature tokom 30 min i zatim mešana još 90 min. Reakciona smeša je ohlađena do 0 °C. Reakcija je kvenčovana sa zasićenim natrijum bikarbonatnim rastvorom (70 mL). Smeša je razblažena sa etil acetatom (2×100 mL). Vodeni sloj je prikupljen i zakišeljen sa 1.5 N HCL da podesi pH na<™™>3.0. Smeša je mešana 15 min da formira čvrstu masu koja je filtrirana kroz Bihnerov levak da da 8-hidroksi-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril 550 mg, 75 % prinos) u vidu braon čvrste supstance. LCMS: m/z = 202.0 (M+H); rt 0.361 min; LC-MS Postupak: Kolona-KINETEX-XB-C18 (75 X 3 mm- 2.6 µm); Mobilna faza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (98:2); Mobilna faza B: 10 mM amonijum format u vodi:acetonitrilu (2:98); Gradijent: 20-100 % B tokom 4 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B protok 1.5 mL/min; zatim Gradijent: 100-20 % B tokom 0.1 minuta, protok 1.5 mL/min.
INTERMEDIJER 23
8-Hloro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0287]
[0288] Mešanom rastvoru 8-hidroksi-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (0.55 g, 2.73 mmol) u acetonitrilu (10 mL) dodat je POCl3(1.53 mL, 16.4 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 5 min i mešana je 16 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da da sirovi materijal. Reakciona smeša je ohlađena do 0 °C. Reakcija je kvenčovana sa zasićenim natrijum bikarbonatnim rastvorom (50 mL). Reakcija je razblažena sa DCM (3 x 100 mL). Kombinovan organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, filtriran, i isparen pod sniženim pritiskom da da 8-hloro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (0.25 g, 29.1 % prinos) u vidu braon čvrste supstance. LCMS: m/z = 220.2 (M+H); rt 1.528 min; LC-MS Postupak: Kolona-KINETEX-XB-C18 (75 X 3mm- 2.6µm); Mobilna faza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (98:2); Mobilna faza B: 10 mM amonijum format u vodiacetonitrilu (2:98); Gradijent: 20-100 % B tokom 4 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B protok 1.5 mL/min; zatim Gradijent: 100-20 % B tokom 0.1 minuta, protok 1.5 mL/min.
INTERMEDIJER 24
1-(terc-Butil) 3-metil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-1,3-dikarboksilat
[0289]
[0290] Mešanom rastvoru 1-(terc-butil) 3-metil piperazin-1,3-dikarboksilata (0.6 g, 2.46 mmol) u acetonitrilu (8 mL) su dodati DIPEA (1.29 mL, 7.37 mmol) i 4,4'-(hlorometilen)bis(fluorobenzen) (0.703 g, 2.95 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 10 min i mešana je 36 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod visokim vakuumom da da braon gumu. Sirovo jedinjenje je prečišćeno sa ISCO<®>koristeći 24 g silika gel kolonu; 8 %-12 % etilacetat/petrol etar da da 1-(terc-butil) 3-metil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-1,3-dikarboksilat (140 mg, 0.285 mmol, 11.62 % prinos) u vidu braon čvrste supstance. LCMS: m/z = 447.2 (M+H); rt 4.147 min; LC-MS Postupak: Kolona-KINETEX-XB-C18 (75 X 3 mm-2.6 µm); Mobilna faza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (98:2); Mobilna faza B: 10 mM amonijum format u vodi:acetonitrilu (2:98); Gradijent: 20-100 % B tokom 4 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B protok 1.5 mL/min; zatim Gradijent: 100-20 % B tokom 0.1 minuta, protok 1.5 mL/min.
INTERMEDIJER 25
Metil 1-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-2-karboksilat, HCl
[0291]
[0292] Mešani rastvor 1-(terc-butil) 3-metil 4-(bis(4-fluorofenil)metil) piperazin-1,3-dikarboksilata (70 mg, 0.157 mmol) u HCl u dioksanu (1.0 mL, 4.00 mmol) je mešan na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod visokim vakuumom da da HCl so od metil 1-(bis(4-fluorofenil)metil) piperazin-2-karboksilata (49 mg, 53.4 % prinos) u vidu braon čvrste supstance. LCMS: m/z = 347.3 (M+H); rt 1.46 min. LC-MS Postupak: Kolona AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm; Mobilna faza A: Pufer: acetonitril (95:5); Mobilna faza B: Pufer: acetonitril (5:95), Pufer: 10 mM amonijum acetat; Gradijent: 20-100 % B tokom 2.0 minuta, zatim zadržavanje od 0.2 minuta na 100 % B, protok 0.7 mL/min.
PRIMER 27
Metil 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat
[0293]
[0294] Mešanom rastvoru 8-hloro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (22.90 mg, 0.104 mmol) u DMA (1 mL) i t-butanolu (4 mL) dodata je TFA so od metil 1-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-2-karboksilata (40 mg, 0.087 mmol) i cezijum karbonat (85 mg, 0.261 mmol) pod atmosferom azota, praćeno dodavanjem hloro(2-dicikloheksilfosfino-2',6'-diizopropoksi-1,1'-bifenil)[2-(2'-amino-1,1'-bifenil)] paladijum(IT) (3.37 mg, 4.34 µmol). Reakcioni sud je uronjen u uljano kupatilo na 70 °C. Temperatura kupatila je povećana na 90 °C tokom 2 min i reakciona smeša je mešana 16 h. Reakciona smeša je filtrirana kroz sloj celita i koncentrovana je pod visokim vakuumom da da braon gumu. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC uz sledeće uslove: Kolona: Sunfire C18, 19 × 150 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat pH 4.5 sa sirćetnom kiselinom; Mobilna faza B: acetonitril; Gradijent: 30-100 % B tokom 15 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; Tok: 17 mL/min. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju metil 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1 -metil-2-okso-1,2-dihidro- 1,5-nafti ridin-4-il)piperazin-2-karboksilat (3.5 mg, 6.23 µmol, 7.17 % prinos). LCMS: m/z = 530.2 (M+H): rt 2.20 min. LC-MS Postupak: Kolona-X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.16 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.08 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.57 (dd, J=8.8, 5.6 Hz, 2H), 7.42-7.28 (m, 2H), 7.22-7.08 (m, 4H), 6.14 (s, 1H), 5.17 (s, 1H), 4.78 (d, J=12.2 Hz, 1H), 3.64 (d, J=12.0 Hz, 1H), 3.59 (s, 3H), 3.54 (s, 3H), 3.45-3.35 (m, 2H), 3.15(dd, J=12.5, 3.9 Hz, 1H), 3.04 (td, J=11.7, 2.9 Hz, 1H), 2.71-2.63 (m, 1H).
INTERMEDIJER 26
terc-Butil (R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-karboksilat
[0295]
[0296] Mešanom rastvoru terc-butil (R)-3-metilpiperazin-1-karboksilata (1.0 g, 4.99 mmol) u acetonitrilu (10 mL) su dodati DIPEA (2.62 mL, 14.98 mmol) i 4,4'-(hlorometilen) bis(fluorobenzen) (1.4 g, 6 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 10 min i mešana je 16 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod visokim vakuumom da da braon gumu. Sirovo jedinjenje je prečišćeno sa ISCO<®>(koristeći 24 g silika gel kolonu; koristeći 8-12 % etilacetat/ petrol etar) da da terc-butil (R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-karboksilat (1.45 g, 72.2 % prinos) u vidu braon čvrste supstance. LCMS: m/z = 403.2 (M+H); rt 1.127 min; LC-MS Postupak: Kolona-KINETEX-XB-C18 (75 X 3 mm- 2.6µm); Mobilna faza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (98:2); Mobilna faza B: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (2:98); Gradijent: 80 % B tokom 0.5 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 2.5 minuta na 98% B protok 1.0 mL/min; zatim Gradijent: 98 % B tokom 1 minuta, protok 1.0 mL/min.
INTERMEDIJER 27
(R)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-metilpiperazin, TFA
[0297]
[0298] Mešanom rastvoru terc-butil (R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-karboksilata (0.45 g, 1.118 mmol) u DCM (8 mL) dodat je TFA (0.431 mL, 5.59 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod visokim vakuumom da da braon gumu. Ostatak je triturisan sa DCM i petrol etrom i mešan je 15 min da da braon čvrstu supstancu koja je filtrirana kroz Bihnerov levak da da TFA so od (R)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-metilpiperazina (320 mg, 56.4 % prinos) u vidu braon čvrste supstance. LCMS: m/z = 303.2 (M+H); rt 2.409 min; LC-MS Postupak: Kolona-KINETEX-XB-C18 (75 × 3 mm- 2.6µm); Mobilna faza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (98:2); Mobilna faza B: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu(2:98); Gradijent: 20-100 % B tokom 4 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B protok 1.5 mL/min; zatim Gradijent: 100-20 % B tokom 0.1 minuta, protok 1.5 mL/min.
PRIMER 28
(R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0299]
[0300] Mešanom rastvoru 8-hloro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (40 mg, 0.182 mmol) i cezijum karbonata (178 mg, 0.546 mmol) u DMA (1 mL) i t-butanolu (4 mL) dodata je TFA so od (R)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-metilpiperazina (76 mg, 0.182 mmol) pod atmosferom azota, praćeno dodavanjem hloro(2-dicikloheksilfosfino-2',6'-diizopropoksi-1,1'-bifenil)[2-(2'-amino-1,1'-bifenil)] paladijuma(II) (7.07 mg, 9.11 µmol). Reakcioni sud je uronjen u uljano kupatilo na 70 °C. Temperatura kupatila je povećana na 90 °C tokom 2 min i reakciona smeša je mešana 16 h. Reakciona smeša je filtrirana kroz sloj celita i koncentrovana pod visokim vakuumom da da braon gumu. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC uz sledeće uslove: Kolona: Sunfire C18, 19 x 150 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat pH 4.5 sa sirćetnom kiselinom; Mobilna faza B: acetonitril; Gradijent: 30-100 % B tokom 15minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; Tok: 17 mL/min. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (6.0 mg, 6.5 % prinos). LCMS: m/z = 486.2 (M+H); rt 2.33 min.LC-MS Postupak: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.12-8.16 (m, 1 H), 8.05-8.08 (m, 1 H), 7.50-7.57 (m, 4 H), 7.12-7.18 (m, 4 H), 6.08 (s, 1 H), 4.85 (s, 1 H), 3.97-4.10 (m, 1 H), 3.52-3.59 (m, 4 H), 3.08-3.20 (m, 2 H), 2.95-3.02 (m, 1 H), 2.69-2.74 (m, 1 H), 2.44-2.48 (m, 1 H), 1.18 (d, J=6.4 Hz, 3 H).
PRIMER 29
(R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-7-hloro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0301]
[0302] Mešanom rastvoru (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (40 mg, 0.082 mmol) u DCM (5 mL) dodat je NCS (22.00 mg, 0.165 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Reakcija je kvenčovana sa vodom (5 mL). Reakciona smeša je razblažena sa etil acetatom (3x10 mL). Kombinovan organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, filtriran i isparen pod sniženim pritiskom da da braon ulje. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC uz sledeće uslove: Kolona: Sunfire C18, 19 × 150 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat pH-4.5 sa sirćetnom kiselinom; Mobilna faza B: acetonitril; Gradijent: 30-100 % B tokom 15 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; Tok: 17 mL/min. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-7-hloro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (18.0 mg, 42.0 % prinos); LCMS: m/z = 520.2 (M+H); rt 2.475 min. LC-MS Postupak: Kolona-X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.17 (q, J=8.8 Hz, 2H), 7.55 (dd, J=10.5, 8.6 Hz, 2H), 7.57(dd, J=10.4, 8.7 Hz, 2H), 7.15 (td, J=8.8, 1.7 Hz, 4H), 4.86 (s, 1H), 3.85 (dd, J=12.0, 2.7 Hz,1H), 3.74-3.53 (m, 4H), 3.47-3.33 (m, 2H), 2.93 (t, J=9.5 Hz, 2H), 2.44 (d, J=11.5 Hz, 1H),1.04 (d, J=6.6 Hz, 3H).
PRIMER 30
(R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-7-fluoro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0303]
[0304] Mešanom rastvoru (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (40 mg, 0.082 mmol) u acetonitrilu (6 mL) na 0 °C dodat je 1-hlorometil-4-fluoro-14-diazoniabiciklo 2.2.2 oktan bis(tetrafluoroborat) (37.9 mg, 0.107 mmol) u THF\H2O (0.510.5 mL) kap po kap na 0 °C. Reakciona smeša je mešana 1.5 h. Reakciona smeša je polako zagrevana do sobne temperature i mešana je još 1.5 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da da braon ulje. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC uz sledeće uslove: Kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 10 % B, 10-40 % B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; Protok: 15 mL/min; Temperatura Kolone: 25 °C. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-7-fluoro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (2.2 mg, 5.3 % prinos); LCMS: m/z = 504.2 (M+H); rt 2.385 min. LC-MS Postupak: Kolona-X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.11-8.19 (m, 2 H), 7.50-7.59 (m, 4 H), 7.11-7.20 (m, 4 H), 4.86 (s, 1 H), 3.49-3.65 (m, 6 H), 3.43 (br d, J=2.0 Hz, 1 H), 2.91-2.98 (m, 1 H), 2.72-2.79 (m, 1 H), 2.41-2.47 (m, 1 H), 1.15 (d, J=6.4 Hz, 3 H).
INTERMEDIJER 28
6-Bromo-3-cijano-1 -metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat
[0305]
[0306] Mešanom rastvoru 6-bromo-1-metil-2,4-diokso-1,2,3,4-tetrahidro-1,5-naftiridin-3-karbonitrila (0.6 g, 2.14 mmol) u DCM (8 mL) su dodati TEA (0.896 mL, 6.43 mmol) i DMAP (0.026 g, 0.214 mmol) na 0 °C, praćeno dodavanjem anhidrida trifluorometansulfonske kiseline (0.724 mL, 4.28 mmol). Reakciona smeša je polako zagrevana do sobne temperature i mešana je 3 h. Reakcija je kvenčovana sa vodom (50 mL). Reakciona smeša je razblažena sa DCM (3×100 mL). Kombinovan organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, filtriran i isparen pod sniženim pritiskom da da braon čvrstu supstancu. Sirovo jedinjenje je triturisano sa DCM i heksanom (1:4) da da 6-bromo-3-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (700 mg, 79 % prinos) u vidu braon čvrste supstance; LCMS: m/z = 414.1 (M+H); rt 0.65 min. LC-MS Postupak: Kolona- AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm; Mobilna faza A: Pufer: acetonitril (95:5); Mobilna faza B: Pufer: acetonitril (5:95), Pufer: 10 mM amonijum acetat; Gradijent: 20-100 % B tokom 2.0 minuta, zatim zadržavanje od 0.3 minuta pri 100 % B, protok 0.7 mL/min.
PRIMER 31
(R)-4-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril
[0307]
[0308] Mešanom rastvoru 6-bromo-3-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (100 mg, 0.243 mmol) u acetonitrilu (8 mL) su dodati DIPEA (0.127 mL, 0.728 mmol) i HCl so od (R)-1-(bis(4-fluorofenil) metil)-2-metilpiperazina (82 mg, 0.243 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 5 min i mešana je 1 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod visokim vakuumom da da braon gumu. Sirovo jedinjenje je prečišćeno sa ISCO<®>koristeći 12 g silika gel kolonu; 60-67 % etil acetat/ petrol etar da da (R)-4-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril (90 mg, 42.7 % prinos) kao braon gumu; LCMS: m/z = 566.0 (M+2H); rt 2.23 min. LC-MS Postupak: Kolona- AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm; Mobilna faza A: Pufer: acetonitril (95:5); Mobilna faza B: Pufer: acetonitril (5:95), Pufer: 10 mM amonijum acetat; Gradijent: 20-100 % B tokom 2.0 minuta, zatim zadržavanje od 0.2 minuta na 100 % B, protok 0.7 mL/min.
PRIMER 32
(R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril
[0309]
[0310] Mešanom rastvoru (R)-4-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitrila (90 mg, 0.159 mmol) u NMP (5 mL) su dodati cink (2.085 mg, 0.032 mmol) i cink cijanid (37.4 mg, 0.319 mmol) pod azotom. Pročišćavanje (eng. purging) azotom je nastavljeno 3 min i dppf (5.30 mg, 9.57 µmol) i Pd2(dba)3(14.6 mg, 0.016 mmol) su dodati. Reakciona smeša je zagrejana do 80 °C tokom 5 min i mešana je 4 h. Reakciona smeša je filtrirana kroz sloj celita i koncentrovana je pod visokim vakuumom da da braon gumu. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC. HPLC Postupak: Kolona- SUNFIRE C18 (150 mm x 19 mm ID, 5 µm); Mobilna faza A: 10 mM Amonijum acetat u vodi; Mobilna faza B: acetonitril; Gradijent: 40-60 % B tokom 3.0 minuta, protok 17 mL/min, zatim zadržavanje od 17 minuta pri 60-100 % B protok 17 mL/min. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i koncentrovane pod visokim vakuumom. Zatim je uzorak razblažen sa (EtOH\H2O, 1:3) i liofilizovan je tokom noći da da (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (50 mg, 61.4 % prinos) kao bledo žuta čvrsta supstanca. LCMS: m/z = 511.2 (M+H); rt 3.520 min. LC-MS Postupak: Kolona-KINETEX-XB-C18 (75 x 3 mm- 2.6µ); Mobilna faza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (98:2); Mobilna faza B: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (2:98); Gradijent: 20-100 % B tokom 4 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B protok 1.5 mL/min; zatim Gradijent: 100-20 % B tokom 0.1 minuta, protok 1.5 mL/min.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.26 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.15 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.56 (dd, J=11.9, 8.7 Hz, 2H), 7.57 (dd, J=11.7, 8.8 Hz, 2H), 7.16 (t, J=8.9 Hz, 4H), 4.90 (s, 1H), 4.10 (d,J=13.0 Hz, 1H), 4.01 (d, J=12.5 Hz, 1H), 3.86 (dd, J=122, 2.9 Hz, 1H), 3.66-3.55 (m, 1H),3.53 (s, 3H), 3.08-2.97 (m, 1H), 2.97-2.90 (m, 1H), 2.90 (s, 1H), 1.03 (d, J=6.6 Hz, 3H).
INTERMEDIJER 29
4,4'-(bromometilen)bis(hlorobenzen).
[0311]
[0312] Mešanom rastvoru bis(4-hlorofenil)metanola (0.75 g, 2.96 mmol) u DCM (10 mL) dodat je BBr3u DCM (3.6 mL, 3.60 mmol) kap po kap na 0 °C. Reakciona smeša je mešana 1 h. Reakcija je kvenčovana sa vodom (50 mL) i razblažena sa etil acetatom (3×100 mL). Kombinovan organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, filtriran i isparen pod sniženim pritiskom da da 4,4'-(bromometilen)bis(hlorobenzen) (700 mg, 74.8 % prinos) u vidu braon čvrste supstance. LC-MS Postupak: Kolona-KINETEX-XB-C18 (75 X 3 mm- 2.6 µm); Mobilna faza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (98:2); Mobilna faza B: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (2:98); Gradijent: 40-100 % B tokom 25 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B protok 1.5 mL/min; zatim Gradijent: 100 % B tokom 2 minuta, protok 1.5 mL/min; Gradijent: 100 % B tokom 4 minuta, protok 1.5 mL/min.
INTERMEDIJER 30
terc-butil (R)-4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-karboksilat
[0313]
[0314] Mešanom rastvoru terc-butil (R)-3-metilpiperazin-1-karboksilata (100 mg, 0.5 mmol) u acetonitrilu (6 mL) dodat je DIPEA (0.262 mL, 1.5 mmol) i 4,4'-(bromometilen)bis(hlorobenzen) (237 mg, 0.75 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 10 min i mešana je 16 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod visokim vakuumom da da braon gumu. Sirovo jedinjenje je prečišćeno sa ISCO<®>(koristeći 24 g silika gel kolonu; koristeći 8-12 % etilacetat/petrol etar) da da terc-butil (R)-4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-karboksilat (180 mg, 83 % prinos) kao braon gumu; LCMS: m/z = 437.2 (M+H); rt 1.945 min. LC-MS Postupak: Kolona-KINETEX-XB-C18 (75 × 3 mm- 2.6 µm); Mobilna faza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (98:2); Mobilna faza B: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (2:98); Gradijent: 80 % B tokom 0.5 minuta, protok 1.0 mL/min, 80-98% B tokom 2.5 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 1.0 minuta pri 98% B protok 1.0 mL/min.
INTERMEDIJER 31
(R)-1-(bis(4-hlorofenil)metil)-2-metilpiperazin, HCl
[0315]
[0316] Mešanom rastvoru terc-butil (R)-4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-karboksilata (130 mg, 0.3 mmol) u HCl u dioksanu (5.0 mL, 165 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod visokim vakuumom da da HCl so od (R)-1-(bis(4-hlorofenil)metil)-2-metilpiperazina (105 mg, 95 % prinos) u vidu braon čvrste supstance; LCMS: m/z = 337.0 (M+H); rt 2.457 min. LC-MS Postupak: Kolona-KINETEX-XB-C18 (75 X 3 mm- 2.6 µm); Mobilna faza A: 0.1%TFA u Milli-Q vodi; Mobilna faza B: 0.1%TFA u acetonitrilu; Gradijent: 20-100 % B tokom 4.0 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B protok 1.5 mL/min, 100-20 % B tokom 0.1 minuta, protok 1.5 mL/min.
INTERMEDIJER 32
6-Cijano-1 -metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat
[0317]
[0318] Smeši 8-hidroksi-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (0.3 g, 1.49 mmol), DMAP (0.018 g, 0.15 mmol) i TEA (0.312 mL, 2.24 mmol) u DCM (30 mL) je dodat kap po kap anhidrid trifluorometansulfonske kiseline (0.269 mL, 1.640 mmol) u DCM (3 mL) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana 3 h. Reakciona smeša je razblažena sa DCM, isprana sa vodom, organski sloj je osušen preko Na2SO4, filtriran i isparen pod sniženim pritiskom da da 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (0.45 g, 81 % prinos) kao bledo žutu čvrstu supstancu; LCMS: m/z = 334.2 (M+H); rt 1.40 min. LC-MS Postupak: Kolona-AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm)1.7 µm; Mobilna faza A: Pufer: acetonitril (95:5); Mobilna faza B: Pufer: acetonitril (5:95), Pufer: 10 mM amonijum acetat; Gradijent: 20-100 % B tokom 2.0 minuta, zatim zadržavanje od 0.2 minuta na 100 % B, protok 0.7 mL/min.
PRIMER 34
(R)-8-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-7-fluoro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0319]
[0320] Mešanom rastvoru (R)-8-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (45 mg, 0.087 mmol) u acetonitrilu (6 mL) na 0 °C dodat je 1-hlorometil-4-fluoro-1 4-diazoniabiciklo 2.2.2 oktan bis(tetrafluoroborat) (40.0 mg, 0.113 mmol) u THF/H2O (0.5/0.5 mL) kap po kap. Reakciona smeša je mešana 1.5 h. Reakciona smeša je polako zagrevana do sobne temperature i je mešana još 1.5 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da da braon ulje. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC uz sledeće uslove: Kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Gradijent: zadržavanje od 10 minuta pri 10 % B, 10-40 % B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; Protok: 15 mL/min; Temperatura Kolone: 25 °C. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju (R)-8-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-7-fluoro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1 mg, 2.2 % prinos). LCMS: m/z = 536.2 (M+H); rt 2.69 min. LC-MS Postupak: Kolona-X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.21-8.09 (m, 2H), 7.52 (d, J=8.6 Hz, 2H), 7.56 (d, J=8.3 Hz,2H), 7.39 (dd, J=8.6, 2.2 Hz, 4H), 4.87 (s, 1H), 3.67-3.54 (m, 4H), 3.52 (d,J=12.5 Hz, 2H), 2.92 (d, J=14.4 Hz, 2H), 2.78 (d, 7=10.8 Hz, 1H), 1.15 (d, J=6.4 Hz, 3H). Jedan proton se spojio sa pikom rezidualnog rastvarača.
INTERMEDIJER 33
terc-butil (S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-karboksilat
[0321]
[0322] Mešanom rastvoru terc-butil (S)-3-metilpiperazin-1-karboksilata (2.0 g, 10 mmol) u acetonitrilu (20 mL) su dodati DIPEA (5.23 mL, 30 mmol) i 4,4'-(hlorometilen)bis(fluorobenzen) (3.57 g, 15 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 50 °C tokom 3 min i mešana 16 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod visokim vakuumom da da sirovi proizvod, koji je prečišćen pomoću ISCO<®>(koristeći 40 g silika gel kolonu; koristeći 8-12 % etil acetat/ petrol etar) da da terc-butil (S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-karboksilat (1.0 g, 24.9 % prinos) u vidu braon čvrste supstance; LCMS: m/z = 403.3 (M+H); rt 3.01 min; LC-MS Postupak: Kolona-KINETEX-XB-C18 (75 × 3 mm- 2.6 µm); Mobilna faza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (98:2); Mobilna faza B: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (2:98); Gradijent: 20-100 % B tokom 4 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B protok 1.5 mL/min; zatim Gradijent: 100-20 % B tokom 0.1 minuta, protok 1.5 mL/min.
INTERMEDIJER 34
(S)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-metilpiperazin
[0323]
[0324] Mešanom rastvoru terc-butil (S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-karboksilata (1.0 g, 2.485 mmol) u HCl u dioksanu (3.0 mL, 12.00 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod visokim vakuumom da da HCl so od (S)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-metilpiperazina (0.7 g, 86 % prinos) u vidu braon čvrste supstance; LCMS: m/z -- 303.2 (M+H); rt 1.834 min. LC-MS Postupak: Kolona-KINETEX-XB-C18 (75 × 3 mm- 2.6 µm); Mobilna faza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (98:2); Mobilna faza B: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (2:98); Gradijent: 20-100 % B tokom 4 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B protok 1.5 mL/min; zatim Gradijent: 100-20 % B tokom 0.1 minuta, protok 1.5 mL/min.
PRIMER 35
(S)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0325]
[0326] Mešanom rastvoru 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (70 mg, 0.210 mmol) u acetonitrilu (8 mL) su dodati DIPEA (0.110 mL, 0.630 mmol) i HCl so od (S)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-metilpiperazina (71.2 mg, 0.21 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 5 min i mešana je 2 h. Reakciona smeša je filtrirana i koncentrovana pod visokim vakuumom da da braon gumu. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC uz sledeće uslove: Kolona: Sunfire C18, 19 x 150 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: acetonitril; Gradijent: 30-100 % B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; Tok: 17 mL/min. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da priušte (S)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (25 mg, 24.2 % prinos); LCMS: m/z = 486.3 (M+H); rt 2.218 min. LC-MS Postupak: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-tk) δ ppm 8.14 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.06 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.63-7.42 (m,4H), 7.24-7.04 (m, 4H), 6.07 (s, 1H), 4.85 (s, 1H), 4.02 (d, J=11.7 Hz, 1H), 3.65-3.44 (m,4H), 3.23-3.04 (m, 2H), 3.04-2.93 (m, 1H), 2.79-2.64 (m, 2H),, 1.17 (d,J=6.4 Hz, 3H).
PRIMER 36
(S)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-7-hloro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0327]
[0328] Mešanom rastvoru (S)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (30 mg, 0.062 mmol) u DCM (4 mL) dodat je NCS (16.50 mg, 0.124 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Reakcija je kvenčovana sa vodom (5 mL). Reakciona smeša je razblažena sa etil acetatom (3 × 10 mL). Kombinovan organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, filtriran i isparen pod sniženim pritiskom da da braon ulje. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC uz sledeće uslove: Kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Gradijent: zadržavanje od 2 minuta pri 34% B, 34-75% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; Protok: 15 mL/min; Temperatura Kolone: 25 °C. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju (S)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-7-hloro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (21 mg, 64.8 % prinos); LCMS: m/z = 520.2 (M+H); rt 2.937 min. LC-MS Postupak: Kolona-X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.17 (q, J=8.8 Hz, 2H), 7.55 (dd, J=10.5, 8.8 Hz, 2H), 7.57(dd, J=10.5, 8.8 Hz, 2H), 7.15 (td, J=8.8, 1.5 Hz, 4H), 4.86 (s, 1H), 3.85 (dd, J=12.0, 2.7 Hz, 1H, 3.71-3.55 (m, 4H), 3.47-3.32 (m, 2H), 3.03-2.82 (m, 2H), 2.44 (d, J=11.5 Hz, 1H), 1.04(d, J=6.6 Hz, 3H).
PRIMER 37
(S)-4-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril
[0329]
[0330] Mešanom rastvoru 6-bromo-3-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (100 mg, 0.243 mmol) u acetonitrilu (8 mL) su dodati DIPEA (0.127 mL, 0.728 mmol) i TFA so od (S)-1-(bis(4-fluorofenil) metil)-2-metilpiperazina (101 mg, 0.243 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 5 min i mešana je 2 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod visokim vakuumom da da braon gumu. Sirovo jedinjenje je prečišćeno sa ISCO<®>(koristeći 12 g silika gel kolonu; koristeći 12-15 % etil acetat/ petrol etar) da da (S)-4-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-6-bromo-1 -metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril (100 mg, 67.9 % prinos) u vidu braon čvrste supstance; LCMS: m/z = 564.0 (M+H); rt 3.958 min. LC-MS Postupak: Kolona-KINETEX-XB-C18 (75 × 3 mm- 2.6 µm); Mobilna faza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (98:2); Mobilna faza B: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (2:98); Gradijent: 20-100 % B tokom 4 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B protok 1.5 mL/min; zatim Gradijent: 100-20 % B tokom 0.1 minuta, protok 1.5 mL/min.
PRIMER 38
(S)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril
[0331]
[0332] Mešanom rastvoru (S)-4-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril (80 mg, 0.142 mmol) u NMP (5 mL) su dodati cink (1.853 mg, 0.028 mmol) i cink cijanid (33.3 mg, 0.283 mmol) pod azotom. Pročišćavanje azotom je nastavljeno 3 min., dppf (4.71 mg, 8.50 µmol) i Pd2(dba)3(12.98 mg, 0.014 mmol) su dodati, i pročišćavanje je nastavljeno još 3 min. Reakciona smeša je zagrejana do 80 °C tokom 5 min i mešana je 1 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da da braon ulje. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativnog HPLC postupka: Kolona- Sunfire C18 (150 × 4.6 mm) 5 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat običan u vodi; Mobilna faza B: acetonitril; Gradijent: 30-60 % B tokom 2.0 minuta, protok 20 mL/min, zatim zadržavanje od 18 minuta pri 60-100 % B protok 20 mL/min. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju (S)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (20 mg, 27.1 % prinos); LCMS: m/z -= 511.2 (M+H); rt 2.158 min.LC-MS Postupak: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.25 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.15 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.56 (dd, J=11.9, 3.1 Hz, 2H), 7.56 (dd, J=14.2, 12.0 Hz, 2H), 7.16 (t, J=8.9 Hz, 4H), 4.91 (s, 1H), 4.10(d, J=13.2 Hz, 1H), 4.01 (d, J=12.2 Hz, 1H), 3.90-3.80 (m, 1H), 3.68-3.55 (m, 1H), 3.53 (s,3H), 3.09-2.97 (m, 1H), 2.92 (t, J=10.0 Hz, 1H), 2.57-2.52 (m, 1H), 1.04 (d,J=6.4 Hz, 3H).
PRIMERI 39 I 40
Metil 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat
[0333]
[0334] Mešanom rastvoru 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (130 mg, 0.39 mmol) u acetonitrilu (8 mL) su dodati DIPEA (0.204 mL, 1.17 mmol) i HCl so od metil 1-(bis(4-fluorofenil)metil) piperazin-2-karboksilata (149 mg, 0.390 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 5 min i mešana je 1 h na istoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da da braon gumu. Sirovo jedinjenje je prečišćeno sa ISCO<®>(24 g silika gel kolona; koristeći 60-64 % etilacetat/petrol etar) da da metil 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat (racemat) u vidu braon čvrste supstance. Enantiomeri su odvojeni koristeći hiralnu HPLC. Postupak hiralne separacije: Kolona-DAD-1: (R, R) Whelk-01 (250 × 4.6 mm), 5 µm; DAD-2: CHIRALPAK AD-H (250 x 4.6mm), 5µ; Postupak: 4.0_50_120; Ko-rastvarač: 0.2% amonijak u metanolu.
[0335] Primer 39: Enantiomer 1: (14.2 mg, 35.1 % prinos); LCMS: m/z = 530.2 (M+H); rt 2.210 min; LC-MS Postupak: Kolona-X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.15 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.08 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.64-7.50 (m,2H), 7.43-7.29 (m, 2H), 7.23-7.05 (m, 4H), 6.14 (s, 1H), 5.17 (s, 1H), 4.78 (d, J=12.5 Hz,1H), 3.64 (d, J=11.0 Hz, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.54 (s, 3H), 3.46-3.34 (m, 2H), 3.15 (dd, J=12.3,4.0 Hz, 1H), 3.04 (td, J=11.9, 3.3 Hz, 1H), 2.71-2.62 (m, 1H).
[0336] Primer 40: Enantiomer 2; (15.4 mg, 38.1 % prinos); LCMS: m/z = 530.2 (M+H); rt 2.210 min; LC-MS Postupak: Kolona-X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.15 (d, J=9.0 Hz, 1H), 8.08 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.57 (dd, J=8.8, 5.6 Hz, 2H), 7.43-7.32 (m, 2H), 7.25-7.05 (m, 4H), 6.14 (s, 1H), 5.17 (s, 1H), 4.78 (d,J=12.5 Hz, 1H), 3.64 (d, J=10.5 Hz, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.54 (s, 3H), 3.45-3.36 (m, 2H), 3.15(dd, J=12.6, 4.0 Hz, 1H), 3.09-2.99 (m, 1H), 2.71-2.63 (m, 1H).
INTERMEDIJER 35
1-(Bis(4-fluorofenil)metil)-4-(terc-butoksikarbonil)piperazin-2-karboksilna kiselina
[0337]
[0338] Mešanom rastvoru 1-(terc-butil) 3-metil 4-(bis(4-fluorofenil)metil) piperazin-1,3-dikarboksilata (750 mg, 1.680 mmol) u tetrahidrofuranu (6 mL) i vodi (3 mL) dodat je LiOH (201 mg, 8.40 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 60 °C tokom 5 min i mešana je 36 h.
Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, zatim zakišeljena sa 1.5 N HCl da podesi pH na -6. Reakcija je kvenčovana sa vodom (50 mL). Reakciona smeša je razblažena sa DCM (3×100 mL). Kombinovan organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, filtriran i isparen pod sniženim pritiskom da da 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(tercbutoksikarbonil)piperazin-2-karboksilnu kiselinu (520 mg, 44.4 % prinos) kao braon ulje. LCMS: m/z = 431.5 (M-H); rt 1.45 min.LC-MS Postupak: Kolona- AQU1TY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm)1.7 µm; Mobilna faza A: Pufer: acetonitril (95:5); Mobilna faza B: Pufer: acetonitril (5:95), Pufer: 10 mM amonijum acetat; Gradijent: 20-100 % B tokom 2.0 minuta, zatim zadržavanje od 0.2 minuta na 100 % B, protok 0.7 mL/min.
INTERMEDIJER 36
terc-Butil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-karbamoilpiperazin-1-karboksilat
[0339]
[0340] Mešanom rastvoru 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(terc-butoksikarbonil) piperazin-2-karboksilne kiseline (0.25 g, 0.58 mmol) u DMF (5 mL) su dodati DIPEA (0.303 mL, 1.73 mmol) i HATU (0.33 g, 0.87 mmol). Reakciona smeša mešana je 5 min i amonijum hlorid (0.046 g, 0.87 mmol) je dodat. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Reakcija je kvenčovana sa vodom (50 mL) i razblažena sa etil acetatom (3×100 mL). Kombinovan organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, filtriran i isparen pod sniženim pritiskom da da terc-butil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-karbamoilpiperazin-1-karboksilat (280 mg, 43.8 % prinos) kao braon gumu. LCMS: m/z = 432.4 (M+H); rt 1.78 min. LC-MS Postupak: Kolona- AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm; Mobilna faza A: Pufer: acetonitril (95:5); Mobilna faza B: Pufer: acetonitril (5:95), Pufer: 10 mM amonijum acetat; Gradijent: 20-100 % B tokom 2.0 minuta, zatim zadržavanje od 0.3 minuta pri 100 % B, protok 0.7 mL/min.
INTERMEDIJER 37
1 -(Bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-2-karboksamid, HCl
[0341]
[0342] Rastvor terc-butil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-karbamoilpiperazin-1-karboksilata (200 mg, 0.464 mmol) u HCl u dioksanu (1.0 mL, 4.00 mmol) je mešan na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod visokim vakuumom da da HCl so od 1-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-2-karboksamida (200 mg, 64.5 % prinos) u vidu braon čvrste supstance. LCMS: m/z = 332.3 (M+H); rt 1.06 min. LC-MS Postupak: Kolona- AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm)1.7 µm; Mobilna faza A: Pufer: acetonitril (95:5); Mobilna faza B: Pufer: acetonitril (5:95), Pufer: 10 mM amonijum acetat; Gradijent: 20-100 % B tokom 2.0 minuta, zatim zadržavanje od 0.2 minuta na 100 % B, protok 0.7 mL/min.
PRIMERI 41 I 42
1 -(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1 -metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5 -naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksamid
[0343]
[0344] Mešanom rastvoru 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (80 mg, 0.24 mmol) u acetonitrilu (9 mL) su dodati DIPEA (0.13 mL, 0.72 mmol) i HCl so od 1-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-2-karboksamida (88 mg, 0.24 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 5 min i mešana je 1 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da da braon gumu. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC uz sledeće uslove: Kolona: Sunfire C18, 19 × 150 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat pH-4.5 sa sirćetnom kiselinom; Mobilna faza B: acetonitril; Gradijent: 20-100 % B tokom 16 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; Tok: 17 mL/min. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju proizvod u vidu enantiomerske smeše. Enantiomeri su odvojeni koristeći hiralnu HPLC. Postupak hiralne separacije: Kolona: Lux Cellulose-4 (250 X 4.6) mm, 5.0 µm; Izokratski režim, Ko-rastvarač: 0.2% NH4OH u metanolu acetonitril (1:1); procenat ko-rastvarača: 50 %, Temperatura Kolone: 30 °C; Povratni Pritisak: 100 bara; Ukupni Protok: 4 g/min. enantiomerske smeše je priuštilo Enantiomer 1 i Enantiomer 2.
[0345] Primer 41: Enantiomer 1 (3.6 mg, 2.9 % prinos); LCMS: m/z = 515.2 (M+H); rt 1.788 min; LC-MS Postupak: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.47 (s, 1 H), 8.13-8.17 (m, 1 H), 8.04-8.08 (m, 1 H), 7.63-7.76 (m, 1 H), 7.54-7.63 (m, 4 H), 7.15 (m, J=8.8, 8.8, 3.9 Hz, 4 H).6.04 (s, 1 H), 5.33 (s, 1 H), 4.18 (br d, J=9.5 Hz, 1 H), 3.72-3.81 (m, 1 H), 3.62-3.70 (m, 1 H), 3.52 (s, 3 H), 3.20-3.27 (m, 2 H), 3.15-3.18 (m, 1 H), 2.54-2.57 (m, 1 H).
[0346] Primer 42: Enantiomer 2: (4.1 mg, 3.3 % prinos); LCMS: m/z = 515.2 (M+H); rt 1.788 min; LC-MS Postupak: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.47 (s, 1 H), 8.13-8.16 (m, 1 H), 8.04-8.08 (m, 1 H), 7.70-7.75 (m, 1 H), 7.54-7.64 (m, 4 H), 7.13-7.19 (m, 4 H), 6.04 (s, 1 H), 5.33 (s, 1 H), 4.15-4.22 (m, 1 H), 3.73-3.80 (m, 1 H), 3.62-3.70 (m, 1 H), 3.52 (s, 3 H), 3.35-3.40 (m, 1 H), 3.14-3.29 (m, 3 H).
PRIMER 43
8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-cijanopiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0347]
[0348] Mešanom rastvoru 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksamida (0.02 g, 0.039 mmol) u DCM (5 mL) dodat je TEA (0.022 mL, 0.155 mmol) na 0 °C, praćeno dodavanjem TFAA (10.98 µL, 0.078 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do sobne temperature i mešana je 1 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC uz sledeće uslove: Kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Gradijent: zadržavanje od 2 minuta pri 30 % B, 30-75% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; Protok: 15 mL/min; Temperatura Kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je izazvano MS signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-cijanopiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (5.2 mg, 25.9 % prinos); LCMS: m/z = 497.2 (M+H); rt 2.056 min; LC-MS Postupak: Kolona- × Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.18 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.11 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.63 (dd, J=8.6, 5.4 Hz, 2H), 7.55 (dd, J=8.9.5.5 Hz, 2H), 7.29-7.11 (m, 4H), 6.17 (s, 1H), 4.69-4.57(m, 2H), 4.01 (s, 1H), 3.81 (d, J=10.3 Hz, 1H), 3.60-3.49 (m, 3H), 3.11 (dd, J=13.1, 2.8 Hz, 1H), 3.07-2.98 (m, 1H), 2.83 (d, J=11.7 Hz, 1H), 2.57-2.53 (m, 1H).
PRIMERI 44 I 45
8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-cijanopiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0350] Primer 43 je odvojen na dva enantiomera koristeći hiralnu HPLC. Postupak hiralne separacije: Postupak: Kolona- Lux-cellulose C4 (250 × 21.2) mm, 5 mikrona; M. Faza A: M. Faza B: 0.1%DEA u acetonitrilu: metanol (10:90); Tok: 21 mL/min; Gradijent: 0-100 %B tokom 20 minuta.
[0351] Primer 44: Enantiomer 1: (7.5 mg, 9.6 % prinos); LCMS: m/z = 497.3 (M+H); rt 1.977 min; LC-MS Postupak: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.15-8.20 (m, 1 H), 8.06-8.15 (m, 1 H), 7.60-7.65 (m, 2 H), 7.53-7.57 (m, 2 H), 7.20 (td, J=8.9, 6.7 Hz, 4 H), 6.16 (s, 1 H), 4.60-4.68 (m, 2 H), 3.99-4.02 (m, 1 H), 3.78-3.87 (m, 1 H), 3.55 (s, 3 H), 3.09-3.15 (m, 1 H), 2.99-3.07 (m, 1 H), 2.80-2.86 (m, 1 H), 2.54-2.58 (m, 1 H).
[0352] Primer 45: Enantiomer 2: (7.5 mg, 9.6 % prinos); LCMS: m/z = 497.3 (M+H); rt 1.977 min; LC-MS Postupak: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.16-8.20 (m, 1 H), 8.09-8.13 (m, 1 H), 7.60-7.65 (m, 2 H), 7.52-7.57 (m, 2 H), 7.16-7.24 (m, 4 H), 6.16 (s, 1 H), 4.60-4.66 (m, 2 H), 3.99-4.02 (m, 1 H), 3.79-3.86 (m, 1 H), 3.55 (s, 3 H), 3.09-3.14 (m, 1 H), 2.98-3.07 (m, 1 H), 2.82 (s, 1 H), 2.54-2.58 (m, 1 H).
INTERMEDIJER 38
terc-Butil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(ciklopropilkarbamoil)piperazin-1-karboksilat
[0354] Mešanom rastvoru 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(terc-butoksikarbonil) piperazin-2-karboksilne kiseline (0.15 g, 0.347 mmol) u DMF (5 mL) su dodati DIPEA (0.182 mL, 1.041 mmol) i HATU (0.198 g, 0.520 mmol). Reakciona smeša je mešana 5 min i ciklopropanamin (0.020 g, 0.347 mmol) je dodat. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 3 h. Reakcija je kvenčovana sa vodom (50 mL) i ekstrahovana je sa etil acetatom (3×100 mL). Kombinovan organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, filtriran i isparen pod sniženim pritiskom da da terc-butil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(ciklopropilkarbamoil)piperazin-1-karboksilat (200 mg, 51.4 % prinos) kao braon gumu. LCMS: m/z = 472.5 (M+H); rt 1.91 min. LC-MS Postupak: Kolona- AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm; Mobilna faza A: Pufer: acetonitril (95:5); Mobilna faza B: Pufer: acetonitril (5:95), Pufer: 10 mM amonijum acetat; Gradijent: 20-100 % B tokom 2.0 minuta, zatim zadržavanje od 0.2 minuta na 100 % B, protok 0.7 mL/min.
INTERMEDIJER 39
1-(Bis(4-fluorofenil)metil)-N-ciklopropilpiperazin-2-karboksamid, HCl
[0355]
[0356] Mešanom rastvoru terc-butil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(ciklopropilkarbamoil)piperazin-1-karboksilata (0.11 g, 0.233 mmol) u HCl u dioksanu (1.5 mL, 49.4 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1h. Reakciona smeša je koncentrovana pod visokim vakuumom da da 1-(bis(4-fluorofenil) metil)-Nciklopropilpiperazin-2-karboksamid, HCl (0.11 g, 79 % prinos) u vidu braon čvrste supstance. LCMS: m/z = 372.2 (M+H); rt 2.276 min. LC-MS Postupak: Kolona-KINETEX-XB-C18 (75 × 3 mm- 2.6 µm); Mobilna faza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (98:2); Mobilna faza B: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (2:98); Gradijent: 20-100 % B tokom 4 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B protok 1.5 mL/min; zatim Gradijent: 100-20 % B tokom 0.1 minuta, protok 1.5 mL/min.
PRIMERI 46 DO 48
1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-N-ciklopropilpiperazin-2-karboksamid
[0357]
[0358] Mešanom rastvoru 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (80 mg, 0.240 mmol) u acetonitrilu (9 mL) su dodati DIPEA (0.126 mL, 0.72 mmol) i HCl so od 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-N-ciklopropilpiperazin-2-karboksamida (144 mg, 0.24 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 5 min i mešana je 1 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da da braon gumu. Uzorak sirovog materijala je prečišćen putem preparativne HPLC uz sledeće uslove: Kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Gradijent: zadržavanje od 5 minuta pri 20 % B, 20-55% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; Protok: 15 mL/min; Temperatura Kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je izazvano MS signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju racemski 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftindin-4-il)-N-ciklopropilpiperazin-2-karboksamid (Primer 46), praćeno hiralnom separacijom da se priušte enantiomeri 1 i 2. Postupak hiralne separacije: Postupak: Kolona-DAD-1 Cellulose-2 (250 × 4.6) mm, 5 mikrona; DAD-2 Cellulose-4 (250 × 4.6) mm, 5 mikrona; M. Faza: 0.1% DEA u acetonitrilu: IPA(70:30); Protok: 2.0 mL/min.
[0359] Primer 47: Enantiomer 1: (12.9 mg, 9.5 % prinos); LCMS: m/z = 555.3 (M+H); rt 1.979 min; LC-MS Postupak: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.16 (d, J=8.8 Hz, 1 H), 8.04-8.09 (m, 1 H), 7.98 (d, J=3.7 Hz, 1 H), 7.55 (dd, J=8.6, 5.6 Hz, 2 H), 7.46 (dd, J=8.6, 5.6 Hz, 2 H), 7.11-7.18 (m, 4 H), 6.03 (s, 1 H), 5.21 (s, 1 H), 4.22-4.35 (m, 1 H), 3.67-3.75 (m, 1 H), 3.59-3.65 (m, 1 H), 3.52 (s, 3 H), 3.33-3.39 (m, 1 H), 3.22-3.30 (m, 1 H), 3.13-3.16 (m, 1 H), 2.52-2.54 (m, 1 H), 2.45-2.48 (m, 1 H), 0.48-0.61 (m, 2 H), 0.18-0.35 (m, 2 H).
[0360] Primer 48: Enantiomer 2: (12.9 mg, 9.64 % prinos); LCMS: m/z = 555.3 (M+H); rt 1.980 min; LC-MS Postupak: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.16 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.07 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.98 (d, J=3.7Hz, 1H), 7.55 (dd, J=8.4, 5.7 Hz, 2H), 7.46 (dd, J=8.8, 5.6 Hz, 2H), 7.15 (td, J=8.8, 2.0 Hz, 4H),6.03 (s, 1H), 5.21 (s, 1H), 4.39-4.23 (m, 1H), 3.78 (dt, J=12.2, 6.0 Hz, 1H), 3.68 (br. s., 1H),3.62 (dd, J=13.1, 3.5 Hz, 1H), 3.53 (s, 3H), 3.38 (br. s., 1H), 3.30-3.22 (m, 1H), 3.15 (t, J=3.8Hz, 1H), 2.47 (br. s., 1H), 0.61-0.44 (m,2H),0.35-0.17 (m, 2H).
PRIMER 49
Metil 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-bromo-3-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat
[0361]
[0362] Mešanom rastvoru 6-bromo-3-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (120 mg, 0.291 mmol) u acetonitrilu (8 mL) su dodati DIPEA (0.153 mL, 0.873 mmol) i HCl so od metil 1-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-2-karboksilata (111 mg, 0.291 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 5 min i mešana je 1 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod visokim vakuumom da da braon gumu. Sirovo jedinjenje je prečišćeno sa ISCO<®>(koristeći 12 g silika gel kolonu; koristeći 12-15 % etil acetat/ petrol etar) da da metil 1-(bis(4-fluorofenil)metil)4-(6-bromo-3-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat (120 mg, 0.197 mmol, 67.7 % prinos) u vidu braon čvrste supstance. LCMS: m/z -= 608.1 (M+H); rt 2.37 min; LC-MS Postupak: Kolona-X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.95 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.89 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.60 (dd, J=8.8, 5.6 Hz, 2H), 7.46 (dd, J=8.6, 5.6 Hz, 2H), 7.16 (q, J=8,9 Hz, 4H), 5.23 (s, 1H), 4.44 (d,J=12.7 Hz, 1H), 4.20 (d, J=12.0 Hz, 1H), 3.64-3.48 (m, 6H), 3.46 (s, 3H), 3.37 (br. s., 1H),2.73-2.63 (m, 1H).
PRIMERI 50 DO 51
metil 1 -(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(3,6-dicijano-1 -metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat
[0363]
[0364] Mešanom rastvoru metil 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-bromo-3-cijano-1 -metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilata (100 mg, 0.164 mmol) u NMP (3 mL) su dodati cink (2.149 mg, 0.033 mmol) i cink cijanid (38.6 mg, 0.329 mmol) pod azotom. Pročišćavanje azotom je nastavljeno 3 min, dppf (5.47 mg, 9.86 µmol) i Pd2(dba)3(15.05 mg, 0.016 mmol) su dodati, i pročišćavanje je nastavljeno još 3 min. Reakciona smeša je zagrejana do 80 °C tokom 5 min i mešana je 1 h. Reakcija je kvenčovana sa zasićenim amonijum hloridnim rastvorom (5 mL). Reakciona smeša je ekstrahovana sa etil acetatom (3x10 mL). Kombinovan organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, filtriran i isparen pod sniženim pritiskom da da braon ulje. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC (Postupak) Postupak: Kolona- Lux-cellulose C4 (250 × 21.2) mm, 5 mikrona; M. faza A: M. Faza B: 0.1% DEA u acetonitrilu: metanol (70:30); Tok: 21 mL/min; Gradijent: 0-100 %B tokom 20 minuta. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju proizvod u vidu enantiomerske smeše. Enantiomeri su odvojeni koristeći hiralnu HPLC. Postupak hiralne separacije: Kolona- X-Bridge Phenyl (250 mm × 19 mm ID, 5 µm); Mobilna faza A: Pufer: 10 mM amonijum acetat u vodi pH-4.5; Mobilna faza B: acetonitril; Gradijent: 50-80 % B tokom 20 minuta, protok 17 mL/min.
[0365] Primer 50: Enantiomer 1: (6.4 mg, 0.011 mmol, 6.9 % prinos); LCMS: m/z = 555.2 (M+H); rt 2.179 min; LC-MS Postupak: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.26 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.16 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.61 (dd, J=8.8, 5.6 Hz, 2H), 7.47 (dd, J=8.8, 5.6 Hz, 2H), 7.26-7.04 (m, 4H), 5.21 (s, 1H), 4.53 (d, J=13.0 Hz, 1H), 4.18 (d, J=11.2 Hz, 1H), 3.97 (dd, J=13.3, 3.5 Hz, 1H), 3.72-3.52 (m, 5H),3.48 (s, 3H), 3.38-3.32 (m, 1H), 2.69 (d, J=12.5 Hz, 1H).
[0366] Primer 51: Enantiomer 2: (7.4 mg, 8.0 % prinos); LCMS: m/z = 555.2 (M+H); rt 2.179 min; LC-MS Postupak: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µ; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.26 (d, J=9.0 Hz, 1H), 8.16 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.61 (dd, J=8.7, 5.5 Hz, 2H), 7.47 (dd, J=8.7, 5.7 Hz, 2H), 7.16 (q, J=9.0 Hz.4H), 5.21 (s, 1H), 4.53 (d,J=13.2 Hz, 1H), 4.18 (d, J=12.0 Hz, 1H), 3.97 (dd, J=13.1, 3.8 Hz, 1H), 3.66-3.50 (m, 5H),3.48 (s, 3H), 3.37-3.32 (m, 1H), 2.69 (d, J=12.0 Hz, 1H).
INTERMEDIJER 40
1-(bis (4-fluorofenil)metil)piperazin-2-karboksilna kiselina, HCl
[0367]
[0368] Mešani rastvor 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(terc-butoksikarbonil) piperazin-2-karboksilne kiseline (190 mg, 0.439 mmol) u HCl u dioksanu (1.0 mL, 4.00 mmol) je mešan na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod visokim vakuumom da da HCl so od 1-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-2-karboksilne kiseline (145 mg, 80.0 % prinos) u vidu braon čvrste supstance. LCMS: m/z = 333.2 (M+H); rt 2.99 min. LC-MS Postupak: Kolona-KINETEX-XB-C18 (75 × 3 mm- 2.6 µm); Mobilna faza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (98:2); Mobilna faza B: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu(2:98); Gradijent: 20-100 % B tokom 4 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B protok 1.5 mL/min; zatim Gradijent: 100-20 % B tokom 0.1 minuta, protok 1.5 mL/min.
PRIMER 52
1 -(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-bromo-3-cijano-1 -metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilna kiselina
[0369]
[0370] Mešanom rastvoru 6-bromo-3-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (180 mg, 0.437 mmol) u acetonitrilu (8 mL) su dodati DIPEA (0.229 mL, 1.310 mmol) i HCl so od 1-(bis(4-fluorofenil) metil)piperazin-2-karboksilne kiseline (161 mg, 0.437 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 5 min i mešana je 1 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod visokim vakuumom da da braon gumu. Sirovo jedinjenje je prečišćeno sa ISCO<®>(koristeći 12 g silika gel kolonu; koristeći 62-65 % etil acetat/ petrol etar) da da 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-bromo-3-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilnu kiselinu (150 mg, 48.5 % prinos). LCMS: m/z = 594.1 (M+H); rt 1.73 min; LC-MS Postupak: Kolona-KINETEX-XB-C18 (75 × 3 mm- 2.6 µm); Mobilna faza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (98:2); Mobilna faza B: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (2:98); Gradijent: 20-100 % B tokom 4 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B protok 1.5 mL/min; zatim Gradijent: 100-20 % B tokom 0.1 minuta, protok 1.5 mL/min.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.47-12.69 (m, 1 H), 7.94-7.96 (m, 1 H), 7.86-7.93 (m, 1 H), 7.58-7.66 (m, 2 H), 7.43-7.49 (m, 2 H), 7.16 (s, 4 H), 5.39 (s, 1 H), 4.41-4.55 (m, 1 H), 4.27-4.37 (m, 1 H), 3.87-3.99 (m, 1 H), 3.40-3.54 (m, 6 H), 2.63-2.69 (m, 1 H).
PRIMERI 53-54
1 -(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(3,6-dicijano-1 -metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilna kiselina
[0371]
[0372] Mešanom rastvoru 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-bromo-3-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilne kiseline (80 mg, 0.135 mmol) u NMP (5 mL) su dodati cink (1.760 mg, 0.027 mmol) i cink cijanid (31.6 mg, 0.269 mmol) pod azotom. Pročišćavanje azotom je nastavljeno 3 min., dppf (4.48 mg, 8.08 µmol) i Pd2(dba)3(12.32 mg, 0.013 mmol) su dodati, i pročišćavanje je nastavljeno još 3 min. Reakciona smeša je zagrejana do 80 °C tokom 5 min i mešana je 1 h. Reakcija je kvenčovana zasićenim amonijum hloridnim rastvorom (5 mL) i ekstrahovana je sa etil acetatom (3x10 mL). Kombinovan organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, filtriran i isparen pod sniženim pritiskom da da braon ulje. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC: Postupak: Kolona- Sunfire C18 (250 × 4.6 mm) 5 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: acetonitril; Gradijent: 40 % B tokom 2.0 minuta, protok 1 mL/min, 40-80 % B tokom 13 minuta, 80-100 %B tokom 15 minuta, zatim zadržavanje od 1 minuta pri 100 % B protok 1 mL/min. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju proizvod u vidu enantiomerske smeše. Enantiomeri su odvojeni koristeći hiralnu HPLC. Postupak hiralne separacije: Postupak: Kolona-DAD-1 Cellulose-2 (250 × 4.6) mm, 5 mikrona; DAD-2 Cellulose-4 (250 × 4.6) mm, 5 mikrona; M. Faza: 0.1% DEA u acetonitrilu: IPA (90:10); Protok: 2.0 mL/min.
[0373] Primer 53: Enantiomer 1: (6.8 mg, 9.0 % prinos); LCMS: m/z = 541.3 (M+H); rt 1.760 min; LC-MS: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.08 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.03 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.60(dd, J=8.7, 5.5 Hz, 2H), 7.52-7.38 (m, 2H), 7.12-6.96 (m, 4H), 5.51 (s, 1H), 4.68 (d, J=13.7Hz, 1H), 4.45 (d, J=11.0 Hz, 1H), 4.07 (d, J=11.2 Hz, 1H), 3.76-3.56 (m, 5H), 3.42 (br. s., 1H), 2.76 (d, J=12.0 Hz, 1H).
[0374] Primer 54: Enantiomer 2: (11.2 mg, 14.78 % prinos); LCMS: m/z = 541.2 (M+H); rt 1.759 min; LC-MS: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.10 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.05 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.60(dd, J=8.7, 5.5 Hz, 2H), 7.49 (dd, J=8.4, 5.5 Hz, 2H), 7.07 (q, J=8.8 Hz, 4H), 5.43 (s, 1H), 4.69(d, J=12.7 Hz, 1H), 4.44 (d, J=12.5 Hz, 1H), 4.07 (d, J=10.5 Hz, 1H), 3.76 (d, J=6.6 Hz, 1H),3.72-3.61 (m, 3H), 3.57 (t, J=9.7 Hz, 2H), 3.25 (d, J=7.6 Hz, 1H).
PRIMER 55
1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilna kiselina
[0375]
[0376] Mešanom rastvoru metil 1-(bis (4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilata (200 mg, 0.378 mmol) u DMF (8 mL) dodat je litijum hlorid (160 mg, 3.78 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 150 °C tokom 10 min na mikrotalasima i mešana je 1.5 h. Reakciona smeša je filtrirana kroz sloj celita i koncentrovana je pod visokim vakuumom da da braon gumu (180 mg, 92 % prinos). Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC uz sledeće uslove: Kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 10 % B, 10-40 % B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; Protok: 15 mL/min; Temperatura Kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je izazvano MS signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju 1-(bis(4-fluorofenil)mεtil)-4-(6-cijano-1 -metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilnu kiselinu (7.1 mg, 34.8 % prinos); LCMS: m/z = 516.2 (M+H); rt 1.616 min; LC-MS: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm12.43 (br. s., 1H), 8.15 (d, J=88 Hz, 1H), 8.07 (d, J=8.8 Hz,1H), 7.57 (dd, J=8.7, 5.5 Hz, 2H), 7.40 (dd, J=8.8.5.6 Hz, 2H), 7.24-7.03 (m, 4H), 6.13 (s, 1H), 5.33 (s, 1H), 4.48 (d, J=9.5 Hz, 1H), 4.02 (d, J=13.4 Hz, 1H), 3.53 (s, 3H), 3.42-3.33 (m,3H), 3.11-2.99 (m, 1H), 2.60-2.54 (m, 1H).
PRIMER 56
1 -(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-bromo-3-cijano-1 -metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksamid
[0377]
[0378] Mešanom rastvoru 6-bromo-3-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (150 mg, 0.364 mmol) u acetonitrilu (8 mL) su dodati DIPEA (0.191 mL, 1.092 mmol) i HCl so od 1-(bis(4-fluorofenil) metil)piperazin-2-karboksamida (134 mg, 0.364 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 5 min i mešana 1 h. Reakcija je kvenčovana sa vodom (50 mL) i ekstrahovana je sa etil acetatom (3x100 mL). Kombinovan organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, filtriran i isparen pod sniženim pritiskom da da 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-bromo-3-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksamid (170 mg, 26 % prinos) kao braon gumu. LCMS: m/z = 595.3 (M+H); rt 1.69 min. LC-MS Postupak: Kolona- AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm; Mobilna faza A: Pufer: acetonitril (95:5); Mobilna faza B: Pufer: acetonitril (5:95), Pufer: 10 mM amonijum acetat; Gradijent: 20-100 % B tokom 2.0 minuta, zatim zadržavanje od 0.2 minuta na 100 % B, protok 0.7 mL/min.
PRIMERI 57 DO 58
1-(bis (4-fluorofenil)metil)-4-(3,6-dicijano-1 -metil -2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksamid
[0379]
[0380] Mešanom rastvoru 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-bromo-3-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksamida (80 mg, 0.135 mmol) u NMP (5 mL) su dodati cink (1.763 mg, 0.027 mmol) i cink cijanid (31.7 mg, 0.270 mmol) pod azotom. Pročišćavanje azotom je nastavljeno 3 min i dppf (4.48 mg, 8.09 µmol) i Pd2(dba)3(12.34 mg, 0.013 mmol) su dodati. Pročišćavanje je nastavljeno još 3 min. Reakciona smeša je zagrejana do 80 °C tokom 5 min i mešana je 1 h. Reakcija je kvenčovana zasićenim amonijum hloridnim rastvorom (5 mL). Smeša je ekstrahovana sa etil acetatom (3x10 mL). Kombinovan organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, filtriran i isparen pod sniženim pritiskom da da braon ulje. Sirovi materijal je prečišćen da da proizvod u vidu enantiomerske smeše putem preparativne HPLC (Postupak) Kolona: Inersil ODS (250 mm × 20 mm ID, 5 µm); Mobilna faza A=Pufer: 0.1%TFA u H2O; Mobilna faza B= acetonitril; Protok: 17 mL/min; Gradijent: 20-40 %B tokom 2 minuta, 40-80 %B tokom 13 minuta, 80-100 %B tokom 1 minuta. Enantiomeri su odvojeni koristeći hiralnu HPLC. Postupak hiralne separacije: Postupak: Kolona-DAD-1 Cellulose-2 (250 × 4.6) mm, 5 mikrona; DAD-2 Cellulose-4 (250 × 4.6) mm, 5 mikrona; M. Faza: 0.1% DEA u acetonitrilu: IPA(70:30); Protok: 2.0 mL/min.
[0381] Primer 57: Enantiomer 1: (1.0 mg, 1.4 % prinos); LCMS: m/z = 540.3 (M+H); rt 1.707 min; LC-MS Postupak: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.24-8.27 (m, 1 H), 8.15 (d, J=9.0 Hz, 1 H), 7.85 (s, 1 H), 7.66-7.77 (m, 4 H), 7.28 (s, 1 H), 7.13-7.20 (m, 4 H), 5.51 (s, 1 H), 4.36-4.44 (m, 1 H), 4.06-4.16 (m, 2 H), 3.65-3.73 (m, 1 H), 3.49-3.58 (m, 4 H), 3.21-3.25 (m, 1 H), 2.69-2.75 (m, 1 H).
[0382] Primer 58: Enantiomer 2: (1.2 mg, 1.7 % prinos); LCMS: m/z = 540.3 (M+H); rt 1.707 min; LC-MS Postupak: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.24-8.28 (m, 1 H), 8.15 (d, J=9.0 Hz, 1 H), 7.84-7.87 (m, 1 H), 7.66-7.77 (m, 4 H), 7.27-7.30 (m, 1 H), 7.13-7.19 (m, 4 H), 5.51 (s, 1 H), 4.36-4.42 (m, 1 H), 4.05-4.16 (m, 2 H), 3.64-3.72 (m, 1 H), 3.49-3.57 (m, 4 H), 3.21-3.24 (m, 1 H), 2.70-2.75 (m, 1 H).
INTERMEDIJER 41
1-(bis(4-fluorofenil)metil)-N-ciklopropilpiperazin-2-karboksamid, HCl
[0383]
[0384] Mešani rastvor terc-butil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(ciklopropilkarbamoil)piperazin-1-karboksilata (140 mg, 0.297 mmol) u HCl u dioksanu (1.5 mL, 49.4 mmol) je mešan na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod visokim vakuumom da da HCl so od 1-(bis(4-fluorofenil) metil)-N-ciklopropilpiperazin-2-karboksamida (100 mg, 83 % prinos) u vidu braon čvrste supstance. LCMS: m/z = 372.4 (M+H); rt 1.21 min. LC-MS Postupak: Kolona-X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 0.1% TFA; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 0.1% TFA).
PRIMER 59
1 -(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-bromo-3-cijano-1 -metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-N-ciklopropilpiperazin-2-karboksamid
[0385]
[0386] Mešanom rastvoru 6-bromo-3-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (150 mg, 0.364 mmol) u acetonitrilu (8 mL) su dodati DIPEA (0.191 mL, 1.092 mmol) i HCl so od 1-(bis(4-fluorofenil) metil)-N-ciklopropilpiperazin-2-karboksamida (148 mg, 0.364 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 5 min i mešana je 1 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da da braon gumu. Sirovo jedinjenje je prečišćeno sa ISCO<®>(koristeći 12 g silika gel kolonu; koristeći 60-64 % etilacetat/ petrol etar) da da 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-bromo-3-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-N-ciklopropilpiperazin-2-karboksamid (80 mg, 21.9 % prinos) u vidu braon čvrste supstance. LCMS: m/z = 635.3 (M+H); rt 1.88 min. LC-MS: Kolona-KINETEX-XB-C18 (75 × 3 mm- 2.6 µm); Mobilna faza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (98:2); Mobilna faza B: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu(2:98); Gradijent: 20-100 % B tokom 4 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B protok 1.5 mL/min; zatim Gradijent: 100-20 % B tokom 0.1 minuta, protok 1.5 mL/min.
PRIMERI 60 DO 61
1-(bis(4-fluorofenil)metil)-N-ciklopropil-4-(3,6-dicijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksamid
[0387]
[0388] Mešanom rastvoru 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-bromo-3-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-N-ciklopropilpiperazin-2-karboksamida (80 mg, 0.126 mmol) u NMP (5 mL) su dodati cink (1.651 mg, 0.025 mmol) i cink cijanid (29.7 mg, 0.253 mmol) pod azotom. Pročišćavanje azotom je nastavljeno 3 min i dppf (4.20 mg, 7.58 µmol) i Pd2(dba)3(11.56 mg, 0.013 mmol) su dodati. Pročišćavanje je nastavljeno još 3 min. Reakciona smeša je zagrejana do 80 °C tokom 5 min i mešana je 1 h. Reakcija je kvenčovana sa zasićenim amonijum hloridnim rastvorom (5 mL). Reakciona smeša je ekstrahovana sa etil acetatom (3x10 mL). Kombinovan organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, filtriran i isparen pod sniženim pritiskom da da braon ulje. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC. Postupak: Kolona- Sunfire C18 (150 × 19 mm) 5 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat u vodi; Mobilna faza B: acetonitril; Gradijent: 50-68 % B tokom 19 minuta, protok 17 mL/min. Enantiomeri su odvojeni koristeći hiralnu HPLC. Postupak hiralne separacije: Postupak: Kolona-DAD-1 Cellulose-2 (250 × 4.6) mm, 5 mikrona; DAD-2 Cellulose-4 (250 × 4.6) mm, 5 µm; M. Faza: 0.1% DEA u acetonitrilu; Protok: 2.0 mL/min.
[0389] Primer 60: Enantiomer 1: (4 mg, 5.46 % prinos); LCMS: m/z = 580.3 (M+H); rt 1.894 min; LC-MS Postupak: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.26 (d, J=9.0 Hz, 1H), 8.22-8.02 (m, 2H), 7.68 (dd, J=11.7,8.6 Hz, 2H), 7.70 (dd, J=11.6, 8.7 Hz, 2H), 7.28-7.05 (m, 4H), 5.42 (s, 1H), 4.36 (d, J=12.7 Hz,1H), 4.16 (dd, J=13.2, 3.7 Hz, 1H), 4.05 (d, J=13.9 Hz, 1H), 3.67 (t, J=10.8 Hz, 1H), 3.54 (s,3H), 3.45 (t, J=10.4 Hz, 1H), 3.23 (br. s., 1H), 2.68-2.61 (m, 1H), 2.49-2.44 (m, 1H), 0.67-0.48 (m, 2H), 0.47-0.37 (m, 1H), 0.36-0.27 (m, 1H).
[0390] Primer 61: Enantiomer 2: (4 mg, 5.5 % prinos); LCMS: m/z -= 580.3 (M+H); rt 1.894 min; LC-MS Postupak: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.26 (d, J=88 Hz, 1H), 8.20-8.03 (m, 2H), 7.68 (dd, J=11.6,8.4 Hz, 2H), 7.70 (dd, J=11.6, 8.7 Hz, 2H), 7.16 (td, J=8.8, 1.5 Hz, 4H), 5.42 (s, 1H), 4.36 (d,J=11.5 Hz, 1H), 4.16 (dd, J=13.2, 3.4 Hz, 1H), 4.05 (d, J= 13.9 Hz, 1H), 3.67 (t, J=10.6 Hz, 1H),3.54 (s, 3H), 3.45 (t, J=10.4 Hz, 1H), 3.23 (br. s., 1H), 2.71-2.61 (m, 1H), 2.48-2.42 (m, 1H),0.65-0.49 (m, 2H), 0.47-0.40 (m, 1H), 0.36-0.23 (m, 1H).
INTERMEDIJER 42
1-(terc-Butil) 3-izopropil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-1,3-dikarboksilat
[0391]
[0392] Mešanom rastvoru 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(terc-butoksikarbonil) piperazin-2-karboksilne kiseline (250 mg, 0.578 mmol) u DMF (8 mL) su dodati K2CO3(80 mg, 0.578 mmol) i 2-jodopropan (0.347 mL, 3.47 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Reakcija je kvenčovana sa vodom (50 mL). Smeša je ekstrahovana sa etil acetatom (3×100 mL). Kombinovan organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, filtriran i isparen pod sniženim pritiskom da da (270 mg, 84 % prinos) kao braon ulje. LCMS: m/z = 475.5 (M+H); rt 1.60 min. LC-MS Postupak: Kolona- AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm; Mobilna faza A: Pufer: acetonitril (95:5); Mobilna faza B: Pufer: acetonitril (5:95), Pufer: 10 mM amonijum acetat; Gradijent: 20-100 % B tokom 2.0 minuta, zatim zadržavanje od 0.3 minuta pri 100 % B, protok 0.7 mL/min.
INTERMEDIJER 43
Izopropil 1-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-2-karboksilat, HCl
[0393]
[0394] Mešani rastvor 1-(terc-butil) 3-izopropil 4-(bis(4-fluorofenil)metil) piperazin- 1,3-dikarboksilata (270 mg, 0.569 mmol) u HCl u dioksanu (1.5 mL, 6.00 mmol) je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod visokim vakuumom da da HCl so od izopropil 1-(bis(4-fluorofenil)metil) piperazin-2-karboksilata (230 mg, 90 % prinos) u vidu braon čvrste supstance. LCMS: m/z = 375.2 (M+H); rt 1.606 min. LC-MS Postupak: Kolona-KINETEX-XB-C18 (75 × 3 mm- 2.6 µm); Mobilna faza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (98:2); Mobilna faza B: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (2:98); Gradijent: 20-100 % B tokom 4 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B protok 1.5 mL/min; zatim Gradijent: 100-20 % B tokom 0.1 minuta, protok 1.5 mL/min.
PRIMERI 62 DO 63
Izopropil 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat
[0395]
[0396] Mešanom rastvoru 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-l,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (100 mg, 0.300 mmol) u acetonitrilu (8 mL) su dodati DIPEA (0.157 mL, 0.900 mmol) i HCl so od izopropil 1-(bis(4-fluorofenil)metil) piperazin-2-karboksilata (123 mg, 0.300 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 5 min i mešana je 1 h. Reakciona smeša je filtrirana i koncentrovana je pod visokim vakuumom da da braon gumu. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC. Postupak: Kolona- SUNFIRE C18 (150 mm × 19 mm ID,5 µm); Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat u vodi; Mobilna faza B: acetonitril; Gradijent: 40-60 % B tokom 3.0 minuta, protok 17 mL/min, zatim zadržavanje od 17 minuta pri 60-100 % B protok 17 mL/min. Da priušti proizvod u vidu enantiomerske smeše. Enantiomeri su odvojeni koristeći hiralnu HPLC. Hiralna separacija : Postupak: Kolona-DAD-1 Cellulose-2 (250 × 4.6) mm, 5 mikrona; DAD-2 Cellulose-4 (250 × 4.6) mm, 5 mikrona; M. Faza: 0.1% DEA u metanolu; Protok: 2.0 mL/min.
[0397] Primer 62: Enantiomer 1: (17.5 mg, 10.0 % prinos); LCMS: m/z = 558.3 (M+H); rt 2.156 min; LC-MS Postupak: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.16 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.07 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.57 (dd, J=8.8, 5.4 Hz, 2H), 7.43-7.30 (m, 2H), 7.23-7.06 (m, 4H), 6.12 (s, 1H), 5.20 (s, 1H), 4.74 (dt, J=12.5, 6.3 Hz, 1H), 4.65 (d, J=13.2 Hz, 1H), 4.01 (d, J=10.3 Hz, 1H), 3.58-3.50 (m, 3H), 3.47(dd, J=13.1, 3.8 Hz, 1H), 3.38-3.33 (m, 2H), 3.19-3.09 (m, 1H), 2.66-2.54 (m, 1H), 1.12 -0.95 (m, 3H), 0.93-0.85 (m, 3H).
[0398] Primer 63: Enantiomer 2: (20.7 mg, 11.4 % prinos); LCMS: m/z = 558.3 (M+H); rt 2.157 min; LC-MS Postupak: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.27 (d, J=8.8 Hz, 1 H), 8.17 (d, J=9.0 Hz, 1 H), 7.59-7.66 (m, 2 H), 7.45-7.50 (m, 2 H), 7.12-7.21 (m, 4 H), 5.32 (s, 1 H), 4.72-4.80 (m, 1 H), 4.46-4.54 (m, 1 H), 4.25-4.37 (m, 1 H), 3.94-4.02 (m, 1 H), 3.47-3.57 (m, 5 H), 2.66-2.73 (m, 2 H), 1.03 (d, J=6.4 Hz, 3 H), 0.95 (d, J=6.4 Hz, 3 H).
PRIMERI 64 DO 65
Izopropil 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(3,6-dicijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat
[0399]
[0400] Mešanom rastvoru 3,6-dicijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (40 mg, 0.112 mmol) u acetonitrilu (6 mL) su dodati DIPEA (0.059 mL, 0.335 mmol) i izopropil HCl so od 1-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-2-karboksilata (45.9 mg, 0.112 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 5 min i mešana 1 h. Reakciona smeša je filtrirana i koncentrovana pod visokim vakuumom da da braon gumu. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC uz sledeće uslove: Kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Gradijent: zadržavanje od 2 minuta pri 18% B, 18-67% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; Protok: 15 mL/min; Temperatura Kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je izazvano MS signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju proizvod u vidu enantiomerske smeše. Enantiomeri su odvojeni koristeći hiralnu HPLC. Hiralna separacija : Postupak: Kolona-DAD-1 Cellulose-2 (250 × 4.6) mm, 5 mikrona; DAD-2 Cellulose-4 (250 × 4.6) mm, 5 mikrona; M. Faza: 0.1% DEA u acetonitrilu: IPA(70:30); Protok: 2.0 mL/min.
[0401] Primer 64: Enantiomer 1: (5.6 mg, 8.6 % prinos); LCMS: m/z = 583.3 (M+H); rt 2.21 min; LC-MS Postupak: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.27 (d, J=88 Hz, 1H), 8.17 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.62 (dd, J=8.8, 5.6 Hz, 2H), 7.54-7.39 (m, 2H), 7.16 (q, J=9.0 Hz, 4H), 5.32 (s, 1H), 4.76 (kvin, J=6.2 Hz, 1H), 4.50 (d, J=13.2 Hz, 1H), 4.37-4.21 (m, 1H), 3.98 (dd,=13.1, 3.3 Hz, 1H), 3.65-3.44 (m, 4H), 3.37 (br. s., 1H), 2.81-2.62 (m, 2H), 1.03 (d,J=6.4 Hz, 3H), 0.95 (d, J=6.4 Hz, 3H).
[0402] Primer 65: Enantiomer 2: (5.2 mg, 8.0 % prinos); LCMS: m/z = 583.3 (M+H); rt 2.21 min; LC-MS Postupak: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.27 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.17 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.62 (dd, J=8.8, 5.6 Hz, 2H), 7.54-7.40 (m, 2H), 7.16 (q, J=9.0 Hz, 4H),,5.32 (s, 1H), 4.76 (dt..7=12.5, 6.2 Hz, 1H), 4.50 (d, J=13.2 Hz, 1H).4.35-4.24 (m, 1H), 3.98(dd, 7=13.2, 3.4 Hz, 1H), 3.63-3.45 (m, 5H), 2.77-2.63 (m, 2H), 1.03 (d, J=6.4 Hz, 3H), 0.95 (d, J=6.4 Hz, 3H).
INTERMEDIJER 44
1 -(terc-butil) 2-metil (S)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-1,2-dikarboksilat
[0403]
[0404] Mešanom rastvoru 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (220 mg, 0.660 mmol) u acetonitrilu (6 mL) dodat je DIPEA (0.346 mL, 1.981 mmol) i 1-(terc-butil) 2-metil (S)-piperazin-1,2-dikarboksilat (161 mg, 0.660 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 5 min i mešana je 3 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod visokim vakuumom da da braon gumu. Sirovo jedinjenje je prečišćeno sa ISCO<®>(koristeći 12 g silika gel kolonu; koristeći 68-73 % etilacetat/ petrol etar) da da 1-(tercbutil) 2-metil (S)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-1,2-dikarboksilat (230 mg, 80 % prinos) kao braon gumu. LCMS: m/z = 428.2 (M+H); rt 2.367 min.LC-MS Postupak: Kolona-KINETEX-XB-C18 (75 × 3 mm- 2.6 µm); Mobilna faza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (98:2); Mobilna faza B: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (2:98); Gradijent: 20-100 % B tokom 4 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B protok 1.5 mL/min; zatim Gradijent: 100-20 % B tokom 0.1 minuta, protok 1.5 mL/min.
INTERMEDIJER 45
metil (S)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat, TFA
[0405]
[0406] Mešanom rastvoru 1-(terc-butil) 2-metil (S)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-1,2-dikarboksilata (230 mg, 0.538 mmol) u DCM (5 mL) dodat je TFA (0.415 mL, 5.38 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod visokim vakuumom da da TFA so od metil (S)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilata (230 mg, 80 % prinos) kao braon gumu. LCMS: m/z = 328.2 (M+H); rt 0.751 min. LC-MS Postupak: Kolona-KINETEX-XB-C18 (75 X 3 mm-2.6 µm); Mobilna faza A: 0.1%TFA u Milli-Q vodi; Mobilna faza B: 0.1%TFA u acetonitrilu; Gradijent: 20-100 % B tokom 4.0 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B protok 1.5 mL/min, 100-20 % B tokom 0.1 minuta, protok 1.5 mL/min.
PRIMER 66
Metil (S)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat
[0407]
[0408] Mešanom rastvoru TFA soli od metil (S)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilata (60 mg, 0.136 mmol) u acetonitrilu (6 mL) su dodati DIPEA (0.024 mL, 0.136 mmol) i 4,4'-(hlorometilen)bis(fluorobenzen) (32.4 mg, 0.136 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 80 °C tokom 3 min i mešana je 16 h. Reakciona smeša je filtrirana i koncentrovana pod visokim vakuumom da da braon gumu. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC uz sledeće uslove: Kolona: Inersil ODS, 21 × 250 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat pH-4.5 sa sirćetnom kiselinom; Mobilna faza B: metanol: acetonitril (1:1); Gradijent: 70-100 %B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; Tok: 18 mL/min. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju metil (S)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il) piperazin-2-karboksilat (9.6 mg, 13.15 % prinos); LCMS: m/z = 530.2 (M+H); rt 2.1 min; LC-MS Postupak: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.16 (d, J=9.0 Hz, 1H), 8.08 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.57 (dd, J=8.6.5.6 Hz, 2H), 7.43-7.30 (m, 2H), 7.24-7.04 (m, 4H), 6.14 (s, 1H), 5.17 (s, 1H), 4.78 (d,J=12.5 Hz, 1H), 3.64 (d, J=10.3 Hz, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.54 (s, 3H), 3.46-3.34 (m, 2H), 3.20 -3.12 (m, 1H), 3.09-2.99 (m, 1H), 2.68-2.61 (m, 1H).
PRIMERI 67-68
Metil 4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-1-((4-fluoro-2-metoksifenil)(4-fluorofenil)metil)piperazin-2-karboksilat
[0409]
[0410] Mešanom rastvoru metil 4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilata (150 mg, 0.458 mmol) u acetonitrilu (8 mL) su dodati DIPEA (0.240 mL, 1.375 mmol) i 1-(hloro(4-fluorofenil)metil)-4-fluoro-2-metoksibenzen (123 mg, 0.458 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 5 min i mešana je 3 h. Reakciona smeša je filtrirana i koncentrovana je pod visokim vakuumom da da braon gumu. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC: Postupak: Kolona- SUNFIRE C18 (150 mm × 19 mm ID, 5 µm); Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat u vodi; Mobilna faza B: acetonitril; Gradijent: 40-60 % B tokom 3.0 minuta, protok 17 mL/min, zatim zadržavanje od 17 minuta pri 60-100 % B protok 17 mL/min. Izomer-A (Smeša dijastereomera): Primer 67; i Izomer-B (Smeša dijastereomera): Primer 68. Enantiomeri su odvojeni koristeći hiralnu HPLC.
PRIMERI 69 DO 70
Metil 4-(6-cijano-1 -metil-2-okso- 1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-1 -((4-fluoro-2-metoksifenil)(4-fluorofenil)metil)piperazin-2-karboksilat
[0411]
[0412] Enantiomeri su odvojeni koristeći hiralnu HPLC. Postupak hiralne separacije za Izomer-A (Smeša dijastereomera): Primer 67: Postupak: Kolona- Cellulose C5 (250 × 4.6) mm, 5 mikrona; M. Faza A: 0.1% DEA u metanolu; Protok: 1.0 mL/min. Izomer-1 (Homohiralni): Primer 69: (4.2 mg, 34.1 % prinos); LCMS: m/z = 560.2 (M+H); rt 2.091 min; LC-MS Postupak: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.15 (d, J=88 Hz, 1H), 8.08 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.55-7.34 (m,3H), 7.15 (t, J=8.9 Hz, 2H), 6.88 (dd, J=11.4, 2.6 Hz, 1H), 6.77 (td, J=8.4, 2.4 Hz, 1H), 6.13 (s,1H), 5.52 (s, 1H), 4.67 (d, J=12.2 Hz, 1H), 3.85-3.71 (m, 3H), 3.60 (s, 4H), 3.56-3.47 (m,4H), 3.40-3.35 (m, 1H), 3.23 (dd, J=12.5, 3.9 Hz, 1H), 3.14-3.04 (m, 1H), 2.59-2.53 (m, 1H). Izomer-2 (Homohiralni): Primer 70: (1.8 mg, 15.0 % prinos); LCMS: m/z = 560.2 (M+H); rt 2.091 min; LC-MS Postupak: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.15 (d, J=88 Hz, 1H), 8.08 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.55-7.36 (m,3H), 7.15 (t, J=89 Hz, 2H), 6.88 (dd, J=11.5, 2.4Hz, 1H), 6.77 (td, J=8.4, 2.4 Hz, 1H), 6.13 (s, 1H), 5.52 (s, 1H), 4.67 (d, J=12.7 Hz, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.60 (s, 4H), 3.56-3.48 (m, 4H), 3.43 -3.33 (m, 1H), 3.23 (dd, J=12.5,3.9 Hz, 1H), 3.14-3.03 (m, 1H), 2.55 (d, J=11.7 Hz, 1H).
PRIMERI 71 DO 72
Metil 4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-nafdiiridin-4-il)-1-((4-fluoro-2-metoksifenil)(4-fluorofenil)metil)piperazin-2-karboksilat
[0413]
[0414] Postupak hiralne separacije: Kolona: Chiralcel ODH (250 × 4.6) mm; 5 µm; Izokratski režim, Ko-rastvarač: 0.2% NH4OH u metanolu i acetonitrilu (1:1); procenat ko-rastvarača: 30 %, Temperatura Kolone: 30 °C; Povratni Pritisak: 100 bara; Ukupni tok: 4 g/min. Hiralna separacija Izomera-B (Smeša dijastereomera) Primer 68. Izomer-1 (Homohiralni): Primer 71: (4.9 mg, 37.8 % prinos); LCMS: m/z = 560.2 (M+H); rt 2.11 min; LC-MS Postupak: Kolona-X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.15 (d, J=9.0 Hz, 1H), 8.08 (d, J=9.0 Hz,1H), 7.78 (t, J=7.8 Hz, 1H), 7.37-7.19 (m, 2H), 7.19-7.02 (m, 2H), 6.92-6.76 (m, 2H), 6.21 -6.06 (m, 1H), 5.55-5.37 (m, 1H), 4.81 (d, J=12.5 Hz, 1H), 3.85-3.70 (m, 4H), 3.60 (s, 4H), 3.58-3.44 (m,4H), 3.44-3.36 (m, 1H), 3.11-3.00 (m, 1H), 2.76-2.67 (m, 1H). Izomer-2 (Homohiralni): Primer 72: (4.7 mg, 36.2 % prinos); LCMS: m/z = 560.3 (M+H); rt 2.11 min; LC-MS Postupak: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.13-8.18 (m, 1 H), 8.06-8.10 (m, 1 H), 7.79 (t, J=7.8 Hz, 1 H), 7.23-7.29 (m, 2 H), 7.08-7.15 (m, 2 H), 6.81-6.88 (m, 2 H), 6.14 (s, 1 H), 5.47 (s, 1 H), 4.79-4.84 (m, 1 H), 3.76 (s, 3 H), 3.59-3.65 (m, 1 H), 3.58 (s, 3 H), 3.53 (s, 3 H), 3.35-3.45 (m, 1 H), 2.96-3.12 (m, 2 H), 2.69-2.73 (m, 1 H), 2.52-2.54 (m, 1 H).
INTERMEDIJER 46
8-Hidroksi-5-metil-7-nitro-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0415]
[0416] Mešanom rastvoru 8-hidroksi-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (1 g, 4.97 mmol) u sirćetnoj kiselini (10 mL) dodata je azotna kiselina (0.666 mL, 14.91 mmol). Smeša je zagrejana do 80 °C tokom 1 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i razblažen sa vodom, mešana 10 min i rezultujuća čvrsta supstanca je filtrirana da da 8-hidroksi-5-metil-7-nitro-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (0.805 g, 65.1 % prinos) u vidu bledo žute čvrste supstance; LCMS: m/z = 247.2 (M+H); rt 1.190 min.LC-MS Postupak: Kolona-KINETEX-XB-C18 (75 × 3 mm- 2.6 µm); Mobilna faza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (98:2); Mobilna faza B: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu(2:98); Gradijent: 20-100 % B tokom 4 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B protok 1.5 mL/min; zatim Gradijent: 100-20 % B tokom 0.1 minuta, protok 1.5 mL/min.
INTERMEDIJER 47
6-Cijano-1-metil-3-nitro-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat
[0417]
[0418] Suspenziji 8-hidroksi-5-metil-7-nitro-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (0.25 g, 1.016 mmol) u suvom DCM (10 mL) dodat je TEA (0.212 mL, 1.523 mmol) praćen anhidridom trifluorometansulfonske kiseline (0.183 mL, 1.117 mmol) pod atmosferom azota na 0 °C. Reakciona smeša je mešana 3 h. Reakciona smeša je razblažena sa DCM, isprana sa vodom, organski sloj je osušen preko Na2SO4, filtriran i isparen pod sniženim pritiskom da da 6-cijano-1-metil-3-nitro-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (0.25 g, 48.8 % prinos) u vidu svetlo braon čvrste supstance; LCMS: m/z = 379.2 (M+H); rt 1.66 min. LC-MS Postupak: Kolona- AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm; Mobilna faza A: Pufer: acetonitril (95:5); Mobilna faza B: Pufer: acetonitril (5:95), Pufer: 10 mM amonijum acetat; Gradijent: 20-100 % B tokom 2.0 minuta, zatim zadržavanje od 0.2 minuta na 100 % B, protok 0.7 mL/min.
PRIMER 73
Metil 1 -(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1 -metil-3-nitro-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin4-il)piperazin-2-karboksilat
[0419]
[0420] Mešanom rastvoru 6-cijano-1-metil-3-nitro-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (80 mg, 0.212 mmol) u acetonitrilu (6 mL) su dodati DIPEA (0.111 mL, 0.635 mmol) i HCl so od metil 1-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-2-karboksilata (81 mg, 0.212 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 5 min i je mešana 1 h. Reakciona smeša je filtrirana i koncentrovana je pod visokim vakuumom da da braon gumu. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC uz sledeće uslove: Kolona: Sunfire C18, 19 × 150 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat pH-4.5 sa sirćetnom kiselinom; Mobilna faza B: metanol: acetonitril (1:1); Gradijent: 60-80 % tokom 15 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; Tok: 17 mL/min. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju proizvod u vidu enantiomerske smeše. Enantiomeri su odvojeni koristeći hiralnu HPLC. Postupak hiralne separacije: Kolona: Chiralcel ODH (250 × 4.6) mm; 5 µm; Izokratski režim, Ko-rastvarač: 0.2% NH4OH u metanolu i acetonitrilu (1:1); procenat ko-rastvarača: 25%, Temperatura Kolone: 30 °C; Povratni Pritisak: 100 bara; Ukupni Tok: 3 g/min. Primer 73: Enantiomer 1: (3.0 mg, 2.4 % prinos); LCMS: m/z = 575.2 (M+H); rt 2.206 min; LC-MS Postupak: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.29 (d, J=88 Hz, 1H), 8.22 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.59 (dd, J=8.6, 5.9 Hz, 2H), 7.42 (dd, J=8.7, 5.5 Hz, 2H), 7.24-7.06 (m, 4H), 5.25 (s, 1H), 3.79 (d,J=10.3 Hz, 2H), 3.65-3.55 (m, 4H), 3.53 (s, 4H), 3.28 (br. s., 3H).
PRIMERI 74 DO 75
Metil 1-(bis(4-fluorofenil)metil)4-(6-cijano-3-fluoro-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat
[0421]
[0422] Mešanom rastvoru metil 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilata (90 mg, 0.170 mmol) u acetonitrilu (6 mL) na 0 °C dodat je 1-hlorometil-4-fluoro-14-diazoniabiciklo 2.2.2 oktan bis(tetrafluoroborat) (78 mg, 0.221 mmol) u THF\H2O (0.5\0.5 mL) kap po kap. Reakciona smeša je mešana na 0 °C tokom 1.5 h. Reakciona smeša je polako zagrevana do sobne temperature i mešana još 1.5 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da da braon ulje. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC (Postupak) Kolona: Sun fire OBD (250 × 30 ID) 5 µm; Mobilna faza A: 10 mM Amonijum Acetat u Milli Q vodi; Mobilna faza B: acetonitril; Protok: 25 mL/min; Gradijent: 60-100 %B tokom 20 minuta. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju proizvod u vidu enantiomerske smeše. Enantiomeri su odvojeni koristeći hiralnu HPLC. Postupak hiralne separacije: Kolona-Cellulose C4 (250 × 21) mm, 5 mikrona; M. Faza A: M. Faza B: 100 % metanol; Protok: 20 mL/min.
[0423] Primer 74: Enantiomer 1: (2.7 mg, 2.9 % prinos); LCMS: m/z = 548.2 (M+H); rt 2.15 min; LC-MS Postupak: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.25-7.99 (m, 2H), 7.59 (dd, J=8.7, 5.7 Hz, 2H), 7.40 (dd, J=8.7, 5.7 Hz, 2H), 7.26-7.04 (m, 4H), 5.19 (s, 1H), 4.07 (d, J=13.9 Hz, 1H), 3.71-3.57 (m,5H), 3.55 (s, 3H), 3.49-3.38 (m, 2H), 3.35 (br. s., 1H), 2.59 (d, J=11.2 Hz, 1H).
[0424] Primer 75: Enantiomer 2: (4.0 mg, 7.254.27 % prinos); LCMS: m/z = 548.2 (M+H); rt 2.15 min; LC-MS Postupak: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.28-8.09 (m, 2H), 7.59 (dd, J=8.6, 5.6 Hz, 2H), 7.40 (dd, J=8.7, 5.5 Hz, 2H), 7.24-7.03 (m, 4H), 5.19 (s, 1H), 4.07 (d, J=12.2 Hz, 1H), 3.70-3.57 (m,5H), 3.55 (s, 3H), 3.50-3.37 (m, 2H), 3.37-3.32 (m, 1H), 2.59 (d, J=11.2 Hz, 1H).
PRIMERI 76 DO 77
metil 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(3-hloro-6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat
[0425]
[0426] Mešanom rastvoru metil 1-(bis (4-fluorofenil) metil)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilata (120 mg, 0.227 mmol) u DCM (8 mL) dodat je NCS (60.5 mg, 0.453 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Reakcija je kvenčovana sa vodom (5 mL). Reakciona smeša je ekstrahovana sa etil acetatom (3 × 10 mL). Kombinovan organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, filtriran i isparen pod sniženim pritiskom da da braon ulje. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC uz sledeće uslove: Kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm.5 µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 50 % B, 50-72% B tokom 15 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; Protok: 15 mL/min; Temperatura Kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je izazvano MS signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju proizvod u vidu enantiomerske smeše. Enantiomeri su odvojeni koristeći hiralnu HPLC. Postupak hiralne separacije: Postupak: Kolona- Lux-cellulose C2 (250 × 21.2) mm, 5 mikrona; M. Faza: 0.1% Amonijum Hidroksid u acetonitrilu: metanol (70:30); Protok: 20 mL/min.
[0427] Primer 76: Enantiomer 1: (20.3 mg, 15.9 % prinos); LCMS: m/z = 564.2 (M+H); rt 2.35 min; LC-MS Postupak: Kolona-X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.28-8.10 (m, 2H), 7.61 (dd, J=8.7, 5.5 Hz, 2H), 7.51-7.34(m, 2H), 7.23-7.06 (m, 4H), 5.33 (s, 1H), 3.95 (dd, J=12.7, 3.4 Hz, 1H), 3.79 (d, J=12.7 Hz,1H), 3.64 (s, 3H), 3.56-3.41 (m, 6H), 3.41-3.33 (m, 1H), 2.59 (d, J=11.2 Hz, 1H).
[0428] Primer 77: Enantiomer 2: (17.5 mg, 0.031 mmol, 13.69 % prinos); LCMS: m/z = 564.2 (M+H); rt 2.35 min; LC-MS Postupak: Kolona-X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.28-8.09 (m, 2H), 7.61 (dd, J=8.7, 5.5 Hz, 2H), 7.49-7.38(m, 2H), 7.24-7.05 (m, 4H), 5.33 (s, 1H), 3.95 (dd, J=12.7, 3.4 Hz, 1H), 3.79 (d, J=12.2 Hz,1H), 3.64 (s, 3H), 3.55-3.41 (m, 6H), 3.41-3.33 (m, 1H), 2.59 (d, J=10.5 Hz, 1H).
INTERMEDIJER 48
terc-butil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(2-hidroksipropan-2-il)piperazin-1-karboksilat
[0429]
[0430] Mešanom rastvoru 1-(terc-butil) 3-metil 4-(bis(4-fluorofenil)metil) piperazin-1,3-dikarboksilata (0.3 g, 0.672 mmol) u tetrahidrofuranu (5 mL) na 0 °C dodat je metil magnezijum hlorid u THF (1.120 mL, 3.36 mmol) kap po kap pod azotom tokom 3 min. Reakciona smeša je polako zagrevana do sobne temperature i je mešana 3 h. Reakcija je kvenčovana sa zasićenim amonijum hloridnim rastvorom (50 mL). Reakciona smeša je ekstrahovana sa etil acetatom (3×100 mL). Kombinovan organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, filtriran i isparen pod sniženim pritiskom da da terc-butil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(2-hidroksipropan-2-il)piperazin-1-karboksilat (290 mg, 92 % prinos) kao braon ulje. LCMS: m/z = 447.3 (M+H); rt 3.58 min; LC-MS Postupak: Kolona-KINETEX-XB-C18 (75 × 3 mm- 2.6 µm); Mobilna faza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (98:2); Mobilna faza B: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (2:98); Gradijent: 20-100 % B tokom 4 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B protok 1.5 mL/min; zatim Gradijent: 100-20 % B tokom 0.1 minuta, protok 1.5 mL/min.
INTERMEDIJER 49
2-(1-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-2-il)propan-2-ol, HCl
[0431]
[0432] terc-butil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(2-hidroksipropan-2-il)piperazin-1-karboksilat (240 mg, 0.537 mmol) u HCl u dioksanu (3.0 mL, 99 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod visokim vakuumom da da HCl so od 2-(1-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-2-il) propan-2-ola (180 mg, 65.6 % prinos) u vidu braon čvrste supstance. LCMS: m/z = 347.3 (M+H); rt 1.26 min. LC-MS Postupak: Kolona- AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm)1.7 µm; Mobilna faza A: Pufer: acetonitril (95:5); Mobilna faza B: Pufer: acetonitril (5:95), Pufer: 10 mM amonijum acetat; Gradijent: 20-100 % B tokom 2.0 minuta, zatim zadržavanje od 0.2 minuta na 100 % B, protok 0.7 mL/min.
PRIMERI 78 DO 79
8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(2-hidroksipropan-2-il)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0433]
[0434] Mešanom rastvoru 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (100 mg, 0.300 mmol) u acetonitrilu (8 mL) su dodati DIPEA (0.157 mL, 0.900 mmol) i HCl so od 2-(1-(bis(4-fluorofenil)metil) piperazin-2-il)propan-2-ola (115 mg, 0.300 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 5 min i mešana je 2 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da da braon ulje. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC (Postupak) Postupak: Kolona- SUNFIRE C18 (150 mm × 19 mm ID, 5 µm); Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat u vodi; Mobilna faza B: acetonitril; Gradijent: 40 % B tokom 2.0 minuta, 40-60 % B tokom 1.0 minuta, 60-100 % B tokom 17 minuta, protok 17 mL/min. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju proizvod u vidu enantiomerske smeše. Enantiomeri su odvojeni koristeći hiralnu HPLC. Postupak hiralne separacije: Postupak: Kolona-Cellulose C4 (250 × 21) mm, 5 mikrona; M. Faza A: M. Faza B: 0.1%DEA u acetonitrilu: metanol (70:30); Protok: 20 mL/min.
[0435] Primer 78: Enantiomer 1: (34 mg, 20.1 % prinos); LCMS: m/z = 530.3 (M+H); rt 1.961 min; LC-MS Postupak: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.18 (d, J=88 Hz, 1H), 8.09 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.48 (dd, J=8.6, 5.6 Hz, 2H), 7.43-7.31 (m, 2H), 7.17-7.01 (m, 4H), 5.94 (s, 1H), 5.49 (s, 1H),3.93-3.87 (m, 1H), 3.68 (dd, J=13.4, 6.4 Hz, 1H), 3.61-3.51 (m, 3H), 3.48-3.33 (m, 1H), 3.28- 3.19 (m, 1H), 3.18-3.11 (m, 1H), 2.78 (q, J=7.3Hz, 3H), 1.18-1.05 (m, 6H). Primer 79: Enantiomer 2: (34 mg, 20.7 % prinos); LCMS: m/z -= 530.3 (M+H); rt 1.961min; LC-MS Postupak: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.18 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.09 (d, J=8.8 Hz, 1H),7.48 (dd, J=8.8, 5.6 Hz, 2H), 7.37 (dd, J=8.6, 5.6 Hz, 2H), 7.20-6.98 (m, 4H), 5.94 (s, 1H),5.49 (s, 1H), 3.89 (dd, J=13.3,5.0 Hz, 1H), 3.68 (dd, J=13.3, 6.2 Hz, 1H), 3.60-3.50 (m, 3H), 3.48-3.31 (m, 1H), 3.29-3.19 (m, 1H), 3.15 (d, J=12.0 Hz, 1H), 2.75 (q, J=7.1 Hz, 3H), 1.17-1.01 (m, 6H).
PRIMERI 80 DO 81
8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(2-fluoropropan-2-il)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0436]
[0437] Mešanom rastvoru 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(2-hidroksipropan-2-il)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (0.1 g, 0.189 mmol) u DCM (5 mL) na 0 °C dodat je DAST (0.050 mL, 0.378 mmol). Reakciona smeša je polako zagrevana do sobne temperature i mešana je 2 h. Reakciona smeša je kvenčovana sa vodom (20 mL) i ekstrahovana je sa etil acetatom (3x50 mL). Kombinovan organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, filtriran i isparen pod sniženim pritiskom da da braon ulje. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC (Postupak) Postupak: Kolona- Sun fire C18 (150 × 20 mm) 5 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat u vodi; Mobilna faza B: acetonitril; Gradijent: 60-100 % B tokom 16 minuta, 100-60 % B tokom 1 minuta, protok 20 mL/min. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju da daju proizvod u vidu enantiomerske smeše. Enantiomeri su odvojeni koristeći hiralnu HPLC. Postupak hiralne separacije: Kolona: Chiralcel ODH (250 × 4.6) mm; 5 µm; Izokratski režim, Ko-rastvarač: 0.2% NH4OH u metanolu acetonitril (1:1); procenat ko-rastvarača: 25%, Temperatura Kolone: 30 °C; Povratni Pritisak: 100 bara; Ukupni Tok: 3 g/min.
[0438] Primer 80: Enantiomer 1: (7 mg, 6.8 % prinos); LCMS: m/z = 532.2 (M+H); rt 2.292 min; LC-MS Postupak: Kolona-X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.18 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.09 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.47 (dd, J=8.8, 5.6 Hz, 2H), 7.34 (dd, J=8.6, 5.6 Hz, 2H), 7.11 (td, J=8.9, 6.7 Hz, 4H), 5.91 (s, 1H), 5.36(s, 1H), 4.06 (dd, J=13.3, 5.7 Hz, 1H), 3.75 (dd, J=13.4, 6.8 Hz, 1H), 3.55 (s, 3H), 3.27 (d, J=10.8 Hz, 2H), 3.23-3.09 (m, 2H), 2.77 (d, J=12.0 Hz, 1H), 1.45 (s, 2H), 1.40 (s, 1H), 1.37 (s, 1H), 1.31 (s, 2H).
[0439] Primer 81: Enantiomer 2: (9 mg, 9.0 % prinos); LCMS: m/z = 532.3 (M+H); rt 2.292 min; LC-MS Postupak: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.18 (d, J=9.0 Hz, 1H), 8.09 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.47 (dd, J=8.6, 5.6 Hz, 2H), 7.34 (dd, J=8.6, 5.6 Hz, 2H), 7.11 (td, J=8.8, 6.6 Hz, 4H), 5.91 (s, 1H), 5.36(s, 1H), 4.06 (dd, J=13.1, 5.0 Hz, 1H), 3.75 (dd, J=13.2, 7.1 Hz, 1H), 3.55 (s, 3H), 3.30-3.11(m, 4H), 2.77 (d, J=13.4 Hz, 1H), 1.45 (s, 2H), 1.40 (s, 1H), 1.37 (s, 1H), 1.31 (s, 2H).
INTERMEDIJER 54
5-metil-8-(3-metil-5-(2-metilpiridin-4-il)piperazin-1 -il)-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0440]
[0441] Mešanom rastvoru 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (120 mg, 0.360 mmol) u acetonitrilu (8 mL) su dodati DIPEA (0.189 mL, 1.080 mmol) i 2-metil-6-(2-metilpiridin-4-il)piperazin (103 mg, 0.540 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 5 min i mešana je 1 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod visokim vakuumom da da 5-metil-8-(3-metil-5-(2-metilpiridin-4-il)piperazin-1 -il)-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (100 mg, 74.2 % prinos) kao braon gumu; LCMS: m/z = 375.2 (M+H); rt 1.473 min. LC-MS Postupak: Kolona-KINETEX-XB-C18 (75 × 3 mm- 2.6 µm); Mobilna faza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (98:2); Mobilna faza B: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (2:98); Gradijent: 20-100 % B tokom 4 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B protok 1.5 mL/min; zatim Gradijent: 100-20 % B tokom 0.1 minuta, protok 1.5 mL/min.
PRIMER 84
8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metil-5-(2-metγlpiridin-4-il)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0442]
[0443] Mešanom rastvoru 5-metil-8-(3-metil-5-(2-metilpiridin-4-il)piperazin-1-il)-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (60 mg, 0.160 mmol) u acetonitrilu (6 mL) su dodati natrijum terc-butoksid (77 mg, 0.801 mmol) i 4,4'-(hlorometilen)bis(fluorobenzen) (57.4 mg, 0.240 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C i mešana je 16 h. Reakciona smeša je filtrirana i koncentrovana je pod visokim vakuumom da da braon gumu. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC (Postupak) Postupak: Kolona- X-Bridge Phenyl (250 mm × 19 mm ID, 5 µm); Mobilna faza A: Pufer: Pufer: 10 mm Amonijum bikarbonat u vodi pH-9.5; Mobilna faza B: acetonitril: metanol (1:1); Gradijent: 70-85 % B tokom 11 minuta, protok 17 mL/min. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metil-5-(2-metilpiridin-4-il)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (8.2 mg, 8.9 % prinos); LCMS: m/z = 577.3 (M+H); rt 2.132 min; LC-MS Postupak: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.32 (d, J=4.9 Hz, 1H), 8.16 (d, J=9.0 Hz, 1H), 8.11 (d, J=9.0Hz, 1H), 7.39-7.25 (m, 2H), 7.25-7.02 (m, 7H), 6.99 (br. s., 2H), 6.33 (br. s., 1H), 4.00 (br. s.,1H), 3.51 (s, 3H), 3.20 (d, J=11.7 Hz, 1H), 3.08 (br. s., 1H), 2.96 (d, J=9.8 Hz, 2H), 2.83 (br. s.,1H), 2.40 (s, 3H), 1.09-0.90 (m, 3H).
INTERMEDIJER 57
terc-butil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-izobutirilpiperazin-1-karboksilat
[0444]
[0445] Mešanom rastvoru 1-(terc-butil) 3-metil 4-(bis(4-fluorofenil)metil) piperazin-1,3-dikarboksilata (0.4 g, 0.896 mmol) u tetrahidrofuranu (6 mL) na 0 °C dodat je izopropil magnezijum hlorid u THF (2.240 mL, 4.48 mmol) kap po kap pod azotom tokom 3 min. Reakciona smeša je polako zagrevana do sobne temperature i mešana je 3 h. Reakcija je kvenčovana sa zasićenim amonijum hloridnim rastvorom (50 mL). Smeša je ekstrahovana sa etil acetatom (3x100 mL). Kombinovan organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, filtriran i isparen pod sniženim pritiskom da da terc-butil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-izobutirilpiperazin-1-karboksilat (400 mg, 97 % prinos) kao braon ulje. LCMS: m/z = 459.2 (M+H); rt 4.25 min. LC-MS Postupak: Kolona-KINETEX-XB-C18 (75 × 3 mm-2.6 µm); Mobilna faza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (98:2); Mobilna faza B: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (2:98); Gradijent: 20-100 % B tokom 4 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B protok 1.5 mL/min; zatim Gradijent: 100-20 % B tokom 0.1 minuta, protok 1.5 mL/min.
INTERMEDIJER 58
1-(1-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-2-il)-2-metilpropan-1-on
[0446]
[0447] Mešanom rastvoru terc-butil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-izobutirilpiperazin-1-karboksilata (80 mg, 0.174 mmol) u HCl u dioksanu (26.5 µL, 0.872 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod visokim vakuumom da da HCl so od 1-(1-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-2-il)-2-metilpropan-1-ona (71 mg, 78 % prinos) u vidu braon čvrste supstance. LCMS: m/z = 359.2 (M+H); rt 2.373 min. LC-MS Postupak: Kolona-KINETEX-XB-C18 (75 × 3 mm- 2.6 µm); Mobilna faza A: 0.1%TFA u Milli-Q vodi; Mobilna faza B: 0.1%TFA u acetonitrilu; Gradijent: 20-100 % B tokom 4.0 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B protok 1.5 mL/min, 100-20 % B tokom 0.1 minuta, protok 1.5 mL/min.
PRIMERI 86 DO 87
8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-izobutirilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0448]
[0449] Mešanom rastvoru 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (60 mg, 0.18 mmol) u acetonitrilu (5 mL) su dodati DIPEA (0.094 mL, 0.540 mmol) i HCl so od 1-(1-(bis(4-fluorofenil)metil) piperazin-2-il)-2-metilpropan-1-ona (71.1 mg, 0.18 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 5 min i mešana je 1 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da da braon ulje. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC (Postupak) Postupak: Kolona- X-Bridge Phenyl (250 mm × 19 mm ID, 5 µm); Mobilna faza A: Pufer: Pufer: 10 mm amonijum bikarbonat u vodi pH-9.5; Mobilna faza B: acetonitril; Gradijent: 50-75 % B tokom 12 minuta, protok 17 mL/min. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju proizvod u vidu enantiomerske smeše. Enantiomeri su odvojeni koristeći hiralnu HPLC. Postupak hiralne separacije: Postupak: Kolona-Cellulose C4 (250 × 21) mm, 5 mikrona; M. Faza A: M. Faza B: 0.1% DEA u metanolu; Protok: 20 mL/min.
[0450] Primer 86: Enantiomer 1: (3.2 mg, 3.2 % prinos); LCMS: m/z = 542.3 (M+H); rt 2.31 min; LC-MS Postupak: Kolona- X: Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5µ; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.18 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.10 (d, J=88 Hz, 1H), 7.57 (dd, J=8.7, 5.7 Hz, 2H), 7.37 (dd, J=8.7, 5.5 Hz, 2H), 7.15 (q, J=8.6 Hz.4H), 6.16 (s, 1H), 5.26 (s,1H), 5.01 (d, J=12.2 Hz, 1H), 3.77 (br. s., 1H), 3.63-3.51 (m, 4H), 3.48 (t, J=12.0 Hz, 1H), 3.24(dd, J=13.1, 4.3 Hz, 1H), 3.17-3.08 (m, 1H), 3.05-2.96 (m, 1H), 2.62 (d, J=12.2 Hz, 1H), 0.85(d, J=6.4 Hz, 3H), 0.55 (d, J=7.1 Hz, 3H).
[0451] Primer 87: Enantiomer 2: (3.4 mg, 3.4 % prinos); LCMS: m/z -= 542.2 (M+H); rt 2.31 min: LC-MS Postupak: Kolona-X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.18 (d, J=88 Hz, 1H), 8.10 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.57 (dd, J=8.7, 5.5 Hz, 2H), 7.37 (dd, J=8.8, 5.6 Hz, 2H), 7.15 (q, J=8.6 Hz, 4H), 6.16 (s, 1H), 5.26 (s,1H), 5.01 (d, J=130 Hz, 1H), 3.77 (br. s., 1H), 3.63-3.51 (m, 4H), 3.48 (t, J=11.5 Hz, 1H), 3.24(dd, J=13.1, 4.3 Hz, 1H), 3.17-3.10 (m, 1H), 3.06-2.97 (m, 1H), 2.62 (d, J=1.5 Hz, 1H), 0.85 (d, J=6.4 Hz, 3H), 0.55 (d, J=7.1 Hz, 3H).
INTERMEDIJER 59
terc-butil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(2-hidroksi-3-metilbutan-2-il)piperazin-1-karboksilat
[0452]
[0453] Mešanom rastvoru terc-butil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-izobutirilpiperazin-1-karboksitata (320 mg, 0.698 mmol) u tetrahidrofuranu (5 mL) na 0 °C dodat je metil magnezijum hlorid u THF (1.163 mL, 3.49 mmol) kap po kap pod azotom tokom 3 min. Reakciona smeša je polako zagrevana do sobne temperature i mešana je 3 h. Reakcija je kvenčovana sa zasićenim amonijum hloridnim rastvorom (50 mL). Smeša je ekstrahovana sa etil acetatom (3 × 100 mL). Kombinovan organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, filtriran i isparen pod sniženim pritiskom da da terc-butil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(2-hidroksi-3-metilbutan-2-il)piperazin-1-karboksilat (230 mg, 36.1 % prinos) kao braon ulje. LCMS: m/z = 475.5 (M+H); rt 1.32 min. LC-MS Postupak: Kolona- AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm)1.7 µm; Mobilna faza A: Pufer: acetonitril (95:5); Mobilna faza B: Pufer: acetonitril (5:95), Pufer: 10 mM amonijum acetat; Gradijent: 20-100 % B tokom 2.0 minuta, zatim zadržavanje od 0.3 minuta pri 100 % B, protok 0.7 mL/min.
INTERMEDIJER 60
2-(1-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-2-il)-3-metilbutan-2-ol, HCl
[0455] Rastvor terc-butil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(2-hidroksi-3-metilbutan-2-il) piperazin-1-karboksilata (230 mg, 0.485 mmol) u HCl u dioksanu (3.0 mL, 99 mmol) je mešan na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod visokim vakuumom da da HCl so od 2-(1-(bis(4-fluorofenil)metil) piperazin-2-il)-3-metilbutan-2-ola (200 mg, 50.2 % prinos) u vidu braon čvrste supstance. LCMS: m/z = 375.2 (M+H); rt 2.574 min. LC-MS Postupak: Kolona-KINETEX-XB-C18 (75 × 3 mm- 2.6 µm); Mobilna faza A: 0.1%TFA u Milli-Q vodi; Mobilna faza B: 0.1%TFA u acetonitrilu; Gradijent: 20-100 % B tokom 4.0 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B protok 1.5 mL/min, 100-20 % B tokom 0.1 minuta, protok 1.5 mL/min.
PRIMERI 88 DO 89
8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(2-hidroksi-3-metilbutan-2-il)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0456]
[0457] Mešanom rastvoru 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (80 mg, 0.240 mmol) u acetonitrilu (5 mL) su dodati DIPEA (0.126 mL, 0.720 mmol) i 2-(1-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-2-il)-3-metilbutan-2-ol, HCl (99 mg, 0.240 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 5 min i mešana 1 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da da braon ulje. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC (Postupak) Postupak: Kolona- sun fire C18 (150 mm × 19 mm ID, 5 µm); Mobilna faza A: 0.1% TFA u vodi: Mobilna faza B: acetonitril; Gradijent: 20 % B tokom 2.0 minuta, 20-60 % B tokom 13 minuta, protok 20 mL/min. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju proizvod u vidu dijastereomerne smeše. Dijastereomer 1 (Racemat/Glavni) i Dijastereomer 2(Racemat/Sporedni); Enantiomeri su odvojeni koristeći hiralnu HPLC. Postupak hiralne separacije: Postupak: Kolona- Lux-cellulose C4 (250 × 21.2) mm, 5 mikrona; M. Faza A: M. Faza B: 0.1% DEA u metanolu; Protok: 20 mL/min.
[0458] Primer 88: Dijastereomer 1, Enantiomer 1: (9.3 mg, 6.7 % prinos); LCMS: m/z = 558.3 (M+H); rt 2.21 min; LC-MS Postupak: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.20 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.11 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.48 (dd, J=8.7, 5.5 Hz, 2H), 7.35 (dd, J=8.6, 5.6 Hz, 2H), 7.07 (td, J=8.8, 5.4 Hz, 4H), 5.87 (s, 1H), 5.42(s, 1H), 4.14-4.05 (m, 2H), 3.61-3.46 (m, 5H), 3.30-3.25 (m, 1H), 3.11 (br. s., 2H), 2.90 (s,1H), 2.74 (s, 1H), 1.02 (s, 3H), 0.82(d, J=6.8 Hz, 3H), 0.52 (d, J=6.6 Hz, 3H).
[0459] Primer 89: Dijastereomer 1: Enantiomer 2: (5.6 mg, 4.0 % prinos); LCMS: m/z = 558.2 (M+H); rt 2.195 min; LC-MS Postupak: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.15-8.21 (m, 1 H), 8.08-8.13 (m, 1 H), 7.45-7.52 (m, 2 H), 7.32-7.39 (m, 2 H), 7.02-7.12 (m, 4 H), 5.87 (s, 1 H), 5.42 (s, 1 H), 4.08 (br d, J=4.9 Hz, 1 H), 3.50-3.61 (m, 5 H), 3.26-3.29 (m, 1 H), 3.07-3.13 (m, 2 H), 2.79-2.86 (m, 1 H), 2.52-2.55 (m, 1 H), 1.92-2.00 (m, 1 H), 1.02 (s, 3 H), 0.82 (d, J=6.6 Hz, 3 H), 0.52 (d, J=6.6 Hz, 3 H).
PRIMERI 90 I 91
8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(2-fluoro-3-metilbutan-2-il)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA
[0460]
[0461] Mešanom rastvoru 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(2-hidroksi-3-metilbutan-2-il)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (80 mg, 0.143 mmol) u DCM (5 mL) na 0 °C dodat je DAST (0.038 mL, 0.287 mmol). Reakciona smeša je polako zagrevana do sobne temperature i je mešana 2 h. Reakcione smeše su kvenčovane sa vodom (20 mL) i ekstrahovane su sa etil acetatom (3x50 mL). Kombinovan organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, filtriran i isparen pod sniženim pritiskom da da braon ulje. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC (Postupak) Postupak: Kolona-SUNFIRE C18 (150 mm × 19 mm ID, 5 µm); Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat u vodi; Mobilna faza B: acetonitril; Gradijent: 70-85.33 % B tokom 9.5 minuta, protok 17 mL/min. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju dijastereomernu smešu: Dijastereomer 1 (Racemat/Glavni) i Dijastereomer 2(Racemat/Sporedni); Enantiomeri su odvojeni koristeći hiralnu HPLC. Postupak hiralne separacije: Postupak: Kolona-DAD-1 Cellulose-2 (250 × 4.6) mm, 5 mikrona; DAD-2 Cellulose-4 (250 × 4.6) mm, 5 mikrona; M. Faza: 0.1% DEA u acetonitrilu:IPA(70:30); Protok: 2.0 mL/min.
[0462] Primer 90: Dijastereomer 1, Enantiomer 1 (homohiralni): (3.1 mg, 3.2 % prinos); LCMS: m/z = 560.3 (M+H); rt 2.506 min; LC-MS Postupak: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.21 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.12 (d, J=88 Hz, 1H), 7.57 (dd, J=8.4, 5.5 Hz, 2H), 7.33 (dd, J=8.7, 5.5 Hz, 2H), 7.22-6.99 (m, 4H), 5.95 (s, 1H), 5.30 (s, 1H),4.23 (dd, J=13.4,6.6 Hz, 1H), 3.76 (dd, J=13.3, 7.2 Hz, 1H), 3.57 (s, 3H), 3.47-3.39 (m, 1H),3.29 (br. s., 1H), 3.26-3.15 (m, 3H), 2.90 (t, J=6.6 Hz, 1H), 1.33- 1.12 (m, 3H), 0.83 (d, J=6.6 Hz, 3H), 0.55 (d, J=7.1 Hz, 3H).
[0463] Primer 91: Dijastereomer 1, Enantiomer 2 (homohiralni): (2.1 mg, 2.2 % prinos); LCMS: m/z = 560.3 (M+H); rt 2.506 min; LC-MS Postupak: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.21 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.12 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.57 (dd, J=8.6,5.6 Hz, 2H), 7.33 (dd, J=8.6, 5.6 Hz, 2H), 7.15 (t, J=8.9 Hz, 2H), 7.08 (t, J=8.9 Hz, 2H),5.95 (s, 1H), 5.30 (s, 1H), 4.23 (dd, J=13.3, 6.7 Hz, 1H), 3.76 (dd, J=13.3, 7.5 Hz, 1H), 3.57 (s,3H), 3.47-3.39 (m, 1H), 3.29 (br. s., 1H), 3.24-3.15 (m, 3H), 2.95-2.87 (m, 1H), 1.35-1.18 (m, 3H), 0.83 (d, J=6.6 Hz, 3H), 0.55 (d, J=7.1 Hz, 3H).
INTERMEDIJER 61
terc-butil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(hidroksimetil)piperazin-1-karboksilat
[0464]
[0465] Mešanom rastvoru 1-(terc-butil) 3-metil 4-(bis(4-fluorofenil)metil) piperazin-1,3-dikarboksilata (1.5 g, 3.36 mmol) u etanolu (15 mL) na 0 °C su dodati NaBH4(0.635 g, 16.80 mmol) i kalcijum hlorid (1.864 g, 16.80 mmol). Reakciona smeša je polako zagrevana do sobne temperature i mešana je 24 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i DCM (200 mL) je dodat. Reakciona smeša je filtrirana kroz sloj celita. Reakcija je kvenčovana sa vodom (100 mL). Smeša je ekstrahovana sa DCM (3x100 mL). Kombinovan organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, filtriran i isparen pod sniženim pritiskom da da braon ulje. Sirovo jedinjenje je prečišćeno sa ISCO<®>(koristeći 24 g silika gel kolonu; koristeći 13 % -17 % etilacetat/ petrol etar) da da terc-butil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(hidroksimetil)piperazin-1-karboksilat (0.8 g, 56.3 % prinos) u vidu braon čvrste supstance. LCMS: m/z = 419.2 (M+H); rt 3.39 min. LC-MS Postupak: Kolona-KINETEX-XB-C18 (75 × 3 mm- 2.6 µm); Mobilna faza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (98:2); Mobilna faza B: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu(2:98); Gradijent: 20-100 % B tokom 4 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B protok 1.5 mL/min; zatim Gradijent: 100-20 % B tokom 0.1 minuta, protok 1.5 mL/min.
INTERMEDIJER 62
terc-butil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(metoksimetil)piperazin-1-karboksilat
[0466]
[0467] Mešanom rastvoru terc-butil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(hidroksimetil)piperazin-1-karboksilata (150 mg, 0.358 mmol) u DMF (8 mL) na 0 °C dodat je NaH (43.0 mg, 1.075 mmol). Reakciona smeša je mešana 10 min na 0 °C, praćeno dodavanjem metil jodida (0.034 mL, 0.538 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do sobne temperature i mešana je 3 h. Reakcija je kvenčovana sa vodom (50 mL). Smeša je ekstrahovana sa etil acetatom (3x100 mL). Kombinovan organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, filtriran i isparen pod sniženim pritiskom da da terc-butil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(metoksimetil)piperazin-1-karboksilat (0.15 g, 97 % prinos) kao braon gumu. LCMS: m/z = 433.5 (M+H); rt 2.31 min. LC-MS Postupak: Kolona- AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm)1.7 µm; Mobilna faza A: Pufer: acetonitril (95:5); Mobilna faza B: Pufer: acetonitril (5:95), Pufer: 10 mM amonijum acetat; Gradijent: 20-100 % B tokom 2.0 minuta, zatim zadržavanje od 0.2 minuta na 100 % B, protok 0.7 mL/min.
INTERMEDIJER 63
1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-(metoksimetil)piperazin, HCl
[0468]
[0469] Mešani rastvor terc-butil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(metoksimetil)pipεrazinε-1-karboksilata (0.1 g, 0.231 mmol) u HCl u dioksanu (3.0 mL, 99 mmol) je mešan na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod visokim vakuumom da da HCl so od 1-(bis(4-fluorofenil) metil)-2-(metoksimetil)piperazina (85 mg, 100 % prinos) u vidu braon čvrste supstance. LCMS: m/z = 333.2 (M+H); rt 2.16 min. LC-MS Postupak: Kolona-KINETEX-XB-C18 (75 × 3 mm- 2.6 µm); Mobilna faza A: 0.1% TFA u Milli-Q vodi; Mobilna faza B: 0.1%TFA u acetonitrilu; Gradijent: 20-100 % B tokom 4.0 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B protok 1.5 mL/min, 100-20 % B tokom 0.1 minuta, protok 1.5 mL/min.
PRIMERI 92 DO 93
8-(4-(bis(4-fluorofeni))metil)-3-(metoksimetil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0470]
[0471] Mešanom rastvoru 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (100 mg, 0.300 mmol) u acetonitrilu (6 mL) su dodati DIPEA (0.157 mL, 0.900 mmol) i HCl so od 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-(metoksimetil)piperazina (111 mg, 0.300 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 5 min i mešana je 2 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da da braon ulje. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC uz sledeće uslove: Kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; Gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 18% B, 18-50 % B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; Protok: 15 mL/min; Temperatura Kolone: 25 °C. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju proizvod u vidu enantiomerske smeše. Enantiomeri su odvojeni koristeći hiralnu HPLC. Postupak hiralne separacije: Postupak: Kolona- Cellulose C4 (250 × 21) mm, 5 mikrona; M. Faza A: M. Faza B: 0.1%DEA u acetonitrilu; Protok: 20 mL/min. Enantiomerska smeša je dala Enantiomer 1 i Enantiomer 2.
[0472] Primer 92: Enantiomer 1: (24.9 mg, 16.03 % prinos); LCMS: m/z = 516.2 (M+H); rt 2.21 min; LC-MS Postupak: Kolona-X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.15 (d, J=88 Hz, 1H), 8.07 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.62-7.41 (m,4H), 7.15 (td, J=8.9, 2.3 Hz, 4H), 6.11 (s, 1H), 5.14 (s, 1H), 4.13 (d, J=11.2 Hz, 1H), 3.77 (d,J=6.6 Hz, 2H), 3.62 (d, J=11.7 Hz, 1H), 3.54 (s, 3H), 3.25-3.08 (m, 5H), 2.96 (br. s., 1H), 2.80- 2.71 (m, 1H), 2.55 (br. s., 1H).
[0473] Primer 93: Enantiomer 2: (27.7 mg, 0.053 mmol, 17.74 % prinos); LCMS: m/z = 516.2 (M+H); rt 2.21 min; LC-MS Postupak: Kolona-X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.15 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.07 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.53 (dt, J=8.7, 5.4 Hz, 4H), 7.15 (td, J=8.9, 2.3 Hz, 4H), 6.11 (s, 1H), 5.14 (s, 1H).4.13 (d, J=12.0 Hz,1H).3.77 (d, J=6.4 Hz. 2H), 3.62 (d, J=13.0 Hz, 1H), 3.54 (s, 3H), 3.22-3.09 (m, 5H), 2.96 (br.s, 1H), 2.81-2.70 (m, 1H), 2.57-2.53 (m, 1H).
INTERMEDIJER 65
1-(terc-butil) 3-metil 4-(bis(4-hlorofenil)metil)piperazin-1,3-dikarboksilat
[0474]
[0475] Mešanom rastvoru 1-(terc-butil) 3-metil piperazin-1,3-dikarboksilata (250 mg, 1.023 mmol) u acetonitrilu (8 mL) su dodati DIPEA (0.536 mL, 3.07 mmol) i 4,4'-(bromometilen)bis(hlorobenzen) (485 mg, 1.535 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 10 min i mešana je 16 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod visokim vakuumom da da braon gumu. Sirovo jedinjenje je prečišćeno sa ISCO<®>(koristeći 24 g silika gel kolonu; koristeći 8 % -12 % etil acetat/ petrol etar) da da 1-(terc-butil) 3-metil 4-(bis(4-hlorofenil)metil) piperazin-1,3-dikarboksilat (280 mg, 57.1 % prinos) kao braon gumu. LCMS: m/z = 481.2 (M+2H); rt 1.803 min; LC-MS Postupak: Kolona-KINETEX-XB-C18 (75 × 3 mm-2.6 µm); Mobilna faza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (98:2); Mobilna faza B: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (2:98); Gradijent: 80 % B tokom 0.5 minuta, 80-98% B tokom 2.5 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 1 minuta pri 98% B protok 1.0 mL/min.
INTERMEDIJER 66
metil 1-(bis(4-hlorofenil)metil)piperazin-2-karboksilat, HCl
[0476]
[0477] Rastvor 1-(terc-butil) 3-metil 4-(bis(4-hlorofenil)metil) piperazin-1,3-dikarboksilata (400 mg, 0.834 mmol) u HCl u dioksanu (5.0 mL, 165 mmol) je mešan na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod visokim vakuumom da da HCl so od metil 1-(bis(4-hlorofenil)metil)piperazin-2-karboksilata (320 mg, 86% prinos) u vidu braon čvrste supstance. LCMS: m/z = 379.2 (M+H); rt 2.44 min. LC-MS Postupak: Kolona-KINETEX-XBC18 (75 × 3 mm- 2.6 µm); Mobilna faza A: 0.1%TFA u Milli-Q vodi; Mobilna faza B: 0.1%TFA u acetonitrilu; Gradijent: 20-100 % B tokom 4.0 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B protok 1.5 mL/min, 100-20 % B tokom 0.1 minuta, protok 1.5 mL/min.
PRIMERI 94 DO 95
metil1-(bis(4-hlorofenil)metil)-4-(6-cijano-3-fluoro-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat
[0478]
[0479] Mešanom rastvoru metil 1-(bis(4-hlorofenil)metil)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilata (80 mg, 0.142 mmol) u acetonitrilu (6 mL) na 0 °C dodat je 1-hlorometil-4-fluoro-1 4-diazoniabiciklo 2.2.2 oktan bis(tetrafluoroborat) (65.5 mg, 0.185 mmol) u THF\H2O (0.5\0.5 mL) kap po kap na 0 °C. Reakciona smeša je mešana 1.5 h. Reakciona smeša je polako zagrevana do sobne temperature i mešana još 3 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da da braon ulje. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC (Postupak) Postupak: Kolona- SUNFIRE C18 (150 mm × 19 mm ID, 5 µm); Mobilna faza A: 10 mM Amonijum acetat u vodi: Mobilna faza B: acetonitril; Gradijent: 50-86 % B tokom 15 minuta, protok 17 mL/min. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju proizvod u vidu enantiomerske smeše. Enantiomeri su odvojeni koristeći hiralnu HPLC. Postupak hiralne separacije: Postupak: Kolona- Lux-cellulose C2 (250 × 21.2) mm, 5 mikrona; M. Faza: 0.1% Amonijum Hidroksid u acetonitrilu: metanol (70:30); Protok: 20 mL/min.
[0480] Primer 94: Enantiomer 1: (1.5 mg, 1.9 % prinos); LCMS: m/z = 580.1 (M+H); rt 2.52 min; LC-MS Postupak: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.23-8.07 (m, 2H), 7.58 (d, J=8.3 Hz, 2H), 7.49-7.30 (m,6H), 5.19 (s, 1H), 4.07 (d, J=12.7 Hz, 1H), 3.70-3.57 (m, 4H), 3.55 (s, 3H), 3.50-3.39 (m,2H), 2.59 (d, J=11.7 Hz, 2H), 2.11 (s, 1H).
[0481] Primer 95: Enantiomer 2: (1.5 mg, 1.9 % prinos); LCMS: m/z = 580.1 (M+H); rt 2.52 min; LC-MS Postupak: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.23-8.09 (m, 2H), 7.58 (d,J=8.6 Hz, 2H), 7.49-7.32 (m, 6H), 5.19 (s, 1H), 4.07 (d, J=11.2 Hz, 1H), 3.72-3.56 (m, 5H),3.54 (s, 3H), 3.49-3.39 (m, 2H), 2.59 (d, J=11.0 Hz, 1H), 2.11 (s, 1H).
PRIMERI 96 DO 97
metil 1-(bis(4-hlorofenil)metil)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat
[0482]
[0483] Mešanom rastvoru 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (85 mg, 0.255 mmol) u acetonitrilu (8 mL) su dodati DIPEA (0.134 mL, 0.765 mmol) i HCl so od metil 1-(bis(4-hlorofenil)metil) piperazin-2-karboksilata (106 mg, 0.255 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 5 min i je mešana 2 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da da braon ulje. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC (Postupak) Postupak: Kolona-Sun fire C18 (250 × 4.6 mm) 3.5 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat u vodi; Mobilna faza B: acetonitril; Gradijent: 40 % B tokom 2 minuta, 40-60 % B tokom 1 minuta, 60-100 % B tokom 17 minuta, Protok: 1 mL/min. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju proizvod u vidu enantiomerske smeše. Enantiomeri su odvojeni koristeći hiralnu HPLC. Postupak hiralne separacije: Kolona: Chiral Pak IG (250 × 4.6) mm; 5µ; Korastvarač: 0.2% NH4OH u metanolu acetonitril (1:1); procenat ko-rastvarača: 40 %, Temperatura Kolone: 30 °C; Povratni Pritisak: 100 bara; Ukupni Tok: 4 g/min.
[0484] Primer 96: Enantiomer 1: (3 mg, 2.1 % prinos); LCMS: m/z = 562.2 (M+H); rt 2.49 min: LC-MS Postupak: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm8.16 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.09 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.56 (d, J=8.6Hz, 2H), 7.47-7.29 (m, 6H), 6.14 (s, 1H), 5.17 (s, 1H), 4.79 (d, J=12.5 Hz, 1H), 3.65 (d, J=13.9Hz, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.54 (s, 3H), 3.47-3.35 (m, 2H), 3.16 (dd, J=12.5, 3.9 Hz, 1H), 3.10 -2.99 (m, 1H), 2.65 (d, J=14.4 Hz, 1H).
[0485] Primer 97: Enantiomer 2: (4 mg, 2.8 % prinos); LCMS: m/z = 562.2 (M+H); rt 2.49 min; LC-MS Postupak: Kolona-X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm8.16 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.09 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.56 (d, J=8.6Hz, 2H), 7.46-7.30 (m, 6H), 6.15 (s, 1H), 5.17 (s, 1H), 4.79 (d, J=12.2 Hz, 1H), 3.65 (d, J=9.8Hz, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.56-3.47 (m, 3H), 3.46-3.36 (m, 2H), 3.16 (dd, J=12.3, 3.5 Hz, 1H),3.09-2.99 (m, 1H), 2.65 (d, J=13.9 Hz, 1H).
PRIMER 98
(R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-7-bromo-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0486]
[0487] Mešanom rastvoru (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (220 mg, 0.453 mmol) u DMF (8 mL) dodat je NBS (121 mg, 0.680 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod visokim vakuumom da da braon gumu. Sirovo jedinjenje je prečišćeno sa ISCO<®>(koristeći 12 g silika gel kolonu; koristeći 56 % -60 % etil acetat/ petrol etar) da da (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-7-bromo-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (150 mg, 58.7 % prinos) u vidu braon čvrste supstance. LCMS: m/z = 564.2 (M+H); rt 4.045 min. LC-MS Postupak: Kolona-KINETEX-XB-C18 (75 × 3 mm-2.6 µm); Mobilna faza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (98:2); Mobilna faza B: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (2:98); Gradijent: 20-100 % B tokom 4 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B protok 1.5 mL/min; zatim Gradijent: 100-20 % B tokom 0.1 minuta, protok 1.5 mL/min.
PRIMER 99
(R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5,7-dimetil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0488]
[0489] Mešanom rastvoru (R)-8-(4-(bis (4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-7-bromo-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (70 mg, 0.124 mmol) u dioksanu (5 mL) su dodati metilboronska kiselina (11.14 mg, 0.186 mmol) i K2CO3(51.4 mg, 0.372 mmol) pod azotom. Pročišćavanje azotom je nastavljeno 3 min i PdCl2(dppf) (9.07 mg, 0.012 mmol) je dodat. Pročišćavanje je nastavljeno još 3 min. Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 5 min i mešana je 16 h. Reakciona smeša je filtrirana kroz kertridž i koncentrovana je pod visokim vakuumom da da braon gumu. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC (Postupak) Postupak: Kolona- Sun fire C18 (150 × 19 mm) 5 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat u vodi; Mobilna faza B: acetonitril; Gradijent: 50-68 % B tokom 19 minuta, protok 17 mL/min. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5,7-dimetil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (17.9 mg, 28.9 % prinos). LCMS: m/z = 500.3 (M+H); rt1.73 min; LC-MS Postupak: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 0.1% TFA; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 0.1% TFA).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.19-7.98 (m, 2H), 7.54 (dd, J=10.5, 8.8 Hz, 2H), 7.56 (dd,=10.5, 8.8 Hz, 2H), 7.15 (td, J=8.9, 4.0 Hz, 4H), 4.87 (s, 1H), 3.84 (d, J=9.3 Hz, 1H), 3.59 (s, 3H), 3.47-3.33 (m, 2H), 3.07 (d, J=11.7 Hz, 1H), 2.97-2.74 (m, 2H), 2.40 (d, J=11.5 Hz, 1H),2.16 (s, 3H), 1.06 (d, J=6.4 Hz, 3H).
PRIMERI 100 DO 101
8-(4-(bis (4-fluorofenil)metil)-3-(hidroksimetil)piperazin-1-il)-7-hloro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0490]
[0491] Mešanom rastvoru 8-(4-(bis (4-fluorofenil) metil)-3-(hidroksimetil) piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (90 mg, 0.179 mmol) u DCM (6 mL) dodat je NCS (47.9 mg, 0.359 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 4 h. Reakcija je kvenčovana sa vodom (5 mL). Reakciona smeša je ekstrahovana sa etil acetatom (3x10 mL). Kombinovan organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, filtriran i isparen pod sniženim pritiskom da da braon ulje. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne LC-MS. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC uz sledeće uslove: Kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 10 % B, 10-40 % B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; Protok: 15 mL/min; Temperatura Kolone: 25 °C. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju proizvod u vidu enantiomerske smeše. Enantiomeri su odvojeni koristeći hiralnu HPLC. Postupak hiralne separacije: Postupak: Kolona-Cellulose C5 (250 × 30) mm, 5 mikrona; M. Faza A: 0.1% amonijak u metanolu; Protok: 30 mL/min.
[0492] Primer 100: Enantiomer 1: (9.8 mg, 10.2 % prinos); LCMS: m/z = 536.2 (M+H); rt 2.33 min; LC-MS Postupak: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm8.18 (q, J=8.8 Hz, 2H), 7.66-7.49 (m, 4H), 7.15 (td, J=8.9,3.5 Hz, 4H), 5.20 (s, 1H), 4.25 (br. s., 1H), 3.80 (d, J=10.0 Hz, 2H), 3.73-3.60 (m, 5H), 3.57 (d,J=12.2 Hz, 1H), 3.42-3.36 (m, 1H), 3.11-3.03 (m, 1H), 2.74 (s, 1H), 2.48 (br. s., 1H).
[0493] Primer 101: Enantiomer 2: (6.5 mg, 6.8 % prinos); LCMS: m/z = 536.2 (M+H); rt 2.33 min; LC-MS Postupak: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.18 (q, J=8.8 Hz, 2H), 7.67-7.46 (m, 4H), 7.15 (td, J=8.9,3.4 Hz, 4H), 5.20 (s, 1H), 4.24 (t, J=5.3 Hz, 1H), 3.86-3.74 (m, 2H), 3.73-3.60 (m, 5H), 3.57(d, J=12.2 Hz, 1H), 3.42-3.35 (m, 1H), 3.07 (t, J=10.1 Hz, 1H), 2.74 (br. s., 1H), 2.48 (br. s., 1H).
INTERMEDIJER 67
terc-butil (R)-4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-karboksilat
[0494]
[0495] Mešanom rastvoru terc-butil (R)-3-metilpiperazin-1-karboksilata (500 mg, 2.496 mmol) u acetonitrilu (6 mL) su dodati DIPEA (1.308 mL, 7.49 mmol) i 4,4'-(bromometilen)bis(hlorobenzen) (1183 mg, 3.74 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 10 min i mešana je 16 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod visokim vakuumom da da braon gumu. Sirovo jedinjenje je prečišćeno sa ISCO<®>(koristeći 24 g silika gel kolonu; koristeći 8 % -12 % etil acetat/ petrol etar) da da terc-butil (R)-4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-karboksilat (180 mg, 83 % prinos) kao braon gumu. LCMS: m/z = 437.2 (M+H); rt 2.24 min.LC-MS Postupak: Kolona-KINETEX-XB-C18 (75 × 3 mm- 2.6 µm); Mobilna faza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (98:2); Mobilna faza B: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (2:98); Gradijent: 80 % B tokom 0.5 minuta, 80-98% B tokom 2.5 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 1 minuta pri 98% B protok 1.0 mL/min.
INTERMEDIJER 68
(R)-1-(bis(4-hlorofenil)metil)-2-metilpiperazin
[0496]
[0497] Rastvor terc-butil (R)-4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-karboksilata (170 mg, 0.390 mmol) u HCl u dioksanu (3.0 mL, 99 mmol) je mešan na sobnoj temperaturi 1 h.
Reakciona smeša je koncentrovana pod visokim vakuumom da da HCl so od (110 mg, 84 % prinos) u vidu braon čvrste supstance. LCMS: m/z = 336.2 (M+H); rt 2.39 min. LC-MS Postupak: Kolona-KINETEX-XB-C 18 (75 X 3 mm- 2.6 µm); Mobilna faza A: 0.1% TFA u Milli-Q vodi; Mobilna faza B: 0.1%TFA u acetonitrilu; Gradijent: 20-100 % B tokom 4.0 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B protok 1.5 mL/min, 100-20 % B tokom 0.1 minuta, protok 1.5 mL/min.
PRIMER 102
(R)-4-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril
[0498]
[0499] Mešanom rastvoru 6-bromo-3-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (100 mg, 0.243 mmol) u acetonitrilu (8 mL) su dodati DIPEA (0.127 mL, 0.728 mmol) i HCl so od (R)-1-(bis(4-hlorofenil) metil)-2-metilpiperazina, HCl (90 mg, 0.243 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 5 min i mešana je 3 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod visokim vakuumom da da braon gumu. Sirovo jedinjenje je prečišćeno sa ISCO<®>(koristeći 12 g silika gel kolonu; koristeći 58 %-62 % etil acetat/ petrol etar) da da (R)-4-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril (110 mg, 50.8 % prinos) u vidu braon čvrste supstance. LCMS: m/z = 598.0 (M+H); rt 4.41 min. LC-MS Postupak: Kolona-KINETEX-XB-C18 (75 × 3 mm- 2.6 µm); Mobilna faza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (98:2); Mobilna faza B: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (2:98); Gradijent: 20-100 % B tokom 4 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B protok 1.5 mL/min; zatim Gradijent: 100-20 % B tokom 0.1 minuta, protok 1.5 mL/min.
PRIMER 103
(R)-8-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril
[0500]
[0501] Mešanom rastvoru (R)-4-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitrila (80 mg, 0.134 mmol) u NMP (5 mL) su dodati cink (1.751 mg, 0.027 mmol) i cink cijanid (31.5 mg, 0.268 mmol) pod azotom. Pročišćavanje azotom je nastavljeno 3 min. Zatim, dppf (4.45 mg, 8.04 µmol) i Pd2(dba)3(12.26 mg, 0.013 mmol) su dodati i pročišćavanje je nastavljeno još 3 min. Reakciona smeša je zagrejana do 80 °C tokom 5 min i mešana je 4 h. Reakcija je kvenčovana zasićenim amonijum hloridnim rastvorom (5 mL). Reakciona smeša je ekstrahovana sa etil acetatom (3 × 10 mL). Kombinovan organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, filtriran i isparen pod sniženim pritiskom da da braon ulje. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC (Postupak) DAD 1: Bridge phenyl (250 mm × 4.6 mm) 5 µm; DAD-2: Inersil ODS (250 mm × 4.6 mm) 5 µm; MFA: 10 mM amonijum acetat u vodi pH: 4.5; MFB: acetonitril; Gradijent: 30-60 %B tokom 2 minuta, 60-100 %B tokom 14 minuta, zatim zadržavanje od 4 minuta pri 100 % B; 100-20 %B tokom 1 minuta; Protok: 2 mL/min. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju (R)-8-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (35.0 mg, 47.6 % prinos); LCMS: m/z = 543.2 (M+H); rt 2.729 min; LC-MS Postupak: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.25 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.15 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.54 (d, J=8.6Hz, 2H), 7.57 (d, J=8.6 Hz, 2H), 7.39 (d, J=8.6 Hz, 4H), 4.92 (s, 1H), 4.10 (d, J=13.7 Hz, 1H),4.00 (d, J=12.2 Hz, 1H), 3.87 (dd, J=12.8, 2.8 Hz, 1H), 3.60 (t, J=10.3 Hz, 1H), 3.53 (s, 3H),3.09-2.97 (m, 1H), 2.96-2.86 (m, 1H), 1.04 (d, J=6.4 Hz, 3H). Jedan pik protona se spojio sa pikom rezidualnog rastvarača.
PRIMER 104
(R)-8-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, dimetilformamid
[0502]
[0503] Mešanom rastvoru 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (60 mg, 0.180 mmol) u acetonitrilu (6 mL) su dodati DIPEA (0.094 mL, 0.540 mmol) i (R)-1-(bis(4-hlorofenil)metil)-2-metilpiperazin, HCl (66.9 mg, 0.180 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 5 min i mešana je 2 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da da braon ulje. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC uz sledeće uslove: Kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Gradijent: zadržavanje od 2 minuta pri 12% B, 12-60 % B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; Protok: 15 mL/min; Temperatura Kolone: 25 °C. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju (R)-8-(4-(bis(4-hlorofenil) metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, dimetilformamid (15.4 mg, 14.5 % prinos); LCMS: m/z = 518.2 (M+H); rt 2.585 min; LC-MS Postupak: Kolona-X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.15 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.07 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.51 (d, J=8.6Hz, 2H), 7.54 (d, J=8.6 Hz, 2H), 7.39 (dd, J=8.6, 3.7 Hz, 4H), 6.08 (s, 1H), 4.86 (s, 1H), 4.02 (d,J=10.5 Hz, 1H), 3.63-3.47 (m, 4H), 3.21-3.05 (m, 2H), 2.98 (d, J=6.4 Hz, 1H), 2.90 (s, 1H),2.46 (br. s., 1H), 1.18 (d, J=6.4 Hz, 3H).
PRIMER 105
(R)-8-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-7-hloro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, dimetilformamid
[0504]
[0505] Mešanom rastvoru (R)-8-(4-(bis (4-hlorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (45 mg, 0.087 mmol) u DCM (5 mL) dodat je NCS (23.18 mg, 0.174 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Reakciona smeša je kvenčovana sa vodom (5 mL) i ekstrahovana je sa etil acetatom (3x 10 mL). Kombinovan organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, filtriran i isparen pod sniženim pritiskom da da braon ulje. Sirovi materijal je prečišćen putem preparative LC-MS (Postupak). Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC uz sledeće uslove: Kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 10 % B, 10-40 % B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; Protok: 15 mL/min; Temperatura Kolone: 25 °C. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da da(R)-8-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-7-hloro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, dimetilformamid (5.2 mg, 9.6 % prinos); LCMS: m/z = 552.2 (M+H); rt2.779 min; LC-MS Postupak: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.17 (q, J=8.8 Hz, 2H), 7.54 (d, J=8.6 Hz, 2H), 7.57 (d, J=8.6Hz, 2H), 7.39 (dd, J=8.6, 1.2 Hz, 4H), 4.87 (s, 1H), 3.90-3.81 (m, 1H), 3.72-3.53 (m, 4H),3.45-3.32 (m, 2H), 3.00-2.85 (m, 1H), 2.44 (d, J=11.7 Hz, 1H), 2.13-2.02 (m, 1H), 1.12 -0.94 (m, 3H).
INTERMEDIJER 69
1 -(terc-butil) 3-ciklopropil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-1,3-dikarboksilat
[0506]
[0507] Mešanom rastvoru 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(terc-butoksikarbonil) piperazin-2-karboksilne kiseline (350 mg, 0.809 mmol) u DCM (8 mL) su dodati DCC (501 mg, 2.428 mmol) i DMAP (99 mg, 0.809 mmol) praćeno dodavanjem ciklopropanola (94 mg, 1.619 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Reakcija je kvenčovana sa vodom (50 mL). Reakciona smeša je ekstrahovana sa etil acetatom (3 × 100 mL). Kombinovan organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, filtriran i isparen pod sniženim pritiskom da da braon ulje. Sirovo jedinjenje je prečišćeno sa ISCO<®>(koristeći 24 g silika gel kolonu; koristeći 11 % -15 % etil acetat/ petrol etar) da da braon gumu (50 mg, 13.1 % prinos). LCMS: m/z = 473.2 (M+H); rt 4.201 min. LC-MS Postupak: Kolona-KINETEX-XB-C18 (75 × 3 mm- 2.6 µm); Mobilna faza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (98:2); Mobilna faza B: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (2:98); Gradijent: 20-100 % B tokom 4 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B protok 1.5 mL/min; zatim Gradijent: 100-20 % B tokom 0.1 minuta, protok 1.5 mL/min.
INTERMEDIJER 70
ciklopropil 1-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-2-karboksilat, HCl
[0508]
[0509] Mešani rastvor 1-(terc-butil) 3-ciklopropil 4-(bis(4-fluorofenil)metil) piperazin-1,3-dikarboksilata (50 mg, 0.106 mmol) u HCl u dioksanu (16.07 µL, 0.529 mmol) je mešan na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod visokim vakuumom da da ciklopropil 1-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-2-karboksilat, HCl u vidu braon čvrste supstance (46 mg, 61.7 % prinos); LCMS: m/z = 373.2 (M+H); rt 2.329 min.
PRIMERI 106 I 107
ciklopropil 1 -(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1 -metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat
[0510]
[0511] Mešanom rastvoru 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (50 mg, 0.150 mmol) u acetonitrilu (5 mL) su dodati DIPEA (0.079 mL, 0.450 mmol) i ciklopropil 1-(bis(4-fluorofenil)metil) piperazin-2-karboksilat, HCl (61.3 mg, 0.150 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 5 min i mešana je 1 h.
Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da da braon ulje. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC Postupak: Kolona- SUNFIRE C18 (150 mm × 19 mm ID, 5 µm); Mobilna faza A: 10 mM Amonijum acetat u vodi; Mobilna faza B: acetonitril; Gradijent: 40 % B tokom 2.0 minuta, 40-60 % B tokom 1.0 minuta, 60-100 % B tokom 17 minuta, protok 17 mL/min. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju proizvod u vidu enantiomerske smeše. Enantiomeri su odvojeni koristeći hiralnu HPLC. Postupak hiralne separacije: Kolona: Chiralcel ODH (250 × 4.6) mm; 5 µm; Izokratski režim, Ko-rastvarač: 0.2% NH4OH u metanolu acetonitril (1:1); procenat korastvarača: 30 %, Temperatura Kolone: 30 °C; Povratni Pritisak: 100 bara; Ukupni Tok: 4 g/min.
[0512] Primer 106: Enantiomer 1: (10.7 mg, 12.3 %prinos); LCMS: m/z = 556.3 (M+H); rt 2.27 min; LC-MS Postupak: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.14-8.19 (m, 1 H), 8.07-8.11 (m, 1 H), 7.55-7.60 (m, 2 H), 7.35-7.40 (m, 2 H), 7.12-7.19 (m, 4 H), 6.13 (s, 1 H), 5.17 (s, 1 H), 4.57-4.68 (m, 1 H), 3.84-3.99 (m, 2 H), 3.54 (s, 3 H), 3.33-3.38 (m, 2 H), 3.01-3.14 (m, 1 H), 2.57-2.64 (m, 1 H), 2.52-2.54 (m, 1 H), 0.50-0.67 (m, 2 H), 0.26-0.37 (m, 2 H).
[0513] Primer 107: Enantiomer 2: (5.0 mg, 5.7 % prinos); LCMS: m/z = 556.3 (M+H); rt 2.27 min; LC-MS Postupak: Kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; gradijent vreme 3 min; Temperatura: 50 °C, 0 % Rastvarača B do 100 % Rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.17 (d, J=8.8 Hz, 1 H), 8.06-8.12 (m, 1 H), 7.57 (dd, J=8.7, 5.5 Hz, 2 H), 7.38 (dd, J=8.6, 5.6 Hz, 2 H), 7.13-7.20 (m, 4 H), 6.13 (s, 1 H), 5.17 (s, 1 H), 4.58-4.65 (m, 1 H), 3.84-3.97 (m, 2 H), 3.54 (s, 3 H), 3.33-3.38 (m, 3 H), 3.03-3.14 (m, 1 H), 2.57-2.64 (m, 1 H).
INTERMEDIJER 71
(4-Fluoro-2-metoksifenil)(4-fluorofenil)metanol
[0514]
[0515] Rastvoru 4-fluoro-2-metoksibenzaldehida (5 g, 32.4 mmol) u tetrahidrofuranu (10 mL) dodat je (4-fluorofenil)magnezijum bromid (64.9 mL, 64.9 mmol) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Reakcija je kvenčovana sa zasićenim NH4Cl rastvorom. Smeša je ekstrahovana dvaput sa etil acetatom (50 mL). Organski sloj je odvojen, osušen preko Na2SO4i isparen do suvoće da da (4-fluoro-2-metoksifenil) (4-fluorofenil)metanol (4.5 g, 41.0 % prinos) u vidu beličaste čvrste supstance. LC-MS Postupak: Kolona: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0x50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5) Mobilna faza B:10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Tok: 0.7 mL/min.<1>H NMR (400 MHz, Metanol-d4): δ 7.92 (d, J = 12.00 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 12.00 Hz, 1H), 7.21-7.27 (m, 2H), 6.85-6.94 (m, 3H), 5.84 (s, 1H), 3.78 (s, 3H).
INTERMEDIJER 72
1-(Hloro(4-fluorofenil)metil)-4-fluoro-2-medioksibenzen
[0516]
[0517] Rastvoru (4-fluoro-2-metoksifenil)(4-fluorofenil)metanola (200 mg, 0.799 mmol) u dihlorometanu (40 mL) dodat je tionil hlorid (0.175 mL, 2.398 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 45 °C tokom 3 h. Reakciona smeša je isparena do suvoće pod visokim vakuumom da da 1-(hloro(4-fluorofenil)metil)-4-fluoro-2-metoksi benzen (170 mg, 69.7 % prinos) u vidu braon tečnosti. Postupak: Kolona: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0x50 mm) 1 .7 µm, Mobilna faza A:10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5) M. faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Tok: 0.7 mL/min.
INTERMEDIJER 73
terc-Butil (2S,5R)-4-((4-fluoro-2-metoksifenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat
[0518]
[0519] Rastvoru 1-(hloro(4-fluorofenil)metil)-4-fluoro-2-metoksibenzena (200 mg, 0.744 mmol) u acetonitrilu (5 mL) su dodati terc-butil (2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (239 mg, 1.117 mmol) i DIPEA (0.390 mL, 2.233 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 80 °C tokom 4 h. Reakciona smeša je razblažena sa vodom i ekstrahovana dva puta sa etil acetatom (20 mL). Organski sloj je odvojen i osušen preko Na2SO4i isparen do suvoće da da terc-butil (2S,5R)-4-((4-fluoro-2-metoksifenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (160 mg, 39.5 % prinos) u vidu beličaste čvrste supstance; LCMS: m/z = 447.4 (M+H); rt 1.75 i 1.76 min (Smeša dijastereomera). Postupak: Kolona: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0x50mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitrilc (95:5) M. faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Tok: 0.7 mL/min.
INTERMEDIJER 74
(2R,5S)-1-((4-fluoro-2-metoksifenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin
[0520]
[0521] Rastvoru terc-butil (2S,5R)-4-((4-fluoro-2-metoksifenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (200 mg, 0.448 mmol) u 1,4-dioksanu (5 mL) dodata je HCl u dioksanu (1.120 mL, 4.48 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h i zatim isparena do suvoće. Čvrsta supstanca je isprana sa dietil etrom da da (2R,5S)-1-((4fluoro-2-metoksifenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin, HCl (190 mg, 82 % prinos) u vidu beličaste čvrste supstance; LCMS: m/z = 347.4 (M+H); rt 1.48 i 1.56 min (Smeša dijastereomera). Postupak: Kolona: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0x50 mm)1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5) M. faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Tok: 0.7 mL/min.
PRIMERI 108 I 109
8-((2S,5R)-4-((4-fluoro-2-metoksifenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-fi-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0522]
[0523] Rastvoru (2R,5S)-1-((4-fluoro-2-metoksifenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazina, HCl (100 mg, 0.261 mmol) u acetonitrilu (5 mL) su dodati DIPEA (0.137 mL, 0.784 mmol) i 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (104 mg, 0.313 mmol). Reakciona masa je zagrejana do 80 °C tokom 16 h i isparena do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC uz sledeće uslove: Kolona: Xbridge phenyl, 21 × 250 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza A: 10 mM amonijum bikarbonat pH-9.5; Mobilna faza B: acetonitril; Gradijent: 60-100 % B tokom 14 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; Tok: 18 mL/min. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju proizvod u vidu dijastereomerne smeše. Enantiomeri su odvojeni koristeći hiralnu HPLC. Hiralna separacija (Prep HPLC Postupak: Kolona: C2/160(250 × 20 mm, 5 mikrona; M. Faza A: acetonitril; M. Faza B:0.1% DEA u acetonitrilu; Protok: 20 mL/min.) dijastereomerne smeše je dala Dijastereomer 1 (Homohiralni); rt 12.690 min, i Dijastereomer 2 (Homohiralni): rt 14.178 min.
[0524] Primer 108: Dijastereomer 1: (6.3 mg, 4.4 % prinos); LCMS: m/z = 530.3 (M+H); rt 1.508 min; Postupak: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm, Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 0.1% TFA, Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 0.1% TFA, Tok: 1.1 mL/min.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.13 (d, J=9.0 Hz, 1H), 8.05 (d, J=8.5 Hz, 1H), 7.73 (t, J=7.8 Hz, 1H), 7.51 (dd, J=8.5, 5.5 Hz, 2H), 7.13 (t, J=8.8 Hz, 2H), 6.90-6.66 (m, 2H), 5.99 (s, 1H), 4.98 (s, 1H), 4.57 (br. s., 1H), 3.80 (s, 3H), 3.71 (d, J=12.0 Hz, 1H), 3.58-3.42 (m, 4H), 3.01 (d, J=6.5 Hz, 1H), 2.82 (dd, J=11.5, 3.5 Hz, 1H), 2.39 (d, J=11.0 Hz, 1H), 1.45-1.20 (m, 3H), 1.04 (d, J=6.5 Hz, 3H).
[0525] Primer 109: Dijastereomer 2: (3.7 mg, 2.5 % prinos); LCMS: m/z = 530.3 (M+H); rt 1.568 min; Postupak: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5µ, Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 0.1% TFA, Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 0.1% TFA, Tok: 1.1 mL/min.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.14 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.06 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.71-7.61 (m, 1H), 7.49 (dd, J=8.6, 5.6 Hz, 2H), 7.12 (t, J=8.8 Hz, 2H), 6.89 (dd, J=11.6, 2.6 Hz, 1H), 6.81 (td, J=8.6, 2.4 Hz, 1H), 6.00 (s, 1H), 5.06 (s, 1H), 4.56 (br. s., 1H), 3.86 (s, 3H), 3.72 (d, J=12.7 Hz, 1H), 3.60-3.46 (m, 4H), 3.16 (br. s., 1H), 2.82 (dd, J=12.1, 3.5 Hz, 1H), 2.30 (d, J=12.2 Hz, 1H), 1.29 (d, J=6.6 Hz, 3H), 1.02 (d, J=6.6 Hz, 3H).
PRIMER 110
6-Bromo-4-((2S,5R)-4-((4-fluoro-2-metoksifenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril
[0526]
[0527] Rastvoru (2R,5S)-1-((4-fluoro-2-metoksifenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazina, HCl (150 mg, 0.392 mmol) u acetonitrilu (5 mL) su dodati DIPEA (0.205 mL, 1.175 mmol) i 6-bromo-3-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (194 mg, 0.470 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 80 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je razblažena sa vodom i ekstrahovana dva puta sa etil acetatom (20 mL). Organski sloj je odvojen, osušen preko Na2SO4i isparen do suvoće. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću ISCO<®>(Kolona: 40 g RediSep silika, Tok rastvarača: 0-50 % EtOAc u petrol etru). Proizvod je eluiran pri 35% EtOAc u petrol etru da priušti 6-bromo-4-((2S,5R)-4-((4-fluoro-2-metoksifenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril (110 mg, 33.7 % prinos); LCMS: m/z -= 610.4 (M+H); rt 1.35 i 1.39 min. Postupak: Kolona: AQUITY UPLC BEH C18(3.0x50 mm)1.7 µm, Mobilna faza A:10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5) M. faza B:10 mM amonijum acetat:acetonitril(5:95), Tok: 0.7 mL/min.
PRIMERI 111 I 112
8-((2S,5R)-4-((4-fluoro-2-metoksifenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril
[0528]
[0529] Rastvoru 6-bromo-4-((2S,SR)-4-((4-fluoro-2-metoksifenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)-1 -metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitrila (120 mg, 0.197 mmol) u NMP (1 mL) su dodati cink (2.58 mg, 0.039 mmol), dppf (6.56 mg, 0.012 mmol) i cink cijanid (46.3 mg, 0.394 mmol). Reakciona smeša je degasifikovana pod N2i Pd2(dba)3(18.06 mg, 0.020 mmol) je dodat pod N2. Reakciona masa je ozračena pod mikrotalasima do 80 °C tokom 2 h. Reakciona smeša je isparena do suvoće i prečišćena putem preparativne HPLC. Postupak: (Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat u vodi, Mobilna faza B: acetonitril, Kolona: Sunfire C18, 21.2x 150 mm, 5 µm, Tok: 20 mL/min) (Dijastereomerna smeša). Enantiomeri su odvojeni koristeći hiralnu HPLC. Hiralna separacija (Kolona: Cellulose-C4 (250 x21 mm) 5 mikrona, Mobilna faza A: acetonitril, Mobilna faza B: metanol Tok: 20 mL/min) dijastereomerne smeše je dala Dijastereomer 1 (Homohiralni); rt 17.824 min, i Dijastereomer 2 (Homohiralni); rt 20.415 min. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju Primer 111 i Primer 112.
[0530] Primer 111: Dijastereomer 1: (1.5 mg, 1.3 % prinos); LCMS: m/z -= 555.3 (M+H); rt 1.644 min; Postupak: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm, Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 0.1% TFA, Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 0.1% TFA, Tok: 1.1 mL/min.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.25 (d, J=9.0 Hz, 1H), 8.15 (d, J=8.5 Hz, 1H), 7.84-7.69 (m, 1H), 7.54 (dd, J=8.5, 6.0 Hz, 2H), 7.13 (t, J=8.8 Hz, 2H), 6.89-6.64 (m, 2H), 5.00 (s, 1H), 4.75 (br. s., 1H), 4.22 (dd, J=12.8, 3.3 Hz, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.61-3.48 (m, 3H), 3.46-3.35 (m, 1H), 3.08 (dd, J=11.5, 3.5 Hz, 1H), 2.98 (d, J=6.0 Hz, 1H), 2.44 (br. s., 1H), 1.44 (d, J=6.5 Hz, 3H), 0.88 (d, J=6.0 Hz, 3H).
[0531] Primer 112: Dijastereomer 2: (5.6 mg, 5.1 % prinos); LCMS: m/z = 555.3 (M+H); rt 1.768 min; Postupak: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm, Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 0.1% TFA, Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 0.1% TFA, Tok: 1.1 mL/min.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.25 (d, J=9.0 Hz, 1H), 8.15 (d. J=8.5 Hz, 1H), 7.81-7.68 (m, 1H), 7.52 (dd, J=8.5, 5.5 Hz, 2H), 7.12 (t, J=8.8 Hz, 2H), 6.94-6.73 (m, 2H), 5.05 (s, 1H), 4.75 (br. s., 1H), 4.22 (dd, J=12.5, 3.0 Hz, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.64-3.48 (m, 3H), 3.42 (d, J=11.5 Hz, 1H), 3.14-3.00 (m, 2H), 2.37 (d, J=11.5 Hz, 1H), 1.42 (d, J=6.5 Hz, 3H), 0.85 (d, J=6.5 Hz, 3H).
INTERMEDIJER 75
metil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-2-karboksilat, HCl
[0532]
[0533] Rastvoru 1-(terc-butil) 2-metil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-1,2-dikarboksilata (3 g, 6.72 mmol) u 1,4-dioksanu (10 mL) dodata je HCl u 1,4-dioksanu (16.80 mL, 67.2 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h i isparena do suvoće. Sirovi materijal je ispran sa dietil etrom da da metil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-2-karboksilat, HCl (2.5 g, 70 % prinos) u vidu beličaste čvrste supstance; LCMS: m/z = 347.4 (M+H); rt 1.61 min. Postupak: Kolona: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0×50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5) M. faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Tok: 0.7 mL/min.
PRIMER 114
Metil 4-(bis(4-fluorophenvl)metil)-1-(3,6-dicijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat
[0534]
[0535] Rastvoru metil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-1-(6-bromo-3-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilata (70 mg, 0.115 mmol) u NMP (1 mL) su dodati cink (1.504 mg, 0.023 mmol), dppf (3.83 mg, 6.90 µmol), i cink cijanid (27.0 mg, 0.230 mmol). Reakciona smeša je degasifikovana pod N2i Pd2(dba)3(10.54 mg, 0.012 mmol) dodat je pod N2. Reakciona masa je ozračena pod mikrotalasima do 80 °C tokom 2 h. Reakciona smeša je razblažena sa vodom i ekstrahovana dva puta sa etil acetatom (20 mL). Organski sloj je odvojen, osušen preko Na2SO4i isparen do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC uz sledeće uslove: Kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetat; Gradijent: zadržavanje od 2 minuta pri 35% B, 35-60 % B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; Protok: 15 mL/min; Temperatura Kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je izazvano MS signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju metil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-1-(3,6-dicijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat (3.5 mg, 5.4 % prinos); LCMS: m/z = 555.2 (M+H); rt 2.162 min. Postupak: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm, Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat. Mobilna faza B: 5% voda:95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat, Tok: 1.1 mL/min.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.25 (d, J=9.0 Hz, 1H), 8.17 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.56-7.38 (m, 4H), 7.18 (q, J=8.8 Hz, 4H), 5.36 (br. s., 1H), 4.51 (s, 1H), 4.16-4.05 (m, 1H), 3.94 (d, J=12.0 Hz, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.55 (s, 3H), 3.26 (d, J=12.0 Hz, 1H), 2.84 (d, J=9.5 Hz, 1H), 2.40 (dd, J=11.9, 3.8 Hz, 1H), 2.31-2.23 (m, 1H).
PRIMER 115
Metil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-1-(6-bromo-3-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat
[0536]
[0537] Rastvoru metil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-2-karboksilata, HCl (111 mg, 0.291 mmol) u acetonitrilu (5 mL) dodat je DIPEA (0.085 mL, 0.485 mmol). Reakciona smeša je zagrevana na 80 °C tokom 30 minuta. Zatim, 6-bromo-3-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (100 mg, 0.243 mmol) je dodat i zagrevanje je nastavljeno tokom 16 h. Reakciona smeša je isparena do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC uz sledeće uslove: Kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 15% B, 15-55% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; Protok: 15 mL/min; Temperatura Kolone: 25 °C. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da priušte metil 4-(bis(4-fluorofenil) metil)-1 -(6-bromo-3-cijano-1 -metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-nafti ridin-4-il) piperazin-2-karboksilat (4.6 mg, 3.1 % prinos); LCMS: m/z -= 610.2 (M+H); rt 2.344 min. Postupak: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm, Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat, Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat, Tok: 1.1 mL/min.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.95 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.88 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.51-7.39 (m, 4H), 7.17 (q, J=9.0 Hz, 4H), 5.40 (br. s., 1H), 4.50 (s, 1H), 4.08 (br. s., 1H), 3.89 (d, J=12.2 Hz, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.53 (s, 3H), 3.25 (br. s., 1H), 2.82 (d, J=8.8 Hz, 1H), 2.41 (d, J=7.8 Hz, 1H), 2.24 (d, J=10.0 Hz, 1H).
PRIMERI 116 I 117
Metil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-1-(3,6-dicijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat
[0538]
[0539] Rastvoru metil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-1-(6-bromo-3-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilata (60 mg, 0.099 mmol) u NMP (1 mL) su dodati cink (1.289 mg, 0.020 mmol), dppf (3.28 mg, 5.92 µmol) i cink cijanid (23.16 mg, 0.197 mmol). Reakciona smeša je degasifikovana pod N2i Pd2(dba)3(9.03 mg, 9.86 µmol) je dodat pod N2. Reakciona masa je ozračena pod mikrotalasima do 80 °C tokom 2 h. Reakciona masa je razblažena sa vodom i ekstrahovana dva puta sa etil acetatom (20 mL). Organski sloj je odvojen, osušen preko Na2SO4i isparen do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC (Kolona: X-Bridge Phenyl (250 mm × 19 mm ID, 5 µm). Mobilna faza A=10 mm amonijum acetat pH 4.5 Mobilna faza B= acetonitril, Flow 17mL/min). Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i isparene do suvoće da daju metil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-1-(3,6-dicijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat (40 mg, 69.5 % prinos; Enantiomerska smeša). Enantiomeri su odvojeni koristeći hiralnu HPLC. Hiralna separacija (Kolona: Lux Cellulose-2 (250 x4.6) mm, 5 µm, 0.2% NH4OH u metanolu acetonitril (1:1) Enantiomerske smeše je dala Enantiomer 1; rt 5.52 min, i Enantiomer 2; rt 6.46 min.
[0540] Primer 116: Enantiomer 1: (6.7 mg, 10.4 % prinos); LCMS: m/z = 555.2 (M+H); rt 3.229 min; Postupak: Kolona-Kinetex XB-C18 (75X3 mm-2.6 µm), Mobilna faza A: 10 mM NH4COOH u vodi: acetonitrilu (98:2), Mobilna faza B: 10 mM NH4COOH u vodi: acetonitrilu (2:98).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.29-8.21 (m, 1H), 8.20-8.11 (m, 1H), 7.46 (br. s., 4H), 7.18 (q, J=8.9 Hz, 4H), 5.36 (br. s., 1H), 4.51 (s, 1H), 4.24-4.01 (m, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.55 (s, 3H), 2.90-2.77 (m, 1H), 2.07 (s, 4H).
[0541] Primer 117: Enantiomer 2: (8.1 mg, 12.5 % prinos); LCMS: m/z = 555.2 (M+H); rt 3.229 min; Postupak: Kolona-Kinetex XB-C18 (75X3 mm- 2.6 µm), Mobilna faza A: 10 mM NH4COOH u vodi: acetonitrilu (98:2), Mobilna faza B: 10 mM NH4COOH u vodi:acetonitrilu (2:98).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.30-8.20 (m, 1H), 8.19-8.10 (m, 1H), 7.53-7.38 (m, 4H), 7.18 (q, J=9.0 Hz, 4H), 5.36 (br. s., 1H), 4.51 (s, 1H), 4.19-4.05 (m, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.56 (s, 3H), 2.84 (d, J=10.0 Hz, 1H), 2.41 (dd, J=3.8, 11.8 Hz, 1H), 2.31-2.21 (m, 1H), 2.03 (s, 2H).
INTERMEDIJER 77
terc-butil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-(hidroksimetil)piperazin-1-karboksilat
[0542]
[0543] Rastvoru 1-(terc-butil) 2-metil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-1,2-dikarboksilata (2.3 g, 5.15 mmol) u etanolu (25 mL) dodat je kalcijum hlorid (2.86 g, 25.8 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je ohlađena do 0 °C i natrijum borohidrid (1.559 g, 41.2 mmol) je dodat. Reakciona masa je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Reakciona smeša je isparena do suvoće. Voda je dodata u reakcionu masu. Reakciona masa je ekstrahovana dva puta sa etil acetatom (50 mL). Organski sloj je odvojen, osušen preko Na2SO4i isparen do suvoće da da terc-butil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-(hidroksimetil)piperazin-1-karboksilat (1.9 g, 70.5 % prinos) u vidu beličaste čvrste supstance; LCMS: m/z = 419.4 (M+H); rt 2.05 min. Postupak: Kolona: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0x50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5) M. faza B:10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Tok: 0.7 mL/min.
INTERMEDIJER 78
(4-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-2-il)metanol.
[0544]
[0545] Rastvoru terc-butil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-(hidroksimetil) piperazin-1-karboksilata (70 mg, 0.167 mmol) u 1,4-dioksanu (4 mL) dodata je HCl u dioksanu (0.051 mL, 1.673 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Reakciona smeša je isparena do suvoće i isprana sa dietil etrom (10 mL) da da (4-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-2-il)metanol, HCl (50 mg, 94 % prinos) u vidu beličaste čvrste supstance; LCMS: m/z = 319.4 (M+H); rt 1.19 min. Postupak: Kolona: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A:10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5) M. faza B:10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Tok: 0.7 mL/min.
PRIMER 118
4-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-(hidroksimetil)piperazin-1-il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril
[0546]
[0547] Rastvoru (4-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-2-il) metanola, HCl (103 mg, 0.291 mmol) u acetonitrilu (5 mL) dodat je DIPEA (0.085 mL, 0.485 mmol). Reakciona smeša je zagrevana na 80 °C tokom 30 minuta. Zatim, 6-bromo-3-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (100 mg, 0.243 mmol) je dodat i zagrevanje reakcione mase je nastavljeno tokom 16 h. Reakciona masa je isparena do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC uz sledeće uslove: Kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 30 % B, 30-65% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; Protok: 15 mL/min; Temperatura Kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je izazvano MS signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju 4-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-(hidroksimetil)piperazin-1-il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril (2.2 mg, 1.5 % prinos); LCMS: m/z = 580.2 (M+H); rt 2.217 min. Postupak: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm, Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat, Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat, Tok: 1.1 mL/min.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.93-7.97 (m, 1 H), 7.86-7.90 (m, 1 H), 7.48-7.56 (m, 4 H), 7.13-7.20 (m, 4 H), 4.80-4.92 (m, 1 H), 4.59-4.69 (m, 1 H), 4.43 (s, 1 H), 3.97-4.13 (m, 2 H), 3.61-3.68 (m, 1 H), 3.49-3.55 (m, 4 H), 2.80-2.91 (m, 2 H), 2.43-2.46 (m, 1 H), 2.01-2.10 (m, 1 H).
PRIMER 119
8-((2R,5S)-4-((4-fluoro-2-metoksifenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0548]
[0549] Rastvoru (2S,5R)-1-((4-fluoro-2-metoksifenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin, HCl (100 mg, 0.261 mmol) u acetonitrilu (5 mL) su dodati DIPEA (0.137 mL, 0.784 mmol) i 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (104 mg, 0.313 mmol). Reakciona masa je zagrejana do 80 °C tokom 16 h i isparena do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC (Kolona: Xbridge Phenyl (250 mm × 19 mm ID, 5 µm). Mobilna faza A=10 mM amonijum bikarbonat pH 9.5 u HzO, Mobilna faza B= acetonitril, Tok 19 mL/min). Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju proizvod u vidu dijastereomerne smeše. Enantiomeri su odvojeni koristeći hiralnu HPLC. Hiralna separacija (Chiralpak IG (250 × 4.6) mm; 5, 10 mM Amonijum Acetat u etanolu) dijastereomerne smeše je dala Dijastereomer 1 (Homohiralni); rt 6.8 min, i Dijastereomer 2 (Homohiralni); rt 7.52 min.
[0550] Primer 119: Dijastereomer 1: (8.0 mg, 5.7 % prinos); LCMS: m/z = 530.3 (M+H); rt 1.573 min; Postupak: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm, Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 0.1% TFA, Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 0.1% TFA. Tok: 1.1 mL/min.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.15 (d, J=8.5 Hz, 1 H), 8.04-8.09 (m, 1 H), 7.71-7.78 (m, 1 H), 7.52 (dd, J=8.8, 5.8 Hz, 2 H), 7.14 (t, J=8.8 Hz, 2 H), 6.78-6.85 (m, 2 H), 6.00 (s, 1 H), 4.99 (s, 1 H), 4.53-4.64 (m, 1 H), 3.80 (s, 3 H), 3.67-3.74 (m, 1 H), 3.50-3.56 (m, 4 H), 2.98-3.06 (m, 1 H), 2.79-2.87 (m, 1 H), 2.37-2.43 (m, 1 H), 1.31 (d, J=6.5 Hz, 3 H), 1.04 (d, J=6.5 Hz, 3 H).
PRIMER 120
8-((2R,5S)-4-((4-fluoro-2-metoksifenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-7-nitro-6-okso-5,6-dihidio-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0551]
[0552] Rastvoru (2S,5R)-1-((4-fluoro-2-metoksifenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazina, HCl (40 mg, 0.104 mmol) u acetonitrilu (5 mL) su dodati DIPEA (0.055 mL, 0.313 mmol) i 6-cijano-1-metil-3-nitro-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (47.4 mg, 0.125 mmol). Reakciona masa je zagrejana do 80 °C tokom 16 h i isparena do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC (Kolona: DAD-1: Cellulose-2 (250 × 4.6 mm), 5 mikrona DAD-2: CELLULOSE-4 (250 × 4.6 mm), 5 µm, MOBILNA FAZA: 0.1% DEA u metanolu TOK: 2.0 mL\min). Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i isparene do suvoće da daju 8-((2R,5S)-4-((4-fluoro-2-metoksifenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)-5-metil-7-nitro-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (15.4 mg, 25.7 % prinos); LCMS: m/z = 575.3 (M+H); rt 1.661 i 1.776 min; Postupak: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm, Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 0.1% TFA, Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 0.1% TFA, Tok: 1.1 mL/min.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.28 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.21 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.78-7.59 (m, 1H), 7.51 (ddd, J=8.7, 5.6, 3.1 Hz, 2H), 7.12 (td, J=8.9, 2.4 Hz, 2H), 6.91-6.72 (m, 2H), 5.09 (s, 1H), 4.65 (br. s., 1H), 3.83 (d, J=9.0 Hz, 3H), 3.75 (d, J=10.5 Hz, 1H), 3.58 (s, 3H), 3.15-2.98 (m, 2H), 2.64 (t, J=12.3 Hz, 1H), 2.30 (d, J=11.7 Hz, 1H), 1.36 (dd, J=13.6, 6.7 Hz, 3H), 0.90 (t, J=6.6 Hz, 3H).
PRIMERI 121 I 122
8-((2S,5R)-4-((4-fluoro-2-metoksifenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-7-nitro-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0553]
[0554] Rastvoru (2R,5S)-1-((4-fluoro-2-metoksifenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin, HCl (40 mg, 0.104 mmol) u acetonitrilu (5 mL) su dodati DIPEA (0.055 mL, 0.313 mmol) i 6-cijano-1-metil-3-nitro-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (47.4 mg, 0.125 mmol). Reakciona masa je zagrejana do 80 °C tokom 16 h i isparena do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC uz sledeće uslove: Kolona: Sunfire C18, 19 × 150 mm, 5 µm čestice; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat pH-4.5 sa sirćetnom kiselinom; Mobilna faza B: acetonitril; Gradijent: 60-100 % B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; Tok: 19 mL/min. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju dijastereomernu smešu. Enantiomeri su odvojeni koristeći hiralnu HPLC. Hiralna separacija (Kolona: DAD-1 CELLULOSE-2 (250 × 4.6 mm), 5 mikrona, DAD-2 CELLULOSE-4 (250 × 4.6 mm), 5 mikrona, Mobilna faza: 0.1% DEA u (acetonitril:metanol)::70:30 TOK:2.0 mL\min) dijastereomerne smeše je dala Dijastereomer 1 (Homohiralni); rt 5.217 min, i Dijastereomer 2 (Homohiralni); rt 5.642 min.
[0555] Primer 121: Dijastereomer 1: (1.2 mg, 2.0 % prinos); LCMS: m/z = 575.3 (M+H); rt 1.662 min; Postupak: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm, Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 0.1% TFA, Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 0.1% TFA, Tok: 1.1 mL/min.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.28 (d, J=9.0 Hz, 1H), 8.21 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.72 (dd, J=8.6, 7.1 Hz, 1H), 7.58-7.45 (m, 2H), 7.11 (t, J=8.9 Hz, 2H), 6.89-6.73 (m, 2H), 5.01 (s, 1H), 4.65 (br. s., 1H), 3.82 (s, 3H), 3.75 (dd, J=11.9, 2.8 Hz, 1H), 3.58 (s, 3H), 3.09 (dd, J=11.7, 3.9 Hz, 1H), 2.91 (d, J=6.6 Hz, 1H), 2.62 (d, J=11.5 Hz, 1H), 2.39 (d, J=11.0 Hz, 1H), 1.37 (d, J=6.8 Hz, 3H), 0.91 (d, J=6.4 Hz, 3H).
[0556] Primer 122: Dijastereomer 2: (3.6 mg, 6.0 % prinos); LCMS: m/z = 575.3 (M+H); rt 1.774 min; Postupak: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm, Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 0.1% TFA, Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 0.1% TFA, Tok: 1.1 mL/min.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.29 (d, J=9.0 Hz, 1H), 8.21 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.66 (dd, J=8.6, 7.1 Hz, 1H), 7.51 (dd, J=8.8, 5.6 Hz, 2H), 7.12 (t, J=8.9 Hz, 2H), 6.87 (dd, J=11.5, 2.4 Hz, 1H), 6.79 (td, J=8.4, 2.7 Hz. 1H), 5.09 (s, 1H), 4.65 (br. s., 1H), 3.84 (s, 3H), 3.74 (dd, J=12.1, 3.3 Hz, 1H), 3.59 (s, 3H), 3.10-2.98 (m, 2H), 2.69-2.61 (m, 1H), 2.29 (d, J=13.0 Hz, 1H), 1.34 (d, J=6.6 Hz, 3H), 0.89 (d, J=6.6 Hz, 3H).
INTERMEDIJER 79
1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,3-dimetilpiperazin
[0557]
[0558] Rastvoru 4,4'-(hlorometilen)bis(fluorobenzena) (200 mg, 0.838 mmol) u acetonitrilu (5 mL) su dodati 2,3-dimetilpiperazin (115 mg, 1.006 mmol) i DIPEA (0.439 mL, 2.51 mmol). Reakciona masa je zagrejana do 80 °C tokom 4 h. Reakciona masa je razblažena sa vodom i ekstrahovana dva puta sa etil acetatom (20 mL). Organski sloj je odvojen, osušen preko Na2SO4i isparen do suvoće (250 mg, 59.4 % prinos); LCMS: m/z = 317.4 (M+H); rt 1.41 min. Postupak: Kolona: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5) Mobilna faza B:10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Tok: 0.7 mL/min.
PRIMERI 123 I 124
8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,3-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0559]
[0560] Rastvoru 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,3-dimetilpiperazina (200 mg, 0.567 mmol) u acetonitrilu (10 mL) su dodati DIPEA (0.297 mL, 1.700 mmol) i 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (227 mg, 0.680 mmol). Reakciona masa je zagrejana do 80 °C tokom 16 h i isparena do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC (Kolona-Kinetex XB-C18 (75X3 mm- 2.6 µm) Mobilna faza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (98:2), Mobilna faza B: 10 mM amonijum format u vodi:acetonitrilu (2:98). Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i isparene do suvoće da daju dijastereomernu smešu. Enantiomeri su odvojeni koristeći hiralnu HPLC. Hiralna separacija (Kolona: DAD-1: CELLULOSE-2 (250 × 4.6mm), 5 mikrona, DAD-2: CELLULOSE-4 (250 × 4.6mm), 5 mikrona, Mobilna faza: 0.1% DEA u (acetonitril:metanol) 90:10 TOK: 2.0 mL\min) dijastereomerne smeše je dala Dijastereomer 1 (Homohiralni); rt 6.754 min, i Dijastereomer 2 (Homohiralni); rt 8.197 min.
[0561] Primer 123: Dijastereomer 1: (3.5 mg, 1.2 % prinos); LCMS: m/z -= 500.3 (M+H); rt 1.831 min; Postupak: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm, Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 0.1% TFA, Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 0.1% TFA, Tok: 1.1 mL/min.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.14 (d, J=8.8 Hz, 1 H), 8.04-8.10 (m, 1 H), 7.59-7.65 (m, 2 H), 7.52-7.57 (m, 2 H), 7.12-7.18 (m, 4 H), 6.03 (s, 1 H), 4.70-4.78 (m, 2 H), 3.53 (s, 3 H), 3.35-3.45 (m, 1 H), 3.19-3.26 (m, 1 H), 2.80-2.87 (m, 1 H), 2.63-2.72 (m, 1 H), 2.54-2.57 (m, 1 H), 1.28 (d, J=6.8 Hz, 3 H), 1.19 (d, J=6.6 Hz, 3 H).
[0562] Primer 124: Dijastereomer 2: (3.5 mg, 1.2 % prinos); LCMS: m/z = 500.3 (M+H); rt 1.830 min; Postupak: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm, Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 0.1% TFA, Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 0.1% TFA, Tok: 1.1 mL/min.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.14 (d, J=8.6 Hz, 1H), 8.06 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.62 (dd, J=8.7, 5.7 Hz, 2H), 7.55 (dd, J=8.6, 5.6 Hz, 2H), 7.15 (td, J=8.7, 6.5 Hz, 4H), 6.03 (s, 1H), 4.80-4.67 (m, 2H), 3.53 (s, 3H), 3.43-3.34 (m, 1H), 3.24-3.17 (m, 1H), 2.83 (d, J=5.1 Hz, 1H), 2.71-2.65 (m, 1H), 2.55 (br. s., 1H), 1.28 (d, J=6.6 Hz, 3H), 119 (d, J=6.4 Hz, 3H).
INTERMEDIJER 80
L-valil-L-alanin
[0563]
[0564] Rastvoru ((benziloksi)karbonil)-L-valil-L-alanina (1 g, 3.10 mmol) u metanolu (20 mL) dodat je Pd-C (0.330 g, 0.310 mmol) pod Nz. Reakciona smeša je mešana pod vodoničnim pritiskom tokom 16 h. Reakciona smeša je filtrirana kroz sloj celita. Sloj je ispran sa metanolom (40 mL). Bistar filtrat je prikupljen i isparen do suvoće da da L-valil-L-alanin (3.5 mg, 1.2 % prinos) u vidu bele čvrste supstance. LCMS: m/z = 189.2 (M+H); rt 0.17 min; Kolona-Kinetex XB-C18 (75X3 mm-2.6 µm), Mobilna faza A: 10 mM amonijum format u vodi:acetonitrilu (98:2), Mobilna faza B: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitrilu (2:98).
INTERMEDIJER 81
(3S,6S)-3-izopropil-6-metilpiperazin-2,5-dion
[0565]
[0566] L-valil-L-alanin (260 mg, 1.381 mmol) je uzet u 5 mL bočici i zagrevan do 200 °C tokom 30 minuta. Čvrsta supstanca sakupljena na bočnim zidovima bočice daje (3S,6S)-3-izopropil-6-metilpiperazin-2,5-dion (235 mg, 99 % prinos) u vidu beličaste čvrste supstance. LCMS: m/z = 171.2 (M+H); rt 0.22 min; Kolona-Kinetex XB-C18 (75X3 mm-2.6 µm), Mobilna faza A: 10 mM amonijum format u vodi:acetonitrilu (98:2), Mobilna faza B: 10 mM amonijum format u vodi:acetonitrilu (2:98).
INTERMEDIJER 82
(2S,5S)-2-izopropil-5-metilpiperazin
[0567]
[0568] Rastvoru (3S,6S)-3-izopropil-6-metilpiperazin-2,5-diona (250 mg, 1.469 mmol) u tetrahidrofuranu (5 mL) dodat je boran tetrahidrofuran kompleks (5.88 mL, 5.88 mmol) na 0 °C. Reakciona masa je zagrejana do 70 °C tokom 16 h. Reakcija je kvenčovana sa metanolom. Reakciona masa je mešana 30 min. i isparena do suvoće da da (2S,5S)-2-izopropil-5-metilpiperazin (220 mg, 96 % prinos) u vidu bezbojne tečnosti; LCMS: m/z = 143.2 (M+H); rt 0.45 min; Kolona-Kinetex XB-C18 (75X 3 mm-2.6 µm), Mobilna faza A: 10 mM amonijum format u vodi:acetonitrilu (98:2), Mobilna faza B: 10 mM amonijum format u vodi:acetonitrilu (2:98).
INTERMEDIJER 83
(2S,5S)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-5-izopropil-2-metilpiperazin
[0569]
[0570] Rastvoru (2S,5S)-2-izopropil-5-metilpiperazina (100 mg, 0.703 mmol), 4,4'-(hlorometilen)bis(fluorobenzen) (0.131 mL, 0.703 mmol) u acetonitrilu (2 mL) dodat je DIPEA (0.246 mL, 1.406 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 80 °C tokom 2 h. Reakciona smeša je razblažena sa vodom i ekstrahovana dva puta sa etil acetatom (20 mL). Organski sloj je odvojen, osušen preko Na2SO4i isparen do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen sa ISCO<®>(Kolona: 24 g RediSep silika, Tok rastvarača: 0-20 % metanola u hloroformu). Proizvod je eluiran pri 5% metanola u hloroformu da priušti (2S,5S)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-5-izopropil-2-metilpiperazin (80 mg, 21.47 % prinos) u vidu braon tečnosti; LCMS: m/z = 345.2 (M+H); rt 1.60 min; Kolona-Luna 3.0 C18(2) 100 Å LC kolona (20 × 4.0 mm) Mercury MS TM, Mobilna faza A: 10 mM amonijum format u vodi:acetonitrilu (98:2), Mobilna faza B: 10 mM amonijum format u vodiacetonitrilu (2:98).
PRIMER 125
8-((2S,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-izopropil-5-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0571]
[0572] Rastvoru (2S,5S)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-5-izopropil-2-metilpiperazina (27 mg, 0.078 mmol), 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (20.90 mg, 0.063 mmol) u acetonitrilu (2 mL) dodat je DIPEA (0.041 mL, 0.235 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 80 °C tokom 2 h i isparena do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC (Kolona: X-Bridge Phenyl (250mm × 19mm ID, 5 µm), Mobilna faza A: Pufer: 10 mM amonijum acetat u vodi pH-4.5, Mobilna faza B: acetonitril, Tok: 17 mL/min). Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i isparene do suvoće da daju 8-((2S,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-izopropil-5-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1 mg, 2.4 % prinos); LCMS: m/z = 528.3 (M+H); rt 2.517 min. Postupak: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm, Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat, Mobilna faza B: 5% voda:95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat, Tok: 1.1 mL/min.<1>H NMR (400 MHz. DMSO-d6) δ ppm 8.16 (d, J=9.0 Hz, 1H). 8.08 (d, J=9.0 Hz.1H), 7.40 (dd, J=8.8, 5.8 Hz, 2H), 7.30 (dd, J=8.5, 5.5 Hz, 2H), 7.22-6.97 (m, 4H), 6.02 (s, 1H), 5.32 (s, 1H), 4.16 (br. s., 1H), 3.89 (br. s., 1H), 3.60-3.50 (m, 3H), 3.21 (dd, J=13.3, 9.8 Hz, 1H), 2.72 (dd, J=13.3, 6.8 Hz, 1H), 2.42-2.35 (m, 1H), 1.24 (s, 1H), 1.19-1.06 (m, 3H), 1.03-0.86 (m, 6H). Jedan pik protona se spojio sa pikom rezidualnog rastvarača.
INTERMEDIJER 84
terc-butil 3-(2-acetilhidrazin-1 -karbonil)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-1 -karboksilat
[0573]
[0574] Rastvoru 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(terc-butoksikarbonil)piperazin-2-karboksilne kiseline (450 mg, 1.041 mmol) u DMF (2 mL) su dodati HATU (791 mg, 2.081 mmol) i DIPEA (0.363 mL, 2.081 mmol). Reakciona smeša je mešana 10 minuta, acetohidrazid (116 mg, 1.561 mmol) je dodat, i mešanje je nastavljeno tokom 16 h. Hladna voda je dodata reakcionoj smeši, i čvrste supstance su odvojene, filtrirane i isprane sa vodom. Čvrste supstance su isprane sa dietiletrom (20 mL) i isparene pod visokim vakuumom da daju terc-butil 3-(2-acetilhidrazin-1-karbonil)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-1-karboksilat (300 mg, 49.6 % prinos); LCMS: m/z = 489.2 (M+H); rt 2.782 min; Postupak: Kolona-Kinetex XB-C18 (75 × 3 mm- 2.6 µm), Mobilna faza A: 10 mM amonijum format u vodi:acetonitrilu (98:2); Mobilna faza B: 10 mM amonijum format u vodi:acetonitrilu (2:98).
INTERMEDIJER 85
terc-butil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(5-metil-1,3,4-oksadiazol-2-il)piperazin-1-karboksilat
[0575]
[0576] Rastvoru terc-butil 3-(2-acetilhidrazin-1-karbonil)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-1-karboksilata (350 mg, 0.716 mmol) u tetrahidrofuranu (2 mL) dodat je Burgesov reagens (512 mg, 2.149 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 80 °C tokom 16 h. LCMS je pokazala 24% startnog materijala i 37% proizvoda. Drugi lot Burgesovog reagensa (512 mg, 2.149 mmol) je dodat i zagrevanje je nastavljeno još 16 h. Reakciona masa je zagrejana do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen sa ISCO<®>(Kolona: 40g RediSep silika, Tok rastvarača: 0-50 % EtOAc u petrol etru). Proizvod je eluiran pri 45% EtOAc u petrol etru da priušti terc-butil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(5-metil-1,3,4-oksadiazol-2-il)piperazin-1-karboksilat (250 mg, 70.5 % prinos); LCMS: m/z = 471.2 (M+H); rt 2.084 min; Kolona-Luna 3.0 C18(2) 100 Å LC kolona (20 × 4.0 mm) Mercury MS TM, Mobilna faza A: 0.1%TFA u Milli-Q vodi, Mobilna faza B: 0.1%TFA u acetonitrilu.
INTERMEDIJER 86
2-(1-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-2-il)-5-metil-1,3,4-oksadiazol
[0578] Rastvoru terc-butil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(5-metil-1,3,4-oksadiazol-2-il)piperazin-1-karboksilata (230 mg, 0.489 mmol) u dihlorometanu (5 mL) dodat je TFA (0.377 mL, 4.89 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. i isparena do suvoće. Postupak: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5) Mobilna faza B:10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Tok: 0.7 mL/min.
PRIMER 126
8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(5-metil-1,3,4-oksadiazol-2-il)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0579]
[0580] Rastvoru 2-(1-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-2-il)-5-metil-1,3,4-oksadiazola (50 mg, 0.135 mmol) i 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (36.0 mg, 0.108 mmol) u acetonitrilu (4 mL) dodat je DIPEA (0.071 mL, 0.405 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 80 °C tokom 2 h. i isparena do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen putem preparativne HPLC (Kolona: XBridge Phenyl (250 mm × 19 mm ID, 5 µm) Mobilna faza A=10 mM amonijum acetat u vodi Mobilna faza B: acetonitril:MeOH Tok 17 mL/min). Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i isparene do suvoće da daju 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(5-metil-1,3,4-oksadiazol-2-il)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (7.1 mg, 9.14 % prinos); LCMS: m/z = 554.3 (M+H); rt 2.178 min. Postupak: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm, Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril: 0.1% TFA, Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 0.1% TFA, Tok: 1.1 mL/min.<1>H NMR (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 8.08-8.14 (m, 1 H), 8.06 (s, 1 H), 7.54-7.59 (m, 2 H), 7.25-7.29 (m, 2 H), 7.09-7.19 (m, 4 H), 6.12 (s, 1 H), 5.01 (s, 1 H), 4.71-4.77 (m, 1 H), 4.14-4.18 (m, 1 H), 3.61-3.68 (m, 1 H), 3.51 (s, 3 H), 3.34-3.39 (m, 2 H), 3.15-3.23 (m, 1 H), 2.69-2.75 (m, 1 H), 2.43 (s, 3 H).
INTERMEDIJER 87
terc-butil (S)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-3-etilpiperazin-1-karboksilat
[0581]
[0582] Rastvoru terc-butil (S)-3-etilpiperazin-1-karboksilata (150 mg, 0.700 mmol), 6-cijano-1 -metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (187 mg, 0.560 mmol) u acetonitrilu (2 mL) dodat je DIPEA (0.244 mL, 1.400 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 80 °C tokom 2 h. Reakciona smeša je razblažena sa vodom i ekstrahovana dva puta sa etil acetatom (20 mL). Organski sloj je odvojen, osušen preko Na2SO4i isparena do suvoće. Sirovi materijal je prečišćen sa ISCO<®>(Kolona: 24 g RediSep silika, Tok rastvarača: 0-50 % EtOAc u petrol etru). Proizvod je eluiran pri 30 % EtOAc u petrol etru da priušti terc-butil (S)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-3-etilpiperazin-1-karboksilat (55 mg, 0.082 mmol, 11.66 % prinos); LCMS: m/z = 398.4 (M+H); rt 1.63 min. Postupak: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A:10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5) Mobilna faza B:10 mM amonijum acetat:acetonitril(5:95), Tok: 0.7 mL/min.
INTERMEDIJER 88
(S)-8-(2-etilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0583]
[0584] Rastvoru terc-butil (S)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-3-etilpiperazin-1-karboksilata (50 mg, 0.126 mmol) u dihlorometanu (5 mL) dodat je TFA (0.097 mL, 1.258 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. i isparena do suvoće. Polučvrsta supstanca je isprana sa dietil etrom da da (S)-8-(2-etilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA (38 mg, 68 % prinos) u vidu čvrste supstance; LCMS: m/z = 298.4 (M+H); rt 0.65 min. Postupak: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5) Mobilna faza B:10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Tok: 0.7 mL/min.
PRIMER 127
(S)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-etilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0585]
[0586] U rastvor (S)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-etilpiperazin (75 mg, 0.213 mmol) TFA soli i 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (56.7 mg, 0.170 mmol) u acetonitrilu (2 mL) dodat je DIPEA (0.074 mL, 0.425 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 80 °C tokom 2 h. i uparena do suva. Sirov materijal je prečišćen preparativnom HPLC (Kolona: SUNFIRE C18 (150 mm × 19 mm ID, 5 µm), Mobilna faza A= Pufer: 10 mM amonijum acetat u vodi Mobilna faza B = acetonitril Protok: 17 mL/min). Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovani i upareni do suva da se dobije (S)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (5 mg, 3.3 % prinos); LCMS: m/z = 500.3 (M+H); rt 2.92 min; postupak: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm, mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat, mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat, protok: 1.1 mL/min.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.12-8.16 (m, 1 H), 8.05-8.08 (m, 1 H), 7.44-7.59 (m.4 H), 7.11-7.23 (m, 4 H). 6.03 (s, 1 H), 4.57-4.70 (m, 1 H), 4.40 (s, 1 H), 3.53 (s, 3 H), 3.34-3.49 (m, 2 H), 2.70-2.82 (m, 2 H), 2.25 (dd, J=11.5, 2.9 Hz, 1 H), 1.99-2.18 (m, 2 H), 1.62-1.77 (m, 1 H), 0.67 (t, J=7.5 Hz, 3 H).
INTERMEDIJER 89
tert-butil (S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-karboksilat
[0587]
[0588] U rastvor tert-butil (S)-3-etilpiperazin-1-karboksilata (150 mg, 0.700 mmol) i 4,4'-(hlorometilen)bis(fluorobenzena) (0.131 mL, 0.700 mmol) u acetonitrilu (2 mL) dodat je DIPEA (0.244 mL, 1.400 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 80 °C tokom 2 h. i razblažena sa vodom. Smeša je ekstrahovana dvaput sa etil acetatom (20 mL). Organski sloj je odvojen, osušen preko Na2SO4i uparen do suva. Sirova supstanca je prečišćena pomoću ISCO<®>(kolona: 24 g RediSep silika, tok rastvarača: 0-50 % EtOAc u petrol etru). Proizvod je eluiran pri 30 % EtOAc u petrol etru da se dobije terc-butil (S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-karboksilat (50 mg, 8.8 % prinos); LCMS: m/z = 417.4 (M+H); rt 2.39 min. postupak: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm, mobilna faza A:10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5) mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), protok: 0.7 mL/min.
INTERMEDIJER 90
(S)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-etilpiperazin
[0589]
[0590] U rastvor terc-butil (S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-karboksilata (50 mg, 0.120 mmol) u 1,4-dioksanu (5 mL) dodata je HCl u dioksanu (0.036 mL, 1.200 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h i uparena do suva. Dobijena polučvrsta supstanca je oprana sa sa dietil etrom da se dobije (S)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-etilpiperazin, HCl (35 mg, 32.3 % prinos) kao čvrsta supstanca; LCMS: m/z = 317.4 (M+H); rt 1.50 min. postupak: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 5m mm) 1.7 µm, mobilna faza A:10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5) Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), protok: 0.7 mL/min.
PRIMER 128
(S)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridine-2-karbonitril
[0591]
[0592] U rastvor (S)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-etilpiperazina, HCl (75 mg, 0.213 mmol) i 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (56.7 mg, 0.170 mmol) u acetonitrilu (2 mL) dodat je DIPEA (0.074 mL, 0.425 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 80 °C tokom 2 h. i uparena do suva. Sirov materijal je prečišćen preparativnom HPLC (kolona: SUNFIRE C18 (150 mm × 19 mm ID, 5 µm) mobilna faza A: pufer: 10 mM amonijum acetat u vodi mobilna faza B: acetonitril protok: 17 mL/min). Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i uparene do suva da se dobije (S)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridine-2-karbonitril (39 mg, 36.4 % prinos); LCMS: m/z = 500.3 (M+H); rt 2.92 min; postupak: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm, mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat, mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat, protok: 1.1 mL/min.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.14 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.07 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.56 (dd, J=8.4, 5.7 Hz, 2H), 7.51 (dd, J=8.6, 5.6 Hz, 2H), 7.15 (t, J=8.6 Hz, 4H), 6.11 (s, 1H), 4.98 (s, 1H), 4.23 (d, J=12.0 Hz, 1H), 3.53 (s, 3H), 3.40 (d, J=11.5 Hz, 1H), 3.12-3.02 (m, 2H), 2.99 (d, J=10.8 Hz, 1H), 2.76-2.64 (m, 1H), 2.00-1.86 (m, 1H), 1.76-1.60 (m, 1H), 0.77 (t, .7=7.3 Hz, 3H). Jedan pik protona spojen je sa pikom rezidualnog rastvarača.
INTERMEDIJER 91
terc-butil (S)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-3-metilpiperazin-1-karboksilat
[0593]
[0594] U rastvor terc-butil (S)-3-metilpiperazin-1-karboksilata (361 mg, 1.800 mmol) u acetonitrilu (5 mL) na sobnoj temperaturi je dodat DIPEA (0.786 mL, 4.50 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 15 min. i 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (500 mg, 1.500 mmol) je dodat. Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u etil acetatu (100 mL), a organski sloj je opran sa vodom, koncentrovanim rastvorom soli i osušen preko natrijum sulfataa. Rastvarač je uparen pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gel koloni koristeći 24g fleš kolone, eluiranjem sa 30 % EtOAc u petrol etru. Frakcije su koncentrovane pod sniženim pritiskom da se dobije terc-butil (S)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-3-metilpiperazin-1-karboksilat (200 mg, 31.6 % prinos); LCMS: m/z = 384.4 (M+H); rt 1.49 min; LCMS postupak: mobilna faza A:pufer: acetonitril (95:5) mobilna faza B:pufer: acetonitril (5:95) postupak:%B: 0 min-20 %: 1.1 min -90 %:1.7 min -90 % kolona: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm protok: 0.7 mL/min.
INTERMEDIJER 92
(S)-5-metil-8-(2-metilpiperazin-1-il)-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA
[0595]
[0596] U rastvor terc-butil (S)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-3-metilpiperazin-1-karboksilata (120 mg, 0.313 mmol) u DCM (5 mL) na 0 °C dodat je TFA (0.241 mL, 3.13 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h.
Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je opran sa smešom petrol etar:dietil etar (1:1) i osušen pod pod visokim pritiskom da da (S)-5-metil-8-(2-metilpiperazin-1-il)-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridine-2-karbonitril, TFA (130 mg, 91 % prinos); LCMS: m/z = 284.2 (M+H); rt 0.46 min. LCMS postupak: mobilna faza A:pufer:acetonitril (95:5) mobilna faza B: pufer: acetonitril (5:95) postupak:%B: 0 min-20 %: 1.1 min -90 %: 1.7 min-90 % kolona: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm Protok: 0.7 mL/min.
PRIMERI 129 I 130
8-((2S)-4-((4-fluoro-2-metoksifenil)(4-fluorofenil)metil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0597]
[0598] U rastvor TFA soli (S)-5-metil-8-(2-metilpiperazin-1-il)-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (70 mg, 0.176 mmol) u acetonitrilu (2 mL) na sobnoj temperaturi je dodat DIPEA (0.092 mL, 0.528 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 15 min i 1-(hloro(4-fluorofenil)metil)-4-fluoro-2-metoksibenzen (47.3 mg, 0.176 mmol) je dodat. Reakciona smeša je mešana na 85 °C preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u EtOAc i opran sa vodom, koncentrovanim rastvorom soli i osušen preko natrijum sulfataa. Rastvarač je uparen pod sniženim pritiskom da da diastereomernu smešu. Enantiomeri su odvojeni korišćenjem hiralne HPLC. Hiralna separacija (zapremina injektiranja: 10 postupak instumenta: 3gr-15%-100 bara ko-rastvarač: 0.2% NH4OH u metanolu acetonitril (1:1) kolona: Chiralcel OJH (250 × 4.6) mm. Separacija diastereomerne smeše dala je diastereomer 1 (homohiralni) i diastereomer 2 (homohiralni). Frakcije koje sadrže proizvode su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije.
[0599] Primer 129: diastereomer 1: (3 mg, 3.3 % prinos); LCMS: m/z = 516.2 (M+H); rt 2.242 min; LCMS postupak A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat protok: 1.1 mL/min temp: 50 °C. kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.15 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.07 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.66 (dd, J=8.6, 7.1 Hz, 1H), 7.42 (dd, J=8.8, 5.6 Hz, 2H), 7.12 (t, J=8.9 Hz, 2H), 6.93-6.75 (m, 2H),6.04 (s, 1H), 4.87 (br. s., 1H), 4.72 (s, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.53 (s, 3H), 3.46-3.37 (m, 1H), 3.34(br. s., 1H), 2.88 (d, J=9.8 Hz, 1H), 2.61-2.52 (m, 1H), 2.35 (dd, J=11.7, 3.4 Hz, 1H), 2.18 -2.03 (m, 1H), 1.24-1.09 (m, 3H). F
[0600] Primer 130: diastereomer 2: (4.5 mg, 4.81 % prinos); LCMS: m/z = 516.3 (M+H); rt 1.329 min; LCMS postupak A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat B: 5% voda:95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat protok: 1.1 mL/min temp: 50 °C; kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.15 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.07 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.66-7.57 (m,lH), 7.45 (dd, J=8.7, 5.5 Hz, 2H), 7.19-7.03 (m, 2H), 6.96 (s, 1H), 6.88-6.75 (m, 2H), 6.04 (s,1H), 4.89 (br. s., 1H), 4.70 (s, 1H), 3.87-3.72 (m, 3H), 3.53 (s, 3H), 3.41-3.34 (m, 2H), 2.94 (dd, J=12.7, 6.8 Hz, 1H), 2.79-2.67 (m, 1H), 2.55 (s, 1H), 2.36-2.27 (m, 1H), 2.14 (t, J=11.1Hz, 1H), 1.34-1.08 (m, 4H).
INTERMEDIJER 93
terc-butil (2R,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat
[0601]
[0602] U rastvor 4,4'-(hlorometilen)bis(fluorobenzena) (130 mg, 0.545 mmol) u acetonitrilu (20 mL) na sobnoj temperaturi dodati su terc-butil (2R,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (128 mg, 0.599 mmol) i DIPEA (0.285 mL, 1.634 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 80 °C preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, ostatak je rastvoren u DCM i opran sa vodom, koncentrovanim rastvorom soli i osušen preko natrijum sulfataa i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gel koloni koristeći 24 g fleš kolone, eluiranjem sa 30 % EtOAc u petrol etru. Frakcije su koncentrovane pod sniženim pritiskom da daju terc-butil (2R,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (150 mg, 58.2 % prinos); LCMS: m/z = 417.4 (M+H); rt 1.72 min. LCMS postupak: M. faza A:10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5) mobilna faza B:10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95) postupak:%B: 0 min-20:2 min-100: 2.3 min-100 protok: 0.7 mL/min kolona: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm.
INTERMEDIJER 94
(2R.5R)-1 -(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin, HCl
[0603]
[0604] U rastvor terc-butil (2R,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (120 mg, 0.288 mmol) u dioksanu (5 mL) na 0 °C dodata je HCl u dioksanu (0.088 mL, 2.88 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i ostatak je opran sa 1:1 dietil etar: petrol etar i osušen pod visokim pritiskom da da (2R,5R)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin, HCl (100 mg, 58.4 % prinos); LCMS: m/z -= 317.4 (M+H); rt 1.38 min. LCMS postupak: mobilna faza A: pufer:acetonitril (95:5) mobilna faza B: pufer:acetonitril (5:95) postupak: %B: 0 min-20 %: 1.1min -90 %:1.7min-90 % kolona: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm, protok: 0.7 mL/min.
PRIMER 131
8-((2R,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0605]
[0606] U rastvor 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (100 mg, 0.300 mmol) u acetonitrilu (5 mL) na sobnoj temperaturi dodati su (2R,SR)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin, HCl (116 mg, 0.330 mmol) i DIPEA (0.157 mL, 0.900 mmol). Reakciona smeša je mešana na 80 °C preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u DCM i opran sa vodom, koncentrovanim rastvorom soli i osušen preko natrijum sulfataa i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen preparativnom HPLC pod sledećim uslovima: kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 2 minuta pri 30 % B, 30-72% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 15 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju 8-((2R,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (16.2 mg, 10.4 % prinos); LCMS: m/z = 500.2 (M+H); rt 2.303 min; LCMS postupak: A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat B: 5% voda:95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; protok: 1.1 mL/min; temp: 50 °C kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.14 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.06 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.42 (dd, J=8.6, 5.6 Hz, 2H), 7.35 (dd, J=8.7, 5.7 Hz, 2H), 7.25-7.07 (m, 4H), 6.07 (s, 1H), 5.30 (s, 1H),4.50 (br. s., 1H), 3.53 (s, 3H), 3.36 (d, J=12.0 Hz, 1H), 3.28-3.20 (m, 1H), 2.67-2.55 (m, 2H),2.37 (dd, J=12.2, 3.9 Hz, 1H), 1.34-1.23 (m, 3H), 1.19 (d, J=6.4 Hz, 3H).
PRIMER 132
8-((2R,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperizin-1-il)-7-hloro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0608] U rastvor 8-((2R,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (30 mg, 0.060 mmol) u dihlorometanu (2 mL) na sobnoj temperaturi dodat je NCS (16.04 mg, 0.120 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcija je kvenčovana sa 10 % NaHCO3rastvorom. Reakciona smeša je ekstrahovana sa DCM i oprana sa vodom, koncentrovanim rastvorom soli, i osušena preko natrijum sulfataa i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen preparativnom HPLC pod sledećim uslovima: kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetat; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 50 % B, 50-77% B tokom 15 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 15 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuto MS signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju 8-((2R,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-7-hloro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (7.6 mg, 23.7 % prinos); LCMS: m/z = 534.3 (M+H); rt 1.534 min. LCMS postupak: A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat B: 5% voda:95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat protok: 1.1 mL/min temp: 50 °C kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.23 (s, 2H), 7.64-7.45 (m, 4H), 7.24-7.07 (m, 4H), 4.88 (s,1H), 4.16 (br. s., 1H), 3.83-3.56 (m, 4H), 3.01-2.83 (m, 2H), 2.48 (br. s., 1H), 2.45-2.36 (m,1H), 1.24 (d, J=6.1 Hz, 3H), 0.76 (d, J=6.4 Hz, 3H).
INTERMEDIJER 95
terc-butil (2S,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat
[0609]
[0610] U rastvor 4,4'-(hlorometilen)bis(fluorobenzena) (200 mg, 0.838 mmol) u acetonitrilu (20 mL) na sobnoj temperaturi dodati su terc-butil (2S,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (198 mg, 0.922 mmol) i DIPEA (0.439 mL, 2.51 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C preko noći i koncentrovana pod sniženim pritiskom da da ostatak. Ostatak je rastvoren u DCM (100 mL) i opran sa vodom (20 mL), koncentrovanim rastvorom soli (20 mL) i osušen preko natrijum sulfata i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gel koloni korišćenjem 24 g fleš kolone, eluiranjem sa 30 % EtOAc u petrol etru. Frakcije su koncentrovane pod sniženim pritiskom da daju terc-butil (2S,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (200 mg, 51.8 % prinos); LCMS: m/z = 417.4 (M+H); rt 1.74 min. LCMS postupak: mobilna faza A: pufer: acetonitril (95:5) mobilna faza B: pufer: acetonitril (5:95) postupak: %B: 0 min-20 %:1.1min -90 %: 1.7 min-90 % kolona: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm, protok: 0.7 mL/min.
INTERMEDIJER 96
(2S,5S)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin
[0611]
[0612] U rastvor terc-butil (2S,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (120 mg, 0.288 mmol) u dioksanu (5 mL) na 0 °C dodata je HCl u dioksanu (0.088 mL, 2.88 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je opran sa dietil etar:petrol etar (1: 1) i osušen pod visokim pritiskom da da (2S,5S)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin, HCl (90 mg, 61.3 % prinos); LCMS: m/z = 317.4 (M+H); rt 1.30 min. LCMS postupak: mobilna faza A: pufer: acetonitril (95:5) mobilna faza B: pufer: acetonitril (5:95) postupak: %B: 0 min-20 %:1.1min -90 %: 1.7 min-90 % kolona: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm, protok: 0.7 mL/min.
PRIMER 133
8-((2S,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0613]
[0614] U rastvor 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (70 mg, 0.210 mmol) u acetonitrilu (5 mL) na sobnoj temperaturi dodati su (2S,5S)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin, HCl (82 mg, 0.231 mmol) i DIPEA (0.110 mL, 0.630 mmol). Reakciona smeša je mešana at 80 °C preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u DCM, washed sa vodom, koncentrovanim rastvorom soli i osušen preko natrijum sulfata, i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen preparativnom HPLC pod sledećim uslovima: kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 15% B, 15-55% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 15 mL/min; Temperatura kolone: 25 °C. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju 8-((2S,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (8.7 mg, 7.8 % prinos); LCMS: m/z = 500.2 (M+H); rt 2.296 min. LCMS postupak: A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat B: 5% voda:95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat protok: 1.1 mL/min temp: 50 °C kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.14 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.06 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.50-7.29 (m,4H), 7.27-7.02 (m, 4H), 6.07 (s, 1H), 5.30 (s, 1H), 4.50 (br. s., 1H), 3.53 (s, 3H), 3.42-3.34(m, 1H), 3.29-3.21 (m, 1H), 2.67-2.54 (m, 2H), 2.36 (dd, J=11.5, 7.6 Hz, 1H), 1.34-1.22 (m,3H), 1.19 (d, J=6.4 Hz, 3H).
INTERMEDIJER 97
terc-butil (S)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-3-metilpiperazin-1-karboksilat
[0615]
[0616] U rastvor terc-butil (S)-3-metilpiperazin-1-karboksilata (361 mg, 1.800 mmol) u acetonitrilu (5 mL) na sobnoj temperaturi dodat je DIPEA (0.786 mL, 4.50 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 15 min. i 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (500 mg, 1.500 mmol) je dodat. Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i ostatak je rastvoren u etil acetatu (100 mL). Organski sloj je opran sa vodom, koncentrovanim rastvorom soli i osušen preko natrijum sulfataa. Rastvarač je uparen pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gel koloni korišćenjem 24 g fleš kolone, eluiranjem sa 30 % EtOAc u petrol etru. Frakcije su koncentrovane pod sniženim pritiskom da daju terc-butil (S)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-3-metilpiperazin-1-karboksilat (200 mg, 31.6 % prinos); LCMS: m/z = 384.4 (M+H); rt 1.49 min. LCMS postupak: mobilna faza A: pufer: acetonitril (95:5) mobilna faza B: pufer:acetonitril (5:95) postupak: %B: 0 min-20 %:1.1min -90 %:1.7min-90 % kolona: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm, protok: 0.7 mL/min.
INTERMEDIJER 98
(S)-5-metil-8-(2-metilpiperazin-1-il)-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA
[0617]
[0618] U rastvor terc-butil (S)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-3-metilpiperazin-1-karboksilata (120 mg, 0.313 mmol) u DCM (5 mL) na 0 °C dodat je TFA (0.241 mL, 3.13 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je opran sa smešom petrol etardietil etra (1:1) i osušen pod visokim pritiskom da da (S)-5-metil-8-(2-metilpiperazin-1-il)-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA (130 mg, 91 % prinos); LCMS: m/z = 284.2 (M+H); rt 0.46 min. LCMS postupak: mobilna faza A:10 mM NH4OAc:acetonitril (95:5) mobilna faza B: 10 mM NH4OAc:acetonitril (5:95) postupak:%B: 0 min-20 %: 1.1 min - 90 %:1.7min-90 % kolona: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm, protok: 0.7 mL/min.
PRIMER 134
(S)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0619]
[0620] U rastvor (S)-5-metil-8-(2-metilpiperazin-1-il)-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA (40 mg, 0.101 mmol) u acetonitrilu (2 mL) na sobnoj temperaturi dodat je DIPEA (0.053 mL, 0.302 mmol). Reakciona smeša je zagrejana na 85 °C tokom 15 min i 4,4'-(hlorometilen)bis(fluorobenzen) (24.02 mg, 0.101 mmol) je dodat. Reakciona smeša je mešana na 85 °C preko noći. Rastvarač je uparen pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u DCM i opran sa vodom i koncentrovanim rastvorom soli, osušen preko natrijum sulfataa, i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen preparativnom HPLC korišćenjem sledećih uslova: kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 15% B, 15-55% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 15 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju (S)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (7.7 mg, 15.0 % prinos); LCMS: m/z = 486.3 (M+H); rt 2.22 min. LCMS postupak: A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat B: 5% voda:95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; protok: 1.1 mL/min temp: 50 °C kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm), 2.5 µm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.13-8.19 (m, 1 H), 8.06-8.10 (m, 1 H), 7.43-7.57 (m, 4 H), 7.11-7.20 (m, 4 H), 6.04 (s, 1 H), 4.82-4.92 (m, 1 H), 4.43 (s, 1 H), 3.53 (s, 3 H), 3.35-3.47 (m, 2 H), 2.74-2.84 (m, 1 H), 2.60-2.70 (m, 1 H), 2.31-2.42 (m, 1 H), 2.10-2.21 (m, 1 H), 1.21 (d, J=6.6 Hz, 3 H).
INTERMEDIJER 99
terc-butil (R)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-3-metilpiperazin-1-karboksilat
[0621]
[0622] U rastvor terc-butil (R)-3-metilpiperazin-1-karboksilata (144 mg, 0.720 mmol) u acetonitrilu (5 mL) na sobnoj temperaturi dodat je DIPEA (0.314 mL, 1.800 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 15 min. i 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (200 mg, 0.600 mmol) je dodat. Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C preko noći i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u DCM, opran sa vodom i koncentrovanim rastvorom soli, i osušen preko natrijum sulfataa. Rastvarač je uparen pod sniženim pritiskom da da terc-butil (R)-4-(6-cijano-1 -metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-3-metilpiperazin-1-karboksilat (200 mg, 33.0 % prinos); LCMS: m/z = 384.4 (M+H); rt 1.50 min. LCMS postupak: mobilna faza A: pufer:acetonitril (95:5) mobilna faza B: pufer:acetonitril (5:95) postupak:%B: 0 min-20 %:1.1 min -90 %:1.7 min-90 % kolona: AQU1TY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm, protok: 0.7 mL/min.
INTERMEDIJER 100
(R)-5-mediil-8-(2-metilpiperazin-1-il)-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA
[0623]
[0624] U rastvor terc-butil (R)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-3-metilpiperazin-1-karboksilata (120 mg, 0.313 mmol) u DCM (5 mL) na 0 °C dodat je TFA (0.241 mL, 3.13 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je opran smešom petrol etar: EtOAc (1:1) i osušen pod visokim pritiskom da da (R)-5-metil-8-(2-metilpiperazin-1-il)-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA (130 mg, 91 % prinos); LCMS: m/z = 284.4 (M+H); rt 0.46 min. LCMS postupak: mobilna faza A: pufer:acetonitril (95:5); mobilna faza B: pufer:acetonitril (5:95) postupak:%B: 0 min-20 %: 1.1 min -90 %: 1.7 min-90 % kolona: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm, protok: 0.7 mL/min.
PRIMER 135
(R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0625]
[0626] U rastvor (R)-5-metil-8-(2-metilpiperazin-1-il)-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA (100 mg, 0.252 mmol) u acetonitrilu (5 mL) na sobnoj temperaturi je dodat DIPEA (0.132 mL, 0.755 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 15 min. i 4,4'-(hlorometilen)bis(fluorobenzen) (60.1 mg, 0.252 mmol) je dodat. Reakciona smeša je mešana na 85 °C preko noći i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u DCM i opran sa vodom i koncentrovanim rastvorom soli, osušen preko natrijum sulfataa, i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen preparativnom HPLC pod sledećim uslovima: kolona: Waters XBridge C18,150 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 3 minuta pri 30 % B, 30-70 % B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 15 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (17.7 mg, 14.3 % prinos); LCMS: m/z = 486.3 (M+H); rt 2.223 min. LCMS postupak: A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat protok: 1.1 mL/min temp: 50 °C kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm,<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.15 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.07 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.61-7.41 (m,4H), 7.27-7.05 (m, 4H), 6.04 (s, 1H), 4.87 (br. s., 1H), 4.43 (s, 1H), 3.53 (s, 3H), 3.45-3.34(m, 2H), 2.79 (d, J=9.3 Hz, 1H), 2.71-2.61 (m, 1H), 2.40-2.30 (m, 1H), 2.20-2.12 (m, 1H),1.32-1.13 (m, 3H).
INTERMEDIJER 101
1 -(terc-butil) 2-metil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-1,2-dikarboksilat
[0627]
[0628] U rastvor 4,4'-(hlorometilen)bis(fluorobenzena) (4 g, 16.76 mmol) u acetonitrilu (20 mL) na sobnoj temperaturi dodat je 1-(terc-butil) 2-metil piperazin-1,2-dikarboksilat (8.19 g, 33.5 mmol), DIPEA (5.85 mL, 33.5 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 80 °C preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u DCM, opran sa vodom i koncentrovanim rastvorom soli, osušen preko natrijum sulfataa, i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gel koloni korišćenjem 24 g fleš kolone, eluiranjem sa 30 % EtOAc u petrol etru. Frakcije su koncentrovane pod sniženim pritiskom da daju 1-(terc-butil) 2-metil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-1,2-dikarboksilat (5 g, 26.4 % prinos); LCMS: m/z = 447.6 (M+H); rt 2.22 min. LCMS postupak: mobilna faza A: pufer:acetonitril (95:5) mobilna faza B: pufer:acetonitril (5:95) postupak:%B: 0 min-20 %:1.1 min -90 %:1.7 min-90 % kolona: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm, protok: 0.7 mL/min.
INTERMEDIJER 102
Metil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-2-karboksilat, HCl
[0629]
[0630] U rastvor 1-(terc-butil) 2-metil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-1,2-dikarboksilata (1 g, 2.240 mmol) u dioksanu (5 mL) na sobnoj temperaturi dodata je HCl u 1,4-dioksan u(5.60 mL, 22.40 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i oprana u smeši petrol etar:dietil etar (1:1) i osušena pod visokim pritiskom da da metil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-2-karboksilat, HCl (900 mg, 94 % prinos); LCMS: m/z = 347.2 (M+H); rt 2.67 min. LCMS postupak: kolona-Kinetex XB-C18 (75 × 3 mm- 2.6 µm) Mfaza A: 10 mM amonijum format u vodi acetonitrilu (98:2) Mfaza B: 10 mM amonijum format u vodi acetonitrilu (2:98).
PRIMERI 136 DO 137
Metil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-1-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat
[0631]
[0632] U rastvor 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (200 mg, 0.600 mmol) u acetonitrilu (5 mL) na sobnoj temperaturi dodati su metil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-2-karboksilat, HCl (230 mg, 0.600 mmol) i DIPEA (0.314 mL, 1.800 mmol). Reakciona smeša je mešana na 80 °C preko noći. Reakcija je kvenčovana sa vodom. Reakciona smeša je ekstrahovana sa DCM (2 × 100 mL), kombinovani organski sloj je opran sa vodom i koncentrovanim rastvorom soli, i osušen preko natrijum sulfataa. Rastvarač je uparen pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gel koloni korišćenjem 24 g fleš kolone i 100 % EtOAc u petrol etru. Frakcije su koncentrovane pod sniženim pritiskom da daju enantiomernu smešu. Enantiomeri su odvojeni korišćenjem hiralne HPLC. Hiralna separacija: (kolona: Lux C5 (250 x30x5) PRHP112F250-0001 mobilna faza A- sirova supstanca čistoća:- mobilna faza B- 0.1% DEA u metanolu:acetonitrilu (70:30) rastvorljivost: DMSO:metanol protok: 35 gradijent ISO) enantiomerne smeše dala je primer 136 (enantiomer 1) i primer 137 (enantiomer 2). Frakcije koje sadrže proizvode su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije.
[0633] Primer 136: Eeantiomer 1: (8.9 mg, 2.8 % prinos); LCMS: m/z = 530.2 (M+H); rt 2.18 min; LCMS postupak: A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat, B: 5% voda:95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat protok: 1.1 mL/min temp: 50 °C kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.15 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.08 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.54-7.34 (m,4H), 7.30-7.06 (m, 4H), 6.14 (s, 1H), 5.80 (br. s., 1H), 4.47 (s, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.60-3.38(m, 5H), 3.28 (d, J=11.7 Hz, 1H), 2.80 (d, J=9.5 Hz, 1H), 2.54 (d, J=6.6 Hz, 1H), 2.45 (dd, J=11.4, 3.3 Hz, 1H), 2.24-2.11 (m, 1H).
[0634] Primer 137: enantiomer 2: (8.4 mg, 2.6 % prinos); LCMS: m/z = 530.3 (M+H); rt 2.183 min. LCMS postupak: A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat B: 5% voda:95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat protok: 1.1 mL/min temp: 50 °C kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm,<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.14 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.07 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.54-7.37 (m,4H), 7.29-7.07 (m, 4H), 6.14 (s, 1H), 5.80 (br. s., 1H), 4.46 (s, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.60-340(m, 5H), 3.28 (d, J=11.5 Hz, 1H), 2.80 (d, J=10.3 Hz, 1H), 2.45 (dd, J=11.5, 3.4 Hz, 1H), 2.20 (td, J=11.1, 4.5 Hz, 1H).
PRIMER 138
4-(bis(4-fluorofenil)metil)-1-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilna kiselina
[0635]
[0636] U rastvor metil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-1-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilata (60 mg, 0.113 mmol) u DMF (2 mL) na sobnoj temperaturi dodat je litijum hlorid (48.0 mg, 1.133 mmol). Reakciona smeša je održavana na 150 °C tokom 30 min. Reakciona smeša je filtrirana kroz sirindž filter i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen preparativnom HPLC pod sledećim uslovima: kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 2 minute pri 12% B, 12-42% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 15 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuto MS signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-1-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilnu kiselinu (8.9 mg, 14.2 % prinos); LCMS: m/z = 516.2 (M+H); rt 1.702 min. LCMS postupak: A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; protok: 1.1 mL/min temp: 50 °C kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm.<1>H NMR (400 MHz, METANOL-d4) δ 8.08 (dd, J=8.9, 4.3 Hz, 1H), 7.99 (dd, J=9.0, 5.1 Hz,1H), 7.62-7.36 (m, 4H), 7.13-6.94 (m, 4H), 6.22 (s, 1H), 5.89 (br. s.,1H), 4.40 (s, 1H), 3.79-3.68 (m, 1H), 3.59-3.45 (m, 2H), 2.96 (d, J=11.0 Hz,1H), 2.52 (dd, J=11.5, 3.7 Hz, 1H), 2.38-2.26 (m, 1H).
INTERMEDIJER 103
4-(bis(4-fluorofenil)metil)-1-(terc-butoksikarbonil)piperazin-2-karboksilna kiselina
[0637]
[0638] U rastvor 1-(terc-butil) 2-metil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-1,2-dikarboksilata (1.8 g, 4.03 mmol) u THF (10 mL) i vodi (5 mL) dodat je LiOH (0.483 g, 20.16 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Isparljive materije su uklonjene iz reakcione smeše pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u vodi i vodeni sloj je opran sa dietil etrom (2 × 50 mL). Vodeni sloj je zakiseljen sa 1.5 N HCl i ekstrahovan sa EtOAc (2 × 100 mL). Kombinovan organski sloj je opran sa vodom i koncentrovanim rastvorom soli, i osušen preko natrijum sulfataa. Rastvarač je koncentrovan pod sniženim pritiskom da da 4(bis(4-fluorofenil)metil)-1-(terc-butoksikarbonil)piperazin-2-karboksilnu kiselinu (1.5 g, 61.1 % prinos); LCMS: m/z = 433.4 (M+H); rt 1.39 min. LCMS postupak: mobilna faza A: pufer: acetonitril (95:5) mobilna faza B: pufer:acetonitril (5:95) postupak: %B: 0 min-20 %: 1.1 min -90 %: 1.7 min-90 % kolona: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm, protok: 0.7 mL/min.
INTERMEDIJER 104
terc-butil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-(ciklopropilkarbamoil)piperazin-1-karboksilat
[0639]
[0640] U rastvor 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-1-(terc-butoksikarbonil)piperazin-2-karboksilne kiseline (500 mg, 1.156 mmol) u DMF (2 mL) na sobnoj temperaturi dodati su HATU (528 mg, 1.387 mmol), DIPEA (0.606 mL, 3.47 mmol) i ciklopropanamin (0.160 mL, 2.312 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 h. Reakcija je kvenčovana sa vodom. Reakciona smeša je ekstrahovana sa etil acetatom (2 × 100 mL), kombinovani organski sloj je opran sa vodom i koncentrovanim rastvorom soli, i osušen preko natrijum sulfataa. Rastvarač je uparen pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gel koloni korišćenjem 24 g fleš kolone i 40 % EtOAc u petrol etru. Frakcije su koncentrovane pod sniženim pritiskom da daju terc-butil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-(ciklopropilkarbamoil) piperazin-1-karboksilat (450 mg, 79 % prinos); LCMS: m/z = 472.2 (M+H); rt 3.434 min. LCMS postupak: kolona-Kinetex XB-C18 (75 × 3 mm-2.6 µm), Mfaza A: 10 mM amonijum format u vodi:acetonitrilu (98:2) Mfaza B: 10 mM amonijum format u vodi:acetonitrilu (2:98).
INTERMEDIJER 105
4-(bis(4-fluorofenil)metil)-N-ciklopropilpiperazin-2-karboksamid, HCl
[0642] U rastvor terc-butil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-(ciklopropilkarbamoil)piperazin-1-karboksilata (350 mg, 0.742 mmol) u dioksanu (5 mL) na sobnoj temperaturi dodata je HCl in 1,4-dioksanu (5 mL, 20.00 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je opran sa smešom petrol etar: Di etil etar (1:1) i osušen pod visokim pritiskom da da 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-N-ciklopropilpiperazin-2-karboksamid, HCl (300 mg, 50.5 % prinos); LCMS: m/z = 372.5 (M+H); rt 1.46 min. LCMS postupak: mobilna faza A: pufer:acetonitril (95:5) mobilna faza B: pufer:acetonitril (5:95) postupak:%B: 0 min-20 %: 1.1 min -90 %: 1.7 min -90 % kolona: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm, protok: 0.7 mL/min.
PRIMERI 139 DO 140
4-(bis(4-fluorofenil)metil)-1-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-N-ciklopropilpiperazin-2-karboksamid
[0643]
[0644] U rastvor 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-N-ciklopropilpiperazin-2-karboksamid, HCl (98 mg, 0.240 mmol) u acetonitrilu (5 mL) na sobnoj temperaturi je dodat DIPEA (0.126 mL, 0.720 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 15 min. i 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (80 mg, 0.240 mmol) je dodat. Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C preko noći i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u DCM (100 mL), organski sloj je opran sa vodom i koncentrovanim rastvorom soli, i osušen preko natrijum sulfataa. Rastvarač je uparen pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gel koloni korišćenjem 24 g fleš kolone i 100 % EtOAc u petrol etru. Frakcije su koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen preparativnom HPLC pod sledećim uslovima: kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 15% B, 15-60 % B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 15 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-1-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-N-ciklopropilpiperazin-2-karboksamid.
Enantiomeri su odvojeni korišćenjem hiralne HPLC. Hiralna separacija: kolona: C2/160(250 × 20) mm, 5 mikrona M. faza A: M. faza B: 0.1% DEA u metanolu. Protok: 20 mL/min vreme (min)/%B: 0/100, 15/100. Frakcije koje sadrže proizvode su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije.
[0645] Primer 139: Enantiomer 1: (6.4 mg, 4.6 % prinos); LCMS: m/z = 555.3 (M+H); rt 2.001 min; LCMS postupak: A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat. protok: 1.1 mL/min temp: 50 °C kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.14 (d, J=8.8 Hz, 1 H), 8.04-8.10 (m, 1 H), 7.76-7.80 (m, 1 H), 7.41-7.48 (m, 4 H), 7.10-7.19 (m, 4 H), 6.07 (s, 1 H), 5.33 (br s, 1 H), 4.40 (s, 1 H), 3.77-3.87 (m, 1 H), 3.53 (s, 3 H), 3.44-3.50 (m, 1 H), 3.17-3.24 (m, 1 H), 2.71-2.78 (m, 1 H), 2.58-2.65 (m, 1 H), 2.33 (s, 1 H), 2.13-2.22 (m, 1 H), 0.54-0.75 (m, 2 H), 0.29-0.48 (m, 2 H).
[0646] Primer 140: Enantiomer 2: (5.6 mg, 4.1 % prinos); LCMS: m/z = 555.3 (M+H); rt 2.001 min; LCMS postupak: A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat B: 5% voda:95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; protok: 1.1 mL/min temp: 50 °C; kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm,<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.14 (d, J=8.8 Hz, 1 H), 8.03-8.11 (m, 1H), 7.78 (d, J=3.9 Hz, 1 H), 7.40-7.47 (m, 4 H), 7.09-7.19 (m, 4 H), 6.07 (s, 1 H), 5.31-5.37 (m, 1 H), 4.40 (s, 1 H), 3.77-3.87 (m, 1 H), 3.53 (s, 3 H), 3.44-3.50 (m, 1 H), 3.17-3.23 (m, 1 H), 2.72-2.78 (m, 1 H), 2.59-2.66 (m, 1 H), 2.34 (br d, J=1.7 Hz, 1 H), 2.14-2.23 (m, 1 H), 0.64-0.73 (m, 1 H), 0.54-0.63 (m, 1 H), 0.40-0.49 (m, 1 H), 0.29-0.38 (m, 1 H).
INTERMEDIJER 106
terc-butil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-karbamoilpiperazin-1-karboksilat
[0647]
[0648] U rastvor 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-1-(terc-butoksikarbonil)piperazin-2-karboksilne kiseline (500 mg, 1.156 mmol) u DMF (2 mL) na sobnoj temperaturi dodati su HATU (879 mg, 2.312 mmol), DIPEA (0.606 mL, 3.47 mmol) i amonijum hlorid (124 mg, 2.312 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 h. Reakcija je kvenčovana sa vodom. Reakciona smeša je ekstrahovana sa etil acetatom (2 × 100 mL). Kombinovani organski sloj je opran sa vodom i koncentrovanim rastvorom soli, i osušen preko natrijum sulfata. Rastvarač je uparen pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gel koloni korišćenjem 24 g fleš kolone i 30 % EtOAc u petrol etru. Frakcije su koncentrovane pod sniženim pritiskom da daju terc-butil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-karbamoilpiperazin-1-karboksilat (400 mg, 52.1 % prinos); LCMS: m/z -= 432.4 (M+H); rt 1.81 min. LCMS postupak: mobilna faza A: pufer:acetonitril (95:5) mobilna faza B: pufer:acetonitril (5:95) postupak: %B: 0 min-20 %: 1.1min -90 %: 1 .7min-90 % kolona: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm, protok: 0.7 mL/min.
INTERMEDIJER 107
4-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-2-karboksamid
[0649]
[0650] U rastvor terc-butil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-karbamoilpiperazin-1-karboksilata (100 mg, 0.232 mmol) u dioksanu (5 mL) na sobnoj temperaturi je dodata HCl u 1,4-dioksanu (0.579 mL, 2.318 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h. i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je opran sa smešom petrol etar: dietil etar (1:1) i osušen pod visokim pritiskom da da 4-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-2-karboksamid, HCl (75 mg, 45.9 % prinos); LCMS: m/z -= 332.3 (M+H); rt 1.25 min. LCMS postupak: mobilna faza A: pufer:acetonitril (95:5) mobilna faza B: pufer:acetonitril (5:95) postupak:%B: 0 min-20 %: 1.1 min -90 %: 1.7 min-90 % kolona: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm, protok: 0.7 mL/min.
PRIMERI 141 I 142
4-(bis(4-fluorofenil)metil)-1-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksamid
[0651]
[0652] U rastvor 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (200 mg, 0.600 mmol) u acetonitrilu (5 mL) na sobnoj temperaturi je dodat 4-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-2-karboksamid, HCl (221 mg, 0.600 mmol) i DIPEA (0.314 mL, 1.800 mmol). Reakciona smeša je mešana naa 80 °C preko noći i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u DCM, opran sa vodom i koncentrovanim rastvorom soli, osušen preko natrijum sulfata, i koncentrovan pod sniženim pritiskom da da enantiomernu smešu. Enantiomeri su odvojeni korišćenjem hiralne HPLC. Postupak hiralne separacije: kolona: DAD-1 CELLULOSE-2 (250 × 4.6 mm), 5 µm, DAD-2 CELLULOSE-4 (250 × 4.6 mm), 5 mikrona mobilna faza: 0.1% DEA u acetonitrilu:metanolu:70:30 protok: 2.0 mL\min enantiomerne smeše dalo je primer 141 (enantiomer 1) i primer 142 (enantiomer 2). Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije.
[0653] Primer 141: enantiomer 1: (5.9 mg,, 1.9 % prinos); LCMS: m/z = 515.2 (M+H); rt 1.846 min; LCMS postupak: A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat B: 5% voda:95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat protok: 1.1 mL/min temp: 50 °C kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm,<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.14 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.07 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.57-7.34 (m,4H), 7.28-7.06 (m, 5H), 6.99 (br. s., 1H), 6.08 (s, 1H), 5.33 (br. s., 1H), 4.45 (s, 1H), 3.86 -3.69 (m, 1H), 3.62-3.41 (m, 4H), 3.28 (br. s., 1H), 2.75 (d, J=10.0 Hz, 1H), 2.38 (dd, J=11.9, 3.8 Hz, 1H), 2.26-2.11 (m, 1H).
[0654] Primer 142: enantiomer 2: (6.4 mg, 2.1 % prinos); LCMS: m/z = 515.2 (M+H); rt 1.846 min; LCMS postupak: A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat B: 5% voda: 95% acetonitril: 10 mM amonijum acetat protok: 1.1 mL/min temp: 50 °C kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.14 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.07 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.61-7.38 (m,4H), 7.31-7.05 (m, 5H), 6.99 (br. s., 1H), 6.08 (s, 1H), 5.33 (br. s., 1H), 4.45 (s, 1H), 3.85 -3.71 (m, 1H), 3.61-3.42 (m, 4H), 3.28 (br. s., 1H), 2.75 (d, J=10.3 Hz, 1H), 2.38 (dd, J=11.7,3.9 Hz, 1H), 2.25-2.11 (m, 1H).
PRIMERI 143 I 144
8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-cijanopiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0655]
[0656] U rastvor 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-1-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksamida (200 mg, 0.389 mmol) u DCM (5 mL) na 0 °C dodati su TEA (0.217 mL, 1.555 mmol) i anhidrid trifluorosirćetne kiseline(0.110 mL, 0.777 mmol).
Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Reakcija je kvenčovana sa 10 % NaHCO3rastvorom. Reakciona smeša je ekstrahovana sa DCM i organski sloj je opran sa vodom i koncentrovanim rastvorom soli, osušen preko natrijum sulfata, i koncentrovan pod sniženim pritiskom da da enantiomerna smeša. Enantiomeri su odvojeni korišćenjem hiralne HPLC. Postupak hiralne separacije MPB: 0.1% DEA acetonitril. Kolona: Celulose-C5 (30*250mm), 5 µm gradijent:- vreme: 0.0020.00 % B konc.: 100 100 protok: 30 mL/min. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije.
[0657] Primer 143: enantiomer 1: (2.4 mg, 1.2 % prinos); LCMS: m/z = 497.2 (M+H); rt 2.096 min. A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat B: 5% voda:95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat protok: 1.1 mL/min temp: 50 °C kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm,<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.22 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.16 (d, J=9.0 Hz, 1H).7.52 (dt, J=8.6, 5.5 Hz, 4H), 7.30-7.10 (m, 4H), 6.35 (s, 1H), 5.89 (br. s., 1H), 4.67 (s, 1H), 3.58 (s, 3H),3.48 (d, J=12.5 Hz, 1H), 3.29-3.22 (m, 1H), 3.10 (d, J=11.7 Hz, 1H) 2.90-2.86 (m, 1H), 2.28 (t, J=11.4 Hz, 1H) (one proton merged with DMSO-d6residual peak).
[0658] Primer 144: enantiomer 2: (2 mg, 1.0 % prinos); LCMS: m/z = 497.2 (M+H); rt 2.097 min. LCMS postupak: A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat protok: 1.1 mL/min. Temp: 50 °C kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.21 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.16 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.62-7.41 (m,4H), 7.21 (td, J=8.9, 2.3 Hz, 4H), 6.35 (s, 1H), 5.89 (br. s., 1H), 4.67 (s, 1H), 3.58 (s, 3H), 3.47(d, J=11.5 Hz, 1H), 3.29-3.21 (m, 1H), 3.10 (d, J=11.7 Hz, 1H), 2.93-2.82 (m, 1H), 2.32 -2.21 (m, 1H).
PRIMER 145
8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-cijanopiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0659]
[0660] U rastvor 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-1-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksamida (30 mg, 0.058 mmol) u DCM (5 mL) na 0 °C dodati su TEA (0.033 mL, 0.233 mmol) i anhidrid trifluorosirćetne kiseline (0.016 mL, 0.117 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Reakcija je kvenčovana sa 10 % NaHCO3rastvorom. Reakciona smeša je ekstrahovana sa DCM. Organski sloj je opran sa vodom i koncentrovanim rastvorom soli, osušen preko natrijum sulfata, i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen preparativnom HPLC pod sledećim uslovima: kolona: Sunfire C18, 21 × 150 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat pH-4.5 sa sirćetnom kiselinom; mobilna faza B: acetonitril; gradijent: 50-70 % B tokom 9 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-cijanopiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (2.5 mg, 8.4 % prinos); LCMS: m/z = 497.2 (M+H); rt 2.02 min. LCMS postupak: A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat B: 5% voda:95% acetonitril: 10 mM amonijum acetat protok: 1.1 mL/min temp: 50 °C kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm,<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.21 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.16 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.52 (dt, J=8.7, 5.6 Hz, 4H), 7.32-7.12 (m, 4H), 6.35 (s, 1H), 5.89 (br. s., 1H), 4.67 (s, 1H), 3.58 (s, 3H),3.47 (d, J=12.0 Hz, 1H), 3.26 (br. s., 1H), 3.10 (d, J=12.5 Hz, 1H), 2.87 (d, J=13.4 Hz, 1H), 2.28(t, J=10.4 Hz, 1H). Jedan pik protona je zamaskiran sa pikom vlage.
PRIMERI 146 DO 148
8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-(hidroksimetil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0661]
[0662] U rastvor 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (650 mg, 1.951 mmol) u acetonitrilu (5 mL) na sobnoj temperaturi dodati su (4-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-2-il)metanol, HCl (692 mg, 1.951 mmol) i DIPEA (1.022 mL, 5.85 mmol). Reakciona smeša je mešana na 85 °C preko noći i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u EtOAc, opran sa vodom i koncentrovanim rastvorom soli, osušen preko natrijum sulfata, i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovo jedinjenje je prečišćeno pomoću ISCO<®>(korišćenjem 24 g silika gel kolone; korišćenjem 20 % -40 % etil acetata/ petrol etra). Frakcije su koncentrovane pod sniženim pritiskom do enantiomerne smeše. Jedinjenje je dalje prečišćeno preparativnom HPLC pod sledećim uslovima: kolona: Sunfire C18, 19 × 150 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat pH-4.5 sa sirćetnom kiselinom; mobilna faza B: metanol: acetonitril (1:1); gradijent: 60-100 % B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 17 mL/min. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije.
[0663] Primer 146: racemat: hiralna separacija kolona: Cellulose C2 (250 * 21 mm) 5 mikrona mobilna faza A: 0.1% DEA u acetonitrilu:IPA (90:10) mobilna faza B: protok: 20 mL/min enantiomerne smeše dalo je enantiomer 1 i enantiomer 2.
[0664] Primer 147: enantiomer 1: (7.5 mg, 0.7 % prinos); LCMS: m/z = 502.3 (M+H); rt 1.525 min; LCMS postupak: A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat protok: 1.1 mL/min temp: 50 °C kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm,<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.13-8.17 (m, 1 H), 8.04-8.07 (m, 1 H), 7.46-7.51 (m, 4 H), 7.12-7.19 (m, 4 H), 6.02 (s, 1 H), 4.90-4.99 (m, 1 H), 4.41 (s, 1 H), 3.80-3.87 (m, 1 H), 3.65-3.70 (m, 1 H), 3.53 (s, 3 H), 3.35-3.44 (m, 2 H), 3.27-3.33 (m, 1 H), 2.86-2.95 (m, 1 H), 2.27-2.32 (m, 1 H), 2.05-2.18 (m, 1 H).
[0665] Primer 148: enantiomer 2: (5.7 mg, 0.5 % prinos); LCMS: m/z = 502.3 (M+H); rt 1.522 min; LCMS postupak: A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat B: 5% voda:95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat protok: 1.1 mL/min; temp: 50 °C kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.12-8.16 (m, 1 H), 8.04-8.07 (m, 1 H), 7.46-7.51 (m, 4 H), 7.12-7.18 (m, 4 H), 6.02 (s, 1 H), 4.91-5.01 (m, 1 H), 4.41 (s, 1 H), 3.82-3.86 (m, 1 H), 3.65-3.70 (m, 1 H), 3.53 (s, 3 H), 2.87-2.94 (m, 1 H), 2.81-2.84 (m, 1 H), 2.27-2.32 (m, 1 H), 2.10-2.18 (m, 1 H), (2 pika protona zamaskirana sa pikom vlage).
PRIMERI 149 DO 151
8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-(fluorometil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0666]
[0667] U rastvor 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-(hidroksimetil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (140 mg, 0.279 mmol) u DCM (5 mL) na 0 °C je dodat DAST (0.037 mL, 0.279 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 min. Reakcija je kvenčovana sa NaHCO3rastvorom. Reakciona smeša je ekstrahovana sa etil acetatom (2 × 100 mL). Kombinovani organski sloj je opran sa vodom i koncentrovanim rastvorom soli, i osušen preko natrijum sulfata. Rastvarač je uparen pod sniženim pritiskom da da enantiomernu smešu (primer 149). Sirovi proizvod je prečišćen pomoću preparativne HPLC (Prep LCMS postupak: kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 5 minuta pri 30 % B, 30-66% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 15 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuto MS signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije.
[0668] Primer 149: racemat: hiralna separacija kolona: Lux-cellulose C4 (250 × 21.2) mm, 5 mikrona M. faza A: M. faza B: metanol protok: 20 mL/min izokratski enantiomerne smeše daje enantiomer 1 i enantiomer 2.
[0669] Primer 150: enantiomer 1: (2 mg, 1.4 % prinos); LCMS: m/z = 504.2 (M+H); rt 2.20 min; LCMS postupak: A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat B: 5% voda:95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat protok: 1.1 mL/min temp: 50 °C kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm,<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.16 (d, J=8.8 Hz, 1 H), 8.05-8.12 (m, 1 H), 7.44-7.55 (m, 4 H), 7.12-7.20 (m, 4 H), 6.10 (s, 1 H), 5.28-5.39 (m, 1 H), 4.93-5.14 (m, 1 H), 4.55-4.74 (m, 1 H), 4.43 (s, 1 H), 3.48-3.55 (m, 4 H), 3.24-3.29 (m, 1 H), 2.82-2.89 (m, 2 H), 2.36-2.42 (m, 1 H), 2.13-2.21 (m, 1 H)
[0670] Primer 151: enantiomer 2: (2 mg, 1.4 % prinos); LCMS: m/z = 504.2 (M+H); rt 2.207 min; LCMS postupak: A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; protok: 1.1 mL/min; temp: 50 °C kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.16 (d, J=8.8 Hz, 1 H), 8.06-8.11 (m, 1 H), 7.45-7.56 (m, 4 H), 7.13-7.20 (m, 4 H), 6.10 (s, 1 H), 5.28-5.38 (m, 1 H), 4.93-5.13 (m, 1 H), 4.56-4.74 (m, 1 H), 4.43 (s, 1 H), 3.48-3.56 (m, 4 H), 3.25-3.29 (m, 1 H), 2.81-2.88 (m, 2 H), 2.36-2.43 (m, 1 H), 2.12-2.23 (m, 1 H).
INTERMEDIJER 108
2,5-diciklopropilpiperazin, diacetatna so
[0671]
[0672] U rastvor 2,5-diciklopropilpirazina (100 mg, 0.624 mmol) u sirćetnoj kiselini (5 mL) na sobnoj temperaturi je dodata platina (IV) oksid (35 mg, 0.154 mmol). Reakcioni sud je evakuisan i primenjen je balon sa vodonikom. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod atmosferom azota tokom 5 h. Balon sa vodonikom je uklonjen i reakciona smeša je filtrirana kroz sloj celita. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da da ostatak. Ostatak je opran sa 1:1 dietil etrom: petrol etrom i osušen pod visokim pritiskom da da 2,5-diciklopropilpiperazin, so disirćetne kiseline (130 mg, 52.2 % prinos); LCMS: m/z = 167.4 (M+H); rt 0.45 min. LCMS postupak: mobilna faza A: pufer:acetonitril (95:5) mobilna faza B: pufer:acetonitril (5:95) postupak: %B: 0 min-20 %: 1.1 min -90 %: 1.7 min-90 % kolona: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm, protok: 0.7 mL/min.
INTERMEDIJER 109
1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-diciklopropilpiperazin
[0673]
[0674] U rastvor 4,4'-(hlorometilen)bis(fluorobenzena) (60 mg, 0.251 mmol) u acetonitrilu (20 mL) na sobnoj temperaturi dodati su 2,5-diciklopropilpiperazin (41.8 mg, 0.251 mmol) i DIPEA (0.132 mL, 0.754 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 80 °C preko noći. Sirova reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u DCM i opran sa vodom i koncentrovanim rastvorom soli, osušen preko natrijum sulfata, i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gel koloni korišćenjem 24 g fleš kolone i 5% metanola u CHCl3. Frakcije su koncentrovane pod sniženim pritiskom da daju 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-diciklopropilpiperazin (40 mg, 16.0 % prinos); LCMS: m/z = 369.4 (M+H); rt 1.65 i 1.71 min. LCMS postupak: mobilna faza A: pufer:acetonitril (95:5) mobilna faza B: pufer:acetonitril (5:95) postupak:%B: 0 min-20 %: 1.1 min -90 %: 1.7 min-90 % kolona: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm, protok: 0.7 mL/min.
PRIMERI 152 I 153
8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-diciklopropilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0676] U rastvor 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-diciklopropilpiperazin (65 mg, 0.176 mmol) u acetonitrilu (2 mL) na sobnoj temperaturi je dodat DIPEA (0.092 mL, 0.529 mmol). Reakciona smeša je mešana na 85 °C tokom 10 min i 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (58.8 mg, 0.176 mmol) je dodat. Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u DCM, opran sa vodom i koncentrovanim rastvorom soli, osušen preko natrijum sulfata, i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Hiralna separacija, kolona: Cellulose-C4 (250*21 mm) 5 µm; mobilna faza A: mobilna faza B: metanol protok: 20 mL/min izomerne smeše dalo je izomer 1 i izomer 2.
[0677] Primer 152: izomer 1: (0.6 mg, 0.6 % prinos); LCMS: m/z = 552.3 (M+H); rt 1.81 min. LCMS postupak: A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat B: 5% voda:95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat. protok: 1.1 mL/min temp: 50 °C kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm,<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.11-8.15 (m, 1 H), 8.03-8.09 (m, 1 H), 7.45-7.52 (m, 2 H), 7.28-7.34 (m, 2 H), 7.12-7.24 (m, 4 H), 6.07 (s, 1 H), 5.84 (s, 1 H), 3.91-3.97 (m, 1 H), 3.51-3.58 (m, 4 H), 2.79-2.84 (m, 1 H), 2.35-2.38 (m, 1 H), 1.99-2.06 (m, 1 H), 1.78-1.88 (m, 1 H), 0.98-1.11 (m, 1 H), 0.83-0.89 (m, 1 H), 0.67-0.74 (m, 1 H), 0.52-0.61 (m, 1 H), 0.41-0.48 (m, 2 H), 0.32-0.41 (m, 1 H), 0.23-0.31 (m, 1 H), -0.08--0.02 (m, 1 H), -0.28-0.15 (m, 1 H).
[0678] Primer 153: izomer 2: (0.5 mg, 1.0 % prinos); LCMS: m/z = 552.3 (M+H); rt 2.55 min. LCMS postupak: A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; protok: 1.1 mL/min. temp: 50 °C kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.18-8.09 (m, 1H), 8.09-7.99 (m, 1H), 7.48 (dd, J=8.0, 5.5Hz, 2H), 7.30 (dd, J=8.5, 5.5 Hz, 2H), 7.26-6.98 (m, 4H), 6.07 (s, 1H), 5.84 (s, 1H), 3.92 (br.s., 1H), 3.59-3.49 (m, 3H), 3.42 (d, J=1.0 Hz, 2H), 2.82 (d, J=9.0 Hz, 1H), 2.36 (br. s., 1H),2.03 (d, J=9.0 Hz, 1H), 1.83 (br. s., 2H), 0.86 (d, J=8.0 Hz, 1H), 0.70 (br. s., 1H),0.55 (d, J=5.0 Hz, 1H), 0.43 (br. s., 1H), 0.37 (br. s., 1H), 0.28 (d, J=5.5 Hz, 1H), -0.04 (d, J=4.5 Hz, 1H), -0.22 (br. s., 1H).
INTERMEDIJER 111
terc-butil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-fenilpiperazin-1-karboksilat
[0679]
[0680] U rastvor 4,4'-(hlorometilen)bis(fluorobenzena) (75 mg, 0.314 mmol) u acetonitrilu (20 mL) na sobnoj temperaturi dodati su terc-butil 2-fenilpiperazin-1-karboksilat (91 mg, 0.346 mmol) i DIPEA (0.165 mL, 0.943 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 80 °C preko noći i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u DCM, washed sa vodom i koncentrovanim rastvorom soli, osušen preko natrijum sulfata, i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gel koloni koristeći 24 g fleš kolone, eluiranjem sa 30 % EtOAc u petrol etru. Frakcije su koncentrovane pod sniženim pritiskom da daju proizvod terc-butil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-fenilpiperazin-1-karboksilat (100 mg, 65.2 % prinos); LCMS: m/z = 465.5 (M+H); rt 1.63 min. LCMS postupak: M. faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5) mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95) postupak: %B: 0 min-20:2min-100:2.3min-100 protok: 0.7 mL/min kolona: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm.
INTERMEDIJER 112
1-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-fenilpiperazin, HCl
[0681]
[0682] U rastvor terc-butil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-fenilpiperazin-1-karboksilata (80 mg, 0.172 mmol) u dioksanu (5 mL) na 0 °C je dodata HCl u dioksanu (0.052 mL, 1.722 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je opran sa petrol etrom:dietil etrom (1:1) i osušen pod visokim pritiskom da da 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-fenilpiperazin, HCl (60 mg, 58.8 % prinos); LCMS: m/z = 365.4 (M+H); rt 0.80 min. LCMS postupak: M. faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95) postupak:%B: 0 min-20:2 min-100: 2.3min-100; protok: 0.7 mL/min kolona: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm.
PRIMERI 154 DO 156
8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-fenilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0683]
[0684] U rastvor 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-fenilpiperazin, HCl (80 mg, 0.200 mmol) u acetonitrilu (2 mL) na sobnoj temperaturi je dodat DIPEA (0.105 mL, 0.599 mmol). Reakciona smeša je mešana na 85 °C tokom 10 min i 6-cijano-1-metil-2-okso-1.2-dihidro-1,5-naftiridin4-il trifluorometansulfonat (66.5 mg, 0.200 mmol) je dodat. Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C preko noći i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u DCM, i organski sloj je opran sa vodom (50 mL) i koncentrovanim rastvorom soli (50 mL), osušen preko Na2SO4, i koncentrovan pod sniženim pritiskom da da primer 154 (racemat). Enantiomeri su odvojeni korišćenjem hiralne HPLC. Postupak hiralne separacije kolona/dimenzije: Lux Amylose-2 (250 × 4.6) mm, 5 µm; % CO2: 85%; % korastvarač: 15% 0.2% DEA u etanolu; ukupni protok: 4.0 g/min; povratni pritisak: 100 bar; temperatura: 30 °C; UV: 225 nm.
[0685] Primer 155: enantiomer 1: (6.4 mg, 5.86% prinos); LCMS: m/z = 548.2 (M+H); rt 2.405 min. LCMS postupak: A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; protok: 1.1 mL/min; temp: 50 °C kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm,<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.14-8.20 (m, 1 H), 8.05-8.09 (m, 1 H), 7.41-7.51 (m, 4 H), 7.31-7.34 (m, 2 H), 7.24-7.29 (m, 2 H), 7.10-7.21 (m, 5 H), 6.00 (s, 1 H), 5.28-5.38 (m, 1 H), 4.50 (s, 1 H), 3.78-3.88 (m, 1 H), 3.48 (s, 3 H), 3.25 (br d, J=16.4 Hz, 1 H), 2.61-2.77 (m, 3 H), 2.52-2.58 (m, 1 H).
[0686] Primer 156: enantiomer 2: (5.5 mg, 4.93% prinos); LCMS: m/z = 548.2 (M+H); rt 2.404 min. LCMS postupak: A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; protok: 1.1 mL/min; temp: 50 °C; kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.15-8.18 (m, 1 H), 8.07 (d, J=8.8 Hz, 1 H), 7.41-7.50 (m, 4 H), 7.31-7.34 (m, 2 H), 7.24-7.29 (m, 2 H), 7.10-7.21 (m, 5 H), 6.00 (s, 1 H), 5.27-5.38 (m, 1 H), 4.50 (s, 1 H), 3.76-3.89 (m, 1 H), 3.48 (s, 3 H), 3.21-3.28 (m, 1 H), 2.66-2.76 (m, 3 H), (1 H zamaskiran sa rezidualnim pikom rastvarača).
PRIMER 157
8-((2S,SR)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-7-fluoro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0687]
[0688] U rastvor 8-((2S,SR)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (50 mg, 0.055 mmol) u acetonitrilu (1 mL) je dodat Selectfluor (19.50 mg, 0.055 mmol) rastvoren u vodi (0.15 mL) i THF (0.15 mL) na °C. Reakciona smeša was je smeštena pod azot i mešana na 0 °C, zagrejana do sobne temperature tokom 1.5 h, i zatim mešana tokom 3 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen preparativnom HPLC pod sledećim uslovima: kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 2 minuta pri 31% B, 31-75% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 15 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuto MS signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju 8-((2S,SR)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)-7-fluoro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (3.6 mg, 12.6 % prinos); LCMS: m/z -- 518.3 (M+H); rt 2.391 min; postupak: kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; vreme gradijenta 3 min; temperatura: 50 °C, 0 % rastvarača B do 100 % rastvarača B; praćenje na 220 nm (rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.26-8.03 (m, 2H), 7.67-7.50 (m, 4H), 7.15 (td, J=8.8, 6.4 Hz, 4H), 4.77 (s, 1H), 4.20 (d, J=6.6 Hz, 1H), 4.01 (d, J=12.2 Hz, 1H), 3.61 (s, 3H), 3.07-2.91 (m, 2H), 2.90 (s, 1H), 2.29 (d, J=9.8 Hz, 1H), 1.30 (d, J=6.6 Hz, 3H), 1.00 (d,J=6.4 Hz, 3H).
PRIMER 158
4-((2S,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril
[0689]
[0690] U mešani rastvor 6-bromo-3-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (0.1 g, 0.243 mmol) i (2R,5S)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin, HCl (0.077 g, 0.243 mmol) u acetonitrilu (10 mL) dodat je DIPEA (0.127 mL, 0.728 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 2 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Sirovo jedinjenje je prečišćeno pomoću Combi (24 g silika gel kolona, eluirano sa 0-5% metanol/DCM) da da 4-((2S,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril (65 mg, 38.7 % prinos) kao polučvrstu supstancu; LCMS: m/z = 580.2 (M+H); rt 2.30 min. Postupak: kolona-AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm; mobilna faza A: pufer:acetonitril (95:5); mobilna faza B: pufer:acetonitril (5:95), pufer: 10 mM amonijum acetat; gradijent: 20-100 % B tokom 2.0 minuta, zatim zadržavanje od 0.3 minuta pri 100 % B, protok 0.7 mL/min.
PRIMER 159
8-((2S,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2.7-dikarbonitril
[0691]
[0692] Mešani rastvor 4-((2S,SR)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-nafdiiridin-3-karbonitrila (50 mg, 0.086 mmol), dppf (2.88 mg, 5.19 µmol), cinka (1.130 mg, 0.017 mmol) i cink cijanida (20.30 mg, 0.173 mmol) u NMP (1 mL) je degaziran tokom 1 min pod atmosferom azota. Zatim, Pd2(dba)3(7.92 mg, 8.64 µmol) je dodat i reakciona smeša je zagrejana do 80 °C tokom 2 h. Reakciona smeša je razblažena sa etil acetatom oprana sa vodom, organski sloj je osušen preko anhidrovanog Na2SO4, filtriran i uparen pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen preparativnom HPLC pod sledećim uslovima: kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; gradijent: zadržavanje od 2 minute pri 12% B, 12-57% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 15 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuto MS signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju 8-((2S,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (8.9 mg, 19.6 % prinos); LCMS: m/z = 525.3 (M+H); rt 2.361 min. Postupak: kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; vreme gradijenta 3 min; temperatura: 50 °C, 0 % rastvarača B do 100 % rastvarača B; monitoring at 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.26 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.16 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.62 (dd, J=10.9, 5.3 Hz, 2H), 7.64 (dd, J=10.9, 5.5 Hz, 2H), 7.26-7.07 (m, 4H), 4.74 (s, 2H), 4.27-4.18 (m, 1H), 3.54 (s, 3H), 3.42 (d, J=11.2 Hz, 1H), 3.17-3.08 (m, 1H), 3.03 (br. s., 1H), 2.41 (d,J=12.0 Hz, 1H), 1.44 (d, J=6.6 Hz, 3H), 0.94-0.86 (m, 3H).
PRIMER 160
4-((2S,SR)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril
[0693]
[0694] U mešani rastvor 4-((2S,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-6-bromo-e-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitrila (50 mg, 0.086 mmol) u etil acetatu (2 mL) dodat je 10 % Pd-C (60 mg, 0.056 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h pod atmosferom vodonika. Reakciona smeša je filtrirana kroz podlogu od celita, oprana sa etil acetatom, i filtrat je uparena pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen preparativnom HPLC pod sledećim uslovima: kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 20 % B, 20-75% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 15 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju 4-((2S,SR)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)-1 -metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril (18.9 mg, 43.8 % prinos); LCMS: m/z = 500.3 (M+H); rt 2.5763 min. Postupak: kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; vreme gradijenta 3 min; temperatura: 50 °C, 0 % rastvarača B do 100 % rastvarača B; praćenje na 220 nm (rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.53 (d, J=3.2 Hz, 1H), 8.00 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.70 (dd, J=8.6, 4.4 Hz, 1H), 7.67-7.44 (m, 4H), 7.15 (td, J=8.8, 2.9 Hz, 4H), 4.90 (br. s., 1H), 4.71 (s,1H), 4.26 (d, J=9.3 Hz, 1H), 3.53 (s, 3H), 3.39 (d, J=13.2 Hz, 1H), 3.14 (d, J=8.3 Hz, 1H), 3.02 (d, J=6.4 Hz, 1H), 2.35 (d, J=11.7 Hz, 1H), 1.41 (d, J=6.6 Hz, 3H), 0.89 (d, J=6.4 Hz, 3H).
PRIMER 161
8-((2S,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-7-nitro-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0695]
[0696] U mešani rastvor (2R,5S)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin, HCl (78 mg, 0.222 mmol) u suvom acetonitrilu (3 mL) je dodat DIPEA (0.032 mL, 0.185 mmol), zatim 6-cijano-1-metil-3-nitro-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (70 mg, 0.185 mmol). Reakciona smeša je zagrejana na 85 °C tokom 2 h. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen preparativnom HPLC pod sledećim uslovima: kolona: Waters XBridge C18, 150 mm x 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 20 % B, 20-75% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 15 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuto MS signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju 8-((2S,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-7-nitro-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (82.8 mg, 80 % prinos); LCMS: m/z = 545.2 (M+H); rt 2.383 min. Postupak: kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; vreme gradijenta 3 min; temperatura: 50 °C, 0 % rastvarača B do 100 % rastvarača B; oraćenje na 220 nm (rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.29 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.21 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.59 (ddd, J=8.8, 5.4, 3.4 Hz, 4H), 7.13 (td, J=8.8, 1.7 Hz, 4H), 4.76 (s, 1H), 4.65 (d, J=5.9 Hz, 1H), 3.75 (dd,J=12.0, 2.9 Hz, 1H), 3.59 (s, 3H), 3.11 (dd, J=11.4, 3.5 Hz, 1H), 3.02-2.91 (m, 1H), 2.64 (d, J=11.5 Hz, 1H), 2.37-2.29 (m, 1H), 1.36 (d, J=6.6 Hz, 3H), 0.94 (d, J=6.6 Hz, 3H).
INTERMEDIJER 113
7-bromo-8-hidroksi-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0697]
[0698] U mešani rastvor 8-hidroksi-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (1000 mg, 4.97 mmol) u suvom DMF (10 mL) dodat je NBS (973 mg, 5.47 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da da ostatak. Ostatak je rastvoren u vodi i mešan tokom 10 min. Čvrsta materija je filtrirana i oprana sa petrol etrom da da 7-bromo-8-hidroksi-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (0.8 g, 56.9 % prinos) kao beličastu čvrstu supstancu; LCMS: m/z = 282 (M+H); rt 1.599 min. Postupak: kolona-KINETEX-XB-C18 (75 × 3 mm- 2.6 µm); mobilna faza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitril (98:2); mobilna faza B: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitril (2:98); gradijent: 20-100 % B tokom 4 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B protok 1.5 mL/min; zatim gradijent: 100-20 % B tokom 0.1 minuta, protok 1.5 mL/min.
INTERMEDIJER 114
3-bromo-6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat
[0699]
[0700] U mešani rastvor 7-bromo-8-hidroksi-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (0.175 g, 0.625 mmol) i TEA (0.131 mL, 0.937 mmol) u suvom DCM (10 mL) je dodat anhidririd fluorometansulfonske kiseline (0.137 mL, 0.812 mmol) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Reakciona smeša je razblažena sa DCM i oprana sa vodom, nakon čega sledi ispiranje sa koncentrovanim rastvorom soli, organski sloj je osušen preko anhidrovanog Na2SO4, filtriran i uparen pod sniženim pritiskom da da 3-bromo-6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (190 mg, 53.9 % prinos) kao svetlo bledo žutu čvrstu supstancu; LCMS: m/z = 414 (M+H); rt 1.61 min. Postupak: kolona- AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm; mobilna faza A: pufer: acetonitril (95:5); mobilna faza B: pufer: acetonitril (5:95), pufer: 10 mM amonijum acetat; gradijent: 20-100 % B tokom 2.0 minuta, zatim zadržavanje od 0.3 minuta pri 100 % B, protok 0.7 mL/min.
PRIMER 162
Metil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-1-(3-bromo-6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat
[0701]
[0702] Rastvor metil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-2-karboksilat, HCl (134 mg, 0.349 mmol) i DIPEA (0.127 mL, 0.728 mmol) u acetonitrilu (2 mL) je mešan na sobnoj temperaturi tokom 5 min. Zatim, 3-bromo-6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (120 mg, 0.291 mmol) je dodat i reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 3 h. Reakciona smeša je uparena pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen preparativnom HPLC pod sledećim uslovima: kolona: Sunfire C18, 19 × 150 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat; mobilna faza B: acetonitril; gradijent: 50-80 % B tokom 16 minutea, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 17 mL/min. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju metil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-1-(3-bromo-6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat (5.4 mg, 3.01 % prinos); LCMS: m/z = 610.1 (M+H); rt 2.330 min. Postupak: kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; vreme gradijenta 3 min; temperatura: 50 °C, 0 % rastvarača B do 100 % rastvarača B; praćenje na 220 nm (rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat.<1>H NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.17-8.21 (m, 1 H), 8.11-8.16 (m, 1 H), 7.42-7.51 (m, 4 H), 7.13-7.21 (m, 5 H), 4.78-4.83 (m, 1 H), 4.48 (s, 1 H), 4.04-4.14 (m, 1 H), 3.74 (s, 3 H), 3.64 (s, 3 H), 3.52-3.59 (m, 1 H), 3.08-3.15 (m, 1 H), 2.69-2.75 (m, 1 H), 2.53-2.55 (m, 1 H), 2.35-2.41 (m, 1 H).
INTERMEDIJER 115
8-(3,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0703]
[0704] U mešani rastvor 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (300 mg, 0.900 mmol) i 2,6-dimetilpiperazina (103 mg, 0.900 mmol) u acetonitrilu (10 mL) je dodat DIPEA (0.472 mL, 2.70 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 16 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da da 8-(3,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (0.22 g, 74.0 % prinos) kao svetlo braon čvrstu supstancu. LCMS: m/z = 298.4 (M+H); rt 0.62 min. Postupak: kolona- AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm; mobilna faza A: pufer: acetonitril (95:5); mobilna faza B: pufer: acetonitril (5:95), opufer: 10 mM amonijum acetat; gradijent: 20-100 % B tokom 2.0 minuta, zatim zadržavanje od 0.3 minuta pri 100 % B, protok 0.7 mL/min.
PRIMER 163
8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0705]
[0706] U mešani rastvor 8-(3,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (101 mg, 0.341 mmol) i bis(4-fluorofenil)metil trifluorometansulfonata (150 mg, 0.426 mmol) u acetonitrilu (5 mL) je dodat DIPEA (0.223 mL, 1.277 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 16 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen preparativnom HPLC pod sledećim uslovima: kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 15% B, 15-55% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 15 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (7.1 mg, 3.3 % prinos); LCMS: m/z - 500.3 (M+H); rt 2.410 min. Postupak: kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; vreme gradijenta 3 min; temperatura: 50 °C, 0 % rastvarača B do 100 % rastvarača B; praćenje na 220 nm (rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat.<1>H NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.13 (d, J=8.0 Hz, 1H), 8.06 (d, J=8.5 Hz, 1H), 7.59 (dd, J=8.3, 5.8 Hz, 4H), 7.13 (t, J=8.5 Hz, 4H), 6.09 (s, 1H), 5.16 (s, 1H), 3.83 (d, J=11.0 Hz, 2H), 3.53 (s, 3H), 3.15-2.96 (m, 4H), 1.18 (d, J=6.5 Hz, 6H).
INTERMEDIJER 122
terc-butil (R)-4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-izopropilpiperazin-1 -karboksilat
[0707]
[0708] U mešani rastvor (R)-1-Boc-3-izopropil-piperazina (100 mg, 0.438 mmol) i 4,4'-(bromometilen)bis(hlorobenzena) (180 mg, 0.569 mmol) u acetonitrilu (4 mL) je dodat DIPEA (0.229 mL, 1.314 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da da sirovo jedinjenje. Sirovo jedinjenje je rastvoreno in etil acetatu i oprano sa vodom, organski sloj je osušen preko anhidrovanog Na2SO4, filtriran, i uparen pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je rastvoren u DCM nanetom na Prep TLC ploču. Ploča je razvijena korišćenjem 5% EA+PE, proizvod je markiran, silika je rastvorena u 10 % metanol/uDCM, mešana tokom 10 min, filtrat je uklonjen pod sniženim pritiskom da da terc-butil (R)-4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-izopropilpiperazin-1-karboksilat (190 mg, 84 % prinos) kao polučvrstu supstancu; LCMS: m/z = 464.2 (M+H); rt 4.233 min. Postupak: kolona-KINETEX-XB-C18 (75 × 3 mm-2.6 µm); mobilna faza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitril (98:2); mobilna faza B: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitril(2:98); gradijent: 20-100 % B tokom 4 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 0.6 minute pri 100 % B protok 1.5 mL/min; zatim gradijent: 100-20 % B tokom 0.1 minuta, protok 1.5 mL/min.
INTERMEDIJER 123
(R)-1 -(bis(4-hlorofenil)metil)-2-izopropilpiperazin, HCl
[0709]
[0710] U mešani rastvor terc-butil (R)-4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-izopropilpiperazin-1-karboksilata (190 mg, 0.410 mmol) u DCM (4 mL) dodata je HCl u dioksanu (6 mL, 197 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da da (R)-1-(bis(4-hlorofenil)metil)-2-izopropilpiperazin, HCl (160 mg, 81 % prinos) kao beličastu čvrstu supstancu; LCMS: m/z = 363.3 (M+H); rt 1.92 min. Postupak: kolona- AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm; mobilna faza A: pufer: acetonitril (95:5); mobilna faza B: pufer: acetonitril (5:95), pufer: 10 mM amonijum acetat; gradijent: 20-100 % B tokom 2.0 minuta, zatim zadržavanje od 0.3 pri 100 % B, protok 0.7 mL/min.
PRIMER 167
(R)-8-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-izopropilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0712] U mešani rastvor (R)-1-(bis(4-hlorofenil)metil)-2-izopropilpiperazin, HCl (0.07 g, 0.175 mmol) u suvom acetonitrilu (5 mL) dodat je DIPEA (0.092 mL, 0.525 mmol), zatim je dodat6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (0.064 g, 0.193 mmol). Reakciona smeša je zagrejana na 85 °C tokom 2 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i Rrastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen preparativnom HPLC pod sledećim uslovima: kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 20 % B, 20-85% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 15 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuto MS signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju (R)-8-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-izopropilpiperazin-l-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-l,5-naftiridin-2-karbonitril (33.9 mg, 35.2 % prinos); LCMS: m/z = 546.2 (M+H); rt 2.975 min. Postupak: kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; vreme gradijenta 3 min; temperatura: 50 °C, 0 % rastvarača B do 100 % rastvarača B; praćenje na 220 nm (rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.15 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.08 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.55-7.44 (m,4H), 7.44-7.31 (m, 4H), 6.12 (s, 1H), 5.51 (s, 1H), 3.81 (dd, J=13.0, 3.7 Hz, 1H), 3.62-3.44(m, 4H), 3.40-3.33 (m, 1H), 3.16-3.03 (m, 2H), 2.54 (br. s.,2H), 2.26 (d, J=8.6 Hz, 1H), 1.09 (d, J=6.8 Hz, 3H), 0.94 (d, J=6.6 Hz, 3H).
INTERMEDIJER 124
terc-butil (R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-izopropilpiperazin-1 -karboksilat
[0714] U mešani rastvor (R)-1-Boc-3-izopropil-piperazina (100 mg, 0.438 mmol) i bis(4-fluorofenil)metanola (0.113 mL, 0.657 mmol) u acetonitrilu (4 mL) dodat je DIPEA (0.229 mL, 1.314 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je rastvoren u DCM nanetom na Prep TLC ploču. Ploča je razvijena korišćenjem 5% EA+PE i proizvod je označen i silika je rastvorena u 10 % metanolu/DCM, mešana tokom 10 min, filtrat je uklonjen pod sniženim pritiskom da da terc-butil (R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-izopropilpiperazin-1-karboksilat (80 mg, 34.4 % prinos kao polučvrstu supstancu; LCMS: m/z = 431.4 (M+H); rt 1.80 min. postupak: kolona- AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm; mobilna faza A: pufer: acetonitril (95:5); mobilna faza B: pufer: acetonitril (5:95), pufer: 10 mM amonijum acetat; gradijent: 20-100 % B tokom 2.0 minuta, zatim zadržavanje od 0.3 minuta pri 100 % B, protok 0.7 mL/min.
INTERMEDIJER 125
(R)-1 -(bis(4-fluorofenil)metil)-2-izopropilpiperazin, HCl
[0715]
[0716] U mešani rastvor terc-butil (R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-izopropilpiperazin-1-karboksilata (80 mg, 0.186 mmol) u suvom DCM (3 mL) dodata je HCl u dioksanu (3.0 mL, 12.00 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da da (R)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-izopropilpiperazin, HCl (60 mg, 76 % prinos) kao beličastu čvrstu supstancu; LCMS: m/z = 331.4 (M+H); rt 2.469 min. (LCMS) Postupak: kolona-KINETEX-XB-C18 (75 X 3 mm- 2.6 µm); mobilna faza A: 0.1% TFA u vodi iz Milli-Q v; mobilna faza B: 0.1%TFA u acetonitrilu; gradijent: 20-100 % B tokom 4.0 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B protok 1.5 mL/min, 100-20 % B tokom 0.1 minuta, protok 1.5 mL/min.
PRIMER 168
(R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-izopropilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0717]
[0718] U mešani rastvor (R)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-izopropilpiperazin, HCl (60 mg, 0.164 mmol) u acetonitrilu (2 mL) dodati su DIPEA (0.086 mL, 0.491 mmol) i 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (59.9 mg, 0.180 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 2 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen preparativnom HPLC pod sledećim uslovima: kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 2 minuta pri 9% B, 9-38% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 15 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil) metil)-3-izopropilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (40.7 mg, 48.5 % prinos); LCMS: m/z -= 514.3 (M+H); rt 2.492 min. Postupak: kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; vreme gradijenta 3 min; temperatura: 50 °C, 0 % rastvarača B do 100 % rastvarača B; praćenje na 220 nm (rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.15 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.08 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.62-7.44 (m,4H), 7.28-7.06 (m, 4H), 6.12 (s, 1H), 5.49 (s, 1H), 3.82 (dd, J=12.5, 3.9 Hz, 1H), 3.66-3.44 (m, 4H), 3.41-3.33 (m, 1H), 3.21-2.99 (m, 2H), 2.90 (s, 1H), 2.55 (br. s., 1H), 2.30-2.17 (m,1H), 1.09 (d, J=6.6 Hz, 3H), 0.94 (d, J=6.4 Hz, 3H).
PRIMER 169
(R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-izopropilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril
[0719]
[0720] U mešani rastvor (R)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-izopropilpiperazin, HCl (30 mg, 0.082 mmol) u acetonitrilu (5 mL) dodati su DIPEA (0.043 mL, 0.245 mmol) i 3,6-dicijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (32.2 mg, 0.090 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 2 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen preparativnom HPLC pod sledećim uslovima: kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 35% B, 35-82% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 15 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil) metil)-3-izopropilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (17.6 mg, 40.0 % prinos); LCMS: m/z = 539.3 (M+H); rt 2.439 min. Postupak: kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; vreme gradijenta 3 min; temperatura: 50 °C, 0 % rastvarača B do 100 % rastvarača B; praćenje na 220 nm (rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.25 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.15 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.59-7.37 (m,4H), 7.27-7.05 (m, 4H), 5.56 (s, 1H), 4.26 (dd, J=13.2, 3.4 Hz, 1H), 3.91 (d, J=12.7 Hz, 1H), 3.83-3.64 (m, 2H), 3.53 (s, 3H), 3.42-3.32 (m, 1H), 2.56 (d, J=14.7 Hz, 1H), 2.48 (d, J=3.9, Hz, 1H), 2.26 (dd, J=14.1, 7.2 Hz, 1H), 1.06 (d, J=6.8 Hz, 3H), 0.71 (d, J=6.6 Hz, 3H).
INTERMEDIJER 126
terc-butil (R)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-3-etilpiperazin-1-karboksilat
[0721]
[0722] U mešani rastvor (R)-1-BOC-3-etil piperazin (100 mg, 0.467 mmol) u DMA (2 mL) dodati su DIPEA (0.244 mL, 1.400 mmol) i 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (171 mg, 0.513 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 16 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Sirovo jedinjenje je prečišćeno pomoću Combi (40 g silika kolone, eluirano sa 100-80 % etil acetatom/ petrol etrom) da da terc-butil (R)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-3-etilpiperazin-1-karboksilat (180 mg, 87 % prinos) kao polučvrstu supstancu; LCMS: m/z = 398.2 (M+H); rt 2.702 min. Postupak: kolona-KINETEX-XB-C18 (75 × 3 mm- 2.6 µm); mobilna faza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitril (98:2); mobilna faza B: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitril (2:98); gradijent: 40-100 % B tokom 25 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B protok 1.5 mL/min; zatim gradijent: 100 % B tokom 2 minuta, protok 1.5 mL/min; gradijent: 100 % B tokom 4 minutea, protok 1.5 mL/min.
INTERMEDIJER 127
(R)-8-(2-etilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA
[0723]
[0724] U mešani rastvor terc-butil (R)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-3-etilpiperazin-1-karboksilata (180 mg, 0.453 mmol) u DCM (3 mL) dodat je TFA (0.035 mL, 0.453 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da da TFA so (R)-8-(2-etilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (100 mg, 42.9 % prinos) kao gumu; LCMS: m/z = 298.4 (M+H); rt 0.66 min. Postupak: kolona- AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm; mobilna faza A: pufer: acetonitril (95:5); mobilna faza B: pufer: acetonitril (5:95), pufer: 10 mM amonijum acetat; gradijent: 20-100 % B tokom 2.0 minuta, zatim zadržavanje od 0.3 minuta pri 100 % B, protok 0.7 mL/min.
PRIMER 170
(R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-etilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0725]
[0726] U mešani rastvor (R)-8-(2-etilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA (100 mg, 0.243 mmol) u acetonitrilu (3 mL) dodati su DIPEA (0.127 mL, 0.729 mmol) i 4,4'-(hlorometilen) bis(fluorobenzen) (0.091 mL, 0.486 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen preparativnom HPLC pod sledećim uslovima: kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 15% B, 15-65% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 15 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuto MS signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-etilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (13.8 mg, 10.8 % prinos); LCMS: m/z = 500.2 (M+H); rt 2.601 min. Postupak: kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; vreme gradijenta 3 min; temperatura: 50 °C, 0 % rastvarača B do 100 % rastvarača B; praćenje na 220 nm (rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.14 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.06 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.50 (dd, J=8.7, 5.5 Hz, 2H), 7.53 (dd, J=8.7, 5.5 Hz, 2H), 7.24-7.06 (m,4H), 6.02 (s, 1H), 4.63 (br. s., 1H), 4.40 (s, 1H), 3.52 (s, 3H), 3.43 (d, J=6.6 Hz, 2H), 2.83-2.69 (m, 2H), 2.25 (dd, J=11.4, 3.3 Hz, 1H), 2.17-1.98 (m, 2H), 1.74-1.62 (m, 1H), 0.67 (t, J=7.5,Hz, 3H).
INTERMEDIJER 128
terc-butil 4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-2,2-dimetilpiperazin-1-karboksilat
[0727]
[0728] U mešani rastvor 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (0.373 g, 1.120 mmol) i terc-butil 2,2-dimetilpiperazin-1-karboksilata (0.2 g, 0.933 mmol) u acetonitrilu (10 mL) dodat je DIPEA (0.489 mL, 2.80 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Sirovo jedinjenje je prečišćeno pomoću Combi (24 g silika kolone, eluirano sa 50-60 % etil acetata/ petrol etra) da da terc-butil 4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-2,2-dimetilpiperazin-1-karboksilat (0.22 g, 55.1 % prinos) kao gumu; LCMS: m/z = 398.4 (M+H); rt 0.65 min. Postupak: kolona- AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm; mobilna faza A: pufer: acetonitril (95:5); mobilna faza B: pufer: acetonitril (5:95), pufer: 10 mM amonijum acetat; gradijent: 20-100 % B tokom 2.0 minuta, zatim zadržavanje od 0.3 minuta pri 100 % B, protok 0.7 mL/min.
INTERMEDIJER 129
8-(3,3-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA
[0729]
[0730] U mešani rastvor terc-butil 4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-2,2-dimetilpiperazin-1-karboksilata (0.1 g, 0.252 mmol) u suvom DCM (2 mL) dodat je TFA (0.5 mL, 6.49 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da da sirovo jedinjenje i triturisan sa DCM i petrol etrom da da 8-(3,3-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA (0.099 g, 81 % prinos) kao polučvrstu supstancu; LCMS: m/z = 298.4 (M+H); rt 0.61 min. Postupak: kolona- AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm)1.7 µm; mobilna faza A: pufer: acetonitril (95:5); mobilna faza B: pufer: acetonitril (5:95), pufer: 10 mM amonijum acetat; gradijent: 20-100 % B tokom 2.0 minuta, zatim zadržavanje od 0.3 minuta pri 100 % B, protok 0.7 mL/min.
PRIMER 171
8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3,3-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0731]
[0732] U mešani rastvor 8-(3,3-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA (50 mg, 0.168 mmol), i DIPEA (0.088 mL, 0.504 mmol) u acetonitrilu (2 mL) dodat je bis(4-fluorofenil)metil trifluorometansulfonat (71.1 mg, 0.202 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 2 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen preparativnom HPLC pod sledećim uslovima: kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 40 % B, 40-74% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 15 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuto MS signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3,3-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (6 mg, 7.1 % prinos); LCMS: m/z = 500.3 (M+H); rt 2.456 min. Postupak: kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; vreme gradijenta 3 min; temperatura: 50 °C, 0 % rastvarača B do 100 % rastvarača B; praćenje na 220 nm (rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.15 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.07 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.33 (dd, J=8.6, 5.6 Hz, 4H), 7.24-6.97 (m, 4H), 6.08 (s, 1H), 5.53 (s, 1H), 3.62-3.48 (m, 4H), 3.39 (s, 2H), 2.61 (br. s., 2H), 1.24 (s, 3H), 1.16 (s, 6H). Jedan pik protona je zamaskiran vlagom.
INTERMEDIJER 130
terc-butil (R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-karboksilat
[0733]
[0734] U mešani rastvor terc-butil (R)-3-etilpiperazin-1-karboksilata (0.3 g, 1.400 mmol) i DIPEA (0.733 mL, 4.20 mmol) u acetonitrilu (5 mL) dodat je 4,4'-(hlorometilen)bis(fluorobenzen) (0.392 mL, 2.100 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Sirovo jedinjenje je prečišćeno pomoću Combi (40 g silika kolone, eluiranje sa 5-10 % etil acetatom/ petrol etrom) da se dobije terc-butil (R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-karboksilat (0.331 g, 48.8 % prinos) kao bezbojna guma; LCMS: m/z = 417.4 (M+H); rt 1.62 min. Postupak: kolona- AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm; mobilna faza A: pufer: acetonitril (95:5); mobilna faza B: pufer: acetonitril (5:95), pufer: 10 mM amonijum acetat; gradijent: 20-100 % B tokom 2.0 minuta, zatim zadržavanje od 0.3 minuta pri 100 % B, protok 0.7 mL/min.
INTERMEDIJER 131
(R)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-etilpiperazin, HCl
[0735]
[0736] U mešani rastvor terc-butil (R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-karboksilata (0.2 g, 0.480 mmol) u DCM (2 mL) dodata je HCl u dioksanu (4 mL, 132 mmol).
Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da da (R)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-etilpiperazin, HCl (0.169 g, 73.8 % prinos)) kao beličasta čvrstu supstancu; LCMS: m/z = 317.4 (M+H); rt 1.46 min. Postupak: kolona- AQU1TY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm; mobilna faza A: pufer: acetonitril (95:5); mobilna faza B: pufer: acetonitril (5:95), pufer: 10 mM amonijum acetat; gradijent: 20-100 % B tokom 2.0 minuta, zatim zadržavanje od 0.3 minuta pri 100 % B, protok 0.7 mL/min.
PRIMER 172
(R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0737]
[0738] U mešani rastvor (R)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-etilpiperazin, HCl (0.169 g, 0.479 mmol) u acetonitrilu (5 mL) dodati su DIPEA (0.251 mL, 1.437 mmol) i 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (0.176 g, 0.527 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 2 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen preparativnom HPLC kolona: X-Bridge Fenil (250mm × 4.6 mm ID, 5 µm), mobilna faza A=pufer: 10 mM amonijum acetat u vodi: mobilna faza B= acetonitril Protok:1 mL/min gradijent: 10-40 % B tokom 15 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 15 mL/min. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (90 mg, 37.2 % prinos); LCMS: m/z = 500.2 (M+H); rt 3.822 min. Postupak: kolona-KINETEX-XB-C18 (75 × 3 mm- 2.6 µm); mobilna faza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitril (98:2); mobilna faza B: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitril (2:98); gradijent: 20-100 % B tokom 4 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B protok 1.5 mL/min; zatim gradijent: 100-20 % B tokom 0.1 minuta, protok 1.5 mL/min.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.18-8.12 (m, 1H), 8.10-8.05 (m, 1H), 7.61-7.47 (m, 4H), 7.15 (td, J=9.0, 1.0 Hz, 4H), 6.11 (s, 1H), 4.99 (s, 1H), 4.23 (d, J=12.0 Hz, 1H), 3.54 (s, 3H), 3.41 (d, J=11.5 Hz, 1H), 3.12-2.97 (m, 2H), 2.76-2.66 (m, 1H), 2.54 (d, J=6.0 Hz, 2H), 1.94 (ddd, J=13.3, 9.3, 7.5 Hz, 1H), 1.70 (dd, J=12.5, 7.5 Hz, 1H), 0.77 (t, J=7.5 Hz, 3H).
PRIMER 173
(R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril
[0739]
[0740] U mešani rastvor (R)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-etilpiperazin, HCl (30 mg, 0.085 mmol) u acetonitrilu (5 mL) dodat je DIPEA (0.045 mL, 0.255 mmol) nakon čega sledi dodavanje u kapima 3,6-dicijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (33.5 mg, 0.094 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 2 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen preparativnom HPLC pod sledećim uslovima: kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 25% B, 25-78% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 15 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (12.4 mg, 27.8 % prinos); LCMS: m/z = 525.3 (M+H); rt 2.364 min. Postupak: kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; vreme gradijenta 3 min; temperatura: 50 °C, 0 % rastvarača B do 100 % rastvarača B; praćenje na 220 nm (Rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.25 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.15 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.65-7.44 (m,4H), 7.16 (t, J=8.7 Hz, 4H), 5.15 (s, 1H), 4.07 (d, J=13.0 Hz, 1H), 4.00-3.86 (m, 2H), 3.62 (t, J=10.1Hz, 1H), 3.53 (s, 3H), 3.05 (t, J=10.3 Hz, 1H), 2.70-2.62 (m, 1H), 2.56 (d, J=13.0 Hz, 1H), 1.78-1.64 (m, 1H), 1.62-1.47 (m, 1H), 0.63 (t, J=7.5 Hz, 3H).
PRIMER 174
(R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-il)-7-fluoro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0741]
[0742] Rastvor je pripremljen rastvaranjem (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (55 mg, 0.110 mmol) u acetonitrilu (2 mL). Rastvor je ohlađen na 0 °C i Selectfluor (50.7 mg, 0.143 mmol) rastvoren u vodi (0.15 mL) i THF (0.15 mL) je dodat. Reakciona smeša je smeštena pod azot, mešana na 0 °C, zagrejana na sobnu temperaturu tokomn 1.5 h, i zatim mešana tokom 3 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen preparativnom HPLC pod sledećim uslovima: kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 35% B, 35-100 % B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 15 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-il)-7fluoro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (4.3 mg, 7.6 % prinos); LCMS: m/z = 518.3 (M+H); rt 2.669 min. Postupak: kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; vreme gradijenta 3 min; temperatura: 50 °C, 0 % rastvarača B do 100 % rastvarača B; praćenje na 220 nm (rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.24-8.03 (m, 2H), 7.67-7.37 (m, 4H), 7.14 (t, J=8.7 Hz,4H), 5.03 (s, 1H), 3.72-3.52 (m, 4H), 3.52-3.35 (m, 3H), 2.76 (dt, J=12.4, 6.1 Hz, 2 H), 2.03 -1.90 (m, 1H), 1.80-1.62 (m, 1H), 0.66 (t, J=7.3 Hz, 3H).
PRIMER 175
(R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-il)-7-hloro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0743]
[0744] U mešani rastvor (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (40 mg, 0.080 mmol) u suvom DCM (3 mL) dodat je NCS (16.04 mg, 0.120 mmol) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen preparativnom HPLC pod sledećim uslovima: kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 35% B, 35-100 % B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 15 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-il)-7-hloro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (31.4 mg, 69.1 % prinos); LCMS: m/z = 534.3 (M+H); rt 2.752 min. Postupak: kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; vreme gradijenta 3 min; temperatura: 50 °C, 0 % rastvarača B do 100 % rastvarača B; praćenje na 220 nm (rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.17 (q, J=8.8 Hz, 2H), 7.68-7.46 (m, 4H), 7.25-7.06 (m,4H), 5.05 (s, 1H), 3.82 (d, J=10.0 Hz, 1H), 3.63 (s, 3H), 3.58 (d, J=13.2 Hz, 1H), 3.49-3.33 (m,2H), 2.98 (t, J=9.7 Hz, 1H), 2.45 (br. s., 1H), 2.08 (s, 1H), 1.82-1.70 (m, 1H), 1.67 (br. s., 1H),0.53 (t, J=7.5 Hz, 3H).
INTERMEDIJER 132
terc-butil (R)-4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-karboksilat
[0745]
[0746] U mešani rastvor terc-butil (R)-3-etilpiperazin-1-karboksilata (0.18 g, 0.840 mmol) i DIPEA (0.440 mL, 2.52 mmol) u acetonitrilu (5 mL) dodat je DIPEA (0.440 mL, 2.52 mmol) nakon čega sledi dodavanje 4,4'-(bromometilen) bis(hlorobenzena) (0.292 g, 0.924 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Sirovo jedinjenje je prečišćeno pomoću Combi (24 g silika kolone, eluirano sa 5-10 % etil acetatom/ petrol etrom) da da tercbutil (R)-4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-karboksilat (0.37 g, 98 % prinos) kao bezbojna gum; LCMS: m/z = 449.2 (M+H); rt 2.02 min. Postupak: kolona-KINETEX-XB-C18 (75 × 3 mm- 2.6 µm); mobilna faza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitril (98:2); mobilna faza B: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitril (2:98); gradijent: 20-100 % B tokom 4 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B protok 1.5 mL/min; zatim gradijent: 100-20 % B tokom 0.1 minuta, protok 1.5 mL/min
INTERMEDIJER 133
(R)-1 -(bis(4-hlorofenil)metil)-2-etilpiperazin, HCl.
[0748] U mešani rastvor terc-butil (R)-4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-karboksilata (0.37 g, 0.823 mmol) u suvom DCM (3 mL) dodata je HCl u dioksanu (9 mL, 36.0 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da da (R)-1-(bis(4-hlorofenil)metil)-2-etilpiperazin, HCl (0.3 g, 83 % prinos) kao beličasta čvrstu supstancu; LCMS: m/z = 349.3 (M+H); rt 1.79 min. Postupak: kolona- AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm; mobilna faza A: pufer: acetonitril (95:5); mobilna faza B: pufer: acetonitril (5:95), pufer: 10 mM amonijum acetat; gradijent: 20-100 % B tokom 2.0 minuta, zatim zadržavanje od 0.3 minuta pri 100 % B, protok 0.7 mL/min.
PRIMER 176
(R)-8-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0749]
[0750] U mešani rastvor (R)-1-(bis(4-hlorofenil)metil)-2-etilpiperazin, HCl (0.1 g, 0.259 mmol) u acetonitrilu (5 mL) dodati su DIPEA (0.136 mL, 0.778 mmol) i 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (0.095 g, 0.285 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 2 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Sirovo jedinjenje je prečišćen pomoću combo (12 g silika kolone, eluirano sa 5-10 % etil acetatom/ petrol etrom) da da (R)-8-(4-(bis(4hlorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (125 mg, 49.8 % prinos) kao gumu; LCMS: m/z = 532.3 (M+H); rt 2.32 min. Postupak: kolona-AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm; mobilna faza A: pufer: acetonitril (95:5); mobilna faza B: pufer: acetonitril (5:95), pufer: 10 mM amonijum acetat; gradijent: 20-100 % B tokom 2.0 minuta, zatim zadržavanje od 0.3 minuta pri 100 % B, protok 0.7 mL/min.
PRIMER 177
(R)-8-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-il)-7-hloro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0751]
[0752] U mešani rastvor (R)-8-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (30 mg, 0.056 mmol) u suvom DCM (3 mL) dodat je NCS (11.28 mg, 0.085 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen preparativnom HPLC pod sledećim uslovima: kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 35% B, 35-100 % B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 15 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju (R)-8-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-il)-7-hloro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (12.9 mg, 40.4 % prinos); LCMS: m/z = 566.2 (M+H); rt 2.864 min. Postupak: kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; vreme gradijenta 3 min; temperatura: 50 °C, 0 % rastvarača B do 100 % rastvarača B; praćenje na 220 nm (rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.17 (q, J=9.0 Hz, 2H), 7.58 (d, J=8.6 Hz, 2H), 7.55-7.44 (m,2H), 7.39 (dd, J=8.6, 1.5 Hz, 4H), 5.06 (s, 1H), 3.82 (dd, J=12.5, 2.4 Hz, 1H), 3.63 (s, 3H), 3.58 (d, J=12.5 Hz, 1H), 3.48-3.33 (m, 2H), 3.00 (dd, J=1.0, 8.6 Hz, 1H), 2.58-2.52 (m, 1H), 2.46,(d, J=12.2 Hz, 1H), 1.85-1.71 (m, 1H), 1.67 (d, J=7.3 Hz, 1H), 0.54 (t, J=7.3 Hz, 3H).
PRIMER 178
(R)-8-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-il)-7-fluoro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0753]
[0754] Rastvor je pripremljen rastvaranjem (R)-8-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (90 mg, 0.169 mmol) u acetonitrilu (3 mL). Rastvor je ohlađen do 0 °C i Selectfluor (78 mg, 0.220 mmol) dissolved u vodi (0.2 mL) i tetrahidrofuran (0.2 mL) dodat je. Reakciona smeša je smeštena po azot, mešana na 0 °C, zagrejana do sobne temperature tokom 1.5 h, i zatim mešana tokom 3 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen preparativnom HPLC pod sledećim uslovima: kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 35% B, 35-100 % B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 15 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju (R)-8-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-il)-7-fluoro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (2 mg, 2.1 % prinos); LCMS: m/z = 550.2 (M+H); rt 2.783 min. Postupak: kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; vreme gradijenta 3 min; temperatura: 50 °C, 0 % rastvarača B do 100 % rastvarača B; praćenje na 220 nm (rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.21-8.09 (m, 2H), 7.57 (d, J=8.6 Hz, 2H), 7.51 (d, J=8.6 Hz,2H), 7.39 (dd, J=8.6, 1.2 Hz, 4H), 5.05 (s, 1H), 3.72-3.56 (m, 4H), 3.51-3.39 (m, 3H), 2.78 (dd, J=13.0, 5.9 Hz, 1H), 2.45 (br. s., 2H), 1.96 (d, J=8.1 Hz, 1H), 1.71 (br. s., 1H), 0.68 (t, J=7.5 Hz, 3H).
PRIMER 179
(R)-8-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril
[0755]
[0756] U mešani rastvor (R)- I -(bis(4-hlorofenil)metil)-2-etilpiperazin, HCl (30 mg, 0.078 mmol) u acetonitrilu (5 mL) dodati su DIPEA (0.041 mL, 0.233 mmol) i 3,6-dicijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (30.6 mg, 0.086 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 2 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen preparativnom HPLC pod sledećim uslovima: kolona: Waters XBridge C18, 150 mm x 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 35% B, 35-82% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 15 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju (R)-8-(4-(bis(4-hlorofenil) metil)-3-etilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (18.5 mg, 42.7 % prinos); LCMS: m/z = 557.2 (M+H); rt 2.635 min. Postupak: kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 x 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; vreme gradijenta 3 min; temperatura: 50 °C, 0 % rastvarača B do 100 % rastvarača B; praćenje na 220 nm (rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.25 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.15 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.52 (d, J=8.6 Hz, 2H), 7.56 (d, J=8.6 Hz, 2H), 7.40 (d, J=8.6 Hz, 4H), 5.17 (s, 1H), 4.07 (d, J=13.7 Hz, 1H), 3.94 (br. s., 2H), 3.62 (t, J=10.1 Hz, 1H), 3.53 (s, 3H), 3.06 (t, J=10.4 Hz, 1H), 2.66 (d, J=9.8 Hz, 1H), 2.56 (br. s., 1H), 1.70 (br. s., 1H), 1.62-1.50 (m, 1H), 0.64 (t, J=7.3 Hz, 3H).
PRIMER 180
(R)-8-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0757]
[0758] U mešani rastvor (R)-1-(bis(4-hlorofenil)metil)-2-etilpiperazin, HCl (0.05 g, 0.130 mmol) u acetonitrilu (5 mL) dodati su DIPEA (0.068 mL, 0.389 mmol) i 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (0.048 g, 0.143 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 2 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen preparativnom HPLC pod sledećim uslovima: kolona: Waters XBridge C18, 150 mm x 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 10 % B, 10-45% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 15 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju (R)-8-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (23.5 mg, 33.4 % prinos); LCMS: m/z = 532.2 (M+H); rt 2.873 min. Postupak: kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 x 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; vreme gradijenta 3 min; temperatura: 50 °C, 0 % rastvarača B do 100 % rastvarača B; praćenje na 220 nm (rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.15 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.08 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.55 (d, J=8.6 Hz, 2H), 7.50 (d, J=8.3 Hz, 2H), 7.39 (d, J=7.1 Hz, 4H), 6.12 (s, 1H), 5.00 (s, 1H), 4.23 (d, J=11.2 Hz, 1H), 3.54 (s, 3H), 3.42 (d, J=12.2 Hz, 1H), 3.10 (d, J=11.5 Hz, 2H), 3.03 (d, J=10.3, Hz, 2H), 2.75 (d, J=14.9 Hz, 1H), 1.93 (s, 1H), 1.71 (br. s., 1H), 0.78 (t, J=7.2 Hz, 3H).
INTERMEDIJER 134
terc-butil(R)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-3-izopropilpiperazin -1 -karboksilat
[0759]
[0760] U mešani rastvor (R)-1-Boc-3-izopropil-piperazina (180 mg, 0.788 mmol) u DMA (1 mL) dodati su DIPEA (0.413 mL, 2.365 mmol) i 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (263 mg, 0.788 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u etil acetatu i opran sa vodom, organski sloj je osušen preko anhidrovanog Na2SO4, filtriran, i uparen pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je rastvoren u DCM i nanet na Prep TLC ploču. Ploča je razvijena korišćenjem 5% etil acetata u petrol etru i proizvod je obeležen i silika je rastvorena u 10 % metanolu/DCM, mešana tokom 10 min, filtrirana i oprana sa DCM, filtrat je uklonjen pod sniženim pritiskom da da terc-butil (R)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-3-izopropilpiperazin- 1-karboksilat (140 mg, 41.9 % prinos) kao polučvrstu supstancu; LCMS: m/z = 412.2 (M+H); rt 2.888 min. Postupak: kolona-KINETEX-XB-C18 (75 x 3 mm- 2.6 µm); mobilna faza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitril (98:2); mobilna faza B: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitril (2:98); gradijent: 20-100 % B tokom 4 minuta, protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje od 0.6 minuta pri 100 % B protok 1.5 mL/min; zatim gradijent: 100-20 % B tokom 0.1 minuta, protok 1.5 mL/min.
INTERMEDIJER 135
(R)-8-(2-izopropilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA
[0761]
[0762] U mešani rastvor terc-butil (R)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-3-izopropilpiperazin-1-karboksilata (140 mg, 0.340 mmol) u DCM (3 mL) dodat je TFA (3 mL, 38.9 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da da TFA so (R)-8-(2-izopropilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (70 mg, 33.9 % prinos) kao gumu; LCMS: m/z = 312.2 (M+H); rt 0.81 min. Postupak: kolona- AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 x 50 mm) 1.7 µm; mobilna faza A: pufer: acetonitril (95:5); mobilna faza B: pufer: acetonitril (5:95), pufer: 10 mM amonijum acetat; gradijent: 20-100 % B tokom 2.0 minuta, zatim zadržavanje od 0.3 minuta pri 100 % B, protok 0.7 mL/min.
PRIMER 181
(R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-izopropilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0763]
[0764] U mešani rastvor (R)-8-(2-izopropilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA (60 mg, 0.141 mmol) u acetonitrilu (3 mL) dodati su DIPEA (0.074 mL, 0.423 mmol) i 4,4'-(hlorometilen) bis(fluorobenzen) (0.053 mL, 0.282 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do 85 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen preparativnom HPLC pod sledećim uslovima: kolona: Waters XBridge C18, 150 mm x 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 15% B, 15-70 % B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 15 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuto MS signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-izopropilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (9.2 mg, 12.7 % prinos); LCMS: m/z = m/z = 514.3 (M+H); rt 2.656 min. Postupak: kolona- X Bridge BEH XP C18 (50 x 2.1 mm 2.5 µm; protok 1.1 mL/min; vreme gradijenta 3 min; temperatura: 50 °C, 0 % rastvarača B do 100 % rastvarača B; praćenje na 220 nm (rastvarač A: 95 % voda: 5 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat; rastvarač B: 5 % voda: 95 % acetonitril; 10 mM amonijum acetat.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.13 (d, J=9.0 Hz, 1H), 8.04 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.51 (d, J=5.4Hz, 4H), 7.25-7.04 (m, 4H), 6.04 (s, 1H), 4.36 (br. s., 2H), 3.51 (br. s., 5H), 2.92-2.73 (m, 3H), 2.18 (d, J=8.8 Hz, 1H), 2.06 (br. s., 1H), 0.77 (d, J=6.6 Hz, 4H), 0.81 (d, J=6.6 Hz, 2H).
INTERMEDIJER 136
Metil 2-etil-4-fluorobenzoat
[0765]
[0766] Metil 2-etil-4-fluorobenzoat je pripremljen u skladu sa opštim postupkom stavljenim na uvid u WO 2017/048950.
[0767] Cink bromid (8 g, 35.5 mmol) je rastvoren u THF (88 mL) u boci sa okruglim dnom od 250 mL pod azotom. Etilmagnezijum bromid (3 M u etru, 11.78 mL, 35.3 mmol) dodat je u kapima tokom 10 minuta. Gusta suspenzija se formirala kada je dodat Grignard-ov reagens, ali se reakciona smeša razblažila nakon što je približno 1/2 reagensa dodato. Reakciona smeša je ohlađena u kupatilu sa suvim ledom da se dobije veoma gusta kaša. Pd(dppf) ([1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen] dihloropaladijum(II)) (1.293 g, 1.767 mmol) i metil 2-bromo-4-fluorobenzoat (4.12 g, 17.67 mmol) dodati su na vrh kaše. Kupatilo za hlađenje je uklonjeno. Kako se temperatura povećavala, reakcija je mešana ručno da bi se homogenizovala sve dok mešalica nije počela da meša. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. TLC analiza u 2:1 heksani:etil acetatu pokazala je početni materijal sa oko 50% konverzije u proizvod sa višim Rf. Reakciona smeša je zagrevana na refluksu 3 sata. TLC je pokazao da je početni materijal utrošen. Reakciona smeša je ohlađena na ledenom kupatilu i dodato je 100 mL zasićenog amonijum hlorida. Smeša je podeljena između etil acetata i vode. Organski deo je koncentrovan i hromatografisan sa etil acetatom i heksanom na koloni sa 80 g silika gela da bi se dobio metil 2-etil-4-fluorobenzoat (2.7 g, 14.82 mmol, 84 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7.93 (dd, J=8.8, 6.1 Hz, 1H), 7.00 (dd, J=9.9, 2.6 Hz, 1H), 6.94 (td, J=8.3, 2.7 Hz, 1H), 3.91 (s, 3H), 3.03 (q, J=7.3 Hz, 2H), 1.26 (t, J=7.5 Hz, 3H).
INTERMEDIJER 137
(2-Etil-4-fluorofenil)metanol
[0768]
[0769] (2-Etil-4-fluorofenil)metanol je pripremljen korišćenjem opšte procedure opisane u Vadola, P. A. i sarad., J. Org. Chem. 2012, 77, 6689-6702.
[0770] U boci sa okruglim dnom od 500 mL osušenoj u pećnici, litijum aluminjum hidrid (LAH) u THF (11.11 mL, 22.23 mmol) je razblažen sa suvim THF (30 mL) pod azotom i ohlađen u ledenom kupatilu. Korišćenjem levka za ukapavanje osušenog u pećnici, metil 2-etil-4-fluorobenzoat (2.7 g, 14.82 mmol) u THF (60 mL) je dodat u kapima LAH rastvoru. Reakciona smeša je zagrejana do sobne temperature. Reakcija je praćena sa TLC u 30 % etil acetatu u heksanima. Nakon završetka reakcije početnog materijala, reakciona smeša je ohlađena do 0 °C. Reakcija je kvenčovana sa vodom (3 mL), mešana 5 minuta, sa KOH 20 % (9 mL), mešana 5 minuta, i konačno vodom (15 mL). Nakon mešanja tokom 5 min., suspenzija je filtrirana, filtrat osušen preko MgSO4i koncentrovan u vakuumu. Materijal je ponovo rastvoren u etil acetatu, osušen preko MgSO4, i koncentrovan u vakuumu da da (2-etil-4-fluorofenil) metanol (2.3 g, 100 % prinos).
INTERMEDIJER 138
2-Etil-4-fluorobenzaldehid
[0771]
[0772] 2-Etil-4-fluorobenzaldehid je pripremljen u skladu sa opštim postupkom stavljenimim na uvid u Wipf, P. i sarad., Org. Lett., 2003, 5 (7), str 1155-1158. U suvoj boci sa okruglim dnom od 500 mL, (2-etil-4-fluorofenil)metanol (2.3 g, 14.8 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (74.0 mL), i piridinijum hlorohromat (6.38 g, 29.6 mmol) je dodat. Nakon 1 sata, TLC u 1:2 etil acetatu:heksanu pokazao je da je reakcija završena. Reakciona smeša je filtrirana kroz sloj silika gela. Silika gel je eluiran sa dihlorometanom dok nije uočena UV aktivnost u efluentu. Organski delovi su kombinovani i rastvarač je uklonjen da da 2-etil-4-fluorobenzaldehid (2 g, 13.14 mmol, 89 % prinos) kao bledožutu ulje.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 10.24 (s, 1H), 7.87 (dd, J=8.4, 6.0 Hz, 1H), 7.10-6.98 (m, 2H), 3.10 (q, J=7.5 Hz, 2H), 1.31 (t, J=7.6 Hz, 3H).
INTERMEDIJER 139
(2-Etil-4-fluorofenil)(4-fluorofenil)metanol (racemski)
[0773]
[0774] U suvu bocu sa okruglim dnom od 250 mL, 2-etil-4-fluorobenzaldehid (1 g, 6.57 mmol) je rastvoren u THF (32.9 mL) i ohlađen u ledenom kupatilu pod azotom. U ovaj ohlađeni rastvor, dodat je (4-fluorofenil)magnezijum bromid (3.94 mL, 7.89 mmol, 2M u etru). Reakciona smeša je mešana na 0 °C tokom 45 minuta i zatim na sobnoj temperaturi tokom 10 minuta. Reakcija je kvenčovana dodavanjem 3 mL zasićenog vodenog amonijum hlorida. Smeša je podeljena između etil acetata i vode. Organski deo je ekstrahovan jednom sa koncentrovanim rastvorom soli, koncentrovan i ostatak hromatografisan na kolini sa 24 g silika gela sa 0-60 % etil acetata u heksanima. Uzorak je osušen pod visokim pritiskom preko noći da da (2-etil-4-fluorofenil)(4-fluorofenil)metanol (2g, 55%) kao kristalnu čvrstu supstancu. NMR analiza je pokazala da je ovaj materijal čistoće > 95%.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7.44 (dd, J=9.3, 5.9 Hz, 1H), 7.33-7.29 (m, 2H), 7.04 (t, J=8.6 Hz, 2H), 6.98-6.91 (m, 2H), 6.05 (d, J=3.2 Hz, 1H), 2.79-2.46 (m, 2H), 2.09 (d, J=3.9 Hz, 1H), 1.16 (t, J=7.5 Hz, 3H). Analitički LC\MS uslovi: zapremina injektiranja= 3 µL, početak %B 2, konačna %B 98, vreme gradijenta 1.5 minuta, protok 0.8 mL/min, talasna dužina 220 nm, par rastvarača acetonitril/ voda/ TFA, rastvarač A 100 % voda/ 0.05% TFA, rastvarač B 100 % acetonitril/ 0.05% TFA, kolona Acquity BEH C1821. X 50 mm 1.7 µm, temp pećnice = 40 °C. LC\MS rezultati; retenciono vreme 1.6 minuta, uočena masa 231.0 (M<+>-OH).
INTERMEDIJER 140
1 -(Bromo(fenil)metil)-4-fluorobenzen (racemski)
[0775]
[0776] (4-fluorofenil)(fenil)metanol (52 mg, 0.257 mmol) i trifenilfosfin (70.8 mg, 0.270 mmol) su kombinovani in tetrahidrofuranu (1029 µL). Reakciona smeša je ohlađena do 0 °C i mešana tokom 2 minuta dok nije postala homogena. Perbromometan (90 mg, 0.270 mmol) je dodat i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. LC/MS analiza je naznačila da je reakcija završena. Čvrste supstance su uklonjene filtriranjem i bistar rastvor je koncentrovan pod vakuumom da da 1-(bromo(fenil)metil)-4-fluorobenzen kao racemsku smešu.
INTERMEDIJER 141
1 -(Bromo(4-hlorofenil)metil)-4-fluorobenzen (racemski)
[0777]
[0778] (4-hlorofenil)(4-fluorofenil)metanol (52 mg, 0.220 mmol) i trifenilfosfin (60.5 mg, 0.231 mmol) su kombinovani u tetrahidrofuranu (879 µl), ohlađeni na 0 °C i mešani tokom 2 minuta dok nisu postali homogeni. Perbromometan (77 mg, 0.231 mmol) je dodat i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. LC/MS analiza je naznačila da je reakcija završena. Čvrste supstance su uklonjene filtriranjem i bistar rastvor je koncentrovan pod vakuumom da da 1-(bromo(4-hlorofenil) metil)-4-fluorobenzen kao racemsku smešu.
INTERMEDIJER 142
Stereohemija: A
(Cijanometil)trimetilfosfonijum jodid
[0780] (Cijanometil)trimetilfosfonijum jodid je pripremljen u skladu sa opštim postupkom opisanim u Zaragoza, F., i sarad., J. Org. Chem. 2001, 66, 2518-2521. U bocu sa okruglim dnom od 1 L, trimetilfosfin u toluenu (100 mL, 100 mmol) je razblažen sa THF (50.0 mL) i toluenom (50.0 mL), i ohlađen u ledenom kupatilu. Reakciona smeša je mešana energično dok je jodoacetonitril (7 mL, 16.7 g, 68.3 mmol) dodavan u kapima da se proizvede produce žutomrk talog. Kupatilo za hlađenje je uklonjen i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Boca je smeštena u sonikator da bi se razbili sve zgrudane čvrste materije. Reakciona smeša je mešana dodatna 4 sata. Čvrste materije su sakupljene filtracijom i osušene pod vakuumom da se dobije (cijanometil)trimetilfosfonijum jodid (16.6 g, 68.3 mmol, 68.3 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 4.03 (d, J=16.4 Hz, 2H), 2.05 (d, J=15.4 Hz, 9H).
INTERMEDIJER 143
Stereohemija: H
8-((2S,5R)-2,5-Dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA
[0781]
[0782] U rastvor 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (65 g, 195 mmol) i terc-butil (2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (43.9 g, 205 mmol) u acetonitrilu (1.3 L) dodat je DIPEA (0.102 L, 585 mmol). Rastvor je mešan na 80 °C tokom 6 sata. Rastvarač je uklonjen i sirovi ostatak hromatografisan na silika gelu (proizvod Rf 0.4 u 100 % etil acetatu). Proizvod, terc-butil (2R,5S)-4-(6-cijano1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (75 g, 189 mmol, 97 % prinos) je dobijen. LCMS: m/z = 398.2 (M+H); rt 2.7 min. Postupak: kolona-Kinetex XB-C18 (75X3 mm-2.6 µm), protok 1 mL/min; vreme gradijenta 4 min; 20 % rastvarača B do 100 % rastvarača B; praćenje na 254 nm (rastvarač A: 98 % voda: 2 % acetonitril; 10 mM amonijum format; rastvarač B: 2 % voda: 98 % acetonitril; 10 mM amonijum format.
[0783] U rastvor terc-butil (2R,5S)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (30 g, 75 mmol) u etil acetatu (1000 mL) na 0 °C dodata je HCl (4 M u dioksanu) (189 mL, 755 mmol) i temperatura je ostavljena da dostigne sobnu temperaturu uz mešanje tokom 6 h. LC/MS analiza je pokazala -90% mase proizvoda na 0.60 RT zajedno sa -4% mase amidnog sporednog proizvoda (u skladu sa hidrolizom nitrila) na 0.44 RT. Reakciona smeša je razblažena sa metil t-butil etrom (MTBE, 2000 mL), mešana tokom 15 min, i HCl so prozvoda je filtrirana, isprana sa MTBE (100 ml). HCl so je rastvorena u vodi (300 ml) i pH je podešena na ~8 korišćenjem 10% vodenog natrijum bikarbonata. Organski deo je ekstrahovan sa DCM (5 x 250 ml). Kombinovani organski slojevi su oprani sa vodom (2 x 300 mL), osušeni preko natrijum sulfata i koncentrovani da daju 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (20 g, 65.2 mmol, 86 % prinos). LCMS: m/z -= 298.2 (M+H); rt 0.5 min. Postupak: kolona- Kinetex XB-C18 (75X3mm-2.6µm), protok 1 mL/min; vreme gradijenta 4 min; 20 % rastvarača B do 100 % rastvarača B; praćenje na 254 nm (rastvarač A: 98 % voda: 2 % acetonitril; 10 mM amonijum format; rastvarač B: 2 % voda: 98 % acetonitril; 10 mM amonijum format.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.79 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 7.70 (d, J= 12,3.2 Hz, 1H), 6.29 (s, 1H), 3.80 (dd, J= 8.8 Hz, 1H) 3.70 (m, 1H), 3.65 (s, 3H), 3.29 (m, 2H), 2.80 (m, 2H), 1.19 (d, J= 6 Hz, 3H), 1.15 (d, J= 6 Hz, 3H).<13>C NMR (75 MHz, Hloroform-d) δ 161.9, 155.0, 138.5, 137.0, 128.2, 125.0, 122.2, 117.2, 111.3, 56.5, 51.9, 50.0, 49.5, 29.0, 18.8, 15.4.
INTERMEDIJER 144
Etil 3-amino-6-bromopikolinat
[0784]
[0785] Etil 3-aminopikolinat (8.0 g, 48.1 mmol) je suspendovan u vodi (66 mL) u boci sa okruglim dnom sa tri grla od 250 mL opremljenoj sa mehaničkom mešalicom, dodatkom levka i sonde za temperaturu termoelementa. Sumporna kiselina (1.7 mL, 31.9 mmol) i sirćetna kiselina (3.31 mL, 57.8 mmol) su dodate polako dok je boca bila potopljena u vodeno kupatilo sobne temperature da se kontroliše temperatura. U reakcionu smešu, dodat je rastvor broma (2.5 mL, 48.5 mmol) u sirćetnoj kiselini (17.5 mL, 306 mmol) tokom 15 minuta na ambijentalnoj temperaturi uz energično mešanje uz održavanje unutrašnje temperature reakcione smeše ispod 23 °C. Vodeno kupatilo je uklonjeno i reakciona smeša je mešana na ambijentalnoj temperaturi tokom 2 sata. Suspenzija reakcije je filtrirana i isprana sa malom količinom vode, i zatim osušena u vakuumu na sobnoj temperaturi da da etil 3-amino-6-bromopikolinat (9.305 g) kao žutu čvrstu supstancu. LCMS: kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 100 % voda sa 0.05% trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 100 % acetonitril sa 0.05% trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 40 °C; gradijent: 2-98 % B tokom 1.5 minuta, zatim zadržavanje od 0.5 minuta pri 98% B; protok: 0.8 mL/min; detekcija: UV na 220 nm. Retenciono vreme 0.94 min.; Uočeni adukti: [M+H]; Uočene mase: 245.0.<1>H NMR (DMSO-d6) δ 7.44 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.21 (d, J=8.7 Hz, 1H), 6.88 (br. s., 2H), 4.29 (q, J=7.1 Hz.2H), 1.31 (t, J=7.1 Hz.3H).
INTERMEDIJER 145
Etil 3-acetamido-6-bromopikolinat
[0786]
[0787] Etil 3-amino-6-bromopikolinat (1.31 g, 5.35 mmol) je rastvoren u THF (6 mL) nakon čega je dodat anhidrid sirćetne kiseline (1.6 mL, 16.96 mmol). Reakciona smeša je bila suspenzija/delimični rastvor. Reakciona smeša je smeštena pod atmosferu azota i zagrejana uz refluks. Reakciona smeša je postala homogena u okviru 15 minuta. Reakciona smeša je refluksovana tokom 4 h. Isparljive supstance reakcije su uklonjene u vakuumu korišćenjem rotacionog uparivača. Mala količina etil acetata je dodata u ostatak reakcije i skoro bezbojna čvrsta supstanca je odfiltrirana i osušena u vakuumu da da etil 3-acetamido-6-bromopikolinat (787 mg). LCMS: kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 100 % voda sa 0.05% trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 100 % acetonitril sa 0.05% trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 40 °C; gradijent: 2-98 % B tokom 1.5 minuta, zatim zadržavanje od 0.5 min pri 98% B; protok: 0.8 mL/min; detekcija: UV na 220 nm. Retenciono vreme 0.98 min.; uočeni adukti: [M+H]; uočene mase: 287.0.<1>H NMR (DMSO-d6) δ 10.40 (s, 1H), 8.32 (d, J=8.7 Hz, 1H), 7.83 (d, J=8.8 Hz, 1H), 4.33 (q, J=7.1 Hz, 2H), 2.12 (s, 3H), 1.32 (t, J=7.2 Hz, 3H). Uklanjanje rastvarača iz filtrata obezbedilo je dodatnih 695 mg proizvoda (87% čistoće).
INTERMEDIJER 146
Etil 6-bromo-3-(N-metilacetamido)pikolinat
[0788]
[0789] Rastvor je pripremljen rastvaranjem etil 3-acetamido-6-bromopikolinata (5 g, 17.41 mmol) u DMF (100 mL). Zatim, cezijum karbonat (8.15 g, 25.01 mmol) i metil jodid (1.75 mL, 28.0 mmol) su dodati. Reakciona smeša je smeštena pod atmosferu azota i mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata i 40 minuta. Rastvarač je uklonjen u vakuumu korišćenjem kombinacije rotacioni uparivač/vakuum pumpa. Etil acetat i DCM su dodati u ostatak reakcije zajedno sa hloroformom i toluenom. Smeša je filtrirana kroz sloj celita da se uklone soli. Rastvarači su ponovo uklonjeni u vakuumu korišćenjem rotacionog uparivača. Ostatak reakcije je ponovo rastvoren u hloroformu i toluenu i filtriran kroz sloj celita kako bi se uklonili tragovi još uvek prisutnih nerastvorljivih materija. Uklanjanje rastvarače u vakuumu dalo je5.35 g proizvoda kao narandžastog ulja. LCMS; kolona: Waters Acquity BEH 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; temperatura: 40 °C; gradijent 0 %B do 100 %B tokom 2 minuta, zatim zadržavanje od 1 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Zapremina injektiranja: 1 µL. Retenciono vreme 1.07 min.; uočeni adukti: [M+H]; uočene mase: 301.1. Protonska NMR pokazala je karakteristike ograničene rotacije (rotameri);<1>H NMR (500 MHz, HLOROFORM-d) δ 7.72 (d, J=8.4 Hz, 0.8H), 7.66 (d, J=8.4 Hz, 0.2H), 7.51 (d, J=8.4 Hz, 0.8H), 7.45 (d, J=8.4 Hz, 0.2H), 4.50-4.36 (m, 2.0H), 3.37 (s, 0.6H), 3.19 (s, 2.4H), 2.24 (s, 0.6H), 1.82 (s, 2.5H), 1.43-1.36 (m, 3.1H).
INTERMEDIJER 147
6-Bromo-4-hidroksi-1-metil-1,5-naftiridin-2(1H)-on
[0790]
[0791] Bočica sa okruglim dnom od 25 mL je napunjena sa KHMDS (4.3 mL, 2.150 mmol) (0.5 M u toluenu), stavljena pod azotom i ohlađena na -78 °C. U rastvor KHMDS polako su dodati rastvor etil 6-bromo-3-(N-metilacetamido)pikolinata (215mg, 0.714 mmol) u THF (2.5 mL) tokom približno 3 minuta. Reakciona smeša je zagrejana do sobne temperature i smeša 1:1 etil acetata i vode je dodata da se napuni levak za odvajanje od 60 mL. Faze su ostavljene da se razdvoje. Na rotacionom uparivaču korišćenjem vakuum pumpe. Sirovi ostatak je mešan u erlenmajeru sa 7 mL vode. Žuta čvrsta supstanca je sakupljena i osušena pod vakuumom da da naslovno jedinjenje (130.2 mg, 72%). LCMS; kolona: Waters Acquity UPLC BEH C182.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 100 voda sa 0.05% TFA; mobilna faza B: 100 acetonitril 0.05% TFA; temperatura: 40 °C; gradijent 2 %B do 98 %B tokom 1.5 minuta, zatim zadržavanje od 1 min pri 100 %B; protok: 0.8 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Zapremina injektiranja: 3 µL. retenciono vreme 0.8 min.; uočeni adukti: [M+H]; uočene mase: 254.9, 256.9.
INTERMEDIJER 148
6-Bromo-4-hidroksi-1,5-naftiridin-2(1H)-on
[0793] U rastvor KHMDS (0.5 M u toluenu) (27.2 mL, 13.58 mmol) na -78 °C polako je dodat rastvor etil 3-acetamido-6-bromopikolinata (1.3 g, 4.53 mmol) u THF (20 mL). Reakciona smeša je mešana na -78 °C tokom 1 sata i zatim tje uklonjeno kupatilo za hlađenje. Nakon zagrevanja do sobne temperature, žuti rastvor je postao svetlo narandžasti. Etil acetate zatim voda su dodati i boja se vratila na žutu. Faze su odvojene i žuti vodeni sloj je tretiran sa HCl (1N) i bela čvrsta supstanca se istaložila. Žuta čvrsta supstanca je sakupljana filtracijom da da proizvod (950 mg, 76%). LCMS; Kolona: Waters Acquity BEH 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 10:90 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; mobilna faza B: 90:10 acetonitril:voda sa 0.1% TFA; temperatura: 40 °C; gradijent 0 %B do 100 %B tokom 2 minuta, zatim zadržavanje od 1 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Zapremina injektiranja: 1 µL, retenciono vreme 0.7 min.; uočeni adukti: [M+H]; uočene mase: 240.9 242.9.
INTERMEDIJER 149
6-Bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat
[0794]
[0795] U bocu sa okruglim dnom, 6-bromo-1-metil-1,5-naftiridin-2,4(1H,3H)-dion (200 mg, 0.784 mmol) je kombinovan sa DMAP (9.58 mg, 0.078 mmol), DIPEA (0.205 mL, 1.176 mmol) i DCM (20 mL). U dobijenu suspenziju, rastvor trifluorometansulfonskog anhidrida (0.141 mL, 0.863 mmol) u dihlorometanu (2 mL) je dodat u kapima na 0 °C. Rastvor je mešan tokom 3 sata. LC/MS analiza je naznačila da je reakcija završena. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i sirova supstanca je prečišćena hromatografijom sa 1:1 heksanom:etil acetatom na koloni sa 24 g silika gela da da proizvod kao belu čvrstu supstancu (260 mg, 86 %). Analitički uslovi LC\MS: zapremina injektiranja= 1 µL, početna %B 0, konačna %B 100, vreme gradijenta 2 minute, protok 1 mL/min, talasna dužina 220 nm, rastvarački par acetonitril/ voda/ TFA, rastvarač A 10 % acetonitril/ 90 % voda/ 0.1% TFA, rastvarač B 90 % acetonitril/ 10 % voda/ 0.1% TFA, kolona Acquity BEH C1821. X 50 mm 1.7 µm, temperatura pečnice= 40 °C. LC\MS rezultati; retenciono vreme 1.5 minuta, uočena masa 386.7,388.7 (M<+>).
INTERMEDIJER 150
Stereohemija: H terc-Butil (2R,5S)-4-(6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat
[0796]
[0797] U smešu (2R,5S)-terc-butil 2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (156 mg, 0.705 mmol) i b-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (260 mg, 0.672 mmol) u acetonitrilu (6.7 mL) dodat je DIPEA (0.352 mL, 2.015 mmol). Reakcija je zagrejana na 80 °C preko noći. LC/MS analiza je naznačila da je reakcija završena. Rastvarač je uklonjen i sirov materijal prečišćen na koloni sa silka gelom korišćenjem gradijenta 1-20% metanola u dihlorometanu da se dobije naslovno jedinjenje (0.28 g, 92 % prinos). Analitički uslovi LC\MS: zapremina injektiranja= 1 µL, početna %B 0, konačna %B 100, vreme gradijenta 2 minuta, protok 1 mL/min, talasna dužina 220 nm, rastvarački par acetonitril/ voda/TFA, rastvarač A 10 % acetonitril/90 % voda/ 0.1% TFA, rastvarač B 90 % acetonitril/10 % voda/0.1% TFA, kolona Acquity BEH C18 21. X 50 mm 1.7 µm, temperatura peći- 40 °C. LC\MS rezultati; retenciono vreme 1.7 minuta, uočena masa 451.0, 453.1 (M+1).
INTERMEDIJER 151
terc-Butil (2R,5S)-4-(6-metoksi-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat
[0798]
[0799] Terc-butil (2R,5S)-4-(6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (270 mg, 0.598 mmol), paladijum(II) acetat (13.43 mg, 0.060 mmol), cezijum karbonat (195 mg, 0.598 mmol), i 2-(di-1-adamantilfosfino)-3,6-dimetoksi-2',4',6'-tri-i-propil-1,1'-bifenil (77 mg, 0.120 mmol) su dodati u mikrotalasnu pod azotom. Acetonitril (2 mL) i metanol (0.1 mL) su dodati i smeša je zagrejana na 80 °C tokom 6 h. LC/MS je ukazala na završetak reakcije. Deo sirovog materijala je prečišćen preparativnom LC/MS da se dobije analitički uzorak pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 26% B, 26-66% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 4 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje fraksija je pokrenuti MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos proizvoda je bio 9.3 mg, a njegova procenjena čistoća sa LCMS analizom bila je 95%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 97.1 %; uočena masa: 403.16; retenciono vreme: 1.85 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 95.1 %; uočena masa: 403.17; retenciono vreme: 1.66 min.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.96 (d, J=9.2 Hz, 1H), 7.12 (d, J=9.2 Hz, 1H), 5.93 (s, 1H), 4.99 (br s, 1H), 4.44-4.28 (m, 2H), 3.91 (s, 3H), 3.56 (s, 3H), 3.31-3.17 (m, 1H), 3.14 (br s, 1H), 3.09-2.93 (m, 1H), 1.43 (br s, 9H), 1.20 (br d, J=6.7 Hz, 3H), 0.96 (br d, J=6.4 Hz, 3H).
INTERMEDIJER 152
4-((2S,5R)-2,5-Dimetilpiperazin-1-il)-6-metoksi-1-metil-1,5-naftiridin-2(1H)-on, TFA
[0800]
[0801] U dihlorometanski (4 mL) rastvor terc-butil (2R,SS)-4-(6-metoksi-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (220 mg, 0.547 mmol) dodat je TFA (0.758 mL, 9.84 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 sata. LC/MS analiza je naznačila da je reakcija završena. Rastvarač je uklonjen i sirov materijal je korišćena bez daljeg prečišćavanja. Analitički uslovi LC\MS: zapremina injektiranja= 3 µL, početna %B 2, konačna %B 98, vreme gradijenta 1.5 minuta, protok 0.8 mL/min, talasna dužina 220 nm, rastvarački par acetonitril/voda/TFA, rastvarač A 100 % Voda/ 0.05% TFA, rastvarač B 100 % acetonitril/ 0.05% TFA, kolona Acquity BEH C1821. X 50 mm 1.7 µm, temperatura peći= 40 °C. LC\MS rezultati; retenciono vreme 1.1 minuta, uočena masa 303.3 (M+1).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.95 (d, J=9.3 Hz, 1H), 7.09 (d, J=9.0 Hz, 1H), 6.04 (s, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.74-3.64 (m, 1H), 3.57-3.43 (m, 3H), 3.31 (s, 3H), 3.16 (dd, J=12.3, 3.3 Hz, 1H), 3.05 (td, J=6.8, 2.9 Hz, 1H), 2.60-2.53 (m, 1H), 1.02 (dd, J=7.8, 6.4 Hz, 6H).
PRIMER 182
8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenilksfenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0802]
[0803] U zapečaćenu reakcionu posudu od 2 drama, 8-((2S,SR)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA (41.1 mg, 100 µmol), (4-fluorofenil)(fenil)metanol (28.3 mg, 140 µmol) i (cijanometil) trimetilfosfonijum jodid (48.6 mg, 200 µmol) su kombinovani u acetonitrilu (200 µl). Hunig-ova baza (75 µL, 429 µmol) je dodata i reakciona smeša je zagrejana na 110 °C tokom 2 sata. Reakciona smeša je injektirana direktno na kolonu sa 12 g silika gela i eluirana sa 20-100 % etil acetata u heksanima da da primer 182 kao diastereomernu smešu. Analitički uslovi LC\MS: zapremina injektiranja= 3 µL, početna %B 0, konačna %B 100, vreme gradijenta 2 minuta, protok 1 mL/min, talasna dužina 220 nm, rastvarački par acetonitril/voda/TFA, rastvarač A 10 % acetonitril, 90 % voda/0.05% TFA, rastvarač B 10 % voda, 90 % acetonitril/0.05% TFA, kolona Acquity BEH C1821. X 50 mm 1.7 µm, temperatura peći= 40 °C. LC\MS rezultati; retenciono vreme 1.4 minuta, uočena masa 482.5 (M<+>).
[0804] Sirov materijal je dalje prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 47% B, 47-87% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 4 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuto MS signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju 14.4 mg naslovnog jedinjenja (30 % prinos). Izračunata molarna masa 481.575. LC\MS uslovi QC-ACN-TFA-XB: Uočeni MS jon 482.2, retenciono vreme 1.6 minuta.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.18-8.10 (m, 1H), 8.06 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.68-7.48 (m, 4H), 7.39-7.26 (m, 2H), 7.25-7.08 (m, 3H), 6.00 (s, 1H), 4.67 (br s, 1H), 4.59 (br d, J=6.7 Hz, 1H), 3.76-3.62 (m, 1H), 3.55 (br d, J=12.8 Hz, 1H), 3.15-3.04 (m, 1H), 2.90-2.81 (m, 1H), 2.36 (br dd, J=17.4, 11.9 Hz, 1H), 1.35-1.28 (m, 3H), 1.24 (s, 1H), 1.07 (br t, J=5.6 Hz, 3H).
PRIMERI 183 I 184
8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0805]
[0806] Primer 182 je odvojen u dva pojedinačna diastereomera korišćenjem hiralne hromatografije sa čvrstom fazom: kolona: Chiralpak OJ-H, 21 x 250 mm; 5 mikrona, mobilna faza: 90 % CO2/10 % metanol, uslovi protoka: 45 mL/min, talasna dužina detektora: 225 nm, detalji injektiranja: 500 µL, 15 mg rasdtvoreno u 1 mL metanolu/acetonitrilu.
[0807] Prvi eluirajući diastereomer, primer 183 (66.4 mg), je izolovan u prinosu od 20.2%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 482.1; retenciono vreme: 2.49 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 482.11; retenciono vreme: 1.75 min.
[0808] Drugi eluirajući diastereomer, primer 184 (71.7 mg), je izolovan u prinosu od 21.9%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B over 3 min, zatim azadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 482.11; retenciono vreme: 2.51 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 482.1; retenciono vreme: 1.76 min.
PRIMERI 185 I 186
8-[(2S,5R)-4-[1-(4-fluoro-2-metoksifenil)-2,2-dimetilpropil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0809]
[0810] U bočicu od 2 drama, 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA (60 mg, 0.117 mmol), 1-(1-hloro-2,2-dimetilpropil)-4-fluoro2-metoksibenzen (32.3 mg, 0.140 mmol) i natrijum jodid (175 mg, 1.167 mmol) su zapečaćeni pod azotom. Hunig-ova baza (0.102 mL, 0.583 mmol) i acetonitril (2 mL) su dodati. Reakciona smeša je zagrejana na 110 °C tokom 5 sati u mikrotalasnom reaktoru. LC/MS analiza je naznačila da je reakcija završena, sa uočenim M+1 i M+42 (M+acetonitril).
[0811] Diastereomeri su odvojeni korišćenjem nehiralne preparativne HPLC. Pri eluirajući diastereomer, primer 185 (4.2 mg), je izolovan u prinosu od 7.3%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 98.3 %; uočena masa: 492.2; retenciono vreme: 1.55 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 97.7 %; uočena masa: 492.21; retenciono vreme: 2.75 min.
[0812] Drugi eluirajući diastereomer. Primer 186 (3.7 mg), je izolovan u prinosu od 6.4%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 nun, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 98.4 %; uočena masa: 492.18; retenciono vreme: 1.58 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 99.2 %; uočena masa: 492.21; retenciono vreme: 2.79 min.
INTERMEDIJER 153
(4-Hlorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metanol
[0813]
[0814] U suvu bocu sa okruglim dnom od 250 mL, 3-fluoropikolinaldehid (677 mg, 5.41 mmol) je rastvoren u THF (20 mL) i ohlađen u ledenom kupatilu pod azotom. U ovaj hladni rastvor, dodat je (4-hlorofenil)magnezijum bromid u dietil etru (6.49 mL, 6.49 mmol). Reakciona smeša je mešana na 0 °C tokom 45 minuta i sobnoj temperaturi tokom 10 minuta. Reakcija je kvenčovana dodavanjem 3 mL zasićenog vodenog amonijum hlorida. Smeša je podeljena između etil acetata i koncentrovanog rastvora soli. Organski deo je koncentrovan i ostatak hromatografisan na koloni sa 24 g silika gela sa 0-60 % etil acetata u heksanima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane, koncentrovane i osušene pod visokim pritiskom preko noći. NMR analiza je pokazala da je ovaj materijal čist > 95%.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8.43 (br d, J=2.9 Hz, 1H), 7.48-7.17 (m, 6H), 5.98 (br s, 1H), 5.29 (br d, J=4.4 Hz, 1H). Analitički uslovi LC\MS: zapremina injektiranja= 3 µL, početna %B 2, konačna %B 98, vreme gradijenta 1.5 minuta, protok 0.8 mL/min, talasna dužina 220 nm, rastvarački par acetonitril/ voda/TFA, rastvarač A 100 % voda/ 0.05% TFA, rastvarač B 100 % acetonitril/ 0.05% TFA, kolona Acquity BEH C1821. X 50 mm 1.7 µm, temperatura peći= 40 °C. LC\MS rezultati; retenciono vreme 1.3 minuta, uočena masa 237.9 (M+1).
INTERMEDIJER 154
2-(Hloro(4-hlorofenil)metil)-3-fluoropiridin
[0815]
[0816] U bocu sa okruglim dnom od 250 mL, (4-hlorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metanol (750 mg, 3.16 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (15.779 mL) i dodat je tionil hloridu (4.61 mL, 63.1 mmol). Reakciona posuda je zapečaćena i zagrejana na 40 °C preko noći. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i sipana u 100 mL zasićenog kalijum karbonata u kupatilu sa ledenom vodom. Smeša je podeljena između dihlorometan i voda. Organski deos su kombinovani, osušen preko magnezijum sulfate i filtriran. Rastvarač je uklonjen to afford 2-(hloro(4-hlorofenil)metil)-3-fluoropiridin (793 mg, 3.10 mmol, 98 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ 8.50 (d, J=4.6 Hz, 1H), 7.56 (d, J=8.3 Hz, 2H), 7.43 (ddd, J=9.7, 8.4, 1.2 Hz, 1H), 7.35 (d, J=8.6 Hz, 2H), 7.31 (dd, J=8.3, 4.2 Hz, 1H), 6.40 (s, 1H).
INTERMEDIJER 155
(4-Fluorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metanol
[0817]
[0818] U suvu bocu sa okruglim dnom od 250 mL, 3-fluoropikolinaldehid (545 mg, 4.36 mmol) je rastvoren u THF (20 mL) i ohlađen u ledenom kupatilu pod azotom. U ovaj hladni rastvor doodat je (4-fluorofenil)magnezijum bromid u dietiletru (2.61 mL, 5.23 mmol). Reakciona smeša je mešana na 0 °C tokom 45 minuta i sobnoj temperaturi tokom 10 minuta. Reakcija je kvenčovana dodavanjem 3 mL zasićenog vodenog amonijum hlorida. Smeša je podeljena između etil acetata i koncentrovanog rastvora soli. Organski deo je koncentrovana i ostatak hromatografisan na koloni sa 24g silika gela sa 0-60 % etil acetata u heksanima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane, koncentrovane i osušene pod visokim pritiskom preko noći. NMR analiza je pokazala da je ovaj materijal čistoće > 95%.<1>H NMR (400 MHz, hloroformd) δ 8.44 (br d, J=3.2 Hz, 1H), 7.52-7.23 (m, 4H), 7.02 (br t, J=8.3 Hz, 2H), 5.99 (br d, J=6.1 Hz, 1H), 5.27 (br d, J=6.4 Hz, 1H). Analitički uslovi LC\MS: zapremina injektiranja= 3 µL, početna %B 2, konačna %B 98, vreme gradijenta 1.5 minuta, protok 0.8 mL/min, talasna dužina 220 nm, rastvarački par acetonitril/ voda/ TFA, rastvarač A 100 % voda/ 0.05% TFA, rastvarač B 100 % acetonitril/ 0.05% TFA, kolona Acquity BEH C1821. X 50 mm 1.7 µm, temperatura peći= 40 °C. LC\MS rezultati; retenciono vreme 1.2 minuta, uočena masa 221.9 (M<+1>).
INTERMEDIJER 156
2-(Hloro(4-fluorofenil)metil)-3-fluoropiridin
[0819]
[0820] U bocu sa okruglim dnom od 250 mL, (4-fluorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metanol (613 mg, 2.77 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (12 mL) i dodat je tionil hloridu (4.04 mL, 55.4 mmol). Reakciona posuda je zapečaćena i zagrejana na 40 °C preko noći. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i sipana u 100 mL zasićenog kalijum karbonat u kupatilu sa ledenom vodom. Smeša je podeljena između dihlorometana i vode. Organski delovi su kombinovani, osušeni preko magnezijum sulfata i filtrirana. Rastvarač je uklonjen da da 2-(hloro(4-fluorofenil)metil)-3-fluoropiridin (798 mg, 3.33 mmol) kao bistro ulje.<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ 8.51 (d, J=4.4 Hz, 1H), 7.60 (dd, J=8.7, 5.3 Hz, 2H), 7.43 (ddd, J=9.7, 8.4, 1.2 Hz, 1H), 7.33-7.29 (m, 1H), 7.07 (t, J=8.7 Hz, 2H), 6.42 (s, 1H).
INTERMEDIJERS 157 I 158
terc-butil (2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat
[0821]
[0822] U bocu sa okruglim dnom, 2-(hloro(4-fluorofenil)metil)-3-fluoropiridin (790 mg, 3.30 mmol) je rastvoren u acetonitrilu (16.5 mL). U ovaj rastvor, dodati su redom kalijum jodid (54.7 mg, 0.330 mmol), trietilamin (0.919 mL, 6.59 mmol) i terc-butil (2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (706 mg, 3.30 mmol). Nakon zagrevanja 75 °C tokom 5 sati, TLC u 2:3 etil acetatu/heksanima pokazao je trag početnog materijala i dva nova jedinjenja niže rf. LS\MS je bila konzistentna sa 2 glavna proizvoda, od kojih je svaki imao tačnu MW koja odgovara dva odvojiva diastereomera. Sirov materijal je hromatografisan na koloni sa 24 g silika gela sa 10-50 % etil acetata u heksanima da se razdvoje dve glavne frakcije obeležene kao izolat-1 i izolat-02. LCMS je pokazala da je svaka frakcija bila konzistentna sa diastereomerom kontaminiranim malom količinom drugog diastereomera.
[0823] Intermedijer 157: izolat-1, Prva eluirajuća frakcija. Analitički uslovi LC\MS: zapremina injektiranja= 1 µL, početna %B 0, konačna %B 100, vreme gradijenta 2 minuta, protok 1 mL/min, talasna dužina 220 nm, rastvarački par acetonitril/ voda/ TFA, rastvarač A 10 % acetonitril/ 90 % voda/ 0.05% TFA, rastvarač B 10 voda 90 % acetonitril/ 0.05% TFA, kolona Acquity BEH C1821. X 50 mm 1.7 µm, temperatura peći= 40 °C. LC\MS rezultati; retenciono vreme 1.27 minuta, uočena masa 418.5 (MH<+>).
[0824] Intermedijer 158: izolat-2, Druga eluirajuća frakcija. Analitički uslovi LC\MS: zapremina injektiranja= 1 µL, početna %B 0, konačna %B 100, vreme gradijenta 2 minuta, protok 1 mL/min, talasna dužina 220 nm, rastvarački par acetonitril/voda/TFA, rastvarač A 10 % acetonitril/90 % voda/0.05% TFA, rastvarač B 10 voda 90 % acetonitril/0.05% TFA, kolona Acquity BEH C1821. X 50 mm 1.7 µm, temperatura peći= 40 °C. LC\MS rezultati; retenciono vreme 1.31 minuta, uočena masa 418.1 (MH<+>).
INTERMEDIJERS 159 I 160
(2R,5S)-1-((4-Fluorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin, HCl
[0825]
[0826] Rastvor svakog odvojenog diastereomera terc-butil (2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (422 mg, 1.011 mmol) u dihlorometanu (20 mL) je ohlađen u kupatilu sa ledom i dodata je hlorovodonična kiselina (4 M u dioksanu) (4 mL, 16.00 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. TLC je ocenio da je reakcija završena. Rastvarač je uklonjen i ostatak osušen pod visokim pritiskom.
[0827] Intermedijer 159: diastereomer 1 iz prvog eluirajućeg uzorka terc-butil (2S,SR)-4-((4-fluorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (350 mg, 0.989 mmol, 98 % prinos). Analitički uslovi LC\MS: zapremina injektiranja= 1 µL, početna %B 0, konačna %B 100, vreme gradijenta 2 minute, protok 1 mL/min, talasna dužina 220 nm, rastvarački par acetonitril/voda/TFA, rastvarač A 10 % acetonitril/ 90 % voda/ 0.1% TFA, rastvarač B 10 voda 90 % acetonitril/0.1% TFA, kolona Acquity BEH C18 21. X 50 mm 1.7 µm, temperatura peći= 40 °C. LC\MS rezultati; retenciono vreme 1.3 minuta, uočena masa 318.0 (MH<+>).
[0828] Intermedijer 160: diastereomer 2 from the second eluting sample of terc-butil (2S,SR)-4-((4-fluorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (350 mg, 0.989 mmol, 98 % prinos). Analitički uslovi LC\MS: zapremina injektiranja= 1 µL, početna %B 0, konačna %B 100, vreme gradijenta 2 Minuta, protok 1 mL/min, talasna dužina 220 nm, rastvarački par acetonitril/voda/TFA, rastvarač A 10 % acetonitril/90 % voda/ 0.1% TFA, rastvarač B 10 voda 90 % acetonitril/0.1% TFA, kolona Acquity BEH C18 21. X 50 mm 1.7 µm, temperatura peći= 40 °C. LC\MS rezultati; retenciono vreme 1.4 minuta, uočena masa 318.0 (MH<+>).
PRIMER 187
8-[(2S,5R)-4-[(4-Fluorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0829]
[0830] Intermedijer 159, diastereomer 1 (2R,5S)-1-((4-fluorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin, HCl (317 mg, 1.000 mmol) i 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (333 mg, 1 mmol) su rastvoreni u acetonitrilu (10 mL). Hunig-ova baza (700 µL, 4.00 mmol) je dodata i reakciona smeša je zagrejana na 80 °C preko noći. Sirov materijal je hromatografisan sa 0-15 % metanola u etil acetatu na koloni sa 24 g silika gela da daju 8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (73 mg, 0.143 mmol, 14 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ 8.43 (d, J=4.4 Hz, 1H), 7.79-7.74 (m, 1H), 7.72-7.64 (m, 3H), 7.33 (ddd, J=10.1, 8.5, 1.2 Hz, 1H), 7.18 (dt, J=8.4, 4.2 Hz, 1H), 7.03 (t, J=8.7 Hz, 2H), 6.11 (s, 1H), 5.19 (s, 1H), 4.57 (br s, 1H), 3.86-3.76 (m, 1H), 3.68-3.63 (m, 1H), 3.62 (s, 3H), 3.27-3.19 (m, 1H), 3.14 (dd, J=11.5, 3.7 Hz, 1H), 2.27 (br d, J=10.8 Hz, 1H), 1.38 (d, J=6.6 Hz, 3H), 1.18 (d, J=6.4 Hz, 3H). Analitički uslovi LC\MS: zapremina injektiranja= 1 µL, početna %B 0, konačna %B 100, vreme gradijenta 2 minute, protok 1 mL/min, talasna dužina 220 nm, rastvarački par acetonitril/voda/TFA, rastvarač A 10 % acetonitril/90 % voda/0.1% TFA, rastvarač B 10 voda/90 % acetonitril/0.1% TFA, kolona Acquity BEH C 1821. X 50 mm 1.7 µm, temperatura peći= 40 °C. LC\MS rezultati; retenciono vreme 1.7 minuta, uočena masa 501.1 (MH<+>).
PRIMER 188
Stereohemija H
8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0831]
[0832] Primer 188 je pripremljen od intermedijera 160, diastereomera 2 (2R,5S)-1-((4-fluorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazina, u skladu sa opštom procedurom primera 187. Jedinjenje (175 mg) je izolovano u prinosu od 35%.<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ 8.49 (d, J=4.6 Hz, 1H), 7.80-7.74 (m, 1H), 7.70-7.65 (m, 3H), 7.38 (td, J=9.2, 1.2 Hz, 1H), 7.20 (dt, J=8.4, 4.2 Hz, 1H), 7.01 (t, J=8.7 Hz, 2H), 6.13 (s, 1H), 5.16 (s, 1H), 4.51 (br s, 1H), 3.86 (br d, J=11.0 Hz, 1H), 3.72 (dd, J=12.2, 3.2 Hz, 1H), 3.63 (s, 3H), 3.21-3.13 (m, 1H), 3.03 (dd, J=11.9, 3.5 Hz, 1H), 1.38 (d, J=6.6 Hz, 3H), 1.19 (d, J=6.6 Hz, 3H). Analitički uslovi LC\MS: zapremina injektiranja= 1 µL, početna %B 0, konačna %B 100, vreme gradijenta 2 minute, protok 1 mL/min, talasna dužina 220 nm, rastvarački par acetonitril/voda/TFA, rastvarač A 10 % acetonitril/90 % voda/0.1% TFA, rastvarač B 10 % voda/90 % acetonitril/0.1% TFA, kolona Acquity BEH C1821. X 50 mm 1.7 µm, temperatura peći= 40 °C. LC\MS rezultati; retenciono vreme 1.7 minuta, uočena masa 501.1 (MH<+>).
PRIMERI 189 I 190
8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0833]
[0834] U bocu sa okruglim dnom od 100 mL, 2-(hloro(4-hlorofenil)metil)-3-fluoropiridin (775 mg, 3.03 mmol) je rastvoren u acetonitrilu (8400 µl). U ovaj rastvor, 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (500 mg, 1.681 mmol), trietilamine (469 µl, 3.36 mmol) i kalijum jodid (27.9 mg, 0.168 mmol) su dodati redom. Reakciona smeša je zapečaćena pod azotom i zagrejana na 75 °C tokom 2 sata. Sirov materijal je hromatografisan sa 0-100 % etil acetata u heksanima. Dva široka pika su odvojena i izolovana, svaki sa tačnom masom. Koinjektiranje u LCMS je pokazalo dva pika i H NMR pomaci su bili slični, ali ne i identični, u skladu sa diastereomerima.
[0835] Primer 189: diastereomer 1 (425 mg, 0.806 mmol, 47.9 % prinos); analitički uslovi LC\MS: zapremina injektiranja= 1 µL, početna %B 0, konačna %B 100, vreme gradijenta 2 minute, protok 1 mL/min, talasna dužina 220 nm, rastvarački par acetonitril/voda/TFA, rastvarač A 10 % acetonitril/90 % voda/0.05% TFA, rastvarač B 10 voda 90 % acetonitril/ 0.05% TFA, kolona Acquity BEH C1821. X 50 mm 1.7 µm, temperatura peći= 40 °C. LC\MS rezultati; retenciono vreme 1.8 minuta, uočena masa 517.1 (MH<+>).<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ 8.40 (d, J=4.4 Hz, 1H), 7.79-7.72 (m, 1H), 7.69-7.61 (m, 3H), 7.36-7.26 (m, 3H), 7.16 (dt, J=8.4, 4.2 Hz, 1H), 6.08 (s, 1H), 5.17 (s, 1H), 4.54 (br s, 1H), 3.78 (brd, J=9.0 Hz, 1H), 3.65-3.60 (m, 1H), 3.59 (s, 3H), 3.25-3.16 (m, 1H), 3.12 (dd, J=11.5, 3.4 Hz, 1H), 2.24 (br d, J=11.5 Hz, 1H), 1.35 (d, J=6.6 Hz, 3H), 1.16 (d, J=6.6 Hz, 3H).
[0836] Primer 190: diastereomer 2: (50 mg, 0.081 mmol, 4.83 % prinos); analitički uslovi LC\MS: zapremina injektiranja= 1 µL, početna %B 0, konačna %B 100, vreme gradijenta 2 minute, protok 1 mL/min, talasna dužina 220 nm, rastvarački par acetonitril/voda/TFA, rastvarač A 10 % acetonitril/90 % voda/0.05% TFA, rastvarač B 10 voda 90 % acetonitril/ 0.05% TFA, kolona Acquity BEH C1821. X 50 mm 1.7 µm, temperatura peći= 40 °C. LC\MS rezultati; retenciono vreme 1.8 minuta, uočena masa 517.1 (MH+).<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ 8.48 (d, J=4.6 Hz, 1H), 7.81-7.74 (m, 1H), 7.66 (dd, J=12.1, 8.7 Hz, 3H), 7.41-7.34 (m, 1H), 7.34-7.27 (m, 3H), 7.23-7.13 (m, 1H), 6.12 (s, 1H), 5.15 (s, 1H), 4.49 (br s, 1H), 3.86 (brd, J=10.8 Hz, 1H), 3.71 (dd, J=12.2, 2.9 Hz, 1H), 3.63 (s, 3H), 3.19-3.11 (m, 1H), 3.04 (dd, J=11.7, 3.4 Hz, 1H), 2.47 (dd. J=11.9, 1.1 Hz, 1H), 1.38 (d, J=6.6 Hz, 3H), 1.19 (d, J=6.4 Hz, 3H).
INTERMEDIJER 161
(4-Hlorofenil)(5-fluoropiridin-2-il)metanol
[0837]
[0838] (4-Hlorofenil)(5-fluoropiridin-2-il)metanol je pripremljen u skladu sa opštom procedurom opisanom tokom pripremanja intermedijera 153 (4-hlorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metanol.<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ 8.44 (br s, 1H), 7.47-7.27 (m, 5H), 7.19 (br s, 1H), 5.76 (br s, 1H), 5.04-4.49 (br m, 1H).
PRIMERI 191 I 192
8-[(2S,SR)-4-[(4-hlorofenil)(5-fluoropiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0839]
[0840] (8-[(2S,SR)-4-[(4-hlorofenil)(5-fluoropiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1 -ilJ-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril je pripremljen u skladu sa opštom procedurom opisanom tokom pripremanja primera 182, 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril. Diastereomeri su odvojeni korišćenjem hiralne hromatografije sa čvrstom fazom: kolona: Chiral AD, 30 x 250 mm, 5 mikrona, mobilna faza: 70 % CO2/ 30 % IPA mas/0.1% DEA, uslovi protoka: 100 mL/min, talasna dužina detektora: 220 nm, detalji injektiranja:1000 µL 15.8 mg rastvoreno u 3 mL metanola.
[0841] Primer 191: prvi eluirajući diastereomer (5.5 mg) je izolovan u prinosu od 6.6%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18,2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 517.25; retenciono vreme: 1.61 min.
Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 98.9 %; uočena masa: 517.07; retenciono vreme: 2.26 min.
[0842] Primer 192: Drugi eluirajući diastereomer (6.4 mg) je izolovan u prinosu od 7.7%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 96.3 %; uočena masa: 517.22; retenciono vreme: 1.67 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 516.97; retenciono vreme: 2.26 min.
INTERMEDIJER 162
(4-Fluorofenil)(5-fluoropiridin-2-il)metanol
[0843]
[0844] (4-Fluorofenil)(5-fluoropiridin-2-il)metanol je pripremljen u skladu sa opštom procedurom korišćenom da se pripremi intermedijer 153 (4-hlorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metanol.<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ 8.44 (br s, 1H), 7.49-7.27 (m, 3H), 7.18 (br d, J=3.9 Hz, 1H), 7.05 (br t, J=7.9 Hz, 2H), 5.77 (br s, 1H), 4.78 (br s, 1H).
PRIMERI 193 I 194
8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(5-fluoropiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0845]
[0846] Diastereomeri su pripremljeni u skladu sa opštom procedurom korišćenom da se pripreme primeri 183-184.
[0847] Primer 193: prvi eluirajući diastereomer (16.4 mg) je izolovan u prinosu od 20.4%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 501.17; retenciono vreme: 2.26 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 501.18, 501.18; retenciono vreme: 1.42, 1.45 min.
[0848] Primer 194: drugi eluirajući diastereomer (6.8 mg) je izolovan u prinosu od 8.4%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 nun, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 97.8 %; uočena masa: 501.2; retenciono vreme: 1.51 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 501.02; retenciono vreme: 2.11 min.
INTERMEDIJER 163
(4-Hlorofenil)(6-fluoropiridin-2-il)metanol
[0849]
[0850] (4-Hlorofenil)(6-fluoropiridin-2-il)metanol je pripremljen u skladu sa opštom procedurom korišćenom da se pripremi intermedijer 153, (4-hlorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metanol.<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ 7.78 (q, J=7.8 Hz, 1H), 7.35 (m, 5H), 7.11 (dd, J=7.3, 2.2 Hz, 1H), 6.86 (dd, J=8.1, 2.4 Hz, 1H), 5.75 (d, J=4.4 Hz, 1H), 4.09 (d, J=4.6 Hz, 1H).
PRIMERI 195 I 196
8-[(2S,SR)-4-[(4-hlorofenil)(6-fluoropiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1 -il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0851]
[0852] Diastereomeri su pripremljeni i odvojeni u skladu sa opštom procedurom korišćenom da se pripremi primer 182, 8-[(2S,SR)-4-[(4-fluorofenil)(fenil) metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril.
[0853] Primer 195: prvi eluirajući diastereomer (4.1 mg) je izolovan u prinosu od 4.9 %. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 95.8 %; uočena masa: 516.92; retenciono vreme: 1.7 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 98.7 %; uočena masa: 516.93; retenciono vreme: 2.37 min.
[0854] Primer 196: drugi eluirajući diastereomer (4 mg) je izolovan u prinosu od 4.8%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 97.9 %; uočena masa: 517.05, 517.1, Retenciono vreme: 1.61, 1.71 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 98.7 %; uočena masa: 517.18; retenciono vreme: 2.37 min.
INTERMEDIJER 164
(4-Fluorofenil)(piridin-2-il)metanol
[0855]
[0856] (4-Fluorofenil)(piridin-2-il)metanol je pripremljen u skladu sa opštom procedurom korišćenom da se pripremi intermedijer 153, (4-hlorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metanol.<1>H NMR (500 MHz, HLOROFORM-d) δ 8.59 (d, J=4.9 Hz, 1H), 7.65 (td, J=7.6, 1.7 Hz, 1H), 7.36 (dd, J=8.6.5.4 Hz, 2H), 7.23 (dd, J=7.2, 5.0 Hz, 1H), 7.14 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.04 (t, J=8.7 Hz, 2H), 5.75 (d, J=2.0 Hz, 1H), 5.43-5.14 (m, 1H).
PRIMERI 197 I 198
8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(piridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0857]
[0858] Diastereomeri su pripremljeni i odvojeniu skladu sa opštom procedurom korišćenom da se pripreme primeri 183-184.
[0859] Primer 197: prvi eluirajući diastereomer (5.8 mg) je izolovan u prinosu od 7.5%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 98.6 %; uočena masa: 483.24; retenciono vreme: 1.96 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 01 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 483.23; retenciono vreme: 1.47 min.
[0860] Primer 198: drugi eluirajući diastereomer (5.2 mg) je izolovan u prinosu od 6.7%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18,2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 93.7 %; uočena masa: 483.24; retenciono vreme: 1.95 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 99.3 %; uočena masa: 483.21; retenciono vreme: 1.46 min.
INTERMEDIJER 165
(5-Hloropiridin-2-il)(p-tolil)metanol
[0861]
[0862] (5-Hloropiridin-2-il)(p-tolil)metanol je pripremljen u skladu sa opštom procedurom korišćenom da se pripremi intermedijer 153, (4-hlorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metanol.<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ 8.53 (s, 1H), 7.61 (dd, J=8.3, 1.7 Hz, 1H), 7.26 (br d, J=7.8 Hz, 2H), 7.21-7.11 (m, 3H), 5.75 (br s, 1H), 4.72 (br s, 1H), 2.36 (s, 3H).
PRIMERI 199 I 200
8-[(2S,5R)-4-[(5-hloropindin-2-il)(4-metilfenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0863]
[0864] Diastereomeri su pripremljeni i separated u skladu sa opštom procedurom korišćenom da se pripreme primeri 183-184.
[0865] Primer 199: prvi eluirajući diastereomer (7.5 mg) je izolovan u prinosu od 9.1%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 99.1 %; uočena masa: 513.27; retenciono vreme: 1.58 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 513.03; retenciono vreme: 2.36 min.
[0866] Primer 200: drugi eluirajući diastereomer (7 mg) je izolovan u prinosu od 8.5%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 98.8 %; uočena masa: 513.25; retenciono vreme: 1.6 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 513.43; retenciono vreme: 2.37 min.
INTERMEDIJER 166
(4-Hlorofenil)(5-hloropiridin-2-il)metanol
[0867]
[0868] (4-Hlorofenil)(5-hloropiridin-2-il)metanol je pripremljen u skladu sa opštom procedurom korišćenom da se pripremi intermedijer 153, (4-hlorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metanol.<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ 8.54 (br s, 1H), 7.64 (br d, J=1.3 Hz, 1H), 7.33 (m, 4H), 7.15 (brd, J=8.3 Hz, 1H), 5.74 (br d, J=3.4 Hz.1H), 4.76 (br d, J=3.9 Hz, 1H).
PRIMERI 201 I 202
8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(5-hloropiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0870] Diastereomeri su pripremljeni i odvojeni u skladu sa opštom procedurom opisanom tokom pripremanja primera 183-184.
[0871] Primer 201: prvi eluirajući diastereomer (2.6 mg) je izolovan u prinosu od 3%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 95.6 %; uočena masa: 533.2; retenciono vreme: 1.66 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 98.8 %; uočena masa: 533.12; retenciono vreme: 2.43 min.
[0872] Primer 202: drugi eluirajući diastereomer (2.8 mg) je izolovan u prinosu od 3.3%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 94.9 %; uočena masa: 533.23; retenciono vreme: 1.75 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 532.97; retenciono vreme: 2.43 min.
INTERMEDIJER 167
(4-Fluorofenil)(6-metilpiridin-2-il)metanol
[0873]
[0874] (4-Fluorofenil)(6-metilpiridin-2-il)metanol je pripremljen u skladu sa opštom procedurom korišćenom da se pripremi intermedijer 153, (4-hlorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metanol.<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ 7.53 (t, J=7.7 Hz, 1H), 7.42-7.31 (m, 2H), 7.12-6.98 (m, 3H), 6.88 (d, J=7.6 Hz, 1H), 5.75-5.63 (m, 2H), 2.62 (s, 3H). Analitički uslovi LC\MS: zapremina injektiranja= 3 µL, početna %B 2, konačna %B 98, vreme gradijenta 1.5 minuta, protok 0.8 mL/min, talasna dužina 220 nm, rastvarački par acetonitril/ voda/ TFA, rastvarač A 100 % voda/ 0.05% TFA, rastvarač B 100 % vcetonitril/ 0.05% TFA, kolona Acquity BEH C18 21. X 50 mm 1.7um, temperatura peći= 40 °C. LC\MS rezultati; retenciono vreme 1.1 minuta, uočene mase 218.3 (M+1) i 200.2 (M<+>-OH).
PRIMERI 203 I 204
8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(6-metilpiridin-2-il)metil J-2,5-dimetilpiperazin-I-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0875]
[0876] Diastereomeri su pripremljeni i odvojeni u skladu sa opštom procedurom opisanom da se pripreme primeri 183-184.
[0877] Primer 203: prvi eluirajući diastereomer (6.7 mg) je izolovan u prinosu od 11.5%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 96.0 %; uočena masa: 497.3; retenciono vreme: 1.45 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 96.8 %; uočena masa: 497.25; retenciono vreme: 2.09 min.
[0878] Primer 204: drugi eluirajući diastereomer (7.8 mg) je izolovan u prinosu od 13.4%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 % B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 97.6 %; uočena masa: 497.08; retenciono vreme: 1.45 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 97.9 %; uočena masa: 497.31; retenciono vreme: 2.08 min.
INTERMEDIJER 168
(2-Etoksipiridin-3-il)(4-fluorofenil)metanol
[0879]
[0880] (2-Etoksipiridin-3-il)(4-fluorofenil)metanol je pripremljen u skladu sa opštom procedurom opisanom da se pripremi intermedijer 153, (4-hlorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metanol.<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ 8.09 (br d, J=4.6 Hz, 1H), 7.56 (d, J=7.3 Hz, 1H), 7.37 (dd, J=7.9, 5.7 Hz, 2H), 7.04 (t, J=8.6 Hz, 2H), 6.90 (dd, 7=6.8, 5.4 Hz, 1H), 5.95 (d, J=3.7 Hz, 1H), 4.40 (q, J=6.9 Hz, 2H), 2.98 (br d, J=4.6 Hz, 1H), 1.36 (t, J=7.1 Hz, 3H). Analitički uslovi LC\MS: zapremina injektiranja= 1 µL, početna %B 0, konačna %B 100, vreme gradijenta 1.5 minuta, protok 1 mL/min, talasna dužina 200 nm, rastvarački par acetonitril/voda/TFA, rastvarač A 10 % acetonitril/ 90 % voda/0.1% TFA, rastvarač B 10 % voda/90 % acetonitril/0.1% TFA, kolona Acquity BEH 21. X 50 mm 1.7 µm, temperatura peći= 40 °C. LC\MS rezultati; retenciono vreme 1.2 minute, uočena masa 248.1 (M<+>).
PRIMERI 205 I 206
8-[(2S,5R)-4-[(2-etoksipiridin-3-il)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0881]
[0882] Diastereomeri su pripremljeni i odvojeni u skladu sa opštom procedurom korišćenom da se pripreme primeri 183-184.
[0883] Primer 205: prvi eluirajući diastereomer (5.8 mg) je izolovan u prinosu od 6.8%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 94.4 %; uočena masa: 527.19; retenciono vreme: 2.41 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 % B do 100 % B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 % B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 98.8 %; uočena masa: 527.12; retenciono vreme: 1.71 min.
[0884] Primer 206: drugi eluirajući diastereomer (6.9 mg) je izolovan u prinosu od 8.1%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 98.8 %; uočena masa: 527.1; retenciono vreme: 2.39 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 % B do 100 % B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 98.8 %; uočena masa: 527.17; retenciono vreme: 1.68 min.
INTERMEDIJER 169
(4-Fluorofenil)(2-izopropoksipiridin-3-il)metanol
[0885]
[0886] (4-Fluorofenil)(2-izopropoksipiridin-3-il)metanol je pripremljen u skladu sa opštom procedurom korišćenom da se pripremi intermedijer 153, (4-hlorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metanol.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 8.09 (br d, J=4.9 Hz, 1H), 7.56 (d, J=7.3 Hz, 1H), 7.36 (dd, J=7.6, 5.6 Hz, 2H), 7.04 (t, J=8.3 Hz, 2H), 6.91-6.84 (m, 1H), 5.91 (d, J=4.9 Hz, 1H), 5.37 (dt, J=12.3, 6.1 Hz, 1H), 3.02 (d, J=5.4 Hz, 1H), 1.29 (dd, J=8.2, 6.7 Hz, 6H).<13>C NMR (101 MHz, Hloroform-d) δ 163.4, 160.9, 160.1, 145.9, 138.3, 138.3, 135.7, 128.3, 128.3, 126.3, 116.5, 115.1, 114.9, 71.5, 68.4, 22.0.<19>F NMR (376 MHz, Hloroform-d) δ -115 (s, IF). Analitički uslovi LC\MS: zapremina injektiranja= 3 µL, početna %B 2, konačna %B 98, vreme gradijenta 1.5 minuta, protok 0.8 mL/min, talasna dužina 220, rastvarački par acetonitril/ voda/TFA, rastvarač A 100 % voda/ 0.05% TFA, rastvarač B 100 % acetonitril/ 0.05% TFA, kolona Acquity BEH C1821. X 50 mm 1.7 um, temperatura peći= 40 °C. LC\MS rezultati; retenciono vreme 1.8 minuta, uočena masa 262.0 (M<+>).
PRIMERI 207 I 208
8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)[2-(propan-2-iloksi)piridin-3-il]metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0887]
[0888] Diastereomeri su pripremljeni i odvojeni u skladu sa opštom procedurom opisanom u pripremanju primera 183-184.
[0889] Primer 207: prvi eluirajući diastereomer (6.1 mg) je izolovan u prinosu od 7%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 96.3 %; uočena masa: 541.29; retenciono vreme: 2.53 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 96.6 %; uočena masa: 541.26; retenciono vreme: 1.83 min.
[0890] Primer 208: drugi eluirajući diastereomer (8.6 mg) je izolovan u prinosu od 9.9%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18,2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 96.9 %; uočena masa: 541.32; retenciono vreme: 2.5 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 97.7 %; uočena masa: 541.26; retenciono vreme: 1.85 min.
INTERMEDIJER 170
(4-Fluorofenil)(2-metoksipiridin-3-il)metanol
[0891]
[0892] (4-Fluorofenil)(2-metoksipiridin-3-il)metanol je pripremljen u skladu sa opštom procedurom korišćenom da se pripremi intermedijer 153, (4-hlorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metanol.<1>H NMR analiza je pokazala da je ovaj materijal čistoće > 95%.<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ 8.12 (d, J=4.9 Hz, 1H), 7.54 (d, J=7.1 Hz, 1H), 7.37 (dd, J=8.3, 5.6 Hz, 2H), 7.05 (t, J=8.6 Hz, 2H), 6.91 (dd, J=7.3, 5.1 Hz, 1H), 5.98 (d, J=4.6 Hz, 1H), 3.98 (s, 3H), 2.92 (d, J=4.6 Hz, 1H).
PRIMERI 209 I 210
8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(2-metoksipiridin-3-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0893]
[0894] Diastereomeri su pripremljeni i odvojeni u skladu sa opštom procedurom korišćenom da se pripreme primeri 183-184.
[0895] Primer 209: prvi eluirajući diastereomer (4.6 mg) je izolovan u prinosu od 5.6%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 96.3 %; uočena masa: 513.19; retenciono vreme: 2.28 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 513.25; retenciono vreme: 1.68 min.
[0896] Primer 210: Drugi eluirajući diastereomer (7.5 mg) je izolovan u prinosu od 9.1%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 97.6 %; uočena masa: 513.27; retenciono vreme: 2.26 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 95.7 %; uočena masa: 513.29; retenciono vreme: 1.58 min.
INTERMEDIJER 171
(5-Hloropiridin-2-il)(4-fluorofenil)metanol
[0898] (5-Hloropiridin-2-il)(4-fluorofenil)metanol je pripremljen u skladu sa opštom procedurom korišćenom da se pripremi intermedijer 153, (4-hlorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metanol.<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ 8.52 (br s, 1H), 7.63 (br d, J=7.8 Hz, 1H), 7.38-7.29 (m, 2H), 7.15 (br d, J=8.3 Hz, 1H), 7.04 (br t, J=8.2 Hz, 2H), 5.75 (br s, 1H), 4.84 (br s, 1H).
PRIMERI 211 I 212
8-[(2S,5R)-4-[(5-hloropiridin-2-il)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0899]
[0900] Diastereomeri su pripremljeni i odvojeni u skladu sa opštom procedurom korišćenom da se pripremi primer 183-184.
[0901] Primer 211: Pri eluirajući diastereomer (3.2 mg) je izolovan u prinosu od 3.8%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 97.6 %; uočena masa: 517.22; retenciono vreme: 1.5 min.
Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 517.04; retenciono vreme: 2.27 min.
[0902] Primer 212: drugi eluirajući diastereomer (3.2 mg) je izolovan u prinosu od 3.8%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18,2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 96.6 %; uočena masa: 517.23; retenciono vreme: 1.57 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 517.04; retenciono vreme: 2.27 min.
INTERMEDIJER 172
(4-Hlorofenil)(5-metilpiridin-2-il)metanol
[0903]
[0904] (4-Hlorofenil)(5-metilpiridin-2-il)metanol je pripremljen u skladu sa opštom procedurom korišćenom da se pripremi intermedijer 153, (4-hlorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metanol.<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ 8.38 (br s, 1H), 7.45 (br d, J=6.8 Hz, 1H), 7.32 (br s, 4H), 7.05 (br d, J=7.3 Hz, 1H), 5.72 (br s, 1H), 5.58-5.22 (m, 1H).
PRIMERI 213 DO 214
8-[(2S,SR)-4-[(4-hlorofenil)(5-mediilpiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0905]
[0906] Diastereomeri su pripremljeni i odvojeni u skladu sa opštom procedurom korišćenom da se pripreme primeri 183-184.
[0907] Primer 213: prvi eluirajući diastereomer (9.3 mg) je izolovan u prinosu od 13.4%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 513.1; retenciono vreme: 2.26 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 513.07; retenciono vreme: 1.63 min.
[0908] Primer 214: drugi eluirajući diastereomer (31.4 mg) je izolovan u prinosu od 45.3%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18,2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 513.13; retenciono vreme: 2.27 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 513.12; retenciono vreme: 1.64 min.
INTERMEDIJER 173
(3-Fluorofenil)(5-metilpiridin-2-il)metanol
[0909]
[0910] (3-Fluorofenil)(5-metilpiridin-2-il)metanol je pripremljen u skladu sa opštom procedurom korišćenom da se pripremi intermedijer 153, (4-hlorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metanol.<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ 8.41 (br s, 1H), 7.47 (br d, J=4.2 Hz, 1H), 7.31 (br s, 1H), 7.20 (br s, 1H), 7.09 (br s, 2H), 6.97 (br s, 1H), 5.74 (br s, 1H), 5.33 (br s, 1H).
PRIMERI 215 DO 216
8-[(2S,SR)-4-[(3-fluorofenil)(5-metilpiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0911]
[0912] Diastereomeri su pripremljeni i odvojeni u skladu sa opštom procedurom korišćenom da se pripreme primeri 183-184.
[0913] Primer 215: prvi eluirajući diastereomer (8.6 mg) je izolovan u prinosu od 12.8%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 497.07; retenciono vreme: 2.09 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 99.3 %; uočena masa: 497.17; retenciono vreme: 1.46 min.
[0914] Primer 216: Drugi eluirajući diastereomer (8.8 mg) je izolovan u prinosu od 13.1%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 497.12; retenciono vreme: 2.1 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 497.21; retenciono vreme: 1.47 min.
PRIMERI 217 I 218
7-hloro-8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0915]
[0916] Pripremljen je DMF (1 mL) rastvor smeše diastereomera 8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(fenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftindin-2-karbonitrila (30 mg, 0.062 mmol). N-Hlorosukcinimid (12.48 mg, 0.093 mmol) je dodat i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. LC/MS analiza je naznačila da je reakcija završena. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 44% B, 44-84% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuto MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Čvrsta supstanca (22.8 mg) koja sadrži smešu diastereomera je izolovan.
[0917] Diastereomeri su odvojeni korišćenjem hiralne hromatografije sa čvrstom fazom: kolona: Chiral OD, 30 x 250 mm, 5 mikrona, mobilna faza: 70 % CO2/ 30 % metanol m/ 0.1% dietil amin, uslovi protoka: 100 mL/min, talasna dužina detektora: 220 nm, detalji injektiranja: 1300 µL 22.8 mg rastvoreno u 3 mL metanola.
[0918] Primer 217: prvi eluirajući diastereomer (9.2 mg) je izolovan u prinosu od 28.8%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 97.2 %; uočena masa: 516.1; retenciono vreme: 2.68 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 97.3 %
[0919] Primer 218: drugi eluirajući diastereomer (9.1 mg) je izolovan u prinosu od 28.4%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 97.1 %; uočena masa: 516.09; retenciono vreme: 2.68 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 97.1 %; uočena masa: 516.34; retenciono vreme: 1.79 min.
PRIMERI 219 I 220
3-hloro-4-{4-[(4-fluorofenil)(fenil)metil]piperazin-1-il}-6-metoksi-1-metil-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-2-on
[0921] Diastereomeri su pripremljeni i odvojeni na sličan način kao u primeri 217-218, 7-hloro-8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1 -ilJ-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril.
[0922] Primer 219: prvi eluirajući diastereomer (13.2 mg) je izolovan u prinosu od 72.4%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 493.17; retenciono vreme: 2.62 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 520; retenciono vreme: 1.51 min.
[0923] Primer 220: drugi eluirajući diastereomer (5.9 mg) je izolovan u prinosu od 32.3%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 493.21; retenciono vreme: 2.54 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 520; retenciono vreme: 1.5 min.
INTERMEDIJER 174
Fenil(4-(trifluorometoksi)fenil)metanol
[0924]
[0925] Fenil(4-(trifluorometoksi)fenil)metanol je pripremljen u skladu sa opštom procedurom korišćenom da se pripremi intermedijer 153, (4-hlorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metanol.<1>H NMR (500 MHz, HLOROFORM-d) δ 7.43 (d, J=8.5 Hz, 2H), 7.40-7.35 (m, 4H), 7.35-7.29 (m, 1H), 7.24-7.16 (m, 2H), 5.88 (d, J=3.4 Hz, 1H), 2.25 (d, J=3.5 Hz, 1H).
PRIMERI 221 I 222
8-[(2S,5R)-2,5-dimetil-4-{fenil[4-(trifluorometoksi)fenil]metil}piperazin-l-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0926]
[0927] Diastereomeri su pripremljeni i odvojeni u skladu sa opštom procedurom korišćenom da se pripreme primeri 183-184.
[0928] Primer 221: prvi eluirajući diastereomer (6.7 mg) je izolovan u prinosu od 7.6%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18,2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 98.8 %; uočena masa: 548.26; retenciono vreme: 2.04 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 98.8 %; uočena masa: 548; retenciono vreme: 2.59 min.
[0929] Primer 222: drugi eluirajući diastereomer (6.4 mg) je izolovan u prinosu od 7.3%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 98.5 %; uočena masa: 548.28; retenciono vreme: 2.02 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 98.6 %; uočena masa: 548.14; retenciono vreme: 2.59 min.
INTERMEDIJER 175
(4-Fluorofenil)(m-tolil)metanol
[0930]
[0931] (4-Fluorofenil)(m-tolil)metanol je pripremljen u skladu sa opštom procedurom korišćenom da se pripremi intermedijer 153, (4-hlorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metanol.<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ 7.37 (dd, J=7.7, 5.7 Hz, 2H), 7.25 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.22-7.15 (m, 2H), 7.12 (br d, J=7.3 Hz, 1H), 7.04 (t, J=8.3 Hz, 2H), 5.82 (d, J=2.9 Hz, 1H), 2.36 (s, 3H), 2.18 (d, J=3.2 Hz, 1H). Analitički uslovi LC\MS: zapremina injektiranja= 3 µL, početna %B 0, konačna %B 100, vreme gradijenta 2 minute, protok 1 mL/min, talasna dužina 220 nm, rastvarački par acetonitril/voda/TFA, rastvarač A 10 % acetonitril, 90 % voda/0.05% TFA, rastvarač B 10 % voda, 90 % acetonitril/ 0.05% TFA, kolona Acquity BEH C1821. X 50 mm 1.7 µm, temperatura peći= 40 °C. LC\MS rezultati; retenciono vreme 1.6 minuta, uočena masa 198.9 (M<+>-OH).
PRIMERI 223 I 224
8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(3-metilfenil)metil J-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5.6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0932]
[0933] Diastereomeri su pripremljeni i odvojeni u skladu sa opštom procedurom korišćenom da se pripreme primeri 183-184.
[0934] Primer 223: prvi eluirajući diastereomer (5.7 mg) je izolovan u prinosu od 9.8%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 496.21; retenciono vreme: 2.65 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 496.21; retenciono vreme: 1.7 min.
[0935] Primer 224: drugi eluirajući diastereomer (5.3 mg) je izolovan u prinosu od 9.1%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 96.0 %; uočena masa: 496.18; retenciono vreme: 2.54 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 96.1 %; uočena masa: 496.19; retenciono vreme: 1.83 min.
INTERMEDIJER 176
(4-Hlorofenil)(2-etil-4-fluorofenil)metanol
[0936]
[0937] (4-Hlorofenil)(2-etil-4-fluorofenil)metanol je pripremljen u skladu sa opštom procedurom korišćenom da se pripremi intermedijer 153, (4-hlorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metanol.<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ 7.39 (dd, J=8.3, 6.1 Hz, 1H), 7.36-7.31 (m, 2H), 7.26 (s, 1H), 6.94 (d, J=8.8 Hz, 2H), 6.04 (d, J=3.2 Hz, 1H), 2.77-2.53 (m, 2H), 2.09 (d, J=3.7 Hz, 1H), 1.18 (t, J=7.6 Hz, 3H). Analitički uslovi LC\MS: zapremina injektiranja= 3 µL, početna %B 2, konačna %B 98, vreme gradijenta 1.5 minuta, protok 0.8 mL/min, talasna dužina 220 nm, rastvarački par acetonitril/voda/TFA, rastvarač A 100 % voda/0.05% TFA, rastvarač B 100 % acetonitril/ 0.05% TFA, kolona Acquity BEH C1821. X 50 mm 1.7 µm, temperatura peći= 40 °C. LC\MS rezultati; retenciono vreme 1.7 minuta, uočena masa 246.9, 248.7 (M<+>-OH).
PRIMERI 225 I 226
8-[(2S,5R)4-[(4-hlorofenil)(2-etil-4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0938]
[0939] Diastereomeri su pripremljeni i odvojeni u skladu sa opštom procedurom korišćenom da se pripreme primeri 183-184.
[0940] Primer 225: prvi eluirajući diastereomer (12.3 mg) je izolovan u prinosu od 16.7%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 544.26; retenciono vreme: 2.8 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 544.15; retenciono vreme: 2.23 min.
[0941] Primer 226: drugi eluirajući diastereomer (12.4 mg) je izolovan u prinosu od 16.9%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 544.18; retenciono vreme: 2.79 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 544.24; retenciono vreme: 2.23 min.
PRIMERI 227 I 228
8-[(2S,5R)-4-[(2-etil-4-fluorofenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0942]
[0943] Diastereomeri su pripremljeni i odvojeni u skladu sa opštim procedurama korišćenim da se pripreme primeri 183-184.
[0944] Primer 227: prvi eluirajući diastereomer (16.5 mg) je izolovan u prinosu od 23.2%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 95.9 %; uočena masa: 528.33; retenciono vreme: 2.64 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 528.12; retenciono vreme: 2.01 min.
[0945] Primer 228: drugi eluirajući diastereomer (14.9 mg) je izolovan u prinosu od 20.9%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 528.16; retenciono vreme: 2.68 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 528.14; retenciono vreme: 2.12 min.
INTERMEDIJER 177
(2-Etoksi-4-fluorofenil)(4-fluorofenil)metanol
[0946]
[0947] (2-Etoksi-4-fluorofenil)(4-fluorofenil)metanol je pripremljen u skladu sa opštom procedurom korišćenom da se pripremi intermedijer 153, (4-hlorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metanol. NMR analiza je pokazala da je ovaj materijal čistoće > 95%.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 7.36 (dd, J=7.5, 6.0 Hz, 2H), 7.24 (t, J=7.6 Hz, 1H), 7.03 (t, J=8.3 Hz, 2H), 6.66 (br t, J=8.4 Hz, 1H), 6.61 (brd, J=10.8 Hz, 1H), 6.01 (d, J=5.1 Hz, 1H), 4.02 (q, J=6.8 Hz, 2H), 2.83 (d, J=5.1 Hz, 1H), 1.38 (t, J=6.8 Hz, 3H). Analitički uslovi LC\MS: zapremina injektiranja= 3 µL, početna %B 2, konačna %B 98, vreme gradijenta 1.5 minuta, protok 0.8 mL/min, talasna dužina 220, rastvarački par acetonitril/voda/TFA, rastvarač A 100 % voda/ 0.05% TFA, rastvarač B 100 % acetonitril/ 0.05% TFA, kolona Acquity BEH C1821. X 50 mm 1.7 µm, temperatura peći= 40 °C. LC\MS rezultati; retenciono vreme 1.8 minuta, uočena masa 247.0 (M<+>-OH).
PRIMERI 229 I 230
8-[(2S,5R)-4-[(2-etoksi-4-fluorofenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1 -il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftindin-2-karbonitril
[0948]
[0949] Diastereomeri su pripremljeni i odvojeni u skladu sa opštom procedurom korišćenom da se pripreme primeri 183-184.
[0950] Primer 229: prvi eluirajući diastereomer (12.2 mg) je izolovan u prinosu od 19.2%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 96.6 %; uočena masa: 544.32; retenciono vreme: 2.7 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 544.17; retenciono vreme: 1.83 min.
[0951] Primer 230: drugi eluirajući diastereomer (15.4 mg) je izolovan u prinosu od 24.2%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18,2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 97.1 %; uočena masa: 544.06; retenciono vreme: 2.69 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 544.15; retenciono vreme: 1.81 min.
PRIMERI 231 I 232
4-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(2-etil-4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-6-metoksi-1-metil-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-2-on
[0952]
[0953] Diastereomeri su pripremljeni i odvojeni u skladu sa opštom procedurom korišćenom da se pripreme primeri 183-184.
[0954] Primer 231: prvi eluirajući diastereomer (6.6 mg) je izolovan u prinosu od 7.3%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 548.96; retenciono vreme: 2.84 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 549.22; retenciono vreme: 2.28 min.
[0955] Primer 232: drugi eluirajući diastereomer (8.7 mg) je izolovan u prinosu od 9.6%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 548.9; retenciono vreme: 2.82 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 548.92; retenciono vreme: 2.28 min.
PRIMERI 233 I 234
4-[(2S,5R)-4-[(2-etil-4-fluorofenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-6-metoksi-1 -metil-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-2-on
[0957] Diastereomeri su pripremljeni i odvojeni u skladu sa opštom procedurom korišćenom da se pripreme primeri 183-184.
[0958] Primeri 233: prvi eluirajući diastereomer (11.4 mg) je izolovan u prinosu od 13%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 95.9 %; uočena masa: 532.94; retenciono vreme: 2.7 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 96.4 %; uočena masa: 532.93; retenciono vreme: 2.08 min.
[0959] Primeri 234: drugi eluirajući diastereomer (13.2 mg) je izolovan u prinosu od 15%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 98.1 %; uočena masa: 532.95; retenciono vreme: 2.7 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 94.8 %; uočena masa: 532.96; retenciono vreme: 2.08 min.
INTERMEDIJER 178
(2-Etilfenil)(4-fluorofenil)metanol
[0960]
[0961] (2-Etilfenil)(4-fluorofenil)metanol je pripremljen u skladu sa opštom procedurom korišćenom da se pripremi intermedijer 153, (4-hlorofenil)(3-fluoropiridin-2-il) metanol. NMR analiza je pokazala da je ovaj materijal čistoće > 95%.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7.47 (d, J=7.1 Hz, 1H), 7.36-7.21 (m, 6H (integrates high due do residual hloroform), 7.03 (t, J=8.6 Hz, 2H), 6.10 (br s, 1H), 2.77-2.52 (m, 2H), 1.17 (t, J=7.6 Hz, 3H). Analitički uslovi LC\MS: zapremina injektiranja= 1 µL, početna %B 0, konačna %B 100, vreme gradijenta 1.5 minuta, protok 1 mL/min, talasna dužina 200, rastvarački par acetonitril/voda/TFA, rastvarač A 10 % acetonitrilc/90 % voda/0.1% TFA, rastvarač B 10 % voda/90 % acetonitril/0.1% TFA, kolona Acquity BEH 21. X 50 mm 1.7 µm, temperatura peći= 40 °C. LC\MS rezultati; retenciono vreme 1.4 minuta, uočena masa 213.1 (M<+>-OH).
PRIMERI 235 I 236
4-[(2S,SR)-4-[(2-etilfenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-6-metoksi-1-metil-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-2-on
[0962]
[0963] Diastereomeri su pripremljeni i odvojeni u skladu sa opštom procedurom korišćenom da se pripreme primeri 183-184.
[0964] Primer 235: prvi eluirajući diastereomer (9.7 mg) je izolovan u prinosu od 11.4%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 514.98; retenciono vreme: 2.76 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 94.1 %; uočena masa: 514.98; retenciono vreme: 2 min.
[0965] Primer 236: drugi eluirajući diastereomer (10.5 mg) je izolovan u prinosu od 12.4%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 95.8 %; uočena masa: 514.96; retenciono vreme: 2.76 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 514.97; retenciono vreme: 1.99 min.
PRIMER 237
8-[(2S,5R)-4-(difenilmetil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0966]
[0967] U zapečaćenoj reakcionoj posudi od 2 drama, kombinovani su 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA (41.1 mg, 100 µmol), difenil metanol (25.8 mg, 140 µmol) i (cijanometil)trimetilfosfonijum jodid (48.6 mg, 200 µmol) u acetonitrilu (200 µl). Dodata je Hunig-ova baza (75 µL, 429 µmol) i reakciona smeša je zagrejana na 110 °C tokom 3 sata. LC\MS analiza je pokazala prisustvo proizvoda. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 42% B, 42-82% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Izračunata molarna masa 463.585. LC\MS uslovi QC-ACN-TFA-XB: Uočena MS jona 464.2, retenciono vreme 1.54 minuta.
PRIMERI 238 I 239
4-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-6-metoksi-1-metil-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-2-on
[0969] 4-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-6-metoksi-1-metil-1,5-naftiridin-2(1H)-on (50 mg, 0.165 mmol) i 1-(bromo(fenil)metil)-4-fluorobenzen (70.1 mg, 0.265 mmol) su kombinovani sa diizopropil etil aminom (0.173 mL, 0.992 mmol) u acetonitrilu (3 mL). Reakciona smeša je zagrejana na 55 °C preko noći. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 38% B, 38-78% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 4 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Izračunata molarna masa 486.591. LC\MS uslovi QC-ACN-TFA-XB: Uočena MS jona 487.2, retenciono vreme 1.62 minuta.
[0970] Diastereomeri su odvojeni u skladu sa opštom procedurom korišćenom da se pripreme primeri 183-184.
[0971] Primer 238: prvi eluirajući diastereomer (5.9 mg) je izolovan u prinosu od 7.3%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 487.1; retenciono vreme: 1.59 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 487.45; retenciono vreme: 1.75 min.
[0972] Primer 239: drugi eluirajući diastereomer (6 mg) je izolovan u prinosu od 7.5%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 95.8 %; uočena masa: 487.22; retenciono vreme: 1.6 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 487.45; retenciono vreme: 1.76 min.
PRIMER 240
4-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-6-metoksi-1-metil-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-2-on
[0973]
[0974] 4-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-6-metoksi-1-metil-1,5-naftiridin-2(1H)-on (50 mg, 0.165 mmol) i 1-(bromo(4-hlorofenil)metil)-4-fluorobenzen (49.5 mg, 0.165 mmol) su kombinovani sa diizopropil etil aminom (0.173 mL, 0.992 mmol) u acetonitrilu (3 mL) i reakciona smeša je zagrejana na 55 °C preko noći. LC/MS je naznačila da je reakcija završenad. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 42% B, 42-82% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuto MS signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Izračunata molarna masa 521.03. LC\MS uslovi QC-ACN-AA-XB: Uočena MS jona 521.1, retenciono vreme 2.77 minuta.
INTERMEDIJER 179
4,4'-(Bromometilen)bis(fluorobenzen)
[0975]
[0976] 4,4'-(Bromometilen)bis(fluorobenzen) je pripremljen u skladu sa opštom procedurom korišćenom da se pripremi 1-(bromo(4-htorofenil)metil)-4-fluorobenzen.
PRIMER 241
4-[(2S,5R)-4-[bis(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-6-metoksi-1-metil-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-2-on
[0977]
[0978] Rastvor 4-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-6-metoksi-1-metil-1,5-naftiridin-2(1H)-ona (128 mg, 0.424 mmol) u acetonitrilu (3 mL) je kombinovan sa 4,4'-(bromometilen)bis(fluorobenzenom) (100 mg, 0.353 mmol) i diizopropil etil aminom (0.185 mL, 1.060 mmol). Reakciona smeša je zagrejana na 80 °C u mikrotalasnom reaktoru tokom 8 sata. LC/MS indicated the starting material was consumed. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 40 % B, 40-80 % B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Izračunata molarna masa 504.582. LC\MS uslovi QC-ACN-TFA-XB: Uočena MS jona 505.2, retenciono vreme 1.51 minuta.
PRIMER 242
8-[(2S,5R)-4-{[2-(difluorometil)-4-fluorofenil]metil}-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1.5-naftiridin-2-karbonitril
[0979]
[0980] U DMF (2 mL) rastvor 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (30 mg, 0.081 mmol) dodat je 2-(difluoromctil)-4-fluorobenzaldehid (16.86 mg, 0.097 mmol). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 1 sata. Natrijum cijanoborohidrid (15.22 mg, 0.242 mmol) je dodat i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. LC/MS analiza je naznačila da je reakcija završena. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 31% B, 31-71% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos proizvoda je bio 13.0 mg, a čistoća procenjena sa LCMS analizom je bila 100 %. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 456.08; retenciono vreme: 1.39 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 456.07; retenciono vreme: 2.22 min. %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 456.07; retenciono vreme: 2.22 min.
PRIMER 243
8-[(2S,SR)-4-{ [2-fluoro-4-(trifluorometoksi)fenil]metil}-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0981]
[0982] Primer 243 je pripremljen u skladu sa opštim procesom korišćenim da se pripremi primer 242, 8-[(2S,5R)-4-{[2-(difluorometil)-4-fluorofenil]metil}-2,5-dimetilpiperazin-1 -il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril.
[0983] Jedinjenje (11 mg) je izolovano u prinosu od 27.7%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 490.12; retenciono vreme: 2.55 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 490.11; retenciono vreme: 1.55 min.
PRIMER 244
8-[(2S,5R)-4-[(4-hloro-2-hidroksifenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-nafthiridin-2-karbonitril
[0984]
[0985] Primer 244 je pripremljen u skladu sa opštim procesom korišćenim da se pripremi primer 242, 8-[(2S,5R)-4-{[2-(difluorometil)-4-fluorofenil]metil}-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril.
[0986] Jedinjenje (17 mg) je izolovano u prinosu od 47.9%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 438.13; retenciono vreme: 2.33 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 438.12; retenciono vreme: 1.35 min.
PRIMER 245
8-[(2S,5R)-4-[(2-hidroksifenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0987]
[0988] Primer 245 je pripremljen u skladu sa opštim procesom korišćenim da se pripremi primer 242, 8-[(2S,5R)-4-{[2-(difluorometil)-4-fluorofenil]metil}-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril.
[0989] Jedinjenje (15.6 mg) je izolovano u prinosu od 47.7%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 404.16; retenciono vreme: 2.02 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 404.14; retenciono vreme: 1.23 min.
PRIMER 246
8-[(2S,5R)-2,5-dimetil-4-[(2,4,6-trifluorofenil)metil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0990]
[0991] U smešu 2-(bromometil)-1,3,5-trifluorobenzena (0.015 mL, 0.114 mmol) i 8-(2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA so (170 mg, 14.5%mas, 0.06 mmol) u acetonitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.063 mL, 0.360 mmol). Smeša je mešana na 55 °C tokom 2 sata. LCMS je pokazala potpunu konverziju u proizvod. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 32% B, 32-72% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos proizvoda bio je 24.3 mg. Izračunata molarna masa 441.458. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 nun x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 442.13; retenciono vreme: 1.22 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 442.12; retenciono vreme: 2.24 min.
PRIMER 247
8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(4-metilfenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0992]
[0993] U smešu 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA so (68.6 mg, 60 %wt, 0.1 mmol), (cijanometil)trimetilfosfonijum jodida (48.6 mg, 0.200 mmol) i (4-hlorofenil)(p-tolil)metanola (28.5 mg, 0.120 mmol) u acetonitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.105 mL, 0.600 mmol). Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom 2 sata, i dodati su dodatni (cijanometil)trimetilfosfonijum jodid (48.6 mg, 0.200 mmol), (4-hlorofenil)(p-tolil)metanol (28.5 mg, 0.120 mmol) i Hunig-ova baza (0.058 mL, 0.300 mmol). Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom još 2 sata. Sirova reakciona smeša je injektirana direktno na 12g Si-RediSep Rf tokom fleš hromatografije sa 20-100 % etil acetata u heksanima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene vakuumom. Dobijeni materijal je dalje prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 51% B, 51-91% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25°C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos diastereomernog proizvoda bio je 23.6 mg.
[0994] Diastereomerni proizvod je razdvojen u dva diastereomera korišćenjem SFC-hiralne hromatografije pod sledećim uslovima: kolona: Chiral AD, 30 x 250 mm, 5 mikrona čestice; mobilna faza: 75% CO2/25% IPA m/0.1%DEA; protok: 100 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Primer 249 je sakupljen kao 1. pik eluenta, >95% de. Izračunata molarna masa 512.05. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 97.2 %; uočena masa: 512.1; retenciono vreme: 2.67 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 98.3 %; uočena masa: 512.44; retenciono vreme: 1.91 min.
INTERMEDIJER 180
(3-fluorofenil)(4-fluorofenil)metanol
[0995]
[0996] (3-Fluorofenil)(4-fluorofenil)metanol je pripremljen u skladu sa opštim procesom korišćenim da se pripremi intermedijer 153, (4-hlorofenil)(3-fluoropiridin-2-il) metanol. NMR analiza je pokazala da je ovaj materijal čistoće > 95%.<1>H NMR (500 MHz, HLOROFORM-d) δ 7.40-7.30 (m, 3H), 7.18-7.10 (m, 2H), 7.09-7.02 (m, 2H), 7.02-6.95 (m, 1H), 5.84 (d, J=3.4 Hz, 1H).
PRIMER 248
8-[(2S,5R)-4-[(3-fluorofenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[0997]
[0998] U smešu 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA (68.6 mg, 60 %wt, 0.1 mmol), (cijanometil)trimetilfosfonijum jodida (48.6 mg, 0.200 mmol) i (3-fluorofenil) (4-fluorofenil)metanola (26.4 mg, 0.120 mmol) u acetonitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.105 mL, 0.600 mmol). Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom 2 sata. Dodati su dodatni (cijanometil)trimetilfosfonijum jodid (48.6 mg, 0.200 mmol), (3-fluorofenil)(4-fluorofenil)metanol (26.4 mg, 0.120 mmol) i Hunig-ova baza (0.058 mL, 0.300 mmol). Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom još 2 sata. Sirova reakciona smeša je injektirana direktno na 12g Si-RediSep Rf tokom fleš hromatografije sa 20-100 % etil acetata u heksanima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene vakuumom. Dobijeni materijal je dalje prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 41% B, 41-81% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos diastereomernog proizvoda bio je 20.9 mg.
[0999] Primer 248 je razdvojen u dva diastereomera korišćenjem SFC-hiralne hromatografije pod sledećim uslovima: kolona: Chiral AD, 30 x 250 mm, 5 mikrona čestice; mobilna faza: 80 % CO2/ 20 % IPA mas/0.1% DEA; protok: 100 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Primer 250 je sakupljen kao 2. pik eluenta, >90 % de. Izračunata molarna masa 499.566. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm. 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 96.3 %; uočena masa: 500.12; retenciono vreme: 2.40 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 98.1 %; uočena masa: 500.37; retenciono vreme: 1.86 min.
PRIMER 249
8-[(2S,5R)-4-[(3-fluorofenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1000]
[1001] Primer 249 je pripremljen i odvojeni u skladu sa opštom procedurom korišćenom da se pripremi primer 248. Primer 249 je sakupljen kao 1. pik eluenta, >95% de. Izračunata molarna masa 499.566. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0-100 % B tokom 3 minuta, zatim a 0.75 minute hold at 100 % B; protok: 1.0 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 96.3 %; uočena masa: 500.12; retenciono vreme: 2.40 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0-100 % B tokom 3 minuta, zatim a 0.75 minute hold at 100 % B; protok: 1.0 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 97.0 %; uočena masa: 500.37; retenciono vreme: 1.87 min.
PRIMER 250
8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(4-metilfenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1002]
[1003] Primer 250 je pripremljen i odvojen u skladu sa opštom procedurom korišćenom da se pripremi primer 247. Primer 250 je sakupljen kao 2. pik eluenta, >90 % de. Izračunata molarna masa 512.05. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Čistoća: 96.4 %; uočena masa: 512.01; retenciono vreme: 2.67 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 97.4 %; uočena masa: 512.22; retenciono vreme: 1.89 min.
INTERMEDIJER 181
(4-fluorofenil)(p-tolil)metanol
[1004]
[1005] (4-Fluorofenil)(p-tolil)metanol je pripremljen u skladu sa opštim procesom korišćenim da se pripremi intermedijer 153, (4-hlorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metanol.<1>H NMR(500 MHz, HLOROFORM-d) δ 7.40-7.33 (m, 2H), 7.26 (d, J=8.1 Hz, 2H), 7.17 (d, J=7.8 Hz, 2H), 7.06-7.00 (m, 2H), 5.83 (d, J=1.8 Hz, 1H), 2.36 (s, 3H).
PRIMER 251
8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(4-metilfenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1006]
[1007] U smešu 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA (68.6 mg, 60 % mas, 0.1 mmol), (cijanometil)trimetilfosfonijum jodida (48.6 mg, 0.200 mmol) i (4-fluorofenil)(p-tolil)metanola (26.0 mg, 0.120 mmol) u acetonitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.105 mL, 0.600 mmol). Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom 2 sata, praćeno drugim dodavanjem (cijanometil)trimetilfosfonijum jodida (48.6 mg, 0.200 mmol), (4-fluorofenil)(p-tolil)metanola (26.0 mg, 0.120 mmol) i Hunigove baze (0.058 mL, 0.300 mmol). Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom još 2 sata. Sirova reakciona smeša je injektirana direktno na 12g Si-RediSep Rf tokom fleš hromatografije sa 20-100 % etil acetata u heksanima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene vakuumom. Dobijeni materijal je dalje prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 20 % B, 20-60 % B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos diastereomernog proizvoda TFA soli bio je 47.1 mg.
[1008] Diastereomerni proizvod je razdvojen u dva diastereomera korišćenjem SFC-hiralne hromatografije pod sledećim uslovima: kolona: Chiral AD, 30 x 250 mm, 5 mikrona čestice; mobilna faza: 80 % CO2/ 20 % IPA w/0.1%DEA; protok: 100 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Naslovno jedinjenje je sakupljeno kao 2. pik eluenta, >91% de. Izračunata molarna masa 495.602. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 97.6 %; uočena masa: 496.26; retenciono vreme: 2.52 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 98.2 %; uočena masa: 496.28; retenciono vreme: 1.73 min.
PRIMER 252
8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(4-metilfenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1009]
[1010] Primer 252 je pripremljen i odvojen u skladu sa opštom procedurom korišćenom da se pripremi primer 251. Primer 252 je sakupljen kao 1. pik eluenta, >95% de. Izračunata molarna masa 495.602. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 97.4 %; uočena masa: 496.14; retenciono vreme: 2.52 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 97.0 %; uočena masa: 496.3; retenciono vreme: 1.71 min.
PRIMER 253
8-[(2S,5R)-4-[(4-cijano-2-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1011]
[1012] U smešu 4-(bromometil)-3-fluorobenzonitrila (16.05 mg, 0.075 mmol) i 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA (142 mg, 14.5%mas, 0.05 mmol) u acetonitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.052 mL, 0.300 mmol). Smeša je mešana na 55 °C tokom 2 sata. LCMS je pokazala potpunu konverziju u proizvod. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 28% B, 28-68% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos proizvoda bio je 18.0 mg. Izračunata molarna masa 430.487. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 99.4 %; uočena masa: 431.13; retenciono vreme: 2.12 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 99.1 %; uočena masa: 431.12; retenciono vreme: 1.14 min.
PRIMER 254
8-[(2S,5R)-4-{[2-fluoro-6-(trifluorometil)fenil]metil}-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1013]
[1014] U smešu 2-fluoro-6-(trifluorometil)benzil bromida (25.7 mg, 0.100 mmol) i 5-metil-6-okso-8-(pipcrazin-1 -il)-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril, TFA (34.0 mg, 60 %mas, 0.05 mmol) u acetonitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.052 mL, 0.300 mmol). Smeša je mešana na 55 °C tokom 2 sata. LCMS je pokazao potpunu konverziju u proizvod. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 40 % B, 40-80 % B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 4 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos proizvoda bio je 23.4 mg. Izračunata molarna masa 473.476. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 474.11; retenciono vreme: 1.31 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 474.11; retenciono vreme: 2.44 min.
PRIMER 255
8-[(2S,5R)-4-[(2-fluoro-6-metilfenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1015]
[1016] U smešu 2-(bromometil)-1-fluoro-3-metilbenzena (20.31 mg, 0.100 mmol) i 5-metil-6-okso-8-(piperazin-1-il)-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril, TFA (34.0 mg, 60 %mas, 0.05 mmol) u acetonitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.052 mL, 0.300 mmol). Smeša je mešana na 55 °C tokom 2 sata. LCMS je pokazala potpunu konverziju u proizvod. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 39% B, 39-79% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 4 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos proizvoda bio je 16.0 mg. Izračunata molarna masa 419.504. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 97.6 %; uočena masa: 420.14; retenciono vreme: 1.19 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 420.14; retenciono vreme: 2.39 min.
PRIMER 256
8-[(2S,5R)-4-[1-(2,6-difluorofenil)etil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1017]
[1018] U smešu 2-(1-bromoetil)-1,3-difluorobenzena (15.12 mg, 0.065 mmol) i 5-metil-6-okso-8-(piperazin-1-il)-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril, TFA (34.0 mg, 60 %mas, 0.05 mmol) u acetonitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.052 mL, 0.300 mmol). Smeša je mešana na 55 °C tokom 2 sata. LCMS je pokazala potpunu konverziju u proizvod. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 37% B, 37-77% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos proizvoda bio je 12.1 mg. Izračunata molarna masa 437.495. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 438.14; retenciono vreme: 2.36 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 438.14; retenciono vreme: 1.2 min.
PRIMER 257
8-[(2S,5R)-4-[bis(3-hlorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1019]
[1020] U smešu 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA (48.0 mg, 60 %mas, 0.07 mmol), (cijanometil)trimetilfosfonijum jodida (68.0 mg, 0.280 mmol) i bis(3-hlorofenil)metanola (53.2 mg, 0.210 mmol) u propannitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.122 mL, 0.700 mmol). Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom 2 sata. Zatim, dodatno su dodati (cijanometil)trimetilfosfonijum jodid (42.5 mg, 0.125 mmol), bis(3-hlorofenil)metanol (53.2 mg, 0.210 mmol) i Hunig-ova baza (0.043 mL, 0.245 mmol). Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom još 2 sata. Sirova reakciona smeša je injektirana direktno na 12 g Si-RediSep Rf tokom fleš hromatografije sa 20-100 % etil acetata u heksanima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene vakuumom. Dobijeni materijal je dalje prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 50 % B, 50-90 % B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos proizvoda bio je 6.6 mg. Izračunata molarna masa 532.47. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 532.09; retenciono vreme: 2.25 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 532.1; retenciono vreme: 2.77 min.
PRIMER 258
8-[(2S,5R)-4-[bis(2-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1021]
[1022] U smešu 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA (48.0 mg, 60 %mas, 0.07 mmol), (cijanometil)trimetilfosfonijum jodid (68.0 mg, 0.280 mmol) i bis(2-fluorofenil)metanol (46.2 mg, 0.210 mmol) u propannitrilu (0.3 mL) dodat je Hunig-ova baza (0.122 mL, 0.700 mmol). Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom 2 sata. Zatim, additional (cijanometil)trimetilfosfonijum jodid (42.5 mg, 0.125 mmol), bis(2-fluorofenil)metanol (46.2 mg, 0.210 mmol) i Hunig-ova baza (0.043 mL, 0.245 mmol) dodati su. Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom another 2 sata. Sirova reakciona smeša je injektirana direktno on 12g Si-RediSep Rf tokom fleš hromatografije sa 20-100 % etil acetata u heksanima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene vakuumom. Dobijeni materijal je dalje prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 42% B, 42-82% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 4 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos proizvoda bio je 6.3 mg. Izračunata molarna masa 499.566. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 500.15; retenciono vreme: 1.95 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 500.16; retenciono vreme: 2.52 min.
PRIMER 259
8-[(2S,5R)-4-[(2-hlorofenil)(fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1023]
[1024] U smešu 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA (48.0 mg, 60 %mas, 0.07 mmol), (cijanometil)trimetilfosfonijum jodid (68.0 mg, 0.280 mmol) i (2-hlorofenil)(fenil)metanol (45.9 mg, 0.210 mmol) u propannitrilu (0.3 mL) dodat je Hunig-ova baza (0.122 mL, 0.700 mmol). Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom 2 sata. Zatim, dodato je još (cijanometil)trimetilfosfonijum jodida (42.5 mg, 0.125 mmol), (2-hlorofenil)(fenil)metanola (45.9 mg, 0.210 mmol) i Hunig-ove baze (0.043 mL, 0.245 mmol). Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom još 2 sata. Sirova reakciona smeša je injektirana direktno na 12g Si-RediSep Rf tokom fleš hromatografije sa 20-100 % etil acetata u heksanima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene vakuumom. Dobijeni materijal je dalje prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 47% B, 47-87% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos diastereomernog proizvoda bio je 7.8 mg. Izračunata molarna masa 498.03. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 498.14; retenciono vreme: 1.93 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 498.11; retenciono vreme: 2.66 min.
PRIMER 260
8-[(2S,5R)-4-[(2-hloro-6-cijanofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1025]
[1026] U smešu 2-(bromometil)-3-hlorobenzonitrila (23.05 mg, 0.100 mmol) i 5-metil-6-okso-8-(piperazin-1-il)-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril, TFA (34.0 mg, 60 %mas, 0.05 mmol) u acetonitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.052 mL, 0.300 mmol). Smeša je mešana na 55 °C tokom 2 sata. LCMS je pokazao potpunu konverziju u proizvod. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 34% B, 34-74% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 4 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos proizvoda bio je 16.4 mg. Izračunata molarna masa 446.94. Dva analitička LC/MS injektiranja su korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0-100 % B tokom 3 minuta, zatim a 0.75 minute hold at 100 % B; protok: 1.0 mL/min; detekcija: UV na 220 nm. Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 447.1; retenciono vreme: 2.21 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7-µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0-100 % B tokom 3 minuta, zatim zadržavanje 0.75 minuta pri 100 % B; protok: 1.0 mL/min; detekcija: UV na 220 nm. Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 447.1; retenciono vreme: 1.34 min.
PRIMER 261
8-[(2S,5R)-4-[(2-hloro-6-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1027]
[1028] U smešu 2-(bromometil)-1-hloro-3-fluorobenzena (22.35 mg, 0.100 mmol) i 5-metil-6-okso-8-(piperazin-1-il)-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril, TFA (34.0 mg, 60 %mas, 0.05 mmol) u acetonitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.052 mL, 0.300 mmol). Smeša je mešana na 55 °C tokom 2 sata. LCMS je pokazao potpunu konverziju u proizvod. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 39% B, 39-79% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 4 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos proizvoda bio je 15.8 mg. Izračunata molarna masa 439.92. Dva analitička LC/MS injektiranja su korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0-100 % B tokom 3 minuta, zatim zadržavanje 0.75 minuta pri 100 % B; protok: 1.0 mL/min; detekcija: UV na 220 nm. Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 440.1; retenciono vreme: 2.38 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 Acetonitril:voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0-100 % B tokom 3 minuta, zatim zadržavanje 0.75 minuta pri 100 % B; protok: 1.0 mL/min; detekcija: UV na 220 nm. Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 440.1; retenciono vreme: 1.18 min.
PRIMER 262
8-[(2S,5R)-4-[(2,5-difluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1029]
[1030] U smešu 2-(bromometil)-1,4-difluorobenzena (20.70 mg, 0.100 mmol) i 5-metil-6-okso-8-(piperazin-1-il)-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril, TFA (34.0 mg, 60 %mas, 0.05 mmol) u acetonitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.052 mL, 0.300 mmol). Smeša je mešana na 55 °C tokom 2 sata. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 33% B, 33-73% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 4 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos proizvoda bio je 22.5 mg. Izračunata molarna masa 423.468. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 424.1; retenciono vreme: 2.24 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 424.11; retenciono vreme: 1.15 min.
PRIMER 263
8-[(2S,SR)-4-[(2,6-dihlorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1031]
[1032] U smešu 2,6-dihlorobenzil bromida (23.99 mg, 0.100 mmol) i 5-metil-6-okso-8-(piperazin-1-il)-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril, TFA (34.0 mg, 60 %mas, 0.05 mmol) u acetonitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.052 mL. 0.300 mmol). Smeša je mešana na 55 °C tokom 2 sata. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 44% B, 44-84% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Izračunata molarna masa 456.37. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0 1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 456.04; retenciono vreme: 1.26 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 456.03; retenciono vreme: 2.56 min.
PRIMER 264
8-[(2S,5R)-4-benzil-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1034] U smešu (bromometil)benzena (17.10 mg, 0.100 mmol) i 5-metil-6-okso-8-(piperazin-1-il)-5,6-dihidro-1.5-naftiridin-2,7-dikarbonitril, TFA (34.0 mg, 60 %mas, 0.05 mmol) u acetonitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.052 mL, 0.300 mmol). Smeša je mešana na 55 °C tokom 2 sata. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 28% B, 28-68% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 4 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos proizvoda bio je 16.5 mg. Izračunata molarna masa 387.487. Dva analitička LC/MS injektiranja su korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0-100 % B tokom 3 minuta, zatim zadržavanje 0.75 minuta pri 100 % B; protok: 1.0 mL/min; detekcija: UV na 220 nm. Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 388.1; retenciono vreme: 2.16 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0-100 % B tokom 3 minuta, zatim zadržavanje 0.75 minuta pri 100 % B; protok: 1.0 mL/min; detekcija: UV na 220 nm. Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 388.1; retenciono vreme: 1.14 min.
PRIMER 265
8-[(2S,5R)-4-[(2,6-dimetilfenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1035]
[1036] U smešu 2-(bromometil)-1,3-dimetilbenzena (19.91 mg, 0.100 mmol) i 5-metil-6-okso-8-(piperazin-1-il)-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril, TFA (34.0 mg, 60 %mas, 0.05 mmol) u acetonitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.052 mL, 0.300 mmol). Smeša je mešana na 55 °C tokom 2 sata. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 43% B, 43-83% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos proizvoda bio je 18.1 mg. Izračunata molarna masa 415.541. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 416.16; retenciono vreme: 1.26 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 416.15; retenciono vreme: 2.53 min.
PRIMER 266
8-[(2S,5R)-4-[(2-hloro-3,6-difluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1037]
[1038] U smešu 2-hloro-3,6-difluorobenzil bromida (24.15 mg, 0.100 mmol) i 5-metil-6-okso-8-(piperazin-1 -il)-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril, TFA (34.0 mg, 60 %mas, 0.05 mmol) u acetonitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.052 mL, 0.300 mmol). Smeša je mešana na 55 °C tokom 2 sata. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 38% B, 38-78% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 4 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos proizvoda bio je 22.2 mg. Izračunata molarna masa 457.91. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 458.06; retenciono vreme: 2.38 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 458.06; retenciono vreme: 1.23 min.
PRIMER 267
8-[(2S,5R)-4-[(4-cijano-2,6-difluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1039]
[1040] U smešu 4-(bromometil)-3,5-difluorobenzonitrila (23.20 mg. 0.100 mmol) i 5-metil-6-okso-8-(piperazin-1-il)-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril, TFA (34.0 mg, 60 %mas, 0.05 mmol) u acetonitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.052 mL, 0.300 mmol). Smeša je mešana na 55 °C tokom 2 sata. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 25% B, 25-65% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 4 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos proizvoda bio je 16.8 mg. Izračunata molarna masa 448.478. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 449.14; retenciono vreme: 1.12 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 449.12; retenciono vreme: 2.08 min.
PRIMER 268
8-[(2S,5R)-4-[(4-hloro-2,6-difluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1041]
[1042] U smešu 4-hloro-2,6-difluorobenzil bromida (24.15 mg, 0.100 mmol) i 5-metil-6-okso-8-(piperazin-1 -il)-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril, TFA (34.0 mg, 60 %mas, 0.05 mmol) u acetonitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.052 mL, 0.300 mmol). Smeša je mešana na 55 °C tokom 2 sata. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 40 % B, 40-80 % B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 4 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos proizvoda bio je 18.5 mg. Izračunata molarna masa 457.91. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm x 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 458.05; retenciono vreme: 2.43 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 458.07; retenciono vreme: 1.25 min.
PRIMER 269
8-[(2S,5R)-4-[(2-cijano-6-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1043]
[1044] U smešu 2-(bromometil)-3-fluorobenzonitrila (21.40 mg, 0.100 mmol) i 5-metil-6-okso-8-(piperazin-1-il)-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril, TFA (34.0 mg, 60 %mas, 0.05 mmol) u acetonitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.052 mL, 0.300 mmol). Smeša je mešana na 55 °C tokom 2 sata. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 24% B, 24-64% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 4 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos proizvoda bio je 19.6 mg.
Izračunata molarna masa 430.487. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 431.12; retenciono vreme: 1.14 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 431.1; retenciono vreme: 2.07 min.
PRIMER 270
8-[(2S,5R)-4-[bis(3-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1045]
[1046] U smešu 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA (68.6 mg, 60 %mas, 0.1 mmol), bis(3-fluorofenil)metanola (66.1 mg, 0.300 mmol) i (cijanometil)trimetilfosfonijum jodida (146.0 mg, 0.6 mmol) u propannitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.175 mL, 1.000 mmol). Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom 5 sati. Sirova reakciona smeša je injektirana direktno na 12 g Si-RediSep Rf tokom fleš hromatografije sa 20-100 % etil acetata u heksanima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene vakuumom. Dobijeni materijal je dalje prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 43% B.43-83% B tokom 22 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos proizvoda bio je 11.6 mg. Izračunata molarna masa 499.566. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 92.0 %; uočena masa: 500.18; retenciono vreme: 1.93 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 98.9 %; uočena masa: 500.15; retenciono vreme: 2.6 min.
PRIMER 271
8-[(2S,5R)-4-[(2,6-difluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1047]
[1048] U smešu 2-(bromometil)-1,3-difluorobenzena (20.70 mg, 0.100 mmol) i 5-metil-6-okso-8-(piperazin-1-il)-S,b-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril, TFA (34.0 mg, 60 %mas, 0.05 mmol) u acetonitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.052 mL, 0.300 mmol). Smeša je mešana na 55 °C tokom 2 sata. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 34% B, 34-74% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 4 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos proizvoda bio je 17.2 mg. Izračunata molarna masa 423.468. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 424.11; retenciono vreme: 2.26 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 424.12; retenciono vreme: 1.11 min.
INTERMEDIJER 182
(2,6-difluorofenil)(fenil)metanol
[1049]
[1050] (2,6-Difluorofenil)(fenil)metanol je pripremljen u skladu sa opštim procesom korišćenim da se pripremi intermedijer 153, (4-hlorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metanol.<1>H NMR (500 MHz, HLOROFORM-d) δ 7.45-7.40 (m, 2H), 7.40-7.35 (m, 2H), 7.34-7.22 (m, 2H, preklapanje sa rezidualnim hloroformom), 6.98-6.88 (m, 2H), 6.27 (d, J=9.0 Hz, 1H).
PRIMER 272
8-[(2S,5R)-4-[(2,6-difluorofenil)(fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1051]
[1052] U smešu (2,6-difluorofenil)(fenil)metanola (66.1 mg, 0.300 mmol), (cijanometil)trimetilfosfonijum jodida (97.0 mg, 0.4 mmol) i 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA (68.6 mg, 60 %mas, 0.1 mmol) u propannitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.175 mL, 1.000 mmol). Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom 5 sati. U gore navedenu reakcionu smešu dodato je još (cijanometil)trimetilfosfonijum jodida (97.0 mg, 0.4 mmol), (2,6-difluorofenil)(fenil)metanola (66.1 mg, 0.300 mmol) i Hunig-ove baze (0.14 mL, 0.8 mmol). Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom još 2 sata. Sirova reakciona smeša je injektirana direktno na 12 g Si-RediSep Rf tokom fleš hromatografije sa 20-100 % etil acetata u heksanima. Frakcije koje sadrže smešu diastereomernih proizvoda su kombinovane i osušene vakuumom. Dobijeni materijal je dalje prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 28% B, 28-68% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 4 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Dva diastereomera su odvojena pod gore navedenim uslovima. Frakcije koje sadrže 2. pik eluenta su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos proizvoda kao TFA soli bi je 6.0 mg. Izračunata molarna masa 499.566. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 99.1 %; uočena masa: 500.16; retenciono vreme: 2 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 99.1 %; uočena masa: 500.16; retenciono vreme: 2.64 min.
PRIMER 273
8-[(2S,SR)-4-[(2,6-difluorofenil)(fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA
[1053]
[1054] Primer 273 je pripremljen i odvojen u skladu sa opštom procedurom korišćenom da se pripremi primer 272. Primer 273 je sakupljen kao 1. pik eluenta. Prinos proizvoda kao TFA soli bio je 7.7 mg. Izračunata molarna masa 499.566. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 98.9 %; uočena masa: 500.14; retenciono vreme: 2.63 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 99.1 %; uočena masa: 500.15; retenciono vreme: 1.72 min.
INTERMEDIJER 183
(2,6-difluorofenil)(4-fluorofenil)metanol
[1055]
[1056] (2,6-Difluorofenil)(4-fluorofenil)metanol je pripremljen u skladu sa opštim procesom korišćenim da se pripremi intermedijer 153, (4-hlorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metanol.<1>H NMR (500 MHz, HLOROFORM-d) δ 7.39 (dd, J=8.5, 5.4 Hz, 2H), 7.33-7.23 (m, 2H), 7.11-7.01 (m, 2H), 6.99-6.89 (m, 2H), 6.24 (d, J=8.9 Hz, 1H).
PRIMER 274
8-[(2S,SR)-4-[(2,6-difluorofenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1057]
[1058] U smešu (2,6-difluorofenil)(4-fluorofenil)metanola (71.5 mg, 0.300 mmol), (cijanometil)trimetilfosfonijum jodida (97.0 mg, 0.4 mmol) i 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA (68.6 mg, 60 %mas, 0.1 mmol) u propannitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.175 mL, 1.000 mmol). Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom 5 sati. Zatim, dodato je još (cijanometil)trimetilfosfonijum jodida (97.0 mg, 0.4 mmol), (2,6-difluorofenil)(4-fluorofenil)metanol a(71.5 mg, 0.300 mmol) i Hunig-ove baze (0.14 mL, 0.8 mmol). Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom još 2 sata. Sirova reakciona smeša je injektirana direktno na 12 g Si-RediSep Rf tokom fleš hromatografije sa 20-100 % etil acetata u heksanima. Frakcije koje sadrže smešu diastereomernih proizvoda su kombinovane i osušene vakuumom. Dobijeni materijal je dalje prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 34% B, 34-74% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 4 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Dva diastereomera su odvojene pod uslovima navedenim iznad. Frakcije koje sadrže 2. pik eluenta su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos proizvoda kao TFA soli bio je 9.2 mg. Izračunata molarna masa 517.556. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 99.1 %; uočena masa: 518.17; retenciono vreme: 2.15 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 99.0 %; uočena masa: 518.16; retenciono vreme: 2.65 min.
PRIMER 275
8-[(2S,SR)-4-[(2,6-difluorofenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftindin-2-karbonitril
[1059]
[1060] Primer 275 je pripremljen i odvojen u skladu sa opštom procedurom korišćenom da se pripremi primer 274. Primer 275 je sakupljen kao 1. pik eluenta. Prinos proizvoda kao TFA soli bio je 10.4 mg. Izračunata molarna masa 517.556. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 97.4 %; uočena masa: 518.16; retenciono vreme: 1.85 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 97.3 %; uočena masa: 518.16; retenciono vreme: 2.64 min.
INTERMEDIJER 184
(2,3-difluorofenil)(fenil)metanol
[1061]
[1062] (2,3-Difluorofenil)(fenil)metanol je pripremljen u skladu sa opštim procesom korišćenim da se pripremi intermedijer 153, (4-hlorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metanol.<1>H NMR (500 MHz, HLOROFORM-d) δ 7.45-7.42 (m, 2H), 7.40-7.35 (m, 2H), 7.35-7.29 (m, 2H), 7.16-7.03 (m, 2H), 6.19 (d, J=3.8 Hz, 1H).
PRIMER 276
8-[(2S,5R)-4-[(2,3-difluorofenil)(fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1063]
[1064] U smešu (2,3-difluorofenil)(fenil)metanola (66.1 mg, 0.300 mmol), (cijanometil)trimetilfosfonijum jodida (97.0 mg, 0.4 mmol) i 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA (68.6 mg, 60 %mas, 0.1 mmol) u propannitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.175 mL, 1.000 mmol). Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom 5 sati. u reakcionu smešu navedenu iznad dodato je još (cijanometil)trimetilfosfonijum jodida (97.0 mg, 0.4 mmol), (2,3-difluorofenil)(fenil)metanola (66.1 mg, 0.300 mmol) i Hunig-ove baze (0.14 mL, 0.8 mmol). Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom još 2 sata. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 28% B, 28-68% B tokom 24 minuta, zatim zadržavanje od 4 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos diastereomernog proizvoda bio je 14.2 mg. Izračunata molarna masa 499.566. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 96.7 %; uočena masa: 500.17; retenciono vreme: 2.65 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 93.7 %; uočena masa: 500.16; retenciono vreme: 1.97 min.
PRIMER 277
8-[(2S,SR)-4-[(2,4-difluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1065]
[1066] U smešu 1-(bromometil)-2,4-difluorobenzena (20.70 mg, 0.100 mmol) i 5-metil-6-okso-8-(piperazin-1 -il)-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril, TFA (34.0 mg, 60 %mas, 0.05 mmol) u acetonitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.052 mL, 0.300 mmol). Smeša je mešana na 55 °C tokom 2 sata. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 36% B, 36-76% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 4 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos proizvoda bio je 20.6 mg. Izračunata molarna masa 423.468. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 424.1; retenciono vreme: 2.19 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 424.11; retenciono vreme: 1.19 min.
PRIMER 278
8-[(2S,5R)-2,5-dimetil-4-{[6-(trifluorometil)piridin-2-il]metil}piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1067]
[1068] U smešu 2-(hlorometil)-6-(trifluorometil)piridina (19.56 mg, 0.100 mmol) i 5-metil-6-okso-8-(piperazin-1-il)-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril, TFA (34.0 mg, 60 %mas, 0.05 mmol) u acetonitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.052 mL, 0.300 mmol). Smeša je mešana na 55 °C tokom 2 sata. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 31% B, 31-71% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B: Protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos proizvoda bio je 20.1 mg.
Izračunata molarna masa 456.473. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 457.11; retenciono vreme: 1.24 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 457.12; retenciono vreme: 2.2 min.
PRIMER 279
8-[(2S,5R)-2,5-dimetil-4-{[2-metil-6-(trifluorometil)piridin-3-il]metil}piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1069]
[1070] U smešu 3-(hlorometil)-2-metil-6-(trifluorometil)piridina (20.96 mg, 0.100 mmol) i 5-metil-6-okso-8-(piperazin-1-il)-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril, TFA (34.0 mg, 60 %mas, 0.05 mmol) u acetonitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.052 mL, 0.300 mmol). Smeša je mešana na 55 °C tokom 2 sata. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 36% B, 36-76% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 4 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos proizvoda bio je 20.5 mg. Izračunata molarna masa 470.5. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 99.4 %; uočena masa: 471.13; retenciono vreme: 1.27 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 471.14; retenciono vreme: 2.32 min.
PRIMER 280
8-[(2S,SR)-4-{ [2-metoksi-6-(trifluorometil)piridin-4-il]metil }-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1071]
[1072] U smešu 4-(bromometil)-2-metoksi-6-(trifluorometil)piridina (27.0 mg, 0.100 mmol) i 5-metil-6-okso-8-(piperazin-1-il)-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril, TFA (34.0 mg, 60 %mas, 0.05 mmol) u acetonitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.052 mL, 0.300 mmol). Smeša je mešana na 55 °C tokom 2 sata. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 42% B, 42-82% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 4 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos proizvoda bio je 21.4 mg. Izračunata molarna masa 486.499. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 487.11; retenciono vreme: 2.5 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 487.13; retenciono vreme: 1.41 min.
PRIMER 281
8-[(2S,SR)-4-{ [2-hloro-6-(trifluorometil)piridin-3-il]metil }-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1073]
[1074] U smešu 2-hloro-3-(hlorometil)-6-(trifluorometil)piridina (23.00 mg, 0.100 mmol) i 5-metil-6-okso-8-(piperazin-1-il)-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril, TFA (34.0 mg, 60 %mas, 0.05 mmol) u acetonitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.052 mL, 0.300 mmol). Smeša je mešana na 55 °C tokom 2 sata. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 39% B, 39-79% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 4 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos proizvoda bio je 20.2 mg. Izračunata molarna masa 490.92. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 99.5 %; uočena masa: 491.07; retenciono vreme: 1.4 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 491.08; retenciono vreme: 2.43 min.
PRIMER 282
8-[(2S,5R)-4-[(3-hlorofenil)(fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1075]
[1076] U smešu (3-hlorofenil)(fenil)metanol (42.6 mg, 0.195 mmol), (cijanometil)trimetilfosfonijum jodida (63.2 mg, 0.26 mmol) i 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA (44.6 mg, 60 %mas, 0.065 mmol) u propannitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.114 mL, 0.65 mmol). Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom 5 sati. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 50 % B, 50-90 % B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 4 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos diastereomernog proizvoda bio je 7.4 mg. Izračunata molarna masa 498.03. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 99.4 %; uočena masa: 498.12; retenciono vreme: 2.74 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 98.1 %; uočena masa: 498.13; retenciono vreme: 1.83 min.
INTERMEDIJER 185
(2,4-difluorofenil)(fenil)metanol
[1078] (2,4-difluorofenil)(fenil)metanol je pripremljen u skladu sa opštim procesom korišćenim da se pripremi intermedijer 153, (4-hlorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metanol.<1>H NMR (500 MHz, HLOROFORM-d) δ 7.50 (td, J=8.4, 6.6 Hz, 1H), 7.44-7.35 (m, 4H), 7.34-7.29 (m, 1H), 6.94-6.87 (m, 1H), 6.83-6.77 (m, 1H), 6.13 (d, J=3.8 Hz, 1H).
PRIMER 283
8-[(2S,5R)-4-[(2,4-difluorofenil)(fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1079]
[1080] U smešu (2,4-difluorofenil)(fenil)metanola (66.1 mg, 0.300 mmol), (cijanometil)trimetilfosfonijum jodida (97.0 mg, 0.4 mmol) i 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA (68.6 mg, 60 %mas, 0.1 mmol) u propannitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.175 mL, 1.000 mmol). Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom 5 sati. U reakcionu smešu navedenu iznad dodato je još (cijanometil)trimetilfosfonijum jodida (97.0 mg, 0.4 mmol), (2,4-difluorofenil)(fenil)metanola (66.1 mg, 0.300 mmol) i Hunig-ove baze (0.14 mL, 0.8 mmol). Reakciona smeša je mešana na 100 °C tokom još 12 sati. Sirova reakciona smeša je injektirana direktno na 12 g Si-RediSep Rf tokom fleš hromatografije sa 20-100 % etil acetata u heksanima. Frakcije koje sadrže smešu diastereomernih proizvoda su kombinovane i osušene vakuumom. Dobijeni materijal je dalje prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 48% B, 48-88% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 4 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos diastereomernog proizvoda bila je 20.3 mg. Izračunata molarna masa 499.566. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 97.2 %; uočena masa: 500.16; retenciono vreme: 1.88 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 98.6%; uočena masa: 500.16; retenciono vreme: 2.67 min.
INTERMEDIJER 186
(2-fluorofenil)(4-fluorofenil)metanol
[1081]
[1082] (2-fluorofenil)(4-fluorofenil)metanol je pripremljen u skladu sa opštim procesom korišćenim da se pripremi intermedijer 153, (4-hlorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metanol.<1>H NMR (500 MHz, HLOROFORM-d) δ 7.51 (td, J=7.6, 1.7 Hz, 1H), 7.39 (dd, J=8.6, 5.4 Hz, 2H), 7.32-7.26 (m, 1H), 7.18 (td, J=7.6, 1.1 Hz, 1H), 7.08-7.00 (m, 3H), 6.15 (d, J=3.8 Hz, 1H), 2.35 (d, J=4.0 Hz, 1H).
PRIMER 284
8-[(2S,5R)-4-[(2-fluorofenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1083]
[1084] U smešu (2-fluorofenil)(4-fluorofenil)metanola (49.5 mg, 0.225 mmol), (cijanometil)trimetilfosfonijum jodida (72.9 mg, 0.300 mmol) i 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA (51.4 mg, 60 %mas, 0.075 mmol) u propannitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.131 mL, 0.750 mmol). Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom 5 sati. Zatim, dodatni (cijanometil)trimetilfosfonijum jodid (72.9 mg, 0.300 mmol), (2-fluorofenil)(4-fluorofenil)metanol (49.5 mg, 0.225 mmol) i Hunig-ova baza (0.105 mL, 0.60 mmol) su dodati. Reakciona smeša je mešana na 100 °C tokom još 12 sati. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 44% B, 44-84% B tokom 22 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos diastereomernog proizvoda bio je 12.2 mg. Izračunata molarna masa 499.566. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm).
Rezultati injektiranja 1: čistoća: 98.6 %; uočena masa: 500.16; retenciono vreme: 1.83 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 99.0 %; uočena masa: 500.15; retenciono vreme: 2.64 min.
INTERMEDIJER 187
(2-fluorofenil)(fenil)metanol
[1085]
[1086] (2-Fluorofenil)(fenil)metanol je pripremljen u skladu sa opštim procesom korišćenim da se pripremi intermedijer 153, (4-hlorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metanol.<1>H NMR (500 MHz, HLOROFORM-d) δ 7.53 (td, J=7.6, 1.8 Hz, 1H), 7.43 (d, J=7.6, 2H), 7.40-7.33 (m, 2H), 7.32-7.23 (m, 3H), 7.18 (td, J=7.6, 1.1 Hz, 1H), 7.04 (ddd, J=10.5, 8.3, 1.1 Hz, 1H), 6.18 (d, J=4.1 Hz, 1H), 2.29 (dd, J=4.2, 0.8 Hz, 1H).
PRIMER 285
8-[(2S,5R)-4-[(2-fluorofenil)(fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1087]
[1088] U smešu (2-fluorofenil)(fenil)metanola (39.4 mg, 0.195 mmol), (cijanometil)trimetilfosfonijum jodida (63.2 mg, 0.26 mmol) i 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA (44.6 mg, 60 %mas, 0.065 mmol) u propannitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.114 mL, 0.65 mmol). Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom 5 sati. U reakcionu smešu navedenu iznad dodato je još (cijanometil)trimetilfosfonijum jodida (63.2 mg, 0.26 mmol), (2-fluorofenil)(fenil)metanola (39.4 mg, 0.195 mmol) i Hunig-ove baze (0.091 mL, 0.52 mmol). Reakciona smeša je mešana na 100 °C tokom još 12 sati. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 41% B, 41-81% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos diastereomernog proizvoda bio je 14.7 mg. Izračunata molarna masa 481.575. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 482.18; retenciono vreme: 2.63 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 98.0 %; uočena masa: 482.18; retenciono vreme: 1.73 min.
PRIMER 286
8-[(2S,5R)-4-[(2,3-difluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1089]
[1090] U smešu 1-(bromometil)-2,3-difluorobenzena (20.70 mg, 0.100 mmol) i 5-metil-6-okso-8-(piperazin-1-il)-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril, TFA (34.0 mg, 60 %mas, 0.05 mmol) u acetonitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.052 mL, 0.300 mmol). Smeša je mešana na 55 °C tokom 2 sata. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 36% B, 36-76% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 4 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos proizvoda bio je 18.6 mg. Izračunata molarna masa 423.468. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 424.1; retenciono vreme: 2.33 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 424.1; retenciono vreme: 1.16 min.
PRIMER 287
8-[(2S,5R)-4-[(2-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1091]
[1092] U smešu 1-(bromometil)-2-fluorobenzena (18.90 mg, 0.100 mmol) i 5-metil-6-okso-8-(piperazin-1-il)-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril, TFA (34.0 mg, 60 %mas, 0.05 mmol) u acetonitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.052 mL, 0.300 mmol). Smeša je mešana na 55 °C tokom 2 sata. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 29% B, 29-69% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 4 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos proizvoda bio je 20.2 mg. Izračunata molarna masa 405.477. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 406.14; retenciono vreme: 1.12 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 406.14; retenciono vreme: 2.3 min.
INTERMEDIJER 188
(3,5-difluorofenil)(fenil)metanol
[1093]
[1094] (3,5-difluorofenil)(fenil)metanol je pripremljen u skladu sa opštim procesom korišćenim da se pripremi intermedijer 153, (4-hlorofenil)(3-fluoropiridin-2-il) metanol.<1>H NMR (500 MHz, HLOROFORM-d) δ 7.43-7.31 (m, 5H), 6.98-6.90 (m, 2H), 6.71 (tt, J=8.9, 2.3 Hz, 1H), 5.80 (s, 1H).
PRIMER 288
8-((2S,5R)-4-[(3,5-difluorofenil)(fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1095]
[1096] U smešu (3,5-difluorofenil)(fenil)metanola (26.4 mg, 0.120 mmol), (cijanometil)trimetilfosfonijum jodida (48.6 mg, 0.2 mmol) i 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA (68.6 mg, 60 %mas, 0.1 mmol) u acetonitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.105 mL, 0.6 mmol). Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom 2 sata. u reakcionu smešu navedenu iznad dodato je još (cijanometil)trimetilfosfonijum jodida (194 mg, 0.8 mmol), (3,5-difluorofenil)(fenil)metanola (79.2 mg, 0.360 mmol) i Hunig-ove baze (0.21 mL, 1.2 mmol). Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom dodatnih 12 sati. Sirova reakciona smeša je injektirana direktno na 12 g Si-RediSep Rf tokom fleš hromatografije sa 20-100 % etil acetata u heksanima. Frakcije koje sadrže smešu diastereomernih proizvoda su kombinovane i osušene vakuumom. Dobijeni materijal je dalje prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 45% B, 45-95% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos diastereomernog proizvoda bio je 11.9 mg. Izračunata molarna masa 499.566. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje 0.75 min na 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 500.15, 500.15; retenciono vreme: 1.94, 1.99 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje 0.75 min na 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 500.18; retenciono vreme: 2.61 min.
INTERMEDIJER 189
(3,5-difluorofenil)(4-fluorofenil)metanol
[1097]
[1098] (3,5-difluorofenil)(4-fluorofenil)metanol je pripremljen u skladu sa opštim procesom korišćenim da se pripremi intermedijer 153, (4-hlorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metanol.<1>H NMR (500 MHz, HLOROFORM-d) δ 7.35-7.27 (m, 2H), 7.10-7.01 (m, 2H), 6.90 (dd, J=8.2, 1.8 Hz, 2H).6.72 (tt, J=8.8, 2.3 Hz, 1H).5.74 (s, 1H).
PRIMER 289
8-[(2S,5R)-4-[(3,5-difluorofenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1099]
[1100] U smešu (3,5-difluorofenil)(4-fluorofenil)metanola (28.6 mg, 0.120 mmol), (cijanometil)trimetilfosfonijum jodida (48.6 mg, 0.2 mmol) i 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA (68.6 mg, 60 %mas, 0.1 mmol) u acetonitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.105 mL, 0.6 mmol). Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom 2 sata. Zatim, još (cijanometil)trimetilfosfonijum jodida (194 mg, 0.8 mmol), (3,5-difluorofenil)(4-fluorofenil)metanola (85.8 mg, 0.360 mmol) i Hunig-ove baze (0.21 mL, 1.2 mmol) je dodato. Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom dodatnih 12 sati. Sirova reakciona smeša je injektirana direktno na 12 g Si-RediSep Rf tokom fleš hromatografije sa 20-100 % etil acetata u heksanima. Frakcije koje sadrže smešu diastereomernih proizvoda su kombinovane i osušene vakuumom. Dobijeni materijal je dalje prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 42% B, 42-82% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos diastereomernog proizvoda bio je 11.6 mg. Izračunata molarna masa 517.556. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje 0.75 min na 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 518.15; retenciono vreme: 2.61 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje 0.75 min na 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 518.12, 518.12; retenciono vreme: 2.08, 2.11 min.
PRIMER 290
8-[(2S,5R)-4-[(3,5-difluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1101]
[1102] U smešu 1-(bromometil)-3,5-difluorobenzena (34.9 mg, 0.160 mmol) i 5-metil-6-okso-8-(piperazin-1-il)-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril, TFA (55 mg, 60 %mas, 0.08 mmol) u acetonitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.084 mL, 0.480 mmol). Smeša je mešana na 55 °C tokom 1 sata. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 36% B, 36-76% B tokom 23 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos proizvoda bio je 28.0 mg. Izračunata molarna masa 423.468. Dva analitička LC/MS injektiranja su korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0-100 % B tokom 3 minuta, zatim zadržavanje 0.75 minuta pri 100 % B; protok: 1.0 mL/min; detekcija: UV na 220 nm. Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 424.1; retenciono vreme: 2.35 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 × 50 mm, 1.7-µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0-100 % B tokom 3 minuta, zatim zadržavanje 0.75 minuta pri 100 % B; protok: 1.0 mL/min; detekcija: UV na 220 nm. Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 424.1; retenciono vreme: 1.16 min.
PRIMER 291
8-[(2S,5R)-4-[(3,4-difluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1103]
[1104] U smešu 4-(bromometil)-1,2-difluorobenzena (34.9 mg, 0.160 mmol) i 5-metil-6-okso-8-(piperazin-1 -il)-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril, TFA (55 mg, 60 %mas, 0.08 mmol) u acetonitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.084 mL, 0.480 mmol). Smeša je mešana na 55 °C tokom 1 sata. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 35% B, 35-75% B tokom 23 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos proizvoda bio je 27.4 mg. Izračunata molarna masa 423.468. Dva analitička LC/MS injektiranja su korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 × 50 mm, 1.7-µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0-100 % B tokom 3 minuta, zatim zadržavanje 0.75 minuta pri 100 % B; protok: 1.0 mL/min; detekcija: UV na 220 nm. Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 424.1; retenciono vreme: 2.32 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0-100 % B tokom 3 minuta, zatim zadržavanje 0.75 minuta pri 100 % B; protok: 1.0 mL/min; detekcija: UV na 220 nm. Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 424.1; retenciono vreme: 1.18 min.
PRIMER 292
8-[(2S,5R)-4-[(3-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1105]
[1106] U smešu 1-(bromometil)-3-fluorobenzena (38.6 mg, 0.200 mmol) i 5-metil-6-okso-8-(piperazin-1-il)-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril, TFA (68.6 mg, 60 %mas, 0.1 mmol) u acetonitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.105 mL, 0.600 mmol). Smeša je mešana na 55 °C tokom 1 sata. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 32% B, 32-72% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos proizvoda bio je 37.4 mg. Izračunata molarna masa 405.477. Dva analitička LC/MS injektiranja su korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0-100 % B tokom 3 minuta, zatim zadržavanje 0.75 minuta pri 100 % B; protok: 1.0 mL/min; detekcija: UV na 220 nm. Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 406.2; retenciono vreme: 2.27 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0-100 % B tokom 3 minuta, zatim zadržavanje 0.75 minuta pri 100 % B; protok: 1.0 mL/min; detekcija: UV na 220 nm. Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 406.2; retenciono vreme: 1.14 min.
INTERMEDIJER 190
(3-fluorofenil)(4-fluorofenil)metanol
[1107]
[1108] (3-Fluorofenil)(4-fluorofenil)metanol je pripremljen u skladu sa opštim procesom korišćenim da se pripremi intermedijer 153, (4-hlorofenil)(3-fluoropiridin-2-il) metanol.<1>H NMR (500 MHz, HLOROFORM-d) δ 7.38-7.29 (m, 3H), 7.17-7.10 (m, 2H), 7.08-7.02 (m, 2H), 7.01-6.96 (m, 1H), 5.84 (d, J=34 Hz, 1H), 2.26 (d, J=3.5 Hz, 1H).
PRIMER 293
8-[(2S,SR)-4-[(3-fluorofenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1109]
[1110] U smešu (3-fluorofenil)(4-fluorofenil)metanola (26.4 mg, 0.120 mmol), (cijanometil)trimetilfosfonijum jodida (48.6 mg, 0.2 mmol) i 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA (68.6 mg, 60 %mas, 0.1 mmol) u acetonitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.105 mL, 0.6 mmol). Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom 2 sata. Zatim, još (cijanometil)trimetilfosfonijum jodida (194 mg, 0.8 mmol), (3-fluorofenil)(4-fluorofenil)metanola (79.2 mg, 0.360 mmol) i Hunig-ove baze (0.21 mL, 1.2 mmol) je dodato. Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom dodatnih 12 sati. Sirova reakciona smeša je injektirana direktno na 12 g Si-RediSep Rf tokom fleš hromatografije sa 20-100 % etil acetata u heksanima. Frakcije koje sadrže smešu diastereomernih proizvoda su kombinovane i osušene vakuumom. Dobijeni materijal je dalje prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 41% B, 41-81% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos diastereomernog proizvoda bio je 20.9 mg. Izračunata molarna masa 499.566. Dva analitička LC/MS injektiranja su korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0-100 % B tokom 3 minuta, zatim zadržavanje 0.75 minuta pri 100 % B; protok: 1.0 mL/min; detekcija: UV na 220 nm. Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 500.2; retenciono vreme: 2.57 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 × 50 mm, 1.7-µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0-100 % B tokom 3 minuta, zatim zadržavanje 0.75 minuta pri 100 % B; protok: 1.0 mL/min; detekcija: UV na 220 nm. Rezultati injektiranja 2: čistoća: 95.2 %; uočena masa: 500.2; retenciono vreme: 1.81 min.
INTERMEDIJER 191
(4-fluorofenil)(4-(trifluorometil)fenil)metanol
[1111]
[1112] (4-fluorofenil)(4-(trifluorometil)fenil)metanol je pripremljen u skladu sa opštim procesom korišćenim da se pripremi intermedijer 153, (4-hlorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metanol.<1>H NMR (500 MHz, HLOROFORM-d) δ 7.61 (d, J=8.1 Hz, 2H), 7.50 (d, J=8.5 Hz, 2H), 7.38-7.29 (m, 2H), 7.10-6.98 (m, 2H), 5.88 (s, 1H).
PRIMER 294
8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)[4-(trifluorometil)fenil]metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1113]
[1114] U smešu (4-fluorofenil)(4-(trifluorometil)fenil)metanola (32.4 mg, 0.120 mmol), (cijanometil)trimetilfosfonijum jodida (48.6 mg, 0.2 mmol) i 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA (68.6 mg, 60 %mas, 0.1 mmol) u acetonitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.105 mL, 0.6 mmol). Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom 2 sata. Zatim, još (cijanometil)trimetilfosfonijum jodida (194 mg, 0.8 mmol), (4-fluorofenil)(4-(trifluorometil)fenil)metanola (97.2 mg, 0.360 mmol) i Hunig-ove baze (0.21 mL, 1.2 mmol) je dodato. Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom još 12 sati. Sirova reakciona smeša je injektirana direktno na 12 g Si-RediSep Rf tokom fleš hromatografije sa 20-100 % etil acetata u heksanima. Frakcije koje sadrže smešu diastereomernih proizvoda su kombinovane i osušene vakuumom. Dobijeni materijal je dalje prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 46% B, 46-86% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos diastereomernog proizvoda bio je 16.8 mg. Izračunata molarna masa 549.574. Dva analitička LC/MS injektiranja su korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0-100 % B tokom 3 minuta, zatim zadržavanje 0.75 minuta pri 100 % B; protok: 1.0 mL/min; detekcija: UV na 220 nm. Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 550.2; retenciono vreme: 2.71 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0-100 % B tokom 3 minuta, zatim zadržavanje 0.75 minuta pri 100 % B; protok: 1.0 mL/min; detekcija: UV na 220 nm. Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 550.2; retenciono vreme: 2.10 min.
INTERMEDIJER 192
(4-fluorofenil)(p-tolil)metanol
[1115]
[1116] (4-Fluorofenil)(p-tolil)metanol je pripremljen u skladu sa opštim procesom korišćenim da se pripremi intermedijer 153, (4-hlorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metanol.<1>H NMR (500 MHz, HLOROFORM-d) δ 7.40-7.32 (m, 2H), 7.26 (d, J=8.1 Hz, 2H), 7.17 (d, J=7.8 Hz, 2H), 7.08-6.97 (m, 2H), 5.83 (d, J=1.8 Hz, 1H), 2.16 (d, J=3.2 Hz, 1H).
PRIMER 295
8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(4-metilfenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1117]
[1118] U smešu (4-fluorofenil)(p-tolil)metanola (26.0 mg, 0.120 mmol), (cijanometil)trimetilfosfonijum jodida (48.6 mg, 0.2 mmol) i 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA (68.6 mg, 60 %mas, 0.1 mmol) u acetonitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.105 mL, 0.6 mmol). Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom 2 sata. U reakcionu smešu navedenu iznad dodato je još (cijanometil)trimetilfosfonijum jodida (48.6 mg, 0.2 mmol), (4-fluorofenil)(p-tolil)metanola (13.0 mg, 0.060 mmol) i Hunig-ove baze (0.052 mL, 0.3 mmol). Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom dodatnih 12 sati. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 20 % B, 20-60 % B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos diastereomernog proizvoda kao TFA soli bio je 47.1 mg. Izračunata molarna masa 495.602. Dva analitička LC/MS injektiranja su korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0-100 % B tokom 3 minuta, zatim zadržavanje 0.75 minuta pri 100 % B; protok: 1.0 mL/min; detekcija: UV na 220 nm. Rezultati injektiranja 1: čistoća: 94.3 %; uočena masa: 496.2; retenciono vreme: 2.55 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 × 50 mm, 1.7-µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0-100 % B tokom 3 minuta, zatim zadržavanje 0.75 minuta pri 100 % B; protok: 1.0 mL/min; detekcija: UV na 220 nm. Rezultati injektiranja 2: čistoća: 95.6 %; uočena masa: 496.2; retenciono vreme: 1.75 min.
PRIMER 296
8-[(2S,5R)-4-[(3-fluorofenil)(fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1119]
[1120] U smešu (3-fluorofenil)(fenil)metanola (24.27 mg, 0.120 mmol), (cijanometil)trimetilfosfonijum jodida (48.6 mg, 0.2 mmol) i 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA (68.6 mg, 60 %mas, 0.1 mmol) u acetonitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.105 mL, 0.6 mmol). Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom 2 sata. U reakcionu smešu navedenu iznad dodat je još (cijanometil)trimetilfosfonijum jodida (48.6 mg, 0.2 mmol), (3-fluorofenil)(fenil)metanola (12.1 mg, 0.060 mmol) i Hunig-ove baze (0.052 mL, 0.3 mmol). Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom dodatnih 12 sati. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 42% B, 42-82% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos diastereomernog proizvoda bio je 15.9 mg. Izračunata molarna masa 481.575. Dva analitička LC/MS injektiranja su korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0-100 % B tokom 3 minuta, zatim zadržavanje 0.75 minuta pri 100 % B; protok: 1.0 mL/min; detekcija: UV na 220 nm. Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 482.2; retenciono vreme: 2.57 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0-100 % B tokom 3 minuta, zatim zadržavanje 0.75 minuta pri 100 % B; protok: 1.0 mL/min; detekcija: UV na 220 nm. Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 482.2; retenciono vreme: 1.68 min.
PRIMER 297
8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1121]
[1122] U smešu 1-(bromometil)-4-fluorobenzena (30.2 mg, 0.160 mmol) i 5-metil-6-okso-8-(piperazin-1-il)-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril, TFA (55 mg, 60 %mas, 0.08 mmol) u acetonitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.084 mL, 0.480 mmol). Smeša je mešana na 55 °C tokom 1 sata. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 35% B, 35-75% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 4 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos proizvoda bio je 28.4 mg. Izračunata molarna masa 405.477. Dva analitička LC/MS injektiranja su korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0-100 % B tokom 3 minuta, zatim zadržavanje 0.75 minuta pri 100 % B; protok: 1.0 mL/min; detekcija: UV na 220 nm. Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 406.1; retenciono vreme: 2.25 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0-100 % B tokom 3 minuta, zatim zadržavanje 0.75 minuta pri 100 % B; protok: 1.0 mL/min; detekcija: UV na 220 nm. Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 406.2; retenciono vreme: 1.13 min.
PRIMER 298
8-((2S,5R)-4-((4-hlorofenil)(4-cijanofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil -6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1123]
[1124] U smešu 4-((4-hlorofenil)(hidroksi)metil)benzonitrila (27.3 mg, 0.120 mmol), (cijanometil)trimetilfosfonijum jodida (48.6 mg, 0.2 mmol) i 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA (68.6 mg, 60 %mas, 0.1 mmol) u acetonitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.105 mL, 0.6 mmol). Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom 2 sata. Zatim, još (cijanometil)trimetilfosfonijum jodida (97.2 mg, 0.4 mmol), 4-((4-hlorofenil)(hidroksi)metil)benzonitrila (54.6 mg, 0.240 mmol) i Hunig-ove baze (0.105 mL, 0.6 mmol) je dodato. Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom dodatnih 12 sati. Sirova reakciona smeša je injektirana direktno na 12 g Si-RediSep Rf tokom fleš hromatografije sa 20-100 % etil acetata u heksanima. Frakcije koje sadrže smešu diastereomernih proizvoda su kombinovane i osušene vakuumom. Dobijeni materijal je dalje prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 40 % B, 40-80 % B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos diastereomernog proizvoda bio je 11.1 mg. Izračunata molarna masa 506.585. Dva analitička LC/MS injektiranja su korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 × 50 mm, 1.7-µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0-100 % B tokom 3 minuta, zatim zadržavanje 0.75 minuta pri 100 % B; protok: 1.0 mL/min; detekcija: UV na 220 nm. Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 507.2; retenciono vreme: 2.40 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0-100 % B tokom 3 minuta, zatim zadržavanje 0.75 minuta pri 100 % B; protok: 1.0 mL/min; detekcija: UV na 220 nm. Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 507.2; retenciono vreme: 1.86 min.
PRIMER 299
8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(4-metilfenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1125]
[1126] U smešu (4-hlorofenil)(p-tolil)metanola (28.5 mg, 0.120 mmol), (cijanometil)trimetilfosfonijum jodida (48.6 mg, 0.2 mmol) i 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA (68.6 mg, 60 %mas, 0.1 mmol) u acetonitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.105 mL, 0.6 mmol). Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom 2 sata. U reakcionu smešu navedenu iznad dodato je još (cijanometil)trimetilfosfonijum jodida (48.6 mg, 0.2 mmol), (4-hlorofenil)(p-tolil)metanola (28.5 mg, 0.120 mmol) i Hunig-ove baze (0.052 mL, 0.3 mmol). Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom dodatnih 12 sati. Sirova reakciona smeša je injektirana direktno na 12 g Si-RediSep Rf tokom fleš hromatografije sa 20-100 % etil acetata u heksanima. Frakcije koje sadrže smešu diastereomernih proizvoda su kombinovane i osušene vakuumom. Dobijeni materijal je dalje prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 51% B, 51-91% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos diastereomernog proizvoda bio je 23.6 mg. Izračunata molarna masa 512.05. Dva analitička LC/MS injektiranja su korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0-100 % B tokom 3 minuta, zatim zadržavanje 0.75 minuta pri 100 % B; protok: 1.0 mL/min; detekcija: UV na 220 nm. Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 512.2; retenciono vreme: 2.83 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 × 50 mm, 1.7-µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0-100 % B tokom 3 minuta, zatim zadržavanje 0.75 minuta pri 100 % B; protok: 1.0 mL/min; detekcija: UV na 220 nm. Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 512.2; retenciono vreme: 1.86 min.
INTERMEDIJER 193
(4-hlorofenil)(4-fluorofenil)metanol
[1127]
[1128] (4-Hlorofenil)(4-fluorofenil)metanol je pripremljen u skladu sa opštim procesom korišćenim da se pripremi intermedijer 153, (4-hlorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metanol.<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d) δ 7.40-7.29 (m, 6H), 7.09-6.98 (m, 2H), 5.82 (s, 1H), 2.23 (br d, J=2.5 Hz, 1H).
PRIMER 300
8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1129]
[1130] U smešu (4-hlorofenil)(4-fluorofenil)metanola (28.4 mg, 0.120 mmol), (cijanometil)trimetilfosfonijum jodida (48.6 mg, 0.2 mmol) i 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1 ,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA (68.6 mg, 60 %mas, 0.1 mmol) u acetonitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.105 mL, 0.6 mmol). Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom 2 sata. Zatim, još (cijanometil)trimetilfosfonijum jodida (48.6 mg, 0.2 mmol), (4-hlorofenil)(4-fluorofenil)metanola (28.4 mg, 0.120 mmol) i Hunig-ove baze (0.052 mL, 0.3 mmol) je dodato. Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom dodatnih 12 sati. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 45% B, 45-85% B tokom 27 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos diastereomernog proizvoda bio je 14.1 mg. Izračunata molarna masa 516.02. Dva analitička LC/MS injektiranja su korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0-100 % B tokom 3 minuta, zatim zadržavanje 0.75 minuta pri 100 % B; protok: 1.0 mL/min; detekcija: UV na 220 nm. Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 516.2; retenciono vreme: 2.72 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 × 50 mm, 1.7-µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0-100 % B tokom 3 minuta, zatim zadržavanje 0.75 minuta pri 100 % B; protok: 1.0 mL/min; detekcija: UV na 220 nm. Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 516.2; retenciono vreme: 1.90 min.
PRIMER 301
8-[(2S,5R)-4-[bis(4-metilfenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1131]
[1132] U smešu (cijanometil)trimetilfosfonijum jodida (46.2 mg, 0.19 mmol), di-ptolilmetanola (23.46 mg, 0.108 mmol), i 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA (72.4 mg, 54%mas, 0.095 mmol) u acetonitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.10 mL, 0.57 mmol). Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom 2 sata. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 55% B, 55-95% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 4 minuta pri 100 % B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos proizvoda bio je 23.4 mg. Izračunata molarna masa 491.639. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje 0.75 min na 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 492.21; retenciono vreme: 2.77 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje 0.75 min na 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 492.2; retenciono vreme: 1.71 min.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.15 (d, J = 8.5 Hz, 1 H), 8.04-8.09 (m, 1 H), 7.81 (s, 4 H), 7.57-7.63 (m, 2 H), 7.12-7.19 (m, 2 H), 6.00 (s, 1 H), 4.82 (s, 1 H), 4.52-4.63 (m, 1 H), 3.64-3.76 (m, 1 H), 3.51-3.58 (m, 4 H), 2.99-3.10 (m, 1 H), 2.86 (br d, J = 8.5 Hz, 1 H), 2.28-2.37 (m, 1 H), 1.31 (d, J = 6.5 Hz, 3 H), 1.07 (d, J = 6.5 Hz, 3 H).<13>C NMR (100.66 MHz, DMSO-d6) δ ppm 162.4, 160.9, 159.9, 153.5, 148.0, 138.7, 138.6, 135.0, 132.6, 129.3 (d, J = 8.0 Hz), 128.8 (d, J = 10.0 Hz), 124.0, 122.8, 118.6, 117.5, 115.6, 115.4, 109.8, 104.8, 69.0, 51.8, 49.4, 48.9, 47.2, 28.6, 13.4, 7.4.
PRIMER 302
8-((2S,5R)-4-((4-hlorofenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1133]
[1134] U smešu 1-(bromo(4-hlorofenil)metil)-4-fluorobenzena (359 mg, 1.2 mmol) i 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA (288 mg, 0.7 mmol) u acetonitrilu (4 mL) dodata je Hunig-ova baza (0.734 mL, 4.20 mmol). Reakcija je mešana na 55 °C tokom 16 sati. Sirova reakciona smeša je podeljena između DCM /NaHCO3(aq). Ostatak iz koncentrovanog organskog sloja je nanet na 40g-Si-RediSepRf tokom fleš hromatografije i eluiran sa 20-100% etil acetata u heksanima. Frakcije koje sadrže smešu diastereomernih proizvoda su kombinovane i osušene vakuumom. Dobijeni materijal je dalje prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 53% B, 53-93% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 4 minuta pri 100% B: Protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže diastereomerni proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije.
[1135] Osušeni proizvod je odvojen u dva diastereomera korišćenjem SFC-hiralne hromatografije pod sledećim uslovima: kolona: Chiral AD, 30 × 250 mm. 5 mikrona čestice; mobilna faza: 70% CO2/ 30% IPA w/0.1%DEA; protok: 100 mL/min; temperatura kolone: 25°C; talasna dužina detektora: 220nm. Naslovno jedinjenje je sakupljeno kao 1. pik eluenta, >95% de.
[1136] Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 516.18; retenciono vreme: 2.59 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 516.22; retenciono vreme: 2.07 min.
PRIMER 303
8-((2S,5R)-4-((4-hlorofenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1137]
[1138] Primer 303 je pripremljen i prečišćen u skladu sa opštim proceduromama za primer 302. Primer 303 je sakupljen kao 2. pik eluenta, >95% de.
[1139] Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 97.5 %; uočena masa: 516.22; retenciono vreme: 2.6 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 98.0 %; uočena masa: 515.91; retenciono vreme: 2.07 min.
PRIMER 304
8-((2S,5R)-4-((2-fluorofenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1140]
[1141] U smešu 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (97 mg, 0.3 mmol), (cijanometil) trimetilfosfonijum jodida (182 mg, 0.750 mmol) i (2-fluorofenil)(4-fluorofenil)metanola (92 mg, 0.420 mmol) u acetonitrilu (909 µL)) dodata je Hunig-ova baza (236 µL, 1.350 mmol). Reakciona smeša je mešana na mikrotalasnom sintesajzeru na 110 °C tokom 2 sata. U reakcionu smešu dodato je još (cijanometil) trimetilfosfonijum jodida (182 mg, 0.750 mmol), (2-fluorofenil)(4-fluorofenil)metanola (92 mg, 0.420 mmol) i Hunig-ove baze (0.184 mL, 1.050 mmol). Reakcija je mešana na 110 °C tokom još 2 sata. Sirova reakciona smeša je podeljena na DCM /NaHCO3(aq). Ostatak iz koncentrovanog organskog sloja je nanet na 24 g-Si-RediSep Rf tokom fleš hromatografije sa 20-100% etil acetata u heksanima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene vakuumom. Prinos diastereomernog proizvoda bio je 110 mg. Diastereomerni proizvod je razdvojen u dva diastereomera korišćenjem SFC-hiralne hromatografije pod sledećim uslovima: kolona: Chiralpak IC, 21 × 250 mm, 5 mikrona čestice; mobilna faza: 35%IPA / 65% CO2; Uslovi protoka: 45 mL/min, 150 Bar; temperatura kolone: 40 °C; talasna dužina detektora: 225 nm. Naslovno jedinjenje je sakupljeno kao 1. pik eluenta, >99.5% de. Prinos homohiralnog proizvoda je bio 46 mg.
[1142] Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 500.19; retenciono vreme: 2.43 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 95.2 %; uočena masa: 500.14; retenciono vreme: 1.88 min.
PRIMER 305
8-((2S,5R)-4-((2-fluorofenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1143]
[1144] Primer 305 je pripremljen i prečišćen u skladu sa opštim procedurama tokom pripremanja primera 304. Primer 305 je sakupljen kao 2. pik eluenta, 97.4% de. Prinos homohiralnog proizvoda bio je 39 mg.
[1145] Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 500.2; retenciono vreme: 2.41 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 95.2 %; uočena masa: 500.17; retenciono vreme: 1.92 min.
PRIMER 306
8-((2S,5R)-4-((4-cijanofenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1146]
[1147] U rastvor 4-((4-fluorofenil)(hidroksi)metil)benzonitrila (4.91 g, 21.18 mmol) u DCM (52.4 ml) i DMF (0.524 ml) at -20 °C dodat je tionil bromid (2.171 ml, 27.5 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 sati. Reakciona smeša je ekstrahovana sa fosfatnim puferom pH 7.4/EtOAc dvaput i zatim ekstrahovana sa koncentrovanim rastvorom soli/EtOAc; organski sloj je osušen sa MgSO4zatim koncentrovan vakuumom da se dobije bromobenzhidral, 4-(bromo(4-fluorofenil)metil)benzonitril (6.3 g, 21.28 mmol).
[1148] U smešu 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (6.27 g, 21.1 mmol) i 4-(bromo(4-fluorofenil)metil)benzonitrila (6.25 g, 21.10 mmol) u acetonitrilu (140 ml) dodata je Hunig-ova baza (18.43 ml, 106 mmol). Smeša je mešana na 55 °C tokom 24 sata. Sirova reakciona smeša je podeljena između DCM i NaHCO3(aq). Ostatak from koncentrovan organski sloj was charged on 220 g-Si-RediSep Rf tokom fleš hromatografije sa 20-100% etil acetate u heksanima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene vakuumom. Prinos diastereomernog proizvoda bio je 7.8 gram. The diastereomeric material je razdvojen u dva diastereomera korišćenjem SFC-hiralne hromatografije pod sledećim uslovima: kolona: Cellulose-4 (5 × 25 cm, 5 µm, #548090); mobilna faza: CO2/MeOH:MeCN (1:1) w 0.1% NH4OH (60/40); Uslovi protoka: 340 mL/min, 100 Bar; temperatura kolone: 35 °C; talasna dužina detektora: 220 nm. Naslovno jedinjenje je sakupljeno kao 2. pik eluenta, >99.5% de. Prinos homohiralnog proizvoda bio je 3.4 gram.
[1149] Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters Aquity BEH C18 2.1 × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 100% Voda/ 0.05% TFA; mobilna faza B: 100% acetonitril/0.05% TFA; temperatura: 50 °C; gradijent: 2 %B do 98 %B tokom 1.5 min, zatim zadržavanje od 1.50 min pri 98 %B; protok: 0.8 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 507.30; retenciono vreme: 1.75 min.
PRIMER 307
8-((2S,5R)-4-((4-cijanofenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1150]
[1151] Primer 307 je pripremljen i prečišćen u skladu sa opštim procedurama za pripremanje primera 306. Primer 307 je sakupljen kao 1. pik eluenta, >99.5% de. Prinos homohiralnog proizvoda bio je 3.3 gram.
[1152] Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters Aquity BEH C182.1 × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 100% voda/ 0.05% TFA; mobilna faza B: 100% acetonitril/0.05% TFA; temperatura: 50 °C; gradijent: 2 %B do 98 %B tokom 1.5 min, zatim zadržavanje od 1.50 min pri 98 %B; protok: 0.8 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 507.30; retenciono vreme: 1.76 min.
PRIMERI 308 I 309
8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1153]
[1154] U smešu 1-(1-bromoetil)-4-fluorobenzena (579 mg, 2.85 mmol) i 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (485 mg, 1.5 mmol) u acetonitrilu (4 mL) dodata je Hunig-ova baza (1.048 mL, 6.00 mmol). Reakciona smeša je mešana na 55 °C tokom 16 sati. Sirova reakciona smeša je podeljena na DCM /NaHCO3(aq). Ostatak iz koncentrovanog organskog sloja je nanet na 40 g-Si-RediSep Rf tokom fleš hromatografije korišćenjem 20-100% etil acetata u heksanima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene vakuumom. Prinos diastereomernog proizvoda bio je 480 mg. Diastereomerni proizvod je razdvojen u dva diastereomera korišćenjem SFC-hiralne hromatografije pod sledećim uslovima: kolona: Chiralpak IF, 30 × 250 mm.5 mikrona čestice; mobilna faza: 20% MeOH/ 80% CO2w/0.1%NH4OH; protok: 85 mL/min, 150 Bar; temperatura kolone: 40 °C; talasna dužina detektora: 226 nm. Prinos 1. eluirajućeg diastereomera (100% de) bio je142 mg. Prinos 2. eluirajućeg diastereomera (97% de) bio je 161 mg.
[1155] Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 420.2; retenciono vreme: 2.06 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 420.2; retenciono vreme: 1.18 min.
PRIMER 310
8-((2S,5R)-4-((4-cijanofenil)(p-tolil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA so
[1156]
[1157] U smešu 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (285 mg, 0.958 mmol), (cijanometil) trimetilfosfonijum jodida (466 mg, 1.916 mmol), i 4-(hidroksi(p-tolil)metil) benzonitrila (262 mg, 1.150 mmol) u acetonitrilu (4 mL)) dodata je Hunig-ova baza (0.837 mL, 4.79 mmol). Reakciona smeša je mešana u mikrotalasnom sintesajzeru na 110 °C tokom 2 sata. U reakcionu smešu navedenu iznad dodato je još (cijanometil) trimetilfosfonijum jodida (466 mg, 1.916 mmol), 4-(hidroksi(p-tolil)metil) benzonitrila (262 mg, 1.150 mmol), i Hunig-ove baze (0.502 mL, 2.87 mmol). Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom još 2 sata. Sirova reakciona smeša je podeljena na vodeni rastvor DCM/NaHCO3(aq.) Ostatak iz koncentrovanog organskog sloja je nenaet na 40g-Si-RediSepRf tokom fleš hromatografije sa 20-100% etil acetata u heksanima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene vakuumom. Prinos diastereomernog proizvoda bio je 180 mg.
[1158] Diastereomerni proizvod je razdvojen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 19% B, 19-59% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100% B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Diastereomeri su sakupljeni odvojeno. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Prinos prvog eluirajućeg diastereomera (primer 310) bio je 73 mg. Prinos drugog eluirajućeg diastereomera ) bio je 86 mg. Prinosi su izračunati na osnovu proizvoda kao TFA soli.
[1159] Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi injektiranja 1: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 1: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 503.21; retenciono vreme: 1.82 min. Uslovi injektiranja 2: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm). Rezultati injektiranja 2: čistoća: 100.0 %; uočena masa: 503.18; retenciono vreme: 2.49 min.
PRIMERI 312 I 313
8-((3R)-4-((4-fluorofenil)(pirimidin-4-il)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril
[1160]
[1161] Na -20 °C, u rastvor (4-fluorofenil)(pirimidin-4-il)metanola (250 mg, 1.224 mmol) u DCM (3 mL) i DMF (0.030 mL) dodat je tionil bromid (0.125 mL. 1.592 mmol) u kapima. Reakciona smeša je zagrejana do sobne temperature i mešana tokom 2 sata. Zatim je filtrirana da da 4-(bromo(4-fluorofenil)metil) pirimidin (232 mg, 0.869 mmol, 70.9 % prinos) kao beličastu čvrstu supstancu. LC/MS: retenciono vreme 1.97 minuta, 267.0 (MH<+>).<1>H NMR (400 MHz, ACETONITRIL-d3) δ 9.46 (s, 1H), 8.99 (dd, J=6.4, 1.0 Hz, 1H), 8.24 (dd, J=6.4, 1.0 Hz, 1H), 7.73-7.63 (m, 2H), 7.26-7.15 (m, 2H), 6.55 (s, 1H).
[1162] U rastvor (R)-5-metil-8-(3-metilpiperazin-1-il)-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitrila (40 mg, 0.130 mmol) u acetonitrilu (1.5 ml), dodati su N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (0.113 ml, 0.649 mmol) i 4-(bromo(4-fluorofenil)metil) pirimidin (52.0 mg, 0.195 mmol). Reakciona smeša je zagrejana na 65 °C preko noći. LC/MS je pokazala formiranje proizvoda. Sirov materijal je zatim prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm × 19 mm, 5-µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 27% B, 27-57% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 4 minuta pri 100% B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvods su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Dva diastereomera su dobijena kao 8-((3R)-4-((4-fluorofenil) (pirimidin-4-il)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril.
[1163] QC postupak 1: Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća: kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm).
[1164] QC postupak 2: Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Kolona: Waters XBridge C18, 2.1 mm × 50 mm, 1.7 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1 % trifluorosirćetnom kiselinom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0 %B do 100 %B tokom 3 min, zatim zadržavanje od 0.50 min pri 100 %B; protok: 1 mL/min; detekcija: MS i UV (220 nm).
[1165] Jedinjenja u tabeli 1 su pripremljeni od (R)-5-metil-8-(3-metilpiperazin-1 -il)-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitrila korišćenjem sličnih uslova reakcije.
PRIMERI 337-339
8-((2S,5R)-4-(1-(2,4-difluorofenil)propil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1166]
[1167] U smešu 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitrila (29.7 mg, 0.1 mmol) i 1-(1-bromopropil)-2,4-difluorobenzena (25.9 mg, 0.110 mmol) u acetonitrilu (0.3 mL) dodata je Hunig-ova baza (87 µL, 0.500 mmol). Smeša je mešana na vrućoj ploči na 55 °C tokom 16 sati. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm × 19 mm, 5-µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 0.1%trifluorosirćetnom kiselinom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 3% B, 3-43% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100% B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Stereohemija: D.
[1168] Diastereomerna smeša primera 337 je dalje odvojena da bi se razdvojila dva homohiralna diastereomera korišćenjem SFC-hiralne hromatografije pod sledećim uslovima: kolona: Chiral OD, 30 × 250 mm.5 mikrona čestice; mobilna faza: 15% IPA/ 85% CO2w/0.1 % DEA; protok: 100 mL/min; talasna dužina detektora: 220 nm.
[1169] Primer 338 (izomer 1) je sakupljen kao prvi pik eluenta u 95% de. Stereohemija: H.
[1170] Primer 339 (izomer 2) je sakupljen kao drugi pik eluenta u 95% de. Stereohemija: H.
PRIMERI 340 I 341
8-[(2S,5R)-5-etil-2-metil-4-[(piridin-2-il)[4-(trifluorometoksi)fenil] metiljpiperazin-1 -il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1.5-naftiridin-2-karbonitril
[1171]
[1172] U acetonitrilni (2 mL) rastvor 2-(hloro(4-(trifluorometoksi)fenil) metil)piridina (102 mg, 0.353 mmol) dodati su 8-((2S,5R)-5-etil-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (55 mg, 0.177 mmol), kalijum jodid (2.93 mg, 0.018 mmol) i Hunig-ova baza (0.093 mL, 0.530 mmol). Smeša je zagrejana na 75 °C preko noći. Nakon 24 sata, LC/MS analiza je naznačila da je reakcija završena. Reakciona smeša je filtrirana i prečišćena preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 46% B, 46-86% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 4 minuta pri 100% B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvode su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije do obezbede primer 340 (9.5 mg) i primer 341 (11.9 mg). Stereohemija: H.
[1173] Jedinjenja tabele 3 su pripremljena u skladu sa opštim postupkom stavljenimim na uvid u primerima 337 i 340 alkilacijom piperazin azota sa ili alkil hloridom ili bromidom. Kada se alkilacijom dobija mešavina diastereomera, smeša je odvojena ili preparativnom hromatografijom ili preparativnom hiralnom hromatografijom. Apsolutna stereohemija nije dodeljena novoformiranoj vezi ugljenik-azot.
PRIMERI 424 I 425
[1174] 7-fluoro-8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)etil-1-d)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril i 7-fluoro-8-((2S,SR)-4-(1-(4-fluorofenil)til-1-d)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1175] 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-7-fluoro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril bis-hidrohlorid (120 mg, 0.309 mmol) je dodat u rastvor 1-(4-fluorofenil)etan-1-d-1-ola (98 mg, 0.694 mmol) i DIEA (0.28 ml, 1.603 mmol) u acetonitrilu (4 mL) u bočicu od 20 mL pod pritiskom. (Cijanometil)trimetilfosfonijum jodid (155 mg, 0.638 mmol) je dodat i smeša je smeštena pod azotom i zagrejana na 110 °C preko noći. Zatim, dodatni 1-(4-fluorofenil)etan-1-d-1-ol (57 mg, 0.404 mmol), DIEA (0.054 ml, 0.309 mmol) i (cijanometil)trimetilfosfonijum jodid (75 mg, 0.309 mmol) su dodati i zagrevanje je nastavljeno tokom još 5 h. Smeša je zatim ohlađena, i uparena u vakuumu. Ostatak smeđe/ćilibarske boje (562 mg) je absorbovan na silika gel i frakcionisan korišćenjem fleš hromatografije korišćenjem 15% EtOAc u DCM kao eluenta. Homogene frakcije su kombinovane i uparene pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 62 mg ulja braon boje. Ovaj materijal je zatim frakcionisan korišćenjem SFC-hiralne hromatografije da bi se dobila dva proizvoda.
[1176] Primer 424: 15.5 mg; čistoća je bila 100% kao što je određeno pomoću analitičke LC/MS. Protonska NMR je dobijena u deuterisanom DMSO. Protonska NMR: Čini se da supresija vode na 3.38 ppm ima smanjene intenzitete susednih pikova. NMR podaci su prijavljeni kao nekorigovani.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.18-8.11 (m, 2.0H), 7.45 (dd, J=8.2, 5.8 Hz, 2.0H), 7.14 (t, J=8.7 Hz, 2.0H), 3.89 (br s, 1.0H), 3.77 (br d, J=12.2 Hz, 1.0H), 3.62 (s, 2.2H), 3.24 (br d, J=4.6 Hz, 0.4H), 3.06-2.95 (m, 0.7H), 2.68 (br dd, J=11.4, 2.9 Hz, 0.9H), 2.06 (br dd, J=1.6, 4.9 Hz, 1.0H), 1.25 (s, 3.0H), 1.08 (d, J=6.4 Hz, 3.0H), 0.98 (br d, J=6.1 Hz, 3.0H).
[1177] Primer 425: 16.5 mg; čistoća je bila 100% kao što je određeno pomoću analitičke LC/MS. Protonska NMR je dobijena u deuterisanom DMSO. Protonska NMR: Čini se da supresija vode na 3.38 ppm ima smanjene intenzitete susednih pikova. NMR podaci su prijavljeni kao nekorigovani:<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.20-8.09 (m, 2.0H), 7.40 (br t, J=6.9 Hz, 2.0H), 7.17 (br t, J=8.5 Hz, 2.0H), 4.07 (br s, 1.1H), 3.61 (s, 2.1H), 3.54 (br d, J=12.2 Hz, 0.6H), 3.12-3.05 (m, 0.5H), 2.90-2.83 (m, 0.7H), 2.30 (br dd, J=10.4, 4.9 Hz, 1.1H), 1.31 (s, 2.8H), 1.10 (br d, .7=6.4 Hz, 3.0H), 1.00 (br d, J=6.1 Hz, 3.0H).
[1178] Postupak hiralne SFC separacije je razvijen kao što je opisano u eksperimentalnim detaljima ispod. Približno 62 mg uzorka je podeljeno u dva pika sakupljena u MeOH mas/0.1% DEA. Hiralna čistoća za izolate je određena korišćenjem dole navedenih analitičkih hromatografskih uslova.
[1179] Uslovi hiralne SFC preparativne hromatografije:
Instrument: Waters100 Prep SFC
Kolona: Chiral IC, 21 × 250 mm. 5 mikrona
Mobilna faza: 70% CO2/ 30% MeOH mas/0.1% DEA
Uslovi protoka: 60 mL/min
Talasna dužina detektora: 220 mm
Detalji injektiranja: 300 µL 62 mg rastvoreno u 3 mL MeOH
[1180] Primeri u tabli 4A su pripremljeni od odgovarajućeg piperazina i alkohola korišćenjem (cijanometil) trimetilfosfonijum jodida u skladu sa opštim proceduromama stavljen na uvid u primerima 182, 424, i 425. Kada je reakcija odala smešz diastereomera, smeša je odvojena korišćenjem ili preparativne hromatografije ili preparativne hiralne hromatografije. apsolutna stereohemija nije dodeljena novoformiranoj vezi ugljenik-azot. Apsolutna stereohemija nije dodeljena novoformiranoj vezi ugljenik-azot.
Ċ
PRIMER 556 8-[(2S,5R)-4-[2-fluoro-1-(4-fluorofenil)etil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1181]
[1182] U zapečaćenu boćicu rastvoren je 8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)-2-hidroksietil)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (70 µL, 0.166 mmol) u dihlorometanu (828 µL) i ohlađen u ledenom kupatilu. Nakon mešanja tokom 5 minuta, bis(2-metoksietil)aminosulfur trifluorid (36.6 mg, 0.166 mmol) je dodat. Reakcija je zapečaćena i ostavljena da se polako zagreva do sobne temperature tokom 3 sata. LC/MS analiza je pokazala da je početni materijal potrošen i da je prisutan novi glavni pik u skladu sa proizvodom. Zasićeni rastvor vodenog rastvora natrijum karbonata je dodat u kapima sve dok ne prestane razvijanje gasa. Vodeni deo je ekstrahovan 2 puta sa dihlorometanom. Kombinovani organski delovi su osušeni pod strujom azota. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 30% B, 30-70% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100% B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da daju 42 mg naslovnog jedinjenja. Stereohemija: D
PRIMERI 557 I 558
8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)-2-hidroksietil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1183]
[1184] Sirov 2-((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-2-(4-fluorofenil)etan-1-ol, TFA (546 mg, 1.490 mmol) i 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (497 mg, 1.490 mmol) su rastvoreni u acetonitrilu (14.9 mL). Dodata je Hunig-ova baza (0.260 mL, 1.490 mmol) i reakciona smeša je zagrejana na 80 °C preko noći. Sirov materijal je hromatografisan sa 0-15 % metanola u dihlorometanu na koloni sa 24 g silika gela da da proizvod kao smešu diastereomera. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm × 19 mm, 5-µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 15% B, 15-55% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100% B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvode su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Primer 557 (3.3 mg) je izolovan kao prvi eluirajući proizvod i njegova procenjena čistoća sa LCMS analizom bila je 100%. Primer 558 (16.7 mg) je izolovan kao drugi eluirajući proizvod i njegova procenjena čistoća sa LCMS analizom bila je 98%.
PRIMERI 559 DO 561
8-((2S,SR)-4-(1 -(4-fluorofenil)-2-metoksietil)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (559-560) i 8-((2S,5R)-4-(2-(4-fluorofenil)-2-metoksietil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (561)
[1185]
Intermedijeri 559A, 560A, i 561A: 8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)-2-hidroksietil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (559A i 560A) i 8-((2S,5R)-4-(2-(4-fluorofenil)-2-hidroksietil)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (561A)
[1186]
[1187] Smeša 2-(4-fluorofenil)oksirana (0.022 mL, 0.180 mmol) i 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (44.6 mg, 0.15 mmol) u MeCN (0.3 mL) je bila zagrejana u mikrotasnom sintesizeru na 100 °C tokom 10 sati. Tri intermedijera su odvojena preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm × 19 mm, 5-µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 18% B, 18-58% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje od 5 minuta pri 100% B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže intermedijere 559A su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Frakcije koje sadrže intermedijere 560A je kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Frakcije koje sadrže intermedijere 561A je kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije.
Primer 559: 8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)-2-metoksietil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril. Izomer 1
[1188] U smešu intermedijera 559A (9 mg, 0.021 mmol) i jodometana (4.52 µL, 0.072 mmol) u DMF (0.3 mL) dodata je NaH (2.89 mg, 0.072 mmol) 60% prah, nakon čega sledi dodavanje THF (0.3 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sata. Sirov materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 200 mm × 19 mm, 5 µm čestice; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: zadržavanje od 0 minuta pri 31% B, 31-71% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje od 4 minuta pri 100% B; protok: 20 mL/min; temperatura kolone: 25 °C. Sakupljanje frakcija je pokrenuo MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže primer 559 su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Stereohemija: H
Primer 560: 8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)-2-metoksietil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, Izomer 2
[1189] Primer 560 je pripremljen u skladu sa opštom procedurom tokom pripremanja primera 559, osim što je intermedijer 560A korišćen umesto intermedijera 559A. Stereohemija: H
Primer 561: 8-((2S,SR)-4-(2-(4-fluorofenil)-2-metoksietil)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1190] Primer 561 je pripremljen u skladu sa opštom procedurom tokom pripremanja primera 559, osim što je intermedijer 561A korišćen umesto intermedijera 559A. Stereohemija: H
PRIMER 573
8-((2S,5R)-4-(3-(dimetilamino)benzil)-2,5-dimetilpipcrazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1191]
[1192] U smešu 3-(dimetilamino) benzaldehida (8.95 mg, 0.060 mmol) i 8-((2S,SR)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (0.018 g, 0.06 mmol) u DCE (0.3 mL) dodata je sirćetna kiselina (0.014 mL, 0.240 mmol), zatim dodat natrijum triacetoksiborohidrid (0.025 g, 0.120 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 sati. Sirov materijal je prečišćen putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18, 200 mm × 19 mm, čestice od 5 µm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Gradijent: zadržavanje 0 minuta na 39% B, 39-79% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje 4 minuta na 100% B; Protok: 20 mL/min; Temperatura kolone: 25 °C. Prikupljanje frakcija je započeto MS i UV signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije. Stereohemija: H.
PRIMERI 574 i 575
8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)propil-1-d)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1193]
[1194] Smeša 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (100 mg, 0.336 mmol), 4'-fluoropropiofenona (0.056 mL, 0.404 mmol), i titanijum(IV) izopropoksida (0.4 mL, 1.365 mmol) u bezvodnom THF-u (0.5 mL) je postavljena u bočicu od 1 drama i zatvorena pod azotom. Smeša je zagrevana na 70 °C tokom noći, tokom čega je postala narandžasto obojen rastvor. Nakon hlađenja, natrijum cijanoborodeuterid (44.0 mg, 0.668 mmol) i metanol-d4(0.4 mL) (Aldrich >99.8 atom %D) su dodati i zagrevanje je nastavljeno na 45 °C tokom 2 h. Reakciona smeša je zatim ohlađena i kvenčovana dodavanjem 1 mL D2O. Dobijena smeša je suspendovana u vodi i hloroformu. Ova suspenzija je filtrirana, čvrst materijal je opran hloroformom i ispirci su kombinovani sa filtratom i prenešeni u levak za razdvajanje. Organski sloj je prikupljen, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan in vacuo. Ostatak (142 mg) je zatim frakcionisan korišćenjem fleš hromatografije primenjujući silika gel eluiran sa 15% EtOAc u DCM-u. Homogene frakcije su kombinovane i uparene pod sniženim pritiskom da se dobije 57.8 mg bledo žute pene. Ovaj materijal je rastvoren u 2 mL acetonitrila i dalje prečišćen primenom preparativne HPLC.
[Kolona: Sunfire C18 19mm × 150 mm, Rastvarač A: 10% ACN-90% H2O-0.1% TFA, Rastvarač B: 90 % ACN-10% H2O-0.1% TFA: Početak %B 10, Kraj %B100, Vreme gradijenta 20 min. Prikupljanje pomoću UV, talasna dužina, 220 nm.]. Glavni pik je prikupljen i koncentrovan in vacuo. Ostatak je podeljen između DCM i 1 M Na2CO3rastvora. Organska faza je prikupljena i vodena faza je ponovo ekstrahovana DCM-om. Kombinovani ekstrakti su osušeni preko Na2SO4, filtrirani i koncentrovani da se dobije 32.2 mg bledo žute čvrste supstance. Ovaj materijal je zatim frakcionisan primenom SFC-hiralne hromatografije da bi se dobila dva dijastereoizomerna proizvoda
[1195] Prinos primera 574 je bio 6.9 mg, i njegova čistoća je bila 95% kao što je određeno analitičkom LC/MS. Protonska NMR je dobijena u deuterisanom DMSO. Supresija vode na 3.52 ppm izgleda da je smanjila intenzitete susednih pikova i zaklonila neke pikove sa preostalom rezidualnom vodom. NMR je prikazana neispravljena:<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.10 (d, J=8.8 Hz, 1.0H), 8.05-8.00 (m, 1.0H), 7.34 (br dd, J=8.4, 5.6 Hz, 2.1H), 7.13 (br t, J=8.7 Hz, 2.0H), 5.98 (s, 1.0H), 4.39 (br s, 0.8H), 2.72 (br dd, J=11.6, 3.1 Hz, 1.0H), 2.06 (br d, J=11.3 Hz, 1.0H), 1.94-1.79 (m, 0.8H), 1.55-1.38 (m, 0.8H), 1.12 (br d, J=6.4 Hz, 3.0H), 1.06 (br d, J=6.4 Hz, 3.1H), 0.64-0.54 (m, 3.0H).
[1196] Prinos primera 575 je bio 3.4 mg, i i njegova čistoća je bila 95% kao što je određeno analitičkom LC/MS. Protonska NMR je dobijena u deuterisanom DMSO. Supresija vode na 3.50 ppm izgleda da je smanjila intenzitete susednih pikova i zaklonila neke pikove sa preostalom rezidualnom vodom. NMR je prikazana neispravljena:<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.13-8.08 (m, 1.0H), 8.05-8.01 (m, 1.1H), 7.37 (dd, J=8.2, 5.8 Hz, 2.0H), 7.16 (t, J=8.7 Hz, 2.0H), 6.00 (s, 1,0H), 4.46 (br s, 0.7H), 3.36 (br s, 0.6H), 2.97 (dd, J=11.1, 3.2 Hz, 0.9H), 2.75-2.67 (m, 1.0H), 2.63 (br dd, J=11.4, 3.2 Hz, 0.9H), 1.89-1.75 (m, 0.8H), 1.58-1.47 (m, 0.8H), 1.21 (d, J=6.4 Hz, 3.0H), 0.97 (d, J=6.4 Hz, 3.0H), 0.66-0.56 (m, 3.0H).
[1197] Hiralna SFC separacioni postupak je razvijen kako je opisano u eksperimentalnim podacima ispod. Približno 33.5 mg uzorka je razdvojeno u dva pika prikupljena u 1PA s/0.1% DEA. Hiralna čistoća za izolate je određena primenom uslova analitičke hromatografije navedenih niže.
[1198] Uslovi preparativne hiralne SFC hromatografije:
Instrument: Waters 100 Prep SFC
Kolona: Chiral AD, 30 × 250 mm. 5 mikrona
Mobilna faza: 85% CO2/ 15% MeOH s/0.1%DEA
Uslovi protoka: 100 mL/min
Talasna dužina detektora: 220 nm
Injekcioni detalji: 400 µL 29.2 mg rastvoreno u 3 mL MeOH
[1199] Jedinjenja u tabeli 7 su pripremljena od (R)-5-metil-8-(3-metilpiperazin-1 -il)-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitrila ili 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)-7-fluoro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril bis-hidrohlorida primenom sličnih reakcionih uslova kao oni koji su korišćeni za pripremu primera 573 do 575. Kada je reakcija dala smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi.
LCMS postupci
[1200]
Postupak A: Kolona: XBridge BEH XP C18 (2.1 × 50 mm), 2.5 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Gradijent = 0-100 % B tokom 3 minuta; Temperatura: 50 °C; Protok: 1.1 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.
Postupak B: Kolona: XBridge BEH XP C18 (2.1 × 50 mm), 2.5 µm; Mobilna faza A: 0.1 % TFA: acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 0.1 % TFA: acetonitril (5:95), Gradijent = 0-100 % B tokom 3 minuta; Temperatura: 50 °C; Protok: 1.1 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.
Postupak C: Kolona: Kinetex XB-C18 (3 × 75 mm) 2.6 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum format: acetonitril (98:2), Mobilna faza B: 10 mM amonijum format: acetonitril (2:98), Gradijent = 20-100 % B tokom 4 minuta, zatim 0.6 minuta zadržavanje pri 100 % B; Temperatura: 27 °C; Protok: 1.0 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.
Postupak D: Kolona: Ascentis Express C8 (50 × 2.1 mm) 2.7 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum format: acetonitril (98:2), Mobilna faza B: 10 mM amonijum format: acetonitril (2:98), Gradijent = 0 -100 % B tokom 1.5 minuta, zatim 0.6 minuta zadržavanje pri 100 % B; Temperatura: 27 °C; Protok: 1.0 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.
[1201] Primeri u tabeli 8 su pripremljeni u skladu sa opštom procedurom opisanom u primeru 246 alkilacijom azota piperazina bilo sa alkil hloridom bilo bromidom. Sirov materijal je prečišćen preparativnom HPLC da bi se dobio proizvod.
[1202] Jedinjenja u tabeli 9 su pripremljena od pogodnog piperazina primenom odgovarajućeg α-metil benzil hlorida/bromida kao što je opisano za primere 308 i 309. Kada je sinteza obezbedila smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena u finalnoj fazi primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi.
[1203] Jedinjenja u tabeli 10 su pripremljena od pogodnog piperazina primenom odgovarajućeg benzhidril hlorida/bromida kao što je opisano za primer 302. Kada je sinteza obezbedila smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena u finalnoj fazi primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi.
Ċ
PRIMERI 700 i 701 8-((2S, 5R)-4-((4-ciklopropiltiazol-2-il) (4-fluorofenil) metil)-2, 5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1204]
Intermedijer 700A: (4-ciklopropiltiazol-2-il)(4-fluorofenil) metanol
[1205]
[1206] U promešani rastvor 4-ciklopropiltiazol-2-karbaldehida (0.3 g, 1.96 mmol) u tetrahidrofuranu (8 mL) na 0 °C dodat je 1 M rastvor (4-fluorofenil)magnezijum bromida u THF-u (3.1 mL, 3.1 mmol) u kapima pod azotom tokom 3 min. Reakciona smeša je polako zagrevana do sobne temperature i mešana je tokom 3 h. Reakcija je kvenčovana sa zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida (50 mL). Reakciona smeša je ekstrahovana EtOAc-om (3 × 100 mL). Kombinovani organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, filtriran i uparen pod sniženim pritiskom da se dobije sirovo jedinjenje. Sirovo jedinjenje je prečišćeno fleš kolonskom hromatografijom (primenom kolone od 12 g silika gela: primenom 12 %-15 % etil acetat/ Pet. etar) da se dobije (4-ciklopropiltiazol-2-il)(4-fluorofenil)metanol (0.42 g, 1.685 mmol, 86 % prinos) kao braon ulje.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.49-7.40 (m, 2H), 7.22-7.10 (m, 3H), 6.77-6.70 (m, 1H), 5.90-5.83 (m, 1H), 2.06-1.95 (m, 1H), 0.88-0.81 (m, 2H), 0.75-0.66 (m, 2H).
Intermedijer 700B: 2-(hloro (4-fluorofenil) metil)-4-ciklopropiltiazol
[1208] U promešani rastvor (4-ciklopropiltiazol-2-il)(4-fluorofenil)metanola (0.15 g, 0.60 mmol) u DCM-u (4 mL) dodat je tionil hlorid (0.178 mL, 2.41 mmol) na 0 °C. Reakciona smeša je zagrevana do 40 °C tokom 3 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije sirovi proizvod.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.66-7.56 (m, 2H), 7.33 (s, 3H), 5.55-5.11 (m, 1H), 2.11-1.95 (m, 1H), 0.94-0.83 (m, 3H), 0.78-0.67 (m, 1H).
Primeri 700 i 701: 8-((2S, 5R)-4-((4-ciklopropiltiazol-2-il) (4-fluorofenil) metil)-2, 5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1209] U promešani rastvor 8-((2S, 5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5, 6-dihidro-1, 5-naftiridin-2-karbonitril, HCl-a (80 mg, 0.24 mmol) u acetonitrilu (8 mL) dodat je DIPEA (0.21 mL, 1.2 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 5 min i zatim 2-(hloro (4-fluorofenil) metil)-4-ciklopropiltiazol (77 mg, 0.29 mmol) je dodat. Reakciona smeša je zagrevana do 85 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod koji je prečišćen preparativnom hiralnom HPLC. (Hiralna HPLC Postupak: Kolona: CELLULOSE-C4 (250 X 21.2) mm, 5 mikrona, M. Faza: 0.1% TFA u acetonitrilu, 0.1% DEA u MeOH-u 90:10, izoCRETIC da se dobije Pik 1 (Primer 700) i Pik 2 (Primer 701).
[1210] Primer 700: (1.6 mg, 2.97 µmol, 1.24 % prinos). LCMS: m/z, 529.2 (M+H); rt 2.27 min; (LCMS postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.17-8.11 (m, 1H), 8.09-8.02 (m, 1H), 7.69-7.50 (m, 2H), 7.27-7.13 (m, 3H), 6.00 (s, 1H), 5.02 (s, 1H), 4.61-4.47(m, 1H), 3.70-3.60 (m, 1H), 3.54-3.44 (m, 4H), 3.06-2.93 (m, 2H), 2.42-2.35 (m, 1H), 1.27 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.02 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.90-0.80 (m,2H), 0.76-0.63 (m, 2H).
[1211] Primer 701: (1.5 mg, 2.84 µmol, 1.2 % prinos). LCMS: m/z, 529.2 (M+H); rt 2.30 min; (LCMS postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.17-8.10 (m, 1H), 8.09-8.02 (m, 1H), 7.56 (dd, J = 5.5, 8.7 Hz, 2H), 7.29-7.13 (m, 3H), 6.01 (s, 1H), 5.09 (s, 1H), 4.63-4.50, (m, 1H), 3.62 (br d, J = 12.2 Hz, 1H), 3.54-3.44 (m, 4H), 3.07 (br dd, J = 2.4, 3.4 Hz, 1H), 2.85 (dd, J = 3.4, 12.0 Hz, 1H), 2.23 (br d, J = 11.0, Hz, 1H), 1.19 (dd, J = 6.5, 13.6 Hz, 6H), 0.91-0.83 (m, 2H), 0.77-0.68 (m, 2H).
[1212] Primeri u tabeli 11 su pripremljeni od pogodnog piperazina prema opštoj proceduri opisanoj u primerima 700 i 701, zamenom 4-ciklopropiltiazol-2-karbaldehida sa pogodnim heterocikličnim aldehidom u sintetskom nizu. Kada je sinteza obezbedila smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena u finalnoj fazi primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi.
PRIMERI 729 i 730
8-((2S,5R)-4-((5-ciklopropilizoksazol-3-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1213]
Intermedijer 729A: 5-ciklopropil-N-metoksi-N-metilizoksazol-3-karboksamid.
[1215] U rastvor 5-ciklopropilizoksazol-3-karboksilne kiseline (650 mg, 4.24 mmol) u DMF-u (2 mL) su dodati N,O-dimetilhidroksilamin hidrohlorid (497 mg, 5.09 mmol), DIPEA (2.22 mL, 12.73 mmol) i 1-propanfosfonski anhidrid (3.75 mL, 6.37 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na istoj temperaturi tokom 16 h. Reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana dva puta etil acetatom (20 mL). Kombinovani organski sloj je osušen preko Na2SO4i uparen pod sniženim pritiskom do suva. Sirov proizvod je prečišćen fleš kolonskom hromatografijom (Kolona: 24g silike: Tok rastvarača: 0.50% EtOAc u pet etru). Proizvod je eluiran pri 30% EtOAc u pet etru da se dobije 5-ciklopropil-N-metoksi-N-metilizoksazol-3-karboksamid (450 mg, 2.16 mmol, 50.8 % prinos). LCMS: m/z, 197.1 (M+H); rt 1.07 min; Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minut, zatim 0.6 minuta zadržavanje pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.
Intermedijer 729B: (5-ciklopropilizoksazol-3-il)(4-fluorofenil)metanon
[1216]
[1217] U rastvor 5-ciklopropil-N-metoksi-N-metilizoksazol-3-karboksamida (350 mg, 1.78 mmol) u tetrahidrofuranu (20 mL) dodat je (4-fluorofenil)magnezijum bromid (4.46 mL, 3.57 mmol) na 0 °C. Nakon potpunog dodavanja, reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Reakcija je kvenčovana zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl. Reakciona smeša je ekstrahovana dva puta etil acetatom (40 mL). Kombinovani organski sloj je osušen preko Na2SO4i uparen do suva da se dobije (5-ciklopropilizoksazol-3-il)(4-fluorofenil)metanon (300 mg, 69.8% prinos) kao bezbojno viskozno ulje. LCMS: m/z, 232.1 (M+H); rt 1.92 min; Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minut, zatim 0.6 minuta zadržavanje pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.
Intermedijer 729C: (5-ciklopropilizoksazol-3-il)(4-fluorofenil)metanol
[1218]
[1219] U rastvor (5-ciklopropilizoksazol-3-il)(4-fluorofenil)metanona (300 mg, 1.30 mmol) u MeOH-u (5 mL) dodat je natrijum borohidrid (98 mg, 2.59 mmol) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana dva puta etil acetatom (20 mL). Organski sloj je izdvojen, osušen preko Na2SO4i uparen do suva da se dobije (5-ciklopropilizoksazol-3-il)(4-fluorofenil)metanol (250 mg, 83 % prinos) kao bezbojna tečnost.<1>H NMR (300MHz, Hloroform-d) δ ppm 7.40-7.27 (m, 2H), 7.05-6.90 (m, 2H), 5.82 (d, J=3.6 Hz, 1H), 5.70 (s, 1H), 1.96-1.82 (m, 1H), 1.03-0.93 (m, 2H), 0.91-0.79 (m, 2H).
Intermedijer 729D: 3-(bromo(4-fluorofenil)metil)-5-ciklopropilizoksazol
[1220]
[1221] U rastvor (5-ciklopropilizoksazol-3-il)(4-fluorofenil)metanola (100 mg, 0.43 mmol) u dihlorometanu (5 mL) dodat je acetil bromid (0.063 mL, 0.86 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana dva puta dihlorometanom (20 mL). Organski sloj je izdvojen, osušen preko Na2SO4i uparen do suva da se dobije 3-(bromo(4-fluorofenil)metil)-5-ciklopropilizoksazol (100 mg, 28.4 % prinos) kao svetlo žuta tečnost.<1>H NMR (300MHz, Hloroform-d) δ ppm 7.56-7.33 (m, 2H), 7.15-6.96 (m, 2H), 6.10 (d, J=15.0 Hz, 1H), 5.84 (s, 1H), 2.08-1.88 (m, 1H), 1.15-0.88 (m, 4H).
Primeri 729 i 730: 8-((2S,5R)-4-((5-ciklopropilizoksazol-3-il)(4-fluorofenil) metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1222] U promešani rastvor 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, HCl-a (100 mg, 0.3 mmol) u acetonitrilu (5 mL) su dodati DIPEA (0.16 mL, 0.9 mmol) i 3-(bromo(4-fluorofenil)metil)-5-ciklopropilizoksazol (115 mg, 0.39 mmol). Reakciona smeša je mešana na 80 °C tokom noći. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u etil acetatu (100 mL). Organski sloj je opran slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, koncentrovan pod sniženim pritiskom da se dobije sirovi proizvod, koji je prečišćen preparativnom HPLC (Prep HPLC Postupak: LUX KOLONA C2(250 mm × 21.2 mm ID, 5 µm) Mobilna faza A-0.1% DEA u acetonitrilu, Mobilna faza B-0.1% DEA u MeOH-u, %B-0/0, 12/100 Tok: 20 mL/min) da se dobiju Primeri 729 i 730.
[1223] Primer 729: (10 mg, 6.19 % prinos); LCMS: m/z, 513.2 (M+H); rt 2.188 min; (LCMS postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.13 (d, J=8.8 Hz, 1 H), 8.03-8.08 (m, 1 H), 7.58 (dd, J=8.6, 5.6 Hz, 2 H), 7.15-7.21 (m, 2 H), 6.40 (s, 1 H), 6.00 (s, 1 H), 4.79 (s, 1 H), 4.50 (br s, 1 H), 3.64-3.72 (m, 1 H), 3.49-3.55 (m, 4 H), 2.98-3.07 (m, 1 H), 2.79-2.91 (m, 1 H), 2.16-2.25 (m, 1 H), 2.03-2.15 (m, 1 H), 1.19 (d, J=6.6 Hz, 3 H), 1.12 (d, J=6.6 Hz, 3 H), 0.98-1.05 (m, 2 H), 0.84-0.90 (m, 2 H).
[1224] Primer 730: (10 mg, 6.19 % prinos); LCMS: m/z, 513.2 (M+H); rt 2.16 min; (LCMS Postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5µm; Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.13 (d, J=8.8 Hz, 1 H), 8.02-8.08 (m, 1 H), 7.59-7.66 (m, 2 H), 7.17-7.24 (m, 2 H), 6.36 (s, 1 H), 5.98 (s, 1 H), 4.78 (s, 1 H), 4.50-4.64 (m, 1 H), 3.61-3.71 (m, 1 H), 3.51 (s, 3 H), 3.44 (br dd, J=12.3, 3.1 Hz, 1 H), 2.89-2.99 (m, 2 H), 2.21-2.28 (m, 1 H), 2.04-2.14 (m, 1 H), 1.26 (d, J=6.6 Hz, 3 H), 0.99-1.07 (m, 5 H), 0.77-0.91 (m, 2 H).
[1225] Primeri u tabeli 12 su pripremljeni od pogodnog piperazina prema opštoj proceduri opisanoj u primerima 729 i 730, supstitucijom 5-ciklopropilizoksazol-3-karboksilne kiseline sa pogodnom izoksazol-3-karboksilnom kiselinom u sintetskom nizu. Kada je sinteza obezbedila smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena u finalnoj fazi primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi.
PRIMERI 735 i 736
8-((2S,SR)-4-((3-ciklopropil-1,2,4-oksadiazol-5-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimctilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril [1226]
Intermedijer 735A: 2-((2R, 5S)-4-(terc-butoksikarbonil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-2-(4-fluorofenil)sirćetna kiselina
[1227]
[1228] U rastvor terc-butil (2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (1.5 g, 7.0 mmol) u acetonitrilu (5 mL) su dodati (4-fluorofenil)boronska kiselina (0.98 g, 7.0 mmol) i glioksilna kiselina (0.39 mL, 7.0 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na 85 °C tokom 2 h. Reakciona smeša je koncentrovana da se dobije braon čvrsta supstanca. Dietil etar (50 mL) dodat je u čvrstu supstancu i smeša mešana je tokom 10 minuta, praćeno filtracijom čvrste supstance. Filtrat je koncentrovan da se dobije 2-((2R,5S)-4-(terc-butoksikarbonil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-2-(4-fluorofenil)sirćetna kiselina (1.34 g, 29.3 % prinos) kao braon čvrsta supstanca. LCMS: m/z, 367.1 (M+H); rt ,0.99 i 1.04 min. (LCMS Postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minut, zatim 0.6 minuta zadržavanje pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
Intermedijer 735B: Terc-butil(2S.5R)-4-((3-ciklopropil-1,2,4-oksadiazol-5-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat
[1229]
[1230] U promešani rastvor 2-((2R,5S)-4-(terc-butoksikarbonil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-2-(4-fluorofenil)sirćetne kiseline (400 mg, 1.1 mmol), (Z)-N'- hidroksiciklopropan karboksimidamid (219 mg, 2.18 mmol) u DMF-u (8.0 mL), BOP (724 mg, 1.64 mmol) i trietil amin (0.46 mL, 3.27 mmol) su dodati na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana tokom 2 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana do 110 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije sirovi proizvod, koji je prečišćen primenom silika gel fleš hromatografije primenom 0 %-100 % etil acetat/ pet. etar). Frakcije su koncentrovane pod sniženim pritiskom da se dobije terc-butil (2S,SR)-4-((3-ciklopropil-1,2,4-oksadiazol-5-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (400 mg, 85 % prinos). LCMS: m/z, 431.2 (M+H); rt 2.28 min. LC-MS Postupak: Kolona-AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm); Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat u vodi: acetonitril (98:02); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat u vodi: acetonitril (2:98); Gradijent: 20% -100% B tokom 2 minuta, zatim 0.2 minutno zadržavanje pri 100% B Protoku 0.7 mL/min.
Intermedijer 735C: 3-ciklopropil-5-(((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)(4-fluorofenil)metil)-1,2,4-oksadiazol
[1231]
[1232] U promešani rastvor terc-butil (2S,5R)-4-((3-ciklopropil-1,2,4-oksadiazol-5-il) (4-fluorofenil)metil)-2,5- dimetilpiperazin-1-karboksilata (400 mg, 0.93 mmol) u DCM-u (8.0 mL) dodat je TFA (0.8 mL, 10.38 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da se dobije TFA so 3-ciklopropil-5-(((2R,5S)-2,5- dimetilpiperazin-1 -il)(4-fluorofenil) metil)-1,2,4-oksadiazola (250 mg, 81 % prinos) kao braon polučvrsta supstanca. LCMS: m/z, 331.0 (M+H); rt 0.94-1.06 min. LCMS Postupak: Kolona-Luna 3.0 C18(2) 100 Å; LC Kolona (20 X 4.0 mm) Mercury MS TM; Mobilna faza A: 0.1% TFA u Milli-Q vodi, Mobilna faza B: 0.1% TFA u acetonitrilu; Gradijent: 20-100% B tokom 2.8 minuta, Protok 2.0 mL/min, zatim 0.1 minutno zadržavanje pri 100% B Protok 1.5 mL/min, 100-20% B tokom 0.2 minuta, Protok 1.5 mL/min.
Primeri 735 i 736: 8-((2S,5R)-4-((3-ciklopropil-1,2,4-oksadiazol-5-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1233] U promešani rastvor 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (200 mg, 0.6 mmol), 3-ciklopropil-5-(((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)(4- fluorofenil)mctil)-1,2,4-oksadiazol, TFA (347 mg, 0.78 mmol) u acetonitrilu (8 mL) dodat je natrijum bikarbonat (151 mg, 1.8 mmol). Reakciona smeša je zagrevana do 85 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i uparena pod sniženim pritiskom da se dobije sirovi proizvod, koji je prečišćen putem preparativne HPLC. Postupak hiralne separacije: Kolona: DAD-1-Cellulose-2 (250 X 4.6 mm), 5 mikrona; DAD-2- Cellulose-4 (250 X 4.6 mm), 5 mikrona. Mobilna faza: 0.1% DEA u acetonitrilu, Tok:2.0mL\min.
[1234] Primer 735: (13.4 mg, 17.4 % prinos): LCMS: m/z, 514.2 (M+H); rt 2.18 min; LCMS postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min) Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.19-8.13 (m, 1H), 8.09-8.03 (m, 1H), 7.66 (dd, J=5.6, 8.6 Hz, 2H), 7.25 (t, J=8.8 Hz, 2H), 6.04 (s, 1H), 5.25 (s, 1H), 4.48-4.38 (m, 1H), 3.63-3.47 (m, 4H), 3.18 (d, J=5.1 Hz, 1H), 2.91-2.83 (m, 2H), 2.20 (dd, J=1.8, 11.6 Hz, 1H), 2.17-2.09 (m, 1H), 1.21-1.11 (m, 6H), 1.11-1.03 (m, 2H), 0.94-0.88 (m, 2H).
[1235] Primer 736: (12.4 mg, 16.1 % prinos): LCMS: m/z, 514.2 (M+H); rt 2.18 min; LCMS postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5µm; Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min) Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.18-8.12 (m, 1H), 8.10-8.02 (m, 1H), 7.69-7.58 (m, 2H), 7.27 (t, J=8.8 Hz, 2H), 6.00 (s, 1H), 5.25 (s, 1H), 4.61-4.50 (m, 1H), 3.66-3.56 (m, 1H), 3.52 (s, 3H), 3.47 (dd, J=3.2, 12.5 Hz, 1H), 3.20-3.09 (m, H), 3.02-2.87 (m, 1H), 2.17-2.08 (m, 2H), 1.22 (d, J=6.6 Hz, 2H), 1.19-0.99 (m, 6H), 0.96-0.78 (m, 2H).
[1236] Primeri u tabeli 13 su pripremljeni od pogodnog piperazina prema opštoj proceduri stavljenoj na uvid javnosti u Primerima 735 i 736, supstitucijom (Z)-N'- hidroksiciklopropan karboksimidamida sa pogodnim amidoksimima u sintetskom nizu. Kada je reakcija dala smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena u finalnoj fazi primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi.
Primeri u Tabeli 14 su pripremljeni od pogodnog piperazina prema opštoj proceduri opisanoj u primerima 735 i 736, supstitucijom 4-fluoro fenilboronske kiseline sa pogodnom aril boronskom kiselinom u sintetskom nizu. Kada je sinteza obezbedila smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena u finalnoj fazi primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi.
PRIMERI 762 i 763
8-((2S,5R)-4-((5-ciklopropil-1,3,4-oksadiazol-2-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
Intermedijer 762A: terc-butil (2S,5R)-4-(2-(2-(ciklopropankarbonil)hidrazinil)-1-(4-fluorofenil)-2-oksoetil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat
[1238]
[1239] U rastvor 2-((2R,5S)-4-(terc-butoksikarbonil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-2-(4-fluorofenil)sirćetne kiseline (0.4 g, 1.1 mmol) u DMF-u (5 mL) su dodati HATU (0.83 g, 2.2 mmol), DIPEA (0.58 mL, 3.27 mmol) i ciklopropankarbohidrazid (0.11 g, 1.1 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da se ukloni DMF i oprana vodom (2 ×10 mL) i ekstrahovana etil acetatom (2 × 10 mL). Kombinovani organski sloj je osušen preko natrijum sulfata, koji je koncentrovan pod sniženim pritiskom da se dobije sirovo jedinjenje kao gusta tečnost. Sirov proizvod je prečišćen silika gel kolonskom hromatografijom sluiranjem sa 10% MeOH u DCM-u. Frakcije su koncentrovane pod sniženim pritiskom da se dobije terc-butil (2S,SR)-4-(2-(2-(ciklopropankarbonil)hidrazinil)-1 -(4-fluorofenil)-2-oksoetil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (450 mg, 46.0 % prinos). LCMS: m/z, 449.3 (M+H); rt 1.60-1.62 min. (LCMS Postupak: Kolona: Aquity UPLC BEH C18(3.0 × 50 mm) 1.7 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (98:2), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (2:98), Gradijent = 20-100 % B tokom 4 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 100 % B; Temperatura: 27 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
Intermedijer 762B: 2-ciklopropil-5-(((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)(4-fluorofenil)metil)-1,3,4-oksadiazol
[1240]
[1241] U rastvor terc-butil (2S,SR)-4-(2-(2-(ciklopropankarbonil)hidrazinil)-1-(4-fluorofenil)-2-oksoetil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (0.13 g, 0.29 mmol) u acetonitrilu (2 mL) dodat je fosforil hlorid (0.03 mL, 0.348 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na 85 °C tokom 2 h. Reakciona smeša je ostavljena da dođe do sobne temperature i zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije sirovo jedinjenje, 2-ciklopropil-5-(((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)(4-fluorofenil)metil)-1,3,4-oksadiazol (130 mg, 54.3 % prinos), kao gusta tečnost. LCMS: m/z, 331.2 (M+H); rt 2.28 min. (LCMS Postupak: Kolona: AQUITY UPLC BEH C18(3.0 × 50 mm) 1.7 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-100 % B tokom 4 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 100 % B; Temperatura: 27 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
Primeri 762 i 763: 8-((2S,5R)-4-((5-ciklopropil-1,3,4-oksadiazol-2-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1242] U promešani rastvor 2-ciklopropil-5-(((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)(4-fluorofenil)metil)-1,3,4-oksadiazola (119 mg, 0.36 mmol) u acetonitrilu (2 mL), natrijum bikarbonat (91 mg, 1.08 mmol) dodat je na sobnoj temperaturi. Smeša je refluksovala na 85 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije sirovo jedinjenje kao gusta tečnost. Sirov proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gel koloni od 12 g eluiranjem sa 10% MeOH u DCM-u. Frakcije su koncentrovane pod sniženim pritiskom da se dobije 8-((2S,SR)-4-((5-ciklopropil-1,3,4-oksadiazol-2-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril kao braon gusta tečnost. Sirov materijal je prečišćen putem preparativne HPLC praćeno hiralnom HPLC. (Postupak hiralne HPLC: Kolona: INERTSIL ODS (250mm × 19mm ID, 5µm); Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat u vodi; Mobilna faza B: acetonitril; Gradijent: 0-100 % B tokom 18 minuta, zatim 5 minutno zadržavanje pri 100 % B; Tok: 18 mL/min).
[1243] Frakcija koja sadrži Primer 762 je koncentrovana pod sniženim pritiskom i ostatak je razblažen smešom EtOH voda (1:5) i liofilizovan da se dobije Primer 762 (7.0 mg, 3.76 % prinos); LCMS: m/z, 514.2 (M+H); rt 2.99 min; (LCMS postupak: Kolona: Kolona-Kinetex XB-C18 (75 X3 mm-2.6 µm); Mobilna faza A: 98% voda: 2% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 2% voda: 98% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.15 (d, J=9.0 Hz, 1H), 8.06 (d, J=8.5 Hz, 1H), 7.69-7.60 (m, 2H), 7.26 - 7.22 (m, 2H), 6.03 (s, 1H), 5.18 (s, 1H), 4.43 - 4.41 (m, 1H), 3.62 - 3.58 (m, 2H), 3.52 (s, 3H), 2.90 - 2.86 (m, 2H), 2.27-2.15 (m, 2H), 1.17 - 1.13 (m, 8H), 1.00 - 0.97 (m, 2H).
[1244] Frakcija koja sadrži Primer 763 je koncentrovana pod sniženim pritiskom i ostatak je razblažen smešom EtOH voda (1:5) i liofilizovan da se dobije Primer 763 (6.4 mg, 3.39 % prinos); LCMS: m/z, 514.2 (M+H); rt 2.98 min; (LCMS Postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm; Mobilna faza A: 98% voda: 2% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 2% voda: 98% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.15 (d, J=9.0 Hz, 1H), 8.06 (d, J=90 Hz, 1H), 7.65 (dd, J=8.8, 5.3 Hz, 2H), 7.28 - 7.26 (m, 2H), 5.99 (s, 1H), 5.17 (s, 1H), 4.57 (br. s., 1H), 3.60 (d, J=11.0 Hz, 1H), 3.52 (s, 3H), 3.46 - 3.42 (m, 1H), 3.09 - 3.05 (m, 1H), 2.96 - 2.92 (m, 1H), 2.10 - 2.06 (m, 1H), 2.13 - 2.09 (m, 1H), 1.22 (d, J=6.5 Hz, 3H), 1.13 (dd, .7=8,0, 2.5 Hz, 2H), 1.03 (d, J=6.5 Hz, 3H), 1.00-0.91 (m, 2H).
PRIMERI 764 i 765
8-((2S,5R)-4-((5-(terc-butil)-1,2,4-oksadiazol-3-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1245]
Intermedijer 764A: terc-butil (2S,5R)-4-(cijano(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat
[1246]
[1247] U rastvor terc-butil (2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (500 mg, 2.3 mmol) i 4-fluorobenzaldehida (290 mg, 2.3 mmol) u acetonitrilu (5.0 mL), dodat je trimetilsilil cijanid (0.31 mL, 2.3 mmol) pod atmosferom azota. Reakciona smeša mešana je tokom 16 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije žuta tečnost. Sirov proizvod je prečišćen silika gel kolonskom hromatografijom eluiranjem sa 10% etil acetata u petrol etru. Frakcije su koncentrovane pod sniženim pritiskom da se dobije tercbutil (2S,5R)-4-(cijano(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (550 mg, 67.9 % prinos). LCMS: m/z, 348.2 (M+H); rt 2.07min. LCMS Postupak: Kolona: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (98:2), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (2:98), Gradijent = 20-100 % B tokom 4 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 100 % B; Temperatura: 27 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
Intermedijer 764B: terc-butil (2S,5R)-4-((Z)-2-amino-1-(4-fluorofenil)-2-(hidroksiimino)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-earboksilat
[1249] U smešu proizvoda terc-butil (2S,5R)-4-(cijano(4-fluorofenil) metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (500 mg, 1.44 mmol) u etanolu (15 mL) dodat je hidroksilamin (0.13 mL, 2.16 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 20 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i prečišćena je silikagel (12 g) hromatografijom primenom 0-100% EtOAc/Pet etra kao eluenta. Frakcije su koncentrovane pod sniženim pritiskom da se dobije terc-butil (2S,5R)-4-((E)-2-amino-1-(4-fluorofenil)-2-(hidroksiimino)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (400 mg, 73.1 % prinos). LCMS: m/z, 381.3 (M+H); rt 1.60 min. LCMS Postupak: Kolona: AQUITY UPLC BEH C18(3.0 × 50 mm) 1.7 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (98:2), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (2:98), Gradijent = 20-100 % B tokom 4 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 100 % B; Temperatura: 27 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
Intermedijer 764C: terc-butil (2S,5R)-4-((5-(terc-butil)-1,2,4-oksadiazol-3-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1 -karboksilat
[1250]
[1251] U promešani rastvor terc-butil (2S,5R)-4-((Z)-2-amino-1-(4-fluorofenil)-2-(hidroksiimino)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (100 mg, 0.26 mmol), DIPEA (0.14 mL, 0.8 mmol) u DMF-u (2.0 mL), dodat je pivaloil hlorid (47.5 mg, 0.39 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana tokom 16 h. Reakciona smeša je zagrevana do 90 °C tokom 12 h. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu, koncentrovana pod sniženim pritiskom, rastvorena u DCM-u (100 mL), oprana zasićenim vodenim NaHCO3(20 mL), vodom (20 mL), slanim rastvorom (20 mL), osušena preko Na2SO4i koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod koji je prečišćen silika gel (12g) hromatografijom primenom 0-100% EtOAc/Pet etra kao eluenta. Frakcije su koncentrovane pod sniženim pritiskom da se dobije terc-butil (2S,5R)-4-((5-(terc-butil)- 1,2,4-oksadiazol-3-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (80 mg, 68 % prinos). LCMS: m/z, 447.3 (M+H); rt 2.05 i 2.08 min. LCMS Postupak: Kolona: AQUITY UPLC BEH C18(3.0 × 50 mm) 1.7 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (98:2), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (2:98), Gradijent = 20-100 % B tokom 4 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 100 % B; Temperatura: 27 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
Intermedijer 764D: 5-(terc-butil)-3-(((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)(4-fluorofenil)metil)-1,2,4-oksadiazol
[1252]
[1253] U rastvor terc-butil (2S,5R)-4-((5-(terc-butil)-1,2,4-oksadiazol-3-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (80 mg, 0.18 mmol) u DCM-u (2 mL) na sobnoj temperaturi dodat je TFA (0.18 mL, 2.33 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 4 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. DCM (5 mL) i smeša su ponovo upareni u rotacionom uparivaču. Sirov materijal je osušen pod vakuumom da se dobije 5-(tercbutil)-3-(((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)(4-fluorofenil)metil)-1,2,4-oksadiazol (41 mg, 0.16 mmol, 66 % prinos) kao TFA so. LCMS: m/z, 347.2 (M+H); rt 1.12 min. (LCMS Postupak: Kolona: AQUITY UPLC BEH C18(3.0 × 50mm) 1.7 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-100 % B tokom 4 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 100 % B; Temperatura: 27 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
Primeri 764 i 765: 8-((2S,SR)-4-((5-(terc-butil)-1,2,4-oksadiazol-3-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1254] U rastvor 5-(terc-butil)-3-(((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)(4-fluorofenil)metil)-1,2,4-oksadiazola (41.6 mg, 0.12 mmol) u suvom acetonitrilu (3 mL), 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (40 mg, 0.120 mmol), natrijum bikarbonat (30.3 mg, 0.36 mmol) je dodat na sobnoj temperaturi pod atmosferom argona. Reakciona smeša je mešana tokom 10 minuta na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana do 85 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i uparene do suva. Ostatak je prečišćen silika gel (12 g) hromatografijom primenom 0-10% MeOH/CHCl3kao eluenta. Frakcije su koncentrovane pod sniženim pritiskom da se dobije dijastereoizomerna smeša 8-((2S,5R)-4-((5-(terc-butil)-1,2,4-oksadiazol-3-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila. Sirov materijal je prečišćen putem preparativne HPLC praćeno hiralnom separacijom. Postupak hiralne separacije: Kolona: Cellulose-2 (250 X 4.6) mm, 5 mikrona Mobilna faza: 0.1% TFA u metanolu, Tok: 1.0 mL\min.
[1255] Primer 764: (1 mg, 1.6 % prinos); LCMS: m/z, 530.2 (M+H); rt 2.35 min; LCMS postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.17-8.12 (m, 1H), 8.09-8.02 (m, 1H), 7.71 (dd, J = 6.2, 8.4 Hz, 2H), 7.23 (t, J = 8.9 Hz, 2H), 5.98 (s, 1H), 5.01 (s, 1H), 4.62-4.53 (m, 1H), 3.56 (br dd, J = 2.0, 3.4 Hz, 1H), 3.51 (s, 3H), 3.46 (br d, J = 0.7 Hz, 1H), 3.07-3.01 (m, 1H), 2.96-2.90 (m, 2H), 1.36 (s, 9H), 1.28-1.14 (m, 3H), 1.04 (d, J = 6.6 Hz, 3H).
[1256] Primer 765: (1 mg, 1.6 % prinos); LCMS: m/z, 530.2 (M+H); rt 2.33 min; LCMS postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.16-8.12 (m, 1H), 8.08-7.99 (m, 1H), 7.72-7.60 (m, 2H), 7.257.16 (m, 2H), 6.03 (s, 1H), 5.01 (s, 1H), 4.46-4.35 (m, 1H), 3.68-3.61 (m, 1H), 3.56-3.50 (m, 4H), 2.99-2.85 (m, 3H), 1.37 (s, 9H), 1.21-1.09 (m, 6H).
PRIMERI 766 i 767
8-((2S,5R)-4-((5-ciklopropil-4H-1,2,4-triazol-3-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1257]
Intermedijer 766A: terc-butil (2S,5R)-4-(2-(2-(ciklopropil(imino)metil)hidrazinil)-1-(4-fluorofenil)-2-oksoetil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat
[1258]
[1259] U promešani rastvor 2-((2R,5S)-4-(terc-butoksikarbonil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-2-(4-fluorofenil)sirćetne kiseline (600 mg, 1.64 mmol) u EtOAc-u (4 mL) su dodati benzilhidrazinkarboksilat (272 mg, 1.64 mmol), Et3N (0.46 mL, 3.27 mmol), praćeno sa 1-propanfosfonskim anhidridom (1250 mg, 1.97 mmol) na 0 °C. Reakcionoj smeši je dozvoljeno da postigne sobnu temperaturu i mešana je tokom 16 h. Reakciona smeša je ekstrahovana EtOAc-om (2 X 100 mL), oprana vodom i slanim rastvorom, osušena preko Na2SO4i koncentrovana da se dobije terc-butil (2S,5R)-4-(2-(2-benziloksi) karbonil)hidrazinil)-1-(4-fluorofenil)-2-oksoetil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (700 mg, 83 % prinos). LCMS: m/z, 515.4 (M+H); rt 1.89 & 1.92 min. (LCMS Postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm. Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Gradijent = 20-100 % B tokom 2 minuta, zatim zadržavanje 0.2 minuta pri 100 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
Intermedijer 766B: terc-butil (2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)-2-hidrazinil-2-oksoetil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat
[1260]
[1261] U promešani rastvor terc-butil (2S,SR)-4-(2-(2-((benziloksi)karbonil) hidrazinil)-1-(4-fluorofenil)-2-oksoetil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (800 mg, 1.56 mmol) u EtOH-u (15 mL) dodat je Pd-C (10% na ugljeniku) (83 mg, 0.78 mmol) i hidrogenizovan primenom vodoničnog balona pri pritisku od ~1 atm tokom 16 h. Reakciona smeša je filtrirana preko Celite podloge, oprana viškom EtOH, i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da se dobije terc-butil (2S,SR)-4-(1-(4-fluorofenil)-2-hidrazinil-2-oksoetil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (600 mg, 1.10 mmol, 71.0 % prinos). LCMS: m/z, 381.3 (M+H); rt 1.47 min. (LCMS Postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-100 % B tokom 2 minuta, zatim zadržavanje 0.3 minuta pri 100 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
Intermedijer 766C: terc-butil (2S,5R)-4-(2-(2-(ciklopropil(imino)metil)hidrazinil)-1-(4-fluorofenil)-2-oksoetil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat
[1262]
[1263] U promešani rastvor metil ciklopropankarbimidat, HCl-a (125 mg, 0.92 mmol) u benzenu (5 mL) dodat je Et3N (0.36 mL, 2.58 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 30 min. Reakciona smeša je filtrirana. Filtrat je dodat u terc-butil (2S,5R)-4-(1-(4-luorofenil)-2-hidrazinil-2-oksoetil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (350 mg, 0.92 mmol) i zagrevan na 85 °C tokom 2 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i ekstrahovana EtOAc-om (2 X 100 mL), oprana vodom, slanim rastvorom, osušena preko Na2SO4i koncentrovana da se dobije sirov proizvod. Sirov proizvod je prečišćen fleš hromatografijom primenom silika gel kolone od 12 g i eluiran sa 5% MeOH/CHCl3da se dobije terc-butil (2S,5R)-4-(2-(2-ciklopropil(imino)metil)hidrazinil)-1-(4-fluorofenil)-2-oksoetil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (200 mg, 48.6 % prinos). LCMS: m/z, 448.3 (M+H); rt 1.46 min. (LCMS Postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-100 % B tokom 2 minuta, zatim zadržavanje 0.3 minuta pri 100 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
Intermedijer 766D: terc-butil (2S,SR)-4-((5-ciklopropil-4H-1,2,4-triazol-3-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1 -karboksilat
[1264]
[1265] U tikvicu sa okruglim dnom, terc-butil (2S,SR)-4-(2-(2-(ciklopropil(imino)metil) hidrazinil)-1 -(4-fluorofenil)-2-oksoetil)-2,5-dimetilpiperazin-1 -karboksilat (200 mg, 0.45 mmol) je zagrevan na 180 °C tokom 2-5 min. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i sirov proizvod je prečišćen putem fleš hromatografije primenom kolone sa silika gelom od 12 g i eluiran sa 3% MeOH/CHCl3. Frakcije su koncentrovane da se dobije terc-butil (2S,SR)-4-((5-ciklopropil-4H-1,2,4-triazol-3-il)(4-fluorofenil) metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (100 mg, 52.1 % prinos). LCMS: m/z, 430.3 (M+H); rt 1.73 min. (LCMS Postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-100 % B tokom 2 minuta, zatim zadržavanje 0.3 minuta pri 100 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
Intermedijer 766E: (2R,5S)-1-((5-ciklopropil-4H-1,2,4-triazol-3-il)(4-fluorofenil) metil)-2,5-dimetilpiperazin
[1266]
[1267] U promešani rastvor terc-butil (2S,SR)-4-((5-ciklopropil-4H-1,2,4-triazol-3-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (100 mg, 0.23 mmol), u DCM-u (4 mL), dodat je TFA (0.181 mL, 2.33 mmol) na 0 °C. Reakcionoj smeši je dozvoljeno da dostigne sobnu temperaturu i mešana je tokom 3 h. Rastvarač je uparen pod sniženim pritiskom da se dobije (2R,SS)-1-((5-ciklopropil-4H-1,2,4-triazol-3-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin, TFA so (70 mg, 73.0 % prinos). LCMS: m/z, 330.1 (M+H); rt 0.80 min. (LCMS Postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Gradijent = 20-100 % B tokom 2 minuta, zatim zadržavanje 0.3 minuta pri 100 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.
Primeri 766 i 767: 8-((2S,5R)-4-((5-ciklopropil-4H-1,2,4-triazol-3-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1268] U promešani rastvor (2R,SS)-1-((5-ciklopropil-4H-1,2,4-triazol-3-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin, TFA soli (70 mg, 0.21 mmol) u acetonitrilu (5 mL) dodat je DIPEA (0.15 mL, 0.85 mmol) i mešano je tokom 2-5 min na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-iltrifluorometansulfonat (70.8 mg, 0.212 mmol). Reakciona smeša je zagrevana na 80 °C tokom 4 h. Rastvarač je uparen pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod koji je prečišćen pomoću SFC. Kolona/dimenzije: Whelk(R,R)(250 X 21)mm, 5 µm, % CO2: 65%, % korastvarač: 35% acetonitril: MeOH (50: 50), Total Tok: 80.0g/min, Back Pressure: 100 bar, Temperatura: 30 °C, UV: 225 nm.
[1269] Primer 766: (4.3 mg, 4.13 % prinos); LCMS: m/z, 513.2 (M+H); rt 1.67 min; (LCMS postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm, Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.18-8.10 (m, 1H), 8.08-8.00 (m, 1H), 7.62 (dd, J = 5.7, 8.4 Hz,2H), 7.13 (t, J = 8.7 Hz, 2H), 6.00 (s, 1H), 4.77 (s, 1H), 4.42 (br d, J= 2.2 Hz, 1H), 3.57-3.48 (m, 5H),3.42 (br s, 1H), 2.93 (br dd, J = 3.1, 6.0 Hz, 1H), 2.82 (br dd, J = 3.4, 11.5 Hz, 1H), 2.23-2.17 (m,1H), 2.01-1.90 (m, 1H), 1.11 (dd, J = 6.6, 12.5 Hz, 6H), 0.92 (br dd, J= 2.2, 8.3 Hz, 2H), 0.84-0.77(m, 2H).
[1270] Primer 767: (4.5 mg, 4.13 % prinos); LCMS: m/z, 513.2 (M+H); rt 1.66 min; (LCMS postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 13.62-13.16 (m, 1H), 8.18-8.10 (m, 1H), 8.08-8.00 (m, 1H),7.67 (dd, J = 5.9, 8.3 Hz, 2H), 7.17 (br t, J = 8.8 Hz, 2H),5.97 (s, 1H), 4.86-4.74 (m, 1H), 4.57-4.34(m, 2H), 3.70-3.59 (m, 1H), 3.51 (s, 3H), 3.45-3.39 (m, 1H), 2.97-2.86 (m, 2H), 2.17-2.04(m,1H), 1.30-1.16 (m, 4H), 1.01 (d, J = 6.6 Hz, 2H), 0.96-0.70 (m, 4H).
PRIMERI 768 i 769
8-((2S,5R)-4-((3-ciklopropil-1-metil-1H-1,2,4-triazol-5-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1271]
Intermedijer 768A: terc-butil (2S,5R)-4-((3-ciklopropil-1-metil-1H-1,2,4-triazol-5-il) (4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1 -karboksi lat
[1272]
[1273] U promešani rastvor 2-((2R,5S)-4-(terc-butoksikarbonil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-2-(4-fluorofenil)ackstatne kiseline (300 mg, 0.82 mmol) u DMF-u (3 mL) su dodati ciklopropankarboksimidamid, HCl (148 mg, 1.23 mmol), DIPEA (0.57 mL, 3.27 mmol) praćeno sa HATU (342 mg, 0.90 mmol) na 0 °C. Reakcionoj smeši je dozvoljeno da dostigne sobnu temperaturu i mešano je tokom 16 h. Metilhidrazin sulfat (130 mg, 0.9 mmol) dodat je u reakcionu smešu i zagrevano je na 80 °C tokom 1 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i ekstrahovana EtOAc-om (2 × 50 mL), oprana vodom, slanim rastvorom, osušena preko Na2SO4i koncentrovana da se dobije sirovi proizvod. Sirov proizvod je prečišćen putem fleš hromatografije primenom 12 silika gel kolone i eluiran sa 35% EtOAc u pet. etru. Tražene frakcije su koncentrovane da se dobije terc-butil (2S,5R)-4-((3-ciklopropil-1-metil-1H-1,2,4-triazol-5-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (120 mg, 33.0 % prinos). LCMS: m/z, 444 (M+H); rt 1.93 & 1.97 min. (LCMS Postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
Intermedijer 768B: (2R,5S)-1-((3-ciklopropil-1-metil-1H-1,2,4-triazol-5-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin
[1274]
[1275] U promešani rastvor terc-butil (2S,5R)-4-((3-ciklopropil-1-metil-1H-1,2,4-triazol-5-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (120 mg, 0.27 mmol), u DCM-u (3 mL) dodat je TFA (0.52 m, 6.76 mmol) na 0 °C. Reakcionoj smeši je dozvoljeno da dostigne sobnu temperaturu i mešano je tokom 2 h. Rastvarač je uparen pod sniženim pritiskom da se dobije (2R,5S)-1-((3-ciklopropil-1-metil-1H-1,2,4-triazol-5-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin, TFA. LCMS: m/z, 344 (M+H); rt 0.88 & 0.96 min. (LCMS Postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minuta, zatim zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
Primeri 768 i 769: 8-((2S,SR)-4-((3-ciklopropil-1-metil-1H-1,2,4-triazol-5-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1276] U promešani rastvor (2R,5S)-1-((3-ciklopropil-1-metil-1H-1,2,4-triazol-5-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazina (100 mg, 0.29 mmol) u acetonitrilu (5 mL) dodat je DIPEA (0.26 mL, 1.46 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 5 min. Dalje, dodat je 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftindin-4-il trifluorometansulfonat (146 mg, 0.44 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 80 °C tokom 3 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i uparena pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen pomoću prep-HPLC (HPLC Postupak: Kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, čestice od 5 µm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 0.1% trifluorosirćetne kiseline; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 0.1% trifluorosirćetne kiseline; Gradijent: zadržavanje 0 minuta na 10% B, 10-35% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje 5 minuta pri 100% B; Protok: 15mL/min; Temperatura kolone: 25 °C).
[1277] Primer 768: (28 mg, 17.7 % prinos); LCMS: m/z, 527.2 (M+H); rt 1.86 min; (LCMS Postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 0.1% TFA; Mobilna faza B: 5% voda:95% acetonitril; 0.1% TFA; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%).).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.19-8.12 (m, 1H), 8.11-8.02 (m, 1H), 7.71 (dd, J = 5.6, 8.3 Hz,2H), 7.26 (br t, J = 8.6 Hz, 2H), 6.04 (s, 1H), 5.47-5.30 (m, 1H), 4.64-4.51 (m, 1H), 3.80 (s, 3H),3.71-3.58 (m, 2H), 3.50 (s, 3H), 3.20-3.02 (m, 2H), 1.98-1.87 (m, 1H), 1.23 (d, J = 6.6 Hz, 3H),1.13 (br d, J = 5.4 Hz,3H), 0.90 (dd, J = 3.4, 8.3 Hz, 2H), 0.85-0.67 (m, 2H). Jedan pik protona se spojio sa pikom rezidualnog rastvarača.
[1278] Primer 769: (16 mg, 10.3 % prinos); LCMS: m/z, 527.3 (M+H); rt 1.61 min; (LCMS Postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 0.1% TFA; Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 0.1% TFA; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.20-8.13 (m, 1H), 8.10-8.02 (m, 1H), 7.66 (dd, J = 5.5, 8.4 Hz, 2H), 7.22 (t, J = 8.8 Hz, 2H), 6.06 (s, 1H), 5.27-5.18(m, 1H), 4.59-4.50 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.72 -3.58 (m, 2H), 3.53 (s, 3H), 3.24-3.10 (m, 1H), 3.05-2.93 (m, 1H), 2.47-2.36 (m, 1H), 1.99-1.88(m, 1H),1.18 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.10 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.93-0.85 (m, 2H), 0.82-0.73 (m, 2H).
PRIMERI 770 i 771
8-((2S,5R)-4-((1-(terc-buil)-1H-tetrazol-5-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1279]
Intermedijer 770A: terc-butil (2S,5R)-4-(4-fluorobenzoil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat
[1280]
[1281] U rastvor 4-fluorobenzoeve kiseline (0.98 g, 7 mmol) u DMF-u (10 mL) su dodati TEA (1.95 mL, 14.0 mmol), BOP (2.06 g, 4.67 mmol) i terc-butil (2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (1.0 g, 4.67 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i sirovo jedinjenje je prečišćeno pomoću fleš hromatografije (silika kolona od 12 g, eluirano sa 25-40% etil acetat/ pet etar) da se dobije tercbutil (2S,SR)-4-(4-fluorobenzoil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (1.1 g, 70.1 % prinos) kao beličasta čvrsta supstanca: LCMS: m/z, 337.2 (M+H); rt 1.95 min. LCMS Postupak naziv kolone: AQUITY UPLC BEH C18(3.0 × 50 mm) 1.7 µm Pufer: 10 mM amonijum acetat Mobilna faza A:pufer acetonitril (95:5) Mobilna faza B: pufer: acetonitril (5:95) Postupak:%B: 0 min-20:2 min -100:2.2 min-100 Tok: 0.7 mL/min.
Intermedijer 770B: terc-butil (2S,SR)-4-((1-(terc-butil)-1H-tetrazol-5-il)(4-fluorofenil) metil)-2,5-dimetilpiperazin-1 -karboksilat
[1282]
[1283] U rastvor terc-butil (2S,5R)-4-(4-fluorobenzoil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (350 mg, 1.040 mmol) u DCM-u (8 mL) dodat je karbonil hlorobis(trifenilfosfin)iridijum(I) (40.6 mg, 0.05 mmol), AcOH (0.119 mL, 2.08 mmol), i 1,1,3,3-tetrametildisiloksan (0.4 mL, 2.1 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 5-10 min, i terc-butil izocijanid (173 mg, 2.08 mmol) i TMS-N3(0.28 mL, 2.08 mmol) su dodati. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 14 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i sirovo jedinjenje je prečišćeno pomoću fleš hromatografije (silika kolona od 12 g, eluirano sa 15-30% etil acetat/ pet etar) da se dobije terc-butil(2S,5R)-4-((1-(terc-butil)-1H-tetrazol-5-il) (4-fluorofenil) metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (200 mg, 43.0 % prinos) kao beličasta čvrsta supstanca; LCMS: m/z, 447.2 (M+H); ret. vreme 2.30 min. Info. o LCMS postupku: LCMS Postupak naziv kolone: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm Pufer: 10 mM amonijum acetat Mobilna faza A: Pufer: acetonitril (95:5) Mobilna faza B: Pufer: acetonitril (5:95) Postupak B: 0 min-20:2 min -100:+2.2 min-100 Tok: 0.7 mL/min.
Intermedijer 770C: ((2R,5S)-1-((1-(terc-butil)-1H-tetrazol-5-il) (4-fluorofenil) metil)-2,5-dimetilpiperazin.HCl so
[1284]
[1285] U rastvor terc-butil(2S,5R)-4-((1-(terc-butil)-1H-tetrazol-5-il) (4-fluorofenil) metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (200 mg, 0.45 mmol) u DCM-u (4 mL) dodata je 4 N HCl u dioksanu (0.11 mL, 0.45 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da se dobije (2R,5S)-1-((1-(terc-butil)-1H-tetrazol-5-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin, HCl (85 mg, 54.8 % prinos) kao dijastereoizomerna smeša; LCMS: m/z, 347.2 (M+H); rt 1.10 i 1.20 min LCMS Postupak Naziv kolone: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm Pufer: 10 mM amonijum acetat Mobilna faza A: Pufer: acetonitril (95:5) Mobilna faza B: Pufer: acetonitril (5:95) Postupak: %B: 0 min-20:2 min -100: 2.2 min-100 Tok: 0.7 mL/min.
Primeri 770 i 771: 8-((2S,5R)-4-((1-(terc-butil)-1H-tetrazol-5-il)(4-fluorofenil) metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1286] U rastvor (2R,5S)-1-((1-(terc-butil)-1H-tetrazol-5-il)(4-fluorofenil) metil)-2,5-dimetilpiperazin, HCl-a (100 mg, 0.29 mmol) u acetonitrilu (5 mL) dodat je DIPEA (0.050 mL, 0.289 mmol) na sobnoj temperaturi. Nakon 5 min, dodat je 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (96 mg, 0.29 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 85 °C tokom 3 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i uparene pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen putem preparativne HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: CELLULOSE-4 (250 × 21.2) mm, 5-mikrona M. Faza: 0.1% DEA u MeOH-u; Tok: 20 mL/min; Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da se dobije Pik 1 (Primer 770) i Pik 2 (Primer 771).
[1287] Primer 770: (4.9 mg, 3.05 % prinos); LCMS: m/z, 530.2 (M+H); rt 1.99 min. LC MS uslovi Kolona: Waters XBridge BEH C18 XP (50 × 2.1 mm) 2.5 µm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 minuta; Tok: 1.1 mL/min.<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.15 (d, J=8.6 Hz, 1H), 8.06 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.62 (dd, J=8.7, 5.5 Hz, 2H), 7.23 (t, J=8.9 Hz, 2H), 6.03 (s, 1H), 5.70 (s, 1H), 4.30 (br. s., 1H), 3.61-3.47 (m, 4H), 3.17 (d, J=6.8 Hz, 1H), 2.92 (dd, J=11.9, 3.3 Hz, 1H), 2.72-2.59 (m, 2H), 1.66 (s, 9H), 1.09-1.05 (m, 3H), 1.00 (d, J=6.6 Hz, 3H).
[1288] Primer 771: (3.1 mg, 1.926 % prinos); LCMS: m/z, 530.2 (M+H); rt 1.99 min. LC MS uslov: Kolona: Waters XBridge BEH C18 XP (50 × 2.1 mm) 2.5 µm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 minuta; Tok: 1.1mL/min.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.13 (br d, J=9.3 Hz, 1 H), 8.01-8.09 (m, 1 H), 7.64 (br t, J=6.5 Hz, 2 H), 7.22 (br t, J=8.3 Hz, 2 H), 5.95-6.02 (m, 1 H), 5.66-5.72 (m, 1 H), 4.37-4.49 (m, 1 H), 3.57-3.63 (m, 1 H), 3.51 (s, 3 H), 3.49-3.49 (m, 1 H), 3.14-3.23 (m, 2 H), 2.11-2.17 (m, 1 H), 1.68 (s, 9 H), 1.08 (br d, J=6.6 Hz, 3 H), 0.93 (br d, J=6.1 Hz, 3 H).
PRIMERI 772 i 773
8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(5-izopropil-1,3,4-tiadiazol-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1289]
Intermedijer 772A: terc-butil (2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)-2-(2-izobutirilhidrazinil)-2-oksoetil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat
[1290]
[1291] U promešani rastvor 2-((2R,5S)-4-(terc-butoksikarbonil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-2-(4-fluorofenil)sirćetne kiseline (500 mg, 1.37 mmol) u EtOAc-u (6 mL) su dodati izobutirohidrazid (139mg, 1.36 mmol), Et3N (0.38 mL, 2.73 mmol) praćeno 1-propanfosfonskim anhidridom (1042 mg, 1.64 mmol) na 0 °C. Reakcionoj smeši je dozvoljeno da dostigne sobnu temperaturu i mešana je tokom 16 h. Reakciona smeša je ekstrahovana etil acetatom, oprana vodom, slanim rastvorom, osušena preko Na2SO4i koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije terc-butil (2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)-2-(2-izobutirilhidrazinil)-2-oksoetil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (0.55 g, 1.22 mmol, 89 % prinos). LCMS: m/z, 451.5 (M+H); rt 1.64 min. (LCMS Postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-100 % B tokom 2 minuta, zatim zadržavanje 0.3 minuta pri 100 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
Intermedijer 772B: 2-(((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)(4-fluorofenil)metil)-5-izopropil-1,3,4-tiadiazol
[1292]
[1293] U promešani rastvor terc-butil (2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)-2-(2-izobutirilhidrazinil)-2-oksoetil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (600 mg, 1.33 mmol) u toluenu (6 mL) dodat je Lawesson-ov reagens (539 mg, 1.33 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana na 110 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i uparene pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod. Sirov proizvod je prečišćen putem fleš hromatografije na silika gel koloni od 12 g i eluiran sa 35% EtOAc/pet. etar. Tražene frakcije su koncentrovane da se dobije 2-(((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)(4-fluorofenil)metil)-5-izopropil-1,3,4-tiadiazol (200 mg, 21.5 % prinos). LCMS: m/z, 349.5 (M+H); rt 0.95 i 1.1 min. (LCMS Postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-100 % B tokom 2 minuta, zatim zadržavanje 0.3 minuta pri 100 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
Primer 772 i 773: 8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(5-izopropil-1,3,4-tiadiazol-2-il) metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1294] U promešani rastvor 2-(((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)(4-fluorofenil) metil)-5-izopropil-1,3,4-tiadiazola (100 mg, 0.29 mmol) u acetonitrilu (5 mL) dodat je DIPEA (0.25 mL, 1.44 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 5 min. Dalje, dodat je 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-iltrifluorometansulfonat (96 mg, 0.29 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 80 °C tokom 3 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i uparena pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen pomoću prep-HPLC postupka kao što sledi Kolona: YMC EXRS (250 mm × 19 mm ID,5 µm); Mobilna faza A= 10 mm amonijum bikarbonata u vodi pH 9.5; Mobilna faza B= acetonitril; Tok 17 mL/min; Grad (T/%B): 0/50, 2/60, 15/75).
[1295] Primer 772: (4 mg, 2.5 % prinos); LCMS: m/z, 532 (M+H); rt 3.26 min; (LCMS postupak: Kolona-Kinetex XB-C18 (75 × 3 mm-2.6 µm) Mfaza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitril (98:2), Mfaza B: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitril (2:98).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.15 (d, J=8.3 Hz, 1H), 8.08 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.67 (s, 2H), 7.27 (t, J=8.1 Hz, 2H), 6.01 (s, 1H), 5.24 (s, 1H), 4.5-4.60 (m, 1H), 3.60- 3.65 (m , 1H), 3.52 (s,3H), 3.45-3.35 (m, 2H), 3.29-3.19 (m, 3H), 1.35-1.23 (m, 9H), 1.05 (d, J=6.4 Hz, 3H).
[1296] Primer 773: (6 mg, 3.81 % prinos); LCMS: m/z, 532 (M+H); rt 3.27 min; (LCMS postupak: Kolona-Kinetex XB-C18 (75 × 3 mm-2.6 µm) Mfaza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitril (98:2), Mfaza B: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitril (2:98).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.15 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.07 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.61 (dd, J=5.5, 8.7 Hz, 2H), 7.25 (t, J=8.8 Hz, 2H), 6.02 (s, 1H), 5.31 (s,1H), 4.5-4.60 (m, 1H), 3.65-3.70 (m, 1H), 3.52 (s, 3H), 3.45-3.34 (m, 2H), 2.89-3.01 (m, 2H), 1.36-1.32 (m, 7H), 1.28-1.16 (m, 6H).
PRIMERI 774 i 775
8-((2S,SR)-4-((5-ciklopropil-1,3,4-tiadiazol-2-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1297]
Intermedijer 774A: terc-butil (2S,SR)-4-(2-(2-(ciklopropankarbonil)hidrazinil)-1-(4-fluorofenil)-2-oksoetil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat
[1298]
[1299] U promešani rastvor 2-((2R,5S)-4-(terc-butoksikarbonil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-2-(4-fluorofenil)sirćetne kiseline (300 mg, 0.82 mmol) u EtOAc-u (6 mL) su dodati ciklopropankarbohidrazid (90 mg, 0.901 mmol), Et3N (0.23 mL, 1.64 mmol) praćeno sa 1-propanfosfonskim anhidridom (391 mg, 1.23 mmol) na 0 °C. Reakcionoj smeši je dozvoljeno da dostigne sobnu temperaturu i mešano je tokom 16 h. Reakciona smeša je ekstrahovana etil acetatom, oprana vodom, slanim rastvorom, osušena preko Na2SO4i koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije terc-butil (2S,5R)-4-(2-(2-(ciklopropankarbonil)hidrazinil)-1 -(4-fluorofenil)-2-oksoetil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (400 mg, 54.5 % prinos). LCMS: m/z, 449.4 (M+H); rt 1.62 i 1.64 min. (LCMS Postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5): Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-100 % B tokom 2 minuta, zatim zadržavanje 0.3 minuta pri 100 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
Intermedijer 774B: terc-butil (2S,SR)-4-((5-ciklopropil-1,3,4-tiadiazol-2-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1 -karboksilat
[1300]
[1301] U promešani rastvor terc-butil (2S,SR)-4-(2-(2-(ciklopropankarbonil) hidrazinil)-1-(4-fluorofenil)-2-oksoetil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (300 mg, 0.67 mmol) u toluenu (1 mL) dodat je Lawesson-ov reagens (271 mg, 0.67 mmol). Reakciona smeša je zagrevana na 110 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i uparena pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen pomoću fleš hromatografije primenom silika gel kolone od 12 g i eluiran sa 35% EtOAc u Pet etru. Tražene frakcije su koncentrovane da se dobije terc-butil (2S,5R)-4-((5-ciklopropil-1,3,4-tiadiazol-2-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (130 mg, 43.5 % prinos). LCMS: m/z, 447.3 (M+H); rt 2.18 i 2.22 min. (LCMS Postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-100 % B tokom 2 minuta, zatim zadržavanje 0.3 minuta pri 100 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
Intermedijer 774C: 2-ciklopropil-5-(((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)(4-fluorofenil)metil)-1,3,4-tiadiazol
[1302]
[1303] U promešani rastvor terc-butil (2S,5R)-4-((5-ciklopropil-1,3,4-tiadiazol-2-il) (4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (130 mg, 0.29 mmol) u EtOAc-u (3 mL) dodata je HCl (4 M u dioksanu) (0.73 mL, 2.9 mmol) na 0 °C. Reakcionoj smeši je dozvoljeno da dostigne sobnu temperaturu i mešana je tokom 2 h. Rastvarač je uparen pod sniženim pritiskom da se dobije 2-ciklopropil-5-(((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)(4-fluorofenil)metil)-1,3,4-tiadiazol (80 mg, 79 % prinos). LCMS: m/z, 347.1 (M+H); rt 0.90 i 1.1 min. (LCMS Postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-100 % B tokom 2 minuta, zatim zadržavanje 0.3 minuta pri 100 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
Primeri 774 i 775: 8-((2S,5R)-4-((5-ciklopropl-1,3,4-tiadiazol-2-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1304] U promešani rastvor 2-ciklopropil-5-(((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)(4-fluorofenil)metil)-1,3,4-tiadiazola (100 mg, 0.29 mmol) u acetonitrilu (5 mL) dodat je DIPEA (0.202 mL, 1.155 mmol). Reakciona smeša mešana je tokom 5 min na sobnoj temperaturi. Dalje, dodat je 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (115 mg, 0.35 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 80 °C tokom 4 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i uparena pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod koji je prečišćen putem preparativne HPLC. Kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, čestice od 5-µm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Gradijent: zadržavanje 0 minuta na 15% B, 15-55% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje 5 minuta pri 100% B; Protok: 15 mL/min; Temperatura kolone: 25 °C. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da se dobije Primer 774 (2 mg, 1.308 % prinos) i Primer 775 (1 mg, 0.65 % prinos).
[1305] Primer 774: LCMS: m/z, 530.2 (M+H); rt 1.98 min; (LCMS Postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.17-8.10 (m, 1H), 8.08-8.01 (m, 1H), 7.63 (dd, J = 5.6, 8.8 Hz, 2H), 7.30-7.21 (m, 2H), 6.00 (s, 1H), 5.20 (s, 1H),4.64-4.56 (m, 1H), 3.66-3.60 (m, 1H), 3.54-3.50 (m, 4H), 3.08-3.00 (m, 2H), 2.89 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 2.47-2.43 (m, 1H), 1.29-1.23 (m, 4H), 1.19-1.11 (m,4H), 1.04 (d, J = 6.6 Hz, 2H).
[1306] Primer 775: LCMS: m/z, 530.2 (M+H); rt 2.02 min; (LCMS Postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.18-8.11 (m, 1H), 8.09-8.01 (m, 1H), 7.62-7.52 (m, 2H), 7.29-7.17 (m, 2H), 6.01 (s, 1H), 5.27 (s, 1H), 4.60-4.50(m, 1H), 3.69 (br dd, J = 2.1, 12.1 Hz, 1H), 3.54-3.49 (m, 4H), 3.05-3.01 (m, 1H), 2.87 (dd, J = 3.1, 11.4 Hz, 1H), 2.46 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 2.28 (br d, J = 10.8 Hz, 1H), 1.27-1.15 (m, 8H), 1.03-0.97 (m, 2H).
PRIMERI 776 i 777
8-((2S,5R)-4-((4-ciklopropiloksazol-2-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1307]
Intermedijer 776A: terc-butil (2S,SR)-4-(2-amino-1-(4-fluorofenil)-2-oksoetil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat
[1308]
[1309] U rastvor 2-((2R,5S)-4-(terc-butoksikarbonil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-2-(4-fluorofenil)sirćetne kiseline (400 mg, 1.1 mmol) u tetrahidrofuranu (8 mL) su dodati TEA (0.46 mL, 3.27 mmol) i etil hloroformat (0.16 mL, 1.64 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Dalje, amonijum hidroksid (0.21 mL, 5.46 mmol) je dodat. Reakciona smeša mešana je tokom 30 min i uparena do suva da se dobije tercbutil (2S,SR)-4-(2-amino-1-(4-fluorofenil)-2-oksoetil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (350 mg, 19.3 %). LCMS: m/z, 366.5 (M+H); rt 1.57 min; Info. o postupku: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda:95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat, Tok: 0.7 mL/min.
Intermedijer 776B: terc-butil (2S,5R)-4-((4-ciklopropiloksazol-2-il)(4-fluorofenil) metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat
[1310]
[1311] Smeša 2-bromo-1-ciklopropiletan-1-ona (161 mg, 0.99 mmol), terc-butil (2S,5R)-4-(2-amino-1 -(4-fluorofenil)-2-oksoetil)-2,5-dimetilpiperazin-1 - karboksilata (300 mg, 0.82 mmol), i srebro trifluorometansulfonata (264 mg, 1.03 mmol) u etil acetatu (4 mL) je zagrevana do 60 °C. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i filtrirana kroz levak za sinterovanje. Voda je dodat i smeša je ekstrahovana dva puta etil acetatom (20 mL). Kombinovani organski sloj je osušen preko Na2SO4i uparen do suva da se dobije terc-butil (2S,SR)-4-((4-ciklopropiloksazol-2-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (220 mg, 24.9 % prinos). LCMS: m/z, 330.2 (M-Boc); rt 1.57 min; info o postupku: Luna 3.0 C18(2) 100 Å LC Kolona (20X4.0mm) Mercury MS TM, Mobilna faza A: 0.1%TFA u Milli-Q vodi. Mobilna faza B: 0.1%TFA u acetonitrilu, Tok: 1.5 mL/min.
Intermedijer 776C: 4-ciklopropil-2-(((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)(4-fluorofenil)metil)oksazol, HCl
[1312]
[1313] U rastvor terc-butil (2S,5R)-4-((4-ciklopropiloksazol-2-il)(4-fluorofenil) metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (400 mg, 0.93 mmol) u 1,4-dioksanu (5 mL) dodata je HCl u dioksanu (0.28 mL, 9.31 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Reakciona smeša je uparena do suva da se dobije 4-ciklopropil-2-(((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)(4-fluorofenil) metil)oksazol, HCl (280 mg, 18.1 % prinos). LCMS: m/z, 330.1 (M+H); rt 1.31 min; Info o postupku: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat, Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat, Tok: 0.7 mL/min.
Primeri 776 i 777: 8-((2S,5R)-4-((4-ciklopropiloksazol-2-il)(4-fluorofenil) metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1314] U promešani rastvor 4-ciklopropil-2-(((2R,SS)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)(4-fluorofenil)metil)oksazol, HCl-a (300 mg, 0.82 mmol) u acetonitrilu (3 mL) su dodati DIPEA (0.43 mL, 2.46 mmol) i 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (328 mg, 0.98 mmol). Reakciona smeša je mešana na 80 °C tokom noći. LCMS sirovog oblika je prikazala formiranje proizvoda. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i ostatak je rastvoren u etil acetatu (100 mL). Organski sloj je opran slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, koncentrovan pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod koji je prečišćen preparativnom hiralnom HPLC (postupak hiralne Prep HPLC: CELLULOSE-2 (250 × 4.6 mm), 5 mikrona M. Faza: 0.1% DEA u acetonitrilu) da se dobiju Primeri 776 i 777.
[1315] Primer 776: (8.1 mg, 1.9% prinos); LCMS: m/z, 513.2 (M+H); rt 2.188 min; (LCMS postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.18-8.12 (m, 1H), 8.10-8.03 (m, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.63 (dd, J = 5.7, 8.4 Hz, 2H), 7.21 (t, J = 8.8 Hz, 2H), 6.03 (s, 1H), 4.92 (s, 1H), 4.45 (td, J = 2.5, 3.8 Hz, 1H), 3.63-3.55 (m, 1H), 3.55-3.46 (m, 4H), 2.86 (dd, J = 3.4, 11.7 Hz, 1H), 2.77-2.69 (m, 1H), 2.17 (dd, J = 1.5, 12.0 Hz, 1H), 1.84-1.75 (m, 1H), 1.15 (dd, J = 6.6, 12.5 Hz, 6H), 0.88-0.76 (m, 2H), 0.69-0.60 (m, 2H).
[1316] Primer 777: (3.4 mg, 2.2 % prinos); LCMS: m/z, 513.2 (M+H); rt 2.19 min; (LCMS Postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.21-8.11 (m, 1H), 8.09-8.00 (m, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.64 (dd, J = 5.9, 8.1 Hz, 2H), 7.23 (t, J = 8.7 Hz, 2H), 5.99 (s, 1H), 4.95 (s, 1H), 4.54 (br d, J = 2.7 Hz, 1H), 3.78 (s, 1H), 3.63 (br d, J = 13.0 Hz, 1H), 3.52 (s, 3H), 3.45 (br dd, J = 2.3, 12.1 Hz, 1H), 3.05 (br dd, J = 2.7, 11.2 Hz, 1H), 2.94 (br d, J = 6.1 Hz, 1H), 2.00 (br d, J = 11.2 Hz, 1H), 1.22 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.03 (dd, J = 6.2, 11.6 Hz, 3H), 0.81 (br d, J = 8.1 Hz, 2H), 0.70-0.57 (m, 2H).
[1317] Jedinjenja u tabeli 15 su pripremljena od pogodnog piperazina prema opštoj proceduri opisanoj u primerima 776 i 777, supstitucijom 2-bromo-1-ciklopropiletan-1-ona sa pogodnim acil bromidima u sintetskom nizu. Sinteza je obezbedila smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena u finalnoj fazi primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi
PRIMERI 780 i 781
8-((2S,5R)-4-(1-(2,6-difluorofenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril
[1318]
Intermedijer 780A: Etil 3-amino-6-bromopikolinat.
[1320] U suspenziju etil 3-aminopikolinata (12.0 g. 72.2 mmol) u vodi (54 mL) su dodate sumporna kiselina (3.9 mL, 72.2 mmol) i sirćetna kiselina (4.1 mL, 72.2 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 5 min. Dalje, brom (3.72 mL, 72.2 mmol) u sirćetnoj kiselini (15 mL) je polako dodavan kroz levak za dodavanje tokom 15 min. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Reakcija je kvenčovana vodom (500 mL). Reakciona smeša je filtrirana kroz Bihnerov levak da se dobije etil 3-amino-6-bromopikolinat (12.9 g, 47.4 mmol, 65.6 % prinos) kao bledo žuta čvrsta supstanca. LCMS: m/z, 247.1 (M+2); rt 1.18 min. (info. o LC-MS postupku: Kolona- AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm; Mobilna faza A: Pufer: acetonitril (95:5); Mobilna faza B: Pufer: acetonitril (5:95), Pufer: 10 mM amonijum acetat; Gradijent: 20-100 % B tokom 2.0 minuta, zatim zadržavanje 0.2 minuta pri 100% B, Protok 0.7 mL/min).
Intermedijer 780B: Etil 6-bromo-3-(2-cijanoacetamido) pikolinat.
[1321]
[1322] U promešani rastvor etil 3-amino-6-bromopikolinata (2.0 g, 8.16 mmol) u DMF-u (15 mL) su dodati 2-cijanosirćetna kiselina (1.39 g, 16.32 mmol) i TEA (2.84 mL, 20.4 mmol), praćeno sa 1-propanfosfonskim anhidridom (10.8 mL, 18 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Reakciona smeša je kvenčovana vodom (100 mL) i mešana je tokom 15 min da se dobije čvrsta supstanca koja je filtrirana kroz Bihnerov levak da se dobije etil 6-bromo-3-(2-cijanoacetamido)pikolinat (2.45 g, 7.85 mmol, 96 % prinos) kao žuta čvrsta supstanca; LCMS: m/z, 314.0 (M+2); rt 2.023 min. (Info. o LCMS postupku: KolonaKINETEX-XB-C18 (75 × 3 mm- 2.6 µm); M faza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitril (98:2); M faza B: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitril (2:98); Gradijent: 20-100% B tokom 4 minuta, Protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 100% B Protok 1.5 mL/min; zatim Gradijent: 100-20% B tokom 0.1 minuta, Protok 1.5 mL/min).
Intermedijer 780C: etil 6-cijano-3-(2-cijanoacetamido)pikolinat
[1323]
[1324] U promešani rastvor etil 6-bromo-3-(2-cijanoacetamido)pikolinata (200 mg, 0.64 mmol) u NMP-u (8 mL) su dodati cink (8.38 mg, 0.128 mmol) i cink cijanid (150 mg, 1.28 mmol) pod azotom. Azotno pročišćavanje je nastavljeno tokom 3 min i dppf (21.3 mg, 0.04 mmol) i Pd2(dba)3(58.7 mg, 0.06 mmol) su dodati. Azotno pročišćavanje je nastavljeno tokom drugih 3 min. Reakciona smeša je zagrevana do 80 °C tokom 1 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature. Reakcija je kvenčovana vodom. Reakciona smeša je filtrirana kroz Celite podlogu. Filtrat je ekstrahovan etil acetatom (3 × 100 mL). Kombinovani organski sloj je opran slanim rastvorom (50 mL) i osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, filtriran i uparen pod sniženim pritiskom. Sirovo jedinjenje je prečišćen silika gel kolonom (12 g, eluiranjem sa 34%-39% etil acetat/ Pet etar) da se dobije etil 6-cijano-3-(2-cijanoacetamido)pikolinat (70 mg, 0.271 mmol, 42.3 % prinos) kao braon čvrsta supstanca. LCMS: m/z, 257.2 (M-H); rt 1.10 min. (Info. o LCMS postupku: Kolona- AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm; Mobilna faza A: Pufer: acetonitril (95:5); Mobilna faza B: Pufer: acetonitril (5:95), Pufer: 10 mM amonijum acetat; Gradijent: 20-100 % B tokom 2.0 minuta, zatim zadržavanje 0.3 minuta pri 100% B, Protok 0.7 mL/min).
Intermedijer 780D: 6,8-diokso-5,6,7,8-tetrahidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril
[1325]
[1326] U promešani rastvor etil 6-cijano-3-(2-cijanoacetamido) pikolinata (70 mg, 0.27 mmol) u DCM-u (5 mL) dodat je trimetilamin (0.11 mL, 0.81 mmol). Reakciona smeša je zagrevana do 45 °C i mešana je tokom 3 h. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Dalje, 10% etil acetat u heksanu je dodat. Reakciona smeša mešana je tokom 15 min i filtrirana je kroz Bihnerov levak da se dobije 6, 8-diokso-5, 6, 7, 8-tetrahidro-1,5-naftiridin-2, 7-dikarbonitril (54 mg, 0.26 mmol, 94 % prinos) kao braon čvrsta supstanca. LCMS: m/z, 211.1 (M-H); rt 0.41 min. (Info. o LCMS postupku: Kolona-AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm; Mobilna faza A: Pufer: acetonitril (95:5); Mobilna faza B: Pufer: acetonitril (5:95), Pufer: 10 mM amonijum acetat; Gradijent: 20-100 % B tokom 2.0 minuta, zatim zadržavanje 0.3 minuta pri 100% B, Protok 0.7 mL/min.
Intermedijer 780E: 5-metil-6,8-diokso-5,6,7,8-tetrahidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril
[1327]
[1328] U promešani rastvor 6,8-diokso-5,6,7,8-tetrahidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitrila (50 mg, 0.24 mmol) u DMF-u (3 mL) dodat je NaH (28.3 mg, 0.71 mmol) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 min, zatim je dodat metil jodid (0.05 mL, 0.7 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom dodatnih 3 h. Reakciona smeša je kvenčovana vodom (10 mL) i zakišeljena sa 1.5 N HCl da se podesi pH ~6 na 0 °C. Reakciona smeša mešana je tokom 15 min da se dobije čvrsti ostatak koji je filtriran kroz Bihnerov levak da se dobije 5-metil-6,8-diokso-5,6,7,8-tetrahidro-1,5-naftiridin-2.7-dikarbonitril (20 mg, 0.088 mmol, 37.5 % prinos) kao braon čvrsta supstanca. LCMS: m/z, 225.0 (M-H); rt 1.30 min. (Info. o LCMS postupku: Kolona-KINETEX- XB-C18 (75 × 3 mm- 2.6 µm); M faza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitril (98:02); M faza B: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitril (2:98); Gradijent: 20-100% B tokom 4 minuta, Protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 100% B Protok 1.5 mL/min; zatim Gradijent: 100-20% B tokom 0.1 minuta, Protok 1.5 mL/min.
Intermedijer 780F: 3,6-dicijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat
[1329]
[1330] U promešani rastvor 5-metil-6,8-diokso-5,6,7,8-tetrahidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitrila (0.3 g, 1.33 mmol) u DCM-u (8 mL) su dodati TEA (0.56 mL, 3.9 mmol) i DMAP (0.02 g, 0.14 mmol) na 0 °C, praćeno sa trifluorometansulfonskim anhidridom (0.45 mL, 2.7 mmol). Reakciona smeša je polako zagrevana do sobne temperature i mešana je tokom 1.5 h. Reakcija je kvenčovana vodom (50 mL). Reakciona smeša je ekstrahovana DCM-om (3 × 100 mL). Kombinovani organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, filtriran i uparen pod sniženim pritiskom da se dobije 3,6-dicijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (0.32 g, 67.3%) kao braon čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 8.06-8.03 (d, 1H), 7.95-7.92 (d, 1H), 3.80 (s, 3H).
Intermedijer 780G: terc-butil (2R,5S)-4-(3,6-dicijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat
[1331]
[1332] U promešani rastvor (2R,5S)-terc-butil 2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (126 mg, 0.59 mmol) u acetonitrilu (5 mL) su dodati DIPEA (0.2 mL, 1.17 mmol) i 3,6-dicijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (140 mg, 0.39 mmol). Reakciona smeša je zagrevana do 85 °C tokom 2 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i uparena pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod. Sirov proizvod je prečišćen silika gel kolonom (24 g, eluirano sa 100-80% etil acetat/ Pet etar) da se dobije terc-butil (2R,5S)-4-(3,6-dicijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (120 mg, 0.24 mmol, 61.8 % prinos) kao svetlo braon čvrsta supstanca. LCMS: m/z, 423.0 (M+H); rt 1.58 min; (LCMS postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
Intermedijer 780H: 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril.TFA
[1333]
[1334] U promešani rastvor terc-butil (2R,5S)-4-(3,6-dicijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (80 mg, 0.19 mmol) u DCM-u (10 mL) dodat je TFA (1 mL, 12.98 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da se dobije 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril, TFA (80 mg, 0.115 mmol, 61.0 % prinos) kao guma. LCMS: m/z, 323.3 (M+H); rt 0.59 min; (LCMS postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
Primeri 780 i 781: 8-((2S,5R)-4-(1-(2,6-difluorofenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril
[1335] U promešani rastvor 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril,TFA (60 mg, 0.19 mmol) u acetonitrilu (2 mL) dodat je DIPEA (0.1 mL, 0.6 mmol), praćeno sa 2-(1-bromoetil)-1,3-difluorobenzenom (61.7 mg, 0.28 mmol). Reakciona smeša je zagrevana do 85 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i uparena pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u etil acetatu (100 mL). Organski sloj je opran slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, koncentrovan pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen preparativnom HPLC (Prep HPLC Postupak: Kolona: DAD 1: Bridge Phenil (250 mm × 4.6 mm) 5 µm, DAD-2: Inersil ODS (250 mm × 4.6 mm) 5 µm ID, 5 µm) Mobilna faza 10 mM amonijum acetat u vodi pH: 4.5, MeOH: acetonitril: 50: 50 A-0.1% DEA u acetonitrilu, Mobilna faza B-0.1% DEA u MeOH-u, %B-0/70, 20/100 Tok: 2 mL/min) da se dobiju Primeri 780 i 781.
[1336] Primer 780: (8.9 mg, 10.23 % prinos); LCMS: m/z, 463.2 (M+H); rt 2.349 min; (LCMS postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.32-8.22 (m, 1H), 8.21-8.10 (m, 1H), 7.44-7.31 (m, 1H), 7.14-6.99 (m, 2H), 4.84 (br. s., 1H), 4.15 (q, J=6.5 Hz, 1H), 3.96 (dd, J=3.5, 12.5 Hz, 1H), 3.54 (s, 3H), 3.25-3.14 (m, 1H), 2.88-2.73 (m, 2H), 1.45 (d, J=6.5 Hz, 3H), 1.36 (d, J=6.5 Hz, 3H), 0.90 (d, J=6.5 Hz, 3H), jedan proton se spojio sa rezidualnom vodom.
[1337] Primer 781: (8.9 mg, 10.23 % prinos); LCMS: m/z, 463.2 (M+H); rt 2.383 min; (LCMS postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm: Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.31-8.23 (m, 1H), 8.19-8.09 (m, 1H), 7.41-7.32 (m, 1H), 7.12-6.99 (m, 2H), 4.71-4.59 (m, 1H), 4.17-4.02 (m, 2H), 3.54-3.46 (m, 5H), 3.18-3.11 (m, 1H), 2.22-2.14 (m, 1H), 1.50-1.40 (m, 3H), 1.22-1.12 (m, 3H), 1.01-0.91 (m, 3H).
[1338] Primeri u tabeli 16 su pripremljeni od pogodnog piperazina prema opštoj proceduri opisanoj u primerima 780 i 781 supstitucijom 2-(1-bromoetil)-1,3-difluorobenzena sa pogodnim α-metil benzilbromidima u sintetskom nizu. Kada je reakcija dala smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena u finalnoj fazi primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi.
[1339] Primeri u tabeli 17 su pripremljeni od pogodnog piperazina prema opštoj proceduri opisanoj u primerima 780 i 781, supstitucijom 2-(1-bromoetil)-1,3-difluorobenzena sa pogodnim benzhidril hloridom/bromidima u sintetskom nizu. Kada je reakcija dala smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena u finalnoj fazi primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi.
[1340] Primeri u tabeli 18 su pripremljeni od pogodnog piperazina prema opštoj proceduri opisanoj u primerima 700 i 701, supstitucijom 4-ciklopropiltiazol-2-karbaldehida sa pogodnim heterocikličnim aldehidom i Intermedijerom 780H u sintetskom nizu. Kada je reakcija dala smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena u finalnoj fazi primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi.
[1341] Primeri u tabeli 19 su pripremljeni od pogodnog piperazina prema opštoj proceduri opisanoj u primerima 735 i 736 supstitucijom (Z)-N'- hidroksiciklopropan karboksimidamida sa pogodnim amidoksimima i Intermedijerom 780F u sintetskom nizu. Kada je reakcija dala smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena u finalnoj fazi primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi.
[1342] Primeri u tabeli 20 su pripremljeni od pogodnog piperazina prema opštoj proceduri opisanoj u primerima 729 i 730, supstitucijom 5-ciklopropilizoksazol-3-karboksilne kiseline sa pogodnom izoksazol-3-karboksilnom kiselinom i primenom Intermedijera 780F u sintetskom nizu. Kada je reakcija dala smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena u finalnoj fazi primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi.
[1343] Primeri u tabeli 21 su pripremljeni od pogodnog piperazina prema opštoj proceduri opisanoj u primerima 780 i 781, supstitucijom 2-(1-bromoetil)-1,3-difluorobenzena sa pogodnim benzhidril hlorid/bromidima u sintetskom nizu. Kada je sinteza obezbedila smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena u finalnoj fazi primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi.
[1344] Primeri u tabeli 22 su pripremljeni od pogodnog piperazina prema opštoj proceduri opisanoj u primerima 780 i 781, supstitucijom 2-(1-bromoetil)-1,3-difluorobenzena sa pogodnim α-metil benzil hloridima/ bromidima u sintetskom nizu. Kada je sinteza obezbedila smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena u finalnoj fazi primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi.
[1345] Primeri u tabeli 23 su pripremljeni od odgovarajućeg piperazina prema opštoj proceduri opisanoj u Primeru 780 i 781, supstitucijom 2-(1-bromoetil)-1,3-difluorobenzena sa pogodnim benzil hloridima/bromidima u sintetskom nizu. Kada je sinteza obezbedila smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena u finalnoj fazi primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi.
[1346] Primeri u tabeli 24 su pripremljeni od pogodnog piperazina prema opštoj proceduri opisanoj u primerima 700 i 701, supstitucijom 4-ciklopropiltiazol-2-karbaldehida sa pogodnim heterocikličnim aldehidom i Intermedijerom 780F u sintetskom nizu. Kada je sinteza obezbedila smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena u finalnoj fazi primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi.
[1347] Primeri u tabeli 25 su pripremljeni od pogodnog piperazina prema opštoj proceduri opisanoj u primerima 735 i 736 supstitucijom (Z)-N'- hidroksiciklopropan karboksimidamida i Intermedijera 780F u sintetskom nizu. Kada je reakcija dala smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena u finalnoj fazi primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi.
[1348] Jedinjenja u tabeli 26 su pripremljena od pogodnog piperazina primenom odgovarajućeg benzhidril hlorida/bromida kao što je opisano za primer 302. Kada je reakcija dala smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi.
[1349] Jedinjenja u tabeli 27 su pripremljena od pogodnog piperazina primenom odgovarajućeg benzil hlorida/bromida kao što je opisano za primere 308 i 309. Kada je sinteza obezbedila smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi
[1350] Jedinjenja u tabeli 28 su pripremljena od pogodnog piperazina primenom odgovarajućeg benzil hlorida/bromida kako je opisano u proceduri za Primer 246. Sirov materijal je prečišćen preparativnom HPLC da bi se dobio proizvod.
[1351] Primeri u tabeli 29 su pripremljeni od pogodnog piperazina prema opštoj proceduri opisanoj u primerima 735 i 736. Kada je reakcija dala smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena u finalnoj fazi primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi.
[1352] Primeri u tabeli 30 su pripremljeni od pogodnog piperazina prema opštoj proceduri opisanoj u primerima 700 i 701, supstitucijom 4-ciklopropiltiazol-2-karbaldehida sa pogodnim heterocikličnim aldehidom i Intermedijerom 780F u sintetskom nizu. Kada je sinteza obezbedila smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena u finalnoj fazi primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi.
[1353] Primeri u tabeli 31 su pripremljeni od pogodnog piperazina prema opštoj proceduri opisanoj u primerima 729 i 730, supstitucijom 5-ciklopropilizoksazol-3-karboksilne kiseline sa pogodnom izoksazol-3-karboksilnom kiselinom i primenom Intermedijera 780F u sintetskom nizu. Kada je sinteza obezbedila smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena u finalnoj fazi primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi.
[1354] Jedinjenja u tabeli 32 su pripremljena od pogodnog piperazina primenom odgovarajućeg benzil hlorida/bromida kao što je opisano za primer 246. Sirov materijal je prečišćen preparativnom HPLC da bi se dobio proizvod.
[1355] Jedinjenja u tabeli 33 su pripremljena od pogodnog piperazina primenom odgovarajućeg α-metil benzil hlorida/bromida kao što je opisano za primere 308 i 309. Kada je sinteza obezbedila smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi.
[1356] Jedinjenja u tabeli 34 su pripremljena od pogodnog piperazina primenom odgovarajućeg benzhidril hlorida/bromida kao što je opisano za primer 302. Kada je reakcija dala smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi.
[1357] Primeri u tabeli 35 su pripremljeni od pogodnog piperazina prema opštoj proceduri opisanoj u primerima 729 i 730. Kada je sinteza obezbedila smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena u finalnoj fazi primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi.
[1358] Primeri u tabeli 36 su pripremljeni od pogodnog piperazina prema opštoj proceduri opisanoj u primerima 735 i 736. Kada je sinteza obezbedila smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena u finalnoj fazi primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi.
[1359] Jedinjenja u tabeli 37 su pripremljena od pogodnog piperazina primenom odgovarajućeg benzhidril hlorida/bromida kao što je opisano za primer 302. Kada je sinteza obezbedila smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi.
TABELA 37
[1360] Jedinjenja u tabeli 38 su pripremljena od pogodnog piperazina primenom odgovarajućeg α-alkil benzil hlorida/bromida kao što je opisano za primer 308/309. Kada je sinteza obezbedila smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi.
[1361] Jedinjenja iz Tabele 39 su pripremljena u skladu sa opštom procedurom opisanom u primeru 246 alkilacijom azota piperazina bilo sa alkil hloridom ili bromidom. Sirov materijal je prečišćen preparativnom HPLC da bi se dobio proizvod.
PRIMER 1150
8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(hidroksimetil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1362]
Intermedijer 1150A: metil ((benziloksi )karbonil)-D-seril-L-alaninat
[1364] Diizopropiletilamin (75 mL, 430 mmol) dodat je u kapima u ohlađenu smešu metil L-alaninata (20 g, 143 mmol), 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilkarbodiimid hidrohlorida (33.0 g, 172 mmol), ((benziloksi)karbonil)-D-serina (34.3 g, 143 mmol) u dihlorometanu (36 mL). Dobijena smeša je mešana pod azotom na temperaturi sredine tokom 16 h. Nakon uklanjanja rastvarača in vacuo na 40 °C, ostatak je razblažen zasićenim natrijum karbonatom (200 mL), vodom (200 mL) i ekstrahovan EtOAc-om (500 mL X 2). Kombinovane organske faze su oprane 1.5 M hlorovodoničnom kiselinom (200 mL), zasićenim slanim rastvorom (200 mL), osušene preko natrijum sulfata i koncentrovane in vacuo na 40 °C da se dobije metil((benziloksi)karbonil)-D-seril-L-alaninat (30 g, 64.6 % prinos) kao bezbojna čvrsta supstanca. LCMS: m/z, 325.1 (M+H); rt 0.90 min. (LCMS Postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 x 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
Intermedijer 1150B: (3R,6S)-3-(hidroksimetil)-6-metilpiperazin-2,5-dion
[1365]
[1366] U promešani rastvor metil ((benziloksi)karbonil)-D-seril-L-alaninata (10 g, 30.8 mmol) u MeOH-u (100 mL) dodat je Pd-C (10% na ugljeniku) (0.66 g, 6.17 mmol). Reakciona smeša je mešana pod vodoničnim balonom pri 1 atm tokom 16 h. Reakciona smeša je filtrirana kroz Celite podlogu, oprana viškom MeOH (150 mL) i the filtrate je refluksovan na 70 °C tokom 16 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da se dobije (3R,6S)-3-(hidroksimetil)-6-metilpiperazin-2,5-dion (4.5 g, 92 % prinos).<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.09 (s, 1 H), 7.91 (br s, 1 H), 5.13 (br s, 1 H), 3.92 (q, J=6.9 Hz, 1 H), 3.49-3.77 (m, 3 H), 1.23 (d, J=7.1 Hz, 3 H).
Intermedijer 1150C: ((2S,5S)-5-metilpiperazin-2-il)metanol
[1367]
[1368] U (3R,6S)-3-(hidroksimetil)-6-metilpiperazin-2,5-dion (5 g, 31.6 mmol) dodat je rastvor borana u THF-u (1M, 237 mL, 237 mmol). Smeša je zagrevana do 70 °C tokom 18 h. Reakciona smeša je ohlađena na 0 °C. Metanol (65 mL) je dodavan postepeno, praćeno 5 M hlorovodoničnom kiselinom (16 mL) i reakciona smeša je zagrevana do 70 °C tokom 2h.Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, dobijena čvrsta supstanca je filtrirana, pogača je oprana THF-om (40 mL) i osušena da se dobije ((2S,SS)-5-metilpiperazin-2-il)metanol, 2 HCl (4.4 g, 68.5 % prinos) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, D2O) δ ppm 3.80-3.89 (m, 1 H), 3.53-3.73 (m, 5 H), 3.10-3.33 (m, 2 H), 1.35 (d, J=6.4 Hz, 3 H).
Intermedijer 1150D: 8-((2S,5S)-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1369]
[1370] U promešani rastvor ((2S,5S)-5-metilpiperazin-2-il)metanol, 2 HCl-a (500 mg, 2.46 mmol) u acetonitrilu (5 mL), DIPEA (2.58 mL, 14.77 mmol) i 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (820 mg, 2.46 mmol) su dodati sekvencijalno na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana na 85 °C tokom 6 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod koji je prečišćen putem silika gel hromatografije (15% MeOH (10% aq. NH3)\CHCl3) da se dobije 8-((2S,5S)-5-(hidroksimetil)-2-metilpipemzin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (250 mg, 32.4 % prinos). LCMS: m/z, 314.3 (M+H); rt 0.54 min. (LCMS Postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
Primer 1150: 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(hidroksimetil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril.
[1371] U promešani rastvor 8-((2S,5S)-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (40 mg, 0.13 mmol), 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1.5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (25 mg, 0.075 mmol) u acetonitrilu (5 mL) dodat je DIPEA (0.09 mL, 0.51 mmol). Nakon 5 min na sobnoj temperaturi, 4,4'-(bromometilen)bis(metilbenzen) (70.3 mg, 0.26 mmol) je dodat. Reakciona smeša je zagrevana na 85 °C tokom 6 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i sirov proizvod je prečišćen preparativnom HPLC. Kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, čestice od 5 µm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 0.1% trifluorosirćetne kiseline; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 0.1% trifluorosirćetne kiseline; Gradijent: zadržavanje 0 minuta na 15% B, 15-46% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje 5 minuta pri 100% B; Protok: 15 mL/min; Temperatura kolone: 25 °C. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da se dobije 8-((2S,5S)-4-(di-p-tolilmetil)-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (2 mg, 3.09 % prinos). LCMS: m/z, 508.3 (M+H); rt 2.296 min; (LCMS Postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%.<1>H NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.17-8.10 (m, 1H), 8.08-8.01 (m, 1H), 7.41 (d, J=8.1 Hz, 2H), 7.36 (d, J=8.1 Hz, 2H), 7.11 (d, J=7.8 Hz, 2H), 7.07 (d,J=8.1 Hz, 2H), 6.12 (s, 1H), 4.84 (s, 1H), 4.82-4.73 (m, 1H), 4.31 (t, J=4.4 Hz, 1H), 3.77-3.64 (m, 2H), 3.63-3.57 (m, 1H), 3.52 (s, 4H), 2.96-2.82 (m, 2H), 2.43-2.38 (m, 1H), 2.24 (s, 3H), 2.21 (s, 3H), 1.23 (d, J=6.6 Hz, 3H).
[1372] Primeri u tabeli 40 su pripremljeni u skladu sa opštom procedurom opisanom u primeru 1150, supstitucijom (4,4'-(bromometilen)bis(metilbenzen) sa pogodnim benzihidril bromidima u sintetskom nizu. Kada je sinteza obezbedila smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena u finalnoj fazi primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi.
PRIMER 1155
8-((2S,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-I,5-naftiridin-2-karbonitril
[1373]
Intermedijer A85: terc-butil (2S,5S)-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat
[1374]
[1375] U ledom ohlađeni, promešani rastvor ((2S,SS)-5-metilpiperazin-2-il)metanol, 2 HCl-a (2.1 g, 10.34 mmol) u MeOH-u (10 mL), dodat je Et3N (4.32 mL, 31.0 mmol). Nakon 5 min., Boc-anhidrid (5.76 mL, 24.81 mmol) u MeOH-u (14.5 mL) dodat je u kapima tokom perioda od 15 min. Reakcionoj smeši je dopušteno da dostigne sobnu temperaturu, mešana je tokom 1 h praćeno zagrevanjem na 50 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je koncentrovana i ostatak je rastvoren u EtOH-u (40 mL). Dodat je rastvor NaOH (2.1 g, 52 mmol) u vodi (40 mL) i reakciona smeša je zagrevana na 100 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, neutralisana sa vodenom 1.5 N HCl (~300 mL) do pH 9 i ekstrahovana hloroformom (3 × 100 mL). Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani da se dobije terc-butil (2S,SS)-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat (2.0 g, 84 % prinos). LCMS: m/z, 231.3 (M+H); rt 0.70 min. (LCMS Postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).<1>H NMR (400 MHz, METANOL-d4) δ ppm 4.06-4.14 (m, 1 H), 3.76 (dd, J=13.8, 1.8 Hz, 1 H), 3.57-3.65 (m, 1 H), 3.52 (dd, J=10.8, 6.8 Hz, 1 H), 3.22 (dd, J= 13.8, 4.3 Hz, 1 H), 3.03 (dd, J=13.1, 5.0 Hz, 1 H), 2.88-2.96 (m, 1 H), 2.52 (dd, J=13.1, 3.0 Hz, 1 H), 1.46 (s, 9 H), 1.23 (d,J=7.0 Hz, 3 H).
Intermedijer 1155B: terc-butil (2S,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1 -karboksilat
[1376]
[1377] U promešani rastvor terc-butil (2S,SS)-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-karboksilata (0.5 g, 2.17 mmol) u acetonitrilu (5 mL), DIPEA (1.2 mL, 6.51 mmol), i 4,4'-(bromometilen)bis(fluorobenzen) (0.62 g, 2.2 mmol) su dodati sekvencijalno na sobnoj temperaturi, praćeno zagrevanjem na 80 °C tokom 3 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod koji je prečišćen silika gel kolonskom hromatografijom primenom silika gel fleš kolone od 24 g, eluiranjem sa 0-7% MeOH u DCM-u da se dobije tercbutil (2S,SS)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat (650 mg, 69.2 % prinos) kao beličasta čvrsta supstanca. LCMS: m/z, 433.3 (M+H); rt 2.12 min. (LCMS Postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 x 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-100 % B tokom 2 minuta, zatim zadržavanje 0.2 minuta pri 100 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
Intermedijer 1155C: ((2S,SS)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-5-mεtilpiperazin-2-il) metanol hidrohlorid
[1378]
[1379] U promešani rastvor terc-butil (2S,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-5-(hidroksimetil)-2-mεtilpiperazin-1-karboksilata (300 mg, 0.7 mmol) u DCM-u (5 mL), dodata je HCl (4N u dioksanu) (1.73 mL, 6.94 mmol) u kapima na sobnoj temperaturi. Nakon mešanja tokom 3 h., rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom, ko-destilovan sa acetonitrilom (3X10 mL), sirov proizvod je triturisan dietil etrom (10 mL) i osušen da se dobije ((2S,5S)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-5-metilpiperazin-2-il)metanol hidrohlorid (235 mg, 92 % prinos) kao beličasta čvrsta supstanca. LCMS: m/z, 333.2 (M+H); rt 1.19 min. (LCMS Postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-100 % B tokom 2 minuta, zatim zadržavanje 0.2 minuta pri 100 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
Intermedijer 1155D: 8-((2S,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1380]
[1381] U promešani rastvor ((2S,5S)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-5-metilpiperazin-2-il)metanol hidrohlorida (230 mg, 0.624 mmol) u acetonitrilu (5 mL), DIPEA (0.33 mL, 1.9 mmol) i 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (208 mg, 0.624 mmol) su dodati sekvencijalno na sobnoj temperaturi praćeno zagrevanjem na 80 °C tokom 4 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom, sirov proizvod je prečišćen silika gel kolonskom hromatografijom primenom fleš kolone od 24 g, eluiranjem sa 40-100% EtOAc/heksan praćeno sa 0-10% MeOH-a u CHCl3-u da se dobije 8-((2S,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (160 mg, 49.8 % prinos). LCMS: m/z, 516.6 (M+H); rt 0.79 min. (LCMS Postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (3.0x50mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-100 % B tokom 2 minuta, zatim zadržavanje 0.3 minuta pri 100 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
Primer 1155: 8-((2S,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-nafti ridin-2-karbonitril
[1382] U promešani rastvor 8-((2S,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1 -il)-5-metil -6-okso-5.6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (30 mg, 0.06 mmol) u THF-u (2 mL), dodat je NaH (4.65 mg, 0.12 mmol, 60%) na 0 °C. Nakon mešanja tokom 5 min., dodat je metil jodid (5.46 µL, 0.09 mmol). Reakcionoj smeši je dopušteno da dostigne sobnu temperaturu. Reakciona smeša je mešana tokom 4 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je kvenčovana ledeno hladnom vodom i ekstrahovana EtOAc-om (3 X 20 mL). Kombinovani organski ekstrakti su oprani slanim rastvorom, osušeni preko natrijum sulfata i koncentrovani da se dobije sirov proizvod. Sirov proizvod je prečišćen preparativnom HPLC. Kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, čestice od 5 µm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Gradijent: zadržavanje 3 minuta pri 40% B, 40-61% B tokom 15 minuta, zatim zadržavanje 5 minuta pri 100% B; Protok: 15 mL/min; Temperatura kolone: 25 °C. Prikupljanje frakcija je započeto MS signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da se dobije 8-((2S,5S)-4-(bis(4-fluorofenil) metil)-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (5.9 mg, 18.2 % prinos). LCMS: m/z, 530.2 (M+H); rt 2.286 min; (LCMS Postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1)mm, 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.13-8.17 (m, 1H), 8.03-8.10 (m, 1H), 7.50-7.64 (m, 4H), 7.06-7.21 (m, 4H), 6.07 (s, 1H), 5.00 (s, 1H), 4.64 -4.75 (m, 1H), 3.64-3.76 (m, 3H), 3.49-3.55 (m, 4H) 3.05 (s, 3H) 3.00 (td, J=6.24, 1.47 Hz, 1H) 2.81-2.88 (m, 1H) 2.35-2.42 (m, 1H) 1.29 (d, J = 6.36 Hz, 3H).
[1383] Primeri u tabeli 41 su pripremljeni u skladu sa opštom procedurom opisanom u primeru 1155, supstitucijom (4,4'-(bromometilen)bis(fluorobenzen) sa pogodnim benzihidril bromidima u sintetskom nizu.
PRIMERI 1157 i 1158
8-((2S,SS)-4-((4-cijanofenil)(4-fluorofenil)metil)-S-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1384]
Intermedijer 1157A: terc-butil (2S,5S)-4-((4-cijanofenil)(4-fluorofenil)metil)-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat
[1385]
[1386] U rastvor terc-butil (2S,SS)-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-karboksilata (250 mg, 1.09 mmol) u acetonitrilu (10 mL) dodat je DIPEA (1.9 mL, 11 mmol) na sobnoj temperaturi. Nakon 5 min, 4-(bromo(4-fluorofenil)metil)benzonitril (315 mg, 1.09 mmol) je dodat praćeno zagrevanjem na 80 °C tokom 2h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen pomoću fleš hromatografije (0-10% MeOH u DCM-u; Kolona od 12 g) da se dobije terc-butil (2S,5S)-4-((4-cijanofenil)(4-fluorofenil)metil)-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat (250 mg, 52.4 % prinos) kao dijastereoizomerna smeša. LCMS: m/z, 438.3 (M-H); rt 1.96 i 2.04 min. (LCMS Postupak: Kolona: AQUITY UPLC BEH C18(3.0 × 50 mm) 1.7 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril(5:95), Postupak:%B: 0 min-20:2 min-100:2.3 min-100, Temperatura: 27 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm). Intermedijer 1157B: terc-butil (2S,5S)-4-((4-cijanofenil)(4-fluorofenil)metil)-5-(metoksimetil)-2 -metilpiperazin-1 -karboksilat
[1387] U rastvor terc-butil (2S,5S)-4-((4-cijanofenil)(4-fluorofenil)metil)-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-karboksilata (200 mg, 0.46 mmol) u THF-u (2 mL) dodat je NaH (32.8 mg, 1.37 mmol, 60%) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana tokom 5 min. Metil jodid (0.09 mL, 1.4 mmol) je dodat i reakcionoj smeši je dopušteno da dostigne sobnu temperaturu. Reakciona smeša mešana je tokom 2 h. Reakciona smeša je ohlađena na 0 °C. Reakcija je kvenčovana ledeno hladnom vodom. Reakciona smeša je ekstrahovana EtOAc-om (2 X 50 mL). Kombinovani organski ekstrakti su oprani slanim rastvorom, osušeni preko Na2SO4i koncentrovani da se dobije sirov proizvod. Sirov proizvod je prečišćen silika gel fleš kolonskom hromatografijom (5-10% MeOH u DCM-u; Kolona od 12 g) da se dobije terc-butil (2S,5S)-4-((4-cijanofenil)(4-fluorofenil)metil)-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-1 -karboksilat (140 mg, 67.8 % prinos) kao dijastereoizomerna smeša. LCMS: m/z, 454.3 (M+H); rt 2.16 i 2.18 min. (LCMS Postupak: Kolona: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Postupak:%B: 0 min-20:2 min-100:2.3 min-100, Temperatura: 27 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
Intermedijer 1157C: 4-((4-fluorofenil)((2S,5S)-2-(metoksimetil)-5-metilpiperazin-1-il)metil)benzonitril hidrohlorid
[1388]
[1389] U rastvor terc-butil (2S,5S)-4-((4-cijanofenil)(4-fluorofenil)metil)-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-1-karboksilata (200mg, 0.44 mmol) u DCM-u (4 mL) dodata je 4N HCl u dioksanu (1.1 mL, 4.41 mmol) na 0 °C. Reakcionoj smeši je dozvoljeno da dostigne sobnu temperaturu i mešana je tokom 2 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije 4-((4-fluorofenil)((2S,5S)-2-(metoksimetil)-5-metilpiperazin-1-il)metil)benzonitril (140 mg, 90 % prinos). LCMS: m/z, 354.4 (M+H); rt 1.45 min. (LCMS Postupak: Kolona: AQUITY UPLC BEH C18(3.0 × 50 mm) 1.7 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Postupak: %B: 0 min-20:2 min-100:2.3 min-100, Temperatura: 27 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
Primeri 1157 i 1158: 8-((2S,5S)-4-((4-cijanofenil)(4-fluorofenil)metil)-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1390] U rastvor 4-((4-fluorofenil)((2S,5S)-2-(metoksimetil)-5-metilpiperazin-1-il)metil)benzonitrila (140 mg, 0.4 mmol) u acetonitrilu (4 mL), DIPEA (0.7 mL, 3.96 mmol) i 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (158 mg, 0.475 mmol) su dodati sekvencijalno na sobnoj temperaturi praćeno zagrevanjem na 80 °C tokom 3 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen fleš kolonskom hromatografijom (75-90% EtOAc u heksanu; Kolona od 12 g) da se dobije 8-((2S,5S)-4-((4-cijanofenil)(4-fluorofenil)metil)-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril kao dijastereoizomerna smeša. Dijastereoizomerna smeša je dalje prečišćena prep-HPLC postupkom kao što sledi: Kolona: YMC EXRS (250mm × 20mm ID, 5µm); Mobilna faza A= 10 mM amonijum bikarbonat u vodi pH-9.5; Mobilna faza B= acetonitril: MeOH (50: 50); Tok: 20 mL/min; Gradijent: 0-100 % B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje 1 minut pri 100 % B. Frakcije su koncentrovane da se dobije Primer 1157 (20 mg, 9.13 % prinos) i Primer 1158 (20 mg, 9.13 % prinos).
[1391] Primer 1157: LCMS: 537.2 m/z, (M+H); rt 3.260 min Kolona: Kolona-Kinetex XB-C18 (75 X 3 mm-2.6 µm), Mfaza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitril (98:2); Mfaza B: 10 mM amonijum format u vodi:acetonitril (2:98); Tok: 1 mL/min; Gradijent: 20-100 % B tokom 4 minuta zatim zadržavanje 0.6 min pri 100% B.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.13-8.17 (m, 1 H), 8.05-8.09 (m, 1 H), 7.72-7.81 (m, 4 H), 7.59-7.65 (m, 2 H), 7.14-7.21 (m, 2 H), 6.07 (s, 1 H), 5.11 (s, 1 H), 4.67-4.76 (m, 1 H), 3.66-3.73 (m, 3 H), 3.56 (br d, J=3.0 Hz, 1 H), 3.53 (s, 3 H), 3.05 (s, 3 H), 2.97-3.03 (m, 1 H), 2.86-2.93 (m, 1 H), 2.34-2.37 (m, 1 H), 1.30 (d, J=6.5 Hz, 3 H).
[1392] Primer 1158: LCMS: 537.2 m/z, (M+H); rt 3.307 min Kolona: Kolona-Kinetex XB-C18 (75 X 3 mm-2.6 µm), Mfaza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitril (98:2); Mfaza B: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitril (2:98); Tok: 1 mL/min; Gradijent: 20-100 % B tokom 4 minuta zatim zadržavanje 0.6 min pri 100% B.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.13-8.17 (m, 1 H), 8.05-8.10 (m, 1 H), 7.77-7.83 (m, 4 H), 7.57 (dd, J=8.8, 5.8 Hz, 2 H), 7.15 (t, J=8.8 Hz, 2 H), 6.06 (s, 1 H), 5.12 (s, 1 H), 4.68 (br s, 1 H), 3.60-3.84 (m, 3 H), 3.54-3.58 (m, 1 H), 3.53 (s, 3 H), 3.06 (s, 3 H), 2.95-3.02 (m, 1 H), 2.83-2.89 (m, 1 H), 2.36-2.42 (m, 1 H), 1.30 (d, J=6.5 Hz, 3 H).
PRIMERI 1159 i 1160
8-((2S,5S)-4-(1-(4-fluorofenil)etil)-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1393]
Intermedijer 1159A: metil N-benzil-N-(N-(terc-butoksikarbonil)-O-metil-D-seril)-L-alaninat
[1394]
[1395] U rastvor metil benzil-L-alaninata (1 g, 5.17 mmol) u DMF-u (10 mL) su dodati HATU (2.95 g, 7.76 mmol), DIPEA (2.71 mL, 15.52 mmol) praćeno sa N-(terc-butoksikarbonil)-O-metil-D-serinom (1.13 g, 5.17 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Reakciona smeša je ekstrahovana sa EtOAc-om (2x50mL), oprana vodom (30 mL), slanim rastvorom, osušena preko Na2SO4i koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod. Sirov proizvod je prečišćen pomoću fleš hromatografije (0-50% EtOAc/Pet etar; kolona od 24 g) da se dobije metil N-benzil-N-(N-(terc-butoksikarbonil)-O-metil-D-seril)-L-alaninat (1.6 g, 77 % prinos). LCMS: m/z, 395.2 (M+H); rt 2.75 min. (LCMS Postupak: Kolona: Kinetex XB-C18 (3 × 75 mm) 2.6 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum format:acetonitril (98:2), Mobilna faza B: 10 mM amonijum format:acetonitril (2:98), Gradijent = 20-100 % B tokom 4 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 100 % B; Temperatura: 27 °C; Protok: 1.0 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
Intermedijer 1159B: (3S,6R)-1-benzil-6-(metoksimetil)-3-metilpiperazin-2,5-dion
[1396]
[1397] U rastvor metil N-benzil-N-(N-(terc-butoksikarbonil)-O-metil-D-seril)-L-alaninata (1.3g, 3.30 mmol) u DCM-u (10 mL) na 0 °C dodat je TFA (3.81 mL, 49.4 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije sirovi proizvod. Sirov proizvod je prečišćen pomoću fleš hromatografije (0-10% MeOH/hloroform; kolona od 24 g) da se dobije (3S,6R)-1-benzil-6-(metoksimetil)-3-metilpiperazin-2,5-dion (0.6 g, 68.0 % prinos). LCMS: m/z, 263.2 (M+H); rt 1.34 min. (LCMS Postupak: Kolona: Kinetex XB-C18 (3 × 75 mm) 2.6 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum format:acetonitril (98:2), Mobilna faza B: 10 mM amonijum format:acetonitril (2:98), Gradijent = 20-100 % B tokom 4 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 100 % B; Temperatura: 27 °C; Protok: 1.0 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
Intermedijer 1159C: (2S,5S)-1-benzil-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin
[1398]
[1399] Promešani rastvor (3S, 6R)-1-benzil-3-(metoksimetil)-6-metilpiperazin-2,5-diona (1.3 g, 4.96 mmol) u tetrahidrofuranu (7 mL) je ohlađen na 0 °C i BH3-THF (24.8 mL, 24.8 mmol) je dodat u kapima. Reakcionoj smeši je dozvoljeno da dostigne sobnu temperaturu i zagrevana je na 65 °C tokom 12 h. Reakciona smeša je ohlađena na 0 °C. Reakcija je kvenčovana sa MeOH-om (5 mL) i HCl-om (11 N, 0.5 mL). Reakciona smeša je refluksovala tokom 3 h. Reakciona smeša je koncentrovana sniženim pritiskom da se dobije (2S,5S)-1-benzil-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin(0.8 g, 68.2 % prinos). LCMS: m/z, 235.4 (M+H); rt 0.43 min. (LCMS Postupak: Kolona: Kinetex XB-C18 (3 × 75 mm) 2.6 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum format:acetonitril (98:2), Mobilna faza B: 10 mM amonijum format:acetonitril (2:98), Gradijent = 20-100 % B tokom 4 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 100 % B; Temperatura: 27 °C; Protok: 1.0 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
Intermedijer 1159D: (2S,5S)-4-benzil-2-(metoksimetil)-5-metilpiperazin-1-karboksilat
[1400]
[1401] U rastvor (2S,5S)-1-benzil-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazina(0.8 g, 3.41mmol) u DCM-u (15 mL) su dodati TEA (0.714 mL, 5.12 mmol) i Boc-anhidrid (0.793 mL,3.41 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 12 h. Reakciona smeša je ekstrahovana EtOAc-om (2 × 30 mL), oprana ledeno hladnom vodom (20 mL), osušena preko Na2SO4i koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod. Sirov proizvod je prečišćen pomoću fleš hromatografije (0-50% EtOAc u pet etru; silika kolona od 24g) da se dobije (2S,5S)-4-benzil-2-(metoksimetil)-5-metilpiperazin-1-karboksilat (0.4 g, 35.0 % prinos). LCMS: m/z, 335.2 (M+H); rt 3.75 min. (LCMS Postupak: Kolona: Kinetex XB-C18 (3 × 75 mm) 2.6 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum format:acetonitril (98:2), Mobilna faza B: 10 mM amonijum format:acetonitril (2:98), Gradijent = 20-100 % B tokom 4 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 100 % B; Temperatura: 27 °C; Protok: 1.0 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
Intermedijer 1159E: tercbutil(2S,5S)-2-(metoksimetil)-5-metilpiperazin-1-karboksilat
[1402]
[1403] U promešani rastvor terc-butil (2S,5S)-4-benzil-2-(metoksimetil)-5-metilpiperazin-1-karboksilata (0.4 g, 1.2 mmol) u MeOH-u (5 mL) su dodati 10% Pd-C (0.04 g, 0.36 mmol) i AcOH (0.07 mL, 1.2 mmol). Reakciona smeša je hidrogenizovana pod pritiskom od 5 kg na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je filtrirana kroz Celite podlogu, oprana metanolom (20 mL) u višku, i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da se dobije terc butil(2S,5S)-2-(metoksimetil)-5-metilpiperazin-1-karboksilat (250 mg, 85% prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 3.94-4.11 (m, 1 H), 3.40-3.64 (m, 2 H), 3.20-3.29 (m, 3 H), 2.94-3.11 (m, 2 H), 2.65 (br d, J=13.6 Hz, 1 H), 1.95-1.92 (m, 2 H), 1.40 (d, J=1.5 Hz, 9 H), 0.92-1.10 (m, 3 H).
Intermedijer 1159F: terc-butil(2S,5S)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-2-(metoksimetil)-5-metilpiperazin-1-karboksilat
[1404]
[1405] U rastvor 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (0.25 g, 0.75 mmol) u acetonitrilu (2 mL) su dodati natrijum bikarbonat (0.32 g, 3.75 mmol) i terc-butil (2S,5S)-2-(metoksimetil)-5-metilpiperazin-1-karboksilat (0.18 g, 0.75 mmol). Reakciona smeša je mešana na 80 °C tokom 12 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije sirovi proizvod. Sirov proizvod je prečišćen pomoću fleš hromatografije (0-100% EtOAc u pet etru; kolona od 24 g) da se dobije tercbutil(2S,5S)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-2-(metoksimetil)-5-metilpiperazin-1 -karboksilat (150 mg, 39.3 % prinos). LCMS:428.2 m/z, (M+H); rt 2.66 min. (LCMS Postupak: Kolona: Kinetex XB-C18 (3 × 75 mm) 2.6 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum format:acetonitril (98:2), Mobilna faza B: 10 mM amonijum format:acetonitril (2:98), Gradijent = 20-100 % B tokom 4 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 100 % B; Temperatura: 27 °C; Protok: 1.0 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
Intermedijer 1159G: 8-((2S,5S)-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5.6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1406]
[1407] U rastvor terc-butil (2S,5S)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-2-(metoksimetil)-5-metilpiperazin-1-karboksilata (150 mg, 0.35 mmol) u DCM-u (5 mL) su dodati 2,6-lutidin (0.245 mL, 2.11 mmol) i TMS-OTf (0.45 mL, 2.46 mmol) na 0 °C. Reakcionoj smeši je dozvoljeno da dostigne sobnu temperaturu i mešana je tokom 4 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i ko-destilovana acetonitrilom (2 × 10 mL) da se dobije 8-((2S,5S)-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (120 mg, 89 % prinos). LCMS: m/z, 328.2 (M+H); rt 0.52 min. (LCMS Postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 run).
Primeri 1159 i 1160: 8-((2S,5S)-4-(1-(4-fluorofenil)etil)-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1408] U rastvor 8-((2S,5S)-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (70 mg, 0.214 mmol) u acetonitrilu (2 mL) su dodati 1-(1-bromoetil)-4-fluorobenzen (65.1 mg, 0.32 mmol) i natrijum bikarbonat (35.9 mg, 0.43 mmol). Reakciona smeša je mešana na 80 °C tokom noći. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Sirov proizvod je ekstrahovan EtOAc-om (2 X 25 mL), opran vodom, slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4i koncentrovan pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod. Sirov materijal je prečišćen putem preparativne HPLC. Kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, čestice od 5 µm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Gradijent: zadržavanje 2 minuta pri 18% B, 18-59% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje 5 minuta pri 100% B; Protok: 15mL/min; Temperatura kolone: 25 °C. Dijastereoizomerna smeša je dalje prečišćena prep-HPLC postupkom kao kolona: Cellulose-4 (250 × 4.6 mm) 5 µm, Mobilna faza: 0.1% DEA u acetonitrilu; Tok: 1.0 mL/min i kolonske frakcije su koncentrovane da se dobije Primer 1159 (3.9 mg, 4 % prinos) i Primer 1160 (3.6 mg, 4% prinos).
[1409] Primer 1159: LCMS:450.2 m/z, (M+H); rt 2.11 min; Kolona: Waters Xbridge BEH C18 XP (50 × 2.1 mm) 2.5 µm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 minuta; Tok: 1.1 mL/min.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.20-8.14 (m, 1H), 8.11-8.02 (m, 1H), 7.43 (dd, J = 5.9,8.6 Hz, 2H), 7.18 (t, J = 8.8 Hz, 2H), 6.04 (s, 1H), 4.72-4.63 (m, 1H), 3.98-3.91 (m, 1H), 3.71-3.61(m, 1H), 3.57-3.45 (m, 5H), 3.41-3.34 (m, 1H), 3.07 (s, 3H), 2.94 (dd, J = 3.7, 11.5 Hz, 1H), 2.82 -2.73 (m, 2H), 1.28 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.21 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
[1410] Primer 1160: LCMS: 450.2 m/z, (M+H); rt 2.13 min. Kolona: Waters XBridge BEH C18 XP (50 × 2.1 mm) 2.5 µm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 minuta; Tok: 1.1mL/min.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.19-8.12 (m, 1H), 8.10-8.02 (m, 1H), 7.41 (dd, J = 5.6, 8.6 Hz, 2H), 7.15 (t, J = 8.9 Hz, 2H), 6.07 (s, 1H), 4.47 (brdd, J = 1.6, 3.3 Hz, 1H), 3.93-3.86 (m, 1H), 3.84-3.78 (m, 1H), 3.63 (d, J = 6.6 Hz, 2H), 3.56-3.48 (m, 4H), 3.42-3.35 (m, 1H), 3.22 (s, 3H), 2.72 (dd, J =3.2, 11.7 Hz, 1H), 2.27-2.18 (m, 1H), 1.33 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.07 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
[1411] Primeri u tabeli 42 su pripremljeni prema opštoj proceduri opisanoj u Primerima 1159 i 1160 supstitucijom 1-(1-bromoetil)-4-fluorobenzena sa pogodnim benzil bromidima u sintetskom nizu. Kada je reakcija dala smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena u finalnoj fazi primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi
PRIMER 1164
8-((2S,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-5-(etoksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1412]
Intermedijer 1164A: terc-butil (2S,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-5-(etoksimetil)-2-metitpiperazin-1-karboksitat
[1413]
[1414] U ledom ohlađeni promešani rastvor terc-butil (2S,5S)-4-(bis(4-fluorofenil) metil)-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-karboksilata (100 mg, 0.23 mmol) u THF-u (5 mL), dodat je natrijum hidrid (11.1 mg, 0.46 mmol) pod argonom i mešano je tokom 10 min. Dodat je jodoetan (0.04 mL, 0.46 mmol) i reakcionoj smeši je dozvoljeno da dostigne sobnu temperaturu i mešano je tokom 6 h. Reakcija je kvenčovana ledeno hladnom vodom. Reakciona smeša je ekstrahovana EtOAc-om (3X30 mL). Organski deo je opran slanim rastvorom, osušen preko natrijum sulfata i koncentrovan. Sirov proizvod je prečišćen silika gel kolonskom hromatografijom primenom fleš kolone od 12 g, eluiranjem sa 40-60% EtOAc/Heksan da se dobije terc-butil (2S,5S)-4-(bis(4-fluorofenil) metil)-5-(etoksimetil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat (45 mg, 42.3 % prinos) kao beličasta čvrsta supstanca. LCMS: m/z, 461.6 (M+H); rt 1.68 min. (LCMS Postupak: Kolona: AQUITY UPLC BEH C18(3.0 × 50 mm) 1.7µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril(5:95), Postupak:%B: 0min-20:2min-100:2.3min-100; Temperatura: 27 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
Intermedijer 1164B: (2S,5S)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-(etoksimetil)-5-metilpiperazin hidrohlorid
[1415]
[1416] U promešani rastvor terc-butil (2S,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-5-(etoksimetil)-2-metilpiperazin-1-karboksilata (40 mg, 0.09 mmol) u DCM-u (4 mL), HCl-a (4 N u dioksanu) (0.217 mL, 0.87 mmol) je dodata u kapima na sobnoj temperaturi. Nakon mešanja tokom 4 h., rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je triturisan sa dietil etrom da se dobije (2S,5S)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-(etoksimetil)-5-metilpiperazin hidrohlorid (30 mg, 87 % prinos). LCMS: m/z, 361.5 (M+H); rt 1.72 min. (LCMS Postupak: Kolona: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Postupak:%B: 0 min-20:2 min-100:2.3 min-100; Temperatura: 27 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
Primer 1164: 8-((2S,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-5-(etoksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1417] U promešani rastvor (2S,5S)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-(etoksimetil)-5-metilpiperazin hidrohlorida (30 mg, 0.076 mmol) u acetonitrilu (1 mL), DIPEA (0.04 mL, 0.23 mmol) i 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (25.2 mg, 0.08 mmol) su dodati sekvencijalno na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana na 80 °C tokom 4 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen putem preparativne HPLC. Kolona: Waters XBridge C18, 19 × 150 mm, čestice od 5 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: acetonitril; Gradijent: 15-50% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje 5 minuta pri 100% B; Tok: 15 mL/min. Prikupljanje frakcija je započeto MS signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da se dobije 8-((2S,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-5-(etoksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (16 mg, 38.6 % prinos). LCMS: m/z, 544.2 (M+H); rt 2.408 min. (LCMS Postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 x2.1)mm, 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.11-8.19 (m, 1 H), 8.01-8.10 (m, 1 H), 7.45-7.64 (m, 4 H), 7.15 (dt, J=11.19, 8.83 Hz, 4 H), 6.09 (s, 1 H), 5.00 (s, 1H), 4.64-4.76 (m, 1 H), 3.61-3.76 (m, 3 H), 3.47-3.60 (m, 4 H), 3.11-3.27 (m, 2 H), 2.95-3.04 (m, 1 H), 2.85 (dd, J=11.49, 3.42 Hz, 1 H), 2.35-2.42 (m, 1H), 1.30 (d, J=6.60 Hz, 3 H), 0.94 (t, J=6.97 Hz, 3 H).
PRIMER 1165
N-(((2R,5 S)-1 -(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1 -metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-5-metilpiperazin-2-il)metil)acetamid
[1418]
Intermedijer 1165A: 8-((2S,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-5-(hlorometil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1419]
[1420] U promešani rastvor 8-((2S,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (170 mg, 0.33 mmol) u DCM-u (5 mL), trietilamin (0.14 mL, 1 mmol), Mezil-Cl (0.05 mL, 0.66 mmol) i katalitička količina DMAP-a su dodati sekvencijalno na 0 °C pod azotom. Reakcionoj smeši je dozvoljeno da dostigne sobnu temperaturu i mešana je tokom noći. Reakciona smeša je ekstrahovana DCM-om (2 X 30 mL), oprana vodom, slanim rastvorom i osušena preko natrijum sulfata. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da se dobije 8-((2S,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-5-(hlorometil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (150 mg, 85% prinos). LCMS: m/z, 534.2 (M+H); rt 2.08 min. (LCMS Postupak: Kolona: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril(5:95), Postupak:%B: 0 min-20:2 min-100:2.3 min-100; Temperatura: 27 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
Intermedijer 1165B: 8-((2S,SS)-5-(azidometil)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1421]
[1422] U promešani rastvor 8-((2S,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-5-(hlorometil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (70 mg, 0.13 mmol) u DMF-u (3 mL), dodat je natrijum azid (25.6 mg, 0.39 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana na 80 °C tokom noći. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i ekstrahovana EtOAc-om (3 X 30 mL), oprana vodom, slanim rastvorom i osušena preko natrijum sulfata. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen silika gel kolonskom hromatografijom primenom fleš kolone od 12 g, eluiranjem sa 25-100% EtOAc u pet etru. Frakcije su koncentrovane pod sniženim pritiskom da se dobije 8-((2S,5S)-5-(azidometil)-4-(bis(4-fluorofenil) metil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6(dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (60 mg, 85 % prinos) kao bledo žuta čvrsta supstanca. LCMS: m/z, 541.2 (M+H); rt 2.07 min. (LCMS Postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
Intermedijer 1165C: 8-((2S,5R)-5-(aminometil)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1423]
[1424] U promešani rastvor 8-((2S,5S)-5-(azidometil)-4-(bis(4-fluorofenil) metil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (60 mg, 0.11 mmol) u THF-u (2 mL)/vodi (1 mL), dodat je trifenilfosfin (87 mg, 0.33 mmol). Reakciona smeša je zagrevana na 65 °C tokom 6 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom, ko-destilovano je toluenom 3 X 5 mL) i osušeno da se dobije 8-((2S,5R)-5-(aminometil)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (50 mg, 88 % prinos). LCMS: m/z, 515.4 (M+H); rt 1.49 min. (LCMS Postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
Primer 1165: N-(((2R,5S)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-5-metilpiperazin-2-il)metil)acetamid
[1425] U promešani rastvor 8-((2S,5R)-5-(aminometil)-4-(bis(4-fluorofenil) metil)-2-metilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (25 mg, 0.05 mmol) u piridinu (1 mL), dodat je Ac2O (0.02 mL) na 0 °C. Reakcionoj smeši je dozvoljeno da dostigne sobnu temperaturu i mešana je tokom noći. Reakciona smeša je ekstrahovana DCM-om (3 X 20 mL), oprana vodom, slanim rastvorom i osušena preko natrijum sulfata. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen putem preparativne HPLC. Kolona: Waters XBridge C18, 19 × 150 mm, čestice od 5 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: acetonitril; Gradijent: 15-50% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje 5 minuta pri 100% B; Tok: 15 mL/min. Prikupljanje frakcija je započeto MS signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da se dobije N-(((2R,5S)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1 -metil-2-okso-1 ,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-5-metilpiperazin-2-il)metil)acetamid (2 mg, 7.10 % prinos). LCMS: m/z, 557.3 (M+H); rt 1.98 min. (LCMS Postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 x2.1)mm, 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril: 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda:95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.19-8.10 (m, 1H), 8.09-8.02 (m, 1H), 7.54 (ddd, J = 5.9, 8.7, 15.0 Hz, 4H), 7.45 (br t, J = 4.9 Hz, 1H), 7.13 (dt, J = 5.6, 8.6 Hz, 4H), 6.03 (s, 1H), 5.01 (s, 1H), 4.91-4.73 (m, 1H), 3.61-3.49 (m, 5H), 3.41 (br s, 2H), 3.02-2.85 (m, 2H), 2.35 (br d, J = 12.0 Hz, 1H), 1.60 (s, 3H), 1.19 (d, J = 6.6 Hz, 3H).
PRIMER 1166
metil (((2R,5S)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-5-metilpiperazin-2-il)metil)karbamat
[1426]
[1427] U promešani rastvor 8-((2S,5R)-5-(aminometil)-4-(bis(4-fluorofenil) metil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (25 mg, 0.05 mmol) u DCM-u (1 mL), DIPEA (0.025 mL, 0.146 mmol), metil hloroformat (8 µL, 0.1 mmol) su dodati sekvencijalno na 0 °C. Reakcionoj smeši je dozvoljeno da dostigne sobnu temperaturu i mešana je tokom noći. Reakciona smeša je ekstrahovana DCM-om (3 X 20 mL), oprana vodom, slanim rastvorom i osušena preko natrijum sulfata. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen putem preparativne HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: Waters XBridge C18, 19 × 150 mm, čestice od 5 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: acetonitril; Temperatura kolone: 25 °C. Prikupljanje frakcija je započeto MS signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da se dobije metil (((2R,5S)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-5-metilpiperazin-2-il)metil)karbamat (1 mg, 3.6 % prinos). LCMS: m/z, 573.3 (M+H); rt 2.121 min. (LCMS Postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50°C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.17-8.10 (m, 1H), 8.09-8.00 (m, 1H), 7.63-7.44 (m, 4H), 7.22-7.07 (m, 4H), 6.85 (br d, J = 1.7 Hz, 1H), 6.03 (s, 1H), 5.03 (s, 1H), 4.90-4.75 (m, 1H), 3.58-3.47 (m, 5H), 3.36 (br s, 5H), 3.04-2.91 (m, 2H), 2.35 (brd, J = 12.2 Hz, 1H), 1.18 (brd, J = 6.4 Hz, 3H).
PRIMER 1167
8-((2S,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-metil-5-(morfolinometil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1428]
[1429] U promešani rastvor 8-((2S,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-5-(hlorometil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-Erokso-S,b-dihidro-1 ,5-naftiridin-2-karbonitrila (70 mg, 0.13 mmol) u acetonitrilu (3 mL), kalijum karbonat (54.3 mg, 0.39 mmol), kalijum jodid (37.0 mg, 0.22 mmol), morfolin (0.02 mL) su dodati sekvencijalno na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana na 70 °C tokom noći. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, filtrirana kroz filter za špric, filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod. Sirov proizvod je prečišćen putem preparativne HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, čestice od 5 µm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 0.1% trifluorosirćetne kiseline; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 0.1% trifluorosirćetne kiseline; Gradijent: zadržavanje 2 minuta pri 20% B, 20-60% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje 5 minuta pri 100% B; Protok: 15 mL/min; Temperatura kolone: 25 °C. Prikupljanje frakcija je započeto MS signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da se dobije 8-((2S,SR)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-metil-5-(morfolinometil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (16 mg, 20.88 % prinos). LCMS: m/z, 585.2 (M+H); rt 2.325 min. (LCMS Postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50°C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.12-8.19 (m, 1 H) 8.01-8.09 (m, 1 H) 7.48-7.67 (m. 4 H) 7.15 (dt, J=11.86, 8.86 Hz, 4 H) 6.19 (s, 1 H) 4.94 (s, 1H) 4.64-4.75 (m, 1 H) 3.82-3.92 (m, 1 H) 3.60 (br dd, J=12.84, 2.08 Hz, 1 H) 3.51 (s, 3 H) 3.24-3.32 (m, 3 H) 2.95-3.07 (m, 1 H) 2.81 (dd, J=11.86,3.30 Hz, 1 H) 2.60 (br t, J=11.00 Hz, 1 H) 2.32-2.44 (m, 2 H) 1.92-2.02 (m, 2 H) 1.74-1.90 (m, 2 H) 1.35 (d, J=6.60 Hz, 3 H). Jedan pik protona se spojio sa pikom vlage.
[1430] Primeri u tabeli 43 su pripremljeni u skladu sa opštom procedurom opisanom u primeru 1167, supstitucijom morfolina sa pogodnim aminima u sintetskom nizu. Reakciona smeša je prečišćen preparativnom HPLC da se dobije čist proizvod.
PRIMERI 1170 i 1171
8-((2S,5S)-4-((4-cijanofenil) (4-fluorofenil) metil)-2-etil-5-(metoksimetil) piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1431]
Intermedijer 1170A: terc-butil (2S,5S)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-5-etil-2-(metoksimetil) piperazin-1-karboksilat
[1432]
[1433] Intermedijer 1170A je sintetisan prema opštoj proceduri koja je opisana za Intermedijer 1159F, supstitucijom metil benzil-L-alaninata sa metil (S)-2-(benzilamino)butanoatom u sintetskom nizu. LCMS: m/z, 386.2, (M+H-56); rt-1.67 min. LCMS Postupak Naziv kolone: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm Pufer: 10 mM amonijum acetat Mobilna faza A: Pufer: acetonitril (95:5) Mobilna faza B: Pufer: acetonitril (5:95) Postupak: %B:Omin-20:2 min -100:2.2 min-100 Tok: 0.7 mL/min.
Intermedijer 1170B: 8-((2S,5S)-2-etil-5-(metoksimetil) piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril. TFA so
[1434]
[1435] U rastvor terc-butil (2S,5S)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-5-etil-2-(metoksimetil) piperazin-1-karboksilata (100 mg, 0.23 mmol) u DCM-u (4 mL) dodat je TFA (0.02 mL, 0.24 mmol) na 0 °C. Reakcionoj smeši je dozvoljeno da dostigne sobnu temperaturu i mešana je tokom 2 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije 8-((2S,5S)-2-etil-5-(metoksimetil) piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA so (60 mg, 78 % prinos). LCMS: m/z, 342.2, (M+H); rt-0.77 min. LCMS Postupak Naziv kolone: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm Pufer: 10 mM amonijum acetat Mobilna faza A: Pufer: acetonitril (95:5) Mobilna faza B: Pufer: acetonitril (5:95) Postupak: %B:0 min-20:2 min -100:2.2 min-100 Tok: 0.7 mL/min.
Primeri 1170 i 1171: 8-((2S,5S)-4-((4-cijanofenil) (4-fluorofenil) metil)-2-etil-5-(metoksimetil) piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1436] U rastvor 8-((2S,SS)-2-etil-5-(metoksimetil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA soli (60 mg, 0.18 mmol) u acetonitrilu (4 mL) dodat je natrijum bikarbonat (14.8 mg, 0.18 mmol) na sobnoj temperaturi. Nakon 5 min, dodat je 4-(bromo(4-fluorofenil)metil)benzonitril (51.0 mg, 0.18 mmol) praćeno zagrevanjem na 85 °C tokom 14 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen putem preparativne HPLC. Kolona:X-Bridgephenyl (250 x19) mm 5 µm Mobilna faza A- 10 mM amonijum acetat u vodi, pH:4.5 Mobilna faza B- acetonitril: Metanol (1:1) Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da se dobije Primer 1170 (5.4 mg, 5.0 % prinos) i Primer 1171 (4.8 mg, 4.76 % prinos).
[1437] Primer 1170: LCMS: m/z, 551.2 (M+H); rt 2.16 min. (LCMS Postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat: Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.15 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.06 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.79 (d, J=8.3 Hz, 2H), 7.74 (d, J=8.3 Hz, 2H), 7.63 (dd, J=8.7, 5.5 Hz, 2H), 7.17 (t, J=8.8 Hz, 2H), 6.05 (s, 1H), 5.09 (s, 1H), 4.44 (br. s., 1H), 3.76 (d, J=13.2 Hz, 1H), 3.68-3.61 (m, 2H), 3.60-3.53 (m, 1H), 3.02-2.95 (m, 4H), 2.85-2.79 (m, 1H), 2.42 (d, J=12.0 Hz, 2H), 2.16-2.06 (m, 2H), 1.91-1.81 (m, 1H), 1.76 (br. s., 1H), 0.67 (t, J=7.5 Hz, 3H).
[1438] Primer A1171: LCMS: m/z, 551.2 (M+H); rt 2.16 min. (LCMS Postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.15 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.06 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.84-7.76 (m, 4H), 7.57 (dd, J=8.8, 5.6 Hz, 2H), 7.16 (t, J=8.8 Hz, 2H), 6.03 (s, 1H), 5.11 (s, 1H), 4.41 (br. s., 1H), 3.82-3.69 (m, 2H), 3.65-3.50 (m, 5H), 3.03 (s, 3H), 2.95 (br. s., 1H), 2.82-2.74 (m, 1H), 2.47 (d, J=12.5 Hz.
1H). 2.21-2.06 (m, 1H), 1.88-1.74 (m, 1H), 0.67 (t, J=7.3 Hz, 3H).
PRIMER 1172
8-((2R,5R)-4-(bis(4-fluorofenil) metil)-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1.5-naftiridin-2-karbonitril
[1439]
Intermedijer 1172A: terc-butil (2R,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-karboksilatkarboksilat
[1440]
[1441] U rastvor terc-butil (2R,5R)-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-karboksilata (100 mg, 0.43 mmol) u acetonitrilu (5 mL) dodat je DIPEA (0.76 mL, 4.34 mmol) na sobnoj temperaturi. Nakon 5 min, dodat je 4,4'-(bromometilen) bis(fluorobenzen) (148 mg, 0.52 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 80 °C tokom 12 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i sirov proizvod je prečišćen pomoću Combiflash primenom silika gel kolone od 12 g i eluiran sa 5-10% MeOH u DCM-u. Tražene frakcije su koncentrovane da se dobije terc-butil (2R,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat (130 mg, 69.2 % prinos) kao beličasta čvrsta supstanca; LCMS: m/z,433.4 (M+H); rt 2.15 min. LCMS Postupak Naziv kolone: AQUITY UPLC BEH C18(3.0 × 50 mm) 1.7 µm Pufer: 10 mM amonijum acetat Mobilna faza A: Pufer: acetonitril (95:5) Mobilna faza B: Pufer: acetonitril (5:95) Postupak: %B: 0 min-20:2min -100: 2.2 min-100 Tok: 0.7 mL/min.
Intermedijer 1172B: ((2R,5R)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-5-metilpiperazin-2-il) metanol hidrohlorid
[1442]
[1443] U rastvor terc-butil (2R,5R)-4-(bis(4-fluorofenil) metil)-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-karboksilata (100 mg, 0.23 mmol) u DCM-u (4 mL) dodata je 4 N HCl u dioksanu (0.58 mL, 2.31 mmol) na 0 °C. Reakcionoj smeši je dozvoljeno da dostigne sobnu temperaturu i mešana je tokom 2 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i čvrsti materijal je osušen da se dobije ((2R,5R)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-5-metilpiperazin-2il)metanol hidrohlorid (70 mg, 91 % prinos) kao gumasta čvrsta supstanca. LCMS: m/z, 333.2 (M+H); rt 1.44 min. LCMS Postupak Naziv kolone: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm Pufer: 10 mM amonijum acetat Mobilna faza A: Pufer: acetonitril (95:5) Mobilna faza B: Pufer: acetonitril (5:95) Postupak: %B: 0 min-20:2 min -100: 2.2 min-100 Tok: 0.7 mL/min.
Primer 1172: 8-((2R,5R)-4-(bis(4-fluorofenil) metil)-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1444] U rastvor ((2R,5R)-1-(bis(4-fluorofenil) metil)-5-metilpiperazin-2-il) metanol hidrohlorida (59.8 mg, 0.18 mmol) u acetonitrilu (2 mL) dodat je DIPEA (0.08 mL, 0.54 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 10 min i dodat je 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (50 mg, 0.15 mmol) u acetonitrilu (2 mL). Reakciona smeša je zagrevana na 80 °C tokom 2h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen putem preparativne HPLC. Kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, čestice od 5 µm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Gradijent: zadržavanje 2 minuta pri 15% B, 15-55% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje 5 minuta pri 100% B; Protok: 15 mL/min; Temperatura kolone: 25 °C. Prikupljanje frakcija je započeto signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da se dobije 8-((2R,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (3.2 mg, 4.00 % prinos); LCMS: m/z, 516.3 (M+H); rt 2.10 min. LCMS uslov: Kolona: Waters XBridge BEH C18 XP(50 × 2.1 mm) 2.5 µm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom: Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 minuta; Tok: 1.1 mL/min.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.17-8.10 (m, 1H), 8.08-8.02 (m, 1H), 7.59 (dd, J=5,6, 8.8 Hz, 2H), 7.53 (dd, J=5.6, 8.6 Hz, 2H), 7.20-7.05 (m, 4H),6.13 (s, 1H), 5.01 (s, 1H), 4.85-4.74 (m, 1H), 4.36 (t, J=4.6 Hz, 1H), 3.76-3.67 (m, 2H), 3.63-3.57 (m, 1H), 3.55-3.47 (m, 3H), 2.92-2.81 (m, 2H), 2.35 (br dd, J=1.7, 13.4 Hz, 1H), 1.24 (d, J=6.6 Hz, 3H).
[1445] Primeri u tabeli 44 su pripremljeni u skladu sa opštom procedurom opisanom u primeru 1172, supstitucijom 4,4'-(bromometilen)bis(fluorobenzen) sa pogodnim benzhidril bromidima ili benzil bromidima u sintetskom nizu. Kada je sinteza obezbedila smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi.
PRIMER 1183
8-((2R,5R)-4-(bis(4-fluorofenil) metil)-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1446]
Intermedijer 1183A:terc-butil (2R,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-1 -karboksilat
[1447]
[1448] U rastvor terc-butil (2R,5R)-4-(bis(4-fluorofenil) metil)-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-karboksilata (150 mg, 0.35 mmol) u THF-u (4 mL) dodat je NaH (20.8 mg, 0.87 mmol) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana tokom 5 min. Metil jodid (0.07 mL, 1.04 mmol) je dodat u kapima, reakcionoj smeši je dozvoljeno da dostigne sobnu temperaturu i mešana je tokom 2 h. Reakciona smeša je ohlađena na 0 °C. Reakcija je kvenčovana ledeno hladnom vodom. Reakciona smeša je ekstrahovana EtOAc-om (2 X 50 mL). Kombinovani organski ekstrakti su oprani slanim rastvorom, osušeni preko Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom da se dobije terc-butil (2R,5R)-4-(bis(4-fluorofenil) metil)-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat (120 mg, 77 % prinos). LCMS: m/z, 447.4 (M+H); rt 2.33 min. LCMS Postupak Naziv kolone: AQUITY UPLC BEH C18(3.0 × 50 mm) 1.7 µm Pufer: 10 mM amonijum acetat Mobilna faza A: Pufer: acetonitril (95:5) Mobilna faza B: Pufer: acetonitril (5:95) Postupak: %B:0 min-20:2 min -100:2.2 min-100 Tok: 0.7 mL/min.
Intermedijer 1183B: (2R,5R)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-(metoksimetil)-5-metilpiperazin hidrohlorid
[1449]
[1450] U rastvor terc-butil (2R,5R)-4-(bis(4-fluorofenil) metil)-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-1-karboksilata (100 mg, 0.23 mmol) u DCM-u (2 mL) dodata je 4 M HCl u dioksanu (1 mL) na 0 °C. Reakcionoj smeši je dozvoljeno da dostigne sobnu temperaturu i mešana je tokom 2 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da se dobije (2R,5R)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-(metoksimetil)-5-metilpiperazin hidrohlorid (65 mg, 84 % prinos). LCMS: m/z, 347.3 (M+H); rt 1.49 min. LCMS Postupak Naziv kolone: AQUITY UPLC BEH C 18(3.0 × 50 mm) 1.7 µm Pufer: 10 mM amonijum acetat Mobilna faza A: Pufer: acetonitril (95:5) Mobilna faza B: Pufer: acetonitril (5:95) Postupak: %B:0 min-20:2 min -100:2.2 min-100 Tok: 0.7 mL/min.
Primer 1183: 8-((2R,5R)-4-(bis(4-fluorofenil) metil)-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1451] U rastvor (2R,SR)-1-(bis(4-fluorofenil) metil)-2-(metoksimetil)-5-metilpiperazin hidrohlorida (50 mg, 0.14 mmol) u acetonitrilu (4 mL) dodat je DIPEA (0.03 mL, 0.14 mmol) na sobnoj temperaturi. Nakon 5 min., dodat je 6-cijano-,1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (48.1 mg, 0.14 mmol). Reakciona smeša je zagrevana na 80 °C tokom 2h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i sirov materijal je prečišćen putem preparativne HPLC. Kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, čestice od 5 µm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Gradijent: zadržavanje 2 minuta pri 18% B, 18-67% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje 5 minuta pri 100% B; Protok: 15 mL/min; Temperatura kolone: 25 °C. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da se dobije 8-((2R,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (14.4 mg, 18.8 % prinos). LCMS: m/z, 530.2 (M+H); rt 2.31 min. Kolona: Waters XBridge BEH C18 XP (50 × 2.1 mm) 2.5 µm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Temperatura: 50 °C; Gradijent: 0-100% B tokom 3 minuta; Tok: 1.1 mL/min.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.10-8.18 (m, 1 H), 8.01-8.08 (m, 1 H), 7.46-7.68 (m, 4 H), 7.14 (dt, J=11.74, 8.80 Hz, 4 H), 6.05 (s, 1 H), 4.98 (s, 1H), 4.60-4.75 (m, 1 H), 3.63-3.79 (m, 3 H), 3.45-3.57 (m, 4 H), 3.04 (s, 4 H), 2.83 (br dd, J=11.74, 3.18 Hz, 1 H), 2.37 (br d, J=11.25 Hz, 1 H), 1.28 (d, J=6.36 Hz, 3 H).
PRIMERI 1184 i 1185
8-(4-(2-hloro-4-fluorobenzil)-3-((difluorometoksi)metil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1452]
Intermedijer 1184A: terc-butil 4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-2-(hidroksimetil)piperazin-1-karboksilat
[1453]
[1454] U rastvor 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonata (3.47 g, 10.4 mmol) u acetonitrilu (15 mL) dodat je terc-butil 2-(hidroksimetil)piperazin-1-karboksilat (1.5 g, 6.94 mmol), praćeno sa DIPEA (3.63 mL, 20.81 mmol). Reakciona smeša je mešana na 85 °C tokom noći. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da se uklone isparljive supstance i ostatak je rastvoren u etil acetatu i opran vodom. Vodeni sloj je povratno ekstrahovan etil acetatom (150 mL X 2). Kombinovani organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, koncentrovan pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod. Sirov proizvod je prečišćen putem fleš hromatografije (5-10% metanol/hloroform; silika gel kolona od 40 g) da se dobije terc-butil 4-(Crcijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-2-(hidroksimetil)piperazin-1-karboksilat (2.415 g, 6.05 mmol, 87 % prinos). LCMS: m/z = 400.1 (M+H); rt 1.18 min. (LCMS uslov: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
Intermedijer 1184B: terc-butil 4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-2-((difluorometoksi)metil)piperazin-1 -karboksi lat
[1455]
[1456] U rastvor terc-butil 4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-2-(hidroksimetil)piperazin-1-karboksilata (0.27 g, 0.68 mmol) u smeši CH2Cl2(3 mL)/voda (3 mL) dodat je kalijum acetat (0.27 g, 2.7 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 10 min i (bromodifluorometil) trimetilsilan (1.05 mL, 6.8 mmol) je dodat. Reakciona smeša je mešana na istoj temperaturi tokom 10 h. Nakon 10 h, reakciona smeša je razblažena sa CH2Cl2-om (20 mL), i tretirana vodom (10 mL) i ekstrahovana CH2Cl2-om (3 × 15 mL). Organski sloj je kombinovan i osušen preko bezvodnog natrijum sulfata da se dobije terc-butil 4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-2-((difluorometoksi) metil)piperazin-1-karboksilat (175 mg, 0.389 mmol, 57.6 % prinos). LCMS: m/z = 450.1 (M+H); rt 1.50 min. (LCMS uslov: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
Intermedijer 1184C: 8-(3-((difluorometoksi)metil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril HCl
[1457]
[1458] U rastvor terc-butil 4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-2-((difluorometoksi)metil)piperazin-1-karboksilata (170 mg, 0.38 mmol) u etil acetatu (5 mL) dodata je 4 N HCl u dioksanu (0.1 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i triturisana heksanom da se dobije 8-(3-((difluorometoksi) metil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, HCl (134 mg, 0.35 mmol, 92 % prinos). LCMS: m/z = 350.1 (M+H); rt 0.88 min. (LCMS uslov: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
Primer 1184 i 1185: 8-(4-(2-hloro-4-fluorobenzil)-3-((difluorometoksi)metil) piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1459] U rastvor 8-(3-((difluorometoksi)metil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, HCl-a (80 mg, 0.21 mmol) u acetonitrilu (3 mL) dodat je DIPEA (0.11 mL, 0.62 mmol), praćeno 1-(bromometil)-2-hloro-4-fluorobenzenom (93 mg, 0.42 mmol). Reakciona smeša je mešana na 85 °C tokom noći. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da se uklone isparljive supstance i rastvorena u etil acetatu, oprana vodom. Vodeni sloj je povratno ekstrahovan etil acetatom (20 mL × 2). Kombinovani organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4, koncentrovan pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod. Sirovo jedinjenje je prečišćeno preparativnom HPLC (Info o postupku: KOLONA: CHIRALPAK-ADH (250*4.6) 5 µm; M.Faza-A:0.1% amonijak u n-heksanu:70; M.Faza-B:0.1% amonijak u IPA:30; TOK: 1mL/min) da se dobije Primer 1184 (4.4 mg, 4.3%) i Primer 1185 (6.0 mg, 5.9%).
[1460] Primer 1184: LCMS: m/z, 492.1 (M+H); rt 2.21 min; Kolona: XBridge BEH XP C18 (2.1 × 50 mm), 2.5 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Gradijent = 0-100 % B tokom 3 minuta; Temperatura: 50 °C; Protok: 1.1 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.22-8.15 (m, 1H), 8.13-8.05 (m, 1H), 7.61 (dd, J=6.5, 8.7 Hz, 1H), 7.43 (dd, J=2.6, 8.9 Hz, 1H), 7.24 (dt, J=2.7, 8.4 Hz, 1H), 6.91-6.45 (m, 1H), 6.14 (s, 1H), 4.31 (dd, J=5.0, 10.6 Hz, 1H), 4.14 (dd, J=5.9, 10.8 Hz, 1H), 4.00 (d, J=14.2 Hz, 1H), 3.70 (d, J--14.4 Hz, 1H), 3.56 (m, 2H), 3.55 (s, 3H), 3.50-3.42 (m, 1H), 3.29-3.21 (m, 1H), 3.11-3.04 (m, 1H), 2.92-2.82 (m, 1H), 2.55 (s, 1H).
[1461] Primer 1185: LCMS: m/z, 492.2 (M+H); rt 2.21 min; Kolona: XBridge BEH XP C18 (2.1 × 50 mm), 2.5 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Gradijent = 0-100 % B tokom 3 minuta; Temperatura: 50 °C; Protok: 1.1 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.21-8.16 (m, 1H), 8.13-8.05 (m, 1H), 7.61 (dd, J=6.4, 8.6 Hz, 1H), 7.43 (dd, J=2.6, 8.9 Hz, 1H), 7.24 (dt, J=2.7, 8.6 Hz. 1H), 6.92-6.50 (m, 1H), 6.14 (s, 1H), 4.31 (dd, J=5.0, 10.6 Hz, 1H), 4.14 (dd, J=5.9, 10.8 Hz, 1H), 4.00 (d, J=14.2 Hz, 1H), 3.70 (d, J=14.2 Hz, 1H), 3.65-3.57 (m, 2H), 3.55 (s, 3H), 3.50-3.42 (m, 1H), 3.30-3.23 (m, 1H), 3.11-3.03 (m, 1H), 2.91-2.83 (m, 1H), 2.55 (s, 1H).
[1462] Primeri u tabeli 45 su pripremljeni prema opštoj proceduri koja je opisana u Primerima 1184 i 1185, supstitucijom 1-(bromometil)-2-hloro-4-fluorobenzena sa pogodnim benzhidril bromidima ili benzil bromidima u sintetskom nizu. Kada je sinteza obezbedila smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi.
PRIMERI 1188 i 1189
8-((2S,5R)-4-(2-(difluorometoksi)-1-(4-fluorofenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1.5-naftiridin-2-karbonitril
[1463]
Intermedijer 1188A: terc-butil (2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)-2-metoksi-2-oksoetil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat
[1465] U promešani rastvor terc-butil (2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (1.5 g, 7. mmol) u acetonitrilu (15 mL) dodat je DIPEA (3.7 mL, 21 mmol) i metil 2-bromo-2-(4-fluorofenil)acetat (1.9 g, 7.7 mmol). Reakciona smeša je zagrevana do 85 °C tokom 10 min i mešana je tokom 16 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije braon gumasta čvrsta supstanca. Sirovo jedinjenje je prečišćeno pomoću fleš hromatografije (primenom silika gel kolone od 24 g; primenom 5 % -10 % etilacetat/ Pet. etar) da se dobije terc-butil (2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)-2-metoksi-2-oksoetil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (2.35 g, 6.18 mmol, 88% prinos) kao braon čvrsta supstanca. LCMS: m/z, 379.3 (M-H); rt 1.13 min; Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.
Intermedijer 1188B: terc-butil (2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)-2-hidroksietil)-2,5-dimetilpiperazin-1 -karboksilat.
[1466]
[1467] U promešani rastvor terc-butil (2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)-2-metoksi-2-oksoetil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (0.9 g, 2.37 mmol) u etanolu (10 mL) dodat je NaBH4(0.45 g, 11.83 mmol) i kalcijum hlorid (1.3 g, 11.83 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 24 h. Reakcija je kvenčovana vodom (10 mL). Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je ekstrahovan etil acetatom (3 × 100 mL) i opran slanim rastvorom. Kombinovani organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, filtriran i uparen pod sniženim pritiskom da se dobije terc-butil (2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)-2-hidroksietil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (0.75 g, 90% prinos) kao braon ulje. LCMS: m/z, 353.5 (M+H); rt 1.84 min; Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri prostiranju od 220.
Intermedijer 1 188C: 2-((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-2-(4-fluorofenil)etan-1-ol, HCl
[1468]
[1469] U promešani rastvor terc-butil (2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)-2-hidroksietil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (300 mg, 0.85 mmol) u DCM-u (5 mL) dodata je HCl u dioksanu (2 mL, 65.8 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije kao braon čvrsta supstanca. Sirovo jedinjenje je triturisano DCM-om i heksanom (1:4) da se dobije čvrsti ostatak. Čvrsti materijal je filtriran da se dobije 2-((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-2-(4-fluorofenil)etan-1-ol, HCl (0.2 g, 71% prinos) kao braon ulje. LCMS: m/z, 253.4 (M+H); rt 0.45 min; Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-100 % B tokom 2 minuta, zatim zadržavanje 0.2 minuta pri 100 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
Intermedijer 1188D: 8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)-2-hidroksietil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril.
[1471] U promešani rastvor 2-((2R,SS)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-2-(4-fluorofenil)etan-1-ol, HCl-a (208 mg, 0.72 mmol) u acetonitrilu (8 mL) dodat je DIPEA (0.31 mL, 1.8 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 5 min i dodat je 6-cijano-1-metil-2-okso-1.2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (200 mg, 0.6 mmol). Reakciona smeša je zagrevana do 85 °C tokom 5 min i mešana je tokom 3 h. Reakciona smeša je filtrirana kroz Celite sloj i koncentrovana je pod pumpom sa visokim vakuumom da se dobije braon guma. Sirovo jedinjenje je prečišćeno pomoću fleš hromatografije (primenom silika gel kolone od 24 g: primenom 88 % -95 % etilacetat/ Pet. etar) da se dobije 8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)-2-hidroksietil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (200 mg, 0.46 mmol, 77 % prinos) kao braon čvrsta supstanca. LCMS: m/z, 436.2 (M+H); rt 1.12 -1.15 min; Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-100 % B tokom 2 minuta, zatim zadržavanje 0.2 minuta pri 100 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).
Primeri 1188 i 1189: 8-((2S,5R)-4-(2-(difluorometoksi)-1-(4-fluorofenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril.
[1472] U promešani rastvor 8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)-2-hidroksietil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (100 mg, 0.23 mmol) u smeši DCM (3 mL)/voda (3 mL) su dodati (bromodifluorometil) trimetilsilan (466 mg, 2.30 mmol) i KOAc (90 mg, 0.918 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Reakcija je kvenčovana vodom (5 mL). Reakciona smeša je ekstrahovana etil acetatom (3 × 10 mL). Kombinovani organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, filtriran i uparen pod sniženim pritiskom da se dobije braon ulje. Sirov materijal je prečišćen preparativnom HPLC (Kolona: Cellulose 4 (250 × 21.2) mm, 5 µm; M. Faza: 0.1% DEA u acetonitrilu; Protok: 20 mL/min; izokratski) da se dobije 8-((2S,SR)-4-(2-(difluorometoksi)-1-(4-fluorofenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril.
[1473] Primer 1188: (1.0 mg, 1.94 µmol, 0.84 % prinos). LCMS: m/z, 486.2 (M+H); rt 2.147 min; Kolona: XBridge BEH XP C18 (2.1 × 50 mm), 2.5 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Gradijent = 0-100 % B tokom 3 minuta; Temperatura: 50 °C; Protok: 1.1 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.11-8.17 (m, 1 H), 8.04-8.09 (m, 1 H), 7.43-7.53 (m, 2 H), 7.21 (t, J=8.80 Hz, 2 H), 6.63 (s, 1 H), 6.02 (s, 1 H), 4.32-4.44 (m, 1H), 4.13(dd, J=10.39, 5.26 Hz, 1 H), 3.98-4.08 (m, 1 H), 3.90 (t, J=5.38 Hz, 1 H), 3.68-3.77 (m, 1H), 2.09-2.15 (m, 1 H), 3.52 (s, 4 H), 1.21 (d, J=6.36 Hz, 3 H), 1.02 (d, J=6.36 Hz, 3 H).
[1474] Primer 1189: (1.0 mg, 2.06 µmol, 0.9 % prinos). LCMS: m/z, 486.1 (M+H); rt 2.161 min; Kolona: XBridge BEH XP C18 (2.1 × 50 mm), 2.5 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Gradijent = 0-100 % B tokom 3 minuta; Temperatura: 50 °C; Protok: 1.1 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.13-8.17 (m, 1 H), 8.02-8.08 (m, 1 H), 7.42-7.49 (m, 2 H), 7.11-7.22 (m, 2 H), 6.56-6.67 (m, 1 H), 6.01 (s, 1 H), 4.31-4.43 (m, 1 H), 4.14-4.22 (m, 1 H), 4.05 (dd, J=10.39, 6.24 Hz, 1 H), 3.82 (t, J=5.14 Hz, 1 H), 3.67-3.76 (m, 1 H), 3.52 (s, 4 H), 3.32 (m, 1H), 2.77-2.82 (m, 1 H), 2.09-2.15 (m, 1 H), 1.19 (d, J=6.11 Hz, 3 H), 1.09 (d, J=6.36 Hz, 3 H).
[1475] Primeri u tabeli 46 su pripremljeni prema opštoj proceduri koja je opisana u Primerima 1188-1189.
PRIMERI 1200 i 1201
8-((2S,5R)-4-(1-(4-ciklopropil-2-fluorofenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1476]
Intermedijer 1200A: 1-(4-ciklopropil-2-fluorofenil)etan-1-ol
[1477]
[1478] U promešani rastvor 4-ciklopropil-2-fluorobenzaldehida (0.65 g, 3.96 mmol) u tetrahidrofuranu (10 mL) dodat je metilmagnezijum hlorid (1.98 mL, 5.94 mmol, 3M u THF-u) u kapima na 0 °C pod azotom tokom 5 min. Reakciona smeša je polako zagrevana do sobne temperature. Reakciona smeša je mešana tokom 2 h. Reakcija je kvenčovana zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida (80 mL). Reakciona smeša je ekstrahovana etil acetatom (3 × 100 mL). Kombinovani organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, filtriran i uparen pod sniženim pritiskom da se dobije sirovi proizvod.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.4-7.29 (m, 1H), 6.96-6.88 (m, 1H), 6.85-6.74 (m, 1H), 5.17 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 4.98-4.84 (m, 1H), 1.94-1.83 (m, 1H), 1.28 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 0.97-0.86 (m, 2H), 0.68-0.58 (m, 2H).
Intermedijer 1200B: 1-(1-hloroetil)-4-ciklopropil-2-fluorobenzen
[1479]
[1480] U promešani rastvor 1-(4-ciklopropil-2-fluorofenil)etan-1-ola (0.6 g, 3.33 mmol) u DCM-u (4 mL) dodat je SOCl2(0.97 mL, 13.32 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana na 40 °C tokom 3 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije 1-(1-hloroetil)-4-ciklopropil-2-fluorobenzen (0.59 g, 91% prinos) kao braon ulje.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.59-7.37 (m. 1H), 7.06-6.85 (m, 2H), 5.50-5.42 (m, 1H), 2.03-1.90 (m, 1H), 1.81 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 1.04-0.92 (m, 2H), 0.78-0.65 (m, 2H).
Primeri 1200 i 1201: 8-((2S,5R)-4-(1-(4-ciklopropil-2-fluorofenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1481] U promešanu suspenziju 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril hidrohlorid soli (100 mg, 0.30 mmol) u acetonitrilu (8 mL) su dodati DIPEA (0.16 mL, 0.9 mmol) i 1-(1-hloroetil)-4-ciklopropil-2-fluorobenzen (71.4 mg, 0.36 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana na 85 °C tokom 16 h, ohlađena je na sobnu temperaturu i koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen preparativnom HPLC (Prep HPLC Info o postupku: Kolona CELLULOSE 5 [250 X 30mm], 5 mikrona; M. Faza: 0.1% DEA u MeOH-u; izokratski) da se dobije Primer 1200 i Primer 1201.
[1482] Primer 1200: (28.6 mg, 20 % prinos). LCMS: m/z = 460.3 (M+H); retenciono vreme 2.46 min [LCMS Info o postupku: A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM NH4OAc; B: 5% voda: 95% acetonitril: 10 mM NH4OAc; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Kolona: Ascentis Express C18 (50 × 2.1)mm, 2.7 µm; Vreme (min): 0-3 %B: 0-100).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.18-8.12 (m, 1H), 8.09-8.02 (m, 1H), 7.34-7.43 (m, 1H), 6.95 (dd, J = 1.5, 8.1 Hz, 1H), 6.86 (dd, J = 1.7, 12.0 Hz, 1H), 5.99 (s, 1H), 4.63 (br d, J = 3.7 Hz, 1H), 3.97 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 3.52 (s, 3H), 3.45-3.38 (m, 1H), 3.35 (br d, J = 3.2 Hz, 1H), 2.98, (dd, J = 3.4, 11.5 Hz, 1H), 2.80 (br dd, J = 3.1, 5.7 Hz, 1H), 2.71 (dd, J = 2.3, 11.6 Hz, 1H), 1.96-1.86 (m, 1H), 1.26 (d, J=6.6 Hz, 3 H), 1.23 (d, J=6.4 Hz, 3 H), 1.00 (d, J = 6.6 Hz,3H), 0.98-0.91 (m, 2H), 0.73-0.65 (m, 2H).
[1483] Primer 1200: (30.4 mg, 21 % prinos). LCMS: m/z = 460.3 (M+H); retenciono vreme 2.47 min [LCMS postupak: A: 95% Voda: 5% acetonitril; 10 mM NH4OAc; B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM NH4OAc; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Kolona: Ascentis Express C18 (50 × 2.1) mm, 2.7 µm; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.19-8.13 (m, 1H), 8.10-8.03 (m, 1H), 7.37-7.46 (m.1H). 6.94 (dd, J = 1.5, 8.1 Hz, 1H), 6.83 (dd, J= 1.7, 12.0 Hz,1H), 6.01 (s, 1H), 4.43-4.31 (m, 1H), 3.93-3.74 (m, 3H), 3.57-3.43 (m, 3H), 3.17 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 2.75 (dd, J = 3.2, 11.5 Hz, 1H), 2.17-2.10 (m, 1H), 1.98-1.85 (m, 1H), 1.27 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.16 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.10 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.97-0.91 (m, 2H), 0.73-0.66 (m, 2H).
[1484] Primeri u tabeli 47 su pripremljeni opštom procedurom koja je opisana u Primerima 1200 i 1201, primenom pogodnog aldehida. Kada je reakcija dala smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena u finalnoj fazi primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi.
PRIMERI 1251 i 1252
8-((2S,5R)-4-(1-(4-(1-cijanociklopropil)-2-fluorofenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1485]
Intermedijer 1251A: 1-(4-acetil-3-fluorofenil)ciklopropan-1-karbonitril
[1486]
[1487] U promešani rastvor 1-(4-bromo-3-fluorofenil)ciklopropan-1-karbonitrila (0.15 g, 0.63 mmol) u 1,4-dioksanu (5 mL) su dodati tributil(1-etoksivinil)stanan (0.25 mL, 0.75 mmol) i Pd(PPh3)4(36.1 mg, 0.03 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je degasirana azotom i zagrevana na 90 °C tokom 16 h, ohlađena je na sobnu temperaturu i isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen silika gel kolonskom hromatografijom (24g, Tok rastvarača: 0-50% EtOAc u pet etru) da se dobije 1-(4-acetil-3-fluorofenil)ciklopropan-1-karbonitril (80 mg, 63 % prinos).<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.79-7.89 (m, 1H), 7.45-7.05 (m, 2H), 2.57 (d, J = 4.1 Hz, 3H), 1.94-1.85 (m, 2H), 1.73-1.62 (m, 2H).
Intermedijer 1251B: 1-(3-fluoro-4-(1-hidroksietil)fenil)ciklopropan-1-karbonitril
[1488]
[1489] U rastvor 1-(4-acetil-3-fluorofenil)ciklopropan-1-karbonitrila (120 mg, 0.59 mmol) u metanolu (5 mL) dodat je NaBH4(45 mg, 1.18 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana tokom 2 h. Reakcija je kvenčovana vodom (5 mL). Reakciona smeša je ekstrahovana etil acetatom (2 × 20 mL). Kombinovani organski sloj je osušen preko bezvodnog Na2SO4, uparen pod sniženim pritiskom da se dobije 1-(3-fluoro-4-(1-hidroksietil)fenil)ciklopropan-1-karbonitril (100 mg, 83% prinos).<1>H NMR (300 MHz, Hloroform-d) δ ppm 7.44-7.54 (m, 1H), 7.09 (br d, J = 8.1 Hz, 1H), 6.95 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 5.18 (br dd, J = 3.8, 5.9 Hz, 1H), 4.12 (q, J = 7.1 Hz, 1H), 1.50 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.45-1.35 (m, 2H), 1.26 (t, J = 7.1 Hz, 2H).
Intermedijer 1251C: 1-(4-(1-hloroetil)-3-fluorofenil)ciklopropan-1-karbonitril
[1490]
[1491] U rastvor 1-(3-fluoro-4-(1-hidroksietil)fenil)ciklopropan-1-karbonitrila (80 mg, 0.39 mmol) u dihlorometanu (1.0 mL) dodat je SOCl2(0.14 mL, 1.95 mmol) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Isparljive supstance su uklonjene iz reakcione smeše pod sniženim pritiskom kako bi se dobio sirov proizvod.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ ppm 7.36-7.46 (m, 1H), 6.79-6.65 (m, 1H), 6.60 (dd, J = 2.5, 12.0 Hz, 1H), 5.38 (q, J = 7.0 Hz, 1H), 1.84 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.75-0.60 (m, 2H), 0.42-0.25 (m, 2H).
Primeri 1251 i 1252: 8-((2S,5R)-4-(1-(4-(1-cijanociklopropil)-2-fluorofenil) etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1492] U promešanu suspenziju 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (100 mg, 0.3 mmol) hidrohlorida u acetonitrilu (2.0 mL) su dodati DIPEA (0.16 mL, 0.9 mmol) i 1-(4-(1-hloroetil)-3-fluorofenil)ciklopropan-1-karbonitril (80 mg, 0.36 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana na 80 °C tokom 4 h, ohlađena je na sobnu temperaturu, rastvorena u etil acetatu (40 mL) i oprana vodom (5 mL × 2). Organski sloj je osušen preko bezvodnog Na2SO4i uparen pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen putem preparativne HPLC (Informacije o postupku: Kolona CELLULOSE 5 [(250 X 4.6mm), 5 mikrona; MOBILNA FAZA A: 0.1 % DEA u acetonitrilu; MOBILNA FAZA B: 0.1 % DEA u metanolu] da se dobiju Primeri 1251 i 1252.
[1493] Primer 1251: (7 mg, 5 % prinos). LCMS: m/z = 485.2 (M+H); retenciono vreme 1.25 min [LCMS postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (2.1 × 50 mm), 2.5 µm; Mobilna faza A: 0.1 % TFA: acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 0.1 % TFA: acetonitril (5:95), Gradijent = 0-100 % B tokom 3 minuta; Temperatura: 50 °C; Protok: 1.1 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.20-8.14 (m, 1H), 8.11-8.03 (m, 1H), 7.53-7.63 (m, 1H), 7.27 (dd, J = 1.8, 8.2 Hz, 1H), 7.11 (dd, J = 2.0, 11.5 Hz, 1H), 6.00 (s, 1H), 4.71-4.58 (m, 1H), 4.03 (q, J = 6.4 Hz, 1H), 3.53 (s, 3H), 3.46-3.40 (m, 1H), 3.37 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 3.00 (dd, J = 3.5, 11.1 Hz, 1H), 2.82-2.70 (m, 2H), 1.80-1.75 (m, 2H), 1.61-1.56 (m, 2H), 1.28 (d, J=6.6 Hz, 3 H), 1.24 (d, J=6.6 Hz, 3 H), 1.02 (d, J= 6.4 Hz, 3H).
[1494] Primer 1252: (8.9 mg, 6 % prinos). LCMS: m/z = 485.2 (M+H); retenciono vreme 1.26 min [LCMS postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (2.1 × 50 mm), 2.5 µm; Mobilna faza A: 0.1 % TFA: acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 0.1 % TFA: acetonitril (5:95), Gradijent = 0-100 % B tokom 3 minuta; Temperatura: 50 °C; Protok: 1.1 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.20-8.13 (m, 1H), 8.11-8.01 (m, 1H), 7.55-7.65 (m, 1H), 7.25 (dd, J = 2.0, 8.1 Hz, 1H), 7.08 (dd, J = 2.0, 11.5 Hz, 1H), 6.02 (s, 1H), 4.46-4.34 (m, 1H), 3.94-3.75 (m, 2H), 3.58-3.46 (m, 5H), 3.17 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 2.81-2.73 (m, 1H), 1.81-1.74 (m, 2H), 1.60-1.53 (m, 2H), 1.29 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.17 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.12 (d, J = 6.6 Hz, 3H).
[1495] Primeri u tabeli 48 su pripremljeni prema opštoj proceduri koja je opisana u Primerima 1251 i 1252, primenom pogodnog bromida. Kada je reakcija dala smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena u finalnoj fazi primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi.
PRIMERI 1267 i 1268
8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-(1-(3-(trifluorometoksi)fenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5.6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1496]
[1497] U suspenziju 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (100 mg, 0.3 mmol) u acetonitrilu (2 mL) su dodati DIPEA (0.16 mL, 0.90 mmol) i 1-(1-bromoetil)-3-(trifluorometoksi)benzen (97 mg, 0.36 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana na 80 °C tokom 4 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i razblažena vodom i ekstrahovana dva puta etil acetatom (20 mL). Kombinovani organski sloj je osušen preko bezvodnog Na2SO4i uparen pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod koji je prečišćen putem preparativne HPLC (Informacije o postupku: Kolona CELLULOSE-2 [(250 X 4.6mm), 5 mikrona; MOBILNA FAZA: 0.1% DEA u metanolu] da se dobiju Primeri 1267 i 1268.
[1498] Primer 1267: Čiste frakcije su uparene do suva da se dobije Primer 1267 (6.3 mg, 4 % prinos). LCMS: m/z = 486.2 (M+H); retenciono vreme 1.44 min [LCMS postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (2.1 × 50 mm), 2.5 µm; Mobilna faza A: 0.1 % TFA: acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 0.1 % TFA: acetonitril (5:95), Gradijent = 0-100 % B tokom 3 minuta; Temperatura: 50 °C; Protok: 1.1 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.19-8.14 (m, 1H), 8.11-8.04 (m, 1H), 7.44-7.52 (m, 2H), 7.39 (s, 1H), 7.25 (br d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.00 (s, 1H), 4.66 (brdd, J = 2.8, 3.8 Hz, 1H), 3.78 (q, J = 6.5 Hz, 1H), 3.53 (s, 3H), 3.47-3.36 (m, 2H), 3.01 (dd, J = 3.5, 11.4 Hz, 1H), 2.80-2.70 (m, 2H), 1.23-1.29 (m, 6 H), 1.03 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
[1499] Primer 1268: (14 mg, 9 % prinos). LCMS: m/z = 486.2 (M+H); retenciono vreme 1.44 min [LCMS postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (2.1 × 50 mm), 2.5 µm; Mobilna faza A: 0.1 % TFA: acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 0.1 % TFA: acetonitril (5:95), Gradijent = 0-100 % B tokom 3 minuta; Temperatura: 50 °C; Protok: 1.1 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm).<1>H NMR (400 MHz. DMSO-d6) δ ppm 8.19-8.12 (m, 1H), 8.10-8.03 (m, 1H), 7.51-7.43 (m, 1H), 7.41 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.23 (br d, J = 7.3 Hz, 1H), 6.02 (s, 1H), 4.45-4.32 (m, 1H), 3.85-3.76 (m, 1H), 3.68-3.60 (m, 1H), 3.59-3.49 (m, 5H), 2.78 (dd, J = 3.7,12.0 Hz, 1H), 2.11-2.00 (m, 1H), 1.29 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.18 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.10 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
[1500] Primeri u Tabeli 49 su pripremljeni prema opštoj proceduri kako je opisano u Primerima 1267 i 1268, primenom pogodnog benzil bromida/hlorida. Kada je reakcija dala smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena u finalnoj fazi primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi.
PRIMERI 1277 i 1278
8-((2S,5R)-4-(2-metoksi-1-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1501]
Intermedijer 1277A: terc-butil (2S,5R)-4-(2-metoksi-2-okso-1-(5-(trifluorometil) piridin-2-il)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat
[1502]
[1503] U promešani rastvor terc-butil (2S,5R)-2,5-dimediilpiperazin-1-karboksilata (0.35 g, 1.63 mmol) u acetonitrilu (8 mL) su dodati DIPEA (0.9 mL, 4.9 mmol) i metil 2-bromo-2-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)acetat (0.54 g, 1.79 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana na 85 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen silika gel hromatografijom (24 g; primenom 6 % -10 % etil acetat/ petrol etar) da se dobije terc-butil (2S,5R)-4-(2-metoksi-2-okso-1-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (0.52 g, 74 % prinos). LCMS: m/z = 432.2 (M+H); retenciono vreme 2.19 min [LCMS postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm), 1.7 µm; Mobilna faza A: 0.1% TFA u vodi; Mobilna faza B: 0.1 % TFA u acetonitrilu; Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].
Intermedijer 1277B: terc-butil (2S,5R)-4-(2-hidroksi-1-(5-(trifluorometil)piridin-2-il) etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat
[1504]
[1505] U rastvor terc-butil (2S,5R)-4-(2-metoksi-2-okso-1-(5-(trifluorometil) piridin-2-il)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (0.15 g, 0.35 mmol) u etanolu (5 mL) dodat je NaBH4(0.07 g, 1.74 mmol) i kalcijum hlorid (0.19 g, 1.74 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana tokom 3 h. Reakcija je kvenčovana vodom (10 mL). Reakciona smeša je ekstrahovana etil acetatom (3 × 100 mL), kombinovani organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata i uparen pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod. LCMS: m/z = 404.2 (M+H); retenciono vreme 1.84 min [LCMS postupak: Kolona: Ascentis Express C8 (50 × 2.1 mm) 2.7 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum format: acetonitril (98:2), Mobilna faza B: 10 mM amonijum format: acetonitril (2:98), Gradijent = 0-100 % B tokom 1.5 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 100 % B; Temperatura: 27 °C; Protok: 1.0 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].
Intermedijer 1277C: terc-butil (2S,5R)-4-(2-metoksi-1-(5-(trifluorometil)piridin-2-il) etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat
[1506]
[1507] U promešani rastvor terc-butil (2S,5R)-4-(2-hidroksi-1-(5-(trifluorometil) piridin-2-il)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (0.25 g, 0.62 mmol) u DMF-u (5 mL) dodat je NaH (50 mg, 1.24 mmol, 60% m/m) na 0 °C. Nakon 30 min., dodat je metil jodid (0.06 mL, 0.93 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Reakcija je kvenčovana vodom (50 mL). Reakciona smeša je ekstrahovana etil acetatom (3 × 100 mL), organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, filtriran, uparen pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod koji je prečišćen silika gel hromatografijom (silika gel kolona od 12 g; primenom 42 %-48 % etil acetat/ petrol etar) da se dobije terc-butil (2S,5R)-4-(2-metoksi-1-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (110 mg, 42 % prinos). LCMS: m/z = 418.2 (M+H); retenciono vreme 2.25 min [LCMS postupak: Kolona: Ascentis Express C8 (50 × 2.1 mm) 2.7 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum format: acetonitril (98:2), Mobilna faza B: 10 mM amonijum format: acetonitril (2:98), Gradijent = 0-100 % B tokom 1.5 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 100 % B; Temperatura: 27 °C; Protok: 1.0 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].
Intermedijer 1277D: (2R,5S)-1-(2-metoksi-1-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)etil)-2,5-dimetilpiperazin.TFA
[1508]
[1509] U rastvor terc-butil (2S,5R)-4-(2-metoksi-1-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (110 mg, 0.26 mmol) u DCM-u (3 mL) dodat je TFA (0.2 mL, 2.6 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod (2R,SS)-1-(2-metoksi-1-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)etil)-2,5-dimetilpiperazin.TFA (100 mg, 88% prinos) kao braon čvrsta supstanca. LCMS: m/z = 318.2 (M+H); retenciono vreme 0.87 min [LCMS postupak: Kolona: Ascentis Express C8 (50 × 2.1 mm) 2.7 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum format: acetonitril (98:2), Mobilna faza B: 10 mM amonijum format: acetonitril (2:98), Gradijent = 0-100 % B tokom 1.5 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 100 % B; Temperatura: 27 °C; Protok: 1.0 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].
Primeri 1277 i 1278: 8-((2S,5R)-4-(2-metoksi-1-(5-(trifluorometil)piridin-2-il) etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1510] U promešani rastvor (2R,SS)-1-(2-metoksi-1-(5-(trifluorometil)piridin-2-il) etil)-2,5-dimetilpiperazin, TFA (0.10 g, 0.24 mmol) u acetonitrilu (8 mL) dodat je DIPEA (0.13 mL, 0.72 mmol), 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (0.08 g, 0.24 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana na 85 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen preparativnom HPLC (Informacije o postupku: Kolona CELLULOSE-2 (250 X 4.6mm), 5 mikrona, MOBILNA FAZA: 0.1% DEA u acetonitrilu, izokratski) da se dobiju Primeri 1277 i 1278.
[1511] Primer 1277: (3.5 mg, 3 % prinos). LCMS: m/z = 501.3 (M+H); retenciono vreme 1.99 min [LCMS postupak: Kolona: Ascentis Express C8 (50 × 2.1 mm) 2.7 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum format: acetonitril (98:2), Mobilna faza B: 10 mM amonijum format: acetonitril (2:98), Gradijent = 0-100 % B tokom 1.5 minuta, zatim zadržavanje 0.6 min pri 100 % B; Temperatura: 27 °C; Protok: 1.0 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.94 (s, 1H), 8.21 (dd, J = 1.6, 8.4 Hz, 1H), 8.17-8.12 (m, 1H), 8.09-8.03 (m, 1H), 7.78 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 6.03 (s,1H), 4.50-4.33 (m, 1H), 4.11 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 3.69-3.81 (m, 2H), 3.52 (s, 3H), 3.47-3.41 (m, 1H), 3.35 (br s, 1H), 3.21 (s, 3H), 3.17 (brdd, J = 3.4, 11.7 Hz, 1H), 2.76-2.63 (m, 2H), 1.19 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.08 (d, J= 6.4 Hz, 3H).
[1512] Primer 1278: (11.9 mg, 10 % prinos). LCMS: m/z = 501.2 (M+H); retenciono vreme 1.96 min [LCMS postupak: Kolona: Ascentis Express C8 (50 × 2.1 mm) 2.7 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum format: acetonitril (98:2), Mobilna faza B: 10 mM amonijum format: acetonitril (2:98), Gradijent = 0-100 % B tokom 1.5 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 100 % B; Temperatura: 27 °C; Protok: 1.0 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.90 (s. 1H), 8.20 (dd, J = 2.1, 8.2 Hz, 1H), 8.17-8.12 (m, 1H), 8.10-8.01 (m, 1H), 7.80 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.03 (s,1H), 4.35 (br dd, J = 2.1, 3.3 Hz, 1H), 3.99 (t, J = 5.3 Hz, 1H), 3.87-3.80 (m, 1H), 3.73 (dd, J = 5.0, 10.1 Hz, 1H), 3.66-3.43 (m, 5H), 3.21 (s, 3H), 3.18 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 2.92 (dd, J = 3.7, 11.7Hz, 1H), 2.13 (dd, J = 2.3, 11.6 Hz, 1H), 1.17 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.11 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
PRIMERI 1279 i 1280
8-((2S,5 R)-4-(2-hidroksi-1 -(5-(trifluorometil)piridin-2-il)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1513]
[1514] Intermedijer 1279A: 2-((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-2-(5-(trifluorometil) piridin-2-il)etan-1-ol
[1515] U rastvor terc-butil (2S,5R)-4-(2-hidroksi-1-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (120 mg, 0.29 mmol) u DCM-u (3 mL) dodat je TFA (0.2 mL, 2.6 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana tokom 2 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije 2-((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)-2-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)etan-1 -ol (100 mg, 63% prinos) kao braon čvrsta supstanca. LCMS: m/z = 304.2 (M+H); retenciono vreme 0.53 min [LCMS postupak: Kolona: Ascentis Express C8 (50 × 2.1 mm) 2.7 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum format: acetonitril (98:2), Mobilna faza B: 10 mM amonijum format: acetonitril (2:98), Gradijent = 0-100 % B tokom 1.5 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 100 % B; Temperatura: 27 °C; Protok: 1.0 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].
Primeri 1279 i 1280: 8-((2S,5R)-4-(2-hidroksi-1-(5-(trifluorometil)piridin-2-il) etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1516] U promešani rastvor 2-((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-2-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)etan-1-ol, TFA (0.1 g, 0.24 mmol) u acetonitrilu (8 mL) su dodati DIPEA (0.13 mL, 0.72 mmol) i 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (0.08 g, 0.24 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana na 85 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen preparativnom HPLC (Informacije o postupku: Kolona CELLULOSE-2 (250 X 4.6mm), 5 mikrona; MOBILNA FAZA: 0.1% DEA MeOH; izokratski) da se dobiju Primeri 1279 i 1280.
[1517] Primer 1279: (9.1 mg, 8 % prinos). LCMS: m/z = 487.2 (M+H); retenciono vreme 1.65 min [LCMS postupak: Kolona: Ascentis Express C8 (50 × 2.1 mm) 2.7 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum format: acetonitril (98:2), Mobilna faza B: 10 mM amonijum format: acetonitril (2:98), Gradijent = 0-100 % B tokom 1.5 minuta, zatim zadržavanje 0.6 min pri 100 % B; Temperatura: 27 °C; Protok: 1.0 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.94 (s, 1H), 8.24-8.12 (m, 2H), 8.11-8.02 (m, 1H), 7.78 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.04 (s, 1H), 4.65 (br t, J = 4.8 Hz, 1H), 4.53-4.38 (m, 1H), 4.04-3.94 (m, 1H), 3.90-3.73 (m, 2H), 3.53 (s, 3H), 3.49-3.43 (m, 1H), 3.26 (br d, J = 7.3 Hz, 1H), 2.80-2.69 (m, 2H), 2.57-2.53 (m, 1H), 1.27-1.14 (m, 3H), 1.12-1.03 (m, 3H).
[1518] Primer 1280: (11.1 mg, 9.3 % prinos). LCMS: m/z = 487.2 (M+H); retenciono vreme 1.65 min [LCMS postupak: Kolona: Ascentis Express C8 (50 × 2.1 mm) 2.7 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum format: acetonitril (98:2), Mobilna faza B: 10 mM amonijum format: acetonitril (2:98), Gradijent = 0-100 % B tokom 1.5 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 100 % B; Temperatura: 27 °C; Protok: 1.0 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.89 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 8.25-8.12 (m, 2H), 8.10-8.04 (m, 1H), 7.80 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.03 (s, 1H), 4.70-4.59 (m,1H), 4.45-4.30 (m, 1H), 3.98-3.89 (m, 1H), 3.85-3.73 (m, 2H), 3.65 (br s, 1H), 3.62-3.55 (m, 2H), 3.53 (s, 3H), 2.92 (dd, J = 3.7, 12.0 Hz, 1H), 2.14-2.06 (m, 1H), 1.18 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.13 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
PRIMERI 1281 i 1282
8-((2S,5R)-4-(1 -(5-ciklopropilizoksazol-3-il)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1519]
[1520] U rastvor 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (130 mg, 0.44 mmol) u acetonitrilu (5 mL) dodat je DIPEA (0.38 mL, 2.19 mmol), 1-(5-ciklopropilizoksazol-3-il)etan-1-ol (94 mg, 0.61 mmol) i (cijanometil) trimetil fosfonijum jodid (212 mg, 0.87 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana na 110 °C u mikrotalasnom reaktoru tokom 2h.Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, razblažena vodom i ekstrahovana dva puta etil acetatom (20 mL). Kombinovani organski sloj je osušen preko bezvodnog Na2SO4i uparen pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen preparativnom HPLC (Informacije o postupku: Kolona: DAD:1-XBRIDGE C18 (150 X4.6) mm 5 mikrona DAD:2-SUNFIRE C18 (150 X4.6)mm 5 mikrona; MOBILNA FAZA: A: 10 mM amonijum acetat u vodi B: ACN; TOK:2.0mL/min). Frakcije su uparene i preuzete za hiralno Prep HPLC prečišćavanje (Hiral Prep postupak: Kolona: DAD-1-CELLULOSE-2 (250 X 4.6mm), 5 mikrona; DAD-2-CELLULOSE-4 ( 250 X 4.6mm), 5 mikrona: MOBILNA FAZA A: 0.1%DEA u ACN-u; MOBILNA FAZA B: 0.1% DEA u MeOH-u) da se dobije Primer 1281: (5.0 mg, 3 % prinos). LCMS: m/z = 433.2 (M+H); retenciono vreme 1.80 min [LCMS postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (2.1 × 50 mm), 2.5 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Gradijent = 0-100 % B tokom 3 minuta; Temperatura: 50 °C; Protok: 1.1 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nmJ.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.20-8.13 (m, 1H), 8.10-8.03 (m, 1H), 6.23 (s, 1H), 6.09 (s, 1H), 4.34-4.06 (m, 1H), 3.96 (q, J = 6.5 Hz, 1H), 3.54 (s, 3H), 3.52-3.45 (m, 1H), 3.25-3.18 (m, 1H), 3.03 (dd, J = 3.4, 11.5 Hz, 1H), 2.84-2.74 (m, 1H), 2.45 (br d, J = 4.6 Hz, 1H), 2.18-2.09 (m, 1H), 1.33 (d,J= 6.8 Hz, 3H), 1.14 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.09-0.99 (m, 5H), 0.94-0.87 (m, 2H); i Primer 1282 (4.4 mg, 2 % prinos). LCMS: m/z = 433.2 (M+H); retenciono vreme 1.18 min (Kolona: XBridge BEH XP C18 (2.1 × 50 mm), 2.5 µm; Mobilna faza A: 0.1 % TFA: acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 0.1 % TFA: acetonitril (5:95), Gradijent = 0-100 % B tokom 3 minuta; Temperatura: 50 °C; Protok: 1.1 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.19-8.14 (m, 1H), 8.11-8.03 (m, 1H), 6.16 (s, 1H), 6.04 (s, 1H), 4.37-4.27 (m, 1H), 3.80-3.73 (m, 1H), 3.69-3.63 (m, 1H), 3.55-3.48 (m, 4H), 3.42-3.36 (m, 1H), 2.79 (dd, J = 3.5, 11.6 Hz, 1H), 2.18 (dd, J = 3.1, 11.6 Hz, 1H), 2.15-2.08 (m, 1H), 1.30 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.08-1.12 (m, 6 H), 1.07-1.02 (m, 2H), 0.93-0.81 (m, 2H).
[1521] Primeri u tabeli 50 su pripremljeni prema opštoj proceduri koja je opisana u Primerima 1281 i 1282, primenom pogodnog alkohola. Kada je reakcija dala smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena u finalnoj fazi primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi.
[1522] Primeri u tabeli 51 su pripremljeni prema opštoj proceduri koja je opisana u Primerima 735 i 736, primenom pogodne boronske kiseline. Kada je reakcija dala smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena u finalnoj fazi primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi.
PRIMERI 1287 i 1288
8-((2S,5R)-4-((2-(dimetilfosforil)fenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1523]
Intermedijer 1287A: (2-bromofenil)(4-fluorofenil)metanol
[1524]
[1525] U promešani rastvor 2-bromobenzaldehida (2.0 g, 10.81 mmol) u suvom tetrahidrofuranu (20 mL) dodat je (4-fluorofenil)magnezijum bromid (10 mL, 10 mmol, 1M u THF-u) na 0 °C. Reakciona smeša mešana je tokom 16 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je kvenčovana zasićenim vodenim NH4Cl rastvorom (20 mL). Reakciona smeša je ekstrahovana etil acetatom (100 mL). Organski sloj je je opran vodom (20 mL), slanim rastvorom (20 mL), osušen preko bezvodnog Na2SO4i uparen pod sniženim pritiskom da se dobije sirovo jedinjenje koje je prečišćeno hromatografijom sa 24 g silika gela primenom 0-30% etil acetat/petrol etar kao eluenta da se dobije (2-bromofenil)(4-fluorofenil) metanol (2.1 g, 89 % prinos).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ ppm 7.50-7.62 (m, 2H), 7.34-7.46 (m, 3H), 7.14-7.24 (m, 1H), 6.92-7.07 (m, 2H), 6.20 (s, 1H).
Intermedijer 1287B: 1-bromo-2-(bromo(4-fluorofenil)metil)benzen
[1526]
[1527] U promešani rastvor (2-bromofenil)(4-fluorofenil)metanola (500 mg, 1.78 mmol) u DCM-u (10 mL) dodat je u kapima BBr3(3.56 mL, 3.56 mmol, 1 M u DCM-u) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša mešana je tokom 4 h. Reakcija je kvenčovana zasićenim vodenim NaHCO3rastvorom (20 mL). Reakciona smeša je ekstrahovana DCM-om (100 mL). Organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, filtriran i uparen pod sniženim pritiskom da se dobije 1-bromo-2-(bromo(4-fluorofenil)metil) benzen (580 mg, 95 % prinos). LCMS: m/z, 263.1 (M-Br); retenciono vreme 2.13 min. LCMS Postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Gradijent = 20-100 % B tokom 2 minuta, zatim zadržavanje 0.3 minuta pri 100 % B; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.
Intermedijer 1287C: terc-butil (2S,5R)-4-((2-bromofenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat
[1528]
[1529] U rastvor terc-butil (2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (500 mg, 2.33 mmol) u suvom acetonitrilu (3.0 mL), su dodati 1-bromo-2-(bromo(4-fluorofenil)metil)benzen (883 mg, 2.57 mmol) i DIPEA (1.22 mL, 7.0 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana na 85 °C tokom 24 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen Combi flash hromatografijom sa 12 g silika gela primenom 0-100% etil acetat/petrol etar kao eluenta da se dobije terc-butil (2S,5R)-4-((2-bromofenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (0.45 g, 40 % prinos).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ ppm 7.75-7.89 (m, 1H), 7.25-7.60 (m, 4H), 6.91-7.17 (m, 3H), 5.02 (d, J=9.6 Hz, 1H), 4.12 (m, 1H), 3.51-3.72 (m, 1H), 3.30 (m, 1H), 2.93 (m, 1H), 2.57-2.71 (m, 1H), 2.17-2.31 (m, 1H), 1.37-1.65 (m, 9H), 1.14-1.33 (m, 3H), 0.82-1.05 (m, 3H).
Intermedijer 1287D: terc-butil (2S,5R)-4-((2-(dimetilfosforil)fenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1 -karboksilat
[1530]
[1531] Promešana suspenzija terc-butil (2S,5R)-4-((2-bromofenil)(4-fluorofenil) metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (75 mg, 0.16 mmol), dimetilfosfin oksida (15 mg, 0.19 mmol), XantPhos-a (6 mg, 9.43 µmol) i kalijum fosfata, tribaznog (33 mg, 0.19 mmol) u DMF-u (2 mL) je pročišćena argonom tokom 10 min, praćeno dodatkom paladijum(II) acetata (2 mg, 7.85 µmol). Reakciona smeša je zagrevana na 120 °C tokom noći. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, koncentrovana pod sniženim pritiskom i prečišćena je hromatografijom sa 12 g silika gela primenom 0-50% etil acetat/petrol etar kao eluenta da se dobije terc-butil (2S,5R)-4-((2-(dimetilfosforil)fenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (50 mg, 67 % prinos). LCMS: m/z, 475.5 (M+H); retenciono vreme 1.94 i 1.98 min. [LCMS Postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Gradijent = 20-100 % B tokom 2 minuta, zatim zadržavanje 0.3 minuta pri 100 % B; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].
Intermedijer 1287E: (2-(((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-µl)(4-fluorofenil)metil) fenil)dimetilfosfin oksid, TFA
[1532]
[1533] U promešani rastvor terc-butil (2S,5R)-4-((2-(dimetilfosforil)fenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (50 mg, 0.11 mmol) u DCM-u (2 mL) dodat je TFA (0.11 mL, 1.37 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da se dobije TFA so (2-(((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)(4-fluorofenil)metil)fenil) dimetilfosfin oksida kao braon polučvrsta supstanca. LCMS: m/z, 375.4 (M+H); retenciono vreme 1.03 min. LC-MS Postupak: Kolona-AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat u vodi: acetonitril (98:2); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat u vodi: acetonitril (2:98); Gradijent: 20% -100% B tokom 2 minuta, zatim zadržavanje 0.2 minuta pri 100% B Protok 0.7 mL/min, Detekcija: UV pri 220 nm.
Primeri 1287 i 1288: 8-((2S,5R)-4-((2-(dimetilfosforil)fenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1534] U suspenziju (2-(((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)(4-fluorofenil) metil)fenil)dimetilfosfin oksid, TFA (88 mg, 0.18 mmol) u suvom acetonitrilu (3 mL), su dodati 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (60 mg, 0.18 mmol) i natrijum bikarbonat (45 mg, 0.54 mmol) na sobnoj temperaturi pod atmosferom argona. Reakciona smeša je zagrevana do 85 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije sirovi proizvod, koji je prečišćen preparativnom hiralnom HPLC (postupak hiralne HPLC: Kolona: LUX KOLONA C4 (250 × 21.2) 5 µm, Mobilna faza: 0.1% DEA u MeOH-u, Tok: 23 mL/min) da se dobiju Primeri 1287 i 1288.
[1535] Primer 1287 (2 mg, 2 % prinos); LCMS: m/z, 558.3 (M+H); retenciono vreme 1.85 min;
[LCMS postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm) 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL / min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%)];<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.20-8.01 (m, 2H), 7.85 (dd, J = 6.0, 8.4 Hz, 2H), 7.59-7.42 (m, 2H), 7.36-7.24 (m, 1H), 7.08-7.18 (m, 2H), 6.51 (s, 1H), 6.39 (s, 1H), 5.99 (s, 1H), 4.59 (br s, 1H), 3.73-3.45 (m, 5H), 3.16-3.06 (m, 1H), 2.96 (br dd, J = 3.3, 11.4 Hz, 1H), 2.35-2.21 (m, 1H), 1.83-1.61(m, 6H), 1.33-1.15 (m, 3H), 1.11-0.95 (m, 3H).
[1536] Primer 1288: (2 mg, 1.8 % prinos); LCMS: m/z, 558.2 (M+H); retenciono vreme 1.89 min: [LCMS postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm) 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% Voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% Voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%)];<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.41-8.09 (m, 1H), 8.09-7.99 (m, 1H), 7.71 (dd, J = 5.9, 8.3 Hz, 2H), 7.63-7.50 (m, 2H), 7.38-7.26 (m, 1H), 7.07-7.17 (m, 2H), 6.52 (br s, 1H), 5.99 (s, 1H), 4.77-4.55 (m, 1H), 3.72-3.46 (m, 5H), 3.17-3.07 (m, 1H), 3.02-2.86 (m, 1H), 2.82 (dd, J = 3.3, 11.4 Hz, 1H), 2.27 (br d, J = 11.2 Hz, 1H), 1.85-1.71 (m, 3H), 1.61-1.47 (m, 3H), 1.30 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.24-1.06 (m, 3H).
[1537] Jedinjenja u tabeli 52 su pripremljena primenom odgovarajućeg bromida kao što je opisano za primer 1287 i 1288. Kada je reakcija dala smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena u finalnoj fazi primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi.
PRIMERI 1296 i 1297
8-((2S,5R)-4-((3-(1-acetilazetidin-3-il)-1,2,4-oksadiazol-5-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1538]
Intermedijer 1296A: 8-((2S,5R)-4-((3-(azetidin-3-il)-1,2,4-oksadiazol-5-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA
[1539]
[1540] U promešani rastvor terc-butil 3-(5-(((2R,5S)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)(4-fluorofenil)metil)-1,2,4-oksadiazol-3-il)azetidin-1-karboksilata (0.15 g, 0.24 mmol) u DCM-u (5 mL) dodat je TFA (0.18 mL, 2.39 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da se dobije sirovo jedinjenje, koji je prečišćeno pomoću prep HPLC da se dobije 8-((2S,5R)-4-((3-(azetidin-3-il)-1,2,4-oksadiazol-5-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA (150 mg, 99 % prinos). LCMS: m/z, 529.3 (M+H); retenciono vreme 1.56 min. Kolona: XBridge BEH XP C18 (2.1 × 50 mm), 2.5 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Gradijent = 0-100 % B tokom 3 minuta; Temperatura: 50 °C; Protok: 1.1 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.20-7.95 (m, 2H), 7.75-7.61 (m, 2H), 7.37-7.19 (m, 2H), 6.04 (br d, J = 15.4 Hz, 1H), 5.38-5.26 (m, 1H), 3.82-3.73 (m, 2H), 3.61-3.50 (m, 6H), 3.17 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 3.01-2.77 (m, 2H), 1.28-0.80 (m, 10H).
Primeri 1296 i 1297: 8-((2S,5R)-4-((3-(1-acetilazetidin-3-il)-1,2,4-oksadiazol-5-il) (4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1541] U rastvor 8-((2S,5R)-4-((3-(azetidin-3-il)-1,2,4-oksadiazol-5-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (0.07 g, 0.13 mmol) u DCM-u (5 mL) na 0 °C su dodati trietilamin (0.07 mL, 0.53 mmol) i acetil hlorid (0.02 mL, 0.27 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Reakcija je kvenčovana zasićenim vodenim NaHCO3rastvorom (5 mL). Smeša je rastvorena u DCM-u (100 mL) i oprana vodom (20 mL), slanim rastvorom (20 mL), osušena preko bezvodnog natrijum sulfata, uparena pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen hromatografijom na koloni sa 12 g silika gela eluiranjem sa 10% MeOH u DCM-u. Željene frakcije su koncentrovane pod sniženim pritiskom da se dobije 8-((2S,5R)-4-((3-(1-acetilazetidin-3-il)-1,2,4-oksadiazol-5-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril koji je prečišćen preparativnom HPLC praćeno hiralnom HPLC. (postupak hiralne separacije: Kolona: Cellulose-2 (250 × 4.6 mm), 5 µm; Mobilna faza: 0.1% DEA u acetonitrilu: metanol (90:10)) da se dobiju Primeri 1296 i 1297.
[1542] Primer 1296: (4.7 mg, 6 % prinos); LCMS: m/z, 571.3m/z, (M+H); retenciono vreme 1.74 min: [LCMS postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1mm) 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%);<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.18-8.10 (m, 1H), 8.10-8.03 (m, 1H), 7.69 (dd, J = 5.4, 8.6 Hz, 2H), 7.21-7.31 (m, 2H), 6.04 (s, 1H), 5.36 (s, 1H), 4.55-4.34 (m, 2H), 4.29-4.15 (m, 2H), 4.11-3.99 (m, 1H), 3.98-3.91 (m, 1H), 3.67-3.47 (m, 5H), 2.98-2.82 (m, 2H), 1.83-1.72 (m, 3H), 1.17 (m, 6H).
[1543] Primer 1297: (4.2 mg, 5.3 % prinos); LCMS: m/z, 571.2 (M+H); retenciono vreme 1.73 min; [LCMS postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm) 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% Voda: 5% acetonitril;10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% Voda: 95% acetonitril;10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%);<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.18-8.12 (m, 1H), 8.10-8.03 (m, 1H), 7.747.64 (m, 2H), 7.22-7.32 (m, 2H), 6.00 (s, 1H), 5.35 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 4.64-4.54 (m, 1H), 4.42-4.54 (m, 1H), 4.27-4.15 (m, 2H), 4.05-3.87 (m, 2H), 3.62-3.46 (m, 5H), 3.18-3.12 (m, 1H), 3.00 (br dd, J = 1.8, 2.8 Hz, 1H), 2.24-2.14 (m, 1H), 1.76 (d, J = 3.2 Hz, 3H), 1.22 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.03 (d, J = 6.6 Hz, 3H).
PRIMERI 1298 i 1299
8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(3-(1-metilazetidin-3-il)-1,2,4-oksadiazol-5-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1544]
[1545] U promešani rastvor 8-((2S,5R)-4-((3-(azetidin-3-il)-1,2,4-oksadiazol-5-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,-6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (0.05 g, 0.1 mmol) u THF-u (1 mL) i MeOH (1 mL) dodat je formaldehid (4.3 mg, 0.14 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Dodat je natrijum cijanoborohidrid (0.01 g, 0.19 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Reakcija je kvenčovana zasićenim vodenim NaHCO3rastvorom (5 mL). Reakciona smeša je rastvorena u DCM-u (100 mL), i oprana vodom (20 mL), slanim rastvorom (20 mL), osušena preko bezvodnog natrijum sulfata, filtrirana i uparena pod sniženim pritiskom da se dobije 8-((2S,5R)-4-((3-(1-acetilazetidin-3-il)-1,2,4-oksadiazol-5-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril koji je prečišćen preparativnom HPLC praćeno hiralnom HPLC. (Postupak hiralne separacije: Kolona: Cellulose-4 (250 × 4.6 mm) 5 µm; Mobilna faza: 0.1% DEA u acetonitrilu: izopropanol (90:10), izokratski) da se dobiju Primeri 1298 i 1299.
[1546] Primer 1298 (3.6 mg, 7 % prinos); LCMS: m/z 543.2 (M+H); retenciono vreme 1.74 min; [LCMS postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1mm) 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% Voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda:95% acetonitril;10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%);<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 8.15-8.13 (m, 1H), 8.07-8.04 (m, 1H), 7.69-7.66(m, 2H), 7.29-7.24 (m, 2H), 6.00 (s, 1H), 5.32 (s, 1H), 4.63-4.51 (m, 1H), 3.72-3.67 (m, 2H), 3.58-3.48 (m, 6H), 3.30-3.13 (m, 4H), 2.21 (s, 3H), 2.16-2.07 (m, 1H), 1.34-1.22 (m, 6H).
[1547] Primer 1299 (2.1 mg, 4 % prinos); LCMS: m/z, 543.3 (M+H); retenciono vreme 1.73 min; [LCMS postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm) 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% Voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% Voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%);<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.15-8.13 (m, 1H), 8.07-8.05 (m, 1H), 7.70-7.66 (m, 2H), 7.27-7.23 (m, 2H), 6.04 (s, 1H), 5.32 (s, 1H), 4.37-4.49 (m, 1H), 3.74-3.68 (m, 1H), 3.62-3.46 (m, 7H), 3.30-3.22 (m, 2H), 3.19-3.16 (m, 2H), 2.32-2.09 (m, 4H), 1.23-1.13 (m, 6H).
PRIMERI 1300 i 1301
8-((2S,5R)-4-((1,1-dioksidotetrahidro-2H-tiopiran-4-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1548]
Intermedijer 1300A: N-metoksi-N-metiltetrahidro-2H-tiopiran-4-karboksamid 1,1-dioksid
[1550] U promešani rastvor tetrahidro-2H-tiopiran-4-karboksilne kiseline 1,1-dioksida (1.0 g, 5.61 mmol) u DCM-u (15 mL) dodat je 1,1'-karbonildiimidazol (0.91 g, 5.61 mmol) na sobnoj temperaturi. Nakon 1 h., dodat je N,O-dimetilhidroksilamin hidrohlorid (0.82 g, 8.42 mmol) i reakciona smeša je mešana tokom 16 h. Reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana DCM-om (2 × 50 mL), Kombinovani organski sloj je opran vodom (50 mL), slanim rastvorom (50 mL), osušen preko bezvodnog Na2SO4i uparen pod sniženim pritiskom da se dobije N-metoksi-N-metiltetrahidro-2H-tiopiran-4-karboksamid 1,1-dioksid (1.2 g, 97 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 3.70 (s, 3H), 3.28-3.20 (m, 2H), 3.10-3.06 (m, 6H), 2.07-1.92 (m, 4H).
Intermedijer 1300B: (1,1-dioksidotetrahidro-2H-tiopiran-4-il)(4-fluorofenil) metanon
[1551]
[1552] U promešani rastvor N-metoksi-N-metiltetrahidro-2H-tiopiran-4-karboksamid 1,1-dioksida (0.700 g, 3.16 mmol) u tetrahidrofuranu (7 mL) dodat je (4-fluorofenil)magnezijum bromid (11.9 mL, 9.49 mmol, 0.8 M u THF-u) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 h. Reakcija je kvenčovana zasićenim vodenim NH4Cl rastvorom. Reakciona smeša je ekstrahovana etil acetatom (2 × 40 mL), kombinovani organski sloj je osušen preko bezvodnog Na2SO4i uparen do suva da se dobije sirovi proizvod, koji je prečišćen hromatografijom sa 12 g silika gela primenom 0-30% etil acetat/petrol etar kao eluenta da se dobije (1,1-dioksidotetrahidro-2H-tiopiran-4-il)(4-fluorofenil)metanon (620 mg, 76 % prinos). LCMS: m/z, 274.0 (M+NH4); retenciono vreme 1.02 min; LCMS Postupak: Kolona-Luna 3.0 C18 (2) 100 Å; LC Kolona (20 X 4.0 mm) Mercury MS TM; Mobilna faza A: 10 mM NH4OAc u vodi: acetonitril (98:2); Mobilna faza B: 10 mM NH4OAc u vodi: acetonitril (2:98); Gradijent: 15-100% B tokom 2.5 minuta, Protok 1.5 mL/min, zatim zadržavanje 0.3 minuta pri 100% B Protok 2.0 mL/min, zatim 100-15% B tokom 0.1 minuta; zadržavanje 0.1 minut pri 15% B, Protok 1.5 mL/min.
Intermedijer 1300C: 4-((4-fluorofenil)(hidroksi)metil)tetrahidro-2H-tiopiran 1,1-dioksid
[1553]
[1554] U rastvor (1,1-dioksidotetrahidro-2H-tiopiran-4-il)(4-fluorofenil) metanona (620 mg, 2.42 mmol) u MeOH-u (6 mL) dodat je natrijum borohidrid (275 mg, 7.26 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana tokom 16 h. Reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana dva puta etil acetatom (20 mL), organski sloj je izdvojen, osušen preko bezvodnog Na2SO4i koncentrovan pod sniženim pritiskom da se dobije 4-((4-fluorofenil)(hidroksi)metil)tetrahidro-2H-tiopiran 1,1-dioksid (550 mg, 88 % prinos) kao bela čvrsta supstanca. LCMS: m/z, 276.2 (M+NH4); retenciono vreme 1.00 min. [LCMS Postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Gradijent = 20-100 % B tokom 2 minuta, zatim zadržavanje 0.2 minuta pri 100 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].
Primeri 1300 i 1301: 8-((2S,5R)-4-((1,1-dioksidotetrahidro-2H-tiopiran-4-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1555] U promešani rastvor 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (170 mg, 0.57 mmol) u acetonitrilu (2 mL) su dodati 4-((4-fluorofenil)(hidroksi)metil)tetrahidro-2H-tiopiran 1,1-dioksid (222 mg, 0.86 mmol), (cijanometil)trimetilfosfonijum jodid (278 mg, 1.14 mmol), i DIPEA (0.5 mL, 2.86 mmol).
Reakciona smeša je zagrevana na 110 °C u mikrotalasnoj tokom 2 h, ohlađena na sobnu temperaturu i koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije sirovi proizvod, koji je prečišćen preparativnom HPLC praćeno hiralnom HPLC. (postupak hiralne HPLC: Kolona: Cellulose 4 (250 mm × 30 mm), 5 µm, Mobilna faza: 0.1% DEA u (acetonitril: MeOH = 70:30)) da se dobiju Primeri 1300 i 1301).
[1556] Primer 1300 (4.1 mg, 1.3 % prinos); LCMS: m/z, 538.3 (M+H); retenciono vreme 1.8 min; [LCMS postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1mm) 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% Voda: 5% acetonitril;10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% Voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%);<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.16-8.14 (m, 1H), 8.08-8.06 (m, 1H), 7.38 (dd, J = 5.7, 8.7 Hz, 2H), 7.25-7.20 (m, 2H), 6.07 (s, 1H), 4.40 (m, 1H), 3.66 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 3.53 (s, 3H), 3.48 (dd, J= 3.4, 12.5 Hz, 1H), 3.20-3.12 (m, 4H), 3.10 - 2.96 (m, 4H), 2.48 (br dd, J = 1.7, 3.7 Hz, 1H), 2.22 - 2.10 (m, 1H), 2.05-1.90 (m, 1H), 1.50-1.35 (m, 1H), 1.23-1.16 (m, 4H) 0.98 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
[1557] Primer 1301 (1 mg, 0.33 % prinos); LCMS: m/z, 538.3 (M+H); retenciono vreme 1.82 min; [LCMS postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% Voda: 5% acetonitril;10 mM amonijum acetat: Mobilna faza B: 5% Voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp:50°C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%);<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.16-8.14 (m, 1H), 8.07-8.04 (m, 1H), 7.35 (dd, J = 5.7, 8.7 Hz, 2H), 7.20-7.16 (m, 2H), 5.99 (s, 1H), 4.40 (m, 1H), 4.10 - 3.90 (m, 1H), 3.59-3.49 (m, 6H), 3.33-3.10 (m, 2H), 2.98 (br d, J = 12.5 Hz, 2H), 2.67-2.52 (m, 1H), 2.33-2.32 (m, 1H), 2.20-2.10 (m, 2H), 2.06-1.98 (m, 1H), 1.37-1.13 (m, 1H), 1.23-1.08 (m, 7H).
PRIMERI 1302 i 1303
8-((2S,5R)-4-(1-(4-metoksi-3-(2-metoksietoksi)fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1558]
Intermedijer 1302A: 5-(1-hidroksietil)-2-metoksifenol
[1559]
[1560] U rastvor 3-hidroksi-4-metoksibenzaldehida (2 g, 13.15 mmol) u THF-u (30 mL), dodavan je metilmagnezijum hlorid (9.6 mL, 28.9 mmol, 3M u THF-u) na 0 °C polako tokom 5 min. Reakciona smeša je mešana tokom 4 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je kvenčovana zasićenim vodenim NH4Cl rastvorom (20 mL). Reakciona smeša je rastvorena u etil acetatu (100 mL), organski sloj je je opran vodom (20 mL), slanim rastvorom (20 mL), osušen preko bezvodnog Na2SO4i uparen pod sniženim pritiskom da se dobije sirovi proizvod, koji je prečišćen hromatografijom na koloni sa 24 g silika gela eluiranjem sa 0-100% etil acetata u petrol etru da se dobije 5-(1-hidroksietil)-2-metoksifenol (2.2 g, kvantitativni prinos) kao bela čvrsta supstanca. LCMS: m/z, 167.1 (M-H); retenciono vreme 0.58 min., [LCMS Postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Gradijent = 20-100 % B tokom 2 minuta, zatim zadržavanje 0.2 minuta pri 100 % B; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].
Intermedijer 1302B: 5-(1-hloroetil)-2-metoksifenol
[1561]
[1562] U promešani rastvor 5-(1-hidroksietil)-2-metoksifenola (340 mg, 2.02 mmol) u DCM-u (3 mL), dodat je tionil hlorid (0.44 mL, 6.06 mmol) u kapima na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana tokom 3 h i uparena do suva da se dobije 5-(1-hloroetil)-2-metoksifenol (375 mg, 99 % prinos). LCMS: m/z, 151.0 (M-Cl); retenciono vreme 0.95 min; [LCMS Postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Gradijent = 20-100 % B tokom 2 minuta, zatim zadržavanje 0.2 minuta pri 100 % B; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].
Intermedijer 1302C: 8-((2S,5R)-4-(1-(3-hidroksi-4-metoksifenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1563]
[1564] U rastvor 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (200 mg, 0.67 mmol) u suvom acetonitrilu (3 mL), dodati su 5-(1-hloroetil)-2-metoksifenol (251 mg, 1.35 mmol), DIPEA (0.35 mL, 2.02 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana na 85 °C tokom 24 h. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije sirovi proizvod, koji je prečišćen hromatografijom na koloni sa 12 g silika gela eluiranjem sa 10% MeOH u DCM-u. Željene frakcije su koncentrovane pod sniženim pritiskom da se dobije 8-((2S,5R)-4-(1-(3-hidroksi-4-metoksifenil)etil)-2,5-dimediilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5naftiridin-2-karbonitril (250 mg, 83 % prinos). LCMS: m/z, 448.2 (M+H); retenciono vreme 1.45 i 1.46 min; [LCMS Postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Gradijent = 20-100 % B tokom 2 minuta, zatim zadržavanje 0.2 minuta pri 100 % B; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].
Primeri 1302 i 1303: 8-((2S,5R)-4-(1-(4-metoksi-3-(2-metoksietoksi)fenil) etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1565] U promešani rastvor 8-((2S,5R)-4-(l-(3-hidroksi-4-metoksifenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (100 mg, 0.22 mmol) u suvom DMF-u (3 mL), dodat je K2CO3(93 mg, 0.67 mmol) na sobnoj temperaturi pod atmosferom argona. Reakciona smeša je mešana tokom 5 min i 1-bromo-2-metoksietan (62 mg, 0.45 mmol) je dodat. Reakciona smeša je zagrevana 85 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu, filtrirana kroz Celite i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen preparativnom HPLC praćeno hiralnom HPLC. [postupak hiralne HPLC: Kolona: CELLULOSE 5 (250 mm × 30 mm) 5 µm, Mobilna faza: 0.1% DEA u MeOH-u, izokratski) da se dobiju Primeri 1302 i 1303.
[1566] Primer 1302 (7.7 mg, 6.7 % prinos); LCMS: m/z, 506.3 (M+H); retenciono vreme 1.9 min; [LCMS postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm) 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% Voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%].
[1567] Primer 1303 (6.6 mg, 5.8 % prinos); LCMS: m/z, 506.4 (M+H); retenciono vreme 1.92 min; [LCMS postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm) 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% Voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% Voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%).
[1568] Jedinjenja u tabeli 53 su pripremljena od fenolnog intermedijera primenom odgovarajućih alkil bromida kao što je opisano za primere 1302 i 1303. Kada je reakcija dala smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena u finalnoj fazi primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi.
PRIMERI 1306 i 1307
8-((2S,5R)-4-(1-(3-ciklopropil-1,2,4-oksadiazol-5-il)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril
[1569]
Intermedijer 1306A: terc-butil (2S,5R)-4-(1-metoksi-1-oksopropan-2-il)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat
[1570]
[1571] U promešani rastvor terc-butil (2S,5R)-2,5-dimediilpiperazin-1-karboksilata (500 mg, 2.33 mmol) u suvom acetonitrilu (10 mL), metil 2-bromopropanoat (468 mg, 2.80 mmol) i DIPEA (1.22 mL, 7.00 mmol) su dodati na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana do 85 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen Combi flash 24 g silika gel hromatografijom primenom 0-30% etil acetata u petrol etru kao eluenta da se dobije terc-butil (2S,5R)-4-(1-metoksi-1-oksopropan-2-il)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (620 mg, 88 % prinos) kao svetlo žuta tečnost. LCMS: m/z, 301.2 (M+H); retenciono vreme 2.941 i 3.094 min. Kolona: Kinetex XB-C18 (3 × 75 mm) 2.6 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum format: acetonitril (98:2), Mobilna faza B: 10 mM amonijum format: acetonitril (2:98), Gradijent = 20-100 % B tokom 4 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 100 % B; Temperatura: 27 °C; Protok: 1.0 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.
Intermedijer 1306B: 2-((2R,5S)-4-(terc-butoksikarbonil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il) propanska kiselina
[1572]
[1573] U rastvor terc-butil (2S,5R)-4-(1-metoksi-1-oksopropan-2-il)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (320 mg, 1.07 mmol) u suvom MeOH (6.0 mL), voda (1.5 mL) i KOH (179 mg, 3.20 mmol) su dodati na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana tokom 6 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je razblažen toluenom (3 × 10 mL), uparen i osušen pod visokim vakuumom da se dobije kalijumova so 2-((2R,5S)-4-(terc-butoksikarbonil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)propanske kiseline (350 mg, 86 % prinos) kao beličasta čvrsta supstanca. LCMS: m/z, 287.3 (M+H); retenciono vreme 0.67 i 0.69 min. LC-MS Postupak: Kolona-AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat u vodi: acetonitril (98:2); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat u vodi: acetonitril (2:98); Gradijent: 20% -100% B tokom 2 minuta, zatim zadržavanje 0.2 minuta pri 100% B, Protok 0.7 mL/min.
Intermedijer 1306C: terc-butil (2S,5R)-4-(1-(3-ciklopropil-1,2,4-oksadiazol-5-il)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat
[1574]
[1575] U promešani rastvor kalijumove soli 2-((2R,5S)-4-(terc-butoksikarbonil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)propanske kiseline (450 mg, 1.38 mmol) u DMF-u (8.0 mL), BOP (1.22 g, 2.77 mmol) i trietil amin (0.58 mL, 4.15 mmol) su dodati na sobnoj temperaturi. Nakon 2 h., reakciona smeša je zagrevana na 100 °C tokom 16 h, ohlađena je na sobnu temperaturu, koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije sirovi proizvod, koji je prečišćen hromatografijom sa 24 g silika gela primenom 0-100 % etil acetat/ petrol etar. Frakcije su koncentrovane pod sniženim pritiskom da se dobije terc-butil (2S,5R)-4-(1-(3-ciklopropil-1,2,4-oksadiazol-5-il)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (450 mg, 93 % prinos). LCMS: m/z, 351.2 (M+H); retenciono vreme 2.218 min. [LCMS Postupak: Kolona-Luna 3.0 C18 (2) 100 Å LC Kolona (20 X 4.0 mm) Mercury MS TM; Mobilna faza A: 0.1%TFA u Milli-Q vodi; Mobilna faza B: 0.1% TFA u acetonitrilu; Gradijent: 15-100% B tokom 2.5 minuta, protok 1.5 mL/min, zatim zadržavanje 0.3 minuta pri 100% B protok 2.0 mL/min, zatim 100-15% B tokom 0.1 minuta, protok 1.5 mL/min; zadržavanje 0.1 minut pri 15% B, protok 1.5 mL/min].
Intermedijer 1306D: 3-ciklopropil-5-(1-((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)etil)-1,2,4-oksadiazol, TFA
[1576]
[1577] U rastvor terc-butil (2S,5R)-4-(1-(3-ciklopropil-1,2,4-oksadiazol-5-il) etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (450 mg, 1.28 mmol) u DCM-u (8 mL) dodat je TFA (0.1 mL, 1.28 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da se dobije TFA so 3-ciklopropil-5-(1-((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)etil)-1,2,4-oksadiazola (320 mg, 68.4 % prinos). LCMS: m/z, 251.0 (M+H); retenciono vreme 0.87 min. LCMS Postupak: Kolona-Kinetex XB-C18 (75 × 3 mm-2.6 µm); Mobilna faza A: 0.1%TFA u Milli-Q vodi; Mobilna faza B: 0.1% TFA u acetonitrilu; Gradijent: 20-100% B tokom 4 minuta, Protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 100% B Protok 1.5 mL/min, zatim 100-20% B tokom 0.1 minuta, Protok 1.5 mL/min; zadržavanje 1 minut pri 20% B, Protok 1.5 mL/min.
Primeri 1306 i 1307: 8-((2S,5R)-4-(1-(3-ciklopropil-1,2,4-oksadiazol-5-il)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril
[1578] U promešani rastvor 3-ciklopropil-5-(1-((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il) etil)-1,2,4-oksadiazol, TFA (132 mg, 0.36 mmol) u acetonitrilu (4 mL), dodati su 3,6-dicijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (100 mg, 0.28 mmol) i DIPEA (0.15 mL, 0.84 mmol). Reakciona smeša je zagrevana na 85 °C tokom 3 h. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i uparena pod sniženim pritiskom da se dobije sirovi proizvod, koji je prečišćen preparativnom HPLC praćeno hiralnom SFC (postupak hiralne SFC: Kolona: Luxcellulose-2 (250 × 50 mm) 5 µm, % CO2= 65%; procenat rastvarača: 35% metanola (100%), ukupni tok: 4.0 g/min. Povratni pritisak: 120 bar; Temperatura: 35 °C; UV detekcija: 235 nm] da se dobiju Primeri 1306 i 1307.
[1579] Primer 1306: (42.2 mg, 64.6 % prinos): LCMS: m/z, 459.2 (M+H); retenciono vreme 1.86 min; LCMS postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.33-8.24 (m, 1H), 8.24-8.11 (m, 1H), 4.70-4.48 (m, 1H), 4.34 (q, J = 7.0 Hz, 1H), 3.91 (dd, J = 3.1, 12.3 Hz, 1H), 3.56 (s, 3H), 3.34 (br s, 1H), 3.27 (dd, J = 4.4, 12.7 Hz, 1H), 3.06-2.97 (m, 1H), 2.41 (dd, J = 5.1, 11.5 Hz, 1H), 2.18-2.08 (m, 1H), 1.49 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.16 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.11-1.03 (m, 2H), 0.92 (d, J = 6.1 Hz, 5H).
[1580] Primer 1307: (18.4 mg, 28.2 % prinos): LCMS: m/z, 459.2 (M+H); retenciono vreme 1.88 min: LCMS postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.30-8.24 (m, 1H), 8.20-8.13 (m, 1H), 4.77-4.67 (m, 1H), 4.24 (q, J = 7.0 Hz, 1H), 4.11 (dd, J = 3.3, 12.6 Hz, 1H), 3.55 (s, 3H), 3.42-3.33 (m, 2H), 3.21 (dd, J = 3.5, 11.6 Hz, 1H), 2.48 (br d, J = 3.4 Hz, 1H), 2 17-2 10 (m, 1H), 1.42 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.24 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.12-1.02 (m, 2H), 0.95-0.88 (m, 2H), 0.86 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
PRIMERI 1308 i 1309
8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)-2-hidroksi-2-metilpropil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1581]
Intermedijer 1308A: terc-butil (2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)-2-hidroksi-2-metilpropil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat
[1582]
[1583] U rastvor terc-butil (2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)-2-metoksi-2-oksoetil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (500 mg, 1.314 mmol) u suvom tetrahidrofuranu (6 mL) dodat je metilmagnezijum bromid (2.63 mL, 5.26 mmol) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Reakcija je kvenčovana zasićenim vodenim NH4Cl rastvorom (20 mL). Reakciona smeša je ekstrahovana etil acetatom (100 mL), organski sloj je je opran vodom (20 mL), slanim rastvorom (20 mL), osušen preko bezvodnog Na2SO4i uparen pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen hromatografijom sa 12g silika gela primenom 0-100% etil acetat/petrol etar smeše kao eluenta da se dobije terc-butil (2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)-2-hidroksi-2-metilpropil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (410 mg, 82 % prinos). LCMS: m/z, 381.2 (M+H); retenciono vreme 3.63 min; Kolona: Kinetex XB-C18 (3 x 75 mm) 2.6 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum format: acetonitril (98:2), Mobilna faza B: 10 mM amonijum format: acetonitril (2:98), Gradijent = 20-100 % B tokom 4 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 100 % B; Temperatura: 27 °C; Protok: 1.0 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.
Intermedijer 1308B: 1-((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-1-(4-fluorofenil)-2-metilpropan-2-ol, TFA
[1584]
[1585] U rastvor terc-butil (2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)-2-hidroksi-2-metilpropil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (200 mg, 0.53 mmol) u DCM-u (4 mL), dodat je TFA (0.4 mL, 5.26 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da se dobije TFA so 1-((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-1-(4-fluorofenil)-2-metilpropan-2-ola (200 mg, 96 % prinos). LCMS: m/z, 281.4 (M+H); retenciono vreme 1.09 min.; LCMS Postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Gradijent = 20-100 % B tokom 2 minuta, zatim zadržavanje 0.3 minuta pri 100 % B; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.
Primeri 1308 i 1309: 8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)-2-hidroksi-2-metilpropil)-2.5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1586] U suspenziju 1-((2R,SS)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-1-(4-fluorofenil)-2-metilpropan-2-ol, TFA (84 mg, 0.3 mmol) u suvom acetonitrilu (3 mL), 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (100 mg, 0.3 mmol) i natrijum bikarbonat (76 mg, 0.9 mmol) su dodati na sobnoj temperaturi pod atmosferom argona. Reakciona smeša je zagrevana do 85 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije sirovi proizvod, koji je prečišćen preparativnom HPLC praćeno hiralnom HPLC (Postupak hiralne HPLC: Kolona: Cellulose 4 (250 mm × 21.2 mm) 5 µm, Mobilna faza: 0.1% DEA u MeOH-u, Tok: 20 mL/min) da se dobiju Primeri 1308 i 1309.
[1587] Primeri 1308: (24 mg, 16 % prinos): LCMS: m/z, 464.2 (M+H); retenciono vreme 2.0 min; [LCMS postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm) 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% Voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% Voda: 95% acetonitril;10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%);<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.12-8.17 (m, 1 H), 8.03-8.08 (m, 1 H), 7.50 (dd, J=8.4, 6.0 Hz, 2 H), 7.13-7.21 (m, 2 H), 6.06 (s, 1 H), 4.55 (s, 1 H), 4.15-4.26 (m, 1 H), 3.50-3.57 (m, 5 H), 3.42-3.50 (m, 3 H), 2.73-2.82 (m, 1 H), 1.13 (d, J=6.1 Hz, 3 H), 1.09 (s, 6 H), 0.97 (d, J=6.4 Hz, 3 H).
[1588] Primer 1309: (15.4 mg, 11 % prinos): LCMS: m/z, 464.2 (M+H); retenciono vreme 1.98 min; [LCMS postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1 mm) 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% Voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% Voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL / min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%);<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.10-8.15 (m, 1 H) 8.01-8.07 (m, 1 H) 7.48 (dd, J=8.56, 5.87 Hz, 2 H) 7.10-7.16 (m, 2 H) 5.97 (s, 1 H) 4.52-4.63 (m, 1 H) 4.32 (s, 1 H) 3.54-3.64 (m, 3 H) 3.49-3.53 (m, 4 H) 2.79 (d, J=1.71 Hz, 2 H) 1.24 (d, J=6.60 Hz, 3 H) 1.15 (s, 3 H) 0.98-1.08 (m, 6 H).
PRIMERI 1310 i 1311
8-((2S,5R)-4-(2,2-difluoro-1-(4-fluorofenil)-3-hidroksipropil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1589]
Intermedijer 1310A: terc-butil (2S,5R)-4-(4-fluorobenzoil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat
[1590]
[1591] U rastvor 4-fluorobenzoeve kiseline (330 mg, 2.36 mmol) u DMF-u (5 mL) su dodati DIPEA (0.6 mL, 3.53 mmol) i HATU (1.35 g, 3.53 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša mešana je tokom 30 min. Reakciona smeša je ohlađena na 0 °C, terc-butil (2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (505 mg, 2.36 mmol) u DMF-u (5 mL) dodat je u kapima pod atmosferom azota i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom, smeša je ekstrahovana EtOAc-om (2 × 50 mL), oprana vodom, slanim rastvorom, osušena preko bezvodnog natrijum sulfata i koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod koji je prečišćen fleš kolonskom hromatografijom (Kolona: 24 g silike; Tok rastvarača: 45-50% EtOAc u pet etru) da se dobije (2S,SR)-4-(4-fluorobenzoil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (400 mg, 50% prinos). LCMS: m/z, 337.3 (M+H); retenciono vreme 1.70 min; Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.
Intermedijer 1310B: terc-butil (2S,5R)-4-(3-etoksi-2,2-difluoro-1-(4-fluorofenil)-3-oksopropil)-2,5 -dimetilpiperazin-1 -karboksilat
[1592]
[1593] Korak-1: U rastvor terc-butil (2S,SR)-4-(4-fluorobenzoil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (1 g, 2.97 mmol) u DCM-u (10 mL) dodat je karbonil hlorobis(trifenilfosfin)iridijum(I) (0.23 g, 0.30 mmol) na sobnoj temperaturi. Nakon 10 min, 1,1,3,3-tetrametildisiloksan (1.1 mL, 5.95 mmol) je dodat i reakciona smeša je mešana tokom 10 min.
[1594] Korak-2: U posebnoj tikvici sa okruglim dnom, cink (1.3 g, 19.32 mmol) je suspendovan u tetrahidrofuranu (10 mL) i smeša je refluksovala na 70 °C tokom 5 min. Dalje, etil 2-bromo-2,2-difluoroacetat (3.9 g, 19.32 mmol) je dodat na 70 °C. Nakon 5 min, rastvor Koraka-1 je dodat i reakciona smeša je održavana na 70 °C tokom dodatnih 2 h., i zatim je ohlađena na sobnu temperaturu. Reakcija je kvenčovana 10% vodenim NaHCO3i smeša je ekstrahovana EtOAc-om (3 × 50 mL). Kombinovani organski ekstrakti su oprani vodom, slanim rastvorom, osušeni preko bezvodnog natrijum sulfata i koncentrovani pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen fleš kolonskom hromatografijom (Kolona: 24 g silike; Tok rastvarača: 40-50% EtOAc u pet etru) da se dobije terc-butil (2S,5R)-4-(3-etoksi-2,2-difluoro-1-(4-fluorofenil)-3-oksopropil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (600 mg, 45 % prinos) kao dijastereoizomerna smeša. LCMS: m/z, 445.4 (M+H); retenciono vreme 2.27 min; Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.
Intermedijer 1310C: terc-butil (2S,5R)-4-(2,2-difluoro-1-(4-fluorofenil)-3-hidroksipropil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat
[1595]
[1596] U rastvor terc-butil (2S,5R)-4-(3-etoksi-2,2-difluoro-1-(4-fluorofenil)-3-oksopropil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (200 mg, 0.45 mmol) u THF-u (2 mL) dodat je LAH (0.4 mL, 0.90 mmol, 2.4 M u THF-u) u kapima tokom perioda od 2 min na 0 °C. Reakciona smeša je mešana tokom 3 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je ohlađena na 0 °C. Reakcija je kvenčovana zasićenim vodenim NH4Cl rastvorom, i smeša je ekstrahovana EtOAc-om (2 X 25 mL). Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko bezvodnog natrijum sulfata i koncentrovani pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen fleš kolonskom hromatografijom (Kolona: 12 g silike; Tok rastvarača: 2-3% MeOH u hloroformu) da se dobije terc-butil (2S,5R)-4-(2,2-difluoro-1-(4-fluorofenil)-3-hidroksipropil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (120 mg, 66% prinos) kao dijastereoizomerna smeša. LCMS: m/z, 403.4 (M+H); retenciono vreme 1.99 min; Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.
Intermedijer 1310D: 3-((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-2,2-difluoro-3-(4-fluorofenil)propan-1 -ol.TFA
[1597]
[1598] U rastvor terc-butil (2S,5R)-4-(2,2-difluoro-1-(4-fluorofenil)-3-hidroksipropil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (120 mg, 0.30 mmol) u DCM-u (4 mL) dodat je TFA (0.23 mL, 2.98 mmol) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da se dobije 3-((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-2,2-difluoro-3-(4-fluorofenil)propan-1-ol, TFA (120 mg, 97 %) kao dijastereoizomerna smeša. LCMS: m/z, 303.3 (M+H); retenciono vreme 0.80 min: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.
Primeri 1310 i 1311: 8-((2S,SR)-4-(2,2-difluoro-1-(4-fluorofenil)-3-hidroksipropil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1599] U promešanu suspenziju 3-((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-2,2-difluoro-3-(4-fluorofenil)propan-1-ol, TFA (135 mg, 0.45 mmol) u acetonitrilu (5 mL) su dodati DIPEA (0.4 mL, 2.24 mmol) i 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (100 mg, 0.22 mmol). Reakciona smeša je zagrevana na 80 °C tokom 3 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen fleš kolonskom hromatografijom (Kolona: 12 g silike; Tok rastvarača: 2-3% MeOH u hloroformu) da se dobije dijastereoizomerna smeša. Smeša je prečišćena preparativnom HPLC (Postupak hiralne separacije: Kolona: Cellulose-2 (250 X 4.6) mm, 5 mikrona Mobilna faza: 10 mM amonijum acetat u MeOH-u, Protok: 20 mL/min; izokratski) da se dobiju Primeri 1310 i 1311.
[1600] Primer 1310: (8.7 mg, 8% prinos); LCMS: m/z, 486.2 (M+H); retenciono vreme 1.80 min; Kolona: XBridge BEH XP C18 (2.1 × 50 mm), 2.5 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Gradijent = 0-100 % B tokom 3 minuta; Temperatura: 50 °C; Protok: 1.1 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.19-8.13 (m, 1H), 8.11-8.05 (m, 1H), 7.52 (dd, J = 5.7, 8.2 Hz, 2H), 7.21-7.30 (m, 2H), 6.15 (s, 1H), 4.45-4.34(m, 1H), 4.03 (br d, J = 1.2 Hz, 1H), 3.90-3.75 (m, 1H), 3.68-3.50 (m, 5H), 3.23-3.07 (m, 3H), 2.79-2.71 (m, 1H), 2.36 (br dd, J = 7.2, 11.6 Hz, 1H), 1.07-1.02 (m, 6H).
[1601] Primer 1311: (7.4 mg, 7 % prinos). LCMS: m/z, 486.2 (M+H); retenciono vreme 1.81 min; Kolona: XBridge BEH XP C18 (2.1 × 50 mm), 2.5 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Gradijent = 0-100 % B tokom 3 minuta; Temperatura: 50 °C; Protok: 1.1 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.13 (d, J=8.8 Hz, 1 H), 8.02-8.08 (m, 1 H), 7.54 (dd, J=8.4, 5.7 Hz, 2 H), 7.17-7.26 (m, 2 H), 5.99 (s, 1 H), 5.53 (t, J=6.1 Hz, 1 H), 4.51-4.60 (m, 1 H), 4.32-4.44 (m, 1 H), 3.83-4.00 (m, 1 H), 3.42-3.70 (m, 7 H), 2.83 (dd, J=11.6, 3.1 Hz, 1 H), 2.63 (br d, J=11.2 Hz, 1 H), 1.18 (d, J=6.6 Hz, 3 H), 1.05 (d, J=6.4 Hz, 3 H).
PRIMERI 1312 i 1313
8-((2S,5R)-4-(2,2-difluoro-1-(4-fluorofenil)-3-metoksipropil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1602]
Intermedijer 1312A: terc-butil (2S,5R)-4-(2,2-difluoro-1-(4-fluorofenil)-3-metoksipropil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat
[1603]
[1604] U promešani rastvor terc-butil (2S,5R)-4-(2,2-difluoro-1-(4-fluorofenil)-3-hidroksipropil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (200 mg, 0.50 mmol) u THF-u (4 mL) dodat je NaH (60 mg, 1.50 mmol, 60% m/m) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana tokom 5 min. Metil jodid (0.062 mL, 0.99 mmol) dodat je na 0 °C i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 h. Reakcija je kvenčovana ledeno hladnom vodom i ekstrahovana EtOAcom (2 X 50 mL), kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko bezvodnog natrijum sulfata i koncentrovani da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen fleš kolonskom hromatografijom (Kolona: 12 g silike; Tok rastvarača: 2-3% MeOH u hloroformu) da se dobije terc-butil (2S,5R)-4-(2,2-difluoro-1-(4-fluorofenil)-3-metoksipropil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (150 mg, 73 % prinos) kao dijastereoizomerna smeša. LCMS: m/z, 417.4 (M+H); retenciono vreme 2.25 min; Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.
Intermedijer 1312B: (2R,5S)-1-(2,2-difluoro-1-(4-fluorofenil)-3-metoksipropil)-2,5-dimetilpiperazin, TFA
[1605]
[1606] U rastvor terc-butil (2S,5R)-4-(2,2-difluoro-1-(4-fluorofenil)-3-metoksipropil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (100 mg, 0.24 mmol) u DCM-u (4 mL) dodat je TFA (0.2 mL, 2.40 mmol) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da se dobije (2R,5S)-1-(2,2-difluoro-1-(4-fluorofenil)-3-metoksipropil)-2,5-dimetilpiperazin. TFA (80 mg, 77 % prinos) kao dijastereoizomerna smeša. LCMS: m/z, 317.3 (M+H); retenciono vreme 1.11 min; Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.
Primeri 1312 i 1313: 8-((2S,5R)-4-(2,2-difluoro-1-(4-fluorofenil)-3-metoksipropil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1607]
[1608] U promešani rastvor (2R,5S)-1-(2,2-difluoro-1-(4-fluorofenil)-3-metoksipropil)-2,5-dimetilpiperazin, TFA (150 mg, 0.35 mmol) u acetonitrilu (5 mL), su dodati DIPEA (0.6 mL, 3.49 mmol) i 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (175 mg, 0.52 mmol). Reakciona smeša je zagrevana na 80 °C tokom 3 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen fleš kolonskom hromatografijom (Kolona: 12 g silike; Tok rastvarača: 2-3% MeOH u hloroformu) da se dobije dijastereoizomerna smeša. Smeša dijastereoizomera je dalje prečišćena preparativnom HPLC (Postupak hiralne separacije: Kolona: Cellulose-2 (250 X 4.6) mm, 5 µm, Mobilna faza A: 0.1% DEA u ACN-u, Mobilna faza B: 0.1% DEA u MeOH-u, Gradijent = 0-100 % B tokom 12 minuta) da se dobiju Primeri 1312 i 1313.
[1609] Primer 1312: (7.1 mg, 4 % prinos); LCMS: m/z, 500.3 (M+H); retenciono vreme 2.09 min; Kolona: XBridge BEH XP C18 (2.1 × 50 mm), 2.5 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Gradijent = 0-100 % B tokom 3 minuta; Temperatura: 50 °C; Protok: 1.1 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.16 (d, J=8.8 Hz, 1 H), 8.06-8.11 (m, 1 H), 7.53 (dd, J=8.6, 5.6 Hz, 2 H), 7.21-7.34 (m, 2 H), 6.15 (s, 1 H), 4.31-4.44 (m, 1 H), 3.98-4.10 (m, 1 H), 3.78-3.94 (m, 1 H), 3.52-3.65 (m, 5 H), 3.34 (s, 3 H, spojena sa pikom vlažnosti rastvarača), 3.09-3.23 (m, 2 H), 2.72-2.82 (m, 1 H), 2.29-2.36 (m, 1 H), 1.06 (d, J=6.1 Hz, 3 H), 1.02 (d, J=6.4 Hz, 3 H).
[1610] Primer 1313: (10 mg, 6 % prinos). LCMS: m/z, 500.2 (M+H); retenciono vreme 2.11 min; Kolona: XBridge BEH XP C18 (2.1 × 50 mm), 2.5 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Gradijent = 0-100 % B tokom 3 minuta; Temperatura: 50 °C; Protok: 1.1 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.15 (d, J=8.8 Hz, 1 H), 7.98-8.12 (m, 1 H), 7.51-7.60 (m, 2 H), 7.19-7.26 (m, 2 H), 6.00 (s, 1 H), 4.54-4.63 (m, 1 H), 4.30-4.42 (m, 1 H), 3.86-4.01 (m, 1 H), 3.49-3.71 (m, 5 H), 3.42-3.47 (m, 1 H), 3.34 (s, 3 H), 2.79-2.87 (m, 1 H), 2.64-2.67 (m, 1 H), 2.62-2.70 (m, 1 H), 1.19 (d, J=6.6 Hz, 3 H), 1.05 (d, J=6.1 Hz, 3 H).
PRIMERI 1314 i 1315
8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluoro-2-(metoksimetil)fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1611]
Intermedijer 1314A: 1-(4-fluoro-2-(metoksimetil)fenil)etan-1-ol
[1612]
[1613] U promešani rastvor 1-bromo-4-fluoro-2-(metoksimetil)benzena (1g, 4.57 mmol) u THF-u (10 mL) dodat je n-butil litijum (2.2 mL, 5.48 mmol, 2.5 M u n-heksanu) u kapima na -78 °C. Reakciona smeša mešana je tokom 1 h i zatim je dodat acetaldehid (1.3 mL, 22.83 mmol). Reakciona smeša je polako zagrevana do sobne temperature. Reakciona smeša mešana je tokom 12 h. i ohlađena na 0 °C. Reakcija je kvenčovana zasićenim vodenim NH4Cl (10 mL) rastvorom. Smeša je ekstrahovana EtOAc-om (3 X 50 mL). Kombinovani organski ekstrakti su oprani vodom i slanim rastvorom, osušeni preko bezvodnog natrijum sulfata i koncentrovani da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen fleš kolonskom hromatografijom (Kolona: 24 g silike; Tok rastvarača: 65-70% EtOAc u petrol etru) da se dobije 1-(4-fluoro-2-(metoksimetil) fenil)etan-1-ol (0.3 g, 36% prinos) kao racemat. LCMS: m/z, 202.2 (M+H); retenciono vreme 1.50 min. (Info. o LCMS postupku: Kolona-KINETEX- XB-C18 (75 × 3 mm- 2.6 µm); Mfaza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitril (98:2); Mfaza B: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitril (2:98); Gradijent: 20-100% B tokom 4 minuta, Protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 100% B Protok 1.5 mL/min; zatim gradijent: 100-20% B tokom 0.1 minuta, Protok 1.5 mL/min).
Intermedijer 1314B: 1-(1-hloroetil)-4-fluoro-2-(metoksimetil)benzen
[1614]
[1615] U rastvor 1-(4-fluoro-2-(metoksimetil)fenil)etan-1-ola (0.2 g, 1.09 mmol) u DCM-u (5 mL) dodat je tionil hlorid (0.4 mL, 5.43 mmol) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom, ko-destilovan sa acetonitrilom (2 × 5 mL) i osušen da se dobije 1-(1-hloroetil)-4-fluoro-2-(metoksimetil)benzen (150 mg, 68 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.67 (dd, J=8.3, 5.8 Hz, 1 H), 7.14-7.28 (m, 2 H), 5.53 (q, J=6.9 Hz, 1 H), 4.63 (d, J=12.5 Hz, 1 H), 4.49 (d, J=13.1 Hz, 1 H), 3.34 (s, 3 H), 1.80 (d, J=7.0 Hz, 3 H).
Primeri 1325 i 1326: 8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluoro-2-(metoksimetil)fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1616] U promešani rastvor 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (0.1 g, 0.34 mmol) u acetonitrilu (3 mL) su dodati natrijum bikarbonat (0.14 g, 1.68 mmol) i1-(1-hloroetil)-4-fluoro-2-(metoksimetil)benzen (0.07 g, 0.34 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana na 80 °C tokom 12 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen preparativnom HPLC (Postupak hiralne separacije:
PRIMERI 1318 i 1319
8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)-2-(metiltio)eil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitnl
[1620]
Intermedijer 1318A: 1-(4-fluorofenil)-2-(metiltio)etan-1-on
[1621]
[1622] U rastvor 2-bromo-1-(4-fluorofenil)etan-1-ona (3 g, 13.82 mmol) u MeOH-u (30 mL) dodat je natrijum tiometoksid (1.94 g, 27.6 mmol) u porcijama na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom, ekstrahovan EtOAc-om (100 mL), opran vodom, slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog natrijum sulfata i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirov proizvod je prečišćen fleš kolonskom hromatografijom (Kolona: 40 g silike; Tok rastvarača: 40-45% EtOAc u petrol etru) da se dobije 1-(4-fluorofenil)-2-(metiltio)etan-1-on (2 g, 79 % prinos).<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.08 (dd, J=5.5, 9.0 Hz, 2 H), 7.47-7.21 (m, 2 H), 3.96 (s, 2 H), 2.04 (s, 3 H).
Intermedijer 1318B: 1-(4-fluorofenil)-2-(metiltio)etan-1-ol
[1623]
[1624] U rastvor 1-(4-fluorofenil)-2-(metiltio)etan-1-ona (0.6 g, 3.26 mmol) u MeOH-u (10 mL) dodat je natrijum borohidrid (0.37 g, 9.77 mmol) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Reakcija je kvenčovana zasićenim vodenim NH4Cl rastvorom. Metanol je uparen pod sniženim pritiskom. Smeša je ekstrahovana EtOAc-om (3 × 50 mL), oprana vodom, slanim rastvorom, osušena preko bezvodnog natrijum sulfata i koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen fleš kolonskom hromatografijom (Kolona: 12 g silike; Tok rastvarača: 40-45% EtOAc u petrol etru) da se dobije 1-(4-fluorofenil)-2-(metiltio)etan-1-ol (0.5 g, 82 % prinos).<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.35-7.44 (m, 2 H), 7.09-7.20 (m, 2 H), 5.42-5.54 (m, 1 H), 4.62-4.75 (m, 1 H), 2.69 (dd, J=8.7.6.5 Hz, 2 H), 2.00 (s, 3 H).
Intermedijer 1318C: (2-hloro-2-(4-fluorofenil)etil)(metil)sulfan
[1625]
[1626] U rastvor 2-(metiltio)-1-feniletan-1-ola (0.4 g, 2.38 mmol) u DCM-u (5 mL) dodat je tionil hlorid (0.9 mL, 11.89 mmol) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom, razblažen acetonitrilom (2X5 mL), rastvarač je uparen i osušen da se dobije (2-hloro-2-feniletil)(metil)sulfan (0.3 g, 68 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.51-7.59 (m, 2 H), 7.16-7.25 (m, 2 H), 5.31 (t, J=7.5 Hz, 1 H), 3.19-3.23 (m, 2 H), 2.00 (s, 3 H).
Primeri 1318 i 1319: 8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)-2-(metiltio)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1627] U promešani rastvor 8-((2S,SR)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (0.3 g, 1.01 mmol) u acetonitrilu (3 mL) su dodati natrijum bikarbonat (0.42 g, 5.04 mmol) i (2-hloro-2-(4-fluorofenil) etil)(metil)sulfan (0.21 g, 1.01 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana na 80 °C tokom 12 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen preparativnom HPLC (Postupak hiralne separacije: Kolona: Cellulose-4 (250 × 21.2) mm, 5 mikrona, Mobilna faza: 10 mM amonijum acetat u MeOH-u, Protok: 20 mL/min, izokratski) da se dobije Primer 1318 i Primer 1319.
[1628] Primer 1318: (6 mg, 1.3%); LCMS: m/z, 466.2 (M+H); retenciono vreme 2.16 min; Kolona: XBridge BEH XP C18 (2.1 × 50 mm), 2.5 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Gradijent = 0-100 % B tokom 3 minuta; Temperatura: 50 °C; Protok: 1.1 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.19-8.12 (m, 1H), 8.10-8.03 (m, 1H), 7.51-7.40 (m, 2H), 7.24-7.14 (m, 2H), 6.03 (s, 1H), 4.52-4.43 (m, 1H), 3.83 (dd, J=4.9, 8.3 Hz, 1H), 3.52 (s, 3H), 3.44-3.37 (m, 1H), 3.31-3.25 (m, 1H), 3.08-2.96 (m, 2H), 2.87-2.78 (m, 1H), 2.78-2.70 (m, 1H), 2.69-2.62 (m, 1H), 1.92 (s, 3H), 1.20 (d, J=6.4 Hz, 3H), 1.00 (d, J=6.4 Hz, 3H).
[1629] Primer 1319: (1.0 mg 0.2%). LCMS: m/z, 466.3 (M+H); retenciono vreme 2.19 min; Kolona: XBridge BEH XP C18 (2.1 × 50 mm), 2.5 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Gradijent = 0-100 % B tokom 3 minuta; Temperatura: 50 °C; Protok: 1.1 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.12-8.19 (m, 1 H), 8.05-8.08 (m, 1 H), 7.38-7.45 (m, 2 H), 7.19-7.26 (m, 2 H), 6.01 (s.1 H), 4.31-4.43 (m, 1 H), 3.72 (br d, J=3.7 Hz, 2 H), 3.48-3.58 (m, 5 H), 2.95-3.03 (m, 1 H), 2.72-2.88 (m, 2 H), 2.10-2.16 (m, 1 H), 1.90 (s, 3 H), 1.16 (d, J=6.4 Hz, 3 H), 1.09 (d, J=6.6 Hz, 3 H).
PRIMERI 1320 i 1321
8-((2S,5R)-4-(1-(4-cijano-3-(2-metoksietoksi)fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1630]
Intermedijer 1320A: 1-bromo-4-(1-bromoetil)-2-fluorobenzen
[1631]
[1632] U promešani rastvor 1-(4-bromo-3-fluorofenil)etan-1-ola (1 g, 4.57 mmol) u DCM-u (5 mL) dodat je BBr3(9.1 mL, 9.13 mmol, 1 M u DCM-u) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Reakcija je kvenčovana ledeno hladnom vodom (30 mL). Reakciona smeša je ekstrahovana EtOAc-om (2 X 30 mL), osušena preko bezvodnog natrijum sulfata i koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije 1-bromo-4-(1-bromoetil)-2fluorobenzen (1.1 g, 85 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.69-7.73 (m, 1 H), 7.47-7.66 (m, 1 H), 7.25-7.39 (m, 1 H), 5.50 (q, J=6.8 Hz, 1 H), 1.98 (d, J=6.8 Hz, 3 H).
Intermedijer 1320B: terc-butil (2S,5R)-4-(1-(4-bromo-3-fluorofenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat
[1633]
[1634] U promešani rastvor terc-butil (2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (0.5 g, 2.33 mmol) u acetonitrilu (10 mL) su dodati natrijum bikarbonat (0.98 g, 11.67 mmol) i 1-bromo-4-(1-bromoetil)-2-fluorobenzen (0.66 g, 2.33 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana na 80 °C tokom 12 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen fleš kolonskom hromatografijom (Kolona: 24 g silike; Tok rastvarača: 40-45% EtOAc u petrol etru) da se dobije dijastereoizomerna smeša terc-butil (2S,5R)-4-(1-(4-bromo-3-fluorofenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (0.3 g, 27 % prinos) kao beličasta čvrsta supstanca. LCMS: m/z, 416.2 (M+2); retenciono vreme 3.55 min. (Info. o LCMS postupku: Kolona-KINETEX- XB-C18 (75 × 3 mm- 2.6 µm); Mfaza A: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitril (98:2); Mfaza B: 10 mM amonijum format u vodi: acetonitril (2:98); Gradijent: 20-100% B tokom 4 minuta, Protok 1.0 mL/min, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 100% B Protok 1.5 mL/min; zatim Gradijent: 100-20% B tokom 0.1 minuta, Protok 1.5 mL/min).
Intermedijer 1320C: terc-butil (2S,5R)-4-(1-(4-cijano-3-fluorofenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1 -karboksilat
[1635]
[1636] U promešani rastvor terc-butil (2S,5R)-4-(1-(4-bromo-3-fluorofenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (1.6 g, 3.85 mmol) u DMF-u (5 mL) su dodati cink (0.38 g, 5.78 mmol) i cink cijanid (1.35 g, 11.56 mmol) pod atmosferom argona, praćeno dihloro[9,9-dimetil-4,5-bis(difenilfosfino)ksanten] paladijumom(II) (0.29 g, 0.38 mmol) i TEA (2.2 mL, 15.41 mmol). Reakciona smeša je zagrevana na 90 °C tokom 12 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, filtrirana kroz Celite podlogu, oprana EtOAc-om (30 mL) i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen fleš kolonskom hromatografijom (Kolona: 40 g silike; Tok rastvarača: 40-45% EtOAc u petrol etru) da se dobije terc-butil (2S,5R)-4-(1-(4-cijano-3-fluorofenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (1.2 g, 86 % prinos). LCMS: m/z, 362.1 (M+H); retenciono vreme 2.17 min; Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.
Intermedijer 1320D: terc-butil (2S,5R)-4-(1-(4-cijano-3-(2-metoksietoksi)fenil) etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat
[1637]
[1638] U rastvor terc-butil (2S,5R)-4-(1-(4-cijano-3-fluorofenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (300 mg, 0.83 mmol) u DMSO (5 mL) su dodati 2-metoksietan-1-ol (63 mg, 0.83 mmol) i kalijum terc-butoksid (190 mg, 1.66 mmol) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Reakciona smeša je ekstrahovana EtOAc-om (30 mL), oprana vodom i slanim rastvorom, organski ekstrakti su osušeni preko bezvodnog natrijum sulfata i koncentrovani pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen fleš kolonskom hromatografijom (Kolona: 12 g silike; Tok rastvarača: 40-45% EtOAc u petrol etru) da se dobije dijastereoizomerna smeša terc-butil (2S,5R)-4-(1-(4-cijano-3-(2-metoksietoksi)fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (250 mg, 72 % prinos). LCMS: m/z, 418.2 (M+H); retenciono vreme 2.09 min; Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.
Intermedijer 1320E: 4-(1-((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)etil)-2-(2-metoksietoksi)benzonitril, TFA
[1639]
[1640] U promešani rastvor terc-butil (2S,5R)-4-(1-(4-cijano-3-(2-metoksietoksi) fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (150 mg, 0.36 mmol) u DCM-u (5 mL) dodat je TFA (0.14 mL, 1.80 mmol) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i osušen da se dobije dijastereoizomerna smeša 4-(1-((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)etil)-2-(2-metoksietoksi)benzonitril, TFA (120 mg, 63 % prinos). LCMS: m/z, 318.2 (M+H); retenciono vreme 0.89 min; Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.
Primeri 1320 i 1321: 8-((2S,5R)-4-(1-(4-cijano-3-(2-metoksietoksi)fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1641] U promešani rastvor 4-(1-((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)etil)-2-(2-metoksietoksi)benzonitrila (100 mg, 0.32 mmol) u acetonitrilu (3 mL) su dodati natrijum bikarbonat (130 mg, 1.57 mmol) i 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (105 mg, 0.32 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana na 80 °C tokom 12 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen preparativnom HPLC (Postupak hiralne separacije: Kolona: Cellulose-5 (250 ×19)mm, 5 µm, Mobilna faza: 0.1% DEA in ACN:MeOH (1:1), Protok: 20 mL/min, izokratski) da se dobiju Primeri 1320 i 1321.
[1642] Primer 1320: (2.6 mg, 1.6%); LCMS: m/z, 501.3 (M+H); retenciono vreme 1.99 min; Kolona: XBridge BEH XP C18 (2.1 × 50 mm), 2.5 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Gradijent = 0-100 % B tokom 3 minuta; Temperatura: 50 °C; Protok: 1.1 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.13-8.18 (m, 1 H), 8.05-8.09 (m, 1 H), 7.69 (d, J=7.8 Hz, 1 H), 7.29 (s, 1 H), 7.15 (d,J=7.8 Hz, 1 H), 5.99 (s, 1 H), 4.63-4.74 (m, 1 H), 4.27-4.34 (m, 2 H), 3.66-3.79 (m, 3 H), 3.52 (s, 3 H), 3.37-3.47 (m, 2 H), 3.34 (s, 3 H), 3.00 (dd, J=11.4, 3.3 Hz, 1 H), 2.76 (br d, J=2.2 Hz, 2 H), 1.24-1.29 (m, 6 H), 1.03 (d, J=6.4 Hz, 3 H).
[1643] Primer 1321: (4.7 mg, 3.0%). LCMS: m/z, 501.3 (M+H); retenciono vreme 1.99 min; Kolona: XBridge BEH XP C18 (2.1 × 50 mm), 2.5 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Gradijent = 0-100 % B tokom 3 minuta; Temperatura: 50 °C; Protok: 1.1 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.14-8.18 (m, 1 H), 8.06-8.10 (m, 1 H), 7.68 (d, J=7.8 Hz, 1 H), 7.29 (s, 1 H), 7.10-7.15 (m, 1 H), 6.02 (s, 1 H), 4.37-4.46 (m, 1 H), 4.29-4.36 (m, 1 H), 4.18-4.25 (m, 1 H), 3.75-3.83 (m, 1 H), 3.72 (t, J=4.4 Hz, 2 H), 3.50-3.66 (m, 6 H), 3.34 (s, 3 H), 2.75-2.83 (m, 1 H), 2.01-2.11 (m, 1 H), 1.29 (d, J=6.4 Hz, 3 H), 1.18 (d, J=6.4 Hz, 3 H), 1.13 (d, J=6.6 Hz, 3 H).
[1644] Primeri u Tabeli 55 su pripremljeni prema opštoj proceduri koja je opisana u Primerima 1320 i 1321 primenom pogodnog 2-(dimetilamino)etan-1-ola. Kada je reakcija dala smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena u finalnoj fazi primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi
PRIMERI 1324 i 1325
8-((2S,5R)-4(1-(6-izopropoksipiridin-3-il)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1645]
Intermedijer 1324A: 1-(6-izopropoksipiridin-3-il)etan-1-on
[1646]
[1647] U rastvor 1-(6-fluoropiridin-3-il)etan-1-ona (0.6 g, 4.31 mmol) u DMSO (5 mL), dodati su propan-2-ol (0.26 g, 4.31 mmol) i kalijum terc-butoksid (0.97 g, 8.63 mmol) sekvencijalno na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Reakciona smeša je razblažena EtOAc-om (20 mL) i oprana vodom (2 × 20mL), Organski sloj je osušen preko bezvodnog Na2SO4, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen fleš kolonskom hromatografijom (Kolona: 12 g silike; Tok rastvarača: 30-40% EtOAc u petrol etru) da se dobije 1-(6-izopropoksipiridin-3-il)etan-1-on (0.4 g, 52 % prinos). LCMS: m/z, 180.1 (M+H); retenciono vreme 1.37 min; Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.
Intermedijer 1324B: 1-(6-izopropoksipiridin-3-il)etan-1-ol
[1648]
[1649] U promešani rastvor 1-(6-izopropoksipiridin-3-il)etan-1-ona (0.4 g, 2.23 mmol) u MeOH-u (10 mL) dodat je natrijum borohidrid (0.25 g, 6.70 mmol) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Reakcija je kvenčovana zasićenim vodenim NH4Cl rastvorom. Metanol je uparen pod sniženim pritiskom. Sirov proizvod je ekstrahovana EtOAcom (3 × 50 mL), opran vodom, slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog natrijum sulfata i koncentrovan da se dobije racemska smeša 1-(6-izopropoksipiridin-3-il)etan-1-ola (250 mg, 40 % prinos). LCMS: m/z, 182.1 (M+H); retenciono vreme 1.01 min; Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 90 % B; Temperatura: 50°C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.
Primeri 1324 i 1325: 8-((2S,5R)-4-(1-(6-izopropoksipiridin-3-il)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1650] U promešani rastvor 8-((2S,SR)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (200 mg, 0.67 mmol) u acetonitrilu (3 mL) su dodati (cijanometil)trimetilfosfonijum jodid (327 mg, 1.34 mmol), 1-(6-izopropoksipiridin-3-il)etan-1-ol (122 mg, 0.67 mmol) i DIPEA (0.4 mL, 2.02 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana na 100 °C pod mikrotalasnim zračenjem tokom 2h.Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen preparativnom HPLC (Postupak hiralne separacije: Kolona: Cellulose-4 (250 × 19) mm, 5 mikrona, Mobilna faza: 10 mM amonijum acetat u MeOH-u, Protok: 20 mL/min, izokratski) da se dobiju Primeri 1324 i 1325.
[1651] Primer 1324: (4.7 mg, 2 % prinos); LCMS: m/z, 461.2 (M+H); retenciono vreme 2.21 min; Kolona: XBridge BEH XP C18 (2.1 × 50 mm), 2.5 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Gradijent = 0-100 % B tokom 3 minuta; Temperatura: 50 °C; Protok: 1.1 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.14-8.18 (m, 1 H), 8.05-8.12 (m, 2 H), 7.68-7.72 (m, 1 H), 6.75 (d, J=8.6 Hz, 1 H), 6.00 (s, 1 H), 5.23 (quin, J=62 Hz, 1 H), 4.57-4.64 (m, 1 H), 3.68 (q, J=6.6 Hz, 1 H), 3.52 (s, 3 H), 3.36-3.43 (m, 2 H), 2.98 (dd, J=11.7, 3.4 Hz, 1 H), 2.67-2.78 (m, 2 H), 1.25-1.31 (m, 9 H), 1.23 (d, J=6.6 Hz, 3 H), 1.02 (d, J=6.6 Hz, 3 H).
[1652] Primer 1325: (2.8 mg, 1 % prinos). LCMS: m/z, 461.2 (M+H); retenciono vreme 2.24 min; Kolona: XBridge BEH XP C18 (2.1 × 50 mm), 2.5 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Gradijent = 0-100 % B tokom 3 minuta; Temperatura: 50 °C; Protok: 1.1 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.13-8.18 (m, 1 H), 8.04-8.09 (m, 2 H), 7.68 (dd, J=8.6, 2.4 Hz, 1 H), 6.71 (d, J=8.6 Hz, 1 H), 6.01 (s, 1 H), 5.17-5.26 (m, 1 H), 4.32-4.40 (m, 1 H), 3.71-3.79 (m, 1 H), 3.48-3.59 (m, 6 H), 2.70-2.80 (m, 1 H), 2.09 (dd, J=12.2, 1.5 Hz, 1 H), 1.27-1.29 (m, 9 H), 1.16 (d, J=6.4 Hz, 3 H), 1.07 (d, J=6.4 Hz, 3 H).
PRIMERI 1326 i 1327
8-((2S,5R)-4-(2-(3-ciklopropil-1,2,4-oksadiazol-5-il)-1 -(4-fluorofenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1653]
Intermedijer 1326A: 3-((2R,5S)-4-(terc-butoksikarbonil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-3-(4-fluorofenil)propanska kiselina
[1654]
[1655] U rastvor terc-butil (2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)-3-metoksi-3-oksopropil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (1.0 g, 2.53 mmol) u THF-u (20 mL) i vodi (10 mL) dodat je litijum hidroksid monohidrat (0.53 g, 12.67 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša mešana je tokom 16 h. Reakciona smeša je neutralisana vodenom 1.5 N HCl i ekstrahovana EtOAc-om (2 × 100 mL), oprana vodom, slanim rastvorom, osušena preko bezvodnog natrijum sulfata i koncentrovana da se dobije 3-((2R,SS)-4-(terc-butoksikarbonil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-3-(4-fluorofenil) propanska kiselina (0.85 g, 88 % prinos). LCMS: m/z, 381.3 (M+H); retenciono vreme 1.11 min. [LCMS Postupak: Kolona: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Postupak: %B: 0 min-20:2 min-100: 2.3 min-100, Temperatura: 27 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].
Intermedijer 1326B: terc-butil (2S,5R)-4-(3-((((E)-amino(ciklopropil)metilen)amino) oksi)-1-(4-fluorofenil)-3-oksopropil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat
[1656]
[1657] U rastvor 3-((2R,5S)-4-(terc-butoksikarbonil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-3-(4-fluorofenil)propanske kiseline (500 mg, 1.31 mmol) u EtOAc-u (10 mL) su dodati (E)-N'-hidroksiciklopropankarboksimidamid (145 mg, 1.45 mmol), Et3N (0.37 mL, 2.63 mmol) i 1-propanfosfonski anhidrid (50% u EtOAc-u) (1 mL, 1.58 mmol) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Reakciona smeša je ekstrahovana EtOAc-om (2X 50 mL), oprana vodom, slanim rastvorom, osušena preko bezvodnog natrijum sulfata i koncentrovana da se dobije terc-butil (2S,5R)-4-(3-((((E)-amino(ciklopropil)metilen) amino)oksi)-1-(4-fluorofenil)-3-oksopropil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (500 mg, 82% prinos) kao dijastereoizomerna smeša. LCMS: m/z, 463.4 (M+H); retenciono vreme 1.81 min.
[LCMS Postupak: Kolona: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Postupak: %B: 0 min-20:2 min-100:2.3 min-100, Temperatura: 27 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].
Intermedijer 1326C: terc-butil (2S,5R)-4-(2-(3-ciklopropil-1,2,4-oksadiazol-5-il)-1-(4-fluorofenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat
[1658]
[1659] U promešani rastvor terc-butil (2S,SR)-4-(3-((((E)-amino(ciklopropil) metilen)amino)oksi)-1-(4-fluorofenil)-3-oksopropil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (320 mg, 0.69 mmol) u 1,4-dioksanu (6 mL) dodat je Et3N (0.4 mL, 2.77 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana na 160 °C u mikrotalasnoj tokom 1 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen silika gel fleš kolonskom hromatografijom (30% EtOAc u n-heksanu; kolona od 24 g) da se dobije terc-butil (2S,SR)-4-(2-(3-ciklopropil-1,2,4-oksadiazol-5-il)-1-(4-fluorofenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (175 mg, 57 % prinos) kao dijastereoizomerna smeša. LCMS: m/z, 445.4 (M+H); retenciono vreme 2.15 min.
[LCMS Postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM NHaOAc:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM NH4OAc:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-100 % B tokom 2 minuta, zatim zadržavanje 0.3 minuta pri 100 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].
Intermedijer 1326D: 3-ciklopropil-5-(2-((2R,SS)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-2-(4-fluorofenil)etil)-1,2,4-oksadiazol
[1660]
[1661] U rastvor terc-butil (2S,5R)-4-(2-(3-ciklopropil-1,2,4-oksadiazol-5-il)-1-(4-fluorofenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (150 mg, 0.34 mmol) u DCM-u (1 mL) su dodati 2,6-lutidin (0.24 mL, 2.02 mmol) i TMS-OTf (0.43 mL, 2.36 mmol) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Reakciona smeša je ekstrahovana DCM-om (2 × 30 mL), oprana vodenim rastvorom NaHCO3, vodom i slanim rastvorom. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko bezvodnog natrijum sulfata, koncentrovani i osušeni da se dobije 3-ciklopropil-5-(2-((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-2-(4-fluorofenil)etil)-1,2,4-oksadiazol (70 mg, 60% prinos). LCMS: m/z, 345.2 (M+H); retenciono vreme 1.08 i 1.11 min.
[LCMS Postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM NH4OAc:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM NH4OAc:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-100 % B tokom 2 minuta, zatim zadržavanje 0.3 minuta pri 100 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].
Primeri 1326 i 1327: 8-((2S,5R)-4-(2-(3-ciklopropil-1,2,4-oksadiazol-5-il)-1-(4-fluorofenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1662] U promešani rastvor 3-ciklopropil-5-(2-((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-2-(4-fluorofenil)etil)-1,2,4-oksadiazola (70 mg, 0.20 mmol) u acetonitrilu (5 mL), su dodati DIPEA (0.15 mL, 0.81 mmol) i 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (68 mg, 0.20 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana na 80 °C tokom 4 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen pomoću prepHPLC (Postupak hiralne separacije: Kolona: cellulose-4 (250 × 4.6) mm, 5 mikrona, Mobilna faza: 0.1% DEA u MeOH-u, izokratski) da se dobiju Primeri 1326 i 1327.
[1663] Primer 1326: (14 mg, 13 % prinos); LCMS: m/z, 528.2 (M+H); retenciono vreme 2.13 min; Kolona: XBridge BEH XP C18 (2.1 × 50 mm), 2.5 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Gradijent = 0-100 % B tokom 3 minuta; Temperatura: 50 °C; Protok: 1.1 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.13-8.17 (m, 1 H), 8.05-8.08 (m, 1 H), 7.33 (dd, J=8.4, 5.7 Hz, 2 H), 7.08-7.20 (m, 2 H), 6.01 (s, 1 H), 4.30-4.44 (m, 1 H), 4.00-4.14 (m, 1 H), 3.66-3.76 (m, 1 H), 3.45-3.61 (m, 6 H), 3.10-3.20 (m, 1 H), 2.74-2.82 (m, 1 H), 2.18-2.27 (m, 1 H), 1.97-2.08 (m, 1 H), 1.14 (d,J=6.4 Hz, 3 H), 1.04 (d, J=6.6 Hz, 3 H), 0.99-1.02 (m, 2 H), 0.70-0.85 (m, 2 H).
[1664] Primer 1327: (3.6 mg, 3 % prinos). LCMS: m/z, 528.2 (M+H); retenciono vreme 2.10 min: Kolona: XBridge BEH XP C18 (2.1 × 50 mm), 2.5 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Gradijent = 0-100 % B tokom 3 minuta; Temperatura: 50 °C; Protok: 1.1 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.15 (d, J=8.8 Hz, 1 H), 8.02-8.11 (m, 1 H), 7.39 (dd, J=8.1,5.6 Hz, 2H), 7.13-7.23 (m, 2 H), 6.03 (s, 1 H), 4.20-4.29 (m, 2 H), 3.62-3.72 (m, 1 H), 3.53 (s, 3 H), 3.37-3.45 (m, 1 H), 3.10-3.24 (m, 3 H), 2.75-2.85 (m, 1 H), 1.99-2.07 (m, 1 H), 1.12 (d, J=6.1 Hz, 3 H), 0.99-1.04 (m, 2 H), 0.95 (d, J=6.4 Hz, 3 H), 0.71-0.87 (m, 2 H).
PRIMERI 1328 i 1329
8-((2S,5R)-5-etil-2-metil-4-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etil)piperazin-1-il)-7-fluoro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1665]
[1666] U rastvor Selectfluor<®>-a (0.125 g, 0.35 mmol) u acetonitrilu (2 mL) na sobnoj temperaturi dodat je 8-((2S,5R)-5-etil-2-metil-4-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil) etil)piperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (0.16 g, 0.32 mmol) u acetonitrilu (2 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 min. Reakcija je kvenčovana vodom. Reakciona smeša je ekstrahovana etil acetatom (2 × 100 mL). Kombinovani organski sloj je opran vodom, slanim rastvorom i osušen preko bezvodnog natrijum sulfata. Rastvarač je uparen pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod koji je prečišćen preparativnom HPLC (Informacije o postupku: LC uslovi: Kolona: Sunfire C18 (150mm × 19.2mm ID, 5u); Mobilna faza A=10 mM AA u vodi; Mobilna faza B = acetonitril:MeOH; tok 18mL/min) da se dobiju Primeri 1328 i 1329.
[1667] Primer 1328: (3.4 mg, 2.0 % prinos). LCMS: m/z = 518.2 (M+H); retenciono vreme 2.54 min [LCMS postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (2.1 × 50 mm), 2.5 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Gradijent = 0-100 % B tokom 3 minuta; Temperatura: 50 °C; Protok: 1.1 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.23-8.08 (m, 2H), 7.51 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.35 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 4.22-4.12 (m, 1H), 4.02-3.91 (m, 1H), 3.70-3.57 (m, 4H), 3.11 (dd, J= 3.1, 11.1 Hz, 1H), 3.03-2.89 (m, 1H), 2.45-2.51 (m, 1H), 2.31-2.22 (m, 1H), 1.73-1.51 (m, 2H), 1.33 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.18 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.58 (t, J = 7.3 Hz, 3H).
[1668] Primer 1329: (4.4 mg, 2.6 % prinos). LCMS: m/z = 518.2 (M+H); retenciono vreme 2.62 min [LCMS postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (2.1 × 50 mm), 2.5 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Gradijent = 0-100 % B tokom 3 minuta; Temperatura: 50 °C; Protok: 1.1 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.20-8.04 (m, 2H), 7.55 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 7.31 (br d, J= 7.6 Hz, 2H), 4.00-3.92 (m, 1H), 3.91-3.77 (m, 2H), 3.61 (s, 3H), 3.17-3.07 (m, 2H), 3.01-2.91 (m, 1H), 2.11-2.00 (m, 1H), 1.81-1.65 (m, 1H), 1.61-1.47 (m, 1H), 1.25 (br d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.00 (d, J= 6.8 Hz, 3H), 0.79 (br t, J= 7.5 Hz, 3H).
PRIMER 1330
8-((2S,5R)-4-(4-(difluorometoksi)benzil)-5-etil-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
Intermedijer 1330A: 4-(difluorometoksi)benzil metansulfonat
[1670]
[1671] U rastvor (4-(difluorometoksi)fenil)metanola (0.5 g, 2.8 mmol) u DCM-u (2 mL) na 0°C su dodati trietilamin (0.8 mL, 5.7 mmol) i metansulfonil hlorid (0.34 mL, 4.31 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Reakcija je kvenčovana vodom. Reakciona smeša je ekstrahovana etil acetatom (2 × 100 mL), kombinovani organski sloj je opran vodom, slanim rastvorom i osušen preko bezvodnog natrijum sulfata i uparen pod sniženim pritiskom da se dobije 4-(difluorometoksi)benzil metansulfonat (0.5 g, 69 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ ppm 7.49-7.35 (m, 2H), 7.22-7.06 (m, 2H), 6.77-6.27 (m, 1H), 4.65-4.53 (m, 2H), 3.41-3.26 (m, 3H).
Primer 1330: 8-((2S,5R)-4-(4-(difluorometoksi)benzil)-5-etil-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1672] U rastvor 8-((2S,5R)-5-etil-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (0.03 g, 0.1 mmol) u acetonitrilu (2 mL) dodat je DIPEA (0.05 mL, 0.29 mmol) i 4-(difluorometoksi)benzil metansulfonat (49 mg, 0.193 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana na 85 °C tokom noći. Reakcija je kvenčovana vodom. Reakciona smeša je ekstrahovana etil acetatom (2 × 100 mL), kombinovani organski sloj je opran vodom, slanim rastvorom i osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, uparen pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen preparativnom HPLC (Informacije o postupku: Kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, čestice od 5 µm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 0 minuta zadržavanje pri 21% B, 21-65% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje 5-minuta pri 100% B; Protok: 15 mL/min; Temperatura kolone: 25 °C) da se dobije 8-((2S,5R)-4-(4-(difluorometoksi)benzil)-5-etil-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (8.3 mg, 18.2 % prinos). LCMS: m/z = 468.2 (M+H); retenciono vreme 2.18 min [LCMS postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (2.1 × 50 mm), 2.5 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Gradijent = 0-100 % B tokom 3 minuta; Temperatura: 50 °C; Protok: 1.1 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.19-8.12 (m, 1H), 8.11-8.04 (m, 1H), 7.48-6.97 (m, 5H), 6.09 (s, 1H), 4.37 (br dd, J = 1.0, 2.9 Hz, 1H), 3.73-3.60 (m, 3H), 3.57-3.44 (m, 4H), 2.93 (dd, J = 3.4, 11.5 Hz, 1H), 2.68-2.62 (m, 1H), 2.28 (dd, J = 3.3, 11.6 Hz, 1H), 1.79-1.57 (m, 2H), 1.13 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.85 (t, J = 7.3 Hz, 3H).
[1673] Primeri u Tabeli 56 su pripremljeni u skladu sa opštom procedurom opisanom u primeru 1330 sa pogodnim alkoholom.
PRIMERI 1333 i 1334
8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(2-(trifluorometil)tiazol-4-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1674]
Intermedijer 1333A: N-metoksi-N-metil-2-(trifluorometil)tiazol-4-karboksamid
[1675]
[1676] U rastvor 2-(trifluorometil)tiazol-4-karboksilne kiseline (1.0 g, 5.07 mmol) u DMF-u (15 mL) su dodati 1-propanfosfonski anhidrid (6.34 mL, 10.15 mmol, 50% u etil acetatu), praćeno sa DIPEA (2.66 mL, 15.22 mmol) i N,O-dimetilhidroksilamin hidrohlorid (0.99 g, 10.15 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša mešana je tokom 5 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da se uklone isparljive supstance i sirov proizvod je rastvoren u etil acetatu (150 mL), opran vodom (100 mL), vodeni sloj je povratno ekstrahovan etil acetatom (50 mL × 2) i kombinovani organski sloj je opran slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog Na2SO4, koncentrovan pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen silika gel hromatografijom (1-5% metanol/hloroform; kolona od 40 g) da se dobije N-metoksi-N-metil-2-(trifluorometil)tiazol-4-karboksamid (925 mg, 76 % prinos). LCMS: m/z = 241.1 (M+H); retenciono vreme 1.17 min [LCMS postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM NHaOAc:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM NH4OAc:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].
Intermedijer 1333B: (4-fluorofenil)(2-(trifluorometil)tiazol-4-il)metanon
[1677]
[1678] U rastvor N-metoksi-N-metil-2-(trifluorometil)tiazol-4-karboksamida (500 mg, 2.08 mmol) u tetrahidrofuranu (10 mL) na 0 °C dodat je 4-fluorofenilmagnezijum bromid (4.16 mL, 4.16 mmol, 1.0 M u THF-u). Reakciona smeša je zagrevana do sobne temperature. Reakciona smeša je mešana tokom noći. Reakcija je kvenčovana zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida (20 mL). Reakciona smeša je ekstrahovana etil acetatom (2 × 50 mL). Kombinovani organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, filtriran i uparen pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen silika gel hromatografijom (50-100% EA/Petrol etar; kolona od 24 g) da se dobije (4-fluorofenil) (2-(trifluorometil)tiazol-4-il)metanon (355 mg, 62.0 % prinos). LCMS: m/z = 276.2 (M+H); retenciono vreme 1.86 min [LCMS postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM NHaOAc:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM NH4OAc:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].
Intermedijer 1333C: (4-fluorofenil)(2-(trifluorometil)tiazol-4-il)metanol
[1679]
[1680] U rastvor (4-fluorofenil)(2-(trifluorometil)tiazol-4-il)metanona (425 mg, 1.54 mmol) u MeOH-u (5 mL) na 4-5 °C dodat je NaBH4(117 mg, 3.09 mmol) u porcijama. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom noći. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da se uklone isparljive supstance i sirov proizvod je rastvoren u etil acetatu (60 mL) i opran vodom. Vodeni sloj je povratno ekstrahovan etil acetatom (50 mL × 2). Kombinovani organski sloj je opran slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog Na2SO4, koncentrovan pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen silika gel hromatografijom (50-100% etil acetat/petrol etar; kolona od 24 g) da se dobije (4-fluorofenil)(2-(trifluorometil)tiazol-4-il)metanol (421 mg, 98 % prinos). LCMS: m/z = 276.1 (M-H); retenciono vreme 1.57 min [LCMS postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm. Mobilna faza A: 10 mM NHaOAc:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM NH4OAc:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].
Intermedijer 1333D: 4-(hloro(4-fluorofenil)metil)-2-(trifluoromctil)tiazol
[1681]
[1682] U promešani rastvor (4-fluorofenil)(2-(trifluorometil)tiazol-4-il)metanola (420 mg, 1.52 mmol) u CH2Cl2-u (10 mL) na 0 °C dodat je SOCl2(1.11 mL, 15.15 mmol) u kapima pod azotom tokom 3 min. Reakciona smeša je polako zagrevana do sobne temperature i mešana je tokom 3 h. Isparljive supstance su uklonjene iz reakcione smeše pod sniženim pritiskom. Sirov proizvod je rastvoren u DCM-u i opran je vodom i slanim rastvorom. Organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, koncentrovan pod sniženim pritiskom da se dobije 4-(hloro(4-fluorofenil)metil)-2-(trifluorometil)tiazol (471 mg). Sirov materijal je prenet u sledeći korak bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.15 (s, 1H), 7.52-7.65 (m, 2H), 7.19-7.29 (m, 2H), 6.75 (s, 1H).
Primeri 1333 i 1334: 8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(2-(trifluorometil)tiazol-4-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1683] U rastvor 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (80 mg, 0.27 mmol) u acetonitrilu (5 mL) dodat je DIPEA (0.24 mL, 1.35 mmol), praćeno 4-(hloro(4-fluorofenil)metil)-2-(trifluorometil)tiazolom (80 mg, 0.27 mmol) i reakciona smeša je mešana na 85 °C tokom noći. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da se uklone isparljive supstance i sirov proizvod je rastvoren u etil acetatu, opran vodom. Vodeni sloj je povratno ekstrahovan etil acetatom (20 mL × 2). Kombinovani organski sloj je opran slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog Na2SO4, koncentrovan pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen preparativnom HPLC (Informacije o postupku: Kolona Cellulose 2 (250 × 4.6 mm), 5 mikrona; Mobilna faza: 0.1% DEA u acetonitrilu; izokratski) da se dobiju Primeri 1333 i 1334.
[1684] Primer 1333: (11 mg, 7.3 % prinos). LCMS: m/z = 557.2 (M+H); retenciono vreme 2.33 min [LCMS postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (2.1 × 50 mm), 2.5 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Gradijent = 0-100 % B tokom 3 minuta; Temperatura: 50 °C; Protok: 1.1 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.27 (s, 1H), 8.18-8.11 (m, 1H), 8.10-8.03 (m, 1H), 7.64 (dd, J = 5.7, 8.7 Hz, 2H), 7.13-7.23 (m, 2H), 6.01 (s, 1H), 5.07 (s, 1H), 4.42-4.54 (m, 1H), 3.71-3.62 (m, 1H), 3.52 (s, 4H), 2.96-2.84 (m, 2H), 2.26-2.17 (m, 1H), 1.20 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.14 (d, J = 6.6 Hz, 3H).
[1685] Primer 1334: (11 mg, 7.3 % prinos). LCMS: m/z = 557.2 (M+H); retenciono vreme 2.35 min [LCMS postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (2.1 × 50 mm), 2.5 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Gradijent = 0-100 % B tokom 3 minuta; Temperatura: 50 °C; Protok: 1.1 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.19-8.12 (m, 2H), 8.09-8.03 (m, 1H), 7.73-7.61 (m, 2H), 7.16-7.26 (m, 2H), 6.00 (s, 1H), 5.06 (s, 1H), 4.64-4.52 (m, 1H), 3.65-3.56 (m, 1H), 3.54-3.43 (m, 4H), 2.97 (br dd, J = 2.9, 11.2 Hz, 2H), 2.24 (br d, J = 11.5 Hz, 1H), 1.26 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.10-1.02 (m, 3H).
PRIMER 1335
8-((2S,5R)-4-(bis(4-(hidroksimetil)fenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1686]
Intermedijer 1335A: dimetil 4,4'-(((2R,5S)-4-(terc-butoksikarbonil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)metilen)dibenzoat
[1687]
[1688] U promešani rastvor terc-butil (2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (0.2 g, 0.93 mmol) u acetonitrilu (6 mL) su dodati DIPEA (0.5 mL, 2.80 mmol) i dimetil 4,4'-(bromometilen)dibenzoat (0.373 g, 1.03 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana na 85 °C tokom 16 h. Isparljive supstance su uklonjene iz rakcione smeše pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen silika gel kolonskom hromatografijom (24 g, 12 %-17 % etil acetat/ petrol etar) da se dobije dimetil 4,4'-(((2R,5S)-4-(terc-butoksikarbonil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il) metilen)dibenzoat (140 mg, 30.2 % prinos). LCMS: m/z = 497.2 (M+H); retenciono vreme 2.52 min [LCMS postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM NH4OAc: acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM NHaOAc:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].
Intermedijer 1335B: terc-butil (2S,5R)-4-(bis(4-(hidroksimetil)fenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1 -karboksilat
[1689]
[1690] U rastvor dimetil 4,4'-(((2R,5S)-4-(terc-butoksikarbonil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)metilen)dibenzoata (140 mg, 0.28 mmol) u tetrahidrofuranu (8 mL) su dodati LiBH4(49.1 mg, 2.26 mmol) i metanol (0.1 mL) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Reakcija je kvenčovana vodom (20 mL). Reakciona smeša je ekstrahovana etil acetatom (3 × 50 mL), osušena preko bezvodnog natrijum sulfata, filtrirana i uparena pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod. LCMS: m/z = 441.2 (M+H); retenciono vreme 1.75 min [LCMS postupak: Kolona: Ascentis Express C8 (50 × 2.1 mm) 2.7 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum format: acetonitril (98:2), Mobilna faza B: 10 mM amonijum format: acetonitril (2:98), Gradijent = 0-100 % B tokom 1.5 minuta, zatim zadržavanje 0.6 min pri 100 % B; Temperatura: 27 °C; Protok: 1.0 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].
Intermedijer 1335C: ((((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)metilen)bis(4,1-fenilen))dimetanol
[1691]
[1692] U rastvor terc-butil (2S,5R)-4-(bis(4-(hidroksimetil)fenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (0.1 g, 0.23 mmol) u DCM-u (8 mL) dodata je HCl u dioksanu (0.5 mL, 16.46 mmol, 4 M u dioksanu) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša mešana je tokom 1 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, triturisana DCM-om i heksanom (1:4) da se dobije čvrsti proizvod, koji je filtriran kroz Bihnerov levak da se dobije (2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il) metilen)bis(4,1-fenilen))dimetanol hidrohlorid (82 mg, 96%). LCMS: m/z = 341.2 (M+H); retenciono vreme 0.44 min [LCMS postupak: Kolona: Ascentis Express C8 (50 × 2.1 mm) 2.7 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum format: acetonitril (98:2), Mobilna faza B: 10 mM amonijum format: acetonitril (2:98), Gradijent = 0-100 % B tokom 1.5 minuta, zatim zadržavanje 0.6 min pri 100 % B; Temperatura: 27 °C; Protok: 1.0 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].
Primer 1335: 8-((2S,5R)-4-(bis(4-(hidroksimetil)fenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1693] U promešani rastvor (((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)metilen)bis(4,1-fenilen))dimetanol hidrohlorida (0.079 g, 0.21 mmol) u acetonitrilu (6 mL) su dodati DIPEA (0.11 mL, 0.63 mmol) i 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (0.07 g, 0.21 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana 85 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je filtrirana kroz filter za špric i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen preparativnom HPLC (Informacije o postupku: Kolona: Inersil ODS, 250 × 20 mm ID, 5 µm; Mobilna faza A: 10 mM NH4OAc u vodi: Mobilna faza B: Metanol; Gradijent: 10-100 % B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje 5 minuta pri 100 % B; Tok: 17 mL/min) da se dobije 8-((2S,5R)-4-(bis(4-(hidroksimetil)fenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (54 mg, 49.0 % prinos) kao bledo žuta čvrsta supstanca. LCMS: m/z = 524.2 (M+H); retenciono vreme 2.17 min [LCMS postupak: Kolona: Ascentis Express C8 (50 × 2.1 mm) 2.7 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum format: acetonitril (98:2), Mobilna faza B: 10 mM amonijum format: acetonitril (2:98), Gradijent = 0-100 % B tokom 1.5 minuta, zatim zadržavanje 0.6 min pri 100 % B; Temperatura: 27 °C; Protok: 1.0 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.17-8.10 (m, 1H), 8.09-8.02 (m, 1H), 7.45-7.55 (m, 4H), 7.29-7.20 (m, 4H), 6.01 (s, 1H), 5.11-5.01 (m, 2H), 4.62-4.54 (m, 2H), 4.45-4.38 (m, 4H), 3.75-3.67 (m, 1H), 3.55-3.49 (m, 4H), 3.18-3.09 (m, 1H), 2.90-2.82 (m, 1H), 1.35-1.28 (m, 3H), 1.10-1.01 (m, 3H).
PRIMERI 1336 i 1337
8-((2S,5R)4-((4-cijanofenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1694]
Intermedijer 1336A: etil 6-bromo-3-(N-(4-metoksibenzil)acetamido)pikolinat
[1696] U rastvor etil 3-acetamido-6-bromopikolinata (1.0 g, 3.48 mmol) u DMF-u (15 mL) dodat je Cs2CO3(3.40 g, 10.45 mmol) i 1-(hlorometil)-4-metoksibenzen (0.705 mL, 6.97 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša mešana je tokom 16 h. Reakcija je kvenčovana vodom (100 mL). Reakciona smeša je ekstrahovana etil acetatom (3 × 100 mL). Kombinovani organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, filtriran i uparen pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen silika gel hromatografijom (24 g, primenjujući 40%-60 % etil acetat/ petrol etar) da se dobije etil 6-bromo-3-(N-(4-metoksibenzil) acetamido)pikolinat (1.1 g, 78 % prinos). LCMS: m/z = 409.0 (M+H); retenciono vreme 1.53 min [LCMS postupak: Kolona-Luna 3.0 C18(2) 100 Å LC Kolona (20 × 4.0 mm) Mercury MS TM; Mfaza A: 10 mM NH4OAc u vodi: ACN (98:2); Mfaza B: 10 mM NH4OAc u vodi:ACN (2:98); Gradijent = 15-100 % B tokom 2.5 minuta, zatim zadržavanje 2.6 min pri 100 % B; Protok: 1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].
Intermedijer 1336B: 6-bromo-4-hidroksi-1-(4-metoksibenzil)-1,5-naftiridin-2(1H)-on
[1697]
[1698] U promešani rastvor etil 6-bromo-3-(N-(4-metoksibenzil)acetamido) pikolinata (0.2 g, 0.49 mmol) u tetrahidrofuranu (6 mL) dodat je u kapima KHMDS (1.57 mL, 1.57 mmol, 1M u THF-u) u THF-u (3 mL) na -78 °C tokom 10 min. Reakciona smeša je mešana na 0 °C tokom 1 h. Reakcija je kvenčovana vodom (15 mL). Smeša je oprana etil acetatom (2 × 50 mL). Vodeni sloj je prikupljen, zakišeljen sa 1.5 N HCl da se podesi pH~3.0 i mešan je tokom 15 min. Dobijeni sirov proizvod je filtriran kroz Bihnerov levak da se dobije 6-bromo-4-hidroksi-1-(4metoksibenzil)-1,5-naftiridin-2(1H)-on (110 mg, 62.0 % prinos). LCMS: m/z = 361.0 (M+H); retenciono vreme 0.99 min [LCMS postupak: Kolona-Luna 3.0 C18(2) 100 Å LC Kolona (20 × 4.0 mm) Mercury MS TM; Mfaza A: 10 mM NH4OAc u vodi: ACN (98:2); Mfaza B: 10 mM NH4OAc u vodiACN (2:98); Gradijent = 15-100 % B tokom 2.5 minuta, zatim zadržavanje 2.6 min pri 100 % B; Protok: 1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].
Intermedijer 1336C: 6-bromo-1-(4-metoksibenzil)-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat
[1699]
[1700] U rastvor 6-bromo-4-hidroksi-1-(4-metoksibenzil)-1,5-naftiridin-2(1H)-ona (0.3 g, 0.831 mmol) u DCM-u (6 mL) su dodati TEA (0.347 mL, 2.492 mmol) i DMAP (10.15 mg, 0.083 mmol) na 0 °C, praćeno trifluorometansulfonskim anhidridom (0.281 mL, 1.661 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1.5 h. Reakciona smeša je zatim kvenčovana vodom (50 mL) i ekstrahovana DCM-om (3 × 50 mL), kombinovani organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, filtriran i uparen pod sniženim pritiskom da se dobije (6-bromo-1-(4-metoksibenzil)-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il (350 mg, 85% prinos). Sirov materijal je prenet u sledeći korak bez dodatnog prečišćavanja. LCMS: m/z = 493.0 (M+2); retenciono vreme 2.13 min [LCMS postupak: Kolona-Luna 3.0 C18(2) 100 Å LC Kolona (20 × 4.0mm) Mercury MS TM; Mfaza A: 10 mM NH4OAc u vodi:ACN (98:2); Mfaza B: 10 mM NH4OAc u vodi:ACN (2:98); Gradijent = 15-100 % B tokom 2.5 minuta, zatim zadržavanje 2.6 min pri 100 % B; Protok: 1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].
Intermedijer 1336D: 4-(((2R,5S)-4-(6-bromo-1-(4-metoksibenzil)-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)(4-fluorofenil)metil)benzonitril
[1701]
[1702] U rastvor 4-(((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-ii)(4-fluorofenil)metil) benzonitril, TFA (310 mg, 0.71 mmol) u acetonitrilu (8 mL) dodat je DIPEA (0.37 mL.2.13 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 5 min i dodat je 6-bromo-1-(4-metoksibenzil)-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (350 mg, 0.71 mmol) i zagrevano je na 85 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije sirovo jedinjenje, koje je prečišćeno silika gel hromatografijom (24 g, primenjujući 34 % -40 % etil acetat/ Petrol etar) da se dobije 4-(((2R,5S)-4-(6-bromo-1-(4-metoksibenzil)-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)(4-fluorofenil)metil) benzonitril (120 mg, 25.4 % prinos). LCMS: m/z = 666.0 (M+H); retenciono vreme 2.62 min [LCMS postupak: Kolona-Luna 3.0 C18(2) 100 Å LC Kolona (20 × 4.0mm) Mercury MS TM; Mfaza A: 10 mM NH4OAc u vodi: acetonitril (98:2); Mfaza B: 10 mM NH4OAc u vodi: acetonitril (2:98); Gradijent = 15-100 % B tokom 2.5 minuta, zatim zadržavanje 2.6 min pri 100 % B; Protok: 1.5 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].
Intermedijer 1336E: 8-((2S,5R)-4-((4-cijanofenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)-5-(4-metoksibenzil)-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1703]
[1704] U rastvor 4-(((2R,5S)-4-(6-bromo-1-(4-metoksibenzil)-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)(4-fluorofenil)metil) benzonitrila (140 mg, 0.21 mmol) u NMP-u (5 mL) su dodati cink (2.8 mg, 0.04 mmol), dppf (7.0 mg, 0.013 mmol) i cink cijanid (49 mg, 0.42 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je degasirana pod N2, Pd2(dba)3(19 mg, 0.02 mmol) je dodat, i reakciona smeša je zagrevana na 90 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana dva puta etil acetatom (2 × 20 mL), kombinovani organski sloj je osušen preko bezvodnog Na2SO4i uparen pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen silika gel hromatografijom (24 g, primenjujući 10 %-50 % etil acetat/ petrol etar) da se dobije 8-((2S,5R)-4-((4-cijanofcnil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-(4-metoksvbenzil)-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (105 mg, 37 % prinos). LCMS: m/z = 613.2 (M+H); retenciono vreme 1.09 min [LCMS postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1× 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM NH4O Ac:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM NH4OAc:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.
Primeri 1336 i 1337: 8-((2S,5R)-4-((4-cijanofenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1705] U rastvor 8-((2S,5R)-4-((4-cijanofenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-(4-metoksibenzil)-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (50 mg, 0.082 mmol) u TFA-u (0.5 mL, 6.49 mmol) dodata je triflična kiselina (0.2 mL, 2.252 mmol) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 h. Reakciona smeša je sipana u 10% vodeni NaHCO3rastvor i ekstrahovana dva puta dihlorometanom (2 × 20 mL). Kombinovani organski sloj je osušen preko bezvodnog Na2SO4, uparen pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen preparativnom HPLC (Informacije o postupku: Kolona: Cellulose-4(150 × 19) mm-5µm; Mobilna faza A= 10 mM amonijum acetat u MeOH-u; tok =20mL/min) da se dobiju Primeri 1336 i 1337.
[1706] Primer 1336: (9 mg, 22 % prinos). LCMS: m/z = 491.2 (M- H); retenciono vreme 2.94 min [LCMS postupak: Kolona: Kinetex XB-C18 (3 × 75 mm) 2.6 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum format: acetonitril (98:2), Mobilna faza B: 10 mM amonijum format: acetonitril (2:98), Gradijent = 20-100 % B tokom 4 minuta, zatim zadržavanje 0.6 min pri 100 % B; Temperatura: 27 °C; Protok: 1.0 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 11.69-11.44 (m, 1H), 8.01 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.80-7.81 (m, 4H), 7.72 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.64-7.55 (m, 2H), 7.10-7.20 (m, 2H), 5.84 (s, 1H), 4.82 (s, 1H), 4.68-4.53 (m, 1H), 3.78-3.66 (m, 1H), 3.55 (dd, J = 3.3, 12.8 Hz, 1H), 3.03 (dd, J = 2.8, 5.3 Hz, 1H), 2.85 (dd, J = 3.0, 12.0 Hz, 1H), 2.37-2.27 (m, 1H), 1.30 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.06 (d, J = 6.5 Hz, 3H).
[1707] Primer 1337: (8 mg, 19.3 % prinos). LCMS: m/z = 493.2 (M+H); retenciono vreme 2.95 min [LCMS postupak: Kolona: Kinetex XB-C18 (3 × 75 mm) 2.6 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum format: acetonitril (98:2), Mobilna faza B: 10 mM amonijum format: acetonitril (2:98), Gradijent = 20-100 % B tokom 4 minuta, zatim zadržavanje 0.6 min pri 100 % B; Temperatura: 27 °C; Protok: 1.0 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.01 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.70-7.82 (m, 5H), 7.60-7.67 (m, 2 H), 7.13-7.22 (m, 2H) 5.84 (s, 1H), 4.82 (s, 1H), 4.67-4.56 (m, 1H), 3.78-3.65 (m, 1H), 3.59-3.50 (m, 1H), 3.08-3.01 (m, 1H), 2.85 (dd, J = 3.8, 11.8 Hz, 1H), 2.36-2.28 (m, 1H), 1.30 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.06 (d, J = 6.5 Hz, 3H).
[1708] Primeri u Tabeli 57 su pripremljeni prema opštim procedurama koje su opisane u Primerima 337 i 340 primenom pogodnog supstituisanog piperazina i halo benzil/alfa-metil benzila/benzhidrila. Kada je reakcija dala smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena u finalnoj fazi primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi.
[1709] Primeri u Tabeli 58 su pripremljeni prema opštem postupku koji je opisan za Intermedijer 1155D, primenom pogodnih benzil bromida/hlorida. Kada je reakcija dala smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena u finalnoj fazi primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi.
PRIMERI 1393 i 1394
8-((2S,5S)-4-((3-ciklopropil-1,2,4-oksadiazol-5-il)(4-fluorofenil)metil)-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1710]
Intermedijer 1393A: terc-butil (2S,5S)-4-(2-etoksi-1-(4-fluorofenil)-2-oksoetil)-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat
[1711]
[1712] U rastvor terc-butil (2S,5S)-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-karboksilata (500 mg, 2.17 mmol) u suvom acetonitrilu (10 mL), etil 2-bromo-2-(4-fluorofenil)acetat (624 mg, 2.39 mmol) i DIPEA (1.14 mL, 6.51 mmol) su dodati na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana do 85 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen hromatografijom sa 24 g silika gela primenom 0-10% MeOH/CHCl3kao eluenta da se dobije terc-butil (2S,5S)-4-(2-etoksi-1-(4-fluorofenil)-2-oksoetil)-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-karboksidat (755 mg, 85 % prinos). LCMS: m/z, 412.3 (M+H); retenciono vreme 1.97 i 2.01 min. LC-MS Postupak: Kolona-AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat u vodi: acetonitril (98:2); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat u vodi: acetonitril (2:98); Gradijent: 20% -100% B tokom 2 minuta, zatim zadržavanje 0.2 minuta pri 100% B, Protok 0.7 mL/min.
Intermedijer 1393B: 2-((2S,5S)-4-(terc-butoksikarbonil)-2-(metoksimetil)-5-metilpiperazin-1-il)-2-(4-fluorofenil)sirćetna kiselina
[1713]
[1714] U promešanu suspenziju NaH (48.7 mg, 1.22 mmol, 60% m/m) u DMF-u (5.0 mL) dodat je terc-butil (2S,5S)-4-(2-etoksi-1-(4-fluorofenil)-2-oksoetil)-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat (250 mg, 0.61 mmol) na 0 °C. Nakon 30 minuta, MeI (0.08 mL, 1.22 mmol) je dodat. Reakciona smeša je mešana tokom 16 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je kvenčovana ledenom vodom (10 mL). Reakciona smeša je ekstrahovana u etil acetatu (100 mL), organski sloj je izdvojen, osušen preko bezvodnog Na2SO4i uparen pod sniženim pritiskom da se dobije natrijumova so 2-((2S,5S)-4-(terc-butoksikarbonil)-2-(metoksimetil)-5-metilpiperazin-1-il)-2-(4-fluorofenil) sirćetne kiseline (220 mg, 85 % prinos). LCMS: m/z, 397.2 (M+H); retenciono vreme 0.33 min. LC-MS Postupak: Kolona-AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat u vodi: acetonitril (98:2); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat u vodi: acetonitril (2:98); Gradijent: 20% -100% B tokom 2 minuta, zatim zadržavanje 0.2 minuta pri 100% B, Protok 0.7 mL/min.
Intermedijer 1393C: terc-butil (2S,5S)-4-((3-ciklopropil-1,2,4-oksadiazol-5-il)(4-fluorofenil)metil)-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat
[1715]
[1716] U promešani rastvor 2-((2S,5S)-4-(terc-butoksikarbonil)-2-(metoksimetil)-5-metilpiperazin-1-il)-2-(4-fluorofenil)sirćetne kiseline (200 mg, 0.5 mmol), (Z)-N'-hidroksiciklopropan karboksimidamid (101 mg, 1.01 mmol) u DMF-u (8.0 mL), BOP (335 mg, 0.76 mmol) i trietil amin (0.21 mL, 1.51 mmol) su dodati na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša mešana je tokom 2 h na sobnoj temperaturi i zagrevana 110 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije sirovo jedinjenje, koje je prečišćeno primenom fleš hromatografije sa 12 g silika gela primenom 0-100 % etil acetat/ petrol etar), frakcije koje sadrže proizvod su koncentrovane pod sniženim pritiskom da se dobije terc-butil (2S,5S)-4-((3-ciklopropil-1,2,4-oksadiazol-5-il)(4-fluorofenil)metil)-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat (155 mg, 67 % prinos).
LCMS: m/z, 461.2 (M+H); retenciono vreme 1.30 min. LC-MS Postupak: Kolona-AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat u vodi: acetonitril (98:2); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat u vodi: acetonitril (2:98); Gradijent: 20% -100% B tokom 2 minuta, zatim zadržavanje 0.2 minuta pri 100% B, Protok 0.7 mL/min.
Intermedijer 1393D: 3-ciklopropil-5-((4-fluorofenil)((2S,SS)-2-(metoksimetil)-5-metilpiperazin-1-il)metil)-1,2,4-oksadiazol, TFA
[1717]
[1718] U promešani rastvor terc-butil (2S,5S)-4-((3-ciklopropil-1,2,4-oksadiazol-5-il) (4-fluorofenil)metil)-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-1-karboksilata (110 mg, 0.24 mmol) u DCM-u (3 mL) dodat je TFA (0.3 mL, 3.89 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da se dobije TFA so 3-ciklopropil-5-((4-fluorofenil)((2S,SS)-2-(metoksimetil)-5-metilpiperazin-1-il)metil)-1,2,4-oksadiazola (85 mg, 75 % prinos). LCMS: m/z, 361.2 (M+H); retenciono vreme 1.21 i 1.28 min. LC-MS Postupak: Kolona-AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat u vodi: acetonitril (98:2); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat u vodi: acetonitril (2:98); Gradijent: 20% -100% B tokom 2 minuta, zatim zadržavanje 0.2 minuta pri 100% B, Protok 0.7 mL/min.
Primeri 1393 i 1394: 8-((2S,5S)-4-((3-ciklopropil-1,2,4-oksadiazol-5-il)(4-fluorofenil)metil)-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1719] U promešani rastvor 3-ciklopropil-5-((4-fluorofenil)((2S,5S)-2-(metoksimetil)-5-metilpiperazin-1-il)metil)-1,2,4-oksadiazola (70 mg, 0.19 mmol) u acetonitrilu (8 mL), 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (64.7 mg, 0.19 mmol) i DIPEA (0.1 mL, 0.58 mmol) su dodati na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana na 85 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i uparena pod sniženim pritiskom da se dobije sirovi proizvod, koji je prečišćen preparativnom HPLC praćeno hiralnom HPLC (Postupak hiralne HPLC: Kolona: Cellulose-2 (250 × 4.6 mm) 5 µm, Mobilna faza: 0.1% DEA u MeOH-u: acetonitril (50:50), Tok: 1.0 mL/min) da se dobiju Primeri 1393 i 1394.
[1720] Primer 1393: (4.2 mg, 4.0 % prinos): LCMS: m/z, 544.3 (M+H); retenciono vreme 2.11 min; LCMS postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.19-8.13 (m, 1H), 8.11-8.02 (m, 1H), 7.64-7.51 (m, 2H), 7.30-7.17 (m, 2H), 6.07 (s, 1H), 5.50 (s, 1H), 4.54-4.40 (m, 1H), 3.86-3.71 (m, 2H), 3.63-3.48 (m, 5H), 3.11 (s, 3H), 3.03-2.94 (m, 1H), 2.87 (dd, J = 3.5, 11.6 Hz, 1H), 2.37 (dd, J = 3.5, 11.6 Hz, 1H), 2.18-2.10 (m, 1H), 1.14-1.05 (m, 5H), 0.95-0.81 (m, 2H).
[1721] Primer 1394: (5.0 mg, 4.6 % prinos): LCMS: m/z, 544.3 (M+H); retenciono vreme 2.11 min; LCMS postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1) mm, 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda:95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.20-8.12 (m, 1H), 8.10-7.98 (m, 1H), 7.56-7.44 (m, 2H), 7.29-7.15 (m, 2H), 6.03 (s, 1H), 5.58 (s, 1H), 4.57-4.44 (m, 1H), 3.77 (br d, J = 11.2 Hz, 1H), 3.63 (dd, J = 6.1, 9.8 Hz, 1H), 3.56-3.45 (m, 5H), 3.25 (dd, J = 3.4, 11.7 Hz, 1H), 3.15-3.08 (m, 1H), 3.00 (s, 3H), 2.29 (dd, J = 2.4, 11.7 Hz, 1H), 2.18-2.10 (m, 1H), 1.14 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.07 (dd, J = 2.0, 8.3 Hz, 2H), 0.94-0.80 (m, 2H).
[1722] Primeri u Tabeli 59 su pripremljeni prema opštim procedurama opisanim u Primerima 1393 i 1394, primenom pogodnih benzil bromida/hlorida. Kada je reakcija dala smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena u finalnoj fazi primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi.
PRIMERI 1405 i 1406
8-((2S,5S)-5-((2-metoksietoksi)metil)-2-metil-4-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil) etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril [1723]
Intermedijer 1405A: terc-butil (2S,5S)-5-((2-metoksietoksi)metil)-2-metil-4-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etil)piperazin-1-karboksilat
[1724]
[1725] U rastvor terc-butil (2S,5S)-5-(hidroksimetil)-2-metil-4-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etil)piperazin-1-karboksilata (200 mg, 0.48 mmol) u THF-u (8 mL) dodat je NaH (57 mg, 1.43 mmol, 60% m/m) na 0 °C. Nakon 5 min., 1-bromo-2-metoksietan (75 mg, 0.53 mmol) je dodat. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Reakciona smeša je ohlađena na 0 °C, kvenčovana ledeno hladnom vodom i ekstrahovana EtOAc-om (2 × 50 mL). Kombinovani organski ekstrakti su oprani slanim rastvorom, osušeni preko bezvodnog Na2SO4i koncentrovani da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen silika gel fleš kolonskom hromatografijom (5-10% MeOH u DCM-u; Kolona od 12 g) da se dobije dijastereoizomerna smeša terc-butil (2S,5S)-5-((2-metoksietoksi)metil)-2-metil-4-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etil)piperazin-1-karboksilata (100 mg, 44% prinos). LCMS: m/z, 477.8 (M+H); retenciono vreme 1.53 i 1.55 min. [LCMS Postupak: Kolona: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Postupak:%B: 0 min-20:2 min-100:2.3 min-100, Temperatura: 27 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].
Intermedijer 1405B: (2S,5S)-2-((2-metoksietoksi)metil)-5-metil-1-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etil)piperazin.HCl
[1726]
[1727] U rastvor terc-butil (2S,5S)-5-((2-metoksietoksi)metil)-2-metil-4-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etil)piperazin-1-karboksilata (100 mg, 0.21 mmol) u DCM-u (6 mL) dodata je 4 N HCl u dioksanu (0.3 mL, 1.05 mmol) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije dijastereoizomerna smeša (2S,5S)-2-((2-metoksietoksi)metil)-5-metil-1-(1 -(4-(trifluorometoksi)fenil)etil)piperizin hidrohlorida (65 mg, 76 % prinos). LCMS: m/z, 377.2 (M+H); retenciono vreme 1.27 i 1.36 min. [LCMS Postupak: Kolona: AQUITY UPLC BEH C 18(3.0 × 50 mm) 1.7 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Postupak: %B: 0 min-20:2 min-100:2.3 min-100, Temperatura: 27 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].
Primeri 1405 i 1406: 8-((2S,5S)-5-((2-metoksietoksi)metil)-2-metil-4-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1728] U rastvor (2S,5S)-2-((2-metoksietoksi)metil)-5-metil-1-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etil)piperizin hidrohlorida (80 mg, 0.19 mmol) u acetonitrilu (8 mL), natrijum bikarbonat (148 mg, 1.76 mmol) i 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (59 mg, 0.18 mmol) su dodati sekvencijalno na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana na 80 °C tokom 14 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da se dobije dijastereoizomerna smeša proizvoda, koja je dalje prečišćena pomoću prep-HPLC (Postupak hiralne separacije: Kolona: Cellulose-5 (250* 19) mm, 5 mikrona, Mobilna faza: 0.1% DEA u MeOH-u, Protok: 20 mL/min, izokratski) da se dobiju Primeri 1405 i 1406.
[1729] Primer 1405: (7.5 mg, 7 % prinos); LCMS: m/z, 560.3 (M+H); retenciono vreme 2.32 min; Kolona: XBridge BEH XP C18 (2.1 × 50 mm), 2.5 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Gradijent = 0-100 % B tokom 3 minuta; Temperatura: 50 °C; Protok: 1.1 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.16-8.19 (m, 1 H), 8.06-8.10 (m, 1 H), 7.51-7.56 (m, 2 H), 7.34 (d, J=7.8 Hz, 2 H), 6.04 (s, 1 H), 4.60-4.74 (m, 1 H), 3.90-4.05 (m, 1 H), 3.58-3.73 (m, 2 H), 3.34-3.55 (m, 6 H), 3.23 (br d, J=1.0 Hz, 3 H), 3.08 (s, 3 H), 2.91-3.00 (m, 1 H), 2.76-2.86 (m, 2 H), 1.28 (d, J=6.6 Hz, 3 H), 1.19 (d, J=6.6 Hz, 3 H).
[1730] Primer 1406: (5.4 mg, 5 % prinos). LCMS: m/z, 560.3 (M+H); retenciono vreme 2.33 min; Kolona: XBridge BEH XP C18 (2.1 × 50 mm), 2.5 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Gradijent = 0-100 % B tokom 3 minuta; Temperatura: 50 °C; Protok: 1.1 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.16 (d, J=8.8 Hz, 1 H), 8.04-8.10 (m, 1 H), 7.50 (d, J=8.8 Hz, 2 H), 7.32 (d, J=7.8 Hz, 2 H), 6.08 (s, 1 H), 4.39-4.59 (m, 1 H), 3.78-3.95 (m, 2 H), 3.50-3.72 (m, 6 H), 3.43-3.50 (m, 1 H), 3.35-3.40 (m, 2 H), 3.29-3.33 (m, 2 H), 3.14 (s, 3 H), 2.75 (dd, J=11.9, 3.8 Hz, 1 H), 2.25 (dd, J=11.9.3.8 Hz, 1 H), 1.34 (d, J=6.6 Hz, 3 H), 1.06 (d, J=6.6 Hz, 3 H).
[1731] Primeri u Tabeli 60 su pripremljeni prema opštim procedurama koje su opisane za Primere 1170 i 1171, primenom pogodnih benzil bromida/hlorida. Kada je reakcija dala smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena u finalnoj fazi primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi.
PRIMER 1410
N-(((2S,SS)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro- 1,5-naftiridin-4-il)-5-metilpiperazin-2-il)metil)metansulfonamid
[1732]
Intermedijer 1410A: terc-butil (2S,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-metil-5-(((metilsulfonil)oksi)metil)piperazin-1 -karboksilat
[1733]
[1734] U promešani rastvor terc-butil (2S,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-karboksilata (620 mg, 1.43 mmol) u DCM-u (10 mL) su dodati Et3N (0.6 mL, 4.3 mmol) i DMAP (9 mg, 0.07 mmol) praćeno metansulfonil hloridom (0.23 mL, 2.87 mmol) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Reakcija je kvenčovana vodom. Reakciona smeša je ekstrahovana DCM-om (2 × 30 mL), oprana vodom, slanim rastvorom i osušena preko bezvodnog natrijum sulfata, uparena pod sniženim pritiskom da se dobije terc-butil (2S,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-metil-5-(((metilsulfonil)oksi)metil) piperazin-1-karboksilat (650 mg, 89 % prinos). LCMS: m/z, 511.2 (M+H); retenciono vreme 1.24 min. [LCMS Postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM NH4OAc:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM NH4OAc:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-100 % B tokom 2 minuta, zatim zadržavanje 0.3 minuta pri 100 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].
Intermedijer 1410B: terc-butil (2S,SS)-5-(azidometil)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat
[1735]
[1736] U promešani rastvor terc-butil (2S,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-metil-5-(((metilsulfonil)oksi)metil)piperazin-1-karboksilata (600 mg, 1.17 mmol) u DMF-u (15 mL) su dodati TBAI (43 mg, 0.12 mmol) i terc-butil (2S,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-metil-5-(((metilsulfonil)oksi)metil)piperazin-1-karboksilat (600 mg, 1.18 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana na 80 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i rastvarač je koncentrovan pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen silika gel fleš kolonskom hromatografijom 3-5% MeOH u DCM-u; Kolona od 12 g) da se dobije terc-butil (2S,5S)-5-(azidometil)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-metilpiperazin-1 -karboksilat (500 mg, 93 % prinos). LCMS: m/z, 458.2 (M+H); retenciono vreme 2.26 min. [LCMS Postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM NHaOAc:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM NH4OAc:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-100 % B tokom 2 minuta, zatim zadržavanje 0.3 minuta pri 100 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].
Intermedijer 1410C: terc-butil (2S,5R)-5-(aminometil)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat
[1737]
[1738] U promešani rastvor terc-butil (2S,SS)-5-(azidometil)-4-(bis(4-fluorofenil) metil)-2-metilpiperazin-1-karboksilata (200 mg, 0.44 mmol) u THF-u (8 mL) i vodi (4 mL) dodat je trifenilfosfin (345 mg, 1.31 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana na 65 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da se dobije terc-butil (2S,5R)-5-(aminometil)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat koji je preuzet u dalji korak bez dodatnog prečišćavanja. LCMS: m/z, 432.3 (M+H); retenciono vreme 1.81 min. [LCMS Postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM NH4OAc:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM NH4OAc:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-100 % B tokom 2 minuta, zatim zadržavanje 0.3 minuta pri 100 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].
Intermedijer 1410D: terc-butil (2S,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-metil-5-(metilsulfonamidometil)piperazin-1 -karboksilat
[1739]
[1740] U promešani rastvor terc-butil (2S,5R)-5-(aminometil)-4-(bis(4-fluorofenil) metil)-2-metilpiperazin-1-karboksilata (100 mg, 0.23 mmol) u DCM-u (4 mL) su dodati DIPEA (0.08 mL, 0.46 mmol) i metansulfonil hlorid (0.03 mL, 0.35 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša mešana je tokom 3 h. Reakcija je kvenčovana vodom. Reakciona smeša je ekstrahovana EtOAc-om (2 × 30 mL), oprana vodom i slanim rastvorom, kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko bezvodnog natrijum sulfata, koncentrovani pod sniženim pritiskom da se dobije terc-butil (2S,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-metil-5-(metilsulfonamidometil)piperazin-1-karboksilat (120 mg) sirovog proizvoda. LCMS: m/z, 510.1 (M+H); retenciono vreme 2.04 min. [LCMS Postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM NH4OAc:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM NH4OAc:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-100 % B tokom 2 minuta, zatim zadržavanje 0.3 minuta pri 100 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].
Intermedijer 1410E: N-(((2S,5S)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-5-metilpiperazin-2-il) metil)metansulfonamid hidrohlorid
[1741]
[1742] U promešani rastvor terc-butil (2S,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-metil-5-(metilsulfonamidometil)piperazin-1-karboksilata (100 mg, 0.20 mmol) u DCM-u (20 mL) dodat je 4 M HCl (u dioksanu) (1 mL, 3.92 mmol) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da se dobije N-(((2S,SS)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-5-metilpiperazin-2-il) metil)metansulfonamid hidrohlorid koji je preuzet u sledeći korak bez daljeg prečišćavanja. LCMS: m/z, 410.2 (M+H); retenciono vreme 1.23 min. [LCMS Postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM NH4OAc: acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM NH4OAc:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-100 % B tokom 2 minuta, zatim zadržavanje 0.3 minuta pri 100 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].
Primer 1410: N-(((2S,SS)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(b-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-5-metilpiperazin-2-il)metil)metansulfonamid
[1743] U promešani rastvor N-(((2S,SS)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-5-metilpiperazin-2-il)metil)metansulfonamida (100 mg, 0.24 mmol) u acetonitrilu (5 mL) su dodati DIPEA (0.2 mL, 1.22 mmol) i 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (81 mg, 0.24 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana na 80 °C tokom 3 h., i zatim je ohlađena na sobnu temperaturu. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen preparativnom HPLC. Kolona: Waters XBridge C18, 150 mm × 19 mm, čestice od 5 µm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Gradijent: zadržavanje 3 minuta pri 40% B, 40-61% B tokom 15 minuta, zatim zadržavanje 5 minuta pri 100% B; Protok: 15 mL/min; Temperatura kolone: 25 °C. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene centrifugalnom evaporacijom da se dobije N-(((2S,5S)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-5-metilpiperazin-2-il)metil)metansulfonamid (8.4 mg, 6 % prinos). LCMS: m/z, 593.2 (M+H); retenciono vreme 2.06 min; [LCMS Postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 × 2.1)mm, 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50 °C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%.<1>H NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.15 (d, J=8.8 Hz, 1 H), 8.06-8.10 (m, 1 H), 7.50-7.63 (m, 4 H), 7.10-7.19 (m, 4 H), 6.72-6.83 (m, 1 H), 6.09 (s, 1 H), 5.03 (s, 1 H), 4.95 (br s, 1 H), 3.53 (s, 3 H), 3.44-3.50 (m, 1 H), 3.33-3.43 (m, 2 H), 3.24-3.31 (m, 1 H), 2.90-3.03 (m, 2 H), 2.65 (s, 3 H), 2.34-2.40 (m, 1 H), 1.16 (d, J=6.6 Hz, 3 H).
PRIMERI 1411 i 1412
8-((2S,5R)-5-(cijanometil)-2-mediil-4-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1744]
Intermedijer 1411A: terc-butil (2S,5S)-5-(hidroksimetil)-2-metil-4-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etil)piperazin-1 -karboksilat
[1745]
[1746] U promešani rastvor terc-butil (2S,5S)-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-karboksilata (1.0 g, 4.34 mmol) u acetonitrilu (8 mL), natrijum bikarbonat (0.37 g, 4.34 mmol) i 1-(1-bromoetil)-4-(trifluorometoksi)benzen (1.2 g, 4.34 mmol) su dodati na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana na 85 °C tokom 14 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom, ekstrahovan EtOAc-om (2 × 100 mL) i opran vodom. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko bezvodnog natrijum sulfata i koncentrovani pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen silika gel kolonskom hromatografijom primenom kolone od 24 g silika gela, eluiranjem sa 0-7% MeOH u DCM-u da se dobije dijastereoizomerna smeša terc-butil (2S,SS)-5-(hidroksimetil)-2-metil-4-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etil)piperazin-1-karboksilata (1.0 g, 55 % prinos). LCMS: m/z, 419.3 (M+H); retenciono vreme 2.35 min. [LCMS Postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-100 % B tokom 2 minuta, zatim zadržavanje 0.2 minuta pri 100 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].
Intermedijer 1411B: ((2S,5S)-5-metil-1-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etil) piperazin-2-il)metanol hidrohlorid
[1747]
[1748] U promešani rastvor terc-butil (2S,SS)-5-(hidroksimetil)-2-metil-4-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etil)piperazin-1-karboksilata (200 mg, 0.48 mmol) u DCM-u (5 mL), dodata je HCl (4N u dioksanu) (0.6 mL, 2.39 mmol) u kapima na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i osušen da se dobije dijastereoizomerna smeša ((2S,SS)-5-metil-1-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etil)piperazin-2-il)metanol hidrohlorida (130 mg, 85 % prinos). LCMS: m/z, 319.1 (M+H); retenciono vreme 1.06 i 1.15 min. [LCMS Postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-100 % B tokom 2 minuta, zatim zadržavanje 0.2 minuta pri 100 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm). Intermedijer 1411C: 8-((2S,5S)-5-(hidroksimetil)-2-metil-4-(1-(4-(trifluorometoksi) fenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1749] U promešani rastvor ((2S,SS)-5-metil-1-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil) etil)piperazin-2-il)metanol, HCl-a (400 mg, 1.26 mmol) u acetonitrilu (8 mL), DIPEA (0.7 mL, 3.75 mmol) i 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (420 mg, 1.26 mmol) su dodati sekvencijalno na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana na 80 °C tokom 14 h. Reakciona smeša ohlađena na sobnu temperaturu i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen silika gel kolonskom hromatografijom primenom fleš kolone od 24 g, eluiranjem sa 40-100% EtOAc/heksan praćeno sa 0-10% MeOH u CHCl3-u da se dobije dijastereoizomerna smeša 8-((2S,SS)-5-(hidroksimetil)-2-metil-4-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-fi-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (400 mg, 64 % prinos). LCMS: m/z, 502.4 (M+H); retenciono vreme 1.86 min. [LCMS Postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (3.0x50mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-100 % B tokom 2 minuta, zatim zadržavanje 0.3 minuta pri 100 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].
Primeri 1411 i 1412: 8-((2S,5S)-5-(hlorometil)-2-metil-4-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etil)piperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1750] U promešani rastvor 8-((2S,5S)-5-(hidroksimetil)-2-metil-4-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (500 mg, 1.00 mmol) u DCM-u (10 mL), TEA (0.42 mL, 2.99 mmol), metansulfonil hlorid (0.16 mL, 1.99 mmol) i 4-dimetilaminopiridin (12 mg, 0.10 mmol) su dodati sekvencijalno na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom noći. Reakciona smeša je ekstrahovana DCM-om (2 X 50 mL), oprana vodom, slanim rastvorom i osušena preko bezvodnog natrijum sulfata. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da se dobije dijastereoizomerna smeša 8-((2S,5S)-5-(hlorometil)-2-metil-4-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (450 mg, 87 % prinos). LCMS: m/z, 520.2 (M+H); retenciono vreme 2.20 i 2.23 min. [LCMS Postupak: Kolona: AQUITY UPLC BEH C18 (3.0 × 50 mm) 1.7 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril(5:95), Postupak: %B: 0 min-20:2 min-100: 2.3 min-100; Temperatura: 27 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].
[1751] U promešani rastvor 8-((2S,SS)-5-(hlorometil)-2-metil-4-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (100 mg, 0.19 mmol) u DMSO-u (5 mL), dodat je KCN (63 mg, 0.96 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana na 70 °C tokom noći. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, ekstrahovana EtOAc-om (2 X 50 mL) i oprana vodom. Kombinovani organski ekstrakti su oprani slanim rastvorom, osušeni preko bezvodnog natrijum sulfata i koncentrovani da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen preparativnom HPLC (Postupak hiralne separacije: Kolona: Cellulose-5 (250 × 19) mm, 5 mikrona, Mobilna faza: 0.1% DEA u MeOH-u, Protok: 20 mL/min, izokratski) da se dobiju Primeri 1411 i 1412.
[1752] Primer 1411: (12.2 mg, 12 % prinos)); LCMS: m/z, 511.2 (M+H); retenciono vreme 2.2 min; Kolona: XBridge BEH XP C18 (2.1 × 50 mm), 2.5 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Gradijent = 0-100 % B tokom 3 minuta; Temperatura: 50 °C; Protok: 1.1 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.22-8.16 (m, 1H), 8.13-8.07 (m, 1H), 7.63-7.52 (m, 2H), 7.38 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 6.10 (s, 1H), 4.84-4.75 (m, 1H), 3.95-3.88 (m, 1H), 3.55 (s, 3H), 3.44 (br s, 2H), 3.10-3.03 (m, 1H), 3.02-2.80 (m, 4H), 1.30 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.18 (d, J = 6.6 Hz, 3H).
[1753] Primer 1412: (18 mg, 18 % prinos). LCMS: m/z, 511.2 (M+H); retenciono vreme 2.20 min; Kolona: XBridge BEH XP C18 (2.1 × 50 mm), 2.5 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Gradijent = 0-100 % B tokom 3 minuta; Temperatura: 50 °C; Protok: 1.1 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.20-8.14 (m, 1H), 8.12-8.06 (m, 1H), 7.51 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.34 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 6.14 (s, 1H), 4.54 (br dd, J = 2.9, 6.4 Hz, 1H), 3.83-3.73 (m, 2H), 3.73-3.61 (m, 2H), 3.55 (s, 3H), 3.06-2.95 (m, 1H), 2.88-2.80 (m, 1H), 2.74 (dd, J = 3.4, 12.2 Hz, 1H), 2.20 (dd, J =2.3, 12.1 Hz, 1H), 1.35 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.01 (d, J = 6.6 Hz, 3H).
PRIMERI 1413 i 1414
8-((2S,5R)-5-((dimetilamino)metil)-2-metil-4-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etil) piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1754]
[1755] U promešani rastvor 8-((2S,5S)-5-(hlorometil)-2-metil-4-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (100 mg, 0.19 mmol) u acetonitrilu (3 mL), kalijum karbonat (80 mg, 0.58 mmol), kalijum jodid (54 mg, 0.33 mmol), dimetilamin hidrohlorid (24 mg, 0.29 mmol) su dodati sekvencijalno na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana na 70 °C tokom noći. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, filtrirana kroz filter za špric i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen preparativnom HPLC (Postupak hiralne separacije: Kolona: Cellulose-5 (250 × 19)mm, 5 mikrona, Mobilna faza: 0.1% DEA u MeOH-u, Protok: 20 mL/min, izokratski) da se dobiju Primeri 1413 i 1414.
[1756] Primer 1413: (14 mg, 13 % prinos); LCMS: m/z, 529.3 (M+H); retenciono vreme 2.16 min; Kolona: XBridge BEH XP C18 (2.1 × 50 mm), 2.5 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Gradijent = 0-100 % B tokom 3 minuta; Temperatura: 50 °C; Protok: 1.1 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.11-8.20 (m, 1 H), 8.03-8.10 (m, 1 H), 7.53 (d, J=8.3 Hz, 2 H), 7.31-7.40 (m, 2 H), 6.08 (s, 1 H), 4.70-4.81 (m, 1 H), 3.91-4.00 (m, 1 H), 3.58-3.68 (m, 1 H), 3.52 (s, 3 H), 3.35-3.43 (m, 1 H), 2.87-2.97 (m, 1 H), 2.74-2.83 (m, 1 H), 2.65-2.73 (m, 1 H), 2.10-2.23 (m, 1 H), 1.84 (br s, 6 H), 1.28-1.25 (m, 6 H), (1H može biti zaklonjen pikom vlage).
[1757] Primer 1414: (21 mg, 20 % prinos). LCMS: m/z, 529.3 (M+H); retenciono vreme 2.17 min; Kolona: XBridge BEH XP C18 (2.1 × 50 mm), 2.5 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Gradijent = 0-100 % B tokom 3 minuta; Temperatura: 50 °C; Protok: 1.1 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.12-8.17 (m, 1 H), 8.04-8.08 (m, 1 H), 7.49-7.54 (m, 2 H), 7.32 (d, J=7.8 Hz, 2 H), 6.16 (s, 1 H), 4.49-4.57 (m, 1 H), 3.78-3.87 (m, 2 H), 3.49-3.66 (m, 4 H), 3.30-3.32 (m, 2H, obscured sa moisture peak), 2.58-2.79 (m, 2 H), 1.99-2.28 (m, 7 H), 1.34 (d, J=5.4 Hz, 3 H), 1.11 (d, J=5.4 Hz, 3 H).
[1758] Primeri u Tabeli 61 su pripremljeni prema opštoj proceduri koja je opisana za Primer 1413 i 1414 primenom pogodnih amina. Kada je reakcija dala smešu dijastereoizomera, smeša je razdvojena u finalnoj fazi primenom bilo preparativne hromatografije bilo preparativne hiralne hromatografije. Apsolutna stereohemija nije dodeljena na novoformiranoj ugljenik-azot vezi
PRIMERI 1419 i 1420
8-((2R,5R)-2-(hidroksimetil)-5-metil-4-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etil) piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1759]
Intermedijer 1419A: terc-butil(2R,5R)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-nafti ridin-4-il)-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1 -karboksilat
[1760]
[1761] U promešani rastvor terc-butil (2R,5R)-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-karboksilata (100 mg, 0.43 mmol) u acetonitrilu (5 mL), su dodati DIPEA (0.8 mL, 4.34 mmol) i 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (145 mg, 0.43 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana na 80 °C tokom 3 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen fleš kolonskom hromatografijom (Kolona: 12 g silike; Tok rastvarača: 2-3% MeOH (10% NH4OH u hloroformu) da se dobije terc-butil (2R,5R)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat (120 mg, 67% prinos). LCMS: m/z, 414.2 (M+H); retenciono vreme 1.36 min.
[LCMS Postupak: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM NH4OAc:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM NH4OAc:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-100 % B tokom 2 minuta, zatim zadržavanje 0.3 minuta pri 100 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].
Intermedijer 1419B: 8-((2R,5R)-2-(hidroksimetil)-5-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril.TFA so
[1762]
[1763] U rastvor terc-butil (2R,5R)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-karboksilata (70 mg, 0.17 mmol) u DCM-u (4 mL) dodat je TFA (0.07 mL, 0.85 mmol) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i osušen da se dobije TFA so 8-((2R,5R)-2-(hidroksimetil)-5-metilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (48 mg, 69 % prinos). LCMS: m/z, 314.2 (M+H); retenciono vreme 0.63 min; Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 × 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.
Primeri 1419 i 1420: 8-((2R,5R)-2-(hidroksimetil)-5-metil-4-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1764] U promešanu suspenziju 8-((2R,SR)-2-(hidroksimetil)-5-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA soli (80 mg, 0.25 mmol) u acetonitrilu (5 mL) su dodati natrijum bikarbonat (65 mg, 0.75 mmol) i 1-(1-bromoetil)-4-(trifluorometoksi)benzen (69 mg, 0.25 mmol) na sobnoj temperaturi i zagrevano je na 80 °C tokom 12 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen preparativnom HPLC (Postupak: Kolona: Sunfire C18 (150 X 19) mm, 5 µm, Mobilna faza A: 0.1% DEA u ACN-u, Mobilna faza B: 0.1% DEA u IPA-u, Gradijent = 0-50 % B tokom 12 minuta Protok: 20 mL/min) da se dobije Primer 1419 i 1420.
[1765] Primer 1419: (3.2 mg, 2 % prinos); LCMS: m/z, 502.3 (M+H); retenciono vreme 2.11 min; Kolona: XBridge BEH XP C18 (2.1 x 50 mm), 2.5 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Gradijent = 0-100 % B tokom 3 minuta; Temperatura: 50 °C; Protok: 1.1 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.19-8.14 (m, 1H), 8.10-8.00 (m, 1H), 7.57-7.46 (m, 2H), 7.34 (d, J=8.1 Hz, 2H), 6.00 (s, 1H), 4.79-4.67 (m, 1H), 4.65-4.59 (m, 1H), 3.87-3.77 (m, 1H), 3.77-3.63 (m, 2H), 3.52 (s, 3H), 3.30 (dd, J=2.6, 4.0 Hz, 1H), 3.09 (br d, J=11.2 Hz, 1H), 2.92 (dd, J=3.7, 11.7 Hz, 1H), 2.79-2.70 (m, 1H), 1.25 (d, J=6.4 Hz, 3H), 0.99 (d, J=6.4 Hz, 3H).
[1766] Primer 1420: (3.1 mg, 2 % prinos). LCMS: m/z, 502.3 (M+H); retenciono vreme 2.12 min; Kolona: XBridge BEH XP C18 (2.1 x 50 mm), 2.5 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Gradijent = 0-100 % B tokom 3 minuta; Temperatura: 50 °C; Protok: 1.1 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.19-8.14 (m, 1H), 8.10-8.00 (m, 1H), 7.57-7.46 (m, 2H), 7.34 (d, J=8.1 Hz, 2H), 6.00 (s, 1H), 4.79-4.67 (m, 1H), 4.65-4.59 (m, 1H), 3.87-3.77 (m, 1H), 3.77-3.63 (m, 2H), 3.52 (s, 3H), 3.30 (dd, J=2.6, 4.0 Hz, 1H), 3.09 (br d, J=11.2 Hz, 1H), 2.92 (dd, J=3.7, 11.7 Hz, 1H), 2.79-2.70 (m, 1H), 1.25 (d, J=6.4 Hz, 3H), 0.99 (d, J=6.4 Hz, 3H).
PRIMER 1421
8-((2R,SR)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-(metoksimetil)-5-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1767]
Intermedijer 1421A: terc-butil (2R,5R)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-1 -karboksilat
[1768]
[1769] U promešanu suspenziju NaH (20 mg, 0.48 mmol, 60% m/m) u THF-u (4 mL) dodat je terc-butil (2R,5R)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat (100 mg, 0.24 mmol) na 0 °C. Nakon 5 min, Mel (0.03 mL, 0.48 mmol) je dodat. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 h. Reakcija je kvenčovana ledeno hladnom vodom. Reakciona smeša je ekstrahovana EtOAc-om (2 X 30 mL), osušena preko bezvodnog natrijum sulfata i koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije terc-butil (2R,5R)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat (100 mg, 97 % prinos). LCMS: m/z, 428.4 (M+H); retenciono vreme 1.63 min; Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 x 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.
Intermedijer 1421B: 8-((2R,5R)-2-(metoksimetil)-5-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA so
[1770]
[1771] U rastvor terc-butil (2R,5R)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-1-karboksilata (80 mg, 0.19 mmol) u DCM-u (4 mL) dodat je TFA (0.07 mL, 0.94 mmol) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i osušen da se dobije TFA so 8-((2R,5R)-2-(metoksimetil)-5-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (45 mg, 74% prinos). LCMS: m/z, 328.2 (M+H); retenciono vreme 0.78 min; Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 x 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.
Primer 1421: 8-((2R,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-(metoksimetil)-5-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1772] U promešanu suspenziju 8-((2R,SR)-2-(metoksimetil)-5-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril TFA (30 mg, 0.09 mmol) u acetonitrilu (5 mL) su dodati DIPEA (0.5 mL, 0.28 mmol) i 4,4'-(bromometilen)bis(fluorobenzen) (26 mg, 0.09 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana na 80 °C tokom 14 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen pomoću prep-HPLC (Kolona: Waters XBridge C18, 150 mm x 19 mm, čestice od 5 µm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Gradijent: 0-minuta zadržavanje pri 15% B, 15-55% B tokom 25 minuta, zatim zadržavanje 5 minuta pri 100% B; Protok: 15 mL/min, Temperatura kolone: 25 °C) da se dobije 8-((2S,5R)-4-(4-(4-fluorofenil)tiazol-2-il)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (4.3 mg, 6 % prinos). LCMS: m/z, 530.1 (M+H); retenciono vreme 1.82 min;
[LCMS postupak: Kolona: XBridge BEH XP C18 (50 x 2.1) mm, 2.5 µm; Mobilna faza A: 95% voda: 5% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Mobilna faza B: 5% voda: 95% acetonitril; 10 mM amonijum acetat; Tok: 1.1 mL/min; Temp: 50°C; Vreme (min): 0-3; %B: 0-100%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.15-8.12 (m, 1H), 8.08-8.04 (m, 1H), 7.62-7.58 (m, 2H), 7.54 (dd, J=5.5, 8,8 Hz, 2H), 7.18-7.14 (m, 2H), 7.13-7.09 (m, 2H), 6.01 (s, 1H), 4.83-4.77 (m, 1H), 4.69 (s, 1H), 3.84-3.77 (m, 1H), 3.75-3.69 (m, 1H), 3.54-3.57 (m, 1 H), 3.52 (s, 3 H), 3.13 (s, 3 H), 3.05-3.09 (m, 1 H), 3.05-3.09 (m, 1H), 2.83-2.80 (m, 1H), 1.02 (d, J= 6.5 Hz, 3H).
PRIMER 1422
8-((2S,5R)-4-((4-cijanotiofen-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1773]
[1774] U rastvor 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (0.03 g, 0.101 mmol) u acetonitrilu (4 mL) na sobnoj temperaturi su dodati DIEA (0.039 mL, 0.222 mmol) i 5-(hlorometil) tiofen-3-karbonitril (0.016 g, 0.101 mmol). Reakcioni sud je poklopljen i zagrevan na 80 °C tokom noći. Napredak reakcije je praćen pomoću LC-MS (Acquity UPLC BEH C182.1 X 50 mm 1.7 µm Kolona.0-100% B; 2 minuta gradijent, 3 minuta vreme toka 0.8 mL/min Protok (Rastvarač A: 90% voda, 10% metanol, 0.1% TFA: Rastvarač B: 10% voda, 90% metanol, 0.1% TFA). Reakciona smeša je koncentrovana i ostatak je ponovo rastvoren u metanolu i prečišćen pomoću HPLC reverznih faza da se dobije 8-((2S,5R)-4-((4-cijanotiofen-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (6.9 mg, 17% prinos). LC-MS: je prikazala (M+H) Pik na 419; Rt: 1.17 min.
[1775] Sirov materijal je prečišćen putem preparativne LC/MS sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18, 200 mm x 19 mm, čestice od 5 µm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Gradijent: nula minuta zadržavanje pri 31% B, 31-71% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje 4 minata pri 100% B; Protok: 20 mL/min; Temperatura kolone: 25 °C. Prinos proizvoda je bio 6.9 mg, i njegova procenjena čistoća pomoću LCMS analize je bila 96%. Analitička LC/MS je korišćena da se odredi konačna čistoća. Uslovi tokom QC su bili uslovi 1 i 2 kao što je ranije pomenuto.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.19-8.13 (m, 1H), 8.11-8.04 (m, 1H), 7.90 (dd, J=7.2, 1.7 Hz, 2H), 7.58-7.48 (m, 3H), 7.00 (s, 1H), 6.12 (s, 1H), 4.34-4.20 (m, 1H), 3.98-3.80 (m, 2H), 3.63-3.53 (m, 2H), 3.47 (br dd, J=7.0, 1.9 Hz, 2H), 3.05 (br dd, J=11.0, 3.1 Hz, 2H), 2.55 (s, 1H), 2.43 (br dd, J=11.4, 3.7 Hz, 1H), 1.16 (dd, J=6.2, 3.5 Hz, 6H).
[1776] Primeri u Tabeli 62 su pripremljeni od (R)-7-fluoro-5-metil-8-(3-metilpiperazin-1-il)-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila primenom opšteg postupka koji je opisan u Primeru 1422.
PRIMERI 1439 i 1440
8-((2S,5R)-4-(1-(4-(ciklopropilmetoksi)fenil)propil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1777]
Intermedijer 1439A: 4-(ciklopropilmetoksi)benzaldehid
[1778]
[1779] U rastvor 4-hidroksibenzaldehida (3 g, 24.57 mmol) u acetonitrilu (10 mL) na sobnoj temperaturi su dodati (bromometil)ciklopropan (3.65 g, 27.0 mmol) i kalijum karbonat (6.79 g, 49.1 mmol). Reakciona bočica je poklopljena i zagrevana na 80 °C tokom noći. Napredak reakcije je praćen pomoću LC-MS (Acquity UPLC BEH C18 2.1 X 50 mm 1.7 µm Kolona. 0-100% B; 2 minuta gradijent, 3 minuta vreme toka 0.8 mL/min Protok (Rastvarač A: 90% voda, 10% metanol, 0.1% TFA: Rastvarač B: 10% voda, 90% metanol, 0.1% TFA). Reakciona smeša je filtrirana i koncentrovana. Ostatak je ponovo rastvoren u dihlorometanu i prečišćen silika gel hromatografijom primenom 40 g ISCO kolone i eluiran sa gradijentom heksana, etil acetata (100:0 do 20:80, 500 mL). Tražene frakcije su koncentrovane da se dobije 4-(ciklopropilmetoksi)benzaldehid (3.62 g, 20.54 mmol, 84 % prinos). LC-MS: (M+H) Pik na 177, Rt= 0.9 min.
Intermedijer 1439B: 1-(4-(ciklopropilmetoksi)fenil)propan-1-ol
[1780]
[1781] U ledeno hladni rastvor 4-(ciklopropilmetoksi)benzaldehida (3.2 g, 18.16 mmol) u THF-u (30 mL) dodat je u kapima, etilmagnezijum bromid (7.57 mL, 22.70 mmol) ( M u Et2O-u). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Napredak reakcije je praćen pomoću LC-MS (Acquity UPLC BEH C182.1 X 50 mm 1.7 µm Kolona.0-100% B; 2 minuta vreme toka gradijenta 0.8 mL/min Protok (Rastvarač A: 100% voda, 0.1% TFA: Rastvarač B: 100% acetonitril, 0.1% TFA). Nije primećen polazni materijal. Reakcija je kvenčovana zasićenim vodenim NH4Cl. Reakciona smeša je razblažen etil acetatom. Organska faza je oprana vodom, slanim rastvorom i osušena (MgSO4). Filtrat je evaporisan u rotovapu i ostatak je prečišćen silika gel hromatografijom primenom 40 g ISCO Kolone i eluiran gradijentom heksana, etil acetata (100:0 do 0:100, 500 mL). Tražene frakcije su koncentrovane da se dobije 1-(4-(ciklopropilmetoksi)fenil)propan-1-ol (3.29 g, 15.95 mmol, 88 % prinos).<1>H NMR (499 MHz, HLOROFORM-d) δ 7.28-7.23 (m, 2H), 6.92-6.87 (m, 2H), 4.54 (t, J=6.7 Hz, 1H), 3.81 (d, J=6.8 Hz, 2H), 1.96 (s, 1H), 1.88-1.69 (m, 2H), 1.33-1.25 (m, 1H), 0.91 (t, J=7.4 Hz, 3H), 0.70-0.63 (m, 2H), 0.40-0.33 (m, 2H).
Primeri 1439 i 1440: 8-((2S,SR)-4-(1-(4-(ciklopropilmetoksi)fenil)propil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1782] U rastvor 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila (0.05 g, 0.168 mmol) u acetonitrilu (5 mL) na sobnoj temperaturi su dodati 1-(4-(ciklopropilmetoksi)fenil)propan-1-ol (0.052 g, 0.252 mmol), (cijanometil)trimetilfosfonijum jodid (0.082 g, 0.336 mmol) i Hunig-ova baza (0.147 mL, 0.841 mmol). Reakciona bočica je zatvorena i zagrevana na 110 °C tokom noći. Napredak reakcije je praćen pomoću LC-MS (Acquity UPLC BEH C182.1 X 50 mm 1.7 µm Kolona.0-100% B; 2 minuta vreme toka gradijenta 0.8 mL/min Protok (Rastvarač A: 100% voda, 0.1% TFA: Rastvarač B: 100% acetonitril, 0.1% TFA). Formiranje nekog proizvoda je primećeno zajedno sa polaznim materijalom. Dalje, 1.5 ekviv. alkohola, 2.0 ekviv. fosfonijum jodida i 5.0 ekviv. DIEA su dodati i zagrevanje je nastavljeno tokom još 16 sati. LC-MS prikazuje još proizvoda. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, koncentrovana i ostatak je ponovo rastvoren u DMF-u. Smeša je filtrirana i prečišćena pomoću HPLC reverznih faza prateći iste uslove kao što su pomenuti ranije. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene putem centrifugalne evaporacije da se dobije Primer 1439 (1.4 mg) i njegova čistoća procenjena pomoću LCMS analize je bila 100%. Rt= 1.66 min, prim. MS jon: 486.08. Prinos drugog pika primera 1440 je bio 1.5 mg, i njegova čistoća procenjena pomoću LCMS analize je bila 97%. Rt= 1.74 min, prim. MS jon: 486.12. QC uslovi 1 i 2.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.88 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.83-7.77 (m, 1H), 6.96 (d, J=8.7 Hz, 2H), 6.62 (d, J=8.5 Hz, 2H), 5.74 (s, 1H), 4.13 (br dd, J=3.2, 1.5 Hz, 1H), 3.54 (d, J=6.9 Hz, 2H), 3.27 (br s, 2H), 3.01 (br dd, J=9.3, 3.1 Hz, 1H), 2.45 (br dd, J=11.7, 3.2 Hz, 1H), 2.31 (s, 4H), 1.92-1.84 (m, 1H), 1.70-1.58 (m, 1H), 1.30-1.18 (m, 1H), 1.03-0.92 (m, 1H), 0.88 (brd, J=6.5 Hz, 3H), 0.83 (d, J=6.5 Hz, 3H), 0.42-0.26 (m, 5H), 0.13-0.01 (m, 2H).
[1783] Primeri u Tabeli 63 su pripremljeni od 8-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila primenom opšteg postupka za Primere 1439 i 1440.
PRIMER 1454
8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)ciklopropil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1784]
Intermedijer 1454A: terc-butil (2S,5R)-4-(4-fluorobenzoil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat
[1785]
[1786] U promešani rastvor 4-fluorobenzoil hlorida(1.0 g, 7.14 mmol) u acetonitrilu (10 mL) su dodati DIPEA (3.74 mL, 21.41 mmol) i HATU (3.53 g, 9.28 mmol) na sobnoj temperaturi. Nakon 30 min., dodat je terc-butil (2S,SR)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (1.83 g, 8.56 mmol) i reakciona smeša je mešana tokom noći. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da se uklone isparljive supstance i ostatak je rastvoren u etil acetatu (100 mL) i opran vodom (50 mL). Vodeni sloj je povratno ekstrahovan etil acetatom (100 mL x 2) i Kombinovani organski sloj je opran slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog Na2SO4, koncentrovan pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen silika gel hromatografijom (50-100% EtOAc u petrol etru; kolona od 40 g) da se dobije terc-butil (2S,SR)-4-(4-fluorobenzoil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (1.99 g, 83 % prinos). LCMS: m/z = 337.1 (M+H); retenciono vreme 1.62 min. [LCMS uslov: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 x 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM NH4OAc:acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM NH4OAc:acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].
Intermedijer 1454B: terc-butil (2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)ciklopropil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat
[1787]
[1788] U promešani rastvor metil titanijum triizopropoksida (3.0 mL, 2.97 mmol, 1 M u DCM-u) u tetrahidrofuranu (15 mL) na -78 °C dodat je etilmagnezijum bromid (6 mL, 5.95 mmol, 1M u THF-u). Nakon 30 min., dodat je rastvor terc-butil (2S,5R)-4-(4-fluorobenzoil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (500 mg, 1.49 mmol u 5.0 mL THF-a). Reakciona smeša je mešana tokom 30 min na -78 °C i zatim, 1 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je sipana u vodu (100 mL) i ekstrahovana etrom (50 mL x 3), Kombinovani organski sloj je opran slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog Na2SO4, koncentrovan pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen silika gel hromatografijom (5-10% etil acetat/petrol etar; kolona od 24 g) da se dobije terc-butil (2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)ciklopropil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (425 mg, 82 % prinos). LCMS: m/z = 349.2 (M+H); retenciono vreme 4.21 min. [LCMS uslov: Kolona: Kinetex XB-C18 (3 x 75 mm) 2.6 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum format: acetonitril (98:2), Mobilna faza B: 10 mM amonijum format: acetonitril (2:98), Gradijent = 20-100 % B tokom 4 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 100 % B; Temperatura: 27 °C; Protok: 1.0 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.
Intermedijer 1454C: (2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)ciklopropil)-2,5-dimetilpiperazin-1-ijum hlorid
[1789]
[1790] U rastvor terc-butil (2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)ciklopropil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (200 mg, 0.57 mmol) u DCM-u (10 mL) dodata je 4 N HCl (0.17 mL, 5.74 mmol) (u dioksanu) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša mešana je tokom 3 h. Reakciona smeša je uparena pod sniženim pritiskom da se dobije HCl so (2R,5S)-1-(1-(4-fluorofenil)ciklopropil)-2,5-dimetilpiperazina (131 mg, 80 % prinos). LCMS: m/z = 249.3 (M+H); retenciono vreme 1.08 min. [LCMS uslov: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2.1 x 50 mm) 1.7 µm, Mobilna faza A: 10 mM NH4OAc: acetonitril (95:5); Mobilna faza B: 10 mM NH4OAc: acetonitril (5:95), Gradijent = 20-90 % B tokom 1.1 minuta, zatim zadržavanje 0.6 minuta pri 90 % B; Temperatura: 50 °C; Protok: 0.7 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm].
Primer 1454: 8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)ciklopropil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril
[1791] U promešanu suspenziju (2R,5S)-1-(1-(4-fluorofenil)ciklopropil)-2,5-dimetilpiperazin hidrohlorida (50 mg, 0.17 mmol) u acetonitrilu (3 mL) su dodati DIPEA (0.09 mL, 0.53 mmol) i 6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il trifluorometansulfonat (88 mg, 0.26 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana na 85 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, koncentrovana pod sniženim pritiskom da se uklone isparljive supstance i ostatak je rastvoren u etil acetatu (20 mL), opran vodom (15 mL). Vodeni sloj je povratno ekstrahovan etil acetatom (20 mL x 2). Kombinovani organski sloj je opran slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog Na2SO4, koncentrovan pod sniženim pritiskom da se dobije sirov proizvod, koji je prečišćen preparativnom HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: Waters XBridge C18, 150 mm x 19 mm, čestice od 5 µm; Mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; Gradijent: zadržavanje 0 minuta na 10% B, 10-45% B tokom 20 minuta, zatim zadržavanje 5 minuta pri 100% B; Protok: 15 mL/min; Temperatura kolone: 25 °C.
Prikupljanje frakcija je započeto signalima. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i osušene centrifugalnim uparavanjem da se dobije 8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)ciklopropil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (3.6 mg, 5 % prinos). LCMS: m/z = 432.2 (M+H); retenciono vreme 2.1 min. [LCMS uslov: Kolona: XBridge BEH XP C18 (2.1 x 50 mm), 2.5 µm; Mobilna faza A: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (95:5), Mobilna faza B: 10 mM amonijum acetat: acetonitril (5:95), Gradijent = 0-100 % B tokom 3 minuta; Temperatura: 50 °C; Protok: 1.1 mL/min; Detekcija: UV pri 220 nm.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 8.12-8.16 (m, 1H), 8.04-8.09 (m, 1H), 7.39-7.50 (m, 2H), 7.15-7.24 (m, 2 H), 6.17 (s, 1H), 3.68-3.82 (m, 1H), 3.48-3.61 (m, 4H), 3.16-3.24 (m, 1H), 2.69-2.84 (m, 2H), 2.36-2.44 (m, 1H), 1.13-1.20 (m, 1 H), 0.98-1.09 (m, 6H), 0.76-0.96 (m, 3H).
BIOLOŠKI TESTOVI
[1792] Farmakološka svojstva jedinjenja ovog pronalaska se mogu potvrditi brojnim biološkim testovima. Biološki testovi koji su uzeti kao primer, a koji slede, su sprovedeni sa jedinjenjima pronalaska.
1. In vitro test inhibicije DGK
[1793] DGKα i DGKζ reakcije su izvedene primenom bilo ekstrudiranog lipozoma (DGKα i DGKζ LIPGLO test) ili deterdžent/lipid micelarnog supstrata (DGKα i DGKζ testovi). Reakcije su izvedene u 50 mM MOPS pH 7.5, 100 mM NaCl, 10 mM MgClx, 1 µM CaClz, i 1 mM DTT (test pufer). Reakcije koje koriste deterdžent/lipid micelarni supstrat su takođe sadržale 50 mM oktil B-D-glukopiranozid. Koncentracije lipidnog supstrata su bile 11 mM PS i 1 mM DAG tokom reakcija koje koriste deterdžent/lipid micele. Koncentracije lipidnog supstrata su bile 2 mM PS, 0.25 mM DAG, i 2.75 mM PC tokom reakcija koje koriste ekstrudirane lipozome. Reakcije su izvedene u 150 µM ATP. Koncentracije enzima za DGKα i DGKζ su bile 5 nM
[1794] Studije inhibicija jedinjenjima su izvedene kao što sledi: 50 nL kapljica svakog ispitivanog jedinjenja (gornja koncentracija 10 mM sa 3-strukim serijama razblaženja u 11 tačaka, za svako jedinjenje) solubilizovanog u DMSO je preneto u bunariće bele ploče sa 1536 bunarića (Coming 3725).5 mL enzim/supstrat rastvora u 2x finalnoj reakcionoj koncentraciji je pripremljeno kombinovanjem 2.5 mL 4x rastvora enzima (20 nM DGKα ili DGKζ (pripremljenog kao što je opisano ispod) u test puferu) i 2.5 mL bilo 4x lipozomnog ili 4x deterdžent/lipid micelarnog rastvora (sastavi opisani ispod) i inkubirano na sobnoj temperaturi tokom 10 minuta. Dalje, 1 µL 2x enzim/supstrat rastvora je dodat u bunariće koji sadrže ispitivano jedinjenje i reakcije su započete dodatkom 1 µL 300 uM ATP-a. Reakcijama je dozvoljeno da teku tokom 1 h, nakon čega je dodato 2 µL Glo reagensa (Promega V9101) i inkubirano je tokom 40 minuta. Dalje, dodato je 4 µL reagensa za detekciju kinaze i inkubirano je tokom 30 minuta. Luminescencija je zabeležena primenom EnVision čitača mikroploče. Procentualna inhibicija je izračunata iz ATP konverzije generisane kontrolnim reakcijama bez enzima za 100 % inhibicije i reakcijama samo sa vehikulumom za 0 % inhibicije. Jedinjenja su procenjena u 11 koncentracija da se odredi IC50.
4x deterdžent/lipid micelarni preparat
[1795] Deterdžent/lipid micela je pripremljena kombinovanjem 15 g fosfatidilserina (Avanti 840035P) i 1 g diacilglicerola (8008110) i rastvaranjem u 150 mL hloroforma u tikvici od 2 L sa okruglim dnom. Hloroform je uklonjen pod visokim vakuumom rotacionim uparavanjem. Dobijeno bezbojno, lepljivo ulje je resuspendovano u 400 mL 50 mM MOPS-a pH 7.5, 100 mM NaCl-a, 20 mM NaF-a, 10 mM MgCl2-a, 1 µM CaClz-a, 1 mM DTT-a, i 200 mM oktil glukozida energičnim mešanjem. Lipid/deterdžent rastvor je podeljen u alikvote od 5 mL i čuvan na -80 °C.
4x lipozomski preparat
[1796] Lipidni sastav je bio 5 mol% DAG (Avanti 8008110), 40 mol% PS (Avanti 840035P), i 55 mol% PC (Avanti 850457) pri ukupnoj lipidnoj koncentraciji od 15.2 mg/mL za 4x lipozomski rastvor. PC, DAG, i PS su rastvoreni u hloroformu, kombinovani, i osušeni u vakuumu u tankom filmu. Lipidi su hidratisani do 20 mM u 50 mM MOPS-u pH 7.5, 100 mM NaCl-u, 5 mM MgCl2-u, i pet puta su zamrzavani-odmrzavani. Lipidna suspenzija je ekstrudirana jedanaest puta kroz polikarbonatni filter od 100 nm. Dinamičko rasipanje svetlosti je izvedeno da se potvrdi veličina lipozoma (50-60 nm radijus). Preparat lipozoma je čuvan na 4 °C tokom četiri nedelje.
Bakulovirusno eksprimiranje humanih DGKα i DGKζ
[1797] Humani DGK-alfa-TVMV-His-pFBgate i humani DGK-zeta-transkript varijanta-2-TVMV-His-pFBgate bakulovirusni uzorci su generisani primenom Bac-to-Bac sistema bakulovirusnog eksprimiranja (Invitrogen) u skladu sa proizvođačkim protokolom. DNK korišćen za eksprimiranje DGK-alfa i DGK-zeta ima SEQ ID NOs (SEK ID BROJEVE): 1 i 3, redom. Amplifikacija Bakulovirusa je postignuta primenom inficiranih Sf9 ćelija pri 1: 1500 virus/ćelija odnosima, i uzgajanih tokom 65 sati na 27 °C posle transfekcije.
[1798] Skaliranje eksprimiranja za svaki protein je sprovedeno u Cellbag 50L WAVE-Bioreactor Sistemu 20/50 od GE Healthcare Bioscience.12 L Sf9 ćelija pri 2 × 10<6>ćelija/mL (Expression System, Davis, CA) uzgajano u ESF921 medijumu za insekte (Expression System) je inficirano virusnim štokom pri odnosima 1:200 virus/ćelija, i uzgajano tokom 66-68 sati na 27 °C posle infekcije. Kultura inficiranih ćelija je prikupljena centrifugiranjem pri 2000 opm tokom 20 min 4 °C u SORVALL<®>RC12BP centrifugi. Ćelijske pelete su čuvane na -70 °C do prečišćavanja.
Prečišćavanje humanih DGK-alfa i DGK-zeta
[1799] Humane DGKα i DGKζ pune dužine, od kojih je svaka eksprimirana da sadrži TVMV-cepajuću C-terminalnu Heksa-His označenu sekvencu (SEK ID BROJEVI: 2 i 4, redom) i proizvedena kako je iznad opisano, su prečišćene iz paste Sf9 bakulovirus-inficiranih ćelija insekta. Ćelije su lizirane primenom postupka azotne kavitacije sa azotnom bombom (Parr Instruments), i lizati su izbistreni centrifugiranjem. Izbistreni lizati su prečišćeni do ~90 % homogenosti, primenom tri sukcesivna koraka kolonske hromatografije na ÄKTA Purifier Plus sistemu. Tri koraka kolonske hromatografije obuhvataju afinitetno hvatanje nikl smolom (tj. HisTrap FF crude, GE Healthcare), praćeno ekskluzionom hromatografijom po veličini (tj. HiLoad 26/600 Superdex 200 prep grade, GE Healthcare za DGK-alfa, i HiPrep 26/600 Sephacril S 300_HR, GE Healthcare za DGK-zeta). Treći stepen je jonoimenjivačka hromatografija, i razlikuje se za dve izoforme. DGKα je postignut primenom izmenjivačke hromatografije anjona Q-Scpharosc (GE Healthcare). DGKζ je postignut primenom izmenjivačke hromatografije katjona SP Sepharose (GE Healthcare). Proteini su isporučeni u koncentracijama od ≥2 mg/mL. Puferi formulacije su bili identični za oba proteina: 50 mM Hepes, pH 7.2, 500 mM NaCl, 10 % v/v glicerol, 1 mM TCEP, i 0.5 mM EDTA.
2. 1L2 test Raji CD4 T ćelija
[1800] IL-2 test u 1536-bunarića je izveden u 4 µL zapremine primenom prethodno aktiviranih CD4 T ćelija i Raji ćelija. Pre testa, CD4 T ćelije su prethodno aktivirane tretmanom sa α-CD3, α-CD28 i PHA pri 1.5 µg/mL, 1 µg/mL, i 10 µg/mL, redom. Raji ćelije su tretirane Stafilokoknim enterotoksinom B (SEB) pri 10,000 ng/mL. Serijski razblažena jedinjenja su prvo preneta u test ploču sa 1536-bunarića (Corning, #3727), praćeno dodavanjem 2 µL prethodno aktiviranih CD4 T ćelija (konačna gustina pri 6000 ćelija/bunarić) i 2 µL SEB-tretiranih Raji ćelija (2000 ćelija/bunarić). Nakon 24 sata inkubacije u inkubatoru pri 37 °C/5% CO2, 4 µl reagensa za detekciju IL-2 je dodato u test ploču (Cisbio, #641L2PEC). Test ploče su očitane na Envision čitaču. Da bi se procenila citotokičnost jedinjenja, ili Raji ili CD4 T ćelije su inkubirane sa serijski razblaženim jedinjenjima. Nakon 24 sati inkubacije, 4 µL Cell Titer Glo (Promega, #G7572) je dodato, i ploče su očitane na Envision čitaču. 50 % efektivna koncentracija (IC50) je izračunata primenom četvoroparamearske logističke formule y = A+((B-A)/(1+((C/x)^D))), gde A i B označavaju minimalni i maksimalni % aktivacije ili inhibicije, redom, C je IC50, D je nagib i x predstavlja koncentraciju jedinjenja.
3. CellTiter-Glo Test CD8 T ćelijske proliferacije
[1801] Zamrznute naivne humane CD8 T ćelije su odmrznute u RPMI+10 % FBS, inkubirane tokom 2 h na 37 °C, i brojane. Ploča sa 384-bunarića za tkivnu kulturu je obložena preko noći na 4 °C sa 20 µl anti-humanog CD3 pri 0.1 µg/mL u običnom RPMI, koji je uklonjen sa ploče pre nego što su 20k/40 µL CD8 T ćelije sa 0.5 µg/ml rastvornog anti-humanog CD28 dodate u svaki bunarić. Jedinjenja su naneta u ćelijsku ploču odmah nakon što su ćelije zasejane. Nakon 72 h inkubacije u inkubatoru na 37 °C, 10 µL CellTiter-glo reagensa (Promega kataloški broj G7570) dodato je u svaki bunarić. Ploča je energično mućkana tokom 5 minuta, inkubirana na sobnoj temperaturi tokom dodatnih 15 minta i očitana na Envision za CD8 T ćelijsku proliferaciju. U analizi, 0.1 µg/mL anti-CD3 i 0.5 µg/mL anti-CD28 stimulisani CD8 T ćelijski signal je bio pozadina. Referentno jedinjenje, 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil) piperazin-1-il)-5-metil-7-nitro-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, pri 3 µM je primenjeno da se podesi 100 % opseg i EC50je bila na apsolutnih 50 % da se normalizuju podaci.
4. DGK AP1-reporterski test
[1802] Jurkat AP1-luciferaza reporter je generisan primenom Cignal Lenti AP1 Reporter (luc) kompleta od SABiosciences (CLS-011L).
[1803] Jedinjenja su preneta iz Echo LDV ploče u pojedinačne bunariće ploče sa 384-bunarića (bela, sa čvrstim dnom, neprozirna PE CulturPlate 6007768) primenom Echo550 instrumenta.
Veličina uzorka je bila 30 nL po bunariću; i jedna odredišna ploča po izvornoj ploči.Suspenzije ćelija su pripremljene prenošenjem 40 mL ćelija (2x 20 mL) u čiste konične epruvete od 50 mL. Ćelije su koncentrovane centrifugiranjem (1200 opm; 5 minuta; ambijentalna temperatura). Supernatant je uklonjen i sve ćelije su suspendovane u RPMI (Gibco 11875) 10 % FBS da se dobije koncentracija 1.35×10<6>ćelija/ml. Ćelije su dodate ručno korišćenjem višekanalne pipete, 30 µL/bunarić suspenzije ćelija u TC ploču sa 384-bunarića koja sadrži jedinjenja, 4.0×10<4>ćelija po bunariću. Ploče sa ćelijama su inkubirane tokom 20 minuta na 37 °C i 5% CO2.
[1804] Tokom inkubacije, rastvori anti-CD3 antitela (aCD3) su pripremljeni mešanjem 3 µL aCD3 (1.3 mg/mL) sa 10 mL medijuma [konačna kone = 0.4 µg/mL]. Dalje, 1.5 µl aCD3 (1.3 mg/mL) je pomešano sa 0.5 mL medijuma [konačna kone = 4 µg/ml]. Nakon 20 minuta, 10 µL medijuma dodato je u sve bunariće u koloni 1, bunarić A do M, i 10 µL aCD3 (4ug/mL) po bunariću je dodato u kolonu 1, redovi N do P za referencu. Zatim primenom višekanalne pipete, dodato je 10 µL aCD3 (0.4ug/mL) po bunariću. aCD3 stimulisane /- jedinjenjem-tretirane ćelije su inkubirane na 37 °C, 5% CO2tokom 6 sati.
[1805] Tokom ovog perioda inkubacije, Steady-Glo (Promega E2520) reagens je polako odmrznut na ambijentalnu temperaturu. Dalje, 20 µL Steady-Glo reagensa po bunariću je dodato korišćenjem Multi-drop Combi-dispenzera. Balončići su uklonjeni centrifugiranjem (2000 opm, ambijentalna temperatura, 10 sec). Ćelije su inkubirane na sobnoj temperaturi tokom 5 minuta. Uzorci su okarakterisani merenjem relativnih svetlosnih jedinica (RLU) primenom instrumenta Envision čitača ploča na protokolu luminescencije. Podaci su analizirani primenom referentnog jedinjenja, 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-1-il)-5-metil-7-nitro-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila, da bi se normalizovala 100 % inhibicija.
5. Test murinskih citotoksičnih T limfocita
[1806] Test antigen-specifičnih citolitičnih T-ćelija (CTL) je razvijen da se funkcionalno proceni sposobnost DGKα i DGKζ inhibitora da poboljšaju aktivnost ubijanja tumorskih ćelija posredovanu efektorskim T ćelijama. CD8+ T-ćelije izolovane iz OT-1 transgenog miša prepoznaju antigen prezentujuće ćelije, MC38, koje prezentuju iz ovalbumina izveden peptid SIINFEKL. Prepoznavanje srodnog antigena inicira citolitičku aktivnost OT-1 antigenspecifičnih CD8+ T ćelija.
[1807] Funkcionalne CTL ćelije su generisane kako sledi: OT-1 splenociti iz 8-12 nedeja starih miševa su izolovani i prošireni u prisustvu SIINFEKL peptida pri 1 µg/mL i mIL2 pri 10 U/mL. Nakon tri dana, svež medijum sa mIL2 U/ml je dodat. Na dan 5 od proširenja, CD8+ T ćelije su izolovane i spremne za upotrebu. Aktivirane CTL ćelije mogu se čuvati zamrznute tokom 6 meseci. Odvojeno, jedan milion MC38 ćelija tumora je pulsirano (tretirano) sa 1 µg/mL SIINFEKL-OVA peptida tokom 3 sata na 37 °C. Ćelije su oprane (3X) svežim medijumom da se ukloni višak peptida. Na kraju, CTL ćelije koje su prethodno tretirane DGK inhibitorom tokom 1 sata u ploči sa 96-bunarića sa dnom u obliku slova U, su kombinovane sa antigenom opterećenim MC38 tumorskim ćelijama u odnosu 1:10. Ćelije su zatim okretane pri 700 opm tokom 5 min i postavljene u inkubator tokom noći na 37 °C. Nakon 24 sata, supernatant je prikupljen za analzu nivoa IFN-γ citokina pomoću AlphaLisa nabavljenim od Perkin Elmer.
6. Test PHA proliferacije
[1808] Fitohemaglutininom (PHA)-stimulisan blastne ćelije iz zamrznutih štokova su inkubirane u RPMI medijumu (Gibco, ThermoFisher Scientific, Waltham, MA) dopunjenom sa 10 % fetalnog goveđeg seruma (Sigma Aldrich, St. Louis, MO) tokom jednog sata pre dodavanja u pojedinačne bunariće ploče sa 384-bunarića (10,000 ćelija bo bunariću). Jedinjenja wsu preneta u pojedinačne bunariće ploče sa 384- bunarića i tretirane ćelije su održavane na 37 °C, 5% CO2tokom 72 h u medijumu za kultivaciju koji sadrži humani IL2 (20 ng/mL) pre merenja rasta primenom MTS reagensa [3-(4,5-dimetil-2-il)-5-(3-karboksimetoksifenil)-2-(4-sulfofenil)-2H-tetrazolijum] prateći instrukcije proizvođača (Promega, Madison, WI). Procentualna inhibicija je izračunata poređenjem vrednosti između IL2 stimulisane (0 % inhibicija) i nestimulisane kontrole (100 % inhibicija). Određivanja koncentracije inhibicije (IC50) su izračunata na osnovu 50 % inhibicije višestruke-indukcije između IL2 stimulisanih i nestimulisanih tretmana.
7. Test IFN-γ humanih CD8 T ćelija
[1809] Zamrznute naivne humane CD8 T ćelije su odmrznute u AIM-V medijumu, inkubirane tokom 2 h na 37 °C, i brojane. Ploča sa 384-bunarića za tkivnu kulturu je obložena preko noći na 4 °C sa 20 µL anti-humanog CD3 pri 0.05 µg/mL u PBS-u, koji je uklonjen iz ploče pre nego što je 40,000 ćelija po 40 mikrolitara CD8 T ćelija sa 0.1 µg/mL rastvornog anti-humanog CD28 dodato u svaki bunarić. Jedinjenja su preneta korišćenjem Echo hendlera (aparata) za tečnost u ploču za ćelijeodmah nakon što su ćelije zasejane. Nakon 20 h inkubacije u inkubatoru na 37 °C, 3 mikrolitra po bunariću supernatanata je preneto u novu belu test ploču sa 384-bunarića za merenje citokina.
[1810] Interferon-y (IFN-γ je kvantifikovan primenom AlphLISA kompleta (kat#AL217) kako je opisano u proizvođačkom uputstvu (Perkin Elmer). Brojanja za svaki bunarić su konvertovana u IFN-y koncentraciju (pg/mL). Vrednosti EC50za jedinjenja su određene postavkom 0.05 µg/mL anti-CD3 plus 0.1 µg/mL anti-CD28 kao osnovne vrednosti, a kostimulacije 3 µM referentnog jedinjenja, 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil) piperazin-1-il)-5-metil-7-nitro-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila, sa anti-CD3 plus anti-CD28 kao 100 % aktivacije.
8. Test pERK humanih CD8 T ćelija
[1811] Zamrznute naivne humane CD8 T ćelije su odmrznute u AIM-V medijumu, inkubirane tokom 2 h na 37 °C, i brojane. CD8 pozitivne T ćelije su dodate u ploču sa 384-bunarića za tkivnu kultivaciju pri 20,000 ćelija po bunariću u AIM-V medijum. Jedno jedinjenje je dodato u svaki bunarić, zatim za zrnca vezani anti-humani CD3 i anti-CD28 mAt su dodati u konačnoj koncentraciji od 0.3 µg/mL. Ćelije su inkubirane na 37 °C tokom 10 minuta. Reakcija je zaustavljena dodavanjem pufera za lizu iz AlphaLISA Surefire kompleta. (Perkin Elmer, kat# ALSU-PERK-A). Lizat (5 µL po bunariću) je prenet u novu belu test ploču sa 384-bunarića za merenje pERK aktivacije.
[1812] EC50jedinjenja je određena postavkom anti-CD3 plus anti-CD28 kao osnovne vrednosti, a ko-stimulacije 3 µM 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-1-il)-5-metil-7-nitro-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila sa anti-CD3 plus anti-CD28 kao 100 % aktivacije.
9. Test IFN-y humane pune krvi
[1813] Humana venska puna krv (22.5 µL po bunariću), dobijena od zdravih donora, je prethodno tretirana jedinjenjima tokom jednog sata na 37 °C u vlažnom inkubatoru sa 95% vazduha/5% CO2. Krv je stimulisana sa 2.5 µL anti-human CD3 i anti-CD28 mAb u konačnoj koncentraciji od 1 µg/mL svaki tokom 24 sata na 37 °C. IFN-y u supernatantima je meren primenom AlphLISA kompleta (kat# AL217).
[1814] EC50jedinjenja određena postavkom anti-CD3 plus anti-CD28 kao osnovne vrednosti, i ko-stimulacije 3 µM referentnog jedinjenja, 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil) piperazin-1-il)-5-metil-7-nitro-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitrila, sa anti-CD3 plus anti-CD28 kao 100 % aktivacije.
[1815] Tabela 1 prikazuje vrednosti in vitro DGK inhibicione IC50aktivnosti merene u testovima DGKα i DGKζ lipozoma (LIPGLO).
[1816] Jedinjenja iz predmetnog pronalaska poseduju aktivnost kao inhibitori) jednog ili oba DGKα i DGKζ enzima, i stoga, mogu se koristiti u lečenju bolesti koje su u vezi sa inhibicijom DGKα i DGKζ aktivnosti.
Nukleotidna sekvenca koja kodira hDGKα-(M1-S735)-Ct-TVMV-His:
Aminokiselinska sekvenca od hDGKα-(M1-S735)-Ct-TVMV-His:
Nukleotidna sekvenca koja kodira hDGKζ-(M1-A928)-transkript varijantu-2 Ct-TVMV-His:
Aminokiselinska sekvenca hDGKζ-(M1-A928)-transkript varijante-2 Ct-TVMV-His:

Claims (16)

  1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje formule (I):
    ili njegova so, pri čemu: R1je H, F, Cl, Br, -CN, C1-3alkil supstituisan sa nula do 4 R1a, C3-4cikloalkil supstituisan sa nula do 4 R1a, C1-3alkoksi supstituisan sa nula do 4 R1a, -NRaRa, -S(O)nRe, ili -P(O)ReRe; svako R1aje nezavisno F, Cl, -CN, -OH, -OCH3, ili -NRaRa; svako Raje nezavisno H ili C1-3alkil; svako Reje nezavisno C3-4cikloalkil ili C1-3alkil supstituisan sa nula do 4 R1a; R2je H, C1-3alkil supstituisan sa nula do 4 R2a, ili C3-4cikloalkil supstituisan sa nula do 4 R2a; svako R2aje nezavisno F, Cl, -CN, -OH, -O(C1-2alkil), C3-4cikloalkil, C3-4alkenil, ili C3-4alkinil; R3je H, F, Cl, Br, -CN, C1-3alkil, C1-2fluoroalkil, C3-4cikloalkil, C3-4fluorocikloalkil, ili -NO2; R4je -CH2R4a, -CH2CH2R4a, -CH2CHR4aR4d, -CHR4aR4b, ili -CR4aR4bR4c; R4ai R4bsu nezavisno: (i) C1-6alkil supstituisan sa nula do 4 supstituenta nezavisno odabrana od F, Cl, -CN, -OH, -OCH3, -SCH3, C1-3fluoroalkoksi, -NRaRa, -S(O)2Re, ili -NRaS(O)2Re; (ii) C3-6cikloalkil, heterociklil, fenil, ili heteroaril, svaki supstituisan sa nula do 4 supstituenta nezavisno odabrana od F, Cl, Br, -CN, -OH, C1-6alkila, C1-3fluoroalkila, C1-4hidroksialkila, -(CH2)1-2O(C1-3alkil), C1-4alkoksi, -O(C1-4hidroksialkil), -O(CH)1- 3O(C1-3alkil), C1-3fluoroalkoksi, -O(CH)1-3NRcRc, -OCH2CH=CH2, -OCH2C≡CH, -C(O)(C1-4alkil), -C(O)OH, -C(O)O(C1-4alkil), -NRcRc, -NRaS(O)2(C1-3alkil), -NRaC(O)(C1-3alkil), -NRaC(O)O(C1-4alkil), -P(O)(C1-3alkil)2, -S(O)2(C1-3alkil), -O(CH2)1-2(C3-6cikloalkil), -O(CH2)1-2(morfolinil), ciklopropila, cijanociklopropila, metilazetidinila, acetilazetidinila, (terc-butoksikarbonil)azetidinila, triazolila, tetrahidropiranila, morfolinila, tiofenila, metilpiperidinila, i Rd; ili (iii) C1-4alkil supstituisan sa jednom cikličnom grupom odabranom od C3-6cikloalkila, heterociklila, arila, i heteroarila, navedena ciklična grupa supstituisana sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabrana od F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-6alkila, C1-3fluoroalkila, C1-3alkoksi, C1-3fluoroalkoksi, -OCH2CH=CH2, -OCH2C≡CH, -NRcRc, -NRaS(O)2(C1- 3alkil), -NRaC(O)(C1-3alkil), -NRaC(O)O(C1-4alkil), i C3-6cikloalkila; ili R4ai R4bzajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani formiraju C3-6cikloalkil ili 3- do 6-člani heterociklil, svaki supstituisan sa nula do 3 Rf; svako Rfje nezavisno F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-6alkil, C1-3fluoroalkil, C1-3alkoksi, C1- 3fluoroalkoksi, -OCH2CH=CH2, -OCH2C≡CH, -NRcRc, ili ciklična grupa odabrana od C3-6cikloalkila, 3- do 6-članog heterociklila, fenila, monocikličnog heteroarila, i bicikličnog heteroarila, svaka ciklična grupa supstituisana sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabrana od F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-6alkila, C1-3fluoroalkila, C1-3alkoksi, C1-3fluoroalkoksi, i -NRcRc; R4cje C1-6alkil ili C3-6cikloalkil, svaki supstituisan sa nula do 4 supstituenta nezavisno odabrana od F, Cl, -OH, C1-2alkoksi, C1-2fluoroalkoksi, i -CN; R4dje -OCH3; svako Rcje nezavisno H ili C1-2alkil; Rdje fenil supstituisan sa nula do 1 supstituentom odabranim od F, Cl, -CN, -CH3, i -OCH3; svako R5je nezavisno -CN, C1-6alkil supstituisan sa nula do 4 Rg, C2-4alkenil supstituisan sa nula do 4 Rg, C2-4alkinil supstituisan sa nula do 4 Rg, C3-4cikloalkil supstituisan sa nula do 4 Rg, fenil supstituisan sa nula do 4 Rg, oksadiazolil supstituisan sa nula do 3 Rg, piridinil supstituisan sa nula do 4 Rg, -(CH2)1-2(heterociklil supstituisan sa nula do 4 Rg), -(CH2)1-2NRcC(O)(C1-4alkil), -(CH2)1-2NRcC(O)O(C1-4alkil), -(CH2)1-2NRcS(O)2(C1-4alkil), -C(O)(C1-4alkil), -C(O)OH, -C(O)O(C1-4alkil), -C(O)O(C3- 4cikloalkil), -C(O)NRaRa, ili -C(O)NRa(C3-4cikloalkil); svako Rgje nezavisno F, Cl, -CN, -OH, C1-3alkoksi, C1-3fluoroalkoksi, -O(CH2)1-2O(C1-2alkil), ili -NRcRc; m je 1, 2, ili 3; i n je nula, 1, ili 2.
  2. 2. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 ili njegova so, pri čemu: R1je H, F, Cl, Br, -CN, C1-3alkil supstituisan sa nula do 4 R1a, ciklopropil supstituisan sa nula do 3 R1a, C1-3alkoksi supstituisan sa nula do 3 R1a, -NRaRa, -S(O)nCH3, ili -P(OXCH3)2; svako R1aje nezavisno F, Cl, ili -CN; svako Raje nezavisno H ili C1-3alkil; R2je H ili C1-2alkil supstituisan sa nula do 2 R2a; svako R2aje nezavisno F, Cl, -CN, -OH, -O(C1-2alkil), ciklopropil, C3-4alkenil, ili C3-4alkinil; R3je H, F, Cl, Br, -CN, C1-2alkil, -CF3, ciklopropil, ili -NO2; R4ai R4bsu nezavisno: (i) C1-4alkil supstituisan sa nula do 4 supstituenta nezavisno odabrana od F, Cl, -CN, -OH, -OCH3, -SCH3, C1-3fluoroalkoksi, i -NRaRa; (ii) C3-6cikloalkil, heterociklil, fenil, ili heteroaril, svaki supstituisan sa nula do 4 supstituenta nezavisno odabrana od F, Cl, Br, -CN, -OH, C1-6alkila, C1-3fluoroalkila, -CH2OH, -(CH2)1-2O(C1-2alkil), C1-4alkoksi, -O(C1-4hidroksialkil), -O(CH)1-2O(C1-2alkil), C1-3fluoroalkoksi, -O(CH)1-2NRcRc, -OCH2CH=CH2, -OCH2C≡CH, -C(O)(C1-4alkil), -C(O)OH, -C(O)O(C1-4alkil), -NRcRc, -NRaS(O)2(C1-3alkil), -NRaC(O)(C1-3alkil), -NRaC(O)O(C1-4alkil), -P(O)(C1-2alkil)2, -S(O)2(C1-3alkil), -O(CH2)1-2(C3- 4cikloalkil), -O(CH2)1-2(morfolinil), ciklopropila, cijanociklopropila, metilazetidinila, acetilazetidinila, (terc-butoksikarbonil)azetidinila, triazolila, tetrahidropiranila, morfolinila, tiofenila, metilpiperidinila, i Rd; ili (iii) C1-3alkil supstituisan sa jednom cikličnom grupom odabranom od C3-6cikloalkila, heterociklila, fenila, i heteroarila, navedena ciklična grupa supstituisana sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabrana od F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-3alkila, C1-2fluoroalkila, C1-3alkoksi, C1-2fluoroalkoksi, -OCH2CH=CH2, -OCH2C≡CH, -NRcRc, -NRaS(O)2(C1- 3alkil), -NRaC(O)(C1-3alkil), -NRaC(O)O(C1-4alkil), i C3-4cikloalkila; ili R4ai R4bzajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, formiraju C3-6cikloalkil ili 3- do 6-člani heterociklil, svaki supstituisan sa nula do 3 Rf; svako Rfje nezavisno F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-4alkil, C1-2fluoroalkil, C1-3alkoksi, C1- 2fluoroalkoksi, -OCH2CH=CH2, -OCH2C≡CH, -NRcRc, ili ciklična grupa odabrana od C3-6cikloalkila, 3- do 6-članog heterociklila, fenila, monocikličnog heteroarila, i bicikličnog heteroarila, svaka ciklična grupa supstituisana sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabrana od F, Cl, Br, -OH, -CN, C1-4alkila, C1-2fluoroalkila, C1-3alkoksi, C1-2fluoroalkoksi, i -NRcRc; R4cje C1-4alkil ili C3-6cikloalkil, svaki supstituisan sa nula do 4 supstituenta nezavisno odabrana od F, Cl, -OH, C1-2alkoksi, C1-2fluoroalkoksi, i -CN; i svako R5je nezavisno -CN, C1-5alkil supstituisan sa nula do 4 Rg, C2-3alkenil supstituisan sa nula do 4 Rg, C2-3alkinil supstituisan sa nula do 4 Rg, C3-4cikloalkil supstituisan sa nula do 4 Rg, fenil supstituisan sa nula do 3 Rg, oksadiazolil supstituisan sa nula do 3 Rg, piridinil supstituisan sa nula do 3 Rg, -(CH2)1-2(heterociklil supstituisan sa nula do 4 Rg), -(CH2)1-2NRcC(O)(C1-4alkil), -(CH2)1-2NRcC(O)O(C1-4alkil), -(CH2)1- 2NRcS(O)2(C1-4alkil), -C(O)(C1-4alkil), -C(O)OH, -C(O)O(C1-4alkil), -C(O)O(C3- 4cikloalkil), -C(O)NRaRa, ili -C(O)NRa(C3-4cikloalkil).
  3. 3. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 ili njegova so, pri čemu: R1je H, Cl, Br, -CN, ili -OCH3; R2je -CH3; R3je H, F, Cl, Br, -CN, -CH3, ciklopropil, ili -NO2; R4je -CH2R4a, -CH2CH2R4a, -CH2CHR4aR4d, ili -CHR4aR4b; R4aje fenil, piridinil, pirimidinil, pirazinil, piridazinil, pirazolil, imidazolil, izoksazolil, izotiazolil, oksazolil, oksadiazolil, tetrazolil, tiadiazolil, tiazolil, triazolil, tiofenil, tetrahidropiranil, dihidrobenzo[b][1,4]dioksinil, dihidrobenzo[b][1,4]dioksepinil, dihidrobenzofuranil, benzo[d]izoksazolil, benzoksazinil, benzoksazinonil, indazolil, indolil, benzo[d][1,3]dioksolil, pirazolo[1,5-a]piridinil, dioksidotetrahidrotiopiranil, hinolinil, ili naftiridinil, svaki supstituisan sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabrana od F, Cl, Br, -CN, -OH, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -C(CH3)3, -CHF2, -CF3, -CH2OH, -CH2OCH3, -OCH3, -OCH2CH3, -OCH(CH3)2, -OC(CH3)3, -OCH2C(CH3)2OH, -OCH2CH2OCH3, -OCHF2, -OCF3, -OCH2CH2N(CH3)2, -C(O)CH3, -C(O)C(CH3)3, -C(O)OH, -C(O)OCH3, -C(O)OC(CH3)3, -N(CH3)2, -P(OXCH3)2, -S(O)2CH3, -OCH2(ciklopropil), -OCH2CH2(ciklopropil), -OCH2CH2(morfolinil), ciklopropila, cijanociklopropila, metilazetidinila, acetilazetidinila, (terc-butoksikarbonil)azetidinila, triazolila, tetrahidropiranila, morfolinila, fenila, fluorofenila, cijanofenila, tiofenila, fluorofenila, i metilpiperidinila; R4bje: (i) -CH3, -CH2CH3, -CH2CH2CH3, -C(CH3)3, -CH2F, -CF3, -CH2OH, -C(CH3)2OH, -CH2OCH3, -CH2OCHF2, -CF2CH2OH, -CF2CH2OCH3, -CH2SCH3, ciklopropil, -CH2(cikloheksil), ili -CH2(ciklopropil-oksadiazolil); ili (ii) fenil, piridinil, pirimidinil, pirazinil, piridazinil, pirazolil, imidazolil, izoksazolil, izotiazolil, oksazolil, oksadiazolil, tetrazolil, tiadiazolil, tiazolil, triazolil, tiofenil, tetrahidropiranil, dihidrobenzo[b][1,4]dioksinil, dihidrobenzo[b][1,4]dioksepinil, dihidrobenzofuranil, benzo[d]izoksazolil, benzoksazinil, benzoksazinonil, indazolil, indolil, benzo[d][1,3]dioksolil, pirazolo[1,5-a]piridinil, dioksidotetrahidrotiopiranil, hinolinil, ili naftiridinil, svaki supstituisan sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabrana od F, Cl, Br, -CN, -OH, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -C(CH3)3, -CHF2, -CF3, -CH2OH, -CH2OCH3, -OCH3, -OCH2CH3, -OCH(CH3)2, -OC(CH3)3, -OCH2C(CH3)2OH, -OCH2CH2OCH3, -OCHF2, -OCF3, -OCH2CH2N(CH3)2, -C(O)CH3, -C(O)C(CH3)3, -C(O)OH, -C(O)OCH3, -C(O)OC(CH3)3, -N(CH3)2, -P(OXCH3)2, -S(O)2CH3, -OCH2(ciklopropil), -OCH2CH2(ciklopropil), -OCH2CH2(morfolinil), ciklopropila, cijanociklopropila, metilazetidinila, acetilazetidinila, (terc-butoksikarbonil)azetidinila, triazolila, tetrahidropiranila, morfolinila, fenila, fluorofenila, cijanofenila, tiofenila, fluorofenila, i metilpiperidinila; ili R4ai R4bzajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani formiraju ciklopropil supstituisan sa fluorofenilom; svako R5je nezavisno -CN, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2F, -C(CH3)2F, -CF(CH3)CH(CH3)2, -CH2CN, -CH2OH, -C(CH3)2OH, -C(CH3)(OH)CH(CH3)2, -CH2OCH3, -CH2OCH2CH3, -CH2OCHF2, -CH2OCH2CH2OCH3, -CH2N(CH3)2, -CH2NHC(O)CH3, -CH2NHC(O)OCH3, -CH2NHS(O)2CH3, -C(O)C(CH3)2, -CH2(hidroksiazetidinil), -CH2(morfolinil), -CH2(metilpiperazinil), -C(O)OH, -C(O)OCH3, -C(O)OC(CH3)2, -C(O)NH2, -C(O)NH(ciklopropil), -C(O)O(ciklopropil), ciklopropil, fenil, metiloksadiazolil, ili metilpiridinil; i m je 1 ili 2.
  4. 4. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 ili njegova so, pri čemu: R4je -CH2R4a, -CD2R4a, ili -CH2CH2R4a; i R4aje fenil, piridinil, tetrahidropiranil, benzoksazinil, benzo[d][1,3]dioksolil, benzoksazinonil, indazolil, indolil, ili hinolinil, svaki supstituisan sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabrana od F, Cl, Br, -CN, -OH, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -C(CH3)3, -CHF2, -CF3, -OCH3, -OCH2CH3, -OCH(CH3)2, -OCHF2, -OCF3, -C(O)CH3, -C(O)OC(CH3)3, -N(CH3)2, cijanociklopropila, i fenila.
  5. 5. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 ili njegova so, pri čemu: R4je -CHR4aR4b, -CDR4aR4b, ili -CH2CHR4aR4d; R4aje fenil, piridinil, dihidrobenzofuranil, benzodioksolil, izoksazolil, naftiridinil, hinolinil, ili tiazolil, svaki supstituisan sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabrana od F, Cl, Br, -CN, -OH, -CH3, -CF3, -OCH3, -OCHF2, -OCF3, -C(O)OH, -C(O)OCH3, i ciklopropila; R4bje -CH3, -CH2CH3, -CH2CH2CH3, -C(CH3)3, -CH2F, -CF3, -CH2OH, -C(CH3)2OH, -CH2OCH3, -CH2OCHF2, -CF2CH2OH, -CF2CH2OCH3, -CH2SCH3, ciklopropil, -CH2(cikloheksil), ili -CH2(ciklopropil-oksadiazolil); i R4dje -OCH3.
  6. 6. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 ili njegova so, pri čemu: R4je -CHR4aR4bili -CHR4bCH2R4a; R4ai R4bsu nezavisno fenil, piridinil, pirimidinil, pirazinil, piridazinil, pirazolil, imidazolil, izoksazolil, izotiazolil, oksazolil, oksadiazolil, tetrazolil, tiadiazolil, tiazolil, triazolil, tiofenil, tetrahidropiranil, dihidrobenzo[b][1,4]dioksinil, dihidrobenzo[b][1,4]dioksepinil, dihidrobenzofuranil, benzo[d]izoksazolil, benzoksazinil, benzoksazinonil, indazolil, indolil, benzo[d][1,3]dioksolil, pirazolo[1,5-a]piridinil, dioksidotetrahidrotiopiranil, hinolinil, ili naftiridinil, svaki supstituisan sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabrana od F, Cl, Br, -CN, -OH, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -C(CH3)3, -CHF2, -CF3, -CH2OH, -CH2OCH3, -OCH3, -OCH2CH3, -OCH(CH3)2, -OC(CH3)3, -OCH2C(CH3)2OH, -OCH2CH2OCH3, -OCHF2, -OCF3, -OCH2CH2N(CH3)2, -C(O)CH3, -C(O)C(CH3)3, -C(O)OH, -C(O)OCH3, -C(O)OC(CH3)3, -N(CH3)2, -P(OXCH3)2, -S(O)2CH3, -OCH2(ciklopropil), -OCH2CH2(ciklopropil), -OCH2CH2(morfolinil), ciklopropila, cijanociklopropila, metilazetidinila, acetilazetidinila, (terc-butoksikarbonil)azetidinila, triazolila, tetrahidropiranila, morfolinila, fenila, fluorofenila, cijanofenila, tiofenila, fluorofenila, i metilpiperidinila.
  7. 7. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 ili njegova so, pri čemu: R4je -CHR4aR4b: R4aje fenil ili piridinil, svaki supstituisan sa nula do 2 supstituenta nezavisno odabrana od F, Cl, Br, -CN, -CH3, i -OCF3; i R4bje fenil, piridinil, pirimidinil, pirazinil, piridazinil, pirazolil, imidazolil, izoksazolil, izotiazolil, oksazolil, oksadiazolil, tetrazolil, tiadiazolil, tiazolil, triazolil, tiofenil, tetrahidropiranil, dihidrobenzo[b][1,4]dioksinil, dihidrobenzo[b][1,4]dioksepinil, dihidrobenzofuranil, benzo[d]izoksazolil, benzoksazinil, benzoksazinonil, indazolil, indolil, benzo[d][1,3]dioksolil, pirazolo[1,5-a]piridinil, dioksidotetrahidrotiopiranil, hinolinil, ili naftiridinil, svaki supstituisan sa nula do 3 supstituenta nezavisno odabrana od F, Cl, Br, -CN, -OH, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -C(CH3)3, -CHF2, -CF3, -CH2OH, -CH2OCH3, -OCH3, -OCH2CH3, -OCH(CH3)2, -OC(CH3)3, -OCH2C(CH3)2OH, -OCH2CH2OCH3, -OCHF2, -OCF3, -OCH2CH2N(CH3)2, -C(O)CH3, -C(O)C(CH3)3, -C(O)OH, -C(O)OCH3, -C(O)OC(CH3)3, -N(CH3)2, -P(OXCH3)2, -S(O)2CH3, -OCH2(ciklopropil), -OCH2CH2(ciklopropil), -OCH2CH2(morfolinil), ciklopropila, cijanociklopropila, metilazetidinila, acetilazetidinila, (terc-butoksikarbonil)azetidinila, triazolila, tetrahidropiranila, morfolinila, fenila, fluorofenila, cijanofenila, tiofenila, fluorofenila, i metilpiperidinila.
  8. 8. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 ili njegova so, koji imaju strukturu:
    pri čemu: (i) R5aje -CN, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2F, -CH2OH, -C(O)OH, -C(O)OCH3, -C(O)NH2, ciklopropil, -C(O)NH(ciklopropil), ili fenil, i R5b, R5c, i R5dsu svako H; (ii) R5aje ciklopropil, R5bje H, R5cje ciklopropil, i R5dje H; (iii) R5bje -CN, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2F, -C(CH3)2F, -CF(CH3)CH(CH3)2, -CH2OH, -C(CH3)2OH, -CH2OCH3, -C(O)OH, -C(O)OCH3, -C(O)C(CH3)2, -C(O)OCH3, -C(O)OC(CH3)2, -C(O)NH2, -C(CH3)OH)CH(CH3)2, -C(O)NH(ciklopropil), -C(O)O(ciklopropil), ili metiloksadiazolil, i R5a, R5c, i R5dsu svako H; (iv) R5bje -CH3ili metilpiridinil, R5cje -CH3, i R5ai R5dsu svako H; (v) R5aje -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2OH, ili -CH2OCH3, R5cje -CH3, i R5bi R5dsu svako H; ili (vi) R5aje -CH3, R5bje -CH3ili -CH2OCF2, i R5ci R5dsu svako H; (vii) R5aje -CH3, R5cje -CH2CH3, -CH2CN, -CH2OH, -CH2OCH3, -CH2OCH2CH3, -CH2OCH2CH2OH3, -CH2N(CH3)2, -CH2NHC(O)CH3, -CH2NHC(O)OCH3, -CH2NHS(O)2CH3, -CH2(morfolinil), -CH2(hidroksiazetidinil), ili -CH2(metilpiperazinil), i R5bi R5dsu svako H; ili (viii) R5aje -CH2CH3, R5cje -CH2CH3ili -CH2OCH3, i R5bi R5dsu svako H.
  9. 9. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 4 ili njegova so, pri čemu: R1je Cl, -CN, ili -OCH3; R2je -CH3; i R3je H, F, Cl, ili -CN.
  10. 10. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 ili njegova so, koji imaju strukturu:
    pri čemu: R1je -CN; R2je -CH3; R3je H, F, ili -CN; R4je:
  11. 11. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 ili njegova so, pri čemu navedeno jedinjenje je: 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(hidroksimetil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1-2); 8-((2S,5R)-4-(bis(4-fluorofenil) metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (3); 8-((2R,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (4); 4-((2R,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril (5); 8-((2R,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (6); 4-((2R,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril (7); 8-(4-(bis(4-fluorofenil) metil)-3-(fluorometil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (8); 4-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(fluorometil)piperazin-1 -il)-6-bromo-1 -metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril (9); (S)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-izopropilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (10); (S)-4-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3izopropilpiperazin-1-il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril (11); (S)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-izopropilpiperazin--il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (12); (S)-4-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-izopropilpiperazin-1-il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril (13); 4-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(hidroksimetil)piperazin-1-il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril (14); 4-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(hidroksimetil)piperazin-1 -il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril (15-16); 4-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(hidroksimetil)piperazin-1-il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril (17); 8-((2S,5R)-4-(bis(4-fluorofenil) metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-7-hloro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (18); 8-((2S,SR)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-7-bromo-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (19); 8-((2S,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-7-ciklopropil-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (20); 8-((2S,SR)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-7-bromo-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (21); 8-((2S,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5,7-dimetil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (22); 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-ciklopropilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (23-24); 8-((2S,5R)-4-(bis(4-hlorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (25); 8-((2S,5R)-4-(bis(4-hlorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-7-hloro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (26); metil 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat (27); (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (28); (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-7-hloro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (29); (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-7-fluoro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (30); (R)-4-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-6-bromo- 1-metil-2-okso- 1,2-dihidro- 1,5-naftiridin-3-karbonitril (31); (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (32); (R)-8-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (33); (R)-8-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-7-fluoro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (34); (S)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (35); (S)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-7-hloro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5naftiridin-2-karbonitril (36); (S)-4-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril (37); (S)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (38); metil 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il) piperazin-2-karboksilat (39-40); 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksamid (41-42); 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-cijanopiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (43); 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-cijanopiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (44-45); 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-N-ciklopropilpiperazin-2-karboksamid (46-48); metil 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-bromo-3-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat (49); metil 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(3,6-dicijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat (50-51); 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-bromo-3-cijano- 1-metil-2-okso- 1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilna kiselina (52); 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(3,6-dicijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilna kiselina (53-54); 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilna kiselina (55); 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-bromo-3-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksamid (56); 1-(bis (4-fluorofenil)metil)-4-(3,6-dicijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksamid (57-58); 1-(bis(4-fluorofenil) metil)-4-(6-bromo-3-cijano-1-metil-2-okso- 1,2-dihidro- 1,5-naftiridin-4-il)-N-ciklopropilpiperazin-2-karboksamid (59); 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-N-ciklopropil-4-(3,6-dicijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il) piperazin-2-karboksamid (60-61); izopropil 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat (62-63); izopropil 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(3,6-dicijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat (64-65); metil (S)-1-(bis(4-fluorofenil) metil)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat (66); metil 4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-1-((4-fluoro-2-metoksifenil)(4-fluorofenil)metil)piperazin-2-karboksilat (67-68); metil 4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-1-((4-fluoro-2-metoksifenil)(4-fluorofenil)metil)piperazin-2-karboksilat (69-70); metil 4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-1-((4-fluoro-2-metoksifenil)(4-fluorofenil)metil)piperazin-2-karboksilat (71-72); metil 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1 -metil-3-nitro-2-okso-1,2dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat (73); metil 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-3-fluoro- 1-metil-2-okso-1,2-dihidro- 1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat (74-75); metil 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(3-hloro-6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat (76-77); 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(2-hidroksipropan-2-il)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (78-79); 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(2-fluoropropan-2-il)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (80-81); 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metil-5-(2-metilpiridin-4-il) piperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (84); 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-izobutirilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (86-87); 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(2-hidroksi-3-metilbutan-2-il)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (88-89); 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(2-fluoro-3-metilbutan-2-il)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA (90-91); 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(metoksimetil)piperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (92-93); metil 1-(bis(4-hlorofenil)metil)-4-(6-cijano-3-fluoro-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat (94-95); metil 1-(bis(4-hlorofenil) metil)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat (96-97); (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-7-bromo-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (98); (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5,7-dimetil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (99); 8-(4-(bis (4-fluorofenil)metil)-3-(hidroksimetil)piperazin-1-il)-7-hloro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (100-101); (R)-4-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1 -il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril (102); (R)-8-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (103); (R)-8-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, dimetilformamid (104); (R)-8-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-7-hloro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, dimetilformamid (105); ciklopropil 1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat (106-107); 8-((2S,5R)-4-((4-fluoro-2-metoksifenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (108-109); 6-bromo-4-((2S,5R)-4-((4-fluoro-2-metoksifenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril (110); 8-((2S,5R)-4-((4-fluoro-2-metoksifenil)4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (111-112); metil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-1-(6-bromo-3-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat (113); metil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-1-(3,6-dicijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il) piperazin-2-karboksilat (114); metil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-1-(6-bromo-3-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat (115); metil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-1-(3,6-dicijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1 ,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat (116-117); 4-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-(hidroksimetil)piperazin-1-il)-6-bromo- 1-metil-2-okso- 1,2-dihidro- 1,5-naftiridin-3-karbonitril (118); 8-((2R,5S)-4-((4-fluoro-2-metoksifenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (119); 8-((2R,5S)-4-((4-fluoro-2-metoksifenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-7-nitro-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (120); 8-((2S,5R)-4-((4-fluoro-2-metoksifenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-7-nitro-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (121-122); 8-(4-(bis(4-fluorofenil) metil)-2,3-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (123-124); 8-((2S,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-izopropil-5-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (125); 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(5-metil-1,3,4-oksadiazol-2-il)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (126); (S)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-etilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (127); (S)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (128); 8-((2S)-4-((4-fluoro-2-metoksifenil)4-fluorofenil)metil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (129-130); 8-((2R,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (131); 8-((2R,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-7-hloro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (132); 8-((2S,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (133); (S)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (134); (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (135); metil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-1-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat (136-137); 4-(bis(4-fluorofenil) metil)-1-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilna kiselina (138); 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-1-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-N-ciklopropilpiperazin-2-karboksamid (139-140); 4-(bis(4fluorofenil)metil)-1-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksamid (141-142); 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-cijanopiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (143-144); 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-cijanopiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (145); 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-(hidroksimetil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (146-148); 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-(fluorometil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (149-151); 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-diciklopropilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (152-153); 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-fenilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (154-156); 8-((2S,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-7-fluoro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (157); 4-((2S,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-6-bromo-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril (158); 8-((2S,5R)-4-(bis(4-fluorofenil) metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (159); 4-((2S,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril (160); 8-((2S,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-7-nitro-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (161); metil 4-(bis(4-fluorofenil)metil)-1-(3-bromo-6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)piperazin-2-karboksilat (162); 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (163); (R)-8-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-izopropilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (167); (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-izopropilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (168); (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-izopropilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (169); (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil) metil)-2-etilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (170); 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3,3-dimetilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (171); (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (172); (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (173); (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-il)-7-fluoro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (174); (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil) metil)-3-etilpiperazin-1-il)-7-hloro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (175); (R)-8-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (176); (R)-8-(4(bis(4-hlorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-il)-7-hloro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (177); (R)-8-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-il)-7-fluoro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (178); (R)-8-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (179); (R)-8-(4-(bis(4-hlorofenil)metil)-3-etilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (180); (R)-8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-izopropilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (181); 8-[(2S,SR)-4-[(4-fluorofenil)(fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (182); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (183-184); 8-[(2S,5R)-4-[1-(4-fluoro-2-metoksifenil)-2,2-dimetilpropil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (185-186); 8-[(2S,SR)-4-[(4-fluorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (187); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (188); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (189-190); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(5-fluoropiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (191-192); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(5-fluoropiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (193-194); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(6-fluoropiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (195-196); (8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(piridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (197-198); 8-[(2S,5R)-4-[(5-hloropiridin-2-il)4-metilfenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (201-202); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(5-hloropiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (201-202); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(6-metilpiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (203-204); 8-[(2S,5R)-4-[(2-etoksipiridin-3-il)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (205-206); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)[2-(propan-2-iloksi)piridin-3-il]metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (207-208); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(2-metoksipiridin-3-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (209-210); 8-[(2S,5R)-4-[(5-hloropiridin-2-il)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (211-212); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(5-metilpiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (213-214); 8-[(2S,5R)-4-[(3-fluorofenil)(5-metilpiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (215-216); 7-hloro-8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (217-218); 3-hloro-4-{4-[(4-fluorofenil)(fenil) metil]piperazin-1-il}-6-metoksi-1-metil-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-2-on (219-220); 8-[(2S,5R)-2,5-dimetil-4-{fenil[4-(trifluorometoksi)fenil]metil}piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (221-222); 8-[(2S,SR)-4-[(4-fluorofenil)(3-metilfenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (223-224); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(2-etil-4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (225-226); 8-[(2S,SR)-4-[(2-etil-4-fluorofenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (227-228); 8-[(2S,5R)-4-[(2-etoksi-4-fluorofenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (229-230); 4-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(2-etil-4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-6-metoksi-1-metil-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-2-on (231-232); 4-[(2S,5R)-4-[(2-etil-4-fluorofenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-6-metoksi-1-metil-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-2-on (233-234); 4-[(2S,5R)-4-[(2-etilfenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-6-metoksi-1-metil-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-2-on (235-236); 8-[(2S,5R)-4-(difenilmetil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (237); 4-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil) (fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-6-metoksi-1-metil-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-2-on (238-239); 4-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-6-metoksi-1-metil-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-2-on (240); 4-[(2S,SR)-4-[bis(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-6-metoksi-1-metil-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-2-on (241); 8-[(2S,5R)-4- {[2-(difluorometil)-4-fluorofenil]metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (242); 8-[(2S,5R)-4- {[2-fluoro-4-(trifluorometoksi)fenil] metil}-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (243); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hloro-2-hidroksifenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (244); 8-[(2S,SR)-4-[(2-hidroksifenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (245); 8-[(2S,5R)-2,5-dimetil-4-[(2,4,6-trifluorofenil)metil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (246); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(4-metilfenil) metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridino-2-karbonitril (247); 8-[(2S,5R)-4-[(3-fluorofenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (248); 8-[(2S,SR)-4-[(3-fluorofenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (249); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(4-metilfenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (250); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(4-metilfenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (251); 8-[(2S,SR)-4-[(4-fluorofenil)(4-metilfenil) metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridino-2-karbonitril (252); 8-[(2S,5R)-4-[(4-cijano-2-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (253); 8-[(2S,5R)-4-{[2-fluoro-6-(trifluorometil)fenil]metil}-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (254); 8-[(2S,5R)-4-[(2-fluoro-6-metilfenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (255); 8-[(2S,5R)-4-[1-(2,6-difluorofenil)etil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (256); 8-[(2S,5R)-4-[bis(3-hlorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (257); 8-[(2S,SR)-4-[bis(2-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (258); 8-[(2S,5R)-4-[(2-hlorofenil)(fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (259); 8-[(2S,5R)-4-[(2-hloro-6-cijanofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (260); 8-[(2S,SR)-4-[(2-hloro-6-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (261); 8-[(2S,5R)-4-[(2,5-difluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (262); 8-[(2S,5R)-4-[(2,6-dihlorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (263); 8-[(2S,SR)-4-benzil-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (264); 8-[(2S,5R)-4-[(2,6-dimetilfenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (265); 8-[(2S,SR)-4-[(2-hloro-3,6-difluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (266); 8-[(2S,5R)-4-[(4-cijano-2,6-difluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2karbonitril (267); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hloro-2,6-difluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (268); 8-[(2S,5R)-4-[(2-cijano-6-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (269); 8-[(2S,SR)-4-[bis(3-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (270); 8-[(2S,5R)-4-[(2,6-difluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (271); 8-[(2S,SR)-4-[(2,6-difluorofenil)(fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (272); 8-[(2S,5R)-4-[(2,6-difluorofenil) (fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA (273); 8-[(2S,5R)-4-[(2,6-difluorofenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (274); 8-[(2S,5R)-4-[(2,6-difluorofenil)(4-fluorofenil) metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (275); 8-[(2S,5R)-4-[(2,3-difluorofenil)(fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (276); 8-[(2S,5R)-4-[(2,4-difluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (277); 8-[(2S,5R)-2,5-dimetil-4-{[6-(trifluorometil)piridin-2-il]metil}piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (278); 8-[(2S,5R)-2,5-dimetil-4-{[2-metil-6-(trifluorometil)piridin-3-il]metil}piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (279); 8-[(2S,5R)-4-{[2-metoksi-6-(trifluorometil) piridin-4-il]metil}-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (280); 8-[(2S,5R)-4- {[2-hloro-6-(trifluorometil)piridin-3-il]metil}-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (281); 8-[(2S,5R)-4-[(3-hlorofenil)(fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (282); 8-[(2S,5R)-4-[(2,4-difluorofenil)(fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (283); 8-[(2S,5R)-4-[(2-fluorofenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (284); 8-[(2S,5R)-4-[(2-fluorofenil)(fenil) metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (285); 8-[(2S,SR)-4-[(2,3-difluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (286); 8-[(2S,5R)-4-[(2-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (287); 8-[(2S,SR)-4-[(3,5-difluorofenil)(fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (288); 8-[(2S,5R)-4-[(3,5-difluorofenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (289); 8-[(2S,5R)-4-[(3,5-difluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (290); 8-[(2S,SR)-4-[(3,4-difluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (291); 8-[(2S,5R)-4-[(3-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (292); 8-[(2S,5R)-4-[(3-fluorofenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (293); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)[4-(trifluorometil)fenil]metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (294); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(4-metilfenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (295); 8-[(2S,SR)-4-[(3-fluorofenil)(fenil) metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (296); 8-[(2S,SR)-4-[(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (297); 8-((2S,5R)-4-((4-hlorofenil)(4-cijanofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (298); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(4-metilfenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (299); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(4-fluorofenil) metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (300); 8-[(2S,SR)-4-[bis(4-metilfenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (301); 8-((2S,5R)-4-((4-hlorofenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (302); 8-((2S,5R)-4-((4-hlorofenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (303); 8-((2S,5R)-4-((2-fluorofenil)(4-fluorofenil) metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (304); 8-((2S,5R)-4-((2-fluorofenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (305); 8-((2S,SR)-4-((4-cijanofenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (306); 8-((2S,5R)-4-((4-cijanofenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (307); 8-((2S,SR)-4-(1-(4-fluorofenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (308-309); 8-((2S,5R)-4-((4-cijanofenil)(p-tolil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril, TFA so (310-311); 8-((3R)-4-((4-fluorofenil)(pirimidin-4-il)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (312-313); 8-((3R)-4-((4-hlorofenil)(2-metilpirimidin-5-il)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (314); 8-((3R)-4-((4-fluorofenil)(2-metilpirimidin-4-il)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (315-316); 8-((3R)-4-((4-fluorofenil)(pirimidin-5-il)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (317-318); 8-((3R)-4-((4-hlorofenil) (pirimidin-4-il)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (319-320); 8-((3R)-4-((2-(terc-butil)pirimidin-4-il)(4-fluorofenil)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (321); 8-((2S,5R)-4-((4-cijanofenil)(p-tolil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-7-fluoro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (322); 8-((2S,5R)-4-((4-hlorofenil)(4-(trifluorometoksi)fenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-7-fluoro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (323-324); 7-fluoro-8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(4-(trifluorometil) fenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (325-326); 8-((2S,5R)-4-((4-cijanofenil)(4-fluorofenil) metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-7-fluoro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (327-328); 8-((2S,5R)-4-((2,6-difluorofenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-7-fluoro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (329 i 336); 7-fluoro-8-((2S,5R)-4-((3-fluorofenil) (4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (330-331); 7-fluoro-8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(p-tolil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (332); 7-fluoro-8-((2S,5R)-4-((2-fluorofenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (333-334); 7-fluoro-8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(p-tolil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (335); 8-((2S,5R)-4-(1-(2,4-difluorofenil)propil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (337-339); 8-[(2S,5R)-5-etil-2-metil-4-[(piridin-2-il)[4-(trifluorometoksi)fenil] metil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (340-341); 8-((2S,5R)-5-etil-2-metil-4-(piridin-2-il(4-(trifluorometoksi)fenil) metil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (342-343); 8-((2S,5R)-4-(1-(3,4-difluorofenil)propil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (344); 8-((2R,5S)-2,5-dimetil-4-(1-(4-(trifluorometil)fenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (345-346); 8-((2S,5R)-4-(1-(2,4-difluorofenil) propil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (347-349); 8-((2S,5R)-4-((5-etilpiridin-2-il)(3-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (350-351); 8-((2S,5R)-4-(2-metoksi-4-(trifluorometoksi)benzil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (352); 8-((2S,5R)-4-(1-(5-hloro-2,3-dihidrobenzofuran-7-il)propil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (353 i 356-357); 8-((2S,5R)-4-((5-etilpiridin-2-il)(3-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (354); 8-((2S,5R)-4-((3-hlorofenil)(5-etilpiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (355); 8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (358-359); 8-((2S,SR)-4-((4-cijanofenil)(5-metilpiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (360-361); 8-((2S,5R)-4-((4-hlorofenil)(4-metilpiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (362 i 364); 8-((2S,SR)-4-((4-hlorofenil)(5-metilpiridin-2-il) metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (363-365); 8-((2S,5R)-4-((3,4-difluorofenil)(piridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (366); 8-((2S,5R)-4-((6-fluoropiridin-2-il)(4-(trifluorometoksi)fenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (367-368); 8-((2S,5R)-4-((3-hlorofenil)(5-metilpiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (369); 8-((2S,5R)-4-((3-fluorofenil)(5-(trifluorometil)piridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (370-371); 8-((2S,5R)-4-((3-hlorofenil)(5-metilpiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (372); 8-((2S,SR)-4-((3-hloro-4-metilfenil)(5-metilpiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (373 i 380); 8-((2S,SR)-4-((3-fluorofenil)(piridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (374 i 379); 8-((2S,5R)-4-((3,4-difluorofenil)(piridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (375-376); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-(piridin-2-il(4-(trifluorometoksi)fenil) metil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (377-378); 8-((2S,5R)-4-((4-hlorofenil)(piridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (381 i 382); 8-((2S,SR)-4-((4-fluorofenil)(piridazin-3-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (383-384); 8-((2S,5R)-4-((4-hlorofenil)(2-metilpirimidin-5-il)metil)2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (385); 8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil) (5-fluoropiridin-3-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (386); 8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (387-388); 8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(2-metilpirimidin-4-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (389); 8-((2S,SR)-4-((3-fluorofenil)(6-metilpiridin-3-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (390); 8-((2S,5R)-4-((5-fluoropiridin-3-il)(ptolil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (391); 8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(pirimidin-4-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (392); 8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(pirimidin-5-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (393-394); 8-((2S,5R)-4-((3-fluorofenil)(6-metilpiridin-3-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (395); 8-((2S,SR)-4-((4-hlorofenil)(pirimidin-4-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (396-397); 8-((2S,SR)-4-((3-hlorofenil)(5-metilpiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (398); 8-((2S,SR)-4-((3-hloro-4-metilfenil)(5-metilpiridin-2-il) metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (399); 8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(5-fluoropiridin-3-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (400); 8-((2S,SR)-4-((4-fluorofenil)(2-metilpirimidin-4-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (401); 8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(pirimidin-4-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (402); 8-((2S,5R)-4-((4-hlorofenil)(piridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (403); 8-((2S,5R)-4-((3-fluorofenil)(piridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (404); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-(piridin-2-il(4-(trifluorometoksi) fenil)metil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (405); 8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(2-metilpirimidin-5-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (406); 8-((2S,SR)-4-(bis(5-fluoropiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (407); 8-((2S,5R)-4-((2-(terc-butil)pirimidin-4-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2karbonitril (408-409); 8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(2-metilpirimidin-5-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (410); 8-((2S,SR)-4-(1-(3,4-difluorofenil)propil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (411); 8-((2S,5R)-4-(1-(2-fluoro-4-(trifluorometil)fenil) etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (412); 8-((3R)-4-((4-hlorofenil)(2-metilpirimidin-5-il)metil)-3-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (413-414); 8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(5-fluoropiridin-3-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (415); 8-((2S,SR)-4-((5-fluoropiridin-3-il)(p-tolil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (416); 8-((2S,5R)-4-((3-fluorofenil)(6-metilpiridin-3-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (417); 8-((2S,5R)-5-etil-4-((4-fluorofenil)(2-metilpirimidin-4-il)metil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (418-419); 8-((2S,SR)-5-etil-4-(1-(2-fluoro-4-(trifluorometoksi)fenil)propil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (420-421); 8-((2S,5R)-4-((4-hlorofenil) (piridin-2-il)metil)-5-etil-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (422-423); 7-fluoro-8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)etil-1-d)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril i 7-fluoro-8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)etil-1-d)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (424-425); 7-fluoro-8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)etil-1-d)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (426-427); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)etil-1-d)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (428-429); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-((2,4,6-trifluorofenil)metil-d2)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (430); 8-((2S,SR)-4-(1-(2-fluoro-4-(trifluorometil)fenil) etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (431); 8-((2S,5R)2,5-dimetil-4-(1-(2,4,6-trifluorofenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (432); 8-((2S,5R)-4-(1-(2-hloro-4-fluoro-3-metilfenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (433); 8-((2S,5R)-4-(1-(2-fluoro-4-(trifluorometil)fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (434); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (435-436); 8-((2S,5R)-4-(1-(2-fluoro-4-(trifluorometoksi) fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (437, 439, i 442); 8-((2S,5R)-4-(1-(2-fluoro-4-(trifluorometoksi)fenil)propil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (438 i 440-441); 8-((2S,5R)-4-((4-hlorofenil)(6-metilpiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (443); 8-((2S,5R)-4-((5-fluoropiridin-2-il)(p-tolil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (444); 8-((2S,5R)-4-((3,4-dihidro-2H-benzo[b][1,4]dioksepin-6-il)(3-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (445); 8-((2S,5R)-4-((4-hlorofenil)(4-fluoropiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (446); 8-((2S,5R)-4-((4-hlorofenil)(2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioksin-5-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (447); 8-((2S,5R)-4-((4-hlorofenil)(4-metilpiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (448); 8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(5-metilpiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (449); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-((6-metilpiridin-2-il)(p-tolil)metil) piperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (450); 8-((2S,5R)-4-((3,4-dihidro-2H-benzo[b][1,4]dioksepin-6-il)(5-metilpiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (451); 8-((2S,5R)-4-((4-cijanofenil)(5-metilpiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (452-453); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-((5-metilpiridin-2-il)(p-tolil)metil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (454, 457); 8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(4-metilpiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (455-456); 8-((2S,5R)-4-((4-hlorofenil)(4-fluoro-2,2-dimetil-2,3-dihidrobenzofuran-7-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (458-459); 8-((2S,SR)-2,5-dimetil-4-((4-metilpiridin-2-il)(ptolil)metil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (460-461); 8-((2S,SR)-4-((5-fluoropiridin-2-il)(4-(trifluorometoksi)fenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (462, 466, 468); 8-((2S,5R)-4-((4-cijanofenil)(5-fluoropiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (463-464); 8-((2S,5R)-4-((2,2-dimetil-2,3-dihidrobenzofuran-7-il)(5-fluoropiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,64hidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (465, 467); 8-((2S,5R)-4-((3,4-dihidro-2H-benzo[b][1,4]dioksepin-6-il)(5-metilpiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (469); 8-((2S,5R)-4-((3-fluorofenil)(6-metilpiridin-2-il)metil)-2,5dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (470); 8-((2S,SR)-4-((4-fluorofenil)(6-fluoropiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (471); 8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(4-fluoropiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (472-474); 8-((2S,SR)-2,5-dimetil-4-((1-metil-1H-indazol-4-il)metil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (475); 8-((2S,5R)-4-((6-fluoropiridin-2-il)(p-tolil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (476, 478-479); 8-((2S,5R)-4-(ciklopropil(2-fluoro-4-(trifluorometoksi)fenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (480-481); 8-((2S,SR)-5-etil-4-(1-(4-metoksifenil)etil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (482-483); 8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(4-metilpiridin-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (484); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-((4-metilpiridin-2-il)(p-tolil)metil) piperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (485); 8-((2S,5R)-4-(1-(2-hloro-4,5-difluorofenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (486); 8-((2S,SR)-4-(1-(2-hloro-4-fluoro-3-metilfenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (487); 8-((2S,SR)-2,5-dimetil-4-(1-(2,4,6-trifluorofenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (488-489, 555); 8-[(2S,5R)-4-[2-fluoro-1-(4-fluorofenil)etil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (556); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)-2-hidroksietil)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (557-558); 8-((2S,SR)-4-(1-(4-fluorofenil)-2-metoksietil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (559-560); 8-((2S,5R)-4-(2-(4-fluorofenil)-2-metoksietil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (561); 8-((2S,SR)-4-(4-(1-cijanociklopropil)benril)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (567); 8-((2S,SR)-4-((1-etil-1H-benzo[d]imidazol-7-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (568-569); 7-(difluorometil)-8-((2S,SR)-4-(2-fluoro-4-(trifluorometoksi)benzil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (570); 8-((2S,5R)-4-(3-(dimetilamino)benzil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (573); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)propil-1-d)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (574-575); 8((2S,SR)-4-(2-cijano-4-(trifluorometoksi) benril)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (581); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-(2,2,2-trifluoro-1-(4-fluorofenil)etil) piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridino-2-karbonitril (582-583); 8-((2S,5R)-4-(3-cijano-4-(trifluorometoksi)benzil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (584); 8-((2S,5R)-4-(4-fluoro-3-(trifluorometoksi)benzil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (585); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-(3-(trifluorometoksi)benzil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (586); 8-((2S,5R)-4-(4-(tercbutil)benzil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (587); 8-((2S,5R)-4-(4-(difluorometoksi)benzil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (588); 8-((2S,SR)-4-((2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (589); 8-((2S,5R)-4-(4-(difluorometoksi)-2-fluorobenzil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (590); 8-((2S,5R)-4-(2-fluoro-4-(trifluorometoksi)benzil)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (591); 8-((2S,5R)-4-(1-(2,6-difluoro-4-hidroksifenil)-2,2,2-trifluoroetil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (592); 8-((2S,5R)-4-(2-bromo-4-(trifluorometoksi)benzil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (593); 8-((2S,5R)-4-(3-izopropoksibenzil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (594); 8-((2S,SR)-4-(2-izopropoksibenzil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (595); 8-((2S,5R)-4-((1-etil-3-fluoro-1H-indol-4-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (596); 8-((2S,5R)-4-(4-fluoro-2-izopropoksibenzil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (598); 8-((2S,5R)-4-(3-etoksibenzil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (599); 8-((2S,5R)-4-(2-metoksi-5-(trifluorometoksi)benzil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (601); 8-((2S,5R)-4-(4-izopropilbenzil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (602); 8-((2S,5R)4-(4-hlorobenzil)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (603); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil4-((1-metil-1H-indol-4-il)metil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (606); 8-((2S,5R)-4-(2-hloro-4-(trifluorometoksi)benzil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (607); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-(2-metil-4-(trifluorometoksi)benzil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (608); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-(4-(trifluorometoksi)benzil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (609); 8-((2S,5R)-4-(3-fluoro-4-(trifluorometoksi)benzil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (610); 8-((2S,SR)-4-(3-hloro-4-(trifluorometoksi)benzil)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (611); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-((tetrahidro-2H-piran-4-il)metil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (623); 8-((2S,SR)-4-(2-fluoro-4-(trifluorometoksi)benzil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (624); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-(2,2,2-trifluoro-1 -(2-fluoro-4-hidroksifenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (625); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-(2,2,2-trifluoro-1 -(4-hidroksifenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (626); 8-((2S,5R)-4-(1-(2,6-difluoro-4-hidroksifenil)-2,2,2-trifluoroetil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (627-628); 8-((2S,5R)-4-(3-bromo-4-(trifluorometoksi)benzil)-2,5-dimetilpiperazin-1 - il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (629); terc-butil 8-{[(2R,5S)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-2,5-dimetilpiperazin-1-il]metil}-3,4-dihidro-2H-1,4-benzoksazino-4-karboksilat (630); 8-[(2S,SR)-4-[(4-acetil-3,4-dihidro-2H-1,4-benzoksazin-8-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (631); 8-[(2S,SR)-2,5-dimetil-4-(2-feniletil)piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (632); 8-[(2S,5R)-2,5-dimetil-4-[2-(4-metilfenil)etil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (633); 8-[(2S,5R)-4-[(3,4-dihidro-2H-1,4-benzoksazin-8-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (634); 8-[(2S,5R)-2,5-dimetil-4-[(4-metil-3-okso-3,4-dihidro-2H-1,4-benzoksazin-5-il)metil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (635); 8-[(2S,5R)-2,5-dimetil-4-{1-[6-(trifluorometil)piridin-2-il]etil}piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (636-637); 8-[(2S,5R)-2,5-dimetil-4-[1-(hinolin-5-il)etil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (638-639); 8-[(2S,5R)-4-[1-(5-fluoropiridin-2-il)etil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (640-641); 8-[(2S,5R)-2,5-dimetil-4-{1-[5-(trifluorometil)piridin-2-il]etil} piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridino-2-karbonitril (642-643); 8-[(2S,5R)-4-[1-(5-metoksipiridin-2-il)etil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (644-645); 8-[(2S,5R)-4-[1-(4-ciklopropil-1,3-tiazol-2-il)etil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (646-647); 8-[(2S,SR)-2,5-dimetil-4-[1-(5-metil-1,2-oksazol-3-il)etil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (648-649); 8-[(2S,5R)-2,5-dimetil-4-[1-(hinoksalin-6-il) etil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (650-651); 8-[(2S,5R)-4-{1-[4-(difluorometoksi)fenil]etil}-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (652-653); 8-[(2S,SR)-4-[1-(2,2-difluoro-2H-1,3-benzodioksol-5-il)etil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (654-655); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(2,2-difluoro-2H-1,3-benzodioksol-5-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (656-657); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(4-metoksifenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (658-659); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(3-metoksifenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (660-661); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil) [4-(morfolin-4-il)fenil]metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (662-663); 8-[(2S,SR)-4-[(4-fluorofenil)[2-(morfolin-4-il)fenil]metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (664-665); 8-[(2S,5R)-4- {[4-(difluorometil) fenil](4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (666-667); 8-[(2S,SR)-4-[(2,2-difluoro-2H-1,3-benzodioksol-4-il)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (668-669); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil) (fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (670-671); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)[3-(morfolin-4-il)fenil]metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (672-673); 8-[(2S,SR)-4-[(4-fluorofenil)(pirazin-2-il) metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (674-675); 8-[(2S,SR)-4-[(4-fluorofenil)(pirimidin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (676-677); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)[6-(trifluorometil)piridin-2-il]metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (678-679); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)[5-(trifluorometil)piridin-2-il]metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (680-681); 8-[(2S,5R)-4-[(2,4-difluorofenil)(piridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (682-683); 8-[(2S,5R)-4-[(2,4difluorofenil)(5-fluoropiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (684-685); 8-[(2S,5R)-4-[(3-fluorofenil)(5-metoksipiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (686-687); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(3-metansulfonilfenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (688-689); 8-[(2S,5R)-4-[(3-fluorofenil)[5-(propan-2-iloksi)piridin-2-il]metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (690-691); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(2,4,6-trifluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (692-693); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)({pirazolo[1,5-a]piridin-7-il})metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (694-695); 8-[(2S,5R)-4-{[6-(difluorometil)piridin-2-il](4-fluorofenil)metil}-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (696-697); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)({pirazolo[1,5-a]piridin-3-il))metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (698-699); 8-((2S,5R)-4-((4-ciklopropiltiazol-2-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5, 6-dihidro-1, 5-naftiridin-2-karbonitril (700-701); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(1-metil-1H-pirazol-4-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (702-703); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(1-metil-1H-imidazol-5-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (704-705); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(1,2-oksazol-3-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (706-707); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(1-metil-1H-imidazol-4-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (708); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(1,3-oksazol-4-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (709-710); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(1,3-tiazol-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (711-712); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(1-metil-1H-imidazol-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (713-714); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(1,2-tiazol-4-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (715-716); 8-[(2S,SR)-4-[(4-fluorofenil)(1,3-oksazol-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (717-718); 8-[(2S,SR)-4-[(4-fluorofenil)(1,2-tiazol-5-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (719-720); 8-[(2S,SR)-4-[(4-fluorofenil)(1,3-tiazol-4-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5naftiridin-2-karbonitril (721-722); 8-[(2S,5R)-4-[(2-ciklopropil-1,3-tiazol-4-il)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (723-724); 8-[(2S,5R)-4-[(1-ciklopropil-1H-pirazol-4-il)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (725-726); 8-[(2S,5R)-4-[(2-ciklopropil-1,3-tiazol-5-il)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (727-728); 8-((2S,5R)-4-((5-ciklopropilizoksazol-3-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (729-730); 8-((2S,5R)-4-((5-(terc-butil)izoksazol-3-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (731-732); 8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(5-metilizoksazol-3-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (733-734); 8-((2S,5R)-4-((3-ciklopropil-1,2,4-oksadiazol-5-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (735-736); 8-[(2S,5R)-4-[(3-tercbutil-1,2,4-oksadiazol-5-il)(4-fluorofenil) metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (737-738); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)[3-(oksan-4-il)-1,2,4-oksadiazol-5-il]metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (739-740); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)[3-(4-fluorofenil)-1,2,4-oksadiazol-5-il]metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (741-742); 8-[(2S,5R)-4-([3-(difluorometil)-1,2,4-oksadiazol-5-il](4-fluorofenil)metil } -2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (743-744); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil) (3-metil-1,2,4-oksadiazol-5-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (745-746); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)[3-(propan-2-il)-1,2,4-oksadiazol-5-il]metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (747-748); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil) [3-(morfolin-4-il)-1,2,4-oksadiazol-5-il]metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (749-750); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)[3-(1-metilpiperidin-4-il)-1,2,4-oksadiazol-5-il]metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (751-752); 8-[(2S,SR)-4-[(3-etil-1,2,4-oksadiazol-5-il)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (753-754); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(1,2,4-oksadiazol-5-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (755); terc-butil 3-(5-{[(2R,5S)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-2,5-dimetilpiperazin-1-il](4-fluorofenil)metil)-1,2,4-oksadiazol-3-il)azetidin-1-karboksilat (756757); 8-[(2S,5R)-4-[(3-ciklopropil-1,2,4-oksadiazol-5-il)[4-(trifluorometoksi)fenil]metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (758-759); 8-[(2S,5R)-4-[(4-bromofenil)(3-ciklopropil-1,2,4-oksadiazol-5-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (760-761); 8-((2S,SR)-4-((5-ciklopropil-1,3,4-oksadiazol-2-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (762-763); 8-((2S,5R)-4-((5-(terc-butil)-1,2,4-oksadiazol-3-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (764-765); 8-((2S,5R)-4-((5-ciklopropil-4H-1,2,4-triazol-3-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (766-767); 8-((2S,5R)-4-((3-ciklopropil-1-metil-1H-1,2,4-triazol-5-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (768-769); 8-((2S,5R)-4-((1-(terc-butil)-1H-tetrazol-5-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (770-771); 8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(5-izopropil-1,3,4-tiadiazol-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (772-773); 8-((2S,5R)-4-((5-ciklopropil-1,3,4-tiadiazol-2-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (774-775); 8-((2S,5R)-4-((4-ciklopropiloksazol-2-il)(4-fluorofenil) metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (776-777); 8-[(2S,SR)-4-[(4-terc-butil-1,3-oksazol-2-il)(4-fluorofenil) metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (778-779); 8-((2S,5R)-4-(1-(2,6-difluorofenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (780-781); 8-[(2S,5R)-4-[1-(4-fluorofenil)etil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (782-783); 8-[(2S,SR)-2,5-dimetil-4-[1-(4-metilfenil)etil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (784-785); 4-{1-[(2R,5S)-4-(3,6-dicijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-2,5-dimetilpiperazin-1-il]etil)benzoeva kiselina (786-787); 8-[(2S,5R)-2,5-dimetil-4-{1-[4-(trifluorometil)fenil]etil}piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (788); 8-[(2S,SR)-4-[1-(4-bromofenil)etil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (789-790); 8-[(2S,SR)-4-[1-(4-hlorofenil)etil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (791-792); metil 4-{1-[(2R,5S)-4-(3,6-dicijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-2,5-dimetilpiperazin-1-il]etil)benzoat (793-794); metil 3-{1-[(2R,5S)-4-(3,6-dicijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-2,5-dimetilpiperazin1-il]etil}benzoat (795-796); 8-[(2S,5R)-4-[1-(2-fluorofenil) etil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (797-798); 8-[(2S,5R)-4-[1-(5-metoksipiridin-2-il)etil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (799-800); 8-[(2S,5R)-2,5-dimetil-4-{1-[4-(trifluorometoksi)fenil]etil}piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (801-802); 8-[(2S,5R)-2,5-dimetil-4-[1-(5-metil-1,2-oksazol-3-il)etil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (803-804); 8-[(2S,5R)-4-[bis(4-hlorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (805); 8-[(2S,5R)-4-[bis(4-metilfenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (806); 8-[(2S,SR)-4-[(4-fluorofenil)(fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (807-808); 8-[(2S,5R)-4-[(2-etilfenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (809-810); 8-[(2S,5R)-4-[(4-etilfenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (811-812); 8-[(2S,5R)-4-[(3,5-difluorofenil)(fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (813-814); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil) (6-metilpiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (815-816); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(4-metilfenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (817-818); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (819 i 822); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (820-821); 8-[(2S,5R)-4-[(4-cijanofenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (823-824); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(4-metilfenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (825-826); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(5-fluoropiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (827-828); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(5-fluoropiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (829-830); 8-[(2S,5R)-4-[(2-hloro-4-fluorofenil)(5-metilpiridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (831-832); 8-[(2S,SR)-4-[(5-fluoropiridin-2-il)(4-metilfenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7dikarbonitril (833); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(fenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (834-835); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)[5-(trifluorometil)piridin-2-il] metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (836-837); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(4-metoksifenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (838-839); 8-[(2S,5R)-4-[(3-fluorofenil)[5-(trifluorometil)piridin-2-il]metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (840-841); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(piridin-2-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1 - il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (842-843); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)[6-(trifluorometil)piridin-2-il]metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (844-845); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(1-metil-1H-pirazol-4-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (846-847); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(1-metil-1H-imidazol-5-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (848-849); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(1,2-oksazol-3-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (850-851); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(1-metil-1H-imidazol-4-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (852-853); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(1,2-tiazol-5-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (854-855); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(1,3-tiazol-4-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (856-857); 8-[(2S,5R)-4-[(2-ciklopropil-1,3-tiazol-4-il)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (858-859); 8-[(2S,5R)-4-[(3-ciklopropil-1,2,4-oksadiazol-5-il)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (860-861); 8-[(2S,5R)-4-[(3-terc-butil-1,2,4-oksadiazol-5-il)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (862-863); 8-[(2S,5R)-4-[(4-fluorofenil)(5-metil-1,2-oksazol-3-il)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (864-865); 8-[(2S,SR)-4-[(5-tercbutil-1,2-oksazol-3-il) (4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (866-867); 8-[(2S,SR)-4-[(5-ciklopropil-1,2-oksazol-3-il)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dimetilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (868-869); 8-[(3R)-4-[bis(4-metilfenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (870); 8-[(3R)-4-[(4-cijanofenil)(4fluorofenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (871); 8-[(3R)-4-[(4-hlorofenil)(4-cijanofenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (872-873); 8-[(3R)-4-[(3,5-difluorofenil) (fenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (874-875); 8-[(3R)-4-[(2-etilfenil)(4-fluorofenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (876-877); 8-[(3R)-4-[(4-fluorofenil)(fenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (878-879); 8-[(3R)-4-[(3-fluorofenil)(4-fluorofenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (880-881); 8-[(3R)-4-[(2-fluorofenil)(4-fluorofenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (882-883); 8-[(3R)-4-[(4-etilfenil)(4-fluorofenil) metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (884-885); 8-[(3R)-4-[(4-hlorofenil)(fenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (886-887); 8-[(3R)-4-[(4-fluorofenil)(4-metilfenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (888-889); 8-[(3R)-4-[(3-fluoropiridin-2-il)(4-metilfenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (890 i 892); 8-[(3R)-4-[(4-fluorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (891 i 893); 8-[(3R)-4-[(4-fluorofenil) (2-metoksipiridin-3-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (894-895); 8-[(3R)-4-[(4-fluorofenil)[5-(trifluorometil)piridin-2-il]metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (896-897); 8-[(3R)-4-[(5-fluoropiridin-2-il) (4-metilfenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (898-899); 8-[(3R)-4-[(4-hlorofenil)(5-fluoropiridin-2-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (900-901); 8-[(3R)-4-[(4-fluorofenil)(5-fluoropiridin-2-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (902-903); 8-[(3R)-4-[(4-fluorofenil)(5-metilpiridin-2-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (904); 8-[(3R)-4-[(4-fluorofenil)(6-metilpiridin-2-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (905-906); 8-[(3R)-4-[(4-hlorofenil)(4-metilfenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (907); 8-[(3R)-4-[(5-cijanopiridin-2-il)(4-fluorofenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (908); 8-[(3R)-4-[(4-hlorofenil)(3-fluoropiridin-2-il) metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (909); 8-[(3R)-4-[(4-fluorofenil)[4-(trifluorometil)fenil]metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (910); 8-[(3R)-4-[(3-fluorofenil)(5-fluoropiridin-2-il)metil]-3-metilpiperazin-1 -il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (911); 8-[(3R)-4-[(3-fluorofenil)(5-metilpiridin-2-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (912); 8-[(3R)-4-[(4-hlorofenil) (3-fluoropiridin-2-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (913); 8-[(3R)-4-[(4-fluorofenil)[4-(trifluorometil) fenil]metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (914); 8-[(3R)-4-[(4-fluorofenil)(5-metilpiridin-2-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (915); 8-[(3R)-4-[(4-fluorofenil)(3-metilfenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (916-917); 8-[(3R)-4-[(4-fluorofenil)(piridin-2-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (918-919); 8-[(3R)-4-[(4-cijanofenil)(4-fluorofenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (920); 8-[(3R)-4-[(4-fluorofenil)[6-(trifluorometil) piridin-2-il]metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (921-922); 8-[(3R)-4-[(3-fluorofenil)(5-metilpiridin-2-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (923); 8-[(3R)-4-[(5-cijanopiridin-2-il)(4-fluorofenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (924); 8-[(3R)-4-[(3-fluorofenil)(5-fluoropiridin-2-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (925); 8-[(3R)-4-[(3-hlorofenil)(5-fluoropiridin-2-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (926-927); 8-[(3R)-4-[(3-hlorofenil) (5-metilpiridin-2-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (928-929); 8-[(3R)-4-[(4-hlorofenil)(5-hloropiridin-2-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (930-931); 8-[(3R)-4-[(5-hloropiridin-2-il)(4-fluorofenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (932-933); 8-[(3R)-4-[(2,2-dimetil-2,3-dihidro-1-benzofuran-7-il)(4-fluorofenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (934-935); 8-[(3R)-4-[(5-hloropiridin-2-il)(4-metilfenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (936-937); 8-[(3R)-4-[(2-hloro-4-fluorofenil)(5-metilpiridin-2-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (938); 8-[(3R)4-[(2,2-difluoro-2H-1,3-benzodioksol-4-il)(4-fluorofenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (939-940); 8-[(3R)-4-[(4-hlorofenil)(2,2-difluoro-2H-1,3-benzodioksol-5-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (941-942); 8-[(3R)-4-[(4-fluorofenil)(pirazin-2-il) metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (943); 8-[(3R)-4-[(4-hlorofenil)(4-metilfenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (944-945); 8-[(3R)-4-[(2,4-difluorofenil)(4-fluorofenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (946-947); 8-[(3R)-4-[(3-fluorofenil)[5-(trifluorometil)piridin-2-il]metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (948-949); 8-[(3R)-4-[1-(2,6-difluorofenil)etil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (950-951); 5-metil-8-[(3R)-3-metil-4-[1-(4-metilfenil)etil]piperazin-1-il]-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (952-953); 8-[(3R)-4-[1-(4-cijanofenil)etil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (954-955); 8-[(3R)-4-[1-(3,4-difluorofenil)etil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (956); 8-[(3R)-4-[1-(4-fluorofenil)etil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (957 i 959); 5-metil-8-[(3R)-3-metil-4-{ 1-[4-(trifluorometoksi)fenil]etil} piperazin-1-il]-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (958 i 962); 5-metil-8-[(3R)-3-metil-4-{1-[4-(trifluorometil)fenil]etil}piperazin-1-il]-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (960-961); 5-metil-8-[(3R)-3-metil-4-[1-(piridin-2-il)etil]piperazin-1-il]-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (963 i 965); 5-metil-8-[(3R)-3-metil-4-[1-(6-metilpiridin-2-il) etil]piperazin-1-il]-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (964); 5-metil-8-[(3R)-3-metil-4-(1-[2-(trifluorometil)fenil]etil}piperazin-1-il]-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (966 i 968); 5-metil-8-[(3R)-3-metil-4-[1-(6-metilpiridin-2-il)etil]piperazin-1-il]-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (967); 8-[(3R)-4-[1-(2,4-difluorofenil)etil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (969-970); 5-metil-8-[(3R)-3-metil-4- {1-[3-(trifluorometil)fenil]etil} piperazin-1-il]-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (971-972); 4-{1-[(2R)-4-(3,6-dicijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-2-metilpiperazin-1-il]etil}benzoeva kiselina (973-974); 8-[(3R)-4-[1-(4-bromofenil)etil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (974-975); 8-[(3R)-4-[1-(2,5-dimetilfenil)etil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (976-977); 8[(3R)-4-[1-(4-hlorofenil) etil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (978-979); metil 4-{ 1-[(2R)-4-(3,6-dicijano- 1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-2-metilpiperazin-1-il]etil}benzoat (980-981); metil 3-{1-[(2R)-4-(3,6-dicijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-2-metilpiperazin-1-il]etil)benzoat (982-983); 8-[(3R)-4-[(2-hloro-6-fluorofenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (984); 8-[(3R)-4-[(2,4-difluorofenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (985); 5-metil-8-[(3R)-3-metil-4-[(2,4,6-trifluorofenil)metil]piperazin-1-il]-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (986); 8-[(3R)-4-[(3,4-difluorofenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (987); 5-metil-8-[(3R)-3-metil-4-[(6-metilpiridin-2-il)metil]piperazin-1-il]-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (988); 8-[(3R)-4-[(6-cijanopiridin-2-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (989); 5-metil-8-[(3R)-3-metil-4-[(piridin-2-il)metil]piperazin-1-il]-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (990); 5-metil-8-[(3R)-3-metil-4-{[6-(trifluorometil)piridin-2-il]metil}piperazin-1-il]-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (991); 5-metil-8-[(3R)-3-metil-4-[(hinolin-2-il)metil]piperazin-1-il]-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (992); 8-[(3R)-4-[(2-hloro-4-fluorofenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (993); 8-[(3R)-4-({[1,1'-bifenil]-4-il}metil)-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (994); 8-[(3R)-4-[(4-fluoro-3-metilfenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (995); 8-[(3R)-4-[(3,4-dihlorofenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (996); 8-[(3R)-4-[(2-hlorofenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (997); 5-metil-8-[(3R)-3-metil-4-[(piridin-3-il)metil]piperazin-1-il]-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (998); 5-metil-8-[(3R)-3-metil-4-{[2-(trifluorometoksi)fenil]metil} piperazin-1-il]-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (999); 8-[(3R)-4-[(3,5-dimetilfenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1000); 8-[(3R)-4-[(5-fluoro-2-metilfenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1001); 8-[(3R)-4-[(3-fluoro-4-metilfenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1002); 5-metil-8-[(3R)-3-metil-4-{ [3-(trifluorometil)fenil]metil } piperazin-1-il]-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1003); 8-[(3R)-4-({[1,1'-bifenil]-3-il}metil)-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1004); 8-[(3R)-4-[(3-fluorofenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1005); 8-[(3R)-4-[(2-fluoro-5-metilfenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1006); 5-metil-8-[(3R)-3-metil-4-[(4-metilfenil) metil]piperazin-1-il]-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1007); 5-metil-8-[(3R)-3-metil-4-([3-(trifluorometoksi)fenil]metil)piperazin-1-il]-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1008); 8-[(3R)-4-[(2-cijanofenil) metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1009); 8-[(3R)-4-[(3-fluoro-2-metilfenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1010); 8-[(3R)-4-[(4-hlorofenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1011); 5-metil-8-[(3R)-3-metil-4-[(3-metilfenil) metil]piperazin-1-il]-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1012); 8-[(3R)-4-[(4-terc-butilfenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1013); 5-metil-8-[(3R)-3-metil-4-{[2-(triftuorometil)fenil]metil}piperazin-1-il]-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1014); 8-[(3R)-4-[(4-hloro-3-fluorofenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1015); 8-[(3R)-4-[(4-fluorofenil)(1-metil-1H-pirazol-4-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1016-1017); 8-[(3R)-4-[(4-fluorofenil)(1-metil-1H-imidazol-5-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1018-1019); 8-[(3R)-4-[(4-fluorofenil)(1,3-oksazol-4-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1022-1023); 8-[(3R)-4-[(4-fluorofenil)(1,3-tiazol-2-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1024-1025); 8-[(3R)-4-[(4-fluorofenil)(1-metil-1H-imidazol-4-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1026-1027); 8-[(3R)-4-[(4-fluorofenil)(1,2-tiazol-4-il)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1028); 8-[(3R)-4-[(3-ciklopropil-1,2,4-oksadiazol-5-il)(4-fluorofenil)metil]-3-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1029-1030); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dietilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1031); 8-[(2S,SR)-4-[bis(4-hlorofenil) metil]-2,5-dietilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1032); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(5-fluoropiridin-2-il)metil]-2,5-dietilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1033-1034); 8-[(2S,5R)-4-[(4-cijanofenil)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dietilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1035-1036); 8-[(2S,SR)-2,5-dietil-4-[(4-fluorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metil] piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridino-2-karbonitril (1037-1038); 8-[(2S,5R)-2,5-dietil-4-[(4-fluorofenil)[5-(trifluorometil)piridin-2-il] metil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1039-1040); 8-[(2S,SR)-2,5-dietil-4-[(3-fluorofenil)(5-fluoropiridin-2-il)metil] piperazin-1 -il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1041-1042); 8-[(2S,5R)-2,5-dietil-4-[(4-fluorofenil)(piridin-2-il)metil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1043-1044); 8-[(2S,5R)-2,5-dietil-4-[(4-fluorofenil)[6-(trifluorometil)piridin-2-il]metil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1045-1046); 8-[(2S,5R)-2,5-dietil-4-[(3-fluorofenil)(5-metoksipiridin-2-il)metil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1047-1048); 8-[(2S,5R)-2,5-dietil-4-[1-(4-fluorofenil)etil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1049-1050); 8-[(2S,5R)-2,5-dietil-4- (1-[4-(trifluorometil)fenil] etil}piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1051-1052); 8-[(2S,5R)-2,5-dietil-4-{1-[4-(trifluorometoksi)fenil]etil}piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1053-1054); 8-[(2S,SR)-4-[1-(2,4-difluorofenil)etil]-2,5-dietilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1055-1056); 8-[(2S,5R)-2,5-dietil-4-{1-[2-fluoro-4-(trifluorometoksi)fenil]propil}piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1057-1058); 8-[(2S,SR)-2,5-dietil-4-{1-[4-(trifluorometoksi)fenil]propil)piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1059-1060); 8-[(2S,5R)-2,5-dietil-4-[(4-fluorofenil) metil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1061); 8-[(2S,SR)-4-[(2,4-difluorofenil)metil]-2,5-dietilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1062); 8-[(2S,5R)-4-[(2,2-difluoro-2H-1,3-benzodioksol-5-il)metil]-2,5-dietilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1063); 8-[(2S,SR)-4-[(3-ciklopropil-1,2,4-oksadiazol-5-il)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dietilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1064-1065); 8-[(2S,SR)-4-[(4-ciklopropil-1,3-tiazol-2-il)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dietilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1066-1067); 8-[(2S,5R)-2,5-dietil-4-[(4-fluorofenil)(1,3-oksazol-4-il)metil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1068-1069); 8-[(2S,5R)-2,5-dietil-4-[(4-fluorofenil) (1,3-tiazol-4-il)metil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1070-1071); 8-[(2S,SR)-2,5-dietil-4-[(4-fluorofenil)(1,2-oksazol-3-il) metil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1072-1073); 8-[(2S,5R)-4-[(5-ciklopropil-1,2-oksazol-3-il)(4-fluorofenil)metil]-2,5-dietilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1074-1075); 8-[(2S,5R)-4-benzil-5-etil-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1076); 8-[(2S,5R)-4-[(2,4-difluorofenil) metil]-5-etil-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1077); 8-[(2S,5R)-4-[(2-hloro-4-fluorofenil)metil]-5-etil-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1078); 8-[(2S,SR)-5-etil-4-[(4-fluorofenil)metil]-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1079); 8-[(2S,5R)-5-etil-2-metil-4-[(2,4,6-trifluorofenil)metil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1080); 8-[(2S,5R)-5-etil-4-{[2-metoksi-4-(trifluorometoksi)fenil]metil)-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1081); 8-[(2S,5R)-4-[(2,2-difluoro-2H-1,3-benzodioksol-5-il)metil]-5-etil-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1082); 8-[(2S,5R)-5-etil-4-[1-(4-fluorofenil)etil]-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1083-1084); 8-[(2S,5R)-5-etil-4-{ 1 -[2-fluoro-4-(trifluorometil)fenil]etil}-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1085-1086); 8-[(2S,5R)-4-[1-(2,4-difluorofenil)etil]-5-etil-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1087-1088); 8-[(2S,5R)-5-etil-2-metil-4-[1-(2,4,6-trifluorofenil)etil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1089-1090); 8-[(2S,5R)-4-[1-(3,4-difluorofenil)etil]-5-etil-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1091-1092); 8-[(2S,5R)-5-etil-2-metil-4-{1-[4-(trifluorometil)fenil]etil} piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1093-1094); 8-[(2S,5R)-5-etil-4-{1-[2-fluoro-4-(trifluorometoksi)fenil]etil}-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1095-1096); 8-[(2S,5R)-4-[bis(4-fluorofenil)metil]-5-etil-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1097); 8-[(2S,5R)-4-[bis(4-metilfenil)metil]-5-etil-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1098); 8-[(2S,SR)-4-[bis(4-hlorofenil)metil]-5-etil-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1099); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(4-fluorofenil)metil]-5-etil-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1100-1101); 8-[(2S,5R)-4-[(4-cijanofenil)(4-fluorofenil)metil]-5-etil-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1102-1103); 8-[(2S,5R)-5-etil-4-[(4-fluorofenil)(3-fluoropiridin-2-il)metil]-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1104-1105); 8-[(2S,5R)-5-etil-4-[(4fluorofenil)[5-(trifluorometil)piridin-2-il]metil]-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1106-1107); 8-[(2S,5R)-5-etil-4-[(3-fluorofenil)(5-fluoropiridin-2-il)metil]-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1108-1109);8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(5-fluoropiridin-2-il)metil]-5-etil-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1110-1111); 8-[(2S,5R)-5-etil-4-[(4-fluorofenil)[6-(trifluorometil)piridin-2-il]metil]-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1112-1113); 8-[(2S,5R)-5-etil-4-[(4-fluorofenil)(1,2-oksazol-3-il)metil]-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1114-1115); 8-[(2S,SR)-4-[(3-ciklopropil-1,2,4-oksadiazol-5-il)(4-fluorofenil)metil]-5-etil-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1116-1117); 8-[(2S,5R)-4-[bis(4-fluorofenil)metil]-2-etil-5-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1118); 8-[(2S,5R)-4-[bis(4-metilfenil)metil]-2-etil-5-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1119); 8-[(2S,5R)-4-[bis(4-hlorofenil)metil]-2-etil-5-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1120); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(4-metilfenil)metil]-2-etil-5-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1121-1122); 8-[(2S,5R)-4-[(4-cijanofenil)(4-fluorofenil)metil]-2-etil-5-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1123-1124); 8-[(2S,5R)-2-etil-4-[(3-fluorofenil)(5-metilpiridin-2-il)metil]-5-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1125-1126); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(4-fluorofenil)metil]-2-etil-5-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1127-1128); 8-[(2S,5R)-4-[(4-hlorofenil)(5-fluoropiridin-2-il)metil]-2-etil-5-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1129-1130); 8-[(2S,5R)-2-etil-4-[(4-fluorofenil)[5-(trifluorometil)piridin-2-il]metil]-5-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1131-1132); 8-[(2S,5R)-2-etil-4-[(4-fluorofenil)[6-(trifluorometil)piridin-2-il]metil]-5-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1133-1134); 8-[(2S,5R)-2-etil-4-[1-(4-fluorofenil)etil]-5-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1135-1136); 8-[(2S,SR)-4-[1-(2,4-difluorofenil) etil]-2-eti1-5-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1137-1138); 8-[(2S,5R)-4-[1-(3,4-difluorofenil)etil]-2-etil-5-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1139-1140); 8-[(2S,5R)-2-etil-5-metil-4- (1-[4-(trifluorometoksi)fenil]etil) piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridino-2-karbonitril (1141-1142); 8-[(2S,5R)-2-etil-5-metil-4-{1-[4(trifluorometil)fenil]etil}piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1143-1144); 8-[(2S,5R)-4-{1-[4-(difluorometoksi)fenil]etil}-2-etil-5-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1145); 8-[(2S,5R)-2-etil-5-metil-4-{1-[4-(trifluorometoksi)feil]propil}piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1146-1147); 8-[(2S,5R)-2-etil-5-metil-4-[(2,4,6-trifluorofenil)metil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1148); 8-[(2S,5R)-2-etil-5-metil-4-[(3,4,5-trifluorofenil)metil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1149); 8-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)-3-(hidroksimetil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1150); 8-[(2S,5S)-4-[bis(4-fluorofenil)metil]-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1151); 8-[(2S,5S)-4-[bis(4-hlorofenil)metil]-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1152); 8-[(2S,5S)-4-[(3-fluorofenil)(5-metilpiridin-2-il)metil]-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1153-1154); 8-((2S,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1155); 8-[(2S,5S)-4-[bis(4-metilfenil) metil]-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1156); 8-((2S,5S)-4-((4-cijanofenil)(4-fluorofenil) metil)-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1157-1158); 8-((2S,5S)-4-(1-(4-fluorofenil)etil)-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1159-1160); 8-[(2S,5S)-5-(metoksimetil)-2-metil-4-[(3,4,5-trifluorofenil)metil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1161); 8-[(2S,5S)-5-(metoksimetil)-2-metil-4-{1-[4-(trifluorometoksi)fenil]etil } piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (1162-1163); 8-((2S,5S)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-5-(etoksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1164); N-(((2R,5S)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-5-metilpiperazin-2-il)metil)acetamid (1165); metil (((2R,5S)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-5-metilpiperazin-2-il)metil)karbamat (1166); 8-((2S,SR)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-metil-5-(morfolinometil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1167); 8-[(2S,5R)-4-[bis(4-fluorofenil)metil]-5-[(3-hidroksiazetidin-1-il)metil]-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1168); 8-[(2S,5R)-4-[bis(4-fluorofenil)metil]-5-[(dimetilamino)metil]-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1169); 8-((2S,5S)-4-((4-cijanofenil)(4-fluorofenil)metil)-2-etil-5-(metoksimetil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1170-1171); 8-((2R,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1172); 8-[(2R,5R)-4-[bis(4-metilfenil)metil]-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1173); 8-[(2R,5R)-4-[(4-hlorofenil)(4-fluorofenil)metil]-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1174-1175); 8-[(2R,5R)-4-[(4-cijanofenil)(4-fluorofenil)metil]-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1176-1177); 8-[(2R,SR)-4-[1-(4-fluorofenil) etil]-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1178-1179); 8-[(2R,5R)-5-(hidroksimetil)-2-metil-4-{1-[4-(trifluorometoksi)fenil]etil}piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1180-1181); 8-[(2R,5R)-5-(hidroksimetil)-2-metil-4-[(2,4,6-trifluorofenil)metil]piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1182); 8-((2R,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1183); 8-(4-(2-hloro-4-fluorobenzil)-3-((difluorometoksi) metil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1184-1185); 8-{4-[bis(4-fluorofenil)metil]-3-[(difluorometoksi)metil]piperazin-1-il}-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1186-1187); 8-((2S,5R)-4-(2-(difluorometoksi)-1-(4-fluorofenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1188-1189); 8-[(2S,5R)-4-{ciklopropil[4-(trifluorometoksi)fenil]metil}-5-etil-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1190); 4-[(2S,5R)-2,5-dimetil-4-{1-[4-(trifluorometoksi)fenil]etil}piperazin-1-il]-1,6-dimetil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-3-karbonitril (1191-1192); 8-[(2S,5R)-5-etil-2-metil-4-(1-fenilbutil)piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1193-1194); 8-[(2S,SR)-4-{2-cikloheksil-1-[4-(trifluorometoksi)fenil] etil}-5-etil-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1195-1196); 8-[(2S,5R)-4-{[2,4-bis(trifluorometil)fenil]metil}-5-etil-2-metilpiperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1197); 8-[(2S,SR)-5-etil-2-metil-4-{1-[4-(trifluorometoksi)fenil] propil } piperazin-1-il]-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (1198-1199); 8-((2S,5R)-4-(l-(4-ciklopropil-2-fluorofenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (1200-1201); 8-((2S,5R)-4-(1-(2-fluoro-5-(trifluorometoksi)fenil)etil)-2,5dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (1202-1203); 8-((2S,5R)-4-(1-(3-fluoro-4-(trifluorometoksi)fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (1204-1205); 8-((2S,5R)-4-(1-(2-fluoro-5-(trifluorometoksi)fenil)propil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (1206-1207); 8-((2S,5R)-4-(1-(2-fluoro-3-(trifluorometoksi)fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (1208-1209); 8-((2S,5R)-4-(1-(3-fluoro-5-(trifluorometoksi)fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (1210-1211); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-(1-(2-(trifluorometoksi)fenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1212-1213); 8-((2S,SR)-4-(1-(4-ciklopropilfenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1214-1215); 8-((2S,SR)-4-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-4-il)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1216-1217); 8-((2S,SR)-4-(1-(4-ciklopropil-2-fluorofenil)propil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1218-1219); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-ciklopropilfenil) propil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1220-1221); 8-((2S,SR)-4-(1-(6-(difluorometil)piridin-2-il)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (1222-1223); 8-((2S,5R)-4-(1-(5-(difluorometoksi)piridin-2-il)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (1224-1225); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-cijano-2-fluorofenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1226-1227); 8-((2S,5R)-4-(1-(5-(difluorometoksi)-2-fluorofenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1228-1229); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-hloro-2-fluorofenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1230); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluoro-3-metoksifenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1231-1232); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-izopropilfenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1233-1234); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-(3,4,5-trifluorobenzil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1235); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluoro-2-metoksifenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1236-1237); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-(1H-1,2,4-triazol-1-i1) fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1238-1239); 8-((2S,SR)-2,5-dimetil-4-(1-(3,4,5-trifluorofenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (1240-1241); 8-((2S,5R)-4-(1-(2,6-difluoro-4metoksifenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1242-1243); 8-((2S,5R)-4-(1-(2,5-difluoro-4-metoksifenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1244-1245); 8-((2S,5R)-4-(1-(2-fluoro-4,5-dimetoksifenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1246-1247); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-metoksi-3-(trifluorometil)fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (1248-1249); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-(1-cijanociklopropil)-2-fluorofenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (1250-1251); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-(1-cijanociklopropil)fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (1253-1254); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluoro-3-metilfenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1255); 8-((2S,5R)-4-(1-(3-hloro-4-fluorofenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1256-1257); 8-((2S,SR)-4-(1-(2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioksin-6-il)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1258-1259); 8-((2S,SR)-2,5-dimetil-4-(1-(2-metilbenzo[d]oksazol-4-il)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1260-1261); 8-((2S,5R)-4-(1-(3-cijano-4-fluorofenil) etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1262); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-(1-(2-metilbenzo[d]tiazol-6-il)etil) piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1263-1264); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-(metoksimetil)fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1265-1266); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-(1-(3-(trifluorometoksi)fenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1267-1268); 8-((2S,5R)-4-(1-(3-fluoro-4-(trifluorometoksi)fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1269-1270); 8-((2S,SR)-4-(1-(3-(difluorometoksi)fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1271-1272); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-(1-(2-(trifluorometil)tiazol-4-il)etil)piperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1273-1274); 8-((2S,5R)-4-(4-etoksi-2,6-difluorobenzil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1275-1276); 8-((2S,5R)-4-(2-metoksi-1-(5-(trifluorometil)piridin-2-il) etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1277-1278); 8-((2S,5R)-4-(2-hidroksi-1-(5-(trifluorometil)piridin-2-il) etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1279-1280); 8-((2S,5R)-4-(1-(5-ciklopropilizoksazol-3-il)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1281-1282); 8-((2S,SR)-4-(1-(5-(tercbutil)izoksazol-3-il)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1283-1284); 8-((2S,5R)-4-((4-hlorofenil)(3-ciklopropil-1,2,4-oksadiazol-5-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1285-1286); 8-((2S,5R)-4-((2-(dimetilfosforil)fenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1287-1288); 8-((2S,5R)-4-(4-(dimetilfosforil)benzil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1289); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-(dimetilfosforil)fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1290-1291); 8-((2S,5R)-4-((4-(dimetilfosforil)fenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1292-1293); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-(dimetilfosforil)fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-it)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1294-1295); 8-((2S,SR)-4-((3-(1-acetilazetidin-3-il)-1,2,4-oksadiazol-5-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1296-1297); 8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(3-(1-metilazetidin-3-il)-1,2,4-oksadiazol-5-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (1298-1299); 8-((2S,5R)-4-((1,1-dioksidotetrahidro-2H-tiopiran-4-il)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1300-1301); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-metoksi-3-(2-metoksietoksi)fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1302-1303); 8-((2S,6R)-4-(1-(4-metoksi-3-(2-morfolinoetoksi)fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1304-1305); 8-((2S,SR)-4-(1-(3-ciklopropil-1,2,4-oksadiazol-5-il)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1306-1307); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)-2-hidroksi-2-metilpropil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1308-1309); 8-((2S,5R)-4-(2,2-difluoro-1-(4-fluorofenil)-3-hidroksipropil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1310-1311); 8-((2S,5R)-4-(2,2-difluoro-1-(4-fluorofenil)-3-metoksipropil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1312-1313); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluoro-2-(metoksimetil) fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1314-1315); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluoro-3-(metoksimetil) fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1316-1317); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)-2-(metiltio)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1318-1319); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-cijano-3-(2-metoksietoksi)fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1320-1321); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-cijano-3-(2-(dimetilamino)etoksi)fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1322-1323); 8-((2S,SR)-4-(1-(6-izopropoksipiridin-3-il)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1324-1325); 8-((2S,SR)-4-(2-(3-ciklopropil-1,2,4-oksadiazol-5-il)-1-(4-fluorofenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1326-1327); 8-((2S,SR)-5-etil-2-metil-4-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etil)piperazin-1-il)-7-fluoro-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1328-1329); 8-((2S,5R)-4-(4-(difluorometoksi)benzil)-5-etil-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1330); 8-((2S,5R)-4-(4-hloro-2-fluorobenzil)-5-etil-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridino-2-karbonitril (1331); 8-((2S,5R)-5-etil-4-(3-fluoro-4-(trifluorometoksi)benzil)-2-metilpiperazin-1 - il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1332); 8-((2S,5R)-4-((4-fluorofenil)(2-(trifluorometil)tiazol-4-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1333-1334); 8-((2S,5R)-4-(bis(4-(hidroksimetil)fenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1335); 8-((2S,5R)-4-((4-cijanofenil)(4-fluorofenil)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1336-1337); 8-((2S,5R)-4-((4-ciklopropiltiazol-2-il)(4-fluorofenil) metil)-5-etil-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1338-1339); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-ciklopropil-2-fluorofenil)etil)-5-etil-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1340-1341); 8-((2S,5R)-4-(4-(difluorometoksi)benzil)-5-etil-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1342); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-(difluorometoksi)fenil)etil)-5-etil-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1343-1344); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-cijanofenil)etil)-5-etil-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1345-1346); 8-((2S,5R)-5-etil-4-(2-fluoro-4-(trifluorometoksi)benzil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1347); 8-((2S,5R)-5-etil-4-(1-(4-izopropoksifenil)etil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1348-1349); 8-((2S,SR)-5-etil-4-(1-(4-metoksifenil) etil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1350-1351); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-hloro-2-fluorofenil)etil)-5-etil-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2karbonitril (1352-1353); 8-((2S,5R)-2,5-dietil-4-(3,4,5-trifluorobenzil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1354); 8-((2S,SR)-4-(1-(4-ciklopropilfenil)etil)-2,5-dietilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1355-1356); 8-((2S,5R)-4-(I-(4-ciklopropil-2-fluorofenil)etil)-2,5-dietilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1357-1358); 8-((2S,5R)-4-(I-(4-ciklopropil-2-fluorofenil)propil)-2,5-dietilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1359-1360); 8-((2S,5R)-2,5-dietil-4-((4-fluorofenil)(2-(trifluorometil)tiazol-4-il)metil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1361-1362); 8-((2S,5R)-2,5-dietil-4-(4-(trifluorometoksi) benzil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1363); 8-((2S,SR)-2,5-dietil-4-(1-(2-fluoro-4-(trifluorometil)fenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1364-1365); 8-((2S,SR)-2,5-dietil-4-(1-(4-metoksifenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1366-1367); 8-((2S,5R)-4-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)etil)-2,5-dietilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1368-1369); 8-((2S,5R)-2,5-dietil-4-(2-fluoro-4-(trifluorometoksi)benzil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1370); 8-((2S,SR)-2,5-dietil-4-(1-(2-fluoro-4-(trifluorometoksi)fenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1371-1372); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-(difluorometoksi)fenil) etil)-2,5-dietilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1373-1374); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-(difluorometoksi)fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2,7-dikarbonitril (1375-1376); 8-((2S,5R)-2-etil-4-(1-(2-fluoro-4-(trifluorometoksi)fenil)propil)-5-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1377-1378); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-(difluorometoksi)fenil)etil)-2-etil-5-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1379); 8-((2S,5R)-2-etil-4-(1-(2-fluoro-5-(trifluorometoksi)fenil)propil)-5-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1380-1381); 8-((2S,5R)-2-etil-5-metil-4-(1-(3,4,5-trifluorofenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1382-1383); 8-((2S,5R)-2-etil-4-(1-(3-fluoro-5-(trifluorometoksi)fenil)etil)-5-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1384-1385); 8-((2S,5S)-5-(hidroksimetil)-2-metil-4-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1386-1387); 8-((2S,SS)-4-((4-fluorofenil)(5-(trifluorometil)piridin-2-il)metil)-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1388-1389); 8-((2S,5S)-4-((2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)metil)-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1390); 8-((2S,5S)-4-((4-fluorofenil)(izoksazol-3-il)metil)-5-(hidroksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1391-1392); 8-((2S,SS)-4-((3-ciklopropil-1,2,4-oksadiazol-5-il)(4-fluorofenil)metil)-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1393-1394); 8-((2S,5S)-4-((4-ciklopropiltiazol-2-il)(4-fluorofenil)metil)-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1395-1396); 8-((2S,5S)-5-(etoksimetil)-2-metil-4-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1397-1398); 8-((2S,5S)-4-((4-fluorofenil)(izoksazol-3-il) metil)-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1399-1400); 8-((2S,SS)-4-((4-fluorofenil)(5-(trifluorometil)piridin-2-il)metil)-5-(metoksimetil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1401-1402); 8-((2S,5S)-5-(etoksimetil)-4-((4-fluorofenil)(5-(trifluorometil)piridin-2-il)metil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1403-1404); 8-((2S,5S)-5-((2-metoksietoksi)metil)-2-metil-4-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1405-1406); 8-((2S,5S)-4-((2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)metil)-2-etil-5-(metoksimetil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1407); 8-((2S,5S)-2-etil-5-(metoksimetil)-4-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1408-1409); N-(((2S,SS)-1-(bis(4-fluorofenil)metil)-4-(6-cijano-1-metil-2-okso-1,2-dihidro-1,5-naftiridin-4-il)-5-metilpiperazin-2-il)metil)metansulfonamid (1410); 8-((2S,5R)-5-(cijanometil)-2-metil-4-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1411-1412); 8-((2S,SR)-5-((dimetilamino) metil)-2-metil-4-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1413-1414); 5-metil-8-((2S,5R)-2-metil-5-(morfolinometil)-4-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etil)piperazin-1-il)-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1415-1416); 5-metil-8-((2S,5R)-2-metil-5-((4-metilpiperazin-1-il)metil)-4-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etil) piperazin-1-il)-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1417-1418); 8-((2R,5R)-2-(hidroksimetil)-5-metil-4-(1-(4-(trifluorometoksi)fenil)etil) piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1419-1420); 8-((2R,5R)-4-(bis(4-fluorofenil)metil)-2-(metoksimetil)-5-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1421); 8-((2S,5R)-4-((4-cijanotiofen-2-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1422); 8-((2S,SR)-4-((1-ciklopropil-1H-tetrazol-5-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1 -il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1423); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-((5-metilizoksazol-3-il) metil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1424); 8-((2S,SR)-2,5-dimetil-4-((3-fenilizoksazol-5-il)metil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1425); 8-((2S,5R)-4-((3,5-dimetilizoksazol-4-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1426); 8-((2S,5R)-4-((3-(2-cijanofenil)izoksazol-5-il) metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1427); 8-((2S,5R)-4-(izoksazol-4-ilmetil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1428); 8-((2S,5R)-4-((2-(3-fluorofenil)-5-metiloksazol-4-il)metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1429-1430); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-((5-metilizoksazol-4-il)metil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1431); 8-((2S,SR)-4-((5-izopropil-1,2,4-oksadiazol-3-il) metil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1432); 8-((2S,5R)-4-(benzo[d]izoksazol-3-ilmetil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1433); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-((2-(tiofen-2-il)oksazol-4-il)metil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1434); 8-((2S,SR)-2,5-dimetil-4-((1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)metil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1435); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-((5-(trifluorometil)-1,3,4-oksadiazol-2-il)metil)piperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1436); 8-((2S,5R)-2,5-dimetil-4-(1-(5-metil-1,3,4-oksadiazol-2-il)etil)piperazin-lil)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1437-1438); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-(ciklopropilmetoksi)fenil)propil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro- 1,5-naftiridin-2-karbonitril (1439-1440); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-(terc-butoksi)fenil)etil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1441-1442); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-(terc-butoksi)fenil)propil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1443-1444); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-(2-ciklopropiletoksi)fenil)propil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1445-1446); 8-((2S,SR)-5-etil-4-(1-(4-izopropoksifenil)propil)-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1447-1448); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-izopropoksifenil)propil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1449-1450); 8-((2S,5R)-4-(1-(4-(ciklopropilmetoksi)fenil)propil)-5-etil-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1451); 8-((2S,SR)-4-(1-(4-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)fenil)propil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1452); 8-((2S,SR)-4-(1-(4-(2-ciklopropiletoksi)fenil)propil)-5-etil-2-metilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1453); ili 8-((2S,5R)-4-(1-(4-fluorofenil)cidopropil)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-metil-6-okso-5,6-dihidro-1,5-naftiridin-2-karbonitril (1454).
  12. 12. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 ili njegova so, pri čemu navedeno jedinjenje je:
  13. 13. Farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1-12 ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, i farmaceutski prihvatljiv nosač.
  14. 14. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1-12 ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za primenu u lečenju.
  15. 15. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1-12 ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za lečenje kancera ili virusnih infekcija.
  16. 16. Jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za primenu prema patentnom zahtevu 15, pri čemu je navedeni kancer odabran od kancera debelog creva, kancera pankreasa, kancera dojke, kancera prostate, kancera pluća, kancera jajnika, kancera grlića materice, kancera bubrega, kancera glave i vrata, limfoma, leukemije i melanoma. Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Kneginje Ljubice 5, 11000 Beograd 1037
RS20230895A 2018-06-27 2019-06-26 Supstituisana jedinjenja naftiridinona korisna kao aktivatori t ćelija RS64641B1 (sr)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201862690439P 2018-06-27 2018-06-27
US201962840459P 2019-04-30 2019-04-30
PCT/US2019/039135 WO2020006018A1 (en) 2018-06-27 2019-06-26 Substituted naphthyridinone compounds useful as t cell activators
EP19744923.4A EP3814348B9 (en) 2018-06-27 2019-06-26 Substituted naphthyridinone compounds useful as t cell activators

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS64641B1 true RS64641B1 (sr) 2023-10-31

Family

ID=67439335

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20230895A RS64641B1 (sr) 2018-06-27 2019-06-26 Supstituisana jedinjenja naftiridinona korisna kao aktivatori t ćelija

Country Status (28)

Country Link
US (3) US10669272B2 (sr)
EP (1) EP3814348B9 (sr)
JP (1) JP7432532B2 (sr)
KR (1) KR102767739B1 (sr)
CN (1) CN112654621B (sr)
AU (1) AU2019291794B2 (sr)
BR (1) BR112020026681A2 (sr)
CA (1) CA3104654A1 (sr)
CL (1) CL2020003260A1 (sr)
CY (1) CY1126280T1 (sr)
DK (1) DK3814348T3 (sr)
ES (1) ES2960754T3 (sr)
FI (1) FI3814348T3 (sr)
HR (1) HRP20231253T1 (sr)
HU (1) HUE064531T2 (sr)
IL (1) IL279728B2 (sr)
LT (1) LT3814348T (sr)
MX (1) MX2020013817A (sr)
PE (1) PE20210469A1 (sr)
PL (1) PL3814348T3 (sr)
PT (1) PT3814348T (sr)
RS (1) RS64641B1 (sr)
SG (1) SG11202012972YA (sr)
SI (1) SI3814348T1 (sr)
SM (1) SMT202300466T1 (sr)
TW (1) TW202019924A (sr)
WO (1) WO2020006018A1 (sr)
ZA (1) ZA202100555B (sr)

Families Citing this family (38)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111471059B (zh) * 2019-01-23 2022-12-02 药捷安康(南京)科技股份有限公司 Pde9抑制剂及其用途
MX2021013135A (es) 2019-04-29 2021-11-25 Solent Therapeutics Llc Derivados de 1,1-dioxido de 3-amino-4h-benzo[e][1,2,4] tiadiazina como inhibidores de mrgx2.
AR119821A1 (es) 2019-08-28 2022-01-12 Bristol Myers Squibb Co Compuestos de piridopirimidinonilo sustituidos útiles como activadores de células t
CR20220236A (es) 2019-11-28 2022-10-03 Bayer Pharma AG Aminoquinolonas sustituidas como inhibidores de dgk alfa para la activación inmune
US20230062100A1 (en) 2019-11-28 2023-03-02 Bayer Aktiengesellschaft Substituted aminoquinolones as dgkalpha inhibitors for immune activation
US20230064809A1 (en) 2019-11-28 2023-03-02 Bayer Aktiengesellschaft Substituted aminoquinolones as dgkalpha inhibitors for immune activation
IL294085A (en) * 2019-12-19 2022-08-01 Bristol Myers Squibb Co Combinations of dgk inhibitors and checkpoint antagonists
CA3162979A1 (en) 2019-12-23 2021-07-01 Upender Velaparthi Substituted piperazine derivatives useful as t cell activators
BR112022012179A2 (pt) 2019-12-23 2022-09-06 Bristol Myers Squibb Co Compostos de quinazolina substituída úteis como ativadores de célula t
KR20220119456A (ko) * 2019-12-23 2022-08-29 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 T 세포 활성화제로서 유용한 치환된 퀴놀리노닐 피페라진 화합물
AR120823A1 (es) * 2019-12-23 2022-03-23 Bristol Myers Squibb Co Compuestos bicíclicos sustituidos útiles como activadores de células t
BR112022012204A2 (pt) * 2019-12-23 2022-09-13 Bristol Myers Squibb Co Compostos de heteroarila substituída úteis como ativadores de célula t
IL294032A (en) 2019-12-24 2022-08-01 Carna Biosciences Inc Compounds that regulate diacylglycerol kinase
AR120896A1 (es) * 2019-12-25 2022-03-30 Astellas Pharma Inc COMPUESTO DE PIRIDAZINIL-TIAZOLCARBOXAMIDA COMO INHIBIDORES DE DGKz
CN115697980B (zh) * 2020-04-24 2025-03-21 拜耳公司 作为dgkzeta抑制剂用于免疫活化的取代的氨基噻唑
WO2021258010A1 (en) * 2020-06-19 2021-12-23 Gossamer Bio Services, Inc. Oxime compounds useful as t cell activators
KR102682398B1 (ko) * 2020-11-26 2024-07-05 주식회사 엘지화학 다이아실글리세롤 키나아제 저해제로서 헤테로사이클 화합물 및 이의 용도
CR20230415A (es) * 2020-11-30 2023-09-08 Kotobuki Pharmaceutical Co Ltd Compuesto de heteroarilcarboxamida
WO2022133083A1 (en) 2020-12-16 2022-06-23 Gossamer Bio Services, Inc. Compounds useful as t cell activators
CN117693508A (zh) 2021-03-03 2024-03-12 朱诺治疗学股份有限公司 T细胞疗法和dgk抑制剂的组合
JP7651018B2 (ja) 2021-06-23 2025-03-25 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド ジアシルグリセロールキナーゼ調節化合物
AU2022299051B2 (en) 2021-06-23 2025-03-13 Gilead Sciences, Inc. Diacylglyercol kinase modulating compounds
JP7686091B2 (ja) 2021-06-23 2025-05-30 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド ジアシルグリセロールキナーゼ調節化合物
MX2023014762A (es) * 2021-06-23 2024-01-15 Gilead Sciences Inc Compuestos moduladores de diacilglicerol quinasa.
WO2023122777A1 (en) * 2021-12-22 2023-06-29 Gossamer Bio Services, Inc. Oxime derivatives useful as t cell activators
WO2023150186A1 (en) * 2022-02-01 2023-08-10 Arvinas Operations, Inc. Dgk targeting compounds and uses thereof
WO2023165525A1 (en) * 2022-03-01 2023-09-07 Insilico Medicine Ip Limited Diacylglycerol kinase (dgk) alpha inhibitors and uses thereof
JP2025507915A (ja) * 2022-03-01 2025-03-21 インシリコ メディスン アイピー リミティド ジアシルグリセロールキナーゼ（ＤＧＫ）α阻害剤及びその使用
EP4486741A4 (en) 2022-03-01 2026-04-08 Insilico Medicine Ip Ltd Diacylglycerol Kinase (DGK) Alpha Inhibitors and Their Uses
AU2023235233A1 (en) 2022-03-14 2024-09-12 Slap Pharmaceuticals Llc Multicyclic compounds
US20250215014A1 (en) * 2022-03-31 2025-07-03 InventisBio Co., Ltd. Kinase inhibitors, preparation methods and uses thereof
US12600723B2 (en) 2022-07-18 2026-04-14 Incyte Corporation Tetracyclic compounds as DGK inhibitors
US12600722B2 (en) 2022-07-18 2026-04-14 Incyte Corporation Tetracyclic compounds as DGK inhibitors
US20240083898A1 (en) * 2022-08-15 2024-03-14 Incyte Corporation Tricyclic triazolo compounds as dgk inhibitors
EP4583876A1 (en) 2022-09-08 2025-07-16 Juno Therapeutics, Inc. Combination of a t cell therapy and continuous or intermittent dgk inhibitor dosing
EP4661869A1 (en) 2023-02-06 2025-12-17 Bayer Aktiengesellschaft Combinations of dgk (diacylglycerol kinase) inhibitors and immune checkpoint inhibitors and modulators
CN116375654B (zh) * 2023-03-22 2024-12-31 湖北三峡实验室 一种由双甘肽制备2,5-二酮哌嗪的方法
CN119143715B (zh) * 2024-11-12 2025-03-14 天津匠新致成科技有限公司 二芳基团甲基哌嗪类化合物及其制备方法、药物组合物和应用

Family Cites Families (67)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4324893A (en) 1979-04-18 1982-04-13 American Home Products Corporation 4-Amino-3-carboxy or cyano-1,2-dihydro-2-oxo-1,8-naphthyridine derivatives
UY27304A1 (es) 2001-05-24 2002-12-31 Avanir Pharmaceuticals Inhibidores del factor inhibidor de la migración de los macrófagos y métodos para su identificación
BR0312204A (pt) 2002-06-27 2005-04-26 Schering Ag Antagonista de receptor ccr5 de quinolina substituìda
GB0230018D0 (en) 2002-12-23 2003-01-29 Syngenta Ltd Fungicides
TW200418829A (en) 2003-02-14 2004-10-01 Avanir Pharmaceutics Inhibitors of macrophage migration inhibitory factor and methods for identifying the same
WO2004087880A2 (en) 2003-03-26 2004-10-14 Bayer Pharmaceuticals Corporation Compounds and their use to treat diabetes and related disorders
GB0316915D0 (en) 2003-07-18 2003-08-20 Glaxo Group Ltd Compounds
EP1660087A2 (en) 2003-07-22 2006-05-31 Janssen Pharmaceutica N.V. Quinolinone derivatives as inhibitors of c-fms kinase
CN1839133A (zh) 2003-08-22 2006-09-27 阿文尼尔药品公司 作为巨噬细胞移动抑制因子的抑制剂的取代的二氮杂萘衍生物及其在治疗人类疾病中的应用
US7381401B2 (en) 2004-01-08 2008-06-03 The University Of Chicago T cell anergy is reversed by active Ras and regulated by diacylglycerol kinase
TWI380996B (zh) 2004-09-17 2013-01-01 Hoffmann La Roche 抗ｏｘ４０ｌ抗體
PT2343320T (pt) 2005-03-25 2018-01-23 Gitr Inc Anticorpos anti-gitr e as suas utilizações
PL1879573T3 (pl) 2005-05-10 2013-05-31 Incyte Holdings Corp Modulatory 2,3-dioksygenazy indoloaminy i sposoby ich zastosowania
PT1907424E (pt) 2005-07-01 2015-10-09 Squibb & Sons Llc Anticorpos monoclonais humanos para o ligando 1 de morte programada (pd-l1)
US8450351B2 (en) 2005-12-20 2013-05-28 Incyte Corporation N-hydroxyamidinoheterocycles as modulators of indoleamine 2,3-dioxygenase
GB0605689D0 (en) 2006-03-21 2006-05-03 Novartis Ag Organic compounds
JP2007308402A (ja) 2006-05-17 2007-11-29 Sumitomo Chemical Co Ltd シンナモイル化合物及びその用途
JP2007308441A (ja) 2006-05-22 2007-11-29 Sumitomo Chemical Co Ltd 含複素環化合物及びその用途
WO2008036642A2 (en) 2006-09-19 2008-03-27 Incyte Corporation N-hydroxyamidinoheterocycles as modulators of indoleamine 2,3-dioxygenase
CL2007002650A1 (es) 2006-09-19 2008-02-08 Incyte Corp Compuestos derivados de heterociclo n-hidroxiamino; composicion farmaceutica, util para tratar cancer, infecciones virales y desordenes neurodegenerativos entre otras.
EP1987839A1 (en) 2007-04-30 2008-11-05 I.N.S.E.R.M. Institut National de la Sante et de la Recherche Medicale Cytotoxic anti-LAG-3 monoclonal antibody and its use in the treatment or prevention of organ transplant rejection and autoimmune disease
US8591886B2 (en) 2007-07-12 2013-11-26 Gitr, Inc. Combination therapies employing GITR binding molecules
EP2044949A1 (en) 2007-10-05 2009-04-08 Immutep Use of recombinant lag-3 or the derivatives thereof for eliciting monocyte immune response
US10047066B2 (en) 2007-11-30 2018-08-14 Newlink Genetics Corporation IDO inhibitors
WO2009156652A1 (fr) 2008-05-29 2009-12-30 Saint-Gobain Centre De Recherches Et D'etudes Europeen Structure en nid d'abeille a base de titanate d'aluminium
AR072999A1 (es) 2008-08-11 2010-10-06 Medarex Inc Anticuerpos humanos que se unen al gen 3 de activacion linfocitaria (lag-3) y los usos de estos
WO2010042489A2 (en) 2008-10-06 2010-04-15 Emory University Aminoquinoline derived heat shock protein 90 inhibitors, methods of preparing same, and methods for their use
EP3255060A1 (en) 2008-12-09 2017-12-13 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-pd-l1 antibodies and their use to enhance t-cell function
US20110319416A1 (en) 2009-01-28 2011-12-29 Emory University Subunit Selective NMDA Receptor Antagonists For The Treatment Of Neurological Conditions
KR101790802B1 (ko) 2009-09-03 2017-10-27 머크 샤프 앤드 돔 코포레이션 항-ｇｉｔｒ 항체
EP2493862B1 (en) 2009-10-28 2016-10-05 Newlink Genetics Corporation Imidazole derivatives as ido inhibitors
ES2722300T3 (es) 2009-12-10 2019-08-09 Hoffmann La Roche Anticuerpos que se unen preferentemente al dominio extracelular 4 de CSF1R y su uso
EP2542256B1 (en) 2010-03-04 2019-05-22 MacroGenics, Inc. Antibodies reactive with b7-h3, immunologically active fragments thereof and uses thereof
US9169323B2 (en) 2010-03-05 2015-10-27 Hoffmann-La Roche Inc. Antibodies against human CSF-1R
JP5989547B2 (ja) 2010-03-05 2016-09-07 エフ・ホフマン−ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト ヒトｃｓｆ−１ｒに対する抗体及びその使用
HRP20190047T1 (hr) 2010-05-04 2019-02-22 Five Prime Therapeutics, Inc. Protutijela koja se vežu na csf1r
US9050334B2 (en) 2010-07-16 2015-06-09 Innov88 Llc MIF inhibitors and their uses
MX337040B (es) 2010-09-09 2016-02-09 Pfizer Moleculas de union a 4-1bb.
WO2012142498A2 (en) 2011-04-13 2012-10-18 Innovimmune Biotherapeutics, Inc. Mif inhibitors and their uses
NO2694640T3 (sr) 2011-04-15 2018-03-17
JP6072771B2 (ja) 2011-04-20 2017-02-01 メディミューン，エルエルシー Ｂ７−ｈ１およびｐｄ−１に結合する抗体およびその他の分子
KR101764096B1 (ko) 2011-11-28 2017-08-02 메르크 파텐트 게엠베하 항-ｐｄ-ｌ1 항체 및 그의 용도
RU2658603C2 (ru) 2011-12-15 2018-06-21 Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг Антитела против человеческого csf-1r и их применения
KR20140127855A (ko) 2012-02-06 2014-11-04 제넨테크, 인크. Csf1r 억제제를 사용하는 조성물 및 방법
AR089939A1 (es) 2012-02-09 2014-10-01 Glenmark Pharmaceuticals Sa COMPUESTOS BICICLICOS COMO INHIBIDORES DE mPGES-1
AR090263A1 (es) 2012-03-08 2014-10-29 Hoffmann La Roche Terapia combinada de anticuerpos contra el csf-1r humano y las utilizaciones de la misma
RU2670743C9 (ru) 2012-05-11 2018-12-19 Файв Прайм Терапьютикс, Инк. Способы лечения состояний антителами, которые связывают рецептор колониестимулирующего фактора 1 (csf1r)
UY34887A (es) 2012-07-02 2013-12-31 Bristol Myers Squibb Company Una Corporacion Del Estado De Delaware Optimización de anticuerpos que se fijan al gen de activación de linfocitos 3 (lag-3) y sus usos
CN107759690A (zh) 2012-08-31 2018-03-06 戊瑞治疗有限公司 用结合群落刺激因子1受体(csf1r)的抗体治疗病状的方法
WO2014039513A2 (en) 2012-09-04 2014-03-13 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Inhibition of diacylglycerol kinase to augment adoptive t cell transfer
ES2898765T3 (es) 2015-04-10 2022-03-08 Araxes Pharma Llc Compuestos de quinazolina sustituidos y métodos de uso de los mismos
PT3889145T (pt) 2015-12-17 2024-04-02 Merck Patent Gmbh 8-ciano-5-piperidino-quinolinas como antagonistas de tlr7/8 e suas utilizações para tratamento de distúrbios imunitários
CN107216325B (zh) 2016-03-22 2019-06-25 上海医药工业研究院 萘啶酮类化合物、及其制备方法和应用
US10946020B2 (en) * 2016-04-06 2021-03-16 University Of Virginia Patent Foundation Compositions and methods for treating cancer
CN110366550A (zh) 2016-12-22 2019-10-22 美国安进公司 作为用于治疗肺癌、胰腺癌或结直肠癌的KRAS G12C抑制剂的苯并异噻唑、异噻唑并[3,4-b]吡啶、喹唑啉、酞嗪、吡啶并[2,3-d]哒嗪和吡啶并[2,3-d]嘧啶衍生物
WO2018134885A1 (ja) 2017-01-17 2018-07-26 初実 田中 支援奨励システムおよび支援奨励方法
GB201700814D0 (en) 2017-01-17 2017-03-01 Liverpool School Tropical Medicine Compounds
AU2018273356B2 (en) 2017-05-22 2021-09-16 Amgen Inc. KRAS G12C inhibitors and methods of using the same
US12187687B2 (en) 2017-06-26 2025-01-07 University Of Virginia Patent Foundation Compositions and uses thereof
FI3761980T3 (fi) 2018-03-07 2024-02-21 Pliant Therapeutics Inc Aminohappoyhdisteitä ja käyttömenetelmiä
US20210238136A1 (en) 2018-06-07 2021-08-05 Daiichi Sankyo Company, Limited Azetidine derivative, and prodrug thereof
TWI841573B (zh) 2018-06-27 2024-05-11 美商普萊恩醫療公司 具有未分支連接子之胺基酸化合物及使用方法
TWI833770B (zh) 2018-06-27 2024-03-01 美商Ionis製藥公司 用於減少 lrrk2 表現之化合物及方法
BR112020026637A2 (pt) 2018-06-27 2021-03-30 Reborna Biosciences, Inc. Agente profilático ou terapêutico para atrofia muscular espinhal
JP7561632B2 (ja) 2018-06-27 2024-10-04 キネタ， インコーポレイテッド プロテアソーム活性増強化合物
AU2019292207B2 (en) 2018-06-27 2022-06-30 Oscotec Inc. Pyridopyrimidinone derivatives for use as Axl inhibitors
WO2020006031A1 (en) 2018-06-27 2020-01-02 Biogen Ma Inc. Ask1 inhibiting agents

Also Published As

Publication number Publication date
JP7432532B2 (ja) 2024-02-16
DK3814348T3 (da) 2023-10-30
LT3814348T (lt) 2023-10-10
US20220324859A1 (en) 2022-10-13
ZA202100555B (en) 2022-07-27
US20200109140A1 (en) 2020-04-09
EP3814348B9 (en) 2023-11-01
ES2960754T3 (es) 2024-03-06
PT3814348T (pt) 2023-10-17
AU2019291794A1 (en) 2021-02-11
BR112020026681A2 (pt) 2021-04-06
US10669272B2 (en) 2020-06-02
EP3814348A1 (en) 2021-05-05
JP2021529191A (ja) 2021-10-28
TW202019924A (zh) 2020-06-01
WO2020006018A1 (en) 2020-01-02
SI3814348T1 (sl) 2023-10-30
IL279728B2 (en) 2023-07-01
CN112654621A (zh) 2021-04-13
SMT202300466T1 (it) 2024-01-10
KR20210024586A (ko) 2021-03-05
CY1126280T1 (el) 2026-02-25
MX2020013817A (es) 2021-03-09
SG11202012972YA (en) 2021-01-28
US10954238B1 (en) 2021-03-23
CA3104654A1 (en) 2020-01-02
FI3814348T3 (fi) 2023-09-22
HUE064531T2 (hu) 2024-04-28
EP3814348B1 (en) 2023-08-02
IL279728B1 (en) 2023-03-01
IL279728A (en) 2021-03-01
KR102767739B1 (ko) 2025-02-12
US11713316B2 (en) 2023-08-01
PL3814348T3 (pl) 2023-09-11
PE20210469A1 (es) 2021-03-08
HRP20231253T1 (hr) 2024-02-02
CN112654621B (zh) 2024-05-14
AU2019291794B2 (en) 2022-06-16
CL2020003260A1 (es) 2021-04-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11713316B2 (en) Substituted naphthyridinone compounds useful as T cell activators
US11584747B2 (en) Substituted pyridopyrimidinonyl compounds useful as T cell activators
KR102808367B1 (ko) Hpk1 억제제로서 유용한 이소푸라논 화합물
ES3008848T3 (en) Substituted bicyclic piperidine derivatives useful as t cell activators
RS64285B1 (sr) Jedinjenja naftiridinona korisna kao aktivatori t ćelija
KR20220120624A (ko) T 세포 활성화제로서 유용한 치환된 피페라진 유도체
WO2020023356A1 (en) Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
EA043061B1 (ru) Замещенные нафтиридиноновые соединения, полезные в качестве активаторов т-клеток