RS64770B1

RS64770B1 - Sinergistički postupci upotrebe jedinjenja benzoksaborola i gasova za prezerviranje kao antimikrobnih agenasa za useve

Info

Publication number: RS64770B1
Application number: RS20231020A
Authority: RS
Inventors: Rodrigo Cifuentes; Daniel Maclean; Renee Engle-Goodner; Timothy Malefyt
Original assignee: Agrofresh Inc
Priority date: 2016-03-07
Filing date: 2017-03-06
Publication date: 2023-11-30
Also published as: EP3426029A1; TW201735792A; US20210137121A1; CA3015662A1; US12213485B2; CL2018002546A1; AU2017229098A1; US20170251673A1; AR107819A1; NZ745681A; US10966429B2; AU2017229098B2; EP3426029A4; WO2017155879A1; EP3426029B1

Description

Opis

OBLAST PREDMETNE PRIJAVE

[0001] Predmetna prijava se odnosi na postupke za upotrebu jedinjenja benzoksaborola sa gasovima za prezerviranje, kao što su ugljen-dioksid ili sumpor-dioksid, kao antimikrobnih agenasa za kontrolu ili inhibiranje patogena poljoprivrednih useva.

POZADINA

[0002] Benzoksaborol je lek za koji se zna da je efikasan u lečenju eukariotskih gljivičnih i parazitskih infekcija. Na primer, benzoksaborol se upotrebljava za lečenje gljivičnih stanja koja utiču na nokte na nogama i rukama ljudi, kao što je onihomikoza. Takođe je poznato da je benzoksaborol efikasan tretman za humanu afričku tripanosomijazu, koja se uobičajeno naziva afrička bolest spavanja, koju izazivaju T. brucei paraziti koji godišnje inficiraju na hiljade ljudi u podsaharskoj Africi.

[0003] Jedan mehanizam kojim je pokazano da benzoksaborol ispoljava antimikrobne efekte je blokiranje ili inhibiranje sinteze proteina u gljivama. Takođe je pokazano da benzoksaborol blokira gljivičnu citoplazmatsku leucil-tRNA sintetazu (LeuRS) kako bi ispoljio antimikrobne efekte. Dopunski mehanizmi delovanja pomoću kojih benzoksaborol deluje kao antibakterijski, antifungalni, ili antimikrobni agens još uvek nisu shvaćeni.

[0004] Takođe je pokazano da benzoksaborol ima antimikrobne efekte kod biljaka. Na primer, dokazano je da je jedinjenje benzoksaborola efikasno kao isparljivi fungicid za biljke. Predmetna objava opisuje postupke upotrebe jedinjenja benzoksaborola kombinovanih sa gasovima za prezerviranje, kao što su ugljen-dioksid (CO2) i sumpor-dioksid (SO2), kako bi se inhibirali patogeni biljaka. Specifičnije, predmetna objava obezbeđuje postupke upotrebe benzoksaborola kombinovanih sa CO2ili SO2kako bi se obezbedila sinergistička antimikrobna zaštita biljkama i delovima biljaka koja ima prednosti u odnosu na druge prethodno opisane antimikrobne tretmane biljaka.

[0005] US 2014/0349853 A1 se odnosi na upotrebu isparljivog antimikrobnog jedinjenja protiv patogena koji utiču na meso, biljke ili delove biljaka. Opšte procedure za zaštitu voća i povrća opisane su u Fruit and Vegatable Processing od strane Mircea Enachescu Dauthy (FAO Agricultural Services Bulletin No.119; ISBN 92-5-103657-8).

SAŽETAK PRONALASKA

[0006] Predmetna objava obezbeđuje postupak tretiranja biljaka sa antimikrobnim agensom. Postupak sadrži postavljanje jedne ili većeg broja biljaka u komoru, i zaptivanje komore. Postupak takođe sadrži dodavanje jedinjenja benzoksaborola u zaptivenu komoru. Postupak dodatno sadrži dodavanje gasa za prezerviranje u zaptivenu komoru, pri čemu se jedinjenje benzoksaborola i gas za prezerviranje kombinuju u komori kako bi se formirao tretman. Konačno, postupak obezbeđuje primenu tretmana biljkama, a zatim, otvaranje komore.

[0007] U postupku koji je ovde opisan, jedna ili veći broj biljaka mogu biti jagode ili grožđe. Pored toga, jedinjenje benzoksaborola iz predmetnog postupka može biti Jedinjenje A ili Jedinjenje B. Konačno, u predmetnom postupku tretiranja biljaka, gas za prezerviranje može biti CO2. Svi primeri izvođenja, odlike, elementi, ili ograničenja postupaka koji su ovde opisani mogu se kombinovati sa drugim primerima izvođenja, odlikama, elementima, ili ograničenjima postupaka koji su ovde opisani.

DETALJAN OPIS

[0008] Razmatrani su sledeći numerisani primeri izvođenja:

1. Postupak tretiranja biljaka ili delova biljaka sa antimikrobnim agensom sadrži:

postavljanje jedne ili većeg broja biljaka ili delova biljaka u komoru, zaptivanje komore,

dodavanje jedinjenja benzoksaborola u komoru,

dodavanje gasa za prezerviranje u komoru,

pri čemu se jedinjenje benzoksaborola i gas za prezerviranje kombinuju kako bi formirali antimikrobni tretman,

primenu antimikrobnog tretmana jednoj ili većem broju biljaka ili delova biljaka u zaptivenoj komori, i

otvaranje komore;

pri čemu je gas za prezerviranje CO2ili SO2;

pri čemu kada je gas za prezerviranje CO2, koncentracija CO2antimikrobnog tretmana je u opsegu od oko 4% do oko 20%; i

pri čemu kada je gas za prezerviranje SO2, koncentracija SO2antimikrobnog tretmana je u opsegu od oko 0,001% do oko 1%; i

pri čemu je jedinjenje benzoksaborola Jedinjenje A koje ima strukturu:

ili

Jedinjenje B koje ima strukturu:

2. Postupak prema klauzuli 1 ili klauzuli 2, pri čemu je jedna ili veći broj biljaka ili delova biljaka meko voće.

3. Postupak prema klauzuli 2, pri čemu je meko voće odabrano iz grupe koja se sastoji od jagoda, malina, kupina, i grožđa.

4. Postupak prema bilo kojoj od klauzula 1 do 3, pri čemu je jedinjenje benzoksaborola Jedinjenje A koje ima strukturu:

5. Postupak prema bilo kojoj od klauzula 1 do 3, pri čemu je jedinjenje benzoksaborola Jedinjenje B koje ima strukturu:

6. Postupak prema bilo kojoj od klauzula 1 do 5, pri čemu je jedinjenje benzoksaborola u obliku tečnosti, gasa, magle, ili čvrste supstance.

7. Postupak prema klauzuli 6, pri čemu je čvrsto jedinjenje benzoksaborola prašak. 8. Postupak prema bilo kojoj od klauzula 1 do 7, pri čemu je gas za prezerviranje CO2.

9. Postupak prema bilo kojoj od klauzula 1 do 7, pri čemu je gas za prezerviranje SO2.

10. Postupak prema bilo kojoj od klauzula 1 do 8, pri čemu je koncentracija CO2antimikrobnog tretmana oko 12%.

11. Postupak prema bilo kojoj od klauzula 1 do 10, pri čemu je antimikrobni tretman u obliku spreja, izmaglice, gela, termalne magle, netermalne magle, potapanja, kvašenja, pare, gasa, ili sublimacije.

12. Postupak prema bilo kojoj od klauzula 1 do 11, pri čemu primena antimikrobnog tretmana sadrži oslobađanje antimikrobnog tretmana iz materijala koji je odabran iz grupe koja se sastoji od kesice, sintetičkog filma, prirodnog filma, obloge, generatora za oslobađanje gasa, cilindra sa komprimovanim gasom, cilindra sa nekomprimovanim gasom, cilindra koji sadrži rastvoreni superkritični CO2, i kapljice unutar kutije.

13. Postupak prema bilo kojoj od klauzula 1 do 12, pri čemu antimikrobni tretman dodatno sadrži komponentu koja je odabrana iz grupe koja se sastoji od 1-metilciklopropena, adjuvanasa, i pesticida.

14. Postupak prema bilo kojoj od klauzula 1 do 13, pri čemu antimikrobni tretman dodatno sadrži nosač tretmana.

15. Postupak prema klauzuli 14, pri čemu nosač tretmana sadrži tečnost, gas, rastvor, rastvarač, i hemikaliju.

16. Postupak prema klauzuli 14 ili klauzuli 15, pri čemu je nosač tretmana superkritični 17. Postupak prema klauzuli 14 ili klauzuli 15, pri čemu je nosač tretmana odabran iz grupe koja se sastoji od vode, fiziološkog rastvora, pufera, rastvora, i rastvarača.

18. Postupak prema bilo kojoj od klauzula 1 do 17, pri čemu je antimikrobni tretman efikasan protiv patogena biljaka.

19. Postupak prema klauzuli 18, pri čemu su patogeni biljaka gljivični patogeni.

20. Postupak prema klauzuli 18 ili klauzuli 19, pri čemu su patogeni biljaka odabrani iz grupe koja se sastoji od Acremonium spp., Albugo spp., Alternaria spp., Ascochyta spp., Aspergillus spp., Botryodiplodia spp., Botryospheria spp., Botrytis spp., Byssochlamys spp., Candida spp., Cephalosporium spp., Ceratocystis spp., Cercospora spp., Chalara spp., Cladosporium spp., Colletotrichum spp., Cryptosporiopsis spp., Cylindrocarpon spp., Debaryomyces spp., Diaporthe spp., Didymella spp., Diplodia spp., Dothiorella spp., Elsinoe spp., Fusarium spp., Geotrichum spp., Gloeosporium spp., Glomerella spp., Helminthosporium spp., Khuskia spp., Lasiodiplodia spp., Macrophoma spp., Macrophomina spp., Microdochium spp., Monilinia spp., Monilochaethes spp., Mucor spp., Mycocentrospora spp., Mycosphaerella spp., Nectria spp., Neofabraea spp., Nigrospora spp., Penicillium spp., Peronophythora spp., Peronospora spp., Pestalotiopsis spp., Pezicula spp., Phacidiopycnis spp., Phoma spp., Phomopsis spp., Phyllosticta spp., Phytophthora spp., Polyscytalum spp., Pseudocercospora spp., Pyricularia spp., Pythium spp., Rhizoctonia spp., Rhizopus spp., Sclerotium spp., Sclerotinia spp., Septoria spp., Sphaceloma spp., Sphaeropsis spp., Stemphyllium spp., Stilbella spp., Thielaviopsis spp., Thyronectria spp., Trachysphaera spp., Uromyces spp., Ustilago spp., Venturia spp., i Verticillium spp., i bakterijskih patogena, kao što su Bacillus spp., Campylobacter spp., Clavibacter spp., Clostridium spp., Erwinia spp., Escherichia spp., Lactobacillus spp., Leuconostoc spp., Listeria spp., Pantoea spp., Pectobacterium spp., Pseudomonas spp., Ralstonia spp., Salmonella spp., Shigella spp., Staphylococcus spp., Vibrio spp., Xanthomonas spp., i Yersinia spp.

21. Postupak prema bilo kojoj od klauzula 18 do 20, pri čemu su patogeni biljaka odabrani iz grupe koja se sastoji od Botrytis cinerea, Mucor piriformis, Fusarium sambucinum, Aspergillus brasiliensis, i Penicillium expansum.

22. Postupak prema bilo kojoj od klauzula 1 do 21, pri čemu je temperatura komore u opsegu od 1 °C do 25 °C.

23. Postupak prema bilo kojoj od klauzula 1 do 22, pri čemu je komora nepropusna za vazduh.

24. Postupak prema bilo kojoj od klauzula 1 do 23, pri čemu je komora polupropusna ili nepropusna.

25. Postupak prema bilo kojoj od klauzula 1 do 24, pri čemu je komora napravljena od materijala koji je odabran iz grupe koja se sastoji od plastike, stakla, celuloznog materijala, i cementa.

26. Postupak prema bilo kojoj od klauzula 1 do 25, pri čemu komora sadrži otvor, izvod, ili oba.

27. Postupak prema bilo kojoj od klauzula 1 do 26, pri čemu komora može imati zapreminu u opsegu od oko 10 l do oko 50 l.

28. Postupak prema bilo kojoj od klauzula 1 do 26, pri čemu komora može imati zapreminu u opsegu od oko 0,5 cm<3>do oko 150 cm<3>.

29. Postupak prema bilo kojoj od klauzula 1 do 26, pri čemu komora može imati zapreminu u opsegu od oko 100 cm<3>do oko 10.000 cm<3>.

30. Postupak prema bilo kojoj od klauzula 1 do 29, pri čemu se jedna ili veći broj biljaka ili delova biljaka ručno ili robotski postavljaju u komoru.

31. Postupak prema bilo kojoj od klauzula 1 do 30, pri čemu se jedna ili veći broj biljaka ili delova biljaka tretiraju tokom inicijalnog vremenskog perioda u opsegu od oko 12 sati do oko 5 dana.

32. Postupak prema bilo kojoj od klauzula 1 do 31, pri čemu je koncentracija antimikrobnog tretmana u opsegu od oko 0,0001 mg/l do oko 0,5 mg/l.

33. Postupak prema bilo kojoj od klauzula 1 do 32, pri čemu je vreme za primenu antimikrobnog tretmana u opsegu od oko 3 sekunde do oko 2 sata.

34. Postupak prema bilo kojoj od klauzula 1 do 33, pri čemu postupak rezultuje sinergističkom inhibicijom patogena biljaka na jednoj ili većem broju tretiranih biljaka ili delova biljaka.

[0009] Termini "biljka(e)" i "delovi biljaka" uključuju, ali nisu ograničeni na, biljne ćelije i biljna tkiva, kao što su lišće, kalusi, stabljike, korenje, voće, povrće, cveće ili delovi cveta, polen, jajne ćelije, zigoti, semena, reznice, kulture ćelija ili tkiva, ili bilo koji drugi deo ili proizvod biljke. Klasa biljaka koja se može upotrebljavati u predmetnom pronalasku je generalno toliko široka koliko je i klasa viših i nižih biljaka uključujući, ali ne ograničavajući se na, dikotiledone biljke, monokotiledone biljke, i sve hortikulturne useve.

[0010] Hortikulturni usevi uključuju, ali nisu ograničeni na, povrtarske useve, voćarske useve, jestivo orašasto voće, cveće i ukrasne useve, rasadničke useve, aromatične useve, i lekovite useve. Specifičnije, hortikulturni usevi iz predmetne objave uključuju, ali nisu ograničeni na, voće (npr. grožđe, jabuka, kruška, i persimon) i bobičasto voće (npr. jagode, kupine, borovnice, i maline).

[0011] Fraza "gasovi za prezerviranje" označava hemikalije u njihovom gasovitom obliku koje deluju kao prezervans biljaka i delova biljaka iz predmetnog pronalaska. Na primer, gasovi za prezerviranje iz predmetne prijave pomažu u održavanju izgleda, svežine, ukusa, i sprečavaju truljenje biljaka i delova biljaka iz ovog pronalaska. Gasovi za prezerviranje iz predmetnog pronalaska su ugljen-dioksid (CO2) i sumpor-dioksid (SO2).

[0012] Fraza "superkritični CO2" označava rastvarač pri čemu se tečno stanje ugljen-dioksida (CO2) održava na ili iznad svoje kritične temperature i kritičnog pritiska. Tipično, CO2na ili iznad svoje kritične temperature i kritičnog pritiska može da usvoji svojstva koja su između gasa i tečnosti. Specifičnije, CO2se može ponašati kao superkritični fluid na ili iznad svoje kritične temperature i kritičnog pritiska, tako da CO2može da ispuni kontejner kao gas, ali ima gustinu kao tečnost.

JEDINJENJA I KOMPONENTE IZ PREDMETNIH POSTUPAKA

[0013] Postupci iz predmetne objave usmereni su na upotrebu jedinjenja benzoksaborola u kombinaciji sa gasovima za prezerviranje ili hemikalijama kao antimikrobnih agenasa za tretiranje biljaka ili delova biljaka. Postupci iz predmetne objave za tretiranje biljaka ili delova biljaka sadrže, suštinski se sastoje od, ili se sastoje od jedinjenja benzoksaborola.

[0014] Primeri izvođenja koji služe kao primer jedinjenja iz predmetne objave sadrže Jedinjenja A i B, koja mogu da obuhvataju dijastereomere i enantiomere ilustrativnih jedinjenja. Enantiomeri su definisani kao jedan od para molekulskih entiteta koji su međusobne slike u ogledalu i nepreklapajuće su. Dijastereomeri ili dijastereoizomeri su definisani kao stereoizomeri različiti od enantiomera. Dijastereomeri ili dijastereoizomeri su stereoizomeri koji nisu srodni kao slike u ogledalu. Dijastereoizomere karakterišu razlike u fizičkim svojstvima.

[0015] Jedan primer izvođenja koji služi kao primer jedinjenja benzoksaborola iz predmetnog postupka je Jedinjenje A:

Dopunski ilustrativni primer izvođenja jedinjenja benzoksaborola iz predmetnog postupka je Jedinjenje B:

[0016] Jedinjenja A i/ili B se mogu upotrebljavati pojedinačno ili kao smeša ili kombinacija. Jedinjenja benzoksaborola se takođe mogu upotrebljavati u kombinaciji sa gasovima za prezerviranje ili hemikalijama za formiranje tretmana benzoksaborolom. Tretman benzoksaborolom obezbeđuje antimikrobnu zaštitu biljkama ili delovima biljaka kada se primenjuje, nanosi, ili izlaže biljkama ili delovima biljaka.

[0017] Jedinjenja A i/ili B benzoksaborola mogu se upotrebljavljati u bilo kom obliku, uključujući, ali ne ograničavajući se na, tečnost, čvrstu supstancu (npr. prašak), ili gasovitu kompoziciju. Konkretno, predmetni postupak obezbeđuje primenu jedinjenja benzoksaborola kao, na primer, sprej, izmaglicu, gel, termalnu i netermalnu maglu, potapanje ili kvašenje, ili putem sublimacije, pare, ili gasa. Dopunski primeri primene tretmana benzoksaborolom uključuju, ali nisu ograničeni na, oslobađanje iz kesice, sintetičkog ili prirodnog filma, obloge ili drugih materijala za pakovanje, generatora za oslobađanje gasa, cilindra sa komprimovanim ili nekomprimovanim gasom, rastvoren u superkritičnom CO2unutar cilindra, kapljice unutar kutije, ili druge slične postupke kao što je opisano u S.A.D. patentima br.8,669,207, 9,138,001, i 9,138,001, i S.A.D. patentnoj publikaciji br.2014/0349853.

[0018] Aktivna jedinjenja se mogu naneti na biljke ili delove biljaka u zapremini komore. Komora iz predmetne objave može biti bilo koji kontejner koji može biti zaptiven iz kojeg gas ili hemikalija ne mogu lako da pobegnu nakon što su introdukovani u zaptivenu komoru. Na primer, komora može biti napravljena od plastike, stakla, ili bilo kog drugog polupropusnog ili nepropusnog materijala.

[0019] Komora može imati otvor (npr. pregradni otvor septuma (bulkhead septum port)) za introdukovanje hemijskog tretmana, bilo kao gas ili tečnost (npr. voda ili rastvor na bazi rastvarača koji sadrži proizvod) ili kao maglu. Komora takođe može imati izvod za ventilaciju ili uklanjanje neiskorišćenog dela nosača tretmana.

[0020] Nosači iz predmetne objave mogu se kombinovati sa aktivnim jedinjenjima benzoksaborola kako bi se formirao tretman benzoksaborolom. Nosači tretmana iz predmetne objave mogu sadržati gasove, rastvore, rastvarače, ili hemikalije. Na primer, tečni nosač iz predmetne objave može sadržati vodu, pufer, fiziološki rastvor, rastvarač, itd. Ilustrativni gasni nosači za predmetni pronalazak su superkritični CO2i/ili CO2sadržan u čeličnom cilindru.

[0021] Komora iz predmetne objave može biti bilo koji kontejner ili materijal iz kog se gas ili hemikalija mogu introdukovati na prehrambeni proizvod u komori. Na primer, komora može biti napravljena od plastike, stakla, celuloznog materijala, cementa, ili bilo kog drugog polupropusnog ili nepropusnog materijala.

[0022] Komora može biti bilo koje veličine koja je dovoljno velika da sadrži biljke i delove biljaka koje treba tretirati. Na primer, primer komore može imati zapreminu od oko 10 litara (l) do oko 50 l, od oko 20 l do oko 40 l, od oko 25 l do oko 50 l, od oko 30 l do oko 40 l, od oko 35 l do oko 40 l, i oko 35 l ili oko 36 l. Pored toga, ilustrativna komora može biti paleta koja može imati veličinu, zaptivenu ili nezaptivenu, u opsegu od 0,5 kubnih metara do oko 150 kubnih metara.

[0023] Pored toga, primer komore iz predmetnog pronalaska može biti velika prostorija za skladištenje (npr. gimnastička sala) koja ima prazan prostor na vrhu (headspace) od nekoliko stotina do nekoliko hiljada kubnih metara. Stoga, primer komore iz predmetnog pronalaska može imati veličinu praznog prostora na vrhu u opsegu od 100 do oko 10.000 kubnih metara, od oko 100 do oko 8.000 kubnih metara, od oko 100 do oko 7.500 kubnih metara, od oko 100 do oko 5.000 kubnih metara, od oko 200 do oko 3000 kubnih metara, i oko 1000 kubnih metara.

[0024] Tretmani gasovitim benzoksaborolom mogu se naneti na biljke ili delove biljaka u koncentraciji koja se nanosi tokom približno 3 do oko 5 sekundi do oko dva sata. Koncentracija tretmana gasovitom hemikalijom može se saopštiti kao količina (miligrami, mg) aktivnog sastojka (tj. jedinjenja benzoksaborola) po zapremini (litar, l) praznog prostora na vrhu komore ili količina (miligrami, mg) aktivnog sastojka (tj. jedinjenja benzoksaborola) po masi (kilogram, kg) useva.

[0025] Na primer, stopa kojom se tretman benzoksaborolom može efikasno naneti u komori i/ili na biljke može biti u opsegu od 0,001 mg/l do 0,5 mg/l. Na primer, stopa tretmana benzoksaborolom može biti od oko 0,002 mg/l do oko 0,2 mg/l, 0,002 mg/l do oko 0,14 mg/l, 0,002 mg/l do oko 0,035 mg/l, 0,002 mg/l do oko 0,0088 mg/l, 0,002 mg/l do oko 0,044 mg/l, od oko 0,004 mg/l do oko 0,15 mg/l, od oko 0,0044 mg/l do oko 0,14 mg/l, od oko 0,0044 mg/l do oko 0,0088 mg/l, od oko 0,0044 mg/l do oko 0,035 mg/l, od oko 0,0088 mg/l do oko 0,14 mg/l, od oko 0,035 mg/l do oko 0,14 mg/l, od oko 0,0088 mg/l do oko 0,035 mg/l, od oko 0,001 mg/l do oko 0,2 mg/l, od oko 0,001 mg/l do oko 0,14 mg/l, od oko 0,001 mg/l do oko 0,0088 mg/l, od oko 0,001 mg/l do oko 0,0044 mg/l, i oko 0,0044 mg/l, oko 0,0088 mg/l, oko 0,035 mg/l, i oko 0,14 mg/l.

[0026] Gasovi za prezerviranje iz postupka u skladu sa pronalaskom su ugljen-dioksid (CO2) i sumpor-dioksid (SO2). Dopunske hemikalije koje se mogu kombinovati sa jedinjenjem benzoksaborola u predmetnoj objavi uključuju, ali nisu ograničene na, 1-metilciklopropen, adjuvans(e), i komercijalne pesticide. Dodatne hemikalije koje se mogu upotrebljavati u predmetnom postupku uključuju neke koje su prepoznate na saveznom nivou. Na primer, u predmetnom postupku takođe se mogu upotrebljavati jedinjenja koja su opšte prepoznata kao bezbedna (GRAS) prema Zakonu o hrani, lekovima i kozmetici, § § 201 i 409, i hemikalije, uključujući eugenol, karanfilić, timijan ili ulja od mente prema saveznom Zakonu o insekticidima, fungicidima, i rodenticidima (FIFRA) § 25(b), prirodna jedinjenja, ili jedinjenja dobijena iz prirodnih izvora.

[0027] Procenat CO2gasa ili hemikalije koji se može upotrebljavati u predmetnom postupku uključuje od oko 5% do oko 18%, od oko 6% do oko 17%, od oko 7% do oko 15%, od oko 8% do oko 14% %, od oko 8% do oko 13%, od oko 8% do oko 12%, od oko 5% do oko 14%, od oko 6% do oko 13%, od oko 7% do oko 13%, i oko 8%, oko 9%, oko 10%, oko 11%, oko 12%, oko 13%, i oko 14%.

[0028] Procenat SO2gasa ili hemikalije koji se može upotrebljavati u predmetnom postupku uključuje od oko 0,005% do oko 1%, od oko 0,01% do oko 1%, od oko 0,05% do oko 1%, i od oko 0,1% do oko 1%.

[0029] Bilo koje biljke ili delovi biljaka, biljne ćelije, ili biljna tkiva mogu se tretirati upotrebom predmetnog postupka. Klasa biljaka koja se može tretirati u predmetnom pronalasku je generalno toliko široka koliko su i hortikulturni usevi. Hortikulturni usevi, uključuju, ali nisu ograničeni na, povrtarske useve, voćarske useve, jestivo orašasto voće, cveće i ukrasne useve, rasadničke useve, aromatične useve, i lekovite useve. Specifičnije, voće (npr. grožđe, jabuka, kruška, i persimon) i bobičasto voće (npr. jagode, kupine, borovnice, i maline) su biljke koje su obuhvaćene predmetnom objavom. Treba napomenuti da se bilo koja vrsta bobica ili voća može upotrebljavati u predmetnom pronalasku (npr. stono grožđe).

[0030] Biljke i poljoprivredni usevi posle žetve mogu se upotrebljavati u postupku iz predmetne prijave. Na primer, primeri biljaka iz predmetnog pronalaska uključuju biljke i useve nakon žetve tokom pakovanja u polju, paletizacije, u kutiji, tokom skladištenja, i širom distributivne mreže. Dodatno, biljke koje se transportuju na bilo koji način, uključujući, ali ne ograničavajući se na lokalna vozila, transportne prikolice, brodske kontejnere, avionske kontejnere, itd. mogu se tretirati upotrebljavajući postupak koji je ovde opisan. Na primer, minimalno obrađeni upakovani proizvodi (npr. upakovano povrće ili voće) takođe se mogu tretirati sa postupkom koji je ovde opisan.

POSTUPCI UPOTREBE JEDINJENJA BENZOKSABOROLA

[0031] Predmetna objava je usmerena na postupke obezbeđivanja antimikrobne zaštite biljkama od patogena biljaka. Specifičnije, gljivični patogeni biljaka mogu se tretirati, prevenirati, ili iskoreniti pomoću postupka koji je ovde opisan. Primeri patogena koji su obuhvaćeni predmetnom objavom uključuju, ali nisu ograničeni na, Botrytis cinerea, Mucor piriformis, Fusarium sambucinum, Aspergillus brasiliensis, i Penicillium expansum. Dopunski patogeni koji su obuhvaćeni predmetnim pronalaskom uključuju, ali nisu ograničeni na Acremonium spp., Albugo spp., Alternaria spp., Ascochyta spp., Aspergillus spp., Botryodiplodia spp., Botryospheria spp., Botrytis spp., Byssochlamys spp., Candida spp., Cephalosporium spp., Ceratocystis spp., Cercospora spp., Chalara spp., Cladosporium spp., Colletotrichum spp., Cryptosporiopsis spp., Cylindrocarpon spp., Debaryomyces spp., Diaporthe spp., Didymella spp., Diplodia spp., Dothiorella spp., Elsinoe spp., Fusarium spp., Geotrichum spp., Gloeosporium spp., Glomerella spp., Helminthosporium spp., Khuskia spp., Lasiodiplodia spp., Macrophoma spp., Macrophomina spp., Microdochium spp., Monilinia spp., Monilochaethes spp., Mucor spp., Mycocentrospora spp., Mycosphaerella spp., Nectria spp., Neofabraea spp., Nigrospora spp., Penicillium spp., Peronophythora spp., Peronospora spp., Pestalotiopsis spp., Pezicula spp., Phacidiopycnis spp., Phoma spp., Phomopsis spp., Phyllosticta spp., Phytophthora spp., Polyscytalum spp., Pseudocercospora spp., Pyricularia spp., Pythium spp., Rhizoctonia spp., Rhizopus spp., Sclerotium spp., Sclerotinia spp., Septoria spp., Sphaceloma spp., Sphaeropsis spp., Stemphyllium spp., Stilbella spp., Thielaviopsis spp., Thyronectria spp., Trachysphaera spp., Uromyces spp., Ustilago spp., Venturia spp., i Verticillium spp., i bakterijske patogene, kao što su Bacillus spp., Campylobacter spp., Clavibacter spp., Clostridium spp., Erwinia spp., Escherichia spp., Lactobacillus spp., Leuconostoc spp., Listeria spp., Pantoea spp., Pectobacterium spp., Pseudomonas spp., Ralstonia spp., Salmonella spp., Shigella spp., Staphylococcus spp., Vibrio spp., Xanthomonas spp., i Yersinia spp.

[0032] Tretmani benzoksaborolom i gasom za prezerviranje mogu se naneti na biljke ili delove biljaka unutar kontejnera ili komore. U skladu sa postupkom iz pronalaska, komora je zaptivena tokom primene tretmana benzoksaborolom i gasom za prezerviranje. Biljke ili delovi biljaka se ručno ili robotski postavljaju u komoru, i komora se zatim zaptiva. Tretman benzoksaborolom i gasom za prezerviranje se zatim primenjuje na zaptivenu komoru koja sadrži biljke ili delove biljaka putem otvora (npr. pregradni otvor septuma).

[0033] Tretmani benzoksaborolom i gasom za prezerviranje primenjuju se na zaptivenu komoru tokom inicijalnog vremenskog perioda. Na primer, biljke mogu biti izložene tretmanima u komori ili zaptivenom kontejneru tokom bilo kog inicijalnog vremenskog perioda. Ilustrativni inicijalni vremenski period može biti u opsegu od oko 12 sati do oko 5 dana (120 sati), od oko 1 dan do oko 4 dana, od oko 2 dana do oko 3,5 dana, od oko 2 dana do oko 3,5 dana, i oko 3,5 dana. Temperatura zaptivene komore može biti u opsegu od oko 1 °C do oko 25 °C.

[0034] Posle isteka perioda tretmana, može se proceniti inhibicija patogena biljaka. Na primer, in vitro uzorci mogu imati rast patogena na agaru ili u medijumu koji se procenjuje, evaluira, i upoređuje sa kontrolnim uzorkom gde nije primenjen tretman benzoksaborolom ili gasom za prezerviranje ili su primenjeni drugačiji uslovi tretmana. Slično, in vivo uzorci mogu imati ozbiljnost i incidencu gljivične ili bakterijske bolesti koje se procenjuju, evaluiraju, i upoređuju sa kontrolnim uzorkom gde nije primenjen tretman benzoksaborolom ili gasom za prezerviranje ili su primenjeni drugačiji uslovi tretmana.

PRIMERI

[0035] Ilustrativni primeri izvođenja postupaka iz predmetne objave ovde su obezbeđeni putem primera.

[0036] Sledeći eksperimenti su upotrebljeni za određivanje sinergije između Jedinjenja A, ili B benzoksaborola i gasova za prezerviranje, tj. ugljen-dioksida (CO2) i sumpor-dioksida (SO2). Specifične stope ili bilo koji drugi jedinstveni uslovi naznačeni su unutar odgovarajućih tabela sa rezultatima. Svaki eksperiment je sadržao hermetičku komoru od 36 litara (l) (Fisher Scientific, P/N: 08-642-23C), opremljenu pregradnim otvorom septuma (Swagelok, P/N: SS-400-61, Solon, OH) koji je upotrebljen za isporuku tretmana, kao i za praćenje (upotrebom ekstrakcije iglom) ugljen-dioksida (CO2), sumpor-dioksida (SO2), kiseonika (O2) ili drugih uzoraka iz praznog prostora na vrhu. Ventilator promenljive brzine (Thermaltake, Mobile Fan II, P/N: A1888, Taipei City, Taiwan) podešen na malu brzinu takođe je upotrebljen za cirkulaciju atmosfere u praznom prostoru na vrhu.

In vitro i in vivo eksperimenti

[0037] In vitro i in vivo eksperimenti izvedeni su istovremeno u po tri ponavljanja (tj. triplikati), osim ukoliko nije drugačije naznačeno. Za in vitro eksperimente, pripremljena je jedna mikrotitar ploča sa 6 bunarića ili tri petri ploče od 10 cm od kojih svaka sadrži polovinu jačine krompir-dekstroze agara. Svaki bunarić ili ploča inokulisana je sa 1 mikrolitrom (μl) 1x10<5>spora/ml odgovarajuće suspenzije patogenih spora (npr. Botrytis cinerea, BOTRCI; Penicillium expansum, PENIEX; Mucor piriformis, MUCOPI; Fusarium sambucinum FUSASA; ili Aspergillus brasiliensis, ASPEBR). Inokulisane mikrotitar ili petri ploče su zatim zaptivene sa prozračnim filmom (AeraSeal; P/N: B-100, Excel Scientific, Victorville, CA).

[0038] Za in vivo eksperimente, osam plodova jagode po ponavljanju je površinski sterilisano sa 70% rastvorom etanola. Posle sterilizacije, jagode su dva puta isprane dejonizovanom vodom. Svaki plod jagode je povređen upotrebom vrha T15 odvijača do uniformne dubine od osam mm (8 mm). Svaka povreda ploda je inokulisana sa 20 μl 1x10<5>spora/ml suspenzije spora patogena B. cinerea ili M. piriformis. Jagode su zatim stavljene sa peteljkom okrenutom nadole u plastičnu posudu sa preklopivim poklopcem (clamshell) za jagode od 1 funte.

[0039] Slično, plodovi stonog grožđa su takođe testirani in vivo. Specifičnije, 16-20 stonog grožđa po ponavljanju je oprano i inokulisano sa patogenima (kao što je prethodno opisano za jagode). Međutim, za povređivanje kraja grožđa kod peteljke upotrebljena je potisna igla sterilisana etanolom, a ne T15 odvijač. Grožđe je inokulisano u povredu, i zatim raspoređeno u plastičnu posudu sa preklopivim poklopcem od 1 pinte.

[0040] Za tretman, inokulisane agar ploče i plastične posude sa preklopivim poklopcem koje sadrže voće (npr. jagode i grožđe) stavljene su u jedinicu eksperimentalne komore od 36 l, koja je zatim zaptivena pre početka tretmana jedinjenjem. Komora je ostala zaptivena tokom čitavog trajanja eksperimenta osim tokom dodavanja tretmana u komoru, i ventilacije nakon tretmana.

Tretman agar ploča (in vitro) i voća sa jedinjenjem benzoksaborola i gasom za prezerviranje

[0041] Jedinjenje A ili Jedinjenje B benzoksaborola je rastvoreno u acetonu i raspoređeno na Whatman #1 filter papirni disk od 60 mm upotrebom pipete. Aceton je ostavljen da ispari tokom pet minuta pre nego što je disk stavljen na staklo za posmatranje u svakoj komori.

[0042] Zatim je u komori uspostavljen tretman sa 12% CO2u praznom prostoru na vrhu tako što je dozvoljeno da 10 grama (g) usitnjenog suvog leda postavljenog u tas za merenje u komori ispari u zaptivenoj komori. Međutim, pregradni otvor komore je olabavljen kako bi se omogućilo oslobađanje unutrašnjeg pritiska. Opciono, ventilator je upotrebljen tokom prvih sati tretmana (tj. do oko 6 sati tretmana) kako bi se obezbedilo uniformno izlaganje voća i ploča tretmanu.

[0043] Komore netretirane kontrole i komore tretirane sa CO2sadržale su disk tretiran acetonom sa sličnim isparavanjem tokom pet minuta. Nivoi CO2i O2u komori su praćeni upotrebom ručnog detektora gasa (Dansensor Checkpoint II; PIN 600111, Ringsted, Danska). Temperatura i relativna vlažnost su takođe praćeni unutar komore upotrebom data logera (Onset HOBO; PIN U12-013, Bourne, MA).

[0044] Komora za sve in vitro i in vivo eksperimente je držana na sobnoj temperaturi (tj. od oko 21 °C do oko 23 °C) tipično tokom oko 3,5 dana (tj. oko 84 sata) izlaganja tretmanu. Komore su zatim provetrene. Posle dodatna 2-3 dana sa komorom na sobnoj temperaturi, posle tretmana izmeren je radijalni rast (u mm) svakog in vitro patogena (videti Primere 1-7, Tabele 1-7) na inokulisanim pločama upotrebom elektronskih merača (Mitutoyo, P/N: CD-6-CX, Aurora, IL). Pored toga, tačka inokulacije na plodovima procenjena je za indukaciju in vivo incidence bolesti (npr. da ili ne) i ozbiljnost incidence bolesti (videti Primere 8-16, Tabele 8-16). Ozbiljnost bolesti je ocenjena na skali u opsegu od 0 do 4, gde "0" ukazuje da nema ozbiljnosti bolesti, "1" ukazuje na minimalnu ozbiljnost bolesti, "2" ukazuje na srednju ozbiljnost bolesti, "3" ukazuje na visoku ozbiljnost bolesti, i "4" ukazuje na izuzetno visoku ozbiljnost bolesti.

[0045] Sinergija je određena upotrebom sledeće Kolbi (Colby) jednačine,

gde je:

• E = Očekivana efikasnost izražena u procentima (%) netretirane kontrole, kada se upotrebljava smeša aktivnih jedinjenja A ili B, i gasa za prezerviranje u koncentracijama a i b, respektivno.

• x = Efikasnost izražena u % netretirane kontrole, kada se upotrebljava aktivno jedinjenje A ili B u koncentraciji a

• y = Efikasnost, izražena u % netretirane kontrole, kada se upotrebljava gas za prezerviranje u koncentraciji b

Primer 1: Sinergistička inhibicija BOTRCI i PENIEX patogena tretmanom agar ploča sa benzoksaborolom i CO2(in vitro)

[0046] Tabela 1 demonstrira da se predmetni postupak može upotrebljavati da inhibira rast patogena biljaka koji su inokulisani na agar ploče. Kao što je očekivano, ploče tretirane sa kontrolom (tj. vazduhom) pokazale su najveći rast patogena od 34 mm BOTRCI i 22,6 mm PENIEX. Postupci tretiranja patogena biljaka upotrebljeni na agar pločama na kojima su uzgajane BOTRCI i PENIEX i koje su tretirane samo sa 12% CO2imali su 28 mm i 18,6 mm rasta patogena, respektivno. Ploče na kojima su uzgajane BOTRCI i PENIEX i koje su tretirane samo sa 0,14 mg/l Jedinjenja A benzoksaborola imale su 16,3 mm i 17 mm rasta patogena, respektivno. Međutim, ploče koje su tretirane i sa Jedinjenjem A benzoksaborola i sa 12% CO2pokazale su da nema rasta i rast od 3,3 mm za BOTRCI i PENIEX patogene, respektivno. Kolbi proračuni od 165,4 i 225 ukazali su da je tretman benzoksaborolom Jedinjenjem A i CO2bio sinergistički u odnosu na druge tretmane da inhibira rast BOTRCI i PENIEX in vitro, respektivno.

Tabela 1: Sinergistički efekat Jedinjenja A benzoksaborola i CO2na inhibiciju in vitro rasta gljivica Botrytis cinerea (BOTRCI) i Penicillium expansum (PENIEX) kada se evaluira 2 dana posle završetka tretmana.<a, b, c, d>

Rast (dijametar, mm)

Jed Stopa Patogen Kontrola Jed 12% Jed+12% Kolbi Ishod (mg/l) (vazduh) CO2CO2proračun

A 0,14 BOTRCI 34,0 16,3 28,0 0,0 165,4 Sinergistički

A 0,14 PENIEX 22,6 17,0 18,6 3,3 225,0 Sinergistički<a>Test je izveden upotrebom mikrotitar ploče sa 6 bunarića

Eksperiment je izveden sa 4 ponavljanja

<c>Ventilator je upotrebljen tokom prvih 6 sati tretmana

Primer 2: Sinergistička inhibicija PENIEX patogena tretmanom agar ploča sa benzoksaborolom i CO2(in vitro)

[0047] Tabela 2 demonstrira da se predmetni postupak može upotrebljavati da inhibira rast patogena biljaka koji su inokulisani na agar ploče. Kao što je očekivano, ploča tretirana sa kontrolom (tj. vazduhom) pokazala je najveći rast patogena od 24,6 mm PENIEX. Postupci tretiranja patogena biljaka upotrebljeni na agar pločama na kojima je uzgajana PENIEX i koje su tretirane samo sa 12% CO2imali su 21,3 mm rasta patogena. Ploče na kojima je uzgajana PENIEX i koje su tretirane samo sa 0,14 mg/l Jedinjenja A benzoksaborola imale su 9,7 mm rasta patogena. Međutim, ploče koje su tretirane i sa Jedinjenjem A benzoksaborola i sa 12% CO2pokazale su rast od 5,2 mm za PENIEX patogene. Kolbi proračun od 119,7 ukazao je da je tretman benzoksaborolom sa Jedinjenjem A i CO2bio sinergistički u odnosu na druge tretmane da inhibira rast PENIEX in vitro.

Tabela 2: Sinergistički efekat Jedinjenja A benzoksaborola i CO2na inhibiciju in vitro rasta gljivica Penicillium expansum (PENIEX) kada se evaluira 2 dana posle završetka tretmana.<a,>b, c

Rast (dijametar, mm)

A 0,14 PENIEX 24,6 9,7 21,3 5,2 119,7 Sinergistički

<a>Test je izveden upotrebom mikrotitar ploče sa 6 bunarića

Ventilator je upotrebljen tokom prvih 6 sati tretmana

<c>Dodatna vodena para je dodata u svaku komoru kako bi se postiglo >90% R.H.

Primer 3: Sinergistička inhibicija BOTRCI i MUCOPI patogena tretmanom agar ploča sa benzoksaborolom i CO2(in vitro)

[0048] Tabela 3 demonstrira da se predmetni postupak može upotrebljavati da inhibira rast patogena biljaka koji su inokulisani na agar ploče. Kao što je očekivano, ploča tretirana sa kontrolom (tj. vazduhom) pokazala je najveći rast patogena od 35 mm i za BOTRCI i za MUCOPI. Postupci tretiranja patogena biljaka upotrebljeni na agar pločama na kojima su uzgajane BOTRCI i MUCOPI i koje su tretirane samo sa 12% CO2imali su 30,9 mm i 35 mm rasta patogena, respektivno. Ploče na kojima su uzgajane BOTRCI i MUCOPI i koje su tretirane samo sa 0,14 mg/l Jedinjenja A benzoksaborola imale su 5,5 mm i 22,3 mm rasta patogena, respektivno. Međutim, ploče koje su tretirane i sa Jedinjenjem A benzoksaborola i sa 12% CO2pokazale su 4,5 mm i 11 mm rasta za BOTRCI i MUCOPI patogene, respektivno. Kolbi proračuni od 101,2 i 189 ukazali su da je tretman benzoksaborolom Jedinjenjem A i CO2bio sinergistički u odnosu na druge tretmane da inhibira rast BOTRCI i PENIEX in vitro, respektivno.

Tabela 3: Sinergistički efekat Jedinjenja A benzoksaborola i CO2na inhibiciju in vitro rasta gljivica Mucor piriformis (MUCOPI) i Botrytis cinerea (BOTRCI) kada se evaluira 2 dana posle završetka tretmana.<a, b, c>

Rast (dijametar, mm)

A 0,14 MUCUPI 35,0 22,3 35,0 11,0 189,0 Sinergistički

A 0,14 BOTRCI 35,0 5,5 30,9 4,5 101,2 Sinergistički

<a>Test je izveden upotrebom mikrotitar ploče sa 6 bunarića

Ventilator je upotrebljen tokom prvih 6 sati tretmana

<c>Dodatna vodena para je dodata u svaku komoru kako bi se postiglo >90% R.H.

Primer 4: Sinergistička inhibicija BOTRCI i PENIEX patogena tretmanom agar ploča sa benzoksaborolom i CO2(in vitro)

[0049] Tabela 4 demonstrira da se predmetni postupak može upotrebljavati da inhibira rast patogena biljaka koji su inokulisani na agar ploče. Kao što je očekivano, ploča tretirana sa kontrolom (tj. vazduhom) pokazala je najveći rast patogena od 35 mm BOTRCI i 25,3 mm PENIEX. Postupci tretiranja patogena biljaka upotrebljeni na agar pločama na kojima su uzgajane BOTRCI i PENIEX i koje su tretirane samo sa 12% CO2imali su 33,4 mm i 21,2 mm rasta patogena, respektivno. Ploče na kojima su uzgajane BOTRCI i PENIEX i koje su tretirane samo sa 0,14 mg/l Jedinjenja A benzoksaborola imale su 1,5 mm i 6,4 mm rasta patogena, respektivno. Međutim, ploče koje su tretirane i sa Jedinjenjem A benzoksaborola i sa 12% CO2pokazale su da nema rasta i rast od 0,5 mm za BOTRCI i PENIEX patogene, respektivno. Kolbi proračuni od 104,3 i 124,4, respektivno, ukazali su da je tretman benzoksaborolom Jedinjenjem A i CO2bio sinergistički u odnosu na druge tretmane da inhibira rast BOTRCI i PENIEX in vitro.

Tabela 4: Sinergistički efekat Jedinjenja A benzoksaborola i CO2na inhibiciju in vitro rasta gljivica Botrytis cinerea (BOTRCI) i Penicillium expansum (PENIEX) kada se evaluira 2 dana posle završetka tretmana.<a, b>

Rast (dijametar, mm)

A 0,14 BOTRCI 35,0 1,5 33,4 0,0 104,3 Sinergistički

A 0,14 PENIEX 25,3 6,4 21,2 0,5 124,4 Sinergistički

<a>Test je izveden upotrebom mikrotitar ploče sa 6 bunarića

Ventilator je upotrebljen tokom prvih 6 sati tretmana

Primer 5: Sinergistička inhibicija BOTRCI, PENIEX, FUSASA, i ASPEBR patogena tretmanom agar ploča sa benzoksaborolom i sa CO2(in vitro)

[0050] Tabela 5 demonstrira da se predmetni postupak može upotrebljavati da inhibira rast patogena biljaka koji su inokulisani na agar ploče. Kao što je očekivano, ploča tretirana sa kontrolom (tj. vazduhom) pokazala je najveći rast patogena od 32,9 mm BOTRCI, 22,7 mm PENIEX, 33,9 mm FUSASA, i 29,6 mm ASPEBR. Postupci tretiranja patogena biljaka upotrebljeni na agar pločama na kojima su uzgajane BOTRCI, PENIEX, FUSASA, i ASPEBR i koje su tretirane samo sa 12% CO2imali su 35 mm, 19,9 mm, 33,9 mm, i 26,2 mm rasta patogena, respektivno. Ploče na kojima su uzgajane BOTRCI, PENIEX, FUSASA, i ASPEBR i koje su tretirane samo sa 0,14 mg/l Jedinjenja A benzoksaborola imale su 3,6 mm, 10,2 mm, 5,0 mm, i 2,6 mm rasta patogena, respektivno. Međutim, ploče koje su tretirane i sa Jedinjenjem A benzoksaborola i sa 12% CO2pokazale su 3 mm, 8,6 mm, 3,8 mm, i da nema rasta BOTRCI, PENIEX, FUSASA, i ASPEBR patogena, respektivno. Kolbi proračuni od 102,9, 102,5, 104,0, i 108,3 ukazali su da je tretman benzoksaborolom Jedinjenjem A i CO2bio sinergistički u odnosu na druge tretmane da inhibira rast BOTRCI, PENIEX, FUSASA, i ASPEBR in vitro, respektivno.

[0051] Ploče na kojima su uzgajane BOTRCI, PENIEX, FUSASA, i ASPEBR i koje su tretirane samo sa 0,14 mg/l Jedinjenja B benzoksaborola imale su 3,5 mm, 7,7 mm, 3,6 mm, i 3,6 mm rasta patogena, respektivno. Međutim, ploče koje su tretirane i sa jedinjenjem B benzoksaborola i sa 12% CO2pokazale su 2,7 mm, 6,4 mm, 3,4 mm, i da nema rasta BOTRCI, PENIEX, FUSASA, i ASPEBR patogena, respektivno. Kolbi proračuni od 103,4, 102,4, 100,4, i 112,0 ukazali su da je tretman benzoksaborolom Jedinjenjem B i CO2bio sinergistički u odnosu na druge tretmane da inhibira rast BOTRCI, PENIEX, FUSASA, i ASPEBR in vitro, respektivno.

Tabela 5: Sinergistički efekat Jedinjenja A ili B benzoksaborola i CO2na inhibiciju in vitro rasta gljivica Botrytis cinerea (BOTRCI), Penicillium expansum (PENIEX), Fusarium sambucinum (FUSASA), i Aspergillus brasiliensis (ASPEBR) kada se evaluira 2 dana posle završetka tretmana.<a, b, c>

Rast (dijametar, mm)

A 0,14 BOTRCI 32,9 3,6 35,0 3,0 102,9 Sinergistički

A 0,14 PENIEX 22,7 10,2 19,9 8,6 102,5 Sinergistički

A 0,14 FUSASA 33,9 5,0 33,9 3,8 104,0Sinergistički

A 0,14 ASPEBR 29,6 2,6 26,2 0,0 108,3 Sinergistički

B 0,14 BOTRCI 32,9 3,5 35,0 2,7 103,4Sinergistički

B 0,14 PENIEX 22,7 7,7 19,9 6,4 102,4Sinergistički

B 0,14 FUSASA 33,9 3,6 33,9 3,4 100,4Sinergistički

B 0,14 ASPEBR 29,6 3,6 26,2 0,0 112,0Sinergistički<a>Test je izveden upotrebom mikrotitar ploče sa 6 bunarića

Ventilator je upotrebljen tokom prvih 6 sati tretmana

<c>Dodatna vodena para je dodata u svaku komoru kako bi se postiglo >90% R.H.

Primer 6: Sinergistička inhibicija BOTRCI patogena tretmanom agar ploča sa benzoksaborolom i CO2(in vitro)

[0052] Tabela 6 demonstrira da se predmetni postupak može upotrebljavati da inhibira rast patogena biljaka koji su inokulisani na agar ploče. Kao što je očekivano, ploča tretirana sa kontrolom (tj. vazduhom) pokazala je najveći rast patogena od 85,0 mm BOTRCI. Postupci tretiranja patogena biljaka upotrebljeni na agar pločama na kojima je uzgajana BOTRCI i koje su tretirane samo sa 12% CO2imali su 78,9 mm rasta patogena. Ploče na kojima je uzgajana BOTRCI i koje su tretirane samo sa 0,14 mg/l Jedinjenja A benzoksaborola imale su 13,2 mm rasta patogena. Međutim, ploče koje su tretirane i sa Jedinjenjem A benzoksaborola i sa 12% CO2pokazale su 6,4 mm rasta za BOTRCI patogene. Kolbi proračun od 108,2 ukazao je da je tretman benzoksaborolom sa Jedinjenjem A i CO2bio sinergistički u odnosu na druge tretmane da inhibira rast BOTRCI in vitro.

Tabela 6: Sinergistički efekat Jedinjenja A benzoksaborola i CO2na inhibiciju in vitro rasta gljivica Botrytis cinerea (BOTRCI) kada se evaluira 3 dana posle završetka tretmana.<a, b>

Rast (dijametar, mm)

A 0,14 BOTRCI 85,0 13,2 78,9 6,4 108,2 Sinergistički

<a>Test je izveden upotrebom petri ploča od 10 cm

Ventilator je radio neprekidno tokom tretmana

Primer 7: Sinergistička inhibicija PENIEX patogena tretmanom agar ploča sa benzoksaborolom i CO2(in vitro)

[0053] Tabela 7 demonstrira da se predmetni postupak može upotrebljavati da inhibira rast patogena biljaka koji su inokulisani na agar ploče. Kao što je očekivano, ploča tretirana sa kontrolom (tj. vazduhom) pokazala je najveći rast patogena od 32,8 mm PENIEX. Postupci tretiranja patogena biljaka upotrebljeni na agar pločama na kojima je uzgajana PENIEX i koje su tretirane samo sa 12% CO2imali su 25,8 mm rasta patogena. Ploče na kojima je uzgajana PENIEX i koje su tretirane samo sa Jedinjenjem A benzoksaborola imale su 10,6 mm rasta patogena. Međutim, ploče koje su tretirane i sa Jedinjenjem A benzoksaborola i sa 12% CO2pokazale su rast od 4,7 mm za PENIEX patogene. Kolbi proračun od 114,7 ukazao je da je tretman benzoksaborolom sa Jedinjenjem A i CO2bio sinergistički u odnosu na druge tretmane da inhibira rast PENIEX in vitro.

Tabela 7: Sinergistički efekat Jedinjenja A benzoksaborola i CO2na inhibiciju in vitro rasta gljivica Penicillium expansum (PENIEX) kada se evaluira 3 dana posle završetka tretmana.<a, b>

Rast (dijametar, mm)

A 0,035 PENIEX 32,8 10,6 25,8 4,7 114,7 Sinergistički

<a>Test je izveden upotrebom petri ploča od 10 cm

Ventilator je radio neprekidno tokom tretmana

Primer 8: Sinergistička inhibicija BOTRCI patogena tretmanom voća sa benzoksaborolom i CO2(in vivo)

[0054] Tabela 8 demonstrira da se predmetni postupak može upotrebljavati da inhibira rast patogena biljaka koji su inokulisani na voću, kao što su jagode. Kao što je očekivano, voće koje je tretirano sa kontrolom (tj. vazduhom) pokazalo je najveći rast patogena od 4,0 mm BOTRCI. Postupci tretiranja patogena biljaka upotrebljeni na voću na kojem je uzgajana BOTRCI i koje je tretirano samo sa 12% CO2imali su 3,7 mm rasta patogena. Voće na kojem je uzgajana BOTRCI i koje je tretirano samo sa 0,14 mg/l Jedinjenja A benzoksaborola imalo je 2,1 mm rasta patogena. Međutim, voće koje je tretirano i sa Jedinjenjem A benzoksaborola i sa 12% CO2pokazalo je samo 0,4 mm rasta za BOTRCI patogene. Kolbi proračun od 176,2 ukazao je da je tretman benzoksaborolom sa Jedinjenjem A i CO2bio sinergistički u odnosu na druge tretmane da inhibira rast BOTRCI in vivo.

Tabela 8: Sinergistički efekat Jedinjenja A benzoksaborola i CO2na inhibiciju in vivo rasta gljivica Botrytis cinerea (BOTRCI) na jagodama kada se evaluira 2 dana posle završetka tretmana.<a, b, c>

Rast (Ozbiljnost, 0 do 4)

A 0,14 BOTRCI 4,0 2,1 3,7 0,4 176,2 Sinergistički

<a>Eksperiment je izveden sa 4 ponavljanja

Ventilator je upotrebljen tokom prvih 6 sati tretmana

<c>Dodatna vodena para je dodata u svaku komoru kako bi se postiglo >90% R.H.

Primer 9: Sinergistička inhibicija BOTRCI patogena tretmanom voća sa benzoksaborolom i CO2(in vivo)

[0055] Tabela 9 demonstrira da se predmetni postupak može upotrebljavati da inhibira rast patogena biljaka koji su inokulisani na voću, kao što su jagode. Kao što je očekivano, voće koje je tretirano sa kontrolom (tj. vazduhom) pokazalo je najveći rast patogena od 3,8 mm BOTRCI. Postupci tretiranja patogena biljaka upotrebljeni na voću na kojem je uzgajana BOTRCI i koje je tretirano samo sa 12% CO2imali su 3,5 mm rasta patogena. Voće na kojem je uzgajana BOTRCI i koje je tretirano samo sa 0,14 mg/l Jedinjenja A benzoksaborola imalo je 1,1 mm rasta patogena. Međutim, voće koje je tretirano sa Jedinjenjem A benzoksaborola i sa 12% CO2pokazalo je 0,8 mm rasta za BOTRCI patogene. Kolbi proračun od 107,6 ukazao je da je tretman benzoksaborolom sa Jedinjenjem A i CO2bio sinergistički u odnosu na druge tretmane da inhibira rast BOTRCI in vivo.

Tabela 9: Sinergistički efekat Jedinjenja A benzoksaborola i CO2na inhibiciju in vivo rasta gljivica Botrytis cinerea (BOTRCI) na jagodama kada se evaluira 3 dana posle završetka tretmana.<a, b>

Rast (Ozbiljnost, 0 do 4)

A 0,14 BOTRCI 3,8 1,1 3,5 0,8 107,6 Sinergistički

<a>Ventilator je upotrebljen tokom prvih 6 sati tretmana

Dodatna vodena para je dodata u svaku komoru kako bi se postiglo >90% R.H.

Primer 10: Sinergistička inhibicija MUCOPI patogena tretmanom voća sa benzoksaborolom i CO2(in vivo)

[0056] Tabela 10 demonstrira da se predmetni postupak može upotrebljavati da inhibira rast patogena biljaka koji su inokulisani na voću, kao što su jagode. Kao što je očekivano, voće koje je tretirano sa kontrolom (tj. vazduhom) pokazalo je najveći rast patogena od 3,6 mm MUCOPI. Postupci tretiranja patogena biljaka upotrebljeni na voću na kojem je uzgajana MUCOPI i koje je tretirano samo sa 12% CO2imali su 3,0 mm rasta patogena. Voće na kojem je uzgajana MUCOPI i koje je tretirano samo sa 0,14 mg/l Jedinjenja A benzoksaborola imalo je 0,5 mm rasta patogena. Međutim, voće koje je tretirano i sa Jedinjenjem A benzoksaborola i sa 12% CO2pokazalo je 0,2 mm rasta za MUCOPI patogene. Kolbi proračun od 106,8 ukazao je da je tretman benzoksaborolom sa Jedinjenjem A i CO2bio sinergistički u odnosu na druge tretmane da inhibira rast MUCOPI in vivo.

Tabela 10: Sinergistički efekat Jedinjenja A benzoksaborola i CO2na inhibiciju in vivo rasta gljivica Mucor piriformis (MUCOPI) na jagodama kada se evaluira 2 dana posle završetka tretmana.<a, b>

Rast (Ozbiljnost, 0 do 4)

A 0,14 MUCOPI 3,6 0,5 3,0 0,2 106,8 Sinergistički

<a>Ventilator je upotrebljen tokom prvih 6 sati tretmana

Dodatna vodena para je dodata u svaku komoru kako bi se postiglo >90% R.H.

Primer 11: Sinergistička inhibicija BOTRCI patogena tretmanom voća sa benzoksaborolom i CO2(in vivo)

[0057] Tabela 11 demonstrira da se predmetni postupak može upotrebljavati da inhibira rast patogena biljaka koji su inokulisani na voću, kao što su jagode. Kao što je očekivano, voće koje je tretirano sa kontrolom (tj. vazduhom) pokazalo je najveći rast patogena od 3,7 mm BOTRCI. Postupci tretiranja patogena biljaka upotrebljeni na voću na kojem je uzgajana BOTRCI i koje je tretirano samo sa 12% CO2imali su 2,7 mm rasta patogena. Voće na kojem je uzgajana BOTRCI i koje je tretirano samo sa 0,14 mg/l Jedinjenja A benzoksaborola imalo je 1,4 mm rasta patogena. Međutim, voće koje je tretirano i sa Jedinjenjem A benzoksaborola i sa 12% CO2pokazalo je 0,8 mm rasta za BOTRCI patogene. Kolbi proračun od 109,0 ukazao je da je tretman benzoksaborolom sa Jedinjenjem A i CO2bio sinergistički u odnosu na druge tretmane da inhibira rast BOTRCI in vivo.

[0058] Voće na kojem je uzgajana BOTRCI i koje je tretirano samo sa Jedinjenjem B benzoksaborola imalo je 0,9 mm rasta patogena. Međutim, voće koje je tretirano i sa Jedinjenjem B benzoksaborola i sa 12% CO2pokazalo je 0,5 mm rasta za BOTRCI patogene. Kolbi proračun od 105,0 ukazao je da je tretman benzoksaborolom sa Jedinjenjem B i CO2bio sinergistički u odnosu na druge tretmane da inhibira rast BOTRCI in vivo.

Tabela 11: Sinergistički efekat Jedinjenja A ili B benzoksaborola i CO2na inhibiciju in vivo rasta gljivica Botrytis cinerea (BOTRCI) na jagodama kada se evaluira 2 dana posle završetka tretmana.<a, b>

Rast (Ozbiljnost, 0 do 4)

A 0,14 BOTRCI 3,7 1,4 2,7 0,8 109,0 Sinergistički

B 0,14 BOTRCI 3,7 0,9 2,7 0,5 105,0 Sinergistički

<a>Ventilator je upotrebljen tokom prvih 6 sati tretmana

Dodatna vodena para je dodata u svaku komoru kako bi se postiglo >90% R.H.

Primer 12: Sinergistička inhibicija BOTRCI patogena tretmanom voća sa benzoksaborolom i CO2(in vivo)

[0059] Tabela 12 demonstrira da se predmetni postupak može upotrebljavati da inhibira rast patogena biljaka koji su inokulisani na voću, kao što su jagode. Kao što je očekivano, voće koje je tretirano sa kontrolom (tj. vazduhom) pokazalo je najveći rast patogena od 3,6 mm BOTRCI. Postupci tretiranja patogena biljaka upotrebljeni na voću na kojem je uzgajana BOTRCI i koje je tretirano samo sa 12% CO2imali su 3,4 mm rasta patogena. Voće na kojem je uzgajana BOTRCI i koje je tretirano samo sa 0,14 mg/l Jedinjenja A benzoksaborola imalo je 0,7 mm rasta patogena. Međutim, voće koje je tretirano i sa Jedinjenjem A benzoksaborola i sa 12% CO2pokazalo je 0,4 mm rasta za BOTRCI patogene. Kolbi proračun od 107,9 ukazao je da je tretman benzoksaborolom sa Jedinjenjem A i CO2bio sinergistički u odnosu na druge tretmane da inhibira rast BOTRCI in vivo.

[0060] Voće na kojem je uzgajana BOTRCI i koje je tretirano samo sa Jedinjenjem B benzoksaborola imalo je 0,4 mm rasta patogena. Međutim, voće koje je tretirano i sa Jedinjenjem B benzoksaborola i sa 12% CO2pokazalo je 0,3 mm rasta za BOTRCI patogene. Kolbi proračun od 100,9 ukazao je da je tretman benzoksaborolom sa Jedinjenjem B i CO2bio sinergistički u odnosu na druge tretmane da inhibira rast BOTRCI in vivo.

Tabela 12: Sinergistički efekat Jedinjenja A ili B benzoksaborola i CO2na inhibiciju in vivo rasta gljivica Botrytis cinerea (BOTRCI) na jagodama kada se evaluira 2 dana posle završetka tretmana.<a, b>

Rast (Ozbiljnost, 0 do 4)

A 0,14 BOTRCI 3,6 0,7 3,4 0,4 107,9 Sinergistički

B 0,14 BOTRCI 3,6 0,4 3,4 0,3 100,9 Sinergistički

<a>Ventilator je upotrebljen tokom prvih 6 sati tretmana

Dodatna vodena para je dodata u svaku komoru kako bi se postiglo >90% R.H.

Primer 13: Sinergistička inhibicija BOTRCI patogena tretmanom voća sa benzoksaborolom i CO2(in vivo)

[0061] Tabela 13 demonstrira da se predmetni postupak može upotrebljavati da inhibira rast patogena biljaka koji su inokulisani na voću, kao što su jagode. Kao što je očekivano, voće koje je tretirano sa kontrolom (tj. vazduhom) pokazalo je najveći rast patogena od 3,4 mm BOTRCI. Postupci tretiranja patogena biljaka upotrebljeni na voću na kojem je uzgajana BOTRCI i koje je tretirano samo sa 12% CO2imali su 3,2 mm rasta patogena. Voće na kojem je uzgajana BOTRCI i koje je tretirano samo sa 0,14 mg/l Jedinjenja A benzoksaborola imalo je 2,4 mm rasta patogena. Međutim, voće koje je tretirano i sa Jedinjenjem A benzoksaborola i sa 12% CO2pokazalo je samo 1,4 mm rasta za BOTRCI patogene. Kolbi proračun od 163,4 ukazao je da je tretman benzoksaborolom sa Jedinjenjem A i CO2bio sinergistički u odnosu na druge tretmane da inhibira rast BOTRCI in vivo.

Tabela 13: Sinergistički efekat Jedinjenja A benzoksaborola i CO2na inhibiciju in vivo rasta gljivica Botrytis cinerea (BOTRCI) na jagodama kada se evaluira 3 dana posle završetka tretmana.<a>

Rast (Ozbiljnost, 0 do 4)

A 0,14 BOTRCI 3,4 2,4 3,2 1,4 163,4 Sinergistički

<a>Ventilator je radio neprekidno tokom tretmana

Primer 14: Sinergistička inhibicija BOTRCI patogena tretmanom voća sa benzoksaborolom i CO2(in vivo)

[0062] Tabela 14 demonstrira da se predmetni postupak može upotrebljavati da inhibira rast patogena biljaka koji su inokulisani na voću, kao što su jagode. Kao što je očekivano, voće koje je tretirano sa kontrolom (tj. vazduhom) pokazalo je najveći rast patogena od 4,0 mm BOTRCI. Postupci tretiranja patogena biljaka upotrebljeni na voću na kojem je uzgajana BOTRCI i koje je tretirano samo sa 12% CO2imali su 3,9 mm rasta patogena. Voće na kojem je uzgajana BOTRCI i koje je tretirano samo sa 0,0044 mg/l ili 0,0088 mg/l Jedinjenja A benzoksaborola imalo je 3,4 mm i 3,3 mm rasta patogena, respektivno. Međutim, voće koje je tretirano sa 0,0044 mg/l ili 0,0088 mg/l Jedinjenja A benzoksaborola i sa 12% CO2pokazalo je samo 3,2 mm i 0,6 mm rasta za BOTRCI patogene, respektivno. Kolbi proračun od 114,8 i 502,5 ukazao je da je tretman benzoksaborolom sa 0,0044 mg/l ili 0,0088 mg/l Jedinjenja A, respektivno, u kombinaciji sa CO2bio sinergistički u odnosu na druge tretmane da inhibira rast BOTRCI in vivo.

Tabela 14: Sinergistički efekat Jedinjenja A benzoksaborola i CO2na inhibiciju in vivo rasta gljivica Botrytis cinerea (BOTRCI) na jagodama kada se evaluira 3 dana posle završetka tretmana.<a>

Rast (Ozbiljnost, 0 do 4)

A 0,0044 BOTRCI 4,0 3,4 3,9 3,2 114,8 Sinergistički

A 0,0088 BOTRCI 4,0 3,3 3,9 0,6 502,5 Sinergistički

<a>Ventilator je radio neprekidno tokom tretmana

Primer 15: Sinergistička inhibicija BOTRCI patogena tretmanom voća sa benzoksaborolom i CO2(in vivo)

[0063] Tabela 15 demonstrira da se predmetni postupak može upotrebljavati da inhibira rast patogena biljaka koji su inokulisani na voću, kao što je stono grožđe. Kao što je očekivano, voće koje je tretirano sa kontrolom (tj. vazduhom) pokazao je najveći rast patogena od 1,6 mm BOTRCI. Postupci tretiranja patogena biljaka upotrebljeni na voću na kojem je uzgajana BOTRCI i koje je tretirano samo sa 12% CO2imali su 1,4 mm rasta patogena. Voće na kojem je uzgajana BOTRCI i koje je tretirano samo sa 0,035 mg/l Jedinjenja A benzoksaborola imalo je 0,9 mm rasta patogena. Međutim, voće koje je tretirano i sa Jedinjenjem A benzoksaborola i sa 12% CO2pokazalo je samo 0,7 mm rasta za BOTRCI patogene. Kolbi proračun od 115,2 ukazao je da je tretman benzoksaborolom sa Jedinjenjem A i CO2bio sinergistički u odnosu na druge tretmane da inhibira rast BOTRCI in vivo.

Tabela 15: Sinergistički efekat Jedinjenja A benzoksaborola i CO2na inhibiciju in vivo rasta gljivica Botrytis cinerea (BOTRCI) na stonom grožđu kada se evaluira 1 dan posle završetka tretmana.<a>

Rast (Ozbiljnost, 0 do 4)

A 0,035 BOTRCI 1,6 0,9 1,4 0,7 115,2 Sinergistički

<a>Ventilator je radio neprekidno tokom tretmana

Primer 16: Sinergistička inhibicija PENIEX patogena tretmanom voća sa benzoksaborolom i CO2(in vivo)

[0064] Tabela 16 demonstrira da se predmetni postupak može upotrebljavati da inhibira rast patogena biljaka koji su inokulisani na voću, kao što je stono grožđe. Kao što je očekivano, voće koje je tretirano sa kontrolom (tj. vazduhom) pokazalo je najveći rast patogena od 2,4 mm PENIEX. Postupci tretiranja patogena biljaka upotrebljeni na voću na kojem je uzgajana PENIEX i koje je tretirano samo sa 12% CO2imali su 1,9 mm rasta patogena. Voće na kojem je uzgajana PENIEX i koje je tretirano samo sa 0,035 mg/l Jedinjenja A benzoksaborola imalo je 1,8 mm rasta patogena. Međutim, voće koje je tretirano i sa Jedinjenjem A benzoksaborola i sa 12% CO2pokazalo je samo 1,3 mm rasta za PENIEX patogene. Kolbi proračun od 108,2 ukazao je da je tretman benzoksaborolom sa Jedinjenjem A i CO2bio sinergistički u odnosu na druge tretmane da inhibira rast PENIEX in vivo.

Tabela 16: Sinergistički efekat Jedinjenja A benzoksaborola i CO2na inhibiciju in vivo rasta gljivica Penicillium expansum (PENIEX) na stonom grožđu kada se evaluira 1 dan posle završetka tretmana.<a>

Rast (Ozbiljnost, 0 do 4)

A 0,035 PENIEX 2,4 1,8 1,9 1,3 108,2 Sinergistički

<a>Ventilator je radio neprekidno tokom tretmana

[0065] Prethodni opis omogućava drugima koji su iskusni u struci da koriste tehnologiju u različitim primerima izvođenja i sa različitim modifikacijama koje su pogodne za konkretnu razmatranu upotrebu. U skladu sa odredbama statuta o patentima, principi i načini rada ove objave objašnjeni su i ilustrovani u primerima izvođenja koji služe kao primer.

[0066] Namera je da se obim objave predmetne tehnologije definiše pomoću sledećih patentnih zahteva.

[0067] Štaviše, namera je da se svim terminima koji se upotrebljavaju u patentnim zahtevima daju njihove najšire razumne konstrukcije i njihova uobičajena značenja kako ih razumeju oni sa iskustvom u struci osim ukoliko se ovde ne da eksplicitna indikacija suprotnog. Konkretno, upotreba jednine neodređenih i određenih članova, "navedeno", itd. treba da se čita tako da navodi jedan ili više od ukazanih elemenata osim ukoliko patentni zahtev ne navodi eksplicitno ograničenje suprotnog.

Claims

Patentni zahtevi 1. Postupak tretiranja biljaka ili delova biljaka sa antimikrobnim agensom naznačen time što sadrži: postavljanje jedne ili većeg broja biljaka ili delova biljaka u komoru, zaptivanje komore, dodavanje jedinjenja benzoksaborola u komoru, dodavanje gasa za prezerviranje u komoru, pri čemu se jedinjenje benzoksaborola i gas za prezerviranje kombinuju kako bi formirali antimikrobni tretman, primenu antimikrobnog tretmana jednoj ili većem broju biljaka ili delova biljaka u zaptivenoj komori, i otvaranje komore; pri čemu je gas za prezerviranje CO2ili SO2; pri čemu kada je gas za prezerviranje CO2, koncentracija CO2antimikrobnog tretmana je u opsegu od oko 4% do oko 20%; i pri čemu kada je gas za prezerviranje SO2, koncentracija SO2antimikrobnog tretmana je u opsegu od oko 0,001% do oko 1%; i pri čemu je jedinjenje benzoksaborola Jedinjenje A koje ima strukturu:

ili Jedinjenje B koje ima strukturu:
2. Postupak prema patentnom zahtevu 1, naznačen time što je jedna ili veći broj biljaka ili delova biljaka meko voće, pogodno pri čemu je meko voće odabrano iz grupe koja se sastoji od jagode, maline, kupine, i grožđa.
3. Postupak prema patentnom zahtevu 1, naznačen time što je jedinjenje benzoksaborola Jedinjenje A koje ima strukturu:
4. Postupak prema patentnom zahtevu 1, naznačen time što je jedinjenje benzoksaborola Jedinjenje B koje ima strukturu:
5. Postupak prema patentnom zahtevu 1, naznačen time što je jedinjenje benzoksaborola u obliku tečnosti, gasa, magle, ili čvrste supstance.
6. Postupak prema patentnom zahtevu 5, naznačen time što je jedinjenje benzoksaborola u obliku čvrste supstance i oblik čvrste supstance je prašak.
7. Postupak prema patentnom zahtevu 1, naznačen time što je gas za prezerviranje CO2, i koncentracija CO2antimikrobnog tretmana je u opsegu od oko 4% do oko 20%.
8. Postupak prema patentnom zahtevu 1, naznačen time što je gas za prezerviranje SO2, i pri čemu je koncentracija SO2antimikrobnog tretmana u opsegu od oko 0,001% do oko 1%.
9. Postupak prema patentnom zahtevu 1, naznačen time što je antimikrobni tretman u obliku spreja, izmaglice, gela, termalne magle, netermalne magle, potapanja, kvašenja, pare, gasa, ili sublimacije.
10. Postupak prema patentnom zahtevu 1, naznačen time što antimikrobni tretman dodatno sadrži nosač tretmana.
11. Postupak prema patentnom zahtevu 1, naznačen time što je antimikrobni tretman efikasan protiv patogena biljaka.
12. Postupak prema patentnom zahtevu 11, naznačen time što su patogeni biljaka gljivični patogeni biljaka.
13. Postupak prema patentnom zahtevu 11, naznačen time što su patogeni biljaka odabrani iz grupe koja se sastoji od Acremonium spp., Albugo spp., Alternaria spp., Ascochyta spp., Aspergillus spp., Botryodiplodia spp., Botryospheria spp., Botrytis spp., Byssochlamys spp., Candida spp., Cephalosporium spp., Ceratocystis spp., Cercospora spp., Chalara spp., Cladosporium spp., Colletotrichum spp., Cryptosporiopsis spp., Cylindrocarpon spp., Debaryomyces spp., Diaporthe spp., Didymella spp., Diplodia spp., Dothiorella spp., Elsinoe spp., Fusarium spp., Geotrichum spp., Gloeosporium spp., Glomerella spp., Helminthosporium spp., Khuskia spp., Lasiodiplodia spp., Macrophoma spp., Macrophomina spp., Microdochium spp., Monilinia spp., Monilochaethes spp., Mucor spp., Mycocentrospora spp., Mycosphaerella spp., Nectria spp., Neofabraea spp., Nigrospora spp., Penicillium spp., Peronophythora spp., Peronospora spp., Pestalotiopsis spp., Pezicula spp., Phacidiopycnis spp., Phoma spp., Phomopsis spp., Phyllosticta spp., Phytophthora spp., Polyscytalum spp., Pseudocercospora spp., Pyricularia spp., Pythium spp., Rhizoctonia spp., Rhizopus spp., Sclerotium spp., Sclerotinia spp., Septoria spp., Sphaceloma spp., Sphaeropsis spp., Stemphyllium spp., Stilbella spp., Thielaviopsis spp., Thyronectria spp., Trachysphaera spp., Uromyces spp., Ustilago spp., Venturia spp., i Verticillium spp., i bakterijskih patogena, kao što su Bacillus spp., Campylobacter spp., Clavibacter spp., Clostridium spp., Erwinia spp., Escherichia spp., Lactobacillus spp., Leuconostoc spp., Listeria spp., Pantoea spp., Pectobacterium spp., Pseudomonas spp., Ralstonia spp., Salmonella spp., Shigella spp., Staphylococcus spp., Vibrio spp., Xanthomonas spp., i Yersinia spp; pogodno pri čemu su patogeni biljaka odabrani iz grupe koja se sastoji od Botrytis cinerea, Mucor piriformis, Fusarium sambucinum, Aspergillus brasiliensis, i Penicillium expansum.
14. Postupak prema patentnom zahtevu 12, naznačen time što je antimikrobni tretman gas, i pri čemu je koncentracija gasnog antimikrobnog tretmana u opsegu od oko 0,0001 mg/l do oko 0,5 mg/l.
15. Postupak prema patentnom zahtevu 1, naznačen time što postupak rezultuje sinergističkom inhibicijom patogena biljaka na jednoj ili većem broju tretiranih biljaka ili delova biljaka. Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Kneginje Ljubice 5, 11000 Beograd 34