RS65265B1 - Kompleks 7-deacetilforskolina i pvp - Google Patents

Kompleks 7-deacetilforskolina i pvp

Info

Publication number
RS65265B1
RS65265B1 RS20240156A RSP20240156A RS65265B1 RS 65265 B1 RS65265 B1 RS 65265B1 RS 20240156 A RS20240156 A RS 20240156A RS P20240156 A RSP20240156 A RS P20240156A RS 65265 B1 RS65265 B1 RS 65265B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
dafsk
pvp
complex
mixture
water
Prior art date
Application number
RS20240156A
Other languages
English (en)
Inventor
Andreas Kubin
Original Assignee
Scipharm S A R L
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Scipharm S A R L filed Critical Scipharm S A R L
Publication of RS65265B1 publication Critical patent/RS65265B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/141—Intimate drug-carrier mixtures characterised by the carrier, e.g. ordered mixtures, adsorbates, solid solutions, eutectica, co-dried, co-solubilised, co-kneaded, co-milled, co-ground products, co-precipitates, co-evaporates, co-extrudates, co-melts; Drug nanoparticles with adsorbed surface modifiers
    • A61K9/146—Intimate drug-carrier mixtures characterised by the carrier, e.g. ordered mixtures, adsorbates, solid solutions, eutectica, co-dried, co-solubilised, co-kneaded, co-milled, co-ground products, co-precipitates, co-evaporates, co-extrudates, co-melts; Drug nanoparticles with adsorbed surface modifiers with organic macromolecular compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/35—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
    • A61K31/352—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings, e.g. methantheline 
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/32—Macromolecular compounds obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. carbomers, poly(meth)acrylates, or polyvinyl pyrrolidone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/58—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. poly[meth]acrylate, polyacrylamide, polystyrene, polyvinylpyrrolidone, polyvinylalcohol or polystyrene sulfonic acid resin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/007—Pulmonary tract; Aromatherapy
    • A61K9/0073—Sprays or powders for inhalation; Aerolised or nebulised preparations generated by other means than thermal energy
    • A61K9/0078—Sprays or powders for inhalation; Aerolised or nebulised preparations generated by other means than thermal energy for inhalation via a nebulizer such as a jet nebulizer, ultrasonic nebulizer, e.g. in the form of aqueous drug solutions or dispersions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0087—Galenical forms not covered by A61K9/02 - A61K9/7023
    • A61K9/0095—Drinks; Beverages; Syrups; Compositions for reconstitution thereof, e.g. powders or tablets to be dispersed in a glass of water; Veterinary drenches
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/08—Solutions

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Otolaryngology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Pyrrole Compounds (AREA)

Description

Opis
OBLAST TEHNIKE
[0001] Predmetni pronalazak se odnosi na kompleks 7-deacetilforskolina (7-DAFSK) i polivinilpirolidona (PVP) i na postupak za dobijanje takvog kompleksa.
STANJE TEHNIKE
[0002] Diterpen forskolin je biljni sastojak iz biljke Plectranthus barbatus (Coleus forskohlii) koji je skoro nerastvorljiv u vodi. Forskolin se nalazi u fokusu za raznovrsne medicinske primene, između ostalog kod kardiovaskularnih bolesti, bronhijalne astme, gojaznosti, glaukoma, bolesti pluća, zapaljenja zglobova ili artritisa/osteoartritisa. Forskolin stimuliše formiranje hrskavice u zglobovima, a istovremeno sprečava osifikaciju i mineralizaciju. Pored toga, forskolin se proučava u istraživanju matičnih ćelija u vezi diferencijacije i regresije do pluripotencije.
[0003] Forskolin aktivira adenilil ciklazu, enzim koji je vezan za membranu. Adenilil ciklaza pretvara adenozin trifosfat (ATP) u ciklični adenozin monofosfat (cAMP) i oslobađa cAMP u citozol, čime se povećava intracelularna koncentracija cAMP u većini ćelija i vrsta tkiva (Metzger H. et al., 1981, Arzneimittelforschung, 1248-50). cAMP deluje kao "Second Messenger" (sekundarni glasnik) pri transdukciji ćelijskih signala i služi za aktivaciju mnogih peptidnih hormona (proteinskih kinaza).
[0004] Forskolin je diterpen sa dve α-hidroksi grupe na pozicijama 1 i 9, jednom β-hidroksi grupom na poziciji 6 i jednom β-acetoksi grupom na poziciji 7, pri čemu su obe α-hidroksi grupe na pozicijama 1 i 9 esencijalne za vezivanje na adenilil ciklazu. Forskolin zbog svoje male rastvorljivosti u vodi (0,01 mg/mL, WO2005025500A2) zahteva različite formulacije da bi se mogao primeniti kao dijagnostik ili terapeutik. Takve formulacije sadrže različite rastvarače, kao što su npr. alkoholi ili DMSO, koji se često ne tolerišu dobro i dovode do neželjenih dejstava.
[0005] Dokument US6346273B1 se odnosi na postupak za povećanje rastvorljivosti u vodi farmaceutski aktivnih supstanci koje se teško rastvaraju u vodi, kao što je npr. forskolin, putem kompleksiranja sa nejonskim polimerom, kao što je npr. polivinilpirolidon (PVP). U ovom dokumentu je opisano povećanje rastvorljivosti forskolina u vodi.
[0006] Povećana rastvorljivost forskolina u vodi ostvaruje se kompleksiranjem forskolina sa ciklodekstrinima. WO2005025500A2 opisuje jedan postupak za kompleksiranje forskolina sa ciklodekstrinom u vodenom medijumu.
[0007] WO2017103840A1 opisuje kompozicije forskolina rastvorljive u vodi posle kompleksiranja sa polimerima rastvorljivim u vodi, kao što je izm. ost. PVP. Posle mešanja forskolina sa polimerom dodaje se rastvor skroba, pa se smeša zagreva, a zatim hladi i suši raspršivanjem.
[0008] WO2018127600A1 opisuje postupak za dobijanje kompleksa forskolinaciklodekstrina koji je baziran na procesu sinterovanja i omogućava povećani sadržaj forskolina u kompleksu, kao i povećanu rastvorljivost u vodi.
[0009] Sledeći pristup za povećanje rastvorljivosti forskolina u vodi je hemijska derivatizacija. Jedan derivat forskolina sa većom rastvorljivosti u vodi u poređenju sa forskolinom je 7-deacetil forskolin, koji ispoljava sličan efekat na adenilil ciklazu kao forskolin (Laurenza A. et al, Molecular Pharmacology 1987, 32(1), 133-139, Pinto C. et al, Biochemical Pharmacology 2009, 78(1), 62-69). Međutim, deacetilacija forskolina na poziciji 7 može povećati rastvorljivost u vodi samo ograničeno (do 1 mg/mL).
[0010] Zato postoji potreba za poboljšanim oblikom derivata forskolina rastvorljivim u vodi, koji se odlikuje kako visokom rastvorljivosti u vodi, a zahvaljujući tome i poboljšanom bioraspoloživosti, kao i većim sadržajem derivata forskolina.
[0011] Zbog toga je cilj predmetnog pronalaska da se realizuje oblik 7-deacetil forskolina sa većom rastvorljivosti u vodi i istovremeno većim sadržajem 7-deacetil forskolina.
SUŠTINA PRONALASKA
[0012] Ovaj cilj je ostvaren pomoću kompleksa 7-deacetilforskolina (7-DAFSK) i polivinilpirolidona (PVP), kao što je opisano u patentnim zahtevima i primerima izvođenja predmetnog pronalaska.
[0013] Predmetni pronalazak otkriva kompleks 7-deacetilforskolina (7-DAFSK) i polivinilpirolidona (PVP).
[0014] U jednom primeru izvođenja kompleks prema pronalasku je naznačen time, što je srednji maseni udeo 7-DAFSK u celokupnom kompleksu u opsegu od 1 do 50 tež. %, a prvenstveno 5, 10, 15, 20 ili 25 tež. %, te posebno poželjno 30 tež. %, 35 tež. %, 40 tež. %, 45 tež. %, ili više.
[0015] U jednom primeru izvođenja je srednji molarni odnos 7-DAFSK prema PVP u kompleksu 0,1 ili veći, a prvenstveno 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 20, 30, 40, 50, 60 ili više, te posebno poželjno 3 ili više.
[0016] U jednom primeru izvođenja kompleks prema pronalasku je naznačen time, što PVP ima srednju molarnu masu od 1 do 40 kD. Poželjno je da PVP ima srednju molarnu masu od 1 do 25 kD, te posebno poželjno oko 2 do 3 kD, a sasvim posebno poželjno oko 2,5 kD.
[0017] U sledećem primeru izvođenja kompleks prema pronalasku je naznačen time, što 7-DAFSK potiče od sintetičkog forskolina.
[0018] U jednom primeru izvođenja 7-DAFSK ima čistoću od najmanje 98,5 %.
[0019] Kao iznenađujuće je otkriveno da se posebno visoki maseni udeo 7-DAFSK u kompleksu 7-DAFSK-PVP može ostvariti time što se smeša 7-DAFSK i PVP zagreva na temperaturu koja je viša od temperature prelaska u staklasto stanje upotrebljenog PVP. Naročito se smeša zagreva na temperaturu koja je najmanje 20°C, a prvenstveno najmanje 25°C, 30°C, 40°C, 50°C, 60°C, 70°C, 80°C, 90°C, 100°C viša od temperature prelaska u staklasto stanje PVP. Naročito se temperatura dovodi u opseg od oko 25 do 50°C iznad temperature prelaska u staklasto stanje PVP.
[0020] Zbog toga predmetni pronalazak takođe predstavlja postupak za dobijanje kompleksa 7-DAFSK-PVP prema pronalasku, koji je naznačen time, što se smeša 7-DAFSK i PVP zagreva na temperaturu koja je viša od temperature prelaska u staklasto stanje upotrebljenog PVP.
[0021] U jednom primeru izvođenja postupak prema pronalasku je naznačen time, što se smeši 7-DAFSK i PVP dodaje rastvarač, a poželjno voda, etanol, metanol, aceton, etil metil keton, dihlormetan i/ili etil acetat, još poželjnije voda, etanol, metanol, propanol i/ili dihlormetan. Posebno poželjno se smeši 7-DAFSK i PVP dodaje voda i/ili etanol, ili njihova smeša.
[0022] U jednom specijalnom primeru izvođenja se smeša prema pronalasku drži najmanje 5 minuta na temperaturi koja je viša od temperature prelaska u staklasto stanje upotrebljenog PVP.
[0023] U jednom primeru izvođenja postupak prema pronalasku sadrži sledeće korake:
a) priprema smeše 7-DAFSK i PVP i sjedinjavanje smeše sa rastvaračem, a prvenstveno alkoholom, te prvenstveno etanolom,
b) dodavanje vode,
c) zagrevanje smeše iznad temperature prelaska u staklasto stanje PVP najmanje 5 minuta,
d) hlađenje smeše i rastvaranje u vodi,
e) odstranjivanje nerastvorenih sastojaka, opciono filtriranjem.
U jednom specijalnom obliku primene smeša se zagreva najmanje 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60°C, 70°C, 80°C, 90°C, 100°C iznad temperature prelaska u staklasto stanje PVP.
[0024] Primena postupka prema pronalasku omogućava efikasno i jednostavno dobijanje 7-DAFSK-PVP kompleksa, koji značajno povećavaju rastvorljivost 7-DAFSK u vodi i takođe mogu sadržati veći maseni udeo 7-DAFSK, što omogućava korisne primene 7-DAFSK u dijagnostici i/ili lečenju.
[0025] Pomoću kompleksa 7-DAFSK sa PVP prema pronalasku može se povećati rastvorljivost 7-DAFSK u vodi. Zahvaljujući većem masenom udelu 7-DAFSK u kompleksu prema pronalasku može se povećati rastvorljivost 7-DAFSK u vodi, bez potrebe za nepoželjno velikom količinom PVP. Zahvaljujući tome formulacije sa derivatima forskolina takođe mogu se pripremiti uz veću uštedu materijala nego ranije. Zbog toga što se mogu izbeći velike količine PVP, a zbog toga i neželjena dejstva koja su uzrokovana time, predmetni pronalazak olakšava i poboljšava primenu 7-DAFSK u dijagnostici i/ili lečenju.
[0026] Zbog toga je predmetnim pronalaskom takođe realizovana farmaceutska kompozicija koja sadrži 7-DAFSK-PVP kompleks prema pronalasku.
[0027] U jednom primeru izvođenja je pomenuta farmaceutska kompozicija naznačena time, što kompozicija sadrži 7-DAFSK u koncentraciji od najmanje 25 mg/L, 50 mg/L, 75 mg/L, 100 mg/L, 200 mg/L, 300 mg/L, 400 mg/L, 500 mg/L, 600 mg/L, 800 mg/L, 1000 mg/L, 2000 mg/L, 3000 mg/L, ili 4000 mg/L, a prvenstveno 4000 mg/L.
[0028] Jedan aspekt predmetnog pronalaska odnosi se na farmaceutsku kompoziciju za oralnu, intravensku ili inhalacionu primenu.
[0029] U sledećem specijalnom primeru izvođenja farmaceutska kompozicija prema pronalasku se primenjuje za lečenje kardiovaskularnih bolesti, bronhijalne astme, gojaznosti, glaukoma, bolesti pluća, zapaljenja zglobova ili artritisa/osteoartritisa.
[0030] Jedan aspekt predmetnog pronalaska odnosi se na farmaceutsku kompoziciju prema pronalasku za primenu kao lek.
SLIKE NACRTA
Slika 1: Reakciona šema za deacetilaciju forskolina u 7-DAFSK pomoću natrijum karbonata (Na2CO3).
Slika 2: Poređenje masenih udela 7-DAFSK u 7-DAFSK-PVP K12 i 7-DAFSK-PVP K25 kompleksima u uzorcima dobijenim pomoću postupka zagrevanja i postupka rastvaranja.
Slika 3: Udeo konvertovanog 7-DAFSK za različite upotrebljene težinske odnose DAFSK prema PVP K12.
Slika 4: Poređenje masenih udela 7-DAFSK u 7-DAFSK-PVP K12 kompleksima za različite težinske odnose 7-DAFSK prema PVP K12.
Slika 5: Odnos između rastvorljivosti u vodi i masenog udela 7-DAFSK u 7-DAFSK-PVP K12 kompleksu.
Slika 6: cAMP test sa HEK293 ćelijama koje sadrže EP2, EP4 i IP receptore. Ćelije su bile stimulisane sa kontrolnim uzorkom (treprostinil), 30µM forskolina u DMSO, 100 µM 7-DAFSK u vodi i 100 µM 7-DAFSK u 7-DAFSK-PVP K12 kompleksa u vodi.
DETALJNI OPIS PRONALASKA
[0032] 7-deacetilforskolin (7-DAFSK) može biti predstavljen strukturnom formulom prikazanom na slici 1. 7-DAFSK takođe može postojati i u drugim oblicima osim molekularnog oblika, kao u obliku soli, npr. solima alkalnih metala, kao što su natrijumove ili kalijumove soli. Izraz "7-deacetilforskolin (7-DAFSK)" u okviru predmetnog pronalaska se odnosi kako na molekularni oblik, koji je prikazan strukturnom formulom na slici 1, tako i na sve druge moguće oblike, kao što su soli 7-DAFSK, a podesno soli alkalnih metala, te natrijumova ili kalijumova so.
[0033] Polivinilpirolidon (PVP), takođe polividon ili povidon, je polimer jedinjenja vinilpirolidon. PVP se može komercijalno nabaviti sa različitim stepenima polimerizacije. Stepen polimerizacije odgovara srednjoj molarnoj masi polimera. Izraz "srednja molarna masa" se ovde odnosi na masenu prosečnu molarnu masu.
[0034] U okviru predmetnog pronalaska je poželjan PVP sa srednjom molarnom masom od 1 do 40 kD, jer se polimeri ove veličine mogu još uvek dobro izlučivati i neće biti metabolisani od strane bubrega.
[0035] U jednom primeru izvođenja je kompleks 7-DAFSK-PVP naznačen time, što PVP ima srednju molarnu masu od 1 do 60 kD, a naročito od 1 do 40 kD. Prvenstven je PVP sa srednjom molarnom masom od 1 do 25 kD, prvenstveno oko 2 do 9 kD, 2 do 8 kD, 2 do 7 kD, 2 do 6 kD, 2 do 5 kD, 2 do 4 kD, posebno poželjno 2 do 3 kD, te sasvim posebno poželjno oko 2,5 kD.
[0036] Izraz "oko" se ovde odnosi na specifikovanu vrednost ili na vrednost koja odstupa od specifikovane vrednosti za /-10 %.
[0037] Molekularna težina PVP, umesto navođenja masene prosečne molarne mase, takođe može biti definisana preko K-vrednosti, koja se dobija putem merenja viskoznosti i zavisi od srednje viskoznosti molarne mase. PVP sa masenom prosečnom molarnom masom od oko 2,5 kD odgovara PVP sa K-vrednosti od oko 12, koji se ovde naziva "PVP K12" (K. Kolter et al. "Hot-Meld Extrusion with BASF Pharma Polymers", ISBN 978-3-00-039415-7, 2012). PVP sa masenom prosečnom molarnom masom od oko 24 kD odgovara PVP sa K-vrednosti od oko 25, koji se ovde naziva "PVP K25".
[0038] Izraz "7-DAFSK-PVP kompleks" se u okviru predmetnog pronalaska odnosi na hemijski proizvod koji sadrži 7-DAFSK i PVP i naznačen je time što postoji veza između 7-DAFSK i PVP. Izraz "kompleks" ne ograničava vezu ni na koji način, već jednostavno označava da postoji veza između jednog ili više 7-DAFSK molekula i jednog ili više PVP molekula. Veza može biti npr. kovalentna veza ili prvenstveno nekovalentno prianjanje 7-DAFSK na PVP, npr. pomoću Van-der-Valsovih veza ili veza sa vodoničnim mostovima. Pod "7-DAFSK-PVP" ili "7-DAFSK-PVP kompleksom" treba podrazumevati hemijski proizvod u celini, a ne pojedinačni 7-DAFSK-PVP kompleks na molekulskom nivou.
[0039] Termine "maseni udeo i "molarni odnos" ovde uvek treba shvatiti kao srednje vrednosti. Oni se ne odnose na svaki pojedinačni kompleks na molekulskom nivou, već na srednju vrednost celokupnog hemijskog proizvoda.
[0040] Procentualni udeli (%) se u predmetnom pronalasku, osim ukoliko nije drugačije specifikovano, uvek odnose na težinske procente (tež. %).
[0041] U jednom primeru izvođenja srednji maseni udeo 7-DAFSK u celokupnom kompleksu iznosi 1 do 50 tež. %, a prvenstveno 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20 ili 25 tež. %, te posebno poželjno 30 tež. %, 35 tež. %, 40 tež. %, 45 tež. % ili više. Maseni udeo ovde ponovo odražava relativni udeo mase 7-DAFSK prema masi celokupnog kompleksa (7-DAFSK- PVP).
[0042] Udeo 7-DAFSK u 7-DAFSK-PVP kompleksu takođe može biti izražen kao molarni odnos. Na primer, 7-DAFSK-PVP kompleks, koji se sastoji od molekularnog 7-DAFSK (molarna masa: 368,5 g/mol) i PVP sa srednjom molarnom masom od oko 2,5 kD ("PVP K12") i srednjim masenim udelom 7-DAFSK u celokupnom kompleksu od 30 tež. %, ima srednji molarni odnos za 7-DAFSK prema PVP u kompleksu od oko 3. Srednji molarni odnos ovde ponovo odražava odnos količine materije za 7-DAFSK prema količini materije za PVP.
[0043] U jednom primeru izvođenja predmetnog pronalaska je srednji molarni odnos 7-DAFSK prema PVP u kompleksu 0,1 ili veći, a prvenstveno 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60 ili veći, te posebno poželjno 3 ili veći.
[0044] Pod udelom (masenim udelom, kao i molarnim odnosom) 7-DAFSK u celokupnom kompleksu ovde treba uvek podrazumevati srednji udeo. Jedna podesna metoda za određivanje srednjeg udela 7-DAFSK u celokupnom kompleksu je tečna hromatografija visokih performansi (HPLC). Stručnjaku iz odgovarajuće oblasti je blisko izvođenje takvog određivanja.
[0045] 7-DAFSK se može dobiti od forskolina pomoću reakcije deacetilacije, npr. pomoću karbonatne saponifikacije, kao što je objašnjeno u konkretnim primerima predmetnog pronalaska. Kao reaktant se može koristiti kako prirodni, tako i sintetički forskolin. Prirodni forskolin tipično je prisutan kao obogaćeni ekstrakt, koji se prečišćava pre primene. U okviru predmetnog pronalaska kao reaktant za sintezu 7-DAFSK prvenstveno se primenjuje sintetički forskolin, koji se može nabaviti komercijalno sa visokom čistoćom.
[0046] U jednom primeru izvođenja kompleks prema pronalasku je zbog toga naznačen time, što 7-DAFSK potiče od sintetičkog forskolina. U jednom podesnom primeru izvođenja 7-DAFSK ima čistoću od najmanje 98,5 %.
[0047] 7-DAFSK-PVP kompleks prema pronalasku je karakterisan povećanom rastvorljivosti u vodi u poređenju sa nekompleksiranim 7-DAFSK-PVP, što je podesno za farmaceutske primene.
[0048] Kao iznenađujuće je otkriveno da se 7-DAFSK-PVP kompleksi mogu lako dobiti sintetički tako što se 7-DAFSK i PVP zagreju na temperaturu koja je viša od temperature prelaska u staklasto stanje upotrebljenog PVP. Kao iznenađujuće, ovaj postupak takođe dovodi do većeg masenog udela 7-DAFSK u celokupnom kompleksu.
[0049] Zbog toga predmetni pronalazak obuhvata postupak za dobijanje 7-DAFSK-PVP kompleksa prema pronalasku koji je naznačen time što se smeša 7-DAFSK i PVP zagreva na temperaturu koja je viša od temperature prelaska u staklasto stanje upotrebljenog PVP.
[0050] PVP kao amorfna supstanca nema tačku topljenja, već je karakteriše takozvana temperatura prelaska u staklasto stanje. Temperatura prelaska u staklasto stanje, između ostalog, zavisi od stepena polimerizacije, dakle od srednje molarne mase PVP (vidi Tabelu 1).
Tabela 1: Primeri temperature prelaska u staklasto stanje za PVP u zavisnosti od molarne mase.
[0051] Pod "temperaturom prelaska u staklasto stanje upotrebljenog PVP" u ovom kontekstu treba podrazumevati temperaturu na kojoj dolazi do prelaska u staklasto stanje PVP u postojećoj smeši sa 7-DAFSK. Na temperaturu prelaska u staklasto stanje upotrebljenog PVP može uticati kompozicija smeše, na primer, kada se smeši dodaju rastvarači ili voda. Metode za određivanje temperature prelaska u staklasto stanje su poznate stručnjacima iz odgovarajuće oblasti. Temperatura prelaska u staklasto stanje podesno se može odrediti prema odgovarajućem DIN standardu (Wampfler B., et al., Messunsicherheit in der Kunststoffanalytik - Ermittlung mit Ringversuchsdaten. Carl Hanser Verlag, Minhen 2017, ISBN-10 : 3446452869).
[0052] Posebno podesan primer izvođenja postupka za dobijanje 7-DAFSK-PVP kompleksa prema pronalasku je naznačen time, što je srednja molarna masa upotrebljenog PVP oko 2,5 kD ("PVP K12") i što se smeša zagreva na temperaturu preko 93°C. Posebno se zagreva na temperaturu koja je najmanje 25°C, a naročito 30°C, 40°C, 45°C ili više iznad temperature prelaska u staklasto stanje PVP K12.
[0053] Sledeći poželjni primer izvođenja je naznačen time, što je srednja molarna masa upotrebljenog PVP oko 9 kD ("PVP K17") i što se smeša zagreva na temperaturu iznad 130°C. Posebno se zagreva na temperaturu koja je najmanje 25°C, a naročito 30°C, 40°C, 45°C ili više iznad temperature prelaska u staklasto stanje PVP K17.
[0054] Sledeći poželjni primer izvođenja je naznačen time, što je srednja molarna masa upotrebljenog PVP oko 24 kD ("PVP K 25") i što se smeša zagreva na temperaturu iznad 155°C. Posebno se zagreva na temperaturu koja je najmanje 25°C, a naročito 30°C, 40°C, 45°C ili više iznad temperature prelaska u staklasto stanje PVP K 25.
[0055] Sledeći poželjni primer izvođenja je naznačen time, što je srednja molarna masa upotrebljenog PVP oko 40 kD ("PVP K 30") i što se smeša zagreva na temperaturu iznad 175°C. Posebno se zagreva na temperaturu koja je najmanje 25°C, a naročito 30°C, 40°C, 45°C ili više iznad temperature prelaska u staklasto stanje PVP K 30.
[0056] Kao podesno se pokazalo da se smeši 7-DAFSK i PVP prema pronalasku doda rastvarač ili smeša rastvarača. Poželjno je da se smeša 7-DAFSK i PVP meša kao pasta u malo rastvarača. Dodavanje rastvarača može doprineti da se 7-DAFSK i PVP homogeno raspodele i omogućava da velike količine 7-DAFSK mogu da prianjaju na PVP. Kao rastvarači su podesni vodeni, alkoholni ili drugi organski rastvarači, kao što su npr. voda, etanol, metanol, propanol, aceton, etil metil keton, dihlormetan i/ili etil acetat.
[0057] U jednom primeru izvođenja postupak za dobijanje 7-DAFSK-PVP kompleksa prema pronalasku je naznačen time, što se smeši 7-DAFSK i PVP dodaje rastvarač, poželjno voda, etanol, metanol, propanol, aceton, etil metil keton, dihlormetan i/ili etil acetat, još poželjnije voda, etanol, metanol, propanol, dihlormetan i/ili piridin. Posebno je poželjno da se smeši 7-DAFSK i PVP dodaju voda i/ili etanol, ili njihova smeša. Dodavanje vode i/ili etanola se može vršiti istovremeno ili sukcesivno.
[0058] Kod postupka dobijanja se pokazalo korisnim da se smeša 7-DAFSK i PVP drži određeni vremenski period na temperaturi koja je viša od temperature prelaska u staklasto stanje upotrebljenog PVP. Dobri rezultati su bili dobijeni kada je smeša držana najmanje 5 minuta iznad temperature prelaska u staklasto stanje.
[0059] U jednom specijalnom primeru izvođenja postupka prema pronalasku smeša 7-DAFSK i PVP se drži dakle najmanje 5 minuta na temperaturi višoj od temperature prelaska u staklasto stanje upotrebljenog PVP.
[0060] U jednom specijalnom primeru izvođenja, postupak prema pronalasku sadrži sledeće korake, koji se izvode po sledećem redosledu:
a) priprema smeše 7-DAFSK i PVP i sjedinjavanje smeše sa rastvaračem, a prvenstveno alkoholom, te prvenstveno etanolom,
b) dodavanje vode,
c) zagrevanje smeše iznad temperature prelaska u staklasto stanje PVP najmanje 5 minuta,
d) hlađenje smeše i rastvaranje u vodi,
e) odstranjivanje nerastvorenih sastojaka, opciono filtriranjem.
[0061] U jednom primeru izvođenja dobija se smeša 7-DAFSK i PVP u težinskom odnosu od 2:1 do 1:4, a prvenstveno 2:1, 2:1,5, 1:1, 2:3, 1:2, 1:3 i 1:4, te sasvim posebno poželjno 1:1 ili 1:2.
[0062] Primena postupka prema pronalasku omogućava efikasno i jednostavno dobijanje 7-DAFSK-PVP kompleksa.
[0063] Postupak prema pronalasku omogućava dobijanje 7-DAFSK-PVP kompleksa sa visokim masenim udelom 7-DAFSK. Uobičajeni postupci za dobijanje PVP kompleksa obuhvataju rastvaranje komponenata u rastvaraču ili smeši rastvarača, pri čemu se smeša ne zagreva iznad temperature prelaska u staklasto stanje PVP. U jednom ovde objašnjenom specifičnom primeru pomoću postupka prema pronalasku ostvareni su za 8-9 % veći srednji maseni udeli 7-DAFSK u 7-DAFSK-PVP kompleksima u poređenju sa uobičajenim postupcima kompleksiranja.
[0064] Visoki maseni udeo 7-DAFSK u 7-DAFSK-PVP kompleksima je posebno podesan za farmaceutsku primenu u dijagnostici i/ili lečenju. Zahvaljujući visokom masenom udelu 7-DAFSK u kompleksu prema pronalasku može se povećati rastvorljivost 7-DAFSK u vodi, bez toga potrebe za nepodesno velikom količinom PVP. Zbog toga se formulacije sa derivatima forskolina takođe mogu pripremiti uz veću uštedu materijala nego ranije. Zahvaljujući tome što se mogu izbeći velike količine pomoćnih materija (PVP) i usled toga nastala neželjena dejstva, predmetni pronalazak olakšava i poboljšava primenu 7-DAFSK u dijagnostici i/ili lečenju.
[0065] 7-DAFSK-PVP kompleks prema pronalasku može se primenjivati za one dijetetske ili medicinske svrhe kod kojih se može primenjivati forskolin i/ili 7-DAFSK.
[0066] Zato se predmetni pronalazak takođe odnosi na farmaceutsku kompoziciju koja sadrži 7-DAFSK-PVP kompleks prema pronalasku sa 7-DAFSK kao aktivnom supstancom.
[0067] Izraz "farmaceutska kompozicija" se ovde upotrebljava u vezi 7-DAFSK-PVP kompleksa prema pronalasku sa 7-DAFSK kao aktivnom supstancom, opciono u vezi sa drugim sastojcima i/ili aktivnim supstancama.
[0068] Farmaceutska kompozicija prema pronalasku može biti prisutna u nizu sistemskih i topičkih formulacija. Neograničavajući primeri sistemskih ili topičkih formulacija koje sadrže 7-DAFSK-PVP kompleks prema pronalasku obuhvataju oralne, intrabukalne, intrapulmonarne, rektalne, intrauterine, intradermalne, topičke, dermalne, parenteralne, intratumorske, intrakranijalne, bukalne, sublingvalne, nazalne, subkutane, intravaskularne, intratekalne, inhalatorne, respirabilne, intraartikularne, intrakavitalne, implantibilne, transdermalne, jonotoforetičke, intraokularne, vaginalne, optičke, intravenske, intramuskularne, intraglandularne, intraorganske, intralimfatične formulacije, enterične prevlake ili formulacije sa sporim oslobađanjem aktivne supstance.
[0069] Kompozicija se može primenjivati jednom ili više puta dnevno. Jedan poželjni primer izvođenja odnosi se na farmaceutsku kompoziciju prema pronalasku za oralnu, intravensku ili inhalacionu primenu.
[0070] Formulacije za oralnu primenu mogu biti obezbeđene u diskretnim jedinicama, kao što su kapsule, tablete ili lozenge, koje sadrže formulaciju kao prašak ili granulat. Formulacije za oralnu primenu takođe mogu biti obezbeđene kao rastvor ili suspenzija u vodenom ili nevodenom medijumu ili kao emulzija.
[0071] Formulacije za intravensku primenu mogu biti obezbeđene kao rastvor ili suspenzija u vodenom medijumu, npr. kao slani rastvor.
[0072] Specifično doziranje 7-DAFSK-PVP kompleksa radi ostvarivanja terapeutskog ili profilaktičkog efekta zavisi od konkretne primene, npr. farmaceutskog oblika, starosti, težine i stanja pojedinih pacijenata, bolesti koja se leči i ozbiljnosti simptoma.
[0073] Doza 7-DAFSK-PVP u kompoziciji prema pronalasku je prvenstveno efektivna doza koja ostvaruje terapeutski ili profilaktički efekat, bez izazivanja neželjenih nepoželjnih dejstava, pri čemu se kompozicija može primenjivati kao pojedinačna doza ili kao više jedinica.
[0074] U jednom određenom primeru izvođenja kompozicija prema pronalasku je obezbeđena kao rastvor ili aerosol koji sadrži 7-DAFSK u koncentraciji od najmanje 25 mg/L, a poželjno najmanje 50 mg/L, 75 mg/L, 100 mg/L, 200 mg/L, 300 mg/L, 400 mg/L, 500 mg/L, 600 mg/L, 800 mg/L ili 1000 mg/L. U jednom poželjnom primeru izvođenja kompozicija sadrži 7-DAFSK u koncentraciji od najmanje 1 mg/mL, 1,5 mg/mL, 2 mg/mL, 2,5 mg/mL, 3 mg/mL, ili 4 mg/mL, te posebno poželjno 4 mg/mL.
[0075] U sledećem određenom primeru izvođenja kompozicija prema pronalasku je obezbeđena kao kapsula ili tableta koja sadrži 7-DAFSK u farmaceutski efektivnoj količini, na primer, 10 mg do 2000 mg, a prvenstveno najmanje 25 mg, 50 mg, 100 mg, 200 mg, 300 mg, 400 mg, 500 mg, 600 mg, 700 mg, 800 mg, 900 mg ili 1000 mg, te posebno poželjno 500 mg.
[0076] Forskolin i 7-DAFSK su poznati kao nespecifični cAMP stimulatori. 7-DAFSK-PVP kompleks prema pronalasku može se primeniti u lečenju onih bolesti ili poremećaja koji se mogu lečiti pomoću forskolina i/ili 7-DAFSK. Neograničavajući primeri takvih bolesti su neurodegenerativne bolesti, Alchajmer, motorne disfunkcije, akutne i hronične kardiovaskularne bolesti, bolesti pluća, kao što su astma, cistična fibroza, vaskularne bolesti povezane sa cističnom fibrozom, bronhitis, hronična opstruktivna bolest pluća (HOBP), gojaznost, glaukom, zapaljenje zglobova, artritis/osteoartritis, fibrotične promene, kao što su idiopatska pulmonarna fibroza, posttraumatska pulmonarna fibroza, bronhopulmonarna displazija (BPD), posttoksične bolesti jetre, kao što su VPD ili ciroza jetre, i bolesti poremećaja periferne cirkulacije, uključujući Rejnoovu bolest i sklerodermu.
[0077] U jednom specijalnom primeru izvođenja farmaceutska kompozicija prema pronalasku se primenjuje u lečenju kardiovaskularnih bolesti, bronhijalne astme, gojaznosti, glaukoma, bolesti pluća, zapaljenja zglobova ili artritisa/osteoartritisa.
[0078] Sledeći aspekt predmetnog pronalaska se odnosi na farmaceutsku kompoziciju prema pronalasku za primenu kao lek.
[0079] Predmetni pronalazak je dalje ilustrovan pomoću sledećih primera i slika, bez ograničavanja na njih.
PRIMERI
[0080] Sledeći primeri opisuju sintezu 7-DAFSK i kompleksiranje 7-DAFSK, pri čemu je bio izabran PVP sa srednjom molarnom masom od oko 2,5 kD ("PVP K12") i oko 24 kD ("PVP K25"), a odnosi količina 7-DAFSK prema PVP su varirali. Primeri se dalje odnose na karakterizaciju dobijenih kompleksa u pogledu sadržaja 7-DAFSK, rastvorljivost u vodi i dejstvo kao cAMP aktivatora u cAMP testovima. Primeri ne sadrže detaljne opise standardnih metoda, kao što je izvođenje određivanja sadržaja pomoću HPLC ili merenje NMR spektara. Takve metode su dobro poznate stručnjaku iz odgovarajuće oblasti.
Primer 1 - Sinteza 7-deacetilforskolina
[0081] Kao reaktant za sintezu 7-deacetil forskolina (7-DAFSK) bio je upotrebljen sintetički forskolin (GMP - Material) firme Mercachem, šarža MAMA07-024-5. Deacetilacija forskolina je bila izvedena putem klasične karbonatne saponifikacije.
[0082] Deacetilacija je izvedena u skladu sa reakcionom šemom prikazanom na slici 1. Prvo su 200 mg forskolina (sintetički forskolin, Mercachem, šarža MAMA07-024-5) i 200 mg kalciniranog Na2CO3bili mešani u 10 mL metanola u okruglom balonu od 250 mL, 4 sata na sobnoj temperaturi. Posle toga je ostavljeno da reakciona smeša stoji preko noći (20 sati).
[0083] Posle toga je bio izdestilovan metanol (rotacioni uparivač) i rastvoren je sa oko 20 mL CH2Cl2iz balona. Ovo je kratko tretirano ultrazvukom (1 min). Formirani 7-DAFSK je prešao sa CH2Cl2u rastvor, pri čemu su se istaložile soli. Soli su isfiltrirane (filteri srednje brzine). Posle toga je filtrat bio ispran sa 2 n HCl u separatorskom levku. Dihlormetanska frakcija je bila izvučena, a rastvarač je bio izdestilovan u rotacionom uparivaču. Tako dobijeni beli prah je analiziran pomoću HPLC. Pri tome je mogla biti utvrđena čistoća od preko 99 %.
[0084] Struktura 7-DAFSK je bila verifikovana pomoću<1>H NMR<13>C NMR. Izmereni<1>H i<13>C NMR spektri dobijenog 7-DAFSK su identični već publikovanim spektrima ovog jedinjenja (J. Org. Chem. 2006, 71, 4619 - 4624). Time je moglo biti potvrđeno željeno deacetilovanje forskolina u skladu sa reakcionom šemom prikazanom na slici 1.
[0085] Dobijeni 7-DAFSK je bio dalje karakterisan pomoću HPLC. Deacetilforskolin i forskolin su bili eluirani mobilnom fazom od acetonitrila/vode (55/45 v/v) sa protokom od 0,6 mL/min (stacionarna faza: Nukleosil 120 3C18, 250 x 4 mm). Za kvantitativno određivanje sadržaja 7-DAFSK u kompleksu sa PVP bila je pripremljena kalibraciona kriva. Za kalibraciju su bili upotrebljeni rastvori za kalibraciju sa koncentracijama 7-DAFSK od 0,014; 0,028; 0,056 i 0,56 mg/mL.
Primer 2 - Dobijanje 7-DAFSK-PVP kompleksa
[0086] Pošto je sam 7-deacetilforskolin samo umereno rastvorljiv u vodi, 7-DAFSK je kompleksiran sa PVP da bi se povećala rastvorljivost u vodi. 7-DAFSK kompleksi su bili dobijeni pomoću postupaka prema pronalasku, koji se u nastavku nazivaju "postupci zagrevanja", kao i pomoću uobičajenog rastvaranja bez zagrevanja ("postupak rastvaranja"), radi poređenja.
1. Dobijanje 7-DAFSK-PVP kompleksa pomoću zagrevanja PVP iznad temperature prelaska u staklasto stanje ("postupak zagrevanja")
7-DAFSK-PVP K12 kompleks (kompleks 7-DAFSK sa PVP K12)
[0087] Radi kompleksiranja 7-deacetilforskolina sa PVP K12 ("Kollidon" 12 PF, Ph. Eur., USP, JP; BASF, srednja molarna masa: oko 2,5 kD) 20 mg 7-DAFSK i 20 mg PVP K12 je rastrljano u porculanskom sudu, pa je sjedinjeno sa 300 µL etanola i onda je mešano. Posle 10 min je bilo dodato 100 µL H2O, pa je mešano i ponovo je ostavljeno da stoji 10 min. Nakon toga je rastvor zagrevan u peći za sušenje tokom 40 min na 140°C i onda je ostavljeno da rastvor stoji u njoj 45 min. Posle hlađenja je dodato 3 mL H2O i zatim je mešano 20-30 min. Posle toga je suspenzija uzeta pomoću šprica i isfiltrirana je kroz filter od 0,45 µm (hidrofilno). Sud je ponovo ispran sa 3 mL H2O, a isprani rastvor je isto tako isfiltriran kroz filter. Sadržaj 7-DAFSK rastvorenog u 6 mL H2O je određen pomoću HPLC. Radi određivanja rastvor 7-DAFSK-PVP kompleksa je bio razređen 1:10 sa eluentom. Bio je utvrđen maseni udeo 7-DAFSK u celokupnom kompleksu od 35 tež. %.
7-DAFSK-PVP K25 kompleks (kompleks 7-DAFSK sa PVP K25)
[0088] Radi kompleksiranja 7-deacetilforskolina sa PVP K25 (FLUKA 81399, srednja molarna masa: oko 24 kD) 20 mg 7-DAFSK i 20 mg PVP K25 je rastrljano u porculanskom sudu, pa je sjedinjeno sa 300 µL etanola i onda je mešano. Posle 10 min je bilo dodato 100 µL H2O, pa je mešano i ponovo je ostavljeno da stoji 10 min. Nakon toga je rastvor zagrevan u peći za sušenje tokom 40 min na 185°C i onda je ostavljeno da rastvor stoji u njoj 45 min. Posle hlađenja je dodato 3 mL H2O i zatim je mešano 20-30 min. Posle toga je suspenzija uzeta pomoću šprica i isfiltrirana je kroz filter od 0,45 µm (hidrofilno). Sud je ponovo ispran sa 3 mL H2O, a isprani rastvor je isto tako isfiltriran kroz filter. Sadržaj 7-DAFSK rastvorenog u 6 mL H2O je određen pomoću HPLC. Radi određivanja rastvor 7-DAFSK-PVP 25 kompleksa je bio razređen 1:10 sa eluentom. Bio je utvrđen maseni udeo 7-DAFSK u celokupnom kompleksu od 17 tež. %.
2. Dobijanje 7-DAFSK-PVP kompleksa pomoću postupaka rastvaranja
7-DAFSK-PVP K12 kompleks
[0089] 20 mg 7-DAFSK i 40 mg PVP K12 je rastrljano u porculanskom sudu, pa je sjedinjeno sa 300 µL etanola i onda je mešano. Posle 10 min je bilo dodato 100 µL H2O, pa je mešano i ponovo je ostavljeno da stoji 10 min. Nakon toga je ostavljeno da rastvor stoji na sobnoj temperaturi 45 min, pa je dodato 3 mL H2O i zatim je mešan 20-30 min. Posle toga je suspenzija uzeta pomoću šprica i isfiltrirana je kroz filter od 0,45 µm (hidrofilno). Sud je ponovo ispran sa 3 mL H2O, a isprani rastvor je isto tako isfiltriran kroz filter. Sadržaj 7-DAFSK rastvorenog u 6 mL H2O je određen pomoću HPLC. Bio je utvrđen maseni udeo 7-DAFSK u celokupnom kompleksu od 24 tež. %.
7-DAFSK-PVP K25 kompleks
[0090] 20 mg 7-DAFSK i 40 mg PVP 25 je rastrljano u porculanskom sudu, pa je sjedinjeno sa 300 µL etanola i onda je mešano. Posle 10 min je bilo dodato 100 µL H2O, pa je mešano i ponovo je ostavljeno da stoji 10 min. Nakon toga je ostavljeno da rastvor stoji na sobnoj temperaturi 45 min, pa je dodato 3 mL H2O i zatim je mešan 20-30 min. Posle toga je suspenzija uzeta pomoću šprica i isfiltrirana je kroz filter od 0,45 µm (hidrofilno). Sud je ponovo ispran sa 3 mL H2O, a isprani rastvor je isto tako isfiltriran kroz filter. Sadržaj 7-DAFSK rastvorenog u 6 mL H2O je određen pomoću HPLC. Bio je utvrđen maseni udeo 7-DAFSK u celokupnom kompleksu od 8 tež. %.
Primer 3 – Određivanje rastvorljivosti u vodi
[0091] Za testove rastvorljivosti je bio upotrebljen odgovarajući kompleks koji je bio osušen pomoću rotacionog uparivača. Dodata je definisana količina vode, a posle toga je dodavan kompleks sve dok se nije pojavio višak 7-DAFSK-PVP. Prezasićeni rastvor je tretiran ultrazvukom, pa je mešan i blago je zagrejan (vodeno kupatilo 40°C). Posle toga je suspenzija isfiltrirana (filter od 0,45 µm) i sadržaj 7-DAFSK u filtratu je određen pomoću HPLC.
Primer 4 - Karakterizacija 7-DAFSK-PVP kompleksa
Maseni udeo 7-DAFSK u celokupnom kompleksu
[0092] Slika 2 prikazuje dijagram određenog sadržaja 7-DAFSK u 7-DAFSK-PVP K12 i 7-DAFSK-PVP 25 kompleksu, kod kojih je bio izabran odnos 7-DAFSK prema PVP od 20 prema 20. Ovde se razlikuju postupak zagrevanja i postupak rastvaranja. Kod svih kompleksa se mogu uočiti jasne razlike u pogledu sadržaja 7-DAFSK između dva postupka. Pomoću postupka zagrevanja može se ostvariti 8-9 % veći sadržaj 7-DAFSK u gotovim kompleksima.
7-DAFSK-PVP K12 kompleks ima najveći sadržaj 7-DAFSK (oko 35 tež. %).
[0093] Radi optimizacije sadržaja 7-DAFSK u celokupnom kompleksu upotrebljeni težinski odnosi 7-DAFSK i PVP K12 su varirali (slika 3). Takođe putem varijacije odnosa 7-DAFSK/PVP K12 pomoću ovog postupka nije moglo biti kompleksirano više od 50-60% upotrebljenog materijala sa 7-DAFSK (20 mg), kao što se može videti sa slike 3. Jasno je da se, uprkos povećanju količine PVP12, konačna kompleksirana količina 7-DAFSK u napravljenom kompleksu ne menja značajno. Da bi se utvrdilo koliko nekompleksiranog 7-DAFSK pri procesu rastvaranja posle dobijanja pomoću postupka zagrevanja prelazi u rastvor, bio je ispitan jedan kontrolni uzorak (bez PVP12, samo 7-DAFSK), koji je bio tretiran isto kao uzorci sa kompleksom. Ovde je manje od jedne četvrtine upotrebljenog 7-DAFSK moglo biti uvedeno u rastvor. Kompleksiranje sa PVP dovelo je dakle do povećanja rastvorljivosti 7-DAFSK.
[0094] Takođe ni povećanjem količine rastvarača pre zagrevanja nije bilo moguće uvesti veće količine 7-DAFSK u kompleks sa PVP K12.
[0095] Na slici 4 se vidi da bi se takođe i sa jako malim količinama PVP mogli dobiti uporedivi rezultati.
[0096] Specifikovani sadržaji 7-DAFSK u tež. % bili su određeni pomoću HPLC. Za proračun je bilo pretpostavljeno da je celokupna količina PVP pri rastvaranju sa 6 mL H2O prešla u rastvor.
Rastvorljivosti u vodi
[0097] Tabela 2 prikazuje da je moguće značajno povećanje rastvorljivosti 7-DAFSK u vodi putem kompleksiranja sa PVP. Rastvorljivost 7-DAFSK u kompleksu sa PVP je do tri puta veća od rastvorljivosti nekompleksiranog 7-DAFSK. Za razliku od 7-DAFSK, forskolin se zbog svoje prostorne strukture jedva može rastvoriti sa PVP, a još uvek može formirati kompleks sa PVP.
[0098] Slika 5 prikazuje da se rastvorljivost u vodi ne menja značajno za različite odnose DAFSK/PVP. Vrednosti variraju između 2,5 mg/mL i 3,5 mg/mL. Ovo je usled činjenice da se kod svakog odnosa kompleksira približno isti udeo 7-DAFSK (50-60%), zbog čega se značajnije ne menja rastvorljivost kompleksa u vodi.
Tabela 2: Rastvorljivost u vodi različitih supstanci/kompleksa
Primer 5 – Test na ćelijskim kulturama: cAMP test
[0099] cAMP test je bio izveden sa HEK293 ćelijama (humane embrionske bubrežne ćelije, 1970) sa EP2 ili EP4 receptorima prostaglandina, ili IP receptorom prostaciklina. HEK293 ćelije su bile inkubirane sa FCS i radioligandom ([3H] adenin). Formiranje cAMP ([<3>H]cAMP) je bilo praćeno eksperimentalno.
[0100] Bila je upoređena aktivacija adenilil ciklaze (AC) pomoću forskolina (rastvorenog u DMSO), 7-DAFSK i 7-DAFSK-PVP, oba rastvorena u vodi. Postoje male razlike između tri derivata forskolina kod aktivacije AC preko EP2 i EP4 receptora i nikakve značajne razlike kod aktivacije IP receptora (slika 6).
[0101] Sva tri derivata forskolina aktivirala su adenilil ciklazu preko navedenih receptora, takođe i u prisustvu treprostinila. Sam treprostinil (kontrolni uzorak) nije ispoljio nikakvu aktivaciju AC. Poboljšana aktivnost forskolina, 7-DAFSK i 7-DAFSK-PVP u odnosu na kontrolu može se jasno videti na slici 6. Shodno tome, ovi rezultati pokazuju da je 7-DAFSK-PVP podesan stimulator adenilil ciklaze.
[0102] Testovi su bili izvedeni kao što sledi:
Dan 1: HEK293 ćelije koje su stabilno izražavale bilo EP2, EP4 ili IP receptore, bile su kultivisane na ploči sa 6 bunarčića u 2 mL DMEM medijuma sa 10% FCS i 2µCi [<3>H]-adenina i inkubirane su 16 sati.
Dan 2: Ćelije su bile stimulisane sa 30 µM samog treprostinila ili u kombinaciji sa 30 µm forskolina u DMSO, 100 µM 7-DAFSK u vodi ili 100 µM 7-DAFSK u 7-DAFSK-PVP K12 kompleksu u vodi (u svežem medijumu tokom 30 minuta na sobnoj temperaturi). Posle toga su ćelije bile lizirane sa 2,5% perhlorne kiseline (PCA) 30 minuta na ledu.
PCA ekstrakt je bio neutralizovan sa KOH i [<3>H]cAMP je bio izdvojen pomoću sekvencijalne hromatografije sa DOWEX i aluminijum oksidnim kolonama. Posle toga je bila izmerena radioaktivnost pomoću scintilatora.
[0103] Za merenje radioaktivnosti je bio upotrebljen po jedan alikvot PCA ekstrakta po svakom bunarčiću.
Primer 6 – Pokušaj dobijanja kompleksa forskolin-PVP pomoću postupka rastvaranja
[0104] 20 mg FSK i 40 mg PVP 25 je rastrljano u porculanskom sudu, pa je sjedinjeno sa 300 µL etanola (alternativno propanola) i onda je mešano. Posle 10 min je bilo dodato 100 µL H2O, pa je mešano i ponovo je ostavljeno da stoji 10 min. Nakon toga je ostavljeno da rastvor stoji na sobnoj temperaturi 45 min, pa je dodato 3 mL H2O i zatim je mešan 20-30 min. Posle toga je suspenzija uzeta pomoću šprica i isfiltrirana je kroz filter od 0,45 µm (hidrofilno). Sud je ponovo ispran sa 3 mL H2O, a isprani rastvor je isto tako isfiltriran kroz filter. Sadržaj FSK rastvorenog u 6 mL H2O je određen pomoću HPLC. Utvrđen je maseni udeo FSK u celokupnom kompleksu <0,01 tež. %. FSK u filtratu nije se mogao detektovati pomoću HPLC.

Claims (13)

Patentni zahtevi
1. Kompleks 7-deacetilforskolina (7-DAFSK) i polivinilpirolidona (PVP).
2. Kompleks prema zahtevu 1, naznačen time, što PVP ima srednju molarnu masu baziranu na masenoj srednjoj molarnoj masi od 1 do 40 kD, a poželjno od 2 do 25 kD, te posebno poželjno oko 2,5 kD.
3. Kompleks prema zahtevu 1 ili 2, naznačen time, što 7-DAFSK potiče od sintetičkog forskolina.
4. Kompleks prema jednom od zahteva 1 do 3, naznačen time, što je srednji maseni udeo 7-DAFSK u celokupnom kompleksu u opsegu od 1 do 50 tež. %, a prvenstveno 30 tež. % ili više.
5. Postupak za dobijanje kompleksa prema jednom od zahteva 1 do 4, naznačen time, što se smeša 7-DAFSK i PVP zagreva na temperaturu koja je viša od temperature prelaska u staklasto stanje upotrebljenog PVP.
6. Postupak prema zahtevu 5, naznačen time, što se smeši 7-DAFSK i PVP dodaje rastvarač, a poželjno voda, etanol, metanol, aceton, etil metil keton, dihlormetan i/ili etil acetat, još poželjnije voda, etanol, metanol, propanol i/ili dihlormetan, još poželjnije voda i/ili etanol, ili njihova smeša.
7. Postupak prema zahtevu 5 ili 6, naznačen time, što se smeša drži najmanje 5 minuta na temperaturi, koja je viša od temperature prelaska u staklasto stanje upotrebljenog PVP.
8. Postupak prema jednom od zahteva 5 do 7, koji sadrži korake:
a) priprema smeše 7-DAFSK i PVP i sjedinjavanje smeše sa rastvaračem, a prvenstveno alkoholom, te prvenstveno etanolom,
b) dodavanje vode ili vodenog rastvora,
c) zagrevanje smeše iznad temperature prelaska u staklasto stanje PVP najmanje 5 minuta,
d) hlađenje smeše i rastvaranje u vodi ili vodenom rastvoru,
e) odstranjivanje nerastvorenih sastojaka, opciono filtriranjem.
9. Farmaceutska kompozicija koja sadrži kompleks prema jednom od zahteva 1 do 4.
10. Farmaceutska kompozicija prema zahtevu 9 za primenu kao lek.
11. Farmaceutska kompozicija prema zahtevu 9, naznačena time, što kompozicija sadrži 7-DAFSK u koncentraciji od najmanje 25 mg/L, a prvenstveno najmanje 100 mg/mL, 250 mg/mL, 500 mg/mL, 1000 mg/mL, 2000 mg/mL, 3000 mg/mL ili 4000 mg/mL, te posebno poželjno 4000 mg/mL.
12. Farmaceutska kompozicija prema zahtevu 9 ili 11 za intravensku, oralnu ili inhalacionu primenu.
13. Farmaceutska kompozicija prema jednom od zahteva 9 do 12 za primenu u lečenju kardiovaskularnih bolesti, bronhijalne astme, gojaznosti, glaukoma, bolesti pluća, zapaljenja zglobova ili artritisa/osteoartritisa.
RS20240156A 2020-01-23 2021-01-22 Kompleks 7-deacetilforskolina i pvp RS65265B1 (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP20153429 2020-01-23
PCT/EP2021/051499 WO2021148633A1 (de) 2020-01-23 2021-01-22 Komplex aus 7-deacetylforskolin und pvp
EP21701961.1A EP4093374B1 (de) 2020-01-23 2021-01-22 Komplex aus 7-deacetylforskolin und pvp

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS65265B1 true RS65265B1 (sr) 2024-03-29

Family

ID=69190714

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20240156A RS65265B1 (sr) 2020-01-23 2021-01-22 Kompleks 7-deacetilforskolina i pvp

Country Status (18)

Country Link
US (1) US20230346956A1 (sr)
EP (1) EP4093374B1 (sr)
JP (1) JP7700133B2 (sr)
AU (1) AU2021211146B2 (sr)
BR (1) BR112022014362A2 (sr)
CA (1) CA3166464A1 (sr)
DK (1) DK4093374T3 (sr)
ES (1) ES2969594T3 (sr)
FI (1) FI4093374T3 (sr)
HR (1) HRP20240181T1 (sr)
HU (1) HUE065181T2 (sr)
IL (1) IL294848B1 (sr)
LT (1) LT4093374T (sr)
PL (1) PL4093374T3 (sr)
PT (1) PT4093374T (sr)
RS (1) RS65265B1 (sr)
SI (1) SI4093374T1 (sr)
WO (1) WO2021148633A1 (sr)

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IT1294205B1 (it) 1997-07-23 1999-03-24 Farmigea Spa Procedimento per la solubilizzazione in acqua e in veicoli acquosi di sostanze farmacologicamente attive
US6960300B2 (en) * 2003-09-08 2005-11-01 Sami Labs Limited Process for preparing water soluble diterpenes and their applications
JP2007210988A (ja) * 2006-02-07 2007-08-23 Sabinsa Corp ジテルペンフォルスコリン及びその誘導体で男性ホルモン及び女性ホルモンを生理学的に増大するための組成物
WO2017103840A1 (en) * 2015-12-16 2017-06-22 MOHAMED ABDULLA ANZAR, Cheppattu A water soluble 10% w/w forskolin composition and a method of synthesizing the same
JP7138643B2 (ja) 2017-01-09 2022-09-16 サイファーム ソシエテ ア レスポンサビリテ リミテ 水溶性フォルスコリンの新規製造法

Also Published As

Publication number Publication date
PL4093374T3 (pl) 2024-04-15
IL294848A (en) 2022-09-01
BR112022014362A2 (pt) 2022-09-13
DK4093374T3 (da) 2024-02-05
AU2021211146B2 (en) 2026-02-12
AU2021211146A1 (en) 2022-09-01
SI4093374T1 (sl) 2024-03-29
ES2969594T3 (es) 2024-05-21
FI4093374T3 (en) 2024-02-06
HRP20240181T1 (hr) 2024-04-26
US20230346956A1 (en) 2023-11-02
CA3166464A1 (en) 2021-07-29
LT4093374T (lt) 2024-03-12
HUE065181T2 (hu) 2024-05-28
WO2021148633A1 (de) 2021-07-29
EP4093374A1 (de) 2022-11-30
JP7700133B2 (ja) 2025-06-30
JP2023511432A (ja) 2023-03-17
EP4093374B1 (de) 2023-11-15
IL294848B1 (en) 2026-01-01
PT4093374T (pt) 2024-01-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP6960853B2 (ja) （６ｓ）−５−メチルテトラヒドロ葉酸又はその塩の組成物及びその調製と応用
KR20100032861A (ko) 5-원 헤테로시클릭 아미드 및 관련 화합물
HRP20050205A2 (en) Benzensulfonate of 4-fluoro-2-cyanopyrrolidine derivative
CN112239459B (zh) 稠环嘧啶氨基化合物、其制备方法、药物组合物及应用
RU2670088C1 (ru) Соль мангиферин-6-о-берберина, способ ее получения и применение
JPH03501970A (ja) Ｓ‐アデノシル‐ｌ‐メチオニン（ｓａｍ）のアシル化タウリン誘導体との親油性塩
RS60358B1 (sr) Kristali jedinjenja 2-acilaminotiazola
EP1664047A1 (fr) Derives d&#39;indolizine 1,2,3,6,7,8 substituee, inhibiteurs des fgfs, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques les contenant
RS65265B1 (sr) Kompleks 7-deacetilforskolina i pvp
RU2485121C1 (ru) Новые кристаллические формы адефовира дипивоксила и способы его получения
CN109456330B (zh) 叶酸类稳定复合物及其制备方法
EP0338092A1 (en) Anti-hiv agent
EA044513B1 (ru) Комплекс 7-дезацетил-форсколина и пвп
JP2001500526A (ja) 粘液溶解剤としての２−メチル−チアゾリジン−２，４−ジカルボン酸の使用
CN109734580A (zh) 曲前列尼尔钠盐新晶型及制备方法
HUE027990T2 (en) An amine salt of a carbostyril derivative suitable for treating gastric ulcer among others
CN113754795A (zh) 磺酸化透明质酸类化合物、其制备方法及其应用
WO2000061109A1 (fr) Procede de production de composition medicamenteuse renfermant un compose medicamenteux hydrophobe basique
JPH0348897B2 (sr)
SI21748A (sl) Inkluzijski kompleksi klopidogrela in njegovih kislinskih adicijskih soli, postopek za njihovo pripravo, farmacevtski pripravki, ki vsebujejo te komplekse in njihova uporaba za zdravljenje tromboze
TW200538457A (en) Aqueous solutions comprising camptothecin
CN119896634A (zh) 一种芳香型受体激动剂纳米水凝胶及其制备方法和应用
WO2026015827A1 (en) Keto acid biopolymers and polyol keto esters and uses thereof
CN112870205A (zh) 塞来昔布和盐酸米那普仑低共熔混合物、含其的药物组合物及其制备方法和应用
HK40049011A (en) Salts of heterocyclic compound and use thereof